ISSN 1347−6602

昭和62年６月９日学術刊行物認可

家畜衛生学
家畜衛生 学 雑 誌
The Japanese Journal of Animal Hygiene（附）

家畜衛生フォーラム2019
日本家畜衛生学会第91回大会

要旨集
要旨集

日本家畜衛生学会
Vol .45 No.3
2019. DEC.

The Japanese Society ofAnimal Hygiene

家

畜

衛

生

学

雑

日本家畜衛生学会

発行

誌

理 事 長：河合一洋
副理事長：樋口豪紀
編集委員長：長井誠

編集委員：末吉益雄・髙井伸二・宮﨑茂

野上貞雄・福士秀人"""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""The Japanese Journal of Animal Hygiene
Published by the Japanese Society of Animal Hygiene
President : Kazuhiro KAWAI（）

Vice President : Hidetoshi HIGUCHI（
Editor-in-Chief : Makoto NAGAI（
Editorial Board : Masuo SUEYOSHI（
Shinji TAKAI （

）
）
）

）

Shigeru MIYAZAKI（
Sadao NOGAMI（
Hideto FUKUSHI（））

複写される方へ
日本家畜衛生学会は有限責任中間法人 学術著作権協会（学著協）に複写に関する権利委託をしていますので，本誌に掲載された著作物を複写したい方は，学著協より許諾を受けて複写して下さい．但し，社団法人日本複写権センター（学著協より複写に関する権利を再委託）と包括複写許諾契約を締結されている企業の社員による社内利用目的の複写はその必要はありません．
（※社外頒布用の複写は許諾が必要です．）
権利委託先：

有限責任中間法人 学術著作権協会〒107−0052 東京都港区赤坂９−６−41 乃木坂ビル３階
電話：03−3475−5618
FAX：03−3475−5619
E-mail：info@jaacc. jp

注意：複写以外の許諾（著作物の転載・翻訳等）は，学著協では扱っていませんので，直接日本家畜衛生学会へご連絡下
さい．
［電話：042−367−5780］
また，アメリカ合衆国において本書を複写したい場合は，次の団体に連絡して下さい．
Copyright Clearance Center, Inc.
222 Rosewood Drive, Danvers, MA 01923 USA
Phone：1−978−750−8400
FAX：1−978−646−8600）

「家畜衛生学雑誌」第45巻第 3 号の送付にあたって
会員の皆様におかれましては，ますますご清栄のこととお慶び申し上げます．ここに，「家畜衛生学雑誌」第45巻
第 3 号を刊行する運びとなりました．
本号では，原著論文の他，「家畜衛生フォーラム2019」講演要旨及び「第91回大会講演要旨」を掲載しています．
「家畜衛生フォーラム2019」では，「牛乳房炎の診断，治療及び予防の最前線」をテーマに，重要疾病であります牛乳
房炎の基本概念，効果的な診断，治療，予防について 5 名の先生方からご講演をいただきますので，ご参加の皆様の積極的なご討論をお願い致します．
家畜衛生学雑誌では，原著論文・短報以外にも，総説，数ページ程度のミニレビュー，技術資料等の原稿を受け付
けておりますが，今回から非会員の方からも学会誌に投稿していただけるようになりました．原著論文はもちろんでございますが，ミニレビューや技術資料も含め，積極的なご投稿をよろしくお願い致します．ご不明な点はご遠慮なく編集委員会事務局へお問い合わせください．
日本家畜衛生学会
家畜衛生学雑誌

理事長

河合一洋

編集委員長

長井

誠

日本家畜衛生学会・学会費納入のお願い
ご承知のように，学会は会員の皆様からの会費をもって運営されております．学会の運営を円滑に運ぶために，所定の会費を納入していただきますようお願い致します．
＊会費は，正会員5,000円，学生会員2,000円です．
＊平成27年度までの未納分をお支払いいただく場合，正会員年会費は4,000円です．
日本家畜衛生学会

払

※

3

※

4 3 1 7 1

2017

2018

2019

欄

0 0 2 4 0※3※

4 3 1 7 1※

日本家畜衛生学会

千

百

十

万

千

百

十

円

おなまえ

※

様
料

（消費税込み）

金

）

※

※

ご 依 頼 人−

受付局日附印

ご依頼人

特殊取扱

これより下部には何も記入しないでください。

円

額

信

様

おなまえ

−

十

）

）

（電話番号

百

取扱

円

裏面の注意事項をお読みください。

千

年度

計

−

万

特殊

（

おところ（郵便番号※

十加入者名 金2016

百記載事項を訂正した場合は︑その箇所に訂正印を押してください︒

2015

千

※

河合一洋

郵便振替払込請求書兼受領証

切り取らないで郵便局にお出しください︒

日本家畜衛生学会

票

金

※

扱

口座番号
（右詰めで記入）※

通各票の※印欄は︑ご依頼人において記載してください︒

加入者名

0 0 2 4 0取

口座記号番号

口座記号

※

込

金 額 料

00

理事長

円

受付局日附印（ご注意）
・この用紙は、機械で処理します
ので、口座番号及び金額を記入する際は、枠内にはっきりと記入してください。
また、本票を汚したり、折り曲
げたりしないでください。

・この払込請求書を郵便局の派遣員にお預けになるときは、引換えに預り証を必ずお受け取りください。

この受領証は、郵便振替の払込
みの証拠となるものですから大切に保存してください。

この払込取扱票の裏面には、何も記載しないでください。

家畜衛生学雑誌
第45巻
目

第3号

2019

次

理事長就任の挨拶 ･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 69〈原著〉
ITS- 1 領域を基にした PCR 法によるカラス腸内容物からの Eimeria 属原虫の検出とその分子系統解析･･･････････････････････････････････････････････････････････ 菊地大希・成廣 隆・木村和輝・上塚浩司･･････････････････････････ 71〜78〈家畜衛生フォーラム2019要旨集〉
企画説明･･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 河合一洋・林 智人････････････････････････････････ 81
牛乳房炎の診断と治療の考え方････････････････････････････････････････････････････････････････････ 河合一洋･･････････････････････････ 83〜89
Coliform 乳房炎の病態と治療戦略･･････････････････････････････････････････････････････････････････ 篠塚康典･･････････････････････････ 91〜94
マイコプラズマ・ボヴィスの病原因子とその対策････････････････････････････････････････････ 樋口豪紀･･････････････････････････ 95〜97
サイトカインを用いた牛の乳房炎防除技術の開発と展望･･･････････････････････････････････ 菊 佳男････････････････････････ 99〜102
乳房炎ワクチンとその効果･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 検崎真司･･･････････････････････ 103〜108〈第91回大会講演要旨集〉
イノシシから世界初となるサポウイルスの検出････････････････････････････････････････････････････････ 勝田りさ子・須永藤子・大井 徹・片山幸枝
白井淳資・水谷哲也・岡智一郎・長井 誠･･･････････････････････ 112〜113
大阪のヌートリアにおけるレプトスピラ浸潤状況調査･････････････････････････････ 村田 亮・森本大貴・内田郁夫・浅川満彦・鳥居春己・高野彩子･･･････････････････････ 114〜115
牛の呼吸器由来菌における薬剤感受性の経年変化･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 坂下満明・加藤晶子・廣瀬和彦･･･････････････････････ 116〜117
牛の細菌性呼吸器病に対するガミスロマイシンの臨床効果と分離菌の感受性･･･････････････････････････････････････････････････････････ 加藤敏英・石田 優・伊藤 貢・芝野健一･･･････････････････････ 118〜119
Mycoplasma bovis P81特異抗体を用いた ELISA 法の構築･････････････････････････････ 中村 光・西 航司・権平 智・藤木純平・岩野英知・樋口豪紀･･･････････････････････ 120〜121
北海道東部地域の乾乳軟膏使用状況および次期泌乳期乳房炎発生率について････････････････････････････････････････････ 北野菜奈・菊 佳男・山田倫明・樋口雅也・髙橋俊彦･･･････････････････････ 122〜123
機械搾乳時におけるライナー内逆流現象とライナー内部形状の関係･･････････････ 今尾賢人・榎谷雅文・乾 洋治・近藤仁志・楜澤共生・篠塚康典・河合一洋･･･････････････････････ 124〜125
会員へのおしらせ ･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 127〜135
2022年第68回国際食肉科学技術会議（ICoMST）神戸大会について ････････････････････････････････････････････････････････････････ 136
家畜衛生学雑誌投稿規程 ･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 137〜138
日本家畜衛生学会会則 ････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 139〜140

家畜衛生学雑誌

The Japanese Journal of Animal HygieneVol. 45 No. 3

2019

Contents〈Original report〉
Detection of Eimeria sp. from intestinal contents of wild crows by PCR based on ITS-1 region andphylogenetic analyses･････････････････････････････････････････････････････････････････････ Hiroki Kikuchi et al.･･････････････････････････････････････････････ 71〜78〈Abstracts of Animal Hygiene Forum 2019〉･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 79〜108〈Abstracts of oral presentations on 91th academic meeting〉････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 109〜125
Information for Members ･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 127〜135
Instruction for Authors ･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 137〜138
The Regulations of The Japanese Society of Animal Hygiene ･･････････････････････････････････････････････････････････････････ 139〜140

Jpn. J. Anim. Hyg.

69

理事長就任の挨拶

就任の ご 挨 拶

麻布大学

獣医学部

教授

河合

一洋

この度， 7 月20日の2019年度総会におきまして第 6 代理事長を拝命いたしました．前理事長の白井淳資先生（東京
農工大学教授）におかれましては 3 期にわたり理事長をお努めになられ，強いリーダーシップのもとに本学会を活発に盛り上げていただきました．この度は白井淳資先生がご退職を迎えられるということで理事長交代となりました．
私自身，若輩者ではございますが，本学会のために精一杯尽力いたす所存でございますので何卒よろしくお願い申し上げます．
日本家畜衛生学会は本年で設立45周年を迎えます．本学会は昭和49年（1974年）家畜衛生研究会の名称で設立され，家畜衛生との関連領域における学究の向上を図り，畜産の進歩発展に寄与する目的で，家畜衛生学の調査研究を討議する唯一の場として研究発表会，学術講演会，学会誌の発行などの活動を続けて参りました．学会の長い歴史の中で取り扱った話題は，人と動物に係る感染症はもとより，家畜の生産性を阻害する疾病，畜産環境衛生，食の安全安心に関わる課題など幅広い分野にわたり会員相互で意見交換をして参りました．特に本年25回目を迎える家畜衛生
フォーラムは，毎回様々なテーマをクローズアップしその時折の最新情報を発信しております．昨年の家畜衛生
フォーラム2018では近年問題となっております越境性動物疾病に焦点をあて海外悪性伝染病の最近の事情について著
名な先生方にご講演いただき理解を深めました．
さて，今回の研究発表会は91回大会となります．家畜衛生に係る多くの演題がエントリーされており活発に意見交換される予定です．午後からの家畜衛生フォーラム2019は，牛の乳房炎がテーマとなっております．本学会で牛の乳房炎が大きく取り上げられるのは初めてのことですが，乳牛の疾病の 3 割を占める重要疾病であります．牛乳房炎における実状を理解し，最新の情報を含めた対応策について意見交換できればと考えております．
家畜衛生の範囲は広く，人と家畜の関わる分野での家畜の健康と食の安全を支える学問としてこれからも積極的に関わらなければいけない分野であると考えます．本学会として社会にどのような貢献ができるのか会員の皆様と一緒に考えながら進めていく所存でございますので，皆様方の尚一層のご助言，ご協力を賜りますようよろしくお願い申し上げます．

原71

著

ITS-1 領域を基にした PCR 法によるカラス腸内容物からのEimeria 属原虫の検出とその分子系統解析
菊地大希 1 ）・成廣

隆 2 ）・木村和輝 1 ）・上塚浩司 1 ）＊Detection of Eimeria sp. from intestinal contents of wild crows
by PCR based on ITS-1 region and phylogenetic analyses
Hiroki Kikuchi 1）, Takashi Narihiro 2）, Kazuki Kimura 1）, Koji Uetsuka 1）＊（ 1）Laboratory of Animal Health and Hygiene, College of Agriculture, Ibaraki University,
Chuo 3-21-1, Ami, Inashiki-gun, Ibaraki 300-0393
2）

Bioproduction Research Institute, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology,
Higashi 1-1-1, Tsukuba, Ibaraki 305-8566）＊

Corresponding Author: Koji Uetsuka（koji.uetsuka.k9@vc.ibaraki.ac.jp））（2019. 6. 3 受付／2019. 9. 2 受理）

Summary
In recent years, many studies have been conducted to evaluate the risks of pathogen transmission to livestock
and poultry from wild animals. The disease coccidiosis is caused by an intestinal infection with species of thegenus Eimeria or Isospora and can lead to serious enteritis in infected livestock and poultry, with consequent
weight loss and stunted growth. This eventually leads to serious economic damage for the industry. There are,however, very few studies that actually assess the risk of spread of the genus Eimeria to livestock and poultry
from wild birds and animals. In this study, to assess the risk of the biological spread of the genus Eimeria, wedetected species of the genus Eimeria from the intestinal contents of wild crows by PCR based on internaltranscribed spacer 1 (ITS-1) sequences and carried out a molecular phylogenic analysis. Suspected Eimeria ITS-1
sequences were detected in 24 out of the 77 wild crows tested (31 %). Although the Eimeria species was not
identified, the molecular phylogenic analysis according to the Eimeria-suspect ITS-1 sequences from the wild
crows suggests that the Eimeria species detected was different from the species known to infect livestock andpoultry. Therefore, it is suspected that the risk of biological transmission of Eimeria to livestock or poultry fromwild crows is low.
Key words：Eimeria, wild crow, internal transcribed spacer 1, wild animal, coccidia
家畜衛生学雑誌

茨城大学 農学部 動物保健衛生学研究室〒300−0393 茨城県稲敷郡阿見町中央 3 −21− 12 ）
国立研究開発法人 産業技術総合研究所 生物プロセス研
究部門〒305−8566 茨城県つくば市東 1 − 1 − 1 中央第 6＊連絡著者：上塚浩司（koji.uetsuka.k9@vc.ibaraki.ac.jp）
1）

序45，71〜78（2019）

文畜舎の周辺には様々な野生生物が生息しており，これらの一部は畜舎内の給水施設や給餌設備を狙って侵入し，家畜及び家禽への傷害や施設の破壊，病原体の伝播など様々な被害を畜産業に与えるとされている．スズ

家畜衛生学雑誌

72

第45巻第 3 号（2019）

メ，ハシブトカラス，ドバト，ツバメ，ムクドリ，キジ

ザウイルスが分離されなかった検体を分与して頂いたもバトは畜舎周辺で確認される野生鳥類における重要種とのである．筋胃由来の DNA から永幡ら 8 ）の変法にて種されている 6 ）．このうち，カラスは行動域内の複数の畜の判定を行ったところ，77検体の内訳はハシブトガラス

舎に飛来することから病原体伝播の要因の一つである可（Corvus macrorhynchos）が32羽，ハシボソガラス（Corvus

能性が示唆されている11）．

corone）が33羽，ミヤマガラス（Corvus frugilegus）が

家畜及び家禽の疾病のうち，経済的被害が大きいとさ10）れる疾病の一つにコクシジウム症がある ．コクシジウ

3 羽，判別不明が 9 羽であった．検体は使用するまで－80 ℃で凍結保存された．

ム症は Eimeria 属や Isospora 属などのコクシジウム原虫
が脊椎動物の消化管上皮細胞に感染する原虫性感染病で2 ）糞便からの DNA 抽出

ある．コクシジウムは感染宿主の体内で分裂増殖を行－80 ℃で凍結保存されていたカラスの腸管検体を常い，糞便と共にオーシストという形状で排泄される．排温で自然解凍した．腸管検体の盲腸分岐部直上から腸内泄されたオーシストは環境中で成熟し，経口摂取される

容物を約200 mg（180 mg ～220 mg）取り出し，QlAamp

ことで他の個体へと伝播する．コクシジウム症に罹患しFast DNA mini stool kit（キアゲン：東京）を用いてた個体は下痢，血便，食欲不振，体重減少，発育不良な

DNA を抽出した．得られた DNA 溶液は使用するまでどの症状を示し重症化の際には死に至るとされている．

4 ℃で保存した．

2013年の栃木県，及び2014年北海道の調査でカラスの腸内容物から Eimeria 属原虫の検出が報告され 1 ， 5 ），カ3 ）PCR 法による検出

ラスによる Eimeria 属原虫の生物学的伝播の可能性が示

Eimeria 属原虫の検出のためにプライマーは Kawahara

唆された．一般的に家畜や家禽の伝染病の伝播の要因とらの Genus-common primer を用いた 3 ）．PCR 酵素にはして野生鳥獣の体表への付着や糞便中への排泄が挙げら

KapaTaq Extra PCR Kit（ニッポンジーン：東京）をれることから，野生鳥獣が病原性微生物のレゼルボアあ用いた．反応液は，KapaTaq Extra DNA polymerase

るいはベクターとして作用している可能性を検討した研（5 U/µl）0.25 µl， 5 ×KapaTaq Extra Buffer（Mg2 ＋

究が多く実施されている

1，2，5，7，9）．しかしながら，free）10.0 µl，25 mM MgCl2 5.0 µl，dNTP Mix（10 mM

畜産業におけるコクシジウム症の被害は極めて大きいにeach）1.5 µl，10 µM Genus-common Reverse Primer

も関わらず，Eimeria 属原虫は宿主特異性が高いという

2.5 µl，10 µM Genus-common Forward Primer 2.5 µl，

理由から，コクシジウム症の伝播における野生鳥獣の排Template DNA 2.0 µl，MQ 水 26.25 µl の総量50 µl で調泄物の関与を調査した研究はあまり実施されていない．

製した．PCR の反応条件は，94 ℃で30秒の後に，94 ℃

一般的にコクシジウムの検査ではオーシストを鏡検しで10秒間，55 ℃で30秒間，72 ℃で30秒間のサイクルをて検出する方法が基本である．しかしながら，本研究で35回繰り返した．その後，72 ℃で420秒の後， 4 ℃で保用いた検体は凍結されたカラスの腸内容物であるため冷した．反応後，1.5 ％アガロースゲル電気泳動で増幅に，オーシストの形態による同定が困難である．そこで産物のサイズを確認した．

本研究では形態による同定法に代わり，ITS-1 配列を基にした Eimeria 属原虫の同定法を試みた．

4 ）TA クローニング

すなわち，本研究ではカラスの腸内容物から抽出した

Kawahara ら に よ る と，Eimeria 属 検 出 用 の Genus-

DNA を用いて Eimeria 属原虫についての PCR を行い，

common プライマーセットを用いた PCR での増幅産物

それぞれの個体での保有状況を反映するとみなし，検出のサイズは348～546 bps とされていた 3 ） ことから，こされた株の分子系統解析を行うことで，カラスによる家の範囲のサイズで増幅された PCR 産物の一部を Fast

畜や家禽への Eimeria 属原虫の生物学的伝播リスクの評

gene Gel/PCR Extraction Kit（日本ジェネティクス：価を行ったので報告する．

東京）で精製し，Target Clone（東洋紡：大阪）を使用

材料及び方法1 ）使用検体

し て 取 扱 説 明 書 に 従 い，T4 ligase 1 µl，2×Ligation
Buffer 5 µl，ptA2 vector（50 ng/µl）1 µl， 精 製 し た
PCR 反応液 X µl，滅菌 MQ 水（3-X）µl の総量10 µl でベ使用したカラスの腸管77検体は，平成27年度と28年度

クター液を調製し，4 ℃で一晩（12～18時間）反応させに茨城県県北及び県南家畜保健衛生所で実施された高病

た．X の値は X ＝50Y/Z の計算式で決定した（Y：精製

原性鳥インフルエンザ対策事業での気管及びクロアカス

した PCR 産物のサイズ（bp），Z：精製した PCR 反応液

ワブによるウイルス分離検査において，鳥インフルエン

濃度（ng/µl））．

菊地ら：カラス腸内容物からのコクシジウム検出

73

ベクター液10 µl に Competent high JM109（東洋紡：

EasyPure（マッハライ・ナーゲル：ドイツ）を用いた．

大阪）100 µl を加え，これをクローニング液とした．ク

得られたプラスミド溶液は1.5 ml サンプルチューブでローニング液を30分間氷中で静置した後に，42 ℃に設

4 ℃で保存した．

定した恒温槽で30秒間加温し，その後 2 分間氷中で冷却した．SOC 培地900 µl にクローニング液110 µl を加え，5 ）塩基配列の決定と遺伝子解析

37 ℃で 1 時間，270 rpm にて振盪培養した後に，IPTG/

プラスミドに挿入された PCR 産物の塩基配列の解析

X-Gal/ アンピシリン含 LB 寒天培地に300 µl ずつ塗布しには（株）マクロジェン・ジャパン（京都）の Pre-Mix

37 ℃で一晩好気培養した．

シークエンスサービスを利用し，T7 promoter primer

培養した IPTG/X-Gal/ アンピシリン含 LB 寒天培地よ（タカラバイオ：滋賀）を用いた塩基配列解析を依頼しり，白色コロニーを選び，アンピシリン含 LB 液体培地

た．得られた塩基配列データよりクローニングインサーに接種し，これを37 ℃で一晩270 rpm にて振盪培養しト部分を抜き出し，BLAST（NCBI：アメリカ）によるた．培養液10 ml を2000×g で 1 分間遠心し，上清を除

相同性検索を行った．得られた塩基配列データは DDBJ

去した．

に登録し，その Accession No. は，LC427973～ LC427992

沈渣からのプラスミドの精製には NucleoSpin Plasmidである．
GenBank（NCBI：アメリカ）より，ウサギ，ウシ，

表 1 ．各種動物を宿主とする Eimeria 属の種と塩基配列の情報
ウサギ，ウシ，ヒツジ，ヤギ，カモ，ツル，ニワトリに感染す
る Eimeria 属の種と，それぞれについての Internal transcribedspacer 1（ITS-1）の塩基配列の Genebank ID を示す．

ヒ ツ ジ， ヤ ギ， カ モ， ツ ル， ニ ワ ト リ を 宿 主 と す る
Eimeria 属原虫の Internal transcribed spacer 1（ITS-1）の塩基配列データをダウンロードし，本研究で入手した
インサート配列のうち ITS-1 と考えられる部分と共にClusterX にてアライメントした．ダウンロードした塩
基配列の情報は表 1 にまとめて示した．MEGA7 4）を用

宿主

種名

Genebank ID

いて ITS-1 領域に基づく分子系統解析を行った．分子系

ウサギ（rabbit）

E.intestinalis

JX406874.1

統解析には近接結合法を用い，推定された系統樹のトポ

E.magna

JX406876.1

ロジーを評価するために1000回の反複でブートストラッ

E.media

JX406877.1

E.bovisKU351711.1

E.canadensis

AB769787.1

E.ellipsoidalis

KU351713.1

ウシ（cattle）

プ検定を行った．

結果1 ）PCR 法によるカラス腸内容物からのコクシジウムの検出
カラス腸内容物の77検体のうち，52検体（68 ％）がE.subspherica

AB769815.1

E.zuernii

AB769665.1

E.alabamensis

AB769701.1

ヒツジ（sheep）

E.wyomingensis

AB769823.1

ヤギ（goat）

E.arloingi

MF356556.1

が 8 検 体（10 ％），500 bps が 5 検 体（6 ％），600 bps

カモ（geese）

E.anseris

KF958703.1

が 6 検体（8 ％）であった．また，複数のサイズの PCR

E.fulva

KP789174.1

E.hermani

KF977223.1

E.stigmosa

KP789173.1

ツル（crane）

E.gruisAB619592.1

サイズの増幅産物が検出されたのは，上述したうちのニワトリ（chicken）

E.brunetti

GQ856314.1

330 bps から500 bps までの増幅産物が検出された検体でE.maxima

AF027726.1

E.acervulina

AY779485.1

E.mitisJN113572.1

PCR 陽性であった．そのうち，PCR 増幅産物のサイズが250 bps 以下であったものが 4 検体（5 ％），300 bps
が 3 検 体（4 ％），330 bps が19検 体（25 ％），380 bps
が17検体（22 ％），420 bps が11検体（14 ％），460 bps

増幅産物が検出されたのは18検体（23 ％）であった．
Kawahara ら は，Eimeria 属検出 用の Genus-common
プライマーセットを用いた PCR での増幅産物のサイズ
は348～546 bps と報告している 3 ）．本研究でその範囲のあり，合計で36検体（47 ％）であった．そこで，この後の検討にはこの36検体の中から 8 検体（検体 No.48，
55，60，62，63，68，73，80）を選抜した（表 2 ）．それらの電気泳動像を図 1 に示す．これら 8 検体で TA ク

家畜衛生学雑誌

74

第45巻第 3 号（2019）

表 2 ．選抜した 8 検体とそれぞれの PCR 増幅産物のサイズ
330 bps ～500 bps の増幅産物が確認された 8 検体をクローニングに選抜した．Kawahara らが予想した増幅産物のサイズである348 bps ～546 bps の範囲を灰色で示している．

検体 No.

