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

〔総 説〕
「ジルコニウム触媒を用いた 1- オレフィンの不斉カルボアルミネーション（ZACA Reaction：Zr-Catalyzed Asymmetric Carboalumination of Alkenes）」

根岸英一 ……… 2「蛍光色素によるタンパク質内微小環境変化の検出技術とその応用」

並木繁行 ……… 9〈生薬のはなし〉「生薬に関わって想うこと −「柴胡さいこ」について−」

神田博史 ……… 12〈テクニカルレポート〉「ポジティブリスト制関連 動物用医薬品の LC/MS/MS 分析」

吉田貴三子 ……… 14〈寄稿原稿〉「二量体 SOD 酵素の構造変化とその検出法」

西田雄三 ……… 34〔化学大家〕「柴田雄次」

芝哲夫 ……… 31〔製品紹介〕
有機合成

8
ジルコニウム触媒「（-）（NMI）
2ZrCl2」………………
（トリメチルシリル）メチルリチウム・ヘキサン溶液 … 19
環境・分析

ポジティブリスト関連標準品 ………………………… 16
プレセップ ® シリーズ C18（ODS）………………… 19
日本薬局方規格 生薬標準類 ………………………… 19
RoHS 対応用試薬 ……………………………………… 20㈱セルシード 温度応答性 HPLC カラム「アクア・ウェイシリーズ」…… 21
カビ毒溶液 ……………………………………………… 29
培

養

トリプシン EDTA 溶液 ……………………………… 24
細胞培養用 液体培地、平衡塩溶液 ………………… 24
植物発現組換えタンパク質 …………………………… 25

細胞生物・生化学

タンパク質蛍光プローブ「I-SO-IAA」 ……………… 11
ポリアクリルアミドプレキャストゲル「スーパーセップ TM」… 22
タンパク質サイズマーカー …………………………… 23
LPS（リポポリサッカリド） ………………………… 26
がん転移抑制剤「MI-22」 …………………………… 26
グルタミン酸レセプター作用物質 …………………… 27
カイニン酸 n 水和物 ………………………………… 27
ユビキノン -10 ………………………………………… 27
新規阻害剤 ……………………………………………… 28
CaroteNature 社（E/Z ）- フィトエン、（E/Z ）- フィトフルエン ………… 29
電気泳動槽「イージーセパレーター TM」…………… 36
遺 伝 子

DNA メチル化阻害剤 ………………………………… 30

1R

esearchジルコニウム触媒を用いた 1- オレフィンの不斉カルボアルミネーション（ZACA Reaction：Zr-Catalyzed Asymmetric Carboalumination of Alkenes）
パーデュー大学化学科

根岸英一

つ で あ る 不 斉hydrogenationが 発 表 さ れ

１ はじめにた。 そ の 約 十 年 後 の1980年 にSharpless-

３ ZACA 反応の開発と現状

香月の不斉epoxidation 9）（不斉C-O結合生
生体化合物はアミノ酸や炭水化物等で代成反応の一例）、そして野依等 10） の不斉表されるようにキラル（chiral）不斉体が多hydrogenationを含むいくつかの不斉C-Hより長いアルキルを含むオルガノアラン

いにもかかわらず、太古から知られている

結合生成反応開発を経て、「第三の触媒」（organoalanes）を用いた場合の不斉度は酵素反応等を用いることなく人工的に高純を用いた不斉合成は開花した。酵素や他

85- 95%eeと秀れている 19） が、最も重要度の不斉体を合成することは最近迄困難での酸・塩基とは異なるスコープ（scope）

なメチルアルミネーションの場合不斉度あった。1960年代の初めにH. C. Brown等

1）を持つ新規かつ有用な有機合成法としは70- 90%eeと他の場合に比べて明らかにがキラルオルガノボランを量論的に用いたて認められ、2001年度の野依、Knowles、

低い 17）。これはメチル基のみが、α-アゴ

高度（≧95%ee）に不斉なC-H及びC-B結

SharplessのNobel賞受賞につながっていスティックインターラクション（α -agostic

合生成反応を開発した。その二・三年後にる。

interaction） に 由 来 す る と 考 え ら れ る2）

野崎・野依等 がキラル銅錯体を触媒に用いて不斉C-C結合生成反応を発表した。初

二次的不斉インダクション（secondary

２ ZACA 反応の発見

asymmetric induction）に関与出来ないという特性に由来すると考えている 20）。

期の不斉度は約10%と極めて低かったが、上記の銅触媒を用いたオレフィンのシクロ

それはそれとしてこの問題の合成面での端となった。キラル試薬はキラルであるがプロパネーション（cyclopropanation）を除く

改善は目下検討中である。その間に過去

故に一般的により高価なものが多いので触と、遷移金属体触媒を用いた不斉C-C結合

数年にわたってスキーム１に示した反応

媒として用いることが望ましい。三十年以

生成反応の開発はC-HやC-O結合生成反応

を用いて不斉 C-C 結合生成法を開発した

上も前のHajos等 3）の先端的な研究が見直さの開発に比べかなり遅れたと云える。PdやNi

結果予想外に良好かつ広範囲に応用可能

これが遷移金属触媒を用いた不斉合成の発11）

れて、近年活発に開発されるに至ったオル

触媒を用いた玉尾-林-熊田等 の不斉クロなそして更に工業化も含めた実用性の高ガノカタリスト（organocatalysts）3） は酵素

スカップリング（cross-coupling）、柴崎等 12）及いものになったと考えられるので以下に

13）に類似したものと云えよう。金属を含むもびOverman等の不斉Heck反応、そして現状を紹介したい。この開発には古くかののうち典型金属化合物は主に酸・塩基化

長年の懸案であった辻-Trost反応14）の不斉ら知られているがしばしば勘違いされる合物として触媒的に広く応用出来るが、そ化を含むTrost等の不斉アリル化（allylation）

原理や、思いがけない好運な現象も含め

れ以外の反応性を必要とする場合は不斉ヒ

等 15）はそれ等の先端的なものと云えよう。著ていくつかの breakthroughs を必要とし

1）

ドロボーレーション やクロチルボーレー

者等は1978年に発 見したZrCp 2 Cl 2を触媒たことを強調して以下にそれ等をまとめ

ション 4）のように触媒的にキラル基を用いとするアセチレンのカルボアルミネーション（Zr-て紹介する。

16）

るのが困難な場合が多い。これに比して遷

catalyzed alkyne carboalumination） に基く移金属化合物はいわゆる酸・塩基触媒とし不斉オレフィンのカルボアルミネーション開発を

３−１．ZACA反応に基く三Protocolsても用いられるが遷移金属特有の多戈な反試みたが、これに成功したのは17年後の1995

合成上最も重要と考えられる2-メチ

応性に基く酸・塩基以外の触媒として広範年であった17）。数々のキラルなジルコノセン錯

ル- 1-アルキル誘導体を不斉メチルアルミ

囲に用いられる利点がある 5）。この種の遷（1-neomenthylindenyl）
zirconium
体中、bisネーションで合成するProtocolⅠに加え移金属体触媒は上記の理由で「第三の触媒」（以下（NMI）
dichloride 18）
2 ZrCl 2と示す）が最て、プロペンにエチル又はより長いアルと云えよう。

も良好な結果を示したので、以下にこれを用いキルとAlを付加することにより約10- 15%

た結果のみを示す。

より高い不斉度で同じ生成物が得られる

１．酵素及びオルガノカタリスト
２．他の酸・塩基触媒（非金属、典型及
び遷移金属化合物を含む）
３．遷移金属体触媒（第2項目の單なる酸・塩基触媒以外のもの）
上 記 野 崎・ 野 依 等 2） の 不 斉 シ ク ロ プ
ロパネーションの発表からやや遅れて
Horner 等 6）、Knowles 等 7）、Kagan 等 8）の遷移金属触媒を用いたC-H結合生成の一2スキーム１に示したようにエチル及びScheme １．

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

（ProtocolⅡ）。ただしProtocolⅠとⅡでは３−２．ZACA反 応 に よ るDeoxypolypropionates等の高能率合成法

触媒のキラリティは反対にする必要がある

アルコール生成、（ⅱ）酸化によるアルデ
ヒド合成、（ⅲ）Wittigオレフィネーション

点注意されたい。さらにω-ヒドロキシ- 1-

多くの場合キラル有機化合物は二つ又と一サイクルに三ステップを要した 27, 28）。

アルケンのエチル又はより長いアルキルとはそれ以上の不斉点を持つ。二つのとな得られた2-メチル- 1-アルカノールは（ⅰ）

Alの付加後單に加水分解によってProtocol

り合う不斉炭素が（1, 3）の関係にある

ヨーソ化、（ⅱ）Pd-触媒を用いるビニール

Ⅰ又はⅡで得られると同じ2-メチル- 1-ア

deoxypolypropionatesは極めて多種多様な化の後に（ⅲ）ZACA反応及び酸化によりルカノールのみならずn -メチル- 1-アルカ

化合物群として天然に存在し様々な生化

一サイクル後の2-メチル- 1-アルカノー

ノール（n = 3, 4,等）が高収率かつ高不斉学活性を示す。有機合成のターゲットとルに変換出来るがこれも三ステップを要度（90- 95%ee）で得られることが分かっして極めて重要かつチャレンジングなもする 27−29）。後者の場合ZACA反応で直接た （ProtocolⅢ）。この場合のキラリティのである。構造上convergentな合成は容得られる生成物は2-メチル- 1-アルキルア

セ ン ス（sense of chirality） はProtocolⅠ

易でなくほとんどlinearなものに限られてランでありアルキルアランはPd-Zn二触の場合と同じになる（スキーム２）。トリ

いる。過去15- 20年主流として広く使わ媒系を用いてビニール化出来るはずであ

アルキルアルミ化合物の三つのアルキルの

22）

24）

れ た も の はEvans 、Myers 、 正 宗 、る。反応条件を検討の末Zn（OTf）2 を補助うち一つだけが反応に使われる。Me 3 Al,Enders 25） 等によって開発された量論的試薬として又Pd（DDEphos）Cl 2 を触媒と

21）

23）

Et 3 Al,等のように安価に購入出来るもののカルボニル化合物の不斉アルキル化でしてDMF溶媒中で約70%収率でone-pot

場合は特に問題はないが高価なアルキル基あるがかなり高価なキラル試薬を量論的

iteration（一段階反復サイクル）の開発を用いる場合その三分の一しか利用出来なに使う必要がある点、そして反復によるに成功した 30）（スキーム４）。三つ又は四いのは大きな問題である。しかしこの問題

deoxypolypropionates合成の場合一サイク

つと不斉炭素が（1, 3）の関係で連っていは高価な1-アルケンをDIBAL-Hでしばしルに三ステップを必要とする等本質的にる場合上記の他の概存法では九又は十二ば溶媒なしにヒドロアルミ化したものを使改良が困難な問題をかかえている。極めス テ ッ プ を 要 し た がZACA法 をone-pot

26）

21）

用してさけられる 。これもスキーム２のて最近にFeringa等

が銅触媒を用いた

iteration protocolを用いて適用すれば三又最後に示す。イソブチル基の反応性は約十共役付加による不斉C-C結合生成反応をは四ステップで合成出来るので極めて能率分の一以下にとどまる。3-ブテン- 1-オー

deoxypolypropionatesの合成に応用した。

の高い合成法が開発されたことになる。但ルを用いて一ステップで約90%eeの3-メ触媒反応ではあるが、反復に三ステップをし生成物はこのままでは純品でない。

チル- 1-アルカノールが約90%収率で得ら必要とするという問題は未解決のままであれる例をスキーム3に示す 21）。高能率、高る。

３−３．不斉反応反復による Kinetic

収率、高不斉度（88- 92%ee）を示すが生ZACA法でも初めはスキーム３に示す

Enantiomeric Resolution

成物は未だ純品ではない。いかなる不斉ように（ⅰ）アルケンのZACA反応による不斉化合物の精製にはenantiomerの分合成法も純品（≧98%ee又は≧99%純度）が容易に得られて始めて実用的なものになる。これに関して二つの極めて実用的な方法があることを以下に説明しよう。

Scheme ３．

Scheme ２．

Scheme ４．

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

3

離とdiastereomerの分離の二つの異なるをペプチド生成分解を繰返すことにより残された問題点は如何に簡便かつ安価

要 素 が あ る。 往 々 に し てenantiomerの合成して来た重要な原理の一つに違いなにdiastereomersを 分 離 す る か で 予 想 以

分 離 に は 旧 来 か ら 知 ら れ て い るoptical

いと考えられそうである。2, 4-dimethyl- 1-

上に簡單な方法が見出されたのは幸運とresolutionが 必 要 で あ る と 思 わ れ て いalkanolsの合成に戻るが約80%eeのプロ云えよう。これが広知の知見であるかる。 こ れ はdiastereomerの 生 成、 分 離、セスを二度繰返すだけでほぼ98%eeの生

ないかは著者は知らないが著者等の発表

diastereomer分解による純品回収の三ス成物が得られることは実験的に繰返し実

以前に報告された例には未だに遭遇して27−31）

テップを要し時間的にもコスト的にも出証されて疑う余地は全くない。更にい な い。 要 約 す る と「diastereomericな

来るだけ回避したい。純品（≧98%ee）

三量体・四量体の生成により99%eeをは1-hydroxy- 2, 4-dimethylbutyl誘 導 体 は そを直接に得られない場合に最も望しいのるかに越えるenantiomeric purityを持っれ等の他の部分に関係なくシリカゲルカ

は不斉反応自身にenantiomerの精製をゆた目的物が得られることも繰返し実証さ

ラムとEtOAc-hexanesを用いたごく普通

27−31）

だねるkinetic resolution法を用いることれている。但しkinetic enantiomericのカラムクロマトグラフィーで分離されで、これは例外なくすべての不斉反応のresolutionによっては未だ不斉体が純品とている」27−31）。例外はあるかも知れない

反復又は二つ以上の不斉体のコンビネー

して得られる訳ではない。上記の例ではが一般性は高い。これに反し1-hydroxy-

ションにより最も多く生成する不斉体の約20%近 く の 二 つ のdiastereomersが 不2, 4, 6-trimethylhexyl誘導体の場合はC 6位

enantiomeric purityが統計的に向上すると純物として生成するからだ。この二つのに何が有るかで分離出来たり出来なかっいう普遍的原理に外ならない。これは誰diastereomersの生成は実は上記のkineticたりする。更に二つのとなり合わせのメ

でも知っている筈の原理であるがしばし

enantiomeric resolutionには必要不可欠なチル基が（1, 4）又は（1, 5）の関係にあば誤解されたり忘れられたりしているのものでいわゆる blessing in disguise （不る場合はクロマトグラフィーによる分離で注意したい。例えば90/ 10の比（80%ee）

幸が実は幸い）でありこれがあるからこは通常法では難しいという結果を得ていで二つの可能なstereoisomers（R とS ）がそenantiomeric purityは不斉プロセスを重る 32）。それでも二つ以上の不斉点を持つ生成する同じ又は二つの異なるプロセス

ねるごとに向上することを充分に理解認識

不斉化合物の合成でしばしば通常のクロを繰返した場合、二つの不斉点を持つ生する必要がある。これ等の関係を上記の例

マトグラフィーで純品が得られることが成物のenantiomeric purityはマッチ-ミスを用いてスキーム５にくわしく示した。

あるので先ずはためしてみることだ。例

マッチを無視すれば97. 6%eeとなる筈で

え ばZACA反 応 を 使 っ た も の と し て スある。もし80%eeの不斉プロセスを三回

３−４．通常のColumn Chromatography

キーム６にkinetic enantiomeric resolution

又は四回繰返せばほぼ99. 9%又は99. 99％（カラムクロマトグラフィー）によ以外はクロマトグラフィーのみを精製に近いenantiomeric purityで最終生成物

るDiastereomeric な 1 -Hydroxy-

法として用いた6, 7-dehydrostipiamideのが得られる筈である。まさにこれぞ自然

2, 4-dimethyl-butyl 誘導体の精製

C 11 -C 18 中間体を 3 -butenylbenzene かがたくまずして極めて高純度のアミノ酸

上記の deoxypolypropionates 合成で

らZACA、PetersonオレフィネーションのCorey-Schlessinger-Mills等 に よ る 改 良法 33）、Brown crotylboration 4） を経てわず
か四ステップで55%の収率で≧99%の純品として得ている 34）。工業的にも応用可能なものと考えている。
メチル基を三ケ又は四ケ持ったdeoxypolypropionatesの合成法として極めて安価なスチレン（$ 1/mol）とアリルアルコー
ル（$ 1. 5/mol）31）を原料とした例をスキー
ム7- 11に示す。着目すべきは1-hydroxy2, 4-dimethylbutyl moiety（部位）ごとにク
ロマトグラフィーで精製することにより純品を得ている点である。著者等はZACA
反応を用いた不斉合成で通常のクロマトグ
ラフィー以外のoptical resolutionや他の特種の精製法を必要として用いたことは未だ一度もない。

Scheme ５．

4

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

３−５．不斉炭素を一つのみ含むか又は二つ以上の不斉炭素がクロマト
グラフィーによる精製に適さな い 場 合 のLipase-Catalyzed
Acetylationによる精製（リパー
ゼ触媒を用いたアセチル化）
ZACA反応を用いた不斉合成法が眞に一般性のある合成法となるためには不斉炭素を一つのみ含むか二つ以上の不斉炭素を有してもクロマトグラフィーによる精製に適さない場合にも純品が安価かつ簡便に得られなければならない。文献調査の結果（ⅰ）
2-methyl- 1-alkanolsのラセミ体から（R ）-体を純品（≧98%ee）として得ることは比較

Scheme ６．

的容易であるが回収率は勿論50%に限定され、実際にはselectivity factor（E -factor）
により20- 40%、極めてE -factorの高い場
合に限って45%位迄の回収率が望める 35）。
（ⅱ）
（S ）-体をラセミ体から一回の精製で99%以上の純品として得ることはE -factor
が100と極めて高い場合でも不可能に近い 36）。従って何度かの反復でenantiomeric
purityを徐々に高める操作が必要になる。
（ⅲ）文献には不斉反応によって不斉度の高められた化合物のこの方法による精製の例はなかったように思うが理論計算でこの組合せが極めて有効であることが知られている 36）。更に不斉合成反応で不斉度が≧70- 90%ee、特に≧80- 90%ee、以上に高められている場合はE -factoerがかなり低い（10- 20）場合でも70%以上の回収率で得らScheme ７．

れることが予測出来る（テーブル１）36）。
スチレンと3-ブテニルベンゼンから
ZACA反応で得られるアルコールのように 極 め て 安 価 なporcine pancreas lipase

Scheme ８．

Scheme ９．

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

5

Table １．Maximally Attainable Yieldsof（S ）-2-Alkyl-1-alkanols of>̲ 98% ee as a Function of
Initial ee（ ee 0）and E Factor（Based on Ref. 36）
Max. yield (%)

Initial eeo (%)

Scheme 10．

0 (racemic)

100
90

<2
0

20

100
80
60

< 35
〜20
0

50

100
50
40
30

< 70
〜55
〜25
0

60

100
50
30
20

< 80
〜65
〜25
0

70

100
50
30
20
10

< 85
〜80
〜60
〜25
0

80

100
30
20
10

< 90
〜85
〜70
0

90

100
20
10
5

< 95
< 95
80
0

され数多くのものが不斉合成に広く応用されるようになると確信する。ZACA反応と競合する触媒的不斉反応として前記の野依還元 10） やFeringa共役付加反応 26） の他に

Scheme 11．

もBurgess等 37）のIr触媒を用いたオレフィ
32）（PPL）がより有効な場合もあるが 、一に到達した。しかしMAO又はH 2 Oを若般 的 にAmano PS lipaseが 有 効 で、 こ れ

干（一等量又はそれ以下）使用することで二・三十年前にはすべてのキラルな有で 満 足 な 結 果 が 得 ら れ な い 場 合 にPPLZACA反応を促進する改良案を見出した

機化合物を不斉合成する日はいつ来るであ等他のlipaseを試みるのが能率的な選択

Wipf等 36）がpitiamide Aの合成に応用した

ろうかと夢のように考えていたがその日は

法 と 考 え て い る。ZACA-lipase-catalyzed

一例を除くとこれ迄天然物又はそれ等の中近いと云えよう。むしろ今日のより重要な

acetylation tandem法を用いて純品として間体合成に応用したのは著者等のものに限

関心事はいかに能率良く、高選択的に、か得られた2-methyl- 1-alkanols（テーブル２）

られているのが現状である。三ステップをつ経済的にキラル有機化合物を不斉合成すと天然物又は中間体（テーブル３）をまと要する（NMI）2 ZrCl 2 の合成は決して難るかにあると思われる。経済的には何とめて示す。更にアリルアルコールとスチレ

しいものではないが、それでもこれを合成云っても触媒反応の開発が重要で、一モルンから得られるZACA反応生成物の精製して使わなければならない現状がZACA

十万円の触媒もTurnover number（TON）

に関する詳細をスキーム12に示す。

反応が未だに広く応用されていない大きなが103、104、そして105 と高くなるにつれ原因だと考えている。この度和光純薬工業て実用上のコストは百、十、そして一円㈱の皆さんがこの工業化に興味を持って下/モルになる潜在的な長所は量論的な試薬さったことは著者等にとって大いなる喜び

では置き換えることの出来ない魅力であであり工業化の成功を祈ってやまない。

る。ZACA反応の更なる開発と共に新規なるがそれでも過去数年間の総合的な開発に「第三の触媒」、つまり遷移金属を触媒

触媒的不斉反応の発見開発に大いなる関心

より有機合成化学者が広く応用出来る段階とする不斉合成法は今後益々の開発が期待を持っている今日このごろである。著者等

４ おわりにZACA反応の開発は未だその途上にあ618）ンの不斉還元も着目に値する。

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

Table ２．List of Chiral Compounds That Are Accessible via ZACA Reaction（A）Compounds not Requiring Enantiomeric Puriﬁcation（B）Compounds Requiring Lipase-Catalyzed Acetylation
Note : All compounds are of >
̲ 98%（>̲ 97% in some cases）
Note : All compounds are >̲ 97−98% enantiomerically pure.
enantiomeric purity.
Entry

Compound1

Yield No. of Diastereo.
% steps Purity (%) Ref.

