第 34 回日本毒性病理学会総会及び学術集会
The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

テーマ

安心・安全をめざした基礎医学から臨床医学への橋渡し

Theme

Bridging Basic Research and Clinical Practice for a Safer Life

年会長

吉見

会

2018 年 1 月 25 日（木）～ 26 日（金）期

直己（琉球大学大学院 医学研究科 腫瘍病理学講座 教授）

協賛学会 / 研究会

日本毒性学会、実験病理組織技術研究会

会

沖縄かりゆしアーバンリゾート・ナハ

場〒 900-0016 沖縄県那覇市前島 3-25-1
プログラム委員会

委員長：鰐渕

英機（大阪市立大学大学院）

委

員：加藤

淳彦（中外製薬株式会社）

串田昌彦（住友化学株式会社）

桑村充（大阪府立大学）

酒々井眞澄（名古屋市立大学大学院）
髙橋智（名古屋市立大学大学院）

塚本

徹哉（藤田保健衛生大学）

平川公昭（株式会社新日本科学）義澤克彦（武庫川女子大学）

吉田事務局

第 34 回日本毒性病理学会総会及び学術集会
琉球大学大学院
事務局長

運営担当

緑（内閣府食品安全委員会）

酒々井

医学研究科

腫瘍病理学講座眞澄（名古屋市立大学大学院

株式会社 沖縄コングレ
TEL：098-869-4220

FAX：098-869-4252

Email：34jstp@okicongre.jp
ホームページ

事務局

http://www.okinawa-congre.co.jp/34jstp/

医学研究科

分子毒性学分野）

目次

年会長挨拶… ………………………………………………………………………………………     5会場アクセス… ……………………………………………………………………………………

6

会場案内… …………………………………………………………………………………………

8

参加者へのご案内… ………………………………………………………………………………

9

座長・演者の皆様へ… ……………………………………………………………………………

12

日程表… ……………………………………………………………………………………………

15

日本毒性病理学会のあゆみ… ……………………………………………………………………

18

協賛法人・企業一覧… ……………………………………………………………………………

19

座長一覧… …………………………………………………………………………………………

20

プログラム… ………………………………………………………………………………………

22

講演要旨
特別講演… ………………………………………………………………………………………

41

シンポジウム… …………………………………………………………………………………

43

パネルディスカッション… ……………………………………………………………………

51

ワークショップ… ………………………………………………………………………………

55

一般口演要旨… …………………………………………………………………………………

61

ポスター要旨… …………………………………………………………………………………

66

著者索引… ………………………………………………………………………………………… 229

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

年会長挨拶「第 34 回日本毒性病理学会総会及び学術集会」の年次会長に推薦され、2018 年 1 月 25 日（木）と26 日（金）に沖縄・那覇市の沖縄かりゆしアーバンリゾート・ナハで開催させていただきます。前日には恒例のスライドカンファランスと試験問題解説を予定しております。

さて、恩師である森秀樹会長（第 16 回、岐阜）に始まり、同門である田中卓二会長（第 26 回、金沢）、西川秋佳会長（第 28 回、東京）から本学会開催を受け継ぐことになりました。しかしながら 16
年前の沖縄赴任後、先島を含む沖縄県内の病理医不足の改善のため、毒性病理学を専門とした基礎研究から病理診断学を中心に微力ながら活動して参りました。その活動のなかでもやはり基礎研究の重要性を日々感じたため、「安心・安全をめざした基礎医学から臨床医学への橋渡し」をテーマに掲げました。

我々の毒性病理学の研究は、農薬・医薬品をはじめとする化学物質や食品等による細胞・組織レベルで生じる様々な変化を、先端の分子生物学的手法を交え、形態学的に追究する生命科学であり、その理念は、究極的には人への安心・安全を与える学問であると理解しております。医療に携わる者
にとって、ある種のリスクを有する化学物質等を利用する必要があり、その安全性の基盤として本学会員の努力なくして臨床医学への応用や発展はないと思います。このような視点から、本学会での研究成果の医療や社会への還元が、今回のテーマである「基礎医学から臨床医学への橋渡し」になることを期待しております。

本学会が開催される 1 月の沖縄は、季節的には沖縄らしい季節ではありませんが、本土の気候からすれば、まだまだコートが必要な季節でしょうが、まず、コートは要りません。開催会場である沖

縄かりゆしアーバンリゾート・ナハは、離島へのフェリー乗り場に隣接しており、開催時期は多くのホエールウォッチングボートの発着地となっております。また空港から車で約 15 分、国際通りから徒歩で約 15 分の立地にあり、東シナ海のサンセットをお楽しみいただけます。1 月頃の沖縄は本土に比べると格段に暖かく、観光や泡盛を堪能いただければ幸甚です。

本学会にて会員皆様の日ごろの研究成果を積極的に発表していただき、研究者の意見交換の場になることを願っております。なお、現在、プログラム委員会では、毒性病理学の基礎から最新の話題を含めた題目として、特別講演２題、２つのシンポジウム（８題）、パネルディスカッション（４題）
およびワークショップ（５題）を予定しております。実り多い会となりますよう、プログラム委員そして事務局一同最善を尽くす所存です。

期待される沖縄の青い海と青い空の下、皆様にお会いできることを心より楽しみにしております。



第 34 回日本毒性病理学会総会及び学術集会
年会長

吉見

琉球大学大学院

直己（よしみ なおき）

医学研究科

腫瘍病理学講座

教授

5

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

会場アクセス
アクセスルート

沖縄かりゆしアーバンリゾート・ナハ①車（タクシー・レンタカー）利用②路線バス利用

●泊高橋
バス停

車

③ゆいレール利用＋徒歩

美栄橋駅

1 2

● 3那覇空港駅
那
覇
空
港

路線バス

モノレール
（ゆいレール）

那覇空港案内図

タクシーをご利用の場合「近距離乗り場」

到着口Ａ

路線バスをご利用の場合「空港３番乗り場」

到着口Ｂ

モノレール（ゆいレール）駅は
エレベーター・エスカレーターで２階へ

ゆいレール那覇空港駅へ
6

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

タクシーをご利用の場合
乗車区間：那覇空港～～

うみそらトンネル～

久茂地交差点

沖縄かりゆしアーバンリゾート・ナハ（とまりん内）

所要時間：約 10 分
料

金：タクシーの場合、約 1,250 円

空港ターミナルを出ると、右手がタクシー乗り場となっております。
タクシー乗り場は「遠距離乗り場」「近距離乗り場」に分かれておりますので、「近距離乗り場」からご乗車ください。

レンタカーをご利用の場合
那覇空港より、うみそらトンネルをご利用の場合：上記タクシーと同じルートで約 10 分（4.9km）

沖縄かりゆしアーバンリゾート・ナハの入口は、空港から国道 58 号線を北上して「とまりん」の奥側（北側）になります。

※ホテル玄関のベルボーイが「とまりんアネックス駐車場」へのご案内をいたします。
先にお荷物を降ろしになってから、お車をご駐車ください。

※「とまりんアネックス駐車場」の駐車は無料となります。

駐車券を沖縄かりゆしアーバンリゾート・ナハ１階のフロントまでお持ちください。

■国道 58 号線バスレーン規制のお知らせ

ホテル前の国道 58 号線は平日（月～金）バスレーン規制が下記の時間帯にございます。

第 一車線（左側）がバス専用レーンとなり特に夕方の時間帯、空港方面からホテルにお越しの場

合は十分にご注意ください。

・AM7:30 ～ AM9:30（南向け上り：那覇市天久→那覇市久茂地）
・PM5:30 ～ PM7:30（北向け下り：那覇市旭橋→那覇市天久）

路線バスをご利用の場合■会場前バス停留所│泊高橋（とまりん前）

系統番号：99 番

天久新都心線

所要時間：［平日］約 20 分～ 30 分

沖縄かりゆしアーバン
リゾート・ナハ 入口
到
着

出
発

［土日祝日］約 20 分

停 留 所：［乗車］「空港３番乗り場」国内線旅客ターミナルビル▶ ［下車］泊高橋

料

と
ま
り
ん

金：230 円

▶

徒歩約１分

N
とまりんアネックス駐車場

沖縄かりゆしアーバンリゾート・ナハ

モノレール（ゆいレール）をご利用の場合
所要時間：合計約 25 分

［モノレール］約 14 分

経料

［徒歩］約 10 分（美栄橋駅 ▶ 会場）

路：［モノレール］那覇空港駅乗車
金：300 円▶

▶

美栄橋駅下車

会場まで徒歩約 10 分

（徒歩約

分）

美栄橋

7

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

会場案内

6F
第１会場
講演会場
懇親会会場

クローク

（ニライカナイ）

７Ｆへ

PC
受付
総合受付

学会事務局受付

座長受付

第２会場
（王朝）

7F
MIYARABI

ポスター会場
企業展示・休憩コーナー（シェルホール）

8

学会本部
６Ｆへ

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

参加者へのご案内■参加者の方へ

1. 総合受付は６Ｆニライカナイ前にございます。受付時間は下記のとおりです。
１月 25 日（木）８：00 ～ 17：00

１月 26 日（金）８：30 〜 15：00

2. 事前参加登録者はあらかじめ送付された参加証（ネームカード）を持参し、会期中は必ずご着用ください。
ネームホルダーは総合受付にご用意いたしますので、ご利用ください。

3. 当日参加者は「当日参加申込書」に必要事項を記入の上、「当日参加受付」にて下記参加費を納入して参加証を受け取り、氏名・所属を記入の上、会期中は必ずご着用ください。学生の場合は学生証の提示が必要です。
一般会員：12,000 円

学生会員：   6,000 円

非 会 員：18,500 円※講演要旨集 5,000 円含む※名誉・功労会員の先生は無料でご参加頂けます。当日は招待者受付にお越しください。

4. 会員の方には講演要旨集を事前に郵送いたしますので、忘れずにご持参ください。当日お忘れの場合、または購入をご希望の場合は一般会員・学生会員：2,000 円、非会員：5,000 円での販売となります。
なお、数に限りがありますので、ご了承ください。

5. 質問・討論される方は、マイクの前に並び、座長の指示に従って所属と氏名を述べてから発言してください。
6. 館内は、指定場所以外はすべて禁煙です。

7. 場内では携帯電話の電源を切るか、マナーモードにしてください。

8. 昼食はランチョンセミナー、あるいはホテル内や会場周辺のレストランなどをご利用ください。

9. 会期中、企業展示を開催いたします。休憩コーナー、ドリンクコーナーも設置しますのでご利用ください。
◆日時

１月 25 日（木）８：30 ～ 18：20
１月 26 日（金）８：30 ～ 15：00◆場所

７Ｆ企業展示会場（シェルホール）

10. クロークは６Ｆの第２会場（王朝）の向かいにございます。受付時間は下記のとおりです。
１月 25 日（木）８：00 ～ 20：40
１月 26 日（金）８：30 ～ 17：00

11. 会場内での呼び出しは緊急時以外にはいたしませんのでご了承ください。

総合受付付近（６Ｆ廊下）にメッセージボードを設置いたしますのでご利用ください。

12. 会場内での写真撮影・録画・録音は禁止させていただきます。
13. 貴重品は各自の自己責任で管理してください。

14. 年会費支払い、新入会受付、勤務先・住所変更受付、評議員会及び総会委任状の出し忘れの方などの受付は、学会事務局デスク（６Ｆニライカナイ前）までお越しください。

今回は、すでに STP および JSTP より発行された INHAND の別冊誌を１部 3,000 円（税込）にて販売いたします。必要な方はお早めにご購入下さい。
◆受付時間

１月 25 日（木）８：00 ～ 17：00
１月 26 日（金）８：30 ～ 14：00

9

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology■評議員会・総会合同開催のお知らせ
日本毒性病理学会会員
拝啓

初冬の候

各位

ますますご清祥のこととお慶び申し上げます。

さ て、第 34 回日本毒性病理学会では、通例に従って評議員会及び総会を合同で下記のとおり開催いたします。

本会議では、活動報告と次年度計画をご承認いただく重要な会議となりますので、ご出席の程何卒よろしくお

願い申し上げます。なお、評議員の皆様には、当日ご出欠を確認させていただきます。



日本毒性病理学会
日時：2018 年１月 26 日（金）15：20 〜 16：50

議

題：・2017 年度活動報告及び決算報告会

理事長

場：第１会場（６Ｆニライカナイ）
・2018 年度活動計画及び予算・功労会員・評議員の推薦
・その他

第１会場（６Ｆニライカナイ）

評議員席

10

舞台
理事会役員席

中江敬具
大The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology■ランチョンセミナーのご案内１ 月 25 日（木）・26 日（金）両日ともに、第１会場（６Ｆニライカナイ）、第２会場（６Ｆ王朝）にてランチョン

セミナーを行います。チケットは、第２会場（６Ｆ王朝）にて配布します。
◆配布時間

１月 25 日（木）８：00 ～ 11：00
１月 26 日（金）８：30 ～ 11：00

ランチョンセミナーⅠ

１月 25 日（木）12：10 ～ 13：00

第１会場（６Ｆニライカナイ）「Immune functions in lymph nodes - how lymph nodes work; illustrated anatomicalbasis for surveillance, filtration and antigen response」
演者：Cynthia Willard-Mack（Pathology, Envigo US）

共催：エンヴィーゴ株式会社

座

長：今立

真（エンヴィーゴ株式会社）

ランチョンセミナーⅡ

１月 25 日（木）12：10 ～ 13：00

第２会場（６Ｆ王朝）「Histopathologic
evaluation for the Monkey Safety Test for Neurovirulence of Yellow Fever andTetravalent Dengue Vaccines - WHO Protocol for Live-Attenuated Vaccines-サ ルを用いた神経毒力試験における病理所見評価について－弱毒生ワクチンの WHO プロトコールにおける
黄熱病および 4 価デングワクチンでの事例を中心に－」演

者：Sheila Grimes（Southern Research）

共催：Southern Research/ 株式会社スリーエス・ジャパン

座

長：渋谷

一元（一般財団法人日本生物科学研究所）

ランチョンセミナーⅢ

１月 26 日（金）12：10 ～ 13：00

第１会場（６Ｆニライカナイ）「Use of Unbiased Stereology in Drug Development」
演者：Danielle L. Brown, DVM, MS, DACVP, DABT（Charles River Pathology Associates）

共催：Charles River

座

長：磯部

香里（Charles River Edinburgh）

ランチョンセミナーⅣ

１月 26 日（金）12：10 ～ 13：00

第２会場（６Ｆ王朝）「ヒト細胞を用いた再生医療等製品の安全性試験

Non-clinical safety studies for human cell derived tissue-engineered medical products」
演

者：孫谷

共

催：株式会社新日本科学

座

長：平川

弘明（株式会社新日本科学
公昭（株式会社新日本科学

安全性研究所）
安全性研究所）■懇親会のご案内

1. 懇親会は１月 25 日（木）18：30 から第１会場（６Ｆニライカナイ）にて開催します。

2. 事前登録制ですが、総合受付にて懇親会費 9,000 円（学生 7,000 円）で申し受けます。
ただし、定員に達した場合は締め切る場合がございます。予めご了承ください。

11

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

座長・演者の皆様へ■特別講演・シンポジウム・パネルディスカッション・ワークショップ・一般口演の座長の先生方へ
1. 来館されましたら、座長受付（６Ｆニライカナイ前）にお越しください。バッジをお渡しします。

2. セッション中は参加証（ネームカード）の他に、見えやすい場所にバッジを必ずご着用ください。
セッション終了後、バッジはそのままお持ち帰りください。

3. ご担当セッション開始 15 分前には、会場内の次座長席にご着席ください。
4. 時間厳守にご協力ください。

■ポスター発表の座長の先生方へ

1. 担当セッション開始時間の遅くとも 15 分前までには、座長受付（６Ｆニライカナイ前）にお越しください。
指示棒、バッジ、ストップウォッチをお渡しします。

2. 討論時間には参加証（ネームカード）の他に、見えやすい場所にバッジを必ず着用ください。セッション終
了後、指示棒、ストップウォッチは必ずご返却ください。バッジはそのままお持ち帰りください。

3. 各発表時間 5 分（要約 1 分、質疑応答 4 分）を目処に進行ください。
4. 時間厳守にご協力ください。

■特別講演・シンポジウム・パネルディスカッション・ワークショップ・一般口演の発表者の先生方へ
1.

発表スライド・ ‌PowerPoint での口演発表用スライド作成にあたっては、外国からの参加者を考慮して可能な限り英語で作成してください。

・ ‌画面解像度は XGA（1024 × 768 ピクセル）です。

2.

PC 受付

・ ‌メディア（USB フラッシュメモリ）持込みの方は発表の 30 分前までには PC 受付（6F 王朝前ロビー）にご持参ください。

・ ‌P C を持込みの方は PC 受付にて発表データ確認後、発表の 30 分前までに発表会場の左手前方のオペレー
ター席まで PC をご持参ください。

・ ‌発 表データは、会場の PC に一時保存いたしますが、これらのデータは本学会終了後、責任を持って廃棄します。

1） Windows をご使用の方

・ ‌USB フラッシュメモリ、またはご自身の PC をお持込みください。

・ ‌会場では Windows7、アプリケーションは PowerPoint2007 / 2010 / 2013 の PC をご用意しております。
・ ‌フ ォントは文字化けを防ぐため下記のフォントで作成してください。
①日本語（MS ゴシック、MSP ゴシック、MS 明朝、MSP 明朝）②英語（Century、Century Gothic、Times New Roman、Arial）

・ ‌USB フラッシュメモリは Windows で読み込み可能なもののみとさせていただきます。
・データファイル名は「演題番号」「氏名」の順でつけてください。
【例】O-160 山田太郎

・お持込みの USB フラッシュメモリの中には発表データ以外は入れないでください。
2） Macintosh をご使用の方

・ Macintosh の用意はございませんので、ご自身の PC をご持参ください。
・ USB フラッシュメモリでのデータの持込みはできません。

12

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology3） ご自身の PC をお持込みの際のご注意点

・ ‌モ ニタの出力端末につきまして D-Sub15 ピン以外の交換ケーブルが必要な機種を使用する方は変換ケーブルをご持参ください。

・ ‌会場には必ず電源アダプターをご持参ください。

・ ‌PC のトラブルにより映像の投影が不可能になる場合にそなえ、必ずバックアップデータをご持参ください。
・ 動画や音声の再生はできません。

・ 発表終了後、PC はオペレーター席で返却いたします。

3.

発表・ ‌前演者の発表が始まりましたら、次演者席にご着席ください。

・ ‌発表機材は PC 液晶プロジェクターを使用します。スライド・ビデオは使用できませんのでご注意ください。
・ ‌発 表は、演台におかれたディスプレイを見ながら、ご自身で画面操作をしてください。
・ ‌発表者ツールの対応はできませんので、ご了承ください。

4.

発表時間
セッション

特別講演
シンポジウムパネルディスカッション

講演時間

討論時間

予告ランプ

講演時間・討論形式等は事前に連絡している通りです。

ワークショップ
一般口演

各8分

各4分

発表時間終了 1 分前に黄色ランプ
発表時間終了で赤ランプ

90cm■ポスター発表をされる先生方へ

1. ポスターパネルは縦 210cm、横 90cm です。

・ ‌図のようにパネル上部左の演題番号（20cm × 20cm）は事務局で用意します。

演題
番号

演題名
所属・氏名

20cm

70cm

20cm

・ ‌演題名・所属・氏名はポスター上部に適宜表示ください。
・ ‌掲示スペースは 190cm × 90cm ですが、上端から貼る場

合は、演題番号表示スペースをとってポスターを作成してください。（但し、下まで貼ると見えにくくなりますので配置の際は気をつけてください）

210cm

・ ‌ポ スターは日本語で問題ありません。

発表内容を貼り付けてください。

190cm

2. ポスターは 1 日ごとの貼り換えとなります。下記時間に貼付けと撤去を行ってください。
日時

1 月 25 日（木）1 月 26 日（金）貼付け

発表・質疑応答8:30 ～ 10:00

13:10 ～ 14:10

8:30 ～ 10:00

17:20 ～ 18:20

撤去

18:20 ～ 18:30

15:00 ～ 15:20※撤去時間内に撤去されないポスターは事務局にて処分させていただきます。
3. 各ポスターパネルにマグネットとポスター発表者用のバッジを用意してあります。

発表・質疑応答の時間帯は必ず発表者用バッジをご着用ください。セッション終了後、バッジはそのままお持ち帰りください。

4. 発表者は座長の進行で進めてください。

各発表時間の持ち時間は 5 分（要約 1 分、質疑応答 4 分）、その後自由討論です。時間厳守でお願いします。

13

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology■学術年会長賞（最優秀賞、優秀賞、優秀症例報告賞）の選出について

演 題番号に * が表示されている演題は、40 歳未満の筆頭演者の演題であり、学術年会長賞（最優秀賞、優秀賞、優秀症例報告賞）の選出対象演題です。

1 月 26 日（金）15 : 20 からの評議員会・総会にて授賞者の表彰を行いますので、ご参加ください。

■利益相反について・ ‌発 表者の皆様は COI（利益相反）の開示をお願いいたします。企業の所属の場合は、別企業と COI 状態にある場合に開示してください。

・ ‌口 演発表者は発表スライドの 2 枚目（表題の次のスライド）に、ポスター発表者は一番最後に記載してくだ
さい。

Sample1

COI Disclosure Information
Taro Dokusei
In connection with this presentation, there is
no COI to be disclosed with any companies.
本演題に関連して開示すべき利益相反はありません。

Sample2
COI Disclosure Information
Hanako Dokusei
In connection with this presentation,
we disclose COI with following companies.
本演題に関連して開示すべき利益相反は以下の通りです。

14

Executive/Advisory Position:(○○Campany)

Funded research/Collaborative research:(○○Campany)

Lecture Honorariums, etc.:(○○Campany)

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

日程表
1 月 24 日（水）第 1 会場（6F ニライカナイ）

第２会場（6F 王朝）控室（6F 寿・優）ポスター会場
ニライカナイ前
企業展示
企業展示（7F シェルホール前）（6F 廊下）（7F シェルホール）

8:00

9:00

10:00

11:00

12:00
12:30

12:30

編集委員会

13:00
13:30
13:45

14:00

15:00

教育委員会
第 30 回スライド
カンファランス（内分泌系および感覚器系）

14:45
15:00

理事会

16:00

17:00

17:00
17:30

18:00

17:50

試験問題解説
18:50

19:00

19:00

バンケットセミナー

20:00

21:00

株式会社イナリサーチ
ルナパス毒性病理研究所
PDS パソロジー・
データシステムズ
21:00

20:00

Global Presidentʼs
Meeting

20:50
21:00

21:50

IFSTP EC
Meeting15

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

日程表
1 月 25 日（木）第 1 会場（6F ニライカナイ）

第２会場（6F 王朝）

8:00

9:00

MIYARABI（7F）

ポスター会場
ニライカナイ前
企業展示
企業展示（7F シェルホール前）（6F 廊下）（7F シェルホール）
8:00 〜

受付開始
8:30

8:30

8:40 〜 開会式
8:50

ポスター貼付
一般口演

10:00

10:00
10:00

Ｏ-01 〜Ｏ-10

10:50

11:00

11:00

特別講演 1

演者：安仁屋洋子

11:50

12:00

12:10

12:10

エンヴィーゴ株式会社

株式会社スリーエス・ジャパン
13:00

ランチョンセミナーⅠ ランチョンセミナーⅡSouthern Research/

13:00

13:00

受付対応

企業展示

13:20

14:00

ポスター閲覧 /企業展示

シンポジウム 1

発がんリスク評価法

15:00

16:00

17:00

15:00
15:10

パネル
ディスカッション
毒性病理専門家の教育システムとキャリアデザイン

17:00

17:10

17:20
17:20

ポスター発表Ⅰ

18:00

18:20
18:30

19:00
懇親会

20:00
20:30

21:00

16

18:20
18:20
18:30

ポスター撤去The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

日程表
1 月 26 日（金）第 1 会場（6F ニライカナイ）

第２会場（6F 王朝）MIYARABI（7F）

ポスター会場
ニライカナイ前
企業展示
企業展示（7F シェルホール前）（6F 廊下）（7F シェルホール）

8:00
8:30 〜

9:00

8:50

受付開始

8:30

8:30

ポスター貼付シンポジウム 2

10:00

ナノ化学物質の安全性評価と展望

10:00
10:00

10:50

11:00

11:00

特別講演 2

演者：木戸
11:50

12:00

ポスター閲覧 /
企業展示

博

12:10

受付対応
12:10

ランチョンセミナーⅢ ランチョンセミナーⅣ

13:00

13:00

Charles River

株式会社新日本科学

13:00

企業展示

12:10

国際用語委員会
13:00

13:10
13:10

ポスター発表Ⅱ

14:00

14:10
14:10

14:20

ワークショップ

15:00

16:00

NASH モデルの病態と機序
15:20
15:20

ポスター閲覧
15:00

15:00

15:00
15:00
ポスター撤去15:20

評議員会・総会・表彰式・
閉会式
16:50

17:00

18:00

19:00

20:00

21:00

17

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

日本毒性病理学会のあゆみ
回

開催地

1

東

京

会長（所属）
西山

2

東

京

藤原

4

浜

松

榎本

札

幌

3
5
6
7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

*20
21

22

23

24

25

26

27

28

29

30

31
32

33
34

名古屋
横

浜

東

京

奈

良

東

京

広

島

大

阪

東

京

鳥

取

東

京

水

戸

岐

阜

淡

路

東

京

東

京

神

戸

浜

松

鹿児島
東

京

浜

松

大

阪

名古屋
金

沢

東

京

つくば
徳

島

香

川

東

沖

京

堺

縄

伊東

保一 （北里学園）

公策 （東京大学）

信行 （名古屋市立大学）
眞 （安評センター）

蟹沢

成好 （横浜市立大学）

林

裕造 （国立衛試）

板倉
小西

土井

伊藤

智敏 （北海道大学）

陽一 （奈良医科大学）
邦雄 （東京大学）

明弘 （広島大学）

佐久間貞重 （大阪府立大学）
高橋

道人 （国立衛試）

前川

昭彦 （佐々木研）

梅村

真板
森

奈良間

孝司 （鳥取大学）
敬三 （残農研）

秀樹 （岐阜大学）功 （摂南大学）

津田洋幸 （国立がんセンター）

福島

昭治 （大阪市立大学）

布谷

今井

鉄夫 （日生研）

清 （安評センター）

吉田浩己 （鹿児島大学）

白井智之 （名古屋市立大学）

三森

真鍋

国敏 （東京農工大学）

淳 （第一三共株式会社）田中

卓二 （金沢医科大学）

西川

秋佳 （国立衛研）

大石

原田
泉

中山

裕司 （アステラス製薬（株））
孝則 （残農研）

啓介 （徳島大学）

裕之 （東京大学）

今井田克己 （香川大学）
山手
吉見

丈至 （大阪府立大学）
直己 （琉球大学）*Joint international meeting of JSTP/IFSTP

18

会

期

1985.3.25

1986.2.7-8
1987.2.6-7
1988.2.5-6

1989.1.27-28
1990.2.13-14
1991.1.17-18

1992.1.23-24

1993.1.21-22

1994.1.27-29

1995.1.26-27

1996.1.24-25

1997.1.23-24
1998.2.3-4

1999.1.28-29

2000.1.26-27

2001.1.25-26

2002.1.24-25

2003.1.23-24

2004.2.15-18

2005.1.20-21

2006.1.26-27

2007.1.30-31
2008.2.6-7

2009.1.27-28
2010.2.3-4

2011.1.27-28
2012.2.2-3

2013.1.31-2.1
2014.1.30-31

2015.1.29-30
2016.1.28-29
2017.1.26-27
2018.1.25-26

シンポジウム特別講演
ワークショップ 一般演題
等
その他
2

0

0

1

5

29

1

7

55

1
1
1
1
1

2

8
6
6

20

19

11
9

7

1

12

0

2

1
1

10
5

2

31

1

15

1

0

1
2

2

2
2

1

71

151

16

0

53

10

0
1

80

126

18

1

53

4

1
2

47

23

15

13

17
10

13
21
8

136
147

151
143

142
125

146

119
102

172
100

109

107
106

124
125

144
108

107

2

15

3

8

101

17

108

1
3
2

11
16

114
96

83

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

協賛法人・企業一覧
第 34 回日本毒性病理学会総会及び学術集会を開催するにあたり、多くの企業・団体様よりご支援ご協力を賜りました。ここにお名前を掲載して厚く御礼申し上げます。
第 34 回日本毒性病理学会総会及び学術集会■共催セミナーエンヴィーゴ株式会社
Southern Research/ 株式会社スリーエス・ジャパン
株式会社新日本科学Charles River■広告株式会社沖縄パソロジー
金秀バイオ株式会社
社会医療法人敬愛会中頭病院
株式会社新日本科学
株式会社中央医療器
株式会社日立ハイテクノロジーズ■企業展示

株式会社イナリサーチ
Indica Labs（インディカ・ラボ）
株式会社エイチ・アンド・ティー
MPI Research Inc.
株式会社考文堂
サクラファインテックジャパン株式会社
実験病理組織技術研究会
株式会社新日本科学株式会社スリーエス・ジャパン／ Southern Research株式会社 DIMS 医科学研究所
内閣府食品安全委員会
日本エスエルシー株式会社
浜松ホトニクス株式会社
株式会社 VIP グローバル
PDS パソロジー・データシステムズ・リミテッド
富士通株式会社
株式会社ボゾリサーチセンター■ HP バナー広告

トミー沖縄ノボサイエンス株式会社■ネームカードホルダー提供
株式会社イナリサーチ

年会長

吉見

直己

■寄附

アイティーアイ株式会社
旭化成ファーマ株式会社
アステラス製薬株式会社
株式会社猪原商会
エーザイ株式会社
株式会社 LSI メディエンス
沖縄県医師会
医療法人沖縄徳洲会中部徳洲会病院
医療法人沖縄徳洲会南部徳洲会病院
株式会社沖縄パソロジー
小野薬品工業株式会社
金秀バイオ株式会社
社会医療法人かりゆし会ハートライフ病院
杏林製薬株式会社わたらせ創薬センター
社会医療法人敬愛会中頭病院
医療法人月桃会宮良クリニック
株式会社札幌総合病理研究所
三栄源エフ・エフ・アイ株式会社
参天製薬株式会社
一般財団法人残留農薬研究所
塩野義製薬株式会社
社会医療法人仁愛会浦添総合病院
住友化学株式会社
正晃株式会社
第一三共株式会社
大正製薬株式会社
大日本住友製薬株式会社
大鵬薬品工業株式会社
武田薬品工業株式会社
中外製薬株式会社
一般社団法人中部地区医師会検診センター
帝人ファーマ株式会社
一般財団法人徳明会
日産化学工業株式会社
日本たばこ産業株式会社
ファイザー株式会社■ドリンク提供

農業生産法人株式会社アセローラフレッシュ
農業生産法人有限会社勝山シークヮーサー
一般財団法人沖縄観光コンベンションビューローの補助事業として賛助を受けております。

（50 音順）19

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

座長一覧
会場：第１会場（6F ニライカナイ）
日付

時間

セッション名座長

所属

1 月 25 日 11:00 ～ 11:50 特別講演 1

吉見直己

琉球大学大学院

1 月 26 日 11:00 ～ 11:50 特別講演 2鰐渕

英機

大阪市立大学大学院

西川秋佳

国立医薬品食品衛生研究所

発がんリスク評価法

塚本徹哉

藤田保健衛生大学

シンポジウム 2

酒々井眞澄

名古屋市立大学大学院

宮田かおり

住友化学株式会社

吉田

緑

内閣府食品安全委員会

桑村充

大阪府立大学髙橋智名古屋市立大学大学院

加藤淳彦

中外製薬株式会社義澤克彦

武庫川女子大学

河部

真弓

株式会社 DIMS 医科学研究所

猪又

晃

谷

吉朗

魏

民

日比

大介

1 月 25 日 13:20 ～ 15:00

1 月 26 日

8:50 ～ 10:50

シンポジウム 1

ナノ化学物質の安全性評価と展望

1 月 25 日 15:10 ～ 17:10 パネルディスカッション

1 月 26 日 14:20 ～ 15:20 ワークショップ

1 月 25 日

8:50 ～ 9:26

一般口演Ⅰ

1 月 25 日

9:26 ～ 10:14

一般口演Ⅱ

1 月 25 日 10:14 ～ 10:50 一般口演Ⅲ

20

富士フイルム株式会社
第一三共株式会社
大阪市立大学小野薬品工業株式会社

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

会場：ポスター会場（7F シェルホール）
日付時間

セッション名（演題番号）
ポスター発表Ⅰ-1（P-01 ～ P-05）

1 月 25 日 17:20 ～ 18:20

所属

中野（伊藤）今日子 エーザイ株式会社
畠山

洋文

株式会社イナリサーチ

横平

政直

香川大学

髙須

伸二

土屋

紀子

ポスター発表Ⅰ-2（P-06 ～ P-10）

井上

ポスター発表Ⅰ-3（P-11 ～ P-14）

小野美穂子

ポスター発表Ⅰ-4（P-15 ～ P-19）

鈴木

ポスター発表Ⅰ-5（P-20 ～ P-23）

小林ポスター発表Ⅰ-6（P-24 ～ P-28）

野口ちひろ

ポスター発表Ⅰ-7（P-29 ～ P-32）

金子

ポスター発表Ⅰ-8（P-33 ～ P-36）

川口

ポスター発表Ⅰ-9（P-37 ～ P-40）

鈴木

ポスター発表Ⅰ-10（P-41 ～ P-45）

井澤

ポスター発表Ⅰ-11（P-46 ～ P-49）

1 月 26 日 13:10 ～ 14:10

座長

薫

周五
欣滋

松尾沙織里
平田

暁大

中村

明子

平川

英志
博明
公昭
智

西村

友成

乾

公正

佐々木

塩野義製薬株式会社
株式会社新日本科学
中外製薬株式会社
大正製薬株式会社
岐阜大学

帝人ファーマ株式会社
JT 医薬

鹿児島大学

株式会社新日本科学

大鵬薬品工業株式会社

アスビオファーマ株式会社

マルホ株式会社

篠塚

淳子

能登

貴久

小寺

ポスター発表Ⅱ-2（P-55 ～ P-59）

河内

ポスター発表Ⅱ-3（P-60 ～ P-64）

藤島

ポスター発表Ⅱ-4（P-65 ～ P-68）

飯塚

ポスター発表Ⅱ-5（P-69 ～ P-72）

尾崎ポスター発表Ⅱ-6（P-73 ～ P-76）

豊沢かおる

喬

ポスター発表Ⅱ-7（P-77 ～ P-80）

黒滝

ポスター発表Ⅱ-8（P-81 ～ P-85）

吉川

ポスター発表Ⅱ-9（P-86 ～ P-89）

石上

ポスター発表Ⅱ-10（P-90 ～ P-93）

岡崎

ポスター発表Ⅱ-11（P-94 ～ P-98）

杉元

眞美
純子
俊彦
生一
仁志
清和
豊

山口

裕子

松本

泉美

哲郎
剛

渡辺

武志

西川

智美

紀明

石原産業株式会社
旭化成メディカル株式会社
日本新薬株式会社
中外製薬株式会社

大日本住友製薬株式会社
参天製薬株式会社

株式会社新日本科学
第一三共株式会社
株式会社ツムラAxcelead Drug Discovery Partners 株式会社
摂南大学

アステラス製薬株式会社

株式会社住化分析センター

株式会社ボゾリサーチセンター株式会社 LSI メディエンス
大日本住友製薬株式会社
大塚製薬株式会社

武田薬品工業株式会社
小野薬品工業株式会社
田辺三菱製薬株式会社

欣正

一般財団法人残留農薬研究所

陽子

日本ベーリンガーインゲルハイム株式会社

美谷島克宏
友成

名古屋市立大学

朋ポスター発表Ⅱ-1（P-50 ～ P-54）

中原

国立医薬品食品衛生研究所

大阪府立大学厚神鳥アステラス製薬株式会社

武史

渡邊

牧野

国立医薬品食品衛生研究所

由紀

東京農業大学株式会社 LSI メディエンス

21

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

プログラム
特別講演 1
第１日目

座長：吉見

SL1

1 月 25 日（木） 11:00 ～ 11:50
直己（琉球大学大学院

医学研究科 腫瘍病理学講座）

第１会場（6F  ニライカナイ）

沖縄の開発研究と毒性学
安仁屋 洋子

沖縄科学技術大学院大学理事

特別講演 2第２日目

座長：鰐渕

1 月 26 日（金） 11:00 ～ 11:50
英機（大阪市立大学大学院

医学研究科

分子病理学）

第１会場（6F  ニライカナイ）

SL2	乳幼児期の食物アレルギーの発症と経口免疫寛容の獲得メカニズムと、それらをモニターするバイオマーカー木戸 博

徳島大学先端酵素学研究所 特任教授

シンポジウム 1
第１日目

座長：西川
塚本

SY1-1

発がんリスク評価法

1 月 25 日（木） 13:20 ～ 15:00

秋佳（国立医薬品食品衛生研究所）
徹哉（藤田保健衛生大学 医学部 病理診断科）

γ -H2AX 免疫染色による膀胱発がんリスク早期検出法の開発○豊田 武士 1），松下 幸平 1），Young-Man Cho1），赤木 純一 1），曽根 瑞季 1,2），西川 秋佳 3），
小川 久美子 1）
国立医薬品食品衛生研究所・病理，2）東京農工大・獣医病理，1）

国立医薬品食品衛生研究所・安全性生物試験研究センター

3）

SY1-2

肺胞サーファクタントの役割と発癌リスク評価への応用
横平 政直

香川大学 医学部 腫瘍病理学

SY1-3

前立腺発がん物質の早期検出モデルの確立○鈴木 周五，内木 綾，加藤 寛之，髙橋 智

名古屋市立大学大学院医学研究科 実験病態病理学

SY1-4

遺伝毒性肝発がん物質超短期検出法の開発○魏 民，藤岡 正喜，梯 アンナ，鰐渕 英機
大阪市立大学大学院医学研究科 分子病理学

22

第１会場（6F  ニライカナイ）

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

シンポジウム 2
第２日目

ナノ化学物質の安全性評価と展望

1 月 26 日（金） 8:50 ～ 10:50

座長：酒々井 眞澄（名古屋市立大学大学院医学研究科
宮田 かおり（住友化学株式会社）

SY2-1

第１会場（6F  ニライカナイ）

分子毒性学分野）

ラットモデルによる大規模吸入試験での毒性影響評価
菅野 純（独）労働者健康安全機構 日本バイオアッセイ研究センター

SY2-2

ナノ化学物質のリスク評価の国際動向と慢性試験の必要性
広瀬 明彦

国立医薬品食品衛生研究所 安全性生物試験研究センター 安全性予測評価部

SY2-3	食品関連製品に含まれるナノ素材の安全性評価
〜ナノ安全科学研究からナノ最適デザイン研究へ〜○東阪 和馬 1,2），長野 一也 1），松本 博志 2），堤 康央 1,3）
阪大院薬，2）阪大院医，3）阪大 MEI セ

1）

SY2-4

抗酸化能を有するナノメディシンの開発
長崎 幸夫

筑波大学数理物質科学研究科・人間総合科学研究科・アイソトープ環境動態研究センター

パネルディスカッション「毒性病理専門家の教育システムとキャリアデザイン」
第１日目

座長：吉田
桑村

1 月 25 日（木） 15:10 ～ 17:10
緑（内閣府食品安全委員会）
充（大阪府立大学）

第１会場（6F  ニライカナイ）

PD-1	毒性病理学専門家に向けた教育としてのミクロ問題解説 - 詳細版 - の現状と医薬品開発における毒性病理学専門家の役割
細川 暁

エーザイ株式会社 グローバル安全性研究

PD-2

日本の大学における毒性病理学・毒性学の専門家教育と卒後の進路指導について
渋谷 淳

東京農工大学PD-3

米国での獣医学部教育の実態と毒性病理専門家のキャリア形成について
平良木 肇

Amgen, Inc., Comparative Biology & Safety Sciences

PD-4

企業での毒性病理専門家の活動における日米間の比較
土屋 毅幸

Department of Safety Assessment and Laboratory Animal Resources（West Point, PA U.S.A.）, Merck
Research Laboratories, Merck & Co., Inc., Kenilworth, NJ, USA

23

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ワークショップ
第２日目

座長：髙橋

WS-1

NASH モデルの病態と機序

1 月 26 日（金） 14:20 ～ 15:20

智（名古屋市立大学大学院）
・加藤

第１会場（6F  ニライカナイ）

淳彦（中外製薬株式会社）

非アルコール性脂肪性肝炎モデルラットの肝炎進展に関わる全身免疫の役割○井澤 武史，大地 祥子，新 真智，宮城 伶奈，橋本 愛，桑村 充，山手 丈至
大阪府大 獣医病理

WS-2 ＊	肥満および耐糖能異常を示す新規 NASH モデルマウスでは、脂肪肝は肝線維化・腫瘍形成へと経時的に進行する○寺山 由依，審 一慧，山際 高史，中谷 祐樹，大嶋 成奈優，森尾 剛，松浦 哲郎，尾崎 清和
摂南大学 薬学部 病理学研究室

WS-3 ＊	改変コリン欠乏メリオニン低減アミノ酸食誘発マウス非アルコール性脂肪性肝炎様病態に対するトランス脂肪酸と代替品の影響○煙山 紀子 1），池端 香織 1），山下 卓也 1），宇野 絹子 1），張 舜恵 1），小川 秀治 2），渡邊 厚 3），
美谷島 克宏 1），中江 大 1）
東京農大・応生・食品安全健康，2）ゼリア新薬・動態安全性研，3）旭化成メディカル・医療技術材料研1）WS-4 ＊	Connexin 32 ドミナントネガティブトランスジェニックラットを用いたメタボリック
シンドローム随伴 NASH 発がんモデルの樹立○内木 綾 1,2），加藤 寛之 1），鈴木 周五 1），高橋 智 1）

名市大・院・医・実験病態病理，2）名古屋市立東部医療センター 病理診断科

1）

WS-5

2 つの NASH モデルマウスにおける病理組織学的所見の違い○奥野 高裕，石井 真美，梯 アンナ，藤岡 正喜，魏 民，鰐渕 英機
大阪市立大学 大学院 医学研究科 分子病理学

一般口演Ⅰ
第１日目

座長：義澤

O-01 ＊

発がん機序・がん予防

1 月 25 日（木） 8:50 ～ 9:26
克彦（武庫川女子大学）
・河部

第１会場（6F  ニライカナイ）

真弓（株式会社 DIMS 医科学研究所）

パルミトイルピペリジノピペリジンの毒性影響および抗がん効果発現機序○安藤 さえこ 1），松本 晴年 1），深町 勝巳 1），二口 充 1,2），吉見 直己 3），酒々井 眞澄 1）
名古屋市立大学大学院医学研究科分子毒性学分野，2）長崎大学病院病理診断科・病理部，

1）

琉球大学大学院医学研究科腫瘍病理学講座

3）O-02	BALB/c-p53 ＋ / －マウスにおける DMBA または PhIP 誘発性乳がんの遺伝子変異 / 表現型の
比較解析○町田 雪乃 1），須藤 柚稀子 1），打屋 尚章 1），落合 雅子 2），今井 俊夫 1）

国立がん研究センター研究所 動物実験施設，2）国立がん研究センター研究所 動物実験部門

1）O-03 ＊

マウス経胎盤ばく露による有機ヒ素化合物 Dimethylarsinic acid の発がん性およびその機序○藤岡 正喜，魏 民，奥野 高裕，熊田 賢次，梯 アンナ，大石 裕司，鰐渕 英機
大阪市立大学大学院 医学研究科 分子病理学

24The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

一般口演Ⅱ
第１日目

座長：猪又

O-04 ＊

毒性機序

1 月 25 日（木） 9:26 ～ 10:14

晃（富士フイルム株式会社）・谷

第１会場（6F  ニライカナイ）

吉朗（第一三共株式会社）

嚢胞における上皮間葉転換－脈絡叢と尿細管の検討－○村井 厚子，中村 賢志，瀧本 憲史，並木 健吾，日比 大介，柳澤 幸宏，下内 孝司，柳 浩由紀
小野薬品工業（株）安全性研究部

O-05	Diacylglycerol acyltransferase 1 阻害剤 DS-7250 による肝臓での脂肪酸合成亢進を介した Zucker fatty ラットにおける脂肪肝増強○熊谷 和善，安野 恭平，井口 拓馬，甲斐 清徳，森 和彦
第一三共（株）安全性研究所

O-06 ＊

カニクイザルにおける Mifepristone による卵巣毒性の病理組織学的解析○武田 賢和 1），堀江 勘太 2），後藤 哲也 3），太田 恵津子 1），中野（伊藤）今日子 1），早川 和宏 1），
関 由妃 1），後藤 彩 1），細川 暁 1）
エーザイ（株）筑波安全性研究部，2）エーザイ（株）ニューロロジービジネスグループ，

1）（株）サンプラネット 筑波研開支援事業部

3）

O-07 ＊

げっ歯類にみられた薬物誘発性フッ素症の機序検討○関 由妃 1），則武 健一 2），武田 賢和 1），朝倉 省二 1），大塚 昭代 1），後藤 彩 1），太田 恵津子 1），
中野（伊藤）今日子 1），早川 和宏 1），園田 二朗 1），細川 暁 1）
エーザイ株式会社 筑波安全性研究部，2）株式会社サンプラネット 安全性研究ユニット

1）

一般口演Ⅲ
第１日目

1 月 25 日（木） 10:14 ～ 10:50

座長：魏O-08 ＊

マーカー民（大阪市立大学）
・日比大介（小野薬品工業株式会社）

第１会場（6F  ニライカナイ）

DNA 二重鎖切断マーカーγ -H2AX を用いた胃発がん物質の短期同定○岡部 麻子 1），桐山 諭和 1），鈴木 周五 2），櫻井 浩平 1），高橋 智 2），塚本 徹哉 1）
藤田保健衛生大学 医学部 病理診断科，2）名古屋市立大学大学院 医学研究科 実験病態病理学

1）O-09 ＊	ブタ腎動脈における熱焼灼直後の病理学的変化と画像診断法による検出：血管内超音波と
光干渉断層法を用いた検討○坂岡 篤 1,2），田上 暁之 3），鬼村 祐治 1），萩原 仁美 1），寺尾 壽子 1），熊谷 文明 4），松村 潔 2）
テルモ株式会社，2）大阪工業大学大学院 工学研究科，3）福井大学 医学部，

1）（一財）食品薬品安全センター 秦野研究所

4）

O-10

膵がん血清診断マーカーの探索○深町 勝巳 1），二口 充 1），津田 洋幸 2），酒々井 眞澄 1）
名古屋市立大学大学院医学研究科 分子毒性学分野，2）名古屋市立大学 津田特任教授研究室

1）25

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター発表Ⅰ-1
第１日目

1 月 25 日（木） 17:20 ～ 18:20

座長：中野（伊藤） 今日子（エーザイ株式会社）
・畠山

P-01

ポスター会場（7F  シェルホール）

洋文（株式会社イナリサーチ）

NNK 誘発マウス肺腺癌における CD44v6 の発現に関する検討○山川 けいこ 1），横平 政直 1），橋本 希 1），成澤 裕子 1），吉田 翔太 1），竿尾 光祐 1,2），今井田 克己 1）
香川大学 医学部 腫瘍病理学，2）回生病院

1）P-02 ＊

若齢 Sprague-Dawley ラットでみられた腎臓の微小変化群の 1 例○安野 恭平，本多 久美，袴田 志野婦，甲斐 清徳，森 和彦
第一三共（株）安全性研究所

P-03

マウス大腸オルガノイドを用いる PhIP の発がんメカニズムの解析○今井 俊夫 1），落合 雅子 1），成瀬 美衣 1），筆宝 義隆 2）

国立がん研究センター 研究所 動物実験部門，2）千葉県がんセンター 研究所 発がん制御研究部

1）

P-04

植物芭蕉（Musa basjoo）葉抽出物のヒト大腸がん細胞に対する殺細胞効果○松本 晴年 1），安藤 さえこ 1），深町 勝巳 1），二口 充 1,2），吉見 直己 3），酒々井 眞澄 1）
名古屋市立大学 大学院 医学研究科 分子毒性学分野，2）長崎大学病院 病理診断科・病理部，

1）

琉球大学大学院医学研究科 腫瘍病理学講座

3）

P-05

Overcoming resistance to cetuximab with honokiol, a small-molecule polyphenol○飯田 麻里 1），Hannah E. Pearson1），Rachel A. Orbuch1），Nellie K. McDaniel1），
Kwangok P. Nickel 1），Randall J. Kimple1），Jack Arbiser2），Deric L. Wheeler1）

Department of Human Oncology, University of Wisconsin School of Medicine and Public Health，1）

Department of Dermatology, Emory University School of Medicine, Winship Cancer Institute2）

ポスター発表Ⅰ-2
第１日目

座長：井上

P-06

1 月 25 日（木） 17:20 ～ 18:20

薫（国立医薬品食品衛生研究所）
・横平

ポスター会場（7F  シェルホール）

政直（香川大学）

NASH の肝臓組織や肝臓癌におけるプロテオーム解析○梯 アンナ，奥野 高裕，藤岡 正喜，魏 民，鰐渕 英機
大阪市立大学・院・医・分子病理学

P-07 ＊	ラット反復投与による肝臓における細胞老化関連代謝分子の発現に関する遺伝毒性及び非遺伝毒性肝発がん物質の反応性の違い○伊藤 優子 1,2），中島 康太 1,2），増渕 康則 1,2），齋藤 文代 3），赤堀 有美 3），吉田 敏則 1），渋谷 淳 1）
東京農工大 獣医病理，2）岐阜大 院 連合獣医，3）化学物質評価研究機構

1）

P-08

早期ラット肝発がんに対する黄き注射液の影響○金 美蘭，唐 倩，張 梅，方 仁東，王 剣，王 自力
西南大学 動物科術学院 獣医病理研究室

P-09 ＊

Luteolin の膵癌化学予防効果の検討○加藤 寛之，内木 綾，鈴木 周五，高橋 智
名古屋市立大学大学院医学研究科実験病態病理学

P-10	ラットにおけるコリン欠乏メチオニン低減アミノ酸食による非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）様病態に対してトランス脂肪酸が及ぼす系統差の影響○宇野 絹子，美谷島 克宏，張 舜恵，煙山 紀子，小川 秀治，渡邊 厚，中江 大
東京農業大学大学院 農学研究科

26

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター発表Ⅰ-3
第１日目

座長：小野

P-11

1 月 25 日（木） 17:20 ～ 18:20

美穂子（アステラス製薬株式会社）
・髙須

ポスター会場（7F  シェルホール）

伸二（国立医薬品食品衛生研究所）

老齢マウスにおける飢餓誘導性肝オートファジー○飯塚 生一 1），名畑 美和 1），関根 瞳 1），藤塚 直樹 1），武田 宏司 2,3）（株）ツムラ ツムラ漢方研究所，2）北海道大学大学院 薬学研究院 臨床病態解析学，

1）

北海道大学病院 消化器内科

3）P-12 ＊

カドミウムを用いた時間毒性学の検討～組織学的検討を中心とした感受性時刻差の解析～○吉岡 弘毅 1,2），野々垣 常正 1），市丸 嘉 1），大谷 勝己 3），酒々井 眞澄 2），三浦 伸彦 3）

金城学院大学 薬学部 薬学科，2）名古屋市立大学 医学部 分子毒性学分野，3）労働安全衛生総合研究所

1）

P-13

クロム・銅・ヒ素化合物系木材防腐剤（CCA）による肝毒性の発現機序解析○高橋 尚史 1），山口 悟 1），大塚 亮一 1），武田 眞記夫 1），加藤 由隆 1），伊藤 強 1），小山 彩 1），
志賀 敦史 1），岡崎 欣正 1），吉田 敏則 2），原田 孝則 1）（一財）残留農薬研究所，2）東京農工大学 獣医病理学研究室

1）

P-14 ＊	Time dependent cytoprotective phenomenon of lipopolysaccharide in TAA-induced
acute liver injury in rats
○ Karim Mohammad Rabiul，Pervin Munmun，倉持 瑞樹，井澤 武史，桑村 充，山手 丈至
大阪府立大 獣医病理ポスター発表Ⅰ-4
第１日目

座長：鈴木

P-15

1 月 25 日（木） 17:20 ～ 18:20
周五（名古屋市立大学）
・土屋

ポスター会場（7F  シェルホール）

紀子（塩野義製薬株式会社）

シスプラチンの腎毒性に対するエダラボンの効果○小池 夏未，佐々木 彩花，矢守 凜，村上 智亮，鈴木 和彦
東京農工大学 農学部 共同獣医学科

P-16 ＊

フマル酸ジメチルの腎間質線維化抑制効果の検討○佐々木 彩花，小池 夏未，矢守 凜，村上 智亮，鈴木 和彦
東京農工大学 農学部 共同獣医学科

P-17 ＊

HNF4 α発現低下に伴う尿細管上皮細胞の形質変化○矢守 凜，小池 夏未，佐々木 彩花，村上 智亮，古谷 哲也，鈴木 和彦
東京農工大学 農学部 共同獣医学科

P-18

低酸素応答のハイスループットスクリーニング：プロモーター機能解析○米沢 理人 1），フォースアルドレッド シェリー 1），トリンクライン ネイサン 1），
シア メンハン 2），フアン ルイリ 2），ハドソン ジム 3），サムエルソン ジョハナ 1）
アクティブ・モティフ，2）NIH ケミカルジェノミクスセンター，3）ハドソンアルファ細胞工学研究所

1）

P-19 ＊

免疫器官の発達に影響をおよぼす因子○等々力 舞，瀬沼 美香，熊谷 文明，斉藤 義明，桑形 麻樹子（一財）食品薬品安全センター秦野研究所

27

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター発表Ⅰ-5
第１日目

座長：小林

1 月 25 日（木） 17:20 ～ 18:20

欣滋（株式会社新日本科学）・松尾

ポスター会場（7F  シェルホール）

沙織里（中外製薬株式会社）

P-20 ＊	Inhalation single toxicity studies of 1-methylnaphthalene in rats and mice:
Histopathological Aspect○ Lee Mi Ju

Inhalation Toxicity Research Center, Occupational Safety and Health Research InstituteP-21

アクリル酸メチルの 13 週間吸入暴露によるラット呼吸器病変○高信 健司，妹尾 英樹，梅田 ゆみ，相磯 成敏，菅野 純（独）労働者健康安全機構 日本バイオアッセイ研究センター

P-22

アクリル酸メチルの 104 週間吸入暴露によるラットの鼻腔発がんと呼吸器病変○妹尾 英樹，高信 健司，梅田 ゆみ，相磯 成敏，菅野 純（独）労働者健康安全機構 日本バイオアッセイ研究センター

P-23 ＊	微小管重合阻害薬 combretastatin A4 disodium phosphate の単回投与によりラットに誘発される心筋障害○栃内 亮太 1），小松 加代子 1），村上 純太 1），永田 百合子 1），安藤 稔 1），畑 千恵 1），鈴木 倫 1），
角 将一 1），小林 稔秀 1），桑原 正貴 2）（株）ヤクルト本社 中央研究所，2）東京大学大学院 農学生命科学研究科 獣医衛生学研究室

1）

ポスター発表Ⅰ-6
第１日目

座長：野口

P-24 ＊

1 月 25 日（木） 17:20 ～ 18:20

ちひろ（大正製薬株式会社）
・平田

ポスター会場（7F  シェルホール）

暁大（岐阜大学）

αリノレン酸 - ジアシルグリセロール油の発がんプロモーション作用に関する検討○本田 大士 1），川本 泰輔 1），土井 悠子 2），森 卓也 1），松村 奨士 1），今井 則夫 2），米良 幸典 2），
伊藤 勇一 1），森田 修 1）
花王株式会社，2）株式会社 DIMS 医科学研究所

1）P-25	有機ゲルマニウム poly-trans 〔- （2-carboxyethyl）germasesquioxane〕（Ge-132）の rasH2
マウスを用いた 26 週間短期発がん性試験○土井 悠子 1），今井 則夫 1），勝呂 繭子 1），河部 真弓 1），佐藤 功 2）（株）DIMS 医科学研究所，2）（株）浅井ゲルマニウム研究所

1）P-26 ＊

肝臓に観察された肝原発とは考えられない腫瘍の免疫組織学的検討○杜 牧，Hui Guo，Yuexiang Zhang，Xiargjiang Liu，Weijuan Zhang，Xiaoxia Ji，
Maowu Guo，Yasuhiko Hirouchi
JOINN Laboratories

P-27 ＊

o-Acetoacetotoluidide（AAOT）の毒性影響の検討○熊田 賢次，奥野 高裕，魏 民，藤岡 正喜，行松 直，梯 アンナ，鰐渕 英機
大阪市立大学 大学院医学研究科 分子病理学

P-28

Wistar Hannover ラット胸腺の増殖性病変における免疫組織学的特徴○友成 由紀，佐藤 順子，黒滝 哲郎，小林 亮介，土居 卓也，菅野 剛，土谷 稔（株）LSI メディエンス 創薬支援事業本部 試験研究センター 病理研究部 病理１ G

28

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター発表Ⅰ-7
第１日目

座長：金子

P-29

1 月 25 日（木） 17:20 ～ 18:20

英志（帝人ファーマ株式会社）
・中村

ポスター会場（7F  シェルホール）

明子（JT 医薬）

ネオニコチノイド系農薬ジノテフランの CD-1 マウスによる経口毒性試験○多田 幸恵，田中 豊人，生嶋 清美，鈴木 俊也，猪又 明子，守安 貴子
東京都健康安全研究センター 薬事環境科学部

P-30 ＊

中期多臓器発がん性試験における MNU の製造施設間比較検討○杉山 大揮，宇田 一成，樋口 仁美，土井 悠子，萩原 昭裕，米良 幸典
株式会社 DIMS 医科学研究所

P-31 ＊	ICR マウスを用いた発がん性試験の対照群で高頻度にみられたアミロイド症の背景データとの比較解析（第 2 報）
○伊藤 強，加藤 由隆，牧野 絵美，小山 彩，高橋 尚史，志賀 敦史，岡崎 欣正，原田 孝則（一財）残留農薬研究所

P-32 ＊	ラットにおける多層カーボンナノチューブおよびクリソタイル誘発中皮腫の病理学的性状の比較○北條 幹 1），坂本 義光 1），山本 行男 1），長谷川 悠子 1），村上 詩歩 1），前野 愛 1），広瀬 明彦 2），
中江 大 3）東京都健康安全研究センター，2）国立医薬品食品衛生研究所，3）東京農業大学

1）

ポスター発表Ⅰ-8
第１日目

座長：川口

1 月 25 日（木） 17:20 ～ 18:20
博明（鹿児島大学）
・平川

ポスター会場（7F  シェルホール）

公昭（株式会社新日本科学）

P-33	ラットを用いたバニリンプロピレングリコールアセタール（バニリン PGA）の 90 日間
亜慢性反復経口投与毒性試験○山田 貴宣 1,2），松下 幸平 1），豊田 武士 1），森川 朋美 1），高橋 美和 1），井上 薫 1），小川 久美子 1）
国立医薬品食品衛生研究所 病理部，2）東京農工大学大学院 獣医病理学研究室

1）P-34 ＊

イソオイゲニルメチルエーテルの F344 ラットにおける 90 日間反復投与毒性試験○赤木 純一，Cho Young-Man，水田 保子，小川 久美子
国立衛研・病理P-35 ＊	Characteristic pathological changes in nuclei of ADC drug-treated animals○ Mingshu Huang，Toko Ohira，Liang He，Jingjing Mao，Jianyan Yan，Tiantian Cui，
Minbo Hou，Hua Li，Jing Ma
国立上海新薬安全評価研究中心

P-36

医療用医薬品のがん原性試験に関する調査－その 1 －

○西村 次平 ，野中 瑞穂 ，直田 みさき ，角田 聡 1），三枝 由紀恵 1），堂口 裕士 1），
小野寺 博志 1），笛木 修 1），篠田 和俊 1），小川 久美子 2），西川 秋佳 2）
1）

1）

1）

（独）医薬品医療機器総合機構，2）国立医薬品食品衛生研究所

1）

29

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター発表Ⅰ-9
第１日目

座長：鈴木

P-37 ＊

1 月 25 日（木） 17:20 ～ 18:20

智（大鵬薬品工業株式会社）
・西村

ポスター会場（7F  シェルホール）

友成（アスビオファーマ株式会社）

ラット実験的自己免疫性神経炎モデルにおける末梢神経の病理組織像の経時変化の検討○富川 恵美，六鹿 麻由，原 宏士朗，金子 ちひろ，三好 智也，井村 奈緒子，冨樫 裕子，林 亮司
東レ（株）医薬研究所

P-38 ＊

レプチン受容体欠損メダカの眼病変に関する病理組織学的検討○苣田 慎一 1），平光 彩乃 2），杉山 晶彦 2）

杏林大学 医学部 衛生学公衆衛生学教室，2）鳥取大学 農学部 共同獣医学科

1）

P-39	マンゴスチン果皮抽出物（αおよびγ -mangostin）の ApoE-KO マウスにおける動脈硬化発症に対する抑制効果とその作用機序の解析○柴田 雅朗 1），斯波 真理子 2），柴田 映子 2），前村 憲太朗 1），近藤 洋一 1）

大阪医科大学 医学部 生命科学講座解剖学教室，2）国立循環器病研究センター研究所 病態代謝部

1）

P-40

脳卒中易発症高血圧自然発症ラット（SHRSH）を用いた味噌による脳卒中の抑制効果○渡辺 敦光 1），笹谷 めぐみ 2），佐藤 健一 2），宮坂 勇一郎 3），吉栖 正生 1）

広大大学院医歯薬保研究院心臓血管生理医学，2）広大学原医研，3）神州一味噌（株）

1）

ポスター発表Ⅰ-10
第１日目

座長：井澤

P-41 ＊

1 月 25 日（木） 17:20 ～ 18:20
武史（大阪府立大学）
・乾ポスター会場（7F  シェルホール）

公正（石原産業株式会社）

緑茶抽出物誘発ラット肝臓障害モデルにおけるミード酸の抑制効果○竹之内 明子 1），榎本 祐子 2），木下 勇一 3），浜崎 景 4），螺良 愛郎 5），義澤 克彦 1）
武庫川女子大学 生活環境学部，2）関西医科大学 倫理審査センター，1）

和歌山県立医科大学附属病院 中央検査部，4）富山大学 医学部 公衆衛生学講座，

3）

大阪府済生会泉尾病院 病理診断科

5）P-42 ＊	炎症誘導因子（DAMPs）と関連シグナルを介したチオアセトアミド（TAA）誘発ラット急性
肝障害における進展機序の解析○倉持 瑞樹，井澤 武史，Pervin Munmun，Karim Mohammad Rabiul，桑村 充，山手 丈至
大阪府立大学 獣医病理

P-43 ＊

雌 SDT fatty ラットにおける若齢及び高齢の病態解析○ Teoh Soon Hui1），美谷島 克宏 1），太田 毅 2），篠原 雅巳 3），宇野 絹子 1），煙山 紀子 1），中江 大 1）
東京農業大学大学院 農学研究科，2）日本たばこ産業（株）医薬総合研究所，3）日本クレア（株）東京 AD 部

1）

P-44 ＊	NZB/W F1 マウスの LPS 誘発早期腎炎発症モデルに対する SLE 治療薬の効果および
病理組織学的検索○金原 智美，大芝 泰弘，今井 順，村瀬 詩織，伊藤 格，木村 均（株）日本バイオリサーチセンター

P-45

食塩負荷が肥満２型糖尿病モデルである SDT fatty ラットの腎症の進展に及ぼす影響○美谷島 克宏 1,2），太田 毅 3），篠原 雅巳 4），岩崎 日向子 1），張 舜恵 2），宇野 絹子 2），煙山 紀子 1），
中江 大 1,2）
東京農大・食品安全健康，2）東京農大・院・食品栄養，3）日本たばこ産業（株）医薬総合研究所，

1）

日本クレア株式会社

4）30

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター発表Ⅰ-11
第１日目

1 月 25 日（木） 17:20 ～ 18:20

座長：佐々木朋（マルホ株式会社）
・渡邊

ポスター会場（7F  シェルホール）

厚（旭化成メディカル株式会社）

P-46	ビーグル犬の膝関節に広範囲な軟骨欠損が作製可能か？軟骨欠損施術後の組織修復に関する研究○田崎 雅子 1），平井 俊行 1），秋山 真洋 1），伊藤 好文 1），中澤 圭一 1），原田 恭治 2），長野 嘉介 3），
萩原 仁美 1）
テルモ（株），2）日本獣医生命科学大学 獣医外科学研究室，3）長野毒性病理コンサルティング

1）

P-47 ＊	アレルギー性皮膚炎モデルにおけるエストロゲンレセプターを介した炎症反応誘導の病
理組織学的検討○小山 彩，田食 里沙子，渡部 優子，福山 朋季，加藤 由隆，牧野 絵美，伊藤 強，高橋 尚史，
志賀 敦史，岡崎 欣正，原田 孝則（一財）残留農薬研究所

P-48	世界最高水準のラットリソース拠点としてのナショナルバイオリソースプロジェクト「ラット」○田中 美有，本多 新，フォークト ビルガー，根小田 祐基，萩原 和美，崔 宗虎，橘 亮麿，
長尾 朋美，中西 聡，山崎 賢一，庫本 高志，浅野 雅秀
京都大学 医学研究科 附属動物実験施設

P-49

F344 ラットにおける 2-Furanmethanethiol の 13 週間反復経口投与による毒性評価○時 亮 1,3），石井 雄二 1），高須 伸二 1），土屋 卓磨 1），木島 綾希 1），小川 久美子 1），西川 秋佳 2），
梅村 隆志 1）
国立医薬品食品衛生研究所 病理部，2）国立医薬品食品衛生研究所 安全性生物試験研究センター，

1）

筑波大学 実験病理研究室

3）

ポスター発表Ⅱ-1
第２日目

座長：小寺

P-50 ＊

1 月 26 日（金） 13:10 ～ 14:10
喬（日本新薬株式会社）・篠塚

ポスター会場（7F  シェルホール）

淳子（中外製薬株式会社）

心筋壊死の検出のための免疫組織化学的検討○高井 有一，神鳥 仁志，渡辺 武志

武田薬品工業株式会社 リサーチ 薬剤安全性研究所

P-51	画像解析ソフト ImageJ を用いた細胞小器官の定量的解析 -PGE2 投与マウスの胃表層粘膜細胞に認められた変化 ○衣斐 彼方，木原 亨，寒川 祐見，柴主 敏行，高部 浩行，橋本 和人
科研製薬（株）P-52	経皮曝露感作性試験におけるコレラトキシン及びコレラトキシン B サブユニットの
アジュバント作用○ Cho Young-Man，水田 保子，赤木 純一，豊田 武士，小川 久美子
国立医薬品食品衛生研究所 病理部

P-53	ベンチマークドーズ（BMD）法を適用した化学物質の毒性評価において適切な毒性病理所
見をエンドポイントとして選択するために毒性病理学者が注意すべき点○吉田 緑 1），梅村 隆志 2）

内閣府食品安全委員会，2）ヤマザキ学園大学

1）

31

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-54	ウシ摘出角膜の混濁度および透過性試験法（BCOP 法）と病理組織学的検査の併用による眼に対する弱刺激性物質判定の検討○伊藤 浩太，古川 正敏，遠藤 ちひろ，松浦 正男

株式会社 化合物安全性研究所 安全性研究部 臨床検査・病理検査室

ポスター発表Ⅱ-2
第２日目

座長：河内

P-55 ＊

1 月 26 日（金） 13:10 ～ 14:10

眞美（大日本住友製薬株式会社）
・能登ポスター会場（7F  シェルホール）

貴久（参天製薬株式会社）

ラットにおける Paclitaxel 投与による自律神経の病理組織学的変化○中村 賢志，横尾 諭，王 蒙東，下内 孝司，村井 厚子，並木 健吾，栗林 正伯，柳 浩由紀
小野薬品工業（株）研究本部 安全性研究部

P-56 ＊	T-2 toxin のマウス発達期曝露による海馬歯状回及び小脳における metallothionein 発現
増加と発現細胞の同定○中島 康太 1,2），伊藤 優子 1,2），増渕 康哲 1,2），吉田 敏則 1），渋谷 淳 1）
東京農工大 獣医病理，2）岐阜大・院・連合獣医1）

P-57	ラット発達期の甲状腺機能低下による海馬歯状回の神経新生障害と抗酸化物質併用による神経保護作用の検討○増渕 康哲 1,2），中島 康太 1,2），伊藤 優子 1,2），小柳 美穂子 3），林 新茂 3），吉田 敏則 1），渋谷 淳 1）
東京農工大 獣医病理，2）岐阜大・院・連合獣医，3）三栄源エフ・エフ・アイ株式会社

1）

P-58 ＊

幼若白色種ウサギの眼球の組織学的特徴○山際 慶典，根本 真吾，榊 秀之，倉田 昌明
千寿製薬株式会社 研究開発本部

P-59

Deep Convolutional Neural Network を用いたヒト肺がん細胞像の自動分類○塚本 徹哉 1），桐山 諭和 1,2），寺本 篤司 3）

藤田保健衛生大学 医学部 病理診断科，2）成田記念病院 病理診断科，

1）

藤田保健衛生大学 医療科学部 放射線学科

3）

ポスター発表Ⅱ-3
第２日目

座長：藤島

P-60 ＊

1 月 26 日（金） 13:10 ～ 14:10

純子（株式会社新日本科学）・牧野ポスター会場（7F  シェルホール）

俊彦（第一三共株式会社）

制限給餌のカニクイザルにみられた心臓病変○松尾 沙織里 1），藤澤 希望 1），松下 智哉 1），林 修次 1），篠塚 淳子 1），三好 昌夫 1），鈴木 雅実 1,2），
加藤 淳彦 1）
中外製薬（株），2）（株）未来創薬研究所

1）P-61 ＊	マウス大腸炎モデルの A-kinase anchor protein（AKAP）13 発現解析及びRho-associated coiled-coil containing protein kinase（ROCK）阻害の影響評価○寒川 祐見 1,2），吉田 敏則 2），村山 宗理 1,2），衣斐 彼方 1），木原 亨 1），葛谷 和也 1），小柳 美穂子 3），
林 新茂 3），渋谷 淳 2）
科研製薬，2）東京農工大獣医病理，3）三栄源エフ・エフ・アイ

1）32

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-62

幼若期ラット /Crl:CD（SD）における腎臓の病理組織学的背景データ○井上 紗季 1），畠山 洋文 1），武井 由弘 1），渡辺 純 1），小泉 治子 1），梶村 哲世 1），下井 昭仁 1），
佐藤 伸一 1），岩田 聖 2）（株）イナリサーチ，2）ルナパス毒性病理研究所

1）P-63 ＊

幼若期ラット /Crl:CD（SD）における皮膚の病理組織学的背景データ○渡辺 純 1），畠山 洋文 1），武井 由弘 1），井上 紗季 1），小泉 治子 1），梶村 哲世 1），下井 明仁 1），
佐藤 伸一 1），岩田 聖 2）（株）イナリサーチ，2）ルナパス毒性病理研究所

1）P-64 ＊

F344 系 gpt delta ラットの自然発生病変スペクトラム○松下 幸平 1），木島 綾希 1），石井 雄二 1），高須 伸二 1），黒田 顕 1），能美 健彦 2），小川 久美子 1），
梅村 隆志 1,3）
国立医薬品食品衛生研究所 病理部，2）国立医薬品食品衛生研究所 変異遺伝部，

1）

ヤマザキ学園大学 動物看護学部

3）

ポスター発表Ⅱ-4
第２日目

座長：飯塚

1 月 26 日（金） 13:10 ～ 14:10
生一（株式会社ツムラ）
・神鳥

ポスター会場（7F  シェルホール）

仁志（Axcelead Drug Discovery Partners 株式会社）

P-65 ＊	IS/Kyo ラットの 30 週齢までの雌生殖器における病理組織学的特徴―妊娠率及び着床率低下との関連―○岡野 拡，山口 裕子，伊倉 佐織，鈴木 勇，斎藤 翼，星谷 達（株）ボゾリサーチセンター 病理部

P-66 ＊

マウス /Crl:CD1（ICR）の精巣に出現する異常遺残体の背景データ検索○早川 知里，木村 真之，黒田 雄介，林 清吾，竹内 和也，古川 賢
日産化学工業（株）生物科学研究所

P-67

マイクロミニピッグにおけるライディッヒ細胞の発達に関する組織学的検索○寒川 彰久，大竹 正剛，塩谷 聡子，柴田 昌利
静岡県畜産技術研究所中小家畜研究センター

P-68 ＊

ゲッチンゲンミニブタにおける精巣毒性評価のための精子形成サイクルステージ分類○山田 直明，涌生 ゆみ，爰島 洋子，土居 卓也，菅野 剛，土谷 稔
ＬＳＩメディエンス（株）試験研究センター 病理研究部

ポスター発表Ⅱ-5
第２日目

座長：尾崎

P-69

1 月 26 日（金） 13:10 ～ 14:10
清和（摂南大学）
・中原ポスター会場（7F  シェルホール）

豊（アステラス製薬株式会社）

化合物投与により神経症状が顕在化したビーグル犬における肉芽腫性髄膜炎の 1 例○見鳥 光 1），寳来 直人 2），梶川 悟 1），小野 美穂子 1）

アステラス製薬株式会社 安全性研究所，2）株式会社新日本科学 安全性研究所

1）P-70 ＊

Sprague-Dawley ラットの胸腔に自然発生した癌肉腫の 1 例○木嶋 恵，末廣 美紀，伊東 志野，二井 愛介
生化学工業（株）

33

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-71 ＊

若齢 Crl:CD（SD）ラットの空腸における自然発症性の高分化型管状腺癌の一例○浅岡 由次，増野 功一，藤澤 可恵，殿村 優，田尻 美奈子，加藤 祐樹，柏木 絵美，土屋 紀子，
鳥井 幹則，上野 元伸
塩野義製薬（株）開発研究所

P-72

盲腸結腸重積を呈したイヌに認められた過誤腫○小野 美穂子，高橋 美和，中原 豊，坪田 健次郎，松本 正博
アステラス製薬（株）安全性研究所

ポスター発表Ⅱ-6
第２日目

座長：豊沢

P-73

1 月 26 日（金） 13:10 ～ 14:10

かおる（株式会社住化分析センター）
・山口

ポスター会場（7F  シェルホール）

裕子（株式会社ボゾリサーチセンター）

ミニブタの壊死性動脈炎を伴う急性出血性胃炎の 1 症例

○江田 景，赤根 弘敏，市川 敦子，清水 茂一，小松 弘幸，秋江 靖樹
シミックファーマサイエンス株式会社

P-74

昼行性動物マイクロミニピッグにおける無麻酔下経時的脳脊髄液採取法の確立○川口 博明 1），阿部 正治 1），牛飼 美晴 1），大井 紗弓 2），柚川 藍色 2），吉川 哲也 2），和泉 博之 2），
谷本 昭英 3），堀内 正久 1）
鹿児島大学大学院医歯学総合研究科

衛生学・健康増進医学分野，

鹿児島大学大学院医歯学総合研究科

病理学分野

1）

株式会社新日本科学安全性研究所，

2）3）P-75 ＊

RccHan：WIST ラットにみられた子宮の部分的形成不全の 2 例○下間 由佳子，武田 周二，緒方 敬子，串田 昌彦
住友化学（株）生物環境科学研究所

P-76 ＊

若齢雄性 SD ラットに認められた乳腺腫瘍についての病理組織学的検討○吉田 翔太，田中 英樹，二宮 芙美子，松原 健嗣，山本 宏美，鈴木 智，森田 文雄，箱井 加津男
大鵬薬品工業株式会社 研究本部

ポスター発表Ⅱ-7
第２日目

座長：黒滝

P-77 ＊

1 月 26 日（金） 13:10 ～ 14:10

哲郎（株式会社 LSI メディエンス）・松本

ポスター会場（7F  シェルホール）

泉美（大日本住友製薬株式会社）

若齢成熟 Wistar ラットで認められた肺転移を伴う皮膚血管肉腫の 1 例○鈴木 志野，高木 理恵，平井 和也，平田 淳也，樫本 幸子，赤沼 三恵
株式会社クレハ 安全性研究・評価センター

P-78

老齢 SD ラットの後腹膜に自然発生した脱分化型脂肪肉腫○内藤 智春 1,2），齋藤 剛 2），樋口 珠美 1），猪又 晃 1），林 大久生 2），山内 敦子 1），剣持 明 1），
柿沼 千早 1,2），八尾 隆 2）
富士フイルム株式会社 R&D 統括本部 医薬品・ヘルスケア研究所，2）順天堂大学医学部人体病理病態学講座

1）

P-79

NOG マウスに発生した皮下腫瘍の一症例○赤根 弘敏，江田 景，市川 敦子，清水 茂一，小松 弘幸，秋江 靖樹
シミックファーマサイエンス株式会社

34

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-80

ビーグル犬の舌下腺腺房細胞にみられた硝子滴を伴う水腫変性○押方 孝文，満石 三喜男，浜村 政夫（株）ＬＳＩ メディエンス

ポスター発表Ⅱ-8
第２日目

座長：吉川

P-81

1 月 26 日（金） 13:10 ～ 14:10
剛（大塚製薬株式会社）
・渡辺

ポスター会場（7F  シェルホール）

武志（武田薬品工業株式会社）

ラットを用いたセルレイン投与による膵外分泌毒性の検討○田中 英樹，吉田 翔太，二宮 芙美子，藤枝 光博，松下 宗史，松原 健嗣，山本 宏美，鈴木 智，
森田 文雄，箱井 加津男
大鵬薬品工業株式会社 研究本部

P-82 ＊

自動車排出粒子はリソソームに集積しリゾチームで溶解される○古賀 のどか，小野寺 章，屋山 勝俊，横山 聖，今村 麗，谷川 千明，大元 知貴，井上 雅己，
角田 慎一，河合 裕一
神院大薬 LCMP

P-83 ＊

自動車排出粒子刺激による鼻咽頭関連リンパ組織の免疫応答への影響○横山 聖，小野寺 章，屋山 勝俊，今村 麗，谷川 千明，大元 知貴，井上 雅己，角田 慎一，
河合 裕一
神院大薬 LCMP

P-84 ＊

都市大気粉塵は鼻腔上細胞の増殖能を抑制する○谷川 千明，小野寺 章，屋山 勝俊，横山 聖，今村 麗，大元 知貴，古賀 のどか，井上 雅己，
角田 慎一，河合 裕一
神院大薬 LCMP

P-85 ＊

成熟マウスにおける自動車排出粒子に対する鼻腔免疫の雌雄での違いに関する検討○今村 麗，小野寺 章，屋山 勝俊，横山 聖，古賀 のどか，谷川 千明，大元 知貴，井上 雅己，
角田 慎一，河合 裕一
神戸学院大学 薬学部 生体機能制御学研究室

ポスター発表Ⅱ-9
第２日目

座長：石上

P-86 ＊

1 月 26 日（金） 13:10 ～ 14:10

紀明（小野薬品工業株式会社）
・西川

ポスター会場（7F  シェルホール）

智美（田辺三菱製薬株式会社）

VEP で刺激された鼻腔上皮細胞のリンパ球サブセットへ及ぼす影響○大元 知貴，小野寺 章，屋山 勝俊，今村 麗，谷川 千明，古賀 のどか，井上 雅己，角田 慎一，
河合 裕一
神院大薬 LCMP

P-87 ＊	免疫制御薬としての TNFR1 選択的アンタゴニストの有効性・安全性の検討
― 一本鎖化技術による構造最適化 ―○大崎 奈都喜 1），井上 雅己 1,2），國重 将大 1），三木 望稔里 1），小野寺 章 1），河合 裕一 1），
鎌田 春彦 2,3），堤 康央 3），角田 慎一 1,2）
神戸学院大・薬・生体機能制御学，2）医薬健栄研，3）阪大院・薬1）

35

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-88 ＊	免疫制御薬としての TNFR1 選択的アンタゴニストの有効性・安全性の検討
― 部位特異的 PEG 修飾による構造最適化 ―○國重 将大 1），井上 雅己 1,2），大崎 奈都喜 1），三木 望稔里 1），小野寺 章 1），河合 裕一 1），
鎌田 春彦 2,3），堤 康央 3），角田 慎一 1,2）
神戸学院大・薬・生体機能制御学，2）医薬健栄研，3）阪大院・薬1）

P-89 ＊

制御性 T 細胞の機能制御分子としての TNFR2 の有用性評価○三木 望稔里 1），井上 雅己 1,2），大崎 奈都喜 1），國重 将大 1），小野寺 章 1），河合 裕一 1），
安藤 大介 2,3），鎌田 春彦 2,3），堤 康央 3），角田 慎一 1,2）
神戸学院大・薬・生体機能制御学，2）医薬健栄研，3）阪大院・薬1）

ポスター発表Ⅱ-10
第２日目

座長：岡崎

1 月 26 日（金） 13:10 ～ 14:10

欣正（一般財団法人残留農薬研究所）
・美谷島

ポスター会場（7F  シェルホール）

克宏（東京農業大学）

P-90	Desmoglein-3 を標的分子とした ADCC 抗体のマウスにおける抗原発現と発現臓器の
生理学的特性による毒性反応の相違○藤井 悦子 1,2），谷口 健治 2），加藤 淳彦 2），鈴木 雅実 1,2）（株）未来創薬研究所，2）中外製薬（株）研究本部

1）

P-91

The Role of the Toxicologic Pathologist in Drug Discovery and Development○ Shirai Norimitsu1），Tomlinson Lindsay2）

Pfizer Drug Safety R & D, Pathology, Groton, CT, USA，

1）

Pfizer Drug Safety R & D, Pathology, Cambridge, MA, USA

2）

P-92

FDA SEND への対応

―パソロジストが心得るべき FDA SEND その 3―○畠山 洋文 ，堀川 真一 1），桜井 淳一 1），小泉 治子 1），下井 昭仁 1），佐藤 伸一 1），岩田 聖 2），
安齋 享征 3）
1）（株）イナリサーチ，2）ルナパス毒性病理研究所，3）昭和大学医学部

1）

P-93

病理ピアレビューと病理報告書についての一考察○岩田 聖 1），安齋 享征 2），大石 裕司 3）

ルナパス合同会社 毒性病理研究所，2）昭和大学医学部，3）大阪市立大学

1）

ポスター発表Ⅱ-11
第２日目

座長：杉元

1 月 26 日（金） 13:10 ～ 14:10

ポスター会場（7F  シェルホール）

陽子（日本ベーリンガーインゲルハイム株式会社）・友成

由紀（株式会社 LSI メディエンス）P-94	多層カーボンナノチュ－ブの経気管反復投与によりラット肺に誘発された増殖性病変の免疫組織学的解析○坂本 義光 1），北條 幹 1），鈴木 俊也 1），猪又 明子 1），広瀬 明彦 2），中江 大 3）

東京都健安研センター 生体影響研究科，2）国立衛研 総合評価研，3）東京農業大 応用生物科学部

1）36

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-95 ＊

Comparative Pulmonary toxicity of DWCNT and MWCNT-7 in Rats

○ Ahmed M. El-Gazzar1,2,7），Mohamed Abdelgied1,2,8），David B. Alexander1），
William T. Alexander1），Takamasa Numano1），Masaaki Iigo1），Aya Naiki2），
Hirotsugu Takase 3），Akihiko Hirose4），Yuhji Taquahashi5），Jun Kannno6），
Satoru Takahashi2），Ashraf Mohamed Nazem9），Osama Saeid Elokle7），Hiroyuki Tsuda1）
Nanotoxicology Project, Nagoya City University, Nagoya, Japan.，1）

Dept Exp Pathology and Tumor Biology, Nagoya City University Grad School Med Sciences, Nagoya, Japan.，2）

Nagoya City University Graduate School Med Sciences, Nagoya, Japan.，3）

Div Risk Assessment, NIH, Tokyo, Japan.，

4）

Div Cellular and Molecular Toxicology, NIH, Tokyo, Japan.，

5）Japan Industrial Safety and Health Association, Japan Bioassay Research Center, Kanagawa, Japan.，
Dept Forensic Medicine and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, Alexandria University,
Alexandria, Egypt.，6）7）

Dept Forensic Medicine and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, Beni Suef University, Beni Suef,
Egypt.，
9）
Dept Food Hygiene, Faculty of Veterinary Medicine, Alexandria University, Alexandria, Egypt.
8）

P-96	消化管粘膜修復過程における幹細胞、増殖細胞、分化細胞の動態
大腸潰瘍モデルの比較－－胃潰瘍および○平田 暁大 1），並木 健吾 2），村井 厚子 2），富田 弘之 3），原 明 3），酒井 洋樹 4），柳井 徳磨 4）
岐阜大学 動物実験分野，2）小野薬品工業株式会社，3）岐阜大学大学院 腫瘍病理学分野，

1）

岐阜大学 獣医病理学研究室

4）P-97 ＊

異なる挙動を示す Furan 及び DEN 誘発 GST-P 陽性細胞巣の網羅的遺伝子発現解析○高須 伸二 1），石井 雄二 1），木島 綾希 1），小川 久美子 1），梅村 隆志 1,2）
国立医薬品食品衛生研究所 病理部，2）ヤマザキ学園大学 動物看護学部

1）

P-98 ＊	Potassium octatitanate fiber（K2O・8TiO2）fiber is a potent inducer of lung and pleural
injury in male Fischer 344 rats: A comparative study of titanium dioxide nano particles○ Mohamed Abdelgied1,2,3），Ahmed M. El-Gazzar1,2,4），David B. Alexander1），
William T. Alexander1），Takamasa Numano1），Masaaki Iigo1），Aya Naiki2），
Hirotsugu Takase 5），Khaled Abbas Abdou3），Akihiko Hirose6），Yuhji Taquahashi7），
Jun Kannno 8），Satoru Takahashi2），Hiroyuki Tsuda1）
Nano toxicology Project, Nagoya City University, Nagoya, Japan.，1）

Dept Experimental Pathology and Tumor Biology, Nagoya City University Graduate School of Medical
Sciences, Nagoya, Japan.，2）

Dept Forensic Medicine and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, Beni Suef University, Beni-Suef, Egypt.，
Dept Forensic Medicine and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, Alexandria University,
Alexandria, Egypt.，3）
4）

Nagoya City University Graduate School of Medical Sciences, Nagoya, Japan.，5）

Div Risk Assessment, NIH, Tokyo, Japan.，

6）

Div Cellular and Molecular Toxicology, NIH, Tokyo, Japan.，Japan Industrial Safety and Health Association, Japan Bioassay Research Center, Kanagawa, Japan.

