ISSN 1347－6602

昭和62年６月９日学術刊行物認可

家畜衛生 学 雑 誌
The Japanese Journal of Animal Hygiene（附）

家畜衛生フォーラム2017
日本家畜衛生学会第87回大会

要旨集
要旨集

日本家畜衛生学会
Vol .43 No.3
2017. DEC.

The Japanese Society ofAnimal Hygiene

家

畜

衛

生

学

雑

日本家畜衛生学会

発行

誌

理 事 長：白井淳資
副理事長：宮﨑編集委員長：宮﨑茂

茂

編集委員：末吉益雄・髙井伸二・長井誠

野上貞雄・福士秀人"""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""The Japanese Journal of Animal Hygiene
Published by the Japanese Society of Animal Hygiene
President : Junsuke SHIRAI（Tokyo Univ. of Agric. and Technol.）Vice President : Shigeru MIYAZAKI（Res. Inst. for Anim. Sci. in Biochem. and Toxicol.）Editor-in-Chief : Shigeru MIYAZAKI（Res. Inst. for Anim. Sci. in Biochem. and Toxicol.）Editorial Board : Masuo SUEYOSHI（Miyazaki Univ.）
Shinji TAKAI（Kitasato Univ.）
Makoto NAGAI（Ishikawa Pref. Univ.）
Sadao NOGAMI（Nihon Univ.）
Hideto FUKUSHI（Gifu Univ.）
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「家畜衛生学雑誌」第43巻第 3 号の送付にあたって
会員の皆様におかれましては，ますますご清栄のこととお慶び申し上げます．ここに，「家畜衛生学雑誌」第43巻
第 3 号を刊行する運びとなりました．
本号では，ミニレビュー 1 編の他，
「家畜衛生フォーラム2017」講演要旨及び「第87回大会講演要旨」を掲載しています．
「家畜衛生フォーラム2017」では，「抗菌剤に頼らない新しい家畜疾病の制御法」をテーマに， 5 人の先生方からご講演をいただきますので，ご参加の皆様の積極的なご討論をお願い致します．
家畜衛生学雑誌では，原著論文・短報以外にも，総説，数ページ程度のミニレビュー，技術資料等の原稿を受け付
けておりますが，今回初めて「ミニレビュー」をご投稿いただき，掲載の運びとなりました．原著論文はもちろんでございますが，ミニレビューや技術資料も含め，会員の皆様の積極的なご投稿をよろしくお願い致します．ご不明な点はご遠慮なく編集委員会事務局へお問い合わせください．
日本家畜衛生学会理事長

白井淳資

家畜衛生学雑誌編集委員長

宮﨑茂（日本家畜衛生学会副理事長）

日本家畜衛生学会・学会費納入のお願い
ご承知のように，学会は会員の皆様からの会費をもって運営されております．学会の運営を円滑に運ぶために，所定の会費を納入していただきますようお願い致します．
＊会費は，正会員5,000円，学生会員2,000円です．
＊平成27年度までの未納分をお支払いいただく場合，正会員年会費は4,000円です．
日本家畜衛生学会

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家畜衛生学雑誌
第43巻
目

第3号

2017

次

〈ミニレビュー〉
非定型 BSE 及び飼料規制実施後に発生する BSE の現状･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････小野寺節・杉浦勝明･･････････････････････････ 81〜88〈家畜衛生フォーラム2017要旨集〉
座長の言葉
抗菌剤に頼らない新しい家畜疾病の制御法
─モデルとしての難治性・慢性疾病克服のための研究─･･････････････････杉浦勝明・大石弘司････････････････････････････････ 91
イントロダクション
日本及び欧州における薬剤耐性対策状況
─動向調査から普及啓発まで─･･･････････････････････････････････････････････････････････････木島まゆみ･･････････････････････････ 93〜96
生理活性タンパク質の応用研究からのアプローチ
牛乳房炎の予防と治療への可能性 非特異性生理活性物質：ラクトフェリン･････････河合一洋･･････････････････････････ 97〜99
免疫研究からのアプローチ
牛の免疫応答を利用した難治性疾病の新規制御法開発･･･････････････････････････････････････今内 覚･･･････････････････････ 101〜103
免疫遺伝学研究によるアプローチ
主要組織適合抗原 MHC をマーカーとした新しい牛乳房炎および牛白血病制圧戦略について･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････間 陽子･･･････････････････････ 105〜108
抗病性育種研究からのアプローチ
豚の抗病性育種によってマイコプラズマなどの病気にかからない豚を作る････････････鈴木啓一･･･････････････････････ 109〜112〈第87回大会講演要旨集〉
ビタミン K 類がウシの免疫担当細胞の機能発現に及ぼす影響･･････････････････････････････西 航司・森 千尋・権平 智・岩野英知・樋口豪紀・永幡 肇･･･････････････････････ 116〜117
豚胸膜肺炎ワクチン免疫血清中の抗体価測定のための ELISA 法の検討････････････････････････････････････････････････手島香保・TOHO・堤 信幸・鎌田 崇・小玉敏明
近藤朋美・眞柄 麗・岩崎紗枝・渋谷一元･･･････････････････････ 118〜119
子牛のマイコプラズマ関節炎罹患牛における免疫学的応答性････････････津田尚樹・笹川操緒・西 航司・岡本真理子・田中貴大・権平 智・根布貴則
大塚浩通・小岩政照・松田一哉・岩野英知・樋口豪紀・永幡 肇･･･････････････････････ 120〜121
競走用馬の感染性とみられる皮膚炎からの細菌・真菌の分離同定と薬剤感受性調査･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････牛屋重人・上塚浩司･･･････････････････････ 122〜123
養豚農家および養豚管理獣医師の抗菌剤使用削減意志に影響する意識要因の分析･･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････礒村れん・松田真理・杉浦勝明･･･････････････････････ 124〜125
乳清および鶏卵由来タンパク質酵素分解物の食肉加工における有効利用････････････････････････････････････････････････････････････････････････梅津敬多朗・竹田志郎・坂田亮一･･･････････････････････ 126〜127
野生獣肉に関する研究
─ジビエの生理活性機能について─･････････････････････････････････金子桜子・竹田志郎・坂田亮一･･･････････････････････ 128〜129
北海道で発生した高病原性鳥インフルエンザ（H5N6亜型）発症鶏の病性鑑定成績と他症例との比較･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････中薗将友・川島悠登･･･････････････････････ 130〜131
牛ウイルス性下痢ウイルス（BVDV）ワクチン製造のための増殖効率の高い細胞株の選択･･･････････････中川健斗・池田凡子・小川美聡・安田奏平・宮崎朋美・長井 誠・白井淳資･･･････････････････････ 132〜133
会員へのおしらせ ･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 135〜141
書評 ････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 142〜143
家畜衛生学雑誌投稿規程 ･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 144〜145
日本家畜衛生学会会則 ････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 146〜147

家畜衛生学雑誌

The Japanese Journal of Animal HygieneVol. 43  No. 3

2017

Contents〈Mini Review〉
Review of atypical BSE and BSE of cattle born after the reinforced feed ban (BARB)･････････････････････････････････････････････････････････････････ Takashi Onodera et al.･･････････････････････････････････････････････ 81〜88〈Abstracts of Animal Hygiene Forum 2017〉･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 89〜112〈Abstracts of oral presentations on 87th academic meeting〉････････････････････････････････････････････････････････････････････ 113〜133
Information for Members ･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 135〜141
Book Review ･･･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 142〜143
Instruction for Authors ･････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････････ 144〜145
The Regulations of The Japanese Society of Animal Hygiene ･･････････････････････････････････････････････････････････････････ 146〜147

Jpn. J. Anim. Hyg.

81

ミニレビュー

非定型 BSE 及び飼料規制実施後に発生する BSE の現状
小野寺節 1 ）・杉浦勝明 1 ）＊Review of atypical BSE and BSE of cattle born after the reinforced feed ban(BARB)
Takashi Onodera 1) and Katsuaki Sugiura 1) ＊（1）Graduate School of Agricultural and Life Sciences, the University of Tokyo）（2017.8.29 受付／2017.10.10 受理）

Summary
It has been postulated that BSE was a strain of sheep that crossed the species barrier to cattle via animal feed.
In the UK whilst the use of BSE-contaminated meat and bone meal in animal feed has been recognized as themeans, by which the disease was disseminated and sustained as an epidemic within the cattle population in theearly 1990s, the origin of the disease, including the born after the reinforced feed ban (BARB) cases, has remained
unclear. Efforts are made by scientists all over the world to generate knowledge on atypical BSE to minimize therisk to human and animal health. The potential threat of new type of BSE and BARB necessitates continued
research and surveillance testing.
Key words：Atypical BSE, Born after the reinforced feed ban (BARB), Surveillance  家畜衛生学雑誌

序

文43，81〜88（2017）

ベイランス（牛延髄部分を取り出し，ELISA などにより一斉にスクリーニング検査する方法）により非定型

畜産副産物である肉骨粉の飼料原料としての利用は，

BSE が散見されるようになった．非定型 BSE の野外例

過去40年以上にわたって行われてきた．特に牛海綿状脳は古典型 BSE のような運動失調・行動異常を示さない症（bovine spongiform encephalopathy, BSE） 発 生 以ために，アクティブ・サーベイランスによってのみ検出

前は，牛肉，製品に利用されない内臓の化製処理は世界可能である．また，非定型 BSE は一般に 8 歳以上の老中で一般的に用いられていた．BSE プリオンのルーツに

齢牛にのみ観察される．このため，BSE 全体の症例数はついては未だ不明であるが，脳脊髄や回腸末端部等が含激減したにも関わらず，BSE 検査継続の根拠となっていまれた牛内臓が化製処理により濃縮され，飼料として牛る．この論文では，未だ不明なところが多いが，現時点に与えられるというプロセスが繰り返えされることによで明らかになっている非定型 BSE の研究経過についてり増幅されたことは疑いない．牛肉骨粉の飼料利用が禁

概説したい．

止されたことにより，世界中より BSE の発生は急激に減少した．しかしながら，21世紀初頭より欧米，日本において死亡牛及び食用牛検査におけるアクティブ・サー

1 ．非定型 BSE の発生
欧州では2001年より非定型 BSE の存在していたことが報告されている 1 ， 2 ）（表 1 ）．2015年までの EU 委員会

東京大学大学院農学生命科学研究科〒113-8657 東京都文京区弥生 1 - 1 - 1＊
連絡著者：杉浦勝明（aksugiur@mail.ecc.u-tokyo.ac.jp）
1）

統計では，累積症例が約100例となっている（表 2 ）．古典型 BSE はプリオンに汚染された飼料あるいは実験感染により伝達され，英国及び他の国に発生した BSE は

家畜衛生学雑誌

82

表1

第43巻第 3 号（2017）

非定型 BSE の歴史的背景

2001

Biacabe ら，フランスで H- 型 BSE を報告 2 ）．

2002

Casalone ら，イタリアで L- 型 BSE を報告（欧州プリオン学会）1）．

2003

Yamakawa ら，日本で23か月齢 BSE を報告34）．

2006

日本厚生労働省研究班，日本で169か月齢の和牛において L- 型 BSE を報告35）．

2007

Jacobs ら，欧州全体の非定型 BSE を報告12）．

2008
2011
2012

2016

Biacabe ら，フランスの非定型 BSE は BSE 対策と無関係に発生していると報告 6 ）．
Nicholson ら，米国でプリオン遺伝子変異による BSE を報告 8 ）．
Baron ら，H 型 BSE プリオンをマウスで継代すると古典型 BSE プリオンが出現すると報告 7 ）．
EU 委員会，非定型 BSE について従来の古典型 BSE のサーベイランスで検出可能と報告15, 16）．
Seuberlich ら，スイスで H 型でも L 型でもない別の非定型 BSE を報告27）．
舛甚ら，H 型 BSE プリオンをウシ型プリオン遺伝子組み換えマウスで継代することにより，新たな BSE プリ
オン株を分離したと報告32）．
EU 委員会

2017

非定型 BSE の出生時期が古典型 BSE と変わらないと報告30）．

岡田ら，日本において，L- 型 BSE プリオンの牛経口感染により，末梢神経を含む全身神経組織におけるプリオン感染を報告23）．

表2
2001

2002

2003

2004

世界の非定型 BSE の発生頭数

2005

2006

オーストリア
0/1

0/1

2/1

3/1

スペイン
アイルランド

1/0
0/1

0/1

0/1

0/1

ポルトガル

2010

2011

2012

2013

1/0

0/1

0/1

0/1

1/0

0/1

1/1

2/2

0/2

1/1

2/3

2/2

1/0
2/1
1/0

0/1

0/1

0/2

1/0

1/2
0/1

1/0

0/1
2/0

0/1

1/2

1/0

0/1
0/1

0/2

0/2

1/0

2/0

1/1

1/0

0/1

2/0

0/2

0/1＊

1/0
0/2

スロベニア

1/0
1/1

0/1

1/0
2/2

0/2

1/0

0/1

1/1

0/1

ブラジル

1/0

1/0
1/0

ノルウェー

1/0

スイス
米国

2015

1/1

ルーマニア
英国

2014

1/1

1/0

1/0
1/0

イタリア
オランダ

2009

1/0

デンマーク

ポーランド

2008

0/1

チェコ

フランス

2007

1/0
1/0

1/0

注：各セルの数字は非定型 BSE 牛の報告頭数（H 型 /L 型）を示す．
＊：ポーランドでは2013年に H 型と L 型の識別がなされなかった非定型 BSE の発生が 1 頭あった．
出典：EFSA Journal 14:4643, 2016.

0/1

小野寺ら：非定型 BSE

83

飼料に添加された肉骨粉が原因と考えられているのに対イツフェルト・ヤコブ病の発症に関与している 9 ）．このし 3 ），非定型 BSE については飼料との関連性が証明され

E211K 牛に古典型 BSE，あるいは L 型 BSE 株を脳内接ていない．多くの非定型 BSE は老齢牛で見られるが，種して経過観察が行われている10）．さらに E211K に病原

4）

感染経路は明らかにされていない ．一部の論文では老体非接種の状態で長期飼育し，BSE が発生するか否かの齢によって，正常プリオン蛋白の品質保証機構（ABC

観察が行われている．非定型 BSE に何らかの遺伝子変カセット等）が疲労して，散発的（sporadic）に異常プ

異が存在するのか否かについては，今後の牛ゲノム計画

リオン蛋白が蓄積するのではないかとの仮説を立ててい等，さらなる研究の進展が必要とされる．

る 5 ， 6 ）．非定型 BSE 散発説のもう一つの根拠は，飼料

表 2 においては EFSA（欧州食品安全機関）の報告書

規制の前後でその発生率があまり変わっていない点であにおける世界の非定型 BSE 発生例が示してある．2001

るが 6 ），さらなるデータの蓄積が必要である．

年にフランス，オランダで H 型が報告されてから約100

Baron 等の報告では，非定型 BSE 株を実験動物体内で例となっている．2002年にベルギーでも L 型が報告され継代すると，古典型 BSE と同様のウエスタンブロット

たが，後にこの症例は古典型 BSE に再分類された．ブ型となるので，この株が古典型 BSE の元株とする説も

ラジル，ノルウエーでは古典型 BSE は発生せず非定型

7）

有る ．しかし，このマウスで見られたのと同じ現象がBSE のみが発生している．おそらく非定型 BSE の方が牛でも再現されるのであろうか．一方，昔から羊スクレ

何らかの原因（環境から除染し難い等）で撲滅が困難とイピー病原体が肉骨粉を通じて牛に感染し，BSE 化した考えられている．今後とも疫学調査が必要とされる．

とする説も根強く，その為に，非定型 L 型 BSE 株，ある
いは非定型 H 型 BSE 株を羊に感染させ，経過観察が行われている 7 ）．

2 ．非定型 BSE プリオン株の生化学的性状
現在 BSE は古典型 1 種，非定型 2 種（L 型，H 型）にまた，遺伝的変異による BSE 発生の可能性は大方否分類されている．古典型 BSE プリオンは，プロテアー

定されているが，米国の例のみが遺伝的変異の結果としゼ消化に非常に抵抗性である，それに対し，非定型 BSE

8）て報告されている ．この牛ではプリオン蛋白211番のプリオンはプロテアーゼ消化に対し，易消化性で，酵素アミノ酸がグルタミン酸よりリジンに変化しているの濃度を高めると消失する11）．BSE 蛋白をウエスタンブ（E211K）．ヒトにおいても同じ型の変異が，家族型クロロット解析すると三種のバンドに分けられる（図 1 ）．

図1

非定型 BSE の特徴

Dr. Zanusso, G.（Verona 大学）提供

家畜衛生学雑誌

84

第43巻第 3 号（2017）

プロテアーゼ抵抗性の BSE プリオンは PrPRES とも記載

典型 BSE においては，小腸末端パイエル板，網膜，中されるが，SDS- ポリアクリルアミドゲルの電気泳動に

枢神経系に高濃度の病原体分布があり，これらの部位がより三本のバンドに分けられる．このバンド（糖蛋白特定危険部位とされている22）．これらのデータを用い群）は，特徴的な分子量を持ち，BSE の種類によりそのて，肉骨粉の規制や特定危険部位の定義を定めることに

分子量と三本のバンド蛋白量の比率が異なる．したがっより，BSE の撲滅に役立てている．

て， 分 子 量 と 比 率により BSE プリオン株が識別 さ れ

非定型 BSE は OIE 基準による clinical suspect（臨床る．古典型 BSE 株は，60％の二本糖鎖バンド，28％の疑い例）の牛では全く見られない．世界的に積極監視が一本糖鎖バンド，12％の無糖鎖バンドで構成される．分

2000年に開始されて初めて非定型 BSE の存在が明らか

子量はそれぞれ28，22，18kDa である

12，13）．H 型 BSE 株にされた．その後，牛脳内接種により病原体及び病気のは二本鎖バンド，一本鎖バンド，無糖鎖バンドの位置が伝達が成功した．したがって，実験感染例でのみその症

2 ，13）．各バンドの比率は状が報告されている（表 3 ）．病理組織学的には，古典

古典型 BSE 株と同様である．L 型 BSE 株は45％の二本型（C 型）BSE では神経細胞質（特にシナプス周囲）に

鎖バンド，35％の一本鎖バンド，20％の無糖鎖バンドで，病原体が染色され，グリア細胞質にも病原体が染色されそれぞれ30，24，20kDa である．これらのる．L 型 BSE では脳内にアミロイド斑が観察されるが 1 ），

分子量，蛋白比率を組み合わせた BSE 型分類は世界的

日本の老齢 L 型ではむしろ神経細胞質内に病原体が観察

分子量はそれぞれ27，21，17kDa である

1 ，13）

14）

された23）．H 型 BSE と C 型 BSE の間に病理組織学的にはに認められている ．
BSE サーベイランスでは，ELISA 法でプロテアーゼ

大 き な 差 異 が 認 め ら れ な か っ た．Casalone ら に よ れ

耐性蛋白を検出し，確定検査で免疫組織化学，ウエスタ

ば，L 型 BSE の組織像はヒト孤発性クロイツフェルト・ンブロット解析を行っている．この方法は古典型 BSE

ヤコブ病脳組織の 2 型に類似している 1 ）（図 1 ）．

株を用いて行われたが，古典的 BSE 株に比べて非定型

非定型 BSE の伝達様式は極めて異なっている．これ

BSE 株はプロテアーゼ易消化性であることから，非定型

らの病原体は脳内接種により伝達可能であるが24），経口BSE 株に対して有効か否かについては疑問がある．現在

感染は困難である．CFIA（カナダ食品検査庁）の研究用いられている ELISA 検査キットでは，非定型 BSE 株によると，100 g の H 型，あるいは L 型 BSE の脳を経口

は偽陰性を示す可能性がある．ただ，現在の EFSA の基投与しても， 6 年以上無発症である．これは古典型 BSE

準では，非定型 BSE も現状の古典的 BSE 株を用いた方株と大きく異なる点である25）．しかしながら，日本で分法で検査してよいとしている15，16）．

離された L 型 BSE 株を経口感染した際は，経口感染で3 ．非定型 BSE 株の伝達性
BSE の株が異なると伝達性も異なる．したがって，各
BSE 株 を 用 い て リ ス ク 評 価 が 行 わ れ て い る． 古 典 型

88ヶ月後に発症した23）．非定型 BSE 株脳内接種では，14〜21か月後に発症する26−28）．古典型 BSE 株を用いた脳内接種では約24か月後に発症し，非定型 BSE 株より遅めである10，29）．

BSE 株は0.15 g の BSE 牛脳の経口摂取により，50％以上

一方，非定型 BSE の出生年を調べると古典型 BSE との牛に伝達する17）．古典型 BSE 株の経口感染は，カニク

それほど大きな差は見られない（図 2 ）30）．したがっ

イザル18，19），羊・山羊20，21） においても可能である．古て，非定型 BSE も古典型 BSE も同じ時期に感染したと

表3

非定型 BSE 実験感染例及び古典型 BSE 野外感染例・実験感染例の表現型のまとめ

性状

H 型 BSE

古典（C）型 BSE

L 型 BSE

発症年齢

全てが 8 歳以上

大部分が 5 歳以上

全てが 8 歳以上

臨床症状

C 型 BSE と同様運動失調，行動異常等

一定でない

PrPSc の型

H型

C型

L型

PrPSc の沈着様式

微細顆粒状
グリア細胞内細胞内外沈着顆粒状
グリア細胞内細胞質外沈着アミロイド斑細胞質内沈着小野寺ら：非定型 BSE

図285

古典型 BSE，H- 型 BSE，L- 型 BSE 牛の生年別の分布

古典型と非定型との間で分布に大きな違いは見られない28）．
出典： EFSA Journal 14:4643, 2016.

考えられる．すなわち，最初に英国で BSE が発生した

り，別の BSE 型のプリオンが出現することがウエスタ時期に非定型 BSE プリオンも牛群に感染し，病原体のンブロット解析により証明されている32）．スクレイピー

増幅も行われたと考えられる．このような考え方から，

ではいくつかの株の動物体内混在が証明されているの2008年の Biacabe の非定型 BSE 散発説 6 ）は，その大部分

で，BSE でも同様の混在が有るのかもしれない．

の症例について否定されつつある．古典的 BSE 中に存在する亜型から，非定型 BSE が生じた可能性が示唆されている．英国における古典的 BSE 初発例のルーツは未だ不明である．

5 ．BSE 対策終了後の新たな BSE の出現
BARB （Born after the reinforced feed ban ま た は
Born after the reinforced ban）とは，英国で動物蛋白

4 ．その他の非定型 BSE

を牛飼料に用いることを禁止した1996年 8 月以降に出生した牛に見られる BSE のことである33）．2001年以来，

すでに 3 種類の BSE が報告されているが，その他のEU で60例が報告されている．英国で28例，アイルラン

BSE 型の存在の可能性も報告されている．それらの新型

ド12例，スペイン 7 例，フランス 3 例，ドイツ 2 例，

BSE のリスク研究もされなければならない．スイスにおポーランド 2 例，ポルトガル 2 例，チェコ 1 例，イタリ

31）

いては別の型の BSE が報告されている ．しかしなが

ア 1 例，ルクセンブルク 1 例，オランダ 1 例である．

ら，それらの脳材料がトランスジェニックマウスや牛にOIE 基準では，最後の BSE が生まれてから11年以上が実験伝達が可能かは明らかにされなければならない．さ

経過した国は BSE 清浄国（negligible risk）と認定してらに，H 型 BSE 株を牛正常プリオン蛋白質が発現するトいる．しかしながら，2016年にフランスにおいて2011年

ランスジェニックマウス脳に何代か継代することによ

生 ま れ の 牛 1 頭 が 古 典 型 BSE で あ る こ と が 確 認 さ れ家畜衛生学雑誌

86

た．また，2015年には，アイルランドにおいて2010年生
まれの牛 2 頭が古典型 BSE であることが確認された．

第43巻第 3 号（2017）
BMC Vet. Res. 8, e74.
6 ）Biacabe, A., Morignat, E., Vulin, J. et al. (2008)

これらの国は，国際獣疫事務局（OIE）の陸生動物衛生

Atypical bovine spongiform encephalopathies,

コードに基づきステータスが格下げとなり，BSE 準清浄France, 2001-2007. Emerg. Infect. Dis. 14, 298-300.

