対 談 記 事Olink® Target 受託サービスが日本上陸！

質量分析が到達できない領域へのアプローチが可能に

株式会社ファーマフーズ
アプロサイエンスグループ

× オーリンクプロテオミクス
株式会社

血液や血清、血漿といったサンプルを解析したい研究者に朗報が舞い込んだ。2022 年 6 月より、スウェーデンに本社を置くオーリンクプロテオミクス株式会社の Olink® Target が日本国内で使えるようになったのだ。この受託サービスを扱うのは 1990 年にプロテオーム解析の受託サービスを開始し、以降およそ 30 年に渡り、日本のプロテオーム解析受託サービスを牽引してきたアプロサイエンスグループ。
㈱アンテグラル・バイオサイエンス事業部を経て 2022 年 4 月、株式会社ファーマフーズと事業統合した。
これまでと変わらず受託サービスと研究用試薬の開発・販売で、研究者と共に考え、トータルに伴走していくが、オーリンクプロテオミクス社とパートナーシップを結ぶことにより同社の主力サービスである質量分析では応えきれなかった分野をカバーできることになった。そこで、株式会社ファーマ

向かって左：オーリンクプロテオミクス㈱ 甲斐渉氏㈱ファーマフーズ アプロサイエンスグループ 福田佳奈氏

フーズ アプロサイエンスグループ福田佳奈氏とオーリンクプロテオミクス株式会社日本エリア営業マ
ネージャーの甲斐渉氏に Olink® Target を国内で使用できる意義について伺った。

海外の受託サービスが使えなくなるか血漿のように複雑性が高くて含まれるタンのが難しくなってきました。
また、競争的資もしれない時代に？

パク質の濃度差が大きい検体中のタンパク金のプロジェクトでは血液等のサンプルを質も精度よく比較定量する事ができ、バイ海外に送ることでデータを悪用される恐れ―― まず、オーリンクプロテオミクス株式

オマーカー探索や疾患研究を行う研究者のがあるため、海外へのサンプル送付を禁止

お役に立つ解析サービスです。

する通達も増えてきました。

――ファーマフーズ株式会社アプロサイエ――研究者にとって、海外の受託サービスのような経緯で結ばれたのでしょうか。

能になる事態が増えてきたのですね。

会社の技術について教えて下さい。

甲斐渉氏（以下、甲斐） 当社は血漿プロテ
オーム解析を主としたタンパク質定量解析の受託サービスを提供しています。当社の開 発 し た Proximity Extension Assay（PEA法）は、タンパク質の発現値をリアルタイムPCR や次世代シーケンサーによってリードアウトする革新的な技術で、マルチプレックス ELISA や質量分析では難しいとされるごく微量のリキッドバイオプシーサンプルからの網羅的なバイオマーカー探索やゲノム情報と統合したマルチオミクス・コホート研究など、幅広い研究に活用されています。PEA 法は、ターゲットのタンパク質に対し 2 つの DNA タグ付き抗体でイムノアッセイを行い、得られた 2 本鎖 DNA からリアルタイム PCR や次世代シーケンサーで発現定量を行います。ターゲットタンパク質に特異的な 2 つの抗体が正しく結合した場合のみ 2 本鎖 DNA が形成されるため、極めて特異性の高いアッセイ技術であり、マルチプレックス反応における抗原と抗体の交差反応性の問題を克服しました。
今回、株式会社ファーマフーズ様とのパートナーシップで日本国内での受託解析が可能になった
Olink® Target 96 & 48 パネルは、質量分析を用いたプロテオーム解析では困難な血清・ンスグループとのパートナーシップは、ど甲斐

弊社はこれまでスウェーデンのウプを使うための手間や苦労だけでなく、不可甲斐そうです。このような事情から弊社サラにある本社と米国ボストンの 2 つのラでは自社での受託解析サービスから試薬キボで受託解析サービスを行ってきました

ット販売へビジネスを拡張し、各国の実績が、ご依頼件数が年々と増加していく中で、ある受託サービス企業とパートナーシップ自社ラボだけではキャパシティーが足りなを結ぶことになり、日本ではプロテオームくなる懸念がございました。それなら自社解析での実績のあるアプロサイエンスさんラボだけではなく、世界各国、ローカルで解にお声がけすることになりました。

