開始時間までお待ちください

Bringing Valuable Solutions from Around the World to your Lab.

蛍光イメージングスキャナー

Odyssey イメージングシステム®

For quantitative & reproducible high-quality western blot
data analysis

株式会社スクラム プロダクト営業
稲葉 亮平

本日の内容・定量ウェスタンブロットの最新の論文投稿規定
・蛍光法ウェスタンと化学発光法ウェスタンの違いについて・Odysseyシリーズの特徴
・Odyssey Mのアプリケーション例（In-Cell Western、組織切片イメージングなど）
・最新の定量解析ソフトウェア

シグナル検出方法

イメージングアッセイ
バリデーション

テクニカルサポート

データ解析

Be More Confident In Your
Data Than Ever Before
データにより確信をどのような実験データを求めていますか？

バラつきの大きい
不正確なデータ

正確だがバラつきの大きいデータ

バラつきは小さいが不正確なデータ

バラつきが少なくて正確なデータ

再現性の高い実験と常に均一な画像取得

本日の内容・定量ウェスタンブロットの最新の論文投稿規定
・蛍光法ウェスタンと化学発光法ウェスタンの違いについて・Odysseyシリーズの特徴
・Odyssey Mのアプリケーション例（In-Cell Western、組織切片イメージングなど）
・最新の定量解析ソフトウェア

定量ウェスタンブロットの論文投稿規定

JBCの定量ウェスタンブロットについてのガイドライン⚫ Ifシグナル強度が泳動した抗原量に対して直線性があるか、ノーマライゼーションをどのように
blots are quantitatively analyzed, record how data were obtained, whether signal
し て 行 っwas
たのか な with
ど 、antigen
定量デー
タ の 算and出法を記録して提 出 すwas
る 必normalized.
要がある。
intensity
linearloading,
howproteinloading
いくつかの検出方法（ECLなど）は極めて定量直線性が狭いので注意すべき。
Somedetection methods (e.g., ECL) have a very limited linear range.
可能ならば総タンパク量によるノーマライゼーションを行う（メンブレンを総タンパク質染色⚫ Normalize
signal intensity to total protein loading (assessed by staining membranes
試薬で染色）。
fortotal protein) whenever possible. “House-keeping” proteins should not be usedfornormalization without evidence that the experimental manipulations do not
ハウスキーピングタンパク質は、実験群間（実験処理間）でその発現量が変わらないことをデータで示さない限り使用するべきではない。
affectexpression.

⚫ Antibodies
that recognize post-translationally modified proteins should be normalized
翻訳後修飾を認識する抗体による実験では、ターゲットタンパク質のトータルの発現量に対して
tototal levels of the target protein.
ノーマライゼーションを行う。

ポイント ❶

定量直線性の検証
直線性のあるゲルローディング量で実験を行う

シグナル強度

イメージャーの検出上限

定量性を確保するには、このレンジのサンプルアプライ量で実験を行う必要がある

イメージャーの検出下限

抗原量

ポイント ❶

定量直線性の検証
直線性のあるゲルローディング量で実験を行う

ポイント ❷

総タンパク質を内部標準とするノーマライゼーション
ハウスキーピングタンパク質はオールマイティーではない
メンブレン上での総タンパク質染色ターゲットタンパク質

ポイント ❸

リン酸化解析におけるノーマライゼーション
同じレーンからリン酸化したタンパク質とトータルのタンパク質を検出する

Overlay

Total Akt
Phospho Akt

700 nmAkt

800 nm

Phospho Akt

蛍光ウェスタンブロット法
こんな方におすすめ⚫ 最新の論文投稿規定に従った解析を行いたい。

⚫ 定量ウェスタンブロットのデータが安定しない。
⚫ ウェスタンブロットって定量性あるの？
⚫ バンドがぼやける、すぐにサチュレーションする。
⚫ 適したハウスキーピングタンパク質がない。

⚫ リン酸化解析を行っている。

本日の内容・定量ウェスタンブロットの最新の論文投稿規定
・蛍光法ウェスタンと化学発光法ウェスタンの違いについて・Odysseyシリーズの特徴
・Odyssey Mのアプリケーション例（In-Cell Western、組織切片イメージングなど）
・最新の定量解析ソフトウェア

