福岡県保健環境研究所年報第40号，98-99, 2013短報
2011-2012年福岡県における流行A群ロタウイルス遺伝子解析
石橋哲也・吉冨秀亮
ロタウイルスワクチン接種が流行野生株に与える影響を知ることを目的に、福岡県内で流行しているA群ロタウイルスの遺伝子型別を行った。遺伝子型別は、2011年及び2012年に県内6医療機関を感染性胃腸炎で受診した患者便71検体及びロタウイルス簡易検出キットストリップ183検体のVP4及びVP7領域についてPCR法で行った。2011年は、G1P[8]24件、G2P[4]24件、G9P[8]21件、G3P[8]12件、G2P[8]2件及びG3P[4]1件、2012年は、G1P[8]91件、G9P[8]13件、G2P[4]2件及びG2P[8]1件であった。
［キーワード：A群ロタウイルス、ロタウイルスワクチン、VP4、VP7、遺伝子型別］
１て1stPCRを行い、その後遺伝子型別用2ndPCRを行って型をはじめに
A群ロタウイルスは，わが国における感染性胃腸炎の主決定した２）。研究対象者へは、掲示説明の方法により同な原因ウイルスの一つであり、5歳までにほとんどの乳幼意を得た。また、本研究計画は、2012年福岡県保健環境研児が感染する。主な症状は、激しい下痢と嘔吐であるが、究所疫学研究倫理審査委員会において、審査、承認されてまれに脳症なども引き起こし、重症となることもある。福いる（許可番号第24-2号、平成24年8月2日）。

岡県においても毎年冬から春にかけて多くの患者が報告されるが、A群ロタウイルスの詳細な遺伝子型別は分かっ３ていない。A群ロタウイルスに対する有効な治療法はなく、結果対症療法による治療のみである。2011年に重症化を予防す

A 群ロタウイルス遺伝子は、190 検体から検出された。
検体の提供者の年齢及び性別を表 1 に示した。

る目的でロタウイルスワクチン（以後、ワクチンと略す）が認可された。今回、本格的なワクチン導入前に県内で流表1

行しているA群ロタウイルスについて遺伝子型別などの詳細な調査を行うことで、ワクチン導入にともなう影響を知男
女
計るための基礎データとすることを目的に調査を行った。
２A 群ロタウイルスが検出された年齢性別患者数

1歳未満 1歳 2歳 3歳 4歳 5歳以上 不明
3432 185972231 114365663 29912138

材料及び方法2011年1月から2012年5月に県内の福津市、古賀市、飯塚A 群ロタウイルス遺伝子が最も多く検出されたのは、1市、福岡市、筑紫野市及びうきは市の計6地域の医療機関

歳で 63 件（33.2%）、次いで 1 歳未満 56 件(29.6%)、2 歳を受診した感染性胃腸炎患者から採取された糞便71検体

29 件(15.3%)の順であった。

及び市販ロタウイルス簡易検出キットストリップ（ストリ2011 年は、92 検体中 84 件から A 群ロタウイルス遺伝子ップ）183検体、合計254検体を検査材料とした。内訳は、が検出された。遺伝子型別結果は、G1P[8]24 件、G2P[4]24

2011年は、ストリップ92検体、2012年は、患者便71検体及件、G9P[8]21 件、G3P[8]12 件、G2P[8]2 件及び G3P[4]1

びストリップ91検体であった。患者便検体は、PBS(-)で約件であった（図 1）。2012 年は、162 検体中 106 件から A

10％懸濁液とし、10,000rpm、20min遠心分離した上清から群ロタウイルス遺伝子が検出された。遺伝子型別結果は、

QIAamp Viral RNA Mini Kit (QIAGEN)を用いてウイルスRNA

G1P[8]91 件、G9P[8]13 件、G2P[4]1 件及び G2P[8]1 件での抽出を行った。ストリップは、陽性バンド部分を切り取あった（図 2）。

り、同キットによりウイルスRNAを直接抽出した

１）

。抽出

RNAをSuperscriptⅢ(Invitrogen)を用いて逆転写反応を４行い、得られたcDNAを元にVP4及びVP7領域それぞれについ考察
2005-2010 年の病原微生物検出情報集計では、この期間に全国で報告された A 群ロタウイルスは、1 歳 38%、1 歳
福岡県保健環境研究所 （〒818-0135 太宰府市大字向佐野 39）

未満 20%、2 歳 16%で 4）、今回の結果でも同じ年齢順で-98-

るが、世界で流行しているのは、主にG1P[8]型、G2P[4]型、G3P[8]型、G4P[8]型、G9P[8]型の5つの型である４）。
この主要な5つの型のウイルスが、地域や流行年によって主流な型の組み合わせを変えながら流行を繰り返している4）。今回の調査結果においても、主な流行遺伝子型は、
G1P[8]型、G2P[4]型、G3P[8]型、G9P[8]型であり主要な5型に含まれていた。今回、同一地域で連続した流行シーズンの調査を行ったが、1年目は上記4型のほぼ均等な流行であったのに対し、2年目は、G1P[8]型による単一の流行であった。この主流行型の変化が何に起因するのかは、今回は2シーズンの調査であったために、明らかにできなかった。今後は、ワクチンの普及に伴う遺伝子再集合等の影響
図１を検証するために、VP4、VP7以外の分節についての型別が2011 年 A 群ロタウイルス遺伝子型別結果必要となってくると考えられた。

４まとめ
今回の調査では、A群ロタウイルス遺伝子が、患者便71検体中29件(41%）、ストリップ183検体中161件(88%)から検出された。遺伝子型別結果は、2011年では、G1P[8]24件、G2P[4]24件、G9P[8]21件、G3P[8]12件、G2P[8]2件及びG3P[4]1件、2012年では、G1P[8]91件、G9P[8]13件、G2P[4]2件及びG2P[8]1件であった。
文献
1) Miren Iturriza-Gomara, Gagandeep Kang and Jim Gray. J

図2 2012年A群ロタウイルス遺伝子型別結果Clin Virol 31, 259-265, 2004.
2) Lester M. Shulman, et al Emerg Infect Dis. 17, 44-48, 20113) 病原微生物検出情報，32，61-62，2011.

A 群ロタウイルス遺伝子が検出されていた。
A群ロタウイルスは、数多くの遺伝子型に分類されてい4) 小林宣道 病原微生物検出情報，32，64-66，2011.

（英文要旨）

Genotyping Group A Rotavirus circulating in Fukuoka Prefecture during 2011-2012
Tetsuya ISHIBASHI and Hideaki YOSHITOMI
Fukuoka Institute of Health and Environmental Sciences,
Mukaizano 39, Dazaifu, Fukuoka 818-0135, Japan
Genotyping circulating rotaviruses before and after introduction of rotavirus vaccine is useful for evaluating vaccine-associatedchanges in genotyping distribution. 71 fecal specimen and 183 rotavirus rapid test strips was collected during 2011-2012 inFukuoka prefecture that were carried out to determine of rotavirus genotypes. Six and four genotypes were decided in 2011 and2012 samples: G1P[8] 24, G2P[4] 24, G9P[8] 21, G3P[8] 12, G2P[8] 2 and G3P[4] 1 and G1P[8] 91, G9P[8] 13, G2P[4] 2,G2P[8] 1 .
[Key words; group A rotavirus, rotavirus vaccine, VP4, VP7, genotyping]-99-