No.3 (2000 年 10 月）＜ 目 次 ＞RNA と私の縁
学習院大学 生命分子科学研究所所長三浦 謹一朗

日本 RNA 学会 第 2 回評議員会議事録
日本 RNA 学会第 2 回総会議事録
日本 RNA 学会 1999 年度会計収支決算報告
日本 RNA 学会 2000 年度収支予算
第 2 回（2000 年）RNA ミーティング報告（第 2 回 日本 RNA 学会年会）
第 3 回（2001 年）RNA ミーティングのお知らせ（第 3 回 日本 RNA 学会年会）＜ 寄 稿 ＞
tmRNA に関する最近の話題
武藤 あきら（弘前大学・農学生命科学）

ＲＮＡと私の縁
学習院大学 生命分子科学研究所所長 三浦 謹一郎

今年はリボソームの立体構造を全原子配置について明らかにするというＸ線解析の結果がTom Steiz らのグループから発表されたが、これは遺伝情報の翻訳機構の研究にとっては一つのモニュメントとなる仕事であった。
私がＲＮＡの研究を始めたのは大学院修士課程２年目の 1954 年からであった。大学の３年生のときには大学院に入って生物化学を勉強したいと思っていた が、新しい生命科学の動きがあって核酸や蛋白質というものを研究されている新進の渡辺格先生の研究室に志願した。研究室は東京の駒場の東大理工学研究所 （のちに宇宙科学研究所）にあった。当時はリボソームという言葉もなく、細胞の中のＲＮＡは遠心分離で分別される顆粒部分と上清部分（可溶分画）に分別さ れていて、可溶分画中のＲＮＡは solubleＲＮＡあるいはｓ－ＲＮＡと呼ばれていた。ｍＲＮ
Ａ、ｔＲＮＡ、ｒＲＮＡの３種のＲＮＡが区別されたのは 1960 年代に入ってからであった。従ってそれからの研究の進歩が如何に早かったかがわかる。大学院の博士課程の終わり頃には核酸関係の論文抄録を作るア ルバイトをしていたが、生化学関係の論文誌から核酸関係の論文は自分でほとんど拾い出して主なものについては抄録を作ることができた。しかし、今では片手 間にそんなことをすることはとてもできない。
私は大学では化学科にいたので、核酸というまだ正体がはっきりしていないが生物学的に注目されている物質の構造に強く関心があった。大学院で渡辺格先生 の研究室ではＲＮＡの不均一性というテーマが与えられたが、また、研究室の中での技術的分担としては塩基組成分析をきちんとできるように実験方法を確立す るように言われていた。大学院の１年目に、渡辺格先生が米国出張中だから修士課程の間は蛋白質化学の安藤鋭郎先生の研究室で勉強して来いと言われ、当時助 手の石井信一先生について生化学実験の手ほどきとアミノ酸の組成分析の方法を習った。修士課程２年目からは渡辺研の方で仕事をするようにということになっ たのだが、安藤研で習得したアミノ酸のクロマトグラフィーの方法を核酸の分析に使えるようにすることが一つのノルマであった。しかし、偶然のことであった かもしれないが、大学院の最初の１年を蛋白質化学の研究室で過ごしたことは私のその後の長い研究生活に大きな意味を持っていたように思う。
テーマの仕事に関しては、当時としてはできるだけ穏やかに細胞から取り出したＲＮＡをイオン交換クロマトグラフィーや塩析で分別してみることを始めた。 発案は助手の鈴木先生であったが、この仕事でも安藤研にいた１年間の経験は大変役に立った。遠心分離や１Ｍ NaCl で塩析することによって顆粒ＲＮＡ（ｒＲＮＡ）とｓ－ＲＮＡ（ｔＲＮＡと少量のｍＲＮＡ）の分画を分けて塩基組成分析をしたところ、はっきり違い があることが見付かった。このときｓ－ＲＮＡの方には通常のＡ、Ｇ、Ｃ、Ｕの他に少量のピリミジンヌクレオチドが含まれていることを見付けて力が不充分であったのでその物質を同定できなかったが、それから程無く Waldo．E．Cohn が見付けたプソイドウリジル酸に相当することを知って悔しい思いをした 覚えがある。
博士課程に進んでからは渡辺格先生から直接指導を受けてファージ感染後に宿主大腸菌の中で微量に合成されるファージに特異的なＲＮＡ（すなわちファージ のｍＲＮＡ）の動態を研究した。私はバクテリアやファージの実験方法をカリフォルニア仕込みの渡辺先生から直接教えていただくという貴重な経験を持ってい る。また、その頃渡辺先生は必要な技術はどんどん外へ出て行って専門家に教えてもらうことを勧めて下さったので、タバコモザイクウイルスの精製や増殖方 法、ウイルス活性の測定方法などは秦野にあった専売公社のたばこ試験場で日高醇先生の研究室で比留木忠治さん（のちにカナダのエドモントン大学教授）に教 えてもらい、共同研究もした。