シグナル検出方法

イメージングアッセイ
バリデーション

テクニカルサポート

データ解析

ウエスタンブロットの検出
化学発光

化学発光＝ケミルミ（≒ECL）

蛍光化学発光法 (ケミルミ・ECL法)

ターゲット
タンパク質

一次抗体

二次抗体

化学発光＝酵素反応

化学発光

蛍光法

ターゲット
タンパク質

一次抗体

二次抗体

蛍光法は安定したシグナルを得られる
蛍光化学発光化学発光法 vs 蛍光法

酵素反応を利用

蛍光色素を利用

基質
HRPの活性温度
反応時間

基質
HRPの活性温度
反応時間

直線性＝定量性の確保に必須

蛍光ウエスタンブロットの利点

化学発光法よりも優れた再現性（酵素反応に依存しない安定したシグナル検出）

化学発光法よりも優れた定量直線性

マルチプレックスが可能

総タンパク質によるノーマライゼーション（リン酸化ウェスタンに特に有用）が可能

化学発光法の課題• 酵素反応を利用した検出✕

様々なパラメーター（時間、温度など）でシグナル強度が変わる✕シグナル強度が抗原量を直接的に反映しない• 1回の撮影につき1ターゲットのみ検出✕

ストリッピング＆リプロービング✕

メンブレンをカットして反応させる必要性

蛍光法は結果のばらつきを最小限にする

酵素反応＝データのバラツキ

安定したシグナル

検出波長による感度の違い

メンブレン由来の自家蛍光
可視波長蛍光（532 nm）

近赤外蛍光（700 nm）

近赤外蛍光 vs 化学発光

化学発光検出（ケミルミ）

近赤外蛍光検出

Serial dilutions of purified transferrin were detected on nitrocellulosewith rabbit anti-Tf primary and IRDye® Secondary Antibody.

近赤外蛍光 vs 化学発光（感度比較）
80 ug

50 ug

25 ug

12.5 ug

Chemiluminescence on a CCD Camera System
10-minute exposure time

Near-infrared IRDye® 800CW on Odyssey® Imager
5-minute scan time

Data from CLX Demo Dec 2014 in Gottingen by Helge, 2 fold dilution, CCD imager was Kodak
Image Station 4000R Pro

6.2 ug

3.1 ug

1.5 ug2ターゲット以上を同時検出するには？

pAKT
AKT
ERK
pERK

CoxlV

本日の内容・定量ウェスタンブロットの最新の論文投稿規定
・蛍光法ウェスタンと化学発光法ウェスタンの違いについて・Odysseyシリーズの特徴
・Odyssey Mのアプリケーション例（In-Cell Western、組織切片イメージングなど）
・最新の定量解析ソフトウェア

Odyssey シリーズ

Odyssey XF

Odyssey DLx

Odyssey Mシグナル検出方法

イメージングアッセイ
バリデーション

テクニカルサポート

データ解析

常に再現性高く画像を取得するには？

常に1回の露光ですべてのデータを得ること（露光時間の調整をしないこと）

どうすればそれを達成できる？

世界的な導入実績と歴史

レーザー励起による高感度イメージング＞6桁のダイナミックレンジ
今までにないソフトウェア

撮影エリア全体で均一な撮影が可能

Odysseyイメージャーの利点 ❶>6桁の広いダイナミックレンジ

X線フィルム他社イメージャー（16ビット）

LI-COR社 Odyssey（22ビット）

X線フィルム （1.5桁）
他社イメージャー （4桁）
LI-COR社Odyssey（6桁）

2022/12/22

Odysseyイメージャーの利点 ❶>6桁の広いダイナミックレンジ

10 秒

20 秒

30秒

露光調整をしなくても、ワンショットですべてのバンドに対してベストな撮影が可能

2022/12/22

Odysseyイメージャーの利点 ❶>6桁の広いダイナミックレンジ
Accumulation / Increment 露光 ➡ Variability
Auto-exposure＝露光調整 ➡ Variability

