No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 1

細胞情報伝達の研究 創薬への応用
タンパク質キナーゼのメカニズムとガンIntroduction

タンパク質キナーゼと創薬
カルナバイオサイエンス株式会社 標的分子研究部長
薬学博士

はじめに

横田 耕一

tyrosine残基をリン酸化するTKファミリー

タンパク質キナーゼ（以下、キナーゼ）は、基質となるタンパ

TKは受容体型と非受容体型に大別されます。受容体型TKは、ク質のtyrosine、serineまたはthreonine残基をリン酸化する酵

そのリガンドが受容体に結合することにより受容体の会合が生素であり、最も良く研究されている遺伝子ファミリーのひとつでじ、細胞質領域のtyrosine残基がリン酸化されることにより触媒す。キナーゼはtyrosine残基をリン酸化するtyrosineキナーゼ

活性が上昇し、自己または基質となるタンパク質のさらに多くの（以下、TK）とserine/threonine残基をリン酸化するserine

tyrosine残基をリン酸化します。そして、src homology domain

threonineキナーゼ（以下、STK）に大別されます。2002年、2（SH2 ドメイン）などのリン酸化tyrosine残基と特異的に結合

Manningら1）はヒトゲノム、complementary DNA（cDNA）する領域を有するタンパク質が結合し、さらに情報が伝達されまおよびexpressed sequence tag（EST）配列情報を分析し、す。受容体型TKには、血管内皮増殖因子受容体2（KDR）、上皮

ヒトには518個のキナーゼ遺伝子が存在することを発表し、こ増殖因子受容体（EGFR）、insulin様増殖因子1受容体（IGF1R）

れを「Kinome」と名付けました。キナーゼ（atypicalを除く）

および幹細胞成長因子受容体（KIT）などがあり、細胞の増殖にはTKファミリーとSTKファミリー（STE、CK1、AGC、CMGC、重要な役割を果たしています。非受容体型TKはその活性化機序

CAMK、RGCおよびTKL）に分類されます。これらのキナーゼが多様ですが、受容体型TKによりリン酸化を受けて活性化されの分子系統樹を図1に示します。

るものがあり、受容体型TKが受けた刺激の情報を伝達する役割があります。非受容体型TK にはABL1およびJAK3などがあり、それぞれ減数分裂およびサイトカイン受容体のシグナル伝達に重要な役割を果たします。

serine/threonine残基をリン酸化する
STKファミリー
STKはそのほとんどが非受容体型であり、細胞外からの刺激で変化する細胞内セカンドメッセンジャーにより活性の制御を受けているものが多くあります。PKAおよびPKGはそれぞれcAMP
およびcGMP、PKCはcalcium-diacylglycerol、CAMKは
calcium-calmodulin、AKTはphosphoinositide、ROCKは活性化Rhoによりそれぞれ活性化されます。これらのキナーゼの活性化は細胞の刺激に応じた形態変化、増殖、分化などに関連します。STEに分類されるmitogen-activated protein kinase（MAPK）カスケードのキナーゼであるMAP4K、MAP3KおよびMAP2KとCMGCに分類されるMAPKは、上流のキナーゼによりリン酸化を受けて活性化し、下流のキナーゼをリン酸化する
ことにより細胞表面近くから核へと情報を伝達します。CK1に分類されるcasein kinaseは活性化の調節を受けずに常に活性型として存在します。TKLには受容体型であるTGF-β（receptor（TGFBR）、サイトカイン受容体に結合するinterleukin-1
receptor-associated kinase（IRAK）およびreceptorinteracting protein kinase（RIPK）があり、それぞれサイト
図1．キナーゼの分子系統樹

81

カインのシグナル伝達に重要な役割を果たしています。

1

No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 2

創薬研究のターゲットとしてのキナーゼ

してプロファイリングすると、必ずしも特定のキナーゼ活性だけ

キナーゼは創薬ターゲットとして注目されています。TKは古阻害作用を有するGLEEVECは承認後GISTに対しても治療効果

くからproto oncogeneとして知られており、多くのガンではが認められました。キナーゼ阻害薬がどのようなプロファイルをTKの遺伝子発現および活性の増加が報告されています。例えば、持つかは、効果副作用を予測する上で極めて重要であると言えま

慢性骨髄性白血病（CML）患者のほとんど（90〜95%）に認す。キナーゼ阻害薬はガン以外にも免疫・アレルギー、炎症およめられる相互転座によって再構成された融合遺伝子のBCR-ABL

び神経変性疾患などの治療薬として期待されています。現在ではは高いTK活性を有しています。消化管間質腫瘍（GIST）の患者100を越えるキナーゼ阻害薬が臨床試験されており、キナーゼの多くはKITが変異しその活性が上昇しています。また、乳ガン

はGPCRに次ぐ主要な創薬ターゲットになっています。

を阻害する訳ではないことが分かります（図2）。KITに対してもや肺ガンの患者の一部では、EGFRが高発現していることが知られています。これらのTK活性を阻害する低分子量化合物は、増殖因子のシグナルを遮断することができます。2002年、

参考文献

GLEEVECがCMLの治療薬として承認されてから、IRESSAおよ

1）M a n n i n g G , W h y t e D B , M a r t i n e z R , H u n t e r T ,びTARCEVAが非小細胞肺ガン（NSCLC）の治療薬として相次

Sudarsanam S., The protein kinase complement of

いで承認されました。これらのキナーゼ阻害薬を全てのTKに対

the human genome., Science, 298:1912-34(2002)

図2．網羅的TKパネルを用いたIRESSATMおよびGLEEVEC ®のプロファイル

281

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本製品はすでに販売を中止しております。

Products

Humanプロテインキナーゼ

高度に精製された活性型ヒトプロテインキナーゼです。阻害剤スクリーニング等に最適です。
カルナバイオサイエンス社はプロテインキナーゼの遺伝子クローニング、および活性タンパク質発現等に関する様々なノウハウを保有しております。本製品はそれらの最新技術を用いて発現・精製された、活性測定用ヒトプロテインキナーゼです。阻害剤アッ
セイや基質スクリーニング等の様々な用途にご使用いただけます。

1

高純度

SDS-PAGEを用いた純度測定結果ELISA法を用いた活性測定結果

・それぞれのプロテインキナーゼは、アッセイ時に問題となる夾雑酵素の混入を最小限に抑える製法を用いて精製されており、様々なアッセイに安心してご使用いただけます。

2

幅広い品揃え・Cytoplasmic/Receptor Tyrosine Kinase、
Ser/Thr Kinaseを幅広く揃えています。Ser/Thr
Kinaseは全て活性化処理を行い、活性をチェックしております。
・他社には無い酵素の品揃えもございます。

3

図1．LynAの純度と活性の測定結果

少量包装

ビオチン化ペプチド：EGPWLEEEEEAYGWMDFを基質として反応させ、ストレプトアビジンコートしたプレートに結合させた後、抗リン酸
化チロシン抗体にて検出しました。
その結果、90％以上の純度で、十分活性があることが確認できました。

・使いやすい少量包装です。
・アッセイの初期検討に最適です。

品名及び内容
上記参照

81

包

装

5μg/vial

保存温度

Code No.

-80℃

上記参照

3

価

格

A：¥38,000、B：¥40,000、C：お問い合わせくださいNo.81 05.12.9 3:35 PM ページ 4

本製品はすでに販売を中止しております。

Products

QTL LightSpeed® Assay Kit
プロテインキナーゼ・プロテインホスファターゼ・プロテアーゼの迅速アッセイに最適です。さらに内容を充実しました。
QTL LightSpeed® Assay Kitはスーパークエンチング技術を用いたホモジニアス酵素活性測定キットです。迅速かつ高感度な各種酵素の測定を行うことができます。ハイスループット阻害剤アッセイや基質スクリーニング等に最適です。
（スーパークエンチング技術：蛍光ポリマーへのクエンチャーの接近により生じる蛍光の顕著な減少を検出に利用する方法）

1

簡便かつハイスループット・洗浄工程を一切必要としません。96、384 well plateを用いる迅速アッセイに最適です。
・一般的な蛍光プレートリーダーを用いる解析が可能です。

2

広い汎用性

・高濃度ATP存在下でもキナーゼ活性を測定可能です（〜100μM）。
・2波長を測定することにより、着色した阻害剤のアッセイにおける、偽陽性や偽陰性を抑えることができます。
・IP3KなどLipidを基質とするようなキナーゼの活性測定も可能です。
・細胞ライゼートを用いる解析も行うことができます。

3

抗体不要

・抗体を準備する手間が省けます。
・TAMRA等を結合した修飾ペプチドを準備いただくだけで簡単に任意のプロテインキナーゼ、ホスファターゼのアッセイ系を組
み立てることもできます。Universal Assay Development Kitをご使用ください。
※Universal Assay Development Kit（Code No. QTK025K004（400回用）、QTK025K008（800回用））
製品構成:Non-phosphorylated peptide control、Phosphorylated
peptide control、Post-reaction Buffer、10×Sensor、
Sensor Dilution Buffer（蛍光基質ペプチドは含まれません）

リン酸基

基質ペプチドKinaseクエンチャー
Phosphatase
MIII

PO3-

基質＋酵素＋阻害剤等

MIII

反応（〜1hr）

リン酸基
結合担体

QTLセンサーQTL Sensor: fluorescent

Fluorescencequenched

センサービーズ添加

図1．スーパークエンチングを用いたアッセイ原理
QTLセンサー粒子表面のリン酸基結合担体(MⅢ)：3価金属イオン）にリン酸化されたペプチドのリン酸基が結合することにより、ペプチド末端のクエンチャーがQTLセンサー表面の蛍光ポリマーに接近するため、蛍光がクエンチ
ング（消光）します［キナーゼアッセイ］。
逆反応を用いることでホスファターゼの活性測定も可能です。