7）
8）

37

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ランチョンセミナーⅠ
第１日目

1 月 25 日（木） 12:10 ～ 13:00

座長：今立 真（エンヴィーゴ株式会社）
共催：エンヴィーゴ株式会社

第１会場（6F  ニライカナイ）

LS-1	Immune functions in lymph nodes - how lymph nodes work; illustrated anatomicalbasis for surveillance, filtration and antigen response
Cynthia Willard-Mack
Pathology, Envigo US

ランチョンセミナーⅡ
第１日目

1 月 25 日（木） 12:10 ～ 13:00

座長：渋谷 一元（一般財団法人日本生物科学研究所）
共催：Southern Research/ 株式会社スリーエス・ジャパン

第 2 会場（6F  王朝）

LS-2	Histopathologic evaluation for the Monkey Safety Test for Neurovirulence of Yellow Feverand Tetravalent Dengue Vaccines - WHO Protocol for Live-Attenuated Vaccines-
サルを用いた神経毒力試験における病理所見評価について－弱毒生ワクチンのWHO プロトコールにおける黄熱病および 4 価デングワクチンでの事例を中心に－
Sheila Grimes

Southern Research

ランチョンセミナーⅢ
第２日目

1 月 26 日（金） 12:10 ～ 13:00

座長：磯部 香里（Charles River Edinburgh）
共催：Charles River

LS-3

第１会場（6F  ニライカナイ）

Use of Unbiased Stereology in Drug Development
Danielle L. Brown, DVM, MS, DACVP, DABTCharles River Pathology Associates

ランチョンセミナーⅣ
第２日目

1 月 26 日（金） 12:10 ～ 13:00

座長：平川 公昭（株式会社新日本科学 安全性研究所）
共催：株式会社新日本科学

LS-4

ヒト細胞を用いた再生医療等製品の安全性試験
Non-clinical safety studies for human cell derived tissue-engineered medical products
孫谷弘明

株式会社新日本科学 安全性研究所

38

第 2 会場（6F  王朝）

講演要旨
特別講演

シンポジウムパネルディスカッション
ワークショップ

特別講演The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

特 別 講 演

SL1
沖縄の開発研究と毒性学
安仁屋 洋子
沖縄科学技術大学院大学理事
大学は地域連携、地域貢献が様々なレベルで求められるようになり、研究を通して地域の開発発展に寄与する役割を担っている。亜熱帯地域としての環境特性、独自の風土・文化を持つ沖縄にある琉球大学でも様々な地域連携研究がなされてきた。また、米国統治・日本復帰という歴史的背景から日本政府により設置された沖縄科学技術大学院大学（OIST）はそのミッションとして教育研究の「Best in the world」を目指す一方、「沖縄の自立的発展」に寄与するとしている。本講演では私が琉球大学で関わってきた健康バイオ資源の地域連携共同研究を紹介し、合わせて OIST を紹介したい。
健康バイオ資源として沖縄産薬草・食材を用い、疾病の予防・健康促進にかかる抗酸化物質の産官学共同開発研究を行った。紫外線をカットするビニールハウスの内外で薬草、野菜を栽培し、紫外線照射が抗酸化作用を強くすることや、古くから食されてきた地元産野菜は強い抗酸化作用を有することが確認された。地元産薬草・野菜の抗酸化成分が分離同定され、それらの薬理作用（肝保護作用、心臓保護作用、大腸がん予防作用、抗炎症作用、抗菌作用、血糖降下作用など）が明らかにされた。
また、海藻モズクの多糖類成分に抗酸化作用があることや紅麹菌より抗酸化成分が分離同定され、その構造式、抗酸化作用メ
カニズムも明らかにされた。この連携研究は地元の健康食品開発を後押しする結果となった。これらの研究を通して強く感じたことがある。バイオ資源から機能性食品や薬を開発する場合、効能・毒性と用量の関係は最も大きな問題であるが、植物の機能性成分は in vitro, in vivo で２相性用量反応曲線を示すものが多く、多様な標的を有するものも多い。また、機能性成分の物理化学的性質は in vitro の試験に影響するものがある。機能性成分の開発に際してこれらの特性を考慮し、機能性試
験、毒性試験を行う毒性学のバックグラウンドが重要である。
OIST は学部学生を持たない大学院大学で 2011 年に設立され、世界中から学生が集まり、すべて英語で教育され、来春に第一回生の Ph.D. 取得者が卒業する。研究室は各教官（教授、准教授）が独立して研究ユニットを形成し、神経科学、生命科学、
海洋科学、物理学、数学、化学の分野にわたる６０のユニットがあり、１００ユニットまで増やす予定である。Best in theWorld をめざした研究がなされ、多くの研究論文がトップジャーナルに発表されている。沖縄の自立発展に関しては、産学連携研究が推進され、また、各研究成果を産業界につなげる「技術開発＆改革センター」部門が強化され、技術移転などの成果が出つつある。

41

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

特別講演

特 別 講 演SL2
乳幼児期の食物アレルギーの発症と経口免疫寛容の獲得メカニズムと、それらをモニターするバイオマーカー
木戸 博
徳島大学先端酵素学研究所 特任教授
近年食物アレルギーの発症原因が、これまで信じられていた経口アレルゲン摂取によるものでは無く、湿疹などを原因とする経皮アレルゲン感作によって発症することが証明された。これにより、離乳食の開始を遅らせる従来の食物アレルギー予防法とは逆に、離乳早期から卵やピーナツなどのアレルゲンを経口摂取することで食物アレルギーを予防できることが論文に発表され、国内外で注目されている。しかしこの革新的事実を、食物アレルギーの発症機序と経口免疫寛容機序から説明する基礎研究が遅れている。また医療現場では、食物アレルギーの予防のため、離乳早期からアレルゲン経口摂取を開始する
事の可否を、どのような根拠によって診断したら良いか、手探り状態にある。現状では、湿疹を完治させた後でアレルゲンの経口摂取を開始する事以外には、アレルゲン経口摂取の可否を判定する基準やバイオマーカーは知られていない。
我々は最近乳児を対象に、出生直後から 2 ヶ月毎に生後 6 ヶ月までの血中アレルゲン特異抗体のモニターと、生後 1 年目の食物負荷試験を実施して、食物アレルギーの発症と経口免疫寛容に関する新たなバイオマーカーを見い出した。具体的には、
食物アレルギー発症者群と経口免疫寛容に進むと予想された乳幼児群間で、イムノグロブリンクラススイッチパターンの明らかな違いと、食物アレルギーハイリスク者群に検出されるアレルゲン高親和性 IgE 抗体と、経口免疫寛容進展予想者群のア
レルゲン低親和性 IgE 抗体の検出である。アレルゲン特異的低親和性 IgE 抗体は、従来の IgE 測定方法では測定できなかった
ため、ヒトでの存在と生理的意義がこれまで解析されていなかった抗体で、我が国で新たに開発された DCP（Densely
Carboxylated Protein）チップ法で初めて測定が可能になった抗体である。アレルゲン低親和性 IgE 抗体は、抗原との架橋反応が弱いために肥満細胞からの Fc ε RI を介したヒスタミン遊離反応を引き起こすことなく、むしろアレルギー反応を抑制する抗体で、これまで臍帯血中に検出されていたが、経口免疫寛容に進むと予想される乳幼児で検出されたため、食物アレル
ギー発症と経口免疫寛容を判定するバイオマーカーの一つとして、イムノグロブリンクラススイッチのパターン解析と共に注目されている。
本講演では、新規 DCP チップ測定法が切り開いた抗原親和性の異なる IgE 抗体の生理的・病態学的意義に関するパラダイ
ムシフトについて、最新知見を紹介したい。

42

シンポジウムThe 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

SY1-1
γ -H2AX 免疫染色による膀胱発がんリスク早期検出法の開発○豊田 武士 1），松下 幸平 1），Young-Man Cho1），赤木 純一 1），曽根 瑞季 1,2），西川 秋佳 3），小川 久美子 1）
国立医薬品食品衛生研究所・病理，
東京農工大・獣医病理，3）
国立医薬品食品衛生研究所・安全性生物試験研究センター
1）
2）

修復関連因子を特定するため、遺伝毒性膀胱発がん物質である N -butyl-N -（4-hydroxybutyl）nitrosamine（BBN）を投与した

ラット膀胱粘膜において、DNA 二重鎖切断（DSB）
・ミスマッチ修復・塩基除去修復など、様々な経路を対象とした免疫組織

化学的検索を実施した。その結果、DSB の指標とされるγ -H2AX の形成が BBN 投与群で特異的に増加していることが明らかとなった。γ -H2AX 陽性細胞は膀胱がんの腫瘍細胞だけでなく、投与終了から 33 週経過後の正常様上皮細胞においても認められた。このことは、曝露時に生じた DNA 損傷が長期にわたって残存し、後の発がんに寄与していることを示している。
γ -H2AX はヒストンタンパク質の一つである H2AX の、139 番目のセリン残基がリン酸化されることで形成される。
1998 年の報告以来、DSB の鋭敏かつ特異性の高いマーカーとして知られ、遺伝毒性試験から臨床診断まで幅広い分野での応用が期待されている。そこで、遺伝毒性と膀胱発がん性について情報のある 12 種類の化学物質をラットに 4 週間経口投与したところ、膀胱を標的としない遺伝毒性発がん物質によるγ -H2AX 形成は対照群と同じレベルであった一方、遺伝毒性膀胱
発がん物質はγ -H2AX 陽性細胞数を有意に増加させた。マウスを用いた比較実験においても、膀胱発がん性の種差を反映した同様の結果を示した。また、経皮または膀胱内投与による遺伝毒性膀胱発がん物質を経口投与した場合でも、程度は減弱す
るものの、γ -H2AX 形成の増加が確認された。以上の結果は、γ -H2AX は遺伝毒性膀胱発がん物質の早期検出に有用である
ことを示唆している。本手法は 4 週間という短期の毒性試験で、通常の免疫染色によって実施できることから、化学物質の効率的かつ迅速なリスク評価法になり得る。
上記の検討においてγ -H2AX 形成は、非遺伝毒性膀胱発がん物質であるメラミンおよびウラシルを投与したラットにおいても、有意差はないものの増加傾向を示した。DSB は DNA に対する直接的な傷害に限らず、間接的な傷害あるいは DNA 複製
時のエラーとしても生じる。γ -H2AX は遺伝毒性機序によるものに限らず、膀胱発がん性の広範なマーカーとして利用し得る可能性が考えられる。
さらに、γ -H2AX 以外の膀胱発がん性早期検出指標の候補として、細胞増殖マーカーとして汎用される Ki67 は、多くの膀胱発がん物質に対して発現増加を示した。また、膀胱幹細胞マーカーであり、ヒト膀胱浸潤癌の起源となることが報告されている KRT14 も応用できる可能性がある。これらの複数のバイオマーカーを併用した検討は、評価の精度向上および発がん機序の推定にもつながると期待される。

43

シンポジウム齧歯類を用いた長期発がん性試験の代替法が求められる中で、我々は膀胱発がんリスクの早期検出法開発を目指し、近年
発がん過程への関与が急速に明らかにされつつある DNA 損傷・修復経路に着目した。発がん物質の曝露初期に変動する DNA

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

シンポジウムSY1-2
肺胞サーファクタントの役割と発癌リスク評価への応用
横平 政直
香川大学 医学部 腫瘍病理学
肺胞サーファクタントプロテイン（以下、SP）はⅡ型肺胞上皮から産生され、表面活性物質として肺の構造維持（含気腔確シンポジウム保）に重要な物質である。臨床現場で去痰剤として広く用いられているアンブロキソール塩酸塩は、Ⅱ型肺胞上皮から分泌される SP の促進作用を有しており、喀痰排泄を促すとともに抗炎症作用を有する。このように、SP は抗炎症作用や異物の除去
等の肺の状態維持にも働くとされている。SP には、SP-A、SP-B、SP-C、SP-D の 4 つのサブタイプが報告されており、この 4 つのサブタイプについて、肺での炎症や腫瘍における発現パターンの特徴と発癌リスク評価への有用性について報告する。
ラットを用い、肺発癌物質の DHPN に誘発された腫瘍性病変や炎症誘発物質の quartz 微粒子の気管内投与による炎症性病
変に対して、SP-A 〜 D の発現を免疫組織化学染色で検討した。SP-B と SP-C は気管支肺胞上皮過形成（以下、過形成）や肺腺腫で強陽性、SP-A と SP-D は炎症性病変の肺胞内における粘液成分などに陽性を示した。このように SP はサブタイプによって機能に差があることが確認された。また、ラットに quartz 微粒子を気管内投与後、SP 促進剤のアンブロキサール塩酸塩を混餌投与すると、炎症所見が顕著に抑制された。一方で、ラット DHPN 誘発肺腫瘍についてはアンブロキサール塩酸塩投与の効果は認められなかった。
Napsin A は SP-B の成熟に寄与する蛋白であり、Ⅱ型肺胞上皮で産生される。肺の炎症性病変と腫瘍性病変において、
napsin A の免疫組織化学染色による陽性部位に明らかな違いが認められた。発癌物質により誘発された過形成は肺胞壁がnapsin A に陽性を示した。炎症性の過形成においては肺胞内に貯留している物質やマクロファージには陽性を示したが、肺胞壁の陽性細胞はごく少数であった。
以上より、SP は抗炎症作用を有するものの、腫瘍性病変に対しては直接的な修飾作用は及ぼさないと推測される。一方で、肺の過形成において、将来腫瘍化リスクのある過形成は肺胞壁における napsin A の陽性所見が指標となることが判明した。
これは、肺胞壁における napsin A を産生するⅡ型肺胞上皮の増殖性変化を検出するものであり、この増殖が腫瘍性変化に重要であることが示唆された。

44

シンポジウムThe 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

SY1-3
前立腺発がん物質の早期検出モデルの確立○鈴木 周五，内木 綾，加藤 寛之，髙橋 智
名古屋市立大学大学院医学研究科 実験病態病理学
前立腺癌は近年日本でも急増しており、前立腺癌の発症予防は重要課題の一つである。その発症予防には発がんおよび発週以上かかることから、病理組織学的な解析による前立腺への早期発がん物質検出モデル開発は困難である。そこで我々は、環境化学物質の前立腺に対する発がん性を効率的にスクリーニングするための分子マーカーを同定し、短期前立腺発がん物
質検出モデル確立を試みた。
前立腺腹葉に標的性を示す発がん物質 PhIP をラットに投与後、1, 2, 7 日後に屠殺し前立腺組織を採取、増殖の高い時期を検討した結果、2 日後腹葉であることを確認した。その前立腺腹葉から RNA を抽出し、PhIP 投与により発現の亢進する遺伝子を選出し、その中からマーカー候補であるリン酸化ヒストン H2AX（γ -H2AX）、high mobility group box 2（HMGB2）および Ki67 を見いだした。発がん物質投与 2 日後の前立腺組織において、これらマーカーの標識率を検討した結果、前立腺に標的性を示す発がん物質 4 種において HMGB2 や Ki67 は有意に上昇する一方で、前立腺に標的性のない発がん物質においては対照群との差が見られず、短期前立腺発がん物質検出モデルとして一定の成果が得られた。次に化学物質の投与経路で検出力に差が現れるかを、前立腺発がん試験において皮下投与される DMAB や、腹腔内投与される MNU を、同用量の経口投与
群と比較検討した結果、一部で異なる標識率が存在するものの、総じて投与経路に関わらず有意な上昇を認めた。これら結果をふまえ、化学物質の毒性試験として一般的な 28 日間反復経口投与毒性試験で採取された前立腺組織においても、同様に検出可能であるか検討した。前立腺に標的性を示す発がん物質 4 種および、示さない発がん物質 4 種を、6 週齢雄 F344 ラットに
1 週間に 5 回強制胃内投与し、4 週間後に屠殺、前立腺を採取し検討した。結果、HMGB2 および Ki67 では前立腺発がん物質
特異的に有意な標識率上昇を認める一方で、前立腺に標的性のない発がん物質においては対照群との差が見られなかった。
γ -H2AX は前立腺発がん物質での発現上昇傾向を認めたものの、DMAB 以外は有意な差がなかった。また、これらマーカー
発現を PhIP や DMAB で誘導したラット前立腺腫瘍病変や、ヒト前立腺癌で検討した結果、周囲正常上皮に比べ有意に標識率上昇を認め、早期の発現上昇は腫瘍形成時まで保持されることが確認された。
以上の結果から、28 日間反復経口投与毒性試験で採取された前立腺組織を用いて前立腺発がん物質を検出できる可能性を示し、その検出マーカー候補タンパクとして HMGB2 および Ki67 を同定した。

45

シンポジウム

がん促進因子を同定し、それらの関与を極力抑える事が重要である。動物を用いた前立腺発がん研究は、前癌病変発生も 30

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

シンポジウム

SY1-4
遺伝毒性肝発がん物質超短期検出法の開発○魏 民，藤岡 正喜，梯 アンナ，鰐渕 英機
大阪市立大学大学院医学研究科 分子病理学
生活環境を取り巻く化学物質の発がん性を迅速にかつ高精度に検証できるシステムの確立は、有害性評価の面から社会的シンポジウムにも経済的にも非常に重要である。現在、国際的な動物試験における 3R の原則に基づき、in vitro 代替実験法の開発が模索されている。一方、ヒトに対する発がん影響を反映できる個体レベルの動物モデルによる評価法は未だに必要不可欠であり、少数の試験動物数においても正確に発がん性評価ができる短・中期でのバイオアッセイ系の開発が望まれている。こうした背景のもと、我々は遺伝毒性肝発がん物質を短期間かつ高精度に検出する in vivo スクリーニング系の開発を取り組んでいる。官民共同プロジェクトであるトキシコゲノミクスプロジェクトで取得されたトキシコゲノミクスデータベース（OpenTG-GATE）より解析を実施した。まず初めに遺伝毒性肝発がん物質のラット単回投与 24 時間後において、肝臓に共通して発現変化を示す 10 遺伝子（遺伝子マーカーセット）を抽出した。次に、抽出され遺伝子マーカーセットと Open TG-GATE に格納されている遺伝子発現データを用いて、遺伝子解析ソフト（GeneSpring）で利用できるサポートベクターマシーン（SVM）によって、遺伝毒性肝発がん物質とそれ以外の物質を区別できる数理学的予測モデルを構築した。最後に、構築した予測モデルの検証として、Open TG-GATEs に含まれていない既知遺伝毒性肝発がん物質について、ラット単回投与試験を行い、qPCR法にて遺伝子マーカーセットの発現データを取得し、構築した予測モデルに発がん性を予測させた。その結果、検索したすべての遺伝毒性肝発がん物質について、陽性判定が得られた。以上より、本研究で開発した遺伝子マーカーセットを用いた遺伝毒性肝発がん物質超短期検出法は、従来の肝発がん性評価系と比較して、極短期間かつ高精度に評価でき、発がん性未知化学
物質の新規評価系としての活用が期待される。現在、本検出法を用いて、多施設協同研究で多数の化学物質を検討しており、同時に評価することにより、その有用性をより一層検証し確立するとともに、標準化を目指している。

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シンポジウムThe 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

SY2-1
ラットモデルによる大規模吸入試験での毒性影響評価
菅野 純（独）労働者健康安全機構 日本バイオアッセイ研究センター
ナノマテリアル（NM）は、その粒子の縦・横・高さのどれか一辺が 100 ナノメートル以下と定義される多種多様な粒子の従来、粒子状物質毒性学という分野があり、その一つにアスベストに代表される繊維発癌（肺癌や中皮腫）がある。カーボ
ンナノチューブの中には、これに該当する大きさと形状の粒子を含むものがある事から、まず腹腔内投与モデルにより、そして全身曝露吸入試験により、その癌原性が確認された。
人における NM の曝露経路として重要なものに「吸入」が挙げられる。その毒性評価を行うために実施する実験動物を用いた全身曝露吸入試験は、実施に必要な設備が必要、かつ、その運転には熟練を要する。これに加え粒子状物質である NM は、
その物理化学的特性に合わせた分散法の開発が必要となる。
毒性学的には、難分解性・不溶性の粒子状物質の「急性毒性」は弱く、その「慢性毒性」が問題となる事が多い。NM の場合、個々の粒子（一次粒子）はナノサイズでも、凝集体（二次粒子）はマイクロメートルに及ぶ場合があり得る。その為、吸入により誘発される毒性は、粒子の大きさや形によって呼吸器系内での到達部位が異なる点や、異物除去や炎症等の組織反応の主役であるマクロファージの反応様式が異なる点などにより、単純ではない。Frustrated phagocytosis、肉芽腫・瘢痕形成、凝集体の修飾、等が論議される。また、細胞外基質への沈着と間葉系細胞との相互作用も考慮される。
ここでは、日本バイオアッセイ研究センターにおいてラットを用いて実施した、多層カーボンナノチューブ（Mitsui
MWNT-7）の 2 年間全身曝露吸入発がん性試験と関連短期曝露試験、及び二酸化チタン（テイカ（株）AMT-600）の短期曝露試験から得られた肺を中心とした呼吸器所見を提示し、毒性発現機序についての考察を試みる。

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シンポジウム

総称であり、それらの新しい物理化学的特性が、新たな毒性の危惧を生んでいる。

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シンポジウム

SY2-2
ナノ化学物質のリスク評価の国際動向と慢性試験の必要性
広瀬 明彦
国立医薬品食品衛生研究所 安全性生物試験研究センター 安全性予測評価部
ナノマテリアルの健康影響に関して国際的に関心が高まってから約 10 年余りの期間が過ぎ、その間に OECD などの国際機

シンポジウム関による活動や EU を中心としたナノマテリアルの安全性に関するプロジェクトを通して多くに知見が集積されてきた。我が国も OECD スポンサーシッププログラムの一環として、炭素系ナノマテリアルに関しての毒性情報の収集に貢献してきた。
近年ではこれらの成果を用いて、多種多様に及ぶナノマテリアルをグループ化して、カテゴリー評価の手法による包括的評
価手法の構築が模索されている。我々は特にナノチューブを中心に慢性投与研究を進めてきており、特に腹腔内投与試験では複数の種類のナノチューブについての中皮腫誘発性の比較検討を行ってきた結果、その強さは長い線維を多く含むナノチューブほど強くなることを示唆してきた。さらに、in vitro 系においては THP-1 細胞を用いた炎症性サイトカインの誘導による影響も同様の傾向を示していることを明らかにしてきた。このことは frustrated phagocytosis が発がん性の引き金になっていることを支持している。一方、吸入暴露試験については、現在のところ利用可能な慢性影響結果は MWNT-7 に限られている。ところが、MWNT-7 の吸入暴露試験では肺がんは認められたが中皮腫は観察されておらず、腹腔内投与の結果をそのまま外挿できない可能性がでてきた。他方で、気管内投与試験では、中皮腫と肺がんの両方を引き起こすことが示唆されているが、気管内投与による慢性研究の結果も現在のところ MWNT-7 を含む 2 種類のナノチューブについて公表されているのみである。結論的には、MWNT-7 以外のナノチューブ暴露による肺組織に対する慢性影響を評価できるデータが不足している状況である。2 年間の慢性吸入曝露を行う設備を持つ実験施設は国際的にも数が限られている現状を考慮すると､ 現実的な対応として少なくとも気管内投与による慢性影響のデータを蓄積していく必要があると考えられる。国際的な状況としては、OECD のナノマテリアルのような粒子物質を評価対象とした吸入毒性試験法の改良が行われ、非溶解性の粒子状物質
が肺に蓄積して慢性影響を示すことを評価するための肺負荷量を測定する項目が追加されたが、吸入試験を代替する試験法の開発については消極的である。そこで、我が国はこれまでの国内研究の成果を生かすべく、短期間の気管内投与及び吸入試
験による in vivo 試験法の妥当性評価に関するプロジェクトを提案していている。慢性吸入曝露試験を全ての物質で行うことができない状況から、カテゴリー評価など共通した物性を持つナノマテリアルの包括的な評価手法としては有用ではないかと考えられる。これらの短期暴露による慢性影響を評価できる手法を確立するために、当面は更なる慢性影響のデータを蓄積する必要があると考えられる。

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シンポジウムThe 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

SY2-3
食品関連製品に含まれるナノ素材の安全性評価〜ナノ安全科学研究からナノ最適デザイン研究へ〜○東阪 和馬 1,2），長野 一也 1），松本 博志 2），堤 康央 1,3）
阪大院薬，2）阪大院医，3）阪大 MEI セ

1）

全性の確保が喫緊の課題となっている。このような背景のもと、ナノ粒子（粒子径 100 nm 以下）をはじめとした、21 世紀テクノロジーを活用した新素材の利用（サプリメント・食品添加物・食品用容器包装等）が食品業界においても急速に進行している。例えば、ナノ粒子の代表例である銀ナノ粒子・白金ナノ粒子は、強い抗酸化作用や抗菌活性など、特有の性能を有し、食品関連製品（サプリメント・食品添加物・食品用容器包装等）に幅広く実用化されている。しかし、ナノ粒子特有の機能が、二面性を呈し、予想外の部位で未知の生体影響を発現し得ることが指摘されつつあるものの、実際の曝露実態を加味した投与量・経路での体内動態を追求し、リスクを解明しようとする研究は少ないのが現状である。即ち、ナノ粒子は我々の生活の質を飛躍的に向上し得ることから、科学的根拠に基づいたナノ粒子のリスク解析に資する安全性情報を幅広く収集し、これら情報を基盤として、ナノ粒子の安全性の理解と確保が重要な課題であると考えられる。
本観点から我々は、種々ナノ粒子の物性・品質を解析すると共に、リスク解析基盤となる細胞内・体内動態と一般毒性・特殊毒性を定性・定量解析し、物性 - 動態 - 安全性の連関評価に資するナノ安全科学研究を推進してきた。そのうえで、安全なものは積極的に有効活用し、安全性に懸念があるものについては安全なものに仕立てあげていくナノ最適デザイン研究をも推し進めることで、持続的なナノ技術の発展に貢献し得る基盤情報の集積を試みてきた。これまでに、食品添加物等として汎用されている非晶質ナノシリカや銀ナノ粒子を用いて、定性的・定量的に体内吸収性・組織移行性を解析することで、経口吸収されたナノ粒子が、胃や小腸などの消化管局所だけでなく、相当量が血中に移行することをはじめ、従来までのサブミクロン
サイズ以上のものとは異なる体内動態を示すことを明らかとしてきた。さらに、ナノ粒子曝露後の一般毒性試験や特殊毒性試験を実施することで、従来素材と比較してより強いハザード（急性毒性、生殖毒性、免疫毒性など）を誘導し得ることを明らかとすると共に、安全性に懸念があるものに関しては、適切な表面修飾を施すことで、安全性を担保し得ることを見出してきた。
本シンポジウムでは、我々が取り組む、これらナノ安全科学研究、およびナノ最適デザイン研究に関する最新の知見について紹介し、ナノ粒子の安全性評価の現状の課題と今後について議論したい。

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シンポジウム

近年の食と健康に関する研究の進展により、健康の維持・増進や生活習慣病の予防に役立つ新たな素材や成分が次々と開発されている。従って、食の安全・安心に対する希求は増しており、食品に使用される新素材・新成分についても同様に、安The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

シンポジウムSY2-4
抗酸化能を有するナノメディシンの開発
長崎 幸夫
筑波大学数理物質科学研究科・人間総合科学研究科・アイソトープ環境動態研究センター
1990 年代初頭より、過剰に産生される活性酸素（ROS）が様々な疾病の原因として重要な役割を果たすことが明らかにシンポジウムなってきた。これまで、活性酸素種を消去するために様々な抗酸化剤が開発されてきた。しかしながらこれらは正常な細胞やその中のミトコンドリアに入り込み、電子伝達系を始め、重要なレドックス反応を阻害してしまうことが問題であった。
我々はこれらの問題を解決するため、「高分子に抗酸化剤を共有結合でぶら下げる」という発案をし、分子をデザインした。
具体的には図 1 に示すように、自己組織化能や環境応答能を有する高分子に触媒的に活性酸素消去能を有するニトロキシド
ラジカル（TEMPO）を導入した。これはすなわち、分子量が大きいことにより、細胞膜やミトコンドリア膜を通りにくく、したがってミトコンドリア内の正規電子伝達系を阻害せず、マクロファージや好中球が過剰に産生する悪玉活性酸素種を選択的に消去するレドックス高分子材料を企図して設計したものである。このレドックスポリマーは水に溶ける部分と溶けない部分を併せ持つため水中で自己組織化してナノ粒子となる（レドックスナノ粒子、RNP と略記する）。RNP の安全性を確かめるため、例えば生まれたばかりのゼブラフィッシュ水槽に入れてみると、水溶性の低分子 4- ヒドロキシ TEMPO は 30 mM の濃度で 12 時間後に全滅するのに対し、RNP では同濃度で 100％生存している。このように分子のサイズを制御することにより強い抗酸化剤を有するにもかかわらず、生存に大切な細胞内レドックス反応を保護することが可能となった。RNP を抗酸化剤として用いると、脳や心臓、腎臓血管の梗塞、再灌流によって生じる ROS の消去のみならず、がんや潰瘍性大腸炎、アルツハイマー病など様々な疾患部位に送達し、そこで過剰に産生される悪玉活性酸素を効果的に消去し、副作用の少ない新しいナノメディシン（レドックスポリマー薬）としてはたらくことが確認された（レビューとして Yoshitomi ら、Adv. Health.

Mat., 3, 1149（2014））。

図 1 レドックスナノ粒子の設計

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パネルディスカッション

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

PD-1
毒性病理学専門家に向けた教育としてのミクロ問題解説 - 詳細版 - の現状と医薬品開発における毒性病理学専門家の役割
細川 暁
エーザイ株式会社 グローバル安全性研究
日本毒性病理学会資格認定制度は 1992 年度に設立され，これまで延べ 514 名の日本毒性病理学会認定毒性病理学専門家を輩出している。資格認定制度の設立趣意は，安全性試験における病理学的検査成績の信頼性向上と毒性病理学の進歩に寄与するため質の高い専門家を認定することであり，日本の安全性試験における病理学的評価の向上と信頼性の確保に大きく貢献してきた。資格認定試験は，マクロ問題，ミクロ問題さらに筆記問題から構成されるが，マクロと筆記問題については比較的高得点が得られているものの，ミクロ問題については組織標本の見方や病変の捉え方を適切に教育されている受験生と教育が充分ではないと思われる受験生の二極化が目立ち，特に複数回の受験生ではその努力が実を結んでいない傾向がうかがわれた。病理組織標本に対する基本的なアプローチや読み方の教育が充分ではない現状が根本的な原因と考えられ，ミクロ問題についての包括的な教育研修の場を提供する必要があると考えられたことから，ミクロ問題解説 - 詳細版 - が企画されフォーカスを当てながら詳細に解説，資格認定試験の合格率向上に大きく寄与している。本発表では，ミクロ問題詳細解説の現状について紹介する。
一方，安全性試験における病理学的評価は，化合物のリスクアセスメントにおいて重要な役割を果たしており，毒性病理学
専門家に求められる役割は年々増加している。医薬品開発における安全性評価においても，毒性病理担当者に期待される役
割は極めて大きく，薬理試験や安全性試験における病理学的な評価にとどまらず，プロジェクトのマネジメントやリスクア
セスメントにおける重要な役割を果たしている。特に，医薬品の開発過程では様々な課題（issue）が生じるが，多種多様な課
題の認識（issue identification），解決策の提示（issue resolution），さらに課題の防止（issue prevention）に果たす毒性病理担当者の役割は大きい。また，それらを病理学的な知識を持たない社内外の関係者にわかりやすく適切に伝達し，適切なリス
クコミニケーションを進めることも重要な役割の一つである。これらの実例をいくつか紹介するとともに，医薬品開発における毒性病理学専門家の役割，さらにはその教育システムとキャリアデザインについて議論したい。

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パネルディスカッション

た。今年度で 3 回目を迎えたが，ミクロ問題詳細解説では，前年度の試験で回答率の低かった問題を選抜し，病変の捉え方に

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パネルディスカッション

PD-2
日本の大学における毒性病理学・毒性学の専門家教育と卒後の進路指導について
渋谷 淳
東京農工大学日本の 16 校の獣医系大学のうち、毒性学系講座を配置している大学は 7 校に留まっている。また、その多くは薬理学系教員から構成されており、それら以外の大学においても、薬理学ないし衛生学関連の講座教員が毒性学の講義・実習を分担している。獣医毒性学の教科書は日本比較薬理学・毒性学会が編集していることもあり、毒性病理学的な視点が乏しく、それに沿った教育環境は十分ではない。一方、毒性病理学を専門とする大学教員は獣医病理学研究室出身者で構成されるため、学問領域としての毒性病理学が学部学生に認知されるためには、これらの教員が毒性学の授業、実習に参画するか、獣医病理学の中で教えるかのどちらかになる。日本獣医病理学会編集の動物病理学総論には環境性疾患（毒性病理学の基礎）が含まれるが、毒性病理学の講義を担当できる教員は少数の大学に留まり、全国の大学で毒性病理学の講義を一律に実施することは困難である。これらの背景により、毒性病理学に対する学部学生の認知度は必ずしも高くないのが現状であり、学生が毒性病理学専門家の道を選択するかどうかは、研究室における研究・教育活動に依存する部分が大きく、ゼミ等で毒性病理学及び毒性

パネルディスカッション

学に対応できるメニューを備えているかが鍵となる。私どもの研究室では、各学生が当番で実施する 4 種類のゼミと、教員が担当するスライドカンファランスをそれぞれ月に 1 回実施している。具体的には、病理診断のルーチンに入る前に全身諸臓
器の組織学を学び直す組織ゼミ、ラット癌原性試験の 1 匹分の全身臓器の標本に現れる自然発生病変を学ぶ Fischer ラット
ゼミ、分子生物学的視点を養うための CELL ゼミと称する Molecular Biology of the Cell の輪読会、卒業研究テーマ関連論文の文献紹介をする学部ゼミ・院ゼミを実施している。学部ゼミでは、外部の社会人を講師として招いて、毒性病理学及び毒性学研究や業務に関連したレクチャーを依頼しており、学部学生が興味を持って聴講してくれている。スライドカンファラン
スは、JSTP というよりは JCVP 向きの病変の供覧が多いが、両方の認定専門家試験対応として企業などの若手も参加しており、学生が将来の進路選択の候補として安全性病理などの情報を入手できる環境にある。また、卒業研究テーマは動物実験研究であるため、一般毒性及び実験病理学的な内容を学ぶ良い機会となり、成果について学会での発表を義務づけておくと外部の毒性病理学及び毒性学担当者との接点ができ、将来の進路として安全性病理をイメージする学生が多くなることを期待している。さらに、5 年次に症例報告で学会発表（JCVP 学会）と英文論文作成を経験させ、6 年次に卒論研究成果の学会発表（日本毒性学会など）、海外の WoS 雑誌に論文投稿させることで、博士課程へ進学した際の学位取得のイメージも可能となり、今までに 7 名が Ph.D. を取得している。過去 10 年間の研究室卒業生の進路の割合では、毒性病理学関連は 75％となって
おり最も多い就職先となっている。動物を使わない代替法へのシフトが進む中、動物を用いた安全性試験は今後も必須であることに変わりはなく、毒性病理学を担う人材の確保のためには、毒性病理学を専門とする教員養成が喫緊の課題であり、大学と国立や財団の研究所、企業体と連携して将来の教員となり得る人材を一緒に育成していくことが重要であることを強く感じている。

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パネルディスカッション

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

PD-3
米国での獣医学部教育の実態と毒性病理専門家のキャリア形成について
平良木 肇
Amgen, Inc., Comparative Biology & Safety Sciences
北米の獣医学位（DVM プログラム）は基本的に学士課程終了後に受験し進学する４年制のプロフェッショナル・スクール
を通して授与され、現在米国内には 30 校の獣医学校が存在する。獣医学位課程において｢毒性病理学｣という単独の履修科目は無く、獣医毒性学及び獣医病理学の講義の一部に含まれる程度であり、それも既存の毒素、毒性物質についての概要が主な内容である。また日本の大学と異なり、獣医学位課程段階である程度専門分野を履修できる研究室制度は無く、DVM プログ
ラムは基本的に臨床獣医育成に重点が置かれている。
北米の獣医学教育のもうひとつの特徴としては、DVM 学位取得後に進むことのできる、専門分野に分かれた研修獣医師（レジデント）制度を通しての各種認定専門獣医師養成プログラムがあり、現在 AVMA（アメリカ獣医師協会）認定の専門獣医師資格は 22 種類ある。全米約８万名の獣医師中、およそ１万２千名が何らかの専門獣医師認定資格を有するため、獣医師の専門化が進んでいるのが伺える。その認定資格中の一つである獣医病理学会（ACVP）の認定病理師数は現在 1400 名程度でクトラル・プログラムへと進む者もいる。北米 STP では資格認定は行っておらず、米国においては JSTP に当たる毒性病理専
門家の資格認定制度は無く、毒性病理業務の多くは ACVP 認定病理師が担っている。
毒性病理専門家の教育システムとキャリアデザインについては、主に就職先の企業、CRO、その他研究機関での実務経験（GLP 試験経験、ピアレビューなど）や、STP 等関連学会によって提供されるセミナー、ワークショップやワーキング・グルー
プの参加等を通して行われている。アムジェンでは毎週インターネット上でスライド・カンフェレンスを行っている。
米国のバイオテクノロジー、製薬・化学業界においては比較病理学、及びシステム・バイオロジーのエキスパートで、かつ新薬、製品開発の実務経験のある毒性病理の専門家は需要が高く、若手毒性病理師の育成が急務である。また、技術革新に伴うバイオ・ベンチャー新興企業設立や企業買収、統合も活発であり、コアである比較病理学、毒性病理学の知識に加え、最新の分子生物学やテクノロジー（バイオ画像解析、NGS など）に精通した専門家（病理・プラスアルファ）の需要は増えている。
加えて、バイオ・製薬業界、及び政府機関を含めた薬品開発業務の国際化（ICH 等）に伴い、クロスボーダーで活躍できる人材の養成も急務である。毒性病理は重要度と専門性が高く、ダイナミックに進化する領域であるため、継続的かつ親和的に新しいコンセプトを学びあえる機会、場が必要であると考える。

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パネルディスカッションある。一部 ACVP 認定病理師の中にはレジデント・プログラムと重複、若しくは継続して毒性病理専攻の大学院やポスト・ドThe 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

パネルディスカッション

PD-4
企業での毒性病理専門家の活動における日米間の比較
土屋 毅幸
Department of Safety Assessment and Laboratory Animal Resources（West Point, PA  U.S.A.）, Merck ResearchLaboratories, Merck & Co., Inc., Kenilworth, NJ, USA
日米の毒性病理専門家の活動の比較と、毒性病理専門家のキャリア形成における潜在的な課題とその対策について触れたい。毒性病理専門家の役割は、非臨床試験における病理所見の検出と解釈、他の検査項目における変化との関連性評価、そして包括的な被検物質のリスク評価に貢献することである。最終的にはリスクを適切にステークホルダー（トキシコロジスト
や規制当局のレビューワー）に伝えることである。日米とも毒性病理専門家は主に製薬会社、コントラクトラボラトリー、そして比較的少数が農薬、その他の化合物を開発する企業、規制当局あるいは民間の研究機関に採用されている。ここでは企業に就職する前後の過程とその後の活動について焦点を当てたい。毒性病理学者の企業への就職の資格要件には日米間に違いがある。米国の殆どの企業で獣医学の修了と American College of Veterinary Pathology（ACVP）ボード（あるいは同等のボード）の取得が応募の必須要件となっている。一方、日本の企業では資格取得前の経験の少ない人材の採用が一般的に行わ

パネルディスカッションれている。専門家認定については本学会が 5 年以上の学会員歴および本学会が規定する科学的な活動要件を満たした者を対象に毒性病理専門家の認定を行っている。また企業が採用後に社員の育成を目的として行う国内あるいは海外留学も日本では珍しくないが、米国には殆ど見られない取り組みである。このように米国企業では求人応募以前に獣医病理専門家として一定の素地構築が求められているのに対し、日本では経験の少ない人材を採用した後、毒性病理専門家として育成を試みるというしくみがある。日米に共通している課題はいずれも企業に入る前に毒性病理に特化した教育およびトレーニングを受けられる教育機関あるいはプログラムが多くないということである。米国では ACVP ボード取得に必要な 3 年間のレジデン
シー期間内に毒性病理トレーニングを行う大学は限られており、毒性病理専門家の認定制度は存在しない。同様に日本においても毒性病理教育に特化した研究室を有する大学は限られている。また 2014 年から 2016 年までの 3 年間の一年当たりの JSTP による毒性病理専門家認定数は 7 ～ 23 人、ACVP ボードの取得者数は 56 ～ 61 人と限られている。これらの課題は、
毒性病理専門家の将来的に持続的な人材確保にも影響を及ぼすと考えられる。持続可能な人材確保のために、企業が行える
アプローチとしてインターンシップあるいはエクスターンシップ等を拡充して適性人材を早期に発掘し、企業における毒性
病理学者の採用についてより具体的な見通しを提供することが考えられる。米国では、3 年間のレジデンシーを製薬企業やコントラクトラボラトリーがサポートするプログラムが The ACVP/STP Coalition for Veterinary Pathology Fellows の下で行われている。以上の点に加えて、業務内容および社外活動についても比較しパネルデスカッションの一助としたい。

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ワークショップ

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

WS-1
非アルコール性脂肪性肝炎モデルラットの肝炎進展に関わる全身免疫の役割○井澤 武史，大地 祥子，新 真智，宮城 伶奈，橋本 愛，桑村 充，山手 丈至
大阪府大 獣医病理【目的】非アルコール性脂肪性肝疾患（NAFLD）はメタボリックシンドロームの肝表現型であり，非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）から肝硬変，肝癌に至る進行性疾患である．NASH の進展には，脂肪組織の炎症，消化管の dysbiosis など全身の病態が関わると考えられているが，その詳細は未だ不明である．本研究では，免疫系や腸内細菌叢の変化を中心に，NASH モデル
ラットの whole body 解析により，肝炎の進展メカニズムを調べた．
【方法】6 週齢の F344/DuCrlCrij 雄ラットに正常食（5% 脂質），高脂肪食（16% 脂質；11% ココアバター，1％コレステロール
添加）を最長 30 週間給餌し，血清および全身諸臓器を経時的に採取し，病理組織学的解析，遺伝子発現解析，腸内細菌叢解析を実施した．
【結果】高脂肪食群において，肝炎の進展に伴って，ALT 優勢型の肝逸脱酵素上昇，肝小葉内炎症巣の増加，肝組織中のサイト
カイン（TNF α , IFN γ , TGF β , IL1 β）の発現上昇がみられた．白色脂肪組織では CCL2 ケモカインの発現上昇が，脾臓ではIFN γ の 発 現 上 昇 と IL4 の 発 現 低 下 が み ら れ た．盲 腸 内 容 物 か ら の 腸 内 細 菌 叢 解 析 で は，グ ラ ム 陰 性 菌 の 割 合 増 加，

Osillospira 属 菌 と Ruminococcus 属 菌 の 減 少，Akkermansia 属 菌 と Parabacteroides 属 菌 の 増 加 が み ら れ，肝 組 織 中 のTLR4・TLR2 シグナル分子の発現上昇，NK 細胞関連分子の発現上昇を伴っていた．

【結論】NASH モデルラットの肝炎進展には，脂肪組織や脾臓に由来するサイトカイン，腸内細菌叢の変化による自然免疫の活性化など，全身の病態が寄与すると考えられた．

肥満および耐糖能異常を示す新規 NASH モデルマウスでは、脂肪肝は肝線維化・腫瘍形成へと経時的に進行する○寺山 由依，審 一慧，山際 高史，中谷 祐樹，大嶋 成奈優，森尾 剛，松浦 哲郎，尾崎 清和
摂南大学 薬学部 病理学研究室【目的】カルニチン欠損により JVS（jvs /jvs ）マウスは脂肪肝を発症するが、我々は JVS 系統の hetero 型（jvs /+）に高脂肪食な
らびに wild 型（+/+）に Alloxan（AL）と高脂肪食を負荷する条件で、40 週齢時に肥満および耐糖能異常を示し、脂肪肝・肝線

維化・腫瘍形成を認める NASH モデルマウスの作製に成功した。今回、肝病変の経時的変化を組織学的に検索するとともに、関与する炎症細胞およびサイトカインの発現を解析した。
【方法】JVS 系統の生後 3 日齢の雄 wild 型に AL を皮下投与後、離乳（3 週齢）後に高脂肪飼料（HFD-60）を与えた群、ならびに雄の hetero および wild 型に AL を投与せず高脂肪食のみを与えた 2 群、以上の計 3 群を設定した。20 および 40 週齢時に剖検し、形態学的解析を行った。
【結果】20 週齢から、実験群のほぼ全ての個体は脂肪肝となり、インスリン・HOMA-IR・コレステロールは高値を示した。組
織学的には、軽度から中等度の小葉中心性の肝細胞の脂肪化および多巣状性好中球集簇を認め、これらは AL 投与群でやや強い傾向を示した。いずれの変化も 40 週齢で高度となり、肝線維化に進行した。さらに、肝病変は AL 投与 wild 群および AL 非投与 hetero 群の約 30% で肝細胞過形成または腺腫にまで達した。脂肪肝・線維化から腫瘍への進行に伴い、肝臓の IL-6・
TNF- α・TGF- βの mRNA 量は上昇し、炎症細胞では好中球に加え CD3 陽性 T 細胞が増加し、肝細胞の再生ならびに増殖を示
唆する cytokeratin 19 陽性細胞（細胆管反応あるいはオーバル細胞）を多数認めた。
【結論】本 NASH モデルマウスはヒト NASH 患者と極めて類似した肝病変の経時的変化を示す。

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ワークショップ

WS-2 ＊

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ワークショップ

WS-3 ＊
改変コリン欠乏メリオニン低減アミノ酸食誘発マウス非アルコール性脂肪性肝炎様病態に対するトランス脂肪酸と代替品の影響○煙山 紀子 1），池端 香織 1），山下 卓也 1），宇野 絹子 1），張 舜恵 1），小川 秀治 2），渡邊 厚 3），美谷島 克宏 1），
中江 大 1）
東京農大・応生・食品安全健康，2）ゼリア新薬・動態安全性研，3）旭化成メディカル・医療技術材料研

1）【目的】本研究は、非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）を背景とした肝発がん病態を明らかにする目的で、NASH の動物モデルであるラット・コリン欠乏メチオニン低減アミノ酸（CDAA）食系を感受性の低いマウスに移殖するため、改変 CDAA 食の開発を行うと共に、肝に蓄積する脂質の質の NASH 様病態に果たす役割を明らかにするため、トランス脂肪酸と近年開発されているトランス脂肪酸代替品が当該病態に及ぼす影響を比較検討した。
【方法】実験は、6 週齢の雄性 C57BL/6J 系マウスに、普通食・CDAA；HF-T+（脂質 45％；トランス脂肪酸含有ショートニン
グ、メチオニン 0.1%）
・CDAA；HF-T-（ 脂質 45%；トランス脂肪酸非含有ショートニング、メチオニン 0.1%）のいずれかを、
3 または 6 ヶ月投与して解剖し、各種の検索を行った。
【結果】3 ヶ月投与群では、CDAA；HF 食群で著明な肝脂質の増加と血漿アラニンアミノトランスフェラーゼ活性の上昇を認めた。F4/80（マクロファージ）・α -SMA（活性化星細胞）
・シリウスレッド（SR、線維化）染色では、CDAA；HF-T+ 群に比較して、CDAA；HF-T- 群でシグナル強度が強い傾向を示した。6 ヶ月投与群でも同様の傾向をより強く認め、さらに、CDAA；
HF-T- 群においては増殖性変化を含む結節性変化を CDAA；HF-T+ 群より多く認めた。
【結論】以上の結果より、いずれの改変 CDAA 食も、マウスにおいて、3 ヶ月投与で肝脂肪化・炎症・線維化を誘発し、さらに6 ヶ月投与で結節性変化を誘発したが、トランス脂肪酸と代替品という脂質の質の違いによって表現される NASH 様病態に差異が顕れることが示唆された。

ワークショップ

WS-4 ＊
Connexin 32 ドミナントネガティブトランスジェニックラットを用いたメタボリック
シンドローム随伴 NASH 発がんモデルの樹立○内木 綾 1,2），加藤 寛之 1），鈴木 周五 1），高橋 智 1）
名市大・院・医・実験病態病理，2）名古屋市立東部医療センター 病理診断科

1）【背景】非アルコール性脂肪肝炎（non-alcoholic steatohepatitis：NASH）は、近年の食生活変化に伴い発生率が増加しており、肝 硬 変 や 肝 癌 へ 進 展 す る 危 険 性 が 指 摘 さ れ て い る。我 々 は こ れ ま で に、肝 の 主 要 な ギ ャ ッ プ 結 合 タ ン パ ク で あ るconnexin 32（Cx32）の、NASH および肝発がんに対する役割を調べるため、methionine choline deficient diet（MCDD）を用いて、Cx32 ドミナントネガティブトランスジェニック（Tg）ラットに対して、NASH を誘導した。その結果、Cx32 のNASH および肝発がんに対する抑制作用が実証され、Tg の使用により NASH の誘発期間を短縮することができた。

【目的・方法】上記の Tg-MCDD モデルは、ヒト NASH に組織像は類似していたが、ヒトで併発するメタボリックシンドローム

を伴わなかった。本研究では、メタボリックシンドロームを随伴する NASH モデルを確立するため、7 週齢雄 Tg ラットおよび野生型（Wt）ラットに、高脂肪食と dimethylnitrosamine（15 mg/kg,i.p.、1 回 /2 週間）を 12 週間投与し NASH を惹起し、ジェノタイプの差を検証した。

【結果】高脂肪食の投与により、いずれのジェノタイプにおいても体重、肝重量、精巣周囲脂肪織重量が増加した。Tg ラットにのみ、血中インスリン値、インスリン抵抗性指標 HOMA-IR の有意な上昇を認め、肝炎症細胞浸潤、線維化、肝逸脱酵素（AST, ALT）、炎症性サイトカイン（Tnf α , Tgf β , Il1 β , Timp2, Col1a1）、活性型 NF- κ B が、Wt と比較して有意に亢進した。肝発がん性に関しても、Tg ラットにおける GST-P 陽性細胞巣（数、面積）は、Wt ラットと比較して、有意に増加した。

【結論】Cx32 は、メタボリックシンドローム併発 NASH および肝発がんに対して、抑制的に作用することが明らかになった。
Tg-HFD-DMN モデルは、新規 NASH 評価系として有用であることが示唆された。

56

ワークショップ

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

WS-5
2 つの NASH モデルマウスにおける病理組織学的所見の違い○奥野 高裕，石井 真美，梯 アンナ，藤岡 正喜，魏 民，鰐渕 英機
大阪市立大学 大学院 医学研究科 分子病理学【背景】非アルコール性脂肪肝炎（NASH: nonalcoholic steatohepatitis）は、生活習慣病と関連がある疾患であり、ウイルス性
慢性肝炎と同様に肝硬変や肝細胞癌に進展する。しかしながら、生活習慣病を合併しない NASH や薬剤性の NASH が報告されていることから、NASH は様々な因子によって生じる heterogeneous な疾患概念であると考えられ、結果として NASH を背景として肝細胞癌が生じるメカニズムも背景因子によって異なることが予想される。我々は肥満や糖尿病を自然発症する
TSOD マウスと、コリン不含メチオニン減量高脂肪食（45%CDAHFD）にて飼育したマウスを NASH モデルマウスとして用い、両者の病理組織学的検討を行った。
【方法】TSOD マウスを MF ペレットにて 48 週齢、56 週齢まで、C57BL/6J マウスを 45%CDAHFD にて 38 週齡、48 週齡まで飼育し、病理組織学的な解析を行った。
【結果】TSOD マウス、45%CDAHFD 食餌マウスはいずれも脂肪沈着や線維化、炎症細胞浸潤といった NASH 様の変化が肝組織に認められ、両者とも肝腫瘍が発生した。しかしながら、炎症や線維化の程度はそれぞれのマウスで異なっていた。また、肝腫瘍に対する p-mTOR の免疫染色では 45%CDAHFD 投与マウスに比べ、TSOD マウスでは陽性率が高かった。
【結論】糖尿病モデルマウスと食餌モデルマウスでは肝組織像に差異があり、NASH 様の病変が生じるメカニズムは両者で異なる可能性が考えられた。また、肝腫瘍における p-mTOR の染色性が異なる点から、肝細胞癌に至るメカニズムも両者で異なっていることが示唆された。

ワークショップ

57

一般口演要旨
O-01 ～ O-10

ポスター要旨P-01 ～ P-98

一般口演The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

O-01 ＊
パルミトイルピペリジノピペリジンの毒性影響および抗がん効果発現機序○安藤 さえこ 1），松本 晴年 1），深町 勝巳 1），二口 充 1,2），吉見 直己 3），酒々井 眞澄 1）
名古屋市立大学大学院医学研究科分子毒性学分野，2）長崎大学病院病理診断科・病理部，
琉球大学大学院医学研究科腫瘍病理学講座

1）
3）

我々は天然脂肪酸をリードとし新規抗がん物質 palmitoyl piperidinopiperisin（PPI, 特許第 5597427, 2014 年）を創製した。本研究では PPI の毒性影響と抗がん作用機序について検証した。50 mg/kg PPI 腹腔内投与は、ヌードマウスに移植した
ヒト大腸がん細胞株に対しアポトーシス誘導および血管新生抑制により腫瘍縮小効果を発揮した。PPI の毒性検証のため雌ヌードマウスに 50 mg/kg 腹腔内投与を行った。実験期間を通して各群間の体重に有意差はなく、主要臓器を組織学的に観察したところ対照群と比較し毒性所見は認めなかった。急性毒性試験では雌雄 SD ラットに 500、1000 および 2000 mg/kg
PPI を単回強制経口投与し 14 日間観察した。LD50 は雄で 1000 mg/kg、雌で 500 mg/kg であった。主な毒性所見として 500

mg/kg 投与群で肝細胞に軽度の脂肪変性、2000 mg/kg 投与群で肝細胞に高度の脂肪変性、食道の潰瘍および食道粘膜下の炎症像がみられた。ヒト大腸がん細胞株 SW837 において 0.15 ～ 2.5 μ M PPI は用量依存的に STAT3 転写活性を阻害した。
2.5 μ M PPI は、SW837 細胞株において pSTAT3 の発現と核内移行を抑制した。2.5 μ M PPI は STAT3 制御分子である
Bcl-2、BclxL、cyclin D1、VEGF の発現を抑制し p53 の発現を増加させた。以上の結果から、50 mg/kg 腹腔内投与の条件下
で、PPI はマウスに重篤な副作用を示すことなく腫瘍縮小効果を発揮する。PPI は転写因子 STAT3 の転写活性阻害により
STAT3 に制御される分子を介し最終的に抗がん効果を発揮している可能性がある。

O-02
BALB/c-p53 ＋ / －マウスにおける DMBA または PhIP 誘発性乳がんの遺伝子変異 / 表現型の
比較解析○町田 雪乃 1），須藤 柚稀子 1），打屋 尚章 1），落合 雅子 2），今井 俊夫 1）
国立がん研究センター研究所 動物実験施設，2）国立がん研究センター研究所 動物実験部門

1）【 背 景 】 環 境 発 が ん 物 質 の 7,12-dimethylbenz[a ]anthracene（DMBA）ま た は 2-amino-1-methyl-6-phenylimidazo[4,5-b ]乳がん自然発症モデルとして知られる BALB/c-p53 ＋ / －マウスの DMBA または PhIP 誘発性乳がんの遺伝子変異と表現型を比較解析した。

【材料と方法】BALB/c-p53 ＋ / －マウス（雌、7 週齢）に DMBA（50 mg/kg 体重、1 回）または PhIP（50 mg/kg 体重、6 回）の経

口投与を行い、触知された乳がんの estrogen receptor α（ER α）の免疫染色と病理組織学的解析を行った。また、遺伝子解析では p53 遺伝子の exon5 ～ 8 領域をシークエンス解析した。

【結果】DMBA と PhIP 各群の乳がん発生率は各 90 と 42% であった。組織学的に DMBA 群では主に管腔細胞と基底細胞様の細胞が二相性に増殖した中～高分化腺がんで、管腔細胞が ER α陽性を示した。PhIP 群では多角細胞が胞巣状、充実性に増殖する中分化腺がんで、ER αは大部分の細胞が陰性であった。遺伝子解析では、DMBA 群と PhIP 群の各 10 例中 9 例で p53 の野生型アレルに A135V 変異もしくは LOH がみられ、DMBA 投与群の 1 例で R246P の変異を認めた。

【結論】DMBA と PhIP により誘発される乳がんでは p53 の遺伝子変異頻度に差はみられなかったが、分化度と ER α陽性率に違いを認めた。以上より、両物質により誘発される他のがん関連遺伝子変異や細胞内シグナル伝達系の変化に違いがあるものと推察された。

61

一般口演

pyridine（PhIP）誘発性ラット乳がんの遺伝子変異を比較した報告があるが、マウスの乳がんに関する報告は少ない。今回、

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一般口演

O-03 ＊
マウス経胎盤ばく露による有機ヒ素化合物 Dimethylarsinic acid の発がん性およびその機序○藤岡 正喜，魏 民，奥野 高裕，熊田 賢次，梯 アンナ，大石 裕司，鰐渕 英機
大阪市立大学大学院 医学研究科 分子病理学【背景】これまでに我々の研究で、無機ヒ素化合物の主な体内代謝物である Dimethylarsinic acid（以下、DMA）を胎仔期に曝露した雄において、その成熟後 84 週齢の肝臓および肺において、発がん性を生じることをすでに明らかにしている。しかし、その詳細な発がん機序については未だ明らかとなっていない。
【目的】本研究は DMA の経胎盤曝露による雄性新生仔マウス肺における影響について検討を行った。
【方法】妊娠期の雌マウスに DMA を 0、200 ppm の用量で胎齢 8 日から 18 日までの 10 日間飲水投与し、経胎盤曝露により作製した雄性新生仔マウスを出生後、直ちに剖検を実施して肺を回収後、以降に記す種々の解析を行った。
【結果】無処置群と比較して DMA 投与群の肺において、KI67 陽性率の有意な増加がみられた。また HPLC/ICP-MS による肺におけるヒ素の形態別解析の結果、無処置群と比較して TMAO の有意な変化がみられなかったのに対して、DMMTA およびDMDTA が有意に増加していることが明らかとなった。さらにその代謝過程で S-adenosylmethionine（SAM）が有意に増加していること、ヒストンメチル基転移酵素である G9a の発現増加、ヒストン H3K9me3 が有意に増加していることが明らかとなった。
【結論】以上の結果から、DMA に経胎盤曝露した雄性新生仔マウス肺において、ヒストン H3K9me3 が増加していることが明らかとなった。また、そのメカニズムとしてヒ素の代謝過程で生じた SAM の増大が関与してることが強く示唆された。

O-04 ＊
嚢胞における上皮間葉転換－脈絡叢と尿細管の検討－○村井 厚子，中村 賢志，瀧本 憲史，並木 健吾，日比 大介，柳澤 幸宏，下内 孝司，柳 浩由紀
小野薬品工業（株）安全性研究部【背景と目的】我々は，第四脳室における脈絡叢嚢胞をラットで初めて報告した．免疫組織化学的染色（IHC）の結果，嚢胞壁で cytokeratin MNF 116（CK）と vimentin の共発現が認められ，嚢胞が上皮間葉転換（EMT）の過程にある可能性が示唆され一般口演たが，同病変はまれであるため更なる検討ができなかった．そこで，嚢胞が比較的多く認められる腎臓を用いて，嚢胞における EMT の進展を明らかにするため，嚢胞形成の初期に着目して検討した．
【材料と方法】雌雄 26 週齢の無処置 Crl:CD（SD）ラットで，腎臓に嚢胞の初期と考えられる尿細管の拡張，あるいは嚢胞が認められた動物のパラフィン包埋ブロックを用い，IHC を実施した．
【結果】正常な尿細管では，CK の発現はヘンレループの細い部分を除く近位尿細管直部～集合管で，E-cadherin はヘンレ
ループ～集合管で認められており，近位尿細管直部では CK は発現し，E-cadherin は発現していなかった．拡張した近位尿細管直部は CK が消失して vimentin が発現し，尿細管周囲に SMA の陽性像がみられた．一方，CK 及び E-cadherin が発現する尿細管では拡張した尿細管でも CK の消失や vimentin の発現は認められず，嚢胞では一部で vimentin の発現が認められたが，CK や E-cadherin の発現もみられた．なお，正常な脈絡叢では CK と共に E-cadherin が発現していた．
【考察】上皮の細胞接着に関与する E-cadherin の消失は EMT に重要なステップである．今回の結果より，正常な状態で
E-cadherin を発現しない尿細管では，嚢胞より早期の拡張した尿細管でも CK の消失及び vimentin の発現が認められたことから，他の尿細管に比べて EMT が起きやすい状態にある可能性が示唆された．なお，正常な脈絡叢では E-cadherin が発現していたため，嚢胞でも EMT が容易に起こらず上皮の性質が残存した可能性が考えられた．

62

一般口演

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

O-05
Diacylglycerol acyltransferase 1 阻害剤 DS-7250 による肝臓での脂肪酸合成亢進を介した
Zucker fatty ラットにおける脂肪肝増強○熊谷 和善，安野 恭平，井口 拓馬，甲斐 清徳，森 和彦
第一三共（株）安全性研究所
Diacylglycerol acyltransferase 1（DGAT1）は中性脂肪を合成する最終段階を担う酵素である。高脂肪食（HFD）負荷 Dgat1 -/マウスでは、食餌性肥満及び脂肪肝が抑制される。このことから、選択的 DGAT1 阻害剤である DS-7250 は、抗肥満及び脂肪肝抑制作用が期待される。本試験では、通常食又は HFD を給餌した雄性 F344 ラット及び Zucker fatty（ZF）ラットに、溶媒又は 10 mg/kg の DS-7250 を 14 日間又は 28 日間反復経口投与し、肝臓への影響を評価した。HFD 給餌 ZF ラットでは DGAT1阻害による変化と考えられる摂餌量及び体重増加抑制がみられた。ZF ラットでは給餌条件によらず軽度の肝細胞脂肪化がみられたが、DS-7250 は HFD 給餌 ZF ラットの肝細胞脂肪化を増悪した。一方、F344 ラットでは、HFD 給餌下においても肝細胞脂肪化は認められず、DS-7250 の血漿中薬物濃度は ZF ラットと同等であった。肝トランスクリプトーム解析では、HFD 給
餌下において、脂質吸収及び脂肪酸合成に関与する遺伝子発現が F344 ラットと比べて ZF ラットで増加した。さらに、HFD
給餌 ZF ラットでは、DS-7250 投与により de novo lipogenesis に関与する主要遺伝子（Elovl6 、Me1 、Srebf1 、及び Fasn ）の発現が溶媒対照群と比べて増加した。以上より、遺伝的素因として肝細胞脂肪化に高い感受性を示す ZF ラットでは、DS7250 は de novo lipogenesis を亢進することで、肝細胞脂肪化を増悪させると考えられた。

O-06 ＊
カニクイザルにおける Mifepristone による卵巣毒性の病理組織学的解析○武田 賢和 1），堀江 勘太 2），後藤 哲也 3），太田 恵津子 1），中野（伊藤）今日子 1），早川 和宏 1），関 由妃 1），
後藤 彩 1），細川 暁 1）
エーザイ（株）筑波安全性研究部，2）エーザイ（株）ニューロロジービジネスグループ，（株）サンプラネット 筑波研開支援事業部

1）
3）【目的】卵巣毒性の病理組織評価では，各動物種の性周期・月経周期による特徴的な組織学的変化を踏まえた観察が重要であ作用を有する Mifepristone による非ヒト霊長類の卵巣毒性の病理組織学的特徴を，月経観察および血中性ステロイドホルモ
ン値の経時的変化とともに解析した。
【方法】4 例の雌カニクイザル（4 歳）に，Mifepristone（20 mg/kg/day）を 2 ヶ月間経口投与した。投与期間中，月経観察および LC-MS/MS を用いた血中エストラジオールならびにプロゲステロン値の経時的測定を実施し，投与期間終了後に剖検し，卵巣の両側複数断面の観察による雌性生殖器の詳細な病理評価を実施した。
【結果・考察】Mifepristone 投与によって月経が消失し，血中エストラジオールおよびプロゲステロン値の周期的な上昇が抑制された。病理観察の結果，子宮内膜の萎縮が認められた。卵巣は，全例が follicular phase の組織像を示し，対照群と比較して閉鎖胞状卵胞の比率に変化は認められなかった。これらの結果から，カニクイザルでは，Mifepristone 投与によって性ス
テロイドホルモンの周期的上昇が抑制され，月経周期が停止するにも関わらず，胞状卵胞の発育はある程度維持されると考えられた。以上から，非ヒト霊長類における卵巣毒性評価においても，月経周期の各ステージの特徴を踏まえた雌性生殖器の総合的な病理評価が重要であり，月経観察および血中性ステロイドホルモンの経時的測定は，その評価において有用である
ことが示された。

63

一般口演

るが，非ヒト霊長類において，月経周期を考慮した卵巣毒性の病理組織学的な知見は少ない。本研究では，抗プロゲステロン

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

一般口演

O-07 ＊
げっ歯類にみられた薬物誘発性フッ素症の機序検討○関 由妃 1），則武 健一 2），武田 賢和 1），朝倉 省二 1），大塚 昭代 1），後藤 彩 1），太田 恵津子 1），
中野（伊藤）今日子 1），早川 和宏 1），園田 二朗 1），細川 暁 1）
エーザイ株式会社 筑波安全性研究部，2）株式会社サンプラネット 安全性研究ユニット

1）【背景】ラットを用いた慢性毒性試験において，脛骨・腓骨の骨折，切歯の白色化，病理組織所見として骨の色素沈着，骨梁の減少，エナメル芽細胞の変性が認められた。これらの骨及び歯の変化は，ラットにおけるフッ素と類似していたことから，機序検討を実施したので報告する。
【材料と方法】化合物 A をラットに 14 週間反復経口投与し，病理組織学的検索，尿中フッ素排泄量及び骨中のフッ素濃度測定
を併せて実施した。ラットにおいてフッ素症を誘発することが知られる，フッ化ナトリム（NaF）に関しても同様の試験を実施した。
【結果と考察】化合物 A を投与したラットにおいて，骨梁の減少，類骨の増加，骨の色素沈着，骨強度及び骨密度の減少が認められた。これらの変化は，NaF をげっ歯類に過剰摂取させた際の骨や歯病変と一致していた。また，尿中フッ素排泄量及び骨
中フッ素濃度の増加がみられた。非特異的 CYP 阻害剤と化合物 A の併用により，尿中のフッ排泄量の減少が認められ，種差の検討の結果，化合物 A による骨，歯の病変はラット特異的であることが示された。以上のことから，ラットの慢性毒性試験で認められた骨及び歯の毒性が，化合物の代謝に伴うフッ素遊離に起因したことが確かめられた。

O-08 ＊
DNA 二重鎖切断マーカーγ -H2AX を用いた胃発がん物質の短期同定○岡部 麻子 1），桐山 諭和 1），鈴木 周五 2），櫻井 浩平 1），高橋 智 2），塚本 徹哉 1）
藤田保健衛生大学 医学部 病理診断科，2）名古屋市立大学大学院 医学研究科 実験病態病理学

1）Helicobacter pylori 感染と慢性炎症によって発生する活性酸素等による DNA 損傷は発癌の重要なリスクファクターと考えられている。本研究では、二重鎖 DNA 損傷によって誘導される Ser139 リン酸化ヒストン H2AX（γ -H2AX）のフォーカスを

一般口演

指標に、種々の化学発がん物質のラット胃粘膜における応答を検討した。６週齢オス F344 ラットに、直接発がん物質のN-methyl-N-nitrosourea（MNU）、間接発がん物質の 3, 2’-dimethyl-4-aminobiphenil（DMAB）、dimethylnitrosamine（DMN）、1, 2-dimehtylhydrazine（DMH）を５日 / 週 x4 週間強制胃内投与した。対象群には水を投与した。実験 28 日に屠殺し、胃粘膜の一部より total RNA を抽出し、残りをホルマリン固定しパラフィン切片を作製した。胃底腺、幽門腺領域に関して、Hematoxylin eosin（HE）染 色 及 び 抗 γ -H2AX 免 疫 染 色 を 施 行 し 腺 管 あ た り の 陽 性 細 胞 を カ ウ ン ト し た。ま た、
glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase を 内 部 標 準 と し、H2AX（h2afx）、p21waf1、pepsinogen c、pepsinogen a5
遺伝子発現の変化を SYBR Green を用いて定量的 RT-PCR 法により検討した。胃底腺、幽門腺ともに増殖帯でγ -H2AX focus
形成が観察された。幽門腺領域では control 群に比べて MNU 群で１腺管あたりの陽性細胞数が有意に増加した。胃底腺領域
で は MNU 群 の み な ら ず DMAB 群 で も 陽 性 細 胞 数 の 有 意 な 増 加 が み ら れ た。MNU 群 で は、表 層 で ア ポ ト ー シ ス に よ る
γ-H2AX 陽性像が観察された。各種遺伝子発現の検討では、control 群と比較し MNU 群、DMN 群で h2afx mRNA 発現は有意に減少し、p21 は上昇傾向にあった。既知の胃発がん物質 MNU のみならず、胃発がん性の報告されていない DMAB でも
γ-H2AX 陽性細胞の有意な増加が見られた。本システムは、未知の胃発がん物質のスクリーニングに有用である可能性が示
された。

64

一般口演

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

O-09 ＊ブタ腎動脈における熱焼灼直後の病理学的変化と画像診断法による検出：血管内超音波と光干渉断層法を用いた検討○坂岡 篤 1,2），田上 暁之 3），鬼村 祐治 1），萩原 仁美 1），寺尾 壽子 1），熊谷 文明 4），松村 潔 2）
テルモ株式会社，2）大阪工業大学大学院 工学研究科，3）福井大学 医学部，4）（一財）食品薬品安全センター 秦野研究所

1）【背景】高血圧の新規治療法である腎除神経術では、腎動脈内に挿入したカテーテル先端部から腎動脈壁への高周波電流の通電により、腎交感神経を熱焼灼する。焼灼手技が不良の場合には治療効果を得られないが、術中の手技成否の診断方法が存在しない。
【目的】焼灼直後の腎動脈の病理学的変化を明らかにするとともに、焼灼巣を画像診断法の血管内超音波（IVUS）、光干渉断層法（OFDI）で検出できるか検討した。
【方法】生体ブタ腎動脈を焼灼し、その直後の変化を病理組織学的に観察した。次の実験として 、肉眼的に焼灼巣を視認して確実に病理組織検査と画像診断法を対応させるため、切り開いた摘出ブタ腎動脈を焼灼した。このうち 3 箇所を透過型電子顕微鏡（TEM）で観察した。
【結果】生体ブタでの焼灼直後には、腎動脈外膜では膠原線維の硝子化と膨化、中膜では平滑筋細胞の萎縮と層全体の菲薄化、神経束では空胞変性と核濃縮が認められた。摘出ブタ腎動脈の焼灼巣でも、病理組織学的に生体焼灼と同様の所見が認められた。TEM 観察では、外膜膠原線維の直径が無処置部の約 2 倍に拡大した。中膜平滑筋細胞では核クロマチンの凝集、細胞質の myofilament 減少や消失が認められた。神経線維では、軸索内細胞小器官の変性・減少または消失を伴う軸索の拡張が認められた。腎動脈の形態変化は、IVUS 画像では外膜の高エコー輝度層で囲まれた領域として、OFDI 画像では腎動脈壁の管腔側表層での信号高散乱・高減衰として観察され、画像診断と病理組織標本での焼灼巣の深度・面積は有意に相関した。神経は画像診断法で同定できなかった。
【結論】熱焼灼直後の腎動脈の形態変化を IVUS、OFDI で検出できたことから、これらの画像診断法が腎除神経術の成否を診断できると考えられた。

O-10
膵がん血清診断マーカーの探索○深町 勝巳 1），二口 充 1），津田 洋幸 2），酒々井 眞澄 1）
名古屋市立大学大学院医学研究科 分子毒性学分野，2）名古屋市立大学 津田特任教授研究室1）

膵がんは極めて悪性度が高いため長期生存が得られにくい、5 年生存率は未だに 10% 以下である、難治癌である。腫瘍特異的な生物学的マーカーがないため、効率的なスクリーニング法が確立されておらず、症状が現れた時にはすでに広く進展しまでにラット膵管がんにおいて N-ERC の血清濃度が高くなっていることから、N-ERC がラット膵がんの血清診断マーカーとなることを報告した。しかし、ヒト膵がんにおいては、血清 N-ERC 濃度はほとんど上昇しなかった。本研究においては、さらに別の血清診断マーカーとなる候補をラット膵管がんモデルにおいて探索した。Cre/loxP システムを用いた活性型 KrasV12
コンディショナルトランスジェニックラットの膵管内に Cre リコンビナーゼ発現アデノウイルスを注入することにより活性型 Kras を膵臓に発現させ膵管がんを発生させた。発生した膵管がんに高発現する遺伝子群を調べることにより、膵がんの診断マーカーとなる候補を同定した。アレイ解析の結果、ラット膵がんで高発現するいくつかの膵がんの診断マーカーとなる候補を同定できた。特に、ヒト膵がんにおいても高発現する LRG の血清濃度が高くなっていた。ラット膵がんモデルを用いることにより、ヒト膵がんに応用可能な診断マーカーの候補を同定することが可能であることが示唆された。

65

一般口演

ている。従来、臨床で用いられてきた膵がんの腫瘍マーカーは、スクリーニングおよび早期診断には不適とされている。これThe 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-01
NNK 誘発マウス肺腺癌における CD44v6 の発現に関する検討○山川 けいこ 1），横平 政直 1），橋本 希 1），成澤 裕子 1），吉田 翔太 1），竿尾 光祐 1,2），今井田 克己 1）
香川大学 医学部 腫瘍病理学，2）回生病院

1）【背景・目的】ヒアルロン酸のレセプターである CD44 は Cancer stem cell のマーカーの一つでもあり、variant form である
CD44 variant6（CD44v6）は、多くのヒト腫瘍で発現が認められ、予後との相関性が報告されている。4-（methylnitrosamino）-1-（3-pyridyl）-1-butanone（NNK）を用いたマウス肺発がんモデルにおいては、早期の過形成の段階より CD44v6 の発現が認められている。今回、我々は、NNK 誘発マウス肺腺癌において組織学的特徴と CD44v6 の発現について検討した。
【材料と方法】７週令の雌性 A/J マウスに 2mg/0.1 ｍ L NNK を 0 および 7 日目に腹腔内投与を行い、78 週目に発生した肺腺
癌 19 例を対象として CD44v6 の免疫染色を行った。
【結果】全例の肺腺癌で CD44v6 の発現が認められた。腺癌結節内では、乳頭状あるいは管状構造部、また結節の辺縁部でCD44v6 の発現が強い傾向を示した。また、結節の周辺の肺胞内に CD44v6 強陽性の腺癌細胞の小集塊を認める症例もあった。多稜形細胞では CD44v6 の強発現、リン酸化 ERK1/2 および SOX9 の発現が認められた。結節辺縁ならびに周辺の正常部
では多数のマクロファージが出現していた。
【考察】今回の NNK 誘発マウス肺腺癌症例における CD44v6 の発現の不均一性は、肺発がん過程の進行期において分化や増殖の進行度の異なる様々な表現型の細胞の混在が影響しており、CD44v6 の発現が腺癌の進展や分化に影響している可能性が示唆された。

P-02 ＊
若齢 Sprague-Dawley ラットでみられた腎臓の微小変化群の 1 例○安野 恭平，本多 久美，袴田 志野婦，甲斐 清徳，森 和彦
第一三共（株）安全性研究所
微小変化群（minimal change disease）はラットで puromycin aminonucleoside の単回投与によって実験的に誘発することができるが、自然発症例の報告はほとんどない。今回、若齢の Sprague-Dawley ラットにヒトの微小変化群に類似した糸球体腎炎がみられたので報告する。9 週齢の雄の Crl:CD（SD）ラットにおいてアルブミン尿が観察され、11 週齢ではさらに増悪した。い ず れ の 週 齢に お い て も、他 の 尿 中 バ イ オ マ ー カ ー（kidney injury marker-1、osteopontin、neutrophil gelatinaseassociated lipocalin、及び clusterin）及び尿生化学的検査値に異常はみられなかった。光学顕微鏡による検査では糸球体及び尿細管に異常はみられず、蛍光抗体法を用いた検査においても Immunoglobulin（Ig）G 及び IgM の糸球体への沈着は観察されなかった。電子顕微鏡検査では糸球体足細胞の足突起が広範にわたり扁平化しており、扁平化した足突起の糸球体基底膜側ではアクチン細胞骨格の再編が観察された。免疫組織学的検査では足細胞傷害マーカーである desmin に陽性を示す足細胞は観察されなかった。また、スリット膜の代表的な構成分子である nephrin は糸球体係蹄に沿って線状に発現している像が観察され、発現の低下はみられなかった。以上の特徴はヒト微小変化群と一致していたことから、本症例はラットでみられポスター要旨た自然発症性の微小変化群の稀な 1 例と考えられた。

66

ポスター

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P-03
マウス大腸オルガノイドを用いる PhIP の発がんメカニズムの解析○今井 俊夫 1），落合 雅子 1），成瀬 美衣 1），筆宝 義隆 2）
国立がん研究センター 研究所 動物実験部門，2）千葉県がんセンター 研究所 発がん制御研究部

1）

化学物質の長期投与による発がん過程における作用メカニズムについて、包括的に解析し理解するのは容易ではない。我々は以前、マウス正常大腸組織から樹立したオルガノイド系に対し in vitro にて Kras の活性化、Apc、p53 あるいは Pten のノッ
クダウン（KD）処理し、ヌードマウスに皮下接種すると造腫瘍性を示すことを報告した。今回、同様のオルガノイド系を用いて、2-amino-1-methyl-6-phenylimidazo[4,5-b]pyridine（PhIP）の短期投与による発がん作用とその作用メカニズムの解析を試みた。
【方法】B6J 雄マウスを安楽死させ、結腸を摘出、マトリゲルと各種増殖因子を用いる 3 次元培養法によりオルガノイドを調製した。オルガノイドにレンチウイルスを用いて shLuc（対照）あるいは shPten を導入後、PhIP（15 μ M）を 3 回処置し、ヌードマウス皮下に接種した。接種 44 日後に皮下組織を摘出、病理組織学的に観察した。
【結果】オルガノイドに対する shPten 導入のみ、あるいは shLuc 導入後の PhIP 処置では造腫瘍性を示さず、shPten 導入後にPhIP 処置するとヌードマウス皮下にて腺がんが形成された。現在、オルガノイドから抽出した DNA を用いて whole exome
解析を行っている。
【考察】先行研究にて K-ras の活性化と Apc の KD の組合せでは造腫瘍性を示さず、更に p53 あるいは Pten の KD 処置を加えると造腫瘍性を示すことを明らかにしている。今回のマウス正常大腸組織由来のオルガノイドに対する Pten の KD と PhIP
処置の組合せによる造腫瘍性について、1）PhIP による K-ras や Apc など他の発がん関連遺伝子の突然変異誘発（PhIP の直接作用）と 2）Pten の発現低下に伴う PI3K-Akt 経路の活性化やゲノム不安定性誘導による PhIP の遺伝子突然変異誘発作用の増強（PhIP の作用増強）のメカニズムが考えられ、whole exome 解析の結果を考察する予定である。

P-04
植物芭蕉（Musa basjoo）葉抽出物のヒト大腸がん細胞に対する殺細胞効果○松本 晴年 1），安藤 さえこ 1），深町 勝巳 1），二口 充 1,2），吉見 直己 3），酒々井 眞澄 1）
名古屋市立大学 大学院 医学研究科 分子毒性学分野，2）長崎大学病院 病理診断科・病理部，
琉球大学大学院医学研究科 腫瘍病理学講座

1）
3）【背景】これまでに我々は沖縄県産植物のがん細胞への細胞毒性を明らかにした（Asian Pac J Cancer Prev 6: 353-358,
2005, Eur J Cancer Prev 14: 101-105, 2005, Cancer Lett 205: 133-141, 2004）。芭蕉（バショウ）の葉身からの抽出物（アセトン（A）あるいはメタノール（M）抽出）を用いてヒト大腸がん細胞株に対する細胞毒性とその機序を調べた。
【方法】各抽出物をヒト大腸がん細胞株 HT29 および HCT116 にばく露し、コロニーアッセイあるいは MTT アッセイにて細胞毒性を解析した。アセトン抽出物を用いて細胞周期への影響およびアポトーシス誘導能の有無をフローサイトメトリー
で、細胞周期調節分子発現レベルをウェスタンブロット法で検討した。ヌードマウスに HT29 を皮下移植し定着した腫瘍内にアセトン抽出物を投与して腫瘍縮小効果を検討した。
【結果と考察】コロニーアッセイでの IC 50 値は、HT29 では 121 μ g/mL（A）、149 μ g/mL（M）、HCT116 では 60 μ g/mL（A）、129 μ g/mL（M）であった。アセトン抽出物にはより強い作用を持つ有効成分が含まれると考えられた。HT29 ではア

セトン抽出物のばく露により G1 期が 5% 有意に上昇、HCT116 では G1 期が 10% 上昇し、これに伴って G2/M 期が減少した。
p27 KIP1 および p53 の発現が濃度依存的に増加した。移植モデルにおいて腫瘍内へのアセトン抽出物の投与は、体重に影響することなく腫瘍縮小傾向をきたした。画像解析において腫瘍の生存領域はアセトン抽出物投与群とコントロール群間で有意差はなかった。実験終了時には主要臓器に毒性影響は見られなかった。芭蕉葉の抽出物には殺細胞効果をもつ物質が含まれ，アセトン抽出物は細胞周期を負に制御したと考えられる。

67

ポスター要旨subG1 population は 見 ら れ な か っ た。cyclinD1 お よ び cdk4 の 発 現 が ア セ ト ン 抽 出 物 の 濃 度 依 存 的 に 減 少 し、p21CIP1、

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ポスター

P-05
Overcoming resistance to cetuximab with honokiol, a small-molecule polyphenol○飯田 麻里 1），Hannah E. Pearson1），Rachel A. Orbuch1），Nellie K. McDaniel1），Kwangok P. Nickel1），
Randall J. Kimple 1），Jack Arbiser2），Deric L. Wheeler1）
Department of Human Oncology, University of Wisconsin School of Medicine and Public Health，Department of Dermatology, Emory University School of Medicine, Winship Cancer Institute1）
2）

Overexpression and activation of the Epidermal Growth Factor Receptor（EGFR）have been linked to poor prognosis inseveral human cancers. Cetuximab is a monoclonal antibody against EGFR, that is used for the treatment in head andneck squamous cell carcinoma（HNSCC）and metastatic colorectal cancer. Unfortunately, most tumors have intrinsic or
acquire resistance to cetuximab during the course of therapy. Honokiol is a natural compound found in the bark andleaves of the Chinese Magnolia tree and is established to have several anti-cancer properties without appreciable
toxicity. In this study, we hypothesized that combining cetuximab and honokiol treatments could overcome acquired
resistance to cetuximab. We previously developed a model of acquired resistance to cetuximab in non-small cell lungcancer H226 cell line. Treatment of cetuximab resistant clones with honokiol and cetuximab resulted in a robust antiproliferative response. Immunoblot analysis revealed the HER family and their signaling pathways were downregulated
after combination treatment, most notably the proliferation（MAPK）and survival（AKT）pathways. Additionally, we
found a decrease in phosphorylation of DRP1 and reactive oxygen species after combination treatment in cetuximab
resistant clones which may signify a change in mitochondrial function. Furthermore, we utilized cetuximab resistant
HNSCC patient derived xenografts（PDX）to test the benefit of combinatorial treatment in vivo. There was significant
growth delay in PDX tumors after combination treatment with a subsequent down-regulation of active MAPK, AKT, and
DRP1 signaling as seen in vitro. Collectively these data suggest that honokiol is a promising natural compound inovercoming acquired resistance to cetuximab.

