  


ライトフルオラスケミストリー
reaction mixture

Rf
Si

Rf

Si
OOO
SiSiSi

FSPE(Demix)

Detag

F1
F2

Tag, Mix

Rf = C6F13, C8F17 etc.

Rf

Mixture Synthesis

fluorophobic fluorophilic
solvent
solvent

F1

F1

F3

F2

F2

F4

F3

F3

F4

F4

F1
F2
F3

fluoroussilica gel

F4organic
fraction: Represents a fluorous tag
fluorous
fraction: Represents an organic substrate〔総 説〕「ライト及びミディアムフルオラスタグの特性を利用する有機合成反応」

松儀

真人 ……… 2「アルツハイマー病患者脳切片における老人斑および神経原線維変化の蛍光染色」

工藤

幸司 ……… 7「マイクロ波加熱による有機合成」

小島秀子 ……… 10〈テクニカルレポート〉「官能基選択的還元触媒の開発」

吉田

雄一 ……… 13「マウス腸骨リンパ節を用いたモノクローナル抗体の作製」

佐渡

義一 ……… 16〈生薬のはなし〉「薄層クロマトグラフィー用ゴシツ並びにシャゼンシ」

木内

文之 ……… 18

芝哲夫 ……… 29〔化学大家〕「朝比奈泰彦」〔製品紹介〕
有機合成

細胞生物

ミディアムフルオラス向山試薬 ……………………… 6
選択的還元触媒セット ………………………………… 15
有機環状トリオールボレート塩 ……………………… 22
希少糖 …………………………………………………… 22

老人斑選択的蛍光プローブ「BF-168」 ……………… 9
神経原線維変化選択的蛍光プローブ「BF-170」 …… 9
抗体作製受託サービス ………………………………… 17
カンナビノイドレセプター作用物質 ……………………… 23
NH イムノクロマト カンピロバクター …………………… 25
抗 GFP, モノクローナル抗体 …………………………… 26
アニマルフリーサイトカイン ……………………………… 26
アレルゲン試薬 ………………………………………… 26

環境・分析

生薬試験用ゴシツ、シャゼンシ ………………………… 19
NH2 シリカゲル 60F254 プレート - ワコー ……………… 20
マイコトキシン標準品 …………………………………… 20
ステビア抽出物定量用標準品 ………………………… 21
SIトレーサブルな標準物質「TRM」…………………… 32培

養マイトマイシン C 溶液 …………………………………… 24
平衡塩溶液 ……………………………………………… 24
トリプシン EDTA 溶液 …………………………………… 24培地添加溶液 …………………………………………… 24
ラクトアルブミン加水分解物 …………………………… 25
NZ アミン ®、NZ ケイス ® ……………………………… 25

遺 伝 子

アルカリホスファターゼ溶液 HG, エビ由来 …………… 27
Pho DNA ポリメラーゼ ………………………………… 27
ポリアクリルアミドプレキャストゲル
「スーパーセップ TM DNA」……… 28
IPTG 大入り包装 ……………………………………… 28
機器

マイクロ波反応装置「μリアクター WA」……………… 12〔お知らせ〕
農薬混合液に関するご案内 ……………………………………………………21

1

R

esearchライト及びミディアムフルオラスタグの特性を利用する有機合成反応

ラス分子は一般に汎用有機溶媒に不溶

1 はじめにreaction mixture

真人

fluorophobic fluorophilic
solvent
solvent

で有機合成反応において扱いにくい一面を有しているが、上述したように単有機合成反応では反応混合物から目的化合物を単離精製する操作が必要で純な分液操作によりフルオラス成分を分離することが可能である。

Rf = C6F13, C8F17 etc.
Rf
Rf

Si

Rf

Si
OOO
SiSiSiある。この精製操作において標的化合一方、ヘビーフルオラス分子から物のみをピンポイントで単離できる

フッ素含有量をかなり減らした「ライツールとして現在フルオラスケミスト

ト」なフルオラス分子を用いるケミス

リーは注目されている１）。「フルオラトリーは「ライトフルオラスケミスト

ス」とはフッ素原子の特性を利用したリー」と呼ばれている５）。ライトフル

ケミストリーに用いられる言葉で「含オラス分子はフルオラス溶媒にはほと媒や有機溶媒に対する溶解度、ならび

フッ素化合物」と「フッ素を含んでいんど溶解せず、むしろ有機溶媒に可溶に分離過程での扱い易さの点でこれらない化合物」の分子間相互作用に基づなので汎用有機溶媒が反応媒質としてに取って代わるだけのメリットは少な

くケミストリーにおいて頻繁に用いら使用できるだけでなく、反応過程においとされている５）。しかしながらこのれるキーワードである２）。筆者らの研いてもフルオラス分子が通常の有機分中間に位置する「ミディアムフルオラ

究グループはこの「フルオラス性」を子とほぼ同様の挙動をとることが期待

スケミストリー」も反応系の設計次第利用した有機反応プロセスの簡略化

でき、反応溶媒の選択や反応追跡の方では興味深いプロセス改良に応用可能

や、環境負荷の少ない有機合成反応剤法も含めて、通常の有機分子（非フルであることを最近筆者らは見いだしてオラス分子）と同様の条件で有機合成いる７）。この「ミディアムフルオラス」

本稿ではライトフルオラスケミスト

反応を行うことが可能である。しかしに関しては本稿後半で述べる。

リーを基点とした簡易反応プロセスにながらヘビーフルオラスケミストリー

ついて概説するとともに、筆者らが開で用いられる「フルオラス液相−有機発したフルオラス試薬を紹介し、その液 相 」 で の 分 離 は 困 難 で あ り、

有用性や可能性について述べたい。

Hadida と Curran により開発された

３）等への応用研究を展開している 。

フルオラスケミストリー
2 の分類：ヘビー及びライト
フルオラスケミストリー「フルオラス分子」と「非フルオラス

fluoroussilica gelorganic
fractionfluorous
fraction

図１．Fluorous Solid Phase Extraction

Fluorous Solid
Phase Extraction
3(FSPE) によるライト
フルオラス分子の分離

分 子 」 の 分 離 手 法（Fluorous Solid

図１に FSPE の概略を示した。まず、Phase Extraction : FSPE） が 一 般 にフルオラス化合物と有機化合物の混合用いられる６）。彼らの報告がブレーク

物をフルオラスシリカゲル担体のごく

含フッ素化合物は、水や大部分の有スルーとなり、現在ではライト及びヘ短いカラムクロマトグラフィーの上に

機溶媒と親和性が低いが、含フッ素化

ビーフルオラスケミストリーは相補的載せる。次に、疎フルオロ性の溶離液

合物同士は親和性が高いという特徴をに幅広く有機合成分野で利用されるよを流すとフッ素を含まない有機化合物有しており、この特性を利用することうになった。なお、ヘビーフルオラス

はすぐにカラムから流れ出すが、フルで「含フッ素化合物」と「フッ素を含ケミストリーとライトフルオラスケミ

オラスシリカゲルはフルオラス化合物

んでいない化合物」の分離が簡単に達ストリーを区別する明確な指標はないを選択的に保持する性質を有している成できる 。初期のフルオラスケミス

が、分子中にフッ素原子が少なくとものでフルオラス化合物はフルオラスシ

トリーの基本戦略は長鎖パーフルオロ

39 個以上ある場合には「ヘビー」な

リカゲル上で吸着されたまま移動しな

１）

アルキル基を組み込んだ有機分子をフルオラス分子と一般に呼ばれておりい。有機化合物の流出後、親フルオロ「フルオラス液相−有機液相」の分液（要するにフッ素含有量がヘビー級と性の溶離液を流すことでフルオラス化

操作により反応混合物からフルオラス

いうことである）、分子中のフッ素原合物が流出し、効率よく有機化合物と液相中へ移動することで精製するとい

子 が 21 個 以 下 の 分 子 は「 ラ イ ト 」

フルオラス化合物を分離することがでうものであった 。この手法は、フルなフルオラス分子と呼ばれる事が多きる。本操作でのフラクションは、高オラス分子のフルオラス溶媒への分配

い５）。

速液体クロマトグラフィー（HPLC）

４）

2

松儀

名城大学農学部応用生物化学科

係数を高める為に分子中フッ素原子の予想されるように、分子中のフッ素や高速液体クロマトマススペクトル装

割合をかなり大きくする必要があるこ

原子数が「ヘビー」と「ライト」の間

置（LC-MS）などによる直接分析がとから「ヘビーフルオラスケミストに位置するものは、ヘビーとライトの可能であるし、本稿の後半で述べるリー」と呼ばれている。ヘビーフルオ

中間の性質を有しておりフルオラス溶「タグの長さ」に基づく液相スプリッ

和光純薬時報Vol.77, No.3（2009）

HN
2

CO2H
C9F19
1

N

FSPE

80% MeOH

O

MeO

g

CHO

O

O
N
C9F19
3 O

N

CHO

o : 36%; p : 16%; o/p : 25%
f-GH 1st 4(a) 2.2 equiv. C8F17I, 1 equiv. Me3Al, 5mol% Pd(PPh3)4, CH2Cl2,
rt, 64% (recryst.). (b) 1.5 equiv. Bu3SnH, 0.2 equiv. AIBN,(85% yield, 94% pure)OH

C8F17I, Cs2CO3
DMF
rt, 20 h

C8F17

Ru

CN

Me
Me

V-70L

OH

PCy3

Cl

Me
OMe

N

Me

C8F17

Cl

fluorous
CH3CN

C8F17
e,f

O

organic
EDCI, EDCU, HOBt
excess 2

Me
N

c,d

HOBt
Et3N

Me
NC

MeO

EDCI

O

C8F17

a,b
MeO

C8F17

図５．V-70L を用いる芳香環上炭素への直接パーフルオロアルキル化反応

benzene, reflux, 81%. (c) 4 equiv. BBr3 S(CH3)2, dichloroethane,
reflux, 88%. (d) 1.5 equiv. NaH, 2 equiv. iPrI, THF/DMF, rt, 94%.

EDCI EtN=C=N(CH2)3N(CH3)2•HCl
EDCU EtNHCONH(CH2)3N(CH3)2(e) 1.1 equiv. Br2, 0.04 equiv. AcOH, CH2Cl2, rt, 94%. (f) 50mol%
Pd(PPh3)4, 3 equiv. tributylvinylstannane, toluene, reflux, 64%.
(g) 1.1 equiv. Grubbs 1st generation catalyst, 1.25 equiv. CuCl,

図２．FSPE による分離例

CH2Cl2, rt, 71%

ト合成にも応用可能である８）。図２はCurran に よ り 報 告 さ れ た FSPE の 実

図３．ライトフルオラス Grubbs-Hoveyda
触媒４の合成80%MeOH elution

ラス分子でありフルオラス溶媒にはほとんど溶けないのでフルオラス液相−
有機液相による分離精製はできない。

+
Mes N N Mes
Cl Ru
Cl

O

CH2Cl2fluorous
fluorous(0.05 M) silica
silica gel
gel
55 °C, 2 hr
C8F17

f-GH 2nd 5(5 mol%)p-Ts
Nfluoroussilica gel

リサイクル型ライト
フルオラス Grubbs4
Hoveyda 触媒の合成と閉環メタセシス反応

C8F17(a) 1.0 equiv. V-70L, 1.5 equiv. C8F17I, 8 equiv. Cs2CO3,
DMF, rt, 16%. (b) 10 equiv. iPrI, 8.0 equiv. K2CO3, DMF,
70 °C, 86%. (c) 2.0 equiv. [Ph3PCH3]Br, 4.0 equiv. NHMDS,

7

5
f-catalyst

RCM productcatalyst, 1.1 equiv. CuCl, CH2Cl2, rt, 66%

図６．高活性型ライトフルオラスメタセシ
ス触媒８の合成

cycles

1

2

3

4

5

yield (%)
recoveredcatalyst (%)

96

98

98

94

97

シルアミン６の閉環メタセシス反応

91

91

85

89

90

（RCM 反応）の結果を図 4 に示した。

図４．ライトフルオラス Grubbs-Hoveyda
触媒５を用いる閉環メタセシス反応

反応性はフルオラスタグを持たない市
販の Grubbs-Hoveyda 第２世代触媒とほぼ同等で、対応する閉環メタセシス

このようにライトフルオラス分子の分離には FSPE が第一選択肢になる。

NMes
Ru

THF, -78 °C, 83%. (d) 1.0 equiv. Grubbs 2nd generationTで得られる。縮合体３はライトフルオ

ClCl

Modified f-GH 2nd 8

6T

縮合体３のみが収率 85 %（純度 94 %）

C8F17

O

おいて、80 % メタノール水溶液で溶で溶離するとフルオラスタグを有する

THF elution

d

p-Ts
N

のアミン２の縮合反応後の FSPE にがまず流出する。次にアセトニトリル

C8F17
MesN

を有する アミノ酸誘導体１と過剰量群、すなわち過剰量のアミン、試薬類

O
CHO b,c

CHO a

施例である９）。ライトフルオラスタグ

離するとフッ素を含まない有機化合物

OH

OH

媒量とはいえ、これらの触媒は非常に体７を高収率で与えた 14）。もちろんラ

高価なので効率的な回収、再利用が望

イトフルオラス触媒５は FSPE によりまれる。筆者らはライトフルオラスタ

反応混合物から容易に分離可能で何度グをメタセシス触媒に組み込めば、たも再利用できた。

とえ薄層クロマトグラフィーにおいて次にフルオラスタグを標的分子の分

メタセシス生成物のR f 値と触媒のR f

離認識だけでなく、触媒活性の向上に

メタセシス反応は 2005 年度のノー値が近くて分離困難な場合であっても利用することを計画し 15）、リガンド

ベル化学賞受賞対象となった有機合成

も、FSPE により確実にフルオラス触

芳香環上にスペーサーを介さず直接フ化学上有用な炭素−炭素結合形成反応

媒のみを回収し、繰り返し再利用でき

ルオラスタグを導入した触媒８の合成の一つである 。メタセシス触媒としるメタセシスシステムが可能になるとを行った。本触媒合成では筆者らが最て Grubbs 第１世代触媒および第２世考えた。

近見いだした V- 70 L（ラジカル開始

10）

11）

代触媒が汎用されているが 、これら

まず、ライトフルオラスタグを組み剤）を用いる無保護フェノール類芳香の触媒は一般に回収できない。一方で込んだルテニウムカルベン錯体として環炭素上への直接パーフルオロアルキ

Grubbs-Hoveyda 型触媒はカラムクロ

ライトフルオラス Grubbs-Hoveyda 第16）を鍵反応として用
ル化反応（図５）

マトグラフィーにより回収可能とされ１世代触媒４を図３に示したルートでいることにより、比較的短行程で触媒

12）

13）

ているが 、生成物と触媒の極性が近合成した 。ここではライトフルオラ８を合成することができた（図６）。

い場合には本触媒の回収は難しい。触ス第２世代触媒５を用いたジアリルト

触媒８の活性を調べるために封緘し

和光純薬時報Vol.77, No.3（2009）3

た NMR チューブ中で６を基質とした
O 2N行った結果、触媒８は市販の GrubbsHoveyda 第２世代触媒及びライトフ示すことがわかった。この触媒８はFSPE により回収および再使用が可能というプロセス化学的見地に加え、反応性においても実用性の高い有用なメ
タセシス触媒であると考えている。

これまで述べてきたように、「ライ
トフルオラス分子」と「フッ素を含まない有機分子」は FSPE により容易にいてフルオラス分子同士を分離すること は で き る の だ ろ う か？

図７に

図７．フルオラス HPLC を用いたライト
フルオラスアミド体９の分離

O

O

N
O

Mixture Synthesis

FSPE(Demix)

Detag

R

O

O
O

F1
F2

Tag, Mix
F1

F1

F3

F2

F2

F4

F3

F3

F4

F4

F1
F2

10

Fmoc-dipeptide

CO2Me 10a R = H

Rretention time
2.1 min10b R = C2H4C4F9

18.3 min10c R = C2H4C6F13

34.8 minConditions: FluoroFlash TM column;
254nm; 1ml/min; 0 to 30 min: 80%
MeCN to 100% MeCN; 30 to 60 min:
100% MeCN

図 10．フルオラス HPLC を用いたフルオラ
スラスペプチド 10 の流出保持時間

F3
F4: Represents a fluorous tag

量の異なる単純なジペプチド体: Represents an organic substrate（f-FMOC-L-Phe-L-Phe-OMe） の 合 成 を図８．フルオラスミクスチャー合成

行い、フルオラス HPLC により液相コ
ンビナトリアル合成の可能性を調べ合成を行ない、タグ付き標的化合物また。その結果、異なるフルオラスタグ

による流出保持時間の結果をで導く。続いてフルオラス HPLC を用保護体で予想通り保持時間に顕著な差示した 18）。９はフルオラスタグの長さ

いてフルオラスタグの長さの違いに基が 認 め ら れ た（ 図 10）。 こ の 結 果 は（フッ素含量）の違いを明確に反映しづく分離を行なった後、最後にタグを様々なフッ素含量の f-FMOC 試薬をアてフッ素含有量の順に流出している。

はずすことでそれぞれの純粋な標的化

ミノ酸保護試薬として用いれば、多様

HPLC

4

17）

Ph
HN

Ph
HN

Curran が報告したフッ素含有量の異なるアミド誘導体９のフルオラス

Rf = C3F7
C4F9 O
C6F13

図９．フルオラス FMOC 試薬の合成

分離することができる。では、フルオラス分子のフッ素含有量の違いに基づNO2 e, f, g, hO(a) H2, 2 mol% of Pd/C, MeOH/THF, rt, 99%; (b) NaNO2,
48% aq HBF4, 0 °C -rt, quant.; (c) 1.0 equiv of RfCH=CH2,
4 mol% of Pd(OAc)2, MeOH, 40 °C, 63% (C3F7), 70%(C4F9), 86% (C6F13); (d) 2 mol% of Pd/C, H2, MeOH/THF,
rt, 100% (C3F7), 97% (C4F9), 95% (C6F13); (e) 5 equiv of
NaH, HCO2Et, diethylether, reflux (f) NaBH4, MeOH/THF,
0 °C-rt, 94% (C3F7), 58% (C4F9), 60% (C6F13) (2steps);(g) 2 equiv of phosgene or triphosgene, N, Ndimethylaniline, THF, rt; (h) NaOSu, THF, rt, 82% (C3F7),
91% (C4F9), 93% (C6F13) (2steps).