1

蛍光測定
図2．測定フロープロテインキナーゼアッセイ例

カルナバイオサイエンス社のLYNa(CAO8-071)を用いて活性AB測定を行いました。反応終了後、センサービーズを添加し430nm
で励起、535nmにて測定したところ、良好な結果を得ることがで き ま し た（ 図 3 - A ）。 本 キ ッ ト で は 、 4 5 0 n m 付 近（ 本 例 ：＊＊にて励起後、490nm付近（本例：535nm）の蛍光を
430nm）

測定することで、クエンチングを検出します。また今回、添付のキャリブレーターを用いて、リン酸化の％も算出しました（図3-B）。
＊：実施例3の図5-Cをご参照ください。

図3

4

81

No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 52

各種ホモジニアスアッセイ系との比較

FRET法（#1）、ATP測定法(#2)、蛍光偏光法(#4)に比べ、QTL LightSpeed®（橙）は、
感度・ダイナミックレンジともに優れる結果でした。
HTRF法(#3)とはほぼ同等の結果でした®

®

が、測定誤差が少ない傾向にありました。

®
®

図4

3

PI3Kinaseを用いた阻害剤プロファイリング例

図Cに示すように基質がリン酸化されることにより、490nm付近の蛍光が減少（クエンチ）する一方で、クエンチャー由
来の600nm付近の蛍光が増大する現象がみられます。この現象をうまく使うことにより、着色化合物を用いるプロファイ
リングにおける偽陽性および偽陰性を減少させることができます。
A

図A、Bは84種類のインヒビター候補

C（着色化合物含む［赤スポット：強着色化合物］）をキナーゼアッセイ時に添加し、活性測定を行った結果を示しています。測定は450nmにて励起し、490nmおよび574nmにて行いました。
その結果、490nmのみの測定ではインB

ヒビターのヒット率は約75%であり、また、
異 常 値 が 散 見 さ れ ま し た（ 図 A ）。 一 方 、
490/574nmをプロットしたものにおいて は（ 図 B ）、阻 害 活 性 を 示 す 化 合 物 を100%検出することができ、極端な異常値を示す物質はありませんでした。

図54タンパク質基質を用いたキナーゼ活性測定例

QTL LightSpeed® Kinase Activity Assay For Protein Substratesを用いることにより、任意のタンパク質基質を用いたプロテインキナーゼアッセイが可能になります。原理は、図6-Aに示すように、あらかじめリン酸化した蛍光ペプチドとリン酸化されたタンパク質の競合アッセイです。すなわち、タンパク質基質がリン酸化されるほど、490nm付近のクエンチングが阻害され、蛍光の増大が観察されます。図6-Bは、MBP（ミエリン塩基性タンパク質）を基質とした場合の、PKCαとIRAK4の活性測定結果を示しています。

B
A

図6

81

5

No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 6

参考文献

1）Science, 298(5600): 1912-34 (2002)2）Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 101(43): 15295-15300 (2004)
3）BMC. Biotechnol., 5(1): 16 (2005)
品 名 及 び 内 容

保存温度

Code No.

4℃

QTK017K100¥98,000

400回用(30μl)

4℃

QTK017K400¥158,000

100回用(60μl)

4℃

QTK002K100¥88,000

400回用(30μl)

4℃

QTK002K400¥142,000

100回用(60μl)

-20℃、
4℃

QTK014K100¥88,000

400回用(30μl)

-20℃、
4℃

QTK014K400¥142,000

100回用(60μl)

4℃

QTK016K100¥88,000

400回用(30μl)

4℃

QTK016K400¥142,000

100回用（60μl）

4℃

QTK015K100¥98,000

400回用（30μl）

4℃

QTK015K400¥158,000

100回用（60μl）

4℃

QTK024K100¥98,000

400回用（30μl）

4℃

QTK024K400¥158,000

100回用（60μl）

4℃

QTK021K100¥98,000

400回用（30μl）

4℃

QTK021K400¥158,000

100回用（60μl）

4℃

QTK012K100¥98,000

400回用（30μl）

4℃

QTK012K400¥158,000

100回用（60μl）

4℃

QTK020K100¥98,000

400回用（30μl）

4℃

QTK020K400¥158,000

100回用（60μl）

4℃

QTK004K100¥88,000

400回用（30μl）

4℃

QTK004K400¥142,000

100回用（60μl）

4℃

QTK008K100¥88,000

400回用（30μl）

4℃

QTK008K400¥142,000

100回用（60μl）

4℃

QTK001K100¥88,000

400回用（30μl）

4℃

QTK001K400¥142,000

100回用（60μl）

-20℃、
4℃

QTK003K100¥88,000

400回用（30μl）

-20℃、
4℃

QTK003K400¥142,000

100回用（60μl）

-20℃、
4℃

QTK011K100¥88,000

400回用（30μl）

-20℃、
4℃

QTK011K400¥142,000

100回用（60μl）

-20℃、
4℃

QTK010K100¥88,000

400回用（30μl）

-20℃、
4℃

QTK010K400¥142,000

100回用（60μl）

4℃

QTK009K100¥98,000

400回用（30μl）

4℃

QTK009K400¥158,000

100回用（60μl）

4℃

QTK006K100¥88,000

400回用（30μl）

4℃

QTK006K400¥142,000

100回用（60μl）

4℃

QTK007K100¥98,000

400回用（30μl）

4℃

QTK007K400¥158,000

100回用（60μl）

4℃

QTK005K100¥88,000

400回用（30μl）

4℃

QTK005K400¥142,000

100回用（60μl）

-20℃、
4℃

QTK018K100¥98,000

400回用（30μl）

-20℃、
4℃

QTK018K400¥158,000QTL LightSpeed® Class ⅠA Phosphoinositide
3- Kinase (PI3Kα,PIK3Kβ、PI3Kδ）Activity Assay

100回用（60μl）

-20℃、
4℃

QTK023K100¥98,000

400回用（30μl）

-20℃、
4℃

QTK023K400¥158,000QTL LightSpeed® Universal Assay Development

400回用（30μl）

4℃

QTK025K004¥180,000

800回用（30μl）

4℃

QTK025K008¥287,000

100回用（60μl）

-20℃、
4℃

QTK022K100¥98,000

400回用（30μl）

-20℃、
4℃

QTK022K400¥158,000¥98,000

QTL LightSpeed® Abl Kinase Activity Assay危QTL LightSpeed® Akt1/PKBα Kinase Activity Assay

危

危

危

危

危

危

危

危

危

危

危

危

危

危

危

危

危

危

危

危

危

包

装＊＊

100回用(60μl)

危

QTL LightSpeed® Aurora A Kinase Activity Assay

QTL LightSpeed® Erk1/Erk2 Kinase Activity Assay

QTL LightSpeed® Fyn Kinase Activity Assay

QTL LightSpeed® IRAK4 Kinase Activity Assay

QTL LightSpeed® Jnk3 Kinase Activity Assay

QTL LightSpeed® Lyn Kinase Activity Assay

QTL LightSpeed® Msk Kinase Activity Assay

QTL LightSpeed® p38α Kinase Activity Assay

QTL LightSpeed® p70S6 Kinase Activity Assay

QTL LightSpeed® PKA Kinase Activity Assay

QTL LightSpeed® PKCα Kinase Activity Assay

QTL LightSpeed® PKCβⅠ/Ⅱ Kinase Activity Assay

QTL LightSpeed® PKCε Kinase Activity Assay

QTL LightSpeed® PKCζ Kinase Activity Assay

QTL LightSpeed® Rsk-2 Kinase Activity Assay

QTL LightSpeed® Sgk1 Kinase Activity Assay

QTL LightSpeed® Src Kinase Activity Assay

QTL LightSpeed® Yes Kinase Activity Assay

QTL LightSpeed® Kinase Activity Assay For Protein Substrates

価

格

危

QTL LightSpeed® PP2A Phosphatase Activity Assay

100回用（60μl）

4℃

QTP002K100

危QTL LightSpeed® PTP-1B Phosphatase Activity Assay

400回用（30μl）

4℃

QTP001K100¥98,000

危

QTL LightSpeed® CASPASE-3/7 Protease Assay

400回用（30μl）

-20℃、
4℃

QTC001K400¥158,000危QTL LightSpeed® β-SECRETASE Protease Assay

400回用（30μl）

-20℃、
4℃

QTS001K400¥158,000危QTL LightSpeed® γ-SECRETASE Protease Assay

400回用（30μl）

-20℃、
4℃

QTS002K400¥158,000

50μmoles−20℃

ATP-111¥15,000

ｒATP＊

危 本キットのパーツには、消防法における第4類第3石油類（等級Ⅲ）であるジメチルスルホキシド（DMSO）が含まれます。可燃性がありますので、お取扱いにはご注意ください。
＊それぞれのキットにはATP濃度を検討いただく場合を想定してATPが添付されておりません。別途添加してご使用いただく必要があります。もしお手元にATP溶液をお持ちで無い場合は、
弊社rATP（Code No. ATP-111）を購入してご使用ください。
＊＊100回用は96ウェルプレート（60μl）、400回用は384プレート（30μl）での使用を前提にしたキット構成になっていますが、どちらでも使用可能です。
※詳しい情報に関しましては、
www.qtlbio.comをご参照ください。

