目〉欠巻 頭 言 本 間 慶 蔵 教 授 及 び Juergen Aschoff 教授の思い出
登倉尋貰
第 1 回学術奨励賞受 賞者論文

3

シアノバクテリ アの時計研究の 舞台裏
岩崎秀雄
視交文上核二ユ ーロンにおける サー力デイアン 細胞内 Ca + 濃度リズムの発 見: その時間生物学 に
2

12おけるインパク卜
池田真行
総説

23

生体時計を基盤 とする循環動態 調節機構の解閉
江本憲昭 、野中英美 、横山光宏
インターパルタ イマータンパク 質 T I M E 、ねじまき PIN 付き

28

甲斐英則 、谷 直 紀、磯 部 稔

35

鳥類の時計遺伝 子と光周性
安尾しのぶ、渡 渥美和 、海老原史樹文 、吉村崇

海外レポート
アメリ力でのポ スドク生活ーテ ネシ一州ナッ シユビルよリ

41

太田英伸
第 2 回 Molecular Clock 東京 2004 に参加して

45

渡辺剛史
日本時間生物学 会学術奨励賞公 募のお知らせ

47

1 1 回大会のおしら せ

48

事務局報告

49

執筆者のプロフ イール

53

賛助会員リスト

55

執筆要領

56

九
九日 守

:...:.....
... ...........九♂
九
恰 ...................:.:.:. 九♂〈

本間

γ
品 山

り九
t
.:.:.:..'φ

叫

ん

E買 一
百

巻

一

叫

品 山
': ' : ' : . ' 降、川島昨日人.ー 川 、:.:.:.:...:，:.
日 …
..... ..:.:戸ウ......
...:.:.:.:..:.:.:.'.山
...日
、 品
弘
、

山、日 p

i

九

山 冶 九 九 日 川 、J

慶蔵教授及び Juergen Aschoff 教授の思い出
A

登居

主主ヨ

5 三軍

主
子主
寺

奈良女子大学名誉教授及び 日本時間 生物学会名誉会員

北大大学院獣医学研究科修士課程の学生に入学したのは、 1965 年 4 月であった 。本間慶蔵教授から魚の行動記録装置をつくり、魚、の行動リズムの研究をするように指示された。既に先生は記録装置のア イデイアを持っておられそれを具体化するようにとのことであった 。その前に、先生はハイデルベ ルクの Ascho妊教授のもとに留学されておられ、その仕事の継続であった 。不肖の弟子で、大学院在学中にその仕事を完成できなかった 。
また、獣医学部で家畜の生理の研究ではなく、なぜ魚、の行動リズムなのかも絶えず疑問に思っていた 。 しかし、様々な文献を読むなかでリズム研究の深さが判ってきた 。 日本生理学会で魚、のリズムの結果を話しでも誰も興味を示さなかった。 ヒ トや種々の動物の行動リズムの研究では Ascho任教授の仕事が世界的だ、という事が、本間慶蔵教授の話や文献から徐々にわかり、いつかは Aschoff 教授のもとに留学したいという夢は膨らんでいた 。本間 慶蔵教授の推薦もあり、アレキサンダー・フォン ・フンボルト財団の留学試験に幸い合格し、 Aschoff 教授の主宰する マックス・プランク行動生理学研究所( 当時、西独) に 留学できることになった 。世界中から多く:tl，のリズムの研究のため留学していた 。そこでの研究者が出入りしていた 。 スエーデンからエリクソン博士がf
過した l 年 10 ヶ月間は私の人生で最も楽しい充実 した時期であ ったように思う 。 ょうやくリズム研究の広さとなぜ本問先生がこだわられた魚のリズムかということも判った 。私は京都大学霊長類研究所で サルの体温調節
反応と行動リズムの研究を行い、サルの扱いに慣れていた関係で、 Ascho妊先生の下で、もブタオザル、リスザルの行動リズムと光 ・温度の研究を夢中で行なった 。私は留学した H寺には、奈良女子大学家政学部被服生理学講座の助教授になっていたが、被 服とは全く関係ないサルの行動 の観察に没頭していた 。本問先生はその後も魚、の行動記録装置の完成に情熱を 持ち読け、その完成品を奈良ま で札幌から持参され、奈良で続 行するよう依頼された 。 さすがに、家政学部の被服生理 学講座でおこなうことは跨踏さ れ、幸い理学部生物学教室の大 石

正助 教 授 ( 当時) が生物リズムに多大の興味を持 って おられたので、彼に本問式魚、行動測定装置を使い魚、のリズ
ムの研究を継続してもら った。彼も後 2 年で停年であるが、その装置は 実験室のどこかに保管されてい ると思う。本問先生の執念には深く頭 がさがるし、先生がリズムの研 究へ導いて下さったご恩は生涯 忘れない。教師というものは、単なる知識ではなく、対象に激しい情熱を持 って いることが、若い学生に 言い知れぬ影響を与えることを本問先生の行動をとおして教えられた 。本問先生に習い、私も多くの弟子にそのように接 してきた 。

Aschoff 先生は奈良に 3 度足を運ばれた 。先生の父上、 L udwig Aschoff 教授は優れた大病理学者で、日本の多くの病理学者を導かれた方である 。 日本とも深い緋があり、奈良に 関係したお寺があるので探して 欲しいといわれ、大石教授が A s choff 教授と私を彼の車にのせ、奈良 のお寺をくまなく探し回り、漸 く大安寺を探 し当てた。
そこには L udw ig Ascho任教授の写真、ゆかりの品々があり、 Ascho任教授は大変喜ばれた 。 Ascho任教授のご子、 Andreas も大安寺を訪問された 。 この大安寺の発見が私が大石教授の助けを借りて、 A s choff 教授にできた
息唯一の恩返しだ、ったのかもわからない。お寺の住職( 河野貫主) もいまは他界され、彼の骨の一部は、 Freiburgの L u d wig Aschoff. Juergen Ascho妊のもとに運ばれるという 。

Ascho任先生は奈良女子大学の人工気候室をみて、光がヒ トの体温調節に与える研究を実施したらと私に薦めた。先生のこのアイデイアは幸い優秀な院生に恵まれ大きく発展した 。昼間の明るさの違いは、夕方 、寒さに曝された際の着衣行動に影響を与えることが判 った。最初は光の強さの違いが 夕刻の寒冷時の着衣行動に影響することを誰も信じなか った。 また、 昼 間の明るさの違いは、夜間や昼 間の体温のレベルに僅かであるが、確実に影響を与えること、その根本 は昼間の高照度は体温調節反応 のセットポイン ト値を低下させることがあり、従って発汗開始や血流の変化と鼓膜温度の関係、 寒冷感覚をも修飾することにつ ながり、それも証明した。 まn

1寺 日生物学V o l. l O . N o .l ( 2 0 0 4 )1

た、時間感覚も周囲の明るさの影響を受け、その根本にはセットポイント値の低下が関係すると考察している 。
体温調節反応だけでなく、胃腸管運動・消化吸収、尿量 にも昼間の照度は確実に影響する 。 Aschoff 先 生 の 一
言が私の研究生活を大きく変えたと思っている 。 さらに、 Ascho妊教授はサルの行動リズムに温度が与える研究を薦められた 。当 時は温度は恒温動物には影響を与えないと信じられていたが、温度サイクルは弱し、けれども確実にサルの行動リズムに影響を与えることがわかった。 この発見は大変な衝撃であった。その後、温度サ
イクルはヒトの体温リズムの振幅や位相を変化させることを若村智子(4 月以降、京大助教授、本学会評議員) が証明 し、彼女の学位論文になった。 これは衣服とリズムの研究に発展した。衣服を着るという事は、皮膚
温度を変えることにつながる 。温度がリズムに影響する以上、衣服も皮膚温度を介してリズムに影響する可能、 Seoul) は同じヒトが半袖シャツ ・半ズボンを着性もあると考えた 。 Shin‑Ju n g Park (Sungkyunkwan 大学
用するか、長袖シャツ・長ズボンを着用するかにより、夜間前半の尿中のメラトニン分泌量が有意に異なり( 半1 . 半ズボンが大きい) 、睡眠感も半袖シャツ・半ズボ ンのほうが良い。両衣服条件間で皮膚温度の挙動が大き布くことなり、その違いがメラトニンに影響し、ひいて睡眠感を変えたと考察している 。 この仕事も Aschoff 教授のサルの行動リズムと温度の研究が最初のヒントになっている 。被服とヒトのリズムの研究はまだ緒についたばかりである 。それはマスクキングだとの批判の受けた 。 しかし、なにかあるという思いは消えない。残り少ない人生になってきたが、今後、この分野にエネルギーを注ぎたい。
本間慶蔵教授と Aschoff 教授は深い友1'育に結ばれていたという 。二 人に共通していえることは、決して弟子を自分の意見で縛らなかった事と思う 。 しかし、 多くの弟子は喜んで先生との共同研究を楽 しんだ。私の周囲にもまだ、日本人、韓国人、中国人、ポーランド人の多くの研究仲間がいる 。両先生がそうされたように、私もそのような関係で研究仲間との関係をつくり、研究生活を楽しみ生涯をまっとうしたい。色々の意味でお 二
人は私の研究人生に影響を与えた巨人であった。

時間生物学

‑

2 ‑

V o I.J O.No.l ( 2 0 0 4 )シアノバクテリアの時計研究の舞台裏
芳
大
T一 ド
ヒ
認ι
可 J一
耳
町 b理
名 古 屋 大学大 刊 E 学 川 知 社
寸生
山 山
川
石 H

Th
lλ
理 学 専︐

私たちが日常体験して いるように 、論文に掲載される内 容は、研究活動のごく ごく一部に過ぎない 。私たちは、シアノバ クテリアを用いて 、概日リズムの基本機 構に関す
る解析を行 ってきた 。研究の前提や意義な どについては 、最近いくつか総説や 解説を書いたので、参照して 頂きたい (岩 崎 、2002; 2 0 0 3 a，2003b) 。 ここでは、その中で.l.l 1998; Iwasaki et a，
私 が 多 少 な り と も 関 与 し た 5 つの主要な論文 (Ishiura et a，l ，2 0 0 2 ) が、 どのよう
2000; Iwasaki et a .
1999; Iwasaki et a .l，2 0 0 0; Nishiwaki et a .l ，な経緯で発表されるに 至 ったか 、できる だけ論文に書 いていないエピソード を中心にお話したいと思う 。 この作業 を通して 、私がどのような失敗 を 積 み重ねてきたか、さらに 、私の研究の経過に 、共同研究者・競争研 究者がいかに重要であ ったかを確認し
たい 。

1.

シ ア ノ バ ク テ リ ア の 時 計 遺 伝 子 群 kai の 同 定れた 。早速問い合わせてみ たところ、手塚先生も 同.l 1 9 9 8 )(Ishiura ，Kutsuna et a，

じ研究室の出身だとい う 。早速手塚先生は近藤 先生

この論文は、シアノバ クテリアを用いて初め て原に連絡をとってくださ り、私は、軌道に乗り はじめ

核 生 物 の 時 計 遺 伝 子 群 kaiABC を同定したものであたシアノバクテリアの 研究をそのとき初めて 知った 。

る。私は M 1 の学生として、この同 定作業のごく最近藤先生らのシアノバクテリアの最初の論文

終段階に部分的に関与 させていただいただけ だが、S) が掲載される直前のこ と(Kondo etσ人 1993. P Nベ

それが私のシアノバク テリアの時計研究の第 一歩とであった。近藤先生には、 1993 年の 10 月、名古屋でなった 。

の 生 物 物 理 学 会 の 際 に は じ め て お 会 い し た 。学 部 4

夜、が生物時計の研究 に興味を持った、いさ さか風

年の時は、見虫内分泌、学で有名な 山下興亜教授の研変わりな理由は最後に 述べるとして、近藤孝 男・石究室に配属し、カイコ の細胞周期関連因子の 分子生

浦正寛グル ー プに参加したのは幾つ かの偶然が絡ん

物学的な研究に参加さ せていただいたが、そ れは大でいる 。大 学 3 年生の頃、生物時計の 総説や本を眺学院から近藤先生のグ ル ー プに参加することを前 提めていた時、

f植物細胞工学j という雑誌で生物時計とした選択だ った。

の特集号 (1991 年) があり、その中に近藤 先生( 当

実際に大学院( 名大人間情報学研究科 ) に入った

時、岡崎基生研) の書 いたウキクサのリズム の総説

石浦グループは岡崎の 基礎生物学
1995 年当時、近藤ーもあった。 そのほか、後藤健先生 ( 帯広畜産大)、中っ
研究所から名古屋大学 理学部に転任したばか りだ、

島秀明先生( 岡 山大) による総説も大変印象 的で、た。 引越しが終わる秋口ま で、連日岡崎に通って 実

とくに後藤先生の仕事 ( 代謝サイクルやセカン ドメ

験をした 。 当時は、まだグループ は小さく、近藤 ・ッセンジャーを核とす るリズム機構の考え方 ) に大石浦両先生とともに、 京大の博士課程

変興味を惹かれた 。 ざっと御略歴を見たところ、 三

摂之さん、名大の先輩 (D1) の沓名仲介さんが主力

人の先生とも名大理学 部出身と気付いた 。 当時私がメンバーとして研究を していた 。沓名さんと私は、在籍していた名大農学 部農学科には、懇意に してい近藤先生による素晴ら しい生物発光測定シス テムとた理学部出身の手塚修 文先生( 植物生理学) がおら

