ISSN 1347-4804

October 2022
Vol.90 No.4

SNPiP（S -Nitroso-N -pivaloyl-D-penicillamine）
構造式

〔総

説〕

「non-neuronal AChシステム誘導薬」

中村

成夫、柿沼

由彦……… 2「2-OG骨格を持たない次世代HIF活性化分子PyrzA」

川口

真一、辻田

忠志……… 6

〈テクニカルレポート〉「バイオ医薬品からの宿主細胞由来残留DNA検出試薬の開発」【連

山本

陽太郎……… 8載】〈幹細胞由来 EV ～治療、診断、化粧品への展開～〉「第 2 回歯肉幹細胞由来エクソソームを応用した歯周炎治療の開発に向けて」〈有機分子触媒の軌跡「第 2 回

福田隆男……… 10―基礎から応用まで―〉

有機触媒の発展」

佐藤

健太郎……… 12［富士フイルム和光純薬創立 100 周年記念］「第 2 回国内販売網の整備・確立」…………………………………………………………………………………………………

5〔化学大家〕「ウィリアム・ニコルソン」

根矢

三郎……… 25

〔製品紹介〕
有機合成

細胞生物

キラル相関移動触媒 …………………………………… 14
有機けい素化合物 ……………………………………… 15
歯科接着性モノマー …………………………………… 16

心筋細胞アセチルコリン産生誘導化合物「SNPiP」… 4
HIF活性化分子「PyrzA」、「PyrzA-50」 ……… 7、 23
トランスサイレチン 組換えタンパク質・抗体 …………… 19
CUBIC-L, R+（M）Trial Kit …………………………… 24

環境・分析

農薬混合標準液 水質-10 ……………………………… 16
陰イオン界面活性剤試験用標準液 …………………… 17
ポジティブリスト関連農薬標準品 ……………………… 17
機能性成分分析用標準品 ……………………………… 18
ペンタフルオロフェノール ………………………………… 18培

養iCell DDP（パーキンソン病モデル） ………………… 22®

免

疫レビス® インスリン-マウス/ラット（発光系）……………… 22
遺伝

子

QCdetectTM 残留DNA検出キット, CHO細胞用 ……… 9
QCdetectTM 残留DNA検出キット, 大腸菌用 ………… 9
MSCultureTM High Growth 基礎培地 …………… 11、 20
MSCultureTM High Growth サプリメント ………… 11、 20
LAMP MASTERシリーズ ……………………………… 21〔お知らせ〕
第 37 回 Wako ワークショップ開催のご案内 ……………………………………………………………… 28

1

R

esearchnon-neuronal AChシステム誘導薬
日本医科大学

化学教室a）、生体統御科学分野ｂ）

中村であるコネキシン43の低酸素による分はじめに解を抑制し、ギャップ結合機能を維持する機能4, 7）、等である。以上の結果

成夫a）、柿沼由彦b）一つであることが示唆された。

SNPiP の発見にいたる
背景

本 化 合 物S -Nitroso-N -pivaloyl- D -は、このNNCCSを亢進またはノック

penicillamine（SNPiP） は、 既 存 のダウンさせたin vitro  /in vivo 研究結

NOド ナ ー で あ るS -Nitroso-N -acetyl-

果から明らかになっている4,5,8）。特に、これまでの先行研究を基盤とし、虚DL-penicillamine（SNAP） の 基 本 骨

後者の心臓特異的NNCCSノックダウ

血耐性能を亢進させるためには転写因格を参考に作製したものであり、心臓ン マ ウ ス で は、NNCCS機 能 の50%以子HIF-1αを最終的に誘導（その蛋白に お け るnon-neuronal cholinergic

上の低下により心機能低下と同時に心レベルを増加させる）することが必要

system（非神経性コリン作動系と訳

不全マーカーの増加が認められた。心と考えられるが、それには低酸素またさ れ、 神 経 由 来 の ア セ チ ル コ リ ン

機能低下に随伴する表現型には、心臓は非低酸素誘導経路の2種類が報告さ（ACh）とは別の、非神経細胞自らがNOS1に よ るNO産 生 障 害・ 迷 走 神 経

れている。外的環境が低酸素状態にな1）産生するAChを表す） をより活性化

活 動 低 下・SOD活 性 低 下 に よ るROS

ることで、それへの適応としてHIF-1αさせる化合物として見出されたもので産生増加、さらに解糖系からTCAサ

蛋白レベルを増加させるのが前者であある。今回、このSNPiPを提供するにイクルへのピルビン酸流入移行障害・り、一方、低酸素に起因せずにHIF-1α

当たり、まだ馴染みの少ない、心臓に脂肪酸代謝障害等の心筋代謝障害を伴の蛋白レベルを増加させるのが後者でおけるnon-neuronalcholinergicsystem

い、NNCCSが心筋代謝・NO産生等にある6）。後者には種々の因子が含まれ、について、これをnon-neuronalcardiac

深く影響していることが示唆されていその一つとして一酸化窒素（NO）が8）

cholinergic system（NNCCS）と名付

る 。 ま た 一 方 で、NNCCS機 能 亢 進

報告されている9）。NOドナーとしてけ、このシステムの紹介と、その活マウスでは心筋梗塞後慢性期の生存知られる低分子化合物SNAPにコリン性化能をもつ化合物という意味で率が野生型の2倍以上の93％と驚異のアセチルトランスフェラーゼ（ChAT）

NNCCS誘導薬として、SNPiPの性質・虚血耐性を示し、その一つの要因とし蛋白発現亢進機能があることを予備実

特徴について説明したい。なお、本化

5）て血管新生促進が顕著に認められた 。

験で確認後、それをリファレンスとし合物は現在、日本医科大学より特許申以上の互いに相補する表現型から、本て、SNAP基本骨格をベースに側鎖を請 中（ 特 願2020-49467 出 願 人： 学 校

NNCCSを亢進させる介入方法は虚血修飾させ、我々はよりChAT蛋白発現

法人日本医科大学）である。

性心疾患治療戦略上有意義な選択肢の亢進能の高い化合物をスクリーニング

NNCCS とは何か
心臓心筋細胞が自ら所有している
ACh産生システムがNNCCSである1,2,3）。
このシステムは心筋細胞にとって不可欠なものであり、以下の生理機能が明らかとなっている。①心筋細胞のミト
コンドリア機能亢進時に、より大量に暴露される活性酸素（ROS）から心筋

図 1A. SNPiP 構造式

細胞自らを守る機能1, 3, 4）、②心筋細胞におけるグルコーストランスポーター
４蛋白発現を亢進させ、心筋細胞のエ
ネルギー基質指向性を、よりグルコー
スに傾斜させる機能5）、③非低酸素状況下であってもHIF-1α蛋白レベルを増加させ、その調節下流遺伝子群の中の血管新生促進因子遺伝子発現を亢進することで、血管新生を促進する機能5, 6）、④ギャップ結合機能構成蛋白2

図 1B. SNPiP による細胞内 cGMP 濃度の経時的変化

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

図 1C. SNPiP による細胞内 NO 代謝産物
濃度の経時的変化

しSNPiPを得ることができた（図1A）10）。
しかし、このスクリーニングでの留意するポイントとして、個体レベルへの投与を想定し、その血行動態への影
響を最小限に抑えるため、HEK293細胞における細胞内cGMP濃度（図1B）、
細胞内NO2濃度（図1C）のタイムコー

図 2.

スがより緩徐に変化することを念頭的に投与すると、心房を切除したする。しかし、この時心拍数へのに、つまりピーク到達時間がより緩徐心臓心室筋でのChAT蛋白発現レ

影響は極めて少ない。SNPiPの心であることを基準として検討した10）。

ベルの増大と心臓心室筋内ACh産拍出量増大効果は、したがって、

なぜなら急激なNO産生は血圧低下・生量が増大する（図3）。その応答

拡張末期容積量の増大つまり一回反射性頻脈を惹起する可能性が懸念さは緩徐で投与後48-72時間後が顕著

拍出量の増大に起因する（図5）。

れるからである。

である。すなわちNNCCSの機能亢

その結果として心拍出量が非投与

進が認められる。

群よりも増大することになる。すSNPiP の合成

こ の 特 徴的効果はin vitro 細胞レ

なわちSNPiPの特徴的機能は、こベルでも認められ、心筋細胞のみ

れまでにない心臓拡張能を亢進さ

SNAPはS -ニトロソチオールの中でに限らず、少なくとも細胞内AChせる点であると考えられる10）。

は化学的に極めて安定であり（通常の産 生 能 を 保 持 す る 細 胞（ 例 え ば

S -ニトロソチオールは数秒から数分でHEK293細 胞 ） で は、 細 胞 内ACh3）この心臓拡張能亢進効果によって、

分 解 す る も の が 多 い ）、 溶 液 中 で は産 生 能 は 亢 進 さ れ、 そ の 効 果 の

心臓拡張能障害を主病態とする

徐々にNOを放出することから前述のピークは緩徐で48時間以降に認め

db/dbマウス心機能障害に対してよ う にNOド ナ ー と し て 知 ら れ て いられる（図4）10）。

SNPiPの効果の有無を検討したとる。SNAPはN -acetyl-DL-penicillamine

ころ、肥満・高血糖を呈する心臓2）SNPiPのC57BL6/J雄成獣マウスへ拡張能低下を伴うdb/dbマウスに11）により合成される 。SNPiPの場合もの投与（腹腔または経静脈）24時

おいても、SNPiPはより心臓拡張

同様に、D-Penicillamineを塩化ピバロ

間 後 か ら 薬 理 効 果 が 認 め ら れ、能を是正し心拍出量を増大させる

イ ル でN -pivaloyl-D-penicillamineに し48-72時間後により心機能亢進が惹ことが認められている（図6A）12）。

た後、亜硝酸ナトリウムでS -ニトロソ

起され、最終的に心拍出量が増大に亜硝酸ナトリウムを反応させること化 し て 合 成 し た（ 図2）。SNPiPは
SNAPのアセチル基をピバロイル基に変 換 し た も の で あ る が、SNPiPも
SNAPと同様に結晶状態では極めて安定である。ピバロイル基はアセチル基に比べて嵩高く、また脂溶性も高いた
め、SNPiPはSNAPとは異なる薬理効
果を発現したと思われる。

SNPiP の薬理効果

図 3. 心臓心室筋内 ACh 量（72 h） 図 4. SNPiPによるHEK293細胞によるACh産生の経時的変化

SNPiPは脂溶性が高く水には難溶性 である。したがって、通常DMSO（propylene glycolで も 溶 解 可 能 で ある）にて易溶性である10）。
1）SNPiP溶液（1 nmol）をC57BL6/J
雄成獣マウスの腹腔または経静脈

図 5. SNPiP 投与後 72 時間での心機能への影響

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

3

図 6A. db/db マウス心機能への SNPiP の影響

図 6B. 心機能への SNAP の影響

以上のSNPiPの効果はすべて対照群

NNCCSを活性化させ心室でのACh産で あ るSNAPと 比 較 し て、 有 意 差 を生を増大させた。それにより心臓拡張もって顕著である。なぜなら、SNAP

能を亢進させる特異的な機能を持つ化投与時の細胞レベルのACh産生量は合物であることが示唆された。このよ

SNPiPと比較し、その量は低く早期にうな心臓拡張機能をもつ化合物の報告応答するため持続性がより低いことがは循環器領域においてはなく、薬効分12）

明らかとなっている（図4） 。

類においてもユニークなものと考えら

さらに、C57BL6/Jマウスにおけるれる。現在、他の薬理効果については

心臓拡張能の比較では、SNAPはより

さらに解析進行中であり、今後新たな拡張能亢進能が劣っており、SNPiPに効能の追加が期待される。

顕著な一回拍出量増加あるいは拡張末期 容 積 量 増 加 はSNAPで は 認 め ら れず、したがって有意な心拍出量の増大もSNAPで は 認 め ら れ て い な い（ 図6B）12）。

まとめ
以上から、SNPiPはNOドナーとしての性格を持ちつつも、細胞レベルでのACh産生能を亢進させ、その結果〔参考文献〕
 1）Kakinuma, Y., Akiyama, T. and Sato, T. :
FEBSJ .,276,5111（2009）.
 2）R ana, O. R., Schauerte, P., Kluttig, R.,
Schröder, J. W., Koenen, R. R., Weber, C.,Nolte,K.W.,Weis,J.,Hoffmann,R.,Marx,N.
and Saygili, E. :Auton. Neurosci ., 156, 82
（2010）.
 3）R ocha-Resende, C., Roy, A., Resende, R.,
Ladeira,M.S.,Lara,A.,deMoraisGomes,E.
R., Prado, V. F., Gros, R., Guatimosim, C.,Prado, M. A. and Guatimosim, S. : J. Mol.
Cell.Cardiol .,53,206（2012）.

 4）K akinuma, Y., Akiyama, T., Okazaki, K.,Arikawa, M., Noguchi, T. and Sato, T. :
PLoSOne ,7,e50761（2012）.
 5）K akinuma, Y., Tsuda, M., Okazaki, K.,Akiyama, T., Arikawa, M., Noguchi, T. and
Sato, T. : J. Am. Heart Assoc ., 2, e004887
（2013）.
 6）K akinuma, Y., Ando, M., Kuwabara, M.,Katare, R. G., Okudela, K., Kobayashi, M.
andSato,T.:FEBSLett .,579,2111（2005）.
 7）Zhang, Y., Kakinuma, Y., Ando, M., Katare,
R.G.,Yamasaki,F.,Sugiura,T.andSato,T.:
J.Pharmacol.Sci .,101,214（2006）.
 8）O ikawa, S., Kai, Y., Mano, A., Ohata, H.,Kurabayashi, A., Tsuda, M. and Kakinuma,Y.:J.Physiol.Sci .,71,2（2021）.
 9）K uwabara, M., Kakinuma, Y., Ando, M.,Katare,R.G.,Yamasaki,F.,Doi,Y.andSato,
T.:J.Physiol.Sci .,56,95（2006）.
10）Oikawa, S., Kai, Y., Mano, A., Nakamura, S.
and Kakinuma, Y. :Cell. Physiol. Biochem .,
52,922（2019）.
11）F ield, L., Dilts, R. V., Ravichandran, R.,
Lenhert,P.G.andCarnahan,G.E.:J.Chem.
Soc.Chem.Commun .,249（1978）.
12）Oikawa, S., Kai, Y., Mano, A., Nakamura, S.
andKakinuma,Y.:Int.Immunopharmacol .,
84,106459（2020）.

