福岡県保健環境研究所年報第42号，69－73，2015

原著
福岡県における2014/15シーズンのインフルエンザウイルス検出状況
芦塚由紀・吉冨秀亮・中村麻子・濱﨑光宏・堀川和美・世良暢之
福岡県における2014/15シーズンのインフルエンザの流行は、2012/13シーズンから2シーズンぶりにA/H3亜型が主流であった。流行開始時期は平年より2週間程度早い立ち上がりで、県内においては第48週頃からインフルエンザウイルスが検出され、2015年の第2～4週頃がピークであった。県内で分離されたA/H3亜型について系統樹解析を行った結果、2014/15シーズンに分離された株は2つのサブクレード（サブクレード3C.3a及びサブクレード3C.2a）に分類された。
［キーワード：2014/15シーズン、インフルエンザ、分離、遺伝子解析、系統樹解析］
１

ズンにおける県内分離株の系統樹解析を行ったので報告

はじめにインフルエンザは、オルトミクソウイルス科に属するイする。

ンフルエンザウイルスによるウイルス性呼吸器感染症で、毎年、冬期に流行を繰り返している。インフルエンザウイ

２方法

ルスは、抗原性の違いによりA、B、C型の3つの属に分類さ２・１

検体および患者情報れ、さらにA型は表面構造の違いにより多数の亜型に分類

2014年第36週から2015年第22週に感染症発生動向調査される。近年主に流行しているのはA/H1pdm09亜型及びにおいて、福岡市と北九州市を除く県内の病原体定点でイA/H3亜型の2つの亜型である。B型及びC型には亜型はない

ンフルエンザと診断され、当所に搬入された咽頭ぬぐい液が、B型は抗原性の異なる山形系統とビクトリア系統の2215件、糞便1件、気管吸引液1件、その他1件の合計218件系統に細分類される。

を検査した。

近年の日本国内における主流行株は、A型は2009/10がまた、インフルエンザ集団発生事例の検査として、福岡

A/H1pdm09型、2010/11がA/H1pdm09型とA/H3亜型の同時流

県「インフルエンザ様疾患発生報告」実施要領に基づき、

行、2011/12および2012/13シーズンはA/H3亜型と変化して県内の４ブロック（福岡、筑後、筑豊、北九州）でのイいる。2013/14シーズンは、A/H1pdm09亜型及びB型山形系

ンフルエンザ様疾患の初発施設（幼稚園および小学校）に統を主流行株とし、A/H3亜型及びB型ビクトリア系統を含おける患者 23 名から採取された検体（咽頭ぬぐい液とう

1)めた4種のインフルエンザウイルスによるものであった 。

がい液を重複して採取したものを含む計 34 検体）を検査

福岡県においても、毎年、感染症発生動向調査事業におけした。
患者の臨床症状および抗インフルエンザ薬の使用状況

るインフルエンザウイルスの亜型別の検出状況等を報告しており、同様の傾向である

2)3)4)

は、感染症発生動向調査事業による感染症発生動向調査検。

同一の亜型内でも、ウイルス遺伝子に起こる変異の蓄積によって、抗原性は少しずつ変化する。インフルエンザウ

査票もしくはインフルエンザ集団発生事例の調査票に基づき集計した。

イルスでは連続抗原変異が頻繁に起こるので、毎年のように流行を繰り返す。そのため、型・亜型の検査だけではな

２・２型・亜型の検査方法及び抗原性解析

く、シーズン毎に流行株の遺伝子解析及び抗原性解析を行検査法は、国立感染症研究所が示すインフルエンザ診断

い、遺伝子レベルでの流行株の変遷や抗原性の変化等を把マニュアル 5)に準拠し、型・亜型の同定はリアルタイム握することが必要である。

RT-PCR法により行い、ウイルスの分離はMDCK細胞を使用し本稿では、2014/15シーズンの感染症発生動向調査及びて行った。

インフルエンザ集団発生事例における検査結果から流行

MDCK細胞によりウイルスが分離された検体については、状況を考察し、さらに2014/15シーズンを含めた過去3シー赤血球凝集(HA)試験を実施した。HAが8倍以上であった場