681

No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 7

本製品はすでに販売を中止しております。

Products

Santa Cruz社「リン酸化タンパク質研究」関連商品
リン酸化タンパク質の研究に有用な製品が新たにラインナップしました。
この度、Santa Cruz社より「リン酸化タンパク質の研究」に有用な製品が新たにラインナップされました。リン酸化タンパク質精製シ
ステムの「PhosphoCruzTM」を始め、抗リン酸化タンパク質抗体や、PhosphoCruzTMによるカラムで濃縮された種々の細胞抽出液もご用意しております。

PhosphoCruzTM Protein Purification System
本システムはIMAC（Immobilized Metal Affinity Chromatograpohy）を利用して細胞 ･ 組織溶解液の調製

細胞溶解液からリン酸化タンパク質を単離･濃縮することができます。リン酸基を持つタンパク質は特異的にカラムのレジンに保持され、非リン酸化タンパク質がカラムを通過し溶解液のタンパク質濃度の測定た後にリン酸化タンパク質をレジンから溶出することで、簡単に抽出することができます。

レジンの平衡化

短時間で精製

1

・操作時間はわずか1.5〜2時間です。

溶解液の希釈（2×Binding/Wash Buffer使用）

高効率

2カラムへロード・カラムに2.5〜5mgのタンパク質をロードして、トータルタンパク質の5〜

洗 浄（1×Binding/Wash Buffer使用）

10%の収率でリン酸化濃縮タンパク質が得られます。
溶 出（Eltion Buffer使用）

簡便

3

付属のConcentratorで濃縮

・リン酸化タンパク質濃縮操作に必要な全ての試薬が含まれています。

リン酸化タンパク質の抽出例

1

EGFで処理したA431細胞よりPhosphoCruzTMを用いてリン酸化タンパク質を抽出した後、抗リン酸化抗体を用いてウェス
タンブロッティングで確認しました。その結果、リン酸化されたタンパク質のみがカラムで濃縮され（図1）、リン酸化されていないタンパク質はカラムに吸着しないことが示されました（図2）
。
A/B

C/D

E/F

A/B

207K

C/D

E/F

207K
p-EGFR

117K

117K

95K

95K
HSP 6049K49K

図1．p-Tyr（PY20）[Code No.SASC508]を用いたウェスタンブロッティング

Lane A/B：非吸着画分（EGF処理）
Lane C/D：吸着画分（EGF処理）
Lane E ：細胞溶解液（EGF未処理）
Lane F ：細胞溶解液（EGF処理）

図2．HSP60（H-1）[Code No.SASC13115]を用いたウェスタンブロッティング

保存温度

Code No.

1セット

4℃

SASC24964￥52,000

2×Binding/Wash Buffer （×2濃度）

100ml

4℃

SASC24965￥15,000

Ultrafiltration Concentrators

20個

4℃

SASC24966￥7,000品 名 及 び 内 容
PhosphoCruzTM Protein Purification System
Column6個
2×Binding/Wash Buffer
100ml
Eluting Buffer
30ml
Phosphatase Inhibitor Cocktail A&B
各200μlUltrafiltration Concentrator
6個

81

包

7

装

価

格

No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 8

リン酸化タンパク質濃縮細胞溶解液 / 組織溶解液

Phospho-Enriched Whole Cell Lysates / Tissue Extracts
PhosphoCruzTMを使って細胞や組織から分離・濃縮したリン酸化タンパク質です。リン酸化タンパク質研究における、ウェスタンブロッ
ティングや免疫沈降のポジティブコントロールとして最適です。
様々な細胞や組織から濃縮したリン酸化タンパク質を取り揃えております。詳細につきましては下記のプライスリストをご参照ください。

Phospho-Enriched Whole Cell Lysates
品

WB用：Code No.各種
50μg ¥22,000
IP用：Code No.各種 200μg ¥39,000（保存温度：-20℃）

名

WB用

IP用

品

名

WB用

IP用

A-431/PE Whole Cell Lysate

SASC24801 SASC24827

MCF7 + etoposide/PE Whole Cell Lysate

SASC24814 SASC45024

A-431 + EGF/PE Whole Cell Lysate

SASC24802 SASC24828

MCF7 + insulin/PE Whole Cell Lysate

SASC24815 SASC45025

A-673/PE Whole Cell Lysate

SASC45004 SASC24829

MCF7/PE Whole Cell Lysate

SASC24813 SASC45023

CCD-1064SK + PDGF/PE Whole Cell Lysate SASC24803 SASC45015

NIH/3T3 + anisomycin/PE Whole Cell Lysate

SASC24817 SASC45026

CCD-1064SK/PE Whole Cell Lysate

SASC24804 SASC45016

NIH/3T3 + heat shock/PE Whole Cell Lysate

SASC24818 SASC45027

Daudi/PE Whole Cell Lysate

SASC45005 SASC24830

NIH/3T3 + IL-6/PE Whole Cell Lysate

SASC24819 SASC45028

HeLa + Calyculin A/PE Whole Cell Lysate

SASC24806 SASC45017

NIH/3T3 + PDGF/PE Whole Cell Lysate

SASC24820 SASC45029

HeLa + IFN-α/PE Whole Cell Lysate

SASC24807 SASC45018

NIH/3T3 + pervanadate/PE Whole Cell Lysate SASC45011 SASC24839

HeLa + PMA/PE Whole Cell Lysate

SASC24808 SASC24832

NIH/3T3 + PMA/PE Whole Cell Lysate

SASC24821 SASC45030

HeLa + serum starved/PE Whole Cell Lysate SASC24810 SASC45020

NIH/3T3 + serum starved/PE Whole Cell Lysate SASC24823 SASC45032

HeLa + serum/PE Whole Cell Lysate

SASC24809 SASC45019

NIH/3T3 + serum/PE Whole Cell Lysate

SASC24822 SASC45031

HeLa + TNFα/PE Whole Cell Lysate

SASC24811 SASC45021

NIH/3T3 + TNFα/PE Whole Cell Lysate

SASC24824 SASC45033

HeLa + UV/PE Whole Cell Lysate

SASC24812 SASC45022

NIH/3T3/PE Whole Cell Lysate

SASC24816 SASC24838

HeLa/PE Whole Cell Lysate

SASC24805 SASC24831

PC-12 + anisomysin/PE Whole Cell Lysate

SASC45012 SASC24841

HL-60/PE Whole Cell Lysate

SASC45006 SASC24833

PC-12/PE Whole Cell Lysate

SASC45013 SASC24840

Jurkat/PE Whole Cell Lysate

SASC45007 SASC24834

RAW 264.7/PE Whole Cell Lysate

SASC45014 SASC24842

K-562 + anisomysin/PE Whole Cell Lysate

SASC45009 SASC24836

SK-MEL-28 + IFN-α/PE Whole Cell Lysate

SASC24826 SASC45035

K-562/PE Whole Cell Lysate

SASC45008 SASC24835

SK-MEL-28/PE Whole Cell Lysate

SASC24825 SASC45034

KNRK/PE Whole Cell Lysate

SASC45010 SASC24837※WB：ウェスタンブロッティング IP：免疫沈降
Phospho-Enriched Tissue Extracts
品

WB用：Code No.各種
50μg ¥22,000
IP用：Code No.各種 200μg ¥39,000（保存温度：-20℃）
名

WB用

IP用

mouse brain extract/PE

SASC24923

SASC29551

mouse heart extract/PE

SASC24924

SASC29552

mouse kidney extract/PE

SASC24925

SASC29553

mouse liver extract/PE

SASC24926

SASC29554

mouse lung extract/PE

SASC24927

SASC29555

mouse spleen extract/PE

SASC24928

SASC29556

mouse cerbellum extract/PE

SASC24929

SASC29557

mouse testes extract/PE

SASC24930

SASC29558

mouse thymus extract/PE

SASC24931

SASC29559

rat brain extract/PE

SASC24932

SASC29560

rat heart extract/PE

SASC24933

SASC29561

rat kidney extract/PE

SASC24934

SASC29562

rat liver extract/PE

SASC24935

SASC29563

rat lung extract/PE

SASC24936

SASC29564

rat spleen extract/PE

SASC24937

SASC29565

rat cerebellum extract/PE

SASC24938

SASC29566

rat testes extract/PE

SASC24939

SASC29567

rat thymus extract/PE

SASC24940

SASC29568※WB：ウェスタンブロッティング IP：免疫沈降881No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 9

抗リン酸化タンパク質抗体

Phospho-Specific Antibodies
Santa Cruz社では、抗リン酸化タンパク質抗体を各種取扱っております。ELISAやウェスタンブロッティング、免疫沈降、組織染色など様々な用途にご使用いただくことができます。数百種類の抗体から各用途に合った抗体を選択することが可能です。

抗リン酸化チロシン抗体の使用例

1p-Thr（PY99）（Code No.SASC7020、￥52,000）を使用して、各種検出を行いました。いずれも良好な結果が得られました。

拡大図
図1．オキシダーゼによる組織染色結果
サンプル:パラフィン包埋したヒト扁桃腺（ホルマリン固定）

A

B

C

図2．免疫染色によるチロシンリン酸化タンパク質の局在確認
サンプル:NIH/3T3細胞（メタノール固定）

D

205K

p-EGFR

116K

図3．ウェスタンブロッティング結果の比較
抗体：
A、B…p-Tyr（PY99）（Code No.SASC7020）
C、D…p-Tyr（PY20）（Code No.SASC508）
各抗体0.2μg/ml使用。
サンプル：
A、C…ネガティブコントロール
B、D…EGF処理したA-431細胞の細胞溶解液

82K

47K

ウェスタンブロッティングをするなら…
ウェスタンブロッティングに最適な免疫反応促進試薬「Can Get Signal ® Immunoreaction Enhancer
Solution」のご使用をお勧めいたします。
Can Get Signal TM

1＊＊＊＊＊＊＊＊

商品検索方法のご案内

2

3 4

1

TBS-T
2 3

4

＊＊＊＊＊＊＊

詳しくは、Santa Cruz社のホームページをご覧ください。弊社ホームページ（URL）からも開くことができます。

Akt

サンプル：培養ウシ副腎髄質細胞
1. Control (H2O)
2. Insulin (1nM, 5分刺激）
3. Insulin (10nM, 5分刺激）
4. Insulin (100nM, 5分刺激）

メニュー
の欄

取扱い
メーカー

Santa Cruz社の順に選択していただきますと、Santa Cruz社のホームページが開きます。

Phospho-Specific
BROWSEOUR CATALOG より Antibodys
をお選びください。
リン酸化タンパク質抗体のページが開きます。

品 名 及 び 内 容
免疫反応促進試薬 ウェスタンブロッティング、ELISA用Can Get Signal ®

包

装

＊

※宮崎大学医学部 薬理学講座 柳田俊彦先生より、ご提供いただいた
データです。

保存温度

各250mlCode No.