P-06
NASH の肝臓組織や肝臓癌におけるプロテオーム解析○梯 アンナ，奥野  高裕，藤岡  正喜，魏  民，鰐渕  英機
大阪市立大学・院・医・分子病理学
本研究は、肝臓における非アルコール性脂肪肝炎（NASH）を背景とした肝細胞癌の発がんメカニズムの解明を行うとともに、ヒトの NASH 肝細胞癌に特異的な発がんマーカーを同定することを目的とした。ヒト NASH 生検、肝細胞癌組織、大腸癌転移患者の正常肝臓組織、または NASH モデルマウス（STAM）を用いて QSTAR-Elite LC-MS/MS、Ingenuity Pathway 解析及び免疫 染 色 を 行 っ た。そ の 結 果 に よ り NASH 由 来 HCC や NASH 生 検 に お け る insulin シ グ ナ リ ン グ、SMAD3-TGF- β、β -catenin、Nrf2、SREBP-LXR α及び nuclear receptor-interacting protein 1（NRIP1）転写因子の活性化が認めたれた。さらに、PPARs や p53 の抑制、cytokeratin 8/18（CK8/18）の発現減少、ミトホンドリア機能不全、脂質代謝不全、alcohol 代謝不全、線維化及び酸化的ストレスの誘導が認められた。また、ヒトの NASH 肝細胞癌と異なって、STAM マウスの肝癌組織における PPARs の抑制が認めらなかったが CK8/18 の有意な過剰発現が観察された。

ポスター要旨68

ポスター

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P-07 ＊
ラット反復投与による肝臓における細胞老化関連代謝分子の発現に関する遺伝毒性及び非遺伝毒性肝発がん物質の反応性の違い○伊藤 優子 1,2），中島 康太 1,2），増渕 康則 1,2），齋藤 文代 3），赤堀 有美 3），吉田 敏則 1），渋谷 淳 1）
東京農工大 獣医病理，2）岐阜大 院 連合獣医，3）化学物質評価研究機構

1）【背景及び目的】細胞周期停止を表現型とする細胞老化は化学物質投与による不可逆的毒性と考えられる。我々は、肝発がん物質のラット投与時に、肝臓での発がん性に関連した細胞周期分子の反応性が発がん物質の遺伝毒性の有無により異なることを見出しており、本研究では、それぞれジエチルニトロソアミン（DEN）、四塩化炭素（CCl 4）を例としてラットに投与した
際の、肝臓における細胞老化関連代謝分子の発現と発がん過程への関与の相違を比較・検討した。

【材料と方法】ラットに DEN ないし CCl 4 の発がん用量を 28 日間ないし 84 日間反復経口投与し、肝臓における代謝及び細胞
老化関連分子の遺伝子発現と免疫組織学的分布を検討した。

【結果及び考察】解糖系関連遺伝子は、DEN 群では 84 日目で発現増加したが、CCl4 群では 28 日目より減少した。酸化的リン酸化関連遺伝子は、CCl4 群のみで 28 日目から発現減少した。老化関連遺伝子 Cdkn1a 及び Cdkn2a の発現は DEN 群で顕著に増加したが、CCl4 群では 28 日目のみで Cdkn2a が増加し 84 日目では逆に低下した。84 日目の免疫組織学的解析により、DEN 群のみで GST-P + 巣に一致して、グルコーストランスポーター GLUT1 の発現が増加しており、解糖系の亢進が示唆された。一方、ミトコンドリア ATP 合成酵素である ATPB の発現は両群で減少し、酸化的リン酸化の抑制が示唆された。細胞老化マーカー p21 WAF1/CIP1+ の発現は、CCl4 群では GST-P + 巣に一致して陽性を示したが、DEN 群では GST-P + 巣を含めた肝臓全域で陽性を示した。以上より、遺伝毒性発がん物質では細胞老化が亢進しながら発がんのスイッチが入り、前がん病変内では悪性腫瘍でみられる代謝シフトが生じるのに対して、非遺伝毒性発がん物質では投与期間の延長に伴う細胞老化の破綻と、前がん病変での解糖系の不応答が示唆された。

P-08
早期ラット肝発がんに対する黄き注射液の影響○金 美蘭，唐 倩，張 梅，方 仁東，王 剣，王 自力
西南大学 動物科術学院 獣医病理研究室【背景】黄き注射液（ASI）は黄きから抽出した主要成分で作られた薬物であり、活性酸素種（ROS）などを駆逐する抗酸化作用
や抗腫瘍作用を有することが知られている。
【目的】本実験ではラット早期肝発がんに対するに黄き注射液の抑制作用について検討し、その作用機序を解明することを目的とした。
【方法】6 週齢の雄 SD ラット 40 匹を 4 群（1 群：DEN 単独群、2 群：DEN+PBO 群、3 群：DEN+PBO+ASI １群、4 群：DEN+PBO+ASI２群）に分け、全群に 200mg/kg DEN でイニシエーション処置を行い、実験開始 2 週後より第 2 ～ 4 群には 0.5％ PBO を 9 週
間混餌投与した。第 3 群には DEN を投与した直後から 2 週間 0.5ml/kg ASI を毎日一回腹腔内投与した。第 4 群には PBO を投与するとともに 0.5ml/kg ASI を 9 週間腹腔内投与した。実験開始 3 週後に全群に対して 2/3 肝部分切除を行った。投与終了
後に動物を屠殺し、体重や肝重量測定すると共に、HE 染色、Ki67 や GST-P 免疫染色、遺伝子発現解析を行った。
【結果】その結果、プロモーション期に ASI を処理した群の最終体重と絶対肝重量は DEN ＋ PBO 群に比べ有意に減少した。さ
群 の Ki67 陽 性 細 胞 率 は DEN ＋ PBO 群 に 比 べ 有 意 に 減 少 し た。遺 伝 子 発 現 解 析 に お い で は、ASI 投 与 群 の CYP1A1 がDEN+PBO 群に比べ有意に増加したが、ASI ２群の p53,Bax,Bcl-2,caspase3 も DEN ＋ PBO 群に比べ増加傾向を示した。特に、
Bcl-2 においては統計学的有意な差も見られた。
【結論】これらの結果から、黄き注射液はラット早期肝発がんに対して抑制作用を有し、その抑制機序には細胞増殖抑制やアポトーシス促進などが含まれている可能性が示唆された。また、これらの作用はプロモーションン期にもっと強いことが示
唆された。

69

ポスター要旨らに、GST-P 陽性細胞巣の数、面積においても統計学的な有意な差はないものの明らかな減少傾向を示した。また、ASI 処理

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ポスター

P-09 ＊
Luteolin の膵癌化学予防効果の検討○加藤 寛之，内木 綾，鈴木 周五，高橋 智
名古屋市立大学大学院医学研究科実験病態病理学【背景】膵癌は治療抵抗性で予後は極めて不良であり、その予防法の検討は重要な課題である。フラボノイドの一種である
Luteolin（Lut）は種々の癌種において腫瘍抑制効果が報告されているが、膵発癌に対する in vivo での報告はない。そのため
本研究ではハムスターを用いた膵発癌モデルを用い、膵癌化学予防効果とそのメカニズムについて検討した。
【方法】6 週齢 Syrian Golden Hamster に 4 回の N-nitrosobis（2-oxopropyl）amine（BOP）10mg/kg 皮下投与を行った後、Lut（100ppm）群（n=13）と対照群（n=14）に分け、高脂肪食と共に 13 週間混餌投与を行い、膵腫瘍性病変を解析した。その後ヒト膵癌細胞株を用いて Lut 投与による細胞増殖抑制とそのパスウェイについて解析し、ハムスター組織で再検討した。
【結果】最終体重、臓器重量において群間差は見られなかった。血液生化学検査では総コレステロールが Lut 投与によって有意に減少した。さらに、Lu 投与により腫瘍の発生率、発生数は減少し、異形成病変における Ki-67 labeling index も有意に低下した。In vitro では Lut 投与による膵癌細胞株（MiaPaCa, PANC1, HPD1NR）での濃度依存性の抑制を認めた。半網羅的リ
ン酸化タンパク解析を行った結果 Lut 処置によりリン酸化 Stat3（Tyr705）が低下し、下流にある cyclin D1 発現も低下していることが明らかとなった。ハムスターの異形成病変、癌いずれにおいても Lut 投与によりリン酸化 Stat3 の陽性率が低下していることを免疫組織学的に確認した。さらにハムスター膵組織において種々のサイトカインの有意な低下が見られた。
【結論】BOP ハムスター膵発がんモデルにおいて Lut において膵癌の発生が有意に低下し、リン酸化 Stat3 経路が関与していることが示唆された。Lut の膵癌化学予防剤としての可能性が示唆された。

P-10
ラットにおけるコリン欠乏メチオニン低減アミノ酸食による非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）様病態に対してトランス脂肪酸が及ぼす系統差の影響○宇野 絹子，美谷島 克宏，張 舜恵，煙山 紀子，小川 秀治，渡邊 厚，中江 大
東京農業大学大学院 農学研究科【目的】コリン欠乏メチオニン低減アミノ酸（CDAA）食により誘導する NASH 様の病態に対するトランス脂肪酸の影響を
Hsd:Sprague Dawley 系（HSD）ラット及び Fischer344 系（F344）ラットを用いて検討した。
【方法】6 週齢の雄 Hsd ラットならびに雄 F344 ラットに、トランス脂肪酸を含まない CDAA 食（CDAA-T（-））、トランス脂肪酸を含む CDAA 食（CDAA-T（+））（いずれも RESEARCH DIETS 社）を 13 週間給餌した（各群 6 匹）。両系統共に対照群には
CDAA 食と同様に基礎食（CLEA Rodent Diet CE-2、日本クレア（株））を給餌した。飼育期間中、一般状態観察ならびに体重・
摂餌量の測定を行った。解剖時には、麻酔下で腹大動脈より採血した後に放血殺し、速やかに肝臓を採取し重量を測定した
後、一部は凍結保存、残りは 4% パラフォルムアルデヒド液にて固定した。血漿サンプルを用いた生化学的検査、肝臓の病理
組織学的検査及び肝臓中の遺伝子発現解析を実施した。
【結果】両系統のラットにおいて、CDAA 食群は対照群と比較して、肝相対重量の有意な増加、病理組織学的に肝細胞の脂肪ポスター要旨化や線維化が認められた。F344 ラットでは Hsd ラットと比較し、顕著な血漿中 AST 及び ALT 活性の上昇、炎症および線維化に関連する遺伝子発現の有意な増加が認められた。
【考察】以上の結果より、トランス脂肪酸の有無は CDAA 食により誘発される NASH 様の病態に明らかな差は示さなかった。
CDAA 食で誘発される NASH 様病態は、Hsd ラットと比較し F344 ラットにおいて、一部の検索項目で顕著な影響を示すことが明らかとなった

70

ポスター

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-11
老齢マウスにおける飢餓誘導性肝オートファジー○飯塚 生一 1），名畑 美和 1），関根 瞳 1），藤塚 直樹 1），武田 宏司 2,3）（株）ツムラ ツムラ漢方研究所，2）北海道大学大学院 薬学研究院 臨床病態解析学，3）北海道大学病院 消化器内科

1）【背景および目的】オートファジーは、異常蛋白の蓄積や損傷した細胞内小器官を排除・再構築し、細胞や臓器の機能を維持する役割を果たす一方、栄養状態が悪化した際の適応反応としてエネルギーを供給する作用をもつ。本研究は、老齢マウスにおける飢餓誘発による肝オートファジー機能の変化について検討した。
【材料と方法】C57BL/6J 雄マウス（Young:8 週齢、Aged：23 ヶ月齢）に通常摂餌量の 30％を与え、12 日間飼育した。オート
ファジー活性は LC3 蛋白を定量し、肝細胞内の autolysosome を電子顕微鏡で観察した。ユビキチン・プロテアゾーム機能は足底筋における Atrogin-1 および MuRF-1 の mRNA を測定した。
【結果】30% 制限食により、Young マウスでは死亡は見られなかったが、Aged マウスでは 12 日目で生存率が 20％に低下した。肝 LC3-II/I 蛋白比は Young マウスでは 5 日目を中心に増加したが、Aged マウスでは変化が見られなかった。Aged マウスの肝細胞内 autolysosome 数は制限食 5 日目で Young マウスと比較して低値を示した。足底筋の Atrogin-1 および MuRF-1 のmRNA は Young マウスよりも aged マウスで有意に低下した。
【結論】栄養制限による Aged マウスの生存率の低下は、筋蛋白からのエネルギー供給と肝オートファジー機能低下が関与していると推測された。肝オートファジー機能の活性化は、低栄養高齢者の脆弱性を回避するターゲットになる可能性が示唆された。

P-12 ＊
カドミウムを用いた時間毒性学の検討～組織学的検討を中心とした感受性時刻差の解析～○吉岡 弘毅 1,2），野々垣 常正 1），市丸 嘉 1），大谷 勝己 3），酒々井 眞澄 2），三浦 伸彦 3）
金城学院大学 薬学部 薬学科，2）名古屋市立大学 医学部 分子毒性学分野，3）労働安全衛生総合研究所

1）【目的】我々は生体リズムを考慮した毒性学を「時間毒性学」として展開しており、これまでにカドミウム（Cd）を中心に様々な物質を用いて検討を行っている。その結果、投与時刻により、毒性感受性が個々で異なることを報告してきた。本発表では、我々が最も研究を進めている Cd に関して、組織学的検討を中心にその差を見出したので報告する。
【方法】実験には、7 週齢の C57BL/6J 系雄性マウスを用いた。CdCl2 を 4.5 mg/kg の用量で 14 時または 2 時に単回腹腔内投与した。投与 24 時間後に解剖を行い、血液を採取し、血漿中の ALT、AST を測定した。また、肝臓組織の H&E 染色、TUNEL 染
色および脂質過酸化を観察・測定することで肝傷害を評価した。

【結果】4 時に Cd を投与したマウスは、重篤な肝障害（ALT、AST の上昇）が認められたが、2 時投与群ではほとんど毒性は観察されなかった。この時、14 時投与群の肝臓では広範囲にわたる壊死、出血、脂肪変性等が観察されたが、2 時投与群の肝臓ではそれらの傷害は認められず、対照群と同様の病理像であった。アポトーシスの指標として、TUNEL 染色を行ったが、TUNEL 陽性細胞は Cd 投与により両投与時刻ともにほとんど観察されなかった。その一方で、necroptosis の指標として知らよって顕著に異なっていたことから、Cd による感受性時刻差は necroptosis レベルでも観察されるものと考えられる。今後
はアポトーシス優位な低用量の Cd 投与による感受性時刻差についても検討を加えていくことで、曝露時刻を考慮した防御対策強化への基盤的情報となり得ることが期待される。

71

ポスター要旨れている receptor interacting protein（RIP）は、2 時投与群に比べて 14 時投与群で顕著に上昇した。
【考察】Cd は高用量投与では necrosis を引き起こす。今回用いた投与量は necrosis 優位の量であり、RIP の上昇は投与時刻にThe 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-13
クロム・銅・ヒ素化合物系木材防腐剤（CCA）による肝毒性の発現機序解析○高橋 尚史 1），山口 悟 1），大塚 亮一 1），武田 眞記夫 1），加藤 由隆 1），伊藤 強 1），小山 彩 1），志賀 敦史 1），
岡崎 欣正 1），吉田 敏則 2），原田 孝則 1）（一財）残留農薬研究所，2）東京農工大学 獣医病理学研究室

1）【背景と目的】クロム・銅・ヒ素化合物系木材防腐剤（CCA）は，日本では 50 年ほど前から使用されており，東日本大震災では，住宅土台に使用された CCA 処理木材が災害廃棄物として大量に発生するなど，現在その廃材の排出およびそれに伴うヒトへの曝露が問題となっている。過去に我々は Wistar Hannover ラットに 4 週間にわたり CCA を 0，8，40 および 80 mg/
kg/day の用量で強制経口投与し，雌の肝臓に血液生化学的な肝毒性パラメーターの変動と 8-OHdG の増加を伴うび漫性肝細胞肥大がみられることを報告した。今回肝毒性発現機序の解明を目的として，分子病理学的解析を実施した。
【材料と方法】過去に行なった CCA ラット 4 週試験の雌の肝臓試料を使用し，細胞増殖活性，アポトーシスおよびグルタチオ
ン化タンパクについて免疫組織化学的に評価した。遺伝子発現解析にはマイクロアレイおよび定量 RT-PCR を用いた。転写
関連領域の DNA メチル化をメチル化 DNA 免疫沈降と定量 PCR を用いて解析した。
【結果】CCA 投与により肝臓では細胞増殖活性の増加傾向がみられた。遺伝子発現解析では主にグルタチオン S- トランス
フェラーゼ，抗酸化，熱ショックタンパク，ユビキチン・プロテアソーム系，細胞増殖，DNA メチル化および P450 に関連する遺伝子の変動が認められた。このうち抗酸化に関わるメタロチオネインの発現は抑制されたが，DNA メチル化の関与はなかった。還元型グルタチオン（GSH）/ 酸化型グルタチオン比の減少に伴い増加するグルタチオン化タンパクは CCA 投与により増加した。
【結論】CCA 投与では解毒および活性酸素の消去のため GSH が消費され，さらにメタロチオネインの発現抑制によりレドックス制御の破断がおこり，肝毒性を誘発する可能性が示唆された。

P-14 ＊
Time dependent cytoprotective phenomenon of lipopolysaccharide in TAA-induced
acute liver injury in rats
○ Karim Mohammad Rabiul，Pervin Munmun，倉持 瑞樹，井澤 武史，桑村 充，山手 丈至
大阪府立大 獣医病理
[Background and Aims] Lipopolysaccharide（LPS）acts as an important cofactor in the pathogenesis of hepatotoxicity.
Here, the time-dependent role of LPS-stimulated autophagy and macrophages in thioacetamide（TAA）-induced acute
rat liver injury were investigated.
[M&M] F344 rats were pretreated with LPS（0.1 mg/kg BW, i.p.）at 2, 6, 12h and 24h before TAA injection（100 mg/
kg BW, i.p.）. Serum and liver were collected one day after TAA injection.
[Results] TAA injection produced centrilobular hepatocyte necrosis in liver, which was markedly reduced in LPSpretreated rats at 12h or 24h as compared with those of without pretreated alone TAA-injected rats. Consistently, AST,
ALT and ALP values tended to be decreased in LPS-pretreated rats at 12h or 24h. At each time point, LC3B（autophagy
marker）expression was increased in liver of TAA-injected rats, however LC3B-labeled cytoplasmic granules inポスター要旨hepatocytes were significantly increased in LPS-pretreated rats. At each time point, additionally, CD163 + and CD68 +macrophages were significantly increased in TAA-injected rats, however, CD68+ exudative macrophages weresignificantly increased or tended to be increased in LPS-pretreated rats particularly at 12h or 24h.
[Conclusions] LPS pretreatment at 12 h or 24 h showed the highest cytoprotection in TAA-induced acute liver injury,
which might be related to the LPS-activated hepatic macrophages and LPS-induced hepatocyte autophagy.

72

ポスター

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-15
シスプラチンの腎毒性に対するエダラボンの効果○小池 夏未，佐々木 彩花，矢守 凜，村上 智亮，鈴木 和彦
東京農工大学 農学部 共同獣医学科【背景と目的】シスプラチン（CIS）は、有用な抗がん剤である一方、腎臓をはじめとする多臓器への毒性が報告されている。腎毒性としては、尿細管壊死とそれに続く腎間質線維化がみられ、その病態形成の一端に酸化ストレスの関与が示唆されている。本研究では、合成フリーラジカル・スカベンジャーであるエダラボン（Eda）による腎尿細管間質病変に対する抑制効果を検討した。
【材料と方法】6 週齢の雄性 Wister ラット（n=25）を各群 5 匹として、陰性対照群、CIS 投与群、CIS 投与＋低用量 Eda 投与群、CIS 投与＋中用量 Eda 投与群、CIS 投与＋高用量 Eda 投与群の 5 群に分けた。CIS は 6 mg/kg で単回腹腔内投与を行い、Eda は1、10、100 mg/kg で CIS 投与の 5 日前より隔日に腹腔内投与した。CIS 投与から 28 日後に血液と腎臓を採材し、組織学的・
免疫組織化学的検索および PCR 解析を行った。
【結果】CIS 投与により認められた血液尿素窒素（BUN）およびクレアチニン（Cr）レベルの上昇は、Eda の併用によって抑制された。腎臓の組織学的検索では、CIS 投与で認められた皮髄境界領域を中心とした尿細管の拡張、尿細管上皮の脱落、間質線
維の蓄積増加が、高用量 Eda 併用群でのみ有意に軽減された。CD68 陽性マクロファージと CD3 陽性リンパ球の浸潤は CIS 投
与により有意に増加し、Eda の併用により浸潤に抑制が認められた。α -SMA 陽性筋線維芽細胞数も CIS で増加したが、Eda併用により用量反応性に抑制傾向がみられた。各種抗酸化関連因子の mRNA 発現については現在検索中である。
【結論】本研究により、Eda の CIS 腎毒性 に対する抑制効果が認められ、その機序の一端として抗酸化作用の関与が示唆された。

P-16 ＊
フマル酸ジメチルの腎間質線維化抑制効果の検討○佐々木 彩花，小池 夏未，矢守 凜，村上 智亮，鈴木 和彦
東京農工大学 農学部 共同獣医学科【背景と目的】腎間質線維化は各種腎疾患に付随して認められ、腎機能の低下と相関がある病態である。しかし、線維化は基
本的には組織修復の過剰反応であり、間質への過剰な細胞外基質の沈着を抑制することが治療法として求められている。フ
マル酸ジメチル（DMF）は Nrf2 転写経路活性化による酸化ストレス軽減を機序とする多発性硬化症治療薬で、抗酸化による
各種病態軽減作用が期待される化合物である。本研究ではシスプラチン（CIS）による腎障害モデルを用いて、DMF による腎間質線維化の発現・進展に対する影響を検討した。
【材料と方法】6 週齢の雄性 Wister ラットを陰性対照群、CIS 投与群、CIS 投与 + 低用量 DMF 投与群、CIS 投与 + 中用量 DMF 投
与 群、CIS 投 与 + 高 用 量 DMF 投 与 群 の 5 群 に 分 け た。CIS は 6 mg/kg で 単 回 腹 腔 内 投 与 し た。DMF は 300、1500 ま た は7500ppm で CIS 投与の 7 日前より混餌投与した。CIS 投与 28 日後に剖検を実施して血液と腎臓を採材し、各種検索に供した。
【結果と考察】CIS 投与群で認められた BUN 及び Cre 値の上昇は、DMF 投与により抑制された。組織学的に CIS 投与群においCD3 陽性リンパ球の浸潤も、DMF 投与により用量反応性に抑制効果が認められた。α平滑筋アクチン陽性細胞は、高用量DMF 投与群のみ増加抑制効果が認められた。各種抗酸化因子の mRNA 発現については現在検索中であるが、血液生化学と組織レベルでは DMF による腎線維化抑制効果が認められ、その機序の一端として抗酸化作用の関与が示唆された。

73

ポスター要旨て認められた尿細管傷害及び間質線維の蓄積増加も、DMF 投与により抑制された。さらに、CD68 陽性マクロファージ及び

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ポスター

P-17 ＊
HNF4 α発現低下に伴う尿細管上皮細胞の形質変化○矢守 凜，小池 夏未，佐々木 彩花，村上 智亮，古谷 哲也，鈴木 和彦
東京農工大学 農学部 共同獣医学科【背景と目的】肝細胞核因子 4 α（HNF4 α）は核内転写因子の一種で、腎臓では発生・成熟段階での複数のトランスポーター
発現制御への関与と成熟後の近位尿細管上皮細胞での恒常的な発現が報告されている。これまでの研究で、アデニン投与マ
ウスでは傷害後の再生尿細管上皮細胞で近位尿細管での HNF4 α発現が消失することを確認した。本研究では、腎臓における HNF4 αの役割を明らかにするために腎臓細胞由来株での HNF4 αの発現低下による変化およびシスプラチンに対する反応性の変化について検討した。
【方法】ラット HNF4 αの shRNA プラスミドベクターをラット腎臓細胞由来株（NRK-52E）に導入し、細胞形態ならびに各種
トランスポーターなどの遺伝子発現の変動について導入株と非導入株で比較した。さらに、腎毒性物質としてシスプラチンを培養液へ添加した際の薬剤感受性の差異についても検討を行った。
【結果】HNF4 αの shRNA を導入した株では、取り込みトランスポーター（Oat1、Oat3、Oct2、Oct3）などの mRNA レベルの発現が低下し、Snail mRNA の発現は増加した。またシスプラチンへの曝露では、導入株と非導入株で細胞の生存率に差がみられた。
【考察】シスプラチン曝露後の再生尿細管上皮細胞において取り込みトランスポーターの発現の低下がみられるという報告もあるため、shHNF4 αを導入した株で発現が低下したトランスポーターの多くはシスプラチン取り込みに関与するもの
で、シスプラチン暴露に対して非導入株よりも細胞生存率が高かったことは、HNF4 αは尿細管上皮細胞において薬物トランスポーター発現を調節しており、その発現低下は薬物によるさらなる傷害から腎臓を保護していることを示唆している。

P-18
低酸素応答のハイスループットスクリーニング：プロモーター機能解析○米沢 理人 1），フォースアルドレッド シェリー 1），トリンクライン ネイサン 1），シア メンハン 2），
フアン ルイリ 2），ハドソン ジム 3），サムエルソン ジョハナ 1）
アクティブ・モティフ，2）NIH ケミカルジェノミクスセンター，3）ハドソンアルファ細胞工学研究所

1）

低酸素シグナル伝達系は化学療法抵抗性を含む広範囲の生物学的プロセスに関わっている。化学療法薬や毒物と組み合わせたハイスループットな遺伝子発現制御研究を簡便に行えるよう、我々は 18,000 を超えるヒト遺伝子の内在性プロモーター
お よ び 合 成 応 答 エ レ メ ン ト を ル シ フ ェ ラ ー ゼ ア ッ セ イ 系 に 組 み 込 ん だ ゲ ノ ム ワ イ ド ラ イ ブ ラ リ ー を 構 築 し た。こ の“LightSwitchTM Assay System” は高度に最適化された新規ルシフェラーゼ遺伝子（RenSP）とそれに合わせたアッセイ用試薬を含み、高感度と広いダイナミックレンジを実現している。我々は多種類の LightSwitch TM プロモーターベクターを利用し、様々な細胞外刺激に対する応答を検証した。400 を超える低酸素応答関連プロモーターベクターを利用した解析により、細胞種ごとに、低酸素に対し異なる応答を示すことが明らかになった。更に、1,400 種類の化合物の毒性スクリーニングにおいて、HIF-1 α依存的誘導因子を含む低酸素応答経路活性化に寄与する化合物を複数同定した。以上より、我々の構築したLightSwitch TM Assay System は毒性応答やその他の細胞経路における遺伝子制御機構を解析する上で非常に役立つと期待される。

ポスター要旨74

ポスター

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P-19 ＊
免疫器官の発達に影響をおよぼす因子○等々力 舞，瀬沼 美香，熊谷 文明，斉藤 義明，桑形 麻樹子（一財）食品薬品安全センター秦野研究所【 背 景 お よ び 目 的 】胎 生 期 か ら 乳 幼 児 期 に い た る 栄 養 環 境 が 成 人 期 の 生 活 習 慣 病 リ ス ク に 影 響 を 及 ぼ す と さ れ る 概 念（DOHaD）が提唱されており、動物モデルを用いて検証が多くなされている。DOHaD 概念では、乳児期の栄養環境が変化し体重の急激な増加（catch up growth）が原因の一つとされている。我々もこれまでに動物実験にて母動物を分娩後 7 日間 50%
給餌制限（FR）し、その児が catch up growth する実験を行ってきた。その結果、FR 群では免疫器官の発達に影響があること、また対照群、FR 群ともに群内で組織所見の結果に個体差があることを明らかにした。今回はこの個体差がどのような因子と関連しているのかを catch up growth を中心に調べ考察した。
【材料と方法】C57BL/6J 母マウスに FR した群と固形飼料（CE-2）を自由摂食させた対照群を設けた。生後 7 日（PD7）、21 日（PD21）の児を解剖し、器官重量を測定し病理組織学検査を行った。児の体重は PD1、PD7、PD14 および PD21 に測定し、PD7 から PD14 の体重増加幅を算出した。
【結果】PD21 の対照群では胸腺の大型のリンパ球の減少および脾臓の PALS 領域（CD3 陽性細胞）の増加のほか、脾臓辺縁帯への樹状細胞（Iba-1 陽性細胞）の集簇が認められた。これらの変化は、体重増加量の少ない例で強い傾向がみられた。FR 群では同様の組織変化を示したが、対照群と比較すると変化の程度は弱く、Catch up growth が強い例でより顕著であった。一方、これらの変化は哺育児数および哺育児体重に相関は認められなかった。
【まとめ】哺育期間中のある時期の体重増加量の程度が免疫器官の発達に影響を及ぼすことが明らかになった。

P-20 ＊
Inhalation single toxicity studies of 1-methylnaphthalene in rats and mice:
Histopathological Aspect○ Lee Mi Ju
Inhalation Toxicity Research Center, Occupational Safety and Health Research Institute[Background] 1-Methylnaphthalene is a polycyclic aromatic hydrocarbon and naphthalene-related compound calledalpha methylnaphthalene. It is used to produce dyes and resins and present in cigarette smoke, wood smoke, tar, andasphalt. Reliable inhalation toxicity information of 1-methylnaphthalene has not been reported to date although its
primary contact route is the respiratory tract.
[Aim] Therefore, the present study was conducted to screening the toxicity of 1-methylnaphthalene via single
inhalation exposure in rats and mice.
[Materials and Methods] Twelve male and 12 female rats and mice were gradationally exposed to 1-Methylnaphthalene
aerosol at 0.05, 0.5, 1 and 5 mg/ and 5 and 1 mg/L 1-methylnaphthalene for 4 hours, respectively. Exposed animals
were necropsied for 14 days observation period. Histopathological examination was performed in animals exposed at 5
[Results] Two male and a female rats exposed to 5 mg/L 1-methylnaphthalene found dead or moribund during theobservation period. Enlargement of the lung was noted in all male rats exposed 5 mg/L. Gray focus in the lung wasnoted in a female mouse exposed to 5 mg/L. Histopathologically, bronchiolar lesions including epithelial hyperplasia,
inflammation and erosion/ulcer in the lung were noted in rats and mice exposed to 5 mg/L.
[Conclusion] This result may be helpful to prepare toxic profiles for 1-methylnaphthalene.

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ポスター要旨mg/L 1-methylnaphthalene.

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ポスター

P-21
アクリル酸メチルの 13 週間吸入暴露によるラット呼吸器病変○高信 健司，妹尾 英樹，梅田 ゆみ，相磯 成敏，菅野 純（独）労働者健康安全機構 日本バイオアッセイ研究センター【背景】アクリル酸メチル（Methyl acrylate：MA）はアクリル樹脂の原料、繊維や粘・接着剤、塗料として使用されている。
今回、がん原性試験の濃度設定試験として実施した、ラットを用いた 13 週間の全身吸入暴露試験でみられた、MA による呼吸器病変を報告する。
【材料・方法】雌雄各 10 匹／群（6 週齢）の F344 ラットに、MA を 0、12.5、25、50、100 および 200 ppm の濃度で、6 時間 /日、5 日 / 週の 13 週間全身吸入暴露を行い、OECD テストガイドライン（TG413）に従い、全身臓器の病理組織学的検査を実施した。
【結果・まとめ】MA 暴露の影響は、雌雄とも気道系（鼻腔、喉頭、及び気管）に限局してみられた。鼻腔では、呼吸部に、杯細胞の過形成、呼吸上皮や粘膜固有層への炎症性細胞浸潤、呼吸上皮の再生、扁平上皮化生、過形成および鼻腺の呼吸上皮化生等の病変がみられた。嗅部に、嗅上皮の萎縮、壊死／剥離、潰瘍、嗅上皮や粘膜固有層への炎症性細胞浸潤、嗅上皮の再生や呼吸上皮化生、嗅腺の呼吸上皮化生、篩骨甲介の癒着がみられた。喉頭に、炎症性細胞浸潤と上皮の再生、気管に、上皮の萎縮と再生がみられたが、肺には毒性所見は認められなかった。これら病変の強度は軽度から中程度であった。この試験を基に、用量設定を行い実施された MA の全身吸入暴露による 104 週間がん原性試験では、雌雄に鼻腔の扁平上皮がんの発生あるいは発生増加がみられた。これらは、本試験で認められた呼吸上皮の化生や過形成等の病変が前腫瘍性病変となり、そこから発がんに至ったものと考察される。
（本試験は厚生労働省の運営交付金事業として実施した GLP 試験である）

P-22
アクリル酸メチルの 104 週間吸入暴露によるラットの鼻腔発がんと呼吸器病変○妹尾 英樹，高信 健司，梅田 ゆみ，相磯 成敏，菅野 純（独）労働者健康安全機構 日本バイオアッセイ研究センター【背景】アクリル酸メチル（CAS No. 96-33-3）は、刺激臭のある無色透明の液体であり、アクリル繊維、成形樹脂、接着剤、塗料等に広く用いられている。今回、アクリル酸メチルのラットに対する長期吸入試験で認められた鼻腔腫瘍について報告する。
【材料・方法】試験は、雌雄各 50 匹／群の F344 ラット（6 週齢）を用い、雌雄ともに 0（対照群）、10、40 および 160 ppm の濃度のアクリル酸メチルを、1 日 6 時間、週 5 日間の頻度で、104 週間全身吸入暴露を行った。
【結果】腫瘍性病変は、鼻腔の扁平上皮癌が、雄の 40 ppm 以上の群と雌の 160 ppm 群に認められ、雄の 160 ppm 群に有意な増加がみられた。また、非腫瘍性病変として、雌雄ともに鼻腔の呼吸上皮の扁平上皮化生、炎症および杯細胞過形成、嗅上皮の基底細胞過形成、呼吸上皮化生、上皮の萎縮、炎症、再生および扁平上皮化生、固有層の腺の変性と呼吸上皮化生、その他、
炎症性ポリープ、甲介の癒着および鉱質沈着を認めた。鼻咽頭では、杯細胞過形成が雄のみにみられ、喉頭では、扁平上皮化
生が雌雄に、扁平上皮過形成が雄にみられた。気管には雌雄に上皮の萎縮がみられた。

ポスター要旨【結論】ラットに対するアクリル酸メチルの長期吸入暴露により、鼻腔の扁平上皮癌が雌雄ともに認められた。当センターでは過去に鼻腔の扁平上皮癌が雌雄ともに自然発生した経験がないこと、また、前腫瘍性病変と考えられる変化が雌雄とも増加していることから、雌雄にみられた鼻腔の扁平上皮癌は、アクリル酸メチル暴露により発生したと考えた。
（本試験は厚生労働省の運営交付金事業として実施した GLP 試験である）

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ポスター

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P-23 ＊
微小管重合阻害薬 combretastatin A4 disodium phosphate の単回投与によりラットに誘発される心筋障害○栃内 亮太 1），小松 加代子 1），村上 純太 1），永田 百合子 1），安藤 稔 1），畑 千恵 1），鈴木 倫 1），角 将一 1），
小林 稔秀 1），桑原 正貴 2）（株）ヤクルト本社 中央研究所，2）東京大学大学院 農学生命科学研究科 獣医衛生学研究室

1）【背景】微小管重合阻害薬は腫瘍血管破綻薬としての応用が期待されているが、徐脈、頻脈、心機能低下、心筋虚血等の心毒性の克服が課題の一つである。今回、微小管重合阻害薬である combretastatin A4 disodium phosphate（CA4DP）をラットに単回投与して誘発される心毒性所見を解析し、ヒトに対する微小管重合阻害薬の安全性試験における心毒性モデルとしての有用性を考察した。
【方法】  i）SD ラットに CA4DP 120 mg/kg を単回、尾静脈内投与し、投与後 0.5、24 あるいは 72 h に心臓の病理組織学的検査および血液バイオマーカー検査（LDH、LDH 1、CK、CK-MB、cTnT、cTnI、FABP3、Myl3、NT-proBNP、BNP）を行った。ii）i）と同様に CA4DP を単回投与し、投与前、投与後 0.5、24 および 72 h に経時的に心電図検査および心エコー検査を実施した。
【結果】  i）投与後 0.5 h に CK、CK-MB および FABP3 の高値が、24 h に LDH 1、CK、CK-MB の高値および心尖部内層の心筋細胞における多巣性の空胞変性および毛細血管内皮細胞の核濃縮・断片化が、72 h に LDH 1 の高値および心尖部内層における多巣性の心筋壊死および炎症性細胞浸潤、毛細血管内皮細胞の核濃縮・断片化および水腫が認められた。ii）投与後 0.5
h に心拍数、左室駆出分画および心拍出量の低下が、24 h に心拍出量の低下が、72 h に心拍数、左室駆出分画および心拍出量の低下ならびに T 波の電位に低下が認められた。
【考察】ラットへの CA4DP 単回投与により心筋傷害、徐脈および心筋収縮機能の低下が誘発された。病変の分布や心電図変化から、心筋傷害は冠血流量および微小循環の低下に起因した虚血性変化であると推察された。これらの変化はヒトで既報の変化と共通であり、今回の試験系はヒトに対する微小管重合阻害薬の心毒性研究に有用であると考えられた。

P-24 ＊
αリノレン酸 - ジアシルグリセロール油の発がんプロモーション作用に関する検討○本田 大士 1），川本 泰輔 1），土井 悠子 2），森 卓也 1），松村 奨士 1），今井 則夫 2），米良 幸典 2），伊藤 勇一 1），
森田 修 1）
花王株式会社，2）株式会社 DIMS 医科学研究所

1）【背景】αリノレン酸（ALA）- ジアシルグリセロール（DAG）油は、DAG と ALA に富む食用油であり、食品の脂肪の代謝を高める作用を有することが報告されている。細胞内に元々存在する短鎖 1,2-DAG が発がん過程に関わる Protein kinase C（PKC）
を活性化することから、オレイン酸とリノール酸を主に含有する DAG 油については発がんプロモーション作用に関する様々な検討が実施されてきたが、通常の摂取において発がんプロモーション作用は認められないと考えられている。一方で、ALA-DAG 油の発がんプロモーション作用については検討されていない。
【目的】ラットを用いて ALA-DAG 油の発がんプロモーション作用を検索する。
【材料と方法】ラット中期多臓器発がんモデルにおいては、遺伝毒性物質によるイニシエーションの後、ALA-DAG 油を含む飼料（0, 13,750, 27,500, 55,000 ppm）をラットに 24 週間混餌投与し、ALA-DAG 油の舌および消化管に対する発がんプロ
モーション作用を評価した。また、舌および消化管における PKC 活性を ALA-DAG 油を含む飼料（0, 7.5, 30%）を 28 日間混餌投与したラットにおいて測定した。
油を混餌投与した動物において PKC 活性の有意な増加は確認されなかった。
【結論】ALA-DAG 油は DAG 油同様に発がんプロモーション作用を有しないと考えられる。

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ポスター要旨【結果】前がん性および腫瘍性の病変の有意な増加は、ラット中期多臓器発がんモデルにおいて認められなかった。ALA-DAG

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ポスター

P-25
有機ゲルマニウム poly-trans -〔（2-carboxyethyl）germasesquioxane〕（Ge-132）の
rasH2 マウスを用いた 26 週間短期発がん性試験○土井 悠子 1），今井 則夫 1），勝呂 繭子 1），河部 真弓 1），佐藤 功 2）（株）DIMS 医科学研究所，2）（株）浅井ゲルマニウム研究所

1）【目的】有機ゲルマニウム poly-trans-〔（2-carboxyethyl）germasesquioxane〕（Ge-132）は食品の原材料として使用されており、多様な生理作用が報告されている。急性、亜急性、慢性、催奇形性、変異原性試験等によりその安全性が確認されているが、発がん性については十分な情報が得られていない。そこで発がん性評価を目的として、CB6F1-Tg rasH2（rasH2）マウスを用いた 26 週間短期発がん性試験を実施した。
【材料と方法】7 ～ 8 週齢の rasH2 マウス雌雄各群 20 匹に 0、0.3、0.8 及び 2.5% の濃度で 26 週間、混餌投与した。投与量は本試験に先立って実施された用量設定試験をもとに決定した。陽性対照として雌雄各 10 匹に MNU を 75 mg/kg の用量で単回腹腔内投与した。26 週間経過後に剖検し、各器官・組織を病理組織学的に検索した。
【結果】投与期間中に雌雄の 2.5% 群において全例に軟便が観察され、摂水量の有意な高値が認められた。剖検時には盲腸の拡張が観察されたが、病理組織学的には盲腸に異常はみられなかった。Ge-132 投与群において種々の腫瘍性病変が発生した
が、対照群との間に統計学的に有意な差は認められなかった。MNU 群においては、雌雄全例に腫瘍性病変が認められ、悪性リンパ腫及び胃の扁平上皮乳頭腫が多くの動物で観察された。
【考察】本試験条件下において、最高用量の 2.5%（雄：3837 mg/kg/day、雌：5442 mg/kg/day）の用量では Ge-132 投与の発がん性は認められなかった。

P-26 ＊
肝臓に観察された肝原発とは考えられない腫瘍の免疫組織学的検討○杜 牧，Hui Guo，Yuexiang Zhang，Xiargjiang Liu，Weijuan Zhang，Xiaoxia Ji，Maowu Guo，
Yasuhiko Hirouchi
JOINN Laboratories
Background and objective  Scattering nodules with approximately 0.1-1 cm diameter were observed in the liver of a rat.
We considered that these nodules are different from primary liver tumor, and conducted immunohistochemical
examination to determine the original tissue.
Materials and methods   This case was a male CD rat sacrificed on scheduled necropsy at week 104. At macroscopice x a m i n a t i o n o n n e c r o p s y, s c a t t e r e d n o d u l e s w e r e o b s e r ve d i n t h e l i ve r. H i s t o l o g i c a l e x a m i n a t i o n a n dimmunohistochemical examination of the liver were conducted.
Results  The accumulated foci of tumor cells consisted of oval cells with light basophilic cytoplasm and round nuclei.
There was no dysplasia of nuclei, and mitosis was very rare.  Although nodular proliferation of tumor cells was shown,significant exclusion of surrounding tissues was not observed. Disseminated infiltration and proliferation of isolated
tumor cells were observed around the tumor nodules. In addition, C cell adenoma of the thyroid gland were observed.

ポスター要旨As the result of immunohistochemical examination, this tumor was AFP-negative, CK19-negative and vimentin-negative.  
Therefore, this tumor was not considered to be derived from hepatocytes or intrahepatic bile ducts. As a possibility formetastasis of an endocrine system tumor was considered from tissue morphology of the tumor, immunohistochemical
examination using calcitonin and chromogranin was conducted.  The results are reported.

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ポスター

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P-27 ＊
o-Acetoacetotoluidide（AAOT）の毒性影響の検討○熊田 賢次，奥野 高裕，魏 民，藤岡 正喜，行松 直，梯 アンナ，鰐渕 英機
大阪市立大学 大学院医学研究科 分子病理学

o- Acetoacetotoluidide（AAOT）は o- Toluidine（OTD）のアミノ基がアシル化された化合物であり、アゾ顔料の合成原料として用いられている物質である。OTD の職業曝露が膀胱癌を誘発することが知られており、IARC によって Group1（ヒトに対して発がん性がある）に分類されている。しかし、化学構造的に類似している AAOT の毒性や発がん性などについての知見はなく、AAOT のリスク評価が急務とされている。したがって、本研究は AAOT の毒性影響について評価することを目的とした。
ヒト膀胱上皮細胞 1T1 およびラット膀胱上皮細胞 MYP3 を用いて、AAOT および OTD を 0、78、156、313、625、1000、
1250、2000、2500ppm の用量でそれぞれ培地に添加し、LD50 を算出した。さらに、6 週齢の雌性 F344 ラットを用いて、AAOT を 0、1500 および 3000ppm の用量で混餌投与し、投与開始から 72 時間後の早朝尿中における AAOT およびその代謝物について解析を行った。
細胞を用いた解析の結果、AAOT の LD50 は 1T1 で 1049ppm、MYP3 で 874.1ppm であった。OTD の LD50 は 1T1 で 157.4ppm、MYP3 で 257ppm であった。
ラット尿中代謝物の解析の結果、対照群と比較して AAOT 投与群で OTD の有意な増加がみられた。興味深いことに、AAOT 投
与群の尿中代謝物の大部分を OTD が占めていた。
以上の結果から、AAOT は OTD と比較して細胞毒性が弱いことが明らかとなった。しかし、生体代謝物として OTD が尿中に産生されることから膀胱粘膜上皮に対する影響が懸念される。現在、動物試験が進行中であり発表ではその結果も含めて報
告する。

P-28
Wistar Hannover ラット胸腺の増殖性病変における免疫組織学的特徴○友成 由紀，佐藤 順子，黒滝 哲郎，小林 亮介，土居 卓也，菅野 剛，土谷 稔（株）LSI メディエンス 創薬支援事業本部 試験研究センター 病理研究部 病理１ G【背景】第 30 回日本毒性病理学会学術集会にて Wistar Hannover ラット（WH）の胸腺では過形成と胸腺腫の発生が SD 系
ラットより多く，胸腺腫の特徴として組織学的に正常胸腺皮髄構造に類似することを報告した．このほか，髄質様であるがリンパ球の存在しない淡明領域の形成も特徴の一つである．
【目的】皮質と髄質の胸腺上皮の Cytokeratin（CK）発現の違いに着目し，胸腺腫と正常胸腺との皮髄構造の比較を行った．
【材料と方法】胸腺腫 40 例（104 週間（w）WH 背景データ集積試験）及び比較対照として正常な胸腺（104w，26w，4w 試験）について，CK14 抗体（髄質型上皮マーカー），CK18 抗体（皮質型上皮マーカー）及び CD20 抗体（B-cell マーカー）を用い免疫染色を行った．
【結果】正常胸腺では，CK14 は髄質と被膜直下，CK18 は主に皮質の胸腺上皮，CD20 は髄質の B-cell に陽性を示した．胸腺腫では皮質様の富リンパ球領域（LyR）に大小の髄質様分化領域（MD）が全域に散在する例と局在する例が認められた．胸腺上皮は MD では CK14，LyR 及び淡明領域では CK18 が陽性であった．MD には CD20 陽性の B-cell が見られた．
していた．MD では B-cell も存在しており正常胸腺の髄質の特徴を有していた．胸腺腫の LyR と MD は，CK 発現の異なる胸腺上皮によって形成されるものと推測された．また，淡明領域は LyR 内に形成される皮質型胸腺上皮の集簇巣であり，MD とは異なっていた．

79

ポスター要旨【結論】胸腺腫では，LyR の胸腺上皮は皮質型であったが，LyR 内に形成された MD の胸腺上皮は髄質型の発現パターンを示The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-29
ネオニコチノイド系農薬ジノテフランの CD-1 マウスによる経口毒性試験○多田 幸恵，田中 豊人，生嶋 清美，鈴木 俊也，猪又 明子，守安 貴子
東京都健康安全研究センター 薬事環境科学部【背景】ネオニコチノイド系農薬ジノテフランは，稲，野菜，果実等に使用されるほか，動物用医薬品としても使用される．ジノテフランは近年急激に出荷量が増加しているが，これまで哺乳類におけるジノテフランの行動観察の報告は無く，安全性に関しても公表された知見は極めて少ない．今回，マウスを用いたジノテフランの反復投与試験を実施し，併せて行動観察を行ったので結果を報告する．
【方法】雌雄の CD-1 マウス各 40 匹を 5 週齢でそれぞれ 4 群に分け，0（対照群），22，44 及び 88 mg/kg 体重のジノテフラン
を，10 mL/kg 体重の投与容量で，1 日 1 回，週 5 日間，4 週間にわたり，体重測定後胃ゾンデを用いて強制経口投与した．投
与 2 週間後に多様式 T 型水迷路試験を，投与 3 週間後に探査行動の運動活性を測定した．4 週間の投与期間終了後，イソフル
ラン麻酔下で採血と殺し，血液・生化学及び病理学的検索を行った．
【結果及び結論】雌雄のマウスとも全群で死亡例はなく，体重及び摂餌量にジノテフラン投与の影響はみられなかった．血液検索の結果、雌雄の投与群に WBC の減少傾向が認められた．また，雌雄の投与群で好中球数の用量相関性の減少がみられ，雌の高濃度群では有意な減少であった．生化学的検索，病理学的検索及び行動観察では投与の影響はみられなかった．これまで，哺乳動物の免疫系に及ぼすジノテフランの影響は報告されていないが，WBC 及び好中球数の減少はジノテフランの免
疫系への影響を示唆している．

P-30 ＊
中期多臓器発がん性試験における MNU の製造施設間比較検討○杉山 大揮，宇田 一成，樋口 仁美，土井 悠子，萩原 昭裕，米良 幸典
株式会社 DIMS 医科学研究所【背景と目的】中期多臓器発がん性試験法ではラットに 5 種類の発がん物質を投与し、イニシエーション（DMBDD）処置を行う。そのうち MNU の A 社製品の製造中止を受け、代替品を探す目的で A 社、B 社及び C 社の製品を用いて得られた種々のデータについて比較検討を行った。
【材料と方法】F344/DuCrlCrlj 雄ラットを用い、これまでと同様の方法で DEN を実験開始時に 100 mg/kg の用量で 1 回腹腔内投与した。その後、実験 1 週から 2 週の 2 週間、BBN を 0.05% の濃度で飲料水に混入して投与し、また A 社（第 1 群）、B 社（第 2 群）及び C 社（第 3 群）の MNU をそれぞれ 20 mg/kg の用量で 4 回腹腔内投与した。その後、実験 3 週から 4 週の 2 週間、DHPN を 0.1% の濃度で飲料水に混入して投与し、また DMH を 40 mg/kg の用量で 4 回皮下投与した。DMBDD 処置終了後は、26 週間（実験 30 週まで）無処置で飼育し、全生存動物を剖検し、全身諸器官を病理組織学的に検索した。
【結果】27 週までの生存率は、第 1 群で 90%、第 2 群で 95%、第 3 群で 90% であった。一般状態は 21 週以降、各群数例ずつに貧血様、血色素尿、削痩の症状がみられた。また途中死亡動物では、主に肺、腎、小腸及び腹腔に腫瘤が認められ、これまでのポスター要旨研究と同様の所見であった。
【結論】27 週までの結果は、いずれも背景データの範囲内で、各群間のばらつきもみられなかった。30 週までの結果と各器官・組織の病理組織学的検査の検索結果を併せて、2 製造施設（B 又は C 社）により製造された MNU の代替性について報告す
る。

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ポスター

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-31 ＊ICR マウスを用いた発がん性試験の対照群で高頻度にみられたアミロイド症の背景データとの比較解析（第 2 報）
○伊藤 強，加藤 由隆，牧野 絵美，小山 彩，高橋 尚史，志賀 敦史，岡崎 欣正，原田 孝則（一財）残留農薬研究所【背景】我々は第 32 回本学術集会において，2015 年最終剖検のマウス発がん性試験 1 試験の対照群の検査結果から，アミロイド症が雌雄で増加傾向にあること，そして約半数の症例で血清アミロイド A（SAA）を前駆体とするアミロイド（AA）が沈着していることを報告した。マウスでは特に脾臓や肝臓に沈着する AA の他に，アポリポ蛋白 AII（ ApoAII）を前駆体とし，特に小腸や心臓に沈着するアミロイド（AApoAII）が知られている。今回，調査試験を追加し，ApoAII の免疫染色を実施したため，
前回報告分と併せて再評価した。
【材料と方法】日本チャールス・リバー（株）より購入した ICR 系 SPF マウス [Crlj:CD1（ICR）] を用いた 78 週間発がん性試験における対照群を 2 試験分追加調査した（2015 年最終剖検）。4 週齢で入荷し，5 週齢から試験を実施後，全動物の全身臓器を採材し HE 染色標本を作製した。また，前回 SAA の免疫染色を行った 1 試験の症例について，同じ臓器を ApoAII で免疫染色した。背景データには 1991 ～ 2014 年最終剖検の Crj:CD-1 あるいは Crlj:CD1（ICR）マウスを用いた 78 週間発がん性試験の対照群を使用した。
【結果と考察】2015 年最終剖検の全 3 試験におけるアミロイド症の発生頻度は雄 23％（36/156 例），雌 34％（53/156 例）
であり，アミロイド症が最も多発した 1996 年（雄 12％，雌 28％）と比較しても高頻度であった。当該 3 試験では，小腸，心臓への沈着が脾臓，肝臓に比較して多かった。ApoAII は免疫染色した全症例で陽性であった。以上の沈着臓器および免疫染
色結果から，現在主に AApoAII によるアミロイド症が多発していることが示唆された。

P-32 ＊
ラットにおける多層カーボンナノチューブおよびクリソタイル誘発中皮腫の病理学的性状の比較○北條 幹 1），坂本 義光 1），山本 行男 1），長谷川 悠子 1），村上 詩歩 1），前野 愛 1），広瀬 明彦 2），中江 大 3）
東京都健康安全研究センター，2）国立医薬品食品衛生研究所，3）東京農業大学

1）【緒言】多層カーボンナノチューブ（MWCNT）はアスベストと同様に腹腔投与により齧歯類に腹膜中皮腫を誘発するが，両者の中皮腫の特徴を比較検討した報告が少ないため，本研究では両者の病理学的性状を比較した．
【方法】実験は，10 週齢の F344 系雄性ラット各群 20 匹の腹腔内に，1 mg/kg 体重の MWCNT（MWNT-7：以下 M 群）あるい
は 40 mg/kg 体重のアスベスト（UICC クリソタイル B；以下 C 群）を投与し，途中死亡例および瀕死例について剖検し，中皮腫について病理学的・免疫組織化学的・生化学的に分析し，体細胞変異の検出を行った．
【結果・考察】M 群では投与 28 週後より，C 群では 37 週後より，それぞれ死亡例が認められ，いずれも 60 週までに全例が死亡した．肉眼的には，M 群で C 群に比べて肝臓の変形の程度が強かった他に顕著な差異がなく，両群の全例で，腹腔内にび慢性に腫瘍結節を認めた．腫瘍結節は，微細な顆粒状のものから，巨大な球状または肥厚したプラーク様のものなど，個体によって様々な形態であった．組織学的には，両群で同様に，上皮性（種々の組織型を含む），肉腫性および二相性に分類される
血清中のメソテリン濃度は，両群で有意差なく正常ラットのレベルより高値であった．以上より，MWCNT とアスベストは本研究で用いた用量で，60 週以内に全ラットに中皮腫を誘発し，誘発された中皮腫の病理学的性状は MWCNT 由来・アスベ
スト由来共に同等のものであった．また，本研究で示された MWCNT またはアスベスト由来のラット中皮腫の病理学的性状は，ヒト中皮腫のそれにも類似していることが示唆された．

81

ポスター要旨

様々な型の中皮腫が観察された．また，巨大な中皮腫結節の腫瘍細胞では，両群共に Cdkn2a の欠失が高頻度に認められた．

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-33
ラットを用いたバニリンプロピレングリコールアセタール（バニリン PGA）の 90 日間
亜慢性反復経口投与毒性試験○山田 貴宣 1,2），松下 幸平 1），豊田 武士 1），森川 朋美 1），高橋 美和 1），井上 薫 1），小川 久美子 1）
国立医薬品食品衛生研究所 病理部，2）東京農工大学大学院 獣医病理学研究室

1）【背景と目的】バニリンプロピレングリコールアセタール（バニリン PGA）はフェノール類に分類される指定添加物の一つで，香料として使用されている。JECFA におけるグループ評価では「安全性の懸念はない（No safety concern）」と判断されているが，その毒性プロファイルについてはほとんど情報がない。そこで本研究ではラットを用いて，バニリン PGA の 90 日間亜慢性反復経口投与毒性試験を実施した。
【材料と方法】6 週齢の F344/DuCrj 系ラット雌雄各群 10 匹に、コーン油を溶媒として本剤を 0，100，300，1000 mg/kg 体
重 / 日の用量で 90 日間強制経口投与した。
【結果】一般状態観察の結果，本剤投与による死亡動物は認められなかった。一方，1000 mg/kg 体重 / 日群の雌雄に，虚脱及び活動性低下が試験期間を通して認められた。体重測定の結果，1000 mg/kg 体重 / 日群の雄で投与 6 週以降に，同群の雌で投与 7 週及び投与 9 週以降に体重増加抑制が認められた。摂餌量測定及び血液学的検査の結果，雌雄共に本剤投与による毒性影響は認められなかった。血清生化学検査の結果，1000 mg/kg 体重 / 日群の雌雄で TP，Alb，TC，Ca，IP 及びγ -GTP の高値が認められ，さらに同群の雄では A/G 比及び BUN の増加も認められた。臓器重量測定の結果，1000 mg/kg 体重 / 日群の雌雄に肝臓相対重量の高値が認められた。病理組織学的検査の結果，1000 mg/kg 体重 / 日群の雌雄において肝臓での小葉中心性肝細胞肥大が認められ，さらに同群の雄では肝細胞の脂肪化の発現頻度減少を伴っていた。
【結論】以上より，本試験におけるバニリン PGA の無毒性量は，雌雄共に 300 mg/kg 体重 / 日であると判断した。

P-34 ＊
イソオイゲニルメチルエーテルの F344 ラットにおける 90 日間反復投与毒性試験○赤木 純一，Cho Young-Man，水田 保子，小川 久美子
国立衛研・病理【背景】イソオイゲニルメチルエーテル（CAS No. 93-16-3）は香料として用いられている指定添加物である。イソオイゲニル
メチルエーテルの日本における使用量（2010 年度）は 484.1 kg、推定摂取量は 122.8 μ g/ 人 / 日であり、香料に関する食品
健康影響評価指針に基づき構造クラス III に分類される。そのクラスにおける許容曝露閾値 90 μ g/ 人 / 日をわずかに超過しているが、SD ラットを用いた 28 日間の混餌投与では NOEL は 100 mg/kg 体重 / 日であること、および 90 日間の混餌投与のNOEL は 6 mg/kg 体重 / 日とされていることから、JECFA では安全性に関する懸念はないとされている。しかし、90 日試験
は単用量で実施されており、私信であるためデータは公開されていない。そこで安全性評価においてはより詳細な 90 日間反復投与毒性試験データが必要であると考えられた。
【目的】F344 ラットを用いたイソオイゲニルメチルエーテルの 90 日間亜慢性毒性試験を実施し、毒性プロファイルを明らかすると共に、最大無毒性量を判断する。
【材料と方法】6 週齢の F344 ラット雌雄（各群 10 匹）に 8、40 または 200 mg/kg 体重 / 日のイソオイゲニルメチルエーテル

ポスター要旨（純度 99.3%）を 91 日間強制経口投与した。
【結果】試験期間を通じて途中死亡および一般状態の変化は見られなかった。9 週目以降に雄の 200 mg/kg 体重群で体重増加抑制が見られた。血清生化学的検査では、雄の 200 mg/kg 体重 / 日群で triglyceride の減少が見られた。臓器重量については、雌雄ともに 200 mg/kg 体重 / 日群で肝臓の絶対および相対重量増加が見られた。病理組織学的検査では雄の 200 mg/kg
体重群で肝細胞肥大の増加が見られた。
【結論】イソオイゲニルメチルエーテルの主要標的臓器は肝臓であると考えられ、本試験における最大無毒性量は 40 mg/kg
体重 / 日であると判断した。

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ポスター

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-35 ＊
Characteristic pathological changes in nuclei of ADC drug-treated animals○ Mingshu Huang，Toko Ohira，Liang He，Jingjing Mao，Jianyan Yan，Tiantian Cui，Minbo Hou，
Hua Li，Jing Ma
国立上海新薬安全評価研究中心[Background] The antibody-drug conjugate（ADC）is a cytotoxic drug coupled to an antibody that specifically targets a
certain tumor marker. The mechanism of ADCs has been studied in depth by many researchers. However, thepathologic changes induced by ADCs were rarely reported.
[Aim] To evaluate the pathological changes of nuclei induced by ADCs, we analyzed the histopathological data frommonkeys and rats treated with ADCs.[Materials and Methods]The 13-week repeated dose toxicity study was carried out
in monkeys and rats. Animals were dosed with vehicle（control group）and ADCs（treated groups）via intravenous
infusion, All tissues were collected and processed for histopathological examination.
[Results] The characteristic changes of nuclei include karyomegaly and mitosis and were found in multiple organs of
ADC-treated monkeys and rats. The nuclei were enlarged with or without expansion of cytoplasm. Affected nuclei were
irregularly bordered and varied in size, and some had several nucleoli or increased mitosis. These nuclear changes
were noted in the liver, heart, spleen, duodenum and skin of monkeys and the kidney, liver, spleen and lacrimal glandof rats.  
[Conclusion] Karyomegaly and mitosis were observed in multiple organs of ADC-treated monkeys and rats.

P-36
医療用医薬品のがん原性試験に関する調査－その 1 －

○西村 次平 1），野中 瑞穂 1），直田 みさき 1），角田 聡 1），三枝 由紀恵 1），堂口 裕士 1），小野寺 博志 1），
笛木 修 1），篠田 和俊 1），小川 久美子 2），西川 秋佳 2）（独）医薬品医療機器総合機構，2）国立医薬品食品衛生研究所

1）2011 年に米国研究製薬工業協会（PhRMA）から発表された未承認薬を含む 182 の医薬品におけるラット 2 年間がん原性試
験に関する回顧的解析結果（Toxicol. Pathol. 39, 716-744, 2011）を端緒に、2012 年 6 月に医薬品規制調査国際会議（ICH）
において S1 ガイドライン（医薬品のがん原性試験に関するガイドライン）改定のための専門家作業部会（EWG）が設置され、現在、薬理作用に関する知見、6 カ月反復投与毒性試験における発がん関連病変、遺伝毒性、ホルモン作用等のエビデンスに基づき、ラット 2 年間がん原性試験を省略できるのではないかとの仮説を検証するための前向き調査がすすめられている。
上記の背景を踏まえ、我々は、2007 年以降、本邦で承認された医療用医薬品（がん原性試験が実施された約 200 品目）の試験
成績を用いて、同様の視点に着目した回顧的調査を行っているところである。本発表では、調査の過程で見いだされたラット
腫瘍性病変についての解析結果を報告する予定である。

ポスター要旨83The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-37 ＊
ラット実験的自己免疫性神経炎モデルにおける末梢神経の病理組織像の経時変化の検討○富川 恵美，六鹿 麻由，原 宏士朗，金子 ちひろ，三好 智也，井村 奈緒子，冨樫 裕子，林 亮司
東レ（株）医薬研究所【背景と目的】ギランバレー症候群のモデルであるラット実験的自己免疫性神経炎（EAN）モデルは神経症状および末梢神経の病理変化を示すが、これらの経過の相互関係は不明な点が多い。そこで、ラット EAN モデルの神経症状の発症初期、ピーク
期および回復期における末梢神経（坐骨神経）の病理変化について検討した。
【材料と方法】Lewis ラットに末梢ミエリン蛋白質部分ペプチド P2（57-81）を投与して EAN モデルを作製し、Day 10、16、
22、25 に坐骨神経を摘出し、光学顕微鏡観察（HE、LFB-HE 染色、免疫染色）および電子顕微鏡像の画像解析を実施した。
【結果】光学顕微鏡観察の結果、神経症状の発症初期（Day 10）では軸索変性および髄鞘変性がみられ、ピーク期（Day 16）では頻度および程度が増加し、回復期（Day 22、25）では変性の持続がみられた。神経線維の画像解析の結果、Day 10 から有髄神経線維密度および髄鞘面積が減少し、Day 22 で最小となった。また、有髄神経線維密度の減少は、大径線維の消失に起因することが示された。軸索および髄鞘の超微形態の定量解析の結果、Day 10 では軽度の変性（軸索内の小胞の蓄積、局所的な髄鞘の離開・折りたたみ）が増加し、Day 16 では重度の変性（軸索消失、髄球、脱髄）が増加し、Day 22、25 では再生性変化（再髄鞘化、シュワン細胞の細胞質腫大）がみられた。
【結論】ラット EAN モデルにおいて、神経症状の発症初期から軽度の末梢神経の変性がみられ、ピーク期では大径有髄神経の消失を伴う重度の変性となり、回復期では重度の変性および再生性変化が同時にみられることが示された。

P-38 ＊
レプチン受容体欠損メダカの眼病変に関する病理組織学的検討○苣田 慎一 1），平光 彩乃 2），杉山 晶彦 2）
杏林大学 医学部 衛生学公衆衛生学教室，2）鳥取大学 農学部 共同獣医学科

1）【背景、目的、材料と方法】これまでの研究により、レプチン受容体欠損（LepRKO）メダカは不断給餌下においてインスリン分泌不全による高血糖を示すことが明らかにされている。本研究では、LepRKO メダカの糖尿病性網膜症・白内障モデル動物
としての有用性を明らかにすることを目的として、10、28、37 週齢の LepRKO メダカおよび Cab 系メダカ（Control）の眼球を病理組織学的に解析した。1 群につきメダカ 3 匹を用いた。
【結果】10 週齢の LepRKO メダカの空腹時血糖値には Control メダカに比較し有意差は認められなかったが、28 および 37 週
齢の LepRKO メダカの空腹時血糖値は Control メダカに比較し有意な高値を示した。また、28 および 37 週齢の LepRKO メダ
カの血漿インスリン濃度は Control メダカに比較し有意な低値を示した。Control メダカおよび 10 週齢の LepRKO メダカの網膜および水晶体の病理組織学的所見に著変は認められなかった。28 および 37 週齢の LepRKO メダカの水晶体では、水晶体線維の空胞化、水腫、崩壊、液状化が観察された。また、28 および 37 週齢の LepRKO メダカでは、網膜中心静脈、網膜毛細血管、虹彩静脈・毛細血管、脈絡叢静脈の拡張が認められた。28 および 37 週齢の LepRKO メダカの網膜の色素上皮層、桿体・ポスター要旨

錐体層、外顆粒層、外網状層、内顆粒層、内網状層は、Control メダカに比較し有意に菲薄化していた。
【結論】本研究により、LepRKO メダカは II 型糖尿病モデルラットに認められる糖尿病性網膜症・白内障に類似した眼病変を形成することが明らかとなった。LepRKO メダカは当該眼病変を II 型糖尿病モデルラットよりも早期に発症することから、
糖尿病性網膜症・白内障モデル動物として有用であることが示された。

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ポスター

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-39
マンゴスチン果皮抽出物（αおよびγ -mangostin）の ApoE-KO マウスにおける動脈硬化発症に対する抑制効果とその作用機序の解析○柴田 雅朗 1），斯波 真理子 2），柴田 映子 2），前村 憲太朗 1），近藤 洋一 1）
大阪医科大学 医学部 生命科学講座解剖学教室，2）国立循環器病研究センター研究所 病態代謝部

1）【背景】近年、動脈硬化の罹患率が増加し、それを基盤として脳・心血管の閉塞が生じ、生命を脅かす重大な病態がもたらされ、動脈硬化発症の抑制は重大な課題となっている。
【方法】ApoE-KO マウス雄を用い、マンゴスチン果皮抽出物（MG, α -Mangostin 84% およびγ -Mangostin 7% 含有）を 0.3％
または 0.4％濃度で混餌投与した。また、対照群には基礎飼料のみを与えた。投与開始の１７週目には全生存動物を屠殺・剖検した。
【結果】実験期間中の体重では、対照群と比較して、両群ともに体重増加の抑制が観察されたが、一般状態は極めて良好であった。血液生化学的検査では、0.3% および 0.4%MG 群で総コレステロール値の有意な低下が見られ、0.4%MG 群ではさらにトリグリセライド値の有意な低下も観察された。また、LPL 活性の有意な上昇が 0.4%MG 群でみられた。大動脈のオイル
レッド O 染色において、動脈硬化巣の面積率は、0.3% および 0.4%MG 群ともに有意な低下を示した。病理組織学的検査では、マウス１匹当たりの動脈硬化病変の数は、MG 両群ともに有意な減少を示した。動脈硬化の発症に関わる因子（Timp-1,
Mmp-9, Lox-1, Cxcl16, Klf-5）の動脈硬化病変を含む血管組織での Real-time PCR 解析では、群間に差は示されなかった。しかし、マクロファージの解析では、0.4%MG 群で CD163（M2）の発現が Real-time PCR と免疫組織染色の両解析で有意な増加を示した。
【結論】マンゴスチン果皮抽出物は、ApoE-KO マウスの動脈硬化の発症に対して、抑制作用があることが明らかとなり、その作用機序の一端としてマクロファージ M2 の関与があることが示唆された。

P-40
脳卒中易発症高血圧自然発症ラット（SHRSH）を用いた味噌による脳卒中の抑制効果○渡辺 敦光 1），笹谷 めぐみ 2），佐藤 健一 2），宮坂 勇一郎 3），吉栖 正生 1）
広大大学院医歯薬保研究院心臓血管生理医学，2）広大学原医研，3）神州一味噌（株）

1）【目的】味噌はがんの予防や血圧を抑えることが疫学的並びに動物実験で報告されている。一方ダイズイソフラボンは、女性の脳梗塞や心筋梗塞のリスクを低下させることが示されている。しかし、味噌の摂取が動物モデルにおける脳卒中の発生率を低下させるかどうかは不明であった。本研究では、脳卒中動物モデルを用いて味噌の脳卒中の予防効果を調べた。
【材料と方法】4 週令雄脳卒中易発症高血圧自然発症ラット（SHRSP/Izm Nihon SLM）に味噌飼料（180 日熟成米味噌、神州一味噌株式会社、通常餌 90％、味噌 10％、最終 NaCl 含量 2.8％）、高食塩餌（通常食および NaCl 2.5％、最終 NaC 含量 2.8％）のに低食塩餌（通常食 ; 最終 NaCl 含量 0.3％）を与えた。飲料水、飼料は自由に摂取させた摂取量並びに血圧を測定した。一日
朝、昼、夕方の 3 回動物は観察し、異常を見つけ剖検し、63 日目に全ての動物を屠殺し病理解剖を行った。
【結果】線形回帰直線により、低食塩群および味噌群と比較して、高食塩群において有意に高い最高血圧を示した。 低食塩群と味噌群の最低血圧には有意差はなかった。同じ食塩が含まれているにもかかわらず味噌群の血圧は低食塩群と同じであった。更に Kaplan-Meier 生存曲線では、味噌群と比較して高食塩群で有意に生存率が減少した。普通餌と味噌群とでは生存率
血管には血栓や、腎臓における組織学的および免疫組織化学的変化は、高食塩群に比べて少なかった。
【結論】本研究の結果から、味噌は食塩濃度が高いにもかかわらず血圧の上昇を妨げ、脳卒中に対して保護作用を有する可能性があることが示唆された。

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ポスター要旨には差は認められなかった。高食塩群では大出血斑が見られたが、他の 2 群では大出血性斑は認められなかった。味噌群の脳The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-41 ＊
緑茶抽出物誘発ラット肝臓障害モデルにおけるミード酸の抑制効果○竹之内 明子 1），榎本 祐子 2），木下 勇一 3），浜崎 景 4），螺良 愛郎 5），義澤 克彦 1）
武庫川女子大学 生活環境学部，2）関西医科大学 倫理審査センター，3）和歌山県立医科大学附属病院 中央検査部，富山大学 医学部 公衆衛生学講座，5）大阪府済生会泉尾病院 病理診断科

1）4）【背景及び目的】我々は緑茶抽出物（GTE）誘発ラット肝臓障害モデルの特徴について第 30 回本学術集会で報告した。このモデルを用いて日常摂取する食品成分の不飽和脂肪酸であるミード酸（MA）の肝障害抑制効果について検証した。
【方法】7 週齢 SD 系雄ラットに 200mg/kg GTE を単回腹腔内投与し、投与後 24、48 時間、7 日に血清及び肝臓を採取した。
基礎食（0%MA）あるいは 4.8%MA 食を GTE 投与 7 日前から解剖時まで摂取させ、基礎食＋生食投与群、4.8%MA 食＋生食投
与群、基礎食＋ GTE 投与群、4.8%MA 食＋ GTE 投与群を設けた。肝障害パラメータ（AST, ALT）、肝臓の病理組織学的検査、アポトーシス（γ H2AX）
・酸化ストレス（8-Nitroguanosine）、低酸素状態（HIF-1 α）に関する各種マーカーの免疫染色を実施した。さらに、基礎食あるいは 4.8%MA 食＋生食投与群の血清・肝臓について脂肪酸分析を実施した。
【結果】基礎食＋ GTE 投与群では AST 及び ALT 値の顕著な増加と小葉中心性の肝細胞障害が投与後 24、48 時間で観察されたが、MA 摂取によりその程度が減弱した。さらに、基礎食＋ GTE 投与群ではγ H2AX、8-Nitroguanosine、HIF-1 α陽性肝細胞の発現が観察され、投与後 48 時間でピークを示した。これらの変化も MA 摂取により程度が減弱した。MA 食により血清・肝臓中 MA 濃度の顕著な増加が認められた。
【結論】MA 食群では、基礎食群に比べて肝障害パラメータの有意な減少と肝細胞死の抑制が認められ、MA の肝障害抑制効
果が確認された。その効果は肝細胞における酸化ストレス並びに低酸素状態の制御による細胞死抑制が関与するものと考えられた。

P-42 ＊
炎症誘導因子（DAMPs）と関連シグナルを介したチオアセトアミド（TAA）誘発ラット急性
肝障害における進展機序の解析○倉持 瑞樹，井澤 武史，Pervin Munmun，Karim Mohammad Rabiul，桑村 充，山手 丈至
大阪府立大学 獣医病理
【背景・目的】薬物性肝障害の進展には，傷害組織から放出される Damage associated molecular patterns（DAMPs）と，受容体である MHC クラス II や Toll-like receptors（TLRs）が重要な役割を担う．これまでの研究から，高用量 TAA 誘発ラット急性肝障害の解析から，DAMPs として High mobility group box 1（HMGB1）と TLR4 が炎症の進展に重要な役割を担う可能性が示された．今回，TAA 誘発ラット急性肝障害モデルにおける炎症の進展について，HMGB1 に着目し，詳細な解析を行った．
【材料・方法】7 週齢 F344 雄ラットに TAA（50 mg/kg BW）を単回腹腔内投与し，6 時間後に HMGB1 中和 IgY 抗体または非免疫 IgY 抗体（200 μ g/rat）を尾静脈投与した．TAA 投与後 1 日に肝臓を採材した．
【結果】TAA 投与後 1 日で中心静脈周辺に肝細胞壊死と単核球・好中球浸潤が軽度みられたが，両群間に明らかな差はなかっ
た．TAA+ 中和抗体投与群で，TAA+IgY 投与群に比べ，AST 値と ALT 値が低値を示し，中心静脈周辺での Iba-1 陽性マクロポスター要旨

ファージ数の減少，炎症性サイトカイン（MCP-1，IL-6）の発現の低下がみとめられた．TLR4 のシグナル分子（MyD88，
TRAM1）は両群間に有意な発現の差はみとめられなかった．
【結論】TAA 誘発急性肝障害では，HMGB1 が肝細胞傷害に続くマクロファージの集簇を促し，炎症の進展に寄与していることが明らかになった．しかし，その進展に TLR4 の関与は否定的で，現在ほかの受容体の検討を進めている．

86

ポスター

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-43 ＊
雌 SDT fatty ラットにおける若齢及び高齢の病態解析○ Teoh Soon Hui1），美谷島 克宏 1），太田 毅 2），篠原 雅巳 3），宇野 絹子 1），煙山 紀子 1），中江 大 1）
東京農業大学大学院 農学研究科，2）日本たばこ産業（株）医薬総合研究所，3）日本クレア（株）東京 AD 部

1）

【背景】糖尿病合併症は世界規模の健康問題として注目されており、疾病のメカニズムをより深く理解するため、ヒト 2 型糖尿病に類似する動物モデルが開発されてきた。肥満を伴う 2 型糖尿病モデルとして開発された SDT fatty ラットは若週齢から様々な糖尿病合併症を発症することが知られているが、加齢に伴う変化は十分に解明されていない。
【目的】本研究では、SDT fatty ラットの腎臓について加齢による病態の推移を解析した。
【材料と方法】雌性 SDT fatty ラットは日本クレア（株）の動物施設において通常食で飼育された。その後、東京農業大学に搬入され、17、59 及び 63 週齢時に剖検し、腎臓を採取・固定した後、常法に従い組織標本を作製し、病理組織学的観察並びに遺伝子発現解析を行った。
【結果】59 及び 63 週齢の腎臓において、糸球体ではメサンギウム領域の増加と萎縮、尿細管の間質では重度の線維化及び炎
症性細胞浸潤、尿細管における変性・壊死及び重度の尿円柱が観察された。これらの変化は 17 週齢では明らかな変化を認めないか、ごく軽度の変化として観察された。遠位尿細管上皮における糖の蓄積を示唆する Armani-Ebstein 病変は、いずれの週齢においても観察された。腎臓中の TGFB, TNFa, IL-1B 及び MCP1 の遺伝子発現は 59 週齢で増加したが、63 週齢ではそ
れに対しむしろ低値を示した。
【結論】病理組織学的解析から腎臓の病変は加齢により明らかに増強したが、59 及び 63 週齢の間には明らかな差は見られなかった。59 週齢に対し 63 週齢において炎症関連遺伝子の発現低下が認められたが、これはより顕著な腎機能の破綻を示唆するものと考えられた。

P-44 ＊
NZB/W F1 マウスの LPS 誘発早期腎炎発症モデルに対する SLE 治療薬の効果および
病理組織学的検索○金原 智美，大芝 泰弘，今井 順，村瀬 詩織，伊藤 格，木村 均（株）日本バイオリサーチセンター【背景】NZB/W F1 マウスはループス腎炎を自然発症し、全身性エリテマトーデス（SLE）の病因解明に有用である。しかし、ループス腎炎の発症は生後 6 か月以降であり、研究に多大な時間を要する。近年、LPS を投与しループス腎炎を早期に発症させる手法が報告されているが、他の臓器の病理評価や、SLE 治療薬の効果については報告が乏しい。
【目的】NZB/W F1 マウスに LPS を投与し、早期に腎炎を発症するモデルの病理評価を行う。また、SLE 治療薬の Cyclosporine、
Betamethasone を投与し、治療効果を検討する。
【材料と方法】NZB/W F1 マウス（雌、7 週齢）に対し、LPS の腹腔内投与を週に 2 回、計 10 回行った。生理食塩水（対照群）、Cyclosporine（Cyc 群）、Betamethasone（BM 群）をそれぞれ LPS 投与開始から毎日経口投与した。採尿と採血を行い、LPS 投
与終了後に剖検を行った。主要臓器の病理組織学的検索を行い、腎臓の標本には PAS 染色および Masson trichrome 染色を、脾臓の標本には B220 抗体および CD3 抗体による免疫染色を行った。
群では対照群と比較して減少した。対照群、Cyc 群、BM 群の腎臓において、硬化糸球体、間質の線維化などがび漫性に観察され、硬化性糸球体腎炎と診断した。対照群、Cyc 群、BM 群の脾臓は、無処置群と比較して肉眼的に腫大しており、組織像では
白脾髄領域が増加していた。
【結論】NZB/W F1 マウスへの LPS 投与により硬化性糸球体腎炎が早期に発症した。Cyclosporine および Betamethasone の投与により、BUN、血中クレアチニン、尿蛋白 / 尿中クレアチニン比が減少し、治療効果が示された。硬化性糸球体腎炎の要因として、脾臓の白脾髄領域が増加していたことから、免疫系の活性化が示唆された。

87

ポスター要旨【結果】BUN、血中クレアチニン、尿蛋白 / 尿中クレアチニン比は、対照群では無処置群と比較して有意に増加し、Cyc 群、BMThe 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-45
食塩負荷が肥満２型糖尿病モデルである SDT fatty ラットの腎症の進展に及ぼす影響○美谷島 克宏 1,2），太田 毅 3），篠原 雅巳 4），岩崎 日向子 1），張 舜恵 2），宇野 絹子 2），煙山 紀子 1），中江 大 1,2）
東京農大・食品安全健康，2）東京農大・院・食品栄養，3）日本たばこ産業（株）医薬総合研究所，4）日本クレア株式会社

1）【目的】慢性腎臓病（CKD）患者が世界中で増加しており、臨床病態を反映した糖尿病性腎症の病態モデルの確立は、新規治療薬の開発を行う上で必要不可欠であり、特に短期間に腎機能が低下する動物モデルの要求が高まっている。本研究は、肥満
2 型糖尿病モデルである SDT fatty ラットにおいて、食塩負荷が腎症の進展に及ぼす影響を検討した。
【方法】実験は，雄性 SDT fatty ラットに、7 週齢から 0.3 及び 0.5% の食塩水を 11 週間飲水投与し、対照群として同週齢のSDT fatty ラットに水道水を飲水処置した。動物は、飼育期間終了後に解剖し、血漿生化学的検査、腎臓を対象に HE 染色・PAS
染色・Sirius Red（SR）染色・ED1 染色・α SMA 染色による病理組織学的検査を実施した。
【結果】血漿 BUN 及びクレアチニン値は、0.5% 食塩水群でごく軽度に増加したのみであった。病理組織学的検査において、対照群では、間質の炎症、線維化ならびに尿円柱がごく軽度に認められた。0.3 及び 0.5% の食塩水群では、それらの変化が用量依存的に増悪すると共に、糸球体の硬化・萎縮・ボーマン嚢との癒着、尿細管間質の線維化、SR 染色陽性領域の増加が軽度
から中等度に認められた。また、それらの群では、糸球体内及び尿細管間質において ED-1 陽性マクロファージが、尿細管間質においてα SMA 陽性細胞が、それぞれ増加した。
【結論】食塩負荷は、雄性 SDT fatty ラットの腎臓病態を悪化させることが明らかとなった。したがって、SDT fatty ラットモ
デルは、CKD を標的とした化合物の開発に有用な評価モデルとなり得ることが示唆された。

P-46
ビーグル犬の膝関節に広範囲な軟骨欠損が作製可能か？軟骨欠損施術後の組織修復に関する研究○田崎 雅子 1），平井 俊行 1），秋山 真洋 1），伊藤 好文 1），中澤 圭一 1），原田 恭治 2），長野 嘉介 3），萩原 仁美 1）
テルモ（株），2）日本獣医生命科学大学 獣医外科学研究室，3）長野毒性病理コンサルティング

1）【目的】これまで薬剤誘発による変形性関節症モデルの作製が報告されているが、その軟骨欠損範囲は限局的である。我々は、外科的治療法の評価に適した広範囲軟骨欠損モデルの開発を目的に、大腿骨遠位部における軟骨欠損部の作製を検討した。さらに、本モデルの軟骨欠損部にインプラントを埋植し、組織修復能を検索した。
【方法】8 か月齢雄ビーグル犬の左膝関節部を切開し、大腿骨両側顆の軟骨を、金属製ポンチと骨鋭匙で剥離した。4 週間後、8 週間後にそれぞれ 3 例を剖検し、軟骨欠損部の病理学的検査を実施した（軟骨欠損群）。さらに、軟骨欠損部の表面に小型のチタン製インプラントを埋植し（インプラント埋植群）、処置部に生じる組織反応を同様に検索した。
【結果】全例の大腿骨遠位部両側顆に、立位の荷重部全域にわたる軟骨欠損を作製できた。術後に起立不能、歩行不可となった動物はなかった。病理組織学的検査の結果、軟骨欠損群では、軟骨石灰化層の露出がみられ、8 週間後では 4 週間後と比較して軟骨石灰化層の摩耗が進む傾向があった。また、ヒト変形性膝関節症の特徴である線維化、血管拡張、血管新生、嚢胞がポスター要旨観察された。一方、インプラント埋植群では、インプラントが関節腔に面する部位に、インプラントを縁取るように線維性組織あるいは軟骨様組織による修復像が観察された。これらの変化は 8 週間後で 4 週間後と比較し、より顕著に観察された。
【考察】本動物モデルは、ヒト変形性膝関節症と類似する組織学的特徴を示し、経時観察の結果から、軟骨損傷の進行過程を観察可能と考えられた。さらに、インプラントの埋植により、軟骨損傷部の組織修復反応を促進できる可能性が示唆された。
以上のことから、本動物モデルは外科的治療効果の評価モデル動物として有用であると考えられた。

88

ポスター

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-47 ＊
アレルギー性皮膚炎モデルにおけるエストロゲンレセプターを介した炎症反応誘導の病理組
織学的検討○小山 彩，田食 里沙子，渡部 優子，福山 朋季，加藤 由隆，牧野 絵美，伊藤 強，高橋 尚史，志賀 敦史，
岡崎 欣正，原田 孝則（一財）残留農薬研究所【背景と目的】エストロゲンが免疫系に影響を及ぼすことは古くから知られており，環境中のエストロゲン様物質による免疫攪乱が世界的に問題となっている。しかし，エストロゲンレセプターと炎症反応の直接的な関連について調査した報告はこれまでにない。そこで我々は，アレルギー性皮膚炎モデルマウスを用いて，エストロゲンレセプターが皮膚アレルギー性炎症に関与する可能性について調査した。本発表では，アレルギー性皮膚炎が誘導されたマウス耳介の病理組織学的検査結果を中心に報告する。
【材料と方法】Toluene-2,4-diisocyanate（TDI）の感作により作製された雄性 BALB/c マウスアレルギー性皮膚炎モデルに，
環境中エストロゲン様物質（メトキシクロル，MXC）および内在性エストロゲン様物質（β - エストラジオール，E2）を 3 日間投与し，TDI を耳介に惹起した。TDI 惹起後 24 時間の耳介腫脹反応を測定後，耳介を採取し，病理組織学的検査およびサイ
トカイン量測定を行った。
【結果】アレルギー性皮膚炎モデルマウスの耳介では，対照群を含む全群で TDI により惹起された炎症反応がみられ，特に毛嚢を中心として好中球が多数観察された。この炎症反応は対照群と比較して MXC および E2 投与群で強く，毛嚢以外にも真皮領域に広く炎症細胞の浸潤がみられた。MXC および E2 投与群では，耳介腫脹反応およびサイトカイン産生量も対照群と比較して有意に増加しており，組織学的な炎症の程度と一致していた。発表では，免疫組織学的検討結果も含めて報告する予
定である。

P-48
世界最高水準のラットリソース拠点としてのナショナルバイオリソースプロジェクト「ラット」○田中 美有，本多 新，フォークト ビルガー，根小田 祐基，萩原 和美，崔 宗虎，橘 亮麿，長尾 朋美，
中西 聡，山崎 賢一，庫本 高志，浅野 雅秀
京都大学 医学研究科 附属動物実験施設【はじめに】文部科学省は、実験動植物や各種生物の遺伝子材料などの生物資源のうち、国が戦略的に整備することが重要なものについて、体系的な「収集・保存・提供」などを行うための体制を整備することを目的とし、2002 年からナショナルバイ
オリソースプロジェクト（NBRP）を開始した。ラット（NBRP-Rat）については、NBRP 発足と同時に開始され、開始から 15 年を経て、質・量ともに世界最大・最高水準のラットリソースセンターに成長した。
【第 4 期 NBRP-Rat】2017 年度（第 4 期）より、京都大学が代表機関、理研 BRC（凍結胚・精子バックアップ保存）と大阪大学（免疫不全ラットの保存・提供）が分担機関となり、新たな体制での事業が始まった。2017 年 8 月時点で、約 850 のラット系
統が寄託されており、そのうち 730 系統が提供可能となっている。保存系統は、国内外の標準系統、自然発症ミュータント、
コンジェニック系統、そしてレポーター遺伝子導入ラット等のトランスジェニックラット、ノックアウト・ノックインラットなど多岐にわたる。各系統の特性情報はデーターベースにて公開され、研究者は研究目的に合った系統を選択・入手することが可能である。
ソースとしてのラットの価値は一段と高まってきている。今後も、ユーザーからのニーズも取り入れた独自性の高いラット
系統の収集、系統情報の充実、ラット生殖工学技術の進展をはかり、毒性病理学分野を含めたライフサイエンスへのラットリ
ソースのさらなる貢献を促進したい。

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ポスター要旨【今後の展望】近年では、CRISPR/ Cas9 などのゲノム編集技術を用いた遺伝子改変ラットの作製が可能となり、バイオリ

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-49
F344 ラットにおける 2-Furanmethanethiol の 13 週間反復経口投与による毒性評価○時 亮 1,3），石井 雄二 1），高須 伸二 1），土屋 卓磨 1），木島 綾希 1），小川 久美子 1），西川 秋佳 2），梅村 隆志 1）
国立医薬品食品衛生研究所 病理部，2）国立医薬品食品衛生研究所 安全性生物試験研究センター，
筑波大学 実験病理研究室

1）
3）【目的】2-furanmethanethiol（ 2FM）は香料指定添加物のうちのチオール類に指定される香料の一つであり、食品の風味向上のため賦香剤として使用されるが、自然界においても酵母による発酵熟成中に生成し、調理時にも発生すると報告されている。2FM の安全性評価に資する知見を収集するため、ラットを用いた 13 週間亜慢性毒性試験を実施した。
【方法】6 週齢の雌雄 F344 系ラット（各群 10 匹）に、2FM を 0、6.25、10 および 40 mg/kg 体重 / 日の用量で 13 週間強制経口投与し、一般毒性検査項目について検討した。
【結果】投与中、死亡例はなかった。1 週目に雌雄全ての投与群において眼瞼周囲の紅涙、鼻出血及び流涎が認められたが、本症状は軽減し 2 週目以降には観察されなかった。また、雌雄 40 mg/kg 体重 / 日の投与群において、投与 1 週間から有意な体重増加抑制が見られた。血液学的検査では異常はみられなかったが、血液生化学検査では雌 40 mg/kg 体重 / 日投与群において血糖の高値が認められた。雄 40 mg/kg 体重 / 日投与群では複数の臓器で絶対重量の減少が見られたが、体重増加抑制に伴う変化と考えられた。また、病理組織学的検査の結果、雌雄の 40 mg/kg 体重 / 日投与群および雄 10 mg/kg 体重 / 日投与群において、鼻腔嗅上皮の壊死・再生および炎症細胞浸潤が認められた。鼻腔粘膜の変化は、げっ歯類では誘導されやすい病変とされるが、体重増加抑制など他の毒性影響も伴っているため、毒性影響を否定できなかった。
【考察】以上より、本試験の無毒性量は雄で 6.25 mg/kg 体重 / 日、雌で 10 mg/kg 体重 / 日と考えられた。

P-50 ＊
心筋壊死の検出のための免疫組織化学的検討○高井 有一，神鳥 仁志，渡辺 武志
武田薬品工業株式会社 リサーチ 薬剤安全性研究所
Artificial eosinophilic myocardium（MC）is often encountered in the heart and might result in misinterpretation. We
examined whether immunohistochemistry（IHC）could be used to distinguish between artifact（AF）or necrosis（NS）
by using 2 categories of antibody. Myoglobin（Myo）, cardiac troponin T（CTnT）, and fatty acid binding protein3（FABP3）were used to detect leakage due to NS; and complement components 3 and 9（C3 and C9）were used to detect
deposition in necrotic tissue. Formalin-fixed paraffin-embedded heart tissues from vehicle or cardiotoxic agent treatedanimals（rat: isoproterenol, dog: minoxidil, monkey: metaproterenol）were used for IHC. Positive reactions of Myo,cTnT, and FABP3 present in the normal MC were not observed in the necrotic MC of all species tested. Additionally,
positive reactions of Myo and cTnT in monkeys, and FABP3 in rats and monkeys, were also not observed in the AFrelated MC.No positive reactions of C3 and/or C9（monkey only）were noted in the normal MC of all species tested orin the AF-related MC in rats and monkeys. In dogs, a positive reaction of C3 was noted in both the AF-related andポスター要旨necrotic MC. In rats, a positive reaction of C3 was noted only in a partial area of the necrotic tissue. Positive reactionsof C3 and C9 were specifically detected in the necrotic MC in monkeys. In conclusion, IHC for Myo and cTnT in rats,
Myo, cTnT, and FABP3 in dogs, and C3 and C9 in monkeys might be useful markers to differentiate cardiomyocyte NS.