From

49

OH

OH

>
̲ 98

4

Entry

Compound

27

OH

40

4

>
̲ 98

27

OH

44

3

>
̲ 98

27

2

OH

33

3

>
̲ 98

27

3

OH

OH

50

4

>
̲ 98

27

OH

OH

50

4

>
̲ 98

27

5

HO

I

55

1

>
̲ 98

29

6

AcO

I

OH

3

OH

4

OH

5
6

66

1

98

32

61

2

98

32

67

1

98.5

32

60

2

97

32

HO

54

1

98

31

HO

54

2

98

31

45

3

98

31

HO

45

3

98

31

HO

36

3

98

31

HO

50

3

98

32

46

1

98

32

52

2

98

32

1

OH

2

Yield No. of Stereo.
% steps Purity (%) Ref.

From

OH

($39/20 g TCI)OH

7 TBSOOH

8 TBSO

OH

TBSO
TBSO

61

>
̲ 97

1

29

OH
4

HO

TBSO

7

TMS
HO

8

OH

50

9

2

30

(7/1)

O

not yet puriﬁed

OH

10

47

(4.6/1)

2

not yet puriﬁed

30

9

TBSO

10

HO

11
12

Pr

OH

OH
OH

TBDPSOTBDPSO

Table ３．Natural Products Synthesized via ZACA Reaction
Natural Product (Year) Ref.
pitiamide A (2000)

Structure

37

H
N

Cl

vitamin E (2001and 2002)

HO

20,21

Pr

O

O

O

2

O

vitamin K (2001) 20

Enzyme2OHOphytol (2001) 20
scyphostatin (side chain) (2004)

2

H
N

29

OH O

O
HO O

siphonarienal (2004) 28

CHO

siphonarienone (2004)

28

siphonarienolone (2004) 28

O(+)-sambutoxin (A) (C9-C18) fragmentused as a key intermediate) (2004) 28

OH O

Cat./Substrate Cost/Substrate Conversion Time Recovery（%） （h） （%）（mg/mmol）（$/mol）

ee
（%）

PPL

80

10

30

0.33

64

90

Amano PS

80

125

17

3

71

94

Amano PS

80

125

31

4

65

98

Amano PS

32

42

25

8.5

68

97

OH

6,7-dehydrostipiamide (2004) 34
ionomycin (B) (C1-C10 fragment) (2005) 30

OH (Z = THP or
TBDPS)

ZO

preen gland wax of the graylag
groose,(2006) 31

CO2H

doliculide (D) (C1-C9 fragment) (2006) 31(+)-stellattamide A (side chain) (2007)

OBn

EtO2C

N

OH
OH

OH

(+)-sambutoxin (A)

O

O

H

O

H2PO4-

+ Me
N Cl-

H

Cat./Substrate Cost/Substrate Conversion Time Recovery（%） （h） （%）（mg/mmol）（$/mol）

ee（%）

Amano PS

68

106

22

3

68

93

Amano PS

136

212

50

4.5

43

96

PPL

68

9

31

8

62

99

PPL

34

4

14

6.5

78

97

Scheme 12．

OH

O

OH

N
H

O
H
N
O

H

+ Me

H
N

32

(+)-stellattamide B (side chain) (2007) 32

O
H

Enzyme

O

COMe

MeO2C

borrelidin (C) (C3-C11 fragment) (2005) 30

OH

H
N

OH

NC

O
H

borrelidin (C)OH OH H

ionomycin (B)

O

H

O

OH

O
H

OH
CO2H
I
HO

HO
O
MeN
O

O
N
H

doliculide (D)

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

7

の研究はNIH、NSF、及びパーデュー大学

Ohkuma, P., Kitamura, M., Noyori, R. : in Ref. 5 ,のサポートの基に行われて来た。著者の報

Chap. 1, Asymmetric Hydrogenation , p. 1.

文に共著者として示されている博士課程学生及びポストドクトラルの諸氏の絶大な努

11）Ogasawara, M., Hayashi, T. : in Ref. 5, Chap. 8F,

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12）Sato, Y., Sodeoka, M., Shibasaki, M. : J. Org. Chem .,54, 4738（1989）.

力に感謝する。特にZhihong Huang、BoLiang、及びDr. Gangguo Zhu氏等がスキー
ム及びテーブルの作成に関与して下さった

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38）（a）Zhou, J., Burgess, K. : Angew. Chem. Int. Ed .,10）（a）Takaya, H., Ohta, T., Sayo, N., Kumobayashi,

R. P., Reijmer, S. J. W., Feringa, B. L., Minnaard,

46, 1129（2007）.（b）Zhou, J., Zhu, Y., Burgess, K. :H., Akutagawa, S., Inoue, S., Kasahara, I., Noyori, R.

A. J. : Chem. Commun ., 1387（2005）.（c）López, F.,

Org. Lett ., 9, 1391（2007）.

: J. Am. Chem. Soc ., 109, 1596 and 4129（1987）.（b）Minnaard, A. J., Feringa, B. L. : Acc. Chem. Res ., 40,

P roducts
有機合成用試薬（-）- ビス〔1-［（1 S , 2 S , 5 R ）-2 - イソプロピル -5 - メチルシクロヘキシル］
インデニル〕ジルコニウム（Ⅳ）ジクロリド【（-）（NMI）
2ZrCl2】
本品はネオメンチル基を有する光学活性なジルコニウム触媒です。アルキルアル
ZrCl2

ミ試薬の末端アルケンへの不斉カルボアルミ化反応に高い活性を示します。本反応を繰り返し用いることで、ビタミン E、ビタミン K などの天然物を、高い収率及び2立体選択性で合成することができます。
C 38 H 50・Cl2 Zr = 668.93

CAS No. : 148347-88-0

コード No.
品
名規 格
容 量025-15981 （-）-Bis〔1-［（1 S , 2 S , 5 R ）-2 -isopropyl-5 -methylcyclohexyl］indenyl〕zirconium（Ⅳ）Dichloride 有機合成用 200mg8

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

希望納入価格（円）19,500R
１esearch
蛍光色素によるタンパク質内微小環境変化の検出技術とその応用

タンパク質内の変化を光で読み取る

名古屋大学大学院医学系研究科細胞生理学

並木繁行

因性あるいは変異導入したシステイン残リロダンが広く知られている 2）。アクリ基への選択的標識によって行う。システ

ロダンはチオールと特異的な反応性を示

インのチオール基（-SH基）と選択的にすアクロイル基を有し、ジメチルアミノ

反応する置換基であるハロアセタミドやナフタレンを骨格とする蛍光色素である

生体内の多くのタンパク質はタンパ

マレイミドを有する蛍光色素と室温以下（図１）。水中では360nmに吸収極大を有ク質相互作用やリガンドの結合、リン酸の穏やかな反応条件で標識することがでし、540nmに蛍光の極大を示すが、エタ化などの様々な修飾に応答して高次構造きる。特に特定の場所での環境変化の測ノール中では387nmに吸収極大を有し、の変化を示す場合が多い。タンパク質の定は既存のアミノ酸を点変異導入によっ502nmに蛍光極大を示す。このような高次構造変化は時として生体内のシグナてシステインに置換し、そこへ蛍光色素

アクリロダンの分光学的性質の非常に大ルカスケードを制御する非常に重要なスを標識することによって実現できる。標

きな溶媒効果を利用してParvalbuminやイッチの役割を担っている。以前より、識した蛍光色素は標識されたタンパク質

Troponin Cとアクリロダンとの蛍光複タンパク質内の構造変化は主にX線にがリガンドを結合したり、他のタンパク合体を用いて、これらのタンパク質がカよる結晶構造解析や核磁気共鳴（NMR）

質と相互作用をしたりした際に生じたタルシウムと結合した際の構造変化を蛍光による解析を中心に行われてきており、ンパク質内の局所的な環境変化を感受

極大波長の変化を基に解析が行われてい近年では分析機器の飛躍的な性能の向上

し、蛍光特性の変化として検出できる可る。アクリロダン以外にもNBD誘導体

によって大幅な分解能の向上を遂げてい能性がある。この現象を利用して試験管やIAANSも環境感受性色素として広くる。しかしながら、これらの手法では内でのタンパク質の動的な振る舞いをリ用いられ、タンパク質の高次構造変化の解析対象となるタンパク質を精製した

アルタイムに追跡が可能であり、タンパ

研究に用いられている（図１）。

上で、結晶化やNMRサンプルの調製とク質内の疎水ポケットの研究や、タンパ

いったわずらわしい問題が依然として存ク質相互作用に伴う高次構造変化に関す在している。今後、創薬スクリーニング

る研究に広く用いられてきた。この目やプロテオーム解析の進展に伴い高まる

的に叶う色素としては蛍光色素Prodan

タンパク質の構造解析技術としては簡便

がヘキサンと水中では大きなスペクト

生体物質を選択的かつ高感度に検出な方法論の開発も並行して望まれる。簡1）
ル変化を示すという知見 を基にしてし定量することは日常の研究の場面で多便なタンパク質の構造変化あるいはタン

Prendergastらによって開発されたアク

く生じるニーズである。しかながら、現パク質間の相互作用の解析法として以前F

よりタンパク質の蛍光分子標識による方ABD-F

境変化をタンパク質内に共有結合を介O

NO2Acrylodan

IANBD

I
O

性（蛍光強度、ピーク波長など）の変化

O

SO3 Naとして捉えるものである。標識された蛍O

光色素はリガンドの結合や他のタンパク

IH2 C C

HN
N
H

質との相互作用によって惹起されるタン

N
H

NaO3S

I
O

O

O
S

S
O

N

IAANS

パク質内のアミノ酸の主鎖や側鎖の空間
疎水性の程度や静電的な環境の変化等をN
O
N

して標識した低分子蛍光化合物の蛍光特的な変化に伴って生じる蛍光色素周辺のN CH2CH2N C CH2I

(H3C)2N

SO2 NH2

ンパク質との相互作用によって生じる環

H3C

C C CH2HO
Nするタンパク質にリガンド結合や他のタ

CH3

O

N

法が用いられている。この方法は対象と生体物質の蛍光性セン
サーとして

２

S-SO-IAAO
S

HN

捉えているのではないかと推測されていONる。したがって、この方法に用いられる蛍光物質は特にその蛍光量子収率やスペクトルが溶媒の誘電率によってかなり大きな差を示すものが適していると考えられる。
タンパク質への蛍光色素の標識は内

I-SO-IAA
NaO3 S

図１．環境感受性蛍光色素
I-SO-IAA と S-SO-IAA 以外は紫外・近紫外領域光で励起を行う。I-SO-IAA と S-SO-IAA は 600 nm 付
近の励起光を用いることができるため、非常に幅広い用途に用いることができる。

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）9

在までに低分子の有機化合物で高感度かつ選択的に生体物質の認識をすることはカルシウムイオン等の一部の分子を除いては実現できていない。この問題に対しては生体内で日常的に特定のリガンドやタンパク質を認識して生理機能の制御をおこなっているタンパク質をセンサーとして用いることが、１つの解決法となりうる。標的とする生体分子を高感度かつ選択的に結合するタンパク質もしくはその一部のリガンド認識ドメインのリ
コンビナントタンパク質と環境感受性蛍
光色素の蛍光複合体を標的リガンド分子の蛍光センサーとして用いることが可能である。現在までにこの原理を利用して多くの生体物質あるいはタンパク質修飾のセンサーが作製されてきた 3−5）。しかしながら、現在まで用いられている多図２．グルタミン酸受容体グルタミン酸結合ドメインと I-SO-IAA との蛍光複合体
グルタミン酸受容体 GluR2 のグルタミン酸受容体のグルタミン酸結合ドメインと環境感受性色素
I-SO-IAA との蛍光複合体のグルタミン酸結合に伴う蛍光スペクトル変化。グルタミン酸非存在下（実線）に比べ過剰量のグルタミン酸の存在下（破線）で約 35 % の蛍光強度の減少が見られた。

くの色素は紫外あるいは近紫外領域の励起光を用いなくてはならず、サンプルたこれらの蛍光色素周辺の微小な環境を作製する必要がある。現在までに、カに存在する夾雑物による吸収や蛍光が測変化を感度良く捉えることが期待でき

ルシウムイオンの細胞内での時空間動定上の障害となる場合が考えられた。近る。実際、HahnらはWASPタンパク質態を解析するために多くのカルシウム蛍

年では可視領域での光での励起が可能なにS-SO-IAAやI-SO-IAAを結合させ、活光指示薬が開発・市販され広く用いられ蛍光センサーも開発されており、より性化型Cdc42との結合に際して生じるている。また、蛍光タンパク質の蛍光共精度の高い生体分子の定量が実現しつつ

WASP内の構造変化を捉えることに成鳴エネルギー移動を利用した多くの蛍光ある。我々はOregon Greenとグルタミ功している 7）。I-SO-IAAはグルタミン酸

分子プローブが作製されて生物学的実験

ン酸受容体のグルタミン酸結合ドメイン

センサーの作製にも非常に有用であり、に用いられている。これら既存のタイプの複合体からなるグルタミン酸の蛍光セ

我々が作製した蛍光性グルタミン酸センの細胞機能を可視化解析する蛍光プロー

6）ンサー、EOSを開発した 。EOSは可視サーのOregon GreenをI-SO-IAAに置き

ブに加えて、環境感受性蛍光色素を用

光（490nm付近）での励起が可能であ

換えることによってグルタミン酸結合にいた蛍光複合体も蛍光可視化プローブ開り、非常に強い蛍光を発する。EOSは伴う蛍光強度の最大変化量が約35%の発の際の非常に有望な戦略のひとつであグルタミン酸の結合に伴い最大で37％ものを得ることができた（図２）。

る。環境感受性色素を用いた蛍光性のセの蛍光強度の上昇を示す。また、グルタ
ミン酸との解離定数は148 nMであり、非常に高感度でのグルタミン酸の検出を

ンサーを生きた細胞の内外に配置するこ細胞機能の可視化解析
３への応用可能にした。また、長年望まれていた

時空間動態をリアルタイムにイメージングすることができる。しかしながら、既可視光領域の光での励起が可能な有望な細胞機能を理解するためには細胞内存の多くの環境感受性蛍光色素を用いた

環境感受性色素がHahnらによって報告外の機能分子が「いつ、どこで」活性化

蛍光センサーを用いたイメージングにはされた。新規に開発された環境感受性

したり、濃度が上昇したりするかといういくつかの問題点が伴う。今まで用いら色素（I-SO-IAAとS-SO-IAA）はいずれ

時空間的な振る舞いを知ることが重要でれてきた多くの環境感受性蛍光色素は紫

もメロシアニン骨格とタンパク質内のシある。このような目的に対しては蛍光顕

外領域の光での励起が必要であり、生じ

ステインとの反応の為にIodoacetamide

微鏡システムを用いた蛍光イメージング

る蛍光もかなり暗い。さらに、それを補を有している 。I-SO-IAAの蛍光量子

によって生きた細胞の内外の生体分子のうために強い励起光を当ててしまうと著収率は非常に大きな溶媒依存性を示し、可視化解析＝イメージングが大きな威力

しい退色が起こってしまうという悪循環（ブタノール中では蛍光量子収率が水中を発揮する。蛍光イメージングには対象を引き起こす問題があった。また、紫外の15倍になる）、タンパク質に標識しとする分子に対する蛍光可視化プローブ

線によって生じる強い細胞毒性や細胞の7）10とで細胞の生理的活動に伴う生体物質の和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

内在性物質の自家蛍光が実際の測定の際しかしながら、この方法論での蛍光セン

dimethylaminonaphthalene（Acrylodan）. Aには問題となってくる。この問題に対しサー作製の際には最適な導入箇所、すな

thiol-selective, polarity-sensitive ﬂuorescentて我々が作製したOregon Greenを用い

わち大きな環境変化を生じる場所の理

たグルタミン酸センサーやHahnらによ論的予測が困難であるという問題点があるCdc42活性化センサーは可視領域光でる。複数の蛍光色素と複数のタンパク質の励起が可能であり、生細胞イメージンとの組み合わせで蛍光複合体を作製し、グへの応用性を非常に高めている。我々

リガンド結合によって生じる蛍光特性変は蛍光性グルタミン酸可視化プローブ：化について調べられているが 9）、タンパ

probe. , J. Biol. Chem ., 258, 7541-7544（1983）.
３）Dattelbaum, J. D. and Lakowicz, J. R. :Optical determination of glutamine using
a genetically engineered protein. , Anal.

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４）Hirose, K., Takeshima, H. and Iino, M. :Fluorescent indicators for inositol 1, 4,5-trisphosphate based on bioconjugates of

EOSを培養海馬神経細胞の細胞膜にビク質内の同じ個所に蛍光標識をしてもオチン−ストレプトアビジンのリンカー

標識した蛍光色素の種類によってリガンを介して結合させ、神経活動に依存してド結合によって生じる変化の程度にはばシナプスから放出されるグルタミン酸

らつきがある。すなわち、ある蛍光色素の動態を優れた空間解像度で画像解析の蛍光複合体がリガンド結合によって大A genetically engineered, protein-based

することに成功した 。また、Hahnら

きな蛍光特性の変化を生じたとしても同

optical biosensor of myosin Ⅱ regulatoryは前述したI-SO-IAAとWASPタンパク

じ個所に別の蛍光色素を導入しても必ず質の蛍光複合体をインジェクションしたしも同様の結果を保証されるものではな

MEF細胞が移動する際のCdc42活性化

い。したがって、性能の良い環境感受性

M. and Hirose, K. : Optical glutamateの過程のイメージングを試みている。彼

色素の開発・探索と並行して、多くの候

sensor for spatiotemporal analysis of

らはリアルタイムで優れた時空間解像度

補となる蛍光複合体の効率の良い作製・

synaptic transmission. , Eur. J. Neurosci .,で細胞内のCdc42の活性化を可視化する評価法を確立する実験系の確立が今後期

6）

pleckstrin homology domain and fluorescent dyes. , Anal. Commun ., 36, 175-177（1999）.
５）Post, P. L., Trybus, K. M. and Taylor, D. L. :light chain phosphorylation. , J. Biol. Chem .,269, 12880-12887（1994）.
６）Namiki, S., Sakamoto, H., Iinuma, S., Iino,25, 2249-2259（2007）.
７）Toutchkine, A., Kraynov, V. and Hahn, K. :待される。

ことによって、細胞が移動する際には細Solvent-sensitive dyes to report protein

胞の辺縁部でのみCdc42が局所的に活性

conformational changes in living cells. , J.

