No.

37( 2018 年 4 月発行 )巻頭言「最後の巻頭言」 ………………………………………………

塩見

美喜子

1

海外より
アメリカ体験記…… 山路

剛史（Cincinnati Childrenʼs Hospital Medical Center）

3

RNAフロンティアミーティング
RNAフロンティアミーティング2017の参加報告

…………

中武

RNAフロンティアミーテイング2017参加レポート…………

武井 夏海（北海道大学） 14

RNA フロンティアミーティング2017 参加報告 ………

誠真（熊本大学） 11

平島 智貴（京都工芸繊維大学） 18

技術セミナー
日本語版Ribosome proﬁling プロトコル …………………… 水戸麻理、岩崎信太郎（理化学研究所岩崎RNA システム生化学研究室）

RNAエッセイ『走馬灯の逆廻し:RNA研究、発見エピソードの数々』
第10回

40年ぶりのReunion

第11回

一品目の新薬から3.4兆円評価の製薬会社への躍進

古市

22

泰宏

…………………………………………………………………

43…………………………………

49

第9期評議員会 議事録(21)-(24) ………………………………………………………………

65

学会本部から

編集後記…………………………………………………………………………………………

70

巻頭言

「最後の巻頭言」
塩見

美喜子（日本RNA学会会長）

一昨日、モスクワから戻りました。すでに５回目の訪問でしたが、初春（3 月）は 2 回目。昨年も、ちょうど今頃モスクワでしたが、気候は今年の方が断然厳しく、最終日の最高気温はマイナス 8 度でした。
路肩は雪の大山小山の連続。公園は一面の雪。手袋をしていても指先が痛く感じられましたが、ブランコを漕ぐ子供は満面の笑み、ハスキー犬はもっと大喜びで、まるでウサギのように雪の上を飛び跳ねていました。慣れとはおそろしいものです。いつだったか、先方からもらったメールに、先週まではマイナス 30
度だったけれど、マイナス 20 度になったから、スキーに行きたいのだけれど、wife が許してくれない、というのがありました。彼は御歳 83 歳（写真参照）。モスクワは意外にも平坦で、よってノルディック
ですが、それにしてもスキーに行きたいとは、恐るべし、かな、よきかな。来年度も訪問予定ですが、秋が良いというので、その頃にしようかな、と思案しているところです。言葉はお互い流暢ではありません。
が、それでも双方の piRNA 研究の進捗や技術を分かち合うのは楽しく、学生の発表のスキル向上にも繋がっています。

写真

右端が Prof. Gvozdev。左は Prof. Shevelyov（Prof. A.A. Aravin 研究室の前にて）

日本 RNA 学会 会報 No.37-1-

RNA という物質は生命体内に散在し、全ての生命機能に携わります。その発現量や機能がバランスを崩すと生命体は異常（疾患）を引き起こし、また、その状態を元に戻すために創薬として RNA 分子を利用することも出来ます。日本 RNA 学会（RNAJ）が扱うトピックも、転写、RNA プロセシング、そして翻訳は勿論、RNA 分解や細胞内局在、エピジェネティクス、疾患、そして創薬に至るまで幅広く、バラエ
ティーに富んでいます。この事実は、RNA 研究領域を比較的穏やかにする効果をもたらし（バッティンが少ないという意味において。昔、Ian Mattaj が RNA から他分野に移行しつつあった際に、まさにそのようなコメントをつぶやいていたのを、今でも憶えています）、また我々RNA 研究者にとっても、近くて遠い研究分野を知るという意味において利益をもたらすものであることは言うまでもありません。が、RNAJ
そのものが“進化”しているかと問われると、100%否ではないかも知れませんが、その答えは、期待通りではない、というのが個人的な感想です。毎年、退会する人もいれば、新しく会員となる人もいます。これは、年中行事で、人という観点からすると、そこには確かに動きはあります。しかし、例えば年会に参加し、春の息吹のような新鮮さに触れる可能性や場がどれくらいあるのかと問われると、う〜んと考え込んでしまうのが現状のように思われます。酸素不足の原因となる温室効果ガスをとり払い、excitement
や enthusiasm を送り込む偏西風を産み出すには何をすべきか。今、個人的には明確な答えをもち合わせていませんが、そろそろ学会が一丸となって、対策や方針を考えても良い時期なのかも知れないとおもう
今日この頃です。

日本 RNA 学会（RNAJ）の会長としての 4 年間（2 年 x 2 期）の任期も、そろそろ終わりを告げよう
としています。「ジャネーの法則」ではないですが、この歳になると、本当に、4 年なんて体感的には数ヶ月くらいにしか思えず、来し方をゆっくり振り返ってみても、私が会長として成し得たことといえば、RNA2016 のお世話くらいしか思い出されません。RNAJ のために特別な力を発揮しえた会長ではありませんでしたが、歴代の RNAJ 会長は、志村先生からはじまり男性のみが就任されていましたので、第 8 期に来てようやく女性会員がなり得たことは、それなりに意義があったのではないかと思ったりしています。
とはいえ、ここまで平穏無事に来られたのも、相馬庶務幹事、杉浦・矢野会計幹事、そして北畠編集幹事の、絶大なる、心温かい気配りに溢れたご支援（それは彼らからのメールの数に反映されています）があったからであるという事実を、これを機に会員の方達と共有させていただきたく思います。本当に有難うございました。また、理事の皆様、並びに集会幹事をつとめてくださった RNA2014〜2017 の年会長の皆様に、この場を借りて深く御礼申し上げます。

平成３０年３月吉日

日本 RNA 学会 会報 No.37
-2-

海外より

アメリカ体験記
山路

剛史（Cincinnati Childrenʼs Hospital Medical Center）

生殖細胞の発生に関わる RNA 制御を研究している、山路剛史と申します。今年の２月から、米国オハイオ州の Cincinnati Childrenʼs Hospital Medical Center (CCHMC) で研究室をスタートさせました。
本稿では、僕がアメリカ生活で学んだことを書かせていただきたいと思います。僕の経験が誰かの役にたち、海外に行くことを躊躇している人の後押しをすることができれば幸いです（うちのラボも絶賛募集中です）。

アメリカに来たきっかけ

僕が修士課程の大学院生として RNA ウイルスの研究をしていた 2003 年頃、microRNA/siRNA が登場し RNA 業界がとても賑わっていました

1-3。一方で、マウス遺伝子工学の発展とともに発生生物学も盛り上がり、神戸に理研 CDB が設立されたのもその頃でした。その二つの分野が融合する研究テーマが生殖細胞でした。ハエや線虫に関しては、RNA-タンパク質複合体の量・質的な成熟が生殖細胞の発生に非常に深く関わっており、そのメカニズムが盛んに研究されていましたが、マウスではまだ最初期の生殖細4胞のマーカー遺伝子がやっと見つかったような状況で 、面白い課題の宝庫で、僕にはフロンティアのよ
うに見えました。それで、生殖細胞研究の最前線にいた斎藤通紀先生が立ち上げた CDB のラボのチームに加えてもらいました。ところが最初のアテが外れ、マウスでは RNA ではなく生殖細胞の初期発生に転写制御の方が大切だということがわかり、僕のフォーカスも転写調節因子 PRDM14 によるエピゲノム制
御機構の解明へとシフトしました

5, 6

。

再び RNA biology に興味を持つきっかけになったのは、2008 年に Robert Darnell lab から出た
7

HITS-CLIP 論文でした 。転写研究が ChIP-chip/seq によって大きく変化したように、RNA 業界もきっと面白くなるに違いないと感じました。マウスでは生殖細胞系列特異的な RNA-binding proteins (RBPs)が発生中期以降に重要な働きをすることが遺伝学的解析から明らかになっていました。僕はそれらを大きな一つの制御ネットワークとして理解することを目標に掲げ、2012 年にラボを移ることを決めました。
行き先は Darnell lab のあるロックフェラー大学の Thomas Tuschl lab でした。Tuschl ラボを選んだのは、彼らが改変版 HITS-CLIP ともいうべき PAR-CLIP を報告したからです 8。胎児期の生殖細胞数、

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ES 細胞からの生殖細胞分化誘導実験で得られる細胞数から計算すると、PAR-CLIP 並みの感度でないとSN 比が保証できません。加えて、多くの microRNA の annotation に貢献した small RNA-seq 技術とコンピューター解析基盤、そして生化学解析基盤などがあり、僕のこれまでの研究に欠けていたものが揃っていました。

Thomas Tuschl 博士との出会い

ラボのボス Thomas を僕はトムと呼んでいました。トムはこれまで出会った誰とも違う、とても個性的な上司でした。仕事になると鬼のように厳しいのですが、僕の私生活やキャリア形成を手厚くサポート
してくれました。考え方を間違ったときは徹底的に厳しく指導されますが、実験上の失敗で怒られることはほとんどありませんでした。トムは化学、生化学的な側面に関しては信じられないくらい長けた眼力で本質を見抜く一方で、生物学的な話になると直ぐに退屈そうな顔になりました。仮説に基づいたプロジェ
クトの立案が嫌いで、遺伝学も好きではないのです。僕とは真逆でした。そして常々、「予想できるような仕事をやっても面白くない。そんなの、incremental だ。怖がらずにもっと大胆にいけ。何でもやって良いから、小さくまとまるな」と言っていました。彼はいつも、僕を専門の違うポスドクたちに引き合わせ、新しいことにチャレンジするようにけしかけました。

僕が入った時、ラボは PAR-CLIP をやりたい人で溢れかえっていたのですが、彼はすでに自然免疫の仕事と、それを基盤にした創薬に夢中でした。また、ロボティクスと組み合わせて、臨床検体（血液や尿）からのハイスループット small RNA-seq も立ち上げていました。ここまでくると、彼の専門分野が何なのかわからなくなってきます。でもトムは常に、一見して畑違いな仕事の中に、自分にしかできないことを見抜いていました。そんな彼は、「今日は特許で〇〇ドル儲けたよ（信じられない大金！）」とか、「マサシもお金になる仕事をしないと、サバイブできないよ？」とか、「ベンチャーを一緒に立ち上げない？」とか、目が回るようなことばかり言ってくるのでした。基礎研究しか眼中になかった僕にとって、彼の柔軟で突飛な発想や体験談は、とても刺激的でした。毎日、僕の中の常識が覆されていきました。

Tuschl ラボ流の Postdoctoral Training

トムがポスドクのプロジェクトを具体的に指導することはありませんでした。マウス実験、ヒト検体実験、DNA 組替え実験などのプロトコル作成から倫理委員会承認までも自分でしなければならなかったのです。それを悟った時は、絶望的な気持ちになりました（当時、ほぼ誰もマウスを使っていませんでした）。
一方で、研究者として生きていくためのトレーニングには力を入れていました。プロジェクトの設定、コ

日本 RNA 学会 会報 No.37-4-

ラボレーションの立ち上げと維持、予算の確保について、常にアドバイスをくれました。特に、コラボレ
ーターとグラントを co-writing する経験をするように奨励されました。これには、アメリカではコラボ
レーションがないとグラントが獲得しにくいという事情もありました。

僕にとって忘れられない、トムらしいエピソードがあります。トムから急に呼び出されたミーティング
で、偶然にもライバルになりそうな研究者と出くわしたことがありました。お互いに気まずい空気が流れる中、トムは不思議な顔をしながら「なんで一緒に働かないの？

ラッキーじゃないか」と言うのです。

それは、当時の僕には斜め上すぎるアドバイスでした。結局、その後、その研究者とは本当に共同研究を立ち上げることになり、グラントも一緒に獲得しました。まだ論文にはなっていませんが、彼との仕事は
現在投稿準備中です。日本で研究にのみ没頭してきた僕にとって、事務手続き、予算獲得、実験、論文と全てこなす生活には苦しめられましたが、その甲斐あって３つの収穫がありました。１つめは多様な価値観を目の当たりにして考え方が柔軟になった事、２つめは研究環境のセットアップからグラント申請まで一通り学べた事、そして３つめは英語がヘタクソなのを気にしなくなった事です。これにより、これまでとは異なる視点からアメリカの研究社会を眺めることができるようになったように思います。

ドリフトする研究生活

自分なりの計画を携えて Tuschl lab にきたわけですが、ここでも思い通りに話は進んでくれませんでした。僕は当初、精子の元になる精原幹細胞の培養モデルを起点として、遺伝学と生化学を繋げる仕事をしようと計画していました。この培養モデルは精巣に移植すると精子形成を再開するため、in vitro から
9in vivo の解析へと比較的容易に発展できるからです 。ようやく系が立ち上がってきて、僕が考えていた
RBP の解析をそろそろ始めようかと思っていた頃でした。同じラボのポスドク仲間であり、かつ、
PAR-CLIP 法を樹立した Markus Hafner から一緒に仕事をしようと誘われました。彼は生殖細胞特異的に発現する RBP の一つ、DND1 に興味を持っていました。