福岡県保健環境研究所（〒818-0315 太宰府市大字向佐野 39 ）-69-

合はワクチン株に対する抗血清を用いた赤血球凝集阻止（HI）試験により抗原性解析を行った。

胃腸炎（前シーズンは 2%）の割合が高かった 4)。抗インフルエンザ薬の服薬状況では、調査票に記載があった 171 件を集計した結果、イナビルが 112 件（65.5%）、タミフルが２・３

41 件（24%）、ラピアクタが 10 件（5.8%）、リレンザは 9

インフルエンザウイルスの系統樹解析

2012/13シーズンから2014/15シーズンの過去3シーズンに、福岡県内で採取された検体から分離されたインフルエ件（5.3％）で、前シーズンと同様に、イナビルの使用率が最も高かった 4)。
インフルエンザ集団発生事例の検査で、検体が採取されンザウイルスのHemagglutinin (HA)遺伝子の塩基配列にた患者は幼稚園児及び小学生 23 名で、内訳は男児 18 名、ついて系統樹解析を行った。
HA遺伝子の塩基配列の決定は、インフルエンザ診断マニ6)

女児 5 名、年齢は 5～11 歳であった。臨床症状は、発熱がュアル に準拠し、A/H3亜型の1024bpの塩基配列を決定し22 名（95.7%）、頭痛が 17 名（73.9%）、胃腸炎が 12 名（52.2%）、た。系統樹作成は、国立感染症研究所インフルエンザウイ

上気道炎が 9 名
（39.1%）、関節痛及び筋肉痛が 7 名（30.4%）、

ルス研究センターに協力依頼し、参照株（国内流行株及びであった。抗インフルエンザ薬の服薬状況では、タミフルワクチン株）と共に近隣結合(Neighbor-joining, NJ) 法が 8 件（34.8%）、リレンザは 4 件（17.4％）、イナビルがにより解析された。解析ソフトフェアは塩基配列解析ソフ

4 件（17.4%）、ラピアクタが 2 件（8.7%）、服用無しが 5

トウェアMolecular Evolutionary Genetics Analysis を名（21.7%）であった。5～7 歳の小児にはタミフルが、10用い、検定はブートストラップ法（1000回サンプリング）～11 歳の小児にはリレンザ、イナビル、ラピアクタが使により行った。

用されていた。

３

３・２

結果及び考察

３・１

インフルエンザ患者の情報

インフルエンザウイルスの遺伝子型・亜型の検査

及び抗原性解析の結果

感染症発生動向調査で検体が採取された患者の内訳は感染症発生動向調査で搬入された 218 件の遺伝子検査

男性 96 名、女性 122 名の計 218 名で、年齢は 0～93 歳で、結果は 187 検体がインフルエンザ陽性で、A/H3 亜型が 161

平均年齢は 35.4 歳であった。年齢区分別の内訳は、0～9件（陽性の 86.1%）、B 型山形系統が 15 件(8.0%)、A/H1pdm09

歳が 43 名、10～19 歳が 29 名、20～29 歳が 22 名、30～39亜型が 10 件(5.3%)、B 型系統不明が 1 件(0.5%)、陰性が歳が 25 名、40～49 歳が 32 名、50～59 歳が 24 名、60～6930 件であった。

歳が 17 名、70～79 歳が 14 名、80～89 歳が 10 名、89～99

図 1 に 2014/15 シーズンの福岡県におけるインフルエン歳が 2 名であった。臨床症状は、発熱が 201 名（92.2%）、ザウイルスの週別検出数を示した。2014 年は流行開始時

頭痛が 82 名（37.6%）、関節痛が 57 名（26.1%）、上気道炎期が全国的に平年より 2 週間程度早い立ち上がりであっが 89 名（40.8%）、筋肉痛が 31 名（14.2%）、下気道炎がたが、県内においても第 48 週頃からインフルエンザウイ

