細胞・遺伝子治療のための品質管理ソリューション
基礎研究から治療まで新薬開発をサポート

詳細はウェブページbio-rad.com/ddPCRAppsGuideでもご覧いただけます細胞・遺伝子治療のためのより高い精度と正確性

機器

ソフトウェアサービス

細胞・遺伝子治療アッセイ

アプリケーションキット

Droplet Digital PCR (ddPCR)は、微小なドロップレット内にカプセル化された核酸分子をカウントすることで、検量線を用いることなく、高精度かつ絶対的な核酸の定量を可能にしています。さらにddPCRはPCR阻害物質に対する高い耐性があるため、医薬品の開発から製造プロセスにおける幅広いシーンで高い定量性を提供します。
バイオ・ラッドのddPCRシステムは、そのシンプルなワークフローにより作業時間を最小限に抑えることが可能であり、サンプルの繰り返し測定の煩雑さを軽減し、ユーザー間の測定データのばらつきを最小限に抑制します。

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細胞・遺伝子治療のためのddPCRアッセイおよびキット
バイオ・ラッドは遺伝子変異検出、コピー数多型解析、ゲノム編集検出、遺伝子発現解析、マルチスクリーニング
キット、マイコプラズマ 検出、Residual DNA検出、およびNGS用ライブラリー定量など、さまざまなアプリケーションに対応したddPCRキットやアッセイを包括的なポートフォリオとしてご提供しています。

ddPCRは、qPCRに比べてPCR阻害物質に対する耐性が高いため、残留DNA検出に用いられる複雑なサンプルマトリックス中の微量なターゲットを検出するのに最適です。

絶対的な定量性を持つddPCRは、 qPCRはでは判定が難しい連続したベクターコピー数においても明瞭に識別することができます。

マルチスクリーニング
キット
コピー数多型解析
残留宿主DNA
定量

遺伝子変異検出

ddPCR
キット

コピー数多型解析

C

エキスパートデザイン
アッセイ

ddPCR
A

GT

T

C

A

Self-ComplementaryなAAVゲノムは、自己配列同士のアニーリングによりプライマーとプローブの結合部位を阻害してしまうことがあり、qPCRによるウイルスタイター測定を複雑にしています。
ddPCR エキスパート デザインアッセイを活用することで、検量線を用いずにウイルスタイターをより正確に測定することができます。

アッセイ

NGS用ライブラリー
定量ゲノム編集検出
マイコプラズマ検出
ATGC

カスタムアッセイ
qPCRと異なり、ddPCRではマイコプラズマ検査において、コロニー形成単位 (CFU)に対するゲノムコピーの比率を、検量線なしで算出することができます。

遺伝子発現解析

細胞・遺伝子治療

最適なddPCRアッセイの検索
24時間利用可能なウェブベースのアッセイサイトにより、次の3ステップで最適なアッセイの検索、設計が可能に
1

ddPCR専用PrimePCRアッセイサイトへアクセス

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ddPCR Cell and Gene Therapy
アッセイは、目的遺伝子のタイターおよびコピー数測定を行うための堅牢なアッセイデザインとプライマー・プローブを提供します。

アッセイデザインサービス
弊社のddPCRスペシャリストがアッセイデザインをお手伝いいたします。

アプリケーションを選択、またはユニークアッセイIDで対象アッセイを検索

インタラクティブなインフォ
グラフィック2ターゲット遺伝子、またはシーケンス情報を入力

3

反応数を選択し、カートに追加

アイコンをクリックすると、細胞・遺伝子治療のアプリケーションに適したddPCRアッセイとキットが見つかります。

遺伝子治療効果的で再現性のある遺伝子治療法を開発するには、治療薬の品質を検証するために、ddPCRのような高感度かつ精度の高いアッセイ方法を用いる必要があります。バイオ・ラッドでは、ddPCR専用ウイルス定量ソリューションのポートフォリオを提供しています。また、これらソリューションの一部は、導入するプラスミドの品質検査や、遺伝子治療薬の生体内分布研究にも使用されています。

製造工程
トランスフェクション

ウイルス産生と回収

ウイルス精製ウイルスタイター測定

プラスミドの品質

エキスパート デザイン

エキスパート デザインアッセイを活用しアッセイを用いたウイルス タイターを正確に測定

プラスミドの品質チェック

最終製品の品質保証（QA）/品質管理（QC）

モニタリング

純度

安全性

治療薬の分布と遺伝子発現の確認

残留宿主DNA

マイコプラズマ検出

遺伝子発現

ddPCR Residual DNA
Quantification キットにより、残留する宿主DNAの絶対的な定量が可能

Vericheck ddPCR
Mycoplasma
Detection キットによる偽陽性の低減エキスパート デザイン
アッセイを用いて、導入遺伝子の発現レベルと体内分布を評価

マイコプラズマ否定
試験をqPCRからddPCRへ移行する
方法をご紹介ddPCR専用アッセイ
デザイン エンジンを使用し、目的遺伝子に対するカスタムddPCRアッセイをデザイン

有効性

ddPCRの感度は、米国食品医薬品局（FDA）のガイドラインである100 pg
host DNA/dose（1回の投与で100 pg以下の宿主DNA）に準拠
Cell and Gene Therapy デザイン エンジンによりCell and Gene Therapy
デザイン エンジンを用いた、プラスミドの品質チェック用カスタム
ddPCRアッセイ

