平成17年4月1日発行

年4回発行

ISSN 1345-9147

LABIO 21
Japanese Society of Laboratory Animals

社団
法人

20

No.

APR. 2005

Tel. 03-3864-9730 Fax. 03-3864-0619

日本実験動物協会 http://group.lin.go.jp/jsla/ E-mail: jsla@group.lin.go.jp【新制度】

実験動物技術指導員・準指導員制度の発足について
4年生大学生の実験動物一級技術師受験特例の制定について

【特集】

（

）

目

次

（社）日本実験動物協会 会長就任のご挨拶 ―――――――――――――― 4
第52回日本実験動物学会総会開催に向けて ―――――――――――――― 5
第39回日本実験動物技術者協会総会開催に向けて ――――――――――― 7

特集 ―――――――――――――――――――――――――――――― 8「単為発生マウス―かぐやの誕生」

表紙の写真説明
動 物 名：比内鶏
特徴：秋田県大館地方で古くから飼育、固定化された中型の鶏で、名前は同地方の古名（比内）に由来する。シャモと同地方の地鶏との交雑により作出された。
冠は３枚冠、赤耳朶、黄脚で羽色は赤笹のものが多い。
昭和１７年天然記念物に指定。
比内地鶏として市場に出ているものは、ロードアイランドレッドとの交雑種である。
写真提供：秋田県畜産試験場

連載記事 ―――――――――――――――――――――――――――― 11
犬の皮膚疾患 ②「犬の皮膚腫瘍」

トピックス ――――――――――――――――――――――――――― 18
日動協主催で「動物実験委員会のあり方」研修会開催される

ラボテック ――――――――――――――――――――――――――― 21「動物実験施設の空調システム（アクアクリーン空調方式）」

開発エピソード ⑥ ―――――――――――――――――――――――― 26「睡眠障害モデルマウスの開発における偶然と必然」
実験動物技術指導員・準指導員制度の発足について ―――――――――― 33
４年制大学在学生の実験動物一級技術師受験特例の制定について ―――― 35

海外技術情報 ―――――――――――――――――――――――――― 37
ほんのひとりごと ―――――――――――――――――――――――― 38
La−house ――――――――――――――――――――――――――― 39「モニタリング研修の質問」

学会の動き ――――――――――――――――――――――――――― 40
技術協会の動き ――――――――――――――――――――――――― 40
協会だより ――――――――――――――――――――――――――― 41
KAZE ――――――――――――――――――――――――――――― 42

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後藤

信男

プロフィール
昭和28年 東北大学農学部畜産学科卒業
昭和28年 福島県立会津短期大学
昭和49年 農林水産省家畜衛生試験場
実験動物研究室長
昭和62年 神戸大学農学部教授
平成 5年 国立予防衛生研究所
客員研究員

本協会は昨年8月光岡先生が健
康上の理由で会長を辞任されて以大役を仰せつかり誠に身の引き締

おける３Ｒ思想の普及などグローまる思いであります。

バル化が進んでいます。

来上松副会長が会長代行として運歴代の藤田潯吉、倉益茂實およ

このような状況のなか、協会で営されてきました、会員の方々かび光岡知足会長はそれぞれ協会のは実験動物技術の普及・推進のたら協会創立20周年という節目にあ進路を明確にされ、多大な功績をめ実験動物高度技術者養成研修会

たって早めに新会長を決めるべき

残されております。浅学非才の私の充実、大学生の実験動物一級技とのご意見が寄せられました。そが四代目の会長として無事つとめ

術師受験特例の制定、実験動物技

こで去る3月25日に新会長を決めあげることができるのかと心配で術指導員・準指導員制度の発足等るための臨時総会が開催され、会はございますが、光岡前会長が築技術者のさらなる資質向上を図る

員の皆様方のご推挙により、図らいてこられた路線を引き継ぎ、会とともに動物福祉の視点からの模ずも私が残された任期を引き継ぐ員の皆様方また関係諸氏のご支

擬調査並びに自主管理の考え方にこととなりました。

援、ご協力を得て、その役目を果基づく第三者評価方式の構築などたしたいと思いますのでよろしくを検討していると聞き及んでおりお願い致します。

ます。

私と社団法人日本実験動物協会とのご縁は協会が設立された当時、研修事業の専門委員を3年間、さて、日本実験動物協会も創立

このような諸課題に対し、微力

また高品質実験動物改良資源確保

20周年という節目を迎えますが、ではございますが全力を尽くして定着事業のウサギ中央総合検討会

実験動物を取巻く環境も大きな転取組みたいと存じますので、会員の委員を平成8年から4年間仰せつ

換期にきております。製薬業界は並びに関係団体そして関係各位のかった程度で特に取り上げるほど海外の大型合併に引続き、わが国

ご理解とご支援を重ねてお願い申の貢献をした訳ではありません。

においても大型の合併が相次ぎ、し上げる次第です。

今回全く思いかけずに会長というＩＣＨの推進、動物福祉の問題に

4

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第52回日本実験動物学会
総会開催に向けて
大会長

関口 冨士男（第一製薬（株））「実験動物の原点に立ち返って」

114演題をポスター発表とさせてせん。今回、「実験動物の原点」

をテーマに、第52回日本実験動物

いただくことに致しました。なお、に立ち返って動物実験を見つめ直学会総会を平成17年5月18日（水）

ポスターの場合も１分間のポスタ

すに当たり、それを支えている実〜20日（金）の３日間、東京都江戸ーレビュウーをしていただきま験動物の品質、飼料の品質、動物川区にある「タワーホール船堀」

す。

実験施設・設備・器具・器材の有で開催致します。総会は一年おき

過去51回の総会で、民間企業か用性などについてあらためてスポに関東地区で開催されていますらの大会長としては一度だけ、ットをあて、関係者の理解を一層が、東京の東の外れ、荒川と江戸1998年に長野県松本文化会館で開深めていただける企画を試みまし

川に挟まれた下町情緒豊かな江戸

催された第45回総会において中外た。

川区での開催は初めてです。近く製薬（株）の高垣善男先生が務めら

私自身、動物管理の立場においには東京ディズニーランド、ディ

れたことがあります。今回が2回て日頃よりマウス・ラットのSPF

ズニーシーがあります。このよう目ということで、民間色を出しな

レベル維持に苦労していることかな環境の中、リラックスして気楽がらも産官学が一体となるよう

ら、今回は特別シンポジウムでなムードで多くの人とコミュニケに、総会の雰囲気、企画、シンポ「実験動物の微生物学的品質を考ーションをとりながら、「実験動ジウムなどにおいて種々検討してえる」をテーマとして取り上げ、物の原点」に立ち返って動物実験

おります。さいわい産からは製薬

みなさんと一緒にディスカッショのあり方を見つめ直してみたいと

業界、実験動物生産・販売業界、ンさせていただきたいと思ってい考えております。運営スタッフは、

飼料生産・販売業界、実験動物施ます。そのようなことから実験動お揃いのオフィシャルジャンパー

設・設備・器具・器材業界など、物生産関係からは「動物実験におという出で立ちでスムーズな運営

官および学からは日頃より交流をける性差の問題を考える」、実験に務めますので、皆様もネクタイ

いただいております諸先生方から動物施設・設備・器具・器材関係を外して、リラックスした服装で多大なるご協力をいただき、順調

からは「実験者にとって使いやす参加していただきたいと思いまに大会の準備が進んでおります。

い動物実験施設へ ―模索と展望

す。

実験動物関連の産業界、特に日本―」、製薬関係からは「GLPと動本総会では演題発表を口演とポ

実験動物学会および日本実験動物物実験」のテーマで、それぞれシスターの二本立てで行うことと協会の会員会社の方々は、日頃よ

ンポジウムを開催していただくこ

し、200演題の申し込みがありまり実験動物の発展を強力に支えてとに致しました。また、学術集会したのでプログラム委員会においいる立場でありながら、中々現状

委員会主催で「比較ゲノム学の視て検討した結果、86演題を口演、を理解していただく機会がありま点から実験動物を考える」、日本
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第52回日本実験動物学会 総会開催に向けて疾患モデル学会との協賛で「行動「一日一善（膳）」のすすめ―のテ

東京都内では初めてのウエルカ異常モデルマウスの新展開」のテーマでご講演をいただきます。

ムパーティーを、大会前日に東京ーマでシンポジウムも開催してい恒例の６つの関連集会および４湾に面した葛西臨海公園内の「江つのワークショップに加え、ラン戸川区シーサイドホテル」で開催

さらに講演会も企画しており、

チョンセミナー、ナイトセミナー、いたします。東京ディズニーラン

教育講演では「エマージングウイ

さらに若手研究者が実験動物の将

ドの花火を見ながらのガーデンパルスの病原性」のテーマで河岡義来を語り合う本総会主催の自由セーティーですので、どうぞ奮って裕先生（東大医科研）に、また今ミナーも開催致します。日本実験

参加いただき十分にお楽しみくだ

回は市民公開講座を開設し、北野

動物器材協議会のご協力により、さい。

大先生（淑徳大教授、江戸川総合

実験動物関連器材・商品の提示も大会会場は都営新宿線船堀駅の人生大学学長）司会のもと、SHR

例年より多い150コマを用意してすぐ前で、アクセスはとても便利

等疾患モデル動物の開発・研究、おります。今回は、スペシャル企です。第52回総会を盛会に運営す

カスピ海ヨーグルトなどでお馴染画として各社毎に専用に使用いた

べくスタッフ一同、万全の準備を

みの家森幸男先生（WHO循環器

だけるホスピタリティールームを整え、多くの皆さまの参加をお待疾患専門委員、京大名誉教授）に、10室用意いたしましたが、大変好ちしております。

「世界調査からみた食と健康」―

評ですでに満杯の状態です。

ただきます。

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以上

KANAZAWA

第39回日本実験動物技術者協会
総会開催に向けて
第39回日本実験動物技術者協会総会会長

中村 由季子

平成17年６月24日（金）、25日（土）の両日、金沢市の県立音楽堂を会場として、第39回日本お知らせ
金沢総会の参加事前申込は、オンライン登録

実験動物技術者協会総会が開催されます。10年です。ホームページより登録できます。登録のぶり北陸支部 が主管となっての総会です。昨際に不明な点がございましたら、どんな些細な

年の長崎大会が大成功を収めただけに、金沢総ことでも構いませんので、どうぞ遠慮なくご連

会は少々物足りなさを感じるかもしれません。
しかし、動物輸入届出制度など さまざまな問
題がクローズアップされる中で、全国から立場の異なる技術者が一堂に会し、互いに、情報や絡下さい。参加登録につきましてのお問い合わ
せは下記までお願い致します。
（株）日本旅行金沢支店
担当 森川和重 090-4682-3456
E-mail: morikawa@mbi.nifty.com

意見を交換するという機会は多くはありません
ので、総会という場を大いに活用して頂きたいと思います。そのためにも総会関係者一同で、気負いなく活発に話せる総会の雰囲気作りに努
めてまいります。
北陸支部の会員数は33名で、技術者協会運営規程に定められている支部設置の条件にさえあてはまっていませんが、小原理事長をはじめ、多くの方々に助けて頂いて総会に向けての準備をすすめております。総会の内容につきまして
はホームページをご参照頂ければ幸いです。新
しい情報が入り次第、更新しております。
第39回総会ホームページ
http://www.labanimal.org/jaeat/2005/

町歩きが楽しい城下町金沢。ご参加の皆様に、ゆっくり歩いてみて頂きたいと思います。より多くの皆様のご参加をお待ちしております。

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a. 新生児由来
ng卵子

﹁
単
為
発
生
マ
ウ
ス
︱
か
ぐ
や
の
誕
生
﹂

e. 成熟した核置換卵子

b. 成熟雌由来fg卵子

c. 核移植d. 体外成熟培養

g. MII分裂装置の移植

f. 排卵卵子

h. 卵子の人為的活性化

i. 再構築されたng/fg
単為発生胚

図1．核移植によるng/fg 単為発生胚の再構築

世界中に紹介された。今まで哺乳込まれた後天的遺伝子修飾により類においては、受精を介すること説明される。哺乳類では、主に雄なく雌のゲノムのみで個体発生をゲノムでのみ発現する遺伝子また遂げることは全く無理だと信じらは主に雌ゲノムでのみ発現する遺れており、 かぐや

これまでの伝子が存在する。これらの遺伝子概念を覆す成果であった。ただ生はインプリント遺伝子と呼ばれ、物界を見渡すと、他の多くの生物

100〜200程度存在すると推定されでは卵子のみから個体発生を行うており、現在までに80を超える遺単為生殖を完全には放棄していな

伝子が報告されている１）。それゆい。鳥類ですら、七面鳥などで見え、雌ゲノムのみに由来する単為られるように、卵子が受精するこ発生胚では、雄ゲノムでのみ発現となく孵化することが知られていすべきインプリント遺伝子が発現る。しかし、胎生となった哺乳類

せず、その一方で、雌ゲノムでのでは、後成的遺伝子修飾機構によみ発現するインプリント遺伝子がって雌雄ゲノム間に機能差をもた過剰に発現することになる。このらすゲノムインプリンティングのようなインプリント遺伝子発現の竹取物語のヒロイン かぐや姫

獲得と同時に、単為発生を阻止す

過不足が原因で、単為発生胚ではは、翁により竹の中から見つけらる仕組みを獲得する必要があった

正常な個体発生を遂げることが全れた月からの光り輝く美しい使者のかもしれない。

く不可能であると考えられる。こ

河野 友宏
東京農業大学応用生物科学部
バイオサイエンス学科 教授

はじめにのようなインプリント遺伝子の親である。私たちが、今回世界で初めて誕生させた単為発生マウス

研究の背景

アレル特異的な遺伝子発現を制御

かぐや （図2d）は、謎を秘め哺乳類の個体発生に精子およびする情報の刷り込みは、雌雄生殖たチャーミングなお姫様として、卵子に由来するゲノムの両者が不細胞が形成される過程で行われる可欠である理由は、ゲノムに刷りはずである。

