2004. MAR.

3
No.57

h t t p : / / w w w . w a k o - c h e m . c o . j p

C

O

N

T

E

N

T

S

タン パ ク質SuperSepTM 2次元電気泳動用ゲル‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ p.２

amaxa社 NucleofectorTMを使用したsiRNAの導入検討方法 ‥ p.22

質量分析用 トリプシン, リシルエンドペプチダーゼ ‥‥‥‥‥‥‥ p.4

機

同仁化学 膜タンパク質可溶化剤 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ p.6

日本ポール 製品取扱い開始 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ p.8

材Sidec社 タンパク質構造解析受託分析サービス ‥‥‥‥‥‥‥ p.7
Spectra社 同位体試薬 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ p.11

生理活性
アルドステロン ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ p.24

免疫

UBI社 Abl（T315I）,ヒト, 組換え体 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ p.3

蛍トランスジェニック 尿中ジアセチルスペルミン測定用ELISAキット ‥ p.１2

蛍光試薬

遺伝子

お 知らせ

EVROGEN社

Duplex-specific nuclease（ DSN） ‥‥‥‥‥ p.13

BioChain社

光新製品 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ p.１4

同仁化学 総合カタログ24版（2004/2005）発行 ‥‥‥‥‥‥‥‥ p.7
日本ポール

High Throughput Northern Blot Human Adult Normal Tissue

γ線滅菌済アクロディスクキャンペーン ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ p.10‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ p.16

2003/2004 カタログ発行 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ p.10

Attoglow Western Blot Analysis Kit ‥‥‥‥‥‥‥‥‥ p.17

Spectra社 2004年度版カタログ発行 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ p.11

N-G社

Ligation-Convenience Kit ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ p.18

学会案内 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ p.19

N-G社 トライアルシリーズ ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ p.19

TOCRIS社 2004年カタログ発行 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ p.21

SIRS-Lab社

amaxa社 株化細胞導入条件データベース

Lab-Arrayor ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ p.２０‥‥‥‥‥‥‥‥ p.24

売!!

新発

2次元電気泳動用ポリアクリルアミドゲル

SuperSepTM（スーパーセップTM）
一次元目に等電点電気泳動、二次元目にSDS-PAGEを行う二次元電気泳動は、タンパク質の分離が良いため、プ
ロテオーム解析で汎用されています。この度、弊社の安定性、再現性に優れた電気泳動用プレキャストゲル
SuperSepTMに二次元電気泳動用ゲルが新発売となりました。
本品は、二次元目に使用するポリアクリルアミドのプレキャストゲルです。ウェルが7㎝のミニゲルサイズですので、市販されている7㎝の等電点電気泳動用ストリップゲルに対応します。

【特 長】●保存安定性、再現性の優れたゲルです。
●手頃な価格ですので、コストが削減できます。
●常時在庫していますので、注文後すぐにお届けできます。

【推奨泳動条件】【仕サンプルバッファー：Laemmli法サンプルバッファー

プレートサイズ ： 100（H）×100（W）×3（T）mm

泳動バッファー：トリス／グリシン／SDS
泳動電流：20mA定電流／1枚

ゲルサイズ

×90
（W）×1
（T）mm
： 85
（H）

ウェルサイズ： 70mm様】

染色：CBB染色、銀染色、ネガティブ染色、蛍光染色など（マーカー用ウェルが別についています。
）【保存条件】2〜10℃保存（凍結不可）【泳動例】■2次元電気泳動
ゲル：SuperSepTM 5-20%, 2D［コードNo.197-13291］

染色：銀染色〈サンプル〉
培養細胞（TM4 マウス セルトリ細胞）（データ提供：大阪府立大学大学院 農学生命科学研究科
獣医学専攻 細胞分子生物学研究室
竹中 重雄 先生）

■SDS-PAGE
1

2

3

4

5

6

7

8

9 10 11 12

分子量ゲル：SuperSepTM 5-20%, 12well［コードNo.194-12961］

泳動バッファー：Running Buffer Soln.（×10）［コードNo.184-01291］

200K
116K
066K
042K

サンプルバッファー：Sample Buffer Soln.
（×2,2-Me＋）［コードNo.196-11022］
染色：Quick CBB［コードNo.299-50101］

030K
017K
010K

〈サンプル〉
Lane 1, 2, 7, 8：ラダーマーカー
Lane 3, 4, 9, 10：低分子量マーカー
Lane 5, 6, 11, 12：高分子量マーカー2

Wako Bio Window No.57 MAR.2004

コードNo.

品

名192-12901
199-12911

SuperSepTM 7.5%, 12well
SuperSepTM 7.5%, 17well

5%

196-12921
193-12931

SuperSepTM 10%, 12well
SuperSepTM 10%, 17well

5%190-12941

SuperSepTM 12.5%, 12well

197-12951
194-13061

SuperSepTM 12.5%, 17well
SuperSepTM 15%, 12well

191-13071
194-12961

SuperSepTM 15%, 17well
SuperSepTM 5-20%, 12well

191-12971

SuperSepTM 5-20%, 17well

198-12981
195-12991

SuperSepTM 10-20%, 12well
SuperSepTM 10-20%, 17well

5%
5%
−

容

量

希望納入価格（円）40,000〜200,000

10枚

12,000（100〜2,000）

10枚

12,00020,000〜130,000（50〜500）

10枚
10枚

12,00012,00014,000〜80,000

10枚

12,000（30〜300）
6,000〜60,000

10枚
10枚

12,00018,000（20〜300）
10,000〜200,000

10枚
10枚

18,00012,00012,000（50〜750）

10枚

10,000〜130,000

10枚

12,000（50〜500）

10枚

12,000−14,000〜80,0000

10枚

18,000−10,000〜200,000

10枚

18,000−SuperSepTM 12.5%, 2D
SuperSepTM 5-20%, 2D

NEW 190-13301
NEW 197-13291

分画分子量範囲（核酸のbp）

濃縮ゲル【関連商品】
299-50101

Quick CBB

2l

09,000196-11022

Sample Buffer Soln.（×2、2-Me＋）

25ml

03,100193-11032
184-01291

Sample Buffer Soln.（×2、2-Me−）
Running Buffer Soln.（×10）

25ml
1l

03,10005,200299-13841
291-50301

Silver Stain Kit wako
Silver StainⅡKit wako

10枚用
10枚用

09,00009,000299-58901

Silver Stain MS Kit

20回用

19,000293-57701
134-14501

Negative Gel Stain MS Kit
Molecular Weight Marker, High Range

20回用
1ml用

11,00012,800131-14511

Molecular Weight Marker, Middle Range

1ml用

12,800K.TA.

mmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmm
グリベック○R 耐性酵素

Abl（T315I）, ヒト, 組換え体
慢性骨髄性白血病（CML）の原因は、染色体転座t（9；22）により、BcrとAbelson Tyrosine Kinase（Abl）の融合がおこり、その結果、Ablの活性が恒常的となるためであることが明らかにされています。抗悪性腫瘍剤グリベック ®
（メシル酸イマチニブ）はこのBcr-Ablチロシンキナーゼ活性を選択的に阻害する薬剤として治療に利用されていま

Activity（% Control）

すが、Ablのキナーゼドメインの変異はグリベック®耐性を起こし、力価を下げるといわれています。
Upstate社ではAblとその変異体を取り揃えました。耐性獲得の機構解明にご利用下さい。
Abl（h）v Gleevec® at 10μM ATP
T315Ⅰ mutant

100
75
50

Wild Type25

T315I変異体はワイルドタイプと比べてグリベック ®
による感受性を200倍以上変化させます。

0
−8

−7

−6

−5

−4

M
log10 conc.（M）

コードNo. メーカーコード
568-56901
14-529Abl, Human, Active
565-56891

14-522

品

名Abl（T315I）, Human, Active

容 量
5μg

希望納入価格（円）68,0005μg

68,000【関連商品】
566-45711

06-465Anti Abl SH2 Domein

250μg

56,000563-45721
──

06-466
12-493

Anti Abl SH3 Domein
Abltide250μg
1mg56,00036,000──

14-459Abl, Mouse, Active

5μg

64,000®

＊グリベック はノバルティスファーマ株式会社の商標です。

U. K.

Wako Bio Window No.57 MAR.20043

売!! 質量分析用グレード 消化酵素

新発トリプシン、質量分析グレード
リシルエンドペプチダーゼ、質量分析グレード
プロテオーム解析において、質量分析はタンパク質の同定や翻訳後修飾に関する情報を得る手法の一つです。質
量分析を行うには、電気泳動後のゲルより目的タンパク質を切り出して酵素処理し、ペプチド断片にする必要があります。
本品は、使用頻度の高いタンパク質分解酵素であるトリプシンとリシルエンドペプチダーゼを質量分析の前処理用として使い易い容量に微量小分けした凍結乾燥品です。