P roducts
心筋細胞アセチルコリン産生誘導化合物
SNPiP
近日
発売

コード No.
197-19151

品
SNPiP

名
危

規 格
細胞生物学用容量10mg

希望納入価格（円）照会…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
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4

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

創立
第2回

周年 !!

国内販売網の整備・確立

前稿の第1回では、創立前後の歩みの中で当社がどのような想いで試薬の取扱いを始め、またいかにして国産化に向けた生産体制を構築してきたかをご紹介しました。第2回の本稿では、当社の事業基盤として欠かすことのできない販
売体制の整備・確立について、ご紹介していきます。
設立から3年後の1925年9月東京日本橋に出張所を開設、その後我が国の戦後復興、高度成長のもと、全国主要都市に営業拠点を拡げました。
また、1960年頃から国内販売網の整備を精力的に実施し、当社代理店・特約店との連携を強化していきました。
1960年代半ばには、直接販売制度を廃止し、全国を網羅した強固な販売網が確立されました。
この代理店・特約店との連携はのちに「和光会」として組織され、現在では、53社もの代理店・特約店の方々に参画いただいています。その200以上の営業拠点よりお客様に製品をお届けするとともに、試薬に関する適切な情報発信を行っています。
この全国に張り巡らされた販売網という当社の大きな強みを活かし、これからもお客様に必要な製品を安定して供給していきます。

代理店代表コメント
この度は創業100周年誠におめでとうございます。富士フイルム和光純薬様は、お客様のニーズに応えるべく高品質な製品をタイムリーに展開され、私ども代理店としてもWako製品を全国のお客様に迅速にお届けできる体制を整えてきました。こうした富士フイルム和光純薬様と代理店の取り組みが、日本の科学研究発展に寄与してきたと考えています。次の100年は、これまで培ってきたWakoブランドを軸に、富士フイルムグループの総力を結集してオリジナリティーの高い製品・サービスの展開を期待致します。我々代理店もより一層のサービス充実に取り組んで参ります。
〈伊勢久株式会社の概要〉
所 在 地：〒460-8558
愛知県名古屋市中区丸の内三丁目4番15号
事業内容：
「バイオ・環境・粉体」の各分野に特化し、試薬・化成品・臨床
検査薬・セラミックス原材料・分析機器及びプラント等設備の提供。
創業：1758年（宝暦8年）

従業員数：約230名

代表取締役社長

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

高木

裕明

様

5

R

esearch2-OG 骨格を持たない次世代 HIF 活性化分子 PyrzA
佐賀大学農学部

天然資源化学分野a）、生化学分野ｂ）

川口真一a）、辻田忠志b）

低酸素誘導因子（HIF）は、脊椎動物において低酸素ストレスを改善する
遺伝子を統括的に制御する転写因子である1,2）。HIFが安定化すると、速やかに核へ移行して、VEGF（血管内皮増殖因子）、EPO（エリスロポエチン）、
GLUT1（グルコーストランスポーター
1）などのタンパク質発現を上昇させ、低酸素障害に対して保護作用のある血管新生、造血、代謝リプログラミングが促進される3,4）。したがって、HIFの安定化は、心筋梗塞や脳卒中などの貧図 1．現在販売承認されている PHD 阻害 HIF 活性化機構による腎性貧血治療薬

血や虚血状態の改善に有効であると注存在し、また、それらを制御するPHDs

目されている。しかし、前述したタンもPHD1、PHD2、PHD3のアイソフォー

パク質群は、低酸素ストレスの緩和にムが存在する。このアイソフォーム同対して「正」と働く一方で、ある一定

士は密接にリンクしながら、低酸素ス

種のがん細胞に対しては増殖活性を補トレス緩和とそれに関連する副作用を助してしまう「負」の側面も有する。

制御できると遺伝子改変マウスの表現

このため、学術研究者や製薬会社は、系より予想されており、PHDsの選択

低酸素状態にさらすことなくHIFを活的な阻害にチャレンジするモチベー

性化可能な低分子化合物の探索に取りションとなっている。PHD1、PHD2、組んでいる。HIFは通常酸素状態ではPHD3タンパク質においての2-OGと相ションによるPHD2とPyrzAの結合位

プロリン水酸化酵素ドメイン含有タン

互作用を示すPHD側鎖の環境はそれ

置 予 測 で は、PyrzAは ヒ トHIF-1α

パク質（PHDs）によって水酸化され、ぞれ酷似しており、PHDsの選択的なの第402番目のプロリン残基と良い重von Hippel-Lindau（VHL）E3ユ ビ キ阻害を達成するには2-OGとの拮抗阻な り を 示 し た（ 図3）。 こ の よ う に、

チンリガーゼによってユビキチン化さ

害でない形式でPHDsの機能阻害が必HIF-1α と 拮 抗 阻 害 を 示 す 分 子 はれる。ユビキチン化されたHIFは、プ

要 で あ る と 考 え ら れ た。 す な わ ち、

PyrzAが初めてである。

ロテアソームを通じて速やかに分解さ2-OG骨 格 を 持 た な いPHDs阻 害 剤 のHeLa細胞およびHep3B細胞の2種類れる。このようにHIFを分解に導く最開発が必要であるため、著者らはランの細胞にPyrzAを加え、イムノブロッ

初の段階はPHDsによるHIFの水酸化

ダムスクリーニングを実施し、2-OG

ティング法によって、HIF-1α、HIF-2αであることから、PHDsの機能を阻害

骨格を持たないPHDs阻害剤PyrzA（5-のタンパク質の安定化を確認した（図することでHIFの活性化が試みられて（1-acetyl-5-phenylpyrazolidin-3-4）。細胞による多少の違いはあるもきた。PHDsがHIFを水酸化するため

ylidene）-1,3-dimethylbarbituric acid）の のPyrzAは ロ キ サ デ ュ ス タ ッ トに は 補 因 子2-オ キ ソ グ ル タ ル 酸（2-を見いだした10）。PyrzAはジメチルバ（FG4592） と 同 様、 濃 度 依 存 的 にOG）が必要であり、これを母骨格とルビツール酸およびピラゾリジン骨格

HIF-1α、HIF-2αいずれも安定化させしたPHD阻害剤の開発が製薬各社かからなる化合物であり、2-OG骨格を持た。

ら進められてきた。現在までに日本でたない（図2）。ドッキングシミュレー

図 2．2-OG 骨格を持たない PyrzA の構造

野生型C57BL6のメスの6週齢マウス

は、5社からPHD阻害剤によるHIF活性化機構に基づく腎性貧血の治療薬が5-9）

販売されている（図1） 。いずれのPHD阻害剤も共通点として2-OG骨格を有している（モリデュスタットナト
リウムはカルボキシル基がバイオアイ
ソスターであるトリアゾール基に変更されている）。一方で、HIFにはHIF-1α、HIF-2α、HIF-3αのアイソフォームが6

図 3．ドッキングシミュレーションによる PyrzA の結合位置予測

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

図 4．イムノブロッティング法を用いた PyrzA の HIF-αの濃度依存的活性化

図 5．マウスに PyrzA を投与することによって Car9,Epo 遺伝子の発現が上昇し、Epo タンパク質量が増加する

図 6．脂溶性パラメーターを改善した PyrzA-50

図 7．PyrzA-50 は PyrzA よりも低濃度で HIFs を安定化するにPyrzAを5日間腹腔内注射したとこ

れをPyrzA-50と名付けた。PyrzA-50はろ、腎臓のCar9（炭酸脱水酵素9）おHep3B細胞においてHIF-1α、HIF-2α

よ びEpoのmRNAは い ず れ も コ ン ト

ともにPyrzAよりも低い濃度で安定化

ロールに対して発現上昇を示した（図した（図7）。

5）。加えて、血漿中のエリスロポエチ

以 上 の よ う にPyrzA、PyrzA-50はン量もコントロールに対して上昇傾向

次世代のPHD阻害によるHIF活性化薬にあることが示された。以上のようにとなりうる有望な分子である。PHDs

PyrzAはin vivo に お い て も 効 果 が 見阻害の機構の解明やPHDs阻害の選択込まれる。

性の解明などに課題は残っているもの

PyrzAの脂溶性のパラメーターでの、活性が高く、in vivo での活性を

あ る 分 配 係 数cLogP値 は、 計 算 値 で示し、2-OG骨格を持たない分子とい－0.91とされ、経口投与を目的とする

う特徴を有する。今後、低酸素研究や化合物の値としては低い11）。そこで、がん研究のツールとして期待できるこ

PyrzAの側鎖構造変換を繰り返して図とに加え、我々は虚血性疾患の治療薬

6に 示 す 化 合 物 を 得 た。 本 化 合 物 のまで昇華できるか研究を推進する予定

cLogP値は3.26となり数値の大幅な改である。

り、テトラクリエイト株式会社はPyrzAおよびPyrzA-50の製造販売を担っていることを申告する。

〔参考文献〕

善に成功した。本化合物は、PyrzAよりも約50倍低い濃度でHIFの転写活性を示すことが明らかとなったので、こ

NEW
NEW

コード No.
639-53441
636-53451

メーカーコード
TC001
TC002

利益相反の申告：著者の川口および辻田はテトラクリエイト株式会社の技術顧問であ品
PyrzA
PyrzA-50

名

容量
10mg
10mg

希望納入価格（円）10,00030,000 1）Semenza, G. L. and Wang, G. L. :Mol. Cell.
Biol .,12,5447（1992）.
 2）Semenza, G. L. :N. Engl. J. Med ., 365, 537（2011）.
 3）Carmeliet,P.etal .:Nature ,394,485（1998）.
 4）Kaelin,W.G.andRatcliffe,P.J.:Mol.Cell. ,
30,393（2008）.
 5）Arend,M.P.etal .:WO2004/108681.
 6）Ogoshi,Y.etal .:ACSMed.Chem.Lett .,8,
1320（2017）.
 7）B eck, H. et al . : ChemMedChem , 13, 988（2018）.
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Chem .,45,123（2010）.
 9）Thevis,M.:DrugTest.Anal .,8,858（2016）.
10）Sonoda, K.et al . :ACS Pharmacol. Transl.
Sci .,5,362（2022）.
11）Sonoda,K.etal .:Manuscriptinpreparation.

詳細は、p.23をご覧下さい。

…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
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和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

7

echnical Report
バイオ医薬品からの宿主細胞由来残留 DNA 検出試薬の開発
富士フイルム和光純薬株式会社

A
100

る糖尿病治療薬「ヒトインスリン」が続けており、2018年までの集計において316のバイオ医薬品が市場にある 。
数は増加していくと考えられている。

0.01

B
40.0

れている医薬品の中でも宿主として用

30.0

1）

70%弱を占めている 。上記のようにバイオ医薬品の社会実装が一層進む中CHO IC

ンが定まっている。本稿では我々が開発した宿主細胞由来残留DNAの検出
試薬について紹介する。

IC

40.0
30.0

25.0

25.0

R2=0.9999
EFF%=100.55

20.0
15.0

20.0
15.0

10.0

10.0

5.0

5.0

0.0
0.0001

0.01

1

100

Quantity(pg)R2=0.9959
EFF%=1090.0
0.01

10,0001

100

Quantity(pg)10,000

図１．QCdetectTM 残留 DNA 検出キット，CHO 細胞用と大腸菌用の検出範囲と感度
A：CHO gDNA 30,000 〜 0.0003pg の増幅曲線（10 倍希釈系列）
B：CHO gDNA 30,000 〜 0.0003pg の検量線（10 倍希釈系列）
C：大腸菌 gDNA 30,000 〜 0.03pg の増幅曲線（10 倍希釈系列）
D：大腸菌 gDNA 30,000 〜 0.03pg の検量線（10 倍希釈系列）◆QCdetectTM残留DNA検出キット

複数コピー存在し、特異性がある目的

超音波破砕処理し、約300bp以下の断バイオ医薬品の安全性と品質を確保領域に設計することにより、感度と特片に調製した溶液と処理していないするためには、製造工程における汚染

異性を保証している。CHO細胞用のgDNA溶液を比較した結果を図2に示物質や不純物の検査において、迅速か

性能は図1AとB、大腸菌用は図1CとDしている。超音波破砕したgDNA溶液

つ正確なスクリーニング方法が必要でに示した。CHOは0.3fg、E. coli は30fg

はBioanalyzerに供してフラグメントある。製造宿主由来の残留DNAは発検出できるため、10pgより低い量をの分布を確認した結果を図2Aに示し

がん性や不必要な免疫の惹起を誘導す検出できることから、高感度かつ検出て い る。 図2Aは 超 音 波 処 理 さ れ た

るため、世界保健機関（WHO）、米国

範囲が広い試験が可能であることを示

DNAが約300bp以下に断片化されてい食品医薬品局（FDA）などの規制当した。

ることを示している。断片化溶液と非局は、非経口投与薬におけるDNA混
入量は、1doseあたり10ngを超えない

断片化溶液を比較したqPCRの結果が◆QCdetect 残 留DNA検 出 キ ッ ト
TM

図2Bであり、Ct（ThresholdCycle）の堅牢性に差異が無いことを確認している。つは、残留DNAのために使用される検実際に検出される宿主由来残留

まり、本品では断片化されたgDNAに出法が、1 dose用量あたり少なくともDNAは培養中、精製中の工程におい対しても検出感度、精度を低下せずに10pgの感度を有していることを推奨て断片化されていることが想定され定量及び検出が可能であることを示しる。本品ではgenomeDNA（gDNA）を