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「単為発生マウス―かぐやの誕生」

る28匹の胚が妊娠満期にまで発生

そこで、我々は、まず、新生児の未成熟な卵子は、ゲノムインプ

H19遺伝子KOマウスを用いたしていることが判明した。その内リンティングを完了していないと単為発生胚の発生延長

訳は、死亡胎仔18匹、生存胎仔10仮定し、この未成熟な卵母細胞に７番染色体の遠位部に位置する匹であった。生存が確認された産雄ゲノムの役割を担わせるため

Igf2およびH19遺伝子は、図3に示仔のうち8匹は、死亡胎仔の表現に、核移植技術を駆使して排卵卵したように、H19遺伝子の上流に型とほぼ同様で、形態的には若干子（これに本来の雌ゲノムの役割

あるDMRのメチル化によって発発生遅延が認められ、また、発育を担わせる）と組み合わせた胚を現が制御されている。そこで、は明らかに抑制されており、体重構築する手法を開発した２）。手法

H19遺伝子の転写領域とその転写は野生型の60％程であった。これの概略は図１に示した。このよう調節領域を欠損したマウス

らの産仔は、自発性呼吸することに非成長期卵子ゲノムと成熟した（H19∆13）新生仔の卵母細胞と成なく、子宮から回収後20分以内に卵子ゲノムを持ち合わせた胚を熟野生型マウスの排卵卵子ゲノム死亡した。ところが、残りの２匹

ng/fg胚と呼ぶこととした。胚操からなる雌核発生胚を図1に従っは明らかに正常な形態の産仔とし作を受けていないマウス単為発生て構築し、その発生能を詳細に検て誕生し、自発性呼吸を開始した

胚は、胎齢9.5日までに必ず致死討した7)。その結果、8.2％にあた（図2c）。このうち１匹は、 かぐとなるが図２a、我々が作成した単為発生胚は、臓器形成をほぼ終えた胎齢13.5日にまで発生した（図２b）２）。さらに、個体発生を完了させることができない理由をa.
Surani et al.,Nature,
1983
E9.5

b.
Kono et al.,Nature Genetics,
1996
E13.5

c.
Kono et al.,Nature, 2004d.
産子を分娩した
KAGUYA

正常新生子

突き止めようと、単為発生胎仔の遺伝子発現を解析したところ、改変すべき遺伝子の候補の特定に至った。すなわち、雄アレルで発現するIgf2（インスリン様成長因子
図2．単為発生マウス胚の発生延長

II型）遺伝子が発現していないこと、およびIgf2と対をなし雌アレ
ルから発現されるH19遺伝子（RNA）が過剰に発現していることが判明した。そこで、インプリ

enhancers
♀

Igf2

DMR

H19

♂

Igf2

CH3
DMR

H19

♀

Igf2

a. Wild typeenhancers

ント遺伝子のH19を欠損し、Igf2遺伝子を発現するようにした遺伝
子欠損マウスの新生仔に由来する卵子を用いて実験を行うことにより、両遺伝子の発現量の是正と発enhancersb. ∆13Kb H19 mutant
enhancers♂

Igf2

生延長の誘導を試みた3,4）。
図3．卵子構築に使用したノックアウトマウスにおけるIgf2 およびH19 遺伝子の発現

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「単為発生マウス―かぐやの誕生」

や と名付けられ、里親につけ保いるかのようにも見える。少なくd）哺乳動物の個体発生に対する育させたところ、正常に発育してとも哺乳類の雄は、自らの遺伝情雌雄ゲノムの役割を解き明か

成熟個体に成長した。さらに、交報を例外なく確実に子孫に伝えるすことに繋がるものと期待さ配により妊娠が成立し無事正常産生殖方法を獲得したのである。一れる。

仔を分娩したことから、正常な繁方、雌側に目を向けると、胎生でe）幹細胞テクノロジーは、再生殖能力を保有していることも証明あるために生じる妊娠による自身

医療の領域で重要な研究課題された（図2d）。また、他の１匹の生命の危険性を可能な限り軽減となっており、単為発生胚には生存可能なことを確認後、 かしようとしている姿が垣間見え

正常に近い性質を持たせるこぐや 誕生の謎に迫るため遺伝子る。雌雄それぞれが利害関係を主とができれば、幹細胞を作製

解析に供試された。以上のごとく、張しあった結果、受精による生殖する胚として適切な材料とな

ゲノムインプリンティングの改変

方法が選択され、単為生殖は排除り得る。

により、卵細胞に由来するゲノムされたのであろうか５）。

おわりにのみを持つ単為発生マウスの生産に成功した4,5）。このことは、哺乳応用への可能性

この研究は決して完結したのも類の個体発生にとって、生殖細胞

かぐや が誕生し、単為生殖ではなく、むしろ今後の可能性を形成過程で行われているDNAメが様々なバイオテクノロジー分野示唆した段階にある新しい研究領

チル化を基軸とする遺伝子修飾機で貢献する可能性が見いだされ域といえる。さらに、生殖細胞の構が、雌雄生殖細胞の機能を制御た。現在考えられる応用の可能性

エピジェネシスによる遺伝子発現

し、決定的な機能差を生み出し、を以下にまとめてみた。

制御機構の解明と人為的な調節の単為発生を阻止する機構として機a）哺乳類における新たな個体生可能性を追究して行きたい。哺乳

能していたことを明確に証明して産システムにより有用動物の類における第３の生殖システムをいる。

育種、および雌雄個体の選択

構築しようとする単為発生研究

的生産技術（雌雄の産み分け

は、これまでに多くの方からご教等、雌個体のみ又は雄個体の授／ご支援をいただいた。2002年の誕生は、ゲノみを選択的に作成する技術）

度からはBRAINの研究課題に採ムレベルにおける雌雄の競合を示

等のバイオテクノロジー分野

択され研究費の支援を受け現在研した良い例であろう。上述を例にの発展に貢献する可能性を示究を展開している。関係者各位にとってみれば、雄の生殖細胞がしている。

謝意を表したい。

性と KAGUYA 誕生の意味
KAGUYA

H19およびIgf2遺伝子の発現制御b）生殖系列細胞におけるゲノム機構を獲得したことによって、ほの機能獲得機構の解明に大き

参考文献

乳類の雌は卵子のみで単為生殖個く貢献し、生殖細胞の高度利

1. http://www.mgu.har.mrc.ac.uk/
imprinting/imprinting.html.

体を誕生させることができなくな

用に繋がる新しい視点を提供ったのではないかと解釈できる。

している。

個体発生という最もダイナミックc）体細胞クローンなどで発症しな生命現象において、あたかも雌ている発生異常と後成的な遺雄ゲノムはそれぞれの意志を持

伝子修飾の変化による遺伝子

ち、自らの遺伝情報を如何に効率発現異常との関連についての的に次世代へ伝達するかを競って解明に貢献する。

10

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2. Kono, T., Obata, Y., Yoshimizu, T.,
Nakahara, T. & Carroll, J. Nature
Genetics 13, 91-94 (1996).
3. Kono, T., Sotomaru, Y., Katsuzawa,Y. & Dandolo, L. Dev Biol 243, 294300 (2002).
4. Kono, T., et al., Nature 428, 860-864(2004).
5. 河野友宏、尾畑やよい、小川英彦 蛋
白・核酸・酵素49, 2123-2130 (2004).

The skin disease of
シリーズ連載 ②

皮膚疾患「犬の皮膚腫瘍」

The

DOG
日本獣医病理学専門家協会
JCVP認定獣医病理学専門家
麻布大学生物科学総合研究所教授

代田 欣二

腫瘍は、元々その組織に存在する細胞が異常な増殖（腫瘍細胞になる）を起こしたものです。したがって、腫瘍の名称というのは腫瘍細胞が生まれた元の細胞や組織（発生母地）の名称がついている訳です。例えば、肝細胞癌といえば、これは肝臓を構成する肝細胞が癌化したものという訳です。本稿ではイヌの皮膚腫瘍について解説しますが、前述しましたように腫瘍の名称や分類は形態学が基礎になっていますので、最初に皮膚の構成要素をについて触れ、それから腫瘍について述べることにします。

（胚芽層）、有棘層、顆粒層、淡明す。

皮膚の構造（図-1−P16参照）

層そして最外層に角質層（角化層）

真皮と皮下組織は結合組織であ皮膚は表面から表皮、真皮そしてとなっています（図-2−P 16参照）。

り、発生学的に間葉（中胚葉）由皮下組織の３層からなり、表皮と基底層は表皮の細胞を補充する場来です。真皮は密な結合組織です

真皮の境界部には基底板（基底膜）であり、正常な状態で細胞分裂像

が、この部分には皮膚付属器と呼が存在します。イヌから皮膚を採が認められます。基底層にあるケ

ばれる組織が存在します。これら取する時に、剥離して皮膚として

ラチノサイトは分化程度が低く、には表皮から連続して形成されて私達が採材するのは表皮と真皮の核が大きく細胞質の狭い細胞で、いる皮膚付属器、すなわち毛とそ

部分で、皮下組織は採材した皮膚ここから表面に向かって徐々に押の莢である毛包、毛包に開口する

サンプルにも体の方にも残りまし上げられ、移動と共に分化し、皮脂腺やアポクリン汗腺、イヌです。これは、表皮と真皮の結合は各層を形成しながら最終的に角化

は肉球の皮膚に開口するエックリ

タイトで、皮下組織はルーズな組層に達し、高度に角化し核を失いン汗腺（肉球腺）があります

織（疎生結合組織）から構成され扁平となり、パイ生地のように層（図-3−P 16参照）。また、立毛筋ているからです。

を形成し、最終的に剥離・脱落しも一端を毛包最外層の結合組織性

表皮は層状構造（重層扁平上皮

ます。表皮にはケラチノサイト以

毛包に付着する形で存在します。

と呼ぶ）からなりますが、この大外に、メルケル細胞（触覚細胞）、

皮下組織には結合組織性線維の部分はケラチノサイト（角質化細メラニン色素を産生してケラチノ

他、様々な量の脂肪組織（皮下脂胞）とよばれる一連の上皮細胞かサイトに分配しているメラニン細肪）が存在します。さらに、真皮らなります。重層扁平上皮の層状胞、表皮内抗原提示細胞であるラや皮下組織には肥満細胞、組織

構造は、基底板に接して基底層

ンゲルハンス細胞などが存在しま

球・マクロファージ、樹状細胞
LABIO 21 APR. 2005

11

シリーズ連載 ②の皮膚疾患「犬の皮膚腫瘍」（抗原提示細胞）が存在し、リン

〜2,600例の腫瘍）がありますが、平上皮癌（図-4−P 16参照）で、パ球も遊走していると考えられてその中で発生が多い腫瘍はほぼ共

これは皮膚癌として代表的な腫瘍います。

通しており、トップ10として、肥です。扁平上皮癌はケラチノサイ

満細胞腫、肛門周囲腺の腺腫、脂トが癌化したものですから、表皮

肪腫、皮脂腺過形成・腺腫、線維に連続して増殖し、外方性発育とさて、このように皮膚には多種

肉腫、メラノサイトの腫瘍、組織ともに深部に浸潤・増殖します。

多様な細胞が存在するため、多く

球腫、扁平上皮癌、血管周皮腫、組織像は腫瘍の分化程度によっての種類の腫瘍や腫瘍類似の病変が基底細胞腫（現在の分類では、ほ様々ですが、典型的なものは腫瘍形成されます。特にイヌでは皮膚

とんどが毛芽腫と思われる）が挙組織内に 癌真珠 という角化細に発生する腫瘍は多く、イヌに発げられています。

胞の塊を形成します。

イヌの皮膚腫瘍

生する腫瘍全体の３分の１を占め皮膚の腫瘍は病理組織学的に、また、特徴的な良性腫瘍としてるとの報告があります。また、皮上皮系腫瘍、メラニン細胞の腫瘍、は、イヌパピローマウイルスによ膚の腫瘍の発生頻度は、イヌでは円形細胞の腫瘍、間葉系腫瘍に大るウイルス性乳頭腫が挙げられま

10万頭あたり450とされており、きく分ける事が出来き、それぞれす。通常は１歳くらいの若いイヌ

やはり動物の中で腫瘍の発生が多に良性および悪性腫瘍がありまの口腔内に発生することが多く、いネコの10万頭あたり120というす。病理診断で用いる動物の腫瘍

自然消褪する事が知られていま

データと比較しても、かなり頻度の細かい分類は、World Health

す。体表の皮膚に発生する事は比が高いことがわかります。

Organization (WHO) による動物

較的稀ですが、ウイルス性の封入イヌでは皮膚腫瘍のおおよそ

腫瘍組織分類に従って行われてお体がパピローマウイルスに感染し20％〜30％が組織学的に悪性腫瘍

り、本稿でもその用語を使用しまて増殖した腫瘍細胞の核内に認めとされており、一般的に年をとる

すが、先に述べましたようにイヌられます。

ほど発生のリスクは高くなりまの皮膚には多種の腫瘍が発生します。また、ある種の腫瘍では、ウ

すので、本稿では上記の発生頻度

イルス感染、日光あるいは放射電が高いものを中心に抜粋して解説

離線、ホルモンや遺伝子異常、ワします。

クチン、熱傷、免疫異常などが発（2）付属器腫瘍（付属器への分化を示す腫瘍）■ 1.毛包系腫瘍
ここに分類される腫瘍は、腫瘍生と関わることも知られていま

イヌの皮膚に良く認められる腫瘍細胞が毛包を形成する細胞（毛包す。

1. 上皮系腫瘍

上皮）やその前駆細胞に類似し、（1）表皮を構成する上皮細胞（ケまた、腫瘍細胞の配列やそれらが皮膚の腫瘍の中ではどのようなものが多いのかという事について

ラチノサイト）由来の腫瘍形成する腫瘍の構造が毛包に類似は、アメリカ、イギリスあるいはイヌの皮膚の上皮系悪性腫瘍とするものです。しばしば嚢胞構造

オーストラリアでの調査（1,000

して最も発生頻度が高いものは扁をとり、内部に角化細胞やケラチ

12LABIO 21 APR. 2005

The skin disease of

The

DOG

ンが堆積しますが、毛のような構られます。悪性腫瘍は皮脂腺（マく発生します。癌細胞は浸潤性が造物が腫瘍細胞によって形成されイボーム腺、肛門周囲腺／肝様腺）

強く外科切除が困難な場合が多る腫瘍もあります。嚢胞壁が破裂

癌（図-7−P 17参照）で、その発く、仙骨リンパ節など局所リンパした場合には周囲に強い炎症が引生頻度は高くはありませんが、深節から内臓転移を起こすこともあき起こされます。イヌでの毛包系部への浸潤性が強く、局所リンパります。また、症例の4分の1以上腫瘍の発生頻度は高く、ほとんど節や肺等に転移する事がありまに高カルシウム血症が認められるは良性腫瘍で悪性腫瘍は稀です。

