博 士（ 獣医 学） 近藤博

学位論文題名豚PTzeuTnoぴ拡carzTZ
ZZ肺炎の臨床ならびに疫学に関する研究
学位論文内 容の要旨

Pneumocys
tiscarinii(Pc)はA
IDSの流行以来、免疫不全症に伴う最も重要な日和見感染
病原 体のーっ として医学 分野で知 られるよ うになり 、Pcに対する情報の集積が進んできた 。その結 果、Pcは多種 の哺乳類 に感染す るが、由 来動物によりその遺伝子塩基配列や 抗原性が 異なり、ま た、異種 動物間の 交差感染 がほとんど成立せず、PcおよびPc肺炎は各種動物間に相違のあることが明らかにされている。一方、獣医学領域では、Pcが各種動物に感染するにも係わらずあまり注意が払われていないため、その報告は限られて いる。し かし、北海 道北広島 市の一養 豚場に発 生した豚Pc肺炎は被害が大きく、そ の 重 大 性 が 推 察 さ れ た の で 、 豚 Pc肺 炎 対 策 に 資 す る た め 本 研 究 を 実施 し た。
北海 道 北広 島 市 の一 貫 経営 養豚 場1戸にお いて、1989年 12月から1991年 5月まで約1年 半 にわ た り Pc肺 炎 が多 発 し、繁 殖豚1頭当 たりの肉 豚生産は 19.9頭／年（ 1988年
か ら 13.5頭 ／ 年 （1990年 ） と32％ 減少した 。発症は 6〜8週齢豚 に限定し 、主な症 状は腹式呼吸、呼吸困難、食欲減退で、発症後3日程度で死亡した。′しかし、発症後の数日 を 耐過 し たも の は 10月 程度 で回 復した。 病理学的 検査では 、36〜43日齢 豚では軽度の 問質性肺 炎、46〜75日齢 では滲出 性増殖性 肺炎が観 察された。発症直後の豚の肺では、肺胞の滲出物充盈と肺胞中隔の単核細胞浸潤が顕著で、呼吸困難が死因と考えらた。また、病理発生として、低かった免疫活性が日齢とともに高まり、顕著な宿主反応を惹起したと考察された。
臨床的および病理学的検査結果から発症予防が重要と考えられたので、離乳豚にトリメトプ1Jム・スルファドキシン合剤、トリメトプリム・スルファメトキサゾル合剤、スルファモノメトキシン・オルメトプリム合剤による予防試験を実施たところ、試験開始
後 Pc肺 炎 の発 生 が なく 、 これ ら化 学療法剤 の予防効 果が顕著 であると 推測された 。
豚Pcの検 出 法 を改 善 す るた め、3種 の市販抗 Pcモノク口 ーナル抗 体(ViroStat社，No.0921、BioG
enex社，3F6、Dako社，3F6)の豚Pcへの応用を検討したところ、ViroStat社の No.0921のみ陽性 反応を呈した。また、Pcの嚢子のみならず栄養体も陽性を呈するた め、グ口 コット染色 で検出さ れる嚢子 の5〜28倍の Pcが陽性を 呈し、検 出が容易にな っ た。 豚 Pc肺 炎 を免 疫 組織 化学 的に検討 したとこ ろ、最も 若齢のPc感 染は15日齢
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豚 に認めら れ、36日齢 豚ではPcは 肺胞上皮上に単層を形成し、39日齢豚では肺胞内に密 な集塊を 形成し、 最も重度 のPc感染は49曰齢豚の滲出性病変部に認められ、気道経
゛由 の空気感 染と考察 された。 また、豚繁 殖呼吸障 害症候群 ウイルス (PRRSV)の免疫組
織 化 学 検索 を 実施 し た とこ ろ 、PRRSV抗原 が 39日齢から 75日齢豚に 確認され、 Pc感染の増悪因子としての関与が示唆された。
Pc肺 炎発生要 因を究明 するため 、宿主要因として発生養豚場の血清生化学プロファイ ルならび にPcおよび 各種ウイ ルス抗体プ口ファイルを調査した。Pc肺炎発生豚群の血清蛋白分画検査成績は各日齢豚の正常値とほぼ一致し、先天性免疫不全はないと考えら れた。Pc肺 炎発生養 豚場では 、1週齢豚は Pcに対する 高い移行 抗体を保有するが、免 疫 組 織学 的 検索では 15日齢以上 豚におけ るPc感染が 確認され 、移行抗体 がPc感染
防 御に有効 ではない ことが示 唆された。 さらに、 Pc抗体は5週 齢まで徐々に低下したが 、Pc肺炎の 発症する 6週齢に顕 著に上昇し 、11週齢ま で高い抗 体価を維持した。Pc
肺 炎 の 発生 し てい な い 対照 養 豚場 で は 、5〜8週齢 豚ではPc抗 体は検出さ れないが 1週齢では移行抗体を、21〜25週齢および成豚はやや低い抗体を保有し、低いレベルのPc感染があることを示した。
北 海道 石 狩お よび上川 家畜保健 衛生所の 1989年4月から 1996年3月まで の豚病性鑑定 症例(245例） にっいて 免疫組織 化学的に検索し、その他の要因や検査結果と併せて環境要因等の疫学解析を試みた。その結果、病性鑑定豚の35.
5％にPc感染がみられたが、Pc肺 炎による 呼吸器症 状を発症 していると診断される症例はなかった。Pc感染率に地域 差や季節 性は認め られなか ったが、感 染豚の若 齢分布が 顕著で1〜 3i月齢を感染のピ ークとし 、6ケ月齢以下にほぼ限定していた。また、その伝播においては飼養環境調査 により、 離乳豚か ら哺乳豚 への水平感 染の重要性が示唆された。Pc
感染と特に関連した疾病または病原体はなかった。
豚 Pcの分類学 的位置付 けを検討 するため、Pc
肺炎多発養豚場の豚より分離したP
cにっいて、ミトコンドリアlargesubu
nitリボソームRNAおよびcytoplasmicS
SリボソームRNAの 遺 伝子 をPCRで 増幅し、 塩基配列 を決定し 、デンマ ーク産豚 由来Pcおよび 他種
動 物由来Pcと 比較した ところ、 それぞれ一塩基の変異がみられ、豚由来Pcは豚独自の系 統 で あ る が そ の 中 に も 変 異の 存在 す るこ とが 明 らか にな っ た。
以 上の 研 究結 果から、 豚Pc肺炎は 臨床学的 に、発症 は6〜8週齢 に限られ、 死亡率が高いが離乳豚への化学療法剤投与により発症が予防できることが明らかになった。また 、病理学 的には、 滲出性増 殖性肺炎を 特徴とし た。発症 には、PRRSV感染等増悪因子の関与が示唆された。また、豚Pc
は北海道において感染率に地域差や季節性がなく、広くまん延しているが発症は極めてまれで、感染には離乳豚から哺乳豚への伝播が重要と 推測され た。さら に、豚Pcは 抗原的・遺伝子的に豚独自の系統であるが、豚Pc内の変異の存在も明らかになった。

