日呼吸誌●原6（3），2017115著

市中病院における T- スポット®.

とクォンティフェロンの偽陰性率の比較

中尾

心人ａ

村松

秀樹ａ

鈴木

悠斗ａ

酒井

祐輔ａ

香川

友祐ａ

黒川

良太ａ

伊藤

直之ｂ

諸戸

昭代ｂ

藤本佐希子ｃ佐藤

英文ａ

要旨：T-Cell Xtend® 使用下 T- スポット®.TB（T-SPOT with TCX）の偽陰性率が高いとの報告がある．活動性結核での T-SPOT with TCX と第三世代クォンティフェロン（QFT-3G）の偽陰性率を比較した．当院の結核菌培養陽性患者で T-SPOT with TCX 施行は 37 例，QFT-3G は 18 例であった．T-SPOT with TCX では 9例が陰性であったが，QFT-3G では陰性例はなかった．T-SPOT with TCX は QFT-3G よりも偽陰性率が高い可能性がある．
キーワード：IGRA，T-SPOT，QFT-3G，活動性結核，偽陰性
IGRA, T-SPOT, QFT-3G, Active tuberculosis, False-negative緒

言

研究対象と方法

結核の補助診断として，インターフェロンγ 遊離試験

2010 年 8 月から 2016 年 3 月に，当院において小川培（interferon-gamma release assay：IGRA）である T-ス

地または液体培地［mycobacteria growth indicator tube

ポット®.

（T-SPOT）と第三世代クォンティフェロン

（MIGT）法］にて，抗酸菌培養が陽性となり結核菌が同（QFT-3G）が広く使用されている ．T-SPOT では T-Cell

定できた活動性結核（肺結核または肺外結核）患者を，（TCX）を添加することで検査までの時間を延長

本研究の対象とした．対象となった活動性結核患者のうできるとされており，TCX 使用下 T-SPOT（T-SPOT

ち，T-SPOT with TCX または QFT-3G が施行された症with TCX）が実地臨床では用いられている2）3）．

例について，後方視的に検討した．IGRA は全例治療開1）®

T-SPOT は QFT-3G と比較し，肺結核，肺外結核のい始前に行われた．

ずれに対しても優れた感度をもつとされているが ，T-

QFT-3G については，3 本の専用採血管（陽性コント

SPOT の 診 断 特 性に関するこれまでの報告の 多 く は

ロール，陰性コントロール，特異抗原）に血液を各 1 ml

TCX 未使用下での検討と思われる3）．近年，活動性結核ずつ採取した．採血後，強く振りすぎないように試験管における T-SPOT with TCX の実地臨床における有用性

を上下に 5 秒間または 10 回程度振って混合し，採血管のが検討され，TCX 未使用下 T-SPOT と比べて偽陰性率

内表面が血液で覆われていることを確認した．採血は午が高い可能性が報告されている ．そこで今回我々は，前中に行い，採血前に採血管は室温（約 18〜25℃）に当院にて活動性結核と診断された症例のうち，T-SPOT

なっていることを確認した．また採血後は室温で保管

with TCX または QFT-3G が施行された症例を対象に，し，外部検査受託機関へ搬送，同日午後に検査を開始しそれぞれの検査の偽陰性率を後方視的に比較検討したのた．判定は QFT-3G の添付文書6）に基づいて行った．

4）
5）

2）

で報告する．

T-SPOT については，ヘパリン採血管に採取された血液 6 ml を用いた．採血検体は室温を維持した状態で当日中に外部検査受託機関へ搬送され，搬送後に TCX が添