化する過程を明らかにすることに成功し〔参考文献〕ている 8）。

１）Weber, G. and Farris, F. J. : Synthesis８）Nalbant, P., Hodgson, L., Kraynov, V.,

and spectral properties of a hydrophobic

Toutchkine, A. and Hahn, K. M. : Activation

fluorescent probe : 6-propionyl-2-（dimeth-of endogenous Cdc42 visualized in living

４ 今後の課題と展望

Am. Chem. Soc ., 125, 4132-4145（2003）.

ylamino）naphthalene. , Biochemistry, 18,

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９）de Lorimier, R. M. et al . : Construction of a

生体物質の検出・定量や生細胞での２）Prendergast, F. G., Meyer, M., Carlson, G.

分子イメージング等に環境感受性色素を

L., Iida, S. and Potter, J. D. : Synthesis,

用いた蛍光センサーの応用範囲は広い。

spectral properties, and use of 6-acryloyl-2-

ﬂuorescent biosensor family. , Protein Sci .,11, 2655-2675（2002）.

P roducts

環境感受性のタンパク質蛍光プローブ
I-SO-IAAI

I-SO-IAA は、メロシアニン骨格とヨードアセトアミドを有する環境感受性のタンパク質蛍光プローブです。その蛍光量子収率は非常に大きO
HN

な溶媒依存性を示します。そのため、本品を標識したタンパク質のリガOンド結合や他のタンパク質との相互作用の強さを環境変化による蛍光強

N

O

S

度、ピーク波長の変化として捕らえることができます。
O

NEW

測定波長

Ex : 600mm, Em : 630nm 付近

コード No.
093-05371

I-SO-IAA

品

NaO3S

名

和光純薬時報規格
細胞生物学用Vol.75, No.3（2007）

C27H26IN2NaO7S2＝704.53

容 量
5mg

希望納入価格（円）50,00011

−⑧

生薬に関わって想うこと

̶「柴胡さいこ」について̶
広島大学薬学部附属薬用植物園

神田博史

漢方療法などの伝統医療による多大な治療効果は、適確な診断と優良な生薬および生薬製剤の使用によって達成されることは言うまでも無い。しかしながら、漢方及び生薬製剤に用いられる原料の生薬は９割以上が輸入に依存しているのが現状であり、国内においてほぼ自給可能と考えられる輸入率20％以下の生薬は 30 品目程度しかない。近年、これら生薬において、品質の低下や野生薬用植物の資源枯渇の恐れが出てきている。そのため生薬の材料となる薬用植物の安定的な生産、あ
わせて品質の均一性の向上が望まれている。同時に薬用植物栽培技術の指導題がある。柴胡として現市場品として淡褐色の物」である。にもかかわらずなどについても各方面から要請がなさ出回っているものは中国輸入品の「唐北柴胡は褐色で香りは殆どない。なぜれてきている。一方、採取される野生柴胡（北柴胡と津柴胡）」とわが国の栽

このようなものが出回るのか。あるとの薬用植物の中には、種の分類が未だ培品である「和柴胡」、それに僅かばかきから柴胡の漢方製剤の品質の評価法

不確定な物があり、また同一種とされりの「韓国産柴胡（植柴胡と山柴胡）」として生理活性物質のサイコサポニン

る物においても植物形態、含有成分、に大別できる。唐柴胡の多くは北柴胡類（特に a, d）が注目され、なんでも含有量の異なることがあり、大きな問で、北柴胡系とは一般的に揚子江以北

かんでもサイコサポニン類となってき題になっている。この様な多様性が植に産するB. chinense である。産地は甘た。事実様々な活性が明らかになり、物の生育環境の違いによって生じてい粛省，陜西省，湖北省，河南省付近で柴胡の言われている薬理効果もサイコるものであるのか、植物自身が本来持ある。その他、津柴胡（南柴胡；狭葉サポニン類で説明できるものも結構あつ遺伝的な特性であるのか、今までの柴 胡B. scorzoneraefolium ）が あ る。 北る。その結果柴胡の品質はいつのまにところ明確にはされていないものが多柴胡は繊維質でポキッと折れるが、津か強い活性が報告されているサイコサ

くある。医薬品材料を考えた場合、基柴胡は北柴胡に比べて多少柔らかい。

ポニン -a, -d が多ければよいということ

原植物が明確であることは勿論である

私が聞いている品質の良い柴胡とは、になった。香り成分としての単一物質

が、形質が均一で、化学的に遺伝的に「細長く鼠の尾のようで、真っ直ぐであの単離や生理活性についての報告がつも均質であることは重要なことである。

まり分枝せず、しなやかで僅かに良いい最近までなかったこともあり、市場

重要漢方用生薬「柴胡は、セリ科植香りがあり、色合いも赤黒色で内部は品としてサイコサポニン類の多いもの

物Bupleurum falcatum ミシマサイコの根を基原とする」と日本薬局方にある。
歴史的には、神農本草経の上薬に「胡」の名で記載され、本草経集注には「生薬前胡に類似する」とある。変遷はあるものの、現在では局方収載植物が基原植物として異論のないところである。「柴胡」の配合された漢方処方は俗に「柴胡剤」と称され、胸脇苦満（胸脇部の圧迫した不快感）を目標とされ投与され、特にわが国では「小柴胡湯」
をはじめ賞用される。柴胡の需要も急激に増加し、年間使用量の 80 % 余りは中国からの輸入品で頼っている。柴胡の品質もほかの生薬と同様かなりの問12

サイコサポニンの構造式

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

−⑧が捜され北柴胡となったのである。北なってきた。これまで日本各地を歩き向にある。生薬切片を観察すると油道

柴胡より香りが高く、それまで主流で回ってきて同じミシマサイコと言わの数は断然２年物のほうが沢山見られ、あった津柴胡はサイコサポニン類が少れながら、かなり形態が違う物があ

精油成分量は高い（ガスクロマトグラ

ないということでいつの間にか市場かる こ と に 気 が つ い て い た。 太 田、 大ムによる精油成分の比較においては、ら少なくなった。香り、色合い、しな

橋、水上先生らによって染色体レベ

１年物の各ピーク全てにおいて、２年やかさの面からは日本産ミシマサイコ

ルで日本の野生ミシマサイコは大き

物は１〜３倍の量であった）。つまり香が優れている。昭和 30 年前後に静岡

く 3 つに分けられると報告された（北り十分である。

県、神奈川県で野生品が乱獲され、さ九 州 産 2 n= 20、 瀬 戸 内 産 2 n= 32、 他

分類学的、科学的にミシマサイコのらには最近の乱開発のため野生品が枯

2 n= 26（ 栽 培 品 ））。 さ ら に、 中 国 のB. falcatum といわれているものとも違実態が明らかとなりつつある。しかし渇してしまい、野生品の市場性はなくなってしまった。あるメーカーは国内うことが明らかとなったし、DNA レベ

しは植物材料を、どのように栽培したの各地で契約栽培をし、除草、調製なルでも差が明らかとなってきた。もとらよいのか。栽培種となると化学的評

ど苦労されながら立派な製品を作られ、もとB. falcatum の学名はヨーロッパ産

価が高いことは勿論であるが、均一で成果をあげられている。しかしながら、の植物について当てられたものであり、収量の上がること、耐病性のあるもの

中国の柴胡は日本の数分の一以下の価

日本産のものとは形態的にかなりの差などの条件を備えていなければならな格とも聞いており、業者のかなりの保があることは佐竹先生によって報告さい。さらにミシマサイコの問題点は他

証なしでは栽培化の確立は難しい。最れていた。サイコサポニン量から判断

殖性で、種子による増殖を基本にする

近、柴胡の香りに注目し、精油成分と、すると、わが国に自生するミシマサイと、１系統による極度の純系化が起こ

脂溶性成分の指標となるとヘキサンエ

コのうち、北九州平尾台や山口秋吉台

り株の弱体化を起こすことが予想されキス（He），エーテルエキス（Ee）をに産する 2 n= 20 のタイプが栽培品や他る。柴胡に限らず全ての生薬の基原植検討してみた。結果は、市場品の北柴の自生地に比べて、1 . 5 〜２倍でだん

物において、優良形質を持ち備えた種

胡にはほとんど精油は認められず、エとつである。

苗を選抜し、クローン苗を大量に増殖ながら、どのようなミシマサイコない

キスにおいても非常に低い値であった

またこれまでは、市場に見られる栽

し、五官的評価、化学的評価、臨床的（He：1 . 5 〜 2 %，Ee：1 . 5 〜 2 . 5 %）。

培品は２年生の栽培品ミシマサイコで評価に答えられるべき生産が望まれる。

一方、日本産柴胡にはかなりの精油量あったが、最近は、２月に播種してそ

単に研究材料として生薬が使用されが認められ、エキスにおいては（He：の年の 12 月からよく年２月までのあい

報告されているが、同一生薬名におい3 . 3 〜 4 . 3 %，Ee：4 . 1 〜 4 . 8 %） と 北

だに収穫する方法が一般化している。

ても非常に多様であり、歴史的にこの

柴胡のほぼ２倍の値であった。なお、栽培する手間から考えると１年物が手

辺が詳細に明記されないでいることに、疑問を持つところである。

津柴胡は両者の中間程度の値であった

間がいらないし、畑も効率的に使える。

（He：1. 9 〜２. 4%，Ee：2. 6 〜 2. 8%）。

確かにサイコサポニン類は１年物と２一部、「北柴胡」で臨床効果があった

北柴胡と津柴胡のこの結果は、サイコ年物とではほとんど変化はない（１年とも聞いている。非常に困難ではある

サポニン類の含量と全く逆となった

物 a；0 . 47 %, c；0 . 12 %, d；0 . 45 %, T；

が、「柴胡剤」の漢方臨床においても、（北柴胡：a, 0 . 62 %, d, 0 . 72 %；津柴胡：

1 . 04 %：２年物 a； 0 . 52 %, c； 0 . 15 %,北柴胡、津柴胡、和柴胡、或いは何処

a, 0 . 23 %, d, 0 . 28 %）。

d； 0 . 43 %, T；1 . 10 %：）。重量は勿論

何処産市場品とか野生品と明確にされ最近。植物の分類を DNA レベル（遺２年物のほうがあるが面積辺りの収穫

たうえで、研究報告、症例報告がある

伝子レベル）で判断することが可能と量からすると、１年物のほうが高い傾と、品質管理の面で参考になる。

日本薬局方規格サイコサポニン類
コードNo.
190-13541
196-14481
197-14531

品
名
Saikosaponin a
Saikosaponin b2
Saikosaponin d

規格
容 量
局方生薬試験用（薄層クロマトグラフィー用）
10mg
局方生薬試験用（成分含量測定用・薄層クロマトグラフィー用） 20mg
局方生薬試験用（成分含量測定用）
10mg

希望納入価格（円）23,00034,00060,000

サイコサポニン標準品
コードNo.
197-08421

品
名
Saikosaponin c Standard

規
格
生薬試験用

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

容 量
10mg

希望納入価格（円）19,60013

echnical Report
ポジティブリスト制関連

動物用医薬品の LC/MS/MS 分析
和光純薬工業株式会社

吉田

貴三子

平成18年５月29日、残留基準が設定の、MS/MS検出条件などは各施設の装ニング検査には有用な方法と考えます。

されていない農薬、動物用医薬品などを置で個別に設定する必要があります。まHPLC 分析においては、ピーク形状が含む食品の流通を禁止する「ポジティ

た、一斉試験法Ⅰでは、分析カラムに粒シャープであればあるほど各成分の重な

ブリスト制」が施行されてから１年あ

子径３μmODS充てん剤を充てんしたりが少なく、実試料分析におけるマト

まりが過ぎました。約800種類の農薬類

3. 0mmφ ×150mmが 採 用 さ れ、 分 析

リクスの影響を抑える効果が期待できに基準値が設定され、GC/MS、LC/MS

時間は安定化も含めると約 50 分となっると考えます。また、HPLC分析条件と（LC/MS/MS）を用いた一斉試験法が厚ています。私達は分離を損なうことなく

MS/MS検出条件の最適化は、定量精度

生労働省より通知され、各施設で取り組

LC/MS/MS検出における分析時間の短や再現性に重要な要素です。当社では、み対応されています。当社では、これら縮を目的にカラム充てん剤、カラムサイ

Wakopak® カ ラ ム 及 び 混 合 液 を 使 用 し一斉試験法に対応した混合液、標準品、ズ及び検出感度について検討しました。

て、ポジティブリスト制関連農薬及び動溶媒類、及びGC用、HPLC用カラムな検討の結果、本目的に使用するカラムは、

物用医薬品の一斉分析法の検討をお考えどを販売しています。今回、動物用医薬®
Wakopak Wakosil-II 3C 18 HGが 最 適の方に、検出器3200Q TRAP（ABI社）

品の混合液をLC/MS/MS（MRM）法でで、カラムサイズを 3 . 0 mm φ× 150 mmで設定したメソッドの提供が可能ですの分析した例をご紹介します。

か ら2. 0mmφ ×100mmに 変 更 す る こ

で、ご一報いただければ幸いです。

厚生労働省より通知された一斉試験とにより分析時間を約３分の１に短縮す

法 に は、 HPLC に よ る 動 物 用 医 薬 品

ることができ、さらには、検出感度アッ等 の 一 斉 試 験 法 Ⅰ（ 畜 水 産 物）（89成

プの効果も認められました。その時の各分）、 HPLC による動物用医薬品等のカラムサイズに合わせたグラジエント条

一斉試験法Ⅱ（畜水産物）（33成分）の件とMRMで検出時のクロマトグラムを

物用医薬品の成分である物質の試験方法につ分析条件が設定されています。動物用

図１〜４に、MS/MS検出イオンを表１、いて（一部改正）」（平成 17 年 11 月 29 日公布）．

医 薬 品 は 確 認 試 験 と し てLC/MS及 び

２に示しました。

〔参考文献〕
1）「食品衛生法等の一部を改正する法律」（平成 15 年 5 月 30 日公布）．
2）「食品中に残留する農薬、飼料添加物又は動LC/MS/MS分析を採用している関係か

以上、Wakopak® Wakosil-Ⅱ 3C 18 HG、ら、HPLC条件、MS検出イオン及び検2 . 0 mm φ× 100 mm を使用して設定した

http://wako-chem.co.jp/siyaku/info/env/

出限界などの情報は公開されているもの

一斉分析条件は多検体を取扱うスクリー

article/positivelist̲ 2 .htm

表 1．PL-1-2(22 sample)
Peak
No.

Analyte Peak Name

3200 Q TRAP メソッド請求先 :表 2．PL-2-1(24 sample)
Analyte Mass Ranges (amu)
Precursor ProductMode

Analyte Retention Time (min)3.0mmφ× 150mm 2.0mmφ× 100mm

Peak
No.

Analyte Peak Name

Analyte Mass Ranges (amu)
Precursor ProductMode

Analyte Retention Time (min)3.0mmφ× 150mm 2.0mmφ× 100mm

1

Lincomycin

407.2

126.3

+

11.0

4.7

1

5-Propylsulfonyl-1H -benzimidazole-2-amine

240.1

133.2

+

11.2

4.7

2

Sulfacetamide

215.1

92.1

+

11.5

4.7

2

Levamisole

207.1

91.2

+

11.3

4.7

3

Danoﬂoxacin

358.2

82.2

+

12.9

5.2

3

Thiabendazole

202.1

175.1

+

11.8

4.9

4

Clenbuterol

278.2

204.2

+

13.7

5.5

4

Trimethoprim

291.1

230.3

+

12.0

4.9

5

Xylazine

221.1

90.1

+

13.6

5.5

5

Sulfadiazine

251.1

92.2

+

12.3

5.0

6

Pyrimethamine

249.1

177.2

+

15.3

6.0

6

Ormetoprim

275.2

123.1

+

12.5

5.1

7

Trichlorfon(DEP)

258.9

109.1

+

15.6

6.1

7

Sulfathiazole

256.0

156.0

+

12.8

5.2

8

Tilmicosin

869.6

174.2

+

15.5

6.2

8

Sulfapyridine

250.0

156.2

+

13.2

5.3

9

Tiamulin

494.3

192.1

+

18.8

7.0

9

Sulfamerazine

265.1

92.2

+

13.8

5.5

10

Prednisolone

361.2

147.0

+

19.4

7.3

10

Thiamphenicol

355.9

308.0

+

14.4

5.7

11

Hydrocortisone

363.3

121.1

+

19.7

7.3

11

Sulfadimidine

279.1

92.1

+

15.0

5.9

12

Dexamethasone

393.2

147.2

+

21.5

7.9

12

Sulfamethoxypyridiazine

281.1

156.1

+

15.0

5.9

13

Emamectin B1a

887.5

158.3

+

25.2

8.9

13

Sulfamonomethoxine

281.1

156.1

+

16.1

6.2

14

Famphur

326.0

93.1

+

26.2

9.3

14

Sulfachlorpyridazine

286.1

157.1

+

16.7

6.4

15

Fenobucarb(BPMC)

208.2

95.1

+

26.6

9.4

15

Sulfamethoxazole

254.0

156.0

+

17.5

6.6

16

Temephos(Abate)

467.0

125.0

+

34.3

11.8

16

Sulfadoxine

311.1

156.1

+

17.4

6.6

17

Allethrin

303.2

91.2

+

34.8

11.9

17

Ethopabate

238.2

136.0

+

19.3

7.2

18

Eprinomectin B1a

914.5

186.3

+

35.8

12.2

18

Sulfaquinoxaline

301.0

156.2

+

19.4

7.2

19

Monensin

688.5

461.4

+

42.5

14.3

19

Sulfadimethoxine

311.1

156.2

+

19.4

7.2

1

Florfenicol

357.8

184.8

−

17.6

6.8

20

Sulfanitran

336.1

134.1

+

21.9

7.9

2

2-Acetylamino-5-nitrothiazole

185.9

138.9

−

17.7

6.8

21

β-Trenbolone

271.2

165.3

+

23.2

8.3

3

Clorsulon

379.7

343.9

−

18.9

7.1

22

α-Trenbolone

271.2

165.2

+

23.7

8.5

23

Melengestrol Acetate

397.2

279.4

+

31.3

10.7

1

Zeranol

321.1

277.2

−

24.2

8.7

[HPLC Conditions]
Column : Wakopak® Wakosil-Ⅱ3C18 HG
Eluent : A) 0.1% HCOOH in H2O＊
B) 0.1% HCOOH in CH3CN＊＊
Time program：
Column size
3.0mmφ×150mm 2.0mmφ×100mm
0-35min.
0-10.5min.
35-40min.
10.5-12min.
40-50min.
12-22min.

