血栓症と体内時計
Thrombosis and Biological Clocks

帝京大学薬学部

病態生理学研究室

准教授

大藏

直樹

NAOKI OHKURA, PhD. (Associate Professor)
Associate professor, Molecular Physiology and pathology, School of Pharma-Sciences, Teikyo University（独）産業技術総合研究所 バイオメディカル研究部門

生物時計研究グループ グリープリーダー

大石勝隆

KATSUTAKA OISHI, PhD. (Group Reader)
Biological Clock Research Group, Biomedical Research Institute, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (AIST)

1. はじめに

2. 血液凝固系と血栓

心筋梗塞、脳梗塞、深部静脈血栓症など、血液が固

血液は血管の内側を、流動性を保ちながら流れていまってできる血栓が原因の疾患は午前中に発症頻度がる。血管内皮細胞は、血管の内側を覆う細胞で、血液高いことがわかっている。また、血栓を溶かす血栓溶解が凝固しないように保つ働きを持つ。しかし、外傷や炎療法の効果が午前中は弱く、血栓症の治療薬であるヘ症などで血 管 壁が損 傷を受けると、損 傷 部 分に血 小パリンやワルファリンに効果が出やすい時間帯があるな

板が粘着して凝集する。また、傷害を受けた血管内皮

ど、血栓に関連する病気の治療効果が時刻によって違細胞には組織因子というタンパク質が発現して外因系

うことも古くから知られている。一方で、体内時計に関す凝固反応を活性化し血栓を形成する。粘着し活性化る研究の進歩により、血液凝固系や線溶系など血栓のした血小板からは細胞内刺激物質が放出され、さらに形成に関わる反応系は体内時計によってコントロールさ

多くの血小板を活性化して大きな血栓を形成する。形

れていることが明らかになってきた。

成した血栓が組織への血流を妨げると、組織障害が本稿では、血液凝固系や線溶系に日内リズムがある

起こり脳梗塞や心筋梗塞が発生する（図 1）。一方、線ことを紹介し、体内時計による血液凝固線溶反応の制

溶系は凝固反応によりできた血栓を溶解させるシステム

御や、糖尿病や肥満が原因で起こる血栓症と時計遺として存在し、線溶系が働くことにより不必要な血栓が伝子との関係について、著者らがマウスを用いて行った血管内から除かれる。すなわち、凝固系が働くと止血研究成果を紹介しながら、体内時計と血栓症との関連や血栓形成の方向に作用し、血栓ができた時は線溶について考えてみたい。

系が働いて血栓を溶かすというバランスを保ち血液の図 1 末梢血管における止血機構

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図 2 血液凝固系と線溶系のしくみ
血液凝固線溶系は、血小板、血液凝固因子、凝固抑制因子、血液線溶因子などが複雑に相互作用して機能するが、これらが持つ日内リズムが血栓形成時刻の好発時
間出現に反映されると考えられる。

循環を維持している。図 2 は、本稿で紹介する血液凝一方、静脈に血栓ができる静脈血栓症は、血液が凝固

固反応と線溶反応およびこれらを調節する主な因子とする反応を抑制する因子（凝固抑制因子）の欠乏や形

その働きの全体像を示したものである。詳細は他の成成された血栓を溶解する因子（線溶因子）の異常など書や文献を参照されたい。
3. 血栓性疾患が発生しやすい時間は午前中である動脈硬化が起こり局所の動脈に狭窄が起こると、その部分で血流速度が増加して余分な力が加わる。それにより、動脈硬化巣の脂質を多く含んだ粥腫が破れると、そこに血小板が凝集して血栓が形成されて血流が止まる。そして、血流が止まった組織は障害されて心筋梗塞や脳梗塞が発生する。心筋梗塞や脳梗塞などの発 症 数は早 朝から午 前中に多いことがわかっている（図 3）1）2）3）。この原因は、起床後の交感神経の興奮による血圧上昇や心拍数の増加によって動脈硬化巣の粥腫が破れることが大きな原因となると考えられてきた。