ルオラス触媒５よりも高い触媒活性をフルオラスミクチャー
合成：ペプチド立体異5性体の液相スプリット
合成

Rf

Rf
a, b, c, d

閉環メタセシス反応の追跡実験を

このサンプルには C 5 F 11 のタグが組み合物を得る。その際、効果的な分離がなペプチド類のエンコード化された液込 ま れ て い な い の でC4F9タ グ と可 能 か ど う か は 直 接 LC-MS や LC-

相ミクスチャー合成が可能であること

C 6 F 13 タグとの間にはかなりの保持時

NMR 分析などによりあらかじめ確認を示している 20）。現在、不斉点の絶対間の間隔が観測されている。この異なすることができる。

立体配置が全て異なる生理活性ペプチ

るフルオラスタグの特性に基づく

筆者らはフッ素含有量の異なるフルFSPE 分離技術を利用すれば、液相でオラスタグを導入した FMOC（アミのエンコード化されたコンビナトリア

ノ酸保護基）を異なるアミノ酸に結合

ル合成（フルオラスミクスチャー合させた後、これらを混合してからスプ成）が可能になる。本手法は 2001 年

リット合成により標的化合物まで導くに Curran らにより報告された反応手事が出来れば、フルオラスタグのフッ法で、固相コンビナトリアル合成とは素含量に基づく分離を利用して構造のフルオラス性を利用した分離技術の異なり、それぞれの反応段階で純粋な

明らかな標的化合物の液相コンビナ

応用として向山縮合試薬（N - メチル

反応生成物を単離、分析、そして同定

トリアル合成が可能になるものと考

21）への適- 2 - クロロピリジニウム塩）することが可能である 19）。フルオラス

えた。まず基礎的実験として、３種用を計画し、ライトフルオラスタグをミクスチャー合成の概念を図８に示し

類 の 異 な る フ ル オ ラ ス タ グ（C 3 F 7、分子内に組み込んだ改良型フルオラス

た。タグの長さが異なるフルオラスタ

C 4 F 9、C 6 F 13） を 導 入 し た f-FMOC

向山縮合剤 11 の反応性と利便性を調グを用いて数種類の前駆体を調製す

試薬を図９に示したルートで合成し、査した。その結果、フルオラス向山試る。これらを混合した後、スプリット

次にこれらを用いて３種類のフッ素含薬 11 は縮合剤として問題なく機能す

和光純薬時報Vol.77, No.3（2009）

ドの立体異性体を一挙に合成するモデ
ル系を検証している段階である。

ライト及びミディアムフル
6 オラス縮合剤（改良型向山試薬）の開発分離できる縮合反応系を達成すること
TfO-

N+

N+
TfO-

Cl

11 C8F17
RCO2H

R'OH
+ or

DMAP, Et3N

R"NH2

CH2Cl2, rt

RCO2R'
or
RCONHR"1) washing with aq. HCl2) FSPE (80%MeOH)

high yieldhigh purity
N

Cl

PhCO2H
13 C10F21+
PhNH2 1) Et3N
DMAP
DMF, rt, 1 h2) H2O, rt, 5 min

NO

14 C10F21
図 11．ライトフルオラス向山試薬 11 を用いる縮合反応る事が確認でき、「目的の縮合生成物」と「試薬由来の副生成物」の分離が確分離に高価なフルオラスシリカゲルを用いる必要はない。本試薬はアミノ酸を含む様々なアミド化反応およびエス
テル化反応に幅広く使用できることも確認した。

7 おわりにO

12 C8F17ができた７）。もはやフルオラス成分のextraction
with ether

本稿では筆者らが取り組んでいるラ
イト及びミディアムフルオラスケミス
トリーの一端を紹介させていただいた。現在ではフルオラスケミストリー

PhCONHPh(99%, 98.8%purity)

関連商品が数多く市販され、研究者が図 12．ミディアムフルオラス向山試薬 13を用いる簡易縮合反応

きている 23）。幸いにも本稿で紹介した

実に可能であることがわかった（図望む試薬類は容易に入手可能になって「ミディアムフルオラス向山試薬」も
和光純薬工業株式会社から市販してい

11）22）。特筆すべき点は、酢酸とN - メ

を予め分子設計すれば、その試薬はラ

ただく運びとなった。今後さらに産学

チルアニリンとの縮合反応において、イトフルオラス試薬として反応前には連携を密にしながら、研究の高度化を目的のアミド体と副生するピリドン体

振る舞うが、反応後には一転してヘ図っていきたい。最後に共同研究者で12 とを FSPE により完璧に分離するこ

ビーフルオラス試薬として振る舞う興ある Dennis P. Curran 教授（ピッツとができたことである。これらの両化

味深い縮合剤になる可能性がある。もバーグ大学）ならびに名城大学農学部

合物の薄層クロマトグラフィー（Silica

し反応の前後でこのようなフルオラス

天然物有機化学研究室の学生諸氏に謝Gel 60 F 254 MERCK ; 酢酸エチル：n-性の物性制御が可能であれば、反応終意を表したい。

ヘキサン＝ 1：1）でのR f 値は 0 . 30 と了後に溶媒組成を変化させるだけで目

0 . 33 と極めて近い値であり、通常の的生成物と試薬由来のピリドン体を極

クロマトグラフィーでこれらを分離す

めて簡便に分離できる縮合反応系が達〔参考文献〕

ることは非常に困難である。

成できると考えた。そこで様々なフッ１）Horváth, I. T., Curran, D. P. and Gladysz, J.

ところで、前述したようにフルオラ

素含量の向山試薬を調整し、N , N - ジ

スケミストリーでは分子中のフッ素含メチルホルムアミド（DMF）への溶量により「ヘビーフルオラス」と「ラ解度と、対応するフルオラスピリドン

イトフルオラス」のみが展開されてお体の含水 DMF 溶液への溶解度を詳細

り、ヘビーとライトの中間に位置するに調べ、その知見を基に C 10 F 21 タグ

A. : The Handbook of Fluorous Chemis-

try , ed. by Gladysz, J. A., Curran, D. P.
and Horváth, I. T., Wiley-VCH, Weinheim,
pp. 1（2004）.
２）Horváth, I. T. and Rabai, J. : Science , 266 ,
72（1994）.
３）Matsugi, M. and Curran, D. P. : Fluorous

フルオラスケミストリーは利点が無いを有するミディアムフルオラス向山試

５）ことからこれまで軽視されてきた 。

薬 13（フッ素含量：49％）を合成し筆者らはこの利用価値がないと一般にた。本誌薬は DMF に可溶でほぼライ

４）Gladysz, J. A. and Costa, R. C. : The Hand-

考えられている「ミディアムフルオラ

トフルオラス分子としての挙動を示す

book of Fluorous Chemistry , ed. byス」に焦点をあて、ヘビーとライトのが、反応後のピリドン体 14 のフッ素

Gladysz, J. A., Curran, D. P. and Horváth, I.

両方の「いいとこ取り」を可能にする

含量は 62％となり、もはやライトでT., Wiley-VCH, Weinheim, pp. 24（2004）.

はなくヘビーフルオラス分子としての５）Curran, D. P. : The Handbook of Fluorous

新しい反応試薬の可能性を探った。
前述の向山縮合剤は反応後に対イオ物性を持つことになる。その結果、反ンを失い、極端に分子量が低下する。

応終了後に少量の水（DMF に対してしたがって、「ライト」と「ヘビー」

20 %）を系内に添加するだけで縮合生の間の適当なフッ素含量を有する構造

成物とピリドン体 14 を簡便に濾過で

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）

Chemistry , ed. by Otera, J., CMC Publishing,pp. 43（2005）.

Chemistry , ed. by Gladysz, J. A., Curran, D.
P. and Horváth, I. T., Wiley-VCH, Weinheim, pp. 128（2004）.
６）Curran, D. P., Hadida, S. and He, M. : J. Org.

Chem ., 62 , 6714（1997）.

5

Chem. , 80 , 31（2008）.

７）Matsugi, M., Suganuma, M., Yoshida, S.,20）Matsugi, M., Yamanaka, K., Inomata, I.,

Hasebe, S., Kunda, Y., Hagihara, K. and

16）Matsugi, M., Hasegawa, M., Hasebe, S.,

Oka, S. : Tetrahedron Lett ., 49 , 6573（2008）.

Takai, S., Suyama, R., Wakita, Y., Kudo, K.,

Takekoshi, N., Hasegawa, M. and Curran, D.
P. : QSAR Comb. Sci. , 25 , 713（2006）.

８）Zhang, W. and Curran, D. P. : Tetrahedron ,Imamura, H., Hayashi, T. and Haga, S. : Tet-21）Mukaiyama, T., Usui, M., Shimada, E. and.（b）
Saigo, K. : Chem. Lett. , 1045（1975）

rahedron Lett. , 49 , 4189（2008）.

62 , 11837（2006）.
９）Curran, D. P. and Luo, Z. : J. Am. Chem.

17）（a）Kamiusuki, T., Monde, T., Yano, K.,

Mukaiyama, T., Toda, H. and Kobayashi, S. :Yoko, T. and Konakahara, T. : Chromato-

Chem. Lett. , 13（1976）.（c）Mukaiyama, T.,10）（a）Hoveyda, A. H., Zhugralin, A. R. : Na-graphia. , 49 , 649（1999）.（b）Kamiusuki, T.,

Narasaka, K. and Kikuchi, K. : Chem. Lett.

ture , 450 , 243（2007）.（b）Grubbs, R. H. andMonde, T., Yano, K., Yoko, T. and Konaka-

Trnka, T. M. : Organic Synthesis , 153

hara, T. : J. Chromatogra. Sci. , 37 , 38822）Matsugi, M., Hasegawa, M., Sadachika, D.,（2004）.（c）Grubbs, R. H. : Tetrahedron , 60 ,（1999）.（c）Curran, D. P. and Oderaotoshi,

Okamoto, S., Tomioka, M., Ikeya, Y.,7117（2004）.

Y. : Tetrahedron , 57 , 5243（2001）.（d）Curran,Masuyama, A. and Mori, Y. : Tetrahedron

D. P., Dandapani, S., Werner, S. and Matsugi,

Lett. , 48 , 4147（2007）.

Soc. , 121 , 9069（1999）.

11）Grubbs, R. H. : Handbook of Metathesis ,.
M. : Synlett , 1545（2004）

Wiley-VCH, Weinheim（2003）.

441（1977）.

23）（a）Nagashima, T. : Fluorous Chemistry ,12）（a） Kingsbury, J. S., Harrity, J. P. A.,18）Zhang, W., Luo, Z., Chen, C. H. -T. andBonitatebus, P. J. and Hoveyda, A. H. : J. Am.

Curran, D. P. : J. Am. Chem. Soc. , 124, 10443（2005）. （b） Shimokawa, K. :Chem. Soc. , 121 , 791（1999）.（b）Garber, S.

（2002）.

Chemistry , ed. by Otera J., CMC Publish-

B., Kingsbury, J. S., Gray, B. L. and Hoveyda,

ed. by Otera J., CMC Publishing, pp. 243

19）Luo, Z., Zhang, Q., Oderaotoshi, Y. and Curran,A. H. : J. Am. Chem. Soc. , 122 , 8168（2000）.

Fluorous

ing, pp. 25（2005）.

D. P. : Science , 291 , 1766（2001）.

13）（a）Maruoka, K., Sano, H., Fukutani, Y. and.
Yamamoto, H. : Chem. Lett. , 1689（1985）（b）Aimetti, J. A., Hamanaka, S., Johnson, D.

フルオラスシリカゲル
ケイ酸の酸素原子上にスペーサーを介してパーフルオロアルキル基が導入されたシリカゲル。フルオラス化合物を選択的に保持する性質を有している。

A. and Kellogg, K. S. : Tetrahedron Lett. ,20 , 4631 （1979）.（c） Williard, P. G. andFryhle, C. B. : Tetrahedron Lett. , 21 , 3731
（1980）.（d）Audic, N., Clavier, H., Mauduit,
M. and Guillemin, J-C. : J. Am. Chem. Soc. ,125 , 9248（2003）.（e）Stille, J. K. : Angew.

フルオラス HPLC カラム
フルオラスシリカゲルを充填剤として用いた HPLC カラム。

Chem. Int. Ed. Engl. , 25 , 508（1986）.
14）Matsugi, M. and Curran, D. P. : J. Org.

Chem. , 70 , 1636（2005）.

フルオラスミクスチャー合成
有機分子に異なる長さのフルオラスタ
グを導入すると、フッ素含量に基 づいて FSPE 分離が可能になる。この特性を利用し、固相合成で用いられるビー
ズの代わりに様々なフルオラスタグを標的分子に組み込んで行うエンコード
化された液相コンビナトリアル合成。

15）Michrowska, A. and Grela, K. : Pure Appl.

縮合反応をより簡便に
ミディアムフルオラス向山試薬
コード No.
031-20911
037-20913

品

名規2-Chloro-1-(3,3,4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,9,9,10,10,11,11,12,12,12henicosafluorododecyl)pyridinium Trifluoromethanesulfonate

格

容

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200mg
有機合成用
1g

希望納入価格（円）5,000
18,000

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ライトフルオラス向山試薬
コード No.
036-20101
032-20103

品

名

規2-Chloro-1-(1,1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6,6,7,7,8,8-heptadecafluorodecyl)
pyridinium Trifluoromethanesulfonate

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希望納入価格（円）5,000
18,000HPLC 用パックドカラム
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001-00030
001-00030

品®

名カラムサイズ4.6mm I.D.×150mm
4.6mm I.D.×250mm®

Wakopak Fluofix -Ⅱ 120E

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希望納入価格（円）50,00058,000アゾ重合開始剤
コード No.
011-18221

6

品

名(2RS ,2'RS )-Azobis(4-methoxy-2,4-dimethylvareronitrile)【V-70L】

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）

規

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有機合成用

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5g

希望納入価格（円）
3,000

R

esearchアルツハイマー病患者脳切片における老人斑および神経原線維変化の蛍光染色
東北大学未来医工学治療開発センター

工藤

幸司

はじめに
アルツハイマー病（AD）においては患者を取り巻く家族または臨床家がこの疾患特有の臨床症状に気づいた時には、AD の代表的病理像としてのア
ミロイドβ蛋白（Aβ）を主構成成分とする老人斑、また過剰リン酸化タウ
蛋白を主構成成分とする神経原線維変化はすでに取り返しのつかない段階まで進展していることが知られている。
これら病理像の存在を確認するためには、まずイン ビトロではそれぞれに特異的選択的に結合する抗体または化合物を用い脳切片を染色する方法が用いられるが、一方、イン ビボで最近用いられるようになってきたのは、それぞれに親和性が高く、しかも血液−脳関門透過性に優れる等の特性を有する標識化合物

図１．各化合物の化学構造
但し、チオフラビン S は混合物であることから図には主成分を示した。

を生体に投与し、病理像とプローブの結合をPET（陽電子断層撮影装置）で確理することによって両化合物では染色

PET プローブ開発を目的とした化合物認する方法（いわゆるアミロイドまたは性が失われるが、抗体ではむしろ染色の最適化の途中で著者らの研究チーム

タウイメージング）である。

性が増すことが多い。

によって見い出された（図１）2）。AD

抗体およびアミロイドまたはタウイ

一般に抗体を用いた免疫染色よりは患者脳切片において BF-168 は老人斑

メージング用標識化合物についてはそ

化合物染色の方が、また普通の化合物を比較的選択的に染色し（図２）、まの権威に譲るとして、本稿では著者ら（dye）による染色よりは蛍光化合物

た蟻酸の前処置によってその染色性がが見い出した化合物によってイン ビ

による染色の方が簡便である。しかし失われる（図３）ことから、蛍光化合

トロで脳切片を簡便に染色可能な蛍光蛍光化合物チオフラビン S は老人斑の物 BF-168 は老人斑の主構成成分であ化合物群について述べる。

ほかに神経原線維変化をもほぼ同等にる Aβのβシート構造を認識している

認識するが、これは老人斑と神経原線ことが確かめられている 2）。

老人斑ないしは Aβを染色できる蛍光化合物

維変化との間にはいくらかの構造の違

BF-168 の具体的な染色法は以下にいは存在するものの、両病理像ともβ示す通りである 2）。

シート構造をとるペプチドであること

１）パラフィン脳切片に脱パラフィン

老人斑ないしは Aβを染色できる化に由来すると考えられている。このβ合物として、コンゴ レッドおよびチ

シート構造の少しの違いを区別して比２）AD 患者脳には殆ど例外なく自家

オフラビン S がよく知られている（図較的選択的に老人斑を染色できる蛍光蛍光を有するリポフスチンの集積１）。抗体は抗原全体を認識している化合物（チオフラビンＳの進化体）がが見られ、それが BF-168・老人のではなく、抗原の一部分（いわゆる以下に示す BF-168 である。

斑結合体の励起および蛍光波長とエピトープ）を認識することによって染色を可能としているが、これに対してコンゴ レッドおよびチオフラビン
S は 老 人 斑 を 構 成 し て い る Aβ の βシート構造を認識して染色を可能としている。したがってβシート構造を破壊する蟻酸 1）で AD 患者脳切片を前処処理を加える

重なり合うことから、あらかじめ蛍光化合物 BF-168 による老人斑ないしは Aβ染色の特徴とその具体的な染色法
BF-168 はアミロイドイメージング用

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）

リポフスチンの自家蛍光を以下の処置で除去しておく必要がある① 10％ ホ ル マ リ ン（ 中 性 ） バ ッ
ファーに 60 分間浸漬
② PBS にて５分間洗浄③ 0.25％ KMnO4 に 30 分間浸漬7