DND1 は microRNA による発現抑制を解除し、標的 mRNA の発現を亢進させるという非常にユニー
10

クな機能が報告されていました 。microRNA のラボで働いてきた彼としては、避けては通れないテーマだったのです。一方で、マウス遺伝学をバックグラウンドとする僕からすれば、主要な発見が少なく、後から参入するには利益が小さい RBP でした。Dnd1 は幹細胞研究分野で長らく研究されてきた teratoma
1112多発性変異マウス（129Ter/Ter） の原因遺伝子としてセンセーショナルに報告された遺伝子でした 。
ゆえに、Dnd1 の遺伝学的解析は、発見と同時にほぼ完了に近いような雰囲気でした。加えて、
13

teratocarcinoma では onco-miR が高発現し、それががん化を促進することが報告されていました 。

日本 RNA 学会 会報 No.37-5-つまり、DND1 による microRNA 機能の抑制は、129Ter/Ter マウスでの生殖細胞ガン形成メカニズムを綺麗に説明してしまっていたのです。

当初は断っていたものの、彼は僕のグラントの英文校正やフィードバックなどをいつも誰よりもしっか
りと助けてくれていたので、友達として断りきれなくなり、一緒に働くことになりました。すると、驚いたことに、綺麗に説明されてしまったと思っていたことがまるで確認できなかったのです。反対に、DND1は CCR4-NOT 脱アデニル化酵素複合体と直接結合し、microRNA とは無関係に、標的 mRNA の分解を14誘導する因子だとわかりました 。この複合体は普遍的な mRNA 分解経路の主要因子なのですが、精原幹細胞においては、CCR4-NOT 複合体の大部分が DND1 によって標的 mRNA にリクルートされている
6

ことが示唆されました。生殖細胞では高発現する DND1（10 コピー以上）によって CCR4-NOT 複合体の大部分が乗っ取られてしまっているようです。このような様式で転写後の遺伝子発現調節を行う例は、
これまでに見たことがありませんでした。

生殖細胞には他にも複数の RBP が発現し、RNA 分解を制御しています。DND1 の標的 mRNA は、こうした RBP の標的ともオーバーラップするはずですが、それらの遺伝子欠損マウスの表現型は、必ずしも dnd1 欠損マウス(129Ter/Ter)とは一致しません。これを説明できるような機能的相互作用を緻密に解析していくことが次の課題です。これまで個別に解析されてきた生殖細胞特異的な RBP 群による RNA
制御を統合し、一つの制御ネットワークとして理解することができるはずです。

後になって分かったことですが、僕が最初に解析しようとしていた因子は、生殖細胞ではそれほど大事ではありませんでした。マーカスとの出会いがなければ、どうなっていたことかと恐ろしくなります。学生時代から振り返ってみても、僕は自分が思い描いていた事とは違う方向に研究テーマがドリフトし続けてきました。それは僕にスマートさが足りないからだと思っていましたが、今考えると、自然現象を予測できると思うこと自体が傲慢だったのかもしれません。誤解のないように書きますが、僕は今でも計画は大切だと思っています。その上で、臨機応変に水平移動することが、新しい発見へと結びつくように思うのです。

ポスドク、凄く凄く募集！

山路研究室では研究員を募集しています。僕と一緒に、生殖細胞発生に関わる RNA 制御を研究しませんか？

やる気のある方、新しいことにチャレンジするのが好きな方、ぜひご連絡ください。

日本 RNA 学会 会報 No.37
-6-

写真１

ラボを出る前に撮った写真。彼のオフィスには、彼の友人が書いてくれた大きな絵が飾ってあります。奥さんがデザイン関係の仕事をしていたためか、友人は芸術家や音楽家だらけです。

写真２

ドイツ人なので、やっぱりビールはホームメイド。でも、これが本当に美味しい。

日本 RNA 学会 会報 No.37
-7-

写真３

最近は日本酒作りにも挑戦し始めました。記念すべき第一弾。これが意外と美味しくて、僕はシ

ョックを受けたのでした。忙しいときに日本語 Web サイトの説明を頼まれ、ちょっと面倒臭い思いをしたのも良い思い出です。

写真４

NIH で独立したマーカス。トムにしろマーカスにしろ、羨ましいくらい背が高いのです。それを際立たせるために、僕が少しだけ屈んだ写真を撮影してみました。学会のネタ用です。撮影者は、彼の奥さんで Greg Hannon Lab 出身の Astrid Haase。彼女も NIH で独立しました。

日本 RNA 学会 会報 No.37-8-

References

1. Pasquinelli AE, Reinhart BJ, Slack F, Martindale MQ, Kuroda MI, Maller B, et al.
Conservation of the sequence and temporal expression of let-7 heterochronic regulatory RNA.
Nature. 2000 Nov 2;408(6808):86‒9.
PMID: 11081512
2. Lagos-Quintana M, Rauhut R, Lendeckel W, Tuschl T.
Identification of novel genes coding for small expressed RNAs.
Science. 2001 Oct;294(5543):853‒8.
PMID: 11679670
3. Elbashir SM, Harborth J, Lendeckel W, Yalcin A, Weber K, Tuschl T.
Duplexes of 21-nucleotide RNAs mediate RNA interference in cultured mammalian cells.
Nature. 2001 May;411(6836):494‒8.
PMID: 11373684
4. Saitou M, Barton SC, Surani MA.
A molecular programme for the specification of germ cell fate in mice.
Nature. 2002 Jul 18;418(6895):293‒300.
PMID: 12124616
5. Yamaji M, Seki Y, Kurimoto K, Yabuta Y, Yuasa M, Shigeta M, et al.
Critical function of Prdm14 for the establishment of the germ cell lineage in mice.
Nat Genet. 2008 Aug;40(8):1016‒22.
PMID: 18622394
6. Yamaji M, Ueda J, Hayashi K, Ohta H, Yabuta Y, Kurimoto K, et al.
PRDM14 ensures naive pluripotency through dual regulation of signaling and epigenetic pathways in mouseembryonic stem cells.
Cell Stem Cell. 2013 Mar 7;12(3):368‒82.
PMID: 23333148
7. Licatalosi DD, Mele A, Fak JJ, Ule J, Kayikci M, Chi SW, et al.
HITS-CLIP yields genome-wide insights into brain alternative RNA processing.
Nature. Nature Publishing Group; 2008 Nov 1;456(7221):464‒9.
PMID: 18978773
8. Hafner M, Landthaler M, Burger L, Khorshid M, Hausser J, Berninger P, et al.

日本 RNA 学会 会報 No.37-9-

Transcriptome-wide identification of RNA-binding protein and microRNA target sites by PAR-CLIP.
Cell. 2010 Apr 2;141(1):129‒41.
PMID: 20371350
9. Kanatsu-Shinohara M, Ogonuki N, Inoue K, Miki H, Ogura A, Toyokuni S, et al.
Long-term proliferation in culture and germline transmission of mouse male germline stem cells.
Biology of Reproduction. 2003 Aug;69(2):612‒6.
PMID: 12700182
10. Kedde M, Strasser MJ, Boldajipour B, Oude Vrielink JAF, Slanchev K, Le Sage C, et al.
RNA-binding protein Dnd1 inhibits microRNA access to target mRNA.
Cell. 2007 Dec 28;131(7):1273‒86.
PMID: 18155131
11. Stevens LC.
A new inbred subline of mice (129-terSv) with a high incidence of spontaneous congenital testicular teratomas.
J. Natl. Cancer Inst. 1973 Jan;50(1):235‒42.
PMID: 4692863
12. Youngren KK, Coveney D, Peng X, Bhattacharya C, Schmidt LS, Nickerson ML, et al.
The Ter mutation in the dead end gene causes germ cell loss and testicular germ cell tumours.
Nature. 2005 May 19;435(7040):360‒4.
PMID: 15902260
13. Voorhoeve PM, Le Sage C, Schrier M, Gillis AJM, Stoop H, Nagel R, et al.
A genetic screen implicates miRNA-372 and miRNA-373 as oncogenes in testicular germ cell tumors.
Cell. 2006 Mar 24;124(6):1169‒81.
PMID: 16564011
14. Yamaji M, Jishage M, Meyer C, Suryawanshi H, Der E, Yamaji M, et al.
DND1 maintains germline stem cells via recruitment of the CCR4-NOT complex to target mRNAs.
Nature. 2017 Mar 15;435(7646):360‒572.
PMID: 28297718

日本 RNA 学会 会報 No.37- 10 -RNAフロンティアミーティング

RNAフロンティアミーティング2017の参加報告

中武誠真（熊本大学）

熊本大学自然科学研究科理学専攻生命科学コースの中武誠真です。比叡山延暦寺で開催された RNA フ
ロンティアミーティング 2017 に参加させていただいたので、得られた体験から 3 つのことに焦点を当ててご報告させていただきます。

専門分野が近いからこそ、濃密な議論の場

私はこういった学外での討論の場は初めてでしたが、それでも前のめりになって参加できたと思っています。各セッションで様々な分野の方が「RNA」をキーワードに興味深い研究内容を発表してくださり、
とても有意義な時間を過ごすことができました。議論では、私が知らなかったことが多く、聞いたことのない手法や背景などを知ることができ、知見の幅が広がりました。質疑応答の時間も十分に設けられていて、ある質問をきっかけにしてさらに面白い議論が展開していくことも多々ありました。また、自分の専門分野と近いため研究発表の内容がとても聞きやすかったと感じました。馴染みのある「言葉」が飛び交
うため、内容が理解しやすく、それも相まってより一層深い内容になったと思います。

図1

充実した口頭発表と質疑応答

日本 RNA 学会 会報 No.37- 11 -

最大の特徴でもある口頭発表の場

この RNA フロンティアミーティングに参加して得られる体験として、様々な研究室のプレゼンテーシ
ョンを見る機会となることがあげられます。私自身、プレゼンテーションを行う立場でしたので、しっかりと準備をして臨みました。自分でいろいろと考えて発表スライドを作る際には、今までみたことのある
スライドやプレゼンテーションの技術がとても参考になるため、この RNA フロンティアミーティングへ参加後では、さらにプレゼンテーションが上達したように感じています。また質疑応答においても、いろ
いろな切り口からの疑問を聞くことができ、より自分の研究テーマに対する考え方や捉え方に深みが持てたと思います。この様な口頭発表の場を作っていただけたことで、とても実りのある時間を過ごすことができたと感じています。

何よりも、楽しい

今回の RNA フロンティアミーティングは、比叡山延暦寺というとても珍しい場所での開催でした。会場に向かうバスの中での、突然の「肉禁止令」に、やっぱそうなんだと感心したのはよく覚えています。
ただ、こういう特殊な環境での体験というのはそうそう得られるものではないので、個人的にはとても楽しみながら時間を過ごさせていただきました。行きのバスで、霧で前がほとんど見えない中、グネグネと山道を登って行った時はどうなることやらと思っていましたが、いざホテルについてみると、窓から見える景色がとてもよく、いいところに来たと思いました。精進料理も初めて食べたのですが、いたるところに工夫がしてありとてもおいしかったです。また初めて座禅を体験しました。「形のないお土産」と言われていましたが、得るものがたくさんあったと感じています。そういった環境だからなのか、本業の議論にすっきりとした気持ちで、集中して臨むことができたと感じています。すべてのセクションが終わり、帰りのバスの中でもその議論がやむことはなく、公の会場だけでなく、あらゆるところで有意義な時間を過ごすことができたと思います。

全体を振り返って、RNA フロンティアミーティングに参加して本当に良かったと思いました。いろい
ろとご迷惑をおかけしましたが、運営してくださった方々に心より深く感謝いたします。また、参加するにあたって旅費の援助をしていただきました。この場を借りて、厚く御礼申し上げます。

日本 RNA 学会 会報 No.37- 12 -

図2

図3

座禅体験

帰りのバスでのひと時

日本 RNA 学会 会報 No.37- 13 -RNAフロンティアミーテイング2017参加レポート
武井夏海（北海道大学）

北海道大学生命科学院生命システム科学コース修士2年の武井夏海と申します。この度、2017年11月8日から10日にかけて比叡山延暦寺延暦寺会館で行われたRNAフロンティアミーテング2017に参加いた
しましたので、その時の様子をご報告いたします。