す。これらの腺の上皮腫〜（皮脂と言われますが、これは腫瘍細胞

腫瘍の種類は多いのですが、代表

腺上皮腫等）と呼ばれる腫瘍もイ

からのPTH-rP（上皮小体ホルモ

的な良性腫瘍として毛芽腫、毛包ヌに良く見られます。この腫瘍はン関連ペプチド）産生によると考上皮腫、毛母腫などが挙げられま

最近ではlow-grade malignancyとえられています。耳垢腺癌もイヌす。中でも毛芽腫の発生頻度は最され、良性・悪性の境界に位置す

では稀でなく、局所リンパ節、肺も高く、新しいWHO分類が1998

るものと考えられています。

に転移することがあります。一方、年に出される前に基底細胞腫と診断されていた腫瘍のほとんどが、汗腺でもエックリン腺の腫瘍は動■ 3. 汗腺の腫瘍物では稀とされています。

この腫瘍であると考えられます。

アポクリン腺とその変形腺の腫瘍

腫瘍細胞は、胎生期の毛包形成時

アポクリン汗腺、耳垢腺（耳道に認められる原始的な毛芽の細胞腺）、肛門嚢のアポクリン腺は発に類似しています（図-5−P 16参

生学的に同じもので、腫瘍の形態

爪は表皮の最外層である角質層

照）。

は類似しています。この中で、アが厚くなったもので、基本的に爪ポクリン汗腺や耳垢腺の良性腫瘍の下の爪床は皮膚と同じ構造になである各々の腺腫はイヌでしばしっています。イヌではこの部分にば認められます。外耳道にある耳扁平上皮癌（爪下扁平上皮癌ない眼瞼に存在するマイボーム腺、垢腺が腫瘍化すると内腔が不規則し爪床扁平上皮癌）がしばしば発

肛門周囲や皮膚に散在性に認めらになり、耳道が狭くなる事が多く、生します。

れる肛門周囲腺／肝様腺は、皮脂

臨床的に慢性外耳道炎との鑑別が腺と発生学的に同じもので、皮脂難しい事があります。また、悪性腺の変形腺です。したがって、こ腫瘍としては、体表に出来るアポ

イヌの皮膚に発生するメラニン

れらの腫瘍は形態も類似しておクリン汗腺癌があり、肉眼的に結細胞由来の腫瘍には、良性およびり、イヌに大変多く認められます。

節あるいはびらん・潰瘍を形成

悪性腫瘍があります。いっぽう、皮脂腺（マイボーム腺、肛門周囲し、一見、皮膚炎様病変を形成す

口腔粘膜や口唇部皮膚・粘膜境界腺／肝様腺）腺腫 （図-6−P 17参る事があります。イヌの肛門嚢の部のメラニン細胞の腫瘍はほとん

照）は良性で、イヌでは良く認めアポクリン腺癌はメスのイヌに多どが悪性です。皮膚の良性腫瘍の■ 2. 皮脂腺およびその変形腺の腫瘍■ 4. 爪床腫瘍（爪の下から発生する腫瘍

2. メラニン細胞の腫瘍

LABIO 21 APR. 2005

13

シリーズ連載 ②の皮膚疾患「犬の皮膚腫瘍」

多くはメラノサイトーマ（皮膚メす。そして、腫瘍性増殖が表皮内に分けられている。一般に、グレ

ラノーマ、良性メラノーマ）（図-で見られるものを表皮向性皮膚リードII、IIIの腫瘍は切除後の再発

8−P 17参照）と呼ばれるもので、ンパ腫（図-10−P 17参照）、真皮リスクも高いとされ、予後とグレ

イヌでは有毛部に発生します。イ

や皮下組織に見られるものを非表

ードのある程度の相関があること

ヌの悪性黒色腫（図-9−P 17参照）

皮向性皮膚リンパ腫と呼び、イヌから、現在までこの組織グレーデのほとんどは、上記の様に口腔やでは両タイプが認められます。表ィングが最も頻繁に腫瘍の病理学

口唇皮膚粘膜境界部に発生したも皮向性皮膚リンパ腫はヒトの菌状的評価に用いられています。

ので、有毛部皮膚のそれは悪性黒息肉腫mycosis fungoidesに類似

組織グレーディングの判定には色腫の10％程度です。腫瘍の増殖

し、リンパ腫細胞が皮膚や皮膚粘どうしても病理学者の主観も入っ速度は速く、局所リンパ節や肺に膜境界部の表皮内や付属器上皮にてしまうことから、より客観的な転移します。爪の下に発生する悪浸潤、増殖しますので、皮膚に角織学的評価方法の検討が多くなさ

性黒色腫は動物ではイヌのみに見化亢進、落屑、脱毛、紅斑、肥厚、れており、最近では、プロトオン

られます。良性・悪性の鑑別にはびらん、潰瘍、腫瘤形成などの病

コジーンc-kit遺伝子産物である

病理組織検査が必要です。通常、変が形成され、これらが消退と再KITの免疫染色性やc-kit遺伝子のメラニン細胞の腫瘍はメラニン色

発を繰り返しゆっくり進行します

イントロン11の欠失の分子生物学素を持ち、肉眼的に黒く、顕微鏡ので、慢性皮膚炎との鑑別が必要

的検出などが有用である事が指摘

的にも腫瘍細胞が色素顆粒を持っです。リンパ腫は進行すると最終されています。また、一般的に、ていますが、中には色素産生が少的に、内臓やリンパ系組織などや口腔、爪床、包皮、鼻鏡などに発ないかほとんどなく、肉眼的に黒

全身に広がります。

生するものは組織グレードにかか

くなく、細胞にも光学顕微鏡的に（2）イヌの皮膚肥満細胞腫

わらず、より挙動が悪いとされて色素がほとんど認められない事も有ります。

イヌの皮膚に発生する腫瘍として最も多いものの一つです。腫瘍

います。
（3）組織球系腫瘍（ヒトではメラノーマという用語は基本的には悪性と考えられておイヌの皮膚組織球腫（図-11−Pは悪性腫瘍を指し、獣医学用語とり、皮膚に弧在性ないし多中心性

17参照）は最も一般的な犬の皮膚は違いますので、注意が必要です）に形成され、局所リンパ節に転移腫瘍の一つで、発生のほとんどはし、その後内臓に転移する事があ

４歳以下の若い動物に見られま

3. 円形細胞の腫瘍

ります。病理組織像による組織グす。頭部、耳に好発し、通常単発（1）皮膚リンパ腫

レーディングが行われており、グで、ドーム状ないしボタン状の外リンパ腫はリンパ球の腫瘍で、レードI／高分化型（３年生存観を示します。腫瘍細胞は表皮ラ

通常はリンパ系組織に病変が形成率：約90％）、II／中間型（３年ンゲルハンス細胞由来とされ、活されますが、皮膚に病変が主座す

生存率：約55％）、III／低ないし性化T細胞の作用によって自然退る場合には皮膚リンパ腫と呼びま未分化型（３年生存率：約15％）

縮します。

14

LABIO 21 APR. 2005

The skin disease ofThe

その他、良／悪境界（中間、とされています。

intermediate）病変として、皮膚組織球症（皮膚反応性組織球症）、

DOG

な症例の写真をご提供頂きまし
た、大室獣医科院長・大室農夫先

5. その他

生に深謝いたします。

全身性組織球症（全身性反応性組

肉眼的に一見腫瘍に似た病変も織球症）、明らかな悪性腫瘍とし高頻度に認められますが、この中

参考図書て悪性組織球症という腫瘍がありには過誤腫や母斑と総称される先1. Goldschmidt MH, Dunstan RW,ます。

天性の組織奇形と考えられている

Walder EJ, Yager JA. Histologic

病変や種々の嚢腫があります。まClassification of Epithelial and

た、乳腺は皮膚に存在するほ乳類

Domestic Animals. World Health

Stannard AA, von Tscharner C,

4. 間葉系腫瘍

Melanocytic Tumors of the Skin ofOrganization International

最初に述べたように皮膚には間特有の腺組織です。イヌの乳腺に葉系の腫瘍（軟部組織腫瘍ともいは高頻度に腫瘍が発生し、両側のう）も多く発生します。この中で乳腺に多発して認められる事も稀

イヌの血管周皮腫について簡ではありません。通常乳腺腫瘍は

2. Hendric MJ, Mahaffey EA, Moore

単に触れておきます。この腫瘍は皮膚腫瘍には含めず、乳腺腫瘍とFM, Vos JH, Walder EJ. Histologic

血管周皮腫と呼ばれています

して独立して扱われています。イTumors of Skin and Soft Tissues ofが、実際のところ腫瘍の由来につヌでは悪性腫瘍に比較して良性のDomestic Animals. World Health

いては未だに解っておらず、WHO

乳腺腫瘍が多く、その中でも腫瘍

Histological Classification of Tumors

分類ではunclassified tumor

組織内に軟骨や骨が形成される良に分類され、悪性腫瘍と見なされ性混合腫瘍が最も多く発生しま

Pathology, Washington, D.C.(1998).

ています。生体にはれっきとしたす。この、良性混合腫瘍はヒトや

3. Meuten D.J.ed, Tumors in Domestic

血管周皮細胞 が存在しますが、他の動物では極めて稀とされてい犬の血管周皮腫ます。

Histological Classification of Tumorsof Domestic Animals. 2nd Series Vol.
III, Armed Forces Institute of
Pathology, Washington, D.C.(1998).

Classification of Mesenchymalの腫瘍細胞は

実はその性格を持たず、ヒトの血管周皮腫

以上、皮膚に原発する腫瘍につにも全く類似していて解説しましたが、この他皮膚いないのです。すなわち、血管周には転移性腫瘍も発生する事があ

皮細胞由来ではないらしいのです

ります。誌面の都合上かなり説明が、従来から仕方なくこの診断名が短くなってしまいましたが、詳を使っている訳で、 イヌの細は参考図書をご参照下さい。

をOrganization Internationalof Domestic Animals. 2nd Series Vol.
2, Armed Forces Institute ofAnimals, 4th ed, Iowa State Press,
Ames, (2002).
4. Scott DW, Milller WH, Griffin CE,
eds. Small Animal Dermatology, 6th
ed. Piladelphia, W.B. Saunders (2001).
5. Valli VE, Jacobs RM, Parodi AL,
Vernau W, Moore PF. Histologic
Classification of Hematopoitic
Tumors of Domestic Animals. World
Health Organization International
Histological Classification of Tumorsof Domestic Animals. 2nd Series Vol.
VIII, Armed Forces Institute of

必ず付けることになっています。

Pathology, Washington, D.C.(2002).

腫瘍とその周囲の正常組織との境最後に、執筆の機会を与えて下界は多くの場合不明瞭であるた

さいました、独立行政法人・産業

め、不完全切除による再発が多い

医学研究所、三枝順三先生、貴重

6. Withrow SJ, MacEwen EG,eds, Small
Animal Clinical Oncology, 3rd ed,
Piladelphia, W.B. Saunders (2001).

LABIO 21 APR. 2005

15

シリーズ連載 ②の皮膚疾患「犬の皮膚腫瘍」

表皮（ケラチノサイト、
メラニン細胞、ランゲルハンス細胞、
メルケル細胞）

角化層
顆粒層

毛包上部
（漏斗部）

有棘層

皮脂腺

表皮

基底層

真皮
（肥満細胞、
血管・結合織、末梢神経）
アポクリン汗線

肥満細胞
基底板
（膜）

毛包下部

真皮

毛球部
（毛母基細胞）
皮下組織（血管・結合織、
末梢神経）

図-1

図-2

表皮の構造

皮膚の構造と腫瘍発生母地

エックリン汗 管

エックリン原基

エックリン汗 腺
皮
脂腺

脂腺管

膚
付

胎生期
表皮胚細層

毛芽

毛包

アポクリン腺アポクリン管

属
器

毛母基

毛

重層扁平上皮表皮基底細胞表 皮（ケラ チ ノ サ イト）

真鍋、幸田（1997）を改変

図-3

表皮と付属器の発生

図-5

毛芽と毛芽腫左図は胎齢18日のラットの皮膚で、矢印は表皮胚細胞から下方に
伸長する
図-4

16

イヌの扁平上皮癌

LABIO 21 APR. 2005

毛芽で、右図の毛芽腫はこれに似る。

The skin disease of

The

図-6

皮脂腺腺腫

図-7

図-8

DOG

皮脂腺癌

皮膚の良性メラノーマ

上は表面、下は割面で黒い事が良く判る

図-9

悪性黒色種（口腔）

点線で囲った腫瘍の右側は黒いが、左側はメラニンが少ない。

図-10 イヌの表皮向性リンパ腫
体表に多数の皮疹が認められる。

図-11

イヌの皮膚組織球腫

LABIO 21 APR. 200517

日動協主催で「動物実験委員会のあり方」研修会開催される動物福祉に関連する問題は「動物の愛護及び管理に関する法律」の見直しの時期もあって、非常に関心の高いテーマである。動物実
験の試験計画書に対し動物実験委
員会がどのような議論をするか模擬委員会を行い、この機会にみん

研修会のプログラムは次の通り。
第一部 講演会

座長： 吉川泰弘（東京大学）

１．生産者の実験動物福祉委員会と日動協の模擬訪問調査

鍵山直子（自然科学研究機構）
２．動物実験における苦痛評価＜SCAW倫理カテゴリーの解説＞松田幸久（秋田大学）
３．動物実験委員会の現状（理化学研究所における動物実験管理体制）
加賀屋悟（理化学研究所）

なで３Ｒの理念を考え直してみようと企画した。平成17年２月９日（水）「動物実験委員会のあり方」
研修会と題して東京大学弥生講堂

第二部 模擬動物実験委員会
１．実験計画の審査のポイント ―３ＲとCost-benefit分析―
大和田一雄（山形大学）
２．実験計画の模擬審査にて日動協主催の研修会を開催し