PCR 増幅産物のサイズ（bps）

48

330

55

380

60

420

62

420

63

330

460

68

380

73

380

80

500

図 1 ．選抜した 8 検体の PCR 産物の電気泳動像
選抜した 8 検体（検体 No.48，55，60，62，63，68，73，80）では330 bps ～500 bps のサイズの増幅産物が認められる．NC：ネガティブコントロール，M：サイズマーカー．

ローニングを行い，そこから合計で20株のクローンを拾BLAST による相同性検索を行い，クローンごとに塩基い，シークエンス解析を実施した．

配列が最も高い一致率を示した種名を表 3 に示した．高い一致率を示した生物種の中には，本来の検出対象とし2 ）PCR 産物の塩基配列の決定と分子系統学的解析
20株のクローンのシークエンス解析結果について，ていたコクシジウム原虫の Eimeria 種のほかに，植物，
真菌，細菌，酵母が認められた．

菊地ら：カラス腸内容物からのコクシジウム検出75

表 3 ．20株のクローンの BLAST による相同性検索の結果
クローンごとに塩基配列が最も高い一致率を示した種名とその Accession
No. を示す．種名の分類は，本来の検出対象としていた原虫のほかに，植物，
真菌，細菌が認められた．

クローン No.

種名（ident）

分類

Accession No.

48（A）

Humulus lupuls

植物

LC427973

55B

Sorghum sp.

植物

LC427974

55C

Sorghum sp.

植物

LC427975

55D

Sorghum sp.

植物

LC427976

60（A）

Eimeria sp.

原虫

LC427977

62B

Eimeria sp.

原虫

LC42797862C

Eimeria sp.

原虫

LC427979

63A

Eimeria sp.

原虫

LC427980

63B

Eimeria sp.

原虫

LC427981

63C

Eimeria sp.

原虫

LC427982

63E

Eimeria sp.

原虫

LC427983

68A

Lagenaria sp.

植物

LC427984

68E

Echinochloa sp.

植物

LC427985

73A

Penicillium sp.

真菌LC427986

73C

Enterobacter sp.

細菌

LC427987

73E

Hordeum vulgare

植物

LC427988

80A

Candida glabrata

真菌

LC427989

80B

Penicillium sp.

真菌LC427990

80C

Candida glabrata

真菌

LC427991

80D

Eimeria sp.

原虫

LC427992

Eimeria 属原虫と高い一致率を示したインサート配列
が 存 在 し て い た の は， ク ロ ー ン No.60（A），62B，
62C，63A，63B，63C，63E，80D の 8 クローンであった．
これら 8 クローンのインサート配列と既知の Eimeria 属

系統樹を図 2 に示した．その結果，本研究の 8 クローン
株は 1 つのクラスターを形成していた．

考察の ITS-1 配列との一致率は15 ％前後であり，インサート本研究で Eimeria 属の ITS-1 配列と高い一致率を示し

配列の上流部分と既知の Eimeria 属の18S rRNA の下流たクローン No.60（A），62B，62C はそれぞれ420 bps のの一部，およびインサート配列の下流部分と既知のPCR 増幅産物 No.60，62から，クローン No.63A，63B，Eimeria 属の5.8S rRNA の上流の一部が一致していた．

63C，63E は460 bps の PCR 増幅産物 No.63から，クロー

クローンNo.60（A），62B，62C，63A，63B，63C，63E，

ン No.80D は500 bps の PCR 増幅産物 No.80から得られた80D のインサート配列のうち ITS-1 と考えられる領域ものであった．この結果から，420 bps，460 bps 及びと，表 1 のウサギ，ウシ，ヒツジ，ヤギ，カモ，ツル，

500 bps の PCR 増幅産物には Eimeria 属原虫が必ず含まニワトリを宿主とする Eimeria 種の ITS-1 の塩基配列れると仮定した場合，カラス腸内容物の77検体のうちデータを ClusterX にてアライメントし，MEGA7を用い

420 bps の PCR 増幅産物は11検体（14 ％），460 bps のて ITS-1 領域に基づく分子系統解析を行った．描画した

PCR 増幅産物は 8 検体（10 ％），500 bps の PCR 増幅産

家畜衛生学雑誌

76

第45巻第 3 号（2019）

図 2 ．ITS-1 に基づいて計算した Eimeria 属の最尤法分子系統樹
MEGA7の初期設定で系統樹を描画した．1000回のブートストラップを行い，ブートストラップ値を各節に示した．
本研究で決定した配列はクローン番号で示している．その結果， 8 クローン株は図の上方で 1 つのクラスターを形成している．また，比較に用いた Eimeria 属の種を含め，それぞれの分離源を〇（ハシブトカラス），●（ハシボソカラス），◇（カモ），■（ニワトリ），◆（ウサギ），□（ツル），▲（ウシ），△（ヤギ），▽（ヒツジ）で示した．80D は種の判定不能だったカラスである．

物は 5 検体（6 ％）から検出されたので，カラス腸内容本研究で検出された Eimeria 属と既知の Eimeria 属の物の Eimeria 属原虫は77羽中の24羽から分離されたこと

ITS-1 配列について，BLAST での相同性検索での一致になり，検出率は31 ％となる．この検出率は PCR 増幅

率は15 ％前後であり，それよりも高い相同性を示す配列

産物の大きさ（420 bps，460 bps および500 bps）だけは見られなかった．Kawahara ら（2010）はウシを宿主を根拠にしたものであるが，北海道や栃木での検出報告とする Eimeria 属において ITS-1 領域の一致率は Eimeriaを支持する結果となっており 1 ， 5 ），ある程度の目安には

種間で30 ％，種内で90 ％程度と報告しており 3 ），本研

なるのではないかと考えている．

究で得られた成績はこの報告よりも低い一致率を示した

菊地ら：カラス腸内容物からのコクシジウム検出ことになる．今回得られた配列が Eimeria 属以外のもの

引に由来する可能性は否定できないが，Eimeria 属の配列

77

用

文

献

であるとの前提では，Eimeria 属における ITS-1 領域の

1 ）古谷哲也・福本晋也・小川晴子（2014）北海道十勝

多様性の高さが推察され，本研究で検出された Eimeria

地方に棲息する野生鳥獣の腸管寄生性原虫調査．帯属は現在よく知られている家禽や家畜に感染する種では

広畜産大学原虫病研究センター共同研究報告書．

なく，カラスを本来の宿主とする未知の種である可能性

2 ）伊藤需啓（2011）最近発生の高病原性鳥インフルエが高いと推察される．実際，Eimeria 属の宿主は特異的

ンザの家禽への伝播要因．鶏病研究会報．47巻増刊

であり，生活環を複数の宿主で完結することはないとい号，23-30．

う先行研究が報告されている ．
12）3 ）Kawahara, F.,Zhang, G., Mingala, C.N., et al. (2010)

BLAST による相同性検索の結果から本研究の PCR 法

Genetic analysis and development of species-

による検出では，本来の対象としていた Eimeria 属だけ

specific PCR assays based on ITS-1 region of

でなく，植物や真菌などの遺伝子の増幅が確認された．

rRNA in bovine parasites. Veterinary Parasitology.

本 研 究 で は Kawahara ら（2010） に よ り 設 計 さ れ た

174, 49-57.

Eimeria 属検出用の Genus-common プライマーセットを4 ）Kumar, S.,Stecher, G., Tamura K. (2016) MEGA7:

用いた 3 ）．Kawahara らの研究ではサンプルの調製にはMolecular evolutionary genetics analysis version

塩化ナトリウム水溶液を用いた浮遊濃縮法により糞便中

7.0 for bigger datasets. Molecular Biology andの破片を除去し，DNA を抽出していた 3 ）．これに対しEvolution. 33, 1870-1874.

て，本研究では糞便をそのまま直接的にサンプル調整に5 ）Maeda, I., Siddiki, M.S., Sugita, S., et al. (2013)

使用したことから，抽出時に Eimeria 属以外の生物由来

Population abundance of potentially pathogenicの遺伝子が多く混入し，植物や真菌，細菌といった他のorganisms in intestinal microbiome of jungle crow

遺伝子の増幅が行われた可能性がある．Kawahara らの(Corvus macrorhynchos) shown with 16S rRNA

プライマーは様々な Eimeria 属の ITS-1 領域の増幅を目

gene-based microbial community analysis.

的に設計されており ，野生生物の排泄物中のオーシス

BiodMed Research International. Vol 2013, Article

トを精製してから Eimeria 属を含む DNA を増幅させる

ID 438956, 5 pages.

3）という目的には適していると考えられるが，本研究のよ6 ）百瀬浩・吉田保志子・光永貴之ら（2013）茨城県南

うに糞便から直接サンプルを調製する場合には Eimeria

部での調査による農場，畜舎への野性鳥類の侵入に属の検出の精度を高めるために DNA の抽出方法並びに影響する要因と侵入防止対策への評価．家畜衛生学

プライマーの設計についての再検討が必要であると考え

雑誌．39，73-83．

られる．
本研究は，カラスによる家畜や家禽への Eimeria 属の7 ）室賀紀彦（2014）口蹄疫ウイルスの感染と伝播．獣
医疫学雑誌．18，46-55．

生物学的伝播リスクの評価を目的として実施した．本研8 ）永幡嘉之・越山洋三・梅津和夫ら（2013）ハシボソ

究で用いたカラス由来の検体からは，家畜や家禽に感染

ガラスの巣で発育したアカマダラハナムグリ DNAすることが知られている Eimeria 属に近縁の遺伝子ク解析による土繭内の蛹殻および幼虫死体の種の同ローンは検出されず，カラスを宿主とする未知の種であ定．昆虫（ニューシリーズ）．16，104-122．

る可能性が高い Eimeria 属原虫のみが検出されたことか

9 ）Paul, M. Tavornpanich, S., ABRIAL, D., et al. (2010)

ら，カラスによる家畜や家禽への Eimeria 属の生物学的Anthropogenic factors and the risk of highly

伝播リスクは低いと考えられた．

pathogenic avian influenza H5N1: Prospects from aspatial-based model. Veterinary Research. 41, 28.

本研究の実施に当たり，検体の提供について茨城県猟10）Shirley, M.W., Smith, A.L., Tomley, F.M., et al.

友会，茨城県県北家畜保健衛生所及び県南家畜保健衛生(2005) The biology of avian Eimeria with an

所の関係職員の皆様，また Eimeria 属の PCR の陽性サ

emphasison their control by vaccination. Advances

ンプルの提供について一般財団法人日本生物科学研究所にご協力いただきました．協力いただいた皆様に深謝し御礼を申し上げます．

in Parasitology. 60, 285-330.
11）竹田努・青山真人・杉田昭栄ら（2015）ハシブトカ
ラス Corvus marcrorhynchos の移動距離と家畜農場への飛来の季節変動．日畜会報．86，191-199．
12）Yun, C.H., Lillehoj, H.S., Lillehoj, E.P. (2000)

家畜衛生学雑誌

78

第45巻第 3 号（2019）

Intestinal immune response to coccidiosis.

（ITS-1）塩基配列を PCR 法により検出し，分子系統学

Development and Comparative Immunology. 24,

解析を行うことで生物学的伝播リスクの評価を行った．

303-324.

その結果，77羽中24羽（31 ％）のカラスから Eimeria

要

旨

属原虫の ITS-1 と考えられる塩基配列が検出された．本
研究では検出された Eimeria 属原虫の種の同定にまでは

近年，野生鳥獣による家畜や家禽への病原体の伝播リ至らなかったが，本研究でカラスから検出された ITS-1

スクの評価を行う研究が数多く実施されている．家畜や配列による系統樹解析からは，カラスが保有していた

家禽の腸管に Eimeria 属や Isospora 属の原虫の感染を起Eimeria 属は家畜や家禽へ感染することが知られている

こすコクシジウム症は，腸炎による体重減少や発育遅延

種とは系統学的に異なる可能性が高く，カラスによる家によって畜産業に対して大きな経済的な打撃を与える

畜や家禽への Eimeria 属原虫の生物学的伝播リスクは低が，それにも関わらず野生鳥獣による家畜や家禽へのいことが推察された．

Eimeria 属原虫の伝播リスクの評価を行う研究はほとん
ど実施されていない．本研究では茨城県内で捕獲されたキーワード：Eimeria，カラス，ITS-1，野生鳥獣，コ

野生カラスの腸内容物から DNA を精製し，そこからクシジウム

Eimeria 属 原 虫 由 来 の Internal transcribed spacer 1

家畜衛生フォーラム2019
フォーラムテーマ「牛乳房炎の診断，治療及び予防の最前線」

要

旨

集

主催：日 本 家 畜 衛 生 学 会
共催：（一財）生物科学安全研究所
後援：農
林
水
産
省

家畜衛生フォーラム2019と き：令和元年12月20日（金） 13：00〜17：30
ところ：Meiji Seika ファルマ（株） 本社講堂

座長

河合一洋（麻布大学），林

智人（農研機構動衛研）

13：00～13：10
挨拶
日本家畜衛生学会理事長，（一財）生物科学安全研究所理事長
企画説明
学術企画委員会委員長
13：10～14：10（ 1 ） 乳房炎の診断と治療の考え方
河合一洋（麻布大学）
14：10～14：40（ 2 ） Coliform 乳房炎の病態と治療戦略
篠塚康典（麻布大学）
14：40～15：25（ 3 ） マイコプラズマ・ボヴィスの病原因子とその対策
樋口豪紀（酪農学園大学）
休憩

15：25～15：45

15：45～16：15（ 4 ） サイトカイン療法
菊 佳男（動衛研）
16：15～16：45（ 5 ） 乳房炎ワクチンとその効果
検崎真司（かごしま中部 NOSAI）
会場設営（16：45−16：50）
16：50～17：10
総合討論

「家畜衛生フォーラム ’19」要旨集

81

企画説明

「牛乳房炎の診断，治療及び予防の最前線」
麻布大学
農研機構

牛の乳房炎は，乳牛の疾病の中で 3 割をも占める最も大きな損害を与えている疾病で，その経済損失は年間

獣医学部 河合

動物衛生研究部門 林一洋
智人

炎に対する考え方を踏襲しながら，また新たな試みへと考えを巡らせていきたい．

800億円にも上るといわれ，生乳生産上の最も大きな損

まず初めに，これまでいわれてきている牛乳房炎に関耗要因として，また公衆衛生上，安全な原料乳の生産をする基本的な概念，予防への取組，そして現在問題の薬行う上でも酪農業界にとって喫緊の課題となっている．

剤耐性を考慮した治療法と課題について座長が解説す一方，近年では産業の技術革新と共に酪農環境が変遷る．続いて経済損失の大きい Coliform 乳房炎の病態とそし，加えて酪農家の減少と規模拡大が伴って牛舎施設，の特徴に基づいた抗菌剤治療戦略について麻布大学の篠搾乳施設の大規模化が進み，効率的に作業を行わなけれ

塚康典先生にご講演いただき，次に高度伝染性難治性乳ばならない環境を作り出している．そして大規模なミル房炎を引き起こす Mycoplasma 性乳房炎の病態，農場でキングパーラーやロボット搾乳が増加し，スマート酪農の防除対策と留意点について酪農学園大学の樋口豪紀先などの言葉も生まれ，ICT や AI を駆使した牛群管理が生にご講演いただく．そして抗菌剤削減のための試みと進められてきている．

してのサイトカイン治療について農研機構

動物衛生研

このように牛群規模や搾乳施設が大きく変化すると新究部門の菊佳男先生にご講演いただき，最後に近年使用しい牛群管理の考え方が必要となるのは必然のことであされている乳房炎ワクチンの効果について，かごしま中り，牛乳房炎の予防や治療法についてもこれからの飼養部 NOSAI の検崎真司先生にご講演いただくこととした．

環境にあったものに改めていかなければならない．今回

今回のフォーラムが現代に即した有効な乳房炎防除対の家畜衛生フォーラム2019では，「牛乳房炎の診断，治策を提言し，その理解の基にその技術が生産現場で活用

療及び予防の最前線」というテーマでこれまでの牛乳房されることを期待したい．

「家畜衛生フォーラム ’19」要旨集

83

牛乳房炎の診断と治療の考え方
麻布大学獣医学部

河合

一洋

はじめに
牛の乳房炎は，乳牛の疾病の中で，酪農家に最も大きな損害を与えている疾病であり，その経済的損失は国内全体で年間800億円にも上るといわれ，生乳生産上の最も大きな損耗要因として，また公衆衛生上，安全な原料乳の生産を行う上でも酪農業界の喫緊の課題となっている．乳房炎の発生を効果的に低減させるためには，治療と予防が相乗的に機能していくことが重要である．
一方，近年世界的に薬剤耐性（AMR）に対する関心が高まってきている．牛の乳房炎についても治療のほとんどが抗菌剤の投与に依存しているため，抗菌剤に対する更なる適正使用・慎重使用が求められている．
また，乳房炎発生の要因は牛を取り巻く環境の中で多図 1 ．搾乳衛生上推奨される作業の同時実施，未実施と体細胞数岐にわたるため，発生の予防は決して容易ではないが極めて重要であるといえる．
本稿では牛乳房炎の発生要因の概念と，乳房炎治療における適切な抗菌剤の選択と適正かつ慎重使用を行うための考え方，それに基づく治療法について解説する．

牛の抵抗性と乳房炎の発生要因
1 ．牛を取り巻く環境要因と乳房炎
乳房炎の発生要因を考える上で，まず一番に考えなけ
ればいけないのは牛を取り巻く環境である．1995年に十勝乳房炎協議会が酪農家のデータを，多変量解析を用いて分析した結果では，体細胞数に最も影響を与える要因
は，牛体の清潔度であると結論付けられた．さらに，推図 2 ．臨床型乳房炎菌種別季節変動

奨される複数の作業を同時実施することで効果的に体細胞数を低減できることを証明した 5 ）（図 1 ）．この牛体る乳房炎は，むしろ乾乳期の新規感染の影響を受け，黄の清潔度に大きくかかわる環境要因は，気候の変化，牛色ブドウ球菌（SA）による乳房炎は主に乳頭損傷や搾群の規模，牛舎構造，牛体管理，搾乳衛生，乾乳期の管乳時の感染に影響を受けることから季節による変動は小理などであることはいうまでもない．

さいと報告している15）．これらのことから乾乳期の新規（ 1 ） 気候の変化と乳房炎感染を低減し，夏期の環境性乳房炎の増加を少しでも抑気候と乳房炎発生の関係については，2013年に十勝えることができれば乳房炎全体の発生率を大きく低減す

NOSAI が行った調査（図 2 ）において，夏期に大腸菌ることにつながるといえる．

群（CO）， 環 境 性 ブ ド ウ 球 菌（CNS），酵母様真菌（ 2 ） 牛群の規模と乳房炎（Yeast）などによる環境性乳房炎の顕著な増加が認めら

牛群の規模が変化すると必然的に牛舎構造も変化してれ，その原因は，牛体衛生・環境衛生の増悪や暑熱のス

くる．例えば，小から中規模の牛群に見られる繋ぎ牛舎

トレスによる抗病性の低下などが関係しているであろう

においては，繋ぎ形式がスタンチョンかタイストールと報告している15）．また，環境性連鎖球菌（OS）によか，換気システムが正しく機能しているか，牛床の長さ

家畜衛生学雑誌

84

第45巻第 3 号（2019）

が適正か，敷料の種類と使用量，また運動場（パドック）の水捌けや整備などが影響すると思われる．また，大規模牛群で見られるフリーストールにおいては，施設に対して牛の頭数が過密になっていないか，ストールの基本設計がうまくいっているか，敷料の種類と使用量，換気システムが正しく機能しているか，通路は滑りやす
い設計になっていないかなど，牛群の規模による施設の形態により，それにあった助言が必要となる．快適な牛舎環境は牛のストレスの低減につながり，ひいては乳房炎への抵抗性を増強することにつながる．
（ 3 ） 牛体管理と乳房炎
牛体管理では，特に定期的な削蹄が重要である．過長
蹄は乳頭損傷の機会を増加させ乳房炎発生のリスクを増

図 3 ．分娩後経過日数別乳房炎発生頭数加させる．また，断尾は尾の汚れによる乳房の汚れを激減させ乳房の衛生状態を保つ方法として有用である．特に四肢の汚れは，前述のパドックなどの管理に深く関係し，汚泥で汚れた状態の牛はいかに乳房炎発生のリスクが高いかが想像できる．
（ 4 ） 搾乳衛生と乳房炎
環境性乳房炎は搾乳衛生と強く関係する．搾乳作業の中で乳頭の衛生状態に関係する部分は，乳頭の清拭と乳頭の乾燥である．乳頭の清拭は，殺菌剤に浸したタオルで乳頭側面とさらに乳頭先端をよく清拭することが重要であり，ライナー装着前の乳頭が清潔な状態になっていることが，その後の乳頭内の微生物の保菌状態に大きく係ってくる．また，乳頭清拭後のペーパータオルを使った乳頭乾燥は，搾乳中のライナースリップを防止するための重要な作業であり，ライナースリップは乳頭表面の汚れによる乳房炎発生のリスクを助長する大きな原因に

図 4 ．新規乳房内感染率の推移

なることから重要である．プレディッピングは特に環境性乳房炎の予防，ポストディッピングは伝染性乳房炎の予防に効果があるといわれているが，効果の認められている薬剤により適正濃度により行うことが重要である．
（ 5 ） 乾乳期の管理と乳房炎
乾 乳 期 の 管 理 と 乳 房 炎 に つ い て は，2013年 に 十 勝
NOSAI が行った調査（図 3 ）で，分娩後の臨床型乳房炎の発症は，分娩後10日までが最も多いことが示され，乾乳後期から分娩直後の感染を減らすことが乳房炎全体を減らすために有効であると考察している14）．Natzke
は，乾乳期の中で最も新規感染リスクの高い時期は乾乳直後 2 週間と分娩直後であることを報告し11），Bradley
and Green らは，乾乳期の中で最も新規感染リスクの高い時期は乾乳直後 2 週間と分娩前 2 週間から分娩直後であるとしている 1 ， 2 ）（図 4 ）．乾乳中期は乳汁中ラクト
フェリン濃度が上昇し細菌が容易に乳房内で増殖できない環境を作っているため，この時期は発症せずに分娩後に発症するといわれている16）．特に分娩前後においては，乳汁中ラクトフェリン濃度の減少や好中球遊走能の低下，免疫グロブリン濃度の減少などで乳房内の細菌発育阻止能が低下する 3 ， 4 ）．この時期は環境性乳房炎が発症しやすくなるため，乾乳期を含めた防除対策が必要となる．