参加にあたって私は学部4年から修士2年の現在まで、生殖発生生物学講座でマウスの卵母細胞を用いて翻訳制御に関する研究を行って参りました。今まで様々な学会で発表する機会をいただきましたが、RNA学会への参加や発表は行っておりませんでした。この度RNAフロンティアミーティングに参加するきっかけとなったのは、去年北海道のニセコで開催されたRNAフロンティアミーテング2016に参加した当研究室の先輩の影響です。正確には私が直接影響を受けたわけではありません。去年のミーティング参加による収穫の大きさに指導教官が味を占めたと言う方が正しく、気が付いたら私も参加のレールに乗って送り出された形となりました。実際にRNAフロンティアミーティングに参加する前は、もちろんRNA研究に特化した研究者の方々と意見交換をできる貴重な場に恵まれたと喜びましたが、正直なところ、開催地「比叡山延暦寺」が非常に魅力的に映ったことは否定できません。

ミーティングの様子

RNA学会に参加していなかったこともあり、私はほとんど知り合いがいない状態でした。一方周りでは「●●大学の■■研究室の方なんですね。私は〜」といった会話が繰り広げられていて、何とも場違いなところに来てしまった気がしました。しかし、あちらこちらに若手研究者同士で交流を深められるような配慮がなされており、最終日には初日の不安が嘘のように楽しく過ごすことができました。発表について
は、3日間で40演題と非常に過密なスケジュールでしたが、どの発表も私にとっては新鮮で非常に興味深
いものでしたので、振り返ってみればあっという間でした。普段の環境では実験動物を用いた研究に触れる機会の方が多いので、皆さんの研究は全く毛色の違うものに感じられました。そのような環境の違いのせいか質疑応答においても、皆さんがどのような点を重視して研究するのか垣間見えて非常に勉強になりました。

日本 RNA 学会 会報 No.37- 14 -

さらに東京大学の泊幸秀教授や京都大学の野田岳志教授による特別講演も拝聴することが出来ました（写真1）。泊幸秀教授のこれまでの研究人生や研究に対する姿勢は私の期待を良い意味で裏切るような内容で、とても面白く聞かせていただきました。野田岳志教授はウイルスに関する研究発表をしてくださいましたが、研究内容はさることながら、ウイルスの知識がほとんど無い私でも驚くほど理解しやすく構成されていて、非常に驚愕しました。このような講演も含め、セッションの時間は大変有意義な時間でした。

自由討論・交流

休憩時間や自由討論の時間は、参加者の方と深く交流することが出来る非常に良い機会でした。会場の雰囲気がとても穏やかでしたので、他の人に話しかけやすく、気楽に研究の話ができました。私の研究に対して有意義な意見や、今後の研究のヒントになるような知識や技術に触れることができ、非常にたくさんのことを得ることができました。また研究内容だけではなく、他の参加者の普段の研究生活や研究に対する姿勢を知ることができ、モチベーションに繋がりました。

2日目の自由交流ではオプションとして座禅体験と写経体験が行われました。私はどちらの体験も参加しましたが、どちらも己と向き合うタイプの自由交流でしたので、この機会に心の姿勢を正して参りました（写真3）。

ミーティングを終えて今まで全く面識のない私のような参加者を温かく迎えてくださり本当に感謝しています。私が今まで参加した学会や発表会に比べて参加者の研究分野が似ているため、皆さんの意見一つ一つが核心的で、話していてとても楽しく、何より本当に有意義でした。このような過ごしやすい雰囲気で参加者同士の距離が近いこともあり、他とは比べ物にならないくらい濃密な時間を過ごせたと思います。RNAフロンティアミーティング2017の収穫を糧に、これからも研究に励んで参りたいと思います。

最後になりましたが、RNAフロンティアミーティング2017を運営してくださった谷口一郎先生と三野享史先生、並びにスタッフの皆様に心より感謝いたします。また、参加にあたり、旅費の支援をしていた
だいたことに対しても深く御礼申し上げます。

日本 RNA 学会 会報 No.37- 15 -

写真１

特別講演

写真２

自由討論

日本 RNA 学会 会報 No.37- 16 -

写真３

座禅体験

日本 RNA 学会 会報 No.37- 17 -

RNA フロンティアミーティング 2017 参加報告

平島智貴（京都工芸繊維大学）

京都工芸繊維大学 応用生物学専攻 染色体工学研究室 修士 1 年の平島 智貴と申します。今回 2017年 11 月 8 日から 10 日にかけての 3 日間、滋賀県比叡山延暦寺会館にて開催された RNA フロンティア
ミーティング 2017(フロンティアミーティング)に参加させていただきましたので、その経験を学生参加者の視点からご報告させていただきます。

私は学部生の頃から、ショウジョウバエの初期胚を用いて mRNA の局在化機構の解明に注目していました。その中で mRNA が、自身のタンパク質合成を伴いながら（翻訳依存的に）局在化するという魅力的な現象に出会い心踊らせていました。しかし、次の一手をどう打てば良いものか思案にくれていた所、フロンティアミーティングの存在を知り、参加すれば何かフロンティアな知見を得れるのではないかと思い参加を決意しました。

【会場】

今回のミーティングの非常に面白い所は、お寺で開催されたところだと思います。日本国内大小数多の学会開催されていますが、お寺で行われたのはフロンティアミーティングのみではないでしょうか。参加
前に研究室内で延暦寺に学会で行くと言うと、ラボメンバーからは修行にでも行くのかと冷やかされました。

初日比叡山は濃霧に覆われ現世から隔離された様相を呈しており、これは本当に「修行を積みなさい」という仏様からの思し召しかとも思いました(図１)。実際に 3 日間の学会を通して、非常に有意義な RNA
三昧の修行を積めたと思います。また食事も三食、精進料理と修行に相応しい体験をすることができました(図２)。

日本 RNA 学会 会報 No.37- 18 -

図１

初日の比叡山は酷い濃霧でした

図２

精進料理づくしでした

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【口頭発表】口頭発表は、発表時間が 12 分、質疑応答が 5 分の計 17 分間の発表が 40 題、8 つのセッションに分けて発表されていました。発表内容は RNA と言っても、コーディングされるものからされないものまで、短鎖のものから長鎖のものまでと非常に幅広く常に新しい知見を得ることができました。また、何と言っても口頭発表をさせて頂く機会を得れたのは良い経験となりました。発表の際、真剣に研究内容を聞いてくださる方が非常に多いように感じました。それに伴い、密度の濃い質問・コメントを多く頂くことができ、研究の励みになりました。

さらに良い経験を積めたと感じたのは、このような学会で質問できたことです（数は少ないですが）。
かねてから、研究室での雑誌会などに比べ、学会の口頭発表の場で質問をすることに高いハードルを感じていたため、これを克服することができ良かったです。

特別講演では東京大学の泊先生、京都大学の野田先生のお話を聞くことが出来ました。泊先生は、ご自身の研究人生を中心にお話しされており、何事も挑戦する大切さについて教えていただきました。野田先生は、インフルエンザウィルス再構築の分子メカニズムについて紹介されており、ウィルスに対する知識の浅い私が聞いても非常に興味深い内容でした。

【自由討論】

毎晩、飲み会ならぬ自由討論が行われていたのは、思い出深いです。みなさん研究で身につけたタフネ
スを存分に発揮されており、お酒片手にお互いの研究に関すること、関係しないことも含めて交流を深めておられました。研究室に籠っていると忘れがちな、研究に対する熱い姿勢を様々な方々から見せて頂き、背筋を正す良い機会となりました。朝方まで飲み会は続いていたようですが、私は普段の実験量が少なく体力がないせいか、途中でリタイアしてしまいました。

【謝辞】

多くの若手研究者が一堂にに会する本ミーティングに参加し、多くの経験を得ることができました。このような素晴らしいミーティングを運営してくださった世話人の谷口先生、三野先生および学生スタッフの皆様には心より感謝申し上げます。

日本 RNA 学会 会報 No.37- 20 -

図３

集合写真

日本 RNA 学会 会報 No.37- 21 -

技術セミナー

日本語版 Ribosome profiling プロトコル

水戸麻理、岩崎信太郎（理化学研究所岩崎 RNA システム生化学研究室）

本プロトコルは哺乳類培養細胞における ribosome profiling の基本プロトコルです。HEK293T 細胞を想定して記述していますが、経験上同様の手法が他の培養細胞でも適用できることが多いです。

ribosome profiling に関する相談、質問、コメント等あれば岩崎(shintaro.iwasaki [at mark] riken.jp)
までご一報いただければありがたいです。Citation はこちらです(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28579404)。

< BASIC PROCEDURE（サンプル 4 本の場合）>
Step1. Lysate 作製【シクロへキシミド処理】

Lysis Buffer[x1][In 5 mL][final]1M Tris-HCl pH 7.5

12

100

20 mM

5M NaCl

18

150

150 mM

1M MgCl2

3

25

5 mM

0.1M DTT

6

50

1 mM

10% Triton X-100

60

500

1%

RNase-free water

500.4

4170

total

600

5 mL

上記のバッファーを作製し、冷やしておく。

日本 RNA 学会 会報 No.37- 22 -

以下の試薬を使用直前に加える。

Cycloheximide 100 mg/mL[In 5 mL][final]5

100 microg/mL

1. 10 cm ディッシュの細胞を冷 PBS 5 ml でリンスする。
2. PBS をよく吸い捨て、Lysis buffer を 400 ul 入れて全体に広げる。
3. ピペッティングで細胞を剥がし、DNA Lobind チューブに移す。Lysis buffer 200 ul で洗い込む。
4. 2 U/ul Turbo DNase I

7.5 ul 加え、氷上に 10 min おく。

5. 20,000 g 4℃ 10 min
6. 上清をチューブに取り、転倒混和する。
7. 濃度測定用 5 ul 1 本、残りは 100 ul ずつ分注し、液体窒素で瞬間冷凍し-80℃で保存する。

PAUSE POINT -80℃

【RNA 濃度測定 Qubit RNA BR Assay Kit】

1. Working Solution 200 ul（スタンダード用

2 本＋サンプル

4 本分）を用意する。Working

Solution＝Qubit RNA BR Reagent 1 ul : Qubit RNA BR Buffer 200 ul
2. 0.5 ml チューブにスタンダード用 190 ul 、サンプル用 199 ul ずつ分注。スタンダード試薬#1,#2
を 10ul、サンプルを 1ul ずつ加え、ボルテックス、スピンダウン。室温で 2 min 置く。
3. Qubit 2.0 Fluorometer で測定、RNA BR Assay を選択。スタンダード、サンプルを測定する。

＊80% confluent の HEK cell で 10 cm ディッシュ 1 枚から 200-300 ng/ul になる。
（600 ul lysateの場合）

Step 2. RNase 消化〜超遠心〜リボソームの精製

・ヒートブロック

25℃準備

・超遠心機のローター冷やしておく

日本 RNA 学会 会報 No.37- 23 -

Sucrose cushion[In 5 mL][final]Sucrose

1.7 g

1M

1M Tris-HCl pH 7.5

100

20 mM

5M NaCl

150

150 mM

1M MgCl225

5 mM

0.1M DTT

50

1 mM

RNase-free water

3565

Total 5 mL

Sucrose が溶けたら氷上で冷やしておき、使用直前に以下を加える。

[In 5 mL][final]Cycloheximide 100 mg/mL

5

100 microg/mL

SUPERase In 20U/microL

5

20U/mL【サンプル準備】・Rnase I は

2 U/1ug RNA で使用する。（RNA 10 microg の時 20 U 使用）[microL]
RNA Lysate (RNA 10 microg 分)

X

Lysis buffer (用時調製)

Y

RNase I (10U/microL)

2

total

300

1. チューブに RNA をとり、Lysis buffer で 298 ul にする
2. RNase I を 2 ul ずつ入れ優しく混合、ヒートブロックで 25℃

45 min(サンプル間で反応時間に差が出ないよう正確に).
3. 氷上へ移して、すぐに SUPERase In (RNase inhibitor)を 10 ul ずつ加える。 (冷やすことで反応止める効果があるので先に氷上へ)
4. 超遠心チューブに RNaseI 消化後のサンプル 300 ul を移す。

日本 RNA 学会 会報 No.37- 24 -

5. Sucrose cushion buffer 900 ul をサンプルの下から２層になるようゆっくり注ぐ。
6. TLA110 ローターで、100,000 rpm

4℃

1h

7. ペレットを崩さないよう、上清を液面の上部から吸い捨てる.
8. ペレットに TRIzol reagent を 300 ul 入れて(ペレットが見えるようになる)よく溶かす。
9. DNA Lobind チューブに移す。

PAUSE POINT -80℃

【Direct-zol MicroPrep kit カラム精製】[microL]
TRIzol sample

300

エタノール（等量）

300

total

600

1. カラムに移して 12,000 g, 1 min, 4℃. 受けチューブは 1 回ごとに使い捨てる。
2. PreWash buffer 400ul を加え 12,000 g, 1 min, 4℃.2 回行う
3. Wash Buffer 700 ul, 12,000 g, 1 min, 4℃.
4. 空遠心12,000 g, 5 min, 4℃.

