福岡県保健環境研究所年報第42号，74－79，2015

原著
15

N標識同位体を用いた分析法によるミクロシスチン調査とアオコ抑制手法の検討
田中義人・飛石和大・藤川和浩・古閑豊和・永島聡子・熊谷博史*・佐野友春**
本報では藍藻類が生産するミクロシスチン汚染の実態調査とアオコ抑制及びミクロシスチン汚染対策を検討した。汚染の実態調査では、従来法を改善し、共同研究機関と分析手法の標準化及び精度管理を行った
上、ミクロシスチン汚染の実態を明らかにした。また、ミクロシスチンを生産するアオコ対策として、
簡易な過酸化水素或いはオゾン添加による手法を検討した。実験では、室内実験を基に、野外実験及び遠賀町の蟹喰池においてオニバス再生への一助となるよう検討を行った。実験の結果、過酸化水素添加による藍藻類の増殖抑制の効果が示唆された。
［キーワード：ミクロシスチン、富栄養化、過酸化水素、LC/MS/MS、15N同位体］

１

LC/MS/MS 分析には、有効な内部標準物質がなく、そのはじめに精度向上には安定同位体の開発が求められていた。この福岡県を含む北部九州の一人当たりの水資源は全国平均と比較して少なく 、その多くをダムなどの閉鎖性水ため、佐野らは 15N で標識した MCs を開発した 7)。そこ

域に依存している。しかし、我が国における閉鎖性水域

で、本研究では国立環境研究所及び他自治体と協力して、の水質改善は河川や海域と比較して低いままで推移して分析方法を検討し、開発された分析手法の精度管理によおり 2)、このため各地の湖沼では富栄養化による藍藻類

り妥当性を評価した。さらに、精度管理及び評価されたの発生（アオコ）が種々の問題の原因となっている。問手法を用いて、各地域の MCs 濃度の実態調査を実施した。

題の一つはアオコを形成する藍藻類の一部が生産するミ

また、アオコに関する別の問題として、生態系への影響

クロシスチン（MCs）汚染である。MCs は肝臓毒であるがあげられる。その一つの例として福岡県遠賀町にあるとともに肝臓ガンのプロモーター活性をもつ環状ペプチ

蟹喰池（ガニハミイケ）のオニバスへの影響がある。オド（図 1）で、現在 80 種類以上の同族体が知られている

ニバスは遠賀町の天然記念物として町民に親しまれてい

3)4)。MCs による被害例は古くから報告されており 、多たが、水質の悪化やアオコの発生による透明度の低下やくは家畜や野生動物に対してであるが、人への健康影響

外来種であるセイヨウスイレンの繁茂によって近年、観を報告した例も複数ある。例えば、1995 年にブラジルの察されなくなり、福岡県の絶滅危惧種に指定されていた。

病院で発生した混入事例では透析患者 100 人以上に被害

このため、蟹喰池では水質改善対策やアオコ対策が求めを出した 6)。また、2014 年米国のオハイオ州で水道水にられていた。一方で現在、ひろく行われているアオコ対MCs が混入し、周辺地域の広範囲にわたって給水停止と策は MCs 汚染への影響が検討されていないものが多い。

なった例などがある。WHO は飲料水中の MCs に対する

安易な対策の実施は、藍藻細胞内 MCs の放出を引き起こ

暫定ガイドラインとして 1.0 g/L を設定しており、各国し、水環境への汚染を拡大させることが懸念される。こでは MCs 汚染の実態把握も広く行われている。しかし、のため本研究では、MCs 汚染を拡大させないアオコ抑制

我が国おいては現在まで全国的な規模での実態調査例は対策を検討し、蟹喰池のオニバス再生を目指した。具体少ない。理由の一つとして、精度の高い確立された分析的にはフリーラジカル生成によるアオコ抑制技術として法がないことがある。質量分析には一般的に安定同位体

過酸化水素（H2O2）及びオゾン（O3）によるアオコ抑制を用いた内部標準物質が利用されるが、従来の MCs の効果を実験室レベル、屋外レベルで検証し、最終的に蟹1)

5)

喰池における隔離水塊での実証実験を行った。本報ではこれらについて報告する。
福岡県保健環境研究所 （〒818-0135 太宰府市大字向佐野 39）*福岡県環境部環境保全課（〒812-8577 福岡市博多区東公園 7-7）**国立環境研究所環境計測研究センター環境計測化学研究室（〒305-8506 茨城県つくば市小野川 16-2）

