第 70 回（平成30年）

日本生物工学会大会
トピックス 集会期2018 年 9 月 5 日（水）～ 7 日（金）

会

場

関西大学

千里山キャンパス

公益社団法人 日本生物工学会Ƹ  ÖĸŊƐƈĈðç MVJ>EȬ第 70 回日本生物工学会大会

トピックス集目次

Ù×ØÝ =?Ò #µª ···················································································································  p. 5Ò

＜トピックス要旨（一般講演番号/一般講演タイトル/講演者/所属）＞【脂質工学／食品科学, 食品工学】

1Cp12

C á Ƹ 1 ĸ 15:54 ɈƸ 4 ðǕ 3 Æȹ 2 ȩɉ ······································································  p. 7

èþÒąûăāÿ *Ìŋł¢¦$ŗŁŚĚġģq E2¢rFě²ŐśŎĥĨŚ<ěcÒň ēÌ 1, |m ſ 2, Ľ ëǌï 2, ň ç 1, ƬƓ ŷï 3, ȉǤ ľĖ 1, çƀ ņ 3
Ɉ1 ƪĦçȦiƯĩ7RZ, 2 ƪĦçȦi¸, 3 ƪĦçȦiȆɉ【抗体工学】
1Dp01

D á Ƹ 1 ĸ 13:30 ɈƸ 4 ðǕ 3 Æȹ 1 ȩɉ ······································································  p. 9

ìÒ [Ò ïéèéÒ ŒŐľŃĚġģŗŇįśŝńŚJ

~Â.2Ęfd«XÒ Ò
°Ǥ Ŀ 1,3, ƓŎ Ē 2, oȚ ƭȪ 1,3
Ɉ1iBody(Ř), 2 ÊÜçȦiȆ, 3 ÊçȦiƐÎȆðɉ【ペプチド工学／核酸工学／植物細胞工学, 組織培養, 育種工学】
1Ep04

E á Ƹ 1 ĸ 14:06 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 1 ȩɉ ·····································································  p. 1115EĶřĭĲŚĤċĖfEŒŐľŃě¢ŁřŉřŝĚºēĖŒŐľŃěÒ ûþÒĂûüûöÿÒ ®¬Ę°ÒÒ

|  1, ŻŪ kĤ 1, mŎ Ź 2, ùĆ Ȅ 2, Ŋæ ǧt 1,3
Ɉ1 ÊçȦiĈ, 2 õäCcC5µð, 3 ÊçȦixȤĹŇ¸ƙ­ĥGɉ
1Ep11

E á Ƹ 1 ĸ 15:42 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 1 ȩɉ ·····································································  p. 13

ñòÕáÒêäãÒ s9ĚġģœřŎĪŇŝŚě.ÒȿŊ Łç 1, ǤĆ đé 1, ŰƓ ŁÅ 2, lā  3, èƓ çƻ 4, Āƀ ĲÇ 4
Ɉ1 ĸ}µðĈş, 2 T_j\hIJYE, 3 çâȭï, 4 ȣďçȦiƐƏƯɉ【生物化学工学／培養工学／バイオプロセス】
1Fp05

F á Ƹ 1 ĸ 14:18 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 1 ȩɉ ·····································································  p. 15

mky§Ò åûĂăĄüûø÷āôÒĂÿüôāûĂÒ ě²R0ĚġģÎ¡¿ěx~Ò Ò1ąƓ ƧȊ , őŊ Å 2, Țā ç 1, ªƓ ǍĻ 1, ÉȚ Ƥï 1, Ɠo « 1
Ɉ1 ȆĈçȦiĈ, 2 ȭŽȠƚɉ
2Ep11

E á Ƹ 2 ĸ 16:18 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 1 ȩɉ ·····································································  p. 17

J¦\ĉíæàèâĊě~Hfd^ĘĬŜĵĨłĳŝŀħŜİĝěDÒƜƾ k 1, oÿ ŭŪ 2, Ő ȑǠ 2, Ǘ ǳ 1,2
Ɉ1 ĢîçȦiȎÈȆ, 2 ȼƤçiȆɉ
2Fa05

F á Ƹ 2 ĸ 9:48 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 1 ȩɉ ········································································  p.19

Ð¦ Aspergillus oryzae ěn*ÌĚčĒģ¦7T`ě©Ęĕě¾~ĝěDôƀ Į 1, ÉǪ Ô 2, ÃļÚ ĳ 1, ƓƖ ȶǡ 1, Ț ľ 3, ȥȓ ĳĠ 1,2
Ɉ1 Ő¶çȦiȆ, 2 Ő¶çiŉŏƥ, 3 ȜĈçi@R]ƥɉɈ1 ƹŲçȦiƐÎƏã, 2 WH]bµðɉ1

2Fp11

F á Ƹ 2 ĸ 16:18 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 1 ȩɉ······································································  p. 21

ĀçÒ 0*ÌiĤlēĖ¿EC~uĠ3¿EC~uěÎxęĸįřŝŅŜİěÆÒȼȚ ¯ 1, Ŏÿ Ŀk 2, Ȯŕ ƭǂ 1
3Ea01

E á Ƹ 3 ĸ 9:00 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 1 ȩɉ ·······································································  p. 23

J¦Eu¶ď£<)¦ě~|lEĚĞĔBËě«^ÒǞƓ óǘ, Ȯŕ ƭǂɈƹŲçȦiƐÎƏãɉ【遺伝子工学】
1Gp16

G á Ƹ 1 ĸ 16:54 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 2 ȩɉ ····································································  p. 25}wÒ îìàÒ ĤċĖÒ ýûîìàÒ ĘĕěÍ

ěÇ8Ò ÒÚƜ ÏŤ, ƴǘ ɈȣĉçȦiĈɉ

2Ga03

G á Ƹ 2 ĸ 9:24 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 2 ȩɉ ·······································································  p.27

ńŇœĦĶŝıŜĵĤċĖ»4OČÐ¦ĲŇŕěÅÄļŜŁŕřōŝłd¸ě«^Òǚ| ł 1, ǝȚ ¹Ʈ 2, ß Źï 3, ư ŵz 3, ȉǤ ľĖ 1
Ɉ1 ƪĦçȦiƯĩ7RZ, 2 ƪĦçȦiĈ, 3 ńř¡iǉƥɉ【バイオマス, 資源, エネルギー工学】
1Hp09

H á Ƹ 1 ĸ 15:18 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 2 ȩɉ ····································································  p. 29~ĐĖbuĎĢěÊ/"ēViěc­Ò Òƾ 1, Ȯň Ơç 2, ĒƁ ƵȒ 3, ȉǤ Ǐ 1, çȲ Ę 4

Ɉ1 MaHǔ´Ȃi5?cS7;yşȓ, 2 ŐçȦiȆƐƯ, 3 ȆƥťŢioêȆƥ, 4 MaHǔ´ȂiT-WfhL65ȓɉ
2Ha06

H á Ƹ 2 ĸ 10:00 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 2 ȩɉ·····································································  p. 31@¦>]ŉĨĬīļŇŝŚě¾~Òùœ ŵ 1, ǤŜ kŹ 2, ǩā Ĭ 1, ŌŊ Ơs 1, ǤȚ ú 1, | Åǫ 3,Ȝő ȫ 3, ÿƓ Ĥů 3, Ǜ| ȏ 3, ÉƓ ŹƆ 1, Ǽ Żă 1, Ű Äv 1
Ɉ1Biomaterial in Tokyo, 2 ƑǉƥiƐƈYfGE, 3 l¿YbhMBjUEɉ
3Ga02

G á Ƹ 3 ĸ 9:12 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 2 ȩɉ ······································································  p. 33

¾ÓîÔÕÚÕŋŃśĮĶ½¿ĘÒ ćÕŋŃśĮĶ¿ěÁ'
ċƟ Ǹ

1,4

ě6'HĘ~«Ò

1, oÿ Ĳì , ĆĄ Ȁ 1, ÿȚ úï 1, Ɠ ùƝÈ 1, š ȨƐ 2, nÕǖ ñĴ 3
Ɉ1 Ƒǉƥ, 2 ƕ»µĈ, 3 ŬǊơĈĩG, 4 MfV<dL>RYbEɉ
【発酵生理学, 発酵工学/代謝工学/オミクス解析】

1Jp04

J á Ƹ 1 ĸ 14:06 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 3 ȩɉ ······································································  p. 35

ðôāù÷ăÕàèãÒ ĤēĖĲŇŕÈĚġģÎ!xŏļŇŝŚ¾Eįśĸłřķĩŕ;C~uěÒ ÒËÿ ŧů 1, ĉũ ŗè 1, Ɠo ³ 2, ǩƓ ĳz 3, ȉǤ ľĖ 3
Ɉ1 ĸŊǭí, 2 ƪĦçȦiĈ, 3 ƪĦçȦiƯĩ7RZɉ

2Ƹ  ÖĸŊƐƈĈðç MVJ>EȬ

1Jp11

J á Ƹ 1 ĸ 15:42 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 3 ȩɉ ·······································································  p.37

2¢¦ĚġģÒ êÕăú÷ôþûþ÷Ò ě¾~iěÆÒçȚ ǎƛ, œ čņ, ƓƖ ÏĖɈºÏƚȗS7;icBjI&7RZjC`hGhHjɉ
1Kp10

K á Ƹ 1 ĸ 15:30 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 3 ȩɉ ····································································  p. 39

¿Î~EÑÐ¦ĚčĒģ¿~ŎŘĿįĸAĚġģ¿~Eě(Òĕ Ķŏ 1, ǚ| ł 1, ǝȚ ¹Ʈ 2, ß Źï 3, ư ŵz 3, ȉǤ ľĖ 1
Ɉ1 ƪĦçȦiƯĩ7RZ, 2 ƪĦçȦiĈ, 3 ńř¡iǉƥɉ
2Jp07

J á Ƹ 2 ĸ 15:30 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 3 ȩɉ ······································································  p. 41

ĸįśŝĸĤoĘēĖ¿¦*ÌĚġģ¿~IÒȚ ōë 1, ŮÈ ǌŚ 1, Øý Ƀǌ 2, Ɠ Ɛ 2, ÿĄ ĝr 3, Ƈ ÔȪ 3
Ɉ1 ȢǩçȦiƍĈ, 2 (Ř) ļů, 3 ȢǩçiµƐĈiƐÎƐĈɉ
2Ka02

K á Ƹ 2 ĸ 9:12 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 3 ȩɉ ······································································  p. 43

ĎĢěN¾ĤLēĖīŚĴľĬņĨŜÎ~S¦ěÆÒǷ ǹ, ÕĠ ï, ā Ǡó, ÿƓ Ť, ȚÂ ƩÇ, ŃƓ ·ŵ, ® łɁɈȟƁƑşɉ
【バイオセンシング, 分析化学／センサー, 計測工学】
1Lp01

L á Ƹ 1 ĸ 13:30 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 3 ȩɉ ·····································································  p. 45

ÃńŇ4ĈÂ4ŃĿłěŐŘĹŗŜÏz³ĤċĖŇśĩĨŚĸÒ îìàÒ ciÒ ÒŜƓ ƢĎ 1, Jaewook Lee2, Oluwasesan Adegoke2, ŋ ɆŶ 1,2
Ɉ1 ȯçȦiǉƯƥiȆ, 2 ȯçi?cjhƯĩƥɉ【酵素学, 酵素工学】
1Mp02

M á Ƹ 1 ĸ 13:42 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 3 ȩɉ ···································································  p. 47

ïăā÷ĀăÿýĆö÷ĂÒĂĀÖÒìðØÒ `]Ò êÕİŚļŔŜ¿ĬĮĶĽŝĻěŎŚĳŜĺŜĵĸ®¬ĚġģtEě(ÒɅǤ ǻĎ 1, sƓ ƣ 1, œ ǘ 2, oȚ ƫÌ 3, Ǥ ­Č 3, ŸȚ Ŵs 4, ȖƁĆ k 5, ŌŜ ç± 1,2
Ɉ1 ƬāçiƐCEL]ƍĈ, 2 ƬāçȦiƍĈ, 3 ȯơçiȸŗ, 4 õÿơçiƐĈƥG, 5 ĺµĥW4j\ɉ
1Mp10

M á Ƹ 1 ĸ 15:30 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 3 ȩɉ ···································································  p. 49

ĶłįśŕÒ íÛÜ×áëÚÒ Ę¾lE4ĤēĖ2¢¦ėěőŜĻŜěN¿ÒÒƀ Ļt 1, ŕƀ ȷè 1, ǜÇ ȟl 1,2, żȇ Ǚ 3
Ɉ1 ÊçȦiƍ, 2JST CREST, 3 Êçiƈ×Gɉ
1Mp14

M á Ƹ 1 ĸ 16:30 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 3 ȩɉ ····································································  p.51

6Ò èèÒ dHŖļŜŗŇĬĮĶĲńŝĻ¤ĤċĖŖļŜ¿DÒȉǤ Ɇk, Ŝ Åv, Ǥ ŗǃ, Ǣū ¨ƶɈŐĈçȦiƐÎƍĈɉ3

【生体医用工学／セル&ティッシュエンジニアリング】
1Op15

O á Ƹ 1 ĸ 16:42 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 4 ȩɉ ····································································  p. 53hĤZĔģ£ě©ÒŠ ǙŤ, ŀÿ ȐĴ, ƬƓ źzɈţ×çȦiĈɉ【醸造学, 醸造工学】

2Da07

D á Ƹ 2 ĸ 10:24 ɈƸ 4 ðǕ 3 Æȹ 1 ȩɉ ·····································································  p. 55

ňĨŌĸĭĸ¥ĎĢM"ēĖ¾gěvEĘjÀ¸ĝěDÒȥȓ Ăt 1, żȇ çȃ 2, ȼň ¼Å 2, â½ ŧ 1
Ɉ1 S7;D9JM, 2 ëǖƷçiS7;ɉ
2Da11

D á Ƹ 2 ĸ 11:12 ɈƸ 4 ðǕ 3 Æȹ 1 ȩɉ ·····································································  p. 57

ïôööúôāÿýĆö÷ĂÒôāõÿāûöÿüôÒ ĘÀ¸¾gě¼`ě HĘĕěÀ¸vEě«^ÒÿŊ ǧǻ 1, Ǥp ǧǻ 1, g7OhE \C_j2, {ā Ěv 3, ǿû  3, ¶Û Źě 1
Ɉ1 ǼçiȆ, 2 8:EMSjDP5çðiƐƯ, 3 Ȗǉƥɉ【タンパク質工学】
2Ia11

I á Ƹ 2 ĸ 11:12 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 3 ȩɉ ·······································································  p. 59

àèÒ ĜļŜŊį¶¹Ĥ:đĎßÞfa6QPĚġģÒ æåíÒ ěÒ óåíÒ c¯Ò¾Ć ŉĹŏ 1, ɅǤ ǧ 2, wƓ  2, oƀ  1, z|Ĩ ÑČ 1, ŷƓ ñů 3,4, śŷ ê 1,4
Ɉ1 Ő¶çȦiĈ, 2 ƑǉƥiĈƤǒƥƳG, 3 ŐçȦiķȳÝ, 4 ƍƥiȱķƤǒǇÈƥƳGɉ【糖鎖工学／生合成, 天然物化学】
2La03

L á Ƹ 2 ĸ 9:24 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 3 ȩɉ ·······································································  p. 61

ÑŅŘKuďĔ·¨{ÈěÇ8_ĘÇ8u¶ěÉÒ Òçǩ  1, oā £ 2, Eltigani Sara3, ȝň Ǡń 2, ǌǤ ¿¼ 2, ŻŪ Ė 4, Ɩo ÓÅ 5, ŅȺ zņ 2
Ɉ1 ȽÀçȦiȆ, 2 ȽÀçiȆ, 3 ȽÀçȦiȎȆ, 4 ȽÀçiCoRE, 5 ĀÿơƐƯǉƥɉ【タンパク質工学／生体情報工学, バイオインフォマティクス／システムバイオロジー】
2Ip10

I á Ƹ 2 ĸ 16:06 ɈƸ 4 ðǕ 2 Æȹ 3 ȩɉ ·······································································  p. 63

²G,+U

ěĖğě1eęC~u´oělě%
1

EÒ

1

÷û ĬȺ , ǅÿ Ñ , ØȜ ğï 1, ôƀ ' 1, Ȟ *+ï 1, Ɯ| Łț 2, Ćɇ Źï 1
Ɉ1NITEiNBRC, 2 ƍƥiCSRSɉ

4Ƹ  ÖĸŊƐƈĈðç MVJ>EȬ

日本生物工学会2018 年度受賞者一覧

Ş±p&Š#µ±pWYŠ-şÒ

■第 37 回 生物工学賞
A1Aa02 第 1 日 10:05 A 会場 (第 2 学舎 4 号館 1 階)浅野 泰久ɈõÿơƴçðĈðȓiıįɉėƐƈ-´ŝƈ)#þȠ/ȗǄ¨ƒĩǥ#&ÞƟȠĬ■第 12 回 生物工学功績賞
A1Aa03 第 1 日 10:40 A 会場 (第 2 学舎 4 号館 1 階)清水 浩ɈçȣçðçðȦġàƯðƥƳƯiıįɉǮƼťĈð%Þ!ǶǯǮ#&Ņ²Ğ&óǰ%Ȣ/ƥƳ
■第 12 回 生物工学功労賞
A1Aa01 第 1 日 9:55 A 会場 (第 2 学舎 4 号館 1 階)
  滝澤 昇ɈĀÿƍƯçðĈðȓiıįɉ  ƐƈĈð,(ȢȎ¥Ț& JABEE ǱòöŖ)&æç$ǺƊ」a■第 51 回 生物工学奨励賞（江田賞）
A2Cp01 第 2 日 13:30 C 会場 (第 4 学舎 3 号館 2 階)浅野 静Ɉ5BTUjd(Ř)ȖȵĩǥƥƳħiq ƥƳÐɉUjdșȍ%/ėƐƈŞŖű&ȈȌµ%Ȣ/ƥƳ
■第 54 回 生物工学奨励賞（斎藤賞）
A2Mp01 第 2 日 13:30 M 会場 (第 4 学舎 2 号館 3 階)本田 孝祐ɈçȣçðçðȦĈðƥƳƯi¢ıįɉìƅĞȗǄ2ƒǅǑåĈǶǆȁ&Ţƽ#¨ƒ%Ȣ/ȻƞƥƳ
■第 41 回 生物工学奨励賞（照井賞）
A2Fp01 第 2 日 13:30 F 会場 (第 4 学舎 2 号館 1 階)
井藤 彰ɈućçðçðȦĈðƥƳȦi¢ıįɉťǒĞƦĞORƿï&Ƞƚ#¸ƙĩǥ)&Ĝƒ%Ȣ/ƐƈĈðƞƥƳ■第 27 回 生物工学技術賞
A1Aa04 第 1 日 11:10 A 会場 (第 2 学舎 4 号館 1 階)佐藤 俊輔 1・有川 尚志 1・小林 新吾 1・藤木 哲也 1・松本 圭司 2Ɉ1(Ř)<Q<i2 çȣçðçðȦĈðƥƳƯɉėƐƈ%,/Ɛ¥ǬĞ[c\j PHBH Ǩȍű&Ƞƚ
■第 15 回 生物工学アジア若手賞
A2Hp01 第 2 日 13:30 H 会場 (第 4 学舎 2 号館 2 階)(Young Asian Biotechnologist Prize)
Verawat Champreda (Director, National Center for Genetic Engineering and Biotechnology (BIOTEC), Thailand)Exploration of lignocellulose degrading enzymes from hidden bioresource for biorefinery and green industries」■第 7 回 生物工学アジア若手研究奨励賞 (The DaSilva Award)b
Pau-Loke Show (Associate Professor, The University of Nottingham, Malaysia)
Converting wastewater to bioenergy and bio-products using microalgae technology
■第 26 回 生物工学論文賞 b1ɉ和田 圭介*・戸谷 吉博・坂野 聡美**・吉川 勝徳***・松田 史生・清水 浩Ɉçȣçð, *Ƌ, ƑşĩǥǉÈƥƳħ,**Ƌ, ƪĦçð, ***Ƌ, ƲŪµðɉ「13C-metabolic flux analysis for mevalonate-producing strain of Escherichia coli
2ɉ張 斯来 1*・伴 暁彦 1**・江原 直樹 1***・水谷 治 2****・田中 瑞己 1*****・新谷 尚弘 1・五味 勝也 1 Ɉ1 Ő¶çð,
2ȖȵǉÈƥƳħ, *Ƌ, ƪĦçð, **Ƌ, oåǨǣ, ***Ƌ, Í&Ǆ, ****Ƌ, Ǝƌçð, *****Ƌ, ȯĀơƴçðɉ「Self-excising Cre/mutant lox marker recycling system for multiple gene integrations and consecutive gene deletionsin Aspergillus oryzae」
3ɉ青井 議輝 1・金子 裕司 2*・常田 聡 2 （1 Ďāçð, 2 ĹƱƓçð, *Ƌ, =chŘĔƨɉ
「pH-gradient ion-exchange microbial cell chromatography as a simple method for microbial separation」
4ɉ加藤 晃代 1,2*・永井 里美 1*・中野 秀雄 1 Ɉ1 ÊÃýçð, 2 Ƥ&ĭƃ , *Ƌ, iBody ŘĔƨ / ÊÃýçðɉ「N-terminal SKIK peptide tag markedly improves expression of difficult-to-express proteins in Escherichia coli and
Saccharomyces cerevisiae」
5ɉLe Gao*・秀瀬 涼太**・藤原 伸介ɈȢǩðȦçð, *Ƌ, Changchun University of Science and Technology, **Ƌ, ƪĦçðɉ「Function of a thermophilic archaeal chaperonin is enhanced by electrostatic interactions with its targets」
6ɉ藤谷 将也 1・Noor Saika Huddin2*・河合 駿 1**・蟹江 慧 1・清田泰次郎 2・清水 一憲 1・本多 裕之 1・加藤 竜司 1
Ɉ1 ÊÃýçð, 2 ŘĔƨPAh, *Ƌ, Google Malaysia, **Ƌ, çĸŊ¿ǨǣŘĔƨ)「Morphology-based non-invasive quantitative prediction of the differentiation status of neural stem cells」
7ɉSuman C. Nath*・堀江 正信**・長森 英二***・紀ノ岡正博 Ɉçȣçð, *Ƌ, University of Calgary, **Ƌ, ~Ȕçð,***Ƌ, çȣĈşçðɉ「Size- and time-dependent growth properties of human induced pluripotent stem cells in the culture of single aggregate」■第 7 回 生物工学学生優秀賞（飛翔賞）
  1ɉ上原 千央
1Ka10 第 2 日 11:00 K 会場 (第 4 学舎 2 号館 3 階)ɈŐ¶çðçðȦĈðƥƳƯS7;Ĉðøİ ɉȗŨ&EMeEĜƺ%Ȣ1/ȧ7;hȅȋ&ťǒǬŒ」
  2ɉ小川 雅人
3Ia06 第 3 日 9:24 I 会場 (第 4 学舎 2 号館 3 階)ɈĹƱƓçðçðȦȏƍĈðƥƳƯƐÎ¸ƯðøİɉǈǋƞCh?dGd@R]ǬŒWfj&Ţƽ%ËȼǀĐCh?dGd@R]ǬŒKjd&Ƞƚ」a  3ɉ竹村 謙信
1Lp05 第 1 日 14:18 L 会場 (第 4 学舎 2 号館 3 階)ɈȯĀçðçðȦǔƄƯðǁıǐȓS7;B7:hEøİɉȜORƿï-țïNJMȡ"ǲȀ0/üÙǦȰYbF^hȾ²Ŕ%,/ȈȌiȼģĐ87dEŞ¤%Ȣ/ƥƳ」a  4ɉ上野 大心
1Ep16 第 1 日 16:54 E 会場 (第 4 学舎 2 号館 1 階)ɈëǖƷƯðĩǥçðȦçðƷƯðĩǥƥƳƯS7;B7:hEȳÝɉmRNA &ȓ¦ĵ%Ȣ1/ȕ§ƞƉę&Ǭļ」
  5ɉ堀 采音
1Dp12 第 1 日 15:54 D 会場 (第 4 学舎 3 号館 1 階)ɈĎāçðçðȦƷƈǾƯðƥƳƯ¥ïƐÎťǒƯðøİɉƘ?fXchǨ¬%,/ķ$ƘĪ©ƒ&ƚǪ#Ŧnī¸ǣǯǮ)&Ĝƒ」a  6ɉ眞榮田麻友美
3Ca06 第 3 日 9:48 C 会場 (第 4 学舎 3 号館 2 階)ɈƎƌçðçðȦȆðƥƳƯ}ƅĊȆðøİ, Ƌ, ɀāçðɉɄɂǟ     ƔŏW9RjdȘǓƂȘȗǄ%Ȣ/ƥƳ」aų) aɋÁǽǴȴÊ#Ŋç"&ǵžȴÊ'Ɨ$.*Ɋ bɋŊç"&Áǽǵž'.*3Ɋ

5

Ĺ  §èñĖđÀ·t³t GOD<AƃIn vitro �����������������
�����������������������
xð Ë¢ 1*_kb Ċ 2_ê ´Ňµ 2_xð ³o 1_ĳę sĀµ 3_ŨŒ ëÎ 1_³Č ï 312

ĲÜ³·³·ſĴ·ÝŔ5KR`@X^ĬĶĴ

ĲÜ³·³·ſ·ĬĶĴĴ·šÈĂ¦Ĵ·Ÿ
3
ĲÜ³·³·ſŦ·ĬĶĴ657-8501 ÉĩĲÜÃĎĚě 1-1 ƅŝ: 078-803-6462
Fax: 078-803-6462 E-mail: sikengo@people.kobe-u.ac.jp

� ��������������������������������������������
��������������������� �����������������������
����������������������������������� ���������
���������������������� in vivo ��������������������
�������� ����in vitro �����������������������������
��������� in vitro �������������(Kobe University Human Intestinal����

Microbiota Model [KUHIMM])�������������������������������
����������������

1.� ����
 MGōĻf

2.� ����������
"²³Łő

" 1011-1012 cells/g-³ō
y±Ĝ1Ɓ¿/.ōĻh/ďġ

13 m!ÄmSY^E43

Ėő!f

KUHIMM !Ŭť

"ĕ¯Ŗ¨



"ŭ!Īŗ1Đ [3]

Ť/.ċĢÕ³ō(2) ÓĖđ DNA !àVC 16S ŘôďƉUlcerative colitisƋUCƊ"ďġÕōğ×!a
-³ō

" 8 Ū­ƇŕņƉBio Jr. 8; ABLE,ólƊ1zĘŬťòrĖºg!LY^AÍ+$ 13 m!ċĢÕ³ōďSY^E43+-ŎÆ÷y!ä{1»ĞÔĺ1ş¼Ö.ŰuĥŖ¨.

