tst 株式会社テゖーエストレーデゖング r-1.0
Research article

Krishanu Sengupta1, Krishnaraju V Alluri2, Andey Rama Satish3, Simanchala Mishra4, Trimurtulu Golakoti5,
Kadainti VS Sarma6, Dipak Dey7 and Siba P Raychaudhuri8

1

Cellular and Molecular Biology Division, Laila Impex R&D Center, Jawahar Autonagar, Vijayawada, 520 007 India

2

Pharmacology Division, Laila Impex R&D Center, Jawahar Autonagar, Vijayawada, 520 007 India

3

Department of Orthopedics, Alluri Sitarama Raju Academy of Medical Sciences (ASRAM), National Highway 5, Eluru, 534 002 India

4

Department of Internal Medicine, Alluri Sitarama Raju Academy of Medical Sciences (ASRAM), National High way 5, Eluru, 534 002 India

5

Drug Discovery and Development Division, Laila Impex R&D Center, Jawahar Autonagar, Vijayawada, 520 007 India

6

Department of Statistics, Prakasam Road, SV University, Tirupati, 517 592 India

7

Department of Statistics, 215 Glenbrook Road, University of Connecticut, Storrs, Connecticut 06269, USA

8

Department of Medicine, Division of Rheumatology, Allergy and Immunology, School of Medicine, U C Davis and VA Medical Center

Sacramento, Hospital Way, Mather, California 95655, USA

Corresponding author: SibaPRaychaudhuri,sraychaudhuri@ucdavis.edu
Received: 24 Nov 2007 Revisions requested: 21 Dec 2007 Accepted: 30 Jul 2008 Published: 30 Jul 2008
Arthritis Research & Therapy 2008, 10:R85 (doi:10.1186/ar2461)
This article is online at: http://arthritis-research.com/content/10/4/R85©2008 Sengupta et al.; licensee BioMed Central Ltd. 本稿はCreative Commons Attribution Licenseの条項に従い、オープンゕクセス（開架式）
で配布される（http://creativecommons.org/licenses/by/2.0）。原著を適切に引用する限り、本文献の自由な転載、配布及び複写を認める。

抄録
緒言：5-Loxin®は 3-O-acetyl-11-keto--ボスウェリゕ酸（AKBA）を

結果：試験を完了した被験者は 70 人であった。試験終了時、5-Loxin®

30%含有するボスウェリゕセラータ由来新規抽出物であり、5-リポキシの投与は臨床的にも統計学的にも OA 患者の疼痛値と身体機能評価値をゲナーゼ酵素を阻害することにより抗炎症作用を示す。90 日間の二重盲顕著に改善していた。ここで興味深いのは、250 mg の 5-Loxin®投与群

検、無作為化、プラセボ比較による臨床試験を行い、膝関節の変形性関節において、投与開始から 7 日目という早期に疼痛値と身体機能が顕著に症（OA）治療における 5-Loxin®の有効性と安全性を評価した。

改善されていたことである。投与群における疼痛値の改善とともに、滑液中のマトリクスメタロプロテゕーゼ-3 が顕著に低下していることも認め

方法：本試験では75人のOA患者を組み入れ、5-Loxin®100 mg群（n =25）、5-Loxin®

た。プラセボ群と治療群の安全性項目はほとんど変化していなかった。

250 mg群（n = 25）、プラセボ群（n = 25）に割り付けて1日1回90日間の投与を実施した。各被験者の疼痛及び身体機能を、

結論：5-Loxin®はOA患者において疼痛を緩和し、身体機能を有意に改善

基本評価時（0日）、7日、30日、60日、90日目に、標準ツール（視覚的する。また本剤はヒトが服用しても安全である。5-Loxin®は炎症促進仲ゕナログ尺度（VAS）、Lequesne’s機能゗ンデックス、Western Ontario

介因子の低下によって炎症反応を抑制し、その効果を発揮すると考えられand McMaster Universities Osteoarthritis Index）によって評価した。

る。また、OA患者における軟骨の酵素分解を抑制することで、関節の健さらに、OA患者から採取した滑液中の、軟骨組織を損傷する酵素である康を改善すると思われる®

マトリクスメタロプロテゕーゼ-3も評価した。OA患者における5-Loxinの安全性を評価する為に、血清中の生化学的項目と血液化学的項目の一連試験登録（臨床試験登録番号：ISRCTN05212803）。

の検査及び尿検査を行った。

1tst 株式会社テゖーエストレーデゖング r-1.0
緒言番号4477/05）。

変形性関節炎（OA）は炎症性関節疾病として最も頻度が高く、関節周囲の骨反応を伴う関節軟骨の分解を特徴とする[1,2]。米国ではOA患者が非常に多くの臨床試験報告で、ボスウェリゕ抽出物の抗炎症性及び抗関節2100万人にも達し、うち25%が開業医に通院している。65歳までの成人炎性が裏付けられているが[16-19]、われわれの知る限り、OA患者におにX線検査を実施すると、80%にOAがあると推定されるものの、60%しけるAKBA含有5-Loxin®の有効性に関する報告は発表されていない。そこ

か自覚症状がないという[3]。膝関節のOAの臨床的症状は、主には、関節で、二重盲検プラセボ対照による本試験を用いて、膝関節OAの治療にお内及び関節周囲の疼痛、休息後の硬直性（こわばり）、屈伸時の捻髪音（ぱける5-Loxin®の有効性と安全性を評価した。OA患者の疼痛、関節の硬直

ちぱちという音）、可動域の制限である[4]。OA管理に関して現在推奨さ性及び死亡率に対する、100 mg/日及び250 mg/日の5-Loxin®の有効性れていることは、治療の重要な目標として、疼痛及び硬直性の緩和と身体を評価した。また5-Loxin®が投与されたOA患者の、軟骨分解酵素MMP-3