スクリーニング系で得 られた長周期変異体 (P48 と(D3) の青木E‑mail ・iwasaki@ bio.nagoya‑u.ac.jp
時間生物学

V o I.l O .N o .l ( 2 0 0 4 )3 ‑呼ばれていた) を相補する、ゲノム断片の相補領域下。toki や ritsu はショウジョウパエの変異体の名前の限定と、塩基配列の解析を行った。変異体の相補すとして使われていたので、残念ながら使えない。「

実験に用いられたゲノムライブラリ ーは、 石浦先生

べては響である J という仏教の教えから がbiki といの洗練された実験デザインによるもので、実際の作うアイデアも青木さんから出されたが、採用にはい製には青木さんがあたった 。 さて 、P48 の相補領域

central oscillator
たらなかった 。そのほか、 chronos，を含む約 5 k b の領域を、私たちは P48 領域と名付け、

master oscil/ator (moc) なども出たが、「折角(cos) ，

そこに含まれる 8 つの O R F ( 読み取り枠) を仮に遺だから日本語にしよう」という意見で一致した 。その中で一旦合意を見たのは wakka (輪っか) だ った。

んと私は最終的な遺伝子領域約 2 k b に絞りこみ、 3

サイクルの輸にひっかけたこのネーミング、ほのぼ

つの遺伝子からなる時計関連遺伝子クラスタ ーを同のとした、なかなか味のある可愛い名前で、例外的定することが出来た 。 これらは P48 領域の D ，E ，F 遺に相談した 5 人の全員 一致を見た 。 ところが、念の伝子であったことから、それ以降しばらく学会等でため石浦先生が、共著者の 一人の Carl H . Jonson

はD ，瓦 F 遺伝子の名で報告していた 。 これらの遺(Vanderbilt 大) に問い合わせたところ、伝子はまったく新規の遺伝子で、コ ードするア ミノ

いうスラング( 意味は辞書 を見て下さい) を連想さ酸の配列から機能をまったく推定できなかった 。いせるから頼むから辞めてくれ」とのこと 。泣く泣く

Iwacky と

まだに 真核生物に相同遺伝子は見つかっておらず、

あきらめざるを得なかった。加iten (回転) も有力な生化学的機能は未解明である 。

候補だった。 この名前は、 96 年の S R B R での石浦先

さて、これらの遺伝子の特定後、二つのプロジェ

生の発表で初めて用いたが、その際も飽くまで仮のクトが立ち上がった 。一 つは転写レベルの解析で、名前のつもりだった 。 ところが、その年に Jay C.

石浦先生の指導の下 、沓名さんが遺伝子破壊、過剰Dunlap が彼の総説にシアノバクテリアの時計遺伝子

RJ定など、 一連の基礎的な仕事を発現、転写活性の ilの名前を Kai と紹介してしまった (Dunlap ， 1996) 。

精力的に行なった 。 ここから、 D ，E ，F 遺伝子( のちしかも、もともと kai はkaiten の短縮形の通称、のつもの加iA ，kaiB，kaiC遺伝子) がそれぞれ概日遺伝子発

りだ、ったが、いつの聞にか kai 自体がフルネームにな現に不可欠なこと、 kaiB とkaiCがオベ ロンを構成しった。 かくして、 D E F 遺伝子は、それぞれ kaiA ，てリズミックに発現すること、 kaiC を過剰発現する

知 iB，kaiC となった 。kai という名称については「実とkaiBC プロモーター活性が強く抑制されること、は Kondo A n d Ishiura の略なのではないか? J とい

kaiA 不活化株では kaiBC 発現が著しく低下することう憎が飛び、交ったのだが、少なくとも身近にいた私などが次々と明らかにされた。 ここから、 KaiC 蛋白

でも、それを肯定する発言 を両先生から聞いたこと

質による自身の転写抑制( ネガティヴ ・フィードパはありません、念のため 。 なお、 Carl Johnson はック制御) を自励振動の本質とするモデルが考案さ

Ikai という名前自体は賛成だが、間違って欧米人にれることになる 。 しかし、後述するようにこの解釈

K a y ( ケイ: Steve A. Kay) と発音されたらたまらには若干問題点もあり、それほどすんなりと出てき

んJ という冗談まじり( ? ) の意見をよこしてきた

たわけではなく、むしろ近藤先生・石浦先生中心にが、その進言は却下させて頂いた( ただし、海外で論文作成の段階で練り上げられていったものと記憶

講演する際、「ケイと発音しないように」という言葉している 。 ともあれ、そのモデルは、初期のショウでしばらくはウケをとることができた 。Steve 本人

ジョウパエの P er 蛋白 質による per 遺伝子発現の抑にも大ウケだった) 。

制、アカパンカピの Frq 蛋白質による frq 遺伝子発現

最終的に kaiABC という名称、が確定されたのは、論フの抑制などと基本的に同様の「単純ネガテイヴ ・

文をまとめる段階だ、った。 1998 年に Science に掲載さィードパック ・モデル j であった 。

れるまでには、相当時間がかかり、そのエピソード

さて、時計遺伝子同定の初期の結果は 95 年の名古も沢山あるのだが、そのいきさつについては省略し屋での時間生物学会や、札幌シンポジウムなどで報よう 。ただし、その問、程らによる mPerl のクロー告されたが、当初は仮の名の D E F遺伝子として発表

ニング、Takahashi らによる Clock のクローニングとした 。 むろん、ネーミングは重要な課題( というよ

いう l晴乳類時計遺伝子の同定とそれに続く急速な展り楽しみ) だったから、色々なアイデアが出た 。

開が、私たちの活動にも大きな意味と影響をもたら

jikan (j ik) は、個人的にはかなり好きな候補だった

したことを記しておかねばならない 。 なお、程さん

が、石浦先生の「俺は濁音 は好かん」との 一言で却のクローニング情報が、分子生物学会の英文要旨を

時間生物学

‑

4 ‑

Vo I.l O. N o. l (2004 )通じて海外に伝わったのを受け、 Joe Takahashi とかった。そこで、 KaiC をアッセイ系に添加すること

Michael Rosbash から近藤先生に直ちに問し、合わせが入ったことも思い出深い 。

で KaiA‑KaiB 間相互作用が促進された。つまり、どなお、同定作業を行なった岡崎 には Susan G old‑体を形成できるらしい。折しも、ショウジョウパエ

en (Texas A & M 大学) のところから、ホ。スドクの、 Per:Tim 間相互作用異のper'‑ 変異による Per:Per 問

Carol Andersson が訪れ、 3 ヶ月ほど共同実験も行常の報告もなされ、私もそれまでに得られた 30 種類なった 。英語の訓練にはまたとない機会で、最大限近くの周期変異の蛋白質問相互作用への影響や、相利用させて頂いたことが、その後外国人研究者たち

互作用ドメインを調査することにした 。 この研究にと知り合ったり議論したりする上で、大変役に立った。

は、途中から院生の谷口靖人さんが加わった。

うやら Kai A. KaiB，KaiC は三成分からなる高次複合

なお、名古屋に移ってしばらくしてから、近藤 ・石

さて、 1996 年ころから、次第にバクテリアの全ゲ

浦両先生と沓名さんと私の 4 人でデイスカッション

ノム配列の解読が報告されるようになった。そこで、していた時、話の流れで光周性の分子遺伝学的な解当初は配列が出るたびに熱心に Kai 蛋白質の相同蛋析として、ウキクサを用いた解析をはじめたらどう

白質の検索をしたのだが、なか なか見つからない 。

か、というアイテ アが一気 に持ち上がったときの熱

最初に iKaiC に部分的に似てるかも ...J と思われた

気も忘れられない。 このプロジェクトは、数年後にのは、 Methanococcus という、メタン菌( 古細菌) の

実際に近藤研で開始され、現在助手の小山時隆さん、ゲノム中にあった MJ1359 という機能不明の O R F に院生の三輪久美子さんを中 心 に活発に展開されつつコードされる蛋白質だ、った。 しかし、サイズは KaiC

ある 。

の半分しかなく、どうも自信が持てずにいた 。そこeで、ともかく配列比較をしてみたところ、 KaiC 蛋白

2. K ai蛋白質の相 E 作用とタンデム構造 (lwasaki
et al. ，1999)

さて、 kai 遺伝子クローニング後の転写レベルの解っ た。 A T P
質の前半部分に低い相向性があるようだ、
結合ドメインの位置もよく対 応している 。 では、

KaiC の後半部分は何かに似ているだ ろうか?

後半析と並んで始まったプロジェクトが蛋白質レベルの部分だけを相同検索したところ、またしても M]1359、 Kai 蛋白質はまったく新規解析だった 。 とは 言 えがヒットした 。 しかも、 A T P 結合ドメインはまたもの蛋白質で、 A T P 結合モチーフ以外にこれとい った

対応する位置にある 。" ということは、 KaiC は前半

特徴もホモログも見いだせなかった 。そこで、とにと後半が似ている 重複構造をとっている!

かく当時流行りの酵母 Two‑hybrid 系を用いて相互本的な構造に気付くまで、配列 が出てから l 年以上

作用パートナーを探索しようということになり、私かか った。その後、古細菌ゲノムの中に単一ユニッが担当することにな った。最初に取り組んだのは、トのみの知iC 相同遺伝子と、重複構造をとる相同遺Kai 蛋白質問で相互作用があるかど うかの検討だ っ伝子が次々と見つか った。 また、 kai遺伝子の相同遺た。遺伝子クラスターを作っていることからして、

伝子は シアノバクテリアのゲノム中には 一般的に存その可能性があ った。 さらに、当時は、 1994 年に在するが( 持 っていないものも最近見つかった) 、大Per:Per ホモダイマーが Rosbash のラボから報告さ腸菌をはじめとする他の多くの真性細菌や真核生物、 1995 年に Weitz らが Per の相互作用因子としてれには見つかっていない。 こうしたことから、 kaiC は

T i m を同定するなど、時計因子の蛋白質問相互作用に焦点が当てられつつあった時期だった 。当時はバ

もともと古細菌で生じたものが重複し、その後シア
ノバクテリアにとりこまれたのではないか、との推クテリアで Two‑hybrid を用いた報告はほとんどな測をした 。

この基

く、かなり不安なスタートだったが、 Weitz の論文

こうしたことをまとめて論文にしたのだが、いつ等を参考にして、比較的すみやかにポジティブな結っ た。そうこう
ものように論文の作成は遅れ気味だ、

果を得ることが出来た 。In vitro の転写翻訳系を用しているうちに、 Carl ]ohnson から B R E T (biolu

いた相互作用アッセイや、 Kai 蛋白質の抗体作りな

minescence resonance energy transfer) という新た

ど、ごくごく基本的な生化学的な 実験も ラボとしては初めてで、今思うとずいぶんまごつきながら 実験

報告を直接 聞いた。 むろん私たちの結果を受けて行していたものである 。いずれにしても、 Kai A. KaiB ，った実験である 。 しかし彼等は書くのが早い 。原稿

KaiC はあらゆる組み 合わせで相互作用できるらしかの内 容 をめぐって 一悶着あったが、調停を重ね、無った 。 しかし、 KaiA‑KaiB 聞の相互作用は非常に弱事に私たちは E M B O J . に (Iwasaki eta/. ，1999) 、彼等

l時￨羽 生物 学

司

な手法を使って、 KaiB 間相互作用を確認した、とのVo l. l O ，N o .l (2 0 0 4 )‑5 ‑のほうはアッセイ法の開発という趣旨で P N A S に論かけ上まったく無周期になっていた 。少なくとも時文を掲載することができた (Xu et a l. 1999)0 K ai蛋

計に大きな影響があることは間違いない 。 そこで

白質問士の相互作用の研究はその後も展開し、院生1998 年の 8 月上旬に Susan に連絡を入れ、無駄な競の景山伯春さんの並々ならぬ努力の結果、最近では争をしなくてすむよう協力を持ちかけた。一応、今500 k D a 以上の巨大な複合体が夜間に形成されるこ

後の実験予定だけ説明し、できるところは協力しよとが示されている (K a g e y a m a et a/.. 2003)

うということになった 。私は 1999 年の 2 月までに、欠失実験、過剰発現実験など、基本的な実験を済ま

3. S a s A の同定と解析 (Iwasaki ，Williams et al. ，
2000)

せ、 ISasA は概日リズムの必須因子であり、 KaiC と相互作用するとともに、 kaiBC の発現の正の調節因

Kai 蛋白質の結合因子の探索は、 1997 年頃から始子である」という内容でまとめようと考え、早速詳まった。酵母 two‑hybrid 系を用い、私がゲノムライ

細を Susan に送り、打診した 。その返事で初めてわブラリ ーを作製し、谷口さんがスクリ ーニングするかったのだが、 Stan は、実験で S a s A に行き着いたことになっていた 。 しかし、私の作ったライブラリのではなく、 KaiB の相同遺伝子検索から SasA を見