10 秒

20 秒

30秒

露光時間調整なし、常に同じ露光設定

露光調整をしなくても、ワンショットですべてのバンドに対してベストな撮影が可能

2022/12/22

Odysseyイメージャーの利点 ❷レーザー光源による励起
白色光源

LEDエミッション光
励起光
検出側に漏れ出た光レーザー

低いバックグラウンド→ 高いS/N比→ 高い検出感度Odysseyイメージャーの利点 ❷レーザー光源による励起

LED光源を使ったイメージャー→ 蛍光チャンネル間のクロストーク（干渉）Odysseyイメージャー（レーザー光源）→ 蛍光チャンネル間のクロストーク（干渉）がほとんどないOdysseyイメージャーの利点 ❸世界的な導入実績と歴史
USの市場２位
蛍光ではダントツ• 蛍光ウェスタンブロットのパイオニア• 20年の実績• 蛍光ウェスタンブロットの歴史＝Odysseyイメージャーの歴史

2001

1990s

2005

2010

2011

2017 2018

2010s

2000s

2020s

REVERT 700
Odyssey Classic

IRDye

Odyssey Fc

2021

Odyssey CLx

Empiria Studio
Software v1

Odyssey DLx

Odyssey XF

Odyssey M

Empiria Studio
Software v2

本日の内容・定量ウェスタンブロットの最新の論文投稿規定
・蛍光法ウェスタンと化学発光法ウェスタンの違いについて・Odysseyシリーズの特徴
・Odyssey Mのアプリケーション例（In-Cell Western、組織切片イメージングなど）
・最新の定量解析ソフトウェア

マルチイメージングスキャナー

Odyssey M イメージングシステム⚫ 多くの撮影チャンネル• 近赤外蛍光だけでなく可視蛍光にも対応• 明視野撮影が可能• 化学発光イメージングも可能⚫ ラインスキャンによる高速画像取得⚫ 最小解像度 5 μｍ
⚫ 25 x 18 cmの撮影エリアで均一な撮影⚫ より多くのアプリケーションに対応⚫ > 6桁のダイナミックレンジ

Odyssey M

製品仕様
タイプ

イメージングエリア• ラインスキャン + CCDイメージング• 25 cm x 18 cm（蛍光/明視野）

励起光源• 488 nm 半導体レーザー

ダイナミックレンジ• 520 nm 半導体レーザー• >6 桁• 685 nm 半導体レーザー

解像度• 785 nm 半導体レーザー

蛍光チャンネル• 9種類

Odyssey M• 15 cm x 11 cm（化学発光）• 5-100 μm

本体サイズと重量• 61 x 76 x 38 cm

化学発光撮影• 52 / 55 kg• 可能モデルと不可モデルを選択

ソフトウェア

明視野撮影• LI-COR Acquisition Software• 反射光源／透過光源撮影• Empiria Studio Software

Odyssey M

撮影チャンネル一覧

蛍光撮影（レーザー励起）化学発光撮影（ケミルミ）

明視野撮影（LED照明）

Odyssey M

アプリケーション
蛍光ウェスタンブロット（3色）

化学発光ウェスタンブロット

蛍光免疫染色病理染色／免疫組織化学

In-Cell WesternTM アッセイ

On-Cell Western アッセイ

ELISA

細胞増殖アッセイ

DNAゲル

タンパク質ゲルゲルシフトアッセイ（EMSA）

プロテインアレイ

Odyssey M
その他のアプリケーション⚫ 発色法ウェスタンブロット⚫ ノーザンブロット⚫ ex vivo イメージング⚫ 二次元電気泳動⚫ サザンブロット⚫ GFP発現細胞⚫ 逆相プロテインアレイ⚫ In Gel ウェスタンアッセイ

and More...