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図 3 ヒトの生理機能および疾患の症状や発症に見られる概日リズム
心筋梗塞や脳梗塞の血栓性疾患の発症頻度には早朝から午前中にかけてピー
クとなる日内リズムが存在する

血栓症と体内時計が原因の一つであるといわれているが、静脈血栓症も内時計の本体であると考えられている。時計遺伝子は午前中に発症頻度も高いことが示されており1）4）、発症

脳内の時計中枢であるSCN だけでなく、心臓や肝臓、には、血 液 凝 固 系 因 子の日内リズムが何らかの形で腎臓、骨格筋、血管内皮細胞や血球細胞に至るまで個関っていると考えられる。興味深いものとして、長時間

体のほとんど全ての組織で発現している。DNA マイクロ

座った姿勢をとった後に発症するエコノミークラス症候

アレイを用いて行った網羅的な発現遺伝子解析により、群も静脈血栓症に属するが、発症に昼夜を通したロン

末梢組織においても数％から10％もの遺伝子が日周発

グフライトによる血液凝固線溶系のリズムの乱れが関わ現していることが報告された。著者らは、時計遺伝子

る可能性もある。この可能性を示唆する研究として、明Clock の変異マウスを用いた解析から、CLOCK が、糖・暗を変化させてジェットラグを模倣して飼育したマウスで脂質代謝や細胞周期，薬物代謝や免疫機能などに関わは、活動期の初めに亢進する凝固系ピークの時間がずる非常に多くの遺伝子の日周発現を制御している可能れることを示したものがある 6）。また、大地震後の避難性を示した 9）。これまで明らかとなったCLOCK の転写標

生活では、エコノミークラス症候群や虚血性心疾患の的遺伝子には、脂肪酸代謝系において中心的な役割を

発症頻度が著しく増加することが問題となっている

6）7）

担っているperoxisome-proliferator-activated receptor α。さらに、虚血性心疾患は大地震後に高い頻度で発（PPARα）
や、転写因子であるalbumin D-site binding

生するが、これらは夜 間から朝にかけて発 症 頻 度のprotein（ DBP）、細胞周期を調節しているWee1、そしてピークがある 。これには、地震のストレスによる血液凝血栓症と関連が深い PAI-1などがある。なお、文中のイタ

固系の亢進に加え、体内時計に依存した凝固線溶系

リック表記の clock、cryなどは遺伝子を示し、大文字のの日内リズムがかかわると考えられる。

CLOCK、CRYなどはそれらの遺伝子産物を示す。

8）7）4. 体内時計の分子メカニズム
体内時計は、ヒトなどの哺乳類だけでなくバクテリアな
どの原始的なものまで、地球上のほとんど全ての生物に存在し、個体の行動や様々な生理機能のサーカディアン
リズム（概日リズム）を作りだしている。哺乳類では脳内視床下部の視交叉上核（SCN）に時計中枢があり、活動リ
ズムや睡眠覚醒、血圧、体温、心拍数などの概日リズムを支配している。近年の研究で、概日リズムを刻む分子機構が明らかとなりつつあり、時計遺伝子間での転写調節を介したフィードバックループモデルが提唱されている（図4）。体内時計を構成する時計分子には、転写因子として特定の時計遺伝子の転写を活性化する正の制御

図 4 体内時計の分子機構

因子（CLOCK, BMAL1）と、正の制御因子の作用によって発現された後に正の制御因子の転写活性を阻害することによって、自身の発現を抑制する負の制御因子

5. 血栓形成に関わる因子の日内リズム（PER1, PER2, CRY1, CRY2, Rev-erbα）が存在する。

血 栓 形 成に関わる凝 固 因 子や線 溶 因 子の多くは、CLOCKとBMAL1 は，負の制御因子の遺伝子上に存

活性や血中濃度が日内リズムを示すことがわかってい在するE-boxという特徴的な配列（CACGTG）に結合しる。日内リズムを示す意義は明らかではないが、活動期て、負の制御因子の日周発現を制御している。従って、に止血する能力を高め、休息期に血液線溶活性を高

多くの時計遺伝子は明確な概日リズムを示しながら発現

めて血栓が溶解しやすくすることは、個体の生命維持しており、この約 24 時間周期のフィードバックループが体に重要なことであるのかもしれない。

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5.1 血小板の起きやすさに日内リズムがあること、また、第Ⅶ因子活

