超低毒性幹細胞標識用量子ドット

Fluclair™

本製品は、幹細胞などの標識に使用できる超低毒性の量子ドットです。
量子ドットは、FITC、Cyなどの蛍光色素やGFPなどの蛍光タンパク質よりも高輝度で⾧寿命の蛍光物質です。
Fluclair™は、コア領域にカドミウムを含まないために、これまでのカドミウムを含む量子ドットと比較して、極めて細胞毒性が低いことが特⾧です。
Fluclair™ Red
Fluclair™ Green
Fluclair™ Yellow
そのため、細胞内イメージングやFluclair™を導入した細胞の移植後の生体内イメージングを行うことができます。
再生医療においては、移植した幹細胞や、幹細胞から分化誘導された分化細胞の患部への生着が治療効果に大きく反映されます。その移植細胞の生体内動態、組織・臓器への集積・生着効率を正確に判断するために、本製品の様な、細胞毒性の低く高輝度な蛍光イメージング試薬が非常に有用です。

使用例
Fluclair™ Yellowを、膜透過性ペプチド (オクタアルギニン)を用いて脂肪組織由来幹細胞内に導入し、蛍光顕微鏡を用いて、脂肪組織由来幹細胞に導入されたFluclair™ Yellowを観察した。
Merge

Fluorescence

Phase

Fluclair Yellow/Hoechst 33342 (nuclear)< データご提供

国立大学法人名古屋大学大学院 工学研究科 湯川 博 先生 >※ご評価用サンプルを準備しております (約8μmol/L, 250µL)。
サンプルご希望の方は、件名を「Fluclair サンプル希望」とし、メール (ffwk-labchem-tec@fujifilm.com)にてお申し込みください。

コードNo.

品名

規格

推奨励起
波⾧

発光ピーク
波⾧

容量

希望納入
価格 (円)

069-06791

Fluclair™ Green

細胞染色用

450nm以下

525nm

250μL

照会

062-06801

Fluclair™ Yellow

細胞染色用

450nm以下

585nm

250μL

照会

069-06811

Fluclair™ Red

細胞染色用

500nm以下

670nm

250μL

照会

使用方法１-1:導入試薬としてSFA P-reagent 使用時【準備試薬】
Fluclair™ (8.0 μmol/L), SFA P-reagent（以下、SFA-P）, 使用培地（FBS 2%以下でご使用下さい;FBSが高濃度の場合、Fluclair™が沈殿する可能性があります。）【調製方法】

Fluclair™+SFA-P溶液 1 mL （Fluclair™濃度 192 nmol/L）調製例を示す。

① Fluclair™溶液の調製
・ FBS濃度 2％以下にした使用培地 476 µL と Fluclair™ 24 µLをエッペンチューブ等に計り取り、軽くピペッティングして撹拌する。

② SFA-P溶液の調製
・ FBS濃度 2％以下にした使用培地 404 µL と SFA-P 96 µLをエッペンチューブ等に計り取り、軽くピペッティングして撹拌する。

③ Fluclair™+SFA-P溶液の調製
・ ①と②を15 mL遠沈管等で混合して、軽くピペッティングする。
・ アルミホイル等で遮光して、室温にて15分間静置する。
・ 使用する濃度に使用培地（FBS通常濃度）で希釈して、調製完了。

【調製フロー】① Fluclair™溶液の調製③ Fluclair™+SFA-P溶液の調製

Fluclair™ (8 µmol/L) 24 µL+使用培地（FBS 2%以下） 476 µL

Fluclair™+SFA-P溶液 1 mL 調製（Fluclair™濃度 192 nmol/L）

軽くピペッティングして均一にする。 エッペンチューブ

遮光
混合

15分静置

② SFA-P溶液の調製
SFA-P 96 µL+使用培地（FBS 2%以下） 404 µL

遮光使用する濃度に使用培地（FBS通常濃度）で希釈して、調製完了。
＊下の濃度調製例を参照

15 mL 遠沈管混合して軽くピペッティングする。
軽くピペッティングして均一にする。 エッペンチューブ

アルミホイルで遮光し、15分間、室温で静置する。

【Fluclair™ 濃度調製例＊】①Fluclair™＋培地 ②SFA-P＋培地③Fluclair™濃度（①+②）

培地で希釈後のFluclair™濃度※（）内は培地添加後の液量

24 µL ＋ 476 µL

96 µL ＋ 404 µL

192 nmol/L (1 mL)

64 nmol/L (3 mL)

32 nmol/L (6 mL)

16 nmol/L (12 mL)

36 µL ＋ 964 µL

144 µL ＋ 856 µL

144 nmol/L (2 mL)