+-ōŁő(1) ŎÆ÷y!Ĉ KUHIMM !Ŭť

-³ō.ōĻbĦŁŊ".ō)Ġő_65[AÄÕ1Ņá¶«Ůž¸/ďġÔ

ŭ

ŎÆ÷y

ūœ.ğ×+#Ĥŵăf+- DNA à1œ-!ĤġV:JBU"cé-öþĥþģ

0?^Q[1P7K`[_HF@[įŶIGZ

ÿ"İĸ/

6UƉSDSƊą;YAN`B1zĘđĔĥ

in vitro ľ+. UC ×ň!qŢQ]P2

Įĭ+-à<Z`^3DQÐ

5[!ē"©ƄÛ" KUHIMM 1øļbuffer

ĉ

ē«'

DNA " TE$Łőĵ!~á*ŎÆ÷yƉMGĽ}Ɗ

Łő! 16S rRNA Űuµ V3-V4 Ɔ¬1úĥQ

f!ųŶ_Q]O9^Ŷ_ŴŶ!łÚ0qŢQ

Y5T`1zĘPCR °ÅPCR ėđ" MiSeq]P25[!Ũv1ŋçĪ!Q\L59E4@`<8^?ƉIlluminaƊ

<A%! Bifidobacterium ¾!Ôĺ1Ŝ|

QIIME version 1.9.1

1000 ĵ

£

.j1®

{Ų1ÑŲ"+-Řô

KUHIMM f!wĿŌŉŶčÇ"ƈũăy<]TG. [1,2]ñĬĶ" UC ×ň!qŢQ]P2=YP

5[1÷ś.j1ħĥ

7

Aminex HPX-87H column 1Śņ÷3. _Q(1) UC ×ň)Łőĵå"ŎÆ÷yf!)!

ăf

ē/

)ē/
!Ämý&îØĆ½

UC ×ň!)

Ɖª 2Ɗ+# UC ×ňKUHIMM Ĥŵ-α ²ùÕƉŁő!²ùÕ!âåƊ

aæŎÆ÷y

.ĵå* αÄm UC ×ňîØÂ"Ş(,/!¡" KUHIMM Ĥŵăf)ùőŹ)Äm×ňîØÂ"Ş(,/ŎÆ÷yf
"KUHIMM f

!ōŁő!ůē/

 "  Actinobacteria,

DNA Ų!³ű

Bacteroidetes,**"ńřĥ

¾

Ĵ\R[Ŝ|ŃõŐ¤ĄŽŪ.ő!

ª 2. KUHIMM ĤŵăfFirmicutes,

Fusobacteria, Proteobacteria, Verrucomicrobia Ż
Lachnospiraceae ĴŁő!øÚ"Äm UC ×ňĝîØÂ.ŴŶĖÚ
.j1ıƉP<0.05Ɗj Lachnospiraceae Ĵ!ő"¥iđ!ōĻÄm!ŎÆ

÷yf

ý& UC ×ňŎÆ÷yfĆ½-

ù

KUHIMM ­Ƈăf) Lachnospiraceae ĴŽ³ű1(Ū.ő!

UC ×ň!)!Ć½

Ɖª 1Ɗŭ!Īŗ) Lachnospiraceae Ĵ!ő

UC ×ňĆ½.j®£/ŴŶĖÚ

.ĝÄōŁő!ē

VC 16S Řô1œŃõÄm²ùÕ

KUHIMM Ĥŵăf.¹Ƃ-ŴŶĖÚ

ŷŖÏ1õ Lachnospiraceae Ĵ

KUHIMM!ő!ŴŶĖÚčÇ

"ü!ĨŽ

Ş(,/

4. 9UR\-Û!Ńõaŏ. ñ@AEU KUHIMM " UC ×ň!MG³ōŁő
.ĵå*²ùÕ1~áeĜ!WF[.,

n'!@AEU²ŪÌ@AEU"ēcŋŴŶĖÚ!Ć½1KUHIMM "ē.ŴŶĖÚ1¹Ƃ!MGōĻřć.j"©Ƅ.'ŴŶ"ÒĖ T ŁŊ!ĖÚ1ş
¼ďġ1Þ.jĪ,/Lachnospiraceae Ĵ!Ć½/Ć½1ē
Ŝ|.KUHIMM "pƀ.ŴŶĖÚ!

.ľ-UC ×ň!ōĕ¯1ŧũ.ľ.

 UC !āâå Mayo score mayo scorezĘ/.

ª 1. Lachnospiraceae Ĵ!!āâå

HS: healthy subjectFeces: ŎÆ÷yCulture: KUHIMM×ňōĤ ŵ ă  ** " ń ř ĥ



îØÂ

.j1ı

Lachnospiraceae ĴĨŽ"Ş(,/ñŃõ" UC

Lachnospiraceae Ĵ½Ĥ.>`A².(" Partial

ĒÙ

Ņá/

j1ķ

û(

nÐ"/1ìü.ßdđ1KUHIMM 1Ę

ƉP<0.05Ɗŀ_Ŝ|.)-.
(2) UC ×ňWF[

.ŴŶĖÚ!Ć½=I[đţ.!(KUHIMM Ĥŵăf

FYl


.Äm UC ×ň!īźŌŉŶ!ĖÚ1Š&

[1] Takagi R, et al.: Plos One, 11, e0160533 (2016)Ĥŵ 30 íżÐ[2] Sasaki D, et al.: Sci. Rep., 8, 435 (2018)īźŌŉŶ"ōŁőºg!Ê1Á.@

Ŷ_ŴŶ

"ųŶ

gŖėđ-Q]O9^gŖėđŐ¤Ą

[3] Sasaki K, et al.: Plos One, 12, e0180991 (2017)

j

8

ã

ă  ÉÓðë³«{¨{ QYOBIĽ� �� �� � ����������
����K���������������
Ě Íy 1, 3móÔ ·u 2msķ þļ 1,31
iBody  , 2  , 3  
464-0814 ²µÿqĎõ 1 ö ²¨«:l@f]nGglÈĢĿĥ: 052-753-8654ŋFax: 052-753-8654ŋE-mail: kato.teruyo@ibody.co.jp

� �������������������������������������K������
�����������K������������� N ��� 4 �������� SKIK �������������������������������������������������
�������������������������������������1)�������
����������� IgG �������������� 2) ���������������
����������������������3) ���������������������
��������������������������

1.� ����
 V:=:lMIQin&!LlWBĬ7¼ð

ëą&02¬mćm¨ĸ&ðñ3Âĝ(½Ğqâ"3ò3÷ïĈ/ùøLlWB

Ĭ'ÿŃ&0!(÷ïĸ±%

3'#!ERlV:9I/ mRNA'tãßİ%$'ē¿4!
(%ľ÷ï%¥
3ÑËü"'-ùøLlWBĬ'÷ïĸ±%¥(ERlÎıw'LlWBĬ#ě÷ï£ńÕz/£¡'ÎıGe^klª#'÷ï%$'ÁĻ#ÌĻ'3Ýġ7Ĝ

±".÷ï

ĸ7p3-'Õz7ċ2į8"

'oĖø" 1. SKIK ^\NRLC'Ø3
ĄĐ1('0

4+"&LC7x3#&02 mRNA%ľ÷ïLlWBĬ'÷ïĸ7ć&¦¨3-'o'Áå#!N ÒĂ SKIK

2'čģîpLlWBĬðñĸ¦¨&®r^\NRLC7ďÛ[1]ÓLC( Ser-Lys-Ile-Lys' 4 9aUĵ1%3^\NR"!

3ē¿7ý­ŅĊØ»14!

3

2ĺ© Met &Č"ÓûĀ&!(h:ZF:<lIûĀm

 2 öù'ERl¨Ĕę'LlWBĬ÷ïĸ&¸ŀñÞ"½Ł%Pnj"

3dUBknSjÃ~(mAb)3#7¤3ĩÆ1XlQ7»!ĢĠ.

7¯ĪLlWBĬĲ|ª#¨Ĕę0)Üë÷ï

'"3[2]Ó^\NR7EnR3 DNA ĳ7ùø

Ĉ&

Ĳ|ª'ĺ©ERlúº&Å3#¨Ĕę/Ĵæ"ľ÷ï"LlWBĬ'ðñĸ¦¨3#Ë1#%ŉ 1Ŋ9!LCx.1¸ŀ7Ĩ*

2.� ����S�����
(1) ¨ĔęêĉĒLlWBĬÀĈ0)°ňđĘê'#1LC'x(êĉĒĈ&ĉĒLlWBĬÀĈ&03 IgG '÷ïĭ

`;IôÖ'Ã¨Ĕę O157 Ã~Ĳ|ª7ò¨Ĕę0)°ňđĘ'êĉĒLlWBĬÀĈ&!

!(čģî7ø&pÊ3#6!SKIK ^\NRLCxLlWBĬÀĸ0)é
¿¢Ã~ðñ&rî&(¸ŀ7r(B) Translation(A) Transcription

3¸ŀ7Ĩ*ŉ 2Ŋ

+

SKIK

+

-

-

Cell Free Protein Synthesis
E. coliWheat Germ
 3. SKIK ^\NRLC'Ïêĭ mčģ&r

 2. ÓûĀ"òLlWBĬÀĈ

3¸ŀ'ğ×ĊØ(2) ĭ(A) T7 RNA _ichnK&03 mRNA Àĸ9?

#čģ'ğ× ¨ĔęêĉĒLlWBĬÀĈ&)čģ¾744ìā!Ĝ

!ĭ

0

knIDjĿçèº'<NH;b[k`:RÙSKIK ^\NRL

ėĊØ7ý

CÏê mRNA À0)LlWBĬÀ&44r(B) ¨ĔęêĉĒčģĈ&3LlWBĬ'Àĸ
SDS-PAGE º' Western Blotting ĊØ7ý

3¸ŀ7ğ×

3.� �����

4.� �����

(1) IgG 'ðñ Ã~',%1áē'^\NRLC'Ïê"`;IôÖ' IgG Ĳ|ª7¨

3LlWBĬ7¬mćm¨ĸ&ðñ3Âĝ(V:=<EUan'Ú'ĔęêĉĒLlWBĬÀĈ"÷ï'ĊØ

oLCê"(÷ïĸ±%ELISA &03Ã~é¿N ÒĂ& 4 9aUĵ1%3^\NR7x3',".

2'ĶĞ¿(++ņ+!

3

Ħ-14%oÇLC7x IgG "("LlWBĬ÷ïĸ7¦¨ē%ÓÂĝ(¬}&÷ïĸņĊé¿7Ï!

oÇ

ć"

°ňđĘêĉĒLlWBĬÀĈ&!(LC'

3#Ň"ľ÷ïLlWBĬ&

3#ď
!Ø

!

31) !'32) LlWB

Ïê&02LlWBĬÀĸ&§Ħ-14%

Ĭ÷ïĸ¦!.4é¿¢(qË"'#1SKIK ^\NRLC(°ň'÷

Ğ%ħł"(

3#&ÁĮ&Ĥ3oïĈ"(¨Ĕę&'Áå#!ò¶3#7Ð¹

!Ħ-143LlWBĬ÷ïĸ¦¨Ø7.1%ē¿ý42Ķ

vºà%÷ïĈ"'Ø/LCx&03LlWBĬ÷ïĸ¦¨'c>TJb7ğË3#&0(2) ^\NRLCĭ

#čģ&r

2ä

3¸ŀ

SKIK ^\NRLC7x;FAôÖÃ~Ĳ|ª7Ĺ¢#T7 RNA _ichnK&03ĭ

Ć&īí

!

3

�����
�

Àĸ&¨´(%ŉ 3AŊ

[1] Ojima-Kato et al.: J. Biosci. Bioeng., 125, 124-130oÇąĸ' mRNA 7Ĺ¢#¨ĔęêĉĒčģĈ

(2017)

Western Blotting "ùøL[2] Bivona, L. et al., Protein Expr Purif., 74, 248 (2010)

lWBĬ7Ý#5SKIK ^\NRLCx&02LlWBĬÀĸ¦¨!

#ď&÷ï"3Âĝß¾7

Ĝ'ĊØLC'Ïê&Ä61mRNA "LlWBĬÀ¾7Ĝ

LlWBĬ7ĕôĕŉ 3BŊ10ď  Ùàýù¸ªk¤k GLD;@Ŋ����������������������������
�������� ��� �� ������

gd sf 1Zõê \Ç 1Z^á tñ 2Z²· tĺ 2Zà£ Ħb 1,3 *1 ´¤ª¤ªň¸ªĈĎČ
2 ¯¡?U?7
3 ´¤ªýz§¸ª±Óªã¼kċcŇÚßāÈAYB[464-8603 ´¹č_ěÿ Ōı: 052-789-3215
Fax: 052-789-3214 *E-mail: honda@chembio.nagoya-u.ac.jp���������������������������������������������
���������������������������������������������
���������������������������������������������
���������������������������������������������
���������������������������������������������
���������������������������������������������
�������������������������������� in silico ����������
���������������������������������������������
������������� in silico ����������������������������
��������������������������������������������
���������

1.� ����

pH2s»Ņ°$ĸ3çğÅOMCH&s»ő0ĈĎ4

3ýüïÅùĹ

/çğÅő%ÞÈz!îć42Ý.



3 [1]

çğÅOMCH&%,,ĕÑ3!ĝ%ò
łĒ$0®Ü$zī4Ġ,,,³3!

#Ŏ5īì3-4,
9=V5þ
FUJU[!

çğÅ5oÎ
Ŏ

pH7

3%



$É&£¨Å?UOMCH%zī5Ë}#1Ġ

3Öí%ņĂ (œ) $È

3

4&?U9=V$OMCH#"%²z§&u3
!

3ò

łĒ#"%Œz§&u3!

#

ē¨5mĨ

3!$í

OMCH5łĒ$03zī1«3!

,%Öí

3

2.� ����������
gSFV!ĞëŃĖOMCH5þ&ĀêÅĴŌĢÅ%OMCH5ú$û0ĠFUJU[[2]

 1. àĈĎ%åÄ2%Ö3!.ĩyg%Íl%­þ

5ĜĞëŃĖïÅŒ

3

AV5¶

çğÅO

OMCH&Ġđx



ĞëŃQ

>W@EX[V%Ë}ßÀ

MCH$çğÅ5oÎ,,ĠĻļúÅ5i`

434,$É& 11 čŐ%ĞëŃŒĖOMC

3äĭ5Ľ-g&%äĭĖâ53

H5Â

3 [3, 4]415N[@$éĘÐ5Ĥ

11ĞëŃĖïÅ5oÎŒĠĻļúÅ���������7��������������

������������������������

�������� 1265 ��������������

���7�

�7��� in silico ����������������

A

����������������7�������
20 ������������7����������
���7������������������7�������7�����������������

B���������������� in vitro ����7�
�7����������������������
��������7 [5]�


PYWFDM
PYWFEM
MPFFFSIYEYMYDPFYFSIYWEMYVAWWMY
1.14
1.11
1.06
0.97
0.94
0.94
1.00


1.56
2.25
0.32
4.90
2.77
3.32
1.00

 100

 80
 60

 40
 20

0

10 mg/mL
5 mg/mL3. x#](1) ����� in silico �������
In silico �������1265 �����������
� 3. ����� in vitro �����

78 ������������������7 (� 2)�

A 45(A) �������������������

IIIIII(B) ���������������

3
2

 10
 -1
 -2
-4
-5

4. Be&`t

IMAKEN-3

DDDDDD
2

4

����������������������7

RRRRRR

6

8





10

������������������������

12�������7��7�������������

B����������������������
������������7����������









������������������������
�����������������������7
����7�������������������

������������������������

� 2. ����������������

�����������������7������(A) 6 ������������

��������������������7�7�

������������� 2 ����������

������������������������

����������������������

�������������������������(B) ��������������
■��������������

¥��������JSPS ������� B (16H04575)�

(2) ����� in vitro ����������� �������� (17J6401b)�

�����������������������

������7������������������ in vitro ����7������78 ��� 6 ����� [3]�����

Pn������ VAWWMY �������������

[1]� Agyei D, et al.: Food Bioprod. Process., 98, 244-256(2016)

���7��7������ 5 ����������VAWWMY � 1.5 �����������������

[2]� �� PCT/JP2018/017676

��7 (� 3 A)������������������

[3]� �� 2010-222300

���������������������7��[4]� Takeshita T, et al.: J. Biosci. Bioeng., 112(1), 92-97(2011)

����5 ��������������������

[5]� ����� ��7������ 13 (2010)

���7 (� 3 B)��7 5 ������ IYWEMY ��

12Ħ  ¨êòđĊË¾}¸} MYK@Dũ

UV-B LED h#%>B<+;FCaųò î¸ 1ŶĻÊ Ðº 1ŶÿĔ î 2ŶpÉ y 3Ŷ¹Ĕ ¸ĩ 4ŶÈĈ ç 4*13

êv¾Ëú÷Ñ}Ġ üĄÞĽFlHnŶ2 Wen_lmJK[DðŤ}Ġ

¸³Ū¼÷Ñ}ĠŶ4 ¸ţÎĥ¸¾¸¾ťđ¥Đ´ġ¾ĝĤġ Øēđ¥ġ¾Ãæ
599-8531 ²Ìt¾«Ė 1-1 Ūņ: 072-254-7341
Fax: 072-254-7341 E-mail: okazawa@plant.osakafu-u.ac.jp

 1}>B<+;FCp(y%!

b®&$pSdk`9F­>B<+;FCG%)E6/)9Es¦VN(t!®¤N®\¢"OQ!c

315 nm) #¡i
7 (LED) (%&%l¬(H%

/.8CL¥^de_!]!

&«'%&&® $® &$& 280 nm UV-LED hU4@f$®|q®¤N­\¢®­KTOQV"®­UV(PY%roj©

1. 

280 nm UV-B LED (w$6AE0-B=6F?~$® o UV-B XgM/.8CL¥£I)E6/)9EZq UV-B (280

$&%|®¨% UV-B R3*,F

#®/D*:818)E6/)9E[§xªh¨aT%





{m

4Ŝ!

#%

¢

&%
/Ŷêv¾ËúŴ÷ŵ āş"ė0 UV-

B ĘI8<nNŴLEDŵ4ćĶ òĝĤ#ŶŢĿ­¯"ÞĽ"ĘÇXCRD".ŶUV-B LED 4ēùĊĕóýĶÙ4ª0 NPO ĀwêòZ;MP@Dō}ŢĿäĝĤřŴJPC ŢĿŵŶċ

6AiU8<ŝ

kC9@M4áœ0*

Ċ"đĒ

ĚÝ

ċ[

2. ~5F2#v

ŃĲ16AiU8<

Z;MP@DĒúĝĤ}ŴABPI ĝŵœ*.1
0ŉŬ"o0(1) āş"ė0 UV-B LED Ĭ·ı"t+ UV-B ě.10Ŵ280–315

MB6Pl¢Ş

nmŵ#Ŷ­ľÆ¹ŧ"t#ï+āşs1)" UV-B ØĨĜŲ

Bk8QOEO"6l0Òū"Łô

"ĝĤ#Ŷāş¯":Rj?n0*Ŷđ¼Ø DNA "Í UV-B hl[4ēļ+"â-ÚÒū4(oéŶűÁÏ"į

/Ŷċ

à

ŜŀXH`l D3 "đÜ# UV-B'5

6lMB6Pl"^iZ9Snj"{ŌÂ0āşþ"Òū"Łôu#

×ŀ0ŶđĊ# UV-B 4)ē0Ŷ270, 280, 300,

ŦqđĂ+ LED 4ēŴª 1ŵŶ1."ĆŗØœ

+Ŷ3Ĵ UV-B.10ùĊ

Â0đďØĨ

Ň1Ŷ¶ė"D@inPlA

ô

ë.





ë.

Ü

UVR8

1 ħĵ.# ABPI ĝ

MP@DÞĽ4ùĊ"ĊŏđĒ" 15 š"ĉÄ"µ
280 nm

ōŋ

13

Bk8Q

0Òū4Ŋ&ļ

Yn@āş4+ UV-LED-ĺ6lMB6Pl¢ŞĞŇ1ĸ£ą

UV-LED "ĉÄŶZ;Øē0*

Yn@āş4ŶĉÄLU8D,ŪĆ"Ńł#Ŷ"ÙĶŅ+¢ "ĮõŶ280 nm-Ö10[2]s*Ŷ[kC9@M"blUnČķ

"bH]knaŁ

-Ŷ^iZ9Snj"oĢ06lM

B6Pl"đ


OEO"6lMB6Pl¢Ş- UVR8 ¤$10 UV-B ÀHlV@ŏ"½¬
[1]"ÔŶUV-B ØĨĞ-%, 310 nmŶ"õ#z"-#Õ.1ŶUV-B "t+ċėę0ğ1Ŵª 2ŵĭŐęě.1 280 nm#Ŷ1)
ØĨ0©¼½¬04ğ§0(3) 280 nm UV-LED ĉÄ
¢Ş

s





(2) 280 nm UV-LED ĉÄāş"ė0 UV-LED 4ē0Bk8QO
280 nm ċėę

EO"6lMB6Pl¢Ş


ë.



µ

0 UVR8 "cS_n

280 nm UV-LED 4ĜìšĞŇ1ŶDIJ,öŎ#ģÔ"+-đ

COP1 fX>Jli=nG

 ^iZ9Snj#ýĶÙ¼ŶÌ±"Pn
E

UV-B ØĨÙŘ~¼"ĘĎ4ňÅ01."Ř~#Ŷ^iZ9Snj"Ű"ÜÜŲ)Ŷ6lMB6Pl#Ĺ"¦ŏ,¸Òū4sŶĊ

0òĝĤĞĥ 280 nm UV-LED "ĜìšĉÄ

Ţ30 PAL, CHS, Zh]S8NŶ6lMB6Pl"^iZ¡û

4. Jnjz

0Ŷő©¼ HY5 4ĂÙŶră"

9Snj"ŶJdŶDIJŶI8EŴöŎŵŶ

"4ē

Łô UV-B "BAOj~ŕ#ŶUV-B "ĉÄ

¼

0Ĵ

.

+Øē

*Ŷ"Ũ"Ř~¼ĘĎ¶ RNA-Seq 4ēİĳęĮ

½¬0ĴĉÄ2Ŷ1+ŭĺ^iZ9Snj"µĨ"MhlD@i[MnaŁô

0

íŔę

/ŶòĝĤÕ.1Įõ#Ŷ¿ēùĊ

^NZ7jaÂ0Bk8QOEO"Ø

¿ēùĊ"6lMB6Pl

0Òū UVR8 #ŦqùĊ1

ċė-0^iZ9Snj¢ŞµÞĽŴċńŮtŵ#ŶģÔ"Ċ+ŗŢ30 DFR ,ŚĪśīŴUGTŵ

ēĶ

¢)10Ŵª 3ŵ.ŶĊ"¦ŏ,4Ų*0^DMTn\DMďÞĽ,ŶùĊ

-0ĊŏđĒ" MhlD@i[MnaŁô"ĮõŶ280 nm UV-LEDŲčÞĽÇŠĶñÓ10xÔŶů¦-ŶCOP1, HY5, PAL, CHS, DFR, UGT Ëúĵ¡òÞĽ"¿ē4œ*Ŷŝü"ĉÄ^iZ9Snj"đ1+ 2Üè®Ē¾Œã

Ţ30Ř~¼"ĘĎŞ

|qµ0å*ĞŇ

-0ġ¾ęøß

°<n[l8S\nBgl"»

oéŶ310 nm UV-LED "ĉÄ# COP1, HY5, PAL,CHS "Ř~¼ĘĎ#¡û
"Ŷđ

Ü"ră

Ĳ06lMB6Pl"

Ţ30Ř~¼"ĘĎ#ňÅ1
ùĊ

UV-B

¢)10

nm "āş"Ŗ4Ûě

Wu


ňÅ1+"Ü

[1] Favory J-J, et al.: EMBO J., 28, 591–601 (2009)

"#Ŷ+3

[2] Kusano M, et al.: Plant J., 67, 354–369 (2011)

10–20/ŶUV-B BAOj~ŕ

14ī 70 ¨æîĕĎÆºzµz KRH<CŲ���� Fistulifera solaris ���������
���������������ÅĘ ĥś 1òî  2ŨÄ µ| 1Ę Ĺç 1Ũ ġ¸ 1Ęp  1
1 ñtřÆµºµºŰiÆiĕ¢Æ 2 ŴćŬě÷ËzĦiŁòĢĨÙ

184-8588 ñtŤÁŪsÇpę 2-24-16 Ŵő: 042-388-7401
Fax: 042-385-7713 E-mail: tsuyo@cc.tuat.ac.jp����������������� Fistulifera solaris ��������������������
���������� (EPA)���������

��������F. solaris � EPA ���� 3.3

��������������� �����������������������������
��� EPA �������

�������������������������������

������������


1.� ����

ŅŸ!p*ë*ž86dũ3Þ÷!k/î÷">O\ōó[1]3")/8

 8]: 3 ľļŦ" α-cOegŦ (C18:3)76?@W[<Cōó

gF7gŦ (EPAC20:5)L?@U;@7gŦ (DHAĜwœã²3Ň

C22:6)3(´oŻ£ľļŦ.ĕ}

ÿ

Ï3Ý

8]: 3 ľļŦ

/ĺ

-0

8]: 3 ľļŦ"qlKgĕĖ0/


m

/

É­żðy3øŏ&ţ{¸ı'á

2.� ����������

ý)-0/
(1) wœã²ŝ8]Ńħ/F-EPA ØĲŕ

 EPA Ø3Ŏ·/8]: 3 J@G`bjE3»EPA ĕĖm-Ü8]: 3 ľļ.Ď×ź¤3

,/ EPA ĕĖ×!mF. solaris !ľļŦ!wœĲŕōóţ{¸ěĔJj

-

«×


wœã²!Fj>HK

!ĞĜţ{¸VBFc4g+h5j:g*â/@Tc]gKĀĞ0/ÍĢĨ½"0&,.§Ŷ/!§ŶăāÕİŅŸ

j?e<Aag,/ê/m3Ő'ė/ſw2/8]: 3 ľļŦĴćíÐ0ĂŜ0#8]: 3 ľļŦ!ŹŖĜĕĖ×ŌŚ)/îĢĨ"F. solaris8]: 3 J@G`bjE3ŠěĔEPA ĕĖ×!