議長： 八神健一（筑波大学）大和田一雄（前述）た。

①NMDAレセプターの抑制による疼痛の制御（疼痛実験）

時期的に関心の高いテーマであ②TMS9641の単回投与毒性試験

り、講師陣も揃い、会場も便利で③腹腔鏡下手術の手技確立と臨床応用のための実験収容能力も大きく、230名が参加④尾部懸垂法を活用したラットの循環調節機構の解明した。大盛況であった。模擬委員⑤光学計測法を用いた半慢性的生理実験会も活発な議論が行われ、総合討論は参加者からの質問も多く、大⑥遺伝子改変による疾患モデルの開発◆ 模擬委員青 木 貢 一（ 動 物との 共 生 を 考 える 連 絡 会 ）、尾 崎 明（ 理 化 学 研 究 所 ）、

いにもりあがった。予定時間を30

大和田一雄（山形大学）、片平清昭（福島県立医科大学）、加賀屋悟（理化学

分間延長し、５時30分閉会した。

研究所）、笠井一弘（リジョイス）、久原孝俊（順天堂大学）、小林英司（自治医科大学）、松田幸久（秋田大学）八神健一（筑波大学）

18

LABIO 21 APR. 2005

動物実験計画書の審査と動物実験委員会の基本姿勢「動物実験委員会のあり方」研修会に参加して神戸大学医学部附属動物実験施設 助教授● 塩見 雅志
昭和62年５月に「大学等におけ度が話題提供者ごとに異なり、審はないのか」などではないであろる動物実験について」という当時

査しにくそうに見えた。動物実験

うか。主観的な意見は一般市民のの文部省学術国際局長通知が出て計画書の審査には動物実験委員会

感情を認識する上では重要と思う

まもなく18年になる。各研究機関のポリシーが反映されるべきであが、実験計画書の審査にはそぐわ

では、当該通知に基づいて動物実り、そのポリシーは動物実験計画

ないと感じた。また、動物実験計

験委員会を組織し、動物実験に関書の書式に具現されていなければ画書は情報開示請求の対象となるする指針を定め、動物実験計画書ならない。とは言え、模擬審査会

文書であることから、研究機関のの審査を実施するようになった。

のあり方が良く示されていたと思社会への説明責任に対する考え方

しかし、これらの活動は各研究機う。とくに、比較生物学に基づくが表されたものでなければなら

関が試行錯誤を繰返し、研究機関

動物種の選定、エンドポイントにず、動物実験委員会による審査もごとに差異があるのが実情であろ関する議論は参考になった。しかそのことを前提に実施されるべきう。今年12月に予定されている「動し、現在広く実施されている遺伝であろう。

物の愛護と管理に関する法律（以子組換えマウスの作成や今後活発

計画書の審査には各研究機関で下、動愛法と略）」の改正を控え、になる可能性があるミュータジェ

差異がある。模擬審査も大切であ本研修会は良いタイミングであった。

ネシス等についての模擬審査を見るが、その前の段階として、審査

第一部の講演会では動愛法の改てみたかった。模擬審査に機関外における基本姿勢についての議論

正を睨んでとも思われる「動物飼の者が参加することには意義があを深める必要があるように感じ

育施設／動物実験委員会の模擬訪る。しかし、どのような角度からた。また、動物実験における倫理問調査」が印象に残った。訪問調のコメントを求めるかを事前に充的な対応については、現状の動物査の目的、動愛法の解釈に基づく

分議論しておく必要があろう。外実験や近い将来に主流になると考訪問調査のポイント、調査結果を部委員を加える目的は、一般市民

えられる動物実験を見据えて方針

受けての自主管理の考え方等、参の視点に立った客観的な意見にあを打出さなければならない。欧米考になった。第二部の動物実験計ると思う。例えば、「この研究での追随ばかりではなく、現在の我画書模擬審査会も大変興味深く拝動物を必要とする理由」、「この研が国の状況を踏まえて、今後どの聴した。しかし、審査される動物

究からどのような成果が期待できように体制を整えていくかについ

実験計画書の記載項目／記述の程るのか」、「より苦痛の少ない方法ての議論も望みたい。
LABIO 21 APR. 200519

（株）田辺Ｒ＆Ｄサービス● 仁田 修治

日動協研修会「動物の福祉を考える」に参加して動愛法改正を控えたこの時期、動物生産、飼育管理、実験等に従事す

さらに動物購入手続きに至る手順を声も聞く。学生時代にVitro実験ば覚える事は必須となった。

かりして来ているからな〜と、理解る関係者を対象とした今回の研修会

委員会は倫理（福祉）条項を精査はするものの、そのためにデータがは、日動協ならではのタイムリーなするのは当然であるが、実験方法さバラツキ、さらに実験回数や供試数企画であった。第二部では模擬とはらには研究の進め方そのものに対しを増やし、時間を浪費することなぞ

いえ、関係者による動物実験委員会ても指導を入れることもある。すな

企業内研究員のすることではないとの審査状況が初めて公開されるとあわち、実験の効率的実施である。供の教育・指導内容である。今や、飼って、迷わず参加した次第。

試数はもとより、実験意義・必要性

育管理ＳＯＰに「実験動物技術師二

主な製薬企業の動物実験実施に関に言及することも委員会業務の範疇級」資格を持たない者は飼育管理業

する承認方法（審査システム）は、としている。またそれを指摘できる

務に携われないと謳われている時代「研究総務部門連絡会」等の情報か委員を配置している。研究の効率的でもある。

ら概略を把握していたが、大学関係

実施とは大学等の研究員には馴染め

委員会業務として他に、動物飼育は全く未知である。従って、各機関ない言葉と思えるが、開発競争のさ施設および動物管理方法あるいは動の運用細則も判らずに「審査状況」

中、最も適切な動物種を選択し、少物実験実施状況に対して定期査察をの感想を述べることは出来ない。こない労力で洗練された手技をもっ行い、指摘事項に対しての改善報告

こでは私の関係する企業の方法、考て、再現性のあるデータを短時間・書の提出を部門長に義務付けていえ方の一端を述べ、その差異を参加

短期間に得ること。言い換えればる。すこし違う話であるが、飼育管した方あるいは読者がどのように感「３Ｒ」を最大限に意識した運営を理部門長に対しては、「防疫ルール」

じ取るか、個々の判断にお任せする

していることに他ならない。

破りの研究員に対する施設利用許可

福祉教育では、これらの思想を新の取り消し（研究不適格者の印）が関係する会社における動物実験承入社員の導入研修において徹底して出来る権限も与えられている。指認審査は、平成３年末より開始され、摺り込んでいる。動物福祉とは？を導・管理体制が厳し過ぎるとの声も現在に至る間、私も委員として委員

教えるため、法律的、宗教的、観念時に聞くが、時流を読めない者には会の立ち上げ、倫理審査に携わって的なお話だけでは学生時代の頭の切研究資格が無いとの基本姿勢が底流来た。この間、幾たびかの改定が行換えには不十分。企業内研究所とに有るからである。

われ、「審査システム」は大きく変は？から始まり経費管理に至るまで

今回の「模擬審査」では、敢えてわった。研究所が複数地域に分散さの考えを含めて教える事になる。動

質疑応答がし易い計画書にアレンジれているため、3年前からはIT化に物の保定一つ満足に出来ない研究員

し、参加者に対して動物の福祉問題踏み切り、申請書・計画書・終了報

は、動物実験をする資格もないとの点を理解し易くするという主催者側

告書は紙ベースからイントラ利用のキツイ言葉は私が入社した頃、先輩の工夫を随所に感じ取れるものがあ

電子「承認システム」に変更された。

から言われた言葉。動物実験を行うった。しかし、実験動物福祉とは？

この結果、全社同一基準による審査、研究員にはこの言葉、今も生き続けを議論する時期は既に去り、今は如複数人による同時審査が可能となるている。覚醒下で行われるADMEや何にすれば必要とする動物実験をす等、適切且つ効率的運用が可能とな

行動薬理学的評価系実験では、実験ることができるか、効率的な組織作

り、審査時間の大幅短縮に結びつい技術の質が問われることをしばしばり、システム構築が必要な時期と思た。そのため、研究員もその運用ル経験する。昨今、管理職からは実験えた。

ールを知った上で審査申請を行い、技術レベル下がっているとの嘆きのことにした。

20

LABIO 21 APR. 2005

空調システムの概要（アクアクリーン空調方式）
日本クレア株式会社

荒巻正樹

本装置は一般空調システムの間接空調とは異なり直接冷水を噴霧し、その中に空気を通過させるだけで夏季は冷却＆除湿、冬季は加熱＆加湿の基本条件である露点温
度作り、室内に吹き出されます。
この水の直接スプレーは、熱交換効率が高いことや空調機内の水タンク（約2.0トン）は蓄熱の役目をすることから、安定した温,湿度制御が得られます。
又、直接スプレーは空気の洗滌や脱臭に効果があり、特に動物室の臭気は水溶性ガス（アンモニア、硫化水素）系が多く含まれていることから除去効率が高く、脱臭の役
割も十分に果たしてくれます。
この様に、空気調和機の出口空気は清浄化されることから、レターン方式でも室内臭気濃度は低く、一般空調機（エアハン型、パッケージ型）と比較し約2倍のレターン量を増やすことができ、エネルギーの削減（全熱交換器不要など）になります。
又、空気中の粉塵や外部からのガスなども清浄化されることから、室内吹出口フィルター（HEPA＆中性能フィルター）の寿命も約3倍(弊社生育場にて比較）に延びるな
ど、交換費用やエネルギーの削減ができ、実験動物施設の空調設備としたは最も優れた『省エネルギー空調システム』の採用で安全な動物飼育環境を得ることができます。

LABIO 21 APR. 200521

を考慮しています。

■ 各装置の動作内容（薬液槽への薬液は次亜塩素酸ナトリウム：約

1．アクアクリーン空気調和機
本空調機は、全ステンレス製で気密性と断熱性の高いボックス構造ですが、内部にはス100ppm濃度を自動添加）2．水フィルター逆洗滌装置

プレーノズルと水滴分離装置（エリミネーター）

空気調和機は温、湿度のコントロールだけでが組込まれ水スプレーだけのイメージになっなく、空気洗滌と脱臭を同時に行なう為、水にています。
（写真−3参照）

洗い落とされた汚れや臭気は水に溶け込むこ

槽内は約2.0トンの水の保有槽と薬液槽（300㍑）があり、通常運転中は水タンクを冷とから水フィルターによる汚れの除去と周期的な水の入替工程が自動的に行なわれます。

却＆加熱し、循環ポンプにて水スプレーの中フィルターの目詰りは、自動的に逆洗滌工程に空気を通し次に水滴分離器（エリミネーター）

でポンプの水圧を自動弁の動作切替により、を通過させ、飽和空気（露点温度：13〜15℃）

逆から加圧し汚れを落とし排水へ放出します。

状態を作り室内に供給されます。
又、薬液槽は2回／週の割合で、スプレーポ
ンプの吸込口が薬液槽に切り替わり、空気調
和槽内を薬液噴霧し、消毒工程が自動的に行
なわれ、水槽内の菌の発生やカビの防止対策

この様な工程にも薬液が注入され、安全な消毒法で処理がおこなわれます。
3．前段処理フィルター：中性能フィルター処理（0.5ミクロン×90％）
外気及びレターン空気は空気調和機の水ス

医学・薬学・理工学者向けの生命科学を中心とした情報誌

ビオフィリア〜生命科学の未来を考える〜
生命科学に関するさまざまな情報の効率的な媒体として、総説、特集、連載、技術紹介、ニュース等を中心とする情報雑誌。

毎年3月･6月･9月･12
毎年
12月 各1010日発売
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定価 1,890円（税込）

詳しくはホームページ http://www.biophilia.jp/ をご覧下さい。随時、内容は更新していきます。
編集委員長 前島 一淑（慶應義塾大学名誉教授）
編集委員
海野 隆 （日本オルガノン株式会社主幹部員）
小林 英司（自治医科大学分子病態治療研究センター教授）
星 信彦 （神戸大学農学部教授）
吉崎 理華（(株)東レリサーチセンター研究員）
劉
陽 （慶應義塾大学医学部）

株式会社 アドスリー
22

LABIO 21 APR. 2005

〒164-0003 中野区東中野4-27-37
tel : 03-5925-2840 fax : 03-5925-2913

http://www.adthree.com

アクアクリーン空調方式

プレーで約60％は浄化されますが、ダクト内ど除去効率が高く（約60％以上）、中性能＆及び機器への汚れ防止やHEPAフィルターのHEPAフィルターの寿命は、一般空調方式と異寿命を延ばす目的から、前段処理として中性能なり約2〜3倍と長く、ランニングコストの低フィルターが取付られています。

減にもなります。

又、フィルターの交換時に動物室内への給気の停止は室内温、湿度の変化、室内圧力保持などが出来ないことから、フィルターBOX内は2層に気密分離され、フィルター交換時は切替方
式にて給気ファンを止めることなく、交換やメンテが可能となっています。

③ 動物室内の臭気対策
動物の臭気成分は、アンモニア、硫化水素、
プロピオン酸、その他数種あり、いずれも水溶性であることから水シャワーに溶け込み易く、有効な脱臭効果があることから、高価な脱臭装置は不要で定期的な水の入替（自動）で行なわれます。

4．前段加熱ヒーター
空気調和機出口に取付けられ、露点温度（13.5℃）の状態では、機器及びフィルターな
どに飽和空気（湿度100％）がふれ、結露や腐食などトラブル防止対策として、予め空調機出口温度を上げる目的の加熱ヒーターです。
（夏季16〜18℃ 冬季：18〜22℃）
又、冬季は室内温度調節用ヒーター（再熱）の補助的な役目を果たし、再熱ヒーターの故障で室温が大きく下がることを防止します。

④ランニングコストの低下
ランニングコストの高くなる原因は、取入れる外気量によって大きく左右されますが、『アクアクリーン』水シャワーは脱臭効果が高いことからレターン量を多く取ることができ、ロスナイ不要で有効なエネルギーの削減ができます。
又、冬季における外気量の増加は加湿エネ
ルギーを大量に必要としますが、本装置は水スプレーとレターン量により加湿エネルギー■ システムの特長

は僅かなエネルギーで済み、全体的に一般シ
ステムの30〜50％の削減が可能です。

（動物実験施設空調に必要な5ポイントの特長があります）⑤設備の耐用年数① 温、湿度の安定性
調機内部には1.5〜2.0トンの水を保有し、水の温度（露点温度）を年間同じ温度にするだけで湿度も一定となります。
水の比熱1.0に対して空気の比熱0.24からも理解できるように、水の温度変化は空気1／4倍にあたることから安定した制御が得られます。

② 外気導入からの汚染防止
一般的な動物室の空気導入はHEPAフィル

動物実験施設空調に関しては一般にアンモニアと消毒液などの影響で機器に腐食が発生し、数年で交換をするようになります。
『アクアクリーン』システムは、水スプレーで冷却することから、冷却コイルが無く、冷却コイルの腐食や目詰まりなどの心配はありません。
又、他の機器・設備に対したも腐食防止対策が施され、ステンレス製を採用し耐久年数を大幅に改善しています。

ターを最終処理とし、中性能フィルターで前段（配管なども鉄分による赤水対策として、ステ処理をしていますが、『アクアクリーン』空調機

ンレスを採用しています）

は水シャワーで外部からの汚れや排気ガスな
LABIO 21 APR. 2005

23

24

LABIO 21 APR. 2005

国立成育医療センター

2

1

9

-1

5

7

1C

6

8

1

動物空調（アクアクリーンシステム）設備フローシート

アクアクリーン空調方式

写真-1 機械室内機設置全体図

写真-2 空気調和機廻り設備機器

写真-3

写真-4 空調設備動力＆操作盤

空調機内部水シャワー冷却状況

Experimental Animals
Covance R. P, Inc 代理店

Japan Laboratory Animals, Inc.