ーには致命的なコンタミネ ーションが見っかり、谷つけていた 。彼はもともとバクテリアの 二成分情報

口さんの数カ月の努力が水泡に帰してしまう事件が伝達系の仕事をしていたことがあり、 S a s A を起こってしまった。大いに落胆する谷口さんを見て、

IKaiB 様配列+ ヒスチジンキナ ーゼドメインの融合

私はこれ以上研究を進める自信がなくなり、もう大蛋白質」とにらんだ、のだった。その問、彼等のほう学院を辞めようと真剣に悩んだが、続けることにしでもいくつか実験をしていたが、彼等のデー タでは、たのは、近藤先生をはじめ周囲の暖かい励ま しがあsasA 欠失株は確かにひどく振幅が低下するものの、ってのことだ、った 。谷口さんも、くじけず方針転換

リズム成分は確認可能だという 。 また、こちらでもし、 KaiC の二つの K aiA 相互作用領域を限定し、そやりかけていた蛋白質レベルの解析にも着手しつつの変異の効果を論文にまとめることが出来たあるようだ、った。 とりあえず、私は sasA 破壊株の表(Taniguchi et a/.. 2001) 。結局 、谷口さんの卒業後に現型の阻婚のチェックに当面専念すること、株をお新たなゲノムライブラリ ーが完成、スクリ ーニング

互いに交換して相互にチェックしてみること、 SasA

したところ、 K a i C の相互作用因子候補として、の蛋白質レベルの解析は Stan に任せること、などを

SasA (Synechococcus adaptive sensor A) と呼ばれ提案した 。 3 月上旬には私も「低振幅の リズム j をる既知の情報伝達系のヒスチジンキナーゼが釣れて捉えられるようになった 。原因は光照度だった 。光

きた 。 このスクリ ーニ ングには、修士の北山陽子さが比較的強ければ、 sasA 破壊株のリズムはなくなるんが尽力してくれた 。彼女はその後 Kai 蛋白質の細が、低照度ならば、かろうじてリズムを確認できた。

胞内動態や (Kitai引 n a et a/.
. 2003) 、さらに新たなさらに、その周期は数時間短くなっていた。SasA を

Kai 結合蛋白質の分離、 2 波長生物発光同時測定系の「必須の時計因子」とする間違った発表をせずに済ん開発など、多方面で顕著な成果をあげることになる 。

だのは、 Susan や Stan と組んで、双方でデー タをとっ

さて、 SasA は、奇遇にも名大農学部の水野猛 ・饗

て確認することができたからだ。つくづく共同研究

場 i告文先生のグル ープが 1993 年にクロ ーニ ングし者は有り難い 。私は 3 月下旬にテキサスに飛び、数た、機能不明のヒスチジンキナ ーゼだ、った 。面白い

日間 Stan. Susan と顔を突き合わせてデー タを検討ことに、シグナルを受容するセンサードメインはし、今後のプランを練った 。

KaiB と相向性があり、 K aiC との相互作用に十分だ

最終的に、 SasA は基本振動発生の必須要素ではなった。機能解析のため、饗場さんから sasA 領域を含

いが、破壊されると振動が不安定化し、周期短縮すむ遺伝子断片を頂き、欠失や過剰発現用のコンストることから、おそらく基本振動の増幅・安定化に寄ラクトを作った 。いよいよ機能解析にとりかかろう

与する circadian a m plifier である、と推察された 。

とした時 (sasA を釣り上げてから 3 ヶ月後) 、饗場さ

この際、 KaiC からの入力と、 kaiBC 発現を正に調節

んから ISusan G olden のところのポスドク (Stan

することを考えると、基本ル ープに対して 二次ルーW ill iams) から、同じクロ ー ンを送ってくれと言っ

プを形成することになる 。 また、破壊株は明日音サイて来たから送っておいた」と伝えられ、いささか焦クル下で (kai 遺伝子群とは無関係に) 増殖阻害を示った 。 とにかく欠失株を解析したところ、 kaiBC 遺したことから、代謝、光、時計のリンクに位置する伝子の発現レベルが劇的に低下し、発現リズムも見因子としても興味深いものであった 。課題は多く残

時間生物学

‑

6 ‑

V o l.l O . N o .l ( 2 0 0 4 )、 Stan がされた が、得ら れた結果には新規性があ り
C ell 誌を狙ったらど うか 、 と提案 してきた 。私は、のは自然 の成り行きだ。 それに、 K ai蛋白質の 生化
学的な機能が まったく推定できなかったため、とにG enes & D evelo p menl誌あたりが妥当と考えていたが、ほだされて C ell に投稿 したのは 1999 年の 年末だ

か く何でもいいからと っかかりが欲しか ったのであった。途中、学位論文の提出などもあ ったが、いい意味で、大変頑固者で、妥協の効かない Stan と論文を仕西脇さんがリン酸化の有無を調べることに した。西脇さんは、 K aiC が SD S‑P A G E 上で、複数のバンドと上げるには驚くほど根気 と忍耐と努力が必要で、結局投稿 した頃の原稿は. . version 37 " にまでな ってして分離でき、移動度の遅いシグ ナルはリン酸化 によること、さらに K aiC の リン酸化 に顕著なリズムがいた。3 人の reviewer の要求は非常に厳 しいものだ
った 。そのうちの一つは 、掲げ、ら れたモデルを「 よあることを見いだした。彼女はさらに KaiC が実際にA T P 結合蛋白質であ ることを明らか に し、 A T P 結

りファインに」する実験と説明を要求するものであを行 った。当初の標的は、合部位の変異体の解析なとさり、科学論文の妥当なチ ェ ックという peer reVlewの本質を超えて 、査読者 ・編集者に誘導 され る形でKaiC が ATPase 活性を持っかどうかだ ったが、そち

論文修正をする際の問題点や危険性も感じた 。訂正稿で掲げた モデル図は、 (どちらかといえば) その場た。

しのぎのアク ロパティックな説明を無理矢理ひねり

共存下で SasA キナ ーゼの自己 リン酸化活性が変化だした点がなきにしもあらずで、最終的にアクセプするかを調べたところ、まったく予期 しない結果がトされたのは嬉 しかったが、個人的には惜侃たると得られた。 1998 年の 10 月末のことである 。 コント ロ

ころもあ った (Iwasaki etal.，2000)0 SasA の研究は、その後 Stan が新たに立ち 上げたユタ大学 のラボと私ールとして大腸菌内で合成 ・精製した KaiC 融合蛋白
質に A T P を加 えただ けで、リン酸基の強い取込みがたちのラボで続けられている 。

見いだされたのである 。つ まり、 K aiC は自己 リン酸

4. KaiC のリン酸化に関する研究: その 1 (Nishi‑
2 0 0 0)waki ，Iwasaki et al. ，る。私は主 として相互作用と蓄積パタ ー ンに 集中 し、らのほうは思うような活性はなかなか得られなか っ
その頃私は SasA の機能解析をし ていたが、 KaiC化能を持つ。 これは、 A T P 結合能とともに、 KaiC
で見いだされた最初の生化学的な性質であ った。 さらに、化学安定性 実験から、 リン酸化残基 はセリン

KaiC 蛋白質の細胞内動態に関して最初に取り組ん

またはスレオ ニ ンと推 察 された 。バクテリアでは、だのは、ウエスタン解析で量的変動を追うことだ っ真核生物と 異 なり、 ヒスチジンやアスパラギン酸のリン酸化 の報告例が遥かに多く、 一般的である 。

た。酵母 two‑hybrid 系の立ち上げの頃から、抗体を作り 、解析をはじめていたが、 kaiBC プロモータ ー

KaiC には既知の真核型のキナ ーゼドメイ ンは存在せの顕著 なリズムに比べ、 Kai 蛋 白質の動きはひどく、 シアノ バ クテリアでは最初のセ リン ・スレオ ニず

緩慢で、 1 :年間以上ま ったく リズムを検出できなか

ン自己 リン酸化蛋白質の報告例になった 。西脇さんった。一 時期、私は「蛋白質レベルの蓄積 リズムがは K aiC の A T P 結合能に関する論文を準備中であ っほとんど検出できないにも関わらず、転写 レベルのた。K aiC が自己 リン酸化活性を持つということに関事実" を報告す

して、私はもっといろいろ調べるつもりもあ ったが、べきだ、とさえ 主張 していた 。 しかし、ある時 Carl

あまり発表が遅くなってはいけないし 、西脇さんのP N A S の論文にこのデ ー タを載せて頂くことにした 。

リズムはは っきりと出る」というから 「こちらでは K aiC の蓄積にも リズムが確認でききてたJ と連絡を受けた。私が実験条件を 最適化で、

ただし、この時には in vivo での リン酸化 の話には言子さん、院生の 富 田淳 さんに条件を変えてい ろいろ

及せず、飽くまで A T P 結合能と、 in vitro での自己リン酸化 に関する論文と な った (Nishiwaki et a.l，

試していただき、私たちのラボでも蓄積リズムが検

2000)。

いないせいに思え、とても有能なポスドクの西脇妙

蓄積 リズムなし」と の結果出できるようにな った。「っ たが、冷や汗ものを公表せずに済んだのは幸いだ、、 1994 年の E dery らに よる Per 蛋白質のリン当時
酸化リズムの発見、1997 年のアカ バ ンカピの Frq 蛋

Nishiwa‑
5. KaiC リン酸化の話: その 2 (Iwasaki ，
2 0 0 2)ki et al. ，itro の KaiC の自己 リン酸化活性に気付い
偶然 in νてから、 SasA の解析を続けつつ、 K aiA や KaiB によ

白質のリン酸化 リズムの報告から間もなか ったため、る自己 リン酸化活性への影響を調べてみた 。私の当Kai 蛋白質にもそうした修飾がないものかと 考 えた

時のアッセイでは KaiB の効果は まったく見られなかっ た。 ここでも私 は共同研究者に大いに救われた。
だ、

時間生物学

Vol. lO.No.l( 2 0 0 4 )‑7 ‑ったが、 KaiA の添加により、 KaiC の自己リン酸化

圧する変異株( サプレッサー) をスクリーニングしが著しく上昇することがわかった。明らかに KaiA のたことがある 。周期が野生型に戻ったその変異は 、KaiC に直接なんらかの作用を及ぼしている 。

kaiC 遺伝子上に見つかった (kaiC15) 。

SasA の解析にある程度目処が経つのと同時に思い

次に、細胞内での KaiC リン酸化状態を、様々な時ついた別の課題は、 Ishiura et a.l (1998) のモデル

計変異株で検討したところ、 kaiA 不活化株ではリンの妥当性を検討することだ、った 。前述の通り、当時

酸化型 KaiC の蓄積が見られない。逆に、 kaiB 不活化のモデルには問題点があった。 KaiC は単純に自己抑株ではリン酸化 KaiC の過剰蓄積が認められた。 した制因子とされていたが、 k a i C 欠失株では決してo でも KaiA は KaiC リン酸化に重要とがって、 in viν

kaiBC プロモーター活性は上昇しない。 むしろ平均考えられた 。 また、面白いことに kaiA2 変異株では以下のレベルであった。いっ ぽう、アカバンカピのKaiC のリン酸化レベルが低下するが、 kaiA2kaiC15

自己抑制因子 F r q の場合、 jトq 遺伝子破壊はjトq 遺伝

二重変異体( 周期サプレッサ一変異株) ではリン酸

子プロモーターの劇的な上昇をきたす。KaiC が抑制

化レベルが回復されていた 。

因子と考えられたのは、欠失実験ではなく、副作用

私達は、以上の結果を論文にまとめることにした。

の起こりかねない過剰発現実験で、知iBC プロモータ

その際、西脇さんによる KaiC のリン酸化リズムの報ーが強く抑制されたためだ、った 。 この点は、注意よ

告も前提として入れさせて頂いたので、この論文でく読めば Science の論文にも 言及しであるが、どちらは西脇さんは co‑first author になってくれた 。 しかかといえばマイナーな問題点とされていた 。私はそし、 KaiC のリン酸化に関する論文は、シアノバクテ

れがいささか気になった 。 また、 Kai 蛋白質問士のリアにしては厳しい競争の中で作成された。 KaiC の相互作用や KaiC の A T P 結合能・自己リン酸化能と自己リン酸化に対する K a i A の効果は、事前に S.

