博 士 ． （獣 医 学 ）中村 健介
学位 論文 題名A Study on Contrast一 enhanced Ultrasonography with
Secondー generation Contrast Agent Sonazoid＠ forDiagnosis of Liver and Splenic Nodules in Dogs
（ 第二 世代 超音波 造影 剤ソ ナゾイド°を用いた造影超音波検査による
犬 の 肝 臓 お よ び 脾 臓 腫 瘤 の 診 断 に 関 す る 研 究 ）学位論文内容の要旨

肝臓および脾臓は犬において悪性腫瘍の発生率が高い臓器であるが、画像診断検査により良悪性を鑑別することは多くの場合で不可能であり、病理組織検査が必須である。しかしながら近年、細網内皮系細胞であるクッパー細胞に取り込まれる性質を持つ超音波造影剤ソナゾイド＠を用いることにより、人の肝臓腫瘤診断において、造影超音波検査は病理検査に匹敵する診断精度を持つことが示され、肝臓腫瘤の画像診断検査は新たなステージに到達した。一方で獣医学領域におけるソナゾイド＠造影超音波検査に関する報告は極めて少なく、その有用性は不明である。そこで本研究では、犬の肝臓腫瘤診断に茄けるソナゾイド＠造影超音波検査の精度を評価する（第一章）とともに、肝臓と同様に細網内皮系細胞を豊富に有する脾臓におけるソナゾイド＠造影超音波検査の有用性を評価する（第二章）ことを目的とした。
第一章では、肝臓腫瘤を持つ犬27症例28結節に対してソナゾイド＠造影超音波検査を実施した。造影所見は動脈相、門脈相韜よび実質相それぞれにおいて、腫瘤のエコー源性を周囲の正常実質と比較して相対的にHypo/Iso/Hyperの三群に分類した。その後、全例に船いて病理組織学的検査もしくは細胞診を行い、病理学的診断とした。得られた造影所見から良悪性鑑別に茄いて有意（Pく0.05)となる所見を抽出し、各々の感度、特異度を算出した。28結飾のうち、20結節（結節性過形成5例 、肝細 胞癌 11例 、血管肉腫1例、混合型肝癌1例、カルチノイド1例、骨肉腫1例）においては病理組織学的検査により、2結節（結節性過形成1例、リンパ腫1例）においては細胞診により確定診断を得た。残りの6結節においては細胞診とその他の臨床検査所見から血管肉腫であることが強く疑われたが、確定診断には至らなかった。確定診断が得られた22結節において統計学的解析を実施し、動脈相および実質相の評価が良悪性鑑別に有効であることが示された。実質相においてHypoと分類された結節は有意に悪性であり、感度94％、特異度100％で悪性と診断することが可能であった。動脈相においてHyperもしくはHypoと分類された結節は有意に悪性であり、感度93％、特異度83％で悪性と診断することが可能で