11 名（5.0%）、及び胃腸炎が 20 名（9.2%）であった。前

ルスが検出され、2015 年の第 2～4 週目がピークであった。

シーズンと比較すると、上気道炎（前シーズンは 24%）、

型別では全国的に A/H3 亜型が主流であり 6)、県内におい

図 1 インフルエンザウイルスの週別検出状況-70-

表 1 インフルエンザ集団発生例における検出状況
ブロック名

北九州

筑豊

検体の種類

筑紫保健所管内

福岡筑後施設

検体採取日

検体数

リアルタイム

ウイルス

検出された

PCR 陽性数

分離数亜型

A 小学校

うがい液

12 月 2 日

441

A/H3 亜型

宗像・遠賀保健所管内

うがい液

12 月 9 日

430

A/H3 亜型

B 幼稚園

咽頭ぬぐい液12 月 9 日

510A/H3 亜型

北筑後保健所管内

うがい液

12 月 11 日

762A/H3 亜型

C 小学校

咽頭ぬぐい液12 月 11 日

650A/H3 亜型

うがい液

12 月 19 日

883A/H3 亜型

嘉穂・鞍手保健所管内
D 小学校

表 2 インフルエンザウイルス分離株の赤血球凝集阻止(HI)試験の結果
抗血清抗原

A/New York/39/2012 に対する HI 価
標準株

A/New York/39/2012

5120（ホモ価）

分離株 1640*

分離株 2640*

分離株 31260* 標準株から 8 倍以上反応性の低下した株を抗原変異株とみなす。ても同様であった。
インフルエンザ集団発生事例における遺伝子検査の結向調査において検出されたインフルエンザウイルスの亜果を表１に示した。初発事例は福岡ブロックでは第 49 週型は 8 割以上が A/H3 亜型であり、また集団発生事例におに発生しており、北九州及び筑後ブロックが第 50 週、筑いて検出された亜型は全て A/H3 亜型であった。そこで、

豊ブロックが第 51 週とつづき、感染症発生動向調査でイ

今回は A/H3 亜型の 2012/13 シーズンから 2014/15 シーズ

ンフルエンザウイルスが検出され始めた頃に、各ブロックンの過去 3 シーズンにおける県内の流行株について解析内での施設における初発の集団発生が起きていた。いずれするため、インフルエンザウイルスの HA 遺伝子の塩基配の施設においても、検出された亜型はすべて流行の主流の列についての系統樹解析を行った（図 2）。

A/H3 亜型であった。1 名は陰性であったが（咽頭ぬぐい液2012/13シーズンから2014/15シーズンに県内で分離さ及びうがい液いずれも陰性）23 名中 22 名の患者から A/H3

れた株は、他の国内で分離された株と同様に、すべてクレ亜型が検出されており、リアルタイム PCR の検出率は、うード3C.3または3C.2の2つの主要なクレードに属していた。

がい液が 23 件中 21 件（91.3%）、咽頭ぬぐい液が 11 件中系統樹の3C.3及び3C.2の各クレードのなかでも毎シーズ6 件（54.5%）とうがい液の方が高かった。MDCK 細胞を用ンの流行株は変異している。国内では2013/14シーズン後

いたウイルス分離についても、分離された検体はすべてう半から新たなサブクレードである3C.2a及び3C.3aが認識がい液であった。

され始めており6)、県内でも2013/14シーズンの分離株からMDCK 細胞により分離され、HA が 8 倍以上であった 3 株

3C.3aに属するものが確認された。2014/15シーズンに県内について、HI 試験により抗原性解析を実施した。A/H3 亜で分離された株はいずれも新たなサブグレード（3C.2aま型のワクチン株である A/New York/39/2012 を比較対照とたは3C.3a）に属しており、5株は3C.3a、1株は3C.2aであして HI 試験を行ったところ、3 株中 1 株はワクチン株とった。

HI 価で 4 倍以内の抗原性の差であり、ワクチン株とほぼ国内で 2014/15 シーズン流行株の主流であったサブク類似した株であったが、3 株中 2 株についてはワクチン株

レード 3C.2a 株は、赤血球凝集活性が極めて低く、HI 試と比べて HI 価で 8 倍以上の差があり、抗原性が変異して験による抗原性解析が困難であった株である 6)。また、いると考えられた（表 2）。

2014/15 シーズンのワクチン株（A/ニューヨーク/39/2012）が属するクレードである 3C.3 からは系統樹上では明確に

３・３

過去３シーズンにおけるインフルエンザウイルス区別されている 6)。
2014/15 シーズン前半(12 月～1 月)に県内で分離された

A/H3 亜型分離株の系統樹解析
3・2 に示したとおり、2014/15 シーズンの感染症発生動株はサブクレード 3C.3a に属しており、2014/15 シーズン