【特長】●リシルエンドペプチダーゼは、タンパク質の切断部
位を特異的かつ効率的に分解でき、ペプチド質量によるデータベース検索が容易になる。
●リシルエンドペプチダーゼとトリプシンと併用する
ことにより、リシン残基における切断の確実性が増し、得られるペプチド数が増加する。
●自己消化が非常に少ない。
●使用量に応じて微量小分けされている。

【トリプシン（Tp）、リシルエンドペプチダーゼ（Lep）およびこれらを併用した場合の比較】
SDS-PAGE後のBSAバンド（100ng）をゲル内消化し、MALDI-TOF/MS（Voyager）で質量分析して、トリプシン、
リシルエンドペプチダーゼおよびこれらを併用した場合の比較を行った。Figureでは実際の質量分析データ、
Tableでは得られた比較データを示した。

〈Figure〉Tp単独とTpとLepを併用した場合の質量分析スペクトル
TpとLepの併用では、Tp単独では得られないピークが、m/z 2000付近に得られました。これはペプチドの回収率が上がったことを示します。
（データ提供：大阪府立母子医療センター 和田芳直先生）

トリプシン単独⇒

リシルエンドペプチダーゼ併用

4

Wako Bio Window No.57 MAR.2004

Improved
coverage

〈Table〉TpとLepおよびこれらを併用した場合の比較
Lep単独使用では、Missed Cleavageがほとんどないことがわかります。TpとLepの併用では、Tp単独と比較してMissed Cleavageが減少し、同定できたペプチド数が増加しています。

切断部位

Tp

Lep

TpとLepの併用

Arg, LysのC末端

LysのC末端Arg, LysのC末端多い

ほとんどない少ない（切れ損なったペプチドの割合）※

Missed Cleavage

（8%）

（0%）

（3%）

Massで同定できたペプチド数

17

19

22

※Missed Cleavage 1でデータベース検索した時のCoverage(得られたペプチドが配列全体に占める割合)からMissed
Cleavage 0で検索した時のCoverageを引いた値。

〔参考文献〕
１）Wada, Y., and Kadoya, M. : J. Mass Spectrom., 38, 117（2003）
２）Shevchenko, A., Wilm, MM., Vorm, O., and Mann., M. : Anal. Chem., 68, 850（1996）
コードNo.

品

名規格

プロテオーム

125-05061 Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade

研究用

202-15951 Trypsin, from Porcine Pancreas, Mass Spectrometry Grade

プロテオーム
研究用

容量

希望納入価格（円）20μg×5本

15,00020μg×5本

15,000K.TA.

iiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiii【関連商品】■Silver Stain MS Kit（銀染色MSキット）
Silver Stain MS Kitは、プロテオーム解析用に開発された銀染色キットです。増感反応にグルタルアルデヒドを用いていませんので、アミノ酸が架橋されません。そのため、ゲル内消化で効率良く消化でき、高感度に質量分析できます。
コードNo.

品

名293-57701 Negative Gel Stain MS Kit

規

格

電気泳動用

容

量

20回用

希望納入価格（円）11,000K.TA.

iiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiii■Negative Gel Stain MS Kit
本品は、SDS-PAGE後のタンパク質バンドを短時間に銀染色とほぼ同等の感度で検出することが出来るキットです。ネガティブ染色は、これまでのタンパク質バンドを染色する方法と異なり、タンパク質以外の部分を白濁させることで、クリアーなタンパク質バンドやスポットを得る染色方法です。タンパク質が色素による修飾を受けないのでウエスタンブロット、アミノ酸シークエンス、質量分析に非常に有効です。
コードNo.
299-58901 Silver Gel Stain MS Kit

品

名

規

格

電気泳動用

容

量

20回用

希望納入価格（円）19,000K.TA.

Wako Bio Window No.57 MAR.20045膜タンパク質の可溶化に用いる界面活性剤

膜タンパク質可溶化剤■n-Decyl-β-D-maltoside
化学名：n-Decyl-β-D-maltopyranoside
近年、タンパク質の立体構造に関する研究が盛んに行われています。これはタンパク質のもつ生物学的機能の重要さの究明が、タンパク質自身の立体構造の面からも掌握されなければならないと考えられているからです。タン
パク質のX線結晶構造解析法には良質な結晶が必要とされています。しかしながら、タンパク質全体の約 30％を占めている膜タンパク質は、採取・結晶化が難しいため、その構造はほとんどわかっておりません。膜タンパク質など非水溶性タンパク質の結晶化の方法のひとつに、低分子量の化学構造のはっきりした界面活性剤を添加することがあります。
牛の心臓から取り出したCytochrome c oxidaseの結晶化を行ない、2.8Åの解像度で解析を行なった例があります。

C22H42O11=482.57■Sodium deoxycholate（for protein crystallization）
化学名：Deoxycholic acid, sodium salt, monohydrate
デオキシコール酸ナトリウムはドデシルスルホン酸ナトリウム（SDS）同様、陰イオン性界面活性剤で、CMC値は5mmol/lです。本試薬はステロイド環上にも2つの水酸基を持ち、かつ末端にカルボキシル基を持っているため親水性部分が分子の一部分に限定されないという特徴を持っています。3つの水酸基を持つコール酸に比べると親水性は弱く、より強い界面活性作用を示します。デオキシコール酸は7分子が会合して小さいミセルを形成するため、透析等によって除去しやすいのです。
本品は精製をくり返すことにより、着色を除いたものです。そのまま水に溶かして、膜タンパク質の可溶化、精製にも使うことができます。

C24H39NaO4・H2O=432.57■Detergent Screening Set（for crystallization）
n-Decyl-β-D-maltoside, n-Dodecyl-β-D-maltoside, n-Octyl-β-D-glucoside, n-Octyl-β-D-maltoside, MEGA-10 以上
5種類のタンパク質の構造解析のための結晶化に用いられた実績のあるDetergentを組み合わせたタイプです。

■Detergent Screening Set（first choice）
CHAPS, n-Dodecyl-β-D-maltoside, n-Octyl-β-D-glucoside, Sodium cholate(purified), Sucrose monolaurate 以上5種
類のよく使われている代表的なDetergentを組み合わせたタイプです。

〔参考文献〕
１）T. Tsukihara, H. Aoyama, E. Yamashita, T. Tomizaki, H. Yamaguchi, K.Shinzawa-Itoh, R. Nakashima, R. Yaono, S.
Yoshikawa, Structures of Metal Sites of Oxidized Bovine Heart Cytochrome c Oxidase at 2.8Å, Science, 269,
1069（1995）.
２）S. Iwata, C. Ostermeier, B. Ludwig. H. Michel, Structure at 2.8・resolution of cytochrome c oxidase from
Paracoccus denitrificans, Nature, 376, 660（1995）.
３）月原冨武, 伊藤-新沢恭子, 吉川信也, ウシ心筋のシトクロム酸化酵素の金属中心の構造, 蛋白質・核酸・酵素, 41,1352（1996）.
４）D. L. Foster, R. H. Fillingame, J. Biol. Chem., 254, 8230
（1979）.
５）H. Hirata, N. Sone, M. Yoshida, Y. Kagawa, Biochem. Biophys. Res. Commun., 69, 665（1976）.
６）J. C. Norton, S. E. Holt, W. E. Wright, J. W. Shay, Enhanced Detection of Human Telomerase Activity., DNA Cell
Biol., 17, 217（1998）.
７）M. B. Jones, J. C. Garrison, Instability of the G-Protein β5 Subunit in Detergent, Anal. Biochem., 268, 126（1999）.