析サービスを行う方針に転換し、より多くのサービス提供ができると共に、サンプルを海外輸送する際の手間や輸送コストやリスク、契約上における言語のハードルといった研究者の負担を減らすことができると考えました。特に PEA 法は臨床検体を主に対象としていますが、そのような貴重サンプルを専門とした業者の輸送コストはかなり高額です。昨今のコロナ禍やウクライナ情勢の影響もあって輸送サービスに遅延が発生したり、輸送コストはどんどん高くなっているのが現状です。弊社の受託サービ
ス自体は比較的、リーズナブルな価格で提供しているのですが、このような事情もあ福田佳奈氏（以下、福田） 私がオーリンク
プロテオミクス社の技術を知ったのは 3 年ほど前でした。
すごい技術で、コンペティターではあるのですが「今やっている質量分析は終わるかもしれない」と思ったことを覚えています。この頃から質量分析というプロテオーム解析技術の限界に危機感を持っていて、お話をいただいた時にはこの危機を放置するのか、自分たちのサービスに取り込んでいくのかであれば、一緒にやるしかないと考えました。まさに渡りに船と言いますか、熱望していたところに申し出をいただいたという状況でした。って限られた予算の中で利用していただく

DNA ハイブリダイゼーション

DNA 増幅リアルタイム PCR

9,216
PCR 反応槽PEA 法：1 つの対象タンパク質に対し、2 つの DNA タグ付き抗体で抗原抗体反応を行い、得られた二本鎖 DNA か抗体 A

らリアルタイム PCR 等で発現抗体 B
タンパク質定量を行う解析技術。
96 アッセイアプライエリア

96 サンプルアプライエリア質量分析では難しかったヒト検体を使いかすことができるので、時間的にも金額的甲斐った疾患、創薬研究分野にアプローチにも可能になりました。これまでお役に立て技術は 2013 年に PEA 法に基づいた最初のず心苦しかったご依頼をカバーできるようタンパク質パネルをリリースし、現在では世――Olink® Target 96 & 48 の導入は、アプロになって嬉しいですね。

界トップ 20 の製薬企業やバイオベンチャサイエンス様にはどのような利点があるのでしょうか。
福田

質量分析を用いたプロテオーム解析の場合、特に血清・血漿のように複雑性が高くて含まれるタンパク質の濃度差が大きいサンプルは、多量タンパク質によって微量タンパク質の検出や定量が妨げられる事が多いものです。例えば、サイトカイン類に代表されるような微量タンパク質は、バイオマー

甲斐

質量分析系のデメリットとして、高濃度タンパク質の除去など、サンプルの前処理の工程が多いため、それらの工程ごとの技術的なばらつきが、再現性の低さに影響する問題もあります。PEA 法のアッセイは血清や血漿をそのまま実験反応液につけて測定できるので、前処理が少なく再現性も高いのです。このような特徴から、治験のように臨床プロテオミクスとして再現性が強く求めらカー探索や疾患研究において大変重要であれる場面でも PEA 法は活用されています。

るにもかかわらず、検出できないケースが多福田

くあります。Olink® Target 96 & 48 を用いた
PEA 法では、このような極微量に含まれるタンパク質も精度よく比較定量する事ができ、質量分析では到達できなかった領域へのアプローチが可能になります。
――どのような研究者のお困りの方に役立つでしょうか。
福田

やはりヒトの血清や血漿をサンプル

質量分析では技術的なばらつきを評価するため、technical replicate を設定されることをお勧めしますが、不要となれば断然いいわけです。さらに PEA 法では必要とするサンプル量が 1μL 程度とごく微量ですから、貴重な検体を無駄にすることなく使えます。
質量分析では 10 〜 100μL は必要で、ご準備可能なサンプルのボリュームが少ないと対応が不可能なケースもありました。

私もタイムラグを感じますね。当社のーのほとんどで使われています。製薬企業はグローバルですから、海外でこの技術を知り、日本でもこれを使いたいと声が次第に出てくるようになり、そして 2020 年に日本法人が立ち上がりました。今年は製薬企業からアカデミアの先生方にも広まりを感じています。
――日本では、欧米で使われている様々な試薬や解析といった技術の導入が遅れがちになっているのですか。
甲斐

海外である程度の実績が出たものでないと、日本の研究者には使っていただけないという面もあります。手続きや輸送コストといったハードルも確かにあるのですが、まだ出始めで評価が定まっていないものに対して、予算の面でそれらに積極的にチャレンジしにくい傾向があるように思います。
福田

