[PRESS RELEASE]2013 年 5 月 16 日
東京大学医学部附属病院
株式会社島津製作所

新開発

冠動脈狭窄症の血液検査法―質量分析技術を用いた新しいバイオマーカー開発―

動脈硬化などにより狭くなった冠動脈（注 1）をカテーテルで治療した後に、その治療部位が完治したかどうか確認する手段は心臓カテーテル検査（注 2）が標準となっていますが、この検査は身体への負担が大きく、費用も高額です。そのため、心臓カテーテル検査に代わる簡易な検査法が求められていました。
このたび、東京大学医学部附属病院 循環器内科・ユビキタス予防医学講座 特任准教授
鈴木亨、東京大学大学院医学系研究科 循環器内科学教室 前教授 永井良三、教授 小室一成は、株式会社 島津製作所 基盤技術研究所 主任研究員 藤本宏隆と共同で、質量分析計（注 3）を用いて新しい血液検査法を開発しました。これにより、冠動脈カテーテル治療後の再狭窄の診断において、心臓カテーテル検査を受ける必要があるかどうかを簡単に検出することができるようになり、身体への負担を軽減できる新しい検査方法となることが期待されます。本研究開発の成果は、クリニカル・ケミストリー（Clinical Chemistry）
電子版にて 5 月 13 日（米国東部夏時間）に発表されました。今後、当院ではこの診断法の実用化を目指します。
なお、本成果は、厚生労働科学研究費、科学研究費（文部科学省）、最先端研究開発支援（FIRST）プログラム（日本学術振興会）、イノベーションシステム整備事業（先端融合領域イノベーション創出拠点形成）プログラム（文部科学省）の支援を受けて行われました。

【発表者】東京大学医学部附属病院

循環器内科・ユビキタス予防医学講座
特任准教授

鈴木亨

株式会社島津製作所 基盤技術研究所 ライフサイエンス研究所
主任研究員 藤本宏隆

【研究の背景】
狭心症の原因となる冠動脈狭窄の治療にはステント（注 4）やバルーン（注 5）を用いた心臓カテーテル治療（注 6）が行われます。しかし、治療後約半年が経過した時点で約 1割～3 割程度、治療部位が再度狭窄を生じることが問題となっています。これは「再狭窄」とよばれています。そのため、日本では、カテーテル治療後約半年経過時に、通常、再狭窄が生じていないかどうかを確認するためにカテーテル検査が行われています。この検査は狭窄を生じている患者さんにとっては必要な検査ですが、造影剤を使用したり、太い注射針を血管に刺したりするため身体への負担が大きく、放射線被曝の問題もあり、さらに費用も高額であることからも、あらかじめカテーテル検査を受ける必要があるかどうかを簡単にスクリーニングすることが可能な血液検査が求められていました。
当院

循環器内科・ユビキタス予防医学講座 特任准教授 鈴木亨 および株式会社島津製作所 基盤技術研究所 ライフサイエンス研究所 主任研究員 藤本宏隆 は 2006 年より、質量分析計を用いて、上記を診断することが可能なバイオマーカーの新規診断法開発の共同研究を行ってきました。
なお、世界の体外診断薬市場は 2012 年に 524 億米ドル規模に達し、今後も年平均成長率7%が見込まれています。また、日本における 2011 年の市場規模は 7,711 億円規模であると報告されています。
【研究の内容】
すでに一般臨床現場で心不全のバイオマーカー（注 7）として利用されている B 型ナトリウム利尿ペプチド（BNP）（注 8）が、冠動脈の狭窄の診断にも応用可能かどうかはこれまで明らかではありませんでした。また、このペプチドは 32 個のアミノ酸がつながってできたペプチドですが、実際の血液中では 32 個のアミノ酸がつながった形態以外の形状で存在しているらしいことも近年世界中で報告されてきました。
研究チームはまず、MALDI-TOF 型質量分析計（注 9）を用いて、患者さんの血液中の BNPの形状を調べ、実際に 4 種類の形状からなる BNP が存在していることを示しました。これらは本来の BNP が持つアミノ酸 32 個からなるもの以外に、端から 2 つのアミノ酸がとれた断片、3 つのアミノ酸がとれた断片、さらに 4 つのアミノ酸がとれた断片でした。
さらに、これらの 4 種類の BNP を、冠動脈の再狭窄を生じた患者さんの血液と生じなかった患者さんの血液で詳細に分析したところ、この病状と BNP 断片（具体的には端から 4つのアミノ酸がとれた断片と 2 つのアミノ酸がとれた断片との比）との間に相関のあることがわかりました。臨床検体の分析数を増やしてさらに検討したところ、適切なカットオフ値（注 10）を設定することで、再狭窄の除外診断（再狭窄が生じていないことの診断）が可能であることがわかり、この BNP 断片が冠動脈カテーテル治療後の再狭窄のバイオマーカーとなり得ることが明らかになりました。
また、これまでのさまざまな研究から狭窄を生じさせるリスクとなる因子として、性差、喫煙、糖尿病、肥満等の病歴が報告されていますが、今回、統計解析を行ったところ、再狭窄が生じるかどうかの因子は、狭窄治療に使用したステントの種類と、今回判明した BNP断片の 2 つだけであることがわかりました。
現在、診断だけではなく将来の予測の診断も可能であるかどうかについて追跡調査を進めているところであり、この成果を社会に還元するべく実用化を目指しているところです。
【用語解説】（注 1）冠動脈
心臓の周囲を冠のように取り囲んでいる血管（動脈）であり、心臓に酸素を供給している。
（注 2）心臓カテーテル検査
カテーテルとよばれるストロー状の細い管を手首またはそけい部（太腿の付け根）の動脈から心臓の血管（冠動脈）や心臓の中まで挿入し、造影剤を注入して冠動脈の状態を見た
り、心室内の圧を測定したり心臓の動きを観察する検査のこと。
（注 3）質量分析計
極めて少量の試料をイオン化し、分離・検出・測定・データ解析を行い、その化合物の質量に関連する情報を得る計測機器のこと。
（注 4）ステント
金属でできた網状の筒のことで、狭くなった冠動脈をカテーテルで広げる治療の時に使用する。近年、再発を予防するための薬剤が溶出するものも使われている。
（注 5）バルーン
狭くなった冠動脈をカテーテルで広げる治療の時に使用する「風船」のこと。
（注 6）心臓カテーテル治療
動脈硬化などで狭くなって、血液が流れにくくなった冠動脈を広げるために、カテーテルを使って治療する方法のこと。バルーンで狭くなった部分を広げたり、またそこにステントを留置したりするという治療法が広く行われている。
（注 7）バイオマーカー
血液や尿などに含まれるタンパク質などの物質で、疾病の存在や進行度を把握するための指標となるもの。
（注 8）B 型ナトリウム利尿ペプチド（BNP）
心臓から分泌されるホルモンの一種で、心不全のように心臓に負担がかかった状態になると心臓（主に心室）から血液中に分泌される。