: 3 ľļŦ3(ľŔ3µũŦ3(¦¤/

î÷! EPA ĕĖ!YKdNH</Ö3Ŏ·/ ØÕĕĎ/ÕİŅŸ"ĕĽ

/¼ű

ĸá

żúė!

!Į 75%-!8]: 3 ľļŦ!Ĵćſþ

&0/ľļŦ38]: 3 ľļŦĒĜ EPA ĕĖTfDC!ùĭ3Ğßî÷!ž¾"S5HA`86diBegZ¡#0ſþx³,.î÷!86dĔď/!)8!

ė0/!
"ů.

Êź-2ÈŭĮ 100]: 3 ľļŦĕĖĬſŽx³!ĞĜ
þ

ſþ3äĕĖ0

/ſþ"¶Ċſiżúſ
ſŽĚ±/Ĕ«m!®ĝÚň/ţ{¸ÀģĪ0/[2]wœã²Ĭô"Ŀ+Ġ!ěš

.ń¤ä¤+@Tc]gKŵŋŧŋ,/ľļŦiľŔwœĲŕ!ōè+uĉZj9jţ{¸ GFP 3v

«×Tf^jFjÌěĔ/V<Fj3ùĭ!ěĔV<Fj3QjI5<d:gÿ3ėăāÕİŅŸ!9dG_

 F. solaris-86dĕĖ÷ăāēŅÀ

Fistulifera solaris JPCC DA0580 ÷3ųP68Čä
ĕĖ%!Öė

(2) EPA ĕĖ×mĢĨ3àşî÷"r­żðy!ëŢ F. solaris 3m-271 ­¬3( 500 ml !­¬čŧũ.ëµ 65%!86d3Ńħå¹!Õİ

15

íĈÉ3 1.0×107 cellsiml-1 /,/ F. solaris ! EPA ĕĖ×[7]ŉ 1. ­żðyĄŜüũ

0.8 lil-1imin-1CO2 ĈÉ 2 % (v/v) Ŝü­żũ¸ï¾É" 100 &" 500 µmol photonsim-2is-1Şĵċ¿n­ż&­żĆÉ" 15202530°C°ĈÉ" 0.440.881.753.50 %­żðyøŏ3Ň

3. hWiF(1) wœã²,/ EPA ĕĖ×!m

QjI5<d:g,/ţ{¸ÀÒÛĕĎŔĻ

×C<cjMg=3ĲņŷÕū,. GFP !ķ

ŀņ3Ĥ÷3 5 <fjgđÔ!<fjg
3c4dF6\ PCRÀţ{¸!ěĔũ3ōó1Ũĕ÷! 4-5 !ţ{¸ěĔũģŒ8]: 3 J@G`bjE3žěĔ

0/ÎŔŗá}!~ŊĤ0~Ŋë*žţ{¸ěĔũ3ĤÎŔŗá}
$Ũĕ÷3ĩįõąðy­ż!ľļŦıØ3ûŘĳôÎŔŗá}!ĶľļŦp EPA !Ńħ

ª 2. ÕĕĎ3ė EPA ĕĖ!ûŘ

14%m!éŨĕ÷ûŘEPA ĕ

4. 2JGT

Ė×" 3.3 m36 mgil-1iday-1  (ª 1)
!ĳô
Ĕ

-

,. EPA ĕĖ

J@G`bjEm

&m/Ĥ08]: 3"F. solaris

EPA ĕĖ!Ñŝ©¸!k/Ĥ¥0xm,.F. solaris



YJ5

ì

!Ĕď/!

!¼Ĕ



-86d

%! EPA Ńħ3Ē0#-/

EPA !ĕĖ×!mĤ¥0-EPA ũ

ì/86dũ (65%)! 6.5%

š!

«×8]: 3 J@G`bjE!ÌěĔ" EPA ĕĖm/

 îĢĨ~ÎŔŗá}"EPA ũ" 19%«×8]: 3 J@G`bjE!Ìě

ŌŚ)/*!ĺ

/

ŮŞťį!86dYJ5%!Â«wœã²!ëŢ3Ő'/

?iO_
[1] Ta anaka T, et al.: Plant Cell, 27, 162-176 (2015).
[2]

Muto M, et al.: Mar. Biotechnol., 15, 48-55 (2013).

[3]

Fernández S, et al.: Appl. Microbiol. Biotechnol., 50,
199-205 (1998).

[4]ª 1. Ũĕ÷$ÎŔŗá}! (A)ĕĽŝÉ(1999).

(B)EPA ĕĖ!ûŘ
(2) EPA ĕĖ×m

[5]
[6]

­żðy!ëŢĆÉ 25 °C, °Ĉ

É 0.44 %!ðyn­ż
ž


¯

Qiang H, et al.: Eur. J. Phycol., 32, 81-86 (1997).
Molina G, et al.: Biotechnol. Appl. Biochem., 20,279-290 (1994).

ëŢ­żðy3øŏĳôũ¸ï¾É
500µmol photonsim-2is-1

Graziella C. Z, et al.: J. Biotechnol, 70, 299-312

ë* EPA ĕĖ×[7]

Tanaka T, et al.: Bioresour Technol 245, 567 (2017).

[8]

Sakayu S, et al.: J. Am. Oil Chem. Soc., 66, 342-347(1989).

ģŒ0 (ŉ 1)!ĕĖ×"0&[9]

0ĐĪöż×!ŅŸXCK!Į 3 Ethel N. J, et al.: E I du Pont de Nemours andCompany, Wilmington, DE (US) US (2012).ÓÃöż×!ğłŸĬ! EPA ĕĖ×[10]

 (ª 2)

Zhixiong X, et al.: Nat. Biotechnol., 31, 734-740(2013).

16Ř  ¶ĄČľĸÚÌÆ SZPFLƮ��������������������
�I�E��EPII���D��ņŞ p 1nvØ ħĤ 2nĐ Ɲŷ 2nÙŁ Þŭ 2nŴ ƌ 1,2ðÉÆÌÆÌƫƛªƖÌŏŕŔ ľĸƐıŀÌÔÿƽŎÆÌ ƖĒĬĩŔÌƠ
783-8502 £ºÛĸƠy 200 ƱƊ: 088-864-5144
Fax: 088-864-5200 E-mail: ashiuchi@kochi-u.ac.jp������������������������I��������C���/�����
����EPII���D������ E�I�II��Q���������������-���-�-����-��� ����������� ��CC��-�����EPII����D
����������������-�����������/������

2.� ���E������

1.� ����

#Čŏŕ<ƜÖŃċŇ'ªòĨ%ÏƤĨ ƗÝëľĸ(58ñĖń<ƩĠ8ŉŇ6H("!#>mG×<ÀčžƳq$Ŋýªò8Ħŀ"ŝ'

8ÐƭñĖíëľĸ(9žƳnž×

#Ň(Ƙ-#ǀ¹ 1ǁPGA/DEQ HoQ

oQ>mGĞŮ<öŶíaibo)Ʋƀƽ0*ƣÆ'È|ƀ·('8%'$3ñĖ(ÒČôĨ<CmI?SªòĨ%¬}ǀAǁ0PGA

8øörîū,)åƵ*ĽÆ%9#8

ĲĮ<Àč(HoQ>mGǀaǁPGA łď)ƽà'+Řµš=mfV@d¡ªĸǀQAǁ*ƽÍýŌí<ÀčžƳq(}tǀbǁğ

$XoS
2+

í%ß¾öŶL_FSj<Ʀó%#¡Š±)Ë

UoÊ%'8Řµš=mfV@dÃ DEQ ĲĮ<İ6pŲŻŽľ)ŉŇ(ƞōć(ƋÀčžƳq$ PGA/DEQ <äò8ƶ¾$ŀ9#ƬŶ0$Ĝ

'œ%(ò#

8ǃ1ǄÀčžƳ,)ojĪī$¨7Ƭ

ýŌí4¡ÌŇŬwí(xûŦŇ'öŶí<Ņþ8%*¸ư$!)2­ QA ƒÊčĀ)ƧŅĊ09#¡9ŉŇ(ƞ8ǀcǁĈè(' DEQ2+<eNǀdǁpĂ$řū6*ÀčžƳq(HoQ>mG PGA/DEQ )ÏƤĨ3ŐŖ
#

.&ƽíŮ

8ǀBǁųŢƉź\lf[AWoj\joǀBPBǁ*Á¯('!

řū6*ĚƪļÄëľĸľĿ8ŖƂíai
GjNcmƢǀL-PGAǁ%ġőş)źŀ QA $3
8^EIRJjZiKV@dǀHDP+ǁ<ŀ#ƒÊčĀ L-PGA ?CmHm]kPFLǀPGAICǁ)ƧŅ
(*2#ò#8ǃ2ǄŦ

#zƷ½ QAǀ

Ň(*RDiV@dDOCmǂDEQ2+ǁ<Õ8%$ƹƔŇ(âƴ¡9 PGAIC )ſ(ò
579Ŭķín¡ÌŇŬwí<ŒEWiV@dN?]) PGAICǀPGA/DEQǁ<â¡½%éď½
ǀPGA/HDPǁ%ģƕęƆ8%$HoQ>mGŮ("¹ 1. PGA/DEQ )CmI?SªòǀAǁ%)ÏƤĨǀBǁ

#ÐŀŇ'ŎƁ<¨ê)$Á¯8

17

(2) PGAICs )ûŦŇ'öŶíƍė

ĲĮ(ƋHoQ>mGÀč<ĭĳǀeǁ' BPB<Ƭ¤8%«ć( BPB/DEQs <äòǀfǁäò BPBIC <ùǀgǁ®àƅ<ŀ¹ 3 (*¿ƻ 24 ćƨè)ŶĴà<ŒPGAIC <#Àč

HoQ>mG9#'

sũÜ$*öŶ

ē*ƃÑžƳq)ĈţŇ' PGA/DEQ Ƥ<Śǀhǁ9' ǀaǁpĂĶĪī) PGAIC HoQ>mGs 0ÏƤĨ<ŐŖ%%#=jHoj

ũÜ$*ƸŹ(öŶí<ŅþǀbǁéďĪīè) PGAIC HoQ>mGsũÜǀŊæ 12 mmǁ<

½HoQ>mGsũÜ)Âª=jHojĪī(57ŀöŶŮ´Ç8%!#öŶíƉƼ<ÐăƉƼÒƏ(*ÆůŶé!#â¡½

ƾų\T@ĻŶĔŵŶ) 3 Ę<Ɵ÷PGAIC Ho

HoQ>mGsũÜ$öŶŮû9#Q>mGÀč<õ LB Į¿¼$¿ƻ<ż'!

Ĺř(8ÏƤĨ<ŀ

HoQ>mGsũÜ(8 PGAIC ĢËƤ<Ś

3. tcvO%*#=jHojĪīè)uťēéď½*./-#9Ÿ#â¡½*ċ) 8 ĢË#)(Ò

(1) PGAICs ªò)ÊĞě)Ƅđ
CmI?Sªò)]lML<ś(7PGAICªòć)ÊĞě<ü8%ĥ269¹ 2 (*PGA Dj`EJjÀ7) QA XoSUoÊfj)ģĺ< 0ǅ100ƿ(ƈÏªò¦ì<ż'!ĜÊ<Œ")®ŌǀťªǁfRj<¥Ū(ƚàƎƄđ<ÖƧ%:PGAIC ªò¦ì*pŲŇ
'hmGcg=fRjǀơŢÌ(8cDBiLemQm)á(ŋãǁ(*ªŰ'pĂNICA f

RjǀYj)á(ŋãǁ(*ªŰ#)ť

ē6 PGAIC )ªò¦ì(*ĉï'¢«íË»
8%2#ą6%'!¢«í*n$ž1 57Æ'$¢«í<#%('8 QA ĵàĎ~r$      ¹ 3. PGAICs )ûŦŇ'öŶíŮ

80ű°į:%3¶§

4. >RP_©Ů' PGAIC *Dj`EJjÀ#Óƥ9Îƺ½$

8% NMR đ(57Œ²9#8

ƋĹí% PGAIC )3"čƑs³)ýŌí<Ť1ª;

 ĚƪļÄëľĸľĿ8ÅĞŮ"ILQ>U\

8%$qƇ)CmI?Sªò©Ů('!

j'aibo<ŀ8%$ā'ƽíŮHoQ
>mGÀč)ſ(ò{¶*ð
)â'HoQ>mGÀč<ĹÏ)Ď~r$Ư
8%(3ò#8Ěŗ'¡ÌŇÍÏí%ŝĆ

'ĂĨ(58Ď~Ưí<û"ĕĝčĀ*řū6
)Ŏ8ƪ7

'



PGAIC *öŶHoQ>mG)ŀ+7Åŀƙ¡(ƞUWŨŧÚ(3ƞ#

8%!#{èƣŜ'ñĖń)ŅľnúÆ<ƩƽàňčĀ)ƧŅ*00ƣƀ('!#8ČŏŕÐƓŏŕ)p('8%<ċç8

Fv[i[1] Sauvet G, et al.: J. Polym. Sci. A: Polym. Chem., 41,
2939-2948 (2003)[2] Ashiuchi M, et al.: ACS Appl. Mater. Interfaces, 5,¹ 2. PGAICs )ƚàƎŇƄđ

1619-1624 (2013)18

� �� ����������� �������
��� ������������������ ����������
��������l������i��������� � 1���� � 2����� �� 1���� �� 1���� �� 3���� �� 1,2,*
1 �������������
2 �����

����������

��������������

3 �������

����������

*�980-8572� �������������� 468-1
��: 022-757-4355� E-mail: kabe@niche.tohoku.ac.jp

� ���������������������������i����������������
������������������������ Aspergillus oryzae ������������
���� α-1,3-�������������������������������������
���������������������������������������������
���������������������������������������������
�����������i���������������i������������������

1.� ����

�������������������0�[1]��
����AG �����������0���0���� �����������������������

�������������� A. nidulans � AG ����������0���������������

����������������������� 1.5

���������� 1 �������������

����0���[2]���������������

������������������������

������������������������

�����������������0������

�������

������������������������
������������������������
������������������� kL ���������������������������
������������������������
������������������������
� 1. ����������

������������������������
��������
������������� α-1,3-�����AG�

������������������Aspergillus

� β-1,3-���������������������

oryzae � AG ������������������

������������������������

����0����� AG �����A. nidulans � AG��������� 1���������������

������������������������

Aspergillus nidulans ���� AG ������� agsA,

��0�����0��� 2�[2]����AG ����agsB �������0���� AG ��������

������������������0���[2]�

�������A. nidulans � AG ��� AgsB ����0�0����������� AG ��������

�����������������[1]������

������������������������

������A. nidulans � AG ������������

������0�����������������

19©¾2ĉé.ö.ĖţĜĝÚ!¤f.!"

Ńūà

. AG r¹!ōƎƋōĹçĬ©¾2£ÃƎ!ĉéā!œĚ¯ŜýAG ĉéā+-)÷Ý

ďĜĝŲ)

ƌ« 3ƍ[4]!

+#

ůĻĜĝ

´

,ƎAG-GAG nŰĉéā"½ŬÆlā.

ó,



ĖţĜĝÚ2Ş|.2ùĮĳ!ĩħ

2.� �����
(1) Ƌō!ĵn!ōĹçĬ©¾!ĥŘ
 Ƌō

.ōĹçĬÚ"ļņœÎ!ĖÚ

¸.Ń

,/.Ķń,

+

Ĭĩ!
« 3. Q\A>±Ɖõ!ĜŅōzŲ CutL1 ďĜĝŲ

ļņ¹ďºĸ8\:K?WN8\:FaƌGAGƍ
.GAG "ģÚĹĘō Aspergillus fumigatus
Æl$!ÞÿR`CA

ŷh.-Ǝ!Ĝ¡à" 5 ŭv¾

/
AFc


(3) @[cQ4cYaFc2Ğľè

²¥

,

,à.ŭv¾:\+-×/.[3]Ķń,"ƎGAGĞÍŵ2Řæ

ĵ+# AG ĉéā2ŚāƎA. fumigatus ! GAGÏă±ƉÜÃ/.

+# AG-GAG nŰĉéā2{Ŕ!ĿþƎAG-GAG nŰĉéā"ōĹđz±­kƎj GAG ĉéā

Î!ķĬÚ!ąŨ
?WaŲ

ƆŐ

Â

" AG.ó,"Ǝļņœ

Đ¼ƌ« 2 gƍƎļņµ8\:KĔÌ!



Š(,/ƎCutL1 ďĜĝŲ"±Ɖ 48 õŶĩr¤ìƌƋō".ōĹÂìā!Ũà; « 2
fkƍ[4]

Ĳ±Ɖút

AG-GAG nŰĉéā"űĜā+-)ĜŅōzŲ!´Ĝ¡àŭv¾!Ƌō6^E`;ŭv¾2į¶ƎGAGĉéā

ƎÏă±Ɖ2ć~ 5 L @[cQ4cYaFc2ĞůĻĜĝ½ŬÚ2Ăŝ.

n!ōĹçĬ©¾.!sš2ĴƎƋō!űĜ
āůĻĜĝĶń,"ƎAG-GAG nŰĉéā!ĝă$!Ù

ŹƎűĜāČĺ 2 }ū1ƎAG-GAG

nŰĉéā"êã¨ť+-3ïAK_A2)òĨ

ĜŅƎƊůĻĜĝÚ2Łå.





ó,

,ƎƋō

3.� g����

 GAG )ōĹçĬ©¾ĈŇ


 ùĮĳ
Ţħ

+-ƎƋō!đz±Ɖ"ƎAG  GAG{ĞōĹ³2Ôà.

&ƎƋō! AG-GAG nŰĉéā
^2ÜÃút
.

ó,

ó,



ÏăA<c

)ƊůĻĜĝÚ2ŁåùĮĳ" AG, GAG !ėÚ2ĞčĞÚ!ƊƊÇÓ±ƉâŒ-ƎĹĘō2ĞÏă±Ɖ!Ƅð-Ö.ðâŒ.oÕ"ƎAG-GAG nŰĉéā!ůĻĜĝ¤f!Ŗ©

« 2. AG-GAG nŰĉéā!±ƉÚĘŜý2Ū(.&ƎĹĘō!ōĹ³Ôàň.

f, ±ƉĽmÕ!eśQ\A>ī

Y7MBX2ěŜƎđz±Ɖõ!ōĹ!çĬÚ2

k, ±ƉÕ!ōĹ!ÄzƆØŴƌĩĨŶŻ = 1 mmƍ×,.ƊÇÓ±ƉâŒ!ĥÍ



g, ōĹœƃ!ŤĀ¯ſ¾ƆØŴƌĩĨ = 5 µmƍ(2) Q\A>±Ɖ_S^!ľè
 Ċ

Ǝ

�����
�

ůĻĜĝ

[1] Yoshimi A. et al., PLoS ONE, (2013) 8:e54893

ā!ĖţĜĝÚ2Ş|.(ƎƋō!ű

ĜāƎAG ĉéā+# AG-GAG nŰĉéā

[2] Miyazawa K. et al., Biosci. Biotechnol. Biochem.,ÈƎ(2016) 80:18531863

U]5AI^ŜůĻ.:GLcD CutL1 2ƊĥĚ.S:Fc2 1 >Pc=NXfÊƎ±Ɖ

ď/. CutL1 2 SDS-PAGE+-ÃŲ

fē[3] Sheppard D.C. and Howell P.L., J. Biol. Chem., (2016)
291:1252912537[4] ŸŮíÛ,, ėƇ 2017-91734 (PCT/JP2018/17474)

!ĿþƎAG-GAG nŰĉéā"ōzĜŅŲƎCutL1

20

Ĕ 70 ÊÓāø¥bb EJD<BŏpH 0).eKLS

]`98RM1`98RM

f(P

ZbT1

Śń r UÔ¤ ÌW 2UŒÚ Đę 1*1ĕëŋ āĀđċēđ āøĻôđ¢Ä
2
KCNPwŜÛŝ
305-8572 #,¦ý 1-1-1 Telş029-853-7212
Fax : 029-853-4605 E-mail : aoyagi.hideki.ge@u.tsukuba.ac.jp

HNIQ/2A.e8RM.e*

pH 1 D%"

JS

ZGXSHNIQ/D%]9:#6BY'Z$NIQ/_

2. C=>K

OC>HNıØ('*ľã)57
8±āø* 99%`X(1) Ń³ĬŗĘ*àĖĀ[)ĒÒ!)ŗw9$(ŗwnĂ9$(3**«Ń³Ā6¾|ĝµ* SCF )ÝĠ

±ā

(6

$8

?SGV:xŐ

/

¡

Ŀ

30%ŗ:Į"ø*xŐŗê+¡¨×ŗŜAPŝê\î&("fĂő(ŗÕa3ķÇ:ðd%¼ćŗŜ30, 200 rpmŝ[1] ù) ùäĀ)8±&Ë6&("

pH 1 *

ŗð:

Èś()]À

SCF X)¬µ9ĬĒ*:Į"8+¡µmăÖ*qāµø('ŝ)58ĜĬ*āĥŉ',d  

A.e8RM.e*^

1. 

ĨdŜZGX!Q7EK

a@c.e.eD%0);&gpH 0).eKh(PU1`9]`98RMāø+Specialized Cellulose FilmgSCFhKS5`9Q/WV(2) ĤŃ³ĬŗĘ*àĖŃtèmı)58*«ªcY(

ŗ:ĮX%*ĺþú:¸Č8ŕ»Á9$82) AP ê*á9$[2, 3]  ¶+ AP ê* SCF ê:Ă$*(_ÎêŇą

éĂ³4Âe³(')őŕö:½Ō

8[³*ķÇ:pH 7 *%oŗ pH 1 % 48 h Ńkÿ® pH 7 )·$®

ŗ:Į pH vŗê:ģÜ

àĖ

ŜŞŝ

ėh(±āøŗê&$ ŗ[)ŗÕa:À~ħ( Specialized
Cellulose FilmŜSCFŝê*Ňąċē:É$
Óċē%+ù)$/«Ń³*Õa)ĊĈ)57

OC>HNıØ

«Ń³*Ā[)+ÐĂ(Òŗ±āøÅ

[³*Ā[)3

ÐĂ(ĤŃ³±āø4Ń³ÕaY%ā8

ĤŃ³łĚ8&Ë6)9$8 [6, 7] $¯Öê+:º[4, 5]¡('*>RwpŃtèmı

«Ń³Õa%*ņÑňŗ4

ĤŃ³
+

SCF

]À)58ņÑň*ŗĘ4ŗ(Ĭd*½Ōő%ê:Ă$±āø*¿ě)
"¶ 1. SCF ê& pH vŗê*ß².

pH vŗê:Ă[): pH 1 *)À8pH vŗê:ÏĿw8:ģÜ#$Þĳ

àĖŃ³

ĤŃ³±āø*uüĆB<2

ĤŃ³ĬB<QVGT=ĘYĴ*ŜAŝ6ŜDŝ* 4 ŔĈ)ŜAŝŗæō*ŗĬ}: PCR-DGGE ê:Ă$

QVGT=Ę*àĖ:ķ0

çĽ

21

ĤŃ³:º

(Ĭd:½Ō~ħ(ŗæōŜ 1ŝ*ŗÑň:ĵ

2.0 x 1045.8 x 107 cells/ml &w ®ŗ*æō%ŜBŝpH 1 **µm±āø*ĤŃ³)z.­œĤŃ³:3#ĬĒjywŃkÿæō) 0.36 N čŃ:Ă$ pH v

:Ł´
ŗ:Į

°69

vŗê)57«Ń³:ŀ¹&ŗĬ}:çĽ2

ĤŃ³±ā

ø*uüĆB<QVGT=:þ%8&ďŜCŝĤŃ³±āøB<QVGT=Ę&$*uü:ŅĆ)Ķg8

pH`X*ĞÙ69vŗ*æō)8ŗæō*ŗÑň (h)Ĭd:{ AP :Ă$āĬÅ*ĲÅ:Į"vo®*āĬÅ:çĽ8&%

B<QVGT=uü:ŅĆ)ĶgŜDŝÏĿw

Ę:Ă$ Ŏ)ĤŃ³±āø*¿ě:Į"

3. [F\30.36 N kÿŜŝ(1) Ń³ĬŗĘ*àĖ)57ï ĢŘĉīìĄ*: NBRC802 %ŗ
TLR% SCF ê:Ă

pH 1, 3, 7 )ĹÆ

ĝµ* AP %+Ĭd*å069("&6 SCF ê%xŐŗ%

 2. pH vŗê*ŃkÿŜ0.36 N čŃ, 48 hŝŗĬ})z.­œ.

Ĭd+ AP ê)58őŗ±āø*~ħ³

ĬĒ*ıØ[%

ăÖ*ITF @

pH 1 *%±āø?SGV*¬µ5-xŐ)µsxŐő(

Bacillus £7

þ

4. #64?