14

試薬研究所

Flow rate : 0.2mℓ/min. at 40℃
Injection vol. : 0.1ppm、4μℓ(3.0mmφ×150mm)、
3μℓ(2.0mmφ×100mm)
B conc.
1-100%
100%
1%＊

LC/MS用ぎ酸（約99%）［コードNo.067-04531］
LC/MS用超純水［コードNo.214-01301］
LC/MS用 0.1vol%ぎ酸-アセトニトリル［コードNo.062-04721］＊＊

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）[MS/MS Conditions]
ESI、MRM
IonSpray voltage : 5,500V(pos)、−4,500Ｖ(neg)Temperature : 400℃ (pos)、500℃ (neg)Curtein gas : 20
Collison gas : 6
Ion source gas 1 : 50
Ion source gas 2 : 80
System : 3200 Q TRAP (ABI)1.8×105

1.2×105
1.1×105

1.6×1059

1.0×1053

9.0×10467
8

1.2×1051

1.0×105194
5

8.0×104

13

15
16

6.0×104

8.0×104

Intensity, cps

Intensity, cps

1.4×105

7.0×10412

5.0×10489
7 10

3.0×104

2.0×104

3

2

17
18

10
11 12

4

6

8

0.0

10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44

46 48

23

13
21 22

1.0×104

0.0
2

5

2.0×104

14

17
18
19

11
12

4

4.0×104

4.0×10415
16

6

6.0×104

20

14
2

4

6

8

10

12

14

16

18

20

22

24

26

28

30

32

34

36

Time, min

Time, mincolumn size 3.0mmφ×150mm

column size 3.0mmφ×150mm
1.8×105

1.2×105
1.1×105

1.6×105

1.0×105
9.0×104

1.2×105

8.0×104

Intensity, cps

Intensity, cps

1.4×105

5

1.0×108.0×104

7.0×104
6.0×104
5.0×104
4.0×104

6.0×104

3.0×104
4.0×104

2.0×104

2.0×104

1.0×104
0.0

0.0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

1

15

2

3

4

5

6

column size 2.0mmφ×100mm

column size 2.0mmφ×100mm

図1. PL-1-2 pos mode (19 sample)

図3. PL-2-1 pos mode (23 sample)

8

9

10

11

12

9.0×104

1.2×105

8.0×104

1.0×105

7.0×104
8.0×104
6.0×104

Intensity, cps

Intensity, cps

7Time, min

Time, min2

4

4.0×10

2.0×1041
4

6

8

5.0×104
4.0×104
3.0×1041

2.0×1043

1.0×104

0.02

6.0×104

10 12 14 16 18

20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44

46 48

0.0
2

Time, mincolumn size 3.0mmφ×150mm

4

6

8

10

12

14

16

column size 3.0mmφ×150mm

18

20

22

24

26

28

30

32

34

36

Time, min

9.0×104

1.2×105

8.0×104
7.0×104

Intensity, cps

Intensity, cps

1.0×105
8.0×104
6.0×104
4.0×104

6.0×104
5.0×104
4.0×104
3.0×104
2.0×104

2.0×104

1.0×104
0.0
1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

0.0
1

Time, min

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

Time, mincolumn size 2.0mmφ×100mm

column size 2.0mmφ×100mm

図2. PL-1-2 neg mode (3 sample)

図4. PL-2-1 neg mode (1 sample)

P roducts■一斉試験用混合液
コード No.
226-01661
222-01663
224-01601
220-01603■ LC/MS 溶離液調製用酸類

品
名
動物用医薬品混合液 PL-1-2（各 20 μg/mℓメタノール溶液）
動物用医薬品混合液 PL-2-1（各 20 μg/mℓメタノール溶液）

規格HPLC 用HPLC 用容 量
1mℓ× 5A
1mℓ
1mℓ× 5A
1mℓ

希望納入価格（円）38,00017,00040,00020,000■カラム
コード No.
001-00030

品

名

Wakopak® Wakosil-II 3C18 HG

カラムサイズ3.0mmφ× 150mm
2.0mmφ× 100mm

希望納入価格（円）47,000照 会

規

希望納入価格（円）
1,900
5,600
13,000
1,050
1,600
3,450
1,800
3,400

■ LC/MS 用溶媒
コード No.
016-19854
012-19851
018-19853
132-14524
138-14521
134-14523
214-01301
210-01303

コード No.
018-20061
067-04531

品
名Acetic Acid
Formic Acid (abt. 99%)

規 格
LC/MS 用LC/MS 用

容 量
50mℓ
50mℓ

希望納入価格（円）
5,500
9,000

容 量
1ℓ
3ℓ
1ℓ
3ℓ

希望納入価格（円）5,700
13,8005,700
13,800

容 量
100mℓ
100mℓ

希望納入価格（円）
6,000
6,000

■ LC/MS 用調製済み溶離液
コード No.
011-20551
017-20553
062-04721
068-04723

品

名

規

格

0.1vol% Acetic Acid-Acetonitrile

LC/MS 用

0.1vol% Formic Acid-Acetonitrile

LC/MS 用■アンモニウム系溶離液の調製に！
品

Acetonitrile

名格

LC/MS 用Methanol

LC/MS 用Ultrapure Water

LC/MS 用

容 量
100mℓ
1ℓ
3ℓ
100mℓ
1ℓ
3ℓ
1ℓ
3ℓ

コード No.
018-21041
011-21031

品
名
1mol/ℓ Ammonium Acetate Solution
1mol/ℓ Ammonium Formate Solution

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

規 格
HPLC 用HPLC 用15

ew Products■イサゾホス標準品

ポジティブリスト 関連標準品
食品衛生法などの一部を改正する法律（平成 15 年法律第 55 号）により、食品に残留する農薬、動物用医薬品または飼料添加物に関し、ポジティブリスト制度が導入され

化学名：O -5-Chloro-1-isopropyl-1H 1,2,4-triazol-3-yl O,O -Diethyl
Phosphorothioate
CAS No.：42509-80-8
含量（cGC）：98.0% 以上
外 観：黄色澄明液体
備 考：殺虫剤

N
N

P

O

H3C

Cl

N

S
O

O
H3C

ました。
この度、残留農薬試験用標準品及び HPLC 用動物用医薬品標準品を追加しました。品目は順次追加の予定です。

農薬標準品

CH3

H3C

追加品目

■ベンゾビシクロン標準品
化学名：3（2-Chloro-4-mesylbenzoyl）-2phenylthiobicyclo[3.2.1]oct-2en-4-one
CAS No.：156963-66-5
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：うすい黄褐色結晶性粉末〜粉末
溶解性：水 0.052（mg/ℓ, 20℃）
備 考：除草剤

S

Cl
C

SO2CH3OO

C22H19ClO4S2 = 446.97■ボスカリド標準品
化学名：2-Chloro-N（4'-chlorobiphenyl-2-yl）
nicotinamide
CAS No.：188425-85-6
含量（cGC）：98.0% 以上
外 観：白色結晶性粉末
溶解性：水 4.6
（mg/ℓ, 20℃）
n - ヘプタン <10、メタノール 40-50、アセトン 160-200（g/ℓ, 20℃）
備 考：殺菌剤O
N
H
N

化学名：2（4,6-Dimethoxypyrimidin-2ylcarbamoylsulfamoyl）-N,N dimethylnicotinamide
CAS No.：111991-09-4
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：白色粉末
溶解性：水 0.07（g/ℓ）
アセトン 18、エタノール 4.5、クロロホルム 64、ジメチルホルムアミド 64、
アセトニトリル 23、トルエン 0.370、
ヘキサン <0.02、ジクロロメタン 160（g/kg, 25℃）
備 考：除草剤

OCH3
O
N

N
H
O

N

H3C

N

O

O
S

N

N
H

OCH3

CH3

C15H18N6O6S = 410.41■オリザリン標準品
化学名：3,5-Dinitro -N 4,N 4dipropylsulfanilamide
CAS No.：19044-88-3
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：黄みの赤色結晶性粉末
溶解性：水 2.6
（mg/ℓ, 25℃）
アセトン >500、アセトニトリル >150、
メタノール 50、ジクロロメタン >30、ベンゼン 4、キシレン 2（g/ℓ, 25℃）
備 考：除草剤

NO2
NH2SO2

N(CH2CH2CH3)2
NO2

C12H18N4O6S = 346.36

Cl■オキサジアルギル標準品
Cl

C18H12Cl2N2O = 343.21■フェノチオカルブ標準品
化学名：S -4-Phenoxybutyl
Dimethylthiocarbamate
CAS No.：62850-32-2
含量（cGC）：98.0% 以上
外 観：白色結晶〜結晶性粉末
溶解性：水 30（mg/ℓ, 20℃）
シクロヘキサノン 3,800、アセトニトリ
ル 3,120、アセトン 2,530、キシレ
ン 2,464、メタノール 1,426、ケロセン 80、ヘキサン 66（g/ℓ, 20℃）
備 考：ダニ駆除剤

C9H17ClN3O3PS = 313.74■ニコスルフロン標準品

H3C

S
N

H3C

C

C
H2

4

O

化学名：5-t -Butyl-3-[2,4-dichloro-5（prop-2-ynyloxy）
phenyl]-1,3,4oxadiazol-2
（3H ）
-one
CAS No.：39807-15-3
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：白色結晶性粉末〜粉末
溶解性：水 0.37
（mg/ℓ, 20℃）
備 考：除草剤

H3C

Cl

C

N
Cl

CH3
CH3

N
O
O

O

C
HC

C15H14Cl2N2O3 = 341.19■ピペロホスオキソン標準品

O
C13H19NO2S = 253.36

化学名：S -2-Methylpiperidinocarbonylmethyl O,O -Dipropyl
Phosphorothioate
CAS No.：62987-99-9
含量（cGC）：98.0% 以上
外 観：黄褐色澄明液体
備 考：ピペロホス代謝産物

O
N

COCH2SP(OCH2CH2CH3)2

CH3

C14H28NO4PS = 337.42■プロヒドロジャスモン標準品（異性体混合物）■フロニカミド標準品
化学名：N -Cyanomethyl-4（triﬂuoromethyl）
nicotinamide
CAS No.：158062-67-0
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：ごくうすい灰褐色結晶性粉末
溶解性：水 5.2
（g/ℓ, 20℃）
備 考：殺虫剤

CF3
CONHCH2CNN

C9H6F3N3O = 229.16

化学名：Propyl（3-Oxo-2-pentylcyclopentyl）
acetateCAS No.：158474-72-7
含量（cGC）：98.0% 以上
外 観：無色澄明液体
溶解性：水 60.2
（mg/ℓ）
ヘキサン、アセトン、メタノール、ア
セトニトリル、クロロホルム、DMSO、トルエン >100（g/ℓ, 25℃）
備 考：植物成長調整剤

O(CH2)4CH3

CH2CO2CH2CH2CH3

C15H26O3 = 254.37■ピラクロストロビン標準品■ 4- ヒドロキシビフェニル標準品
化学名：p -Phenylphenol
CAS No.：92-69-3
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：白色フレーク
備 考：ビフェナゼート代謝産物

OH

C12H10O = 170.21

化学名：Methyl N -{2-[1（4-Chlorophenyl）-1H -pyrazol-3-yloxymethyl]phenyl}（N -methoxy）
carbamate
CAS No.：175013-18-0
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：黄色結晶性粉末〜粉末
溶解性：水 1.9（mg/ℓ, 20℃）
備 考：抗かび剤

N
Cl

O

N
H3CO

N

CO2CH3

C19H18ClN3O4 = 387.82［次頁に続く］16

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

ew Products■ピリダフェンオキソン標準品

コード No.

化学名：O（1,6-Dihydro-6-oxo-1-phenyl3-pyridazinyl）
O,O -Diethyl
Phosphate
CAS No.：63135-29-5
含量（cGC）：98.0% 以上
外 観：黄色澄明液体
備 考：ピリダフェンチオンのオキソン体

O

C2H5O

P

C2H5O

N

O

N
O

C14H17N2O5P = 324.27■レスメトリン標準品
化学名：5-Benzyl-3-furylmethyl（1RS ,3RS ;1RS ,3SR ）-2,2-Dimethyl-3（2-methylprop-1-enyl）
cyclopropanecarboxylate
CAS No.：10453-86-8
含量（cGC）：98.0% 以上
外 観：白色粉末
備 考：殺虫剤

CH3 O

H3C
H3C

名

規

格

希望納入価格（円）168-22851 Piperophos Oxon Standard

残留農薬試験用

50mg

30,000Standard
166-22891 Prohydrojasmon(mixture of isomers)

残留農薬試験用 200mg

20,000163-22921 Pyraclostrobin Standard

残留農薬試験用 200mg

18,000165-22861 Pyridaphenoxon Standard

残留農薬試験用

50mg

30,000

182-02071 Resmethrin Standard

残留農薬試験用 200mg

13,000208-16651 Tetradifon Standard

残留農薬試験用 200mg

11,000205-16781 TFNA Standard

残留農薬試験用

50mg

15,000202-16791 TFNA-AM Standard

残留農薬試験用

50mg

15,000208-16771 TFNG Standard

残留農薬試験用

50mg

15,000O

CH3O

C22H26O3 = 338.44■テトラジホン標準品
O

O

Cl

S

Cl

Cl

動物用医薬品標準品
Cl

C12H6Cl4O2S = 356.05

追加品目■ベンゾカイン標準品
化学名：Ethyl 4-Aminobenzoate
CAS No.：94-09-7
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：白色結晶〜結晶性粉末

O

H2N
C9H11NO2 = 165.19■ TFNA 標準品
化学名：4-Triﬂuoromethylnicotinic Acid
CAS No.：158063-66-2
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：白色結晶性粉末
備 考：フロニカミド代謝産物■クロステボル標準品

CF3

OH
CH3

化学名：
（17β）
-4-Chloro-17-hydroxyandrost-4-en-3-one
CAS No.：1093-58-9
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：白色結晶性粉末〜粉末

COOH
N

C7H4F3NO2 = 191.11

CH3

化学名：4-Triﬂuoromethylnicotinamide
CAS No.：158062-71-6
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：ごくうすい黄色結晶性粉末
備 考：フロニカミド代謝産物

H

H■ TFNA-AM 標準品

H

O

CF3

Cl

C19H27ClO2 = 322.87

CONH2
N

C7H5F3N2O = 190.12■クリスタルバイオレット標準品■ TFNG 標準品
化学名：N（4-Triﬂuoromethylnicotinoyl）
glycine
CAS No.：207502-65-6
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：白色粉末
備 考：フロニカミド代謝産物

コード No.

容量

C O CH2C C
H
CH3

化学名：4-Chlorophenyl 2,4,5Trichlorophenyl Sulfone
CAS No.：116-29-0
含量（cGC）：98.0% 以上
外 観：白色結晶性粉末
溶解性：水 0.078（mg/ℓ, 20℃）
アセトン 82、ベンゼン 148、クロロホルム 255、シクロヘキサノン 200、ジオキサン 223、ケロセン 10、
メタノー
ル 10、トルエン 135、キシレン 115（g/ℓ, 10℃）
備 考：ダニ駆除剤品

品

化学名： N -[4-[Bis[4（dimethylamino）
phenyl]methylene]-2,5cyclohexadien-1-ylidene]-N methylmethanaminium Chloride
Nonahydrate
CAS No.：548-62-9（無水物）
含量（HPLC）：94.0% 以上
外 観：暗黄緑色結晶〜結晶性粉末

CF3

N

名

CONHCH2COOH
C9H7F3N2O3 = 248.16

規

格

容量

N(CH3)2
Cl・9H2OC(H3C)2N

N(CH3)2

C25H30ClN3・9H2O = 570.12

希望納入価格（円）023-15781 Benzobicyclon Standard

残留農薬試験用 100mg 25,000

027-15821 Boscalid Standard

残留農薬試験用 100mg 15,000

067-04891 Fenothiocarb Standard

残留農薬試験用 200mg

6,000

060-04881 Flonicamid Standard

残留農薬試験用 200mg 15,000

086-08501 4-Hydroxybiphenyl Standard

残留農薬試験用 200mg

095-05451 Isazofos Standard

残留農薬試験用 200mg 15,000

143-08401 Nicosulfuron Standard

残留農薬試験用 200mg 20,000■ジエチルスチルベストロール標準品
化学名：
（E ）
-3,4-Bis（p -hydroxyphenyl）-3-hexene
CAS No.：56-53-1
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：白色粉末

CH2CH3HOOH
H3CH2CC18H20O2 = 268.35

158-02651 Oryzalin Standard

8,000

残留農薬試験用 200mg 16,000■ジメトリダゾール標準品
化学名：1,2-Dimethyl-5-nitro-1H -imidazole
CAS No.：551-92-8
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：ごくうすい黄色結晶性粉末

CH3

O2N

N

CH3
N

155-02661 Oxadiargyl Standard

残留農薬試験用 100mg 30,000

C5H7N3O2 = 141.13［次頁に続く］和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）17

ew Products■フロルフェニコール標準品
化学名：2,2-Dichloro-N -[（1S ,2R ）-1（ﬂuoromethyl）-2-hydroxy-2[4（methylsulfonyl）
phenyl]ethyl]acetamide
CAS No.：73231-34-2
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：白色結晶性粉末〜粉末■フマル酸チアムリン標準品
OH

H3C

S

O

Cl

H
N

F

Cl
O

O

C12H14Cl2FNO4S = 358.21■ジプロピオン酸イミドカルブ標準品
化学名：N,N -Bis[3（4,5-dihydro-1H imidazol-2-yl）
phenyl]urea
Dipropionate
CAS No.：55750-06-6
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：白色粉末

コード No.

O
H
N

N
H

N
2CH3CH2COOH

C25H32N6O5 = 496.56■ケトプロフェン標準品
O

CH3
COOH

C16H14O3 = 254.28

N(CH3)2

C
H(H3C)2N

N(CH3)2

C25H31N3 = 373.53

H2C

H3C

H3C
HO

COOH

HOOC
CH3

C32H51NO8S = 609.81

規格

希望納入価格（円）容量020-15791 Benzocaine Standard

高速液体クロマトグラフ用

200mg 10,000

034-20141 Clostebol Standard

高速液体クロマトグラフ用

200mg 10,000

032-20201 Crystal Violet Standard

高速液体クロマトグラフ用

200mg 10,000

Diethylstilbestrol048-30111
Standard

高速液体クロマトグラフ用

200mg

8,000

047-30181 Dimetridazole Standard

高速液体クロマトグラフ用

200mg

8,000

060-05001 Florfenicol Standard

高速液体クロマトグラフ用

200mg 15,000

Imidocarb Dipropionate
092-05461
Standard

高速液体クロマトグラフ用

200mg 10,000

111-00741 Ketoprofen Standard

高速液体クロマトグラフ用

200mg

高速液体クロマトグラフ用

200mg 10,000

高速液体クロマトグラフ用

200mg 15,000

9,000

192-14581 Sulfacetamide Standard 高速液体クロマトグラフ用

200mg

8,000

197-14651 Sulfathiazole Standard

高速液体クロマトグラフ用

200mg

5,000

Tiamulin Fumarate
201-16881
Standard

高速液体クロマトグラフ用

200mg

9,000

■ アガリチン一水和物標準品

化学名：4,4 -Bis
（dimethylamino）
triphenylmethane
CAS No.：129-73-7
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：白色粉末〜塊

アガリチンはアガリクス属のキノコ類に含まれている
フェニルヒドラジン誘導体であり、その毒性がかねてより指摘されています。
H3C

CH3

N

N

CH3

CH3

C23H26N2 = 330.47■スルファセタミド標準品
化学名：N -[
（4-Aminophenyl）
sulfonyl]acetamide
CAS No.：144-80-9
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：白色結晶性粉末

O O
S

O

N
H

化学名：β-N -[γ-L（+）-Glutamyl]-4hydroxymethylphenylhydrazine
Monohydrate
CAS No.：2757-90-6（無水物）
含量（HPLC）：95.0% 以上
外 観：白色粉末

HO
N
H

NH2

H
N

COOH ・ H2OOC12H17N3O4・H2O = 285.30■ α - リポ酸標準品
CH3

本品は液体クロマトグラフ法によってα- リポ酸の含量を保証した商品です。

H2N

S

化学名：
（±）
-1,2-Dithiolane-3-valeric Acid
CAS No.：1077-28-7
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：黄色結晶性粉末

C8H10N2O3S = 214.24■スルファチアゾール標準品

S
CH2(CH2)3COOH

C8H14O2S2 = 206.33

O

S

O
S

コード No.