国（controlled risk） と な っ て い る．2017年 に な り7 ）Baron, T., Vulin, J., Biacabe, A.G. et al. (2011)

EFSA は 緊 急 に BARB 対 策 委 員 会 を 開 催 し て い る．

Emergence of classical BSE strain properties

BARB の原因について，プリオン遺伝子の変異，あるいduring serial passages of H-BSE in wild-type mice.

は飼養管理のミス等様々な方面から調査がなされている

PLoS One 6, e15839.
8 ）Nicholson, E.M., Brunelle, B.W., Richt, J.A. et al.

が，今のところ原因不明である．

6 ．まとめ
牛肉骨粉の飼料利用が禁止されたことにより，世界中
より BSE の発生は急激に減少したが，2001年に非定型(2008) Identification of a heritable polymorphism inbovine PRNP associated with genetic transmissible
spongiform encephalopathy: evidence of heritable
BSE. PLoS One 13, e2912.

BSE が最初に報告され，15年が過ぎようとしている．そ9 ）Hsiao, K., Meiner, Z., Kahana, E. et al. (1991)の間 BSE の元のプリオンに様々な亜型が混在している

Mutation of the prion protein in Libyan Jews with

ことが明らかにされつつある．非定型 BSE の出生年をCreutzfeldt-Jakob disease. N. Engl. J. Med. 324,

調べると古典型 BSE とそれほど大きな差は見られな

1091-1097.

い．したがって，非定型 BSE も古典型 BSE も同じ時期

10）Moore, S.J., West Greenlee, M.H., Smith, J.D. et al.

に感染したと考えられる．最初の英国 BSE が発生した(2016) A comparison of classical and H-type bovine

時期に非定型 BSE プリオンも牛群に感染し，病原体のspongiform encephalopathy associated with E211K

増幅も行われたと考えられる．全世界で非定型 BSE は

prion protein polymorphism in wild-type and100例を超えるが，発生数は減少しており，その大部分

E211K cattle following intracranial inoculation.

は肉骨粉飼料に由来する増幅された病原体によると考え

Front. Vet. Sci.3, 78.

られ，今後とも重層的な BSE 対策を継続する必要があ11）Stack, M., Jeffrey, M., Gubbins, S. et al. (2006)
Monitoring for bovine spongiform encephalopathy

る．

引

用

文

献

1 ）Casalone, C., Zanusso, G., Acutis, P.et al. (2004)

in sheep in Great Britain, 1998-2004. J. Gen. Virol.
87, 2099-2107.
12）Jacobs, J.G., Langeveld, J.P., Biacabe, A.G. et al.

Identification a second bovine spongiform(2007) Molecular discrimination of atypical bovine

encephalopathy: Molecular similarities withspongiform encephalopathy strains form asporadic Creutzfeldt-Jakob disease. Proc. Natl.

geographical region spanning a wide area in

Acad. Sci. USA. 101,3065-3070.

Europe. J. Clin. Microbiol. 45, 1821-1829.

2 ）Biacabe, A.G., Laplanche, J.L., Ryder, S. et al. (2004)

13）Priemer, G., Balkema-Buschmann, A., Hills, B. et al.

Distinct molecular phenotypes in bovine prion(2013) Biochemical characteristics and PrP Sc

disease. EMBO Rep. 5, 110-114.

distribution pattern in the brain of cattle

3 ）Wells, G.A., Wilesmith, J.W., McGill, I.S. (1991)
Bovine spongiform encephalopathy: a newpathological perspective (Review). Brain Pathol. 1,
69-78.

experimentally challenged with H-type and L-typeatypical BSE. PLoS One 8, e67599.
14）Langeveld, J.P., Erkens, J.H.F., Rammel, I.et al.
(2011) Four independent molecular prion protein

4 ）Brown, P., McShane, L.M., Zanusso, G. et. al. (2006)

parameters for discriminating new cases of C, L,

On the question of sporadic or atypical bovine

and H bovine spongiform encephalopathy in cattle.

spongiform encephalopathy and Creutzfeldt-Jakob
disease. Emerg. Infect. Dis. 12, 1816-1821.

J. Clin. Microbiol. 49, 3026-3028.
15）Gray, J.G., Dudas, S., Graham, C. et al. (2012)5 ）Sala, C., Morignat, E., Oussaid, N. et al. (2009)

Performance analysis of rapid diagnostic tests on

Individual factors associated with L-and H-typeatypical bovine spongiform encephalopathy. J. Vet.

bovine spongiform encephalopathy in France.

Diagn. Invest. 24, 976-980.

小野寺ら：非定型 BSE

8716）Meloni, D., Davidse, A., Langeveld, J.P.M. et al.

28）Konold, T., Bone, G.E., Clifford, D. et al. (2012)(2012) EU-approved rapid tests for bovine

Experimental H-type and L-type bovine

spongiform encephalopathy detect atypical forms:

spongiform encephalopathy in cattle: observationa study for their sensitivities. PLoS One 7, e43133.

of two clinical syndromes and diagnostic17）Konold, T., Arnold, M.E., Austin, A.R. et al. (2012)

challenges. BMC Vet. Res. 8, 22.

Bovine spongiform encephalopathy: the effect of29）Seuberlich, T., Gsponer, M., Drogemuller, C. et al.

oral exposure dose on attack rate and incubation(2012) Novel prion protein in BSE-affected cattle,

period in cattle- an update. BMC Research Notes 5,

Switzerland. Emerg. Inf. Dis. 18, 158-159.

674.

30）Boelaert, F., Hugas, M., Pelaez, A.O. et al. (2016)18）Holznagel, E., Yutzy, B., Schulz-Schaeffer, W. et al.

The European Union summary report on data of2013) Foodborne transmission of bovine

the surveillance of ruminants for the presence ofspongiform encephalopathy to nonhuman primates.

transmissible spongiform encephalopathies (TSEs)

Emerg. Infect. Dis. 19, 712-720.

in 2015. EFSA J. 14, 4643.

19）Lasmezas, C., Comoy, E., Hawkins, S. et al. (2005)31）Dudas, S., James, J., Anderson, R. et al. (2015)

Risk of oral infection with bovine spongiform

Exploring the cause of initially reactive bovine

encephalopathy agent in primates. Lancet 365, 781783.

brains on rapid tests for BSE. Prion 9, 429-443.
32）Masujin, K., Okada, H., Miyazawa, K.et al. (2016)20）Bellworthy, S.J., Dexter, G., Stack, M. et al. (2008)

Emergence of a novel bovine spongiform

Oral transmission of BSE to VRQ/VRQ sheep in

encephalopathy (BSE) prion from an atypicalan experimental flock. Vet. Rec. 162, 130-313.

H-type BSE. Sci. Rep. 6, 22753.

21）Foster, J.D., Hope, J., Fraser, H. (1993) Transmission33）Saunders, G.C., Griffiths, P.C., Cawthraw, S.et al.

of bovine spongiform encephalopathy to sheep and(2007) Polymorphism of the prion protein genegoats. Vet. Rec. 133, 339-341.

coding region in born-after-the-reinforced-ban22）Espinosa, J.C., Morales, M., Castilla, J. et al. (2007)
Progression of prion infectivity in asymptomatic
cattle after oral bovine spongiform encephalopathy
challenge. J. Gen. Virol. 88, 1379-1383.
23）Okada, H., Iwamaru, Y., Imamura, M.et al. (2017)(BARB) bovine spongiform encephalopathy cattle
in Great Britain. J. Gen. Virol. 88, 1374-1378.
34）Yamakawa Y., Hagiwara K., Nohtomi K. et al. (2003)
Atypical proteinase K-resistant prion protein(PrP res ) observed in an apparently healthy

Oral transmission of L-type bovine spongiform

23-month-old Holstein steer. Jpn. J. Infect. Dis. 56,

encephalopathy agent among cattle. Emerg. Inf.

221-222.

Dis. 23, 284-287.

35）Masujin, K., Shu, Y., Yamakawa, Y. et al. (2008)24）Balkema-Buschmann, A., Fast, C., Kaatz, M. et al.

Biological and biochemical characterization of(2011) Pathogenesis of classical and atypical BSE in

L-type-like bovine spongiform encephalopathy

cattle. Prev. Vet. Med. 102, 112-117.

(BSE) detected in Japanese black beef cattle. Prion

25）Dudas, S., Czub, S. (2017) Atypical BSE: Current
knowledge and knowledge gaps. Food Safety 5, 1013. doi: 10.14252/foodsafetyfsc.2016028.

2, 123-128.

要旨26）Buschmann, A., Gretzschel, A., Biacabe, A.G. et al.

BSE は1980年代に一般的には羊のスクレイピー病原体(2006) Atypical BSE in Germany- proof ofに汚染された肉骨粉が含まれる飼料を通じ，種を超えてtransmissibility and biochemical characterization.

牛に伝達したと考えられている．しかし，英国では，汚Vet. Microbiol. 117, 103-116.

染の原因となる肉骨粉が禁止された後も少数の BSE が27）Okada, H., Iwamaru, Y., Imamura, M. et al. (2011)

発生しており（BARB 例の発生），BSE の初発例の原因

Experimental H-type bovine spongiform

については未だに不明である．また，2001年以降世界各

encephalopathy characterized by plaques and glial-

地で古典型 BSE と生化学的性状などが異なる BSE（非and stellate-type prion protein deposits. Vet. Res.

定型 BSE）の発生が報告されている．最初の英国 BSE

42, 79.

が発生した時期に非定型 BSE プリオンも牛群に感染

88

家畜衛生学雑誌

第43巻第 3 号（2017）

し，病原体の増幅も行われたと考えられる．このことに

BSE 牛が引き続き確認される中，世界中の科学者が非定

よって，2008年の Biacabe の非定型 BSE 散発説はその大型 BSE や BARB の発生機構を明らかにしようとしてい部分の症例については否定されつつある．古典的 BSEる．

中に存在する亜型から，非定型 BSE が生じた可能性が示唆 さ れ て い る．英国における古典的 BSE 初発 例 のルーツは未だに不明である．BSE サーベイランスの下でキーワード：非定型 BSE，BARB，サーベイランス

家畜衛生フォーラム2017
フォーラムテーマ「抗菌剤に頼らない新しい家畜疾病の制御法
─モデルとしての難治性・慢性疾病克服のための研究─」要

旨

集

主催：日 本 家 畜 衛 生 学 会
共催：（一財）生物科学安全研究所
後援：農
林
水
産
省

家畜衛生フォーラム2017と き：平成29年12月15日（金） 13：00〜17：30
ところ：Meiji Seika ファルマ（株） 本社講堂

座長

杉浦勝明（東京大学），大石弘司（動物医薬品検査所）

13：00〜13：10
挨拶 日本家畜衛生学会理事長，（一財）生物科学安全研究所理事長
13：10〜13：15
今年度の企画について
伊藤 博哉（農研機構・動物衛生研究部門）
13：15〜13：45（うち討論 5 分）
（ 1 ） イントロダクション
日本及び欧州における薬剤耐性対策状況
─動向調査から普及啓発まで─
木島まゆみ（動物医薬品検査所）
13：45〜14：35（うち討論 5 分）
（ 2 ） 生理活性タンパク質の応用研究からのアプローチ
─牛乳房炎の予防と治療への可能性 非特異性生理活性物質：ラクトフェリン─
河合 一洋（麻布大学）
14：35〜15：25（うち討論 5 分）
（ 3 ） 免疫研究からのアプローチ
─牛の免疫応答を利用した難治性疾病の新規制御法開発─今内覚（北海道大学）
休憩

15：25〜15：35

15：35〜16：25（うち討論 5 分）
（ 4 ） 免疫遺伝学研究によるアプローチ
─主要組織適合抗原 MHC をマーカーとした新しい牛乳房炎および牛白血病制圧戦略について─間
陽子（理化学研究所）
16：25〜17：15（うち討論 5 分）
（ 5 ） 抗病性育種研究からのアプローチ
─豚の抗病性育種によってマイコプラズマなどの病気にかからない豚を作る─
鈴木 啓一（東北大学）
17：15〜17：30
総合討論

「家畜衛生フォーラム ’17」要旨集

91

座長の言葉

抗菌剤に頼らない新しい家畜疾病の制御法
─モデルとしての難治性・慢性疾病克服のための研究─
東京大学大学院農学生命科学研究科
農林水産省動物医薬品検査所
薬剤（抗菌剤）耐性菌は医療及び獣医療現場で世界的

教授 杉浦
部長 大石

勝明
弘司

生にお話しいただく．

に増加しているが，あらたな抗菌剤の開発は減少傾向に

その後， 6 分野中最も難問であろうと考えられる 5 ）あり，薬剤耐性菌対策は国際的に大きな課題となっていの分野に関連する話題として，「抗菌剤に頼らない家畜る．2015年 5 月，世界保健機関（WHO）の第68回世界の感染疾病の制御法に関する研究」について 4 人の専門

保健総会において，AMR に関するグローバル・アク家の方々に紹介していただく．まずは，難治性・慢性疾ションプランが採択された．このプランでは，医療，獣病の代表である乳房炎の予防薬・治療薬として期待され医療等の関連部門の一体的な取組み（ワンヘルス・アプ

る非特異性生理活性物質・ラクトフェリンの可能性につローチ）の重要性が改めて示され，各国が 2 年以内にナいて，麻布大学の河合一洋先生にご紹介頂く．さらに，

ショナル・アクションプランを策定することを求めてい

免疫療法の最前線とも言える免疫チェックポイントを標る．我が国においては，関係府省が連携して取りまとめ的とした抗体医薬品の牛疾病への応用について，北海道た初めての総合的な AMR 対策として，2016年 4 月にナ大学の今内覚先生にお話し頂く．理化学研究所の間陽子

ショナル・アクションプランが取りまとめられた．この先生には，免疫遺伝学研究によるアプローチから，「主アクションプランでは，AMR の現状と課題をわかり易

要組織適合抗原 MHC をマーカーとした新しい牛乳房炎

く整理したうえで， 6 分野の目標と戦略を示し，また各および牛白血病制圧戦略について」ご教授願い，また，戦略には，対応方針，執るべき取組，その成果の評価指東北大学の鈴木啓一先生には，抗病性育種研究からのア標等が具体的に示されている．

プローチとして，「豚の抗病性育種によってマイコプラ

6 分野の目標を概略すると， 1 ）医療，獣医療等の関係者を中心とした国民の知識と理解の増進を図りつつ，ズマなどの病気にかからない豚を作る」をテーマにご講
演頂く．

2 ）AMR の発生状況や抗微生物剤の使用実態の動向調

畜産現場における抗菌剤使用量の削減は，ワクチンプ

査・監視（サーベイランス・モニタリング）とリスク評

ログラムの実施，バイオセキュリティ水準の向上，アニ価を行い， 3 ）適切な感染予防・管理及び 4 ）抗微生物

マルウェルフェアの確保，抗病性品種の使用，畜舎の改剤の適正（慎重）使用を徹底する．また， 5 ）その基礎

善，代替物の使用などを含む適切な衛生管理プランのとなる薬剤耐性の発生や伝播のメカニズム，新たな診下，家畜の健康に影響を及ぼす様々な要因をバランスよ断・予防・治療手段の研究・実用化を推進する．そしくコントロールしつつ，飼養管理を進めることにより初て，6 ）アジア地域において，AMR 対策のリーダーシッ

めて可能となる．本フォーラムの演題である非特異性生プを発揮していくというものである．

理活性物質・ラクトフェリンが抗菌剤の代替となる可能

本フォーラムでは，上記 6 分野のうち 2 ），3 ）， 4 ）の性，抗病性育種の使用による抗菌剤使用量の削減の可能分野に関連する話題として，「日本及び欧州における薬性を含め，我が国の AMR 対策の活性化に資するよう参剤耐性対策状況」について，動物薬分野の AMR 対策の加者の皆様からの活発なご議論を期待したい．

中心的役割をつとめる動物医薬品検査所の木島まゆみ先「家畜衛生フォーラム ’17」要旨集

93

イントロダクション

日本及び欧州における薬剤耐性対策状況
─動向調査から普及啓発まで─
農林水産省

動物医薬品検査所

総括上席研究官 木島

まゆみ

1 ．はじめに2016年 4 月に「国際的に脅威となる感染症対策関係閣

僚会議」において，「薬剤耐性（AMR）対策アクションプラン（2016−2020）」（以下，「アクションプラン」という．）が取りまとめられた．その中には，ヒト・動物といった垣根を超えたワンヘルス・アプローチの重要性が唱えられており，内閣官房，内閣府食品安全委員会，
文部科学省，厚生労働省及び農林水産省が協同して「薬剤耐性（AMR）対策推進国民啓発会議」や「薬剤耐性（AMR）対策推進月間（11月）の取り組み」等を行っている（内閣官房 HP；https://www.cas.go.jp/jp/houdou/
161004amr.html）．

図 1 ．人体用抗菌剤の開発の歴史

また，アクションプランに基づき，獣医療分野においても，多方面からの取り組みが進められているところで2015年 の 総 会 で Global action plan on antimicrobialある．そこで，今回，日本と欧州における薬剤耐性対策

resistance（薬剤耐性に関するグローバルアクションプの取り組みについて，デンマークの取り組みと日本の動ラン）を採択した．WHO のアクションプランは，薬剤物 由 来 薬 剤 耐 性 モ ニ タ リ ン グ（Japanese Veterinary

耐性対策のための各国における行動計画の枠組みを示し

Antimicrobial Resistance Monitoring；JVARM） の 事たもので，これに基づいて，日本においても，2016年 4例を中心に紹介する．

月に，冒頭のアクションプランが取りまとめられた．
アクションプランには， 1 ）普及啓発・教育， 2 ）動

2 ．薬剤耐性（AMR）対策アクションプラン策定の背景と取り組み目標

向調査・監視， 3 ）感染予防・管理， 4 ）抗菌剤の適正ゴールドマンサックスの元チーフエコノミストである分野の目標と戦略が示されている．例えば，戦略2.3「畜ジム・オニール氏は，英国の依頼により，2014年に「薬水産，獣医療等における動向調査・監視の強化」の取り剤耐性（Antimicrobial Resistance；AMR）に関するレ組みとしては，JVARM の体制強化，愛玩動物におけるビュー」を取りまとめた 1 ）．このレビューには，「AMR

薬剤耐性の動向調査・監視体制の確立等が掲げられていに起因する死亡者数は，2013年時点で低く見積もって70る．また，戦略3.2「感染予防・管理の推進」には，ワ

万人で，何も対策を取らない場合には，2050年には1,000

クチンの開発・使用の推進，飼養衛生管理基準の遵守の万人を超えるであろう」と記載されている．この数字

徹底等が，戦略5.4「新たな予防・診断・治療法等の開は，人医療分野において，非常に大きな衝撃をもたら発に資する研究及び産学官連携の推進」には，感染症にし，経済協力開発機（OECD）が2015年の G7の厚生大対する抗微生物薬とは異なる非伝統的な治療法として，使用， 5 ）研究開発・創薬， 6 ）国際協力という 6 つのをはじめ，薬剤耐性菌の脅威

例えば，ファージ治療，抗体を含む免疫療法等の研究開を示す資料として世界で広く引用されている．また，発の推進が，実施すべき取り組みとして掲げられている．

臣会合に提出した資料

2）

2015年の OECD の資料には，抗菌剤の開発後，耐性菌

また，アクションプランには，「ヒト」及び「動物」が確認されるまでの期間が非常に短くなっていること，の各々の分野における2020に向けた「成果指標」や，戦及び人体用の新規抗菌剤の開発数が急激に低下している略毎の「評価指標」が設定されている．関係閣僚会議のことについても言及されている（図 1 ）．

枠組みの下で，毎年，評価が行われることとなっておこれらの諸情勢を背景に，世界保健機関（WHO）は，

り，2017年10月に「薬剤耐性ワンヘルス動向調査年次報

家畜衛生学雑誌

94

第４3巻第 3 号（2017）

告書2017年」が取りまとめられた．

入され，2014年以降の抗菌剤の使用量も低下している．
なお，デンマークでは，過去10年間に豚のワクチン接種

3 ．国際機関の動向

薬剤耐性菌に関する国際機関の取り組みとしては，量が増加しており，ワクチン接種の増加も抗菌剤の使用量減少に寄与している可能性が示唆されている．

WHO がヒトの健康の観点から，国際獣疫事務局（OIE）
が動物衛生の観点から，コーデックス委員会（Codex）
が食品の国際規格等の観点から，薬剤耐性関連ガイドラ
インの策定・見直し等を行っている．直近では，Codex

5 ．日本における取り組み（JVARMの成績を中心に）
薬剤耐性菌をコントロールするには， 1 ）薬剤耐性菌の動向調査・監視， 2 ）薬剤耐性に関するリスク評価，がフードチェーン全体を視野に入れた慎重使用のガイド3 ）抗菌剤の適正使用・慎重使用， 4 ）普及啓発・専門

ラインの見直しや耐性菌モニタリングガイドラインの原

家教育の 4 つのステップが考えられる．耐性菌を低減す案を作成しており，2017年11月末に，韓国で薬剤耐性にるためには，普及啓発・専門家教育等を通じて，抗菌剤関する特別部会が開催される予定である．

の使用者に現状以上の適正使用・慎重使用を実施してもらうことが必要で，それが最終目標と考えられるが，そ4 ．ヨーロッパにおける薬剤耐性対策

ヨーロッパの各国は，薬剤耐性対策を積極的に進めている．その中でも，特に先進的な取り組みを行っている
デンマークの事例を紹介する．

のためには，科学的根拠に基づいた 1 ）から 3 ）の取り組みが重要である．
このうち， 1 ）に該当するのが，JVARM で，動物医
薬品検査所（動薬検）が基幹検査機関として，農林水産デンマークには，DANMAP（The Danish Integrated

消費安全技術センター，全国の家畜保健衛生所，その他

Antimicrobial Resistance Monitoring and Researchの多くの機関と連携し，1999年から継続して実施していProgramme）という抗菌剤の使用量と耐性動向をモニる．JVARM の調査は， 1 ）動物用抗菌剤の販売高， 2 ）タリングする制度がある．図 2 は，DANMAP（2015年）

