安全な不死化細胞によるエクソソーム製造
上流から下流までをワンストップでサポート
昨今、エクソソームをはじめとする細胞外小胞（EVs）を治療薬として利用することに注目が集まっている。オーストリアに拠点を置く Evercyte 社と Phoenestra 社は、姉妹会社として連携しながら、独自の技術による安全な不死化 EV 生産細胞株の樹立から、GMP 製造、特性評価までをワンストップサービスでサポートする。
Evercyte 社 CTO の Regina Grillari 氏と Phoenestra 社 CEO の Klaus Graumann 氏に、EV ベースの治療薬の現状やサービスの概要などについて話を伺った。

――細胞外小胞（EVs）を利用した治療薬の現状について教えてください。

形成能試験、顧客の要求によるオプション試験などが含まれます。
このほか、小規模な EV 製造サービスおよび細胞培

Regina 氏 細胞外小胞（EVs）は、養上清からの EV 濃縮、抗炎症活性や抗線維化活性と細胞から分泌される脂質二重膜構

いった EVs の生物活性をテストするための造を有する小胞の総称です。さまオアッセイの開発といったサービスも提供しています。

ざまな細胞種から生成され、細胞Klaus 氏 Phoenestra 社は、EVsな間でタンパク質、脂質、遺伝物質どの幹細胞由来製品を社会実装す（DNA、RNA な ど ） と い っ た 生
物活性分子を輸送することで、細Evercyte・CTO
Regina Grillari 氏

バイるうえでの課題に対処するため設立しました。運営開始以来、iPS胞間コミュニケーションにおいて重要な役割を果たし細胞株および間葉系幹細胞の作製ます。この生物活性分子を輸送する能力により、がんおよびスケーラブルな培養、これや神経変性疾患など広範な疾患においてバイオマーらの細胞種からの EVs の製造、分Phoenestra・CEO
Klaus Graumann 氏

カーや DDS などの有望な解決策を示すほか、再生医離、精製、特性評価のための技術プラットフォームを療分野での活用も期待されています。欧州および米国開発してきました。これらの技術プラットフォームに基では、これらの治療法の開発が積極的に進められておづき、EV ベースの治療薬に関連するプロセスおよび製り、臨床試験も行われています。製造および規制の課品開発サービスを提供しています。

題を克服しながら、革新的な治療法を臨床現場にもたらすことに重点を置いています。

――Evercyte 社・Phoenestra 社はどのような事業を展開しているのでしょうか。

姉 妹 会 社 で あ る Evercyte 社 お よ び TAmiRNA 社（RNA シーケンシングを行う CRO）とともに開発したエンドツーエンドのアプローチは、「EVscaleTM」というブランド名で展開しています（図）。ワンストップショップとして、標準化可能な EV 製造用細胞株のRegina 氏 Evercyte 社は、生物活性を有する EVs を樹立から、EVs の大量製造、濃縮・精製、EVs の特性安定的に製造できる多様なヒト組織由来の間葉系幹細評価までを一貫して提供します。

胞（MSC）の樹立に注力しています。具体的にいうと、
臍帯、胎盤組織、羊膜、骨髄、歯髄、脂肪組織由来の不死化細胞株をすでに樹立してカタログ品として分譲――Evercyte 社が提供する不死化細胞株について詳しく教えてください。

しています。さらに、これら既存の MSC ラインアップ

Regina 氏に加えて、お客様の要望に合わせた不死化細胞株の樹ることが多いのですが、初代細胞は立サービスも提供しています。このサービスでは、ま組織・細胞と似た表現型を示すものの、限られた回数ず商業・臨床用途のための倫理承認およびインフォーの細胞分裂後に不可逆的な増殖停止（複製老化と呼ば現在 EVs の製造には初代細胞が使用されの対応するムドコンセントを得たヒト組織の調達を行い、そこかれる）に至るため、EV 製造では頻繁な交換が必要とら初代細胞の分離および特性評価を実施します。そのなります。また、初代細胞は細胞分裂ごとに表現型が後、初代細胞の寿命延長処理（不死化処理）を施し、変化し、初期と後期の継代細胞を比較すると分化能力セルバンクを構築。単一クローンを分離し、個々のクにも変化が見られ、培養が進むと非常に異質な細胞集ローンについてさらに詳細な特性評価を行います。