N
H

H2N
C9H9N3O2S2 = 255.32

18

CH3
H O

O

S

その他標準品■ロイコマラカイトグリーン標準品

化学名：4-Amino-N -2thiazolylbenzenesulfonamide
CAS No.：72-14-0
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：白色結晶性粉末

N

O

名

Leucocrystal Violet
120-05371
Standard
Leucomalachite Green
121-05301
Standard■ロイコクリスタルバイオレット標準品
化学名：4,4 ,4 -Tris（N,N dimethylaminophenyl）
methane
CAS No.：603-48-5
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：わずかにうすい紫灰色結晶性粉末

品

H3C
H3C

H
N

N
H

N

化学名：3-Benzoyl-α-methylbenzeneacetic
Acid
CAS No.：22071-15-4
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：白色粉末

化学名：[3aS（3aα,4β,5α,6α,8β,9α,9aβ,10S ＊）]-[（2（Diethylamino）- ethyl）
thio]acetic Acid
6-Ethenyldecahydro-5hydroxy-4,6,9,10-tetra- methyl1-oxo-3a,9-propano-3aH cyclopentacycloocten-8-yl Ester（E ）-2-butenedioate
CAS No.：55297-96-6
含量（HPLC）：98.0% 以上
外 観：白色粉末

N018-21281

品

名Agaritine MonohydrateStandard124-05411 α-Lipoic Acid Standard

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

規

格

容量

希望納入価格（円）

高速液体クロマトグラフ用

100mg 30,000

高速液体クロマトグラフ用

200mg

8,000

ew Products
Presep® シリーズ C18（ODS）®

ご好評いただいております、Presep -C

日本薬局方規格
生薬標準類

C 18（ODS）にショートタイプカートリッジ（Short）及びシリンジタ

バイカリン

イプの Type M を追加しました。
最近ではポジティブリスト制度の導入により、食品中のオウゴンの確認試験用指標成分として用いられます。オ

残留農薬試験の前処理で、これらのサイズの ODS カラム

ウゴンはコガネバナの周皮を除いた根であり、漢方では消が使用されています。

炎、利尿、解熱などの目的で配合され、充血性の炎症の抑新製品

制などに用いられています。

タイプＭ

源：Scutellaria baicalensis Georgi（Labiatae ）起

CAS No.：21967-41-9
O

GlcA

O

HO

新製品
Short タイプ

・H2 O
OH

O

C21H18O11・H2O＝464.38

従来品

仕

オウゴニン

様
粒子径

0 . 47 g

Presep®-C
C 18（ODS）

63 〜
212 μm

コード No.

品

0. 8mℓ/g 270ｍ2/g

0 . 85 g

源：Scutellaria baicalensis Georgi（Labiatae ）CAS No.：632-85-9
OCH3

5g
HO
名

規

格

®

（Short） 試料前処理用
297-47451 Presep -C C18（ODS）®

NEW

用いられます。
起

120 Å

Presep® C 18（ODS）
Type M（5g/ 25mℓ）

NEW

バイカリン同様、オウゴンの確認試験用指標成分として

細孔径 細孔容量 比表面積 充てん量

Presep®-C
C 18（ODS）（Short）

292-32251 Presep -C C18（ODS）

試料前処理用

291-48554 Presep® C18（ODS）
297-48551 Type M（5g/25mℓ）

試料前処理用容量

希望納入価格（円）10 個×525,00010 個×525,00010 個×240,00010 個×5照OOH

C16H12O5＝284.26

O

塩化パルマチン第 15 局方試験において、オウバクの定量時のカラムの選会定用に使用されます。同試験では塩化ベルベリンと塩化パル
マチンをそれぞれ 1 mg、メタノールに溶解して使用します。
起

アルキル金属（トリメチルシリル）メチルリチウム・ヘキサン溶液

源：Phellodendron amurense Ruprecht,

Phellodendron chinense Schneider（Rutaceae ）CAS No.：10605-02-4

アルキル金属化合物です。シクロシロキサンの重合開始

OCH3剤など有機合成用試薬として使用されます。
濃度：1 mol/ℓ

OCH3ヘキサン溶液

+

N

H3CO

CH3
H3 C

Si

OCH3

C21H22CINO4・nH2O（C21H22CINO4＝387.86）

LiCH2Si(CH3)3＝94.16※結晶が析出する場合があります。その場合は、周囲から約 40℃で暖めて溶解させてご使用下さい。
コード No.

nH2 O

CH2Li

CH3

品

名

Clｰ

容量

希望納入価格（円）207-16501 （Trimethylsilyl）
methyllithium

100 mℓ

19,000209-16505 Hexane Solution

500 mℓ照会

コード No.

品

名

規

格

容量

希望納入価格（円）024-15691 Baicalin

局方生薬試験用20mg（薄層クロマトグラフィー用）

12,000236-02321 Wogonin

局方生薬試験用10mg（薄層クロマトグラフィー用）

16,000165-22481 Palmatine Chloride

局方生薬試験用（一般試験法用）

25,000

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

20mg

19

ew Products
RoHS 対応用試薬
平成 18 年７月より、欧州連合（EU）において、「RoHS指令」が施行されました。「RoHS 指令」とは、あらゆる電子機器を対象に、特定有害物質の使用を制限するものです。制限対象となる特定有害物質は、鉛（Pb）、水銀
6+（Hg）、 カ ド ミ ウ ム（Cd）、 六 価 ク ロ ム（Cr ）、 ポ リ ブ
ロモビフェニル（PBB）、ポリブロモジフェニルエーテル（PBDE）の６物質です。
当社では、特級試薬 57 品目、容量分析用試薬４品目に、それぞれ RoHS 指令の規制対象である６物質の規格項目を追加した、「RoHS 対応用試薬」61 品目を発売しておりま
すので、ご活用下さい。

特長●特級・容量分析用の規格に、RoHS 指令の規制対象となる６物質を追加

規 格 例
カドミウム（Cd）……………………………… 10 ppm 以下
水銀（Hg）……………………………………… 10 ppm 以下
鉛（Pb）………………………………………… 100 ppm 以下
クロム（Cr）…………………………………… 10 ppm 以下
臭素系難燃剤（PBB、PBDE） ………………… 1 ppm 以下
コード No.
016-20805
012-20807
013-20795
019-20797
013-20815
010-20825
016-20827
014-20845
017-20835
013-20837
021-15645
027-15647
020-15615
026-15617
024-15635
020-15637
027-15625
023-15627
038-20085
034-20087
031-20075
037-20077
034-20065
030-20067
045-29935
048-29925
044-29927
041-29915
047-29917
042-29945
048-29947
046-29965
055-07515
051-07517

20

品

名

規

格

Acetic Acid

RoHS対応用

Acetone

RoHS対応用

28% Ammonia Solution

RoHS対応用

25% Ammonia Solution

RoHS対応用

Ammonium Acetate

RoHS対応用

Ammonium Sulfate

RoHS対応用

Boric Acid

RoHS対応用

1-Butanol

RoHS対応用

2-Butanone

RoHS対応用

2（2-Butoxyethoxy）
ethanol

RoHS対応用

Chloroform

RoHS対応用

Citric Acid Monohydrate

RoHS対応用

Copper（II）Sulfate Pentahydrate

RoHS対応用

Diammonium Hydrogen Citrate

RoHS対応用

Dichloromethane

RoHS対応用

N , N -Dimethylformamide

RoHS対応用

Dimethyl Sulfoxide

RoHS対応用

Disodium Hydrogenphosphate

RoHS対応用

Ethanol（99.5）

RoHS対応用

容量
500mℓ
20kg
500mℓ
14kg
500mℓ
500mℓ
18ℓ
500g
500g
20kg
500g
20kg
500mℓ
14kg
500mℓ
14kg
500mℓ
15kg
500mℓ
25kg
500g
20kg
500g
15kg
500g
500mℓ
20kg
500mℓ
15kg
500mℓ
18kg
500g
500mℓ
18ℓ

希望納入価格（円）
1,020
照 会
900
照 会
850
850
照 会
1,650
1,050
照 会
1,150
照 会
1,130
照 会
1,050
照 会
1,900
照 会
1,350
照 会
1,750
照 会
1,700
照 会
2,200
1,250
照 会
1,700
照 会
1,850
照 会
1,900
2,000
照 会

コード No.
052-07525
058-07527
058-07505
054-07507
059-07535
055-07537
064-04845
060-04847
073-05215
079-05217
070-05225
076-05227
082-08405
088-08407
089-08415
085-08417
086-08425
083-08435
080-08445
086-08447
099-05415
095-05417
133-15235
139-15237
141-08365
148-08375
144-08355
140-08357
159-02625
169-22565
165-22567

品

名

規

格

Ethanol（95）

RoHS対応用

Ethyl Acetate

RoHS対応用

Ethylene Glycol

RoHS対応用

Formaldehyde Solution

RoHS対応用

Glycerol

RoHS対応用

Glycine

RoHS対応用

Hexane

RoHS対応用

Hydrochloric Acid

RoHS対応用

1mol/ℓ Hydrochloric Acid
0.1mol/ℓ Hydrochloric Acid

RoHS対応用
RoHS対応用

Hydrogen Peroxide

RoHS対応用

Iron（II）Sulfate Heptahydrate

RoHS対応用

Methanol

RoHS対応用

Nickel（II）Chloride Hexahydrate
Nickel（II）Sulfate Hexahydrate

RoHS対応用
RoHS対応用

Nitric Acid（1.38）

RoHS対応用

Oxalic Acid Dihydrate

RoHS対応用

Petroleum Ether

RoHS対応用

PhenolRoHS対応用

Phosphoric Acid

RoHS対応用

Potassium Chloride

RoHS対応用

162-22555

Potassium Dihydrogenphosphate164-22515
160-22517

Potassium Hydroxide

165-22545

Potassium Iodide

RoHS対応用

161-22525
167-22505
163-22507
168-22535
164-22537

164-22495
160-22497
166-22575
162-22577
198-14365
194-14367
195-14375
191-14377
199-14395
195-14397
191-14355
197-14357
199-14415
195-14417

容量
500mℓ
18ℓ
500mℓ
15kg
500mℓ
18kg
500mℓ
18kg
500mℓ
20kg
500g
10kg
500mℓ
12kg
500mℓ
23kg
500mℓ
500mℓ
500mℓ
20kg
500g
20kg
500mℓ
14kg
500g
500g
500mℓ
25kg
500g
500mℓ
18ℓ

希望納入価格（円）
2,000
照 会
1,170
照 会
1,400
照 会
900
照 会
1,700
照 会
2,400
照 会
980
照 会
850
照 会
1,000
950
1,100
照 会
1,250
照 会
770
照 会
3,400
2,900
1,000
照 会
2,000
1,100
照 会

500g

1,750

500mℓ
25kg
500g
20kg

1,300
照 会
1,000
照 会

RoHS対応用

500g

1,500

RoHS対応用

500g
20kg

1,160
照 会

500g

4,800

500mℓ
14kg
500mℓ
17kg
500g
20kg
500g
20kg
500g
20kg
500g
15kg
500g
20kg

900
照 会
2,800
照 会
2,000
照 会
950
照 会
1,400
照 会
1,300
照 会
1,050
照 会

2-Propanol

RoHS対応用

Pyridine

RoHS対応用

Sodium Carbonate

RoHS対応用

Sodium Chloride

RoHS対応用

Sodium Dihydrogenphosphate Dihydrate

RoHS対応用

Sodium Hydrogen Carbonate

RoHS対応用

Sodium Hydroxide

RoHS対応用

196-14425

1mol/ℓ Sodium Hydroxide Solution

RoHS対応用

500mℓ

1,000

193-14435

0.5mol/ℓ Sodium Hydroxide Solution RoHS対応用

500mℓ

1,000

192-14385
198-14387
192-14405
198-14407
205-16585
201-16587
205-16605
201-16607
202-16595
208-16597
206-16635
202-16615
208-16617
209-16625
205-16627
245-00815
241-00817

Sodium Sulﬁte

RoHS対応用

Sulfuric Acid

RoHS対応用

Tetrahydrofuran, no Stabilizer

RoHS対応用

Tetrahydrofuran, with Stabilizer

RoHS対応用

Toluene

RoHS対応用

p -Toluenesulfonic Acid Monohydrate

RoHS対応用

Triethylamine

RoHS対応用

Trisodium Citrate Dihydrate

RoHS対応用

Xylene

RoHS対応用

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

500g
20kg
500mℓ
30kg
500mℓ
15kg
500mℓ
15kg
500mℓ
15kg

980
会
980
照 会
1,700
照 会
1,750
照 会
860
照 会
照

500g

3,200

500mℓ
14kg
500g
10kg
500mℓ
15kg

1,950
照 会
2,100
照 会
1,020
照 会

ew Products
温度応答性HPLCカラム
アクア・ウェイ（Aqua Way）シリーズ
アクア･ウェイ（Aqua Way）シリーズは、100％完全水系移動相を用いて分離を可能とした他に例を見ない画期的な次世代型 HPLC 用カラムです。分離条件の変更･設定は温度制御により行います。試料の変化を最小限に抑えるこ

Aqua Way 専用温調器
アクア・ウェイ・グラジエンター
１）アクア・ウェイカラムの性能を 100％引き出すカラム
温度制御装置２）世界最小・低騒音ヘリカルコンプレッサーを内蔵
３）室温以下の温度設定（０℃〜 50℃）が可能とができ、環境にもやさしい新しい分離精製法です。
シリーズには逆相系カラム「Aqua Way Philic」と陰イオ
ン性物質の分離に最適な「Aqua Way Cation」の２種類をご用意しております。「Aqua Way Philic」はステロイド系化
合物、CYP Probe 化合物、抗てんかん薬などの医薬品、ペプチドやタンパク質に、「Aqua Way Cation」はヌクレオチ
ドなどの陰イオン性化合物に最適です。

温度応答性逆相系 HPLC カラム
アクア・ウェイ フィリック
１）温度応答性ポリマー（PIPAAm）をアミノシリカビーズ（5 μm、120Å）に固定化
２）ポリマーが固定化されたビーズ表面は高温時には疎水性、低温時には親水性を示す

方式

アルミブロック方式

温度設定範囲0℃〜50℃ /0.1℃ステップ

制御精度/制御性能±0.1℃ /1分当たり1〜6℃

精密温調機能冷却出力の可変機能

寸法/重量

W17cm×L45cm×D27cm/17Kg

電源

AC 100V、50/60Hz

最大瞬間消費電力

700W

３）分離選択性と保持時間は、カラム温度を制御すること

Small molecules

により調節。カラム温度が低いほど低保持
Hydrophobic surface（40℃）
〜Molecule attaching〜

1,2

Hydrophilic surface（10℃）
〜Molecule releasing〜

Protein

3

1

4

5
10℃

12 3

4

10℃
1

40℃

5

10℃
40℃

PIPAAm0

Target molecules

温度応答性イオン系 HPLC カラム
アクア・ウェイ カチオン
１）温度応答性ポリマー（PIPAAm）に導入された塩基性官能基をシリカビーズ（5 μm、120Å）に固定化
２）ポリマーが固定化されたシリカビーズの表面は低温では陽性、温度が上昇するにつれ中性表面へ変化
３）分離選択性と保持時間はカラム温度を制御することで最適化。カラム温度が高いほど低保持

CationPIPAAm

20

30

40

（min）

0

Column : 150mm×4.6mm I.D.
Mobile phase : Water
Flow rate : 1.0mℓ/min
Detection : UV 254nm
Sample : 1) Hydrocortisone
2) Cortisone
3) Prednisolone
4) Prednisolone acetate
5) Testosterone

Silica beads

Positively charged surface（10℃）
〜Molecule attaching〜

10

Non-charged surface（40℃）
〜Molecule releasing〜

10

20

30

40

（min）

Column : 150mm×4.6mm I.D.
Mobile phase : 66.7mmol/ℓ phosphatebuﬀer(pH 7.0)
Flow rate : 1.0mℓ/min
Detection : UV 280nm
Column oven : Aqua Way Gradienter
Temperature gradient speed : 4℃/min
Sample : 1) Chymotrypsinogen A

詳しくは、下記ホームページをご覧下さい。
http://wako-chem.co.jp/siyaku/info/chromato/article/AquaWay.htm
コード No. メーカーコード

カラムサイズ

容量 希望納入価格（円）638-10811 AWA046050

4.6×50mm

１本

39,000639-10721 AWA046150 Aqua Way Philic

4.6×150mm １本

59,000636-10731 AWA046250

4.6×250mm １本

79,000633-10741 AWC046050

4.6×50mm

１本

39,000630-10751 AWC046150 Aqua Way Cation

4.6×150mm １本

59,000637-10761 AWC046250

4.6×250mm １本

79,000634-10771

名

Aqua Way Trial Set＊

１本

69,000１台

Silica beads

850,000＋出張設置

Anionic
molecules＊ 4 .6 × 50 mm のアクア・ウェイ フィリックとアクア・ウェイ カチオンがそれぞれ１本同梱。

631-10801

AWT001

品

AWG001

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

Aqua Way Gradienter

4.6×50mm−

21ew Products
泳 動 例

ポリアクリルアミドプレキャストゲル

■ 10 % [ コード No. 190 - 12941 ]

スーパーセップ TM

分子量（k） 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1112

分子量（k）

スーパーセップ TM はタンパク質や核酸の電気泳動用ポ
180
110
97
79

リアクリルアミドプレキャストゲルです。ゲル中に SDSを含んでいませんので、ランニングバッファーを変えることで SDS-PAGE、Native-PAGE に使用できます。また、
低分子領域の分離が優れている HG（High Grade）タイプ

4242も取り揃えております。

30

30

特

長

●保存安定性が優れている■ HG 5 - 20 % [ コード No. 195 - 13611 ]（使用期限は品目により製造日から６〜９ヶ月）

分子量（k） 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1112

●再現性が優れている

分子量（k）●ウェル容積が大きく、サンプルのアプライ量が多い

180
110
97
79

（12 ウェル：35 μℓ、17 ウェル：25 μℓ）●ウエスタンブロッティングにおいて、タンパク質のPVDF 膜への転写効率が優れている● HG タイプは、新製法により低分子領域の高分離を実現●価格が安く、ランニングコストを抑えられる

42
30
20
17
6.5
3.5

42
30
20
14
6.5

■ HG 10 - 20 % [ コード No. 199 - 13631 ]
分子量（k）

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1112

分子量（k）

30

180
110
97
79
42
30

20
17
6.5

20
14
6.5

プ レ ー ト サ イ ズ：100（H）×100（W）× 3（T）
（mm）

42

セレクションチャート
目的タンパク質の分子量に応じて、スーパーセップ

TMの濃度を選択して下さい。
品

目的タンパク質の分子量
（k）

名
4

6

8

10

25

50

使用
※
75 100 150 200 250 期限SuperSepTM

NEW〔泳動条件〕

7.5%（濃縮ゲル：5%）

6 ヶ月

10%（濃縮ゲル：5%）

6 ヶ月

12.5%（濃縮ゲル：5%）

9 ヶ月

15%（濃縮ゲル：5%）

6 ヶ月

3-10%

6 ヶ月

5-20%

9 ヶ月

10-20%

9 ヶ月

SuperSepTM HG
5-20%

6 ヶ月

10-20%

6 ヶ月

SuperSepTM（Tricine Gel）
NEW

15-20%[ コード No. 184 - 01291 ]電
流：20 mA/ 定電流（約 90 分）
染色：Quick-CBB PLUS [ コード No. 174 - 00553 ]サンプル
Lane 1：Molecular Weight Marker, Low Range[ コード No. 294 - 63101 ]6 ヶ月[ コード No. 131 - 14511 ]

