博 士 （ 医 学 ） 鈴 木勇

学位論文題名Association betweenaC十 33T Polymorphism
intheI
L・4PromoterRegionandTotalSerumlg
ELevels（インターロイキン4遺伝子プロモーター領域のC十 33T多 型 と 血 清 総 IgE値 と の 相 関 ）学位論文内容の要旨（研究 目的）喘 息や ア レ ル ギー 性 鼻 炎 ，アト ピー性 皮膚炎 などの アトピ ー性疾 患の患者 におい て血清 総lgE
値 は高 値 を 示 すこ と が 知 られて いる． 血清総 lgE値は遺 伝と環 境要因 によっ て決定 される が，遺 伝要 因 の 候 補と し て ， 連鎖解 析によ り5番染 色体長 腕上の いくっ かの遺 伝子が報 告され ている ．我 々 は 5番 染 色体 長 腕 上 に存 在 す る イン タ ー 口イ キン4遺 伝子の プロモ ーター 領域に 新たな 多型 C+33Tを見 い だ し た． イ ン タ ー口 イ キ ン 4は 免疫グ ロブリ ンのクラ ススイ ッチに おいてlgEの産生 に重要 な役割 を果た すこと から， この多 型を遺 伝要因の 候補の ーっとして，日本人の集団に ついて 血清総 lgE値との 相関分 析を施 行した ，（対象 と方法 ）対 象 は 喘 息 患 者 120人 ， 健 常 者 120人 か ら な る 合 計 240人 の 日 本人 で あ る ，こ の 内 230人は
非 喫煙 者 で あ り， 10人は 既 喫煙者 である が，研 究開始 時にお いて少 なくと も2年間 は禁煙 をし
てい る．喘 息患者 は北海道 大学医 学部附 属病院 第一内 科外来 にて臨 床症状 ，可逆性 の閉塞 性換
気障害 ，メサ コ1」ン に対す る気道 過敏性 試験をも とに喘 息と診 断され ている，健常者は健康診
断を希 望した むのか ら，喘 息を含 めたアレ ルギー 性疾患の既往のない者，、何らかの薬剤の投与を受け ていな い者を 選んだ ．血清 総lgE値の 測定は radioimmunosorbenttest(lgERIST)を用いた．C+33T多型の 同定は制 限酵素 Mr711を用 いたPCR‑restri
ctionfragmentlengt
hpol
ymorp
hism
(PCR‑RFLP)‑法を 使用し た．
（統訐 分析）初 めに 240人 に つい て ， 血 清総lgE値 に対す るC+33T多型 ，喘息 の有無 ，年齢 ，性別 の影響 と，C+33T多型 と喘息 の相互作 用を要因分散分析(factorialanalysisofvariance)で検討した，次に喘 息 患 者 120人 ， 健 常 者 120人 の 各 々 の 集 団 に つ い て 血 清 総 lgE値 に 対 す るC+33T多 型， 喘息 の有 無 ， 年 齢， 性 別 の 影響を 重回帰 分析に て検討 した， 血清総 lgE値は分 布を正 規化す るために対 数化し た．
（結果 ）240人 に お い てC+33T多 型は Hardy‑Weinberg均 衡 を 満た し て お り， 喘 息 患 者， 健 常 人 は同 一の 集団 か ら 抽 出さ れ た こ とを示 した． 喘息患 者と健 常人の 間でC+33T多 型頻度 の違い は認め ら
れ な か っ た ． 喘 息 患 者 の 血 清 総 lgE値 は 2.40+0.6210gIU/ml(mean+SD)で あ り ， 健 常 人 の1.75ニヒ 0.6010gIU/mlよ りも有 意（pく 0.001）に高 値であ った． 240人につ いて対 立遺伝 子T汀allele)を持 つ者は 持たな い者に 比べて有 意に高 値の血 清総lgE値 を示し た(
p=0.016，2.
12+0.
55
VS l.81+0.56logIU/ml).血 清 総 lgE値 に 対 す るC+33T多 型と 喘 息 の 有無 の 相 互作用 は認めら
れ なか っ た ． 喘息 患 者 と 健常者 を分け た分析 では， 喘息患 者にお いては対 立遺伝 子Tを持 つ者
は 持た な い 者 に比 べ て 有 意に高 値の血 清総lgE値 を示し た(p=0． 039)が，健 常者に おいて は有ー 142意ではなかった（p 0．129）．また，FEVl.0％を喘息の重症度の指標として，対応のない場合のf検定 を施 行し たが ， 対立 遺伝 子Tを持 つ者 と持 たない者との 間で有意な違いは認められな かった．
（考察）
我々 の分 析で は， 日 本人 の集 団に お いて イン ター ロイ キ ン4遺 伝 子プ 口モーター領域の C+33T
多型 と喘 息の 発症 や 重症度との関 係は認められなかった．し かし喘息患者においてのみア トピーの 指標 のー つで あ る血 清総 lgE値と の相 関を 認めた．これ は喘息が発症する過程におい て，その 原因 とな る遺 伝 的ま たは 環境 的 な要 因が ，C+33T多型 の持 つ 潜在 的な血清総lgE値へ の影
響が 発揮 され る上 で 必要となる可 能性を示唆している．今後 ，この多型のIL‑4遺伝子の転 写過
程 や転 写 後の メッ セン ジャ ― RNAの 安 定性 に及 ばす 影響 等 の機 能的 な研 究や C‑589T等他 の多型とのハプロタイプ(haplotype)を同定した分析が期待 される．