48 nmol/L (6 mL)

24 nmol/L (12 mL)

12 nmol/L (24 mL)

24 µL ＋ 976 µL

96 µL ＋ 904 µL

96 nmol/L (2 mL)

32 nmol/L (6 mL)

16 nmol/L (12 mL)

8 nmol/L (24 mL)※1 24 µL ＋ 1,976 µL

96 µL ＋ 1,904 µL

48 nmol/L (4 mL)

16 nmol/L (12 mL)

8 nmol/L (24 mL)

4 nmol/L (48 mL)

12 µL ＋ 988 µL

48 µL ＋ 952 µL

48 nmol/L (2 mL)

16 nmol/L (6 mL)

8 nmol/L (12 mL)

4 nmol/L (24 mL)

6 µL ＋ 994 µL

24 µL ＋ 976 µL

24 nmol/L (2 mL)

8 nmol/L (6 mL)

4 nmol/L (12 mL)

2 nmol/L (24 mL)

3 µL ＋ 997 µL

12 µL ＋ 988 µL

12 nmol/L (2 mL)

4 nmol/L (6 mL)

2 nmol/L (12 mL)

1 nmol/L (24 mL)

2 µL ＋ 998 µL

8 µL ＋ 992 µL

8 nmol/L (2 mL)

2.7 nmol/L (6 mL)

1.3 nmol/L (12 mL)

0.67 nmol/L (24 mL)

1 µL ＋ 999 µL

4 µL ＋ 996 µL

4 nmol/L (2 mL)

1.3 nmol/L (6 mL)

0.67 nmol/L (12 mL)

0.34 nmol/L (24 mL)

2 µL ＋ 498 µL

4 nmol/L (1 mL)

1.3 nmol/L (3 mL)

0.67 nmol/LL(6 mL)

0.34 nmol/L (12 mL)※2 0.5 µL ＋ 499.5 µL※1 Fluclair™ と SFA-Pとの complex を作製するのに、大量にFluclair™+SFA-P溶液を調製したい場合は、仕込み量の培地量を増やすことも可能です。ただし、※２にも記すように、希釈し過ぎないようにご注意下さい。
※2 Fluclair™ と SFA-Pとの complex を作製するのに、希薄溶液は好ましくないため、Fluclair™添加量を1 µL未満にする 場合は、培地量と合わせて500 µLになるようにして下さい。

使用方法1-2:導入試薬としてR8（オクタアルギニン） 使用時【準備試薬】
Fluclair™ (8.0 μmol/L), R8溶液 (8.0 mmol/L), 使用培地（FBS 2%以下でご使用下さい;FBSが高濃度の場合、Fluclair™
が沈殿する可能性があります。）【調製方法】

Fluclair™+R8溶液 1 mL （Fluclair™濃度 192 nmol/L）調製例を示す。

① Fluclair™溶液の調製
・ FBS濃度 2％以下にした使用培地 476 µL と Fluclair™ 24 µLをエッペンチューブ等に計り取り、軽くピペッティングして撹拌する。

② R8溶液の調製
・ R8を水に 8.0 mmol/L となるように溶解し、0.2µmフィルターでろ過する。
・ FBS濃度 2％以下にした使用培地 476 µL と R8溶液 24 µLをエッペンチューブ等に計り取り、軽くピペッティングして撹拌する。

③ Fluclair™+R8溶液の調製
・ ①と②を15 mL遠沈管等で混合して、軽くピペッティングする（Fluclair™+R8溶液 96 nmol/L 1 mL 調製）。
・ アルミホイル等で遮光して、室温にて15分間静置する。
・ 使用する濃度に使用培地（FBS通常濃度）で希釈して、の調製完了。

【調製フロー】③ Fluclair™+R8溶液の調製① Fluclair™溶液の調製

Fluclair™+R8溶液 1 mL 調製（Fluclair™濃度 192 nmol/L）

Fluclair™ (8 µmol/L) 24 µL+使用培地（FBS 2%以下） 476 µL
軽くピペッティングして均一にする。 エッペンチューブ② R8溶液の調製
R8 (8mmol/L) 24 µL+使用培地 (FBS 2%以下) 476 µL

遮光遮光混合使用する濃度に使用培地（FBS通常濃度）で希釈して、調製完了。

15分静置＊下の濃度調製例を参照
15 mL 遠沈管

混合して軽くピペッティングする。
軽くピペッティングして均一にする。 エッペンチューブ

アルミホイルで遮光し、15分間、室温で静置する。

【Fluclair™濃度調製例＊】①Fluclair™＋培地②R8＋培地

③Fluclair™濃度（①+②）

24 µL ＋ 476 µL

24 µL ＋ 476 µL

192 nmol/L (1 mL)