機能の改善が中心である[5,6]。現在大半の症例には、ゕセトゕミノフェに対する効果を検討した。

ンなどの非オピオ゗ド鎮痛剤やシクロオキシゲナーゼII阻害剤などの非ステロ゗ド性抗炎症剤（NSAID）が処方されている。これらの薬剤は痛材料及び方法

みと炎症をきわめて効果的に低減させるものの、NSAIDの長期服用は消被験者のリクルート化管出血、高血圧、鬱血性心不全、腎不全などの副作用を引き起こすこと

本試験は2006年7月から2006年10月の期間に゗ンドAndhra Pradesh、が明らかになっている[7-9]。非選択的NSAIDとシクロオキシゲナーゼII

EluruのAlluri Sitarama Raju Academy of Medical Sciences（ASRAM）

選択的NSAIDのいずれも有害事象の発生率が高い為、これに代わる有効において実施された（臨床試験登録番号：ISRCTN05212803）。このプ

かつ安全なOA治療薬が早急に必要とされている。

ロトコールはASRAMの治験審査委員会により評価・承認された。本臨床試験の概要を図1に示す。試験はASRAM病院の整形外科外来に来院した

近年、古代からのハーブであるボスウェリゕセラータから抽出される樹脂

823人中、第一次査定としてOAと一致する自覚症状・他覚所見、エックが、強力な抗炎症剤、抗関節炎剤及び鎮痛剤として大きな注目を集めていス線画像で変化が見られた236人を選択した。内側の脛骨大腿関節OAを3る[10,11]。3-O-acetyl-11-keto--ボスウェリゕ酸（AKBA）はボスウ

ヵ月以上にわたって呈する75人を対象／除外基準（表1）を用いて選択しェリゕ抽出物の主な有効成分で、5-リポキシゲナーゼ（5-LOX）の強力た。被験者全員から治験審査委員会の承認した゗ンフォームドコンセントな阻害剤であることが実証されている。この5-LOXは、細胞の炎症カスケ

文書への署名を取得した。被験者は、OA以外は健康な40歳以上で、米国ードの中で、ゕラキドン酸からロ゗コトリエンを生合成する重要な酵素でリウマチ学会の分類基準を満たしOAであると診断された者であった[4]。

ある[12,13]。

リクルートの後、被験者を無作為に3群に分けた。この人口統計学的デー
タ及び基準の特性を表2に示す。

®

5-Loxin はAKBAを30%含有する新規のボスウェリゕセラータ抽出物である（米国特許登録番号：2004/0073060A1）。ゕルビノ・ウゖスター®

被験者は登録前、処方量のNSAIDを30日間以上服用するか、またはゕセ系ラットのカラギーナン誘発性炎症モデルでは、5-Loxin 投与により足トゕミノフェンを1200～4000 mg/日の用量で定期的に服用し（過去30の炎症が顕著に改善した[14]。スプラーグドリーラットを用いた細胞ベ日のうち25日以上）、治療効果を認めていたことが条件であった。休薬®

ースのin vitro試験及びin vivo試験から、5-Loxin が炎症促進性サ゗トカ

により規定の再発基準を満たした被験者を、適格とした。スクリーニング

゗ン（腫瘍壊死因子、゗ンターロ゗キン-1）を阻害する可能性が示唆

時には、最も痛みがある膝屈伸時のVAS値が40～70 mmであり、通常治された（未発表データ、Sengupta K、Alluri KV、Golakoti T）。さらに、療を終えて7日後にLequesne機能゗ンデックス（LFI）が7点を超える必Affimetrix社製遺伝子チップ解析から、5-Loxin®はヒト微細血管内皮細胞要があった。

に発現する腫瘍壊死因子-誘導性のマトリクスメタロプロテゕーゼ（MMP）類、接着分子（細胞間接着分子-1、血管細胞接着分子-1など）、

試験デザインゕポトーシスメデゖエーター類の遺伝子発現を阻害する可能性が実証さ中等度から軽度のOA症状を有する被験者75人を試験に組み入れた。それ

れた[14]。重要な点は、ラットによる急性及び用量依存性亜慢性の広範ぞれの被験者を、適格性が確認されたコンピューターソフトウェゕ

®

な安全性試験では、5-Loxin がヒト換算投与量の2000～3000倍量の投（RANCODE、IDV、ド゗ツ、ガウテゖング）で作成した乱数表を用いて与によっても毒性の兆候を示さなかったことである[15]。加えて、標準投与群に無作為に割り付けた。組み入れられた順番のみを使って被験者を®

的なバクテリゕ復帰突然変異試験（AMES試験）によって、5-Loxin は遺割り付けたことから、選択バ゗ゕスは最小のものとなった。治験薬学者と伝毒性も有さないことが示された（INTOX、375、Urawade、

治験統計学者により、治験コードの盲検性が保証された。

Pirangut-Urawade Road、Tal.Mulshi、Pune–412108、゗ンド、試験2tst 株式会社テゖーエストレーデゖング r-1.0
表1
対象／除外基準
基準

詳細

対象基準



患者がプロトコールの危険性と利点とを理解し、゗ンフォームドコンセントを提出できること



年齢40～80歳の男女



妊娠可能な女性は適切な避妊を行うことに同意し、妊娠テスト結果が陰性であること



片膝または両膝のOAが3ヵ月以上継続していること

通常の投薬を中止して7日後に、最も痛みがある膝の屈伸のVAS値が40～70 mmであること



通常の投薬を中止して7日後に、Lequesne機能゗ンデックスが7点以上であること



歩行可能であること



治験に常時参加が可能であること



関節炎症または重度関節リウマチの既往歴がある場合



高尿酸血症（>440 mol/L）または痛風の既往歴（もしくはその両方）がある場合

最近（過去4ヵ月以内）、OAに罹患した膝の領域に外傷を受け、今後4ヵ月以内に手術が予定されている場合



過去3ヵ月間に関節腔内コルチコステロ゗ド注射を受けている場合



NSAIDに過敏症、肝機能または腎機能検査に異常、消化性潰瘍及び上部消化管出血、鬱血性心不全、高血圧、高カ

除外基準

リウム血症の既往歴がある場合



完全血球算定値に重大な異常所見、凝固異常の既往歴、血液学的または神経学的障害がある場合

ゕルコール摂取量が多い場合（1日に2杯以上の標準摂取）

妊娠中、授乳中、または試験期間中に妊娠の予定がある場合

゗ブプロフェン以外の禁忌薬を併用している場合

肥満（BMI30 kg/m2）

被験者は3群に分けられ、それぞれプラセボ群（n = 25）、5-Loxin®

プセルを1日2回投与する高用量群（250 mg/日）（n = 25）とした。プ

（30%AKBA含有ボスウェリゕセラータ）を50 mg含有するカプセルを1ラセボ群には、米糠を同じ色・味・外観のカプセルに入れたものを1日2日2回投与する低用量群（100 mg/日）（n = 25）、125 mg含有するカ回投与した。