5. RNase-free water を 6 ul を加え

12,000 g, 2 min, 4℃.

6. 2x RNA Loading Buffer を 6 ul 加える

PAUSE POINT -80℃

Step 3. Footprint Fragment 精製【RNA サイズマーカー準備と泳動】

日本 RNA 学会 会報 No.37- 25 -

2 レーン分[microL]

10 microM NI800 (34 nt)

1

10 microM NI801 (26 nt)

1

RNase-free water10

2x RNA Loading Buffer

12

total

24

1. RNA サイズマーカーとサンプルをヒートブロックで 95℃

3 min

→

氷上

2 min

2. WAKO SuperSep RNA 15% ゲルを用意
3. well 掃除を行ってから、サンプルをアプライする。コンスタント 10 mA で 50 min 泳動する。
4. 1 x TBE

50 ml + SYBRGold 5 ul (10,000 倍希釈)でゲルを染色する。シェーカーで揺らしながら 3 min
5. ブルーライトに乗せて、バンドを確認しサンプルの 26bp-34bp の間を切り出す。
6. マーカーも切り出しておく。

日本 RNA 学会 会報 No.37- 26 -

【gel からの RNA 抽出】<RNA gel extraction buffer>[microL][final]3M 酢酸 Na pH 5.2

400

300 mM

0.5M EDTA

81 mM

10% SDS

100

0.25%

RNase-free water

3492

total

4000

1. 1.5 ml チューブに入れたゲル片をペッスルで潰す。
2. RNA gel extraction buffer 400 ul を入れ、ペッスルについたゲルを洗い込む。
3. ­80℃, 30 min or 液体窒素で凍結する。
4. 室温 2 h 以上転倒混和する。
5. Spin-X カラムを DNA Lobind 1.5 ml チューブにセットし、先太チップでゲル溶液を移す。
6. 10000 g, 1 min, 4℃
7. GlycoBlue 3 ul , イソプロパノール 500 ul を加えよく混ぜる。
8. 冷凍庫に 1 h 入れた後、20,000 g, 30 min, 4℃.
9. 上清を捨てて、70% エタノールリンス
10. ペレットに 10 mM Tris pH7.5 を 7 ul 入れ、溶かす。

PAUSE POINT -80℃

Step 4. 20 microM Preadenylylated linker 作製

1. 以下の溶液を 8 連チューブに調製する。
[microL]
100 microM 5 p-linker-ddC primer

1.2

10x 5 DNA Adenylation reaction buffer

2

1 mM ATP2

Mth RNA Ligase

2

RNase-free water

12.8

total

20

日本 RNA 学会 会報 No.37- 27 -

65℃

1 h → 85℃

5 min

2. Oligo clean & Concentrator カラム精製[microL]
サンプル 20 microL + RNase-free water 30 microL

50

Binding buffer（2 倍量）

100

total

150

Mix

+

エタノール（8 倍量）

400

total

550

カラムに移して 12,000 g, 1 min.
Wssh buffer 750 ul を加え、12,000 g, 1 min.
空遠心 12,000 g, 5 min.
RNase-free water 6 ul で Elution.

PAUSE POINT -20℃

Step 5. Dephosphorylation and Linker Ligation【脱リン酸化】

1. Mixture の準備

マーカー + サンプル４つの場合[x1 sample][x5.2 (premix)]

RNA sample

7-

10x T4 PNK buffer

1

5.2

T4 PNK

1

5.2

SUPERase In

1

5.2

total

10

15.6

2. サンプルは 8 連チューブに移し、95℃2 min → 氷上 3 min

日本 RNA 学会 会報 No.37- 28 -

3. mixture を 3ul ずつ分注し

37℃

1h

PAUSE POINT -80℃

【リンカーライゲーション】
・サンプルごとにそれぞれ別のリンカーをつける。メモしておく。
・マーカーにはどのリンカーをつけても良い

1. 脱リン酸化後

95℃2 min → 氷上 3 min[x1 sample][x5.2 (premix)]

50% PEG-8000

7

36.4

10x T4 RNA ligase buffer

1

5.2

T4 Rnl2(tr)K227Q (200U/microL)

1

5.2

total

9

46.8

2. サンプルに 9 ul ずつ分注
3. Preadenylated linker (20 uM)を 1 ul ずつ分注
4. 22℃

3h

→

mix

4℃

5. Oligo clean カラム精製(前述の通りに精製)する。
6. Elution 6 ul + 2 x RNA Loading Buffer 6 ul

PAUSE POINT -80℃

【泳動準備】① linker のみ[microL]
Preadenylated linker (20 microM)

1

RNase-free water

5

2x RNA Loading Buffer

6

total

12

② Linker ligation 後のマーカー

日本 RNA 学会 会報 No.37- 29 -

③ Linker ligation 後サンプル

1. ヒートブロック

95℃

3 min

→

氷上

2 min

2. 前述の通りに泳動する。

3. Linker ligation 後のサンプルとマーカーを切り出す。
＊切り出したサンプルはリンカーがそれぞれ違うので、以降は混ぜても良い。
4. gel からの RNA 抽出(前述の通り)〜70%リンス後ペレットを溶解時〜
次の Ribo-Zero 処理では４サンプルをまとめて処理する。全量が 26 ul になるように、10 mM
Tris pH 7.5 で溶解する。
マーカーは Ribo-Zero 処理しないので、10 mM Tris pH7.5 を 10 ul で溶解する。

PAUSE POINT -80℃

日本 RNA 学会 会報 No.37- 30 -

Step 6. Ribo-Zero 処理

1. ビーズを 225 ul チューブに移し、マグネットに立てる。
2. 上清を捨てて、RNase-free water 225 ul で 2 回洗浄する。
3. Resuspension solution 60 ul で懸濁する。室温においておく。
4. 1.5ml チューブに以下の溶液を作製。

[microL]
RNA サンプル（4 サンプル分）

26

Ribo-Zero reaction buffe r

4rRNA Removal SIn-Gold

10

total

40

68℃

10 min

→

室温

5 min

5. 用意しておいたビーズ 65 ul を入れピペッティング、vortex 10 s。室温で 5 min おいた後 vortex
10 s、マグネットに立てる。
6. 上清を新しいチューブに移す。
7. Oligo clean & Concentrator カラム精製を行う。

[microL]
Ribo-Zero 後サンプル

100

binding buffer（2 倍量）

200

total

300

Mix

+

エタノール（8 倍量）

800

total

1100

(カラムには 800 ul までしか入らないので、2 回に分けてカラムに通す)
前述の通りに精製し、RNase-free water 10 ul で Elution。

PAUSE POINT -80℃

日本 RNA 学会 会報 No.37- 31 -

Step 7. 逆転写反応

1. 8 連チューブに以下のものを用意する。

① RT primer のみ (RNase-free water 10ul) or② RT primer + linker (RNase-free water 9.5 ul + 20 uM liker 0.5 ul) or③ マーカー（linker ligation 後）10 ul or④ サンプル（linker ligation、Ribozero 後）10 ul＋

1.25 uM RT primer NI802 2 ul
total

12 ul

65℃

5 min

→

氷上

5 min

2. mixture を①〜④ + RT primer に 8ul ずつ分注する

x1

x4.2 (premix)

5x Protoscript II buffer

4

16.8

10mM dNTPs

1

4.2

10x DTT1

4.2

SUPERase In1

4.2

Protoscript II

1

4.2①〜④ + RT primer

12

-

total

20

33.6

3. 50℃

30 min4. 1 M NaOH を 2.2 ul ずつ加え、混ぜる。70℃

20 min5. Oligo clean & Concentrator カラム精製

日本 RNA 学会 会報 No.37- 32 -

RNase-free water を 28 ul 足して 50 ul にする。前述の通りに精製する。
Elution 6ul + 2x RNA Loading Buffer 6ul

PAUSE POINT -20℃

【泳動準備】・リンカーと RT primer がアニールしたものがサンプルサイズと重なるため、ヒートブロックで 100℃
5 min

→

氷上においてから泳動する。

DNA gel extraction buffer（泳動の間に作っておく）[microL] [final]
5M NaCl300

300 mM

1M Tris pH7.5

50

10 mM

0.5M EDTA

10

1 mM

RNase-free water

4640

-

total

5000

-

日本 RNA 学会 会報 No.37- 33 -

・切り出したゲルは DNA gel extraction buffer を入れ DNA を抽出し、前述の通りにイソプロ沈を行い、ペレットに 10 mM Tris pH7.5 を 12 ul 入れ溶かす。

Step 8. Circularization

1. mixture を 8 連チューブに 8 ul ずつ分注する。

x1 sample

x4.2 (premix)

First strand cDNA

12-

10x CircLigase II buffer

2

8.4

5M Betine

4

16.8

50 mM MnCl21

4.2

CircLigase II (100U/microL)

1

4.2

total

20

33.6

2. サンプルを 12 ul ずつ分注する
3. 60℃

1h→

80℃

10 min

PAUSE POINT -20℃

Step 9. PCR Amplification and Barcode Addition

・サンプルはサイクル数を振って（6 ,8, 10 サイクル）、非特異バンドが少ないバンドを切り出す。
・コントロール① RT primer のみ② RT primer + linker ③ マーカー（inker ligation 後）は 8 サイ
クルのみでよい。

1. サンプルは反応液 100 ul を作り、33 ul ずつ 3 つの well に分ける（6 ,8, 10 サイクル）

コントロールは 100 ul 分の template なし反応液作成、3 つの well に分け、template を 1.7 ul ずつ加える（8 サイクル）。
PCR 後、ライブラリーをさらに pool する場合は、ライブラリーごとに異なる Rv primer (NI822-826)を必要に応じて用いる。

日本 RNA 学会 会報 No.37- 34 -

(pool できるサンプル数= linker バーコード X PCR primer バーコード)

サンプル コントロール

1 well5x Phusion HF buffer

20

20

6.7

2.5 mM dNTPs

8

8

2.7

10 microM NI798 Fw primer

5

5

1.7

10 microM NI799 Rv primer

5

5

1.7

Circularized cDNA template

5

-

1.7

H2O

56

56

18.7

Phusion polymerase (2U/microL)

1

1

0.3

total

100

95

33

2. PCR をスタートさせたら、各サイクルの伸長反応が終わったところでチューブを回収していく。

1) 98℃ 30 s2) [98℃ 10 s, 65℃ 10s, 72℃ 5 s] x6, x8, x10（になるよう 2 サイクルずつ回収する）
3) 72℃ 5 min
4) 4℃

PAUSE POINT -20℃

Step 10. PCR product のゲル精製

PCR product は denature させてはいけない。ゲルは SuperSep DNA, 15%を使用する。 Loading
Dye は 6 x non-denaturing purple loading dye を使用する。

【泳動準備】
・サンプル 33 ul + 6 x non-denaturing purple loading dye 6.5 ul を混合し、2 well に 19 ul ずつ
泳動する
・RT primer, linker, Marker 33 ul + 6 x non-denaturing purple loading dye 6.5 ul を混合し、2well に 10 ul ずつ泳動する・20 mA1 h 20min 泳動し、前述の通りにゲル染色する

日本 RNA 学会 会報 No.37- 35 -

・最適サイクル数を確認して、バンドを切り出す【gel からの DNA 抽出】

1. 2 well 分のゲル片をペッスルで潰し、DNA gel extraction buffer 230 ul 入れる。
2. -80℃ or 液体窒素で凍結後、室温 2 h 以上転倒混和。Spin-X カラムでゲル片を取り除く。
3. NucleoSpin Gel and Clean カラム精製[microL]DNA 抽出液230

Buffer NT1（2 倍量）

460

total

690

4. カラムに移して、11,000 g, 1 min, 4℃.
5. Buffer NT3 700ul で WASH 11,000 g, 1 min, 4℃. x2 回
6. 空遠心 11,000 g, 5 min.
7. NE buffer 17 ul 加え、室温 1 min おく

日本 RNA 学会 会報 No.37- 36 -

8. Elution

11,000 g, 1 min, 4℃.

