新技術説明会

多様な細孔径と多孔質層がもたらす
コアシェルカラムの分離挙動：
低分子から高分子まで
クロマニックテクノロジーズ
塚本友康 佐藤誠 小島瞬 長江徳和
Email: info@chromanik.co.jp
http://chromanik.co.jp

カラム選択では・・・
官能基は・・・
粒子径は・・・

高速化するには

細孔径は・・
多孔質層の厚さは2市販されているコアシェル粒子

コア

粒子径

1.3‐2 µm

2.4‐2.7µm

3.4 - 3.6 µm

4 - 5 µm

細孔径

9 - 10 nm

8 - 16 nm, 30 nm, 100 nm

20 - 40 nm

8 - 12 nm

多孔質層0.22 - 0.4 µm

0.3 - 0.5 µm

0.2 - 0.5 µm

0.?- 0.6 µm

比表面積 100 – 120 m2/g

90 – 150 m2/g,
25 – 40 m2/g

15 m2/g

90 m2/g

多孔質％58 - 77％27％

60%

58 – 78%3コアシェルカラム
Manufacturer

Brand

Porous layer
Particle size
Pore diameter Surface area
thickness(μm)(nm)(m2/g)(µm)

Bonded phase1

Advanced
Chromatography
Technologies

UltraCore

2.5, 5

C18, Phenyl-hexyl

2

Advanced Mterials
Technologies

HALO

2.0, 2.7,
3.4,4.6

120, 135, 15,0.2, 0.4, 0.5,
9, 16, 40, 100
90
0.6

C18, C8, Phenyl-Hexyl, PFP, Cyano, RP-Amide, HILIC,
Pentahydroxy-HILIC, C4, Glycan

3

AkzuNobel

Kromasil ClassicShell/
EternityShell

2.5

0.5

110

C18, C8

4Agilent Technologies

PoroShell

1.9, 2.7, 4, 5 0.25, 0.5

12, 30130

C18, C8, Phenyl-Hexyl, PFP, SB-Aq, Cysno, HILIC

5

Chrom4

Isosceles

2.6, 4.6

9.5, 16

140, 90

C18, AQ, C8，C3, Phenyl-hexyl, PFP, Amide(HILIC)

6

ChromaNik
Technologies

SunShell

2.0, 2.6, 3.4, 0.2, 0.4, 0.5, 9, 12, 16, 30,
4.6
0.6
100

7

Dr Maisch

PeproShell

2.6

8

Fortis Technologies

SpeedCore

2.6, 3.5, 5

0.4

8, 16, 30

140

C18, C18-Amide, C18-PFP, Diphenyl, PFP, HILIC C8, C4

9GL Sciences

InertCore

2.4

0.3

9

100

C18

10

Knauer

BlueShell

2.6, 4.5

0.5

8

130

C18, C8

11

Merck (supelco)

Ascentis Express/
BioShell

2.0, 2.7, 3.4, 0.2, 0.4, 0.5,
9, 16, 40,50.6120, 135, 80,
15, 90C18, C8, C4, RP-Amide Phenyl-Hexyl, Biphenyl, Cyano, PFP,
Pentahydroxy-HILIC

12

Macherey-Nagel

NucleoShell

2.7

0.5

9

130

C18,Phenyl-Hexyl, PFP, HILIC

13

Nacalai Tesque

CosmoCore

2.6

0.5

9

150

C18, Cholestrol, Pentabromobenzyl

14

Perkin Elmer

Brownlee SPP

2.7

0.5

9, 16

15

Phenomenex

Kinetex/ Aeris

1.3, 1.7, 2.6, 0.2, 0.23,
3.6, 50.35, 0.67

16RestekRaptor

2.7

9

150

C18, Biphenyl, PFP, HILIC

17

Sepax Technologies

Opalshell

2.6

0.5

9

150

C18

18

Osaka Soda

2.7

0.5

9, 16, 30

150

C18, AQ, Adamantyl , Phosphocholine, PFP

19

SCAS

Capcell Core
Sumipax ODS Z-Shel
Sumichiral OA-Shell P1

2.6

0.5

9, 30

150, 40

C18, Poly(diphenylacetylene) derivative

20

SIELC Technologies

21

Thermo Scientific

Accucore

2.6, 4130

Mixed mode: RP + cation exchange, aRP + anion exchnge, HILIC+ ion exchange
C18, C8, AQ, henyl-Hexyl, Phenyl, C30, PFP

