ー35一

静岡水試研報 (42):35‑
37,2007Bull.
Shizuo
kaPref.
Fish.
Exp.
Stn.
(42)
:
35‑
37,2007

簡便かつ迅速なサガラメ藻体 の窒素含有量の測定
二 村

和 視 *1

Short paperseni
a arboreasporophyteSi
mpl
eand rapi
d determi
nati
on ofnitroge
nc
ontentin Ei
KazumiNi
mura
キーワー ド :サガラメ Eiseniaarborea,紫外線吸光光度法 ultr
a‑violetabs
orpti
onmethod,trogencont
ent
窒素含有量 ni

はじ めにS K 010245.27)に従 った｡試料
紫外線吸光光度法 は,JIは60℃で 24時間乾燥 させ,2‑3mgdr
yweightを測定 に

コンプ科海藻 において体内の窒素含有量 は生長,末枯れ供 した｡ この試料 と水酸化 ナ トリウムーペルオキソ二硫酸や成熟 と密接 な関係があ り,生理状態の指標 として重要でカ リウム溶液 (40g/P NaOH,30g/A K2S208 ; いずれ もある1‑a)O一般 に海藻の窒素含有量 の測定 には,ケル ダール

窒素 ･リン測定用) 10mPを耐圧 ネジロ瓶 に入れ,オー トク法や過硫酸分解後,銅 ･カ ドミウムカラムで還元 し,比色レー ブを用 いて 120℃で 30分間加熱分解 した｡冷却後,定量す る方法や 3‑5),元素分析計 などの分析機器を用 いる方

mgの溶液 に等量 の希塩酸 (1N HCl) を加 え,分取 した 1法がある1･2･6)｡ しか し, これ らの方法 は分析手順が煩雑 でこの溶液 の 220nm の吸光度 を吸光光度計で測定 した｡ こあ り,高価な分析機器が必要であるなどの問題点がある｡

れにより得 られた吸光度 と乾燥重量か ら窒素含有量を算 出

一方,紫外線吸光光度法 は排水中の総窒素量 の測定 に広 くした ｡

利用 されてお り7),分析手順が簡便かつ測定 に要す る時間

紫外線吸光光度法で測定 した窒素含有量 を従来法で測定が短 い利点があるが,海藻の窒素含有量 の測定 には用 いらした含有量 と比較す るため,上記 と同一の試料を過硫酸分れていない｡ そ こで本研究では静岡県沿岸 に生育す るコン

解後,鋼 ･カ ドミウムカ ラムで還元 し,比色定量す る方seni
a arboreaを材料 と して,プ科植物であ るサガ ラメ Ei

法 1･7) (以下,比色定量法 とす る) により測定 した｡試料 を

紫外線吸光光度法 によ り窒素含有量を測定 し,従来法での上記 と同様 に加熱分解 し,冷印後,分取 した 1mgの溶液 に

測定値 と比較す ることで測定方法 としての適用の可否につ

1.
5N HCl) とホウ酸緩衝液 (30.
9g/P
等量 の希塩酸 (いて考察 した｡

00mD/P I
N NaOH ;pH 8.
0)を 8m拍口え, 慕H3B0 ,,,10倍 に希釈 した｡ この溶液中の硝酸態窒素濃度 を留水 で 1材料及 び方 法

Parsonseta18)に従 い測定 し,測定値 と乾燥重量か ら窒素含有量 を算出 した｡ また,上記 とは別の試料 を用いて,栄材料 には,静岡県水産試験場駿河湾深層水水産利用施設

外線吸光光度法および比色定量法で同一 の試料 を繰 り返 し8個体)を用いた｡
で発芽 ･育成 したサガラメ成体の側葉 (て測定 し,平均値の差を検定 した｡ なお,両測定法の変動

2007
年 2月19日受理
117号
静岡県水産試験場 (本場)業績第 1']
静 岡県水産試験場利用普及部

ー36‑

二村和視

液 と,1mg/P硝酸態窒素溶液 の 200‑240nm にお ける吸結果及 び考察

01光度 を測定 した｡

51リウムーペルオキソ二硫酸 カ リウムで加熱分解 した試料溶0つー

紫外部での吸光を調べ るため,前述の側葉 を水酸化 ナ ト言( bp的∈＼N 切77)
叫撫 % 礁榊巾 T り1避軸 嶋gql(n‑5‑6)であった｡

5つ︼

係 数 は, 窒素 含 有 量 約 15〃g/mg dr
y wtで 10%以下

05

紫外線吸光光度法および比色定量法 によるサガラメの窒素含有量測定値の関係を第 1図に示す｡紫外線吸光光度法

wtの範囲であ った｡天然海域でのサガラメの窒素含有量

152025

紫外線吸光光度法による窒素含有量

0.
6‑21.
6FLg/mgdr
y wtでによる窒素含有量測定値 は 1
あ り,比色定量法 による測定値 は 11.
4‑20.
5FLg/mgdr
y10(FLgN/mgdrywt)
第 1図 紫外線吸光光度法および比色定量法 によるサガラメ窒素含有量 の関係