2 ．牛の抵抗性と乳房炎（ 1 ） ストレスと乳房炎
分娩前後のいわゆる移行期に受けるさまざまなストレ
スには，分娩またはそれによる代謝の変化，暑熱，感染症の罹患などさまざまな要因があり，その結果として，
飼料摂取量の低下，免疫の低下，乳量の低下，ボディコ
ンディションスコアの急激な変化をもたらし，肝機能の低下へとつながっている．2002年 Drackley は，ストレ「家畜衛生フォーラム ’19」要旨集

85スが加わると，栄養分はストレスへの対処に配分されることを示し，ストレスが少ない時には栄養のほとんどが生産に使われるが，さまざまなストレスが重なってしま
うと生産のための栄養配分が犠牲となり，ストレスが一定の閾値に達すると臨床症状が発現し正常な生産が不可能になると提言しており，2009年には Sordillo らが，抗酸化ストレスが乳牛の免疫能に影響を与えることを報告している13）．乳房炎では，この移行期の免疫能の低下の問題と泌乳最盛期に見られる泌乳のストレスが大きく影響してくると思われる．1981年 McDonald らは，乾乳後期に大腸菌を実験感染させたところ，乾乳中は乳房炎を発症せず，分娩後13日以内に感染分房の38％において急性または甚急性乳房炎を発症したと報告している10）．また，筆者の経験においても大腸菌による甚急性乳房炎
は，分娩直後と泌乳最盛期の過ぎた頃に多発することを

図 5 ．搾乳システムと乳房炎の因果関係（アップルマン
原図改変）認めている．おそらくこれらの現象は，上記の種々のス
トレスによる乳腺への好中球の遊走の遅延が大きな原因と考えられる．

不調は，乳頭先端の損傷を引き起こし，それが乳房炎感

3 ．乳頭における防御機構と乳房炎（ 3 ） 遺伝と乳房炎

乳頭には，乳頭内に外界から容易に微生物が侵入でき染のリスクを高めることがうかがえる．
乳房の付着強度や乳頭の長さ，乳頭口の形状などの形ないように乳頭管にケラチン層やその奥にはフルステン

質的遺伝は乳房炎に大きな影響を与えることが知られてベルグのロゼットが存在し，最初の感染防御機構としている．つまり乳房の付着が弱く乳頭口が地面に近い牛，

重要な役割を果している．しかし，乳頭先端が損傷を受

ヤギ乳頭のように乳頭先端が細く突出している牛，逆にけるとこの防御機構が機能しなくなるため，乳房炎の感

乳頭口が極端に窪んでいる牛などは乳房炎罹患のリスク

染リスクは高くなってしまう．乳頭損傷は乳頭の切創，が高い．

踏傷のほか，過搾乳や搾乳システムの整備不良によっても引き起こされ，乳頭のうっ血や乳頭粘膜の出血，乳頭乳房炎の診断と治療

先端の糜爛，乳頭の突出変形を引き起こす．

1 ．牛乳房炎における抗菌剤使用の考え方と治療の有効（ 1 ） 搾乳手技と乳房炎
乳頭損傷を防ぐための搾乳手技とは，泌乳生理にあった搾乳をすることであり，乳頭の根元から握って 1 乳頭につき 4 回ずつしっかりと前搾りし，60～90秒後にライナーを装着して 5 分程度で早めに離脱することである．
不十分な前搾りや装着のタイミングを誤るとオキシトシンの分泌が遅延し，また分泌のピークが低くなるので短時間に搾乳することが不可能になる 9 ）．これが過搾乳の原因となり乳頭先端に糜爛を作る原因となる．またマシ
ンストリッピングをしてもそこから搾れる乳はごくわず
かであり，過搾乳することによる乳頭損傷のリスクの方が大きいといえる．
（ 2 ） 搾乳システムと乳房炎
搾乳システムの不良が乳頭に与える影響で最も影響度が高いのは，設定真空度やパルセーターの拍動数，拍動比の狂いである．図 5 に示すように搾乳システムの設計不良などによる真空度の変動やパルセーター，調圧器の性の評価
牛の乳房炎は，原因となる微生物が乳頭から侵入し乳腺に定着することによって感染が成立する．また，原因菌の種類によって症状が相違し，治療効果もそれらの特性に左右されることから，原因菌に基づいた対応を行う
ことが乳房炎の発生予防や効果的な治療を行う上で重要である．病原体の持つ特性は，その病原性と関連があり，宿主の免疫応答は多くの環境要因によって影響を受ける．乳房炎を引き起こす病原体は，感受性宿主に感染を引き起こす．行った治療が奏功するかどうかは，宿主側の免疫要因，病原体の感染性，病原性，薬剤耐性，そして使用薬剤の作用機序と特徴，投与経路，体内動態などの相互作用により左右される．したがって，薬剤による治療は，宿主の持つ自然防御能を補助するものであることを治療の基本的な概念として持つことが重要である．
乳房炎の治療は，抗菌剤，消炎剤などを使用して病原家畜衛生学雑誌

86

第45巻第 3 号（2019）

体の除去，宿主免疫を補助し，または感染による病態生以上のことから，獣医師は乳房炎に対して重要な疾病

理学的反応を低減させることである．臨床現場では，よであると考えているにもかかわらず，細菌検査に時間をく抗菌剤投与による病原体の除去に焦点がおかれるが，要し煩雑であることから，原因菌の同定を行い有効な抗

乳腺内感染に対する治療の有効性は，臨床徴候の低減に菌剤を選択するという，耐性菌を選択させないための必より評価することが適切と考えられる．その理由は，治要な対応が十分に行われていない部分がみられたので，療の目的が市場取引に耐えうる乳質を保持し，その牛が今後，簡易で正確な新たな同定手段の開発などを含め，長期間生存し経済的に貢献するところにあるからであ検討していく必要があると考えられた．

る．一方で，微生物学的培養検査の結果により原因菌の（ 1 ） 国内での具体的な診断および治療の実態特徴に基づいた適切な処置を施すことで効果的な治療を国内だけでなく全世界的に見ても，乳房炎の治療のほ実施することができ，結果として抗菌剤の使用を必要最

とんどは抗菌剤の使用に頼っている．乳房炎治療の多く小限に減らすことができる．したがって，その牛の病態

は，局所治療で完結しており，全身症状を伴うものにはと原因菌の特徴をよく理解した上で，総合的に治療効果

全身への抗菌剤の投与がなされる．しかしながら，前述を評価することが重要である．

のアンケートや聞き取り調査によると，必ずしも抗菌薬の適正な使用に留まっているかどうかは不明である．そ2 ．乳房炎治療の実態
2015年の家畜感染症学会における全国の獣医師に向けたアンケート調査 6 ） および私たちの追加調査の結果かの一因には，原因となる微生物種が多種にわたるため，
正確な原因菌の同定とそれに基づく治療がなされていな
いことがあげられる．

ら，まず99％の獣医師が乳房炎は重要な疾病であると認識し，97％の獣医師が乳房炎低減のために力を注ごうと

3 ．グ ラ ム 陽 性・ 陰 性 細 菌 に お け る 薬 剤 感 受 性 成 績

思っていることを伺うことができた．そして，99％の獣（MIC）医師が原因菌同定のための細菌検査は必要であると認識

2013～2015年に全国 1 道 5 県より収集した牛臨床型乳し，62％の獣医師が診療所において自ら細菌検査を実施

房炎の乳汁1349検体から分離された411株に対する各種しており，検査を実施することがある獣医師も含める

抗菌剤の MIC（最小発育阻止濃度）の結果とディスクと，実施率は81％にも上ることが明らかとなった．しか拡散法との比較を行い，乳房炎株に対する臨床的ブレイ

し一方で，細菌検査は時間がかかることや，菌名までのクポイントを検討した．MIC の結果からは原因菌種に同定が困難であること，ある程度の熟練を要することなより薬剤耐性傾向が相違することが明らかとなった．具どから，敬遠している獣医師が少なくないことも実態と体的には，グラム陽性菌はペニシリンやピルリマイシン

して明らかとなった．また，薬剤感受性試験は80％以上の感受性が高く，逆にセファゾリンに耐性傾向が見られの獣医師が行っており，結果は治療に活用されていた．

た．またグラム陰性菌に対する薬剤耐性が顕著であり，臨床型乳房炎の治療においては，抗菌剤の全身投与をフルオロキノロンのみに高い感受性を示していた．ま行う場合は獣医師の判断によって投与中止を決定していた，現在一般的に使用されているディスク法の判定基準

るが，局所治療の場合は，97％の獣医師が乳房炎軟膏をである米国臨床・検査標準協会（CLSI）の参考値と今

薬治し，獣医師の指示のもと，治癒判定は農家が確認している場合があった．また最も経済的損失の大きい
Coliform 乳房炎に使用する全身投与の抗菌剤の選択においては，地域により差が見られたが，カナマイシン，オキシテトラサイクリン，フルオロキノロンの使用が多かった．フルオロキノロンの使用については，第二次選択薬として使用すべき抗菌薬であることから，農場での治療歴等から原因菌の感受性が判断し得る場合など，やむを得ない場合を除き，第一次選択薬が無効の症例にのみ使用すべきであると思われた．
またある地域では，乳房炎スコア 2 以下（乳汁異常と局所症状のみ）の乳房炎であっても恒常的に併用して抗菌剤の全身投与を行っている事例も見られ，このような治療も耐性菌を作出する要因に繋がっているものと思われた．

図 6 ．Streptococcus uberis の OTC に対する薬剤感受性と臨床的ブレイクポイント設定例

「家畜衛生フォーラム ’19」要旨集

87

回の国内株でのディスク法の阻止円の直径には乖離があ6）．高いラインにおいて臨床的ブレイクポイントを検ることも明らかとなった．したがって，国内株の MIC

討し本調査で求められた乳房炎原因菌に対する薬剤感受とディスク直径の関係を調査し，感度と特異度のた（図性判定表は表 1 に示す通りである．

表 1 ．乳房炎原因菌に対する薬剤感受性判定表

家畜衛生学雑誌

88

第45巻第 3 号（2019）
した適正な使用を心がけることが重要であり，科学的に4 ．野外データに基づくディスク法の判定基準とその評価証明された最も有効な治療法により治療することが求められる．今回の調査より，臨床型乳房炎の治療における野外データに基づくディスク法の判定基準は表 2 に示

抗菌剤の慎重使用を行うための実際的なフローチャート

した通りである．従来の基準に基づいて治療した結果とを作成した（図 7 ）．このフローチャートは，Roberson

今回検討したディスク法の基準で判定して治療した結果

JR 12）の文献に基づき，日本の実情に合うように改変しを比較し適正であるかを検証した．これらの結果から，たものである．全ての症例がこのチャートにあてはまる

今回検討した基準を利用して薬剤の選択を行った場合，

ものではないが，この客観的な臨床スコアリングによっ

グラム陽性菌において従来と比較しペニシリン系の選択て治療方針を考えていく試みは，現在世界的にも浸透しの幅が増えたこと，従来のセフェム系の抗菌剤を第一次てきており，わが国でも取り入れていくべきと考える．

選択薬として選択した場合に比較し， 3 ， 6 ， 9 ，21日

このフローチャートでは，乳房炎スコア 1 ，2 の場合，までの治癒率はいずれもペニシリン系を第一次選択とし

第 1 病日は翌日の細菌培養検査の結果が出るまで治療をた場合の方が優れていることが明らかとなった．した

しないこととなっている．この 1 日様子見ることに対すがって，これまでのセフェム系への偏重使用は耐性菌をるリスクは，その後の短期的または長期的な乳房炎の治助長する観点から見直すべきであり，ペニシリン系の抗癒率等に影響を与えないことが報告されている 7 ， 8 ）．

菌薬とバランスよく使用することが望ましいと考えられた．グラム陰性菌については，判定基準が従来と変わらなかったため治癒率にも変化が認められなかった．

6 ．今後の展望
これまでの調査結果から，今後はいかに抗菌剤の使用削減ができるかという点についてさらに議論が進んでい5 ．臨床型乳房炎治療のフローチャート

くと思われる．また正確な原因菌の同定と同定結果に基臨床型乳房炎の治療において最も重要なことは，臨床づく適正な薬剤選択が益々重要となると考えられ，今症状と正確な原因菌の同定結果に基づく治療である．こ

後，抗菌剤の適正使用，慎重使用により，用法用量に基のことは，抗菌剤の慎重使用を行うことにも繋がるのでづく薬剤の特性を考慮した有効な抗菌剤の使用が更に必治療の基本ルールといっても過言ではない．また抗菌剤要となるであろう．

の使用については，過剰な使用なく，薬剤の特徴を活か農林水産省は「抗菌性物質薬剤耐性評価情報整備委託

図 7 ．臨床型乳房炎治療のフローチャート

「家畜衛生フォーラム ’19」要旨集

89

事業（平成27～29年度）」において調査した内容をまとselective treatment of clinical mastitis based on on-

めた「牛乳房炎抗菌剤治療ガイドブック」を公表した．

farm culture results: I. Effects on antibiotic use,

本稿はその中から乳房炎の診断と治療の考え方についてmilk withholding time, and short-term clinical and

抜粋して紹介した．今後はその普及に努めたいと考えてbacteriological outcomes. Journal of Dairy Science.
94, 4441-4456.

いる．
「牛乳房炎抗菌剤治療ガイドブック」は下記のアドレ8 ）Lago, A., Godden, S.M., Bey, R., et al. (2011) Theスからダウンロードできるので，広く現場の先生に活用

selective treatment of clinical mastitis based on on-

していただきたく思う．

farm culture results: II. Effects on lactation（http://www.maff.go.jp/j/syouan/tikusui/yakuzi/

performance, including clinical mastitis recurrence,

pdf/MastitisGuidebook1st.pdf）

somatic cell count, milk production, and cow
survival. Journal of Dairy Science. 94, 4457-4467.

Reference9 ）Mayer. H., Schams. D., Worstorff. H. et al. (1984)

1 ）Bradley, A. J., Green, M. J. (2004) The importance

Secretion of oxytocin and milk removal as affectedof the nonlactating period in the epidemiology ofby milking cows with and without manual

intramammary infection and strategies forstimulation. Journal of Endocrinology. 103, 355-361.

prevention. Veterinary Clinics of North America:10）McDonald, J.S., Anderson, A.J. (1981) Experimental

Food Animal Practice. 20, 547-568.

intramammary infection of the dairy cow with

2 ）Green, M. J., Green, L. E., Medley, G. F. et al. (2002)

Escherichia coli during the nonlactating period.

Influence of dry period bacterial intramammary

American Journal of Veterinary Research. 42, 229-

infection on clinical mastitis in dairy cows. Journalof Dairy Science. 85, 2589-2599.
3 ）Hill, A.W. (1981) Factors influencing the outcomeof Escherichia coli mastitis in the dairy cow.
Research in Veterinary Science. 31, 107-112.

231.
11）Natzke, R.P. (1981) Elements of mastitiscontrol.
Journal of Dairy Science. 64, 1431–1442.
12）Roberson, J.R. (2004) Establishing treatment
protocols for clinical mastitis. Veterinary Clinics of4 ）Hill, A.W., Shears, A.L., Hibbitt, K.G. (1979) The

North America: Food Animal Practice. 19, 223-234.

pathogenesis of experimental Escherichia coli13）Sordillo L.M., Aitken S.L. (2009) Impact of oxidative

mastitis in newly calved dairy cows. Research instress on the health and immune function of dairy

Veterinary Science. 26, 97-101.

cattle. Veterinary Immunology and5 ）Kawai, K., Kurosawa, S., Nagahata, H. (2009)
Relationship between milking management
practices and milk somatic cell counts in local
dairy farms. The Japanease Journal of Animal

Immunopathology. 128, 104-109.
14）十 勝 乳 房 炎 協 議 会（2005）MASTITS CONTROL
北海道．
15）十 勝 乳 房 炎 協 議 会（2014）MASTITS CONTROL
2nd ed.

Hygiene, 34, 141-147.

北海道．

6 ）菊佳男（2015）わが国における牛乳房炎の発生状況

16）Welty, F.K., Smith, K.L., Schanbacher, F.L. (1976)

ならびにその問題点と対策─乳牛の乳房炎に関する

Lactoferrin concentration during involution of the

全国アンケート調査から─

bovine mammary gland. Journal of Dairy Science.

家畜感染症学会誌，

6 ，109-132．
7 ）Lago, A., Godden, S.M., Bey, R., et al. (2011) The

59, 224-231.

「家畜衛生フォーラム ’19」要旨集

91

Coliform 乳房炎の病態と治療戦略
麻布大学獣医学部

篠塚
はじめに

康典

る．したがって ACM の治療に際しては，原因菌の正し

グラム陰性桿菌である大腸菌群（Coliform）の乳房内

い推定はいうまでもないが，的確な病態ステージの診断

感染によって引き起こされる乳房炎の症状は，乳汁異常とそのステージに応じた適切な対応をとることが肝要でや乳房の腫脹といった局所症状のみを示す軽度なものかある．

ら強い全身症状をともなう重度なものまで幅広い．なか本フォーラムでは ACM の病態ステージに応じた治療でも重篤な症状を呈する急性大腸菌性乳房炎（Acute

方針を述べるとともに，とくに抗菌剤の選択と使い方にColiform Mastitis: ACM）の発病病理がその他の乳房炎

ついて，臨床への応用を念頭に考えてみたい．

と大きく異なる点は，急性期の病態のほとんどが原因菌の 細 胞 壁 構 成 成 分 で あ る エ ン ド ト キ シ ン

病態ステージ（Lipopolysaccharide: LPS）に対する生体反応によって

ACM の病態の進展を図 1 に示す．感染のごく初期は形成され，その進展が極めて速いことである．LPS のもつ原因療法である感染制御が奏功するが，この時期に早期

多彩な生物活性は直接的に生体に作用するのではなく，発見・治療される例は少ない．著者の臨床経験では，臨LPS の刺激を受けた種々の細胞から産生されるサイトカ

床獣医師が初診する ACM 病態ステージは「局所感染のインを介した過度な免疫応答を招来した結果，純粋な生存在する SIRS」または「敗血症性ショック」が多く，体反応が過剰となって自己傷害的にはたらく病態をしめ

さらに病態が進んだ「多臓器障害」は予後不良であった．

す．ACM の非特異的な病像は LPS 単体の乳房内投与によってよく再現されることから，LPS チャレンジモデルを用いた ACM 病態研究がこれまでに報告

1）「局所感染の存在する SIRS」の治療戦略

されてき

SIRS は高サイトカイン血症で，この状態の持続によた．このような ACM の病態理解に全身性炎症反応症候り全身循環に支障を生じ不可逆的な病態へ進展する初期群（Systemic Inflammatory Response Syndrome:

段階でもあり，非常に危険な状態である 5 ）．したがってSIRS）の疾患概念

2）が導入され，その後高サイトカイ
3）

治療の基本方針は優先順に① SIRS からの脱却，② SIRS

ン血症と臨床症状の関連も明らかにされてきた ．臨床の原因である LPS コントロール，③感染制御，の三点

獣医師が対峙する ACM では LPS に対する生体応答に加である．病態の進展が極めて早いため，治療はこれらのえて感染が存在し（中にはすでに感染が終息している症方針に従ってできるだけ早期に行うべきであるが，①の例もあるが），治療にあたっては原因菌固有の病原性や感染の程度（今後予想される LPS の継続的な曝露）も考慮する必要がある．すなわち，ACM 治療の柱は LPS と原因菌それぞれについて必要といえる．ここで注意すべきは，治療として原因菌を死滅させた場合，細胞壁が壊された菌体から炎症の主原因である LPS が医原的に大量に放出されてしまうという，いわゆる「トレードオフ（二律背反）」の関係にあることで，この点において感染症の原因療法である抗菌剤の使い方は他の乳房炎とは異なっていることである．このような ACM 特有の事情を踏まえた上で著者が行ってきた ACM 治療と臨床反応を整理したところ，炎症制御と感染制御の治療バランスが予後にあたえる影響は病態ステージによって異なる可能性が示された 4 ）．すなわち，ACM の治療は病態ステージによって炎症制御と感染制御の優先順位が異なってい

図 1 ．急性大腸菌性乳房炎における病態の進展

家畜衛生学雑誌

92

第45巻第 3 号（2019）

SIRS（高サイトカイン血症）に対する直接的な治療法応じた適切な補液の選択と投与である．乳房内 LPS にはないので，②，③が治療の中心となる．乳房内に充満対する治療は「局所感染の存在する SIRS」と同様であや乳房内洗るが，感染の継続に伴って LPS 量は対数的に増えてい浄療法 7 ） などの積極的な物理的排除が安全で効果も高ると考えられることから局所治療の重要性も増大していい．この病態で特に気を付けなければならないことが，る．乳房内から血中への LPS 移行については一定の見感染制御として抗菌剤を用いた場合の菌の大量死滅に伴解が得られておらず不明な点が多い．血中の LPS は肝う一過性の LPS 遊離（以下医原性 LPS）である．局所感

クッパー細胞の貪食によって処理されるが，ウルソデキ

染が存在する SIRS 状態の生体に抗菌剤を用いること

シコール酸の静脈内投与による胆汁中への LPS 排泄促は，結果として誘導される医原性 LPS によってさらな進作用（ラット）が報告11）されていることから ACM でる炎症反応の誘発が危惧され，病態を悪化させる可能性の治療効果が期待される．感染制御は，感染巣である乳がある．このことに関する研究は数多くなされ，TNF-

房局所治療（抗菌剤投与や乳房内洗浄ドレナージ）を行している LPS コントロールは，頻回搾乳やサイトカイン血症

うとともに，このステージでは40％が菌血症12） との報時の LPS 刺激添加によるショック誘発事例（ヒト） 9 ）告もあることから全身をターゲットとした抗菌剤投与がが報告されるなど，人医療においては医原性 LPS の影必須となる．この病態では殺菌に伴って放出された LPS

響を認める結果10）となっており，ACM においても同様

追加刺激によるサイトカイン産生応答は低下することがの可能性が考えられる．ACM においては直接的な証明

報告13） されており，その理由として LPS 受容体である

αと LPS の相乗作用（マウス）8）

6）はされていないが，初回診療の抗菌剤非使用という間接的な手法により医原性 LPS の影響の可能性が示唆

4）さ

トル受容体（TLR4）発現の低下によるトレランス誘導14）などが考えられているが詳しいメカニズムはわかっれている．したがって，この病態における抗菌剤投与はていない．したがって，この病態ステージでは医原性慎重に行うべきで，抗菌剤の使用にともなう LPS 放出

LPS の生体への影響は相対的に小さくなっていると考えを少なくするような抗菌剤の選択と使い方をするとともられ，実際，敗血症性ショックを呈する臨床例に抗菌剤に，放出 LPS に対する生体反応の制御を組み合わせるを投与しても急激な病態悪化は「局所感染の存在するなどの工夫が必要となる．このステージは炎症制御にく

SIRS」の時ほど観察されない．生体が循環不全状態にらべ原因菌コントロールの優先順位は相対的に低いと考あるこの病態ステージにおいて抗菌剤を投与する際に注えられる．

意すべきことは，医原性 LPS の相乗的な生体への悪影
響よりも，できるだけ早く抗菌剤を目標部位にデリバ「敗血症性ショック」の治療戦略
敗血症性ショックは，侵襲に対する生体反応の集大成であり，その病態は全身の過剰な炎症反応とこれにともなう微小循環不全で，それを補正しないと死に至る状態

リーできるよう循環改善治療と組み合わせることであり，適切な投与ルートを選択することである．

ACM における抗菌剤治療の治療戦略である．この病態の治療基本方針は，①ショック状態か

SIRS と い う 病 態 ス テ ー ジ で は 血 中 で 原 因 菌12） やら の 離 脱， ② シ ョ ッ ク の 原 因 で あ る LPS コ ン ト ロ ー

LPS15）は観察されないと報告されていることから，LPS

ル，③感染制御である．ショックの治療目的は循環不コントロールや感染制御のターゲットとなる部位は局所

全，低酸素やサイトカインの過剰産生状態から引き起こ（乳房）であり，局所治療の効果が十分に期待できる時される細胞・組織・臓器障害を防止することであり，正期ともいえる．一方，SHOCK 状態にある場合は菌血症

