博 士 （ 獣 医 学 ） 岡 本 芳晴
学 位 論 文 題 名天 然 多 糖 届 ― キ チ ン の 創 傷治 癒促 進機 構 解析 とそ の臨 床 効果
学位論文内容の要旨
キチンの創傷治癒促進効果の機序とその臨床効果を解明する目的で，ムラサキイカの軟甲より精製したp・キチンを粉砕器を用いて粉砕したもの（以下キチン―フレークと略す），スポンジ状に加工したもの（以下キチン‐スポンジと略す），ポリエステル製不織布にキチンを含浸させたもの （以下キ チン‑ NWF/Pと略す ），綿 状に加工 したもの（以下キチン・コットンと略す）および ポ リ エステ ル製不 織布（以 下NWF/Pと略す） を用いて ，キチ ンの犬実 験的開 放創に対 する
創傷治癒促進効果と皮下埋設時の周囲組織の反応ならびにその生体内消長，キチンの多形核自血球遊走能および化学発光能に及ぽす影響とキチンの生物活性物質産生効果にっいて実験動物として犬を用いて検討し、きらにそれらの臨床的応用方法と効果にっいて犬，猫及び牛等の臨床例で検討し，以下の結果を得た。
1．キチンの実験的開放創に対する創傷治癒促進効果と皮下埋設時の周囲組織の反応ならびにその生体内消長
1)
実験的開放創に及ぼすキチンの影響
キ チンの存 在により術後4日および7日目に対照群に比べて滲出液の増量，創縁の肥厚がみられ ，28日目に はキチン群では全例上皮形成が完了していた。しかし対照群では，4例中2例しか完了していなかった。組織学的には，4日目にキチン群の創傷深部で対照群に比べて線維芽細胞および新生血管の増殖がみられた。合成されたコラーゲン線維の太さは対照群に比べてキチン群の方が細い傾向を示した。
2）キチン・スポンジの皮下組織への影響とその消長
埋設 後14日目で 5例中4例においてキチンースポンジは完全に消失し，スポンジ接触面に赤色の肉芽組織が形成された。29日目においては埋設部位に結合組織の増生所見はみられず，組織学的にも正常な組織構築が観察された。
3）キチンーNWF/
P堕皮下組織への影響とその器質化
キチン―NWF/P
群 に お いて 埋 設後 2日目 に埋設 部皮膚に わずか な発赤を 認めた が，同時 期
NW
F/P群 でみ ら れ た熟 感 お よび 疼 痛はみら れなか った。埋 設後18日 目に（ま キチン ーNWF/P‑269ー

は完 全に 皮下 組織 で取 り囲まれ，埋設片へ侵入する新生血管が明瞭 にみられた。一方，NWF/
P群ではその周辺に白色を呈した肉芽組織が観察され，埋設片への新生血管は肉眼的にtまみられなか った 。組 織学 的に は， 埋設 後2日 目に 埋設 片周 囲に 炎症 性細 胞の 集簇 がキチン‑ NW
F/P
群に おい て著 明に みら れた 。キ チン ‑ NWF/
P群 では 埋設 後4日 目に は埋 設片 周囲に肉芽組織が観察されたが，この時期対照群では観察されなかった。両群より採取された滲出液中には新鮮な 炎 症 性 細 胞 が み ら れ ， そ の 液 を 細 菌 培 養 し たが ， 細 菌 は 検 出 さ れ な か っ た 。
2．キチンの生物活性効果
1）多形核自血球遊走能に及ぼすキチンの影響
キチ ン・ フレ ーク をさらに粉砕した微粉末キチン （平均粒径1um)をハンクス液に懸濁した液（以下キチン懸濁液と略 す）に対し，多形核自血球は遊走活性を示し，CheckerboardAssayにより検討した結果，キチンは化学走化性および化学運動性の双方の性質を有していることが明らかとなった。その遊走能は同種血清を添加することにより増強された。また，キチン懸濁液の遠心上清は多形核白血球の 遊走能を増強させなかった。
2）多形核自 血球化学発光能に及ぼすキチンの影響
10％同 種血 清添 加状 態 での多形核自血球のルミノール依存性化学発光強度(CL)はザイモザンを100％と した時，微粉末キチンは約30％であった。しかし，同種血清未添加あるいは非動化した同種血清を添加しても化学発光はほとんど起こらなかヮた。新鮮同種血清を微粉末キチンで処理(
37℃， 20分間）した遠心上清を用いて，ザイモザンに対するCLを検討した結果，未処理同種血清を添加した場合よりもCLは約2倍増強された。
3）キチン― ニN
WF/P！三より誘導された 滲出液中の生物活性物質
キ チ ン ‑ NWF/Pを 犬 の 皮 下 に 埋 設 す る こ と に よ り NWF／ Pに 比 べ て 3〜 7倍 の 滲 出 液 がその 周囲 に貯 留し た。 そ の滲 出液 中に は線 維芽 細胞 増殖因子(FGF)様およびイン ターロイキン(IL−1）様 物質 が含 ま れ， さら にプ ロス タグ ライ ディンEz (PGE：）が血清中 の約10倍含まれていた。
3．キチンの 獣医臨床への応用方法の検討とその効果
キチン製材を使用した全例において副 作用はみられなかった。
1)キチンースポンジ
キチン‐スポンジを，ヘルニア，血腫，膝蓋脱臼，抜歯および去勢の手術時に生じた創腔30
例の充填材，外傷25例，膿瘍24
例および感 染性蹄皮炎7例の組織欠損部への充填材あるいは創面被覆材として計86例に使用した結果，77例(90％）が良好な治癒経過を示した。特に腫瘍摘出部に生じた創腔20例に対して充填材として使 用したところ，術後再発した例は1例のみであった。

