体外診断用医薬品
製造販売承認番号

20700AMZ00660000＊＊ 2022 年＊ 2020 年

B型肝炎ウイルス表面抗原キット

7 月改訂（第10版）
4 月改訂（第 9 版）（1000 テスト）

＊＊
＊
＊＊

ご使用に際しては、本電子化された添付文書（電子添文）をよく読んでから使用してください。

【重要な基本的注意】

B型肝炎ウイルス（HBV）
感染の診断は、他の免疫測定法等と同じく、本製品による陽性又は陰性の検査結果のみにより行わず、HBc
抗体測定、HBV−DNA定量検査等、他の検査結果及び臨床経過を考慮して総合的に判断すること。
特に下記の場合は使用方法に留意すること。
1 ）健康診断時のスクリーニング検査
できるだけ検出感度の高いEIA法／化学発光法等を用いた検出試薬を使用し、イムノクロマト法や凝集法で検出感度の低い検出試薬の使用にあたっては、充分に留意すること。
2 ）緊急検査
緊急対応として実施される迅速・簡便な検出試薬において、陰性と判定された場合でも、必要に応じてさらに検出感度の高い検出試薬で再検査することを推奨する。
3 ）B型肝炎と診断された患者の経過観察検査
EIA法／化学発光法、凝集法、イムノクロマト法等いずれの方法を用いた検出試薬でも使用できるが、陰性化した場合はより検出感度の高い検査方法で確認することを推奨する。
注）HBV感染直後はウイルス量が極めて少なく、どのような高感度の検出試薬を用いてもウイルスを確認できません。この時期
は「ウインドウ（空白）期間」と呼ばれており、ウインドウ時に採取された血液では、HBs抗原は必ず検出されるとは限りません。

【全般的な注意】
1 ．本製品は体外診断用であり、それ以外の目的に使用しないこと。
2 ．診断は他の関連する検査結果や臨床症状等に基づいて総合的に判断すること。
＊＊ 3 ．本電子添文に記載された使用方法に従って使用すること。記載された使用目的及び用法・用量以外での使用については、測定結果の信頼性を保証しかねる。
4 ．本キット中の陽性コントロールの原料血液は、ＨＣＶ抗体、ＨＩＶ−1 抗体及びＨＩＶ−2 抗体について陰性を確認しているが、感染性を完全に否定できるものではない。また、不活化（60℃、10 時間の加熱処理）などの操作も行っていない。従って、本品の取扱いにおいては、検体と同様に感染の危険性を考慮し、十分に注意すること。
5 ．使用する機器の添付文書又は取扱説明書をよく読んで使用すること。
【形状・構造等（キットの構成）】
1 ．感作血球抗ＨＢｓウマポリクローナル抗体感作赤血球
2 ．対照血球
ウマ血清感作赤血球
3 ．陽性コントロール
ＨＢｓ抗原陽性コントロール（凝集価： 32 倍〜128 倍）として用いる。
4 ．確認試験液
精製抗ＨＢｓウマポリクローナル抗体を含むりん酸緩衝液で、判定保留検体の確認試験に用いる。
5 ．血球懸濁液
ウサギ血清を含むりん酸緩衝液で、感作血球と対照血球の懸濁液として用いる。
6 ．検体希釈液
ウマ血清を含むりん酸緩衝液で、検体の希釈液として用いる。

＊

感作血球
対照血球陽性コントロール
確認試験液
血球懸濁液
検体希釈液
血球調製容器1000テスト
1．
4 mL 2 本
1．
4 mL 2 本
1 mL 1 本
10 mL 1 本
65 mL 1 本
55 mL 2 本
2本

【使用目的】
血清又は血漿中のＨＢｓ抗原の測定【測定原理】
本試薬はカモ赤血球を担体とし、抗ＨＢｓウマポリクローナル抗体を結合させた逆受身赤血球凝集反応（ＲｅｖｅｒｓｅｄＰａｓｓｉｖｅＨｅｍａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ：Ｒ−ＰＨＡ法）に基づくＨＢｓ抗原測定用試薬
である4）。対照血球を用いることによりスクリーニング時に容易に陽性、陰性判定することが可能である。
1 ．スクリーニング
抗ＨＢｓウマポリクローナル抗体感作赤血球の凝集の有無を調べる。被検検体中にＨＢｓ抗原が存在すると、感作血球は凝集する。
2 ．確認試験
検体と感作赤血球の凝集反応が特異的な抗原抗体反応によるものであることを確認する。
確認試験液（抗ＨＢｓウマポリクローナル抗体）を検体に添加すると被検検体中のＨＢｓ抗原が吸収され凝集価の低下がみられるが、非特異的な凝集の場合には凝集は阻止されず凝集価は低下しない。
3 ．定量試験
凝集反応の認められる最高希釈倍率を定量値とする。
【操作上の注意】
1 ．測定試料の性質、採取法⑴ 血漿を用いる場合、抗凝固剤としてヘパリン、EDTAの使用は検査結果に影響を与えない。

