ら3カ月以内 は 高いECHO 21 型ウイル スに対する補体要求性中和坑体を血清中に ，あ るい は髄液中に証明す ることができるo
3）本症患者の同一症例から 1カ年以上にわたり数回採血した1 6例の血清につい て，補 体要求性中和抗体を測定してみると，神経症状の再燃時には補体要求性 中和抗体が著明に上昇してい るo4) SMON流行地（割｜｜路，室蘭，呉），非流行地（防府，山口，門司，久留米，大村，宮崎，日南〉の健康人血清1 8 0 0例をほY同時期に集め，ECH021型ウイルスに対する中和抗体保有状況を調査し たが，本症の流行地は非流行地に比して抗体保有 率が高い。
5）最近．わが国住民のECH021型ウイルスに対する中和抗 体保有率か渇くなってきつつある。 例
えば，九州地方では1 9 6 4年に は4 0 ～ 4 4婦 で あ ったも の が，1 9 7 0年には6 0 ～ 7 0婦となり6年間で2 0 ～26%も抗体 保有率の上昇がみられる。
本論文では ，ECHO 21型ウイルス粒子と神経組織 との聞に共通抗原 が存在すること 。 ECHO 21型ウイルスに対して高い抗体価を維持させることにより ，サルに SMON 様症状をおこさせる ことに成功したの で，これらの 成績につい てのべた。

実験材料及び方法

Ir

モノレモツ ト：アレルギ ー 性脳炎 を起す に 適当なモパモ ツトとして白黒茶ブチの もの を特に用意した。
サル：ブタオザル及び日本ザルを用いた。
ECH021型ウイルス：p rototyp eであ るFari na株を用い たo神経組織：ヒト及びカニクイザルの神経組織を用いた。
中和抗 体価，補体要求性中和抗 体価の測定：既報の 方法に準じて行ったD (JOXJ.l)
共通抗原を検索する手技：i n vitro cell

migrati on inhibi tion tes t及びECH021型ウイルス免疫血清中の抗体が神経組織乳剤に吸着するか否かを調べる方法によ った。

E

実験成績

a〕 ECH021 型ウイルスと神経組織との問に存在する共通抗原：．
サルを用いてECH Oウイルス各型の抗血清を作製する仕事が， わが国でも米国でも 行な われたが，

このECH021型ウイル スはい ずれも最も抗体価 の低い抗血清 しか得ることができていない 。 また ，
ECHO 2 1型ウイルス髄膜炎患者 におい て，ウイノレスが髄液から分離されて いるにも かか わらず，抗体価の上昇が認められ なかった とl、う報告も2～3 ;z..ることができる。 これ は ，E CH021型ウイル
ス粒子構成成分と生体組織の あるもの とが類似の抗原性を示しているために， よ い抗原とはなりえないのではな いかと想像される。 そこで，もし，この ようなウイルスに対し て抗体が高力価に 生体内 にできたとすると，その抗体は自己の特定の組織を障害する抗体ともなると考えられる。
ヒトの神経由質組織 と完全アジユパントを混合して モノレモツトの皮内に注射すると，約2週間後にア-4 ーむしろ従来問題にならな か ったも のが最近問題になったことは，キノホ Jレムの副作用を 増加させ ている生体側にこそ問題があるとも考えられ る。すでに本邦に おけるECH021型ウイルスの漫淫は近年，特に広範囲にし か も高度にな っており ，このウイルスに対する補体要求性抗体は脊髄及び交感神経の神経由貿ことにミエリンに 対する抗体となることを細胞性免疫と体液性免疫の両面から指摘した。
今までの研究を総括する意味でE CHO 21 型ウイノレスのS MONにおける役割をまとめてみよう。
ECHOヨl型ウイルスの初感染は多 くの場合，幼児期か らみられ，他の腸管系ウイノレスに比して感染率は低いカろ邑半数の人は3 0才までにこのウイルスの洗礼をうける。この際，多くの人 は不顕性感染に終わり ，なんら発病することなく，ECHO 2 1型ウイルスに 対する抗 体を獲得す る D 少数の人は，このウイルスによって ウイルス性髄膜炎を起こす 人もある。
しかし，い ずれの場合でも抗体産生がみられるo 長い年月がたち，この幼児が次第に成長する につれ ，抗体価は低下し て くる。この時，再感 染を うける と多くの人はb oo ste r効果で抗体が再び上昇して不顕性感染に終わるが，特定の人は体内に残ってい た抗体が ウイルス増殖を許す程度で あり，
しか も増殖し たウイルスとは完全に結合せず持続感染のような型をとった 時，S MONとい う 病像を形成するものと 考え たい。
この再感染によって出現した持続感染は高い補体要求性中和抗体を出現させ，こ の抗体はE CHO
2 1型ウイルスに対す る抗体であるが，一方，自己の神経組織の特定部分に対する抗体ともなり， この抗体は補体の関与によって特定の神経組織を障害する D この障害はいわゆるtype2のa Ilergic
reactionによるものであろう。
腹部神経を 障害すれば腹部症状を呈し，激烈なる腹痛，下痢となり，腸管占膜の病理変化を もたらし，腸管より のビタミン吸収阻害 に働けば神経 病変の修飾をもたら すことも考 えられるし，又異常吸収が増加すれば，キノホノレムの吸収が増加する ことも考え られる。脊髄神経の障害は神経症状を呈し ，変性 神経組織はさら に抗原となり，自己免疫機序によって脊髄神経の障害を修飾し，さ らに は視神経の脱髄をもたらし，視神経障害にまで進展するものと考えたい。