.
3‑24.
5F
Lg/mgdrywt(ケル ダール法 ;タ ンパ クは,9',質含有量か ら換算)の範囲であることが報告 されてお り5
本研究で測定 した試料の窒素含有量の範囲とほぼ同 じであった｡上記 とは別の試料を用 いて,紫外線吸光光度法および比色定量法で同一の試料を繰 り返 して測定 した結果, それ

5.
5±1.
4F
Lg/mgdrywt(n‑6) および 1
6.
1±1.
5F
L
ぞれ 1g/mgdrywt(n‑5) とな り,有意な差 はなか った (t検0.
05)｡
定,p>
試料溶液および硝酸態窒素溶液にお ける吸収曲線 を第 2
図 に示す｡ いずれの溶液 も 205nm 付近 に極大があ り,痩長が長 くなるにつれて吸光度が緩やかに減少す る傾向を示200した｡ 並 木 ら7'は, 硝酸 態 窒 素 溶液 で の吸 収 曲線 が,205nm 付近 に極大 を持っ ことを報告 して いる｡ この よ うに試料溶液で,硝酸態窒素溶液 と同様の吸収曲線を示 した

220

240

波長 (nm)
第 2図吸収曲線 (
A:サガラメ試料溶液 ;B:1mg/P硝酸態窒素溶液)

ことか ら,測定波長付近 において吸光度 に著 しい影響 を及ぼす物質 はないと考え られ,紫外線吸光光度法 によるサガラメの窒素含有量の測定 は可能であると考え られた｡

文

献紫外線吸光光度法での分析手順 は,過硫酸分解後,分解液の分取および塩酸 の添加,そ して吸光値の測定 となる｡

1)Mizuta,H.
,Y.MaitaandM.Yanada(1992):

一方,比色定量法では分解後,分解液の分取,塩酸およびSeasonalchangeso
fnitrogen metabolism int
he

緩衝液の添加,蒸留水での希釈後に,銅 ･カ ドミウム還元

spor･ophyteofLami
nari
ajaponica(Phaeophyceae),カラムでの硝酸態窒素の還元および比色定量 となる｡また,Fisheries.S°
i.
,58,2345‑2350.

ケルダール法 において も同様 に分解後,蒸留,比色などのyasakiand H.Yamamoto2) Mizuta,H" J.Ha手順がある｡両方法 と比べて紫外線吸光光度法 は,分析手(1998):Re
lationshi
pbetweennitroge
ncont
entand順が少ないうえ,それぞれの手順に要する時間 も短いため,

sor
usfor
mationint
hebr
ownal
gaLaminaT･iaJa‑

簡便かつ迅速 な方法である｡ また,元素分析計 などの高価

ponicacultiv
atedinsout
her
n Ho
kkai
do,Japan,な分析機器を用いず,吸光光度計やオー トク レーブなどのFisher･ies.Sci.
,64,909‑913.

一般的な理科機器のみで窒素含有量を測定す ることがで き3)Nimura,K.
,H.Mizutaa
ndH.Yama
moto(2002):

る利点がある｡ このように紫外線吸光光度法を用いること

Criticalc
ontentsofnitrogena
nd phosphor
usforによ り,簡便かつ迅速 にサガラメの窒素含有量を測定す る

sor
usfor
mationi
nfour
･Lami
nar
iaspecies,Bot.

ことが可能であ った｡

Mar"45,184‑188.

サガラメ藻体の窒素含有量の測定

ー 37‑4)Bj6r
nsater,B.R.an d P.A.Wheeler(1990):

in canopy and first‑
year plant
sof Lami
naria

Effec
t of nitrogen and phos
phor
us s
uppl
y onhyper
borea(Laminariales,Phaeop
hyceae),Phyco
lo
gi
a,

gro
wt
handtiss
ueco
mpo
si
tio
nofUIuafe
nestr
ata

35,1‑8.

and7)並木博 (1982) :全窒素,工場排水試験方法 (並木博Enteromor
phaintesti
nalis(UIvales,Chlorophyta),J.Phyco1.
,26,603‑611.

ほか編), 日本規格協会,東京,306‑324.

5)浅川明彦 ･大和田紘一 ･田中信彦 (1988):志摩半島,Y.Maitaa
ndC.M,Lalli(1984):8)Pa
rsonsT,R.

甲賀周辺 にお けるア ラメ, カ ジメの主要化学成分 の季節

Nutrients,A manualofc
hemicaland biologl
Cal変動,養殖研究所研究報告 ,13,33‑44.

met
hodsf
orseawa
teranalysis(ed.byT.R.Pa
r‑,S.Fredriksenand∫.Rueness(1996):6)S沖t
un,K.

sons,Y.MaitaandC.M.Lalli),Per
ga
monPr
ess,

Se
asonalgr
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b
ona
ndni
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0Ⅹford,3‑33.