Step 11. Quality Check by MultiNA【超高感度モードで測定】※設定が必要なので島津に相談

・1/25 Gel Star（TE で 25 倍希釈したもの）
・1/5 島津マーカーDNA-1000（H2O で 5 倍希釈したもの）
・1/50 100 bp DNA ラダー（TE で 50 倍希釈したもの）

1. 分離 Buffer の準備[microL]
Separation buffer (DNA-1000)

398

1/25 希釈 Gel Star

2

total

400

2. サンプル、ラダーの準備[microL]
サンプル or 1/50 希釈ラダー

2

1/5 島津マーカー

4

total

6

3. 機械にセットして測定
4. 濃度、mol 数は結果を 1/5 した値になる。（超高感度測定のため）

シークエンスに必要な量は 1 nM が 15 ul 分です。
足りない場合は最適サイクルのみを 100ul 分 PCR し、同様にゲル精製を行ってください。
PCR Duplicate を減らすために、解析に出すサンプルはサイクル数の少ない方を優先します。サイク
ル数の違うサンプル同士は混ぜないでください。

日本 RNA 学会 会報 No.37- 37 -

Materialsl

HEK293 cells (ATCC, cat. no. CRL-1573)

l

DMEM (1x) + GlutaMAX-I (ThermoFisher Scientific, cat. no. 10566-016), with 10% FBS

before use.
l0.05% Trypsin-EDTA (ThermoFisher Scientific, cat. no. 25300-54)lCycloheximide 100 mg/ml (Sigma/Aldrich, cat. no. C4859-1ML)l

D-PBS (-)(1x) (nacalai tesque, cat. no. 14249-24)lRNase-free water, molecular biology grade (Millipore, cat. no. H20MB1001) or(ThermoFisher Scientific cat. no. 10977-015)l

1 M Tris-HCl pH 7.5, molecular biology grade (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., cat. no.

318-90225)l

5 M NaCl, molecular biology grade (nacalai tesque, cat. no. 06900-14)l

1 M MgCl2, molecular biology grade (nacalai tesque, cat. no. 20942-34)lTurbo DNase, 2 U/µl (ThermoFisher Scientific, cat. no. AM2238)

日本 RNA 学会 会報 No.37- 38 -

l

Triton X-100, molecular biology grade (nacalai tesque, cat. no. 12967-32)lQubit RNA BR Assay kit (ThermoFisher Scientific, cat. no. Q10210)

lSUPERase·In, 20 U/µl (ThermoFisher Scientific, cat. no. AM2694)lSucrose, molecular biology grade (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., cat. no.

198-13525)l

3 M NaOAc pH 5.2, molecular biology grade (nacalai tesque, cat. no. 06893-24)lRNase I, 10 U/µl (Epicentre, cat. no. N6901K)l

13 x 56 mm polycarbonate ultracentrifuge tube (Beckman Coulter, cat. no. 362305)l

Direct-zol RNA MicroPrep (Zymo Research, cat. no. R2062)

l

TRIzol (ThermoFisher Scientific, cat. no. 15596018) or other Direct-zol compatible

reagentl

Ethanol, molecular biology grade (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., cat. no.

054-07225)lIsopropanol, molecular biology grade (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., cat. no.

168-21675)
lGlycoBlue, 15 mg/ml (ThermoFisher Scientific, cat. no. AM9515)

l

0.5 M EDTA, molecular biology grade (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., cat. no.

311-90075)
l

2× RNA Loading Buffer without Ethidium Bromide (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.

cat. no. 182-02571)
lSuperSepRNA, 15%, 17well (Wako Pure Chemical Industries, Ltd. cat. no. 194-15881)

lUpper size marker oligoribonucleotide NI800 (34 nt),

5´-AUGUACACUAGGGAUAACAGGGUAAUCAACGCGA-(Phos).
lLower size marker oligoribonucleotide NI801 (26 nt),

5´-AUGUUAGGGAUAACAGGGUAAUGCGA-(Phos).
l10,000x SYBR Gold (ThermoFisher Scientific, cat. no. S11494)l

UltraPure 10% SDS (ThermoFisher Scientific, cat. no. 15553-027)l

T4 polynucleotide kinase (New England Biolabs, cat. no. M0201S). Supplied with 10x T4

polynucleotide kinase buffer.
l

T4 RNA Ligase 2, truncated K227Q (New England Biolabs, cat. no. M0351S). Supplied with

PEG 8000 50% w/v and 10x T4 RNA ligase buffer

日本 RNA 学会 会報 No.37- 39 -

l

Preadenylated linkers at 20 µM

lOligo Clean & Concentrator (Zymo Research, cat. no. D4060)l

10 mM dNTP mix (New England Biolabs, cat. no. N0447L)l

ProtoScript II (New England Biolabs, cat. no. M0368L). Supplied with 5x first-strand buffer

and 0.1 M DTTlReverse transcription primer, NI-802,

5´-(Phos)NNAGATCGGAAGAGCGTCGTGTAGGGAAAGAG(iSp18)GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTC.
l

1M Sodium hydroxide (nacalai tesque, cat. no. 37421-05)

l

CircLigaseII ssDNA ligase (Epicentre, cat. no. CL9025K). Supplied with 10x CircLigaseII

buffer, 5 M Betaine, and 50 mM MnCl2.
l

Forward library PCR primer, NI-798,

5´- AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGACGCTCl

Indexed reverse library PCR primers,

NI-799,5´-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCGTGATGTGACTGGAGTTCAGACGTGTG
lPhusion polymerase (New England Biolabs, cat. no. M0530S). Supplied with 5x HF buffer.

l

Gel Loading Dye, Purple (6×) (New England Biolabs, cat. no. B7024S)

l

SuperSep DNA, 15%, 17 well (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 190-15481)

lDNA-1000 kit (SHIMAZU BIOTECH)l

GelStar Nucleic Acid Gel Stain 10,000× (LONZA, cat. no. 50535)

l

100 bp DNA Ladder (TAKARA BIO, cat. no. 3407A)

l

NucleoSpin Gel and PCR Clean-up (TAKARA, cat. no 740609.250)

Equipmentl

DNA LoBind Tube 1.5 ml (eppendorf, cat. no. 022431021)l

8-strip PCR tube with lid (BIO-BIK, cat. no. 3247-00)lNunc 50mL Conical Sterile Polypropylene Centrifuge Tubes (ThermoFisher Scientific, cat.

no. 339652)
lEppendorf Tubes 5.0 ml (eppendorf, cat. no. 0030122313)

日本 RNA 学会 会報 No.37- 40 -

l

Low retention filter tips (greiner bio-one, cat. nos. 771265, 773265, 738265, and

750265)lShort 10 µl filter tips (watson, cat. no. 1252-207CS)l

Wide Bore 200 µl filter tips (Axygen, cat. no. TF-205-WB-R-S)l

Gel loading 20 µl filter tips (ThermoFisher Scientific, cat. no. 2155P)

lRefrigerated microcentrifuge (TOMY, cat. no. MX-307)l

Qubit 2.0 Fluorometer (ThermoFisher Scientific)lOptima MAX-TL Ultracentrifuge (Beckman, cat. no. A95761)l

TLA 110 rotor (Beckman, cat. no. 366735)l

Dry block heater (Major science, cat. no. MC-0203)

l

EasySeparator (Wako Pure Chemical Industries, Ltd. cat. no. 058-07681)

lElectrophoresis power supply (Amercham Biosciences, cat. no. EPS301)

l

Blue light illuminator and orage filter cover (NA). A standard UV transilluminator can beused instead.
lRazors (Feather, cat. no. FAS-10) or (Feather, cat. no. No 11 stainless steel)lSpin-X centrifuge tube filter 0.22 µM (costar, cat. no. 8160)l

Thermal cycler (Applied Biosystems, cat. no. 2720)l

DynaMag-2 separation rack (ThermoFisher Scientific, cat. no. 12321D)l

MixMate (eppendorf)lMultiNA (SHIMAZU BIOTECH)l

Disposable homogenizer pestle R-1.5 (ASONE, cat. no. 1-2955-01)

Custom Linker Barcodes
Index

PrimerBarcodeOligo sequence1

NI-810ATCGT

5´-/5Phos/NNNNNATCGTAGATCGGAAGAGCACACGTCTGAA/3ddC/

2NI-811AGCTA

5´-/5Phos/NNNNNAGCTAAGATCGGAAGAGCACACGTCTGAA/3ddC/

3NI-812CGTAA

5´-/5Phos/NNNNNCGTAAAGATCGGAAGAGCACACGTCTGAA/3ddC/

4NI-813CTAGA

5´-/5Phos/NNNNNCTAGAAGATCGGAAGAGCACACGTCTGAA/3ddC/

5NI-814GATCA

5´-/5Phos/NNNNNGATCAAGATCGGAAGAGCACACGTCTGAA/3ddC/
日本 RNA 学会 会報 No.37- 41 -

6

NI-815GCATA

5´-/5Phos/NNNNNGCATAAGATCGGAAGAGCACACGTCTGAA/3ddC/

7NI-816TAGAC

5´-/5Phos/NNNNNTAGACAGATCGGAAGAGCACACGTCTGAA/3ddC/

8NI-817TCTAG

5´-/5Phos/NNNNNTCTAGAGATCGGAAGAGCACACGTCTGAA/3ddC/

PCR Indexing Primers
Index

No. Oligo

Oligo sequence

ATCACG

1

NI-799 5´-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCGTGATGTGACTGGAGTTCAGACGTGTG

CGATGT

2

NI-822 5´-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATACATCGGTGACTGGAGTTCAGACGTGTG

TTAGGC

3

NI-823 5´-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGCCTAAGTGACTGGAGTTCAGACGTGTGTGACCA

4

NI-824 5´-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTGGTCAGTGACTGGAGTTCAGACGTGTG

ACAGTG

5NI-825 5´-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCACTGTGTGACTGGAGTTCAGACGTGTG

GCCAAT

6

NI-826 5´-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATATTGGCGTGACTGGAGTTCAGACGTGTG

日本 RNA 学会 会報 No.37- 42 -RNAエッセイ『走馬灯の逆廻し：RNA研究、発見エピソードの数々』

10. 40 年ぶりの Reunion
古市

泰宏

南オーストラリア、アデレード

昔、1974~75年ごろ、米国ロシュ分子生物学研究所で、一緒にmRNAキャッピングの仕事をした4人の研究者が、今年10月に、夫婦づれで南オーストラリアのアデレードという古い町に集まり、1軒の家を借りて久しぶりの邂逅（Reunionと呼ぼう）を楽しんだ。日本からは私と家内、アメリカからはNuss夫妻（ドナルドとクリスタ）、オーストラリアのメルボルンからAbraham夫妻（ゴードンとアルテア）、シドニーから幹事役のBoth夫妻（ジェリーとキャロル）の合計4組8人だ。幸い、どの組も離婚しなかったから、昔からの知り合いで、お互いに子供達の名前も憶えている。そんな４組だ。

アデレード飛行場の荷物受取場で、全員が落ち合ったが、すぐにお互いが判った。そして、かわるがわるに熱くハグをした。私自身は、個別に、男性陣とは1~2度会っているが、家内などは、ほんとうに40年ぶりの再会だった。最近は、ネット交信があり、フェイスブックで互いに写真を見ているから、全く遠い人
ではないが、ハグで相手を抱いていると一挙に40年も昔へ、タイムスリップするから不思議だ。そして、
この8人で3日間を、４ベッドルームの家で、自炊しながら暮らし、語り合った（写真１）。4組の夫婦の中では老生夫婦が最年長だったので、それを理由に、マスターベッドルームを主張して我々が使った。古い家だったが、バスルームも二つあるので、快適に過ごすことができた。

語りつくせぬ思い出

40年前、ジェリーと私のボスはAaron Shatkinだったが、彼は3年前に亡くなっていて、もういない。ドナルドとゴードンは隣のラボのポスドクだったが、Shatkinを中心に大きな家族のようなグループになっていたので親しくしていた。クリスタは、一時期Shatkinの秘書をしていたこともあって、いうなれば、
このグループのReunionは、先生が亡くなった後の小学校の同級会に似た雰囲気がある。朝食と夕食はこの家の台所で手わけして作る。最初の夕食は、やはり地元料理のラムチョップだ。この土地の赤ワインとよく合っておいしかった。昼は、2台のレンタカーに分乗し、ピクニックに出かけた。