-7

V

結

論

ECH O 2I型ウイルス粒子と神経組織こと にミエリン画分に共通抗原の存在を体液性免疫と細胞性免疫 の両面から指摘することができた 。 ゆえに ，ECH021型ウイルスに対して高い抗体 が出現す る
ことは自己の神経組織，特にミエリソを障害する抗体となると考えられる。
サノレ にECHO 2I型ウイルスとアジユバントを注射し ，高い補体要求性抗体を長く持続させることによ り，下肢の知覚障害を伴った麻揮を起すことに 成功した。叉，こ の 発症したサルの血清 にみられた抗体像はSMO N患者にみら れ?.i血清学的特長と 一致した。
SMO Nにおけ るECH021型ウイルスの役割に ついて今迄の研究成果をまとめ ，発病機序につ いての考察を行ったo

参

考

文

献

(1）緒方正名，他：岡山県で発生した腹部症状を伴う非特性脳脊髄炎症（SMON）の疫学，日本公衛誌， 16:687 ,
(2)

1969

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日伝染会誌，4 3:99 , 1969

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匿学のあゆ み ，74: 163, 1970
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8:143 ,1968(5)

新宮正久，他 ：腹笥症状に続発する脊髄炎の病原に関する研究，日伝染会誌 ，39;139 ,
1965

(6)

新宮正久：腹部症状に続発する脊髄炎の発病機序に関する研究，日伝染会誌， 39 : 4 4 2 ,1 9 6 5(7)新宮正久 ，他：腹自荘状に続 発する脊髄炎の近年増加に対する 疫学的 考察 ，日伝染会誌，
40:24 7 ,1966(8)

新宮正久，他：腹 部症状に続発する脊髄炎の血清疫学，日伝 染会誌，40:4 5 4 ,
196 7

(9)

新宮正久： SMON病因論

SMONにおけるE CHO 2 1型ウ イノレスの役割り，

最近医学，24:2407 ,196900)

野見山重之：ECHO 21型ウイル スの基礎的性状に関する研究．久留米医誌，
33:14 13-1 424，昭45

ω 田中義博：E CHO 21型ウイルス の免疫学的性状に関する研究，久留米医誌，-9 一

33:1425-1439 ，昭45

その免疫中枢としての可能性，科学， 39:57�－ －581 , 1969(12)

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03)

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Lancet , I , 5 2 , 19 6 6。心

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Jr. and G.T.