12.5%

9 ヶ月

5-20%

9 ヶ月

10-20%

9 ヶ月※使用期限は製造日からの期限です。

[ コード No. 196 - 11022 ]泳動バッファー：Running Buﬀer Soln.（× 10）

Lane 2 , 3 , 8 , 9：大腸菌由来タンパク質
Lane 4 , 10 , 11：Molecular Weight Marker, Middle Range

SuperSepTM 2D

NEW

サンプルバッファー：Sample Buﬀer Soln.（× 2 , 2 -ME+）

保存条件
２〜 10℃・遮光保存（凍結不可）［次頁に続く］22

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

ew Products
コード No.
192-12901
199-12911
196-12921
193-12931
190-12941
197-12951
194-13061
191-13071
NEW

199-14611

NEW

196-14621
194-12961
191-12971
198-12981
195-12991
195-13611
192-13621
199-13631
196-13641

NEW
NEW

NEW

品
TM

SuperSep

名

ウェル

7. 5%

SuperSepTM 10 %SuperSepTM 12 . 5 %TMSuperSep

15 %SuperSepTM 3 - 10 %SuperSepTM 5 - 20 %SuperSepTM 10 - 20 %TM

SuperSep

HG, 5 - 20 %SuperSepTM HG, 10 - 20 %195-14691

SuperSepTM 15 - 20 %（TricineGel）
198-14701

規格

容量 希望納入価格（円）

電気泳動用 10 枚

12,00017電気泳動用 10 枚

12,00012

電気泳動用 10 枚

12,00017電気泳動用 10 枚

12,00012

電気泳動用 10 枚

12,00017電気泳動用 10 枚

12,00012

電気泳動用 10 枚

18,000タンパク質は還元アルキル化処理を施しているため、シャー

17

電気泳動用 10 枚

18,000プで均一なバンドが得られます。

12

電気泳動用 10 枚

18,00017電気泳動用 10 枚

18,00012

電気泳動用 10 枚

12,00017電気泳動用 10 枚

12,00012

電気泳動用 10 枚

12,00017電気泳動用 10 枚

12,00012

電気泳動用 10 枚

15,00017電気泳動用 10 枚

15,00012

電気泳動用 10 枚

15,00017電気泳動用 10 枚

15,00012

電気泳動用 10 枚

18,00017電気泳動用 10 枚

18,000190-13301

SuperSepTM 12 . 5 %, 2 D

2D

電気泳動用 10 枚

18,000197-13291

SuperSepTM 5 - 20 %, 2 D

2D

電気泳動用 10 枚

18,000192-14721

TM

SuperSep

10 - 20 %, 2 D

CBB 染色用マーカー

122D

電気泳動用 10 枚

銀染色用マーカー
本品は、それぞれ CBB 染色用（④〜⑦）、銀染色用（⑧〜⑪）に最適化された未着色マーカーです。含まれるマーカー

分子量（k）

分子量（k）

79

116
79

42

42

30

30

20
14

17

42

42

30
20
17
6.5
3.5

④低分子用

⑥高分子用

分子量（k）

分子量（k）

79②）。バンドの移動度が正確で、ロット間差がなくスタンダードとして最適です。

分子量（k）

180

180

110
79

110
97
79

42

42

30

30

20
16

20

42

42

14

30

30

16

20
14
6.5

6.5

ウエスタン用マーカー

⑧低分子用

⑨中分子用

含むリコンビナントタンパク質で作られたマーカーです（③）。

コード No.

品

名WIDE-VIEWTM Prestained Protein Size
MarkerⅡ
WIDE-VIEWTM Prestained Protein Size
230-02221
Marker239-02291

分子量
（k）

分子量
（k）

TM

140 blue

100 blue

100 blue

70 orange

70 blue
50 pink
40 blue

35 blue
25 orange

30 blue

20 blue

20 blue15 blue
7 blue15 blue②プレステイン

150
120
100
80
60
50
42
35
25

233-02211 WIDE-VIEW

Western Size Marker

294-63101 Molecular Weight Marker, Low Range
131-14511 Molecular Weight Marker, Middle Range
134-14501 Molecular Weight Marker, High Range
296-63301 Molecular Weight Marker, Wide Range
196-14001 Silver Stain MW Marker, Low Range
193-14011 Silver Stain MW Marker, Middle Range

16③ウエスタン⑩高分子用⑪ワイドレンジ

銀染色用

本品は、プロテイン G の免疫グロブリンとの結合域を①プレステインⅡ⑦ワイドレンジ

分子量（k）

本品は、あらかじめ色素と結合させたマーカーです（①〜50 blue

20

CBB 染色用

プレステインマーカー

140 blue

30

14
6.5

⑤中分子用

タンパク質サイズマーカー

分子量（k）
240 blue

180
116
97
79

200

18,000※専用泳動槽「イージーセパレーター TM」は p. 36 をご参照下さい。

分子量（k）

分子量（k）

190-14021 Silver Stain MW Marker, High Range
197-14031 Silver Stain MW Marker, Wide Range

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

規格

容量

500μℓ
（約50−100回用）
500μℓ
電気泳動用
（約 50−100回用）
250μℓ
電気泳動用
（約 50−250回用）
1 mℓ用
電気泳動用
（約 200回用）
1 mℓ用
電気泳動用
（約 200回用）
1 mℓ用
電気泳動用
（約 200回用）
1 mℓ用
電気泳動用
（約 200回用）
6 mℓ用
電気泳動用
（約 600回用）
6 mℓ用
電気泳動用
（約 600回用）
6 mℓ用
電気泳動用
（約 600 回用）
6 mℓ用
電気泳動用
（約 600 回用）
電気泳動用

希望納入価格（円） 写真№
20,000①

18,000②

20,000

③

9,800

④

9,800

⑤

9,800

⑥

9,800

⑦

12,000⑧

12,000⑨12,000⑩

12,000⑪

23

ew Products
接着細胞の剥離、細胞分散用

細胞培養用

トリプシン EDTA 溶液

液体培地

本品はろ過滅菌済みのトリプシン EDTA 溶液です。接平衡塩溶液

着細胞の剥離、各種組織の細胞分散などにご利用下さい。

液体培地は、D-MEM、E-MEM、RPMI- 1640 など汎用されている商品群を品揃えしています。ろ過滅菌済みですので、培養温度（37℃付近）に温めてそのままご利用下さい。
平衡塩溶液は Ca 2 +、Mg 2 + 不含です。細胞内外の浸透圧平衡を維持しながら細胞の洗浄や希釈を行う際にご利用下さい。

品質試験
液体培地（エンドトキシン試験、マイコプラズマ試験、無マイコプラズマ試験、ウイルス試験※、無菌試験、実用試
験

菌試験、細胞増殖能試験 適合品）

他

※ブタパルボウイルス試験済みの原料を使用しています。

コード No.

コード No.

希望納入価格（円）044-29765

●

●

1,800

043-30085●●

0.25w/v% Trypsin-1mmol/ℓ
細胞培養用 100mℓ
EDTA ･ 4Na Solution with Phenol Red

1,800

●

●

209-16941

名規格

L- グル フェノー ピルビ
タミン ルレッド ン酸

名0.05w/v% Trypsin-0.53mmol/ℓ
NEW 202-16931
細胞培養用 100mℓ
EDTA ･ 4Na Solution with Phenol Red
NEW

品

品

容量

NEW

048-30275

NEW

045-30285

関連商品
コード No.

☞P.25

名204-15933 expressed in Corn

規格

202-09221

24

希望納入価格（円）

5mg

8,000

50mg

48,000

50mg

2,800

100mg

4,200

500mg

15,000

208-09223

1g

24,000204-09225

5g

100,000

Trypsin Inhibitor, from Soybean> 9,000 BAEE units/mg

014-21021 Aprotinin, Bovine, recombinant

生化学用

500μℓ

18,0001,000μℓ

33,000038-10531 Collagenase034-10533 起源：Clostridium histolyticum
細胞分散用
コラゲナーゼだけでなく種々の加水分解酵素を含む粗製品。相乗効果で細胞分散作用が強い
032-10534

100mg

3,700

1g

22,0005g

78,000031-17601 Collagenase Type Ⅰ
037-17603 起源：Clostridium histolyticum
細胞分散用
共存酵素群をバランス良く含み、肝臓、肺、
035-17604 上皮細胞、脂肪組織からの細胞分散に優れる

100mg

5,000

010-21023 expressed in Plants, Solution

041-29775

細胞生物学用

206-09224

☞P.25

容量

細胞培養用

NEW

D-MEM
（Low Glucose）

051-07615 E-MEM●●

135-15175 MEM α●●

189-02025

●

●

●

●

189-02145●

183-02165

細胞
500mℓ 1,200
培養用

●

細胞
500mℓ 1,200
培養用細胞
500mℓ 1,200
培養用

●

細胞
500mℓ 1,200
培養用
●

細胞
500mℓ 1,200
培養用●

Ham s F-12K（Kaighn s Modification）
D-MEM/Ham s
048-29785F-12
080-08565

細胞500mℓ 1,500
培養用細胞
500mℓ 1,200
培養用●

087-08335 Ham s F-12NEW

細胞500mℓ 1,800
培養用細胞
500mℓ 1,200
培養用

RPMI-1640

NEW

希望納入
価格（円）

細胞
500mℓ 1,200
培養用●

186-02155

容量

細胞500mℓ 1,200
培養用

●

●

●

NEW

規格

細胞
500mℓ 1,200
培養用

040-30095
品

208-15931 Trypsin, Bovine, recombinant

202-09226

D-MEM（High Glucose）

HEPES

●

●

●

●

●

●

●

●

●

細胞
500mℓ 1,200
培養用細胞
500mℓ 3,800
培養用細胞
500mℓ 1,200
培養用

500mg

16,0001g

26,500038-17851 Collagenase Type Ⅴ
034-17853 起源：Clostridium histolyticum
細胞分散用
トリプシン活性を抑えているため、膵臓から032-17854 の細胞分散に優れる

100mg

4,500

500mg

15,800

コード No.

1g

28,600084-08345 HBSS（−）with Phenol Red

細胞培養用 500mℓ

1,200

035-17861 Collagenase Type X
031-17863 起源：Clostridium histolyticum
細胞分散用
プロテアーゼ活性が高く、骨、心臓、胸腺、
039-17864 唾液腺などの硬組織の細胞分散に優れる

100mg

5,000

1,200

18,000045-29795 D-PBS（−）

細胞培養用 500mℓ

500mg
1g

32,000048-29805 10 × D-PBS（−）

細胞培養用 500mℓ

2,300

平衡塩溶液（エンドトキシン試験、マイコプラズマ試験、無菌試験 適合品）

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

品

名

規格

容量

希望納入価格（円）ew Products
動物由来成分不含

リゾチーム，ヒト，植物発現組換え体

植物発現組換えタンパク質

本品は、ニワトリ卵白由来リゾチームと比較して、グラム陽性菌、陰性菌に対して４倍以上の溶菌活性を示しま

再生医療用の組織培養、動物培養細胞を用いたワクチンす。溶菌活性はヒト由来リゾチームと同等で、動物細胞をや抗体医薬の製造などにおいて、動物由来成分不含の培地用いた組換えタンパク質生産時に細菌のコンタミネーショが注目されています。

ン抑制に最適です。

当社では、これらのニーズに対応するため、植物発現組単位の定義：Micrococcus 属 細 菌 の 懸 濁 液 を 基 質 と し て、換えタンパク質として、ウシアプロチニン、ヒトラクト

450 nm における吸光度を 0 . 001 変化させる酵

フェリン、ヒトリゾチーム、ウシトリプシンの、計４種類

素量を 1 unit とする。

をラインアップしております。ヒト由来ウイルスや、BSE

デ ー タ

原因物質の混入の心配がありません。

■ Micrococcus luteus への溶菌活性アプロチニン，ウシ，植物発現組換え体，溶液

16

本品は、接着性の動物培養細胞のトリプシン処理後に添12加し、トリプシンを不活性化するために使用します。
プロテアーゼ阻害活性：＞ 5 TIU/mg protein8
比活性（10 units/mg）

1 TIU（Trypsin Inhibitor Unit）≒ 900 KIU（Kallikrein Inhibitor Unit）

4

8 UIP（Peptidases Inhibitor Units）= 1 KIU（Kallikrein Inhibitor Unit）
1

2

4

分子量
（k）
← 30

本品

ヒト由来 ニワトリ卵白由来
リゾチーム
リゾチーム

← 20

Micrococcus luteus に対するニワトリ卵白由来リゾチームとヒト由来リゾ
チームとの溶菌活性比較。ヒト由来リゾチームと同等の活性を示した。

← 15

トリプシン，ウシ，とうもろこし発現組換え体

本品→

本品は、接着性の動物培養細胞のトリプシン処理に使用

レーン 1：本品 5μg
レーン 2：分子量マーカー

します。
活性：72 TAME units/mg 以上（3 , 300 USP units/mg 以上）
単位の定義：pH 8 . 2、25℃、0 . 01 mol/ℓ カ ル シウ ム イ オ

ラクトフェリン，ヒト，植物発現組換え体
本品は、一般的な細胞や増殖効率が低い細胞の培養、ハン の 存 在 下 に お い て 1 分 間 に 1 μmol のN α -イブリドーマによる IgG 1 の生産に最適です。無血清最小

ｐ - ト シ ル -L- ア ル ギ ニ ン メ チ ル エ ス テ ル

培地を用いたハイブリドーマの IgG 1 生産量は、トランス（TAME）を加水分解する酵素量を 1 TAME

フェリン添加時の約 1 . 5 倍です。

unit とする。
1 TAME unit = 19 . 2 USP unit = 57 . 5 BAEE unit

デ ー タ

コード No.

■ トランスフェリンとの細胞増殖能比較

014-21021
NEW

010-21023
8

188-02051

HEK 細胞数（106 Cells/mℓ）

184-02053

品

名Aprotinin, Bovine, recombinant
expressed in Plants, Solution

規格
細胞培養用

Lactoferrin, Human, recombinant
細胞培養用
expressed in Plants

182-02054

4185-02061
NEW

181-02063

Lysozyme, Human, recombinant
細胞培養用
expressed in Plants

189-02064
トランスフェリン

本品

Human Embryonic Kidney（HEK）細胞の培養では、トランスフェリン
よりも細胞数が約2倍であった。

208-15931
204-15933

Trypsin, Bovine, recombinant
expressed in Corn

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

細胞生物学用容量

希望納入価格（円）500μℓ

18,0001,000μℓ

33,000

50mg

9,200

100mg

14,000500mg

60,700

10mg

2,000

100mg

5,000

500mg

16,000

5mg

8,000

50mg

48,00025

ew Products
生体防御機能研究に！

がん転移抑制剤

LPS（リポポリサッカリド）

MI - 22LPS は、グラム陰性菌の細胞壁の最外層を構成している

近年の研究により、がん細胞株でギャップ結合を構成す成分です。本品には、菌体より粗 LPS をフェノール - 水抽るタンパク質であるコネキシン 26 の発現増大が確認され出法（Westphal 法）にて抽出した製品（フェノール抽出ており、がん細胞の転移機構の一つとしてコネキシン 26

品）と、さらに超遠心法で精製し２回洗浄した製品（超遠の関与が示唆されています。
オレアミドの誘導体である MI- 22（metastasis inhibitor- 22）心品）の２種類があります。各種炎症反応の誘発実験など

は、がん細胞がコネキシン 26 を介して他の細胞とギャッにご使用下さい。
プロテウス菌３株はリケッチア感染症（発疹症、発疹チ
フス、ツツガ虫病）の血清診断（Weil-Felix 反応）に用い

プ結合を形成するのを抑制するだけでなく、in vivo における自然転移も抑制することが分かってきています。

られています。リケッチアとプロテウス菌の LPS にある O
Connexin 26

抗原に共通構造があることが明らかにされています。

Plasma membranes

規格

形状：凍結乾燥品
コード No.

品

名

菌株 精製

規格 容量 希望納入価格（円）

Escherichia coli
Lipopolysaccharide,
120-05131 from E.coli O26（by phenol extraction）

O26

細胞
フェノー
生物 25mg
ル抽出
学用10,000

Lipopolysaccharide,
127-05141 from E.coli O55（by phenol extraction）

O55

細胞
フェノー
生物 25mg
ル抽出
学用10,000

Lipopolysaccharide,
125-05201 from E.coli O111
（by phenol extraction）

細胞
フェノー
O111
生物 25mg
ル抽出
学用10,000

Lipopolysaccharide,
124-05151 from E.coli O127
（by phenol extraction）

細胞
フェノー
O127
生物 25mg
ル抽出
学用10,000

Lipopolysaccharide,
121-05161 from E.coli O26（by ultracentrifugation）

細胞
O26 超遠心 生物
学用

5mg

12,000

Lipopolysaccharide,
128-05171 from E.coli O55（by ultracentrifugation）

細胞
O55 超遠心 生物
学用

5mg

12,000

Lipopolysaccharide,
NEW 126-05471
from E.coli O103
（by ultracentrifugation）

細胞
O103 超遠心 生物
学用

5mg

12,000

Lipopolysaccharide,
125-05181 from E.coli O111
（by ultracentrifugation）

細胞
O111 超遠心 生物
学用

5mg

12,000

Lipopolysaccharide,
122-05191 from E.coli O127
（by ultracentrifugation）

細胞
O127 超遠心 生物
学用

NEW

Lipopolysaccharide,
129-05461 from E.coli O157
（by ultracentrifugation）

細胞
O157 超遠心 生物
学用

26

長

●ギャップ結合を介した細胞間コミュニケーションを阻害する●in vivo における自然転移も抑制する
化学名：N 1,N 1,N 7,N 7 -Tetraethyl- 2, 6-di[（Z ）-7-hexadecenyl]heptanediamide
外

観：黄色油状物
O
NEt2

NEt2

5mg

12,000O
C47H90N2O2＝715.23

5mg

12,000〔参考文献〕
１）Ito, A. et al . : J. Clin. Invest ., 105 , 1189（2000）.

細胞
フェノー
OX2
生物 25mg
ル抽出
学用15,000

Lipopolysaccharide,細胞
フェノー
121-05281 from Proteus vulgaris OX19 OX19
生物 25mgル抽出（by phenol extraction）
学用

15,000細胞
フェノー
生物 25mg
ル抽出
学用15,000

Lipopolysaccharide,
128-05291 from Proteus mirabil is OXK（by phenol extraction）

特●コネキシン 26 を特異的に阻害する

Proteus vulgaris
Lipopolysaccharide,
124-05271 from Proteus vulgaris OX2（by phenol extraction）

MI-22

OXK

２）Ito, A. et al . : Carcinogenesis , 25 , 2015（2004）.
３）Ohba, Y. et al . : Int. J. Cancer , 121 , 2801（2007）.
コード No.

品

名

規

格

132-15043
MI-22

136-15041

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

容量

希望納入価格（円）

5mg

5,000

200mg

50,000

細胞生物学用ew Products
神経系シグナル伝達研究に！

認知症などの研究にグルタミン酸レセプター作用物質

カイニン酸n 水和物

当社でラインナップしている神経系レセプター作用物質

回 虫 駆 除 剤 と し て 知 ら れ る 紅 藻 の マ ク リ（ 海 人 草、Digenea simplex ）から抽出、単離されたグルタミン酸骨に、新しく２品目が追加になりました。

格を持つアミノ酸です。

（+）-MK 801 マレイン酸塩【Dizocilpine Maleate】
NMDA 型グルタミン酸受容体に選択性を示す非競合的
アンタゴニストです。リガンドが結合して開いたイオン
チャンネル部のポア領域に結合するオープンチャンネル阻

本品は、カイニン酸型グルタミン酸受容体の選択的アゴ
ニストの一つで、中枢神経を著しく興奮させる薬理作用があります。カイニン酸カスケードを経由するシグナル伝達系、神経細胞のアポトーシス、ALS（筋萎縮性側索硬化症）、アルツハイマー病の病態メカニズムの研究などに利害剤です。

用されます。

規

水溶状：澄明格

含量（HPLC）：98 . 0％以上

含量：98 . 0％以上

HN

20
（c= 0 . 1, C 2 H 5 OH）：＋ 114 〜＋ 118℃
比旋光度〔α〕
D

COOH
H
CH2COOH

H
H2C

NH
・C4H4O4

H

C
CH3

CH3

C10H15NO4・nH20（C10H15NO4 = 213.23）
C16H15N・C4H4O4＝337.37

保存条件
２〜 10℃・遮光保存

CAS No.：77086 - 22 - 7

コード No.

