69−技術資料−●東ソー自動グリコヘモグロビン分析計HLC−723G8の開発
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技術部
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村上 卓司
荻野 慎士
山岸 茂夫
黒木瞳
尾崎 啓二
松野 隆則
土本健太郎
石塚 哲也
伊藤 義正

しかし、G7上市後も糖尿病患者の増加とともに検1．はじめに体数は増加し続けて、さらなる処理能力の向上が必要

東ソー自動グリコヘモグロビン分析計HLC−723シとなった。加えて診察時の患者負担を低減するため、

リーズは、イオン交換HPLC法を用いて糖尿病の臨床採血から結果報告までの時間短縮が求められるように検査項目であるグリコヘモグロビン（A 1c）を測定すなり、測定開始から初検体の結果出力までの時間（1stる自動分析計である。同シリーズは1983年の発売開始

レポート出力時間）の短縮も診断装置に要求されてい後、計5回のモデルチェンジを経て、糖尿病検査装置る。

として広く普及し、現在ではA1c分析計の標準機の1つ

これらの要望に応えるべく、1 stレポートを最短2.0となっている。特に1995年に上市したGHbVからは非分で出力可能な迅速報告性能と、60検体／時間の処理多孔性陽イオン交換体カラムを用いて不安定型グリコ能力を有する東ソー自動グリコヘモグロビン分析計

ヘモグロビン（L−A1c）と安定型グリコヘモグロビン

HLC−723G8を開発・商品化した。本報告では、この（s−A1c）をカラム上で分離することが可能となり、s−G8の主な仕様およびその基本性能を報告する。

A 1cを再現性良く測定することが可能となった。さらに2000年に上市したG7では分析時間（1.2分）、処理能力50検体／時間の高速・高処理性能を達成した。

２．装置の外観、仕様
装置の外観を図1に、主な仕様を表1に示す。

表１
測定項目
測定対象検体
測定原理
処理時間
検出方式
検体使用量
最大検体搭載数
注入方法
希釈方法
検体容器形状図１

検体ID認識
表示装置
入力装置
出力装置
記憶装置
送液部カラム温調装置外観（ 69 ）

HLC−723G8の主な仕様

HbA1c（s−A1c）、HbF、HbA1
全血、希釈溶血液
イオン交換高速液体クロマトグラフィー
1.0min/検体
2波長吸光度（検出波長415nm）
全血3μL、希釈溶血液80μL
90、100、290検体
サンプルループ（4μL）
希釈槽にて溶血洗浄液で自動希釈
φ12〜φ15×75〜100mm真空採血管
汎用サンプルカップ（アダプタ使用）
最大20桁のバーコード
320×240ドット モノクロ液晶ディスプレイ
圧力感知式タッチパネル・シートキー
サーマルプリンタ
スマートメディア
シングルプランジャーポンプ
電子冷却（25℃）

70

TOSOH Research ＆ Technology Review Vol.50（2006）

結果を示す。待機状態が3時間経過しても初測定の結３．迅速測定性能

果と以降の測定の結果に差はなく、1.0分の予備動作

HPLC法では気泡の混入による送液不良を避けるたで初検体を正確に測定できるようになった。これによめ、減圧脱気装置を利用している。このため、送液がり1 stレポート出力時間を2.0分まで短縮することがで停止する待機中（STAND−BY状態中）に配管内の溶きた。

離液が徐々に濃縮され、待機時間が長くなると初検体が正常に測定できない問題があった。この問題を解消するためには脱気装置を含む配管内の液置換を十分に行うことが必要なため、G7では分析前に2.4分の予備

４．基本性能［1］基本性能

動作を必要とした。

オートサンプラとカラム間の配管容量を低容量化す

G8は脱気装置の配管容量を半分に削減し、さらにることで、G7と同じカラムサイズ（4.6mmI.D.×分析に使用する3種類の溶離液のうち、特に分析結果20mm）を用いて、G7で1.2分を要した分析時間を1.0に大きな影響を及ぼす溶離液を重点的に置換すること分に短縮することが可能となった。クロマトグラムをとした。表2に待機直後から同一検体を連続測定した図2に示す。G7と同じく、ヘモグロビンをA 1a,F,

表２

A1c測定結果に及ぼす待機時間（STABD−BY経過時間）の影響
STAND−BY経過時間（時間）
320
1
5.3
5.4
5.3
5.4
5.3
5.3
5.3
5.3
5.3
5.3
5.3
5.3
5.3
5.3
5.3
5.3
5.3
5.3
5.3
5.3

