動物組織や動物培養細胞からのRNA 抽出キット

ISOSPIN Cell & Tissue RNA
製品名ISOSPIN Cell & Tissue RNA

Code No.

容量

希望納入価格 ( 税別）

314-08211

50 回用

30,000 円

310-08213

200 回用 (50 回用 ×4）

108,000 円

製品概要
本品は、スピンカラムを用いて動物組織や動物培養細胞からRNAを抽出・精製するためのキットです。カオトロピックイオン存在下でRNAがシリカへ吸着する原理を応用し、フェノールやクロロホルムなどを使用しません。また、夾雑物を遠心分離により除去する方法とシリカメンブレン上でのDNaseⅠ処理を採用しており、約１時間で高純度のRNAを抽出・精製できます。

特長

RNA-Seqにも適用可能な高品質なRNAフィルターによる前処理不要

RNA-Seqに適用可能な高品質なRNAを抽出できます。

試料のホモジナイズやろ過を目的としたフィルター処理を必要としません。遠心分離により夾雑物を沈殿にして除去します。

心臓、骨格筋組織、軟骨のための改変プロトコール

DNaseⅠ添付（溶液品）

心臓、骨格筋組織、軟骨など硬く繊維等が多い組織からも、改変プロトコール ※1で高純度、高収量なRNAが抽出可能です。

DNaseⅠ（RNase free）がキットに付属しています。さらに還元剤、エタノール等の別途購入も不要です。

※1 実験データ②（本紙裏面）参照

プロトコール

構成品
50回用《 通常プロトコール 》
・動物培養細胞 （≦6×106 cells）
・動物組織 （≦20 mg)(① サンプルを溶解
動物培養細胞： C Extraction Buffer
動 物 組 織： PT Extraction Buffer)② 遠心分離（夾雑物の除去）③ 上清を回収

夾雑物の沈殿の様子（遠心分離後）④ メンブレンにRNAを吸着

PT Extraction Buffer (組織用)C Extraction Buffer (細胞用)PT Binding Buffer（エタノール含有）
PT Wash1 Buffer（エタノール含有）
PT Wash2 Buffer（エタノール含有）
DNase I (RNase free) ※210×DNase I Buffer ※2ddWater (RNase free)
Spin Column

室温30 ml × 1本
室温30 ml × 1本
室温40 ml × 1本
室温
40 ml × 1本
室温
40 ml × 1本
2,000 units × 1本 -20℃-20℃
1 ml × 1本
室温
1 ml × 8本
室温50 本 × 1袋※2 DNase I が添付されていない、『ISOSPIN Cell & Tissue RNA（w/o DNase I）』（Code No.318-09571）もご用意しております。

⑤ 洗浄⑥ シリカメンブレン上でのDNaseⅠ処理⑦ 洗浄⑧ RNAの溶出

保存温度

写真：200回用（50回用×4）

動物組織や動物培養細胞からの RNA 抽出キット

ISOSPIN Cell & Tissue RNA
実験データ① マウス肝臓からの RNA 抽出（RNA 品質の比較）
本品とA社RNA抽出キットを用いて、マウス肝臓からRNA抽出を行った。抽出したRNAは、バイオアナライザ（Agilent Technologies社）を用いたRIN値の測定、アガロースゲル電気泳動及び吸光度測定からRNAの品質を比較した。
＜吸光度測定結果とRIN値＞
RNA収量

RIN値

（ng/mg tissue)

(n=2)

1.96

1.52

7.05

2.10

4.59

7.35

A260/A280

A260/A280① A社キット2.11② ISOSPIN Cell & Tissue RNA

2.11抽出キット

Lane① : A社
Lane② : 本品
各1 μg泳動
1% Agarose S[結果] 本品を用いて高品質なRNAを抽出できていることが確認できた。
RNA電気泳動図

実験データ② マウス心臓からの RNA 抽出（通常プロトコールと改変プロトコールの比較）
本品の通常プロトコールとProteinase Kを用いた改変プロトコールにて、各保存条件のマウス心臓（各5mg）からRNA抽出を行い、吸光度測定およびアガロースゲル電気泳動によりRNAの品質を確認した。
（注意） Proteinase Kは本キットに添付されておりません。別途ご用意ください。

試料の保存条件※

260/280260/230

RNA濃度

収量

ratioratio(ng/µL)(ng/mg tissue)

1-20℃、14ヵ月（保存溶液中）

2.192.2044.8

400.0

24℃、2日（保存溶液中）

2.36

1.53

7.2

72.0

3-80℃、4日

2.53

1.49

3.2

29.6

4-20℃、14ヵ月（保存溶液中）

2.10

2.07

159.4

1475.954℃、2日（保存溶液中）

2.12

2.08

139.4

1366.7

6-80℃、4日

2.12

2.1491.7

881.7

Protocol Lane

通常改変123M456M

Lane1-6：サンプル各2.5 µL泳動M：OneSTEP Marker 6（5 µL）
非変性 1% Agarose S/TAE※ 試料の保存溶液には、Gene Keeper RNA & DNA stabilization solution（Code No.319-08901）を使用[結果] マウス心臓からのRNA抽出では、Proteinase Kを用いた改変プロトコールによって、収量が改善された。

改変プロトコールは
当社 WEBサイトをご覧ください。

Q&A

Q1

本品を用いて、RNA安定化試薬で保存した試料からRNA抽出は可能ですか？

A1

はい、可能です。 Gene Keeper RNA & DNA stabilization solution（Code No.319-08901)や、RNAlaterTM (Thermo Fisher社)で実績があります。

Q2

本品でmiRNAの抽出は可能ですか？

A2

本品で抽出したTotal RNAから、83 basesおよび107 basesのmiRNAをリアルタイムPCRで検出した実績があります。また、液体試料からmiRNAなどのsmall RNAを精製するためのキットとして、 『ISOSPIN Liquid Sample miRNA』 (Code No.318-09191) がございます。

・本パンフレット掲載の製品仕様や価格を予告なく変更する場合があります。
・表示価格は2024年7月現在の希望納入価格（税別）です。最新情報は弊社HPをご確認ください。

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