ている。

している

2,3,4）。

本品では、規制当局の要求事項を満たすために、二重標識プローブを用A

い たQuantitative PCR（qPCR） を 採
用し、qPCRの成否を確認するためのInternal control（IC）assayを 内 包 させた。さらに、実験者のハンドリングを極限まで減らすことを考慮し、調液不要のMaster mixとして提供できる

B

［bp］

Sonication

qPCRにおいて最も重要であるプラ

Sonication +Sonication −

17.5
10380
7000
2000
1000
600
500
400

Intact
gDNA

15.0
12.5

300
200
150
100
35

Fragmented
DNA（pg/well）① 3,000
② 300
③ 30
④3
⑤ 0.3
⑥ 0.03

10.0
7.5
5.0
2.5

①

②

③

④

⑤

⑥

1.373828

0.0

ように開発した。
イマー・プローブが標的とする配列はAmpliﬁcation Plot

20.0

ΔRn

ことを推奨している。さらに、FDA

8

Cycle
35.0

で、組換えタンパク質及び抗体医薬品の品質管理についてはレギュレーショ

2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40

D

35.0

Ct

いられているのはCHOや大腸菌で約

0.1

0.01

2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40

Cycle

Walshなどのまとめによれば、承認さ

IC Plot

1

0.1

1）

今後も、治療薬としてバイオ医薬品の1

陽太郎

Ampliﬁcation Plot

10IC Plot

10ΔRn

開発されて以来、バイオ医薬品は増え

C

Ampliﬁcation Plot

ΔRn

1982年に世界初のバイオ医薬品であ

Ct

◆はじめに

山本

生産プロセス開発部

2

4

6

8

10 12

14 16 18

20 22 24 26

Cycle

28

30 32 34

36

38 40

図２．断片化 gDNA に対する堅牢な qPCR
A：断片化 gDNA の Bioanalyzer 解析図、B：qPCR における gDNA の断片化有無の比較

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

◆DNAエキストラクター ® キットと表．高タンパク質溶液からの添加回収試験結果の適合性
DNAエキストラクター®

DNA 添加量
検出系中の DNA 量
回収率（平均）N=10
SD
CV%

キットは

高濃度タンパク質溶液、幅広いpH条
件下、主要な緩衝液、添加剤共存下から高い効率でDNAを回収することが0.1ng/mL
1pg
91.1%
2.6
2.8%

の需要と期待は今後も増加し続けていできる抽出精製キットである5, 6, 7）。
抗 体 溶 液 を 想 定 し た 組 成（20mg/

くと思われる。我々はより簡便、高感mL human IgG溶液）にgDNAを添加

度、堅牢性のあるシステムを提供する

し、DNAエキストラクター ® キット

ことで、生命科学研究とバイオ産業のを用いて精製し、本品で定量する添加発展に貢献する。

回収試験を行った。その試験データを2）WHO Study Group on Biologicals & Worldが実行できることを示している。

for Biologics Evaluation and Research. : J.

Immunother ., 20（3）,214（1997）.
4）K nezevic, I., Stacey, G., Petricciani, J., onbehalf of the WHO Study Group on cell

J. Pharm. Biomed. Anal ., 55（1）,71（2011）.

（2018）.

数pg DNA量においても安定した検出

3）U.S. Food and Drug Administration Center

substrates : Biologicals , 36（3）,203（2008）.

1）W alsh, G. : Nat. Biotechnol ., 36（12）, 1136

90%以上の回収率を得ることができ、Health Organization : "Acceptability of cell6）Ishizawa, M., Kobayashi, Y.,   Miyamura, T.
and Matsuura, S. : Nucleic Acids Res ., 19（20）,5792（1991）.
7）C harlebois, R. L., Sathiamoorthy, S., Logvinoff, C.,  
Gisonni-Lex, L.,   Mallet, L. and Ng, S. H. S. :substrates for production of biologicals :NPJ Vaccines , 5（1）,61（2020）.

report of a WHO study group [meeting held

◆おわりに

10ng/mL
100pg
102.5%
3.5
3.4%5）Cai, H., Gu, X., Scanlan, M. S. and Lively, C. R. :〔参考文献〕

表に示している。低DNA量において1ng/mL
10pg
94.3%
2.3
2.4%

in Geneva from 18 to 19 November 1986]",

冒頭で述べたように、バイオ医薬品

World Health Organization（1987）.

バイオ医薬品の残留DNA検査に
QCdetectTM残留DNA検出キット，CHO細胞用
QCdetectTM残留DNA検出キット，大腸菌用
本品は、CHO細胞及び大腸菌由来の微量なゲノムDNAの検出に最適化したqPCRキットです。当社の微量DNA抽出試薬であるDNAエキストラクター ® キットと組合せることで、検体中にごく微量に存在するDNAを効率よく回収し、qPCRによって検出及び定量することができます。

特

デ ー タ

長

●プレミックス化により試薬調製不要■ 検量線（例）QCdetect 残留DNA検出キット，CHO細胞用
TM

QCdetectTM残留DNA検出キット，大腸菌用●Internal Control含有●ゲノムDNAの高感度検出が可能

キット内容●1×PCR Master Mix

近日発売

1mL×2本●DNA Dilution Buffer

10mL×1本●Control DNA

40μL×1本

コード No.
294-85201
290-85301

キット添付のCHO Control DNAから10倍希釈系 キット添付のE. coli Control DNAから10倍希釈系
列を調製し、そのうち10μLをPCR反応に供した。 列を調製し、そのうち10μLをPCR反応に供した。
CHO Control DNA量：0 .03pg ～ 3,000pg/ E. coli Control DNA量：0.03pg ～ 3,000pg/
reactionreaction品
名
QCdetectTM Residual DNA Detection Kit for CHO cells
QCdetectTM Residual DNA Detection Kit for E. coli

規 格
遺伝子研究用遺伝子研究用

容量
100回用
100回用

希望納入価格（円）130,000照会

規 格
遺伝子研究用容量
50回用

希望納入価格（円）20,000

関連製品
コード No.
295-50201

品

名

DNA Extractor® Kit

危…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2022 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）9幹細胞由来 EV ～治療、診断、化粧品への展開～

第２回

歯肉幹細胞由来エクソソームを応用した歯周炎治療の開発に向けて九州大学病院 歯周病科

1．はじめに
歯周炎は口腔内の歯周病細菌によっし通常の歯周炎治療は、細菌性プラー
クとその足場となる歯石除去を中心とした原因除去療法が中心である。その刺激を加えた後に培養上清からエクソの歯周病治療応用にむけた基礎研究を

ソームを回収し、M2マクロファージ誘4）

進めている 。

導能を比較した。その結果、TNF-α
刺激が最も効果的にM2マクロファー

2．GMSCs
GMSCs 由 来 エ ク ソ ソ ームによる M2 マクロファー
ジ誘導

ジを誘導することが確認された4）。
さ ら にin vivo で 検 証 を 行 う た め、
マウスの背面皮下に表皮欠損を作成
し、GMSCs由来エクソソームを注入ため、歯周炎で喪失した歯槽骨の再生

歯周炎の各ステージにおいてマクロして経時的な創傷治癒効果を比較しはほとんど期待できず、病状の進行を

ファージは異なる表現型で存在する5）。

た。エクソソーム群はコントロール食い止める対処療法であるのが現状で

マクロファージは、炎症誘導型のM1（PBS）群と比較して有意な創傷治癒ある。

マクロファージと抗炎症型のM2マクが認められたが、TNF-α刺激後エク

このような状況を打開すべく、歯周ロファージの2つの表現に大別される。

ソソーム群ではさらに創傷治癒の促進

組織再生療法の開発が行われてきた。

M1マ ク ロ フ ァ ー ジ はLPSも し く は効果が確認された。このときの組織切

現在に至るまで様々なオプションの開IFN-γのようなTh1サイトカインによ

片においても、TNF-α刺激後エクソ発を経ながら、一定の成果があがってり活性化され、iNOS，ROS，TNF-α，ソーム群はM2マクロファージの早期きているものの適応症は限定的であIL-1β，IL-6などの炎症誘導性因子を集積を認め、同時に炎症性細胞浸潤のる。一方、近年注目されている幹細胞産生する。対照的にM2マクロファー

早期減少および創傷部位の上皮化の亢を中心とした細胞移植による細胞治療

ジ は、Th2サ イ ト カ イ ン で あ るIL-4，

進が観察された4）。

はめざましい成果をあげつつも、必要

IL-13によって誘導され、IL-10やTGF-

設備・コストなどの面から、歯科臨床

β，VEGFなどの抗炎症性サイトカイへの普及には多くのハードルが課せらンを産生することで血管新生、スカベ

れているのが現状である。いずれの治

ンジングを促進し、炎症応答を収束さ療においても、統一的見解に基づいたせ組織修復へと転換していくフェーズ

GMSCs由来エクソソームによるM2分子基盤の確立は、安全性とさらなるにおいて中心的役割を担っている。

マクロファージ誘導を介した歯周炎治

治療効果の向上に必須である。

3．GMSCs 由来エクソソー
ムによる歯周炎治療効果

GMSCs由来エクソソームの有する療の可能性を検証するため、絹糸結紮

間葉系幹細胞（MSCs）は、細胞治療

抗炎症効果について、マクロファージ

誘導性マウス歯周炎モデルを作成し、の代表的ソースとして利用されている。

の表現型に及ぼす影響に着目して検証

歯槽骨吸収抑制効果について検証した

近年、従来の細胞治療の概念に加え、したところ、IL-4/13刺激と同様にM2（図１）。歯肉へのエクソソーム注入に幹細胞からの分泌因子による効果が注

マクロファージ誘導効果が確認されより歯槽骨吸収の抑制が認められた目を集めている。すなわち、MSCsにた。MSCsは疾病由来の刺激に応じてが、TNF-α刺激後エクソソーム群でよる疾病治療効果には、MSCsから分治療効果が増幅することが報告されてはさらに骨吸収抑制効果の改善が確認

泌されるエクソソームと呼ばれる細胞

6）いる 。そこでGMSCsに種々の炎症性さ れ た。 ま た 組 織 像 に お い て も、

分泌小胞が中心的役割を果たし、内包
されるmiRNAを介した遺伝子発現制
御が組織再生に重要であることが明らかとなりつつある1）。
歯肉幹細胞（GMSCs）は他組織由来のMSCsに比べて採取が容易である
うえ、免疫制御能に優れ2）、さらにエクソソームの分泌量が高いという特性を有する3）。MSCs由来エクソソーム
は長期の冷凍保存が可能なため臨床応用上の操作性の点で優れており、細胞治療に該当しないため倫理的ハードルが低いという利点があげられる。以上10

隆男に着目し、GMSCs由来エクソソームて引き起こされる慢性炎症で、歯を支える歯槽骨の吸収を特徴とする。しか福田

図1．マウス歯周炎モデルにおける歯槽骨吸収抑制効果（参考文献４より改変）

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

幹細胞由来 EV ～治療、診断、化粧品への展開～

TRAP陽性破骨細胞数の減少が認められた4）。
近年、M2マクロファージのIL-4/13
刺激以外の誘導経路について、アデノシン（ADO）およびその受容体を介した分化経路が報告されている7）。ADO
は抗炎症分子であり、炎症反応を誘導するアデノシン三リン酸（ATP）から細胞膜酵素CD39/CD73による脱リ
ン酸化カスケードを経て産生される。
CD73は代表的なMSC陽性マーカーとしてGMSCsにも恒常的に発現しているが、TNF-α刺激によりエクソソー
ムでの発現が増強することを確認し

図2．TNF-α刺激GMSCs由来エクソソーム（Exo-TNF）による歯周炎治療モデル（参考文
献４より改変）た。一方、エクソソームをCD73中和

らず、miR-1260b導入でも有意に抑制

さらに、GMSCs由来エクソソーム

抗体で処理するとM2マクロファージ

されることを確認した。これらの分子

内 包miRNAに つ い てIngenuity Path-誘導が有意に阻害された。以上から、機構について検証した結果、TNF-α

way Analysisを 行 っ た と こ ろ、 生 活

GMSCsへのTNF-α刺激により誘導さ

誘 導 性miR-1260bはWnt5aお よ びJNK

習慣病および難治性疾患への応用が期

れ る エ ク ソ ソ ー ムCD73がM2マ ク ロ

シグナルの阻害を介して、PDLCsに待できるパスウェイが多数、上位に上ファージ誘導に重要であることが明らおけるRANKL発現を抑制することががっていることも確認された。今後

4）

明らかとなった 。

4）かとなった 。

は、GMSCs由来エクソソームが有す
るmiRNAを介した抗炎症作用の機序

4．GMSCs
GMSCs 由 来 エ ク ソ ソ ー
ム 内 包 miR-1260b に よる骨吸収抑制解明を通して、将来的にヒトを対象と

5．さいごにした研究に向けた分子基盤を構築し、

歯 周 炎 治 療 に お い て、M2マ ク ロ

歯周病治療にとどまらず「口腔から全ファージは炎症を収束させ組織修復へ

身の健康」に繋がる治療戦略への応用も目指したいと考えている。

GMSCs由来エクソソームによる骨と誘導する中心的役割を担っている。

吸収抑制機構について検討するため、さらに近年、歯根膜幹細胞（PDLSCs）

エクソソーム内包miRNAについてマがM2マクロファージとの共培養によ〔参考文献〕

イクロアレイ解析を行った。TNF-α

り歯周組織再生に重要なセメント芽細誘導性miRNAに注目してDatabase解8）胞へ分化促進することが報告され 、析を行ったところ、miR-1260bが多数

M2マクロファージによる歯周組織再の骨吸収関連遺伝子を標的とすること

生効果のエビデンスが構築されつつあが判明した。そこでmiR-1260b導入がる。そのため、GMSCs由来エクソソー

1）Q uesenberry, P. J. et al . : Stem Cell Res.
Ther .,6,153（2015）.
2）Zhang,Q.etal .:J.Immunol .,183,7787
（2009）.
3）Kou,X.etal .:Sci.Transl.Med .,10,eaai8524
（2018）.
4）Nakao, Y. et al . : Acta Biomater ., 122, 306（2021）.
5）Ebersole, J. L.et al . :Periodontol. 2000 , 62,163（2013）.
6）K atsuda, T. et al . : Proteomics , 13, 1637
（2013）.
7）Csóka,B.etal .:FASEBJ .,26,376（2012）.
8）Li,X.etal .:StemCells ,37,1567（2019）.

