高正確性・高速PCR酵素

Go-to DNA Polymerase
125 units（ 50回用*）

319-08663

500 units（200回用*）

製品内容

9,000 円

22,500 円* 50μlの反応系で使用した場合。

本品は、Pyrococcus sp. 由来のα型DNAポリメラーゼと改変型伸長エンハンサーを混合したPCR酵素です。3ʼ → 5ʼ エキソヌクレアーゼ（校正）活性を有するため、クローニングなど正確性の高いDNAフラグメントを必要とする場合に最適です。
さらに改変型伸長エンハンサーによって、α型DNAポリメラーゼの欠点である伸長反応時間や増幅効率の低さを改善しています。
本品は、高正確性を保持したまま優れた伸長性を兼ね備えた“信頼性の高い（Go-to）”PCR酵素です。

特(保存： −20℃）● Go-to DNA Polymerase (2.5 U/μl)● 10×Go-to Buﬀer● dNTPs Mixture (2.5 mM each)

改変型伸長エンハンサー
5ʼ

DNA Polymerase

PrimerA

313-08661

希望納入価格(税別)

T

包装単位

CCode No.

DNA伸長3ʼTAGAGGA

TAC

5ʼ

改変型伸長エンハンサーは、鋳型DNAとプライマーを外れないようにする留め金の機能をもつリング状のタンパク質複合体で、DNAポリメラーゼの伸長活性を著しく向上させます。

長

校正活性を有し、正確性が高い。(PCR産物は平滑末端)＜各社PCR酵素のエラー率の比較＞
Go-to DNA Polymerase

1.2％

高正確性PCR酵素 A社

1.3％

高正確性PCR酵素 B社

1.5％

Pfu DNA Polymerase

1.3％

lacZ遺伝子を持つ pUC19 DNAの全長を各社PCR酵素で増幅し、Self-ligation操作で環状化したのち、大腸菌を形質転換した。
結果、Go-to DNA Polymerase は他社の高正確性酵素や同じα型のPfu DNA Polymerase と同程度の白コロニー率を示した。

Taq DNA Polymerase

8.2％

01237
白コロニー率89％（青色コロニーは機能的なlacZ遺伝子領域の増幅を示し、白色コロニーは欠損や配列エラーを含む非機能的なlacZ遺伝子が増幅されたことを示す。）

改変型伸長エンハンサーにより、伸長速度が速く、DNA増幅効率が良い。
＜高速反応（伸長時間 5秒）で増幅可能なサイズ＞＜本品と各社高正確性PCR酵素との増幅効率比較 ＞

ラムダDNAを鋳型に、伸長時間5秒で1 kb〜6.5 kb領域の増幅を行った。

ヒトゲノムDNAを鋳型に、各社推奨PCR条件に従って同じサイクル数（30サイクル)で増幅した。

伸長時間：5秒

レーン
1：1.0 kb
2：1.5 kb
3：2.0 kb
4：2.5 kb
5：3.0 kb
6：4.0 kb
7：5.0 kb
8：5.5 kb
9：6.5 kb
M：Gene Ladder Wide1(Code No. 313-06961）

ラムダDNAを鋳型とした場合、本品は伸長時間5秒で5 kbまでの増幅を確認することができた。

本品

C社

D社

Taq

レーン
1：β-globin 0.4 kb
2：β-globin 1.3 kb
3：β-globin 2.8 kb
4：β-globin 4.0 kb
M：Gene Ladder Wide1

Go-to DNA Polymerase は、他社の高正確性酵素と比べて高い特異性で効率よく増幅できた。

本製品は、国立研究開発法人産業技術総合研究所よりライセンスを受けて製造、販売しています。

平滑末端PCR産物の3ʼ末端にdAを付加

dA-overhang reaction Mix
Code No.

包装単位313-08781

実 験 例

α型高正確性PCR酵素「Go-to DNA Polymerase」で増幅したPCR産物（3 kb）を本品によりdA付加し、「TA-Enhancer Cloning Kit」を用いてTAクローニングした。dA付加反応をしていないPCR産物をコントロールとして、コロニー数を計測して比較した。

希望納入価格(税別)

25回用

dA付加反応の有無によるTAクローニングの効率比較

13,000 円

コロニー数（ 個）

α型の高正確性PCR酵素は、3ʼ→5ʼ エキソヌクレアーゼ活性（校正活性）を有するため、得られるPCR産物は平滑末端です。
このPCR産物をTAクローニングするためには、3ʼ末端にdAを付加する必要があります。
本品は、平滑末端のPCR産物にdAを簡便に付加するための10×反応液です。本品でdAを付加したPCR産物は、そのままTAクローニングに用いることができます。

600

青コロニー数500

白コロニー数

4003002001000

本品で処理未処理（dA付加反応あり）（dA付加反応なし）

本品でdA付加したPCR産物を効率良くTAクローニングすることができた。

高効率TAクローニングキット

TA-Enhancer Cloning Kit
Code No.

312-08273
316-08271

包装単位

希望納入価格(税別)5回用

9,000 円

25回用

23,000 円

本品は、Tベクターとライゲーション用試薬を組み合わせたTAクローニング用キットです。
ライゲーション用試薬は、ニッポンジーン独自のバッファー組成と10 x Enhancer Solutionに含まれる「PprAタンパク質」によって、これまで効率が低いとされてきたTAクローニングを高効率に行うことができます。

実 験 例

製品内容(保存： −20℃）● 10 x Enhancer Solution● pANT Vector (25 ng/µl)● 5 x Ligation Mix

特● Control Insert DNA (10 ng/µl)

長■ PprAタンパク質で高効率なライゲーションが可能。
■ 30分間でライゲーション反応が完了。
■ ECOS™ Competent E. coli と組み合わせることでより迅速に。
■ ライゲーション反応終了液をそのまま形質転換に使用可能。

各鎖長のライゲーション効率

各社製品のプロトコールに従ってクローニングを行った。Taq DNA polymeraseで増幅したインサート長 200 bp, 500 bp, 1 kbp, 3 kbp, 5 kbpのPCR産物を用いて、16℃、30分間（A社：室温、60分間）のライゲーション反応を行った。反応後、ECOSTM Competent E. coli JM109へ形質転換（6分間プロトコール）し、本品とA社製品のライゲーション効率を比較した。
2500

TA-Enhancer Cloning Kit

2000

2000

1500

1500

1000

1000

500

500

0200 bp 500 bp 1 kbp

3 kbp

5 kbp

A社製品

2500

0200 bp 500 bp 1 kbp

インサートサイズ

本品はA社製品と比較して、コロニー数および白コロニー率において優位性が認められた。
本製品は、国立研究開発法人 日本原子力研究開発機構が所有する特許のライセンスを受けて製造販売しております。

https://www.nippongene.com/siyaku/

3 kbp

インサートサイズ

5 kbp

白コロニー
青コロニー
白コロニー率（%）