博士（獣医 学）

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学位論文 題名
Pathogenesis of gastroenteropathy
in Tae7zia taeniaefor7nお larval infections（ 猫 条 虫 幼 虫 感 染 動 物 にお け る胃 腸 病 の病 理 発生 ）学位論文内容の要旨
寄生虫は 、通常そ の寄生部 位である宿 主の器官 や組織に おいて病理組織学的変化を引 き 起 こすが、ラ ットの肝 臓に寄生 する猫条 虫(Tenねぬenね eめr m圃幼 虫の重度感染で は、胃腸 粘膜の過 形成を引き 起こす。 寄生部位 から離れた胃腸の病理学的変化は、 本種独特 の現象で 、この胃腸 粘膜過形 成の機序 はまだ明らかではない。今回の研究 では、猫 条虫幼虫 感染ラット における 胃腸粘膜 の上皮細胞の動態を調ベ、さらに胃 腸粘膜の 過形成を 引き起こす 因子を解 析するた めのモデル動物について検討した。
まず、猫 条虫感染 ラットに おける胃腸 粘膜細胞 動態を調 べた。この上皮細胞増殖
およ び 動 態に つ いて は 、 増殖 細 胞核 抗 原 （proliferatingce11nuclearantigen：PCNA）の 免 疫染 色 、 ブロ モ デ オキ シ ウリ ジ ン （BrdU） 1回 投 与後 の 経時的 な観察によって 調べた。
感染ラットの胃（胃底部および幽門部）における上皮細胞の増殖域（PCNA陽性細胞分布域） が拡大し 、細胞増 殖は著しく 活発にな っていた 。すなわち、BrdU
ラベル実験では、 BrdU陽性細胞 （ウリジ ン取り込み細胞）数もラベル率（BrdU陽性細胞/全上皮細胞）もともに顕著な増加となった。壁細胞および主細胞の消失をともなう粘膜細胞の過形 成は、未 分化・粘 液細胞の顕 著な増加 が特徴で あった。これは粘膜上皮細胞の過形 成が、粘 膜細胞の 正常な分化 過程の阻 害と関連 していることを示唆した。
猫条虫幼 虫感染ラ ットにお いては、胃 だけでな く腸粘膜 の過形成も観察された。
小腸の細 胞動態を 近位部、 中央部、遠 位部につ いて調べ た。感染ラットにおける腸上皮 細 胞 の増 殖 域の 拡 大 が認 め られ た 。BrdUラベル 実験では 、BrdU陽性細 胞数の−1273―

顕著な増加となったが、ラベル率は、コント口ールのラットとほぼ同等であった。
前述したように胃では壁細胞と主細胞が減少するが、小腸粘膜では、特に減少する細胞は認められなかった。また、小腸上皮細胞の過形成は胃に隣接した小腸近位部において顕著に認められたが、小腸中央部、遠位部では軽度であった。このことは、猫条虫幼虫感染における小腸粘膜の過形成が、近接した胃粘膜過形成と関連して起こったものと考えられた。しかし、この腸病変は小腸に限らず、結腸粘膜においても観察され、結腸陰窩における上皮細胞の増殖域の拡大およびラベル率の増加が認められた。
猫条虫幼虫感染ラットにおいて、胃腸の病変を起こすためには大量の幼虫感染および長期間の寄生が必要であることから、胃腸病変を引き起こす寄生虫由来因子を
今 後 解 析 す る た め に は 新 た な 動 物 モ デ ル が 必 要 と 考 え ら れ た。
猫条虫（マウス株）感受性AKRマウスにおいて胃腸病変が起こるかどうかを調べたところ、重度感染マウスでは感染後6―12ケ月で胃腸病変が現れ、AKRマウスを用いて胃腸病変に関与する因子を解析するためには長期間の接種が必要と考えられた。
次に、SCIDマウスの動物モデルとしての適性を調べた。猫条虫の六鉤幼虫もしくは虫卵を異なった量および異なった経路で接種されたSCIDマウスでは、様々な程度の胃粘膜過形成が見られた。SCIDマウスにおける胃粘膜過形成の最も早い発生は、六鉤幼虫を経口的に投与後3週間目で見られた。このように、SCIDマウスでも猫条丶