6

Wako Bio Window No.57 MAR.2004

コードNo. メーカーコード
349-08041

品

名

容

量

希望納入価格（円）1g

10,8005g

42,000

1g

8,600

D382

n-Decyl-β-D-maltoside

D520

Sodium deoxycholate（for protein crystallization）

5g

34,000341-90291

DS04

Detergent Screening Set（first choice）

1set

14,000344-90301

DS05

Detergent Screening Set（for crystallization）

1set

18,000345-08043
341-08121
347-08123

iiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiiii
同仁化学研究所 新総合カタログ発行
株式会社 同仁化学研究所の総合カタログ24版（2004〜2005年版）が、４月上旬に出来上がります。
ご希望の方は、ぜひご請求下さい。出来上がり次第、お届けいたします。

〔カタログ請求先〕
Wako Bio Window係
E-mail : biowin@wako-chem.co.jp
FAX : 06-6201-5964

mmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmm
Sidec Technology社

タンパク質構造解析受託分析サービス
Sidec社のテクノロジーは、試料を溶液状態で構造解析を行いますので、従来結晶化困難の対象に対して溶液での３次元構造画像を提供します。Electron Tomographyで電子線照射による輻射波を独自の画像解析技術により解析し、立体画像化し提供します。スウェーデン国立カロリンスカ研究所で開発された技術で、現在ヨーロッパとアメリカ中心にタンパク高次構造解析の受託分析実績が数多くあります。
※当初の見積りに必要な条件：タンパクの1次構造、提供予定タンパク量、緩衝液の種類、サンプルの形態等。

〔価格の目安〕1件300万円前後（正式には、個々の試料に対し、別途お見積りを提出します。）【特徴】●結晶化不要で構造解析を行います。
●試料形体はパウダーでも溶液でも可能。（測定後の試料はお返しします。）

1. サンプリング
レセプター蛋白2. 電子照射＊メーカーの講師による説明セミナーを予定しております。
ご希望の方は弊社までご相談ください。

3. 画像解析による3次元構造の描出

ホルモンがレセプター蛋白と結合活性化したホルモンレセプター複合体

U. H.

Wako Bio Window No.57 MAR.2004

7ろ過・分離のエンジニアリングカンパニー

ポール社製品取扱い開始「ろ過・分離・精製の問題解決」
この度、弊社では、アメリカ・ポール社のラボ製品の取扱いを開始いたしました。ポール社は、ライフサイエン
ス・ヘルスケア・マイクロエレクトロニクス・エアロパワー・化学・食品・飲料等、幅広い産業分野でろ過・分離・精製技術によりお客様の問題解決を目指すリーディングカンパニーとして世界的に知られています。
研究分野では、1983年に核酸/タンパクのトランスファーメンブレンを開発以来、特にナイロンメンブレン「バイオダイン」においては世界の80%以上のシェアを獲得しています。卓越したメンブレン技術を応用した製品は、分子生物試験・ろ過滅菌・ベント・分析用前処理・微生物検査・環境検査用として世界の多くの研究室で使用されています。近年その豊富なメンブレン技術は、創薬研究におけるHTS化に対応した様々なフィルタープレートの製品化を実現しています。

■ライフサイエンス
製品群

製品名
製品概要
アクロプレップ96
HTSロボット適用低タンパク吸着96穴プレート
アクロプレップ384
HTSロボット適用低タンパク吸着384穴プレート
フィルタープレート
アクロプレップ96 1ml
HTSロボット適用低タンパク吸着96穴ディーププレート
アクロウェル96
HTSロボット適用96穴バインディングプレート
吸引マニホールド（新製品）
アクロプレップ・アクロウェル適用吸引マニホールド
ビビッドマイクロアレイスライド ナイロン膜による高感度マイクロアレイスライド
マイクロアレイスライド
プロテインアレイスライド（近日発売） ニトロセルロース膜による高感度プロテインアレイスライド
ナノセップ
スピンタイプの限外ろ過デバイス：50〜500 μl対応
マイクロセップ
スピンタイプの限外ろ過デバイス：〜3.5 ml対応
遠心ろ過デバイス
マクロセップ
スピンタイプの限外ろ過デバイス：〜15 ml対応
ジャンボセップ
スピンタイプの限外ろ過デバイス：15〜60 ml対応
ミニメイト
（新製品）
ディスポーザブル・カプセルタイプの限外ろ過製品：〜1l対応
TFF製品
ミニウルトラセット
ラボ用限外ろ過デバイス：100 ml〜1l
ウルトラセット
ラボ用限外ろ過デバイス：200 ml〜5l
滅菌シリンジフィルター
様々なニーズに適用したγ線滅菌シリンジフィルター
アクロパック20・200・500・1000 様々なニーズに適用したγ線滅菌カプセルフィルター
バキュキップ
滅菌用吸引ろ過デバイス：100 ml〜5l
ムスタングQ
プラスチャージ アクロディスク（シリンジ用）
ろ過用フィルター（滅菌用／精製用）
ムスタングS
マイナスチャージ アクロディスク（シリンジ用）ムスタングE
エンドトキシン除去用 アクロディスク（シリンジ用）ベントフィルター
PTFEメンブレンフィルター
ヘパカプセル
HEPA基準適用カプセル

アクロプレップ ・ アクロウェル

8

ビビッド マイクロアレイスライド

Wako Bio Window No.57 MAR.2004

遠心ろ過デバイス■アナリティカル
製品群

機器分析前処理

アクセサリー

製品名
エキクロディスク
エキクロディスクCR
アクロディスク
GHPナノセップ
ソルバック
加圧/吸引ポンプ

エキクロディスク・シリンジフィルター

製品概要
水溶液系試料用シリンジフィルター（日本向け製品）
有機溶媒系試料用シリンジフィルター（日本向け製品）
各種シリンジフィルター、ロボット対応（PSF）新発売
ナノセップタイプの遠心ろ過デバイス（高回収率）
マグネティックシールのフィルターホルダー
小型軽量ポンプ

フィルターファンネル・マニホールド

トランスファーメンブレン■微生物検査製品群
メンブレン

微生物検査デバイス

アクセサリー

製品名
製品概要
GN−6メトリセル
微生物検査用親水性セルロース混合エステル
メトリセルブラック
微生物や微粒子分析用の高コンストラスト・ブラックメンブレン
スーポア
高温適用親水性ポリエーテルスルホン
マイクロファンネル
微生物検査用吸引デバイス
マイクロファンネルプラス（新発売） 熱湯試料対応微生物検査用吸引デバイス
47mmマグネティックファンネル 独自のマグネティックシール吸引デバイス
微生物検査用液体培地
2mlタイプの液体培地
マイコプラズマ迅速検査キット 75分でマイコプラズマ・バクテリアの検査キット（GenProbe社製）
マニホールド
1／3／6連吸引マニホールド
加圧/吸引ポンプ
小型軽量ポンプ
ペトリディッシュ
独自デザインによる容易な取扱とコンパクトな収納が可能

■環境検査
製品群
メンブレン
カセット
カプセルフィルター
アクセサリーフィルターホルダー

製品名
グラスファイバー・PTFE等
エアーモニタリング用カセット
アクアプレップステンレススチール製フィルターファンネル
各種フィルターホルダー

製品概要
環境測定用
産業衛生面でのサンプリング用
地下水サンプリング用デバイス
吸引ろ過用高品質・耐腐食性ファンネル
サンプリング用軽量フィルターホルダー

製品名
バイオダインA
バイオダインB
バイオダインプラス
バイオダインC
フルオロトランス
フルオロトランスW
オメガ（1K〜300K)
スーポア
HTタフリンバーサポア
GN-4/6メトリセル
GHP
FPベリセル(PVDF)
PTFE
グラスファイバー

製品概要
両性ナイロン
プラス荷電ナイロン
プラス荷電ナイロン 化学発光用
マイナス荷電ナイロン
疎水性PVDF
疎水性PVDF ウエスタントランスファー用
修飾ポリエーテルスルホン
ポリエーテルスルホン
ポリスルホン
親水性アクリル共重合体
親水性セルロース混合エステル
親水性ポリプロピレン
親水性PVDF
ポリテトラフロロエチレン
ホウケイ酸グラスファイバー■メンブレン
製品群

トランスファーメンブレン

限外ろ過（UF）膜

精密ろ過

Wako Bio Window No.57 MAR.2004

9

ポール社製品取扱い記念

γ線滅菌済アクロディスクキャンペーン！

＊【対象商品】
コードNo. メーカーコード
368-00051
4192
367-00021
4184
361-00301
4612
368-00311
4614

品 名HTタフリン・アクロディスク 0.2μm、25mm （γ線滅菌済）
HTタフリン・アクロディスク 0.45μm、25mm（γ線滅菌済）
スーポア・アクロディスク
0.2μm、25mm （γ線滅菌済）
スーポア・アクロディスク
0.45μm、25mm（γ線滅菌済）

容 量
50個
50個
50個
50個

希望納入価格（円）14,00014,00014,00014,000＊専用の用紙にご記入頂き、お申込みが必要です。詳しくは、弊社または代理店までお問合せ下さい。

mmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmm
製品内容の詳細については、ポール社カタログをご覧下さい。

〔カタログ請求先〕
Wako Bio Window係
E-mail : biowin@wako-chem.co.jp
FAX : 06-6201-5964

10

Wako Bio Window No.57 MAR.2004

Spectra Stable Isotopes社

同位体試薬
Spectra Stable Isotopes社は、米国宇宙航空局NASAで開発された技術を元に創立され、現在ではタンパク構造解
析に欠かせない同位体試薬と培地製品について、最も信頼されています。
13