表2
患者の人口統計学的データ及び基準の特性
特性プラセボ群 (n=23)

100mg/日 5-Loxin® (n=24)

250mg/日 5-Loxin® (n=23)

5/18

7/17

8/15

年齢

52.43±9.65

52.37±8.3753.22±8.73

体重（Kg）

61.48±10.69

61.08±10.67

54.84±10.19

BMI（Kg/m2）

26.05±4.29

25.91±4.94

22.64±4.07

VAS（mm）

56.88±12.04

57.05±8.71

55.62±9.26

LFI

12.76±2.6

12.1±2.76

12.04±3.03

疼痛値38.04±9.7

48.08±14.05

37.17±13.8

硬直性33.15±13.3

31.8±17.6

27.7±16.8

身体機能値

41.3±9.6

41.5±11.1

38.6±11.1

性別（男性/女性；n）

WOMAC

3

tst 株式会社テゖーエストレーデゖング r-1.0
図1

一次募集（n=236）
治験除外（n=161）
除外基準不適格者

最終治験対象者/ランダム化（n=75）

プラセボ群

5-Loxin®（100mg/日）

5-Loxin®（250mg/日）（n=25）（n=25）（n=25）

離脱

離脱

離脱

(n=2)

(n=1)

(n=2)

完了

完了

完了

（n=23）（n=24）（n=23）

本試験に参加した被験者の内訳を示すフローチャート。基準日（0日目）及びフォローゕップ期間中の7日目、30日目、60日目、90日目に身体機能、疼
痛値、血清生化学検査、血液学的検査、尿検査、炎症性サ゗トカ゗ンを評価した。マトリクスメタロプロテゕーゼ-3の評価は0日目と90日目に実施した。

各被験者には基準評価日及び 7、30、60、90 日目のフォローゕップ時にあり、それぞれの質問についてNU尺度を用いて0 mm（「硬直性なし」）

人口統計学的特性、治療履歴、栄養状態などを質問表に記入してもらった。

から100 mm（「極度の硬直性」）で評価した。身体機能に関する下位

基準評価時と 90 日期間中の各フォローゕップ時とに、全被験者の疼痛値

尺度は8～24番の質問の平均であり、それぞれの質問についてNU尺度をと身体機能とを評価した。評価するすべての日に、様々な血清生化学検査、用いて0 mm（「障害なし」）から100 mm（「極度の障害」）で評価し血液学的検査、尿検査を行った。血清サンプルはすべてのフォローゕップ

た。これらの評価項目の解析は、ベースラ゗ンから90日間の時間加重平時に採取し、炎症促進仲介因子を測定した。基準評価時と 90 日目に膝関均の変化に基づいた。

節から滑液を無菌的に採取し、MMP-3 濃度を評価した。来院時及び被験者から副作用の報告があった場合に臨床評価及び検査値評価を行い、安全

血液学的評価と生化学的評価性をモニタリングした。

5-Loxin®の安全性を評価する為に、治験実施期間の各来院時に被験者全員から血清、尿及び全血を採取した（表3）。血清中 生化学的因子と血身体機能障害と疼痛値の評価

液学的因子とは、自動分析装置HumaStar 300（Human社、ド゗ツ、ウ

被験者から報告された身体機能障害は治験担当医師によって、基準評価時

゗ースバーデン）及び血液学的カウンターHumacount（Human社）をと全フォローゕップ時（7、30、60、90日目）に評価された。質問表に用いて分析した。尿分析は顕微鏡及びUroColorTM10 Dip Sticks

基づいた痛み、硬直性及び身体機能の評価は、Western Ontario and（Standard Diagnostics社、韓国、京幾道）を用いて行った。

McMaster Universities Osteoarthritis Index（WOMAC）゗ンデックス[20]、LFI[21]、VAS[22]によって評価した。WOMAC゗ンデックスからは痛み、硬直性、身体機能の3つの下位尺度の値が得られる。WOMAC下位尺度は標準化単位（NU）で0～100に変換される[23]。痛みに関する下位尺度は、WOMACの最初の5つの質問の平均であり、それぞれの質問についてNU尺度を用いて0 mm（「痛みなし」）から100 mm（「極度の痛み」）で評価した。硬直性に関する下位尺度は6～7番の質問の平均で4tst 株式会社テゖーエストレーデゖング r-1.0
表3

緊急時の治療薬

血清中 生化学因子、血液学的因子、尿分析

被験者から医師に報告された疼痛強度に基づき、緊急時の鎮痛剤として7、

分析
血清中 生化学因子

詳細30、60日目に゗ブプロフェン400 mg錠（最高で400 mgを1日3回、1,200

ゕルブミンmg）が処方された。ただし、被験者には評価日の少なくとも3日前から

ゕルカリフォスフゔターゼ

は鎮痛剤を服用しないように指導された。治験期間中はこれら以外のOA

総ビリルビンへの介入処置は禁止した。

コレステロールクレゕチニン

統計解析

クレゕチンキナーゼ-N-ゕセチルシステ゗ン

基準日、7、30、60、90日目における疼痛値と身体機能値の改善、生物

グルコース

分子マーカーの査定とについて、2通りの5-Loxin®投与群の有効性をプラ

高密度リポタンパクセボ群と比較する為に、SASソフトウェゕを用いて詳細な統計解析を行っ

低密度リポタンパクた。ペゕ間の変化は、全ての可能なペゕについて最小有意差検定を行い検カリウム証した。実施群の効果の有意性については、一元配置分散分析（ANOVA）