ウイルス タイター測定用カスタムddPCRアッセイを作成

AAVタイター測定のためのddPCRワークフロー ソリューションの紹介

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細胞治療

キメラ抗原受容体（CAR）T細胞のような遺伝子改変細胞治療の安全性と有効性を検証するためには、堅牢で正確な検証法の開発と導入が不可欠です。ddPCRは、サンプル中の導入遺伝子のコピー数を絶対的に定量することが可能なため、T細胞にトランスフェクションされたCARのコピー数を定量したり、目的遺伝子を含む細胞数の測定に大変有用です。この手法は抗体で検出できない導入遺伝子の場合に特に重要です。ddPCR whole-cell
DNAワークフローは、最小限の細胞を用いたアッセイで改変細胞の割合を測定できる再現性の高い簡便な方法であり、細胞治療製剤の製造工程のさまざまなステップで利用することができます。

製造工程
ベクター導入T細胞の活性化と形質転換必要となる細胞用量の準備

最終製品の品質保証（QA）/品質管理（QC）

モニタリング

純度

安全性

治療薬の分布と遺伝子発現の確認

有効性

プラスミドの品質

遺伝子発現

ベクターコピー数定量

残留宿主DNA

マイコプラズマ検出

遺伝子発現

エキスパート デザイン

CAR-T CD19 Monitoring
アッセイによる抗CD19
CAR-T細胞の導入遺伝

whole-cell Droplet Digital PCRを用いて、細胞内のVericheck ddPCR
Mycoplasma
Detection キットによる偽陽性の低減

子発現の確認子とリファレンス遺伝子を測定することで、目的のddPCR Residual DNA
Quantification キットにより、残留する宿主DNAの絶対的な定量が可能

CAR-T CD19 Monitoring
アッセイによる抗CD19
CAR-T細胞の導入遺伝子発現の確認

アッセイを用いたプラスミドの品質チェック

遺伝子改変を定量化
このプロトコルは、細胞をカプセル化し、導入遺伝

ddPCRの感度は、米国食品医薬品局（FDA）のガイドラインである100 pg
host DNA/dose（1回の投与で100 pg以下の宿主DNA）に準拠

改変細胞のカウントが可能

Cell and Gene Therapy
デザイン エンジンを用いた、プラスミドの品質チェック用カスタム
ddPCRアッセイ-

マイコプラズマ否定
試験をqPCRからddPCRへ移行する
方法をご紹介Fehseら（2020年）が開発した、axicabtageneciloleucel（axi-cel）で治療を受けた患者から採取しCAR-T細胞療法のためのddPCRを用いた細胞動態および生体内分布
アッセイに関する文献

た抗CD19 CAR-T細胞を0.01%の頻度で正確に定量するためのddPCRアッセイについて紹介

高感度なddPCRによるCAR-T細胞の in vivo
モニタリングに関するウェビナー

WEBINAR

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ddPCRソフトウェア

バイオ・ラッド ddPCRシステムおよびRegulatory Edition ソフトウェア（RE ソフトウェア）を用いることで、GMP製造およびQC環境のニーズを満たすための電子文書および署名に関する規制であるFDA 21 CFR part 11に対応いただけます（オプション）。QX RE ソフトウェアは、ddPCRデータの取得および解析のための強力なソフトウェアであり、ddPCRシステムに接続し、実験プロトコルの作成、実行、解析に必要なすべての機能を提供します。
QX RE ソフトウェアは下記の項目を実行可能です

プレート2D Amplitudeチャート

解析モジュールによるチャートやテーブルを用いた様々なデータ解析
レポートやプレートのテンプレートをカスタマイズすることができ、レポートとデータ取得のフォーマット変更が容易
システムおよび実験の監査ログ表示
ファイルを再処理した後に、新旧のデータに関する監査ログのレポートを作成

バイオ・ラッドは、ISO13485に自主的に準拠しています。この規格は、製品固有の要求やより厳しい文書化など 、ISO9001を超える追加要求があります。

QX ソフトウェアでは、任意のチャネルの組み合わせを2D プロット、スクリーン上に並列表示、または96ウェルプレートレイアウトで可視化することができます。

詳細はこちら bio-rad.com/QXSoftware

3D Amplitudeチャート

ツールバーでウェルを選択すると、3D Amplitude表示により1つのチャートで3つのターゲットの表示が可能です。

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ddPCRアプリケーション
サポートとサービス
バイオ・ラッドは、最先端の細胞・遺伝子治療法の開発、分析、製造をサポートするための経験と専用ツール を提供しています。

アプリケーションサポート
弊社のddPCR専属フィールドアプリケーションスペシャリストおよびテックコールは、高い知識と幅広いスキルを活用して、お客様に包括的なサポートを提供します。

Droplet Digital PCRアプリケーションガイド
ddPCRアプリケーション実験のセットアッ プに関する詳細情報データ解析、トラブルシューティング、およびアッセイの最適化に関する技術的サポート

詳細はこちら bio-rad.com/ddPCRAppsGuide

製品の使用方法や実験手法をレクチャーするユーザ様向けトレーニングコース

BIO-RAD, DDPCR, and DROPLET DIGITAL PCR are trademarks of Bio-Rad Laboratories,Inc. in certain jurisdictions. All trademarks used herein are the property of their respective
owner.

“Easy-to-Use Solutions”をご用意しております。取り扱い説明とは別に、実機を用いたTipsやお客様の実験系構築に関するアドバイス等にも対応できるよう、各種コースを取り揃えておりますサービス
50年にわたるライフサイエンス業界での信頼できる豊富な経験を“Expert Care”として提供しています。
Expert Careの各種サービス ：•IQOQ サービス （オンサイトでの適格性試験代行サービス）•Complete Support Plan （1 年契約期間中の故障時無償修理および点検1 回）•Performance Plan （スポット有償点検）•Extended Cover Plan （機器購入時の保証年延長プラン）

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