日本臨床検査標準協議会会誌

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2023

８．令和４年度 認証委員会・認証評価委員会報告
常用参照標準物質：JSCC 常用酵素（JCCLS CRM001e）の値付けに関する概要
Report of JCCLS Certification Committee for Reference
Materials and Committee for Certification Assessment in2022
The Overview of the value assignment for JCCLS
Certified Enzyme Reference Materials (JCCLS CRM001e)
高木康（ JCCLS 認証委員会委員長、昭和大学名誉教授）
Yasushi Takagi（ Chairperson of JCCLS Certification Committee for Reference
Materials, Professor emeritus for Showa University ）植田成（ JCCLS 認証評価委員会委員長、千葉科学大学准教授）
Shigeru Ueda （ Chairperson of JCCLS Committee for Certification Assessment,
Associate Professor, Chiba Institute of Science ）１．はじめに加藤CRM-001） の ロ ッ ト 更 新 を 行 い、 新 ロ ッ ト

荒木秀夫（日本大学病院）、常 用 参 照 標 準 物 質：JSCC 常 用 酵 素（JCCLS

多田正人（山梨大学病院）、（JCCLS CRM-001e）の設定を行った。設定手順

河西真史（旭化成ファーマ㈱）、と認証書は国際文書に従い準備した。

梅原
2.3

認証委員会：高木
矢冨康（昭和大学）、
裕（東京大学）、

2.2

事務局：

加藤英夫、梅田衞

3. 経過の概要

濱崎直孝（常任理事）、植田実（㈱シノテスト）、坂田裕二（日水製薬㈱）

2. 委員
2.1

愛（産総研）、

3.1

候補品製造の公募

常 用 参 照 標 準 物 質：JSCC 常 用 酵 素（JCCLS

成（千葉科学大学）

認証評価委員会：

CRM-001）のロット更新にあたり、候補品製造

久保野勝男（順天堂大学）、ロット（JCCLS CRM-001d） の設定条件および植田成（千葉科学大学）、の公募を令和 3 年 6 月に行った。公募内容は現石橋みどり（新東京病院）、規格を継続することとした。

山舘周恒（人間総合科学大学）、-32-日本臨床検査標準協議会会誌

3.22023

施設数は、各 18 〜 23 であった。以下に値付け

公募結果に参加した施設リストを記す。 旭化成ファーマ

常用参照標準物質：JSCC 常用酵素の候補品製㈱、栄研化学㈱、㈱エスアールエル、大阪大学医造の応募が旭化成ファーマ㈱からあった。これに学部附属病院、㈱カイノス、関東化学㈱、熊本大より候補品製造を旭化 成ファー マ㈱（AKP） に学病院、九州大学病院、慶應義塾大学病院、（一依頼した。尚、これまで AKP で実施していた候社）検査医学標準物質機構、国立循環器病研究セ

補品性能試験の中の評価項目「酵素の反応性」試ンター、シスメックス㈱、㈱シノテスト、順天堂

験が、社内倫理規定の厳格化により実試料の入手が困難になったため外部の検査室へ依頼したいとの提案があり、AKP が試験先を選定し交渉する、という条件で了承された。
3.3

第 38 巻 1 号

大学医学部附属浦安病院、㈱セロテック、積水メディカル㈱、天理よろづ相談所病院 ､ 東京大学医学部附属病院、日水製薬㈱、ニット−ボ−メディカル㈱、日本大学病院、浜松医科大学医学部附属認証値設定試験病院、富士フイルム和光純薬㈱、山梨大学医学部

認証値設定試験は、前ロットと同様に共同試験方式による手順で進めた。すなわち、1）共同試

験への参加依頼、2）試薬調製依頼、3）試験要綱、測定条件、報告書書式の作成、4）試料配布、5）
データ集計・解析、6）認証評価委員会の開催などである。認証評価委員会では、データの解析・評価と認証書案等を作成した。作成した認証書案

