第 53 回東北臨床細胞学会学術集会 （2016.7.2）

体腔液細胞診の診断精度向上への取り組み

株式会社 秋田病理組織細胞診研究センター○ 金子 翔 阿部 一之助 及川 守康
齊藤 千佳 阿部 博之 阿部 彩 杉山 達朗

Akita Karyology and Histology research center

はじめに
体腔液細胞診の精度向上には各自施設での標本作製と細胞診判定様式（推定病変記載など）が大きな影響を与える。体腔液検体処理法の選択には細胞変性が少なく、多数の細胞が塗沫されるよう日々慎重に検討を重ねる必要がある。
また、診断報告様式においても細胞判定や推定病変の根拠をより明確にすることは臨床医への信頼を得ることになり、精度向上に繋がると考える。
今回、当センターで施行している体腔液の検体処理法（血性、粘液、フィブリンが析出した検体）と診断報告様式について症例を提示しながら紹介する。

Akita Karyology and Histology research center対象�● 2009年4月から2016年3月までの７年間に提出された体腔液検体３２４４件を対象とした。

● 体腔液細胞診断の判定はclass 分類および「陰性」・「疑陽性」・「陽性」の３段階で評価している。

● 標本作製は、塗抹標本４枚（Papanicolaou 染色２枚、PAS 染色、Giemsa染色）を作製し、 残りの沈渣で ThinLayer 標本1枚を作製している。

● 体腔液検体では、肉眼的に １）フィブリン析出 ２）粘液性成分 ３）血液成分（血餅）などみられた検体に対してセルブロック標本を作製している。
Akita Karyology and Histology research center

体腔液検体内訳
対象期間；2009年４月～2016年３月（7年間）

検査材料

検体数

セルブロック数

（％）

胸水

１５２１

３２９２１.６

腹水（洗浄液含む）

１６６０

１５９９.６心嚢液

４１４９.７

陰嚢液

２２００

合計

３２４４４９２１５.１

Akita Karyology and Histology research centerも く じ・ 当センターにおける体腔液標本作製過程について・ 当センターにおけるセルブロック作製法について
・ 当センターにおける診断および報告様式について
・ 症例提示１）セルブロック標本のみに異型細胞が出現していた症例
２）セルブロック標本で確定できた症例
３）セルブロック標本で原発を推定できた症例

Akita Karyology and Histology research center当センターにおける体腔液細胞診の標本作製法
検体の性状確認（液量、色、性状）�
粘液 および 血性

ﾌｨﾌﾞﾘﾝ析出

検体（2500 rpm, 5分遠心）�

検体（2500 rpm 5分遠心）検体（1000 rpm 3分遠心)引きガラス法(Pap.,PAS,Giemsa)

引きガラス法 or すり合わせ法+スプレー固定(Pap.,PAS)
乾燥固定（Giemsa）

Thinlayer法（残沈査を処理）
セルブロック作製

HE染色標本PAS染色標本細胞診断�
※免疫染色は必要時に施行�当センターにおける体腔液の処理方法
引きガラス法Pap染色(±Ÿ∫∞Ÿ固定)
PAS染色
Pap染色(ΩÃﬂ⁄∞固定)
Giemsa染色
Pap染色(º›⁄≤‘∞法)Akita Karyology and Histology research center

Thinlayer法の標本作製方法
1) 前処理として2500rpm 5分間遠心2) 沈渣に専用の固定液 3mlを加え、30分間静置
3) 2500rpm 5分間遠心
4) 沈渣に蒸留水3mlを加えてよく混和し、専用のトレイに移して10分間静置
5) デカント後、95％エタノールにて洗浄・固定
6) Papanicolaou 染色

Akita Karyology and Histology research center粘性および血性成分時の処理方法
粘性成分や血性成分が多いと細胞が落ちやすいためスプレー固定すり合わせ法

