博士 （医 学） 橘かおり

学位論 文題 名
選択的セロトニン・ノルアドレナリン再取り組み阻害薬milnacipranの抗不安作用機序
学位論文内容の要旨
海馬のシナプス可塑性、すなわち長期増強(long―term potentiation:LTP)は、記憶・学習の背景をなす電気生理学的現象と考えられている．しかし、海馬LTPは情動ストレスを含む様々なストレス負荷によって抑制され、抗うつ薬や抗不安薬投与によっても影響を受けることが明らかにされている，このことはストレスによって引き起こされる不安障害やう つ病と 海馬 シナ プス 可塑 的変 化の 間に 密接 な関 連性 があ ることを示唆している．
選 択 的 Serotonin（ 5― HT)お よ び noradrenaline(NA)再 取 り 込 み 阻 害 薬(serotonin一noradrenal
inereuptakeinhibitor：SNRI)であるmilnacip
ranは優れた抗う つ 作 用 が 期 待 さ れ て い る 新 規 抗 う つ 薬 で あ る ．Mlnacipranは 三 環 系 抗 う つ 薬(tricyclicantidepressan
t：TCA)や選択的5―HT再取り込み阻害薬(serotonin−selectiv
ereu
ptake inhibi
tor： SSRI)に比べ副作用が少なく、治療効果発現も早レ｀ことが知られている．また動物実験において抗不安効果を示す可能性も報告されているが、詳細な機序は不明である，
本研究はNAならびに5−HT神経機能と海馬シナプス可塑性との関連性に焦点を当て、milnacipranの抗不安作用機序について追究することを目的とした．この目的のため、電気生理、神経化学的手法を用い、行動学的解析を行うことにより、以下の三点を検討した．
（I）海馬CA1領域のLTP形成におよぼすmilnaciprane単回投与の影響ならびに関与する受容体の検討（H）milnacipran反復投与によるLTP形成の変化および5−HT/ N
A神経系による調節機構の解明(ni) milnacipranの抗不安作用とシナプス可塑的変化との関連性およびその意義の追究、以上をSS
RIであるfluvo
xami
neの作用と比較検討することにより、
milnacipranの抗不安作用機序解明を試みた．
Milnacipr
an単回投与(30mg/kg，i．p．）により海馬CA1領域のLTP形成は抑制された，
このLTP形成抑制は5−HTlA受容体遮断薬であるWAY 100635(0.1mg/kg，iル）およびQ
l― 579 ‑受容体 遮断薬 であるprazosin（lor10lig，i．c．v．）前処置により拮抗された．の：受容体 遮断 薬 で ある idazoxan（ 5mg/kg，i．p．）前 処置によ る影響は 受けな かった， 以上の 結果 から milnacipran
は 5ー HTlA受 容体 お よ びai受 容体 を 介 して 海 馬 C
A1領 域 のLTPを抑 制 すること が示唆 された．
Milnacipran単回 投 与 で みら れ た L
TP形 成抑 制 作 用は 、 反 復投与 (30mg/kg，p．o．，14days)では 認 め られ ず 、 controlと 同 程度 の LT
Pが 形 成さ れ た ．Milnacipr
an反 復投 与 により 海馬 細 胞 外液 中 NAの 基 礎 遊離 量 が 有 意に 増 加 した ， ま た急 性投与で 生じた 海馬5―H
T増加反応 は、反 復投与により増強する傾向がみられた，一方、fluvoxa
mine単回投与(30mg/kg，i．p．） でみら れたLTP抑制は 、反復投 与(30mg/kg p．o．， 14days)
により影響を受けな
か った ． ま たfluv
oxamineに よる 5−HT増加反応 は、単 回ならび に反復 投与群間 で差が 認めら れな か っ た． 以 上 の結 果 は 、milnacipran
反復 投与で 認められ たLT
P抑制作用 の回復 に、NA神 経 系 を介 し た 5― HT神経 活 動 の 機能 亢 進 が関 与 し てい る ことを示 唆する ものと考 えられた．
さ ら に 、恐 怖 条 件付 け 負 荷テ ス ト (CFS)にお け る すく み 行 動(freezing)は milnac
ipran
単回投 与(30mg/kg，i．p． ）ではな く、反復 投与(30mg/kg p．o．，14days)により有意に 減弱 した． このこ とは、milnacipranの抗 不安作 用は反復 投与によ り発現 すること を示して いる ， 一 方fluv
oxam
ineの 反復 投 与 (30 mg/kg p． o．，14days)
はCF
Sによ るすくみ 行
動 に は 影 響 を 与 え な か っ た ． ま た 、 CFSに よ り 生 じ た 海 馬 CA1領 域 の LTP形 成 抑 制 は 、milnacipra
n単 回 投与 な ら び にfluv
oxam
ine反復 投 与 では 影 響を 受けず、 milnacipran
反復投与に より回 復した． より回復 した．
以 上 の 結果 か ら 、milnacipr
an反 復投 与 に より 生 じ た抗 不 安作用 は、海馬 シナプス 可塑性 の変 化 と 密接 な 関 連性 が あ ると 考えら れた．こ の可塑 的変化は N
A神経系 による調 節機構
を 介し た 5―HT神 経活 動 の 機能 亢 進によ り生じる 可能性 が示唆さ れた． また、miln
acipr
an
反 復投 与 で 見ら れ た 5― HT神経 系 の機能 亢進は、 同期間 のfluvoxamine反復投与 では認 められ ず 、 NA神 経 系 に よ る 調 節 が SNR
Iで あ るmilnacipranの治 療 効 果早 期 発 現 に寄 与 し ていること が推察 された，

