バイオ医薬品アプリケーションインデックス

バイオ医薬品の開発および QA/QC 分野におけるアジレントのアプリケーション

s

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P

L

A

Y

R

P

L

A

Y

R

Q

S

M

A

Y

R

Q

S

M N N

F

S

M N N

F

G

H

N N

F

G

H

開発の効率向上と品質の確保
バイオ医薬品の発見から開発にスムーズに移行するには、

予想外 の事態 の発生をいかに少なく抑えるかが重要です。
そのためには開発プロセス全体を通して生体分子 の正確な状態を高い信頼性で理解できることが大切です。
アジレントのソリューションは、徹底的なバイオ医薬品の分析と品質管理を確実かつ簡単に行える、安定性と信頼性の高い

分析メソッドを提供します。

本書 の内容このアプリケーション集では、バイオ医薬品 の 特性解析から、モニタリング、製造関連 の分析例まで、さまざまな文献と関連する分析装置について紹介します。文献は、www.agilent.com/chem/jp の「ライブラリ」−「資料ライブラリ」で、資料番号で検索、ダウンロードが可能です。

2

目次

09.1

47.1

145,1

144,9

71.3

145,2

00

86.3

7

×10
3.5

144,7
3
2

Co

ts
un

2.5

00
145,1
u)
00
145,0 mass (am00ted
144,9 convolu
De

1.5

1

4,800

14

00

0.5

00

144,6

144,7

145,4

質量分析法によるタンパク質の分析

4

凝集および断片の分析

5

電荷変異体の分析

6

グリコフォームおよびグリカンの分析

7

翻訳後修飾および分解生成物の分析

8
9

+

+

0

5,300

00 14

145,2

s

s

s

s

L

A

Y

R

P

L

A

Y

R

Q

S

M

A

Y

R

Q

S

M N N

F

ペプチドマッピング

S

M N N

F

G

N N

F

G H S Y
バイオシミラー

10

2D-LC、ハイスループット LC、ワークフローの自動化

11

サンプル前処理の自動化

12

宿主細胞および処理関連の不純物

13滴定およびタンパク質の定量

14

原材料および培地の分析

15

H

S

H

G

F

E

D

C

B

A

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

P

e

hod

タンパク質のキャピラリー電気泳動およびマイクロフルイディクス電気泳動

de
no
A

Cat

=

16

核酸の分析

17

コンプライアンス、
QC、QbD18

アジレントの装置とソリューション

19

3

09.1

47.1

145,1

144,9

71.3

145,2

3
2.5

2

un
Co

ts

質量分析法によるタンパク質の分析

86.3

144,7

7

×10
3.5

1.5

1

インタクトタンパク質の質量、主なグリコフォーム、その他の翻訳後修飾 (PTM) の確

0

00

144,6

00

144,7

00

144,8

+

0.5

00
145,1
00
mu)
145,0 mass (a00ted
144,9 convolu
De認は、治療用タンパク質の特性解析とその効能および安定性を理解するための重要な測定です。質量分析法は、高い質量真度、特異性、および感度を 1 台のプラット+フォームで提供し、これらのすべての測定を実行できる主要なツールです。

次 の アプリケ ー ションノートで は、Accurate-Mass 飛 行 時 間 型 (TOF) LC/MS および Accurate-Mass 四重極飛行時間型 (Q-TOF) LC/MS プラットフォームを 用 いた、 インタクトタンパク質 の 質量と一般的 な PTM のルーチン測定用にアジレントが開発した非常に真度の高いソリューションについて詳細に説明しています。

文献は、www.agilent.com/chem/jp の 「ライブラリ」−「資料ライブラリ」で、資料番号で検索可能です。

• CE-ESI-MS を用いたモノクローナル 抗体の 分析

Characterization of Monoclonal Antibodies
Using Capillaray Electrophoresis-Electrospray
Ionization-Mass Spectrometry (CE-ESI-MS).
5991-5212EN• Agilent 1290 Infinity LC システムと Agilent
6530 Accurate-Mass Q-TOF を用いた
モノクローナル 抗体 (mAb) の 分析
Analysis of Monoclonal Antibody (mAb) Using
Agilent 1290 Infinity LC System Coupled toAgilent 6530 Accurate-Mass Quadrupole
Time-of-Flight.
5991-4266EN.
• MassHunter Easy Access ソフトウェアを用いたタンパク質製剤 のロット間純度
分析法

5991-3521JAJP• Agilent 6550 Q-TOF 質量分析装置を 使用したインタクトタンパク質の 分析

5991-2116JAJP• HPLC および Q-TOF 質量分析装置を用いたポリエチレングリコール (PEG)および mono- および di-PEG 化された治療用タンパク質の 分析

Analysis of Polyethylene Glycol (PEG) and a
Mono and Di-PEGylated Therapeutic Protein
Using HPLC and Q-TOF Mass Spectrometry.
5991-1509EN• Agilent 1260 Infinity HPLC-Chip/MS システム
および Accurate-Mass 6520 Q-TOF LC/MSを用いたモノクローナル 抗体 の酸化部位の同定

Identification of Oxidation Sites on a
Monoclonal Antibody Using an Agilent 1260
Infinity HPLC-Chip/MS System Coupled to an
Accurate-Mass 6520 Q-TOF LC/MS.
5990-8768EN• Agilent 1260 Infinity HPLC-Chip/MS システム
および Accurate-Mass 6520 Q-TOF LC/MSを用いたモノクローナル 抗体 の酸化部位の定量

Quantitation of Oxidation Sites on a
Monoclonal Antibody Using an Agilent 1260
Infinity HPLC-Chip/MS System Coupled to an
Accurate-Mass 6520 Q-TOF LC/MS.
5990-8769EN• Agilent HPLC-Chip Q-TOF LC/MS システムを用いた製造 から精製までのバクテリオ
ファージ由来 の 抗 ブドウ球菌タンパク質(P128) の 分析
Characterization of Bacteriophage Derived
Anti-Staphylococcal Protein (P128) from
Production to Purification Using Agilent HPLCChip Q-TOF
LC/MS System.
5990-7952

注 : 資料番号 (各資料名 のあとの 数字) が EN で終わっているものは英文の 資料です。

4• Agilent HPLC-Chip Accurate-Mass LC/MS を用いたモノクローナル抗体 の 特性解析

Primary Characterization of a Monoclonal
Antibody Using Agilent HPLC-Chip
Accurate-Mass LC/MS.
5990-3445EN

00

45,3

00 1

145,2

00

145,4

凝集および断片の分析
または処理条件によって形成された凝集は、
バイオ医薬品の不適切な製造、保管、

安全性や効能に重要な影響を与えることがあります。小さい凝集が免疫反応をまた、引き起こす可能性があること、投与時に粒子が有害事象をもたらす可能性があることの 2 つの理由により、凝集の存在は望ましくありません。

次のアプリケーションノートでは、電気泳動、高速液体クロマトグラフシステム、サイズ排除
カラムを用いたタンパク質のサイズのルーチン測定および凝集の定量用にアジレントが開発した信頼性の高いソリューションについて詳細に説明しています。
文献は、www.agilent.com/chem/jp の「ライブラリ」−「資料ライブラリ」で、資料番号で検索可能です。

• 高性能光散乱検出器と Agilent 1260 Infinity
マルチ検出器 Bio-SEC ソリューションを用• モノクローナル 抗体 の高分解能 の 分離
および 定量 の SEC メソッドの開発と部分いたタンパク質の 分子量とサイズの決定

的 バリデーション

Determination of Protein Molecular Weightand Size Using the Agilent 1260 Infinity MultiDetector Bio-SEC Solution with Advanced Light
Scattering Detection.
5991-3955EN

Development and Partial Validation of a SEC
Method for High-Resolution Separation and
Quantification of Monoclonal Antibodies.
5991-0835EN• 高性能光散乱検出器と Agilent 1260 Infinity
マルチ検出器 Bio-SEC ソリューションを用いたモノクローナル 抗体 の凝集分析

Detailed Aggregation Characterizationof Monoclonal Antibodies Using the Agilent
1260 Infinity Multi-Detector Bio-SEC Solution
with Advanced Light Scattering Detection.
5991-3954EN• Agilent 1260 Infinity マルチ検出器 GPC/SEC
システム

Agilent 1260 Infinity Multi-Detector GPC/SEC
System.
5991-2884EN• Agilent Bio SEC-3 カラムの正しいキャリブ
レーションの 選び 方

Choosing the Right Calibration for the Agilent
Bio SEC-3 Column.
5991-2463EN• Agilent Bio SEC カラムによる生体分子の特性分析のための最適なポアサイズ