C、18O、15Nの３核種の原料を自社プラントで調達しているのは、Spectra Stable Isotopes社だけです。

弊社は米国メリーランド州のSpectra Stable Isotopes社から直接輸入し販売いたします。
培地の他、98%純度の15Nammonium Chloride,13C-D-UL-Glucoseなど、糖、アミノ酸、各種重水等豊富な品揃えと高い在庫率を誇ります。
特に代表的な同位体培地（MARTEK 9-UとCELTONE-U）は、国内で最大の需要があります。
Nativeの培地は検討用として無償でご提供する予定です。

【Martek-9の発現データ】

コードNo. メーカーコード【Celtoneの発現データ】

品

名

規

格

容

量

希望販売価格（円）────5011L05111L97

MARTEK 9-U
MARTEK 9-dNatural
D>97%

1l
500ml

11,70042,000──

5211L97

MARTEK 9-C

13

500ml

43,200────

5311L98
5411L98

MARTEK 9-N
MARTEK 9-CN

15

N>98%
13
C>98%, 15N>98%

500ml
500ml

17,50043,200────

5511L50
5611L97

MARTEK 9-dCN
MARTEK 9-dN

D=50%, 13C>98%, 15N>98%
D>97%, 15N>98%

500ml
500ml

81,70064,200──

5711L97

MARTEK 9-dCN

D=97%, 13C>98%, 15N>98%

500ml

86,400────

5013L05013L0CELTONE-U Complete Medium
CELTONE-U Complete Medium

NaturalNatural

100ml
1l

4,800
46,800────

5113L97
5213L98

CELTONE-d Complete Medium
CELTONE-C Complete Medium

D>97%
13
C>98%

100ml
100ml

46,80046,800──

5313L98

CELTONE-N Complete Medium

15

100ml

46,800────

5413L98
5513L50

CELTONE-CN Complete Medium 13C>98%, 15N>98%
CELTONE-dCN Complete Medium D=50%, 13C>98%, 15N>98%

100ml
100ml

46,80046,800────

5613L97
5713L97

CELTONE-dN Complete Medium D>97%, 15N>98%
CELTONE-dCN Complete Medium D=97%, 13C>98%, 15N>98%

100ml
100ml

46,80046,800

C>98%

N>98%

U. H.

〔カタログ請求先〕
Wako Bio Window係
E-mail : biowin@wako-chem.co.jp
FAX : 06-6201-5964

Wako Bio Window No.57 MAR.2004

11腫瘍マーカーの測定キット

尿中ジアセチルスペルミン測定用ELISAキット
癌患者において、尿中ポリアミン排泄量が増加することは1971年にRusselによって最初に報告され、それ以降多くの研究が行われてきました。
近年、わずかな量ではありますがN1,N12-ジアセチルスペルミン、N1,N8-ジアセチルスペルミジンという2種類のジアセチルポリアミンが尿中に排泄されていることが見出されました。健常者の尿中では、これらの成分はそれぞれ総ポリアミンの0.6％、1.4％を占めるにすぎませんが、総ポリアミンと比較して、病態の変化をより顕著に示す可能性が報告されています。
本キットは、尿中ジアセチルスペルミン量をELISA法により簡便に測定できるキットです。

【キット内容】
s抗原固相化マイクロプレート …………………… 1枚
sジアセチルスペルミン標準品……………… 250μl×2s抗体希釈液 ………………………………………… 20ml
s抗ジアセチルスペルミン抗体（×100）………… 60μl
sHRP標識-抗IgG抗体（×80）…………………… 70μl
sOPD錠 ……………………………………………… 2錠
s基質液 ……………………………………………… 30mls反応停止液 ………………………………………… 15mls濃縮洗浄液（×20） ……………………………… 30ml
s希釈用プレート …………………………………… 1枚【測定原理】
本キットは、ジアセチルスペルミンに特異的な抗体を用いた競合ELISA法に基づいています。マイクロプレートには抗原（ジアセチルスペルミン）がコートされております。あらかじめ尿サンプルおよび標準液中のジアセチルスペ
ルミンと抗ジアセチルスペルミン特異抗体を反応させると、残った抗体がプレート上のジアセチルスペルミンと結合します。さらに、HRP標識抗ウサギIgG抗体を反応させ、HRPにより触媒される発色反応により定量されます。

【キット性能】【標準検量線】●標準曲線領域：6.25〜200nM●最低検出実測域：12.5nM●最低尿希釈倍数：×4●検体最低検出感度：50.0nM●同時再現性（n=20、2濃度）：CV（％）＝4.87、5.20●日差再現性（n=20、2濃度）：CV（％）＝7.98、9.50●添加回収試験：98.2〜108％

尿中排泄物の濃度は尿量に依存しますが、腎疾患等や健常人においても水分摂取量や環境などにより尿量は大きく変動します。そのため一般に尿中排泄物の測定値には尿中クレアチニン排泄量による補正が行われます。
尿中クレアチニン排泄は、クレアチニンの産生が筋肉の量に依存することからほぼ一定であるため、1gのクレアチニンあたりの量に換算して利用するものです。本キットにて得られた尿中ジアセチルスペルミン濃度（nM）を、酵素法などにより測定した尿中クレアチニン濃度（mg/dl）
で補正してください。
尿中ジアセチルスペルミン濃度（nM）
補正式 ： nmol/g・cre ＝ ─────────────────────── × 100
尿中クレアチニン濃度（mg/dl）〔参考文献〕
１）Hiramatsu K, Sugimoto M, Kamei S, Hoshino M, Kinoshita K, Iwasaki K, and Kwakita M:Determination of amounts ofpolyamines excreted in urine;demomstration of N1,N8-diacetylspermidine and N1,N12- diacetylspermine as components
commonly occurring in normal human urine. J. Biochem., 117:107-112,1995
２）Sugimoto M, Hiramatsu K, Kamei S, Kinoshita K, Hoshino M, Iwasaki K, and Kwakita M：Significance of urinary N1,N8diacetylspermidine and N1,N12- diacetylspermine as indicators of neoplastic diseases. J. Cancer Res. Clin. Oncol.,121:317319,1995
３）Hiramatsu K, Sugimoto M, Kamei S, Hoshino M, Kinoshita K, Iwasaki K, and Kwakita M:Diagnostic and prognostic usefulnessof N1,N8- diacetylspermidine and N1,N12- diacetylspermine in urine as novel markers of malignancy. J. Cancer Res. Clin.
Oncol., 123:539-545,1997
４）トピックス「尿中ジアセチルポリアミンと悪性腫瘍」
平松恭子（東京都臨床医学総合研究所医化学研究部門）、高橋慶一（東京都立駒込病院外科）、杉本雅幸（東京都立大久保病院泌尿器科）、川喜田正夫（工学院大学応用化学科・教授）臨床検査 第46巻 第1号 別冊（2002年1月15日発行）
５ ）Hiramatsu K, Miura H, Kamei S, Iwasaki K, and Kwakita M:Development of a sensitive and accurate enzyme-linked
immunosorbent assay（ELISA）system that can replace HLPC analysis for the determination of N1,N12- diacetylspermine inhuman urine. J. Biochem., 124 : 231-236, 1998

コードNo. メーカーコード
304-14901

KK073

品

名

尿中ジアセチルスペルミン測定用ELISAキット

容

量

96回用

希望納入価格（円）75,000＊本製品は研究用試薬ですので、臨床目的ではお使いになれません。

12

Wako Bio Window No.57 MAR.2004

カムチャッカカニ由来 新規DNAヌクレアーゼ

Duplex-specific nuclease（DSN）
Evrogen社では、カムチャッカカニの肝臓由来の新規のDuplex-specific Nuclease（DSN）を販売しています。DSN
は、ssDNAと比較して2本鎖DNA、DNA-RNAハイブリッド中のDNAを優先的に切断するDNA分解酵素です。また、2本鎖中の不完全一致部分より、完全一致部分を特異的に分解する性質をもっています。

長】

Digestion effidency（％）

【特●2本鎖DNA、DNA-RNA中のDNA部分を認識して切断●cDNA Normalizationに応用可能（文献1）●SNP解析にも応用可能（文献2）●Mg2＋要求性（7mM）で、EDTAにより阻害●至適pH： 7〜8●至適温度： 55〜65℃●ヌクレアーゼ活性：pH 6以上、75℃以下で安定に作用