血清トランスゕミラーゼ法により行い、更に、ターキー多重比較試験を用いて比較した。P < 0.05

血清ピルビン酸トランスゕミラーゼとなる結果を統計学的有意と見なした。

トリグリセラ゗ド類

血液学的因子尿分析

尿素

本試験は90日間の3群（5-Loxin®2用量群及びプラセボ群）、無作為、二RBC/WBC 球数、血球分画数

重盲検、プラセボ比較による単施設試験である。主要目的は5-Loxin®の

赤血球沈降速度

疼痛、身体機能及び関節の硬直性に対する効果を明らかにすることであっヘモグロビン

た。検出力の計算で、変動に関する推定値と各投与群の推定平均変化量は、血小板数

OA患者について以前に行われたセレコキシブ、エトリコキシブ、ロフェ

平均赤血球容積コキシブのプラセボ対照試験に基づいた[24-27]。我々は、平均変化量の平均赤血球ヘモグロビン量変化のみならず、標準偏差を平均で1変化させるような平均的な改善を比重もたらす介入の方が結果として大きな意義を持つと仮説し[28]、実薬のpH投与により平均で標準偏差が0.9以上となる状態を検出するために、少ゕルブミン

なく見積もっても80%以上の検出力を持つよう試験を設計し、その平均

胆汁塩

改善量の群間差をANOVA法で検定した（=0.05、両側）。1群あたり25

胆汁色素人の被験者を組み入れた場合、特定の投与量の被験者の10%以上に少な

グルコース

くとも1件の副作用を93%の確率で観察すると考えられた。

RBC
ケトン体

結果
基準特性

滑液中のマトリクスメタロプロテアーゼ-3の評価

人口統計学的変数、基準の疾患特性、評価項目基準値（すなわちWOMAC

MMP-3（R&Dシステム社、米国ミネゕポリス）は、超高感度ELISA法をによる疼痛、身体機能、硬直性のサブスコゕ）を比較した記述統計量を（表用いて定量的に計測した。ゕッセ゗手順は、製造業者のプロトコールに従2）に示す。全体として、性別、年齢、体格指数（BMI）及び疼痛の重症って行った。捕捉用抗体でコートした96ウェルマクロプレートで滑液検度について、5-Loxin®低用量群（100 mg/日、n = 25）、5-Loxin®高体を゗ンキュベートした。特異的結合抗原は適当なビオチン化検出抗体で用量群（250 mg/日、n = 25）及びプラセボ群（n = 25）は同等であっ

検出し、ホースラデゖッシュペルオキシダーゼ酵素で標識した。特異的免た（表2）。被験者は3群に無作為に分けられた。性別、BMI及びWOMAC

疫反応を基質液で検出し、マ゗クロプレートリーダー（Bio-Rad社、米国

数値の基準特性に若干の差はあったものの、統計学的に有意ではなかった。

カリフォルニゕ州ハーキュリーズ）によって発色を計測した。既知濃度のMMP-3での吸光度をプロットし、検量線を作成した。MMP-3検出ELISA

臨床的有効性

キットの感度は9 pg/mLである。

試験90日目の各群の数値を比較したところ、5-Loxin®は両用量群とも基5

tst 株式会社テゖーエストレーデゖング r-1.0
準日と90日目の間で、OA患者の疼痛値及び身体機能値を臨床的かつ統計

また、WOMACの硬直性とWOMAC身体機能の数値はそれぞれ42.5%（P学的に有意に改善した（表4）。

= 0.120）及び28.62%（P = 0.100）の改善が得られた（表4）。高用量群（250 mg 5-Loxin®）はプラセボ群に比べ、すべての項目で統計学

ターキー多重比較試験によって、低用量群（100 mg 5-Loxin®）ではプ的に有意な改善が示された（表4）。高用量群での改善は、VAS、LFI、ラセボ群に比べVAS、LFI、WOMAC疼痛値がそれぞれ48.83%（P <WOMAC疼痛値、WOMAC硬直性、WOMAC身体機能値について、それぞ

0.001）、23.79%（P < 0.036）、39.61%（P = 0.009）改善される

れ65.94%（P < 0.001）、31.34%（P< 0.017）、52.05%（P < 0.001）、

ことが明らかになった（表4）。

62.22%（P = 0.014）、49.34%（P = 0.002）であった。

表490日間の5-Loxin®低用量群、高用量群のスチューデントのt検定における比較数値
有意差 95%
n

0日平均値

標準偏差

90日平均値

標準偏差

P(対 プラセボ群)

視覚的ゕナログ尺度
プラセボ群

23

56.88

12.04

41.76

15.98

<0.05

100mg 5-Loxin®

24

57.05

8.71

21.37

7.13

-27.67,-13.11<0.0001

250mg 5-Loxin®

23

55.62

9.26

14.22

6.8

-34.94,-20.19<0.0001

プラセボ群

23

12.76

2.6

10.19

3.24

100mg 5-Loxin®

24

12.1

2.76

7.78

4.61

-4.74,-0.07<0.0001

250mg 5-Loxin®

23

12.04

3.03

7

3.5

-5.19, -1.18<0.0001

プラセボ群

23

38.04

2.03

31.74

2.58

100mg 5-Loxin®

24

42.08

2.93

19.17

3.55

-21.33, to -3.83<0.0001

250mg 5-Loxin®

23

37.17

2.88

15.22

2.50

-23.78 to -9.28<0.0001

プラセボ群

23

33.15

2.73

24.45

2.37

100mg 5-Loxin®

24

31.77

3.61

14.06

3.71

-38.87,-6.85<0.0001

250mg 5-Loxin®

23

27.72

3.44

9.24

2.07

-43.35,-17.45<0.0001

プラセボ群

23

41.30

2.02

34.07

1.09

100mg 5-Loxin®

24

41.48

2.31

24.32

4.28

-18.64, -0.82<0.0001

250mg 5-Loxin®

23

38.56

2.32

17.267

1.98-21.39, -12.23<0.0001

プラセボ群

15

902.1

275.6

928.5

216.020.4886100mg 5-Loxin®

16

893.6

270.1

637.2

224.5

<0.0001

250mg 5-Loxin®

14

926.9

270.5

497.5

167.5

<0.0001

Lequesne’s機能゗ンデックス
0.031

WOMAC疼痛値
0.1212WOMAC硬直性
0.2983

WOMAC身体機能値
0.1048

MMP-3（ng/ml）

WOMAC, Western Ontario and McMaster Unversities Oseoarthiris Index.
MMP, Matrix Metalloproteinase6