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ポスター

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-51
画像解析ソフト ImageJ を用いた細胞小器官の定量的解析 -PGE2 投与マウスの胃表層粘膜
細胞に認められた変化 ○衣斐 彼方，木原 亨，寒川 祐見，柴主 敏行，高部 浩行，橋本 和人
科研製薬（株）【背景と目的】近年の画像解析技術の進歩は目覚ましく、定性的評価が中心であった病理所見の定量的評価も期待されている。一方、特定の細胞小器官に対する定量的評価法はほとんど確立されていない。本研究では、PGE2 を反復投与したマウスの腺胃表層粘膜細胞に認められた細胞小器官の変化に注目し、画像解析ソフト ImageJ による各種細胞小器官の定量的解析
法を検討した。

【材料と方法】BALB/cAnNCrlCrlj 雌性マウスに対し、PGE2 を 0.018 mg/ 回の用量で 2 日に 1 度、計 10 回皮下投与し、2 日後に胃を採材した（Control、PGE2 群各 10 例）。次に腺胃組織を用い、以下の 4 項目を検討した。

（1）HE 染色下の病理組織学的検査（定性的評価）（2）透過型電子顕微鏡検査（定性的評価）（3）PAS と Cytokeratin 免疫染色の重染色組織の画像解析（定量的評価）（4）LAMP-2 と Cytokeratin の二重免疫染色組織の画像解析（定量的評価）（3）、（4）の画像解析については、各個体につき表層粘膜細胞を 100 細胞以上抽出し、ImageJ を用いて核面積、細胞面積、N/C 比、細胞質に占める分泌顆粒（PAS 陽性）及びライソソーム（LAMP-2 陽性）の割合を算出して t 検定を実施した。

【結果】PGE2 投与群において以下の変化が認められた。
（1）表層粘膜細胞の肥大（2）表層粘膜細胞における分泌顆粒、ライソソームの増加（3）、（4）表層粘膜細胞の細胞面積、細胞質に占める分泌顆粒及びライソソームの割合の有意な上昇、N/C 比の有意な低下【考察と結論】定性的評価の結果、PGE2 を反復投与したマウスの腺胃表層粘膜細胞において、細胞肥大、分泌顆粒及びライソ
ソームの増加が観察された。さらに ImageJ を用いた本評価法により、この結果を定量的に裏付けることができた。以上か
ら、核、分泌顆粒及びライソソームといった細胞小器官の定量的評価法として、本法の有用性が示された。

P-52
経皮曝露感作性試験におけるコレラトキシン及びコレラトキシン B サブユニットの
アジュバント作用○ Cho Young-Man，水田 保子，赤木 純一，豊田 武士，小川 久美子
国立医薬品食品衛生研究所 病理部【目的】小麦タンパク質加水分解物を含有する洗顔石鹸の使用により重篤な小麦アレルギーを発症する事例が多数報告された。当所の生化学部では即時型アレルギー誘発経皮感作性試験法を開発し、タンパク質加水分解物を含む様々な化学物質による経皮感作について、感作性や影響要因の詳細に関する解析を進めている。本研究では、コレラトキシン（CT）及びコレラ
トキシン B サブユニット（CTB）の経皮曝露によるアジュバント作用を、本モデルを用いて解析した。
【方法】実験 1 では、BALB/c マウス（8 週齢雌）の背部を剃毛し、パッチテスターを用いて溶媒に 2 μ g オボアルブミン（OVA）
及び 0.1､ 1､ 10 μ g CT を加えた懸濁液をマウス皮膚に貼付した（3 日間連続貼付 / 週× 4 週）。その後血中の OVA 特異的抗体
価、OVA 腹腔内投与によるアナフィラキシー反応惹起について検討した。また、皮膚、脾臓及びリンパ節について病理組織学的解析を行った。実験 2 では、OVA 及び 0.7 μ g CTB の懸濁液を用いて実験 1 と同様の実験を行った。
【結果】OVA の腹腔内投与で惹起した OVA + CT 群及び OVA + CTB 群では感作後の IgG1 及び IgE 抗体価上昇、惹起後の直腸CT 群は OVA 単独群に比べても有意な高値をしめした。感作部位近傍のリンパ節において、細胞増殖を示す濾胞の数が、溶媒対照群と比較して全 OVA 処置群で増加した。
【考察】OVA+ 被験物質の経皮曝露後、OVA を腹腔内投与する本モデルにおいて、CT は明らかなアジュバント活性が認められたが、同じ成分濃度の CTB による明らかなアジュバント効果は認められなかった。CT は毒素であり、取り扱いが困難である
ことから、今後、CTB の皮膚毒性及び至適濃度に関する検討が必要と考えられた。

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ポスター要旨

温度低下、アナフィラキシー症状、血中ヒスタミン濃度上昇が溶媒対照群に比べ有意に見られた。抗体価においては OVA +The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-53
ベンチマークドーズ（BMD）法を適用した化学物質の毒性評価において適切な毒性病理所見をエンドポイントとして選択するために毒性病理学者が注意すべき点○吉田 緑 1），梅村 隆志 2）
内閣府食品安全委員会，2）ヤマザキ学園大学

1）【背景】BMD 法は、無毒性量を求める評価法とは異なり用量反応関係を全体として関数化し、生体に悪影響を検出できる反応レベルの用量に対する 95% 信頼限界の用量下限値を悪影響のでない指標値（BMDL）とする評価法である。BMD 法は無毒性量が求められない、遺伝毒性懸念物質の評価等に使用されてきた。
【目的と方法】本発表では毒性病理データが適切に BMD 法による評価に反映されるためにデータ作成および評価に携わる毒性病理学者が注意すべき点について評価事例を紹介しながら考察したい。
【結果と考察】近年の BMD 法適用例として、食品安全委員会がアクリルアミドの評価でマウスハーダー腺腫瘍を、EFSA が
3-MCPD の評価でラット尿細管過形成を、JECFA が動物用医薬品の評価で無毒性量が求められないとして肝細胞肥大をそれぞれエンドポイントとして BMDL を算出した。まず毒性病理学者は毒性組織学的所見が数理モデルである BMD 法で評価されていることを認識すべきである。毒性病理データ作成にあたり病変の程度だけでなく病変の発生部位（小葉中心性かび漫性）や発生状況（単細胞壊死か巣状壊死）等の記載は、毒性の機序や経緯の推測に有用な情報となろう。ヒト外挿性に関する機序研究の進展も望まれる。リスク評価が多様な専門家により行われることから、他分野にもわかりやすい説明や考察も有用である。また評価にあたり毒性病理データを的確に解析可能な毒性病理学者の参画があれば適切なエンドポイントの選択に資すると考えられる。
【結論】このように毒性病理学者による毒性機序や病態の毒性病理データへの適切な反映や明確な説明並びに機序研究そして評価への参画は今回取り上げた BMD 法のみならず毒性評価全体における毒性病理学の貢献度を高めるものと考える。

P-54
ウシ摘出角膜の混濁度および透過性試験法（BCOP 法）と病理組織学的検査の併用による
眼に対する弱刺激性物質判定の検討○伊藤 浩太，古川 正敏，遠藤 ちひろ，松浦  正男
株式会社 化合物安全性研究所 安全性研究部 臨床検査・病理検査室
緒言

牛摘出角膜を用いる混濁度および透過性試験法（BCOP 法）はウサギを用いる眼刺激性試験（Draize 法）の代替法として開発され、2009 年に経済協力開発機構（OECD）の化学物質に関するテストガイドライン（TG437）に採択され、2013 年に改訂されている．しかし，BCOP 法では UN GHS 分類の 2A あるいは 2B に相当する弱刺激性物質の判定が出来ないことが課題となっており，UN GHS Category 2 を判定することが出来る in vitro 眼刺激性代替法は確立されていない．我々は多くの被験物質について検討を重ね、BCOP 法と病理組織学的検査による早期回復性の判定を組み合わせる方法で弱刺激性物質の分類 を 試 み た． 材 料 お よ び 方 法

85 の 被 験 物 質 を 用 い て OECD TG437 に 従 っ て 試 験 を 実 施 し，病 理 組 織 標 本 は OECD

Guidance document No.160 に従ってヘマトキシリン・エオジン染色標本を作製した．病理組織学的検査では，角膜上皮の損
傷を 4 段階に分類し，基底細胞層全体の損傷がなく，損傷が角膜基質に至っていない場合には，早期の回復が望める変化とした．結果および考察

角膜損傷の回復性と UN GHS

Category および in vitro 刺激性スコア（IVIS）の関係性について解析しポスター要旨た結果．この方法によって UN GHS No Category + Category 2B と Category 1 + 2A を分類した際の正確度は 81%，偽陰性率
は 19%，偽陽性率は 18% であり，UN GHS Category 2B および No Category の物質の分類が可能であると考えられた．

92

ポスター

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-55 ＊
ラットにおける Paclitaxel 投与による自律神経の病理組織学的変化○中村  賢志，横尾 諭，王 蒙東，下内 孝司，村井 厚子，並木 健吾，栗林 正伯，柳 浩由紀
小野薬品工業（株）研究本部 安全性研究部【背景と目的】抗がん剤である Paclitaxel（ PTX）は，臨床において感覚神経障害や自律神経障害といった末梢神経障害を示すことが報告されている．基礎研究としては，PTX を投与したラットにおける感覚神経の病理組織学的変化に関する報告はな
されているが，自律神経の病理組織学的変化を詳細に解析した報告はない．そこで，先に報告されているラット PTX 誘発末梢神経障害モデルを用いて，自律神経の病理組織学的変化について検討した．
【材料と方法】6 週齢の雄性 SD ラットに PTX を 0，2.5 及び 5 mg/kg の用量で実験 1，2，3，8，9 日に各 1 回ずつ計 5 回投与後，交感神経幹，上頸神経節及び星状神経節の病理組織学的検査を実施した．また，上頸神経節について，特殊染色（クリュー
バ・バレラ染色）及び免疫染色（GFAP，S-100 及び Cleaved caspase-3）を実施し，その病理組織学的変化を詳細に検討した．
【結果】病理組織学的検査の結果，PTX 投与群では，上頸神経節及び星状神経節の神経節細胞において，辺縁性色質融解が認められた．また，クリューバ・バレラ染色においても辺縁性色質融解が確認された．なお，交感神経幹では著変は認められなかった．上頸神経節における GFAP，S-100 及び Cleaved caspase-3 の発現及び分布に対照群との明らかな差は認められなかった．
【結論】ラットへの PTX 投与により，自律神経の神経節細胞において辺縁性色質融解が認められた．今後，さらに超微形態学
的解析，神経傷害マーカーの免疫染色等を行い，本変化の病理学的意義について考察する予定である．

P-56 ＊
T-2 toxin のマウス発達期曝露による海馬歯状回及び小脳における metallothionein 発現増加と発現細胞の同定○中島 康太 1,2），伊藤 優子 1,2），増渕 康哲 1,2），吉田 敏則 1），渋谷 淳 1）
東京農工大 獣医病理，2）岐阜大・院・連合獣医1）【背景及び目的】我々は、かび毒 T-2 toxin（T2）のマウス発達期曝露により、生後 21 日目（離乳時）の児動物海馬歯状回（DG）
で type 1 神経幹細胞及び type 2 前駆細胞を標的とした可逆的神経新生障害と malondialdehyde（MDA）の増加を報告した。
本研究では、T2 マウス発達期曝露による DG 及び小脳において酸化ストレス除去及び神経保護作用のある metallothionein（MT）の発現について検索した。
【材料と方法】妊娠 ICR マウスに妊娠 6 日目から分娩後 21 日目まで T2 を 0, 1, 3, 9 ppm の濃度で混餌投与した。離乳時と成熟後の児動物脳について DG 及び小脳における MT-I/II、グリア細胞関連マーカー及び神経細胞各分化段階マーカーについて
二重免疫染色も含めて免疫組織化学的に解析した。さらに、DG での MT 発現関連因子の遺伝子発現解析を実施した。
【結果】免疫染色では、離乳時の 9 ppm 群で DG 及び小脳で MT-I/II+ 細胞数が有意に増加し、小脳では GFAP+ 細胞数が有意に増加したが、海馬歯状回門の GFAP+ 及び IBA1+ 細胞数に変動は認められなかった。MT-I/II との二重免疫染色では、DG においと共発現を認めた。DG での遺伝子発現では Mt2 、Il1 α 及び Il1r1 において有意な発現増加を認めた。

【考察】T2 のマウス発達期曝露により MT の誘導が DG と小脳で確認された。DG では type 1 神経幹細胞が MT を発現し、神経新生障害に対する保護的作用が示唆され、遺伝子発現解析と先行研究での MDA 増加の結果より、MT は炎症性メディエー
ター及び酸化ストレスにより誘導されたと考えられた。一方、小脳では T2 曝露による明らかな組織傷害はないものの、
GFAP 特異的な MT 発現が示唆されたことから、小脳においても MT を介した保護機能の亢進が考えられた。

93

ポスター要旨て GFAP 及び SOX2 との共発現が認められたが、TBR2、DCX 及び NeuN との共発現は認められなかった。小脳では主に GFAPThe 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-57
ラット発達期の甲状腺機能低下による海馬歯状回の神経新生障害と抗酸化物質併用による神経保護作用の検討○増渕 康哲 1,2），中島 康太 1,2），伊藤 優子 1,2），小柳 美穂子 3），林 新茂 3），吉田 敏則 1），渋谷 淳 1）
東京農工大 獣医病理，2）岐阜大・院・連合獣医，3）三栄源エフ・エフ・アイ株式会社

1）【背景及び目的】抗甲状腺薬である propylthiouracil（PTU）のラット発達期曝露により児動物の海馬歯状回の神経新生障害が生じることが知られており、これに対する酸化ストレスの関与が示唆されている。本研究は、PTU と抗酸化物質である
alpha-glycosyl isoquercitrin（AGIQ）あるいはα - リポ酸（ALA）をラットに同時に発達期曝露し、神経新生障害に対する抗酸化物質の神経保護作用について検討した。
【材料と方法】妊娠 SD ラットに、妊娠 6 日目から分娩後 21 日目（離乳時）まで PTU、PTU+AGIQ 及び PTU+ALA を投与した。
PTU、AGIQ 及び ALA の投与方法及び投与量はそれぞれ飲水（12 ppm）、混餌（0.5%）及び混餌（0.2%）とした。離乳時の児動
物脳について海馬歯状回の顆粒細胞系譜及び歯状回門の介在ニューロンの免疫組織化学的解析を行った。
【結果】PTU 投与群では、無処置対照群と比較して、GFAP、TBR2、DCX 及び NeuN 陽性顆粒細胞系譜の減数及び PVALB 陽性
GABA 性介在ニューロンの減数がみられた。PTU+AGIQ 群では、顆粒細胞系譜の解析において、PTU 群と比較して GFAP 陽性細胞の減数及び SOX2 陽性細胞、TBR2 陽性細胞及び NeuN 陽性細胞の増数がみられ、これらの変化はいずれも統計学的に有意であった。しかし、介在ニューロンの解析では、いずれの介在ニューロンにも変化がみられなかった。PTU+ALA 群では、顆
粒細胞系譜のいずれの細胞についても、PTU 群と比較して細胞数の変化がみられなかった。一方介在ニューロンの解析では、PTU 群と比較して PVALB 陽性細胞が有意に増加した。
【考察】AGIQ 併用により成熟ニューロンを含む顆粒細胞系譜の増加が、ALA 併用により神経新生の制御に関わる一部の介在ニューロンの増加がみられ、AGIQ 及び ALA 共に発達期甲状腺機能低下に起因する海馬神経新生障害に対する保護作用を示
すことが示唆された。

P-58 ＊
幼若白色種ウサギの眼球の組織学的特徴○山際 慶典，根本 真吾，榊 秀之，倉田 昌明
千寿製薬株式会社 研究開発本部【緒言】ウサギは眼科用剤の毒性試験に汎用されるが、薬物曝露部位である眼の発育に関する情報は断片的である。今回我々はウサギの生後眼組織発育の情報を得るため、幼若日本白色種ウサギの眼球及び眼瞼について経日的な組織学的検索を行った。
【材料と方法】21 匹の幼若日本白色種ウサギ Kbl:JW を、生後 1、3、5、7、9、11、14、18、21、24、28、35、及び 42 日に 1
～ 2 例ずつ安楽死させ、採取した眼球・眼瞼組織標本を組織学的に観察した。
【結果】動物は 10 ～ 12 日齢で開眼した。眼瞼では、成長とともにマイボーム腺腺房が増生した。角結膜では、開眼とともに角膜固有質の肥厚、角膜上皮の多層化、結膜杯細胞の増加がみられ、生後 28 日で概ね組織学的に成熟した。水晶体は成長とともに水晶体線維増生により大型化が進んだ。出生後しばらく残存していた硝子体血管や瞳孔膜構造は、それぞれ生後 14 日
あるいは 18 日までに消失した。網膜は、成長とともに内・外顆粒層細胞の減数と分化が進み、視神経は次第に太くなり、生後35 日で概ね組織学的に成熟した。

ポスター要旨【結論】本検討で幼若日本白色種ウサギの眼球の経日的な組織発育を確認でき、幼若動物毒性試験を含む毒性試験でのウサギの齢選択や病理組織評価に有用な基礎的知見となると考えられる。

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ポスター

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-59
Deep Convolutional Neural Network を用いたヒト肺がん細胞像の自動分類○塚本 徹哉 1），桐山 諭和 1,2），寺本 篤司 3）
藤田保健衛生大学 医学部 病理診断科，2）成田記念病院 病理診断科，3）藤田保健衛生大学 医療科学部 放射線学科

1）

近年の治療法の進歩により、肺がんを腺がんと扁平上皮がんに厳密に分類する必要性が出てきた。しかし、細胞診画像では両者の鑑別が困難な場合が多い。本研究では Deep Convolutional Neural Network（DCNN）を用いて、細胞診画像から肺がん組
織型を自動診断する手法の開発を行った。Papanicolaou 染色した肺細胞診検体を対象とし、腺がん、扁平上皮がん、小細胞がんの画像を顕微鏡デジタルカメラで撮影した。分類に使用する DCNN は、3 つの Convolution 層と Pooling 層、2 層のフル結合層からなり、入力層には 256 × 256 画素の画像を与え、出力層の 3 つのユニットから、それぞれの組織型の確信度を得た。
画 像 枚 数 が 少 な い た め、画 像 の 回 転・ 反 転 等 に よ り 枚 数 を 220 倍 に 増 加 さ せ て 学 習 を 行 っ た。DCNN の 処 理 に は GPU（GeForce GTX TITAN X）を用い Caffe を利用し 30,000 回の学習を行った。交差確認法にて分類能力を評価した結果、がん別の正解率は腺がんが 85.5%、扁平上皮癌が 55.2%、小細胞癌が 82.4% であった。識別正解率が 71.9% と比較的良好な結果となり、DCNN が細胞診の画像分類に有効であることが示唆された。今後、扁平上皮がんの識別率向上のため、DCNN の構造最適化を行う必要があると考えられた。

P-60 ＊
制限給餌のカニクイザルにみられた心臓病変○松尾 沙織里 1），藤澤 希望 1），松下 智哉 1），林 修次 1），篠塚 淳子 1），三好 昌夫 1），鈴木 雅実 1,2），
加藤 淳彦 1）
中外製薬（株），2）（株）未来創薬研究所

1）【背景と目的】毒性試験において、被験物質投与群における摂餌量の減少にしばしば遭遇する。その際、各種評価項目に摂餌量減少による二次的変化が認められ、被験物質による直接的な変化との区別が困難な場合がある。我々は、カニクイザルにおける 2 週間の制限給餌試験を行い、その結果については第 44 回日本毒性学会学術年会にて報告した。今回は、その試験において認められた心臓病変の特徴について報告する。
【材料と方法】カニクイザル（雄、3-4 歳）を対照群（n=2）及び制限給餌群（n=3）に分け、制限給餌群には対照群の 25％を 2 週間給餌した。心臓は弊社の標準の切り出し方法を用いて標本作製を行い、病理組織学的検査を行った。また、病変の出現状況
や局在を確認するために、非制限給餌のカニクイザル 5 例を加え心臓の追加切り出しを行い、病理組織学的検査を実施した。
【結果】制限給餌群において、冠状動脈周囲脂肪織を含む脂肪細胞の萎縮が全例で認められた。加えて、右冠状動脈周囲の脂肪織において、単核あるいは多核の泡沫状マクロファージの集簇を主体とした肉芽腫性病変も全例で観察された。制限給餌
群の心臓のその他の部位や、対照群や追加した非制限給餌のカニクイザルの心臓のいずれの部位おいても肉芽腫性病変は観の萎縮に関連し、右冠状動脈周囲に好発する変化であると推察された。従って、毒性試験の中で同様の心臓病変が観察された
場合は、摂餌量減少や体重減少に伴う二次的変化である可能性についても考慮すべきであると考えられた。今後、追加染色を実施し、合わせて報告する予定である。

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ポスター要旨察されなかった。
【結論】制限給餌群のカニクイザルにみられた肉芽腫性病変の病理発生は不明であるが、制限給餌による冠状動脈周囲脂肪織The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-61 ＊
マウス大腸炎モデルの A-kinase anchor protein（AKAP）13 発現解析及び Rho-associatedcoiled-coil containing protein kinase（ROCK）阻害の影響評価○寒川 祐見 1,2），吉田 敏則 2），村山 宗理 1,2），衣斐 彼方 1），木原 亨 1），葛谷 和也 1），小柳 美穂子 3），林 新茂 3），
渋谷 淳 2）
科研製薬，2）東京農工大獣医病理，3）三栄源エフ・エフ・アイ

1）【背景・目的】AKAP13 は細胞内シグナル伝達調節に関わる足場蛋白質であり、下流エフェクターである ROCK は、消化管粘膜の傷害初期に restitution と呼ばれる細胞増殖を伴わない上皮の遊走に関与することが知られている。しかし、AKAP13 とROCK の消化管での役割に関する検討は限定的である。そこで、デキストラン硫酸ナトリウム（DSS）誘発大腸炎モデルの大腸炎初期における AKAP13 の発現及び ROCK 阻害による DSS 誘発大腸炎への影響を解析した。
【方法】BALB/c マウスに、4% DSS を 4、6、8 日間（急性期試験）又は 2% DSS を 16 日間（亜急性期試験）飲水投与すると共に、ROCK のリン酸化阻害剤 fasudil hydrochloride hydrate（FH, 10 mg/kg, twice per day）を反復皮下投与した。
【結果】AKAP13 の発現は、急性期試験では DSS によって誘発される組織傷害に先行して粘膜上皮の細胞質において増加した。亜急性期試験では、粘膜欠損部を覆う restituted 細胞に AKAP13 が発現した。急性期試験において、FH 投与により血漿中 serum amyloid A 濃度及び粘膜傷害が増加の傾向を示した。また、亜急性期試験では、FH 投与によって restitution 率の抑制が認められた。
【考察】FH 投与によって DSS 誘発大腸炎は増悪した。これらの結果から、消化管における AKAP13 の機能として AKAP13/ROCK シグナルを介した restitution の制御が考えられた。また、AKAP13/ROCK シグナルは DSS 誘発大腸炎において傷害に対する初期応答に作用し、粘膜修復及び大腸粘膜の恒常性維持に関与する可能性が示唆された。

P-62
幼若期ラット /Crl:CD（SD）における腎臓の病理組織学的背景データ○井上 紗季 1），畠山 洋文 1），武井 由弘 1），渡辺 純 1），小泉 治子 1），梶村 哲世 1），下井 昭仁 1），佐藤 伸一 1），
岩田 聖 2）（株）イナリサーチ，2）ルナパス毒性病理研究所

1）【目的】小児用医薬品には，幼若動物を用いた毒性試験による安全性評価が推奨される場合がある．幼若動物への薬物の影響を適切に評価するには，各日齢における正常組織を熟知する必要がある．腎臓は薬物代謝に関与し，標的となり易いため，毒性試験において重要な臓器の一つである．我々は昨年の本集会において，腎臓の糸球体の成熟過程について発表したが，本研究では腎臓についてより詳細に検索し，各日齢でみられる正常組織像の特徴をまとめた．
【方法】Crl:CD（SD）ラット，4，7，14，21，28，35 及び 42 日齢の雌雄各 2 ～ 6 匹の計 8 匹ずつ用いて，腎臓を常法に従いホルマリン固定後，ヘマトキシリン・エオジン染色標本を作製し，組織学的観察を行った．
【結果】4 日齢から皮質と髄質は明瞭に区別されていた．4 ～ 7 日齢では，皮質は被膜直下の好塩基性の層，皮質迷路及び髄放線から成る．被膜直下の層にはネフロンの原基である未熟な細胞塊がみられた．髄放線を構成する近位尿細管及び集合管は好塩基性を呈し，核分裂像が多数認められた．髄質は主に集合管から成り，外帯及び内帯の区別は明らかでないが，外側では尿細管の密度が低く，間質に緩やかな結合組織が豊富に認められた．4 日齢では腎乳頭付近においてヘンレのループはほと

ポスター要旨んど認められなかったが，7 日齢では多数みられた．14 ～ 21 日齢では髄質外帯が好塩基性を呈し，尿細管及び集合管が高密度にみられ，核分裂像が多数みられた．間質の結合織は徐々に減少し，21 日齢では僅かにみられる程度になった．28 日齢では髄放線は成熟し，髄質は外帯外側，外帯内側及び内帯に明瞭に分けられ，腎臓全体は成獣に近い像となった． 以上のように，幼若動物を用いた毒性試験にとって有用な背景データが得られた．今後は他組織についても検索を進める予定である．

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ポスター

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P-63 ＊
幼若期ラット /Crl:CD（SD）における皮膚の病理組織学的背景データ○渡辺 純 1），畠山 洋文 1），武井 由弘 1），井上 紗季 1），小泉 治子 1），梶村 哲世 1），下井 明仁 1），佐藤 伸一 1），
岩田 聖 2）（株）イナリサーチ，2）ルナパス毒性病理研究所

1）【目的】我々は第 33 回本学会において幼若ラットの腎臓，眼球及び大腿骨の正常組織について報告した．しかし，幼若動物の正常組織像についての文献は未だ少なく，更なる調査が必要である．皮膚は外界からの刺激に対するバリア機能を果たしているが，小児の皮膚は未熟であり，大人とは化学物質に対する反応が異なると考えられる．そこで今回は，幼若ラットの皮膚について，各日齢でみられる正常組織像の特徴をまとめた．
【方法】Crl:CD（SD）ラット，4，7，14，21，28，35 及び 42 日齢の雌各 4 匹を用い，腹部皮膚について，常法に従いホルマリ
ン固定後，ヘマトキシリン・エオジン染色標本を作製し，組織学的観察を行った．
【結果】表皮：7 日齢まで，成獣と比較して厚い表皮がみられ，顆粒層，有棘層，基底細胞層の観察が可能であった．14 日齢ではこの表皮の厚みはなくなり，21 日齢では成獣とほぼ同様の表皮が認められた．角質層については 14 日齢まで成獣より厚く，21 日齢以降は成獣とほぼ同じ厚みに変化した．毛：4 及び 7 日齢では真皮内に多数の毛包が存在し，毛乳頭が毛母細胞で完全に覆われており，未熟な毛幹もわずかに観察された．14 日齢以降では，多数の毛幹が皮膚表面に突出している像が観察された．また，14 日齢まで真皮内に密集し未熟で大型であった毛胞は，21 日齢以降で小型化し，28 日齢以降で密度が低くなる傾向がみられた．皮脂腺：4 日齢では未熟な皮脂腺がごくわずかに観察され，7 日齢ではその数の増加が認められた．この日齢では，皮脂腺の細胞は毛胞の細胞よりやや大型かつ淡明で，毛胞内に 2 ～ 4 個程度の塊を形成していた．14 日齢では，皮脂腺細胞が大型化し，毛に隣接し 3 ～ 10 個程度の塊を形成する像が観察され，21 日齢ではほぼ成熟した像となった．

P-64 ＊
F344 系 gpt delta ラットの自然発生病変スペクトラム○松下 幸平 1），木島 綾希 1），石井 雄二 1），高須 伸二 1），黒田 顕 1），能美 健彦 2），小川 久美子 1），梅村 隆志 1,3）
国立医薬品食品衛生研究所 病理部，2）国立医薬品食品衛生研究所 変異遺伝部，3）ヤマザキ学園大学 動物看護学部

1）【背景】レポーター遺伝子導入動物の gpt delta ラットは新しい in vivo 変異原性試験ツールとして開発された。近年、本動物を用いた遺伝毒性、一般毒性及び発がん性を同時に評価する包括的試験法が提唱されているが、本動物の実験動物としての背景データに関する報告はほとんどない。そこで本研究では、基礎的データ収集を目的として長期飼育による自然発生病変
スペクトラムを野生型と比較した。

【方法】6 週齢の雌雄 F344 系 gpt delta ラット及びその背景系統である F344 系ラット各 75 匹を同条件下で 2 年間飼育し、全身諸臓器について病理解析を実施した。

【結果】実験期間中の生存率に遺伝子型間で差は認められなかった。雄性 gpt delta ラットの体重は試験開始 10 週目から終了
時まで野生型に比して有意な低値を示した。腫瘍スペクトラム解析では、雄性 gpt delta ラットの副腎褐色細胞腫の発生率が野生型に比して有意な高値を示した（野生型ラット 16/75 例、gpt delta ラット 30/75 例）。一方、雌雄ともに副腎髄質過形成の発生率に遺伝子型間で差は認められなかった。その他、雄性 F344 系ラットで好発する脾臓の大顆粒リンパ球性白血病、精子型間で差はなく、その他の腫瘍及び前腫瘍性病変の発生率にも差は認められなかった。

【考察】雄性 gpt delta ラットにみられた褐色細胞腫の発生率の有意な上昇は、同ラット副腎の髄質過形成並びに雌性 gpt

delta ラット副腎の褐色細胞腫及び髄質過形成の発生率に野生型との差はみられなかったことから、検索母数が小さいことから生じた偶発事象であると結論した。今後、非増殖性病変の病理解析結果を加えて、F344 系 gpt delta ラットの自然発生病変のスペクトラムを検証する。

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ポスター要旨巣の間細胞腫、雌性 F344 系ラットで好発する下垂体前葉腺腫、乳腺の線維腺腫が高率にみられたが、それらの発生率に遺伝

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ポスター

P-65 ＊
IS/Kyo ラットの 30 週齢までの雌生殖器における病理組織学的特徴
―妊娠率及び着床率低下との関連―○岡野 拡，山口 裕子，伊倉 佐織，鈴木 勇，斎藤 翼，星谷 達（株）ボゾリサーチセンター 病理部【背景】IS/Kyo ラット（ISR）は腰椎を主とする脊椎後側弯症及び心室中隔欠損を自然発症することが知られている。ヒトを含め多くの哺乳類は加齢により生殖機能が減退する。ISR においても 20 から 30 週齢にかけて妊娠率及び着床率が顕著に減少
し、20 週齢の ISR では同週齢の Wistar Hannover 系ラット（RccHanTM:WIST）と比較して妊娠率及び着床率の低値が認められる。そこで、ISR の加齢による妊娠率低下と組織形態との関連を考察するために、卵巣及び腟スメアを用いた検索を行った。
【材料と方法】ISR の腟スメアを連日採取し、10、20 及び 30 週齢までの性周期を評価した。対照として WIST についても同様に評価した。20、30 週齢の ISR 及び WIST の卵巣について HE 染色標本を作製、検索した。
【結果】性周期異常が ISR は 10 週齢で 1/36 匹、20 週齢で 13/29 匹、30 週齢で 12/15 匹に認められた。一方、WIST は 10 週
齢で 1/6 匹にのみ認められ、20 及び 30 週齢には認められなかった。病理組織学的には、ISR では加齢により間質腺の割合が増加し、黄体数が顕著に減少していた。また同週齢の WIST と比較して間質腺の割合は高値、黄体数は低値を示した。間質腺への移行を示し、内腔に顆粒膜細胞の残存あるいは好酸性液胞を含む閉鎖卵胞が 30 週齢で増加する特徴がみられた。
【まとめ】週齢別及び WIST との比較より、ISR では性周期の乱れ、卵胞の発育不良ならびに排卵減少が加齢により増強することが示され、これらが妊娠率及び着床率の低下に関連することが示唆された。現在、他の雌生殖器の検索中であり、これらの結果も含め報告する。

P-66 ＊
マウス /Crl:CD1（ICR）の精巣に出現する異常遺残体の背景データ検索○早川 知里，木村 真之，黒田 雄介，林 清吾，竹内 和也，古川 賢
日産化学工業（株）生物科学研究所【目的】マウスの精巣では、異常遺残体は毒性変化として出現するが、背景病変としても認められるため、両者を区別する必要がある。マウスの異常遺残体の背景データに関する知見は少ないため、本研究ではマウスにおける異常遺残体の背景データを収集した。
【材料と方法】Crl:CD1（ICR）マウス、5、6、8、10 及び 19 週齢の雄各 15 匹の右精巣について、常法に従い標本作製後、組織学的観察を行った。形態学的に精子形成段階を I ～ VI 期、VII ～ VIII 期、IX ～ XII 期の 3 ステージに大別し、精細管各 10 個の異常遺残体数を観察した。5 週齢では未成熟でありステージ分類ができなかった為、ランダムに 30 個の精細管を観察した。
【結果及び考察】異常遺残体が認められた動物数は、5 週齢では 11/15、6 週齢では 5/15、8 週齢では 5/15、10 週齢では1/14（外れ値により 1 例除外）、19 週齢では 3/15 であり、加齢とともに減少した。異常遺残体が出現した個体の平均異常遺残体数（平均± SD）は、5 週齢では 7.2 ± 5.2、6 週齢では 6.0 ± 4.6、8 週齢では 7.4 ± 4.4、10 週齢では 6、19 週齢では 17.3
± 8.1 であった。病理組織学的に異常遺残体の多くは好塩基性大型球形塊状を呈した。異常遺残体が認められた精細管のス

ポスター要旨テージは、6 及び 8 週齢では大部分は IX ～ XII 期であり、10 週齢以降では IX ～ XII 期のみであった。異常遺残体は精細管の管腔側あるいは精上皮内に認められ、精細管内の出現部位における割合は、5 ～ 6 週齢では 90％以上が管腔側に認められ、8週齢以上では 50 ～ 65％が管腔側であったものの、精上皮内でも認められた。背景病変として認められる異常遺残体は 8 週
齢までは高頻度に発現すること、IX ～ XII 期に多く認められることが明らかとなった。また、異常遺残体の出現における週齢差については、セルトリ細胞の貪食能との関連が示唆されるが今回は不明であった。

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ポスター

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P-67
マイクロミニピッグにおけるライディッヒ細胞の発達に関する組織学的検索○寒川 彰久，大竹 正剛，塩谷 聡子，柴田 昌利
静岡県畜産技術研究所中小家畜研究センター【背景】マイクロミニピッグは 6 ヵ月齢時の体重が約 10kg と実験用ミニブタの中でも小型である利点を活かし、一般毒性試
験を始め様々な試験研究で利用されている。雄のマイクロミニピッグの性成熟時期は精子形成や副生殖腺の発達状況より
4.5 ヵ月齢頃と報告してきたが、ライディッヒ細胞の発達については未だ検討されていない。
【目的】マイクロミニピッグにおけるライディッヒ細胞の発達を組織学的側面から明らかにする。
【材料と方法】0 日齢～ 12 ヵ月齢のマイクロミニピッグ合計 28 頭の精巣について常法に従いパラフィン包埋切片を作製した。染色は HE に加え、特殊染色として PAS、シュモール染色を実施し、免疫組織化学ではステロイド代謝酵素等に対する染色性を確認した。また、組織形態の計測と血清中テストステロン濃度検査も合わせて実施した。
【結果】ライディッヒ細胞は 0 日齢では部位による形態的違いはほとんど認められなかった。1.5 ヵ月齢以降では精細管周囲に位置し好酸性細胞質を有する大型な細胞と白膜下や結合組織間に存在する小型な細胞の 2 種類の細胞が認められ、共に免疫染色で細胞質が P450scc と Aromatase に陽性を示した。4.5 ヵ月齢以降で大型の細胞内には大小様々な好酸性顆粒が出現し、同顆粒は P450scc に強陽性を呈した。リポフスチンは 6 ヵ月齢の一部と 12 ヵ月齢のすべての個体で観察された。精巣断面に占めるライディッヒ細胞の面積割合は 1.5 と 3 ヵ月齢で約 20% であったが、4.5 ヵ月齢以降では約 35% で推移した。血
清中テストステロン濃度は 1.5 ヵ月齢から 4.5 ヵ月齢にかけて顕著な増加がみられた。
【結論】マイクロミニピッグのライディッヒ細胞は細胞・組織形態の発達状況より 4.5 ヵ月齢で成熟期に達すると推察された。これは精子形成等からの性成熟時期を補完する結果であった。

P-68 ＊
ゲッチンゲンミニブタにおける精巣毒性評価のための精子形成サイクルステージ分類○山田 直明，涌生 ゆみ，爰島 洋子，土居 卓也，菅野 剛，土谷 稔
ＬＳＩメディエンス（株）試験研究センター 病理研究部
実験動物の精巣毒性評価には，精子形成サイクルを考慮した評価方法が用いられている．Jorgensen らは，ゲッチンゲンミニ
ブタ（Göttingen Minipigs TM，以下 GMP）の精細管の精子形成サイクルステージをセルトリ細胞と精子細胞の関係等を目安に分類している（1998）．しかし，この方法はラットやイヌで用いられている分類方法と差異がある．そこで，我々はイヌのス
テージ分類を参考に GMP の精子形成サイクルを分類してドキソルビシン（DOX）で誘発した精巣の毒性変化を評価し実用性を検討した．
【方法】9-10 か月齢の GMP に DOX 0.5 mg/kg を第 1，8 日に静脈内投与し，第 15，43，64 日に剖検した（各 2 匹）．精巣はブアン液にて固定し，定法に従って HE 染色および PAS 染色標本を作製し鏡検した．
【結果】GMP はイヌと同様に一つの精細管に複数のステージが混在し，精子形成サイクルのステージもイヌとほぼ同様に
VIII ステージに分類できた．DOX 投与第 15 日では，ほぼ全ステージの精母細胞の減少・消失が認められた．第 43 日では，
elongate 精子細胞は認められず，精祖細胞と精母細胞，round 精子細胞が認められ，セルトリ精細管も多く認められた．第
組織変化から，DOX は主に精祖細胞を傷害することが示された．
【考察】本実験で用いた VIII ステージ分類による評価によって，GMP でも，DOX の精祖細胞への障害性変化を評価することができた．他種の動物間で精巣毒性を比較する上でも，イヌやラットのステージ分類に基づいたステージ分類方法は利点があると考えられる．

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ポスター要旨64 日では，ほとんどの精細管がセルトリ精細管であったが，ほぼ正常に回復した精細管も僅かに見られた．これら経時的なThe 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-69
化合物投与により神経症状が顕在化したビーグル犬における肉芽腫性髄膜炎の 1 例○見鳥 光 1），寳来 直人 2），梶川 悟 1），小野 美穂子 1）
アステラス製薬株式会社 安全性研究所，2）株式会社新日本科学 安全性研究所

1）【目的】予備的な安全性薬理試験において，2 例のビーグル犬に 30，100，300 mg/kg の投与量で化合物を投与したところ，
1 例で 30 mg/kg 投与時から常同行動や身もだえといった薬理作用からは想定できなかった神経症状が認められた。もう1 例では 300 mg/kg 投与時においても同様の症状はみられなかったことから，神経症状の原因となる基礎疾患の有無を確認する目的で脳の MRI 検査及び全身諸臓器の病理組織学的検査を含む各種検査を実施した。
【材料及び方法】予備的な安全性薬理試験において症状を呈した雄のビーグル犬（35 ヶ月齢）について体重，眼科学的検査，血液・血液化学的検査に加え，脳の MRI 検査を実施した。検査後，剖検を行い，脳の MRI 検査異常部位及び全身諸臓器について，定法に従い病理組織学的検査を実施した。また，脳については抗 Iba-1 抗体を用いた免疫染色を施した。
【結果】MRI 検査の結果，T1 及び T2 強調画像において大脳左側と比較し，大脳右側前頭葉に高信号域がみられた。病理組織学的検査の結果，MRI 検査異常部位に一致して脳溝の拡張が認められた。また，大脳，小脳，橋に Iba-1 陽性類上皮細胞を伴う
多巣性の髄膜炎及び白質の囲管性細胞浸潤が認められ，肉芽腫性髄膜炎と診断した。その他器官・組織に症状との関連が疑われる変化は認められなかった。また，体重，眼科学的検査，血液・血液化学的検査及び剖検で明らかな異常はなかった。
【結論】同化合物を用いた予備毒性試験において神経症状は認められなかったことから，これらの病変によって化合物投与時の神経症状が顕在化した可能性が示された。

P-70 ＊
Sprague-Dawley ラットの胸腔に自然発生した癌肉腫の 1 例○木嶋 恵，末廣 美紀，伊東 志野，二井 愛介
生化学工業（株）【背景と目的】癌肉腫は、上皮性成分と非上皮性成分が混在する稀な悪性腫瘍で、非上皮性成分は骨、軟骨並びに横紋筋等へ分化することが知られている。ラットでは、子宮や乳腺で少数例報告されているのみであるが、今回、胸腔内に自然発生性の癌肉腫を認めたため、その病理組織学的特徴について報告する。
【症例と方法】本症例は、モニタリング動物として飼育された 21 週齢の雄性 Crl:CD（SD）ラットで、死亡後発見された。剖検
時に認められた胸腔内の腫瘤について、HE 染色、Movat Pentachrome 染色、PAS 染色及び各種免疫組織学的染色を実施した。
【結果】剖検では、胸腺は確認できず、心臓、肺表面に結節状の腫瘤（割面白色）が密在していた。組織学的検査では、腫瘤は、胸腺を包囲していたが連続性はみられず、一方、肺との連続性が確認された。腫瘤は、巣状に配列した腫瘍細胞と、それらを結節状に取り囲むように走行する少量の間質から構成されていた。腫瘍細胞は、主に大型の核を持ち弱好酸性の細胞質を有する CytokeratinAE1/AE3 陽性細胞と、充実した細胞質を持つ小型の Vimentin 陽性細胞から成り、両抗原を共発現している

ポスター要旨

細胞は認められなかった。これらの細胞は、α -SMA、S-100、並びに中皮マーカーである mesothelin 及び podoplanin に陰性を示した。細胞間基質は、Movat 染色のアルシアンブルー及び PAS 染色陽性であった。さらに、結節内には軟骨及び骨の形成が認められた。
【考察】本症例は、悪性中皮腫、肺癌、軟骨肉腫及び骨肉腫が疑われたが、上皮性成分と非上皮性成分が混在し、非上皮性成分
は軟骨及び骨への分化が認められたことから、癌肉腫と診断した。

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ポスター

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-71 ＊
若齢 Crl:CD（SD）ラットの空腸における自然発症性の高分化型管状腺癌の一例○浅岡 由次，増野 功一，藤澤 可恵，殿村 優，田尻 美奈子，加藤 祐樹，柏木 絵美，土屋 紀子，鳥井 幹則，
上野 元伸
塩野義製薬（株）開発研究所【背景】ラットの小腸における自然発症性の腫瘍の発生は極めて少なく，若齢における報告はほとんどない．今回，8 週齢の雄性 SD ラットの空腸における自然発症性の腺癌の症例を報告する．
【症例】本例は 1 ヵ月間反復経口投与毒性試験の中間用量群の雄性 Crl:CD（SD）ラットで，投与開始 12 日目から体重減少が認められ，投与 16 日目に安楽死された（解剖時 8 週齢）．剖検時，胃，十二指腸及び空腸の拡張，空腸の重積，大腸の暗赤色内容物が認められた．空腸の重積部分の粘膜面には大小の表面滑沢で膨隆する充実性の白色腫瘤（直径約 4 から 10 mm）が認められた．なお，高用量群を含めた他の個体に消化管の変化が認められなかったことから，病変は自然発症性の変化と判断した．
【結果及び考察】腫瘤は主として粘膜内で粘膜上皮細胞が管腔様構造を有して増殖し，それらの構成細胞は細胞内に PAS 染色
陽性の粘液を有する杯細胞及び好酸性顆粒を有するパネート細胞が多数認められ，ときにクロモグラニン A 免疫染色陽性の
基底顆粒細胞も認められた．多量の粘液産生と貯留を呈する異型の腺管構造が混在して認められたが，その領域は概ね全体の 50% 未満であった．一方，粘膜筋板は部分的に断裂し，粘膜下織には核分裂像が豊富で多層化する異型細胞からなる基底膜形成が不完全でいびつな管腔様構造の浸潤増殖巣が認められ，周囲に線維化や炎症性細胞浸潤を伴っていた．腫瘤と正常組織の境界に明瞭な圧排増殖は認められなかった．以上の組織学的特徴から，本例を高分化型管状腺癌と診断した．若齢
ラットの空腸における高分化型管状腺癌は報告がなく，極めてまれな症例と考える．

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盲腸結腸重積を呈したイヌに認められた過誤腫○小野 美穂子，高橋 美和，中原 豊，坪田 健次郎，松本 正博
アステラス製薬（株）安全性研究所【目的】盲腸結腸重積は結腸内へ盲腸が反転して入り込む病態であるが，発生は極めて稀であり，原因に関する報告も乏しい。今回，イヌにおける盲腸過誤腫に起因すると考えられる盲腸結腸重積を経験したので報告する。
【材料及び方法】4 週間反復投与毒性試験の被験物質投与群に供された 12 か月齢の雌性ビーグル犬 1 例で，投与期間中の症状，体重，摂餌量，血液学的検査及び血液生化学検査に薬物投与関連以外の変化はなかった。剖検時に盲腸は反転して完全に結腸内へ入り込み，先端部の粘膜は暗赤色であった。盲腸は反転したまま採材し 10% 中性緩衝ホルマリン液で固定後パラ
フィン切片を作製し，HE 染色及び各種抗体（α SMA，neurofilament，CD34，Ki-67）による免疫染色を施し病理組織学的検査を行った。
【結果】先端部粘膜の暗赤色部には潰瘍が認められた。漿膜側では，成熟した大小様々な血管，平滑筋束，神経線維束及び大型の神経細胞が不均一に混在する組織が被膜を持たずに漿膜に沿って増殖していた。組織は一部で縦走筋層内に浸潤し，さらに結合組織に沿って増殖していた。回腸及び結腸漿膜において同様の変化は認められなかった。
る神経細胞，及び血管腫様血管の組織学的特徴により neuromuscular and vascular hamartoma（NMVH）と診断される。
NMVH は主に小腸で発生し，盲腸における報告は非常に稀である。本症例は盲腸においてヒト neuromuscular and vascularhamartoma に相当する過誤腫が発生し，それにより盲腸結腸重積が起こった極めて稀な症例と考えられた。

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ポスター要旨【結論】病理組織学的検査より，盲腸漿膜側に増殖した組織は過誤腫と判断した。ヒトでは平滑筋束，無髄神経線維束，散在すThe 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-73
ミニブタの壊死性動脈炎を伴う急性出血性胃炎の 1 症例
○江田 景，赤根 弘敏，市川 敦子，清水 茂一，小松 弘幸，秋江 靖樹
シミックファーマサイエンス株式会社【目的】壊死性血管炎は，家畜では牛，馬，豚などで報告されている．我々は，ミニブタで壊死性動脈炎を伴う急性出血性胃炎を経験したので報告する．
【材料及び方法】本症例は所有動物として飼育していたが，１週間前より摂餌量が減少し，突然死した 11 ヶ月齢の雄クラウン系ミニブタである．常法に従って HE 及び PTAH 染色標本を作製し，病理組織学的検査を行った．
【結果及び考察】剖検では，胃体部及び胃幽門部粘膜に顕著な水腫，出血及び壊死が認められた．また，小腸及び大腸粘膜の限局性出血，腸間膜及び幽門付近のリンパ節の暗赤色，血性心嚢水貯留，心臓及び肝臓の点状出血，肝臓の腫大及び多発性梗塞
巣，腎臓の腫大，うっ血及び出血などが観察された．病理組織学的検査では，胃粘膜に出血性壊死及び炎症細胞浸潤，粘膜下組織に水腫，出血及びリンパ管の拡張，胃の小動脈及び細動脈のフィブリノイド壊死及び血栓形成が観察された．PTAH 染色
では，胃粘膜の毛細血管に多数の線維素血栓がみられた．同様の病変は，心臓，肝臓，腸管，膵臓，リンパ節，副腎，腎臓などの小動脈及び細動脈に多発した．更に，心臓及び肝臓の梗塞，腎糸球体の微小血栓形成及び限局性壊死，尿細管の壊死などもみられた．急性出血性胃炎は感染症，ストレスなどにより発症することが知られているが，本症例における顕著な胃粘膜出血性壊死は、胃の動脈のフィブリノイド壊死及び血栓形成による虚血性変化と推察された．

P-74
昼行性動物マイクロミニピッグにおける無麻酔下経時的脳脊髄液採取法の確立○川口 博明 1），阿部 正治 1），牛飼 美晴 1），大井 紗弓 2），柚川 藍色 2），吉川 哲也 2），和泉 博之 2），谷本 昭英 3），
堀内 正久 1）
鹿児島大学大学院医歯学総合研究科
株式会社新日本科学安全性研究所，
3）
鹿児島大学大学院医歯学総合研究科
1）
2）

衛生学・健康増進医学分野，
病理学分野【緒言】脳脊髄液（CSF: Cerebrospinal fluid) の研究は、脳科学、認知症をはじめとして、多岐にわたって行われてきた。動物実
験においては、大槽穿刺や穿頭術による脳室内カテーテル留置による CSF 採取が報告されているが、侵襲性や手技の困難さなどの問題がある。本研究ではヒトと同様に昼行性であるミニブタ（マイクロミニピッグ）を用いて、経皮的にくも膜下腔カテーテルを大槽内に留置し、無麻酔下で経時的に CSF を採取する方法を確立した。
【方法】2 歳齢雌 2 頭（体重約 19kg）を用いた。麻酔・透視下、腹臥位として、21G スパイナル針で腰仙椎間隙より、経皮的にくも膜下腔にアプローチした。ガイドワイヤーを用いて、ポリエチレンチューブを挿入し、先端位置は大槽に位置するように固定した。カテーテル留置後、無麻酔下で経時的に CSF を採取し、１頭は、カテーテル刺入に対する回復期間（血球細胞数を指標）を検討し、別の 1 頭は、メラトニンの日内変動（生化学検査含む：LDH、CK、Na、K、glucose、total protein、glutamine、

ポスター要旨alanine）を検証した。
【結果】留置直後の CSF は淡血性であり、手技に伴う血液混入が考えられた。7 日後に透明となったものの、赤血球は残存していたが（約 600 個 / μ l）、21 日時点で赤血球はほぼ消失した。メラトニンは夜間で日中よりも高値とヒトと同様の日内変動を示したが、生化学所見に日内変動はみられなかった。
【まとめ】本 CSF 採取マイクロミニピッグモデルは、無麻酔下で経時的 CSF 採取が可能であり、睡眠などの脳科学研究や化学物質の毒性評価への応用が考えられる。

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The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-75 ＊
RccHan：WIST ラットにみられた子宮の部分的形成不全の 2 例○下間 由佳子，武田 周二，緒方 敬子，串田 昌彦
住友化学（株）生物環境科学研究所【背景】発生異常による子宮の形成不全は複数の動物種で報告されているが、RccHan：WIST ラットにおける報告例は少ない。今回我々は RccHan：WIST ラットの無処置動物において、自然発生性の子宮の部分的形成不全を 2 例経験したため、その病理学的特徴について報告する。
【症例】2 例とも同一生産場から入荷した別ロットの RccHan：WIST ラットであり、解剖時の週齢は 9 および 14 週齢であった。いずれの動物も一般状態に異常は認められなかった。剖検において、右側子宮の卵管近位部に無色透明の液を貯留する
シストの形成が認められた。シストより尾側の子宮角は正常な子宮構造が確認されず、紐状構造物により子宮頸部と連続していた。なお、左右の卵巣、卵管および腎臓は正常な位置に存在し、著変は認められなかった。組織学的検査において、シストは子宮内膜上皮様の単層立方上皮により内張りされており、内膜が薄く、子宮腺はみられなかった。免疫染色の結果、紐状構造物はα -SMA 陽性の平滑筋や結合組織および血管で構成されており、Cytokeratin AE1/AE3 陽性の上皮はみられず、子宮内膜構造は認められなかった。
【考察】本病変は、発生過程において片側子宮が正常に形成されず、子宮頸部との交通が途絶され、分泌液が内腔に貯留してシスト状に拡張した可能性が考えられた。本例と同質の子宮病変は、ミューラー管の発生異常による雌生殖器の形成不全として、牛、猫、ヒトなど複数の動物種で報告されている。ラットでは ACI 系や UUA 系において、腎臓の形成不全を伴い雌雄生殖器の形成不全が生じることが知られているが、RccHan：WIST における報告例はなく、今回の症例は RccHan：WIST ラットでみられた子宮の部分的形成不全の初めての報告である。

P-76 ＊
若齢雄性 SD ラットに認められた乳腺腫瘍についての病理組織学的検討○吉田 翔太，田中 英樹，二宮 芙美子，松原 健嗣，山本 宏美，鈴木 智，森田 文雄，箱井 加津男
大鵬薬品工業株式会社 研究本部
【背景】ラットにおける自然発生性乳腺腫瘍は，一般に老齢雌性ラットに認められるが，少数ながら若齢雌性ラットでの発生も報告されている．しかしながら，我々の調査範囲では若齢雄性ラットにおける発生の報告はほとんどない．今回，毒性試験の媒体対照群に供された 7 週齢の雄性 SD ラットに自然発生性の乳腺腫瘍が認められたため，病理組織学的な検討結果について報告する．
【材料と方法】7 週齢の雄性 Crl:CD（SD）ラットを剖検し，採材された鼠径部皮膚及び乳腺を 10% 中性緩衝ホルマリン溶液にて固定後，常法に従ってパラフィン包埋切片を作製した．肉眼的に腫瘤は確認できなかったが，HE 染色標本上で，乳腺組織中に約 8.5 × 6.0 mm の腫瘤が認められ，この腫瘤について，特殊染色及び免疫組織化学的染色を実施し，病理組織学的検討を実施した．
【結果】腫瘤の大部分は線維性結合組織に区画された多中心性の増殖巣によって形成されていた．腫瘤と正常な乳腺組織との境界は不明瞭であり，腫瘤と考えられる領域内にも非腫瘍性の乳腺腺房等の既存構造が散見された．腫瘍細胞の増殖巣で乳頭状又は腺管状に増殖する領域も認められ，この領域では腫瘍細胞はやや核異型を示し，有糸分裂像も多数認められた．
【考察】7 週齢という若齢かつ雄性のラットにおける乳腺腫瘍の発生は非常に稀である．当日は特殊染色や免疫組織化学の結果に加え，本腫瘍の特徴像や組織診断名を踏まえて報告する．

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ポスター要旨は，腺腔形成の他，筋上皮細胞様細胞による偽腺腔形成や塊状の増殖が認められた．また，腫瘤中央部において，腫瘍細胞がThe 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-77 ＊
若齢成熟 Wistar ラットで認められた肺転移を伴う皮膚血管肉腫の 1 例○鈴木 志野，高木 理恵，平井 和也，平田 淳也，樫本 幸子，赤沼 三恵
株式会社クレハ 安全性研究・評価センター【目的】ラットにおいて血管肉腫の発生は少なく、若齢ラットではごく稀である。さらにラットの皮膚に発生した血管肉腫の報告はない。今回、14 週齢の雄性 Wistar ラットに肺への転移を伴う皮膚血管肉腫が認められたので報告する。
【症例】微生物モニタリング動物として飼育されていた 14 週齢の雄性 Wistar ラットの背部皮膚に腫瘤が認められ、自発運動の低下及び腫瘤からの出血がみられたため、安楽死させた後、剖検した。肉眼所見として背部皮膚に径 10 mm 大の暗赤色腫瘤がみられ、表面の一部は潰瘍状であった。また、肺の全葉に径 5 ～ 15 mm 大の暗赤色腫瘤が散在して認められた。皮膚及び肺腫瘤からのヘマトキシリン・エオジン染色標本を鏡検したところ、類円形核と、豊富な細胞質を有する紡錘形細胞が赤血球を容れた大小の血管様空隙を形成しながら増殖し、広範囲な壊死が病巣の中央部に存在していた。免疫組織化学染色にて、増殖する紡錘形細胞は von Willebrand factor 及び CD34 に陽性であり、Ki-67 に高い陽性率を示した。
【考察】組織形態的及び免疫組織化学的に血管内皮由来の悪性腫瘍であったことから血管肉腫と診断した。また、腫瘍の大きさや分布から皮膚が原発と判断した。ヒトでも皮膚血管肉腫の発生は稀であり、肺転移する例が多く予後不良である。免疫
組織化学的な Ki-67 及び programmed death - ligand 1（PD-L1）の発現が予後を予測するマーカーとなるとの報告があるた
め、ヒトと同様に肺転移を示した本例についても現在検討中である。

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老齢 SD ラットの後腹膜に自然発生した脱分化型脂肪肉腫○内藤 智春 1,2），齋藤 剛 2），樋口 珠美 1），猪又 晃 1），林 大久生 2），山内 敦子 1），剣持 明 1），柿沼 千早 1,2），
八尾 隆 2）
富士フイルム株式会社 R&D 統括本部 医薬品・ヘルスケア研究所，2）順天堂大学医学部人体病理病態学講座

1）【背景】げっ歯類（ラット）における自然発生性の脂肪肉腫は非常に稀である。特に、多臓器への転移を伴う悪性脂肪肉腫はこれまで報告されていない。今回我々は、背景データ収集のために長期飼育した Sprague-Dawley（SD）雄ラットに多臓器転移を伴う悪性度の高い脱分化型脂肪肉腫を認めたため報告する。
【材料と方法】本症例において 89 週齢より体重減少がみられ、104 週齢で自発運動減少及び腹部膨満を呈し瀕死状態に陥ったため、麻酔下で安楽死後に剖検を実施した。摘出した臓器は常法に従い、ホルマリン固定、パラフィン包埋切片を作製し、HE 染色、脂肪染色及び各種免疫染色を行い、光顕による検査を実施した。腫瘍組織の一部については戻し電顕による検査を実施した。
【結果】剖検時に、腹腔内全域で大量の脂肪塊かつ血性腹水を伴う腹膜播種像、肝臓の退色及び腎臓に乳白色の腫瘤を認めた。光顕による検査の結果、腫瘍組織は成熟脂肪様の細胞、紡錘形細胞、及び脂肪芽細胞からなる多型性に富む形態を示した。同様の腫瘍細胞は胃、肺及び肝臓において血行性に転移していることが認められた。脂肪染色においては、成熟脂肪様のポスター要旨細胞及び脂肪芽細胞が陽性像を示した他、胃粘膜下層及び成熟脂肪周囲に局在する紡錘形細胞に陽性像を認めた。免疫組織学的検査の結果、これらの腫瘍細胞は S100 陽性像を示した。以上より、本症例は高分化型細胞、脂肪滴を含有する脂肪芽細
胞及び紡錘形細胞が混在する脱分化型脂肪肉腫と診断した。
【結論】本症例においてみられた、多臓器転移を伴う自然発生性の悪性脱分化型脂肪肉腫は、老齢 SD ラット症例としては初の症例報告となる。

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P-79
NOG マウスに発生した皮下腫瘍の一症例○赤根 弘敏，江田 景，市川 敦子，清水 茂一，小松 弘幸，秋江 靖樹
シミックファーマサイエンス株式会社【目的】再生医療等製品の安全性評価試験では、重度免疫不全マウスである NOG マウス（NOD/Shi-scid，IL-2R γ KO Jic）を使用しているが、自然発生腫瘍の報告例は少ない。今回、無処置雄 NOG マウスの大腿部皮下に腫瘍を経験したので、病理組織学的に検討した。
【方法】32 週齢時に切迫剖検した NOG マウスの皮下腫瘤について、ホルマリン固定後、HE 染色および免疫組織化学染色を施して病理組織学的検査を実施した。
【結果および考察】剖検時、大腿部皮下において直径約 5.5 cm の灰白色腫瘤がみられた。その他の全身諸臓器において異常は認められなかった。病理組織学的に、腫瘤は、核異型が強く、細胞質が比較的乏しい腫瘍細胞で構成されていた。これら腫瘍細胞は充実性に増殖しており、大型の淡明な核を有する細胞も散在していた。さらに有糸分裂像を有する細胞も多数みられた。腫瘤の中心部は壊死に陥っており、一部に骨形成もみられた。これら HE 染色での所見に加え、さらに、免疫染色による検討を追加して報告する。

P-80
ビーグル犬の舌下腺腺房細胞にみられた硝子滴を伴う水腫変性○押方 孝文，満石 三喜男，浜村 政夫（株）ＬＳＩ メディエンス【諸言】ビーグル犬の舌下腺において，硝子滴を伴う水腫変性が認められたので報告する．
【症例】2 週間反復経皮投与毒性試験の対照群として試験に供された雄のビーグル犬で，7 か月齢で剖検された．肉眼的には，舌下腺を含めた唾液腺やその他の器官に異常は認められなかった．10% 中性緩衝ホルマリンで固定したのち，パラフィン切片を作製し，HE，PAS，Azan 染色を実施した．また，電子顕微鏡による検査も実施した．
【結果】HE 染色において，舌下腺の漿液腺の腺房細胞に弱好酸性の空胞及び好酸性顆粒がみられ，多くの弱好酸性の空胞内に硝子滴が認められた．好酸性顆粒及び硝子滴は，いずれも PAS 染色で陰性，Azan 染色で赤色を呈した．電顕的には，それぞれ
粗面小胞体内における高電子密度の顆粒及びその凝集物として認められた．弱好酸性の空胞は，PAS 染色で陰性を呈し，
Azan 染色では硝子滴に加え，赤色に染まる粒子状物を含んでいるのが確認された．電顕的には，空胞は拡張した粗面小胞体
であり，その中に粒子状物に対応する高電子密度の顆粒が疎に分布していた．
【まとめ】以上の形態的特徴から，ビーグル犬の舌下腺腺房細胞にみられた硝子滴を伴う水腫変性と診断した．なお，本病変

ポスター要旨でみられた硝子滴，好酸性顆粒及び粒子状物については，粗面小胞体内の合成蛋白の凝集物と考えられた．

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The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-81
ラットを用いたセルレイン投与による膵外分泌毒性の検討○田中 英樹，吉田 翔太，二宮 芙美子，藤枝 光博，松下 宗史，松原 健嗣，山本 宏美，鈴木 智，森田 文雄，
箱井 加津男
大鵬薬品工業株式会社 研究本部
【目的】薬物誘発性の膵外分泌傷害に遭遇する機会は稀であり，その病理発生及び組織学的変化と膵逸脱酵素変動の関係性については不明な点が多い．今回，膵外分泌傷害の初期像及び膵逸脱酵素変動と病理組織学的変化の相関性を検索する目的で，膵外分泌傷害を誘発するコレシストキニン類似体のセルレインをラットに単回投与し，以下の検討を行った．
【材料と方法】6 週齢の雌性 Crl:CD（SD）ラットに，セルレインを 0，10 及び 50 μ g/kg の用量で単回腹腔内投与後，4 及び24 時間にアミラーゼ・リパーゼを含む血液化学的検査，血液学的検査及び血液凝固検査を実施し，剖検後，病理組織学的検査を実施した．
【結果】50 μ g/kg 投与群で，投与後 4 時間に血中アミラーゼ・リパーゼの高値，肉眼的に膵臓の水腫，病理組織学的に膵腺房細胞の空胞変性 / 単細胞壊死が認められた．一方，投与後 24 時間では，4 時間時点の組織学的変化と同様の変化がみられた
が，膵臓の肉眼的水腫や逸脱酵素の高値は認められなかった．現在，膵臓について，免疫組織化学的及び透過型電子顕微鏡による検索を実施中であり，その結果も併せて報告する．

P-82 ＊
自動車排出粒子はリソソームに集積しリゾチームで溶解される○古賀 のどか，小野寺 章，屋山 勝俊，横山 聖，今村 麗，谷川 千明，大元 知貴，井上 雅己，角田 慎一，
河合 裕一
神院大薬 LCMP【背景】本研究グループは、大気中に浮遊する微粒子の生体影響の解明を目的に、自動車排出粒子（VEP）の炎症性・毒性に着目した研究を進めている。一方で、皮膚炎モデル試験や細胞毒性試験では、VEP の生体影響を担保する実験結果は得られていない。また、培養細胞を用いた解析では、VEP はリソソームに集積することを見出しており、VEP の毒性の程度はリソソー

ム分解と関連するものと考えられた。そこで本研究は、リソソームにより VEP が溶解されるか否か、および in vivo 曝露による VEP の動態と局在について検討した。

【材料・方法】In vitro の解析には人鼻腔上皮細胞（HNEpC）を用いた。In vivo の解析には C57BL/6 マウスを用いた。VEP は国立環境研究所の環境標準物質を用いた。リゾチームは卵白由来のものを用い、肉眼的観察と FACS により VEP の溶解性を評価した。VEP の動態と局在は透過型電子顕微鏡（TEM）で観察した。

【結果】リソソームは pH 5 前後の酸性溶液及び複数の分解酵素を含み、細胞内外成分の溶解により細胞内の恒常性維持に寄与している。HNEpC へ VEP を 24 時間処置すると、VEP はリソソーム内に集積し、その後 5 日間培養すると消失していた。試ポスター要旨験管内で VEP をリゾチームで処理すると、黒色 VEP 分散液が透明になった。現在、VEP は生体でどのように処理されるかを明らかにするため、in vivo 曝露による VEP の影響を解析している。

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ポスター

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-83 ＊
自動車排出粒子刺激による鼻咽頭関連リンパ組織の免疫応答への影響○横山 聖，小野寺 章，屋山 勝俊，今村 麗，谷川 千明，大元 知貴，井上 雅己，角田 慎一，河合 裕一
神院大薬 LCMP【背景・目的】大気中の微小粒子状物質は、喘息や気管支炎の原因となることが危惧されている。これら病態の発症には鼻腔免疫との関連が想定されるが、詳細は明らかにされていない。鼻腔免疫は、ヒトの扁桃・アデノイド、げっ歯類の鼻咽頭関連リンパ組織（NALT）がその中心を担い、大気中の微小粒子状物質の刺激もこれらリンパ組織での免疫応答を惹起すると想定される。そこで本研究では、NALT における微小粒子状物質の局在や抗体産生について検討した。
【材料・方法】実験動物は、8 週齢の NC/Nga 雄性マウスを用いた（n = 4）。微小粒子状物質は、環境標準物質の自動車排出粒子（国立環境研究所）をモデル材料として用いた。NALT は、摘出後に Alys 培地で 24 時間培養し解析に用いた。抗体産生は、
IgA、IgG、IgE、IgM について ELISA 法で測定した。
【結果・考察】NALT へ VEP を 24 時間または 48 時間処置し、培養上清を回収した。次に、培養上清に含まれる免疫グロブリンの量を ELISA 法で測定した。培養上清に含まれる IgA 量は、無処置が約 50 ng/mL、VEP 処置は約 50 ng/mL であった。IgG 量は、無処置が約 450 ng/mL、VEP 処置約は 300 ng/mL であった。IgE 量は、無処置が 0 ng/ml、VEP 処置は 0 ng/mL であった。IgM 量は、無処置が約 30 ng/mL、VEP 処置は約 30 ng/mL であった。以上より、NALT での液性免疫の成立において、VEP 刺激の関与は低いと考えられた。現在、抗体産生に関する再現性を確認するとともに、NALT における VEP の局在と組織レベルでの影響について検討している。

P-84 ＊
都市大気粉塵は鼻腔上細胞の増殖能を抑制する○谷川 千明，小野寺 章，屋山 勝俊，横山 聖，今村 麗，大元 知貴，古賀 のどか，井上 雅己，角田 慎一，
河合 裕一
神院大薬 LCMP【背景】大気中の微小粒子は、喘息や鼻アレルギーなどの呼吸器疾患の原因となると考えられている。またこれら疾患の発症には、大気中の微粒子による上皮細胞障害からはじまる好酸球性炎症が関与すると示唆されている。一方で、大気中の微小粒子による炎症惹起の有無や上皮細胞の役割は未だ解明されていない。そこで本研究は、中国の北京市で採取された都市大気
粉塵（UA）をモデル材料に、上皮細胞への影響と炎症惹起との関連をヒトの上皮細胞を用い解析した。
【材料・方法】上皮細胞は鼻腔から採取された初代培養細胞（HNEpC, Takara bio）を用いた。UA は国立環境研究所の環境標
準物質を用いた。上皮細胞への影響は、死細胞数の測定と増殖率を指標に評価した。また、UA が細胞内に取込まれるか否かを共焦点走査型顕微鏡で観察した。
【結果】7.4-200 μ g/mL の UA を HNEpC へ処置し 24、48 時間後の死細胞数を測定した。その結果、UA の処置濃度および処置時間に関わらず、死細胞数の増加は観察されなかった。次に、同様の条件で細胞の増殖率を測定した。その結果、処置濃度の増加に伴い増殖率が低下し、200 μ g/mL の UA を処置した細胞は 48 時間後においても増殖しなかった。また、UA の細胞を停止させるような毒性があると考えられた。

107

ポスター要旨

内取込みは、処置後 24, 48 時間ともに細胞内での蓄積が観察されている。すなわち、UA の細胞障害性は弱いものの細胞増殖

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ポスター

P-85 ＊
成熟マウスにおける自動車排出粒子に対する鼻腔免疫の雌雄での違いに関する検討○今村 麗，小野寺 章，屋山 勝俊，横山 聖，古賀 のどか，谷川 千明，大元 知貴，井上 雅己，角田 慎一，
河合 裕一
神戸学院大学 薬学部 生体機能制御学研究室【背景】呼気から取込まれる大気中の微粒子は、上下気道の各部位へと移行する。粒径の小さい微粒子は、下気道の深部へと移行し、鼻アレルギーや喘息を惹起すると考えられている。このような影響は、主に子供への影響が懸念されるものの、成人においても類似のリスクが存在する。そこで本研究は、微粒子の曝露から病態の発症に至る過程において、成熟マウスにおける獲得免疫への影響を雌雄の違いを含めて検討した。なお本解析では、マウスから摘出した鼻腔リンパ組織を実験材料に、国内で採取された自動車排出粒子（VEP）の影響について検討した。
【材料・方法】VEP は国立環境研究所の環境標準物質を用いた。マウスは、20 週齢の C57BL/6 雄マウス及び雌マウスを用いた。マウスから摘出した NALT は、培養液中で 2 時間培養し、200 µg/mL の VEP を処置した。5 日後、培養液中の IgA、IgG、IgE、IgM 量を ELISA 法で測定した。
【結果・考察】成熟マウスから採取した NALT へ VEP を処置し、NALT から産生される免疫グロブリン量を指標に、獲得免疫への影響を検討した。正常状態における雌雄の免疫グロブリン産生の違いは IgM で観察され、IgM 量は雄が雌の 1.5 倍であった。雄における VEP の影響は、IgA、IgG、IgM が無処置と比較し 20 ～ 30% 減少し、IgE は 1.7 倍であった。雌においては、IgEと IgM が無処置と同程で、IgA と IgG が 1.4 倍と 1.2 倍に増加した。以上の結果は、成熟したリンパ組織においても自動車排出粒子の刺激が体液性免疫を惹起することを示しており、また雌雄によって VEP に対する免疫応答が異なることが示唆された。

P-86 ＊VEP で刺激された鼻腔上皮細胞のリンパ球サブセットへ及ぼす影響○大元 知貴，小野寺 章，屋山 勝俊，今村 麗，谷川 千明，古賀 のどか，井上 雅己，角田 慎一，河合 裕一
神院大薬 LCMP【背景】IgE 非依存的な自然型アレルギーの成立には、IL-33 を含めた種々サイトカインの関与が示唆されている。大気中の微小粒子状物質による鼻アレルギーの発症においても、自然型アレルギーとの関連が示唆されており、鼻腔上皮細胞から産生される種々サイトカイン・ケモカインが免疫応答を引き起こすものと考えられる。そこで本研究は、VEP 刺激により産生される HNEpC 由来の液性因子がリンパ球サブセットへ与える影響を検討し、微小粒子状物質と鼻腔上皮細胞及び免疫応答との連関を明らかにする。

【材料と方法】In-vitro の解析には正常ヒト鼻腔上皮細胞（HNEpC）を用いた。In-vivo の解析には、7 週齢の BALB/c マウスを用いた。VEP は国立環境研究所の環境標準物質を用いた。リンパ球サブセットは、種々処置後のリンパ球を蛍光標識モノク
ローナル抗体で標識し、フローサイトメーター（FACS）で測定した。
【結果】VEP を HNEpC へ処置し、48 時間後に培養上清（コンディションドメディウム）を回収した。マウスの脾臓から採取したリンパ球へコンディションドメディウムを 24 時間処置し、リンパ球サブセットを FACS で評価した。その結果。VEP 刺激

ポスター要旨の有無にかかわらず、B 細胞・T 細胞・NK 細胞の細胞集団の増加は観察されなかった。現在、自動車排出粒子と炎症性物質を
HNEpC へ共処置し脾細胞の分化・成熟にどのような影響を及ぼすかを解析している。

108

ポスター

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-87 ＊
免疫制御薬としての TNFR1 選択的アンタゴニストの有効性・安全性の検討
― 一本鎖化技術による構造最適化 ―○大崎 奈都喜 1），井上 雅己 1,2），國重 将大 1），三木 望稔里 1），小野寺 章 1），河合 裕一 1），鎌田 春彦 2,3），
堤 康央 3），角田 慎一 1,2）
神戸学院大・薬・生体機能制御学，2）医薬健栄研，3）阪大院・薬1）【背景・目的】TNF は種々の自己免疫疾患の病態形成に関わっており、その作用は主に１型 TNF 受容体（TNFR1）を介するシ
グナルによる。一方、2 型 TNF 受容体（TNFR2）のシグナルは病態の抑制に寄与することが示唆されており、TNFR2 シグナルに着目した創薬が期待されている。本観点から我々は、有効性・安全性に優れた新規モダリティの TNF 制御薬の開発を目指し、TNFR1 選択的アンタゴニストとして機能する TNF 変異体タンパク質（R1antTNF）を創製し、関節リウマチモデルマウス
等での効果を明らかにしてきた。しかし、R1antTNF は抗体医薬品に比べて生体内での安定性に乏しいことから、有効性のさらなる向上には分子構造の安定化が必要と考えられた。そこで本発表では、R1antTNF の構造最適化のため、ホモ 3 量体構造を一本鎖化した R1antTNF（scR1antTNF）を創製し、特性評価を試みたので報告する。
【方法】scR1antTNF は、ペプチドリンカーによって 3 つの R1antTNF 単量体が直鎖状に連結するように cDNA を設計した。哺乳類細胞発現系で作製し、TNF 受容体への結合親和性、生物活性、熱安定性測定等を in vitro で評価した。
【結果・考察】scR1antTNF の in vitro 特性評価の結果、従来型の R1antTNF と同等の TNFR1 選択結合活性、アンタゴニスト活性を保持しつつ、熱安定性が向上していた。これは、ペプチドリンカーが R1antTNF と TNFR1 との結合に干渉しないこと、また、単量体間の分子内相互作用が強化されたことによると考えられた。以上、R1antTNF の 3 量体構造を融合し一本鎖化する
構造安定化技術は、TNFR1 アンタゴニストの有効性向上に有用と考えられた。

P-88 ＊
免疫制御薬としての TNFR1 選択的アンタゴニストの有効性・安全性の検討
― 部位特異的 PEG 修飾による構造最適化 ―○國重 将大 1），井上 雅己 1,2），大崎 奈都喜 1），三木 望稔里 1），小野寺 章 1），河合 裕一 1），鎌田 春彦 2,3），
堤 康央 3），角田 慎一 1,2）
神戸学院大・薬・生体機能制御学，2）医薬健栄研，3）阪大院・薬1）【背景・目的】我々は、有効性・安全性に優れた新規モダリティの抗 TNF 薬として、TNFR1 選択的アンタゴニストとして機能する TNF 変異体タンパク質（R1antTNF）の開発を推進している。これまでに、関節リウマチモデルマウス等の自己免疫疾患
モ デ ル マ ウ ス で 有 用 性 を 明 ら か に し て き た が、抗 体 医 薬 品 に 比 べ、血 中 半 減 期 の 短 さ が 課 題 で あ っ た。そ こ で 現 在、
R1antTNF の血中半減期延長を目的に、3 量体構造を連結した一本鎖化 R1antTNF（scR1antTNF）及びポリエチレングリコー
ル（PEG）修飾体の創製を試みている。本発表では、PEG 化 scR1antTNF の特性評価を行ったので報告する。
【方法】修飾のための PEG には分岐型（20kDa × 2）の NHS 活性化 PEG を使用した。PEG と scR1antTNF を複数の条件で反応させ、GPC 分析を行うとともにアンタゴニスト活性を測定し、最適な修飾条件を探った。さらに、マウスに投与した際の薬物動態を調べた。
【 結 果・ 考 察 】 従 来 の 3 量 体 型 の R1antTNF は、NHS 活 性 化 PEG の 反 応 に よ っ て 複 数 箇 所 PEG 修 飾 さ れ る の に 対 し、イの結果、PEG-scR1antTNF は、未修飾体と同等のアンタゴニスト活性を示した。さらに、PEG-scR1antTNF の血中半減期は未修飾体に比べて大きく延長した。以上の結果より、R1antTNF の一本鎖化によって可能となった、部位特異的 PEG 修飾が有効性・安全性の向上のための最適化法として有用であると考えられた。

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ポスター要旨scR1antTNF の修飾部位は一箇所であることから、単一組成の PEG 修飾体を効率的に得ることができた。また、バイオアッセ

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ポスター

P-89 ＊
制御性 T 細胞の機能制御分子としての TNFR2 の有用性評価○三木 望稔里 1），井上 雅己 1,2），大崎 奈都喜 1），國重 将大 1），小野寺 章 1），河合 裕一 1），安藤 大介 2,3），
鎌田 春彦 2,3），堤 康央 3），角田 慎一 1,2）
神戸学院大・薬・生体機能制御学，2）医薬健栄研，3）阪大院・薬1）【背景・目的】制御性 T 細胞（Treg）は免疫抑制機能を有するリンパ球であり、免疫応答を調節する役割を担っている。一方で、Treg の機能の過不足は病態形成に関わっており、例えば、がんにおいては Treg の機能が亢進し、がんの免疫逃避に関与していると考えられている。従って、がんや免疫疾患の新規創薬標的として、Treg の選択的な機能制御分子の探索が期待される。
本観点から我々のグループでは、Treg 制御分子として、2 型 TNF 受容体（TNFR2）の可能性について検討を行っており、本発表では Treg における TNFR2 の発現特異性や機能を検討したので報告する。
【方法】マウス脾臓等からリンパ球を調製し、CD4+CD25+ T 細胞を Treg、CD4+CD25- T 細胞を Tconv として解析を行った。
Treg/Tconv におけるサイトカイン受容体等の発現プロファイルはフローサイトメトリーにより解析した。また、Treg 機能への TNFR2 シグナルの関与を調べるため、細胞増殖アッセイを行い、TNFR2 を刺激した場合の Treg の増殖性の変化を測定した。
【結果・考察】発現プロファイル解析の結果から、TNFR2 は Tconv での発現率が低いのに対し、Treg では高発現していることが判明した。また、細胞増殖アッセイにおいて、TCR 単独刺激に比べ、TCR/TNFR2 の共刺激により Treg の細胞分裂が亢進したことから、TNFR2 は Treg の増殖促進に関与することが明らかとなった。以上の結果より、TNFR2 は、Treg の機能に関与しており、Treg の機能制御のための標的となりうることが示された。

P-90
Desmoglein-3 を標的分子とした ADCC 抗体のマウスにおける抗原発現と発現臓器の生理学的特性による毒性反応の相違○藤井 悦子 1,2），谷口 健治 2），加藤 淳彦 2），鈴木 雅実 1,2）（株）未来創薬研究所，2）中外製薬（株）研究本部

1）【背景】Desmoglein-3（DSG3）は種々の器官・組織の扁平上皮癌に対する細胞障害性抗体医薬の標的抗原として有望であると考えられる。しかし、同抗原は様々な正常組織の扁平上皮にも発現しており、抗体投与の影響を受ける可能性が考えられる。
【目的】DSG3 の組織分布とマウスにおける抗 DSG3 抗体投与毒性試験の情報を組み合わせることで毒性発現の可能性を精度高く評価することを目的として検討を行った。
【材料と方法】BALB/cAnNCrlCrlj マウスの膣、皮膚、舌、胃、回腸、結腸、食道、眼球、肝臓、腎臓、心臓、肺、脾臓組織を用い、免疫組織化学的解析により抗原分布を評価した。さらに、同マウスを用いて抗 DSG3 抗体を 0、10、50 mg/kg（n=5）の用量で週に 1 回投与し、3 回投与後 3 日で剖検を実施し、扁平上皮を含む臓器を中心に、全身の諸臓器・組織を病理組織学的に評価した。同様に、卵巣摘出（OVX）動物でも膣における抗原分布解析と抗体投与試験を実施した。

ポスター要旨【結果】DSG3 は皮膚、食道、舌、前胃、眼球、膣の扁平上皮に発現していることが明らかとなった。膣ではすべての性周期で発現がみられ、周期によって発現パターンが異なっており、卵巣摘出（OVX）動物では発現が低下していた。抗体投与試験では、様々な臓器で発現しているにもかかわらず膣でのみ変化がみられた。これらの結果から、膣の変化は性周期に応じた組織構築の変動に関連していると考えられた。OVX 動物では性周期の停止と DSG3 の発現低下に伴い、組織変化は低減した。
【結論】以上より、抗体の特徴と抗原の発現量・分布によって毒性発現予測が可能であるが、生理的に組織構築ならびに抗原発現が変化する臓器については注意深く解析する必要があることが示された。

110

ポスター

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P-91
The Role of the Toxicologic Pathologist in Drug Discovery and Development○ Shirai Norimitsu1），Tomlinson Lindsay2）
Pfizer Drug Safety R & D, Pathology, Groton, CT, USA，2）Pfizer Drug Safety R & D, Pathology, Cambridge, MA, USA1）

Aim: The drug discovery and development process encompasses target identification, synthesis of new chemical or
biological entities to interact with the target chosen, preclinical and clinical evaluations for efficacy and safety, andapproval and registration.   We will focus on the unique skill set of toxicologic pathologists, who have a strong
understanding of normal and abnormal tissue morphology, and various toxicity or disease processes.   We will also
discuss their roles in the biopharmaceutical industry in order to highlight career development opportunities andinstitutional benefits.  
Conclusion: Toxicologic pathologists can contribute widely including, but not limited to the following roles:
engagement in target selection; evaluation of animal models, efficacy in animal models of human disease, and tissue
cross reactivity; interpretation of anatomic and clinical pathology data from toxicity studies; pathology peer review;due diligence for licensing activities; design, management, and reporting of investigative and regulatory nonclinicalstudies; and representation of drug safety research and development（R&D）on multidisciplinary drug development
teams at all levels from early discovery through late stage development.   This poster outlines the perspectives of
toxicologic pathologists and the benefit of their input in the development of therapies including integrating findings inefficacy and toxicity studies and translating findings to clinical studies.