いう蛋白質レベルの観察と、転写リズムの自己制御

Golden やC . Johnson に{ 云えてあ った。 KaiB についをどのように絡めるのかも見通しが立っていなかっては、 Golden のところの Stan Williams が KaiA のi 遺伝子同士の遺伝学的な関係をもた。 ともかく、 kα

効果 (KaiC リン酸化促進効果) に対して抑制的に働う少し検討してみようと思 った。そこで、 kaiA ，kaiB，

くとの結果を出した 。そこで、 Stan らは KaiB の効

kaiC それぞれの機能欠失株で、 kaはまたは kaiC遺伝子

果も含め、 in vitro のリン酸化の性質と、 KaiA の部を過剰発現させ、 kaiBC プロモーター活性をモニタ

分 N M R 解析情報とカップリングさせた論文を準備ーした 。野生株で kaiC 過剰発現を行うと、 kaiBC プ

した 。本来、その内容は私たちが論文の作成についロモーターは強く抑制され、リズムが停止される Oて事前協議したスケジュールや内容とは異な っていkaiA 不活化株でこの実験を行うと、 kaiBC プロモーたが、彼等はそれを先に Science に投稿した( 私達のターはむしろ緩慢に上昇する結果が得られた( ただ

論文作成の遅れも重大な 一 因) 。それを聞いて私達

し、 kaiA 不活化株自体の kaiBC プロモーター活性はも、同時掲載の可能性を求めて (KaiB の解析結果ももとから低く抑えられている )。逆に、 kaiA を野生株加えて) Science に投稿したが、残念ながら両者ともで過剰発現すると kaiBC プロモーターの活性は上昇

却下された。そこで、私達は KaiB の解析部分を外しし、無周期化するが、この 実験 をkaiC 欠失株で、行うて PNAS に投稿し直し、彼等もそれに続き 、無事両と、 kaiBC プロモーター活性はま ったく変化しなか

者とも同じ号に掲載された( Iwasaki et a人 2002;

った。以上の結果から、 KaiA とKaiC は協調的にポWilliams eta，
.l 2002) 。 この間 KaiB の解析を主に行 っジティブにもネガテイブにも働くと示唆された 。むていた北山さんには、内外の調整に巻き込む形で随ろん、これはかなりトリッキーな実験である 。過剰分迷惑をかけてしまった 。彼女の素晴らしい粘りと発現実験は、本来ありえないレベルに特定の蛋白質

周囲のサポートもあり、 in vivo，in vitro の解析に加え、が増えたことに依存する、 異常な 撹乱を起こしかね

Kai 蛋白 質複合体形成や局在性に関する検討を踏まない。 したが って、この種の 実験 はごく限られた範えた KaiB 中心の論文が E M B O J に掲載できたのは囲内で解釈の参考にする程度が望 ましい 。 しかも、

本当によかった (Kitayama et a 人 2003) 。

この 実験 を変異株で行うのだから、 二重に注意が必

この問、 Johnson ラボもリ ン酸化に関する研究を要だ。いずれにせよ、 kaiA‑kaiC 間相互作用を 裏付け

遅れて開始し、論文を整備できる段階になっていた。

るデータは遺伝学的スクリーニングからも得られた。

リン酸化に関する限り、内容はすでに私達や Stan の

以前、 kaiA と遺伝学的に相 互作用しうる因子を特定

結果と同様だ、ったが、彼等はそれに KaiC 蛋白質の安するため、 kaiA 上の長周期変異株 kaiA2 の変異を抑定性や、ゲノムワイドな転写調節の話を含めて、よ

時間生物学

‑

8 ‑

Vo l.l O ，N o .l (2 004 )り大きな論文にまとめあげた 。後者は、 KaiC の特定ら/ 彼ら( ここにはお名前をあげることの出来なかの C lS エレメントは必ずしも振動発生 に必須ではなった多くのラボメンバー ・共同研究者・関係者も含い、という重要な内容を含んでいた 。それについてめて) に、心からお札とお詫びを申し上げたい 。世は、私達のラボでも彼らと情報交換しつつ、ポスド

界的にも珍しくシアノバクテ リア研究者人口が高く、クの中平洋ーさんを中心に研究が進行していた 。結日本有数の生物リズム研究密度を誇る名古屋大学の果的には協議や言い合いをしつ つ、彼等の論文は研究環境にも感謝である。

.l 2003) 、私達の論文は3 年の E M B O J に (Xu et a，∞2

大学院在籍中から心掛けたことは、内外の研究者

Sに別の観点からの実験結果も加えて 2004 年に P Nベとできるだけフランクに議論し、幅広く情報交換す.1 2 4) 。 この経緯の詳細掲載された (Nakahira 針 。，

ることと、若手の研究者・院生と連絡をとりあうこは省くが、一悶着も二悶着もあった 。 さまざまな思とだ、った。今でも、吉村崇さん( 名大) 、松本顕さん

惑が複雑に絡み合い、大量のシビアなメールのやり( 九大) 、上田泰己さん( 理研) 、八木田和弘さん( 神

とりをしながら調整にあたり、少なからず消耗 ・昨大 ・名大) などには特に日頃から議論や相談にのっ易し、まだなかなか整理のつかない問題点について、て頂いている 。 こうした若手の交流には、近藤先生

いろいろ考えさせられた 。 そのいっぽう、 Johnson

をはじめシニアの大御所の方々 、有能な中堅の研究グループの優秀なポスド夕、 Tetsuya Mori ( 盛徹者の方々の暖かいご理解が不可欠だ、った。たとえば、也さん) とは、とても有益な情報交換を行うことが研究室を気楽に訪問させて頂い たり、若手交流会

でき、感謝している 。

(犬山、 1999 年) 、学会での若手シンポジウム( 山口、∞その後の私達のグループの研究の流れや概要につ2001 年) の後援など、大変好意的に支援して頂いた

いては、最近書いた総説( 岩崎、 2003a) を参照してりしたことは、私達若手にとって大きな励ましで、頂きたい。現在では、現行の真核生物での転写翻訳

大変ありがたかった 。

フィードパックモデルから、さらに大きく逸脱した

さて、ここに書いたことは私の立場から見た、限概日発振機構の可能性が検討されつつある 。それに定された記憶とメモによる、意図のあるなしに関わ

ついては、近い将来機会を改めて報告させて頂きたらず限定されたスケッチに過ぎなし、 。 しかし、自然い。 シアノバクテリアのリズム研究は、 KaiC の生化科学の研究は、主観と思惑と日常のせめぎあいの中学的機能や周期決定機構、ゲノムワイドな転写調節

で、そのときどきの条件に依存しながら冷静かっ熱の機構など、まだまだ課題が多く、未解明の重大なっぽく進行する 。 たとえ導き出されたデータや解釈

謎がたくさん残されている 。その解明は、多くの意が単純明快であっても、そこには常にさまざまな事

外な事実の発見と、興奮と感動に満ちたものになる

情が複雑に入り組んだ背景がある 。 自然科学が社会はずだ。

的に無視し得ない重みを決定的に増し続けている現在、そうした背景からどのように科学的成果がもた終わりに. . .

らされ、社会的に伝達 ・受容され、淘汰されていく

まず、私が行ってきた研究には、以上述べたようのかを冷静に把握することは、現代の人間や社会のに、多くの共同研究者の協力が当然ながら不可欠だ

営みのダイナミックスを考える上で極めて重要で、あった。 また、研究や論文作成の大半が、内外の共同る。私はそこに、科学と市民社会、文化や思想をつ研究グループ・半競争グループの進捗状況に依存しなぐ( あるいは既に繋がれている) 機相やヒントをつつ、研究室内部の事情も絡む形で発表にこぎつけ

垣間みることも期待している 。

たものであった 。その問、私自身は共同研究者たち

時間生物学は極めて多義性/ 多様性に富み、ダイに迷惑をかける側面もずいぶん多く、反省すべきこ

ナミ ックな領域( デイシプリン) として展開してきとが多かった。上に書いたこと以外にも、原稿のチた。私たちは生命のリズムをどのように面白がり、

ェックや追試の遅れ、並行して 行うべきラボの事大切に思い、情熱を傾けてきたのか。 さらに、この務 ・管理や実験指導の怠慢、海外の共同研究者の立分野が扱う内容が、自然科学以外の周辺領域とどの場とラボの研究メンバ ーの立場の違いをうまく調整

ように関わり、影響を与えあっ てきたのか。実は、仕切れなかったこと、研究テーマの割り振りで一部

私の時間生物学の研究に参入したのは、もとはとい

不満を招いてしまったことなど、山のように不手際

リ ズムをめ
えば、このような「時間 ・生物・生命 ・があった( 今でも多分ある) 。その中でも、これほどぐって交わされてきた考え方や 周辺領域を、科学充実した研究を共有する機会を 与えてくれた彼女

史・文化史の問題系として捉え直すこと j への科学

時間生物学

V o I. I O . N o .1 ( 2 0 0 4 )9r時 を刻むバクテリア J (3 節「生論 (Science Studi巴s) 的な興味に基づいている 。そ岩崎秀雄 (2003b)の興味は、大学 2‑3 年生のときに「生物時計J という命と時計」をめぐる歴史)

概念を初めてまともに聞いた時にはじまり、ますま

w e b版

す強くなるばかりである 。時間やリズム、時計といtion/journal/37/res巴arch̲2 1. ht ml: 生命誌ジャ ーナル、

http://www.brh.co.jp/experience/巴xhibi‑

った内容を 扱うゆえに、時間生物学に は周辺領域とr生物時計と歴史」、生命誌研究館の独特の接点があり、その隣接領域は狭義の自然科

岩崎秀雄 (2003c)

学の範時を遥かに超えている 。真の意味で文理の枠

HP、コラムの庭 http://www.brh.co.jp/salon/col‑を超えた融合型研究に適した境界条件を、この分野

u m n/msg.php?89

が必然的に備えていることは間違いない( この点、山口大学の時間学研究所が、時間生物学を柱のーっ

Ishiura. M. ，Kutsuna. S. ，Aoki. S.. Iwasaki.H. ，Ander‑として取り込む形で新たに設立されたことは素晴ら

sson. C.R.. Tanabe. A.. Golden. S.S.. Johnson. C.H..

しい) 。 こうした条件を注視し、理解を深めながら、

Kondo. T. (1 998) Expression of a gene cluster

今後の研究を模索 ・展開していきたいと思 っている 。

kaiABC

そこでは、高度の科学研究の理解を前提として、自cyanobacteria. Science. 281: 1519‑1523.

asa circadianfeedback

proc巴ssm

然科学に限らぬ他分野との対話 ・リベラルアーツの積極的な理解がより重要になってくるだろう 。 関連

Kageyama. H..Kondo. T .. Iwasaki. H . (2003) Circa‑

して、生命誌研究館に依頼されて昨年書いた小文がdian formation of clock protein complexes by Kai A.

w e b 上で公開されている( 岩崎、 2003b;2003c) 。 ご

KaiB. KaiC and SasA in cyanobacteria.

意見 ・ご批判を頂ければ幸いです。

C hem.. 278: 2388‑2395

J. Bio/.

Nakahira. Y.. Katayama. M.. Miyashita. H.. Kutsuna.
参考文献

S..Iwasaki. H .. Oyama. T..Kondo. T. (2004) Global

Dunlap. ].D. (1996) Genetic and molecular analysis

gene repression by KaiC as a m aster process of pro‑of circadian rhythms. Annu. R ev. Genet. 30: 579‑601

laryotic circadian syste m. Proc Natl Acad Sci U S A.
10 1: 881‑885.

Iwasaki. H.. Taniguchi. Y.. Ishiura. M.. Kondo. T .
(1 999) Physical interactions a m o n g circadian clock

Nishiwaki ，T.. I wasaki，H .. Ishiura. M.. Kondo. T.

proteins Kai A. KaiB and KaiC in cyanobacteria(2000) Nucleotide binding and autophosphoryla‑

E M B O J. 18: 1137‑1145

tion of the clock protein KaiC as a circadian timing
process of cyanobacteria. Proc. Naf/. Acad. Sci. U S A ，

Iwasaki. H.. Williams. S.. Kitayama. Y.. Ishiura. M..

97:495‑499

Golden. S.S.. Kondo.T . (2000) A KaiC‑interacting his‑
tidine kinase. SasA. necessary to sustain robust cir‑cadian oscillations in cyanobacteria. Cell，10 1: 223‑233

Taniguchi. Y..Yamaguchi. A.. Hijikata.A .. Iwasaki.H. ，Kamagata ，K.. Ishiura. M .. Go. M.. Kondo. T. (2001)
T w o KaiA‑binding domains of cyanobacterial circa‑

Iwasaki ，H .. Nishiwaki. T.. Kitayama. Y.. Nakajima.

. 496: 86‑90
dian clock protein Kai C. F E B S Lett.

M.. Kondo. T . (2002) K a i A stimulated KaiC phos‑
酔

phorylation in circadian timing loops in cyanobac‑

Williams. S.B.. Vakonakis. 1. Golden. S.S.. LiWang.

teria. Proc. Nat.l Acad. Sci. USA. 99: 15788‑15793

A .C . (2002) Structure and function from the circa‑

岩崎秀雄 (2002)

rシアノバクテリアの概日リズムの発振機構について」日本時周生物学会誌 8 (1) :5‑10
岩崎秀雄 (2003a)rシアノバクテリアの概日リズム制御研究の新展開」細胞工学 22 (12):1309‑1314

dian clock protein KaiA of Synechococcus elongatusa potential clock input mechanism. Proc Natl Acad Sci
USA.99: 15357‑15362.

X u ，Y.. Piston. D.W.. Johnson. C.H. (1999) A biolu‑
minescence resonance energy transfer (BR E T )system: application to interacting circadian clock

時間生物学

nu

V o I.J O.No.l ( 2 0 0 4 )proteins. Proc Nat/ Acad Sci USA. 96: 151‑156.
Xu. Y.. Mori. T.. Johnson. C.H. (2000) Circadianclock protein expression in cyanobacteria: rhythms
時and phase setting. E M B O J. 19: 3349‑3357.
Xu. Y.. Mori. T .. Johnson. C.H . (2003) Cyanobacte‑rial circadian clockwork: roles of KaiA. KaiB and the
kaiBC promoter in regulating Kai C. E M B O J. 22:

2117‑2126.