22

WatersCortecs

1.6, 2.7

0.26

9

100

C18, C8, Phenyl-Hexyl, HILIC

23

Welch

Boltimate

2.7

0.5

9

120

C18, Phenyl-Hexyl, PFP, HILIC

24

YMC

Meteoric Core

2.7

0.5

8, 16

150, 90

C18, C8

Coresep

9.5

0.5, 0.6130150, 90, 40,15, C18, RP-AQUA, C8, PFP, Pnenyl-Hexyl, 2-Etheylpyridine, HILIC22
Amide, C30, Hexafunctional C18, C4
C18

2.7

10, 20C18, C8, Phnyl-Hexyl, PFP, RP-Amide, HILIC
200

9
8, 15

C18, C8, Phenyl-hexyl, PFP, Biphenyl, HILIC, C44

コアシェルシリカの電子顕微鏡写真
CP-SEM

粒子径: 2.6 µm
細孔径: 16 nm

粒子径: 2.6 µm
細孔径: 100 nm

粒子径: 3.4 µm
細孔径: 30 nm

コアシェルシリカ粒子を樹脂包埋し、Arイオンミリングにより断面加工し、導通処理のためOs(オスミウム)蒸着して観察しました。コア（フューズドシリカ）とその周りの多孔質層が確認できます。

5

多孔質層の厚さの影響
厚い

多孔質層

薄い

大

保持時間

小

大

負荷量

小

大

炭素含有量

小

コアシェル粒子の多孔質層の厚さは粒子の比表面積の大きさに影響
カラムでは、保持時間、負荷量に大きく影響

6標準試料の分離比較
Column:Company P C18, 2.6 μm 150 x 4.6 mm (26.1 Mpa, 30,800 plate )Company P C18
2
6
4
Company T C18, 2.6 μm 150 x 4.6 mm (22.7 Mpa, 31,600 plate)
26.1 MPa
113
Company W C18, 2.7 μm 150 x 4.6 mm (18.5 Mpa, 23,300 plate)2
7Company A C18, 2.7 μm 150 x 4.6 mm (30.6 Mpa, 30,200 plate)51
k6=7.4Company T C18
Company S C18, 2.7 μm 150 x 4.6 mm (22.2 Mpa, 31,800 plate)
N6=31,600
6
3
422.7 MPa
SunShell C18, 2.6 μm 150 x 4.6 mm (21.8 Mpa, 31,900 plate)
Mobile phase: CH3OH/H2O=75/25
7
1 2 k6=7.7
5Company W C18 Flow rate: 1.0 mL/min
N6=23,300 4
6
318.5 MPa
Temperature: 40 ºC
Sample: 1 = Uracil, 2 = Caffeine, 3 = Phenol, 4 = Butylbenzene
7
1 2 k6=9.0
5
5 = o-Terphenyl, 6 = Amylbenzene, 7 = Triphenylene
Company A C18
N6=30,200
7

k6=5.45
N6=30,800

3

0

2

4

6

7
6

SunShell C18
21.8 MPa 4
430.6 MPa5

2 k6=9.7
1 3 N6=31,800
2
3
1

6

4

8

5
6

比表面積 (m2/g)

炭素含有量(%)

0.35

102

4.9

0.5

130

8.8

Company W C18

-

113

7.3

Company A C18

0.5

135

8.5

Company S C18

0.5

133

8.0

SunShell C18

0.5

125

7.3

Company P C18

Company S C18
Company T C18
22.2 MPa7k6=10.4
N6=31,900

10
12
14
16
Retention time/min

多孔質層(µm)

18

20

22

24

7

アミトリプチリンの負荷量比較
Mobile phase: Acetonitrile/20mM phosphate buffer pH7.0=(60:40)
Column dimension: 150 x 4.6 mm, Flow rate: 1.0 mL/min, Temp.: 40oC

CH3
N
CH3

3

16000

1

TF=1.18

2

4

SunShell C18(core shell)

14000

Theoretical plate

10000
8000
6000

100 times

SunShell C18
Company A C18
Sunniest C18 3um
Company P C18
Company T C18
Compnay W C18
Company S C18

TF=2.43

TF=3.21

2000

T C18
(core shell)
W C18(core shell)