健康動物及び 3 ）病気動物由来細菌の薬剤感受性の 3 つにおけるヒト及び動物用抗菌剤の使用量の推移を示したに分けられ，これまで食用動物由来の細菌を対象とした3）ものである ．デンマークでは，2010年に ʻYellow Card

薬剤感受性成績等を取りまとめてきた（図 3 ）．また，

Initiative’ という制度が導入された．これは，農場毎の今年度，アクションプランの取り組み目標を受け，新た抗菌剤の使用量が閾値を超えた農家に対して，イエローに，愛玩動物（イヌ及びネコ）由来の細菌を収集するこ

カードと言われる指導書を出し，規制値以下に下がるまととした（図 4 ）．なお，愛玩動物由来の耐性菌のモニで「第三者の獣医師のアドバイス」や「規制当局の無通タリングは，諸外国においても殆ど実施されていないこ

告の査察」を受けるというもので，これにより，2011年とから，昨年度，動薬検に「愛玩動物薬剤耐性（AMR）に動物用抗菌剤の使用量が低下した．さらに，2013年に調査に関するワーキンググループ」を設置し，モニタリ

は，「ヒトの医療上重要な抗菌剤は10.8％，ワクチンはング体制に関する意見取りまとめを依頼した．
（動物医無課税」といった，動物薬の区分毎に異なる消費税が導

薬 品 検 査 所 HP；http://www.maff.go.jp/nval/yakuzai/
yakuzai ＿ p3.html）．今年度は，この検討結果に基づい

図 2 ．デンマーク；人と動物における抗菌薬の使用量推移

図 3 ．動物由来細菌の薬剤耐性モニタリング：JVARM（Japanese Veterinary Antimicrobial Resistance Monitoring: 1999〜）

「家畜衛生フォーラム ’17」要旨集

95

図 4 ．愛玩動物における薬剤耐性菌のモニタリング体制
─専門家ワーキンググループによる推奨体制─

て，大腸菌等， 6 菌種を対象とした調査を行う予定である．
なお，JVARM の成績は，食品安全委員会が実施しているリスク評価の資料として活用されている．また，農林水産省では，このリスク評価結果に基づいて，リスク管理措置を策定・実施しており，「第二次選択薬（第一次選択薬として投与された抗菌剤が無効の場合のみに使用する薬）」としての位置づけや，モニタリング調査の強化等の対策を行っている．さらに，動物用抗菌剤の慎重使用のガイドライン，牛呼吸器病（BRDC）における抗菌剤治療ガイドブック等の作成を通じて，抗菌剤の適正使用・慎重使用の喚起を行っている．

6 ．おわりに

前述のように，アクションプランにおける戦略の一つ

図 5 ．ワクチン投与と魚病被害状況
─大分県におけるブリ類の魚病被害額の推移─

には「感染予防・管理の推進」がある．獣医療分野では，従来から，ワクチンや飼養衛生管理による感染予防

菌対策の観点からも，感染防御に関する多方面の取り組に努めているが，これらの取り組みは，抗菌剤の使用のみが重要と考えられる．

低減につながることから，薬剤耐性対策上，極めて基本的かつ重要な取り組みである．1990年代に海水魚のワクチンが開発された際には，魚病被害額及び抗菌剤の使用量が急激に減少したという事例も残されている（図 5 ）．

参考資料1 ）Review on Antimicrobial Resistance. Antimicrobial
Resistance: Tackling a Crisis for the Health andWealth of Nations. Chaired by Jim O’Neill (2014)「新たな予防・診断・治療法等の開発に資する研究及2 ）Antimicrobial Resistance in G7 Countries andび産学官連携の推進」の戦略を含めて，今後，薬剤耐性

Beyond. Economic Issues, Policies and Options for家畜衛生学雑誌

96

Action. OECD (2015)
3 ）Statens Serum Institut et al: DANMAP 2015 - Useof antimicrobial agents and occurrence of第４3巻第 3 号（2017）
antimicrobial resistance in bacteria from foodanimals, food and humans in Denmark. ISSN 16002032 (2016)

「家畜衛生フォーラム ’17」要旨集

97

生理活性タンパク質の応用研究からのアプローチ

牛乳房炎の予防と治療への可能性
非特異性生理活性物質：ラクトフェリン
麻布大学獣医学部 河合

一洋

はじめに

LF 濃度は，正常乳：169（68-419）µg/mL よりも潜在性

ラクトフェリン（LF）は，トランスフェリンファミ

乳房炎乳：495（199-1,229µg/mL）が高く，さらに臨床

リーのタンパク質に属する鉄結合糖タンパク質である．

型乳房炎乳：849（318-2,270）µg/mL が高いことが明ら

従来報告されていたラクトフェリンの生物学的機能は，

かとなっている（Kawai et al. 1999）．またその他に LF

主にその静菌活性（Reiter et al. 1967）にあったが，近と年齢や体細胞数の関係についても明らかにされている年ではラクトフェリンの多くの生物学的機能が発見さ（Hagiwara et al. 2003）．

れ，多機能性タンパク質として認識されている．ラクト
フェリンの基本的な役割は，生体防御因子として働くことであり，乳汁中に分泌されるラクトフェリンは，母牛LF の抗菌活性LF は静菌活性だけでなく，殺菌および抗真菌活性をと新生子の両方にとって重要な役割を果たしている．乳示すことが知られている（Orsi 2004; Jenssen et al. 2009;中のラクトフェリンは，腸内細菌叢の形成や粘膜免疫，

Yen et al. 2011）．静菌活性はアポラクトフェリンによ全身免疫の活性化を助けることによって，新生子およびる鉄イオンのキレート化（Reiter et al. 1967; Arnold et

子牛の健康な成長を促進することが明らかとなっている

al. 1980）によるものであるが，LF には細菌増殖を抑制（Baldi et al. 2005; Prgomet et al. 2007; Sherman 2010）．

するいくつかの報告がある．例えば，LPS との強力な結一方，牛の乳房炎は乳牛の疾病の 3 割をも占め，量合能力（Ellison et al. 1988）は，細菌の表面上のポーリン

的，質的に牛乳の生産性を低下させ，大きな経済的損失を閉塞する（Sallmann et al. 1999），細菌バイオフィルをもたらしている．その上，牛の乳房炎は抗菌剤で治療

ム形成の阻害（Singh et al. 2002; Gomes et al. 2016），

されるのが一般的であり，その偏重的な使用が耐性菌のリゾチーム（Suzuki et al. 1989; Ellison et al. 1991）ま出現を助長しているといわれている．このような背景か

たは免疫グロブリン A（IgA）（Watanabe et al. 1984）

ら，抗菌剤に頼らない非特異性生理活性物質による乳房との協力などがある．LF は殺菌作用，殺菌および免疫炎の予防，治療についての研究が盛んに行われるように能の刺激において深く関わっている．LF は，乳腺内でなってきた．

は乳腺上皮（Masson et al. 1966）および好中球の特殊顆粒に存在し（Baggiolini et al. 1970），病原体の乳房内

ミルク中の LF 濃度の変動

侵入にともなって主に好中球の遊走，貪食に続いて特殊

LF と乳房炎との関係に関する初期の報告は1970年代

顆粒から遊離（Lash et al. 1988）されることによって作頃から存在する．これら初期の研究では，泌乳ステージ

用を発揮するといわれている．乳房炎原因菌に対するにおいて乳中 LF 濃度が変化することが明らかにされLF の抗菌活性は，1970年代後半から報告されている．

た．初乳の LF 濃度は約2mg / mL までであり，その後乳房炎由来の細菌は，LF およびペプシンによって生成泌乳期のベースライン（0.02〜0.5mg / mL）まで徐々にされる LF 加水分解物，ラクトパーオキシターゼ（LPO）

低下する（Harmon et al. 1975, 1976; Smith et al. 1977;

に対して異なる感受性または耐性を示すことが明らかに

Suzuki et al. 1977; Gaunt et al. 1980）．LF は，乳牛の乾された（Kawai et al. 2007; Ishido et al. 2011）（表 1 ）．

乳期に乳汁中濃度が上昇し，乳腺内侵入細菌の増殖を抑乳中では，LF だけでなく LPO，免疫グロブリン，リゾ

制するなど，乳房炎の感染防御にも重要な役割を果たし

チ ー ム，β- デ フ ェ ン シ ン な ど が（Thompson-Crispi etている（Nonnecke et al. 1984; Welty et al. 1976）．またal. 2014），細菌を不活性化し，乳腺組織表面への細菌の泌乳期においては，分娩直前より乳汁中 LF 濃度が低下

付着を防ぎ毒素を中和している．

することから，分娩直後の乳房炎発症に大きく関わってい る も の と 考 え ら れ て い る（McDonald et al. 1981a;
Nonnecke et al. 1984; Welty et al. 1976）．泌乳期の乳中

家畜衛生学雑誌

98

第４3巻第 3 号（2017）

表 1 ．ラクトフェリン・ラクトフェリン分解物・ラクト
パーオキシダーゼの乳房炎原因菌に対する作用

LF，ヒト LF および LFcin B の阻害活性を比較すると，
ウシ LF および LFcin B でサイトカイン放出に対する抑制効果が観察された（Mattsby-Baltzer et al. 1996）．また代替防御経路を介した補体系の活性化，乳汁中の食細胞の増加，食作用の促進など，免疫防御に対する LF の他の効果が報告されている（Kai et al. 2002a, 2002b）．
LPS は，細菌の侵入時に組織に炎症を誘導することがよく知られている．細菌誘導 LPS が宿主細胞の Toll 様受容体 4 （TLR4）に結合した後，炎症性サイトカインの産生は特定のシグナル伝達経路を介して起こる．しかしながら，乳房炎の炎症反応に対する LF の抑制効果に関 す る 多 く の 報 告 が あ る（Machnicki et al. 1993;
Mattsby-Baltzer et al. 1996; Conneely 2001; Kushibiki et（Lee et al. 2004, Ishido et al. 2011）＋：有効，－：効果なし

al. 2008, 2009）．このような活性は，LF がマクロファー
ジ上の CD14受容体への LPS の結合を抑制することに起因する可能性があることが示唆されている（Conneely2001）．さらに，LF-LPS 複合体は，LF 結合タンパク質

自然防御における LF の関与

および CD14との競合などの免疫抑制や LF または LF-

LF の抗感染機能は，前述のように，その免疫調節活

LPS 複合体による TLR4シグナル伝達の誘導などの免疫性と微生物に対するその直接作用によるものである

活性化を示すことが知られている（Puddu et al. 2010;（Targowski 1983; Hanson 2007; Griesbeck-Zilch et al.

Latorre et al. 2012）．LF は，その強力な LPS 結合能の2009; Legrand 2012）．感染した乳腺組織の炎症部位でために LPS の効果を中和すると一般に考えられているは，ある生理的変化が観察されている（Schalm et al.

（Kutila et al. 2004; Kushibiki et al. 2008; Drago-Serrano

1971; Harmon 1994; De Vliegher et al. 2012）．例えば，

et al. 2012）．

血管透過性の変化に伴う，血清アルブミンの浸透亢進，
白血球と食細胞の遊走，乳成分の合成減少が起きることが知られている．主に乳中の白血球の細胞数は体細胞数

LF による乳房炎治療

乳房内投与後の LF の動態に関する報告では，平均排と 呼 ば れ， 乳 腺 感 染 の 指 標 と し て 用 い ら れ て い る

泄半減期は2.2時間であり，最大平均濃度は 1 〜 4 時間

（Harmon 1994）．乳汁中の体細胞数および LF 濃度は，に達する（Kutila et al. 2002）．実験的に誘発された乳房

臨床型乳房炎の抗菌剤治療後に著しく減少するが炎を伴う乳腺への LF 投与の比較研究では，細菌数，（Kawai et al. 2015），LF と乳房内感染の関係について

SCC および毎日の乳量において有意な差はなかったが，は未だ完全には解明されていないことが多い．

細菌数を比較した乳中の LPS 濃度は，抗菌剤治療群よ炎症応答に関与するサイトカインには，腫瘍壊死因子

り，LF 処 置 牛 の 方 が 有 意 に 低 か っ た（Kutila et al.

（TNFα）や IL-1，IL-2，IL-6などのインターロイキン

2004）．LF の乳房内投与の研究について一部の研究者（IL）がある（Cray et al. 2009）．LF 誘導による単球，

は，完全な LF 単独では十分な抗菌活性がないと考えて

PMN か ら の そ れ ら の 産 生 抑 制 が 報 告 さ れ て い る

おり，その効果の影響を高めるための他のアプローチが（Crouch et al. 1992; Machnicki et al. 1993; Mattsby-

研究されている． 1 つは LF と抗菌剤との併用である．

Baltzer et al. 1996; Kushibiki 2011）．一方，ウシおよび

β- ラクタム耐性黄色ブドウ球菌によって引き起こされ

ヒ ト LF お よ び ラ ク ト フ ェ リ シ ン（LFcin） は， ヒ ト

る慢性乳房炎に対する研究ように，乳房炎治療のためにPMN からの IL-8放出を刺激することが報告されている

LF と 抗 菌 剤 を 併 用 し た い く つ か の 研 究 が あ る（Shinoda et al. 1996）．In vitro で は，LF が TNF-α，（Petitclerc et al. 2007）．併用療法は，細菌学的治癒率

IL-1，IL-2または IL-6の生物学的活性を抑制しないが，を高める（Lacasse et al. 2008）．LF は LPS を介して細代わりに白血球の活性化を阻害し，炎症組織における白菌膜に結合し，抗菌剤が細菌細胞に侵入して破壊するの

血球からのサイトカインの産生を妨げることを報告してを容易にすると考えられている．ペニシリン G と組み合いる（Mattsby -Baltzer et al. 1996; Conneely 2001）．単

わせた LF は，黄色ブドウ球菌の食作用に対する感受性球（THP-1）から放出された LPS 誘導 IL-6に対するウシを高めることも観察されている（Diarra et al. 2003）．

「家畜衛生フォーラム ’17」要旨集

図 1 ．LFH 投与後の原因菌別体細胞数の推移（Kawai etal. 2003）

99

図 2 ．潜在性乳房炎罹患分房への LFH および PS 投与後の感染分房割合（Kawai et al. 2003）

さらに，LF と抗菌剤との併用療法での TNF-αの RNA

週間から分娩直後に高値を示すことが報告されている発現の減少が報告されている（Komine et al. 2006）．ま（Bradley et al. 2004）．乾乳期の間，乳頭管はケラチン

た LF は酵素の転写を抑制することによって黄色ブドウ栓（Krömkerand Friedrich 2009）によって充填され，球菌のβ- ラクタマーゼ活性を低下させることが報告さ

LF を含む抗菌物質が乳腺に多く存在する．しかし，これている（Lacasse et al. 2008）．乳房炎の別の治療法との防御システムは，乾乳開始時には不十分であり，乾乳

して，LF 加水分解物を潜在性乳房炎の乳房に注入して後期には効果が低下する．従って，LF を乾乳期に投与治療した（Kawai et al. 2003）（図 1 ， 2 ）．LF 加水分したところ，細菌感染に対する大きな防御効果が示され解物は，ペプシン消化によって調製され，強力な抗菌性ている（Itagaki et al. 2015）．

ペプチドである LFcin B のような特定の機能性ペプチドを含むあらゆるフラグメントを含んでいる．この試み
は，感染分房からのミルク中の細菌数の減少などの良好まとめ

このように乳中に含まれる機能性天然素材である LF

な治療結果を示し，細菌感染分房数を有意に減少させは，生体内で抗菌活性や免疫に大きく関わっていること

た．

から，今後乳房炎に限らず他分野においても応用されていくと思われる．乳房炎の新規治療法や予防法としてのラクトフェリンによる乳房炎予防

LF の応用については，安全性の点からも利用価値が高乾乳牛の乳汁中のラクトフェリン濃度が低い場合，高く，今後抗菌剤治療に代替または抗菌剤使用を削減する

い感染率が観察されている（Farke et al. 2008）．した手法の一つとして貢献する可能性がある．更なる研究ががって，LF が豊富な乳の牛の選抜と飼育が試みられて進むことを期待したい．

いる（Arnould et al. 2009）．もう 1 つのアプローチは，
選択または遺伝子工学による病原体耐性牛の生産である（Donovan et al. 2005; Wall et al. 2005; Huang et al.

参考文献

Shimazaki, K. and Kawai, K. (2017) Advances in2015）．乳房感染症の疫学において乾乳期の重要性は認

lactoferrin research concerning bovine mastitis.

識されている．新期感染率が乾乳直後 2 週間と分娩前 2Biochemistry and Cell Biology, 95(1), 69-75.

「家畜衛生フォーラム ’17」要旨集

101

免疫研究からのアプローチ

牛の免疫応答を利用した難治性疾病の新規制御法開発
北海道大学大学院獣医学研究院

今内

覚

1 ．はじめに2 ．PD-1/PD-L1を標的とした治療薬の話題て，種々の免疫抑制因子がその病態進行および維持に関

過剰な免疫応答を抑制し，免疫寛容に深く関連している

連することが示唆され，感染細胞や腫瘍細胞を排除する因子として京都大学，本庶 佑教授らによって同定されことができない免疫回避機序の一因であることが示された分子である．PD-1とそのリガンドによる機構は免疫

近年，慢性感染症や腫瘍疾患などの難治性疾病におい免疫抑制受容体 PD-1とそのリガンドである PD-L1はている（Barber et al., 2006, Day et al., 2006）．このよ抑制および免疫寛容に重要であることが明らかとされてうな慢性感染症や腫瘍疾患では Programmed death 1

以降，さまざまな疾患の病態発生に関与することが報告（PD-1）に代表される免疫抑制因子が，エフェクター細されるようになった．免疫抑制因子 PD-1および PD-L1

胞上で発現が上昇し，それぞれのリガンドと結合するこは B7ファミリーに属する一回膜貫通型分子で，細胞表とでエフェクター細胞の免疫疲弊化を誘発し，細胞増殖

面に発現する．免疫活性化刺激により発現が誘導され，能，サイトカイン産生能，細胞傷害機能が著しく低下す

過剰な免疫反応を抑え，免疫反応を終息させるためのネ

る．一方，この反応は可逆的であることから，抗体を用

ガティブフィードバック機構として理解されている．受

いてその機能を阻害する研究が行われている．例えば，

容体 PD-1にそのリガンドが結合すると，PD-1の細胞内PD-1のシグナルを抑制する抗 Programmed death-ligand

領 域 に 存 在 す る immunoreceptor tyrosine-based

1（PD-L1）抗体や抗 PD-1抗体を投与すると，病原体まinhibitory motif（ITIM） や immunoreceptor tyrosine-

たは腫瘍特異的 T 細胞の増殖能やサイトカイン産生能おbased switch motif（ITSM）に src homology 2-domain-

よびエフェクター分子の発現が上昇することが報告されcontaining tyrosine phosphatase 2（SHP-2）や SHP-1がている．このように，免疫抑制因子の機能を阻害するこ動員され，これらが抗原受容体シグナル仲介因子を抑制とにより，免疫寛容に陥った免疫細胞の再活性化を誘導することで，結果的に IFN-γや IL-2などのサイトカイン

し，慢性感染症や腫瘍疾患などの新規治療やワクチン効

産生や細胞増殖能が低下し，免疫細胞の活性化が抑制さ

果増強法への応用が期待されている．本制御法の特徴はれる．このように生体の恒常性に深くかかわる免疫抑制

サイトカインの単独投与や移入免疫療法等とは異なり，

因子 PD-1および PD-L1は，前述の通り，腫瘍や慢性感

エフェクター細胞を標的とすることから細胞増殖能をは染症における免疫抑制に関与していることも近年明らか

じめ種々のサイトカインの誘導および細胞傷害機能なにされた．一般的に正常組織では PD-L1の発現は認めらど，多機能的な効果により抗病原体効果や抗腫瘍効果がれないが，メラノーマや肺癌，大腸癌および卵巣癌の腫発揮されることにある．一例としてヒト免疫不全ウイル

瘍組織では高率に PD-L1が発現し，腫瘍の免疫回避に関ス（human immunodeficiency virus ： HIV）感染のモ与していることが明らかになったのである（Dong et al.,デ ル と し て 行 わ れ た サ ル 免 疫 不 全 ウ イ ル ス（simian2002）．腎細胞癌や胃癌の患者では PD-L1の予後決定因

immunodeficiency virus ： SIV）感染実験では，PD-1抗子としての重要性が示され，PD-L1を発現している腫瘍体の投与によって生体内のウイルス排除効果ならびに劇を持つ患者は PD-L1発現が認められない患者と比較する的な延命効果が報告されている（Velu et al., 2009）．し

と病態の進行が早く，致死率が高いことが報告された

かし，獣医畜産領域ではこのような研究は皆無である．

（Thompson et al., 2006 ; Wu et al., 2006）．また，乳癌

我々は現在，腫瘍疾患である牛白血病ウイルス（BLV）

や膵臓癌，膀胱癌などその他の腫瘍についても同様に感染症や難治性下痢を呈するヨーネ病などのウシの慢性PD-L1の発現が報告され，腫瘍浸潤リンパ球における難治性感染症を対象とした解析を行っている．

PD-1の発現もメラノーマ，肺癌および肝内胆管癌など
数多くの腫瘍で確認されており，様々な腫瘍における免疫抑制機構としての PD-1/PD-L1経路の重要性が明らかとなった．腫瘍疾患における一連の PD-1/PD-L1研究か102

家畜衛生学雑誌

第４3巻第 3 号（2017）

ら，この経路を標的とした治療法の開発が進められてい行われた動物衛生研究所の大規模調査によると，BLVる．すなわち，抗 PD-1抗体や抗 PD-L1抗体あるいは組の陽性率は約35％で感染牛の淘汰更新事業の実施は極め

換えタンパク質を利用した PD-1/PD-L1経路を阻害するて困難な状況にある．北海道大学大学院獣医学研究院なバイオ医薬品である．同バイオ医薬品による抗腫瘍効果

らびに北海道大学動物医療センターでは，BLV 感染症

は，腫瘍の種類を選ばず良好な抗腫瘍効果が報告されての迅速診断ならびに感染防疫対策の指導・助言を行っており，新規の抗腫瘍療法として期待が高まっている．すいる．その一方，臨床検体を用いた牛白血病の病態発生でに完全ヒト化抗 PD-1抗体および完全ヒト化抗 PD-L1

機序および制御法に関する研究を行ってきた（Ikebuch

抗体が作製され，治療薬としてこれらを用いた臨床試験

et al., 2014a, Nishimori et al., 2017a）．

（治験）が活発に実施されており，メラノーマや肺癌，

BLV 感染牛を病態別に比較解析した結果，ウイルス

腎細胞癌などの患者において良好な抗腫瘍効果が報告さ

量 が 多 い 持 続 性 リ ン パ 球 増 多 症（Persistent

れ続けている．極めて予後が不良な腫瘍疾患であるメラ

Lymphocytosis； PL）を呈するウシは，発症リスクがノーマにおいては，日本やアメリカで行われた臨床試験

高く感染源になりやすいこと（Ooshiro et al., 2013）やでは，癌細胞の増殖を抑えるだけでなく，癌が完全寛解

垂 直 感 染 の リ ス ク が 高 い こ と（Mekata et al., 2015,

する治験例も報告されている．遂に2014年 9 月 2 日，小Sajiki et al., 2017） に 加 え，CD4+CD25+Foxp3+ T

野薬品工業が抗 PD-1抗体「オプジーボ」（ニボルマブ） （Treg） 細 胞 が 増 加 し，Treg か ら 産 生 さ れ る TGF-βを抗腫瘍新規治療薬として発売し，画期的な免疫チェッは，CD4+ T 細胞の IFN-γおよび TNF-αの産生抑制とクポイント阻害剤の先駆けとなった（小野薬品工業：

NK 細胞の細胞傷害活性を主とする細胞性免疫を低下さ

https://www.opdivo.jp/contents/action/）．この免疫せ，日和見感染症への感受性が高まっていることが示唆

チェックポイントを標的とした免疫療法は，世界的な革された（Ohira et al., 2016）．さらに PL 牛は，BLV に対

命 技 術 と し て，Science 誌 の「Breakthrough of theするリンパ球増殖能も顕著に低下しており，リンパ球かYear 2013」 の ト ッ プ に 選 出 さ れ た（http://news.