附属病院、ロシュ ･ ダイアグノスティックス㈱、㈱ LSI メディエンス（以上五十音順）。
4.2

認証値の設定手順

・CRM-001e の 値 付 け 共 同 実 験 に つ い て、 令 和
4 年 9 月に従来のロット更新手順と同様に実施した。

・ 用 手 法 は JSCC 勧 告 法 に 従 い、 自 動 化 法 は 勧および取扱説明書案は認証委員会に提出した。

告 法 に 準 じ 作 成 さ れ た JCCLS-SOP 法 に よ り

CRM-001d を校正標準として CRM-001e の測

４．認証評価委員会での協議概要定を実施した。

公募に先立ち、 令和 3 年 4 月 2 日に開催された認証評価委員会では、ロット更新の進め方、お4.3

認証値の不確かさ

・ 値付け参加施設の測定結果について、JCCLSよび大まかなスケジュール案が提示された。 まの HP 掲載不確かさ計算ソフトにより統計学的た、常用基準法が JSCC 法から IFCC 法へ変更さ

検定で外れ値を除外し、候補認証値と不確かされ た ALP 、LD に つ い て は、 す べ て の 施 設 で 置を求めた。不確かさの成分として、実験誤差、き換えが達成されているわけではないことを考慮均質性、上位標準の不確かさ、および CRM のし、今回に限り JSCC 法による認証値も併記することとした。

令和 4 年 12 月 7 日に認証評価委員会を開催し、

長 期 保 存 安 定 性 不 確 か さ か ら、CRM-001d の合成標準不確かさ、拡張不確かさを求めた。

認証値設定試験における測定データの解析・評価

・CRM-001e の保存安定性不確かさの評価につ本委員会での主な協議の概略は以下のごとくであトである d ロットの実保存データについて直および認証書案と取扱説明書案の作成を行った。

線回帰式による保存安定性の不確かさを評価る。
4.1

いて、AKP から概要説明がなされた。現ロッし、前 c ロットとほぼ同等であることを確認し、試薬の調製依頼、値付け共同試験参加依頼

試 薬 調 製 に つ い て は、 ㈱ カ イ ノ ス（ALP,e ロットの有効期間を 6 年として相対不確かさ

JSCC-ALP）、 関 東 化 学 ㈱（CK, LD）、 ㈱ シ ノ テス ト（ γ-GT, AMY, JSCC-LD, p-AMY, Lipase）、を見積もった結果、各項目の不確かさは、0.4〜 0.8％の範囲であった。

富士フイルム和光純薬㈱（ALT, AST）が担当し・ 現ロット 001d における ALP/LD の IFCC 法にその他の項目については各 4 、 自動化法の参加により値付けを実施し、さらに ALP は前ロッた。 用 手 法 の 参 加 施 設 数 は、ALP と LD が 5 、-33-よる認証値は、ISO Guide 35 に基づき用手法

日本臨床検査標準協議会会誌

第 38 巻 1 号

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計 11 社 に 依 頼 し た。ALT 、CK に お い て 001e

ト 001c の 暫 定 IFCC 値 で 校 正、LD は IRMM

か ら 頒 布 さ れ て い る ERM-AD453k（ 認 証 値

校正で自社キャリブレーターの測定値が表示値よ者で校正する自動化法により値付けを実施したが、その他のメーカーにおいてすべての項目でり若干低めになったという報告が 1 社からあっ330 U/L）及び CRM-001c の暫定 IFCC 値の両継続性に問題なし、という結果であった。

た。今回、ERM-AD453k の入手が困難だった

校 正 を 自 社 キ ャ リ ブ レ ー タ ー、CRM-001（dこともあり、001d の認証値で校正し、自動化で校正し e を測定、e で校正し d を測定）で実施法による値付けを実施した。