日本には質のいい研究やシーズ、人材があるのに、金銭的に厳しいというのはつら――これまで断るしかなかった解析には、どいですね。しかも、それがどんどん研究開発

質の濃度のバリエーションは組織と比べてのようなものがあったでしょうか。の遅れにつながってしまう。

広く、1011 オーダーのレンジがあるといわ福田

甲斐とする場合ですね。血清・血漿中のタンパクれています。残念ながら質量分析では 106あたりまでしか追えず、見えない領域が多いのです。私たちも技術改良や工夫を重ねて見える範囲を広げようとしてきましたが、どうしても到達できない領域は歴然としてあります。その部分に Olink® Target の技術がマッチしているわけです。特に血清、血漿のサンプルを網羅的に見たい、タンパク質を検出したいという方にはもってこいの分析です。
分野で言えばヒト検体を使った疾患、創薬研究になるでしょう。
――従来の質量分析ではテクニカルな工夫を重ねて苦労しておられたわけですね。
福田

質量分析は未知のタンパク質を見つけることに優位性がありますが、ダイナミッ
クレンジは大きくないので、低濃度タンパク血漿中の微量なタンパク質、たとえば外送付禁止が増えている状況ですから、海外比較定量したいという方には、質量分析ではで評価を得ているサービスや技術であって検出できたとしても精度の高い比較定量はも、日本国内になければ使えないものが今後かなり難しいです、とお断りしていました。

は増えていく可能性があるでしょうし、それ別の方法、例えば ELISA 法などを提案したりはいずれ、研究業界全体に深刻な影響を及ぼしてましたが、それでも難しかったでしょ

すかもしれません。

う。特に測定対象因子が多い場合とか、多検体のプロジェクトでは困難ですね。

技術導入に欧米とのタイムラグが発生している――もし、オーリンクプロテオミクス社を紹介しようとしても、スウェーデンかボストンでというハードルの高い紹介になってしまうわけですよね。

質を検出するためには様々な前処理を施す福田必要がありました。そうすると解析のスルー

ロテオミクス社の技術は非常に先進的で、すプットが下がってしまうので、サンプル数がでに欧米諸国では広く使われているメジャ

100、1000 といった多検体のプロジェクトーな技術ですが、日本国内ではあまり知られではスケジュール的に耐えられません。マシていないのですね。この技術に限らず、欧米ンタイムをほぼそのオーダーに割かなけれの新しい解析技術が知られて実際に使わればならなくなってしまいますし、当然、高額るまで、タイムラグが 2，3 年あると感じてになるのでお断りしてきましたが、Olink®

います。

Target を使えば多検体でもスループットを先に申し上げましたが、サンプルの海インターロイキンやサイトカインを検出・そうなんです。しかも、オーリンクプ

福田

日本国内でそういった技術が使えるということは、これまで以上に重要になってきますね。
その意味でも、Olink® Target を弊社で扱うことには大きな意味があると考えています。

工夫を凝らしたオーリンクプロテオミ

ソフトウェアにも、問題があった場合にアラす。同じ悩みがわかるからでしょう、他の受クス社の品質管理プログラムートが出ます。
CV 値が高い、バラつきが発生

託解析を行う企業等からは好評ですね。

――パートナーシップを結ばれたことで、こることは、ご依頼者にとっても、弊社、分析担――ユーザーにとっても、このように綿密な当にとっても、非常に重要です。ユーザー様

品質管理を経ての解析結果だと納得が深まからすれば、厳密なデータ品質管理を経て得りそうですね。

した場合に原因がどこにあるのか明確にすれまでの受託サービス導入と違いはありましたか。
福田

通常は装置や試薬をメーカーから購入し、自分たち独自で使っていくものですが、オーリンクプロテオミクス社とはコミュニケーションを密に取って互いに何ができるのかをしっかりと理解しながら導入を進め、さらに装置や試薬の使い方などについて実地でトレーニングを受け、スタッフが正確な技術を身につけました。
甲斐得いただけますし、私たちにとっては、品質福田管理のチェックをパスしているのだから、技たかがわかるように内部標準が各ステップどこでエラーが起きたか、ずれが生じ術的なミスは起こっていないと証明できまごとにあって、全工程をカバーしていますのす。もし、測定結果が想定外のものだったとで、本当に心強いです。この品質管理プログ