団を形成します。初代細胞の場合、単一クローンの分特性評価の項目には、増殖能力、形態、特異的マー離は困難であり、一方でサブクローニングを行うと多カー（表面抗原である CD 抗原が主）の発現、分化能くの増殖回数を失い、細胞集団が老化してしまいます。

力、汚染物質（菌、ウイルスなど）の否定試験、STR

こうした問題の解決策が、細胞寿命を延長させた不プロファイリングによる認証（元の初代組織との比死化細胞株です。ヒトテロメア逆転写酵素（hTERT）

較）、mRNA プロファイリングおよびプロテオミクスなどの不死化因子の導入によりテロメアが延長される解析（姉妹会社である TAmiRNA 社との協力）、腫瘍ことで、初代細胞が不死化します。細胞は長期間、安提供：住商ファーマインターナショナル株式会社

図EVscaleTM（EV製造のone stopサービス）の概要

定的に増殖可能となり、hTERT は細胞周期制御経路て、EV ベースの治療法の開発における主要な課題をに影響を与えないため、元の初代細胞に似た表現型を克服することができると考えています。EVscaleTM は維持することができます。hTERT で不死化した MSC

非常に生産性が高く、すでに小規模なベンチトップバ（hTERT-MSC）を使用することで、長期間にわたっイオリアクター（0.25 L）から臨床研究に適した量のて EVs を供給するためのセルバンクを確立することEVs を製造することができています。
新規医薬品原料への採用と持続可能性においてはコが可能です。

――EVscaleTM の具体的な内容を
教えてください。
Klaus 氏 EVscale

スト面も重要な要素です。技術面、コスト面の両方にお い て EV 分 野 を リ ー ド し て い る EVscaleTM に よ って、われわれは日本の顧客によりよいサービスを提供

は、hTERT-MSC を基盤としてしていきます。さらに、顧客のニーズに基づいて特定います。hTERT-MSC の各製造工程は文書管理されの不死化細胞株が必要な場合など、カスタマイズしたており、GMP セルバンキングに直接利用可能です。

サービスの提供も行います。

TM

Phoenestra 社では、樹立済みの hTERT-MSC を用

顧 客 と の コ ミ ュ ニ ケ ー シ ョ ン に お い て は、 住 商

いて、新しい灌流バイオリアクタープラットフォーム

ファーマインターナショナル株式会社が日本国内の総プロセスを開発しました。このプロセスは、hTERT-代理店として、フレキシブルな交渉についても専門的MSC を制御下で保持しながら、数週間にわたってな知見をもって対応可能ですので、まずは同社までおEVs を連続製造することが可能で、長期培養における気軽にご相談ください。

細胞の生存率にも影響がないことを確認しています。
EVs は培養上清から分離され、ダウンストリームで分析やさらなる処理が行われます。すでに陰イオン交換カラムをはじめとした、いくつかのクロマトグラフィー分離手法を確立しており、不純物を減少させたり、特定の成分を濃縮したりすることができます。また、細胞・EVs の品質管理や分析方法は顧客のニーズに合わせて柔軟にカスタマイズ可能です。

住商ファーマインターナショナル株式会社はEvercyte社・Phoenestra社の総代理店です

EVs 中の搭載分子の詳細な調査も可能で、RNAseqやプロテオミクス、またはリピドミクスなどの -omics
手法は、TAmiRNA 社を通じて提供されます。
なお、2025 年からは EVs の GMP 製造にも対応できるようになる予定です。

――今後、日本においてはどのようなサービスを展開していく方針でしょうか。
Regina 氏・Klaus 氏

わ れ わ れ は EVscaleTM に よ っ住商ファーマインターナショナル株式会社
創薬支援部 新規モダリティ支援グループ〒100-0003
東京都千代田区一ツ橋一丁目2番2号 住友商事竹橋ビル12階
TEL：03-5220-1560 FAX：03-5220-1501
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