・ 認証値及び拡張不確かさの数値は、小数点以下後の CRM-001d 、CRM-001e の継続性確認試験

・CRM-001e の AST 、ALT 、CK 、ALP 、LD 、に示した（AMY は常用基準法と異なる基質を用四捨五入し整数として表記した。

γ-GT 、AMY 、JSCC-ALP 、JSCC-LD の 認

証 値と拡 張 不 確 かさを 表 1 のように 定 めた

（P-AMY 、LIP は参考値）。
表1

参加施設全体の測定値平均及び標準偏差を表 2いた施設があったため除外した）。
5. 認証委員会

令和 5 年 4 月 3 日開催の認証委員会において、認証値及び拡張不確かさ

前述の認証評価委員会の報告、認証書および取扱酵素

認証値
（U/L）

AST

1595

ALT1564LD4119CK45113

GGT1535ALP

42014AMY33910

IFCC-LD43612IFCC-ALP

1526P-AMY

1585LIP1265

説明書について確認と承認を行った。また、ラベ

不確かさ（ｋ＝２）

ル、認証書、取扱説明書の印刷、発売、頒布、ホームページ公表などのスケジュールについて協議した。

6. 課題

用手法参加施設数は、全ての項目において前回よりも減少し、項目当たり 4 ないし 5 施設であった。昨今、病院等検査室では用手法実施の機会が殆どないことがその要因のひとつとして挙げられる。更に、前回よりも用手法による測定値の施設間差が拡大しており、技術継承の点からも今後何らかの対策を講じる必要がある。

JCCLS CRM-001 の認証値設定手順（Ver.1.9）によれば、 現ロットの常用基準法による測定値の平均値が認証値±不確かさの範囲内であることを確認したのち、現ロットの認証値で校正し、4.4

JSCC/JCCLS 自動化法により、 新ロットとなる

継続性確認試験（ 一 社 ） 日 本 臨 床 検 査 薬 協 会 を 通 し て CRM-候補品を測定し、 特性値を求めることになって

001e 値付け用試薬調製依頼先メーカー 4 社（カいる。今回、用手法で上記範囲を外れた CK におイノス、シノテスト、関東化学、富士フイルム和

いて、 用手法参加施設数は 4 、 そして認証値±

光純薬）及び、自社キャリブレーターを有し継続

不 確 か さ 及 び 用 手 法 実 測 値 は そ れ ぞ れ、425 ±性確認試験を希望するメーカー 7 社（シーメンスヘルスケア、デンカ、ニットーボーメディカル、ベックマン・コールター、ロシュ・ダイアグノス

ティクス、LSI メディエンス、積水メディカル）、-34-

10 、450 U/L であり、実測値は認証値より若干高めの結果となった。これについては、製造元である AKP の長期安定性の実データ、および現ロットと新ロットを用いた継続性確認試験結果から、

日本臨床検査標準協議会会誌

表2

継続性確認試験

CRM-001

第 38 巻 1 号(U/L)

ロット

認証値

不確かさ 平均値

ｄ1604e159

5ｄ

1584

e1564ｄ425

10e45113ｄ153

5e153

5ｄ430

11e43612ｄ153

6e152

6AST

ALT

CK

GGT

LD-IFCC

ALP-IFCC

ｄ406

8

e411

9ｄ424

13e42014

LD-JSCC

ALP-JSCC-35-

標準偏差 校正

160.5

3.0

自社キャリブ

158.4

2.1d又はe

158.7

1.4

自社キャリブ

158.4

2.1

d又はe

158.6

2.5

自社キャリブ

156.1

2.5d又はe

158.4

1.7

自社キャリブ

158.7

1.4d又はe

421.4

5.8

自社キャリブ

424.7

3.2d又はe

446.8

6.3

自社キャリブ

450.4

10.6

d又はe152.9

2.4

自社キャリブ152.7

1.4

d又はe153.0

2.0

自社キャリブ

153.0

1.3

d又はe433.0

11.2

自社キャリブ429.0

3.0

d又はe437.5

5.2

自社キャリブ

436.4

2.4

d又はe

152.0

2.3

自社キャリブ152.1

1.6

d又はe151.4

1.9

自社キャリブ

152.4

1.7

d又はe

402.1

2.7

自社キャリブ405.7

1.4

d又はe407.2

3.7

自社キャリブ

411.2

1.5

d又はe

419.7

4.6

自社キャリブ

420.6

3.4

d又はe418.3

2.5

自社キャリブ422.4

3.5

d又はe2023

日本臨床検査標準協議会会誌

第 38 巻 1 号

2023

現ロット認証値の変動とは考えられず、今回認め東化学㈱、熊本大学病院、九州大学病院、慶應義技に起因すると判断した。

立循環器病研究センター、シスメックス㈱、㈱シられた認証値と実測値との差異は用手法の測定手塾大学病院、（一社）検査医学標準物質機構、国最後に、今回のロット更新作業は令和 4 ‑ 5 年