P-92
FDA SEND への対応

―パソロジストが心得るべき FDA SEND その 3―○畠山 洋文 1），堀川 真一 1），桜井 淳一 1），小泉 治子 1），下井 昭仁 1），佐藤 伸一 1），岩田 聖 2），安齋 享征 3）（株）イナリサーチ，2）ルナパス毒性病理研究所，3）昭和大学医学部

1）

米国 FDA への SEND（Standard for Exchange of Nonclinical Data）フォーマットでの電子データ審査・申請の義務化が開始
され約 1 年が経過した．また，昨今 CDISC（Clinical Data Interchange Standards Consortium）により作成され SEND のデー
タセットの交換・提出方法を解説した現行の SEND Implementation Guide（SENDIG）Version 3.0 から Version 3.1 への移行
時期が決定した．我々は第 32 回の本学会より継続して SEND に関して発表してきたが，今回，新バージョン SENDIG 3.1 と現行の SENDIG3.0 との病理組織検査に関わる変更点および SEND 統制用語である Controlled Terminology（CT）と INHAND を
パソロジストの立場から比較検討した．SENDIG3.1 では，病理組織所見に関する MI ドメインに，FOCID（Focus of StudySpecific Interest），MICHRON（Chronicity of Finding），MIDISTR（Distribution Pattern of Finding）の新たに 3 つの変数が追加されたため，所見マッピングの際に留意が必要である．CT はこの 1 年間で臓器名を示す Codelist が “Specimen” 及び腫瘍性所見を示す “Neoplasm” はそれぞれ 486 語と 301 語と変動が無いのに対し，非腫瘍性所見を示す “Non-neoplastic” は約 1.3
倍の 179 語まで増加した．しかし，INHAND の用語数には満たないため今後の充実化が期待されている．また，SEND データと MI ド メ イ ン の STRESC 変 数 と を 一 致 さ せ る こ と が 重 要 で あ る．SEND を 取 り 巻 く 環 境 が 刻 々 と 移 り 変 わ る 中 で，TCG（Study Data Technical Conformance Guide）の的確な理解や最新情報を入手し続け，所見入力段階から SEND を意識した病
理検査の実施により，SEND データセットのスムーズな作成が今求められている．

111

ポスター要旨

セットを適切に完成させるためには，たとえ SENDIG や CT に変遷があったとしても，毒性試験で最終化された所見（総括表）

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-93
病理ピアレビューと病理報告書についての一考察○岩田 聖 1），安齋 享征 2），大石 裕司 3）
ルナパス合同会社 毒性病理研究所，2）昭和大学医学部，3）大阪市立大学

1）【背景】INHAND や SEND Controlled Terminology など毒性病理用語の標準化が叫ばれている．しかし用語を統一しても鏡検者 Study Pathologist による所見入力が適切でないと意味がない．そこで組織所見の定性的品質保証法として GLP 試験では病理ピアレビューが推奨される．更に，鏡検者が作成する病理報告書についても生データとして重要である．
【方法】病理ピアレビューに関する STP 学会（連合）の推薦案，OECD ガイダンスや同追補などの公的見解や文献から，病理ピアレビューや病理報告書について一考した．
【結論】1: OECD ガイダンスでは，病理ピアレビューは慢性／発癌試験の中に記載されている．一方，STP 学会の推薦案にはさらに一般毒性試験や非げっ歯類試験でのピアレビュー方法についても解説があり，病理ピアレビューは慢性／発癌試験に限らず広く GLP 試験では実施すべきであると考えられた．2: 病理ピアレビューでは，被験物質の有害性（Adversity）所見が正しく記録されているかがピアレビュアー Peer Review Pathologist によって確認されることが大切で，鏡検者との意見一致を表明した同意書として記録される．3: 自然発生性病変を含むその他の病変についても両者の見解に大きな差はないことも記
載しておくべきである．事前ピアレビューでは，個々の所見変遷の記録は必ずしも必要とされないと考えられる．4: ピアレ
ビュアーは，同意された所見が最終所見として報告書に反映されることを確認すべきである．5: ピアレビュアーは被験物質による有害病変が，病理報告書に適切に説明されているかを確認すべきである．また，この病理報告書は生データとして保管されるべきである．

P-94
多層カーボンナノチュ－ブの経気管反復投与によりラット肺に誘発された増殖性病変の免疫
組織学的解析
○坂本 義光 1），北條 幹 1），鈴木 俊也 1），猪又 明子 1），広瀬 明彦 2），中江 大 3）
東京都健安研センター 生体影響研究科，2）国立衛研 総合評価研，3）東京農業大 応用生物科学部

1）【背景・目的】多層カ－ボンナノチュ－ブ（MWCNT）は，齧歯類に腹膜中皮腫または肺癌を誘発することから，その社会的認容を得るために詳細なリスク評価が求められている．本研究は，ラットを用いた経気管反復投与実験の MWCNT 投与群の肺に観察された，組織学的性状を異にする２種類の増殖性病変について，免疫組織学的に解析した．
【材料・方法】動物は，Han：WIST 系雄性ラット 10 週齢を用いた．動物は，MWCNT（MWNT-7）を，ショ糖及び Tween 80に混合した水溶性懸濁液［長さ，2 μ m，径 75 nm，鉄含有量 0.344%］として，1 回投与用量 0（懸濁媒体）
・0.01・0.05・0.25
mg/kg 体重にて，4 週間毎に計 12 回経気管噴霧投与し，最終投与終了後 52 週間飼育した後に屠殺・剖検した．
【結果・考察】被験物質投与に関連した中途死亡・瀕死や，臨床症状または体重及び肺重量の変化はなかった．被験物質投与
群の肺では，MWCNT 繊維沈着に関連した肺胞の軽度な炎症性変化や線維の増生に加え，組織学的性状が異なる 2 種類の増殖性病変が，いずれも用量依存性に誘発された．一方の病変は，扁平～多形な細胞が一層または多層に配列し，部分的に小集ポスター要旨塊状の増生を伴う組織像から，早期の扁平上皮化生と診断した．本病変は，メソテリン・サイトケラチン AE1 ／ AE3 に加え，
ラット肺扁平上皮癌前がん病変のバイオマーカである GST-P が陽性で，しかも PCNA 染色にて高い細胞増殖活性を示したことから，扁平上皮癌の前がん病変であるものと示唆された．他方の病変は，組織学的に MWCNT 貪食マクロファージが集簇する肺胞の II 型上皮の過形成であり，上記のいずれの蛋白も発現していなかった．こちらの病変は，反応性過形成と診断し
た．

112

ポスター

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-95 ＊
Comparative Pulmonary toxicity of DWCNT and MWCNT-7 in Rats
○ Ahmed M. El-Gazzar1,2,7），Mohamed Abdelgied1,2,8），David B. Alexander1），William T. Alexander1），
Takamasa Numano 1），Masaaki Iigo1），Aya Naiki2），Hirotsugu Takase3），Akihiko Hirose4），
Yuhji Taquahashi 5），Jun Kannno6），Satoru Takahashi2），Ashraf Mohamed Nazem9），
Osama Saeid Elokle7），Hiroyuki Tsuda1）
Nanotoxicology Project, Nagoya City University, Nagoya, Japan.，
Dept Exp Pathology and Tumor Biology, Nagoya City University Grad School Med Sciences, Nagoya, Japan.，3）
Nagoya City University Graduate School Med Sciences, Nagoya, Japan.，
4）
Div Risk Assessment, NIH, Tokyo, Japan.，
5）
Div Cellular and Molecular Toxicology, NIH, Tokyo, Japan.，
6）
Japan Industrial Safety and Health Association, Japan Bioassay Research Center, Kanagawa, Japan.，7）
Dept Forensic Medicine and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, Alexandria University, Alexandria, Egypt.，8）
Dept Forensic Medicine and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, Beni Suef University, Beni Suef, Egypt.，9）
Dept Food Hygiene, Faculty of Veterinary Medicine, Alexandria University, Alexandria, Egypt.
1）
2）

The toxicity of double-walled carbon nanotubes（DWCNTs）is mostly uncharacterized. It is theorized that because
DWCNTs are less rigid than multi-walled carbon nanotubes（MWCNTs）, DWCNTs may be less toxic than MWCNTs. In
the present study, we compared the pulmonary toxicity of DWCNT to MWCNT-7. Rats were divided into 6 groups:
untreated, vehicle, low dose DWCNT, high dose DWCNT, low dose MWCNT-7, and high dose MWCNT-7. The test
materials were administered by trans-tracheal intrapulmonary spraying（TIPS）every other day for 15 days: the lowdose and high dose groups were administered final total doses of 0.250 and 0.500 mg/rat, respectively, of the test
materials. The animals were sacrificed 1 and 6 weeks after the final TIPS administration. Bronchioalveolar lavage（BALF）, pleural cavity lavage（PL）, and lung tissue were collected to assess pulmonary damage. The results showedthat DWCNT exposure has no significant effect on LDH activity, ALP activity, or protein concentration in the BALF or
LDH activity or protein concentration in the PL supernatant at 6 weeks after the final TIPS administration. In contrast,
at 6 weeks MWCNT-7 administration resulted in significant elevation of LDH activity, ALP activity, and protein
concentration in the BALF and a small increase in protein concentration in the PL supernatant. In conclusion, our data
indicate that MWCNT-7 has higher pulmonary toxicity than DWCNT, and suggest that MWCNT-7 may have higher
carcinogenic potential than DWCNT.

P-96
消化管粘膜修復過程における幹細胞、増殖細胞、分化細胞の動態－胃潰瘍および大腸潰瘍モデルの比較－○平田 暁大 1），並木 健吾 2），村井 厚子 2），富田 弘之 3），原 明 3），酒井 洋樹 4），柳井 徳磨 4）
岐阜大学 動物実験分野，2）小野薬品工業株式会社，3）岐阜大学大学院 腫瘍病理学分野，4）岐阜大学 獣医病理学研究室

1）【背景・目的】胃および大腸上皮細胞は、腺管・陰窩単位で細胞の増殖と分化が制御されており、単一の腺管・陰窩内に上皮幹細胞、増殖細胞および分化細胞を含んでいる。我々は、マウスの胃および大腸に誘発された潰瘍の修復過程を組織学的に解析し、再生粘膜組織内での未分化細胞および分化細胞の動態に共通点を見出したので報告する。

【方法】消化管上皮幹細胞である Lgr5 発現細胞を GFP で標識できる Lgr5 -GFP ノックインマウスを使用した。胃潰瘍モデル

では、0.3 M 塩酸 -60％エタノール溶液を 0.2 ml 胃内投与した。大腸潰瘍モデルでは、2％ デキストラン硫酸ナトリウム（DSS）水溶液を 5 から 7 日間飲水投与した。消化管潰瘍誘発後、マウスを経時的に剖検し、採取した胃を組織学的および免疫
組織学的に解析した。
【結果】胃および大腸いずれにおいても、はじめに潰瘍部表面を覆うように一層の上皮細胞が伸長し、その後、潰瘍部近傍において、残存する胃腺管・大腸陰窩の底部が分岐し、複数の再生腺管・陰窩が生じ、潰瘍部に向かって伸長した。再生胃腺管
腺管・大腸陰窩と一致していた。

【考察】潰瘍修復過程は、胃と大腸で類似しており、分岐により生じた複数の再生腺管・陰窩がそれぞれ独立した腺管・陰窩へと成長していく段階で、既に幹細胞、増殖細胞、分化細胞に階層化されていることが明らかとなった。

113

ポスター要旨（幽門腺）
・再生大腸陰窩において、伸長途中の段階から Lgr5 発現細胞、増殖細胞、分化細胞が認められ、その配置も正常な胃The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-97 ＊
異なる挙動を示す Furan 及び DEN 誘発 GST-P 陽性細胞巣の網羅的遺伝子発現解析○高須 伸二 1），石井 雄二 1），木島 綾希 1），小川 久美子 1），梅村 隆志 1,2）
国立医薬品食品衛生研究所 病理部，2）ヤマザキ学園大学 動物看護学部

1）

我々はこれまでに、GST-P 陽性細胞巣の生物学的特徴を明らかにする目的で、肝発がん物質を投与したラットに一定の休薬期間を設け、その動態を検討してきた。その結果、diethylnitrosamine（DEN）誘発 GST-P 陽性細胞巣は休薬後にも増加する
一方、furan 誘発では休薬後に減少し、なかでも大型の GST-P 陽性細胞巣が減少していることを報告した。そこで、本研究では furan 誘発と DEN 誘発の GST-P 陽性細胞巣の休薬後の異なる挙動に寄与した遺伝子群の探索を目的に、それぞれの GST-P
陽性巣について網羅的遺伝子解析を行い、比較した。6 週齢の雄性 F344 ラットに furan を 8 mg/kg 体重 / 日の用量で 1 日 1回、週 5 日間の頻度で 13 週間強制経口投与、あるいは DEN を 10 ppm の濃度で 13 週間飲水投与した。投与終了後、肝臓を摘出し GST-P 陽性細胞巣並びに GST-P 陰性領域をレーザーマイクロダイセクション法にて採取し、網羅的遺伝子発現解析を実施した。その結果、Gstp1 の発現上昇は furan 並びに DEN 誘発 GST-P 陽性細胞巣に共通しており、試料採取方法の妥当性を確認した。また、DEN 誘発 GST-P 陽性細胞巣では Mors2 や Cdh23、Secisbp2l 等の発現上昇が、furan 誘発 GST-P 陽性細胞巣では Col1a1 や Sox9、Fbln1 等の発現上昇が認められた。以上より、furan 誘発と DEN 誘発の GST-P 陽性細胞巣には異なる遺伝
子発現を示す細胞群が存在することが示され、これら分子の中に GST-P 陽性細胞巣の異なる挙動を規定している分子が含まれている可能性が考えられた。

P-98 ＊
Potassium octatitanate fiber（K2O・8TiO2）fiber is a potent inducer of lung and pleural
injury in male Fischer 344 rats: A comparative study of titanium dioxide nano particles○ Mohamed Abdelgied1,2,3），Ahmed M. El-Gazzar1,2,4），David B. Alexander1），William T. Alexander1），
Takamasa Numano 1），Masaaki Iigo1），Aya Naiki2），Hirotsugu Takase5），Khaled Abbas Abdou3），
Akihiko Hirose 6），Yuhji Taquahashi7），Jun Kannno8），Satoru Takahashi2），Hiroyuki Tsuda1）
Nano toxicology Project, Nagoya City University, Nagoya, Japan.，
Dept Experimental Pathology and Tumor Biology, Nagoya City University Graduate School of Medical Sciences, Nagoya, Japan.，3）
Dept Forensic Medicine and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, Beni Suef University, Beni-Suef, Egypt.，4）
Dept Forensic Medicine and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, Alexandria University, Alexandria, Egypt.，5）
Nagoya City University Graduate School of Medical Sciences, Nagoya, Japan.，
6）
Div Risk Assessment, NIH, Tokyo, Japan.，
7）
Div Cellular and Molecular Toxicology, NIH, Tokyo, Japan.，
8）
Japan Industrial Safety and Health Association, Japan Bioassay Research Center, Kanagawa, Japan.
1）
2）

ポスター要旨Potassium octatitanate fibers（K 2O・8TiO2, POT fibers）are widely used as an alternative to asbestos. We investigatedthe pulmonary and pleural toxicity of POT fibers with reference to 2 non-fibrous titanium dioxide nanoparticles（nTiO 2）, photo-reactive anatase（a-nTiO 2）and inert rutile（r-nTiO 2）. Male F344 rats were administered 1 mg POT
fibers, a-nTiO2, or r-nTiO2 over a 2 week period by trans-tracheal intrapulmonary spraying（TIPS）and killed 6 hours
and 4 weeks after the last TIPS administration. A significant increase in the number of alveolar macrophages wasobserved in all three treatment groups at 6 hr and 4 wk. At week 4: a-nTiO 2, and r-nTiO 2 were largely cleared from thelung, but a large fraction of POT fibers persisted. In the BALF, ALP activity was elevated in all three treatment groups,
and LDH activity was elevated in the a-nTiO2 and POT groups. In the lung tissue, the oxidative stress index and the
PCNA index were elevated in the a-nTiO 2 and POT groups, and there CCL2  mRNA and protein was elevated in the POT
group. All three test materials were also observed in the pleural cell pellet, and in the pleural lavage, total protein waselevated in all three treatment groups, and LDH activity was elevated in the a-nTiO 2 and POT groups. In addition, the
PCNA index of the visceral mesothelium was increased in the POT group. Overall, POT fibers had greater
biopersistence, induced higher expression of CCL2, and provoked a larger tissue response than a-nTiO2 or r-nTiO2.
114

ポスター

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター要旨115

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター要旨116

ポスター

The 34th Annual Meeting of the Japanese Societyof Toxicologic Pathology

Theme

Bridging Basic Research and Clinical Practice for a Safer Life

President

Naoki Yoshimi(Department of Pathology & Oncology, Graduate School of Medicine, University of the Ryukyus)

PeriodJanuary 25th (Thu.) and 26th (Fri.), 2018

Venue

Okinawa Kariyushi Urban Resort Naha
3-25-1 Maejima, Naha, Okinawa, Japan

Program Committee

Chair:

Hideki Wanibuchi (Osaka City University Graduate School of Medicine)

Members:

A tsuhiko Kato (Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.)
Masahiko Kushida (Sumitomo Chemical Co., Ltd.)
Mitsuru Kuwamura (Osaka Prefecture University)
Masumi Suzui (Nagoya City University Graduate School of Medical Sciences)
Satoru Takahashi (Nagoya City University Graduate School of Medical Sciences)
Tetsuya Tsukamoto (Fujita Health University)
Kimiaki Hirakawa (Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.)
Katsuhiko Yoshizawa (Mukogawa Women’s University)
Midori Yoshida (Food Safety Commission of Japan, Cabinet Office)

OfficeDepartment of Pathology & Oncology, Graduate School of Medicine,
University of the Ryukyus
207 Uehara, Nishihara, Okinawa 903-0215, Japan

Congress Secretariat

O ffice for the 34th Annual Meeting of JSTP
Okinawa Congress Corporation
Nippon Seimei Naha Bldg., 3-1-1 Kumoji, Naha, Okinawa, 900-0015, Japan
Phone: +81-98-869-4220  FAX: +81-98-869-4252
Email: 34jstp@okicongre.jp

Website  

http://www.okinawa-congre.co.jp/34jstp/

Table of Contents
Greetings…………………………………………………………………………………………… 121
Access to the venue… …………………………………………………………………………… 122
Venue Floor Plans………………………………………………………………………………… 124
General Information… …………………………………………………………………………… 125
To Presenters……………………………………………………………………………………… 128
Timetable…………………………………………………………………………………………… 131
Program… ………………………………………………………………………………………… 134
Abstracts
Special Lecture… ……………………………………………………………………………… 155
Symposium… …………………………………………………………………………………… 157
Panel Discussion… …………………………………………………………………………… 165
Workshop… …………………………………………………………………………………… 169
Oral Presentation… …………………………………………………………………………… 175
Poster Presentation… ………………………………………………………………………… 180
Auther’s Index…… ………………………………………………………………………………… 229

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Greetings
The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology (JSTP) will be held at
Okinawa Kariyushi Urban Resort Naha on January 25th (Thu) and 26th (Fri) (including the 30th slide
conference for histopathology on January 24th (Wed)), 2018, in Naha city, Okinawa.
It is a great honor for me to serve as president of this coming congress in Okinawa, following mypredecessors, namely my mentor Dr. Hideki Mori (16th meeting in Gifu), Dr. Takuji Tanaka (26thmeeting in Kanazawa), and Dr. Akiyoshi Nishikawa (28th meeting in Tokyo). Since coming toOkinawa  to take up my new post 16 years ago, I have been working to overcome the shortage ofpathologists in Okinawa Prefecture, including the Sakishima Islands, with a focus on basic research
into toxicologic pathology and pathological diagnosis. Through such activities, I have strongly felt
the importance of basic research, and so I decided on “Bridging from Basic Medicine to Clinical
Medicine for a Safer Life”  as the main theme for this meeting.
Our research into toxicologic pathology can be described as a branch of the life sciences that
pursues the truth in a wide variety of changes caused at the cellular and tissue levels by
agrochemicals, pharmaceuticals, and other chemical substances, as well as herbs and foods, usingmorphological approaches, including advanced molecular biology. I believe the ultimate goal is toensure people’s safety . Engaging in medical care services, we unavoidably use chemical substancesand other approaches that entail certain risks, and I believe that achievements in basic researchcannot be applied or extended to clinical medicine   without the efforts of the members of ourSociety to ensure safety. Accordingly, I hope that the research achievements published at thiscongress will contribute to medical care services and society at large by “Bridging from Basic
Medicine to Clinical Medicine.”
In January, Okinawa is not as warm as in the rest of the year. Unlike on the Japanese mainland,
however, you will not need to wear an overcoat when attending the congress. The venue, Okinawa
Kariyushi Urban Resort Naha, is close to the pier for ferries going to isolated islands as well as
many whale-watching boats, which will be active during the congress period. Accessible in 15
minutes by car from Naha Airport and just 15 minutes on foot from Kokusaidori Street, the venue isideal for enjoying the splendid sunset over the East China Sea. Okinawa in January is much warmer
than the mainland, and you will surely enjoy the many sights and awamori, a distilled alcoholic
beverage unique to Okinawa.
I hope many members of our Society will be keen to present the achievements of their work at
the congress and take the opportunity to exchange opinions with other researchers. The Program
Committee has planned to hold 2 special invited lectures, 8 topics in two symposiums, 4 topics inpanel discussion and 5 topics in workshop, ranging from the basics of toxicologic pathology to thelatest topics. The Program Committee and Congress Secretariat  members will do their best to makethe congress rewarding for all participants.
I look forward to seeing you in Okinawa with its blue sea and sky.

Naoki Yoshimi, M.D., Ph.D.

President, The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology( Department of Pathology & Oncology, Graduate School of Medicine,
University of the Ryukyus)

121

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Access to the venue
Access routes

Okinawa Kariyushi Urban Resort Naha

① By car (taxi, rented car)●Tomaritakahashi
Bus stop

By car

② By local bus③ By Yui Rail + Walk

Miebashi
Station

1 2

Airport● 3Naha Station

Naha
AirportBy local bus

By Yui RailNaha Airport Map
Getting the venue by taxi  
“Short distance destination stand”

Arrival A

By local bus“Airport stop No. 3”

Arrival B

To get the Monorail (Yui Rail) station, use theelevator or escalator to the second floor

To Yui Rail Naha Airport Station
122

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Getting the venue by taxi
Route: ‌Naha Airport – Umisora Tunnel -Kumoji intersection Okinawa Kariyushi Urban Resort Naha
(within the Tomarin Port building)Time required: Approx. 10 minutes
Fare: In the case of a taxi, approx. 1,250 yen.
Taxi stands are located to the right when coming out of the airport terminal.
The taxi stands are divided into “Long distance taxi stand” and “Short
distance taxi stand,” so please take a taxi from “short distance taxi stand.”Getting the venue by a rented car
 misora tunnel route from Naha Airport: Approx. 10 minutes (4.9km) taking the same routeU
as the taxi route described above.
The entrance of Okinawa Kariyushi Urban Resort Naha is located at the backside (the north side)of the Tomarin Port building if driving from the airport to the north on Route 58* ‌Bellboys at the hotel entrance will guide you to the parking space.
Please park your car after unloading luggage from the car.
* ‌“ Tomarin Annex Parking Garage” is available for free.
Please bring a parking ticket to the Reception on the ground floor of Okinawa Kariyushi
Urban Resort Naha.
■ Notice about the bus lane regulation on Route 58

O n weekdays (Monday-Friday), the bus lane on Route 58 in front of the hotel operates
during the following time zones.
T he first lane (left lane) becomes a bus-only lane. Please pay careful attention to this if you
drive from the airport direction to the hotel, particularly during the evening time,・7:30 AM ～ 9:30 AM (Southwards upbound:  Ameku, Naha City → Kumoji, Naha City)・5:30 PM ～ 7:30 PM (Northwards downbound: Asahibashi, Naha City → Ameku, Naha City)

Getting the venue by local bus■会場前バス停留所│泊高橋（とまりん前）
Route 58

Okinawa Kariyushi
Urban Resort Naha
Entrance

Departure

ArrivalTomarinRoute No.:No. 99 Ameku Shintoshin RouteTime required: [Weekday] Approx. 20-30 minutes[Weekend and national holidays] Approx. 20 minutes
Stops:[Getting on] “Airport stop No. 3”at the domestic         flight passenger terminal building
[Getting off ] Tomaritakahashi stop –         Approx. 1 minute walkFare:
230 yenN
Tomarin Annex Parking Garage

Okinawa Kariyushi
Urban Resort Naha

Getting the venue by Monorail (Yui Rail)Time required: Approx. 25 minutes in total[Monorail] Approx. 14 minutes[Walk] Approx. 10 minutes (Miebashi Station venue)
Route:[Monorail] Get on at Naha Airport Station –                  Get off at Miebashi Station –                 Approx. 10 minute walk to the venue
Fare:
300 yenApprox.
10 minutes walkMiebashi
Station123

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Venue Floor Plans

6F
Venue 1
Conference Venue
LuncheonⅠ& Ⅲ

Cloak-Nirai Kanai banquet room-

General Reception

To ７F

Reception for PC

JSTP
Secretariat Desk

Venue 2LuncheonⅡ & Ⅳ-Ouchou banquet room-

7F
MIYARABI

Poster RoomCompany Exhibitions,
Refleshment Corner-Shell Hall banquet room-

124

Secretariat
To ６F

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

General Information■ To the Participant

1. General Reception is located at 6F Lobby.
Date and Time: January 25th (Thu.) 8：00 - 17：00
January 26th (Fri.)   8：30 - 15：00
2. Early registration
1) Early registration through the website
Name card will be sent only domestically to those who have completed Early registration through thewebsite by December 8th, 2017. You are kindly asked to bring your name card to the venue on the day.  
Your name card will not be sent if your payment has not been conﬁrmed by December 15th, 2017. In  this case, you will be asked to pay the fee for On-site registration.
2) Early registration from abroadPlease printout the confirmation e-mail sent to the registered e-mail address and bring it to the General
Reception in the venue. You will receive a receipt and a name card.
3. For On-site registered participants, please fill out the On-site registration form and make the payment for
Registration fee at the General Reception, and wear provided name card throughout the congress. Students
must show student IDs.
Member:12,000 Yen
Student Member:
6,000 Yen
Non-Member:
18,500 Yen ※ Included abstract book fee (5,000 Yen)
※ ‌Honorary and meritorious members are free of charge. Please come to General Reception on theday.
4. The abstract book will be mailed to the members in advance, so please bring it on the day. Extra copiesof the abstract book will be available at 2,000 yen for members, 5,000 yen for non members and
2,000 yen for Students per issue.
5. For questions and discussions, please follow the chairperson’s instructions and state your name andaffiliation first by using the provided microphone.
6. Smoking is allowed in designated areas.
7. Please turn off your cell phones or set them to be silent mode inside the venue.
8. Lunch boxes will be provided during Luncheon Seminars. You can also use restaurants in the vicinity ofthe venue.
9. Company Exhibitions will be held. Refreshment corner and Drink corner will also be available at theShell Hall.
Place:
  7F Shell Hall
Date and Time:  January 25th (Thu.)  8：30 ～ 18：20
   January 26th (Fri.)    8：30 ～ 15：00
10. Cloakroom
Place:
  6F Lobby(in front of Ouchou banquet room)
Date and Time:  January 25th (Thu.)  8：00 ～ 20：40
   January 26th (Fri.)    8：30 ～ 17：00
11. The paging service will not be available in the venue.
Please use the message board located at the General reception (6F Lobby).
12. Photography and video or sound recording are prohibited in the venue.
13. Please take the charge of your valuables.
14. For the payment of annual membership fee, new member enrollment, and the alteration registration,please contact to JSTP Secretariat desk (6F Lobby) .
Date and Time:  January 25th (Thu.) 8：00 - 17：00
   January 26th (Fri.)   8：30 - 14：00

(

)

125

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology■ General Assembly and Board of Councillors
Place:

6F Nirai Kanai banquet room

Agenda:  Performance and annual review in 2017

Date and Time:  

January 26th (Fri.) 15：20 - 16：50

Budget and planning for annual performance in2018
Recommendation Meritorious Members
Councillors

Nirai Kanai banquet room (Venue 1)

Seats forCouncillors

126

Stage
Seats for Board
Directors

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology■ Luncheon SeminarF ree tickets for Luncheon Seminars will be provided at the Luncheon Seminar Ticket Desk (Ouchou

banquet room)

Date and Time: January 25th (Thu.)  8:00 ～ 11:00
January 26th (Fri.)    8:30 ～ 11:00

Luncheon Seminar Ⅰ

January 25th (Thu.) 12:10 ～ 13:00

Nirai Kanai banquet Room, 6F“I mmune functions in lymph nodes - how lymph nodes work; illustrated anatomical basis for surveillance,
filtration and antigen response”

Speaker:
Chair:

Cynthia Willard-Mack (Pathology, Envigo US)

Makoto Imatachi (Envigo Co., Ltd.)

Co-sponsor: Envigo Co., Ltd.
Luncheon Seminar Ⅱ

January 25th (Thu.) 12:10 ～ 13:00

Ouchou banquet Room, 6F“Histopathologic evaluation for the Monkey Safety Test for Neurovirulence of Yellow Fever and Tetravalent
Dengue Vaccines - WHO Protocol for Live-Attenuated Vaccines-”

Speaker:
Chair:

Sheila Grimes (Southern Research)

Kazumoto Shibuya (Nippon Institute for Biological Science)

Co-sponsor: Southern Research/Three S Japan Co., Ltd.
Luncheon Seminar Ⅲ

January 26th (Fri.) 12:10 ～ 13:00

Nirai Kanai banquet Room, 6F“Use of Unbiased Stereology in Drug Development”
Speaker:
Chair:

Danielle L. Brown, DVM, MS, DACVP, DABT (Charles River Pathology Associates)

Kaori Isobe (Charles River Edinburgh)

Co-sponsor: Charles River
Luncheon Seminar Ⅳ

January 26th (Fri.) 12:10 ～ 13:00

Ouchou banquet Room, 6F“Non-clinical safety studies for human cell derived tissue-engineered medical products”
Speaker:
Chair:

Hiroaki Magotani (Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.)

Kimiaki Hirakawa (Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.)

Co-sponsor: Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.

■ Social Gathering Banquet
Place:

  N irai Kanai Banquet room. 6F

Date and Time: Jan. 25th (Thu.) 18:30 ～*The Social gathering banquet requires Early registration, and On-site registration will be available at
9,000 yen (7,000 yen for students) at the General Information desk on Jan. 25th (Thu.) . First come,first served. Please note that we may close registration due to limited seating.

127

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

To Presenters■ Request to Special Lecture , Symposium, Panel discussion, Workshop and Oral Presentation
1. Data and PCs

1) For Windows・ ‌P lease bring your USB memory stick or your own PC to Reception for PC 30 minutes before yourpresentation.

   (I t is recommended to bring personal USB memory sticks or PC to avoid any troubles that may becaused by differences in the user environment.)・ ‌Windows 7 based PCs with Microsoft Power Point 2007, 2010, and 2013 are available.

・ ‌To avoid display problems, please use standard OS fonts such as Century, Century Gothic, Times New
Roman or Arial.

・ ‌P lease bring USB memory sticks acceptable for windows.

・ ‌P lease name your presentation file using your program number and your name.
      EX. Symposium-1

Taro Yamada・ ‌P lease do not store any data except your presentation in your USB memory stick.

2) For Macintosh・ ‌P lease bring your own PCs to Reception for PC 30 minutes before your presentation.
・ ‌USB memory stick is unavailable.

3) Notification for using your own PC.

・ ‌Monitor output with a D-sub15 pin is required. If your PC requires an adaptor for D-sub15 pin, please
prepare by yourself. Please note that connections other than D-sub15 pin are unavailable・ ‌P lease make sure to bring the power cable.

・ ‌P lease bring an extra data in case of any unexpected media problems.
・ ‌M ovies and sound reproductions are not allowed.

・ ‌P lease bring your PC with you when you finish your presentation.
2. Presentation・ ‌When the prior presenter starts his/her presentation, please sit in the Next-Presenter seat.

・ ‌T he monitor, pad and mouse will be provided on the rostrum. Please use them by yourself withlooking at the screen and use the cursor of the mouse or a pointer.

・ ‌P resenter’s tool will not be available during presentation.
3. Time allocation
Session Types
Special Lecture
Symposium
Panel discussion
Workshop
Oral Presentation

128

Presentation time

Discussion Time

Presentation time and discussion style are as
informed before.
8 minutes

4 minutes

Signal light colors
Yellow light will turnon 1 minute before
the presentation timeends.
Red light will turn on
when presentation
time ends.

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology■ Request to Poster Presenters

90cm

1. Poster panel size is described as right figure.

・ ‌Poster number tags (20 cm × 20 cm) will be provided
by the congress secretariat. Please indicate yourabstract title, name and affiliation in the upper area ofPosterNo.

Abstract Title
Name / Aﬃliation

20cm

70cm

20cm

the poster panel.

・ ‌T he placement space for the poster is height 190 cm
and width 90 cm. The space for the poster number

should be secured when you place your poster from the
top edge. (If your poster would be placed to thePlacement Space
for Poster

210cm

190cm

bottom, please be careful of the placement to avoid

getting difficult to see.)・ ‌Japanese language is acceptable.

2. Please set up and remove your poster according to the time table below.
Set-Up Time

Presentation periods

January 26, Fri.   8:30 ～ 10:00

13:10 ～ 14:10

January 25, Thu. 8:30 ～ 10:00

17:20 ～ 18:20

Removal time

18:20 ～ 18:30

15:00 ～ 15:20※ In case your poster is not removed during the period, the secretariat properly disposes of the poster.
3. Magnets and presenter’s badge are available for each poster panels. Please wear presenter’s badge
during presentation time. Please take the badge with you after the session.

4. Please proceed with your presentations by Chair's instructions.

・ 5 minutes are prepared for each presenter (1 minute for presentation and 4 minutes for discussion).
・ ‌P lease be strict to your presentation time.

129

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology■ President's Awards (Best Award, Excellent Award, Case Study Award)

Please note that abstracts marked with asterisks ( ＊ ) are written by authors under the age of 40 and areconsidered for President's Awards (Best Award, Excellent Award and Case Study Award).

■ COI・ ‌Please disclose COI (Conflict of Interest). When you are company employees, please disclose COI status withother companies.

・ ‌Presenters for Oral Presentation are required to show COI on the second slide.

・ ‌Presenters for Poster Presentation are required to show COI on the last position.

Sample1

COI Disclosure Information
Taro Dokusei
In connection with this presentation, there is
no COI to be disclosed with any companies.

Sample2
COI Disclosure Information
Hanako Dokusei
In connection with this presentation,
we disclose COI with following companies.

130

Executive/Advisory Position:(○○Campany)

Funded research/Collaborative research:(○○Campany)

Lecture Honorariums, etc.:(○○Campany)

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Timetable
January 24（Wed.）
Venue 1
Venue ２
（Nirai Kanai banquet (Ouchou banquetroom, 6F）
room, 6F）

Kotobuki・Sugure, 6F

In front of
Nirai Kanai
banquet room, 6F

In front of
Shell Hall
banquet room, 7F

Poster room
(Shell Hall
banquet room, 7F)

8:00

9:00

10:00

11:00

12:00
12:30

12:30

Editorial Committee

13:00

13:30
13:45

14:00

15:00

Educational
Committee
The 30th
Slide Conference

14:45
15:00

Board Meeting

16:00

17:00

17:00
17:30

18:00

17:50

Explanation of
Exam Questions
18:50

19:00

20:00

19:00

Banquet Seminar

20:00

Global Presidentʼs
Meeting

21:00

21:00

20:50
21:00

21:50

IFSTP EC
Meeting131

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Timetable
January 25（Thu.）
Venue 1
Venue ２
（Nirai Kanai banquet (Ouchou banquetroom, 6F）
room, 6F）

8:00

MIYARABI, 7F

In front of
Nirai Kanai
banquet room, 6F

In front of
Shell Hall
banquet room, 7F

Poster room
(Shell Hall
banquet room, 7F)

8:30

8:30

8:00 〜

Reception Starts

9:00

8:40 〜 Opening ceremony
8:50

Poster Setup
Oral Presentaion

10:00

10:00
10:00

Ｏ-01 〜Ｏ-10

10:50

11:00

11:00

Special Lecture 1

11:50

12:00

Yoko Aniya

12:10

12:10

Seminar Ⅱ
Luncheon Seminar Ⅰ Luncheon
Southern Research/
Envigo Co., Ltd.

13:00

13:00

Company
Exhibitions

Reception

Three S Japan Co., Ltd.
13:00

13:20

14:00

15:00

16:00

17:00

Symposium 1

Innovation ofcarcinogenic risk assessment
15:00
15:10

Panel Discussion

Expertise training
for toxicologic
pathologists andencouragement of
their career design
17:10

17:20
17:20

18:20
18:30

19:00
Social Gathering
Banquet

20:00
20:30

132

17:00

Poster Presentation Ⅰ

18:00

21:00

Poster Viewing/
Company Exhibitions

18:20
18:20
18:30

Poster Removal

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Timetable
January 26（Fri.）
Venue 1
Venue ２
（Nirai Kanai banquet (Ouchou banquetroom, 6F）
room, 6F）MIYARABI, 7F

In front of
Nirai Kanai
banquet room, 6F

In front of
Shell Hall
banquet room, 7F

Poster room
(Shell Hall
banquet room, 7F)

8:30 〜

8:30

8:30

8:00

9:00

Reception Starts

8:50

Poster Setup
Symposium 2

10:00

A safety assessment of
nano-materials andits prospect

10:00
10:00

10:50

11:00

11:00

Special Lecture 2

11:50

12:00

Poster Viewing/
Company Exhibitions

Hiroshi Kido

Reception

12:10

12:10

13:00

Shin Nippon
Terminology
Biomedical Laboratories, Ltd.
Committee
13:00
13:00

Luncheon Seminar Ⅲ Luncheon Seminar Ⅳ

13:00

Charles River

Company
Exhibitions

12:10

International

13:10
13:10

Poster Presentation Ⅱ

14:00
14:20

15:00

16:00

14:10
14:10

Workshop

Pathological aspects and themechanisms in NASH models
15:20
15:20

Poster Viewing
15:00

15:00

15:00
15:00
Poster Removal
15:20

Board Councillors
The General AssemblyAwards Ceremony
Closing Ceremony
16:50

17:00

18:00

19:00

20:00

21:00

133

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ProgramSpecial Lecture1

Day 1, January 25, Thursday

11:00 ～ 11:50

Venue 1 (Nirai Kanai banquet room, 6F)

Chair: Naoki Yoshimi (Department of Pathology and Oncology, Graduate School of Medicine,			
University of the Ryukyus)

SL1

Development of bioresources in Okinawa and toxicology
Yoko Aniya

Okinawa Institute of Science and Technology Graduate University

Special Lecture2

Day 2, January 26, Friday

11:00 ～ 11:50

Venue 1 (Nirai Kanai banquet room, 6F)

Chair: Hideki Wanibuchi (Department of Molecular Pathology,Osaka City University Medical School)

SL2	Mechanisms of food allergy and oral immune tolerance in early infancy and possible
diagnostic biomarkers of them  
Hiroshi Kido, M.D., Ph.D.

Institute for Enzyme Research, Tokushima University

Symposium1

Innovation of carcinogenic risk assessment

Day 1, January 25, Thursday

13:20 ～ 15:00

Venue 1 (Nirai Kanai banquet room, 6F)

Chair: Akiyoshi Nishikawa (National Institute of Health Sciences)・
Tetsuya Tsukamoto (Department of Diagnostic Pathology, Fujita Health University School of Medicine)

SY1-1	Early detection of risk of bladder carcinogenesis by immunohistochemistry for 
γ-H2AX〇 Takeshi Toyoda1），Kohei Matsushita1），Young-Man Cho1），Jun-ichi Akagi1），
Mizuki Sone 1,2），Akiyoshi Nishikawa3），Kumiko Ogawa1）
Division of Pathology, National Institute of Health Sciences，1）Tokyo University of Agriculture and Technology,

2）

Biological Safety Research Center, National Institute of Health Sciences3）

SY1-2	The role of surfactant protein and application for assessment of the risk ofcarcinogenesis.
Masanao Yokohira

Onco-pathology, faculty of medicine, Kagawa university

SY1-3	Elucidation of molecular markers and establishment of rat model for early detectionof prostatic carcinogens.
○ Shugo Suzuki，Aya Naiki-Ito，Hiroyuki Kato，Satoru Takahashi

Nagoya City University Graduate School of Medical Sciences Experimental Pathology and Tumor Biology

134

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

SY1-4	A novel gene expression-based short-term model for detecting genotoxic
hepatocarcinogens○ Min Gi，Masaki Fujioka，Ann Kakehashi，Hideki Wanibuchi

Department of Molecular pathology, Osaka City University Graduate School of Medicine

Symposium2 A safety assessment of nano-materials and its prospect
Day 2, January 26, Friday

8:50 ～ 10:50

Venue 1 (Nirai Kanai banquet room, 6F)

Chair: Masumi Suzui (D epartment of Molecular Toxicology,Graduate School of Medical Sciences
and Medical School Nagoya City University)・
Kaori Miyata (Sumitomo Chemical Co.,Ltd)

SY2-1

Nanomaterial respiratory toxicity monitored in rats after whole body inhalation.
Jun Kanno

Japan Bioassay Research Center, Japan Organization of Occupational Health and Safety

SY2-2	International trends and necessity of chronic effects information on risk assessmentof nanomaterials
Akihiko Hirose

Division of Risk Assessment, Biological Safety Research Center, National Institute of Health Sciences

SY2-3	Nano-safety research of nanoparticles used in foods toward sustainable
nanotechnology○ Kazuma Higashisaka1,2），Kazuya Nagano1），Hiroshi Matsumoto2），Yasuo Tsutsumi1,3）
Grad. Sch. Pharm. Sci., Osaka Univ.，2）Grad. Sch. Med., Osaka Univ.，3）MEIC, Osaka Univ.

1）

SY2-4	Novel Antioxidative Nanotherapeitics by Nitroxide-radical Containing Polymer
Nanoparticles
Yukio Nagasaki

Department of Materials Science and Medical Sciences, Satellite, University of Tsukuba, Tsukuba, Japan

Panel Discussion Expertise training for toxicologic pathologists and encouragement of their career design
Day 1, January 25, Thursday

15:10 ～ 17:10

Venue 1 (Nirai Kanai banquet room, 6F)

Chair: Midori Yoshida (Food Safety Commission of Japan, Cabinet Office)・
Mitsuru Kuwamura (Osaka Prefecture University)

PD-1	Current status of histopathology slide educational session for JSTP certification exam,and the role of toxicologic pathologists in drug development
Satoru Hosokawa

Global Drug Safety Research, Eisai Co., Ltd.

PD-2	Education and Postgraduate Career Guidance on Toxicologic Pathology in Japanese
Veterinary Schools
Makoto Shibutani

Tokyo University of Agriculture and Technology

PD-3	Veterinary Education in the U.S. and Career Development Path for Toxicologic
Pathologists
Hajime Hiraragi

Amgen Inc., Comparative Biology & Safety Sciences, South San Francisco, CA, USA

135

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

PD-4	A Comparison of Practice of Industrial Toxicologic Pathologists in Japan and theUnited States
Takayuki Tsuchiya

Department of Safety Assessment and Laboratory Animal Resources (West Point, PA U.S.A.), MR L,
Merck & Co., Inc., Kenilworth, NJ, USA

Workshop Pathological aspects and the mechanisms in NASH models
Day 2, January 26, Friday

14:20 ～ 15:20

Venue 1 (Nirai Kanai banquet room, 6F)

Chair: Satoru Takahashi (Nagoya City University Graduate School of Medical Sciences ) ・Atsuhiko Kato (Chugai Pharmaceutical Co,Ltd.)

WS-1	Role of systemic immunity in the progression of hepatic inflammation in a rat modelof nonalcoholic steatohepatitis○ Takeshi Izawa，Shoko Ohji，Machi Atarashi，Rena Miyagi，Ai Hashimoto，
Mitsuru Kuwamura，Jyoji Yamete
Veterinary Pathology, Osaka Prefecture University

WS-2 ＊	How does the hepatic lesion progress to fibrosis and tumor in a newly establishedmurine model for NASH
○ Yui Terayama，Kazue Akira，Takashi Yamagiwa，Yuki Nakatani，Nanayu Oshima，Tsuyoshi Morio，Tetsuro Matsuura，Kiyokazu Ozaki
Laboratory of Pathology, Setsunan University

WS-3 ＊

Effects of trans fatty acid and its substitute on NASH model by a modified CDAA diet

○ Noriko Kemuriyama1），Kaori Ikehata1），Takuya Yamashita1），Kinuko Uno1），
Soon Hui Teoh 1），Shuji Ogawa2），Atsushi Watanabe3），Katsuhiro Miyajima1），Dai Nakae1）
Dept. Nutr. Sci. Food Safety, Facul. Appl. Biosci., Tokyo Univ. Agricul.，

1）

Zeria Pharmaceutical Co., Ltd.，3）ASAHI KASEI MEDICAL CO., LTD.

2）

WS-4 ＊	Establishment a model of non-alcoholic steatohepatitis-related
hepatocarcinogenesis in connexin 32 dominant negative transgenic rats
○ Aya Naiki-Ito1,2），Hiroyuki Kato1），Shugo Suzuki1），Satoru Takahashi1）

Dept. Exp. Path. Tumor Biol., Nagoya City Univ.，2）Pathol. Div., Nagoya City East Med. Ctr.

1）

WS-5

Differences of pathological findings between two NASH model mice

○ Takahiro Okuno，Naomi Ishii，Anna Kakehashi，Masaki Fujioka，Min Wei，Hideki Wanibuchi
Department of Pathology, Osaka City University Graduate School of Medicine

Oral Presentation Ⅰ Carcinogenic mechanism & cancer prevention
Day 1, January 25, Thursday

8:50 ～ 9:26

Venue 1 (Nirai Kanai banquet room, 6F)

Chair: Katsuhiko Yoshizawa (Mukogawa Women's University) ・Mayumi Kawabe (DIMS Institute of Medical Science,Inc)

O-01 ＊

Toxicity and mechanism of action of palmitoyl piperidinopiperidine○ S Ando1），H Matsumoto1），K Fukamachi1），M Futakuchi1,2），N Yoshimi3），M Suzui1）
Dept. Mol. Tox., Grad. Sch. Med. Sci., Nagoya City Univ.，2）Dept. Path., Nagasaki Univ. Hosp.，

1）

Dept. Path. Oncol., Faculty of Medicine, Univ. of the Ryukyus

3）

136

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

O-02	Genotypic/phenotypic differences between DMBA- and PhIP-induced mammary
adenocarcinomas in BALB/c-p53 +/- mice

○ Yukino Machida1），Yukiko Sudo1），Naoaki Uchiya1），Masako Ochiai2），Toshio Imai1）
Natl. Cancer Ctr. Res. Inst., Dep. Anim. Exp.，2）Natl. Cancer Ctr. Res. Inst., Ctr. Anim. Div.

1）

O-03 ＊	Study of the mechanism of carcinogenesis by prenatal exposure to dimethylarsinicacid in mice

○ Masaki Fujioka，Min Gi，Takahiro Okuno，Kenji Kumada，Anna Kakehashi，Yuji Oishi，Hideki Wanibuchi
Dept. Mol. Path., Osaka city univ. grad. sch. med.

Oral Presentation Ⅱ
Day 1, January 25, Thursday

Toxic mechanism

9:26 ～ 10:14

Venue 1 (Nirai Kanai banquet room, 6F)

Chair: Akira Inomata (Fujifilm Corporation) ・ Yoshiro Tani (Daiichi Sankyo Co., Ltd.)

O-04 ＊

Epithelial-Mesenchymal Transition in Cysts in the Choroid Plexus and Renal Tubules○ Atsuko Murai，Kenji Nakamura，Norifumi Takimoto，Kengo Namiki，Daisuke Hibi，
Yukihiro Yanagizawa，Koji Shimouchi，Hiroyuki Yanagi
Safety Research Laboratories, Discovery and Research, Ono Pharmaceutical Co., Ltd.

O-05	DS-7250, a Diacylglycerol Acyltransferase 1 Inhibitor, Enhances Hepatic Steatosis in
Zucker Fatty Rats Via Upregulation of Fatty Acid Synthesis○ Kazuyoshi Kumagai，Kyohei Yasuno，Takuma Iguchi，Kiyonori Kai，Kazuhiko Mori
Medicinal Safety Research Laboratories, Daiichi Sankyo Co., Ltd.

O-06 ＊	Histopathologic Characterization of Mifepristone-Induced Ovarian Toxicity in
Cynomolgus Monkeys○ Yoshikazu Taketa1），Kanta Horie2），Tetsuya Goto3），Etsuko Ohta1），Kyoko Nakano-Ito1），
Kazuhiro Hayakawa1），Yuki Seki1），Aya Goto1），Satoru Hosokawa1）
Tsukuba Drug Safety, Eisai，2）Neurology Business Group, Eisai，3）Sunplanet1）

O-07 ＊

Drug-Induced Fluorosis in Skeletal/Dental Tissues in Rodent Chronic Toxicity Studies○ Yuki Seki1），Kenichi Noritake2），Yoshikazu Taketa1），Shoji Asakura1），Akiyo Otsuka1），
Aya Goto1），Etsuko Ohta1），Kyoko Nakano1），Kazuhiro Hayakawa1），Jiro Sonoda1），
Satoru Hosokawa1）
Eisai Co., Ltd.，2）Sunplanet Co., Ltd.

1）

Oral Presentation Ⅲ
Day 1, January 25, Thursday

Biomarkers

10:14 ～ 10:50

Venue 1 (Nirai Kanai banquet room, 6F)

Chair: Min Gi (Osaka City University Graduate School of Medicine) ・Daisuke Hibi (ONO pharmaceutical Co.,Ltd.)

O-08 ＊	Short-term detection of gastric carcinogens using DNA double-strand break marker,
γ -H2AX○ Asako Okabe1），Yuka Kiriyama1），Shugo Suzuki2），Kouhei Sakurai1），Satoru Takahashi2），
Tetsuya Tsukamoto1）
Dept Diag Path, Fujita Health Univ Sch Med，2）Dept Exp Pathol Tumor Biol, Nagoya City Univ

1）

137

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

O-09 ＊	Acute changes in histopathology and intravascular imaging after renal denervation inswine○ Atsushi Sakaoka1,2），Akiyuki Takami3），Yuji Onimura1），Hitomi Hagiwara1），
Hisako Terao1），Fumiaki Kumagai4），Kiyoshi Matsumura2）
Terumo，2）Osaka Inst. of Technology，3）Univ. of Fukui，4）Hatano Res. Inst. FDSC

1）

O-10

Potential biomarker for diagnosis of pancreas cancer○ Katsumi Fukamachi1），Mitsuru Futakuchi1），Hiroyuki Tsuda2），Masumi Suzui1）
Department of Molecular Toxicology, Nagoya City University Graduate School of Medical Sciences，1）

Nanotoxicology project, Nagoya City University

2）

Poster Presentation Ⅰ-1
Day 1, January 25, Thursday

17:20 ～ 18:20

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Kyoko Nakano(Ito) (Eisai Co.,Ltd.) ・Hirofumi Hatakeyama (Ina Research Inc.)

P-01

CD44v6 expression in NNK-induced mouse lung adenocarcinoma○ Keiko Yamakawa1），Masanao Yokohira1），Nozomi Hashimoto1），Yuko Narusawa1），
Shota Yoshida 1），Kousuke Saoo1,2），Katsumi Imaida1）
Onco-Pathol., Fac. Med., Kagawa Univ.，2）Kaisei General Hosp.

1）

P-02 ＊

Minimal change disease of the kidney in a young Sprague-Dawley rat○ Kyohei Yasuno，Kumi Honda，Shinobu Hakamata，Kiyonori Kai，Kazuhiko Mori
Medicinal Safety Research Laboratories, Daiichi Sankyo Co., Ltd.

P-03

Mechanistic analysis of PhIP on carcinogenesis using mouse colon organoids○ Toshio Imai1），Masako Ochiai1），Mie Naruse1），Yoshitaka Hippo2）

Div. Anim. Exp., Natl. Cancer Ctr. Res. Inst.，2）Div. Mol. Carcinog., Chiba Cancer Ctr. Res. Inst.

1）

P-04

Cytotoxicity of the crude extracts of Musa basjoo in human colon cancer cells○ H Matsumoto1），S Ando1），K Fukamachi1），M Futakuchi1,2），N Yoshimi3），M Suzui1）
Dept. Mol. Toxicol., Nagoya City Univ. Grad. Sch. Med. Sci. & Med. Sch.，

1）

Dept. Pathol., Nagasaki Univ. Hosp.，3）Dept. Pathol. & Oncol., Univ. of the Ryukyus

2）

P-05

Overcoming resistance to cetuximab with honokiol, a small-molecule polyphenol○ Mari Iida1），Hannah E. Pearson1），Rachel A. Orbuch1），Nellie K. McDaniel1），
Kwangok P. Nickel 1），Randall J. Kimple1），Jack Arbiser2），Deric L. Wheeler1）

Department of Human Oncology, University of Wisconsin School of Medicine and Public Health1）

Department of Dermatology, Emory University School of Medicine, Winship Cancer Institute2）

Poster Presentation Ⅰ-2
Day 1, January 25, Thursday

17:20 ～ 18:20

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Kaoru Inoue (National Institute of Health Sciences) ・Masanao Yokohira (Kagawa University)

P-06

Proteome analysis in NASH liver tissue and associated hepatocellular carcinomas○ Anna Kakehashi，Takahiro Okuno，Masaki Fujioka，Min Gi，Hideki Wanibuchi
Dept. Mol. Pathol. Osaka City Univ. Grad. Sch. Med.

138

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-07 ＊	Responses of cellular senescence-linked cell metabolism-related molecules bygenotoxic or non-genotoxic carcinogens in rats

○ Yuko Ito1,2），Kota Nakajima1,2），Yasunori Masubuchi1,2），Fumiyo Saito3），Yumi Akahori3），
Toshinori Yoshida 1），Makoto Shibutani1）
LVP, TUAT，2）UGSVS, Gigu Univ.，3）Chem. Eval. Res. Inst.

1）

P-08

Effects of astragalus injection on early hepatocarcinogenesis in SD rats.
○ Meilan Jin，Qian Tang，Mei Zhang，Rendong Fang，Jian Wang，Zili Wang

Laboratory of Veterinary Pathology, College of Animal Science and Technology, Southwest University

P-09 ＊

Chemopreventive effects of luteolin on pancreatic carcinogenesis○ Hiroyuki Kato，Aya Naiki-Ito，Shugo Suzuki，Satoru Takahashi
Dep. Exp. Pathol. Tumor Biol., Nagoya City Univ.,

P-10	Influence of strain difference of trans fatty acids on NASH-like lesions between Hsd
rats and F344 rats fed with a CDAA diet.
○ Kinuko Uno，Ktsuhiro Miyjima，Soon Hui Teoh，Noriko Kemuriyama，Shuji Ogawa，Atsusi Watanabe，Dai Nakae
Facul. Agricul, Graduate School of Tokyo Univ. Agricul

Poster Presentation Ⅰ-3
Day 1, January 25, Thursday

17:20 ～ 18:20

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Mihoko Ono (Astellas Pharma Inc.) ・Shinji Takasu (National Institute of Health Science)

P-11

Starvation-induced liver autophagy in aged mice

○ Seiichi Iizuka1），Miwa Nahata1），Hitomi Sekine1），Naoki Fujitsuka1），Hiroshi Takeda2,3）
Tsumura & Co.，1）

Pathophysiology and Therapeutics, Faculty of Pharmaceutical Sciences, Hokkaido University，
Hokkaido University Hospital Gastroenterological Medicine

2）
3）

P-12 ＊

Multidirectional analyses of hepatic chronotoxicity induced by cadmium in mice

○ Hiroki Yoshioka1,2），Tsunemasa Nonogaki1），Yoshimi Ichimaru1），Katsumi Ohtani3），
Masumi Suzui2），Nobuhiko Miura3）
Kinjo Gakuin University，2）Nagoya City University，

1）Japan National Institute of Occupational Safety and Health

3）

P-13

Analyses of mechanism on liver toxicity by CCA○ Naofumi Takahashi1），Satoru Yamaguchi1），Ryoichi Ohtsuka1），Makio Takeda1），
Yoshitaka Katoh 1），Tsuyoshi Ito1），Aya Koyama1），Atsushi Shiga1），Yoshimasa Okazaki1），
Toshinori Yoshida2），Takanori Harada1）
The Institute of Environmental Toxicology，2）Tokyo Univ. Agricul. Technol.

1）P-14 ＊	Time dependent cytoprotective phenomenon of lipopolysaccharide in TAA-induced
acute liver injury in rats
○ Mohammad Rabiul Karim，Munmun Pervin，Mizuki Kuramochi，Takeshi Izawa，Mitsuru Kuwamura，Jyoji Yamate
Veterinary Pathology, Osaka Prefecture University

139

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation Ⅰ-4
Day 1, January 25, Thursday

17:20 ～ 18:20

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Shugo Suzuki (Nagoya City University Graduate School of Medical Sciences) ・Noriko Tsuchiya (Shionogi&Co.,Ltd.)

P-15

Effect of edaravone on cisplatin nephrotoxicity○ Natsumi Koike，Ayaka Sasaki，Rin Yamori，Tomoaki Murakami，Kazuhiko Suzuki
Tokyo University of Agriculture and Technology Faculty of Agriculture Cooperative Department of
Veterinary Medicine

P-16 ＊

Effects of Dimethyl Fumarate on renal interstitial fibrosis○ Ayaka Sasaki，Natsumi Koike，Rin Yamori，Tomoaki Murakami，Kazuhiko Suzuki
Tokyo University of Agriculture and Technology, Faculty of Agriculture, Department of Veterinary
Medicine

P-17 ＊	Transformation of renal tubular epithelial cell associated with decreased expressionof HNF α○ Rin Yamori，Natsumi Koike，Ayaka Sasaki，Tomoaki Murakami，Tetsuya Furuya，Kazuhiko Suzuki
Tokyo University of Agriture and Technology, Fuculty of Agriculture, Cooperative Department of
Veterinary Medicine

P-18	High-throughput screening of the hypoxia pathway: examining promoter response
and function○ Masato Yonezawa1），Shelley Force Aldred1），Nathan Trinklein1），Menghang Xia2），
Ruili Huang 2），Jim Hudson3），Johanna Samuelsson1）
Active Motif Inc.，2）NIH Chemical Genomics Center，3）Hudson Alpha Institute for Biotechnology

1）P-19 ＊Catch up growth and immune organ development in DOHaD study○ Mai Todoroki，Mika Senuma，Fumiaki Kumagai，Yoshiaki Saito，Makiko Kuwagata
Hatano Research Institute Food and Drug Safty center

Poster Presentation Ⅰ-5
Day 1, January 25, Thursday

17:20 ～ 18:20

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Kinji Kobayashi (Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd. ) ・
Saori Matsuo (Chugai Pharmaceutical Co,Ltd.)

P-20 ＊	Inhalation single toxicity studies of 1-methylnaphthalene in rats and mice:
Histopathological Aspect○ Mi Ju Lee

Inhalation Toxicity Research Center, Occupational Safety and Health Research InstituteP-21	Respiratory lesions induced in rats after inhalation exposed to Methyl Acrylate for 13
weeks.
○ Kenji Takanobu，Hideki Senoh，Yumi Umeda，Shigetoshi Aiso，Jun Kanno
Japan Bioassay Research Center, JOHAS

P-22	Nasal Cavity Neoplastic/Non-neoplastic lesion induced by 104-week whole bodyinhalation exposure to Methyl Acrylate in rats
○ Hideki Senoh，Kenji Takanobu，Yumi Umeda，Shigetoshi Aiso，Jun Kanno
Japan Bioassay Research Center, JOHAS

140

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-23 ＊	Myocardial damage induced in rats by a single dose of combretastatin A4 disodium
phosphate○ R Tochinai1），K Komatsu1），J Murakami1），Y Nagata1），M Ando1），C Hata1），T Suzuki1），
S Kado 1），T Kobayashi1），M Kuwahara2）
Yakult Cent. Inst.，2）Dep. of Vet. Pathophysiol. and Anim. Health, The Univ. of Tokyo

1）

Poster Presentation Ⅰ-6
Day 1, January 25, Thursday

17:20 ～ 18:20

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Chihiro Noguchi (TAISHO PHARMACEUTICAL CO., LTD.,) ・Akihiro Hirata (Gifu University)

P-24 ＊	Studies on the tumor-promoting activity of alpha-linolenic acid-enricheddiacylglycerol oil○ Hiroshi Honda1），Taisuke Kawamoto1），Yuko Doi2），Takuya Mori1），Shoji Matsumura1），
Norio Imai2），Yukinori Mera2），Yuichi Ito1），Osamu Morita1）
Kao Corporation，2）DIMS Institute of Medical Science, Inc.

1）

P-25	A 26-week Short-term Carcinogenesis Bioassay of Organic Germanium, poly-trans[(2-carboxyethyl) germasesquioxane] (Ge-132) using rasH2 Mice
○ Yuko Doi1），Norio Imai1），Mayuko Suguro1），Mayumi Kawabe1），Isao Sato2）
DIMS Institute of Medical Science, Inc.，2）Asai Germanium Research Institute Co., Ltd.

1）

P-26 ＊

Immunohistochemical examination of a tumor observed in the liver○ Du Mu，Guo Hui，Zhang Yuexiang，Liu Xiangjiang，Zhang Weijuan，Ji Xiaoxia，
Guo Maowu，Yasuhiko Hirouchi
JOINN Laboratories

P-27 ＊	Study on toxicity of o-Acetoacetotoluidide (AAOT) Kenji kumada Dept. Mol. Path.,
Osaka City Univ. Graduate Sch. Medicine○ Kenji Kumada，Takahiro Okuno，Min Gi，Masaki Fujioka，Nao Yukimatsu，Anna Kakehashi，Hideki Wanibuchi
Department of Molecular Pathology Osaka City University Medical School

P-28	Immunohistochemical characteristics of proliferative lesions in Wistar Hannover rat
thymus○ Yuki Tomonari，Junko Sato，Tetsuro Kurotaki，Ryosuke Kobayashi，Takuya Doi，
Takeshi Kanno，Minoru Tsuchitani
LSIMedience Corporation, Pathology Department

Poster Presentation Ⅰ-7
Day 1, January 25, Thursday

17:20 ～ 18:20

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Hideshi Kaneko (TEIJIN PHARMA LIMITED) ・ Akiko Nakamura (JAPAN TOBACCO INC.)

P-29

Oral toxicity study of neonicotinoid pesticide dinotefuran in CD-1 mice

○ Yukie Tada，Toyohito Tanaka，Kiyomi Ikushima，Toshinari Suzuki，Akiko Inomata，
Takako Moriyasu
Tokyo Metropolitan Institute of Public Health

141

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-30 ＊	Comparison between MNU manufacturing facilities concerning the medium-term
multi-organ carcinogenesis bioassay○ Taiki Sugiyama，Kazunari Uda，Hitomi Higuchi，Yuko Doi，Akihiro Hagiwara，
Yukinori Mera
DIMS Institute of Medical Science, Inc.

P-31 ＊	 The high incidence of amyloidosis in control ICR mice in carcinogenicity studies:
Comparison to historical controls (2nd report)○ Tsuyoshi Ito，Yoshitaka Katoh，Emi Makino，Aya Koyama，Naofumi Takahashi，Atsushi Shiga，Yoshimasa Okazaki，Takanori Harada
The Institute of Environmental Toxicology (IET)

P-32 ＊	Comparative study of pathological characteristics of rat mesotheliomas induced by
MWCNT and chrysotile○ Motoki Hojo1），Yoshimitsu Sakamoto1），Yukio Yamamoto1），Yuko Hasegawa1），
Shiho Murakami1），Ai Maeno1），Akihiko Hirose2），Dai Nakae3）
Tokyo Metropol. Inst. Pub. Health，2）Natl. Inst. Health Sci.，3）Tokyo Univ. Agricul.

1）

Poster Presentation Ⅰ-8
Day 1, January 25, Thursday

17:20 ～ 18:20

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Hiroaki Kawaguchi (Kagoshima University.) ・Kimiaki Hirakawa (Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd. )P-33

A 90-day oral toxicity study of vanillin propylene glycol acetal (vanillin PGA) in rats
○ Takanori Yamada1,2），Kohei Matsushita1），Takeshi Toyoda1），Tomomi Morikawa1），
Miwa Takahashi1），Kaoru Inoue1），Kumiko Ogawa1）
Div. Pathol., Natl. Inst. Health Sci.，2）LVP, Tokyo Univ. Agri. Tech.

1）

P-34 ＊

13-week subchronic toxicity study of isoeugenol methyl ether in F344 rats
○ Jun-ichi Akagi，Young-Man Cho，Yasuko Mizuta，Kumiko Ogawa
Div. Pathology, Natl. Inst. Health Sci.

P-35 ＊	Characteristic pathological changes in nuclei of ADC drug-treated animals○ Mingshu Huang，Toko Ohira，Liang He，Jingjing Mao，Jianyan Yan，Tiantian Cui，
Minbo Hou，Hua Li，Jing Ma
National Shanghai Center for New Drug Safety Evaluation and Research

P-36

Investigation on carcinogenicity study of prescription drugs -Part I-○ Jihei Nishimura1），Mizuho Nonaka1），Misaki Naota1），Satoshi Tsunoda1），
Yukie Saegusa 1），Hiroshi Doguchi1），Hiroshi Onodera1），Osamu Fueki1），
Kazutoshi Shinoda1），Kumiko Ogawa2），Akiyoshi Nishikawa2）
PMDA，2）NIHS

1）

142

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation Ⅰ-9
Day 1, January 25, Thursday

17:20 ～ 18:20

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Satoshi Suzuki (Taiho Pharmaceutical Co.,Ltd.)・Tomonari Nishimura (Asubio Pharma Co.,Ltd.)

P-37 ＊	Time course study on histopathological changes of the peripheral nerve inexperimental autoimmune neuritis rats

○ Emi Tomikawa，Mayu Mutsuga，Kojiro Hara，Chihiro Kaneko，Tomoya Miyoshi，Naoko Imura，Yuko Togashi，Ryoji Hayashi
Pharmaceutical Research Laboratories, Toray Industries, Inc.

P-38 ＊

Histopathological examination of ocular lesions in leptin receptor-knockout medaka○ Shin-ichi Chisada1），Ayano Hirako2），Akihiko Sugiyama2）

School of Medicine, Kyorin University，2）Faculty of Agriculture, Tottori University

1）

P-39	Inhibition of atherosclerosis in ApoE-knockout mice by mangosteen extracts and themechanism analysis○ Masa-Aki Shibata1），Mariko Harada-Shiba2），Eiko Shibata2），Kentaro Maemura1），
Yoichi Kondo 1）

Dept of Anat & Cell Biol, Osaka Med Coll，2）Dept of Mol Innov Lipidol, Natl Cereb & Cardiovasc CentrRes Inst

1）

P-40

Protective effects of Japanese soybean paste (miso) on SHRSP○ H Watanabe1），M Sasatani2），K Satoh2），Y Miyasaka3），M Yoshizumi1）
Dept Cardiovascular Physiol Med, Inst Biom Health Sci, Hiroshima Univ，

1）

Dept Envir Biomet, Res Inst Radiat Biol Med, Hiroshima Univ，3）Shinsyu-ich Miso

2）

Poster Presentation Ⅰ-10
Day 1, January 25, Thursday

17:20 ～ 18:20

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Takeshi Izawa (Osaka Prefecture University) ・Kousei Inui (Ishihara Sangyo Kaisha,Ltd.)

P-41 ＊	Inhibitory Effects of Mead Acid Supplementation on Green Tea Extract-Induced
Hepatotoxicity○ A Takenouchi1），Y Emoto2），Y Kinoshita3），K Hamazaki4），A Tsubura5），K Yoshizawa1）
Mukogawa Women's Univ.，2）Kansai Med. Univ.，3）Wakayama Med. Univ. Hospital，

1）

Public Health-Univ.of Toyama，5）Pref Osaka Saiseikai Izuo Hospital4）P-42 ＊	Damage associated molecular patterns (DAMPs) and the related signals inthioacetamide (TAA)-injected rat liver injury○ Mizuki Kuramochi，Takeshi Izawa，Munmun Pervin，Mohammad Rabiul Karim，Mitsuru Kuwamura，Jyoji Yamate
Veterinary Pathology, Osaka Prefecture University

P-43 ＊

Histopathological Analysis of Young and Aged Female SDT Fatty Rats

○ Soon Hui Teoh1），Katsuhiro Miyajima1），Takeshi Ohta2），Masami Shinohara3），
Kinuko Uno 1），Noriko Kemuriyama1），Dai Nakae1）
Grad. Sch. of Agricul.Tokyo Univ of Agricul.，2）Central Pharma. Research Inst. Japan Tobacco Inc，

1）

Tokyo AD Dept. CLEA Japan Inc

3）

143

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-44 ＊	The effects of SLE therapeutic medication and histopathological examination on LPSinduced early nephritis develop model in NZB/W F1 mice
○ Tomomi Kanehara，Yasuhiro Ohshiba，Jun Imai，Shiori Murase，Tadashi Itoh，Hitoshi Kimura
Nihon Bioresearch Inc.

P-45

Effect of NaCl supplementation on renal complications in SDT fatty rat○ Katsuhiro Miyajima1,2），Takeshi Ohta3），Masami Shinohara4），Hinako Iwasaki1），
Soon Hui Teoh 2），Kinuko Uno2），Noriko Kemuriyama1），Dai Nakae1,2）Tokyo Univ. Agricul.，2）Dept. Food Nutr. Sci., Grad. Sch. TUA.，3）Japan Tobacco Inc.，4）CLEA Japan Inc.

1）

Poster Presentation Ⅰ-11
Day 1, January 25, Thursday

17:20 ～ 18:20

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Tomo Sasaki (Maruho Co.,Ltd.) ・Atsushi Watanabe (Asahi Kasei Medical Co.,Ltd.)

P-46

Development of canine model with large cartilage defects on femoral condyles○ M. Tasaki1），T. Hirai1），M. Akiyama1），Y. Itou1），K. Nakazawa1），Y. Harada2），K. Nagano3），
H. Hagiwara 1）
Terumo Corp.，2）Div. of Vet. Surg., Nippon Veterinary and Life Science Univ.，
Nagano Toxicologic-Pathology Consulting

1）
3）

P-47 ＊	Histopathology of inflammatory response through ERs in allergic dermatitis micemodel

○ Aya Koyama，Risako Tajiki，Yuko Watanabe，Tomoki Fukuyama，Yoshitaka Katoh，
Emi Makino，Tsuyoshi Ito，Naofumi Takahashi，Atsushi Shiga，Yoshimasa Okazaki，Takanori Harada
The Institute of Environmental Toxicology

P-48

The world's leading rat resource center: the National BioResource Project-Rat○ Miyuu Tanaka，Arata Honda，Birger Voigt，Yuki Neoda，Kazumi Hagiwara，
Zong-hu Cui，Ryoma Tachibana，Tomomi Nagao，Satoshi Nakanishi，Ken-ichi Yamasaki，Takashi Kuramoto，Masahide Asano
Kyoto University

P-49

A 13-week repeated oral dose toxicity study of 2-furanmethanethiol in F344 rats.
○ Liang Shi1,3），Yuji Ishii1），Shinji Takasu1），Takuma Tsuchiya1），Aki Kijima1），
Kumiko Ogawa1），Akiyoshi Nishikawa2），Takashi Umemura1）
Div.Pathol., NIHS，2）Biol.Safety Res.Ctr.,NIHS，3）Lab.Exp.Pathol., Univ.Tsukuba

1）

Poster Presentation Ⅱ-1
Day 2, January 26, Friday

13:10 ～ 14:10

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Takashi Kotera (Nippon Shinyaku Co.,Ltd.)・Junko Shinozuka (Chugai Pharmaceutical Co,Ltd.)

P-50 ＊

An immunohistochemical study to differentiate cadiomyocyte necrosis○ Yuichi Takai，Hitoshi Kandori，Takeshi Watanabe

Drug Safety Research and Evaluation, Research, Takeda Pharmaceutical Company Limited

144

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-51	Quantitative evaluation of organelles using image analysis software ImageJ ―Stomach surface mucous cell alteration of PGE2 treated mouse ―○ Kanata Ibi，Tohru Kihara，Yumi Kangawa，Toshiyuki Shibanushi，Hiroyuki Takabe，Kazuto Hashimoto
Kaken Pharmaceutical Co,Ltd.

P-52	Adjuvant effects of transcutaneously exposed cholera toxin and its B subunit in skinsensitization model○ Young-Man Cho，Yasuko Mizuta，Jun-ichi Akagi，Takeshi Toyoda，Kumiko Ogawa
Division of Pathology, National Institute of Health Ssciences

P-53	Contribution of toxicologic pathologists to choosing appropriate histopathologicalfindings as endpoints for benchmark dose (BMD) approach in toxicologicalevaluation of chemicals○ Midori Yoshida1），Takashi Umemura2）

Food Safety Commission of Japan, Cabinet Office，2）Yamazaki Gakuen University

1）

P-54	An approach for assessing mild irritants in the Bovine Corneal Opacity andPermeability Test (BCOP test) includes a histopathological examination○ Kouta Itoh，Masatoshi Furukawa，Chihiro Endoh，Masao Matsuura
SAFETY RESEARCH INSTITUTE FORCHEMICAL COMPOUNDS CO., LTD

Poster Presentation Ⅱ-2
Day 2, January 26, Friday

13:10 ～ 14:10

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Mami Kouchi (Sumitomo Dainippon Pharma Co.,Ltd. Preclinical Research Unit) ・Takahisa Noto (Santen Pharmaceutical Co.,Ltd)

P-55 ＊

Histopathological changes of autonomic nerves induced by Paclitaxel in rats

○ Kenji Nakamura，Yu Yokoo，Moutou Ou，Koji Shimouchi，Atsuko Murai，Kengo Namiki，Masanori Kuribayashi，Hiroyuki Yanagi
Safety Research Laboratories, Discovery and Research, ONO Pharmaceutical Co., Ltd.

P-56 ＊	 Cellular identification of MT + cells increased in the hippocampal dentate gyrus andcerebellum by developmental exposure to T-2 toxin in mice
○ Kota Nakajima1,2），Yuko Ito1,2），Yasunori Masubuchi1,2），Toshinori Yoshida1），
Makoto Shibutani1）
LVP, Tokyo Univ. Agricul. Technol.，2）United Grad. Sch. Vet. Sci., Gifu Univ.

1）

P-57	Neuroprotection on the disruptive hippocampal neurogenesis induced bydevelopmental hypothyroidism in rats

○ Yasunori Masubuchi1,2），Kota Nakajima1,2），Yuko Ito1,2），Mihoko Koyanagi3），
Shim-mo Hayashi3），Toshinori Yoshida1），Makoto Shibutani1）
LVP, TUAT，2）UGSVS, Gifu Univ.，3）San-Ei Gen F.F.I., Inc

1）

P-58 ＊

Histological features of the eye in the juvenile white rabbit○ Yoshinori Yamagiwa，Shingo Nemoto，Hideyuki Sakaki，Masaaki Kurata
Research and Development Division, Senju Pharmaceutical, Co., Ltd.

145

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-59	Classification of Lung Cancer Types from Cytological Images Using Deep
Convolutional Neural Networks○ Tetsuya Tsukamoto1），Yuka Kiriyama1,2），Atsushi Teramoto3）

Dept Diag Path, Fujita Health Univ Sch Med，2）Dept Diag Path, Narita Memorial Hosp，

1）

Fac Radiol Tech, Sch Health Sci, Fujita Health Univ

3）

Poster Presentation Ⅱ-3
Day 2, January 26, Friday

13:10 ～ 14:10

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Junko Fujishima (Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd. ) ・Toshihiko Makino (Daiichi Sankyo Co,.Ltd.)

P-60 ＊

Cardiac lesions in cynomolgus monkey with food restriction○ Saori Matsuo1），Nozomi Fujisawa1），Tomochika Matsushita1），Shuji Hayashi1），
Junko Shinozuka 1），Akio Miyoshi1），Masami Suzuki1,2），Atsuhiko Kato1）
Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.，2）Forerunner Pharma Research Co., Ltd

1）

P-61 ＊

Expression analysis of AKAP13 and ROCK inhibition assay in mouse DSS-induced colitis○ Y Kangawa1,2），T Yoshida2），H Murayama1,2），K Ibi1），T Kihara1），K Kuzutani1），
M Koyanagi 3），SM Hayashi3），M Shibutani2）

Kaken Pharmaceutical Co., Ltd.，2）Lab. Vet. Pathol., Tokyo Univ. Agric. Technol.，3）San-Ei Gen F. F. I., Inc.

1）

P-62

Historical Data for the Histopathology on the Kidneys in Juvenile Crl:CD(SD) rats

○ Saki Inoue1），Hirofumi Hatakeyama1），Yoshihiro Takei1），Jun Watanabe1），
Haruko Koizumi 1），Tetsuyo Kajimura1），Akihito Shimoi1），Shin-ichi Sato1），Hijiri Iwata2）
Ina Research Inc.，2）LunaPath LLC.

1）

P-63 ＊

Historical Data for the Histopathology on the Skin in Juvenile Crl:CD(SD) Rats

○ Jun Watanabe1），Hirofumi Hatakeyama1），Yoshihiro Takei1），Saki Inoue1），
Haruko Koizumi 1），Tetsuyo Kajimura1），Akihito Shimoi1），Shin-ichi Sato1），Hijiri Iwata2）
Ina Research Inc.，2）LunaPath LLC.

1）

P-64 ＊	Spontaneous lesions spectrum in male and female F344 gpt delta rats in two years
breeding○ Kohei Matsushita1），Aki Kijima1），Yuji Ishii1），Shinji Takasu1），Ken Kuroda1），
Takehiko Nohmi2），Kumiko Ogawa1），Takashi Umemura1,3）

Div. Pathol., NIHS.，2）Div. Genet. Mutat., NIHS.，3）Fac. Anim. Sci. Tech., Yamazaki Gakuen Univ.

1）

Poster Presentation Ⅱ-4
Day 2, January 26, Friday

13:10 ～ 14:10

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Seiichi Iizuka (Tsumura & Co.) ・Hitoshi Kandori (Axcelead Drug Discovery Partners, Inc. Nonclinical Safety Research)

P-65 ＊	Histopathological features of female genitals in IS/Kyo rats up to 30 weeks of age― Relationship with a decline of the pregnancy and the implantation rate ―○ Hiromu Okano，Yuko Yamaguchi，Saori Igura，Isamu Suzuki，Tsubasa Saito，Toru Hoshiya
Pathology Department, BoZo Research Center Inc.

146

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-66 ＊

Background data of atypical residual bodies in the testes of Crl:CD1(ICR) mice
○ Chisato Hayakawa，Masayuki Kimura，Yusuke Kuroda，Seigo Hayashi，Kazuya Takeuchi，Satoshi Furukawa
Biological Research Laboratories, Nissan Chemical Industries, Ltd.

P-67

Histological development of Leydig cells in microminipigs○ Akihisa Kangawa，Masayoshi Otake，Satoko Enya，Masatoshi Shibata
Shizuoka Prefectural Research Institute of Animal Industry, Swine and Poultry Research Center

P-68 ＊	Classification of spermatogenesis cycle for evaluation of testicular toxicity in
Göttingen Minipigs○ Naoaki Yamada，Yumi Wako，Hiroko Kokoshima，Takuya Doi，Takeshi Kanno，Minoru Tsuchitani
LSI Medience Corporation, Nonclinical Research Center, Pathology Department

Poster Presentation Ⅱ-5
Day 2, January 26, Friday

13:10 ～ 14:10

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Kiyokazu Ozaki (Setsunan University) ・ Yutaka Nakahara (Astellas Pharma Inc.)

P-69	Granulomatous meningitis in a beagle dog showing neurological signs by compound
administration○ Hikaru Mitori1），Naoto Horai2），Satoru Kajikawa1），Mihoko Ono1）
Drug Safety Research Labs., Astellas Pharma Inc.，

1）

Drug Safety Research Labs., Shin Nippon Biomedical Laboratories Ltd.

2）

P-70 ＊

A spontaneous intrathoracic carcinosarcoma in a Sprague-Dawley rat : a case report○ Kei Kijima，Miki Suehiro，Shino Ito，Aisuke Nii
Central Research Lab., Seikagaku Co.