一虫 幼 虫 感 染 に お い て 胃 粘 膜 細 胞 過 形 成 が 起 こ る こ と が 確認 さ れ た 。
NOD/Shi−scidマウスにっいても調べたところ、わずかな胃粘膜過形成しか示さなかったが、明らかな十二指腸病変を示した。次に、SCIDマウス腹腔への40隻の幼虫の外科的移植では、移植後7日目に胃粘膜の軽度の過形成を引き起こした。これによって、SCIDマウス(CB17)は幼虫の排泄・分泌産物を解析するためのよいモデル動物であることが示唆された。
最後に、幼虫由来因子が胃粘膜過形成を引き起こすという仮説を確認するために、幼虫をinvitro培養し、培養液中に放出された幼虫排泄・分泌産物(1.0mgもしくは0.5 mgの蛋白量）を毎日SCIDマウスに接種したところ、軽度の胃粘膜増殖が認められた。今後、猫条虫幼虫排泄・分泌産物の成分の特徴づけが必要であるが、このSCIDマウスを用いた動物モデルが有用と考えられた。
猫条虫幼虫感染動物における胃腸病変の病理発生を明らかにすることは、新しい

宿主 寄生体関 係を提示す ることと なり、胃腸粘膜細胞の分化増殖機序の解明、さらに こ の 疾 病 と 類 似 し た 特 徴 を 持 つ 胃 腸 病 を 理 解 す る の に 役 立っ と 思わ れ る 。

学 位 論 文 審 査の 要 旨
主査
副査
副査
副査

教授

神谷正男
教授
梅 村孝司
教授
岩 永敏彦
助教授 奥 祐 三 郎

学位論文題名Pathogenesis of gastroenteropathyinヱ ae7z励tae7ziaeり黼必1arval
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（猫条虫幼虫感染動物における胃腸病の病理発生）

ラットの肝臓における猫条虫幼虫感染では胃腸粘膜の顕著な過形成が起こる。申請 者 は こ の 胃 腸粘 膜 過 形 成 に お ける 粘膜上 皮細 胞の 動態 を、増 殖細 胞核 抗原(PCNA)の免疫染色、およびブ口モデオキシウリジン(BrdU)投与後の経時的な観察などによって調べた。感染ラットの胃粘膜では、まず壁細胞および主細胞の消失が起こり、その後PCNA陽性細胞分布域の拡大、BrdU陽性細胞数とラベル率の顕著な増加、未分化・粘液細胞の顕著な増加が起こった。小腸でも上皮細胞の増殖域の拡大、BrdU陽性細胞数の顕著な増加があり、特に胃に隣接した小腸近位部において顕著で、小腸中央部、遠位部では軽度であった。このような上皮細胞増殖の活性化は結腸においても観察された。
．胃腸病変を引き起こす寄生虫由来因子を解析するためには、新たな小型の動物モデルが必要であるが、申請者はマウスの有用性について検討を加えた。重度感染AKRマウスでは胃腸病変が現れたが、長期間の感染が必要であった。SCIDマウスでは短期間において様々な程度の胃粘膜過形成が起こったが、NOD/Shi−scidマウスでは軽度の胃粘膜過形成のみ観察された。これらの結果からSCIDマウスを選択し、SCIDマウス腹腔への幼虫の移植を試みた。マウスの移植後の生存期間は短期間であったが、胃粘膜の過形成が見られた。さらに、幼虫の排泄・分泌産物をSCIDマウスに連続接種し、
軽 度 で は あ っ た が 短 期 間 にお い て 胃 粘 膜 増 殖 が起 こ る こ と を 示 した 。
以上のように、申請者は猫条虫幼虫感染による胃腸粘膜過形成における粘膜上皮細胞の動態を明らかにし、さらに猫条虫幼虫排泄・分泌産物の今後の特徴づけのためのモデル動物を確立した。今後の胃腸粘膜の増殖・分化の機序解明に資するところが大きい 。よって審 査員一同 は、ラガ パ氏が博士（獣医学）の学位を受ける資格が十分にある ものと認め る。