TF=3.170.01

Sunniest
C18 3μm(fully porous)
P C18(core shell)

TF=1.25

4000

0
0.001

A C18
(core shell)

TF=1.42

12000

0.1

1

S C18
(core shell)

10
TF=4.38

Sample weight/μg0

理論段数はピークの高さの4.4%のピーク幅を用いる5シグマ法を用いました。

4.4%

1

2

3

5
6
7
4
Retention time/min

8

9

10

Sample: 1=Uracil, 2=Propranolol,
3= Nortriptyline, 4=Amitriptyline8界面活性剤の分離 Triton X-100
Column: SunShell C18, 2.6 µm 150 x 3.0 mm i.d.
Mobile phase: Tetrahydrofuran:Acetonitrile:Water = 20:20:60
Flow rate: 0.5 mL/min
Temperature: 25 oC
Detection: UV@275nm
Sample: 1= Triton X-100

0

5

10

15

20

25

30

Retention time/min

9コアシェルカラムでタンパク分析

コアシェルカラムに変えると・・・

高分離能

高理論段数

高速化

10

薄い多孔質層の利点• 高分子の拡散速度は遅い
多孔質層が薄いと・・・•溶質の拡散距離が短くなる

シャープなピーク
高速分離が可能•試料負荷量が小さい

11

多孔質相の厚さが異なるコアシェルシリカ
SunShell particle

コア

0.2 µm

0.5 µm

2.6 µm

3.4 µmParticle size: 2.6 µm
Thickness of porous layer: 0.5 µm
Specific surface area: 40 m2/g

Particle size: 3.4 µm
Thickness of porous layer: 0.2 µm
Specific surface area: 15 m2/g

12

多孔質相の厚さが異なるコアシェルカラムの比較１
Column: SunShell C8-30, 2.6 µm (30 nm, 0.5 µm layer) 100 x 2.1 mm, Sunshell C8-30HT, 3.4 µm (30 nm, 0.2 µm layer) 100 x 2.1 mm
Mobile phase: A) 0.1% TFA in water B) 0.08 % TFA in Acetonitrile
Gradient program: Time 0 min 15 or 35 min
%B
20%
65%
Flow rate: 0.5 mL/min , Temperature: 60 or 80 oC, Detection: UV@215 nm,
Sample:1 = Cytochrome C, 2 = Lysozyme, 3 = BSA, 4 = Myoglobin, 5 = Ovalbumin

260oCでは、粒子径、多孔質相の厚さが異なってもピーク幅は同じ

31W0.5=2.5 sec
460 oC and 15 min gradient5

W0.5=2.5 sec

Sunshell C8-30HT 3.4 µm (0.2 µm)
SunShell C8-30 2.6 µm (0.5 µm)

W0.5=4.8 sec

80 oC and 35 min gradient

80 oCでも大きな違いはない

W0.5=4.2 sec
Sunshell C8-30HT 3.4 µm (0.2 µm)
SunShell C8-30 2.6 µm (0.5 µm)
0

5

10

15

Retention time/min

Surface area works well for separation.

20

25

13

多孔質相の厚さが異なるコアシェルカラムの比較２
Column: SunShell C8-30, 2.6 µm (30 nm, 0.5 µm layer) 100 x 2.1 mm, Sunshell C8-30HT, 3.4 µm (30 nm, 0.2 µm layer) 100 x 2.1 mm (prototype)
Mobile phase: A) 0.1% TFA in water B) 0.08 % TFA in Acetonitrile
Gradient program: Time 0 min 5 or 35 min
高速分離においては多孔質相が薄いほう
%B
20%
65%
が分離が良好Flow rate: 0.5 mL/min , Temperature: 60 or 80 oC, Detection: UV@215 nm,
W0.5=0.87 sec
Sample:1 = Cytochrome C, 2 = Lysozyme, 3 = BSA, 4 = Myoglobin, 5 = Ovalbumin2

W0.5=0.93 sec
1

3

5
4

80 oC and 5 min gradient
Sunshell
C8-30HT
Prototype3.4 µm 3.4(0.2µmµm)(0.2 µm)
SunShell C8-30 2.6 µm (0.5 µm)

W0.5=4.8 sec

80 oC and 35 min gradient
W0.5=4.2 sec
SunshellPrototypeC8-30HT
3.4 µm
3.4 (0.2µm (0.2µm) µm)SunShell C8-30 2.6 µm (0.5 µm)
0

5

10

15

Retention time/min

Surface area works well for separation.