破骨細胞活性化因子であるRANKL発

ムは歯周炎治療に必須の炎症の収束に現に及ぼす影響について、歯根膜細胞

加え、組織のリモデリングと再生を包（PDLCs）を用いて検討を行った。そ括的に誘導する可能性をも秘めており、の結果、LPS誘導性のRANKL発現が歯周組織再生に大きなアドバンテージ

GMSCs由来エクソソーム刺激のみながもたらされると考えられる（図２）。

間葉系幹細胞増殖用培地
コード No.
NEWNEW132-19345
133-19331

品

名MSCultureTM High Growth Basal Medium
MSCultureTM High Growth Supplement

規格

容量

希望納入価格（円）

細胞培養用
細胞培養用

500mL
  5mL

15,5006,000

詳しくは、p.20をご覧下さい。
…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
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和光純薬時報 Vol.90, No.4（2022）11有機分子触媒の軌跡 －基礎から応用まで－

第２回

有機触媒の発展サイエンスライター

佐藤健太郎

前回、有機触媒の定義とその特徴、発見にいたるまでの歴史について述べた。今回は、さまざまなタイプの有機触媒が報告され、爆発的に進展した過程について述べてゆきたい。
◆不斉相間移動触媒
相間移動触媒は、水相と有機相の間を行き来しながら反応を進行させるタ
イプの触媒であり、長鎖アルキル基を持つ四級アンモニウム塩などが用いられる。この相間移動触媒に不斉要素を

図1．丸岡触媒（1）と簡素化丸岡触媒（2）、アミノ酸不斉合成への適用例

組み込んで不斉合成に用いる研究は、有機触媒の登場前から盛んに行われて量で、96%ee前後の高い選択性をもっ媒の文脈で語られることは少ないが、いた。メルク社のグループが、シンコて反応が進行する。これは工業的規模

その定義は間違いなく満たしている。

ナアルカロイドの誘導体を用いて不斉のアミノ酸不斉合成にも展開され、有時代が違っていればもっと注目を浴びアルキル化に成功したのが1984年であ機触媒研究におけるランドマークの一ていたかもしれず、「早すぎた有機触

り、有機触媒の先駆的な例に数えられつとなった。

媒」といえるかもしれない。

◆ケトン触媒を用いた不斉エポキシ化

◆チオ尿素

る。
1999年には丸岡らがビナフチル骨格を2つ持つスピロ型四級アンモニウム

1996年、史一安らはフルクトースか

これも有機触媒の概念が提唱され塩をデザインし、これがα-アミノ酸

ら誘導される不斉なケトン（3）を触媒

る 以 前 の、1998年 にE. N. Jacobsenの不斉合成などに適用可能な触媒としとし、酸化剤としてペルオキシ一硫酸によって報告されている。当時流行て働くことを見出した（図1）1）。汎用

カリウムを用いることで、各種の三置していたコンビナトリアル合成の考性の高い不斉相間移動触媒の報告はこ

換オレフィンを高いエナンチオ選択性

え方を、不斉合成反応開発に適用すれが初めてであり、注目を集めた。そのもとエポキシ化できることを示した

る 研 究 の 中 か ら 発 見 さ れ た（図3）。

の後、ビナフチル骨格を一つだけにし（図2） 。ケトン触媒と過硫酸イオン

当初は金属元素への最適な不斉配位た「簡素化丸岡触媒」も報告されていが反応してできる、ジオキソラン（4）子を探索する意図であったが、実はる。有機触媒はかなり多量の添加を必が活性種であると考えられている。

金属は不要であり、配位子だけでも2）

要とするものが多いが、この簡素化丸

Listら、MacMillanら の 論 文（2000

岡触媒はわずか0.01mol％という添加年）以前に現れたため、一般に有機触

エナンチオ選択的な反応が起きるこ
3）とが見つかったという流れだ 。
この化合物の持つ触媒作用の鍵とな っ た の は、 チ オ 尿 素 部 分 の2つ の水素原子だ。これらが基質化合物のカルボニル酸素あるいはイミン窒素

図2．史不斉エポキシ化12

図3．Jacobsen触媒の一例

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

有機分子触媒の軌跡 －基礎から応用まで－

原 子 を 挟 み 込 む よ う に 水 素 結 合 し、ルイス酸のように働いて活性化させる。チオ尿素が通常の尿素より有効なのは、水素の酸性度が高まっていること、また二量化しにくいことが要因と考えられる。
この触媒は、Strecker反応、Mannich

図4．プロリン誘導体型触媒

でもカルボキシ基の代替として導入さ性・選択性が低下している点だ。触媒

シリル化など、多くの反応を高選択

れ る こ と が あ り、 生 物 学 的 等 価 体能の発現には、コンホメーションが変的 に 進 行 さ せ る 能 力 を 持 つ。 ま た、（bioisostere）と呼ばれるが、触媒の化しにくい5員環構造が重要なのだろこの触媒をもとに構造を簡略化した世界においても等価体として振る舞うう。

もの、チオ尿素以外の水素結合供与のは興味深い。このうち、たとえばプ体を用いるものなどが提案され、多ロリンのカルボキシ基をテトラゾール

くのバリエーションが生まれていに置き換えた7は、アセトンとアルデ

各種のプロトン酸（ブレンステッドる。

ヒドの不斉アルドール反応を、プロリ酸）が触媒として働く反応は、古くかンよりも速く進行させることが報告さ

ら数多く知られてきた。ただしそれら

反応、Pictet-Spengler反応、シアノ◆プロリン誘導体5）れている 。

◆不斉ブレンステッド酸

はエステルの加水分解など結合切断反前回も述べた通り、有機触媒ブーム

やはりプロリンから誘導される、ジ応が多く、炭素－炭素結合生成反応にの大きなきっかけになったのは、List

アリールプロリノールシリルエーテル9はあまり用いられてこなかった。ましらによるプロリン触媒（6）を用いた不は、林雄二郎ら及びKarlA.Jørgensenて不斉反応に適用した例は、極めて稀4）

斉アルドール反応の報告であった 。

らによって2005年ごろから独立に報告であったといえる。

極めてシンプルな構造であるプロリンされたため、林-Jørgensen触媒と呼ば
6）

ところが、シンプルなリン酸と、不に手を加えれば、新たな反応性が引きれる（図5） 。アルデヒドα位の不斉斉配位子として多くの使用例が積み出せると考えるのは自然なことであハ ロ 化、 ア ミ ノ 化、Michael付 加 や、

重ねられてきたビナフトール骨格をり、ここから多くのバリエーションがα,β-不飽和アルデヒドの不斉エポキ

組み合わせた化合物が、極めて有効な生まれた（図4）。

シ 化、 不 斉Diels-Alder反 応 な ど、 幅

不斉触媒として働くことが示された。

広く展開されて成果を上げた。

この触媒は、秋山隆彦と寺田眞浩に

プロリン触媒による不斉アルドール
反応は、プロリンの二級アミン部分が1987年 に 報 告 さ れ たCorey-Bakshi-

カルボニル化合物とエナミンを形成

柴田還元も、これに類似した触媒を用め、秋山－寺田触媒の名で呼ばれる

し、カルボキシ基がもう一つのカルボいる反応だ（図6）。ジアリールプロリ（図7） 。

ニル化合物と水素結合を作ることで反ノールから誘導される、オキサザボロ

こ の 触 媒 は 不 斉Mannich反 応、 ア

応を制御すると考えられる。そこで、リジン骨格を持った10を触媒に、ケトルデヒドへのアリルボランの不斉付

このカルボキシ基を他の官能基に置きンの不斉還元を行うというものだ7）。

加反応、対称ケトンへの不斉Baeyer-

換えるアプローチが行われた。

プロリン骨格の有用性を示した、先駆

Villiger反応など、非常に幅広い分野的な結果といえる。

の反応に適用されており、いずれも優プロリンのカルボキシ基の代わりよってそれぞれ独立に開発されたた
8）に、同様に酸性を示す官能基であるプロリンの5員環部分を変換するア

れた選択性を示す。また、ビナフチル

テトラゾリル基や、N -メタンスルホニ

プローチももちろん行われている。興

骨格とブレンステッド酸というシンプ

ルアミド基（-CONHMs）を導入した

味深いのは、単に環を6員環や7員環にもの（7, 8）などが報告されている。

しただけのものは、多くの場合反応

これらの官能基は、医薬化学の世界

図5．林-Jørgensen触媒

図6．Corey-Bakshi-柴田還元に用いられる触媒

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

図7．秋山−寺田触媒13有機分子触媒の軌跡 －基礎から応用まで－

ルな組み合わせであることから、さまざまにアレンジされた触媒が開発されており、有機触媒の中でも大きな一分野を築いている。
◆N -ヘテロサイクリックカルベン触媒
この分野の始まりは、古く1943年にさかのぼる。チアミン（ビタミンB1）
がベンゾイン縮合の触媒として働くこ

図9．Wanzlick-Arduengoカルベン

図10．Rovis触媒の例とを、鵜飼貞二らが報告したのだ。こ9）。これによってN -ヘテロサイクリッ

有機触媒を金属触媒などと組み合わの 反 応 機 構 は1957年 にBreslowら に

クカルベン（NHC）の化学が開花し、せて、さらなる反応性を引き出す研究

よって解明され、チアミンのチアゾリ

多くの応用研究が展開された。その中も多数なされ、発展を遂げている。こウム環からプロトンが脱離して生ずる

で、NHCに不斉要素を組み込み、エ

ちらについては、次回以降に触れてゆ

カルベンが鍵中間体であることが判明

ナンチオ選択的反応を行う取り組みもきたい。

した（図8）。

盛んに行われている。

そして1991年、Arduengoらがかさた と え ばRovisやBodeは、 図10の よ

高い置換基と窒素原子で挟むことでカ

うな4環性化合物を設計し、不斉Stetter

ルベンを安定化し、結晶として取り出反応などに適用して高い選択性を実すブレイクスルーを成し遂げる（図現している。これらNHC触媒の化学については以前も取り上げたので、詳細は当該記事（Organic Square , 48, 8
（2014）.）及びそちらに挙げた参考文
献を参照していただきたい。

1）Hashimoto,T.andMaruoka,K.:Chem.Rev .,
107,5656（2007）;Ooi,T.andMaruoka,K.:

Angew.Chem.Int.Ed .,46,4222（2007）.
2）Tu, Y.et al . :J. Am. Chem. Soc ., 118, 9806
（1996）.
3）D oyle, A. G. and Jacobsen, E. N. : Chem.

Rev .,107,5713（2007）.
4）List,B.:J.Am.Chem.Soc .,122,9336（2000）.

この他にも、4-ジメチルアミノピリ
ジン（DMAP）やグアニジンをベースとしたものなど、多くのタイプの触媒が報告されている。一口に有機触媒といっても、その構造や反応機構は実に多様であることが改めて感じられ
図8．チアミン〔参考文献〕

5）Hartikka, A. and Arvidsson, P. I. : Eur. J.

Org.Chem .,20,4287（2005）.
6）Jensen,K.L.etal .:Acc.Chem.Res .,45,248
（2012）.
7）Corey, E. J.et al . :J. Am. Chem. Soc ., 109,
5551（1987）.
8）Akiyama,T.:Chem.Rev .,107,5744（2007）.

る。

P roducts
不斉相間移動触媒（R,R）-3,5 - ビストリフルオロメチルフェニル -NAS= ブロミド
本品は、京都大学の丸岡教授によって開発されたスピロ型キラル相関移動触媒です。
コード No.
品
名029-14921（R ,R ）-3,5-Bistriﬂuoromethylphenyl-NAS Bromide025-14923

規

有機合成用

当社では、多数の触媒を取揃えています。当社 HP をご覧下さい。
試薬事業トップ→合成・材料→触媒
https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/category/synthesis/catalyst/index.html

14

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

格

容量
100mg
500mg

希望納入価格（円）32,000照 会

ew Products■ 1（トリメチルシリル）
イミダゾール合成に有用なけい素試薬をラインアップ

反 応 例

有機けい素化合物■ シラ環状ジペプチドの合成5）

有機けい素化合物は、シリル化剤に代表されるように有機合成において有用な反応試薬の一つです。当社では、反応試薬として需要が高い有機けい素化合物を新たにライン
アップしました。研究・開発にぜひご利用下さい。

特長●さまざまな用途に合わせた有機けい素試薬をラインアップ●高品質品■ 1,1,3,3-テトラメチルジシロキサン

水素ガス、LAH（水素化リチウムアルミニウム）などに代わる安全な還元剤として使用されます1）。

反 応 例■ アリル基の脱保護

2）■ トリメチルシラノール
反 応 例■ フェノール誘導体からのワンポットホスホリル化反応3）

C4H14OSi2 = 134.32
CAS RN® 3277-26-7
1

C3H10OSi = 90.20
CAS RN® 1066-40-6
2

C5H10Si = 98.22
CAS RN® 1066-54-2
3

C6H12N2Si = 140.26
CAS RN® 18156-74-6
4〔参考文献〕
1）Pesti, J. and Larson, G. L. : Org. Process Res. Dev ., 20, 1164（2016）.
2）Li, N. et al . : Org. Lett ., 23, 8460（2021）.
3）Zhang, Y. et al . : Chem. Commun ., 57, 4588（2021）.
4）Westley, E. et al . : J. Am. Chem. Soc ., 144, 977（2022）.
5）Hattori, T. and Yamamoto, H. : J. Am. Chem. Soc ., 144, 1758（2022）.