8

 Óċē%+ pH vŗê:Ă

ĤŃ³±āø*(2) ĤŃ³ĬŗĘ*àĖB<QVGT=Ę:àĖ

Óê:ĂĆ( pH vŗ*æō*ŗÑň)#$ [³ĤŃ³±āøB<QVGT=Ę&$©Íz8:ķÇ&$ĒÞĳĞÙ®ŗ*ņ

2

DGGE ê%Þl98ITF*Å)­œ$

éĂ³4Âe³*X)|7ĝ1

Ñň*ĵ*Ĉ&$oŗ5-®ŗ:99 48 h &8Ę)

^®

/Ĭdå*MV;V&(8øļ*ñt)58vŗ[*Ĭd*ò*~İw4

$ pH *v)58Ŗĭ(Ĭ}*wĎĸ9

AVEX*?SGV*İĸ³:X8%4Zġ§*Ãĩ:Į`Ŋ*ř%+oŗ

Ńkÿ

®ŗ

93 48 h &8Ę:Ă pH 1 *& 0.36 N čŃ%B<QVGT=ŗ

Ę% Bacillus

ĞÙ 0.36 N čŃ:ĂĬ}:çĽ

%+ív:iâ82~ħ(ÐĂ±āø*¿ě:ĈĆ&8&6

85

143-69 (1995)(2009)AP :[³ķÇ)$[3] Colin J, et al. : Proc Natl Acad Sci U.S.A., 104 (46),pH 7

18217-22 (2007)Ĭdõª 4.9 x

5[4] Śń6 : Ĕ 68 āø¥bb, 2P-2p136 (2016)[5][³ķÇ6*ĤŃ³Ĭ*¿ě:Į"xŐŗ

āĬÅ:ĲóÒŗ[1] Amann R, et al. : Microbiological Reviews., 59 (1),`ŊĞÙ įÅ* Enterobacter £jyw xŐŗ)µs(ĀÕa)Ĥ³:º#±āø:uüĆ

á

+\<O

10 1.0 x 10 2.2 x 10 cells/ml &wá)

«Ń³`*Õa)#$vŗê:ĿĂ[2] Tamaki H, et al.: Environ Microbiol., 11 (7), 1827-34

 pH vŗ*æō)8āĬÅ:
ĞÙ



mõª('

B<QVGT=Ę)÷

pH 1 pH 7 &v8&)57«³±āø*ŗw:ķ08

ö:ğ7Þĳ:("Ă$ĲÅ

2AVE«Ń³ÕaY

Óċē%+«Ń³ÕaY%ív

*ř%+ 0.36 N čŃ:Ă

Óċē:))B<QVGT=%8éĂŗê:àĖ£ăÖ*ITFï Ŝ 2ŝ Bacillus £+ĪĦ:¬µ8&%ĤŃ³:û°8ŗ[7] Hayatsu M, et al. : ISME J., 11 (5), 1130-41 (2017)

Ĭ:Ă$ pH vŗo®*ĞÙ v)57Ĭdõª 1.1 x 10

Śń6 : Ĕ 69 āø¥bb, 2P-J189 (2017)[6] Aliaga G, et al. : ISME J., 9 (4), 1014-23 (2015)822è  }«°ÔËbb IMGAEģ��������������������������āÖ ÿ 1Vĥ´ ãð 1, 2*
1êÁġ ÔxÓåáçå ÔËēÇå¨
2êÁ ÔxÓï
305-8572 ĀÝ!*Ït 1į1į1* E-mail: aoyagi.hideki,ge@u.tsukuba.ac.jp

� ����������������������������������� ��������
���������������������������������������������
������ ��������������������������������������
������������ ��������������������������������
����������Staphylococcus epidermidis � S. aureusĮ����������������
��������������������� 2 ����������������������
�������������������������������������

2.� �����

1.� ���� ä(Ûý)«Ú'Ăl¤Ă¡ËĔĭĠül

¤ÔËĔéĮ$¦Č9¹b©îy5Ã¾l$

IRATDUÄn;ÕÛýĂ(Ĩ

¤

9

°áç#)

o

ÛýĂ(|ÎĂ(PHS$"Ą

ÛNJ>ÑĂĭStaphylococcus epidermidisĮ;ąy'Än:"9¤Ă¡Ë¢ÎĂyĔíÒ&%(ĊÉ7ąy[(ÔË(ĠĢ(PHS$"ĬþNJ>ÑĂĭS. aureusĮ;ĩ'c

ĭĦĂ5¼Ă&%Į$ÙÀ\Ġ(ĊÉ7ÙqĂ(ĠÕ 802 ĭHipolypepton 10 g/L Yeast extract 2 g/L

Ģ;ÜÚ$"8

MgSO4V7H2O 1 g/LĮ$ 50 nM (IRATDU;Än

Ĕ)(Ē$&9ÔË'r0ħ'ğ9ÞĈ)©

9&7 802 ;Õ":7(¤Ă¡ËĔÛýĂ'r0ħ)pk'ċ) S. aureus ; 37℃²:"9$)čĤ

O.D.660 ;ÅÛýĂ)eg9ıí# S. epidermidis

40 strokes/min #Ĩ9

1 h ½'

ÔË7ú;9LR=¹û5ú(fÆ&%(¸IRATDUÄn;ÕÛýĂ(ó^Ĩ&m;³"9 [1] (3 ¤Ă¡ËĔÛýĂ'Y9ħ(ċ²)

 802  50 nM (IRATDU;Än 802 ¤Ă¡ËĔ;h'cÕ9#ěć#9

IRATDU)^ĄÚ&¤Ă¡ËĔ(+$!#

8

àī5?WQSB=ąy&%(©(¤Ăąy'cÕ:"9°áç#)HS$"IRATDU;Ē'

S. epidermidis 1) S. aureus ; L í#

Ĩĭ37

40 strokes/minĮ(ªĪ'§æ&Ĩñę;PKFW7 Ė EU 5=OR@;3 «°#4(h¡Ø{ĉ:"9

;Õ"



1

¯(Ă;::1 h ½' O.D.660 ;Åđ¯(Ĝ$»Ę;ìj

50 nM (IRATDUÄn;Õ"¤Ă¡ËĔ(PÛýĂ(ó^Ĩ;ăïĭ~ 1AĮ$ IRATÛýĂ(ÔÒDUÊÄnĭCUITWSĮ;Õ"ó^Ĩ;Â¡'r0ħ(ċ²;Đ2Ć©}ø8ė

50 nM IRATDUÄn;Õ"Ĩ;&ïĭ~ 1BĮ'!"¶Ď;&23ÛýĂ(»Ì¡;¿ĕ�����0�����������������
��

S. epidermidis ��� S. aureus 0���������
���������������50 nM ������
�������������������������
������������������������
����50 nM �����������������
� 1. ����������������.

����������������������� 1��������������������������

3. pUqA

��������S. epidermidis � S. aureus ��� 50 nM������������������������
�������������� 1�������

������0����������������

���������������S. epidermidis ��

S. epidermidis � S. aureus 0������������

� S. aureus �������������������

�������������0������

��������������������S. epidermidis����������������������

��������0 5.3 h �� 25.6 h�S. aureus ��

S. epidermidis � S. aureus �������������

3.3 h �� 23.5 h �����������������

������������������������

���0������ 2��������������������0������ ������� S. epidermidis ���� S. aureus ��������������������������

� 1. S. epidermidis � S. aureus 0����������

������ 2 ������������������

������.

������������0�����������

� ��

S. epidermidis

S. aureus����������������� � S. epidermidis

����*

A

B

A

B

� S. aureus 0�����������������0��� [h]

3.64

4.62

4.10

3.69

������

����

0.25

0.21

0.31

0.45

����������������� 2�������

[O.D.660/h]* � 1A�� 1B �����������(a)

4. -HCQ���������������S. epidermidis �
S. aureus�0�������������������
��������������������0��������0������������������
������������������������
�������������0������0������������
���(�)������0 Propionibacterium acnes ���������������(�) ��������
������������������������
� 2. ������0 S. epidermidis (a)� S. aureus (b)

5qM^


���������.
��������� �������� 50 nM[1] Belkaid, Y, and Tamoutounour, S,: Nat. Rev. Immunol.,16, 353-366 (2016).

24

� 70 ����������� �������

�� RNA ���� miRNA ����������� ����� ���������� ����� �������
�558-8585� �������� 3-3-138� ��: 06-6605-2702
E-mail: tatibana@bioa.eng.osaka-cu.ac.jp

microRNA (miRNA) ���������������������������miRNA �������������������������������������������
��������miRNA ��������������������

����������

��������� RNA ����� miRNA ����������������������
��� miRNA ��������

1. ��miRNA ���� (pri-miRNA) �����
��������������������miRNA ����� miRNA � RISC ���������������� mRNA �����������������������
[1,2]

� � � miRNA � � � � � RISC � �miRNA ��������[3,4]�������� miRNA ����� pri-Fig. 1 pRING �����miRNA ����������������miRNA � � pri-miRNA � � � � � � � �

2. �����miRNA �������� (Fig. 1)(1) pRING ������

����

miRNA �����������������

pRING ������� HEK293T ����[5]���������� RNA �������

�����������72 ���� total RNA��������� ����� miRNA ������� RT-PCR �������pri-miRNA �������RNA inhibitor� � PCR � � � � � � � � � � � � � �

for gene transcripts������pRING����(Div)������������ PCR �����25������

Fig. 3 pRING � miR-21 ����Fig. 2 RT-PCR ��� pRING ������

3. �����

�����pRING ��� RNA ������

��� miRNA ���� RISC ������

����������� (Fig. 2)

� miRNA ������������pRING ���������������������

(2) pRING �����miRNA ����������������

pRING ����������������
����������� miR-21 �����

����

���pRING ���������

���������� DsRed2 ������

�����������

� pri-miR-21 �������� pRING ������� HEK293T �����������

����

����72 ���� DsRed2 �������

[1] Kawamata T., Tomari Y. : Trends Biochem. Sci.
35, 368-376 (2010).

������ pRING ����������

[2] Kawamata T., Seitz H., Tomari Y. : Nat. Struct.

�����pRING ������������

Mol. Biol. 16, 953-956 (2009).

������������ ���miR-21 �[3] Haraguchi T., Ozaki Y., Iba H. : Nucleic Acids

guide � � � � � � � � � � � � �Res. 37, e43 (2009)

pRINGguideON�loop �����������

[4] Haraguchi T. et al. : Nucleic Acids Res. 40, e58

��� pRINGloopON �����������

(2012)

��������� pRING ��������

[5] Lu Z. et al. : RNA 21,1554–1565 (2015)

���guide �� loop ����������
����� pRING ������������� (Fig. 3)��������������� pRING ������� RNA ������������miRNA ����������������
���������

26Ē  ÕÚüöª¤mm JPH<Cŗ013&,7(6+%n=KxY~)14:-6.4527/gb%  1& #%  2&%  3&%  3&"!% 
1 ĉÀ¤¤Ŗ Ċ¤ÃĬ9NS`BY^ćďĊ2  $%

3 % 1

657-8501 ĉÀ¬òyÿĀ 1-1 řĸ: 078-803-6462
Fax: 078-803-6462 E-mail: wakaists@pegasus.kobe-u.ac.jp

 ~w@hlm|P

E

!pG@D`~<ljoa=K%N?

mfnwlm@i^n=KxY>ZJ

gv



$#

~=KxY8QZ=K%d}>:xRB|B%kT
#W%rt

\!



+%n#d}>:[=Kx$]X?uV`qseA%

Z9IHM!U#z"

1. 

*27Z

F|013&,7(6Ag%\!#UC

Úćď%ń®¹ň#ÃĬŕă

ŋ73Ŕœ

DNA ĳÜÃĬ3LNU8B`>^A6þx?
 ŠşħAspergillus oryzae%1000 ®lc1ăNWâŉ$ĳÜ6ķ,Þĥpc$©wŌn¢$âŐŜ|ő~þ4ÕÚ6kĭ3¶üö
3Úħ


ŉ6Ö1

#$3ăŐŜ|őîŁäĢ$aĘġ#ĩŒ$Őė6üý3

Ģ2$Ģ%üöā.JHR<ZC3
$-ăŐŜ$|ő"ýàþŐėü
ý$|ő#.#îŁ3ô#Ç

3±"G^O<ľ|ìüýĢ6~þ3
ĩğ1%4+#Ð$Øþ"Ōn¢Ě,dĶşħ$ŕă#¾
$Ġ×#%şħ$Þĥpc#įÐ@P`Ōn¢6©w3ÃĬ3@JZ^CQ:`X`BY^
3Ň­ 1 @P`3Ōn¢6įÐsÞĥpc
#u

3



Ģ#"3š 1Ţ$Ōn¢6±#ăú3aÔ$Âí#%ś.è$!$oĝ#!

²+!

2Þĥpc

X;MDW©w43$

%pĕĄ#ļ(14"41$ó6Ö1#"4&ÃĬe¥¦º/{Ōn¢Ě,Ë!

»4ùĄ"Ě,Ë$p$äĢåÍ"p${$¡#.

 1. ŠşħŌn¢ĚË

"3

27

ÃĬ

ćďáİ

2. yc{L(1) Ōn¢Ě,ËŠşħ$Ōn¢@P`Ð$¦Œ

bČE\Z`F6Şăú3-#{Ōn¢Ě,ËŠşħ$Ęġ

1 DNA 6Å{¦Œ PCR#02Þĥpc$bČE\Z`FŌn¢$@P`Ð6Ê¦Þĥpc# 1 @P`£3Ōn¢6ðěÝbČE\Z`FŌn¢%44

Ė 5 @P`©w43

|

bČE\Z`FŞăúŠşħ$E\]`C|ĳîº%44 1 @P`é(3Ç"ŠşħĖ 10 t.Ş4%Ōn¢3

įÐ@P`w

 2. ©wŌn¢$?NWc$âŉĻÖ3aÔ41$E\Z`FŌn¢$Éwoĝ/ÉwÔ#%¦ŒĢ2Ŕœ DNA #÷

PCR %Ö1$±,#"

{3ěÝ

LNU8B`>^A"

3. ;SO_(2) LNU8B`>^CĳÜŠşħ$?NWzĳÜ#%Ŀg}æfkB`>^AšMiSeq "!Ţ6þÔíaģĄ

 @JZ^CQ:`X`BY^#02įÐŌn¢ÒõĖ 300©w4?NWâŉ6ĳÜ3ÃĬ

ċ°$BY`J[`K6¯1g(.Ė 10 kbĈĐ$Ŕ6ÇŌn¢;EHJ$©wø½6?NWc#$4+#q¾²ľłËp6þéŃĳg(ĲÜ6ī?NWc$ÛŌn¢Òõ$©wX;M

3

%eĢ3Ŕœ

DNA |¢$ĳÜĢ"LNU8B`>^A6Ú§ŝ

DW6Ö1#©w3



?NWc$THJCUHJ$ĳÜ"!$ã"ûĳ%Ōn¢Ě,Ë

Ŕœ DNA ĳÜ$-#%Ŕ DNA |¢$ kb 6ŀÚ

z°LNU8B`>^AšMinIONŢ#02ĳÜ6ī$ěÝĴœŔ 1.6 Gb $ŏ}6ë¦

6âē3
ă3

x[`K6E\Z`FŌn¢#¨VHP^=
VHP^=4ŏ}$,6Å{´Šşħ A.

Á6÷¦( 2)

#ŗĎ43âŉ

ı

ı

g7

"âŉ

+blc$;EHJ
ıÙ³43

$0

fkB`>^A$ĳÜěÝ0'ĊćĽ_È¿ĄĨĦqs3'6/
VW)&V-W72÷ç"Ä2Ņâ¸543âŉ.Ĉĺ4ŕ÷¦$Á

÷#?NWc©w4

"3ń®¾üö¤|ő

16K14887 $ÎÌ6ī54.$|$3Á%ņ# 2 EHJlc$E\Z`FŉĢ{Æó²¾R]=ZWh¼

ĳ

Úćď%ÑŎĊ¤ĆvđĪŚ9NS`BY^©w43Ï©w43

3$X;MDW

4. 

oryzae RIB40 $?NWŏ}#¨zVHP^=6ī

Ōn¢;EHJÖ1

g7©w

ê-143Ó"Ŕœ DNA ¾ÃĬ Minimap2 6þĳÜ%Ė 10 kb $E\Z`FŌn¢;EHJĞįÐ$Û DNA Òõ6ŊěŔœ DNA

Ö3

?NWcE\Z`FŌn¢3

?NWc$a;Á#Ð3xŔįÐ@P`$Ōn¢

43

č%ĆĂ3µ14Ĥľ" DNA ñï6þDNA 8Z9X^JI`\

p$e¥¦º$ō#Ĝih¼"âŉ

1$ DNA Å{íĹĘ#ßĵ$ăĭ%ęj3&Ōn¢©w4/143

Ş Řö6+"Ĥľ" DNA ñï6ļĮ3
·İ3iĔøħĘġ

#3r

:<>/.

;&70;CLP$9QAKGP;"0

VIR@WJLN?FUBTE;%0ą}#VW+6=#8($9230 kb ±$«"âŉ6Ŀg}æ
1©{$%)*e28

';"0V

1WOSHDMUQAKGP;"0V

2W86+* 453 !;,0Ĕ  ØáĀýµ¯|ª| U_RFLŐ���������������������Ę  1*Œà Ĉª 2

1 UkPħĹr@Gm\BDyéņ»û ēŅ 3

2 âªŎrĻĀĎļĪ ģ 1ªŔ Ä 43 Ļċïìrw«Ļċ

4 UkPħĹrT-`oqSA@ņ*470-0201 ÉĊĉ28·Śĕăxå 1099 Ą¢ UkP \BDrĝċĒÌ őĳ: 0561-36-8416
Fax: 0561-36-8469 E-mail: madoka_yonekura@mail.toyota.co.jp

� [��] ������������������������ SWEET�Sugars Will Eventually be
Exported Transporter�����������������������������������
������������������ ����������� AtSWEET12 ���������
�������(CaMV) 35S ������������������������������� 10.2mM � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � ����AtSWEET12 �������������������� ���� CAB1 ������������
������������������������������ ��������������
���������������������������������������������
���

1.� ����

ŀĆÿ;bohsPs*$%èıĀĤō²>ń$$ę>:ĦÇ>Ò#"çý+Êāý&;ęŘśKję

Tqbq

NnosL)(Ŝ>\BDblLQRF6\BDüÖ+Ö'%Ă;ŏ*,đ"çý9+'ÔòrÏ6đý+įrĆŇ)(Åĭ&; 

1"

ęŘ+įrĆŇ*,ÃĀýķ6K

ję

GnHsL

1

"#%

`nFUsL)(+øÇęÝĜć*:'Ħ*)<öÍī*$);'Æ=<;*çý9øÇę>œČ§&ĿĬľHLU+

&Ë

%&

$

,<1&

ęUlqLdsPs+tĐ&; SWEET�Sugars

Will Eventually be Exported Transporter� [1, 2] >Ă%ĨěĠ+ę>Ěĥ¨ś@dblLUŜ*Õ
<>

 

Ĩ+ÐñÿĶ [2]>Ă%@dblLU

9çý¨*Ðñõ'%Ð;'>Ĳ2

 !
$(#" 
SWEET$ œ¡ 1. çý9+œČ§ę:×ô+ëĭČ§&+ę:*Ê"ś¡ 1Ŝ[3]hTnçýKoBYWMW&, Clade9*

2.� ����������

Ř<; 17 ĐŘ+ AtSWEET Ń}®Ċ9<; [1]w&5 Clade*´; AtSWEET12 >Em`lps(1) ěÓ+hJBFCBnL(CaMV) 35S bohsPsÂu&ŀĆÿ;'

Û5řúº+ęśę½Ŋ&¹£ 10.2

Ćÿņ~6Ùß

ĆÿŊą);'Ģ9<;

4

mMŜ>3ÐñõÁ9<" +ŀĆÿĐŘ+bohsPsśFooblLU RNA dmgls

& AtSWEET12 >O>HsV; AtSIG1 Ń}® KjęUlqLdsP&,ŗĩ)ĀĤō²Į9<"29

s>HsV; AtSUC4 Ń}® ŐÇFoo`AnP

Ps*8;ŀĆÿ+ĀĤ,q]Fĸ+IaiXRU>HsV; CAB1 Ń}®

#"ś¡ 3BŜ^sUKjRFPq]Fĸ>HsV; HSP18.2 Ń}<9+'9

AtSWEET12 +KoBY®+bohsPsŜ>Ă%ŉĀ¤'/0Ė&

bohsPs+łÎ,Ðñõw

+ęúº6ŀĆÿ+ĀĤ*¼¾ŕ;ĭ

WMWŀĆÿ>"&;'=#"(2) Ðñõ+Ñ'ãçý>blLQRF\RU*v.
;Ø+ÚßŌ­* 2,000
õ&ùñ¸ň[BdZRFL

÷º>ř$"4*lRb`Anf>"ślRbô

Ðñõ>

¡ 2AŜ ġÞlRb`Anf>¨Ĩ+Ğ*Ā"Ðñõś¡ 2BŜ>Ľ6*eBF

o_cRU*8:Ðñõw+ęśKję

G`nFUsLŜ> HPLC &°Ŋã"nHsL¡ 3. Ðñõw+ęúºðĺ(A)'ĀĤðĺ(B) ***WTśŉĀ¤Ŝ*³%ÜÈ¶:(P<0.001,Mann-Whitney U-test)¡ 2. ÐñõÑ×ô(A) 'Ðñõ(B) +í®

4. E_Zg
3. {i|Y áÍī,çýÊ"ę>=7;î:
AtSWEET12 >ŀĆÿ;ÛŁbohsPs+èı

;Íī&;"4 Ćÿņ~6Ùß$ĆÿŊą);'Ģ9<;

çý+ĀĤō²>êń$8:©+ę>:'ĵŖ');AtSIG1 AtSUC4 CAB1 HSP18.2 + 4 ĐŘ+bohs")

Ps& AtSWEET12 >ŀĆÿ"KoBYWMW+

įó+ŋ'):;'č<"Ĩ9lRbô*8:Ðñõ>Ñ%ęúº>ãPs+ÛŁ*%

"

þÇ

ŉĀ¤+KoBYWMW+Ðñõ*,Kję

áċĒ*8:bohsPs+ÛŁĵŖ
zÀ

bohs

ę+ÊĦ6ÐñõÑ+æ¥HLU)(5%8:¬Ł)çýĐ

1.9  0.8 µM GnHsL 2.0  0.3 µM `nFUs>ł°%'&L 2.1  1.0 µM <9+İ&, 7.9  2.0 µMśĦ'):

8:řúº+ę+:±Ă*ğ;'ß¿<;ęÓėŜ+ę1<%" AtSIG1 AtSUC4 HSP18.2
bohsPs>Ă"¦

M|cq


ęúº,ŉĀ¤'ďº& ŀĆÿ+ä,Į9<)#" t× CAB1 b
ohsPs>Ă"¦*,
0.2 mM

GnHsL 1.8  0.4 mM

 0.5 mM

[1] Chen, LQ., et al.: Nature, 468, 527-532 (2010).

<!<Kję 1.1 [2] Œà Ĉª {.: ¯'Āý, 56 (1), 33 – 38 (2017)`nFUsL 2.6[3] Singh, S.: Aust. J. Bot., 61, 497-515 (2013).

İ 6.6  1.2 mMśęÓėŜ+ę>

[4] Ę  {.: Āýµ¯Ĵ, 96 (3), 129-136 (2018)?&:ŉĀ¤6{+bohsPs*8;ŀĆÿ
8:5řúº&#"ś¡ 3AŜ 1" CAB1 bohs30ĕ  ÖÜĀû·¬pªp KQH@Eő`_s7-/.46<9¨



小林 洋介 1, 藤森 一浩 2, 西島 拓人 1, 杉本 直久 1, 藤野 尚人 1,今井 史規 3, 金松 雅俊 3,
山田 憲治 3, 荒井 進 3 , 吉田 浩爾 1, 佐賀 清崇 1, 泉 可也 1
1(á)Biomaterial in Tokyo, 2 āğċ\ĀûRZFE, 3 `RX[KC]PE (á)
277-0872 ĥĈà¸ti 572-58 œķ: 04-7135-5201
Fax: 04-7135-5201 E-mail: kobayashi.y@biomt.onmicrosoft.com

 ¯061vW'*_ (`_)7-/j£hRpI7-/82=)`_M&¨La®)«\+Y)'* Xylose Tn"`_A7-/82z

Ethanol Q+c) Xylose + Ethanol XhR¨d`_' Ethanol +T$%IU¬

²%²

e?Rx)q)f+gM;¨rCw+

VFH¤|{+`_+MbXylose +¢M­h¨
yW°+ 1/10 ©K¨+#Glucose '¢M

Ethanol +!,¨ªZm pH + 5.5 B>)Ethanol

)





G 'C5C6 Sm¨§D[h¨y+¨





R)

±+uGlucoseP Xylose !,+ 72 h BF~¡E' Ethanol XhL 90%B>J¥
q&(`_39:<2.46<9¦Nj)
1. %

+H%l'

¾Ŗ2ŏ±ûĿ#,;GM]YąňŒ
#Ă"Ŏ3*!ċēń7 Ł¹# CO2 ÎŊ¦!

!

*¼Ĥº$k#N9<UE"ë' Xylose#ÿ¥²ėĕi

elN9<;GM]YīłĨ53

1

2ò¨$#ÙüŚ

,Ś

Ethanol ü6Á2"$

ĕ^elN9<;GM]YīłRX[K#ĳ{6uĂXylose 6 Ethanol "§Ïģ!ąňÂĀûÃĭcèÛĂN9<UE6ªįæ"ő\ŅÐ2ĹņBEK6qõĕielN9<;GM]ð"!