時間生物学

Vo I. IO. No. I (2 0 0 4 )一

11‑鳥類の時計遺伝子と光周性

安 尾 し の ぶ、 渡 遷 美 和 、 海 老 原 史 樹 文、 吉 村崇

名古屋大学大学院生命農学研究科バイオモデリング講座

温帯地域の多くの鳥類では日長に応じて性腺軸の活性やプロラクチンの分泌量が変化する 。 日長計測には概日時計が利用されていることか 知られているが、日長を測る時計の存在はいかなる種でも明らかではなし、 。最近、我々はウズラの光周性制御部位として知られる視 床下部内側基底 部 (mediobasal hypothalamus 、M B H ) において、
これまで鳥類でク口ーニングされている全ての時計遺伝子が発現していることを明らかにした 。 さらにその発現パターンはいかなる光条件でも変化しなかった 。これらの結果から、 M B H には光感受相を一定の位相に保持する光周時計が存在する可能性を指摘した 。一方、プロラ クチン分泌の光 周性制御部位と 思われる下垂体 隆起葉 (parstuberalis 、P T) でも時計遺伝子が発現していた 。特に Per2 と Cry1 が強く発現しており、日長に応じてその位相関係が変化した 。Per2 と Cry1 は複合体を形成して時計制
御遺伝子の活性を変化させるため、日長はそれらの位相関係の変化を通じて分子レベルの変化に置き換えられることが考えられた 。またこの機構はヒツジの P T で示唆されているものと同様であり、鳥類と晴乳類とで光周性制御機構が保存されている可能性
考えられた 。
か、はじめに果をもとに鳥類の光周性 における時計遺伝子の役割

温帯に楼息する多くの鳥類は l 年の中で変化する
日長を読み取り 、繁殖に適した 季節に性腺の増大やについて概説する 。

換羽などの生理反応を示す。 このような性質は光周1. 性腺軸の光周性制御部位

性と呼ばれ、餌の豊富な時期と子育ての時期を 一致させるために生物が獲得してきた生殖戦略の一つである 。 日長は概日時計を利用して計測されることが調節により行われている 。即ち、視床下部の正中隆
起 (median e minence 、M E ) に蓄積された性腺刺知られている 。哨乳類は概日時計を通じて出力されたメラトニンの分泌充進時間の長さで日長を判断す

激ホルモン放出ホル モ ン (gonadotropin‑releasingるが )])、鳥類ではメラ トニ ンは光周性に関与 しない

hormone 、G nR H) が光周時計の制御を受けて下垂体門脈に放出され、続いて下垂体から黄体形成ホル。 また 鳥類の 概日時計振動体である眼や松果体や山

モン

視交叉上核を除去しでも光周性反応は正常に起こることから 5 日川 、日長を測る 「光周時計」が これら

モ ン (folli cJ e‑stimulating hor mone 、 F SH) が分泌の部位以外に存在すると考えられてきた 。 しかし鳥類では概日時計を刻む因子が分かっていなかったた

ウズラ (Coturnix coturnixjaponica) は短日条件から長日条件に移すと初日から G n R H や L H の増加がめ、「光周時計J の正確な位置や分子メカニズムは全く検討されていなかった 。近年鳥類の時計遺伝子が見られ 却、短期間で劇的に精巣重量が変化することから古くより光周性の実験に用いられてきた 。 ウズ

クロ ーニ ングされ 2. 7・他民札制 、日長計測機構を分子レベルで探る突破口が聞かれた 。 この総説では我々

ラを用いた数多くの実験結果から、光周性制御部位
は漏斗核( i nfundibular n u cJ eus、IN) や M E 、視床がこれまで、に行ってきた時計遺伝子の発現解析の結下部背側部 (dorsal hypothala mus、D H ) を含む視11寺I i 日生物学

Outeinizing h o r mone、L H ) や卵胞刺激ホルされると生殖腺が増大する九V o I.I O .No. l (2 0 0 4)
F
q ﹁
J υ

床 下 部 内 側 基 底 部 (mediobasal h y p o t h a l a m u s 、さを伝達するが、 M B H にはメラトニン受容体が存在

M B H ) であることが知られている 。例えば IN や M E、
D H を局所的に破壊すると光周性反応が阻害 される
さらに M B H を電気刺ことが報告されている 4 3 5 4性反応が阻害 されることが示されている 1. :!5 J。 また激すると L H の上昇や生殖腺の発達を再現できるこM B H に投与 した時のみに L H の分泌量が変化する 19とや 1" 刷、c‑Fos タンパクが光周性反応時に特異的に乙却。 これらの報告から、メラトニンの長さを読みIN や M E で発現することも示されている 却 2 九 また取り性腺軸の活性を制御する機構が M B H に存在す

光ファイパーや発光ビーズを用いた局所的光照射実ると考えられてきた 出。

することや 州 ハムスターの M B H を破壊すれば光周
ヒツジの様々な脳部位にメラトニンを投与すると験から、光周性に影響を及ぼす光は M B H で受容されることが示唆されている 活問。 さらにオプシン抗2. M B H の時計遺伝子発現

体の 一つである RET‑Pl に対する免疫陽性反応が INに検出されている 制。 これらのことから、 M B H にはM B H が光周性の制御に重要であることが知られてきたにも関わらず、 M B H に光周時計が存在するか否

光周性に関する光入力、光周性反応開始時のや1 経活

かはいかなる種でも全く分かっていなかった 。近年

動、内分泌系への出力といった光周性反応に重要な鳥類において数々の時計遺伝子がク ローニングされ、コンポーネントが含 まれることが示唆されてきた 。

)。
概日時計の分子機構が解明されてきた .!: 7. 10. 37. 47 叩

M B H の光周性における重要性は晴乳類に関する報
SCN

MBH

告からも伺える 。晴乳類ではメラトニンが暗期の 長PlnealP er2

SCN

Pineal & M B H
P er3

Per2
Clock

Per3

Clock
Cry1

B m al1
Cry2

Cry1
E4bp4

Cry2

。

1 ‑ 8

16

24

0

8

市

24

0

a

16

24

Zeitgeber T i m e (hou l')

E4bp4

図 1 ウズラの視交文上核 (S C N ) 、松果体 (Pineal) 、および視床下部内側基底部 ( M B H ) における時計遺伝子の発現制
P e r 2 の M B H における発現の拡大図 (四角で図 った 部分)を右に示した 。検討した全ての時計遺伝子力、 S C N 、松果体、M B H に発現していた 。Cb: 小脳、 T e O: 視蓋

時間生物学
q
t
u

6

Vo Ll O ，N o ，j (2004 )図 2 長日条件と短日条件における、ウズラの視交叉上核 ( S C N ) 、松果体 (Pineal) 、および視床下部内側基底
部 (M B H ) における時計遺伝子の発現リズム '8 )口が長日条件 (LD16:8) 、圃が短目条件 (LD8:16 ) を示す。各クラフの下のバーは明暗条件を表す 。長日条件群と短日条件群の差はグラフ右上の白いアスタリスクで(two‑way A N O V A 、* P < O 0 5 ) 、各サンプリンクポイン
卜における差は黒いアスタリスクで表した (t‑ 検定、，合

P < O ，0 5 、 P < O ，01) 。

我々はこれらを用いてウスラの M B H における光周ンの長さを読み取っていることが示唆されている li. 山。

時計の存在を検討した へ その結果、鳥類でクロー

一方、鳥類の P T とプロラクチンの光周性制御機

ニ ングされている全ての時計遺伝 子 (P er2 、P er3 、構との関係はほとんど検討され ていない。鳥類ではClock 、Bmall 、 o γl 、 Cry2 、E4bp4) が M B H に発視床下部から放出される血管作 動性腸管ポリペプチ

現していることが明らかとなっ た( 図 1) 。 さらにそド (vasoactive intestinal polyp 巴ptide. VIP) カf プロの発現様式を長日条件、短日条 件、恒暗条件、恒明

ラクチンの放出因子であるため へ P T ではなく視床

条件、光中断条件( 短日条件の暗期の様々な位相に下部が注目されてきたためであ る 。 しかし V I P 神経

短い光照射を追加した光条件) において網羅的に調が局在する M B H を破壊 した ウズラでも血中プロラ

べた 。その結果、位相や振幅に大き な変化は認めら

クチン量は長日条件に正常に反 応して上昇することれず常に安定したリズムが刻ま れていることが判明から日}、プロラクチンの分泌制御が必 ずしも V I P のした 。 (図 2、長日条件と短日条件のみ示す) 。

完全な支配下にあるわけではな く P T が関与する可

これらの結果から、 M B H には日 長に影響されない能性が考えられる 。

光周時計が存在することが示唆 された 。我々が示した時計遺伝子発現の局在は、光 周性反応開始時に c‑

4. P T の時計遺伝子発現

Fos タンパクが誘導される部位や局 所破壊により光

そこで我々はウズラの P T に注目し、時計遺伝子

周性反応が阻害される部位と 一致し、これらの時計，)10 M B H と同様、これまでにクの発現を検討した 相，遺伝子発現が光周性制御機構に 関与していることがローニングされている 全ての時計遺伝子について検考えられた。

討したところ、 P er2 と O yJ が強く 発現していること

M B H における時計遺伝子の役割は明らかではないが明らかとなった。 C lock や B m alJ などの発現も確認

が、ウズラの日長計測機構には 光感受相の概日リスされたが、その発現は弱し、傾向にあった 。 さらにムが関係していることから へ M B H の時計遺伝子は様々な光条件で Per2 と O yJ の発現パターンを検討

光感受相を制御することが考え られる 。我々が示 しした。驚いたことに、いかなる光 条件でも 一定のリたように M B H の時計遺伝子の発現パターンは 様々

ズムが刻まれていた M B H と異なり、日長に応じてな光条件で変化しなかったが、 これは光感受相の位発現パターンの変化が見られた ( 図 3) 。最も顕著な相が一 定に保持されていることを示唆 する 。 最近
) を活性
我々は甲状腺ホルモンのサイロ キシン (T.，ba

型のトリヨードサイロニン (T ，) に変換する type2

Timc of light pulsc

0 ，4iodothyronine deiodinase (Dio2) が M B H においてを脳室 内投与すると光光感受相にのみ誘導され、 T ，Per2周性反応が再現できることを示 した 51 )。 したが って

ai 0.2〉ω』ーM B H の時計遺伝子は Dio2 の発現誘導に H寺問依存性

企

戸
見

。

4

z
z

をもたらしていることが考えら れるが、この点に つZT 7
d. ZT13...ZT21

・

ロLD16:6
LD6:16

E

ω

・
6
〉

いては 今後の課題である 。

4

ω

Cry1

a: 0.2

n﹄
q
u
4
‑
n
u

3. プロラクチンの光周性制御機構
光周性反応は G n R H 分泌の他、換羽や抱卵行動などを促すプロラクチンの分 j必にも認められる 1.3 11。

2

6 10 14 16 22

プロラクチンの光周性制御機構 は哨乳類で研究が進

26 10 14 16 22

Zeitgeber T i m e

んでおり、 高密度のメラトニン受容体が存 在する下垂体隆起葉 (pars tuberalis 、 P T ) が重要であることが知られている 3 1.

1，( ' 0P T からは日長に応じてtuberalin と呼は、れるプロラクチン放出促進因子が分泌され、下垂体前葉からのプロ ラクチ ン分泌量が調節される仕組みである 1:!.11 1。 さらに近年、ハムスタ
ーやヒツジの P T において H寺計遺伝子が周期的に発刷 、 その発現パターンを変化 させてメラ卜ニ
現し :!o甜
時 n 生物学

図 3 ウスラの 下垂体隆起葉における Per2 と Cry 1 の発
現リスムa は長日条件 (口 、L D 1 6 :8 ) と短目条件 (・、L D8: 1 6 )、 b は光中断条件を表す 。光中断条件では短日条件
を、 ZT13(L D 4 :20 ) の暗期に 3 0 分の光パルスを Z T 7 (企))、 Z T 2 1 (T ) に 1 0 日間照射 した 。各グラフの下の(ム
パーは明暗条件を表す 。各サンプリンクポイントにおける差をアスタリスクで表した (one ‑way A N O V A 、
4 8 . 4 9)合

P < 0 .05、

日)
P く 0.0 1。

¥‑"0 1.J O. N o. l ( 2 0 0 4 )‑ 37‑

0.4 1 ロ light
言 l 図 co‑ntrol

言Photoinducible phase

*

ZTO

50
'
N日
M 21

J
《

Z

0.2
0

抗

..e
〉

PT

(!)