午前中に血小板が凝集しやすくなることが、動脈に発生する血栓が午前中に多いことの大きな要因である性のピークも活動期の初めにあることもマウスで示されている 17）18）。

と考えられてきた 10）11）。血小板は、外界からの様々な刺激に迅速に反応して凝集しやすくなる。血小板を活

5.3 血液凝固抑制因子

性 化 する刺 激には、カテコールアミン類、トロンビン、

凝固抑制因子は、凝固因子の活性を抑制し凝固反ADPなどのアゴニスト、コラーゲン、フィブリノーゲンなど応を調節する因子である（図 2）。凝固抑制因子の活性の多価タンパク質がある。血小板の凝集活性が日内リや量の低下は血栓を作りやすくなることに繋がる。これらズムを示すメカニズムについては不明な点が多いが、この因子のうちプロテインC、プロテインS、アンチトロンビ

れらのアゴニストや多価タンパク質の血中濃度の日内リン、外因系凝固インヒビター（TFPI）などは日内リズムをズムと密接な関連があると考えられる。午前中に血小板示すことがヒトの研究で示されている 19）。著者らのマウが凝集しやすい理由の最も有力なものに、起床後の活スによる検討では、ICR 系マウスでプロテインC やアンチ動量の増加に伴うカテコールアミン類の血中濃度の急

トロンビンの日内リズムがあることを示し、プロテインC にな上昇による血小板凝集能の増加が考えられる 10）。起

ついては mRNA の発現レベルで日内リズムが調節され床後の血圧上昇、心拍数増加に加え、活動量の増加ている可能性も示した 20）。ICR 系マウスではプロテインに伴って生じる血小板凝集能の亢進は、午前中に心筋Cもアンチトロンビンも活動期の初めに低値を示す傾向

梗塞や脳梗塞などが起こりやすくなることに深く関係すにあり、これらの凝固抑制因子の低下も活動期の初めると思われる。

の血栓傾向に関与している可能性が示された。また、
後述のようにトロンボモジュリンが日内リズムを示すことを

5.2 血液凝固因子

マウス個体やヒトの培養血管内皮細胞を用いた検討で静脈で血流がうっ滞して起こる血栓形成においても、示している 21）。

活性化した血小板膜上で血液凝固反応が進行して血栓が生じる動脈の血栓形成においても、血液凝固因子
は大きな役割を果たす。血液凝固因子の血液中の濃線溶系は組織型プラスミノーゲンアクチベーター（tPA）

度の日内リズムや、血液凝固因子が作用する形に変換

がプラスミノーゲンに作 用して生 成されたプラスミンにされる活性化の日内リズムについても多くの研究がなさ

よって、血栓の主成分であるフィブリンが溶解されるシスれてきた。これらの研究の中には、凝固反応の最終段

テムである（図 2）。血栓形成時の虚血状態などが刺激階で生成するフィブリンの前駆体であるフィブリノーゲンとなりtPA が大量に放出されると、tPA はフィブリンに結の血中濃度のピークは午前中に見られることを示したも合し、フィブリン上でプラスミンを効率よく生成しフィブリンの 12）、フィブリノーゲンをフィブリンに転換するトロンビンの溶解反応が始まる。一方、プラスミノーゲンアクチベーの生 成 量は午 前中に高い値を示すことを示したもの

ターインヒビター1（ PAI-1）は tPA の阻害タンパク質であ、健常人血中のⅦ因子活性が朝 8 時で昼 2 時にるが、PAI-1 は正常ヒト血漿中に tPAよりも大量に存在

13,14）

比べて有意に高いこと示したものなど、ヒトでは午前し、生成された tPAと速やかに結合して阻害するととも中に凝固因子の増加や凝固反応の活性化が起こるこに、tPAのフィブリンへの結合を阻害して線溶反応をコンとを示した報告がみられる。