No.

1
2

■ トリメチルシリルアセチレン

アセチレン等価体として使用されます。

反 応 例

3

4）
NEW

■ 薗頭カップリング反応を経由したアセチレンの導入

NEW

4

コード No.

品

名1,1,3,3209-21191
危
Tetramethyldisiloxane
203-21231
危
Trimethylsilanol
209-21233
205-21291 Trimethylsilylacetylene
危203-21292
202-21181 1-（Trimethylsilyl）imidazole危
208-21183

規格

容量 希望納入価格（円）

有機合成用 100g

17,000

10g
50g
   5g
有機合成用
25g
50g
有機合成用
250g

11,00031,0005,800
16,0009,000
29,000有機合成用

その他の有機けい素化合物は当社 HP をご覧下さい。
試薬事業トップ→合成・材料→反応剤→含けい素，含りん
反応剤→有機けい素化合物
https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/category/02206.
html…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2022 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）15

ew Products
歯科有機材料の研究用途に

水質管理目標設定項目 農薬類の最新規制に対応！

歯科接着性モノマー

農薬混合標準液 水質 -10

歯科用接着材を構成する成分は、モノ及びジメタクリ

水道水中の農薬類は、水質管理上留意すべき項目である

ラート系モノマー、添加剤（開始剤など）、増粘剤、溶媒

水質管理目標設定項目で規制されており、検出される可能が挙げられます。接着系材料は、可視光あるいは化学的に性の大きさから4つに分類されています。2022年4月1日よ開始するラジカル重合を用いて未重合のモノマーを重合硬り水質管理目標設定項目における農薬類の目標値・分類が化することでレジンと歯質を接着します。接着材に用いら改正されました。具体的には、食品健康影響評価を踏まえ、れるモノマーはさまざまな機能が必要であり、機能性に応ホスチアゼート、クロロピクリン、ウニコナゾールPの目

じて複数のモノマーが配合されます。モノマーの一つであ

標値が変更、昨今の検出状況を踏まえ、イプフェンカルバ

る接着性モノマーは、酸性基と重合性基の両方を有する酸

ゾンを要検討農薬類から対象農薬リスト掲載農薬類に分類性のモノマーで、りん酸系モノマーとカルボン酸系モノが変更されました。また、その他の見直しとして対象農薬

1, 2）マーがあります。

リスト掲載農薬類であるメチダチオンの検査対象が、メチ

この度、歯科接着性モノマーのラインアップにりん酸系

ダチオン原体と、オキソン体を原体の濃度に換算したもののモノマーであるM-TEG-P®を追加しました。M-TEG-P®は合算となりました。これらの改正を受け、当社では新規検査

メタクリラート基とりん酸基を有する酸性モノマーです。

対象農薬イプフェンカルバゾン、メチダチオンオキソンと、連結基部分をテトラエチレングリコール鎖にすることで両従来の水質シリーズに含まれていなかった検査対象農薬イプ

親媒性を示します。カルボン酸系モノマーの4-MET及びロジオン代謝産物の3種の混合標準液を発売しました。

4-METAと併せて、歯科接着材の研究用途でご使用いただ

デ ー タ

けます。
■ 4-MET  ■ LC/MSクロマトグラム■ 4-META

C15H14O8 = 322.27
CAS RN® 68183-31-3

C15H12O7 = 304.25
CAS RN® 70293-55-9■ M-TEG-P®
［HPLC］ Column : Wakopak® Wakosil-Ⅱ® 3C18HG 2.0 × 150mm
Column temperature : 40℃
Eluent : A）5mmol/L CH3COONH4 in H2OB）5mmol/L CH3COONH4 in CH3OH
Gradient :Time（min.）
B conc.（%）

C12H23O9P = 342.28
CAS RN® 140921-66-0

0-20
20-40

5-100
100

Flow rate : 0.2mL/min.

〔参考文献〕［MS］ Ionization : ESI1）山田文一郎：「歯科有機材料の化学 改訂版 基礎知識と応用」（YAMAKIN（株））（2018）.
2）Yoshida, Y. : Ann. Jpn. Prosthodont. Soc ., 4, 353（2012）.

コード No.

NEW

品

名

規格

容量 希望納入価格（円）4-MET
139-19051 【4-[2-（Methacryloyloxy）
ethoxycarbonyl]phthalic Acid】

有機合成用

5g

35,0004-META
136-19061 【4-[2-（Methacryloyloxy）
ethoxycarbonyl]phthalic Anhydride】

有機合成用

5g

30,000M-TEG-P®
133-19071 【Tetraethyleneglycol Methacrylate
危Phosphate】

有機合成用

コード No.

成分名
検出イオン（m/z） Mode
DMTP オキソン
287＋（メチダチオンオキソン）
イプフェンカルバゾン
427＋
イプロジオン代謝産物
328
−

品

名

166-29133 3 Pesticides Mixture Standard
Solution WQ-10（each 20μg/mL
NEW
160-29131 Acetone Solution）
NEW

規格

容量 希望納入価格（円）11,000残留農薬 1mL
試験用
1mL×5A 30,000
危

詳細は当社 HP をご覧下さい。
試薬事業トップ→分析→残留農薬・動物用医薬品→混合標

5g

照 会

準液→水質管理目標設定項目 農薬一斉分析対応混合標準
液 WQ シリーズ
https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/category/00339.html

M-TEG-P® は YAMAKIN 株式会社の登録商標です。

…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2022 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

16

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

ew Products
関連製品

陰イオン界面活性剤の LC/MS 分析に！

陰イオン界面活性剤分析用カラム

陰イオン界面活性剤試験用標準液

LASは、異性体が混合して存在し、ODSカラムでは多数

陰イオン界面活性剤は、工場排水や家庭下水からの混入のピークが溶出します。Wakopak® Wakosil® AS-Aquaは、により、水中に存在すると泡立ちの原因となるため、水質

LASの炭素数毎に異性体を1本のピークとして分離できる汚濁の重要な指標とされています。陰イオン界面活性剤のため、検出感度の向上と定量計算の簡便化、さらに分析時一種である直鎖アルキルベンゼンスルホン酸（LAS）は、間の短縮が可能です。また、直鎖型（LAS）と分岐鎖型は合 成 洗 剤 の な か で 最 も 使 用 量 が 多 く、 水 道 水 質 基 準 で分離するため、これらを判別することができます。

0.2mg/L以 下 に 規 制 さ れ て い ま す（ 固 相 抽 出-HPLC法 ）。
LASは、環境省の水質汚濁に係る環境基準においても規制

品

名

容量 希望納入価格（円）がされており、直鎖LAS及びその塩の分析法として固相抽
出-LC/MS法（内部標準法）が採用されています。現在、その他のサイズも取揃えています。詳細は当社 HP をご覧

水道水質基準においてもLASのLC/MS法（内部標準法）
採用に向けた検討が進められています。
当社ではこの度、陰イオン界面活性剤のLC/MS分析に使用できる内部標準液「4-ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム-13C6標準液」を発売しました。各種規制の対象となっているC12のLASに物性が近く、内部標準としてご使用いただけます。

コード No.

品

名規格

容量 希望納入価格（円）Sodium 4-Dodecylbenzenesulfonate1mL×
191-19171 13C6 Standard Solution（10μg/mL
水質試験用
45,0005A
危Methanol Solution）
Sodium p -n -Octylbenzenesulfonate
水質試験用 1mL
7,900
195-17131 Standard Solution（1mg/mL
危Methanol Solution）

品

名

規格

容量 希望納入価格（円）Anionic Surfactants Mixture Standard
1mL×
013-20131 Solution（each 1mg/mL Methanol
水質試験用25,0005A
危
Solution）※混合成分は直鎖アルキル鎖の末端以外の炭素にフェニル基が結合した LAS（C10 〜 C14）であり、それぞれの濃度が明確な混合標準液です。水道水質基準の告示試験法にご使用いただけます。

単品標準液
コード No.

試薬事業トップ→分析→水質→水道水・飲料水→陰イオン
界面活性剤（LAS）
https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/category/00343.
html

ポジティブリスト関連農薬標準品
当社では、ポジティブリスト制度の対象となる農薬・
動物用医薬品の標準品を取扱っています。
下記品目を新たに発売しました。

農薬標準品■ ブタフェナシル標準品

混合標準液
コード No.

下さい。

追加品目のお知らせ

内部標準液

NEW

コード No.

230-63283
1本（W） 60,000
Wakopak® Wakosil® AS-Aqua 4.6*250mm
1本（D） 60,000
234-63281

品

名

規格

容量 希望納入価格（円）Sodium Decylbenzenesulfonate
1mL×
195-13111 Standard Solution（1mg/mL
水質試験用
5A
危
Methanol Solution）
Sodium Dodecylbenzenesulfonate
1mL×
199-13131 Standard Solution（1mg/mL
水質試験用
5A
危
Methanol Solution）
Sodium Tetradecylbenzenesulfonate
1mL×193-13151 Standard Solution（1mg/mL
水質試験用
5A
危
Methanol Solution）
Sodium Tridecylbenzenesulfonate
1mL×196-13141 Standard Solution（1mg/mL
水質試験用
5A
危
Methanol Solution）
Sodium Undecylbenzenesulfonate
1mL×
水質試験用
192-13121 Standard Solution（1mg/mL
5A
危Methanol Solution）

8,100
7,800
7,900
8,900
8,200

■ 2-クロロエタノール標準品■ フルアジナム代謝産物D標準品■ フルアジナム代謝産物E標準品■ チアジニル代謝産物C標準品
コード No.

品

名規格

容量 希望納入価格（円）028-19631 Butafenacil Standard
残留農薬試験用 100mg
2-Chloroethanol
Standard
NEW
食品分析用 100mg
031-26011
危NEW

Fluazinam Metabolite D
Standard
Fluazinam
Metabolite ENEW
066-07041
Standard
Tiadinil Metabolite CNEW
207-21251
Standard
NEW069-07031

29,0007,000

残留農薬試験用 100mg

照 会

残留農薬試験用 100mg

照 会

残留農薬試験用 50mg

35,000

随時、当社 HP の検索ページに発売品目を追加・更新しています。詳細は当社 HP をご覧下さい。
試薬事業トップ→分析→残留農薬・動物用医薬品→農薬・
動物用医薬品混合標準液検索バナー
https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/product/search/pesticides.html…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2022 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）17

ew Products
品目追加

GPC 測定に対応して新発売！

機能性成分分析用標準品

ペンタフルオロフェノール

機能性表示食品のガイドラインでは「機能性関与成分と当社では、GPC（ゲル浸透クロマトグラフィー）用規格

は特定の保健の目的に資する成分と定義され、定性確認及としてペンタフルオロフェノールを発売しました。

び定量確認が可能な成分である。」とされています※1。

現 在、 有 機 合 成 用（ コ ー ドNo. 162-28172，164-28171）

近年、食品の機能性成分に対して成分基原や含量を正確を発売していますが、本品はGPC測定に対応した規格を保に定性・定量する意識が高まってきています。当社では、証しています。GPC測定の際は、本品をご使用下さい。

機能性成分の定性・定量にご使用いただける標準品を取揃えています。この度、下記品目を新たに発売しました。

保証規格項目※1 消
 費 者 庁HP（https://www.caa.go.jp/policies/policy/food_labeling/foods_with_function_claims/assets/foods_with_function_claims_210322_0002.pdf（2022年8月4日閲覧））より
コード No.

名※2

品

規格

容量

希望納入 主な試験対象となる価格（円） 機能性成分

Cyanidin 3-Glucoside Chloride
ビルベリー由来
食品分析用 20mg 照 会
Standard
アントシアニン
3-Hydroxy-3-methylbutyric AcidNEW
087-10621
食品分析用 100mg 6,500 HMBカルシウム
Calcium Salt Standard
松樹皮由来
近日
食品分析用 20mg 照 会
発売 163-29001 Procyanidin B1 Standard
プロシアニジン
りんご由来
近日
食品分析用 20mg 照 会
発売 165-28961 Procyanidin B2 Standard
プロシアニジン
松樹皮由来
近日
食品分析用 20mg 照 会
発売 160-29011 Procyanidin B3 Standard
プロシアニジン
近日
食品分析用 50mg 照 会
発売 209-21331 Tectoridin Standard
近日
食品分析用 50mg 照 会 葛の花由来
発売 200-21361 Tectorigenin Standard
イソフラボン
Tectorigenin 7-O -Xylosylglucoside
NEW 204-21381
食品分析用 20mg 80,000
Standard
近日発売

380〜400nm）、GPC試 験 適 合 性、 水 分、 不 揮 発 物、 含 量（キャピラリー GC）
コード No.

031-25891※2 製品の由来は「主な試験対象となる機能性成分」の項目に記載の由来植物とは異なる場合があります。
（由来を保証する製品ではありません。）

関連製品
フコイダン
フコイダンは褐藻類に含まれる多糖類で、抗血液凝固活性、抗腫瘍作用、コレステロール低下作用などの有効性が
報告1）されており、健康食品として注目されています。
本品は、平均分子量10,000以上のオキナワモズク由来フコイダンです。
〔参考文献〕
1）Kimura-Takagi, I. et al . : Chromatography , 22, 85（2001）.

コード No.
NEW

外観、アセトン溶状、吸光度（320nm、350nm、370nm、品

061-06991 Fucoidan

名

規格

容量

希望納入価格（円）

食品分析用

100mg

28,000NEW

163-29062

NEW

165-29061

品

名Pentafluorophenol

規格

容量 希望納入価格（円）

GPC用

17,000100g

44,000

関連製品
コード No.