あ った 。 ま た動 脈 相で は 多 くの 肝 細胞 癌 が Hyperと なっ た が、 全ての 血管肉腫 でHypoであっ た。以上 の結果か ら、ソナ ゾイド＠ 造影超音波検査は、極めて高い精度
で犬の 肝臓腫瘤 の良悪鑑 別を行え ることが 明らかとな った。さらに、動脈相の検査
所 見 か ら 、 悪 性腫 瘍 の より 詳 細ぬ 鑑 別 診断 が 可能 で あ る可 能 性 が示 唆 され た 。
第 二 章 では 、 超音 波 検 査に よ り牌臓 腫瘤が確認 された犬 29症例を対 象とした 。
全症例 にソナゾ イド＠造 影超音波 検査を実 施し、早期 血管相、後期血管相、およぴ
実 質相 に おい て 腫瘤 の エコ ー 源性 を 周 囲の 正 常実 質 と比 較し て相対的に 、Hypo/Hetero/Isoの三群 に分類した。その後、全例において病理学的検査を実施し、確 定診 断 を 得た 。 得ら れ た 造影 所見 から良悪性 鑑別に韜 いて有意 （Pく0.05)となる所見 を抽出し 、各々の 感度、特 異度を算 出した。29症 例中、良性腫瘤は13例（結節 性 過 形 成 8例 、 血 腫 2例 、 髄 外 造 血 2例 、 肉 芽 腫 1例 ） で あ り 、 悪 性 腫 瘍 は16例 （ 血 管 肉 腫 8例 、 リ ン パ 腫 3例 、 組 織 球 性 肉 腫 2例 、平 滑 筋 肉腫 1例 、 骨肉 腫 1例 、癌腫 1例）であ った。統 計学的解 析により、 早期血管 相および 後期血管 相の評価が良 悪性鑑別 に有効で あること が示され たが、実質 相においては有意な所見は認め られ な か った 。 早期 血 管 相に 茄い ては、Hypoと分 類された 症例は、 感度38％、特 異度 100％ にて 悪 性と 診 断 する こ とが 可 能 であ っ た 。後 期 血管相 において は、
Hypoと 分類 さ れ た症 例 は、 感 度 81％ 、特 異 度 85%に て 悪 性と 診断 すること が可能であっ た。以上 の結果か ら、ソナ ゾイド＠ 造影超音波 検査が犬の脾臓腫瘤の良悪性鑑別に 有用であ ることが 明らかと なった。 ただし、そ の評価には早期およぴ後期血管相の みが有用 であり、 実質相に 韜いて有 意な所見は 認められなかった。これは、
実 質相 の 評 価が 良 悪性 鑑 別 にお いて 有用となる 肝臓腫瘤 とは著し く異なる 結果であった 。
本 研究 の 成 果よ り 、犬 の 肝 臓お よぴ 脾臓腫瘤の 良悪性鑑 別におい てソナゾ イド°
造影超 音波検査 が極めて 有用であ ることが 示された。 これは、これまで腫瘍の診断におい て、病理 組織学的 検査に頼 らざるを 得なかった 臨床獣医学において、画像診断検査 法による 確定診断 へと近づ く大きな 一歩となる 。さらに今後の研究により、本法を 用いて良 悪性鑑別 のみなら ず、より 詳細な鑑別 診断が可能となることが期待される 。