常血圧の回復だけでなく末梢組織が必要としている酸素の可能性があり，全身投与が必要となる．しかし，臨床を供給できるようにすることである．一度ショックに例においてこの二つの病態の境界が明確であるわけでは陥ってしまうと加療によりショックが改善しても組織・なく，実際には安全マージンを考慮した上で抗菌剤は全臓器障害は完全には回復しない場合もあるので，一刻も身投与されることがほとんどである．治療に用いる抗菌

早いショックからの離脱が最優先される．敗血症性剤の選択根拠として薬剤感受性は重要であるが，ACM

ショックの病態は主として LPS 血症に基づくもので，の初回治療に用いられた抗菌剤の薬剤感受性と翌日の臨ACM におけるショックは LPS の持つ血管拡張作用によ

床反応を観察した研究16） ではこれらは関連せず，いずる「血液分布異常性ショック」だけでなく，毛細血管透れの臨床症状も良化していた．これは，初回診療時にお過性亢進にともなう血漿成分および血漿タンパクの血管ける抗菌治療は，翌日の臨床症状改善に占める割合がそ

外漏出による「循環血液量減少性ショック」を併せ持つれほど高くないことの証左であり，言い換えれば，翌日のが特徴である．したがって治療の中心は，この病態にの臨床症状から初回治療に用いた抗菌剤の薬剤感受性の「家畜衛生フォーラム ’19」要旨集

93

らのことを考慮した研究デザインによる臨床研究に加SS 群え，感染を慢性化させないための適切な抗菌剤投与期間の検証や，炎症の場における好中球の役割などを明らかにしていくことがよりよい ACM 治療法確立への足がか

RS 群

生
存
率

りになると考えている．

文献
RR 群

1 ）Blum JW, Dosogne H, Hoeben D et al.: Tumor
necrosis factor-α and nitrite/nitrate responses
during acute mastitis induced by Escherichia coli
infection and endotoxin in dairy cows, Domestic
Animal Endocrinology, 19, 223-235(2000)
2 ）Moore FA, Moore EE: Evolving concepts in thepathogenesis of postinjury multiple organ failure,

発症後日数

図 2 ．ACM 治療に用いた抗菌剤（ 1 診目および 2 診目）の薬剤感受性別の28日生存曲線
		（SS 群： 1 診目， 2 診目とも感受性あり，RS 群： 1 診目
感受性なし， 2 診目感受性あり，RR 群： 1 診目， 2 診目
とも感受性なし）

Surg Clin North Am, 75(2), 257-277(1995)
3 ）久枝啓一，有馬春樹，園部隆久ら：Escherichia coli
による乳牛の甚急性乳房炎における血清中および乳清中サイトカインの動態と臨床症状 , 日獣会誌，
61，443-448（2008）
4 ）篠塚康典，平田晴美，中谷啓二ら：乳牛の大腸菌性乳房炎に対する初回治療時抗生物質無投与療法の検討，家畜診療，55（8），501-509（2008）5 ）Ogawa M: Systemic inflammatory response

有無を推し量ることはできないともいえる．しかし，
ACM 野外例の治療では少なくとも 2 診目までに感受性のある抗菌剤を使用しなければ予後が悪くなることも報告16）

されていることから（図 2 ），ACM 治療において抗菌剤の薬剤感受性が重要であることに変わりはない．
抗菌剤の薬剤感受性は初回診療時には知り得ないので，
当該牛群の日ごろの乳汁検査にもとづいて薬剤感受性傾
向（アンチバイオグラム）を把握しておくことが重要で

syndrome ‒ a concept for avoiding organ
dysfunction induced by a “second attack”, Jpn J
Surg, 28(7), 679-681(1998)
6 ）Suojala L, Simojoki H, Mustonen K et al.: Efficacy
of enrofloxacin in the treatment of naturally
occurring acute clinical Escherichia coli mastitis, J
Dairy Sci, 93(5), 1960-1969(2010)7 ）S h i n o z u k a Y , H i r a t a H , I s h i b a s h i I e t a l . :ある．

Therapeutic efficacy of mammary irrigation

おわりに

coliform mastitis, J Vet Med Sci, 71(3), 269-

ACM の治療法に関する研究はこれまでに数多く報告されてきたが，さまざまな症例に対して同様に推奨される治療を行っても異なる臨床結果が得られてしまうことの要因の一つに，病態ステージによる治療法の違いが考慮されていなかったことが考えられる．特に抗菌剤の使い方においては，グラム陰性桿菌死滅にともなう LPS
放出の生体への影響を考慮した抗菌剤の選択や投与経路，またその影響が重大となる病態ステージの検討など
十分とは言えないのが現状である．また，Coliform 乳房炎は大腸菌やクレブシエラ属菌など，いろいろな菌種菌
株によって引き起こされるが，それぞれの微生物が持っている病原性についても不明な点が多い．今後は，これregimen in dairy cattle diagnosed with acute273(2009)
8 ）Sakaguchi S, Furusawa S, Yokota K et al.: The
enhancing effect of tumour necrosis factor-α onoxidative stress in endotoxemia, Pharmacol
Toxicol, 79(5), 259-265(1996)
9 ）Endo S, Inada K, Inoue Y et al.: Two types of
septic shock classified by the plasma levels ofcytokines and endotoxin, Circ Shock, 38, 264274(1992)
10）Prins JM, van Agtmael MA, Kuijper EJ et al.:Antibiotic-induced endotoxin release in patientswith gram-negative urosepsis : A double- blind家畜衛生学雑誌

94

study comparing imipenem and ceftazidime, J
Infect Dis, 172(3), 886-891(1995)

第45巻第 3 号（2019）2236-2242(1995)
14）Cuschieri J, Billigren J, Maier RV: Endotoxin

11）Hori Y, Ohyanagi H: Protective effect of thetolerance attenuates LPS-induced TLR4

intravenous administration of ursodeoxycholic acidmobilization to lipid rafts: a condition reversed byagainst endotoxemia in rats with obstructive

PKC activation, J Leukoc Biol, 80(6), 1289-

jaundice, Surg Today, 27(2), 140-144(1997)

1297(2006)12）Wenz JR, Barrington GM, Garry FB et al.:15）Dosogne H, Meyer E, Sturk A et al.: Effect ofBacteremia associated with naturally occuring

enrofloxacin treatment on plasma endotoxin

acute coliform mastitis in dairy cows, J Am Vet

during bovine Escherichia coli mastitis, Inflamm

Med Assoc, 219(7), 976-981(2001)

Res, 51(4), 201-205(2002)

13）Prins JM, Kuijper EJ, Mevissen MLCM et al.:16）Shinozuka Y, Kawai K, Takeda A et al.: Influence

Release of tumor necrosis factor alpha andof oxytetracycline susceptibility as a first-line

interleukin 6 during antibiotic killing ofantibiotic on the clinical outcome in dairy cattle

Escherichia coli in whole blood: Influence ofwith acute Escherichia coli mastitis. J Vet Med

antibiotic class, antibiotic concentration, andSci, 81(6), 863-868(2019)presence of septic serum, Infect Immun, 63(6),「家畜衛生フォーラム ’19」要旨集

95

マイコプラズマ・ボヴィスの病原因子とその対策
酪農学園大学獣医学群獣医学類

獣医衛生学ユニット

樋口
1 ．はじめに

豪紀

推移として2010年当時は各農場規模で陽性率にほとんど

マイコプラズマ性乳房炎が日本国内で最初に摘発され差が認められなかったが，2012年頃から差が明確になりたのは1977年である．それから凡そ42年の時が経過し，現在に至っている．これらの本報告は，これまで臨床獣

酪農場の規模拡大とともに問題はより顕在化している．

医師が感覚的に捉えていた発生因子を初めて学術的に証

2009年頃には大規模農場を中心としたマイコプラズマ性明した研究として高く評価されている．ただし，これは乳房炎のアウトブレイクが全国的に発生し，発見時の陽あくまで発生状況を疫学的および俯瞰的に見た結果であ性率が20〜50％という事例が多く報告された．様々な状り，経営規模の小さい農場でも一定のリスクとして認識

況の中で廃業に至った農場も多かった．その後，遺伝子することは重要である．

検査（PCR）による迅速検査技術が開発され，獣医師による速やかな介入が可能となり，アウトブレイクは数年

3 ．検査技術の構築の間に大幅に減少した．一方で，当時から予防対策プロ

現在，日本国内では培養法と PCR 検査を組み合わせ

グラムの一つとして行ってきたバルクタンクスクリーニ

たハイブリッド型の迅速検査法が広く普及している．感

ングの陽性率を見ると，横ばい，もしくは微増傾向で推度，特異度，簡便性，迅速性および経費等を総合的に鑑移している．本項では，マイコプラズマ乳房炎の原因微

みるに，現在，日本国内で用いられている PCR を基礎

生物に着目しその病原因子や制圧技術について述べたとした迅速検査が本病制圧に最も有効である．本法は培い．

養法の特徴である「生きた菌を増やす」ことでより検出

2 ．疫

学

感度を上げるとともに，その欠点であった「検出時間」と「菌種同定」を PCR によって補うものである．増え防除対策プログラムとして日本国内で初めてバルクタた菌を菌種別の特異プライマーにより高い精度で迅速にンクスクリーニングが実施されたのは2009年である．当検出することが可能である．家畜保健衛生所や民間の検時，十勝農業協同組合連合会・生乳検査センターの所長査会社でも様々な形でマイコプラズマの遺伝子検査が行であった太田雄大ら（現十勝農業協同組合連合会・畜産

われている．マイコプラズマ性乳房炎症状の進行は早部長）によって提唱され，酪農学園大学の樋口・岩野ら

く，さらに短時間で農場内に拡散する．PCR による遺に よ っ て 検 出 技 術 の 開 発 が 行 わ れ た（Higuchi et al.,

伝子の迅速検査は，こうした本病の特性に対応しうる検2011）．その後，北海道内でもバルクタンクスクリーニ

査技術として普及している．

ング事業が推奨され，現在の実施率は概ね60％とされている．北海道におけるバルクタンの陽性率は約 2 〜 5 ％4 ．臨床学的特徴の間で安定的に推移しているが，地域によっては上昇傾

マイコプラズマ性乳房炎の特徴的な臨床症状は，泌乳

向を示す市町村もあり，継続的な監視が必要である．

量の低下および泌乳停止である．酪農家の稟告では「最マイコプラズマ性乳房炎の発生要因については，2019

近，急に乳が減る牛が増えた」と言うのが特徴的であ

年に Murai らによって日本国内の状況が報告されている

る．マイコプラズマは乳汁への排菌量が約109CFU にお（Murai et al., 2019）．本論文により，①飼養頭数，②飼よぶこともあり，他の乳房炎原因菌種よりも高い菌数を養形態（タイストール vs フリーストール），③経営形態示すことが多い．一方で，感染に必要とされる菌数は約（家族経営 vs 法人経営），④外部導入（有り vs 無し）

70CFU と，わずかな菌であることも特徴である．そのが有意な因子として特定されている．端的に言えば，ため，農場内での伝搬が非常に早く，連続的に発生する「大規模農場ではより発生しやすい」ということであ事例が多い．また，マイコプラズマは乳頭口を介さなくる．その裏付けとして農場規模別に陽性率を比較するても感染が成立する，唯一の乳房炎原因菌である．すなと，年間出荷乳量が2,000 t 未満の農場では 5 ％以下であわち，体内で血行性にも移行し感染が成立するため，分るが，5000 t を超えると15〜30％まで急激に上昇する．

房間の広がりも早い．一般的には前後の分房に感染が広家畜衛生学雑誌

96

第45巻第 3 号（2019）

がり，そこから左右への広がりを見せる．こうした特徴

マ（M. bovis）を保持している個体が一定数存在する．

的な感染様式から，マイコプラズマ乳房炎では盲乳は不農場によってもその浸潤率は異なるが，日本国内では概適切とされている．感染初期において明確な臨床症状は

ね20〜30％とする報告が散見される．健康な個体では概ほとんど示さないが，時間経過とともに乳房の著しい硬ね 6 ヶ月齢から 1 歳齢で鼻腔から自然に消失する．健康

結とそれに続く急激な退縮を認める．一部で発熱等の全な子牛では鼻腔内に定着しても明確な呼吸器症状を示さ

身症状を認める場合もあるが，それらを示さない個体もないが，同じ菌が乳腺に侵入すると容易に乳房炎の発症多い．

に至る．子牛が健康である場合，マイコプラズマの汚染

5 ．主要菌種と病原因子
ウシに感染性を有するマイコプラズマ種は10菌種程度を想定しにくいが，作業着や靴，手指に付着したマイコプラズマが搾乳棟に持ち込まれる事例も多い．
3 ） 農場内で広がる原因で あ る が， そ の 内， 乳 腺 で 病 原 性 を 発 現 す る 種 は農場において感染が拡大する最大の要因は搾乳であM. bovis，M. californicum，M. bovigenitalium お よ びる．先述の通り，乳汁への排菌は109CFU/ml である．

M. canadense の 4 種である．中でも M. bovis は日本国

一方，感染に必要な菌数はわずかに約70CFU 程度であ内のみならず，世界的にも最も広く浸潤しており，さらる．従って，わずかな乳汁であっても，搾乳システムにに明確な臨床症状を伴うことが多い．M. bovis の病原因より容易に感染拡大する．ロボットや消毒剤を含むバッ子に関する報告は少なく，バイオフィルムの生成能に関

クフラッシュ等の自動洗浄システムは本病制圧に有効とするわずかな報告に止まっている．我々の研究ではされている．また，漏乳や鼻汁によって排菌されたマイM. bovis が生体の免疫担当細胞に作用しその機能を制御

コプラズマはバイオフィルムの形成により，環境でも一す る こ と を 明 ら か に し て き た（Nishi et al., 2019,

定期間生存する．そのため，感染個体が潜在している農Gondaira et al., 2018）．また，Goto らは PD-1 に関する解場では，飼養環境下でも感染が拡大する場合がある．

析を通し，M. bovis による免疫抑制機構について報告している（Goto et al., 2017）．M. bovis は生体内における7 ．効果的な防除対策プログラム

長期生存戦略の一つとして，免疫機能を高度に調整し，①

新規導入牛における検査の徹底

このことが病変部における M. bovis の急激な増殖や体内マイコプラズマ乳房炎の早期清浄化において，「感染移行を可能にするとともに，特徴的な臨床症状の原因にルート」の制御は重要である．農場に新たに導入されるなっているものと推察される．

個体（外部導入牛（初産および経産）と自家産初産）は

6 ．感染経路

分娩時に全て検査し，検査結果が出るまで通常の群に入れないことが望ましい．また，これらの個体について，

1 ） 牛が持ち込む場合

搾乳順番は一番最後にする．

①②

外部導入牛による持ち込み

ヒトの動線と衛生管理

外部からの導入は牛によってマイコプラズマが持ち込

ヒトが農場内にマイコプラズマを持ち込むことは，作まれる事例で最も頻度が高い．新規就農や規模拡大のた業手順を精査することで容易に防ぐことができる．連続めの一括導入，によって農場に持ち込まれる．泌乳開始

的にマイコプラズマ乳房炎の発生を認めた農場でも，子まで検査ができないため，特に初産牛や乾乳期の個体に牛飼育施設と搾乳施設間の作業動線や衛生管理（専用のあっては着地検査が困難である．

長靴や作業着を使用）を徹底することで，短期間で完全②制圧に至った事例もある．臨床的に健康な子牛であって自家育成牛による持ち込み
自家育成牛には心理的にも一定の安心感があるため，も一定数の個体において，鼻腔内にマイコプラズマを保通常マイコプラズマの検査を積極的に実施している農場有しているとの認識が重要である．

でも，自家育成牛は検査対象としない場合が多い．しか③

日常的な観察による異常牛の摘発

し，子牛期にマイコプラズマ感染があった場合，長期間

酪農家（または作業者）により異常牛がいかに早く摘にわたって菌が体内（扁桃等）で保持され，生体防御能発されるか，このことは，個体の治癒率や牛群の感染率が低下する分娩後間もないタイミングで乳房炎を発症すに最も強く影響する．先に示した特徴的な臨床症状につることもある．前述の通り，血液感染によっても乳腺感

いては，一般的な普及情報の一つとして日頃から酪農家

染が成立するため，初産で発症する個体も多い．

に提示しておくことが望ましい．マイコプラズマ乳房炎2 ） 人が持ち込む場合を知っていた酪農家と，知らなかった酪農家では，農場

呼吸器症状を示さない子牛でも鼻腔内にマイコプラズの感染率や清浄化に要する時間に統計的な差が生じる．

「家畜衛生フォーラム ’19」要旨集④

バルクタンクスクリーニング

97

じられている．摘発と淘汰による対応がなされているもバルクタンクスクリーニングは牛群に潜在する感染個のの，十分な制圧には至っていないのが現状である．日

体を摘発するための有効な方法として，一般的に広く用

本国内では，マイコプラズマ性乳房炎に対し複数の判断いられている．300頭程度に 1 頭の感染個体を摘発する基準により淘汰もしくは治療が選択されており，生産性ことも可能であるが，一方で，感染初期など，排菌数がの回復に至る症例も多い．本病は子牛におけるマイコプ

低い場合には摘発できないこともある．実施頻度は地域

ラズマ感染症とも深く関連しており，農場における総合や牛群規模によっても異なるが，現状では概ね年に 4 〜

的な衛生対策技術の構築が求められる．

6 回程度である．牛群規模が大きい場合には月に 1 〜 2回程度実施することもある．スクリーニングで陽性と

参考文献

な っ た 場 合 は 菌 種 同 定 を 実 施 し，M. bovis，M.

Higuchi et al., J Vet Sci 2011. 12: 191-193.

californicum，M. bovigenitalium および M. canadense でGoto et al., Immun Inflamm Dis. 2017. 5: 355-363.

は速やかに全頭検査を行うことが望ましい．

Nishi et al., Vet. Immunol. Immunopathol. 2019:8 ．おわりに2017年にこれまで発生のなかったニュージーランドでマイコプラズマ感染症が確認され，国を挙げて対策が講

10.1016/j.vetimm.2019.109920.
Murai et al., Res Vet Sci 2019. 123: 29-31.
Gondaira et al., J Vet Sci 2018. 19(1): 79-87.

「家畜衛生フォーラム ’19」要旨集

99

サイトカインを用いた牛の乳房炎防除技術の開発と展望
国立研究開発法人

農業・食品産業技術総合研究機構

動物衛生研究部門

病態研究領域

菊1 ．はじめに佳男用された．サイトカインは獣医療分野を含め，従来の技

牛の乳房炎は，病原微生物の乳房内感染に起因し，乳術では制御が困難であった疾病に対して，宿主の免疫機質ならびに泌乳量の低下を招く経済的損失の大きい疾患

能を調節することによって治療効果を得るバイオ医薬品

である．わが国の乳用牛等飼養頭数は年々減少の一途をとして利用されている．

1）

が，乳房炎を含む泌乳器病の発生件数は我々が開発を進めているサイトカイン療法では，抗菌減少の兆しを見せておらず，現在の飼養管理技術や獣医薬治療とは異なり病原微生物に直接作用せずに牛の生体療技術，搾乳機器の性能だけでは，乳房炎防除が未だに防御機能を高めることによって感染を制御することを目困難であることを示している．現在の酪農生産現場で的としている．乳房炎罹患乳房内にサイトカインを投与

は，泌乳期乳房炎の治療や乾乳時の乳房炎治療および予した場合，サイトカインは乳房内に存在する免疫細胞に防を目的とした乳房内あるいは全身への抗菌薬投与を働きかけ，それらの機能の増強や更なる免疫細胞の動員行っているが，近年の薬剤耐性（AMR）問題に対するを促進させる．すなわち一時的に乳房内の免疫細胞機能

意識の高まりから，今まで以上に抗菌薬の使用法についの質と量を高めることによって，侵入した微生物を排除て慎重に行う必要がある．

することを期待した治療技術である．これらの機能面に辿っている

AMR に対して，世界保健機関（WHO）では AMR グ

加え，開発したサイトカインは牛型であるため，異物とローバルアクションプラン（2015年）2 ），わが国では AMR

しての残留の危険性や薬剤耐性菌の出現も無く，安全面

3）

対策アクションプラン（2016年） が策定され，その対策が進められている．また，2016年の G7伊勢志摩サミッ
トにおいても AMR について議論され，感染症に対して既存の抗微生物薬の有効性を維持しながら，代替治療法
4）でも優れていると考えられる．

3 ．乳房炎に対するサイトカイン療法のねらい
現在の牛の乳房炎に対する治療は，抗炎症剤やホルモなどの研究開発を促進することが宣言されている ．こン剤，補液，乳房内洗浄等による抗菌薬以外の治療と，れらの情勢から，乳用牛の乳房炎治療を含む家畜への抗全身あるいは乳房局所への抗菌薬を用いた治療に大別で菌薬使用の低減を早急に取り組むとともに，ワンヘル

きる．ここに動物用バイオ医薬品としてサイトカイン製

ス・アプローチへの取り組みとして，感染症制御の新た剤が新たに加わった場合には，次のような波及効果が得なツールを手に入れる必要があると考えられる．そこでられると考えている．臨床獣医師にとっては，治療方法

我々は，免疫調節機能を有するタンパク質であるサイトの選択の幅が広がり，治療精度の向上が期待できる．酪

カインに着目し，それを用いた乳房炎防除技術の開発に

農生産者にとっては，抗菌薬治療に比べ，生乳出荷停止

5−9）．本講演では，免疫賦活機能を有す

期間が短縮し生産性の向上が見込まれる．また，国内農るサイトカインである顆粒球マクロファージコロニー刺業に目を向ければ，抗菌薬の低使用あるいは不使用の生激因子を用いた乳房炎防除技術の開発と展望について紹

乳生産が可能となり，国内外に競争力の高い乳製品を提介したい．

供することができる．さらに，国際的な視野に立てば，取り組んできた2 ．サイトカイン療法とそのメリット
サイトカインとは，免疫細胞をはじめとする種々の細胞から産生される情報伝達物質の総称であり，免疫系の調節や炎症反応の惹起，細胞の分化・増殖，抗腫瘍作用
等に関連している10）．人や愛玩動物の医療分野において重要課題である薬剤耐性菌の解決策のひとつとして貢献できる可能性がある．これらのようにサイトカインが乳房炎治療の選択肢に加わることは，酪農産業の様々な部
分で新たな可能性を広げていくことに繋がる．

4 ．乳房炎に対するサイトカイン療法の試み

は，抗ウイルス作用を持つインターフェロン製剤の利用

乳房内の免疫細胞機能を高める効果が期待できるサイが広まっており，過去には産業動物分野においても人型

11）
トカインとして，顆粒球コロニー刺激因子（G-CSF），

インターフェロンが子牛のロタウイルス感染症対策に使

12）
顆粒球・マクロファージコロニー刺激因子（GM-CSF）

家畜衛生学雑誌

100

第45巻第 3 号（2019）

ならびにインターロイキン 8 （IL-8）13）が挙げられる．

組換えカイコ発現系を選択した理由のひとつに，本手法

G-CSF は顆粒球系前駆細胞，GM-CSF は顆粒球およびマでは発現プロセスにおいて組換え微生物を使用せず，発クロファージ系前駆細胞に作用して，それぞれの分化・現産物を含む抽出試料がカルタヘナ法の対象外となり，成熟，機能亢進を促進するサイトカインである．また，取り扱いが容易に行えるメリットも挙げられる．これにIL-8 は好中球への走化性活性および脱顆粒・酵素放出をよって発現産物の実験室間の移動や生産ラインの外への促すサイトカインである．我々はバキュロウイルス発現