Optimum Pore Size for Characterizing
Biomolecules with Agilent Bio SEC Columns.
5990-9894EN• Agilent ZORBAX Rapid Resolution HighDefinition (RRHD) 300SB-C8 カラムを用いた
還元 モノクローナル 抗体 の高速 UHPLC 分析
5990-9631JAJP• 効率的 なタンパク質サイズ分離 のための最適 なパラメータの決定

Defining the Optimum Parameters for EfficientSize Separations of Proteins.
5990-8895EN• Agilent Bio SEC カラムを用いた SEC による
モノクローナル 抗体 およびダイマーの高速

分離

Fast Separation of Monoclonal Antibody and
Dimer by SEC with Agilent Bio SEC.
5990-8613EN• Agilent BioSEC カラムと Agilent 1260 Infinity
バイオイナートクォータナリ LC を用いた
サイズ 排除クロマトグラフィーによるモノクローナル 抗体 の 分析

5990-6414JAJP• AgilentBio SEC-3 を用いた 遺伝子組み 換えヒトエリスロポエチンタンパク質 (rEPO)の 分離によるタンパク質分子量 の 精密 な
決定Precise Determination of Protein Molecular
Weight Using the Separation of Recombinant
Human Erythropoietin (rEPO) Using AgilentBio
SEC-3.
5990-9544EN• SEC の 多重検出器によるタンパク質凝集分析へのアプローチ

Multiple Detector Approaches to Protein
Aggregation by SEC.
5991-1400EN

注 : 資料番号 (各資料名 のあとの 数字) が EN で終わっているものは英文の 資料です。

5電荷変異体 の分析

s

s

s

s

タンパク質は、バイオ医薬品の製造および精製プロセスで電荷均一性が変化することがあり、これらの変化は、安定性だけではなく活性にも影響を与えることがあります。さらに、有害な免疫反応を引き起こすこともあります。開発時の電荷変異体の同定、また製造全体にわたる電荷変異体のモニタリングは、安全で有効な医薬品の製造に非常に重要です。
アジレントでは、アジレントの電気泳動プラットフォーム、バイオクロマトグラフシステム、および
イオン交換カラムを用いた電荷変異体の同定およびモニタリングのための堅牢なソリューションを開発してきました。

文献は、www.agilent.com/chem/jp の 「ライブラリ」−「資料ライブラリ」で、資料番号で検索可能です。

• ネイティブモノクローナル 抗体 の 分離と• 高 い 性能 の証拠: アニオン交換クロマト

電荷変異体 の同定

グラフィーによるタンパク質の 分析

Separation of Native Monoclonal Antibodies
and Identification of Charge Variants.
5991-4969EN

Proof of Performance: Analysis of Proteins byAnion Exchange Chromatography.
5990-9614EN• モノクローナル 抗体 の電荷変異体分析 のサイクル時間 の 短縮 – Agilent 1200 Infinity
シリーズ Quick-Change バイオイナート
2 ポジション/10 ポートバルブを用いた
交互 カラム再生

Reducing Cycle Time for Charge Variant
Analysis of Monoclonal Antibodies –Alternating Column Regeneration
Using an Agilent 1200 Infinity Series QuickChange Bio-inert 2-position/10-port Valve.
5991-4722EN• オンライン pH および導電率モニタリング
によって Buffer Advisor で生成 された pH
グラジエントを用いた mAb 電荷変異体
分析でのシンプルメソッドの 最適化

Simple Method Optimization in mAb Charge
Variant Analysis using pH Gradients Generated
from Buffer Advisor with Online pH and
Conductivity Monitoring.
5991-3365EN• Agilent Bio MAb 5 µm カラムを用いた
インタクトおよび C 末端分解 IgG1 の 分析
Analysis of Intact and C-terminal Digested IgG1
on an Agilent Bio MAb 5 µm Column.
5991-0895EN• pH グラジエント溶出によるモノクローナ
ル 抗体電荷変異体 の 分離 の向上

5990-9629JAJP• Agilent 弱カチオン交換 カラムを用いた
分離 の高速化

Faster Separations Using Agilent Weak Cation
Exchange Columns.
5990-9931EN• pH グラジエントカチオン交換クロマト
グラフィーを用いたモノクローナル 抗体内の電荷不均一性 の高分離能分析 - Agilent
1260 Infinity バイオイナートクォータナリ LC
システムと Agilent Bio カラム
High-resolution Analysis of Charge
Heterogeneity in Monoclonal Antibodies Using
pH-gradient Cation Exchange Chromatography- Agilent 1260 Infinity Bio-inert Quaternary LC
System with Agilent Bio Columns.
5991-1407EN• Agilent Buffer Advisor ソフトウェアで計算された複合緩衝液システムを用いた

pH グラジエントによるタンパク質分離
Protein Separation with pH Gradients Using
Composite Buffer Systems Calculated by the
Agilent Buffer Advisor Software.
5991-1408EN• Agilent 7100 キャピラリー電気泳動システ
ムを用いたキャピラリー 等電点によるモノクローナル 抗体 の電荷不均一性分析

Monoclonal Antibody Charge Heterogeneity
Analysis by Capillary Isoelectric Focusing on the
Agilent 7100 Capillary Electrophoresis System.
5991-1142EN

注 : 資料番号 (各資料名 のあとの 数字) が EN で終わっているものは英文の 資料です。

6• Agilent Buffer Advisor を用いたカチオン
交換クロマトグラフィーによるタンパク質
分離 の 最適化

Optimizing Protein Separation with Cation
Exchange Chromatographyusing Agilent Buffer Advisor.
5991-0565EN• カチオン交換クロマトグラフィーによる
mAb 電荷変異体 の 分析
Characterize mAb Charged Variants by CationExchange Chromatography.
5991-5273EN• カチオン交換クロマトグラフィーによるFab および Fc フラグメントの 分析
Characterize Fab and Fc Fragments by CationExchange Chromatography.
5991-5274EN• フルオロカーボン 被膜 キャピラリーでのキャピラリー 等電点によるモノクローナル
抗体 の電荷不均一性 の 分析

Monoclonal Antibody Charge Heterogeneity
Analysis by Capillary Isolectric Focusing on
Fluorocarbon Coated Capillaries
5991-2885EN

グリコフォームおよびグリカンの分析
タンパク質医薬品の 90 % 以上はグリコシル化されています。これらの糖タンパク質バイ
オ医薬品には複雑なオリゴ糖部分が含まれ、その存在、欠落、接続部位、および相対アバンダンスプロファイルが、医薬品の効能、薬物動態、免疫性、フォールディング、および安定性に大きな影響を与えることがあります。

次のアプリケーションノートでは、mAb-Glyco Chip 技術、LC/MS、高速液体クロマトグラフ
システム、および電気泳動を使用したグリカン構造の特性解析とグリカンプロファイルのモニタリングのための高真度のソリューションについて説明します。

文献は、www.agilent.com/chem/jp の 「ライブラリ」−「資料ライブラリ」で、資料番号で検索可能です。

• UHPLC と 蛍光検出による mAbs および
その 他 の 糖 タンパク質の N-グリカン分析
N-Glycan Analysis of mAbs and Other
Glycoproteins with UHPLC and Fluorescence
Detection.
5991-5253EN• HILIC-LC/MS と RP-LC/MS の比較による
IgG 糖 ペプチドの 分離
Separation of IgG Glycopeptides using HILICLC/MS in Comparison to RP-LC/MS.
5991-4903EN• Agilent mAb-Glyco Chip と Mass Profiler
Professional によるモノクローナル
抗体 のグリカン個体群 の 差分分析

Differential Analysis of Glycan Populations of
Monoclonal Antibodies Using Agilent mAbGlyco Chip and Mass Profiler Professional.
5991-5068EN• ヒト Ig G の高感度 かつ再現性 の高 いグリ
カン分析 – Agilent AdvanceBio 2.7 µm Glycan
マッピングカラムおよび 蛍光検出による

Agilent 1260 Infinity バイオイナートクォータ
ナリ LC システム
Sensitive and Reproducible Glycan Analysis of
Human Immunoglobulin G – The Agilent 1260
Infinity Bio-inert Quaternary LC System with an
Agilent AdvanceBio 2.7 µm Glycan Mapping
Column and Fluorescence Detection.
5991-4801EN• UHPLC/FLD/Q-TOF を用いたモノクローナル
抗体 の N-グリカンプロファイリング分析
N-Glycan Profiling Analysis of a Monoclonal
Antibody Using UHPLC/FLD/Q-TOF.
5991-5067EN• 高速 かつ 効率的 な HILIC メソッドによる• UHPLC と蛍光検出を用いたモノクローナ