図２．アルツハイマー病患者脳切片における BF-168 の染色像
左：BF-168 染色、右：抗Ａβ抗体（6F/3D）染色図３．アルツハイマー病患者脳切片における BF-168 の染色像に対する蟻酸処理の影響④ PBS にて２分間×２回洗浄

図４．アルツハイマー病患者脳切片における BF-170 の染色像
左：BF-170 染色、 右 : 抗リン酸化タウ抗体（pSer422）染色図５．アルツハイマー病患者脳切片における BF-170 の染色像に対する蟻酸処理の影響
Bar=400μm

９）蛍光顕微鏡で観察し、写真撮影⑤ 0.2％ K2S2O5 および 0.2％ oxalic acid

成成分である過剰リン酸化タウ蛋白の蛍光化合物による神経原線維変化ないしはタウ染色の特徴およびその具体的な染色法

βシート構造を認識していることが確

前述したようにチオフラビン S は老ライトなどの様々な病理像が知られて

人斑と神経原線維変化の両者を染色す

いるが、これらキノリン誘導体はあくる蛍光化合物であるが、神経原線維変まで標本の状態が良好な場合に限る

６）10 分間反応させた後、洗い桶中化特有のβシート構造のみを染色できが、これらの病理像のすべてを染色すの水道水（流水ではない）で２、る蛍光化合物の登場が待たれていた。

ることができる（図６にはニュールピ

３回洗うの等量混合液に５秒間浸漬⑥ PBS にて２分間×３回洗浄３）BF-168 を 100％エタノールにて溶解し 200μM に調整
４）純水にて希釈し 100μM BF-168
溶液を作製
５）脳切片をダコペンで囲み、100 μM
BF-168 溶液を滴下

かめられている 3）。
神 経 原 線 維 変 化 に は PHF（Paired
Helical Filament）、ニュールピル ス
レッド、ディストロフィック ニュー

著者らは前述の PET プローブの最適

ル スレッドが染色されている１例を

７）著者らの蛍光顕微鏡（Nikon エ

化作業中に神経原線維変化を比較的選示した）。また図７にはかなり病状のクリプス 80i）の V-2A フィルター

択的に染色可能な蛍光化合物群を見い進んだ患者さんの THK-111 による染（ エ キ サ イ テ ー シ ョ ン：380 −出した（図１）3）。

色像を示した。

420nm、エミッション：450nm 以

BF-170 に代表されるキノリン誘導

これらのキノリン誘導体はアミノ基上）に相当する、またはその近傍

体は AD 患者脳切片において神経原線の側鎖の短い化合物ほど神経原線維変のフィルターで観察し、洗浄が不維変化を比較的選択的に染色し（図化への選択性は高くなるが親和性はや十分の場合は適宜洗浄を追加する

４）、また蟻酸の前処置によってそのや低くなり、側鎖の長い化合物ほど神８）蛍光褪色防止剤 FluorSave（Carbio-

染色性が失われる（図５）ことから、

経原線維変化への選択性はやや低くな

蛍光化合物 BF-170 をはじめとするキるが親和性は高くなる傾向がみられてchem）を用いて封入する

8ノリン誘導体は神経原線維変化の主構

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）いる。

要ないことから更なる簡便な染色が可

具体的な染色法としては著者らの蛍能となると考えている。近い将来にこ

光顕微鏡（Nikon エクリプス 80i）のれらを紹介できることを願っている。

B-2A フィルター（エキサイテーショ〔参考文献〕

ン：450 − 490nm、 エ ミ ッ シ ョ ン：

１）Kitamoto, T., Ogomori, K., Tateishi, J. andPrusiner, S. B.： Formic acid pretreatment
enhances immunostaining of cerebral andsystemic amyloids. , Lab. Invest ., 57, 230236（1987）.
２）Okamura, N., Suemoto, T., Shimadzu, H.,
Suzuki, M., Shiomitsu, T., Akatsu, H., Yamamoto,T., Staufenbiel, M., Yanai, K., Arai, H., Sasaki,
H., Kudo, Y. and Sawada, T.： Styrylbenzoxazole derivatives for in vivo imaging ofamyloid plaques in the brain. , J. Neurosci .,24, 2535-2541（2004）.
３）Okamura, N., Suemoto, T., Furumoto, S., Suzuki,
M., Shimadzu, H., Akatsu, H., Yamamoto, T.,
Fujiwara, H., Nemoto, M., Maruyama, M.,
Arai, H., Yanai, K., Sawada, T. and Kudo,
Y.： Quinoline and benzimidazole derivatives: candidate probes for in vivo imagingof tau pathology in Alzheimer s disease. , J.
Neurosci ., 25, 10857-10862（2005）.

520nm 以上）に相当する、またはその近傍のフィルターで観察する以外
は、前述の BF-168 の手順とまったく同様である 3）が、特にアミノ基の側鎖

図６．アルツハイマー病患者脳切片における THK-055 の染色像
緑色蛍光の PHF の背景に細かいごみ状のニュールピル スレッドが観察される。

の短い BF-170 では染色像が洗い流されやすいことから、水洗１回目から蛍光顕微鏡で染色具合を確かめることをお勧めする。

最後に
蛍光染色はリポフスチン除去処理したプレパラートさえ準備してあれば 30分以内で染色が可能である。著者らは最近、老人斑、または神経原線維変化に親和性を持ち、且つリポフスチンのエキサイテーション・エミッション波
長と重ならない長い波長をもつ蛍光化

図７．アルツハイマー病患者脳切片における THK-111 の染色像合物を開発中であるが、これらが登場したならばリポフスチン除去処理も必アルツハイマー病の研究に
蛍光プローブ BF-168、BF-170
アルツハイマー病患者脳では、βアミロイドが凝集した老人斑とりん酸化

波

長タウが凝集した神経原線維変化が観察されます。このうち、老人斑を比較的励起波長 (nm)蛍光波長 (nm)BF-168380 − 420450 以上BF-170450 − 490

520 以上

選択的に染色する蛍光プローブが BF-168、神経原線維変化を比較的選択的に認識する蛍光プローブが BF-170 です。
免疫組織染色と比較して操作が簡便です。
コード No.

品

029-16361

BF-168 ( 老人斑選択的）

名

病理研究用

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1mg

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近日発売

026-16371

BF-170 ( 神経原線維変化選択的 )

病理研究用

1mg

近日発売

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コード No.
299-56701

品

名Amyloidβ-Protein Immunohistostain Kit

規格

免疫組織染色用

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）

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50 回用

希望納入価格（円）95,0009

Researchマイクロ波加熱による有機合成
小島

愛媛大学大学院 理工学研究科

秀子

常使用できるのは周波数 2 . 45 GHz、

３ マイクロ波有機合成の例

波長 12 . 2 cm のマイクロ波に限られ

１ はじめにている。紫外・可視光線（200 〜 800

マイクロ波加熱は、電子レンジに代nm）を分子に照射すると、電子励起

まず最初に、金属トリフラート触媒表されるように日常生活に使われておにより光化学反応が起きるが、エネルを用いた Friedel-Crafts アシル化により、工業用としても広く使用されていギーが５桁も小さいマイクロ波では直る、アルキルベンゾフェノンの無溶媒

る。化学においても分析試料の加熱分

接化学反応は起こすことはできない。

マイクロ波合成を紹介する（スキーム解に用いられてきた。有機合成につい

しかし、マイクロ波を分子に照射する

1 a）4）。アルキルベンゼン、酸塩化物、ては、マイクロ波を用いて加熱するとと、正負の電場が高周波（2 . 45 GHz）

インジウムトリフラートを１：１：

反応速度が飛躍的に速くなることがで入れ替わるたびに双極子の方向が変0 . 05 のモル比でナスフラスコに入れ、1986 年に初めて報告され 、最近の 10

わって分子は高速で正逆に回転し、隣アルミナ粉末に埋めてマイクロ波を照年間は膨大な数の報告がなされてきの分子と激しく擦れあうため熱が発生射すると、数分間で反応が完結するこた。現在では基本的な有機反応は殆どする（図１）。すなわちマイクロ波加とがわかった。未反応の酸塩化物は、網羅されており、マイクロ波加熱は、

熱は、分子自体から熱が発生する「分少量の水と炭酸ナトリウムを加えて１有機合成の反応時間を従来の時間単位

子レベルでの局所加熱」である。一分間マイクロ波を照射すると完全に分から分単位へと大幅に短縮できる手法

方、従来の通常加熱は熱源からの熱伝

解し、反応混合物に水を加えてろ過す

1）

2）

として認められている 。また有機合導によるものであり、マイクロ波加熱るだけで、対応するアルキルベンゾ

成のみならず、高分子、金属錯体、無とは原理が全く異なる。通常加熱ではフェノン誘導体を高収率で得た。

機材料、ナノ粒子の合成など、様々な物質は一様に加熱されるが、マイクロ

次に、芳香族アミンとカルボン酸を化学合成プロセスにも利用されつつあ

波照射では誘電損失係数が高い極性分

塩化亜鉛共存下、マイクロ波加熱による 3）。私達は数年前から無溶媒下での子ほど加熱され易く、無極性分子は全るアクリジン合成を検討した（スキー

マイクロ波有機合成に取り組んできてく加熱されない。これは物質ごとの選

5）。 こ の 反 応 は Bernthsen 反 応
ム 1 b）

おり 4 − 9）、本稿でその一端を紹介する

択加熱が可能であることを意味していとして古くから知られているが、長時とともに、今後の課題についても少しる。

間の反応を要していた。ジフェニルア

触れたい。
COCl

２ マイクロ波加熱の原理と特徴

(a)

＋

R

CO2CH3マイクロ波は、赤外線とラジオ波の間に位置する、波長１〜 100 cm、周
波 数 0 . 3 〜 30 GHz の 電 磁 波 で あ る。

O
MW, 2−6 min(CF3SO3)3In
solvent-free

H
N

R

CO2CH368−95％
N

MW, 5−6 min

(b)

＋

RCO2H
ZnCl2
solvent-free

マイクロ波はレーダーや携帯電話などの通信用として使われているため、通R
63−87％

MW, 3−4 min

HN

polyphosphoric acid

N

NH2

(c)

RCO2H

＋

NH2

solvent-free
O

O

(d)

OH

Br(CH2)3CO2C2H5＋

R

78−97％

MW, 4 min O

O

K2CO3
DMF

O(CH2)3CO2C2H5

75％
NH2

MW, 2−5 min(e) Ar−CHO ＋

MW, 6−12 min
65−96％

N-CH3o

図１．マイクロ波と物質の相互作用

10

Ar

Ar−CN
NH2OH・HCl

スキーム１．マイクロ波有機合成例

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）

N

NH2NH2・2HCl
NH2NH2・H2O
ethylene glycol

N

Ar
N

42−67％

ミン、過剰量の酢酸と塩化亜鉛の混合なかったため、少量のエチレングリ

キーム 1 c）における、マイクロ波加

物にマイクロ波を数分間照射すると速コールを加えたところ互いに混じり合

熱と通常加熱での温度依存性を調べやかに環化縮合し、9 - メチルアクリジ

い、10 分程度の照射で反応が完了した。当量の 1 , 2 - フェニレンジアミン

ンが良い収率で得られることがわかった。反応混合物に水を加えてろ過するとカルボン酸および過剰のポリリン酸

た。炭素数 10 までのアルキルカルボ

ことにより、簡単にトリアゾールをまの混合物に、マイクロ波をパルス的にン酸についても、数分間の照射によりずまずの収率で得た。比較のために、照射して約５分間で所定の温度とした

同程度の収率で一連の 9 - アルキルア

二段階目の反応を 130℃の通常加熱を後、５分間保持して反応させた。図２

クリジンを得た。安息香酸などの芳香行ったところ、トリアゾールを同程度

a に温度プロファイルを示す。オイル族カルボン酸についても、ある程度のの収率で得たが、数時間の反応時間をバス中でも同じ温度条件で反応させ収率でアクリジン化合物が得られた。

要した。このように溶媒をうまく使うた。その結果、図２c の 4 - ピリジンカ

この時の反応温度をファイバー温度計

ことにより、２段階の反応を続けてワルボン酸との反応では、マイクロ波照を用いて調べたところ、最終到達温度

ンポットで行うことが可能となった。

射はオイルバスでの通常加熱よりも少は 200 − 210℃であった。一方、通常加熱では反応が完結するのに数時間をし収率が高いものの、いずれも 200℃

４ マイクロ波効果

付近で最高値に達しており、それ程大要した。

きな違いは認められなかった。しかし

青色蛍光物質であるベンズイミダ

マイクロ波による反応の加速効果に

図２d に示す反応系では、マイクロ波

ゾールは、当量の 1 , 2 - フェニレンジ

は、「熱的効果」と「非熱的効果」が加熱の方が通常加熱よりも明らかに約

アミンとカルボン酸に過剰のポリリンあると言われている。熱的効果とはマ

50℃低い温度で反応しており、130℃

酸を共存させてマイクロ波を 200℃程

イクロ波加熱による急激な温度上昇に以上では定量的な収率が得られてい度で数分間照射することにより、簡よるものであり、大部分が熱的効果でる。これがマイクロ波の非熱的効果で単に合成することができた（スキー説明可能である。問題は同じ温度で反ある。

6）。この場合、有機溶媒は加えム 1 c）

応させても、マイクロ波加熱の方が通

ここで、ポリリン酸は非常に極性がていないが、ポリリン酸は高極性溶媒

常加熱よりも何故速く反応が進行する

高いために、マイクロ波を 1 . 5 分間照の役割も果たしており、マイクロ波のかという「非熱的効果」である。こ射するだけで 400℃に達した。これに照射により容易に 200℃に達した。まの機構を解明するために以下の検討を対して無極性のヘキサンはマイクロ波

た、ヒドロキシクマリンの求核置換反行なった。

をフルパワー（700 W）で照射しても応による誘導体化を、高沸点、高極性

オーブン型のマイクロ波照射装置を

温度はほとんど上昇しなかった。そこ

溶媒のジメチルホルムアミド中で行な用いて、ベンズイミダゾール合成（スで、ポリリン酸を含む反応混合物をヘ（a）

最後にアルデヒドからトリアゾール
へのワンポット合成を紹介する（ス8）

キーム 1 e） 。アルデヒドをニトリル

150

600

100

400

50

200

に変換するために、一連のベンズアル

0

0

2

デヒドと塩酸ヒドロキシルアミンを無めに、反応後の混合物に直接、塩酸ヒ
ドラジンとヒドラジン水和物を加えてマイクロ波を照射した。しかし溶液が二層に分離して反応がスムーズに進ま

100

400

50

200
0
2

4
6
8
Irradiation time (min)

NH2
HO2C

N

N

（c）

N

NH2

100

10

MW

H
N

Polyphosphoric acid

N

PH
N

（d）

80
Yield (％)

80
Yield (％)

行しなかった。そこで溶媒として 1 -からアミノトリアゾールに変換するた

600

0

H
N

MW

N

Polyphosphoric acidsdvent-free

NH2

100

反応は完結した。引き続いてニトリル

800

150

0

0

10

（b）

200

Ph
HO2C

も温度が上がらず、反応がほとんど進たところ急激に温度が上昇し数分間で

4
6
8
Irradiation time (min)NH2

溶媒下で反応させたが、照射を続けてメチル - 2 - ピロリドンを少量共存させ

800

Microwave (W)Temperature (℃)

200

Microwave Power (W)キーム 1 d）7）。

Temperature (℃)

うと、数分の照射時間で完了した（ス

60
40
20

60
40
20

0
0

50

100

150

200

Temperature (℃)

0

0

50

100

150

200

Temperature (℃)

図２．ベンズイミダゾール合成におけるマイクロ波効果（a) 反応混合物のマイクロ波出力と温度プロファイル、（b) ヘキサン分散液のマイクロ波出力と温度プロファイル、（c, d) ●マイクロ波加熱と○通常加熱の温度依存性；ヘキサン分散液の▲マイクロ波加熱と△通常加熱

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）11キサン中に小さい液滴として分散さ方が通常加熱よりも約 50℃低い温度

要であり、マイクロ波合成プロセスのせ、撹拌しながらマイクロ波をフルパで反応しているが、実際に反応してい実用化を進める上でも不可欠である。

ワーで照射したところ、ヘキサン分る分子の局所温度は、バルク温度より散液の温度は 70℃までしか上がらなも約 50℃高い温度となっていると考〔参考文献〕かった（図２b）。それにも拘らず生えれば説明がつく。今後、この分子レ成物は、図２c と d の▲印で示すよう

ベルでの「局所加熱」説は実証する必に、いずれも約 50％の収率で得られ要がある。

１）Giguere, R. J., Bray, T. L. and Duncan, S. M. :Tetrahedron Lett ., 27 , 4945 - 4948（1986）.
２） Microwaves in Organic Synthesis , ed. by
Loupy, A., Wiley-VCH, Weinheim（2002）.
３）和田雄二、竹内和彦 監修：「マイクロ波化学プロセス技術」，（シーエムシー出版）（2006）．
４）Koshima, H. and Kubota, M. : Synth. Commun .,33 , 3983 - 3988（2003）.
５）Koshima, H. and Kutsunai, K. : Heterocycles ,57 , 1299 - 1302（2002）.
６）Yu, H., Kawanishi, H. and Koshima, H. :Heterocycles , 58 , 1457 - 1460（2003）.
７）Yu, H., Mizufune, H., Uenaka, K., Moritoki,
T. and Koshima, H. : Tetrahedron , 61 , 8932 8938（2005）.
８）Koshima, H., Hamada, M., Tani, M., Iwasaki,
S. and Sato, F. : Heterocycles , 57 , 2145 - 2148
（2002）.
９）Yu, H., Kawanishi, K. and Koshima, H. : J.
Photochem. Photobio ., A : Chem ., 178 , 62 - 69
（2006）.