-74-

▲H 池

●B ダム

●E ダム

●A ダム
●D ダム

図1 ミクロシスチンの構造例
▲F 堤
▲G 堤

●
C ダム

図 3 福岡県内における調査地点●：大規模湖沼、▲：ため池など
２

研究方法

２・１

15

N標識MCsを用いた分析法の検討

現在まで MCs には 80 を越える同族体が報告されている。

図2 分析法の概要

本研究では、我が国でよく検出される MC-RR、MC-LR、
MC-YR、MC-WR、MC-FR、MC-7dmLR の 6 成分を分析の対象とした 8)。分析方法の概要を図 2 に示す。水試料

表1 MCs分析のLC/MS/MS条件
LC条件

機種：Waters社 Alliance2695
カラム：Supelco製 Ascentis Express C18
2.1×100mm，2.7μm
移動相：0.1%ギ酸 + 10mMギ酸ｱﾝﾓﾆｳﾑ：ﾒﾀﾉｰﾙ
70：30→55:45→45:55→20：80→70:30
流量：0.3ｍL/min.
温度：50℃，注入量：20μL

検出器条件 機種：Water社 Quatro microAPI
ｲｵﾝ化法：ESI-positive
ｷｬﾋﾟﾗﾘｰ電圧：0.5ｋＶ
Cone電圧：15～35V，ｶﾞｽ流量：50L/hr
ｲｵﾝ源温度：100℃
Desolvation温度：300℃，ｶﾞｽ流量：600L/hr

50 mL に酢酸 2.5 mL と 15N で標識した各 MCs をサロゲート物質として加え、藍藻細胞を破壊するために超音波処理を 5 分間、2 回行った。水中に遊離した MCs をあらかじめメタノールと超純水でコンディショニングした
Waters 社製 OASISHLB に、20 mL/min.で通水し、20%

メタノールで洗浄後、60％アセトニトリルで溶出を行った。得られた溶液は 1 mL に定容した後、LC/MS/MS による分析に用いた。表 1 及び表 2 に LC/MS/MS の分析条件を示す。本分析方法の妥当性と各機関の分析精度を評価するために、共同研究を実施している 3 機関（千葉県
環境研究センター、奈良県景観環境総合センター及び国表2 MCs分析におけるモニターイオン
14

15

MC名

測定対象（ N-MC）

内部標準（ N-MC）

MC-LR

498-->135

503-->135

MC-RR

519-->135

526-->135

MC-YR

523-->135

528-->135

MC-FR

515-->135

520-->135

MC-WR534-->135

540-->135

MC-7dmLR

491-->135

496-->135

立環境研究所）と室間精度管理を行った。精度管理は国
立環境研究所により 1.2 g/L に調製された MCs 含有試料を、未知試料として各機関に配布し、前述の方法に準じて分析を行った。分析結果は集計し、調製値に対する真度や精度について検討した。
２・２

MCs汚染の実態調査方法

福岡県では、県内 5 地点の大規模な湖沼（1 千万立方-75-メートル超）と小規模なため池 3 地点を対象として実態調査を行った（図 3）。調査は 2014 年春から初秋まで各湖沼等の表層水を採取して MCs 濃度を分析した。併せて、化学的酸素要求量（COD）やクロロフィル a（Chl-a）などの一般的な水質項目も測定した。また、共同研究機関
がその地域にある富栄養化した池や湖沼について行った
MCs の実態調査結果と福岡県内の結果を比較し、地域性や同族体組成の相違などの検討を行った。
２・３

H2O2 添加装置の概要

図4

アオコ抑制効果の検討
３

H2O2 及び O3 によるアオコ抑制効果を実験室内の単純結果及び考察

３・１

培養系と屋外の大容量混合培養系で検討した。室内実験
は無菌的に 10 L の大型透明丸型瓶に MA 培地 9)5 L を入分析法の検討20140719STD-10
MCYST477