複雑 なグリカン 構造分析 の向上

ル 抗体 およびその 他 の 糖 タンパク質のFast and Efficient HILIC Methods for Improved
Analysis of Complex Glycan Structures.
5991-4896EN

N-グリカン分析 – Agilent 1260 Infinity バ
イオイナートクォータナリ LC システムとAgilent 1260 Infinity 蛍光検出器
N-Glycan analysis of monoclonal antibodies
and other glycoproteins using UHPLC withfluorescence detection – Agilent 1260 Infinity
Bio-inert Quaternary LC System with Agilent
1260 Infinity Fluorescence Detector.
5990-9774EN• HILIC カラムを用いた N-結合型グリカンの
高速分析

A Novel HILIC Column for High Speed N-linked
Glycan Analysis.
5991-4886EN• 治療用遺伝子組み 換 えモノクローナル
抗体 の Fc 領域 のグリコシル 化 の 分析
Characterization of Glycosylation in
the Fc Region of Therapeutic Recombinant
Monoclonal Antibody.
5991-2323EN• キャピラリー電気泳動と Q-TOF 質量分析による抗体 の 糖 ペプチド分析

Glycopeptide Analysis of Antibodies by
Capillary Electrophoresis and Q-TOF Mass
Spectrometry.
5990-7138EN• Agilent AdvanceBio ペプチドマッピング
カラムを用いた EPO の高分離能糖• モノクローナル 抗体 の N-結合型グリカンの高速全自動分析を実現 する mAb-Glyco
chip キット5990-6924JAJP• マイクロフルイディクス HPLC-Chip と Agilent
Accurate-Mass Q-TOF LC/MS による
モノクローナル抗体 の糖 ペプチドとグリカンの 分析

Glycopeptide and Glycan Analysis of Monoclonal
Antibodies Using a Microfluidic-based HPLCChip Coupled to an Agilent Accurate-Mass
Q-TOF LC/MS.
5990-5190EN

ペプチドマッピング

High Resolution Glycopeptide Mapping of EPO
Using an Agilent AdvanceBio Peptide Mapping
Column.
5991-1813EN• キャピラリー電気泳動と質量分析によるモ
ノクローナル 抗体由来 の N-グリカンの 分析
Analysis of N-glycans from a Monoclonal
Antibody by Capillary Electrophoresis and Mass
Spectrometry.
5991-1020EN

注 : 資料番号 (各資料名 のあとの 数字) が EN で終わっているものは英文の 資料です。

7

翻訳後修飾および分解生成物の分析
バイオ医薬品は複雑な分子であり、多くの場合、安定性を維持し、インタクトな状態を保つためには特殊な条件が必要です。開発を通じてこれらの分子にストレスをかけ、このような安定化条件を確認し、製造時や医薬品の保管方法が不適切な場合に形成される分解生成物を同定します。

次のアプリケーションノートでは、高速液体クロマトグラフシステム、さまざまなカラム充填剤、および電気泳動を使用して分解生成物を特定し、製造および調合時にこれらのモニタリングを監視するための信頼性の高い
ソリューションについて説明しています。

文献は、www.agilent.com/chem/jp の 「ライブラリ」−「資料ライブラリ」で、資料番号で検索可能です。

• Agilent 1260 Infinity バイオイナートクォータ
ナリ LC と Agilent BioHPLC カラムを用いたN 末端 の 部位特異的 PEG 化 および PEG
リゾチームの 分析規模 の 精製

N-Terminal Site-Specifi c PEGylation andAnalytical-Scale Purifi cation of PEG Lysozyme- Agilent 1260 Infinity Bio-Inert Quaternary LC with
Agilent BioHPLC Columns.

5991-2883EN• Agilent 1260 Infinity バイオイナート LC シス
テムと Agilent ZORBAX RRHD ジフェニルのサブ 2 µm カラムを用いた IgG1 のジスル
フィド 結合 の 分析

Disulfide Linkage Analysis of IgG1 using an
Agilent 1260 Infinity Bio-inert LC System withan Agilent ZORBAX RRHD Diphenyl sub-2 µm
Column.
5991-1694EN• Agilent ZORBAX RRHD 300SB-C3 カラムを用いたインタクトおよび 還元型モノクローナル 抗体 の 超高速 プロファイリングにおける逆相最適化

5990-9667JAJP• Agilent ZORBAX RRHD サブ 2 µm 300
Diphenyl UHPLC カラムを用いた 還元型
およびインタクトモノクローナル 抗体 の

超高速 / 高分離能 の 分離

5990-9668JAJP• Agilent 2100 バイオアナライザを用いた
PEG 化されたタンパク質の 分析
Analysis of PEGylated proteins using the Agilent
2100 Bioanalyzer.
5990-9593EN• Agilent ZORBAX Rapid Resolution High Definition(RRHD) 300SB-C8 カラムを用いた 還元 モノク
ローナル 抗体 の高速 UHPLC 分析
5990-9631JAJP• Agilent 1260 Infinity HPLC-Chip/MS システム
および Accurate-Mass 6520 Q-TOF LC/MS を• P200 ScreenTape を用いた抗体 の再現性 のQuantitation of Oxidation Sites on a Monoclonal
Antibody Using an Agilent 1260 Infinity HPLCChip/MS System Coupled to an Accurate-Mass
6520 Q-TOF LC/MS.
5990-8769EN

高 い完全性 および 純度試験

Reproducible integrity and purity testing ofantibodies with P200 ScreenTape.
5990-9052EN• 逆相 Agilent ZORBAX RRHD 300SB-C18
1.8 µm による遺伝子組み 換 えヒトエリスロ
ポエチンタンパク質の高速分離

Fast Separation of Recombinant Human
Erythropoietin Using Reversed Phased Agilent
ZORBAX RRHD 300SB-C18, 1.8 µm.
5990-9248EN• Agilent ZORBAX RRHD 300SB-C8 1.8 µm カラ
ムを用いたインタクトモノクローナル 抗体の 逆相分離Reversed-Phase Separation of Intact
Monoclonal Antibodies Using Agilent ZORBAX
Rapid Resolution High Definition 300SB-C8 1.8µm Column.
5990-9016EN• Agilent 1260 Infinity HPLC-Chip/MS システム
および Accurate-Mass 6520 Q-TOF LC/MS を用いたモノクローナル 抗体 の酸化部位の特定

Identification of Oxidation Sites on a
Monoclonal Antibody Using an Agilent 1260
Infinity HPLC-Chip/MS System Coupled to an
Accurate-Mass 6520 Q-TOF LC/MS.
5990-8768EN

注 : 資料番号 (各資料名 のあとの 数字) が EN で終わっているものは英文の 資料です。

8

用いたモノクローナル 抗体 の酸化部位の定量• 逆相 Agilent ZORBAX RRHD 300SB-C18 を用いた酸化型 のインスリン 鎖 の 分析

Analysis of Oxidized Insulin Chains using
Reversed Phase Agilent ZORBAX RRHD 300SBC18.
5990-7988EN• Agilent 1290 Infinity LC システムと ZORBAXRRHD 1.8 µm カラムを用いた TCM 化合物に含 まれるノトジンセノサイド R1 と ギンセ
ノシド Rg1、Re、Rb1 の LC 分析 の高速化
Speed up the LC Analysis of Notoginsenoside
R1 and Ginsenosides Rg1, Re, and Rb1 in
Compound TCM Using the Agilent 1290 Infinity
LC system and ZORBAX RRHD 1.8 µm Column.
5990-5861EN

ペプチドマッピング

P

L

A

Y

R

P

L

A

Y

R

Q

S

M

A

Y

R

Q

S

M N N

F

S

M N N

F

G

H

S

N N

F

G

H

S

包括的なタンパク質の特性解析はバイオ医薬品の品質管理に非常に重要です。ここには単一アミノ酸の変化、修飾、および分解生成物を検出し、モニタリングするためのパワフルなメソッドがY含まれます。
次のアプリケーションノートでは、高速液体クロマトグラフシステムおよびカラム、キャピラリー電気泳動、および LC/MS システムを用いたタンパク質配列の高真度の確認、修飾の同定、また QA/QC 向けタンパク質フィンガープリントのモニタリングのための包括的な分析ソリューションについて詳細に説明しています。
文献は、www.agilent.com/chem/jp の 「ライブラリ」−「資料ライブラリ」で、資料番号で検索可能です。