Temperarure（℃）

温度における酵素活性【基質となるDNAの特異的構造に対するDNSの作用】（A）1本鎖M13ファージDNAと2本鎖λファージDNAにおけるDNSの効果
lane 1 : ss M13ファージDNAlane 2 : dsλ DNAlane 3 : ss M13ファージDNAとdsλ DNAを加え、DNS処理70℃、1.5分間処理
lane 4 : ss M13ファージDNAとdsλ DNAを加え、DNS処理70℃、5分間処理（B）1本鎖オリゴヌクレオチド（20mer）および蛍光標
識した2本鎖オリゴヌクレオチド（20mer）に対する
DNSの効果蛍光標識オリゴヌクレオチドは、5'末端にfluorescent、3'末端にクエンチャーをつけている。酵素処理は35℃、各処理時間行った。蛍光強度は、励起波長550nm、蛍光波長570nmで測定した。オレゴヌクレオチド中のRFI（相対的蛍光増加）は、（Fi-Fo/Fmax-Fo）×100％で決定した。Fi : DNS処理後の基質の蛍光強度、Fo : 酵素なしで基質の蛍光強度、Fmax : 100％分解時の蛍光強度をそれぞれ示す。

【基質特異性の実験】

RNAに対しての分解は認められませんが、DNA-RNAハ
イブリッド中のDNAを特異的に分解します。8−12bpの完
全一致のDNA−DNAハイブリッドと少なくとも1塩基のミスマッチのある同じ長さのDNA−DNAハイブリッドを区別して切断することができます。

ミスマッチ（A, B）および完全一致のDNA（C）duplexに対するDSNの基質特異性5-carboxyfluoresce（F1）-5'-gccctatagt-3'-TAMRA
シグナルプローブとそれと相補的な各オリゴヌクレオチドとのduplex形成後、35℃で15分間、DSN処理した。蛍光スペクトルは、
480nm励起波長により得られた。赤線は、酵素なしの基質蛍光、
黒線は、NSN処理後の基質蛍光。

【製品内容】
sDuplex-specific nuclease（凍結乾燥品）
sDSN storage buffer 50mM Tris-HCl（pH 8.0）
sDSN reaction buffer 100mM Tris-HCl,（pH 8.0）, 10mM MgCl2, 2mM DTT〔参考文献〕
1）Zhulidov, P. A., Bogdanova, E. A., Shcheglov, A. S., Vagner, L. L., Khaspekov, G. L., Kozhemyako, V. B., Matz, M.
V., Meleshkevitch, E., Moroz, L. L., Lukyanov, A. S. and Shagin, D. A., Nucleic Acids Res., Feb 18, 32
（3）
：e37.
（2004）
2）Shagin, D. A., Rebrikov, D.,V., Kozhemyako, V.,B., Altshuler, I., M., Shcheglov, A. S., Zhulidov, P. A., Bogdanova, E.
A., Staroverov, D. B., Rasskazov, V. A. and Lukyanov, S., Genome Res., 12, 1935
（2002）
コードNo. メーカーコード
580-69991

EA001

品

名

容

Duplex-specific nuclease, lyophilized（50Kuniz-units）

量

1 set

希望納入価格（円）86, 000
I. S.

Wako Bio Window No.57 MAR.2004

13

蛍光試薬
■5-Carboxyfluorescein Diacetate【5-CFDA】
生体膜標識蛍光試薬。細胞内で蛍光物質5- Carboxyfluoresceinに加水分解される。
●測定波長：λex＝492nm，λem＝518nm●溶 解 性：DMSO、メタノール、エタノール、アセトン●構造式： O

O
O

CH3CO

●CAS No.：［79955-27-4］

OCCH3

O

〔参考文献〕
１）Boitano, S., et al. : J. Cell Sci. 98, 343（1991）.

O２）Goodall, H., et al. : Nature 295, 524（1982）.
３）Hansson, Y., et al. : J. Immunol. Meth. 100, 261（1987）.
４）Bruning, J. W., et al. : J. Immunol. Meth. 33, 33（1980）.

COOH

C25H16O9＝460.39■DiI【DiIC18(3)、1,1'-Dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine Perchlorate】
生体膜標識蛍光試薬。カルボシアニン膜色素。
●測定波長：λex＝550nm，λem＝565nm●構造式：●溶 解 性：DMSO、エタノール
CH3●CAS No.：［41085-99-8］〔参考文献〕CH3

N１）Derzko, Z., et al. : Biochemistry 19, 6050
（1980）.
２）Leuther, M. D., et al. : J. Immunol. 127, 893（1981）
.

+

CH
ClO4

CH3
CH

CH
N

CH（CH
3
2）
17

３）Honig, M. G. and Hume, R. I. : Trends in Neurosci. 9,333（1989）
.

CH3

（CH2）
17 CH3

C59H97ClN2O4＝933.87

４）McConnell, S. K., et al. : Science 245, 978（1989）.

■Di-4-ANEPP【Pyridinium,4-{2-[6-(dibutylamino)-2-naphthalenyl]ethenyl}-1-(3-sulfopropyl)-hydroxide, inner salt】
膜電位感受性蛍光試薬。
●構造式：●測定波長：λex＝496nm，λem＝705nm●溶 解 性：DMSO、メタノール、エタノール、DMF●CAS No.：［90134-00-2］

-

O3S
（CH2）
3

+

N

CH

CH
N
［
（CH2）
3 CH3］
2〔参考文献〕
１）Davidenko, J.M., et al. : Nature 355, 349（1992）.
C28H36N2O3S＝480.66

２）Fromherz, P., et al. : Biochim. Biophys. Acta 1068,
149（1991）.

■CPM【7-Diethylamino-3-(4-maleimidophenyl)-4-methylcoumarin】
チオール反応性蛍光試薬。
●純
度：94%以上（HPLC）●溶 解 性：DMSO●CAS No.：［76877-33-3］〔参考文献〕
１）Grossman, H. S. : Biochemistry 22, 5369（1983）.

●構造式：（H3CH2C）
2N

O

O

O
CH3

N

２）Zot, G. H., et al. : J. Biol. Chem. 265, 14796（1990）.
O

C24H22N2O4＝402.44

14

Wako Bio Window No.57 MAR.2004

●構造式：■Fluorescein-5-maleimide

HO

チオール反応性蛍光試薬。

O

O●測定波長：λex＝492nm，λem＝515nm●溶 解 性：DMF、水（pH>6）●CAS No.：［75350-46-8］

COOH〔参考文献〕
Bigelow, J. D. et al. : Biochemistry. 30, 2113（1991）.
ONO

C24H13NO7＝427.36
コードNo.
038-19291

品

名規5-Carboxyfluorescein Diacetate【5-CFDA】

格

容量

希望納入価格（円）細胞生物学用

100mg

22,000

細胞生物学用50mg

照

細胞生物学用5mg

31,000

細胞生物学用25mg

照

細胞生物学用25mg

39,000DiI
048-29121 【DiIC18（3）, 1, 1'-Dioctadecyl-3, 3, 3', 3'-tetramethylindo

会

carbocyanine Perchlorate】
Di-4-ANEPPS
041-29111 【Pyridinium,4｛2［6-(dibutylamino)-2-naphthalenyl］
ethenyl｝-1（3-sulfopropyl）-hydroxide, inner salt】
CPM
045-29131 【7-Diethylamino-3（4-maleimidophenyl）-4-methylcou

会marin】
066-04501 Fluorescein-5-maleimide

K. N.

mmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmm【関連製品】NHC6H5

■ANM

■BIPM

●測定波長：
λex＝350nm●測定波長：
λex＝308nm

λem＝530nm（水）λem＝365nm（水）＝470nm（90％エタノール）

ON＝356nm（90％エタノール）O

C20H14N2O2＝314.34

N
N
N
H
O

C17H11N3O2＝289.30

■DACM

■FAM

●測定波長：●測定波長：

O

λex＝400nm
λem＝485nm（水）OO

λex＝362nm
λem＝484nm（水）CH3
N＝448nmN＝478nm（90％エタノール）
（CH3）
2N

O

O

O

（90％エタノール）

O

C16H14N2O4＝298.30

C20H11NO2＝297.32
テイカ製薬㈱製コードNo.