（注 9）MALDI-TOF 型質量分析計
マトリックス支援レーザー脱離イオン化法（MALDI：Matrix Assisted Laser DesorptionIonization）と飛行時間型質量分析法（TOF-MS：Time of Flight Mass Spectrometry）の組み合わせで質量を分析する装置。MALDI は、生体高分子イオン化において主要な方法となっており、（株）島津製作所 田中耕一が発明した Soft Laser Desorption（2002 年ノーベル化学賞受賞）の発展形である。
（注 10）カットオフ値
疾患の有無を決定するために設定する値のことで、これを境に治療方針を変えたりする。

【発表雑誌】
雑誌名：クリニカル・ケミストリー（Clinical Chemistry）電子版
掲載日時：5 月 13 日（米国東部夏時間）
論 文 タ イ ト ル ： Processed B-type natriuretic peptide is a biomarker of
postinterventional restenosis in ischemic heart disease【参照 URL】
ユビキタス予防医学講座ホームページ
http://plaza.umin.ac.jp/upm/index.html------------------------------------------------------------------------------≪東京大学医学部付属病院

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東京大学医学部附属病院
特任准教授

循環器内科・ユビキタス予防医学講座

鈴木亨

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E-mail：torusuzu-tky@umin.ac.jp
・取材に関するお問合せ
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パブリック・リレーションセンター

担当：小岩井、渡部
電話：03-5800-9188（直通）E-mail：pr@adm.h.u-tokyo.ac.jp

≪島津製作所

お問合せ先≫

株式会社島津製作所

広報室

担当：石川
電話：075-823-1110

E-mail：isikawa@shimadzu.co.jp-------------------------------------------------------------------------------

免疫沈降＋質量分析
質量分析（MS）

免疫沈降法
血液（血漿）

P

P

磁気ビーズ

試験管内で免疫沈降

質量分析計(MALDI-TOF MS）

成熟体

1

P

磁気ビーズ

4 翻訳後修飾体

相対シグナル強度

P

抗体

3

2

1
4
質量（m/z）

2 未成熟体参考図１

本 検出系により左 記 ４ つを区別して検出することが可能
3

プロセシング体

新しく開発した診断手法の概念図

さまざまな物質が存在する血液中において BNP だけを抗体を用いて捕獲する（免疫沈降法）。
BNP は本来の形状（成熟体）以外にも、未成熟体や、一部切断されたようなプロセシング体、さらには翻訳後修飾された形態（翻訳後修飾体）が存在すると考えられる。これら、さまざまな形状の BNP は同じ抗体によって捕まえられる。現在広く用いられている免疫化学的な手法ではこれらを区別して検出することは不可能である。しかし、質量分析計を用いるとこれらは区別して検出することが可能である。

新規バイオマーカーの臨床的有用性

再狭窄あり
正常な血管（冠動脈） 動脈硬化による狭窄

カテーテル

治療後の血管（冠動脈）狭窄部位（治療前）

狭窄部位（治療後）カテーテル治療

カテーテル検査

再狭窄なし

再狭窄の除外診断3.0

p<0.001

フラグメント比BNP断片比

2.5

冠動脈

2.0
1.51.52

カットオフ値

1.52

1.0
n=83

n=220.5

再狭窄なし

参考図２

特異度
100%

再狭窄あり

新規バイオマーカーの臨床的有用性

血管（冠動脈）内に狭窄が生じ、カテーテル治療により治療。その約半年後に再狭窄が生じた場合と生じなかった場合について示した。
カテーテル治療後約半年時点でのカテーテル検査時に血液を採取し、その血液検体中において検出された 2 種類の BNP 断片（端から 4 つのアミノ酸がとれた断片と 2 つのアミノ酸がとれた断片）の強度比を計算後、再狭窄ありと再狭窄なしとの相関を調べたところ、その比との相関がみられた。特に、その比を 1.52 に設定するとそれより大きい値を示した患者ではすべて再狭窄が生じておらず、このことから除外診断の可能性が示唆された。