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乳癌８症例に関する HER２の免疫染色におけるモノクロナール抗体（HER２-MONO）とポリクロナール抗体（HER
厚生連医誌 第２７巻 １号 ２３２〜-POLY）の２７ ２０１８
染色態度の比較および HER２蛍光インサイチューハイブリダイゼーション（HER２-FISH）との相関性の検討

原著

乳癌８症例に関する HER２の免疫染色におけるモノクロナール抗体（HER２-MONO）とポリクロナール抗体（HER２-POLY）の染色態度の比較および HER２蛍光インサイチューハイブリダイゼーション（HER２-FISH）との相関性の検討
長岡中央綜合病院、病理部；臨床検査技師
たけひ竹日けん目的：乳癌症例における HER２染色性に関して、一次抗体による有意差を明瞭にし、臨床診断の精度管理を確立する。
方法：乳癌８症例に関して、染色用キットの中でニチレイバイオサイエンスの HER２キット MONO
および HER２キット POLY を各々の特性を比較し HER２FISH との相関性を比較検討した。
成績：HER２免疫染色における２種類の 抗 体 に 関 して、８例中５例には有意差は認められなかった。３例に関しては、FISH 法との相関性において、モノクロナール抗体が有意であった。
結論：HER２免疫染色に関して、一次抗体としてモノクロナール抗体が有意と判断された。

方法

HER２ FISH において増幅あり、増幅なし、判定不能、境界域と判定された症例に対し HER２ POLY、HER２MONO による免疫染色を実施し各々の染色態度を比較検討した（表４）。染色対象として乳癌の単発浸潤癌であり１０％中性緩衝ホルマリンで７２時間以内に固定された症例を材料とした。

結キーワード：乳癌、HER２、免疫染色（IHC）、蛍光イン
サイチューハイブリダイゼーション（FISH）、モノクロナール抗体（HER２-MONO）、ポリクロナール抗体（HER２-POLY）、染色性、有意差

目た

健太

的

HER２検査では免疫染色によって HER２蛋白の過剰発現の有無を判定し、FISH 法などによって HER２遺伝子の増幅の有無を評価する。HER２ IHC では乳癌細胞の細胞膜における染色強度、細胞膜の全周に占める割合、陽性細胞の割合を総合的に評価し、０〜３＋のいずれかのスコアを記載する（表１、２）。HER２免疫染色（IHC）は抗 HER２抗体薬治療の対象症例を適切に選定するうえで極めて重要である。HER２ IHC 用抗体は体外診断用医薬品として４メーカー６種類が認定されており、高い精度で実施することが求められている。今回、体外診断用医薬品として承認されている染色用キットの中でニチレイバイオサイエンスの HER２
キット MONO および HER２キット POLY を各々の特性を比較し HER２FISH との相関性を比較検討した（表３）。

果HER２ FISH で（＋）の増幅有と判定された症例にお い て HER２ IHC-MONO、POLY い ず れ も３＋の 強い染色強度を呈した。POLY は細胞膜、細胞質ともに強い反応がみられたのに対し、MONO は細胞膜にのみ強い反応がみられた。ER２ FISH で（−）の増幅無と判定された症例においては HER２ IHC-MONO で０を呈したのに対し POLY で１＋の染色反応がみられた。また同じく HER２FISH（−）の症例において HER２-MONO１＋に対し POLY で２＋の反応がみられた。Chr
１７、HER２シグナルがまったく観察されなかった判定
不 能 症 例 で は HER２ IHC-MONO は０、POLY は２＋と結果に差異が生じた。HER２ FISH において境界域と 判 定 さ れ た 症 例 に お い て は HER２ IHC-MONO で０〜１＋、POLY で２＋という染色結果が確認された（表５）。