日本 RNA 学会 会報 No.37- 43 -

40年以上も年月を過ぎると、話題は多いので、Reunionも3日間ほども時間がなければ、話はつくせない、―――その昔に失敗した実験のこと、家族のこと、友人たちのこと、孫のこと、持病のこと、トランプ大統領への不満など、思い出や話題はいくらでも出てきて尽きることがない（写真２−①）。私達は、いうなれば、若い時の戦友である。命をかけて闘ったわけではないが、将来をかけて、発明と発見を目指して、
日夜、一生懸命実験した仲間だ。Nature誌やCellなどへの採択も数報あったろうか、良い論文もたくさん書いた。そして論文が採択されると、トップネーム著者のアパートでパーティーを開いて祝いあったりしたものだ。

友人のルーツを探るピクニック

このReunionは、ジェリーとキャロルが育って、出会ったオーストラリアの故郷の町を、友人たちに見せたいというところから始まっている。そんなことで、昼間はピクニックにでかけ、二人が出会ったアデレ
ード大学の構内の小道、ジェリーの育った故郷の田舎町、生家（もう他人の家になっていた）、お使いに行った町の肉屋（昔と変わらぬ店舗だったので、夕食の食材を買って帰った）などなど、へドライブしてルーツを確認した。幸い、天気も良かった。ドイツから、200年ほど前に、この地にやって来たジェリーの祖先が眠るBoth一族の墓地も皆で探訪した（野原の藪の中にあった）。その昔、ジェリーとキャロルが、我々に話して聞かせてくれた故郷の町と、彼らのルーツがこれでよく分かった。家では、朝食と夕食を作ったり、皿洗いも手分けして、まかなったが（写真２−②）、昼食は、海辺の鮮魚レストランへ行ったり、ワインで有名なBarossa

Valleyのワイナリーのビュッへで楽しんだ（写真２−③、④）。そんなことで、あっというまに3日間が過ぎてしまった。

このように昔の仲間と過ごした3日間は、ことのほか快適で意義深いものであったので、健康に気を付け、また2年後にはどこかで、やろうということになった。Nuss夫婦の別荘があるフロリダが、次の最有力候補であるが、その次は日本であろうか。私には別荘はないので、五箇山の古民家あたりを借りてやってはどうだろうかと、考えているところであるが、ーーまず、4年後に、皆が元気でいることを願うばかりである。

このエッセイを読まれる多くの若い方は、研究者ではなかろうかと想定している。研究者は、私もそうだ
が、大抵は、貧しい。そして、研究稼業は、大学であれ企業であれ、地道で、根気のいる稼業である。ただ、夢を見ることはできる。論文や主張の記録は残る。友人との（ときにはライバルとも）コミニケーシ
ョンを欠かさなければ、老境に入っても、貧しくても、健康であれば、こんな国際的なReunionを、先々に、楽しめる稼業であることをお伝えしておきたい。さて、このエッセイでは、毎号、RNA関連の発見に

日本 RNA 学会 会報 No.37- 44 -

絞ってエピソードを紹介して来ているが、折角だから、10月のReunionにあつまった友人たちの発見についても紹介しておこう。

Cap-olignucleotideスカベンジャーdecapitase DcpSの発見

ドナルドとはキャップオリゴを壊すDecapitase DcpSを発見し、1975年にCell誌、1977にJBCに発表した（論文70−71）。彼は隣のラボの米国人ポスドクだったが、若い研究者の交流が盛んな研究所だったので、土日には、ソフトボールなどをやって一緒に楽しんだ。ドナルドは生粋のアメリカ人だが、ドイツ人Koch博士の研究室で、ポリオウイルスの研究をやっていた。彼は、私の隣のベンチでタンパク合成の研究をやっていたジェリー（第５話に登場）からキャップのタンパク合成における重要性を聞いていたので、ソフトボールの帰りのビールを飲んでいる時、私に色々聞いてきた。キャップがタンパク合成に必要であ
れば、キャップを持っている壊れた小RNAは，タンパク合成を調節するかもしれない。ならば、それを調節するための、キャップを壊すスカベンジャーDecapitaseがあるに違いないということで、共同研究をはじめた。ソフトボールの後は、話題は米国の風習などサイエンス以外のことが多いので、耳を傾けているばかりではあったが、サイエンスや実験のこととなると話は違う。

パブのペーパータオルに鉛筆で絵をかきながら、二人で実験計画を練り、共同研究がはじまった。その結果、そのようなデキャピターゼ酵素DcpSが見つかって、Cell誌に発表した70。この酵素は、残念ながら、長いmRNAのキャップは壊さないが、小さなRNAについているキャップを効率よく壊すことができた。レ
オウイルスなどの転写では、短い脱落転写物（キャップオリゴ）がたくさんできるが（文献72）、そのよ
うな邪魔なCapオリゴを掃除するための酵素かも知れない。その後、ドナルドは、メリーランド大学の教授として植物に感染するカビの研究で有名になり、NIHのグラントが切れたところで、今年ついに72歳で引退した。しかし、中国人教え子へのアドバイスなどもあって、今回のReunionは、中国の荒廃したサトウキビ畑を視察した後、講演旅行を終えてから参加している。

VSVの不思議な転写初期反応の発見

ゴードンはインド人Banerjee博士のポスドクで、VSV（ウシ水疱性口内炎ウイルス）のin vitro転写反応のメカニズムを調べていたが、筆者がReovirus で発見したCappingメカニズムと違うメカニズムを見出していた。VSVは、長い一本のマイナス鎖RNA遺伝子とRNAポリメラーゼ（含キャッピング活性）を持ち、モノネガウイルスとも言われ、RNAポリメラーゼ（Lタンパク）は、試験間内では５種類のキャップを持
つmRNAを作る。ゴードンが詳細にしらべると、５種類のmRNAが作られる前に、5 末端にpppAを持つ

日本 RNA 学会 会報 No.37- 45 -

47-merの、小さなRNAが出来ていることを見つけ、ゴードンはこれにLeader

RNAという名前を付けた。

同時に、VSVのmRNA合成やCappingは他のウイルスと全く違うことがわかった。VSVの５種類のmRNAは、m7GpppAm̶を共通に持つが、レオウイルスや宿主細胞のメカニズムと違い、GpppAm−RNAが最初にできる。それに加えて、GpppAmの前にできるGpppA-RNAのでき方も、通常のEnz-pGとppN-RNA
をつかうキャッピングではなく、L-pA-RNAへppGが付加して、pA-RNAをGpppA-RNAへとグアニジル化する反応であり、VSVに特徴的な反応と思われた。

これは、筆者が提唱していたレオウイルスや宿主細胞で起こるメカニズムとは異なる、一本鎖（−）RNA
ウイルスに特異的な反応であるらしい。この現象を、ゴードンはCellとNature誌へ投稿して発表した。そして、彼はそのあと故郷のオーストラリアへ戻っていったが、我々との絆は切れていなかった。ただ、彼のVSV分子メカニズムは解明されることなく、謎のままで、30数年が過ぎた。しかし、この謎は、2010
年、野本明男さんの研究室出身でBanerjee博士の研究室（米国Cleveland Clinic）へ留学した荻野朝朗博士（現Case Western Reserve 大）によって解かれることになる73。長く続いた謎が、日本人によって、しかも野本さんの弟子によって解かれたことは、筆者には、誠に嬉しいことであり、親しい友人でもある
Banerjeeへエールをおくりたい。また、この発見については別の機会に紹介したいが、インフルエンザウ
イルスのCap-snatching反応をターゲットとして抗インフル薬が生まれる最近の創薬事情からすれば、VSVに見られるこのキャッピング反応をターゲットとする抗ウイルス剤の創薬も大いに期待される。

ゴードンとは別の記憶もある。40年前のある日、ゴードンと筆者が二人でいた時、彼はコッソリ思いがけない質問をした「日本人はオーストラリア人を恨んで（resentして）いないか？」との問いのである。
「え！、Why? 何故？」と私は答えた。「俺たちは、先の大戦で日本と戦ったが、ひどくやっつけたので、日本人はオーストラリア人を恨んでいるのではないかと、実は心配している。お前はどうだ」とのことである。
その時の、私の答えは恥ずかしい。
「え？日本は米国とは戦ったが、オーストラリアとも戦ったのかい？」。
実は、そうだったのである。北のDarwinや南のSydney港を日本海軍に攻撃されて、オーストラリアも大戦に参戦したのである。日本軍の参謀も、馬鹿なことをしたものである。Reunionでは、この時の会話を二人とも憶えていて笑った。

奥さんのアルテアも印象深い。昔、夫の論文がNature誌にアクセプトになった時、お祝いに大きなチーズ
ケーキを作り、夫に持たせて、グループの研究集会へ届けてきた。「そんなこともあったわね」という昔話なのだが――、それを憶えている人、いない人、――とりとめもない会話ではあるが、これが結構楽し
く、夜遅くまで語り合った。忘れずにコメントするが、――アルテアはそんな気配りができる素晴らしい女性で、Reunionの料理も彼女が仕切っていた。

日本 RNA 学会 会報 No.37- 46 -

Cap-dependent

Translation

Wheat germ（小麦胚芽抽出液）のタンパク合成系を何処からか仕入れてきて、最初に、レオウイルスのCap-mRNAがキャップレスのmRNAより格段に良く蛋白質を作るという衝撃的な結果を出したのはジェリーだった。先に第５話で書いたが、ボスのShatkinがメチル化された（つまりCapを持った）mRNAのタンパク合成能は“変わりなし”と間違った結論の論文を出していたのだが、ジェリーのデータは文句のつけようもなく、その結果をもとに、論文をNature誌へ発表した74。その辺の、矛盾というか、違いを突っ込まれると「左手で、反時計回りに、小麦胚芽をすり潰したから、活性が強かったからさ」などとジョー
クで問題を躱した話などきわどい話も出た。ちなみに彼は左利きだ。その後、オーストラリアCSIROという日本の理化学研究所のような国立研究所で、遺伝子工学などでタンパクの生産を目指したりしていたが最近、停年になり「悠々自適」の生活に入っている。

あとがき

今年春、第９話（PCRの発見）を終えてから、パソコンが壊れ、買い替えたものの使い勝手が悪かったり、書きたい話題はあるものの体調がよくなかったり、あるいは、老生に久しぶりの学会発表（RNA学会富山大会、日本がん学会）の機会があったりして、このエッセイを書く余裕が失われていたのだが、このオーストラリアでの旧友達とのReunionの話をキッカケに復活するつもりでいる。乞うご期待。

写真１：

40年ぶりに集まった、1970代のRNA研究者

左から、筆者、ジェリー、ゴードン、ドナルド

日本 RNA 学会 会報 No.37- 47 -

写真２―①〜④：グループスナップ写真① ：左から時計回りに、ゴードン、ドナルド、キャロル、クリスタ、アルテア、イクコ、筆者② ：クッキング中③ ：Adelaideの市政宣言アーチ型記念樹にて記念写真④ ：グループ写真（ワイナリービュッフェにて）

日本 RNA 学会 会報 No.37- 48 -RNAエッセイ『走馬灯の逆廻し：RNA研究、発見エピソードの数々』

11. 一品目の新薬から 3.4 兆円評価の製薬会社への躍進

古市泰宏

創薬研究：Clozel博士の実験ノートから

1985年、筆者はキャップの研究から離れ、帰国して鎌倉のロシュ研究所で創薬研究をはじめた。きっかけは、スイス・ロシュのClozel博士の実験ノートからだった。第9話のPCRで紹介したロシュ研究トップのドレーブス氏（Dr. Drews）が彼女の実験ノートのコピーを私に見せたのである。そこには、内皮細胞の培養液中には、血管を攣縮する（ぎゅっと引き締める）活性を持つ物質が出ているというデータが示されていた。血管が攣縮すると内容積が減るから、血圧が上がるのである。実験ノートからは、その物質は、ペプチド性の小さな化合物であることが読みとれた。

ドレーブスは言った「Closelの専門は薬理で、グループは小さい。ロシュでは30名ほどのグループでなけ
ればプロジェクトとして予算をつけられない。分子生物学の君のグループと薬理学のClozelのグループを合わせれば良いサイズのグループになる。未知の部分が多いが、やってみないか？」。――ということは、
日本とスイスのグループで（ロシュの歴史で初めての国際連携チームで）、血圧を調節する新規のメカニズムを探り、薬を探さないかということである。私は、創薬のプロジェクトは初めてであったが、このプロジェクトは面白いと思った。即受けた。Clozelの発見のきっかけが素朴でとてもいい。その発見を血圧を下げる薬の発見につなげたいと思った。

