グリカン分析ソリューション
製品セレクションおよび構成ガイド

モノクローナル抗体 (mAb) とその誘導体は、バイオ医薬品分子の中でも特に重要であり、治療用アプリケーションで幅広く利用されています。これらの分子のN-結合グリコシル化は、多くの生物学的プロセスで重要な役割を果たす複雑な翻訳後修飾であり、また、治療の効果、安定性、薬物動態、免疫原性にも影響を及 ぼします。

重要なワークフロー構成

グリカン分析の重要なワークフローは次のものから構成されます。アフィ

ニティ精製、酵素消化、還元、脱グリコシル化、および遊離グリカンを蛍光標識する AssayMAP Bravo 自動分注システム、タンパク質あるいはグリカン分離用の 1290 Infinity II LC、インタクトとサブユニットタンパク質分離用の PLRP-S、1000Å カラム、遊離グリカン分離用の AdvanceBio

Glycan マッピングカラム、質量測定用の 6545XT AdvanceBio Q-TOF、同定および定量用の MassHunter BioConfirm ソフトウェア。次に各要

AssayMAP Bravo 自動分注システム

Agilent AssayMAP Bravo 自動分注システムは、Prozyme GlykoPrep®

キットによって、グリカン分析のサンプル前処理の複雑なプロセスを自動化するシステムです。このシステムの驚くべきロボティクス技術による精度が、ユーザーやラボを問わず、結果の再現性を高めます。また、数個のサンプルから数十個、数百個のサンプルへと、実験規模のスケールアップ

素の特長と利点の詳細を示します。

やスケールダウンも自在に可能です。

2 つのワークフロー– 高精度の自動分注

グリカンの 特性分析 には、異 なる 2 つの 分析メソッドがあります。インタクトおよびサブユニットタンパク質レベルでグリコフォームをモニタリングします。これにより迅速 に 結果 が 得られ、主要 なグリカン 成分 を効率的 にスクリーニングできます。N-グリカンを遊離後 に 蛍光標識します。これにより非常 に 良好 な 定量 が 可能 になり、質量分析 で詳細 に 分析 することにより、 グリカン 構造 を同定 できます。いずれのワークフローも 本資料 の 後半 に 構成全体 の 詳細情報 を記載します。

特長:– 96 プローブシリンジ付きの AssayMAP Bravo ヘッド– 高精度の流量コントロールでカートリッジベッドを通過

利点:– 分析結果の再現性向上– 定量的結合と溶出– 高い洗浄効率– 溶出量がごく少量– 8 ～ 96 サンプルを同時処理

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Agilent 1290 Infinity II LC

6545XT AdvanceBio Q-TOF 質量分析計稼働時間を実現します。

で、質量精度および感度に優れた MS 結果を提供します。

– 特別に設計された流路コンポーネントによりサンプルの– 真空状態の向上 (10-8 真空)Agilent 1290 Infinity II LC は、グリカン分析で卓越した分離能、性能、特長:

拡散を最小限に抑制– デュアルニードル注入による高速注入サイクル– 標準的なアジレント LC モジュールの設置面積内で最大 6144 サンプルを収容– インテリジェントシステムエミュレーション技術 (ISET)

利点:– 分析結果の再現性向上– 定量的結合と溶出– 高い洗浄効率– 溶出量がごく少量– 8 ～ 96 サンプルを同時処理

Agilent AdvanceBio カラムのポートフォリオ

Agilent AdvanceBio Glycan マッピングカラムと逆相カラムのポートフォ

6545XT AdvanceBio LC/Q-TOF は、グリカンや糖タンパク質の分析

特長:– 新しい高分子 SWARM オートチューン手順および不安定な化合物のオートチューン– 質量範囲 30k m/z– 真空を開放することなくキャピラリの取り外しが可能

利点:– インタクトグリコフォーム/タンパク質スペクトルの分解能向上– MS シグナルが 4 倍以上増加– 高分子の透過率の向上– 不安定なグリカン構造を維持– 大気開放、真空排気、基本メンテナンスが不要

グリカン特性解析ソフトウェア

MassHunter BioConfirm ソフトウェアは、グリカン分析のためのグリカ

リオは、高分離能のグリカンマップが得られるように設計されています。

ンのデータベースと自動データ処理機能を備えています。

– 高速グリカン分析– サンプルバッチ分析と自動データ処理の設定が容易

特長と利点:– 高速、高性能を実現する UHPLC 1.8 µm 全多孔質カラム– 低圧で優れた分離能を得られる HPLC 2.7 µm 表面多孔質カラム– 独自の親水性結合相– MS および FLD の互換性

特長と利点:– 多数の商用またはカスタム仕様の蛍光色素識別タグに対応– パーソナル化合物データベース (PCD) にグリカンの精密質量情報および構造情報を網羅– Agilent Find by Formula アルゴリズムにより、グリカンの正確な同定が可能