取扱品目

各種実験動物の受託飼育
非GLPの受託試験
SPF・クリーン各種実験動物
動物用医薬品一般販売
輸入動物（Covance・Harlan・Vanny）：ビーグル犬・モングレル犬・サル類・遺伝子操作マウスetc.
その他実験動物 獣血液・血 清・臓 器 床 敷 飼 料 飼育器具・器材

株式会社 日本医科学動物資材研究所〒179-0074 東京都練馬区春日町6丁目10番40号
TEL（03）3990-3303
FAX（03）3998-2243

LABIO 21 APR. 200525

⑥睡眠障害モデルマウスの開発における偶然と必然(財) 大阪バイオサイエンス研究所
分子行動生物学部門・研究部長

裏出 良博

以来、20年以上も本酵素に関するなのは人である。情熱と好奇心に研究を続けている。こんなに長く、溢れ、正確な実験技術と卓越した

我々は、睡眠の基礎研究に取り一つの研究テーマを継続できたの観察眼を持つ研究者が、発見や発組んでいる。その研究の歴史は、は、大変幸運だったと思う。この明の必須条件である。先人もその1983年、京都大学・医学部・医化

数年は、「遺伝子から行動まで」ことは良く話された。
「とにかく、学第一講座（早石修教授、現大阪をモットーに本酵素の結晶構造解

やってみなはれ。」というのが当

バイオサイエンス研究所理事長）

析と遺伝子操作マウスの機能解析研究所の初代理事長であった佐治における「プロスタグランジン

を中心に、研究を進めている。

敬三サントリー会長（故人）の口

はじめに（PG）D 2による睡眠誘発の発見」

睡眠のような難解なテーマを相癖であり、「乱れたデータで自分に遡る。その後、新技術開発事業

手にすると、「使える技術は何での頭を汚すな。」というのは、早団（現科学技術振興機構）ERATOも使う」ことは当然で、様々な分

石先生の恩師であるアーサー・コ

早石情報伝達プロジェクト、当研

野を行来できる学際性を要求され

ンバーグ教授（スタンフォード大究所・酵素代謝部門を経由して、る。そして、「誰も考えないこと学）の口癖である。そして、これ現在の我々に引き継がれている。

を必死で考える」ことが習慣にならの要素がうまく組合わさると筆者は、PGD 2の睡眠誘発作用

り、「考え抜いたすえに偶然を期

様々な予想外の発見に結びつく。

が発見された当時、大学院生とし待する」ようになる。そして「常以下に、PGD合成酵素遺伝子操て同教室に在籍し、その後、日本識を越えた発見には、非常識な論

作マウスに関する研究エピソード

学術振興会の奨励研究員として理展開や偶然が必須である」と納を紹介する。

PGD合成酵素の精製を担当した。

得する。しかし、発見に最も重要

26

LABIO 21 APR. 2005

睡眠障害モデルマウスの開発における偶然と必然が最も明確な睡眠物質である。

睡眠物質としてのPGD2
睡眠の重要性は誰でも知っている。睡眠不足が続くとミスが増え、体調も悪くなる。２、３日の徹夜なら何とかなるが、徹夜を続けると、どんどん眠気が強くなる。そして、１週間も起き続けるのは至難の技だ。どうしてだろうか？いつも寝付きの悪い人でも、徹夜明
けには簡単に寝付ける。そして、眠気の強いとき、たとえ20分程度の短時間の睡眠でも頭はすっきりする。この間、頭のなかで何がおきているのだろうか？実は、脳内の睡眠物質の濃度が変化して眠気が左右されているのである。
「断眠中に睡眠物質が脳内に蓄積する」ことを世界で最初に証明したのは、20世紀初頭の日本の石
（1）

森国臣博士

とフランスのヘン（2）

リー・ピエロン博士である。

る。たとえば、アデノシンA2A受PGD 2による睡眠誘発の分子機容体拮抗薬であるカフェインは睡構を図１に示す（3-5）。睡眠物質と眠を妨げる。逆に、GABAA受容

してのPGD2は、脳を包むくも膜、体作動薬であるベンゾジアゼピン

脳脊髄液を産生する脈絡叢、ミエ

系の精神安定薬は睡眠導入効果をリンを作るオリゴデンドログリア

示し、風邪薬や抗アレルギー薬と細胞に分布するリポカリン型

して服用する抗ヒスタミン薬は眠PGD合成酵素（L-PGDS）により気を誘う等々である。では、これ産生され、脳脊髄液に分泌される。

らの情報伝達系に関与する遺伝子

そして前脳基底部に局在するDPの欠損や大量発現は、動物の睡眠受容体を刺激して、第２の睡眠物

覚醒にどのような影響を及ぼすの質であるアデノシンの分泌を促だろうか？我々は、L-PGDSの遺し、前脳基底部近傍のアデノシン

伝子操作から実験を始めた。

A2A受容体を持つ神経細胞を刺激する。その刺激は、視索前野に存

L-PGDS遺伝子操作マウスの作製

在する睡眠中枢に伝えられ、12年前、私が日本チバガイギー

GABA系の抑制性投射を介して後（現ノバルティス）国際科学研究部視床下部のヒスタミン系覚醒中

所から当部門の副部長に着任した枢を抑制し、睡眠を誘発する。こ際、部長兼務であった早石所長との情報伝達系は、従来から知られ江口直美特別研究員（現・当部門ている様々な睡眠覚醒調節作用を副部長）の３人で作戦を練り、L-示す物質の作用機構を説明でき

PGDSの遺伝子ノックアウト

彼らは、それぞれ独自に、長時間断眠させたイヌの脳脊髄液を別のイヌの脳内に投与すると、そのイヌが眠ることを発見し、断眠中に脳内に蓄積する睡眠物質の存在を予言した。その後、約１世紀の間に、動物の脳、血液、尿などから、約30種類にも及ぶ睡眠物質が同定された。その中で、PGD 2は最も強力であり分子レベルの作用機構

図１

PGD2による睡眠誘発機構の模式図

LABIO 21 APR. 200527

⑥（KO）マウスの作製とマウス用の会社との共同研究を開始した。そ漂う時に悲観的な事を考えると、

睡眠バイオアッセイ系の確立を最の結果、全データをDVDに記録

実験結果に反映されると私は信じ

優先課題として研究を開始した

するシステムが完成し、現在、世ている。こんな時こそ楽観的に考（6）。まず、江口博士が東京大学・

界の睡眠研究施設で標準ソフトとえ「幸運」をを待つのである。当

医学部の生化学講座（岡山博人教

して利用されている「スリープサ

時の研究室には、情熱に溢れ、好授）に出向して、マウスL-PGDSイン」が開発された。

奇心旺盛で、元気な研究者が既にの遺伝子クローニングを行い、次これらの研究と並行して、新た大勢集まり、外部の共同研究者といで、大阪府立母子保健総合医療に研究に参加した金岡禧秀特別研の交流も盛んになっていた。「そセンター（吉田進昭部長、現東京究員（現ハーバード大学・講師）のうち、なにか出てくる。」と念大学・医科学研究所教授）のもとがヒトL-PGDSを大量発現するト

じてしばらくすると、予想通り、

でES細胞での相同組み換え、胚ランスジェニック（TG）マウス

幸運の女神が微笑だした。そして、移植、キメラマウス、F1ヘテロの作製を担当し、これらの動物がこれらの動物の生理機能の異常がマウス、そして、KOマウスの作示す睡眠異常についての検討を始

次々と明らかになってきた。

製を行った。

めた。ところが、両マウスとも発

予想外の発見も多い。一例はL-

同時に、当時、マウスの睡眠測

育や行動パターンに明らかな異常PGDS-KOマウスの痛覚異常であ定を行っていた世界の３つの研究は見られず、ノンレム睡眠（脳波る （7）。アスピリンやインドメタ所、オーストリア・チューリッヒ

が緩やかになるので徐波睡眠ともシンなどの非ステロイド性抗炎症

大学（アレキサンダー・ボルベイ

いう。意識が無く脳を休息させる

薬が、PGの合成を止めて痛みを教授、アイリーン・トブラー教と考えられる睡眠）とレム睡眠緩和することは知られていたが、授）、フランス・リヨン大学（レ（Rapid Eye Movementの頭文字

痛みに関係するのはPGE 2と考え

イモンド・セスプルジオ教授）、から名付けられた睡眠。睡眠中でられ、PGD 2 は無視されていた。

スイス・ジュネーブ大学（メディあり全身の筋肉が弛緩しているに

ところが、江口博士はPGD 2と痛ー・タフティー教授）を訪問しても関わらず、大脳が活発に活動し、覚の関連を研究していた関西医大研修を受け、彼らの方法を組み合閉じた瞼の下で眼球が水平方向にの伊藤誠二教授との共同研究を進わせた新たな睡眠バイオアッセイ

活発に動く。夢を見る睡眠と考えめ、ヘルペスによる帯状発疹など系を当部門に設置した。さらに、られる）の量と質や、工業技術院の際に本来痛みとして感じない接

それまで使用されていた脳波と筋（現産業総合研究所）石田真理雄

触刺激が激痛を起こすアロディニ

電図を記録紙に出力する方式を廃部長に依頼して解析してもらったア（異痛）と呼ばれる現象がL-止し、全波形データのコンピュー

行動量の日内リズムも、野生型マ

PGDS-KOマウスでは起きないこ

ター解析を目指してNECバイオ

ウスと同じであった。

とを証明した。研究所の片隅でいメディカル（現GEバイオメディ「変化が無いとは、どういうこつも黙々と実験をしていた大阪医カル）とキッセイコムテック株式とだ。作戦ミスか？」嫌な予感が大の南敏明講師（現大阪医大教授）

28

LABIO 21 APR. 2005

睡眠障害モデルマウスの開発における偶然と必然

と共に、江口博士がデータシート

スが眠り始めると化粧用のパフでを片手に部長室へ駆け込んで来た

ひげや耳たぶ、尾のつけ根を軽くこの断眠実験の様子とその結果ときには、「これで報告書は何と触って起こすという、極めて手間を図２に示す。12時間の明暗サイかなる。
」と胸をなで下ろした。

のかかる実験をすることになっクルで飼育しているマウスの場た。（図２．左の写真）数人でチ合、暗期（活動期）12時間全体で

L-PGDS遺伝子操作マウスのームを作り、２時間交代でネズミのノンレム睡眠時間は約220分、

睡眠異常のケージの横に張り付く実験が、レム睡眠時間は約30分である。そL-PGDS遺伝子KOマウスの睡眠

何回となく行われた。この実験は、の睡眠時間の総量や日内リズム

調節異常は、約１世紀前の石森博

参加者が多くないと不可能であは、野生型マウスとL-PGDS-KO士とピエロン博士が行ったのと同る。しかも、彼らの理解と協力がマウスの間に変化はない。次に、じ、断眠実験により明らかになっ不十分だと断眠の精度が低下す

明期の後半６時間、上に述べた方た （8）。但し、マウスの断眠は、る。我々は、幸い良い仲間に恵ま法でマウスを起こし続けると、野彼の行なった犬の散歩のように簡れた。さらに、この実験は参加者

生型マウスでは断眠解除後の暗期

単には行かない。定期的に床に微の動物の行動観察力を磨くと同時の睡眠量が著しく増加する。そし弱な電気を流して動物を刺激するに、日常生活の悩みや進路の相談て、暗期12時間全体では、断眠前とか、動物の足を水につけておく、室としての「井戸端会議」的機能

日に比べ、ノンレム睡眠は約66分、

あるいは強制的に泳がせるようなも果たすという予想外の効果もあ

レム睡眠時間は約６分増加する。

げた。

ことをすると、ストレスに対する野生型マウス

防御反応が動物の行動に現れ、断かといって、マウスが眠りだすのを感知してやさしく起こす便利な機械はない。結局、研究者がマウスのそばにいて彼らの行動やモニターに現れる脳波を観察し、マウ

100

ノンレム睡眠ノンレム睡眠断眠後

2時間ごとの睡眠量（分）眠に対する反応を隠してしまう。

L-PGDS KOマウス

＊
＊

50

断眠後

＊
＊

＊

＊

断眠

断眠
断眠前

断眠前

0
レム睡眠

レム睡眠

20
＊

＊

10
0
8

20

図２

8 8
時間

＊

20

8

断眠実験の様子（左の写真）とその結果（文献8）

明期後半6時間（14:00〜20:00）の断眠処置による（■、□、●、○）
野生型（左）およびL-PGDS KO（右）マウスのノンレムおよびレム睡眠
量の経時変化（n=6）
。

LABIO 21 APR. 200529

⑥

この現象は、我々も経験する。前ら始まった。そこで、再度遺伝子ウスであった。その後、マウスの夜、充分な睡眠時間が確保できな診断を行うために尾の末端を少し脳波を測定してみると、尾の切断