• Agilent 1290 Infinity 2D-LC ソリューションを用いたモノクローナル抗体消化物 の 分析 – パート
2:HILIC × RPLC-MS
Analysis of Monoclonal Antibody Digests with theAgilent 1290 Infinity 2D-LC Solution – Part 2: HILIC ×
RPLC-MS.
5991-4530EN• モノクローナル 抗体 (mAb) の高速高効率 ペプチ
ドマッピング: 表面多孔性粒子カラムが 実現 する低圧 での高分離分析

5991-3585JAJP• Agilent 1290 Infinity UHPLC と Agilent 6550 iFunnel
Q-TOF LC/MS システムを用いたモノクローナル
抗体 の高分離能 かつ高速 なペプチドマッピング

High Resolution and Rapid Peptide Mapping of
Monoclonal Antibody Using an Agilent 1290 Infinity
UHPLC and an Agilent 6550 iFunnel Q-TOF LC/MS
System.
5991-3600EN• Agilent 1290 Infinity 2D-LC ソリューションによるモノクローナル抗体消化物 の 分析

(2013 年 9 月発行)
Analysis of Monoclonal Antibody Digests with theAgilent 1290 Infinity 2D-LC Solution. Published
September 2013
5991-2880EN• CE/MS と LC/MS の 連携 – ペプチドマッピングの補完的ソリューション

CE/MS and LC/MS Synergy – Complementary
Solutions for Peptide Mapping.
5991-2583EN• HILIC LC/MS と RP-LC/MS による糖 タンパク質
エリスロポエチンのペプチドマッピング

Peptide Mapping of Glycoprotein Erythropoietin by
HILIC LC/MS and RP-LC/MS.
5991-2085EN• Agilent AdvanceBio ペプチドマッピングカラムによる EPO の高分離能糖 ペプチドマッピング
High Resolution Glycopeptide Mapping of EPO Using
an Agilent AdvanceBio Peptide Mapping Column.
5991-1813EN• Agilent AdvanceBio ペプチドマッピングカラムによる EPO の高分離能糖 ペプチドマッピング
Simultaneous Quantitation and Confirmation of
Peptides with Triggered MRM Acquisition.
5990-8912EN• 内径 1 mm のカラムを用いた Agilent 1290 Infinity
LC システムの 性能 の 最適化。ペプチド分析 のための UHPLC 分離 の向上
Optimizing Performance of the Agilent 1290 Infinity
LC System Using 1-mm id Columns. Enhancing UHPLC
Separation for Peptide Analysis.
5991-0734EN• モノクローナル抗体 の QA/QC: Agilent 1260 Infinity
バイオイナートクォータナリ LC と Agilent 1290
Infinity LC システムを用いた高分離能 ペプチド
マッピング

QA/QC of Monoclonal Antibodies: High- Resolution
Peptide Mapping Using the Agilent 1260 Infinity
Bio-Inert Quaternary LC and Agilent 1290 Infinity LC
Systems.
5991-0524EN• 直交型テクニックとしての CE/MS/MS による
複雑 なマトリックスにおけるペプチドの高感度かつ容易な定量 の実現

CE/MS/MS as an Orthogonal Technique for Sensitiveand Easy Quantification of Peptides in Complex
Matrixes.
5991-2729EN• 1260 バイオイナート LC システムを用いたペプチ
ドマッピング、SEC、IEX による治療用タンパク質の 物理化学的分析

5990-6192JAJP• HPLC による固相合成したペプチドの 迅速 かつ効率的 な 精製

Fast, efficient HPLC purification of peptides from solidphase synthesis.
5989-8306EN• マイクロフルイディクス HPLC-Chip と Agilent
Accurate-Mass Q-TOF LC/MS による
モノクローナル 抗体 のペプチドマッピング

Peptide Mapping of a Monoclonal Antibody using a
Microfluidic-based HPLC-Chip coupled to an Agilent
Accurate-Mass Q-TOF LC/MS
5990-4587EN• Agilent 1290 Infinity LC システムを用いたトリプシ
ン消化分析5990-4031JAJP• キャピラリー HPLC によるペプチドとタンパク質の 分析 – クロマトグラフィーおよび機器パラメー
タの 最適化Peptide and protein analysis by capillary HPLC –Optimization of chromatographic and instrument
parameters.
5988-8628EN• マイクロ分取キャピラリーゾーン電気泳動を用いた遺伝子組み 換 え GroES のトリプシン消化物分析
Micropreparative Capillary Zone Electrophoresis ̶tryptic digest analysis of recombinant GroES.
5990-3384EN• キャピラリー電気泳動を用いたペプチドマッピングと分析

Peptide Mapping and Analysis Using Capillary
Electrophoresis.
5989-9807EN

注 : 資料番号 (各資料名 のあとの 数字) が EN で終わっているものは英文の 資料です。

9

1

バイオシミラー

0

医療におけるバイオシミラーの見通しは広大で、最近の開発ではすでに治療の可能性を発揮し始めています。しかし、分子の複雑さや環境因子に対する感度のために、構造の同一性の確立および発見、開発、製造プロセス全体を通してのインテグリティを確保するために厳格なプロトコルが必要です。
バイオシミラーを製造する効果的な手法は、関連のある先行バイオ医薬品の-1147500148200
カウント vs. デコンボリューションされた質量 (amu)

製造で使用され確立されたツールを利用することです。これらの技術には、たくさんのクロマトグラフィーメソッドおよび質量分析による広範囲な構造的特性解析が含まれています。アジレントの高度なソフトウェアツールを使用するとバイオシミラーの特性解析ワークフローを大幅に拡張でき、より短時間かつより高い信頼性でバイオ医薬品間の構造的類似点を確証することができます。
• バイオ医薬品の分子分析: 高性能光散乱検出器と Agilent 1260 Infinity マルチ検出器
Bio-SEC ソリューション
Molecular Characterization of Biotherapeutics:
The Agilent 1260 Infinity Multi-detector BioSEC Solution with Advanced Scattering Light
Detection.
5991-5220EN• ネイティブモノクローナル 抗体 の 分離と電荷変異体 の同定 : Agilent 3100 OFFGEL
Fractionator、Agilent 2100 バイオアナライザと Agilent LC/MS システムのチームワーク
Separation of Native Monoclonal Antibodies
and Identification of Charge Variants: Teamworkof the Agilent 3100 OFFGEL Fractionator,
Agilent 2100 Bioanalzyer and Agilent LC/MS
System5991-4969EN• Agilent 1260 Infinity バイオイナート LC
システム と Agilent OpenLAB MatchCompare
ソフトウェアによるバイオシミラーと先行
モノクローナル 抗体リツキシマブの比較

Comparison of Biosimilar and Innovator
Monoclonal Antibody Rituximab Using theAgilent 1260 Infinity Bio-inert LC System andAgilent OpenLAB Match Compare Software.
5991-4920EN

注 : 資料番号 (各資料名 のあとの 数字) が EN で終わっているものは英文の 資料です。

10

Genetic Engineering News との共著
「バイオシミラーの主な課題」

Prepping Biosimilars for a Big Play ,produced in cooperation with Genetic
Engineering News.
5991-5493EN

1495002D-LC、ハイスループット LC、

ワークフローの自動化

バイオ医薬品、特に組み換えタンパク質は非常に複雑な分子であり、固有の精製手法、複雑なサンプル前処理、そして多くの場合は分離と検出のための長い分析メソッドが必要です。高スループットプラットフォームと自動化されたワークフロー開発は、効率を向上し、スループットを上げ、精度を確保するためにワークフローのこのような多様な手順をまとめる方法です。
次のアプリケーションノートでは、高速液体クロマトグラフシステム、カラム、2D-LC ソフトウェア、LC/MS、およびカスタマイズされたメソッド開発 LC プラットフォームを使用して高スループットのワークフローをサポートし、ワークフローの自動化を促進する方法について説明しています。

文献は、www.agilent.com/chem/jp の 「ライブラリ」−「資料ライブラリ」で、資料番号で検索可能です。
• Agilent 1290 Infinity 2D-LC ソリューションによるバイオ医薬品中 の 複雑 な N-グリカンのオンライン 2D-LC 分析
Online 2D-LC Analysis of Complex N-Glycans inBiopharmaceuticals Using the Agilent 1290 Infinity
2D-LC Solution
5991-5349EN• DAD および Q-TOF LC/MS を用いた Agilent 1290
Infinity 2D-LC ソリューションによるトップ
ダウンおよびボトムアッププロテオミクス分析