トロールしている。従って血栓形成後に tPA が増加して

15）

著者らが行ったマウスの血漿を用いた検討では、フィブリノーゲン、第Ⅶ因子、第Ⅹ因子、プロトロンビンなどの10

5.4 血液線溶系因子

も血中 PAI-1 が増加するような状況では、プラスミンの生成が抑制され、正常な線溶反応が起こらない。

凝固因子の抗原量は一日中ほぼ一定であった。また、

線溶系因子のうち、PAI-1 は特に日内リズムが大きくて外因系凝固活性と内因系凝固活性の指標であるPT

明確なため、血栓症の日内リズムとの関連が注目されてや APTTも一日中ほとんどリズムしなかった。しかし、きた。PAI-1 は種々の疾患により遺伝子転写レベルで産一方で、血液凝固の活性化反応（外因系凝固反応）

生が影響を受けるが、その遺伝子の発現は、CLOCKTHE CHEMICAL TIMES

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16）

血栓症と体内時計とBMAL1/BMAL2 によって転写レベルで制御されており、PAI-1 遺伝子転写調節領域に存在するE-boxを介

6. 時計遺伝子変異マウスを用いた血液凝固線溶系の研究した日周発現を示す。ヒトPAI-1 遺伝子の転写調節領

著者らのグループでは時計遺伝子変異マウスを用い

域には 4G/5G 多型が存在している。疫学的に 4G/4Gて、血液凝固系や線溶系および血小板と体内時計との型で血中 PAI-1 値が高く、血栓症のリスクが高いことが関連を調べてきた。以下は、著者らのグループが行なっ知られているが、PAI-1 の日周 発 現を調 節しているてきた研究の成果を中心に解説する。なお、本稿におけE-boxと4G/5G 多型領域は重複しており、時計分子にる時刻表示は、明期を0 時から12 時、暗期を12 時から

よるPAI-1 発現の日内変動の制御に、この多型が影響

24 時としているが、げっ歯類であるマウスは夜行性であしている可能性も考えられる。朝の時間帯の血中 PAI-1

り、昼行性であるヒトとは昼夜が逆転している。すなわ

上昇が 4G/4G 型では他の遺伝子型に比べ有意に高く

ち、12 時から24 時が活動期である。マウスで夜間（12なるとの報告があることも興味深い

時から24 時）に見られる現象はヒトにおいては昼間に見。

22）

PAI-1 は、血管内皮細胞をはじめ、平滑筋細胞、心られるものと解釈して頂きたい。

筋細胞、脂肪細胞など多くの細胞により産生されており、血糖や脂質など様々な因子によって発現が制御され6.1 血液線溶系

る。血糖や脂質などが異常となる糖尿病や肥満などのマウス血漿を用いた検討で、線溶系の指標である血代謝性疾患では、血中の PAI-1 の上昇がみられる。詳

栓溶解活性（正確にはユーグロブリン溶解時間）に活

しくは後述するが、代謝性疾患で PAI-1 の上昇が起こ性が高い時間と低い時間があること、線溶系の日内リズ

ること自体にも体内時計が深く関係することがわかって

ムは PAI-1 の日内リズムと一致する結果であることを示きた。

した（図 5）。時計遺伝子変異マウスでの検討では、野生型マウスで見られた線溶活
性の日内リズムが、Clock 遺伝
子変異マウスでは消失していることがわかった。また、野生型 マウスでは 血 中 PAI-1 や
PAI-1 mRNAは日内リズムを示したが、Clock 遺伝子変異マ
ウス（Clk/Clk）では恒 常 的に
PAI-1 発 現 が 低 下していた（図 5）。マウス転写開始点付
近に E-box が存 在し、マウスにおいてもCLOCK 分子が直接 PAI-1 遺伝子の日周発現を制御していることも明らかにしている 23）。一方、Cry 遺伝子
KO マウス（Cry1/2 WKO）では
PAI-1 の発現が亢進するとともに、線 溶 活 性の日内リズムが消 失した（図 5）16）。Clock 遺図 5 野生型マウスと時計遺伝子変異マウスにおける線溶活性の日内リズムと血中 PAI-1 濃度
PAI-1は線溶を阻害するため、血中 PAI-1が上昇すると血栓が溶解するまでの時間は延長する。野生型マウスでは線溶活性に日内リズムが見られ、PAI-1 の日内リズムとの間に相関が見られたが、Clock 遺伝子変異マウス（Clk/
でこの日内リズムは消失していた。一方、Cry 遺伝子KO マウス（Cry1/2 WKO）
では線溶活性は一日を通してClk ）上昇し、血中の PAI-1も日内リズムを消失していた。
（文献 16より改変して引用）