らの IFN-γ，IL-2，IL-12などの抗ウイルスサイトカイン

sciencemag.org/breakthrough-of-the-year-2013#.

の産生も抑制されていた（Konnai et al., 2003, Ikebuch

Vim4myhuBbE）．現在，Merck 社や Roche 社など世界

et al., 2011）．そこで PD-1 およびそのリガンドである

中の大手製薬会社が同様の抗体医薬開発を加速させておProgrammed death ligand 1（PD-L1）の発現解析を行っ

り，抗腫瘍療法においては，従来の治療法の概念を翻すた．その結果，病態が進むに伴い PD-1は CD4+ および

程の勢いで非常に注目されている．

CD8+ 細胞，PD-L1はウイルス感染 B 細胞上で発現が亢進し，PD-L1の発現は白血球数，ウイルス力価およびプ

3 ．牛白血病に対する新規予防治療薬の開発

ロウイルス量と有意な正の相関を示す一方，免疫抑制の牛白血病は，白血球増加や全身性の悪性リンパ肉腫を指標である IFN-γ発現量とは有意に負の相関を示した．

主徴とする．牛白血病の発生原因は，ウイルス性と非ウ

抗 ウ シ PD-1抗 体 お よ び 抗 ウ シ PD-L1抗 体 を 樹 立 し，

イルス性に大きく二つに分かれる．ウイルスが関与しな

PD-1と PD-L1との結合阻害試験を行った結果，抗ウイルい牛白血病は，散発型と呼ばれ，子牛型，胸腺型およびス免疫の賦活効果が確認され，IFN-γの産生量の増加

皮膚型の 3 つに分類されるが，発生原因は不明である．

は，CD4+ T 細胞上の PD-1発現率と正の相関を示した．

一 方， 牛 白 血 病 ウ イ ル ス（Bovine leukemia virus：

これらの結果から PD-1/PD-L1経路が牛白血病の免疫抑BLV）が原因となる地方病型は，本病のほとんどを占制機序の一端であることが明らかとなった（Ikebuch et

め，増加の一途をたどっている．牛白血病の病態進行に

al., 2010, Ikebuch et al., 2011, Ikebuch et al., 2012,

は，細胞性免疫の低下が顕著であるが発症機序は明らか

Ikebuch et al., 2013, Ikebuch et al., 2014b, Nishimori et

ではない上，ワクチンや有効な治療法はなく発症するとal., 2014）．さらに抗原特異的リンパ球に発現する死に至る．牛白血病は，平成10年の家畜伝染病予防法のLymphocyte-activation gene 3（LAG-3）（Shirai et al.,改正に伴い，新たに届出伝染病に指定された．平成28年

2011, Konnai et al., 2013），T-cell immunoglobulin andの牛白血病届出数は3,125頭（北海道が557頭で最多発生）

mucin domain-containing protein 3（Tim-3）（Okagawa

で，家畜伝染病予防法が指定するウシの監視伝染病では

et al., 2013），Cytotoxic T-lymphocyte antigen 4最多である．この発生数は，平成10年（発生数99頭）の（CTLA-4； CD152）（Suzuki et al., 2013, Suzuki et al.,31.2倍にも達し，未だ増加に歯止めがかかっていない．

2015）などの PD-1/PD-L1経路以外の免疫抑制受容体に診療現場や生産現場からは，本病への早急な対策を求め

ついても解析を進めた結果，PD-1同様に病態が進むにる声が非常に多いが，2009年から2011年の検体を用いてつれて，リンパ球上の LAG-3，Tim-3，CTLA-4および

「家畜衛生フォーラム ’17」要旨集
それらのリガンドの発現量も上昇しており，それらの結合阻害においても抗ウイルス免疫は賦活化された．そこ

103

参考文献

Barber et al., Nature 2006. 439(7077):682-7.

で牛白血病ウイルス感染牛に対する PD-1または PD-L1

Day et al., Nature 2006. 443(7109):350-4.

抗体投与試験を行った結果，ともに抗体投与後に抗ウイDong et al., Nat Med 2002. 8(8):793-800.

ルス免疫応答が活性化し，ウイルス量を減少させることにGoto et al., Immun Inflamm Dis. 2017. 5(3):355-363.

成功した（Okagawa et al., 2017, Nishimori et al., 2017b）．

Ikebuchi et al., Microbiol Immunol 2010. 54(5):291-8.
Ikebuchi et al., Vet Res 2011. 42:103.

4 ．今後，何が必要か

Ikebuchi et al., Vet Res 2013. 44:59.

免疫異常（不全）を呈するウシの疾患は多いが，機序

Ikebuchi et al., J Gen Virol. 2014a. 95(Pt 8):1832-42.

については，ほとんど明らかになってない．これまでのIkebuchi et al., Immunology 2014b. 142(4):551-61.

我々の解析により，牛白血病のほかにもヨーネ病で認めKonnai et al., Vet Microbiol 2003. 94(4):283-94.

られる免疫抑制にも PD-L1等の免疫抑制因子が関与する

Konnai et al., Comp Immunol Microbiol Infect Dis 2013.

ことが明らかとなった（Okagawa et al., 2015）．さらに36(1):63-9.

アナプラズマ病（Okagawa et al., 2016），マイコプラズ

Konnai et al., J Vet Med Sci. 2017. 79(1): 1 -5.

マ症（Goto et al., 2017），乳房炎（投稿準備中）などのMekata et al., Vet Rec 2015. 176(10):254

慢性感染症における免疫機能の低下に PD-1などの免疫

Nishimori et al., Microbiol Immunol 2014. 58(7):388-97.

抑制因子が関与することが明らかとなってきた．本研究

Nishimori et al., Clin Vaccine Immunol. 2017a. 24(9). pii:

室では長年，BLV ワクチン開発に取り組んできた．In

e00067-17.

vitro 試験で有望だったワクチン抗原を応用したものでNishimori et al., PLoS One. 2017b. 12(4):e0174916.

ある．しかし，様々な手法を用いて挑んだが，エフェク

Ohira et al., Immun Inflamm Dis. 2016. 4(1):52-63.

ター細胞は確実に体内に存在するのにもかかわらず，感Okagawa et al., Vet Res 2012. 43:45.

染どころか発症すら防ぐことができなかった．今回の解Okagawa et al., Infect Immun 2015. 84(1):77-89.

析結果より，ワクチンの無効化の原因には，ウイルスがOkagawa et al., Infect Immun 2016. 84(10):2779-90.

備え持つリンパ球の疲弊化という免疫回避機構が関与す

Okagawa et al., Front Immunol. 2017. 8:650.

る可能性が示唆された．今後の慢性感染症対策には，病Ooshiro et al., Vet Rec 2013. 173(21):527.

原体が備え持つこの手強い免疫回避機構を先回りした新Sajiki et al., J Vet Med Sci. 2017. (in press).

規制御法の開発が必要となるであろう（Konnai et al.,Shirai et al., Vet Immunol Immunopathol 2011. 144

2017）．そのためにも今後，他の慢性感染症における免(3-4):462-7.

疫疲弊化について，より詳細な解析結果が待たれる．ヒ

Suzuki et al., Microbiol Immunol 2013. 57(8):600-4.

トでは今回紹介したような免疫チェクポイントを標的とSuzuki et al., Vet Immunol Immunopathol 2015. 163

したバイオ医薬品が次々開発され，臨床治験が活発に行(3-4):115-24.

われている．今後，牛病を含めた獣医畜産領域への応用

Thompson et al., Cancer Res 2006. 66(7):3381-5.

も期待される．

Velu et al., Nature 2009. 458(7235):206-10.
Wu et al., Acta Histochem 2006. 108(1):19-24.

「家畜衛生フォーラム ’17」要旨集

105

免疫遺伝学研究によるアプローチ

主要組織適合抗原 MHC をマーカーとした新しい牛乳房炎および牛白血病制圧戦略について
理化学研究所

1 ．はじめに牛サルモネラ症，大腸菌 O157，口蹄疫，牛伝染性鼻間陽子

アミノ酸残基に多型が集中しており，この構造が結合するペプチドの種類と結合親和力に影響を与えている．

気管炎，コクシジウム症，ヨーネ病，乳房炎，牛白血このように，MHC の最大の特徴は，他には類をみな病，牛ウイルス性下痢症などのウシの感染症は世界規模

い高度な多型性を持つ点であり，結果として免疫応答とで畜産界に多大な経済損失を与え続けている．中でも，疾患感受性の個体差をもたらす．ウシでは乳房炎と地方

乳房炎を初めとする慢性感染症の主要な治療方法である

病性牛白血病（EBL）に加えて，タイレリアおよびウイ抗生物質の投与は，抗生物質耐性の病原体の出現や，畜

ルス性下痢症等の発症と MHC との相関性が報告されて産物中への抗生物質の残留といった問題を抱えている．

いる．さらに，乳量や肉質などの経済形質との相関性がまた，多くの感染症は病原体に対するワクチン療法によ報告されている（表 1 ）．

り大きな効果を上げてきたが，乳房炎や牛白血病といった慢性感染症においては有効なワクチンは未だ存在しない．さらに，これらの慢性疾患では，病原体だけでなく，複数の遺伝的背景が複雑にからみあって病態の悪性化や発症が規定されているため，有効な治療法の確立は非常に困難である．
我々はこれまでに，慢性感染症の病態進行に関与する
遺伝的背景の一つとして主要組織適合性遺伝子複合体（MHC）に注目してきた．

2 ．MHCMHC は魚類から哺乳類まで，脊椎動物で広く認められ

図 1 ．MHC クラス 1 およびクラスⅡの分子構造ている分子であり，ヒトMHCはHuman leukocyte antigen;
HLA，ウシは Bovine leukocyte antigen; BoLA と呼称される．MHC 分子は脊椎動物において，自己と非自己の識別および非自己の除去という，極めて重要な現象に関与している膜糖タンパク質である．MHC はクラスⅠとクラスⅡに大別され，クラスⅠは大部分の細胞表面に発現し，ウイルス，ガン等の内在性抗原をその抗原提示部
位に噛み込み，CD8陽性 T 細胞に提示し，細胞傷害性の免疫応答を引き起こす．一方，クラスⅡは細菌，寄生虫等の外来性抗原ペプチドを噛み込み，CD4陽性 T 細胞に提示することで，炎症性反応や液性免疫を引き起こす．
MHC クラスⅠ分子はα鎖とβ2ミクログロブリンが非共有結合した分子であり，α1およびα2ドメインがペプ
チドを収容する溝を形成している（図 1 ）．また MHC
クラスⅡ分子はα鎖とβ鎖が非共有結合した分子で，
α1ドメインとβ1ドメインによってペプチド収容溝が形成されている（図 1 ）．このペプチド収容溝を形成する

表 1 ．BoLA 多型と形質との関連性
疾患感受性
１）ウイルス感染症
地方病性牛白血病
血清陽転
持続性リンパ球増多症
B 細胞数
プロウイルス遺伝子量
白血病発症
２）細菌感染症
乳房炎
臨床性乳房炎
乳汁中体細胞数
デルマトフィルス症
３）寄生虫感染症
寄生虫血症
Nematodes
４） ダニ症
Boophilus microplus５）その他の疾患
後部脊髄麻痺症
ケトン症
遺残胎盤癒着免疫応答性
血清アルブミン
オバルブミン
タイレリアワクチン
口蹄疫アクチン
生産性
増体
赤肉領域
乳量
乳脂量
乳脂率
乳中蛋白量
妊娠期間
空胎期間
発情期間
医療コスト
収益性
睾丸重量
生涯産子数

家畜衛生学雑誌

106

第４3巻第 3 号（2017）

図 2 ．ウシ MHC（BoLA）領域のゲノム構造

3 ．ウシ MHC（BoLA）

BoLA 領域はウシ第23番染色体上の約4M 塩基対にわど4000頭以上ものウシゲノムの解析を行い，世界中のウシをタイピング可能な方法の構築に成功した．

たる広大な領域に位置し，HLA 領域と同様に，クラス
Ⅰ，クラスⅡおよびクラスⅢが存在する（図 2 ）．しかし，BoLA 領域はセントロメア側からクラスⅡ b，クラ4 ．乳房炎発症を規定する BoLA クラスⅡ

乳房炎は乳頭へ細菌が感染し惹起される疾患で，遺伝

スⅡ a，およびクラスⅠ／Ⅲから構成されており，クラ的要因が存在することが古くから示唆されていた．最スⅡが二つに大きく分断されていることが最大の特徴と近，その遺伝子要因として FEZL，H3K27me3等が同定なっている．この領域には，疾患発症に相関性を示し，されたが，MHC との相関性も報告されていた．そこ

かつ免疫応答の誘導に関与する MHC クラスⅠならびにで，開発した PCR-SBT 法を用いて， 4 種類の異なる原クラスⅡ遺伝子，および疾患関連遺伝子を始めとする多因菌（連鎖球菌，黄色ブドウ球菌，大腸菌，コアグラー数の非 MHC 遺伝子が密に連鎖して存在している．このゼ陰性ブドウ球菌）による乳房炎の発症に関わる抵抗性

BoLA 領域の中で機能的で多型に富むのが BoLA-DRB3と感受性を規定する DRB3 および DQA1 対立遺伝子を解および BoLA-DQA1 遺伝子であり，それぞれの対立遺伝析した．

子数は133種類および28種類である．

その結果，DRB3 ではなく，DQA1 のヘテロ接合性がそこで，我々は BoLA-DRB3 および BoLA-DQA1 対立

乳房炎の発症リスクの低下を誘発することを初めて明ら

遺伝子を塩基配列レベルで決定できる PCR-Sequence

かにした．MHC は一個体につき 2 種類の対立遺伝子がbased typing（SBT）法を世界に先駆けて開発した．こ発現・機能しており，それが同じ種類，つまりホモ接合の領域は，重複遺伝子が存在し，遺伝子変異も密集してである場合，その個体が認識可能な抗原ペプチドは限ら存在しているため，個体が有する 2 種類の塩基配列を，れる．一方，異なる対立遺伝子を持つヘテロ接合の個体

複数ある対立遺伝子のどの組み合わせにおいても安定しでは，より多種類の抗原ペプチドに応答可能となり，免て増幅可能なプライマーの構築が困難であった．そこ

疫応答の多様性が広がり，環境への適応性が高くなる．

で，日本のみならず，フィリピンや南米，北米各国か

事実，エイズではクラスⅠがヘテロ接合である場合にはら，日本在来種，フィリピン在来種，ボリビア在来種，延命効果，B 型・C 型肝炎においてはクラスⅡがヘテロ

コブウシ，そして各国で飼育されている主要な西洋種なである場合には感染率の低下，リウマチにおいて DQA1

「家畜衛生フォーラム ’17」要旨集

107のヘテロ接合度が高い場合には発症率の低下，が誘発さ続いて，BoLA-DRB3 対立遺伝子が発症を規定するとれる事が報告されている．次に，原因菌別の解析によっいう事実を，短期間で BLV 誘発性白血病を発症するモて，乳房炎に関与するDQA1 対立遺伝子の同定に成功した．

デル動物ヒツジを用いた感染防御実験によって検証し

DQA1＊0101 がホモの個体は連鎖球菌由来，DQA1＊10011

た．その結果，白血病発症に対して抵抗性 MHC 対立遺がホモの個体は大腸菌由来の乳房炎の発症と相関する事

伝子を有するヒツジは BLV 感染後，感受性 MHC 対立遺が示された．

伝子を持つ個体と異なり，強い免疫応答が誘導され，ウイルス増殖が抑えられ，最終的に白血病を発症しないと以上の結果から，乳房炎の発症を抑えるためには，
DQA1 遺伝子のヘテロ接合性を低下させないような育種いう興味深い知見を得た．

戦略の有効性が示された．

6 ．BLV 遺伝子量を規定するBoLA-DRB3 対立遺伝子

5 ．EBL 発症を規定する BoLA-DRB3 対立遺伝子

最近我々は，清浄化対策を進めるための基準値を決め

EBL は牛白血病ウイルス（BLV）によって誘発される試験法として，BLV プロウイルス量を宿主遺伝子でる悪性 B リンパ腫である．BLV 感染によって，白血病補正する高感度・高精度・全ての BLV 変異株を検出で発症による死廃のみならず，乳房炎などの易感染性，乳きる新規 BLV プロウイルス遺伝子量絶対定量法 “BLV-

量・産肉・繁殖能力の低下，使用可能期間の短縮およびCoCoMo-qPCR 法 ” の開発に成功し，BLV 感染牛の中

空胎期間の延長をきたすことが報告され，畜産界に与えでも血中のプロウイルス量が10,000コピー／10万細胞をる打撃は深刻である．

下回る個体は，鼻汁や唾液からウイルスが検出されな

そこで，開発した PCR-SBT 法を用いて，EBL の発症

い，他の牛への水平伝播の可能性が低い「BLV 伝播低と BoLA-DRB3 の多型性との相関性を長年収集してきたリスク牛」であり，逆に上回る個体は鼻汁や唾液にウイ

大量のサンプルを用いて解析した．その結果，白血病発

ルスをまき散らす他の牛への水平伝播の可能性が高い症に対して抵抗性に関与する「発症抵抗性 MHC 対立遺「BLV 伝播高リスク牛」である事を示した．

伝子」と白血病発症に対して促進に関与する「発症感受性 MHC 対立遺伝子」を同定した．

続いて，BLV プロウイルス量と BoLA-DRB3 対立遺伝
子との相関性を解析した．農林水産省家畜伝染病早期診表 2 ．地方病性牛白血病（EBL）の制圧戦略
従来の EBL 制圧戦略
（農林水産省牛白血病に関する衛生対策ガイドラインより抜粋）
Ⅰ. 本病の農場内感染拡大防止対策（農場内伝播の防止）
１．

本病の浸潤状況にかかわらず実施する対策：① 注射針の確実な交換② 直腸検査および人工授精時に使用する直検手袋の確実な交換③ 除角、去勢、削蹄、耳標装着等の出血を伴う処置への対応
２．
本病の浸潤農場における対策：④ 分娩・ほ乳時等の作業による感染ルートの遮断⑤ 吸血昆虫対策⑥ 農場における牛の配置⑦ 日常作業における順序
Ⅱ. 本病の農場への侵入防止対策（農場間伝播の防止）
３．
繁殖雌牛の外部導入
４．
預託放牧等
MHC をマーカーにした新しい EBL 制圧戦略
５．

感受性・抵抗性牛の識別による感染低減効率の最大化戦略：① プロウイルス量による BLV 伝播高リスク牛・低リスク牛の同定② BoLA-DRB3 遺伝子型による感受性牛と抵抗性牛の同定③ 生物学的防壁の構築
抵抗性牛を BLV 陽性牛と陰性牛の間に配置して生物学的防壁として用いる事で、新たな陽転を防ぐ④ 感受性牛の優先的な更新
血中ウイルス遺伝子量＝10,000 コピー/10 万細胞以上の高値を継続す
る感受性牛を優先的に更新する

６．
７．

育種：抵抗性種雄牛を選別し、発症しがたく、プロウイルス量が上昇しな
い育種集団の造成
ワクチン：感受性牛を標的とした細胞性免疫を誘導可能なワクチンによる
プロウイルス量の低減による BLV 感染率の低下

108

家畜衛生学雑誌

第４3巻第 3 号（2017）

断体制整備委託事業（牛白血病診断用試薬の配布）におべてきたように，近年定量可能となったプロウイルス量

いて平成23年度〜平成26年度に全国から収集したウシサは，感染源となるリスク，感染仔牛を産生するリスク，

ン プ ル を 用 い て，BoLA-DRB3 タ イ ピ ン グ と BLV-

発症するリスク，感染により引き起こされる経済被害な

CoCoMo-qPCR 法を行った．その結果，黒毛和種とホルどに強く相関していると考えられ，感染伝播リスクに応

スタイン種において，プロウイルス量を低下させる抵抗

じて更新順位を決定する新たな清浄化対策が可能となっ

性 MHC 対立遺伝子と上昇させる感受性 MHC 対立遺伝てきた（表 2 上段）．しかし，プロウイルス量は変動す

子を各々同定することに成功した．

る数値で，将来的な感染伝播リスクを推定可能な指標でそこで，感受性および抵抗性 BoLA-DRB3 対立遺伝子はないため，この戦略をさらに一歩前進させて，表 2 下を有する黒毛和種およびホルスタイン種を用いた BLV段に示すような，「白血病発症を規定する BoLA-DRB3の感染実験を行い，プロウイルス量の推移を比較した．

遺伝子をマーカーにした新しい EBL 制圧戦略」を提唱

黒毛和種において，抵抗性 MHC 対立遺伝子を有する抵

したい．

抗性牛では少なくとも120日間にわたりプロウイルス量

即ち，BoLA タイピングとウイルス遺伝子量を指標との上昇は低く抑えられたが，感受性 MHC 対立遺伝子をして，発症および感染伝播リスクが低い “ 抵抗性牛 ” と有する感受性牛では同じウイルスを接種しても少なくと高い “ 感受性牛 ” を鑑別することが可能となった．そこも160日間にわたりプロウイルス量が高く維持された．

で，表 2 下段に示すような “ 疾患感受性の個体差 ” とい同様の傾向がホルスタイン種でも得られた．

う遺伝的要因を活用する 3 つの新しい EBL 制圧戦略を

このように，プロウイルス量が低く抑制され続ける

提唱したい． 1 ）抵抗性対立遺伝子を持つプロウイルス“ 抵抗性 ” 個体と，高値を示し続ける “ 感受性 ” 個体の量が低い抵抗性牛を BLV 陽性牛と陰性牛の間に配置存在が明らかとなった．

し，新たな陽転を限りなく 0 に近づける生物学的防壁として活用し，感受性対立遺伝子を有するウイルス排泄量

7 ．感染伝播リスクが低い “ 抵抗性牛 ” と伝播リスクの高い “ 感受性牛 ” の分類が高い感受性牛から優先的に更新する革新的清浄化対では，抵抗性 MHC 対立遺伝子を有する抵抗性牛と感3 ）抵抗性種雄牛を選別して残し発症しがたく BLV ウ