大学院を了えて自分で研究テーマを選ぶようになってからはまずｓ－ＲＮＡが大部分アミノ酸転移ＲＮＡと呼ばれるものであって分子量も小さいので構造と機 能の関係を調べるということを主テーマとすることにした。しばらくして核酸、といってもＲＮＡの日本における研究のメッカであった名古屋大学理学部分子生 物学研究施設に行くことになった。
ｔＲＮＡの塩基配列決定を目指していた竹村彰祐さんの研究室で一緒になって仕事を始めたが、私の方はどちらかというとｔＲＮＡの機能の方の仕事を受け持 ち、アミノ酸識別機構を研究した。ｔＲＮＡの塩基配列は酵母のアラニンｔＲＮＡについてコーネル大学の Holley が一番乗りをし、ミュンヘンの Zachau がラットのセリンｔＲＮＡでこれに続き、それに次いで竹村グループが酵母のバリンｔＲＮＡについて決め、だんだん生物材料の異なる色々な種類 のｔＲＮＡの塩基配列が決定された。ｔＲＮＡは蛋白質合成で核酸語を蛋白語に翻訳する中心的役割を果たす小さい乍ら有能な分子であるということで、私は ＲＮＡにのめり込んでしまった。ｔＲＮＡがアミノアシルｔＲＮＡ合成酵素（ＡＲＳ）とアミノ酸の種類を見分けることにはアンチコドンが関与していると思わ れるデータがいろいろ出てきて興奮していた。90 年代になってｔＲＮＡとＡＲＳの複合体の構造解析が進んで、多くの場合にｔＲＮＡのアンチコドンと３’末 端付近はＡＲＳと直接相互作用をしており、ｔＲＮＡのアミノ酸識別には多くの場合にアンチコドンも関与しているという結果が報告されるようになり、我々が 立てた仮説がかなりの場合に実際と合致しているようである。名古屋にいるときには均一なＲＮＡ成分を含むウイルスＲＮＡの構造を調べることもやってみたい と思っていた。
イネ萎縮病ウイルスとカイコ細胞質多角体病ウイルスの２種について精製して分析を行ったとこ
ろ、いずれも二本鎖ＲＮＡを遺伝子として持って いるが、それぞれ 12 個または 10 個のＲＮＡ断片に分かれており、ゲル電気泳動で断片同士を分離させ、サイズを決めることができた。
1970 年からは静岡県三島にある遺伝研に創設された分子遺伝部で仕事をすることになった。
ここでは遺伝子の構造研究をやろうとしたが、小さな遺伝子 （ゲノム）から取り組むべきだと考えてウイルスを材料にすることにした。当時長いＤＮＡの塩基配列を決める方法はまだなくて、これはかなり先のことになり そうだが、ＲＮＡならばやり方次第ではかなりの長さの塩基配列を調べることが可能であった。上に述べたように名古屋大学にいたとき二本鎖ＲＮＡ遺伝子を含 む
ウイルスのＲＮＡは一つのウイルスの中で 10 個ほどのシストロン・サイズの断片に分かれていることがわかっていたのでこれなら遺伝子の情報発現やその調 節機構を調べるのに格好な材料であろうと思って二本鎖ＲＮＡ遺伝子を持つウイルスを研究材料にすることにした。当時はまだＤＮＡをシストロン部分で切断し て取り出すことなどできていなかったから、このウイルスの二本鎖ＲＮＡの断片はまさに天から与えられた材料ではないかと思った。構造研究のためには研究材 料はできるだけ量的に多量に得られることが必要だったからカイコの細胞質多角体病ウイルス（ＣＰＶ）を主に用いて研究を展開した。
研究の最初の目標はＣＰＶの二本鎖ＲＮＡの各断片とそれぞれの転写産物の末端付近の塩基配列を調べて情報を持っている鎖の特徴を明らかにすることであっ た。こうしてメッセンジャーＲＮＡと二本鎖ＲＮＡの情報鎖（＋鎖）の５’末端がブロックされた構造であることを発見することができた。これが mＲＮＡの キャップ構造の発見である。その研究経過は詳しくは Advances inBiophysics Vol. 14 (1981)に書いたが、岩波新書の「ＤＮＡと遺伝情報」にもあらましを書いた。
このようにして、私は魅惑的なＲＮＡというものから離れることができなくなってしまった。最近
は私の仕事の重点が蛋白質やＤＮＡの方に移っているが、 ＲＮＡからも離れることはできないでいる。ＲＮＡ研究が新しい局面を迎えている今、ＲＮＡ研究者の集まりができて嬉しく思っている。
皆さんの御活躍を期待 したい。