20

25

14

選択性の異なるC18の比較

P/N

Pore
Surfacediameterarea

Carbonloading

C18
EndSurface
capping
coverage

SunShell HFC18-16
CG6471
4.6 x 150 mm

16 nm

90 m2/g

2.5%

1.2µmol/m2

Yes

SunShell C18-WP
4.6 x 150 mm

16 nm

90 m2/g5%2.5µmol/m2

Yes

CW6471

HFC18-WP は1対のシリル基によりC18を結合しますので，結合密度が低くなります。C18-WPに比べ約1/2です。
ペプチドやタンパク質はC18の結合密度により，分離が変化します。
15

HFC18とは
Hexa-Functional C18 は６個の官能基を持つ6カ所のシロキサン結合により耐酸性は高くなる

Sunniest
Bonding
Technology
Hexamethydichlorotrisiloxane+
Trimethylchlorosilane (TMS)
O
Si

Si
O
Si
O

（X: Cl, OCH3, OC2H5)

HFC18試薬の概略図

O

Si

O

O

O

Si
Si

Si O
O
O
Si
Si
O
O
O

O
O O

Si

O

Si
Si

O

Si O

Si
Si O O
Si
Si O
O O
O
O
O

Si
HO O
Si
O

Si
O
Si

Si

O
O

Si
O
O

O

O

Si

Si

O

O

O
Si O

O O

O

シリカ表面への結合状態の概略図
16

HFC18カラムのLC/MS移動相条件における耐酸性Durable test condition
Column : SunShell HFC18-16
2.6µm, 50 x 2.1 mm
Mobile phase: CH3CN/0.1%
formic acid, pH2.6=40/60
Flow rate: 0.4 mL/min
Temperature: 70 ºC
Measurement condition
Mobile phase: CH3CN/H2O=60/40
Flow rate: 0.4 mL/min
Temperature: 40 ºC
Sample: 1 = Uracil
2 = Butylbenzene

17結合密度の異なるC18のペプチドの分離比較
SunShell HFC18-16

SunShell C18-WP

Column: SunShell HFC18-16, 2.6 µm (16 nm) 150 x 4.6 mm, SunShell C18-WP, 2.6 µm (16 nm) 150 x 4.6 mm
Mobile phase: A) 0.1% TFA in Acetonitrile/water(10:90)
B) 0.1 % TFA in Acetonitrile
Gradient program: Time 0 min 5 min 40 min
%B
5% 5%
50%
Flow rate: 1.0 mL/min , Temperature: 25 ºC, Detection: UV@210 nm,
Sample: Tryptic digest of CytochromC

18結合密度の異なるC18のペプチドの分離比較
SunShell HFC18-16

SunShell C18-WP

Column: SunShell HFC18-16, 2.6 µm (16 nm) 150 x 4.6 mm, SunShell C18-WP, 2.6 µm (16 nm) 150 x 4.6 mm
Mobile phase: A) 0.1% TFA in Acetonitrile/water(10:90)
B) 0.1 % TFA in Acetonitrile
Gradient program: Time 0 min 5 min 40 min
%B
5% 5%
50%
Flow rate: 1.0 mL/min , Temperature: 25 ºC, Detection: UV@210 nm,
Sample: Tryptic digest of Myoglobin19粒子の細孔径
細孔径

0 nm(ノンポーラス)

8 - 12 nm

16 - 20 nm

20 - 100 nm

比表面積

極小

大

小

保持

極小

大きい

小さい

試料

タンパク

低分子化合物

ペプチドなど高分子(タンパクなど)

分子量の大きいタンパクなどの高分離向けのカラムはC4やC8が主流
試料の分子量に対し細孔径が小さすぎるものを選ぶとテーリングや保持が短くなることがある
ノンポーラスの充填剤は、試料負荷量が小さすぎるため実用的ではない20適切な細孔径を選ぶのは・・・

高分子に小さいポアサイズ

低分子に大きいポアサイズ

活用できる表面積が狭くなる

粒子の持つ表面積が狭い

適切な細孔径を選ぶことで分離に必要な面積を確保できる21

コアシェル粒子の細孔分布

Desorption Dv (log d) (cc/g)