米国からの帰国の際に、新しい研究部（分子遺伝部）を創ってもらったり、外国人ポスドク2名に加え大学院生も連れ帰ったり、いろいろ我儘を聞いてもらったロッシュには、良いヒットを飛ばして創薬で恩返したいという気持ちも強かった。そして、このドレーブスによる合同チームは成功だったように思う。後
年、紆余曲折はあったが、Clozelはこの発見から、粘り強く肺高血圧症の特効薬の開発研究をすすめ、多くの患者さんを救うことになる。やがて彼女は、ロシュからスピンアウトしてアクテリオン社を創業し、副社長として、プライベートジェット機で世界を飛び回るFlying Scientist “Madam Clozel”となるのであるが、これは得難い懐かしい記憶でもあり、紹介したい。

日本 RNA 学会 会報 No.37- 49 -

筑波大医の大学院生柳沢正史博士らによるエンドセリンの発見

そんなことで、私は、バーゼルへ頻繁に通うようになった。Clozel博士はフランス人で、名前をMartine
Clozelという。Martineと書くと男性のマーチンと間違えそうだが、女性である。だから、私は彼女をマルチーナと呼んだが、マルチーナは活発で、気が強い、テニスも上手だ。その当時、私もテニスをやっていたので、その点でも二人は気が合った。さて、バーゼルと鎌倉の双方で研究スタッフをリクルートしたりしているうちに、1988年、驚きの新発見がNature誌に発表された。筑波大医学系大学院学生の柳沢正史博士（現テキサス大教授）らによるエンドセリンの発見である75。そこでは、エンドセリン（以後ETと略す）は21個のアミノ酸からなるペプチドであり、強力な血管収縮作用を持つことが示されていた。何ということ、マルチーナの実験ノートに記載されていた正体不明の物質はETだったのである。そして、柳沢博士らの研究から、ETにはアミノ酸組成の異なるET-1,-2,-3の3種のサブタイプがあることがわかった。

さて、これでリガンドとしてのETが判ったわけだが、次にはETと結合するレセプター（受容体）の問題が残った。リガンドが3種類あるからには、受容体も複数個あると思われた。化合物スクリーニングの方は、125

Iで標識した放射性のETペプチドが作れるようになったので、血管平滑筋細胞上の（まだ未知の）受容体へ、ET-1が結合する際に阻害する化合物（アンタゴニスト）のスクリーニングが加速された。運よく、かなり早い時点で、ロシュ社が以前合成したことのあるスルフォンアミド系化合物ライブラリーの中から、いくつかのヒット化合物が、――例えばRo46-2005が――ETアンタゴニスト候補として見つかった。ア
ンタゴニストとは、リガンドと拮抗して、リガンドが受容体への結合するのを阻害する化合物である。

エンドセリンレセプターの発見

一方、ETと結合する受容体を探索する研究競争が世界中でスタートした。受容体が血管を構成する内皮細胞や血管平滑筋細胞の膜表面にあるタンパク質であることが判っていたので、我々も近くの病院から胎盤を分けてもらい、そこからETと結合する受容体・タンパクを精製・同定するチームと、mRNAをcDNAへ
変えて、発現クローニング（Expression Cloning）で、受容体遺伝子を探す二つのチームを作って、クローニング競争に加わった。しかし、ほどなく、京都大グループ76がET-1と強く結合するウシETA受容体を、筑波大グループ77が、3種のリガンドに同じように結合するラットETB受容体を発現クローニングにより明らかにした。ET受容体は、Gタンパク結合型・7回膜貫通タンパクであった。実際、この二つのグループの活躍は素晴らしかった。なにしろNature誌の同じ号に“back to back”で、ET受容体を解明する論文を載せたのだから、日本の研究レベルも大したものである。ドレ−ブスも、彼のアドバイザーであるワイス
マン博士も、これには大いに感心していた。日本人による、日本からの研究から、エンドセリン・システ

日本 RNA 学会 会報 No.37- 50 -

ムは血圧制御をつかさどる非常に重要なシステムであることが良くわかり、世界へ発信された。マルチー
ナと我々は、クローニング競争に敗れ、悔しい思いをしたわけだが、マルチーナは強気だった。「いいのよ、私達は。もう化合物を持っているんだからーー」。それは、そうだった。我々の目的は、基礎研究ではなく、薬を作ることなのだから。

リード化合物、ボセンタンの発見へ

さて、2種類のエンドセリン受容体ETAとETBは、学術的には面白いが、創薬には面倒であった。一方で、受容体アンタゴニストの候補化合物は得られたが、一体どちらのレセプターに良く働くようにすればよいのか不明である。しかし、二種の受容体の各臓器での発現が明らかになり、状況がよくわかってきた。ETAとETBはともに重要であるが、肺動脈の血圧などを調節するには、血管平滑筋細胞上でETAを阻害する化合物が良く、それでいて、細胞増殖作用を持つETBへも多少は働く化合物が望ましい。その点、Ro46-2005
はETBへの結合が弱すぎるので化学修飾による最適化が必要だった。そこで、我々は、京都大と筑波大グ
ループのデータを参考にして、ヒトのET受容体ETAとETB遺伝子をクローニングし、遺伝子工学的にバキュロウイルスのシステムで純粋なETAとETB 受容体タンパクを作り、マルチーナの研究室へ送った78,79。

マルチーナの研究室では、二つの受容体を使い、Ro46-2005からスタートして合成した誘導体の中から理想的な結合比を持つリード化合物Ro47-0203を選出することに成功した。さらに、薬理学的な実験を重ね、最終的に、この化合物で先へ進めることにした。この化合物には、のちに伝説ともなる、Bosentan（ボセンタン）というニックネームが付けられた。

＜ちょっと脱線＞「新しい学問は、新しいデザインの建物の中でなければ芽生えない」

ロシュの研究トップのドレーブスは、不思議な経営者だった。彼はオーストリア人で、サンド製薬からロシュへリクルートされ、ロシュの研究全体を統括することになった。第9話で紹介したように、彼の目の付け所と決断力は素晴らしく、PCR権利の取得、ジェネンテク社の買収や、2度にわたる日本での国際創薬シンポジューム開催など、“正解だったな”と思う決断が多い。彼は、「今はもう、分子生物の時代ではない、ゲノムの時代である」として、私の古巣でもあり、世界的に有名になった米国のロシュ分子生物学研究所を閉鎖して、ロシュゲノム研究所（仮名）を新設し、米国西海岸へ移すアイ
デアを進めていた。彼の考えでは、研究所の環境が大事で、新しいゲノム研究はカリフォルニアが良日本 RNA 学会 会報 No.37- 51 -く、大学の近くにあることが望ましい。そこで、筆者は彼の意を受け、Stanford 大学敷地内にあるSyntexという（買収を進めていた）製薬会社の研究所を見に出かけた。

近くには、上代先生や新井賢一さんがいるDNAX研究所があるので、この旅は実り多かった。ドレー
ブスへは「Syntexの研究所の建物は古い，ただスタンフォード大の敷地は申し分ない」と報告した。
すると、彼は言った、「新しい学問は、新しい建物の中でなければ芽生えない」。新研究所は新所長の意向のデザインで「建て替えよう」ということであった。新研究所は、大学と企業が連携する形で進めるべきである、というのが彼の持論であり、実際その方向で事態は進んでいった。数年後、予定どおり、米国東部にあった分子生物学研究所は閉鎖されたが、スタンフォード大敷地内の新デザイン
建築構想は、大学との折り合いが停滞し、その間に、ドレーブスは社内で失脚し、新しいゲノム研究
所構想は途絶えてしまった。そんなことで、ドレーブスは新風をロシュに吹き込むことに成功したが、最終的には、足元をすくわれて失脚してしまった。まるで織田信長のようなセンスと強い決断力の持ち主だったが、似たような結末を辿ることになってしまったのが残念である。ロシュ引退後は、ＥＵ
経済圏で、ベンチャーキャピタルとして活躍されていると聞いたが、お元気であれば、お会いして思い出話をしたいものである。

分子生物学技術の紹介

PCR技術もそうであるが、ドレーブスのオープンイノベーションのスピリッツもあって、私は、国際シンポジュームの開催や、国内への創薬技術の紹介を進めたが、以下はその数例である。

（i）Max Summers の発明になるバキュロウイルス・システムの紹介

この時代、多量のタンパク質を大腸菌の中で作ることはできたが、大きな分子量のタンパクを活性ある形で作ることは難しかった。筆者は、テキサス大のウイルス学者のMax Summers博士から、彼が1970年代に発明したバキュロ・ウイルスシステム（昆虫細胞の中でバキュロウイルスベクターを使ってタンパクを作らせる技術）80を教わっていたが、この技術は受容体タンパクや酵素を活性のある形で作ることが出来た。Maxは、荒々しく見える気性で、怖がられる男だったが、私には優しかった。
共に、蚕に感染するウイルスを研究する間柄だったから、話が合ったのかもしれない。この技術は日本の創薬技術のために必用であると思ったので、同僚の宮本力博士と詳細なプロトコルを「蛋白質・核酸・酵素」で紹介した81。この技術はまた、膜結合型のタンパクであれば、組換えタンパクを発現中の細胞を、“生きているままに使って”、リガンド結合アッセイができる。しかも一細胞あたり10万

日本 RNA 学会 会報 No.37- 52 -

個以上の受容体分子などを細胞表面に並べることができるので、鋭敏なアッセイが出来るので便利であった82,83。

（ii）6x Hisタグ付きの、組換えタンパクの作成技術の紹介

大腸菌やバキュロシステムにより遺伝子工学的に産生させた組換えタンパクを活性ある状態で抽出し精製する技術として、ロシュ社内で使われていた便利な技術があった。

あらかじめ蛋白質のN末端やC末端に6個のヒスチジン（His）をつけておき、この6x Hisをタグとして,緩和な中性pH条件下で、ニッケルキレート・レジンカラムに吸着させ、カラムをよく洗浄した

後、目的とする6x Hisをつけたタンパクをヒスチジン溶液、あるいはEDTA溶液により溶出するという、タンパク精製の方法である。現在ではお馴染みの、技術になっていると思うが、最初は、先に述べたETAとETBレせプター・タンパクの作成に使われ、ボセンタンの選抜に使われたという輝かしい実績を持つ。

Clozelらによるアクテリオン社の創立

1991年、これまでボセンタンを育ててきた研究者たち全員がバーゼル・ロシュ本社の大会議室に集り、研究データを発表して、血圧降下薬を目指した医薬品開発へ向かうことを決意する記念する日があった。
当然、私も日本から駆けつけた。丸一日かけての議論の結果、ボセンタンをヒト臨床試験へ向けて開発を進めることを、上部の役員会へ上奏することに決まった。これはチームにとって、すこぶる嬉しいことであり、（スイス風の喜び方だが）全員が机を割れんばかりに叩いて祝福した。比較的短期間に、順調に、
このステージにまで来れたのは、「ボセンタンが運のいい化合物だから」と言わねばならないが、社内的には、ロシュ内で初の国際連携が成功したことも、好意的に支援されたもう一つの理由だったかもしれな
い。マルチーナや彼女の研究パートナーのウオルター博士（Walter Fishli）は共に薬理学の専門家であるから、ボセンタンに付き添って臨床開発へ進むことになったが、鎌倉の我々は、ここでボセンタンとはお別れである。

アクテリオン社の設立

さて、その後のボセンタンであるが、順調に臨床試験フェーズ１を進み、投与量などを決めるフェーズ2へ入った。しかし、ここで予期せぬことが起り、ボセンタンの運命は変わるのである。いや、マルチーナ

日本 RNA 学会 会報 No.37- 53 -

やウオルターの運命が変わったというべきなのかもしれない。それは、欧州内で行われた臨床試験中に、多量のボセンタンを投与されていたボランティアに死亡事例がでて、これを重く見たロシュは、ボセンタ
ンの医薬品開発を中止してしまうのである。

これ以前に、このプロジェクトを離れていた我々はともかく、期待の化合物ボセンタンに付き添っていた
マルチーナと彼女のチームの落胆は如何ばかりであったろうか。しかしそこはマルチーナである。1997
年、彼女の研究チームは、ロシュをスピンオフし、夫君のClozel博士（やはり薬理研究者）を加えて新しいベンチャーを立ち上げて、ボセンタンのライセンスをロシュから受け、肺高血圧症という難病に対する
オーファンドラッグ治療薬として再挑戦したのである。ベンチャーの名前をアクテリオン社という。アクテリオンはマルチーナが副社長で、社長は夫君のClozel博士である、ウオルターは研究担当の重役であったろうか。古くなってしまったが、筆者へ挨拶代わりに送られてきた「アクテリオンの創業者」紹介のパンフレットの写真を示す（写真1）。