受性 MHC 対立遺伝子を有する感受性牛は BLV 伝播低・イルス遺伝子量を低下させる育種集団を造成する育種戦

高リスク牛のどちらに分類されるのであろうか？

略，である．

長年

策， 2 ）感受性牛を標的にしたワクチン戦略，および，収集してきた大量のサンプルを用いて解析したところ，抵抗性 MHC 対立遺伝子を有する抵抗性牛は有意にプロ
ウイルス量が10000コピー／10万細胞以下に抑制されて【おわりに】

乳房炎と EBL の発症や病態に対して感受性・抵抗性いることが明らかとなった．また，前述の感染実験の結に関わる BoLA クラスⅡ対立遺伝子の存在が明らかと果から，少なくとも120日間にわたりプロウイルス量がなった．今後は，牛サルモネラ症，大腸菌 O157，口蹄

上昇しない事から，長期的に BLV を排出しない抵抗性疫，牛伝染性鼻気管炎，コクシジウム症，ヨーネ病，牛牛は感染源となるリスクが極めて低い BLV 伝播低リス

ウイルス性下痢症などの感染症と BoLA 多型との相関性

ク牛に分類されると考えられた．一方，感受性 MHC 対を調べることによって，新たなウシ感染症を克服する道

立遺伝子を有する感受性牛は，有意に10000コピー／10

を切り開くことが強く望まれる．

万細胞以上を保持し，さらに，上昇したプロウイルス量が少なくとも感染後160日間，高い水準で維持されていることから，次への感染源となる危険性が高い BLV 伝【謝辞】

本講演で述べた実験結果は，多くの共同研究者との共播高リスク牛であり，農場の感染率を上昇させ続ける一

同研究により得られたものであり，心から厚く深謝致し因となることが強く示唆された．

ます．なお，本研究は生研支援センターイノベーション
創出基礎的研究推進事業，農林水産省家畜伝染病早期診

8 ．MHC をマーカーとした新しい牛白血病制圧戦略

断体制整備委託事業（牛白血病診断用試薬の配布），農8 割以上の牛が BLV に汚染されている農場も珍しく

林水産省革新的技術創造促進事業（異分野融合共同研

なくなった我が国では，全ての感染牛の「摘発・淘汰」

究），および生研支援センター「革新的技術開発・緊急による牛白血病清浄化対策は機能しなくなっている．そ展開事業（うち地域戦略プロジェクトおよび経営体強化

こで，経済的損失を最小に抑えながら清浄化を成功させプルジェクト）」の支援を受けて行われたものであり，るための戦略が強く求められている．一方，これまで述この場を借りて深謝致します．

「家畜衛生フォーラム ’17」要旨集

109

抗病性育種研究からのアプローチ

豚の抗病性育種によってマイコプラズマなどの病気にかからない豚を作る
東北大学大学院農学研究科

教授 鈴木

1 ．はじめに豚）と比較調査した試験結果を紹介する．

病症候群（PRDC）の病名に象徴される病原微生物の混2 ．MPS 病変および免疫能選抜試験

啓一

国内外の養豚生産現場で最も重要な病気は，豚呼吸器

合 感 染 に よ る 複 合 呼 吸 器 病 で あ る． 豚 萎 縮 性 鼻 炎1 ）MPS 選抜反応

（AR）
，マイコプラズマ性肺炎（MPS），豚繁殖・呼吸種雄豚15頭と種雌豚50頭のランドレース種を基礎集団

傷害症候群（PRRS）などの慢性疾病による被害は，北として，各選抜世代で育成候補の雄豚50頭，雌豚110頭

アメリカだけでも年間18億ドルと推定されている．国内と，MPS 病変を調査するための調査豚120頭の能力検定でも宮城県の食肉衛生検査所事業概要の報告（平成20年

を 5 世代行った．羊赤血球を異物として二度接種し，二度〜平成27年度）によると，出荷豚の MPS による一部

次接種 1 週間後に末梢血免疫能を測定した．一日平均増

内臓廃率は，32％〜47％と報告され，最も多い疾病であ

体 量（DG）， 背 脂 肪 厚（BF），MPS 病 変（MPS） と 末り，近年増加傾向にある．MPS はマイコプラズマ・ハ

梢血コルチゾール濃度（CORT）の 4 形質を選抜形質とイオニューモニエが主要な原発要因として重要である

して多型質 BLUP 法により育種価を計算し総合育種価にが，肺炎が引き起こされるメカニズムは明らかでない．

よる選抜を行った． 5 世代の選抜により，一日平均増体

疾病コントロールの方法として，ワクチネーション，投量は有意に増加し，MPS 病変は有意に減少した（図 1 ）．

薬，予防衛生，SPF 化があるが，必ずしも万全とは言え2 ）MPS 免疫相関反応

ない．これらの技術を補うものとして抗病性育種があ

末梢血免疫能の総白血球数，食細胞活性，補体別経路

る．宮城県畜産試験場は東北大学との共同研究により，活 性， 顆 粒 球・ リ ン パ 球 比 率，CORT， 羊 赤 血 球

ランドレース種について慢性疾病である MPS 病変を測

（SRBC）に対する特異的 IgG 産生量を調べた結果， 7 週

定して選抜形質とした 5 世代の選抜を行い，MPS 病変

齢及び105kg 時点での食細胞活性と顆粒球／リンパ球比の少ない集団を造成した．また，日本ハム中央研究所は率と MPS 病変は中から高の負の遺伝相関を示し， 5 世

大ヨークシャー種について，末梢血の自然免疫と獲得免代の選抜により食細胞活性と顆粒球・リンパ球比率は有疫能の総合育種価を高める方向に 6 世代の選抜を実施

意に増加し，IgG 産生量は有意に減少した（図 2 ）．さし，各形質とも 1 標準偏差以上の育種価の上昇が認めら

らに，末梢血 IL-17と IFN-γ濃度は有意に増加し，TNF-

れ免疫能の高い集団として確立した．しかし，これらのαは有意に減少した（図 3 ）．また，一般豚と比較し集団の免疫調節及び疾病防御機構の詳細は明らかでない．また，育種改良は純粋種について行われるが，肉豚生産は純粋品種の交雑により行われる．純粋種の抗病性が改良されればそれらの交雑によるヘテローシス効果により抗病性機能がさらに高まることが期待される．本報
告では，はじめにランドレース種の MPS 病変の 5 世代の選抜試験の選抜実験と，日本ハム中央研究所が東北大学との共同研究で行った大ヨークシャー種の豚丹毒ワク
チン接種後の末梢血食細胞活性，補体別経路活性，豚丹
毒ワクチン特異的抗体産生量の総合育種価に対する 6 世
代の選抜実験の選抜反応と相関反応，免疫応答の比較の内容について紹介する．次に，選抜された純粋種およびそれらの交雑豚（雑種第一代と三元交雑豚）の病変の程度と各種免疫能について一般の無選抜豚（純粋種と交雑

図 1 ．MPS 選抜ランドレース種の選抜形質の遺伝的趨勢（横軸は選抜世代を示す．育種価（BV）の大きさは形質により異なるので，標準偏差（SD）単位で示した）

家畜衛生学雑誌

110

第４3巻第 3 号（2017）て，SRBC 特異的 IgG が低いことも明らかとなった．こ末梢血食細胞活性，補体別経路活性，豚丹毒ワクチン特れらの結果から，MPS 病変の選抜に伴う自然免疫，細異的 IgG 量を測定した．各形質の育種価の標準偏差で重胞性免疫能の活性化と液性免疫能の抑制が示唆された．

み付けして合計した総合育種価に基づき 6 世代の選抜を3 ）免疫能選抜試験行った．その結果，各形質とも 6 世代では育種価の 1 標

種雄豚10頭，種雌豚50頭の大ヨークシャー種を基礎集

準偏差以上の選抜反応が認められ，自然免疫と液性免疫団として，育成雄50頭，育成雌120頭について， 9 週齢

能の高い大ヨークシャー種集団を造成することができたで豚丹毒ワクチンを接種後，二週間以内に採血を行い，（図 4 ）．

3 ．MPS 選抜，免疫能選抜系統およびそれらを利用した交雑豚の無選抜豚との MPS 病変と免疫形質の比較

MPS 病変を減少させる方向に選抜したランドレース

種と免疫能を高める方向に選抜した大ヨークシャー種，これらの品種を利用した交雑 F1（雑種第一代）と三元
交雑 LWD 豚，さらにこれらの対照として一般のランド
レース種，大ヨークシャー種，交雑 F1，三元交雑豚
LWD について，MPS 病変，内分泌・免疫調節機構の比較を行った．
図 2 ．MPS 選抜ランドレース種の免疫形質の相関反応

はじめに MPS 病変選抜ランドレース種と無選抜一般
ランドレース種，免疫選抜大ヨークシャー種と無選抜一般大ヨークシャー種について，MPS ワクチン接種前後の 免 疫 能， と 畜 後 の 肺 病 変 を 調 査 し た． そ の 結 果，
MPS 病変選抜ランドレースは MPS 病変程度が最も低
く，MPS 抗病性選抜の有効性が確認されたが，免疫能選抜大ヨークシャー種の MPS 抵抗性は確認できず，採用された免疫形質（食細胞活性，補体別経路活性及び豚
丹毒特異的 IgG）は MPS 抵抗性の改良には有効でない
ことが明らかとなった．免疫担当細胞種の比較から，
MPS 選抜ランドレース種は一般ランドレース種と比較し，顆粒球を増加させる一方で，T 細胞や B 細胞などのリンパ球系を減少させる反応が確認された．そして

図 3 ．血清サイトカイン濃度の遺伝的趨勢

IL-10と IFN-γの産生濃度が一般豚に比べ有意に高い値を示し，IL-10では mRNA レベルの発現量も高いこと（図 5 ），IgA 産生を特徴とした細胞性及び粘膜免疫機能が活性化され，B 細胞と IgG 産生を特徴とした液性免疫能が抑制されていることが明らかになった．以上の結果
から，MPS 抵抗性直接選抜による抗病性育種の有効性と，特異的 IgG の抑制及び，IFN-γと IgA を高めること
が MPS 抗病性育種の重要な免疫指標であることが示唆された．
次に，MPS 選抜ランドレース純粋種 La，免疫能選抜
大 ヨ ー ク シ ャ ー 種 と の 交 雑 豚 LaWa， 一 般 大 ヨ ー ク
シャー種と MPS 選抜ランドレース種の交雑豚 LaWb，
一般大ヨークシャー種と一般ランドレース種の交雑豚
LbWb の 4 系統に抗原として羊赤血球（SRBC）を接種

図 4 ．大ヨークシャー種の免疫形質の遺伝的趨勢

し病変と各種免疫能を比較した．MPS 選抜ランドレー

「家畜衛生フォーラム ’17」要旨集

111

図 5 ．MPS 選抜ランドレース種，一般ランドレース種の IL-10と IFN-γ産生量（上）と発現量（下）（横軸は， 2 回目の MPS ワクチン接種日を 0 とし，その 1 週間前を - 7 とし， 2 ， 7 ，14日後をそれぞれ示す）

ス，一般大ヨークシャー種と MPS 選抜ランドレース種との交雑 LaWa の MPS 病変が最も低く，免疫能選抜大ヨークシャーとの交雑により MPS スコアが少し増加
し，一般的な LbWb が最も MPS スコアが高い結果が得られた．さらに，SRBC 特異的抗体量は一般 LbWb が最も高く，MPS 選抜ランドレース種との交雑により産生量が減少する結果が得られた（図 6 ）．この結果から，
抗体産生量の抑制の程度が MPS 抵抗性の指標として有効であることが示唆された．
最後に，MPS 選抜ランドレース豚と末梢血免疫能選
抜大ヨークシャー種との LW 交雑雌豚にデュロック純粋種雄豚を交配して生産した三元交雑豚（LaWaDa）と一般の純粋種を交雑した三元交雑豚（LbWbDb），そしてMPS 選抜ランドレース種（La）を用いて比較検討した．
肺病変スコアは LaWaDa が La と LbWbDb の中間値を示したことから，MPS 選抜ランドレース種の MPS 抵抗性

図 6 ．M PS 選 抜 La， 交 雑 豚 LaWa，LaWb，LbWb のSRBC 特異的抗体産生量（横軸は， 2 回目の SRBC 接種日を 0 とし，一週前， 2 日後， 7 ，
14日後を示す）に関する遺伝的能力が影響したものと考えられる．また，血中免疫担当細胞数の T 細胞数は LaWaDa が他の
2 系 統 よ り 有 意 に 高 か っ た が，LaWaDa の IFN-γ，IL- 4 ，IL- 6 ，IL-10及 び TGF-β mRNA 発 現 量 は La と
LbWbDb の中間値を示した（図 7 ）．
以上の結果より，抗病性育種の方法としては，遺伝率は低いながらも病変を直接の選抜形質として改良を進めることが有効であることが確認された．感染症は，病原体，宿主，宿主反応と環境といったものが様々に影響し合っているため調査測定自体が難しい形質だが，きょうだい豚や後代群の疾病の記録システムを充実させた方法
により遺伝率が低い場合も改良が可能と考えられる．さ家畜衛生学雑誌

112

第４3巻第 3 号（2017）

図 7 ．血中サイトカイン IFN-γ（A），IL- 6（B），IL- 4（C），IL-10（D），TGF-β（E）遺伝子発現の変化（La●，LaWaDa ○，LbWbDb ◇）各時点での異なる文字間で有意差あり（横軸は， 2 回目の MPS ワクチン接種日を 0 とし，- 7 ， 2 ， 7 ，14日後を示す）

らに，MPS 抵抗性の改良指標としては細胞性免疫能を高め，獲得免疫能を抑制する指標の有効性が示唆された．また，MPS 病変について選抜されたランドレース
種の交雑豚は一般の交雑豚より MPS 病変が有意に少な
いか，あるいは少ない傾向が認められたことから交雑に
より MPS 抵抗性が遺伝することが確認された．免疫形質に関しては片方の純粋種に影響されると考えられる形
質は認められず，免疫形質を支配するポリジーンにより交雑豚は中間的な値をとる現象が認められた．本研究で得られた結果は今後の抗病性育種を進める上で有用な情報であると考えられるが，さらなる実証研究が必要と思われる．

本研究は，農業生物資源研究所の受託研究課題「動物ゲノムを活用した新市場創出のための技術開発─動物ゲ
ノム情報を活用した新需要創造のための研究─」のうち，「抗病性育種のための家畜免疫系遺伝子解析とブタ実験系及び実用集団での評価」の課題として取り組んだ．また，選抜系統と交雑豚の免疫特性の解明研究は，農研機構生物系特定産業技術研究支援センター，イノ
ベーション創出基礎的研究推進事業の受託研究「豚の慢性病に関わる免疫機構の解明と高抗病性種豚の開発」の課題として取り組んだことを記す．

日本家畜衛生学会
第87回大会

講演要旨集

主 催：日本家畜衛生学会

日本家畜衛生学会第87回大会と き：平成29年12月15日（金） 10：00〜12：00
ところ：Meiji Seika ファルマ（株） 本社講堂

座長

伊藤博哉（農研機構・動物衛生研究部門）
10：00〜10：13

1 ．ビタミン K 類がウシの免疫担当細胞の機能発現に及ぼす影響
〇西

航司・森

千尋・権平

智・岩野英知・樋口豪紀・永幡肇

10：13〜10：26
2 ．豚胸膜肺炎ワクチン免疫血清中の抗体価測定のための ELISA 法の検討
〇手島香保・TOHO・堤信幸・鎌田崇・小玉敏明・近藤朋美・眞柄麗・

岩崎紗枝・渋谷一元座長

山本孝史（前東京農業大学）
10：26〜10：39

3 ．子牛のマイコプラズマ関節炎罹患牛における免疫学的応答性◯津田尚樹・笹川操緒・西航司・岡本真理子・田中貴大・権平智・

根布貴則・大塚浩通・小岩政照・松田一哉・岩野英知・樋口豪紀・永幡肇

10：39〜10：52
4 ．競走用馬の感染性とみられる皮膚炎からの細菌・真菌の分離同定と薬剤感受性調査〇牛屋重人・上塚浩司
10：52〜11：05
5 ．養豚農家および養豚管理獣医師の抗菌剤使用低減意志に影響する意識要因の分析〇礒村れん・松田真理・杉浦勝明

座長

柿市徳英（前日本獣医生命科学大学）
11：05〜11：18

6 ．乳清および鶏卵由来タンパク質酵素分解物の食肉加工における有効利用〇梅津敬多朗・竹田志郎・坂田亮一
11：18〜11：31
7 ．野生獣肉に関する研究─ジビエの生理活性機能について─
〇金子桜子・竹田志郎・坂田亮一
座長

須藤慶子（群馬県中部農業事務所家畜保健衛生課）
11：31〜11：44

8 ．北海道で発生した高病原性鳥インフルエンザ（H 5 N 6 亜型）発症鶏の病性鑑定成績と他症例との比較〇中薗将友・川島悠登
11：44〜11：57
9 ．牛ウイルス性下痢ウイルス（BVDV）ワクチン製造のための増殖効率の高い細胞株の選択〇中川健斗・池田凡子・小川美聡・安田奏平・宮崎朋美・長井

誠・白井淳資家畜衛生学雑誌

116

1

第43巻第 3 号（2017）

ビタミン K 類がウシの免疫担当細胞の機能発現に及ぼす影響〇西航司 1 ）・森

千尋 1 ）・権平（酪農学園大学

智 1 ）・岩野英知 2 ）・樋口豪紀 1 ）・永幡
1）

肇1）

獣医衛生学・ 2 ）獣医生化学）

Key words：vitamin K, neutrophil, mononuclear leukocyte, apoptosis【はじめに】
ビタミン K（以下，K）は血液凝固促進および骨形成調節等の重要な生理機能を担う脂溶性ビタミンの一種である．近年では，ヒトやマウスの免疫細胞に及ぼす作用が明らかとなってきている．しかし，その作用は動物種，免疫細胞の種類および K 類の種類により異なっており，特に，ウシの免疫細胞に及ぼす影響については解明されていな
い．そこで本研究では K 類がウシ免疫細胞に及ぼす影響について，好中球化学発光能およびリンパ球幼若化能を指標に検討した．さらに，K3がウシ単核球の Bax の mRNA 発現量に及ぼす影響について検討した．
【材料および方法】①供試牛：ホルスタイン種雌牛 5 頭②化学発光量測定：細胞を 1 ×106cells/ml に調整，K1，K2および K3（最終濃度0，0.1，1 および10µM）処置③幼若化能測定：細胞を 3 ×105cells/ml に調整，K1，K2および K3（最終濃度 0 ，
0.1，
1 および10µM）処置後，ConA で刺激④遺伝子発現：単核球 5 ×106cells を，K3（最終濃度 0 および10µM）処置後，ConA で刺激，遺伝子発現は RT-PCR 法で測定⑤生存率，アポトーシスおよびネクロ―シス：MUSE Cell Analyzer
で測定

【結果】
①好中球化学発光量への影響は，K1および K2添加では認められず，1µM および10µM の K3添加により有意に（p ＜0.05）抑制された．② K1，K2および K3は好中球の生存率，アポトーシスおよびネクロ―シスに影響を及ぼさなかった．③リンパ球幼若化能への影響は，K1および K2添加では認められず，1µ および10µM の K3添加により有意に（p ＜0.05）抑制された．④1µM および10µM の K3添加で，単核球の生存率は有意に（p ＜0.05）低下し，アポトーシ
スが有意に（p ＜0.05）誘導された．⑤10µM の K3添加により Bax の mRNA 発現量は有意に（p ＜0.05）増加した．

【考察】
K3はウシ好中球に対してアポトーシスおよびネクロ―シスを誘導することなく機能を抑制することが推察された．一方で，ウシ単核球へはアポトーシスを誘導し，生存率を低下させることにより，細胞機能を抑制すると推察された．また，K3添加による Bax の mRNA 発現量の増加は，K3がアポトーシスを誘導する根拠の一つと考察された．

「日本家畜衛生学会第87回大会」要旨集

117

単核球

600

1.2

OPZ−
OPZ+

a

500

1

300

OD value

400
b

200
100
0

b
0

0.1

1

100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0

ConA−
ConA＋

a

ConA−
ConA+

c

0.8
0.6

d

0.4

a

0.2
0

10 (μM)

図 1 ．ビ タミン K3が好中球の化学発光反応に及ぼす影響

Late Apoptosis (%)

化学発光量 (cpm)

好中球

b
0

0.1

b d
1

10 (μM)

図 2 ．ビ タミン K3がウシ単核球の幼若化反応に及ぼす影響da-b, c-d: p <0.05
d

b

c

0

0.1

1

図 3 ．ビタミン K3がウシ単核球のアポトーシスに及ぼす影響

10 (µM)家畜衛生学雑誌

118

2

第43巻第 3 号（2017）

豚胸膜肺炎ワクチン免疫血清中の抗体価測定のための
ELISA 法の検討

○手島香保・TOHO・堤信幸・鎌田崇・小玉敏明・近藤朋美・眞柄麗・岩崎紗枝・渋谷一元（（一財）日本生物科学研究所）
Key word：Actinobacillus pleuropneumoniae, ELISA, LPS, vaccine【はじめに】
豚胸膜肺炎は，Actinobacillus pleuropneumoniae（App）を原因とし，豚に甚大な被害を及ぼす呼吸器疾病である．App は，莢膜多糖（CPS）の抗原性の違いに基づき，16の血清型に分類され，日本では， 2 型， 1 型， 5 型，15型の順に多い．本疾病に対する予防法として，不活化ワクチンの接種，農場の清浄化，発病誘因の排除などが挙げられる．その為，有効なワクチンプログラムを構築するには，農場の清浄度や，移行抗体の消失時期，ワクチン投与後の免疫応答を把握することが重要である．本疾病の抗体検出法として，これまで自家開発の菌体オートクレーブ抗原を用いたサンドイッチ ELISA（菌体 ELISA）を実施してきたが，非特異反応が出現することがあり問題となっていた．近年，CPS や LPS を抗原に用いた新たな ELISA の作出も報告されている．しかし，これらの ELISA を用いてワクチン抗体を検出できるかは不明であった．そこで CPS および LPS を抗原とした ELISA（LPS ELISA）を作出し，App ワクチン免疫血清の抗体価測定における有用性を検討した．

【材料と方法】
LPS ELISA は App 1型， 2 型および 5 型からホットフェノール抽出した CPS を含む LPS を抗原として使用し，間接法に基づき実施した．菌体 ELISA は LPS ELISA と同一の菌株をオートクレーブ処理した菌体を抗原として使用
し，サンドイッチ法に基づき実施した．ワクチン免疫した実験豚の抗体応答を調べる為に，App1.2.5型を含む不活化ワクチンである APXME ワクチンで免疫後，App 2型を気管内投与し攻撃した実験豚から採取した血清を用いて， 2
つの ELISA で測定し相関を調べた．またワクチン免疫した野外豚の抗体応答を調べる為に，App1.2.5型を含む不活化ワクチンである AP125RX ワクチンで免疫した野外豚から採取した血清を用いて， 2 つの ELISA で測定し相関を調
べた．