品

名Kainic Acid n -Hydrate

規格

容量

希望納入価格（円）

生化学用

10mg

15,000MPEP 塩酸塩【2-Methyl- 6-（Phenylethynyl）
pyridine Hydrochloride】

118-00751

代謝型グルタミン酸受容体５型（mGluR5）に選択性をお求め易くなりました

示す強力な非競合的アンタゴニストです。

ユビキノン -10【Coenzyme Q10】

格

生体の細胞内に存在する補酵素です。生体のエネルギー

含量：98 . 0％以上産生に重要な役割を果たし、最近では抗酸化作用も注目さ規れています。
外観：黄色〜だいだい色、粉末または塊C
N
H3C

含量（HPLC）：98 . 0％以上

C

O

・HCl

H3 CO
C14H11N・HCl＝229.70

CH3

H3 CO

H
O

コード No.

NEW

NEW

品

名

134-15461 （+）-MK801 Maleate130-15463 【Dizocilpine Maleate】

規格
細胞生物学用MPEP Hydrochloride
131-15471 【2-Methyl-6（Phenylethynyl） 細胞生物学用
pyridine Hydrochloride】

容量

希望納入価格（円）10mg

12,50050mg

49,00010mg

24,000CH3

10

C59H90O4 = 863.34
コード No.

品

名

規格

211-01311
Ubiquinone-10

219-01312

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

容量

希望納入価格（円）

5g

8,000

25g

29,000

和光特級

27

ew Products
新規阻害剤

アポトーシス阻害剤
RKTS- 33

理化学研究所 抗生物質研究室 長田裕之博士が発見した新規の阻害剤を理化学研究所から販売ライセンスを受け製

本品はPaecilomyces 属から単離されたエポキシシクロ

品化しました。

ヘキセノンの誘導体です。エポキシシクロへキセノンよりも低毒性であり、エポキシシクロヘキセノンと同様に、細

HSP60 阻害剤

胞傷害性 T 細胞によるパーフォリン依存性経路を阻害せETBず、Fas リガンド依存性経路のみを選択的に阻害すること

本品はPenicillium 属から単離されたエポラクタエンのによりアポトーシスを阻害します。
O誘導体です。ヒト神経芽腫細胞 SH-SY 5 Y に対してエポラ
クタエンより強力な細胞増殖抑制効果があり、アポトー

O

シスを誘導します。また、ヒト T リンパ腫細胞 Jurkat にOH

対してアポトーシスを誘導することが明らかにされていOHます。近年では、ETB の結合タンパク質の一つとして

C7H8O4＝156.14

HSP 60 が同定されました。HSP 60 に結合し、シャペロン
活性を阻害します。
OO〔参考文献〕

O１）Mitsui, T., Miyake, Y., Kakeya, H., Hayashi, Y., Osada, H. andO

Kataoka, T. : Biosci. Biotechnol. Biochem ., 69（10）,1923（2005）.

O NH

細胞周期阻害剤OH
C24H33NO6＝431.52

トリプロスタチン A〔参考文献〕

本品はAspergillus 属から単離されたアルカロイド系抗１）Nagumo, Y., Kakeya, H., Shoji, M., Hayashi, Y., Dohmae, N. and

生物質です。微小管結合タンパク質結合部位に作用し、細Osada, H. : Biochem. J ., 387（3）,835（2005）.

胞周期を M 期特異的に停止させることにより抗腫瘍活性を示します。

タンパク質合成阻害剤

H

H3CO

O

リベロマイシン A ナトリウムN
N
H

本品はStreptomyces 属から単離された抗生物質です。

HN
H

イソロイシル tRNA 合成酵素をターゲットとし、真核細胞

Oのタンパク質合成を阻害します。抗腫瘍活性や抗真菌性が認められて研究が進められていましたが、近年では低濃度
C22H27N3O3＝381.47

投与により、酸性環境を作り出す活性化破骨細胞に細胞死を誘導することがわかり、骨粗鬆症・多発性骨髄腫の治療〔参考文献〕

薬候補として注目を浴びています。

１）Usui, T., Kondoh, M., Cui, C. B., Mayumi, T. and Osada, H. : Biochem.

O

O
HOOC

H

J ., 333（3）,543（1998）.

COOH

O

H
COOH

O

コード No.

品

名

規

格

容量

希望納入価格（円）OHNEW

051-07671 ETB

細胞生物学用 200μg

38,000NEW

185-02181 Reveromycin Sodium Salt 細胞生物学用 500μg

30,000NEW

182-02191 RKTS-33

細胞生物学用 200μg

38,000NEW

203-16961 Tryprostatin A

細胞生物学用 500μg

30,000※本品は上記構造式化合物のナトリウム塩です。

〔参考文献〕
１）Woo, J. T., Kawatani, M., Kato, M., Shinki, T., Yonezawa, T., Kanoh,N., Nakagawa, H., Takami, M., Lee, K. H., Stern, P. H., Nagai, K. andOsada, H. : Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 103（12）,4729（2006）.

28

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

ew Products
関連商品

マイコトキシン試験用

カビ毒粉末品

カビ毒溶液

コード No.

品

規 格

容量

希望納入価格（円）マイコトキシンはカビの二次代謝産物として産生され、016-17671

Aﬂatoxin B 2

生化学用

10mg

41,000ヒトや動物などに対して毒性を有する物質の総称です。こ010-17691

Aﬂatoxin G 2

生化学用

10mg

58,000の度、食品など検体中のマイコトキシンの検査に用いるこ

018-18351

Aﬂatoxin M 1

生化学用

100μg

30,000024-07761

Butenolide

マイコトキシン試験用

10mg

15,700030-17171

Cyclopiazonic Acid

生化学用

5mg

8,500

046-20401

Diacetoxyscirpenol

マイコトキシン試験用

10mg

16,000048-18631

Deoxynivalenol Standard

マイコトキシン試験用

10mg

24,000141-04661

Neosolaniol Standard

マイコトキシン試験用

10mg

20,000144-04651

Nivalenol Standard

マイコトキシン試験用

10mg

21,000150-02111

Ochratoxin A

生化学用

5mg

42,000168-21631

Patulinマイコトキシン試験用

10mg

30,000209-08251

T- 2 Toxin Standard

マイコトキシン試験用

10mg

15,500とができるカビ毒の溶液タイプを各種揃えました。
溶解の手間を省き、簡便にマイコトキシン試験を行うことができます。
形状：アセトニトリル溶液（＊フモニシン類のみアセトニトリル：水（１：１））
濃度（μg/mℓ）

コードNo.

品

容量

希望納入価格（円）019-21071

3-Acetyl-deoxynivalenol
Solution

100

15-Acetyl-deoxynivalenol
016-21081
Solution

マイコトキシン試験用

5mℓ

59,000013-21091 Aﬂatoxin B1 Solution

100

マイコトキシン試験用

5mℓ

59,0002

マイコトキシン試験用

5mℓ

45,000016-21101 Aﬂatoxin B2 Solution

0.5

マイコトキシン試験用

5mℓ

45,000013-21111 Aﬂatoxin G1 Solution

2

マイコトキシン試験用

5mℓ

45,000

フィトエンは、植物や菌類において生体内で合成される

010-21121 Aﬂatoxin G2 Solution

0.5

マイコトキシン試験用

5mℓ

45,000017-21131 Aﬂatoxin M1 Solution

0.5

マイコトキシン試験用

5mℓ

52,000

最初のカロテノイドです。その後、フィトエン→フィトフ

Deepoxy-deoxynivalenol
Solution50

マイコトキシン試験用

5mℓ

65,000043-30161 Deoxynivalenol Solution

100

マイコトキシン試験用

5mℓ

59,000100

マイコトキシン試験用

5mℓ

65,00050

マイコトキシン試験用

5mℓ

57,000067-04911 Fumonisin B2 Solution

50

マイコトキシン試験用

5mℓ

64,000068-04941 Fusarenon X Solution

100

マイコトキシン試験用

5mℓ

60,000144-08431 Neosolaniol Solution

100

マイコトキシン試験用

5mℓ

64,000147-08421 Nivalenol Solution

100

マイコトキシン試験用

5mℓ

59,000

159-02701 Ochratoxin A Solution

10

マイコトキシン試験用

5mℓ

59,000166-22771 Patulin Solution

100

マイコトキシン試験用

5mℓ

75,000083-08491 HT-2 Toxin Solution

100

マイコトキシン試験用

5mℓ

75,000205-16801 T-2 Toxin Solution

100

マイコトキシン試験用

5mℓ

75,000267-01911 Zearalenone Solution

100

マイコトキシン試験用

5mℓ

59,000

B1,G1･･･2
B2,G2･･･0.5 マイコトキシン試験用

5mℓ

52,000

各0.25

マイコトキシン試験用

6mℓ

80,000各50

マイコトキシン試験用

5mℓ

75,000各100

マイコトキシン試験用

5mℓ

90,000046-30151

040-30171

名

名

Diacetoxyscirpenol
Solution

060-04901 Fumonisin B1 Solution＊＊

Aﬂatoxins Mixture014-21141 Solution 1[Aﬂatoxin B1, B2, G1 and G2]

Aﬂatoxins Mixture011-21151 Solution 2

規格

3-Acetyl-deoxynivalenol,
15-Acetyl-deoxinivalenol]

A, B-Trichothecenes,
Zearalenone Mixture
Solution209-16821[3-Acetyl-deoxynivalenol,
Deoxynivalenol, Nivalenol,
Fusarenon X, HT-2 toxin, T-2
toxin, Diacetoxyscirpenol and
Zearalenone]

各10

マイコトキシン試験用

5mℓ

110,000レン）→リコペンと生合成経路をとることが知られています。また、近年、フィトエンによる、細胞の脂質過酸化抑制作用が示唆されています。
■ フィトエン

C40H64＝544.94■ フィトフルエン〔参考文献〕
２）高市真一：「カロテノイド−その多様性と生理活性−」（裳華房）．
純度
抽出 /合成（HPLC）

形状

容量 希望納入価格（円）516-23971 0044 （ / ）-Phytoene

約 98%

抽出

oily

1mg 116,800

513-23981 0042 （ / ）-Phytoﬂuene

約 95%

抽出

oily

1mg 116,800

純度
抽出 /合成（HPLC）

形状

容量 希望納入価格（円）

コード No. メーカー
コード

品

名

関連商品
コード No. メーカーコード

※ 一部の品目については生物・毒素兵器の製造・使用防止の為、販売の際に ｢ 試験研究用に使用することを確認する証 ｣ を頂いております。

ルエン→ ζ−カロテン→ノイロスポレン（ニューロスポ

１）谷村顕雄 編：「天然色素ハンドブック」（光琳）．

[Fumonisin B1 and B2]

B-Trichothecenes Mixture
Solution202-16811 [Deoxynivalenol, Nivalenol,（E/Z ）-フィトエン（E/Z ）-フィトフルエン

C40H62＝542.92[Aﬂatoxin B1, B2, G1 and G2]Fumonisins Mixture
065-04951 Solution＊

カロテノイド生合成の研究に！

品

名512-28571 0038 ζ-Carotene−

0031

519-23961 0034

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

約 98%

合成

crystal 1mg

99,700

Lycopene

約 95%

合成

crystal 1mg

56,000

Neurosporene

約 95%

合成

crystal 1mg

99,70029

ew Products
エピジェネティクス研究に

5- アザシチジン

DNA メチル化阻害剤

本品は、濃度依存的にゲノム DNA の脱メチル化を引きDNA のメチル化はエピジェネティックな遺伝子の発現起こす、DNA メチル化阻害剤の一つです 1）。前立腺がん制御に関与しています。DNA メチルトランスフェラーゼ

細胞におけるプロモーター部位メチル化研究 2）などに使用（DNMT）によって DNA の C（シトシン）塩基の５位炭素されています。

原子にメチル基が付加され、メチル化 DNA が生成されます。

ＮＨ2

含量（HPLC）：98 . 0％以上

DNMT に よ る DNA メ チ ル 化 に は ２ 種 類 存 在 し、
DNMT 1 による維持型 DNA メチル化（DNA 複製後もメ

CAS No.：320 - 67 - 2

チ ル 化 状 態 が 維 持 ） と、DNMT 3 a と DNMT 3 b に よ る

保存条件：− 20℃

ＮO

de novo 型 DNA メチル化（メチル化されていない DNA

ＨO

Ｎ
Ｎ

O

を新たにメチル化）があります。がん細胞・生殖細胞の種類や、細胞周期に依存して、メチル化 DNA 量が変化すOＨるため、DNA メチル化を効果的に阻害することにより、遺伝子発現を詳細に解析することができます。

OＨ
C8H12N4O5＝244.20〔参考文献〕

１）Stresemann, C. et al . : Cancer Res ., 66 , 2794（2006）.
２）Leiblich, A. et al . : Oncogene ., 25 , 2953（2006）.

DNA メチルトランスフェラーゼ阻害剤
本品は、5 - アザシチジンや 5 - アザ - 2 - デオキシシチジン

5- アザ - 2 - デオキシシチジンなどの DNA メチル化阻害剤とは異なり、DNA メチルトラ
本品は、濃度依存的にゲノム DNA の脱メチル化を引

ンスフェラーゼの酵素活性中心に結合することでその酵素き起こす、シチジン類縁体の DNA メチル化阻害剤の一活性を不活性化します。

つです 1）。肺がん細胞におけるプロモーター部位メチル

含量（HPLC）：97 . 0％以上

化研究 2）などに使用されています。

O

保存条件：− 20℃

ＮＨ2

N

含量（HPLC）：97 . 0％以上

O

O
N
H

Ｎ

CAS No.：2353 - 33 - 5

OH

保存条件：− 20℃

Ｎ
O

Ｎ
ＨO

C19H14N2O4＝334.33

O〔参考文献〕
１）Brueckner, B. et al . : Cancer Res ., 65 , 6305（2005）.

OＨ

ゼブラリン

１）Stresemann, C. et al . : Cancer Res ., 66 , 2794（2006）.
２）Vuillemenot, B. R. et al . : Mol. Cancer Res ., 4 , 267（2006）.

本品は、濃度依存的にゲノム DNA の脱メチル化を引き

コード No.

起こす、シチジン類縁体の DNA メチル化阻害剤の一つで041-30101

1）

す 。水溶液中での安定性が高く、低毒性であることが知NEW

047-30103

られています 2）。

267-01891
Ｎ

263-01893

O

保存条件：４℃
ＨO

名DNA Methyltransferase Inhibitor規格

遺伝子研究用遺伝子研究用Zebularine

ＮOＨ

32,00025mg

76,0005mg

14,00025mg

56,0004,800
10,000014-20644

1g

38,000018-20941

10mg

16,00050mg

68,000014-20943
OＨ

希望納入価格（円）250mg

016-20643 5-Azacytidine

O

量

10mg

容

100mg

NEW

30

品

010-20641

含量（HPLC）：97 . 0％以上

〔参考文献〕C8H12N4O4＝228.21〔参考文献〕

生化学用

5-Aza-2 -deoxycytidine

遺伝子研究用関連商品

C9H12N2O5＝228.20

コード No.

品

名

規

格

容

量

希望納入価格（円）１）Stresemann, C. et al . : Cancer Res ., 66 , 2794（2006）.

059-05411 （−）-Epigallocatechin Gallate

生化学用

100mg

13,000２）Cheng, J. C. et al . : J. Natl. Cancer Inst ., 95 , 399（2003）.

167-15111 Procaine Hydrochloride

生化学用

50g

5,500

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）化学大家 406
柴田雄

次 （1882 〜 1980）
大阪大学名誉教授

芝哲夫

日本の無機化学研究の基礎を固め、頃、ウェルナーがウュルツブルグ大学

錯体化学、地球化学に新しい道を開いへ移るのを止めてチューリヒ大学に留たわが国化学の先達柴田雄次は明治まっていることが分かり、柴田は改め

15 年（1882）１月 28 日に柴田承桂の次てウェルナー研究室へ移ることをハン

男として東京に生まれた。父承桂は名チに申し出た。ハンチはライプチッヒ

古屋藩藩医の家の出身で、わが国の近大学に赴任する前にチューリヒ工業大代薬学の最初の開拓者であった。長兄

学に勤めていた時代があり、そのときは植物化学者として有名になる柴田桂

ウェルナーがその助手として働いてい太であった。そのような一家の環境のたという縁があって、ハンチは快く柴中で育った柴田雄次は第一高等学校を

田の申し出を受けてウェルナーへの推卒業後、明治 37 年（1904）に東京帝薦状を書いてくれた。

国大学理科大学すなわち現在の東大理

その頃、ウェルナー研究室では新し

学部化学科に入学した。

い原子価理論に基づく錯塩（Complex

卒業研究は松原行一教授の有機化学講座に所属して、テトラメチレン‐
1 , 2 , 3 , 4 - テトラカルボン酸の合成と

salt, 今日では錯体と呼ばれる）の配写真１．柴田雄次位説が一般に認められるために最も重要な根拠となる錯塩構造の分子不斉にその立体異性体の課題を与えられた。

よる光学異性体分割の実験が行われ卒業後はさらにフタル酸エステルなど

旦は断った。しかし桜井は「君の研究ていて、それが英人留学生のキングに対するグリニヤ試薬の反応の研究をは有機化学であろうと無機化学であろKing によってはじめて成功した矢先続け、生涯を有機化学研究にささげる

うと好むままでよろしい。ただ帰朝で研究室は沸いていた。柴田はコバル

熱意に燃えていた。

後は無機化学の講義をしてくれれば3+
X 3 を合成し、ト錯塩 [Co en（NH23）
2]

明治 43 年（1910）になって桜井錠

よく、留学先も自由に選んでよろし

その光学異性体の分割を行ってウェル二教授に呼ばれて、当時病気療養中のい」との桜井の言葉に逆らうことがでナーの期待に応えた。

無機化学担当の垪和（はが）為昌の後きず、遂に決心して、当時『無機化学柴田は予定の留学期間の最後の年を任候補として無機化学研究のための留の領域における新見解』の書を著しさらにフランスのパリのソルボンヌ大学を命じられた。有機化学を志向してて、新しい錯体化学の領域を切り拓こ

学の G. ユルベン Urbain の許で希土類いた柴田にとっては自分には到底できうとしていたスイスの A. ウェルナー

化学を学ぶために留学することにしないこととしてこの桜井の申し出を一

Werner 教授の許に行くことに決めてた。ユルベンはしかし希土類元素の研日本を出発した。

究は面倒な分別結晶の手法が多く長年チューリヒに着いてそこで留学中の月を要するので、短期の外国留学生に

眞島利行と朝比奈泰彦に迎えられた柴は不適当であるとして吸収スペクトル田は目指すウェルナー教授がドイツのによる金属錯塩の色の研究のテーマをウュルツブルグ大学へ移るために視察与えた。不思議なことに柴田が欧州で旅行中であるという思いがけない話を渡り歩いた三ヶ所の研究室での研究対聞いた。落胆した柴田は急遽ベルリン