学位論文審査の要旨
主 査 教 授 滝口満喜
副 査 教 授 奥村正裕
副査 准教授 落合謙爾
副査 准教授 山崎真大

学位論文題名ASt
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cNodulesinDogs（ 第 二 世代 超 音波 造 影 剤ソ ナ ゾイ ド °を用い た造影超 音波検査 による
犬 の 肝 臓 お よ び 脾 臓 腫 瘤 の 診 断 に 関 す る 研 究 ）肝臓 および脾 臓は犬 において 悪性腫 瘍の発生 率が高 い臓器であるが、画像診断検査により 良悪性を 鑑別す ることは 多くの 場合で不 可能であ り、病 理組織検査が必須である。
しか しながら 近年、 細網内皮 系細胞 であるク ッパー細 胞に取 り込まれる性質を持っ超音
波造 影剤ソナ ゾイド ＠を用い ること により、 人の肝臓 腫瘤診 断において、造影超音波検査は 病理検査 に匹敵 する診断 精度を 持つこと が示され 、肝臓 腫瘤の画像診断検査は新たなス テージに 到達し た。一方 で獣医 学領域に おけるソ ナゾイ ド＠造影超音波検査に関する報 告は極め て少な く、その 有用性 は不明で ある。そ こで本 研究では、犬の肝臓腫瘤診断に おけるソ ナゾイ ド＠造影 超音波 検査の精 度を評価 する（ 第一章）とともに、肝臓と同様 に細網内 皮系細 胞を豊富 に有す る脾臓に おけるソ ナゾイ ド＠造影超音波検査の有用性を 評価する （第二 章）こと を目的 とした。
第一 章では、 肝臓腫 瘤を持っ 犬27
症例 28結節に対 してソ ナゾイド＠造影超音波検査を実施 した。造 影所見 は動脈相 、門脈 相および 実質相そ れぞれ において、腫瘤のエコー源性を 周囲の正 常実質 と比較し て相対 的にHy
po/Iso/Hyperの 三群に分類した。その後、全例に おいて病 理組織 学的検査 もしく は細胞診 を行い、 病理学 的診断とした。得られた造影 所見か ら良悪性 鑑別に おいて有 意（Pく0.
05）と なる所 見を抽出 し、各 々の感度 、特異度 を算出し た。28結 飾のうち 、20結節 （結節性 過形成 5例、 肝細胞癌11例、血管肉腫1例 、混合 型肝癌1例、 カルチノ イド1例、骨 肉腫1例）に おいては 病理組織 学的検 査により、 2結節 （結節 性過形成 1例、 リンパ腫1例）においては細胞診により確定診断を得た。
残 りの6結節に 韜いて は細胞診 とその 他の臨床 検査所見 から血 管肉腫で あるこ とが強く疑わ れたが、 確定診 断には至 らなか った。確 定診断が 得られ た22結節において統計学的解析 を実施し 、動脈 相および 実質相 の評価が 良悪性鑑 別に有 効であることが示された。
実 質相に おいてHypoと分類き れた結 節は有意 に悪性で あり、 感度94％、 特異度 100％で− 35ー悪 性と 診 断するこ とが可能 であっ た。動脈 相に韜 いてHyperもしく はH
ypoと分類 された
結節 は有意に 悪性であり、感度93％、特異度83％で悪性と診断することが可能であった。
ま た動 脈 相では多 くの肝細 胞癌が H
yperとな ったが 、全ての 血管肉 腫でHypoであ った。
以上 の結果か ら、ソナ ゾイド ＠造影超 音波検 査は、極 めて高 い精度で犬の肝臓腫瘤の良悪鑑 別を行え ることが 明らか となった 。さら に、動脈 相の検 査所見から、悪性腫瘍のより詳 細な鑑別 診断が可 能であ ることが 示唆さ れた。
第二 章では、 超音波 検査によ り脾臓腫 瘤が確 認された 犬29症例 を対象とした。全症例にソ ナゾイド ￠造影超 音波検 査を実施 し、早 期血管相 、後期 血管相、およぴ実質相において 腫瘤のエ コー源性 を周囲 の正常実 質と比較して相対的に、Hypo/Hetero/lsoの三群に分類 した。そ の後、全 例にお いて病理 学的検 査を実施 し、確 定診断を得た。得られた造影所 見から良 悪性鑑別 におい て有意（ 尸く0.
05） となる所 見を抽 出し、各々の感度、特異 度を 算 出した。 29症例中 、良性腫 瘤は13例 （結飾性 過形成8例、 血腫2例、髄外 造血2例 、肉 芽 腫 1例） で あ り、 悪 性 腫瘍 は16例（ 血管肉腫 8例、 リンパ 腫3例 、組織球 肉腫2例、 平滑筋肉 腫1例 、骨肉 腫1例 、癌腫1例）であ．った。統計学的解析により、早期血管相お よび後期 血管相の 評価が 良悪性鑑 別に有 効である ことが 示されたが、実質相において は有 意 な 所 見は 認 め られ な か った。 早期血 管相にお いては、 Hypoと分類 された 症例
は、 感度38％、 特異度 100％に て悪性と 診断することが可能であった。後期血管相においては 、Hypoと分類 された 症例は、 感度81％ 、特異度 85％にて 悪性と診断することが可能であ った。以 上の結果 から、 ソナゾイ ド＠造 影超音波 検査が 犬の脾臓腫瘤の良悪性鑑別に有 用である ことが明 らかと なった。 ただし 、その評 価には 早期および後期血管相のみが有 用であり 、実質相 におい て有意ぬ 所見は 認められ なかっ た。これは、実質相の評価が 良 悪 性 鑑 別 に お いて 有 用と な る 肝臓 腫 瘤と は 著 しく 異 な る結 果 であ っ た 。
本研 究の成果 より、 犬の肝臓 および脾 臓腫瘤 の良悪性 鑑別に おいてソナゾイド＠造影超音 波検査が 極めて有 用であ ることが 示され た。これ は、こ れまで病理組織学的検査に頼ら ざるを得 なかった 動物の 腫瘍診断 におい て、画像 診断検 査法による確定診断へと近づく 大きな一 歩となる。さらに今後の研究により、本法を用いて良悪性鑑別のみぬらず、より 詳細を鑑 別診断が 可能と なること が期待 される。 よって 審査員一同は、上記博士論
文 提出 者 中村健介 氏の博士 論文は 、北海道 大学大 学院獣医 学研究 科規程第 6条の 規定による 本研究科 の行う博 士論文 の審査等 に合格 と認めた 。

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