-71-A/FUKUOKA/14256/2015 JAN
A/FUKUOKA/14218/2015 JAN
A/FUKUOKA/14267/2015 JAN
63
A/FUKUOKA/14061/2014 DEC
A/GUNMA/88/2014 DEC
E62K,Y94H,S198P 99 A/KITAKYUSYU/1/2015 JAN
A/TOKYO/41617/2014 NOV
A/FUKUOKA/1492/2014 DEC
A138S,F159S,N225D,K326R 97
A/MIYAGI/43/2014 MAR
55
63 A/NAGANO-C/37/2014 APR
A/NIIGATA/296/2014 FEB
88 A/OSAKA-C/2003/2014 JAN
A/FUKUOKA/1418/2014 JAN
A/Switzerland/9715293/2013 DEC
A/OITA/30/2013 FEB
A/YAMAGUCHI/30/2012 OCT
A/AICHI/123/2013 NOV
A/HYOGO/3059/2012 OCT
A/FUKUOKA/1/2012 DEC
R33Q
A/KOCHI/31/2013 DEC
A/IWATE/24/2014 FEB
A/SAGA/1010/2014 JAN
A/FUKUOKA/1411/2014 JAN
72
A/FUKUOKA/1408/2014 JAN
81
L157S
A/SAITAMA/136/2013 NOV
86
A/YAMAGATA/104/2014 MAR
A/FUKUOKA/1406/2014 JAN
88 A/GUNMA/39/2014 JAN
T128A,R142G 54
A/AKITA/19/2014 MAR
63
A/SAPPORO/116/2014 MAR
69 A/TOKYO/31512/2013 OCT
N122D
A/OKINAWA/4/2014 JAN
59
A/New York/39/2012 OCT＊
A/SHIGA/37/2014 APR
A/SAPPORO/125/2012 NOV
A/AOMORI/3/2015 JAN
L3I,N144S,F159Y,
Q57K 64 A/GIFU-C/30/2015 MAR
K160T,N225D,Q311H
A/YOKOHAMA/2/2015 JAN
A/GIFU/46/2014 SEP
A/FUKUOKA/14346/2015 FEB
64
3C.2a
A/HYOGO/3126/2015 JAN
A/YOKOHAMA/55/2015 FEB
97
A/WAKAYAMA-C/87/2015 FEB
A/SAKAI/72/2014 MAR
64
A/KANAGAWA/154/2014 MAY
A/SENDAI/13/2012 DEC
N145S 72
A/YOKOHAMA/159/2013 OCT
A/FUKUOKA/1/2013 NOV
A/KITAKYUSYU/5/2014 JAN
A/FUKUI/64/2013 MAY
84
A/FUKUOKA/38/2013 FEB
A/TOKYO/33393/2013 NOV
A/FUKUSHIMA/94/2014 APR
A/CHIBA-C/53/2014 MAY
60
A/YAMAGATA/197/2014 APR
93
Q33R,N278K 83
75 A/SHIMANE/88/2014 MAR
A/YOKOHAMA/93/2013 FEB
A/IBARAKI/7/2013 JAN
53 A/YOKOHAMA/164/2012 DEC
A/YAMAGUCHI/19/2013 JAN
62
A/OSAKA/32/2013 MAY
S45N,T48I 96
92
A198S,N312S
A/FUKUOKA/2/2012 DEC
A/FUKUI/19/2013 FEB
A/KOBE/225/2012 DEC
80
A/SAKAI/14/2012 NOV
A/Texas/50/2012 APR
3C.1
A/Victoria/361/2011 OCT
V223I 70
A/MIE/31/2011 DEC
3B
90
A/KOBE/241/2011 OCT
59
A/VICTORIA/873/2012 AUG
3A
K62E,
94
A/Ghana/FS-12-758/2012 JUN
K144N,T212A 99
A/BRISBANE/11/2010 MAY 4
A/YAMAGUCHI/77/2011 DEC 6100
5
A/OITA/92/2011 OCT
51 A/VICTORIA/208/2009 JUN
A/Shizuoka/736/2009 MAY
A/Victoria/210/2009 JUN
1A/Perth/16/2009 APR