輸送において煩雑な手続きが不要となり，酪農現場で直系を用いて作製したこれらのサイトカインを乳房内投与

ぐに使用することができる利便性を有している．

することによって，一時的に乳房内に好中球等の白血球

遺伝子組換えカイコ発現系によって作製された牛 GM-を誘導させ，乳房炎治療に繋げることを目指してきた．

CSF（TGrbGM-CSF）を製剤化するための基盤情報のその中で，各サイトカインを乳房炎罹患牛の乳房内に単ひとつに，諸条件下における安定性評価が挙げられる．

回投与，反復投与あるいは併用投与等を行い，その有効

乳汁あるいは PBS 中の TGrbGM-CSF が，37℃保持ある性を検証した．その結果，GM-CSF と IL-8 に一定の治療

いは凍結融解反復条件下において生物活性が維持される効果が確認された 5 ）．その概要は以下の通りである．

か検討したところ，乳汁および PBS 中の TGrbGM-CSF

黄色ブドウ球菌（SA）性乳房炎に罹患している泌乳中は37℃で 0 ， 2 ， 8 ，24時間の条件下，あるいは，凍結期のホルスタイン牛（乳汁中体細胞数：平均70万cells/mL）

融解を 1 ， 3 ， 5 回繰り返す条件下において安定的な生を供試し，バキュロウイルス発現系を用いて作製した組物活性を示した．このことから，作製した TGrbGM-

換え牛サイトカイン（BVrbGM-CSF：400 µg/5 mL/ 乳

CSF は，乳房内においても活性が維持され，製剤化時に房，BVrbIL-8 ：1 mg/5 mL/ 乳房）ならびに陰性対照は種々の条件下でも保存が容易であることが確認でき（リン酸緩衝液（PBS）：5 mL）を乳房内に注入した．

た16）．

その結果，乳房炎の指標となる California Mastitis Test

次に，泌乳期の乳房炎罹患牛に対する TGrbGM-CSF（CMT）変法のスコアが，投与後14日において投与前に治療試験の概要を以下に示す16）．乳房炎自然発症牛を比較し，BVrbGM-CSF 群ではスコア2.00±0.37から0.83

供 試 し， そ の 乳 房 内 に TGrbGM-CSF（GM-CSF 群：±0.40，BVrbIL-8 群ではスコア2.22±0.28から1.22±0.40

400 µg/5 mL/ 乳房）あるいは PBS（対照群：5 mL/ 乳房）と両者ともに減少し，両者ともに乳房炎治療効果が期待を 単 回 注 入 し， そ の 治 療 効 果 を 乳 性 状（ 体 細 胞 数，できた．両者の CMT 低減効果は同程度であったが，CMT スコア，細菌数等）および血液性状検査（貪食細BVrbGM-CSF に関しては乳汁中の貪食細胞機能および胞 機 能， サ イ ト カ イ ン 濃 度 等 ） に よ り 評 価 し た．

単核球細胞性免疫応答の亢進がみられ，BVrbIL-8 に関TGrbGM-CSF および PBS 乳房内投与後14日間では体温

しては乳汁中の貪食細胞機能の亢進がみられた．これら等の一般症状に変化は見られなかったが，GM-CSF 群にの作用によって，SA 感染した乳房内の免疫環境が改善

おいて投与後14日までに 9 頭中 7 頭で体細胞数が低減しされたと考えられた．また，乳房内の免疫応答はサイト

た．治療効果が見られた 7 頭は，投与前に比較し CMT ス

カインによって共通する部分と異なる部分が生じること

コアが2.0±0.2から0.6±0.2，体細胞数が123±34万個 /mLが 明 ら か と な っ た． 一 方，CMT の 結 果 に お い て，から25± 6 万個 /mL に有意に低減しており，TGrbGM-

BVrbIL-8 注入区は注入後0.25時間に BVrbGM-CSF 注入

CSF の体細胞数低減効果が明らかとなった．TGrbGM-

区よりも有意に高い値となったことから，反応が過度にCSF 投与後の血液ならびに乳汁の生化学および免疫機能なる可能性が考えられた．これらの結果から，乳房炎治検査を行ったところ，注入直後から乳汁中の貪食細胞機

療には乳房内の免疫細胞機能をバランスよく亢進させる

能の亢進が観察され，その後ヘルパー T 細胞およびメモ

BVrbGM-CSF が実用化に結び付きやすいと判断した．

リー T 細胞の割合増加も見られた．また，血中の炎症性5 ．遺 伝子組換えカイコ発現系で作製した牛 GMCSF による乳房炎防除技術の開発に産生増加していることも観察された．一方，供試した

乳房炎治療に用いるサイトカインをその有効性等からかった 2 頭においては，TNF-αおよび IL-1βの上昇が見

GM-CSF と定めたが，酪農生産現場で利用するためにられず，これらの因子が治療効果に関連することが考えは，大幅な作製コスト削減が必要であった．そこで，低ら れ た． こ れ ら の こ と か ら， 泌 乳 期 乳 房 炎 に 対 す る

コストかつ大量生産が可能であり，ウイルス混入の危険

TGrbGM-CSF の治療効果と作用機序の一端が明らかに性のない遺伝子組換えカイコを用いたタンパク質発現技することができた．

14，15）

術を利用した．また，様々な発現系の中から遺伝子

サイトカイン（TNF-α，IFN-γ，IL-1β）が注入後徐々9 頭のうち，試験期間中に体細胞数低減効果が得られな

続いて，乾乳用乳房内注入剤（乾乳軟膏）による乾乳

「家畜衛生フォーラム ’19」要旨集

101

導入の代替として TGrbGM-CSF を乳房内に注入し，分い将来にサイトカインがバイオ動物用医薬品として，新

娩後の乳房炎発生状況に及ぼす影響を評価した17）．乾乳

たな乳房炎治療薬となるよう研究開発を進めている．

3 日前に供試牛の 4 分房の乳汁細菌検査によって菌種お今回紹介したサイトカインが，抗菌薬や抗炎症剤等とよび菌数を確認し，乾乳直前に CMT 法および体細胞数

ともに乳房炎治療薬として新たに加わることによって，測定により罹患程度を確認した．乾乳導入は，乾乳時に診療時の薬剤選択の幅が広がり，乳房炎の治療効率を高TGrbGM-CSF（試験区）あるいは乾乳軟膏（対照区）

める可能性が考えられる．また，それによって，抗菌薬を乳房内単回注入することによって行った．乾乳期間中

使用量の低減や生産者の経済的損失の低減，さらには，の経過観察と分娩時の状況観察を行った後，分娩後 0 か

消費者に対してより良質な牛乳ならびに乳製品を提供で

ら 4 週目までの乳性状検査（細菌数および体細胞数等）きるようになることが期待できる．

を行い，その結果から，TGrbGM-CSF を用いた乾乳導入の治療および予防効果を評価した．対照区と試験区に

7 ．謝辞

おける分娩後の体細胞数および生菌数は大きな差はな

本研究は JSPS 科研費（19780236，16K08065）ならびく，TGrbGM-CSF による乾乳導入でも乾乳軟膏と同等に農研機構生研支援センター「革新的技術開発・緊急展の効果が得られることが示唆された．また，TGrbGM-

開事業（うち経営体強化プロジェクト）」の支援を受け

CSF の濃度を，400，100，40 µg/5 mL/ 乳房と 3 区分にて実施した．

分けて試験したところ，40 µg/5 mL/ 乳房に比べて，
400，100 µg/5 mL/ 乳房の濃度において良好な成績が得

8 ．引用文献られた．さらに，乾乳前の乳性状によって，乳汁中から1 ）農林水産省経営局，平成29年度家畜共済統計表，東細菌が検出されず体細胞数が10万個 /mL 未満の分房を京（2018）

健康分房，細菌が検出され体細胞数が30万個 / 以上の分

2 ）W H O G l o b a l a c t i o n p l a n o n a n t i m i c r o b i a l

房を乳房炎分房として，TGrbGM-CSF による乾乳導入

resistance; https://www.who.int/antimicrobial-を行ったところ，既存の乳房内感染菌（コアグラーゼ陰

resistance/global-action-plan/en/

性ブドウ球菌（CNS），無乳性レンサ球菌（SAG），環境

3 ）厚生労働省：薬剤耐性（AMR）対策アクションプ性レンサ球菌（OS），黄色ブドウ球菌（SA））の減少あ

ラ ン2016-2020：www.mhlw.go.jp/file/06-Seisakujo

るいは新規感染の阻止に有効である可能性が示され，
TGrbGM-CSF を用いた乾乳導入は，乳房炎治療あるいは予防を目的とした新たな乾乳処置技術となる可能性があると考えられた．

uhou-10900000/0000120769.pdf
4 ）外 務 省，2016

G7伊 勢 志 摩 首 脳 宣 言（ 仮 訳 ），http://www.mofa.go.jp/mofaj/files/000160266.pdf
5 ）Kiku Y, Ozawa T, Takahashi H, et al. (2017) Effect

TGrbGM-CSF を用いた泌乳期治療試験ならびに乾乳of intramammary infusion of recombinant bovine

導入試験の結果から，現在では，動物用医薬品企業と連GM-CSF and IL-8 on CMT score, somatic cell

携しながら，TGrbGM-CSF の安定性評価や薬理作用，

count, and milk mononuclear cell populations in

作用機序の解析を進めるとともに，TGrbGM-CSF の乳

Holstein cows with Staphylococcus aureus

房内拡散性を高める技術についての特許出願を行っていsubclinical mastitis. Vet Res Commun., 41, 175-182.

る．これらを踏まえて，TGrbGM-CSF の濃度，形状，

6 ）Kiku Y, Nagasawa Y, Tanabe F, et al. (2016) The

容器，基剤，注入方法等を検討し，乳房炎防除効果が得

cell wall component lipoteichoic acid of

られる適正条件を定めている段階である．

Staphylococcus aureus induces chemokine gene

6 ．おわりに

expression in bovine mammary epithelial cells. J
Vet Med Sci., 78, 1505-1510.

牛の乳房炎治療には抗菌薬が有効であることは明らか

7 ）Ozawa T, Kiku Y, Mizuno M, et al. (2012) Effect ofであり，今後も抗菌薬の使用無くして乳房炎の治療は考intramammary infusion of rbGM-CSF on SCC and

えられない．しかしながら，過剰な使用は人や動物に負expression of polymorphonuclear neutrophilの影響を与えることが危惧されるため，適正な使用が常adhesion molecules in subclinical mastitis cows.

に必要とされる．また，今回紹介した組換えカイコ発現

Vet Res Commun., 36:21-7.

系で作製するサイトカインは，大量生産が可能であり，8 ）Takahashi H, Komatsu T, Hodate K, et al. (2005)

生産現場で活用できるレベルまで生産コストを抑えるこ

Effect of intramammary injection of RbIL-8 onとが可能になりつつある．これらのことから，我々は近milk levels of somatic cell count,家畜衛生学雑誌

102

第45巻第 3 号（2019）

chemiluminescence activity and shedding patterns13）Gerszten RE, Garcia-Zepeda EA, Lim YC, et al.

of total bacteria and S. aureus in Holstein cows

(1999) MCP-1 and IL-8 trigger firm adhesion ofwith naturally infected-subclinical mastitis., J Vet

monocytes to vascular endothelium under flow

Med B Infect Dis Vet Public Health, 52, 32-37.

conditions. Nature 398:718–723.

9 ）Takahashi H, Odai M, Mitani K, et al. (2004) Effect14）Miyazawa, M., Tatematsu, T., Sezutsu, H., et al.

of intramammary injection of rboGM-CSF on milk

(2016) Transgenic silkworm expression system forlevels of chemiluminescence activity, somatic cellmass-production of animal cytokines. Peptide

count, and Staphylococcus aureus count in Holstein

Science 2015, 329-332.

cows with S. aureus subclinical mastitis., Can J Vet
Res, 68, 182-187.
10）Ian RT : Veterinary Immunology: an introduction,
7th ed, 133-144, Saunders, Pennsylvania (2004)

15）宮澤光博，立松謙一郎，瀬筒秀樹ら（2014）遺伝子
組換えカイコを用いたウシ GM-CSF の大量調製，日本乳房炎研究会報，18，59-61．
16）菊佳男，櫛引史郎，宮澤光博ら（2018）組換えカイ11）Powell EJ, Reinhardt TA, Casas E, et al. (2018) The

コ発現系で作製した牛 GM-CSF の泌乳期乳房炎治療

effect of pegylated granulocyte colony-stimulating

技術としての有用性，日本乳房炎研究会報，22，

factor treatment prior to experimental mastitis in

35-38．

lactating Holsteins. J Dairy Sci. 101, 8182-8193.
12）Fleetwood AJ, Cook AD, Hamilton JA (2005)
Functions of granulocyte-macrophage colonystimulating factor. Crit Rev Immunol., 25:405–428.

17）菊佳男，平林晴飛，長澤裕哉ら（2016）遺伝子組換
えカイコ発現系で作出した牛 GM-CSF の乾乳時乳房内投与の効果，日本乳房炎研究会報，20，63-66．

「家畜衛生フォーラム ’19」要旨集

103

乳房炎ワクチンとその効果
かごしま中部農業共済組合

検崎真司

乳房炎は乳頭口から乳房内へ侵入した細菌などの微生

2 ．乳 房炎ワクチン（以下，スタートバックⓇ ）と作用機序物が定着，増殖することにより引き起こされる乳腺の炎

スタートバックⓇは2016年 9 月より日本国内で初めて症であり，発症すると，乳量・乳質低下のための販売利販売された乳房炎ワクチンで，黄色ブドウ球菌（以下，益の損失だけでなく，治療費や淘汰・更新費用，更にはSA），大腸菌群およびコアグラーゼ陰性ブドウ球菌（以治療中の飼料費・乳の廃棄費なども含め，酪農業におい

下，CNS）による臨床型乳房炎の症状軽減に効果がある

1 ．はじめにては経済損失の最も重大な原因の一つとなっている

1 ，2 ）．

とされている．このワクチンには SA の（CP8）SP140

乳房炎の発生要因としては牛を取り巻く環境，気候，

株と大腸菌の J5株が含まれており，どちらも不活化菌体

牛体管理，搾乳衛生，搾乳システム，遺伝など多岐にわ株となっている 2 ， 5 ）．

たるため，乳房炎防除をおこなうには要因となり得るこSA（CP8）SP140株 は ス ラ イ ム 関 連 抗 原 複 合 体

られの多くの事項に広く目を向け，総合的に判断してい（SAAC）を多く産生する株となっており，菌体に対す

3）かなければならない ．

る免疫に加え，バイオフィルム（スライム）形成に対す

その中で，大腸菌群による乳房炎は通常の急性症状でる免疫も誘導される．また，多くの CNS もバイオフィ

回復するものと，内毒素であるエンドトキシンショック

ルム産生することが既に知られており，CNS などの多によりショック症状を引き起こして甚急性乳房炎に症状様なブドウ球菌に対してもバイオフィルム形成を抑制が進行するものがあり，適切な治療を実施しないと死にし，好中球による細菌の補足を容易にさせ細菌を死滅さ至ることがある．大腸菌群はグラム陰性桿菌であり，甚せることができる 2 ， 5 ）．

急性乳房炎牛の原因菌として大腸菌（Esherichia coli）

また，大腸菌 J5は大腸菌群に共通のコア多糖という抗およびクレブシエラ菌（Klebsiella pneumoniae）がよく原が露出した株となっており，通常細胞壁外膜の最外層

知られている．グラム陰性菌はグラム陽性菌と比較してにある O 抗原を欠損しており，コア多糖はグラム陰性桿増殖スピードが速いために，重篤な症状を引き起こし，菌でほぼ一定であり，このため広くグラム陰性桿菌に対斃死や廃用の転帰をとり，乳牛の経済的な価値を著しくする免疫を誘導することが可能であり，その結果として損なわせることになる 2 ）．さらに，大腸菌と比較してク大腸菌だけでなくクレブシエラ菌，プロテウス菌およびレブシエラ菌は強いサイトカイン誘導性があるため自己セラチア菌といった大腸菌群の細胞壁の形成を阻害し，傷害による組織損傷の程度が強く，乳腺上皮細胞に深くそれによって細菌の増殖を抑制する．また，細胞壁の形侵入する傾向があり，甚急性乳房炎発症時の菌コント

成過程において重要なコア抗原に対する免疫を誘導し，ロールがより重要と考えられている

2，4）

．

細菌を死滅させる自然免疫も高める 2 ， 5 ）．この J5株は米

基本的に乳房炎を治療する目的は，酪農家の利益確保

国では約20年にわたって市販されており，この細菌群にであり当該牛の生命を救うことだけではなく，治癒後に起因する乳房炎の臨床症状を有意に低減することが証明出荷できる乳量を確保し牛の生産寿命を延ばすことが重されている 6 ）．

要である為，経済的損害の大きい甚急性乳房炎は治療よ

アメリカにおける J5のワクチン接種プログラムは分娩りも予防に重点をおくべき疾病と考えられており 2 ， 4 ），予定日の60日前および28日前に接種する 6 ） が，スター

その一手法として乳房炎ワクチンやラクトフェリンがあ

トバックⓇは分娩予定日45日前（± 4 日），10日前（± 4り，さらに乳房炎を重症化させないための新たな治療法日）および分娩予定日の52日後（± 4 日）の計 3 回，牛として組換え型インターロイキン 8 （IL-8）および顆粒の頚部筋肉に左右交互に接種する 2 ， 5 ）．また，ブラッド球・マクロファージコロニー刺激因子（GM-CSF）やバ

レーらはスタートバックⓇの一斉接種方法を報告しておクテリオファージなどの研究開発が展開されている 2 ）．

り，この一斉接種方法は国内で承認されているワクチン
接種プログラムではないが，搾乳牛および乾乳牛を含めた全頭に 1 回目（ 0 日目）， 2 回目（28日目）および 3家畜衛生学雑誌

104

第45巻第 3 号（2019）回目（90日目）に接種し，その後は90日間隔で追加接種

0.05）と判定した．また，初診時スコアは一元配置分散するというものである 7 ）．

分析と等分散性の検定を同時に実施し，等分散性が仮定

3 ．Klebsiella pneumoniae が起因した乳房炎多発
農場におけるワクチン（スタートバックⓇ ）の一斉接種方法を用いた乳房炎コントロール

された場合，最小有意差で多重比較検定を実施した．
ワクチン接種前の四半期における乳房炎の発生および死廃頭数を調査した結果， 1 − 3 月が少ない傾向で季節変動性を認めた（表 1 ）．またワクチン接種前の乳期区

鹿児島県霧島市隼人町の搾乳牛および乾乳牛を含めた分においては，すべての泌乳期においてクレブシエラ菌

飼養規模約50頭のフリーストールで，2009～2011年度に乳房炎の発生があった（表 2 ）．このことから，クレブ

SA 対策を実施し SA を撲滅したが，2013年より毎年ク

シエラ菌に起因する乳房炎は季節に関係なく，泌乳期にレブシエラ菌による甚急性乳房炎が多発するようになっも関係なくワクチンによる抗体価を上げることが必要とた．家畜保健衛生所の環境中細菌検査で通路に滑り止め判断し，乳房炎症状軽減対策を目的として2016年10月よとして使用しているモミガラの敷料からのクレブシエラ

りスタートバックⓇの一斉接種を取り入れて実施した．

菌の感染を指摘された．その後，モミガラを継続的に石2 ）スタートバックⓇ一斉接種

灰消毒するもクレブシエラ菌による甚急性乳房炎の発生

2016.10，2016.11および2017.2 にワクチン接種を実施

減少に至らなかった．その為，スタートバックⓇワクチ

し，それ以後は 3 ヶ月おきに半腱半膜様筋に左右交互でン接種前に発生状況等を調査し，その結果スタートバッ

一斉接種した．導入牛（育成委託牛）は分娩45日前およクⓇの牛群一斉接種プログラムで乳房炎対策を実施した．

び分娩10日前に 2 回接種後，直近の一斉接種群に組み入れた．

1 ）ワクチン接種前の四半期および乳期区分ごとの乳房炎発生状況等の調査

3 ）スタートバックⓇ接種前後の効果判定調査
ワクチン接種前後の乳房炎発生数（発生率）と乳房炎

ワクチン接種を実施するにあたり，過去 4 年間の四半
期ごとにおける乳房炎発生状況および死廃頭数，さらに由来における死廃数（死廃率）およびワクチン対象疾病
割合，費用対効果について調査した．

泌乳期ごとにおける乳房炎発生状況を調査した．乳房炎

その結果，乳房炎発症率は，スタートバックⓇワクチ

原因菌は分離培養後 API キットにより診断し，四半期おン接種前の2013年が47.4％，2014年が85.7％，2015年がよび乳期区分の乳房炎発生状況等はカルテおよび乳検

86.3％で，ワクチン接種後は2016年が59.1％（10月より

データより調査した．

接種），2017年が24.5％，2018年が25.5％だった．カイ二

統計処理は統計処理ソフトの Dr.SPSS を用いた．発生乗検定の結果，2014年と2015年は有意に他の頻度よりも割合はカイ二乗検定を実施し，P ＜0.05を有意差ありと乳房炎の発生が多く（P ＜0.05），2017年と2018年は有意し，さらに調整済み標準化残差による残差分析をおこなに他の頻度より乳房炎の発生が少なかった（P ＜0.05）

い，絶対値±1.96以上で他の頻度より有意差あり（P ＜（図 1 ）．

表 1 ．四半期ごとにおける乳房炎および死廃頭数の発生状況

表 2 ．泌乳期毎における乳房炎発生状況（乳房炎細菌同定頭数からのクレブシエラ菌乳房炎発生状況）

「家畜衛生フォーラム ’19」要旨集

105

乳房炎死廃率は，スタートバックⓇワクチン接種前の細菌同定を実施した乳房炎のうち，スタートバックⓇ

2013年が7.9％，2014年が10.2％，2015年が29.4％で，ワのワクチン対象疾病（大腸菌群および CNS）割合はス

クチン接種後は2016年が11.4％（10月より接種），2017

タートバック Ⓡ ワクチン接種前の2013年が73.3％，2014

年が2.0％，2018年が3.9％だった．カイ二乗検定の結果，年が78.3％，2015年が80.0％で，ワクチン接種後は2016

2015年が他の頻度よりも乳房炎による死廃の発生が多く

年が75.0％（10月より接種），2017年が61.5％，2018年が（P ＜0.05），2017年は他の頻度より乳房炎による死廃の76.9％でずっと 6 割以上だった（図 3 ）．

発生が少なかった（P ＜0.05）（図 2 ）．

全ての期間中に乳房炎の乳汁細菌検査で SA を認める

図 1 ．スタートバックⓇ接種前後の乳房炎発症率

図 2 ．スタートバックⓇ接種前後の乳房炎死廃率

図 3 ．スタートバックⓇ前後の乳房炎細菌検査結果とワクチン対象疾病割合

家畜衛生学雑誌

106

第45巻第 3 号（2019）

ことはなく，CNS に対してもワクチン接種から約 1 年

総額だけでもワクチン接種前の直近と比較して費用対効

経過後より CNS が起因する乳房炎の発症が認められな果を認めた（表 4 ）．

くなった．

4 ）スタートバックⓇ接種牛と未接種牛における初診時Ⓡ

スタートバック 接種後，クレブシエラ菌乳房炎の発における全身症状，乳汁および乳房スコアの比較．

症は2016年が 3 頭，2017年が 4 頭，2018年が 7 頭発症し全身症状スコアとして食欲，活力，体温および眼窩陥た．発症した14頭のうち，11頭は快方に向かったが，没，乳汁異常として乳汁性状，乳房異常として，乳房腫

2017年 1 頭，2018年 2 頭はエンドトキシンショック症状

脹および硬結をスコア化（表 5 ）し，スコア集計したもを呈して死亡した．死亡した 3 頭は初診時にセファゾリのをワクチン未接種の大腸菌群乳房炎発症群（以下，ワンを選択した牛が 2 頭，初診時に抗生物質未使用が 1 頭