Odyssey M

ラインスキャン（蛍光イメージング）

Odyssey M

反射光源（明視野イメージング）

Odyssey M

透過光源（明視野イメージング）

Odyssey M

化学発光／生物発光イメージング

Odyssey M

スループットOdyssey M

プレートイメージング⚫ イメージング枚数:最大4枚⚫ 使用アクセサリー:
プレートホルダー（標準付属）

Odyssey M

スライドイメージング⚫ イメージング枚数:最大12枚⚫ 使用アクセサリー:
スライドホルダー（標準付属）撮影スピード

XF

DLx

M

ウェスタンブロット

解像度: 125 µm

解像度: 169 µm

解像度: 100 µm• サイズ: 9 cm x 7 cm

4m 43s

5m 54s

4m 10s

解像度: 169 µm

解像度: 100 µm• チャンネル: 2色 (700/800)

8m 18s

5m 00s

スライドガラス

解像度: 21 µm

解像度: 10 µm

7m 51s3m 43s• チャンネル：2色 (700/800)

プレート• サイズ: 12.5 cm x 8 cm•

サイズ: 2.55 cm x 2.5 cm•

チャンネル: 2色 (700/800)

N/A

N/A

蛍光ウェスタンブロット

最大2波長（2色）

最大3波長（3色）

蛍光ウェスタンブロット（総タンパク質補正）

総タンパク質（REVERT 700）

ターゲットタンパク質（800 nm）

最大2波長（2色）

総タンパク質（REVERT 520）

ターゲットタンパク質 1（700 nm）

最大3波長（3色）

ターゲットタンパク質 2（800 nm）

化学発光ウェスタンブロット

Not available• 最大メンブレンサイズ: 12 x 10 cm• 最大メンブレンサイズ: 15 x 13 cm• 発色分子量マーカーとの重ね合わせ：不可• 発色分子量マーカー撮影との重ね合わせ：可能(発光分子量マーカーを使用、ケミルミペンを使用、青色マーカーを700nm蛍光で撮影）

タンパク質ゲル撮影（発色法）

Not available

Not available• クマシ―染色ゲル• 銀染色ゲルタンパク質ゲル撮影（発色法）• Channel 525 Trans：銀染色ゲル
感度: クマシー染色（CBB）< 銀染色• Channel 630 Trans：クマシ―染色ゲル• Channel RGB Trans：クマシ―染色ゲル、銀染色ゲル

クマシ―染色ゲル
RGB Trans

クマシ―染色ゲル
630 Trans

銀染色ゲル
RGB Trans

銀染色ゲル
470 Trans

タンパク質ゲル撮影（蛍光）• クマシ―染色ゲル（700nm蛍光）• クマシ―染色ゲル（700nm蛍光）• 様々な蛍光染色法に対応

タンパク質ゲル撮影（蛍光）Pro-Q Diamond: 糖タンパク質を特異的に染める• Channel 700：クマシ―染色ゲル

Pro-Q Emerald: リン酸化タンパク質を特異的に染める• Channel 520：Pro-Q Diamond 染色ゲル など

感度：クマシー染色 < 銀染色 ≒ SYPRO Ruby

• Channel 488：Pro-Q Emerald 染色ゲル など• Channel 488A：SYPRO Ruby 染色ゲル、SYPRO Orange 染色ゲル など

クマシ―染色ゲル
700 nmPro-Q Diamond 染色ゲル
520 nmPro-Q Emerald 染色ゲル
488 nmSYPRO Ruby 染色ゲル
488A nm

SYPRO Orange 染色ゲル
488A nmDNAゲル撮影（蛍光）• エチジウムブロマイド 染色ゲル

• SYBR Safe / Green 染色ゲル

• SYTO 60 染色ゲル（700nm蛍光）• 様々な蛍光染色法に対応

In-Cell WesternTM アッセイ

Not officially supported

最大2波長（2色）

最大3波長（3色）

In-Cell WesternTM アッセイ

Single Channels:

CellTag 520

IRDye 680RD

IRDye 800CW

CellTag 520

CellTag 520

CellTag 520

IRDye 680RD

IRDye 680RD

IRDye 800CW

IRDye 680RD

IRDye 800CW

Multiplexes:

IRDye 800CW

ELISA※ Perkin Elmer社のAiphaLISAには対応できません。

細胞アッセイ（細胞増殖アッセイなど）⚫ MTTアッセイ（MTS/XTT/WST-1/WST-8 アッセイ）⚫ LDHアッセイ⚫ Promega社アッセイキット⚫ 同人化学アッセイキット⚫ Sapphire 700など