丘

O

←
﹁
つ

light

V
Prolactinの(¥c̲P了 ra n s crip t i o n a lc ontrol

つV

Prolactin

control

図4 ウスラの下垂体隆起葉における C ヴ 1の光発現誘導叫短 日条件 (LD4:20) の Z T 7 、旬、 21 から 3 0 分の白色光を照射した 。サンプリンクは光照射終了から 90 分後に行った。グ ラフの下に各群のオートラジオグラムの代表例を示した 。光感受相 (Z T 1 3 ) 特異的に Cry1 の発現が)誘導された (Mann‑Whitney U ー検定 、P < 0.01 。

図 5 ウズラの下垂体隆起葉 (P T) におけるプロラクチ
ン分泌の光周性制御機構 叫
Per2 の発現リスムのピ ークはいかなる光条件 でも 明期開始付近に固定されている 。一方 Cry1 の発現は光感受
相 (Photoinducible p h a s e ，ウスラの場合は Z T 1 2 ‑ 1 8 )で特異的に誘導され、長 日条件 では発現のピー クが後退する (図の右側 )。 その結果 Per2 と Cry1 の発現リズムの位相関係が変化す る。 Per2 と C ry1 は複合体を形成して時計制御遺伝子の転写を調節するため、位相関係の変化がプロラクチン分泌量の変化につながる 。S D 短日条
件、 LD: 長日条件、 NI: 光中断条件

変化は C ryJ の発現ピーク時間に見 られ、長日条件や5. 鳥類と晴乳類における光周性制御機構の類似性

光感受相を含んだ光中断条件ではピーク時聞が後退

近年、ヒツジの P T 、
で P e r と CIアの発現リズムが長した 。 この 原因 として 0 ァl の発現がそれらの光条件

日条件と短日条件で変化することが報告され、 P T にでのみ誘導されることが原因と考えられたため、次おける時計遺伝子がメラ トニ ンの長さを分子レベルに暗期の様々な位相に光を照射して CryJ の発現誘導の変化に置き換える役割を担うことが示唆されていを検討した 。すると光感受相でのみ CryJ の発現が誘る li. 18}。我々が示したウズラの P T における時計遺伝、 P er2
導されることが明らかとなった( 図 4) 。一方

子の動態は ヒツ ジにお けるこれらの報告 と類似しては日長が変化しでもピーク時間は明期初期に保持さいる 。 すなわち、日長を P T へ入力する媒体が違うれていた 。

が( ヒツジではメラトニン、ウズラでは光) 、分子レ

71321
T i m e of Li ght Pulse (ZT)

これらの結果からウズラの P T における日 長計測

ベルでは同様の変化が起こっていると 言 える 。 した機構のモデルを考えた( 図 5) 。短日条件などの光感

がって l浦乳類と鳥類の間で光周性制御機構の基本的受相を含 まない光条件では Cryl の発現は誘導されな部分は保存されていることが示唆された 。

ず、比較的弱いピ ー クが明期と暗期の中間に存在す

我々は最近 M B H における性腺軸の光周性制御にる。 しかし 長日条件など光感受相に光が照射されれついても晴乳類と鳥類で保存されている可能性を示ば CIアl の発現が誘導され、ピークが後退する 。 そのした。 ウズラの M B H では長日条件で、 Dio2 の発現量

結果、短日条件と長日条件で、 P e r 2 と CryJ の位相関が増加して性腺紬を活性化することが考えられてい係が変化する 。Per2 と CryJ は複合体を形成して時計るが、 同様のことがハムスタ ーでも観察されたので、これらの位ある 4 九 すなわち長日条件で Dio2 の発現が増加し、相関係の変化を通じて日長が分子の変化に置き換え

さらに短日条件を模したメラトニン投与実験で発現られることが考えられる 。 そして諸々のシグナルリレが抑制された 。 これらのことは P T と問機、晴乳類

ーを経てプロラクチンの分泌調節につながると考えらと鳥類 とでメラトニンや光などの入力経路の違いは

41 )

れる 。実際に、ウズラの血中プロラクチン 量の変動はあるが本質的なメカニズムは保存されていることをこのモデルに合致する ことを我々は確かめている 刷。

示唆している 。

時間生物学
九
q U口
u

Vo l.l O.No.l (2 004 )applications. pp 163‑168. Amsterdam. Elsevier

おわりに数年前から時計遺伝子は 一 日の H寺を刻む因子とし. (1 993)
Publて同定されてきた 。その同じ分子 が日 長を測ることにも利用されているということは、生物が厳しい自

17) Lincoln G A. Andersson H. Hazlerigg DG: J Neu‑
. 15:390‑397 (2003)
roendocrinol

然条件に際して同 ーの分子に様々な調節機構を形成しながら適応してきたことが伺えて大変興味深い 。

18) Lincoln G A. Andersson H. Loudon A : J. 179:1 ‑13 (2003)
Endocrinol

M B H や P T における時計遺伝子が実際にいかなる因子の転写調節に関わるのかはまだ明らかではないが、. 132・201‑215
19) Lincoln G A. M a e d a KI: J Endocrinol

今後は時計遺伝子と相互作用する因 子の同定や光のある 。
入力経路等 を明らかにすることが必要で、

20) Lincoln G A. Messager S ，Andersson H ，Haz‑
lerigg DG: Proc Natl Acad Sci U S A. 99:1 3890

(1 992)13895 (2002)

K. Antoch MP.
Y a m azaki S. Zemenides PD. Ralph M R.

2 1) Lowrey PL. Shimomura
参考文献

1) Bae H H. Mangels R A. Cho BS. Dark J. Yellon
SM. Zucker 1・ J Biol R hythms. 14:391‑401(1 999)2) Chong N W . Bernard M. Klein DC: J Biol C h 巴m.
275:32991‑32998 (2000)
3) Curlewis JD: R eprod Fertil Dev. 4 :1 ‑23 (1 992)
4) D avies DT. Follett BK: Proc R Soc Lond B Biol
Sci. 19 1:285・301 (1 975)
5)

Davies DT. Follett BK: Proc R Soc Lond B Biol
Sci. 191:303‑315 (1 975)

M e n a ker M. Takahashi JS: Science. 288:483‑492(2000)
22) Malpaux B. Daveau A. Maurice F. Gayrard V.
Thi̲ry JC: Biol Reprod. 48:752‑760 (1 993)
23) Malpaux B. Daveau A. Maurice‑Mando n F.
Duarte G . Chemineau P: Endocrinology.
139:1 508‑1516 (1 998)
24) Malpaux B. Viguie C. Skinner DC. Thiery JC.
. 44:431‑438
Chemineau P: Brain Res Bull
(1 997)

6) Dawson A. King V M . Bentley GE. Ball GF: J
Biol Rhythms. 16:365‑380 (2001 )25) M a y w o o d ES. Hastings M H : Endocrinology.

7) Doi M . Nakajima Y. Okano T. Fukada Y: Proc
Natl Acad Sci U S A. 98:8089‑8094 (2001 )26) Meddle SL. Follett B K: J C o m p Physiol [A].

8) EI Halawani M E . Youngren O M . Pitts G R: P er‑
spectives in avian endocrinology. pp 403‑416.

27) Meddle S L.Follett BK: J Neurosci. 17:8909‑8918. J Endocrinol Ltd. (1 997)
Bristol. 19:5‑18
9) Follett B K: J Reprod Fertil Suppl28) Messager S. Garabette ML. Hastings M H . Haz‑
lerigg DG: Neuroreport. 12:579‑582 (2001 )(1 973)

10) F u Z. Inaba M. Noguchi T. K ato H : J Biol
Rhythms. 17:1 4‑27 (2002)
11 ) Goldman B D: J Biol Rhythms. 16:283‑301(200 1)
12) Hazlerigg D G.Hastings M H . M o r gan pJ; J Neu‑
. 8:489‑492 (1 996)
roendocrinol.
13) Juss TS: A vian endocrinology. pp 47‑60. Bristol
993)
1(
Soc Endocrinology.
14) Konishi H. Fost巴r RG. Follett B K: J C o m p Physiol [A]. 16 1:315‑319 (1 987)
15) Konishi H. Iida K. Ohta M. Takahashi M: Gen. 72:461‑466 (1 988)
C o m p Endocrinol16) K u m a r V. Juss T S. Follett B K: Melatonin andthe pineal gland from basic sciences to clinical時!羽 生 物 学

136:1 44‑153 (1 995)
176:79‑89 (1995)(1 997)29) Messager S. Hazlerigg DG. Mercer JG. MorganpJ; Eur J N eurosci. 12:2865‑2870 (2000)30) Messager S. Ross A W . Barrett P. Morgan pJ;
Proc Natl Acad Sci U S A. 96:9938‑9943 (1 999)31 ) Morgan pJ; J Neuroendocrino.l 12:287‑295(2000)
32) Morgan P J. Williams LM: Rev Reprod. 1:1 53‑161(1 996)33) Nicholls TJ. Follett B K. Robinson JE: J. 97:1 21‑126 (1 983)
Endocrinol34) N icholls T J. Goldsmith A R. Dawson A: Physiol
Rev.68・133‑176 (1 988).
35) Ohta M. H o m m a K : Gen C o m p Endocrinol
68:286‑292 (1 987)
36) Ohta M. W a d a M. H o m m a K: J C o m p Physiol

V o l. l O .No .l ( 2 0 0 4 )q Qdu[A]. 154:583‑589 (1 984)
37) O k a n o T ， Y a m a m o t o ，K Okano ，
K Hirota T ，Kasahara T ，Sasaki M ，Takanaka y ，Fukada Y:
Genes Cells. 6:825‑836 (2001)38) Oliver ，
J Bayle JD: Experi 巴ntia. 38 1021‑1029
目(1 982)

J Leak R ，
K Silver R : Psychoneu‑
39) Saldanha C，roendocrinology. 19:641‑656 (1994)40) Sharp P，
J Follett B K: Neuroendocrinology.
5:205‑218 (1 969)
41) Shearman

L P ， Zylka

M，
J

WeaverD，
R

Kolakowski L F， J，.r
Reppert S M : Neuron.
19:1 261‑1269 (1997)42) Silver ，
R Witkovsky p ，Horvath p ，Alones V ，Barnstable C，
J L e h m a n M N : Cell Tissu 巴 Res
253・189‑198 (1988)
43) Siopes T D ，Wilson W O : Poult Sci. 53:2035‑2041(1 974)44) Stirland J，
A Johnston J D ，C a g a m p a n g F，
R Mor‑
gan P，J Castro M G ， White M ，
R Davis J，
R
Loudon AS: J Neuroendocrino.l 13:147‑157(2001)
45) Watanabe M ，Yasuo S ，Watanabe T ，Y a m a m u
ra T ， Nakao N ， Ebihara S ， Yoshimura T
Endocrinology. 145:1546‑1549 (2004)46) Williams L M ，M o r g a n P，
J Hastings M H ，Lawson
W . Davidson G ，Howell HE: J Neuroendocrino.l

1:315‑320 (1989)

K O k a n o T ，Fukada Y: Neurosci47) Y a m a m o t o ，Lett. 313:1 3‑16 (2001)
48) Yasuo S ，Watanabe M. Okabayashi N ，Ebihara
S. Yoshimura T: Endocrinology. 144:3742‑3748(2003)A Takagi T ，49) Yasuo S ，Watanabe M ，Tsukada ，Iigo M. Shimada ，K Ebihara S ，Y oshimura T :Endocrinology. 145・1612‑1616
50) Yoshimura T ，Suzuki Y ，Makino E ，Suzuki T ，
Kuroiwa ，A Matsuda y ，N a m i k a w a T ，Ebihara
S: Brain Res Mol Brain R es. 78:207‑215 (2000)
5 1) Yoshimura T. Yasuo S. Watanabe M. Iigo M ，
Y a m a m u r a T ，Hirunagi ，K Ebihara S: Nature.
426:1 78‑181 (2003)

1時間 生物学40

V o l.l O. N o .J ( 2 0 0 4 )アメリカでのボスドク生活ーテネシー州ナツシユビルより
太田 英 伸自分が生物時計の世界に入ったきっかけは、音にについて軽く触れることができたら、と思います。

対する新生児の驚博反射の慣れのレベルが睡眠サイ

自分が留学を考えた動機には、幾つかあります。

クルで異なることを、発達心理学の分野で勉強したことから始まりました 。 当時は、北大乳幼児発達臨

1.

時計の発達について自分のアイデイアを 実現

床センタ ーの陳省仁先生の指導の下、新生児室の先するには、 Perl‑G F P/L uc マウスを使用でき

生方、助産婦さんに助けられ、今にも壊れそうな赤る環境にいた方が、都合がいいのではなし、かちゃんの身体的なかよわきに、おつかなび、っくりしと考えたこと 。

ながら、実験をしていました 。その後小児科医にな

2. 光向調の発達が重要だと感じたこと 。 日本でり、未熟児 ・新生児医療にたずさわること、まして行った研究では、時計 の母子同調を考える手

や、こうして生物時計の発達をテーマにアメリカで段として盲目ラット新生仔を使っていました 。

ポスドク生活することなど全く頭にありませんでししかし、眼球を摘出しない通常のラット新生た。最終的に大学院で生物時計を勉強したいと思っ仔においては生後 I 週目から光同調が時計 に、 Nature (1 997)
たのは、横浜の小児病院の図書室で強く影響すること、ま た、視覚系の発達スピに掲載された程先生 ・岡村先生の Perl の論文を眺め

ー ドがげっ歯類 よ り速いヒトの赤ちゃんに対たときでした。それまでも、新生児室のモニターにして時計の知識を応用することを考えると、記録されている心拍数 ・呼吸数 ・血中酸素飽和度等

光同調に関する知識を 深めなければいけないのリズム解析を自分でしていましたが、それが単なと感じていました 。現在のボスのマック マー

るマスキングなのか、意味のある内因性のリズムなン先生 は、生物時計だけでなく視覚研究にものか、よく分かりませんでした 。動物実験で新生仔

学問 的に強いパックグラウンドをもっていま

マウス・ラット S C N の Perl を測定できれば、答えす。就職先を探すため に渡米した際、何人かが分かるだろうとぼ んやりと考えました 。 当時はの教授と面接を行いま したが、明らかにそのPediatrics といった小児科学専 門誌にも、自分と同じように未熟児 ・新生児の心拍数といっ た生理指標点が他の方と異なっていたので魅力を感じまのリズムを測定した論文が時々目に留まるようにな

した 。

3.