た。一方、オイルバス中で 70℃で反応させても全く生成物は得られなかっ

５ おわりにた（図２c,d の△印）。この違いの説明
として、測定した反応温度はヘキサン

マイクロ波有機合成は迅速合成を達

分散液のバルクの温度であり、マイク

成できる手法として有用である。しかロ波照射では微小液滴中ではポリリン

し、反応温度も測定せず、単に反応時酸が含まれているためバルク温度よ間を短縮できたというだけでは論文とりもかなり高温となっている。図２

して受け付けないジャーナルもでてきc と d のマイクロ波照射の温度依存性ており、マイクロ波有機合成の研究は曲線から、液滴中ではそれぞれ 160、

新しい段階を迎えている。マイクロ波

100℃に達したと推定され、このための化学反応の促進機構を解明して、マに反応が進んだと考えられる。同様

イクロ波化学の基礎を確立することに、図２d においてマイクロ波加熱のが、今後のマイクロ波化学の発展に必P roducts
マイクロ波反応装置
μリアクター WA
マイクロ波反応装置 μリアクター WA は ､ マイクロ波を用いた基礎的な実験を行う装置です。

特長●マイクロ波反応の入門機として最適●プログラム温度調節可能●発振周波数●出力マイクロ波を化学利用する事により期待できる効果

2 . 45 GHz

40 〜 770 Ｗ

可変●実験用途に応じた様々な容器（50 mℓ ビーカー〜 2 ℓ セパ
ラフラスコ、還流冷却、焼成ユニット）に対応●マイクロ波出力、温度データの計測・記録が可能●タッチパネルによる簡単操作●ワンタッチ式熱電対挿入アダプター●温度センサーを熱電対（TC：最高使用温度 750℃）、ファ

出典：初歩から学ぶマイクロ波応用技術（化学，材料、医療から環境浄化まで）工業調査会

イバー（F：最高使用温度 260℃）の２種類を用意●電磁スターラ内蔵
コード No.

12品①反応時間の著しい短縮（1 / 2 〜 1 / 1 , 000）
②収率，純度の向上（80 〜 100％） ③反応条件の緩和④工程の簡略化 ⑤新規物質の合成⑥選択性の向上（位置，立体的選択性）⑦新材料の開発 ⑧新規プロセスの開発⑨廃棄物量の削減、溶媒の削減 ⑩プラントの小型化⑪作業環境の改善⑫著しい省エネルギー化（1 / 2 〜 1 / 数 10）

名

容

量

希望納入価格（円）005-23010

μリアクター WA-TC

１台

照

会

005-23010

μリアクター WA-F

１台

照

会

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）

echnical Report
官能基選択的還元触媒の開発 1）
和光純薬工業株式会社 試薬研究所

吉田雄一

これまで筆者のグループでは「グば、化合物中に、ニトロ基とエポキシ

これらの官能基が共存する化合物でア

リーンケミストリー」の観点から、繰

基があるような場合、Pd/C（en）を用

セチレン、オレフィン、ベンジルエス

り返し使用が可能な貴金属触媒の開発

いるとエポキシ基はそのまま残しニト

テル、芳香族ハロゲン、アジド基、ニを行ってまいりました。一般に還元はロ基をアミノ基まで還元できます。まトロ基のみを容易に還元することが可

パラジウム炭素（Pd/C）を触媒とした、別の触媒である Pd/Fib を用いる

（Scheme 1）。また
能となりました 2 , 3）て用い、水素ガス雰囲気中で室温、常と化合物中にホルミル基とビニル基の芳香族ケトンを基質とした反応で、通圧、中性条件下で行いますが、触媒活

様な炭素−炭素二重結合を持つ場合、

常 Pd/C では一気にアルカンまで還元性が高くほとんどの還元性官能基を変

ホルミル基を残し、さらに炭素−炭されてしまいケトンの中間体であるベ

換してしまうため、官能基や炭素−炭素二重結合を還元します。Pd/C（en）、

ンジルアルコール体を得ることは難し

素不飽和結合の位置を区別して選択的

Pd/Fib は反応後、触媒をろ過してろいとされていますが、10 % Pd/C（en）に還元することは困難でありました。

液を濃縮するだけで目的物を得ることを用いることで選択的還元が可能とな

これを回避する方法として触媒毒を用ができるという利点を持ち合わせていりベンジルアルコール誘導体を高収率いて触媒活性を低下させる方法が考案ます。以下に各々の触媒について幾つ（Scheme 2）ほか 1 , 2 で単離できる 4）されましたが、再現性に乏しいなど問かの反応例を挙げてご紹介します。

エポキシドの位置選択的還元 5）、選択

題を抱えていました。

1）パラジウム炭素−エチレンジアミ的脱アセトキシ化反応 6）などが可能と

2）

そこで、これらを解決する手段となります（Scheme 3）。

ン複合体（Pd/C（en））

して、岐阜薬科大学・佐治木教授ら

Pd/C（en）は、触媒毒として窒素性

な お、Pd/C（en） は、Pd/C に 見 らと共同で開発したパラジウム炭素−

塩基であるエチレンジアミンを Pd/C

れるような発火性を示さず、長期保存

エチレンジアミン複合体２種（略称：に大過剰に配位させ、開発しました。

安定性を有していることも大きな利点

Pd/C（en）、Pd 3 . 5 〜 6 . 5 %、Pd 8 . 5

エチレンジアミンを配位させることにであります。

〜 11 . 5 %）、パラジウム−フィブロイ

より、官能基の選択的還元が可能とな

7）2）パラジウム−フィブロイン（Pd/Fib）ン（略称：Pd/Fib）、パラジウム−ポ

りました。５% Pd/C（en）を用いた

Pd/Fib は絹のフィブロイン上に約リエチレンイミン（略称 Pd/PEI）の接触還元では保護基である脂肪族及び2 . 5 % のパラジウムを担持させた不均

４種類の官能基選択的還元触媒を商品

芳香族ベンジルエーテル、脂肪族アミ一系接触還元触媒です。この触媒は化してまいりました。ここでいう「官ンのN -Cbz 基（ベンジルオキシカルボ

Pd/C、Pd/C（en）に比べて還元活性

能基選択的還元」とは一つの化合物中ニル基）、エポキシ基、アルコールの能が低くベンジルエーテル、ベンジルに還元が可能な複数の官能基がある場

O -TBDMS 基（ - ブチルジメチルシリ

エ ス テ ル、 芳 香 族 ア ミ ン のN -Cbz、合、一方の官能基を残し、他方を還元

ル基）及びベンジルアルコールなどの

O -TBDMS などの保護基やエポキシ基、するといった性質を指します。例え

還元を選択的に抑制することができ、ケトン、アルデヒド、ハロゲン、ベン

5% Pd/C(en)H2 (1 atm)
OBn
MeO
BnO

5% Pd/C(en)H2 (1 atm)

C CH2
H

rt, 2 hMeOH

Br
CO2(CH2)2OBn

CO2Bn

O

rt, 3 hTHF

Scheme 1 .

O

5% Pd/C(en)H2 (1 atm)
Ort, 18 h
THF

O
CH3

yield 96%

10% Pd/C
H2 (1 atm)
rt, 24 h
MeOH

O

Et

O

10% Pd/C (en)H2 (1 atm)
rt, 2 hMeOH

CO2(CH2)2OBn

CO2H

O

N
Cbz
yield 75%

Ph

O
yield 82%
OH
CH3
O
yield 91%OO

10% Pd/C(en)H2 (5 atm)
rt, 24 h
MeOH

Oyield 98%

O

OH

yield 81%

10% Pd/C(en)H2 (1 atm)
rt, 3 h
MeOH

O
H2N

CH3

Scheme 2 .

yield 93%5% Pd/C(en)H2 (1 atm)

O
O2N

BnO

rt, 3 hDMAP, THF

Cbz

Ph

yield 91%

5% Pd/C(en)H2 (1 atm)
rt, 0.5 h
TEA, THF

CH3

MeO

5% Pd/C(en)H2 (1 atm)

N

O

O
OBn

rt, 24 h
MeOHyield 91%

O

Scheme 3 .

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）13

CO2Bn

2.5% Pd/Fib
H2 (1 atm)
rt, 17 h
MeOH

N3

NHCbz

5% Pd/PEI
H2 (1 atm)

CO2 BnH2Nrt, 24 h
MeOH + dioxane

yield 97%

2.5% Pd/Fib
H2 (1 atm)

NHCbz

yield 97%5% Pd/PEI
H2 (1 atm)3

rt, 5 hTHF

3

rt, 24 h
MeOH + dioxane

3yield 100%

yield 92%
CHO

2.5% Pd/Fib
H2 (1 atm)
rt, 27 h
AcOEt

O

O

2.5% Pd/Fib
H2 (1 atm)
rt, 3 hMeOH

5% Pd/PEI
H2 (1 atm)

CHO

HO

OH

O

HO

rt, 24 h
MeOH + dioxane

Oyield 100%

3yield 100%OH

5% Pd/PEI
H2 (1 atm)

OHOH

rt, 24 h
AcOEt + pyridine

yield 100%

yield 96%O

2.5% Pd/Fib
H2 (1 atm)Cl

OCH2CO2H
Cl

rt, 12 h
MeOH

O

Cl

5% Pd/PEI
H2 (1 atm)

CbzHN

OCH 2CO2 H

CbzHNrt, 24 h
MeOH + dioxane

Clyield 93%

yield 100%

Scheme 4 .

Scheme 5 .

ジルアルコールの還元を抑制しながら、とで同一化合物中に複数の官能基を有て問題が残されています。本触媒はさオレフィン、アセチレン、アジド、ニする場合、従来困難であった望みの官

まざまな還元性官能基が同一化合物中トロ基などの官能基を容易に還元する能基だけを変換できる選択的還元反応に存在する芳香族ニトロ化合物においことができます（Scheme 4）7 , 8）。

が可能となります。

て、ニトロ基の選択的部分水素化が可

3）パラジウム−ポリエチレンイミン（Pd/PEI）9）11）

能であるため、芳香族アミン化合物

Os/C はこれまでご説明してきたパを新しい合成ルートで合成できます

4）オスミウム−活性炭素（Os/C）

アルキンからアルケンへの選択的部

ラジウム担持触媒と同様、官能基選択（Scheme 7）。また、この触媒は発火

分水素化は極めて難しい反応です。鉛性を有する活性炭素にオスミウムを担性が少なく、還元性オスミウムのためを触媒毒として用いる Lindlar 触媒が持した触媒です。

昇華性、毒性が少ないのが特長です。

知られていますが、鉛の毒性により環芳香族アミン化合物の合成はこれま

境負荷が高く、一置換アルキンには適で化学量論量の鉄粉を使用し芳香族ニ

当社ではご紹介した触媒を手軽にお用できないという欠点があります 10）。

トロ化合物を還元して合成されてきま

試しいただけるよう「選択的還元触媒

この問題を解決するために、窒素性塩

したが、鉄を除去する煩雑な作業が必セット」として、触媒各 1 g をセット

基を多く含むポリエチレンイミンをパ

要であることなど、工業的製造においにした商品を販売します。このキット

5）最後にラジウムの強い触媒毒かつ担体として調製した Pd/PEI を開発しました。こCH2CO2Hの触媒は PEI によってパラジウムの還HO

5% Pd/C
H2

元活性が抑制されているため、二置換
アルキンからcis -アルケンへの選択的CH2CO2 Bn

5% Pd/C(en)H2rt, 2 hDMAP + THF

BnO

で対応するアルケンを合成することがBnO

rt, 12 h
MeOH

以上、ご紹介してきたパラジウム系
触媒の比較を Scheme 6 1）、Figure 1 5）

14

R-CO2 Bn
R-OBn

ArCOR

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）

olefinPd/PEI
alkyl-N-Cbz

Ar-X

Ar-NO2

Recoveryacetylene
R-N3

yield 99%

Scheme 6 .

aromatic-N-Cbz

Pd/FibepoxidePd/FibH2

Benzyl alcohol

Pd/C(en)

CH2CO2H

yield 94%

可能となります（Scheme 5 9））。

に示しました。各触媒を使い分けるこ

Reducible Functionalities

Pd/C

R-OTBDMS(TES)

部分還元だけでなく、末端にアルキンを有する化合物の場合にも高い選択性

yield 99%

rt, 3 hMeOH

Figure 1 .

Reducible Functionalities
O2N

Os/C
NH2NH2・H2O (excess)R-OBnaromatic-N-Cbz

ArCOR

alkyl-N-Cbz

Ar-X

acetylene

olefinH2Nrt, 60 ℃, 4 h
MeOH

Scheme 7 .

Os/CAr-NO2

Figure 2 .

をご利用いただきターゲットとする化（2000）.;（e）Sajiki, H., Hattori, K. andT. and Hirota, K. : Tetrahedron Lett ., 44 ,合物の最適な還元触媒を見つけて下さ

Hirota, K. : J. Chem. Soc., Perkin Trans ., 1 ,8437（2003）. ;（c）Ikawa, T., Sajiki, H. and

れば幸いです。

4043（1998）.（f）Sajiki, H., Hattori, K. andHirota, K. : Tetrahedron , 61 , 2217（2005）.

Hirota, K. : Chem. Commun. , 1041（1999）.

９）（a）Kitamura, Y., Sako, S., Udzu, T.,
Sakurai, A., Tanaka, A., Kobayashi, Y., Bora,

４）Hattori, K., Sajiki, H. and Hirota, K. :Tetrahedron , 57 , 4817（2001）.

〔参考文献〕
１）大 野 桂 二、 佐 治 木 弘 尚：Wako Organic

U., Kozaki, T., Maegawa, T. and Sajiki, H. :231 st ACS National Meeting, Atlanta, GA,

５）佐治木弘尚 : 平成 18 年前期有機合成化学講

Square , 22 , 1（2008）.
２）（a）佐治木弘尚、廣田耕作 : 有機合成化学協

習会 , 日本薬学会長井記念ホール 6 月 22 日

United States, March 26 - 30 , 2006（2006）. ;107（2006）.

（b）Sajiki, H., Mori, S., Kitamura, Y., Ikawa,

会誌 , 59 , 109（2001）. ;（b）佐治木弘尚、廣６）Maegawa, T., Fujita, Y., Sakurai, A., Akashi,T., Hattori, K., Monguchi, Y. and Maegawa,

田耕作 : Wako Organic Square , 12, 1（2004）.

A., Sato, M., Oono, K. and Sajiki, H. : Chem.

T. : 234 th ACS National Meeting, Boston,

Pharm. Bull ., 55 , 837（2007）.

３）（a）Sajiki, H., Hattori, K. and Hirota, K. : J.

Org. Chem. , 63 , 7990（1998）. ;（b）Hattori,

MA, United States, August 19 - 23 , 2007
（2007）.; Sajiki, H., Ikawa, T. and Hirota, K. :７）（a）井川貴詩、佐治木弘尚、廣田耕作 : 有機

K., Sajiki, H. and Hirota, K. : Tetrahedron ,合成化学協会誌 , 63 , 1218（2005）. ;（b）佐56 , 8433（2000）. ;（c）Sajiki, H., Hattori,

治木弘尚 : 和光純薬時報 , 74 , 2（2006）.

Tetrahedron Lett ., 44 , 8437（2003）.
10）Rylander, P. N. : Hydrogenation Methods ,K. and Hirota, K. : Chem. Eur. J ., 6 , 2200８）（a）Sajiki, H., Ikawa, T., Yamada, H.,

Academic Press , New York（1985）.

（2000）.;（d）Hattori, K., Sajiki, H. andTsubouchi, K. and Hirota, K. : Tetrahedron11）Wako Organic Square , 27 , 7（2008）.