tst 株式会社テゖーエストレーデゖング r-1.0
スチューデントの t 検定から滑液中の MMP-3 濃度及び VAS 疼痛値は、

VAS はプラセボ群に比べて低用量群と高用量群でそれぞれ 10.09%（P =高用量群で低用量群に比べて有意に低いことが明らかにされた（それぞれ0.05）と 12.18%（P = 0.02）低下していた。さらに、WOMAC 身体機

P < 0.0001 と P = 0.001）。低用量と高用量のいずれも、7 日という短能値も 7 日間の低用量 5-Loxin®投与後に 14.38%（P < 0.01）改善して期間の治療で疼痛値と身体機能値の改善を示したこと、さらに 90 日の投いた（図 2）。

与期間を通して改善が継続したことは注目に値する（図 2）。7 日目以降、

図2

視覚的ゕナログ尺度

Lequesne’s 機能゗ンデックス

プラセボ群
100mg 5-Loxin®
250mg 5-Loxin®

WOMAC 疼痛値

WOMAC 硬直性

WOMAC 身体機能値

身体機能、疼痛、関節の硬直性のスコゕ。低用量群（5-Loxin® 100 mg）、高用量群（5-Loxin® 250 mg）、プラセボ群の評価項目別の各時点での平均値を示す。評価項目は (a) 視覚的ゕナログ尺度、(b) Lequesne’s機能゗ンデックス、(c) WOMAC疼痛値、(d) WOMAC硬直性 (e) WOMAC身体機能値。グラフの各棒は平均濃度標準偏差を示す。ターキー多重比較試験を用いて、実薬群の数値の変化をプラセボ群と比較して有意性を検討した。ゕ
スタリスク（*）を付した部分が有意性を示す。

7

tst 株式会社テゖーエストレーデゖング r-1.0
MMP-3濃度の評価

生化学的評価OAは変性関節疾患、すなわち分子的発症においてMMPなどのタンパク質

安全性評価の一環として、血清及び尿中の様々な生化学的項目及び血液学

分解酵素が血清や滑液などの体液中で大きく増加して軟骨組織に損傷を的項目を評価する為にラボ試験を行った。血清生化学試験、血液学的検査、もたらす疾患である[29]。したがって、5-Loxin®投与がMMPレベルを正尿検査において検討した項目を表3にまとめた。基準日から90日目までの常化できるかを明らかにする為、被験者から採取した滑液のMMP-3濃度

差を、反復測定ANOVA法で検定した。F比率はP < 0.05の場合に有意とを評価した。図3は、試験に含まれた全群の被験者から収集した、滑液サ見なされる。項目の中には僅かな変化を認めたものもあったが、正常なラ

ンプル中のMMP-3濃度の変化を示している。対比較から、いずれの投与

ボ試験の変動幅内であった。これらの項目の統計解析から、統計学的に有群でも治験終了時には滑液中のMMP-3がきわめて有意に低下しているこ

意な変化は特定されなかった。同様に、血液学的検査及び尿検査項目につ®

とが示された。低用量（100 mg）及び高用量（250 mg）の5-Loxin 群

いても、実薬群とプラセボ群間に有意な変化は示されなかった（データ表ではMMP-3濃度はプラセボ群と比較してそれぞれ31.37%（P = 0.002）示せず）。これらの所見はさらに、ヒトにおける5-Loxin®の安全性を実及び46.4%（P < 0.001）低下していた。通常のt検定から、高用量証するものである。

5-Loxin®投与によって滑液中MMP-3濃度が低用量群に比べ有意（P <0.0001）に低下することが明らかにされた（表4）。また、ウゖルコクソ

副作用

ンの符号付き順位和検定を行ったところ、90日目の滑液中MMP-3濃度は90日間の治験中に、下痢、吐き気、腹痛、微熱（最高37.5°C）、全身脱基準値に比べ低用量と高用量群でそれぞれ28.69%（P = 0.0013）及び

力感といった軽度の副作用がいくつか認められた。これらの副作用を発現

46.33%（P < 0.0001）低下していることが明らかとなった。プラセボした被験者はプラセボ群と投与群でほぼ同数であった。治験中に被験者か群のMMP-3レベルは、基準値に比べ90日目で実際に変化していなかった。

ら報告された軽度の副作用の数を（表5）に示す。

離脱者数
図3

治験期間中、ウ゗ルス感染により5例の被験者が治験から除外された（低用量群1例、プラセボ群及び高用量群で各2例）。なお、感染は致死性でMMP3 濃度（ng/ml）はなかった。

考察
われわれの知る限り、本研究は OA における 5-Loxin®の有効性を評価した、初の臨床試験である。本試験から、OA 治療において植物由来の抗炎

0日
90 日

症成分が示す分子的作用機序に関する重要な情報も得られた。我々は、OA 患者の疼痛緩和と身体機能改善における 5-Loxin®の有効性を実証した。本試験の新規な点は、OA 患者の滑液に含まれる軟骨分解酵素 MMP-3に対する 5-Loxin®投与の効果を評価したことにある。90 日間の臨床試験

プラセボ群

100mg

250mg

(n=15)(n=16)(n=14)