64 nmol/L (3 mL)

32 nmol/L (6 mL)

16 nmol/L (12 mL)

36 µL ＋ 964 µL

36 µL ＋ 964 µL

144 nmol/L (2 mL)

48 nmol/L (6 mL)

24 nmol/L (12 mL)

12 nmol/L (24 mL)

24 µL ＋ 976 µL

24 µL ＋ 976 µL

96 nmol/L (2 mL)

32 nmol/L (6 mL)

16 nmol/L (12 mL)

8 nmol/L (24 mL)※1 24 µL ＋ 1976 µL

24 µL ＋ 1976 µL

48 nmol/L (4 mL)

16 nmol/L (12 mL)

8 nmol/L (24 mL)

4 nmol/L (48 mL)

12 µL ＋ 988 µL

12 µL ＋ 988 µL

48 nmol/L (2 mL)

16 nmol/L (6 mL)

8 nmol/L (12 mL)

4 nmol/L (24 mL)

6 µL ＋ 994 µL

6 µL ＋ 994 µL

24 nmol/L (2 mL)

8 nmol/L (6 mL)

4 nmol/L (12 mL)

2 nmol/L (24 mL)

3 µL ＋ 997 µL

3 µL ＋ 997 µL

12 nmol/L (2 mL)

4 nmol/L (6 mL)

2 nmol/L (12 mL)

1 nmol/L (24 mL)

2 µL ＋ 998 µL

2 µL ＋ 998 µL

8 nmol/L (2 mL)

2.7 nmol/L (6 mL)

1.3 nmol/L (12 mL)

0.67 nmol/L (24 mL)

1 µL ＋ 999 µL

1 µL ＋ 999 µL

4 nmol/L (2 mL)

1.3 nmol/L (6 mL)

0.67 nmol/L (12 mL) 0.34 nmol/L (24 mL)

4 nmol/L (1 mL)

1.3 nmol/L (3 mL)

0.67 nmol/L (6 mL)※2 0.5 µL ＋ 499.5 µL 0.5 µL ＋ 499.5 µL

培地で希釈後のFluclair™濃度※（）内は培地添加後の液量0.34 nmol/L (12 mL)

使用法2:細胞ラベリング方法④ 対象の培養細胞の培養液を捨てて、③で作製した Fluclair™＋SFA-P溶液（あるいは R8溶液）を添加する。
⑤ 4～24時間、培養条件下でインキュベートする。
⑥ インキュベート後は、新しい培地、もしくはD-PBSで2回以上洗浄してから使用する。
Fluclair™+SFA-P溶液
or Fluclair™+R8溶液
添加 ※3

4～24時間 ※4
インキュベート

対象細胞

対象細胞培地 or D-PBS
により洗浄することで、ラベリング完了。

対象細胞※3 培養容器による添加量の参考データ （細胞はコンフルエント状態を想定） ※4 細胞によっては取り込み時間に違いがあるため、導入効率が低い時は培養容器添加量
培養容器添加量
最大24時間インキュベートする。
T75フラスコ

15 mL

12 well

1.0 mL

T25フラスコ5 mL

24well500 µL６well

2.0 mL

96 wel100 µL

参考文献
1.

Ogihara, Y., Yukawa, H., Kameyama, T., Nishi, H., Onoshima, D., Ishikawa, T., Torimoto, T. and Baba,

2.
3.

Y.: Sci. Rep., 7, 40047 (2017).
Yukawa, H. and Baba, Y.: Anal. Chem., 89, 2671 (2017).
Yukawa, H., Watanabe, M., Kaji, N., Okamoto, Y., Tokeshi, M., Miyamoto, Y., Noguchi, H., Baba, Y. and4.

Hayashi, S.: Biomaterials, 33, 2177 (2012).
Yukawa, H., Kagami, Y., Watanabe, M., Oishi, K., Miyamoto, Y., Okamoto, Y., Tokeshi, M., Kaji, N.,
Noguchi, H., Ono, K., Sawada, M., Baba, Y., Hamajima, N. Hayashi, S.: Biomaterials, 31, 4094 (2010).

コードNo/
メーカーコード
191-18331
197-18333
4065816.0001
4065816.0005

規格/メーカー容量

希望納入価格(円)

SFA P-reagent

遺伝子研究用

100µL
500µL

9,000
20,000Octaarginine, H-Arg-Arg-ArgArg-Arg-Arg-Arg-Arg-OH,
Trifluoroacetate 【R8】Bachem AG

1mg
5mg

20,00070,000

品名1 9 7 0 0 培 01