寄稿文 ＡＦ－２物語 菊池康基

寄稿文

ＡＦ－２物語菊池康基
元遺伝研、元武田薬品工業株式会社――――――――――――――――――――――――――――――――――――――――――――――

１．緒言学会設立当初（1973 年頃）に大きな問題としてAF-2 についても、安全性見直しの一環として実施

取 り 上 げ ら れ た 食 品 添 加 物 で あ る AF-2

された染色体異常試験で陽性結果が出たことから、[furylfuramide,(Z)-2-(2-furyl)-3-(5-nitro-2-

学会の一大トピックとして取り上げられ、様々なfuryl)prop-2-enamide]に関して振り返ることと試験が実施された。その結果、AF-2 が環境変異原する。

研究の発展や評価体系の構築に、大きく寄与した

当時、汎用されていた多くの食品添加物の安全と考えられることから、日本の環境変異原研究の性に疑念が生じ、大きな社会問題となっていた。

歴史を振り返るうえで極めて重要な出来事と言え最も頻用されていた食品添加物の一つであった

よう。

２．発端
1973 年 9 月、JEMS の第 2 回研究発表会が三島の遺伝研で開催された。プログラムを見てびっくい。そこで、握り寿司弁当にしたので御了解願いたい」との主旨であった。

り。演題数は全部で 17 題だったが、後半の 7 題がこの時の AF-2 関係の発表をまとめてみると、陽AF-2 関連で占められていたのである。特定の化合性結果は、(1)枯草菌レックアッセイ（rec assay）、物にこれだけ集中するのは珍しかった。昼食休憩(2)大腸菌 WP2hcr-株の変異誘発性試験、(3)培養のときの挨拶で、賀田恒夫先生が「今日の弁当を細胞での染色体異常試験等で報告された。一方、どうするか大いに迷った。通常の幕の内弁当には、サルモネラ菌の Ames 株での復帰変異試験では陰おそらく AF-2 が使用されている。本日、これだけ性であった。また、カイコの試験では明瞭な陽性

多くの発表で AF-2 の陽性結果が報告されている結果はなかった。なお、第 3 回 JEMS では発表 23

のに、AF-2 の入った食事を提供する訳にはいかな

題中 11 題が AF-2 関連の発表であった。

３．AF—2 とはAF-2[furylfuramide,(Z)-2-(2-furyl)-3-(5-ni用が許可されていたが、1965 年に AF-2 はより安tro-2-furyl)prop-2-enamide] とは、1960 年代よ

全性が高く効果も高い保存料として厚生省によっり食品保存料として使用されていた食品添加物でて指定された。保存剤としての用途は広く、魚肉ある（製造販売：上野製薬）。わが国では戦後間もハム、魚肉ソーセージ、食肉ハム、食肉ソーセー

ない頃より、ニトロフラン系保存料の食品への使ジ、ベーコン、蒲鉾、ちくわ等の魚肉練製品、豆1寄稿文 ＡＦ－２物語 菊池康基

腐、和菓子のあん等に使用が認められていた。こAF-2 の指定以前に認可されていた食品添加物につの頃の AF—2 を取り巻く社会情勢について簡単にいても見直され、食用タール色素類やチクロ等の触れておく。当時は各種食品添加物の安全性につ甘味料が指定削除となった。こうして、食品添加いて疑問点が指摘され始めた頃であり、AF-2 につ物に対する消費者運動が高まり、マスコミによるいても保存剤としての使用が広範囲にわたること批判的な報道も増加した。1971 年 5 月には民放テから、安全性についての議論が社会問題化しつつレビ番組で、AF—2 の作用により金魚に影響が出たあった。当時、厚生省の食品調査会が、WHO/FAOかのような映像が放映され、世論が盛り上がる中、の勧告に従って食品添加物の安全性試験について国会でも取り上げられた。なお、AF-2 についてさ見直しているところであった。AF-2 はこの勧告にらに詳しくお知りになりたい方は、「二十世紀食品従って、安全性試験が実施された最初の食品添加添加物」（社団法人日本食品衛生協会、2010）1)を物であり、1865 年 7 月 5 日に指定された。その後、参照されたい。

４．AF—2 の遺伝毒性試験に与えたインパクト1971 年、東京医科歯科大の外村晶教授と佐々木下に紹介する。

正夫助教授は、AF-2 が培養ヒトリンパ球に染色体・Prof. Ames が Ames test 用に最初に開発したサ切断や転座を誘発することを最初に発見した。外ルモネラ菌 TA1535、TA1537、TA1538 では、AF-2

村教授は、食品添加物の染色体異常誘発性についは陰性となった。これにショックを受けた Prof.てのスクリーニング試験を開始したところであっAmes は、より高感度の新菌株 TA98, TA100 を開発た。その頃、外村研究室を訪問した時に、「君も変し、AF-2 の検出が可能となった。

異原研究を始めたのだから、面白いものを見せて・AF-2 は遺伝毒性試験に強烈なインパクトをもたあげよう」と言われて、AF-2 で処理したヒトリンらした。医薬品等の毒性評価の一つとして、未確パ球の標本を顕微鏡で見せていただき、「食品添加立の変異原性試験が、これを機に一気に広まった物でこんなに染色体異常が起こるなんて」と驚いことは事実である。JEMS にとっても、設立後、日た記憶がある。外村教授は AF-2 の実験結果を、田も浅く会員数も伸び悩んでいた時でもあり、AF-2島研究班で報告され、班員の先生方や研究機関にの存在が学会活動を後押しするエネルギーにもなよる AF-2 の追認試験が開始された。その結果が第った。また、Ames 株の改良に代表されるように、2，3 回 JEMS での集中発表となったわけである。