Top-down and Bottom-up Proteomics with the Agilent
1290 Infinity 2D-LC Solution Using DAD and Q-TOF
LC/MS.
5991-5179EN• Agilent 1290 Infinity 2D-LC ソリューションによるモノクローナル 抗体消化物 の 分析

Analysis of Monoclonal Antibody Digests with theAgilent 1290 Infinity 2D-LC Solution.
5991-2880EN• モノクローナル 抗体 の電荷変異体分析 のサイ
クル 時間 の 短縮 – Agilent 1200 Infinity シリーズ
Quick-Change バイオイナート 2 ポジション/
10 ポートバルブによる交互 カラム再生
Reducing Cycle Time for Charge Variant Analysisof Monoclonal Antibodies – Alternating Column
Regeneration Using an Agilent 1200 Infinity Series
Quick-Change Bio-inert 2-position/10-port Valve.
5991-4722EN• ヒト血漿中 の 多量タンパク質除去にかかるサイクル 時間 の 短縮 - Agilent 1200 Infinity
シリーズ Quick-Change バイオイナート 2
ポジション/10 ポートバルブと Agilent 1290 Infinity
フレキシブルキューブを用いた 交互 カラム再生

Reducing Cycle Time for Affinity Removal of HighAbundant Proteins in Human Plasma - Alternating
Column Regeneration Using an Agilent 1200 Infinity
Series Quick-Change Bio-inert 2-position/10-port
Valve and an Agilent 1290 Infinity Flexible Cube.
5991-4721EN• バイオモノリスプロテイン A HPLC カラムによる
ヒト IgG の定量にかかるサイクル 時間 の 短縮 Agilent 1200 Infinity Quick-Change バイオ
イナート 2 ポジション/10 ポートバルブと Agilent
1290 Infinity フレキシブルキューブを用いた
交互 カラム再生

Reducing Cycle Time for Quantification of Human
IgG Using the Agilent Bio-Monolith Protein A HPLC
Column - Alternating Column Regeneration Using
an Agilent 1200 Infinity Quick-Change Bio-inert
2-position/10-port Valve and the 1290 Infinity
Flexible Cube.
5991-4723EN• モノクローナル 抗体 のスモールスケール 精製と分析を 一台 の 機器で実現 する Agilent 1260
Infinity バイオイナートクォータナリ LC システム
Combining Small-Scale Purification and Analysis of
Monoclonal Antibodies on One Instrument.
5991-1195EN• Agilent 1260 Infinity バイオイナートクォータナリ
LC を用いたタンパク質のピークベースのフラク
ションコレクション。自動カラム切り替えを用いた多様 な 精製と再分析

Peak-based fraction collection of proteins with
the Agilent 1260 Infinity Bio-inert Quaternary LC.
Versatile purification and re-analysis using automatedcolumn switching.
5991-0990EN• Agilent 1290 Infinity 2D-LC ソリューションによる
ハートカットによる不純物 の 検出

Detection of Impurities by Heart Cutting Using theAgilent 1290 Infinity 2D-LC Solution.
5991-0834EN• Agilent 1260 Infinity メソッド 開発ソリューション
Agilent 1260 Infinity Method Development Solution.
5990-6863EN• Agilent 1290 Infinity 2D-LC ソリューションによるモノクローナル 抗体消化物 の 分析 – パート 2:
HILIC × RPLC-MS
Analysis of Monoclonal Antibody Digests with theAgilent 1290 Infinity 2D-LC Solution - Part 2: HILIC ×
RPLC-MS.
5991-4530EN• Agilent 6540 Q-TOF LC/MS システムのハート
カット 2D-LC/MS による医薬品不純物 の同定
Heart-Cut 2D-LC/MS Approach for Pharmaceutical
Impurity Identification Using an Agilent 6540 Q-TOF
LC/MS System.
5991-1873EN

注 : 資料番号 (各資料名 のあとの 数字) が EN で終わっているものは英文の 資料です。

11

12
11
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
A
B

H

G

F

E

D

C

サンプル前処理の自動化
生体サンプルの前処理の自動化により、同一のワークフローでの定量とサンプル前処理の実行、信頼性の高い自動プロセスによるエラーの減少と無人操作時間の増加、既存の充填剤またはカスタマイズされたワークフローを使用したスループットの向上が可能になります。組み換えタンパク質では、このような自動化されたサンプル前処理手順に、取り込み手順、グリカン除去およびラベリング、ペプチドマッピングのためのタンパク質分解などを含めることができます。

次のアプリケーションノートでは、生体分子サンプル前処理専用に設計された、オープンアクセスの無人操作自動化ソリューション
である Agilent AssayMAP プラットフォームの使用について説明しています。このプラットフォームは、小規模な充填済みクロマトグ
ラフィーカートリッジ、最先端の Bravo 自動液体処理プラットフォーム、およびシンプルなアプリケーションベースのユーザーインタ
フェースをパワフルに組み合わせ、自動化が初めてのユーザーから経験豊かなユーザーまでを対象としたオープンアクセス環境を作り出します。
文献は、www.agilent.com/chem/jp の 「ライブラリ」−「資料ライブラリ」で、資料番号で検索可能です。

• Agilent AssayMAP Bravo プラットフォームによるバイオ医薬品タンパク質の 精密 で拡張性 のある定量および 分析 のためのサンプル前処理法 の自動化

Automation of Sample Preparation for
Accurate and Scalable Quantification andCharacterization of Biotherapeutic Proteins
Using the Agilent AssayMAP Bravo Platform.
5991-4872EN• LC/MS のワークフローの自動化:
AssayMAP 技術によって可能になる、
溶液中タンパク質消化、ペプチドクリーン
アップ、ペプチドの 強 カチオン交換分取

Workflow Automation for LC/MS: In-Solution
Protein Digestion, Peptide Cleanup, and Strong
Cation-Exchange Fractionation of Peptides
Enabled by AssayMAP Technology.
5991-3602EN• カタログ: ProZyme Glykoprep を用いた
N-グリカンのサンプル前処理によるAgilent AssayMAP ソリューション
Brochure: Agilent AssayMAP Solutions for
N-Glycan Sample Preparation using ProZyme
Glyko-prep.
5991-1140EN• Agilent AssayMAP Bravo プラットフォームによる細胞培養上清 からの 抗体 の 精製

Purification of Antibodies from Cell Culture
Supernatant Using the Agilent AssayMAP
Bravo Platform.
5990-9247EN• 溶液中酵素消化と脱塩処理 の自動化を可能にするハイスループット型試料前処理システム Agilent AssayMAP Bravo プラットフォーム

5991-2957JAJP

注 : 資料番号 (各資料名 のあとの 数字) が EN で終わっているものは英文の 資料です。

12• タンパク質精製用 Agilent Bravo とAssayMAP Protein A カートリッジによる
ヒト IgG のハイスループット精製High Throughput Purification of Human IgG
Using the Agilent Bravo for Protein Purification
and AssayMAP Protein A Cartridgess.
5990-7203EN

宿主細胞および処理関連の不純物
バクテリアおよび哺乳類の細胞は、ヒト治療用タンパク質生成用の宿主系として一般に使用されています。精製プロセスでは、治療用化合物とともに取り込んだときに安全上の懸念が生じる DNA やタンパク質など、宿主細胞に関連する物質を取り除くことが重要です。バイオ医薬品の製造には、精製用緩衝液、溶媒、バイオリアクターのほか、プラスチック、ステン
レス、その他の金属からなるさまざまな装置も含まれます。最終的なバイオ医薬品製品には、製造時に緩衝液や溶媒内に存在する、また医薬品の製造や精製に使用するハードウェアから溶出する処理関連の不純物が一切含まれていてはなりません。
次のアプリケーションノートでは、アジレントの qPCR システムを使用した宿主細胞 DNAの高真度の測定と、LC/MS を使用した宿主細胞タンパク質の同定および定量のための信頼性の高いソリューションについて説明しています。アジ
レントは、ICP-OES、ICP-MS、GC ヘッドスペースアナライザ、GC/MS プラットフォームを使用して金属や残留溶媒などの処理関連の不純物を測定するための包括的なソリューションも提供しています。
文献は、www.agilent.com/chem/jp の 「ライブラリ」−「資料ライブラリ」で、資料番号で検索可能です。

• Agilent 7100 キャピラリー電気泳動システ
ムと蛍光検出器 の新しい発光ダイオードによる不純物検出

Impurity Detection with a New Light Emitting
Diode Induced Fluorescence Detector Coupled
to the Agilent 7100 Capillary Electrophoresis
System.
5991-4043EN• モノクローナル抗体試料由来 のゲノム DNAの除去およびモニタリングのためのアジレ• USP ジェネラルチャプター <232>/<233>• LC-QQQ による E.coli で 発現させた 遺伝子