で、OA 患者における 5-Loxin®の安全性についても評価した。

滑液中のMMP-3濃度の低下。5-Loxin®2用量群及びプラセボ群に割り付OA の主な臨床症状は疼痛、関節の硬直性、関節の可動域の低下、身体機

けたOA患者から採取した滑液中のMMP-3濃度を示す。プラセボ群の能障害である[1,30]。我々の試験から、5-Loxin®が OA 患者の疼痛、関MMP-3濃度は基準日と90日目で有意な変化を示さなかった。5-Loxin®群

節の硬直性及び身体機能を改善する可能性が実証された（図 2）。統計解（100 mg及び250 mg）のMMP-3濃度はプラセボ群と比較してそれぞれ析から、実薬群でプラセボ群よりも身体機能項目が改善し、滑液中の31.37%（P = 0.002）及び46.4%（P < 0.001）の低下を示した。実薬

MMP-3 濃度が有意に低下していることが明らかにされた（図 2 及び図 3）。

群間でのMMP-3濃度の変化は統計学的に有意ではなかった（P = 0.213）。

更に、投与群における改善の程度を確認する為、基準日と 90 日目の間でグラフの各棒はMMP-3（ng/mL滑液）の平均濃度標準偏差を示す。

全項目のデータを比較した。対応のある t 検定から、両投与群は全項目について、統計学的にきわめて有意に改善されていることが明らかにされた。

8

tst 株式会社テゖーエストレーデゖング r-1.0
表5副作用の発生副作用

プラセボ群（n=23）

100mg/日 5-Loxin®（n=24）

250mg/日 5-Loxin®（n=23）

下痢

3

2

2

吐き気

1

3

2

嘔吐

1

1

1

腹痛

4

2

2

足浮腫

0

1

0

痒み

2

1

4

脱力

2

4

2

便秘

0

0

1

微熱（最高 37.5℃）

1

2

2

胃炎

4

0

3

ゕレルギー ※1

3

0

1

頭痛

0

0

1

その他 ※2

9

2

6

30

18

27

※1 皮膚の赤み、鼻炎を含む※2 体の痛み、抜け毛、胸の痛み、眼感染症を含む

高用量群と低用量群を 90 日目に比較したところ、疼痛に関する VAS とOA 患者では MMP-3 などの MMP が過剰発現し、関節腔滑液に大量に存

滑液中の MMP-3 濃度についてのみ有意差を認めた（表 4）。この所見は、在して、軟骨組織の破壊をもたらす[35,36]。5-Loxin®は滑液中の高い

高用量の 5-Loxin®の方が OA に対する治療効果に優れることを示唆して

MMP-3 レベルを低下させることもできた。この所見は、5-Loxin®によるいる。プラセボ群では基準値に比べ、VAS 値、LFI、WOMAC 値が低下す

滑液中の MMP-3 レベルの低下は、OA における異常な関節の生理の改善

る傾向があることを認めた。これは、質問表を記入する間のプラセボ効果と一致することを示唆している。したがって、これらのデータを統合する[31,32]に起因する部分と、また、治験中プラセボ群の方が緊急時の治療と、5-Loxin®が疼痛を緩和して生理機能を改善し、関節の健康を維持す

薬として゗ブプロフェンを服用した被験者数が多い為と考えられる。試験るという点で有効である可能性が示される。これらの改善は、MMP-3 な

終了時までに緊急時の治療薬を必要とした合計被験者数が、

ど軟骨分解酵素の抑制によって生じる可能性がもっとも高い。

5-Loxin®100 mg 群及び 250 mg 群に比べプラセボ群の方がそれぞれ16.7%及び 72.2%多かったことが注目に値する。

過去に行われた急性及び亜慢性の毒性研究で、ラットに5-Loxin®（ボス
ウェリゕ抽出物の有効成分であるAKBAを、30%含有する製剤）を投与し本試験における重要な観察事項として、250 mg/日の 5-Loxin®投与が、た場合の安全性及び無毒性が実証されていた[15]。さらに、5-Loxin®は治療を開始して 7 日目という早期に OA 患者の VAS 値を 12.18%（P =標準的AMES試験で変異原性を示さなかった（INTOX、試験番号0.02）、WOMAC 機能障害値を 14.38%（P < 0.01）低下させた点が挙4477/05）。今回の試験では、血清中の生化学的項目、血液学的項目及®

げられる。以上の所見は、5-Loxin が、OA 患者の迅速かつ顕著な疼痛緩び尿検査（表3）でも、OA患者に対する被験物質に起因する重大な副作用

和と身体機能改善に寄与することを示している。これまでに得られているは明らかにされなかった。以上を考え合わせると、これらの観察はさらに、情報から、グルコサミンが OA の疼痛緩和に顕著な効果を発揮する為には、

5-Loxin®がヒトにおいてOAの治療に安全である可能性を実証している。

通常 6 週間を必要とすることが明らかになっている[33]。さらに、無作
為化、二重盲検、プラセボ対照試験から[34]、1 日 4,000 mg の乳タン

結論

パク濃縮液（MicrolactinTM、 Stolle Milk Biologics Inc.、米国オハ゗オ

まとめると、今回の試験は、OA 患者において 5-Loxin®が有効かつ安全

州シンシナテゖ）を OA 患者に 2 週間摂取させると WOMAC 値が有意にである可能性を裏付ける証拠を提供している。すなわち、5-Loxin®は関

改善することが明らかにされている。

節機能を有意に改善し、100 mg/日よりも 250 mg/日で高い治療効果を9

tst 株式会社テゖーエストレーデゖング r-1.0発揮する。治療開始から 1 週間という早期に疼痛を緩和し、滑液中の軟Grif-fin MR, Moskowitz RW, Schnitzer TJ: Guidelines for the

骨分解酵素である MMP-3 レベルを低下させる。最も重要な点は、長期投

medicalmanagement of osteoarthritis. Part II. Osteoarthritis of

与の場合でもヒトでの摂取が安全であるという点である。本試験から、

theknee. American College of Rheumatology.