― 23 ―考察

今回、HER２ IHC-MONO および POLY の同一症例における染色性の違いについて、HER２ FISH の結果を基に検討した。HER２ FISH で増幅有と判定された症例に関しては両者ともに強い反応を呈したが、増幅無し症例において結果に差異が生じた。また判定不能、境界域症例に関しても異なる染色結果を呈した。
MONO は HER２ FISH との相関性があると判定されるのに対し、POLY では増幅有り症例においては相関性があるが、増幅無し症例では相関性は得られなかっ／【Ｋ：】Ｓｅｒｖｅｒ／１８０１０６５５ 新潟厚生連農業協同組合／本文／２０ｆ

厚生連医誌

第２７巻

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１号 ２３〜２
７ ２０１８た。現在我が国では、IHC 法により HER２蛋白発現の検査を行い、IHC 法スコア３＋を治療適応あり、IHCスコア０/１＋を原則治療適応なし、IHC スコア２＋の場合は FISH 法で再検査を行い HER２遺伝子増幅が確認された症例のみを治療適応ありとする施設が多い。
当院においては初めから FISH 法のみ行い、判定のつかない症例に関して IHC 法などで再検査を行う場合がある。HER２ IHC 検査は体外診断用医薬品として認可された抗体を用い、推奨されたプロトコルに則り免疫染色を行うことが重要である。今回 HER２キット
MONO の 染 色 態 度 は 認 識 部 位 が ECD で あ り HER２FISH との相関性が高く、HER２ FISH との関連検査法として判定がつかない症例に精度の高い結果が得られると示唆された。

英 文 抄録Original article
Immunohistochemical HER２ staining comparison between
monoclonal antibody（HER２-MONO）and polyclonal antibody（HER２-POLY）in our eight breast cancer cases andthe correlative examination with HER２ fluorescence insitu hybridization（HER２-FISH）

ogy ; Medical technologist
Kenta Takehi
Objective : About the HER２ immunohistochemical stainability in the breast cancer case, we disclose a significant difference between the primary antibody
and the polyclonal one.
Study design : We compared the immunohistochemicalstainability between HER２ kit MONO and HER２kit POLY（Nichirei, Tokyo）for ８ cases of breast
cancer８cases, and correlated with HER２FISH results.
Results : About two kinds of antibodies in the HER２ immunostaining, the significant difference was notfound in five of eight patients. But about threecases, monoclonal antibody was significantly superior in the correlation with the FISH results.
Conclusion : About HER２ immunostaining, monoclonal
antibody was significantly useful rather than polyclonal one as primary antibody.
Key words : breast cancer, HER２, immunohistochemistry（IHC）, fluorescence in situ hybridization（FISH）,
monoclonal antibody（HER２-MONO）, polyclonal
antibody（HER２-POLY）, stainability, significant
difference

Nagaoka Central General Hospital, Department of pathol-

表１

HER２IHC 判定基準＜乳癌検体＞

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乳癌８症例に関する HER２の免疫染色におけるモノクロナール抗体（HER２-MONO）とポリクロナール抗体（HER２-POLY）の染色態度の比較および HER２蛍光インサイチューハイブリダイゼーション（HER２-FISH）との相関性の検討

表２

乳癌検体のスコア判定上の注意点

1㸸⭘⒆⣽⬊ࡢ୰࡛⣽⬊⭷࡬ࡢ㝧ᛶᰁⰍࢆ᭷ࡍࡿ⣽⬊ࡀ 10㸣௨ୖ࠿ᮍ‶࠿☜ㄆࡍࡿࠋ10㸣ᮍ‶ Ѝࢫࢥ࢔ 010㸣௨ୖ Ѝࢫࢥ࢔ 1+~3+2㸸⣽⬊⭷࡬ࡢ㝧ᛶ⣽⬊ࡀࠊ୍㒊࠶ࡿ࠸ࡣ᏶඲࡛࠶ࡿ࠿☜ㄆࡍࡿࠋ୍㒊࡛࠶ࡿ Ѝࢫࢥ࢔ 1+᏶඲࡛࠶ࡿ Ѝࢫࢥ࢔ 2+~3+3㸸᏶඲࡞⣽⬊⭷ࡢ㝧ᛶᰁⰍࡢᙉᗘࢆ☜ㄆࡍࡿࠋᙅ࠸㹼୰➼ᗘ Ѝࢫࢥ࢔ 2+ᙉ࠸     Ѝࢫࢥ࢔ 3+௨ୖࡢุᐃᇶ‽࡟ࡼࡾࠊุᐃࢫࢥ࢔ 0 ࡲࡓࡣ 1+ࡣ HER2/new ࢱࣥࣃࢡ㐣๫Ⓨ⌧࡞ࡋࠊุᐃࢫࢥ࢔ 2+ࡲࡓࡣ 3+ࡣ HER2/new ࢱࣥࣃࢡࡢ㐣๫Ⓨ⌧ࡀ࠶ࡿࡶࡢ࡜ࡍࡿࠋ