3

インタクトグリコフォームのワークフロー

サンプル前処理
AssayMAP Bravo

アフィニティ精製

分離

検出1260 Infinity II

6545XT AdvanceBio

バイオイナート

1290 Infinity II LC

Q-TOF

データの処理およびレポート作成

MassHunter BioConfirm
B.09.00 ソフトウェア

PLRP-S 1000 Å カラム

ソリューションの構成
Agilent AssayMAP Bravo システム
AssayMAP Bravo

G5571AA

250 µL ピペットチップ

19477-002

20 L Heavy Duty Bottle And Cap
シリンジ交換キット

2 個必要です。

08091-001
G5409-68002

PlateLoc シーラー

G5585AA

アジレントタンパク質逆相カラム
PLRP-S、1000Å

42.1 x 50 mm、5 µm

PL1912-1502

ソリューションの構成、続き1290 Infinity II LC システム
1290 Infinity II ハイスピードポンプ

Agilent Lab Advisor Advanced ソフトウェア

超低拡散キット
ウルトラクリーンチューブキット

InfinityLab セーフティキャップスタータキット

デガッサユニット内蔵の 130 MPa ポンプ

G7120A
G7120A#004

ハイエンド MS アプリケーション用に強く推奨します。
キットに ULD フローセルは含まれていません。

ハイエンド MS アプリケーション用に強く推奨します。

G7120A#006
G7120A#033
G7120A#034

Agilent 1290 Infinity II マルチサンプラ

40 μL 分析ヘッドおよび 20 μL サンプルループ付き

G7167B

1290 Infinity マルチウォッシュオプション

キャリーオーバーを最小化します。

G7167B#112

Agilent Infinity II サンプル冷却器
1 段用引き出し

2 段高さ引き出し (2H)
40 μL サンプルループ
Agilent Infinity II マルチカラムサーモスタット
Quick-Change バルブ

各引き出しにウェルプレート 2 枚 (注文数 2) を収容できます。

各引き出しにウェルプレート 2 枚またはバイアルラック 2 個 (各ラックに 2 mL バイアル 54 個) を収容できます。

カラムクリップ 2 個付き標準クイックコネクト熱交換器 (1.6 µL) 1 個、InfinityLab クイックコネクトおよび InfinityLab クイックターンフィッティング 2 個が含まれます。
フィッティング 1 個、G7167B#100

G7167B#131
G7167B#132

G7116B

ヘッドは別途ご注文いただく必要があります。

G7116B#058

マルチカラム選択バルブヘッド 130 MPa

6 カラム選択バルブ

G4234C

セミミクロフローセル

容量 5 μL、6 mm、12 MPa

取り付け用バルブドライブ

低分散キャピラリキット、内径 0.12 mm

1290 Infinity II LC の点検

取扱説明

ステンレス製
溶媒インレットフィルタ、ボトルヘッドアセンブリ

InfinityLab フレックスベンチ

G4234C#005
G7115A#016
SYS-LC-1290II
SYS-LC-1290II#0A9

マルチウォッシュオプション用 (2 個ご注文ください)

01018-60025
G4220-60007
5043-1252

Agilent 6545XT AdvanceBio Q-TOF LC/MS システムバイオ医薬品市場用に設計され、インタクトタンパク質、ペプチド、および PTM レベルでの6545XT AdvanceBio Q-TOF LC/MS システム

モニタ

プリンタ

BioConfirm ソフトウェア
MS ベンチPEAK N2 ジェネレータ

生物製剤の特性解析に特化した Q-TOF。
Jet Stream イオン化、PC、モニタ 1 台、ネットワークハブ、
MassHunter Acquisition ソフトウェア 1 ライセンス、MassHunter Quant/Qual 2ライセンス、
ADC DAR カリキュレータオプション付き BioConfirm 1 ライセンス、およびG6549AA

LC カラム 3 本 (AdvanceBio ペプチドプラス 2.1 x 50 mm、AdvanceBio ペプチドマッピング

2.1 x 150 mm、2.7 μm、PLRP-S 1000 Å、2.1 x 50 mm、5 μm) のスタータパックが含まれます。
G6549AA#780
G6549AA#880

タンパク質、ペプチドおよびグリカンの特性解析用。
6549AA には 1 ライセンスが含まれます。

G6829AA
G3215A
G1953A#001

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遊離 N-グリカンワークフロー

サンプル前処理

分離

検出

AssayMAP Bravo GlykoPrep®

1260 Infinity II バイオイナート

6545XT AdvanceBio

AdvanceBio Glycan

柔軟な SWARM チューン

インスタント PC

1290 Infinity II LC

マッピングカラム、

1.8 µm、2.1 x 15 cm

Q-TOF

データの処理およびレポート作成

MassHunter BioConfirm
B.09.00 ソフトウェア

グリカンデータベース

遊離グリカン専用 (IPC)