― 143―

学位論文審査の要旨
主 査

教 授

西 村 正 治副 査

教 授

小 野 江 和 則

副 査

教 授

大 野 重 昭学位論文題名Association betweenaC十 33T Polymorphism
intheIL
一4P
rom
oterRegio
nandTot
alSer
umlgELevels（インターロイキン4遺伝子プロモーター領域のC十 33T多 型 と 血 清 総 IgE値 と の 相 関 ）喘息や アレルギー性鼻炎，．アトピー性皮膚炎などのアトピー性疾患の患者において血清総lgE値は 高 値 を 示すこ とが知 られてい る．血 清総lgE値は遺伝 と環境 要因に よって 決定さ れるが ，遺伝 要 因 の 候補と して， 連鎖解析 により 5番染色 体長腕 上のい くっか の遺伝 子が報 告され ている． 申 請 者 は5番染 色 体 長 腕上 に 存 在す るインタ ー口イ キン4遺 伝子の プ口モ ーター 領域に 新たな 多 型 C+33Tを 見 い だし た ． イ ンタ ー口イ キン4は 免疫グ ロブリ ンのク ラスス イッチに おいてlgEの 産 生に 重要な 役割を 果たす ことか ら，申 請者は， この多 型を遺 伝要因 の候補 のーっ として， 日本人 の集団に ついて 血清総 lgE値との 相関分 析を施 行した ，対 象 は 喘 息 患 者 120人 ， 健 常 者 120人 か ら な る 合 計 240人 の 日 本 人で あ る ， この 内 230人
は非 喫 煙 者 であり ，10人は 既喫煙 者であ るが，研 究開始 時にお いて少 なくと も2年間 は禁煙 をしてい る．喘 息患者は 北海道 大学医 学部附 属病院 第一内 科外来 にて臨 床症状， 可逆性の閉塞性
換気障 害，ヌ サコリン に対す る気道 過敏性 試験を もとに 喘息と 診断さ れている ．健常者は健康診断を 希望し たものか ら，喘 息を含 めたア レルギ ー性疾 患の既 往のな い者，何 らかの薬剤の投与を受 けてい ない者を 選ばれ た，血 清総lgE値 の測定 はradioi
mmunosorbenttest(lgERIST)を用い ら れ た ．C+33T多 型の 同 定 は 制限 酵素Mnl｜ を用い たPCR― restrictionfragmentlengthpolymorphism(PCR‑RFLP)法が使用 された ，初 め に 240人 に つ い て， 血 清 総 lgE値 に 対 す るC+33T多 型， 喘 息の有 無，年齢 ，性別 の影響と，C+33T多 型と喘息の相互作用を要因分散分析(factorialanalysisofvariance)で検討し，次に 喘 息 患 者 120人 ， 健 常 者 120人 の 各 々 の 集 団 に つ い て 血清 総 lgE値 に 対す る C+33T多 型 ，喘息 の 有 無 ，年齢 ，性別 の影響を 重回帰 分析に て検討 してい る，血 清総lgE値 は分布 を正規 化
するた めに対 数化され た，．． ■240人 に おい て C+33T多 型 は Hardy‑Weinberg均 衡を 満 た し てお り ， 喘 息患 者 ， 健 常人 は同一の 集 団 か ら抽出 された ことが示 された ．喘息 患者と 健常人 の間で C+33T多型頻 度の違 いは認
めら れ な か った ． 喘 息 患者 の 血 清 総lgE値 は2.40+0．6210gIU/ml(mean+SD)で あり， 健常人の1.75+0.6010gIU/mlより も 有 意 （pく0.001） に高値 であった ．240人 につい て対立遺 伝子T汀allele)を持 つ者は持 たない 者に比 べて有 意に高 値の血 清総lg
E値を示した(p=0.
016｜2.12+0.55
VSl.81+0.56logIU/ml).血 清 総lgE値 に 対 する C+33T多型 と 喘息 の有無 の相互 作用は 認めら
れな か っ た ，喘息 患者と 健常者を 分けた 分析で は，喘 息患者 におい ては対 立遺伝 子Tを持 つ者は持た ない者 に比べて 有意に 高値の血清総lgE値を示した（p二ニ0.039)
が，健常者においては有144 ‑意ではなかった（p 0，129）．また，FEVl/FVCを喘息の重症度の指標として，C+33T多型との相関関係を分析したが，有意ではなかった，本研究においては，日本人の集団においてインター口イキン4遺伝子プロモーター領域のC+33T多型と喘息の発症や喘息患者の肺機能との関係は認められなかった．しかし喘息患者においてのみアトピーの指標のーつである血清総lgE値との相関を認めた．これは喘息が発症する過程において，その原因となる遺伝的または環境的な要因が，C+33T多型の持つ潜在的な血清総lgE値への影響が発揮される上で必要となる可能性を示唆している．今後，この多型のIL‑4遺伝子の転写過程や転写後のメッセンジャ―R
NAの安定性に及ばす影響等の機能的な研究やC‑589T等他の多型とのハプ口夕イプ(haplotype)を同定した分析が期待される．
審査にあたり，副査大野教授より，1）対立遺伝子+
33
Tの人類の進化の過程での影響，2）
特異的lg
EとC+33T多型との相関につ いての検討結果，3）C+
33
T多型の機能的側面の研究方法，4）C+
3
3T多型の日本人以外の現在までの報告の有無について，副査小野江教授からは，
1）寄生 虫感染の観点からC+33T多型の生存への影響，2）塩基配列の違いがlg
E産生の違いに至るまでの機序について，主査西村教授からは，1）喘息患者に限って多型間で有意差が生じたのは何故か，2）喘息患者をアトピー性と非アトピー性に分けて分析した場合の結果，3）
本研究とこれまでに報告された日本人以外の研究結果との相違点と一致点について質問があった，申請者はこれらの質問に対して ，文献を引用しながら，概ね適切な解答を行った，
審査員一同は本研究を高く評価し，申請者が博士（医学）の学位を受けるのに充分な資格を有するものと判定した．

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