草案に従った医薬品成分中 の 元素不純物測定における Agilent 7700x/7800 ICP-MSのバリデーション

組み 換 えタンパク質中 の 混入 バクテリア
宿主細胞由来 タンパク質の 測定

5990-9365JAJP• 元素不純物に関する新たな ICH およびUSP
メソッド 案 :医薬品分析におけるICP-MS
および ICP-OES の 適用
5991-9382JAJP

Determination of Contaminant Bacterial
Host Cell Proteins in Recombinant Proteins
Expressed in E.coli by LC-QQQ
View poster

ントのソリューション

Agilent Solutions for Removal and Monitoringof Genomic DNA from Monoclonal Antibody
Preparations.
5991-3527EN• Agilent Mx3005P QPCR システムによる CHO
宿主細胞由来 の 残留 DNA の検出
Detecting Residual CHO Host Cell DNA Using
the Agilent Mx3005P QPCR System.
5990-9519EN• Agilent 1290 Infinity LC システムと Agilent
6530 Accurate-Mass QTOF LC/MS による合成 オリゴヌクレオチドの不純物 の高速プ
ロファイリング

Fast impurity profiling of synthetic
oligonucleotides with the Agilent 1290 Infinity
LC System and Agilent 6530 Accurate-Mass
QTOF LC/MS.
5990-5825EN

注 : 資料番号 (各資料名 のあとの 数字) が EN で終わっているものは英文の 資料です。

13

滴定およびタンパク質の定量
バイオ医薬品の高真度の定量機能は、製造中の高収率の (滴定) 発酵および精製プロセスの開発に非常に重要です。バイオ医薬品の濃度も、安全で効果的な処方と投与量を決定するために重要です。
アジレントでは、アジレントの UV/Vis システム、Bravo 用 AssayMAP、高速液体クロマトグラフシステムおよびカラムを使用したルーチン滴定および濃度測定のための信頼性の高いソリューションを開発してきました。
文献は、www.agilent.com/chem/jp の 「ライブラリ」−「資料ライブラリ」で、資料番号で検索可能です。
• バイオモノリスプロテイン A カラムによる
mAb タイター分析
mAb Titer Analysis with the Agilent
Bio-Monolith Protein A Column.
5991-5135EN• バイオモノリスプロテイン A カラムと LC/
MS を用いた 細胞培養 の 最適化
Cell Culture Optimization Using an Agilent BioMonolith Protein A Column and LC/MS.
5991-5125EN• バイオモノリスプロテイン A カラムと
LC/MS を用いた細胞クローン選択
5991-5124JAJP• バイオモノリスプロテイン A による細胞培養 のモノクローナル 抗体力価 のモニタリング• Agilent AssayMAP Bravo プラットフォームによる細胞培養上清 からの 抗体 の精製のサイジングと定量

Purification of antibodies from cell culture
supernatant using the Agilent AssayMAP Bravo
platform.
5990-9247EN

Protein Sizing and Quantitation with the Agilent
Protein 80 and Protein 230 Kits on the Agilent
2100 Bioanalyzer.
5990-5721EN• バイオモノリスアニオン交換 HPLC カラム
を用いたアデノウィルス 5 型粒子 の高速分
析により高抗体価 の 製造プラットフォームの開発 をサポート

Rapid Analysis of Adenoviruse Type 5 Particles
with Bio-Monolith Anion-Exchange HPLC
Columns to Support the Development of a HighTitre Manufacturing Platform.
5990-5524EN

5991-2990JAJP• Agilent Cary 60 によるマイクロボリュームのルーチン測定における優 れた直線性と再現性

Superior Linearity and Reproducibility Using theAgilent Cary 60 for Routine Measurements ofMicro Volumes.
5990-9688EN

注 : 資料番号 (各資料名 のあとの 数字) が EN で終わっているものは英文の 資料です。

14• Agilent Protein 80、Protein 230 キット、Agilent
2100 バイオアナライザによるタンパク質• Agilent 2100 バイオアナライザ HighSensitivity Protein 250 アッセイによる定量
ストラテジー

Quantification Strategies Using the HighSensitivity Protein 250 Assay for the Agilent
2100 Bioanalyzer.
5989-8941EN

原材料および培地の分析
すべてのタンパク質またはペプチドは特異なアミノ酸配列と組成を持っているため、アミノ酸分析は医薬品創薬からバッチ間品質の一貫性を示す製造、またタンパク質の特性解析や細胞培養のモニタリングのために使用されています。
次のアプリケーションノートでは、高速液体クロマトグラフシステムおよび高分離能逆相カラムを使用して、バイオ医薬品の成分であるアミノ酸を定量、分類するために最適化されたソリューションについて説明しています。
文献は、www.agilent.com/chem/jp の 「ライブラリ」−「資料ライブラリ」で、資料番号で検索可能です。

• Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 カラムとAgilent HPLC による既存 アミノ酸分析法 の改良

5990-4547JAJP• 吸光度検出器と自動化された誘導体化機
能付き HPLC を用いた 迅速 かつ高精度 な 細
胞内アミノ酸 のフラックスレートの 測定

Rapid and Precise Determination of CellularAmino Acid Flux Rates Using HPLC with
Automated Derivatization with Absorbance
Detection.
5990-3283EN

注 : 資料番号 (各資料名 のあとの 数字) が EN で終わっているものは英文の 資料です。

15

e

hod

Cat

タンパク質のキャピラリー電気泳動
およびマイクロフルイディクス電気泳動

ode

An

タンパク質およびペプチドの電気泳動は、等電点または電荷の状態、サイズ、またはこれらの属性の組み合わせに基づいて分離を行います。キャピラリー電気泳動 (CE) は、電荷状態に基づく
インタクトタンパク質の分離やグリカン分析に一般に使用されています。CE は質量分析計と組み合わせることもでき、多くの場合はLC/MS とは統計的に独立した直交的手法として使用されます。SDS-PAGE などの単純な電気泳動手法は一般的にタンパク質の安定性テストや QC、タンパク質発現のアットラインモニタリング、タンパク質精製の最適化およびモニタリングに使用されています。
次のアプリケーションノートでは、飛行時間型 (TOF) 質量分析計と組み合わせて Agilent 7100 キャピラリー電気泳動システムをタンパク質の特性解析およびタンパク質修飾分析に使用する方法について説明しています。2200 TapeStation および 2100 バイオアナライザは、

SDS-PAGE ゲルに代わり、プロセス開発を通じてタンパク質の変化をモニタリングするためのプラットフォームとして提案されたものです。
文献は、www.agilent.com/chem/jp の 「ライブラリ」−「資料ライブラリ」で、資料番号で検索可能です。

• キャピラリー電気泳動と質量分析による
小さな免疫複合体 (< 40 kDa) の 分析
Characterization of Small Immunoconjugates(< 40 kDa) Using Capillary Electrophoresis –Mass Spectrometry.
5991-4433EN• フルオロカーボン 被膜 キャピラリーでの• Agilent 7100 キャピラリー電気泳動システ

キャピラリー 等電点によるモノクローナル

ムでのキャピラリー 等電点によるモノク

抗体 の電荷不均一性 の 分析

ローナル 抗体 の電荷不均一性分析• Agilent 7100 キャピラリー電気泳動システ

Monoclonal Antibody Charge Heterogeneity
Analysis by Capillary Isoelectric Focusing on
Fluorocarbon Coated Capillaries.
5991-2885EN

Monoclonal Antibody Charge Heterogeneity
Analysis by Capillary Isoelectric Focusing on the
Agilent 7100 Capillary Electrophoresis System.
5991-1142EN

ムと蛍光検出器 の 新しい発光 ダイオード• 直交型テクニックとしての CE/MS/MS によ• Agilent 7100 CE システムにおける UV 検出

による不純物検出る複雑 なマトリックスにおけるペプチドのImpurity Detection with a New Light Emitting
Diode Induced Fluorescence Detector Coupled
to the Agilent 7100 Capillary Electrophoresis
System.
5991-4043EN

高感度 かつ容易な定量 の 実現器 を用いたキャピラリーゲル電気泳動によるタンパク質分析用市販ゲルの 性能• モノクローナル 抗体試料由来 のゲノム DNAの除去およびモニタリングのためのアジレ

CE/MS/MS as an Orthogonal Technique for
Sensitive and Easy Quantification of Peptides inComplex Matrixes.
5991-2729EN• キャピラリー電気泳動と四重極飛行時間型 (Q-TOF) 質量分析計を用いたモノクロー