品

名039-24493 Chloroform, Amylene added
036-24481
Chloroform
032-24483
危034-24541 1-Chloronaphthalene043-33841
危o -Dichlorobenzene
049-33843
045-33921
危
N,N -Dimethylacetamide
041-33923
046-33831
危N,N -Dimethylformamide
042-33833
048-33911
危Dimethyl Sulfoxide044-33913
082-10311
1,1,1,3,3,3-Hexafluoro-2-propanol
084-10315
134-18521
危
1-Methyl-2-pyrrolidone
130-18523
205-20071 Tetrahydrofuran, Stabilizer Free危201-20073
209-20091 Tetrahydrofuran, with Stabilizer
危205-20093
202-20101
危
1,2,4-Trichlorobenzene
208-20103

規格

容量 希望納入価格（円）

GPC用

3L
1L
3L
1L
1L
3L
1L
3L
1L
3L
1L
3L
100mL
500mL
1L
3L
1L
3L
1L
3L
1L
3L

GPC用
GPC用
GPC用
GPC用
GPC用
GPC用
GPC用
GPC用
GPC用
GPC用
GPC用

9,950
3,900
9,900
36,000
3,100
8,150
8,150
18,2004,600
11,4006,310
14,70020,60082,4008,500
16,5006,590
14,3506,680
14,60017,00038,000

製品詳細は当社 HP をご覧下さい。

その他標準品・測定用キットも取揃えています。詳細は当試薬事業トップ→分析→液体クロマトグラフィー→液体ク

社 HP をご覧下さい。

ロマトグラフィー用溶媒→ GPC 用溶媒→ペンタフルオロ

試薬事業トップ→分析→食品・栄養・機能性成分

フェノール

https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/category/analysis/

https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/product/detail/nutrition_functionality/index.html

W01W0116-2906.html…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2022 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

18

25g

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

ew Products
家族性アミロイドーシスの研究に〔参考文献〕

トランスサイレチン 組換えタンパク質・抗体

2）Chung, C. M. et al . : Amyloid , 8, 75（2001）.

トランスサイレチンはプレアルブミンとして知られてお4）Westermark, P. et al . : Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 87, 2843（1990）.

1）Nilsson, S. F. et al . : J. Biol. Chem ., 250, 8554（1975）.
3）Connors, L. H. et al . : Amyloid , 7, 54（2000）.

り、in vivo で甲状腺ホルモンとレチノール結合タンパク5）Goldsteins, G. et al . : Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 96, 3108（1999）.

質の結合と輸送に関与しています1）。また、変異体は家族性アミロイドポリニューロパチー（FAP）2, 3） に関与して組換えタンパク質

いることが報告されており、野生型についても老人性全身メーカーコード性アミロイドーシスへの関連が示唆されています4）。

状：凍結乾燥

●分子量：13,760
列：GPTGTGESKCPLMVKVLDAVRGSPAINVAVHVFRKAADDTWEPFASGKTSESGELHGLTTEEEFVEGIYKVEIDTKSYWKALGISPFHEH
AEVVFTANDSGPRRYTIAALLSPYSYSTTAVVTNPKE
量：95％（SDS-PAGE）●発

現：E. coli■ 抗体
Mouse IgG AntiMouse IgG AntiTransthyretin（39-44）Transthyretin（56-61）
メーカー製品コードAT-550-01
AT-560-01
形状
凍結乾燥
抗原
組換えトランスサイレチン（野生型）
免疫動物
マウス
サブクラス/サブタイプ
IgG1
Clonality
モノクローナル精製法
アフィニティー精製
反応性
ヒト トランスサイレチン（アミロイド型）
適用＊）
ELISA（1:1000）, WB（1:1000）, IHC（1:500）
品名＊）WB：ウエスタンブロット、IHC：免疫組織化学

デ ー タ■ ウエスタンブロット
Anti-Transthyretin（39-44）

容量 希望納入価格（円）48,100T-503-10

Transthyretin（A36P）Human,
Recombinant

A36P

1mg

78,000T-517-10

Transthyretin（A97S）Human,
Recombinant

A97S

1mg

78,000T-504-10

Transthyretin（D18G）Human,
Recombinant

D18G

1mg

78,000T-511-10

Transthyretin（F64S）Human,
Recombinant

F64S

1mg

58,500T-509-10

Transthyretin（F87M/L110M）,
Human, Recombinant

F87M/
L110M

1mg

58,500T-506-10

Transthyretin（G53E）Human,
Recombinant

G53E

1mg

58,500T-519-10

Transthyretin（L111M）Human,
Recombinant

L111M

1mg

96,800T-501-10

Transthyretin（L12P）Human,
Recombinant

L12P

1mg

78,000T-510-10

Transthyretin（L55P）Human,
Recombinant

L55P

1mg

58,500T-518-10

Transthyretin（S52P）Human,
Recombinant

S52P

1mg

96,800T-515-10

Transthyretin（T119M）Human,
Recombinant

T119M

1mg

58,500T-516-10

Transthyretin（T60A）Human,
Recombinant

T60A

1mg

78,000T-507-10

Transthyretin（V122I）Human,
Recombinant

V122I

1mg

58,500T-502-10

Transthyretin（V30G）Human,
Recombinant

V30G

1mg

58,500T-535-10

Transthyretin（V30I）Human,
Recombinant

V30I

1mg

58,500T-505-10

Transthyretin（V30M）Human,
Recombinant

V30M

1mg

58,500T-512-10

Transthyretin（Y69H）Human,
Recombinant

Y69H

1mg

58,500変異型■ 組換えタンパク質（野生型）

●含

変異型

Transthyretin（Wild Type）Human,Wild Type 1mg
Recombinant

T-500-10

スサイレチンと2種類の抗体をラインアップしています。

●配

名

野生型

AlexoTech社では、野生型の他に、多数の変異型トラン●形品

Anti-Transthyretin（56-61）
メンブレン : PVDF
ブロッキングバッファー : 1% ドライミルク（TBS 溶液）, 0.3%
Tween 20
抗体希釈率 : 1:1000
二次抗体 : 抗マウス IgG-HRP 標識抗体
検出 : Enhanced Chemiluminescence

抗体
メーカーコード品

名

容量 希望納入価格（円）NEW

AT-550-01 Mouse IgG Anti-Transthyretin（39-44）100μg 139,800

NEW

AT-560-01 Mouse IgG Anti-Transthyretin（56-61）

100μg 139,800…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2022 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

19

ew Products
デ ー タ

エクソソーム産生実験に！
間葉系幹細胞増殖用培地■ 細胞増殖能培地です。本基礎培地とサプリメントを混合し、さらに血本品は通常のMEMαやMSC用増殖培地と比較して、高エクソソーム産生用培地（コードNo.

053-09451/298-84001）で培養することで高活性のエクソ
ソームを大量に産生させることができます。エクソソーム研究にご使用下さい。

●高い増殖能●高品質な（扁平様にならない）状態でMSCを培養可能●EV-UpTM培地とセットで使用することで高活性なエク

2.5
2
1.5
1
0.5
0

他社
MEMα

本品

1.6
1.4
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0

ソソームを大量に産生可能●アニマルフリー※

2.5

1.6

他社
MEMα

本品

他社
MSC用増殖培地

本品

他社MSC用増殖培地との比較

他社MEMαとの比較
細胞増殖率（他社MEMαとの相対値）

長

本品

3

臍帯マトリクス由来MSC

特

他社
MEMα

他社MEMαとの比較
細胞増殖率（他社MEMαとの相対値）

血清不含のEV-Up

0

脂肪由来MSC

い増殖能を有しています。本品でMSCを増殖させた後に、
TM

1
0.5

細胞増殖率
（他社MSC用増殖培地との相対値）

本品は、ヒト間葉系幹細胞（MSC）専用の増殖用血清21.5

他社MSC用増殖培地との比較
1.8
1.6
1.4
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0

細胞増殖率
（他社MSC用増殖培地との相対値）

細胞増殖率（他社MEMαとの相対値）

MSCultureTM High Growth サプリメント

清を添加して使用します。

他社MEMαとの比較
2.5

細胞増殖率
（他社MSC用増殖培地との相対値）

骨髄由来MSC

MSCultureTM High Growth 基礎培地

2
1.5
1
0.5
0

他社
MSC用増殖培地

本品

他社MSC用増殖培地との比較
1.4
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0

他社
MSC用増殖培地

本品

他社のMEMα及びMSC用増殖培地と本品を用いてMSCを培養した際の細胞増殖能を比較した。
他社のMEMα及びMSC用増殖培地と比較して、本品は高い細胞増殖能を持つことが確認できた。

※血清添加前の培地としてアニマルフリーです。

適用細胞例
さまざまなMSCにご使用いただけます。

■ 抗線維化活性▽当社で培養実績のある細胞
骨髄由来MSC、脂肪由来MSC、臍帯マトリクス由来MSC

使用方法■EV-UpTM培地を用いてエクソソーム産生実験を行う際のプロトコル
MSC
播種

Day - 4

MSCultureTM HighGrowth Medium
細胞増殖

培地
交換

Day 0

培養上清
回収
EV-Up™

エクソソーム精製

エクソソーム産生 Day 3- 5

回収した血清からのエクソソームの精製には、PSアフィ
ニティー法をおすすめします。PSアフィニティー法とはホスファチジルセリン（PS）結合分子（Tim4）を用いてエクソソームを金属イオン依存的に捕捉後、キレート剤により溶出する方法です。MagCaptureTM Exosome Isolation
Kit PS Ver.2（コードNo. 290-84103）が本法に対応しています。

他社MEMαと本品で骨髄由来MSCを増殖後、EV-UpTM エクソ
ソーム産生用培地に交換しエクソソーム産生を行い、その培養上
清からPSアフィニティー法でエクソソームを精製した。精製エクソソーム5×107 particles/mLをTGFβで刺激したヒト胎児肺由来線維芽細胞に添加し、線維化マーカー（Collagen V）遺伝子の発現をqPCRにより定量し、それぞれの抗線維化活性を比較した。
本品で増殖させたMSC由来のエクソソームはTGFβによって増加したCollagen Vの発現を抑制した。
コード No.

品

名規格

容量 希望納入価格（円）

MSCultureTM High Growth
NEW 132-19345
細胞培養用 500mL 15,500
Basal Medium
TM
MSCulture High Growth
NEW 133-19331
細胞培養用    5mL 6,000
Supplement…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2022 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

20

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

ew Products
LAMP法用核酸増幅試薬
LAMP MASTER シリーズ
LAMP MASTERシリーズは、LAMP法による等温核酸
増幅のためのマスターミックス試薬です。
2×LAMP MASTERにプライマーと鋳型核酸を添加するだけでLAMP法によるDNA増幅を行うことができます。
また、DNA増幅を蛍光検出用装置で検出するための試
薬や目視判別用試薬とのセットもあるため、検出方法に合わせてお選びいただけます。

特長●2×LAMP MASTERにプライマーと鋳型核酸を添加するだけで反応液を調製可能●検出方法に合わせて試薬を選択できる

ISOSPIN Cell & Tissue RNA［コードNo. 314-08211］を用いて
HeLa細胞から抽出したRNAを鋳型にし、LAMP MASTER for
Fluorescence（2×LAMP MASTER、インターカレーター）とプ
ライマーセットに逆転写酵素を追加した反応液を68℃で60分間反応させ、増幅から検出までの工程をリアルタイムPCR装置で1ス
テップで行った。
RNAを鋳型にした場合でも、逆転写酵素AMV Reverse Transcriptase［コードNo. 311-07501］の添加で、DNA増幅を確認できた。
コード No.

品

名

検出系 容量 希望納入価格（円）300
回用

45,000317-08941 LAMP MASTER for Fluorescence 蛍光検出用 1set

55,000LAMP MASTER for Turbidity
314-08951（Visible Dye）

51,000311-08961 LAMP MASTER for Turbidity

濁度検出用

目視判別用 1set

関連製品
AMV由来 組換え逆転写酵素
本品は、酵素活性が高く、RNAを高感度に検出できます。
コード No.

品

名311-07501 AMV Reverse Transcriptase

容量

希望納入価格（円）500units

27,000LAMP法用遺伝子増幅検出装置

デ ー タ■ エンドポイント濁度測定装置 LT-16■ RT-LAMP（One Step）によるRNAからの増幅と蛍LT-16は、LAMP法によるDNA増幅の副産物であるピロ

光検出

リン酸マグネシウムの濁度をエンドポイント測定すること
で、増幅の有無を確認することができる装置です。
■ LAMP法用測定装置 LF-8 Plus
LF-8 Plusは、濁度と蛍光の2種類の測定器を搭載し、1回の測定で両方のデータを取得できる装置です。
コード No.

品

名

容量 希望納入価格（円）313-09261 エンドポイント濁度測定装置 LT-16
NEW
310-09271 LAMP法用測定装置 LF-8 Plus
NEW

1台
1台

750,000
650,000※PCと接続ケーブル及び外付けプリンタは、別途ご用意下さい。

デモ機の貸し出しを行っています。ご希望の方は当社または当社代理店までお問合せ下さい。
…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2022 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

21

ew Products
キット内容

インスリン測定のファーストチョイス●抗体固相化96ウェルプレート

レビス® インスリン -マウス /ラット（発光系）

1枚（8×12列）●標準マウス/ラットインスリン溶液（200ng/mL）

本品は、マウス/ラットインスリンを定量的に測定する

50μL/1本

ためのサンドイッチELISAキットです。血清または血漿、●緩衝液

60mL/1本

培養上清、細胞抽出液中のインスリンを測定できます。

●ペルオキシダーゼ結合抗インスリン抗体

100μL/1本

検出に発光系を用いることにより、低濃度域から高濃度●発光試薬1

6mL/1本域までをカバーできるようワイドレンジ化を行いました。

●発光試薬2

6mL/1本そのため1つのキットで絶食検体から食後検体までの測定●濃縮洗浄液（10×）

をほぼカバーすることができ、再測定になる可能性が少な●プレートシール

1枚くなります。貴重な検体、時間を有効に使用できることは●取扱説明書1部

100mL/1本

大きなメリットとなります。

特コード No.