P-71 ＊	A spontaneous tubular adenocarcinoma (well differentiated type) in the jejunum of
young SD rat○ Yoshiji Asaoka，Koichi Masuno，Kae Fujisawa，Yutaka Tonomura，Minako Tajiri，Yuki Kato，Emi Kashiwagi，Noriko Tsuchiya，Mikinori Torii，Motonobu Ueno
Research Laboratory for Development, Shionogi & Co, Ltd

P-72

Cecal hamartoma in the dog with cecocolic intussusception○ Mihoko Ono，Miwa Takahashi，Yutaka Nakahara，Kenjiro Tsubota，Masahiro Matsumoto
Drug Safety Research Labs., Astellas Pharma Inc.

Poster Presentation Ⅱ-6
Day 2, January 26, Friday

13:10 ～ 14:10

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Kaoru Toyosawa (Sumika Chemical Analysis Service, Ltd.) ・Yuko Yamaguchi (BOZO Research Center Inc.)

P-73

A case of acute hemorrhagic gastritis with necrotic arteritis in mini pig○ Hiro Eda，Hirotoshi Akane，Atsuko Ichikawa，Shigekazu Shimizu，Hiroyuki Komatsu，Yasuki Akie
CMIC Pharma Science Co., Ltd.

147

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-74

Method for Sequential Cerebrospinal Fluid Collection from Diurnal Microminipigs○ Hiroaki Kawaguchi1），Masaharu Abe1），Miharu Ushikai1），Sayumi Oi2），Airo Yukawa2），
Tetsuya Yoshikawa2），Hiroyuki Izumi2），Akihide Tanimoto1），Masahisa Horiuchi1）
Kagoshima University，2）Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.

1）

P-75 ＊

Segmental aplasia of uterine horn in two RccHan:WIST rats

○ Yukako Shimotsuma，Shuji Takeda，Keiko Ogata，Masahiko Kushida
Environmental Health Science Laboratory, Sumitomo Chemical Co., Ltd.

P-76 ＊

Histopathological Investigation of Mammary Tumor in a Young Male SD Rat○ Shota Yoshida，Hideki Tanaka，Fumiko Ninomiya，Kenji Matsubara，Hiromi Yamamoto，Satoshi Suzuki，Fumio Morita，Kazuo Hakoi
Discovery and Preclinical Research Division, Taiho Pharmaceutical Co., Ltd.

Poster Presentation Ⅱ-7
Day 2, January 26, Friday

13:10 ～ 14:10

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Tetsuro Kurotaki (LSI Medience CorPoration) ・Izumi Matsumoto (Sumitomo Dainippon Pharma Co.,Ltd.)

P-77 ＊

Cutaneous hemangiosarcoma with pulmonary metastasis in a young adult Wistar rat○ Shino Suzuki，Rie Takagi，Kazuya Hirai，Junya Hirata，Yukiko Takeuchi-Kashimoto，
Mie Watanabe-Akanuma
Kureha Corporation, Safety Research Center

P-78

Dedifferentiated liposarcoma of retroperitoneum spontaneously occurred in aged SD rat.
○ Tomoharu Naito1,2），Tsuyoshi Saito2），Tamami Higuchi1），Akira Inomata1），
Takuo Hayashi2），Atsuko Yamauchi1），Sayaka Kemmochi1），Chihaya Kakinuma1,2），
Takashi Yao 2）
FujiFilm Co.，2）Dept Human Pathology, School of Medicine, Juntendo Univ

1）

P-79

Subcutaneous tumor in a NOG mouse○ Hirotoshi Akane，Hiro Eda，Atsuko Ichikawa，Shigekazu Shimizu，Hiroyuki Komatsu，Yasuki Akie
CMIC Pharma Science Co., Ltd.

P-80	Hydropic degeneration with hyaline droplet of the acinar cell in the sublingual glandin a beagle dog○ Takafumi Oshikata，Mikio Mitsuishi，Masao Hamamura
LSI Medience Corporation

148

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation Ⅱ-8
Day 2, January 26, Friday

13:10 ～ 14:10

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Tsuyoshi Yoshikawa (Otsuka Pharmaceutical Co.,Ltd.) ・Takeshi Watanabe (Takeda Phaemaceutical Company Limited.)

P-81

Exocrine pancreatic injury induced by Caerulein in rats

○ Hideki Tanaka，Shota Yoshida，Fumiko Ninomiya，Mitsuhiro Fujieda，Norifumi Matsushita，Kenji Matsubara，Hiromi Yamamoto，Satoshi Suzuki，Fumio Morita，Kazuo Hakoi
Discovery and Preclinical Research Division, Taiho Pharmaceutical Co., Ltd.

P-82 ＊

Vehicle exhaust particulates accumulate in lysosomes and are lysed by lysozyme○ Nodoka Koga，Akira Onodera，Katsutoshi Yayama，Akira Yokoyama，Rei Imamura，
Chiaki Tanigawa，Tomoki Ohmoto，Masaki Inoue，Shinichi Tsunoda，Yuichi Kawai
Fac. Pharmaceut. Sci., Kobegakuin Univ.

P-83 ＊	Effect of vehicle exhaust particulates on the immune response in nasopharyngealassociated lymphoreticular tissues○ Akira Yokoyama，Akira Onodera，Katsutoshi Yayama，Rei Imamura，Chiaki Tanigawa，
Tomoki Ohmoto，Masaki Inoue，Shinichi Tsunoda，Yuichi Kawai
Fac. Pharmaceut. Sci., Kobegakuin Univ.

P-84 ＊

Urban aerosols suppress proliferation of nasal epithelial cells○ Chiaki Tanigawa，Akira Onodera，Katsutoshi Yayama，Akira Yokoyama，Rei Imamura，
Tomoki Ohmoto，Nodoka Koga，Masaki Inoue，Shinichi Tsunoda，Yuichi Kawai
Fac. Pharmaceut. Sci., Kobegakuin Univ.

P-85 ＊

Effect of gender on upper airway immunity to vehicle exhaust particulates in aged mice
○ Rei Imamura，Akira Onodera，Katsutoshi Yayama，Akira Yokoyama，Nodoka Koga，
Chiaki Tanigawa，Tomoki Ohmoto，Masaki Inoue，Shinichi Tsunoda，Yuichi Kawai
Fac. Pharmaceut. Sci., Kobegakuin Univ.

Poster Presentation Ⅱ-9
Day 2, January 26, Friday

13:10 ～ 14:10

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Noriaki Ishigami (ONO pharmaceutical Co.,Ltd.) ・Satomi Nishikawa (Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation)

P-86 ＊	Effects of nasal epithelial cells treated with vehicle exhaust particulates on
lymphocyte composition in vitro○ Tomoki Ohmoto，Akira Onodera，Katsutoshi Yayama，Rei Imamura，Chiaki Tanigawa，
Nodoka Koga，Masaki Inoue，Shinichi Tsunoda，Yuichi Kawai
Fac. Pharmaceut. Sci., Kobegakuin Univ.

P-87 ＊

Structural optimization of TNFR1 antagonist by single-chain modification○ Natsuki Osaki1），Masaki Inoue1,2），Masahiro Kunishige1），Midori Miki1），
Akira Onodera1），Yuichi Kawai1），Haruhiko Kamada2,3），Yasuo Tsutsumi3），
Shin-ichi Tsunoda1,2）
Fac. Pharm. Sci., Kobe Gakuin Univ.，2）NIBIOHN，3）Grad. Sch. Pharm. Sci., Osaka Univ.

1）

149

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-88 ＊

Structural optimization of TNFR1 antagonist using site-specific PEGylation○ Masahiro Kunishige1），Masaki Inoue1,2），Natsuki Osaki1），Midori Miki1），
Akira Onodera1），Yuichi Kawai1），Haruhiko Kamada2,3），Yasuo Tsutsumi3），
Shin-ichi Tsunoda1,2）
Fac. Pharm. Sci., Kobe Gakuin Univ.，2）NIBIOHN，3）Grad. Sch. Pharm. Sci., Osaka Univ.

1）

P-89 ＊

Function of TNFR2 signaling as a regulatory T cell regulator○ Midori Miki1），Masaki Inoue1,2），Natsuki Osaki1），Masahiro Kunishige1），
Akira Onodera1），Yuichi Kawai1），Daisuke Ando2,3），Haruhiko Kamada2,3），
Yasuo Tsutsumi3），Shin-ichi Tsunoda1,2）
Fac. Pharm. Sci., Kobe Gakuin Univ.，2）NIBIOHN，3）Grad. Sch. Pharm. Sci., Osaka Univ.

1）

Poster Presentation Ⅱ-10
Day 2, January 26, Friday

13:10 ～ 14:10

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Yoshimasa Okazaki (The Institute of Environmental Toxicology(IET)) ・Katsuhiro Miyajima (Tokyo University of Agriculture)P-90	Difference in toxic response of an anti-desmoglein-3 ADCC antibody in mouse due totarget expression and physiological characteristics of organs○ Etsuko Fujii1,2），Kenji Taniguchi2），Atsuhiko Kato2），Masami Suzuki1,2）

Forerunner Pharma Research, Co., Ltd.，2）Research Division, Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.

1）

P-91

The Role of the Toxicologic Pathologist in Drug Discovery and Development○ Norimitsu Shirai1），Lindsay Tomlinson2）

Pfizer Drug Safety R & D, Pathology, Groton, CT, USA，

1）

Pfizer Drug Safety R & D, Pathology, Cambridge, MA, USA

2）

P-92

Responses to FDA SEND data -Part III-○ Hirofumi Hatakeyama1），Shin-ichi Horikawa1），Junichi Sakurai1），Haruko Koizumi1），
Akihito Shimoi 1），Shin-ichi Sato1），Hijiri Iwata2），Takayuki Anzai3）
Ina Research Inc.，2）LunaPath LLC.，3）Showa University School of Medicine

1）

P-93

A consideration on pathology peer review and pathology phase report○ Hijiri Iwata1），Takayuki Anzai2），Yuji Oishi3）

LunaPath L.L.C.，2）Showa University School of Medicine，3）Osaka City University

1）

Poster Presentation Ⅱ-11
Day 2, January 26, Friday

13:10 ～ 14:10

Poster Room (Shell Hall banquet room, 7F)

Chair: Yoko Sugimoto (Nippon Boehringer Ingelheim Co.,Ltd.) ・Yuki Tomonari (LSI Medience Corporation)

P-94	Immunohistochemical characterization of lung proliferative lesions in rats
intratracheally given MWCNT○ Yoshimitsu Sakamoto1），Motoki Hojo1），Tosinari Suzuki1），Akiko Inomata1），
Akihiko Hirose2），Dai Nakae3）
Tokyo, Metropol. Inst. Pub. Health，2）Natl. Inst. Health Sci.，3）Tokyo Univ. Agricul

1）

150

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-95 ＊

Comparative Pulmonary toxicity of DWCNT and MWCNT-7 in Rats

○ Ahmed M. El-Gazzar1,2,7），Mohamed Abdelgied1,2,8），David B. Alexander1），
William T. Alexander1），Takamasa Numano1），Masaaki Iigo1），Aya Naiki2），
Hirotsugu Takase 3），Akihiko Hirose4），Yuhji Taquahashi5），Jun Kannno6），
Satoru Takahashi2），Ashraf Mohamed Nazem9），Osama Saeid Elokle7），Hiroyuki Tsuda1）
Nanotoxicology Project, Nagoya City University, Nagoya, Japan.，1）

Dept Exp Pathology and Tumor Biology, Nagoya City University Grad School Med Sciences, Nagoya, Japan.，2）

Nagoya City University Graduate School Med Sciences, Nagoya, Japan.，3）

Div Risk Assessment, NIH, Tokyo, Japan.，

4）

Div Cellular and Molecular Toxicology, NIH, Tokyo, Japan.，

5）Japan Industrial Safety and Health Association, Japan Bioassay Research Center, Kanagawa, Japan.，
Dept Forensic Medicine and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, Alexandria University,
Alexandria, Egypt.，6）7）

Dept Forensic Medicine and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, Beni Suef University, Beni Suef, Egypt.，
Dept Food Hygiene, Faculty of Veterinary Medicine, Alexandria University, Alexandria, Egypt.

8）9）P-96	Dynamics of stem, progenitor, and differentiated cells in the regenerative process ofgastrointestinal ulcer in mice
○ Akihiro Hirata1），Kengo Namiki2），Atsuko Murai2），Hiroyuki Tomita3），Akira Hara3），
Hiroki Sakai4），Tokuma Yanai4）
Gifu Univ.，2）Ono Pharmaceutical Co., Ltd.，3）Gifu Univ. Graduate Sch. Med.，4）Gifu Univ.

1）

P-97 ＊	Comprehensive gene expression analysis for two different types of GST-P positive fociin terms of their kinetics after cessation of carcinogen treatment○ Shinji Takasu1），Yuji Ishii1），Aki Kijima1），Kumiko Ogawa1），Takashi Umemura1,2）
Div. of Pathol, NIHS，2）Faculty of Anim. Sci. Technology, Yamazaki Gakuen Univ.

1）

P-98 ＊	Potassium octatitanate fiber (K 2O・8TiO 2) fiber is a potent inducer of lung and pleural
injury in male Fischer 344 rats: A comparative study of titanium dioxide nanoparticles○ Mohamed Abdelgied1,2,3），Ahmed M. El-Gazzar1,2,4），David B. Alexander1），
William T. Alexander1），Takamasa Numano1），Masaaki Iigo1），Aya Naiki2），
Hirotsugu Takase 5），Khaled Abbas Abdou3），Akihiko Hirose6），Yuhji Taquahashi7），
Jun Kannno 8），Satoru Takahashi2），Hiroyuki Tsuda1）
Nano toxicology Project, Nagoya City University, Nagoya, Japan.，1）

Dept Experimental Pathology and Tumor Biology, Nagoya City University Graduate School of Medical
Sciences, Nagoya, Japan.，2）

Dept Forensic Medicine and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, Beni Suef University, Beni-Suef, Egypt.，3）

Dept Forensic Medicine and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, Alexandria University,
Alexandria, Egypt.，

4）

Nagoya City University Graduate School of Medical Sciences, Nagoya, Japan.，5）

Div Risk Assessment, NIH, Tokyo, Japan.，7）Div Cellular and Molecular Toxicology, NIH, Tokyo, Japan.，

6）

Japan Industrial Safety and Health Association, Japan Bioassay Research Center, Kanagawa, Japan.

8）

151

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Luncheon Seminar Ⅰ
Day 1, January 25, Thursday

12:10 ～ 13:00

Chair: Makoto Imatachi (Envigo Co., Ltd.)
Co-sponsor: Envigo Co., Ltd.

Venue 1 (Nirai Kanai banquet room, 6F)

LS1	Immune functions in lymph nodes - how lymph nodes work; illustrated anatomicalbasis for surveillance, filtration and antigen response
Cynthia Willard-Mack
Pathology, Envigo US

Luncheon Seminar Ⅱ
Day 1, January 25, Thursday

12:10 ～ 13:00

Venue 2 (Ouchou banquet room, 6F)

Chair: Kazumoto Shibuya (Nippon Institute for Biological Science)
Co-sponsor: Southern Research/Three S Japan Co., Ltd.

LS2	Histopathologic evaluation for the Monkey Safety Test for Neurovirulence of Yellow
Fever and Tetravalent Dengue Vaccines - WHO Protocol for Live-AttenuatedVaccinesSheila Grimes

Southern Research

Luncheon Seminar Ⅲ
Day 2, January 26, Friday

12:10 ～ 13:00

Chair: Kaori Isobe (Charles River Edinburgh)
Co-sponsor: Charles River

LS3

Venue 1 (Nirai Kanai banquet room, 6F)

Use of Unbiased Stereology in Drug Development
Danielle L. Brown, DVM, MS, DACVP, DABTCharles River Pathology Associates

Luncheon Seminar Ⅳ
Day 2, January 26, Friday

12:10 ～ 13:00

Venue 2 (Ouchou banquet room, 6F)

Chair: Kimiaki Hirakawa (Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.)
Co-sponsor: Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.

LS4	Non-clinical safety studies for human cell derived tissue-engineered medical
products
Hiroaki Magotani

Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.

152

Abstracts
Special Lecture
Symposium

Panel Discussion
WorkshopSpecial Lecture

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Special Lecture

SL1
Development of bioresources in Okinawa and toxicology
Yoko Aniya
Okinawa Institute of Science and Technology Graduate University
  It is an important role for local university to contribute to welfare and development of each prefecture. In line withsuch a policy various developmental researches have been conducted in University of the Ryukyus. Okinawa Institute of
Science and Technology Graduate University (OIST) founded by Japanese Government aims to achieve excellence inresearch and science education, and thus contribute to the sustainable development of Okinawa. I would like to talkabout the developmental research of bioresources performed by Ryukyu University-Industry cooperation, and also to
introduce OIST.
   In the developmental research of bioresources in Okinawa screening and evaluation of antioxidant action were
examined by using traditional medicinal and dietary herbs as well as food materials. It was clarified that antioxidant
activity of herbs is potentiated by cultivating under irradiation of UV rays and typical Okinawan vegetables show
higher antioxidant activity compared with general vegetables. Pharmacological and toxicological actions of theseherbs/foods were evaluated and main antioxidant components were isolated. Antioxidants thus obtained have shownvarious pharmacological actions including liver protective, cancer preventive, anti-inflammatory, antidiabetic, andantibacterial actions. Some new antioxidants were isolated and their functional mechanisms were also clarified. These
academia-industry collaboration researches resulted in promotion of a development of healthy food in Okinawa. I
really, through these studies, recognized that herbal antioxidants show biphasic dose-response curve and multi-target
actions, and these unique properties of herbal antioxidants should be kept in mind for evaluation of pharmacological/
toxicological action.   
   OIST is an international graduate school and all education and research are conducted entirely in English. The firststudents will graduate at the end of this year with Ph.D. At OIST there are no academic departments but are 60
research units, each directed by faculty members (professor, associate professor, assistant professor). Research areas of
the units include neuroscience, environmental and ecological science, physics and chemistry, mathematical andcomputational science, and molecular, cellular and developmental biology. Excellent academic achievements at OIST
have been seen in many papers published in prestigious journals. OIST has also strengthened the Technology Transfer
and Development Center to promote the development of Okinawa.

155The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Special Lecture

Special Lecture

SL2
Mechanisms of food allergy and oral immune tolerance in early infancy and possible
diagnostic biomarkers of them  
Hiroshi Kido, M.D., Ph.D.
Institute for Enzyme Research, Tokushima University
   Recently, evidences are accumulating that there is a strong association between food sensitization and atopic
dermatitis, suggesting that allergic sensitization to foods can be mediated by cutaneous allergen sensitization. For
prevention of food allergy, such as peanut and egg allergy, it has been reported that early consumption is more
beneficial in reducing the incidence of food allergy than late introduction or avoidance of the food allergen. We
recently reported that introduction of heated egg in a stepwise manner together with aggressive eczema treatment is asafe and efficacious way to prevent hen’s egg allergy at one year of age in high-risk infants (The Lancet 389:276-86,
2017). However, studies on the mechanisms of food allergy and oral immune tolerance in early infancy and possible
diagnostic biomarkers for introduction of early consumption in medical setting have not been fully studied.       We recently monitored egg and milk allergen-specific immunoglobulin subclass formation trajectories every 2 months
from birth to 6 months of age. Allergen-specific immunoglobulins and allergen-specific affinity of IgE were measured
by the densely carboxylated protein (DCP) microarray using a 20 μ L serum or plasma in total under a less burden conditions
on infants. We found two different immunoglobulin class-switching patterns between food allergy infants and no-foodallergy infants who will develop to oral tolerance at one years of age, and high and low allergen-specific affinity of IgE
in food allergy and no food allergy infants, respectively. Low-affinity IgE has not been detected by the ordinal assay
methods reported and is detected only by the new DCP microarray established in Japan. Low-affinity IgE in human was
originally found in cord blood by us and has characteristics of no-induction of Fc ε RI-mediated histamine release frommast cells. In the present study, we found high-affinity IgE in the infants who had eczema history and developed tofood allergy at one years of age, and low-affinity IgE in the infants who have no food allergy at one years of age andwill develop to oral tolerance.
   In this presentation, I will introduce the new findings and paradigm shifts of human low- and high-affinity of IgE
which are detected by a novel DCP chip microarray.

156

Symposium

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

SY1-1
Early detection of risk of bladder carcinogenesis by immunohistochemistry for γ -H2AX〇 Takeshi Toyoda1），Kohei Matsushita1），Young-Man Cho1），Jun-ichi Akagi1），Mizuki Sone1,2），
Akiyoshi Nishikawa 3），Kumiko Ogawa1）
Division of Pathology, National Institute of Health Sciences，Tokyo University of Agriculture and Technology，
3）Biological Safety Research Center, National Institute of Health Sciences1）2）

method for risk of bladder carcinogenesis, we focused on the DNA repair pathway. In order to identify DNA repairassociated factors that change at the early stage of exposure of carcinogens, we performed immunostaining for various
pathways, such as double-strand breaks (DSB) and mismatch repair, using the urinary bladder of rats treated with

N -butyl-N -(4-hydroxybutyl)nitrosamine (BBN), a genotoxic bladder carcinogen. The formation of γ -H2AX, a biomarker

of DSB, was increased in the BBN-treated groups. γ -H2AX-positive cells were observed not only in tumor cells but also
in normal-like epithelial cells after 33 weeks from the end of administration. These results indicate that the DNA
damage generated at the early stage of exposure persists for a long time and contributes to later carcinogenesis.
  γ-H2AX is formed by phosphorylation at Ser139 of H2AX. Since its discovery in 1998, γ -H2AX is known as a sensitiveand specific marker of DSB, and is expected to be applied in a wide range of scientific fields. Genotoxic bladdercarcinogens significantly increased the number of γ -H2AX-positive cells in the bladder urothelium of rats, whereas
chemicals that were genotoxic but not carcinogenic in the bladders did not cause upregulation of γ -H2AX. Comparative
experiments using mice showed similar results, reflecting species differences in bladder carcinogenicity. In addition,oral treatment of the genotoxic bladder carcinogen by subcutaneous or intravesical administration induced increased
γ -H2AX formation, although the degree was attenuated. These results suggest that γ -H2AX is useful for early detectionof genotoxic bladder carcinogens. Since this method can be performed by routine immunostaining in short-term
toxicity test, it can be an efficient and rapid risk assessment of chemicals.
   γ-H2AX formation showed a tendency to increase in rats treated with nongenotoxic bladder carcinogens, such as melamine
and uracil, without statistical significance. DSB occurs not only as a result of direct injury to DNA but also as indirect
injury or DNA replication error. γ-H2AX is not limited to those based on genotoxic mechanism but may possibly be used asa broad marker of bladder carcinogenicity.
  Furthermore, as a candidate for early detection of bladder carcinogenicity other than γ -H2AX, Ki67 showed the increased
expression by many bladder carcinogens. It might be possible to apply KRT 14 which is a bladder stem cell marker andreported to be the origin of human bladder invasive cancer. Combined use of these biomarkers is expected to lead to an
improvement in the accuracy of the evaluation and estimation of carcinogenic mechanisms.

157

Symposium

   Alternative methods for long-term carcinogenicity tests using rodents are required. To develop an early detection

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Symposium

SY1-2
The role of surfactant protein and application for assessment of the risk ofcarcinogenesis.
Masanao Yokohira
Onco-pathology, faculty of medicine, Kagawa university
  Surfactant proteins (SPs) are essential to proper respiratory structure and function. There are 4 subtypes, SP-A, SP-B,

Symposium

SP-C and SP-D. However, the expression of SP-A, SP-B, SP-C or SP–D in lung tumors has received only limited
information. The expectorant drug ambroxol hydrochloride is clinically prescribed to stimulate pulmonary surfactant
and airway serous secretion, and some studies reported that ambroxol treatment regulated SP production and lowered
pulmonary inflammation. In this presentation, it is shown the expressions of SP-A, SP-B, SP-C and SP-D in lungneoplastic lesions and in inflammatory lesions in rodents, and application for diagnosis by using marker concerning theSPs.
   SP-B and SP-C showed strong expression in lung hyperplasias and adenomas and expression of SP-A and SP-D was
observed in mucus or exudates in inflammatory alveoli. It has also demonstrated a suppressive effect of ambroxolhydrochloride, stimulating pulmonary surfactant and airway serous secretion, on the quartz-induced lunginflammation. Latent tumorigenic hyperplasia induced by various carcinogens in rodents were positive for napsin A, anaspartic proteinase involved in the maturation of SP-B, and this indicated focal type 2 pneumocytes increase in thelung.  Thus, high expression of napsin A in alveolar walls may serve as a useful marker for detecting the tumorigenic
potential of lung hyperplasia in rodents.

158

Symposium

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

SY1-3
Elucidation of molecular markers and establishment of rat model for early detection of
prostatic carcinogens.
○ Shugo Suzuki，Aya Naiki-Ito，Hiroyuki Kato，Satoru Takahashi
Nagoya City University Graduate School of Medical Sciences Experimental Pathology and Tumor Biology
Elucidation of molecular markers and establishment of rat model for early detection of prostatic carcinogens. It islesions in prostate glands. To overcome these problems, we investigated alternative molecular markers for detection of
prostatic carcinogens in a short period with rat model. For the purpose, microarray analysis was utilized with RNA
from ventral prostate in PhIP-treated rat, and phospho-H2AX ( γ -H2AX), high mobility group box 2 (HMGB2) and Ki67
were detected as up-regulated genes. For the potency of these genes as prognostic markers, 6-week-old male F344 rats
were treated with various carcinogens including prostate carcinogens such as PhIP, DMAB, MNU and BOP, and weresacrificed at experimental day 2. γ -H2AX labeling indices were significantly increased in rats treated with PhIP and
DMAB, but not in rats treated with MNU or BOP. HMGB2 and Ki67 labeling indices were significantly increased in rats
treated with all prostate carcinogens. Meanwhile, there were no differences in these 3 labeling indices in prostate ofrats treated with non-prostatic carcinogens. To consider the 3Rs (Replacement, Reduction and Refinement), we
investigated the detection method of prostatic carcinogens with a toxicological program, and focused on the Repeated
Dose 28-Day Oral Toxicity Study in Rodents. Six-week-old male F344 rats were orally treated for 4 weeks with 8
carcinogens including prostate carcinogens (PhIP, DMAB, BOP and MNU), and were sacrificed at the end ofadministration. γ -H2AX labeling indices were significantly increased in rats treated with DMAB, but not in rats treatedwith other prostate carcinogens. HMGB2 and Ki67 labeling indices were significantly increased in rats with all prostate
carcinogens. Meanwhile, there were no differences in these 3 labeling indices in prostate of rats treated with nonprostatic carcinogens. In rat and human neoplastic lesions, HMGB2 and Ki67 labeling indices were significantly higher
than these around normal epithelium. In conclusion, HMGB2 and Ki67 are possible candidates of alternative molecularmarkers for detection of prostatic carcinogens in rats within a short period.

159

Symposiumtime-consuming for screening prostatic carcinogens because it takes long time to induce preneoplastic and neoplastic

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Symposium

SY1-4
A novel gene expression-based short-term model for detecting genotoxic
hepatocarcinogens○ Min Gi，Masaki Fujioka，Ann Kakehashi，Hideki Wanibuchi
Department of Molecular pathology, Osaka City University Graduate School of Medicine
Cancer risk assessment of environmental chemicals using various animal models is a major component of risk

Symposium

assessment for humans. While animal studies should be conducted only after consideration of the 3Rs (reduction,refinement and replacement, the guiding principles underpinning the humane use of animals in scientific research),there is a great need to develop short-term and comprehensive animal models for risk assessment. Current
experimental methods used to evaluate carcinogenicity are often time-consuming and expensive, indicating that they
are not suitable for a large-scale evaluation, especially for those newly introduced into the environment. We will
present our recent work on the development of a short-term rat model for detecting genotoxic hepatocarcinogens
using expression profiles of marker genes after 24-hour exposure and support vector machine (SVM) method.
GeneChip expression data deposited in the Open Toxicogenomics Project-Genomics Assisted Toxicity Evaluation System(TG-GATEs) was used to identify marker genes. Ten genes whose expression were commonly altered 24 hours after
exposure to genotoxic hepatocarcinogens were identified as marker genes and a SVM classification model was
d e ve l o p e d . We s h o w e d t h a t o u r g e n e e x p r e s s i o n - b a s e d c l a s s i f i c a t i o n m o d e l c a n d i s c r i m i n a t e g e n o t o x i chepatocarcinogens from other chemicals. We also demonstrated that expression data of marker genes deriving fromthe quantitative real-time PCR are directly applicable for the classification. These results indicated that our model isuseful for rapid detection of genotoxic hepatocarcinogens.

160

Symposium

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

SY2-1
Nanomaterial respiratory toxicity monitored in rats after whole body inhalation.
Jun Kanno
Japan Bioassay Research Center, Japan Organization of Occupational Health and Safety
  One of the reasons that the chronic toxicity study on nanomaterials (NMs) has not been well developed, compared togeneral chemicals or “soluble” compounds, is because they are one of the particulate matter (PM), and PM toxicology
inhalation. This inhalation is another big hurdle for toxicologists; inhalation facilities are expensive to build and run,and requires skillful operators. Methods to generate well-dispersed aerosol and quantitatively measure the aerosol
density often need case-by-case innovation for each NM specimen.
   And yet, fortunately, we find a few hints from the PM-related human diseases that are reported in the past. One
example is asbestos. Studies ranges from foreign body inflammation, granulomatous responses, responses towards
fibrosis, to the most important “frustrated phagocytosis” for a specific size and shape of a fiber related to the oxidative
stress mechanisms to initiate and promote mesotheliomagenesis and lung adenocarcinomagenesis.
   Here, lung responses against multi-wall carbon nanotubes (MWCNT: Mitsui MWNT-7, long and short term) andtitanium dioxide (TiO2, Tayca Corp. AMT-600, short term) monitored by whole body inhalation studies are presented.
In addition, findings of “Taquann” dispersion method and direct injection system using MWCNT and other particles at
NIHS are shown for comparison.

  In vitro and in vivo acute toxicity data are accumulating fast. The extrapolation of such data to in vivo chronic toxicity

awaits further accumulation of bridging data. For the sound growth of nanomaterial industry and protection of workers
and users, usage of both acute and chronic toxicity data in a reasonable balance is practical and essential.

161

Symposium

which is a very difficult subfield of Toxicology to engage. One of the most important routes of exposure of PMs is

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Symposium

SY2-2
International trends and necessity of chronic effects information on risk assessment of
nanomaterials
Akihiko Hirose
Division of Risk Assessment, Biological Safety Research Center, National Institute of Health Sciences
After activities of gathering initial toxicological information for nanomaterial safety evaluation by international or

Symposium

national agencies including OECD for the last decade, the future works are focusing on developing category risk
assessment approaches as the next step. The Japanese government has also contributed to construct the dossiers ofcarbon-based nanomaterials under the OECD sponsorship program, and focused on the development of screening
studies or sample preparation methods. We studied several types of MWCNTs to rats by single intraperitoneal
administration and followed by one-year observation period. The potential of induction of mesothelioma seems to be
dependent on ratios of the number for longer length fibers. We found that the potency of the inflammatory cytokines
production in macrophage type cells (THP-1) mainly depended on the fiber length of nanofibers. Such results support
that the frustrated phagocytosis is a major mechanism of carcinogenicity by nanomaterials exposure. The recent report
indicated that the MWNT-7, a one of the various types of multi-wall carbon nanotubes (MWCNTs), induced lung cancer,
but not induced mesothelioma in a two-year inhalation rat study. We realized that the potential of induction ofmesothelioma is not always correlated with the potential of induction of lung carcinoma. Meanwhile, it is reported thatchronic observation by intratracheal administration of only a few carbon nanotubes caused both mesothelioma andlung carcinoma. Therefore, it is still lack of assessment information to evaluate chronic effects by carbon nanotubes
exposure. As for the international test guideline activities by OECD, recently, the two inhalation toxicity guidelines (28days and 90 days) were revised for adjusting nanomaterials evaluation. Especially, the protocols for measuring lungburden of particles, such as insoluble nanomaterials, were added to the both guidelines. However, we have not fully
understood the correlation of short-term exposure effects and chronic carcinogenicity. Additionally, conducting theinhalation studies for many kinds of nanomaterials is not realistic option. Then, we proposed the feasible study forassessment of in vivo short-term exposure methods which include an intratracheal administration method forinhalation toxicity testing of manufactured nanomaterials. We should continuously gather the chronic effects ofnanomaterials exposure by using such methods, and further researches for chronic toxicity mechanism areundoubtedly important for the development of the in vitro or short-term in vivo methods.

162Symposium

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

SY2-3
Nano-safety research of nanoparticles used in foods toward sustainable nanotechnology○ Kazuma Higashisaka1,2），Kazuya Nagano1），Hiroshi Matsumoto2），Yasuo Tsutsumi1,3）
Grad. Sch. Pharm. Sci., Osaka Univ.，2）Grad. Sch. Med., Osaka Univ.，3）MEIC, Osaka Univ.

1）

   Due to progress of researches on food and health in recent years, new materials and ingredients useful for
maintenance and promotion of health and for prevention of lifestyle diseases are being developed one after another.
used for foods. From this viewpoint, the use of new materials, including nanoparticles, is also progressing rapidly in thefood industry. Nanoparticles are defined as substances that have at least one dimension of less than 100 nm in size.
They have unique physicochemical properties and innovative functions compared with conventional materials ofsubmicron size. However, safety concerns regarding the use of nanoparticles have extended worldwide. On the other
hand, there are few studies trying to elucidate the risk by pursuing biological kinetics in doses and proper routes
taking into account the actual exposure situation. Since nanoparticles can dramatically improve the quality of our lives,
it is essential to obtain wide range of safety information that contributes to the risk analysis of nanoparticles based on
scientific evidence. Moreover, understanding and securing their safety based on this information are important issues
to ensure their safety. Thus, in order to promote the development of safe and effective forms of nanoparticles, we haveattempted to assess the association among their physical properties, nanoparticles-induced biological effects, andbiological kinetics. In addition, basic information that could contribute to the development of sustainable
nanotechnology have attempted to be collected by accumulating information for making it safe what are concerned
about safety. In this symposium, we introduce the latest findings on these nano-safety science and nano-safety design
research, and we would like to discuss the current issues of the safety assessment of nanoparticles.

163

Symposium

Therefore, the desire for food safety and security is increasing, and securing safety is an urgent issue for new materials

Symposium

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

SY2-4
Novel Antioxidative Nanotherapeitics by Nitroxide-radical Containing Polymer
Nanoparticles
Yukio Nagasaki
Department of Materials Science and Medical Sciences, Satellite, University of Tsukuba, Tsukuba, Japan
   Reactive oxygen species (ROS) are known to play various roles on the occasion of many important events in vivo.  

Symposium

However, excessive production of ROS causes significant adverse side effects to living body.   Numerous drugs havebeen applied to reduce excessive generated ROS.   However, low molecular weight (LMW) antioxidants spread nonspecifically to entire body and internalize in healthy cells. Because the living body obtains energy via the mitochondrial
electron transport chain, such LMW antioxidants suppress this kind of normal redox reaction to cause severe damage
to normal organs and body.   In order to improve selective anti-oxidant character in vivo, we have designed redox
polymer drugs, which possess self-assembling character in aqueous media.   The synthesized amphiphilic block
copolymer, poly(ethylene glycol)-b-poly[4-(2,2,6,6-tetramethylpiperidine-1-oxyl)aminomethylstyrene] (PEG-b-PMNT)
spontaneously forms core-shell type self-assembled nanoparticle in aqueous media.   The nitroxide radicals, whichcovalently installed as a side chain of hydrophobic segment in the block copolymer were compartmentalized in a solidcore of the nanoparticle, and named nitroxde radical-containing-nanoparticle (RNPN). Because RNP N hardly internalize
in healthy cells, it showed the extremely low toxicity in vivo, unlike LMW antioxidants. RNP N has pH-sensitive
disintegration character, thus it disintegrates in tumor and inflamed sites because of decrease in pH in these areas,
which can be utilized as pH-responsive bioimaging and therapy.   We have so far employed this particle for cerebral,
renal and myocardial ischemia-reperfusions, cerebral hemorrhage, cancer chemo-therapy, gene delivery system,
ulcerative colitis and Alzheimer’s disease and confirmed that it is promising as novel redox-polymer nanotherapeutics.
The nitroxide radical-containing polymers can also be used for new types of biomaterials.
References1.

H i r o y u k i N a k a g a w a , e t a l . , D e s i g n o f h i g h performance anti-adhesion agent using injectablegel with an anti-oxidative stress function,

2.

Biomaterials , Vol. 69,165-173 (2015)

Yukio Nagasaki, et al., Design and use of silica-

containing redox nanoparticles, siRNP for high-performance peritoneal dialysis, Biomaterials

3.

Science , Vol.2, No.4., 522-5298(2014)

Toru Yoshitomi, Yukio Nagasaki, ROS-scavenging

Nanomedicine for Treatment of Oxidative Stress

Injuries, Advanced Healthcare Materials , Vol.3,
Issue 8, p.1149-1161(2014)4.

T o r u Yo s h i t o m i , e t a l . , R e d o x N a n o p a r t i c l e
Therapeutics to Cancer -Increase in therapeutic
effect of doxorubicin, suppressing its adverse

effect-, Journal of Controlled Release , Vol. 172
No. 1, pp. 137-143

5.

L ong Binh Vong, et al., An Orally Administered
Redox Nanoparticle that Accumlates in theColonic Mucosa and Reduces Colitis in Mice,

6.

164

Gastroenterology ,Vol.143, No.4, 1027-1036 (2012).

Fig.1. Design of Redox Nanoparticle forNovel Anti-oxidativeYukio Nagasaki, Nitroxide radicals and nanoparticles: A partnership for nanomedicine radical delivery, Therapeutic

Delivery , 3(2) 1-15(2012)Panel Discussion

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

PD-1
Current status of histopathology slide educational session for JSTP certification exam,and the role of toxicologic pathologists in drug development
Satoru Hosokawa
Global Drug Safety Research, Eisai Co., Ltd.
In order to meet the increasing demand to verify the quality of pathological assessments in safety studies forchemicals, the Japanese Society of Toxicologic Pathology established the board certification system in 1992.

The

purpose of certification is to provide credentials for toxicologic pathologists, and to promote professional competency
in toxicologic pathology.

Up until now, 514 pathologists, in total, have been certified as Diplomates of the JapaneseSociety of Toxicologic Pathology.  The certification exam is composed of three categories, i.e. the written examination,and practical examinations in macroscopic and microscopic diagnosis.

In spite of relatively consistent high marks inthe written examinations and macroscopic diagnosis, there is a tendency for microscopic diagnosis marks to vary
substantially among applicants.

There is a group that appears to have been given adequate opportunity to learn slide

reading and interpretation of pathologic lesions; while another group includes those with apparently little opportunity.  
These observations led

us to hold a histopathology slide educational session.   Three slide sessions have been held so far.   The session isdesigned to have group discussions for selected slides, that were used in the previous year’s certification examination
with resultant low marks among candidates.   The educational session provides a training opportunity for the JSTP
exam candidates. These sessions have greatly contributed to improvement of the rate of passing grades.   Anintroduction to the slide session will be delineated.  
Pathological assessment in safety studies plays a critical role in the risk assessment of chemicals, and the demand forthe role and responsibilities of toxicologic pathologists is increasing.  In the preclinical safety assessment during drug
development, the toxicologic pathologists play an essential role in project management and risk assessment, as well as
pathological evaluation in pharmacology and toxicity studies. In the face of various issues during drug development,
toxicologic pathologists contribute to issue identification, issue resolution and issue prevention.  It is also important for
toxicologic pathologists to adequately communicate these issues to internal/external non-pathologists in an easy-tounderstand and appropriate manner (risk communication).    Examples of such issues in drug development will be
introduced, and the education and career design for toxicologic pathologist will be discussed.

165

Panel Discussion

This is especially likely for those sitting for the exam more than once, in spite of their efforts.

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Panel Discussion

PD-2
Education and Postgraduate Career Guidance on Toxicologic Pathology in Japanese
Veterinary Schools
Makoto Shibutani
Tokyo University of Agriculture and Technology
  In many veterinary schools of Japan, toxicology class and its practice are handled by academics who have scientificbackground of pharmacology or hygiene. In addition, textbook of veterinary toxicology edited by Japanese Society ofComparative Pharmacology and Toxicology lacks viewpoints of toxicologic pathology. Therefore, educational
environment is insufficient in terms of toxicologic pathology in Japanese veterinary schools. On the other hand, all theacademics specialized in toxicologic pathology have scientific background of veterinary pathology. Therefore, theyshould either participate in veterinary toxicology classes or include toxicologic pathological contents in the veterinary
pathology classes, if they wish students to know toxicologic pathology. However, it is virtually difficult to give such
lectures evenly in all schools, because many of academics of veterinary pathology are not familiar with toxicologic
pathology. From these points of view, veterinary undergraduates usually do not have a chance to recognize toxicologic

Panel Discussion

pathology as a part of veterinary sciences, and therefore, activities on research and education in the laboratories
investigating toxicologic pathological studies become important for guiding students to the field of toxicologic
pathology.
  In our laboratory, we have Histology Relearning Seminar for students before entering the routine of histopathologicaldiagnosis; Fischer Rat Seminar for learning of spontaneous histopathological lesions developed in animals in
carcinogenicity studies; Cell Seminar to promote understanding of molecular biological mechanism of the cells; twokinds of Journal Club for each of undergraduate and graduate school students to promote understanding of scientificissues related to graduation or doctor thesis work. We also invite scientists to give us lecture regarding up-to-date
topics on researches and related affairs. We also host a slide conference, and undergraduate school students can collectinformation on pharmaceutical and/or agrochemical companies as a choice for future career from the attending young
researchers of outside. In addition, graduation work in our laboratory involves animal experiment studies, and thus,
students can learn general toxicity and experimental pathological studies during the study. Through the presentation ofresearch findings in scientific meetings, students can have opportunities to discuss with outside scientists, and thisexperience may lead to a motivation to have career in the field of toxicologic pathology. Moreover, by paper
publication in international journals, students can describe images to have a Ph.D. degree. In our laboratory, 75% ofalumnae and alumni during the recent 10 years have careers in the field of toxicologic pathology, and seven of them
got a Ph.D. degree.
  To recruit researchers for toxicologic pathology, it becomes now urgent issue to train academic candidates in the fieldof toxicologic pathology. For this purpose, co-operative education of human resources may be necessary among
universities, governmental and foundation institutes, and company institutes.

166

Panel Discussion

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

PD-3
Veterinary Education in the U.S. and Career Development Path for Toxicologic
Pathologists
Hajime Hiraragi
Amgen Inc., Comparative Biology & Safety Sciences, South San Francisco, CA, USA
Doctorate of Veterinary Medicine (DVM) is a professional degree awarded after completing a 4-year program at one of
30 accredited veterinary schools within the U.S. In a typical DVM curriculum, there is no stand-alone course fortoxicologic pathology. Instead, it is typically covered as a part of veterinary toxicology and veterinary pathology
courses, with its contents limited to clinical manifestations of mostly well-characterized toxins and toxic compounds. In
contrary to the program in Japan, there is a limited opportunity for students to specialize a certain discipline as the
U.S. veterinary degree program weighs heavily on clinical practice education and training.
Another feature of U.S. veterinary education system is its long-established and widely recognized post-DVM residency
programs, in which a DVM graduate can opt to pursue a training to become a specialist of certain type of veterinary
practice through board-certification process. As of 2017, there are 22 veterinary specialties recognized by thecertified in at least one specialty. American College of Veterinary Pathologists (ACVP) currently has approximately
1,400 pathologists, making it the third largest veterinary specialty group. Some pathology trainees who are enrolled inpathology residency programs either concurrently or subsequently pursue additional graduate-degree (e.g., M.S, Ph.D.)

and/or complete post-doctoral research work in fields including toxicologic pathology.

There is no certifying body for toxicologic pathologist in the U.S. The Society of Toxicologic Pathology (STP) does notcertify toxicologic pathologist unlike JSTP, and ACVP-boarded pathologists conduct the majority of toxicologic
pathology work. For toxicologic pathologists in industry setting, most of training and career design information areprovided as on-the-job basis, including work experience as a study and peer review pathologist, with mentorship fromexperienced pathologists, and through participation in continuous education (CE) courses and workshops on topics intoxicologic pathology offered by various societies and organizations. At Amgen, weekly slide conference with digitallyscanned slides is held to review and discuss cases and their impact to R&D projects.
As technical and scientific experts in comparative pathology and system biology, the demand for toxicologic
pathologists, especially those who have hands-on experience in drug and chemical product development processes,
remains high among U.S. biopharmaceutical and chemical industry, hence the urgent need to recruit, train, and retain
future talents. Additionally, there is an increasing demand for veterinary pathologists who possess additional skill setsin emerging technologies such as digital image analysis and genomics, given the fast pace of innovation inbiotechnology and its proliferation in the U.S. From globalization aspect, more pathologists who can work effectively
under international environment are needed as well.
As toxicologic pathology is a pivotal scientific discipline in a wide range of industry such as biopharmaceuticals andagrochemicals that are constantly subject to new technology and regulatory environment, a common and sustainable
platform to share and learn both basic and emerging concepts in toxicologic pathology is needed for successful careerdevelopment of toxicologic pathologists.  

167

Panel Discussion

American Veterinary Medical Association (AVMA) with approximately 12,000 out of 80,000 U.S. veterinarians board-

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Panel Discussion

PD-4
A Comparison of Practice of Industrial Toxicologic Pathologists in Japan and the UnitedStatesTakayuki Tsuchiya
Department of Safety Assessment and Laboratory Animal Resources (West Point, PA  U.S.A.), MR L, Merck & Co., Inc.,
Kenilworth, NJ, USA
The author would like to share views on the practice of toxicologic pathologists in Japan and the United States, and will
touch upon potential challenges in the career development of toxicologic pathologists, as well as possible approaches
to address these challenges.   
Toxicologic pathologists are responsible for detecting and interpreting pathological findings, assessing correlation ofthese findings to changes in other parameters, and contributing to a comprehensive risk assessment of the test article.
Ultimately, identified risks should be communicated to stakeholders (toxicologists and regulatory reviewers) properly.
In both Japan and the United States the majority of toxicologic pathologists are employed by pharmaceuticalcompanies, contract laboratories and, to a lesser extent, agricultural or other chemical companies or governmental or
private research organizations. The focus here will be on the path to enter the profession and following practice inPanel Discussion

Japan and the United States.
Qualifications for employment as a toxicologic pathologist differ between Japan and the United States. In the UnitedStates, job applicants must have a doctor of veterinary medicine and certification from the American College of
Veterinary Pathology (ACVP) board (or equivalent) for most industrial positions. In contrast in Japan, in general,companies hire entry level applicants without these qualifications. The Japanese Society of Toxicologic Pathology(JSTP) certifies eligible toxicologic pathologists who maintain a full membership in JSTP continuously or intermittently
during the past five years, or longer, and have completed scientific activities specified by JSTP. Employer-sponsored job
training in pathology, either domestically or abroad, which is not uncommon in Japan, is not seen in the United States.
Therefore, industrial job applicants in the United States must acquire a basic education as a veterinary pathologist
before entering the job market. In contrast, in Japan there is a system based on employers investing in inexperienced
pathologists by providing on the job training. An issue common to Japan and the United States is that there are few
educational institutions or programs that provide specialized toxicologic pathology training before joining theindustrial work force. In the United States there are a limited number of universities that offer programs emphasizing
toxicologic pathology training during the 3-year residence period necessary for ACVP board certification. In addition,in the United States there is no certification system for toxicologic pathologists. The number of universities withlaboratories specialized in toxicologic pathology training are limited in Japan as well. Furthermore, the numbers of
toxicologic and veterinary pathologists qualified by JSTP and ACVP per year from 2014 through 2016 were 7 to 23
and 56 to 61, respectively, and are limited. These issues could have an impact on the sustainable acquisition of future
toxicologic pathology talent. A potential approach to these problems is to expand industrial internships or externships
in order to identify talented individuals early in their careers and provide greater perspective on possible employmentof toxicologic pathologist in industry. In the United States, the ACVP / STP Coalition for Veterinary Pathology Fellows
organizes a program in which pharmaceutical companies and contract laboratories support three year pathology
residencies for students interested in industrial careers. In addition to the above points, the author will touch on thecomparison of work content and external activities between Japan and the United State, and would like to assist thispanel discussion.

168

Workshop

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

WS-1
Role of systemic immunity in the progression of hepatic inflammation in a rat model ofnonalcoholic steatohepatitis○ Takeshi Izawa，Shoko Ohji，Machi Atarashi，Rena Miyagi，Ai Hashimoto，Mitsuru Kuwamura，Jyoji Yamete
Veterinary Pathology, Osaka Prefecture University[Background] Nonalcoholic fatty liver disease is a hepatic manifestation of metabolic syndrome, and can progress tononalcoholic steatohepatitis (NASH), cirrhosis and hepatocellular carcinoma. The mechanism of NASH progression isstill largely unknown. Here we investigated the mechanism of steatohepatitis progression in rat model, focusing onchanges in immune systems and intestinal microbiota. [Materials and Methods] Six-week old male F344 rats were fed acontrol (5% fat) or high-fat diet (16% fat) for 30 weeks. Serum and systemic organs were used for histopathological,
gene expression and intestinal biota analyses. [Results] In high-fat group, ALT-predominant elevation of serumtransaminases, increases in hepatic lobular inflammation and cytokine expression (TNFα , IFNγ , TGFβ , IL1β ) are associatedwith disease progression. Simultaneously, increased expression of CCL2 in the white fat tissue, and increased expressionof IFN γ and decreased expression of IL4 in the spleen were observed. Microbiota analysis from cecal content revealed

an increased proportion of Gram-negative bacteria, increases in Akkermansia and Parabacteroides , and decreases inOsillospira and Ruminococcus , which are associated with upregulation of TLR2/4 signaling and NK cell-related

molecules. [Conclusion] Systemic pathology, including cytokine release from fat tissue and spleen, and activation of
innate immunity by intestinal dysbiosis, is involved in the progression of steatohepatitis in NASH model rat.

How does the hepatic lesion progress to fibrosis and tumor in a newly establishedmurine model for NASH
○ Yui Terayama，Kazue Akira，Takashi Yamagiwa，Yuki Nakatani，Nanayu Oshima，Tsuyoshi Morio，Tetsuro Matsuura，Kiyokazu Ozaki
Laboratory of Pathology,  Setsunan University
Introduction: Homozygous mice of JVS (jvs /jvs ) strain are known to develop fatty liver. We have reported that bothheterozygous (jvs /+) mice fed high fat diet (HFD) and wild-type (+/+) mice treated with alloxan (AL) and HFD, show

steatosis, inflammation, fibrosis and tumor at 40 weeks of age.   In the present study, we try to investigate time-dependent change from 20 to 40 weeks of age, and inflammatory cells and cytokines involved in this lesions.  
Methods: Male heterozygous and wild-type mice were fed HFD from 3 weeks of age. In addition, the wild type wasdivided into 2 groups; mice treated with/without AL treatment.   Results: At 20 weeks of age, almost all mice in 3

groups showed fatty liver as well as high insulin level, HOMA-IR index and cholesterol level. Histopathologically, mild
to moderate hepatic steatosis and multifocal neutrophil accumulation in centrilobular zone were detected, and thesechanges tended to be stronger in the AL-treated group. These hepatic lesions became stronger and progressed tosinusoidal fibrosis in all groups at 40 weeks of age. The incidence of nodular hyperplasia and/or adenoma reachednearly 30% in heterozygous mice with HFD and wild-type mice treated with AL+HFD. The mRNA levels of IL-6, TNF- α
and TGF- β were elevated, and CD3-positive T cell, neutrophil, and cytokeratin 19-positive hepatocyte also increased.  

Conclusion: A newly established murine model for NASH showed time-dependent histologic changes closely similar to
those in human NASH.

169

WorkshopWS-2 ＊

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

WorkshopWS-3 ＊
Effects of trans fatty acid and its substitute on NASH model by a modified CDAA diet
○ Noriko Kemuriyama1），Kaori Ikehata1），Takuya Yamashita1），Kinuko Uno1），Soon Hui Teoh1），
Shuji Ogawa 2），Atsushi Watanabe3），Katsuhiro Miyajima1），Dai Nakae1）
Dept. Nutr. Sci. Food Safety, Facul. Appl. Biosci., Tokyo Univ. Agricul.，Zeria Pharmaceutical Co., Ltd.，3）ASAHI KASEI MEDICAL CO., LTD.

1）
2）

Background: This study aimed to develop a mouse model of hepatocarcinogenesis through non-alcoholicsteatohepatitis (NASH), using a modified choline-deficient, methionine-lowered, L-amino acid-defined (CDAA) diet,because mice is less sensitive to the original diet than rats, and to investigate effects of trans fatty acid and its

substitute on the model.

Methods: C57BL/6J mice (male, 6 weeks old) were fed a control diet, CDAA; HF-T+ (45% fat by a shortening with transfat, methionine 0.1%) or CDAA; HF-T- (45% fat by a shortening without trans fat, methionine 0.1%), for 3 or 6 months.

Results: At the end of month 3, plasma alanine aminotransferase activity, hepatic lipid contents and inflammatory
marker gene expressions were markedly increased in both of modified CDAA diets. F4/80, alpha-smooth muscle actin,

and Sirius red staining were stronger in CDAA; HF-T- group than in CDAA; HF-T+ one. These phenotypes were enhanced
at the end of month 6, when hepatocellular proliferative, nodular lesions were observed more in CDAA; HF-T- than in
CDAA; HF-T+.

Conclusions: The present study indicates that high-fat CDAA diets can induce NASH in mice, and that thecharacteristics of the fat may play roles in the induced NASH.

WorkshopWS-4 ＊
Establishment a model of non-alcoholic steatohepatitis-related hepatocarcinogenesis inconnexin 32 dominant negative transgenic rats
○ Aya Naiki-Ito1,2），Hiroyuki Kato1），Shugo Suzuki1），Satoru Takahashi1）
Dept. Exp. Path. Tumor Biol., Nagoya City Univ.，2）Pathol. Div., Nagoya City East Med. Ctr.

1）

[Background] We previously reported that Cx32 has suppressive roles in non-alcoholic steatohepatitis (NASH) byanalyzing methionine-choline deficient diet (MCDD) received Cx32 dominant negative transgenic (Tg) rat. Though
MCDD is well-established tool for induction of NASH, this model system does not reflect metabolic syndrome, such as

obesity and insulin resistance. [Aim and Methods] In this study, we aimed to establish an improved NASH model. 7
week-old male Tg and wild-type (Wt) rats were received high-fat diet (HFD) with dimethylnitrosamine (DMN) for 12

weeks. [Results] HFD gained body, liver and visceral fat weights in both genotypes. Serum insulin level and HOMA-IR

score in Tg rats were higher than those in Wt rats. Elevation of serum hepatic enzymes (AST, ALT), inflammatory
cytokine expressions (Tnf α , Tgf β , Il1 β , Timp2, Col1a1), NF- κ B activity, and progression of steatohepatitis, fibrosis
were induced by HFD especially in Tg rats. Concerning NASH-related hepatocarcinogenesis, the number, area of GST-P
positive foci and expression of Bex1, which was established as a maker for hepatocarcinogenesis with NASH, weresignificantly increased in Tg as compared to Wt rats. [Conclusion] Cx32 dysfunction promoted the development ofsteatohepatitis and carcinogenesis in NASH accompanied by metabolic syndrome. Therefore Tg-HFD-DMN model may
be a useful tool for NASH study.

170

Workshop

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

WS-5
Differences of pathological findings between two NASH model mice
○ Takahiro Okuno，Naomi Ishii，Anna Kakehashi，Masaki Fujioka，Min Wei，Hideki Wanibuchi
Department of Pathology, Osaka City University Graduate School of Medicine[background] Nonalcoholic steatohepatitis (NASH) is related to lifestyle disease like diabetes or dyslipidemia, andprogresses into cirrhosis and hepatocellular carcinoma. However, some kinds of NASH do occur without lifestyledisease, and some drugs are reported to trigger NASH. Therefore, NASH may be heterogeneous disease caused byvarious factors, and the carcinogenic mechanisms of NASH may also be different depending on the factor. To
investigate these differences, we studied the pathological findings of two NASH model mice. One is TSOD mouse whichdevelops obesity and diabetes spontaneously. The other is the mouse fed a choline-deficient, L-amino acid-defined,
high-fat diet consisting of 45 kcal% fat (45%CDAHFD). [method] TSOD mice were fed MF pellets, and bred up to 48 or
58 weeks of age. C57BL/6J mice were fed 45%CHAHFD up to 38 or 48 weeks of ages. We analyzed the pathologicalfindings of the liver of the two models. [result] Both of two model mice showed fatty changes, fibrosis, andinflammation in their liver, and developed liver tumors. But the degree of the fibrosis and inflammation was different
between two models. Immunohistochemistry of liver tumors about phosphorylated mTOR revealed stronger and higher
positivity in TSOD mice than in the mice fed 45%CHAHFD [conclusion] The differences on the pathological findings
between two models may show the different mechanisms of NASH development and the carcinogenicity of NASH
depending on various background factors.

Workshop171Oral Presentation
O-01 ～ O-10

Poster Presentation
P-01 ～ P-98

Oral Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

O-01 ＊
Toxicity and mechanism of action of palmitoyl piperidinopiperidine○ S Ando1），H Matsumoto1），K Fukamachi1），M Futakuchi1,2），N Yoshimi3），M Suzui1）
Dept. Mol. Tox., Grad. Sch. Med. Sci., Nagoya City Univ.，2）Dept. Path., Nagasaki Univ. Hosp.，
Dept. Path. Oncol., Faculty of Medicine, Univ. of the Ryukyus

1）
3）

We developed a novel anticancer drug, palmitoyl piperidinopiperidine, named PPI (patent 5597427, 2014).   Weexamined toxicity and mechanism of action of PPI.   PPI inhibits the growth of implanted tumor by the induction of
apoptosis and the inhibition of angiogenesis.  Treatment of mice with PPI did not cause either significant body weightloss or significant histological changes in main organ sites.  In acute toxicity test, male/female SD rats received a single
gavage of PPI.  The LD50 values of male and female rats were 1000 and 500 mg/kg, respectively.  Treatment of micewith PPI caused ulcerative changes with severe inflammation in the forestomach and fatty degeneration in the liver.  
PPI markedly inhibited transcriptional activity of STAT3 in SW837 cells.  PPI caused a decrease in expression levels of
pSTAT3 in both whole lysate and chromatin fraction of SW837 cells.  Also, PPI caused a decrease in expression levelsof VEGF, Bcl-2, Bcl-XL, cyclin D1.  Inhibition of STAT3 by PPI may affect the function of molecules that are related to
apoptosis, angiogenesis, and cell cycle progression and eventually contributes to PPI-induced growth inhibition.

O-02
Genotypic/phenotypic differences between DMBA- and PhIP-induced mammary
adenocarcinomas in BALB/c-p53 +/- mice
○ Yukino Machida1），Yukiko Sudo1），Naoaki Uchiya1），Masako Ochiai2），Toshio Imai1）
Natl. Cancer Ctr. Res. Inst., Dep. Anim. Exp.，2）Natl. Cancer Ctr. Res. Inst., Ctr. Anim. Div.

1）

mammary tumors, whereas there is few report of mouse. p53 +/- mice with BALB/c-background display increased

mammary tumors compared with other strains. In the present study, phenotypic and genetical analyses were
performed to examine the differences between them. [Materials and methods] DMBA (50 mg/kg b.w., once) or PhIP (50mg/kg b.w., 6 times) were administered to BALB/c-p53 +/- mice (female, 7-week-old) by gavage. The palpable tumors

were analysed with H&E-stained and estrogen receptor α (ER α )-immunostained specimens. Sequence analyses of exon

5 to 8 of p53 gene were also performed.   [Results] The incidence of mammary carcinomas in DMBA- or PhIP-treatedgroups were 90% or 42%, respectively. Histologically, DMBA-induced mammary tumors showed moderately to welldifferentiated double-layered structures with ER α -positive ductal and -negative basal-like cells. PhIP-induced ones
showed moderately differentiated alveolar structures with ER α -negative polygonal cells. By sequencing analyses,

9 out of 10 of each group had A135V mutation of p53 . 1 out of 10 of DMBA- group had R246P mutation of p53 .

[Conclusion] There was no mutational differences but distinct differences were observed in morphology andER α -positivities between DMBA- or PhIP-induced mammary tumors.

175

Oral Presentation

7,12-Dimethylbenz[a ]anthracene (DMBA) and 2-amino-1-methyl-6-phenylimidazo[4,5-b ]pyridine (PhIP) areenvironmental carcinogens. There are some reports of genotypic differences between DMBA- and PhIP-induced rat

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Oral Presentation

O-03 ＊
Study of the mechanism of carcinogenesis by prenatal exposure to dimethylarsinic acidin mice○ Masaki Fujioka，Min Gi，Takahiro Okuno，Kenji Kumada，Anna Kakehashi，Yuji Oishi，Hideki Wanibuchi
Dept. Mol. Path., Osaka city univ. grad. sch. med.
In our previous study, prenatal exposure to dimethylarsenic acid (DMA), which is the main metabolites of inorganic
arsenic, occurred lung and liver tumor in male adult mice. Though, the mechanism of carcinogenesis by prenatal
exposure to DMA is unclear. The purpose of this study is to clarify the mechanism of carcinogenesis by prenatal
exposure of DMA in male neonatal mice lung.DMA was administered to female CD-1 mice at dose of 0 and 200 ppm for
10 days from 8 to 18 days of gestation, and male newborn mice prepared by transplacental exposure were postnatallysubjected immediately. And various analyzes described below were performed.A significant increase in the Ki 67
positive index was observed in the lungs of the DMA administration group as compared with the control group. In
addition, as a result of morphological analysis of arsenic with HPLC/ICP-MS in the lung, no significant change in TMAO
was observed as compared with the control group, whereas it was revealed that DMMTA and DMDTA were significantly
increased. Furthermore, it was revealed that S-adenosylmethionine (SAM) was significantly increased in its metabolic
process, the expression of histone methyltransferase G9a increased, and histone H3K9me3 was significantly increased.
From the above results, it was revealed that histone H3K9me3 was increased in neonatal male mice lung prenatal
exposed to DMA. In addition, involved as its mechanism suggested that SAM increase caused by metabolic process ofarsenic.

O-04 ＊
Epithelial-Mesenchymal Transition in Cysts in the Choroid Plexus and Renal Tubules○ Atsuko Murai，Kenji Nakamura，Norifumi Takimoto，Kengo Namiki，Daisuke Hibi，
Yukihiro Yanagizawa，Koji Shimouchi，Hiroyuki Yanagi
Safety Research Laboratories, Discovery and Research, Ono Pharmaceutical Co., Ltd.

Oral Presentation(Background and Aim) We have reported the first case of a choroid plexus cyst in the fourth ventricle in rats.
Immunohistochemistry (IHC) revealed that the cyst was undergoing the epithelial-mesenchymal transition (EMT). To
clarify the development of EMT, we are now focusing on the beginning of cyst formation. Kidneys were used in thisstudy because choroid plexus cysts are rare and cysts are relatively common in the kidneys. (Materials and Methods)
Paraffin embedded kidneys from male and female 26-week-old Crl:CD(SD) rats without dosing were used for IHC.
(Results) In normal renal tubules, IHC revealed that expression of cytokeratin MNF116 (CK) was from thin limb ofHenle's loops to collecting ducts and E-cadherin was from Henle's loops to collecting ducts. In pars recta of proximal
tubules which express CK but not E-cadherin, dilated tubules expressed vimentin without CK and SMA was foundaround these tubules. In tubules normally express both CK and E-cadherin, dilated tubules retained CK without
vimentin expression and cyst showed focal expression of CK, vimentin, and E-cadherin. Normal choroid plexus
expressed both CK and E-cadherin. (Discussion) Loss of E-cadherin, which is associated with cell adhesion, has animportant role in EMT. The present study suggested that renal tubules without E-cadherin expression could easily
undergo EMT. Retaining epithelial feature in the choroid plexus cyst may be associated with E-cadherin expression in
the choroid plexus.

176

Oral Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

O-05
DS-7250, a Diacylglycerol Acyltransferase 1 Inhibitor, Enhances Hepatic Steatosis in
Zucker Fatty Rats Via Upregulation of Fatty Acid Synthesis○ Kazuyoshi Kumagai，Kyohei Yasuno，Takuma Iguchi，Kiyonori Kai，Kazuhiko Mori
Medicinal Safety Research Laboratories, Daiichi Sankyo Co., Ltd.
Diacylglycerol acyltransferase 1 (DGAT1) catalyzes the final step in triglyceride synthesis. Since Dgat1 -/- mice fed a highfat diet (HFD) are resistant to diet-induced obesity and hepatic steatosis, a DGAT1 inhibitor is expected to have antiobesity and anti-fatty liver effects. To evaluate the hepatic effects of DS-7250, which is a selective DGAT1 inhibitor,

vehicle or 10 mg/kg of DS-7250 was administered orally to male Fisher 344 (F344) and Zucker fatty (ZF) rats fed astandard diet or HFD for 14 or 28 days. DS-7250 decreased food consumption and body weight gain in ZF rats fed a
HFD, which was attributable to its pharmacological action. Twelve-week old ZF rats showed slight hepatic steatosis
regardless of feeding conditions. DS-7250 deteriorated hepatic steatosis in ZF rats fed a HFD compared to the vehicletreated ZF rats. Hepatic steatosis did not occur in F344 rats fed a HFD, in which systemic exposures of DS-7250 werecomparable to those in ZF rats. In hepatic transcriptome analysis, there was a higher expression of genes involved inlipid uptake and fatty acid synthesis in ZF rats as compared to F344 rats under HFD conditions. DS-7250 upregulated

key genes involved in de novo lipogenesis (e.g., Elovl6 , Me1 , Srebf1 , and Fasn ) in ZF rats fed a HFD compared to thevehicle-treated ZF rats. These data suggest ZF rats were susceptible to hepatic steatosis due to their genetic

characteristics and DS-7250 exacerbated hepatic steatosis through increased de novo lipogenesis.

O-06 ＊
Histopathologic Characterization of Mifepristone-Induced Ovarian Toxicity in
Cynomolgus Monkeys○ Yoshikazu Taketa1），Kanta Horie2），Tetsuya Goto3），Etsuko Ohta1），Kyoko Nakano-Ito1），
Kazuhiro Hayakawa 1），Yuki Seki1），Aya Goto1），Satoru Hosokawa1）
Tsukuba Drug Safety, Eisai，2）Neurology Business Group, Eisai，3）Sunplanet1）

undertaken to investigate detailed histopathologic changes in the ovary induced by mifepristone and its relationship tochanges in menstrual cycle and circulating sex steroid hormone in non-human primates.
[Methods] Twenty mg/kg of mifepristone was orally administered to 4 cynomolgus monkeys for 2 months. Menstrual
signs and circulating sex steroid hormone levels were monitored; and, a detailed histopathologic examination of the
reproductive organs, with ovaries transversely dissected into 3 different sections, was conducted.
[Results & Discussion] Mifepristone inhibited the cyclic increases in estradiol and progesterone with absence ofmenstruation. Histopathologically, the ovary in the treated animals showed follicular phase without changes in thepercentage of atretic antral follicles. There was endometrial atrophy in the uterus. These changes indicated that acertain degree of antral follicle development had been retained in spite of the menstrual cycle arrest by mifepristone.
These results suggest the importance of a detailed histopathologic examination of reproductive organs in conjunction
with evaluation of menstrual stages in order to detect ovarian toxicity in non-human primates. Monitoring of menstrual
signs and circulating sex steroid hormone levels provides additional evidence to understand the mechanism of ovarian
toxicity.

177

Oral Presentation[Introduction] Mifepristone, which has anti-progesterone activity, is a known ovarian toxicant. The present study was

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Oral Presentation

O-07 ＊
Drug-Induced Fluorosis in Skeletal/Dental Tissues in Rodent Chronic Toxicity Studies○ Yuki Seki1），Kenichi Noritake2），Yoshikazu Taketa1），Shoji Asakura1），Akiyo Otsuka1），Aya Goto1），
Etsuko Ohta1），Kyoko Nakano1），Kazuhiro Hayakawa1），Jiro Sonoda1），Satoru Hosokawa1）
Eisai Co., Ltd.，2）Sunplanet Co., Ltd.

1）

[Background] In a chronic toxicity study in rats, characteristic findings in bone and teeth were identified, includingbone fracture, incisor discoloration, histopathologic pigmentation, decreased trabecular bone, and ameloblast
degeneration. Based on similarities of these changes to those seen in fluorosis in rats, investigational studies wereconducted. [Experimental design] Compound A (Cpd. A) was administered orally by gavage for 14 weeks in rats.
Pathologic examination and fluoride measurements in urine and bone were conducted. A chronic study was also
conducted in a similar manner with sodium fluoride (NaF) as a positive control. [Results] Bone changes werecharacterized by decreased trabecular bone, increased osteoid, and artifactual fluoride-related pigmentation, correlatedwith decreases in strength and mineral density. In the incisors, degeneration of the ameloblast with decreased ironcontent was associated with discoloration. These changes were fully consistent with those noted in rats given NaF thathave developed fluorosis. Significant increases in fluoride in urine and bone were observed in rats treated with Cpd. A,
and a high ratio of defluorinated-metabolites was identified. The bone/teeth toxicity induced by Cpd. A is rodent
specific. This is the first report, to our knowledge, to demonstrate in rats that the skeletal and dental toxicity noted inlong term toxicity studies was due to fluoride released through metabolism of the compound.

O-08 ＊
Short-term detection of gastric carcinogens using DNA double-strand break marker, γ -H2AX○ Asako Okabe1），Yuka Kiriyama1），Shugo Suzuki2），Kouhei Sakurai1），Satoru Takahashi2），
Tetsuya Tsukamoto 1）
Dept Diag Path, Fujita Health Univ Sch Med，2）Dept Exp Pathol Tumor Biol, Nagoya City Univ

1）

Oral Presentation

DNA damage caused by Helicobacter pylori infection and chronic inflammation is considered as an important risk
factor of gastric carcinogenesis. In this study, we have evaluated double-stranded DNA damage response utilizing focus
formation of Ser 139 phosphorylated histone H2AX ( γ -H2AX) against various chemical carcinogens. Six-week-old
male rats were administered N-methyl-N-nitrosourea (MNU), 3, 2'-dimethyl-4-aminobiphenil (DMAB),
dimethylnitrosamine (DMN), 1,2- dimehtylhydrazine (DMH), and water for control intragastrically for 5 days / week x 4
weeks. Animals were sacrificed at day 28 and stomachs were excised. Total RNA was extracted for quantitative
RT-PCR, and the rest were fixed with formalin for histological analyses. γ -H2AX focus formation was observed in the
proliferative zone of both fundic and pyloric glands. The number of positive cells/gland significantly increasedin pyloric glands in MNU group and in fundic glands in the MNU and DMAB groups. γ -H2AX positive apoptotic cells
were observed on the surface layer in MNU group. H2AX (h2afx) mRNA expression was significantly decreased andp21waf1 was in increasing trend in MNU and DMN groups compared to the control. Pepsinogens c and a5 showedno significant differences. In conclusion, there was a significant increase in γ -H2AX -positive cells not only with MNU
but also with DMAB, unknown for gastric carcinogenesis. This system, utilizing γ -H2AX, may be useful for screening
undetermined gastric carcinogens.

178

Oral Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

O-09 ＊
Acute changes in histopathology and intravascular imaging after renal denervation inswine○ Atsushi Sakaoka1,2），Akiyuki Takami3），Yuji Onimura1），Hitomi Hagiwara1），Hisako Terao1），
Fumiaki Kumagai 4），Kiyoshi Matsumura2）
Terumo，2）Osaka Inst. of Technology，3）Univ. of Fukui，4）Hatano Res. Inst. FDSC

1）[Background] No practical endpoint to determine procedural success during renal denervation (RDN) has been
established.
[Aim] We first aimed to identify the histopathological changes occurring immediately after RDN with radiofrequency
energy, and then to assess the feasibility of determining procedural success using currently available clinicalintravascular imaging techniques.

[Methods] Ablation lesions were induced in vivo and ex vivo in porcine renal arteries. Acute histological changes andappearance on intravascular imaging of the lesions were investigated with light microscopy, transmission electron

microscopy, intravascular ultrasound (IVUS), and optical frequency domain imaging (OFDI).
[Results] Marked changes were noted in media, adventitia, and nerves immediately after in vivo ablation. Changes
visualized on IVUS were characterized by focal adventitial thickening comprising a relatively echogenic layer around aheterogeneously hypoechoic interior region, and on OFDI as disappearance of the external elastic membrane signals

with high scattering of signals in the surface layer. The changes after ex vivo ablation were histopathologically

identical to those from in vivo ablation. There were significant positive correlations in measured dimensions of ablation

lesions between histopathology and IVUS/OFDI findings.

[Conclusions] These findings suggest that observation of treated renal arteries by IVUS or OFDI immediately after RDN
improves the success rate of RDN.

O-10
Potential biomarker for diagnosis of pancreas cancer○ Katsumi Fukamachi1），Mitsuru Futakuchi1），Hiroyuki Tsuda2），Masumi Suzui1）
Department of Molecular Toxicology, Nagoya City University Graduate School of Medical Sciences，
Nanotoxicology project, Nagoya City University

1）
2）

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is one of the most lethal types of cancer, with a five-year survival rate of lesshave established transgenic rats carrying a mutated K-ras gene controlled by Cre/loxP activation. Targeted activationof the transgene is accomplished by injection of a Cre recombinase-carrying adenovirus into the pancreatic ducts
through the common bile duct. The animals develop PDAC which is histopathologically similar to that in humans. We
reported that serum levels of N-ERC were significantly higher in rats bearing PDAC than in controls. However there wasno significant difference in serum N-ERC concentrations between pancreas cancer patients and healthy control groups.
In this study, we performed a global analysis to find diagnosis markers to detect rat PDAC. Our array analysis indicatedthat LRG was overexpressed in PDAC compared to pancreata of control. Importantly, a previous report showed thatoverexpression of LRG was identified in pancreas carcinomas in humans. Our findings indicate that the rat models ofcancer provide a useful strategy to identify candidate markers applicable to human cancer with potential utility forearly detection.

179

Oral Presentation

than 10% and a mortality rate closely approaching the incidence rate. At present, biomarkers have limited utility for
detecting early-stage PDAC. Several new approaches were taken in the search for biomarkers for pancreatic cancer.We

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-01
CD44v6 expression in NNK-induced mouse lung adenocarcinoma○ Keiko Yamakawa1），Masanao Yokohira1），Nozomi Hashimoto1），Yuko Narusawa1），Shota Yoshida1），
Kousuke Saoo 1,2），Katsumi Imaida1）
Onco-Pathol., Fac. Med., Kagawa Univ.，2）Kaisei General Hosp.

1）[Background and Aim] CD44 which acts as receptor for hyaluronan, is one of the markers of cancer stem cells.
Expression of CD44 variant isoform encoded by variable exon 6 (CD44v6) have been observed in various humancancers and is correlated with poor prognosis. In this study, expression of CD44v6 in the 4-(methylnitrosamino)-1-(3pyridyl)-1-butanone (NNK) -induced mouse lung adenocarcinomas.
[Materials and Methods] Female 7-week old A/J mice were administered a single dose of NNK (2 mg/0.1 ml saline/
mouse, i.p.) at days 0 and 7, then maintained without any additional treatment until sacrifice at weeks 78. The 19 lungadenocarcinomas were examined histopathologically and immunohistochemically for CD44v6.
[Results] The expression of CD44v6 was detected in all cases. Increased expression of CD44v6 was detected inpapillary and ductal structures or peripheral area of tumor lesions. The small clusters of adenocarcinoma cells
expressing CD44v6 strongly were observed.  Polygonal form cells expressing strongly CD44v6, phosphorylated Erk1/2
and SOX9 were observed in adenocarcinoma lesions. A large number of macrophages were observed in peripheral areaof tumor lesions and normal adjacent tissue.
[Conclusion] The heterogeneity of CD44v6 expression in adenocarcinomas at the advanced stage of NNK-induced
mouse lung carcinogenesis was impacted by various phenotypes of adenocarcinoma cells, suggesting that CD44v6 is
associated with progression or differentiation of lung adenocarcinomas.

P-02 ＊
Minimal change disease of the kidney in a young Sprague-Dawley rat○ Kyohei Yasuno，Kumi Honda，Shinobu Hakamata，Kiyonori Kai，Kazuhiko Mori
Medicinal Safety Research Laboratories, Daiichi Sankyo Co., Ltd.
Minimal change disease (MCD) can be experimentally induced in rats by single administration of puromycin
aminonucleoside, but spontaneous cases have been not reported. Herein, we present a case of MCD in rats, which
resembled the phenotypes of human MCD. A male Sprague-Dawley rat aged 9 weeks developed albuminuria and thisalbuminuria was exaggerated at 11 weeks of age. Other urinary biomarkers such as kidney injury marker-1,
osteopontin, neutrophil gelatinase-associated lipocalin, and clusterin, and urinary biochemical values did not show
significant changes at both 9 and 11 weeks of age. Histological test of the rat at 11 weeks of age revealed noglomerular or renal tubular abnormalit ies on light microscopy. Immunofluorescence revealed absence of
immunoglobulin G or immunoglobulin M deposition in the glomerulus. Extensive foot process effacement of glomerular
podocytes was observed by electron microscopy, with rearrangement of the actin cytoskeleton at the base of the fused
foot processes. The rat did not show podocyte injury marker (desmin)-positive podocytes, and the nephrin, which is the

Poster Presentation

major component of slit diaphragm, showed a normal liner pattern distribution along the glomerular capillary loop
throughout the glomeruli. These pathological characteristics corresponded to those of human MCD, and the glomerularlesion was considered a rare case of rat MCD.

180

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-03
Mechanistic analysis of PhIP on carcinogenesis using mouse colon organoids○ Toshio Imai1），Masako Ochiai1），Mie Naruse1），Yoshitaka Hippo2）
Div. Anim. Exp., Natl. Cancer Ctr. Res. Inst.，2）Div. Mol. Carcinog., Chiba Cancer Ctr. Res. Inst.

1）

The mechanisms of mult istep carcinogenesis by long-t ime treatment of chemicals in vivo have not been

comprehensively understood. We reported that subcutaneously injected mouse colon-derived organoids, to which Kras

activation, Apc , p53 and/or Pten knockdown have been introduced in vitro , showed tumorigenicity. In the present
study, analyses for carcinogenic potential and molecular mechanisms by a short-time treatment of 2-amino-1-methyl-6-

phenylimidazo[4,5-b ]pyridine (PhIP) was conducted using organoids. [Materials and methods] Colon tissue was excisedfrom B6 mice and its organoids were established by a 3D-culture method using Matrigel and growth factors. After

introduction of shLuc (control) or shPten followed by three times of PhIP (0, 15 microM) treatment, the organoids were
injected to nude mouse subcutis. At 44 days after the injection, subcutaneous tissues were histopathologicallyexamined. [Results] Although adenocarcinomas were induced in shPten +1 microM PhIP group, no tumor formation wasobserved in shPten +0 microM, shLuc +1 microM groups. A whole exome analysis using DNA isolated from organoids is
now conducted. [Discussion] As for mechanisms of the tumorigenesis by shPten +1 microM PhIP treatment, 1)

additional mutations of tumor-related gene(s) by PhIP or 2) increased susceptibilities to PhIP by genomic instability by

shPten are considered, we now analyze the whole exome sequencing.

P-04
Cytotoxicity of the crude extracts of Musa basjoo in human colon cancer cells○ H Matsumoto1），S Ando1），K Fukamachi1），M Futakuchi1,2），N Yoshimi3），M Suzui1）
Dept. Mol. Toxicol., Nagoya City Univ. Grad. Sch. Med. Sci. & Med. Sch.，2）Dept. Pathol., Nagasaki Univ. Hosp.，
Dept. Pathol. & Oncol., Univ. of the Ryukyus

1）
3）

Musa basjoo (MB) is a tropical evergreen tree growing mainly in subtropical/tropical countries. Biological activities of

MB are unknown. Therefore, we examined whether the acetone/methanol extracts of MB cause cytotoxicity in humancolon cancer cells. These extracts inhibited the growth of cells with IC 50 values of 121 μ g/mL (acetone extract, HT29),

149 μ g/mL (methanol extract, HT29), 60 μ g/mL (acetone extract, HCT116), 129 μ g/mL (methanol extract, HCT116)
by colony assays. Flowcytometry analysis demonstrated that treatment of HT29/HCT116 caused an increase of G1
phase by 5%/10% with a concomitant decrease of G2-M phase, indicating the induction of G1 arrest. Acetone/methanol
extracts did not cause subG1 fraction. When these cells were treated with 50-100 μ g/mL acetone extract, there was amarked decrease in expression levels of the cyclinD1, cdk4 and a marked increase in expression levels of the p21 CIP1,
p27 KIP1 and p53. Tumor weight and volume were tended to be inhibited during experiment without causing significant
treatment and control. At the end of the experiment, no toxic effects were found in any of organ sites. The crude
extracts of MB contain active component(s) that exert cytotoxicity in human colon cancer cells.

181

Poster Presentationbody weight loss. There was no significant difference in the ratio of viable region/total tumor area (%) between

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-05
Overcoming resistance to cetuximab with honokiol, a small-molecule polyphenol○ Mari Iida1），Hannah E. Pearson1），Rachel A. Orbuch1），Nellie K. McDaniel1），Kwangok P. Nickel1），
Randall J. Kimple 1），Jack Arbiser2），Deric L. Wheeler1）
Department of Human Oncology, University of Wisconsin School of Medicine and Public Health
Department of Dermatology, Emory University School of Medicine, Winship Cancer Institute1）
2）

Overexpression and activation of the Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) have been linked to poor prognosis inseveral human cancers. Cetuximab is a monoclonal antibody against EGFR, that is used for the treatment in head andneck squamous cell carcinoma (HNSCC) and metastatic colorectal cancer. Unfortunately, most tumors have intrinsic or
acquire resistance to cetuximab during the course of therapy. Honokiol is a natural compound found in the bark andleaves of the Chinese Magnolia tree and is established to have several anti-cancer properties without appreciable
toxicity. In this study, we hypothesized that combining cetuximab and honokiol treatments could overcome acquired
resistance to cetuximab. We previously developed a model of acquired resistance to cetuximab in non-small cell lungcancer H226 cell line. Treatment of cetuximab resistant clones with honokiol and cetuximab resulted in a robust antiproliferative response. Immunoblot analysis revealed the HER family and their signaling pathways were downregulated
after combination treatment, most notably the proliferation (MAPK) and survival (AKT) pathways. Additionally, we
found a decrease in phosphorylation of DRP1 and reactive oxygen species after combination treatment in cetuximab
resistant clones which may signify a change in mitochondrial function. Furthermore, we utilized cetuximab resistant
HNSCC patient derived xenografts (PDX) to test the benefit of combinatorial treatment in vivo. There was significant
growth delay in PDX tumors after combination treatment with a subsequent down-regulation of active MAPK, AKT, and
DRP1 signaling as seen in vitro. Collectively these data suggest that honokiol is a promising natural compound inovercoming acquired resistance to cetuximab.

P-06
Proteome analysis in NASH liver tissue and associated hepatocellular carcinomas○ Anna Kakehashi，Takahiro Okuno，Masaki Fujioka，Min Gi，Hideki Wanibuchi
Dept. Mol. Pathol. Osaka City Univ. Grad. Sch. Med.
To uncover mechanisms of nonalcoholic steatohepatitis (NASH) associated hepatocarcinogenesis, we compared theproteomes of human NASH-associated liver biopsies, and resected hepatocellular carcinomas (HCCs) with normal livertissue of patients with gastrointestinal tumor metastasis. In addition, LC-Ms/Ms analysis of liver tumors in male STAM
NASH-model mice was performed. Similar changes in the proteome spectrum such as overexpression of enzymes
involved in lipid, cholesterol and bile acid biosynthesis and examples associated with suppression of fatty acidoxidation and catabolism, alcohol metabolism, mitochondrial function as well as low expression of cytokeratins 8 and
18 (CK8/18) were observed in both human NASH biopsies and NASH HCCs. Significant activation of insulin signaling,
SMAD3-TGF-beta, beta-catenin, Nrf2, SREBP-LXR-alpha, nuclear receptor-interacting protein 1(NRIP1) and inhibition of
PPARs and p53 in human NASH biopsies and/or HCCs, suggesting their involvement in accumulation of lipids,
development of fibrosis, oxidative stress, cell proliferation and suppression of apoptosis in NASH hepatocarcinogenesis.

Poster Presentation

In STAM mice, PPARs inhibition was not obvious, while expression of CK8/18 was elevated.

182

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-07 ＊
Responses of cellular senescence-linked cell metabolism-related molecules by genotoxic
or non-genotoxic carcinogens in rats
○ Yuko Ito1,2），Kota Nakajima1,2），Yasunori Masubuchi1,2），Fumiyo Saito3），Yumi Akahori3），
Toshinori Yoshida 1），Makoto Shibutani1）
LVP, TUAT，2）UGSVS, Gigu Univ.，3）Chem. Eval. Res. Inst.