連絡先：中尾 心人〒498‑8502 愛知県弥富市前ヶ須町南本田 396
ａ

JA 愛知厚生連海南病院呼吸器内科

ｂ

同

ｃ

臨床検査技術科

同 感染制御部（E-mail: kokoro1979@gmail.com）（Received 11 Jan 2017/Accepted 21 Feb 2017）

加された．その後は 32 時間以内に T-SPOT の検査手順に従い測定された．判定は T-SPOT の添付文書7）に基づいて行い，判定保留についての再検査は行わなかった．
IGRA を施行した活動性結核患者について診断時の年
齢，性別，body mass index（BMI），喫煙歴，performancestatus（PS），リンパ球数，アルブミン値，併存疾患，主訴，罹患部位，胸部画像所見，痰塗抹陽性の有無といっ

日呼吸誌

116

6（3），2017

表 1 患者背景

年齢
≦40
41〜60
61〜80
≧81
性別
男性
女性
診断時の BMI（kg/m2）＜18.5
18.5 以上 22 未満
22 以上 25 未満
≧25
不詳
喫煙歴
非喫煙者
喫煙経験者
不詳
PS
0
1
2
3
4
併存症（重複あり）
糖尿病
悪性腫瘍
慢性腎臓病・維持透析
慢性肝炎・肝硬変
ステロイド・免疫抑制剤使用
リンパ球数（cells/μl）＜500
500 以上 1,000 未満
1,000 以上 1,500 未満≧1,500アルブミン（mg/dl）＜2.5
2.5 以上 3.0 未満
3.0 以上 3.5 未満≧3.5不詳

QFT-3G 群（％）
（N＝18）

T-SPOT 群（％）
（N＝37）

4（22.2）3（16.7）
6（33.3）4（22.2）6（16.2）5（13.5）14（37.8）
12（32.4）

13（72.2）
5（27.8）19（51.4）
18（48.6）4（22.2）5（27.8）2（11.1）0（0.0）
7（38.9）9（24.3）15（40.5）9（24.3）3（8.1）
1（2.7）

5（27.8）10（55.6）3（16.7）18（48.6）
18（48.6）1（2.7）

6（33.3）7（38.9）2（11.1）
2（11.1）1（5.6）

18（48.6）
7（18.9）3（8.1）
4（10.8）5（13.5）2（11.1）
2（11.1）3（16.7）2（11.1）3（16.7）4（10.8）6（16.2）2（5.4）
3（8.1）
2（5.4）

3（16.7）4（22.2）5（27.8）6（33.3）4（10.8）7（18.9）10（27.0）16（43.2）

2（11.1）4（22.2）4（22.2）7（38.9）1（5.6）

3（8.1）
5（13.5）4（10.8）25（67.6）0（0.0）

p 値*
0.933

0.160

0.877

0.360

0.541

−

0.873

0.266

*Fisherʼs exact test．BMI：body mass index，PS：performance status．

た項目について診療記録をもとに後方視的に検討した．
統計解析には Fisherʼs exact test を用い，危険率 5％を有意水準とした．

結果

当院での IGRA は，2010 年 8 月から 2013 年 4 月まで

本研究は臨床研究として，愛知県厚生農業協同組合連

は QFT-3G，2013 年 5 月から 2016 年 3 月は T-SPOT with合会海南病院の倫理委員会の承認を得ている（承認番号

TCX を採用していた．2010 年 8 月から 2016 年 3 月に当281206-01）．

院で活動性結核と診断された症例は 121 例（培養陽性例のみ）であった．活動性結核 121 例中，QFT-3G を行った症例は 18 例，T-SPOT with TCX を行った症例は 37