Hirota, K. : Tetrahedron Lett ., 41 , 5711

Lett ., 44, 171（2003）.;（b）Sajiki, H., Ikawa,

P roducts
お求めやすいセット品
選択的還元触媒セット
セット内容● Osmium-Activated Carbon（Os 3.5 〜 6.5%） 1g● Palladium-Activated Carbon Ethylenediamine
Complex（Pd 3.5 〜 6.5%）1g
コード No.
032-21041

品● Palladium-Activated Carbon Ethylenediamine
Complex（Pd 8.5 〜 11.5%）● Palladium-Fibroin● Palladium-Polyethyleneimine

名

Chemoselective Reduction Catalysts Set
内容：Os/C、5％ Pd/C（en）、10%Pd/C（en）、Pd /Fib、Pd/PEI 各 1g

規

格

容

量

有機合成用

1 セット

規

容

1g
1g
1g

希望納入価格（円）19,000

単品製品
コード No.
151-02881
157-02883
163-21441
169-21443
161-21442
167-23301
163-23303
167-22181
163-22183
161-22221
167-22223

品

名格Osmium-Activated Carbon（Os 3.5 〜 6.5%）【略名：Os/C】

有機合成用

Palladium-Activated Carbon Ethylenediamine Complex（Pd 3.5 〜 6.5%）【略名：5％ Pd/C
（en）】

有機合成用

Palladium-Activated Carbon Ethylenediamine Complex（Pd 8.5 〜 11.5%）【略名：10%Pd/C（en）】

有機合成用

Palladium-Fibroin【略名：Pd /Fib】

有機合成用

Palladium-Polyethyleneimine【略名：Pd/PEI】

有機合成用

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）

量

1g
5g
1g
5g
25g
1g
5g
1g
5g
1g
5g

希望納入価格（円）5,000
16,0004,000
13,50046,0005,000
16,0004,500
14,0008,000
26,00015

echnical Report
マウス腸骨リンパ節を用いたモノクローナル抗体の作製
重井医学研究所 免疫部門

モノクローナル抗体の作製は改良が進み以前に比べて容易になった。これ

佐渡義一

法を表１に示している。

は抗原エマルジョンを左右の尾根部筋

使用動物

肉内に１回注射（各 50 μ l）するだけ

は主に尾根部筋肉内に抗原エマルジョ

従来はマウスを用いるのが常識で（図１）で、期間も２から３週間で十分ンを注射し、腫大した腸骨リンパ節をあった。現在ではマウスはもちろんのである。免疫期間が４週間を超えると、用いる方法が開発されたことによる。

ことラットの場合もマウスミエローマ

融合細胞の効率は落ちる。後肢足蹠に

従来法より簡単に、短期間に、高効率と融合することが出来る。その融合細３日ごとに３回抗原エマルジョンを注に抗体を作製できる。しかも動物に優胞はマウス−マウスの融合細胞と変わ射し、約 10 日後に鼠蹊リンパ節を取りしい。

らない安定性、増殖能を示す。また、出し、使用する短期間免疫法も知られウサギのミエローマも開発されており、ている。

モノクローナル抗体は 1975 年にケーウサギ抗体の作製はマウス、ラットの免疫に必要な抗原量は脾臓法ではマラーとミルシュタインにより報告され抗原に対する抗体を作製する場合は有ウス１匹あたり、150μg であり、腸骨て 33 年が経過している。この間に抗体効である。

リンパ節法では 50μg である。抗原は作製に多くの改良がなされている。し使用リンパ臓器

免疫用のほか ELISA 法による陽性ウェ

かし、どのような改良がなされたのか

従来はマウスの脾臓由来の細胞が用ルのスクリーニングにも必要である。

具体的な点を理解している研究者は少いられていたが、リンパ節細胞を用いしたがって抗原量は最低で 500μg 程度

ないと思われる。

た方が効率が良い。陽性ウェルの出現は必要である。
細胞融合の方法

今までの常識では、マウスを用いて、率は 10 倍以上である。特に腸骨リンパマウスの腹腔に抗原のエマルジョンを

節細胞を用いる方法がよい結果を出し

注射し、約１ヶ月後に追加免疫を行い、ている。

細胞融合はポリエチレングリコールを用いる方法が一般的である。それはさらに、細胞融合の３日から４日前に動物から取り出したリンパ臓器はス

今も変わらないが、電気融合法を用い

アジュバントを用いずに抗原だけで最テンレスメッシュを通して遊離細胞にる方法も有用である。この場合はポリ後の免疫を行う。そして、脾臓を取りして、凍結培地を用いて凍結保存がでエチレングリコールを用いる方法の２

出し、マウスの脾臓細胞を用いて、ポきる。この凍結保存により、いつでも倍以上の効率があること、融合操作がリエチレングリコール（PEG）を用い必要なときに細胞融合ができる。また、

簡単で、実験ごとの差が少ない特徴がて細胞融合を行う。融合細胞の培養で細胞を分割して保存すれば何度かの細ある。

はマウスの腹腔由来の細胞をフィー

胞融合ができる。

ダー細胞として使用する、と理解され

免疫方法

目的の抗体を産生している陽性ウェ
ルを予想して融合細胞を 96 穴培養プている。確かに、この方法で抗体を作

従来の脾臓法の場合は最低３回の抗レートに播く。４枚のプレートで目的製できないことはないが、労力が大変

原免疫注射を必要としている。免疫期の抗体を産生している陽性ウェルがであり効率は極めて悪い。

間も最低でも１ヶ月を必要としている。

100 程度出現するように播くとよい。

しかし、腸骨リンパ節を用いる方法で細胞増殖因子を用いた培養

現在のモノクローナル抗体の作製方

融合細胞の培養には現在ではフィー表１．従来の方法と現在の方法の比較

ダー細胞を用いることはない。増殖因

従来の方法（おもに脾臓法）

現在の方法（おもにリンパ節法）

使用動物

マウス

マウス，ラット

使用リンパ臓器脾臓

腸骨リンパ節簡単であり、いつでも必要なときに細抗原注射部位

腹腔

尾根部筋肉内胞融合ができる。

注射抗原量 / マウス

150 μ g50 μ g

免疫回数

３回

１回

最短免疫期間

34 日間

14 日間

感作リンパ球すぐ融合に使用

凍結保存したものを使用

融合方法

PEG 法

PEG 法

子を含むコンディションメディウムを用いる。この方法は培地作製の操作がまたは電気融合法（PEG 法の２倍以上の効率）
培養方法

16

フィーダー細胞使用

培地に増殖因子を添加

陽性ウェル数

10 ウェル程度

100 ウェル程度

高濃度抗体調製

腹水高濃度培養

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）

図１．マウス尾根部筋肉内への抗原エマル
ジョン注射スクリーニング方法
目的の抗体を産生している陽性ウェ
ルは培養上清を ELISA 法でアッセイす脾臓法に比較して少ないためクローニン

作は同じであり、抗原量も同じでよい。

グが容易で、成功の確率が高い。

ラットの場合はリンパ節が大きいので

その他

１匹のリンパ節は数回の細胞融合ができることが多い。

る。凍結切片の染色法、ウエスタンブ

動物愛護の観点からはリンパ節法のロットを用いてのアッセイは ELISA 法

ほうが脾臓法より優れていると考えら

なお、マウス腸骨リンパ節法は日本の後で目的の陽性ウェルを絞り込むのれる。抗原注射が１回でよいこと、尾国特許（特許第 4098796 号）であり、に使用する。

根部注射では潰瘍の発生がないこと、

現在、株式会社アイティーエムがライ

クローニング飼育期間が短いこと、効率がよいためセンスを受けて、受託事業を開始して用いる動物数を減らすことができるかいる。

目的の抗体産生をしているウェルにおいては不要の融合細胞も、目的の細胞らである。

と競合して増殖している。リンパ節細胞

腸骨リンパ節法はマウスばかりではを用いた細胞融合では不要の融合細胞がなくラットにも使用できる。基本的操〔参考文献〕
１）Sado, Y. et al . : Acta Histochem. Cytochem .,39 , 89 - 94（2006）.

P roducts

株式会社アイティーエム

短期間のお試しコースもあります！
抗体作製受託サービス
上記抗体作製技術を使用した受託サービスを株式会社アイティーエムが行っております。
今回、当社は株式会社アイティーエムと提携して、抗体の受託サービスを取扱うこととなりましたので、その内容を紹介します。

※チャレンジコース

受託内容項
目
マウスモノクローナル抗体作製※チャレンジコース
標準コース
ラットモノクローナル抗体作製
腹水化
抗体産生ハイブリドーマの大量培養
リクローニング

希望納入価格（円）98,0001,200,000
1,200,000
照 会
照 会
照 会

抗体産生ハイブリドーマの保護預かり（1 クローン当り）

10,000ウサギポリクローナル抗体作製（2 羽）
その他のポリクローナル抗体作製
抗体精製
抗体の断片化
抗体・抗原の標識
ELISA の構築検討

150,000
照 会
照 会
照 会
照 会
照 会

●マウスモノクローナル抗体作製の際、細胞融合を行う前に必要な抗体が得られる可能性があるかを約 1 か月で確認することができます。
●対象は、免疫するだけの遺伝子組換えタンパク質はない
が、少量の遺伝子組換えタンパク質や発現細胞の準備ができる方、抗体作製が難しいと考えられる抗原をお持ちの方です。
●抗体活性陽性が確認できましたら、ご希望により標準コースへの移行もできます。

※標準コース●抗体産生ハイブリドーマ株を最短８週間で確立することができます。
●ご希望により従来の脾臓を用いた方法でも受託可能です。納期は５ヵ月となります。

今なら、キャンペーン価格でモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体が作製できます。
■モノクローナル抗体
標準コース
通常 1,200,000円■ポリクローナル抗体
標準コース
通常 150,000円→

960,000円→

120,000円

キャンペーン期間：2009年８月受注分まで

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）17

−⑭
薄層クロマトグラフィー用ゴシツ並びにシャゼンシ
慶應義塾大学 薬学部

木内文之

日本薬局方（日局）への医療上重要

われる主として TLC 試験の標準品とたのがシャゼンシです。シャゼンシにな医薬品の全面収載の方針のもとに、される」とし、研究班で「TLC 法のついては、前述のように既に生薬標準

現在、漢方処方エキスの日局への収載

条件設定並びにロット更新時のための品の検討が行われており、改めて行っが進められており、第 15 改正日本薬純度試験を検討すること」としました

た市場品の調査でも日局の規定を満足

局方第２追補には、牛車腎気丸エキ（「平成 10 年度理化学試験用生薬標準するシャゼンシであれば、TLC のパス、真武湯エキス、八味地黄丸エキス。
品研究班」総括研究報告書 1a） より）ターンに大きな差はないことがわかりの３処方エキスが新たに収載される予

このような方針のもとに、生薬標準品

ました。そこで、日局シャゼンシの代定です。これらの処方エキスのうち、を設定する候補として 25 品目が選定

表的な TLC パターンを２種類の溶媒

1b）

牛車腎気丸エキスの確認試験には、化さ れ（ 平 成 11 年 度 ） 、TLC の 条 件系について写真の形で規定し、このパ合物ではなく生薬そのものを TLC のと産地の異なる生薬についての TLC

ターンと同等と認められるパターンを標品として使用する確認試験が採用さ

1c）

パターンの比較を経て（平成 12 年度） 、示す生薬を「理化学試験用標準生薬」

れ、この確認試験に用いる薄層クロマ

生薬標準品「シャゼンシ」が試作されとして利用することとしました。

1d）

トグラフィー用ゴシツ並びにシャゼンました（平成 13 年度） が、日本公

さて、第 15 改正日本薬局方から漢シが、日局に試薬として収載されるこ定書協会の組織改編などもあり、この方処方エキスの収載が開始され、現在とになりました。本稿では、これらの生薬標準品は実用化されていませんでも新規収載に向けた作業が進められて設定の経緯について紹介します。

した。

いますが、エキスの収載にあたって

日本薬局方では、生薬の確認試験とこのような経緯を踏まえ、主に日局

は、処方を構成する生薬についての確して指標成分を TLC や HPLC で検出

における生薬の確認試験に利用する標認試験が必要になります。牛車腎気丸する方法を多くの生薬で採用していま準品としての生薬の実用化を目指し、エキスの日局への収載のための検討のすが、起泡試験や呈色反応といった特平成 18 年度から「理化学試験用標準

中で、構成生薬であるシャゼンシにつ異性の低い方法が未だに 50 程度の生生薬に関する研究」が、厚生労働科学

いては、TLC による確認試験に用い薬で採用されている他、適当な指標成研究費補助金事業として新たに開始さることのできる適当な化合物がなかっ分が見いだせない等の理由から、確認れました。この研究班でまず取り上げたため、上述の「理化学試験用標準生

試験が設定されていない生薬もあり、適切な確認試験法の設定が課題となっています。このような課題を解決する方法の一つとして、生薬自体の標準品を利用して確認試験を行うことが考えられ、「生薬全体の品質を評価する方
法として、（中略）生薬そのものを比較の対象標準とする『理化学試験用生薬標準品』の設定を考案し、日本公定書協会の研究班で標準品の品質規格と試験法並びに標準品の純度試験を検

➡
➡

討する」
（
「平成 11 年度理化学試験用生
薬標準品研究班」総括研究報告書 1b）より）こととなり、平成 10 年度から生薬標準品に関する検討が佐竹等によって開始されました１）。この研究では、
生薬標準品の意義を、「理化学試験用
生薬標準品は生薬の品質確保を目的と

１．牛車腎気丸エキス中のシャゼンシの確認する日本公定書協会標準品で、従来の展開溶媒：アセトン／酢酸エチル／水／酢
酸（10：10：3：1）
A：薄層クロマトグラフィー用シャゼンシ
B：牛車腎気丸エキス
C：牛車腎気丸エキス（去シャゼンシ）１成分を指標とする確認試験法、定量試験法に加えて多成分分析法により判別するものである。用途として、生薬の輸入、輸出、製造、販売等の際に行

18

A B C

A

B

２．牛車腎気丸エキス中のゴシツの確認
展開溶媒：1 - プロパノール／酢酸エチル／
水（4：4：3）
A：薄層クロマトグラフィー用ゴシツ
B：牛車腎気丸エキス
C：牛車腎気丸エキス（去ゴシツ）

写真．TLC 用ゴシツ、シャゼンシを用いた牛車腎気丸エキスの確認試験

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）

C

−⑭薬」を TLC による確認試験に利用す

して、これらを包括的に表現するとと〔参考文献〕

ることになりました。また、同じく牛もに、スポットの色の表現には JIS 色

１）a）医薬品研究，31（11）, 836（2000）．；b）医車腎気丸の構成生薬であるゴシツの確名帳

２）の色名を採用しました。なお、

薬品研究，31（11）, 837 - 841（2000）．；c）医薬 品 研 究，35（9）, 461 - 465（2004）．；d）医認試験についても、同様な理由から

TLC のパターンを言葉のみで表現す「標準生薬」を利用することになり、ることには限界があることから、理化

上述の研究班で TLC の標品としての学試験用標準生薬の研究班で作成した色名帳

ゴシツの規格の検討が行われました。

規格の TLC 写真が参考として JPTI

（日本規格協会）．

ゴ シ ツ の 市 場 品 に つ い て TLC パ

薬品研究，35（9）,466 - 468（2004）.
２）日本規格協会 JIS 色名帳委員会（監修）：「JIS
第２版（JIS Z 8012：2001 準拠）」，に掲載される予定です。

ターンを調べたところ、かなりパター

TLC 用シャゼンシは全形生薬としンの異なるものが見られたことから、て供給されますが、TLC 用ゴシツはゴシツについてはシャゼンシのよう

粉末生薬として供給されます。TLCに市場品の生薬を利用するのではな

用ゴシツについては、高温で長期保く、標準生薬用に加工した材料を用い存 す る と 粉 末 の 色 が 徐 々 に 変 化 し、る必要があると考えられました。そこ

TLC のパターンにも変化が見られるで、（独）医薬基盤研究所（基盤研）

ことがわかっていますが、この TLC

薬用植物資源研究センターで栽培さのパターンの変化は、牛車腎気丸エキれたヒナタイノコズチ（Achyranthes

スの確認試験に利用するスポットが濃fauriei Leveill et Vanito） を 加 工 しくなる方向に進むため、多少の変色がて用いることにし、その加工法を規定あっても確認試験の実施には支障はあするとともに規格となる TLC パター

りません。

ンの写真を作成しました。当初「理化学試験用標準生薬」は、基盤研が「標準品」として供給する方向で検討が進んでいましたが、最終的には日局に試薬として収載されることになりました。これに伴い、写真を用いて規定していた TLC パターンを言葉で表現して日局の規定とすることになり、複数の機関で実施した TLC の結果を参照

生薬試験用
ゴシツ
シャゼンシ
本品は薄層クロマトグラフィー用の生薬、ゴシツ、シャゼンシです。
本試薬の規格は日本薬局方フォーラム 17（4），685 - 686 に記載されています。
ご参照下さい。

コードNo.

品

名
（和名）

規

格

容

量

希望納入価格（円）015-22271

Achyranthes Root（ゴシツ）

生薬試験用

5g

2,000

166-23751

Plantago Seed（シャゼンシ）

生薬試験用

10g

2,000

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）19

ew Products
塩基性化合物の分離に！

関連商品

NH2 シリカゲル 60F254 プレート - ワコー

薄層クロマトグラフ用
コード No.

NH2 シリカゲル 60F254 プレート - ワコーは、アミノプロ
ピル基を修飾したシリカゲルをガラスプレートに塗布した

品

名

規

164- 08531 Polyamide FM Plate

格サイズ

薄層クロマトグラフ用

193- 08381

容量 希望納入価格（円）5×10ｃｍ 10 枚

6,000

5×10ｃｍ 10 枚2,700

薄層クロマトグラフ用のプレートです。緑色の蛍光物質が197- 08384 Silicagel 70 Plate-Wako

添 加 さ れ て お り、 分 離 さ れ た ス ポ ッ ト を 紫 外 線（λ199- 08383

20×20ｃｍ 25 枚 15,000=254nm）の照射により、緑色地に暗いスポットとして観190- 08391

5×10ｃｍ 10 枚

察できます。

194- 08394 Silicagel 70 FM Plate-Wako 薄層クロマトグラフ用

5×20ｃｍ 100 枚 22,500

196- 08393

20×20ｃｍ 25 枚 17,200

193- 08401

5×10ｃｍ 10 枚

193- 08406

5×10ｃｍ 200 枚 23,100

分離条件の検討などに適した層厚 0.25mm、分取に適した層厚 0.5mm、0.75mm の商品を発売しました。

197- 08404

分 析 例■ ヌクレオシド類の分離
試料 : チミジン、アデノシン、シチジンeach 10mg/mℓ（2μℓ）
展開溶媒 : Acetonitrile/Methanol/Water= 80 /10 /10（V/V/V）
サンプル名

層厚 0.25mm

薄層クロマトグラフ用

5×20ｃｍ 100 枚 21,000

Silicagel 70 F 254 Plate-Wako 薄層クロマトグラフ用

2,800

5×20ｃｍ 100 枚 21,000
20×20ｃｍ 25 枚 13,200

199- 08403
195- 12871

3,000

Silicagel 70 PF 254 PlateWako（層厚 0 . 75 mm）®

233- 00533 Wakogel FM Plate

薄層クロマトグラフ用 20×20ｃｍ 10 枚 15,000
薄層クロマトグラフ用 20×20ｃｍ 20 枚 15,500

層厚 0.5mm

展開距離

Rf 値

展開距離

Rf 値

分取用カラムthymidine

40 mm

0.36

40 mm

0.38

コード No.

adenosine

31 mm

0.28

31 mm

0.27

cytidine

15 mm

0.13

14 mm

0.12

Presep® Polyamide C- 200 Type M
296- 64901（2g/ 25mℓ）(front)

112 mm‒

113 mm‒297- 44151
293- 44153■ 色素類の分離
試料：アシッドレッド 52 4 mg

293- 44251

ブリリアントブルー FCF 2 mg

299- 44253

エオシン Y 4 mg

292- 62801
298- 62803

ニューコクシン 2 mg

297- 33421

in メタノール 1 mℓ

293- 33423

展開溶媒：LiCl/Methanol= 1/ 100（W/V）

294- 33431

層厚：0.25 mm

290- 33433

品

名

規

格

容量

希望納入価格（円）

試料前処理用 10 個×5

40,00010 個×220,00010 個×10照 会

10 個×225,000Presep® Silica Gel Type M

試料前処理用

Presep® Silica Gel Type L

試料前処理用

Presep® Silica Gel Type ３L

試料前処理用

Presep® NH 2 Type M（14g/ 25mℓ） 試料前処理用
Presep® NH 2 Type L（34 g/ 70 mℓ） 試料前処理用

10 個×10照 会

5個

22,000

30 個

照 会

20 本

近日発売

100 本

近日発売

20 本

近日発売

100 本

近日発売

カビ毒の分析に！
マイコトキシン標準品
サンプル名

1μℓ

2μℓ

展開距離

Rf 値

展開距離

Rf 値

食の安全・安心が問われている現在、食料の約６割を諸acid red 52

68 mm

0.61

68 mm

0.61

外国に依存している日本にとって、輸入食品のマイコトキ

brilliant blue FCF

60 mm

0.54

60 mm

0.54

シン（カビ毒）汚染は深刻な問題となっています。

eosin Y

46 mm

0.41

47 mm

0.42

new coccine

24 mm

0.22

24 mm

0.23

(front)

111 mm‒

111 mm‒

コード No.