しても、それはサンプル由来の意味のあるデラムは発想もすごいですし、十分な種類を準ータですよ、と自信を持って報告できます。

備するのは大変な労力ですから、実現した技色々な実験系が世の中にはありますが、実験術力の高さに感銘を受けました。

担当者のテクニカルなエラーではないと証弊社としては世界各地で使っていただきたい一方で、ユーザー様にはスウェーデンやボストンのラボと同じクオリティで提供できるように、共通のトレーニング・プログラムを導入し、品質管理の試薬キットも充実させています。
福田られたデータであるという事でご安心、ご納試薬キットは非常に細やかにできていて、エラーが出た場合にヒューマンエラーなのかサンプル由来のものかがしっかりわかるようになっていますし、分析結果を出す明するのは実はとても難しいので、Olink――世界中のどこに持って行っても、使う人Target はとてもいい系だと感じました。

が誰であっても解析のクオリティが保たれ甲斐

弊社自身が受託解析サービス会社とるわけですね。

して、どのように品質管理を行うべきかとい甲斐

特に臨床分野では安定的に実験できう悩みがあり、それを解決するにはどのようることが強く求められますので、現場で安心な品質管理用試薬が必要かというノウハウして使っていただけるように設計しているが蓄積されているからこそ、それらがお客様こともあります。これまで感度など技術的に向けの試薬キット、解析ソフトウェアやトレ質量分析ができなかった解析を実現する一ーニングプログラムに反映しており、それを方で、安定的に結果を出せることにも重視し世界中で使っていただけるようにしていまています。

厳密なデータ品質管理

Olink Proximity Extension Assay（PEA）は、複数のコントロールを使用し、全工程によって問題が生じていない事が厳密にチェックされます。

内部標準

各ステップごとに内部標準が設定されており、これらがバラつきなく測定できるかモニタリングします。

外部標準

Immuno controls
IMMUNO REACTION

GFP

非ヒト抗原（phycoerythrin と GFP）
2 種類とそれらに結合する各 2 つの抗体です。PEA のすべてのステップに問題がないか評価できます。

Sample control (x2）

ヒト血漿 (pooled)⇒ intra/ inter CV 値を算出

Negative control (x3）

標準的なバッファー⇒ 検出限界 (LOD) の算出

3 種類 ( 計 4 つ ) の内部標準を全ウェルにスパイクイン

Interplate control (x3）PE
Extension control
EXTENSION REACTION

オリゴペアが結合した
抗体 92 種類
⇒ ラン内・間のノーマライズ

内部標準

…

マッチするオリゴペアが IgG
抗 体 に 結 合 さ れ た も の で、DNA タグは常に近接しています。伸長反応、増幅、検出のステップの評価に使用されます。また、データのノーマライズにも使用されます。

PRE-AMPLIFICATION
1

Ampliﬁcation/Detection control
Detection by qPCR

ステップの評価に使用されます。

閾値を満たさない
データポイント

0.3
NPX

合成 2 本鎖 DNA です。増幅、検出の0.50-0.3-0.5-1

品質管理（例）
設定基準を満たさないデータポイントが明確に判定されます。

株式会社ファーマフーズ アプロサイエ

は、わずか数μL のサンプル量で 96 種類の――ところで、甲斐さんはなぜこの世界に？

ンスグループとしての新しい挑戦

タンパク質を同時解析できますから、全採血することなく、マウスを生かしたままにでき甲斐――アプロサイエンスグループは 2022 年 4るので、例えば、タンパク質の経時的な変化は海洋生物でした。幼少期に父が熱帯魚を趣を観察することも可能です。これまでできな味としていて、グッピーの品種や交配をするかったことが可能になるので、マウスパネルのが好きで、休日になると色々な熱帯魚店にとの提携に影響はありましたか。の重要性も感じています。

連れて行ってもらっていたので、その影響で福田――今後の展望をお聞かせください。

月からファーマフーズ株式会社に事業統合されましたが、オーリンクプロテオミクス社

ファーマフーズ社は機能性素材、創薬、通信販売の 3 つをビジネスの柱としてお大学・大学院時代は農学を学び、専門すね。高校でメンデルの遺伝の法則などを習って、ますますその仕組みを知りたくなって遺伝分野に興味を持ちました。博士研究もト甲斐 弊社としては、日本のユーザー様にはラフグを用いた遺伝地図の作製で、幼少期の国内でより身近に PEA 法を用いたプロテオ