いと、その夜の睡眠時間は、いつ切り取った。本来、この操作は生による痛覚刺激を与えると野生型もより長くなる。これは睡眠不足

後１、２週間の段階で行う。そのマウスでは睡眠量は低下するのにを解消するための恒常性維持機能

場合は尾も柔らかいが、成熟した

対し、TGマウスでは刺激後5時間の働きによる現象である。しかし、マウスだと骨も硬くなっており、にわたりノンレム睡眠が増加した

L-PGDS-KOマウスでは、この断少々てこずる。この実験を行った（図3）。しかし、レム睡眠量は変眠によるノンレム睡眠の増加が起

小野泰子技術員（現大阪大学・技化しなかった。また、ノンレム睡

こらない。一方、レム睡眠のリバ術員）は、少し心配になって、尾眠の増加と相関した脳内PGD 2含

ウンドは観察され、断眠前日に比の組織を採取した後のマウスを観量の増加も証明された。従って、

べ約15分増加した。以上の結果は、察していた。すると、片方のケー

このTGマウスの睡眠発作は、痛「L-PGDSが欠損すると、断眠によジのマウスは全て興奮し活発に動覚刺激の負荷により脳内のPGD 2る睡眠物質PGD 2の脳内での蓄積

き回っているのに対して、もう一量が増加して起きたと考えられが起こらないので、断眠後のノン方のケージのマウスは全てじっとる。「痛い」と感じた後、徐々にレム睡眠時間が変化しない。」こ

眼を閉じて動かなくなることに気眠気が強くなって眠ってしまう睡とを示している。この説明は、断がついた。遺伝子診断の結果、前眠発作モデル動物ができていたの眠前後のマウスの脳内PGD 2量を者が野生型マウス、後者がTGマである。

定量すると、野生型マウスでは6野生型マウス

時間の断眠により脳内PGD 2量がノンレム睡眠倍増するが、L-PGDS-KOマウス付けられた。どうやら、約１世紀前に石森とピエロンが存在を予言した睡眠物質はPGD 2らしいことを突き止めた。
一方、ヒト型L-PGDS大量発現
TGマウスの睡眠異常は、実験担当者により、偶然発見された（9）。

ノンレム睡眠40
1時間ごとの睡眠量（分）では全く変化しないことからも裏

L-PGDS TGマウス

50

30

＊

20

＊
＊
＊ ＊
＊

＊

＊

＊

前日
切断後

前日 ＊
切断後

10
6

レム睡眠

レム睡眠

4
2
20

8

20 20
時間

8

20

それは、運悪く野生型とTGマウ

図３ ヒト型L-PGDS大量発現TGマウスにおける痛覚刺激後の睡眠量の変化（文献9）

スが同じ匹数入った隣り合わせの○は切断前日、●は切断後の結果を示す。通常の明暗サイクル下において、マウスのケージから、遺伝子系を表示したラベルが落下したことか
30

LABIO 21 APR. 2005

TGマウスの睡眠発現パターンは野生型と比べ、明らかな異常はない。しかし暗期開始時（20:00）に尾の先端を切ると（矢印）、その後5時間にわたりノンレム睡眠量が特異的に増加する。

睡眠障害モデルマウスの開発における偶然と必然

人程度の大所帯になり、２、３年

ッフ、あるいは企業の研究員としおきに研究員が入れ替わり、のべて現在も睡眠研究を継続してい

L-PGDSの欠損と大量発現が共10人以上の海外からの研究者も参る。そして、本年１月、当部門のにノンレム睡眠に影響を与えるこ加している。睡眠研究は行動学的池田真行研究員が富山大学理学部とがわかり、PGD 2の睡眠誘発作解析が主要な部分を占め時間がかの助教授に転出し、新たに毛利育用が遺伝子レベルで裏付けられかる。何よりもスピードを要求さ子研究員がノースカロライナ大学

た。現在、我々の部門では、京都れる企業研究所から着任した当時より着任した。さらに、江口副部

大学の成宮周教授の研究室で作成「こんなスローペースで研究費や長は、本年４月より早稲田大学先されたDP受容体KOマウス、ハー研究ポジションが獲得できるのだ

端バイオ研究所の客員教授としてバード大学チェン・ジャン・ファ

ろうか」と不安だった。しかし、着任し、シンガポールの早稲田オン教授の研究室で作成されたアデ

現在のところ、その心配は取り越リンパスバイオサイエンス研究所

ノシンA 2A 受容体KOマウス、九し苦労に終わっている。

に新たな睡眠研究室を開設する。

おわりに州大学渡邊武教授（現理化学研究

研究費の面では、科学技術振興

そこには当部門の特別研究員であ所・免疫・アレルギー科学総合研

事業団（現科学技術振興機構）った坂田三恵博士が既に講師とし究所）の研究室で作成されたヒス

CRESTプロジェクト、厚生労働て着任している。当部門のもう１

タミンH1受容体KOマウスの睡眠

科学研究費、文部科学省振興調整

人のスタッフである黄志力（ホァ

解析を進めている。これらのKO

費などの大型プロジェクトの助成

ン・ツーリー）研究員は、中国・マウスは、いずれも、その発育やを受け、大阪市や様々な民間財団、

上海の復旦大学医学部（旧上海医行動パターンに明らかな異常は見

企業からの支援を頂いている。さ科大学）の教授を兼任し、新たなられず、明暗環境下における睡眠らに、昨年度より、生研センター

睡眠研究施設の開設を進めてい

量も野生型マウスとほぼ同様であの基礎研究推進事業に採択され、る。我々の睡眠研究は海外に活動る。つまり、睡眠物質および睡眠京都リサーチパーク内に分室を設の場を広げている。これまでの睡情報の伝達系は単一ではなく、一けて、「自然な睡眠覚醒調節作用

眠研究で得た実感を綴った随録

つの物質の情報伝達系の欠損は他を持つ天然素材の探索に関する研「不眠社会の眠り考」が日本経済のシステムにより充分に補償され究」を開始した。いろんな素材が新聞サイエンス欄（平成15年11月

るようである。ところが、これら多くの企業から持ち込まれ、日本から16年２月）に掲載された。ごの動物に断眠のような刺激を加え一の脳波解析の規模を持つ動物睡

興味ある方はご一読ください。

ると様々な睡眠異常が起きる。L-

眠研究室が稼働し始めた。

PGDS-KOマウスでの経験が大変役立っている。

最後に、本原稿の執筆の機会

当部門で睡眠研究に参加した研を頂いた、日本実験動物協会・究者のほとんどが国内の大学の教理事の中川真佐志氏に感謝しま

上述のように、12年前３人から授・助教授、ハーバード大学やス出発した研究チームも、最近は30

タンフォード大学などの研究スタ

す。

LABIO 21 APR. 2005

31

⑥

略歴

文献
1. 石森国臣: 不眠動物ノ脳質中ニ證明シ得タル催眠性物質-睡眠の真因. 東京医学会雑誌23: 429-457, 1909.
2. Pieron H.: Le probleme
Physiologique du Sommeil. Paris:
Masson; 1913.
3. 裏出良博：睡眠覚醒調節の分子機構.
神経進歩44（6）: 883-890, 2000.
4. 裏出良博ら：睡眠物質. 脳神経558（1）：455-55，2003.
5. 裏出良博ら：睡眠覚醒調節の分子機
構. 最新医学59（3）：15-20, 2004.

8. Eguchi N et al.:Sleep of geneknockout and transgenic mice forprostaglandin D synthase. Sleep
Res Online 2: 665, 1999.
9. Pinzar E., et al.: Prostaglandin D
synthase gene is involved in theregulation of non-rapid eye
movement sleep. Proc Natl Acad
Sci USA 97: 4903-4907, 2000.
10. 裏出良博：「不眠社会の眠り考」日本経済新聞日曜日朝刊サンデーニッ
ケイサイエンス欄2003. 11〜2004. 2

1982年 4月〜 日本学術振興会

奨励研究員
1983年10月〜 新技術開発事業団・早石
生物情報伝達プロジェク
ト 研究員
1987年10月〜 (財)大阪バイオサイエン
ス研究所・酵素代謝部門
研究員
1988年10月〜 米国ロッシュ分子生物学研究所 客員研究員
1990年 4月〜 日本チバガイギー国際科学研究所 主任研究員

6. 裏出良博ら：睡眠研究における遺伝

1993年11月〜 (財)大阪バイオサイエン

子工学的アプローチ. 日本臨床 56

ス研究所・分子行動生物（2）：489-492, 1998.

学部門 研究副部長

7. Eguchi N., et al.: Lack of tactile pain
(allodynia) in lipocalin-type
prostaglandin D synthase-deficientmice. Proc Natl Acad Sci USA 96:
726-730, 1999.

32

LABIO 21 APR. 2005

1998年 4月〜 現在(財)大阪バイオサ

イエンス研究所・分子行
動生物学部門 研究部長
2000年4月〜 現在

大阪大学大学院医学研究科 客員教授

実験動物技術指導員・準指導員制度の発足について
教育・認定専門委員会 委員長（社）日本実験動物協会はこ

大和田

一雄

実験動物技術の進展 ＝ 生命科学の進展に寄与れまで20年にわたり、数千人の二級実験動物技術師と700人に及ぶ一級実験動物技術師を認定し実験動物技術の教育普及
実験動物技術師の資質向上

書類審査
・経歴
・業績
・小論文
面接

てきた。初期の頃からこの事業に関わり、実験動物技術師の養成、教育、認定の任にあたってこられた先達の諸先生方のご尽

実験動物技術の教育・普及
実地試験官
実地試験問題の作成
各種研修講師

力に心より敬意を表するものである。

実験動物技術指導員（１）関連機関で実験動物学・実験動物技術の教育研究に７年以上従事（２）実験動物高度技術者で当協会が要請（３）一級取得後、関連機関で実験動物学・
実験動物技術の実務に５年以上従事〔３年で所定単位を取得し更新〕

近年は、時代の要請に添い、学科試験問題をWeb上に公開し、〔準指導員の実務経験 3 年で指導員の認定に応募可〕

20年ぶりに教科書を改訂し、各論や実地試験における選択動物

実験動物技術準指導員

種を変更する等、種々新たな視一級取得後2年を経過し、指導員および準指導員として活動する意思のあるもの、
および当協会が要請するもの

点で実験動物技術師の養成、教育・認定にとりくんできたところである。
21世紀における生命科学の進展や動物実験の場における動物

一級実験動物技術師〔5年で更新〕福祉の実践という観点から今後
とも実験動物技術師の必要性は益々高まっていくことは疑いが二級取得後4 年の実務経験
2 年制以上の生物系大学卒後1年の実務経験
4年制認定大学の在学4年次

二級実験動物技術師

実務経験4年以上
高卒実務経験1年以上
認定高校・専門学校最終学年次

無く、より質の高い実験動物技術師の養成システムの構築が求められている。

本制度は、実験動物技術指導

定規程第１条）。併せて、今次研

この様な背景のもと、平成１員を認定並びに確保することに究の潮流である生命科学の進展

７年度から実験動物技術指導員

より、実験動物技術の教育・普に寄与することを目的とするこ並びに準指導員の制度を発足さ及に努め、実験動物技術師の資とはいうまでもない。

せ、実験動物技術師養成の新た質を向上させ、実験動物技術の〔実験動物技術指導員の役割〕な枠組みを構築することとした。

進展に貢献することを目的とし

実験動物技術指導員の役割は、概略を図に示した。

ている（実験動物技術指導員認

実験動物技術者の実地指導等、
LABIO 21 APR. 200533

実験動物技術指導員・準指導員制度の発足について

実験動物技術の教育・普及に関〔資格認定〕

ことが継続の要件となる。更新することと、日動協の実施する

実験動物技術指導員認定小委に必要な取得単位は25単位以各種試験の実地試験官、実地試

員会（学識経験者、理事等で構験問題の作成、各種研修講師等成）による書類審査（経歴、業に関することである。また、準績、小論文）並びに面接試験に

指導員は指導員の実務を補助すより認定の可否が判断される。

以上、平成17年度から発足することを役割とする。

認定を受けるには、①所属機関

る実験動物技術指導員並びに準

実験動物技術指導員並びに準等からの推薦、②公募出願、③指導員の制度の概略について述指導員は下記の３種類の方法に

当協会から依頼する場合、の３べた。常に質の高い実験動物技より公募し、当協会の審査並びつの方法があり、それぞれ所定術師を確保し、時代に即した先に試験により認定する。

の必要書類を当協会まで提出し端技術を導入していくためには、〔実験動物技術指導員の応募資格〕

なければならない。

実験動物技術師による実験動物

上／３年とする。
所定単位の例は以下の通りである。

（1）大 学 、 研 究 所 、 製 薬 企 業 、いずれの場合も上記の応募資技術師の再生産（養成・教育）

受託研究企業、動物生産企

格要件を満たしている必要があが必要不可欠であり、その様な業等で実験動物学・実験動る。

システムの構築が実験動物界の物技術の教育・研究等の実〔資格の継続〕裾野を磐石なものとし、ひいて務に7年以上従事している者

認定者は実験動物技術指導員（2）関連分野に従事する実験動または準指導員として名簿に記

物高度技術者で当協会が要載・登録され、資格認定証が交

請する者

付される。

は生命科学の進展に寄与していくものと信じてやまない。
関係各位におかれては、上記の背景と趣旨にご賛同いただき、（3）実験動物技術師一級資格取

登録後は、３年ごとに登録の多数の応募（推薦）と今後の協得後大学、研究所、製薬企更新を行う必要があり、その際、力を切にお願いする次第である。

業、受託研究企業、動物生所定の必要単位を取得している産企業等で実験動物学・実
験動物技術に関する実務に5年以上従事している者〔更新に必要な所定単位の例〕
・当協会の「実験動物技術指導員研修」受講 ： 10単位
・同「教育セミナー フォーラム」受講 ： 3〜5単位〔実験動物技術準指導員の応募資格〕（内容により事前に明示する）

一級資格取得後2年を経過し、・同「動物実験法研修」受講： 3単位・同「上記以外の各種研修」受講： 2単位・同 研修その他一般業務補助： 2単位・同2日以上の実地指導： 5単位