ノテスト、順天堂大学医学部附属浦安病院、㈱セ度 JCCLS 認証評価委員会が担当した。また、測ロテック、積水メディカル㈱、天理よろづ相談所

定の実施についての試薬などの準備は（一社）日本臨床検査薬協会

病院 ､ 東京大学医学部附属病院、日水製薬㈱、ニット−ボ−メディカル㈱、日本大学病院、浜松医科技術委員会を通じて依頼した。共同実験に際し、以下のユーザー施設ならび大学医学部附属病院、富士フイルム和光純薬㈱、にメーカー施設の協力を得た。ここに関係者に深山梨大学医学部附属病院、ロシュ ･ ダイアグノス

ティックス㈱、 ㈱ LSI メディエンス（以上五十く謝意を表します。

音順）。

旭化成ファーマ㈱、栄研化学㈱、㈱エスアール

エル、大阪大学医学部附属病院、㈱カイノス、関-36-日本臨床検査標準協議会会誌

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2023 年 4 月作成

JCCLS 認証標準物質
常用参照標準物質：JSCC常用酵素Reference Standard-JSCC【Enzyme（JCCLS Certified Reference Standard for Enzymes of JSCC method）[旧：日本・常用酵素標準物質 JCCLS certified enzyme reference material]

認 証 書【JCCLS CRM-001e
日本臨床化学会（JSCC）は 1989 年および 1994 年にヒト血清中の AST、ALT、CK、ALP、LD、γ-GT 活性測定の勧告法を提示した。本品はこれら JSCC 勧告法をもとに提示された JSCC 常用基準法の値を日常検査法に伝達するための標準物質であり、日本臨床化学会学術連絡委員会の規格に則り作製されたものである。AMY については、国際臨床化学連合（IFCC）の IFCC-SOP 法 37℃に基づいている。なお、ALP と LD についても、2020 年 4 月にJSCC 常用基準法から諸外国で広く用いられている IFCC の基準測定操作法へ移行されたため、これを反映した値となっている（今回は JSCC 値も併記）。

【【適用範囲】

本常用参照標準物質：JSCC 常用酵素（JCCLS CRM-001e）は、ISO 17511（2020）による計量学的トレーサビリティの二次校正物質に相当し、製造業者社内標準測定操作法（製造業者自社推奨測定操作法）のための校正物質として適用する。使用に際しては必ず添付取扱説明書の記載に従い使用すること。

【【認証値及び不確かさ】

JCCLS CRM-001e の認証値および不確かさは以下の通りである。
項目名
AST
ALT
CK
IFCC-ALPIFCC-LD
γ－GT
AMY＊2
JSCC-ALP＊2
JSCC-LD

認証値（U/ L）
159156451152436153339420411

測定温度：37 ℃
拡張不確かさ（U/ L）＊1±5±4±13±6±12±5±10±14±9【【認証値は､ISO GUIDE 35 に基づいた方法により決定した。不確かさの成分は、均質性と実験誤差成分、校正に用いた標準物質の不確かさ、および安定性を含む総合的な拡張不確かさ（包含係数 k＝2）として示した。
＊2
JSCC-ALP 及び JSCC-LD 値は ISO GUIDE 35 に準じて値付けを行っており、今回は、JSCC 値も併記した。
＊1【認証値の測定方法及び測定施設】

JCCLS CRM-001e の 認 証 値 の 測 定 は、JCCLS-SOP 及 び IFCC-SOP 法 に よ り 実 施 し た。JCCLS-SOP 法 は、JSCC 勧告法に準じ作成した。測定には、旭化成ファーマ（株）、栄研化学㈱、（株）LSI メディエンス、（株）エスアールエル、
大阪大学医学部附属病院、（株）カイノス、関東化学（株）、九州大学病院、熊本大学病院、慶應義塾大学病院、（一社）検査医学標準物質機構、国立循環器病研究センター、シスメックス（株）、（株）シノテスト、順天堂大学医学部附属浦安病院、㈱セロテック、積水メディカル（株）、天理よろづ相談所病院 / 天理医療大学､東京大学医学部附属病院、日水製薬（株）、ニット－ボ－メディカル（株）、日本大学病院、浜松医科大学医学部附属病院、富士フイ
ルム和光純薬（株）、山梨大学医学部附属病院、ロシュ･ダイアグノスティックス（株）（以上五十音順）が参加した。