新しい研究室の雰囲気を求めたこと 。医学部って いました。生物時計の 発達を研究することが 未という世界で仕事 ・研究を行い、人間関係 ・

熟児 ・新生児医療の改善につながるのではないか、

仕事の取り組みに対す る医学部独特の閉 塞性

保育器の環境を考える手がかりになるのではないか、を感じていました 。全 く問題のない研究環境という期待感もあり、その後、北大第一生理学講座

は存在しないとは思いますが、限度というもで大学院生となりました 。

のがあるだろうと 、諸先輩方に降りかか った
火の粉を横 目で見つつ、今までの環境を離れ、アメリカ留学後まだ自分の仕事が まとまらない状況

新しい理学部( 正確には生物学部) という世で、自分や所属研究室の仕事について、みなさんに紹

界で、医学を考えてみ うようと、思い立ちま介するのは気が引けたので、今回は留学にあた って考した 。できたら、政治にあ ま り興味のない若えたこと( どうして留学する気になったのか) 、そし干若手の教授が主催す る研究室 に所属したいて留学の前と後で何が期待通りで、何が思惑と違 ったとも考えていました。

のかについて、まとめてみたいと思います。 その中で、パンダーピルト大学の 4 つの時間生物学の研究室

n

時 日生物学4.

アメリカの研究の雰囲気に憧れたこと 。以前
アメリカで聞かれた国際学会に出席した際、. J O.No. J ( 2 0 0 4 )Vol‑ 41 ‑

5.

すでに留学している日本人の研究者の方たち思います。 また、 隣のジョンソン研究室には、に、アメリカでは研究者にオリジナリティー

マウス ・ヒト Perl をクローニングした程先生を求める雰囲気が日本より強くあるのではなの研究室から来た肥田( 福田) さんがポスド

いか、と言われたのが心に残りました。

クをしており、 Perl プロモーターについて直自分の研究室をもつことを意識したこと 。将接教えてもらえたことも非常に幸運でした 。

来、幸運にも自分が研究室をもっ機会に恵まれた場合、その準備として研究室立ち上げの2. 生物時計の発達と視覚研究: ここパンダーピ

プロセスを勉強したいと考えていました 。た

ルト大学は視覚研究が非常に盛んな大学です。

またま自分の留学開始時期は、現在所属する

そのため、マックマーン先生に加え、視覚研

研究室がケンタッキ一大学からパンダービル

究の優秀な研究者が多数研究を行っており、ト大学に移 ってきて半年の時期であり 、また私も他の視覚研究者と共同研究を行っていま

隣の研究室の山崎先生が実際に立ち上げを行す。 自分の小児科・ 生物時計の知識と視覚研っている時期で した 。 日本でも国公立大学の究者の知識がうまく融合し、自分の学問的興独立法人化のプロセスが進む中で、その研究

味を満たしつつ、小児科医療に貢献できるこ室の運営が、ポスドクを基礎と したアメリカとを祈って研究を進めています。

の運営形態に似た部分をもって移行していくのではないかと感じていました 。

6.

3.

新しい研究の雰囲気: 場所も言葉も違い、 ま

外国を職場に選ぶチャンスがこれで最後かも、 4 つの生物時計研究室が混在して、今またしれないと思ったこと 。 自分は 30 代半ばになで経験したことのない研究の雰囲気に包まれったので、様々な仕事 ・家庭環境から外国生ています。

活のチャンスは今を逃すと難しいように思い1)

ジャ ーナル・ クラブ : 1 週間に 1 度、4 研ました。 また、研究者として生きていくなら、究室の合同で最近の論文を検討するジャ留学を機会に英語のプレゼンテ ー ション能力

ーナル・クラ ブがあります。それは、ジョンソン先生、マックマーン先生、ペーを高めておきたいと考えました。

ジ先生、 山崎先生 4 人が論文検討に参加するということを意味しており、先生方
その後、 l 年経って感じたことは、
1.

トランス ジェ ニ ック ・マウ ス :マ ックマ ー ン

く分かります。特にジョンソン先生とペ先生の中で発達に関するテーマが興味がある

ージ先生はパンダーピル ト大学での付き

ためか、また、研究室の立ち上げという時期

合いも長く 、お 互いの気心が知れている

トラ ンスジェニック ・マ

せいか、意見が異なる場合もかなり突っ

ウスじ基づいた自分のアイデイアは意外とス

込んだ意見の交換を行うことが多いよう

ムーズに受け入れられているように思います。

です。

と重なったためか、

しかし、以前 P erl‑GFP マウスを扱 っていた2)

雑談: 他学部出身の研究者、あるいは異主な大学院生が卒業していなくなっていたこなる生物を扱う研究者( マックマーン先と、また、自分に顕微鏡に関する知識が欠け生は げっ歯類・魚類、ペ ージ先生は主にていたという 2 つの理由から最初の数ヶ月は見虫、ジョンソン先生 と山崎先生は不特

シス テムの調整に苦労 しました。その時期に、定) と雑談することによって 、自分の頭顕微鏡の専門家のマックマーン先生や同僚かの中で解決できなかった問題にヒントを

ら顕微鏡のイロハを教わったこと、また、もらうことが多々あります。別の言葉でPerl‑luc システムを開発した山崎先生に培養

言えば、それは自分の頭が固かったなあ

方法について指導を受けたことは非常に幸運と思う瞬間でもあります。 その意味で、でした。もし、これらの環境が揃っていなけ

自分が無意識にベースとしている世界をれば、ハードウェアが問題なのか、培養条件離れる発想を身に つけようと、チャンスが問題なのか、問題の焦点を絞れず、どうどがあれば諸先生方と科学雑談しようと心う巡りを長い間繰り返すことになったようにが け て ( ? ) います 。ペー ジ先生とは、

時間生物学

42

によってデータの見方が異なることがよVo l.l O.No.l (2004)

夕方コーヒーを飲む時間に休憩所でいっ方とあいまって厄介でかつ重要な仕事でしょになる機会も多く、自分は全く扱 っした 。完全に独立した審査 委員会で実験たことのないゴキブリを題材に夜行性動プロトコールが了承されないかぎり、ア

物と 昼行性動物の生物時計における進化

メリカでは実験がスタートできない状況について 2 人で考えてみたことがありまです。 このプロトコール作成の作業に早した 。 自分の研究に直接結びつくかどうめに慣れる事ができたのは、今後の研究かはよく分かりませんが、興味深い考え

計画作成の勘をつかむ上で、重要だったよ
うに思います。

方を聞く機会に恵まれています。

2)
4.

グラント獲得のための準備: 今年はたま

アメリカではオリジナリティーを求められる

たま 1 つのグラントの更新時 期だったたか ? マ ッ ク マ ー ン先生が、オリジナリティ

め、アメリカでの生活が落ち着いたと安ーを私の研究に対して強く求めているかどう心していたところ、グ ラントのためのデかは正直言ってよく分かりません。ただ、研ータ作成という忙しい時期に突入しまし究助成金( グラント) 申請時のテーマについた。ポスドク 一人一人に、作成すべきデては、意味のある新しいテーマを申請しなけータとおよその期限が割り当てられ、研れば、グラントをもらうことが難しいという究者も結果が全ての! 被人だなあと思いつ

厳しい現実があるようです。 このアメリカの

つ仕事をこなして行きました 。同時にググラント決定システム自体が、自然と研究者

ラントの原稿を渡され意見を求められるに新しい意味のあるテーマを模索させるといので、表面的にもグラント作成のプロセ

う雰囲気をつくってい るのかもしれません 。

スを眺めることができ、有意義でした 。

日本の研究助成金の決定には人脈が大きくかかわると 言・われていいますが、アメリカでは
むしろグラント申請書 内容にもと づいた割合

6.

難しいなあと感じた点
1)

2 つの分野( 時間生物・視覚研究 ) が l

公平な審査が行われているようです。マ ック

つの研究室に混在す るということ: 2 つマーン先生も、昨年グラント 書類を宅急便のの異なる研究分野の人聞が、基礎知識の箱に 収めたときは、敬度なクリスチャンでは講を埋めるにはお互いの努力が必要だとないと思いますが、お祈りを冗談でしていま感じました 。 どちらの努力が欠けても落した( 自分も日本流に手をたたきま した)。そとし穴がある 実験プ ロトコールができての後は、大学受験の合格通知を待つ受験生のしまいます。 自分には視覚研究の知識がように N I H からの決定を神妙に待ち、先日う足りなかったので、分からないことはな

れしい知らせが電話で伝えられました。

るべく視覚研究が専門の同僚に質問するようにして、 一度マックマーン先生に薦5.

められた教科書を勉強しました。 このよ

アメリカの研究室という職場で学ぶこと:

1)

研究室の立ち上げマ ックマーン研究室

うな講埋めはポスドク個人の努力によるがパンダービルト大学に移ってきてからことが多いようで、勉強家の人と不勉強な人の差が大きいように思います。

半年後に自分が来たという こともあ って、ーから全て準備していくという作業に携

11寺￨ 羽生物学

2)

新入社員教育: となりのジョンソン研究

わることはありませんでした。マウス管室は大所帝で、かっ時間生物をパックグ

理の大部分は終了しており、自分にはサス ドクもいランウンドにもっていないホ。

ーカデ イアン ・リズムの研究に欠かせなるという理由から、ジョンソン先生自ら、い行動計測に関するソフト・ハードを整

日本企業の新人研修さながら基礎知識を備する仕事( 山崎先生の助手として )、ま

叩き込む講義を行 っていました 。面白そた、今後の研究展開に必要な動物プロトうなので、自分も参加させてもらったとコールの作成等の仕事が研究室の立ち上

ころ、 一皮むけた講義を聴く機会に恵まげ仕事と して割り 当てられ ました 。動物れました 。光条件に合わせた位相反応曲

プロトコールの作成は、動物愛護の考え

線の変化をプロットさせる宿題が出るな

Vo I.J O .No. 1 (2004 )‑ 43 ‑

ど、かなり綴密な講義で 自分 も真似した院生がいない職場というのは、それほどいと講義の勧め方をノートさせていただ

アメリカでは不思議 な状況ではないようきました 。お互い同じパックグランドをです。むしろポスドクの中には、大学院共有することの難しさをここでも感じま

生が来ると競争が増えるから入らないほした 。

うがいいと考えている人もいます。基本3) 日本の社会 と同じように、誠実な同僚も的には学位がかかっている大学院生がポいれば、そうでない同僚もいるようです。

スドクより優先されることが多いというその中でお 互いがスム ーズに 実験機材を

状況が、そういった考え方の背後にあり共有し実験を進めていく上で大事なのは、ます。 日本の職場で育っと、上になれば実験時聞が他人衝突しないように自分で下の人より自由な時聞が制限されるのはずらしてしまうこと( 自分は夜も昼もな

仕方がないこと、と思う傾向があると思い職場で昔働いていたのであまり苦痛でいますが、アメリカの職場はドライな見はありません) と、ボスの公平な態 度の方をするようです。そういう目で新参者ように感じています。留学先を決定するの私も見られているのかもと、少し寂し

際も、ボスの公平さが非常に気 にかか っい気持ちになることもあります。

ていたのですが、自分の直感はそれなりに正しか ったようで、無事毎日を過ごし
総じて 言 えば、公平な上司の下、興味のある発達

ています。

4)

大学院生がこれから加わ って: 現在はポのテーマを続けられている 幸せなケ ースのように思スドクのみの職場ですが、将来は大学院います。後は 自分次第ということだと思います。

生が研究室 に入 ってきます。ただ、大学

筆者

ページ先生

山崎先生

マックマーン研究室 (中心がマ ックマーン先生)

時 間生物 学‑ 44 ‑

Vo 1.1 O. N 0 .1 ( 200 4 )ジョンソン先生

第 2 回 Molecular Clock 東京 2 0 0 4 に参加して
渡辺

剛史

名古屋大学大学院生命農学研究 科

2 月 26 日から 28 日にわたり東京都板橋区の東京カチャーを拝聴することができま した 。早石先生はプンファレンスセンタ ーで開催された国際シンポジウ

ロス タグランジンの 一つであるプ ロス タグ ラン ジン

Molecular C lock 東京 2004" に参加しました 。

(PG) D 2 と睡眠覚醒リズムの関連につい て、精力的

ム

このシンポジウムは、神戸大学 の岡村均先生の 主に行われてきた研究成果を発表 なさいました 。 まず催で行われ、今回は 二回目の開催でした 。 2001 年にP G D2 の投与が R E M I睡眠を増加させ ること、 P G D2

淡路島で行われた第 l 回大会は、アメリカでの同時の 合 成 酵 素 ( P G D S ) 阻 害 剤 や P G D レセプター

多発テロの直後ということもあ り、多数の外国人研(D P R) のア ンタゴニストの投与が睡眠を妨 げるこ

究者の講演がキャンセルとなる 非常事態でしたが、とから P G D 2 が睡眠の安定に関係しているこ とを示

今回はイラク戦争から約 一年がたち警戒体制が強まされた後に、 P G D S 及びD P R ノ ックアウ トマウス のっていたものの 、大き な事件もなくプログラムどお

断眠後の特徴的な表現型から P G D システムが N R E M

り講演を聞くことができました。

l睡眠の調節に重要な役割を果 たすことを 報告されま行われた第2003 年度は昨年の 9 月に北海道大学で、した 。学会 の要旨集をみてみると、 早石先生はなん

I 四時間生物学世界大会にも参加することができ、日と 1920 年生 まれだそうで、 80 歳をこ えられた現在で本に居ながらに して 半年の聞に二度も世界を リード