T-SPOT と QFT-3G の偽陰性率の比較

表2

症状，主病巣および肺結核の画像所見
QFT-3G 群（％）
（N＝18）

T-SPOT 群（％）
（N＝37）

主訴
無症状
咳・痰
発熱・発汗
食欲低下・体重減少
呼吸困難感
血痰・喀血
胸痛
腰痛
股関節痛
腫瘤触知
意識レベル低下症状なしあり

3（16.7）4（22.2）3（16.7）1（5.6）
2（11.1）1（5.6）
0（0.0）
2（11.1）0（0.0）
1（5.6）
1（5.6）

16（43.2）
6（16.2）6（16.2）5（13.5）0（0.0）
1（2.7）
1（2.7）
0（0.0）
1（2.7）
1（2.7）
0（0.0）

3（16.7）15（83.3）

16（43.2）
21（56.8）

肺病変の有無肺結核
肺外結核
脊椎カリエス
リンパ節結核
結核性胸膜炎関節結核

14（77.8）4（22.2）21
1
034（91.9）3（8.1）
01
1
1（N＝14）（N＝34）

3（21.4）7（50.0）4（28.6）16（47.1）
11（32.4）
7（20.6）12（85.7）2（14.3）25（73.5）9（26.5）1（7.1）
12（85.7）1（7.1）

8（23.5）26（76.5）0（0.0）

3（21.4）11（78.6）8（23.5）26（76.5）

肺結核
病型（肺病変の広がり）
1：一側肺の 1/3 まで
2：1 と 3 の間
3：一側肺を超える
肺内空洞の有無なし
あり
肺野散布影の有無なし
あり
粟粒状
痰または胃液の抗酸菌塗抹
陽性
陰性

117

p 値*
―

0.072

0.200

0.266

0.469

0.192

1.000

*Fisherʼs exact test．

例であった．

性腫瘍が 6 例で糖尿病が 4 例などとなっていた（一部重患者背景および受診時の状況を表 1 に示す．QFT 群

複）． リ ン パ 球 数 が 1,000/μl 未 満 の 症 例 は QFT 群 で18 例（男性 13 例，女性 5 例）の年齢は 19〜90 歳（年齢38.9％，T-SPOT 群では 29.7％であり，アルブミン 3.0 g/

中央値 66 歳）で，T-SPOT 群 37 例（男性 19 例，女性

dl 未満の症例は QFT 群で 33.3％，T-SPOT 群では 21.6％

18 例）は 16〜92 歳（年齢中央値 77 歳）であった．年齢であった．リンパ球数およびアルブミン値について，両および男女比については統計学的に有意な差を認めな群間で統計学的に有意差を認めなかった．

かった．いずれの群においても，BMI が 22kg/m 未満の初診時の症状，主病巣および肺結核の画像所見につい症例が多く，PS は 0〜1 の症例が 2/3 以上を占めていた．

て表 2 に示す．受診時の主症状は，咳・痰や発熱・盗汗

QFT 群では 6 例，T-SPOT 群では 12 例が併存疾患を伴っといった症状がいずれの群でも多かったが，健診時異常ており，QFT 群では慢性腎臓病・維持透析例とステロイ

影などを契機に受診した無症状受診者が T-SPOT 群でや

ド・免疫抑制剤使用例が各 3 例ずつ，T-SPOT 群では悪や 多 い 傾 向 に あ っ た（p＝0.072）． 肺 外 結 核 の 割 合 は

2

日呼吸誌

118

QFT 群で 22.2％，T-SPOT 群で 8.1％であった．肺結核

表 3 活動性結核患者での QFT-3G と
T-SPOT with TCX の陽性率の比較

症例に関して，肺病変の広がり，肺内空洞の有無，塗抹

QFT-3G

T-SPOT with
TCX

陽性
陰性
判定保留または
判定不可 *

15
0
3

27
9
1

0.016

合計人数

18

37

55

判

定

p 値#

陽性結核の割合といった項目については，両群間で統計学的に有意差は認めなかった．
QFT 群と T-SPOT 群における IGRA の判定結果を表3 に示す．T-SPOT 群は 37 例のうち 9 例（24.3％）が陰性であったが，QFT 群では陰性例を認めなかった．判定* 判定保留は QFT-3G で 2 例，T-SPOT で 1 例．判定不可は QFT#
Fisherʼs exact test．
3G で 1 例．