クチン未接種大腸菌群，n ＝15）とワクチン接種後の大であった．甚急性乳房炎を疑い，初診時にエンロフロキ

腸菌群乳房炎発症群（以下，ワクチン接種後大腸菌群，サシンを使用した牛10頭は死亡しなかった（表 3 ）．

n ＝12）および大腸菌群以外の乳房炎発症群（以下，大乳房炎診療費は2013年が416,280円，2014年が837,700

腸菌以外群，n＝ 9 ）で比較を行った．初診時スコア合計

円，2015年 が846,020円，2016年 が551,820円，2017年 がはワクチン未接種大腸菌群10.13±2.13でワクチン接種後

229,340円，2018年が325,170円だった．ワクチン接種費

大腸菌群が7.67±2.77，大腸菌以外群が5.11±3.98とワク

用 は2016年 が120,000円，2017年 が301,500円，2018年 がチン未接種大腸菌群が他の 2 群と比較して有意に初診時351,1600円だった（表 4 ）．

スコア合計が高かった（P ＜0.01）（表 6 ）．また，乳汁性

診療費総額（乳房炎診療費およびスタートバック Ⓡ

状スコアはワクチン未接種大腸菌群において水溶性乳汁

ワ ク チ ン 接 種 費 用 ） は2013年 が416,280円，2014年 がを呈する頻度が他よりも有意に多く（p ＜0.05），ワクチ

837,700円，2015年 が846,020円，2016年 が671,820円，

ン接種後大腸菌群および大腸菌以外群は正常の乳白色で2017年が530,840円，2018年が626,670円となり，診療費ある頻度が他よりも有意に多かった（P ＜0.05）（表 7 ）．

表 3 ．スタートバックⓇ接種後のクレブシエラ菌による乳房炎発症牛表 4 ．乳房炎発生頭数と乳房炎診療費およびワクチン接種費用

「家畜衛生フォーラム ’19」要旨集

107

表 5 ．スコア基準

表 6 ．初診時スコアによる比較

表 7 ．乳汁性状スコア

以上の結果より，スタートバックⓇを接種することにより，初診時の明らかな症状軽減を認めた．

4 ．まとめチン接種後においても泌乳期に関わらずクレブシエラ菌による乳房炎の発症を認めることから，今後もこの農場においては一斉接種プログラムを続けていくことが望ましいと考えられた．

乳房炎は細菌を主体とする病原微生物（原因菌）の乳

今回，紹介した事例のように乳房炎の細菌検査を実施

腺への感染だが，飼養管理衛生状態や牛の健康状態などした上で，スタートバック Ⓡ に含まれる大腸菌群，SAが複雑に絡み合って発生するため，ワクチン接種のみでおよび CNS が問題となっている農場であれば，ワクチ

乳房炎の発症を完全に抑えるわけではない．

ン接種により乳房炎の発生および発症時の症状軽減効果

しかし，スタートバックⓇ 接種により SA および CNSの乳房炎を抑えられる上に，大腸菌群であるクレブシエを認め，さらに費用対効果も認められると思われる．

ラ菌や大腸菌性の乳房炎発症率を減らし，発症した場合

参考文献

でも適切な初期治療を実施することにより症状を緩和す

1 ）十勝乳房炎協議会．2014．MASTITIS CONTROLることが十分に可能と考えられた．クレブシエラ菌による乳房炎の発症状況調査により，通常の用法ではなく，
年 4 回のワクチン接種を実施したが，乳房炎発生および死廃率等の減少や費用対効果も認められた．さらにワク

Ⅱ．1-8
2 ）日本乳房炎研究会．2018．牛の乳房炎 Q ＆ A．3949，135-1403 ）動物用抗菌剤研究会．2015．牛の乳房炎治療ガイド

家畜衛生学雑誌

108

ライン．28-51
4 ）篠塚康典．2015．大腸菌性乳房炎にどう対峙するか．家畜感染症学会誌．4（4）179-186
5 ）江口佳子．2018．乳房炎ワクチンの効果．MP アグ
ロジャーナル．32，32-35

第45巻第 3 号（2019）
Antibody Responses with Clinical Mastitis
Outcome for J5 Vaccinate and Control Dairy
Cattle. CLIN. VACCINE IMMUNOL. 16, 209–217
7 ）A. J. Bradley, J. E. Breen, B. Payne, V. White,M. J.
Green.2015. An investigation of the efficacy of a

6 ）David J. Wilson, Bonnie A. Mallard, Jeanne L.

polyvalent mastitis vaccine using different

Burton, Ynte H. Schukken, Yrjo T. Grohn.2009.

vaccination regimens under field conditions in the

Association of Escherichia coli J5-Specific Serum

United Kingdom J. Dairy Sci. 98, 1706–1720

日本家畜衛生学会
第91回大会

講演要旨集

主 催：日本家畜衛生学会

日本家畜衛生学会第91回大会と き：令和元年12月20日（金） 10：00〜12：00
ところ：Meiji Seika ファルマ（株） 本社講堂

座長

村上裕信（麻布大学）
10：00～10：15

1 ．イノシシから世界初となるサポウイルスの検出
勝田りさ子・須永藤子・大井
岡智一郎・○長井
座長

徹・片山幸枝・白井淳資・水谷哲也・誠

上塚浩司（茨城大学）
10：15～10：30

2 ．大阪のヌートリアにおけるレプトスピラ浸潤状況調査〇村田
座長亮・森本大貴・内田郁夫・浅川満彦・鳥居春己・高野彩子

山本孝史（前東京農業大学）
10：30～10：45

3 ．牛の呼吸器由来菌における薬剤感受性の経年変化◯坂下満明・加藤晶子・廣瀬和彦
10：45～11：00
4 ．牛の細菌性呼吸器病に対するガミスロマイシンの臨床効果と分離菌の感受性〇加藤敏英・石田座長

優・伊藤貢・芝野健一

廣瀬和彦（Meiji Seika ファルマ）
11：00～11：15

5 ．Mycoplasma bovis P81特異抗体を用いた ELISA 法の構築
〇中村
座長

光・西

航司・権平

智・藤木純平・岩野英知・樋口豪紀

樋口豪紀（酪農学園大学）
11：15～11：30

6 ．北海道東部地域の乾乳軟膏使用状況および次期泌乳期乳房炎発生率について〇北野菜奈・菊佳男・山田倫明・樋口雅也・髙橋俊彦

座長

高橋俊彦（酪農学園大学）
11：30～11：45

7 ．機械搾乳時におけるライナー内逆流現象とライナー内部形状の関係〇今尾賢人・榎谷雅文・乾洋治・近藤仁志・楜澤共生・篠塚康典・河合一洋

家畜衛生学雑誌

112

1

第45巻第 3 号（2019）

イノシシから世界初となるサポウイルスの検出

勝田りさ子 1 ）・須永藤子 1 ）・大井

徹 2 ）・片山幸枝 3 ）・白井淳資 3 ）・水谷哲也 3 ）・岡智一郎 4 ）・
○長井

誠1）

（ 1 ）麻布大・ 2 ）石川県立大学・ 3 ）東京農工大学・ 4 ）国立感染研）
Key word：animal waste water, purification, soil layer, land application system【目的】
近年，我が国においてイノシシの生息頭数は増加しており，家畜では豚コレラ，ヒトでは E 型肝炎といったウイル
ス疾患の感染源として注目されている．しかしながら，我が国のイノシシにおけるウイルスに関する情報は限られており，未知の部分が多い．サポウイルス（SaV）はノロウイルスとともにカリシウイルス科に属するウイルスで，19遺伝子群（GI-GIX）に分類されている．SaV は，ヒトではノロウイルス，ロタウイルスに次ぐ重要なウイルス性胃腸炎の病原体であるが，ヒト以外の動物での病原性は不明である．SaV はヒト以外にブタ，ラット，アシカ，ミンク，イヌおよびコウモリから検出されているが，これまでイノシシからの検出例はない．今回，腸管ウイルスを標的としてイノシシの糞便の次世代シークエンス（NGS）によるメタゲノム解析を行ったところ，SaV の遺伝子断片を発見した．イノシシからの SaV の検出は世界初となるため，本研究では NGS のデータをもとにプライマーを考案してPCR を行い，遺伝子解析を実施した．

【材料と方法】〈材料〉 富山県および石川県で捕獲された 1 歳未満のイノシシ36頭の直腸便を用いて10〜20％乳剤を作製し，遠心上清を検査材料とした．
〈方法〉 遠心上清から RNA を抽出し，DNase I で処理してからライブラリーを作製し，Illumina 社の次世代シークエンサー MiSeq で解析した．得られたシークエンス成績をもとにプライマーを作成し，全ゲノムの解析を
行った．

【結果】
36頭中 6 頭の正常便から SaV リードが検出された．確認された SaV は Blast 解析により 1 検体が GIII， 4 検体がGVI， 1 検体が GVI であると推定された．SaV 陽性検体からは，いずれも 1 ～ 3 種の他のウイルスが同時に検出された．得られた遺伝子断片では更なる解析が困難なため，遺伝子リード数の少ない GIII を除く GV および GVI 株について，NGS データを基に設計したプライマーを用いたロング PCR 等の手法を用いて遺伝子全長の塩基配列を決定した．遺伝子全長は，GV 株（Ishikawa12株）は7,498bp，GVI 株（Toyama2株）は7,201bp と Ishikawa12株の方が約300bp 長かった．遺伝子全長および VP1遺伝子を用いた系統樹解析では，Ishikawa12株は豚由来の SaV とともに GV群のクラスターを形成した．Toyama2株も豚由来の GVI 株とともに分岐したが，最も近い豚由来 SaV 株とはやや離れた位置に分岐した．そこで VP1遺伝子の進化距離を塩基配列の比較により調べたところ，Toyama2株は最も近い
豚由来株とは進化距離に有意な差があり，GVI の新しい遺伝子型（GVI.3型）に分類されることが判明した．

【考察】
今回，イノシシからは世界で初めてとなる SaV が検出され，遺伝子解析の結果，イノシシ由来の SaV は豚由来のそれと相同性を示すことが判明したことから，SaV は豚とイノシシとの間で種間伝播していることが示唆された．しかし一方では，Toyama2株はこれまでにない新しい遺伝子型に分類されたことから，イノシシの中で進化してきた「日本家畜衛生学会第91回大会」要旨集

113

ウイルス株である可能性が示された．本研究によりイノシシの SaV 感染における役割が初めて明らかになり，本成績は SaV の疫学解明の一端を担う有用な研究成果と思われる．

図 1 ．V P1遺伝子完全長を用いた最尤法による分枝系統樹．サポウイ
ルスの遺伝子型は完全長 VP1の解析で区分されており，これまで51型が報告されている．Toyama2は GVI では他の株と異なった分岐を示し，新しい遺伝子型の可能性が示された．そこで，VP1完全長の進化距離を CLC Genomics Workbench を用いて計算したところ，GVI 内の他の株との進化距離は0.3以上を示しており，新規の遺伝子型 GVI.3であることを確認した．

家畜衛生学雑誌

114

2

第45巻第 3 号（2019）

大阪のヌートリアにおけるレプトスピラ浸潤状況調査○村田亮 1 ）・森本大貴 1 ）・内田郁夫 1 ）・浅川満彦 2 ）・鳥居春己 3 ）・高野彩子 3 ）（ 1 ）酪農学園大

獣医細菌・ 2 ）酪農学園大

獣医寄生虫病・ 3 ）奈良教育大

自然環境教育セ）

Key word：leptospira, nutria, Japan, Osaka【目的と背景】
レプトスピラ症は病原性レプトスピラの感染によって起こる人獣共通感染症であり，げっ歯類を中心とした保菌動
物の尿を介して様々な哺乳類に伝播する．
ヌートリアは南アメリカ原産の半水棲げっ歯目であり，毛皮利用などの目的で戦前に日本に導入された．2005年に施行された「外来生物法」によって「特定外来生物」に指定され防除の対象となっているが，天敵となる動物が存在しないことなどから西日本を中心に増加傾向にある．我々はヌートリアがその生態学的特徴からレプトスピラ症の伝播に関与している可能性があると考え，個体数削減の重要性をより明確にすることを目的としてレプトスピラの保菌状況ならびに抗体陽性率を調査した．

【材料と方法】
2017年 8 月から2019年 9 月にかけて大阪府の桂川，淀川，八尾市調整池の 3 か所で捕獲されたヌートリアを対象とした（図 1 ）．遺伝子検出：病原性レプトスピラが保有する鞭毛関連遺伝子（flaB）を標的とした Nested PCR を実施した．レプトスピラの培養：尿，腎臓および河川水を EMJH 培地に接種し，菌分離を試みた．単離されたスピロヘータ
については，ウサギ免疫血清を用いた顕微鏡下凝集試験（MAT）による血清型別に加えて各種遺伝子（16S rRNA，
23S rRNA，flaB，gyrB）のシークエンス等，詳細な遺伝学的解析を実施した．血清診断：MAT によって， 9 つのレ プ ト ス ピ ラ 血 清 型（Hebdomadis，Autumnalis，Australis，Grippotyphosa，Canicola，Icterohaemorrhagiae，Pomona，Hardjo，Javanica）に対する抗体保有率を明らかにした（図 2 ，表 1 ）．

【結果と考察】Nested PCR では，91頭中 5 頭（5.5％）の尿，30頭中 2 頭（6.6％）の腎臓から flaB 増幅が確認された．さらに培養の結果 Leptospira interrogans 血清型 Hebdomadis が 1 株，L. interrogans 血清型 Australis が 2 株，それぞれ別のヌートリアから分離された．遺伝学的解析の結果，いずれも国内のイヌから分離された株との関連性が疑われた．
MAT の結果から，血清型 Hebdomadis，Australis および Autumnalis に対する抗体の存在が証明され，抗体陽性率は33.0％であった．地域別にみると，桂川12.9％，淀川34.3％，八尾市調整池50.0％となり，流れの速い上流の桂川に比べて，下流の淀川や水が滞留する調整池ではレプトスピラ感染のリスクが高いことが示唆された．
以上の結果より，国内のヌートリアが病原性レプトスピラを保有していることが明らかとなった．今後はヌートリ
ア生息地域において人獣共通感染症の保菌動物としての注意喚起も行い，個体数の削減に向けて防除体制を強化する必要があると考えられる．

「日本家畜衛生学会第91回大会」要旨集

図 1 ．ヌートリアの捕獲地域

図 2 ．レプトスピラ感染状況の調査手順

表 1 ．MAT に使用したレプトスピラ血清型

115

家畜衛生学雑誌

116

3

第45巻第 3 号（2019）

牛の呼吸器由来菌における薬剤感受性の経年変化
坂下満明・加藤晶子・廣瀬和彦（Meiji Seika ファルマ株式会社）

Key word：antimicrobial susceptibility, bovine respiratory diseases, Pasteurella, Mannheimia, Mycoplasma【背景と目的】近年，抗菌剤の薬剤耐性（AMR）は世界的な問題であり，我が国においても AMR アクションプランが策定され対策が実行される中，動物衛生分野でも動物用抗菌剤の慎重使用の推進など AMR を抑制する取組みがなされている．牛の傷病類別事故原因において常に上位にある呼吸器病は経済的損失が大きく，生産現場での治療機会が多い．
その治療に際して原因菌の薬剤感受性を把握することは，抗菌剤の慎重使用のために重要である．そこで本研究では，牛呼吸器由来菌を対象として薬剤感受性の経年変化を調査し，呼吸器病治療時における抗菌剤の慎重使用の一助とすることを目的とした．

【材料と方法】
2007年 か ら2019年 に か け て 国 内 各 地 か ら 分 離 さ れ た 牛 呼 吸 器 由 来 Pasteurella multocida（Pm），Mannheimia
haemolytica（Mh）及び Mycoplasma bovis（Mb）を供試した．薬剤感受性試験は米国臨床検査標準協議会（CLSI）の方法に準拠したディスク拡散法（Pm 及び Mh）又は微量液体希釈法（Mb）で実施し，効能効果として牛細菌性肺炎を承認された薬剤を供試した．供試薬剤は二次選択薬として承認されているものを二次選択薬に，それ以外のもの
を一次選択薬に位置付けた．薬剤感受性の経年変化は，菌分離年を2007年～2008年，2010年～2011年，2014年～2015
年，2018年～2019年の 4 区分にして比較した．

【結果と考察】菌分離は，年を経るたびに 8 道県23施設（2007年～2008年）から25道府県130施設（2018年～2019年）に施設数を拡大し，分離株数は Pm で217株から788株，Mh で76株から303株，Mb で122株から398株に増加した．菌分離された施設の背景に規則性はなく，品種・月齢・病歴・薬剤使用歴等は特定しなかった．薬剤感受性は，Pm では一次選択薬ペニシリン（PCG），アモキシシリン（AMPC），セファゾリン（CEZ），フロルフェニコール（FFC）が調査期間2007年～2019年を通して供試株中高率に感受性（S）を維持する一方，カナマイシン（KM）は耐性（R）率が高かった（図 1 ）
．二次選択薬マルボフロキサシン（MBFX），セフチオフル（CTF）は調査期間を通して高率に S を維持していた（図 2 ）．Mh では一次選択薬ホスホマイシン（FOM），CEZ，FFC が調査期間を通して高率に S を維持する一方，KM は R 率が高かった（図 3 ）．二次選択薬 MBFX，CTF は調査期間を通して高率に S を維持していた（図 4 ）．
Mb では，一次選択薬タイロシン（TS），チルミコシン（TMS），オキシテトラサイクリン（OTC）の MIC は調査期間を通して高値の範囲で推移したが，チアンフェニコール（TP），FFC の MIC は大きく変動することなく推移した．二次選択薬エンロフロキサシン（ERFX），MBFX の MIC は調査開始時から二峰性を示して推移した．
本研究では調査した施設の背景は多様であるため，抗菌剤の使用に際しては個々の施設の状況を踏まえて薬剤感受性を予め確認することが重要である．抗菌剤の慎重使用のため，薬剤感受性の動向については引き続き注視していく必要がある．

「日本家畜衛生学会第91回大会」要旨集
左図：2010年−2011年

右図：2018年−2019年

図 1 ．Pm の一次選択薬に対する感受性

図 2 ．Pm の二次選択薬に対する感受性

図 3 ．Mh の一次選択薬に対する感受性

図 4 ．Mh の二次選択薬に対する感受性
一次選択薬：PCG，AMPC，CEZ，FOM，TS，TMS，KM，TP，FFC，SO
二次選択薬：MBFX，ERFX，CTF（凡例上の薬剤の並びと棒グラフの並びは一致する．）
ディスク拡散法： R；耐性
I；中間
S；感受性
※紙面の都合上，各図の年代は2010年～2011年及び2018年～2019年とした．発表では2007年～2008年及び2014年～
2015年も加え，Mb の薬剤感受性も合わせて報告する．

117

家畜衛生学雑誌

118

4

第45巻第 3 号（2019）

牛の細菌性呼吸器病に対するガミスロマイシンの臨床効果と分離菌の感受性〇加藤敏英 1 ， 2 ）・石田

優 3 ）・伊藤

貢 4 ）・芝野健一 5 ， 6 ）（ 1 ）NOSAI 山形・ 2 ）酪農学園大学・ 3 ）士別動物病院・ 4 ）あかばね動物病院・ 5 ）NOSAI 兵庫・ 6 ）岡山理科大学）
Key word：bacterial bovine respiratory disease, drug susceptibility, gamithromycin, therapeutic efficacy【背景と目的】
牛飼育農場の大型化と群飼育の普及により，呼吸器病の主たる原因菌であるマイコプラズマが蔓延し，臨床現場では難治化が大きな問題となっている．マクロライド系抗菌性物質に対するマイコプラズマの感受性低下は，国内外で大きな問題となっており，そのことに関する報告も数多い．一方で，マイコプラズマに対しては，これまでもマクロライド系抗菌性物質が有効とされ，最近では国内でも15員環マクロライド系抗菌性物質であるツラスロマイシンが汎用されている．しかし，国内では15員環マクロライド系抗菌性物質の臨床試験成績ならびに原因菌の薬剤感受性に関する報告は未だない．昨年度，同系抗菌性物質のガミスロマイシン（GAM）注射液が承認を受けたことから，今回は GAM の牛細菌性呼吸器病に対する臨床的有用性と安全性，原因菌の薬剤感受性の調査成績を報告する．

【材料と方法】
山形県，北海道，愛知県，兵庫県および熊本県において，臨床的に呼吸器病と診断された牛，合計245頭を供試した．試験期間は2009年 1 ～10月であった．供試牛を試験群（n ＝121）と対照群（n ＝124）に無作為に分け，試験群
では GAM6mg/kg，対照群ではチルミコシン（TMS）10mg/kg をそれぞれ 1 回皮下注射した．投与前と投与後 3 日および10日の臨床症状を比較し，有効率を調べた．同時に有害事象の有無を観察した．また，深部鼻腔拭い液を材料に呼吸器病原因菌を分離し，各種薬剤に対する感受性を調べた．

【成績】
試験群の薬剤投与後 3 日および10日の有効率は，それぞれ72.5％と89.2％であり，対照群（64.5％および83.1％）と同等であった（Table 1）．両群とも，一部供試牛に注射部位の腫脹や硬結が診られたものの軽度であり，そのほかの有害事象は認められなかった．また，投与前のスワブからは，Pasteurella multocida が31.4％（77/245），Mycoplasma
bovis が19.2％（47/245）分離された（Table 2）．薬剤感受性試験では，P. multocida の GAM に対する MIC50と MIC90
は，0.5および4µg/ml，TMS に対するそれらは 4 および32µg/ml であった．また，M. bovis の GAM に対する MIC50と MIC90は， 8 および32µg/ml，TMS に対するそれらはどちらも128µg/ml< であった．

【考察】
供試牛は，投与前と投与後21日における呼吸器病ウイルス抗体価の推移から，細菌性呼吸器病であったと診断された．GAM 注射液の有効率は，TMS と同等であり，有害事象発現もみられなかった．また，分離された原因菌のGAM に対する薬剤感受性は TMS に比べ高かったことから，GAM 注射液は牛の細菌性呼吸器病治療薬として臨床的有用性が高いと評価された．

「日本家畜衛生学会第91回大会」要旨集

119Table 1. Comparison of the clinical effects 3 and 10 days after drug administration

GAM (n = 120)†

TMS (n = 124)

Effects

day 3

day 10

day 3

day 10Highly effective

75 (62.5) †96 (80.0)60 (48.4)

84 (67.7)

Effective

12 (10.0)

11 (9.2)

20 (16.1)

19 (15.3)

Moderately effective

7 (5.8)3 (2.5)

11 (8.9)5 (4.0)Not effective

26 (21.7)

10 (8.3)

33 (26.6)

16 (12.9)

Clinical efficacy (%)‡

72.5

89.2

64.5

83.1

Number (%)‡

Sum of "highly effective" and "effective" cases / total number of cases

Table 2. Number of cattle from which bacterial species were isolated from nasal swabs

Isolated species ††GAM group

TMS group

day 0 (n = 121)

day 10 (n = 112)

day 0 (n = 124)

day 10 (n = 110)

P. multocida

43 (35.5) ‡18 (16.1)

34 (27.4)

20 (18.2)

M. haemolytica

5 (4.1)1 (0.9)1 (0.8)2 (1.8)

H. somni

0 (0.0)0 (0.0)0 (0.0)0 (0.0)

M. bovis

26 (21.5)

24 (21.4)

21 (16.9)

21 (19.1)

M. bovirhinis

21 (17.4)

14 (12.5)

17 (13.7)

10 (9.1)

more than one species

73 (60.3)

49 (43.8)

58 (46.8)

45 (40.1)

P. multocida; Pasteurella multocida, M. haemolytica; Mannheimia haemolytica, H. somni; Histophiluis

somni, M. bovis; Mycoplasma bovis, M. bovirhinis; Mycoplasma bovirhinis‡

Number (%)