長●ワイドレンジ：39pg/mL ～ 20,000pg/mL

NEW

メーカーコード

637-54721 AKRIN-111L

再測定の頻度を減少させます。絶食後/食後の検体を別品

名容量 希望納入価格（円）

LBIS Mouse/Rat Insulin ELISA
96回用
Kit（Luminescent type）

56,000タイプで測定する必要がありません。
●少量検体：5μL/ウェル
同一検体で他項目を測定したい貴重な検体を節約できます。

性

パーキンソン病メカニズム・創薬研究用
iPS 細胞由来ドーパミン神経細胞

能

検量線範囲

38.1pg/mL ～ 20,000pg/mL

測定対象

インスリン

iCell® DDP（パーキンソン病モデル）

測定対象検体 マウス/ラット血清、血漿、培養上清、細胞抽出液

FUJIFILM Cellular Dynamics, Inc.が 製 造 す るiCellⓇ

5μL

DDPは、iPS技術を用い疾患の特徴をin vitro （細胞レベル）

測定時間

2時間

で再現し、疾患メカニズムの解明や医薬品候補物質の創薬

検出用

発光系 ※測定には発光プレートリーダーが必要です。

スクリーニング、薬効評価といった創薬研究におけるさ

必要検体量

まざまな用途でご利用いただけます。iCell® DDP（パーキン ソ ン 病 モ デ ル ） のiCell® ド ー パ ミ ン 神 経 細 胞（GBA〈検量線（例）〉N370S）-11344及び（LRRK2 G2019S）-11299は、パーキン
ソン病リスク因子として知られるGlucosylceramidase（GBA）N370S遺伝子変異及びLeucine rich-repeat kinase 2（LRRK2）G2019S遺伝子変異を持ったパーキンソン病患者の体細胞からiPS細胞を樹立し、ドーパミン神経細胞に分化した“innate”パーキンソン病モデル細胞です。また、
iCell®ドーパミン神経細胞（SNCA A53T）-01279は、健常者由来iPS細胞のα-シヌクレイン遺伝子（SNCA）に、53残基のアラニンがトレオニンのヘテロ変異（A53T）を導入
後、ドーパミン神経細胞に分化した“engineered”パーキ
ンソン病モデル細胞です。

特長●パーキンソン病患者iPS細胞由来ドーパミン神経細胞●パーキンソン病の分子病態を示すフェノタイプ
…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2022 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

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和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）［次頁に続く］ew Products
各iPS細胞株のドナー

低酸素研究用 PHD 阻害 -HIF 活性化化合物
PyrzA

iCell ドーパミン
iCell ドーパミン
iCell ドーパミン
神経細胞（GBA 神経細胞（LRRK2 神経細胞（SNCA
N370S）-11344 G2019S）-11299 A53T）-01279®

®

®

PyrzA-50

性別
男性
男性
男性
年齢層
60-69歳50-59歳50-59歳民族性
Caucasian
Caucasian
Caucasian
組織起源
PBMC
PBMC
PBMC
遺伝子変異 GBA（N370S） LRRK2（G2019S） SNCA（A53T）
リプログラミン エピソーマル
エピソーマルエピソーマル
グ法
ベクター
ベクター
ベクター
病態モデル
Genetic
InnateInnate
作製法
Engineering

PyrzAは、低酸素誘導因子（HIF-1α）を活性化させる化合物です。通常の酸素状態下では、HIF-1αはプロリン
水酸化酵素（PHD）によってHIF-1αのプロリン残基が水酸 化 さ れ、HIF-1α の 分 解 へ と つ な が り ま す。 本 品 は、
HIF-1αのプロリン残基部分と構造が酷似していることで、HIF-1αのPHDへの結合を競合的に阻害し、HIF-1αを活性化させます。また、HIF-1αの転写活性を約50倍向上さ

デ ー タ

せるPyrzA-50も取揃えています。テトラクリエイト株式
会社は、新規化合物及びその用途について特許※1を取得しています。
※1：特許第6904528号

特長●低酸素誘導因子活性化化合物●PHD阻害化合物
AHN（Apparent Health Normal） と 比 べ た 結 果、iCell ド ー パ
ミン神経細胞 GBA N370S、LRRK2 G2019S 及び SNCA A53T
ミュータントにおいて、GBA 活性の低下（A）、α-シヌクレイン
濃度（B）の増加が認められた。
®

コード No. メーカーコード

品名■ PyrzA●含量：>95%（HPLC）●外観：白色固体

遺伝子型/疾患 容量（細胞数）希望納入価格（円）

1M iCell®
1vial
NEW 559-41981 C1147 DopaNeurons（GBA
187,000（≥1.0×106cells）
N370S）-11344 150 GBA（N370S）
パーキンソン病
5M iCell®
1vial
NEW 556-41991 C1148 DopaNeurons（GBA
550,000（≥5.0×106cells）
N370S）-11344 150®
1M iCell
1vial
NEW553-42001 C1149 DopaNeurons（LRRK2
187,000（≥1.0×106cells）
LRKK2
G2019S）-11299 150（G2019S）®
5M iCell
パーキンソン病
1vial
NEW
550-42011 C1150 DopaNeurons（LRRK2
550,000（≥5.0×106cells）
G2019S）-11299 150
1M iCell®
1vial
553-34791 C1112 DopaNeurons（SNCA
137,000（≥1.0×106cells）
A53T HZ）-01279 150 SNCA（A53T）
パーキンソン病
5M iCell®
1vial
480,000
556-34801 C1113 DopaNeurons（SNCA（≥5.0×106cells）
A53T HZ）-01279 150

O
H3C
N

NH

O

CH3

N

O

N

O

CH3

C17H18N4O4＝342.4
CAS RN® 900276-47-3■ PyrzA-50●含量：>95%（HPLC）●外観：クリーム色固体
H3C

O
N

関連製品

NH

O
N

コード No. メーカーコード

品

名

容量（細胞数）希望納入価格（円）

iCell® DopaNeurons, 01279
1vial
551-33511 C1087
138,000
6
150 （≥1.0×10 cells）
1M cells®
iCell DopaNeurons, 01279
1vial
551-33371 C1028
248,000
6
150 （≥5.0×10 cells）
5M cells®
100mL
11,500550-33601 M1010 iCell Neural Base Medium 1
551-33631 M1029 iCell® Neural Supplement   2mL
28,750®
iCell
Nervous
SystemSupplement558-33641 M1031   1mL
33,350ONO

C29H38N4O4＝506.6
CAS RN® 2766569-20-2

コード No. メーカーコード
品
639-53441
TC001
PyrzA
NEW
636-53451
TC002
PyrzA-50
NEW

名

容量 希望納入価格（円）10mg 10,000
10mg 30,000…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2022 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

23

ew Products
デ ー タ

組織透明化試薬■ マウス脳の透明化例

CUBIC-L, R+（M）Trial Kit（1）蛍光タンパク質発現と核染色の組合せ

近年、複雑な神経回路網理解を目指したアプローチとし

CAG-EGFP Tg マウス全脳を本品で透明化及び専用の染色キットで核染色（RedDot2）を行った。染色後のサンプルをライトシート顕微鏡で観察した。

て、組織透明化技術を用いた脳の3次元観察が注目を集めています。CUBIC（Clear, Unobstructed Brain/Body
Imaging Cocktails and Computational Analysis）は組織透明化技術の一つであり、東京大学大学院 医学系研究科
上 田 泰 己 先 生、 順 天 堂 大 学 大 学 院 医 学 研 究 科・ 医 学 部
洲崎悦生先生らによって開発されました。
本品は、第2世代CUBICに対応した4種類の溶液で構成さ（データご提供：順天堂大学大学院
医学研究科・医学部 洲崎悦生先生）

れています。マウスの脳を含む組織や全身はもちろん、
マーモセット組織（脳を含む）や全身、ヒト組織ブロックの透明化が可能です。本品でサンプルを透明化することで、（2）核染色と免疫染色の組合せ

細胞種、細胞機能、細胞同士の接続などの情報をノンバイ
アスかつ網羅的に収集し、解析できます。

キット内容
試薬名

容量

試薬の役割

CUBIC-L Solution

125mL×2

脱脂・脱色

CUBIC-R+（M）Solution

125mL×1

屈折率調整

Mounting Solution 1

40mL×1

サンプル観察用

Mounting Solution 2

40mL×1

サンプル観察用

操作概要
以下はマウス全脳及び組織丸ごとの透明化手順です。サンプルの大きさや種類によって最適なプロトコルは異なり

B6N マウス全脳を本品で透明化した。併せて専用の染色キット
で核染色（SYTOX-G）と免疫染色（NeuN-A594）を行い、染色後のサンプルをライトシート顕微鏡で観察した。
（データご提供：順天堂大学大学院医学研究科・医学部 洲崎悦生
先生）

核染色及び免疫組織染色は別途試薬が必要となります。詳
細は当社までお問合せ下さい。

ます。
工程

試薬

温度

時間

臓器摘出・灌流固定
脱血

D-PBS

4℃

<5min

コード No.
NEW

品

名

規格

灌流

4% PFA

4℃

<5min

固定

4% PFA in PBS

4℃

12-24 hrs

洗浄0.01% NaN3 in PBS

RT>2 hrs×2 回

前置換

50% CUBIC-L Solution

37℃>6 hrs「CUBIC Trial Kit」を販売してい37℃

2-5 days

ま す。 第2世 代CUBICと 比 較 し てRT>2 hrs×3 回

脱脂・脱色

脱脂・脱色 CUBIC-L Solution

容量 希望納入価格（円）298-85101 CUBIC-L, R+（M）Trial Kit 危 組織透明化用 1キット

関連製品
CUBIC Trial Kit
当 社 で は、 第1世 代CUBIC試 薬①透明化の過程が目に見える②サ

洗浄
洗浄

PBS

屈折率調整
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150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2022 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

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61,500

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

45,000化学大家 458
ウィリアム・ニコルソン（1753 . 12 . 13 ～ 1815 . 5 . 21）
千葉大学名誉教授

根矢三郎

ギストン（燃素；ギリシャ語で炎の意
１．はじめに味）という物質が燃焼で出るためとす

地球は青く輝く美しい星である。表るフロギストン説が信じられていた。

面の7割は蒼海で覆われ、その深さは

この理論は1703年にドイツ人医師ゲオ

平均3700mにもおよぶ。45億年前の地

ルグ・シュタールが提唱したもので、

球誕生時、地球はまだ熱く柔らかいマ

木や炭が燃えて発熱して軽くなるのはグマ様の凝集物だった。この中に宇宙フロギストンが出ていくためとされて空間から引きつけられた水が気体としいた。一方、ラヴォアジエは燃焼に対て混在していた。やがて6億年かけてして新たに、酸素との化合が燃焼であ

地球は冷え固まり、水が地表に現れてるとする酸素説を提起した。酸素説は海ができた。水の化学式はH2Oで水素金属の燃焼も説明でき、金属を燃焼さと酸素の2元素からなる物質である。

せると重量が増加するのは、金属酸化水素ガスと酸素ガスを混ぜて火をつけると両者は爆発的に化合して水とな

図１．ウィリアム・ニコルソン。参考文献
１より

1）

物ができるためとし、フロギストン説
は終末を迎えつつあった。ニコルソン

り、大量の熱が発生する 。これらははフロギストン説に関するリチャー

誰もが知る事実だが、人類の歴史から

ド・カーワンの「フロギストン論考」

見れば、水が気体の水素と酸素から成教員を辞職し、多くの人々との触れ合の説も世の中に紹介した。カーワンはる物質と判明したのは、さほど過去でいを求めて執筆と出版活動の道を選ん

自著で、1765年に発見された気体であはない。さらに、水が「分解」する過だ。

る水素が、燃焼や酸化を支配するフロ程については、その昔まったく知られニコルソンは活発に筆を進め、28歳

ギストンの実態であると主張していていなかった。ところが、今から約で 初 め て 出 版 し た「 自 然 科 学 入 門 」

た。ニコルソンは多数の人々が気軽に200年前、水の分解を調べた英国人がは、物理学者ニュートン（1643-1727）

意見表明できる機会が必要と配慮したいた。約200年前といえば、日本ではのアイデアを化学に浸透させた入門書ため、1795年に「化学の辞書」を出版

徳川幕府第11代将軍、家 斉 の時世で、と認められた。1783年にはフランス人

した際、フロギストン説への批判とラ

欧米の近代科学もまだ黎明期にあっ探検家アイダー・アリ・カーンが書いヴォアジエの酸素説への明確な支持をた。こんな時代に水の分解過程を調た西インド諸島についての著書をフラ避けていた。この著書は若き日のハン