品

名

容306-00051 N-（1-Anilinonaphthyl-4）maleimide【ANM】

量

10mg

希望納入価格（円）7,000

303-00061 N-〔p-（2-Benzimidazolyl）phenyl〕maleimide【BIPM】

10mg

8,000

300-00071 N-（7-Dimethylamino-4-methyl coumarinyl）maleimide【DACM】

10mg

12,000307-00081 N-（3-Fluoranthyl）maleimide【FAM】

10mg

6,000

Wako Bio Window No.57 MAR.2004

15

BioChain社 ヒト組織由来の機能的ゲノミクス製品

High Throughput Northern Blot
Human Adult Normal Tissue（32レーン）High Throughput Northern（HTN）Blotは、mRNA ArrayとmRNA Northern Blotの特長を組み合わせた、今までにない遺伝子発現解析用ツールです。HTNブロットを使うと、30種類以上の異なるヒト成人正常組織において、遺伝子発現だけでなく、遺伝子サイズも決定することができます。HTNブロットの大きさはわずか2.6×4.7㎝で、検出方法は、ノーザンブロット解析に一般に用いられている方法と同じです。
切り取られているのが左上角
Bound
1
5
10
15
20

lane 1lane 32
レーン1とレーン32の2mm下にある目印

シグナルのレーンとサイズが簡単に同定できる透明

複数のノーザンブロットが必要な解析をたった1枚のなシグナル位置シートが付属しています。

HTNブロットで行うことができます。

【特 長】

【用

●高品質のmRNAを正荷電のナイロン膜にUV架橋●各レーンには3μgのmRNAがサイズ別に20分画され●広範囲の組織における組織特異的遺伝子の同定●遺伝子発現パターン解析

てブロット

途】

●新規遺伝子の発現量の比較●すべての製品にGAPDHコントロールプローブが付属●結果の再現性：製品はアレイ型で供給され、ロット●遺伝子サイズおよび異なる組織間での遺伝子の相対存在量の測定間差がない●高感度：膜上の単位面積あたりにmRNAが高濃縮さ●特定の遺伝子転写物の選択的スプライシングおよび未完熟終了の検査れており、プローブのハイブリが容易●複数の検出系：RIおよびNon-RIの両方の標識プロー
ブに最適●簡易操作：従来のノーザンブロットと同じように取り扱いが可能●経済的：1回のハイブリで30種類の異なる組織での遺伝子発現が解析可能、膜サイズが小さいため検出用試薬コストを削減【検出例】
32レーンから構成されるHigh Throughput Northern Blot
BioChain社のHTNブロット（メーカーコード N8234480）
上で、Non-RI標識されたGAPDHプローブを用いて65℃、
一晩ハイブリし、洗浄、検出後、30秒間、X線フィルムに露光した。ハイブリはBioChain社のFastHyb Hybridization
Solution（メーカーコード L1021250)中で行った。

実際の大きさ：2.6×4.7cm

コードNo. メーカーコード
──

品

名

N8234480 Human Adult Normal Tissue High Throughput Northern Blot

容量1 blot

希望納入価格（円）
照

会
I. T.

16

Wako Bio Window No.57 MAR.2004

BioChain社 機能的プロテオミクス製品

Attoglow Western Blot Analysis Kit
アトグラム（10−18g）あるいはヨクトモル（10−24M）レベルでタンパク質を検出できます。このキットは、Millennium（1,000倍）エンハンサー、タンパク質相互作用試薬、検出試薬および独自のブロッキング試薬の4つのパーツから構成されます。強力で革新的な専有技術から生み出されたMillenniumエンハンサーは、標識複合体や化学発光基質の持つエンハンサーとは違って、抗原と抗体の親和性を増大させることによる新しい機構で作用します。その独自の機構によって、Millenniumエンハンサーは、構造タンパク質（Actin）、酵素タンパク質（GAPDH）や膜タンパク質（EGFR）など、種々の抗原や抗体とともに作用し、ウエスタンブロッティングにおけるシグナルを大幅に高めて、標識複合体や化学発光基質のシグナル増強機構との波及効果をもたらします。
（−）Millennium Enhancer

1ng

0.1ng 10pg

1pg

0.5pg 0.1pg

10fg（＋）Millennium Enhancer

10ag

1ag

1ag

10ag

10fg

0.1pg 0.5pg

1pg

10pg 0.1ng

1ng

Attoglow Western Blot Analysis Kitの感度
1ngの精製されたウサギ筋肉組織由来GAPDHタンパク質を1agまで連続希釈し、電気泳動を行った。ゲルをPVDF膜へ転写し、中央部で切断した。右側はMillenniumエンハンサーで処理し、左側は処理しなかった。一次抗体（clone 6C5）およびHRP標識ウサギ抗マウス抗体を用いてイムノブロッティングを行い、化学発光基質を加えた。
2分間露光したフィルムを上に示す。10pgの未処理および10fgの処理済のGAPDH抗原において同等のシグナル強度が検出され、1,000倍の増強が示された。
（増強の度合は、使用する抗体および抗原によって、数倍〜1,000倍まで変動する。）

【特

長】

●高

感

度：アトグラム（10−18g）あるいはヨクトモル（10−24M）レベルで検出可能で、低コピー数の遺伝子や低親和性の抗体に対して非常に有用（従来のキットではフェムトグラム（10−15g）レベルまで）●多 目 的：あらゆる種類の化学発光基質においてシグナルを増強●相 乗 作 用：標識複合体や化学発光基質のシグナル増強機構との相乗効果●費用効果的：1キットで2,500 cm2の膜に十分な試薬（K3171250の場合）●適 合 性：PVDF、ニトロセルロースおよびナイロン膜に適合●簡 易 操 作：非常に取り扱いやすい、Non-RI法を採用、特別な装置不要●利便

性：キットには二次抗体および化学発光基質をセット【用途】●微量の抗原、低発現の遺伝子産物の検出●高感度が必要とされるウエスタンブロッティングおよびタンパク質アレイ分析【キット内容】
K3171120
K3171250（Detect 1,200cm2） （Detect 2,500cm2）
sMillennium EnhancersAntibody Binding Buffer （10×）

50ml
60ml

100ml
120ml

sAttoglow Blocking AgentsHRP Conjugated Secondary Antibody

20 g

40g

55-110μl

110-220μl

25ml
25ml

50ml
50ml

（anti-Mouse, anti-Rabbit, anti-Chicken or anti-Goat）
sLuminescence Substrate Solution A
sLuminescence Substrate Solution B＊一次抗体および洗浄バッファーは含まれません。
＊ご希望の二次抗体を、上記4種類からご注文時に指定して下さい。
指定がなければ、anti-Mouse抗体が供給されます。

コードNo. メーカーコード────

K3171120
K3171250

品

名Attoglow Western Blot Analysis Kit

容量

希望納入価格（円）Detect 1,200cm2

照

会

2

照

会

Detect 2,500cm

I. T.

Wako Bio Window No.57 MAR.2004

17

短時間で高効率なDNAライゲーションが可能です！

Ligation-Convenience Kit【特 長】【キット内容】●短時間（16℃, 5分間）で高効率なライゲーション反応●反応終了液をそのまま形質転換に使用可能

s2×Ligation Mix ………………… 250μl×4本（20μlの反応系で約100回分）●DNA末端形状の違いによる条件検討が不要【保存方法】●実験操作が簡単な1液タイプで1ステップ操作
●低コスト

−20℃

【データ①】 ベクター：インサート モル比の検討
ライゲーションの際のベクターとインサートのモル比は、ライゲーション効率に大きく影響します。以下の表に（プロメガ、3,015bp）をベクターとして使用し、様々なは、pUC19 DNA（ニッポンジーン、2,686bp）、pGEM®-T Easy
長さのインサートDNAをライゲーション、形質転換した結果、各条件で最も良い結果が得られたモル比を示します
ので、ご参考下さい。

1. プラスミドライゲーション（反応条件：16℃、5分間）（1）粘着末端（3）TAクローニング

インサート長

200bp

600bp

1,000bp3,000bp

インサート長

200bp

600bp

1,000bp3,000bp

ベクター

1

1

1

1

ベクター

1

1

1

1

インサート

10

5〜10

2〜10

0.5〜2

インサート

10

5

5

1

ベクター：EcoRⅠで切断したpUC19 DNA 0.03pmol
インサート：EcoRⅠで切断したインサートDNA

ベクター：pGEM®-T Easy 0.03pmol
インサート：Gene Taq NTで増幅したPCR産物（2）平滑末端

2. リンカーライゲーション（反応条件：16℃、5分間）

インサート長

200bp

600bp

1,000bp3,000bp

インサート長

8bp

ベクター

1

1

1

1

ベクター

1

インサート

5

5

2〜10

0.5〜2

インサート

50以上

ベクター：SmaⅠで切断したpUC19 DNA

0.03pmol

インサート：SmaⅠで切断したインサートDNA

ベクター：HincⅡで切断したpUC19 DNA

0.03pmol

インサート：Linker EcoRV（コードNo. 318-02251）【データ②】Ethachinmate の影響
Ethatinmateはエタノール沈殿を行う際に使用する、DNase, RNase Free の高分子キャリアーです。EthatinmateとLigation-Convenience Kitを上手く使用することで、ベクターやインサートが少量の場合でも効率よく実験を進め①：Ethachinmateで調製したベクターやインサートを使用しても、ライゲーション反応、形質転換への悪影響はありません。右のグラフは20μl1000の反応系に2μlのEthachinmateを持ち込んだ場合の結果です。
②：ただし、ライゲーション反応後、すぐにEthachinmateを添加してエタノール沈殿を行うと、形質転換効率が低下しますのでご注意下さい。
③：Ethachinmateでライゲーション産物を回収する場合は、ライゲーシ
ョン反応後、PCI処理をしてからEthachinmateを加えて下さい。また、
Ethachinmateが反応系に持ち込まれている場合はPCI処理後にエタノール沈殿を行って下さい。その際、2μl以上のEthachinmateが持ち込
まれている場合には、再度Ethachinmateを加える必要はありません。
コードNo.
319-05961
315-05963