【結果】
LPS ELISA の非特異反応の有無を調べる為に，菌体 ELISA で非特異反応を示した血清を測定した結果，いずれの検体にも非特異反応は認められなかった．
LPS ELISA の特異性を調べる為に，App1.2.5型をそれぞれ豚に気管内投与し， 1 週間後採血した血清を陽性血清として，同一および異なる血清型の組み合わせで測定した．その結果，同一の血清型の陽性血清に対して， 1 型， 2型および 5 型の OD 値の平均は，それぞれ1.24，1.103および0.80を示した．一方，異なる血清型の陽性血清に対しては，OD 値の平均は，それぞれ 1 型が0.18（対 2 型陽性血清）と0.04（対 5 型陽性血清），2 型が0.18（対 1 型陽性血清）と0.02（対 5 型陽性血清）， 5 型が0.17（対 2 型陽性血清）と0.16（対 5 型陽性血清）を示し， 1 - 2 - 5 型間で交差反
応は認められなかった．
（図 1 ）
実験豚でのワクチン免疫血清の抗体応答を調べた結果，免疫群は攻撃時に App1型， 2 型および 5 型に抗体上昇が認められたのに対して，対照群は攻撃後に 2 型のみ上昇が認められた．また菌体 ELISA と LPS ELISA の間には高い相関が認められた．

「日本家畜衛生学会第87回大会」要旨集

119

野外でのワクチン免疫血清の抗体応答を調べた結果，App1型，2 型および 5 型において菌体 ELISA と LPS ELISAの間には高い相関が認められた．
（図 2 ）【考察】
LPS ELISA は，（ⅰ）菌体 ELISA に比べて非特異反応がない．（ⅱ）血清型特異的な LPS と CPS を抗原としている
為，LPS に対する抗体応答を特異的かつ高感度に検出できる．（ⅲ）間接 ELISA である為，サンドイッチ ELISA に比べてより作業工程が簡潔である．
（ⅳ）感染血清のみでなく，免疫血清の抗体価も測定できる，といった利点を持った有用な抗体検出法と考えられた．

図 1 ．LPS ELISA の App1- 2 - 5 型間における特異性

図 2 ．野外豚における免疫血清の抗体応答（a）LPS ELISA の抗体価の推移（b）菌体 ELISA 抗体価と LPS ELISA 抗体価との相関（App1型）（c）菌体 ELISA 抗体価と LPS ELISA 抗体価との相関（App2型）（d）菌体 ELISA 抗体価と LPS ELISA 抗体価との相関（App5型）

家畜衛生学雑誌

120

3

第43巻第 3 号（2017）

子牛のマイコプラズマ関節炎罹患牛における免疫学的応答性〇津田尚樹 1 ）・笹川操緒 1 ）・西航司 1 ）・岡本真理子 1 ）・田中貴大 1 ）・権平

智 1 ）・根布貴則 1 ）・

大塚浩通 2 ）・小岩政照 3 ）・松田一哉 4 ）・岩野英知 5 ）・樋口豪紀 1 ）・永幡
（酪農学園大学

1）

肇1）

獣医衛生学・ 2 ）生産動物内科学Ⅰ・ 3 ）生産動物内科学Ⅱ・ 4 ）獣医病理学・ 5 ）獣医生化学）

Key words：mycoplasma arthritis, synovial fluid, M. bovis-specific antibody【はじめに】
Mycoplasma bovis（Mb）は牛において関節炎，中耳炎，肺炎および乳房炎を引き起こす主要な病原体の一種である．Mb による関節炎および乳房炎の症状は重篤であり，酪農家の経済損失は甚大である．また，その発生件数は近年増加傾向を示している．Mb による関節炎の特徴的な所見として，関節の腫脹，関節液の増量および骨融解が報告されているが，その病態生理については十分に解明されていない．そこで本研究では，関節炎罹患子牛の関節液性状，特異抗体価およびサイトカイン mRNA 発現量を測定し，関節における Mb に対する免疫学的応答性を評価した．

【材料および方法】①供試動物：Mb に感染した子牛 0 〜 4 ヶ月齢のホルスタイン種およびジャージー種計 7 頭，また対照牛として
Mb 陰性と判定された子牛ホルスタイン種13頭②関節液：関節液を採取し，細菌学的検査および関節液性状（pH，比重，蛋白量，細胞数および細胞百分比）について検査③特異抗体：血清および関節液の特異抗体価を ELISA 法により測定④サイトカイン mRNA 発現量：関節液由来細胞について，サイトカイン（IFN-γ，TNF-α，IL-1β，IL-6，
IL-8，IL-10，IL-13および IL-17）の mRNA 発現量を測定⑤サイトカイン濃度：ELISA 法により，関節液上清の IL-1β
および IL-6濃度を測定【結果】①対照子牛と比較し，Mb 罹患子牛の関節液は pH の有意（p ＜0.05）な低下，比重および蛋白量の有意（p ＜0.01）
な増加を示した．②罹患子牛の関節液中の細胞数は対照子牛と比較して100倍程度の有意（p ＜0.01）な増加を示し，それらの多くは好中球であることが認められた．③血清および関節液中の Mb 特異抗体価は，対照と比較し有意（p ＜0.01）な増加を認め，これらの相関係数は0.88と有意（p ＜0.01）な正の相関性を認めた．④罹患関節液由来細胞のサイトカイン mRNA の発現量は対照子牛と比較して，IFN-γ，IL-1β，IL-6，IL-8および IL-17で明瞭な上昇を認めた．⑤対照子牛関節液中の IL-1βおよび IL-6はともに検出限界以下であったのに対し，罹患関節液ではともに著しい増加を示した．

【考察】
血清および関節液の抗体価が高い相関性を示したことから，炎症反応による血管透過性の亢進により抗体が関節内に移行する可能性が示唆された．また，比重および蛋白量の上昇も血管透過性の亢進によるものであると示唆された．炎症性サイトカインである IFN-γ，IL-1βおよび IL-6などの mRNA 発現量および，IL-1β，IL-6のサイトカイン濃度が増加したことから，Mb が関節腔内において炎症反応を誘起し，好中球の誘導および破骨細胞の活性化の増強などに深く関与していることが示唆された．

「日本家畜衛生学会第87回大会」要旨集

121

関節液抗体価(OD 値)

1.20
1.00
0.80
0.60
0.40

n=18
r=0.88p<0.01

0.20
0.00
0.00

0.50

1.00

1.50

血清抗体価(OD 値)
図 1 ．血清および関節液 M. bovis 特異抗体価の相関性

120

相対値

100
80
60
40
20
0

IFN-γ IL-1β

IL-6

TNF-α

IL-8

IL-17 IL-10 IL-13

図 2 ．罹患関節液由来細胞サイトカイン mRNA 発現量

家畜衛生学雑誌

122

4

第43巻第 3 号（2017）

競走用馬の感染性とみられる皮膚炎からの細菌・真菌の分離同定と薬剤感受性調査○牛屋重人 1 ）・上塚浩司 2 ）（ 1 ）うしや競走馬クリニック・ 2 ）茨城大学農学部）
Key words：dermatitis, identification, bacteria, fungus, susceptibility test, racehorse【はじめに】
競走用馬の皮膚炎は日常的に見られるが，この多くは生命や運動能力を脅かす疾病でなく自然治癒も多いため，治療は経験則に基づく投薬・洗浄が主体で，鑑別診断まで行われることは少ない．しかしながら，複数年にわたり症状が固着する難治例も散見されるため，これらへの対処指針の検討の目的で，まず感染性と思われる皮膚炎を対象に取り上げ，病変からの細菌・真菌の分離同定と薬剤感受性の調査を実施した．

【材料と方法】
2016年 8 月から2017年10月に当クリニックで治療したサラブレッド種競走用馬のうち，感染性とみられる皮膚炎を発症した73頭について，患部の体毛，鱗屑，痂皮を採取し，細菌・真菌の好気性培養を実施した．このうち15頭は複数回調査したため，調査対象は延べ89頭となった．この中には，なかなか治癒しないため同じ部位から 2 度採材したものや，同じ馬が異なる部位に異なるタイプの皮膚炎を発症したものも含まれる．
細菌培養は主に SCD 培地を使用し，単離したコロニーについてグラム染色後の光学顕微鏡検査と薬剤感受性試験を行った．薬剤感受性試験は，アンピシリン（ABPC），ジクロキサシリン，セファゾリン，セファロチン，ゲンタ
マイシン，オキシテトラサイクリン，ミノサイクリン，オルビフロキサシン，エンロフロキサシン，ST 合剤，およびポリミキシン B の11種類のディスクを使用した．
真菌培養は皮膚糸状菌鑑別培地を用いた．
細菌・真菌・酵母の同定は大半を（株）テクノスルガ・ラボに委託し，細菌では MALDI-TOF/MS 法もしくは16S
rDNA 解析，酵母・真菌では微視的な形態観察，もしくは28S rDNA 解析を依頼した．
細菌の薬剤感受性試験，真菌の培養結果に基づき外用軟膏を作製し，患部に塗布した．

【結果】（ 1 ）治療成果：軟膏塗布は，89例中55例で奏功した．89例のうち，経験則に基づく投薬・洗浄に反応しなかった
病変は24例あり，このうち20例で改善が見られた．
（ 2 ）分離菌の同定：細菌は89例から172菌種が分離された．真菌・酵母は 8 例からは分離されず，81例から102菌種が分離された（表 1 ）．同定した細菌は，グラム陽性球菌95種，グラ
ム陽性桿菌40種，およびグラム陰性桿菌10種であった．Staphylococcus 属が最も多く72種，次いで Corynebacterium
属24種，Aerococcus 属 8 種 で あ っ た． 真 菌 は Penicillium 属19種，Paecilomyces 属14種，Aspergillus 属10種 な ど であった．（ 3 ）薬剤感受性試験：11種類すべての抗生物質に感性を示す細菌がある一方， 1 種類にしか感性を持たない細菌も見られた．本来有効とされる抗生物質に耐性を示す細菌は少なくなく，有効な抗生物質が11種類中 5 種類以下であった多剤耐性菌も11菌種確認された．また ABPC は有効とされる Staphylococcus 属に限っても有効率は31％と低値を示した．

「日本家畜衛生学会第87回大会」要旨集

123

【考察】
分離された細菌の多くが常在菌であることから，今回調査した皮膚炎の多くは日和見感染に因ることが示唆された．一般的な消毒薬，消毒水，外用薬で治癒しない理由として，薬剤耐性菌の存在，および細菌と真菌の混合感染の関与が推察された．
また日常的に使用されていない抗生物質に対する耐性菌が馬の体表に認められたことから，個体別の診断・治療を正確に実施する一方で，皮膚炎を生じさせる微生物の進入経路の解明が必要と思われた．

表 1 ．分離された細菌・真菌・酵母の内訳

家畜衛生学雑誌

124

5

第43巻第 3 号（2017）

養豚農家および養豚管理獣医師の抗菌剤使用削減意志に影響する意識要因の分析○礒村れん・松田真理・杉浦勝明（東京大学大学院）
Key words：Antimicrobial resistance, attitudes, pig production, social science【はじめに】
薬剤耐性菌問題は人および動物医療分野で大きな課題となっており，その背景には抗菌剤の不適切な使用がある．
現在日本で動物用抗菌剤の販売量が最も多いのは豚に対してであり，養豚分野における抗菌剤使用削減に影響する要因の解明は重要である．本研究は養豚農家（n ＝105）および養豚管理獣医師（n ＝28）に抗菌剤使用に対する意識調査を実施し，各農場における抗菌剤使用に及ぼす意識要因の解明を目的とした．

【材料と方法】
農家への意識調査票は，Ajzen の「計画的行動理論」モデル（図 1 ）に基づき構成され，抗菌剤使用の A. 利便性，B. 必要性，C. 危険性の認識，D. 使用量削減への意志，E. 削減策への統制可能性，F. 管理獣医師との信頼関係性を評価した（表 1 ）．獣医師への意識調査票は抗菌剤使用の A. 利便性，B. 必要性，C. 危険性の認識，D. 処方削減姿勢，
E. 削減への統制可能性，F. 契約農家の削減への困難性，G. 処方への期待圧力および H. 信頼関係性を評価した．調査
票結果を主成分分析した後，農場における抗菌剤使用量に及ぼす意識要因を，多変量回帰分析を用いて明らかにした．

【結果】
農家および獣医師に共通する使用量削減意志に影響する因子は，養豚従事年数および抗菌剤使用に対する利便性の認識であった．さらに従事年数は回答者自身の年齢と相関関係があり，養豚業・臨床の従事年数が少ない若い年齢層
では抗菌剤使用・処方に対する削減意志が強い傾向がみられた．また農家では，削減策の統制可能性が高く，抗菌剤
使用の危険性の認識が高いほど抗菌剤使用の削減意志が高い結果を示した（表 2 ）．

【考察】
養豚農場における抗菌剤の適正使用の推進には，より養豚従事年数の長い農家に対する抗菌剤使用の公衆衛生上の危険性を啓発するともに，農場疾病管理において抗菌剤以上の利便性が認識される代替策の提案が求められており，
バイオセキュリティの向上やワクチンプロトコルの徹底等の具体的な使用量削減策の提案が必要である．さらに，費用の観点から代替策導入への助成の実施および一部の抗菌剤購入にかかる税金を高く設定することも検討すべきである．今後，農家における実際の抗菌剤使用量に影響を与える意識的要因以外の外的因子の調査を進めることで，抗菌剤使用量削減に向けた有効な対策の特定に貢献できると考える．

「日本家畜衛生学会第87回大会」要旨集

125

図 1 ．Ajzen の「計画的行動理論」に基づく，抗菌剤使用の削減の意志に影響する意識要因の解析モデル

表 1 ．6 段階リッカート尺度で評価した農家（n ＝105）および獣医師（n ＝28）への抗菌剤使用に関する
質問表とその結果
農家への質問

平均値

標準偏差

獣医師への質問

平均値

標準偏差

A . 利便性の認識

4.15

1.22

A .利便性の認識

4.45

1.06

B . 必要性の認識

3.32

1.43

B . 必要性の認識

2.11

1.13

C . 危険性の認識

3.33

1.37

C . 危険性の認識

3.36

1.29

D .使用量削減への意志

4.49

1.48

D . 抗菌剤処方の削減姿勢

4.94

1.14

E . 使用量削減への統制可能性

4.30

1.56

E .抗菌剤使用削減への統制可能性

5.36

0.70

F. 管理獣医師との信頼関係性

4.82

1.37

F.契約農家の削減への困難性

3.25

1.47

G . 農家からの抗菌剤処方への期待圧力

2.52

1.73

H . 農家との信頼関係性

4.57

1.15

表 2 ．農家の抗菌剤使用量の削減意志および獣医師の抗菌剤処方の削減姿勢の多変量回帰分析結果
農家の抗菌剤使用量の削減意志

獣医師の抗菌剤処方の削減姿勢

B

SE

定数

4.266

0.715

養豚業の従事年数-0.011

0.007-0.122

抗菌剤の「利便性」認識-0.252

0.092-0.210 ＊＊0.090-0.221＊＊＊＊＊

抗菌剤の「必要性」認識-0.239β＊＊＊抗菌剤の「危険性」認識

0.260

0.069

0.308

削減策への「統制可能性」

0.342

0.070

0.391 ＊＊＊

モデル統計

F (5 ,9 5)= 1 5.76 8

B

SE

定数

6.046

1.091

養豚管理獣医療の従事年数-0.0300.012-0.380 ＊

抗菌剤の「利便性」認識-0.3720.163-0.363 ＊契約農家との「信頼関係性」

0.275

0.146

0.299

＊＊＊

F (3,24 )= 5 .32 2

モデル統計

p < 0.0 0 1 、調整済みR ²＝0 .4 2 5
B ：非標準化係数、S E：B の標準誤差、β：標準化係数βp < 0 .0 1 、調整済みR ²＝0 .3 24＊＊＊

p ＜0.001、＊＊p＜0.01、＊p< 0.05

家畜衛生学雑誌

126

6

第43巻第 3 号（2017）

乳清および鶏卵由来タンパク質酵素分解物の食肉加工における有効利用〇梅津敬多朗・竹田志郎・坂田亮一（麻布大学大学院獣医学研究科）
Key words：meat processing, natural additive, hydrysates【目的】
食肉製品の発色剤として亜硝酸ナトリウム（NaNO2）が広く用いられている．発色剤は加工食肉製品の赤色化を促進するだけでなく，熟成フレーバーの賦与，脂質酸化やボツリヌスなど微生物の増殖を抑制することが知られている．しかし，世界各国では消費者の健康志向の高まりから発がん性物質の生成など安全性への懸念が高まっており（Bedale et al., Meat Science 2016），発色剤の使用量を減らして効率的に食肉を発色させる加工法の開発が望まれる．
これまでに，乳清タンパク質酵素分解物の発色促進効果が報告されており（Sakata et al., Fleischwirtschaft
2001），他の動物性タンパク質酵素分解物においても同様の効果が期待できる．本研究では乳清タンパク質に加え，鶏卵由来タンパク質酵素分解物に着目し，発色剤による食肉製品における発色効果への影響と保水性に対する影響について比較した．

【材料と方法】〈材料〉 本実験では，動物性タンパク質由来酵素分解物として，卵白酵素分解物（キユーピー），卵殻膜酵素分解物（キユーピー），乳清タンパク質酵素分解物（第一化成）を使用し，その対照試験区として卵白粉末（キユーピー），
乳清タンパク質粉末（よつ葉乳業）を用いた．
〈方法〉 1 ）モデルソーセージの作製：冷凍した国産豚もも挽肉（5mm 径）を解凍し，NaCl 2％，NaNO2 30ppm，卵白，卵殻膜および乳清タンパク質粉末またはそれらのタンパク質酵素分解物 5 ％を，すべて対肉の割合で添加した．その後のモデルソーセージの作製工程を図 1 に示す．サンプルは卵白酵素分解物 5 ％添加区（EWP），卵殻膜酵
素分解物 5 ％添加区（ESP），卵白粉末 5 ％添加区（EW），乳清タンパク質粉末 5 ％添加区（WPC），乳清タンパク
質酵素分解物 5 ％添加区（WPP），無添加区（BL）の計 7 種作製した． 2 ）発色率の測定法：発色促進効果は発色率（全ヘム色素量に対する発色したヘム色素の量 ,％）で表した．即ち75％アセトン抽出液の波長395nm における吸光度（ニトロシルヘムヘム色素量に相当）と75％アセトン−0.7％HCl 抽出液の波長383nm における吸光度（全ヘム
色素量に相当）から算出した（坂田亮一，食肉の科学 1999）． 3 ）a ＊値の測定法：モデルソーセージを真空包装した状態で分光測色計（MINOLTA CM-3500d）を用いて測定した． 4 ）保水性の測定法：サンプルの加熱前と加熱後の重量を測定し，加熱前の重量に対する重量の減少率を加熱離水率（％）として算出した．

【結果】
発色率は，WPP は WPC と比べ有意に高い値を示した（P ＜0.05）．また，EWP，ESP，WPP のすべてにおいて有意差は認められなかったが，BL よりも高い発色率の傾向を示した（図 2 ）．a ＊値は酵素分解物添加区である EWP，
ESP，WPP すべてにおいて BL よりも有意に高い値を示した（P ＜0.05）．EWP と ESP は EW と比べ，また WPP は
WPC に対して有意に高い a ＊値を示した（P ＜0.05）（図 3 ）．
以上の結果より，各酵素分解物は亜硝酸塩存在下の加熱食肉製品において発色を促進し，赤色化を増強させることが認められた．

「日本家畜衛生学会第87回大会」要旨集

127

一方，加熱離水率は EWP，ESP，EW，WPP 添加区において低い値を示し，BL との有意差が確認された（P ＜0.05）（図 4 ）．この結果より，動物性タンパク質酵素分解物は加熱食肉製品の保水性を向上させることが認められた．

豚もも挽肉に試験材料を全て添加する

氷冷しながら十分に混和する

真空フィルムに充填し真空包装するウォーターバスを用い真空包装したまま 75℃30 分
加熱する

加熱後十分に冷まし測定を行う

図 1 ．モデルソーセージ作製方法

図 2 ．酵素分解物等添加モデルソーセージの発色率

図 3 ．酵素分解物等添加モデルソーセージの a ＊値

図 4 ．酵素分解物等添加モデルソーセージの加熱離水率

家畜衛生学雑誌

128

7

第43巻第 3 号（2017）

野生獣肉に関する研究
─ジビエの生理活性機能について─
〇金子桜子・竹田志郎・坂田亮一（麻布大学大学院獣医学研究科）
Key words：gibier, venison, ACE inhibitory activity, antioxidant, bioactive compound【目的】
近年，日本各地で増加が確認されている野生鳥獣による農作物被害は，その額を200億円前後，森林被害は約8,000
ヘクタールと報告されている．被害対策の一環で個体数管理のために捕獲された野生獣を利活用することが地域活性化および地域経済において重要である．シカ肉やイノシシ肉は，畜牛と比べて高タンパク，低脂肪であり，優れた栄養食品である．また適切に放血をされた個体の肉は臭いもなく，味も良いことから，地域振興の有望な資源として期待されている．しかしながら現状は，捕獲された個体のうち食品として流通されているのは一割に留まっている．
一方で，タンパク質由来ペプチドの生理活性機能について探索が行われている．通常，摂取した食品は生体内で消化作用を受けるため，タンパク質は分解され，低分子化し，生体内に吸収される．その中でも高タンパク質な畜産食
品は生理活性を有する様々なペプチドなどの低分子化合物に分解されることが知られている．Saiga ら 1 ）は，豚肉タンパク質由来のペプチドに抗酸化活性能があることを報告している．Ahhmed ら 2 ）は食肉の消化酵素処理により生
じるペプチド混合物に血圧降下作用を有することを，竹田ら 3 ）は抗酸化作用を有することを報告している．そこで
本研究では，これらの生理活性機能について，偶蹄類猪豚亜目のブタとイノシシ，同類反芻亜目のウシとシカでそれぞれ比較検討を行った．

【材料と方法】〈材料〉 供試した豚肉は神奈川県産と岩手県産，牛肉は豪州産と米国産のものを使用した．シカ肉は長野県と広島県から，イノシシ肉については鳥取県のものを使用した．各種サンプルは調理後の体内における消化吸収の条件を考慮
して，挽肉に対して 2 倍量の蒸留水でホモジナイズ後，70℃で30分加熱をした．その後 pH1.8に調整し，胃粘膜由来の消化酵素であるペプシンを添加後37℃で 2 時間加温を行った．pH6.8に調整後，すい臓由来の消化酵素であるトリ
プシンとパンクレアチンをペプシンと同量添加し，再び37℃で 2 時間加温を行った．消化酵素を加えていないものを未処理区，ペプシンのみを添加した分解物をペプシン（pep）処理区，すべての消化酵素を加えた分解物をペプシ
ン・トリプシン・パンクレアチン（pep/try/pan）処理区とし，消化酵素別での比較を行った．なお消化酵素別で得られたペプチド混合物を遠心後，その上清を定量ろ紙にてろ過した．
〈方法〉 1 ）分子量の推定：SDS-PAGE およびゲルろ過 HPLC を用いて各種サンプルの分子量分布の推定を行った．
2 ）抗酸化効果試験：1,1-diphenyl- 2 -picrylhydrazyl（DPPH）ラジカル消去活性を測定し，抗酸化作用の指標である Trolox に換算した． 3 ）血圧上昇抑制試験：アンギオテンシンⅠ変換酵素（ACE）阻害活性で比較した．

【結果】1 ）SDS-PAGE により，消化酵素処理に伴い各動物肉タンパク質の低分子化が確認された（図 1 ）．またゲルろ過
HPLC によって消化酵素処理による低分子量画分の増加が確認されたが，pep/try/pan 処理区においては動物種による明確な違いは確認できなかった． 2 ）DPPH ラジカル消去活性についても pep/try/pan 処理区において活性が認められ，シカ肉に有意に高い活性が認められた（図2A）． 3 ）ACE 阻害活性は pep/try/pan 処理区において活性が認「日本家畜衛生学会第87回大会」要旨集

129

められ，なかでも豚肉と牛肉に比べてイノシシ肉とシカ肉が有意に高いことが確認された（図2B）．
以上の結果から，消化酵素処理を行ったシカ肉に ACE 阻害活性および DPPH ラジカル消去活性を有するペプチドの存在が示唆された．今後，消化酵素分解物の詳細な分析を行い，その成分の同定と高血圧自然発症ラットなどを用いて，これらの成分の効果を検証していく予定である．

【文献】
1 ）Saiga A, Tanabe S, Nishimura T. 2003. Antioxidant activity of peptides obtained from porcine myofibrillar
proteins by protease treatment. Journal of Agricultural and Food Chemistry 51, 3661-3667.
2 ）Ahhmed AM, Muguruma M. 2010. A review of meat protein hydrolysates and hypertension. Meat Science 86,
110-118.
3 ）竹田志郎，久保田大樹，竹之山愼一，河原聡，六車三治男．2015．各種食肉の消化酵素分解物における抗酸化作用の検討─その畜種別差異の比較検討─．日本暖地畜産学会報58，103−108.