（ ２０００年１０月 ）◆日本 RNA 学会 第２回 評議員会議事録

日時： 平成１２年７月３１日（月）１２時から１３時
場所： 品川プリンスホテル・新館 38F 個室「平塚」出席者：会長志村令郎
評議員 井上丹、太田成男、坂本博、谷時雄、中村義一（集会幹事）、野本明男、武藤あきら、渡辺公綱（会長補佐）
幹事饗場弘二（編集）、内海利男（会計）、多比良和誠（集会）、井上邦夫（庶務）１．志村会長が挨拶を行った。
２．井上庶務幹事より、正会員、賛助会員の状況が報告された。
３．饗場編集幹事より、会報第１号が平成１１年１０月、第２号が平成１２年５月に発行されたことが報告された。
４．谷評議員より、学会ホームページが平成１１年１０月に開設され、これまでに７千数百件のアクセスがあったことが報告された。
５．内海会計幹事より、平成１１年度の会計収支決算報告が行われた。すでに会計監査により適正な予算執行と認められたことが確認され、収支決算報告を承認した。続いて平成１２年度の会計収支予算案が提出され、これを承認した。
６．今後の財政基盤強化のために会費値上げ等を行うべきか議論し、平成１２年度には会費値上げを行わな
いこと、今後必要に応じて評議員会で検討することとなった。
７．第２回年会世話人の中村評議員・集会幹事より、年会準備が順調に進んでおり、事前参加申し込み１８６名と発表申し込み１００件を受け付けたことなどが紹介された。
８．第２回総会の議長・副議長として正木春彦氏、阿形清和氏を指名することとなった。また、総会成立には正会員の半数にあたる１２５名以上の出席（委任状を含む）が必要なことが確認された。
９．第３回年会は坂本評議員、第４回年会は多比良集会幹事が世話人を行うこととなった。坂本評議員から、
平成１３年８月１日（水）～３日（金）に神戸大学学術交流会館を主会場として開催準備を進める予定であることが報告された。
１０．志村会長より、RNA Society の Abelson 会長に日本での国際 RNA ミーティング開催を打診し、2005 年以降に開催可能との回答を得たことが報告された。

（庶務 井上邦夫）

◆日本 RNA 学会 第２回 総会報告

日時： 平成１２年８月１日（火）16:15 - 17:00
場所： 品川プリンスホテル・３２階「函館」１．志村会長が開会挨拶を行った。
２．総会議長に正木春彦氏、副議長に阿形清和氏を選出した。
３．議長より、４３通の委任状を含めて１６０名の会員が総会に参加しており、総会が成立していることが報告された。
４．井上庶務幹事より活動報告が行われた。
(1) 平成１２年７月現在、正会員数が２５０名、賛助会員が１１社に及んでいる。
(2) 年２回の会報発行と学会ホームページによる広報活動を行っている。
(3) 第３回年会世話人に坂本博評議員、第４回年会世話人に多比良和誠集会幹事を予定している。
５．内海会計幹事より、平成１１年度会計収支決算書が提出・説明され、異議なく承認された。また、同幹事より平成１２年度収支予算案が提案・説明され、異議なく承認された。
６．中村義一第２回年会世話人の挨拶があり、多数の参加・発表者を得て年会が順調に運営されている旨の説明があった。
７．坂本第３回年会世話人の挨拶があり、平成１３年８月１日（水）～３日（金）まで神戸大学学術交流会館を主会場として準備を進める予定であることが紹介された。
８．正木議長により閉会挨拶があり、総会が終了した。

（庶務 井上邦夫）

◆1999 年度会計収支決算報告

1999 年度（1999 年 10 月 1 日～2000 年 3 月 31 日）の学会会計収支決算は以下のようになりましたのでご報告致します。

（会計幹事 内海利男）

収入の部
科目

決算額

学会費 666,000

備考
666,000

一般会員会費 450,000 円 (5000 円 x 90 名)
学生会員会費 84,000 円（2000 円 x 42 名)