家畜衛生学雑誌

120

5

第45巻第 3 号（2019）

Mycoplasma bovis P81特異抗体を用いた ELISA 法の構築〇中村光 １ ）・西航司 １ ）・権平（ １ ）酪農学園大

智 １ ）・藤木純平 ２ ）・岩野英知 ２ ）・樋口豪紀 １ ）獣医衛生・ ２ ）酪農学園大

獣医生化）

Key word：Mycoplasma bovis, ELISA, P81【目的】
Mycoplasma bovis（M. bovis）は，ウシに乳房炎，肺炎および関節炎などの疾病を引き起こし，深刻な経済損失を招く病原体であることが知られている．M. bovis の感染を制御する為には，罹患牛の早期診断が重要である．本研究では，高感度で特異的な ELISA 法の確立を目的とし，M. bovis の特異的な膜タンパク質である P81および抗 P81抗体の精製を試みた．

【材料および方法】
1 ）P81の精製および特異的反応性：M. bovis 基準株（PG45）の P81領域の DNA を大腸菌内に導入し，GST 融合タン
パク質を発現させた．発現タンパク質はカラムを用いて精製した．ポリアクリルアミドゲル電気泳動（SDSPAGE）にて分子量を確認した．P81と被検血清の抗原抗体反応を確認するために，M. bovis 実験感染牛（PG45株），自然感染牛および非感染牛の血清を用いたウエスタンブロット法を行った．
2 ）抗 P81抗体の精製および特異的反応性：M. bovis 陽性血清および P81を用いて抗 P81抗体のカラム精製を行い，
SDS-PAGE にて分子量を確認した．また抗 P81抗体と P81および可溶化した M. bovis を用いたウエスタンブロッ
ト法にて特異反応性を確認した．
3 ）P81 ELISA：P81を96穴プレートに固相化し，被検血清中の抗 P81抗体濃度を検量線で測定した．

【結果】1 ）SDS-PAGE 解析にて P81タンパク質と推定される約81.6kDa の位置にバンドが確認され，ウエスタンブロット法
にて P81タンパク質は実験感染牛および自然感染牛の血清に特異的に抗原抗体反応を示した．
2 ）SDS-PAGE 解析にて抗 P81抗体の重鎖と軽鎖に推定される約50kDa および25kDa の位置にバンドが確認され，ウエスタンブロット法にて抗 P81抗体は P81および可溶化した M. bovis に特異的に抗原抗体反応を示した．
3 ）P81 ELISA にて陽性牛中の抗 P81抗体濃度は平均347ng/ml であり，これは陰性牛のものよりも高値を示した．

【考察】
SDS-PAGE 解析にて推定された分子量のタンパク質が検出され，ウエスタンブロット法にて単一のバンドが認められたことから，M. bovis 陽性血清と特異的に反応する P81の精製およびその特異抗体（抗 P81抗体）が精製されていることが示された．P81 ELISA にて M. bovis 遺伝子検査（PCR 法）で陽性と認められたウシの抗 P81抗体量は陰性牛と比較して高値を示した．本研究において精製した P81，抗 P81抗体は，M. bovis 特異的な膜タンパク質および抗体であり，これを用いた ELISA 法を確立することは，従来の血清学的な診断よりも交差反応が少なく，高い特異性を示すことが期待される．

「日本家畜衛生学会第91回大会」要旨集

2

1

M

(kDa)
51
42

3

121

5

4

IgG 重鎖29
IgG 軽鎖M:マーカー
1:脱塩後抗体液添加液

2:1 を再度カラム添加

3:溶出後洗浄分画

4:溶出 1 回目分画

5:溶出 2 回目分画
図 1 ．抗 P81抗体の精製確認（銀染色）

A: M. bovis 陽性血清との反応性

(kDa)
95

M

1

2

3

B: 脱塩後抗体液との反応性

M

1

2

70
51
62

(kDa)
95
70

M

C: 精製抗体との反応性

123
M:マーカー
1:大腸菌可溶化上清62

2:P81 タンパク質51

3:M. bovis 可溶化分画
図 2 ．抗 P81抗体との反応性（ウエスタンブロット法）

3

家畜衛生学雑誌

122

6

第45巻第 3 号（2019）北海道東部地域の乾乳軟膏使用状況および次期泌乳期乳房炎発生率について〇北野菜奈 1 ）・菊（ 1 ）酪農学園大

佳男 2 ）・山田倫明 3 ）・樋口雅也 3 ）・髙橋俊彦 1 ）酪農学・ 2 ）農研機構

動衛研・ 3 ）NOSAI 道東）

Key word：antimicrobial resistance, dry cow therapy, mastitis, postpartum incidence【はじめに】
現在の日本では，ウシ乾乳導入時に乳房炎の治療および予防の確実性と効率性から，長期間持続する乾乳軟膏（抗菌薬）を全頭全乳房へ注入することが一般的である．その一方で，世界的に薬剤耐性（AMR）問題が喫緊の課題として取り上げられており，酪農現場における抗菌薬の慎重使用が求められている．近年欧州等では，全頭全分房への乾乳軟膏の使用は AMR の問題から再考すべき課題と考えられており，乾乳軟膏の使用を牛や乳房の状態に応じた選択的治療へと移行しつつある．本研究では，北海道東部（道東）における乾乳軟膏使用状況と分娩後の次期泌乳期乳房炎発生状況の関連性を調査し，乾乳軟膏の効果の検証とともに乾乳軟膏の選択的使用の可能性を検討した．

【材料および方法】
道東地域の酪農家1579戸，乳用牛142,361頭から，分娩頭数（全て），分娩頭数（経産牛），乾乳軟膏薬治のべ頭数および分娩後の次期泌乳期乳房炎発生のべ頭数を調査した．その結果から各酪農家の乾乳軟膏使用率並びに乳房炎発生率を算出した．また，乾乳軟膏使用率の結果から，酪農家を乾乳軟膏使用率 0 ％（不使用群）， 0 ～30％（低使用群），30～70％（中使用群）および70％以上（高使用群）に群分けし，各群間の乳房炎発生率を比較した．

【結果】
分娩頭数（全て）は131,858頭であり，そのうち経産牛は92,353頭であった．乾乳軟膏薬治のべ頭数は76,014頭であり，乳房炎発生のべ頭数は67,755頭であった．乾乳軟膏不使用群の酪農家個数は，181戸，低使用群は65戸，中使用
群は150戸，高使用群は1.183戸であった．各群の平均乳房炎発生率は，それぞれ46.4％，51.4％，55.1％，56.1％であり，
不 使 用 群 が 最 も 低 値 と な っ た． ま た， 各 群 の 乳 房 炎 発 生 率30％ 未 満 の 個 数 は， そ れ ぞ れ58戸（32.0％），11戸（16.9％），
28戸（18.7％），180戸（15.2％）であり，同発生率70％以上の個数は，それぞれ37戸（20.4％），16戸（24.6％），
36戸（24.0％），318戸（26.9）であった．

【考察およびまとめ】
本調査によって，乾乳軟膏の利用が分娩後の乳房炎発生抑制に結びつくとは限らないことが示された．また，個体状態や飼養衛生管理が良好であれば，乾乳時に必ずしも乾乳軟膏は必要ではないことが推察された．現在，広く行われている全頭全乳房への乾乳軟膏の使用法は，感染乳房を選択的に治療する方法へと見直す時期に来ていると考えられた．

「日本家畜衛生学会第91回大会」要旨集

123

各群の平均次期泌乳期乳房炎発生率

（戸数）

不使用農家

低使用農家

中使用農家

高使用農家

農家戸数

181

65

150

1183

46.4%

51.4%

55.1%

56.1%

次期泌乳期乳房炎発生率

次期泌乳期乳房炎発生率が30％未満，70％以上の各群の農家割合

（戸数）

不使用農家

低使用農家

中使用農家

高使用農家

農家戸数

181

65

150

1183

58

11

28

180

（32.0%）（17.0％）（18.7％）（15.2％）

37

16

36

318

（20.4）（24.6%）（24.0%）（26.9%）

30%未満

70％以上

家畜衛生学雑誌

124

7

第45巻第 3 号（2019）

機械搾乳時におけるライナー内逆流現象とライナー内部形状の関係◯今尾賢人 1 ）・榎谷雅文 1 ，3 ）・乾洋治 4 ）・近藤仁志 4 ）・楜澤共生 1 ，2 ）・篠塚康典 1 ，2 ）・河合一洋 1 ，2 ）（ 1 ）麻布大 獣医・ 2 ）麻布大 乳房炎リサーチセ・ 3 ）北海道デーリィマネージメントサービス・ 4 ）株式会社 トクヤマ）
Key word：liner shape, milking system, reverse pressure impact type Ⅱ , simulated milking device, vent

【はじめに】
牛乳房炎の発生要因として人，牛，搾乳機器，そして牛を取り巻く環境が挙げられる．その中でも搾乳機器は搾乳
中乳牛に直接接触し，乳頭に大きな影響を与えているにも関わらず詳細な研究は未だ不十分である．市販されている
ライナーゴムには多くの型や形状があるが，ライナー形状が乳房炎発生に与える影響は明らかにされていない．一方，乳房炎の一因となる，ライナースリップ時に引き起こされる分房間の逆流現象（ドロップレッツ現象：Reverse
Pressure Impact type Ⅰ；RPI- Ⅰ）とは異なった，同一ライナー内で起こる逆流現象（Reverse Pressure Impact
type Ⅱ；RPI- Ⅱ）の存在が報告されている．本研究では乳房炎予防の観点から理想のライナー形状を追求するために，流水試験装置を利用して，RPI- Ⅱとライナー形状との関係性を明らかにすることを目的とした．

【材料および方法】
1 ）流水試験装置と流量試験装置：試験用に開発した模擬搾乳装置は，水タンク（容量50L，胴経379mm×高さ673mm）から分岐した
4 本のチューブに繋がる独立した 4 個の液体流量計（KZ-7003-07L，アズワン株式会社，大阪）で構成され，各流量を調整した．それぞれの装置の位置関係は，高低差を付けて重力の影響が出ないように行った．模擬乳頭は
市販のライナープラグを改良して使用した．
流量：各試験共に，流量はライナー 1 本あたり1.0kg/ 分より0.5kg/ 分刻みに，4.0kg/ 分までとした．流量調整後30秒間を導入時間として，30秒後より60秒まで，30秒間動画撮影を行った．表示流量は流量計の読みとし，実際の流量はパルセータ拍動休止時間の影響により約半量となり，最大吸引量は流量計読みの半量8kg/ 分（2kg/ 乳
頭 / 分）であった．
2 ）試験用の丸形ライナー＊クローインレット部分（以下クローインレットポイント：図 1 ）の口径：試験ライナーの口径11mm 内部のク
ローインレット部分に絞りを挿入し，口径をφ7mm からφ11mm まで，各1mm 刻みで口径を調整した．同じようにショートミルクチューブとの境目（以下ジャンクションポイント：図 1 ）の口径も，試験ライナーの口径14mm 内部のショートミルクチューブとの境目に絞りを挿入し，口径をφ8mm からφ14mm まで，各1mm 刻み
で口径を調整した．各試験ライナーを用いて流量を変えながらライナー内の流体の動きを高速動画撮影し，同時にクロー内圧を真空測定器で測定した．
＊ベ ント位置：それぞれの口径に際し，クローベント（CV），マウスピースベント（MPV），ショートミルク
チューブベント（SMTV）の 3 種類を用意した．
3 ）ライナー内逆流の評価方法：高速ビデオカメラ（カシオ EX10 OF（500コマ / 秒での撮影））を用いて撮影し，スロー再生しながら前後 2 本のライナー内の流れを，ドロップレッツスコアを基にして流量毎に 2 本のスコア平
均値で判定した．

「日本家畜衛生学会第91回大会」要旨集

125

ドロップレッツスコアは次のように設定した．スコア： 1 ；逆流が全く見られない，スコア 2 ；霧状に僅かに発生する，スコア 3 ；ショートミルクチューブ内に逆流が発生，スコア 4 ；ライナー内に逆流が発生，スコア 5 ；乳頭が水没する．
クローインレット部分におけるベント位置別の評価と，ショートミルクチューブとの境目におけるベント位置別の評価を行った．

【結果】1 ）クローインレットポイントの口径とベント位置
口径と流量の関係：口径が細い程，流量が多い程ドロップレッツスコアが高値を示し，逆流が重度になった．一方で口径が太い11.0mm 以上では，流量が4.0kg/min でも RPI- Ⅱは発生しなかった．
ベント位置を比較した場合：CV では口径が細いほどドロップレッツスコアが高値を示し，口径11mm 以上では
RPI- Ⅱは発生しなかった．MPV では RPI- Ⅱはどの口径でも全く発生しなかった．SMTV では口径が8mm 以上
で RPI- Ⅱは発生しなかった．
2 ）ジャンクションポイントの口径とベント位置
ジャンクションポイントの口径が細い程，流量が多い程ドロップレッツスコアが高値を示した．口径8.0mm と9.0mm では流量が2.0kg/min 以上で RPI- Ⅱが発生した．CV では口径が細いほどドロップレッツスコアが高値を示し，口径13mm 以上では RPI- Ⅱの発生は稀であった．MPV では RPI- Ⅱは口径10mm 以上では全く発生しな
かった．SMTV では口径が細いほどドロップレッツスコアが高値を示し，口径13mm 以上では全く RPI- Ⅱが発生しなかった．

【考察】
今回の研究では RPI- Ⅱを引き起こす因子としてライナー付近の 2 箇所の口径，流量，ベント位置の 3 項目で比較を行った．RPI- Ⅱ発生の状況から口径が細いほど RPI- Ⅱの発生リスクは高くなることが明らかになった．RPI- Ⅰの発生が乳房炎リスクを高めることから，RPI- Ⅱも同様に乳房炎リスクを高めることが予想される．そのため，乳房炎予防の観点からライナーは出来るだけ口径の太いものを使うことが好ましい．ベントの位置では MPV が最も RPI- Ⅱの発生が抑えられた．また，搾乳中に乳頭の形状は変化していくため，常に空気が MPV から流れ込むようなライナーの内部形状が重要であると考えられる．以上のことから市販の丸形ライナーでは，できるだけ口径の太いものを使用することが好ましいと明らかになった．今後は丸形以外のライナー形状の違いについても研究がさらに必要である．

MPV

ジャンクションポイント

SMTV
クローインレットポイント

図 1 ．絞りの位置

CV
図 2 ．ベントの位置

127

会員へのおしらせ①「日本家畜衛生学会第90回大会」開催される
日本家畜衛生学会第90回大会が，去る 7 月20日に開催されました．本年も，開催場所は麻布大学で，神奈川県相模原市淵野辺の獣医学部棟 7 階大会議室で行われました．
一般演題は 5 題の発表があり， 6 名の演者と 6 名の座長の先生方のご協力により，活発な質疑が行われました．教
育講演では，麻布大学の長井誠先生による「家畜の下痢症から検出されるウイルスについて」の講演が行われ，参加者による活発な議論が交わされました．
発表会終了後には，麻布大学 7 階ラウンジにおいて，ささやかなビアパーティーが開催され，多くの方が参加されて会員一同大いに懇親を深めました．

②「日本家畜衛生学会2019年度通常総会」開催される
第90回大会に先立ち，午後 1 時から2019年度通常総会が開催されました．以下に総会資料を掲載いたします．

日 本 家 畜 衛 生 学 会
2019年度年通常総会
		日時：2019年 7 月20日（土） 13：00～

		場

所：麻布大学次

獣医学部棟 7 階

第Ⅰ．開 会
Ⅱ．理事長挨拶
Ⅲ．議長選出Ⅳ．議 事1 ）第 1 号議案 2018年度事業報告及び収支決算報告並びに監査報告について
2 ）第 2 号議案 2019年度事業計画（案）及び収支予算（案）について
3 ）第 3 号議案 会則の一部改正について（会則第18条第 3 号に規定に基づく議案の追加）
4 ）第 4 号議案 名誉会員・役員の承認について（会則第11条第 1 項の規定に基づく議案の修正）
5 ）家畜衛生学雑誌投稿規程の一部改正について（報告事項）
Ⅴ．議長解任
Ⅵ．閉会

大会議室

128

第 1 号議案
Ⅰ

2018年度事業報告・収支決算報告並びに監査報告について

2018年度事業報告

1 ．通常総会

2018年 7 月 7 日（土） 於：麻布大学獣医学部棟 7 階大会議室
・2017年度事業報告及び収支決算報告並びに監査報告について
・2018年度事業計画（案）及び収支予算（案）について
2 ．研究発表会
第88回大会2018年 7 月 7 日（土） 於：麻布大学獣医学部棟 7 階大会議室

一般講演 5 題
第89回大会

受賞記念講演 1 題，教育講演（坂田亮一

先生） 1 題約40名参加2018年12月14日（金） 於：Meiji Seika ファルマ（株）本社・講堂

一般講演 6 題

約78名参加3．
「家畜衛生フォーラム2018」2018年12月14日（金） 於：Meiji Seika ファルマ（株）本社講堂
テーマ：「越境性動物疾病の侵入および蔓延をいかに食い止めるか？」座

長：迫田義博（北海道大学），小倉弘明（農研機構動物衛生研究部門）

講演者：釘田博文（OIE），迫田義博（北海道大学），深井克彦（農研機構動物衛生部門），山田学（農研機構動物衛生部門），森岡一樹（農研機構動物衛生部門），伊藤和夫（農水省動物検疫所）
参加者：96名（有料：80名，無料：16名） マスコミ関係： 3 社
4 ．常務理事会
第1回

2018年 5 月12日（土） 於：東京農工大学農学部本館第 3 会議室

1 ）2018年度の主な行事と日程の確定
2 ）第88回大会・通常総会の開催について
3 ）家畜衛生フォーラム2018について
4 ）編集委員会報告5 ）事務局報告6 ）役員の確認
7 ）賛助会員の確認
8 ）常設委員会・委員の確認
9 ）その他
第2回

2018年 6 月16日（土） 於：東京農工大学農学部本館第 3 会議室

報告事項1 ）2018年度

総会・第88回研究発表会開催について

2 ）編集委員会報告3 ）事務局報告審議事項
1 ）総会上程議案について
2）「家畜衛生フォーラム2018」開催について
3 ）その他
第3回

2018年11月17日（土） 於：東京農工大学農学部本館第 3 会議室

1 ）第89回研究発表会について
2 ）家畜衛生フォーラム2018について
3 ）編集委員会報告4 ）事務局報告5 ）その他

129

5 ．理事会2018年 7 月 7 日（土） 於：麻布大学獣医学部棟 3 階会議室
総会の上程議案について，2018年度の事業の進行状況，フォーラム2018について，
その他
6 ．編集委員会
2018年度（第44巻）の家畜衛生雑誌発行状況
44巻 1 号（2018年 7 月 7 日発行）
原著 1 編

第88回大会要旨 5 編

教育講演要旨 1 編

平成29年度家畜衛生学雑誌論文賞受賞講演要旨 2 編
44巻 2 号（2018年12月14日発行）
技術資料 1 編

家畜衛生フォーラム要旨 6 編

44巻 3 号（2019年 3 月28日発行）
原著 1 編技術資料 1 編

第44巻総目次

第89回大会要旨 6 編

130

2018年度収支決算報告〈一般会計〉
収入の部
項（単位：円）

目

予算額

決算額

一般会費

750,000

625,500

賛助会費
広告掲載代
雑収入
購読・団体会員等
前年度繰越金計

200,000
250,000
900,000
20,000940,220
3,060,220

200,000
198,720
957,001
20,000940,220
2,941,441

予算額
2,000,000
10,000250,000

決算額
1,159,002
3,506
275,370

差額（決算−予算）

備 考
126名分（下記内訳）△124,500
2018年度以前分：590,500円
2019年度以降分：35,000円
0 12件△51,280
57,001 フォーラム共催費，フォーラム参加費
0 4件
0△118,779

支出の部
項
目
印刷費
会議費
事業運営費
通信運送費

70,00042,736

事務経費
事務局人件費
役員交通費
予備費
計60,000330,000
40,000300,220
3,060,220

101,144
264,526
23,20001,869,484

差額（予算−決算）
備 考
840,998 家畜衛生雑誌（ 3 号分），雑誌発送代6,494 お茶代等
△25,370 講師謝礼，アルバイト代，フォーラム開催費等
27,264

案内葉書代，請求書送付代，フォーラムポスター送料等△41,144 HP 管理費（ 2 年分），事務用品
65,474 1,000円 /1時間
16,800300,220
1,190,736

一般会計収支差額＝決算収入額2,941,441－決算支出額1,869,484＝1,071,957（次年度へ繰越）〈特別会計〉
収入の部

項
目
雑収入
前年度繰越金計（単位：円）

予算額

決算額

0979,597
979,5978
979,597
979,605

予算額
100,000
100,000

決算額
57,50057,500

差額（決算−予算）
8 受取利子08

備考差額（予算−決算）
42,50042,500

備

考

支出の部
項
目
受賞講演者謝礼等
計

特別会計収支差額＝決算収入額979,605－決算支出額57,500＝922,105（次年度へ繰越）

2018年度監査報告

日本家畜衛生学会会則第10条第 3 項の規定に基づいて，2018年度の監査を実施した結果，一般会計および特別会計
ともに適正に処理されていることを認めます．
2019年 6 月22日
監

事

柿

市

徳

英

㊞

監

事

平

山

紀

夫

㊞

131

第 2 号議案
Ⅰ

2019年度事業計画（案）・収支予算（案）について

2019年度事業計画（案）1 ．通常総会

2019年 7 月20日（土） 於：麻布大学獣医学部棟 7 階大会議室
・2018年度事業報告及び収支決算報告並びに監査報告について
・2019年度事業計画（案）及び収支予算（案）について
2 ．研究発表会
第90回大会

2019年 7 月20日（土） 於：麻布大学獣医学部棟 7 階大会議室

第91回大会

2019年12月20日（金） 於：Meiji Seika ファルマ（株）本社・講堂

3．
「家畜衛生フォーラム2019」2019年12月20日（金） 於：Meiji Seika ファルマ（株）本社・講堂
テーマ：「牛乳房炎の診断，治療及び予防の最前線」
4.