−1−

⑵

血清又は血漿を常法に従って採血し、溶血しないように注意すること。被検血清の不活化（非働化）の有無は、検査結果にほとんど影響を与えない。
⑶ 採血後、すぐに測定を行わない場合は、アジ化ナトリウム（最終濃度 0. 1％）を入れて冷蔵保存するか又は凍結保存すること。
⑷ 被検検体を冷蔵、冷凍保存した場合は室内温度に戻してから使用すること。
２．妨害物質・妨害薬剤⑴ 赤血球及びフィブリンは判定に影響を及ぼすことがあるのでできるだけ除くこと。
⑵ 乳ビ 2000 度（ホルマジン濁度数）、ビリルビンＣ 20 ｍｇ／ｄＬ、ビリルビンＦ 20 ｍｇ／ｄＬ、溶血ヘモグロビン 500 ｍｇ／ｄＬ、リウマチ因子 500ＩＵ／ｍＬの濃度までは影響がない。
３．その他⑴ 測定器具の精度を確認し、各器具の操作法に従い測定すること。
⑵ ドロッパーを使用する際は、ドロッパーの先端に付いた液滴を拭き取り、垂直に立てゆっくりと一定の速度で滴下すること。
⑶ 感作血球液及び対照血球液の滴下後は速やかにマイクロプレートをマイクロプレートミキサーにかけ、十分に混和すること。
⑷ 反応液の蒸発をおさえるため、プラスチック板等でマイクロプレートをカバーして反応させること。
⑸ 操作は手順どおり正確に行うこと。

検体希釈液

第 1ウェル 第 2ウェル 第 3ウェル

ダイリューターかマイクロピペットで検体又は陽性コントロールを 25 μＬとり、第 1 ウェルから第 3 ウェルまで 2 倍段階希釈する。

④

あらかじめ調製しておいた感作血球液と対照血球液をよく懸濁し、ドロッパーを用いて第 2 ウェルに対照血球液を、第 3 ウェルに感作血球液をそれぞれ 1 滴ずつ滴下する。第 1 ウェルには血球を滴下しない。

検体2倍

4倍

8 倍 （希釈倍率）

対照血球液

感作血球液

第 1ウェル 第 2ウェル 第 3ウェル⑤

【用法・用量（操作方法）】
1 ．試薬の調製方法＊⑴ 感作血球液及び対照血球液
感作血球と対照血球の上清を除き血球懸濁液をそれぞれに 2 ｍＬ加え懸濁し、キットに添付の血球調製容器に移し血球懸濁液を更に 12 ｍＬ加え全量 14 ｍＬとして使用する。
○ 調製した感作血球液及び対照血球液は調製後 2〜8℃で1 箇月間は安定である。
○ 使用する各試薬は 15〜30℃に戻してから使用すること。
○ 感作血球液と対照血球液は、調製後 15〜30 ℃で１時間放置又は 2〜8℃で一晩放置後使用すること。
○ 血球懸濁液、検体希釈液、確認試験液に不溶物が生じることがあるが、凝集反応には影響しない。
2 ．必要な器具・器材・試料等⑴ Ｖ型マイクロプレート（メッシュ付）⑵ ダイリューター（ 25 μＬ）⑶ ドロッパー（ 25 μＬ）⑷ マイクロプレートミキサー⑸ 蓋（プレート用）⑹ ピペット（マイクロピペット又はメスピペット）
3 ．測定（操作）法⑴ スクリーニング（定性試験） 表 1 参照
① Ｖ型マイクロプレートを用意し、１検体に 3 ウェル用いる。

表1

マイクロプレートミキサーでよく混和した後蓋をし、振動を与えないように注意して 15〜30 ℃で 1 時間静置後、判定する。
感作血球液、対照血球液滴下後はできるだけすみやかに混和すること。よく混和されない状態のまま血球が沈降すると、正しい凝集像が得られないことがある。