品

名Ligation-Convenience Kit

100
白コロニー
90
青コロニー
80
白コロニー率（％）
70

800

60
600

50
40

400

30

白コロニー率（％）

1200

コロニー数（個）ることができます。Ethachinmateの使用には下記をご参考下さい。

20

200

10
0

0

①

②

③

pUC19/EcoRⅠ＋500bpインサート。16℃、5min. 20μlのうち3μlを形質転換に使用。

容量

希望納入価格（円）

100回分

20,000

10回分

3,200

0.2ml

15,0000.02ml

3,200【関連製品】
312-01791
318-01793

18

Ethachinmate

Wako Bio Window No.57 MAR.2004

お試し用小包装

トライアル シリーズ
ニッポンジーンでは各種製品の小包装をご用意しております。
大変お手ごろな価格となっておりますので、ぜひご利用ください。
製品が自分の試料に適しているかどうか試したい。
実験は行いたいが、実際に使う量はごくわずかだ。
コードNo.
312-06073

Agarose S ＜錠＞

品

316-01191
318-01433

Agarose S
Agarose HS

319-06044
317-05244\

トライアル シリーズをお試しください！
希望納入価格：￥2,000〜名

容 量
0.5g×10錠

希望納入価格（円）
2,000

5g
2g

2,000
2,000

OneSTEP Ladder 50（0.05-2kbp）
OneSTEP Ladder 100（0.1-2kbp）

25μl
25μl

2,000
2,000

317-05364

OneSTEP Ladder 500（0.5-5kbp）

25μl

2,000

314-05374
313-03943

OneSTEP Ladder 1kb（1-10kbp）
Smart Ladder（0.2-10kbp)

25μl
25μl

2,000
2,000

311-05943
319-01181

RTmateAgarose L

25μl
2g

2,000
3,200

315-01203

Agarose H

1g

3,200

311-03243
319-02683

Agarose 21
Agarose X

3g
3g

3,200
3,200

310-01513
315-05963

Agarose GB
Ligation-Convenience Kit

1g
10回分

3,200
3,200

317-03103

ISOTISSUE

3回分

3,200

318-01793
312-02874

Ethachinmate
Gene Taq

0.02ml50units

3,200
5,600

312-03234
311-04164

Gene Taq NT
Gene Taq FP

50units
50units

5,600
5,600

310-80253

HotGoldstarTM DNA Polymerase

50units

5,600

314-03853
318-03253

Drop PCR Kit for Human Blood
T4 gene 32 protein

6 回分
20μg

5,600
5,600

318-02413
315-02423

EASY ANCHOR BamH I-N
EASY ANCHOR EcoR I-N

5μl
5μl

5,600
5,600

312-02433
315-02504

EASY ANCHOR NotⅠ
ISOGEN

5μl
10ml

5,600
5,600

317-02623

ISOGEN-LS

315-03403
310-04754

ISOHAIR
α-Amylase Ultrapure

10ml

5,600

10回分
600units

5,600
5,600

310-02733
316-04153

ISOPLANTISOPLANTⅡ

20回分
20回分

9,000
9,000

304-14641

CUGA®7 in vitro Transcription Kit

5回分

9,000

mmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmm
お知らせ
学 会 名

会 期

会 場

＊ 日本薬理学会年会

3/8〜10

大阪国際会議場＊ 日本再生医療学会総会

3/24〜25

幕張メッセ国際展示場＊ 日本薬学会

3/29〜31大阪南港地区ATCホール＊ 日本農芸化学会

3/29〜31

広島大学 東広島キャンパス＊印は当社展示予定の学会です。

Wako Bio Window No.57 MAR.2004

19

SIRS-Lab社

Lab-Arrayor
SIRS-Lab社では、ヒト遺伝子由来のcDNAおよびポリヌクレオチドアレーを販売しています。cDNAアレーは、
炎症、ストレス反応、免疫学的なモニタリング、アポトーシス、シグナル伝達、細胞分化に関わる遺伝子を、ポリヌクレオチドアレーは、ガラスチップ上にのせています。

■cDNAアレー【特 長】●炎症、ストレス反応、免疫学的なモニタリング、アポ
トーシス、シグナル伝達、細胞分化に関わる遺伝子をスポットしています。
●完全にシークエンスされたcDNAプローブです。
●最適化された高品質ハイブリダイゼーションデータ。
●1スライド上にトリプリケートアレーをのせています。

human 500-1

human 500-1

タイプ

cDNAアレー

情報源

GenBank®

ガラススライドのサイズ

76×26×1.1mm

遺伝子数／アレー

340

スポット距離スポットサイズ480
300μm

7.8×7.8mm

8.4×8.4mm

スポット数／アレー

576

784

Arabidopsis陰性コントロールの数

610

複製アレー数／アレー
プローブの長さ
由来

3200-2,000bp
Homo sapiens＊スポットされた遺伝子情報については、お問い合わせ下さい。

■ポリヌクレオチドアレー【特 長】●最新の遺伝情報を基にしたアレーです。
●長さ、GC含量、融点を最適化しています。
●2次構造やクロスハイブリを抑えています。
●スライド上に、4つ同じアレーをのせています。
●インターロイキン/インターフェロンおよびレセプタ
ー、ケモカイン、MAP-Kinase、アポトーシス、ス
フィンゴ脂質経路、補体経路、NFκB経路および関連遺伝子をスポットしています。

20

Wako Bio Window No.57 MAR.2004

関連遺伝子タ
情イ
報human 60-1

human 60-2

インターロイキン

ケモカイン

インターフェロン
およびレセプター

および
レセプター

human 60-3

プ
源

human 60-5

スフィンゴ脂質経路

human 60-6
NFκBシグナル

アポトーシス

MAP-キナーゼ

経路

補体経路

および
関連遺伝子

ポリヌクレオチドアレー
GenBank®

ガラススライドのサイズ

76×26×1.1mm

遺伝子数／アレー

79

66

43

スポット距離スポット直径

136

68

146

300μm
150μm

スポットサイズ
Arabidopsis陰性

7.8×7.8mm

8.4×8.4mm

7.8×7.8mm

8コントロールの数
複製アレー数／スライド

10
4

プローブの長さ由human 60-4

56bp

57-70bp
Homo sapiens

来＊スポットされた遺伝子情報については、お問い合わせ下さい。

〔参考文献〕
1）Russwurm, S., Stonans, I., Stonane, E., Wiederhold, M., Luber, A., Zipfel, P. F., Deigner, H. P. and Reinhart, K.,
Shock, 16, 109（2001）
2.）Russwurm, S., Vickers, J., Meier-Hellmann, A., Spangenberg, P., Bredle, D., Reinhart, K. and Losche, W., Shock,17, 263（2002）
3）Russwurm, S., Stonans, I., Schwerter, K., Stonane, E., Meissner, W. and Reinhart, K., J. Interferon Cytokine Res.,22, 215（2002）

コードNo.

メーカーコード

579-99691

101-01-01

Lab-Arraytor human 500-1

1箱

照

会

572-99701

101-02-01

Lab-Arraytor human 500-2

1箱

照

会

579-99711

102-02-02

Lab-Arraytor human 60-1

1箱

照

会

576-99721

103-02-02

Lab-Arraytor human 60-2

1箱

照

会

573-99731

104-02-02

Lab-Arraytor human 60-3

1箱

照

会

570-99741

105-02-02

Lab-Arraytor human 60-4

1箱

照

会

577-99751

106-02-02

Lab-Arraytor human 60-5

1箱

照

会

574-99761

107-02-02

Lab-Arraytor human 60-6

1箱

照

会

品

名

容

量

希望納入価格（円）＊希望納入価格は、希望するスライドの数により変わりますので、お問合せ下さい。 I. S.

mmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmm

トクリス社2004年カタログ配布中
脳神経科学関連製品を中心に最新のライフサイエンス研究用製品を多数掲載しています。

【掲載内容】【カタログ請求先】●Signal Transduction Agents●Pharmacological Probes●Neurochemicals●Biochemicals●Peptides
URL : http://www.tocris.com

Wako BioWindow係
E-mail：biowin@wako-chem.co.jp
F A X：06-6201-5964

品
新製
上追加
品目以
0
0
2
U. F.