象はいずれもコバルト化合物であっに滞在中の兄の桂太を訪ねて新しい留た。それがまた帰国後の柴田の研究を

学先を相談した。結局兄と一緒にライ方向づけることになった。さらに幸運

プチッヒに移り、そこの大学の A. ハ
ン チ Hantzsch 研 究 室 に 入 る こ と になった。
柴田がハンチから与えられたテーマ
はコバルト塩類の色の変化を紫外吸収
スペクトルで調べることであった。こ写真２．チューリヒにおける朝比奈泰彦（左）、眞島利行（中央）、柴田雄次（右）こではじめて柴田は分光化学的手法を習得したことが後の研究に役立つことになった。一年間でこの仕事を終えた

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

写真３．ウェルナーの自筆「化学は分子世界の天文学であらねばならない」〔『日本の化学と柴田雄次』所載〕

31

写真４．チューリッヒ大学ウェルナー研究室の人々
前列左より３人目がウェルナー、右より３人目が柴田〔『日本の化学と柴田雄次』所載〕

なことには丁度その時ユルベン研究室

百種以上の錯塩の構造と発色の関係の端緒ともなった。帰朝後に柴田がフが注文していた Adam Hilger 社の新研究を継続し、錯体の吸収スペクトル

ランス科学書の輪読会を始めて多く鋭の石英分光器が到着した。柴田はこの体系的研究を達成した。大正 10 年の人々を糾合して次々と和訳書を刊の分光器の操作を任され、合成した（1921）に柴田は『分光化学』（裳華房

行した。その中で V.I. ベルナドスキイ

25 種のコバルト錯塩を用いてその吸刊）を著しこの分野の研究成果をまとVernadoski著の収スペクトルを観測し、系統的な分光化学的研究に先鞭をつけることができめた 。

Géochimieの書に遭遇したことが機縁となり、地球化学

わが国ではそれまで配位化学は全くに関する外国文献を講読する地球化学の処女地であったが、柴田によって播会が始められ、それが地球化学討論会

不思議な縁の糸に操られたような柴かれた種子はその門下生たちによってに発展することになった。柴田をはじ

田の３年間の欧州留学体験は柴田個人

着実に育てられて行った。松野吉松にめとして木村健二郎、植村琢らととものその後の研究のみならず、わが国のよる金属錯塩による水膠液の凝固に関に美濃苗木石の分析から始まるフェル

新しい化学の研究分野の開拓に多大のする研究、井上敏による錯塩生成の新グソン石、モナズ石などの希元素鉱石貢献を果たすことになった。

検出法、槌田龍太郎による錯塩水溶液の科学的研究が開始された。それが今

た。

32

1）

大正２年（1913）に帰国した柴田はおよび微細結晶の吸収スペクトル研究

日日本の地球化学がこの領域で世界的

東京帝国大学理科大学の助教授に任命などとして開花して行った。昭和 22に指導的立場に発展する契機となっされ、無機化学および分析化学の講義

年（1947）には植村琢によりウェルた。

を担当して多忙な生活に入った。フ

ナー生誕記念祭が開催された。これが次に柴田は令兄桂太との協同研究とランス滞在中に注文していた Adam

契機となって日本化学会主催の錯塩化

して植物化学関係の仕事を行った。まHilger の石英分光計も到着して、わが学討論会が毎年開かれることになっず植物色素アントシアンの花色の研究

国はじめての分光学研究が開始された。

がある。花の赤色については R. ウィ

た。柴田は松野吉松から始まる協同研

柴田がフランスのユルベン研究室でルステッター Willstätter によるアン究者にも恵まれ、コバルトのみならず

留学最後の１年間を過ごした経験は日トシアニンの構造が提出されていたニッケル、クロム、銅をはじめとする本に新しい地球化学の研究が拓かれるが、塩基性で青色に変じるのはその和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

フェノラートによるとされていたこと

古文化財自然科学研究会を立ち上げに柴田らは疑問を持ち、その青色はアた。それが国立博物館内に古文化財研

ントシアニンがマグネシウムと錯化合究所が設けられるきっかけとなった。

物をつくるという説を立てた。しかし

また柴田は正倉院御物の保存・調査に

これはウィルステッター一派により痛も委員として貢献した。

烈な反論を受けたが、後に服部静夫や

昭和 17 年（1942）に柴田は東京大林孝三によりこの錯体説が確証された

学理学部教授を定年退官し、同年新設

のみならず、最近に至り後藤俊夫らにされた名古屋大学理学部の学部長に就よりツユクサの青色色素コンメリニン

任した。名古屋は柴田の父承桂の出身の化学構造が X 線解析によりアント

地で、柴田家は代々尾張藩の藩医を勤

シアニンのマロニルアオバニンとフラめる家柄であったので、名大赴任もそ

ボンのフラボコンメリニンの重層構造の機縁であった。新設の理学部を充の中心にマグネシウムが存在する構造

実させる間もなく、戦争が苛烈となが確定したことは、柴田兄弟により先り、研究室もすべて疎開した後も柴田

鞭をつけられた花色色素の研究の大団は学部長として独り留まった。戦争が者が多くおられる中で、門外漢の私が終り、延び延びになっていた引退も漸

ただ既知の資料をもとにまとめて紹介

また桂太、雄次兄弟による協同研究く昭和 23 年（1948）に実現し、柴田させて頂いたのは、与えられた責めをとして植物体におけるフラボン類色素はその機会に自伝「化学界四十年の見果たすための所業としてその非礼を免の存在意義についての提唱がある。葉聞」を雑誌『化学の領域』に投稿しぜられんことを願いつつ筆を擱く。

11）円であった 。

緑植物の同化作用には赤色光線のエネ

写真５．柴田雄次漢詩 昭和４８年〔『日本の化学と柴田雄次』所載〕

2）

た 。

ルギーが必要であるが、紫外線はむし

柴田の社会的活動は名大退官をろ有害であるはずである。フラボン類

もって終わらなかった。翌昭和 24 年

はこの紫外線を吸収して葉中で紫外線（1949）に今度は東京都立大学総長に遮蔽効果の役割を担っていることを明就任し、新制大学の教育のために新たらかにした。

な意欲と努力を重ねることになった。

〔参考文献〕
１）柴田雄次：『分光化学』，（裳華房）大正 10 年
（1921）．
２）柴田雄次：「化学界四十年の見聞」Ⅰ , Ⅱ , Ⅲ ,完， 化 学 の 領 域，2 , 254 , 335 , 396（1948），
3 , 2 ,（1949）．

植物における金属錯体についてのも

さらにはまた昭和 26 年（1951）には

３）柴 田 雄 次：
「私と錯塩化学̶ウェルナー

うひとつの研究はフラボン色素にコバ

日本化学会に創設された化学教育委員（Werner）の思い出」，科学知識，昭和 44 年

ルト錯塩を滴下すると褐色の沈殿を生会の初代委員長に推されて、現在までじることに端を発して山崎一雄ととも続いている同委員会の基礎を築いた。

に金属錯体の酵素的酸化還元作用の機

昭 和 37 年（1962）11 月 3 日 に 柴 田

構を解明し、錯体の中心金属に配するはこれまでの数々の業績と貢献に対し水分子の活性化によるとの説を提出して文化功労賞の栄誉を受けた 5）。このをたずねて」，化学と工業，16（1）, 60（1963）．

年の 1 月に柴田は第 11 代の日本学士院

６）柴田雄次、長倉三郎、松井義人：「分光化学たことである。
柴田は昭和２年（1927）にそれまで院長に選ばれ、その後規則によって昭の業績により学士院恩賜賞を受賞し、

和 45 年（1970）に退任するまでその同年柴田は新設された学術研究会議、任を全うして、満 88 歳にしてはじめ今日の学術会議の会員に選ばれた。昭て束縛のない自由の身となった。それ

和 4 年（1929）にはリエージュで開催

か ら 10 年 後 の 昭 和 55 年（1980）1 月

された万国化学協会第 10 回会議に日28 日の丁度満 98 歳の誕生日を迎えた

本代表として出席し、世界大戦の戦後

日に長い一生を閉じた。

処理としてのドイツ加入の問題に腐心

４月号，32（1969）．
４）柴田雄次：「わが思い出、無機化学」①〜⑦，科学新聞，昭和 44 年３月 7 , 14 , 21 , 28日，４月 4 , 11 , 18 日（1969）．
５）柴田雄次、植村琢：「お慶びの柴田雄次先生の夜明け」，科学，35（3）,133（1965）．
７）柴田雄次：「我家の化学百年」，化学と工業，
21（5）,1968．
８）柴田雄次、山崎一雄：『新訂無機化学攬要』（南江堂）（1972）．
９）田中実：『日本の化学と柴田雄次』，（大日本図書）昭和 50 年（1975）．
10）黒谷寿雄：「柴田雄次先生と錯塩化学」，化学，35（10）,786（1980）．
11）Kondo, T., Yoshida, K., Nakagawa, A.,

この拙稿は文献に挙げた多くの資料

Kawai, T., Tamura, H. and Goto, T. :柴田は古美術の科学的研究にも関心

特に田中実著『日本の化学と柴田雄

Nature , 358 , No. 6386 , 6 , August（1992）．

を示し、昭和 14 年（1939）には法隆

次』、柴田雄次「化学界四十年の見聞」

寺壁画保存調査委員会の委員を嘱託さを主として参考にさせていただいてまれ、古代の染料、顔料などを研究するとめたものである。門下の方々や関係した。

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

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寄稿原稿

和光純薬時報の読者様からご寄稿頂きました原稿をご紹介します。

二量体ＳＯＤ酵素の構造変化とその検出法
山形大学理学部

はじめに
筋萎縮性側索硬化症（ALS）は上位および下位運動ニューロンが選択的かつ系
統的に傷害される代表的な運動疾患である。有病率は人口 10 万人あたり２〜６人で、世界各地でほぼ一定しているが、西南太平洋に分布するグアム島、西部ニューギ
ニア、本邦の紀伊半島、グレートアイランド（オーストラリア）は本症の多発地域として有名である 1 , 2）。現在でも有効な治療法は発見されておらず３）、患者とご家族の苦悩は計り知れない。
ALS の ほ と ん ど は 孤 発 性 で あ る が、
５〜 10％が家族性（FALS）に発症することが知られている 1 , 2）。この FALS について徹底的な調査が行われた結果、FALS には原因遺伝子が複数存在することが指摘され、1993 年 21 q 22 . 1 に 存 在 す る SOD1 遺伝子の変異が明らかにされた 4）。SOD1 遺伝子の 100 bp 前後の小さなエクソンのすべてに点変異が観測されているが、正常コン
トロールには変異は全く存在していない。
現在までに 100 を超える変異が見つかっている 5）。
SOD は、体内で生成する活性酸素種のひとつであるスーパーオキサイドイオンを酸素と過酸化水素に分解する。生成した過酸化水素はグルタチオンペルオキシダー
ゼ、カタラーゼなどで水と酸素に分解される。さて、この SOD1 酵素における変異がどのように ALS 発症と関連しているかが最大の問題である。SOD 酵素の変異による効果としてスーパーオキサイドイオンの分解能が問題となる。確かに、いくつかの変異型では SOD 活性は正常型の 40 〜 50％までに落ち込んでいるが、しかしほとんど活性が落ちていないものも多い 2 , 6）。例えば、Asp90Ala 変異は正常コントロール型の 90％以上、Gly93Asp は 86％の活性がある。Gly93Ala 変 異 SOD1 を 過 剰 発 現 さ せたマウスは生後３〜４ヵ月後から筋力低下を発症し、5 ヶ月までには死亡するが、このマウスではコントロールの４倍以上の SOD 活性がみられる。このように高い
SOD 活性がありながら細胞障害が生じるというのは、単に SOD 活性の低下のみで運動ニューロンの変性メカニズムを論じることができないことを示している。
現在の中心的な考え方は、「変異 SOD1が構造変化によって神経細胞に対する細胞毒性機能を新たに獲得したことが原因で、

34

ニューロンの変性が起きる」というものである 7）。これを、 gain-of-function と呼んでいるが、この gain-of-function の真の発現機構も解明されていなかった。

二量体 SOD 酵素のモノマーへの解離とその検出法
変異 SOD による毒性の原因については、
SOD の構造解析の結果から、分子表面のβ鎖に集中している変異が原因でβバレル構造が歪み、SOD1 サブユニットの二量体形成が阻害され、モノマーへ解離し、SOD
酵素の会合体形成が進行することが原因であろうと指摘されてきた 6 , 8 − 10）。蛋白の会
合体形成は多くの神経性疾患に共通に見られる現象 11） であることは広く認識されているが、最近この SOD 酵素の会合体とALS 発症との関連性について疑問が投げられている 12）。
最初に SOD 二量体構造からモノマーへの解離反応から見てみよう。二量体 SODの単量体への解離反応を調べる手法として、DLS（dynamic light scattering）法がある 13）。これは分子の大きさを直接的に測定する方法で、単量体と二量体ではその大きさが異なることを利用する。wild-type
二量体 SOD の溶液に銅（Ⅱ）イオン / アスコ
ルビン酸溶液を加えると、モノマーへ解離することが DLS 法で検出できる。この場
合、更に生成したモノマーが会合体を形成することも観測されている。Wild-type 二量体と metal-free モノマーはゲルろ過カラ
ム法などで分離できることも明らかにされている 7 , 14）。
われわれは二量体 SOD の構造変化・モノマーへの解離反応を検出する簡単な方法がないかを検討した。溶液中での蛋白質にはいくつもの構造（コンフォーメーション）が可能である 15）。どれか一つが主たる構造ということになれば、その存在比は非常に高くなる。一方、特にどの構造が有利というわけではないとき、いくつものコン
フォーメーションが可能になるので、個々のコンフォーメーションの存在確率は低くなる。これをキャピラリー電気泳動で観測すると、可能なコンフォーメーションの数の少ない蛋白のシグナルは幅の狭い、強度の高いピークで観測され、一方、コン
フォーメーションの数が多い場合は、はっきりとしたシグナルが見えず、幅広い強度の弱いシグナルとなって観測されること

和光純薬時報 Vol.75, No.3（2007）

西田雄三が多い。これは我々の測定結果から支持されている 16 , 17）。この特徴を二量体構造を持
つ２つのタンパク（SOD とトランスフェリン）で比較すると面白い対応が見つかる 18）。（SOD の CE に つ い て は 図 １、A を参照されたい）。濃度を同じにしても２つの蛋白の CE 強度は相当に異なる。トラン
スフェリンは、SOD と同じ二量体構造を持つタンパクではあるが、その二量体としてのコンフォーメーションは SOD ほど固定されていないことが、シグナル強度が弱い原因だと思われる。
二量体 SOD 酵素に、Cu（ Ⅱ）/ アスコル
ビン酸溶液を加えると、二量体 SOD がモノマーへ解離することがすでに DLS 法か
ら明らかにされているが 13）、同じ溶液のCE を測定してみると、二量体種に相当す
るシグナル強度（図１、A、参照）が大きく減少する。これらの結果よりわれわれはSOD 酵素の二量体の構造変化・モノマーへの解離を CE での二量体構造に相当する
シグナル強度でもって簡便に判定できるようになった。

gain-of-function
二量体構造の変化と SOD

1993 年、Yim らは正常型、および変異
SOD に過酸化水素と DMPO（スピンートラップ剤）を加えた溶液の ESR スペクト
ルの結果から、変異 SOD は正常型と比較して過酸化水素を異常に活性化できることを報告した 19 , 20）。これは、変異 SOD での二量体構造での表面相互作用が低下しており、モノマーへの解離が容易になり、銅（Ⅱ）イオンと過酸化水素との相互作用が可能になったためと判断された。（ gainof-function ） し か し、 正 常 型 SOD で もDMPO-OH が観測されることにほとんど注意が払われていなかった。
SOD 酵 素 と の 過 酸 化 水 素 と の 反 応 に関する研究報告は多い 21）。まとめてみると、① SOD は過酸化水素で不活性化される、②２つある銅（Ⅱ）イオンのうち１つの銅（Ⅱ）イオンの還元が起きる、などが知られている。これは過剰の過酸化水素の存在下では SOD は非対称な状況が形成されることを示唆している。この状況下では、二量体構造に不安定化が生じることが結晶構造の研究から指摘されているが 22）、溶液中で確認されていなかった。
我々は、上で得た CE 法の特徴を考慮し

図１．Wild-type SOD に過酸化水素を加えた溶液の CE（P/ACE, MDQ で測定）23）A : SOD（1 mg/ 1 mL） B：加えた直後 C：60 分後。

て、SOD に過酸化水素を加えたときの CE
変化を入念に検討した。その結果、過酸化
水素の添加で、SOD の二量体構造に相当す
るシグナル強度が大幅に減少することが明らかになった（図１、B, C, 参照）23）。この挙動は、すでにのべた SOD に銅（Ⅱ）/ アス
コルビン酸系を加えたときとよく似ている。
ピーク強度の減少は加えた過酸化水素の量と、時間に依存する。これは溶液中で過剰な過酸化水素の存在で、正常型 SOD でもその二量体構造の解離・構造変化が起きることを示唆し、Yim らの結果と矛盾しない。
SOD はスーパーオキサイドイオンを酸素と過酸化水素に分解する酵素であるが、生成した過酸化水素が SOD 酵素中に残る状況が続くことは非常に危険である。正常型 SOD では過酸化水素は離れやすいのであるが、それが SOD の構造とどのように結びついているかである。
それに関して、我々はモデル錯体を用いて調べた。その結果、周辺の微妙な構造変化によってもともとなかった銅（Ⅱ）イオンによる過酸化水素捕獲能力が新しく出現
し、このようにして捕捉された過酸化水
素は蛋白の C-N 結合の切断、メチオニンの硫黄原子上での酸素化反応、DNA 切断反応、を触媒する、などの作用を示すことを見出した 24 , 25）。これらのことから変異 SODで 生 成 し た 過 酸 化 水 素 に よ る gain-offunction の発現機構が明らかにされたのであるが、この変異 SOD における過酸化水素による異常な反応性を理解するには、
これまでの酸素分子に関する議論を 180 度

転換させる必要がある。詳細は総説を参照
されたい 26）。

おわりにSOD 変異をもつ症例は、ALS 全体から見ればほんの数％前後を占めるに過ぎず、これまで述べてきた FALS に関する研究成果が、孤発性 ALS の病因解明に直結するかは不明ではあるが、正常型 SOD も過酸化水素で障害を受ける事実からして、SOD
二量体構造がいわゆる変異による gainof-function 以 外 の 原 因 で 壊 れ る 可 能 性を 調 べ る こ と は、 孤 発 性 ALS 発 症 を 考える上でも非常に重要な問題であろうと思っている。事実、孤発性 ALS について
は過酸化水素を中心とした酸化ストレスと SOD 酵素との関連性を指摘する論文は多い 27 , 28）。その意味で、CE 法を利用する
SOD 構造変化を簡便に調べる手法が開拓されたことは大きな意味を持っているし、また今回の研究成果は孤発性プリオン病（BSE, ヤコブ病など）の発症機構を考える上でも重要である 29 − 31）。
〔参考文献〕
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26）Nishida, Y. : The Chemical Times, 2007 ,2 - 15 .
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28）Furukawa, Y. et al . : Proc. Natl. Acad. Sci.
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29）Nishida, Y. : Medical Hypothesis Research , 1 ,227- 245（2004）,http://www.journal-mhr.com/
PDF̲Files/vol̲ 1 ̲ 4 / 1 ̲ 4 ̲PDFs/ 1 ̲ 4 ̲ 2 .
pdf.
30）西田雄三：「BSE の化学」
（牧歌舎）（2004）.
31）Nishida, Y. : Inorganic-Biochemical Perspectives of Sporadic Prion Diseases , CIN
Press（2006）. http://repo.lib.yamagata-u.
ac.jp/bitstream/ 123456789 / 107 / 1 /rep. 01 .
pdf.

35

スーパーセップTM用電気泳動槽
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収載されている試薬は、試験・研究の目的にのみ使用されるものであり、家庭用、医療用など他の用途には用いられません。
記載希望納入価格は本体価格であり消費税などが含まれておりません。

和光純薬時報 Vol. 75 No. 3
2007 年７月 20 日 発行

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