Stewart: Treati n g acrodermati tis

enteropathica. Lanc et, I, 2 61-2 6 2-10 ー

19 6 6

型Fari na P- 1 0株，細胞は F L細胞H S 株であるつ培養液は久留米大処方によるF L 細胞H S株のための組織培養液（増殖用と して 1 0 %仔牛血清加 Melnick-Ha出s液，維持用として重曹を除いた1
弼スキムミルク加Meln ick-Ea rl e 液〉を使用した。
補 体要求性中和抗 体の担！｜定法も大略久留米大の方法〔血清0.4mtを4倍希釈し5 6 ℃ 3 0分非動化後，4 倍段階で 1 0 2 4 倍ま で希釈し，各蔚昔希釈液を o. 5111.£づっ 2 本の tubeに分注し〈原法では 0.6mt

づっ分注とあるが， 1. 2m_e から 0.6111.tづっ2本はとれない〉 一 列を対照列．一列を椅体例とし，対照測
食塩水 0. 2 5 me （原法では 0. 3 me ）を各 tube に加え，補体列にはあらかじめ nonspeci fie

－＋十

には Mg

inh ibi tor の含まれていないこと を確めた新鮮モノレモツト血清を 1 0 倍にMgのを �－ 2 5 me （原 法で rt 0. 3 me ） 加える D 更にウイルス被 C＊

食塩水てて希釈したも

o. 1 m.e に 2 0 OT CD�0 ウイルス含有）を

0. 2 5 me （原法では 0. 3 me ） づっそれぞれの tub e に加えてよく混和し， 3 7℃1 時間保ち，そ の0.8

me をとり. 0. 2me づっ4 本のF L t ubeに接種する。対照ウイノレス液はまず 2倍に希釈し，これを原被とし て10 より1 o• まで 希釈し， 2列の c on t rol
1virus titration を行う。 一 列は正常のFもtube で他のー列は前述の補体液 を更に 2倍に希釈し，各 tube に 0. 1 me づっ加えたものである。 0.1

m.e接種とする 白 FL

tube は 4 ～ 5 日目に t iter が100 TCD50 を示し，こ の時の血清 の中和抗体価

を 5 0 婦中和点 で判定する。〕に従った 。
白木

E

結

それぞれのSMON患者血清の中和抗体価及び補体要求性中和抗体価の成績は〔表〕に記載したとお
りである。

地区
井原

（表〕
年

血 清番号
408

メ

-ff
35

F

発病 年 月。

41 5 18

F

44. 6. 7

F

4 3. 3.

442 57
4 51

452

456

35

F

43. 6.

//

43.12.1 7

//

//

//

50

F

44. 4. 1 5

44. 5. 22M

51 7 23F

468 2751 8 24

5 44

//

31
//

F

M

M
//

4 4. 5.1 3 44. 5.1 8
4 3. 11.20 44. 1. 29
4 5. 3.

4 4.1 0. 3 44. 10.

4 5. 4.

3

//

5 35

＊

44 F 4 3. 8. 3 0 43. 9.21
551 71 F 4 4. 822 I 44. 9.23
カツコ内は腹部症状発現からの月数-12-血

神経症状 中和折 補体要求発現から性中京抗 備考
年月日 の 月数 体 価 体価つ44.6.25
8
く4
8と
3
6 40
4 4.7.2 3
く4
同一人
4 4.81
. 8
く4
く4
採

//

460 62

5 30

日

部
腹
神
経
4 4. 4.12 4 4 . 4.23

//

409

湯原

性

】

4 4.6.20( 12)

4 4.8.20

8446.206

44.8.18

4 4.6.20

45. 6 .

6

6

3

く4

6

く4

3

44.8.1 48

く4

4 5.6.

C 3)9

く4

4 5.9.

C

s)

く4

45.8.
4 5.8.
4 5.9.