MRM of 13 Channels ES+
519.79 > 135
6.88e4

7.30

100

%

14

れ、H2O2 濃度を 2 mg/L 或いは O3 濃度を 0.2 mg/L にな
るようにそれぞれ添加し、無菌的に培養した。H2O2 は和

0

N-MC-RR

1.00

2.00

3.00

4.00

5.00

6.00

MCYST477

光純薬工業株式会社、特級試薬（30%）を用い、O3 の添

7.00

8.00

9.00

10.00

11.00

12.00

13.00

14.00

15.00

16.00

17.00

18.00

19.00

20.00

21.00

22.00

23.00

24.00

25.00

26.00

27.00

28.00
29.00
MRM of 13 Channels ES+
526.27 > 135
2.25e5

7.30

100

15

N-MC-RR%

加はマルチオゾナイザ RMO-150AC-A（南北産業株式会

0

1.00

2.00

3.00

4.00

5.00

6.00

100

エアストーンを用いて曝気した。培養は 23℃、12 時間%

MCYST477

社、O3 発生量能力：182 mg/h）にエアーポンプを接続し、

7.00

8.00

9.00

10.00

11.00

12.00

13.00

14.00

15.00

16.00

17.00

16.00

17.00

18.00

19.00

20.00

19.00

20.00

21.00

22.00

23.00

24.00

25.00

26.00

27.00

28.00
29.00
MRM of 13 Channels ES+
TIC
5.38e5

23.00

24.00

25.00

26.00

27.00

28.00

7.30

TIC

13.50
14.58 14.91
14.22

10.91

17.14
17.64

0

明暗条件下で行った。室内実験では単純培養系として、

1.00

2.00

3.00

4.00

5.00

6.00

7.00

8.00

9.00

10.00

11.00

12.00

13.00

14.00

15.00

18.00

21.00

22.00

29.00

Time

Retention time (min.)

国立環境研究所から供与された藻類の標準菌株
図5

Microcystis aeruginosa NIES-90 (有毒)株を用いた。培養

MCs のクロマトグラム（MC-RR）

中は経時的に採水し、Chl-a 及び MCs 濃度を測定した。
表3

一方、屋外における大容量混合培養系実験は平成 15 年 4

MCs 同族体の定量下限値と報告下限値

月 15 日（最高気温の平均 23.2℃）から 2 週間，500 L槽（サミット樹脂工業株式会社、CPE-500）に MA 培地

MC-RR

MC-LR

MC-YR

MC-FR

定量下限値(ng/mL)*

1.2

3.9

8.8

12.8

MC-WR MC-7dmLR257.9

報告下限値（ng/mL)**

0.02

0.08

0.2

0.2

0.5

0.2

を満たし、屋外開放系で培養を行った。アオコの接種液
は藍藻類の増殖しているため池から採取してきた実試料を用いた。実験は、H2O2 添加槽、O3 添加槽、H2O2＋O3
添加槽および無処理槽に分けて実験を行った。H2O2 処理
は、1 日に 1 回 H2O2 を 2 mg/L になるように添加し、よく 攪 拌 し た 。 ま た 、 O3 添 加 は マ ル チ オ ゾ ナ イ ザ
RMO-150AC-A にエアーポンプで通気し、槽中で 1 日 6
時間曝気した。実験は 2 週間行い、期間中、Chl-a 及びMCs 濃度を経時的に測定した。

*

20μＬ注入の場合 **サンプル量 50 mL の場合

15N標識MCs (15N-MCs) をサロゲート物質として用いる分析手法の検討を行った。LC/MS/MS 分析時のクロマト
グラムを図 5 に示す。また、各同族体の定量下限値（S/N=10）及び報告下限値を表 3 に示す。各 MCs の感
度は、同族体によって大きな差がみられ、最も高感度な
MC-RR と最も低い MC-WR とは 25 倍近い差がみられた。
一方、14N-MCs と 15N-MCs の比の内部標準法による検量
線は、各同族体とも良好な結果であった。分析法の検討

２・４

遠賀町蟹喰池の隔離水塊における実験

遠賀町の蟹喰池に直径約 10 m の半円形の隔離水塊を作製し、その内部で H2O2 の添加によるアオコ抑制実験を行った。H2O2 の添加は 1 L タンクを装備した直径 90cm のフロート上に、太陽電池セット A200（Elekit 社、後、各機関と共同で分析法の妥当性評価のため精度管理を行った。各機関における MCs 分析の精度管理の結果を表 4 に示す。各成分の正確さ（回収率）は 98.1～104%となり良好な結果であった。一方、変動係数（RSD）については MC-WR 以外は 10 %以下で良好な結果が得られ1.4 V）を 2 枚とマイクロリングポンプ RP-Q（株式会社た。一方、MC-WR については同族体中でもっとも感度