0.9Core shell 2.6um, 16nm

0.8Core shell 2.6um, 30nm

0.7Core shell 3.4um, 30nm

0.6Core shell 2.6um, 100nm

0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0

1

10

100

1000

Pore Diameter (nm)22

標準タンパク質の分離(5min)
Column:SunShell C4-100, 2.6 μm (100 nm) 100 x 2.1 mm,
SunShell C4-30, 2.6 µm (30 nm) 100 x 2.1 mm,
SunShell C8-100, 2.6 µm (100 nm) 100 x 2.1 mm,
SunShell C8-30, 2.6 µm (30 nm) 100 x 2.1 mm,
SunShell C8-30HT, 3.4 µm (30 nm) 100 x 2.1 mm,
Mobile phase: A) 0.1% TFA in waterB) 0.1 % TFA in Acetonitrile
Gradient program: Time 0 min 5 min%B 20% 65%
Flow rate: 0.5 mL/min ,Temperature: 80 oC
Detection: UV@215 nm,
Injection volume: 0.5 µL
Sample:1 = Cytochrome C, 2 = Lysozyme, 3 = BSA,
4 = Myoglobin, 5 = Ovalbumin
UHPLC instrument: HITACIHI Chromaster

タンパク質分離には多孔質層が薄い方が有利だと言われるが，細孔径1000Å(100nm)の場合には多孔質層は0.5 µmでも問題ない。

ピーク幅(W0.5, min)
多孔質層
Cytochrome C
Lysozyme
BSA
Myoglobin
Ovalbumin

C4-1000.5 µm
0.047
0.045
0.079
0.048
0.109

C4-30
0.5 µm
0.057
0.056
0.122
0.066
0.133

C8-1000.5 µm
0.047
0.046
0.077
0.047
0.109

C8-30
0.5 µm
0.057
0.056
0.100
0.063
0.119

C8-30HT 試料濃度
0.2 µm
0.046
0.025%
0.046
0.025%
0.075
0.050%
0.045
0.025%
0.109
0.025%

23

標準タンパク質の分離(60min)
Column:SunShell C4-100, 2.6 μm (100 nm) 100 x 2.1 mm,
SunShell C4-30, 2.6 µm (30 nm) 100 x 2.1 mm,
SunShell C8-100, 2.6 µm (100 nm) 100 x 2.1 mm,
SunShell C8-30, 2.6 µm (30 nm) 100 x 2.1 mm,
SunShell C8-30HT, 3.4 µm (30 nm) 100 x 2.1 mm,
Mobile phase: A) 0.1% TFA in waterB) 0.1 % TFA in Acetonitrile
Gradient program: Time 0 min 60、 min%B 20% 65%
Flow rate: 0.5 mL/min ,Temperature: 80 oC
Detection: UV@215 nm,
Injection volume: 1.0 µL
Sample:1 = Cytochrome C, 2 = Lysozyme, 3 = BSA,
4 = Myoglobin, 5 = Ovalbumin
UHPLC instrument: HITACIHI Chromaster
Retention time / min

ピーク幅(W0.5, min)C4-100多孔質層が薄い場合には0.5 µm
試料負荷量が小さくなり， 多孔質層
Cytochrome C 0.167
注入量を考慮しなければLysozyme
0.164
BSA
0.308
ならない。
Myoglobin
Ovalbumin

0.197
0.391

C4-30

C8-100C8-30 C8-30HT

0.5 µm
0.177
0.180
0.410
0.221
0.889

0.5 µm
0.160
0.153
0.276
0.180
0.247

0.5 µm
0.155
0.166
0.514
0.199
0.428

0.2 µm
0.212
0.196
0.422
0.238
0.184

C8-30HT
0.5uL
0.2 µm
0.144
0.145
0.330
0.176
0.176

試料濃度
0.050%
0.050%
0.100%
0.050%
0.050%

24

ナノカラムによる細胞培養によって得られた精製抗体(IgG)の分離

Core shell C4, 300 Å
100 x 2.1 mm i.d.

Column dimension: 100 x 2.1 mm i.d.
100 x 0.15 mm i.d. (nanoclolumn)
Mobile phase: A) water/TFA (100/0.1)
B) acetonitrile/TFA (100/0.085)
30-45%B (0-30 min) (0-15min）
Flow rate: 0.4 mL/min, 0.004 mL/min (nano-column)
Temperature: 80 ºC
Detection:
UV at 215 nm
Injection: 5 µL, 0.1 µL (nano-column)
Sample: 細胞培養によって得られた精製抗体（IgG, プロテインGアフィニテイーカラムで精製）

SunShell C4-100, 1000
Å 100 x 2.1 mm i.d.
SunShell C4-100, 1000
Å 100 x 0.15 mm i.d.