Akita Karyology and Histology research center

体腔液細胞診におけるセルブロック作製法
フィブリン析出検体の場合�

1000rpm、３分で遠心後、フィブリンをホルマリン入り容器に移し、セルブロック作製

粘性成分、血性成分が見られた場合�

2500rpm、５分で遠心後引きガラス法またはすり合わせ法で検体処理し、再度遠心後、残検体をホルマリン固定し、セルブロック作製

Akita Karyology and Histology research centerセルブロック標本作製法
ホルマリン固定後フィブリン析出

血 性ホルマリン固定後、先端部分をカットし、カセットに移し包埋装置へ

そのまま包埋装置へ

包埋時は半割し、割面を標本面にAkita Karyology and Histology research centerセルブロック標本の薄切【 ＨＥ染色 】【 ＰＡＳ染色 】＊ＨＥ染色標本とＰＡＳ染色標本を作製＊切片は通常面と深切り面の２面を作製

Akita Karyology and Histology research center

報告様式

Akita Karyology and Histology research center

体腔液細胞診における細胞診断結果
＜胸水＞
判定

症例数

セルブロック

免疫染色

陰性

1236

81.3%

272

82.7%

1 （セルブロック1）

疑陽性261.7%

72.1%

5 （セルブロック5）

陽性

259

17.0%

5015.2%16 （セルブロック10、細胞転写6）

合計

1521

100.0%

329100.0%22＜腹水（洗浄液含む）＞
判定

症例数

セルブロック

免疫染色

陰性

1267

76.3%

10968.6%

1 （セルブロック1）

疑陽性

33

2.0%

31.9%

1 （セルブロック1）

陽性

360

21.7%

47

29.6%

2 （セルブロック1、細胞転写1）

合計

1660

100.0%

159

100.0%

4

Akita Karyology and Histology research center症例 1 フィブリン析出検体
８４才 男性 右胸水
セルブロック標本

塗抹標本；陰性

pap×100

HE.×100

CD56；陽性

ｼﾅﾌﾟﾄﾌｨｼﾞﾝ；陽性×100×100
Akita Karyology and Histology research center症例 1 細胞診断結果＜ファーストレポート＞＜セカンドレポート＞＜ファイナルレポート＞

Akita Karyology and Histology research center症例 ２ 血性検体
８１才 女性 左胸水
ｼﾝﾚｲﾔｰ法

塗抹標本

Pap.×100

Pap.×100

セルブロック標本

HE.×100Akita Karyology and Histology research center症例 ２ 細胞診断結果＜ファーストレポート＞＜ファイナルレポート＞

Akita Karyology and Histology research center症例 ３ フィブリン析出検体
８８才 女性 右胸水
セルブロック標本

塗抹標本

HE.×100

Pap.×100
TTF-1×100

ｶﾙﾚﾁﾆﾝ×100

Akita Karyology and Histology research center症例 3 細胞診断結果＜ファーストレポート＞＜ファイナルレポート＞

Akita Karyology and Histology research centerま と め
体腔液の細胞診断の主たる目的は、腫瘍細胞が存在するか否かである。病理診断による裏付けが得られず細胞診断が唯一の診断材料となるため、その重要度が高い。しかし、体腔液中に血性や多量の粘液、フィブリン析出を含む検体が提出され診断が困難な場合も少なからず遭遇する。
各症例で提示したとおり、通常の塗抹標本に異型細胞が無かったり、または細胞が少ない場合でもセルブロックおよびThinLayer標本を作製することによって診断可能となる症例がみられたことは、より正確な診断のために必須な方法のひとつと考える。
また、セルブロックで免疫染色を施行することは原発病変推定の一助となると考える。
Akita Karyology and Histology research centerご静聴ありがとうございました資料１（各種セルブロック法の比較）

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寒天法

コロジオンバック法

グルコマンナン法

遠沈管法

簡易セルブロック法
（著者）

前処理

寒天の準備

遠心管の処理

試薬調整

不要

不要

検体処理

煩雑

簡便

煩雑

比較的簡便

簡便

包埋過程

自動包埋装置使用可能

自動包埋装置使用可能

自動包埋装置使用可能

手作業

自動包埋装置
使用可能

操作過程中の細胞減少ときにありなし

なし

ときにありなし

細胞密度の低下

ありなし

なし

ありなし

細胞変性

比較的軽度

軽度

軽度

比較的軽度

軽度

医学検査 Vol.64 No.2 ２０１５
消化器および体腔液細胞診における簡易セルブロック作製法併用の有用性
信広 亮輔他 国家公務員共済組合連合会呉共済病院病理診断科 抜粋