価

格NKB-101¥30,000

NKB-101T¥10,000

NKB-401¥12,000

4℃

Immunoreaction Enhancer Solution

Solution 1 for primary antibody
Solution 2 for secondary antibody

抗phospho-Akt抗体による、Aktリン酸化の検出結果

各50ml

免疫反応促進試薬 免疫組織染色用

Can Get Signal ® immunostain Starter Set

各5ml

Immunoreaction Enhancer Solution＊：上記以外に他の容量でも販売しております。詳しくはお問い合わせください。

81

9

4℃

No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 10

Products

Pre-screened Human Endothelial Cells
VEGFへのシグナルパスウェイの応答が確認されたヒト血管内皮細胞です。
VEGF（vascular endothelial growth factor: 血管内皮細胞増殖因子）によるプロテインキナーゼカスケードの活性化が確認されたヒト血管内皮細胞です。
血管内皮細胞は血管やリンパ管において重要な働きを行っている細胞です。またそれらの細胞は、動脈疾患や癌の進行などにも密接に関わっており、近年盛んに研究が行われています。
一方、VEGF receptor-2（VEGFR-2）は血管内皮細胞にほぼ特異的に発現している、VEGFのレセプターです。このレセプターを介すシグナルは増殖、分化、細胞移動、細胞の活着、および血管形成に関与していることが知られています1）。VEGF刺激はVEGFR-2の二量化および細胞内チロシンキナーゼドメインの自己リン酸化を誘発し、結果的に、AktやMAPキナーゼのリン酸化による活性を引き起こします2、3）。血管内皮細胞を用いて様々な実験を行うには、VEGF応答性が確認されている細胞を用いる方が好ましいといえます。

VEGFへの応答を確認

1

・VEGFに刺激によってプロテインキナーゼのカスケードが活性化されることをLot毎にチェックしています。

3種類の血管内皮細胞から選択可能

2

・HUVEC（ヒト臍帯静脈内皮膚細胞）、HAOEC（大動脈内皮細胞）、およびHMVEC（ヒト皮膚微小血管内皮細胞）〈CADMECTM〉を供給いたします。

VEGF刺激による応答の確認 -ウェスタンブロッティング検出例-

1

VEGFによってHUVECおよびHMVEC を刺激し、5分後、15分後の細胞破砕液をサンプルとして、各種プロテインキナーゼのリン酸化部位特異的抗体を用いてウェスタンブロッティングにて検出しました。その結果、プロテインキナーゼの経時的なリン酸化を確認することができました。

参考文献
1）Tandle A., et al., J. TranslMed., 2: 22 (2004)
2）Zachary I., Cardiovasc. Res., 49: 568 (2001)
3）Ortega N., et al., Front. Biosci., 4: D141 (1999)

細

胞

名

Pre-screened Human Umbilical Vein Endothelial
Cells

Pre-screened HUVEC（ヒト臍帯静脈内皮細胞）

内容

性能：初代培養細胞（保証分裂回数16回）
単一ドナー由来
用途：創傷治癒、皮膚疾患、細胞毒性等の研究
品質：第Ⅷ因子発現、Dil-Ac-LDL取り込み陽性

Code No.
CAS20005n

価格を変更しております。
現在の情報は、お問い合わせいただきますよう
包 お願いいたします。
装
価 格
凍結細胞
（neonatal）¥81,000

Total Kit
¥115,000（neonatal）
Pre-screened Human Aortic Endothelial Cells
凍結細胞
性能：第2継代細胞（保証分裂回数16回）
CAS30405a¥150,000（adult）
Pre-screened HAOEC
単一ドナー由来（ヒト大動脈内皮細胞）
用途：動脈硬化、高血圧、心疾患等の研究
Total Kit
¥180,000
品質：第Ⅷ因子発現、Dil-Ac-LDL取り込み陽性 CAS304K05a （adult）
凍結細胞
Pre-screened Cell Applications' Dermal
性能：第2継代細胞（保証分裂回数16回）¥135,000
CAS10005a
Microvascular Endothelial Cells（adult）
単一ドナー由来
TM
Pre-screened CADMEC
凍結細胞
専用培地にて管様構造を観察することが¥135,000
CAS10005n（HMVEC）（neonatal）
可能。CD36発現。
（ヒト皮膚微小血管内皮細胞）
用途：血管新生、癌転移、血液凝固、炎症、
Total Kit
¥170,000
CAS100K05a
薬物代謝、白血球動態等の研究（adult）
品質：第Ⅷ因子発現、Dil-Ac-LDL取り込み陽性
Total Kit
¥170,000
CAS100K05n（neonatal）※HIV、HBV、HCV、マイコプラズマ、細菌、酵母、真菌陰性を確認しています。詳細は、http://www.cellapplications.com/をご参照ください。

10

CAS200K05n81No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 11

Products

Pre-screened Human Skeletal Muscle Cells
Insulin等へのシグナルパスウェイの応答が確認されたヒト骨格筋細胞です。
骨格筋肉細胞はOligomycinやInsulinによってプロテインキナーゼカスケードが活性化されることが知られています。本品はハムスト
リング筋由来のヒト骨格筋細胞（Human Skeletal Muscle Cells：HSkMC）であり、刺激によってプロテインキナーゼのカスケードが活性化されることがLot毎にチェックされています。
ヒト骨格筋細胞（HSkMC）は筋肉を構成する主要細胞であり、創薬研究の分野でも広くつかわれている細胞の一つです。特に、HSkMCはインスリンの主要ターゲットであり、近年、糖尿病研究の材料としても注目されています1）。これまでに、HSkMCをインスリ
ンの刺激することにより、インスリンリセプターのチロシンキナーゼドメインの自己リン酸化が誘導され、それに応答してIRS-1や、
Akt、
MAP Kinase、p70 S6 Kinase、GSK-3bなどがリン酸化されることが知られています。HSkMCを用いて様々な研究を行う場合、これらの応答性が確認されている細胞を用いる方が好ましいと言えます。

1

ホルモン等への応答性を確認

・OligomycinやInsulinによってプロテインキナーゼのカスケードが活性されることを、Lot毎に確認しています。

1

Insulin刺激による応答の確認 -ウェスタンブロッティング検出例-

未分化および分化HSkMCのInsulin刺激におけるこれらのプロテインキナーゼの経時的なリン酸化を、抗リン酸化タンパク質認識抗体を用いてウェスタンブロッティングにて検出しました。
その結果、これらのプロテインキナーゼが特異的にリン酸化されることが確認できました。

参考文献

1）J. Clin. Invest. 103(7): 931-943 (1999)
細

胞

名

内

ヒト骨格筋細胞容性能：第2継代細胞（保証分裂回数15回）
単一ドナー由来
Pre-screened HSkMC
Pre-screened Human Skeletal Muscle Cells 用途：骨格筋等の研究
品質：筋ミオシン陽性

Code No.
CAS15005f
CAS150K05f

包価格を変更しております。
現在の情報は、お問い合わせいただきますようお願いいたします。
装

凍結細胞（fetal）
Total Kit
（fetal）

価

格¥156,000¥190,000※HIV、HBV、HCV、マイコプラズマ、細菌、酵母、真菌陰性を確認しています。詳細は、http://www.cellapplications.com/をご参照ください。

8111

No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 12

本製品はすでに販売を中止しております。

ウサギの抗体に無料でニワトリの抗体をお付けいたします。

ニワトリポリクローナル抗体作製受託サービス開始キャンペーン
ウサギポリクロナール抗体作製受託（10万円/1羽）をご注文いただいた方に、同一の抗原に対し、無料でニワトリ1羽分のポリクロナール抗体を作製しご提供いたします。
なお、2006年3月31日（ご注文分）まではキャンペーン対象となりますので、この機会に是
非ご利用ください。
期 間：〜2006年3月31日（ご注文分）
2 種 類 作って 安 心・抗原とするタンパク質のアミノ酸配列が、免疫動物由来のホモログ遺伝子と比較して高いホモロジーを有している場合、抗体価が上昇しないことがあります。ニワトリに免疫することにより、これを回避できる可能性があります。
・3回免疫終了後の抗血清を1,000倍希釈した際のELISAの値を計測し、データをご返却いたします。4回免疫後に全採決するか、延長飼育を行うかをご選択いただけます。