品

格

容量 希望納入価格（円）

名規

NH 2 Silica Gel 60F254 Plate-Wako
143- 08641
薄層クロマトグラフ用 100 枚（層厚 0. 25mm）（6. 6cm× 2. 5cm）

20,000NH 2 Silica Gel 60F254 Plate-Wako
146- 08631
薄層クロマトグラフ用 25 枚
（層厚 0 . 25 mm）（20 cm× 20 cm）

39,000NH 2 Silica Gel 60F254 Plate-Wako
149- 08621
薄層クロマトグラフ用 10 枚
（層厚 0 . 5 mm）（20 cm× 20 cm）
NH 2 Silica Gel 60F254 Plate-Wako
145- 08721
薄層クロマトグラフ用 10 枚
（層厚 0 . 75 mm）（20 cm× 20 cm）

20

35,00058,000

この度、トリコテセン系マイコトキシンを中心に標準品を品揃えしました。残留分析の標準品としてご利用下さい。
コード No.

品

名

規

格

容量 希望納入価格（円）3 -Acetyldeoxynivalenol
014- 22621
Standard

マイコトキシン試験用

5mg

90,000047- 31041 Deoxynivalenol Standard

マイコトキシン試験用

5mg

90,000044- 31051 Diacetoxyscirpenol Standard マイコトキシン試験用

5mg

30,000065- 05431 Fusarenon-X Standard

マイコトキシン試験用

5mg

130,000

149- 08741 Nivalenol n -Hydrate Standard マイコトキシン試験用

5mg

90,000204- 17731 T- 2 Toxin Standard

マイコトキシン試験用

5mg

45,000153- 02961 Ochratoxin A Standard

マイコトキシン試験用

5mg

近日発売

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）ew Products＜HPLC Conditions＞
Column ： Wakosil 5NH2 4.6mmφ×150mm
Eluent： CH3CN：H2O=80 : 20
Flow rate ： 0.9 mℓ/min
Detection ： UV 210nm
Temp. 40℃
Injection vol.： 0.5mg/mℓ soln. 20μℓ

食品添加物標準品類
ステビア抽出物定量用標準品
ステビアは南アメリカ原産のキク科の植物です。ステビ
アにはステビオシド、レバウジオシド A などのステビオー
ル配糖体類が含まれています。ステビア抽出物は甘味料と■ ステビオシド標準品

して第八版食品添加物公定書にも収載され、世界中で使わ起源：Stevia rebaudiana

HO

Bertoni

れています。当社製品は高純度の分析用標準品です。より

O

O
OH

■ イソステビオール標準品
起源：Stevia rebaudiana Bertoni
CAS No.：27975 - 19 - 5

HO

C20H30O3 = 318.45＜HPLC Conditions＞
Column ：Wakosil-Ⅱ 5C18HG
4.6mm I.D.×150mm
Eluent：0.1vol% phosphoric acid soln. :MeOH=25 : 75
Flow rate ：1.0 mℓ/min
Detection ：UV 210nm
Temp. 40℃
Injection vol.：5mg/mℓ soln. 10μℓ

■ レバウジオシドA 標準品

HO

コード No.

OH

HOO

Bertoni

H

O

OH

H O

HO

O

HO

CAS No.：58543 - 16 - 1

O
CH3

H

O

O

HO

OH

O HO

OH
CH2

品

名

規

格

容量 希望納入価格（円）

ステビオシド定量用

1g23,000183- 02361 Rebaudioside A Standard ステビオシド定量用

1g22,000193- 15351 Stevioside Standard

1g

19,000

ステビオシド定量用関連商品
コード No.

HCH3O

C44H70O23 = 967.01

OH

O

C38H60O18 = 804.87

OH

H
HO

O

H

＜HPLC Conditions＞
Column ： Wakosil 5NH2 4.6mmφ×150mm
Eluent： CH3CN：H2O=80 : 20
Flow rate ： 1.2 mℓ/min
Detection ： UV 210nm： Temp. 40℃
Injection vol.： 0.5mg/mℓ soln. 10μℓ

098- 05681 Isosteviol StandardOH

起源：Stevia rebaudiana

H 3C

OH

H
CH3

HOOC

CH2

H
O

H

H
O

HO

O

CH3

O

CH3

HO
CH3

OH

H

HO

CAS No.：57817 - 89 - 7

精度の高い定量用用途にお使い頂けます。

OH
HO

HO

品

名

規

格

容量 希望納入価格（円）187- 02401 Rebaudioside B Standard ステビオシド定量用 100mg

11,000194- 15401 Steviol Standard

ステビオシド定量用 100mg

11,000193- 15471 Steviolbioside Standard

ステビオシド定量用 100mg

10,000

農薬混合液に関するご案内
ご好評頂いております下記の FA シリーズ、水質関連の農薬混合液を、使用期限を設定した混合標準液へリニューアルします。
今後とも、当社製品をご愛顧賜りますようよろしくお願い申し上げます。

［混合標準液対比表］
FA シリーズ
平成 20 年３月７日厚生労働省事務連絡「食品中に残留する有機リン系農薬に係る試験法について」において、分析対象となった
農薬の混合標準液です。
現
コード No.

行

商品名

混合標準液
容量

コード No.

商品名

容量

規格

希望納入価格（円）

成分変更

有機りん農薬混合液 FA- 1- 1
152 - 02791（各 20μg/mℓ）

1mℓ

有機りん農薬混合標準液 FA- 1
152- 02931（各 20μg/mℓ）

1mℓ

残留農薬
試験用

15,000成分変更はございません。

155 - 02801

有機りん農薬混合液 FA- 2- 1
（各 20μg/mℓ）

1mℓ

159- 02941

有機りん農薬混合標準液 FA- 2（各 20μg/mℓ）

1mℓ

残留農薬
試験用

15,000成分変更はございません。

152 - 02811

有機りん農薬混合液 FA- 3- 1
（各 20μg/mℓアセトン溶液）

1mℓ

156- 02951

有機りん農薬混合標準液 FA- 3（各 20μg/mℓアセトン溶液）

1mℓ

残留農薬
試験用

12,000成分変更はございません。

容量

コード No.

商品名

水 質
現
コード No.

行

商品名

混合標準液
希望納入価格（円）成分変更

15 種農薬混合液 水質 - 2- 1
163 - 23261
1mℓ×5A（各 20μg/mℓアセトン溶液）

15 種農薬混合標準品液 水質 - 2
残留農薬
163- 23881
1mℓ×5A（各 20μg/mℓアセトン溶液）
試験用30,000成分変更はございません。

28 種農薬混合液 水質 - 3- 1
160 - 23271
1mℓ×5A（各 20μg/mℓアセトニトリル溶液）

28 種農薬混合標準品液 水質 - 3
残留農薬160- 23891
1mℓ×5A（各 20μg/mℓアセトニトリル溶液）
試験用

35,000成分変更はございません。

容量

規格

上記以外の混合標準液につきましては、別途お問合せ下さい。

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）21

ew Products
コード No.

鈴木−宮浦カップリング反応に最適

品

名

規

格

容量 希望納入価格（円）

近日発売

134-16061 （4-Methylphenyl）cyclic-triolborate130-16063 Potassium Salt

有機合成用

1g
5g

5,500
18,000近日発売

163-23761 （2-Pyridine）cyclic-triolborate
169-23763 Lithium Salt

有機合成用

1g
5g

照 会
照 会

近日
発売

167-23781 （4-Pyridine）cyclic-triolborate
163-23783 Sodium Salt

有機合成用

1g
5g

8,000
28,000ている反応のひとつです。
鈴木̶宮浦カップリング反応は、一般に塩基を加えて行

021-16321 （2-Biphenyl）cyclic-triolborate
027-16323 Potassium Salt

有機合成用

1g
5g

8,000
28,000

われますが、多くのボロン酸は脱水三量化し環状無水物と041-30841 （3,4-Diﬂuorophenyl）cyclic-triolborate
有機合成用
047-30843 Potassium Salt

1g
5g

4,000
12,000近日発売

201-17481 （3,4,5-Triﬂuorophenyl）cyclic-triolborate
有機合成用
207-17483 Potassium Salt

1g
5g

11,00040,000

近日発売

068-05301 （4-Formylphenyl）cyclic-triolborate064-05303 Sodium Salt

1g
5g

6,000
21,000有機環状トリオールボレート塩
アリールボロン酸とハロゲン化アリールから遷移金属を触媒に用いてビアリール化合物を合成する鈴木̶宮浦カッ
プリング反応は、非常に有用性が高く、近年最も利用されなるため、水の共存下に反応が行われることも少なくありません。しかしながらボロン酸の中には塩基性水溶液中で加水分解するものもあり、しばしば大過剰のボロン酸が必
要となります。
有機環状トリオールボレート塩は、宮浦らが開発した

有機合成用

アート型錯体構造のボレート試薬であり、パラジウム触媒

新規合成用素材に！新たな生理活性の発見に！

によるクロスカップリング反応において塩基の添加は必要

希少糖

なく、水系、非水系の両者で使用可能です。また、銅触媒

希少糖のラインアップが充実しました。

を用いるN - アリール化反応にも有用です。

希少糖の生理活性作用は未知の部分が多く、医薬、機能性食品、化粧品など、人体への応用や動物や昆虫、微生

反 応 例

物、植物へ応用できる可能性があります。

■トリオールボレート塩のビアリールカップリング反応

また、不斉をもつ素材として合成研究での利用も期待されております。幅広い分野の研究でご活用下さい。
含量（HPLC）：98 . 0％以上
コード No.

品

名

規

格

容量 希望納入価格（円）

ケトース■２- ピリジントリオールボレート塩のカップリング反応

165-23841 D（＋）-Psicose
161-23843 ［CAS No.551-68-8］

生化学用

1g
5g

9,000
32,000163-23901
L-Psicose
169-23903［CAS No.16354-64-6］
167-23904

生化学用

100mg
1g
5g

5,000
15,00058,000195-15291 D（＋）-Sorbose
191-15293 ［CAS No.3615-56-3］

生化学用

1g
5g

15,00063,000

191-03762
L（−）-Sorbose
193-03761［CAS No.87-79-6］
195-03765

和光特級

25g
100g
500g

3,800
10,00030,000208-17511 D（−）-Tagatose
204-17513 ［CAS No.87-81-0］

生化学用

250mg
1g

5,500
12,000209-17541 L（＋）-Tagatose
205-17543 ［CAS No.17598-82-2］

生化学用

250mg
1g

9,000
25,000017-22591 D（＋）-Allose013-22593 ［CAS No.2595-97-3］

生化学用

250mg
1g

11,00032,000012-22421 D（＋）-Altrose
018-22423 ［CAS No.1990-29-0］

生化学用

250mg
1g

11,00032,000078-05581 L（−）-Galactose
074-05583 ［CAS No.15572-79-9］

生化学用

250mg
1g

11,00032,000200-17711 D（＋）-Talose206-17713 ［CAS No.2595-98-4］

生化学用

250mg
1g

11,00032,000L（−）-Talose［CAS No.23567-25-1］

生化学用

100mg

30,000アルドース〔参考文献〕
１）Yamamoto, Y., Takizawa, M., Yu, X. and Miyaura, N.：Angew. Chem.

Int. Ed ., 47 , 928（2008）.
２）山本靖典、宮浦憲夫：和光純薬時報，76（2），2（2008）.

22

207-17721

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）ew Products■ アナンダミド エタノール溶液（約 5 mg/mℓ）

神経系シグナル伝達研究に！

本品は、アナンダミドのエタノール溶液です。アナンダ

カンナビノイドレセプター作用物質

ミドはアラキドン酸誘導体であり、内因性のカンナビノイ

カンナビノイドレセプターは、７回膜貫通型の G タンパ

ドレセプター、バニロイドレセプターのリガンドです。

ク質（Gi/Go）共役型 CB1、CB 2 レセプターに分類されており、食欲、記憶・学習、痛覚、免疫・炎症に関与している

純度（HPLC）：95 . 0％以上と考えられています。主に、CB1 レセプターは中枢及び末CAS No.：94421 - 68 - 8

梢神経系に発現し、神経伝達の抑制的制御に関与している
C22H37NO2 = 347.53と考えられており、CB 2 レセプターは脾臓や扁桃腺などの免疫系臓器や末梢神経系に発現し、炎症・免疫応答の調節■（−）-CP- 55 , 940
カンナビノイドレセプターの強力な非選択的アゴニストに関与していると考えられています。

です。

当社でラインアップしているカンナビノイドレセプター
作用物質に新製品が加わりました。

含量（HPLC）：97 . 0 %（初回実績値）■ AM 251
CB 1 レセプターの強力なアンタゴニスト / インバースア

エタノール溶状：試験適合

ゴニストとして作用します（K i= 7 . 5 nmol/ℓ）。カンナビ

CAS No.：83002 - 04 - 4

ノイドレセプターアンタゴニスト SR141716A のアナログ

C24H40O3 = 376.57

です。

■ JWH015
CB 2 カンナビノイドレセプターの選択的アゴニストで含量（HPLC）：97 . 0％以上す。

エタノール溶状：試験適合
CAS No.：183232 - 66 - 8

含量（HPLC）：97 . 0 % 以上
エタノール溶状：試験適合
CAS No.：155471 - 08 - 2

C22H21Cl2IN4O = 555.24■ AM 281
CB 1 レセプターの強力なアンタゴニスト / インバースア

C23H21NO = 327.42

ゴニストとして作用します（K i= 14 nmol/ℓ）。カンナビノ
イドレセプターアンタゴニスト SR141716A のアナログで
コード No.

す。

品

名

規

格

019-22171

含量（HPLC）：97 . 0％以上

015-22173 AM251

メタノール溶状：試験適合8,300

細胞生物学用 10mg

25,00050mg

98,000

2mg

8,500

10mg

34,000

2mg

9,500

10mg

38,0001mℓ14,5005mℓ58,0002mg

11,00010mg

44,0005mg

15,50025mg

59,000012-22161
AM281

C21H19Cl2IN4O2 = 557.21■ AM630
CB 2 レセプターのインバースアゴニストです。
（K i= 31. 2

019-22551
AM630

NEW

nmol/ℓ）

012-22183（初回実績値）

細胞生物学用

015-22553
016-22181

含量（HPLC）：92 . 4％

細胞生物学用

018-22163
NEW

Anandamide Ethanol Solution(abt. 5mg/mℓ)

細胞生物学用( − )-CP-55,940

細胞生物学用

038-20781

ジメチルスルホキシド溶状：

034-20783

試験適合102-00111

CAS No.：164178 - 33 - 0

JWH015
C23H25IN2O3 = 504.36

108-00113

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）

量 希望納入価格（円）2mg013-22174

CAS No.：202463 - 68 - 1

容細胞生物学用23

ew Products
コード No.

フィーダー細胞作製に
マイトマイシン C 溶液
NEW

鎖切断により DNA 複製を阻害し、細胞の増殖能を停止させます。この作用を利用し、フィーダー細胞作製に使用さ

NEW

れます。

長

規

格

容量

希望納入価格（円）細胞培養用 500mℓ

1,200

048-29805 10×D-PBS（−）

細胞培養用 500mℓ

2,300

※1
166-23555 PBS（−）

細胞培養用 500mℓ

1,600

084-08345 HBSS（−）with Phenol Red

細胞培養用 500mℓ

1,200

084-08965 HBSS（＋）without Phenol Red 細胞培養用 500mℓ

1,600

※1

D-PBS（−）は Dulbecco 処方 PBS（−）のため KCl を含んでいますが、PBS（−）は KCl を含んでいません。

接着細胞の剥離、細胞分散に●ろ過滅菌済みのためそのまま使用可能

トリプシン EDTA 溶液●凍結しないのですぐに使用可能（本品は 10v/v% エタノール、90v/v% エチレングリコー

本品はろ過滅菌済みのトリプシン EDTA 溶液です。接ル溶液です）

着細胞の剥離、細胞の分散にご使用下さい。

コード No.
近日
発売

名

※1

マイトマイシン C は抗腫瘍性抗生物質の一種で、DNA

特

品

※1
045-29795 D-PBS
（−）

品

名

規

格

133-15931 1mg/mℓ Mitomycin C Solution 細胞培養用

容量 希望納入価格（円）
1mℓ

品質試験

10,000

無菌試験、エンドトキシン試験、マイコプラズマ試験、実※ 推奨使用濃度は 10μg/mℓです。

用試験、ウイルス試験※ 2 など

関連商品

※２ ブタパルボウイルス試験済みのトリプシン（1：250）を使用しています。

コード No.

品

名規134-07911 Mitomycin C

格

生化学用

容量 希望納入価格（円）10mg

コード No.

6,800

抗生物質溶液他にも下記の抗生物質の溶液タイプをラインアップして
います。
NEW

活性の対象

コード No.