’
｝

( 4)

く4
く4

23

32

12

く4

16

8

．

451 と
阿一人
く4 !
8

く4
8

く4

く4

5 3 0とく 4 同 一人
128
8 I

スモン患者のE .c h O 2 1型ワイルス
K対する補体要求性中和抗体Kついて
上田重晴

I

奥野良臣（阪大徴研）

高橋理明

はじめに
久留米医大の新宮博士はスモン病の原因としてEcho 2 1 型ウイノレスの再感染アレルギ 一説を主張して居り，その中でスモン患者の 80 婦は符経症状発現時か ら 3 ヶ月以内では Echo 2 1 型ウ イルスに対し高い補 体要求性中和抗体価を示し， 中和 抗体価に比し8倍以上高い値を示すことを報告して いる。私共は北大底地区の大手前病院 ，新千里病院からスモン患者血清の提供を受け ， Ee ho 2 1型ウイノレスに対する中和抗体価及ひ補体要求性中和抗体価を測定したので 報告する。

IT

実験材料及び方法
1.

ウイノレス

大阪府立公衆衛生研究所より分与を受けた Echo 21 型 ウイルスを用いたo ，同ウイルスは健康児糞便よりカニクイ猿腎細胞を用いて分離 ，同定され，FL細胞で数代継代されたものであるo ウイルス液の7.・

F L細胞での感染価は 1 0 5 τ℃ID50 /0.1 m.eであった。
2. 細胞
当研究室に於てクロ ー ニングした Echo 21 型ウイルスに良好な感受性を示すFL細胞 H2 株を用4いた。 1 0 場仔牛血清C CS）加 E agle's MEM(E.MEM）に浮遊させた 1 5×I 0 コ／me の細胞を’

1 mわ つ 1 3 IIUP!× 9 0 mの tube に 分散し 2 日後に使用し た。
3.

ウイ J レス希釈液

最終濃度 0. 5 %ゲラチ刈日 Dulb ecco' s PBSH (pH 7.0 ）を 用いたo4.

患者血清希釈液

E.MEM( pH7.0 ）を用いた。
5

補 体
朴

新鮮モルモツト血清（ I 0 匹の血清をプーノレした）をMg

食塩水で 1 0 倍に希釈したものを補体とし て用いた．。補体は中和反応に用いる前に nonspecificinhibito r の含まれ ていないことを確か

めた。

14

SMO N患者血清のエンテロワイルス抗体
保有状況の調査研究（昭和4 4 - 4 5年度成績のまとめ〉
多ヶ谷

I

勇（国立予防 衛生研究 所）

はじめに

SMO N 研究協議会病原班の研究活動の一部として，既知の病原ウイルスが S MONの症状発現に何らかの関係があ りそうか，またはそのような可能性を否定し得るかを明らかにする必要が あることが議論されて来 たo このような研究の手はじめと して ， エ ンテロウイルスのいく つ かの型に対する中和抗体
保有状況を， S MON 患者血 清および健康人血清について比較検討する ことと なり，6研究機関の共同研究がーなされた。 参加機羽及び責任者は下に示す通りであった D

TI

北海道衛生研究所

飯

田

広

夫

宮城県衛生研究所

今

野

二

郎

国立予防衛 生研究所

中野

千葉県衛生研究所

芦原

義

受知県衛生研究所

山

田

不二造

大阪府公衆衛生研究所

国

田

信

稔

守

治

材料並に方法S MON 患者血清 は1 9 6 8 年，1 9 6 9 年に岡山県の湯原，井原両地区で採血されたもので，予研
ウイルス中央検査部に凍結保管されていたものである。血清量科理られていることと．出来 るだけ多くのウ イ ルスに対して同 じ血清の抗体価を測定した いとの要望から，5検体ずつの血清をプールして，湯原地区血・ 清 6 プール C 1 9 6 9 年春採血〉，井原地区 1 1 プール C 1 9 6 s 年春および 1 9 6 9 年秋採血〉につ いて 抗体測定が行われた。 健康人血清としては ，各機関で 手持ちの ，ある い は採血し得るもの
で， SMON 患者と年令．性別など出来るだけ同じ条件のものを， 5 検体ずつ のプールを作って抗体測定を行うことが決められたo
使用ウ イノレスおよび対応する WHO 標準馬血清（約 2 0 0 単位／ 0.lm.£に希釈されたもの〉は予研腸内ウイルス 部から分与された。 20 0 単位の希釈血清をつくるための 希釈倍数はWHO の記載 1