3C.3a

3C.3

3C.20.002

図 2 インフルエンザウイルス A/H3 亜型の HA 遺伝子（1024bp）系統解析結果
下線は、福岡県において 2012/2013, 2013/2014, 2014/2015 シーズンに分離された株*：2014/15 シーズンのワクチン株-72-

のワクチン株（A/ニューヨーク/39/2012）と同じ 3C.3 のがある。

クレードではあるが、1 株は当所における抗原性解析において、抗原変異株（ワクチン株と比べて 8 倍以上の差が見謝辞られた株）であった。国立感染症研究所による国内分離流

インフルエンザウイルスの系統樹解析にご協力いただ

行株の解析では、解析された株の約 78％が抗原変異株できました国立感染症研究所の藤崎誠一郎氏に深謝致しま6)あったことが示されており 、2014/15 シーズンの流行株す。また、調査にあたり、検体採取にご協力頂きました医は前シーズンの流行株から抗原性が大きく変化している

療機関及び保健（福祉）環境事務所の関係各位に深謝致しと考えられた。

ます。

４

文献

まとめ
2014/15 シーズンは、感染症発生動向調査では 8 割以上、

1) 国立感染症研究所： インフルエンザウイルス分離・インフルエンザ集団発生事例においては検出された全て検出速報, http://www.nih.go.jp/niid/ja/iasr-の検体が A/H3 亜型であり、2012/13 シーズンから 2 シー

inf.html

ズンぶりに A/H3 亜型が主流であった。流行開始時期は平2) 世良暢之、江藤良樹、中山志幸ら：福岡県保健環境研

年より 2 週間程度早い立ち上がりで、県内においても第48 週頃からインフルエンザウイルスが検出され、2015 年

究所年報,第35号,65-70, 2008.
3) 吉冨秀亮、石橋哲也、中村朋史ら：福岡県保健環境研の第 2～4 週頃がピークであった。

究所年報,第40号,90-93, 2013.

2014/15シーズンに分離されたA/H3亜型について、塩基4) 吉冨秀亮、吉山千春、濱﨑光宏ら：福岡県保健環境研

配列を決定し、系統樹解析を行った結果、5株はサブクレード3C.3a、1株はサブクレード3C.2aであった。サブクレ

究所年報,第41号,88-89, 2014.
5) 国立感染症研究所：インフルエンザ診断マニュアル

ード3C.3aは、2014/15シーズンのワクチン株（A/ニューヨ（第二版）, 2010年3月.

ーク/39/2012）と同じ3C.3のクレードではあるが、国内分

6) 国立感染症研究所、厚生労働省結核感染症課：今冬の離株の多くが抗原性変異株であることがわかっており、

イ ン フ ル エ ン ザ に つ い て (2014/15 シ ー ズ ン ) ，2015/16シーズン向けのワクチン株は、サブグレード3C.2a

http://www.nih.go.jp/niid/ja/flu-m/flutoppage/27)に属するA/スイス/9715293/2013に変更となった 。次シーズンも引き続き、県内におけるインフルエンザの発生動向066-idsc/related/5647-fludoko-2014.html7) 厚生労働省健康局長通知：健発0508第1号, 2015年5に注意し、遺伝子解析および抗原性解析を行っていく必要月.

（英文要旨）

Genetic Characterization of the Influenza Virus from the 2014/15 Winter Season inFukuoka
Yuki ASHIZUKA，Hideaki YOSHITOMI，Asako NAKAMURA，Mitsuhiro HAMASAKI,Kazumi HORIKAWA，Nobuyuki SERA
Fukuoka Institute of Health and Environmental Sciences,
Mukaizano 39, Dazaifu, Fukuoka 818-0135, Japan
During the 2014/2015 influenza season in Fukuoka, influenza activity was dominated by the circulation of the influenza A/H3virus. Patient numbers infected with this virus began increasing about 2 weeks earlier than commonly occurs for influenza
outbreaks in most years. This virus was first detected in the 48th week of 2014, with patient numbers peaking between the 2nd and
4th week of 2015. Results of phylogenetic analyses of the hemagglutinin genes showed that isolates of A/H3 belonged to two
different clades: 3C.2a and 3C.3a.
[Key words ; 2014/15 season, influenza, Isolation, Phylogenetic analysis]-73-