も研究に打ち込むことができる エネルギーに感銘 をする H寺間生物学者を目の当たりにでき たこ とは、 学

カ f 同じ年になった 11寺も同様にパワフ、うけました 。夜生の私にとってとても幸運で した。

ルでいられるよう 、心 身共に鍛えなくてはと思いま

大会前には、筆者の研究室では Morehouse 大学のした 。

福原千秋先生を客 員研究員 に迎え、様 々な デイ スカッションをしていただきました 。福原先生は最近、今回のシン ポジウムでは、早石先生の 1量1[( 覚醒にGianluca Tosini 博士と共に、網膜でのメラトニ ン合関する講演 をはじめとして概日時計のフィ ードパ ッ

成が type 1 adenylyl cyclase を介して概日時計によクループそのものというより、概日 ￨時計の中枢からり制御されているという報告を していて、大会では影響を受ける様々な成分 についての 話題が多かったポスターでその発表をされてい ました 。 2 週間ほどという印 象 をうけました 。 その中から、筆者の研究

研究室 に滞在なさいましたが、 筆者の研究に対し で背景から個人的に興味を持った 発表について抜粋しも姉御のようにいろい ろな 指J商をしていただ き、刺て紹介します。

激になりました。 ちなみに福原先生とは 、大会後に

I1 i 乳類の概日時計の中枢である視、 If
岡村均先生 は研究室の 同僚と観光で訪れた六本木ヒル スでば った

交叉上核 とその影響を受 ける様々な末梢組織との問りと会ってし まいました 。 その日は、土曜日というを、コルチコステロンが仲介す る可能性を示唆されこともあり人であふれかえる中 で偶然にも出 会うなました 。 その中で岡村先生は、光の刺激 が adrenal

んて不思議な縁を感じました 。

nerve の活動を活発にすることや光刺 激によってコ
ルチコステロンが急 激 に 上 昇 す る こ と 、 さ ら に

さて、 M olucular C lock 東京 2004 では、 3 日間を通adrenal nerve の切 断によりその 上昇が抑制される

して 2 つの招待講演、 9 つのシンポジウムが行われまことを 示さ れました 。 また、岡村先生は光刺激を与した。招待講演では日 本 におけるゲノムプロ ジェク

えた時の adrenal gland における遺伝子の発現パタ

トをリードしてこられた東京大 学の榊 佳之先生と、ー ンを網羅的に解析することで、 コルチコステロ ン

長年にわたり 睡眠覚醒の研究に御尽力されて こられを 含 め た 視 交 叉 上 核 か ら の 情 報 の d o w n stream

た大坂バイオサイエンス研究所 の早石修先生の レク

pathway を明らかにしようとされているようでした。

時 n日生物学V o l. 10. No. 1 (2 004 )

4

Fh
J

岡村先生の発表に関連する所では、 Francis L evi博ったことが残念でした 。今回のような日本で 行われ士がマウスの休息期を 妨害することで、コル チコス

る大会は、テロンの分j必パターンが変化し、がん腫療の生成が手にしてもらえないよ うな大物研究者と話を する絶促進されるという発表 を行いました 。 L evi博士は加好の機会 という話を聞きます。 今回のシンポジウム

TGF一日などいくつかの遺伝子を腫蕩に関連すliam Schwartzにも Paolo Sassone‑Corsi博士や W il

えて、

SRBR のような規模の大きな 学会では相博士のような世界的に 著明な研究者が参加さ れている因子として挙げていました 。
これまでホルモンの分泌パターンにリズム性があることや、ホルモンが 生理的な恒常性に重要 な役割ました 。学生 として、少ないチャンスを逃してはならないと実感しています。

を果たすことは周知の 事実でしたが、このよ うに視

最後に第二回を迎えた Molucular Clock シンポジ

交叉上核と末梢組織をつなぐキーワ ー ドと、概日時

ウムに次回の開催予定 がないということをと ても残計と病気( 生活習慣病) をつなぐキーワードが 一致

念に思います。今回の 大会は、国際シンポジ ウムでしていることを非常に興味深く感じました 。

あるにもかかわかず参 加費も無料であり、学 生の筆筆者の研究室では、行 動 リズムの活動相がスプリ者にとって参加しやす い貴重な大会でした 。今後もッティングする C S マウスや、フィリピンのマ ーケ ッ

再び日本人の時間生物 学者が大型の研究費を 獲得さ

トで捕獲レ恒暗条件下で行動 リスムが消失してしまれて、 学生 をはじめ若手研究者に世界の先端をいく

う突然変異マウスを保 有していますが、いず れも視研究者と接する機会を与えて下さる ことを期待しま

交叉上核での 時計遺伝子の発現は正 常である可能性す。

が示唆されています。 このことから、 筆者の研究室で保有する突然変異マ ウスが視交叉上核に支 配される output gen 巴に異常を持っていて、その原因遺伝子の解明が視交叉上核 からの出力経路の解明に 貢献できるのではないかと 期待 しています。筆者のこのような興味から、岡村先生や L evi博士の発表は私た
ちが今後、研究を進めていく上での参考と して大変勉強になりました 。
シンポジウム以外につ いては 、大会 2 日目に行われたパンケットに個人 的な理由により参加で きなか研究室のバ ーベキューで ヤギの肉を食べる筆者 (左)M olecular C lock 記念撮影より
時間生物学‑ 4 6 ‑

Vo l. l O. No. 1 ( 2004)日本時間生物 学会学術奨励 賞公募のお知 らせ
昨年より日本時間生 物学会の新企画とし て学術奨励賞を募集 しております。この 制度は時間生物学領域で顕著な業績を あげ、今後の活躍が 期待される若手研究 者を表彰するための もので、年齢 3 7 歳までの方を対象として おります。自薦他薦 を問いませんので、 第 2 回学術奨励賞へどし どしご応募ください。応募にあたっ ては、下記の様式に ご記入いただきます ようお願いいたしま す。
. 締め切り : 平成 16 年 8 月 17 日 ( 火) 必着

・あて先: 干464‑8602

名古屋大学大学院理 学研究科生命理学専 攻内

名古屋市不老町

日本時間生物学会事 務局

近藤孝男

日本時間生物学会学 術奨励賞選考委員長
石田直理雄( 産業技術総合研究所)

選考委員(埼玉医科大学)

海老津尚

海老原史樹文( 名古屋大学)
大川( 滋賀 医科大学)

匡子( 東京大学)深田 吉 孝....

.......，，?

> ‑ ，担>...

...

....

...也 >...

...

......

.. b ・...'‑>，

時間生物学術奨励 賞候補者調書
1. 氏名:

2 生年月日:3. 現 職 :4(平 成 年 月 日 現 在)最終学歴ならびに職歴:

5 . 学会等での表彰歴:

6 . 本件に関する連絡担当者名:

7

業績1 ) 研究の名称:
2) 研究の内容

3 ) 時間生物学に対するこれまでの貢献と今後の可能性( 具体的・分かり易く記述すること) :4 ) 論文リスト( ピアレビューのある原著論文のみ)

11刊日 生 物学

V o I.l O .No .l ( 2 0 0 4 )
A斗 円
A

i

11 回大会のおしらせ
第 1 1 回日本時間生物学会学術大会力¥ 以下の通リ行われます。

みなさんの参加をお待ちしております。

本 時間生物学会学術大 会
第 1 1 回酒 、.
会
.会

、 12 日 (金)期: 平成 1 6 年 1 1 月 1 1 日 (木)場: ピアザ淡海 (おうみ)(滋賀県大津市)

・大会会長: 大川匡子 (滋賀医科大学
特別講演

1

教 育講演

1
2
2

シンポジ ウム

ークショップワ

精神医学講座)程度を予定 しています
・演題申し込み: 大会ホームページ U R L よりの o n line 申し込みとなります。

8 月 27 日締め切り予定です。

生物学
i日
時I

48

Vo I. IO ，N o ，I (2 00 4)

賛助会員リスト(50 音順)

以下の団体( 代表者、敬称略) ) からは 2004 年度賛助会員として学 会運営に御協力頂いて おります。 お名前を掲載し感謝いたし ます。
岩井化学薬品( 株)(岩井麿行)( 株) 化研(吉 田幸介)光華産業( 有)( 越山順一)三協ラボサ ー ピス (株 )( 椎橋明広)( 有) シンワ科学( 上原和敬)( 株) 薬研社( 鈴木泰志)ヤンセンーファーマ( ; j : 朱)(手塚慎也)

理科研( 株)(森川義雄)

塩野義製薬株式会社(竹村俊彦)
時間生物学会事務局

H寺H日生物 学

V o 1. 10. N o .l ( 2 0 0 4 )
にに
J d

執筆要領
原稿について本誌で は、投稿原稿を 受 け付けています。以下 の執筆要領にしたがって原稿を編集局 までお 送り下さい。 原稿の採用については、編集委員会が中心になって査読を行いま すが、必要に応じて関連分野の専門家に依頼し決定し ます。
原稿 は、 ワードプロセ ッサ ーまたはコ ンピュ ー タソフ トを 用いて作成する 。 プリントアウトした原稿 1 部( 図
表を含 む) とフロ ッピ ーディスクを編集局へ送付する 。 フロ ッピーディスクのフォ ーマット、使用したマイコンの機種、ワープロソフトは 一般に使わ れているも のなら 何 でも結構ですが、使用したマイコ ンの機種、 ワー
プロソフ ト、氏名及び タイ トル 名をフ ロ ッピ ーディスクの上に明記して下さい 。 なお、念のため、テキスト形
式で保存 したファイルも 添付す る ようにして 下さい。
総説と技術ノートの著作には、別刷り 50部を無料でさしあげます。 50部以上希望の場合は有料となりますので、編集局までその旨連絡して下さい 。 また、非会員で総説また は技術ノートを執筆いただ いた場合、会費免除で 1 年間本学会会員にな れます。
1 . 総説と技術ノート

1 頁は約 2100字 と考えて下さい: 横 l

1
行 23文字で 1 頁 4 6 x 2 =92行) とする 。

、 電話番号、 F A X 番号、 E ‑mailアドレス及び脚注( 必要があ2 ) 第 1 頁に表題、著者名、所属及びその所在地
る場合) を記す。

3 ) 第 2 頁 に400字程度のアブストラクトを記入する 。
4) 本文 に節を 設 け る場合、 1. 、 2.、 3. 、 ・・・・と する 。
5 ) 書体の指定は、プ リントアウトした原稿に朱で行い、 斜体( イタ リック体) は l 本 下 線 ( 一一一一 ) 、太文 字 ( ゴシック体) 波下線( 一一一一一、) とする 。

6 ) 参考文献の数は特 に制限しな いが、 50編以内が望ま しい。参考文献は 、アル ファベッ ト順に通し番号を付
けて文末にまとめて掲げる 。 本文中の 引用個所には、通 し番号を右肩に付けて示す。
(例) Aschoff による I ‑ J ) 、 ・・・・ である 。 5 . • . 91 。
、 次のようにする 。
7 ) 文末の参考文献の記載は[雑誌l通 し番号) 著作名: 誌名、巻数、ペ ー ジ( 発行年)
[書籍]通し番号) 著作名: 書名、ページ、発行所( 発行年)
( 例)1) Aschoff J.G erecke U. wever R :Jpn J Physio.l 17:450‑457 (1967). North‑Holl and. A m s t e r d a m (1965)
2) Aschoff J :Circadi an C locks. p p 95‑11 1

8て、本文とは別の用紙に作成する 。

9図の標題と説明は別紙にまとめる 。

10) 図及び表の表示 は、図 1 、図 2 、 ・・・ 、表 1 、表 2 、 ・・・ の通 し番号で行う 。 これらを挿入する個所を、プ リントアウ トした 本文の原稿欄外にエ ンピツ 書 きで指示する 。

11 ) 図及び表 を文献から引用した場合、引用を明記するとともに、引用の許 可が必要な場合には、著者の責任で許可をとっておく 。

2. 研究グループ
研究室や研究グル ー プの紹介記事。刷り 上がりで 12 頁程度。執筆者を含む顔写真、または研究現場のスナップ写真を少なく とも 1 枚は 添付す る。写真には標題と説明を付 ける。

3. 海外レポート
留学などで滞在 した研究室、訪問 した研究施設、あるいは海外調査や見聞の紹介記事。写真があ れば添

4. 関連集会報告時間生物学‑ 5 6 ‑

Vo I.l O.No. l (2 004 )時間生物学

平成 16 年 5 月発行. 10，N o 1 (2004)
V ol，.ac.jp/jsc/index.htmO
発行: 日本時間生物学会 (http://w w w s oc.nii( 事務局) 〒464 ‑ 8602

名古屋市千種区不老町

名古屋大学大学院理学研究科

T E L : 052 ‑ 789 ‑ 2498
(編集局) 〒464 ‑ 8601

生命理学専攻内F A X : 052 ‑ 789 ‑ 2963

名古屋市千種 区不老町

名古屋大学大学院生命農学研究科応用分子生命科学専攻内

T E L & F AX : 052 ‑ 789 ‑ 4066
( 印刷所) 名古屋大学消費生活協同組合

印刷・ 情 報サービス部