常務理事会
第1回

2019年 5 月11日（土） 於：東京農工大学本館第 3 会議室

第2回

2019年 6 月22日（土） 於：東京農工大学本館第 3 会議室

第3回

2019年11月17日（日） 於：東京農工大学本館第 2 会議室

6 ．理事会
2019年 7 月20日（土） 於：麻布大学獣医学部棟 3 階会議室
7 ．編集計画
巻

号

発行予定

内

容

45− 1 − 22019年 7 月

総説 1 編，第90回大会講演要旨

45− 3

2019年12月

原著 1 編審査中，フォーラム2019・第91回大会講演要旨

45− 4

2020年 2 月

原著，総目次＊常設委員会（2019～2021）
編 集 委 員 会 （○は委員長）
髙井

福士

野上

末吉

○長井

宮﨑

学術企画委員会 （○は委員長）○伊藤（博）

杉浦

河合

磯

須藤

HP 管理委員会 （○は委員長）
樋口

廣瀬

○白井

坂田

高橋

篠塚

田中（良）

上塚

132

Ⅱ 2019年度収支予算（案）〈一般会計〉
収入の部
項（単位：円）

目

2018年度

2019年度

差

額

備

考

一般会費

750,000

700,000

賛助会費

200,000

240,000

広告掲載料

250,000

200,000

雑収入

900,000

950,000

50,000 フォーラム共催費および参加費，大会参加費など

購読・団体会員等

20,00015,000△5,000940,220

1,071,957

131,737

3,060,220

3,176,957

116,737

前年度繰越金計△50,000 のべ140名分
40,000 12件△50,000
3件

支出の部
項

（単位：円）

目

2018年度

2019年度

差

額

備

考

印刷費

2,000,000

1,200,000

会議費

10,00010,000△800,000 「家畜衛生学雑誌」 3 号分発行，雑誌発送代

事業運営費

250,000

270,000

20,000 講師謝金，アルバイト，フォーラム開催費など

通信運送費

70,00050,000△20,000 案内葉書代，請求書送付代，フォーラムポスター送料など

0

お茶代など

事務経費

60,00020,000△40,000

事務局人件費330,000

300,000△30,000 1,000×4h×6d×12m ＝288,000円から起算

役員交通費40,00040,0000

予備費300,220

1,286,957

986,737

計

3,060,220

3,176,957

116,737

事務用品，インターネット回線使用料等
11,900× 3 回＝35,700円から起算〈特別会計〉
収入の部
項（単位：円）

目

2018年度

雑収入
前年度繰越金計

2019年度

差

額

0

0

0

979,597

922,105△57,492

979,597

922,105△57,492

備

考

備

考

支出の部
項

目

謝礼等
計

2018年度

2019年度差額

100,000

20,000△80,000

100,000

20,000△80,000

133

第 3 号議案

会則の一部改正について

日本家畜衛生学会会則一部改正案
現

新旧対照表

行

改

正

案

第三章 （役員，役員会および委員会）

第三章 （役員，役員会および委員会）

役員および役員会

役員および役員会

第12条 （略）第12条 （略）

第13条

第13条

理事長は，常務理事の互選により選出する．
2

理 事長は，学会を代表し , 会務を総理す

理事長は，常務理事の互選により選出する．
2

る．
3

理 事長は，学会を代表し , 会務を総理する．

理事長は，常務理事の中から庶務・会計3を担当する事務局担当者を委嘱する．

理 事長は，常務理事の中から庶務・会計を担当する事務局担当者（事務局長）を
委嘱する．

附則

附則

（ 1 ） この会則は平成14年 7 月 6 日より施行する．

（ 1 ） この会則は平成14年 7 月 6 日より施行する．

（ 2 ）～（ 8 ）（略）（ 2 ）～（ 8 ）（略）

（ 9 ） この会則は平成28年 7 月 9 日に改正し，同日に（9） こ の会則は平成28年 7 月 9 日に改正し，同日に

施行する．

施行する．
（10） この会則は2019年 7 月20日に改正し，同日に施
行する．

134

第 4 号議案

名誉会員・理事の承認について改正（案）

役員（理事長，副理事長，常務理事，監事，理事）の任期は 2 年間で，次期の体制は2019～2021年である．太字が変更となる予定の理事の方々である．

名誉会員・理事名簿（2019～2021）
名誉会員
飯塚

三喜

前東京農工大学

倉田一明

前日本生物科学研究所

柿市

徳英

前日本獣医生命科学大学

山城

富男

前科学飼料研究所

磯動物病院

△高橋

欣也

（一財）日本生物科学研究所

理事・監事
△磯

日出夫

△伊藤

博哉

農研機構動物衛生部門

△高橋

俊彦

酪農学園大学

岩田

祐之

山口大学

＊竹中

昭雄

（一社）日本科学飼料協会

△上塚

浩司

茨城大学

△田中

良和

日本獣医生命科学大学

植村興

前四条畷学園大学

△長井

誠

麻布大学

△大友

浩幸

農水省動物検疫所

永幡肇

岡山理科大学

＊押田

敏雄

前麻布大学

△並松

孝憲

全農家衛研

小尾

岳史

鹿児島大学

△野上

貞雄

前日本大学

◎河合

一洋

麻布大学

△羽賀

清典

（一財）畜産環境整備機構

△齋藤

康倫

日本全薬工業（株）○樋口豪紀

酪農学園大学

△坂田

亮一

明治大学

△平山

紀夫

日獣大客員教授

迫田

義博

北海道大学

△廣瀬

和彦

Meiji Seika ファルマ（株）

佐藤

繁

岩手大学

福士

秀人

岐阜大学

塩野

浩紀

農研機構動物衛生部門

△福田

昌治

埼玉県農業技術センター

●篠塚

康典

麻布大学

△藤井

武

ゾエティス・ジャパン（株）

△嶋﨑

智章

農水省動物医薬品検査所

△牧江

弘孝

（公社）日本動物用医薬品協会

△下平

浩己

農水省動物衛生課△宮﨑茂（一財）生物科学安全研究所

△白井

淳資

東京農工大学

△村上

裕信

△杉浦

勝明

東京大学

△守野

繁

農水省動物検疫所△須藤慶子

群馬県中部農業事務所家畜保健衛生課

△山本

孝史

前東京農業大学

△髙井

伸二

北里大学

麻布大学

〔五十音順〕〈変更個所は太字表示〉◎：理事長○：副理事長●事務局長△：常務理事＊：監事〔2019年 7 月現在〕

135

賛助会員名簿1 ．MSD アニマルヘルス（株）

7 ．田村製薬（株）

2 ．エランコジャパン（株）

8 ．日生研（株）

3．
（株）科学飼料研究所

9 ．日本ハム（株）

4 ．共立製薬（株）

10．日本全薬工業（株）

5 ．住化エンバイロメンタルサイエンス（株）

11．バイエル薬品（株）

6 ．ゾエティス・ジャパン（株）

12．Meiji Seika ファルマ（株）〔2019年 7 月現在〕

136

2022年第68回国際食肉科学技術会議（ICoMST）
神戸大会について
1 ．国際食肉科学技術会議（International Congress of Meat Science and Technology）（略称「ICoMST」）とは，1955年に設立されたヨーロッパ食肉研究者会議に端を発する国際会議で，食肉および食肉製品に関する世界の研究者・技術者の専門的・総合的な討論の場として，世界各国で年に一度開催されています．
 わが国では，1999年に第45回大会が横浜市にてアジアで初めて開催され，2022年の第68回神戸大会は23年ぶり
2 度目の日本開催となります．
2 ．ここ数年の開催状況
今年2019年はドイツで開催され，2020年は米国，2021年はポーランド，2022年は日本で開催されます．
3 ．開催時期：2022年 8 月21日（日）～25日（木）（ 5 日間）
4 ．開催場所：神戸市国際会議場（神戸市中央区ポートアイランド）
5 ．参加予定者数等
約40ヵ国・地域から約400人（海外200人，国内200人）
6 ．日本での開催の意義（ 1 ） 食肉の生産から利用および流通に至る科学技術は，各国の研究者や技術者の努力で日進月歩の発展を遂げています．
これら食肉に関わる世界の研究者や技術者が一堂に会し，世界の最新の研究成果等について発表・討論するにより，わが国の畜産および食肉産業の発展のための重要な機会といえます．
（ 2 ） この機会に，わが国の和牛をはじめとする牛肉，豚肉，鶏肉，ハム・ソーセージ等を世界各国からの参加者に PR す
ることにより，わが国の畜産物の輸出拡大につなげる絶好の機会となります．
（ 3 ） 今回の大会では「食肉の未来を考える」をメインテーマとして，①世界の食肉市場の動向，②世界に誇る和牛肉等のPR，③食肉・食肉製品の品質や生産加工技術，④ IT・AI，培養肉などの先進的技術，⑤食肉・食肉製品の栄養と安全性，⑥食肉生産における動物福祉などの安全性確保，などの幅広いテーマを議論することとしており，世界における最新の研究成果が得られ，わが国の畜産・食肉産
業の発展につながるものと期待されます．

137「家畜衛生学雑誌」投稿規程
1 ．本誌には原則として，家畜衛生に関する原著論文，
短報，総説（刷り上がり 4 頁以下のミニレビューを

Key words（キーワード）をつける．
6 ）英語論文および和文論文の英文 Summary は，含む），技術資料を掲載する．なお，原稿は編集委

投稿前にしかるべき校閲を受けること．

員会事務局へ電子メール添付（PDF ファイル）で7 ）原著論文で刷り上り 8 頁（30文字×25行＝750

提出する．印刷原稿 3 部（うち 2 部は鮮明なコピー

文字で，図表を含めて16枚程度）までは，印刷でもよい）の書留郵便あるいはレターパックによる費を本学会で負担する．ただし，超過ページに提出も可とする．

ついては，その費用を著者の負担とする．な

2 ．投稿にあたり，論文掲載までの対応を行う連絡著者

お，総説についてはこの限りではない．また，（コレスポンディングオーサー）は，投稿原稿が他

カラーや特殊な用紙での印刷は，その費用を著

誌にすでに掲載あるいは投稿中ではないこと，著者全員が投稿論文の内容及び掲載に同意していることを記載した文書（カバーレター）を提出すること．
3 ．筆頭著者あるいは連絡著者は本学会会員であることが望ましいが，投稿の要件とはしない．
4 ．掲載論文は原著論文，短報，総説（刷り上がり 4 頁

者の負担とする．
8 ）使用する動植物・微生物などの学名はイタリッ
ク体で表記する．
9 ）度量衡の単位，略記は SI 単位系を基本とし，以下の例に従う．
［例］m，cm，mm，µm，nm，kg，g，mg，µg，ng，以下のミニレビューを含む），技術資料とする．

L，mL，µL，nL，M，mM，µM，％，cm2，
m3，

5 ．全ての投稿論文は編集委員及び複数の審査員が審査

hr，min，sec，℃，pH，Pa（血圧は mmHg，し，編集委員長が掲載の採否を決定する．
6 ．投稿論文は和文または英文とし，次の指示（記述順

生体内圧力は Torr）など．
10）表および図（写真を含む）は用紙 1 枚に 1 つと序など）に従うこと．

し，個々に番号と表題を記入し，投稿原稿の最1 ）論文原稿は別に定める注意に従って作成するこ

後に添付する．

と．用紙サイズは A4とし，和文の場合は30字

11）引用文献は下記の例にならって，アルファベッ

で25行程度，英文の場合はダブルスペース（70ト順にならべ，本文中では 1 ）， 3 − 6 ）のよ

字で25行程度）とする．原稿本文の左側に行番

うに上付き（superscript）で記入する．ただ号を表記すること．

し，著者名は 3 名までとし， 4 人目以降は省略

2 ）和文の場合も句読点は，
「，
」
，
「．
」を用いること．

し，「ら」，「et al」で示す．

3 ）論文原稿は第 1 ページに表題，著者名，所属機［例］

関名およびその所在地を和文と英文で記載する

雑誌とともに，連絡著者とその電子メールアドレスを記載する．また，和文の場合は20字，英文の場合は40字以内の略表題（running head）を記載する．
4 ）原著論文の構成は原則として，Summary（本文が和文の場合も英語），序文（Introduction），
材料および方法（Materials and Methods），結果（Results）， 考 察（Discussion）， 引 用 文 献（References），要旨（本文が和文であっても英文であっても，和文の要旨）とする．ただし，謝辞は，別項目を設けず，本文の最後に 1 行の空白をとった後に記載する．
5 ）英文 Summary は250語以内，和文要旨は600字以内とし，それぞれの最後の行に 5 つ以内の1 ）内田孝治・藤井武・高山公一ら（1991）ブロ
イラーにおける実験的大腸菌症に対するラノ
フロキサシンの治療効果および用量設定試
験．家畜衛生研究会報．33，19−24．
2 ）Oshida, T., Fukuyasu, T., Kohzaki, K., et al.
(1993) A new treatment system for animal
waste water using microorganism, soil andvagetation. Asian-Australasian Journal ofAnimal Sciences. 6, 205-209.
電子ジャーナル3 ）Wilson, D.J., Rood, K.A., Bunnel, J., et al. (2014)
Johne’s disease, mycoplasma and BVD in
Utah-Bulk tank milk testing and comparison

138

する，その他の規定については原著の場合に準じ

		 t o p r e v i o u s r e g i o n a l p r e v a l e n c e a n d
individual herd results over time. Journal of
Veterinary Science and Technology. 5:182.

る．
8 ．総説及び技術資料の構成については特に規定を設けないが，引用論文の記載法は原著論文の場合に準じ

doi: 10.4172/2157-7579.1000182.
単行書

ることとする．
9 ．別刷り費用は著者の負担とするが，筆頭著者あるいは連絡著者が本学会会員の場合は，50部に限り無料4 ）伊予部志津子（1980）薬剤耐性因子（R）のとする．

検出法，薬剤感受性測定法．22−48頁．三橋

10．本誌の発行は原則として，年 4 回（ 4 月， 7 月，10

進編，講談社，東京．

月および 1 月）とする．

5 ）McDonrd, P. (1976) Trends in silage making,Microbiology in Agriculture, Fisheries and11．編集委員会事務局を下記に置く．
〒252−5201

Food. pp109-121. Shinner, F.A and Carr, J.G.

神奈川県相模原市中央区淵野辺 1 −17−71

eds. Acad. Press, London, NY.

麻布大学獣医学部伝染病学研究室内
12）図はグラフィックソフトウェアで作成すること

日本家畜衛生学会編集委員会

が望ましい．手書きで作成する場合は，そのまTel 042（769）1643

ま製版できるよう，白色紙または青色方眼紙にE-mail：jjah@azabu-u.ac.jp

タイプやレタリングなどにより作成する．

12．本誌に掲載された論文の著作権は，日本家畜衛生学

13）投稿原稿が受理（掲載決定）されたならば，著会に帰属する．

者 は す み や か に 最 終 原 稿 の Microsoft Word
ファイルを電子メールで提出すること．図につ附則

いては，グラフィックソフトウェアで作成した

本規程は，2015年 1 月 1 日以降の投稿論文に適用する．

ファイルも併せて提出する．

本規程は，2015年 7 月12日以降の投稿論文に適用する．

7 ．短報は，その内容を成績および考察（Results and本規程は，2016年11月 5 日以降の投稿論文に適用する．

Discussion） と し て ま と め， 要 旨（Summary） は

本規程は，2019年 7 月20日以降の投稿論文に適用する．

英文では200字以内の和文，和文では100語以内の英文をつける．原稿の長さは刷り上りで， 2 頁以内と論文原稿を作成する上での注意
1 ）執筆にあたり，投稿規定をもう一度，熟読すること．

5 ）写真は印刷に耐えうる鮮明なものを使用すること．

2 ）各行の行末での強制改行をしないこと．

6 ）図は，Microsoft PowerPoint，Excel，Adobe Photoshop，

3 ）投稿論文が和文，英文のいずれの場合も数字，欧文Illustrator 等のソフトウェアで作成するのが望ましい．

は全て 1 バイト文字（いわゆる半角）で入力するこ

7 ）論文受理後の最終原稿は，Microsoft Word（あるいと．ただし和文ではかっこ（ ）は 2 バイト文字

は Microsoft Word 互換ソフトウェア）ファイルと（いわゆる全角）とする．
「µ」（マイクロ）は半角して提出する．ただし，Microsoft Word 互換ソフ

立体で入力すること．

トウェアを使用した場合は，Microsoft Word で正4 ）投稿論文原稿は PDF ファイルとして事務局まで電しく表示されることを確認すること．グラフィック

子メールで提出すること．その際には必ずパスワー

ソフトウェアで作成した図データは，jpeg，tiff 等

ドロックし，パスワードは別メールで事務局まで連の汎用フォーマットで提出する．

絡すること．特段の理由がある場合は，印刷原稿 3部（うち 2 部は鮮明なコピーでも可）を事務局まで
書留郵便あるいはレターパックで送付すること．

日本家畜衛生学会
編集委員会

139

日本家畜衛生学会会則

第一章（総
第1条

則）

本学会は，日本家畜衛生学会（英文表記：The

当する事務局担当者を委嘱する．
会員の退会・除名
第 9 条 退会を希望する会員は，理事長に退会する旨を届出ること．

Japanese Society of Animal Hygiene）（以下，「学会」とする．
）と称する．
第2条
第3条

あった場合，または会費を 5 年分以上滞納した機関におく．

場合は除名とする．

学会は，家畜衛生とその関連領域における学究の向上を図り，畜産の進歩発展に寄与すること

第4条

第10条 学会の名誉を傷つけたり，目的に反する行為が

学会の事務局は，原則として理事長の所属する
を目的とする．

第三章（役員，役員会および委員会）

学会は，前条の目的を達成するために，次の事

役員および役員会

業を行う．

第11条

⑴

研究発表会及び学術講演会等の開催⑵

学会誌「家畜衛生学雑誌」の発行⑶

学会の発展に貢献した者への表彰⑷

その他学会の目的達成のために必要な事業

理事は理事長が委嘱し，総会の承認を受ける．
2

理事は理事会を組織し，理事長を補佐し，学会の運営に関して第 4 条の事項を行う．

第12条

1

理 事長は，常務理事の互選により選出する．

第二章（会員および会費）2理事長は，学会を代表し , 会務を総理する．

3

理事長は，常務理事の中から庶務・会計を学会の構成員

担当する事務局担当者（事務局長）を委嘱

第5条

する．

学会の会員は正会員，学生会員，賛助会員および名誉会員より構成する．
⑴
⑵

⑶

⑷

第13条 常務理事会および理事会は理事長が随時招集する．

正会員：学会の趣旨に賛同し，会費を納入
した個人

委員会

学生会員：学会の趣旨に賛同し，会費を納

第14条の編集委員会，学術企画委員会およびホー

単年度とする．

ムページ管理委員会を設置する．
2

賛助会員：学会の趣旨に賛同し，その事業理事の中から指名する．但し，常務理事会

人又は団体が必要と認めた場合には会貝の中から指名

名誉会員：学会に永年功労があり，総会にすることができる．
3

委 員会の委員長は , 委員の互選により選出
し，理事長が指名する．

会 費は正会員にあっては年額5,000円，学生会
は 1 口年額10,000円とし，毎年 7 月末までに納第四章 （総入するものとする．

第15条

会員資格

会）

通常総会は毎年 1 回，理事長が招集する．

第16条 理事長が必要と認めた場合は，臨時総会を招集
学会の会員になろうとする者は，所定の手続を行い，定められた会費を納入すること．

会員の義務
第8条

委員会の委員は，原則として理事長が常務を援助するため，所定の会費を納入した個員にあっては年額2,000円，賛助会員にあって第7条

理事長は第 4 条の事業を達成するため常設入した学生，大学院生．ただし会員期間はおいて承認された個人
第6条

1

1
2

することができる．
第17条

総会では次の事項を議決する．
⑴

事業計画および事業報告に関する事項

会員は本学会の会則に従い，本学会の運営⑵

予算および決算に関する事項に協力し，会費を納入する義務を負う．

⑶

会則の改正に関する事項

理事長は常務理事の中から庶務・会計を担⑷ その他，学会の目的を達成するために必要

140日に施行する．

な事項

第五章（会
第18条

計）

学会の経費は会費その他の収入をもって，これ⑷日に施行する．
⑸会計年度は 4 月 1 日より，翌年 3 月31日までと⑹⑺

則この会則は平成21年 7 月 4 日に改正し，同日に施行する．

する．

附この会則は平成17年 7 月 2 日に改正し，同日に施行する．

にあてる．
第19条

この会則は平成16年 7 月 3 日に改正し，同この会則は平成23年 7 月 2 日に改正し，同日に施行する．

⑴⑵

こ の会則は平成14年 7 月 6 日より施行す⑻

る．

日に施行する．ただし，平成27年度の会費

学会設立時の役員は家畜衛生研究会（以下は4,000円 と し， 平 成28年 度 か ら 会 費 を「研究会」と略す）の役員が，暫定的に就5,000円とする．

任することとし，理事長は研究会の会長⑼

究会の評議員が，監事は研究会の監事がそれぞれ就任する．
この会則は平成15年 7 月 5 日に改正し，同この会則は平成28年 7 月 9 日に改正し，同日に施行する．

が，常務理事は研究会の幹事が，理事は研⑶

この会則は平成27年 7 月11日に改正し，同⑽

この会則は令和元年 7 月20日に改正し，同日に施行する．

141

協賛企業一覧
日本家畜衛生学会は以下の企業からの協賛を受けております．ここに記して謝意を表します（五十音順）．
1 ．MSD アニマルヘルス（株）

8 ．日生研（株）

2 ．エランコジャパン（株）

9 ．日本ハム（株）

3．
（株）科学飼料研究所

10．日本全薬工業（株）

4 ．共立製薬（株）

11．バイエル薬品（株）

5 ．住化エンバイロメンタルサイエンス（株）

12．Meiji Seika ファルマ（株）

6 ．ゾエティス・ジャパン（株）

13．（株）メディプラス製薬

7 ．田村製薬（株）〔2019年12月現在〕

日本家畜衛生学会入会のすすめ
日本家畜衛生学会は家畜衛生とその関連領域における学術の交流を図り、畜産の進歩発展に寄与することを目的とした学会です。
＜主な活動＞
・ 年２回（７月、12 月）の研究発表会
・ 年１回のフォーラム（12 月ごろ）の開催
これまでの主なテーマ「狂犬病」、「口蹄疫」、「鳥インフルエンザ」、「BSE」、「家畜ふん尿」など
・ 年４冊の機関誌「家畜衛生学雑誌」の発行
・ 学会賞の授与
年会費5,000円（但し、学生は2,000円）
御請求戴ければ、見本誌を贈呈します!!

家畜衛生学雑誌

The Japanese Society of Animal Hygiene
日 本 家 畜 衛 生 学 会〒252-5201 神奈川県相模原市中央区淵野辺1-17-71
麻布大学獣医学部獣医学科衛生学第一研究室内TEL ／ FAX：042−850−2508

http://www.kachiku-eisei.jp/
e-mail：k-eisei@azabu-u.ac.jp
Hpで活動内容がご覧になれます!!（日本家畜衛生で検索）

第45巻第 3 号

令和元年 12月20日発行（会員配布）
発

行

印 刷 所

日本家畜衛生学会
理事長 河合一洋〒252−5201 神奈川県相模原市中央区淵野辺 1 −17−71
麻布大学獣医学部獣医学科衛生学第一研究室内☎／ FAX：042−850−2508
ホームページ：http://www.kachiku-eisei.jp/
e-mail：k-eisei@azabu-u.ac.jp
振替口座：00240－ 3 －43171
明誠企画株式会社〒208－0022 東京都武蔵村山市榎 2 － 25 － 5☎ 042−567−6233 FAX 042−567−6230

令和日本家畜衛生学会

年

月

日

御中

入 会 申 込 書
貴会への入会を下記の通り申込ます．

記
フリガナ
氏

名：

所属名称：
部

署：

役

職

所属住所：〒TEL：

FAX：

e-mail：

自宅住所：〒

TEL：
e-mail：会員の種類 ： ○正 会 員 ・ ○学生会員 ・ ○名誉会員
会報送付先 ： ○自宅 ・ ○勤 務 先○内にチェックを付して下さい．

１．入会申込書は必要事項をすべて正確に記入し，郵便またはFAX（042−850−2508）にてご送付下さい．
２．年会費は個人会員 5,000円，賛助会員 10,000円／口（１口以上）を郵便振替口座（加入者名：日本家畜衛生学会，No. 00240−3−43171）へお振込下さい．
３．申込先は〠252−5201

神奈川県相模原市中央区淵野辺１−17−71
麻布大学獣医学部獣医学科衛生学第一研究室内
日本家畜衛生学会事務局宛

TEL／FAX：042−850−2508

４．ホームページからも申し込めます：http://www.kachiku-eisei.jp/

令和
日本家畜衛生学会

年

月

御中

変
変更手続きを下記の通り致します．

更

届

記

フリガナ
○

氏

名：

○

所属名称：

○

部

○

所属住所：〒

署：

○

役

TEL：

○

自宅住所：〒

○

TEL：

職

FAX：

e-mail：e-mail：○会員の種類：○正会員 ・ ○学生会員 ・ ○名誉会員○会報送付先：○自宅 ・ ○勤務先全てご記入の上，上記変更部位の○内にチェックを付して下さい．

１．変更届出書は必要事項を正確に記入し，郵便またはFAX（042−850−2508）にてご送付下さい．
２．届け先は〠252−5201

神奈川県相模原市中央区淵野辺１−17−71
麻布大学獣医学部獣医学科衛生学第一研究室内
日本家畜衛生学会事務局宛

TEL／FAX：042−850−2508

３．ホームページからも手続きできます：http://www.kachiku-eisei.jp/

日乳剤