図 1 ．各動物肉タンパク質の消化酵素処理における分解パターン

図 2 ．各動物肉タンパク質のペプシン・トリプシン・パンクレアチン処理区における機能性の評価

家畜衛生学雑誌

130

8

第43巻第 3 号（2017）

北海道で発生した高病原性鳥インフルエンザ（H5N6亜型）
発症鶏の病性鑑定成績と他症例との比較〇中薗将友・川島悠登（北海道十勝家畜保健衛生所）
Key words：highly pathogenic avian influenza, pathological and virological comparison, hokkaido【はじめに】
平成28年12月16日，管内で採卵鶏約28万羽を飼養する養鶏場において，高病原性鳥インフルエンザ（以下，本病）を疑う通報があり，発症鶏の病性鑑定成績から，道内初事例となる本病と診断した．今回，本症例の病理及びウイル
ス学的成績について分析するとともに，亜型の異なる国内報告例（以下，過去株）と比較考察したので報告する．

【材料および方法】
検体は571日齢のもみじ 7 羽（死亡鶏 5 羽，衰弱鶏 2 羽）．剖検後，主要臓器の，ヘマトキシリン・エオジン染色及び抗 A 型インフルエンザウイルス抗体を用いた免疫組織化学染色（以下，IHC）を実施した．ウイルス学的検査では，気管及びクロアカスワブの遺伝子検査（リアルタイム PCR 法）及び分離培養（発育鶏卵接種法）並びに判定検査によりウイルスを同定した．また，気管及び腸管からの分離ウイルス株（以下，北海道株）について，ウイルス価
測定及び国内野鳥由来株との遺伝子系統樹解析を実施した．

【結果】
全ての検体で，本病に特徴とされる肉冠や肉垂のチアノーゼ及び顔面や脚の浮腫を認めず，衰弱鶏に神経症状を認めなかった．剖検では 7 羽全羽で脾臓の腫大，死亡鶏 2 羽で十二指腸粘膜の充血，死亡鶏 1 羽で肝臓の退色を認めた．組織所見は全羽で脾臓，肝臓及び腸管の多発性巣状壊死を認め，脳の軽度な壊死性病変や肺の血球貪食像等も認めた．IHC では，病変部の他，組織病変の乏しい膵臓や全身の血管内皮細胞及び血管内にも抗原を確認した．ウイル
ス学的検査では，H5遺伝子及びウイルスの増殖を確認し，判定検査により H5N6亜型ウイルス（以下，H5N6亜型），
強毒株と同定された．また，ウイルス価測定では，腸管のウイルス量は気管の約103倍，遺伝子系統樹解析では，北
海道株は国内野鳥由来株と近縁，clade2.3.4.4C であった．

【過去株との比較】
比較対象は，平成16年の山口県株等，H5N1亜型 2 株及び H5N8亜型 3 株とした．組織病変を重症度と抗原の有無
によりスコアリングしたところ，共通して脾臓のスコアが高い一方，遺伝子亜型の違いにより異なる特徴も認め，北
海道株は肝臓・腸管型，H5N1亜型株は膵臓・脳・肝臓型，H5N8亜型株は脳・肺型と分類された．今回の比較検討
では，clade の違いによる病変の違いは認められなかった．ウイルス接種鶏の死亡時間とウイルス量による病原性の比較では，北海道株は，平成16年の山口県株に比べ病原性は低く，感染鶏は長期間生存し，組織中のウイルス量は多
かった．

【考察】
全身の血管内皮細胞や血管内に抗原を確認したことから，ウイルスは血行性に全身に拡散すると考えられた．血球破壊機能を有する脾臓は血流量が多く，血中のウイルスに障害されやすいと推察された．また，遺伝子亜型の違いでウイルスが定着・障害する臓器や病原性が異なることが示された．北海道株は①消化器系に親和性が強く糞便中のウ

「日本家畜衛生学会第87回大会」要旨集

131

イルス量は多い，②山口県株より病原性が低い，③臓器のウイルス含有量は多いことが特徴であったことから，異常鶏発見の遅れやウイルス拡散の危険性が高く，改めて，本病の封じ込めを目的とした迅速な防疫の重要性が再確認された．今後，感染鶏の品種の違いによる病態の比較についても検討したい．

図 1 ．北海道株及び比較対象とした過去株の詳細

図 2 ．亜型別の組織病変スコア

家畜衛生学雑誌

132

9

第43巻第 3 号（2017）

牛ウイルス性下痢ウイルス（BVDV）ワクチン製造のための増殖効率の高い細胞株の選択○中川健斗 1 ）・池田凡子 1 ）・小川美聡 1 ）・安田奏平 1 ）・宮崎朋美 1 ）・長井

誠 2 ）・白井淳資 1 ）（ 1 ）東京農工大共同獣医・ 2 ）石川県立大学）
Key words：BVDV, cell cloning, vaccine production【目的】
牛ウイルス性下痢・粘膜病は牛の増体重及び乳量の減少，繁殖成績の低下及び牛群の免疫力低下により経済的損失をもたらす疾病であり，わが国を始め世界各地で発生が認められ，わが国では家畜届出伝染病に指定されている．
BVD（Bovine Viral Diarrhea）の予防には主にワクチンが用いられているが，血清を使用する場合には，BVDV（Bovine Viral Diarrhea virus）混入の有無に対する事前の検査が必要になっており，それがワクチンの価格に反映されていることが推察される．従って，BVD ワクチン製造においては，より効率的にワクチン株を増殖させる手段を開発し，安価なワクチンを提供することが求められている．これらの背景より，本研究では，今まで BVDV のワ
クチン製造や実験に使用されてきた細胞を用いて，ワクチン製造技術の向上を目的として，ウイルスが増殖する細胞をクローニングすることにより，ウイルスがより良く増殖するための細胞株を選択するという手法を用い，優れた
BVDV ワクチン製造工程を確立することを最終目的として実験を行った．

【材料と方法】〈材料〉 細胞は牛由来の株化細胞である MDBK 細胞と豚由来の株化細胞である SK-L 細胞を用いた．ウイルスは
BVDV1型の代表株であり細胞病原（CP）株である Nose 株と，BVDV2型の国内標準株の一つであり，非細胞病原（NCP）株でもある KZ-91NCP 株を用いた．
〈方法〉 細胞のクローニングは限界希釈法により行った．また各クローン細胞における BVDV の増殖測定は，CP 株
である Nose 株については感染価（TCID50）測定，NCP 株である KZ-91NCP 株および両株について，リアルタイム
PCR による遺伝子量の測定により行った．

【結果】
MDBK 細胞及び SK-L 細胞に対し，複数回限界希釈法による細胞クローニングを行なった結果，MDBK 細胞由来のクローン細胞を 5 株，SK-L 細胞由来のクローン細胞を 5 株得る事が出来，MDBK 細胞から得られたクローン細胞
はそれぞれ M-CL1，M-CL2，M-CL3，M-CL4，M-CL5と名付け，SK-L 細胞から得られたクローン細胞はそれぞれ
S-CL1，S-CL2，S-CL3，S-CL4，S-CL5と名付けた．
Nose 株を接種した各クローン細胞及び対照コントロールにおけるウイルス増殖性の優劣は，概ねウイルス感染価の測定結果と同じであった．SK-L 由来のクローン細胞における Nose 株の増殖能の優劣は特に感染価測定結果と概ね変わらないものの，リアルタイム PCR の結果では，より大きな差が認められた．
KZ-91NCP 株を接種した MDBK 細胞由来のクローン細胞における増殖性は概ね MDBK 細胞と同等かそれ以上で，Nose 株と比べると Ct 値は全体的に大きく，ウイルス量は少なかった．しかし，Nose 株でウイルスの増殖が良いクローン細胞で，KZ-91NCP 株で同様にウイルスの増殖が良いことはなく，ウイルス株によってクローン細胞における増殖能が異なることが示された（図 1 ）．

「日本家畜衛生学会第87回大会」要旨集

M-CL1

MDBK
クローン細胞

M-CL2

M-CL3

133

M-CL4

M-CL5

S-CL4

S-CL5

7
6
5

2-ΔCt

4
3
2
1
0
Nose

SK-L
クローン細胞

S-CL1

S-CL2

KZ-91NCP

S-CL3

6
5

2-ΔCt

4
3
2
1
0
Nose

KZ-91NCP

2－ΔCt = 1/2ΔCt = 1/2Ct (sample)/2Ct (control)
各クローン細胞におけるウイルスRNA量= 対照コントロールにおけるウイルスRNA量
図 1 ．作出した各クローン細胞における BVDV ウイルス遺伝子量の比率（2−ΔCt）【考察】
本研究において，BVDV の Nose 株に高感受性を示す M-CL1，M-CL3，S-CL2，S-CL3，および KZ-91NCP 株に高感受性を示す M-CL4，M-CL5，S-CL1クローン細胞を作出することに成功した．今回得られたクローン細胞のいずれも，増殖は比較的緩慢であることが難点であるが，添加する血清濃度を高めるなどの処置をした際に，増殖速度に変化があるかどうかなど今後検討する必要があると考えられる．また，長期継代することによって，株化細胞のウイル
スに対する感受性が変化する事があるので，今回得られた高感受性の株を長期継代した時の，BVDV 感受性に対する変化も検討したいと考えている．今後はより優れたワクチン株増殖細胞を得るため，今回作出した BVDV 高感受性のクローン細胞の無血清培地への馴化を行い，無血清でワクチン株に高感受性の細胞を樹立する事を目指す．それにより，より安価なワクチン開発が可能となり，農家へのワクチン供給率向上の一助となる事を期待したい．

135

会員へのおしらせ①「日本家畜衛生学会第86回大会」開催される
日本家畜衛生学会第86回大会が，去る 7 月 8 日に開催されました．本年も，開催場所は東京農工大学で，東京都府中市の農学部 2 号館21番教室で行われました．
一般演題は 5 題の発表があり， 5 名の演者と 4 名の座長の先生方のご協力により，活発な質疑が行われました．続
いて，平成28年度の家畜衛生学雑誌論文賞受賞講演が行われ，受賞された北海道十勝家畜保健衛生所の榊原伸一先生
が「ヨーネ病が牛飼養農場に与える損失の評価」について講演されました．また教育講演では，東京大学大学院農学
生命科学研究科国際動物資源科学研究室の杉浦勝明先生による「狂犬病ワクチン接種の必要性について」の講演が行
われ，わが国にとって将来的に課題となる話題を提供して頂き，参加者による活発な議論が交わされました．
発表会終了後には，東京農工大学武蔵野荘ラウンジにおいて，ささやかなビアパーティーが開催され，多くの方が参加されて会員一同大いに懇親を深めました．

②「日本家畜衛生学会平成29年度通常総会」開催される
第86回大会に先立ち，午後 1 時から平成29年度通常総会が開催されました．以下に総会資料を掲載いたします．

日 本 家 畜 衛 生 学 会
平成29年度年通常総会

次Ⅰ．開 会
Ⅱ．理事長挨拶
Ⅲ．議長選出Ⅳ．議 事1 ）第 1 号議案
2 ）第 2 号議案
3 ）第 3 号議案
Ⅴ．議長解任Ⅵ．閉 会

日時：平成29年 7 月 8 日（土） 13：00〜

場

所：東京農工大学 2 号館21教室

第平成28年度事業報告及び収支決算報告並びに監査報告について
平成29年度事業計画（案）及び収支予算（案）について名誉会員・役員確認【ビアパーティー】
第86回定期大会終了後，東京農工大学武蔵野荘ラウンジにおいて開催

136

第 1 号議案
Ⅰ

平成28年度事業報告・収支決算報告並びに監査報告について

平成28年度事業報告

1 ．通常総会

平成28年 7 月 9 日（土） 於：東京農工大学農学部第 1 講義棟25番教室
・平成27年度事業報告及び収支決算報告並びに監査報告について
・平成28年度事業計画（案）及び収支予算（案）について
2 ．研究発表会
第84回大会

平成28年 7 月 9 日（土） 於：東京農工大学農学部第 1 講義棟25番教室

一般講演 8 題
第85回大会

教育講演（小谷浩治

先生） 1 題約40名参加

平成28年12月 2 日（金）於：Meiji Seika ファルマ㈱本社・講堂

一般講演 7 題

約70名参加3．
「家畜衛生フォーラム2016」平成28年12月 2 日（金） 於：Meiji Seika ファルマ㈱本社講堂
テーマ：「21世紀の家畜の飼養管理及び食の安全性確保に求められるもの」
座

長：白井淳資（農工大教授）宮崎茂（安全研参与）

講演者：佐藤衆介（帝京科学大），伊地知俊一（中央畜産会），窪園薫（鹿児島県），田村

高井伸二（北里大）
参加者：69名（有料：64名，無料： 5 名） マスコミ関係： 1 社
4 ．常務理事会
第1回

平成28年 5 月14日（土） 於：東京農工大学農学部本館第 3 会議室

1 ）平成28年度の主な行事と日程の確定
2 ）第84回大会・通常総会の開催について
3 ）家畜衛生フォーラム2016について
4 ）編集委員会報告5 ）事務局報告6 ）役員の確認
7 ）賛助会員の確認
8 ）常設委員会・委員の確認
9 ）その他
第2回

平成28年 6 月18日（土） 於：東京農工大学農学部本館第 3 会議室

報告事項1 ）平成28年度

総会・第84回研究発表会開催について

2 ）編集委員会報告3 ）事務局報告審議事項
1 ）総会上程議案について
2）「家畜衛生フォーラム2016」開催について
3 ）その他
第3回

平成28年11月 5 日（土）於：東京農工大学農学部本館第 3 会議室

1 ）第 2 回理事会の開催について
2 ）第85回研究発表会について
3 ）家畜衛生フォーラム2016について

豊（酪農学園大），1375 ）編集委員会報告6 ）事務局報告7 ）その他
5 ．理事会
第1回

平成28年 7 月 9 日（土） 於：東京農工大学農学部第 1 講義棟21番教室
総会の上程議案について，2016年度の事業の進行状況，フォーラム2016について，その他

第2回

平成28年12月 2 日（金） 於：Meiji Seika ファルマ㈱本社・会議室
2016年度の事業の進行状況，2016年度日本家畜衛生学会賞，その他

6 ．編集委員会
2016年度（第42巻）の家畜衛生雑誌発行状況
42巻 1 号（2016年 5 月30日発行）
原著 2 編42巻 2 号（2016年 7 月 8 日発行）
総説 1 編

第84回大会要旨 8 編

教育講演要旨 1 編

平成27年度家畜衛生学雑誌論文賞受賞講演要旨
42巻 3 号（2016年12月 2 日発行）
原著 2 編家畜衛生フォーラム要旨 6 編

42巻 4 号（2017年 2 月 8 日発行）
原著 3 編第42巻総目次

第85回大会要旨 7 編

138

平成28年度収支決算報告〈一般会計〉
収入の部
項（単位：円）

目

予算額

決算額

一般会費

900,000

1019,500

賛助会費
広告掲載代
雑収入
購読・団体会員等
前年度繰越金計

260,000
400,000
500,000
25,0002,245,986
4,330,986

250,000
328,320
1,279,179
22,0002,245,986
5,144,985

予算額
2,000,000
70,000200,000

決算額
2,063,404
73,220210,873

50,000123,368

100,000
250,000
1,660,986

79,510221,500
0
1,000,000
3,771,875

差額（決算−予算）

備考
142名分（下記内訳）
119,500 28年度以前分：982,500円
29年度以降分：37,000円△10,000 12件△71,680
779,179 フォーラム共催費（ 2 回分），参加費，別刷代金等△3,0000813,999

支出の部
項
目
印刷費
会議費
事業運営費
通信運送費
事務経費
事務局人件費
予備費
特別会計へ移動計

4,330,986

差額（予算−決算）
備考63,404 家畜衛生雑誌（ 4 号分），雑誌発送代3,220 室料，弁当代等
10,873 講師謝金，アルバイト，フォーラム開催費等
73,368

雑誌発送，案内葉書代，フォーラムポスター送料等△20,490 事務用品，HP 管理費△28,500 1,000円／ 1 時間
△1660,986
1,000,000 寄付金（押田先生）△559,111

一般会計収支差額＝決算収入額5,144,985－決算支出額3,771,875＝1,373,110 （次年度へ繰越）〈特別会計〉
収入の部

項
目
雑収入
前年度繰越金計（単位：円）

予算額
1,000,000
49,381
1,049,381

決算額
1,000,000
49,381
1,049,381

差額（決算−予算）
備考
0 寄付金（押田先生）一般会計より
0
0

予算額

決算額
21,36021,360

差額（予算−決算）
21,36021,360支出の部
項
目
受賞講演者交通費等
計

0
0

備

考

特別会計収支差額＝決算収入額1,049,381－決算支出額21,360＝1,028,021 （次年度へ繰越）

平成28年度監査報告

日本家畜衛生学会会則第10条第 3 項の規定に基づいて，平成28年度の監査を実施した結果，一般会計および特別会
計ともに適正に処理されていることを認めます．
平成28年 7 月 2 日
監

事

柿

市

徳

英

㊞

監

事

平

山

紀

夫

㊞

139

第 2 号議案
Ⅰ

平成29年度事業計画（案）・収支予算（案）について

平成29年度事業計画（案）1 ．通常総会

平成29年 7 月 8 日（土） 於：東京農工大学農学部 2 号館21教室
・平成28年度事業報告及び収支決算報告並びに監査報告について
・平成29年度事業計画（案）及び収支予算（案）について
2 ．研究発表会
第86回大会

平成29年 7 月 8 日（土） 於：東京農工大学農学部 2 号館21教室

第87回大会

平成28年12月15日（金） 於：Meiji Seika ファルマ㈱本社・講堂

3．
「家畜衛生フォーラム2017」平成29年12月15日（金） 於：Meiji Seika ファルマ㈱本社・講堂
テーマ：「抗菌剤に頼らない新しい家畜疾病の制御法─モデルとしての難治性・慢性疾病克服のための研究─」
4.