Y6īł

}#ŅĂĶř6Ĩ¤ŕĒ´2ÖÜ$^ă½1#
"

]YīłRX[K(7
#/

2#/

!ĸŗ"²È$eĄ$g2ŃĞíĦìúČĪĠ6,³
2[1]Üċē$¼

ĕ^elN9<;GMĤº0 Ethanol 6Āā2Ëĩ#čĔ6ćÍĘ

đ|

\ąňÝn#ãı6Ĩ

!

,

!ò¨#DEIV6ŇĂ2!



2. t5<4&k}#,N9<;GM]Y6Āā2,"$­¯­x"őģ!N9<UEľ÷#čzŉĭ!ĸŗŃĞíĦìúČĪĠ 20010 min ō#Ýnþ

2

¼Ĥº$ŘĂ>MBĀā"-!
[éöĀ[EK]N]¼Ĥº6~Ęù» 120 g/L ma"!2/¹ōÒ_K2 [1]¼Ĥº#gÔ$B]

6Ĩ

36Ă

1ŉŊS]E 50%Đ»#TZF

YZ]E*3

3. u]20ĕielN9<;GM]YĀā#ÔŚģÅ6ď,

¼Ĥº"©*32Ę2(1) pH ĹÓ"/2ąňŏ±#ŀõ/%ąňü"31"Ę 38ąňĶř6ĨąňŌ«# pH  4.55.05.56.0 "!2/ĹÓ¿ŔĜÏ

 2. ĜÏ

"ąňĶř#ĝß (C15 á) 38ąňĶř6Ĩňê6Ă

#ĝßpH5.56.0 #C[RY$48 h m

ma#ĝß0¼Ĥº$ŏ±ûĿ6©+,"()~Ŋ# Glucose 6óļEthanol 6Āā2
ģ

ňê6Ă

ÀÞFYZ]Eę;GM]YĀā"$Ň

26×0" ( 1)

ġ


!

03Ethanol 6Āāģ!ÙÚ!Ô26$,×0"

4. @b^o Üċē$¼Ĥº0N9<;GM]Y6üĆ"Āā2ģ
Õ!ĸŗ-Į26ĎØ"ąňÂĀû"$

pH5.5 6¥"Äø"ąňÅģa2$c×
1#ýĻ"Ŏd2¼Ĥº"*32ûĿň 1. ąňŌ«Ø pH #ąňÅģ&#¾Ŗ (48 h)

ê#ŏ±ûĿĢÅ Carbon catabolite repression
#Ŏy6×0"2Ãĭ#ĝß0¼Ĥº6Ăąň$ pH5.5 maFE"

2ňê$ pH5.5 mb-ąň2Ċ03

$jĨ¼Ĥº#ąňRZþ (úČ)Ý

n$C6 Ę6©2C5 Ę6,~Ę#"2Glucose 6£Ŀ2;GM]Yąň
ģ

24

ü$..q2,[2]ňê# pH

ŔĜÏ#,ĜÏňê"ŇÝnňê"Ň~Ęü#ÆÅ$!ąňŌ«Ø# pH 6Ś2"/Ś¼Ĥº"*32s0#ŏ±ûĿ#¾Ŗq

0"EA]Y8HRĶřĖ#°Ă"ċē"õ32-#ġý

032

úČÝn#úČÝn"ŇĘňě#ãı1Ĝ7

24

2

N9<;GM]Y"Ŏ2ċē$ŋ¹ā¬®Ń(2) ĜÏ

ňê6Ă

 C5 Ę0# Ethanol Āā¼Ĥº6Ô2;GM]Yąň"Ø# pH ŉĭÑ"/1©#oäª¬ċēçŎń,03Ō«

°Ă"ĝ%

21°Ő"¼Ĥº0Ethanol 6Āā2ģ"!ĜÏ
ňê6Ă

ÊvĂĜÏÈ$3*­¯

N9<;GM]YĀā#hä"+ċēŌą Xylose 0# Ethanol Āā#ãı"ĉ%ÿ¥Ó{6ń,ňê$ Xylose lĺňě

Xylose isomerase 6³}ĀÇû#Āā6Ì

w$µ!

"¢Ëĩ6őĚ"2*aĲ#//!ĸŗ6

ŎyÉİîā¬®ŃÑ#WJYA]á

E"!26ćÍ

2Xylose 6+Ç¢¡!CK:>PN=E6ÔØĘfĨĬąň"-~Ę0 Ethanol &#§Ïü$ 90%ma6ņÇ-#

2[3]#ĜÏňê6Ă

 Üċē$N9<UE;LY?]ËĩċēŌąśFY

2Z]Eę;GM]YĀāDEIVğŌą°Ĵhäśå"ąň

OYR6Ă

íĦìúČï"/2N9<;GM]YĶř6Ĩĝß¼Ĥº"*32()~Ŋ#Āā"Ŏ2ËĩŌą

Xylose 6 Ethanol "§Ï~Ę0 Ethanol &#§Ï2Çß/%häÅĵx (NEDO)"/2

ü 90%ma6ņÇ ( 2)

Oi
[1] rĽ ô¶k.: ĕ 26 ÖÜ;LY?]¬pªp,(2017)[2] Neelakantam V. et. al.: Appl. Environ. Microbiol., 71:
2239–2243 (2005)[3] ħâ ^ñk.: ĕ 68 ÖÜĀû·¬pªp, (2017)32đ  ¤ÓÙüø¹±« V_SGNŏ���� ������������
�����������������������
»ćĹŚqx¶Î¬Śq¸·Ļ q¶ņµ¯ qÿ´ą qáŎüśqu£ħ²ÏŜ
ŘŚ ýĜċś ā¹Ŝ íĞĉ¹ÊO

ŝVo_DmTG[akNř563-8577 «Ō½ìÿºĝv 1-8-31 őĶ: 072-751-9522
Fax: 072-751-8370 E-mail: y.tokiwa@ aist.go.jp

� �������������������(R)-3-���������������L-�������
L-��������������L-�����L-�����������������������

�������������������� PHB ����������������������
����-����������-L-���������-L-�����������

1.� ����
×ľĤ­h?GoakNRSGëÞòðüÇĖ-*&$ïĈ9$8

WoEMłńŘPHBř+Ãüø8gl-3-^òð%3Ĳ4üĲÆakNRSG&$Ċ69$8



Ãü

ø8 PHB 4*Ņ+ ÃüøĀÛ*tėø;1('*¢Œ¼Ö$(7Ø Ď!+ íĞ%Ő9 Halomonas sp. OITC1261
ß;þ$]?oSVNIrm%üýŖė¾)Ĕ

İ9(R)-3-^WoEMłńŘR3HBř*þĿŉă;ĭ"$8ŘR3HB + PHB *âÈ%Vo_DmTG[akN;įà&$
¹

ňč\?C

¥Ś(R)-3-^WoEMłń;þŅ

8ř[1]
ā

{ń4HlJrmń+ α-^WoEMń*sď%z¹«* 5 åŋ%Hlrp

ýĜċhTl>müýÊĮ|à

;¿È

Ē*È

ÊĮOpQr&% R3HB 6*åĢÆäģ åĢBNTmĚ6(8ùç(glBNTm%Æœ¡qē¡('*ŉă)7ę<%8l{ń

R3HB +üĲÆakNRSG('*åĢÆäģ*
Ð

%(

Ëüøĺ4ĩ¡*Ð%3

8/ R3HB +^V*Ĭóx)3»)°¦8Ņı(BZmFrô*s#%3
%)
±È$

L-

3HB &*Ņ

4gl@nQp;

{ń kOi

ŃĘ4òé

g

glHlJrmń5,*wĠ*Ņ+%)¹àüý9$7akNRSGĘÚ&

$

%(
sĦ)

HlJrmń

8Ìĕ($35ÉĮþ*ĕ('&$Ăņ%3¼þ9$8

8

R3HB ;yÈ&8

7

96;Ņgl{ń4glHlJrmń+ α-íĞĉ¹àģġÒglBNTm+l]rP)57Ĳ

98[2]

gl{ń+l]rP%Ĳ9

T?XrP K

ñÆëî;þ$96*

ao

BkNQrP('*OlpaoT>r

P%Ĳ98[3]ŃĘ)58ĲùÆ6+gl

ĲùÆ;ĲÕ$Ř¥Śř *ĚÝ òé4ñ{ń+>kYp4HlMp;ª1ěĕ4BkNRÆëî)58ĲÆ)9p('*ĪĄĺ)$8&ğ698

h?GoakNRSGë

>kYp&

HlMp)±âŀ³Ä8 α-^WoEMń{ńÞ*ōæ)ÀĐ#&Å:98ĘÚÂ69&;¨Řđ 69 ¤ÓÙüø¹±«ĸöıÔŏ 2P-J196ř

&HlJrmń%

33

8

 }¤
p

`AYm>kYp

o?Mp

© ęÈè 95.2:4.8 ¯Ň Mw 8610 *Ņ

VlaV`=>N]kFpń('*>i[ń*±âŀ)³Ä8`AYm{ńo?Mpń

?pWrm{ńpKń('* α-^WoEMń)ïĈ$Ņ

5,úŅÂ69l*±È;ĭ

α-^WoEMń*úŅ

sÑ

&$

gl L-

`AYm{ńŘMw 8180 Tm 47.4ř gl L-o?Mp

R3HB &*

ńŘMw 6800 Tm 119ř gl?pWrm{ńŘMw 1780

96

Tm 130ř gl L-lpKńŘMw 8220ř5,gl L-*ŃĘ4òé)58ĲÆ;ĴŘ¥śřhpUmńŘõ®tõřÂ69(2) ŃĘ)58ĲÆĵŕ
PHB ĲŃĘ+
Ņ

)³$

oT?XrP K +

jm~Ľ0è 90:10 *99*ŖĲÆ;ČŅa;.&<'Ĳ("*gl L-o?Mpń&gl L-lpKúŅń)³$ĲñÆ;Čp+

α-EjVlaMsÑ*gl L-`AYm{ńúŅ

gl L-o?

Mpń5,gl L-lpKń)³$èļĆŖĲ
ñÆ;Č
¥ś R3HB &-^WoEMń&*Ņ9+ α-EjVlaMpĪĄĺ* L-`AYm>kYp4 L-o?Mp*DmfEMm§**ÈdaRWĚ;8&&ŋ

8&ğ692.� ��
(3)òé)58ĲÆĵŕ(1) Ņòé)58 27 3 ŁŊ*ĲÆĵŕ%+ ŃĘ)5

*±È&øÆĴ±ė¾ 99ŗee *ăŃ R3HB &ď

8ĲÆķ269gl L-`AYm{ń&gl L-o* α-^WoEM

ń; p-VmBpNmepń;ĳ®)þ$

VmBp?Mpń*ĲÆ+ķ269(" R3HB &*

x%ĥéŅ8&)57Ņ

Ņ

Ņ

;Â

*

+ŖĲÆ;Č¯Ň+ 1,1,1,3,3,3-bEL`mCo-2-ao][rm;Umń&*Ņõ®& GPC )57üĲÆ;ČŅ(2) ŅŅ*ęÈ+

ī÷+ DSC )57ê2

R3HB & L-hp

glDaokGVp&Ē*

NMR UrQ*ĲÜ)57ê2

4.� R����
�*üĲÆ*Ĵ*üĲÆ+

ĲŃĘ[4]3/

Streptomyces sp. MG ß* PHB

aoT?XrP K

R3HB ;crN&ď α-^WoEMń&*Ņ

α-EjVlaMp5, BOD TNQr;þ$òé)57Ĵ+

R3HB ;crN&gl@nQp&ã)òéx%3Ĳ4Ŗ¯ĘÚ%

8&Õ6

)("$

3.� �����

}Á

òé%*ĲÆ&&3)þĿ)Ä$ê2698øÆ;3"ĘÚ*)ï8(1) R3HB & α-^WoEMń6(8Ŗ¯*Èjm~Ľ0è 90:10 % R3HB & L-`AYm{ń5, R3HB & L-o?Mpń;Ä©
ęÈè 91.6:8.4Ř¯Ň Mw 3600
90.6: 9.4Ř¯Ň Mw 11600

�����

99

Tm 118ř ęÈè

Tm 119ř*Ņ[1] Yokaryo H, et al.: Biotechnol. J. 13 (2). DOI:
10.1002/biot.20170343 (2018)

Â
[2]

69
/

R3HB &?pWrm-3-{ń5, R3HB &l

pKń;ã)Ä©99 Mw 2880

Mw 8070 *Ņ

/

Â69

[3]

Tokiwa Y and Suzuki T: Nature 270, 76-78 (1977)
Tokiwa Y and Calabia B P: Appl. Microbiol.
Biotechnol. 72, 244-251 (2006)[4] Calabia B P and Tokiwa Y: Biotechnol. Lett. 28,

R3HB &ĨŔû;Í# L-hpUmń;jm~Ľ0è 90:10 %Ä383-388 (2006)34� �� ����������� �������
����������� ������A������� � � � � � � � � ������A����������������������� �� 1���� �� 1���� � 2���� �� 3����� 2,3
1� ���������

������

�654-0034� ������� 5-8� ��: 06-6317-2219
Fax: 06-6317-2219� E-mail: masaharu_mukoyama@shokubai.co.jp
2� �������������

������

3� ������������A�������� ':D/= Target-AID 5

Clostridium saccharoperbutylacetonicum

ATCC27021 @C4.9AC4.9?$+8*#!)3 79mol%<1%.
"4.9?$+&#!6B-<1%.

8*



"4.,>7







������

������������������� n-��A�� n-��A�����A���������I����������������������������

��I�������������I�������

����

ABE

������������������������


����I�������A�����A���ABE���������I���ABE ������A���

ctfB



���������A�������������A



pta



�������������

pta:phospho transacetylase
ptb1:phospho transbutylase������ n-��A��������������

2  

53 → 85mol%�������I���I������������
������������������������



ptb1

������������������������
�����������I n-��A��������

ABE

�������������

����������� ����������� Clostridium

Target-AID �����������I������

saccharoperbutylacetonicum ATCC27021 �����

A���������CRISPR ��������������A�����A��� 3:6:1 ��������

�� g-RNA ����I CAS9 �������A���� ������I GoupII �����������

DNA ���� 2 �� DNA ������������

������������� pta ���������

���I��������������������

ptb1 �������������� ctfB ������

�����I Target-AID ���A��������

��������� n-��A�����������

��� dCAS9 �����������������

A���������������� 2014 �����������������A� DNA �������

����������I�����[1]�

����� 5’�����������C����A��

���1���

2017 ��������������I�A�������A��I�����U������������

���A����� Target-AID[2] ���I��� pta�������A� DNA ������I����T��

ptb1 ���������������I�����[3]�I������������������ � � � �35

Target-AID���A��

2<

75.0

(C) 3&)+?65-=T>(')+;070.0 mol%� �:%78 = />T A G C A T G
T G A CA C T G T C G T A C.4# $,9"*1
Target-AID

65.0

60.0
55.0
50.0

+ 

2<

!1

1

� �
P148S � G155R ���������A������

CHCQ= >MJ/1?OCP5 #"6+5GMQ3/1 /1 2(.;

���������������GroupII �����

30KERQ

���A��pta�ptb1 �������������

-NH2

���A��

AON*!2:
 CG
↓
Clostridium saccharoperbutylacetonicum
 UG
Corynebacterium glutamicum↓DNA
Brevibacillus chosinensis

Target-AID

90.0
80.0

 mol%

 UA↓DNA
 TA 



@PELI26-79,$& 54<8 )%26 $)%' BDHF?Q

100.0

70.0

60.0
50.0



40.0



30.0

 

20.0



10.0

 

0.0

������������������� DNA ������A������������ CRISPR �������������A�A������� CRISPR� ������������������������

������������������ ctfB ���A

Target-AID �������A����������CTFB ������ P121L ������������

������������������������

����������������������

������A��������� �����
45/����������� ���������
���� Clostridium ��������� pKNT19 ��

���
���

45��

����
���
�����
�����
� ����
����

����
���
�����
�����
� ����
����

�����
���
�����
�����
� ����
�����

��
���
�����
�����
� ����

���� Target-AID ����� dCAS9-PmCDA �� �

g-RNA �������������A�������

������

���������������������A������ Target-AID ������A��������

������������������������

������������A�����������

������������������������

������������������������

������������������������

������������������������

����������� g-RNA �����A������������A���������������

��������������A���������

���A������

������A�����������

C.

�5��

(;02

saccharoperbutylacetonicum ATCC27021 - pta �[3]� Keiji Nishida, Takayuki Arazoe, Nozomu Yachie,�Target-AID ���� PTA ��������A��

Satomi Banno, Mika Kakimoto, Mayura Tabata,

R311K������A��������������

Masao Mochizuki � Science 2016:Vol. 353, Issue

�A����������������������

6305, aaf8729�

����A�������������������

[1]� ���������������������

������A�����������������

��������������

���������������������� ptb1[2]� ��������������

�����������A PTB1 ������ P148S�

���������

G155R�V251I ���A�������������

36

2014

2017 �����

Ĝ 70 Øãāû®¥i¡i FNC:>ř������� L-theanine ���������¡Œ ĭĊ*\ç ²Þ\ĄĈ ¸ĉŐK69\R&I ?[A]
747-8522 ­ĎŖ³¯Ć ŜŅ: 0835-22-2518
E-mail: syoto.ohno@kyowa-kirin.co.jp

� L-theanine (������) ���������

��������������������������

���������������������������������������
���L-glutamine (���Gln) ����������
�������������������

��������

�����������

����

�in vitro �������

�������������

���������������

������������������������

�������������������������������
������������

���������

��������������

�����������������

������������

��� L-glutamate (���Glu) ����������

������L-alanine (�����Ala)�Glu �������������������������� K-12 �����
����������

�����������

�����������

�����������
���

����

���

���

1. ����

ð0

/[3]

 D5I[#īı"ÙÆxĐ-0/;YAS

2. ��[őŇ«k"^ė.řa}_è+XWC:ŐĢð">èÂďèÛ±àŘ©Òèĝ"lăŉ20/ÿv

0.1964 ±!#ØãţôûË§

Pseudomonas ¬ Ĥ Ĳ "  §  Ĳ k 3 ărµţĢämă0íį

/Ü*ýċ

ķŎÖð/jķŎ®ĖÏĉ8BY5S[Ĵîlì/

" 1 Č#Éwð.D5I[3Ý/þŝ+Ā!Ä¹Š3"āĂăı!

_3Čċüy

¼-0/ıĳcúû

/ķðŔĉ0/[#ıĳcúû.2-¨ăċ#

1.5%{ºŁsÀĹ!

/ĝ"š

/[4]

ĵĘ0
ķðĝ

/ýjáÁÔ+|āÆû"ó÷ò
ùŚ/0

%įÃ.&Áý

/[1]2 ČÝíÆð.QPBGÆ3ă
Ŕĉ0

-Éw

ãķð#D5I0-ČċāÆû"xśğķĝ!

Ñl3ÀĹ/[2]3 ČŐĢ3ăšËÐ0/ķŎð/8BY5S[ Gln 3Ŋ! γ-glutamyltransferase ñÃ3Ý/ŐĢ(glutaminase, γ-glutamyltransferase)3Á
/

ãķ

ð#ô/8BY5S["ïø 16.6Ş°!

-Ăìć"ŕ¿#Ŧ

0&!ĸÓ"ķŎð0

glutaminase Á!,/D5I["āĂÿ0
D5I[#"ü¾ċGln 8BY5S[3Ô!

 *   # 8 B Y 5 S [  Glu 3  Ŋ !

γ-amidation ñÃ3Ý/ŐĢ(glutamine synthetase, 1. D5I["e®ÆĦŋ

γ-glutamylmethylamide synthetase)3Á/ķ

37

3Æ/Ħŋ3Å§in vitro  ATPÇ#ĠgňÆ0/5?F5YEL,$ PLP

G"5SJ!,.8BY5S[3nĨ/Ħŋ3z

5SJn`k Ala5?F5YELGGlu 3¡İĲ

ăD5I["čÍĉŐāĂ3Įê( 1)

ĥÎĉÿğķ PP_5182  Psyr_2273 ó"Ħŋ!,.8BY5S[3nĨ/

ÁāÆû3xæħèD5I[

8BY5S["ô3ŏ//&"ĵĘ3Ēņ"e®ÆĦŋíį/ŗ;Y<]>5[UI53Ô!D5I[3čÍÚ-ĉŐ/!,.¦p(4) ¡İĲ!,/;Y<]Y//ĮŦġ´

D5I[3āĂ


-"D5I[āĂëĿ "D5I[e®ÆĦŋ!



Ŋ

/5?

F5YELGAlaGlu #¡İĲ"gňñÃnĨ

3. }f/¡İĲ K-12 é3ªb!Ġ

(1) 5?F5YELG→8BY5S[3ļ£/5S"ĉŐāĂ3ń'&5?F5YELG"nĨ

JōĕŐĢ"Ìģœ3/)5?BY CoA5?F5YEL

5?F5YELG3Ŋ!8BY5S[3āÆ/
5SJŐĢ#GŧCoA "Á3Ê

acetaldehyde dehydrogenase(eutE) 3&PP_5182 "5SJn`k Ala "n)5YELGâě
/ ω-FW[>5SH

35SJ/Đ-0

-"D5I[

Ĩœ3/)NYM[ő→Ala "Á3Ê]@3qĶÈß"Á3ļ£/ŐĢ3ÌģBacillus subtilis ąå alanine dehydrogenase (BsAld)

1Pseudomonas putida ąå" PP_5182 ã"ĉÿ¶3¨×_ŀ" eutEÁ3ļ£/Ú-

&PP_5182

#5SJn`k Ala 3¢(*x,$ BsAld-!D5I[āĂ!ŕ2/ PP_5182Psyr_2273 3P

(W>SG_ĉÿé3Ġö3;Y<]>

2)

ńťĞŤ1D5I["ĵĘĒņ
0&ãé3=V]O4]T[A]!








fed-batch Ť3¨×120 g/L h_"D5I




["ĵĘĒņ0





  



4. Dnh{





 ãđę#D5I["Ŋ/8BY5S[3



5?F5YELG"5SJ!,.Æ/ÕĻe®





  

ÆĦŋ3Łľė¨ť"ħè5?F5YE




  








 







 2 PP_5182 3ă

 





      LG"5SJ3Ê

5SJFW[>O7W]@

PP_5182 3ĺw!Æ~ĥÎ

8BY5S["Æ¡İĲ!,.

;Y<]>3Ô!D5I[3āĂ/
(2) D5I[ÆŐĢ"ÌģãĦŋ!,/D5I[āĂ#Ŋ D5I[3Æ/ŐĢ#8BY5S[[ô"ÀĹ)»å"ķð,.*¦uş\$ Glu<>Fşt0/Į- ATP o ¤ ċ ! D 5 I [ 3  Æ  /Methylovorus mays ą å γ-glutamylmethylamide!

synthetase (GMAS) 0ķð"-å  Glu/[5]ãŐĢ#ã/đē3ĩĪ T B Y 5 S [ 3 Ĭ  UuĢ.½āû!

[1] üŔ 2007-008865/Ľ20

-0/·Ĕ#ãķðüłwŢõ'.fºdì!ã

γ-glutamylmethylamide 3Æ/Á3ļ£/Ő

"Ŧ

/8BY5S/ĚĢgň"^Ō3Ê[2] üŔ 2006-083155/ãŐĢ"RUZ;ñÃŐĢ3Ìģ1Pseudomonas syringae[3] Mu et al., Biotechnol Adv 2015;33:335-342

ąå Psyr_2273 ãÁ3ýċ!ļ£/3ĺ

[4]

w

[5] Yamamoto et al., Biosci Biotechnol Biochem(3)D5I[e®ÆĦŋ"Łľ ãëĿ!

3ă

$ in vitro "ëŃĺw PP_5182

5?F5YELG

2007;71:545-52,$ Psyr_2273,$ GluüŔ 2009-225705

-D5I[

38

Ě  ÏÙāú¬§q¤q HPF;AŞ����������������������������
��������
±ÌÚ 1`įkÒ 1`İŗē 2`ï¦ 3`ĕìj 3`ōĴÑ´ 1
1 Ē¿¤§¤§ŜĔ§Áķ6KSa@Y_čĘĔ¬§čĘĔ

2 Ē¿¤§¤§Ŝ
3 ÖßÞ°qđĨčĘÀ

657-8501 Ē¿®÷{ąĆ 1-1 şŁ: 078-803-6462
Fax: 078-803-6462 E-mail: zhangsilai@people.kobe-u.ac.jp

�� (Aspergillus oryzae) ���������������������������������
����������������������������� ���������������
��������������������������������������������
�������������TCA ����������������������������

��������������������������������������������
��������������������������� (Mpc) ��������������
�����������������������������������������

������������������������������������������������
������������

1.

����

ŉ$

î03Â/,/iŕāĂ»d3ĉÄ&iŕĦŉ3²/iŕā
 Ŧı!G_R_ľŔĢ5VZaC3¤ŘêāĂ/àúM68UA-

Ă3ÔťāĂ/3ŀ'b/G_R_ãúňāĂă0

2.

/¾!0&����������

ÝŤĺè»Þ A. oryzae NSPlD1 Þù(Bos taurus)
BtLDH-Dpdc Þ3©hÞmpcA  mpcB

ĄÚ lactate dehydrogenase (LDH) őr¦3«z7D
Ka\ā½Ħŉ(PDC) 3Ď¡100 g/L <\>aA
g/L100 g/L G_R_
/[1]

_?ŕ>L;ŕĜ
)P\O_ŕ/- 42 g/L

ŝTCA ŉ×äŕ

3²/)B. taurus ĄÚ-ġ 49iŕāĂ½gŚoŅĂú/[
āĂ*ł0

VH>_I[5$¹ĺ/Īî03Â Ŕæ!P\O_ŕ

P\O_ŕ:X[5D_

N;"0/D_N;ňĹu,.VH>_I[
5Ő"0

.(Mpc1, Mpc2, Mpc3)
Wg

-j

Ăú3 MpcA
0-

Ĺu

c

-â½0

mpc őr¦Ļ

D_N;ň

/[2]Ŧı=K.00,# MpcB ÙčĘ!