A0の6分画へ分離可能である。図3にGHbV、G7とのA1c（％）の相関を示す。

［％］
14.0

12.0

y＝0.9889x＋0.0565
r＝0.9993（n＝146）

10.0
G8

1回目
2回目
3回目
4回目
5回目

L−A1c, s−A1c,

A 1b,

8.0

6.0

4.0

2.0
2.0

4.0

6.0

8.0
G7

10.0

12.0

14.0
［％］

［％］
14.0

12.0
y＝1.0111x−0.0669
r＝0.9991（n＝146）

G810.08.06.0
A 1aA 1bF

L−A 1c4.0

s−A 1cA02.02.0

図２

図３

HLC−723G8の測定結果レポートとクロマトグラム（ 70 ）

4.06.08.0
GHbV

10.012.014.0［％］

GHb8と前モデルG7、GHbVとのs−A1c（％）の相関性

東ソー研究・技術報告 第50巻（2006）

相関係数はいずれもr＝0.999以上であり良好な相関71

体で連続再現性、日差再現性ともにCV1.0％以下の良好な再現性を示した。

性を示した。
表3に連続再現性と日差再現性の結果を示す。
A1c（％）の異なる検体で評価した結果、すべての検［2］修飾ヘモグロビンの影響
試料は健常人血に所定量のグルコース、アセトアル

表３デヒド、シアン酸ナトリウムを添加し、35℃で１時間

s−A1c（％）の再現性結果インキュベートし調整した。図4に結果を示す。
連続再現性

平均値
SDCV
（％）

L
5.150.040.72（n＝10）
H
9.760.030.27M
7.450.050.73（1）不安定型グリコヘモグロビンの影響
グルコース添加量の増加とともにL−A1cが増加する
が、s−A1c値は添加量10 g/Lまでは変化せず、影響のないことを確認した。
（2）アルデヒド化ヘモグロビンの影響

日差再現性

平均値
SDCV
（％）

アルデヒドを添加した場合もL−A1cが増加すること（n＝10）
H
9.750.070.74

L
5.210.040.79

から、アルデヒド化ヘモグロビンもL−A1cと一緒に溶出していることがわかる。s−A 1c値への影響はアルデ
ヒド添加量で0.2 g/Lまで認められなかった。
（3）カルバミル化ヘモグロビンの影響
カルバミル化ヘモグロビンもアルデヒド化ヘモグロ
ビン同様にL−A1c分画に溶出した。s−A1c値への影響は

不安定型グリコヘモグロビンの影響

Hb［％］

シアン酸ナトリウム添加量で0.25 g/Lまで認められな6543210かった。
L−A1c
s−A1c［3］干渉物質の影響
遊離型ビリルビン（ビリルビンF）、抱合型ビリル

024681012ビン（ビリルビンC）、乳ビおよびアセチルサリチル
酸の影響を図5及び図6に示す。

グルコース添加量［g/L］

遊離型ビリルビン

アルデヒド化ヘモグロビンの影響

L−A1c
s−A1c8Hb［％］

s−A1c［％］10642000.05

0.1

0.15

0.20.25

6.0
5.5
5.0
4.54.03.53.00.30.000.05

アセトアルデヒド添加量［g/L］

0.150.200.250.200.25

添加量［g/L］

抱合型ビリルビン

カルバミル化ヘモグロビンの影響

6.076543210

s−A1c［％］

Hb［％］

0.10

L−A1c
s−A1c

5.55.04.54.0
3.5
3.000.05

0.10.15

0.20.25

0.30.00

シアン酸ナトリウム添加量［g/L］

図４0.050.100.15

添加量［g/L］

修飾ヘモグロビンがs−A1c（％）に及ぼす影響

図５（ 71 ）干渉物質（ビリルビン）がs−A1c（％）に及ぼす影響

72TOSOH Research ＆ Technology Review Vol.50（2006）

遊離型ビリルビンは0.19 g/Lまで、抱合型ビリルビ
乳ビンは0.20 g/Lまで、乳ビは2100ホルマジン濁度まで添

s−A1c［％］

6.0加の影響を受けなかった。

5.55.0アセチルサリチル酸添加試料は添加後、35℃で1時4.5間インキュベートしたのち測定したが、添加量4.00.25g/Lまで影響を認めなかった。

3.53.00.00

500

1000

1500

2000

2500

５．ま と め

添加量（ホルマジン濁度）

G8は2.0分で1stレポートを出力可能な迅速測定と60検体／時間の高処理能力を実現した自動グリコヘモグ
ロビン分析計である。本開発品は修飾ヘモグロビンおアセチルサリチル酸

s−A1c［％］

よび干渉物質の影響を受けず、日差再現性はCV1％以
6.05.55.04.54.0
3.5
3.0下と再現性に優れ、信頼性の高い測定が可能である。
前モデルであるGHbVおよびG7と高い相関性を維持していることから、高い信頼性と多検体処理が必要とされる検査室において幅広く利用されるものと期待され
0.00

0.050.100.150.200.25る。

0.30

添加量［g/L］

図６

干渉物質（乳ビ、アセチルサリチル酸）がs−A1c（％）に及ぼす影響（ 72 ）