アクアテック社製、最大能力 0.45 mL/min.）を装着し、が低く、さらに各機関で使用した分析機器でも感度に大実施した（図 4）。また、オニバスの再生のために、隔離
水塊外では、オニバス種子の採取やセイヨウスイレンの除去及び池干しなどを行った。

き な 差 が み ら れ た た め 、 RSD が 若 干 高 め に な っ た（RSD：13.1%）。しかし、本分析方法はおおむね妥当であると考えられたことから参加機関において湖沼等にお-76-

表 6 各県の調査結果との比較

ける MCs の実態調査を行った。
３・２

福岡県内の MCs 実態調査と各地との比較

福岡県内及び共同研究各機関の地域において湖沼水等の分析を行った。福岡県では、大規模湖沼とため池を対象に調査を行い、その概要を表 5 に示す。今回の調査期

地点名

調査月

検出月

Aダム
Bダム
Cダム
Dダム
Eダム
F堤
G堤
H池

4月～10月4月～10月4月～10月
6月
6月
4月～11月4月～10月
5月，6月

9月，10月
7月，9月
8月

最高濃度 (g/L)
総量
単成分
0.018
0.010 (LR)0.014 (RR)
0.014
0.002
0.002 (RR)

5月～11月
5月～9月

14
29

7.3 (LR)
14 (RR)

検出MCs
RR, LR
RR, LR
RR

RR, LR, YR, 7dmLR
RR, LR, YR, 7dmLR

間中、福岡県の大規模湖沼で MCs が検出されたのは A
ダムで 2 回（9 月及び 10 月）、B ダムで 2 回（7 月と 9月）及び C ダムの１回（8 月のみ）だった。検出された

３・３

MCs は MC-RR と MC-LR だったが，調査対象の大規模

アオコ抑制効果の検討

福岡県内でもアオコの発生とMCs汚染がみられたため、湖沼では藍藻類の大発生が観られなかったことから、有毒藍藻類の増殖抑制及びMCs汚染への対策が求められ

WHO の暫定基準未満の値だった（Total-MCs として最高る。このため、アオコ抑制技術の検討とMCs汚染への影

検出濃度 0.018 g/L）。一方、比較的富栄養化しているた

響を検討した。抑制技術としてH2O2添加とO3添加の効果

3

め池では、初夏のアオコ発生時期（chl-a:14 g/m ～220を検討した。まず、H2O2とO3の添加濃度を変化させ効果

3

g/m )から継続的に MCs が検出された（Total-MCs としがみられる濃度設定のための実験を行い、その結果、て最高検出濃度 29g/L）。全体的には総サンプル数 40

H2O2濃度が2 mg/L以上、O3濃度が0.2 mg/L以上あればアに対して 17 のサンプルで MCs が検出され、検出されたオコの増殖の抑制効果がみられた。室内実験でH2O2添加

主な MCs は MC-RR 及び MC-LR であったが、ため池で(2 mg/L)によるアオコ抑制効果を検討した結果を図6には、MC-YR 及び MC-7dmLR も微量ながら検出された。

示す。培養期間中、H2O2添加していない対照群のChl-a

他機関の調査と比較した結果を表 6 に示す。他機関の調濃度は経時的に増加したが、H2O2添加群のChl-a濃度の上査結果でも富栄養化した湖沼などでは MCs が検出され昇はみられなかった。この時、対照群のMCs濃度はChl-aており、MCs が我が国に広く存在することが明らかにな濃度と共に上昇したが、H2O2添加群では藍藻類の増殖がった。また、各地で検出される MCs の組成については、

みられなかったためMCsの上昇はみられなかった。次に、福岡県内では検出されない MCs が継続的に検出され、福屋外において500 Lの大型タンクを用いた実験を行った。

岡県の結果と異なって地域差がみられた。MCs は同族体

実験はO3単独添加、H2O2単独添加、H2O2＋O3添加および8）によって毒性も異なることが報告されている 。今回の無処理槽に分けて行った。まず、H2O2単独添加実験にお調査では MCs の組成に地域差があることが示唆された