表4

年齢
≦40
41〜60
61〜80
≧81
性別
男性
女性
診断時の BMI（kg/m2）＜18.5
18.5 以上 22 未満
22 以上 25 未満
≧25
不詳
喫煙歴
非喫煙者
喫煙経験者
不詳
PS
0
1
2
3
4
併存症（重複あり）
糖尿病
悪性腫瘍
慢性腎臓病・維持透析
慢性肝炎・肝硬変
ステロイド・免疫抑制剤使用
リンパ球数（cells/μl）＜500
500 以上 1,000 未満
1,000 以上 1,500 未満≧1,500アルブミン（mg/dl）＜2.5
2.5 以上 3.0 未満
3.0 以上 3.5 未満≧3.5

6（3），2017

保留は QFT 群で 2 例，T-SPOT 群で 1 例であり，判定
不可は QFT 群で 1 例であった．判定結果について QFT

T-SPOT の判定と患者背景

陽性（N＝27）

陰性
（N＝9）

判定保留
（N＝1）

4
4
10
9

1
1
4
3

1
0
0
0

12
15

7
2

0
1

8
10
7
2
0

1
4
2
1
1

0
1
0
0
0

15
11
1

2
7
0

1
0
0

12
5
3
4
3

5
2
0
0
2

1
0
0
0
0

3
3
2
2
2

1
3
0
1
0

0
0
0
0
0

3
6
7
11

2
1
2
4

0
0
0
1

0
5
4
18

3
0
0
6

0
0
0
1

p 値*
0.756

0.124

0.913

0.121

0.853

―

0.922

0.036

*Fisherʼs exact test．BMI：body mass index，PS：performance status．

T-SPOT と QFT-3G の偽陰性率の比較

表5

119

QFT-3G と T-SPOT with TCX の比較
QFT-3G

保険点数#
保険収載年月
採血管量と採血管数
採血後の混和

T-SPOT with TCX

630 点
2009 年 4 月
専用採血管で 1 ml を 3 本
5 秒間または 10 回振り十分に混和（この際に強く振りすぎない）
ESAT-6，CFP-10，BT7.7 を混合して刺激
16 時間以内
24 時間以内ELISA 法
（血漿中の IFN-γ を定量）
比較的簡便
93.7
93.8
なし

刺激抗原
採血後の抗原刺激までの時間
抗原刺激時間IFN-γ 測定法
検査の操作性感度（％）
特異度（％）
免疫不全患者での有用性

630 点
2012 年 11 月
ヘパリン採血管で 5〜6 ml（1 本）
不要
ESAT-6，CFP-10 を別に刺激
32 時間以内
24 時間以内
ELISPOT 法（IFN-γ 産生細胞のスポット数を計測）
リンパ球を分離精製する操作があり複雑
97.5*
99.1*
あり

* 感度および特異度は TCX 未使用下での結果を示す．#2016 年 12 月時点での保険点数．

群と T-SPOT 群の 2 群間に，統計学的に有意な差を認めが一定ではない，④結核治療による反応の減弱・陰転化

た（p＝0.016）．

がある，⑤ QFT-3G と T-SPOT の結果が必ずしも一致し

表 4 に，T-SPOT with TCX の陽性例 27 例と陰性例 9ない1）9）〜11）．

例に分けた患者背景を示す．年齢，性別，BMI，喫煙歴，

QFT-3G と T-SPOT の相違点を表 5 に示す．QFT-3G

PS，リンパ球数に関して両群間で統計学的な有意差は認

は，採血現場における採血管の振り方，採血量や検体保めなかった．ステロイド・免疫抑制剤使用例は T-SPOT

管温度など，適切な運用が行われなければ，正確な結果

陽性群で 2 例，陰性群は 0 例，糖尿病は陽性群で 3 例，が得られないことが報告されている12）．一方で T-SPOT

陰性群で 1 例であった．アルブミン値に関してはアルブ

は，採血現場における検体の取り扱いが QFT-3G より簡ミン 2.5 g/dl 未満の症例が T-SPOT 陰性群で多く，両群便であり，また TCX を添加することで採血から検体処間で統計学的に有意な差を認めた（p＝0.036）．