表３

HER２MONO と HER２POLY の特性

HER2MONO⣽⬊እࢻ࣓࢖ࣥࠋ

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POLY⣽⬊ෆࢻ࣓࢖ࣥ⣽⬊⭷࡟≉␗ⓗᰁⰍᛶ(⣽⬊㉁ࡢᰁⰍࡀᑡ࡞

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１号 ２３〜２
７ ２０１８

表４検討症例࣍ࣝࣔࣥࣞࢭࣉࢱ࣮⑕౛
1

HER2FISH
HER2 㑇ఏᏊࢥࣆ࣮ᩘᖹᆒER

PR

HER2/CEP17ุᐃ

2+2+5.85

ቑᖜ࠶ࡾ

6.13

ቑᖜ࠶ࡾ

2

㸫

㸫

32+2+4

㸫

㸫

3.02

ቑᖜ࠶ࡾ

5㸫

㸫

1.08

ቑᖜ࡞ࡋ

62+1+1.22

ቑᖜ࡞ࡋ

72+2+1.29

ቃ⏺ᇦͤ

5.05

82+1+1.70

ቃ⏺ᇦͤ5.20

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HER2 ቑᖜᖜࡀ 2.00ӌࡢሙྜ(+)࡜ุᐃࠋ
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表５HER２IHC と HER２FISH との比較

HER2IHC⑕౛MONO

HER2FISH

POLY13㸩3㸩

㸩23㸩3㸩

㸩

302㸩ุᐃ୙⬟43㸩3㸩

㸩

51㸩2㸩

㸫

601+

㸫

71㸩2㸩

ቃ⏺ᇦͤ

802㸩

ቃ⏺ᇦͤ

HER2 ቑᖜᖜࡀ 2.00ӌࡢሙྜ(+)࡜ุᐃࠋ
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図HER２-MONO×４００
細胞膜に強い染色強度が確認される。
判定スコア３＋

症例２
HER２-POLY×４００
細胞膜および細胞質に強い染色強度が確認される。
判定スコア３＋― 26 ―

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乳癌８症例に関する HER２の免疫染色におけるモノクロナール抗体（HER２-MONO）とポリクロナール抗体（HER２-POLY）の染色態度の比較および HER２蛍光インサイチューハイブリダイゼーション（HER２-FISH）との相関性の検討

図

症例３

HER２-MONO×４００
腫瘍細胞の中で HER２/new 陽性細胞が（−）。
判定スコア：０

HER２-POLY×４００
細胞膜に中等度の染色強度が確認される。
判定スコア：２＋

図 症例５
HER２-MONO×４００
HER２-POLY×４００
腫瘍細胞の一部の膜に限局した弱い染色強度を有する。
細胞膜に中等度〜強度の染色強度が確認される。
判定スコア：１＋
判定スコア：２＋

図 症例７
HER２-MONO×４００
腫瘍細胞の中で HER２/new 陽性細胞が１０％に満たない。
判定スコア：０

HER２-POLY×４００
細胞膜に中等度の染色強度が確認される。
判定スコア：２＋（２０１
８／０２／１
３受付）― 27 ―