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学位論文審査の要旨
主査
副査
副査
副査

教授

神谷正 男

教授

藤永教 授

徹
梅 村 孝 司実 中 研 ・ 室 長 伊藤守

学位論文題名豚Pneu7nocystis carznzz肺炎の臨床ならびに疫学に関する研究
Pneumocystiscarinii(Pc)は、獣医学領域では注意が払われていなかったが、1養豚場に 発 生 した 豚 Pc肺 炎 は被害が 大きく、 重大性が 推察され たため、 本研究が実 施された。
北 海 道北 広 島 市の 一 貫経 営 養 豚場 1戸 に おい て 、 Pc肺炎が 多発し、 肉豚出荷頭 数は 32％ 減 少 し た 。 発 症 は 6〜 8週 齢 豚に 限 定し 、 発 症後 3日 程 度で 死 亡 した が 、発症後 の 数 日を 耐 過 した も のは 1ケ 月 程 度で 回 復し た 。病 理学的検 査では、肺 胞の滲出物 充 満 と肺 胞 中 隔の 単核細 胞浸潤が 顕著で、 呼吸困難 が死因と 考えられた 。離乳
豚に 化 学 療法 剤 に よる 予防試 験を実施 したとこ ろ、Pc肺炎 の発生が 終息し予防 効果が顕著で あった。
豚 Pcの モ ノ クロ ー ナル 抗体によ る免疫組 織化学検 索を試み た。Pcの嚢 子および栄養体 が 陽 性を 呈 す るた め 、検 出 感 度が 向 上し た 。 最も 若 齢の Pc感染 は 15日 齢 豚に認め ら れ たが 、 生 後の 気道経 由感染と 考察され た。豚繁 殖呼吸障 害症候群ウ イルスの免 疫 組 織化 学 検 索で は、Pc感 染の増悪 因子とし ての関与 が示唆さ れた。Pc肺炎 発生の 宿 主 要因 を 究 明す るため 、血清生 化学なら びにPcおよ ぴ各種ウ イルス抗体 プロフん イ ル を調 査 し た。 Pc肺炎発 生養豚場 には先天 性免疫不 全はない と考えられ た。
1週 齢豚 は Pcに 対 す る高 い 移行 抗 体 を保 有 する が 、 Pc感染防 御に有効 ではないこ とが示 唆 さ れた 。 豚 病性 鑑定症 例の免疫 組織化学 的回顧検 査では3515％ にPc感染がみられ た が 、感 染 率 に地 域 差や 季 節 性は 認 めら れ な かっ た 。感 染 は 1〜 3ケ 月齢 を ピーク と し 、6ケ月 齢 以下 に 限 定し て い た。 Pcの 伝 播 につい ては、離 乳豚から哺 乳豚への水平 感染の重 要性が示 唆された 。
以 上 のように本 研究は、 豚Pc肺炎を 臨床学的 、病理学 的に明ら かにし、ま た、豚Pc感 染 の疫学に関 する知見 を提供す るもので ある。よ って、審 査委員一同 は、上記
学位 論 文提出者 近藤博氏 が博士（ 獣医学） の学位を 授与され るに充分な 資格を有 す
るも の と認 め た 。
ーワ Qイ −