理までの時間的猶予ができるという特徴がある3）11）12）．さ考

察らに，T-SPOT で使用される ELISPOT 法はリンパ球を分離して数を調整する過程があるため，QFT に比べ，検当院にて活動性結核と診断された患者のうち，QFT-

査の操作性が比較的複雑であるがリンパ球数が減少して3G または T-SPOT with TCX を施行した 55 例の IGRA

免疫能が低下するような患者においても感度低下は少なの結果を解析した．T-SPOT with TCX を施行した 37 例

いとされている13）．

について感度は 73.0％であり，9 例（24.3％）の偽陰性が添付文書によると T-SPOT の感度と特異度はそれぞれ存在した．一方で QFT-3G については，感度が 83.3％で97.5％，99.1％であり，QFT-3G の感度と特異度（それぞあり偽陰性例は認めなかった．

れ 93.7％，93.8％）より高く，また採血現場での検体取当院は愛知県西部の，結核病床を有さない 540 床の急り扱いや検査開始までの時間的制約の面からも，市中病

性期総合病院である．診療圏に呼吸器専門医が少ないた

院では T-SPOT with TCX が主流になってきている6）7）11）．

め，結核やその疑いのある患者の対応を行うことが多T-SPOT で の 偽 陰 性 率 に つ い て は， 肺 結 核 で 8.7％

く ，日常臨床で IGRA を行う機会も多い．IGRA は，接（46/530 例），肺外結核で 13.1％（32/244 例）と報告され

触者健診，医療従事者の健康管理，潜在性結核感染症のている14）．しかし T-SPOT の診断特性に関するこれまで

判断のみならず，診察や画像などで活動性結核が強く疑の報告の多くは TCX 未使用下での検討と思われ3），実地

われるが細菌学的または組織学的検査で確定診断が得ら

臨床で用いられる T-SPOT with TCX は，偽陰性率がれない患者の補助診断として，重要な役割を担ってい20％以上と高率な可能性がある2）．本検討での偽陰性率

る ．しかし IGRA は主に以下の点が問題点として指摘

も 24.3％であり，T-SPOT with TCX の結果解釈に際しされている．①低年齢小児では感度が低いまたは判定不て，これまで以上に偽陰性の可能性を考慮すべきではな能が多い，②検査を繰り返すと感染危険の有無によらずいかと考える．

8）1）

結果に変動がある，③結核菌曝露から陽転化までの期間

一方，QFT-3G の偽陰性率については海外の報告で約

120

日呼吸誌

5％程度とされているが15），日本国内での活動性結核における QFT-3G の検討では計 65 例中 61 例（93.8％）が陽

6（3），2017

著者の COI（conﬂicts of interest）開示：本論文発表内容に関して特に申告なし．

性，4 例（6.2％）が判定不能または判定保留，偽陰性例

引用文献は認めなかったという報告がある16）．本検討においてもQFT-3G では偽陰性例を認めなかったが，症例数が 18 例と非常に少なく偶然の可能性も否定できない．日本国内の実地臨床における QFT-3G の偽陰性率について，追加的検討が必要と考える．
IGRA の偽陰性に影響を与える要因として，高齢，
BMI，免疫抑制剤治療，リンパ球数減少，HIV 合併，罹病期間，血清アルブミン低下などがこれまでに報告されているが，患者背景に有意差がないとする報告もあ