病理染色／免疫組織化学（明視野）

Not available

Not available

例：H&E染色スライド

蛍光免疫染色Not available• 解像度: 最大 21μm

• 解像度: 最大 5μm• 波長：近赤外蛍光のみ• 波長：近赤外蛍光だけでなく可視蛍光も可能

核染色についてOdyssey MはUVを搭載していないのでDAPIの撮影は不可。
核染色を行いたい場合は、NucSpot 488、SYTOX Green、Propidium Iodide（PI）などで行う。

Tissue sections Imaging

近赤外蛍光標識プローブの生体分布試験

Prostate Cancer. 2014;2014:104248.

⚫

腫瘍ターゲティング蛍光標識プローブのインビボでの生体分布イメージングのあとに、同じ個体からターゲット部位以外で蛍光シグナルが強かった臓器を取り出し、凍結切片（8 μm厚）を作製して、Odysseyimagerで組織レベルの検索を行った。緑が蛍光プローブのシグナル、赤は組織の自家蛍光。
➢➢➢➢➢

Saline：1x PBS（ネガティブコントロール）
Carboxylate 800CW：IRDye 800CW Caboxylateのみ（ネガティブコントロール）
IgG 800CW：Non-specificなIgG抗体をIRDye 800CWで標識したもの（ネガティブコントロール）
PSMA 800CW：PSMA（前立腺特異的膜抗原）に対する抗体をIRDye 800CWで標識したもの
YC27 800CW：PSMAに結合する低分子をIRDye 800CWで標識したもの

組織切片イメージング プロトコル

Biodistribution andOrgan Imaging

ex vivo イメージングによる近赤外蛍光標識プローブの生体分布試験

臓器イメージング

PLoS Pathog. 2011 Sep;7(9):e1002246.

⚫

⚫

トキソプラズマ脳炎マウスにおける脳と脾臓の臓器イメージング。樹状細胞を近赤外蛍光ポリマソー
ムでラベルし、脳と脾臓をOdyssey Imagerで撮影した。

PTX（百日咳菌由来毒素）で処理した樹状細胞は脾臓から脳へのmigrationが少ない。

組織切片イメージング 試薬消耗品⚫

IRDye標識二次抗体
anti-sheep以外のほぼすべての動物種のIgGに対する二次抗体• IRDye 800CW（800nm）• IRDye 680RD（700nm）• IRDye 680LT（700nm）

近赤外蛍光標識した分子標的プローブのバイオディストリビューション研究21

近赤外蛍光色素でラベルしたプローブ

マウスにインジェクション
プローブの生体内分布をin vivo イメージングで調べるマウスから臓器を取り出し、ex vivo イメージングで検証する

顕微鏡スライドは顕微鏡を使えばよいのでは？
最終的にプレゼンや論文に載せるのは1枚のスライドの1部分の画像だけ

しかし・・・⚫ 何枚もの連続切片スライドを見て局在を確かめないといけない・・・⚫ 1視野で観れるのは切片の一部分だけ・・・⚫ 絵になるベストな1枚を探したい・・・

時間がかかるスライドスキャナーPros• ハイスループット• 高解像度• 共焦点可能なモデルあり• バーコードリーダー• 機能に優れた画像解析ソフトウェア

Cons• 1画像のファイルサイズが大きい（> 1.0 GB*）• 明視野は撮影スピードが速いが蛍光は時間がかかる• 顕微鏡スライドを撮影するだけの専用機である• 近赤外蛍光不可*Specs on WSI systems are based on a 15x15 mm region of interest

Odyssey M
Odysseyによるスライドスキャンの利点⚫ ハイスピード画像取得（1.5 分/チャンネル*)⚫ 局在確認に十分な解像度（5 µm）⚫ 小さいファイルサイズ（25 MB*）
⚫ H&E画像と蛍光画像を同じ解像度で撮影→容易な重ね合わせが可能⚫ 厚い切片（>6 µm）を撮影可能***Based upon a 15x15 mm region of interest** Thickest tissue would be ~1.5 mm