スクリーニング操作
ウェル番号123
検体希釈液 （μL）
252525
検体（μL）
252525検体希釈倍率 （倍）248
感作血球液 （μL）−−25対照血球液 （μL）
−25−
マイクロプレートミキサーで混和して 15〜30 ℃で 1 時間静置後判定）⑵））

確認試験 表 2 参照
Ｖ型マイクロプレートを用意し、 1 検体について 6 ウ
ェル× 2 列用いる。

①検体希釈液
左列

確認試験液
右列
第 1ウェル 第 2ウェル 第 3ウェル 第 4ウェル 第 5ウェル 第 6ウェル②

左列には検体希釈液を、第 1 ウェルから第 6 ウェルまで 25 μＬ滴下する。右列には確認試験液を、第 1 ウェ
ルから第 6 ウェルまで 25 μＬ滴下する。
③ ダイリューター又はマイクロピペットで両列分の検体を 25 μＬずつ 2 本とり、第 1 ウェルから第 6 ウェルまで 2 倍段階希釈する。
④ 全てのウェルに感作血球液を 1 滴（25 μＬ）ずつドロッパーで滴下する。
⑤ マイクロプレートミキサーでよく混和した後蓋をし、振動を与えないように注意して 15〜30 ℃で 1 時間静置後、判定する。

第 3ウェル
第 2ウェル
第 1ウェル 検体No．
1〜8
検体No．
9〜16
検体No．
17〜24

表2

検体No．
25〜31，
C
C：陽性コントロール②③

確認試験操作

ウェル番号
検体希釈液 （μL）
検体（μL）
確認試験液 （μL）
検体（μL）
検体希釈倍率（倍）感作血球液 （μL）

ドロッパーに検体希釈液をとり第 1 ウェルから第 3 ウ
ェルまで、それぞれ 25 μＬずつ滴下する。

⑶−2−125252525225））

225252525425））

325252525825））

4252525251625））

5252525253225））

定量試験
本キットは、定量試験を行うこともできる。

6252525256425））

スクリーニング又は確認試験で陽性と判定された検体の最終凝集価を求める。
① ドロッパーで検体希釈液をとり 1 滴（ 25 μＬ）ずつ各ウェルに滴下する。
② ダイリューター又はマイクロピペットで検体又は陽性コントロールを 25 μＬとり、第 1 ウェルから 2 倍段階希釈列をつくる。
③ 全てのウェルに感作血球液を 1 滴（ 25 μＬ）ずつドロッパーで滴下する。
④ マイクロプレートミキサーでよく混和した後蓋をし、振動を与えないように注意して 15〜30 ℃で 1 時間静置後、判定する。

下図のときは、高力価の可能性があるので 64 倍以上の希釈で再試験を行うこと。
検 体 希 釈 倍 率2倍

凝集像

確認試験液列⑶

定量試験
凝集の認められた最高希釈倍率をＨＢｓ抗原価とする。
2 ．判定上の注意⑴ ウィンドウ期間に採取された血液では、ＨＢｓ抗原は必ず検出されるとは限らない。
⑵ 自己免疫疾患患者の検体では免疫反応の場合、非特異的反応が起こりうるので測定結果に基づく診断は他の検査や臨床症状等を考慮して総合的に判断すること。

凝集（−）

血球の一部がウェルの中心部に沈降し、その周辺に環状又は網状の血球凝集が認められるもの
凝集血球環が大きくなり、その周辺に明らかな血球凝集が網状に認められるもの

凝集（＋）

凝集血球が一面に網状に広がっているもの⑴

スクリーニング
感作血球の凝集が（−）のものは陰性とする。
対照血球の凝集が（−）で、感作血球の凝集が（＋）を示すものを陽性とする。
感作血球及び対照血球の凝集が（＋）のものは保留とし、確認試験を行う。

第 3 ウェル
（感作血球）
第 2 ウェル
（対照血球）⑵

陰性陰性陽性16 倍 32 倍 64 倍

検体希釈液列判定

血球の大部分がウェルの中心部に沈降するもの

8倍

確認試験液列【測定結果の判定法】
1 ．凝集像の判定
凝集像の判定は以下の基準で行う。
血球の全てがウェルの中心に沈降するもの

4倍

検体希釈液列保留 （確認試験へ）

確認試験
検体希釈液の列（左列）と確認試験液の列（右列）との凝集価の差（ＨＢｓ抗体による凝集価の低下）が 2 ウェ
ル以上あるときは、ＨＢｓ抗原陽性とする。第 1 ウェルから第 5 ウェルまでの両列の凝集価の差がないときは、陰性とする。その他は判定保留とし、原理の異なる測定方法（ＲＩＡ法、ＥＩＡ法、ＣＬＥＩＡ法等）により確認する。