076-05381
072-05383
NEW

NEW

品

名

G-418 Sulfate Solution

希望納入
ラ ム グ ラ ム 酵母 カビ マイコプ価格（円） グ陽性菌
陰性菌
ラズマ
NEW

20mℓ 20,000
●

●

●

●

●

●

●

●

●

●

10mℓ 8,000

084-07681 50mg/mℓ Hygromycin B

20mℓ 15,000

080-07683 Solution

100mℓ 60,000

112-00771 50mg/mℓ Kanamycin Solution

20mℓ 5,000
100mℓ 4,600

●

●

●

●

規

格

EDTA・4Na Solution with Phenol 細胞培養用
204-16935 Red
209-16941 0.25w/v% Trypsin-1mmol/ℓ
EDTA・4Na Solution with Phenol 細胞培養用
201-16945 Red
0.5w/v% Trypsin-5.3mmol/ℓ
細胞培養用
208-17251 EDTA・4Na Solution without
Phenol Red (×10)
0.5w/v% Trypsin-5.3mmol/ℓ
206-17291 EDTA・4Na Solution with Phenol 細胞培養用
Red (×10)

容量

希望納入価格（円）

100mℓ

1,800

500mℓ

6,800

100mℓ

1,800

500mℓ

6,800

100mℓ

4,200

100mℓ

4,200

液体培地の成分補充に●培地添加溶液各種培地成分の濃縮溶液です。ろ過滅菌済みのためその●●まま適量を添加して下さい。

●

品質試験

168-23191

Penicillin-Streptomycin
Solution（×100）

100mℓ 3,500●●

161-23201

Penicillin-Streptomycin-L100mℓ 4,000
Glutamine Solution（×100）●●

無菌試験、エンドトキシン試験、マイコプラズマ試験 など
コード No.

品

名

規

格

200mmol/ℓ L-Alanyl-L-Glutamine
細胞培養用
Solution（×100）
30w/v% Albumin Solution, from
細胞培養用
017-22231
Bovine Serum, Fatty Acid Free
L
200mmol/ℓ -Glutamine Solution
細胞培養用
073-05391（×100）

016-21841

細胞の洗浄や希釈に

NEW

平衡塩溶液
細胞内外の浸透圧を維持しながら、細胞の洗浄や希釈を行う際にご使用下さい。

品質試験
無菌試験、エンドトキシン試験、マイコプラズマ 試験 など

24

名

100mℓ 85,000

072-05481 50mg/mℓ Gentamicin Solution

Penicillin-Streptomycin161-23181 Amphotericin B Suspension（×100）

NEW

容量品

202-16931 0.05w/v% Trypsin-0.53mmol/ℓ

和光純薬時報NEW079-05511 45w/v% D（+）-Glucose Solution

細胞培養用

MEM Essential Amino Acids
細胞培養用
132-15641
Solution（×50）
MEM Non-essential Amino
細胞培養用
139-15651
Acids Solution（×100）
100mmol/ℓ Sodium Pyruvate
細胞培養用
190-14881
Solution（×100）

Vol.77, No.3（2009）

容量

希望納入価格（円）

100mℓ

6,500

50mℓ 28,500
100mℓ

3,000

100mℓ

3,500

100mℓ

3,000

100mℓ

2,800

100mℓ

1,800

ew Products
特培地添加用窒素源

長●安価

ラクトアルブミン加水分解物

700 円 / テストと現在市販されているキットの中で最も

NZ アミン ®

安価。（※ 2009 年６月現在）

NZ ケイス ®

●簡単
増菌培養液をテストプレートに滴下するだけの簡単操■ ラクトアルブミン加水分解物
本品はラクトアルブミンの加水分解物であり、可溶性が高い窒素源となるため、細胞培養用培地に添加されます。

作。赤紫色のラインを確認するだけの容易な判定。
●迅速判定

また、実験動物飼料にも高脂肪栄養分として添加されま試料溶液をテストプレートに滴下後、わずか 15 分で結果す。

が得られるため、培養法に比べ、検査時間の短縮が可能。
®

■ NZ アミン 、NZ ケイス®

NZ アミン ®、NZ ケイス ® はカゼインを酵素により加水使用方法

増菌培養後の操作®

分解して得られた高品質の窒素源です。NZ アミン は大腸菌をはじめとする微生物培養培地、抗生物質、毒素、酵
素生産用培地などの窒素源として、NZ ケイス ® は無菌試
験用、TGC 培地用などの窒素源として使用されます。NZ
アミン ® は、NZ ケイス ® と比較して酵素による消化度がStep 1：テストプレートをアルミパウチ袋に入れたまま室温に戻した後、必要量を取り出す。
Step 2：吸収パッドに油性ペンなどを用いて、検体名もしくは検体番号を記入。
Step 3：試料滴下部へ試料溶液（培養液）を添加。
使用例２：試料溶液を分注した試験管へ
テストプレートを挿入

使用例１：試料滴下部へ試料溶液を滴下高いので、含まれるアミノ酸量は多くなります。
コード No.

品

名

規

格

容量 希望納入価格（円）NEW

127-05705

Lactalbumin Hydrolysate

細胞培養用

500g

17,500NEW

146-08675

NZ Amine®

細胞培養用

500g

12,500

細胞培養用

500g

19,000NEW

143-08685®

NZ Case

試料溶液100μℓを滴下
試料溶液150μℓを分注

Step 4：テストプレートを静置し、15分後に判定。

大好評 NH イムノクロマトシリーズ新製品！！

結果判定

NHイムノクロマト カンピロバクター
現 在、 カ ン ピ ロ バ ク タ ー 属 17 菌 種 の 中 で、C. jejuni

展開部上に現れる赤紫色のラインの本数により判定。

及び C. coli の 2 菌種が食中毒菌に指定されています。C.
①陽性

jejuni が食中毒の大部分を占め、一部C. coli による食中毒も認められています。日本におけるカンピロバクターによ②陰性る食中毒の発生件数は平成 19 年で最多となっており、食品衛生上大きな問題となっています。
本キットはイムノクロマト法を用いた食品中のC. jejuni※C. lari 及びC. upsaliensis は、C. jejuni 、C. coli と同一抗原を保有しているため、交差反応性を示します。
※キット使用前に増菌培養操作が必要になります。

及びC. coli を検出するキットです。

コード No.
301-83141

品

名NH Immunochromato
Campylobacter

容量

希望納入価格（円）20 回用

14,000容量

希望納入価格（円）関連商品

和光純薬時報コード No.

品

304-31361

NH Immnochromato O157

名

20 回用

10,000304-34421

NH Immnochromato O26

20 回用

10,000301-34431

NH Immnochromato O111

20 回用

10,000300-31581

NH Immnochromato Listeria

20 回用

14,000303-31691

NH Immnochromato Salmonella

20 回用

10,000Vol.77, No.3（2009）25

ew Products
コード No.

安価なウエスタン用抗GFP抗体
抗緑色蛍光タンパク質，モノクローナル抗体（mFX75）
オワンクラゲ Aequorea victoria 由来の green ﬂuorescentprotein（GFP）は､ 目的タンパク質の局在や細胞､ オルガ
ネラの挙動をリアルタイムに検出できるマーカータンパク
質で､ 幅広い分野で使用されています｡
本品は､ 特にウエスタンブロッティング用に開発された
抗 GFP モノクローナル抗体です｡
クローン No.：mFX 75
サ ブ ク ラ ス：マウス IgG 2 a･ κ
濃度：ラベルに表示（約 1 μg/ μℓ）

実用希釈倍率：1：500 〜 1：1 , 000

デ ー タ
分子量（k）
250
150
100

和光

S社

N社

C １ ２

C １ ２

C １ ２

C

：HepG2 cell Lysate（5×104cells）
Lane 1：HepG2 cell Lysate（5×104cells）
非特異
タンパク質
+ rGFP 1ng
GFP
Lane 2：HepG2 cell Lysate（5×104cells）+ rGFP 10ng

75
50
37

25
20
15

品

名

規 格

容 量 希望納入価格（円）Growth Factor, Human, recombinant, 細胞生物学用 500μg
053-07871 Epidermal
Animal-derived-free 【EGF】
Growth Factor (acidic), Human,
067-05371 Fibroblastrecombinant, Animal-derived-free 【aFGF/FGF1】 細胞生物学用 50μg
Growth Factor (basic), Human,
064-05381 Fibroblastrecombinant, Animal-derived-free 【bFGF/FGF2】 細胞生物学用 50μg
Ligand, Human, recombinant, Animal061-05391 Flt3
細胞生物学用 10μg
derived-free【Flt3 Ligand】
Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor, Human, 細胞生物学用 10μg
近日
発売 078-05601
recombinant, Animal-derived-free 【GM-CSF】
Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor, Mouse, 細胞生物学用 10μg
近日
発売 079-05631
recombinant, Animal-derived-free 【GM-CSF】
Heregulin-β-1, Human, recombinant, Animal- 細胞生物学用 50μg
近日
発売 080-09001
derived-free 【HRG1】
Insulin-like Growth Factor-I, Human,
近日細胞生物学用 100μg
発売 096-05741
recombinant, Animal-derived-free 【IGF-I】
Interleukin-2, Human, recombinant, Animal近日細胞生物学用 50μg
発売 093-05751
derived-free 【IL-2】
Interleukin-3, Human, recombinant, Animal近日細胞生物学用 10μg
発売 090-05761
derived-free 【IL-3】
Interleukin-4,
Human,
recombinant,Animal近日細胞生物学用 10μg
発売 099-05731
derived-free 【IL-4】
Keratinocyte
GrowthFactor,Human,
116-00811 recombinant, Animal-derived-free 【KGF】
細胞生物学用 10μg
Colony-Stimulating Factor, Human,
138-16101 Macrophage
細胞生物学用 10μg
recombinant, Animal-derived-free 【M-CSF】
Stem Cell Factor, Human, recombinant,
近日細胞生物学用 10μg
発売 197-15511
Animal-derived-free 【SCF】
Thrombopoietin,
Human,
recombinant,Animal近日細胞生物学用 10μg
発売 207-17581 derived-free 【TPO】
Thrombopoietin,
Rat,
recombinant,Animal近日細胞生物学用 10μg
発売 204-17591 derived-free【TPO】
Vascular Endothelial Growth Factor-A165, Human,
近日細胞生物学用 10μg
発売 226-01781 recombinant, Animal-derived-free 【VEGF-A 】
165

39,00039,00039,00039,00039,00039,00039,00039,00039,00039,00039,00039,00039,00039,00039,00039,00039,00010

HepG2 細胞ライセートに 1ng または 10ng GFP 組換えタンパク質を添加したサンプルを SDS-PAGE 後､ PVDF 膜に転写し、X
線フィルムで発光検出した。露光時間：３分。
一次抗体に各社モノクローナル抗体を終濃度 1μg/mℓで使用した｡
コード No.
NEW品

名

容 量 希望納入価格（円）Anti Green Fluorescent Protein, Monoclonal012-22541
Antibody（mFX75）

100μℓ30,000品

名012-20461 Anti Green Fluorescent Protein,018-20463 Monoclonal Antibody㈱ビオスタではダニのアレルゲン物質をラ
インアップしています。また、下記アレルゲンも製造できますのでお問合せ下さい。
●ヒノキなど植物由来アレルゲン●ミルクなど動物由来アレルゲン※精製法についてもご相談下さい。

容 量

希望納入価格（円）100μℓ
100μℓ×5

30,000120,000

アニマルフリー
サイトカイン新製品
組換え型のサイトカインは、動物から抽出・精製したネイティブサイトカインよりも製造行程が明確であり、また安価に供給可能であるため広く使用されています。
さまざまな動物の感染症が報告される中、より安心してご使用いただける動物原料不使用のサイトカインを発売しましたのでご紹介します。本品は培養・精製の過程で動物に由来する物質を使用せずに作製した組換え型のサイトカインです。

26

ビオスタ社 アレルゲン試薬●ゴキブリなど昆虫由来アレルゲン

関連商品
免疫沈降 ･ 免疫組織染色用抗 GFP 抗体
コード No.

各種アレルゲンをラインアップしています

コード No. メーカーコード

306-34143
300-34141
303-34153
307-34151
300-34163
304-34161
308-35183
302-35181
304-35163
308-35161
301-35173
305-35171

品

名容 量 希望納入価格（円）

bo002
1g
コナヒョウヒダニ虫体
bo001
2g
fb002
50mg
コナヒョウヒダニ虫体由来粗精製アレルゲン
fb001
100mg
ﬀ002
50mg
コナヒョウヒダニ排泄物由来粗精製アレルゲン
ﬀ001
100mg
ybo0021g
ヤケヒョウヒダニ虫体
ybo0012g
pb002 ヤケヒョウヒダニ虫体由来粗精製抗原 50mg
pb001 (Dpb)
100mg
pf002 ヤケヒョウヒダニ排泄物由来粗精製抗原 50mg
100mg
pf001 (Dpf)

20,00038,00068,000130,000
68,000130,000
20,00038,00068,000130,000
68,000130,000

304-35141

cp001 日本スギ花粉

307-35153
301-35151

cpe002
日本スギ花粉由来粗精製抗原
cpe001

304-84611

hk001 日本ヒノキ花粉

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）5g

23,00050mg
100mg

35,00068,0005g

47,000ew Products
脱りん酸反応の効率アップに正確性の高い DNA ポリメラーゼ

アルカリホスファターゼ溶液 HG，エビ由来

Pho DNA ポリメラーゼ

本品は、デオキシリボヌクレアーゼ及びリボヌクレアー

本品は、超好熱古細菌Pyrococcus horikoshii OT3 由来

ゼの混入が極めて低い高品質なアルカリホスファターゼの耐熱性 DNA ポリメラーゼです。3 → 5 エキソヌクレです。65℃、15 分間の熱処理で完全に失活します。よっアーゼ活性（校正活性）を持つため、PCR 増幅において正て、酵素反応後のフェノール / クロロホルムによる不活性

確性の高い反応を行うことができます。

化処理が必要がなく、高効率かつ特異的に、核酸（DNA、RNA など）や核酸基質（dNTP、NTP）の 5 ʼ 末端りん酸

特長●正確性の高い PCR が可能

基を除去することができます。
遺伝子のクローニングに用いる DNA の脱りん酸反応、●長鎖 DNA を増幅可能

DNA 及び RNA の 5 ʼ 末端標識（蛍光物質、ビオチンなど）● PCR の阻害物質である SDS の影響を受けにくいの前処理反応、タンパク質の脱りん酸反応などにご利用下● GC 含量の高い DNA を増幅可能

さい。

製品構成
本品は、microRNA Cloning Kit Wako ［コード No. 290 - 66501］に使用している高品質なアルカリホスファターゼです。

特長●Pho DNA Polymerase

250 units●dNTP Mixture（2.5 mmol/ℓ each）

800 μℓ×２●10×Pho Reaction Buﬀer（10 mmol/ℓ Mg2+）

1.0 mℓ×１

使 用 例●熱処理（65℃、15 分間）で完全不活性化●高効率な脱りん酸反応■λ DNA を鋳型にした増幅（200 bp 〜 20 kbp）

●反応バッファー類添付
M1 1

2

3

4

5 6

7

8

9 M2

M1
: Gene Ladder Wide 1
Lane 1 : 200 bp
Lane 2 : 500 bp
Lane 3 : 1 kbp
Lane 4 : 3 kbp
Lane 5 : 5 kbp
Lane 6 : 8 kbp
Lane 7 : 10 kbp
Lane 8 : 15 kbp
Lane 9 : 20 kbp
M2: Marker 1 (λ/ dⅢdigest)

製品内容● Alkaline Phosphatase Solution HG, from Shrimp ※ 1
500 units ×１本● 10 × Reaction Buﬀer※2１mℓ ×１本● Dilution Buﬀer ※ 3

１mℓ ×１本※1：25mmol/ℓ Tris-HCl, pH 7.6, 1mmol/ℓ magnesium chloride, 0.1mmol/ℓ zinc chloride,
50％ glycerol.
※2：200mmol/ℓ Tris-HCl, pH 8.0, 100mmol/ℓ magnesium chloride.
※3：50mmol/ℓ Tris-HCl, pH 8.0.

由 来：Shrimp（Pandalus borealis ）ユニット定義：グリシンバッファー※ 4 中で、37℃で１分間に１μmolのp - ニトロフェノールを生成する酵素量を１unitとする。

Pho DNA Polymerase は 200 bp から 20 kbp の DNA を問題なく増幅した。

■ SDS を含むサンプルの PCR
Pho DNA
Polymerase
1

2

3

他製品Ａ

他製品Ｂ

M
4

1

2

3

4

1

2

3

※4：150mmol/ℓ glycine-NaOH, pH 10.4, 1.5mmol/ℓ magnesium chloride, 1.5mmol/ℓzinc chloride, 18mmol/ℓ p -nitrophenyl phosphate.

4

Lane 1 : SDS 0.01 %Lane 2 : SDS 0.005%
Lane 3 : SDS 0.001%
Lane 4 : SDS なし
M: Gene Ladder Wide2

保存条件
他製品A : 他社のα型酵素
他製品 B : Taq DNA Polymerase− 20℃保存
コード No.
NEW

品

名

規

格

希望納入価格（円）容量

Alkaline Phosphatase Solution HG,
遺伝子研究用 500units
296-68301
from Shrimp

27,000

Pho DNA Polymeraseは 他 社DNAポ リ メ ラ ー ゼ で は 増 幅 困 難 なSDS
0.01％を含むサンプルでもDNAを増幅した。
本製品は、独立行政法人産業技術総合研究所の研究成果（松井郁夫ら、特関連商品
コード No.

許第 3015878 号）が活用されております。
品

名290-66501 microRNA Cloning Kit Wako

規

格

容量

遺伝子研究用 8 回用

希望納入価格（円）

コード No.