いて、H2O2濃度は2 mg/L程度で屋外の野生株についてもため、今後、さらに MCs の実態調査を進める必要がある

アオコ抑制効果が確認できた。次に、O3単独添加、H2O2と考えられる。

＋O3添加および無処理槽におけるアオコ抑制実験を行った。その結果を図7に示す。O3単独添加によるアオコ

表 4 分析法の精度管理結果

抑制効果は室内実験では確認されていたが、屋外の野生MC-RR

分析結果(µg/L)
機関A 機関B 機関C 機関D
1.18
1.22
1.15
1.18

平均
1.18

MC-YR

1.18

1.25

1.11

1.17

1.18

4.9

98.1

MC-LR

1.17

1.23

1.15

1.27

1.21

4.6

100.4

MC-WR

1.19

1.44

1.13

-

1.25

13.1

104.4

MC-FR

1.29

1.34

1.15

1.21

1.25

6.8

104.0

MC-7dmLR

1.17

1.16

1.2

1.18

1.18

1.5

98.1

変動係数 正確さ
(%)
(%)
2.4
98.5
50
対照群
処理群

Chl-a濃度(mg/m3)40

表 5 福岡県における実態調査結果概要
地点数

検体数

検出数

検出MCs

福岡県

8

40

17

RR, LR, YR, 7dmLR

A県

1

8

8

RR, LR, YR, 7dmLR, FR

B県

3

5

5

RR, LR, YR, 7dmLR, FR, WR

30

20

10

0
0

10

20

30

40

50

日数

図 6 過酸化水素添加によるアオコ抑制効果

-77-

150
120

300

Chl-a (mg/m3)

Chl-a(mg/m3)

350

90
60

250
200

隔離水塊内

150

隔離水塊外

100
50

30

0
H25.5.8

H25.6.8

H25.7.8

H25.8.8

H25.9.8

0
0

5

10

15

図 9 蟹喰池の隔離水塊内外におけるアオコ
抑制効果

日数
図 7 屋外実験におけるアオコ抑制効果●：オゾン添加処理、○：オゾン+過酸化水素添加処理、□：無処理

月から7月の中旬までは隔離水塊の内外でアオコの発生はみられなかったが、8月に入るとアオコの発生による
Chl-aの上昇がみられた。このとき、フロートを設置している隔離水塊の内と外でChl-aの濃度差がみられ、藍藻類の増殖抑制効果がみられた。添加したH2O2のオニバスへの影響が考えられたために、隔離水塊外で発芽したオニ
バスの芽を隔離水塊内に移植し成長を確認した。その結

無処理
O3+H2O2 添加
O3 単独添加果、オニバスの新芽にH2O2の影響はみられなかった。また、その他の水生生物への影響も考えられたために隔離
水塊内の底生生物の調査を実験の前後で実施したが、捕図 8 屋外実験における MCs 抑制効果

獲された水生生物種の数や個体数への影響は見られなか

MCs の増減は MCs の初期濃度に対する増減としたった。このことから、H2O2の添加によるアオコ抑制は、その水域の水生生物や植物に影響の少ない手法であると株では、アオコ抑制効果が観られなかった。この原因と考えられる。一方、隔離水塊外におけるオニバスの成長

して、室内実験では藍藻標準株を用いたのに対して、屋はセイヨウスイレンの除去や池干し等の水質管理によっ

外実験で用いた藍藻は天然に生育する野生株を用いたたて、前年度に比較して良好になった。今後は、さらに適めと思われる。標準株は無菌保存のため藍藻細胞を一つ

正な池の水質管理に加え、アオコ発生時にH2O2添加フロ

一つ分散して単離されたものである。一方、野生株は細ートなどを活用したオニバスの再生が必要であると考え胞が寒天質に包まれた群体を形成しておりO3が藍藻細胞に効率的に到達できなかったためと考えられた。一方、
H2O2 ＋O3添加はH2O2単独添加実験と同様アオコ抑制効果（Chl-aの抑制）が観られた。また、実験期間中のMCsの経時変化を図8に示す。H2O2＋O3添加では無添加槽及びO3単独添加槽よりMCsの濃度が低く抑えられている結果となった。1g/L のMCsが，0.2mg/Lのオゾンで分解することを確認しており，H2O2＋O3添加では、アオコの抑制が抑えられたことに加え、藍藻細胞から遊離したMCs
がO3によって分解されたことを示唆していると考えら
れる。
３・４