Wako Bio Window No.57 MAR.200421

細胞へsiRNA導入をお考えの方に…

NucleofectorTM を使用したsiRNAの導入検討方法
NucleofectorTMは細胞ごとに最適化プロトコールを用意しています。このプロトコールはプラスミドDNAは
もちろん合成siRNA, siRNA発現ベクター、PCRカセットの導入にも用いることができます。しかしながらプ
ロトコールがない細胞については下記スキームにより導入試薬、導入プログラムを決定することができます。

NucleofectorTM Device, NucleofectorTM Kit【siRNA導入のための導入条件決定スキーム】
Primary cells
専用プロトコール有り

Cell lines
専用プロトコール無し

細胞ごとの特異的な専用試薬を選びます

Cell Line OptimizationTM Kit を使用します

一般的に初回は蛍光標識siRNAを使用します

プロトコールに従いpEGFPを使用し最適条件を検討します

陽性コントロールとしてvimentinやLamin A/CでRNAi確証を行います。また遺伝子導入効率の陽性コントロールとしてEGFPにて確認することを推奨します。

最適化した条件でRNAi実験を行います

Primary cellでの遺伝子抑制効果を見ます

Cell lineでの遺伝子抑制効果を見ます【siRNA導入成功のポイント】
ssiRNAの使用濃度
siRNAの濃度はNucleofectorTMユーザーでは10nM〜1μMで満足した結果が得られたと報告されています。

【導入例】■Jurkat細胞へのsiRNA導入効率

導入後3時間経過時の顕微鏡像

導入後3時間経過時の蛍光顕微鏡像

Rhodamine標識した21mer siRNAをATCC社由来Jurkat細胞へマニュアルの条件にて導入。
ほぼ100%に近い細胞に導入ができた。

22

Wako Bio Window No.57 MAR.2004

■THP-1細胞でのsiRNAによる遺伝子発現抑制
coⅠ : -siRNA / +program
coⅡ : 0.14μg control siRNAcoⅢ : 1.4μg control siRNAvim : vimentin siRNAM: Marker
Vimentin遺伝子（ターゲットシーケンス：AAGAATGGTACAAATCCAAGT）発現抑制
Vimentin発現抑制siRNAを導入し24時間後、48時間後の発現抑制をウエスタンブロットにて確認を行った。

【試薬】

コードNo. メーカーコード

品

名

容

507-98931 VPA-1001 Human B Cell NucleofectorTM Kit
TM

504-98941 VPA-1002 Human T Cell Nucleofector

Kit

501-98951 VPA-1003 Human CD34 Hematopoietic Progenitor Cell Nucleofector

TM

Kit

579-32671 VPA-1004 Human Dendritic Cell NucleofectorTM Kit
571-77051 VPA-1005 Human Natural Killer Cell NucleofectorTM Kit

量

希望納入価格（円）

25回用

60,00025回用

60,00025回用

60,00025回用

60,00025回用

60,00025回用

60,000508-98961

VPB-1001 Human Coronary Artery Endthelial Cell NucleofectorTM Kit

505-98971

VPB-1002 Human Umbilical Vein Endthelial Cell NucleofectorTM Kit

25回用

60,000573-35491

VPB-1003 Human Microvascular Endothelial Cell-Lung NucleofectorTM Kit

25回用

60,000502-98981

VPC-1001 Human Aortic Smooth Muscle Cell NucleofectorTM Kit

25回用

60,000509-98991

VPD-1001 Normal Human Dermal Fibroblast NucleofectorTM Kit

25回用

60,000506-99001

VPD-1002 Normal Human Epidermal Keratinocyte NucleofectorTM Kit

25回用

60,000503-99011

VPD-1003 Normal Human Epidermal Melanocyte-Neonatal NucleofectorTM Kit

25回用

60,000577-76431

VPD-1004 Mouse Embryonic Fibroblast 1 NucleofectorTM Kit

25回用

60,00025回用

60,000

10回用

35,00025回用

60,00025回用

60,00025回用

60,00025回用

60,00025回用

60,00025回用

60,000TM

Kit

574-76441

VPD-1005 Mouse Embryonic Fibroblast 2 Nucleofector

570-76421

VPD-1006 Mouse Embryonic Fibroblast NucleofectorTM Starter Kit
TM576-35481

VPE-1001 Human Mesenchymal Stem Cell Nucleofector

574-77041

VPE-1002 Rat Cardiomyocyte NucleofectorTM Kit
TM

573-35511

VPF-1001 Human Chondrocyte Nucleofector

570-35521

VPG-1001 Mouse Neuron NucleofectorTM Kit
TM

577-35531

VPG-1002 Chicken Neuron Nucleofector

570-38681

VPG-1003 Rat Neuron NucleofectorTM Kit

Kit

Kit

Kit
TM

572-72341

VPG-1004 Mouse Neural Stem Cell Nucleofector

579-72351

VPG-1005 Rat Neural Stem Cell NucleofectorTM Kit

570-77021

VPG-1006 Mouse Astrocyte NucleofectorTM Kit

25回用

60,000577-77031

VPG-1007 Rat Astrocyte NucleofectorTM Kit

25回用

60,000578-77061

VPG-1008 Mouse Oligodendrocyte NucleofectorTM Kit

NEW 575-77071
574-70721

TM

VPG-1009 Rat Oligodendrocyte Nucleofector

Kit

Kit

VPH-1001 Mouse ES Cell NucleofectorTM Kit

500-99021 VCA-1001 Nucleofector

TM

Kit R for Cell Line（e.g. for HeLa, NIH 3T3, UT7/Epo）507-99031 VCA-1002 NucleofectorTM Kit T for Cell Line（e.g. for CHO, ）504-99041 VCA-1003

Nucleofector

TM

Kit V for Cell Line（e.g. for 293, COS-7, K562, PC12,
Jurkat, HepG2, HL60, HaCaT）

573-26341 VCO-1001 Cell Line Optimization NucleofectorTM Kit

25回用

60,00025回用

60,00025回用 近日発売予定
25回用

60,00025回用

60,00025回用

60,00025回用

60,00025回用

60,00050回用

140,000

1台

2,500,000【導入装置】
500-98921 AAD-1001 NucleofectorTM Device

I. K.

Wako Bio Window No.57 MAR.200423株化細胞導入条件データベースが完成しました
amaxa社ホームページにて最新の細胞導入条件を検索することができるようになりました。
http://www.amaxa.com/products/cell̲lines/ ページ内からログインすると約200種類の使用試薬、使用プログラム等を含む細胞データを見ることができます。なお、このページ内に最新データが順次更新されていきます。

Wako Bio Window

amaxa社 お知らせ

2004.MAR.

No.57

I. K.

mmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmm

アルドステロン
副腎皮質ホルモンのうち電解質代謝に関わる鉱質コルチコイドです。遠位尿細管末部においてナトリウムイオンの再吸収を促進し、カリウムイオン、水素イオンの分泌を増加させる作用があります。
●構造式：
O

O
CH

HO
CH3
H

CH2OH
C

●純

度：97%以上（HPLC）●CAS No.：［52-39-1］

H
H

O

C21H28O5＝360.44
コードNo.

品

名010-19891

Aldosterone

016-19893【d-Aldosterone、（+）-Aldosterone】

規

格

容

細胞生物学用量

希望納入価格（円）

5mg

照

会

25mg

照

会
K. N.

■本文に収載しております試薬は、試験・研究の目的にのみ使用されるもので、「医療品」、「食品」、「家庭用品」などとして使用できません。
希望納入価格には消費税等が含まれておりません。

本社 540-8605 大阪市中央区道修町三丁目1番2号 （06）6203−3741（代表）支店 103-0023 東京都中央区日本橋本町四丁目5番13号 （03）3270−8571（代表）
中 国 営 業 所 （082）285−6381㈹
九 州 営 業 所 （092）622−1005㈹横 浜 営 業 所 （045）476−2061㈹
東 海 営 業 所 （052）772−0788㈹筑 波 営 業 所 （0298）58−2278㈹
北関東営業所 （048）641−1271㈹北海道営業所 （011）271−0285㈹東 北 営 業 所 （022）222−3072㈹フリーダイヤル：0120-052-099 フリーファックス：0120-052-806 ■機器の問合わせ先 06-6203-2759／03-3270-8124■ご意見・お問合せ E-mail : biowin@wako-chem.co.jp

04.214.3学 01 F

http://www.wako-chem.co.jp/

3