Performance of commercially available gelsfor protein characterization by capillary gelelectrophoresis with UV detection on the Agilent
7100 CE System5990-7976EN• Agilent 2100 バイオアナライザを用いた

ントのソリューション

ナル抗体 の酸化部位の 特定と定量

精製中タンパク質原基 のモニタリング

Agilent Solutions for Removal and Monitoringof Genomic DNA from Monoclonal Antibody
Preparations.
5991-3527EN

Identification and Quantification of Oxidation
Sites on Monoclonal Antibodies Using Capillary
Electrophoresis and Quadrupole Time-of-Flight
Mass Spectrometry.
5991-2728EN

Monitoring Protein Fate during Purification with
the Agilent 2100 Bioanalyzer.
5990-6153EN• CE/MS と LC/MS の 連携 – ペプチドマッピング用の 補完的ソリューション

CE/MS and LC/MS Synergy – Complementary
Solutions for Peptide Mapping.
5991-2583EN• キャピラリー電気泳動と質量分析によるモノクローナル 抗体由来 の N-グリカンの分析

Analysis of N-glycans from a Monoclonal
Antibody by Capillary Electrophoresis and Mass
Spectrometry.
5991-1020EN

注 : 資料番号 (各資料名 のあとの 数字) が EN で終わっているものは英文の 資料です。

16• キャピラリー電気泳動と Q-TOF 質量分析による抗体 の 糖 ペプチド分析

Glycopeptide Analysis of Antibodies by
Capillary Electrophoresis and Q-TOF Mass
Spectrometry.
5990-7138EN

核酸の分析
合成オリゴヌクレオチドは、ウィルス感染症や癌など、さまざまな疾病の将来性のある治療薬として新たに使用されるようになりました。アンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉 RNA(siRNAs)、アプタマーなどの一部の核酸クラスが治療用アプリケーション向けに研究されています。カップリング反応のキャッピングが不十分なために発生する不純物、製品関連の不純物、出発物質および合成後処理の不純物をモニタリングし、同定し、除去する必要があります。
次のアプリケーションノートでは、LC/MS、高速液体クロマトグラフシステム、およびカラム
充填物を使用してオリゴヌクレオチド合成プロセス全体 の 不純物を同定し、 モニタリングするためのアジレントの包括的なソリューションについて詳細に説明しています。

文献は、www.agilent.com/chem/jp の 「ライブラリ」−「資料ライブラリ」で、資料番号で検索可能です。

• ヌクレオチド分析に最適な 極性修飾した
固定相

Polar Modified Stationary Phases are Ideal for
the Analysis of Nucleotides.
5991-2058EN• Agilent TOP-DNA による高性能 DNA オリゴ
ヌクレオチドの 精製High Performance DNA Oligonucleotide
Purification Using Agilent TOP-DNA.
5990-9006EN• オリゴヌクレオチドイオンペア RP HPLC 用の 熱安定性 の高 いポリマーカラムによるカラム 寿命 の向上

Improved Column Lifetime with Thermally
Stable Polymer Columns for Oligonucleotide
Ion-Pair RP HPLC.
5990-7764EN• Agilent 1290 Infinity LC システムと Agilent
6530 Accurate-Mass QTOF LC/MS による合成 オリゴヌクレオチドの 不純物 の高速
プロファイリング

Fast Impurity Profiling of Synthetic
Oligonucleotides with the Agilent 1290 Infinity
LC System and Agilent 6530 Accurate-Mass
QTOF LC/MS.
5990-5825EN• オリゴヌクレオチド ̶アンチセンス
治療薬 の 分析

Oligonucleotides ̶ Analysis of Antisense
Therapeutics.
5990-3383EN• PL-SAX 強アニオン交換 HPLC カラムによる
オリゴヌクレオチドの高分解能分離

High Resolution Separations of Oligonucleotides
Using PL-SAX Strong Anion-Exchange HPLC
Columns.
5990-8297EN• 温度によるオリゴヌクレオチドの 質量移動の 促進 およびイオンペア RP HPLC の
分解能 の向上Use Temperature to Enhance Oligonucleotide
Mass Transfer and Improve Resolution in IonPair RP HPLC.
5990-7765EN

注 : 資料番号 (各資料名 のあとの 数字) が EN で終わっているものは英文の 資料です。

17=

コンプライアンス、QC、QbD
GMP (Good Laboratory Practice) の品質管理テストには、原材料、ビタミン、媒体分析、金Compliance属カチオン、プロセスおよび製品に関連した不純物の構成に関する詳細な情報が含まれQCています。包括的な特性解析プロファイルは、仕様や判定基準の確立を可能にするためにもバイオ医薬品の品質管理では重要です。

QbD

メソッド開発に対する従来の経験的なアプローチでは、バリデーションや製造移管の際に適合できない可能性もあります。QbD (Quality by Design) は、製品および開発から始まる製造プロセスに対する適切な理解を促進し、実質的に品質基準を製造プロセスに各段階で組み込みます。QbD と共に、重要なメソッドの変数間の影響や相互作用は、統計的な多変量解析およびモデリングによる

DOE (Design of Experiments: 実験計画法) が用いられます。
アジレントは、製造、コンプライアンス、QbD をサポートする、液体クロマトグラフィー、質量分析、分光分析、カラム、消耗品、
ソフトウェアなど、バイオ医薬品の製造および品質管理のための包括的なポートフォリオを提供しています。

• バイオ医薬品ラボのコンプライアンス、
Ludwig Huber 著
5990-7001JAJP• リナグリプチン製剤 の 安定性指標
メソッド 開発 のための QbD アプローチ
Quality-by-Design Approach to Stability
Indicating Method Development for Linagliptin
Drug Product.
5991-3834EN

注 : 資料番号 (各資料名 のあとの 数字) が EN で終わっているものは英文の 資料です。

18

質量分析法によるタンパク質の分析
Agilent 1290 Infinity バイナリ/クォータナリ LC システムを Agilent 6230 TOF および 6500 シリーズ Q-TOF と組み合わせることにより、高速の 優れた分離力、高い質量真度に加えて卓越した 感度 が 提供されます。インテリジェントシステムエミュレーション 技術を 使用すると、

世界中 の 機器から機器 へ一貫したメソッド 変換 が可能になります。
アジレントの 幅広 いバイオカラムがタンパク 質 の 特性分析 を 完全 にサポートします。ZORBAX Rapid Resolution High Definition (RRHD)
300Å、Poroshell 300 および AdvanceBio ペプチドマッピングカラムなどの AdvanceBio ファミリーが 高速の UHPLC 逆相分析を提供します。

Agilent ZORBAX RRHD 300Å カラム、1.8 µm および Poroshell 300 カラム、5 µm

Agilent 1290 Infinity バイナリー/クォータナリ LC システムとAgilent 6500 シリーズ Q-TOF

凝集および断片の分析
Agilent 1260 バイオイナートクォータナリ LC とマルチ検出器スイートは、光散乱検出器が絶対分子量 データを提供 するために必要な柔軟性を提供します。光散乱 は凝集体 のピーク面積も増加させます。

Agilent Bio SEC-3 および Bio SEC-5 カラムは小さい 3 µm 粒子を使用しているため、凝集体、分解生成物、および断片の高速 で信頼性の高い正確 な測定 が可能になります。

Agilent Bio SEC カラム
Agilent 1260 Infinity マルチ検出器 Bio-SEC ソリューション

19

電荷変異体の分析
Buffer Advisor を搭載した Agilent 1260 バイオイナートクォータナリ LC システムによりメソッド開発 が 簡略化され、0.1 pH 単位を超 える
優れた pH 真度と精度 で 4 種類の原液 から緩衝液を容易に混合できるため、最適な電荷変異体 の 分離を見つけやすくなります。Buffer
Advisor ソフトウェアはシステムに依存しないソリューションであり、pH スカウティングのために複数の 緩衝液を前処理し、滴定 する必
要はありません。

Agilent Bio MAb カラムは粒子、コーティング、および結合が MAb 分離用に最適化されており、耐圧性 が 高いため、高い分離能と高速の 分離 が 実現します。独自の疎水性コーティングによってほとんどの非特異的 な相互作用が 排除 されます。

Agilent 7100 CE システムは、MAbs の電荷不均一性の 分析にも適しており、HPLC に代 わって用いることができます。

Agilent 1260 Infinity バイオイナートクォータナリ LC システムとBuffer Advisor および Agilent Bio MAb カラム