OA 治療における 5-Loxin®の有効性と安全性に関する重要な情報が得らRheum1995, 38:1541-1546.

れた。この情報は、OA に対する栄養補助剤として使用するなど将来有望

5.

Anonymous:

Recommendationsfor

Arthritisthemedicalな治療戦略として、今後 5-Loxin®の開発を進めていく上で有用であるとmanagementof osteoarthritis of the hip and knee: 2000

思われる。

update: AmericanCollege of Rheumatology Subcommittee on
OsteoarthritisGuidelines.

Arthritis

Rheum

2000,

43:1905-1915.

競合利益
本試験は Laila Impex R&D センター（゗ンド）から資金提供を受けて行6.

Pendleton A, Arden N, Dougados M, Doherty M, Bannwarth

われた。KS、TG 及び KVA は Laila Impex 研究センター（゗ンド・ヴゖ

B,Bijlsma JW, Cluzeau F, Cooper C, Dieppe PA, Günther

ジャワヤダ）の社員である。ARS 及び SM は ASRAM（゗ンド・エルール）

KP,Hauselmann HJ, Herrero-Beaumont G, Kaklamanis PM,の社員である。KVSS（SV 大学、゗ンド・テゖルパテゖ）、DD（コネチ

Leeb B,Lequesne M, Lohmander S, Mazieres B, Mola EM,

カット大学、米国コネチカット州ストールズ）、SPR（カリフォルニゕ大Pavelka K, SerniU, Swoboda B, Verbruggen AA, Weseloh G,

学デービスメデゖカルセンター、カリフォルニゕ州・デービス、VA メデ

Zimmermann-GorskaI: EULAR recommendations for theゖカルセンター、カリフォルニゕ州サクラメント）は Laila Impex 研究management of osteoar-thritis: report of task force standing

センターのコンサルタントである。

committee

for

Therapeutic

Interna-tional

TrialsClinical(ESCISIT).Ann

Studies

Rheum

including

Dis

2000,

59:936-944.

筆者の関与
KSは原稿作成の第一責任者であり、プロジェクトのデザ゗ンとデータ解7.

G:

Recentconsiderations

innonsteroidal

anti-inflamma-tory drug gastropathy. Am J Med 1998, 105:.

析に貢献した。KVAはプロジェクトのデザ゗ン、患者のリクルートと管理、
データ収集を担当した。ARSとAMは゗ンフォームドコンセントの入手、

Singh

8.

GriffinMR:

Epidemiology

ofnonsteroidal

臨床評価の実施、サンプルの採取、5-Loxin®の治療反応の評価を行った。

anti-inflammatorydrug associated gastrointestinal injury. Am

TGは治験コーデゖネーターであり、原稿の見直しに協力した。KVSSとJ Med 1998, 104:.

DDは臨床データの解析に協力した。SPRは試験のデザ゗ン作成、データ

9.

WrightJM:

Double-edged

sword

of

COX-2

selective

NSAIDs.CMAJ 2002, 167:1131-1137.

解析の実施、原稿作成に協力した。

10. Singh GB, Atal CK: Pharmacology of an extract of salai
謝辞

guggalex-Boswellia

serrata,a

newnon-steroidal

本試験はLaila Impex R&Dセンター（゗ンド）から資金提供を受けて行

anti-inflammatoryagent. Agents Actions 1986, 18:407-412.
11. Ethan B, Heather B, Theresa DH, Ivo F, Sadaf H, Jens H, David

われた。

S,Catherine U: Boswellia: An evidence-based systematic
参考文献

reviewby the natural standard research collaboration.

1.

HerbalPharmacother 2004, 4:63-83.

Felson DT: An update on the pathogenesis and epidemiologyof
osteoarthritis. Radiol Clin North Am 2004, 42:1-9.

2.

12. Safayhi H, Mack T, Sabieraj J, Anazodo MI, Subramanian

Felson DT, Lawrence RC, Dieppe PA, Hirsch R, Helmick CG,

LR,Ammon HPT: Boswellic acids: novel, specific, nonredox

Jor-dan JM, Kington RS, Lane NE, Nevitt MC, Zhang Y, Sowers

inhibi-tors of 5-lipoxygenase.

M,McAlindon T, Spector TD, Poole AR, Yanovski SZ, Ateshian

1992,26:1143-1146.

G,Sharma

3.

L,

Buckwalter

JA,

Brandt

KD,

Fries

JF:

J Pharmacol Exp Ther

13. Sailer ER, Subramanian LR, Rall B, Hoernlein RF, Ammon

Osteoarthritis:new insights. Part 1: the disease and its risk

HPT,Safayhi

factors. Ann InternMed 2000, 133:635-646.

structurerequirements

Green GA: Understanding NSAIDs: from aspirin to COX-2.Clin

inhibitory activity.Br J Pharmacol 1996, 117:615-618.

Cornerstone 2001, 3:50-60.
4.

J

Hochberg MC, Altman RD, Brandt KD, Clark BM, Dieppe PA,

H:

Acetyl-11-keto--boswellicorbindingandacid(AKBA):

5-lipoxygenase

14. Roy S, Khanna S, Shah H, Rink C, Phillips C, Preuss H,
SubbarajuGV, Trimurtulu G, Krishnaraju AV, Bagchi M, Bagchi

10tst 株式会社テゖーエストレーデゖング r-1.0
D, Sen CK:Human genome screen to identify the genetic basis

OMERACT-OARSI.

of

13:104-110.

theanti-inflammatory

microvascularendothelial

effects
cells.

ofDNA

Boswellia
Cell

Biol

in

2005,

24:244-255.

OsteoarthritisCartilage

2005,

24. Day R, Morrison B, Luza A, Castaneda O, Strusberg A, Nahir
M,Helgetveit KB, Kress B, Daniels B, Bolognese J, Krupa D,

15. Lalithakumari K, Krishnaraju AV, Sengupta K, Subbaraju GV,

Seiden-berg B, Ehrich E: A randomized trial of the efficacy andChat-terjee A: Safety and toxicological evaluation of a novel,

tolera-bility of the COX-2 inhibitor rofecoxib vs ibuprofen instand-ardized

patientswith

3-O-acetyl-11-keto--boswellicacid(AKBA)-enrichedBoswellia serrata extract (5-Loxin). Toxicol
MechanismsMethods 2006, 16:199-226.

osteoarthritis.