～

3 ）に

よる抗体価から計算して定め られたが エ コー3 3型血清のみはWR Oの記載が発表されて いないのて予研腸内 ウイルス部で得られた抗体価から計 算された。 （表 1 )-J 8 ー体価が示された 。 以上述べたような例外的な場合を除けば，各機関で得られた抗体価は比較的よく一致していた。
各機関により測定された希釈WH O標準血清C 2 o 0単位）の中和抗体価

表2

A

B

>8 0 0
562)
く5 0
178 )
40
100)
>8 0 059
C 450)
15 9
C 1 7o)
1 18
C 316)
豆5 9(100 0)200
C 100)

ウイルス型
CA

7

CA

9

CB

1

CB

2

CB

3

CB

4

CB

5

CB

6

Echo

1

Echo

4

Echo

6

Echo

7

Echo

9

関

機

標準血清

l

く5 0
C 1000)

1 00(>l 00 0)
く5 0
C 1000)

398
32)
280
32)

C
220
32 )

43
32)
33 0
C 2 so )
51 0
4 7)
\.
15 9
( 3 2 0)59
C 3 2o)
4 9 0
C32o)

\.

D

E

F

171
5 0〕

400
3 2)

>5 1 2C s o 2)

8 6
32)
15 4
32)

25 6
C so 2 )25 6
C s o2 )

200
32 )
13 2
32 )
222
l 32 )
4 00( 10 0)
22 2
32)
28 6
32)
20 0
( 3 0 0)>5 1 2C 12 6 )35 4
C7s 9)>5 1 2(126 )

24 2( 10 0)
13 3
75 )
N D
18 5
50 )

l

30 8
50 )
14 6

Echo 12
Echo 14
E Cho 1 650(>l 00 0)50
17 7)

二三5 6 0( 456 )
三二3
( 316)

4 90
47)
74〔3 2 0 )

83
(100)
143
( 450 )

く5 0177)

孟2 8 0
J 2)

71(10 0 )

10 0
l 2 00 )Echo 25
Echo 3 3（）は中和に用いられたウイルス量（TC I D50 ）を示す

ND: 実施せず c

-21-

(

51 2
C 79 s )
く1 6
(795)
128
( 5 02)16
C 1 2 6)