学 位論文審 査の要旨
主 査 教 授 森 本 裕 二
副 査 教 授 小 山司副 査 教 授 吉 岡 充 弘

学 位 論 文 題 名選 択的セ ロトニン ・ノル アドレナリン
再 取 り 組み 阻 害薬 milnac
ipr
anの抗不安 作用機 序

本 研 究 は NAな ら び に 5― HT神 経 機 能 と 海 馬 シ ナ プ ス 可 塑 性 と の 関 連 性 に 焦 点を 当 て 、 milnacipranの 抗 不 安 作 用 機 序 に つ い て 追 究 す る こ と を 目 的 と し た ，
こ の 目的 の ため 、ラ ットを用 いて電気 生理、神経 化学的解 析、なら びに行動 学的 解 析 を 行 う こ と に よ り 、 milnacipranの 抗 不 安 作 用 機 序 解 明 を 試 み た ．
Milnacipran単 回 投 与 (30 mg/kg， i． p． ） に よ り 海 馬 CA1領 域 の LTP形 成 は抑 制 さ れ た ． こ の LTP形 成 抑 制 は 5― HTIA受 容 体 遮 断 薬 で あ る WAY 100635 (0.1mg/kg， i． v． ）お よ び a
エ 受 容 体 遮断 薬 で ある prazosin（ lor 10ルg，i．c．v．）
前 処 置 に よ り 拮 抗 さ れ た ． 以 上 の 結 果 か ら milnacipranは 5ー HTIA受 容 体 お よ びai受 容 体 を 介 し て 海 馬 CA1領 域 の LTPを 抑 制 す る こ と が 示 唆 さ れ た ，Milnacipran単 回 投 与 で み ら れ た LTP形 成 抑 制 作 用 は 、 反 復 投 与 (30 mg/kg，p． 0． ， 14 days） で は 認 め ら れ ず 、 controlと 同 程 度 の LTPが 形 成 さ れ た ．
Milnacipran反 復 投 与 に よ り 海 馬 細 胞 外 液 中 NAの 基 礎 遊 離 量 が 有 意 に増 加 し た，
ま た 急 性 投 与 で 生 じ た 海 馬 5― HT増 加 反 応 は 、 反 復 投 与 に よ り 増 強 す る 傾 向 がみ ら れ た ． 一 方 、 fluvoxamine単 回 投 与 (30 mg/kg， i． p． ） で み ら れ た LT
P抑 制は 、 反 復 投 与 （ 30 mg/kg p． o． ， 14 days)に よ り 影 響 を 受 け な か っ た ． ま た
fluvoxamineに よ る 5一 HT増 加 反 応 は 、 単 回 な ら び に 反 復 投 与 群 間 で 差 が 認 め られ 社 か っ た ． 以 上 の 結 果 は 、 milnacipran反 復 投 与 で 認 め ら れ た LTP抑 制 作 用 の回 復 に 、 NA神 経 系 を 介 し た 5― HT神 経 活 動 の 機 能 亢 進 が 関 与 し て い る こ と を 示
唆 す るも の と 考え ら れ た．

さらに、恐怖条件付け負荷テスト(CFS)におけるすくみ行動(freezing)は反復投与（30 mg/kg p．o．，14days）により有意に減弱した．このことは、milnacipranの抗不安作用は反復投与により発現することを示している．一方
fluvoxamineの反復投与(30mg/kg p．o．，14days)はCFSによるすくみ行動には影響を与えなかった．また、CFSにより生じた海馬CA1領域のLTP形成抑制は、milnacipran単回投与ならびにfluvoxamine反復投与では影響を受けず、milnacipran反復投与により回復した．
以上の結果から、milnacipran反復投与により生じた抗不安作用は、海馬シナプス可塑性の変化と密接な関連性があると考えられた．この可塑的変化はNA神経系による調節機構を介した5−HT神経活動の機能亢進により生じる可能性が示唆された，また、milnacipran反復投与で見られた5ーHT神経系の機能亢進は、同期間のfluvoxamine反復投与では認められず、NA神経系による調節がSNRIであるmilnaciprariの治療効果早期発現に寄与していることが推察された．
公開発表では，副査の小山教授から抗不安効果における海馬CA1領域LTPの示す意義、またSSRIならびにベンゾジアゼピン系等の他の抗不安薬におけるLTPの検討について，吉岡教授から単回投与におけるLTP形成抑制での5―HTIA受容体およびcAMPの役割と，a2自己受容体脱感作の意義、また主査の森本教授から慢性疼痛治療におけるミルナシプランの有効性に関する展望等の質問がなされた．これらの質問に対し，申請者は自らの実験結果およびこの分野に関する文献 な ど を も と に，誠 実に， かつ概 ね妥当 な回 答を成 しえた ．
ミルナシプランによる抗不安効果は，ラットモデルでの急性投与における報告をみるにすぎず，本実験はこの効果を慢性投与で追究したのみならず，その機序における5−HT神経活動並びにNA神経活動の重要性を初めて確認したものである，さらに，抗不安作用における海馬LTP形成の意義について解明の一端を担ったものであり，ミルナシプランの精神神経疾患への臨床使用における今後の展開に重要な寄与をしうるものと評価される．
審査員一同は，申請者の学識に合わせて，この研究が関連領域研究と臨床成績の進展に成果を評価し，大学院課程における研鑽や単位取得なども併せ申請者が博士（医学）の学位を受けるのに充分な資格を有するものと判定した．