近畿大学次世代基盤技術研究所報告 Vol.1（2010）77−81 ␹⚻ᯏ⢻ߦ㑐ਈߔࠆᄤὼൻቇ‛⾰ߩ⎇ⓥ          Ꮏቇㇱ↢‛ൻቇᎿቇ⑼ ᢎ᝼ ጊ↰ ᐽᨑ㧝㧚ߪߓ߼ߦ ⥄ὼ⇇ߦߪᬀ‛㧘⊒㉂㘩ຠ↱᧪ߩࡐ࡝ࡈࠚࡁ࡯࡞ࠍߪߓ߼ߣߒߡ᭽‫ߥޘ‬ᄤὼൻቇ‛⾰߇ሽ࿷ߒ㧘ߘߩ↢ℂᵴᕈߦߟ޿ߡߩ⎇ⓥ߇ㅴࠎߢ޿ࠆ㧚ߘߩਛߢ߽᛫㉄ൻߦߟ޿ߡߪ․ߦ⎇ⓥߐࠇߡ߅ࠅ㧘ࡐ࡝ࡈࠚࡁ࡯࡞㘃ߩ᛫㉄ൻߩᕈ⾰߿㉄ൻߦࠃࠆ㓚ኂ૞↪߳ߩ଻⼔૞↪ߪ᣿ࠄ߆ߦߥࠅߟߟ޽ࠆ㧚ߒ߆ߒ㧘␹⚻ᯏ⢻ߦᓇ㗀ࠍਈ߃ࠆ‛⾰ߩᕈ⾰ߩᬌ⸛ߪ㧘߹ߛ㧘௖߆ߢ޽ࠆ㧚⨥߿㈬㧘ṽᣇ⮎ߥߤ㧘ฎ᧪࡝࡜࠶ࠢࠬലᨐࠍᜬߟ‛⾰ߩሽ࿷ߪ⍮ࠄࠇߡ޿ࠆ߇㧘૞↪ᯏᐨߪ޿߹ߛਇ᣿ߥὐ߇ᄙߊ㧘᭴ㅧߥߤ߽หቯߐࠇߡ޿ߥ޿߽ߩ߽ᄙ޿㧚ࠊߚߒߚߜ
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ヒト神経芽細胞腫由来細胞株 SK-N-SH は交感神経系の神経細胞や副腎髄質細胞が分化する前に癌化したものであり，神経細胞への分化能をもつことが知られている． 現在 当研究室では，レチノイン酸添加による神経細胞への分化の最適条件を検討し，ヒト神経機能研究やヒト神経細胞へ作用する物質の研究への応用の可能性を検討している．ヒト神経細胞機能には未だ解明されていない部分が多く存在する．その原因はヒト神経細胞を使った研究を簡便に行うことができないということがあげられる．通常，神経細胞研究は，動物初代培養細胞や培養細胞を用いるが，得られた結果が，ヒトの神経系の実際の機能とは関連しないことがある．iPS 細胞や ES 細胞を分化させ神経機能研究に用いることもできるが，高度な技術や多くの設備が必要である． SK-N-SH 細胞はレチノイン酸添加により神経細胞への分化能を持つことが知ら࿑  ࡅ࠻␹⚻⧘⚦⢩⣲↱᧪ᩣ 6.16+ ߆ࠄಽൻߒߚ␹⚻⚦⢩
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れている．SK-N-SH 細胞を用いて簡便にヒト神経細胞へ分化させる方法を確立した(図 3)．神経細胞であれば，NMDA 受容体が発現しており，すでに述べているように，この受容体に過剰のグルタミン酸を添加することにより細胞内へ過剰のカルシウムイオンが入り神経細胞死を誘導することが可能である．SK-N-SH から分化させた神経細胞を用いてグルタミン酸の添加により誘導される神経細胞死に保護効果のある物質の検索を行うことが出来、得られた物質を神経機能や精神疾患の研究に利用可能であると考える．また，統合失調症のような神経疾患や認知症の薬を考えるうえで重要な基礎データとなる 3,4,5)．
４．ラット初代培養神経細胞
ラット初代培養神経細胞では， 妊娠ラットから胎仔を取り出しその脳の神経細胞を生体外培養している(図 4)．正常な神経系受容体やタンパク質を発現しているため継代培養が可能な株化細胞より細胞本来の性質を観察できる点が優れており， 初代神経細胞は他の株化細胞と比較して 1/10 以下の濃度でも細胞応答性が高く，薬理作用や細胞毒性の評価を正確に行うことができるため， 薬物活性や細胞毒性評価に用いられている．ラットやマウス脳のスライス標本やラット初代培養神経細胞を使用して神経活動を測定し，神経活動に影響を与え࿑  ࡜࠶࠻ೋઍၭ㙃␹⚻⚦⢩ ᄢ⣖⊹⾰㧕࡜࠶࠻⢝ఽ⣖ࠍ  ᣣ㑆න㔌ၭ㙃ᓟ␹⚻․⇣⊛᛫૕㧔0$3㧕ߢ᛫૕ᨴ⦡ߒߚ㧚る物質を検索することが可能である．受容体活性に影響があることが証明された物質が実際の神経活動にも効果があるか検証できれば，医薬品やサプリメントへの応用の可能性が高まる.

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