られる。
４

まとめ
本研究ではMCs汚染の実態調査とアオコ抑制及びMCs

汚染対策を検討した。汚染の実態調査では、従来の分析手法を改善し、共同研究機関と分析手法の標準化及び精度管理を行った上、MCs汚染の実態を明らかにした。また、MCsを生産するアオコ対策として、簡易なH2O2添加による手法を検討した。実験では、室内実験を基に、野外実験及び遠賀町の蟹喰池においてオニバス再生への一助となるよう検討した。実験の結果、H2O2添加による藍遠賀町蟹喰池の隔離水塊におけるアオコ抑制実験
平成25年5月から9月まで、隔離水塊内にH2O2を添加す
るフロートを設置して水塊内外の藍藻類繁殖の比較実験を行った。その結果を図9に示す。フロートを設置した5藻類の増殖抑制とO3によるMCsの分解などの効果が示唆された。今後は、アオコが発生している個別の湖沼、ため池などでの活用を検討しなければならない。一方、課題としてH2O2添加で長期間、藍藻類の増殖は抑制できる
もののアオミドロなど他の植物プランクトンの成長は抑-78-

制できないことも今回の研究で明らかになった。本来、

2) 環境省、平成 26 年版環境・循環型社会・生物多様性

閉鎖性水域の水質改善には流入負荷量の削減や底質の改白書、274-277

善など根本的な対策が望まれるが、本研究で検討した手

3) W. W. Carmichael et.al. : J. Appl. Bact., 72, 445-459, 1992.

法は応急処置的な対策としては有効ではないかと考えら

4) R. Nishiwaki-Matsushima et. al. : J. Cancer Res. Clin.

れた。

Oncol.,

118, 420-424, 1992.

5) E. J. McBarron et. al. : Aust. Vet. J., 51, 587, 1975.
6) E. M. Jochimsen et. al. : New Eng. J. Med., 338(13),謝辞873-878, 1998.

本研究の一部は平成25年度(財)住友財団環境研究助成
及び国立環境研究所II型共同研究により行った。ここに、

7) T. Sano et. al. : Analytical and Bioanalytical Chemistry,

謝意を表する。

399(7), 2511-2516，
8) 渡辺真利代ら：アオコ-その出現と毒素、東京大学出版、1994
9) 国立環境研究所

文献1) 国土交通省、日本の水資源（平成 26 年版）、56-62微生物系統保存施設

培地リスト（http://mcc.nies.go.jp/）（英文要旨）

Analysis of 15N labeled microcystins from lakes in Fukuoka Prefecture
Yoshito TANAKA、 Kazuhiro TOBIISHI、 Kazuhiro FUJIKAWA、 Toyokazu KOGA、 Satoko NAGASHIMA.
Hiroshi KUMAGAI*、 Tomoharu SANO**
Fukuoka Institute of Health and Environmental Sciences、
Mukaizano 39、 Dazaifu、 Fukuoka 818-0135、 Japan*Environmental Affairs Division、 Fukuoka Prefecture、
Higashikoen 7-7、 Hakata-ku、 Fukuoka 812-8577**National Institute for Environmental Studies、
Onogawa 16-2、 Tsukuba、 Ibaragi 305-8506
Three aspects of toxic cyanobacterial microcystins were studied in Fukuoka Prefecture. First, we determined the accuracy of an
improved analysis method using liquid chromatography coupled with tandem mass-spectrometry on 15N labeled microcystins.
Second, we investigated microcystins in lakes and ponds within Fukuoka Prefecture, using this new analysis method. Finally, weused our measurements to evaluate toxic water blooms. To evaluate our new analysis method, microcystins were analyzed by four
different laboratories. Using our verified technique we carried out a survey of microcystins in Fukuoka Prefecture. Microcystinswere detected in most lakes and ponds from May to October, especially in eutrophic ponds. Specifically, we detected
microcystin-LR, microcystin-RR, and microcystin-YR in Fukuoka Prefecture. Collaborative institutes also reported thatmicrocystin-FR and microcystin-WR were present in this area. Microcystin variants have different toxicity. Therefore, it isnecessary to determine the distribution of each microcystin variant. Because toxic microcystins were detected in Fukuoka
Prefecture, a measure of their toxicity was required. Growth of cyanobacteria under addition of hydrogen peroxide and ozone also
was studied as a remediation technique. We found that addition of hydrogen peroxide inhibited growth of cyanobacteria, reducing
microcystin production.
[Key words : microcystin, LC/MS/MS, 15N-labeled, hydrogen peroxide, Lake, eutrophication ]-79-