興味がそのまま自分の研究テーマになったーム解析を使っていただけるような環境をことはとても幸運でした。その後、研究機関充実させたいというのが一つの展望です。そでポスドクとして研究を続けていましたが、れから、今回導入した qPCR ベースの Olink®

当時使っていた遺伝子解析装置のメーカー

Target シ リ ー ズ と は 別 に NGS ベ ー ス のから、フィールドアプリケーション・サイエ

Olink® Explore シリーズがあります。現在のンティストとして誘っていただき、メーカー

Olink® Explore 3072 は 1 サ ン プ ル か ら 約と研究者をつなぎ、サポートする仕事に就い

3000 種類のタンパク質を定量できますが、たのです。研究者として独創的なアイデアでションにもなっています。

今後近い将来、その数を 4500 種程度に増や新しいことを発見できるようなタイプでは甲斐す製品開発が進んでいます。ファーマフーズ

なく、どちらかというとそのような先端を進社にも興味を持っていただいており、いずれむ研究者の目的を達成するために、より良いは両方のプラットフォームが日本のユーザ

実験プロトコルを考えたりするのが好きでー様に提供できればと思います。

したから、メーカーの立場から研究者をサポり、アプロサイエンスグループは創薬のバイオメディカル部門に組織もメンバーも内容も変わることなくグループインしました。受託サービスはこれまでと変わりませんが、会社内での解析業務にも携わることになります。これまで自分たちの行った解析がどうなっていくのかを知ることができませんでしたが、これからは製品になるところまで見届けられるかもしれないので、新たなモチベー

弊社側では、事業統合前から話を進めていましたが、機能性食品などの研究開発を行うファーマフーズ社と提携できたことは大きいですね。機能性食品の分野では免疫応答や炎症など免疫細胞に関わるものに注目が集まっています。弊社がターゲットとするのはそれらの分泌タンパク質が多いので、受託サービスだけでなく、ファーマフーズ社内の臨床研究にも使っていただけるだろうと

福田

アプロサイエンスグループの展望としては、まず Olink® Target の受託サービスを広く使っていただくことが第一です。質量分析とオーリンク社の PEA 法を使った技術は、例えるなら地引き網と特異的な餌の付い期待しております。

た一本釣りです。地引き網の質量分析は、タ―― Olink® Target を使った受託サービスをくような未知の魚との出会いがあるかもし

開始されて 1 ヶ月ほど経ちますが、反応はどーゲットを狙うわけではないので、あっと驚れないけど、アジばかり獲れてしまって 1 匹うでしょうか。

しかいないレアな魚を見逃してしまうかも福田を定めた特定の魚を釣りに行くので、それら国内の研究者にまだそれほど知名度は高くないと申し上げましたが、予想以上の反応があり、すでに多くのご依頼をいただいしれない。
Olink® Target では、92 種類の狙いがどんなにレアでも必ず釣り上げる。一本釣りでは未知の魚を探索することはできませートする仕事には大きなやりがいを感じていました。そのメーカーで働いている当時、自社の qPCR 装置でタンパク質のマルチプレックス解析技術を作った会社がヨーロッパにあることを知り、論文などを見ても、すごく品質管理の徹底した手法でこれは素晴らしい技術だなと思っていました。それが今のオーリンクプロテオミクス社です。日本法
人を立ち上げて本格的に日本で事業をスタートするタイミングでお声かけいただき入社しました。
定年後はグッピーに立ち戻って、バックヤードに PCR やシーケンサーが置いてある学術的に裏打ちされた熱帯魚屋さんになろうかな、なんて ( 笑 )。ています。

んが、地引き網ではアジの中に隠れたレアな甲斐魚が見えないこともあります。それぞれにメ福田

リット・デメリットはありますが、どちらもお客さんがお店から帰れなくなりそうです

研究者の皆様にとっては強力な武器となり、ね。

その中で、マウスのサンプルを解析したいというアカデミアからの依頼が増えていると聞きました。マウスの場合、複数のタンパク質を定量する場合に、ELISA などでは必要量の問題から全採血が必要になることついついサポートするお話が弾んで、両方とも弊社で使えるので必ずお役に立てると確信しております。

（取材／文・坂元 希美）も多いと思います。PEA 法のマウスパネルで株式会社ファーマフーズ

アプロサイエンス グループ

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