賛助会費

210,000

預金利子

7

雑収入

0

合計

入会金 132,000 円

876,007

支出の部
科目

決算額

備考

事業費102,075

会報発行53,075

年会補助金
ホームページ関連費
その他

No. 1049,0000業務委託費

343,581

一般事務費

84,740（財）日本学会事務センター

印刷費

720

通信費

41,485

コピー代等

庶務事務費

5,250

会報・請求書発送費等

雑費

37,285

事務封筒等

支出小計

530,396

会長印・学会印 35,500 円、その他払い込み手数次年度繰越金

345,611 料

合計876,0071999 年度会計監査報告 平成 11 年度収支計算書について関係書類とともにその内容を慎重に監査した結果、正当であることを認めます。
日本 RNA 学会会計監査委員
水本清久 印西川一八 印◆2000 年度会計収支予算（2000 年 4 月 1 日 ～ 2001 年 3 月 31 日）
収入の部
科目

2000 年度予算案

学会費 666,000

備考

683,000

一般会員会費 544,500 円(5,000 円 x 121 名 x0.9)学生会員会費 138,600 円(2,000 円 x 77 名 x

756,000 0.9)(30,000 円 x 28 口 x 0.9)

賛助会費
預金利子

20

雑収入

0

収入小計

1,439,020

前年度繰越金合計

345,611
1,784,631

支出の部
科目

決算額

備考

事業費
会報発行

550,000

年会補助金

150,000 年 2 回（No.2, No.3)

ホームページ関連費

300,000

その他

100,0000

評議員会

306,000

旅費・会議費296,000

その他

10,000

業務委託費

409,000

一般事務費

200,000

印刷費

30,000 委任状等印刷・コピー代等
120,000 会報・請求書・委任状発送費等

通信費（財）日本学会事務センター

庶務事務費30,000

雑費

20,000

予備費

100,000

支出小計

1,565,000

次年度繰越金219,631

合計

1,784,631（会計幹事 内海利男）

◆第 2 回（2000 年）RNA ミーティングの報告（第２回日本ＲＮＡ学会年会）

第２回年会は、７月３１日（月）から８月２日（水）の３日間、品川プリンスホテルで開催されました。今年度のＲＮＡミーティングは、特定領域研究 「RNA 動的機能の分子基盤」の公開合同班会議（７月３０～３１日）に引き続いて同じ会場で開催しました。合計１０５件の発表演題の申込があり、口頭発表 とポスター発表を半々にして、４日間を通して１会場での口頭発表、ならびに会期中を通したポスター展示と３回のポスターセッションを行い、時間的、空間的 にもスムースに会を進行できたように思います。年会への参加人数は、一般１３５、学生１１９、合計２５４名となり、第２回にして安定したサイズの年会の開 催を今後も見込めるようになったと言えます。
１会場での口頭発表は、特に若い学生の方々には、エンカレッジングな経験でもあり、今後も継続して欲しいと思います。懇親会も盛況で、主催者としては （最高でも）１６０名程度と考えていましたが、予想に反し、ほぼすべての２４０名の方にお集り頂きました。うれしい誤算で、学生諸君が「全員」参加する懇 親会を、今後ともRNA ミーティングの伝統として続けて欲しいところです。
最後に、会期中、すべての口頭発表に熱心に耳を傾けて頂いた志村会長はじめ、学会員各位、ならびに会の運営をサポート頂いた東さんと我々の研究室のメン バー、及び開催に際し経済的な支援を賜わった RNA 特定研究の領域代表・渡辺先生に、この場をかりてお礼を申し上げます。
第２回 RNA ミーティング世話人代表
中村義一（東京大学医科学研究所）

◆第３回 RNA ミーティングのお知らせ

来年度の日本 RNA 学会年会（第３回 RNA ミーティング）は、２００１年８月１日（水）～８月３日（金）の期間、神戸大学キャンパス内に現在建設中の神大 会館をメイン会場（口頭発表及び懇親会）に、また隣接する滝川記念学術交流会館をポスター会場として開催する予定です。学会終了後は週末なので神戸エリア を存分に楽しむこともできます。多数の皆様が参加して下さり、活気あふれたミーティングになるように世話人として精一杯頑張りますので、どうかよろしくお 願いします。なお、詳しい年会案内は来年２月ぐらいに RNA 学会のホームページ（http://molgen.biology.kyushu-u.ac.jp/usr/RNA/）に掲載する予定です。
第３回年会世話人
神戸大学理学部 坂本博（hsaka@kobe-u.ac.jp）

tmRNA に関する最近の話題
武藤あきら(弘前大学・農学生命科学部)

tmRNA や trans-translation という言葉が提唱されて 5 年近くになるが、新しい教科書「ゲノム」にもはじめて登場したりして、最近は かなりポピュラーになってきたことは我々以前から研究しているものにとって嬉しいことである。Trans-translation モデルがあまりにもきれ いで分かりやすいことから、この機構が一般にはもう解明されたものとして受け取られがちだが、実際にはまだ不確かなことの方が多いのが現状である。それで もここ 1～２
年、かなりの研究グループが参入してきて、新たな展開がみられた。いくつかのトピックスを紹介しよう。