伝 子 変 異マウスではプラスミ
ノーゲンが恒常的に高値を示し、CLOCK 分 子 が PAI-1 以

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外の分子の産生にも関り線溶を制御している可能性を点より上流の 2ヶ所にE-box が存在していた。レポーター

示した 16）。時計遺伝子変異による凝固系への大きな影

アッセイ法で時計遺伝子によるTM 遺伝子の転写調節

響は観察されなかった 16）。

機構を検討した結果、CLOCK-CLIF のヘテロ二量体
存在下で転写が促進することや、E-box への変異の導6.2 血液凝固系

入によりこの活性化が起こらなくなることなども確認して著者らの検討では、マウスの凝固因子について大きいる 21）。非常に興味深いのは、マウスの制限給餌によな日内リズムは確認できなかった 16）。また、時計遺伝子る実験で TM の日内リズムは末梢組織の時計遺伝子に変異マウスでも野生型マウスと血中濃度や mRNA で大より制御されていることを示したものである（図7）。このこ

きな差はみられなかったことから、時計遺伝子は凝固系とは、不規則な食事が、血栓を作らないように働く仕組に関連する因子には大きな影響を与えないと考えられ

みのリズムを乱す可能性を示すものであり、規則正しいる。ところで、血液凝固因子の異常や低下のスクリーニ

食生活が血栓の予防につながることを示唆するのかも

ング検査、抗凝固療法に用いられるワルファリンの効果しれない。

などはプロトロンビン時間（PT）や活性化部分トロンボプ
ラスチン時間（APTT）を利用して調べる。PT や APTTには日内リズムがみられるとの報告もあるが、著者らの結果を考えるとそのリズムは大きなものではなく、これらの測定に採血時間はさほど影響しないのかもしれない。
6.3 血液凝固抑制系
トロンボモジュリン（TM）は、血管内 皮細胞に発現する血栓を作らないように働くタンパク質で、血流中の凝固抑制タンパク質であるプロテインCを活性化してトロンビンの生成を抑制することで、血液の流動性を保つ役割を持つ。著者らはマウスを用いた研究で、肺におけるTM発現に日内リズムが存在することを示した21）（図6）。
Clock 遺伝子変異マウスの肺では、この発現のリズムが消失することから、TM 発現の概日リズム形成も時計遺伝子による発現制御の影響下にあることが示された。
また、ヒトTM 遺伝子の転写調節領域には、転写開始

図 7   トロンボモジュリンの日内リズムへの摂食の影響
マウス肺におけるトロンボモジュリンmRNA 発現の日内リズムは、制限給餌によって位相が変化した。
（文献 21より改変して引用）

図 6 野生型マウスと時計遺伝子変異マウスにおけるトロンボモジュリンの日内リ
ズム
野生型マウスではトロンボモジュリンの発現に日内リズムが見られ、Clock 遺伝
子変異マウスではこの日内リズムは消失していた。
（文献 21より改変して引用）

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6.4 血小板マウスの血小板機能の日内リズムをしらべてみると、
血 小 板の数は一日中ほとんど変 化 が 見られなかった

血栓症と体内時計（図 8）24）。しかし、マウスの出血時間（出血が止まるま

由はわからないが、マウスでは休息期に攻撃を受けたでの時間）には日内リズムがあり、マウスが行動しない時時にすぐに止血できるような生体防御機構を備えている

間には、出血が止まりやすいことがわかった（図 8）24）。

のかもしれない。

出血時間は血小板機能と密接に関連することから、血小板の凝集能を調べたところ、明期の朝 9 時では、暗期の夜 21 時と比較して血小板凝集能は著しく高い値

7. 糖尿病や肥満などの生活習慣病における血栓症と体内時計を示した（図 9）24）。Clock 遺伝子変異マウスで同様の糖尿病や肥満などの代謝異常による生活習慣病で検討を行ってみると、出血時間は一日を通して短縮し、は血 栓が出来やすい状 態になるが、これには血中の血小板の凝集活性は高いままであった。この結果から