常務理事会
第1回

平成29年 5 月13日（土） 於：東京農工大学本館第 3 会議室

第2回

平成29年 6 月17日（土） 於：東京農工大学本館第 3 会議室

第3回

平成29年11月11日（予定） 於：東京農工大学本館第 3 会議室

5 ．理事会
平成28年 7 月 8 日（土） 於：東京農工大学農学部 2 号館22教室
6 ．編集計画表

題発行日（予定）

内

容

43− 1

2017年 5 月

総説 1 ，原著 1

43− 2

2017年 7 月

原著 1 ，第86回大会講演要旨

43− 3

2017年12月

原著，フォーラム2017・第87回大会講演要旨

43− 4

2018年 2 月

原著，総目次＊常設委員会（2017〜2018）
編 集 委 員 会 （○は委員長）
髙井

福士

野上

末吉

長井

○宮﨑

学術企画委員会 （○は委員長）○伊藤（博）

杉浦

河合

磯

須藤

HP 管理委員会 （○は委員長）
樋口

廣瀬

○白井

坂田

高橋

篠塚

田中（良）

上塚

140

Ⅱ 平成29年度収支予算（案）〈一般会計〉
収入の部
項（単位：円）

目

平成28年度

平成29年度

差

額

備

一般会費

900,000

900,0000

賛助会費

260,000

250,000△10,000

広告掲載料

400,000

400,000

雑収入

500,000

700,000

購読・団体会員等

25,00025,00002,245,986

1,373,110△872,876

4,330,986

3,648,110△682,876

前年度繰越金計考のべ160名分0
200,000 フォーラム参加費，大会参加費，別刷り代など

支出の部
項

（単位：円）目

平成28度

平成29年度

差

額

備

考

印刷費

2,000,000

2,000,000

会議費

70,00075,000

事業運営費

200,000

250,000

50,000 講師謝金，アルバイト，フォーラム開催費など

通信運送費

50,000150,000

100,000 雑誌発送，案内葉書代，フォーラムポスター送料等

事務経費

100,000

100,000

事務局人件費250,000

290,000

予備費

1,660,986

783,110△877,876

4,330,986

3,648,110△682,876

計0 「家畜衛生学雑誌」 4 冊分発行，雑誌発送代
5,000 室料，旅費等

0

事務用品，HP 管理費，インターネット回線使用料等

40,000 1000×4h×6d×12m ＝288,000円から起算〈特別会計〉
収入の部
項（単位：円）

目

雑収入
前年度繰越金計

平成28年度

平成29年度

差額

1,000,000

049,381

1,028,021

978,640

1,049,381

1,028,021△21,360

備

考

備

考

△1,000,000

支出の部
項

目

平成28年度

平成29年度差額

受賞講演者旅費等

21,360100,000

78,640計

21,360100,000

78,640＊寄付金を押田敏雄基金と命名し，論文賞および学会賞に使用することとする．

141

第 3 号議案

役員名簿：2017〜2018の確認

役員（理事長，副理事長，常務理事，監事，理事）の任期は 2 年間で，現在の体制は2017〜2018年．参考として，現行の役員名簿を示す

名誉会員・理事名簿（2017〜2018）
名誉会員
飯塚

三喜

前東京農工大学

倉田一明

前日本生物科学研究所

△須藤

慶子

群馬県中部農業事務所家畜保健衛生課
北里大学

理事・監事
△磯

日出夫

磯動物病院

△伊藤

博哉

農研機構動物衛生研究部門

△髙井

伸二

岩田

祐之

山口大学

△高橋

欣也 （一財）日本生物科学研究所

△上塚

浩司

茨城大学

竹中

昭雄

FFTC（Taiwan）

△田中

良和

日本獣医生命科学大学

長井誠

石川県立大学

植村

興

△大石

弘司

前四条畷学園大学
農水省動物医薬品検査所

△押田

敏雄

前麻布大学

永幡

肇

酪農学園大学

小尾

岳史

鹿児島大学

△野上

貞雄

前日本大学

＊柿市

徳英

前日本獣医生命科学大学△羽賀清典 （一財）畜産環境整備機構

△河合

一洋

麻布大学

△樋口

豪紀

△菊池

栄作

農水省動物衛生課

＊平山

紀夫

麻布大学

△齋藤

康倫

前ちば NOSAI 連

△廣瀬

和彦

Meiji Seika ファルマ（株）

酪農学園大学酒井健夫

日本獣医師会副会長

福士

秀人

△坂田

亮一

麻布大学

△藤井

武

岐阜大学

迫田

義博

北海道大学

△牧江

弘孝 （公社）日本動物用医薬品協会

佐藤

繁

岩手大学

○宮﨑

茂 （一財）生物科学安全研究所

塩野浩紀

農研機構動物衛生研究部門△守野繁

農水省動物検疫所

△篠塚

康典

麻布大学

山城

富男

前科学飼料研究所◎白井淳資

東京農工大学△山本孝史

前東京農業大学

末吉

益雄

宮崎大学

△杉浦

勝明

東京大学

ゾエティス・ジャパン（株）〔五十音順〕〈変更個所は太字表示〉◎：理事長○：副理事長△：常務理事＊：監事



賛助会員名簿インターベット（株）

コーキン化学（株）

日生研（株）

日本全薬工業（株）

Meiji Seika ファルマ（株）（株）科学飼料研究所

住化エンバイロメンタルサイエンス（株）

ゾエティス・ジャパン（株）

共立製薬（株）

ベーリンガーインゲルハイム・ベトメディカジャパン（株）

バイエル薬品（株）

田村製薬（株）

日本ハム（株）

〔2017. 4 現在〕

142

書

評

動物の飼育管理鎌田壽彦・佐藤幹・祐森誠司・安江健編，文永堂出版，定価4,752円（税込み）「動物の飼育管理」と言う書籍が刊行されました．これは名著の「家畜の管理」を踏襲し，広範なコンセプトで文永堂出版から新刊として発行されたものです．
獣医学，畜産学（動物応用科学）あるいは農学関係の専門家が状況確認のために，さらには動物・家畜関係の勉強を始めた諸君が入門書として手に取るには格好の書と言えます．
本の構成として，全体は14の章で組立てられています．総論，環境管理，行動，福祉，衛生，排せつ物の処理・環境保全，各家畜（牛，豚，鶏，馬，山羊・めん羊，伴侶動物，展示動物，実験動物）の管理について，写真や図表を多用し，分かりやすく解説・記述しています．執筆された先生方は斯界の権威と言える錚々たる面々で，内容的にも新しい事象について取組まれている様子が伝わる書と言えます．
昨今は，動物を使っての実験や実習が倫理の立場から難しくなってきましたが，多くの動物たちの将来を考えれば，必要最低限な範囲での動物飼育は不可欠です．ここで，飼育管理の方法を誤っては期待されるデータはもちろん，正確なデータを得ることも出来ずに，貴重な動物の命さえも無駄にしてしまうことにもなりかねません．
本書は飼育管理の考え方，動物の行動様式，畜舎の環境制御，動物の衛生，各家畜の管理，排せつ物の処理管理，
さらには福祉にも触れ，まさに痒い所に手が届きそうな書として，高く評価されるものと考えられます．
書評を書いている私が獣医学部の学生だった頃には「飼育管理」という科目がなく，物足りなさを感じていました．その当時に本書のような書物があれば，勉強の仕方も変わっていたような気がします．
（麻布大学名誉教授／東京農業大学客員教授

押田敏雄）

143

動物用ワクチンとバイオ医薬品
小沼─新たな潮流─操，犬丸茂樹，濵岡隆文，平山紀夫

編，文永堂出版，定価9,720円（税込み）

本書は2011年に発刊された「動物用ワクチン─その理論と実際─」の姉妹版として刊行された．
ヒト及び動物の感染症対策のために臨床現場では抗菌剤による治療が行われているが，新しい抗菌剤の開発数は減少しており，耐性菌の増加が現在国際社会で大きな問題になっている．2015年 5月の WHO の世界保健総会で，加盟各国は国家行動計画の策定が求められ，日本政府は2016年 4 月に薬剤耐性アクションプラン（2016- 2020年）を発表した．プラン達成の戦略の一つとして，畜水産・獣医療分野用ワクチンの適切な使用ならびにワクチン等新たな予防法の研究開発の推進が掲げられている．このような動物用医薬品における国内外の動きの中，この時機の本書の発刊は，非常にタイムリーであると思われる．
本書は（ 1 ）総論，
（ 2 ）各論，（ 3 ）将来展望および（ 4 ）動物用医薬品開発のためのガイドラインと承認の 4 章から構成されている．第 1 章では，動物用ワクチンの現状，ワクチン製造における留意点と課題，およびワクチネーションプログラムのほか，前書にはなかった免疫チェックポイント阻害薬等の抗体医薬，インターフェロン製剤等のバイオ医薬品，プロバイオテックスおよび
海外の動物用ワクチンおよび動物用医薬品の最新の法規制について概説されている．第 2 章の各論では，前書の出版後に新たに上市された23の新規承認ワクチンの詳細な解説が掲載されているほか，前書にすでに掲載されたワクチンについては，
動物種別および症状別に簡潔に表にまとめられており，日本で入手可能なほとんど全てのワクチンについての情報を得ることができる．第 3 章の将来展望では，新しい概念及び手法を用いた新規ワクチンの開発研究の参考となる役立
つ情報ならびにワクチンアジュバントとワクチン投与法に関する研究開発の現状と今後の方向性について記載されている．最後に第 4 章では，近年あらたに注目されている動物用再生医療製品を含めた動物用医薬品の研究開発および承認に関わる法的規制関係について記載されている．これらに加えて，通常はあまり知ることができないワクチンにまつわる豆知識が記載されたコラムが掲載されており，非常に興味深く拝読させていただいた．
私の知る限り，動物用ワクチンおよびバイオ医薬品の基礎から応用までにわたって，広く，深くかつ体系的にまとめられた教科書は姉妹版の前書を除き他にはなく，本書は唯一無二の動物用ワクチン学の教科書であると思われる．
また本書は，別名 All about Animal Vaccines and Biomedicines（オール・アバウト・動物用ワクチン＆バイオ医薬品）と名付けても良いと思われる．以上のことから，本書は，動物用ワクチンおよびバイオ医薬品の創薬開発を行っている研究者，製造を行っている製造業者，ユーザーである臨床獣医師ならびに動物用ワクチンおよび感染症等について学んでいる学生必携の教科書であると思われる．
（農研機構

動物衛生研究部門

生物学的製剤製造グループ

伊藤博哉）

144

「家畜衛生学雑誌」投稿規程
Key words（キーワード）をつける .

1 ．本誌には原則として，家畜衛生に関する総説，原著論文，短報を掲載する．なお，原稿は編集委員会事

6 ）英語論文および和文論文の英文 Summary は，務局へ電子メール添付（PDF ファイル）で提出す

投稿前にしかるべき校閲を受けること．

る．印刷原稿 3 部（うち 2 部は鮮明なコピーでもよ

7 ）原著論文で刷り上り 8 頁（30文字×25行＝750い）の書留郵便あるいはレターパックによる提出も文字で，図表を含めて16枚程度）までは，印刷可とする．

費を本学会で負担する．ただし，超過ページに

2 ．投稿にあたり，論文掲載までの対応を行う連絡著者

ついては，その費用を著者の負担とする．な（コレスポンディングオーサー）は，投稿原稿が他

お，総説についてはこの限りではない．また，誌にすでに掲載あるいは投稿中ではないこと，著者

カラーや特殊な用紙での印刷は，その費用を著者の負担とする．

全員が投稿論文の内容及び掲載に同意していることを記載した文書（カバーレター）を提出すること．

8 ）使用する動植物・微生物などの学名はイタリッ
ク体で表記する．

3 ．筆頭著者あるいは連絡著者は本学会会員であるこ9 ）度量衡の単位，略記は SI 単位系を基本とし，と．

以下の例に従う．

4 ．掲載論文は原著論文，短報，総説（刷り上がり 4 頁
以下のミニレビューを含む），技術資料とする．

［例］m，cm，mm，µm，nm，kg，g，mg，µg，ng，L，mL，µL，nL M，mM，µM，％，cm2，
m3，

5 ．全ての投稿論文は編集委員及び複数の審査員が審査し，編集委員長が掲載の採否を決定する．

hr，min，sec，℃，pH，Pa（血圧は mmHg，

6 ．投稿論文は和文または英文とし，次の指示（記述順序など）に従うこと．

生体内圧力は Torr）など．
10）表および図（写真を含む）は用紙 1 枚に 1 つと

1 ）論文原稿は別に定める注意に従って作成するこ

し，個々に番号と表題を記入し，投稿原稿の最と．用紙サイズは A4とし，和文の場合は30字後に添付する．

で25行程度，英文の場合はダブルスペース（7011）引用文献は下記の例にならって，アルファベッ

字で25行程度）とする．原稿本文の左側に行番

ト順にならべ，本文中では 1 ，3 − 6 ） のように上号を表記すること．

付き（superscript）で記入する．ただし，著者

2 ）和文の場合も句読点は，「 ，」，「 ．」を用いること．

名 は 3 名 ま で と し， 4 人 目 以 降 は 省 略 し，「ら」，「et al」で示す．

3 ）論文原稿は第 1 ページに表題，著者名，所属機［例］

関名およびその所在地を和文と英文で記載する

雑誌とともに，連絡著者とその電子メールアドレスを記載する．また，和文の場合は20字，英文の場合は40字以内の略表題（running head）を記載する．
4 ）原著論文の構成は原則として，Summary（本文が和文の場合も英語），序文（Introduction），
材料および方法（Materials and Methods），結果（Results）， 考 察（Discussion），引用文献（References），要旨（本文が和文であっても英文であっても，和文の要旨）とする．ただし，謝辞は，別項目を設けず，本文の最後に 1 行の空白をとった後に記載する．
5 ）英文 Summary は250語以内，和文要旨は600字以内とし，それぞれの最後の行に 5 つ以内の1 ）内田孝治・藤井武・高山公一ら（1991）ブロ
イラーにおける実験的大腸菌症に対するラノ
フロキサシンの治療効果および用量設定試
験．家畜衛生研究会報．33，19-24．
2 ）Oshida, T., Fukuyasu, T., Kohzaki, K., et al.
(1993) A new treatment system for animal
waste water using microorganism, soil andvagetation. Asian-Australasian Journal ofAnimal Sciences. 6, 205-209.
電子ジャーナル3 ）Wilson, D.J., Rood, K.A., Bunnel, J., et al. (2014)
Johne’s disease, mycoplasma and BVD in
Utah-Bulk tank milk testing and comparison

145

英文では200字以内の和文，和文では100語以内の英to previous regional prevalence andindividual herd results over time. Journal of
Veterinary Science and Technology. 5:182.
doi: 10.4172/2157-7579.1000182.

文をつける．原稿の長さは刷り上りで， 2 頁以内とする，その他の規定については原著の場合に準じる．
8 ．総説及び技術資料の構成については特に規定を設けないが，引用論文の記載法は原著論文の場合に準じ単行書ることとする．

4 ）伊予部志津子（1980）薬剤耐性因子（R）の9 ．別刷りは50部に限り無料とする．追加分についてその費用を著者の負担とする．

検出法，薬剤感受性測定法．22-48頁．三橋

10．本誌の発行は原則として，年 4 回（ 4 月， 7 月，10

進編，講談社，東京．

月および 1 月）とする．

5 ）McDonrd, P. (1976) Trends in silage making,Microbiology in Agriculture, Fisheries and  

11．編集委員会事務局を下記に置く．
〒252−0132

Food. pp109-121. Shinner, F.A and Carr, J.G.

神奈川県相模原市緑区橋本台 3 − 7 −11

eds. Acad. Press, London, NY.

（一財）生物科学安全研究所内
12）図はグラフィックソフトウェアで作成すること

日本家畜衛生学会編集委員会

が望ましい．手書きで作成する場合は，そのまTel

ま製版できるよう，白色紙または青色方眼紙にFax 042（762）7979

タイプやレタリングなどにより作成する．
13）投稿原稿が受理（掲載決定）されたならば，著

042（762）2775

E-mail：jjah@riasbt.or.jp
12．本誌に掲載された論文の著作権は，日本家畜衛生学

者 は す み や か に 最 終 原 稿 の Microsoft Word

会に帰属する．

ファイルを電子メールで提出すること．図については，グラフィックソフトウェアで作成した

附則ファイルも併せて提出する．

本規程は，2015年 1 月 1 日以降の投稿論文に適用する．

7 ．短報は，その内容を成績および考察（Results and本規程は，2015年 7 月12日以降の投稿論文に適用する．

Discussion） と し て ま と め， 要 旨（Summary） は

本規程は，2016年11月 5 日以降の投稿論文に適用する．

論文原稿を作成する上での注意
1 ）執筆にあたり，投稿規定をもう一度，熟読すること．
2 ）各行の行末での強制改行をしないこと．
3 ）投稿論文が和文，英文のいずれの場合も数字，欧文6 ）図は，Microsoft PowerPoint，Excel，Adobe Photoshop，Illustrator 等のソフトウェアで作成するのが望ましい．

は全て 1 バイト文字（いわゆる半角）で入力するこ

7 ）論文受理後の最終原稿は，Microsoft Word（あるいと．ただし和文ではかっこ（ ）は 2 バイト文字

は Microsoft Word 互換ソフトウェア）ファイルと（いわゆる全角）とする．
「µ」（マイクロ）は半角して提出する．ただし，Microsoft Word 互換ソフ

立体で入力すること．

トウェアを使用した場合は，Microsoft Word で正4 ）投稿論文原稿は PDF ファイルとして事務局まで電しく表示されることを確認すること．グラフィック

子メールで提出すること．その際には必ずパスワー

ソフトウェアで作成した図データは，jpeg，tiff 等

ドロックし，パスワードは別メールで事務局まで連の汎用フォーマットで提出する．

絡すること．特段の理由がある場合は，印刷原稿 3部（うち 2 部は鮮明なコピーでも可）を事務局まで
書留郵便あるいはレターパックで送付すること．
5 ）写真は印刷に耐えうる鮮明なものを使用すること．

日本家畜衛生学会
編集委員会

146

日本家畜衛生学会会則
（総
第１条

則）

第８条

理事長は常務理事の互選により選出する．

本 学会は，日本家畜衛生学会（英文表記：

２．理事長は学会を代表し，会務を総理する．

The Japanese Society of Animal Hygiene）

３．理事長は常務理事の中から庶務・会計を担当する事務局担当者を委嘱する．

（以下，「学会」とする．
）と称する．
第２条
第３条

第４条

４．理事長は第4条の事業を達成するため常設の学会の事務局は，原則として理事長の所属する機関におく．

学術企画委員会，編集委員会を設置する．

学会は，家畜衛生とその関連領域における学（1）委員会の委員は原則として理事長が常務

究の向上を図り，畜産の進歩発展に寄与する

理事の中から指名する．但し，常務理事ことを目的とする．

会が必要と認めた場合には会員の中から指名することが出来る．

学会は，前条の目的を達成するために，次の（2）委員会の委員長は，委員の互選により選事業を行う．

出し，理事長が指名する．

（1）研究発表会及び学術講演会等の開催（2）学会誌「家畜衛生学雑誌」の発行

第９条

副理事長は常務理事の互選により選出し，理事長を補佐する．

（3）学会の発展に貢献した者への表彰（4）その他学会の目的達成のために必要な事業第１０条

常務理事および監事は理事の互選により選出
し，総会において承認を受ける．
２．常務理事は常務理事会を組織し，理事長を補（会員および会費）
第５条

佐し，学会の運営に関して第４条の事項を行う．

学会の会員は正会員，学生会員，賛助会員お３．監事は理事長を補佐し，会務と会計を監査する．

よび名誉会員より構成する．
（1）正会員：学会の趣旨に賛同し，会費を納

第１１条

理 事は理事長が委嘱し，総会の承認を受ける．
２．理事は理事会を組織し，理事長を補佐し，学入した個人会の運営に関して第４条の事項を行う．

（2）学生会員：学会の趣旨に賛同し，会費を納入した学生，大学院生．た

第１２条

役員の任期は２年とし，再任を妨げない．
２．役員の補欠又は増員は，第８条第１項，第９だし会員期間は単年度とす

条，第10条若しくは第11条の規定により選任る．

し，その任期は前任者又は現任者の残任期間（3）賛助会員：学会の趣旨に賛同し，その事業を援助するため所定の会費とする．ただし，常務理事会が会務の運営にを納入した個人又は団体支障がないと認めたときは，この限りでない．

（4）名誉会員：学会に永年功労があり，総会

第１３条

第６条

常務理事会および理事会は理事長が随時招集する．

において承認された個人
会
 費は正会員にあっては年額5,000円，学生会員にあっては年額2,000円，賛助会員にあって（総は１口年額10,000円とし，毎年７月末までに

第１４条

会）
通常総会は毎年１回，理事長が招集する．

納入するものとする．

第１５条

理事長が必要と認めた場合は，臨時総会を招集することができる．

第１６条（役員および役員会）
第７条

総会では次の事項を議決する．

学会に次の役員をおく．

（1）事業計画および事業報告に関する事項（1）理 事 長

１名（2）予算および決算に関する事項（2）副理事長

１名（3）会則の改正に関する事項（3）常務理事若干名（4）その他，学会の目的を達成するために必

（4）監

事

２名

（5）理

事

35〜45名

要な事項

147

（会

計）

第１７条

（3）こ の会則は平成15年7月5日に改正し，

学会の経費は会費その他の収入をもって，これにあてる．

第１８条

会計年度は４月１日より，翌年３月31日までとする．

同日に施行する．
（4）こ の会則は平成16年7月3日に改正し，同日に施行する．
（5）こ の会則は平成17年7月2日に改正し，同日に施行する．

附則（6）こ の会則は平成21年7月4日に改正し，（1）この会則は平成14年7月6日より施行する．
（2）学会設立時の役員は家畜衛生研究会（以下「研究会」と略す）の役員が暫定的に同日に施行する．
（7）こ の会則は平成23年7月2日に改正し，同日に施行する．

就任することとし，理事長は研究会の会（8）こ の会則は平成27年7月11日に改正し，長が，常務理事は研究会の幹事が，理事同日に施行する．ただし，平成27年度のは研究会の評議員が，監事は研究会の監

会費は4,000円とし，平成28年度から会事がそれぞれ就任する．

費を5,000円とする．

148

協賛団体・企業一覧
日本家畜衛生学会は以下の各団体・企業からの協賛を受けています．ここに記して謝意を表します．（五十音順）（株）インターベット（株）科学飼料研究所

共立製薬（株）

コーキン化学（株）

住化エンバイロメンタルサイエンス（株）

ゾエティス・ジャパン（株）

田村製薬（株）日本イーライリリー（株）（一般財団法人）日本生物科学研究所

日本全薬工業（株）

日本ハム（株）

バイエル薬品（株）

Meiji Seika ファルマ（株）

日本家畜衛生学会入会のすすめ
日本家畜衛生学会は家畜衛生とその関連領域における学術の交流を図り、畜産の進歩発展に寄与することを目的とした学会です。
＜主な活動＞
・ 年２回（７月、12 月）の研究発表会
・ 年１回のフォーラム（12 月ごろ）の開催
これまでの主なテーマ「狂犬病」、「口蹄疫」、「鳥インフルエンザ」、「BSE」、「家畜ふん尿」など
・ 年４冊の機関誌「家畜衛生学雑誌」の発行
・ 学会賞の授与
年会費5,000円（但し、学生は2,000円）
御請求戴ければ、見本誌を贈呈します!!

家畜衛生学雑誌

The Japanese Society of Animal Hygiene
日 本 家 畜 衛 生 学 会〒183-8509

東京都府中市幸町3-5-8
東京農工大学農学部獣医伝染病学講座内TEL ／ FAX：042－367－5780
http://www.kachiku-eisei.jp/
e-mail：k-eisei@cc.tuat.ac.jp
Hpで活動内容がご覧になれます!!（日本家畜衛生で検索）

第43巻第 3 号

平成29年 12月15日発行（会員配布）
発

行

印 刷 所

日本家畜衛生学会
理事長 白井淳資〒183－8509 東京都府中市幸町 3 − 5 − 8
東京農工大学農学部獣医伝染病学講座内☎／ FAX：042−367−5780
ホームページ：http://www.kachiku-eisei.jp/
e-mail：k-eisei@cc.tuat.ac.jp
振替口座：00240－ 3 －43171
明誠企画株式会社〒208－0022 東京都武蔵村山市榎 2 － 25 － 5☎ 042−567−6233 FAX 042−567−6230

平成日本家畜衛生学会

年

月

日

御中

入 会 申 込 書
貴会への入会を下記の通り申込ます．

記
フリガナ
氏

名：

所属名称：
部

署：

役

職

所属住所：〒TEL：

FAX：

e-mail：

自宅住所：〒

TEL：
e-mail：会員の種類 ： ○正 会 員 ・ ○学生会員 ・ ○名誉会員
会報送付先 ： ○自宅 ・ ○勤 務 先○内にチェックを付して下さい．

１．入会申込書は必要事項をすべて正確に記入し，郵便またはFAX（042－367－5780）にてご送付下さい．
２．年会費は個人会員 5,000円，賛助会員 10,000円／口（１口以上）を郵便振替口座（加入者名：日本家畜衛生学会，No. 00240－3－43171）へお振込下さい．
３．申込先は〠183－8509

東京都府中市幸町３－５－８

日本家畜衛生学会事務局宛

東京農工大学農学部獣医伝染病学講座内

TEL／FAX：042－367－5780

４．ホームページからも申し込めます：http://www.kachiku-eisei.jp/

平成
日本家畜衛生学会

年

月

御中

変
変更手続きを下記の通り致します．

更

届

記

フリガナ
○

氏

名：

○

所属名称：

○

部

○

所属住所：〒

署：

○

役

TEL：

○

自宅住所：〒

○

TEL：

職

FAX：

e-mail：e-mail：○会員の種類：○正会員 ・ ○学生会員 ・ ○名誉会員○会報送付先：○自宅 ・ ○勤務先全てご記入の上，上記変更部位の○内にチェックを付して下さい．

１．変更届出書は必要事項を正確に記入し，郵便またはFAX（042－367－5935）にてご送付下さい．
２．届け先は〠183－8509

東京都府中市幸町３－５－８

日本家畜衛生学会事務局宛

東京農工大学農学部獣医伝染病学講座内

TEL／FAX：042－367－5935（042－367－5780）

３．ホームページからも手続きできます：http://www.kachiku-eisei.jp/

日