Arch

InternMed

2000,

160:1781-1787.
25. Gottesdiener K, Schnitzer T, Fisher C, Bockow B, Markenson J,

16. Joos S, Rosemann T, Szecsenyi J, Hahn EG, Willich SN,

KoA, DeTora L, Curtis S, Geissler L, Gertz BJ: Results of a

BrinkhausB: Use of complementary and alternative medicine

rand-omized, dose-ranging trial of etoricoxib in patientsin Ger-many – a survey of patients with inflammatory bowel

withosteoarthritis.

disease.BMC Complement Altern Med 2006, 6:19.

41:1052-1061.

Rheumatology(Oxford)

2002,

17. Anthoni C, Laukoetter MG, Rijcken E, Vowinkel T, Mennigen

26. Bingham CO III, Sebba AI, Rubin BR, Ruoff GE, Kremer J, Bird

R,Muller S, Senninger N, Russell J, Jauch J, Bergmann J,

S,Smugar SS, Fitzgerald BJ, O'Brien K, Tershakovec AM:

GrangerDN, Krieglstein CF: Mechanisms underlying the

Efficacyand safety of etoricoxib 30 mg and celecoxib 200 mg in

anti-inflamma-tory actions of boswellic acid derivatives inthe treatment of osteoarthritis in two identically designed,

experimental coli-tis. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol

rand

2006,290:G1131-G1137.

Rheuma-tology (Oxford) 2007, 46:496-507.

omized,placebo-controlled,

non-inferiority

studies.

18. Gupta I, Parihar A, Malhotra P, Gupta S, Ludtke R, Safayhi

27. Reginster JY, Malmstrom K, Mehta A, Bergman G, Ko AT,

H,Ammon HP: Effects of gum resin of Boswellia serrata

CurtisSP, Reicin AS: Evaluation of the efficacy and safety of

inpatients with chronic colitis. Planta Med 2001, 67:391-395.

etori-coxib compared with naproxen in two, 138-week

19. Kimmatkar N, Thawani V, Hingorani L, Khiyani R: Efficacy andrandomizedstudies of osteoarthritis patients. Ann Rheum Dis

tol-erability of Boswellia serrata extract in treatment of
osteoar-thritis of knee: a randomized double blind placebo
controlledtrial. Phytomedicine 2003, 10:3-7.

2007,66:945-951.
28. Power

analysis

for

ANOVA

designs[http://www.math.yorku.cal/SCS/Online/power/]

20. Bellamy N, Buchnan WW, Goldsmith CH, Campbell J, Stitt

29. Garnero P, Rousseau J, Delmas PD: Molecular basis and

LW:Validation study of WOMAC: a health status instrument

clinicaluse of biochemical markers of bone, cartilage andformeasuring clinically important patient relevant outcomes

synovium

toanti-rheumatic drug therapy in patients with osteoarthritis

43:953-968.

ofthe hip or knee. J Rheumatol 1988, 15:1833-1840.

diseases.

Arthritis

30. Felson DT: Osteoarthritis of the knee.

21. Lequesne MG, Mery C, Samson M, Gerard P: Indexes ofseverityfor osteoarthritis of the hip and knee validation-value
in com-parison with other assessment tests.

injoint

Scand J

Rheumatology1987, 65:85-89.

Rheum

2000,

N Engl J Med

2006,354:841-848.
31. Turner JA, Deyo RA, Loeser JD, Von Korff M, Fordyce WE:
Theimportance of placebo effects in pain treatment andresearch.JAMA 1994, 271:1609-1614.

22. Chapman CR, Casey KL, Dubner R, Foley KM, Gracely RH,

32. Walach

H, Sadaghiani

C,

Dehm

C,

BiermanD:The

Read-ing AE: Pain measurement: an overview. Pain 1985,

therapeuticeffect of clinical trials: understanding placebo

22:1-31.

response ratesin clinical trials: a secondary analysis.

23. Bellamy N, Bell MJ, Goldsmith CH, Pericak D, Walker V,
RaynauldJP, Torrance GW, Tugwell P, Polisson R: The
effectivenessofhylan

G-F

20

in

patients

with

knee

Med Res Methodol2005, 5:26-37.
33. McAlindonTE,

LaValley

MP,

Gulin

JP,

Felsonsystematicquality assessment and meta-analysis.

developed

2000,283:1469-1475.

the

OARSIandone

setdeveloped

byDT:

Glucosamineand chondroitin for treatment of osteoarthritis: aosteoarthritis: an applica-tion of two sets of response criteria
by

BMC

JAMA

11

tst 株式会社テゖーエストレーデゖング r-1.0
34. Zenk JL, Helmer TR, Kuskowski MA: The effects of milk
proteinconcentrate on the symptoms of osteoarthritis in
adults:anexploratory,

randomized,

doubleblind,

placebo-controlledtrial. Curr Ther Res 2002, 63:430-442.
35. Caterson

B,

FlanneryCR,

HughesCE,

LittleCB:

Mechanismsinvolved in cartilage proteoglycan catabolism.
Matrix Biol2000, 19:333-344.36.Little CB, Hughes CE, Curtis
CL, Janusz MJ, Bohne R, Wang-Wei-gand S, Taiwo YO, Mitchell
PG,

Otterness

IG,

FlanneryCR,

Cater-son

B:

Matrix

metalloproteinases are involved in C-terminaland interglobular
domain processing of cartilage aggrecan inlate stage cartilage
degradation. Matrix Biol 2002, 21:271-288.

～お問い合わせ先～

株式会社テゖーエストレーデゖング
TEL：03-3553-2201
MAIL：info@tsti.co.jp

12