(b) SM ON患者および健康人の血清のエンテロウイルス中和抗体価
各機関より報告 されたもの をまとめた のが表 3である。同一血清に対して同一ウイルスを用いて異る2機関で得られた 抗体価を土下に並べ て載せである。それぞれの血清型 のウ イルスに対する中和抗 体を測定する際に ，WH Oの標準血清を同時に測定 しているので，その時の中和 ウイノレス量は表1に示 されたものである。結果を通覧し て見られるように， 大部分の血清につい て，異った 2機関により， ほY等
しい中和抗体価が 示されているが，時として同一ウイ ルスに対する同一血清の中東航体価が1 0倍以上の差を 示し た場合もあったo 中和抗体価が証明されない 場合や，中和終末価の出なかった 場合もあったが， 一応比較の便の ために， 2機関で得られた同一 ウイ／レス に対する同一 血清の中和抗体価 の幾何平均を出して表に並記すると同時に， SMON患者血清のそれ ぞれのウイルスに 対する中和 抗体価の幾何平均値を表に示し た の SMO N患者血清で特に何らかの特定のウイルス型に対 して異常に高い中和抗体 を含むものは見られなかっ た。健康人血清は機関B,Dで， それぞれ2プーノレずつが 測定さ れたのみで，広く全般的な傾向を う かが うことが出来ないが，概してS MON患者血清 より中 和抗体価 が 高いようであった。これは，あ るいはSMON患者ではステロイドホルモンが治療に用いられることもあることと関係があるかも知れない が， 健康人血清の検査例数が少いので何 とも云えない。機関Eでも9人 の健康
人 血清の中和抗体 測定が 為されたが，個体別に測定が なされ，且つ中和終末価の得られていないものもあったので，集計からはずされた。
以上の結果から， しらべられた1 8の血清型につい ては，SMON患者血清で特に異常に高い中和抗体価を有するもの は見られず，直接ない しは間接の関係を示唆するような成績は得られなかった。今回しらベた ウイノレスは過去7年間のある時期，あるいは何年かに亘って相当多く の分離が病的材料（主として小児の疾患〉から為されたもの として，CA9,CB1 ー 5,E4,6,7,9,12,1 4の各ウイルスが含まれ，それ程多くは ないが分離のみられたものとしてEI, 25, 33があ り，あまり分
離が みられてい ない ウイルスとしてCA7, CB6お よびE1 6が含まれている。近年比較的高い頻度
で分離 されたエ ンテロウイルスは今回の調査にほとんど含まれ てい るが，これ以外の あま り分 離頻度の高くないもの ， あるいはわが国では未だ分離の報告の ない型 のウイル スに対する抗体の保有状況もし ら
べ る必要があ る と思われる。なお，今回は健康人血清が あまり数多くし らべられなかったが，今後この仕事を継続し て行う場合には，この点の考慮も 必要であろう。また標準血清 の 抗体価 測定に 際 して時 とし て見られたように，機関による大きな 差の生じる原因の解明も，この種の共同研究にとっては重要 なことである。

-22-,タリウム中毒患者の尿中のタリウム定量の例数は少ないが，鈴木が2名のタリウム中毒患者について測定したタリウム量はそれぞれ0. 4 8 ppmと0.2 0 ppmであったことから，Z) SMON患者尿中のタ
リウム量はかなり高いと考えられるが，今後定量法について更に検討するとともに ，多数の健康者およ12)
びS MON患者の尿中タリウム量を測定し，比較検討する必要がある。

V

要

約

昭和3 9年から現在まで， 34 7名のS MON患者と1 6 7名の接触者から採取した5 7 9件の材料からウイルス分離を試み，l 3株のCoxsackie A群ウイルスを分離した。 Po Ii o , ECHO,
Coxsackie B群およ7.f Ade no virusは分離されなかった。Coxsackie A群ウイルスが分離された時期の9 8名の患者血清について補体結合抗体価を測定したが，同ウイノレスが病原agen tと考えられる
抗体保有状態はみられなかった。
昭和4 0年から4 2年に採取された1 9 0名のSMO N患者についてE CHO 2 l株に対する中和抗体価を測定したが，7 6名が抗体を保有せず，抗体保有者でも特に高い抗体価を有するものは少なかったゐ昭和4 5年から患者血清について，血清蛋自分画，r globulin定量，

コ リンエステラ ー ゼ定量を行った。 4 4名の血清中，I gGの増量が29名にみられ， 4 7名の血清中コリンエステラ ー ゼの減量
が2 7名にみられた。なお尿中のタリウムの定量も行った。

献文1）厚生省監修：徴生物検査必携， l 9 6 6 ，日本公衆衛生協会
2）鈴木俊雄：Japan Analyst, 14, 130, 1965
3）小南文四郎，小野双葉：Japan An a I ys t , 1 8 , 5 7 3 , 1 9 6 94）宮本益夫：Japan Ana I ys t , 1 0 , l O 2 , l 9 6 l5）甲野礼作：最奈医学， 24, 2043，昭和4 4年
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7）多ヶ谷勇：スモン調査研究協議会班研究報告プログラム ，昭和4 5年
8）新宮正久ほか：日本伝染病学会誌，39 ,139,1965
9）新宮正久ほか：日本伝染病学会誌，39 , 442 ,1965
10)

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11)Pentschew.A, Ebner. F, Kovatch.R: Proceediuzs

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-3 0 ー