グリコフォームおよびグリカンの分析
AssayMAPは N-グリカンのプロファイリングに対応 する自動化ソリューションを提供します「( サンプル前処理の自動化」p.12、p.22を参照)。
MAb-Glyco Chip/MS キットはチップベースの脱グリコシル化、グリカンの分離、グリカン転移を高感度の TOF/QTOF 検出と統合しています。
アジレントのシングルソース CE/MS ソリューションは、電気泳動による分離を質量分析計によるグリカン分析の分離能と結合したものです。ZORBAX RRHD 300-HILIC は、糖ペプチドの分離を拡張する UHPLC カラムです。

Agilent AdvanceBio グリカンマッピングカラム

インタクトグリコフォームプロファイリング、糖 ペプチドおよびグリコシル 化部位の 特定、放出グリカンの分析 のストラテジー

20

翻訳後修飾および分解生成物の分析
分析時間の短縮と分離能の向上のために真の UHPLC 性能を備えた Agilent 1260 Infinity バイオイナートクォータナリ LC システムの分析」を参照) および Agilent Bio SCX、Bio SAX
Agilent Bio MAb カラム「電荷変異体(

高分子タンパク質 (> 50 kDa) の分離用 Poroshell 300

AdvanceBio ペプチドマッピングカラムは、最適化された 120Å のポアサイズと表面多孔質 2.7 µm 粒子を備えています。このカラムでは、分析が困難なペプチド混合物を使用して特別にテストを実施し、信頼性の高いペプチドマッピング性能を保証しています。

ZORBAX Rapid Resolution High Definition (RRHD) カラムファミリーには、SB-C18、SB-C8、SB-C3、および独自の SB-Diphenyl 相の 4 つの相が含まれているため、分析対象のタンパク質の理解を深 める直交分離に対応 することができます。

Agilent 1260 Infinity バイオイナートクォータナリ LC システム

Agilent AdvanceBio RP-mAb、ZORBAX RRHD 300Å カラム、1.8 µm およびPoroshell 300 カラム、5 µm

ペプチドマッピング
Agilent 1290 Infinity バイナリ/クォータナリ LC システムは、ペプチドマッピングの最適化に必要な出力範囲と性能を備えています。
Agilent AdvanceBio ペプチドマッピングカラムは、最適化された 120Å のポアサイズと表面多孔質 2.7 µm 粒子を備えています。このカラムでは、分析 が困難 なペプチド混合物を 使用して特別にテストが 実施され、信頼性 の高 いペプチドマッピング性能を保証しています。

Agilent AssayMAP ペプチドサンプル前処理ソリューション 「( サンプル前処理 の自動化」を参照) は、ペプチドマッピングのスループット
を劇的に向上することができます。

Agilent MassHunter Bioconfirm ソフトウェアは、ペプチド分解物 の LC/MS データをタンパク質配列に正確にマッピングすることで、配列の範囲を明らかにし、修飾部位を突き止めます。

Agilent AdvanceBio ペプチドマッピングカラム
Agilent 1290 Infinity II LC システムと Agilent 6500 シリーズ Q-TOF

21

2D-LC、ハイスループット LC、ワークフローの自動化
Agilent 1290 Infinity 2D-LC ソリューションは、分析に新たな次元を加 える柔軟性 の高 いハードウェアとソフトウェアによりメソッドの設定を容易にします。ピークトリガ 操作 などのパワフルな 機能 や、ハートカット分析 のための革新的 なバルブ技術、幅広 い 粒子サイズと構成 が用意 された 逆相、IEX、SEC、アフィニティ技術などの、アジレントのさまざまなバイオカラムと 2D-LC システムを組み合わせることができます。

Agilent 1200 Infinity シリーズメソッド開発ソリューションは直 ちに使用できる状態 で出荷 され、1000 セットを超 える独自の LC 分離条件に自動的にアクセスできるように設計 されています。

1
2

Waste
1

2

3

6

IN

6

OUT

D-Pump=#6: 8.67 min#7: 8.98 min

2

3#8: 10.75 min#9: 14.30 min

1

4

8

Deck 25#3: 4.79 min

6#4: 6.10 min

D-Column

´4´
3´
2
1´ ´

Deck 1

D-Column

1

2

7

2

6´ 5

4

5

8
5

5

´4´
3´
2
1´ ´

1

4

1

3

IN
4

D-Column

2

Waste

6´ 5

3

7

2

D-Pump#5: 6.83 min

OUT
6

D-Column

2

Agilent 1290 Infinity II 2D-LC ソリューション
マルチハートカットを 使用 すると、1 次元目のピークを 貯蔵してその 後 2 次元

目で 分析 することができます。オンラインモニタリング 機能 により、測定時 は
いつでもハートカットの 状態 や 2D 分析状況を 表示できます。

Agilent 1200 Infinity シリーズメソッド開発ソリューション

サンプル前処理の自動化
AssayMAP テクノロジーソリューションでは、GlykoPrep-plus および 1260 Infinity バイオイナートクォータナリ LC システムを使用した
N-グリカンの効率的なサンプル前処理 が可能です。
Agilent AssayMAP ペプチドサンプル前処理ソリューションを 使用すると、再現性 およびスループットが向上し、操作時間 が 短縮 され、ペプチドマッピングのメソッド開発 が迅速になります。

Agilent AssayMAP ペプチドサンプル前処理ソリューション

22

プロセスに関連する不純物
アジレントの ICP-MS および ICP-OES は ICH Q3D および USP <232>/<233> に準拠した元素不純物 の 微量分析に最適 です。

5990-9382JAJP
Agilent 7900 ICP-MS は、経口、吸入、静脈を含 むすべての 投薬 ルートの医薬品に対して最高の 感度を備えています。自動化メソッドのセットアップおよび機器 の 最適化、超高マトリックス導入 (UHMI)、sub-ng/L から % レベルまで 最大 11 桁 の非常にワイドなダイナミック
レンジを提供します。 5991-5314EN
Agilent 5100 ICP-OES は、コストを意識しながら、経口投与薬や原材料分析におけるサンプルのハイスループットにフォーカスしているラボに最適なソリューションです。 5991-5403EN
Agilent 8800 ICP-QQQ は、MS/MS 機能を備えた世界初 のトリプル四重極 ICP-MS です。ORS セルへのイオン透過は、第 1 四重極 (Q1) によって選択的に制御され、制御された化学反応によって卓越した干渉除去を実現しています。 5991-4967JAJP

Agilent 7900 ICP-MS

Agilent 5100 ICP-OES

Agilent 8800 ICP-QQQ

滴定およびタンパク質の定量
Agilent 1260 Infinity バイオイナートクォータナリ LC システム – 100 % バイオイナート : オートサンプラ、カラムコンパートメント、検出器のすべてのキャピラリーとフィッティングには一切金属 を 使用していないため、セラミックまたは PEEK だけがサンプル内 の 生体分子と接触します。

Agilent BioMonolith Protein A カラムは、正確 な定量 のために広い直線範囲で高速の滴定分析を提供します。
Agilent Cary 60 UV-Vis 分光光度計は、DNA、RNA、およびその 他 のタンパク質のマイクロボリューム分析に優れた直線性と再現性を提供します。

Agilent 1260 Infinity バイオイナート
クォータナリ LC システム

Agilent BioMonolith Protein A カラム

23アミノ酸および培地の分析
Agilent 1200 Infinity シリーズは、アミノ酸分析に必要な出力範囲と性能を提供します。
Agilent ZORBAX アミノ酸分析 (AAA) カラムはアミノ酸 の高分離能分析を提供します。

Agilent ZORBAX アミノ酸分析 (AAA) カラム

タンパク質のキャピラリー電気泳動およびマイクロフルイディクス電気泳動
Agilent 7100 CE/MS システムと MassHunter ソフトウェア
Agilent 7100 CE および CE/MS システムを使用すると、クロマトグラフィー LC/MS 分析を理想的に補足し、インタクトタンパク質分析 や、タンパク質分解物 のペプチド分析、またグリカンなどによる修飾に理想的 な直交的アプローチにより知見を広げることができます。

Agilent 2100 バイオアナライザは DNA、RNA、およびタンパク質分析 の定量、分離能、時間およびデータ処理を向上させます。

Agilent 7100 CE/MS システムと MassHunter ソフトウェア

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詳細情報
ホームページ
www.agilent.com/chem/jp
カストマコンタクトセンタ
0120-477-111

本資料に記載の情報は、予告なしに変更されることがあります。
アジレント・テクノロジー株式会社© Agilent Technologies, Inc. 2015
Published in Japan, November 30, 2015
(based on March 25, 2015 version)
5991-1504JAJP