無料 で
ご提供

ニワトリ

ウサギ

ポリクローナル抗体

ポリクローナル抗体

サービス内容納

ウサギ＋ニワトリポリクローナル抗体作製受託サービス

期

8週間

キャンペーン価格￥100,000/各1羽（計2羽）※抗体は抗血清でのご提供になります。精製料金は別途申し受けます（¥120,000〜）。
※ウサギとニワトリ同一抗原で同時のご利用とさせていただきます。
※抗原は合計3.5mg以上をご送付ください。ニワトリ免疫用には約1mg使用します。
※延長飼育料金は10,000円／10日になります。

品 名 及 び 内 容

納ポリクローナル抗体作製サービス（4回免疫、ELISAデータつき）

期

8週間

価

格

￥100,000/ウサギ1羽※ウサギ以外に頬科の動物でも承ります。お気軽にお問い合わせください。

キャンペーン中のご注意
・本キャンペーンのご利用は、各お客様につき1回（1抗原）までとさせていただきます。
・各月先着5名様までのご利用とさせていただきます。
・抗体ご提供後、ニワトリとウサギそれぞれの比較データをご提供いただける場合にご利用いただけます。
（抗原名を公開していただく必要はありません。なお、データはウェスタンブロッティング、免疫染色などの実験方法を問いません。）

1281

No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 13

MultiReporter Assay System -Tripluc®- ベクターシリーズ

多色ルシフェラーゼ（SLG/SLO/SLR）ベクター -Short lifeタイプ-Tripluc®-ベクターシリーズに、Short lifeタイプが登場します!
MultiReporter Assay System -Tripluc ®-は、緑色（Green）、橙色（Orange）、赤色（Red）の3色の発光ルシフェラーゼを用いたマルチ遺伝子転写活性測定システムです。
これらのルシフェラーゼは、ホタル由来のルシフェラーゼに比べ、シャープかつpHの影響を受けず安定した発光スペクトルを有します
ので（Stable Luciferase）、色分離機能を備えたルミノメーターを用いることにより、複数のレポーター活性を同時に測定することが可能です。
この度、本システムのベクターシリーズに、細胞内タンパク質半減期を短縮したShort lifeタイプをラインナップします。サーカディア
ンリズムや刺激応答など、遺伝子発現の動的な解析に是非ご利用ください。

1

応答性の向上

MluⅠ
Sal Ⅰ
XhoⅠ

Bgl Ⅱ

polyA

KpnⅠ

・細胞内タンパク質半減期が2時間以下と短くなりました。

NheⅠ SphⅠ

Spe Ⅰ
Eco RV
Eco RⅠpolyA

ori

・レポータータンパク質が合成後、短時間に分解されるので、サーカディアン
リズムや刺激応答など、遺伝子発現の動的な解析にご活用いただけます。
pSLG/SLO/SLR(PEST)-test
SLG/SLO/SLR

PEST

Amp

Bam HⅠ
SmaⅠ

図1．3色のルシフェラーゼの発光の様子

XbaⅠ
NotⅠ
SacⅡ SacⅠ

図2．Short lifeタイププロモーター挿入用ベクター

図3. タンパク質半減期の短縮
SLO、SLO（PEST）、SLR、SLR（PEST）を発現する
CHO細胞をシクロヘキシミド処理しました。残存発光活性をMultiReporter Assay System -Tripluc®Detection Reagentsを用いて測定し、相対活性をプ
ロットしました。
これより、各タンパク質半減期は、SLO 5.4時間、SLO（PEST）1.6時間、SLR 2.3時間、SLR（PEST）1.2時間であることが分かります。

シクロヘキシミド添加後経過時間（hr）

Short lifeタイプ（SLO（PEST）およびSLR（PEST））
スタンダードタイプ（SLOおよびSLR）

シクロヘキシミド添加後経過時間（hr）

品 名 及 び 内 容

装

保存温度

Code No.

価

20μg

-20℃

MRV-501¥80,000

20μg

-20℃

MRV-502¥80,000

20μg

-20℃

MRV-503¥80,000

各20μg

-20℃

MRV-511¥200,000

包

Short lifeタイププロモーター挿入用ベクター

pSLG（PEST）-test
Short lifeタイププロモーター挿入用ベクター

pSLO（PEST）-test
Short lifeタイププロモーター挿入用ベクター

pSLR（PEST）-test

格

Short lifeタイププロモーター挿入用ベクターセット

SLG/SLO/SLR（PEST）プロモーター挿入用ベクターセット
pSLG（PEST）-test、pSLO（PEST）-test、pSLR（PEST）-test※特許の関係上、ご購入の際は別途申込書を提出していただきます。企業の方のご購入に関しては、別途ライセンスが必要です。詳しくは弊社までお問
い合わせください。

Detection Reagents
細胞溶解剤（Lysis Solution）
発光基質（Assay Reagent）
MultiReporter Assay System -Tripluc®- in vivo アッセイ用試薬

D-luciferin（カリウム塩）

81

保存温度

Code No.

100回用
500回用
10,000回用-80℃

MRA-101
MRA-102
MRA-103¥30,000¥99,000¥1,350,000

20 mg
100 mg-20℃

MRL-101
MRL-102¥24,000¥92,000

包品 名 及 び 内 容
MultiReporter Assay System -Tripluc®- in vitro アッセイ用試薬

13

装

価

格

No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 14

本製品はすでに販売を中止しております。

再生研究用培地シリーズ

間葉系幹細胞 軟骨分化培地 DF-C / 骨分化培地 DF-B
MF-medium® 間葉系幹細胞増殖培地に新たなラインナップの登場です。

ご好評いただいておりますMF-medium®間葉系幹細胞増殖培地に新たに分化実験用の培地が加わりました。間葉系幹細胞の分化実験にご使用ください。

間葉系細胞の分化実験に

1・間葉系幹細胞は骨、軟骨、脂肪などの細胞に分化しうる細胞です。多分化能を有する間葉系幹細胞の分化実験にご使用いただけます。

簡単調製

2

・基礎培地に添付の添加剤を加えるだけで簡単に調製することができます。

キット構成

※［

］内は保存温度です。

間葉系幹細胞 軟骨分化培地 DF-C
（Code:TMDFC-001, 容量:250ml）
・基礎培地［4℃］
・インスリン‐
トランスフェリン溶液［-20℃］

マウス間葉系幹細胞の分化実験

・デキサメタゾン溶液［-20℃］
・牛胎児血清［-20℃］
・TGF‐β1（TMDFC-002には含まれません）［-20℃］［-20℃］
・BMP-2 （TMDFC-002には含まれません）
間葉系幹細胞 骨分化培地 DF-B
（Code:TMDFB-001, 容量:250ml）
・基礎培地［4℃］
・インスリン‐
トランスフェリン溶液［-20℃］
・デキサメタゾン溶液［-20℃］
・グリセロリン酸溶液［-20℃］
・牛胎児血清［-20℃］

軟骨分化培地で培養
2週間、スフェロイド培養の後、切片を作製しトルイジンブルーで染色しました。
軟骨様のメタクロマジーが観察されます。

骨分化培地で培養
10日間培養後、フォンコッサ染色を行いました。
フォンコッサ陽性コロニーが観察されます。

・TGF‐β1（TMDFB-002には含まれません）［-20℃］

保存温度

Code No.

間葉系幹細胞 軟骨分化培地 DF‐C

品 名 及 び 内 容

250ml

包

装

4℃、-20℃

TMDFC-001¥65,000

価格

間葉系幹細胞 軟骨分化培地 DF‐C（TGF-β1、BMP-2なし）

250ml

4℃、-20℃

TMDFC-002¥40,000

間葉系幹細胞 骨分化培地 DF‐B

250ml

4℃、-20℃

TMDFB-001¥50,000

間葉系幹細胞 骨分化培地 DF‐B（TGF-β1なし）

250ml

4℃、-20℃

TMDFB-002¥25,000※本培地は in vitro 研究用にのみ限定して販売しています。ヒト・動物への使用、臨床及び体外診断には使用できません。

品 名 及 び 内 容
®

包

装

保存温度

Code No.

価

格MF-medium 間葉系幹細胞増殖培地

500ml

4℃、-20℃

TMMFM-001¥35,000

MF-startTM 初代細胞スターティング培地

250ml

4℃、-20℃

TMMFS-001¥28,000

前駆脂肪細胞分化培地

250ml

4℃、-20℃

TMTADM-250¥20,000

14

81

No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 15

本製品はすでに販売を中止しております。

三次元培養ヒト肝細胞 TESTLIVERTM -human簡単に長期間の肝細胞実験が可能。薬物代謝実験、肝毒性試験などに最適！

TESTLIVERTM -human-は透過性膜中空糸内にヒト肝細胞を充填培養し、組織体を形成させたヒト肝細胞培養物です。煩雑だったヒト肝細胞の代謝実験を簡単に行うことができます。

煩わしい初代細胞培養技術は不要

1・そのまま使用可能です。
・簡単な操作でヒト肝細胞の性能を維持したまま実験できます。

１ヶ月以上の長期培養

2・ヒト肝細胞の培養に適した完全無血清培地（HHM培地）を使用します。
・3次元培養により長期間、肝細胞機能を維持しています。
・これまで困難だった長期に渡るin vitro実験が可能になります。

Lot指定可能3・Lot指定で購入することができ、計画的な実験が可能です。

様々な実験に活用

4・薬物代謝研究をはじめとする多くの試験研究に応用することができます。
50

2週目
0.1% DMSOTESTLIVER

40
6βHidroxylation(pmol/min/106cells)

TESTLIVERTM -human- の組織構造

TM

10μM
Rifampicin30

4週目
0.1% DMSO

20
10μM
Rifampicin
10
0

単層培養
0
3

8

13

18
23
培養日数 (日)

50

100

150

200

250

300

350

6βHydroxylation(pmol/min/106cells)
28

（

33

図2．TESTLIVERTM -human-のCYP3A4誘導結果

図1．CYP3A4活性推移

上：縦断面
下：横断面

）

TM

（注：酵素活性量は細胞lotにより変動します）

TESTLIVER -human-は、長期間の培養が可能な上、高い性能を維持していることが分かります。

品 名 及 び 内 容

包TESTLIVERTM -human-＊

保存温度

Code No.