őr¦3åÈ/P\O_ŕüĎ¡`jŖĎ¡Þ3v½&iŕāĂĦŉ

P\O_ŕG9\T:@ZaC

TCA

39

LDH (BtLDH) ,.

í»iŕı (Lactococcus lactis) ĄÚ

ť

LDH 3

,.ýĈ¢>aIőr¦3Dpdc-DmpcA Þ«zâĝÆ0

 Þ 3 CaCO3 3  ( YPD   (10% glucose, 1%/peptone, 0.5% yeast extract) Ť00

/Ŀ

<\

4. Ic_t>aAðņŘiŕ`×äŕāĂŘ3 HPLC Ń%



3.

y^

þ£

Ă

á`āíśŏĸ(1) MPC åÈČéĠv-0/iŕāĂ

 BtLDH-Dpdc 3©hÞmpc

üĎ¡Þ3v

ĸiŕāĂ3Ń%1mpcA

üĎ¡Þ

.0ÿòÓã! 100 g/L <\>aA-ġ 81 g/LmpcB

üĎ¡

Ā

$

Þ!ġ 67 g/LāĂďł0(Fig 2)&<ñ¼º00o2.àúŇó\>aA

iŕāĂ3ĐDmpcA ! 100 g/L-ť-ġ 61 g/L

G_R__µš

ĭŇó/&ªÚČŇó-v-0/M68[Q46J[aiŕ3āĂ

ŝ

mpcA Ď¡,.[_?ŕ>L;ŕ#œŕĳėË.Ğŧ5VKŕŧĮīŕoŅ

Ĳte

mpcA Ď¡,.

P\O_ŕ

g 20 xpdê0

(Fig 3)pd

Û-mpcA Ď¡,.P\O_ŕ$ŊŎÂ0P\O_ŕ

P\O_ŕ

VH>_I[5~āëĉ0giŕ!ŖĺM68RZAEF;

f/oŅĦŉ

ħ%śl­øsĩ/Ŗĺúň/-½0

.ľĞĠ/Ŧı!¥ç»¸āúÕĤĂú/P\O_ŕ

VH>_I[5.Ō&0 TCA ŉ,.ŕ0/ģĬň}ĳėiŕāĂýĈă0Ī

/

Ü

-0/

ÙčĘ!P\O_ŕ

VH>_I[5$ŊŎ3Â/,.<\>aA+àúM68UA
/G_R_
¾
-

B\ZaC

úňāĂ

¦ĥ'Æ
í

ťāĂ½&čĘ¨!àúM68UA/ 3 Ėţ
ň-iŕ

3ă

B\^aAāĂľ¹ĺ|ťćþ,/B\^aAĭŦıbť/[3]m·őr

D_N;ňêĭ

M68UA

-

3

ĊÅiŕ

Ø¶0/&P\O_ŕVH>_I[5:X[5D_N;ň
ň/nåÈ,/P\O_ŕ3ćú×ăú

68R^BAťāĂĉÄÍļM

řć*Ø¶0/Ņŋ(2) iŕĦŉ²

 0&!ŔæťiŕāĂ»

BtLDH 3Ŧı«z
āĂŘ

ďł0

/

ÙčĘ!ÊŒĔ§ċyęĵŢ6KSa@Y_MpcA Ď¡,.iŕÃø³½R^<ZW

20 xpdô0



/Ī

.í»

LlLDH 3>aI/őr

ť

iŕıĄÚ

Qn


-i

ŕāĂĦŉ3²/¹ĺ

/BtLDH ,[1] ěw-ŨĚ 16 ğûıāú§>_Q4]_A¤q¦3 DpdcDmpcA Þ«zħÛ100 g/L <\>a-dbÎMPC ŠĎ¡Þ,.*gP\O_ŕ

AÉÇ,.Ķ20*iŕāĂŘ!ġ 92 g/L dg\O_ŕö¯ńõĺÐ(P-78)[2] Sébastien, H., et al. : Science.,P

BtLDHDpdcDmpcA Þ,.Ĳte(Fig 2, 3)ħÛňĳėP\O_ŕ

13:71(2014)-MPC åÈ,/ģĬ
ňĽ»

ť

337, 93-96 (2012)[3] Yamada, R., et al. : Microbial Cell Factories.,

LlLDH

40

Ĝ  ÕÜăû³«l§l KSHBFŘ

+(34+k*1^l"^U

5hd>i5hWXG;

1,   1,    2,   2,
 3,   31ŕĸ§« §«ŗā³«ĐĚĕ «ă³«¯Ò
2
à·lēÖï eŒĳĐĚÇ
Ċ½ăûĐĚŐ hŀ³« G3ŕĸ§« «ă³«Ő ă^ăû³«ĕ 

564-8680 Ć´²Èć 3-3-35 ŚĽ: 06-6368-0809
E-mail: katakura@kansai-u.ac.jp

 5hd5h"8
5he\
Y>i

[]n03/$&,#(+RZ5hdm?O7jVD>inK[]m+(34+k*1^l"^U@Pm5hWX"7!%.2'4WX`gSF=mmh_"9b5hWX"G;"f:mWX)+-<T

1. 

nBMY5hd"jVD>i

n



 eŒĳ

İúĈ"ăī6Ă¢(ťû'Įz2ß­^Ęŝ%$"ťUL>Ğ eŒĳ(cĞ'}ia:eŒ&¤#¬ħ7!

5ť''ŋ5£è&m!Ĵœ'eŒ:ăĄ6ŦŠø¶&ª6#(Ė"60ť­(ť74'ģņ:ñą!ťeŒ

6½ăû

ťeŒ'ăĄ(ťeŒĳ&#!¨-#"(%ťeŒăĄ&36İö:Ŏ!6'

17%Ŧ

"ÜĐĚ"(ťaŉ'ģņ

É7%3

Ğõ:UL>Ğ

ĵę6#æĜ&£4EXĞŢďĞţ&h

ť

6Ş:á

&(ç&ı6Ŧ'0ťeŒ

Ļ6##1&ťNADŤ:{ă6~'ģņ#!įĳ:Šø¶-"Ş6#(ř"ťĀ3Ş:ą60ť¨ìĉ%Ş:áĻťeŒĳ&"%#

eŒ:r4%Ş:ČÌŦ

è"%%5ť

ĿŜ&%!6Ŧ7&®!ťe

Œĳ(%İö&ĩ'%ÜĐĚ'

 eŒĳ

6eŒ:

6'8

ť#

2. LHIQ

"6Ŧ

eŒ:ăĄ6'(ťĞ:hŀ6#&V\P=@I<BF#!1są76eŒĳ3!£è&¾Ĺ%?N[A_:¼60"6ŦĞhŀ76×&( NADŤ

NADH &ŏx76

Lactobacillus reuteri, Leuconostoc mesenteroides, Lb.

ťĢĬ'd&6 NADŤ(ÚŖ%'"ťNADH :Œ

plantarum &! NAD &ZD=B[%7)Ğ:hŀ"%àťNCIMB8826 à:ą!áĻŦĞõ#! 6 g/L%!-'UL>Ğ-(EXĞ:/Æ"ťśĦŞŤŦ"eŒĳ(ťS[R]Œ

4eŒ

!ť77 JCM1112 àťNBRC100496:r6#&3! NADH :Œ! NAD :{ă-(Œġ!6'"6Ŧ»!ťNAD 'ŏx:m9&?N(÷¶"ťeŒ^Ğ^?GO_[%$'ø¶(őġð[A_:¼6ģņ:ą6-(ópB\WKCYT<_"ô¬ŦŤŤťeŒăĄi¥'Ôð" NAD :{ă"7)ťeŒ'ăĄ:É6#
Ť

"6Ŧ

ť&UL>Ğ

'ģņ'¦(É76#

 ĳp

6#ť74Ď47!

3*eŒø¶'ģ×¤'J_G

4ť7

7ťn×Ŕ5nĳpœ5'ĳp

3*eŒ'ăĄœ"6ë£èŌ¶ µ #eŒëăĄŌ¶ ρ

5ťeŒ

ĳ(eŒ:ăĄ6:¼%ýÃ&%!-uĥ76ÍċŞ:ĶŦĳpø¶Ŧ:ĝ|ť®Ó£è!6Ŕ"£èĳpœ¸5'eŒăĄœ YL/XŢ=ρ/µţ:î0Ŧ'w

°,$ťeŒ:ăĄ&£è"#&%5ť'w

hŀ¿& !íġ:`×ĉ&6¹:
6ķőġ' 1 ėŦ:"6Ŗ5°6#41

ÜĐĚ'Čĉ"6Ŧ

3. aNcA

4. 6ECJ ­ş 3 ĳày!&

!ťĞõ:UL>Ğ

EXĞ&¤Ø6#"eŒ'ăĄśĦŞ351ÍċŞÔ

4

eŒĳ&c

É7ť-ťeŒ'ăĄ

4EXĞ&¤

6#ť

É7Ŧ

ü&ťLb. reuteri '¡ťĞ#!EXĞ:cÉ

7Ţ 1ţŦ

6#e

Œ'h95&W]MK_[:r6#&3! NADŤLb. reuteriťLeu. mesenteroidesťLb. plantarum 7:{ăť£è"6#

!ťUL>Ğ:ą!śĦŞ¡' YL/X

7&

6Ğ:UL>Ğ

ÜĐĚ"(q7'eŒĳ"1eŒăĄ9Ŧg'eŒĳ&!1ťeŒăĄi¥'Èé" NADŤ:{ă6ģ

( 5.6ť7.8ť5.3 g-lactate/g-cell "'&®!ťÍ

ņ:Ë!6#ĩċ¡(77 4.8ť4.0ť5.2 g-lactate/g-cell &o¥'Ğ:ą7)74:ñą"6#ĩ

47ťEXĞ%$ťUL>Ği
476ŦbŦ-ťEXĞ:ą!śĦŞ6# YL/X (ťUL>Ğ(ăû&#!Ù1ą2Ğ"6

77 3.7ť3.0ť4.9 g-lactate/g-cell &obť4&ť

0ťĔōĐĚĪ(½ăû:Ş6×ťÄĨĉ&UÍċŞ6# 2.5ť2.2ť4.0 g-lactate/g-cell &obŦ

L>Ğ:ą!Ŧťŋµ'ŞÝk"6Ğõ:UL>Ğ#śŇ."5ťeŒĳ&#!(ť?N[A_:¼6ĦŞ&ë+!ťĞõ:EXĞ&h0&eŒ:r46:¼%UL>Ğ:c!ÍċŞ6# YL/X (74 3 ĳà"77 45ť29ť75%&obŦĺÏ

'(ť­(ŊÂ%'6#ťŋµ'Ş#ø¶'eŒť7(Ĕō'È%À
476

17%Ŧ

eŒĳ(ŋÁ©ìÁĳ"5ťŒġ

ĲÈ%½ăû

ť±%#1fą 3 ėĵę6-"£è6#j¬7)ť77ťŋ

#!ľŁ7!

µŞ'Ġ 2.3ť3.5ť1.3 v'ĳp:ÿ¼"6#&ŝ'eŒĳ"(ťq71ÍċŞ!Œġ:c%6Ŧ

£è(Ō%5ťeŒăĄ1É7Ŧ77'ĳà&

!ťhŀĄû:}Þ!ùġ

'ûńÑ:5ťeŒăĄ

#8"ťőê(Ğ:hŀ6×&S[R]Œ
?GO_[:r! NAD :{ă6
ŤÉ7åã:Î¬Ŧ'ĤßťLb. reuteri "(;[AM]:ą!

&3!1 NAD :{ă6#
őê('3

Ť

4W]M

¼6#

"6

47!ŦLeu. mesenteroides "(

6#ťt

Œġ

É

ûńÑ

42š#o

#

4ťÛĎ'hŀû&

36?N[A_'ÿ¼-( NAD {ă
Ť

-Ā

Ķ97!

£èĳpœ

§%!

ùġ'ąĒ7Ŧ

ťğ'ĭ:Ņ6Ğ:c}&!1?GO_[:r!

ob6ŦQ]őê'³âăĄ&(ť74:ĩÅ!ťŋìÐÊ:%47ŦLb. plantarum "(ťòŃĞ¸5'"6Ŧ

&&3!Ā3?N[A_:

K_[:ăĄ6ģņ" NADŤ:{ă6#&3
!eŒăĄ

4

ťŒġ:ą

?N[A_:ÿ¼6##1&ťEXĞ

6#ĩ

Ô

!

4ťĳp'

£è&9!º&Ğ:uĥ6#&35ťňŌ

5ť&36Āĉ%&Šø¶-"ŠĀ"Ş6ÔðeŒĳ&

!1ťŒġ:c)ŠĀ%Şđě7!6Ŧ!Ğ:º&uĥ7"6"%ťeŒ'ĵę:Ŏ!Šø¶-"Ş"6("6Ŧ
eŒĳ&(ä%G=V`Ő'Æ}:ķ5ť"61'ť

)"61'ť

1'ť4&(ť("!1Œġ"%

ĲÈ%1'16Ŧ-ťLb. reuteri 'W]MK_[ăĄ%$ťeŒ
i¥' NADŤ{ăğ:Ë!61'1ťË!6ĭ}"(%1'16Ŧ

ÜĐĚ"Ē3&ťĞ:EXĞ&h!eĞi¥' NADŤ{ăğ:ñą6##1&ťeŒĳ&("?N[A_k:ļ¬7)ťQ]őê'3

¼4763

"6

&ŞÝ

&ťŠø¶-"Š 1. £èĳp¸5'eŒăĄœ

Ā"eŒĳ:Ş"6ĭÁ(}&5ťeŒĳ

*UL>Ğ:Ğõ#!śĦŞ¡:

'1''ăĄ2eŒĳ&36Úąûń'ăĄ&łþ

100%#č®w

"6#ĩ

42

476Ŧ

� �� ����������� �������
�f_L]r^K".$'#)!/wZ[Milt]�� ����� ������ ����� ����� ���������
�651-2241� ���������� 2-2-3� ��: 078-992-3164
Fax: 078-992-3192� E-mail: takeshi.nakatani@nagase.co.jp

 ".$'#)!/xEGTypEu>8e>9m>d\q

6\

SG

Js

-*sFa1oZ[,&( Streptomyces DglEGT 5VZ<I8

NBgl0b
?=



 EGT 1o7v3+&'%/:PT`c@4f_L]rXt]^K

]rX

EGT wZ[Milkbn

1.





� ���������EGT�� 1����������
������������������������
������������� EGT ���������
2005 �� EGT ������������������
������������������������

� 1.� L -���������EGT�����[1-3]������������� EGT ��������������C=S���������������

������������������������

��������������������00������

������������������������

2. UPQX���������[4]������EGT ������
������������������������

(1) EGT �������

���������������������[5]�
���� EGT �����������������

�� N-STePP®������� Streptomyces lividans������������������������

TK64 � EGT ��������������EGT �������������������� Streptomyces������������ EGT ����������

®

�������������������� N-STePP

�������� His ��������������

����������������� EGT ������

�������������HAL���� SLI_5205 �

2������������������������

����� EGT �����������

�������������������������

(2) His ��������������

��������������His������� EGT

������ His ���������������

������������������������

His ����������������������

������������������������

���FBR������������������ 2�������� His ����� EGT ���������

����Streptomyces ���������������

������������������������

��0�His � FBR ���������������

������������ EGT ����������

�������� FBR ��������0�����
������������������������

���������������

TK64 � His �������������������

43

' 

(2) His &Z:mRWNAÔį&ŋŲ

NTG $#&´Ė7ē9SjBĆ"¼ź½ťßă7Ĳ,¥6ľċ´Ė%¸

IAgmTkB&Ĵ÷His 9SjB7¨-ñÃ°¯

 His 9SjBķÚ´Ėø&Ó7Ńľċ´Ė!/đĸ¡ĺ$9SjBķÚ´Ėøİ 80 ø7Ó7ŧē4"!DVa%Â54´Ė7ùĀ%Ó 80 ø& His ( EGT &đĒÚ7Őà4"!Ó´Ėø&ÿrxGmCkĴ÷23 &´ĖøŊø13~%đĒÚ§oIžNGSſŋö2FBR &ŋŲ%űŤ4ò´Ė&¦»¾ï"$42%¦» His & FBR ŋ
Ų%ò$´Ė7 EGT đĒø%ųĨ4"!ĎĘ$ His & FBR ŋŲø&ĸħ7Ěã­ 3. EGT đĒø&Ő
TK64žWTſ!/ż

EGT đĒÚ7ģ¥ÝŨ}·&ėďÏHis ŋį&ÎžSLI_5205ſ%13đĒÚ§o°¯t% EGT Ă54

4. 2HCR­ 2. EGT &đ¥ÝĳŜĮ2 EGT 7żđĒ4%'Ź!

ď®NGS %13¦»´Ėĉ&òÚ7úŏ

4 His &Z:mR

WNAÔžŝÔ7¨-ſ7ŋŲ4Øň

EGT đĒø%ò´Ė7ųĨ4"!FBR &ŋŲ

4PRPP:

5-Phosphoribosyl diphosphate, SAM: S-Adenosylmethionine, Cys:7ť.

cysteineēEGT đĒð&ZfNAIWfkIŋöžFBAſ

7Ń

"!EGT đĒÚ&§o%ò$xŗé´7

3. hWjA

45"sŃTK64 ø&xŗcPh7G`dimGek´%

(1) EGT đ¥Ýį&Ï

4FBA 2Ó25xŗé/oō FBR ŋŲø%Â

"!

His !$GIO;k0 S-9PVGhbM?Tk

S. lividans TK64 ĕõ EGT đ¥ÝŨ}·AfILm&ĵ%

&ñŧ7Ń

Į2& EGT ěåė

egtABCD 7żEYm\ALm%ŤĴóĿ%ÂŪă&¼ď7Ěã

EGT đĒø7Ó2%[jcmLmúŌžóğĩ' NEDO I_mQJh[jH<AQ&èç7(°Ÿô{&úŌ7Ń&Ĵ÷His ĊĆô{
p&ZfIE°Ÿ%

Ń65+ſ/İ 600 mg/L "Ŋø%Á

10 yo& EGT 7đĒž­ 3ſ2%His&ŋ% HAL Ũ}·Ġ³ø!đĒ7ŃĴ÷

;jOY


òÜ% EGT đĒŭ§o4"Ģœ5ıĹ[1] Grundemann D, et al.: PNAS., 102, 5256-5261 (2005)

His &²%Àq4é´ò!

[2] Paul BD, et al.: Cell Death Differ., 17, 1134-1140



4"7Ģœ(2010)

+Ēđ5 EGT &İ 80Ž°Ÿąt%ŁĨ
3óĿż[3] Kato U, et al.: Pharm. Res., 27, 832-840 (2010)

EGT äĺ7/"î2

[4] Irwin K, et al.: Biochim. Biophys. ACTA, 1822, 784"$S. avermitilis 7¿u" EGT Ũ}·Af-793 (2012)ILmÏø!/EGT &İ 80%Ŀµ%ŁĨStreptomyces ÅıĿ EGT =AI^mLm7ē
Ď1 EGT 7ĂđĒ¡ĺ!

[5] Nakamichi N, et al. : Brain Behav., 6, e00477 (2016)[6] zřŚ w : čŎ Ī 6263672 ¢ (2017)4"ģ5[6]44Ď  ÕÛúõ³©m¦m KQI<Cņ������������������������N�
��R��A �� ����áü Ćº 1`Jaewook Lee2`Oluwasesan Adegoke2`Ü œë 1, 2
1 ň²¦©¦©Ń ĘĊ©ÊģćČĊ Ĳ©°Ð
2 ň²¦©=\a_Ċ©ÊģćČÉ
422-8529 ň²µŐè¦ĭ 836
E-mail: park.enoch@shizuoka.ac.jp

� ��A����������AuNP�������� AuNP �������R��A� G�.17 � RNA ����� DNA � 10 ������ AuNP-DNA �������N�������R��A� G�.17 � RNA
��� 10 ���������QD�������� QD-DNA �������N�DNA ���������
�������������QD ����������AuNP � QD �����������������
������������������N���10 fM ��� DNA �������������N���������R��A����������������N��� QD-DNA ��������������
R��A�����������������

1.� ����

qħē¨%¦& 40 nm Ĵ¸È&Ŏ§jÿÄ%

$.1ÆßĚÂ¥½1ĀpA¢$.Į$¶Ň

1:[CĤŊ&

polydiallyldimethylammonium chlorideŔPDDAŕ!ňŇæ

1ö$N^65]C&Æß4Íf¹z/Çh)PL^;ºđ$Æß

ă$ė

ÃěĞñ4¼İŎ%ª{4ĝN^65



]C4ĳĵ$őÆ»PDDA $.ä$¶Ň

1ĤŊ$Į$¶Ň

1 AuNP 4ňŇă$ėâ~

2'ÆßÌ¦$ķAuNP %H8a]¢4ûN^65]

#ª{¯Đ21øN^65]C%ĪÒ&

C G.12 à% RNA %ąĦă# DNA % 10 ¤¢4 AuNP

5WN<^VKé$.Ģŋ%ĤŊ$tŏAuNP-DNA T^aS 1 !oÆ»-öþÃ$0Ó#â~é%ŀĂç+/2¸È&MNē¨%Íöþ#Ãį4û

1Ĵ
5_

R]7_@65]C4&+!J_=B965]C#"%Óğ`}ğÆßā65]C4őÆ»
â~ 1–3)ÛćČLIKŔQDŕ!±&őĠyöÃ4Ù1ļ¨

ĤŊT[DY_|ŒÞŔLSPRŕ

$.0Ġy4¥½1!
ŔAuNPŕ4û

1ĽMNē¨

N^65]C RNA %â~é%ŀĂ4)4Ģ 

2.� ��
Ŕ1ŕC[5L:[Cu% DNA T^aSŗ!âpu%T^aSŘ%qħÛćČ%ŁŅŗŖFa>IK DNA Ļ%â~Ôé&layer by layer é$. AuNP 4b«
tŏC[5L:[CŔâ~%¢Ýŕ4q

 5)AuNP & HEPES $.Ľ58_4Ĺx45bÔÛćČ­!Ĝ$#Ç CdZnSeS QDŔļ¨÷

& 84 %584 nm kĴ$ĠyQa<4Ù1 4 nm %ù
¾%ē¨ŕ$&DNA T^aSŗ!þ#1Ļ%Fa>IK DNA 4tŏQD-DNA T^aSŘ!
Ŕ2ŕ?_T] DNA %â~N^65]C G.12 à% RNA %bĺ4 DNA Òô!
Fa>IK DNA !ûQD-DNA T^a

S 2 !?_T] DNA 4Á¿¢Ýd$CUI
KAuNP-DNA T^aS 1 ! QD-DNA T^aS 2&22þ#1Ļ%Fa>IK DNA !gÛľ4

 2Ŗ?_T] DNA ð»$¾Ç1+2 %T^aS4j QD &¢Ýd$1Ġy5XaB«21ÚÁ% QD-DNA T^aS 2 4êì1
Fa>IK DNA  AuNP-DNA T^aS 1 ! QD-DNA
T^aS 2 $ė1!

AuNP ! QD %Ł% LSPR

Ŕ 1 óŕ$.0QD %Ġy¥½ DNA %Ùò
4

1

3. hZiL
Ŕ1ŕĤŊT[DY_|ŒÞ$.1Ġy¥½Þ

AuNP %ĤŊT[DY_|ŒÞ$.1 QD %Ġy¥
½  Þ 4 Ĉ Ĭ   Ŕ  Ř ŕ ï í eqħ

AuNP-DNA T^aSŗQD-DNA T^aSŘ?_T]4Á!3Ġy½»&?_T]%ð»0cċō% DNA ?_L5I$år¥
HãĶ4¾Ç!

 3ŖLSPR $.1Ġy¥½ÞQD %Ġy AuNP % LSPR$.¥½2

1!ĈĬ

Ŕ2ŕ:[C¢Ýd%?_T]%â~

4. 9ONX ÛćČ

AuNP-DNA T^aSŗ4ĤŊ«¢Ý4û

&N^65]C G.17 à% DNA Ļ4

Ēs$â~1!$Çi%ėÞ/ĸË

F a > I K DNA % â ~ 4 Ģ    )   ď ļ %Ã$ł,#´þĈĬ

QD-DNA T^aSŘ!âp?_T]4O5S\G5E

5]C4×$â~1!Ĝ!#1i¿J

aAZ_30 ŁÁ¿Áí4¢Ý_=65]C%â~é!J_=65]C% 4 ċō%ġd$/$ 30 ŁÁ30 ¿ÚÁî¡4×$% DNA 4êì0ńĠyŌÀĿ

QD %Ġy4ĩ® 2 $?_T] DNA ð»$

1Ġy&ĒÖă#İĥę

5XaB%ýv4ĉ?_T] DNA 4

Ĝ#8_?5K!$å(10 fM ld% DNA ?_T]4û

£ÙÅ#Ġy½»%´4ĈĬ1!
ŉąĦă# DNA ÒôŔNCŕ4û

+ĨÑ%6

1â~Ĕ4ŀĂÛâ~Ĕ%¬ûÃ4âī1S/B å%Ï$0Ė*Øĕă$#)

,65]C%â~%â~é%Ĉč4ĄÎBiS^

£%Ġy½»[1] Adegoke. O, et. al, ACS. Omega, 3, 1357–1366 (2018)&ąĦă# DNA Òô$å(ÙÅ#Ġy½»%´

[2] Adegoke. O, et al, Biosens. Bioelectron, 94, 513–522

ĈĬ(2017)

%!/Ûâ~Ĕ&ő

65]

C DNA %ĸËÃ4Ù

1!ĉ22/%ėÞ/ĒÖă#Ôé

DNA 4â~%«ļÃĈĬ[3] Takemura. K, et al, Biosens. Bioelectron, 89, 998–1005(2017)

1ĒÖ65]Câ~Ĕ%qħ$ÇŔřŕ)DNA %ı£! AuNP 4û

[4] Eliza. H, et al., Adv. Mater., 16, 1685–1706 (2004)

1!