1）

Background and Aim. We previously reported that responses of cell cycle proteins differed between genotoxic andnon-genotoxic hepatocarcinogens. In this study, we examined the hepatocellular expression of senescence-linked cell
metabolism-related molecules in rats administered genotoxic or non-genotoxic hepatocarcinogen, as exemplified by

N -diethylnitrosoamine (DEN) and carbon tetrachloride (CCl 4). Materials and Methods. Rats were orally administrated
DEN or CCl4 for 28 or 84 days. The liver was examined with real-time RT-PCR and immunohistochemistry. Results andDiscussion. Glycolysis-related genes were upregulated with DEN, but were downregulated with CCl 4 . Oxidative

phosphorylation-related genes were downregulated with CCl 4. Senescence-related genes, Cdkn1a and Cdkn2a , were

profoundly upregulated with DEN. Immunohistochemically, glucose transporter 1 (GLUT1)-positive (+) foci wereincreased in GST-P + foci with DEN, whereas mitochondrial ATP synthase, ATPB-negative foci in GST-P + foci wereincreased with both DEN and CCl4. p21WAF1/CIP1+ foci in GST-P+ foci were increased with CCl4; however, liver cells wereentirely p21 WAF1/CIP1+ with DEN. These results may suggest that genotoxic hepatocarcinogens lead to carcinogenic

process concurrently with facilitation of cellular senescence. In contrast, non-genotoxic hepatocarcinogens may disrupt
cellular senescence after long-term administration. Metabolism changes in GST-P + foci were also different between
these carcinogens.

P-08
Effects of astragalus injection on early hepatocarcinogenesis in SD rats.
○ Meilan Jin，Qian Tang，Mei Zhang，Rendong Fang，Jian Wang，Zili Wang
Laboratory of Veterinary Pathology, College of Animal Science and Technology, Southwest University
Astragalus injection (ASI) is a drug made with the main component of astragalus, which is known to have an antioxidative and an antitumor effects. However, whether ASI have antitumor effect to early hepatocarcinogenesis in rats,
is still unclear. To clarify the suppressive effects of the ASI on early hepatocarcinogenesis in rats, SD rats in theinitiation or promotion periods were intraperitoneally administered 0.5ml/kg ASI for 2 or 9 weeks, respectively. The
grouping is as follows: gr .1: DEN alone; gr. 2: DEN+PBO; gr. 3: DEN+PBO+ASI1 (initiation); gr. 4: DEN+PBO+ASI2(promotion). The final body weights and absolute liver weights in the gr. 4 were significantly decreased compared to
the gr.2. The number and area of GST-P positive foci were showed decrease tendency in the gr. 3 or 4 as compared to
the gr. 2, but there are no significant difference. Therefore, the Ki67 positive ratio of the gr.3 and gr.4 weresignificantly decreased compared to the gr.2. In the analysis of gene expression, CYP1A1 gene in the gr. 4 hadsignificantly increased as compared to the gr. 2, but the levers of p53, Bax, Bcl-2, caspase 3 were also showed increaseproliferation and induction of apoptosis are involved in those mechanisms.

183

Poster Presentation

tendency in the gr.4. Especially, it was seen statistically significant difference in Bcl-2. These results may suggest that
the ASI to early hepatocarcinogenesis in rats has a suppressive effect and suppression to the inhibition of cell

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-09 ＊
Chemopreventive effects of luteolin on pancreatic carcinogenesis○ Hiroyuki Kato，Aya Naiki-Ito，Shugo Suzuki，Satoru Takahashi
Dep. Exp. Pathol. Tumor Biol., Nagoya City Univ.,[Background] New strategy for preventing pancreatic cancer is urged because of its poor prognosis and none ofeffective therapeutics. luteolin, one of flavonoids, were reported anti-tumor activities in in vivo on several cancers
except pancreatic cancer. [Materials and Methods] In this study, to assess the chemopreventive effects of luteolin,
twenty seven syrian golden hamsters at 6 week-old were administered with or without luteolin (100ppm) in quick fat
diets for 13 weeks after four times subcutaneous administration of N-nitrsobis(2-oxopropyl)amine. [Results] The bodyand organ weights were not different among the groups while serum cholesterol was decreased by luteolin.
Furthermore, the incidence and multiplicity of pancreatic cancer were significantly suppressed by luteolin. Ki67
labeling indices were decreased in dysplastic lesions of treated luteolin. In vitro study, cell growth was inhibited byluteolin treatment in dose-dependent manner in hamster (HPD1NR) and human pancreatic cancer cell lines (MiaPaCa,
PANC1). We found Stat3 was molecule responsible for the mechanisms of chemopreventive action of luteolin by multiblot analysis for phosphorylated proteins in vitro and we confirmed down-regulation of pStat3(tyr705) in bothcarcinomas and dysplasia of hamsters by immuneohistochemistry. Several cytokines in hamster pancreatic tissue werealso decreased by luteolin administration. [Conclusion] Luteolin have potential as a chemopreventive agent forpancreatic cancer.

P-10
Influence of strain difference of trans fatty acids on NASH-like lesions between Hsd ratsand F344 rats fed with a CDAA diet.
○ Kinuko Uno，Ktsuhiro Miyjima，Soon Hui Teoh，Noriko Kemuriyama，Shuji Ogawa，Atsusi Watanabe，Dai Nakae
Facul. Agricul, Graduate School of Tokyo Univ. Agricul[Aim]To clarify the influence of trans fatty acids on nonalcoholic steatohepatitis (NASH)-like lesions in Hsd:Sprague
Dawley (Hsd) rats and Fischer 344 (F344) rats by feeding a choline-deficient, methionine-lowered, amino acid-defined(CDAA) diet. [Methods]A trans fatty acids-containing CDAA diet (CDAA-T (+)) or trans fatty acids free CDAA diet
(CDAA-T (-)) were fed from 6 weeks to Hsd rats and F344 rats in males for 13 weeks (6 animals in each group). In
control group, basal diet was fed as a same manner to CDAA diets in each strain. At necropsy, liver was removed andweighed and stored as frozen tissue or fixed. Plasma biochemistry, histopathological examination and gene expression
in the liver were performed. [Results]In the CDAA group of both strains, significant increase of the relative liver weight
were noted compared with that of control group. Histopathologically, fatty change of hepatocyte and fibrosis were

Poster Presentation

observed in CDAA groups in both strain. In F344 rats, significant elevation of plasma AST and ALT activities, increases
of inflammation and fibrosis related gene expression were observed compared with these of Hsd rats. [Conclusions]
There was no difference between CDAA-T (+) and CDAA-T (-) in NASH like lesions and it was suggested that trans fatty
acid had no obvious effect on the lesions fed with CDAA diet. On the other hand, the strain difference was seen in
NASH-like lesions which were prominent in F344 rats compared with the lesions in Hsd rats.

184

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-11
Starvation-induced liver autophagy in aged mice
○ Seiichi Iizuka1），Miwa Nahata1），Hitomi Sekine1），Naoki Fujitsuka1），Hiroshi Takeda2,3）
Tsumura & Co.，2）Pathophysiology and Therapeutics, Faculty of Pharmaceutical Sciences, Hokkaido University，
Hokkaido University Hospital Gastroenterological Medicine

1）
3）[Background/Aim] Autophagy plays an important role in the maintenance of cytosolic protein and cell organelles.
Additionally, it supplies poorly nourished cells and organs with energy as an adaptive response to starvation. This
study aimed to examine the changes in liver autophagy function following starvation in aged mice. [Materials andMethods] C57BL/6J male mice (young: 8 weeks old, aged: 23 months old) were fed 30% of the amount of foodconsumed before the restriction and were maintained for 12 days. Liver autophagy activity was evaluated bydetermining LC3. The morphological features of autolysosomes were examined by electron microscopy. The function of
the ubiquitin-proteasome system in plantar muscle was analyzed. [Results] Aged mice exhibited an 80% decrease in thesurvival rate by day 12, although mortality did not occur among young mice following the restricted diet. While young
mice showed an increase in the liver LC3-II/I ratio and autolysosome count of hepatocytes on day 5 of the restricted
diet, only slight changes were observed in aged mice. The mRNA expression of atrogin-1 and MuRF-1 in aged micedecreased significantly more than those in young mice. [Conclusion] It is conceivable that the disruption of adaptiveenergy supply from muscle protein and dysfunction of liver autophagy led to a decline in the survival rate of aged micefollowing the restricted diet. The activation of this function could minimize the fragility in malnourished elderly
people.

P-12 ＊
Multidirectional analyses of hepatic chronotoxicity induced by cadmium in mice
○ Hiroki Yoshioka1,2），Tsunemasa Nonogaki1），Yoshimi Ichimaru1），Katsumi Ohtani3），Masumi Suzui2），
Nobuhiko Miura 3）
Kinjo Gakuin University，2）Nagoya City University，3）Japan National Institute of Occupational Safety and Health1）<background>Now, we have focused on the relationship between injection timing and the severity of cadmium (Cd)toxicity, which we advocated as “chronotoxicology.” These previous studies clearly indicated that mice showedremarkable daily fluctuations in the severity of the toxic response to Cd. In addition, we investigated other chemicals,suggesting that diurnal variation was observed in the toxicity of each compounds. <Aim> The aim of this study is toinvestigate the factor which Cd-induced diurnal variation triggers. <material and method>Seven-weeks old male
C57BL/6J mice received a single i.p. injection of 4.5 mg/kg CdCl 2 (24.5   umol Cd/kg) at 14:00 or 2:00. Control micereceived the same volume of saline. At 24-h after the Cd or saline injection, blood samples and the liver were collected.  
<result> Injection of Cd at 14:00 showed drastic hepatic injury estimated by histopathological analyses, plasma hepatic
injury markers, and oxidative stress but showed no injury when injected at 2:00. In addition, although TUNEL positive
injected at 14:00. <conclusion> Chronotoxicology is of great value not only for the field of toxicology, the importanceof injection timing for toxicity evaluation tests, but also for occupational health, to improve the quality of risk
assessments for night shift workers who may be exposed to toxic substances at various time of the day.

185

Poster Presentation

cell was not observed, necroptosis-related parameters such as receptor interacting protein was upregulated when

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-13
Analyses of mechanism on liver toxicity by CCA○ Naofumi Takahashi1），Satoru Yamaguchi1），Ryoichi Ohtsuka1），Makio Takeda1），Yoshitaka Katoh1），
Tsuyoshi Ito 1），Aya Koyama1），Atsushi Shiga1），Yoshimasa Okazaki1），Toshinori Yoshida2），
Takanori Harada 1）
The Institute of Environmental Toxicology，2）Tokyo Univ. Agricul. Technol.

1）[Background and Aim] Wood preservative chromated copper arsenate (CCA) has been used in Japan for about 50 years.
Lots of CCA-treated wood wastes after the Great East Japan Earthquake could hazard to human health. Our prior study,
in which Wistar Hannover rats were given CCA (0, 8, 40, 80 mg/kg/day) by gavage for 4 weeks, showed that CCA
induced diffuse hepatocellular hypertrophy accompanied by blood biochemical hepatotoxicity and increased 8-OHdG infemale liver. To elucidate the mechanism on hepatotoxicity, molecular pathological analyses were conducted.
[Materials and Methods] Using female liver sampled in the prior study, cell proliferation (CP), apoptosis andglutathionylated protein (GP) were evaluated immunohistochemically. Microarray and qRT-PCR were used for gene
expression analysis. DNA methylation in the transcription-related region was analyzed by methylated DNA
immunoprecipitation and qPCR.
[Results] Increased trend of CP was noted by CCA. In gene expression analysis, genes involved in GST, antioxidant, HSP,
ubiquitin-proteasome pathway, CP, DNA methylation and P450 were mainly changed. Metallothionein (MT) related toantioxidant was down-regulated, but DNA methylation was not associated. GP which increases with reduction of
reduced glutathione (GSH) / oxidized glutathione ratio was increased by CCA.
[Conclusion] CCA may induce redox dysregulation-related hepatotoxicity caused by GSH consumption due todetoxification and elimination of ROS and by suppression of MT.

P-14 ＊
Time dependent cytoprotective phenomenon of lipopolysaccharide in TAA-induced
acute liver injury in rats
○ Mohammad Rabiul Karim，Munmun Pervin，Mizuki Kuramochi，Takeshi Izawa，Mitsuru Kuwamura，Jyoji Yamate
Veterinary Pathology, Osaka Prefecture University[Background and Aims] Lipopolysaccharide (LPS) acts as an important cofactor in the pathogenesis of hepatotoxicity.
Here, the time-dependent role of LPS-stimulated autophagy and macrophages in thioacetamide (TAA)-induced acute rat
liver injury were investigated. [M&M] F344 rats were pretreated with LPS (0.1 mg/kg BW, i.p.) at 2, 6, 12h and 24h
before TAA injection (100 mg/kg BW, i.p.). Serum and liver were collected one day after TAA injection. [Results] TAA
injection produced centrilobular hepatocyte necrosis in liver, which was markedly reduced in LPS-pretreated rats at
12h or 24h as compared with those of without pretreated alone TAA-injected rats. Consistently, AST, ALT and ALP
values tended to be decreased in LPS-pretreated rats at 12h or 24h. At each time point, LC3B (autophagy marker)
expression was increased in liver of TAA-injected rats, however LC3B-labeled cytoplasmic granules in hepatocytes were

Poster Presentation

significantly increased in LPS-pretreated rats. At each time point, additionally, CD163+ and CD68 + macrophages weresignificantly increased in TAA-injected rats, however, CD68+ exudative macrophages were significantly increased or
tended to be increased in LPS-pretreated rats particularly at 12h or 24h. [Conclusions] LPS pretreatment at 12 h or 24
h showed the highest cytoprotection in TAA-induced acute liver injury, which might be related to the LPS-activatedhepatic macrophages and LPS-induced hepatocyte autophagy.

186

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-15
Effect of edaravone on cisplatin nephrotoxicity○ Natsumi Koike，Ayaka Sasaki，Rin Yamori，Tomoaki Murakami，Kazuhiko Suzuki
Tokyo University of Agriculture and Technology Faculty of Agriculture Cooperative Department of Veterinary Medicine[Background and Aim]Cisplatin (CIS) is known as a useful anticancer agent, while its toxicity to multiple organs
including the kidney has been reported. As for the nephrotoxicity, tubular necrosis and subsequent renal interstitial
fibrosis are observed, and the involvement of oxidative stress is suggested as part of its pathogenesis. In this study, we
examined the inhibitory effect of Edaravone (Eda), synthetic free-radical scavenger, on renal tubule interstitium lesions.
[Materials and Methods]6 weeks old male Wister rats (n=25) were divided into five groups; Control, CIS, CIS + Low
dose Eda, CIS + Medium dose Eda, CIS + High dose Eda. CIS (6 mg/kg, i.p.) was injected at first day, and Eda (1, 10, 100
mg/kg) was intraperitoneally administrated every other day from 5 days before CIS injection. Blood and kidney were
sampled at 28 days after CIS administration and used for various searches. [Results]BUN and Cr level increased by CIS,
and were suppressed by Eda. Tubular injury, increased accumulation of extracellular matrix and increased number of
α -SMA positive cells were induced by CIS, and were attenuated by high dose of Eda. CD68-positive macrophages andCD3-positive lymphocytes were significantly increased by CIS, and these increase were significantly attenuated by Eda.
The mRNA expression of various antioxidant-related factors is currently being researched. [Conclusion]It wassuggested that Eda has inhibitory effect on CIS nephrotoxicity via anti-oxidative pathway.

P-16 ＊
Effects of Dimethyl Fumarate on renal interstitial fibrosis○ Ayaka Sasaki，Natsumi Koike，Rin Yamori，Tomoaki Murakami，Kazuhiko Suzuki
Tokyo University of Agriculture and Technology,  Faculty of Agriculture,  Department of Veterinary Medicine[Background and Aim]Renal interstitial fibrosis is observed in various kidney disease and correlated with renal
dysfunction. However, fibrosis is fundamentally an overreaction of tissue repair, the treatment focused on inhibition ofexcessive extracellular matrix accumulation is required. Dimethyl fumarate (DMF) is therapeutic agent for multiple
sclerosis with mechanism of oxidative stress reduction by activating Nrf2 transcription pathway, and is expected fortreatment of any other diseases. We investigated the effect of DMF on renal interstitial fibrosis using cisplatin (CIS)induced model. [Materials and Methods]6-week-old male Wistar rats were divided into 5 groups.; negative control, CIS,
CIS + low dose DMF, CIS + middle dose DMF, CIS + high dose DMF. 6 mg/kg of CIS was injected intraperitoneally once.
DMF was administered by food containing 300, 1500 or 7500 ppm from 7 days before CIS administration. 28 days
after CIS administration, blood and kidney were sampled and used for various searches. [Results and Discussions]
Increased BUN and Cre levels and tubulointerstitial lesions in the CIS-group were suppressed by DMF. The increasedof oxidative stress related factors are under investigation, DMF may attenuate renal fibrosis by anti-oxidative pathway.

187

Poster Presentation

number of CD68-positive macrophages and CD3-positive lymphocytes was attenuated by DMF dose-dependently.
Increase number of α-smooth muscle actin-positive cells was suppressed by high dose of DMF. Although mRNA expressions

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Poster Presentation

P-17 ＊
Transformation of renal tubular epithelial cell associated with decreased expression of
HNF α○ Rin Yamori，Natsumi Koike，Ayaka Sasaki，Tomoaki Murakami，Tetsuya Furuya，Kazuhiko Suzuki
Tokyo University of Agriture and Technology, Fuculty of Agriculture, Cooperative Department of Veterinary Medicine
Background and Purpose Hepatocyte nuclear factor 4-alpha (HNF4 α ) has been reported the involvement of multiple
transporter expression at development and maturation stage and constitutive expression in proximal renal tubularepithelial cells after maturation in the kidney. Our previous study showed that HNF4 α expression was loss in theregenerating epithelial cells after injury in adenine-treated mice. In this study, we constructed HNF4 α knock out cellline, and compared the cell morphology, mRNA expression and reactivity to various stimulations with NRK-52E.

Methods The rat HNF4 α shRNA plasmid vector was introduced into NRK-52E (shHNF4 α cell), and the changes in cellmorphology and mRNA expressions, including various transporters, was compared. Furthermore, susceptibility against

cisplatin (CIS) was also compared. Results The mRNA expressions of transporters decreased and the Snail mRNA

expression increased in shHNF4 α cell. In addition, survival rate after CIS exposure was higher in shHNF4 α cell.

Discussion Considering with previous report that the transporters expression decrease in regenerating renal tubularepithelial cells after CIS exposure, findings of this investigation that most of the transporters whose expression

decreased in shHNF4 α cell was involved in CIS uptake, and that higher survival rate after CIS exposure suggests that
HNF4 α regulates drug transporter expression in renal tubular epithelial cells and its decreased expression would
protect from further injury.

P-18
High-throughput screening of the hypoxia pathway: examining promoter response andfunction○ Masato Yonezawa1），Shelley Force Aldred1），Nathan Trinklein1），Menghang Xia2），Ruili Huang2），
Jim Hudson 3），Johanna Samuelsson1）
Active Motif Inc.，2）NIH Chemical Genomics Center，3）Hudson Alpha Institute for Biotechnology

1）

The hypoxia pathway is involved in a wide range of biological processes including tumor resistance to chemotherapy.
To facilitate high throughput gene regulation studies in combination with chemotherapeutic drugs and toxic
substances, we created a genome-wide library of over 18,000 human endogenous promoters and synthetic response
elements in a quantitative and sensitive luciferase-based reporter system. This system, designated the LightSwitchTM
Assay System, contains a novel and highly optimized luciferase gene (RenSP) and all companion assay reagents yielding
industry leading sensitivity and dynamic range. Using a large panel of the LightSwitchTM promoter vectors, we validated
the response of each promoter to various external cellular stimuli. Application of over 400 hypoxia-related promoter
vectors revealed differential responses to hypoxia in different cell types. Furthermore, a toxicology screen of 1,400

Poster Presentation

compounds allowed the identification of several compounds that activate hypoxia pathway, including HIF-1 alphadependent hypoxia inducers. Thus, our LightSwitch TM Assay System is a highly useful tool to dissect gene regulatory
mechanisms in toxicological response and other cellular processes.

188

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-19 ＊Catch up growth and immune organ development in DOHaD study○ Mai Todoroki，Mika Senuma，Fumiaki Kumagai，Yoshiaki Saito，Makiko Kuwagata
Hatano Research Institute Food and Drug Safty center
To reveal the mechanisms of the developmental origin of health and disease (DOHaD) hypothesis, many animal studies
have been conducted. Excessive increase in body weight over the short term after undernutrition in the lactation period(catch up growth) is considered one of triggers of DOHaD. We demonstrated histopathologically that 50%
undernutrition in C57BL dams during neonatal one week induced altered development of the immune organs, such as
the spleen and thymus, in pups. Between postnatal days 7 to 14, body weight in the pups rapidly increased under thiscondition compared to that in the controls (catch up growth). In addition, individual differences in the degree of thehistopathological changes in these organs were observed in the pups exposed to neonatal undernutrition, as well as in
the controls. In this study, we examined the relationship of the individual differences in the histopathological changes
in the pups to other developmental parameters, such as litter size, body weight gain and organ weight. The differencesin the degree of the histopathological changes in the immune organs of the pups was not related to litter size, organ
weight or body weight.

P-20 ＊
Inhalation single toxicity studies of 1-methylnaphthalene in rats and mice:
Histopathological Aspect○ Mi Ju Lee
Inhalation Toxicity Research Center, Occupational Safety and Health Research Institute[Background] 1-Methylnaphthalene is a polycyclic aromatic hydrocarbon and naphthalene-related compound calledalpha methylnaphthalene. It is used to produce dyes and resins and present in cigarette smoke, wood smoke, tar, andasphalt. Reliable inhalation toxicity information of 1-methylnaphthalene has not been reported to date although its
primary contact route is the respiratory tract. [Aim] Therefore, the present study was conducted to screening thetoxicity of 1-methylnaphthalene via single inhalation exposure in rats and mice. [Materials and Methods] Twelve maleand 12 female rats and mice were gradationally exposed to 1-Methylnaphthalene aerosol at 0.05, 0.5, 1 and 5 mg/ and
5 and 1 mg/L 1-methylnaphthalene for 4 hours, respectively. Exposed animals were necropsied for 14 days
observation period. Histopathological examination was performed in animals exposed at 5 mg/L 1-methylnaphthalene.
[Results] Two male and a female rats exposed to 5 mg/L 1-methylnaphthalene found dead or moribund during thenoted in a female mouse exposed to 5 mg/L. Histopathologically, bronchiolar lesions including epithelial hyperplasia,
inflammation and erosion/ulcer in the lung were noted in rats and mice exposed to 5 mg/L. [Conclusion] This result
may be helpful to prepare toxic profiles for 1-methylnaphthalene.

189

Poster Presentation

observation period. Enlargement of the lung was noted in all male rats exposed 5 mg/L. Gray focus in the lung was

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-21
Respiratory lesions induced in rats after inhalation exposed to Methyl Acrylate for 13
weeks.
○ Kenji Takanobu，Hideki Senoh，Yumi Umeda，Shigetoshi Aiso，Jun Kanno
Japan Bioassay Research Center, JOHAS[Background] Methyl Acrylate (MA) is used as a material for acrylic resin, adhesive, paint, etc. In this study, we reporton the respiratory lesions of the rats induced by whole body inhalation of MA for 13 weeks.
[Material and Methods] F344 rats of each sex (n = 10 for each group) at 6 weeks of age were exposed to 0, 12.5, 25,
50, 100 or 200 ppm (v/v) MA, for 13 weeks. All organs were sampled for histopathological examination.
[Results] Goblet cell hyperplasia, inflammatory infiltration, regeneration, squamous metaplasia, and hyperplasia of therespiratory epithelium, and respiratory metaplasia of the nasal gland were observed in the respiratory area of nasal
cavity. In the olfactory part of the nasal cavity, atrophy, necrosis/desquamation, ulcer, inflammatory infiltration,
regeneration and respiratory metaplasia of the olfactory epithelium, and respiratory metaplasia of the olfactory gland
were found. In the larynx and trachea, atrophy, inflammatory infiltration, and regeneration of the lining epithelium
were seen.
[Conclusion] In the following inhalation carcinogenicity study for 104 weeks, squamous cell carcinoma of the nasal
cavity was induced in both sexes. We consider that metaplasia and hyperplasia of respiratory epithelium might havepreceded in the study. This study was contracted by Ministry of Health Labour and Welfare of Japan. (GLP study)

P-22
Nasal Cavity Neoplastic/Non-neoplastic lesion induced by 104-week whole bodyinhalation exposure to Methyl Acrylate in rats
○ Hideki Senoh，Kenji Takanobu，Yumi Umeda，Shigetoshi Aiso，Jun Kanno
Japan Bioassay Research Center, JOHAS[Background] Methyl Acrylate (CAS No. 96-33-3) is a liquid substance with irritable odor. It is widely used for Acrylic
fiber, molding resin, adhesives and paints. In the present study, inhalation carcinogenicity of Methyl Acrylate was
examined.
[Materials and Methods] Airflow containing Methyl Acrylate vapor was administered to groups each of 50 males and
50 females of F344 rat at target concentrations of 0, 10, 40 or 160 ppm (v/v), 6 hours/day, 5 days/week for 104
weeks.
[Results] The squamous cell carcinomas in nasal cavity were increased in 160 ppm exposed male and non-significant
increase in 40 ppm exposed male and 160 ppm exposed females. Non-neoplastic lesions were increased in nasal cavity,
larynx and trachea in both sexes and nasophalynx in male.

Poster Presentation[Conclusion] This study demonstrated that 104-week inhalation exposure to Methyl Acrylate vapor exerted nasal cavity
carcinogenicity in rats of both sexes. This study was contracted by Ministry of Health Labour and Welfare of Japan(GLP studies).

190

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-23 ＊
Myocardial damage induced in rats by a single dose of combretastatin A4 disodium
phosphate○ R Tochinai1），K Komatsu1），J Murakami1），Y Nagata1），M Ando1），C Hata1），T Suzuki1），S Kado1），
T Kobayashi1），M Kuwahara2）
Yakult Cent. Inst.，2）Dep. of Vet. Pathophysiol. and Anim. Health, The Univ. of Tokyo

1）[Background] Cardiotoxicity is a problem in the development of microtubule disassembling agents (MDA) in vascular
disruption of tumors. This study investigated cardiotoxic findings in rats induced by a single dose of combretastatin A4
disodium phosphate (CA4DP), and discussed the use of this rat model in non-clinical studies of MDA. [Methods] i)
CA4DP (120 mg/kg) was administered to rats intravenously, and cardiac histopathology and blood biomarkers were
examined after 0.5, 24, and 72 h. ii) As with i), CA4DP was administered to rats, and electrocardiography (ECG) andechocardiography results were analyzed over time. [Results] i) At 0.5 h after dosing, plasma creatine kinase (CK), CKMB, and Fatty Acid Binding Protein 3 levels increased. At 24 h, lactate dehydrogenase (LDH) 1, CK, and CK-MB levels
increased, and multifocal vacuolar degeneration of myocardial cells in apical subendocardial regions was observed. At
72 h, LDH 1 levels were increased, and multifocal myocardial necrosis was observed. ii) At 0.5 h after dosing, heart
rate (HR), ejection fraction (EF), and cardiac output (CO) decreased. At 24 h, HR and CO decreased. At 72 h, HR, EF, andCO decreased, and depression of T-wave potential was observed. [Conclusion] Myocardial injury, bradycardia, anddepression of cardiac function were induced. Distribution of lesions and ECG features suggested that myocardial injury
was induced by ischemia. This rat model proved useful in the study of cardiotoxicity of MDA in humans.

P-24 ＊
Studies on the tumor-promoting activity of alpha-linolenic acid-enriched diacylglycerol oil○ Hiroshi Honda1），Taisuke Kawamoto1），Yuko Doi2），Takuya Mori1），Shoji Matsumura1），
Norio Imai 2），Yukinori Mera2），Yuichi Ito1），Osamu Morita1）
Kao Corporation，2）DIMS Institute of Medical Science, Inc.

1）

[Background] Alpha-linolenic acid (ALA)-enriched diacylglycerol (DAG) oil, an edible oil enriched with DAG and ALA,
has been reported to enhance dietary fat utilization as energy. Since protein kinase C (PKC), which is involved in
carcinogenesis, could be activated by intracellular short-chain 1,2-DAG, the tumor-promoting activity of DAG oil mainlycontaining oleic or linoleic acids has been investigated and no activity was demonstrated. However, the activity of ALADAG oil has not been investigated. [Aim] The aim of the present study was to investigate the tumor-promoting activityof ALA-DAG oil on rats. [Materials and Methods] Using a rat medium-term multi-organ carcinogenesis bioassay model,
the tumor-promoting activity of ALA-DAG oil in the tongue and gastrointestinal tract was investigated. After treatment
with genotoxic carcinogens, the rats were fed on a diet of ALA-DAG oil (0, 13,750, 27,500, and 55,000 ppm) for 24
weeks. Meanwhile, the activity of PKC in the tongue and gastrointestinal tract was measured in rats consumed a dietneoplastic and neoplastic lesions in the rat medium-term multi-organ carcinogenesis bioassay model. Animals that
consumed the diet with ALA-DAG oil exhibited no significant increase in PKC activities. [Conclusion] ALA-DAG oil would
have no tumor-promoting activity, similar to the DAG oil.

191

Poster Presentation

with ALA-DAG oil (0, 7.5, and 30%) for 28 days. [Results] There were no meaningful increases in the incidence of pre-The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-25
A 26-week Short-term Carcinogenesis Bioassay of Organic Germanium, poly-trans-
[(2-carboxyethyl) germasesquioxane] (Ge-132) using rasH2 Mice
○ Yuko Doi1），Norio Imai1），Mayuko Suguro1），Mayumi Kawabe1），Isao Sato2）
DIMS Institute of Medical Science, Inc.，2）Asai Germanium Research Institute Co., Ltd.

1）

[Purpose] An organic germanium, poly-trans-[(2-carboxyethyl) germasesquioxane] (Ge-132) is used as an ingredient offood, and its various physiological effects were reported. The safety of Ge-132 has been confirmed by single andrepeated dose toxicity, teratogenic and mutagenic studies. However, sufficient information to assess carcinogenesis is
not available. Therefore, present 26-week short-term carcinogenicity study using rasH2 mice was performed.
[Materials and Methods] Seven to 8 week-old mice were fed a diet containing 0, 0.3, 0.8 and 2.5% of Ge-132 (20 mice/sex/group) for 26 weeks. The dose level was determined by a preceding dose finding study. As a positive control, 10
males and 10 females were treated with a single i.p. injection of MNU at 75 mg/kg. After 26 week-feeding, all mice
including MNU group were necropsied.
[Results] Loose stool was observed in all mice of the 2.5% group, and water intake was statistically increased.
Dilatation of the cecum was observed at necropsy, however, no abnormality was observed histopathologically.
Incidences of neoplastic lesions in the Ge-132 groups were not significantly different compared with the control group.
In the MNU group, all mice showed neoplastic lesions, and most of them developed malignant lymphoma and/or
squamous cell papilloma of the stomach.
[Conclusion] Our results indicate that Ge-132 ingestion up to 2.5% (male: 3837 mg/kg/day, female: 5442 mg/kg/day)
was not carcinogenic under the conditions in this study.

P-26 ＊
Immunohistochemical examination of a tumor observed in the liver○ Du Mu，Guo Hui，Zhang Yuexiang，Liu Xiangjiang，Zhang Weijuan，Ji Xiaoxia，Guo Maowu，Yasuhiko Hirouchi
JOINN Laboratories
Background and objective  Scattering nodules with approximately 0.1-1 cm diameter were observed in the liver of a rat.
We considered that these nodules are different from primary liver tumor, and conducted immunohistochemical
examination to determine the original tissue. Materials and methods   This case was a male CD rat sacrificed onscheduled necropsy at week 104. At macroscopic examination on necropsy, scattered nodules were observed in theliver. Histological examination and immunohistochemical examination of the liver were conducted. Results   Theaccumulated foci of tumor cells consisted of oval cells with light basophilic cytoplasm and round nuclei. There was nodysplasia of nuclei, and mitosis was very rare.   Although nodular proliferation of tumor cells was shown, significant
exclusion of surrounding tissues was not observed. Disseminated infiltration and proliferation of isolated tumor cells
were observed around the tumor nodules. In addition, C cell adenoma of the thyroid gland were observed. As the result

Poster Presentationof immunohistochemical examination, this tumor was AFP-negative, CK19-negative and vimentin-negative.  Therefore,
this tumor was not considered to be derived from hepatocytes or intrahepatic bile ducts. As a possibility for metastasisof an endocrine system tumor was considered from tissue morphology of the tumor, immunohistochemical examination
using calcitonin and chromogranin was conducted.  The results are reported.

192

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-27 ＊
Study on toxicity of o-Acetoacetotoluidide (AAOT) Kenji kumada Dept. Mol. Path., Osaka
City Univ. Graduate Sch. Medicine○ Kenji Kumada，Takahiro Okuno，Min Gi，Masaki Fujioka，Nao Yukimatsu，Anna Kakehashi，Hideki Wanibuchi
Department of Molecular Pathology Osaka City University Medical Schoolo- Acetoacetotoluidide (AAOT) is a compound in which the amino group of o- Toluidine (OTD) is acylated, and is a
substance used as a raw material for synthesis of azo pigment. Occupational exposure of OTD is known to induce

bladder cancer and is classified by IARC as Group 1 (carcinogenic to humans). However, there is no information on the
toxicity, carcinogenicity of AAOT and risk assessment is urgently required. Therefore, this study aimed to evaluate
toxicity of AAOT.
By human bladder epithelial cells 1T1 and rat bladder epithelial cells MYP3, AAOT and OTD were added to the medium
at doses of 0, 78, 156, 313, 625, 1000, 1250, 2000 and 2500 ppm. Then, LD 50 was calculated. Using 6 week old
female F344 rats, AAOT was fed at doses of 0, 1500 and 3000 ppm. Further, AAOT and its metabolites were analyzed
72 hours after.
As analysis results of the cells, LD 50 of AAOT was 1049 ppm at 1 T 1 and 874.1 ppm at MYP 3. LD50 of OTD was
157.4 ppm at 1 T 1 and 257 ppm at MYP 3.
Analysis of urinary metabolites showed a significant increase in OTD in AAOT group compared to control group.
Interestingly, OTD accounted for the majority of urinary metabolites in the AAOT group. From the results, they
revealed that AAOT is weaker in cytotoxicity than OTD. However, since OTD is produced in the urine as a biologicalmetabolite, there is a concern about the effect on bladder mucosal epithelium. Currently, animal testing is ongoing andwill be reported in the presentation.

P-28
Immunohistochemical characteristics of proliferative lesions in Wistar Hannover rat
thymus○ Yuki Tomonari，Junko Sato，Tetsuro Kurotaki，Ryosuke Kobayashi，Takuya Doi，Takeshi Kanno，Minoru Tsuchitani
LSIMedience Corporation, Pathology Department[Background] We reported at the 30th JSTP annual meeting a higher incidence of thymic hyperplasia and thymoma in
Wistar Hannover (WH) rats than SD rats and a histopathological resemblance of thymoma to the normal thymic cortex
and medulla. Moreover, thymoma have pale areas similar to the medulla but without lymphocytes. [Aim] We focalizedon the differences of thymic epithelium (TE) of the cortex and medulla, and then compared the structure of thymoma
with normal thymic cortex and medulla. [Materials & Methods] Thymoma (40 cases, 104-week background study (ws)of WH rats) and normal thymus as control (104, 26, and 4ws) were stained with anti-cytokeratin (CK) 14 (medullaryTE), CK18 (cortical TE), and CD20 (B-cell). [Results] In the normal thymus, TEs were positive for CK14 at the medulla
and subcapsular area, CK18 at the cortex; B-cells in the medulla were positive for CD20. In thymoma, small to large
were positive for CK14 at MD, CK18 at LyR and pale areas; B-cells in MDs were positive for CD20. [Conclusion] TEs at
LyR and MDs at LyR indicated the nature of TEs of the normal cortex and medulla, respectively. B-cells also existed at
MDs as in the normal medulla. LyR and MDs of thymoma were suggested dependent on the difference in an
immunohistochemical pattern of each TE. Additionally, the pale areas consisted of CK18 positive TEs at LyR, differedfrom MDs.

193

Poster Presentation

medullary differentiation areas (MDs) were noted focally or diffusely at the cortex-like lymphocyte rich area (LyR). TEs

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-29
Oral toxicity study of neonicotinoid pesticide dinotefuran in CD-1 mice
○ Yukie Tada，Toyohito Tanaka，Kiyomi Ikushima，Toshinari Suzuki，Akiko Inomata，
Takako Moriyasu
Tokyo Metropolitan Institute of Public Health<Backbround> Neonicotinoid pesticide dInotefuran is widely used in Japan. However, there is minimal data on adverse

effects of dinotefuran in either experimental animals or humans. In the present study, an oral toxicity study ofdinotefuran was conducted in CD-1 mice.

<Methods> Each of 40 male and female mice, 5-week-old, was administered 0 (control), 22, 44 or 88 mg/kg bodyweight for dinotefuran by gavage, once per day, 5days per week, for 4 weeks. After two or three weeks from start ofthe study, behavioral parameters were measured. After 4 weeks administration, the mice were anesthetized underisoflurane, and hematological, biochemical and pathological consequences were investigated.

<Results> There were no significant differences on body weight or food intake during the experimental period in eachsex. The spatial learning memory or movement activity of exploratory behavior was not affected by dinotefuran. In

hematological study, white blood cells in the treated group were showed a tendency to decrease, and neutrophils in thefemale high dose group were significantly decreased compared with the corresponding control group. There were notreatment-related changes in the biochemical and pathological findings.

P-30 ＊
Comparison between MNU manufacturing facilities concerning the medium-term multiorgan carcinogenesis bioassay○ Taiki Sugiyama，Kazunari Uda，Hitomi Higuchi，Yuko Doi，Akihiro Hagiwara，Yukinori Mera
DIMS Institute of Medical Science, Inc.
[Background and Aim] In the medium-term multi-organ carcinogenesis bioassay, animals were sequentially given 5
carcinogens (DMBDD). MNU product by company A had been discontinued, therefore, we tried to compare bioassay
data obtained by using alternative MNU products of company B and C. [Materials and Methods] At the commencementof the experiment, male F344 rats were treated with DEN (100 mg/kg body weight, single i.p. injection), sequentiallyfollowed by MNU (20 mg/kg body weight, s.c. injection, four times during Weeks 1 and 2) of each company A (G1), B(G2) and C (G3), DMH (40 mg/kg body weight, i.p., four times during Weeks 3 and 4), BBN (0.05% in drinking water
during Weeks 1 and 2) and DHPN (0.1% in drinking water during Weeks 3 and 4). After the DMBDD treatment, animals
would be maintained until experimental Week 30. At Week 31, all surviving animals will be necropsied, and the organs
and tissues will be examined histopathologically. [Results] The survival rates for G1, G2 and G3 up to Week 27 were

Poster Presentation

90%, 95% and 90%. After Week 21, anemia, hemoglobinuria and emaciation were observed in some rats in each group.
In the dead animals, tumors were mainly found in the lung, kidneys, small intestine and abdominal cavity, similar to theprevious studies. [Conclusion] No significant differences between groups were noted until Week 27. We will report the
final results including histopathological data, and discuss the use of alternative MNU manufactured by company B or C.

194

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-31 ＊The high incidence of amyloidosis in control ICR mice in carcinogenicity studies:
Comparison to historical controls (2nd report)○ Tsuyoshi Ito，Yoshitaka Katoh，Emi Makino，Aya Koyama，Naofumi Takahashi，Atsushi Shiga，
Yoshimasa Okazaki，Takanori Harada
The Institute of Environmental Toxicology (IET)[Background] In the 32nd annual meeting of JSTP, we reported that control ICR mice showed an increasing trend in theincidence of amyloidosis in a carcinogenicity study terminated in 2015 and AA amyloid (AA), whose precursor was
serum amyloid protein A (SAA), deposited in half of cases. Besides AA, which tends to deposit mainly in the spleen andliver, apolipoprotein AII amyloid (AApoAII), whose precursor is apolipoprotein AII (ApoAII) and which tends to deposit
mainly in the small intestine and heart, is known in mice. We added data to the previous report. [Methods] The data ofcontrol SPF ICR mice [Crlj:CD1(ICR)] (Charles River Japan, Inc.) in two 78-week carcinogenicity studies were added.
Mice were purchased at 4 weeks of age and studies were initiated at 5 weeks of age. Systemic organs were removed
and HE-stained sections were prepared. For all amyloidosis cases previously subjected to SAA immunostain, ApoAII
immunostain was conducted. IET's historical controls of Crj:CD-1 and Crlj:CD1(ICR) mice were used. [Results anddiscussion] The incidence (%) of amyloidosis in total three carcinogenicity studies was higher than upper limit ofhistorical controls.   In these three studies, the incidence of amyloid deposition in the small intestine and heart was
higher than that in the spleen and liver, and all cases examined were immunopositive for ApoAII. From these results, it
was suggested that amyloidosis which occurred recently in high incidence was mainly caused by AApoAII.

P-32 ＊
Comparative study of pathological characteristics of rat mesotheliomas induced by
MWCNT and chrysotile○ Motoki Hojo1），Yoshimitsu Sakamoto1），Yukio Yamamoto1），Yuko Hasegawa1），Shiho Murakami1），
Ai Maeno 1），Akihiko Hirose2），Dai Nakae3）
Tokyo Metropol. Inst. Pub. Health，2）Natl. Inst. Health Sci.，3）Tokyo Univ. Agricul.

1）[Introduction] Multi-wall carbon nanotube (MWCNT) and asbestos have been shown to induce mesotheliomas inrodents by similar mechanisms. The present study comparatively examined characteristics of such mesotheliomas.
[Methods] Twenty each of 10-week-old male F344 rats were intraperitoneally administered 1 mg/kg body weight of
MWCNT (MWNT-7; M-group) or 40 mg/kg of asbestos (UICC chrysotile B; C-group), and moribund or dead animals
were autopsied. Mesotheliomas were pathologically and molecular biologically analyzed. [Results and discussion] The
first deaths occurred 28 and 37 weeks after in M- and C- groups, respectively, and all animals died within 60 weeks.
There were no apparent differences in gross findings between 2 groups, except the liver deformity severer in M-group,and diffusely distributed tumor nodules were found throughout the abdomen with a variety of appearances including
sarcomatoid and mixed) were observed, and again there were no apparent differences between 2 groups. Most of thesetumor cells in both groups displayed the deletion at Cdkn2A locus. Serum mesothelin levels were similar in bothgroups, higher than its control level. It is thus indicated that under the present conditions both MWCNT and asbestos
induce mesotheliomas with similar characteristics that are also similar to those of a human counterpart.

195

Poster Presentation

small granular, large spherical and plaque-like shapes in all rats. Histologically, all types of mesothelioma (epithelioid,

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-33
A 90-day oral toxicity study of vanillin propylene glycol acetal (vanillin PGA) in rats
○ Takanori Yamada1,2），Kohei Matsushita1），Takeshi Toyoda1），Tomomi Morikawa1），
Miwa Takahashi1），Kaoru Inoue1），Kumiko Ogawa1）
Div. Pathol., Natl. Inst. Health Sci.，2）LVP, Tokyo Univ. Agri. Tech.

1）[Background] Vanillin propylene glycol acetal (vanillin PGA) is one of the designated additives and used as a flavoring
agent. Although vanillin PGA was evaluated as "No safety concern" by JECFA, there is little information regarding thetoxicity. In this study, we performed a 90-day oral toxicity study of vanillin PGA in rats to establish a no-observedadverse-effect level (NOAEL).[Methods] Six-week-old male and female F344 rats were administered orally with corn oil[0 mg/kg BW/day (control)] and vanillin PGA [100 (low), 300 (middle), 1000 mg/kg BW/day (high)] for 90 days.
[Results] In clinical signs, loss of vigorous prostration and listless were observed at high dose in both sex. Suppressionof body weight gain was noted at high dose in both sex (male: 6th week and later, female: 7th week, 9th week andlater). In food consumption and the hematology, no toxicity effects were observed. In serum biochemistry, increases in
TP, Alb, TC, Ca, IP and GGTP were noted at high dose in both sex. In addition, increases in A/G ratio and BUN were also
detected in high dose males. In organ weighs, increased relative weights in the liver was noted at high dose in both sex.
In histopathology, centrilobular hepatocellular hypertrophy in the liver was observed at high dose in both sex.
Furthermore, decrease in the incidence of fatty change of hepatocytes was observed at high dose in males. [Conclusion]
Based on the results, NOAEL of vanillin PGA was determined to be 300 mg/kg BW/day.

P-34 ＊
13-week subchronic toxicity study of isoeugenol methyl ether in F344 rats
○ Jun-ichi Akagi，Young-Man Cho，Yasuko Mizuta，Kumiko Ogawa
Div. Pathology, Natl. Inst. Health Sci.
[Introduction]
Isoeugenyl methyl ether (CAS No. 93-16-3) is a food additive used as a naturally deriving flavoring agent.
In Japan, daily per capita intake of isoeugenyl methyl ether, classified as structural class III, is 122.8 μg/kg body weight(BW)/day, which exceeds the threshold of concern estimated by JECFA's 'decision tree' approach (90 μg/human/day).
Therefore, we performed subchronic toxicity test of isoeugenyl methyl ether in F344 rats to determine the toxicity
profile and the no-observed-adverse-effect level (NOAEL).
[Materials & Methods]
8, 40, or 200 mg/kg BW/day of isoeugenyl methyl ether (99.3% purity) was orally administrated to six-week-old maleand female F344 rats for 13 weeks.
[Results]

Poster Presentation

All animals survived and no clinical signs were observed throughout the experimental period. Body weight gain in themale 200 mg/kg BW/day group was decreased from the ninth week. In serum biochemistry, decrease in triglyceride
was observed in the male 200 mg/kg BW/day group. In organ weights, increases in both absolute and relative liver
weights were observed in both sexes of 200 mg/kg BW/day group. In histopathological examination, hepatocyte
hypertrophy was observed in the male 200 mg/kg BW/day group.
[Conclusion]
We considered that the main target organ of isoeugenyl methyl ether is liver. The NOAEL of isoeugenyl methyl ether
was estimated to be 40 mg/kg BW/day.

196

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-35 ＊
Characteristic pathological changes in nuclei of ADC drug-treated animals○ Mingshu Huang，Toko Ohira，Liang He，Jingjing Mao，Jianyan Yan，Tiantian Cui，Minbo Hou，
Hua Li，Jing Ma
National Shanghai Center for New Drug Safety Evaluation and Research[Background] The antibody-drug conjugate (ADC) is a cytotoxic drug coupled to an antibody that specifically targets a
certain tumor marker. The mechanism of ADCs has been studied in depth by many researchers. However, thepathologic changes induced by ADCs were rarely reported. [Aim] To evaluate the pathological changes of nuclei
induced by ADCs, we analyzed the histopathological data from monkeys and rats treated with ADCs. [Materials andMethods]The 13-week repeated dose toxicity study was carried out in monkeys and rats. Animals were dosed withvehicle (control group) and ADCs (treated groups) via intravenous infusion, All tissues were collected and processed forhistopathological examination. [Results] The characteristic changes of nuclei include karyomegaly and mitosis andwere found in multiple organs of ADC-treated monkeys and rats. The nuclei were enlarged with or without expansion ofcytoplasm. Affected nuclei were irregularly bordered and varied in size, and some had several nucleoli or increased
mitosis. These nuclear changes were noted in the liver, heart, spleen, duodenum and skin of monkeys and the kidney,
liver, spleen and lacrimal gland of rats. [Conclusion] Karyomegaly and mitosis were observed in multiple organs of
ADC-treated monkeys and rats.

P-36
Investigation on carcinogenicity study of prescription drugs -Part I○ Jihei Nishimura1），Mizuho Nonaka1），Misaki Naota1），Satoshi Tsunoda1），Yukie Saegusa1），
Hiroshi Doguchi 1），Hiroshi Onodera1），Osamu Fueki1），Kazutoshi Shinoda1），Kumiko Ogawa2），
Akiyoshi Nishikawa 2）
PMDA，2）NIHS

1）

Beginning with retrospective analysis on data collected from 182 marketed- and unapproved- pharmaceuticals which
was published by PhRMA (Toxicol. Pathol. 39, 716-744, 2011), ICH S1 (carcinogenicity study) Expert Working Group(EWG) was set in June 2012.   Currently, prospective evaluations have been conducted to verify a hypothesis that a
2-year rat carcinogenicity study could be waivered based on evidences such as pharmacology, genotoxicity and tumorrelated lesions from rat 6-month studies.In view of the above background, we are retrospectively investigating from thesimilar point of view using data of about 200 prescription drugs approved in Japan in 2007 or after whereincarcinogenicity studies were conducted.   In this presentation, we will introduce analysis results regarding neoplastic
lesions in rats which were found in the process of the investigation.

Poster Presentation
197

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-37 ＊
Time course study on histopathological changes of the peripheral nerve in experimental
autoimmune neuritis rats
○ Emi Tomikawa，Mayu Mutsuga，Kojiro Hara，Chihiro Kaneko，Tomoya Miyoshi，Naoko Imura，Yuko Togashi，Ryoji Hayashi
Pharmaceutical Research Laboratories, Toray Industries, Inc.
[Background and Aim] The experimental autoimmune neuritis (EAN), an animal model for Guillain-Barré syndrome,shows neurological symptoms and histopathological changes of the peripheral nerve, but the interrelation of theirprogress is not well understood. We examined the time course of histopathological changes in EAN rats.
[Materials and Methods] The sciatic nerves in P2 (57-81)-administered Lewis rats were sampled on Day 10, 16, 22,
and 25, and were observed under light microscope (HE, LFB-HE, and IHC staining) and TEM.
[Results] In the light microscope, axon/myelin degeneration appeared at the onset of neurological symptoms (Day 10),
became severe at the peak (Day 16), and persisted at the recovery (Day 22 and 25). The myelinated nerve fiber density
and myelin area decreased from Day 10 and became the minimum on Day 22. The decreased density was attributed to
the loss of large diameter fibers. In the TEM analysis, slight axon/myelin degeneration (accumulation of vesicle in axon,
focal myelin splitting/folding) increased on Day 10, severe degeneration (axonal loss, myelin ovoid, demyelination)
increased on Day 16, and regenerative changes (remyelination, enlargement of Schwann cell cytoplasm) was observedon Day 22 and 25.
[Conclusion] In EAN rats, degeneration of the peripheral nerve slightly appeared at the onset of neurological symptoms
and became severe with less large myelinated fibers at the peak, and regenerative changes also occurred at therecovery.

P-38 ＊
Histopathological examination of ocular lesions in leptin receptor-knockout medaka○ Shin-ichi Chisada1），Ayano Hirako2），Akihiko Sugiyama2）
School of Medicine, Kyorin University，2）Faculty of Agriculture, Tottori University

1）[Background, Aim, Materials and Methods] Leptin receptor-knockout (LepRKO) medaka reared with ad libitum feeding
showed hypoinsulinemia and hyperglycemia. Eyeballs of LepRKO and control medaka at 10, 28, and 37 weeks old were
examined histopathologically to clarify the usefulness of the LepRKO medaka as a model of diabetic cataract andretinopathy. [Result] The LepRKO medaka at 28 and 37 weeks old showed hypoinsulinemia and hyperglycemia.
Histopathologically, vacuolation, edema, fragmentation and liquefaction of the lens fibers were observed in the lenscortex of LepRKO medaka at 28 and 37 weeks old. In LepRKO medaka at 28 and 37 weeks old, dilatation was observedin the retinal central veins, retinal capillaries, iridal veins and capillaries, and choroidal veins. The pigment epithelial
layer, layer of rods and cones, outer granular layer, outer plexiform layer, inner granular layer and inner plexiform
layer in LepRKO medaka at 28 and 37 weeks old were significantly thinner compared with those in control medaka.
[Conclusion] The histopathological characteristics in the lens and retina of LepRKO medaka were similar to those in rat

Poster Presentation

models for type II diabetes mellitus. In the LepRKO medaka, the above-mentioned histopathological changes were
induced within a shorter rearing period compared with rat models for type II diabetes mellitus. These findings
demonstrate the usefulness of LepRKO medaka as a model of diabetic cataract and retinopathy.

198

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-39
Inhibition of atherosclerosis in ApoE-knockout mice by mangosteen extracts and themechanism analysis○ Masa-Aki Shibata1），Mariko Harada-Shiba2），Eiko Shibata2），Kentaro Maemura1），Yoichi Kondo1）
Dept of Anat & Cell Biol, Osaka Med Coll，2）Dept of Mol Innov Lipidol, Natl Cereb & Cardiovasc Centr Res Inst

1）

Background: The incidence of atherosclerosis is increasing with an aging population, as are the myocardial andcerebral infarctions associated with the disease. Since lifestyle choices play heavily in development of atherosclerosis,
development of more effective therapeutic treatments is of critical importance. Methods: Male ApoE-knockout mice
were fed 0, 0.3 and 0.4% mangosteen (MG) extracts, comprised of 84% alpha- and 7% gamma-mangostin,   in the dietfor 17 weeks and tissues collected from all animals surviving to terminal sacrifice. Results: Body weights weresignificantly decreased in both MG-treated groups as compared to control. Total serum cholesterol levels were alsosignificantly decreased in both MG-treated groups. However, at 0.4% dietary MG, serum LPL was significantly increased
and triglyceride levels were significantly decreased. Both H&E and Oil-Red O staining showed that atheroscleroticchanges were significantly reduced at both levels of MG exposures. Expression of such atherogenic markers as Timp-1,
Mmp-9, Lox-1, Cxcl16 and Klf-5 were similar between control and MG-treated groups by real-time PCR analysis, but inmice receiving 0.4% MG, CD163, a M2 macrophage marker, was significantly elevated in lesions while M1 markers
CD63 and NOS2 were not. Conclusions: A crude mangosteen extract comprised largely of alpha-mangostin suppresseddevelopment of atherosclerosis in male ApoE-KO mice, possibly through a M2 macrophage-mediated mechanism.

P-40
Protective effects of Japanese soybean paste (miso) on SHRSP○ H Watanabe1），M Sasatani2），K Satoh2），Y Miyasaka3），M Yoshizumi1）
Dept Cardiovascular Physiol Med, Inst Biom Health Sci, Hiroshima Univ，Dept Envir Biomet, Res Inst Radiat Biol Med, Hiroshima Univ，3）Shinsyu-ich Miso

1）
2）

<Aim> Whether intake miso can reduce the incidence of stroke in animal models remains unknown. In this study, weinvestigated the effects of soybean paste (miso) in an animal model. <Materials and Methods> Stroke-prone
spontaneously content hypertensive rats (SHRSP/Izm, SLC ) were fed a miso diet (Shinsyu-ich Miso, NaCl 2.8%), a highsalt diet, NaCl 2.8%), or a low salt diet (NaCl 0.3%). <Results> A significantly higher systolic blood pressure (SBP) in thehigh salt group compared to the low salt group and the miso group. There was no significant difference in SBP between
the low salt group and the miso group. Diastolic blood pressure was significantly higher in the high salt groupcompared to the low salt group and the miso group. There was no significant difference in diastolic blood pressure
between the low salt group and the miso group. The Cox proportional hazards model revealed that event-free time wassignificantly shorter in the high salt group compared to the low salt group   and the miso group. There was no
cerebrum in the high salt group. There were also fewer histological and immunohistochemical changes in the brain andkidneys in the miso group compared to the high salt group. <Conclusion> In conclusion, our findings suggest that a
miso-containing diet, regardless of its high salt content, may be protective against stroke.

199

Poster Presentation

significant difference between the low salt group and the miso group. Large hemorrhagic macules were found in theThe 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-41 ＊
Inhibitory Effects of Mead Acid Supplementation on Green Tea Extract-Induced
Hepatotoxicity○ A Takenouchi1），Y Emoto2），Y Kinoshita3），K Hamazaki4），A Tsubura5），K Yoshizawa1）
Mukogawa Women's Univ.，2）Kansai Med. Univ.，3）Wakayama Med. Univ. Hospital，4）Public Health-Univ.of Toyama，Pref Osaka Saiseikai Izuo Hospital

1）
5）<Background> We reported on the characteristics of green tea extract (GTE)-induced hepatotoxicity in rats. We
explored the inhibitory effects of an n-9 PUFA, Mead acid (MA), by dietary supplementation. <Methods> 7-week-old
male Sprague-Dawley rats received a single intraperitoneal injection of 200 mg/kg GTE, serum and liver were collected
24, 48hrs, and 7 days after the GTE injection. The basal, or 4.8% MA diets were given from one week before GTE
injection to sacrifice. Basal diet+saline, 4.8% MA diet+saline, basal diet+GTE, and 4.8% MA diet+GTE groups were set.
Serum biomarkers of hepatotoxicity (AST, ALT), histopathology, and immunohistochemistry of apoptosis, oxidative
stress and hypoxiawere examined. Fatty acid in serum and liver tissue of the basal diet + saline and 4.8% MA diet+saline groups were analyzed. <Results>In the basal diet+GTE group, AST and ALT levels increased. Centrilobular
hepatocellular necrosis was seen 24 and 48 hrs after GTE exposure. Furthermore, the levels of these changes decreasedin the MA diet group. In the basal diet+GTE group, γ H2AX, 8-NG, and HIF-1 α -positive hepatocytes appeared and peakedat 48hr. The level of these changes reduced by MA diet feeding.  <Conclusion>The levels of GTE-induced liver damage,such as serum biomarkers, histology, and immunohistochemistry for hepatotoxicity were inhibited by MA diet feeding.
This effect may be related to suppression of cell death via the pathway of oxidative stress and hypoxia in the liver.

P-42 ＊
Damage associated molecular patterns (DAMPs) and the related signals in thioacetamide(TAA)-injected rat liver injury○ Mizuki Kuramochi，Takeshi Izawa，Munmun Pervin，Mohammad Rabiul Karim，Mitsuru Kuwamura，Jyoji Yamate
Veterinary Pathology, Osaka Prefecture University[Background/Purpose] Damage-associated molecular patterns (DAMPs), which are released from injured cells, and theirligand-receptor, MHC class II or Toll-like receptors (TLRs), play important roles in the pathogenesis of chemicalinduced liver injury. We have already reported that DAMPs, particularly high mobility group box 1 (HMGB1), and TLR4
may play important roles in TAA-induced rat acute liver injury. Here, we analyzed the roles of HMGB1 and TLR4 in
TAA-induced rat liver injury in more details.   [M & M] 7-week-old male F344 rats were injected with TAA (50 mg/kg
BW, ip) and after 6 hours post injection with HMGB1 neutralizing IgY antibody or non-immune IgY (control) was
injected (200 μ g/rat, iv). Samples were collected on 1 day post TAA injection.   [Results] After injection, hepatocyte
injury accompanied by mononuclear cell and neutrophil infiltration was seen around the central veins; no clear

Poster Presentationdifference was seen between both groups. Compared with control, neutralizing group showed low values of AST and
ALT, the low number of Iba-1 positive macrophages around central vein and low expression level of MCP-1 and IL-6.
The expressions of signal molecules of TLR4, MyD88 and TRAM1, were the same level between both groups.  
[Conclusion] In TAA-induced liver injury, HMGB1 promotes the accumulation of macrophages following hepatocytes
injury, and progresses hepatic injury. TLR4 is likely not to relate with progressing inflammation, and other receptors
should be investigated.

200

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-43 ＊
Histopathological Analysis of Young and Aged Female SDT Fatty Rats
○ Soon Hui Teoh1），Katsuhiro Miyajima1），Takeshi Ohta2），Masami Shinohara3），Kinuko Uno1），
Noriko Kemuriyama 1），Dai Nakae1）
Grad. Sch. of Agricul.Tokyo Univ of Agricul.，2）Central Pharma. Research Inst. Japan Tobacco Inc，
Tokyo AD Dept. CLEA Japan Inc

1）
3）[Background]The SDT fatty rats, introduced as a new model of obese type 2 diabetes had shown several diabetic
complications from a young age. However, details of the pathophysiological features of the aged SDT fatty rats havenot been reported. [Aim]This study is focused on the pathophysiological progression of diabetes on the kidney of the
SDT fatty rats.[Materials and Methods]Female SDT fatty rats were kept in animal facilities of CLEA Japan Inc. with basal
diet. Necropsy was performed at the ages 17, 59 and 63-weeks and kidney samples were immediately fixed andhistopathological examination and analysis of gene expression were performed. [Results]The kidney of SDT fatty rats at
59 and 63-weeks showed increased mesangial matrix and atrophy of the glomeruli, severe fibrosis and inflammatory
cell infiltration in the tubulointerstitium and severe urinary cast in the renal tubule. These changes were foundnegative or very slight at 17-weeks. Armani-Ebstein changes which are accumulation of glucose in the epithelial cells in
distal tubules were observed in all observation periods. The gene expression of TGFB, TNFa, IL-1B and MCP1 increased
at 59-weeks compared to 17-weeks, but decreased in 63-weeks. [Conclusion]Renal lesions showed progression withaging but there was no significant difference between 59 and 63-weeks. The lowered gene expression was considered
to be related to severe kidney lesions in 63-weeks.

P-44 ＊The effects of SLE therapeutic medication and histopathological examination on LPSinduced early nephritis develop model in NZB/W F1 mice
○ Tomomi Kanehara，Yasuhiro Ohshiba，Jun Imai，Shiori Murase，Tadashi Itoh，Hitoshi Kimura
Nihon Bioresearch Inc.
[Background] NZB/W F1 mice are useful to study SLE because they develop lupus nephritis (LN). However the problem
is the time to develop LN (6 months after the birth). Recently, LPS administration to make mice develop LN early has
been reported, but the pathological evaluation of organs and the effects of SLE remedy are poorly reported.[Aim]We
evaluate the histopathology of NZB/W F1 mice by administering LPS, and the effect of Cyclosporine (Cyc),
Betamethasone (BM). [Materials and Methods] LPS were injected intraperitoneally on NZB/W F1 mice twice a week andsaline (control), Cyc or BM were administrated orally every day for 5 weeks and necropsied. The kidneys  were stainedwith PAS and Masson trichrome stain, and the spleens were immunostained with B220 and CD3 antibodies. The
histopathology and therapeutic analysis were done and compared with the untreated group (no LPS, Cyc, BM or saline).
[Results] BUN, blood creatinine, and urine protein/creatinine ratio increased more in the control group than the[Conclusion]NZB/W F1 mice developed sclerosing glomerulonephritis in early age by administration of LPS. Cyc andBM showed positive effect. The cause of sclerosing glomerulonephritis is suggested to be activation of the immune
system from the result.

201

Poster Presentation

untreated group. The Cyc and BM group had lower values of them compared to the control group. The LPS injectedgroups were diagnosed sclerosing glomerulonephritis, had enlarged spleens, and their white pulp region was increased.

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-45
Effect of NaCl supplementation on renal complications in SDT fatty rat○ Katsuhiro Miyajima1,2），Takeshi Ohta3），Masami Shinohara4），Hinako Iwasaki1），Soon Hui Teoh2），
Kinuko Uno2），Noriko Kemuriyama1），Dai Nakae1,2）Tokyo Univ. Agricul.，2）Dept. Food Nutr. Sci., Grad. Sch. TUA.，3）Japan Tobacco Inc.，4）CLEA Japan Inc.

1）

Background: Spontaneously Diabetic Torii (SDT) fatty rats rapidly develop obesity, type 2 diabetes and hypertension
with aging, but the development of kidney disorders need about 40 weeks. This study aimed to examine effects of NaCl
supplementation on advanced renal complications in SDT fatty rats. Materials and Methods: Male SDT fatty rats were
given 0, 0.3 and 0.5% NaCl solution as the drinking water from 7-week of age for 11 weeks, and necropsied, whenblood samples were collected for plasma biochemistry, and the kidney was collected for histopathological examination.
Results: Plasma BUN and creatinine levels were slightly increased in 0.5% NaCl group. Histopathologically, interstitialinflammation and fibrosis and urinary cast were slightly observed in control group, and these findings were prominent
in NaCl supplementation in a dose-dependent manner. Slight to moderate sclerosis, atrophy and adhesion to Bowman's
capsule were observed in the glomeruli of NaCl groups. Sirius Red-positive area, and numbers of ED1- andα SMA-

positive cells in the interstitium or the glomeruli were increased in NaCl groups in a dose-dependent fashion.  
Conclusion: It is indicated that NaCl supplementation enhances advanced kidney disorders in male SDT fatty rats.
Therefore, SDT fatty rat represents a robust model to evaluate drugs targeting diabetic nephropathy.

P-46
Development of canine model with large cartilage defects on femoral condyles○ M. Tasaki1），T. Hirai1），M. Akiyama1），Y. Itou1），K. Nakazawa1），Y. Harada2），K. Nagano3），
H. Hagiwara 1）
Terumo Corp.，2）Div. of Vet. Surg., Nippon Veterinary and Life Science Univ.，
Nagano Toxicologic-Pathology Consulting

1）
3）[Aim] The purpose of this study was to establish a cartilage defect animal model with adequate area to evaluate
medical treatment or devices. We developed a canine model with large cartilage defects on the femoral condyles.
[Material and Methods] Eight-month-old male beagle dogs were used in this study. The cartilage lesions were produced
using a metal punch and bone curette on the medial and lateral condyles of the femur. Gross and histopathologicalexaminations were performed at 4 and 8 weeks after surgery, respectively. To assess the histological response to the
medical treatments, small titanium implants were applied on the surface of the defects. [Results] Cartilage defects weresuccessfully produced over the weight-bearing sites of the medial and lateral femoral condyles. Histopathologicalobservation revealed disappearance of the calcified cartilage in a time-dependent manner in the cartilage defect group.

Poster Presentation

Fibrosis, vasodilation, neovascularization, and cysts were also observed in this group. In the implantation group, repair
by fibrous or cartilage-like tissue was observed lateral to the implant heads. [Discussion] The model exhibitedmorphological features similar to human osteoarthritis of the knee with respect to progression of the cartilage lesions.
Additionally, implantation on the surface of the cartilage lesion has the potential to induce the tissue repair. In
summary, this canine model is a useful tool for evaluation of the efficacy of medical treatments.

202

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-47 ＊
Histopathology of inflammatory response through ERs in allergic dermatitis mice model○ Aya Koyama，Risako Tajiki，Yuko Watanabe，Tomoki Fukuyama，Yoshitaka Katoh，Emi Makino，Tsuyoshi Ito，Naofumi Takahashi，Atsushi Shiga，Yoshimasa Okazaki，Takanori Harada
The Institute of Environmental Toxicology[Background and Aim] It has been reported that estrogen influences the immune system, and immune disturbance byenvironmental estrogen is a worldwide problem. However, direct interaction between estrogen receptors (ERs) andinflammatory response are still remained uncertain. We investigated whether ERs are possibly involved in proinflammatory reaction of cutaneous allergy using allergic dermatitis model, and histopathological evaluation of the ear
auricle sample was mainly presented here.
[Materials and Methods] Allergic dermatitis was produced in male BALB/c mice by sensitization of Toluene-2,4diisocyanate (TDI). The sensitized animals were exposed to Methoxychlor (MXC) or β -Estradiol (E2) for 3 days andchallenged with TDI onto ear auricle. The ear swelling response was measured 24 h after challenge, and ear auricle was
sampled for histopathological evaluation and cytokine measurement.
[Results] In histopathological evaluation, inflammatory responses induced by TDI, in particular neutrophil influx
around hair follicle, were observed in all groups. However, the histologic degree of inflammation was higher in the
MXC- or E2-treated group than that of vehicle control group. Significant enhancement of ear swelling response andcytokine production in MXC- or E2-treated group was correspondingly observed. More detail results including
immunohistochemical staining will be presented in this conference.

P-48
The world's leading rat resource center: the National BioResource Project-Rat○ Miyuu Tanaka，Arata Honda，Birger Voigt，Yuki Neoda，Kazumi Hagiwara，Zong-hu Cui，
Ryoma Tachibana，Tomomi Nagao，Satoshi Nakanishi，Ken-ichi Yamasaki，Takashi Kuramoto，Masahide Asano
Kyoto University[Background] The National BioResource Project - Rat in Japan (NBRP-Rat) is one part of the NBRP in Japan for morethan 20 species including animals, plants, microbes, tissues and DNAs, and conducted the collection, preservation andsupply of rat resources. It is founded by the Japanese Ministry of Education, Culture, Sports, Science and Technology
and started in 2002. NBRP-Rat is now operating in its 16th year, and contributes as the world's largest and leading rat
resource center to various fields of biomedical research. [The 4th term of NBRP-Rat] From 2017, the 4th term of NBRPRat starts with collaboration of Kyoto University (central facility), RIKEN BRC and Osaka University (cooperative
facilities). By August 2017, 850 rat strains (various inbred, spontaneous mutant, congenic, transgenic, and geneticallymodified (GM) strains) are deposited, and 730 strains are available for biological research. We provide a uniquegeneration of GM rats are boosting the utility of the rat as biological resource. Collection of unique rat strains,improvement of strain database, and development of rat reproduction technologies in the NBRP-Rat can promotefurther utilization of the rat resources as a research tool in biomedical sciences including toxicological pathology.

203

Poster Presentation

database and this allows scientists to select strains suitable for their research. [Prospects] Recent developments of theThe 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-49
A 13-week repeated oral dose toxicity study of 2-furanmethanethiol in F344 rats.
○ Liang Shi1,3），Yuji Ishii1），Shinji Takasu1），Takuma Tsuchiya1），Aki Kijima1），Kumiko Ogawa1），
Akiyoshi Nishikawa2），Takashi Umemura1）
Div.Pathol., NIHS，2）Biol.Safety Res.Ctr.,NIHS，3）Lab.Exp.Pathol., Univ.Tsukuba

1）<Aim> 2-Furanmethanethiol (2FM) has been used as flavoring agent. 2FM is also produced during cooking and yeast
fermentation. However, its oral toxicity remains unclear. We investigated a rat 13-week repeated oral dose toxicity of
2FM for its safety assessment. <Materials and methods> Six-week old male and female F344 rats were given 2FM at doses
of 0, 6.25, 10 and 40 mg/kg body weight/day by gavage for 13 weeks. Typical parameters used in a subchronic toxicity
study were examined. <Results> No mortality were observed. The reddish tear, nasal bleeding and salivation wereobserved in all 2FM treated rats in the first week. However, these clinical signs were disappeared from the second
week. Body weight gain was significantly reduced from the first week to the end of experiment at the highest dose inboth sexes. The serum glucose was significantly increased in 40 mg/kg treated female. Necrosis and regeneration of
olfactory epithelium, and inflammation cell infiltration were observed in 40 mg/kg treated male and female and 10
mg/kg treated male. These pathological finding were relatively easily induced in rodents, however, we could not
exclude the possibility of toxicity related, since other changes such as body weight loss was also observed.
<Conclusion> The no-observed-adverse-effect level (NOAEL) of 2FM in the present study was concluded as 6.25 mg/kg
weight/day in male and 10 mg/kg weight/day in female.

P-50 ＊
An immunohistochemical study to differentiate cadiomyocyte necrosis○ Yuichi Takai，Hitoshi Kandori，Takeshi Watanabe
Drug Safety Research and Evaluation, Research, Takeda Pharmaceutical Company Limited
Artificial eosinophilic myocardium (MC) is often encountered in the heart and might result in misinterpretation. We
examined whether immunohistochemistry (IHC) could be used to distinguish between artifact (AF) or necrosis (NS) by
using 2 categories of antibody. Myoglobin (Myo), cardiac troponin T (CTnT), and fatty acid binding protein3 (FABP3)
were used to detect leakage due to NS; and complement components 3 and 9 (C3 and C9) were used to detect
deposition in necrotic tissue. Formalin-fixed paraffin-embedded heart tissues from vehicle or cardiotoxic agent treatedanimals (rat: isoproterenol, dog: minoxidil, monkey: metaproterenol) were used for IHC. Positive reactions of Myo,cTnT, and FABP3 present in the normal MC were not observed in the necrotic MC of all species tested. Additionally,
positive reactions of Myo and cTnT in monkeys, and FABP3 in rats and monkeys, were also not observed in the AFrelated MC.No positive reactions of C3 and/or C9 (monkey only) were noted in the normal MC of all species tested or in
the AF-related MC in rats and monkeys. In dogs, a positive reaction of C3 was noted in both the AF-related and necrotic

Poster Presentation

MC. In rats, a positive reaction of C3 was noted only in a partial area of the necrotic tissue. Positive reactions of C3 andC9 were specifically detected in the necrotic MC in monkeys. In conclusion, IHC for Myo and cTnT in rats, Myo, cTnT,and FABP3 in dogs, and C3 and C9 in monkeys might be useful markers to differentiate cardiomyocyte NS.

204

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-51
Quantitative evaluation of organelles using image analysis software ImageJ ― Stomach surface mucous cell alteration of PGE2 treated mouse ―○ Kanata Ibi，Tohru Kihara，Yumi Kangawa，Toshiyuki Shibanushi，Hiroyuki Takabe，Kazuto Hashimoto
Kaken Pharmaceutical Co,Ltd.
[Background and purpose]The progress of the image analytic technology is remarkable, and the quantitative evaluationof pathological findings is expected. However, the quantitative evaluation methods for organelles have hardly been

established. We focused on stomach surface mucous cells of the mouse with repeated dose of PGE2 and investigatedthe quantitative evaluation for organelles with ImageJ.

[Materials and methods] BALB/cAnNCrlCrlj female mice were treated with PGE2(0.018 mg/dose/2day,10 times) andthe stomachs were collected 2 days from last dose(Control, PGE2 group:10 mice).We investigated following 4 methods.
(1)Histopathological examination(2)Transmission electron microscopy examination(3)Image analysis of the double stained slides with PAS and Cytokeratin(4)Image analysis of the double stained slides with LAMP-2 and Cytokeratin

For image analysis, over 100 surface mucous cells were selected per mouse and nuclear area, cell area, N/C, the ratioof secretary granule and lysosome to cytoplasm (S/C, L/C) were measured by ImageJ.
[Results] The following changes were observed in PGE2 group.
(1)Hypertrophy of the surface mucous cell(2)Increase of secretary granule and lysosome in surface mucous cell(3), (4)Significant increase of cell area, S/C, and L/C, and decrease of N/C.

[Discussion and conclusion]We confirmed the results of qualitative evaluation quantitatively by ImageJ. This suggeststhat this method is useful for quantitative evaluation for some organelles.

P-52
Adjuvant effects of transcutaneously exposed cholera toxin and its B subunit in skinsensitization model○ Young-Man Cho，Yasuko Mizuta，Jun-ichi Akagi，Takeshi Toyoda，Kumiko Ogawa
Division of Pathology, National Institute of Health Ssciences[Background] We investigated immunological and histopathological changes of mice transcutaneously sensitized with
ovalbumin (OVA) as antigen and cholera toxin (CT) or its B subunit (CTB) as positive adjuvant candidate. [Methods] In
experiment 1, 0.1, 1 and 10 μ g CT with 2 μ g OVA was applied in skin patches to the flanks of BALB/c female mice 3days a week for 4 weeks, and immune responses were evoked with OVA given intraperitoneally. Rectal temperatures,scores on anaphylactic responses, plasma histamine levels and histopathology were evaluated. In experiment 2, 2 μ g
OVA with 1 μ g CT or 0.7 μ g CTB was applied mice as same manner in experiment 1. [Results] In the OVA + CT groups
and the OVA + CTB group, increased IgG1 and IgE levels after sensitization and decreased rectal temperature, withaugmented anaphylaxis scores and plasma histamine levels after evocation were noted as compared with vehicle
control. In addition, IgG1 and IgE levels in the OVA + CT groups, were significantly increased as compared with OVA
treated groups, except OVA + CTB group than in the vehicle group. [Conclusion] Transcutaneously exposed CT with
antigen showed sufficient adjuvant effect in skin sensitization model and CT is promising positive control material.
Further studies about optimum dose on sensitization with CTB should be analyzed.

205

Poster Presentationgroup. Ki67-positive germinal center in the regional axillary lymph node was observed more frequently in all OVA-

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-53
Contribution of toxicologic pathologists to choosing appropriate histopathologicalfindings as endpoints for benchmark dose (BMD) approach in toxicological evaluation ofchemicals○ Midori Yoshida1），Takashi Umemura2）
Food Safety Commission of Japan, Cabinet Office，2）Yamazaki Gakuen University

1）[Background] BMD approach, a fitting mathematical model to dose response, has been accepted as an alternative to
NOAEL based method at toxicological evaluation of chemicals. In the approach, BMD lower (BMDL), the lower limit of aconfidence interval (typically 95%) on the maximum likelihood estimate of the dose associated with a specified
benchmark response level, is calculated as preferred POD. [Aim and Methods] We propose consideration points tochoose histopathological endpoints appropriately for BMD approach and contribution of toxicologic pathologists to theapproach in the poster. [Results and Discussions] BMD approaches were recently applied in the assessments ofacrylamide by FSCJ, 3MCPD by EFSA, and a veterinary drug by JECFA. Toxicologic pathologists should recognize
current situation that health guidance values have been established based on histopathological findings applying BMD
approach at national or international toxicological evaluation. To choose sensitive and appropriate endpoints for theevaluation, comprehensive description and clear explanation indicating MoA or pathogenesis of the histopathologicalfindings are useful for non- toxicologic pathology background assessors. Participation of toxicologic pathologist to theevaluation will contribute to precise interpretation of pathology data. [Conclusion] Toxicologic pathologists could
contribute to choosing histopathological endpoints appropriately for BMD approach at toxicological evaluation ofchemicals.

P-54
An approach for assessing mild irritants in the Bovine Corneal Opacity and Permeability
Test (BCOP test) includes a histopathological examination○ Kouta Itoh，Masatoshi Furukawa，Chihiro Endoh，Masao Matsuura
SAFETY RESEARCH INSTITUTE FORCHEMICAL COMPOUNDS CO., LTD
Introduction  The bovine corneal opacity and permeability (BCOP) test was developed as an alternative to the in vivo
Draize eye irritation test in rabbits, it was adopted by the OECD Test Guideline (TG437) in 2009, and updated in 2013.
However, in alternative eye irritation tests, there is no test system capable of evaluating UN GHS Categories 2A and 2B(mild irritants), which is a major issue to be solved.We have been considering the possibility on the evaluation of mild
irritants in the BCOP test with a combination of histopathological examination for determining potential for earlyrecovery. Material and Method  The BCOP test conducted in accordance with the OECD TG437 using test substances of85, the corneas were stained with hematoxylin and eosin, according to the OECD Guidance Document No. 160. In
pathological examination, we defined four stages of damage to the epithelium and concluded that there is potential forearly recovery when damage does not extend throughout the entire basal cell layer and there no damage to the stroma.

Poster Presentation

Results and Discussion  Predictive capacity of the BCOP test with histopathological examination exhibits an accuracy of
81%, a false negative rate of 19%, and a false positive rate of 18%, which demonstrates the ability of this method topredict test chemicals to be UN GHS Category 2B and No Category, that these results demonstrate the ability ofsuccessfully distinguish Category 1 and 2A chemicals from No Category and Category 2B chemicals.

206

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-55 ＊
Histopathological changes of autonomic nerves induced by Paclitaxel in rats
○ Kenji Nakamura，Yu Yokoo，Moutou Ou，Koji Shimouchi，Atsuko Murai，Kengo Namiki，Masanori Kuribayashi，Hiroyuki Yanagi
Safety Research Laboratories, Discovery and Research, ONO Pharmaceutical Co., Ltd.
[Aim] Paclitaxel (PTX), an antitumor drug, induces peripheral neuropathy (PN) in patients. Histopathological changes of
sensory nerves have been reported in rats treated with PTX, but those of autonomic nerves have not been reported yet.
In this study, we examined the histopathological changes of autonomic nerves by using previously-reported PTXinduced PN model. [Material and methods] Histopathological examinations of sympathetic trunk, superior cervical
ganglion (SCG) and stellate ganglion were conducted after each single administration of PTX at the doses of 0, 2.5 and5 mg/kg to 6-week-old male SD rats on the days of 1, 2, 3, 8 and 9. Furthermore, the details of the histopathologicalchanges of SCG were examined by Kluver-Barrera (KB) staining and IHC staining using antibodies for GFAP, S-100 andCleaved caspase-3. [Results] Peripheral chromatolysis was observed in ganglion cells of SCG and stellate ganglion. Thischange was confirmed by KB staining.. There was no change in sympathetic trunk. There were no obvious differencesin the expressions and distributions of GFAP, S-100 and Cleaved caspase-3 in SCG between control and PTX-dosing
group. [Conclusion] Peripheral chromatolysis was observed in ganglion cells of autonomic nerve in rats treated with
PTX. Its pathological significance will be discussed from the results of additional examinations about its ultrastructuralchange and the neuropathy marker.

P-56 ＊
Cellular identification of MT+ cells increased in the hippocampal dentate gyrus andcerebellum by developmental exposure to T-2 toxin in mice
○ Kota Nakajima1,2），Yuko Ito1,2），Yasunori Masubuchi1,2），Toshinori Yoshida1），Makoto Shibutani1）
LVP, Tokyo Univ. Agricul. Technol.，2）United Grad. Sch. Vet. Sci., Gifu Univ.

1）

Background and aim. We previously reported that developmental exposure to T-2 toxin ( T2) caused transient

disruption targeting type 1 neural stem cells and type 2 progenitor cells and involvement of oxidative stress in the
hippocampal neurogenesis on weaning in mice. The present study examined expression of metallothionein (MT) andcellular markers in the hippocampal dentate gyrus (DG) and cerebellum in these animals. Materials and methods. T2 at

0, 1, 3, 9 ppm in diet were given to maternal mice from gestational day 6 to postnatal day (PND) 21 after delivery. The
hippocampal DG of offspring was examined with immunohistochemistry and real-time RT-PCR analysis on PNDs 21 and
77. Results. Immunohistochemically, increase of MT + cells was noted in the DG and cerebellum at 9 ppm on PND 21. In
the cerebellum, increase of GFAP + cells was noted. Although there were no co-expression with TBR2, DCX and NeuN,

double immunostaining between MT and neuronal stage markers showed co-expression of MT with GFAP and SOX2 in

Developmental T2 exposure to mice resulted in induction of MT in the DG and cerebellum. MT expression in type 1 andtype 2a cells in the DG suggested neuroprotective action on T2-induced disruptive neurogenesis, in response tooxidative stress and inflammatory mediator. It was thought that the protective function through MT is also enhanced in
the cerebellum.

207

Poster Presentation

the DG, and with GFAP in the cerebellum. Expression level of Mt2 , Il1 α and Il1r1 was increased in the DG. Discussion.

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-57
Neuroprotection on the disruptive hippocampal neurogenesis induced bydevelopmental hypothyroidism in rats
○ Yasunori Masubuchi1,2），Kota Nakajima1,2），Yuko Ito1,2），Mihoko Koyanagi3），Shim-mo Hayashi3），
Toshinori Yoshida 1），Makoto Shibutani1）
LVP, TUAT，2）UGSVS, Gifu Univ.，3）San-Ei Gen F.F.I., Inc

1）

Introduction. Developmental exposure to propylthiouracil (PTU) induces disruption of hippocampal neurogenesis, andinduction of oxidative stress is suggested to be involved in this disruption. In the present study, PTU wasdevelopmentally administered to rats together with antioxidants, i.e., alfa-glycosyl isoquercitrin (AGIQ) and alpha-lipoic
acid (ALA), to evaluate whether antioxidant mitigates neurogenesis.

Materials and methods. Pregnant SD rats were exposed to PTU (in water at 12 ppm), PTU+AGIQ (in diet at 0.5%) andPTU+ALA (in diet at 0.2%) from gestational day 6 to postnatal day 21 (weaning day). On weaning, distribution of
granule cell lineage (GCL) in the dentate gyrus and interneurons in the dentate hilus were immnohistochemicallyanalyzed.

Results. In PTU group, GFAP+ cells, TBR2+ cells, DCX+ cells and NeuN+ cells of the GCL and PVALB+ interneurons weredecreased vs. untreated control group. In PTU+AGIQ group, GFAP + cells were decreased and SOX2+ cells, TBR2+ cells
and NeuN + cells were increased vs. PTU group, but no differences were observed in the number of interneurons. In
PTU+ALA group, although any GCL cells were unaltered the number from PTU group, PVALB + interneurons wereincreased vs. PTU group.

Conclusion. AGIQ treatment improved CGL populations, and ALA treatment increased GABAergic interneurons,

suggestive of neuroprotective effects of these antioxidants on disruptive hippocampal neurogenesis induced bydevelopmental hypothyroidism in rats.

P-58 ＊
Histological features of the eye in the juvenile white rabbit○ Yoshinori Yamagiwa，Shingo Nemoto，Hideyuki Sakaki，Masaaki Kurata
Research and Development Division, Senju Pharmaceutical, Co., Ltd.
[Introduction] Rabbits are frequently used in ocular toxicity studies; however, information about its ocular histologicaldevelopment is limited. To provide the information, we investigated postnatal histological development of the eyes in
the juvenile rabbits. [Methods] Twenty-one neonates/infants of Japanese white rabbits Kbl:JW were euthanized per 1-2
animals at postnatal days (PND) 1, 3, 5, 7, 9, 11, 14, 18, 21, 24, 28, 35, 42. Following euthanasia, their eyes andeyelids were examined histologically. [Results] At PND 10-12, their eyes were opened. In the eyelid, the meibomian
gland acini increased with maturity. Thickening of the corneal stroma, increases in the corneal epithelial layer and in
the conjunctival goblet cells were occurred after eye-opening. The cornea and conjunctiva were matured on PND 28.
The lens enlarged by the proliferation of fibers with aging. The remaining hyaloid vessels and pupillary membrane
disappeared on PND 14 and 18, respectively. Differentiation and decreases of the INL/ONL cells, and thickening of the
optic nerve were occurred on the postnatal period. The retina and optic nerve were matured on PND 35. [Conclusion]

Poster Presentation

In this study, we confirmed postnatal histological features of the eyes in the juvenile white rabbit. This result provides
basic knowledge for histological examination of the ocular tissues of juvenile rabbits and rationale for appropriate
study design using juvenile animals, especially for ophthalmic drug evaluation.