PAI-1 増加が関与していると考えられる。肥満に伴い血血小板も時計遺伝子の支配を受けており、血小板の凝中に増加するインスリン、グルココルチコイド、VLDL、グ

集能は時計遺伝子の支配を受けて低下する傾向にあ

ルコース、中性脂肪や遊離脂肪酸や、肥満・糖尿病にることがわかった。ヒトでは活動期の初めに血小板の起 因 する慢 性 的な炎 症 状 態 で分 泌される TNFαや機能は増加するようであり、午前中の血栓症の発症と強TGFβなどの炎症性サイトカインによりPAI-1 産生は誘く関わるといえるが、マウスでは、休息期に活性が高い

導されるためと考えられる。生 活 習 慣 病 では、血 中ことがわかった。ヒトとマウスでこのような違いがある理

PAI-1 の上昇に加え日内リズムが血栓症発症の引き金24）になる可能性も考えられる。そこで我々は代謝異常におけるPAI-1発現と体内時計との関連性を解明するため、ストレプトゾトシンを投与して作った糖尿病モデルマウス
やレプチン欠損による肥満マウスモデル（ob/ob）26）お25）

よび高脂肪低炭水化物食であるケトンダイエット負荷による代謝異常マウス 27）を用いて検討を行った（図 10）。
これらのすべての病態モデルマウスにおいて、心臓、肝臓、脂肪組織などで PAI-1 の発現増加が認められ、血中の PAI-1も増加していた。PAI-1 は日内リズムを示した
まま上昇していることから、生活習慣病などの代謝異常に伴う血栓症発症には、体内時計が関与している可能性が考えられた。そこで、PAI-1 遺伝子の日内リズムを
直接転写制御している時計分子 CLOCK がどのように関与するかについて調べた。STZを投与したマウスで
図 8 Clock 遺伝子変異マウスにおける出血時間と血小板数の日内リズム（文献 24より改変して引用）

はインスリン分泌が低下し高血糖状態となるが、Clock
遺伝子変異マウスに STZを投与しても野生型マウスと同様に高血糖となり糖尿病が誘発された 25）。この糖尿

図 9 Clock 遺伝子変異マウスにおける血小板凝集の日内リズム（文献 24より改変して引用）図 10 糖尿病モデルマウス（A）、レプチン欠損肥満マウス（B）、ケトンダイエット
負荷マウス（C）における血中 PAI-1 抗原量の日内リズム（文献 25,26,27
より改変して引用）

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病になった Clock 遺伝子変異マウスの PAI-1を調べた
ところ、野性型マウスで見られたような日内リズムは消失

8. 加齢による血栓症と体内時計しており、PAI-1 増加も抑制されていた。従って、この糖「ヒトは血 管とともに老いる」と言われるように、加 齢尿病マウスにおけるPAI-1 発現亢進には Clock 遺伝子

は、肥満症や糖尿病などの生活習慣病と同様、血栓症が関与していること、すなわち、体内時計は糖尿病時にのリスク因子として考えられている。加齢に伴う血栓傾発生しやすくなる血栓症に関与していると考えられる。ま向には、動脈硬化などの血管自体の病態な変化とともた、肥満とそれによる糖尿病が原因の血栓症と体内時に、血液凝固第Ⅸ因子や第Ⅷ因子などの凝固因子の計の関係についてもPAI-1を対象に肥満モデルマウス

活性亢進や、血液線溶活性の低下が関与しているものを使って検 討した。この研 究では ob/ob マウスおよびと考えられる。著者らは、血液線溶系の阻害因子 PAI-1

ob/ob マウスとClock 遺伝子変異マウスとの交配を行の加齢に伴う発現変化について、マウスを使った日内リなって作製した Clock 遺伝子の変異した肥満モデルマ