[5] Sudhanshu S, et al., Acc. Chem. Res., 41(12),LSPR Þ$.1Ġy¥·2â~4.0wn$Ģ

1831–1841 (2008)46Ŧ  ãĝĦŋņþó¹ï¹ ~Ƭ {y BRIPS>@EJTH2
NRCSGSDF169k2aVƶƂƑă ³ÂŎŚ ĪÆſ ±Ƣşà ¸ƂÒā ĿƢĽ³ ƟŃýÃ® ƹħįïÔ  Šüïó¬Éŋ¡ŊþóƲŠüïóïóƩ¬Éŋ¡ŊþóŜţšƯûřŤïó¬ƳâĬƴšóƝöúřŤïó¬ŋņþóŜţ«­ĞÕďt­ƷĭƸ¬ƋęƁƅâƝƥŕŜţ¨­



G 

+A

 ŠüÿƤƐý

Œè ƭƍ

 7+36<>1379;3<<<0>5><237+>+-4: BRIPS>@EJTH¢ £3¡b5\qX2 BRIPSf1^
v

0|

':-#9

."9!te.3}k k i1(-;n$-#9!+&.x.3 YiISMA~168

 <PL%7092  ?m1<PLo;s(,NRCSGSDFc  ¢  £;(,!do$   3 
2=S@QOTK.4k3U][W*)  }k k4

1aV'*9&/1l_(,! u¨ơƞÏs~y§­aT_ #$ ­TDĵŻLng
«ơ{}­Ʒ!'ƸfD¨ƞÏƲ»«~ƒaT_   ƞÏsÇĒTZE «ơƷ6>ƸõƣōƠŮaT_Ōı¯Ģō`HpDƳâ

ƞÏMoňŽeu¨§¡dnp !' $ dŇċŖc

ÍƢmźĵŻƋęƷ!$ "$ ŁõƸdăPÐōSrnJ

u

aT_IqEŉçDƅâÕSr_Iq !'f  Ă( )dnpÞõDƞÏeűpƔjƷŪƛƸsƃ]ZEŪdæÊ¨­Nėŵƀ #=;/:=97B-/<<:MoƆÌT

ƛTZƞÏĎìMo««ƊƈsƃIDŰīD

Zle`HpDYeŹŅčaĸľčfĜś !' ecM!' $ aĸƓT`ġlƵI©¨dHq( )EYr`lcLDŹŅčD

é !'Ʒ-*!'ƸsƊƈTZƷå  ƸEĸľčDŋŌþŢdƧVqƏƱeƇĺNąPģir_ơƝ¼s - ÅƷ-98</;?+=398/8/;1B eŴáƸIZEYR`ĐFfDĜò !' aÞŧ·¯ečŻsĔ
^ !' s~§­«dnpÚĊTDĜò !' nplŹŅčdÆrZ !' dĖíSXqRasŗĳaT

 |đdíœNÇ]ZôÈ««

.,"+.*(2 "-,+(2 %)% /-  
.,"+.*(2 "-).%*1%!).,"+.*(2 "--+$.,"+.*(2 "-%,)")-%.,"+.*(2 "-0%*' "/-)%#",
.,"+.*(2 "-$2#,*- *+% /.,"+.*(2 "--+).
.,"+.*(2 "-/.*'2.% /

ZEĐFfDĸľčmëƒŇœčcbeĵŻs®Î½

.,"+.*(2 "-#,%-"* $,*(*#")".,"+.*(2 "-2*&*-/&)")-%.,"+.*(2 "--+/ 
.,"+.*(2 "--+
.,"+.*(2 "--+°SXWdŹŅčejsïĀdß¯SXqdfĉĨe
ÍñƗÕþóŖĒĻ`fƨőNHqaŸKDµþ«





.,"+.*(2 "-.,./.,"+.*(2 "--+ 
.,"+.*(2 "-,/"''*(/,%)/.,"+.*(2 "--+
.,"+.*(2 "-+'.")-%-

~ƒƊƈĻsøÇVqRadTZE

 r~

.,"+.*(2 "-$%(-..%)% /- 
.,"+.*(2 "-*'%)!")-%.,"+.*(2 "--+ 
.,"+.*(2 "- ",/'"./.,"+.*(2 "-!%-..* $,*(*#")".,"+.*(2 "-%+*(*""  µþ«~ƒƊƈå !' $ eu ơƞÏaƲŶƷƗÕƸƧÁsĔ^£ªa -*!' eÍñūųĴĐFN~§­«dnpƆI[TZėŵƀ

#=;/:=97B-/<<: $ ĭŏĨ !'Ʒ!' $ Ƹeu 47ƞÏƊƈTZ -*!' ƜºñsÈÝďTD:$ + a 

pDYrdn]_íčTdPIĲƖsaqRa`ŹŅ

-963  sōI_ƀ¾ÊdÛłčŕŉSXZEÕTZaŸK_IqEĉĨeŹŅÕ`f <+6=,;3.1/

 z/geĆďmŔĹ}«cbD²d«~ƒÊƝdíœsøÇVq ;+=398+6./<318 `H]Zed÷TD
¶ãĐFfĉĨafÈPœcq«DíœøÇ
Ɲ¼dnpïĀcŹŅÕdďÓTZńN{§ -*!' eůĕKŋŌ¦êƴ¬ŕŉ`fDêè

7 HZpŬ 1

¨a

IKqE

@/=-/66< eůĕKïżƀNĊorDYeƀ¾ÊeÛłčŐÍd  % 7Ʒ C:ƸDĸľč % 71:;9=/38
e -*!' sĊqRaN`OZEReĸľčfĜòƠŮƷ  % 71:;9=/38ƸeŬÄdlƙTD-*!'fŹŅčejcoWDƠŮŋŌčeưdLI_lĮķdß¯TZaIKqƷƄ ƸEiZD-*!' f  CD
738 ËŊdnpïżƀŏĨ«~ƒsïĀdíč
ƪØVqRaN`ODĸľčs % 71:;9=/38ƷŬ ÄƸi`ß¯SXqRaN`OZESodDƫw{«´ĕ~ª¦v­dnpƵŭĄƠŮƷĸľč
å &$Ʒ£ ƣ¾ƸeŤ¾ĲƖ£¨¯dLQq
 |đeu ơŷĕńƷ®Ěe¥ejŷĕńs­¨ƄŞTZƸ

% 71:;9=/38+= CƸsĊqRalÛŻ`HqEƄ ƺůĕKŋŌ &$ a -*!' eľčaŹŅčľč +!' $  Ʒ% 7Ƹ+ĸľč
Ʒ% 71:;9=/38Ƹ

ŹŅč ,
ƷCƸ

&$







-

 



 

 Zj2hw
ĦŜţ`fµþ«~ƒƊƈĻdnpƠŮeŬ
dHZquïżƀÛłčŐÍeƠŮľčs CD: `ŁõE
738 w«}¤­ĈDľčN
ĶòTZŀĄE,ơdŷĕsøÇTDïĀcŹŅčß¯dďÓTZERR`ļŗVhOfDƠŮĵŻƷĸľ
čDëƒŇœčƸs®Î½°SXqRacPïĀcŹ ŹŅčLngƠŮĵŻƌÀŅÕdďÓTZń`HqE¶ĈD ~¨Ƈĩm&$DĜòƠŮeŹŅčNÜFCD CƷ

738Ƹ

' ŵŰĠĲƖƇĩcbeņŊÕóŖƇĩsƗkqRa

`H]Zed÷TD-*!' eŹŅčf &$ dĸh CdnpŹŅÕ¢|¡sƇğTZIaŸK_IqE

lß¯TD CD 738 ®ÎľčN½°TcM]ZƷƄ

¶ãDƵĸľčM^ƵŹŅč !' NÒƅ`OZRaƻƸE-*!' ežƚŀĄf &$ aÞU  CDžƚ : fdnpDƠŮŋŌaƠŮÀĮsïĀx«SX

 Mo  dTZEëƒŇœčdfíÕNƎkor

qRaNÛŻdcqaŸKorqEYeŰīD!$ "$WD6> ·îeuŁõƷÙČŋďņƼ6>ƸōƠŮm 6> õƣōw{ơdf®ÎľčsŞScIƵIë

ƒƛēčeii`HqRaNŝƎ`OZE«­DeƥŕcbDYeČōũäNăNqR
aNĤć`OqESodDƕĂ 6> f¿ŲƘÑac] ŹŅÕ¢|¡¶ãDĐFf !' $ e  u_IqZkDÖƁ±Ʀ¾ŧe×ĘaT_Ģōcα
ơeJ\

 |đ

¨¨ơƷαƸs 6> Mow{Ļ`ƅƖVqR

díœsøÇTZE&$ a -*!' ƦeuơƞÏŘaNİƉSr_LpDŹŅč -*!'sÐōTZαÞčf aĸƓŖƵIĚ`HqNDå

dŞVnJdÍñūųŖdfňŤTZĥťŨƷ­¨­Ƹ

ŋŌlÛŻacqMlTrcIEsĆďVqnJdµþƊƈsěT_IqESodDļ
ŗVhOfu`pơŷĕƝ¼NƠŮÍñeîŶƝƷł

ðƮÌƄưƸa¦«¡w¨dƬ±T_Iqń`H[1] Kusakabe H, et al.: Agric. Biol. Chem., 47, 1323-1328

qƷå ƸE&$ a -*!' eŤ¾ĲƖ£¨sĸƓVq

(1983)a -*!' `f¦«¡w¨NùcPcqaaldD[2] Nakano S, et al.: Biochem., 57, 3722–3732 (2018)ÍñÈ¾Nnp«~dz­¨v«T_L48Ą  ÎÖóë´¬p¤p HPF>AŃ

 P450BM3 -($'

&+,.è Ïh^Joshua Kyle Stanfield^Úè Ň¦^Ē Ľb^æī đj
³¤¬¤¬łñ¬ûāþ ëħñ¬°Ë ¬ą464-8602 ³·ÿeĊö Ņğ: 052-789-2955
Fax: 052-789-3557 E-mail: shoji.osami@a.mbox.nagoya-u.ac.jp¶¤ēõØ$@H>\W P450BM3(P450BM3)%ō¸ç^¸$ç"×odeã¿" C-H ć4áĸ1»
"SWķĆ1ōħĴÆ¿ŊĽļĎČĸn¢$ħ1ħã¿ĵr#0Ĭ)21
+ō¯ĥ

1ħ

2/$ĸ¾%(

4HZ<_

$¾

%"/ō

5!İĔ"

1ħP450BM3 $A8FE4ON$íÁ

1.



4¯ĥ

4ô1¾ą4ľøÊqħŋG?8}ªŌ 0Ĭ)1
21ëħ¡É4ĔótĚ©ōì­$ë4ßü#ĠĤ¾1.
21.

1+#ō¯ĥō¾$A8FE4»ù#¸#ONíōT]B]"!$Ý"ÔÞħ4ĸč#"1 ķĆ%ót{½Ė1%ÜĮ¤÷"1ÔÞ}ª%ōP450BM3 $A8FE%ON$íÁ

Á#1

ĝě2

P450BM3 %ō¯ĥ¾İĔ1µ§"kÈÍ2ķĆÜĮqÊqħŋG?8}ªŌ4 P450BM3 #0Ĭ)1

ï%ņ¸#s1ķĆ¾%ōĻ

P450BM3ĢuōT]B]-R\N]"!$ĽļĎČĸ

#%ÜĮ¤÷"1ħ4ĸ1

4Ð/

#ŋ 1Ō[1, 2, 3]

ĻĀ$ŀvģÐ#ōĭ¸%ķĆ$ĻĀ#Đ1ħ$*ëħ¡É4Ĕ#¯1ã¿%s+ō2n¢$ëķĆ$ħì÷¿$¡É#%ō

ã¿ĵr4ÜÃ17VLĸ4l$7VLĸ#ĉÉ1¡÷±yÔōY]DW#¡÷±y4Ĕİ

}ª´¬ùÅâ4+ōķĆ¡÷t$uÃð$gä1Ä%ōÖØ$¯ĥħ#ÜĮ.qÊqħŋG?8}ªŌ4ķĆ#0Ĭ)ō
ķĆ$ĢuíÁ4Àù#0|%ÜĮz÷ħ¾1
}ª4ô

ōÖØ$ħ

"1T]B]"!$Ąi$
4Ð/#/#ōG?8

1Åâ%ōēt{¾#,Ô



 1. @H>\W P450BM3 #.1ĽļĎČĸ$áĸ1

4®Ğ

¾ŋcŌ

2. )#*¾ŋdŌ(1) Êqħ#.1 P450BM3 $ĢuġĨ Ąi$

/#ōN_Q[:\7[=[;[U]ĸ$;[U=ħ$áĸ¾@[47VLĸwňĄifm$G?8}ªP450BM3 $ĸã¿ÿóÃ¾%ōĽļĎČĸ$0Ĭ*¾4ľ¨1HZ<_#"

ōĽÊqħ«d$T]B]$áĸ%ã¿¤¹#c1

4ė|[4]wň1

7VLĸ$xļÜĮ$Ĳ#.0ōĸã¿¤ļĎČĸ P450BM3 $ĳ~"rĉ#0Ĭ)2¡ōN_Q[:\LJ]ĸ4Q9K[7YK]

#$*ĸã¿ÿ4óÃ1.

wň PFC9-L-Phe $#%T]B]$áĸ%à

#ĝě21ĽļĎČĸ$Õă4+'$áĆªQFĆ} 157 ĪİĔN_Q[:\LJ]ĸ4HZ

ª#ĉÉ2N_Q[:\7[=[;[U]ĸ4

RHQ6]wň PFC9-L-Trp 40Ĭ5íÁ$49

P450BM3 $ćÒÜĮęÙ#,ÃōÊqħ$Õă}ªĽļĎČĸ

$N_Q[:\7[=[ļ%ōã¿ĵr#%²



"





"!4Ð/#ŋ 3Ōħćĵr#0Ĭ)21,Ð/#T]B]$áĸ¾%ōQ

9K[7YK]

R\Z]4įćiĹt$R\Z]47[=[ļwň C7-L-Pro-L-Phe Ŋĸã¿4ýōT]B]%à} 259 Īáĸ2ō
P450BM3 `}ª0 4 aĪ4ĩ1Ě©ã¿4ý(3) ¤ďē{$T]B]áĸ@H>\W P450BM3 4øð¤ďē$ŉå#ōĄbfmG?8}ª4
&

1T]B]Q9L_[

4Ð/#ŋ 4Ō[6]5 ÑĿ¡É21

$¾Q9L_[$ï% 59%#ı1Q9L_[/#ĸ2OI\=L], 16%$ï¼/2ōT]B]$ĪÉ
C7-L-Pro-L-Phe Ó,Ŋéº}#Ŋï % 75% # ı   ,#ō5µŎ$ã¿4ýã¿4ý

 2. G?8}ª$ÜĮ

 4. ¤ďē{$T]B]$áĸ¾

3. "
 3.G?8}ª4ô1¾%ōG?8}ª$ÜĮ

PFC9-L-Trp 40Ĭ5 P450BM3 $ã¿ĵr

$ÜĮ

$Ĳ

(2) QFĆª4)"8}ª4ĄbfmG?8}ª#.ķĆã¿¤¡1+ōG?
)ĝě1ōÌ"M8:Ě©ľ

 N_Q[:\7[=[;[U]ĸ$;[U=@[øč

1G?8}ª4ô1¾%ōēt{4HZRHQ6]wňĄifmG?8}ª$ëħ¡É#,ĳôč"+ō®ôč"ò

P450BM3 ĕt$ćÒÜĮęÙŋ 3Ō#.0ō;[#ĶÂëħ¡Éą$ľø#Ħî1

U=@[47VLĸwň#%ō7[=[1ð%ō¥ê<A$gÃ}

áĸ2"ċ

8}ª$ľø4Ĉ,ōP450BM3 #.

/2ō7[=[;}ª(2011).
[2] N. Kawakami, et al.: Chem. Sci., 4, 2344 (2013).

G?8[3] O. Shoji, et al.: Angew. Chem. Int. Ed., 52, 6606 (2013).

, P450BM3 4ã¿čōĄifmG

?8}ª.0,Ŋ¢2

[4] Z. Cong, et al.: ACS Catal., 5, 150 (2015).

ĸã¿4ý[5]QFĆª4Ô1;[U]ĸ4ô"%"/"

1[1] N. Kawakami, et al.: Angew. Chem. Int. Ed., 50, 5315

fm$G?8}ªŋ 2Ō4ÃōT]B]$áĸ3ōQFĆª4)"

1XC]4XC

*!%

[U]ĸ$;[U=@[47VLĸwňĄb
¾4ÛĜ



L_[#¡É1¾ą$üĂ4úÇōÌĘG?

ļ$Õăã¿ĵr$SW$ĺª/}#ń2
0ōQFĆªĉÉ"ċ

[5] O. Shoji, et al.: Angew. Chem. Int. Ed., 56, 10324(2017).

Ł[6] K. Masayuki, et al.: Angew. Chem. Int. Ed., in press.

ōÜĮ$÷"1£$G?8}ª4ôč#"ćÒÜĮęÙ#.0ōĄbfmG?850ā  ÉÏóð´ªx¤x OWM@GĲ

HN[  Iuh60:74')-,2;/J$
60:NPfġĒ ĻhfÕ pfwĒ ÓąfĐàĀÑq´Ö¤ª óò´ªį óò´ªĄ
152-8550 Ñqħúĺ¤³² 2-12-1 M6-7 ĳĘ: 03-5734-3123
Fax: 03-5734-3357 E-mail: tkamachi@bio.titech.ac.jp

X|(.@hJ!60:nLKT

60:604;9iNPfy"!60:Ns60:74')-,2;/azaU=<vPf60:/
604;9WjR!



PfZF>Ee!

q

60:74')-,2;/Y~g-%45+18%sHN[ II (PSII)$S#HM
VNPf$u

PSII H}^=wZ$Q\

 PSII $60:NJIuh:$B

60:74')-,2;/C

{_H&39*;$K

H}^!

)4:$G!

!wdZ?)4"NPf!

JqD&39*;604;9R!

1. 



pb

"!

0ºĳ©!/2]KeĥÁùĩ¼ØĂ22

 ġ¶"E:gbĵ!/1¥í=G"o¿
2]Ke"Íõmønß,03

2. rlmx

2]Ke"ĩð2]KTgb#Úmu";Sb?
gfëĆĜèâú3

PSII-pMMO č÷#Thermosynechococcus elongatus2ñ"´Öù

BP-1 ö Ð PSII (30 µg-Chl/mL)

óô!#Ĵµ!£Ī";Sb?g5»Ė2]/ %  Methylosinus

Ke5h"ëĆè2]KeĜćĎ#uě"trichosporium OB3b ö ÐāhÛı]Ke^T<>EBQgI

ĨĆ5õ

(2.0 mg-protein/mL)5 0.01%(w/v) dodecyl-β-D-maltoside,]Ke5]KTgb&¢Å2"¼#µ25%(v/v) glycerol, 10 mM MgCl2 and 20 mM CaCl2 ÍçµhÛı"zCGO
3ĳ©5
¤

õ2Ĺ~" PSII-pMMO č÷¾êä5¯ÔG@a_g

0º0

U87bnÆÂÝü!

ĳ©}l{#¬õ"õÞ

ĝ5æî°2

(20 µE/m ·s)2ĸĩ¼5ī¨ĩęķÀ#ĳ©}l"ķ5ėá2,!;Sb?g5

 Í č ÷ 

25 mM MOPS-KOH buffer (pH7.0)¾êĚĕ

¼2Ľ"/!ĳ©kÙ2ó{# NADH

pMMO

¼ó¿ð#=G@d\OA`X(FID)«Ī

0ĳ©5º2¿!âúv"ýÿ[9ceJ9öÐ"ďċ{čĉ]Ke^T<>EBQg
I(pMMO)Íč÷5å¼éäî°!
/1 NADH 5aD8@b]Ke/]KTgb¢Å¼5Ĥ¿[1]Ïýÿ#§ï½E7TU@Na
7öÐªĄ II (PSII)5ăĕ35 pMMO 5+č÷!ØĂ(PSII-pMMO č÷Ľ)ĸĩ¼Ą5ØĂPSII #î°jÞ

0ĳ©5®>Te5Ħ22"
 1. PSII-pMMO č÷!/2ĸĩ¼"×ĖĦ>Te pMMO 5Ħ3$î°Þ

51

(2) PSII-pMMO č÷ó¿32ģĩÞĆ"«Ī )¼Ą"ģĩÞĆ(H2O2)"«Ī!#Zb<>ELgIVPd>EX:RbXb<cH8ev"ýÿpMMO &"ģ

ĳ©}l!/1(HPF)5|õ[2]PSII-pMMO č÷!F_d>

H2O2 ó¿pMMO 5¦ã24Tgbæ)#î° (100 µE/m2·s)¹"ËĬ!

2 [4]PSII-pMMO č÷ó¿32ģĩ

2 H2O2 5«ĪÞĆ5«ĪpMMO &"ĳ©}lČ5ÃF_d>Tgb5 PSII-pMMO č÷&æĉÒÌ¤

3. t] 700 µM " H2O2 ó¿hÈî°
PSII-pMMO č÷#H2O2 #(6ó¿(1) PSII-pMMO č÷!/2ĸ]Keĩ¼
PSII-pMMO č÷5õ
"*]Ke¼!

PSII-pMMO č÷# H2O2 !/2pMMO "¦ã#Ğ0î°jÜĠPSII-pMMO č÷#ó¿ð"Ī

¼#Ģē[H2O2] / µM

 PSII-pMMO č÷#î°-ĩPSII-pMMO č÷#;Sb?g5õ

 PSII Þ

0ºĳ©!/ pMMO !/2ĩ¼Ģē24

PSII-OB3b č÷"ĳ©yĤĈğ5ėÊ2,!č÷!)3

750

Duroquinol

500
250

2 NADH >Te<>EPcL@K[3]"ĉÒdNTe"æ!/2ĩ¼&"·

0
0

,PSII-OB3b č÷Ą"ĩ¼!
þ3

4PSII

5

vi"ĉÒõÇ

4. Ac`o0ĔĨĆ5æpMMO ¼Ą"ØĂ!¿ÏýÿØĂ PSII-OB3b č÷#Ø¿

2

PSII ;Sb?g5õÞ0ĳ©5ºč">TeYgb5s pMMO &ĳ©yĤ3

150[Methanol] / µM600}Ċ3ĳ© pMMO &ĳ©yĤ324

20
40Time / min 3. PSII-pMMO č÷ó¿32ģĩÞĆĪ

0}Ċ3ĳ©čn">Te5ûÄĦĦ>Te

2100 µE/m ·s LightgI(NQO)Į­2dNTe"æÒ5Ě'

NQO ĭl



1000

/

 2 !¡)Mn @`GKg5İ

Ķ#



/%YdWce"ĩ¼Ģē(ľ)v"ďċ{ļpMMO Íč÷"¼Ą

PSII 5õ



pMMO "ĩ¼Ģē2"¼Ą!/1ì

Light

±đ

;Sb?gÞ

0ºĳ©5õz;Sb?g"]KTgbóô.t"ĨĆ¼r¹Î¸
32

100

Ok


50

Dark

[1] Ito H, et al.: RCS Advances, 4, 8645-8648 (2014)[2] Setsukinai K, et al.: J. Biomol. Chem., 278, 3170-3175(2003)

00[3] Tormo R. J, et al. : Arch. Biochem. Biophys., 381,

20
40Time / min60

241-246 (2000)[4] Miyaji A, et al.: J. Mol. Catal. B. Enzym., 57,

 2. PSII-pMMO č÷!/2ĸ]Keĩ¼

211-215 (2009)52� �� ����������� �������
������������������� ������������
�������������� �����������
�240-8501� ���������� 79-5� ��: 045-339-4008
Fax: 045-339-4008� E-mail: fukuda@ynu.ac.jp�������������������������7�����������
�������� in vitro ���������������������������
���������������������������������������
��������������������������7�����������
���������������7����������������������
��������������������������������������
�7�
�1.� ��

2.� �����(1) �������

�����������������������
�������������������������

������������7 2 ���������

�����������������7�������

�������������� 1�1 ��������

�������������������������

�������������������7����

��������������7���������

����� 3 �������7�������������������������
(2) ���������������

�7����������������������
����������������������7������������������������

�������������������������

�����������������7������

����������7�������������

����������� 7.0 mm��� 7.5 mm�����������������������������

��������������������7���������������������������

�������������������7����

����7�������������������

�������������������7��������������������������
�������������������
�����������������������
����������7�������������
������������������������
�����������7[1]�����������
������������������������
����7��������������������
������������������������
�������������������������
������������������������

� 1� ���7����������

��������������7�

53

Įö 28 éÒ$ĘĀƌ9àũô§Ɓ±Ɔ
Öŷ9Ě

Īţ6ƍ¤ 3DƎp¢Āª$Ě

Āƌ%ŘƃùŮ9Ŝ¸3$Įö 28 éÒ%ĢŎ9ĮöÉ

]?Kŉ}Ĝñ%î

34ŀńď9w

ř%[]SEIaefACJeƍHEƎóő5

%/Āª9©ƈĢŎ$ŀ-Ū.!

Ā



Ú%Ƌ

ľŊ&

ľŊ9Ě

#ĢŌō0ÎÛ6!ņ

365

C>bcOTóő9Ŗ

3. !
(1) Āª%ťř ©ƈ¡$ãİ 2 İƇ%ľŊ& 1 éĤ$Ə%
ſv9ÎÛÒ3 éŹ%©ƈv

2 İƇ%ľŊſƀĀªùŮ9ŐĠġ$ÎÛ5ú±Ŝ¸6ƍ¤ 2ƎĠĘŰį%Āª&ĀÎÛ]gDg

5<bDaYBKY;MgLƍALPƎŹŔļľŊ$

Ġĕ5!Ĩ36řĀª

ALP %Ġĕ9ŠxŁòĠĘ

í!ú$ŹŔļľŊ$5w

 ALP %ĠĕĪţ

¤ 3 ĘŻ¾¡9ì5ĢŎ

6

ƍAƎĘĀƌ9ì5ĢŎƍBƎĘĀƌ
%E`gQ=FbùŮƍCƎĘĀƌĢŎď%HE óőƍDƎC>bcOTóő

4.