-37-

2301_日本臨床検査標準協議会_能書.indd 1【１/１日本臨床検査標準協議会会誌

成第 38 巻 1 号

2023

JCCLS：Japanese Committee for Clinical Laboratory Standards; 日本臨床検査標準協議会
IFCC：International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine；国際臨床化学連合
SOP：Standard Operating Procedure；標準操作法
JSCC：Japan Society of Clinical Chemistry; 日本臨床化学会【トレーサビリティ】

AST、ALT、CK、γ-GT、AMY、JSCC-ALP、JSCC-LD は JSCC の常用基準法に準じ作成した JCCLS-SOP 法にて測定した。従って､本標準物質の認証値を伝達した試薬キットは JSCC 常用基準法にトレーサブルな測定結果が得 ら れ る。な お､CK、γ-GT、AMY の JCCLS-SOP 法 は IFCC-SOP 法 と 同 一 で あ る。ま た、IFCC-ALP とIFCC-LD は IFCC-SOP 法に準じ作成した JCCLS-SOP 法にて測定した。

【基材及び製造方法】

本 JCCLS CRM-001e は､日本臨床化学会学術連絡委員会による常用酵素標準物質（常用参照標準物質）の規格（1996-02-15）および常用酵素標準物質（常用参照標準物質）の性状（Ver.1.0）に従って調製した。なお、原料に用いた酵素の起源は、以下の通りである。
AST ：ヒト組換え体（肝型遺伝子）
ALT ：ヒト組換え体（肝型遺伝子）
CK ：ヒト組換え体（骨格筋型遺伝子） ALP ：ヒト組換え体（肝型遺伝子）
LD ：ヒト組換え体（１型遺伝子）
γ-GT：ヒト組換え体（肝型遺伝子）
AMY ：ヒト組換え体（膵型遺伝子）およびヒト唾液
また、基材にはウシ血清アルブミン（BSA）を用いた。

定すは、に値【認証日付及び認証機関】
2023 年 4 月 3 日

公益社団法人 日本臨床検査標準協議会

ィて

令和 4 年度認証委員会委員長

高木康

令和 4 年度認証評価委員会委員長

植田成【使用方法及び使用上の注意等】
使用方法、使用上の注意、保存方法、有効期限及び形状と包装単位は取扱説明書に記載。

【認証書の複製について】
事前の承認なしにこの認証書の一部分のみ複製して用いてはならない。

【参考文献】
１）日本臨床化学会学術連絡委員会：常用酵素標準物質の規格（1996-02-15）
臨床化学 1996;25:135-148２） JCCLS 認証委員会標準物質小委員会 WG：酵素標準物質（ERM）Lot 004 の設定概要．
日本臨床検査標準協議会会誌 2004;19:1-52３） G.Shcumann, et al. IFCC primary reference procedures for the measurement of catalytic
activity concentrations of enzymes at 37ºC: Part 8. Reference procedure for the measurementof catalytic concentration of α-amylase. Clin Chem Lab Med 2006；44（9）：1146-1155４） TP.Linsinger et al. Estimating the uncertainty of stability for matrix CRMs.
Fresenius J Anal Chem 2001；370：183-188５） G.Shcumann, et al. IFCC primary reference procedures for the measurement of catalytic
activity concentrations of enzymes at 37ºC: Part 9. Reference procedure for the measurement of catalytic
concentration of alkaline phosphatase. Clin Chem Lab Med 2011；49（9）：1439–1446
６） G.Shcumann, et al. IFCC primary reference procedures for the measurement of catalytic
activity concentrations of enzymes at 37ºC: Part 3. Reference Procedure for the Measurementof Catalytic Concentration of Lactate Dehydrogenase. Clin Chem Lab Med 2002 ; 40（6）：643–648に。

は、ー一学附イた。

【発行】

JCCLS 公益社団法人 日本臨床検査標準協議会〒101－0047 東京都千代田区内神田 2－7－13 山手ビル 3 号館 6 階
TEL：03-6206-9746、FAX：03-6206-9747

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