Odyssey Mは・・・

最大12枚のスライドをFast Scan可能

蛍光顕微鏡（共焦点レーザー顕微鏡）の撮影に持っていくスライドをOdyssey Mを用いてトリアージ

Whole Slide Triage Imaging

組織切片全体（Whole Slide）を最低限の解像度で、ファーストスキャンして、蛍光顕微鏡観察を行う
スライドをスクリーニングする

画像取得のかかる時間

スキャンに要する時間の比較
スライドスキャナー

Odyssey M

H&E 染色

2.5 分

1.5 分

蛍光2色

8分

2.0 分

1スライドあたりの合計スキャン時間

10.5 分

4.5 分

24 スライド （H&E + 蛍光2色）
25スライドの合計スキャン時間

4.2 時間

1.8 時間データ容量

データ容量の比較
スライドスキャナー

Odyssey M

H&E 染色2000 MB

25 MB

蛍光2色

4000 MB

50 MB

1スライドあたりの合計データ容量

6000 MB

75 MB

25 スライド （H&E + 蛍光2色）
25スライドの合計データ容量

Note: File size specification is based upon the standard 15x15mm area of interest150 GB

1.88 GB

タンパク質発現解析アッセイソリューション

In-Cell Western アッセイ
TM96ウェルプレート⚫ セルベースのハイスループットなタンパク質発現解析法⚫ タンパク質の抽出と可溶化を行わずNativeな状態のままでサンプル間の発現比較を行うことができる。
細胞固定

膜透過処理

抗体反応

それぞれのウェルで蛍光免疫染色を行い、ウェル全体の蛍光強度を数値化して比較する

In-Cell Western アッセイTM

ハイスループットなアッセイが可能

In-Cell Western アッセイTM

セルベースのアッセイ法
細胞の回収・洗浄・タンパク質抽出・電気泳動・転写が不要なので手間と時間を減らすことが可能

In-Cell Western アッセイTM

バラつきの少ないデータ

In-Cell Western アッセイ
TM

リン酸化レベルの変化など微妙な発現差を正確に定量
5%のリン酸化レベルの違いを定量

Sci Rep. 2015; 5: 9013.

プレート間でも優れた再現性

Anal Biochem. 2005 Mar 1;338(1):136-42.

In-Cell Western アッセイTM

ワークフロー薬剤刺激
細胞培養

ブロッキング
細胞固定
透過処理

二次抗体反応
一次抗体反応

画像取得

画像解析

Empiria StudioResearch Example

Example ❶EGFによるシグナル伝達系の活性化

Huaxian Chen, et. al., (2005) A cell-based immunocytochemical assay for monitoring kinase signaling pathways and drug efficacy.
Anal Biochem. 2005 Mar 1;338(1):136-42. doi: 10.1016/j.ab.2004.11.015.

Example ❸TALEN + siRNAによるβ-arrestinのノックダウンアッセイ⚫ TALEN と siRNA に よ り β-arrestin 1/2 をノックダウンし、ERKタンパク質リン酸化
をIn-Cell Westernアッセイとウェスタンブロットで測定•HEK293細胞株•

リガンド刺激（10 μM Isoproterenol）後のERKリ ン 酸 化 レ ベ ル の 経 時 的 変 化 を In-Cell
Western アッセイで測定➡ノックダウン細胞ではリン酸化が亢進•ウェスタンブロットでも同様の結果を確認

Morgan O'Hayre., et al. (2017) Genetic Evidence That β-Arrestins Are Dispensable for the Initiation of β 2-adrenergic Receptor Signaling to ERK.
Sci Signal. 2017 Jun 20;10(484):eaal3395. doi: 10.1126/scisignal.aal3395.