ïĩĳ

&Āª9.©ƈĢŎĀƌ1ĢŌ

ō9ì5ĢŎŀń9Ę5ŋ9ì

5!

9ī%ŀń&ŕKFagUeG%ĻÌi$ŧē5%-#3ĀƌĘ1ĢŌ
ź85ŕŸĠ)%ÙĚ0íÑ¤ 2 iĢļľŊ!ŹŔļľŊ%ŐÃſ9Ě

·ĕ5

!

%/

µ#ĢŎŀń%Ę9·ĕ$ŴŚ#£±9¶5!
ëŲ5ØŚ57(2) N_eWgŎŻ¾¡9^RbĚ

%Ż¾¡9ì5ĢŎ%Ę5pÒ&ĢŎŻ¾¡9ì5©ƈĢŎ9 in vitro %©ƈė«$&]?KN_eWgĀªÎÛ

ą%Õ$ĢŎŻ¾¡ÎÛ5ž
in vitro %©ƈðr9
ū

3652

ºñřŕs÷

ĢïÝŗ924h]?KĢj$¨/Ū:N_eWg$Āª!

¿Ġ½

ŘĢŝľŊĦĢŃłœľŊ9ĮöŁòĮö 21
éĤ$&ĢŎ%Ę!!0$Āƌ%ÎÛĪţ6


!

Įö 28 éĤ$&æï%ĀƌĘ

[1] T. Kageyama et al., Biomaterials, 154, 291-300, 2018ƍ¤ 3AƎ,ĘĀƌ%Ɓ±ƆÖŷ|9Ô!7Āƌ$đ×ġ#E`gQ=FbùŮŜ¸6ƍ¤
3BƎĘĢŎ%ŀńď% HE óő24ĢŎ%ŘĢ¿(ĦĢ¿%ı¿ùŮÎÛ3$ŘĢĦĢy$Ž~ĀÎÛƍ¤ 3CƎ,ĢŌōOTóő

5ú±Īţ6

3ęĘ65ĢŌ9C>bcŜ¸!7ĀĲ$ĄĢŌ%²¦

54





� 70 ����������� ������

������������������������������ �� 1���� �� 2���� �� 2����� 1*
1������������2 �������������� ����������
�904-2231� ��������� 315� ��: 098-979-3515
Fax: 098-979-3515� E-mail: tsuka@ biojet.jp� ��������600 ����������������

�����������������

���������������������������������������������
���������� HC02-5-2 �����

������������������������

�� HC02-5-2 ��������������������������������

������������������� HC02-5-2 ��������������������������
���������� 101 ������������������������ ��������
���������������������������������������������
����������������� HC02-5-2 ������������ C14 ��������

����������

1.� ����

������������������������
������������� 101 ���������� �����������������������

������������������������

������������������������

�������� [3]�������������������������

�����������������������

������������������������

������������������������

������������������������

������������������������

�����������������������

������������������������� �����������������������

��������������������� 1���������������� 1 ������ [1]��

2.� �����

���������� 101 ������ [2] ����������������������������

(1) �����������������

���������� 101 ����������

�����������������������

������������������������ ���������������������

55

M\>#.0Ű

(3) Įğ#.1śóÖĴ$Ņ*

6ZA^ZĉĊİ4Òķ4ŧ

$6ZA^ZĊĉķŲHC02-5-2ų$@NV DNA

 HC02-5-2 é4ċ

4ïajC^?\B^#p3{Ķśóµċ#ĲŲ 1ų)O8QE<Eśó

Saccharomyces cerevisiae #āďđ"Ř}4ê{1

µċé

áċ


HC02-5-2 é÷ĒŝŒ#ŕśó//"1ÖĴ4

ğé4È$b$Ŵ C14 é#

1êń



¯/ 14 ÜÆ$àħ,3*b$6ZA^ZþÂ% 101

jň4G^@HK

HC02-5-2 é%Ĥ

4ēÓ`µî#ŀŐ)21|%µîŅů4ĩēÓĮğ4ĺ$Īç2)#ľ×$Į

1+#¸iŐ*Ņů4ĺ$ĪçiŐ*š
é

÷Ē#

$

%µċ

#Í

%÷Ē$

1 ( 3))ā´$6UNŜ1łé.0ŝŭ4©

ĉĊ1Įğé4o{Ć¡$é$ŝŭ

,|"6ZA^ZÈŰĉĊ$|°W<MFV#Ńæ

1 [6]

4ę)÷Ē$şĿ"ŭõÍ

1 vanillin $~Ůn 4-vinylguaiacol %HC02-5-2é4ċ

,3*% 101 śó)2k`$Īç/HC02-5-2 é%÷ĒĽŒ#ċ/21Ú"śóéô' 4 vk`$İÌę2(2) O8QE<EĵČåśó HC02-5-2 $ĥīŃæ
HC02-5-2 é{Ķśó$b!$.

">Z^T#º1Ý/#1

4Ņ*ĥīŃæ#.0

DNA $Ř}4ôō1éŢŘ}!$ĝÂūm

14ę1+ØĄ[4, 5]4ĭ#ĥīí$oÍ4ĺśó$@NV DNA ũ£#ĖēŃæ4ĺ#ċ3÷Ē 101 śó%ûŚĽŒ 3 Įğé4ċ÷Ē$µċ

/21lśó$>Z^T#)21$#·

HC02-5-2 é%[8\ĽŒ#ċ

3. OnCF$y

/21śó$>Z^T#)2Ų 2ųHC02-5-2 é%ûŚ]ÿř]÷Ēśó1%ď"0ĥīđ#[8\śó#őÄę2101 śóHC02-5-2 é4ċ1Çå$śó

 HC02-5-2 é4ċ

é

$Ōŧ4ĭ

÷Ē$šĐ%_ÙŊ§#.1Ĕdç4ĂÚŁ"Ņ*1ľ×$ŚŒÐ

Þ#Ŕ+5 ŠèÞ#Đ§2Ų 1ųO%ď"1

8QE<E$8W^D#ĸ-"Ŭ$÷ĒŬ4á1÷Ē$šĐâÅ2

WJ76#Ħh2C14 ék¨$O8Q
E<Eśó$Įğé#

,

4ēÓ

1

Î%gÆ,Ĉć÷ĒÔĳ4ēÓöĬĕ$Ś
ŒÐ-ŚŒţrîţ4+Ċ±³$œÕ4ú+ì"ėĠÍç4Ěl#Ŗx0Ĩ*4Ŕ+1ä0Ĩ*Ĉć÷Ē$ĊëÔĳ#öĬĕ$Øđqw`$_

"1

!)/
4Ū

E}]m
[1] ą¢ ñ: ÜäŝŒlŇ, 77, 74-77 (1982)[2] ÚŞ u_/: ÜäŝŒlŇ, 84, 121-123 (1989)[3] Takagi et al., J. Biosci. Bioeng., 119, 140-147 (2015)[4] Fay et al., PLoS Genet., 1, 66-71 (2005) 2 śó$ĥīíŃæ

56

[5]

Futagami et al., Yeast, 34, 407-415 (2017)[6]ŉ¼ ø_/ŵģ 70 ÜäĉĀ½±lªlĐļ� �� ����������� �������
�     !e%<c%@U!
%jS%a����� ������ ��Matthew Winans������ ����� ������ �����������������������������(������� �
�840-8502� ������ 1*E-mail: ktgkhrs@cc.saga-u.ac.jp

 ?ze%J& Saccharomyces cerevisiae $O.]Sld}1K.

)jS$TQ1;.?L1P%H v(.!{,/.
 _sw &e%?q#X1rq!P~in p/ S.
cerevisiae !EOou% S. arboricola [1]1he!<%jS1'%yb6438572> gS%F:#"]m#jSIB<c ,/%
swUb&?LxWV1A0$ou<$+-?ze%?qXD}
.!1tG.*%.

1. |\

2. `Z9[f��Hansen 3 1883 ���������������

��������������������

�������������� Saccharomyces� KanMX ����� pGS39 ����� K7 �

cerevisiae ��������3�S. cerevisiae ��� Saccharomyces ���� S. cerevisiae ������������������������ � � � 3 � � � � � � � � � � � � � S.
cerevisiae � S. eubayanus ���������
�����������[2]��S. cerevisiae �
S. kudriavzevii 3�����3�������
����������������������
�3��������[3]��3��������
����������������������
����������������������
���3������������������
����������������������
��3����������
��������������������
����������������S. cerevisiae�������� S. arboricola ��������
���������������������
�������natMX ����� pGAL-HO-NAT1 �
S. arboricola 350 ��������� �� S. arboricola 350 �����������

����������������������
���������Zymolyase ���������
������������������K7 ������������� 4 ���������
YPD+0.5
mg/mL
G418+0.05
mg/mL
Nourceothricin ���������������
���� DNA ���������������
��� PCR ����S. cerevisiae � S. arboricola
� DNA ���������� ���� DNA �������������
����������������������
���� 13.3 mg/mL �������� MSTFA�������GC-FID ������������
���������� 26 ����������
����������������������

57

3.� �����

� 2 ������������������3����������������������

(1) ������
S. arboricola 350 ����� K7 ������

����������������������

������������������� DNA
��S. cerevisiae, S. arboricola ��������

���������������� ������������������3�������������������

�����3����������������
���������3�����������
������������������� K7 ���������7�3��������� [4]�7�7������������������
���������������������
������ ��������������������
����������������������

� 1 � � � � PCR � � � � � � � � ����������7������������

K7868h �������S.a 350 � S. arboricola ���

�3�����������3�������7�3������

� 1 �� 4 �����������������
�����3���������7�3�����
�����.1 ������������

4.� ��o��(2) ������ � � � � � � � � � S. arboricola � S.
cerevisiae �����������������
����������������������
�������������������3�����������������������
��������7������������
����������3����������
��S. arboricola �7��� S. cerevisiae �������������3�����������
���������������������
������������

���������.1 ����������� � � � � � � � � .1 � � � � � K7-4, S.

arboricola 350 ���������������
���������������������7�������� 26 ������������
�����������������

�����
[1] Naumov G. et al, Anton. van Leeuwenhoek

103.1: 217-228 (2013).
[2] Hebly M. et al, FEMS Yeast Research 15.3
(2015).

[3] González S. et al, International Journal of
Food Microbiology 116.1, 11-18 (2007).

[4] Kadowaki M et al, Appl. Env. Microbiol., 83,
24, e01620-17 (2017).

� 2 ����������������
������Score plot+Loading Plot�58ē  ÕÝüö´ªm¥m HME<@ŕ�� ��I����F������
���������� �� � �� F��
³ ÜÖÞ]ŠĦ ī]eÿ w]cô {]ghÇ ¸]ñÿ ¬ï]ãñ {¦ß¥ª¥ªŔ´ªĈĐč K7:´ª°Ò üpêğčªĹ»D\L<Ļ´ªŎ
980-8579 k¶ŗĤĢµ¨ŗĤ 6-6-11-607
Ŗķ: 022-795-7274 Fax: 022-795-7276 E-mail: mitsuo@tohoku.ac.jp

� ������������������������I�������������������
����������I����������������������������������
���������������������������������������������
�������������������������������������������(�������������)��������������������������������
��������

1.� ����
 D\L<Ļ&çŃ"êğ&Æ'úĄ$£ā±|%/2D\L<Ļ&êğÑ£)¥$_ì5a£ā5±|2í52Ďºœ­!2/


2



%$

£āpĚ(W7OWX^)- 1010

Ďº*!ĸĬ!2/%$2"~%&įé%Į

@<X^I\=Èĩ-Íâ31ýæ 1. êäªěÐÏ%/2D\L<Ļń

Ā%

P[B@

-£ā±|%/2D\L<Ļ&þÊ¥%Û¾ŝ*

2

1010 įé&W7OW

X^!- 8 íĎº&£ā!ś%ņ

*

,

\L<Ļ(YFP))êğÑ£2ĕ5VGY"

£ā±|5ę1Ł"¤*3$1&Ĵy"ĺŐ5Ãĭ2"¤êäªěÐÏP[B@5őĂ ( 1)*GFP & YFPW7OWX^c%ØŇ£āp*32tĵ'$

%ōĭ$ 4 í5×%ś£ā GFP £āpŉn§5-ĂùQ<D^Ě5þ

!ÝĈĐ!'£āpW7OWX^&qĬ%iÎ´Ćğ!2êäªě5þ2"!ąĄ£āp5ŝ

´ª¥Ġģ5½Ļľ

ü>[I^5 200 uĎºňÉÁŏŜŊİà"êğĶs5

ċø!+²įé$W7OWX^(@S^HRE

30&ėá5ªěG^D"}£āp(204=1.6

HW7OWX^)5Ĵı¥įé$@<X^I\=5105)&Şġħ{Å5êäªěÇð& 1 !2Q7A

Ãĭ"$

ØŇ

D\L<Ļń

´ªP[B@5őĂ%/1fó&fó

0ŝêğ$`o£&Çð'D\L<Ļ&ń

5řĽĄ%ł!

āp5+W7OWX^(@S^HREHW7OWXŚ]û¡]ĥ$#·¹

Ŏ!&ÄþÛ¾!

^)5Ĵı@<X^I\=2"!ØŇ£āp&

2"Ĝ

À5ąË

2

2.� ����������

(2) "#-

/,64BD;C5/& êäªě&±|%zĒ£āpĚ&qĬ(1)' 

0êğ

Ķs*!5êäªě%¯Äł!ŀł%«Ņ!

.028C<4!$

2ĕ&çĔ5Ĩ*øĄ% 1 í%ś£ÝĈĐ!'Ęġħ{D\L<Ļ(GFP)5Şġħ{D59ā5±|!2 22c-trick ð[1]5Äþ4 í5×Ī 1. ªěþW7OWX^"êäªěÍâ%ś£ā£āpĚqĬ*ŉn§Ŋİà"êğĶs5×bĨ!Ĩ

2/

W7OWX^%

2Şġ£āp&îĿ%2"!AI &ªě%Ãĭ$ 200 Ďº&G^D5Øć 5 Õ!
ŕğ"$(3) >37%.

+)



`ĳ&@<X^I\=ĕ
D5ªěG^D"Ŋ

0À032êğĶsG^ÜĆ£āp%¯

6TJŌ

0&êğĶsv5fó2êäªěÇð5őĂêäªěVGY%'Q7AØŇ

5þ

f

ó?@FU&őĂ%'ŝł$Q7AØŇ

CNH89

[2]

6!2 COMBO 5rþ&fóÇð%/1ŊđŒc&}£āp%¯êğĶsv5fó2

"ğ"$2

3. zg}Q 2. ªěþW7OWX^(ăd)"êäªěÍâW7OWX^(şd)&îĿ(1) 

(1/ŢÓv'êäªě!&W\;\=Řo5Čţ/

*4 í5×ś£āêäªěþ&£āpW7OWX^5Ăù2¥Ġģ5üĞPZ

êäªě!Íâ3£āpĚ&Ŋ5Į2"`0 186 u&>[I^5ňÉŉn§Ŋ5İ

o 78 o&£āp*!'í!Ìó36TJŌ^H

à2"~%ÁŏŜ¥Ġģ&Ċĉò0£&÷Â%x1!Ô

āp&ħ{&Şġº"ħ{¼º5ó­&ėá"4í%

153 ď&£āpŊŕ3&

3Şġħ{5*Venus "(32¼

á-,3(ÙÚ£āp&©'}p& 3šĎº!

%W\;\=330&ėá

5c&}£āp(1.6×10 )%

Şġħ{Å&ŘojŞġħ{5ČŊ 2 o2"-0²įé!

ÙÚ£āp&© 3šĎº&ªěþG^D!

&ªěþG^D!êäªěŊđŒ

0åĲ

26TJŌ¤W\;\=3Ă2£āp' 3 ď"$1ŊÔĆ&Ô© YFP &ė(Ī 1,  2 c&ăd)

&G^D

Şġħ{5Č"-ÝÇð5þ2"%/1ÙÚ£āp&©ø5¥·%¢5Ĩ"4ŊÔĆ& YFP `o 1%(1313 o)2"!2!$ªěG^D%þ

Ù%|&ėáÚ£āp5ļ

2

0ªěþG^Dc&ÙÚ£āp&©ø 3šĎº!

-êäªěėá'Ù

2ŝêğ$£āp-fó!

"Č3l`!2"Č30¿Þ&W7OWX^ð/

1-²įé]ċ®]ŀł%D\L<Ļ5ń[B@5őĂ!"Ĝ

(2) 

!2P

2.026@D:?9:A3=ABD/,*/

4. >UTc!ë%êäªě!Íâ3£āpW\;\=c&ŝêğ$`o£āpĚ ÝĈĐ!őĂêäªěÐÏ%/2D\L<Ļń

0$2@S^HR

EHW7OWX^5ĸĬêğĶs5Ĩ&´ªP[B@&őĂ'GFP %œ0ŋĖ$#&ê£āpĚ( 2 c&ăd)ğÑ£.ĝõÅ&`%-Äþ&·5¹032"ĜėáªěþG^D%þ
"îĿŞġħ{5Č£āp&©ø 70%Ďº*!¥·%¢"

1ù&®ĵ5Ĩ

2

1(Ī 1,  2 c&şd)ąèÔ© YFP 5ļG}`p

2Şġħ{5Č£āp

[1] Sabrina K.,et al.,ACS Synth.Biol., 2, 83-92 (2013)-Ó¤[2]

60

Ueno T., et al., Mater. Discov., 4, 18-21 (2016).

� 70 ����������� ������

-6aCuwBWFjWuH��� � 1���� � 2�Sara Ahmed Eltigani Ebrahim3���� �� 2���� �� 2���� �� 4���� �� 5���� �� 2
1�������������������� ����2

3�������� �������

4������������ ��������
����������������
������� �������
�680-8553� ������� 4-101� ��: 0857-31-5363

5����������

Fax: 0857-31-5347� E-mail: arima@tottori-u.ac.jp

 Porphyromonas gingivalis @_Rp_$65_nN|I"GCi
m30)(:'wB"zy] !WynN1530),#4."kt9wQ`E

Cu-6[ P. gingivalis wBWr_

C

K^

h~-6a!wB`Eu

_lH9MV"_lj-6aCucWuTPO!A>}o};UV=DS07#7*/,%+828'8x"bGLu



csP

��������
������� ����

����������������������� � � � � � � � � � Porphyromonas

gingivalis ��������P. gingivalis ������������

^!

D{\&8���������������

�����������������

������������

2. eq����������������

������������[1]����!f[BWr_"uH"jaCu 90 ?ZWr_"b{D

1. 



(1) ����������

����������

5 ����� ����������� �����

�������������������

������������������������

������

���������������� 1 ����������

����������������

��������������

������������ ����������������

����������������

���������

��������������������

��������������

������

������[2,3]�
�������������������
�����������������
���������

(2) ���������

������

P. gingivalis ����������� 48~72 ������� �������������� 10 ��� PBS

��������������������������

����������������������������

� P. gingivalis �������������

���������

�������

��������������

�����������������

���������������������

�������

��������������

�����������

������

�����

����
�����

������������������������

��������������������

���������� P. gingivalis �������������

�������������������

����� ���������� P. gingivalis ���������������

61

���

Bz-DL-Arg-pNA ����P. gingivalis ������������������

��������������

���������
��������

����������������

�������

���������������

����������������

�������

���������������������

P. gingivalis ������������

������

����������������

(3) ������������

(3) ��������������

��������������������

����������������������
�����������������

���

�����

��������� ��������������

����������� Sep-Pak C18 ��������

Sep-Pak C18 �������������� ���������������������� TLC � MS �

�� 88 ���������������������

����������

������� LC/MS ������������ ����������������

3. jX)&(("%$#)')!)(1) �������������������

�����

�� 1� ��������������������

5 ������������ 6 ����������

��������������������������� �������� P. gingivalis ��� �����TLC �����

�������

���������������������

������

�����������������

��������������� 1 ��������
��������

���������������

�������� 1��
� 1. Sep-Pak C18 ��������������� TLC ���
A�������������������

� 1� �����������������������
����� nd�not detectable �������++ + ±������������K���
M������������

D������������

H������������

������

E�UV ������������ ��� 1������ ��� 2�0% AcCN ��� 3�

S������������

5% AcCN

W������������
���

B������

�������� C������������������

��� 4�10% AcCN��� 5�20% AcCN

���
K

H

M

S

W

4. <\Yg

��

nd

++

++

++

++

++

� �����������������������

�����

nd

+

++

++

+

+

��

���������������

Bz-DL-Arg-pN ��

nd

±

+

++

+

±

�������

nd

nd

+

+

nd

nd

���������

�������������������������

������������������

80��������

�������������������

������������������������

���

Jdv
[1] Shah H.N. and Collins M.D.: J. Syst. Bacteriol. 38,

������������������������
��������������

����������������

128-131 (1988)

���

[2] Kadowaki T., et al.: J. Biol. Chem. 269: 21371-21378

�������

(1994)

�� pH ��������������������
��������������

������

���������������������

������������������������

���������������

�������� 95�� 30 ������������

������������������

�����������������

(2) ������������

��������������

��������

��� 1 ��������������������
����������

��������

�����������

[3] Xu Y., et al.: J. Mol. Biol. 375,708-719 (2008)���������

62� �� ����������� �������
�������������������

���������

���� 1���� 1����� 1������ 1������ 1����� 2����� 1
1����������������������������� (NITE�NBRC)
2�������������������������� (���CSRS)*�292-0818� ������������ 2-5-8� ��: 0438-20-5764*Fax: 0438-20-5582� E-mail: bio-sangyo-inquiry@nite.go.jp

� ��������������������������������������0�����
��� 700 ����������������������������� HS-GC/MS �����
���������������������������������������������
���������������0�����������������������������
������������������0��������������������������
�����������������0�������

1.� ����

0�������� 1�5 mL ���������5�14

� 2009 �� OECD ��“Bioeconomy”0�������

������������������������

������������������������

��������������HS-GC/MS���� 70������������0�����������

������������������������

������������������������

������������������������

������������������������

������������������������

������0�����������������

������������������������

�������CRISPR/Cas9 �����������

�������0�������������KEGG [3]�������������������������

��� BRENDA [4]���������������

�����������������������0������������������������

������������0�����������

�����������������

���������������������[1]�

� 1 ����������

�����������������������

Domein������������M-Path [2]��������
������������������������
������������������������

Bacteria����������������0�������
�������0����������������

PhylumActinobacteria
Bacteroidetes
Deinococcus-ThermusFirmicutes
Proteobacteria
Euryarchaeota������������������������

Archea�������0����������������

Eukaryota Ascomycota�����0���������������NBRC

Total

0�����������������������
������������������������

3.� �����

������������������

(1) ������

Class Order Family Genus Strain
3
4

14
4

34
5

48
10

206
19

1

1

1

1

1

2
4
4

3
15
4

13
31
4

29
62
5

228
244
5

2
20

2
43

2
90

3
158

11
714

� 714 ����������������������
��������������0���������

2.� ����NBRC 0������� 7 � 158 � 714 ��� 1��

����0�������������������

���������������������NBRC

�������������������������

63��������ABE �������� Clostridium ���������������� n-��������
0�����������������������
��������0���������������
������������������������
����� 3 ��������������1,3-���������������������������
�0����������������
� 2 KEGG�BRENDA ��������������

(2) ����� (Isoprene)�����������������������

� 3 KEGG�BRENDA �������������

�������������������������� �� �� ������������������
. ��������� ���.����� �.�������.�����.�� � ������.� �� �����.��� .���. �������� .�������� �.�������.�����.�� �����
.��� ������� �.�����������.��
����������������
��������� ������� .����.����������.��

������������������������
������������������������
�� DMAPP �� Isoprene synthase ���������

(4) 1,3-����� (1,3-butadiene)�0��������������� 1, � 2������

1,3-����������������������

KEGG Orthology ������Isoprene synthase ����������������������������

��������������� Actinobacteria ����������������� ABS �������

Alphaproteobacteria ��������������0�������������������������

������������������������

���0������ Firmicutes ����������

0�������0������

�� 1,3-�����0���������������
����������0�������0������

4.� �����
������ 3 ����������������
���������0��������������
������������������������
������������������������
������������������������

� 1 KEGG�BRENDA ��������������

������������������������

� 2 KEGG�BRENDA �������������

���������� NBRC �����������

"$   &!    �����8 ��� HP��������������

&!%'#(�https://www.nite.go.jp/nbrc/industry/index.html
�(3) ����� (Ethyl acetate)�����������������������������
������������������������

[1] ����� (2016) ��������������

������������������������

��������0�������������
������������������

������������������������

[2] Araki, M., Cox, RS. 3rd, Makiguchi, H., Ogawa, T.,�������������� CoA��������

Taniguchi, T., Miyaoku, K., Nakatsui M., Hara, KY.,�����������0������������

and Kondo, A.: Bioinformatics, 31(6): 905-911 (2015).

2, � 3)�����KEGG Orthology ������� 3[3] Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes., https:

������������������������

//www.genome.jp/kegg/kegg.html

����� Firmicutes ��������������0[4] BRENDA

������������������������

Comprehensive

EnzymeSystem., http://www.brenda-enzymes.org

�0�������0������

64

Information

第 70 回日本生物工学会大会講演トピックス集
2018 年 8 月 21 日発行
発行所

公益社団法人 日本生物工学会〒 565-0871 大阪府吹田市山田丘 2-1
大阪大学工学部内
TEL. 06-6876-2731 FAX. 06-6879-2034
E-mail: info@sbj.or.jp
https://www.sbj.or.jp

編

第 70 回日本生物工学会大会実行委員会

集