べた先駆者がいたとは驚きである。そンス語から翻訳して出版し、1784年に

フリー・デービー（最多数の元素を発の 人 物 が ウ ィ リ ア ム・ ニ コ ル ソ ン

は羊毛輸出を防ぐ議会法に関する本

見した英国化学者で後述、1778-1829）（William Nicholson） で あ る （ 図1）。

を、また1786年には彼自身の航海に関（図2）らの興味を引きつけ、多数の版

それでは、ニコルソンの業績、研究する本を書いた。活発な著作活動が認を重ねた。

歴、人物像に加えて、当時の英国の科められ、リチャード・カーワン（アイ

学の様子を覗いてみよう。

ルランドの化学者、1733-1812）が主

いえ なり

2）

催する哲学協会「コーヒーハウス」へ
２．生い立ちと1783年に転職している。ほどなく、ニコルソンは1773年、ロンドンのグ

バーミンガムにあった学識者、発明

レート・カーター通りに生まれた。父

家、事業経営者らの交流団体であるル

親はロンドン中心街にある法廷弁護士

ナー・ソサエティの会員らと知り合の育成施設であるインナー・テンプル

い、燃焼に関する理論で有名なフラン協会の弁護士だった。ニコルソンはス人科学者アントワーヌ・ラヴォアジ

ノースヨークシャー州で学んだ後、16エ（水素の命名者で酸素の燃焼作用を

歳で英国の東インド会社に入り、イン解明、1743-1794）に出会い、科学のドにあった支社で数年間働いた。22歳

最先端を経験することとなった。

でオランダのアムステルダムで英国の製陶会社ウェッジウッド社の代理人と

３．フロギストン説

して勤務し、25歳でロンドンに戻って

18世紀頃には燃焼の実体がよく分か

数学の教員として過ごした。やがて、らず、物が燃えて発熱するのは、フロ

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

図２．ハンフリー・デービー。電気分解法を利用して多数の元素を初めて単離。参考文献３より25

４．ニコルソン・ジャーナル

ストン（英国科学者、1766-1828）だっ理学者A.ボルタ（メタンガスも発見、た。ウォラストンはニコルソン・ジャー

1745-1827）により、バイメタル（熱当時のロンドン王立協会が出版してナルに最初の発見報告を匿名で出した膨張率が違う2種金属板を張り合わせ

い たPhysiological Transactionsは 敷

理由について、王立協会誌とは違い、たもの）の接触で発生する電荷の実験

居が高すぎ、一般の科学人が気軽にニコルソン・ジャーナルが匿名記事をに活用された。

発表できる場所ではなかった。そこ受け入れてくれるためで、さらに発見

やがて、物理学全体に大きな影響をで、ニコルソンは科学雑誌の創刊を思の優先権を主張したかったからと述べ与える出来事が起きた。ボルタは2種いついた。1797年4月に月刊誌Journalている。

類の金属板を直接張り合わすのではな

of Natural Philosophy, Chemistry andニコルソン・ジャーナルの出版は、

く、その間に湿った紙を挟むと電流が

the Arts（自然哲学・化学・技芸誌）

科学と社会をつなぐ雑誌がほとんど流れる現象を発見してボルタ電堆をつ（別称、ニコルソン・ジャーナル）をなかった当時、科学発展に希望の光くった。この装置が1800年のボルタ電発刊し、初代編集長として意欲ある読を当てた先見性のある企画だった。ニ池の発明につながった。電気の存在は者なら誰もが迅速に論文発表できる場

コルソンが成功を収める様子を見て、静電気や生物電気の現象から当時すで所を提供した。この雑誌は天文学、生

ロンドンのA.ティロック（科学者で出に知られていたが、人類が初めて安定

物学、化学、数学、物理学、光学、医版 社 社 長、1759-1825） は、1798年 にして電気を手にしたのがボルタ電池で学、動物学などの広範な分野を覆い、P h i l o so phical M agazine（ 後 のある（図3）。ボルタ電池の結果は王立

さらに王立協会や他の科学での会議報

Philosophical Journal）の発刊を開始

協会に報告され、それを見た王立協会

告も掲載した。J.ドルトン（化学者、した。さらに、1813年にはT.トムソン

長 J.バンクス（1743-1820）はとても興

1766-1844）、T.ト ム ソ ン（ 物 理 学 者、

（1773-1852）がAnnals of Philosophy

奮したと言われている。当時、英国と1773-1852）、R.フィリップス（科学研を世に送り始めた。ニコルソンは16

フランスは第二次百年戦争中で、イタ究家、1767-1840）など、王立協会誌

年後の1813年12月に自分のジャーナ

リア人のボルタはフランス経由で送らでの出版に消極的だった人々も大勢がル を 第36巻で休刊し、ティロックのれる自分の論文原稿を、用心のため

ここに寄稿した。ドルトンは、1801年

Physiological Journalと 統 合 し た が、二分割して英国に送っていた。第二と1803年にそれぞれ大気と天気の論文

ニコルソン・ジャーナルで発表された部が届くまで、バンクスはその第一部を載せ、J.ヘンリー（米国物理学者、

論文は2860報以上にも及び、人々の科をA.カ ー ラ イ ル 卿（ 英 国 人 外 科 医、

スミソニアン協会の初代会長、1797-

学リテラシーを高めた。

1748-1840）に見せた。カーライルは
友人のニコルソンに原稿を示し、二人

1878） やJ.ゴ ッ フ（ 英 国 博 物 学 者、
1757-1825）がその論文にコメントを

26

でんたい

５．水の電気分解への道のり

でボルタの実験の再現を試みた。この掲載している。スウェーデンの化学者

ニコルソンの活動は出版や執筆に限時、彼らは針金と金属板の電気板の電J. J.ベルセーリウス（元素セレンやケ

られていなかった。彼はジャーナル休

気的接触を良くするために接触点に水イ素の発見者で元素記号のアルファ刊前、すでに1799年にロンドンのソーを垂らすと、針金の周囲に小さな気泡

ベット表記を考案、1779-1848）も基ホー地区で学校を開き、20人の生徒をができることに気づいた。そこで、二金を援助している。ニコルソン自身も相手に化学の講義を行い、レッドライ

人は、ボルタ電池の両端につないだ針

この雑誌で130報以上の著作を発表しオン広場では弁理士や発明家としても金を別容器の水に浸した。すると今度た。1803年、ニコルソンは、見つかっ

働いていた。さらに、産業機械を研究

は一方の針金から気泡が発生し、他方たばかりの元素パラジウムの発見報告

して新しい比重計を発明し、英国ポーの針金は黒ずみ、そこからも気体が発を、発表者が不明のままに、この雑誌

トシー水道水供給会社の技師も務めて生した。黒ずんだ針金からは酸素が発に掲載した。多くの人はその報告に懐いた。彼が作った最も重要な装置は静生したとし、この結果から彼らは電流疑的であった。そこでニコルソンは、電気の検出器だった。もともと、静電により水が酸素と水素に分解されたと彼が指名した3名の監視下でパラジウ

気の検出にはイタリアの科学者ガル

結論を下した。すなわち、ボルタが彼ムを作った者には賞金20ポンドを与え

バーニ（1737-1798）が発見したカエの電池を発表した数か月後に、それをるとの手紙を掲載した。しかし、名乗ル足の収縮現象を利用していた。英国

利用してニコルソンとカーライルが、り出る者はいなかった。その半年後

人 物 理 学 者A.ベ ネ ッ ト（1749-1799）

水を水素と酸素に分解したのであるに、パラジウムが白金鉱石中にわずかは金箔を利用した装置を発明したが、（図3）。彼らはこの発見をニコルソンに存在し、新元素であるとの報告が王ニコルソンはこれを大幅改良した。ニ自 身 が 発 刊 し て い た ニ コ ル ソ ン・立協会誌に出た。著者はW. H.ウォラ

コルソンの改良装置は、イタリアの物

ジャーナルに発表し、さらにボルタ電

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

て社会と科学を結びつけ、計り知れないほど豊かな痕跡を私たちに残した。
６．現代社会への影響
水素ガスは燃えると水になり、石油や天然ガスのように二酸化炭素を発生することはない（図4）。水素はメタ
ノールやアンモニアなどの工業原料でもある。医学分野では水素ガス吸入が疾病に効くとされている。さらに、脱炭素社会の切り札になるエネルギー源

図３．ボルタ電池と水の電気分解でもある。世界各地では水素ガスを街池の紹介や関連論文をここに多く掲載

閉じ、葬儀にはカーライル卿ら多数のの水素ガスステーションで充填して電して電気化学という新分野を切り開い友人が列席し、聖ジョージ礼拝堂に埋池を充電し、電気自動車を動かすシス

た。

葬された。

テムが広まりつつある。一方、水力発

その数年後には、ハンフリー・デー

19世紀の近代科学の揺籃期に、ニコ電、風力発電、太陽光発電で得られた

ビー（図2）は電気分解の技術を溶融

ルソンは科学革命の渦中にいた。彼が電力で水を電気分解して水素をつく

金属塩に応用し、当時未知だったナト

改良した静電気検出器は電気化学の発り、燃料電池の充電に利用する試みがリウム、カリウム、カルシウム、スト

展に不可欠の道具となり、彼が世に脱炭素社会の切り札として期待されてロンチウム、バリウムおよびマグネシ送ったニコルソン・ジャーナルは英国いる。こうした観点から、ニコルソン

ウムを初めて単離した 。デービーのの科学発展に大きく貢献した。しかとカーライルの熱意は今なお生き続け研究を引き継いだM.ファラデー（1791-

し、ニコルソンは当時の多くの科学活ている。

1867）は1833年に電気分解の法則を導動家が経験したように人生の浮き沈み

工業的な水素製造法としては、赤熱いた。短期間のうちにこれだけの新元に見舞われた。彼の努力から経済的利した炭素（石炭、コークスなど）で水素や新物理法則の発見が相次いだ例は

益をほとんど得ることがなく、1806年

を還元し、できたCOを除去する水性

科学史上まれである。

には多額の負債を抱えてフリート刑務

ガス法がある（図4）。また、製鉄所で1）

ニコルソンとカーライルは1801年に所にいたことさえあった。ニコルソン

銑鉄の製造に使うコークス炉から出る

王立協会の化学物質調査委員に任命さの没後に、ニコルソン・ジャーナルの水素ガスを利用する方法があり、そのれ、さらにニコルソンはオランダ王室

当時の編集長は、「彼はトラブルを抱

量は日本全体で年間約50億m と見積

研 究 所 の 外 国 人 会 員 に 推 挙 さ れ た。

えて生き、清貧のうちに亡くなった」

もられている。重油や天然ガス中の炭

1815年、ニコルソンはロンドンのブと述懐している。ニコルソンは人の心化水素を約800℃で水蒸気と反応させルームズベリー地区にて61歳で生涯をを読む才能と卓越した解析力を活かしる方法、あるいはニッケル触媒で炭化3

水素を部分酸化する方法もある（図４）。ニコルソンらが突き止めた水の電気分解法は現在の工業的水素製造で大規模に利用されることは少ない。しかし、彼らの発見は新しい扉を押し開いた基本的真実として、いつまでも人々の脳裏に記憶されるであろう。
〔参考文献〕
1）桜井弘：「元素118の新知識」（講談社，ブルー
バックスB2028）（2017）．
2）Wikipedia : https://en.wikipedia.org/wiki/
William_Nicholson（最終閲覧日2022年6月15日）．
3）Wikipedia : https://en.wikipedia.org/wiki/

図４．水素が関わる化学反応と水素の製法

Humphry_Davy（最終閲覧日2022年6月15日）．

和光純薬時報Vol.90, No.4（2022）

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第37回

Wako ワークショップ

日時：2022 年 11 月 24 日（木）10：00 〜 17：00（終了時間は変更になる場合があります。）

会

場：秋葉原コンベンションホール（ウェビナーによるハイブリッド開催）〒 101 - 0021

オーガナイザー：幸谷愛

東京都千代田区外神田 1 丁目 18 - 13

秋葉原ダイビル 2 F

東海大学総合医学研究所造血腫瘍分野

主催：富士フイルム和光純薬株式会社

定

員：秋葉原コンベンションホール
ウェビナーによる参加

東海大学先端医療科学

教授

100 名

500 名

（申し込みは先着順で、定員になり次第、締め切らせていただきます。）
参
申

加
込

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費：無料（事前登録制）
方R

法：下記ホームページ「参加申込み」よりお申込み下さい。
L ：https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/seminar/036097.html

お 問 合 せ 先：Wako ワークショップ係
TEL：06 - 6203 - 1788e-mail：ffwk-seminar@fujifilm.com〈講演プログラム〉●「レビュートーク」
落谷

孝広（東京医科大学 医学総合研究所 分子細胞治療研究部門教授）●「新規翻訳修飾 UBL3 化を標的とした新たな治療戦略」
上田洋司（藤田医科大学 総合医科学研究所 難病治療学

講師）●「細胞外小胞の新機能と SPREDs の臨床応用に向けて」
幸谷

愛（東海大学 総合医学研究所造血腫瘍分野

東海大学 先端医療科学教授）●「改変エクソソームを用いた新規免疫制御法の開発」
華山

力成（金沢大学 医学系 免疫学／金沢大学 ナノ生命科学研究所

教授）●「老化細胞が分泌する細胞外小胞の特性」
高橋暁子（公益財団法人がん研究会 がん研究所 細胞老化プロジェクト プロジェクトリーダー）●「膵癌の細胞外小胞に着目した病態解明と癌早期診断への応用」
大塚基之（東京大学大学院医学系研究科

内科学専攻器官病態内科学講座

講師）●「マルチモーダル医薬としてのエクソソーム創薬」
落谷孝広（東京医科大学 医学総合研究所 分子細胞治療研究部門教授）…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。
…特定毒物
…毒物
…劇物
…毒薬
…劇薬 危 …危険物
…向精神薬
…特定麻薬向精神薬原料特定…化審法 第一種特定化学物質…化審法 第二種特定化学物質…化学兵器禁止法 第一種指定物質…化学兵器禁止法 第二種指定物質
毒素等 …国民保護法
覚 …覚せい剤取締法
掲載内容は、2022 年 10 月時点での情報です。上記以外の法律及び最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

…カルタヘナ法収載されている試薬は、試験・研究の目的にのみ使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
記載希望納入価格は本体価格であり消費税などが含まれておりません。

和光純薬時報 Vol. 90 No. 42022 年 10 月 15 日 発行
発行責任者
編集責任者
発 行 所

印

28

刷

所

増田雅信
鎌田裕子
富士フイルム和光純薬株式会社〒 540-8605 大阪市中央区道修町三丁目 1 番 2 号
TEL.06-6203-3741（代表）URL http://fujifilm.com/ffwk
共進社印刷株式会社●和光純薬時報に対するご意見・ご感想はこちらまでお寄せ下さい。
E-mail ffwk-jiho@fujifilm.com●製品に対するお問合せはこちらまでお寄せ下さい。

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Toll-Free（U.S. only）+1 877 714 1920

Tel +1 804 714 1920 / Fax +1 804 271 7791

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Vol.90 No.4

「細胞外小胞の作動原理と生物学的展望」