品

63,000314-07111

Pho DNA Polymerase

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）

名

容量

希望納入価格（円）250 units

27,50027

ew Products
製品仕様

低分子量 DNA の電気泳動に
スーパーセップ TM DNA

プレートサイズ：100 × 100 × 3（mm）

低分子量 DNA の分離には、アガロースよりもゲルの網

ウ ェ ル 数：17 ウェル

ゲ ル サ イ ズ：90 × 85 × 1（mm）

目構造が小さいポリアクリルアミドゲルが使用されます。

ウ ェ ル 容 積：25 μℓ

しかし、アクリルアミド濃度やゲルの架橋度によって分離

コード No.

できる DNA のサイズはさまざまです。

品

名

分画範囲

規格

容量 希望納入価格（円）TM

190-15481 SuperSep DNA 15%, 17 well 20 〜 200bp 電気泳動用 10 枚

本品は、アクリルアミド濃度とゲル架橋度を低分子量19,500

DNA の分離に最適化しています。そのため、DNA サイズ

関連商品

20 〜 200 bp のサンプルの分離に有効です。

コード No.

泳 動 例

058-07681■トリスグリシンバッファー

品

名

規格

EasySeparatorTM
ゲルのセッティング、取り外しが簡単な電気泳動槽

容量

希望納入価格（円）

電気泳動用 1 セット 45,000040-28721 10bp DNA Step Ladder（10-100bp） 遺伝子研究用 32.5μg 17,000
①

②

③

（bp）

（bp）

547-02301 25bp DNA Step Ladder（25-300bp） 遺伝子研究用

90μg 50,000

544-02311 50bp DNA Step Ladder（50-800bp） 遺伝子研究用

85μg 27,000

200
150
100

DNase, RNase 活性チェック済み

50

IPTG 大入り包装

30

本品は、ラクトースオペロンの転写を誘導する働きがあ

25

20

ります。また、ラクトースリプレッサーに結合してその働きを阻害し、ラクトースを分解する β- ガラクトシダーゼの発現を誘導します。これらの性質を利用して大腸菌にお■ TBE バッファー
①

（bp）

②

ける組換えタンパク質の大量生産や、遺伝子クローニング③のブルーホワイトセレクションに使用できます。
当社では、さまざまなグレードの IPTG をラインアップ（bp）

しておりますが、お客様のご要望にお応えして、分子生物
200
150

学用（DNase、RNase 活性チェック済み）の大包装を追加

100

しました。

50

CAS No.：367 - 93 - 1

30
20

CH₂OH

25
HO

O

S

OH

［泳動条件］
泳動バッファー
（× 10）：
0 . 25 mol/ℓ Tris,
1 . 92 mol/ℓ Glycine
電流：30 mA（定電流），60 min
染
色：EtBr 染色，15 min
泳動装置：EasySeparatorTM［サンプル］① 10 bp DNA Step Ladder[ コード No. 040 - 28721 ]② 25 bp DNA Step Ladder[ コード No. 547 - 02301 ]③ 50 bp DNA Step Ladder[ コード No. 544 - 02311 ]
アプライ量：6 μℓ（500 ng/well）

SuperSepTM DNA とトリスグリシンバッファー及び TBE バッファーで 20 〜 200 bp の DNA を き れ い に 分 離 で き、 特 に 20 〜 30 bp の領域はトリスグリシンバッファーで良好な結果が得られました。
200 bp 以下の PCR 産物、特に small RNA クローニングの際のゲルからの切り出しに利用できます。

28

C 9 H 18 O 5 S= 238 . 30

OH

コード No.

品

名

規 格090-05141
096-05143
NEW

094-05144

NEW

090-05146

Isopropyl-β-D(-)thiogalactopyranoside

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）

容量

希望納入価格（円）

100mg

2,500

1g

9,000

10g

38,000100g

240,000

分子生物学用化学大家 412
朝 比 奈 泰 彦（1881 〜 1975）
大阪大学名誉教授

芝哲夫

蕾軒（ライケン）の号を持つ薬学者を受けて、植物成分の研究を始めた。

朝比奈泰彦はその名に因むライフワー

その最初の論文は一高時代に樹下で瞑クの地衣（leichen）成分の研究で知想した白雲木の成分アンヒドロへキられ、その号は東大薬学教授時代のシットのスチラチットの研究であった１）。

門下生からは度々落とされる雷親父の私事になるが、筆者も大学で有機化学意にも受け取られていた。朝比奈泰彦

専攻を決めた時、最初に読んだ原報がは慶応義塾で福沢諭吉の教を受けた

この報告であった２）。

朝比奈和四郎の嫡男として明治 14 年

朝 比 奈 が 28 歳 に な っ た 明 治 42 年

（1881）４月 12 日に東京本所で生まれ（1909）に下山教授のはからいで外国た。尋常中学校の時代に動植物を教留学費を得て、スイスの R. M. ウィル

わった帰山信順先生に強い影響を受

ステッター Willst tter 教授の門をたけ、「朝顔の花がひらくまでの時間をたいた。ところが、ウィルステッター

測れ」といわれて実測した実験の結果

ははじめはなかなか入室を許可してくが後に植物学雑誌に掲載された体験かれなかったが、偶々同じ研究室に留学

ら植物愛好心が植えつけられた。中学していた真島利行の口添えでやっとそ時代から牧野富太郎の家に通い、押葉の鑑定を乞うほどの熱の入れ方であった。

の研究室に入ることができた。当時の図１．朝比奈泰彦

ウィルステッター研究室は葉緑素クロる」とすすめられて、東大医科大学薬

ロフィルの研究が大詰めを迎えていた一高に入学し、将来の人生の道に思学科に入学した。当時はまだ薬学は学時で、朝比奈もポルフィリン類の酸化

い悩み、校庭の白雲木の下に静座して部ではなく、医学部に属する学科で３やそれに関連する血色素へミンの酸沈思黙考して、思い余って旧師の帰山講座のみしかない小さい学科であっ

化、還元の研究を担当した。

先生を訪ねた。先生に「植物では一生た。

滞欧３年目の明治 45 年（1912）に食えないが、それほど植物に執心する

朝比奈は植物学と生薬学担当の下山はドイツのベルリン大学の E. フィッ

なら、実用にも役立つ薬学が適してい

順一郎教授の研究室に入り、その指導

シャー Fischer 研究室に移り、かっての白雲木成分スチラチットの研究を完成させた。帰国を前にして下山順一郎
教 授 の 訃 報 が 寄 せ ら れ、 明 治 45 年
（1912）９月に帰朝した朝比奈は図らずも恩師の生薬学教室を継承することになり助教授に任命された。それより

図２．朝比奈泰彦の最初の報告「ハクウンボク果実の成分」

和光純薬時報図３．外国留学の頃の朝比奈泰彦

Vol.77, No.3（2009）29

（1914）には現在の日本化学会賞に当たる桜井賞を受け、大正 12 年（1923）には学士院賞恩賜賞を受賞した。
朝比奈は大正７年（1918）に当時の東京帝国大学医科大学教授となり、学術研究会議会員となった。その頃、第一次大戦の影響で薬品の輸入が途絶し、払底したキニーネの補給のために台湾に渡ってキナ栽培の道を開くための尽力もした。当時また有機化学の実
験には不可欠な有機微量元素分析法がP. プレーグル Pregl によって発表され普及し始めていたが、それには千分の１ミリグラムの量が測れる微量天秤が必要であった。しかし高価な輸入品のミクロ天秤を手に入れることは容易でない状況で、朝比奈はそのミクロ天秤を使わず、できるだけ少量の試料で元素分析を行える簡易元素分析法を開発した。その装置はそれから約十年後

図４．アネモニンの構造式を示す朝比奈泰彦にプレーグル法がわが国でも実施でき

朝比奈は恩師の遺志を継ぎ、下山研究

ケトンの研究など矢継ぎ早に難問を解るようになるまで大いに役立つことと室での未解決の課題に取り組み次々に明して行った。アネモニンの原料にはなった。

片付けて行った。

キツネノボタンを採集したが、それはその頃の朝比奈の大きい業績としてそれにはアネモニンの構造と合成、

眼や鼻の粘膜を刺激し、蒸留の時にはビタカンファーの発見がある。重態の漢薬呉茱萸（ごしゅゆ）の成分エボジ

眼が見えなくなるという苦労を重ね病人に強心剤としてカンフル注射を打アミンとルテカルピンの分離と構造、て、西欧でも難問といわれたアネモニ

つとかえって病態が悪化することがあ

漢薬香薷（こうじゅ）の原植物ナギナンの構造研究を完成させた。これらのるといわれ薬理学的に疑問視され始め

タコウジュの揮発成分エルショルチア「漢薬成分の研究」に対して大正３年ていた。東大医学部薬理学の田村憲造

図５．朝比奈泰彦の簡易元素分析装置30

和光純薬時報Vol.77, No.3（2009）

教授から依頼を受けてこの問題解決のの脚が及び、新たに 50 余種の新種がが、昭和 11 年（1936）にはドイツの共同研究を行うことになった。カン

判明することになった。そのためにあKaiserlich Deutsche Akademie der

ファーすなわち樟脳を犬に食わせて、らたにパラフェニレンジアミンの鑑定

Naturforscher の会員に選ばれ、昭和

その体内変化産物を精査する研究が実

試薬の導入に加えて、標本の小断片で16 年（1941） に は ド イ ツ 化 学 会

施されて、その結果、カンファー分子

含有成分を同定するミクロ検定法が開Deutsche Chemische Gesellschaft ののπ位が酸化されてアルデヒドに発された。地衣成分としてはデプシ

名 誉 会 員 に 推 薦 さ れ た。 昭 和 13 年なったものが強心剤としてはたらく本

ドーン類、デプシド類、ウスニン酸な（1938）には日本薬学会会頭を務めた体の作用物質であることが突き止めら

どが挙げられるが、その成分の大半が、昭和 18 年（1943）には文化勲章れ、武田薬工からビタカンファーとしは朝比奈研究室において確定された受賞の栄に輝いた。それより前の昭和て売り出されることになった。このビ

もので、それに関する報告は邦文 85

16 年（1941）には東大教授を退官しタカンファーの特許料を以って後に財報、 欧 文 102 報 に 及 び、 そ の 総 説 がて い る が、「 人 生 と 業 績 は そ の 人 に団となる薬理研究会が設立され、そのFortschritte der Chemie organischer

よってのみ創造される芸術品である」

後の地衣研究の推進にも役立つことに

Naturstoﬀe

３）に集録されている。

という言葉を残して大学を去った。

なった。これは大学における研究業績

その他に朝比奈の薬化学研究とし退官後の昭和 29 年（1954）には日が社会に貢献したひとつの顕著な例とて、サントニンの生体内酸化物の研

本薬史学会が創立され、朝比奈はそのなった。

究、吉草油成分ケッシールアルコール初代会長に推されている。昭和 50 年

冒頭にも述べたように、朝比奈の畢の研究など広範にわたっているが、報（1975）６月 30 日に朝比奈泰彦は享年

生の研究はその頃から始まった当時世文の総数は邦文 373 篇、欧文 148 篇に

94 歳の生涯を閉じた。

界的に未開拓であった地衣の化学的研及ぶ膨大なものである。さらに朝比奈究であった。それは生来の朝比奈の植の業績として特記すべきことは、昭和物に対する志向から発したことに違い

23 年（1948）に正倉院薬物調査団のこの一文は主として朝比奈泰彦『私ないが、またドイツ留学時代のフィッ首班として歴史的な役目を果たしたこのたどった道』５）、根本曽代子『朝比シャーの地衣酸の研究の影響もあったとである。それは千二百年来勅封で奈泰彦伝』６）に拠った。朝比奈泰彦先と思われる。地衣は分類、同定が植物あった正倉院御物のうちの薬物を初め生の門下生が多くご健在の中で、このあとがき学者でも容易でないことが朝比奈の意て化学的調査したことで、その報告は一文を草した無礼は、筆者が本誌に欲を刺激したと思われる。多くの研究『朝比奈泰彦監修

正倉院薬物』４） と『化学大家』欄の継続執筆を依頼され室員を動員して長年にわたった精力的して植物文献刊行会から出版され、まている責に免じて御寛恕を乞う次第でな研究によって、植物学者ではできなたその模様は武田薬工学術部記録映画ある。

い化学的手段の導入により地衣類の研「地衣を探る」として記録に残されて究が確立したといえる。その地衣類のいる。

蒐集には日本全国はもとより、樺太、

朝比奈は既に述べた桜井賞、学士

満洲、朝鮮、台湾、南洋群島にも探索

院賞の他に数々の褒賞を受けている〔参考文献〕
１）朝比奈泰彦：「ハクウンボク果実の成分」薬学雑誌，306，859（明治 40 年）．
２）『朝比奈泰彦および協力者報文集、化学の部』（生薬学教室発行）（昭和９年）．
３）Asahina, Y. : Fortschritte der Chemie

organischer Naturstoﬀe (II) : Flechtenstoﬀe（1939）.
４）『正倉院薬物』（植物文献刊行会）（1955）．
５）朝比奈泰彦：『私のたどった道』（南江堂）（昭
和 24 年）．
６）根本曽代子：『朝比奈泰彦伝』（廣川書店）（昭和 41 年）．

図６．朝比奈泰彦の地衣スケッチ

和光純薬時報 Vol.77, No.3（2009）31

SIトレーサブルな標準物質
TRM（Traceable Reference Material）※SI：（国際単位系）The International System of Units の略称

特長●特性値として純度（質量分率）を記載した証明書を商品に添付●純度（質量分率）は NMIJ トレーサブル●特性値の不確かさの要因として、当社で小分け時の均質性及び保存安定性による不確かさを付与

見計量トレーサビリティの根拠となる NMIJ による分析結果報告書は下記ホームページで検索できます。
http://www02 .wako-chem.co.jp/siyaku/trm/index.asp

本〔参考文献〕
１）日本分析化学会編：「分離分析化学事典」，p. 350，
（朝倉書店）（2001）．
２）井原俊英、飯島由美子、清水由隆：分析化学，57，493（2008）．
３）齋藤剛、井原俊英、佐藤浩志、J. Harald、衣笠晋一：分析化学，52，1029（2003）．
４）産業技術総合研究所計量標準総合センターのホームページの下記サイトで、これまでに発行した残留農薬試験用標準物質の分析結果報告書が閲覧可能．
http://www.nmij.jp/˜measure-sys/topics/wako/

コード No.
018-22261
020-16271
025-16341
022-16351
027-16281
037-20871
049-30881
049-30641
052-07841
058-07821
054-07801
091-05671
094-05661
134-15961
136-16021
164-23791
164-23811
161-23821
165-23461
162-23611
168-23831
198-15281
204-17471

品
名
Atrazine Reference Material
Benthiocarb Reference Material
Bethrodine Reference Material
Bifenox Reference Material
BPMC Reference Material
Chloroneb Reference Material
DCMU Reference Material
DEP Reference Material
Echlomezol Reference Material
EPN Reference Material
Ethofenprox Reference Material
Iprodione Reference Material
Isoprothiolane Reference Material
Malathon Reference Material
MCPP Reference Material
2,4-PA Reference Material
Pendimethalin Reference Material
Probenazole Reference Material
Procymidone Reference Material
Propyzamide Reference Material
Pyridaphenthion Reference Material
Simetryn Reference Material
Thiuram Reference Material

規格Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material
Traceable Reference Material

容 量
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg

希望納入価格（円）
8,500
6,000
10,00010,0007,000
15,000
近日発売
12,00012,00013,000
5,000
近日発売
6,000
11,000
近日発売
近日発売
13,00020,00013,00012,000
6,000
7,000
5,000

収載されている試薬は、試験・研究の目的にのみ使用されるものであり、家庭用、医療用など他の用途には用いられません。
記載希望納入価格は本体価格であり消費税などが含まれておりません。

和光純薬時報 Vol. 77 No. 3
2009 年 7 月 15 日 発行

●製品に対するお問合せはこちらまでお寄せ下さい。

発行責任者
編集責任者
発 行 所

■和光純薬工業株式会社（Japan） http://www.wako-chem.co.jp

印

刷

所

糸 博之
大西礼子
和光純薬工業株式会社〒 540-8605 大阪市中央区道修町三丁目 1 番 2 号
TEL.06-6203-3741（代表）URL http://www.wako-chem.co.jp
共進社印刷株式会社●和光純薬時報に対するご意見・ご感想はこちらまでお寄せ下さい。
E-mail jiho@wako-chem.co.jp

32

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フリーダイヤル（日本のみ）0120-052-099/Tel 81-6-6203-3741
フリーファックス（日本のみ）0120-052-806/Fax 81-6-6201-5964
E-mail labchem-tec@wako-chem.co.jp■Wako Overseas Oﬃces :・Wako Chemicals USA, Inc. http://www.wakousa.com
Toll-Free（U.S. only）1-877-714-1920
Head Oﬃce（Richmond, VA）：Tel 1-804-714-1920 / Fax 1-804-271-7791
Los Angeles Sales Oﬃce（Irvine, CA）：Tel 1-949-679-1700 / Fax 1-949-679-1701
Boston Sales Oﬃce（Cambridge, MA）：Tel 1-617-354-6772 / Fax 1-617-354-6774

・Wako Chemicals GmbH

http://www.wako-chemicals.de

European Oﬃce（Neuss, Germany）：Tel 49-2131-311-0 / Fax 49-2131-311100

 

現在市販されている標準品類は、主に GC や HPLC などの機器分析により含量保証が行われています。しかし、純度（質量分率）の計量トレーサビリティが確保された標準品類を数多く提供することは、純度測定の技術とトレーサ
ビリティ証明の両面から実現が困難でした。
この度当社では、産業技術総合研究所計量標準総合センター（NMIJ）との共同研究により、SI※トレーサブルな測定法とその不確かさの評価法を導入し、計量トレーサビリティを確保した標準物質 TRM（Traceable Reference
Material）の供給システムを開発しました。
TRM シリーズでは、NMIJ が SI トレーサブルな方法で測定した特性値［純度（質量分率）］に、当社小分け時の均質性及び、商品の保存安定性による不確かさを付与した証明書が現品に添付されています。
残留農薬試験用の農薬を中心に、TRM シリーズを順次追加しております。
信頼性の高い純度が保証された標準物質としてご使用頂けます。