ズムの観点から検討を行った（図 12）28）。5 週齢の若齢

ウスクロックClk/Clk;ob/ob マウスを作製して検討を行っマウスと、15カ月齢の中高齢マウスを用いて比較を行った 26）。ob/ob マウスでは血中 PAI-1 は日内リズムを持ったところ、血中の PAI-1 抗原量については、ともに休息たまま増加しており、肥満に伴うPAI-1 発現量増加に体期に低く活動開始時間帯に高い日内リズムが存在し、内時計が関与している可能性が考えられた。また、Clk/

若齢マウスと中高齢マウスの間には有意な差異が認め

Clk;ob/ob マウスは ob/ob マウスに比べて肥満が大きいられなかった。ところが、心臓におけるPAI-1 遺伝子のにもかかわらず、血中の PAI-1 濃度は肥満していない

mRNA 発現量については、中高齢マウスにおいて有意野生型マウスと同レベルまで低下していることがわかっ

な高値を示したばかりでなく、昼夜の発現リズムが消失た（図 11）。肥満や糖尿病患者では血栓症発症の頻していることが判明した。その一方で、おそらく血中の度が高いが、我々の結果は、体内時計の存在は血液PAI-1 抗原量を左右しているものと考えられる肝臓での凝固の日内リズムだけでなく凝固系因子の活性や量にPAI-1 発現については、中高齢マウスで有意に低値をも影響し、これらの患者の血栓症発症にも関わっている示しており、PAI-1 遺伝子発現に対する加齢の影響が、可能性を示すといえる。

臓器により特異的に制御されている可能性が示された。
心筋梗塞などの心血管障害のリスクが高齢者で高くなることを考えると、加齢に伴う心臓に特異的な PAI-1 発
現の増加がこれらの疾患の発症と深く関連する可能性が高い。今後、加齢に伴う心臓に特異的なPAI-1 発現の増加と疾患との関連や、分子メカニズムの解明が期待される。

図 11 ob/ob マウスの血中 PAI-1 の日内リズム（A）、Clk/Clk;ob/ob マウスの血中 PAI-1 濃度と脂肪組織のPAI-1 mRNA
（B）
ob/ob マウスでは血中 PAI-1 濃度は日内リズムを持ったまま増加しており、肥満に伴うPAI-1 発現量増加に体内時計が関与している可能性が考えられた。
Clock 遺伝子変異マウスとob/ob マウスの交配によって作製したClk/Clk;ob/ob では、脂肪のPAI-1 mRNA 発現量が顕著に増加したにもかかわらず、血中PAI-1 濃度が野生型レベルにまで低下していた。時計分子であるCLOCKが肥満や糖尿病に起因する線溶活性の低下に重要な役割を担う可能性を示すと思われる。
（文献 26より改変して引用）

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図 12  PAI-1 発現の日内リズムに与える加齢の影響
加齢により、若齢マウスで見られたPAI-1 mRNA 発現の日内リズムが消失する。
血中 PAI-1レベルの日内リズムには加齢の影響が認められないが、心臓では恒常的に発現が亢進する。
（文献 28より改変して引用）

血栓症と体内時計

9. おわりに
血液凝固線溶系に関わる様々な因子が日内リズムを示していることは明らかで、それらが複雑に関りあって
血液凝固線溶系全体としての日内リズムを形成していると考えられる。血液凝固線溶系や血小板機能の日内リズムを考慮に入れることが血栓症の予防や治療を行う上で重要であることは間違いなく、血栓症発症の日内リズムを生むメカニズムの解明が望まれる。また、体内時
計は日内リズムだけでなく、代謝性疾患や加齢による凝固因子の発現量の調節に関与することも明らかになってきた。今後の研究が進めば、時刻依存的な血栓症の予防や治療のみならず、生活習慣病や加齢に起因した血栓傾向の改善など、体内時計の調整によって行う血栓症の新しい治療や予防が可能になるかもしれない。
今後の研究が発展し血栓症の予防や治療に応用されることを期待する。なお、筆者らと共同研究者（女子栄
養大学・堀江修一教授）によるこの分野の他の解説も参照頂ければ幸いである 29-32）。

参考文献

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