Retention time/min

25

精製抗体（IgG）のサイズ排除分離
SunSecDiol30

2

4

6

8

10

Column: SunSec Diol30, 4 μm 300 x 4.6 mm i.d.
Mobile phase:
0.1M Phosphate buffer + 0.2 M NaCl (pH6.8)
Flow rate: 0.35 mL/min
Temperature: 25 ºC
Detection UV at 220 nm
Injection 2 µL
Sample: 細胞培養によって得られた精製抗体（IgG, プロテインGアフィニテイーカラムで精製）

12

14

Retention time/min26

2-プロパノールを移動相に添加したIｇGの分離
Column dimension: 100 x 2.1 mm i.d.
Mobile phase: A) water/TFA (100/0.1)
B) acetonitrile/2-propanol/TFA (20/80/0.085)
15%B (0-0.5 min) and 15-50%B (0.5-50 min)Flow rate: 0.4 mL/min
Temperature: 80 ºC
Detection UV at 215 nm
Injection 5 µL
Sample: 細胞培養によって得られた精製抗体（IgG, プロテインGアフィニテイーカラムで精製）

2-プロパノールはC8カラム
でもIgGを溶出させるが，分離は悪くなる。

Core shell C8, 1000 Å

SunShell C4-100, 1000 Å

0

5

10

15

20

25

Retention time/min27

IgG standardのクロマトグラム
Column dimension: 100 x 2.1 mm i.d.
Mobile phase: A) water/TFA (100/0.1)
B) acetonitrile/TFA (100/0.085)
35-45%B (0-45 min)Flow rate: 0.4 mL/min, Temperature: 80 ºC
Detection:UV at 215 nm
Injection: 5 µL
Sample: Intact mAb Mass Check Standard (Waters)

0

2

4

6

8

10

12

14
Retention time/min28

IgG standardのクロマトグラム2
Column: SunSec Diol30, 4 μm 300 x 4.6 mm i.d.× 2
Mobile phase:
0.1M Phosphate buffer + 0.2 M NaCl (pH6.8)
Flow rate: 0.1 mL/min
Temperature: 25 ºC
Detection UV at 220 nm
Injection 2 µL
Sample : Intact mAb Mass Check Standard (waters)(Waters)

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

Retention time/min

29

まとめ
• 低分子において多孔質層が厚い方が保持、負荷量ともに大きくなった。
• 多孔質層の厚さが異なるコアシェルシリカを比較した
結果、タンパク分離において差が観察された。
• 高速分離においては、多孔質層が薄いコアシェルカラ
ムのほうが優れたピーク形状を示した。
• 結合密度の低いHFC18-16カラムにおいて，いくつかのペプチドで分離の改善が見られた。
• モノクロナール抗体のような分子量が15万を超える試料は，100nmの細孔径が有利に働く。
• 多孔質層の厚さの違うそれぞれのコアシェルカラムをサンプルや目的に応じて使い分けることが重要となる
30

Micro column and Nano column

ミクロカラム: 0.3 mm i.d., 0.5 mm i.d.

ナノカラム: 0.075 mm i.d., 0.1 mm i.d., 0.15 mm i.d.

カラム管材質: 0.075mm i.d., 0.10 mm i.d., 0.15 mm i.d., 0.3 mm i.d.はPEEKSIL,
0.5 mm i.d.はガラスライニングチューブ

ナノカラムによるモノクローナル抗体(IgG)の分離
Column dimension: 100 x 0.15 mm i.d.
Mobile phase: A) water/TFA (100/0.1)
B) acetonitrile/TFA (100/0.085)
30-45%B (0-15 min)Flow rate: 0.004 mL/min
Temperature: 80 ºC
Detection: UV at 215 nm
Injection: 0.1 µL
Sample: 細胞培養によって得られた精製抗体

SunShell C4-100, 1000 Å 100 x 0.15 mm i.d.

（IgG, プロテインGアフィニテイーカラムで精製）min31

Core Shell HPLC column

SunShell
C4-100モノクローナル抗体分離用

32