208

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-59
Classification of Lung Cancer Types from Cytological Images Using Deep Convolutional
Neural Networks○ Tetsuya Tsukamoto1），Yuka Kiriyama1,2），Atsushi Teramoto3）
Dept Diag Path, Fujita Health Univ Sch Med，2）Dept Diag Path, Narita Memorial Hosp，
Fac Radiol Tech, Sch Health Sci, Fujita Health Univ

1）
3）

Lung cancer is a leading cause of death worldwide. Currently, in differential diagnosis of lung cancer, accurateclassification of cancer types (adenocarcinoma, squamous cell carcinoma, and small cell carcinoma) is required.
However, improving the accuracy and stability of diagnosis is challenging. In this study, we developed an automatedclassification scheme for lung cancers presented in microscopic images using a deep convolutional neural network(DCNN), which is a major deep learning technique.The DCNN used for classification consists of three convolutional
layers, three pooling layers, and two fully connected layers. In evaluation experiments conducted, the DCNN wastrained using our original database with a graphics processing unit. Microscopic images were first cropped andresampled to obtain images with resolution of 256x256 pixels and, to prevent overfitting, collected images wereaugmented via rotation, flipping, and filtering.The probabilities of three types of cancers were estimated using thedeveloped scheme and its classification accuracy was evaluated using threefold cross validation. In the results
obtained, approximately 71% of the images were classified correctly, which is on par with the accuracy ofcytotechnologists and pathologists.Thus, the developed scheme is useful for classification of lung cancers frommicroscopic images.

P-60 ＊
Cardiac lesions in cynomolgus monkey with food restriction○ Saori Matsuo1），Nozomi Fujisawa1），Tomochika Matsushita1），Shuji Hayashi1），Junko Shinozuka1），
Akio Miyoshi 1），Masami Suzuki1,2），Atsuhiko Kato1）
Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.，2）Forerunner Pharma Research Co., Ltd

1）[Background] In toxicity studies, test article treatment occasionally causes reduction of food consumption. In suchcases, it is not easy to distinguish primary changes in each test item from secondary changes related to reduced foodconsumption caused by test article treatment. We have previously reported the results of a 2-week food restriction
study in cynomolgus monkey in the 44 th Annual Meeting of JSOT. In this presentation, we will report features ofcardiac lesions in the food restriction study. [Materials and Methods] Male cynomolgus monkeys were assigned to thecontrol group (n=2) or food-restricted (FR) group (n=3, 25% food supply compared to the control group for two weeks).
The heart specimens were prepared according to our SOP and examined histopathologically. To clarify the incidence
and localization of the lesions, Non-FR males were added, and additional heart specimens were prepared and examined.
[Results] All animals in the FR group showed atrophy of adipocytes in the heart. Furthermore, granuloma composed ofartery. No granuloma was observed in control or Non-FR animals at any site of the heart examined. [Conclusion]
Although the pathogenesis of granuloma in FR animals was unclear, it was suggested that granuloma appearedcommonly in the adipose tissue surrounding the right coronary artery and was related to atrophy of coronary fat.

209

Poster Presentation

aggregation of mono- or multinuclear foamy macrophages was noted in adipose tissues surrounding the right coronary

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-61 ＊
Expression analysis of AKAP13 and ROCK inhibition assay in mouse DSS-induced colitis○ Y Kangawa1,2），T Yoshida2），H Murayama1,2），K Ibi1），T Kihara1），K Kuzutani1），M Koyanagi3），
SM Hayashi3），M Shibutani2）
Kaken Pharmaceutical Co., Ltd.，2）Lab. Vet. Pathol., Tokyo Univ. Agric. Technol.，3）San-Ei Gen F. F. I., Inc.

1）

[Background and Aim] AKAP13 is a scaffold protein that acts upstream of ROCK. ROCK is involved in the migration ofsurrounding epithelial cells to cover the denuded area without proliferation, termed restitution. However the role of
AKAP13 and ROCK in gastrointestine is unknown. In this study, we determined the expression of AKAP13 in mice with
DSS-induced colitis, and investigated whether inhibition of ROCK affects these mucosal responses. [Materials andMethods] BALB/c mice were challenged with 4% or 2% DSS in their drinking water for up to 8 or 16days, respectively.
During this period, mice received subcutaneous injections of fasudil hydrochloride hydrate (FH, 10mg/kg, twice perday), an inhibitor of phosphorylation of ROCK. [Results] In immunohistochemistry, AKAP13 was highly expressed in themucosal epithelium prior to DSS-induced mucosal injury, and also expressed in ulcer-covering non-proliferativeepithelium, which corresponded to restituted epithelial cells. Coadministration of FH increased serum amyloid A levels
and histopathological scores for mucosal injury and decreased restituted score, as compared with the DSS group.
[Conclusion] Coadministration of FH exacerbated DSS-induced colitis. Our findings suggested that AKAP13 is involvedin the regulation of mucosal restitution via AKAP13/ROCK signaling in DSS-induced colitis in mice. Furthermore, it issuggested that AKAP13 and ROCK are involved in mucosal response at early injury and maintenance of homeostasis.

P-62
Historical Data for the Histopathology on the Kidneys in Juvenile Crl:CD(SD) rats
○ Saki Inoue1），Hirofumi Hatakeyama1），Yoshihiro Takei1），Jun Watanabe1），Haruko Koizumi1），
Tetsuyo Kajimura 1），Akihito Shimoi1），Shin-ichi Sato1），Hijiri Iwata2）
Ina Research Inc.，2）LunaPath LLC.

1）

<Purpose>When performing non-clinical safety studies using juvenile animals for evaluate the safety of pediatric
medicines, it is necessary to understand normal tissues at each age. However, there is little literature available on
tissue development in juvenile animals. In this study, postnatal development of the kidneys was examined at differentdays of age. <Method>The kidneys from 2 to 6 Crl:CD (SD) rats/sex/age (8 animals/age in total) at 4, 7, 14, 21, 28, 35
and 42 days of age were routinely processed and fixed in formalin.   From these, hematoxylin and eosin (HE) stained
specimens were prepared for histological observations. <Results>At 4 to 7 days of age, the cortex consists of a
subcapsular basophilic layer, cortical labyrinth and medullary rays. The medullary rays showed basophilia. The medulla
consists mainly of collecting ducts. The density of renal tubules was low at the outer side, and loose connective tissue
was abundantly observed in the interstitium. At 14 to 21 days of age, renal tubules and collecting ducts present highPoster Presentation

density in medulla. Interstitial connective tissue decreased. At 28 days of age, the medullary lays matured, the medulla
was clearly divided into the inner and outer medulla, the inner and outer stripe, and the whole kidney was close to themature.As described above, useful historical data for toxicity studies in juvenile animals were obtained.   Further
examinations on other tissue are planned in the future.

210

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-63 ＊
Historical Data for the Histopathology on the Skin in Juvenile Crl:CD(SD) Rats
○ Jun Watanabe1），Hirofumi Hatakeyama1），Yoshihiro Takei1），Saki Inoue1），Haruko Koizumi1），
Tetsuyo Kajimura 1），Akihito Shimoi1），Shin-ichi Sato1），Hijiri Iwata2）
Ina Research Inc.，2）LunaPath LLC.

1）

[Purpose] We have previously reported on normal tissues of the kidneys, eyes and femur of juvenile rats. However,literature on juvenile animals is still insufficient and further investigation is necessary. The skin has a barrier function
against stimulation from the outside, but the skin of children differs from that of adults in that it is immature. In thisstudy, histopathological examinations were conducted on the skin of juvenile rats.
[Method] The abdominal skin from 4 Crl:CD(SD) rats at 4, 7, 14, 21, 28, 35 and 42 days of age were routinely
processed and fixed in formalin.   From these, hematoxylin and eosin (HE) stained specimens were prepared forhistological observations.
[Results] Epidermis: Until 7 days of age, a thick epidermis compared to adults, and it was possible to observe the 4
stratum. At 21 days of age almost the same epidermis as adults was observed. The stratum corneum was thicker than
the adult until 14 days of age. Hair: At 4 and 7 days of age, numerous hair follicles were present in the dermis, the hairpapilla was completely covered with hair matrix cells, and immature hair shaft was also slightly observed. After 14days of age, a large number of hair shafts protruded on the skin surface. Sebaceous glands: Immature sebaceous glands
were observed slightly at 4 days of age. At 14 days of age, the sebaceous gland cells became large, images adjacent to
the hair forming 3 to 10 clusters were observed, and at 21 days of age, the images were almost mature.

P-64 ＊
Spontaneous lesions spectrum in male and female F344 gpt delta rats in two years
breeding○ Kohei Matsushita1），Aki Kijima1），Yuji Ishii1），Shinji Takasu1），Ken Kuroda1），Takehiko Nohmi2），
Kumiko Ogawa1），Takashi Umemura1,3）
Div. Pathol., NIHS.，2）Div. Genet. Mutat., NIHS.，3）Fac. Anim. Sci. Tech., Yamazaki Gakuen Univ.

1）[Background] The gpt delta rats, reporter gene-transgenic rats, were developed for in vivo mutation assay. The animals

are applied to comprehensive studies including genotoxicity, general toxicity and carcinogenicity studies despite lack of
their background data. The aim of the present study is to investigate spectra of spontaneous lesions observed in aged

gpt delta rats. [Methods] Six-week-old male and female F344 gpt delta and their wild-type of rats were bred for two
years and histopatholog ical analysis of all their org ans were performed. [Results] Incidence of adrenal

pheochromocytoma in male gpt delta rats was significantly higher than that in wild-type of rats (Wild type: 16/75, gptdelta: 30/75). There were no inter-genotype differences in incidences of adrenal medullary hyperplasia, and other pre-and neoplastic lesions in both sexes including large granular lymphocytic leukemia in spleen and leydig cell tumor in
observed with higher incidences.[Discussion] In consideration of no differences in preneoplastic (male and female) andneoplastic (female) adrenal lesions of both genotypes, increased incidence of pheochromocytoma in male gpt delta rats

was likely incidental due to a small number of animals examined in the present study. Along with further analysis of
non-proliferative lesions, spectra of spontaneous lesions in the gpt delta rats will be discussed.

211

Poster Presentation

testes in the males, and adenoma in anterior lobe of pituitary and fibroadenoma in mammary glands in the females

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-65 ＊
Histopathological features of female genitals in IS/Kyo rats up to 30 weeks of age― Relationship with a decline of the pregnancy and the implantation rate ―○ Hiromu Okano，Yuko Yamaguchi，Saori Igura，Isamu Suzuki，Tsubasa Saito，Toru Hoshiya
Pathology Department, BoZo Research Center Inc.
[Aim] IS/Kyo rats (ISR) are known to have congenital kyphoscoliosis in their lumbar and ventricular septal defects.  In
ISR, the pregnancy and the implantation rate declined definitely from 20 to 30 weeks of age (wk).   These rates werelower than those of Wistar Hannover rats (RccHanTM:WIST) at 20 wk.  We researched the ovaries and vaginal smears toclarify the relationship between the decline of these rates due to aging and the morphological changes in ovaries in
ISR.   [Methods] Vaginal smears at 10, 20 and 30 wk and ovaries at 20 and 30 wk were examined in ISR and WIST.  
[Results] Abnormal estrous cycle in ISR was observed in 1/36 at 10 wk, in 13/29 at 20 wk and in 12/15 at 30 wk.  On
the other hand, in WIST, it was observed only in 1/6 at 10 wk and was not observed at 20 or 30 wk.  In histopathology,
the number of corpora lutea decreased definitely, and the appearance rate of interstitial glands increased by aging andcompared to that of WIST at the same wk.   Distinctively, the atretic follicles that shifted to interstitial glands andincluded the remnant of granulosa cells or eosinophilic liquid inside were increased at 30 wk.  [Conclusion] From theresults, it was considered that the enhancement of the disorder of estrous cycle, underdevelopment of follicles and thedecrease of ovulation are the important factor for the declines of the pregnancy and the implantation rate.  At present,
we are researching other female genitals and will report including these results.

P-66 ＊
Background data of atypical residual bodies in the testes of Crl:CD1(ICR) mice
○ Chisato Hayakawa，Masayuki Kimura，Yusuke Kuroda，Seigo Hayashi，Kazuya Takeuchi，Satoshi Furukawa
Biological Research Laboratories, Nissan Chemical Industries, Ltd.
[Aim] Atypical residual bodies are a frequent background finding in mice but can also be a treatment-related finding intoxicity studies, and the necessity of differentiation between both lesions should be discussed. In this study, we
collected histopathologic background data of atypical residual bodies in mice. [Materials and Method] Seminiferous
tubules in testes from ICR mice at 5, 6, 8, 10 and 19 weeks for each 15 male were histologically classified in stages of
I-VI, VII-VIII and IX-XII and the frequency of atypical residual bodies examined in each stage. [Results and Discussion]
The frequency in the number of animal with atypical residual bodies was 11/15 at 5 weeks, 5/15 at 6 weeks, 5/15 at
8 weeks, 1/14 at 10 weeks (1 for outlier) and 3/15 at 19 weeks. The average number of atypical residual bodies (mean± SD) per animal was 7.2 ± 5.2 at 5 weeks, 6.0 ± 4.6 at 6 weeks, 7.4 ± 4.4 at 8 weeks, 6 at 10 weeks and 17.3 ± 8.1 at
19 weeks. The atypical residual bodies were mostly observed in the stages of IX-XII. Atypical residual bodies appeared

Poster Presentation

both in the luminal side and in the epithelium of the seminiferous tubule, and the appearance frequency was evident in
the luminal side at 5 to 6 weeks in comparison with 8 weeks or above. The cause of the age difference in theappearance frequency of atypical residual bodies was unknown, but it was considered that the phagocytic activity by
Sertoli cells could be related to the occurrence of this lesion.

212

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-67
Histological development of Leydig cells in microminipigs○ Akihisa Kangawa，Masayoshi Otake，Satoko Enya，Masatoshi Shibata
Shizuoka Prefectural Research Institute of Animal Industry, Swine and Poultry Research Center[Background] Microminipigs have been used in various experiments and researches including regulatory toxicologicalstudies. Sexual maturity age of male microminipigs is known to be 4.5 months of age according to the development ofspermatogenesis and accessory glands. However, the development of Leydig cells has not been investigated. [Aim]To
clarify the histological development of Leydig cells in microminipigs. [Materials and Methods]Testes of 28
microminipigs from 0 to 12 months of age were used for histological examinations. Sections were stained with HE, PAS,and Schmorl method, and were also stained immunohistochemically with antibodies against steroidogenic enzymes. In
addition, histomorphometry was performed. [Results]Leydig cells at 0 day of age appeared to be similar all over thetestis. After 1.5 months of age, two types of Leydig cells were recognized: the large cells with abundant eosinophilic
cytoplasm, and the small cells with scant cytoplasm, both positive for P450scc and aromatase. Various sizes of
eosinophilic granules within the large cells first appeared at 4.5 months of age. The area occupied by Leydig cells in
the transverse sections of the testis was approximately 20% at 1.5 and 3 months of age, and then increased toapproximately 35% at 4.5 months of age and thereafter. [Conclusion] It was suggested that Leydig cells in
microminipigs matured at 4.5 months of age, which supported the previous report describing the sexual maturity of
male microminipigs.

P-68 ＊Classification of spermatogenesis cycle for evaluation of testicular toxicity in Göttingen
Minipigs○ Naoaki Yamada，Yumi Wako，Hiroko Kokoshima，Takuya Doi，Takeshi Kanno，Minoru Tsuchitani
LSI Medience Corporation, Nonclinical Research Center, Pathology Department
The spermatogenesis cycle of Göttingen Minipigs TM(GMPs) had been classified considering the relationship between
Sertoli cells and spermatids (Jorgensen et al., 1998). Thus, we classified the spermatogenesis cycle of GMPs referringto that of dogs and evaluated testicular toxicity of doxorubicin (DOX) to evaluate the validity of the method.
[Materials and methods] Six GMPs from 9 to 10 months of age were administered 0.5 mg/kg of DOX intravenously on
Day 1 and 8. Animals were necropsied on Day 15, 43 and 64 (2 animals each). The testes were fixed in Bouin's
solution. HE- and PAS-stained specimens were prepared by the standard method and observed microscopically.
[Results] The spermatogenesis cycle of GMPs could be classified into VIII stages similar to that of dogs.  Multiple stages
were present in a seminiferous tubule. On Day 15, spermatocytes were decreased or depleted at all stages. On Day 43,
spermatogonia, spermatocytes, and spermatids were sporadically observed without elongated spermatids. Many Sertoli[Discussion] The testicular toxicity of DOX could be evaluated by the VIII stage classification of the spermatogenesis
cycle in GMPs. It was judged that the spermatogenesis cycle based on that of dogs is useful to compare testicular
toxicity with other species.

213

Poster Presentation

tubules were observed. On Day 64, mostly seminiferous tubules were Sertoli tubules, but a few of them recovered tonormal. The results of diachronic changes showed that DOX mainly affected the spermatogonia.

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Poster Presentation

P-69
Granulomatous meningitis in a beagle dog showing neurological signs by compound
administration○ Hikaru Mitori1），Naoto Horai2），Satoru Kajikawa1），Mihoko Ono1）
Drug Safety Research Labs., Astellas Pharma Inc.，
Drug Safety Research Labs., Shin Nippon Biomedical Laboratories Ltd.

1）
2）[Aim] Neurological signs such as stereotypy and writhing were observed in a dog treated with a compound over 30
mg/kg, but not in the other dog in the preliminary telemetry study. Therefore, further investigations including MRI andhistopathological examination were conducted to examine underlying diseases. [Materials and Methods] A male beagle
dog (35 months old) showing neurological signs was subjected to MRI examination of the brain, body weight,
ophthalmology, hematology and blood chemistry. After euthanization, gross pathology and histopathologic examination
were conducted. Immunostaining (Iba-1) was also performed in the brain. [Results] In MRI examination, a high signal
area was seen in the right frontal lobe of the cerebrum in the T1 and T2 weighted images. In histopathologicalexamination, dilation of the sulcus was observed consistent with the lesion of MRI examination. In addition, multifocal
meningitis and perivascular infiltration of inflammatory cells in white matter with Iba-1 positive epithelioid cells wereobserved in the cerebrum, cerebellum and pons, and were diagnosed as granulomatous meningitis. There were noabnormalities in the other examinations. [Conclusion] Neurological signs were not recognized in the other toxic studies.
It is suggested that those lesions have potential to aggravate drug-induced neurological signs.

P-70 ＊
A spontaneous intrathoracic carcinosarcoma in a Sprague-Dawley rat : a case report○ Kei Kijima，Miki Suehiro，Shino Ito，Aisuke Nii
Central Research Lab., Seikagaku Co.
Carcinosarcomas are rare malignant tumors in animals and humans. They are composed of malignant epithelial andnonepithelial elements, and the latter sometimes includes bone and cartilage. We here report a case of spontaneous
intrathoracic carcinosarcoma in a rat.
A 21-week-old male Sprague-Dawley rat, kept as a monitoring animal, was found dead. At necropsy, many white masses
were found at the surfaces of the lung and heart. Histopathologically, these masses surrounded the thymus without acontinuity with the organ, while they showed a continuity with the lung. In the masses, tumor cells formed nodules
which were surrounded by poor stromata. There were two distinct types of tumor cells; one is characterized byepithelial (carcinomatous) nature and another is nonepithelial (sarcomatous) one. The carcinomatous cells had large
nucleus and weak eosinophilic cytoplasm, and were positive for Cytokeratin AE1/AE3. The sarcomatous cells had smalland enriched cytoplasm, and were positive for Vimentin. There were no tumor cells which were double positive for

Poster Presentation

both antigens. In addition, these cells were negative for SMA, S-100, mesothelin and podoplanin. Moreover, cartilage
and bone components were formed in many nodules.
Malignant mesothelioma, lung cancer, chondrosarcoma and osteosarcoma were included in the differential diagnosis
list in this case. Since this case was characterized by an admixture of malignant epithelial and nonepithelial elements, it
was diagnosed as  carcinosarcoma.

214

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-71 ＊
A spontaneous tubular adenocarcinoma (well differentiated type) in the jejunum of
young SD rat○ Yoshiji Asaoka，Koichi Masuno，Kae Fujisawa，Yutaka Tonomura，Minako Tajiri，Yuki Kato，
Emi Kashiwagi，Noriko Tsuchiya，Mikinori Torii，Motonobu Ueno
Research Laboratory for Development, Shionogi & Co, Ltd
Spontaneous tumors of the rat small intestine are very rare. We report an 8 week-old male Crl:CD(SD) rat had aspontaneous adenocarcinoma in the jejunum.
This animal was assigned the middle dose group in the 4-week repeated oral dosing toxicity study, and was euthanized
after administrations for 16 days because of an abrupt decrease in the body weight. The necropsy findings were as
follows; dilations of stomach, duodenum and jejunum, invagination of jejunum, dark red contents in the large intestineand the large and small nodules on the mucosa of invaginate jejunum. These changes were judged to be spontaneous
because other animals including high dose group had no compound-related lesion in the gastrointestinal tract.
Histopathologically, the mucosal epithelia were proliferated with mostly tubular growth pattern in the mucosal regionof nodules; and these proliferation lesions included goblet cells, Paneth granular cells and basal granule cells.
Abundant intra- and extra-cellular mucus occupied less than approximately half of nodule area were also observed. In
the submucosal region of nodules, the atypical cells were proliferated with irregular tubule-like structure and deficient
basal membrane, and these lesions were accompanied w ith desmoplasia and inflammat ion. Based on thehistopathological features, we diagnosed tubular adenocarcinoma (well differentiated type) in the jejunum. This
spontaneous tumor in a young rat has not still been reported, and is extremely rare.

P-72
Cecal hamartoma in the dog with cecocolic intussusception○ Mihoko Ono，Miwa Takahashi，Yutaka Nakahara，Kenjiro Tsubota，Masahiro Matsumoto
Drug Safety Research Labs., Astellas Pharma Inc.
[Background] Cecocolic intussusception, which is defined as an invagination of the cecum into the lumen of the colon,
is rare and information of the cause is scarce. Here, we report a case of cecocolic intussusception induced byhamartoma in the dog. [Materials and Methods] The animal was a 12-month-old female beagle dog in the treatmentgroup in a 4-week toxicity study. This animal showed no abnormalities in clinical signs, body weight, foodconsumption, hematology, or blood chemistry other than treatment-related findings. At necropsy, whole cecum wasinverted into the colon. The mucosa of the apex was dark red. The cecum was examined histopathologically.
Immunohistochemistry was performed with alpha-SMA, neurofilament, CD34, and Ki-67. [Results] Ulcer was observedat the mucosa of the apex. In the serosa, a tissue, which was composed of disorganized nerve fibers, smooth muscle,
various sized blood vessels, and scattered ganglion cells, was proliferated along the serosa without a capsule. Thistissue partially invaded into the muscle. There was no change in the serosa of the ileum or colon. [Conclusion] The
myelinated nerve fibers, abnormal ganglion cells and hemangiomatous vessels is specifically diagnosed asneuromuscular and vascular hamartoma (NMVH). This is a rare case in the dog with cecocolic intussusception causedby hamartoma with the features of NMVH.

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proliferative tissue was diagnosed as hamartoma. In clinic, hamartoma with features such as smooth muscle, non-The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

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P-73
A case of acute hemorrhagic gastritis with necrotic arteritis in mini pig○ Hiro Eda，Hirotoshi Akane，Atsuko Ichikawa，Shigekazu Shimizu，Hiroyuki Komatsu，Yasuki Akie
CMIC Pharma Science Co., Ltd.
[Aim] Necrotic vasculitis of domestic animals has been reported in cattle, horses and pigs. We report a case of acutehemorrhagic gastritis with necrotic arteritis in mini pig. [Materials and Methods] This case is an 11-month-old malecrown mini pig which suffered a sudden death with a decrease in food intake from one week before. HE and PTAH
staining specimens were prepared according to a conventional method, and histopathological examination was
performed. [Result and discussion] Necropsy revealed marked hemorrhage and necrosis in the pylorus and body of thestomach, dark red color of the mesentery and the pyloric lymph node, bloody pericardial effusion, petechia in the heart
and liver, liver enlargement and multiple infarction, and enlargement and dark red of the kidney, In histopathologicalexamination, hemorrhagic necrosis in the gastric mucosa, fibrinoid necrosis and thrombus in arterioles and arteriolae
in the stomach were observed. Similar vascular lesions occurred in the heart, liver, intestine, pancreas, lymph nodes,
adrenal gland, kidney and bladder. In addition, hepatic and myocardial infarction, renal tubular necrosis, glomerular
microthrombosis and focal necrosis were seen. Acute hemorrhagic gastritis is known to develop due to infection, stressetc. The gastric mucosal hemorrhage and necrosis in this case was thought to be due to fibrinoid necrosis andthrombus formation in the artery in the stomach.

P-74
Method for Sequential Cerebrospinal Fluid Collection from Diurnal Microminipigs○ Hiroaki Kawaguchi1），Masaharu Abe1），Miharu Ushikai1），Sayumi Oi2），Airo Yukawa2），
Tetsuya Yoshikawa 2），Hiroyuki Izumi2），Akihide Tanimoto1），Masahisa Horiuchi1）
Kagoshima University，2）Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.

1）

Background: The number of studies using minipigs, which share many physiological and anatomical similarities withhumans, including diurnality, has increased in recent years; however, there are few reports on porcine cerebrospinal

fluid (CSF) collection methods.

Aim: To develop a method for sequentially collecting CSF from unanesthetized Microminipigs (mMPs).

Materials and methods: We used two adult female mMPs. A catheter was placed percutaneously into the subarachnoid
space of an anesthetized animal by first inserting a spinal needle into the lumbosacral space. After confirming theoutflow of CSF, a guide wire was inserted and used to place the tip of the catheter into the cisterna magna.

Results & Discussion: After catheter placement, a period of one week or more was necessary to ameliorate the effect of
RBCs on CSF. The CSF sample was collected sequentially from unanesthetized animals, and high melatonin levels in the

Poster Presentation

CSF were noted during lights-off time. This technique is easy and requires less-skilled operators compared to otherexisting methods involving a surgical approach. Moreover, being less invasive, it potentially leads to fewer
complications.

Conclusions: This method of sequential CSF collection from the cisterna magna from unanesthetized mMPs willcontribute to CSF research, brain science, and toxicological testing.

216

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-75 ＊
Segmental aplasia of uterine horn in two RccHan:WIST rats
○ Yukako Shimotsuma，Shuji Takeda，Keiko Ogata，Masahiko Kushida
Environmental Health Science Laboratory, Sumitomo Chemical Co., Ltd.
[Background] Aplasia of uterine horn caused by developmental defects was reported in several species but very rare in
RccHan:WIST rats. We encountered two cases of spontaneous segmental aplasia of the right uterine horn in
RccHan:WIST rats, and their detailed characteristics were evaluated.
[Case] RccHan:WIST rats were supplied from the same production site, but the rats with aplasia were of different lots.
The age of those two rats were 9 and 14 weeks at necropsy, and no clinical signs were observed. At necropsy, a cyst
with clear and transparent fluid was observed in the right uterine horn close to the oviduct. Normal uterine horn wasn't
observed on the right side, and remaining tissue consisted of a fibrous band connected to the cervix. Histologically, thecyst was lined by simple cuboidal epithelium looks like uterine endometrium, and endometrium was thin, but uterine
glands were not observed. The fibrous band was consisted of α-SMA positive smooth muscles, connective tissue andblood vessels, but no Cytokeratin AE1/AE3 positive epithelium and uterine endometrium were observed.
[Conclusion] The cysts might be due to accumulation of secretory fluid by disruption of canalization in the rudimentary
tissue. Segmental aplasia of uterine horn, which might be caused by partial nondevelopment of the Mullerian ducts isreported in several species such as cattle, cat and human, but this should be the first described case of segmental
aplasia of uterine horn in RccHan:WIST rats.

P-76 ＊
Histopathological Investigation of Mammary Tumor in a Young Male SD Rat○ Shota Yoshida，Hideki Tanaka，Fumiko Ninomiya，Kenji Matsubara，Hiromi Yamamoto，Satoshi Suzuki，Fumio Morita，Kazuo Hakoi
Discovery and Preclinical Research Division, Taiho Pharmaceutical Co., Ltd.
<Background> Spontaneous mammary tumors are commonly known in aging female rats. There are only a few reportsof mammary tumors in young female rats, however no reports of them in young male rats as far as we searched. In thepresent report, we histopathologically investigated a spontaneous mammary tumor found in a young male SD rat.
<Materials and Methods> Inguinal skin and mammary tissue were obtained from a vehicle control 7-week-old male
Crl:CD(SD) rat of a toxicity study. The tissues were fixed in 10% neutral-buffered formalin, embedded in paraffin,
sectioned and stained with hematoxylin-eosin. A mass (approximately 8.5 × 6.0 mm) was observed in the section regardlessof no macroscopic findings. Then, special stain and immunohistochemistry were also performed to the sections.
<Results> The most part of the mass was histopathologically composed of multicentric nodules divided by collagen. The
border between the mass and normal tissue was unclear, and there were non-proliferative mammary acini within the
myoepithelial cells. In the central area of the mass, neoplastic cells formed papillary and ductal structures, and showed
nuclear atypia including multilayered proliferation and mitoses. We will report the details including the results ofspecial stain and immunohistochemistry and the diagnosis.

217

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mass. Those nodules consisted of neoplastic cells arranged in glandular and pseudoglandular structures with

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P-77 ＊
Cutaneous hemangiosarcoma with pulmonary metastasis in a young adult Wistar rat○ Shino Suzuki，Rie Takagi，Kazuya Hirai，Junya Hirata，Yukiko Takeuchi-Kashimoto，
Mie Watanabe-Akanuma
Kureha Corporation, Safety Research Center[Aim] Hemangiosarcoma is uncommon in rats and especially rare in young ones. There is no report of cutaneous
hemangiosarcoma in rats. This report describes the case with pulmonary metastasis in 14-week-old male Wistar rat.
[Case] A mass, 10 mm in diameter, was observed on the back skin of a 14-week-old male Wistar rat,   kept as a
microbiological monitoring animal. The rat showed decreased locomotor activity and hemorrhages from the mass, andhence was euthanized and necropsied. In addition to the skin mass, dark red masses, 5-15 mm in diameter, scatteredthroughout the lungs. Microscopic examination of hematoxylin and eosin stained sections from the masses revealed
that proliferated spindle-shaped cells formed blood vessel-like structures of various sizes filled with erythrocytes. The
cells were immunohistochemically positive for von Willebrand factor and CD34, and showed high Ki-67 labeling index.
[Discussion] The lesions were identified as malignant tumors derived from the vascular endothelial cells from theirmorphological and immunohistochemical features; therefore it was diagnosed as hemangiosarcoma and categorized asa cutaneous primary tumor. Cutaneous hemangiosarcoma is rare even in human, and frequently accompanied bypulmonary metastases with poor prognosis. With reference to an earlier report of Ki-67 and programmed death-ligand
1 (PD-L1) expressions being useful as prognostic markers, we have examined these expressions in the present case as
well.

P-78
Dedifferentiated liposarcoma of retroperitoneum spontaneously occurred in aged SD
rat.
○ Tomoharu Naito1,2），Tsuyoshi Saito2），Tamami Higuchi1），Akira Inomata1），Takuo Hayashi2），
Atsuko Yamauchi 1），Sayaka Kemmochi1），Chihaya Kakinuma1,2），Takashi Yao2）
FujiFilm Co.，2）Dept Human Pathology, School of Medicine, Juntendo Univ

1）

[Background] Spontaneous liposarcoma is very rare in rats and that with distant metastasis has not yet reported. We
report here highly metastatic dedifferentiated liposarcoma occurred in a Sprague-Dawley (SD) male rat in a long-term
study.
[Materials and Methods] The rat was euthanized at 104 weeks of age as it became moribund accompanied byabdominal distension. At necropsy, collected tissues were fixed in formalin for microscopic examination. The tissue
sections were stained with HE, Oil-red-o stain and immunohistochemically with several antibodies. Small pieces offormalin-fixed tumor were also processed for electron microscopic examination.
[Results] At necropsy, there was tumor dissemination with a large amount of fatty-like tissue and bloody ascites inPoster Presentation

abdominal cavity. A white nodule in the right kidney, and pale discolored liver were also noted. Microscopically, thetumor tissue showed pleomorphic features consisting of lipogenic cells, spindle cells, and lipoblasts. There were bloodborne metastases in the stomach, lung and liver. The fine cytoplasmic vacuoles of lipogenic cells and spindle cells in
submucosal and around matured lipocytes in the stomach were positive for oil-red-o stain. These tumor cells werepositive for S100. Based on these, we diagnosed dedifferentiated liposarcoma mixed with well-differentiatedcomponent.
[Conclusion] This is the first report of a spontaneous dedifferentiated liposarcoma with metastatic tumor disseminationin an aged SD rat.

218

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-79
Subcutaneous tumor in a NOG mouse○ Hirotoshi Akane，Hiro Eda，Atsuko Ichikawa，Shigekazu Shimizu，Hiroyuki Komatsu，Yasuki Akie
CMIC Pharma Science Co., Ltd.
[Purpose] The incidence of spontaneous tumors has been rarely reported in the NOG (NOD/Shi-scid, IL-2RγKO Jic)
mice, which are severely immunocompromised, and commonly used in toxicity studies of biological products forregenerative medicine. In this case report, we pathologically investigated the details of spontaneous femoral
subcutaneous tumors which were found in an untreated male NOG mouse.
[Method] A NOG mouse at 32 weeks of age was necropsied. Histopathological examination was performed for a
subcutaneous mass of the mouse, after fixation with formalin, HE staining and immunohistochemical staining.
[Results and Discussion] At necropsy, a gray-white mass (about 5.5 cm in diameter) was observed in the femoral
subcutaneous region. No abnormalities were found in any other organs. Histopathological examination revealed solidly
proliferated neoplastic cells with prominent nuclear atypia and relatively poor cytoplasm and sporadic cells with large
pale nucleus. Cells with mitosis were frequently observed. Necrosis was observed in the center of mass. Osseous
metaplasia was observed partially.

P-80
Hydropic degeneration with hyaline droplet of the acinar cell in the sublingual gland in abeagle dog○ Takafumi Oshikata，Mikio Mitsuishi，Masao Hamamura
LSI Medience Corporation<Introduction>We report the hydropic degeneration with hyaline droplets in the sublingual gland of a beagle dog.
<Case>A male beagle dog used as a control in a 2-week repeated-dose dermal toxicity study was subjected to necropsy
at the age of 7 months. There were no macroscopic abnormalities in any organs including the sublingual gland. The
sublingual gland was fixed with 10% neutral buffered formalin solution, embedded in paraffin, and stained with HE,
PAS, and Azan. Electron microscopic examination (EM) was also performed.
<Results>HE staining revealed pale eosinophilic vacuoles (PEV) and eosinophilic granules (EG) in serous acinar cells inthe sublingual gland and hyaline droplets (HD) in many of the PEV. The EG and HD stained negative by PAS staining
and red by Azan staining, and were ultrastructurally electron dense granules (EDG) and aggregates of the EDG in rER,
respectively. PEV stained negative by PAS staining and contained particulates (PC), which also stained red by Azan
the PC.
<Conclusion>According to the morphological features described above, we diagnosed hydropic degeneration withhyaline droplet of the acinar cell in the sublingual gland of a beagle dog. HD, EG, and PC noted in this case were likely
to be aggregates of synthetized protein in rER.

219

Poster Presentation

staining, as well as HD. EM revealed vacuoles as dilated rER which contained sparsely-distributed EDG corresponding toThe 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-81
Exocrine pancreatic injury induced by Caerulein in rats
○ Hideki Tanaka，Shota Yoshida，Fumiko Ninomiya，Mitsuhiro Fujieda，Norifumi Matsushita，Kenji Matsubara，Hiromi Yamamoto，Satoshi Suzuki，Fumio Morita，Kazuo Hakoi
Discovery and Preclinical Research Division, Taiho Pharmaceutical Co., Ltd.
[Aim] Opportunities for encountering drug-induced exocrine pancreatic injury are rare. In addition, its pathogenesis
and relationship with deviation enzymes in blood are not fully clarified. In the present study, a cholecystokinin analog:
caerulein which was reported to induce an exocrine disorder in pancreas was administrated to rats for confirming thehistopathological characteristics in initial phase and relationship between morphological changes and the deviation
enzymes.
[Materials and Methods] Caerulein at dose levels of 0 (saline), 10 and 50 ug/kg was administered interperitoneally to
6-week-old female Crl:CD(SD) rats in a single-dose. Blood samples were collected to perform hematological test,
coagulation test and blood chemistry including amylase and lipase 4 and 24 hours after dosing. Rats were sacrificed
immediately to take their organs for histopathological examination.
[Results] In the 50 ug/kg group, high values of amylase and lipase in the blood chemistry, pancreatic edema, vacuolar
degeneration/single cell necrosis of pancreatic acinar cells were noted 4 hours after dosing. On the other hand,alterations of pancreatic parameters and macroscopic findings were not observed 24 hour after dosing. We will report
the details including the results of the immunohistochemical and electron microscopic analysis which are in progressnow.

P-82 ＊
Vehicle exhaust particulates accumulate in lysosomes and are lysed by lysozyme○ Nodoka Koga，Akira Onodera，Katsutoshi Yayama，Akira Yokoyama，Rei Imamura，
Chiaki Tanigawa，Tomoki Ohmoto，Masaki Inoue，Shinichi Tsunoda，Yuichi Kawai
Fac. Pharmaceut. Sci., Kobegakuin Univ.
[Background] To elucidate the biological effects of atmospheric particulates, we examined the inflammation andtoxicity caused by vehicle exhaust particulates (VEPs). Skin inflammation animal model and cellular toxicity analyses
have not produced conclusive evidence of the effect of VEPs. Analyzing cell cultures have confirmed the accumulationof VEPs in lysosomes, and the severity of VEP-associated toxicity is thought to be related to lysosomal resolvability.
Here, we examined in vivo VEP kinetics and whether VEPs were lysed by lysozymes.

[Materials and Methods] We analyzed human nasal epithelial cells (HNEpCs) in vitro and 7-week-old C57BL/6 mice invivo. VEPs were used as standard environmental materials, as classified by the National Institute for Environmental
Studies. Egg-white lysozyme was used and the resolvability of VEPs was evaluated by macroscopic observation and flow
cytometry. In vivo kinetics of VEPs was observed using a transmission electron microscope.

Poster Presentation[Results] Lysosomes contain acidic solution of approximately pH 5 and many lytic enzymes, and they contribute to themaintenance of intracellular homeostasis by lysing intracellular and extracellular components. Following the treatmentof HNEpCs with VEPs for 24 h, VEPs were shown to accumulate in lysosomes. Five days later, no VEPs were present in
the culture. The treatment of VEPs with lysozymes transformed the black VEP suspension to a transparent liquid,
indicating lysis of VEPs.

220

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-83 ＊
Effect of vehicle exhaust particulates on the immune response in nasopharyngealassociated lymphoreticular tissues○ Akira Yokoyama，Akira Onodera，Katsutoshi Yayama，Rei Imamura，Chiaki Tanigawa，
Tomoki Ohmoto，Masaki Inoue，Shinichi Tsunoda，Yuichi Kawai
Fac. Pharmaceut. Sci., Kobegakuin Univ.
[Background] Atmospheric particulates are believed to cause asthma and bronchitis in association with nasal immune
mechanisms; however, this phenomenon is still unclear. A nasopharyngeal-associated lymphoreticular tissue (NALT) in
rodents play an important role in nasal immunity. Atmospheric particulates are believed to evoke immune response inthese lymphoid tissues. This study examined the localization of atmospheric particulates and production of antibodies
in NALT.
[Materials and Methods] We used 8-week-old NC/Nga male mice (n = 4) and vehicle exhaust particulates (VEPs), a
standard environmental material as classified by the National Institute for Environmental Studies, as atmosphericparticulates. NALT samples cultured for 24 h after its isolation were analyzed to determine the levels of IgA, IgG, IgE,
and IgM using ELISA.
[Results] NALT was treated with VEPs for 24 or 48 h and the culture supernatant (CS) was collected. IgA level was 50
ng/mL in both the untreated and VEP-treated CS. IgG level was 450 ng/mL in the untreated CS, whereas it was 300 ng/
mL in the VEP-treated CS. IgE was not detected in untreated or VEP-treated CS. IgM level was 30 ng/mL in both the
VEP-treated and untreated CS. These results demonstrated that VEPs do not induce the activation of humoral immunity
in NALTs. It is assumed that the establishment of humoral immunity in NALT is not associated with VEP stimulation.

P-84 ＊
Urban aerosols suppress proliferation of nasal epithelial cells○ Chiaki Tanigawa，Akira Onodera，Katsutoshi Yayama，Akira Yokoyama，Rei Imamura，
Tomoki Ohmoto，Nodoka Koga，Masaki Inoue，Shinichi Tsunoda，Yuichi Kawai
Fac. Pharmaceut. Sci., Kobegakuin Univ.
[Background] Atmospheric particulates are believed to cause respiratory diseases such as asthma and nasal allergies. In
addition, onset of these diseases suggests that eosinophilic inflammation begin with epithelial cell damage byatmospheric particulates; however, the mechanism remains to be clarified. This study examined the effects of urban
aerosols (UA), which was collected in Beijing City, China, on epithelial cells and the relationship between UAs andinflammation.
[Materials and Methods] Primary human nasal epithelial cells were used to study the relationship between UAs andinflammation. UAs were used as standard environmental materials, as classified by the National Institute forEnvironmental Studies. HNEpCs were treated with 7.4-200 µg/mL of UAs, and the number of dead cells and total cells
was measured using the CytoTox-Glo cytotoxicity assay after 24 and 48 h. Cellular uptake of UAs was observed by[Results] An increase in cell death was not observed regardless of treatment time or UA concentration, and cellproliferation rate was found to decrease with increase in UA concentration. At a UA concentration of 200 µg/mL,
HNEpCs completely arrested a cell proliferation. Intracellular accumulation of UA was observed both at 24 and 48 h.
These results suggested that UA can arrest cell proliferation, but has a low cytotoxicity.

221

Poster Presentation

confocal microscopy.

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-85 ＊
Effect of gender on upper airway immunity to vehicle exhaust particulates in aged mice
○ Rei Imamura，Akira Onodera，Katsutoshi Yayama，Akira Yokoyama，Nodoka Koga，
Chiaki Tanigawa，Tomoki Ohmoto，Masaki Inoue，Shinichi Tsunoda，Yuichi Kawai
Fac. Pharmaceut. Sci., Kobegakuin Univ.
[Background] Atmospheric particulates localize in both the upper and lower airways. Smaller atmospheric particulates
can reach deep parts of the lower airway that may induce development or aggravation of nasal allergies and asthma.
There is predominant concern regarding these effects in children, but there is a similar risk in adults. This study
examined the effects of vehicle exhaust particulates (VEPs) on acquired immunity in an aged mouse, including genderspecific effects on developing symptoms due to atmospheric particulates. In addition, we demonstrated the effect of
VEPs on nasopharyngeal-associated lymphoreticular tissue (NALT) in adult mice.
[Materials and Methods] NALT samples from 20-week-old male and female C57BL/6 mice were treated with VEPs. After
five days, culture supernatants were collected, and the levels of IgA, IgG, IgE, and IgM were measured using ELISA.
[Results] Gender differences in normal immunoglobulin production were observed for IgM, with males producing 1.5
times more IgM than females. In males, VEP-induced production of IgA, IgG, and IgM decreased 20%-30% and IgE
increased 1.7 times compared with the control. In females, VEP induced no change in IgE or IgM levels; however, IgA
and IgG levels increased 1.4 and 1.2 times compared with the control, respectively. These results indicated that VEPs
induce humoral immunity in mature lymphoid tissue in a gender-specific manner.

P-86 ＊
Effects of nasal epithelial cells treated with vehicle exhaust particulates on lymphocyte
composition in vitro○ Tomoki Ohmoto，Akira Onodera，Katsutoshi Yayama，Rei Imamura，Chiaki Tanigawa，
Nodoka Koga，Masaki Inoue，Shinichi Tsunoda，Yuichi Kawai
Fac. Pharmaceut. Sci., Kobegakuin Univ.
[Background] Different types of cytokines, including interleukin (IL)-33, are thought to be involved in the developmentof IgE-independent innate-type allergy. Atmospheric particulates are believed to induce the onset or aggravate nasal
allergies by inducing cytokine production in nasal epithelial cells (NEpCs) as an immune response. To elucidate therelationship among atmospheric particulates, NEpCs, and immune response, we examined the effect of factors secretedby the atmospheric particulate-treated NEpCs on lymphocyte composition.
[Materials and Methods] We used human NEpCs (HNEpCs) and 7-week-old C57BL/6 mice. Vehicle exhaust particulates(VEPs) were used as standard environmental materials, as classified by the National Institute for Environmental
Studies. HNEpCs were treated with VEPs for 48 h, and the culture supernatants were collected (conditioned medium,

Poster Presentation

CM). Subsequently, lymphocytes isolated from mouse spleen were treated with the CM for 24 h, and lymphocyte
subsets were detected using fluorescent monoclonal antibodies and flow cytometry.
[Results] We demonstrated the effects of VEP-treated HNEpC-secreted factors on lymphocyte differentiation or

maturation in vitro . With respect to the lymphocyte composition, no increase was observed in the population of B cells,
T cells, or natural killer cells.

222

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-87 ＊
Structural optimization of TNFR1 antagonist by single-chain modification○ Natsuki Osaki1），Masaki Inoue1,2），Masahiro Kunishige1），Midori Miki1），Akira Onodera1），
Yuichi Kawai1），Haruhiko Kamada2,3），Yasuo Tsutsumi3），Shin-ichi Tsunoda1,2）
Fac. Pharm. Sci., Kobe Gakuin Univ.，2）NIBIOHN，3）Grad. Sch. Pharm. Sci., Osaka Univ.

1）[Background and Aim]

The signaling mediated by type 1 TNF receptor (TNFR1), but not type 2 TNF receptor (TNFR2), is involved in thepathogenesis of autoimmune diseases. Signaling of TNFR2 presumably contribute to the suppression of these disorders.
We previously generated a TNFR1 selective antagonistic TNF mutant protein (R1antTNF) that specifically inhibits
TNFR1 signaling as a novel modality TNF-regulating drug. However, R1antTNF cannot be used therapeutically because
it displays poor stability in vivo. Here, we generated a single-chain variant of R1antTNF (scR1antTNF) fused as a homo
trimeric structure of R1antTNF using peptide linkers.
[Materials and Methods]

The sequence of scR1antTNF was designed to comprise three R1antTNF monomers fused by two peptide linkers.
scR1antTNF protein was expressed in mammalian cells.  In vitro assays were performed to confirm (i) affinity for the
TNF receptors (ii) TNF inhibitory activity and (iii) thermal stability.
[Results and Conclusion]

scR1antTNF retained TNFR1 selective binding activity and antagonist activity, while displaying improved thermal
stability by comparison to R1antTNF. We suppose the fusion by peptide linkers does not interfere with the binding to
TNFR1, but enhances interaction between each monomer in scR1antTNF. Thus, structural optimization of R1antTNF by
single-chain modification is useful for improving TNFR1 antagonist.

P-88 ＊
Structural optimization of TNFR1 antagonist using site-specific PEGylation○ Masahiro Kunishige1），Masaki Inoue1,2），Natsuki Osaki1），Midori Miki1），Akira Onodera1），
Yuichi Kawai1），Haruhiko Kamada2,3），Yasuo Tsutsumi3），Shin-ichi Tsunoda1,2）
Fac. Pharm. Sci., Kobe Gakuin Univ.，2）NIBIOHN，3）Grad. Sch. Pharm. Sci., Osaka Univ.

1）[Background and Aim]

We previously developed a TNF mutant protein (R1antTNF) with TNFR1 selective antagonistic activity as a novel
therapeutic modality. Although R1antTNF has been shown to be useful in rheumatoid arthritis model mice, its half-lifein blood is much shorter than antibody drugs. In order to extend the half-life of R1antTNF, we aimed to generate asingle-chain variant of R1antTNF (scR1antTNF) and to modify scR1antTNF with polyethylene glycol (PEGylation). Here,
we report on the characterization of PEGylated scR1antTNF.
[Materials and Methods]

To identify effective PEGylation conditions, scR1antTNF was reacted with NHS-activated PEG at various temperatures,and the molecular weight of the reaction product determined by size-exclusion chromatography. A 40-kDa branchedpharmacokinetics when administered to mice.
[Results and Conclusion]

scR1antTNF has only one N-terminus, whereas R1antTNF, which adopts a trimeric structure, possesses three N-termini.
Therefore, the scR1antTNF protein enables facile modification to generate a uniformly PEGylated product. Bioassays
demonstrated PEG-scR1antTNF retained antagonistic activity. Furthermore, the half-life of PEG-scR1antTNF in blood
was significantly prolonged.  Therefore, site-specific PEGylation of scR1antTNF was useful for structural optimization.

223

Poster Presentation

PEG-scR1antTNF was evaluated by measuring (i) antagonistic activity using a TNF-inhibition assay and (ii)The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-89 ＊
Function of TNFR2 signaling as a regulatory T cell regulator○ Midori Miki1），Masaki Inoue1,2），Natsuki Osaki1），Masahiro Kunishige1），Akira Onodera1），
Yuichi Kawai1），Daisuke Ando2,3），Haruhiko Kamada2,3），Yasuo Tsutsumi3），Shin-ichi Tsunoda1,2）
Fac. Pharm. Sci., Kobe Gakuin Univ.，2）NIBIOHN，3）Grad. Sch. Pharm. Sci., Osaka Univ.

1）[Background and Aim]

Regulatory T cells (Treg) are a sub-population of CD4 positive T lymphocytes with immunosuppressive functions that
regulate the host immune response. For example, Treg enhances its activity in the microenvironment of a tumor, andinduces the cancer immune escape state. We aim to identify molecules that specifically regulate Treg function as novel
targets for the treatment of cancer. In this regard, we have confirmed the usefulness of type 2 TNF receptor (TNFR2).
Here, we report the function of TNFR2 signaling in ex vivo Treg.
[Materials and Methods]

Treg (CD4+CD25+ T cells) and Tconv (CD4+CD25- T cells) were prepared from mouse lymph tissue. The expression
level of cytokine receptors on Treg and Tconv was checked using flow cytometry. To confirm the effect of TNFR2
signaling on Treg expansion and activation, the growth rate of Treg during TNFR2 stimulation was measured by a cellproliferation assay.

[Results and Conclusion]

Results of receptor profiling show TNFR2 was expressed at high levels on Treg, but at low levels on Tconv.
Furthermore, Treg was expanded significantly by the stimulation of TCR with TNFR2 compared to TCR solo stimulation.
Treg expansion appeared to depend on TNFR2 signaling. Therefore, we believe that TNFR2 signaling is functionallyinvolved in Treg and may be a useful target as a Treg regulator.

P-90
Difference in toxic response of an anti-desmoglein-3 ADCC antibody in mouse due totarget expression and physiological characteristics of organs○ Etsuko Fujii1,2），Kenji Taniguchi2），Atsuhiko Kato2），Masami Suzuki1,2）
Forerunner Pharma Research, Co., Ltd.，2）Research Division, Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.

1）

[Background] Desmoglein-3 (DSG3) is a promising target for cytotoxic antibody therapy in squamous cell carcinoma of
various organs. But it is expressed in several normal squamous epithelial tissues, which may cause toxicity. [Aim] To
accurately evaluate the toxic potential of cytotoxic antibody therapy targeting DSG3 by combining tissue target
distribution and toxicity study data in mouse. [Materials and methods] The vagina, skin, tongue, and other organs of
BALB/cAnNCrlCrlj were examined immunohistochemically for DSG3 expression. Additionally, mice were administeredan anti-DSG3 antibody at doses of 0, 10, and 50 mg/kg, once weekly for 3 weeks and examined pathologically. The
same procedures were performed for ovariectomized (OVX) mice. [Results] DSG3 was expressed in the squamous
epithelium of various tissues including the vagina with different expression patterns at each estrus cycle, and reduced
expression in OVX mice. With antibody administration, in spite of target expression in multiple organs, changes were

Poster Presentation

limited to the vagina, so the changes were judged to be related to changes in tissue structure during the estrus cycle.
The severity of the lesions was reduced in OVX mice. [Conclusion] It was possible to evaluate the toxic potential ofanti-DSG3 therapy by combining tissue distribution and toxicity study data in mice. Furthermore, it was thought thatorgans with physiological change in tissue structure and target expression require careful analysis.

224

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-91
The Role of the Toxicologic Pathologist in Drug Discovery and Development○ Norimitsu Shirai1），Lindsay Tomlinson2）
Pfizer Drug Safety R & D, Pathology, Groton, CT, USA，2）Pfizer Drug Safety R & D, Pathology, Cambridge, MA, USA1）

Aim: The drug discovery and development process encompasses target identification, synthesis of new chemical or
biological entities to interact with the target chosen, preclinical and clinical evaluations for efficacy and safety, andapproval and registration.   We will focus on the unique skill set of toxicologic pathologists, who have a strong
understanding of normal and abnormal tissue morphology, and various toxicity or disease processes.   We will also
discuss their roles in the biopharmaceutical industry in order to highlight career development opportunities andinstitutional benefits.   Conclusion: Toxicologic pathologists can contribute widely including, but not limited to thefollowing roles: engagement in target selection; evaluation of animal models, efficacy in animal models of humandisease, and tissue cross reactivity; interpretation of anatomic and clinical pathology data from toxicity studies;
pathology peer review; due diligence for licensing activities; design, management, and reporting of investigative andregulatory nonclinical studies; and representation of drug safety research and development (R&D) on multidisciplinary
drug development teams at all levels from early discovery through late stage development.   This poster outlines theperspectives of toxicologic pathologists and the benefit of their input in the development of therapies including
integrating findings in efficacy and toxicity studies and translating findings to clinical studies.

P-92
Responses to FDA SEND data -Part III○ Hirofumi Hatakeyama1），Shin-ichi Horikawa1），Junichi Sakurai1），Haruko Koizumi1），
Akihito Shimoi 1），Shin-ichi Sato1），Hijiri Iwata2），Takayuki Anzai3）
Ina Research Inc.，2）LunaPath LLC.，3）Showa University School of Medicine

1）

One year has passed since the commencement of mandatory electronic data review and application in the SEND format
to the FDA. The timing of transition from the current CDISC SEND Implementation Guide (SENDIG) Version 3.0 to
Version 3.1, that explains the method of converting / submitting SEND data sets, was decided. We compared changes
related to histopathological examinations as well as controlled terminology (CT) vs. INHAND between the new version,
SENDIG 3.1, and current SENDIG 3.0. In SENDIG 3.1, three new variables of FOCID (Focus of Study-Specific Interest),
MICHRON (Chronicity of Finding), MIDISTR (Distribution Pattern of Finding) were added to the MI domain, and it isnecessary to pay attention to the mapping of findings. In CT, there are now 486 words  representing the organ namefor "Specimen",  301  representing the neoplastic findings for "Neoplasm" , and 179  representing the non-neoplastic
findings for "Non-neoplastic", an approximately 1.3-fold increase in terms. Also, in order to properly complete thevariables of the MI domain. Therefore, smart creation of a pathology SEND data set, based on a sound understanding ofand latest information on the Study Data Technical Conformance Guide (TCG), is required.

225

Poster Presentation

SEND data set, it is important to match findings (summary table) finalized in the toxicity study with the STRESC

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-93
A consideration on pathology peer review and pathology phase report○ Hijiri Iwata1），Takayuki Anzai2），Yuji Oishi3）
LunaPath L.L.C.，2）Showa University School of Medicine，3）Osaka City University

1）

Background:   Standardization of the terms such as INHAND and SEND Controlled Terminology has been discussed.
However, it is meaningless unless the input finding is inappropriate. So, pathology peer review(PPR) is recommended
as a qualitative quality assurance. In addition, pathological phase reports are important as a raw data.  Methods:  Fromthe publication on the PPR such as the recommendation proposal of the STP Society (Union) and OECD guidance andsupplement and other literatures on the PPR, importance of the PPR and the pathology report in study were discussed.  
Conclusions:  1: When OECD guidance and the recommendation of the STP Society were compared, it seemed that the
PPR should be performed not only in the chronic and carcinogenic study but also in the other general GLP studies. 2: It
is important that the reviewer confirms whether the adversity by the test substance is recorded correctly as findings.
And agreement is recorded as a raw data. 3: It should also be noted there is no significant difference between thepathologists for the other findings. In the preliminary peer review, a record of individual finding changes was notnecessarily required. 4: The peer reviewer should confirm the agreed findings are reflected in the report as the final
finding. 5: The peer reviewer should confirm the adverse lesion by the test substance is adequately described in thepathology report. In addition, the pathology report should be archived as a raw data.

P-94
Immunohistochemical characterization of lung proliferative lesions in rats
intratracheally given MWCNT○ Yoshimitsu Sakamoto1），Motoki Hojo1），Tosinari Suzuki1），Akiko Inomata1），Akihiko Hirose2），
Dai Nakae 3）
Tokyo, Metropol. Inst. Pub. Health，2）Natl. Inst. Health Sci.，3）Tokyo Univ. Agricul

1）

Background:   As a part of the risk assessment of multi-wall carbon nanotube (MWCNT), the present study evaluatedimmunohistochemical characteristics of histologically different 2 types of proliferative lesions observed in the lung ofrats given MWCNT by the repeated intratracheal spray instillation. Methods:  Male Han:WIST rats, 10 weeks old, were
exposed to 12 quadweekly intratracheal instillations of MWCNT [MWNT-7; 2

μ m (L), 75 nm (D), Fe 0.344%],

suspended into a vehicle  consisting of sucrose and Tween 80, at doses of 0 (vehicle), 0.01, 0.05 and 0.25 mg/kg bodyweight, kept untreated for additional 52 weeks and then killed for the examination. Results and Discussion:   Twohistologically different types of proliferative lesions were induced in the lung of MWCNT-treated rats, both in a dosedependent manner.   One was a lesion consisting of mono- or multilayered squamous/polygonal cells lining along the

Poster Presentation

alveolar walls with scattered clusters of proliferating cells, which was positive for mesothelin, cytokeratin AE1/AE3
and GST-P, and with high PCNA-positive cell proliferating activity.   This lesion was diagnosed as an early stage
squamous metaplasia and suggested to be a preneoplastic lesion for squamous cell carcinoma.   The other was a
hyperplasia of type II alveolar cells with MNCNT-laden macrophages, which was negative for aforementioned proteins.  
This lesion was diagnosed as reactive hyperplasia.

226

Poster Presentation

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-95 ＊
Comparative Pulmonary toxicity of DWCNT and MWCNT-7 in Rats
○ Ahmed M. El-Gazzar1,2,7），Mohamed Abdelgied1,2,8），David B. Alexander1），William T. Alexander1），
Takamasa Numano 1），Masaaki Iigo1），Aya Naiki2），Hirotsugu Takase3），Akihiko Hirose4），
Yuhji Taquahashi 5），Jun Kannno6），Satoru Takahashi2），Ashraf Mohamed Nazem9），
Osama Saeid Elokle7），Hiroyuki Tsuda1）
Nanotoxicology Project, Nagoya City University, Nagoya, Japan.，
Dept Exp Pathology and Tumor Biology, Nagoya City University Grad School Med Sciences, Nagoya, Japan.，3）
Nagoya City University Graduate School Med Sciences, Nagoya, Japan.，
4）
Div Risk Assessment, NIH, Tokyo, Japan.，
5）
Div Cellular and Molecular Toxicology, NIH, Tokyo, Japan.，
6）
Japan Industrial Safety and Health Association, Japan Bioassay Research Center, Kanagawa, Japan.，7）
Dept Forensic Medicine and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, Alexandria University, Alexandria, Egypt.，8）
Dept Forensic Medicine and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, Beni Suef University, Beni Suef, Egypt.，9）
Dept Food Hygiene, Faculty of Veterinary Medicine, Alexandria University, Alexandria, Egypt.
1）
2）

The toxicity of double-walled carbon nanotubes (DWCNTs) is mostly uncharacterized. It is theorized that because
DWCNTs are less rigid than multi-walled carbon nanotubes (MWCNTs), DWCNTs may be less toxic than MWCNTs. In
the present study, we compared the pulmonary toxicity of DWCNT to MWCNT-7. Rats were divided into 6 groups:
untreated, vehicle, low dose DWCNT, high dose DWCNT, low dose MWCNT-7, and high dose MWCNT-7. The test
materials were administered by trans-tracheal intrapulmonary spraying (TIPS) every other day for 15 days: the lowdose and high dose groups were administered final total doses of 0.250 and 0.500 mg/rat, respectively, of the test
materials. The animals were sacrificed 1 and 6 weeks after the final TIPS administration. Bronchioalveolar lavage(BALF), pleural cavity lavage (PL), and lung tissue were collected to assess pulmonary damage. The results showed thatDWCNT exposure has no significant effect on LDH activity, ALP activity, or protein concentration in the BALF or LDH
activity or protein concentration in the PL supernatant at 6 weeks after the final TIPS administration. In contrast, at 6
weeks MWCNT-7 administration resulted in significant elevation of LDH activity, ALP activity, and protein
concentration in the BALF and a small increase in protein concentration in the PL supernatant. In conclusion, our data
indicate that MWCNT-7 has higher pulmonary toxicity than DWCNT, and suggest that MWCNT-7 may have higher
carcinogenic potential than DWCNT.

P-96
Dynamics of stem, progenitor, and differentiated cells in the regenerative process ofgastrointestinal ulcer in mice
○ Akihiro Hirata1），Kengo Namiki2），Atsuko Murai2），Hiroyuki Tomita3），Akira Hara3），Hiroki Sakai4），
Tokuma Yanai4）
Gifu Univ.，2）Ono Pharmaceutical Co., Ltd.，3）Gifu Univ. Graduate Sch. Med.，4）Gifu Univ.

1）[Background & Aim] In the gastrointestinal mucosa, cellular proliferation and differentiation are tightly regulated in an
individual gland/crypt under normal physiological conditions. In this study, we examined the temporal and spatial

distribution of Lgr5 -expressing stem cells, progenitor, and differentiated cells in regenerating glands/crypts after

gastrointestinal ulceration in mice.[Materials and Methods] For the visualization of Lgr5 -expressing cells, Lgr5 -EGFP

knock-in mice were used. In gastric ulcer model, mice received an intragastric administration of 0.2 ml acidified
ethanol (0.3 M HCl in 60% ethanol). In colonic ulcer models, mice were treated with 2% DSS in the drinking water for 5
to 7 days.  [Results] The regenerative process was similar in the both models. In both the gastric and colonic mucosa,
the surface of the ulcer bed was covered by a single layer of epithelial cells that arose from the remaining glands/
ulcer margins and grew into independent glands/crypts. Importantly, Lgr5 -expressing cells, Ki-67+ progenitor cells anddifferentiated cells were arranged in the regenerating glands/crypts in a pattern similar to normal glands/crypts.  
[Discussion] These findings indicate that the stem, progenitor, and differentiated cells are already hierarchicallyarranged within newly formed glands/crypts before they grow into independent glands/crypts.

227

Poster Presentation

crypts adjacent to the ulcerated region. Small epithelial invaginations developed within glands/crypts remaining at theThe 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-97 ＊
Comprehensive gene expression analysis for two different types of GST-P positive foci interms of their kinetics after cessation of carcinogen treatment○ Shinji Takasu1），Yuji Ishii1），Aki Kijima1），Kumiko Ogawa1），Takashi Umemura1,2）
Div. of Pathol, NIHS，2）Faculty of Anim. Sci. Technology, Yamazaki Gakuen Univ.

1）

We previously reported the existence of two different types of GST-P positive foci in terms of their kinetics after
cessation of carcinogen treatment. Namely, GST-P positive foci induced by diethylnitrosamine (DEN) were increased
after cessation of the treatment, those by furan being decreased.   In the present study, we compared global gene
expression between the two types of GST-P positive foci. 6-week old male F344 rats were given 10 ppm DEN in thedrinking water or 8 mg/kg/day (5 days/week) furan by gavage for 13 weeks. cDNA microarray was performed usingmRNA extracted from serial frozen sections including GST-P positive foci or negative area collected by the laser
microdissection with a mirror section stained by GST-P immunohistochemical staining. In both DEN and furan-treatedgroups, the expression levels of Gstp1 were significantly up-regulated in GST-P positive foci compared with GST-P
negative area, demonstrating the validity of the collected samples. The up-regulated genes in GST-P positive fociinduced by DEN included Mors2, Cdh23 and Secisbp2l, those by furan including Col1a1, Sox9 and Fbln1. Thus, wewere able to demonstrate the existence of GST-P foci showing different gene expression in response to carcinogencessation. These results might suggest that some of those genes regulate the kinetics of GST-P foci.

P-98 ＊
Potassium octatitanate fiber (K2O・8TiO2) fiber is a potent inducer of lung and pleural
injury in male Fischer 344 rats: A comparative study of titanium dioxide nano particles○ Mohamed Abdelgied1,2,3），Ahmed M. El-Gazzar1,2,4），David B. Alexander1），William T. Alexander1），
Takamasa Numano 1），Masaaki Iigo1），Aya Naiki2），Hirotsugu Takase5），Khaled Abbas Abdou3），
Akihiko Hirose 6），Yuhji Taquahashi7），Jun Kannno8），Satoru Takahashi2），Hiroyuki Tsuda1）
Nano toxicology Project, Nagoya City University, Nagoya, Japan.，
Dept Experimental Pathology and Tumor Biology, Nagoya City University Graduate School of Medical Sciences, Nagoya, Japan.，3）
Dept Forensic Medicine and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, Beni Suef University, Beni-Suef, Egypt.，4）
Dept Forensic Medicine and Toxicology, Faculty of Veterinary Medicine, Alexandria University, Alexandria, Egypt.，5）
Nagoya City University Graduate School of Medical Sciences, Nagoya, Japan.，
6）
Div Risk Assessment, NIH, Tokyo, Japan.，
7）
Div Cellular and Molecular Toxicology, NIH, Tokyo, Japan.，
8）
Japan Industrial Safety and Health Association, Japan Bioassay Research Center, Kanagawa, Japan.
1）
2）Poster Presentation

Potassium octatitanate fibers (K2O・8TiO2, POT fibers) are widely used as an alternative to asbestos. We investigated thepulmonary and pleural toxicity of POT fibers with reference to 2 non-fibrous titanium dioxide nanoparticles (nTiO 2),
photo-reactive anatase (a-nTiO2) and inert rutile (r-nTiO 2). Male F344 rats were administered 1 mg POT fibers, a-nTiO 2,
or r-nTiO 2 over a 2 week period by trans-tracheal intrapulmonary spraying (TIPS) and killed 6 hours and 4 weeks after
the last TIPS administration. A significant increase in the number of alveolar macrophages was observed in all threetreatment groups at 6 hr and 4 wk. At week 4: a-nTiO 2, and r-nTiO 2 were largely cleared from the lung, but a large
fraction of POT fibers persisted. In the BALF, ALP activity was elevated in all three treatment groups, and LDH activity
was elevated in the a-nTiO2 and POT groups. In the lung tissue, the oxidative stress index and the PCNA index were
elevated in the a-nTiO2 and POT groups, and there CCL2  mRNA and protein was elevated in the POT group. All threetest materials were also observed in the pleural cell pellet, and in the pleural lavage, total protein was elevated in all
three treatment groups, and LDH activity was elevated in the a-nTiO2 and POT groups. In addition, the PCNA index of
the visceral mesothelium was increased in the POT group. Overall, POT fibers had greater biopersistence, induced
higher expression of CCL2, and provoked a larger tissue response than a-nTiO2 or r-nTiO2.
228

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

著者索引
A

原

宏士朗

P-37

P-95

原田

孝則

P-13、P-31、P-47

祐子

P-41

原田

恭治

P-46

遠藤

ちひろ

P-54

長谷川

塩谷

聡子

P-67

橋本

愛

WS-1

橋本

和人

P-51

El-Gazzar, Ahmed M.

P-95、P-98

Elokle, Osama Saeid
P-95、P-98

榎本

Abdou, Khaled Abbas

P-98

阿部

正治

P-74

相磯

成敏

P-21、P-22

赤木純一

SY1-1、P-34、P-52

赤堀

有美

P-07

赤根

弘敏

P-73、P-79

赤沼

三恵

秋江

靖樹

Abdelgied, Mohamed

審

一慧

秋山

真洋

F

悠子

P-32

橋本

希

P-01

P-08

畑

千恵

P-23

Force Aldred, Shelley

P-18

畠山

洋文

P-62、P-63、P-92

P-77

笛木

修

P-36

早川

知里

P-66

P-73、P-79

藤枝

光博

P-81

早川

和宏

O-06、O-07

WS-2

藤井

悦子

P-90

林

亮司

P-37

P-46

藤岡

正喜

林

清吾

P-66

方

仁東

Alexander, David B.

P-95、P-98

SY1-4、WS-5、O-03、P-06、林

新茂

P-57、P-61

Alexander, William T.

P-95、P-98

P-27

林

修次

P-60

  

安藤

大介

P-89

藤澤

可恵

P-71

林

大久生

P-78

安藤

稔

P-23

藤澤

希望

P-60

He, Liang

P-35

安藤

さえこ

O-01、P-04

藤塚

直樹

P-11

日比

大介

O-04

安仁屋

洋子

SL1

深町

勝巳

O-01、O-10、P-04

東阪

和馬

SY2-3

P-92、P-93

福山

朋季

P-47

樋口

仁美

P-30

Arbiser, Jack

P-05

古川

正敏

P-54

樋口

珠美

P-78

朝倉

省二

O-07

古川

賢

P-66

筆宝

義隆

P-03

浅野

雅秀

P-48

古谷

哲也

P-17

平井

和也

P-77

浅岡

由次

P-71

二口

充

O-01、O-10、P-04

平井

俊行

P-46

平光

彩乃

P-38

平良木

肇

PD-3

平田

暁大

P-96

平田

淳也

P-77

広瀬

明彦

安齋

新

享征

真智

B

WS-1

魏

Brown, Danielle L.

C

苣田

慎一

P-38
SY1-1、P-34、P-52

Cui, Tiantian

P-35

崔

P-48

宗虎

民 SY1-4、WS-5、O-03、P-06、
P-27

LS3

Cho, Young-Man

D

G

後藤

彩

後藤

哲也

O-06、O-07
O-06

SY2-2、P-32、P-94、P-95、Grimes, Sheila

LS2

P-98

Guo, Hui

P-26

Hirouchi, YasuhikoGuo, Maowu

P-26

北條

幹

P-32、P-94

本多

新

P-48

本田

大士

P-24

H

   
P-26

萩原

昭裕

P-30

本多

久美

P-02

萩原

仁美

O-09、P-46

寳来

直人

P-69

堂口

裕士

P-36

萩原

和美

P-48

堀江

勘太

O-06

土居

卓也

P-28、P-68

袴田

志野婦

P-02

堀川

真一

P-92

土井

悠子

P-24、P-25、P-30

箱井

加津男

P-76、P-81

堀内

正久

P-74

浜村

政夫

P-80

星谷

達

P-65

浜崎

景

P-41

細川

暁

PD-1、O-06、O-07

P-96

Hou, Minbo

E

江田

景

P-73、P-79

原

明

P-35

229

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Huang, Mingshu

P-35

Huang, Ruili

P-18

Hudson, Jim

P-18

I

K

角

古賀
将一

のどか
P-82、P-84、P-85、P-86

P-23
O-05、P-02

小池

夏未

P-15、P-16、P-17

P-69

小泉

治子

P-62、P-63、P-92

P-62、P-63

爰島

洋子

P-68

小松

弘幸

P-73、P-79

SY1-4、WS-5、O-03、P-06、

小松

加代子

P-23

P-27

近藤

洋一

P-39

甲斐

清徳

梶川

悟

梶村

哲世

梯

アンナ

衣斐

彼方

P-51、P-61

市川敦子

P-73、P-79

市丸

嘉

P-12

井口

拓馬

O-05

柿沼

千早

P-78

小山

彩

伊倉

佐織

P-65

鎌田

春彦

P-87、P-88、P-89

小柳

美穂子

P-57、P-61

飯田

麻里

Iigo, Masaaki   

P-13、P-31、P-47

P-05

神鳥

仁志

P-50

熊田

賢次

O-03、P-27

P-95、P-98

金原

智美

P-44

熊谷

文明

O-09、P-19

飯塚

生一

P-11

金子

ちひろ

P-37

熊谷

和善

O-05

池端

香織

WS-3

寒川

彰久

P-67

國重

将大

P-87、P-88、P-89

生嶋

清美

P-29

寒川

祐見

P-51、P-61

倉持瑞樹

P-14、P-42

今井

順

P-44

菅野

純

庫本

高志

P-48

今井

則夫

P-24、P-25

SY2-1、P-21、P-22、P-95、

倉田

昌明

P-58

今井

俊夫

O-02、P-03

P-98

   

栗林

正伯

P-55

P-28、P-68

黒田

顕

P-64

今井田
今村

克己

P-01

菅野

剛

黒田

雄介

P-66

P-14、P-42

黒滝

哲郎

P-28

Karim, Mohammad Rabiul

麗P-82、P-83、P-84、P-85、

樫本

幸子

P-77

串田

昌彦

P-75

P-37

柏木

絵美

P-71

桑形

麻樹子

P-19

P-29、P-94

加藤淳彦

P-60、P-90

桑原

正貴

P-23

P-86
井村

奈緒子

猪又

明子

猪又

晃

P-78

加藤

寛之

SY1-3、WS-4、P-09

桑村

充

井上

薫

P-33

加藤

祐樹

P-71

葛谷

和也

P-61

井上

雅己

加藤

由隆

P-13、P-31、P-47

P-82、P-83、P-84、P-85、

河部

真弓

P-25

P-86、P-87、P-88、P-89

川口

博明

P-74

Lee, Mi Ju

P-20

河合

裕一

井上

紗季

P-62、P-63

石井

真美

WS-5

石井

雄二

P-49、P-64、P-97

伊藤

浩太

P-54

川本

泰輔

P-24

伊東

志野

P-70

剣持

明

P-78

伊藤

格

P-44

煙山

紀子

伊藤

強

P-13、P-31、P-47

伊藤

好文

P-46

木戸

伊藤

勇一

P-24

伊藤

優子

岩崎

日向子

岩田

聖

井澤
和泉

WS-1、P-14、P-42

L

Li, Hua

P-35

P-82、P-83、P-84、P-85、Lindsay, Tomlinson

P-91

P-86、P-87、P-88、P-89

Liu, Xiargjiang

P-26

M

Ma, Jing

P-35

WS-3、P-10、P-43、P-45

町田

雪乃

O-02

博

SL2

前村

憲太朗

P-39

木原

亨

P-51、P-61

前野

愛

P-32

P-07、P-56、P-57

木島綾希

P-49、P-64、P-97

孫谷

弘明

LS4

絵美

P-31、P-47

P-45

木嶋

恵

P-70

牧野

P-62、P-63、P-92、P-93

木村

均

P-44

Mao Jingjing

P-35

武史

WS-1、P-14、P-42

木村

真之

P-66

増渕

康則

P-07

博之

P-74

Kimple, Randall J.

P-05

増渕

康哲

P-56、P-57

木下

勇一

P-41

増野

功一

P-71

桐山

諭和

O-08、P-59

松原健嗣

P-76、P-81

JJi, Xiaoxia

P-26

小林

亮介

P-28

松本

晴年

O-01、P-04

金

P-08

小林

稔秀

P-23

松本

博志

SY2-3

230

美蘭

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

松本

正博

P-72

大谷

勝己

P-12

松村

潔

O-09

内木

綾
SY1-3、WS-4、P-09、P-95、

大塚

亮一

P-13

松村

奨士

P-24

P-98

大井

紗弓

P-74

松尾

沙織里

P-60

内藤

智春

大石

裕司

O-03、P-93

松下幸平

SY1-1、P-33、P-64

中江

大

岡部

麻子

O-08

松下

宗史

P-81

WS-3、P-10、P-32、P-43、

岡野

拡

P-65

松下

智哉

P-60

P-45、P-94

岡崎

欣正

松浦

正男

P-54

中原

豊

奥野

高裕

松浦

哲郎

WS-2

中島

康太

P-07、P-56、P-57

McDaniel, Nellie K.

P-05

中村

賢志

O-04、P-55

鬼村祐治

P-24、P-30

中西

聡

P-48

小野

美穂子

小野寺

章

P-78

P-72

P-13、P-31、P-47

WS-5、O-03、P-06、P-27
O-09

米良

幸典

三木

望稔里

見鳥

光

P-69

中谷

祐樹

WS-2

P-82、P-83、P-84、P-85、

満石

三喜男

P-80

中澤

圭一

P-46

P-86、P-87、P-88、P-89

三浦

伸彦

P-12

並木

健吾

O-04、P-55、P-96

宮城

伶奈

WS-1

直田

みさき

P-36

Orbuch, Rachel A.

成澤

裕子

P-01

大崎

奈都喜

成瀬

美衣

P-03

押方

孝文

P-80
WS-2

美谷島

P-87、P-88、P-89

克宏
WS-3、P-10、P-43、P-45

中野（伊藤） 今日子

O-06、O-07

小野寺

博志

宮坂

勇一郎

P-40

Nazem, Ashraf Mohamed

P-95

大嶋

成奈優

三好

昌夫

P-60

根本

三好

智也

P-37

根小田

水田

保子

真吾

P-87、P-88、P-89

大竹

正剛

P-67

P-48

大塚

昭代

O-07

P-34、P-52

Nickel, Kwangok P.

P-05

王

P-70

尾崎

O-05、P-02

二井

愛介

森

卓也

P-24

二宮

芙美子

P-76、P-81

森川

朋美

P-33

西川

秋佳

SY1-1、P-36、P-49

森尾

剛

WS-2

西村

次平

P-36

森田

文雄

P-76、P-81

能美

健彦

P-64

森田

修

P-24

野中

瑞穂

P-36

守安

貴子

P-29

野々垣

P-26

則武

村井

厚子

O-04、P-55、P-96

村上

純太

P-23

村上

詩歩

P-32

村上

智亮

P-15、P-16、P-17

村瀬

詩織

村山
六鹿

N

P-05

P-58

和彦

牧

P-36

祐基

森

杜

P-69、P-72

常正
健一

Numano, Takamasa

O

P-12
O-07
P-95、P-98

蒙東

P-55

清和

WS-2

Pearson, Hannah E.

P-05

P

Pervin, Munmun

SP-14、P-42

三枝

由紀恵

P-36

齋藤

文代

P-07

斎藤

翼

P-65

齋藤

剛

P-78

落合

雅子

O-02、P-03

斉藤

義明

P-19

P-44

緒方

敬子

P-75

酒井

洋樹

P-96

宗理

P-61

小川

久美子

麻由

P-37
小川

榊

秀之

P-58

SY1-1、P-33、P-34、P-36、

坂本

義光

P-49、P-52、P-64、P-97  

坂岡

篤

O-09

WS-3、P-10

桜井

淳一

P-92

浩平

O-08

秀治

P-32、P-94

長野

嘉介

P-46

Ohira, Toko

P-35

櫻井

長野

一也

SY2-3

大地

祥子

WS-1

Samuelsson, Johanna

P-18

長尾

朋美

P-48

大元

知貴

竿尾

P-01

長崎

幸夫

SY2-4

P-82、P-83、P-84、P-85、

佐々木

彩花

P-15、P-16、P-17

永田

百合子

P-23

P-86

笹谷

めぐみ

P-40

名畑

美和

P-11

P-44

佐藤

功

P-25

光祐

大芝

泰弘

太田

恵津子

O-06、O-07

佐藤

順子

P-28

太田

毅

P-43、P-45

佐藤

健一

P-40

231

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

佐藤P-62、P-63、P-92

田尻

美奈子

P-71

螺良

愛郎

関

由妃

O-06、O-07

高部

浩行

P-51

土谷

稔

関根

瞳

P-11

高木

理恵

P-77

土屋

紀子

P-71

妹尾

英樹

P-21、P-22

高橋美和

P-33、P-72

土屋

毅幸

PD-4

瀬沼

美香

P-19

高橋

尚史

P-13、P-31、P-47

土屋

卓磨

P-49

P-49

高橋

智

津田

洋幸

O-10、P-95、P-98
O-08、P-59

時

伸一

亮

斯波

真理子

P-39

SY1-3、WS-4、O-08、P-09、

塚本

徹哉

柴主

敏行

P-51

P-95、P-98

角田

聡

柴田

映子

P-39

Taquahashi, Yuhji

角田

慎一

柴田

雅朗

P-39

高井

有一

柴田

昌利

P-67

谷本

昭英

P-74

渋谷

淳

田上

暁之

O-09

PD-2、P-07、P-56、P-57、

高信

健司

P-21、P-22

P-61

高瀬

弘嗣

P-95、P-98

P-95、P-98

敦史

P-13、P-31、P-47

高須伸二

P-49、P-64、P-97

清水茂一

P-73、P-79

武田

宏司

P-11

下井

昭仁

P-62、P-92

武田

眞記夫

下井

明仁

P-63

武田

下間

由佳子

P-75

武井

下内

孝司

O-04、P-55

篠田

和俊

P-36

武田

賢和

O-06、O-07

篠原

雅巳

P-43、P-45

竹内

和也

P-66

篠塚

淳子

P-60

瀧本

憲史

O-04

Shirai, Norimitsu

P-91

田中

英樹

P-76、P-81

曽根

瑞季

SY1-1

田中

美有

P-48

園田

二朗

O-07

田中

豊人

P-29

須藤

柚稀子

O-02

唐

末廣

美紀

P-70

谷川

杉山

晶彦

P-38

杉山

大揮

P-30

勝呂

繭子

P-25

酒々井

眞澄
O-01、O-10、P-04、P-12

鈴木

勇

鈴木

P-36
P-82、P-83、P-84、P-85、

P-50

志賀

P-41
P-28、P-68

P-86、P-87、P-88、P-89
堤康央
SY2-3、P-87、P-88、P-89

U

打屋

尚章

O-02

P-13

宇田

一成

P-30

周二

P-75

上野

元伸

P-71

由弘

P-62、P-63

梅田

ゆみ

P-21、P-22

P-41

梅村

隆志

竹之内

明子

倩

P-08
千明

P-49、P-53、P-64、P-97
宇野絹子
WS-3、P-10、P-43、P-45

牛飼

美晴

P-74

V

Voigt, Birger

P-82、P-83、P-84、P-85、
P-86

W

P-48

谷口

健治

P-90

田崎

雅子

P-46

王

剣

P-08

舜恵 WS-3、P-10、P-43、P-45

王

自力

P-08

張

涌生

ゆみ

P-68

P-65

寺本

篤司

P-59

和彦

P-15、P-16、P-17

寺尾

壽子

O-09

SY1-4、WS-5、O-03、P-06、

鈴木

雅実

P-60、P-90

寺山

由依

WS-2

P-27

鈴木

智

P-76、P-81

栃内

亮太

P-23

渡邊

厚

鈴木

志野

等々力

舞

P-19

渡辺

敦光

鈴木

周五

冨樫

裕子

P-37

渡辺

純

SY1-3、WS-4、O-08、P-09

富川

恵美

P-37

渡辺

武志

P-50

鈴木

倫

P-23

富田

弘之

P-96

渡部

優子

P-47

鈴木

俊也

P-29、P-94

友成

由紀

P-28

Wheeler, Deric L.

P-05

殿村

優

P-71

Willard-Mack, Cynthia

LS1

鳥井

幹則

P-71

P-48

豊田

武士

SY1-1、P-33、P-52

T

橘

亮麿

P-77

多田

幸恵

P-29

Trinklein, Nathan

P-18

田食

里沙子

P-47

坪田

P-72

232

健次郎

鰐渕

X

英機

Xia, Menghang  WS-3、P-10
P-40
P-62、P-63

P-18

The 34th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Y

山田

直明

P-68

山田

貴宣

P-33

山際

高史

WS-2

山際

慶典

P-58

山口

悟

P-13

山口

裕子

P-65

山川

けいこ

P-01

山本

宏美

P-76、P-81

山本

行男

P-32

山崎

賢一

P-48

山下

卓也

WS-3

山手

丈至

WS-1、P-14、P-42

山内

敦子

P-78

矢守

凜

P-15、P-16、P-17

Yan, Jianyan

P-35

柳

浩由紀

O-04、P-55

柳澤

幸宏

O-04

柳井

徳磨

P-96

八尾

隆

安野

恭平

屋山

勝俊

P-78
O-05、P-02

P-82、P-83、P-84、P-85、
P-86
横平

政直

横尾

諭

横山

聖

SY1-2、P-01
P-55
P-82、P-83、P-84、P-85

米沢

理人

吉田

緑

吉田

翔太

吉田

敏則

P-18
P-53
P-01、P-76、P-81

P-07、P-13、P-56、P-57、
P-61
吉川

哲也

P-74

吉見

直己

O-01、P-04

吉岡

弘毅

P-12

義澤

克彦

P-41

吉栖

正生

P-40

行松

直

P-27

柚川

藍色

P-74

Zhang, Weijuan

P-26

Zhang, Yuexiang

P-26

張

P-08

Z

梅

233