2）キチ三ニN
WF/P
キチ ン‑ NW
F/Pを， 感染 性蹄 皮炎 12
例 の創 面被 覆材 ，外 傷2例 の組 織欠 損部 への 充填材，腫瘍，ヘルニアお よび血腫の手術時に生じた創腔6例の充填材，さらには臍ヘルニア12例のへル
ニア輪縫合部の補 強材として計32例に使用した結果，26例(88％）が治癒あるいは再発防止効果がみられた。臍ヘ ルニアにおいては術後半年を経過した後も再発はみられなかった。しかし，外傷 への 応用 例お よび 感染 を併 発し た 会陰 ヘル ニア 整復 例においてはキチン ‑ NWF/Pを除去することにより治癒 した。
3)
キチンーコット ン
キチンーコットン を，外傷8例および膿瘍12例の計20例の組織欠損部への充填材あるいは創面被覆材として使用し た結果，18例(90％）が1回から数回の治癒で良好な治癒経過をたどった。
4)
キチンーフレーク
キチン，フレークを外傷9例の組織欠損部への充填材あるいは創面被覆材として使用した結果，8例(89％）が創面に速やかに痂皮を形成することにより治癒した。
以上の結果を総合すると，キチンの存在により炎症性細胞の浸潤が亢進し，血管に富む肉芽組織が速やかに形成され，゛しかも滲出液の貯留はあるもののいわゆる炎症の局所症状はほとんど示さないことが明らかとナょった。さらに，キチンは生体内で2週間以内に速やかに消化されることも明らかとなった。また，キチンは創傷治癒の一段階の主要な構成細胞である多形核自血球の遊走 お よ び 貪 食 能 を 亢 進 さ せ ， 肉 芽 組 織 形 成 に 関与 する FG
F様 およ びIL―1様 物質 なら びにPGエを間接的または直接的に誘導することが明らかとなった。臨床応用とその効果にっいては，
キチン―スポンジは組織欠損部あるいは手術時生じた創腔に対する充填材あるいは創面被覆材，
キチ ン‑ NW
F/Pは感 染性 蹄皮 炎患 部の 創面 被 覆材 ，手 術時に生じた創腔に対する充填材あるいtま組織補強材，キチンーコットンは組織欠損部の充填材あるいは創面被覆材，およびキチン‐フレ

クは創面被覆材として応用することが適当と考えられ，その創傷治癒効果は従来の治療方法によるものに比べて優れていた。

学位論文審査の要旨
主副副副

査
査
査
査

教
教
教
教

授
授
授
授

藤 永
徹
前 出光
板吉 敏
倉 智斉之
藤 昌

本研究は，厶ラサ キイカの軟甲より精製したロ‐キチンを用いてキチンの創傷治癒促進効果の機序の解明とその臨 床効果を判定するために行われたものであり，その内容は以下のように要約される。
1．イヌを用いた実験的創傷作出部において，キチンの存在は炎症性細胞の浸潤を亢進させ，血管に富む肉芽組織 を速やかに形成し，しかも炎症の局所症状はほとんど示さなかったこと，およ び キ チ ン は 生 体 内 で 2週 間 以 内 に 速 や か に 吸 収 さ れ る こ と を 明 ら か に し た 。
2．キチンは創傷治癒の第一段階の主要な構成細胞である多形核自血球遊走能および貪食能を亢進させ，さらに肉 芽組織形成に関与する線維芽細胞成長因子様物質，インター口イキン‑1様物 質な らび にプ ロス タグ ラン ジンE2を間接的または直接的に誘 導することを明らかにした。
3．イヌ，ネコおよびウシ等の臨床例にっいて，種々に加工したキチンの臨床的応用方法とその効果にっいて検討 し，スポンジ状に加工したキチンは組織欠損部あるいは手術時に生じた創腔に対する充填材ある いは創面被覆材として，キチンを含浸させたポリエステル不織布は感染性蹄皮炎患部の創面被覆 材や創腔に対する充填材あるいは組織補強材として，綿状に加工したキチンは組織欠損部の充填 材あるいは創面被覆材として，粉砕器を用いた粉砕したキチンは創面被覆材として応用すること が適切であり，その創傷治癒効果は従来の治療法に比べて優れていることを認めた。
以上のように申請 者は，キチンの創傷治癒促進効果の機序とその臨床応用方法ならびに創傷治癒効果を明らかにし た。この研究成果は獣医臨床外科学の治療法の改善に大きく寄与する。よって，審査員一同は岡 本芳晴氏が博士（獣医学）の学位を受けるに十分な資格を有するものと認めた。