（写真１：アクテリオン創立時のマルチーナ（中央）とウオルター（右）、バックに若い研究者）

オーファンドラッグへの挑戦

肺高血圧症は苦しい症状の病気で、症状を軽減する治療薬がない難病である。患者の肺では、ETA受容体が高発現し、ET-1により肺動脈が局所的に高血圧になっているこの病気に対して、幸いなことに、ボセン
タンは、オーファンドラッグとして肺高血圧症治療薬として認可され、見込みどおり、よく効いたのであ日本 RNA 学会 会報 No.37- 54 -

る。筆者は、血圧というのは全身性のものであるとばかり思っていたので大変驚いた。朗報を伝えるマルチーナからのメール（2002年）には、肺高血圧症の患者さんからアクテリオンへ寄せられた感謝状のコ
ピーが付されていた。そう、「ボセンタンは、よみがえって、お役に立った」のである、我々も嬉しかった。

ボセンタンという化合物名は、新しい医薬品名Tracreer (日本名トラクリア)をもらい、現在では世界中で使われるようになった。これまで、大手の製薬会社は、患者数が少ない分野の医薬品について、売り上げ額が少ないことから、開発を避けてきた傾向がある。しかし、アクテリオンはこのジンクスを最初に破って、オーファンドラッグで成功した製薬会社となった。患者数は少なくても、競合薬品が少なく、高い薬
価で、生涯服用し続けてくれる患者がいる医薬品は、安定して利益率が高いのである。アクテリオンは販売を独自で行う戦略をとり、世界中に子会社のアクテリオン・ファーマシューティカルズを作り、各国の医療機関へTracreerを供給している。研究所もバーゼル以外に米国西海岸に作り、後継品を創ったりしな
がら、会社自身も大きく育ち、社員も増え、新医薬品開発のパイプラインには次の医薬品候補が多々詰まっているとのことである。マルチーナが自家用ジェットで飛び廻らねばならないのは当然のことである。

あとがき

1品目の新薬発見から製薬ベンチャーとして大成功を収めることになったこの話は、研究開発医薬品業界のアメリカンドリームのようなものである。薬の都と呼ばれるスイス・バーゼルでは、今や、アクテリオ
ンはノバルティスやロシュに次ぐ第3の新薬メーカーとして有名であるといってよい。このことは、真に役立つ医薬品であればたとえ1品目の成功でもよく、事業戦略を誤らなければ、小さなベンチャーも、世界的な企業へ躍進できるということの証でもある。今後、若い日本人研究者にも、こんな活躍を期待したい。

アクテリオンは現在、世界に約20社の子会社を持ち、本邦でも東京にActelion Pharmaceuticals Japanがある。昨年の経済関連誌のニュース（昨年1月27日）から知ったことであるが、Actelion社は、時価総額が3.4兆円で買収され、米国ジョンソン＆ジョンソンの傘下に入ったとのことであり、その大化け振りには驚くばかりである。本邦の製薬会社の時価総額と比べると、一体、どのあたりにランクされるのであろうか。他人事ながら興味深い。数年前、筆者がバーゼルのアクテリオン本社を訪問した時には、マルチーナは有名イタリア人設計になる素晴らしい研究所・センターを嬉しそうに案内してくれた。多くの若い研究者達に“昔の、Bosentanの発見時の協力者よ”と紹介して回ってくれたのが懐かしい。秘書達やスタッ

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フは、彼女を“マダムClozel”と敬称で呼んでいた。先に紹介したマリリンといい、ここで紹介したマルチーナといい、私には、素晴らしい発見をする女性と出会う運があるようである。

（写真２：アクテリオン研究センター/バーゼル；この新しいデザインの研究所から新しい発見は出るだろうか、期待したい）

あとがき（続）より最近のことであるがーー、昨年(2017年秋)のメール交換から、マルチーナが大企業の傘下に入ったア
クテリオンからさらに、再独立して、夫君とイドルシア（Idorsia）という別の新会社を作ったことを知って驚いた。自分で開発したいEarly phaseの化合物があるので、大企業からの指図なしにやりたいのだという。そのように、マルチーナは、強い、素晴らしい女性である。筆者も、"老生"などと言って、のんび
り老いてはいられないような気がするーー元気をもらうとか、勇気をもらうというのは、こういうことであろうか。

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日本 RNA 学会 会報 No.37- 64 -

学会本部から
第9期評議員会

議事録（21）

相馬亜希子（庶務幹事） Akiko Soma (General Affairs Secretary)

日時：2017年9月24日（日）〜11月15日（水）場所：メール会議

議題配信先（50音順、敬称略）
評議員： 稲田利文、影山裕二、片岡直行、黒柳秀人、塩見美喜子（会長）、鈴木勉、谷時雄、中川真一、廣瀬哲郎、
藤原俊伸
オブサーバー：矢野真人（会計幹事）、井川善也（第19回年会幹事）

議事：

１．年会ベストプレゼンテーション賞優秀賞への副賞について

年会ベストプレゼンテーション賞優秀賞に対し、副賞として賞状を授与することが提案された。また、青葉賞と僅差の優秀賞（特別）の受賞者には国際学会参加経費の助成を行うことが提案された。審議の結果、優秀賞および優秀賞（特別）受賞者に対して賞状を授与すること、優秀賞（特別）受賞者には海外での成果発表の為の資金（上限１２万円）を援助することが決定した。

日本 RNA 学会 会報 No.37- 66 -

第9期評議員会

議事録（22）

相馬亜希子（庶務幹事） Akiko Soma (General Affairs Secretary)

日時：2017年11月22日（水）〜11月27日（月）場所：メール会議

議題配信先（50音順、敬称略）
評議員： 稲田利文、片岡直行、黒柳秀人、塩見美喜子（会長）、鈴木勉、谷時雄、中川真一、廣瀬哲郎、藤原俊伸（本件の申請施設に所属する影山裕二評議員を除外して審議を行った。）

配付資料
依頼文書、要望書（雛形）、参考資料（センターの活動実績等）

議事：
１．神戸大学バイオシグナル総合研究センターの「バイオシグナル創薬共同研究拠点」の活動状況に関する意見・要望書について神戸大学バイオシグナル総合研究センターの菅澤薫センター長から塩見美喜子会長宛に、「バイオシグナル創薬共同研究拠点」の設置に関する関連資料を添えて要望書の依頼があった。依頼元である神戸大学および共同で申請する名古屋大学や愛媛大学には複数の会員が在籍することや、採択後の共同研究の公募やRNA研究に関わる研究者に対する研究環境の整備が期待できることなどを考慮して原案を作成し、評議員会での確認と了承を得て、塩見会長名の「意見・要望書」を神戸大学バイオシグナル総合研究センター宛に送付した。

平成31年度からの国立大学における共同利用・共同研究拠点の認定について
http://www.mext.go.jp/a_menu/kyoten/1397836.htm

日本 RNA 学会 会報 No.37- 67 -

第9期評議員会

議事録（23）

相馬亜希子（庶務幹事） Akiko Soma (General Affairs Secretary)

日時：2018年2月28日（月）〜3月9日（金）場所：メール会議

議題配信先（50音順、敬称略）
評議員： 稲田利文、影山裕二、片岡直行、黒柳秀人、塩見美喜子（会長）、鈴木勉、谷時雄、中川真一、廣瀬哲郎、
藤原俊伸

配信元
庶務幹事：相馬亜希子

配付資料
第34回（平成30年度）国際生物学賞受賞候補者の推薦について（通知）第15回（平成30年度）日本学術振興会賞受賞候補者の推薦について（通知）議事：1．第34回国際生物学賞受賞候補者の推薦について
第34回（平成30年度）国際生物学賞受賞候補者の推薦の依頼が独立行政法人日本学術振興会理事長から日本RNA学会の会長宛てに届いたことを庶務幹事から報告した。協議の結果、候補者を一般正会員から公募し、第9期または第10期評議員で構成する選考委員会での選考を経て、応募者の中から若干名を、第10期会長から日本学術振興会に推薦することが了承された。推薦対象者は応募時点で当該年度の年度会費を支払い済みであり、表彰年度も引き続いて会員である予定の一般正会員とした。

2．第15回日本学術振興会賞受賞候補者の推薦について
第15回（平成30年度）日本学術振興会賞受賞候補者の推薦の依頼が独立行政法人日本学術振興会理事長から日本RNA学会の会長宛てに届いたことを庶務幹事から報告した。協議の結果、候補者を一般正会員から公募し、第9期評議員で構成する選考委員会での選考を経て、応募者の中から若干名を、第10期会長から日本学術振興会に推薦することが了承された。推薦対象者は応募時点で当該年度の年度会費を支払い済みであり、表彰年度も引き続いて会員である予定の一般正会員とした。選考委員会は谷評議員、廣瀬評議員、藤原評議員で構成し、谷評議員を委員長とすることが塩日本 RNA 学会 会報 No.37- 68 -

見美喜子会長から提案され、了承された。なお、選考委員と密接に関わる会員からの応募があった場合は選考委員会で対応を協議し、必要に応じて選考委員の交替を含めた適切な措置を取ることとなった。

日本 RNA 学会 会報 No.37- 69 -

第9期評議員会

議事録（24）

相馬亜希子（庶務幹事） Akiko Soma (General Affairs Secretary)

日時：2018年3月20日（火）〜3月22日（木）場所：メール会議

議題配信先（50音順、敬称略）
評議員： 稲田利文、影山裕二、片岡直行、黒柳秀人、塩見美喜子（会長）、鈴木勉、谷時雄、中川真一、廣瀬哲郎、
藤原俊伸
オブサーバー：矢野真人（会計幹事）

配信元
庶務幹事：相馬亜希子

議事：
1．支援依頼があった関連学術集会への支援内容の決定
正会員の伊東孝祐氏（新潟大学）から支援依頼があった「第5回Ribosome meeting」（2018年9月13日（木）〜9月14日（金）、新潟大学中央図書館ライブラリーホール）について、支援内容を記述した支援申請書を詳細に審査した結果、助成金として100,000円を拠出して協賛することが承認された。

日本 RNA 学会 会報 No.37- 70 -

編集後記
北畠真（第 8 期・第 9 期編集幹事）

日本 RNA 学会第 8 期・第 9 期の編集幹事をつとめました、北畠です。

4 年の間、RNA 学会会報の編集を担当していました。いつもぎりぎりのスケジュールで突然にご寄稿依頼をお送りすることになってしまいましたが、こころよく執筆を快諾いただいた執筆者のみなさま、本当にありがとうございました。また、わたしの計画性のなさから、十分な執筆時間をご用意できない状態での依頼となってしまい、結果としてご寄稿がかなわなかった方々も多数いらっしゃいました。大変失礼いたしました。執筆者の方々、読者の方々、裏方で一緒に支えてくれた方々、RNA 学会の会員・非会員を問わず、たいへん多くの方々に会報のために貴重なお時間をさいていただきました。みなさまのご協力により、多様性に富んだ会報の発行を続けることができました。ありがとうございました。

細胞の中に（細胞の外にも）ある RNA は、多種多様な形態をもち、生命現象のあらゆる局面でさまざまな役割をはたしています。同じように、それを研究する RNA 研究者にも大きな多様性があり、そのことがこのコミュニティの持つ、もっとも大きな魅力だと個人的に感じていました。年齢、性別、国籍、専門、立場の異なるさまざまな方々に自由に語っていただき、その多彩な魅力がコミュニティで自然に共有されるようにーー。RNA 学会の外にいる人たちにも、また、30 年後の未来の RNA 学会の人たちにも、現在のこのコミュニティの魅力が伝わるようにーー。そのように期待して会報を作ってきましたが、はたして、どのくらいうまくいったでしょうか？

振り返って考えると、編集者としてもう少しできることもあった

はずだ、という反省もいろいろ思い浮かびます。ーーしかし、編集者はもっとがんばるべきだったとしても、集まった記事の値打ち自体は、すでに明らかではないかーー。いろいろ考えて、その結論に達しました。自分をそのように納得させることにして、この編集後記を終えることとします。

RNA 学会会報の発行にあたり、みなさまからいただいたご協力・ご支援に心から感謝いたします。みなさまに助けていただき、編集は楽しい作業でした。遠いような近いような関係がたくさんあるこの研究分野
で、時に協力し、時に競いながら、楽しく研究していきましょう。

2018 年 4 月

北畠真（日本 RNA 学会第 8 期・第 9 期編集幹事）

日本 RNA 学会 会報 No.37- 65 -