【性能】
1 ．感度試験
陽性コントロールを試料として定量試験を行った場合、希釈倍率で 32 倍から 128 倍の力価を示す。
2 ．特異性試験
ＨＢｓ抗原陰性管理用血清を測定する時、ＨＢｓ抗原陰性であると判定できる。
ＨＢｓ抗原陽性管理用血清を測定する時、ＨＢｓ抗原陽性であると判定できる。
3 ．同時再現性試験
陽性コントロールを試料として 10 回定量試験を行った場合、最頻値± 1 管以内である。
4 ．最小検出限界（自社データ）
5ＩＵ／ｍＬ（国立感染症研究所ＨＢｓ抗原標準品で値付けした。）
5 ．国立感染症研究所依頼試験の成績 表 3 参照
6 ．相関性試験成績
本品と同じ測定法を採用しているＡ社キットとの相関性を検討した。
（結果）70 検体について測定を行った結果、判定は 100％一致した。
A社キット
−

本 品＋−

200＋050

Low Titer（♯105）

Mixed Titer（♯204）

Seroconv．
（♯929）（ 1 回目）

National Standard（ 1 回目）

No． IU／mL スクリーニング 確認

No． IU／mL スクリーニング 確認 No． IU／mL スクリーニング 確認

No．スクリーニング 確認

No． IU／mL スクリーニング 確認
116＋＋28＋＋

表3Negative（ 1 回目）
No．

スクリーニング 確認 No．

スクリーニング 確認

1（−）＋16（−）−

10．3−

1＞3．8＋

161．2

−

1−

2（−）

−

17（−）

−

20．8

−

20．5

−

17＞3．8

−

2

不能

3（−）

−

18（−）

−

30．3

−

30．8

−

181．7

−

3−

34−

4（−）

−

19（−）

−

40．3

−

4＞3．8＋

190．4

−

4−

42−

5（−）

−

50．3

−

52．2

−

200．8

−

5−

51

−

6（−）

−

60．6

−

60．5

−

211．2

−

6−

60．
5

−

7（−）

−

70．1

−

7NEG−

222−

7−

70．
25

−

8（−）

−

80．2−

80．3−

23＞3．8−8−80．125

−

9（−）

−

90．2

−

9NEG

−

24＞3．8＋

9−

10（−）

−

100．3

−

10＞3．8＋25＞3．8＋

11（−）

−

11NEG

−

111．7＋

12（−）

−

120．3

−

120．1

−

13（−）

−

130．6

−

130．4

−

14（−）

−

140．2

−

14＞3．8＋

15（−）

−

150．2

−

150．4

−

−

Negative（ 2 回目）
No．

スクリーニング 確認 No．

スクリーニング 確認保留−保留Low Titer（♯103）

Mixed Titer（♯203）

Seroconv．
（♯929）（ 2 回目）

National Standard（ 2 回目）

No． ng／mL スクリーニング 確認

No． ng／mL スクリーニング 確認 No． ng／mL スクリーニング 確認

No．スクリーニング 確認

No． IU／mL スクリーニング 確認−

111（−）

−

16（−）

−

10．6

2（−）

−

17（−）

−

20．9

3（−）

−

18（−）

−

32．3

−

16＞2．5＋

1

−

16＋

−

20．7

−

171．7−

2不能

28＋

欠番

3＞2．5＋

18＞2．5−3−344（−）

−

19（−）

−

4−0．3

−

4NEG

−

19＞2．5＋4−425（−）

−

−

50．8−

52．3−

200．7−

5−516（−）

−

−

61．2

−

62．2

−

211．7−

6−

60．
57−

（−）

−

70．5−

7＞2．5±22＞2．5

−

7−

70．
25

−

8（−）

−

80．8

−

81−

23＞2．5＋8