14）
17）

る2）． 本 検 討 で は 低 ア ル ブ ミ ン 血 症 と T-SPOT with
TCX の偽陰性との関連が示唆されたが，年齢やリンパ球数，BMI，ステロイドや免疫抑制剤使用とは明らかな関連は認めなかった．血清アルブミン低下のみで有意な関連を認めた理由の詳細は不明であるが，本検討の結果からも高齢者や基礎疾患を有する患者，低栄養状態の患者
では IGRA の判定を慎重に行う必要があると思われた．
なお，T-SPOT with TCX が偽陰性となった症例の検査
施行時期に偏りはなく，採血時間帯についても偏りは認めなかった．
本研究は単施設の少数例での検討で，後方視的な観察研究であるため，結果については示唆の範囲を超えないと思われる．また 2 種類の検査（QFT-3G と T-SPOT
with TCX）の対象者が，時期的に異なることにも留意が必要と考える．一方で，実地臨床に即した結果であり，
T-SPOT with TCX と QFT-3G のいずれも既報と矛盾しない偽陰性率であったため，今後多施設多症例で再検討を行う契機となりうる研究と考える．IGRA に関して，採血時の手技の簡便性，検査開始までの時間的猶予，免疫不全患者での有用性といった点から，実地臨床では TSPOT with TCX が好まれる可能性が高いが，T-SPOT
with TCX と QFT-3G それぞれの偽陰性率を踏まえたう
えでの臨床的判断が必要と考えられた．
当院での活動性結核患者における IGRA の偽陰性率について検討した．T-SPOT with TCX の偽陰性率は，
QFT-3G より高く，既報と同程度であった．TCX 未添加
での T-SPOT と比較して偽陰性率が高い可能性があり，
T-SPOT を外部検査受託機関で施行する T-SPOT with
TCX を用いる施設では，T-SPOT の結果解釈について注意すべきと考えられた．本研究は単施設の少数例での後方視的検討であり，今後さらなる検討が望まれる．
謝辞：本論文を作成するにあたり，多くのご助言およびご指導をいただきました，海南病院 臨床検査技術科および各診療科の皆様に深謝いたします．

1）日本結核病学会予防委員会．インターフェロンγ遊離試験使用指針．結核 2014; 89: 717‑25.
2）根本健司，他．活動性結核に対する T-cell®

使用下 T スポット .TB の当院実地臨床における有用®

性．結核 2016; 91: 445‑9.
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フェロン TB ゴールド検査と T- スポット.TB 検査結果の検討．調研ジャーナル 2014; 3: 32‑5.
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7）T- スポット®

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T-SPOT と QFT-3G の偽陰性率の比較

QuantiFERON TB-2G test. Intern Med 2009; 48:

121

137‑42.

Abstract

Comparison of false-negative results between the T-SPOT®.TB assay
with T-cell Xtend® reagent and QuantiFERON-TB Gold In-Tube test
Makoto Nakao a, Hideki Muramatsu a, Yuto Suzuki a, Yusuke Sakai a, Yusuke Kagawa a,
Ryota Kurokawa a, Naoyuki Ito b, Akiyo Moroto b, Sakiko Fujimoto c and Hidefumi Sato a
Department of Respiratory Medicine, Kainan Hospital Aichi Prefectural
Welfare Federation of Agricultural Cooperativesb
Department of Clinical Laboratory, Kainan Hospital Aichi Prefectural
Welfare Federation of Agricultural Cooperativesc
Department of Infection Control and Prevention, Kainan Hospital Aichi Prefectural
Welfare Federation of Agricultural CooperativesaA recent study showed that the proportion of patients with active tuberculosis who demonstrate a false-neg®
ative result on the T-SPOT®.
assay conducted with the T-cellreagent（T-SPOT with TCX）might behigh. In patients with active tuberculosis, we compared the proportion of false-negative results between T-SPOT
with TCX and QuantiFERON-TB Gold In-Tube test（QFT-3G）.Among 121 patients with culture-positive active
tuberculosis diagnosed at Kainan Hospital during the study period, 55 underwent testing with either T-SPOT
with TCX（N＝37 patients）or QFT-3G（N＝18 patients）.In the T-SPOT with TCX group, 9 patients had falsenegative results; however, in the QFT-3G group no patients had false-negative results. The proportion of patientswith false-negative results for T-SPOT with TCX might be higher than that for QFT-3G.