1セット（12バンドル）

室温

TMHHO-001¥190,000

250ml

4℃

TMHHM-001¥25,000

ヒト肝細胞無血清培地

装

価

格

＊：HIV、HBV、HCV、マイコプラズマ、細菌、酵母、真菌陰性を確認しています。

中空糸モジュール培養セット同時発売

ヒト肝細胞中空糸モジュール培養受託サービスはじめました

ご使用の細胞を中空糸に遠心充填させることで3次元細胞凝集体を簡単に作ることができます。

ヒト肝細胞の中空糸内遠心充填培養を承ります。今お使いの凍結ヒト肝細胞（接着型）をお送りください。ご希望のヒト肝細胞をご指定いただき、ご用意することも可能です。組織形成培養後、ご送付いたします。

■特長
1．細胞、培地の種類は問いません。
2．遠心充填法により簡単に細胞を中空糸内に充填できます。
3．擬似組織体の形成により生体に近い環境で培養できます。
■構成
・充填用チューブ2本（1本につき中空糸6束）
・中空糸は内径285μm、
外径387μm、
平均ポアサイズは0.2μmです。

■特長
1．お持ちのヒト肝細胞をお使いいただけます。
2．ご希望のヒト肝細胞をご指定いただければ、ご用意いたします。
3．ヒト肝細胞を簡単に長期間培養することができます。
■概要
中空糸モジュールへの遠心充填および組織体形成までの培養です。
※細胞ロット等によっては組織体ができないものもあります。ご注文の際はお問い合わせください。

保存温度

Code No.

中空糸モジュールセット品

細胞充填用チューブ×2本

室温

TMHFK-001¥70,000

TESTLIVERTM -human-培養受託

中空糸バンドルへの遠心充填および組織体形成までの培養

ー

TMHHJ-001¥120,000

81

名

内

容

15

価

格

No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 16

本製品はすでに販売を中止しております。

New SNAP-tagTMシリーズ製品 SNAP-capture Resin S

SNAP-tagTMによるプルダウンアッセイ用のBG-セファロースビーズの登場です。固定化酵素実験などにも最適です。
本製品はSNAP-tagTM融合タンパク質を用いるプルダウンアッセイ用に

H2N

H
N

N

開発された06-ベンジルグアニン（BG）を結合させたセファロースビー
N

ズです（図1）。

NO

SNAP-tagTMがBGリンカーと酵素反応を介して強固な共有結合を形成すること（図2）を利用して、本ビーズはプルダウンアッセイの他に、固定化酵素実験等に用いることができます。

NH

タンパク質間の相互作用確認 -プルダウンアッセイ検出-1

図2．固相への特異的結合
SNAP-tagTM（金色）を融合したタンパク質（青色）のBG-Linkersを介した固相への固定化

O

FKBP（FK506-binding protein）とFRB（FKBP12-rapamycin
Sepharose beadassociated protein1, FRAP1 fragment）はRapamycin存在下でヘテロダイマーを形成することが知られています。本実験ではこのタンパク質-タンパク質相互作用をSNAP-capture Resin Sを用

図1．SNAP-Capture
Resin Sの構造

いるプルダウンアッセイで検出することを試みました。FKBPもしく

図3．蛍光基質との特異的結合
SNAP-tagTM（金色）を融合したタンパク質（青色）と蛍光基質（緑色）との反応

はFRBとSNAP-tagとの融合タンパク質は、大腸菌で発現させた後精製し、調製しました。FKBP固定ビーズは、400μlのSNAP-FKBP（2mg/ml）を50μlのSNAP-capture Resin S（wet volume）と混合し、4℃で1時間反応させた後、洗浄を行い調製しました。また同時に、未精製の場合を想定して、2mg/mlで大腸菌のライゼートを混合した条件でもSNAP-FKBPの固定化を行いました。一方、SNAPFRBの蛍光ラベルはSNAP-vista TM Green kit（ Code No.
CVLK012）を用いて行いました（図3原理図参照）。
タンパク質の相互作用反応は、FKBP固定化ビーズ20μlとラベル化したFRB（13.6μg）を100μlのバッファー（Rapamycin含むも

図4．実験の概要のと含まないもの）中で行いました。相互作用した蛍光ラベルFRBの検出は、ビーズを洗浄後、SDS処理により遊離したタンパク質をRapamycin

SDS-PAGEに供し、蛍光を検出することで行いました。

1

2

3

4

−

＋

−

＋

その結果、Rapamycin存在下でのみFKBPとFRBが特異的に相互作用したことが示されました（図5）。また、ビーズへの固定時に大量の不純物が存在しても効率的にSNAPタンパク質が固定化されることも確認されました。

品

図5．相互作用したラベル化FRBの検出
1,2：精製したSNAP-FKBPを用いて調製したビーズ使用
3,4：大腸菌のライゼートを混合したSNAP-FKBPを用いて調製したビーズ使用

名

備

考

包装

保存温度

Code No.

価

格

SNAP-capture Resin S 5-Kit

50% suspension（500μl×2本）

1 kit

4℃

CVSK048¥74,000

SNAP-capture Resin S Starter Kit

50% suspension（500μl×5本）

1 kit

4℃

CVIM049¥166,000

危

SNAP-vistaTM Blue 50-Kit

Ex390nm, Em470nnm（UV transilluminator用） 1 kit-20℃

CVLK011¥25,000

危TM

SNAP-vista

Ex500nm, Em524nm（488nm fluorescence scanner用） 1 kit-20℃

CVLK012¥20,000

危

SNAP-blockTM Kit

O6-benzylguanine溶液（SNAP-tag不活性化に使用） 1 kit-20℃

CVBK021¥32,000

SNAP-sourse plasmid pSS26b

バクテリア細胞用

5μg

-20℃

CVPL022¥24,000

SNAP-sourse plasmid pSS26m

哺乳類細胞用

5μg-20℃

CVPL023¥24,000

SNAP-expression plasmid pSET7-26b

バクテリア細胞用発現プラスミド 1）

5μg

-20℃

CVPL024¥48,000

SNAP-expression plasmid pSEMXT-26m 哺乳類細胞用発現プラスミド（コントロールプラスミド付き） 5μg-20℃

CVPL038¥48,000

Green 50-Kit

2）

危 本キットのパーツには、消防法における第4類第3石油類（等級Ⅲ）であるジメチルスルホキシド（DMSO）が含まれます。可燃性がございますので、お取扱いにはご注意ください。
1）SNAP-tagTMの下流にマルチクローニングサイトがあり、N末端側にSNAP-tagTMを融合することができます。本プラスミドの発現は、T7 RNAPolymerase遺伝子を保有する大腸菌株を用いて行ってください。SNAP-tagTMのコドンユーセージはバクテリア型になっています。
2）SNAP-tagTMの上流および下流にマルチクローニングサイトがあり、N末およびC末にSNAP-tagTMを融合することができます。CMVプロモーターを有しており、一過性発現用にお使いいただけます。SNAP-tagTMのコドンユーセージは哺乳類型になっています。また、本製品にはコントロールプ
ラスミドとして、pSEMXT-26m-CaaXが供給されます。
※SNAP-tagTMの研究用途での使用に際しましては書面での契約等は一切必要ありません。研究用途以外で使用する場合は弊社までお問い合わせください。
※詳しい情報に関しましては、www.covalys.com/をご参照ください。

1681

No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 17

本製品はすでに販売を中止しております。

PCRクローニング用遺伝子ライブラリー

FirstDraftTM cDNA Libraries

様々な遺伝子のソースとして力を発揮する新発想のcDNAライブラリーです。
PCRによるクローニングに最適です。
FirstDraftTM cDNA Librariesは種々のヒトおよびラットの細胞株から取得した高品質なcDNAライブラリーです。
レア発現遺伝子や、スプライシングバリアント、一連のファミリー遺伝子など様々な遺伝子のソースとしてご使用いただけます。

効率的なスクリーニングが可能

1・サイズ分画（>800bp, >2kb）を行った2種のマスタープール［各10 6クローン］と、それぞれを24分割したサブプール（平均12,000クローン）から効率的にクローンを選択することができます。それぞれ、大腸菌クローンとそれらから抽出したプラスミド
DNAを入手できます。

様々なソースのライブラリーを選択可能

2

・複数のセルラインから構築された5種のヒトライブラリー、
ヒト脳ライブラリー、3種のラットライブラリーから選択いただけます。

高品質

3・インサート率約95%、完全長率は50%前後（細胞株由来ライブラリー）です。平均鎖長は製品毎に算出され添付されます。また、
PCR等による増幅は一切行っておりませんので人為的変異導入の心配はございません。

Ngc MIV

図1．A：ライブラリー構築フロー
B：製品外観 Code No.GNFDH-○○○、
Code No.GNFDR-○○○＋
RNAから
本ライブラリーは、高品質なPoly（A）
cＤＮＡを合成後に、＞800bpと＞2kbpのサイ
ズ分画を行い、それぞれからライブラリーのマス
タープールを作製、そのマスタープールをさらに24のサブプールに分割するというユニークな方法を用いて調製されています（図１A）。詳細な作製法はwww.genofi.comをご参照ください。
使用方法は、まずプラスミドマスタープールを用
いて目的遺伝子のPCRを行い、次いで成績の良かったプールに対応するサブプールをPCRでス
クリーニングします。サブプールの方が各遺伝子のコピー数が多くなっておりますので、より良好な結果を得ることができます。その後、増幅された産物を直接クローニングすることもできます
し、対応するグリセロールストックを用いてスクリーニングを行い目的クローンを得ることも可能
です。

品

名

来

Afl Ⅲ
Pai Ⅰ

PaiⅠ

T3 promoter

f1 ori

2500

500

pT3

2000

Hin dⅢ
SphⅠ
PstⅠ
AccⅠ
Hin cⅡSal Ⅰ
XbaⅠ
Bam HⅠ
SmaⅠ
XmaⅠ
KpnⅠ
Sac Ⅰ
Eco RⅠ
XhoⅠ
Not Ⅰ

ori
2551 bps
Alw 44Ⅰ
1000

1500

XmnⅠ
Bsa HⅠ
TaiⅠ

amp

ScaⅠ

VspⅠ

BsaⅠ

AhaⅠ

BpmⅠ

図2．
プラスミドマップ
cDNAはPstⅠ/SacⅠ siteに挿入されています。
（挿入後PstⅠ siteは失われ、挿入遺伝子の直下にSmaⅠ siteが挿入されています。）

保存温度

Code No.