ワークフロー

ソリューションの構成
Agilent AssayMAP Bravo システム
AssayMAP Bravo

G5571AA

250 µL ピペットチップ

19477-002

20 L Heavy Duty Bottle And Cap
シリンジ交換キット

PlateLoc シーラー

AssayMAP Digest and C18 Cleanup Kit

2 個必要です。

08091-001
G5409-68002
G5585AA

ペプチドマッピング用スタータキット

G5496-60013

2.1 x 100 mm、1.8 µm

858700-913

アジレントグリカンマッピングカラム
AdvanceBio Glycan マッピングカラム

6ソリューションの構成、続き
1290 Infinity II LC システム
1290 Infinity II ハイスピードポンプ

Agilent Lab Advisor Advanced ソフトウェア

超低拡散キット
ウルトラクリーンチューブキット

InfinityLab セーフティキャップスタータキット

デガッサユニット内蔵の 130 MPa ポンプ

G7120A
G7120A#004

ハイエンド MS アプリケーション用に強く推奨します。
キットに ULD フローセルは含まれていません。

G7120A#006

ハイエンド MS アプリケーション用に強く推奨します。

キットには、製造時のポンプの特殊洗浄手順が含まれます。

G7120A#033
G7120A#034

Agilent 1290 Infinity II マルチサンプラ

40 μL 分析ヘッドおよび 20 μL サンプルループ付き

G7167B

1290 Infinity マルチウォッシュオプション

キャリーオーバーを最小化します。

G7167B#112

Agilent Infinity II サンプル冷却器
1 段用引き出し

2 段高さ引き出し (2H)
40 μL サンプルループ
Agilent Infinity II マルチカラムサーモスタット
Quick-Change バルブ

各引き出しにウェルプレート 2 枚 (注文数 2) を収容できます。

各引き出しにウェルプレート 2 枚またはバイアルラック 2 個 (各ラックに 2 mL バイアル 54 個) を収容できます。

カラムクリップ 2 個付き標準クイックコネクト熱交換器 (1.6 µL) 1 個、InfinityLab クイックコネクト

および InfinityLab クイックターンフィッティング 2 個が含まれます。
フィッティング 1 個、G7167B#100

G7167B#131
G7167B#132
G7167B#150
G7116B

ヘッドは別途ご注文いただく必要があります。

G7116B#058

マルチカラム選択バルブヘッド 130 MPa

6 カラム選択バルブ

G4234C

1260 Infinity II 蛍光検出器

標準フローセル 8 µL を含む

G7121A

取り付け用バルブドライブ

低分散キャピラリキット、内径 0.12 mm

FLD 用セミミクロフローセル 4 µL

G4234C#005

G1321-60015

FLD 用標準フローセル 8 µL

G1321-60005

FLD 波長校正キット

G7121-68001

取扱説明SYS-LC-1290II#0A9

FLD 用バイオイナートフローセル 8 µL

G5615-60005

1290 Infinity II LC の点検

ステンレス製
溶媒インレットフィルタ、ボトルヘッドアセンブリ

InfinityLab フレックスベンチ

SYS-LC-1290II

マルチウォッシュオプション用 (2 個ご注文ください)

01018-60025
G4220-60007
5043-1252

Agilent 6545XT AdvanceBio Q-TOF LC/MS システムバイオ医薬品市場用に設計され、インタクトタンパク質、ペプチド、および PTM レベルでの6545XT AdvanceBio Q-TOF LC/MS システム

モニタ

プリンタ

BioConfirm ソフトウェア
MS ベンチPEAK N2 ジェネレータ

生物製剤の特性解析に特化した Q-TOF。
Jet Stream イオン化、PC、モニタ 1 台、ネットワークハブ、
MassHunter Acquisition ソフトウェア 1 ライセンス、MassHunter Quant/Qual 2ライセンス、
ADC DAR カリキュレータオプション付き BioConfirm 1 ライセンス、およびG6549AA

LC カラム 3 本 (AdvanceBio ペプチドプラス 2.1 x 50 mm、AdvanceBio ペプチドマッピング

2.1 x 150 mm、2.7 µm、PLRP-S 1000 Å、2.1 x 50 mm、5 µm) のスタータパックが含まれます。
G6549AA#780
G6549AA#880

タンパク質およびペプチドの特性解析用。
6549AA には 1 ライセンスが含まれます。

G6829AA
G3215A
G1953A#001

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サービスとサポート:

アジレントのサービスプランでは 、迅速 なオンサイトサポート、複数 ベンダにわたる 機器 サービ

ス 、機器 のリモ ート診断 など 幅広 いサービスを 通 じてラボの 運営 を 総合的 にサポートします 。
メンテナンス、コンプライアンス、トレーニング、ラボの移設など、お客様が抱える課題にア機器の修理、ジレントの専門エンジニアがすばやく対応します。
1 台の機器からラボ全体まで、効率の向上にお役立てください。

ホームページ

www.agilent.com/chem/jp

カストマコンタクトセンタ

0120-477-111email_japan@agilent.com
本製品は一般的な実験用途での使用を想定しており、医薬品医療機器等法に基づく登録を行っておりません。

本文書に記載の情報、説明、製品仕様等は予告なしに変更されることがあります。

アジレント・テクノロジー株式会社© Agilent Technologies, Inc. 2018
Printed in Japan, July 20, 20185991-9232JAJP