る意思がある者並びに当協会が・同実地試験官担当： 5単位

実験動物技術準指導員として要・同実地問題の作成： 1問1単位請する者。但し、準指導員が指・実験動物技術関連学会での発表・論文（10単位/3年を限度とする）

実験動物技術指導員および実験
動物技術準指導員として活動す導員の認定を受けるには準指導員の実務経験3年を必要とする。

34

LABIO 21 APR. 2005

筆頭演者・筆頭著者： 3単位

共演・共著者： 2単位・他機関での関連研修（実技）指導： 2〜5単位（内容を勘案する）

更新手続きに必要な取得単位数： 25単位以上/3年

４年制大学在学生の実験動物
一級技術師受験特例の制定について
教育・認定専門員会委員長 ■ 大和田一雄

生物系４年制大学の在学生を対象に一級実験動物技術師資格
認定試験の特例規定を設け、大実験動物一級技術師大学受験特例必須履修項目
1． 学科

学在学中に受験が可能となるよ

１）「実験動物の技術と応用・入門編」１）並びに「実験動物の技

うに規程を制定した。この制度

術と応用・実践編」２）の総論および各論の内容をすべて網羅

は平成17年度より適用される。

した講義を受講し、単位を取得していること。

従来、一級実験動物技術師認
定試験を受験するためには、二級技術師資格取得後４年の実務

２）90〜120分×15回＝2単位とし、別紙の内容3）（「実験動物の技
術と応用・入門編」及び「実験動物の技術と応用・実践編」）に相当する内容を履修し、合計8単位以上（相当）取得していること。

経験あるいは生物系２年制以上

３）各大学で開講している学科目で、内容的に上記に該当するものの大学卒業者で１年以上の実務があれば、科目を問わない。ただし、申請時に、内容が合致し経験が必要であったが、この特ているか、単位として十分か、等について日動協で調査を行う

例が設けられたことにより、所定の単位を取得していれば、生こととする。
４）必修、選択を問わず、「実験動物学」を２単位以上、履修していること。

物系４年制大学在学中に一級実５）通常開講している学科目で不足の場合は、夏期特別講習等で補験動物技術師認定試験を受ける

講してもよいが、この場合も内容の妥当性について日動協が調ことが可能となった。

査を行う。

この特例の適用を受けるためには、予め、そのカリキュラム、

２．実地
1）「実験動物の技術と応用・入門編」の「Ⅸ動物実験の基本」及

動物飼育設備等について日動協

び各論の各種動物における実験手技の項、並びに「実験動物のの認定を受ける必要がある。詳技術と応用・実践編」の「Ⅸ特殊実験法と検査法」、「Ⅹ遺伝子

細は（社）日本実験動物協会事操作と凍結保存」、「ⅩⅠ命名規約およびモニタリング」及び各務局に問い合わせられたい。図

論の各種動物における実験手技の項を履修していること。

に申請から認可並びに受験から合格、認定登録までの概略を示した。

２）実験動物の適正な飼育・取扱いができ、実験動物施設および動物実験施設の運営管理について理解できること。
３）一級技術師資格認定試験受験者のための実験動物高度技術者養成研修（白河研修）の実地テキストに記載されている実技が正確にできること。

（１） 教育カリキュラム
学科及び実地とも、当協会が認定する内容を８単位以上取得

４）90〜120分×15回＝2単位とし、上記に該当する内容の実地・実習の単位を、該当する科目において合計8単位以上（相当）取得していること。

していることが求められる。大※1）：実験動物技術師二級用テキスト（アドスリー

2004）

学生の受験特例必須履修項目の2）：実験動物技術師一級用テキスト（アドスリー

2004）

概要は以下の通りである。

3） 本編では内容を省略する。詳細はそれぞれのテキストを参照のこと。

LABIO 21 APR. 200535

４年制大学在学生の実験動物
一級技術師受験特例の制定について

技術師名簿に登録する。実務経

格等の特例規程について概略を

験に含まれる業務は、飼育管理述べた。21世紀は生命科学の時

書面審査および実地調査によや動物を用いた試験、研究の実代といわれ、益々動物実験の重り、認定の適否を判定する。飼務を内容とし、動物飼育施設に要性が高まることは疑いがない。

育施設・設備の規模の大小等はあっても机上作業や動物に接し従来の受験制度に加え、今回制問わないが、適切な飼育環境がない周辺作業は実務経験とは認定した新たな制度を活用し、多維持できること、学生が適正なめない。

くの有為な若者がこの世界に挑（２）実験動物飼育施設、実習
設備

戦し、業界活性化と飛躍の担い飼育管理を学ぶ環境にあること、並びに動物福祉に立脚した適正

以上、新たに制定された一級な動物実験が実施できる状況に

実験動物技術師認定試験受験資手として斯界で活躍することを願っている。

あること、等が実地調査のポイントとなる。
実験動物技術師資格認定規程第５条（２）ウ（３）受験時期
受験は、卒業年次とし、仮に〔会長は、生物系大学等の在学者の受験資格について特例を設けることができる。〕

大学

認定校の申請日動協

単位を修得済みであってもそれ以前の学年での受験は認めない。
試験日は一般受験者の試験日と・実験動物飼育施設、実習設備の概要

同一日とし、大学在学生だけの・実験動物関係教育カリキュラム

審査
実地調査

・その他、必要資料

特別日程は設定しない。例年、一級技術師認定試験の学科試験
は11月末から12月はじめ、実地試験は翌年の３月上旬に予定さ認定
学生

学科・実地とも指定内容のを８単位以上履修れている。なお、学科試験不合
格者は実地試験を受けることが大学受験特例必須項目の履修出来ない。
最終年度までに所定単位を修得（４）合格から認定まで
学科試験および実地試験合格

受験（卒業年度）者には合格年度に合格証を与える。その後関連業務において１

合格者

・飼育管理、動物を用いた試験・研究の実務
・動物飼育施設にあっても机上作業や動物に接しない周辺作
業は実務と認めない

年の実務経験を経た後、本人の１年の実務経験申請により、実務経験を勘案して認定の可否を判断し、一級技術師認定証を与え、同時に一級
36

LABIO 21 APR. 2005

合格証

認定証

一級技術師名簿に登録

Information on Overseas Technology
Information

翻訳20−1

ラットにおける低分子物質の脳への浸透性（脳-血漿比）の検討における灌流効果の比較
創薬の過程において、齧歯類を用

アゼパムを陽性対照として、また脳へ

質量分析を用いて得られたB/P値は、

いて、血漿および脳における新規化学の浸透性の低いことが知られている化

灌流処置ラットと無処置ラットの間で有物質の濃度を測定することは、とくにそ合物Aを陰性対照として用いた。ラッ

意差は認められなかった（p ≥ 0.05）。

の標的受容体が脳にある場合は重要

トにジアゼパムまたは化合物Aを静脈

ラットを用いた脳への浸透性研究におである。齧歯類を用いた薬物動態試

内投与した後、麻酔下において採血し、いて、この方法（灌流をせずに雄ラット

験により脳と血漿中の濃度比（B/P）
をさらに、無処置あるいは生理食塩水にの脳を摘出する方法）
は、灌流を行う

測定することは、化学物質の脳への浸よる全身灌流を行った後に脳を摘出方法に比べ有用な代替法である。な

透性を検討するために有用である。

した。血漿および脳ホモジェネートは、

ぜなら、B/Pデータを得る際、麻酔や本研究では、脳組織における化学物

遠心によるタンパク質除去後に分析物

外科的処置を省くことができるため、質濃度を正確に測定するためには、生（化合物A、ジアゼパム、内部標準）を実験に要する時間を大幅に短縮し、理食塩水の全身灌流によって血液を回収し、液体クロマトグラフィー/タンデ

動物の苦痛を軽減させることができる

完全に除去することが必要であるか否ム質量分析（LC/MS/MS）
により解析ためである。

か検討した。脳への浸透性の高いジした。液体クロマトグラフィー/タンデムキーワード：ラット、薬物動態、脳、浸透、
脳-血漿比、灌流
keywordInformation

翻訳20−2

Helicobacter hepaticus感染A/JCrマウスの慢性腸炎における性差

Helicobacter hepaticusはマウスにおけ

IL-10、マクロファージ炎症タンパク質を示した（P≦0.05）。さらに、感染雌る細菌性病原体であり、A/JCrマウス、（MIP-1α）、インターフェロン誘導１α

マウスでは、非感染雌マウスおよび感

無菌Swiss Websterマウスおよび免疫タンパク10（IP-10）およびγインターフ

染雄マウスに比べて、盲腸IFN-γ、不全マウスに慢性腸炎を惹起すること

ェロン誘導モノカイン（MIG）のmRNA

TNF-α、IL-10、MIP-1α、IP-10およが報告されている。著者らの知る限発現量を半定量逆転写ポリメラーゼ

びMIGのｍRNA発現量が有意に上り、H. hepaticus感染マウスの慢性腸連鎖反応（RT-PCR）解析によって測昇し（P≦ 0.05）、そして感染雄マウス炎の発症における性差に関する研究定した。感染1か月後では、盲腸病変

では、雄対照群に比べて盲腸TNF-

は未だ行われていない。本論文の目

スコアに有意差は認められなかった。

α およびIL-10のｍRNA発現量が有的は、H. hepaticusを慢性感染させた

しかしながら、感染雌マウスにおいて意に上昇した（P≦ 0.05）。これらのデ

雄と雌のA/JCrマウスにおける腸炎のは、非感染雌マウスに比べて、盲腸ータは、H. hepaticusを感染させた

重症度の違い、およびこれらのマウス

IL-10、MIP-1α、IP-10およびMIGの

A/JCrマウスにおいては、雌マウスがにおける粘膜免疫応答の特性を検討

ｍRNA発現量が有意に上昇し、IL-10

雄マウスに比べてより重篤な腸炎を発することである。H. hepaticusを感染およびMIP-1αの発現量は、感染雄マ症すること、慢性粘膜炎症がIL-10活させた雄と雌のA/JCrマウスの盲腸

ウスに比較して有意に上昇していた性の亢進による抑制作用を受けない組織を用いて、感染１か月および３か（P≦0.05）。感染3か月後においては、

ためTh-1応答に偏っていることを示

月後に腸疾患の組織学的評価を客観

感染雌マウスおよび雄マウスの盲腸病

唆している。H. hepaticusを感染させ的に行った。さらに、これらのマウス

変スコアは、非感染対照群に比べてたA/JCrマウスは、細菌感染による粘の盲腸組織を用いて、インターフェロ

有意に上昇し（P≦0.05）、また感染雌膜の炎症反応における性差の研究のン γ（ I F N - γ ）、腫 瘍 壊 死 因 子 α

マウスにおいては、感染雄マウスに比適切なモデル動物となるであろう。

（TNF-α）、インターロイキン4（IL-4）、

べて盲腸病変スコアが有意に高い値

R. S. Livingston, M. H. Myles, B. A. Livingston, J. M.
Criley, C. L. Franklin : Comparative Medicine. 54(3),301-308 (2004).

（翻訳：北野真見）

キーワード：マウス、Helicobacter hepaticus 、性差、
粘膜免疫
keywordLABIO 21 APR. 2005

37

Information on Overseas Technology

J. E. Fenyk-Melody, X. Shen, Q. Peng, W. Pikounis, L. Colwell, J.
Pivnichny, L. C. Anderson and C. S. Tamvakopoulos:
Comparative Medicine. 54(4), 378-381 (2004).

（翻訳：黒川正樹）

Information on Overseas Technology

Information

Information on Overseas Technology

翻訳20−3

生物材料の感染性因子汚染の検出感度に関する
in vivo 抗体産生試験と in vitro PCR法に基づく手法の比較
細菌およびウイルスは、汚染したPCR）法を用いた試験を行い、評価

は、リアルタイムPCR法はMAP試

可移植性腫瘍、細胞株、血清あるいすることにした。したがって、本研

験より高感度であった。14種類のウはその他の生物材料を介して実験用究の目的は、われわれの考案した新

イルスのうち2種類のウイルスでは、

齧歯類に感染することがある。現在、

たなPCR法の検証、ならびにPCR法

３つの検出方法は同程度の感度を示

生物材料はマウス抗体産生試験とMAP試験の比較検討を行うことした。さらに、PCRによるスクリー（MAP）あるいはラット抗体産生試である。14種類のウイルスのうち８ニング法は、生物材料におけるマウ

験（RAP）などの血清検査によって種類のウイルスに関しては、通常のスウイルス検出のために動物を使用検査されている。われわれは、生物

PCR法は、マウスウイルス検出におする必要性がなく、３Rの原則の代

材料のウイルス汚染を直接検出する

いて、MAP試験より高感度かつよ

替法に明らかに合致している。

新たな方法として、ポリメラーゼ連り特異的であった。14種類のウイル鎖反応（PCRおよびリアルタイム

スのうち12種類のウイルスに関して

F. Bootz, I. Sieber, D. Popovic, M. Tischhauser and F. R.
Homberger: Laboratory Animals. 37(4), 341-351 (2003).

（翻訳：北野真見）

キーワード：マウス、MAP試験、PCR、代替法、
マウスウイルス、生物材料、３R
keywordBooks Books Books Books Books Books Books Books Books Books Books Books Books Books Books Books Books Books Books Books Books「へんないきもの」

BOOK

早川いくお
（著）
、寺西晃
（イラスト）、
バジリコ社 1,575円

もの 自身にとっては合目的的なはず的に解説し、おじさん達の琴線に触

表題通りのへんな いきもの 満載

であるが、人間から見るとそれはしれてくる。寺西のイラストも秀逸であの本である。へー！こんな いきもの

ばしば不可解であったり滑稽であっる。もっとへんな いきもの も存在が存在するのだと感心させられる。

たりする。著者はへんな いきものするにちがいないので、続編が待たいきもの の生態・形態はその いきの生態を巧みに、しかもかなり擬人れる。

人の中年が連れ立ってその日の気分

い町にはいつか行ってみようと思わで街中をぶらぶらと各自の薀蓄を披せる。また著者らはかなりの健啖家

瀝しながら徘徊し、いろいろなお店

でかなり食い飲むので、訪ねてみた

嵐山光三郎 著に立ち寄って買い物をしたり、町のい料理屋・レストラン・居酒屋等の

知恵の森文庫、光文社 648円

人情に触れたりしながら、最後は居メニューを含めた情報も豊富であ

不良中年（今や老年？）嵐山光三

酒屋でまとめるパターンで28地域をる。元本は1990年のものであるが、郎による東京散歩案内。著者が言っ紹介している。本書の中で馴染みの文庫化にあたり2004年現在での店のているように「文学碑や史跡めぐり