Human Leukemia Cell lines

6 cell lines: 29SR, CCRF-CEM, HL-60, K-562,
Molt-4, RPMI-8226-80℃

GNFDH-701
GNMPO-701¥490,000¥250,000

Human Colon Cancer Cell lines

5 cell lines: Colo-205, DLD-1, HCT-15, HCT-116,
SW-620-80℃

GNFDH-702
GNMPO-702¥490,000¥250,000

4 cell lines: A549, DMS114, NCI-H460, SHP-77-80℃

GNFDH-703
GNMPO-703¥490,000¥250,000

Human Breast Cancer Cell lines

7 cell lines: BT-549, Hs 578T, MCF7, MDA-MB-231,
MDA-MB-435S, MDA-MD-468, T-47D-80℃

GNFDH-704
GNMPO-704¥490,000¥250,000

Human Other Cancer Cell lines

6 cell lines: melanoma RPMI-7951, ovarian OVCAR-3,
prostate PC-3 & DU 145, renal 786-O & ACHN

-80℃

GNFDH-705
GNMPO-705¥490,000¥250,000

Human Brain 12 Areas

Whole Brain, Amygdala, Caudate Nucleus, Hippocampus, Insula,
Medulla Oblongata, Nucleus Accumens, Paracentral Gyrus,Pons, Postcentral Gyrus, Putamen, Subthalamic Nucleus-80℃

GNFDH-706
GNMPO-706¥490,000¥250,000

Rat Brain Adult(Brown Norway)

Total brain (2 male adults)-80℃

GNFDR-601
GNMPO-601¥490,000¥250,000

Rat Total Embryo(Brown Norway)

Total embryos (16-18 dpc)

-80℃

GNFDR-602
GNMPO-602¥490,000¥250,000

Rat Adult Universal(Brown Norway)

Equal ratio of male/female: 80% total animal,
10% brain, 5% placenta and 5% testes-80℃

GNFDR-603
GNMPO-603¥490,000¥250,000

Human Lung Cancer Cell lines

由Bsa AⅠ NaeⅠ
DraⅢ

価

格

＊：GNFDH-○○○、GNFDR-○○○は2つのマスタープール（プラスミド各1μg、グリセロールストック各200μl）と48のサブプール（プラスミド各1μg、グリセロールストック各40μl）、GNMPO-○○○は2つのマスタープール（プラスミド各5μg、グリセロールストック各400μl）から構成されます。

8117

No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 18

本製品はすでに販売を中止しております。

PCRクローニング用遺伝子プール

Human MosaicTM cDNA Template

66のソースに由来するcDNAが混合された理想的な遺伝子プールです。PCRによる遺伝子クローニングに最適です。
Human MosaicTM cDNA Templateは32のヒト組織、および34のヒト細胞株から調製されたcDNAライブラリーを混合したものでPCRを用いたクローニングの際の鋳型DNAです。ヒトトランスクリプトームを幅広くカバーしています。

1

効率的なクローニングが可能

・66の様々なヒト細胞に由来するcDNAが混合された1チューブで供給されます。組織から調製する手間を省くことができます。
・組織特異的に発現しているような遺伝子でも効率的に増幅し、クロー
ニングできる可能性があります。
・Nested PCR（2段階PCR）によりさらに感度・特異性を向上させ、クローニングの効率を向上させることができます。

2●タンパク質発現等に用いるDNA断片の調製には、KOD-Plus-等の高正確性PCRポリメラーゼをご使用ください。
●通常のサイクルで増幅がみられない場合は、Nested
PCR（2段階PCR）を行うか、DMSOを5%程度添加する
条件で検討されることをお勧めします。KOD系の酵素を用いる場合、DMSOは酵素の正確性を落とさないことを確認しています。

高品質・cDNAライブラリーは、基本的にFastDraftTM cDNA Libraries（p.17掲載）とほぼ同じ製法で構築されており、高品質です。

3

確実・レア発現遺伝子であるhuman activating transcription factor 2（ATF2）を増幅するためのPCRプライマーが添付されており、コントロール実験を行いつつ実験を進めること
表1．遺伝子ソースリストができます。

4

簡便・使用方法は、PCR系に本製品1μlを加えて50μlの反応液を調製し、増幅するだけです。

図1．インサート鎖長解析

M

図2．PCR結果

M

1

2

3

4.5kb insert
800bp insert

図1：NotⅠで直鎖化した本品の電気泳動結果。プラスミド（pT3）の約2.6kbp
を差し引くと、約0.8〜4.5kbpの位置にインサートが確認されました。
図2：PCRによる増幅例。レア発現遺伝子がPCRで確認されました。
1：Human neutrophil cytosolic factor 4
2：Human activating transcription factor 2
3：Human general transcription factor ⅡE, polypeptideⅠ

品 名 及 び 内 容
PCRクローニング用遺伝子プール

Human MosaicTM cDNA Template
cDNA template
Control primer （ATF2遺伝子増幅用）

包

装

保存温度

100回用

Code No.

価格

GNHMT-100¥129,000

GNHMT-020¥49,000-20℃
20回用※詳しい情報に関しましては、www.genofi.com /をご参照ください。

1881

No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 19

Can Get Signal® immunostainを用いた
蛍光免疫染色東京工業大学大学院 生命理工学研究科 原田 伊知郎
はじめ に

3．2次抗体反応

近年、蛍光顕微鏡の著しい性能の向上のため、蛍光免疫染色法

Can Get Signal ® immunostain（solution A）に2次抗体

はタンパク質の発現の有無、細胞内タンパク質の局在などの詳細

を 1/2000倍希釈、Alexa355標識phalloidinを1/50倍希釈を調べるための有力なツールとなりました。しかし、同じ抗原・

し、サンプルのカバーガラスに50μlマウントして室温で1時間

抗体反応を利用するウェスタンブロッティングと比較すると、抗反応させました。反応後、3回TBSにて洗浄しました。

体の非特異的な反応であることを視覚的に判断することが難し
く、そのためできるだけ抗体反応部分とそれ以外のコントラスト

使用した2次抗体:を明確にする必要があります。さらに、蛍光画像を撮影するため

Alexa488標識抗ラビットIgG抗体【Invitrogen社製】には感度のよいカメラを利用し、撮影時の露光時間を大きくする

Alexa546標識抗マウスIgG抗体【Invitrogen社製】

ことが必要ですが、露光時間の延長は蛍光プローブを褪色させてAlexa355標識phalloidin 【Invitrogen社製】

しまいます。目的タンパクへの抗体の反応効率の向上は画質のコントラストの向上により上記2点を改善することが期待されます。

4．観察・撮影

免疫染色用Can Get Signal ® immunostain は、従来のCan

蛍光褪色防止剤にProLong Gold【Invitrogen社製】をサン

Get Signal ®を元に免疫染色用として開発されたものであり、蛍プルにマウントし、スライドガラス上にサンプル面を挟んで顕光免疫染色などサンプルが複雑な状態であっても従来品のような微鏡観察を行いました。観察顕微鏡にはOlympus IX71顕微抗原抗体反応の促進効果が期待されます。今回我々は、抗原抗体

鏡にUPlanApo（×60）の対物レンズを使用し、撮影用CCD

反応だけではなく、アクチンフィラメントの染色に用いられるカメラにはKeyence社のVB-7000を使用しました。

Phalloidinを併用し、従来方法では詳細観察が比較的難しい接着

結果及び考察斑の免疫染色としてPaxillinとリン酸化タンパクの3重蛍光免疫染色を行い、免疫染色用Can Get Signal®

図には抗Paxillin抗体をCan Get Signal ® immunostainに希immunostainが従来法に比べて優れているかを検討しました。

釈した場合とTBSに希釈した場合（従来方法）のPaxillinの染色結果を比較しています。2つの結果は明度に大きな差があり露光
時間を統一することができなかったため、撮影は異なる露光時間

1．サンプル処理

方法（Can Get Signal ® immunostain 1秒、従来法 3秒）で撮影し滅菌した15mm×15mmのカバーガラス上に5μg/mlのフたものであることに注意してください。 Can Get Signal ®

ィブロネクチンをコートし、Swiss 3T3繊維芽細胞を一晩

immunostainを使用した場合は、明らかなシグナル増強が認め

10%血清入りDMEM培地にて培養しました。24時間後、培られました。また、Phalloidinのような抗原抗体反応ではない反地を除きただちに4%ホルマリンで15分浸し細胞を固定しま