＊SmpB の発見：trans-translation に関与する因子の存在は予想されていたことだが、昨年 MIT の Sauer のグループからそのひとつとして SmpB が報告された(Karzai et al., EMBO J. 18:3793-3798 (1999))。すべての真正細菌に存在する分子量 2 万程度の小型塩基性タンパク質で、遺伝子 smpB は大腸菌、枯草菌などでは ssrA(tmRNA 遺伝子)の 5’側に隣接している。正確な機能は不明だが欠失株では tmRNA がリボソ－ムと結合できない。別の因子を探して複数のグループが tmRNA に特異的に結合する他のタンパク質の単離を試みている。役者はまだ出揃っていないのだ。
＊二つの断片からなる tmRNA：インデアナ大学の Williams のグループはク－ロバクターの tmRNA は二つの断片から成ることを見つけた (Keiler et al., PNAS 97:7778-7783(2000))。遺伝子上では同一オペロン内に 3’側断片が上流（５’側）で 5’側断片が下流（3’側）に介在配列を挟んで位置 し、転写後に介在配列が切り出されて二つの断片が塩基対を介してひとつの tmRNA に組み上がる。全ゲノム配列が決まったが tmRNA 遺伝子が見つからな かったリヶッチャに同様な遺伝子構造があることもわかり、調べられた限りすべての真正細菌に存在することが確かとなった。
＊標的タンパク質：trans-translation は翻訳に失敗したペプチドの分解という一般的な役割のほかに、特定の標的タンパク質の分解という機 能もあるらしい。名古屋大学の饗場弘二のグループは大腸菌の Lac repressor(LacI) が標的となることを報告した(Abo et al., EMBO J., 19:3762-3769 (2000))。タンパクの分解による新しい遺伝子発現調節の機構として注目される。これを契機に他の標的タンパク質の検索が進むにちがいない。
＊生理的役割：大腸菌や枯草菌の tmRNA は通常の増殖に必須ではないが、淋病菌(Nisseria gonorrhoeae)では必須であることが分かった(Huang et al., EMBO J., 19:1098-1107 (2000))。間接的証拠ではあるがシアノバクテリアとマイコプラズマでも tmRNA は必須であるという報告がある。我々は枯草菌の tmRNA 遺伝子は ストレス応答型で、高温などの強いストレス下で転写は数倍～1０倍増加すること、また強いストレス下の増殖に必須であること示した(Muto et al., Genes to Cells, 5:627-636 (2000))。その他 tmRNA がファージの増殖やサルモネラの病原性にも関与しているという報告もあり、tmRNA または trans- translation が細菌に多面的な作用をもつこ

とは明らかである。
＊機能構造：大腸菌 tmRNA は 363 塩基の長さで、少なくとも４個のシュードノット、６個のヘリックス構造をもつ。
我々のグループでは数百の変異体 tmRNA と in vitro の trans-translation 系を用いた解析から、tRNA と mRNAとしての機能に必要な配列、構造の特定を行ってきた (Nameki et al., J. Mol. Biol.286: 733-744 (1999);NucleicAcids Res., 27: 3667-3675 (1999); FEBS Lett., 470: 345-349 (2000)など)。シュードノットのひとつの重要性が明らかになったし、たった 1 塩基の変化でリボソ－ムと結合できない変異や mRNA の切り替えが起き ないものなどもみつかり、それらの総合から機能構造の全体像が明らかになってきた。
世は構造生物学の時代である。最近のリボソ－ムの X-線結晶解析の成果はその威力をまざまざと我々に見せつけた。tmRNA や tmRNA と EF-Tu な どとの complex の結晶化の試みは既にいくつかのグループで始まっている。日本でも千葉工大、東大、弘前大、理研のグループを中心に好熱菌を使った構 造解析のプロジェクトがスタートし、この 1０月に弘前でミ－テイングが開かれた。最終ゴールはリボソ－ム上での trans-translation
complex の構造解析で、それによりこの反応の分子機構の詳細が明らかになるであろう。その日の来るのが楽しみである。