ある地域が出てくると有無や値段を再調査してくれているではなく、東京の町に吹いている風

うだな

そのものを捜す」散歩が楽しい。3

ど結構楽しめるし、全く馴染みの無「東京旅行記」

38

LABIO 21 APR. 2005

うんうんそ

それは知らなかったな〔選・評：三枝順三〕のが嬉しい。 〔選・評：三枝順三〕

感染症診断・予防実技研修会（モニタリング研修会）においては、受講生から様々な質問が出されます。その中から今回は血清反応に関する質問について特集します。

１．材料採取等に関する質問に必要となります。一方ELISAや間溶血が起こらなかったりします。

Q：溶血した血清、血漿は血清反応

接蛍光抗体法においては必須ではあ

Q：凝集反応の判定において、凝集の結果にどのような影響を及ぼすのりませんし、また非動化処理血清をしているのか、していないのか迷うでしょうか？

用いても問題ありません。

ことがあります。明確に見分ける方

A：切れないハサミの使用や、一回

Q：血清を凍結保存していますが、法はありますか？

で必要量が取れずシリンジなどにてどのくらい保存可能なのでしょう

A：このような判定像は、非動化処

何度も採血を繰り返したり、また水か？また凍結融解が抗体価に与える理されていない血清を検体として用分混入等により溶血が起きてしまい

影響を教えてください。

いたときに血清中の自然凝集素によますが、多少の溶血は検査結果に影

A：凍結保存（−20℃）されている

り起こることがあります。まずそれ響ありません。特にELISAでは操作

血清は半永久的に保存可能です（冷を確認してください。また抗原が自中の洗浄により、溶血した血清は排凍庫の故障等がない限り）。つぎに

然凝集してしまうことがありますの除されるので問題ありません。ただ、凍結融解の影響ですが、何度も繰りで、必ず生理食塩水などを用いた陰補体結合反応（CF）は溶血の有無返す（１回くらいはOKです）と血性対照を置き、抗原が自然凝集してにて判定するため強い溶血をした血

清中の抗体価は低下します。したがいないことを確認してください。た清は判定を困難させる恐れがありまって何度も使用する抗血清などは、だこのような処置をしても判定しにす。また強く溶血した血清を加熱非小分けし保存しておいた方が良いとくいことがあります。その場合は完動化処理した場合、血清内に凝固物思います。

全に凝集（陽性対照と同じ凝集像）
しているものだけ陽性と判断した方が出現し、検査に使用できないことが良いと思います。

Q：血清の非動化はどのような場合

２．補体結合反応（CF）と凝集反応に関する質問に必要なのでしょうか？

Q：CFにおいて、全て溶血が起こら

３．ELISAに関する質問

A：血清中には、自然凝集素や補体

ないあるいは全て溶血してしまった

Q：偽陽性反応が起こる原因のひと

そして抗補体作用を起こす因子など時の原因は何ですか？

つとして、高週齢動物（特にラット）

血清反応を阻害する様々な因子が含A ： CFにおいては、補体の力価の検査があげられていますが、高週

まれていますが、それらの多くは熱（濃度）が重要なファクターとなりに弱いとされています。そこでこれます。溶血が起こらない場合は補体

ら因子を血清中から排除し、正常な量が少ない、また全て溶血してしま反応をさせるために非動化が必要にう場合は多すぎることが考えられまなります。ただこの処理は全ての血す。まず、使用している補体の力価

清反応に必要ではなく、方法によりを再測定し、至適濃度か否かを確認異なります。特にCFでは、この処すべきです。補体量が適正な場合、向が見られます。ただこの現象は、理により血清中の補体そして抗補体

次に考えられる原因は適正な非動化

全ての高週齢ラットにおいて見ら作用を起こす因子を完全に除去した処理がされているか否かです。非動

れる分けではありません。個体、血清を検体として準備しなければな

化されていない場合は、血清中にも系統、生産施設により異なります。

りません。また凝集反応においてもともと存在する補体により全て溶血したがってこのような動物を検査

血清中の自然凝集素を除去するためしてしまったり、抗補体作用によりする際、偽陽性反応が起きる可能があるので、注意が必要です。

齢とは何週齢以上でしょうか？
A：確かに、ELISAにおいて高週齢ラットで偽陽性反応が見られる
ことがあります。われわれの経験
では、30週齢以上の動物でその傾LABIO 21 APR. 200539

性があることを念頭に置き検査が起きた場合、その発色は陽性コ

MHV抗原を用いてSDAV抗体をし、結果を解析すべきであると思

ントロールよりかなり強い発色を検査しているのかと言うと、

います。

示します。

MHVはSDAVと同じコロナウイ

Q：判定において、発色が陽性コン

Q：ラット血清はMHVで陽性になっ

ルス属であり、SDAV抗原と高いトロール以下の場合、それが無色透たとき、それはMHV感染より唾液腺

交差性を有しています。ですから

明でなくても陰性と判定して良いの

涙腺炎ウイルス（SDAV）感染を疑

MHV抗原を用いてもSDAV抗体

でしょうか？

うべきでしょうか？

が検出できるわけです。

A：はい、その通りです。ELISA

A： はい、その通りです。MHV

キットの判定は、陽性コントロー

はマウスに感染するウイルスであ

次回は、培養検査、寄生虫検査にルと同等かそれ以上の発色のみ陽り、自然感染ではラットに感染す

関するQ&Aを特集します。

性と判定してください。通常感染

ることはありません。では何故、モニタリング技術小委員会 高倉 彰

日本実験動物学会の動き
1． 平成16年度米田記念若手研究者支援事業授与決定について
平成16年度社団法人日本実験動物学会米田記念若手研究者支援事業授与候補者として選考委員会より推薦され、理事会で承認されました。
授与者は、大谷真、川口友浩、木村展之、滝澤明子の各会員です。

2. 2004年Experimental Animals最優秀論文賞が以下の通り決定しました。
野口章会員・他:「ゲノムウォーキングにより決定した外来遺伝子近傍ゲノム配列による導入

遺伝子の染色体マッピングと遺伝子型判定法」

3． 第52回日本実験動物学会総会
標記の総会が平成17年5月18日（水）〜20日（金）にタワーホール船堀で開催される予定です。
詳細に関しましてはホームページ（http://www.cs-oto.com/52jalas/）をご覧下さい。

日本実験動物技術者協会の動き
第39回日本実験動物技術者協会総会のお知らせ
会

期：平成17年 6月24日 (金) 〜25日 (土)お問い合わせは下記総会事務局へ

会

場：石川県立音楽堂

担当

邦楽ホール・交流ホール会

淳

E-mail ：uchimoto@kiea.m.kanazawa-u.ac.jp

石川県金沢市昭和町20-1(金沢駅東口)
TEL：076-232-8111(代)：内本

FAX：076-232-8101

長：中村由季子（金沢大学学際科学実験センター
実験動物研究施設）

1. 関西支部
講習会等
学習会

40

期

日

場

所

H17.7（予定） 大阪大学医学部 銀杏会館（予定）

LABIO 21 APR. 2005

テーマ
第57回実験動物学習会･座学協 会 だ よ り（社）
日本実験動物協会は創立二十周年を迎えました
当協会は実験動物の開発・改良・普及、実験動物

記に関する技術の向上を図り、実験動物産業の健全な期 日 平成17年5月24日（火）発展に寄与する目的で、広く実験動物生産者および場 所 虎ノ門パストラル

関連事業者並びに実験動物利用者団体を結集した全第一部 記念式典 午後15：00〜15：30

国組織として昭和60年に創立され、本年、創立二十周年を迎えることができました。

開会の辞、会長式辞、表彰式、来賓祝辞、閉会の辞
第二部 20周年記念講演 午後15：30〜16：30

創立二十周年を迎えるにあたり､会員・賛助会員

講師 筑波大学名誉教授 村上 和雄 先生と共に協会の設立、発展にご尽力いただいた先輩諸氏ならびに諸先生方をお招きし、右記の内容で記念

演題 「笑いと感動があなたの遺伝子をオンにする」
第三部 祝宴

午後16：30〜

式典、記念講演会ならびに祝宴を開催する予定です。

平成16年度実験動物技術師一級資格認定実地試験結果（速報）平成17年３月６日（日）に実施された一級技術師の実地試験結果は次の通りである。
一級受験者は60名であり、最終合格率は24名で合格率は40％であった。
① 一級実地（必須科目）

受験者

4名

合格者

2名

（合格率 20％）② 一級実地（選択科目）

受験者

37名

合格者

24名

（合格率 65％）

1．専門委員会等活動状況
委員会名等

開催月日

協議内容及び決定事項

第4回実験動物福祉専門委員会

17. 1. 6

動愛法の見直し対応他

第5回情報専門委員会

17. 1. 14

LABIO21

No.20の企画及び20周年記念誌

第4回モニタリング小委員会

17. 1. 19

モニタリングマニュアル改定の件

第2回20周年記念行事準備委員会

17. 1. 24

式典の式次第、記念講演他

第6回教育・認定専門委員会

17. 1. 25

実験動物技術指導員、教育セミナーフォーラム

第2回通信教育小委員会

17. 2. 1

Ｑ＆Ａについて

第2回運営会議

17. 2. 4

平成17年度事業計画他

動物実験法研修会

17. 2. 9「動物実験委員会のあり方」（東大弥生講堂）

実験動物生産体制中央委員会

17. 2. 25

今後の課題について

第20回実験動物技術師一級実地試験

17. 3. 6

会場：日本獣医畜産大学

教育セミナー フォーラム2005（京都）

17. 3. 15「最近話題の人獣共通感染症と実験動物の感染症」

教育セミナー フォーラム2005（東京）

17. 3. 23「実験動物における遺伝子改変技術の現状と畜産分野への展開」

第43回理事会

17. 3. 25

平成16年度の事業報告及び平成17年度事業計画

臨時総会

17. 3. 25

理事の補欠選挙

2．行事予定（1）協会関係
開催月日

行事名

17. 5. 24

第44回理事会

17. 5. 24

第21回総会並びに20周年記念式典

17. 6中旬

日常の管理講習会

LABIO 21 APR. 2005

41

協 会 だ よ り（2）関係協会団体行事◆ 第52回日本実験動物学会総会◆ 技術者協会・環境研究会共催シンポジウム

日時：2005年5月18日（水）〜20日（金）日時：2005年6月24日（金）、25日（土）会

場：江戸川区民総合ホール（タワーホール船越）会

場：石川県立音楽堂会

長：関口冨士男内

容：「実験動物の福祉と環境（仮題）」

邦楽ホール・交流ホール◆ 第32回日本実験動物環境研究会◆ 第2回北海道実験動物研究会

総会及び学術集会日時：2005年5月17日13：00〜16：00

日時：2005年7月

会

場：タワーホール船掘、東京

会

場：北海道大学大学院獣医学研究科

内容：「飼育スペース指針─ILAR96の適合性を考える

内

容：総会及び学術集会（土曜日午後に実施予定）

─（仮題）」（3）海外行事◆ AZAALAS Spring Symposium日時：2005年４月22日

会

場：InnSuites Tucson City Center Hotel - Tucson,

米国獣医学会日 時：2005年7月16日〜20日
会 場：Minneapolis, MN

Arizona詳◆ Am. Veterinary Medical Assoc. Annual Meeting

細：http://www.azaalas.org/Events/Symposium/
Symposium̲registration.htm)◆ ACLAM Forum c

米国実験動物医学専門医協会
日時：2005年5月15日〜18日

会

場：Asheville, NC

詳

細： http://www.aclam.org

詳 細：(847)925 -8070 AVMA
◆ The 6th Transgenic Technology Meeting (TT2005)

日 時：2005年９月11〜13日
会 場：Barcelona (Spain)
詳 細：http://www.cnb.uam.es/˜tt2005/◆ National AALAS Meeting（米国実験動物学会）

日 時：2005年11月6〜10日◆ 19th Annual Charles River Laboratories Short Course

会 場：St. Louis

日 時：2005年６月13〜17日

詳 細：http://www.aalas.org

会 場: Sheraton Ferncroft, Danvers, MA.
詳 細：Registration at www.criver.com/shortcourse2005.
※ 関連団体の行事については出来るだけ多くの関係者に周知したいので、行事計画が決定した場合には事務局まで御連絡下さい。

STAFF
自分が50代になり、若い頃イメージしていた50歳とあまりにもかけ離れた現実を見て、呆然としている今日この頃です。
先日、ひょんな事でバリバリのカソリックの牧師の話を聞きました。
不幸にも宗教を持たない私としては、何年かぶりに自分の内面と話

情報専門委員会
担当理事

新関 治男

HARUO NIIZEKI

委 員 長

三枝 順三

JUNZO SAEGUSA

委

荒巻 正樹

MASAKI ARAMAKI

櫻井 康博

YASUHIRO SAKURAI

員〃をしました。こういうのも、たまには有りかなと考えました。

〃

日

政彦

MASAHIKO KUSANAGI

今年も始まり、端から悪いニュースばかりです。何か突き抜けたい、

〃

久原 孝俊

TAKATOSHI KUHARA

〃

椎橋 明広

AKIHIRO SHIIHASHI

〃

仁田 修治

SHUJI NITTA

〃

中川真佐志

MASASHI NAKAGAWA

事 務 局

宮本 伸昭

NOBUAKI MIYAMOTO

関TAKEHIRO SEKI

青空を見たいという気持ちは私だけでしょうか。

（荒巻）

〃
制作
● LABIO 21 No.20

武浩

株式会社 ティ・ティ・アイ TTI

K. NAMIMOTO

平成17年4月1日発行/ ● 発行所 社団法人日本実験動物協会/ ● 編集 情報専門委員会● 住所 〒101-0032 東京都千代田区岩本町2-8-10 神田永谷マンション602号室/ ● TEL 03-3864-9730● URL

h t t p : / / g r o u p . l i n . g o . j p / j s l a / ● E-mail j s l a @ g r o u p . l i n . g o . j p

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LABIO 21 APR. 2005

FAX 03-3864-0619

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日本チャールス・リバー株式会社は、創業時の基本理念「科学の知識に基づいた実験動物の生産・供給」に基づき、世界のスタンダードとなる高品質SPF/VAF実験動物を安定供給し、ライフサイエンスの発展を応援しています（VAF：Virus Antibody Free）。
※1995年、ISO9002シリーズ認証取得。

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