試験系の開発・改良・普及も積極的にされるようその間の経緯は田島先生の著書に書かれている 2）。になった。

その後も数年間、JEMS では AF-2 に関する発表は・外村晶教授、近藤宗平教授（阪大）、賀田恒夫部多かった。1975 年第 4 回 JEMS の公開シンポジウ

長（遺伝研）は、いずれも一流の研究者であり、ム「環境変異原と人類の健康」の中で近藤宗平先純粋に学問的観点から AF-2 を研究されていた。そ生が「AF-2 物語」と題して、これまでの研究結果のことは、当時先生方と親しくお話をする度に痛を総括された。AF-2 の遺伝毒性に関する代表的な感した。AF-2 を禁止すべきかどうかについては、論文としては、遺伝学雑誌に掲載された外村ら、様々な意見があり、激論が交わされたこともしば近藤ら及び賀田らの３論文が挙げられる

3-5)

。

AF-2 の遺伝毒性試験にまつわるエピソードを以2

しばであった。
・AF-2 にとって不幸だったことは、すでに述べた

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ように、化学物質による突然変異誘発性に関するのであろう。国立衛生試験所の Ochiai らは、マウ組織的研究が開始された直後に変異原性が検出さスを用いたがん原性試験の結果、がんを作ることれたことであった。上記の先生方も含め、研究者に成功した 6)。その投与量は当時としては極めての変異原性試験の経験も浅く、データの蓄積も十高い用量であり、この結果を受け、AF-2 は食品添分でなかった。そのため、陽性・陰性結果の評価、加物の認可は取り消された。この発がん性試験に

in vivo と in vitro 系の違いに関する認識も低かついては、科学的根拠よりも行政的な目的をもっった。毒性分野での新参者の変異原性試験の存在た用量設定であり、political experiment の典型意義を、意識的にあるいは無意識的にでも強調すと、感じた人も多かったようである。

るあまり、陽性結果だけが独り歩きする結果とな・自分自身のことを振り返ってみると、変異原性ったことは否めない。

試験に着手して間もなく、化合物での in vitro

・AF-2 は、他の毒性試験ではさしたる問題は見当positive について疑問を持つようになったが、そたらず、安全な添加物とされていた。しかし、すの意味を深く考えだしたのは AF-2 の各種変異原

でに述べたような社会情勢の下でも、変異原性試性試験における成績を数多く知るようになってか

験の陽性結果だけでは発売認可取消し処分ができらであった。

ないために、大量投与のがん原性試験が行われた

５．AF—2 の遺伝毒性とがん原性についての新たな見直し
これまでの多くの研究によって、AF-2 の遺伝毒

この研究で AF-2 の試験を担当した本間は、

性は、in vitro では明らかであるが、in vivo でOchiai らのマウス発がん性試験 6）のデータを用は認められていない。

いて、AF-2 の発がん性のリスク評価を試みている

2009 年に国衛研を中心とした、食品添加物等に8）。1973 年当時の AF-2 の生産量の全てが食品に利おける遺伝毒性発がん物質の評価法に関する研究用されたとして、食品中の残存量、当時の人口、が行われた。その中で、AF-2 についても Ames 試等々の係数を考慮すると、平均一日摂取量は験、トランスジェニック（Tg）マウスを用いた Tg

0.0057 mg/day

遺伝子突然変異試験と小核試験が実施された。Tgた。このことから、その当時の AF-2 のリスクはそマウスの、肝臓、前胃、大腸、脾臓での突然変異れほど高いものではなかった、と述べている。

(0.00011 mg/kg/day)と計算され誘発性を解析した結果、いずれの臓器でも変異誘

なお、AF-2 は、国際がん研究機関（IARC）の発発性は認められなかった、特に、前胃は AF-2 のががん性分類では、グループ２B（ヒトに対する発がん標的臓器であることから、この陰性結果は胃でん性が疑われる）に分類されている。の発がん原因が遺伝毒性によるものでないことをAF-2 の遺伝毒性とがん原性が問題となって 45示唆した。また、小核誘発性についても陰性であ年が経過した。JEMS としてもそろそろこの問題に7）った（鈴木ら，2003） 。

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決着をつける時期を迎えているのではなかろうか。

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６．AF—2 に関するまとめ1970 年代以降の日本の変異原研究、遺伝毒性試験の発展を語る時、AF-2 抜きでは語れない。
1）誕生まもない日本環境変異原学会の基礎固めに貢献した。
2）Ames test 用菌株改良の直接要因となった。
3）各種遺伝毒性試験法の開発・改良・発展へ直接的あるいは間接的に寄与した。
4）食品添加物、医薬品等のガイドラインの整備を促した。
5）遺伝毒性試験データの評価の見直し（現在に続く課題も含め）を促した。
〇 In vitro 陽性の意味するもの、特に in vitro 染色体異常試験陽性とは？
〇 遺伝毒性試験とがん原性試験との関係の見直し〇 Somatic mutation と Germinal (heritable) mutation〇 Risk (hazard) identification, risk evaluation, risk management 等
文献1) 社団法人日本食品衛生協会, 2010. 二十世紀食品添加物.
2) 田島彌太郎，1981.「環境は遺伝にどう影響するか」ダイヤモンド社.
3) Tonomura, A, et al., 1973. Japan. J. Genet., 48, 291.
4) Kondo, S. et al., 1973. Japan. J. Genet., 48, 295.
5) Kada. T. et al., 1973. Japan. J. Genet., 48, 301.
6) Ochiai, T. et al., 1982. Bul. National Inst. Hygenic Sci., 100, 80.
7) 鈴木ら，2003. 環境変異原研究 25, 119-125.
8) 本間正充, 2018. Foods & Food Ingredients, J. Jpn., 223, 8.
菊池康基
元遺伝研、元武田薬品工業株式会社（2019 年 5 月）

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