応の認識力の低下も認められませんでした。一方、従来方法と同した。TBS（10mM Tris, 0.15M NaCl）にて3回洗浄しじ露光時間で撮影した場合は、バックグラウンドの増強がわずか

0.5%Triton® X-100/TBSにて3分間処理した後、TBSで1ながら認められました。しかしながら、従来方法より目的タンパ

回洗浄しBlocking-One【ナカライテスク社製】にて30分ブ

クからのシグナルの増強が大きく、非常に高いコントラストであロッキングしました。

ったため、露光時間を短縮することで、バックグラウンドおよび非特異的反応の影響を大きく抑えることができました。また、今回示しましたデータは検証の同一条件にて行いましたが、Can

2．1次抗体反応
1次抗体を、Can Get Signal ® immunostain（solution

Can Get Signal ® immunostainを用いることにより、従来よA）で1/200に希釈し、サンプルのカバーガラスに50μlマウ

り少ない抗体量で検出することも可能でした。以上の結果からントして室温で1時間反応させました。反応後、3回TBSにて

Can Get Signal ® immunostainは蛍光免疫染色にて大きな威洗浄しました。コントロールはTBSに抗体を希釈して同様に反力を発揮するものと考えられました。

応させました。
使用した1次抗体:
抗Paxillin ポリクローナル抗体（H-114）【Santa Cruz社製】
抗リン酸化チロシンモノクローナル抗体（PY20）【Becton Dickinson社製】

8119

No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 20

Can Get Signal ® immunostain使用

従来法

従来方法でPaxillinを染色した結果。露光時間は3秒。従来方法では核近傍の細 Can Get Signal ®を用いてPaxillinを染色した結果。露光時間は1秒。本方法で胞中央付近に存在する接着部位（Fibrillar Adhesion）などは確認できない。 は核近傍の細胞中央付近に存在するFibrillar Adhesionのような細かい接着部位（コントラストの変調など画像処理は行っていない。）
まで鮮明に確認することができた。（コントラストの変調など画像処理は行っていない。
）

Can Get Signal ® immunostain使用

Can Get Signal ® immunostain使用

Can Get Signal ® immunostain使用

Can Get Signal ®を用いたPY20での染色結果。
（画像処理は行っていない。）

Can Get Signal ®を用いたアクチンフィラメント
の染色結果。Phalloidinによる染色も問題なく行えた。
（画像処理は行っていない。）

Can Get Signal ®を用いた全てをマージした結果。
本画像はコントラストを調整し明暗の強調を行ったもの。

各種染色結果品 名 及 び 内 容

Can Get Signal ® immunostain Starter Set
Solution A
Solution B
Can Get Signal
Solution A®

Can Get Signal
Solution B®

immunostain

包

装

各5ml

品 名 及 び 内 容
Immunoreaction Enhancer Solution

Solution 1 for primary antibody
Solution 2 for secondary antibody

価4℃

NKB-401¥12,000

NKB-501¥30,000

NKB-502¥70,000

NKB-601¥30,000

NKB-602¥70,000

Code No.

価

NKB-101¥30,000

NKB-101T¥10,000

4℃

20ml×1本
20ml×4本

Can Get Signal ®

Code No.

20ml×1本
20ml×4本

immunostain

保存温度

包

装

4℃

保存温度

各250ml

格

格

4℃
各50ml

®

Can Get Signal
Solution 1 for primary antibody

250ml

4℃

NKB-201¥17,000

250ml

4℃

NKB-301¥17,000®

Can Get Signal
Solution 2 for secondary antibody※上記関連商品は特にウェスタンブロッティングやELISAにおいて効果があります。

20

81

No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 21

本製品はすでに販売を中止しております。

TOYOBO取扱いcDNAクローン
弊社で取り扱っている各種cDNAクローンをご紹介いたします。

FLJ cDNA Clones
・NEDO「完全長cDNA構造解析プロジェクト」にて取得されたヒトcDNAクローンです。
・ORF（CDS）のみでなくほぼ完全な5'＆3'UTRを含むクローンで、30,070クローンを取り揃えています。
・インサート全長がシーケンシングにて配列決定されています。
・研究用途にのみご購入・ご使用いただくことができます。

TOYOBO cDNA Clones
・TOYOBOにて独自に単離したヒトcDNAクローンです。
・ORF（CDS）のみでなく5'&3'UTRを含むほぼ全長のクローンで、現在約6,200クローンを取り揃えています。
・遺伝子の確認は、5'端および3'端のワンパスシーケンシングにて行っています。

GeneCopoeia ORF Clones
OmicsLinkTM ORF Expression Clones：各種細胞用発現ベクターに組み込まれたクローン
ORFEXPRESS TM cDNA Clones：GatewayTM System（invitrogen社）により、お好みの発現ベクターへ
・OmicsLinkTMおよびORF EXPRESSTMクローンは、GeneCopoeia社が製造・販売しているヒトcDNAクローンです。
・ORF（CDS）のみを含むクローンで、現在約16,000クローンを販売しております。
・ORFEXPRESSTMクローンはatt Lカセットを持つエントリーベクターに挿入されており、invitrogen社のGatewayTM Systemにより、お好みの発現ベクターに簡便に組み込むことができます。
・全てのクローンは、受注発注です。お取り寄せに約2週間かかりますので予めご了承ください。
装Code No.

価

FLJ cDNA Clones

品 名 及 び 内 容

0.5μg

FLJ-1011）¥30,000

TOYOBO cDNA Clones

0.5μg

FCC-1011）¥20,000

TM

OmicsLink

包

ORF Expression Clones

ORF EXPRESS TM cDNA Clones

格2μg/25μl-

1）¥180,000

5μg /25μl- 1）¥180,000

1）各クローンの情報につきましてはホームページでご確認ください。
※ベクター情報を含めた各目的クローンのご検索は、弊社ホームページcDNA
クローンコーナー「ORFクローン他」へアクセスください。ご注文・詳細情報を掲載しております。
http://www.toyobo.co.jp/seihin/xr/cdna/※本品は、研究用途にのみご購入・ご使用いただくことができます。また、ご購入にあたっては同意書に同意していただく必要がございます。
※GatewayTMは、invitrogen社の登録商標です。

ORFクローン他
をクリックします

こちらの画面からご希望のcDNA
クローンを選択します81

21

No.81 05.12.9 3:35 PM ページ 22;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;●「PCRは東洋紡キャンペーン」のお知らせ
KOD -Plus-を初め、弊社で好評販売中のPCR関連商品のキャンペーンを実施中です。
日頃よくご使用されるPCR関連の商品を一定金額購入いただくだけで、景品を手に入れるチャンスが得られます。
コースは、5万円、10万円、30万円、100万円の4コースをご用意しております。応募方法など詳しくは、チラシ及び弊社ホームページにてご案内しております。

期間 2005年12月5日〜2006年2月28日（ご注文分）

特価 のついている商品につきましては、期間中特別価格にてご提供いたします。

【対象商品】 PCR用酵素 : KOD -Plus-、KOD -Plus- Ver.2、Blend Taq 特価 、Blend Taq -Plus- 特価
TAクローニングキット : TArget CloneTM、TArget CloneTM -Plus逆転写酵素/キット : ReverTra Ace®、ReverTra Ace -α-®、ReverTra Dash®、ReverTra -Plus-TM
リアルタイムPCR用試薬 : Realtime PCR Master Mix 特価 、SYBR® Green Realtime PCR Master Mix 特価®

®

●KOD -Plus- Ver.2 Buffer発売のお知らせ
多くのお客様の声にお応えし、好評販売中のPCR用酵素KOD -Plus- Ver.2（¥32,000/200U、KOD-211）の添付Bufferの販売を2005年9月27日より開始いたしました。
品名及び内容包

10×PCR Buffer for KOD -Plus- Ver.2

装

1ml×1本

保存温度

Code No.

価-20℃

KOD-3B¥3,000格

本製品はすでに販売を中止して2006年1月1日より、弊社取扱いの受託サービスにおいて一部、下記の通り価格を改定いたしましたのでご案内いたします。
おります。

●受託サービス価格改定のお知らせ
サービス名

内

人工遺伝子合成
受託サービス

基本料金

cDNAクローン
作製サービス

クローン長1kbまで作製

安定発現株作製サービス

容

従量料金（100bpまで毎に）

旧価格

新価格

¥100,000¥100,000（変更ありません）¥30,000¥40,000¥230,000￥250,000¥80,000¥80,000（変更ありません）

安定発現株作製+発現確認【標準12クローン/株】（リアルタイムPCR版）¥1,300,000¥1,300,000（変更ありません）

安定発現株作製+発現確認【標準12クローン/株】（ウェスタンブロッティング版）¥1,300,000¥1,500,000

クローン長 延長料金（1kbにつき）ウェスタンブロッティン 定性
グサービス
定量

¥200,000／使用メンブレン1枚取り扱い中止¥500,000／使用メンブレン1枚¥500,000／使用メンブレン1枚（変更ありません）●本ページ掲載の試薬類は全て一般研究用の目的にのみ販売しており、医薬品、診断用医薬品、化粧品、食品用等には使用できませんので、十分ご注意ください。誤用による事故については、当社は一切の責任を負いません。
●本ページ掲載商品にには消費税は含まれておりません。実際のご購入価格については弊社代理店へお問い合わせください。
●本ページ中の略号：毒 印は毒物および劇物取締法に基づく医薬用外毒物です。
劇 印は毒物および劇物取締法に基づく医薬用外劇物です。
危 印は消防法に基づく危険物です。

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22;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;
81