タンパク質発現解析アッセイソリューション ❸On-Cell Western アッセイ
96ウェルプレート⚫ In-Cell WesternTM Assayの変法⚫ 膜透過処理を行わずに細胞膜タンパク質だけを検出⚫ 細胞膜タンパク質の立体構造を維持したまま解析が可能

細胞固定

抗体反応

それぞれのウェルで蛍光免疫染色を行い、ウェル全体の蛍光強度を数値化して比較する

On-Cell Western アッセイ

ワークフロー

薬剤刺激

細胞培養

ブロッキング

細胞固定

二次抗体反応一次抗体反応

画像取得

画像解析

Example ❷On-Cell Western アッセイによるGPCR Internalizationの測定
Extracellular CB1 Staining⚫ Win2（アゴニスト）によるCanniboid Receptor 1（CB1）のインタナリゼーションをOn-Cell Western法で測定⚫ Win2刺激により細胞表面のCB1染色強度が減少、SR1（アンタゴニスト）によりCB1が細胞膜にリクルートメントされる。

⚫ 受容体のインターナリゼーションを定量的に測定することが可能

Wager-Miller, J. (2004). Tracking G Protein-coupled Receptor Trafficking Using Odyssey Imaging.

Extracellular CB1

本日の内容・定量ウェスタンブロットの最新の論文投稿規定
・蛍光法ウェスタンと化学発光法ウェスタンの違いについて・Odysseyシリーズの特徴
・Odyssey Mのアプリケーション例（In-Cell Western、組織切片イメージングなど）
・最新の定量解析ソフトウェア

次世代定量ウェスタンブロット解析ソフトウェア

Empiria Studio™ Software

トップジャーナルが求める
定量ウェスタンブロットデータ解析

リニアレンジの検証

適切な統計解析

抗体反応性と特異性の検証

不適切な画像加工の禁止と生画像の保持

適切なノーマライゼーション法の選択と検証

実験法、画像解析法の詳述

適切な反復実験法

The Journal of Biological Chemistry. (n.d.). Collecting and presenting data. Retrieved December
15, 2020, from http://jbcresources.asbmb.org/collecting-and-presenting-dataEmpiria StudioTM ソフトウェア⚫

最新の論文投稿規定に準拠した高品質な定量ウェスタンブロットデータを得るために、トップジャーナルとコラボレーションして作られた唯一のソフトウェア

Empiria Studioソフトウェア

シグナル検出方法

イメージングアッセイ
バリデーション

テクニカルサポート

データ解析

Combined Linear Range Determination(直線性のあるサンプルロード量の決定)

Combined Linear Range？

泳動サンプル量

重ね合わせ

シグナル強度ローディングコントロール

シグナル強度

シグナル強度ターゲット・タンパク質泳動サンプル量

泳動サンプル量ターゲット・タンパク質とローディングコントロールの両方で直線性を確保できる濃度域が定量範囲となる

REVERT 520/700による総タンパク質補正
TM✓ 抗体結合を妨げない染色法✓ アミノ酸組成に依存しない染色法✓ 脱色可能✓ 総タンパク補正＋2ターゲット定量が可能✓ 従来のゲルを使用可能⚫ REVERT 700 総タンパク質染色試薬⚫ REVERT 700 洗浄液⚫ REVERT 700 脱色液

Import into Reports Easilyシグナル検出方法

イメージングアッセイ
バリデーション

テクニカルサポート

データ解析

実験間や解析者間のエラーを減らすには？

画像解析のバラつきを最小化

解析者間で差のでないレーン検出⚫

Adaptive Lane Finding process (ALF)解析者間で差のでないバックグラウンド補正⚫

http://licor.com/empiria-studio-background

Adaptive Background Subtraction (ABS)Automated Calculation & Graphing(自動ノーマライゼーション計算と自動グラフ化)

信頼性の高い高品質なデータを短時間で取得

抗体バリデーション

直線性バリデーション

発現差異解析

POTENTIAL VARIABILITY+60 minutes

15 minutes

Data Export & Sharing(データのエクスポートと共有)⚫

Publication Pack（シングルファイル）のエクスポート⚫

PDFレポートのエクスポート⚫

画像と数値データのエクスポート⚫

解析過程と生画像を含めたすべてのExperimental Dataを
学生↔先生間、部下↔上司間、研究者間で簡単に受け渡し

LI-COR® ソリューション
⚫ 蛍光ウェスタンブロットとIn-Cell WesternTM アッセイのパイオニア⚫ 約20年の経験に基づくアッセイプロトコルとサポートの提供⚫ 豊富な論文使用実績

イメージングシステム

アッセイプロトコル

ソフトウェア試薬

Questions ？