不能

80．125

−

9（−）

−

9NEG

−

92．3

−

240．8

−

9−

10（−）

−

101．7−

10NEG−

25＞2．5±11（−）

−

110．3

−

11＞2．5

−

12（−）

−

120．8

−

1213（−）

−

130．6

14（−）

−

1415（−）−

150．81．1−−

132．2−

欠番14＞2．5−−

15＞2．5＋−3−±

保留

±−−

【使用上又は取扱い上の注意】
1 ．取扱い上（危険防止）の注意⑴ 検体はＨＢＶ、ＨＣＶ、ＨＩＶなどによる感染の危険性があるものとして注意して取り扱うこと。検査にあたっては感染の危険を避けるために使い捨て手袋を着用し、また口によるピペッティングを行わないこと。
⑵ 試薬が過って目や口に入った場合には、水で十分に洗い流す等の応急処置を行い、必要があれば医師の手当等を受けること。
2 ．使用上の注意⑴ 本品は凍結を避け、貯蔵方法に従い保存すること。
⑵ 使用期限を過ぎた試薬は使用しないこと。
⑶ 製造番号の異なるキットの試薬を組み合わせて使用しないこと。また、同一製造番号の試薬であっても、試薬を注ぎ足さないこと。
⑷ 繰り返し使用したマイクロプレートは、洗浄不良や傷のために凝集像が多少異なる場合があるので、十分留意すること。
⑸ 試薬にはいずれも防腐剤（ 0.1％アジ化ナトリウム）を加えてあるが、開封後は微生物等による汚染に注意すること。汚染すると、感作血球及び対照血球が沈むのに時間がかかる等、判定困難になることがある。
3 ．廃棄上の注意⑴ 使用後の検体、試薬、検体に使用した器具類は廃棄前に下記のいずれかの方法で処理を行う。
① 0.05 ｗ／ｖ％ホルマリン溶液に 37℃、 72 時間以上浸す。
② 2 ｗ／ｖ％グルタルアルデヒド溶液に 1 時間以上浸す。
③ 次亜塩素酸ナトリウム溶液（有効塩素濃度 1000ｐｐｍ以上）に１時間以上浸す。
④ 121℃、 20 分以上オートクレーブにかける。
⑵ ダイリューターは使用後 2 ｗ／ｖ％グルタルアルデヒド溶液に 1 時間浸して消毒し、水洗後、ガスバーナーで 5〜10秒間先端部を焼くこと。
⑶ 全ての試薬にはアジ化ナトリウムが添加されているので、廃棄の際には爆発性の金属アジドが生成しないように十分注意して多量の水を流しながら行うこと。
＊⑷
試薬及び器具等を廃棄する場合には、医療廃棄物等の廃棄物の処理及び清掃に関する法律、水質汚濁防止法等の規制、感染性廃棄物処理マニュアル等に従って処理すること。
＊⑸
検体、廃液等が飛散した場合には、次亜塩素酸ナトリウム溶液（有効塩素濃度 1000 ｐｐｍ以上、 1 時間以上浸漬）、グルタルアルデヒド（ 2 ｗ／ｖ％、 1 時間以上浸漬）等による拭き取りと消毒を行うこと。

【主要文献】
1 ）吉村英理子、林純、柏木征三郎：ＨＢｓ抗原および抗体測定における鳥類（カモ）血球を用いた凝集法の検討．基礎と臨
床 29：4545− 4550, 1995．
2 ）赤羽賢浩、他：逆受身赤血球凝集反応によるＨＢｓ抗原の測定について．基礎と臨床 19：515− 520, 1985．
3 ）Ｂ
ｌｕｍｂｅｒｇＢＳ, ＡｌｔｅｃＨＪ, Ｖｉ
ｓｎｉｃｈＳ：Ａｎｅｗａｎｔｉｇｅｎｉｎｌｅｕｋｅｍｉ
ａｓｅｒａ. ＪＡＭＡ 191：541− 546, 1965．
4 ）今井光信、他：ＨＢｓ抗原と抗体の検出法−Ｒ−ＰＨＡとＰＨＡについて−．ＭｅｄｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ 3 ：239− 244, 1975．
5 ）真弓忠、吉澤浩司、宮川侑三：Ｂ型肝炎ウイルス感染の基礎と臨床．日本医師会雑誌 83：691− 712, 1980．
【問い合わせ先】株式会社特殊免疫研究所 営業部〒 112− 0004
東京都文京区後楽一丁目 1 番 10 号
日本生命水道橋ビル
ＴＥＬ 03− 3814− 4081 ＦＡＸ 03− 3814− 5957

【貯蔵方法・有効期間】
凍結を避け、 2〜8℃で保存。
製造後 1 年間有効（包装に表示の使用期限内に使用すること。）＊【包装単位】

1000 テスト／スクリーニング（ＣＯＤＥ：1ＡＡ3）

製造販売元

マMA31010722−4−