子馬のロドコッカス感染症
Rhodococcus equi infection in Foals（第２版）
公益社団法人

中央畜産会

目

次

発刊にあたって …………………………………………………… 1
子馬のロドコッカス感染症の要約 ……………………………… 2
子馬のロドコッカス感染症について
Ⅰ．発生の歴史と分布 …………………………………………… 3
１．発生の歴史２．本症と強毒株
Ⅱ．病原体 ………………………………………………………… 4
１．菌の分類と特徴
２．菌の遺伝学的特徴
３．菌の培養とコロニー形態
４．菌の生物学的性状
５．病原性試験
Ⅲ．馬飼育環境におけるR. equiの生態 ……………………… 7
１．感染経路２．生態と感染源
３．強毒株を指標とした環境汚染調査
Ⅳ．臨床所見 ……………………………………………………… 8
１．臨床症状２．血液所見３．Ⅹ線所見
Ⅴ．診断 …………………………………………………………… 10
１．臨床細菌学的診断
２．血清学的診断
３．病理学的診断
Ⅵ．実験感染モデルにおける病態解析 ………………………… 14
１．実験感染モデル子馬の作出
２．臨床経過からみた各種診断法の有用性
３．病理解剖学的所見
Ⅶ．治療と予防 …………………………………………………… 15
１．治療法
２．予防法
おわりに …………………………………………………………… 16

発刊にあたって子馬のロドコッカス感染症は、子馬に肺炎や腸炎を起こす難治性の細菌性疾患です。
本症は世界各国の馬産地で発生しており、わが国でも戦前から発生が報告されています。1960年代からは、北海道日高地方の軽種馬で毎年春から夏にかけて散発的に発生がみられ、時には地方病的に流行しています。本症の病原体であるRhodococcus equi（R. equi）は馬の飼育環境の土壌中に広く生息し、子馬は呼吸器や消化器から感染します。かつては、本病の発生要因は、漠然と、子馬側の易感染因子が重要であると考えられていましたが、近年の精力的な研究により、R. equiには強毒株と無毒株が存在し、強毒株は病原性に関与するプラスミドを有していることが明らかにされてきました。またこの強毒株を用いた感染モデル子馬の様々な研究から、本病の発症機序や診断・治療法に関する多くの知見も得られてきています。このような成果は、主として北里大学、日高家畜衛生防疫推進協議会およびJRA競走馬総合研究所が共同で実施した調査研究によるものです。この小冊子が本病の防疫に有効な指針を示すものとなれば幸いです。
平成28年２月
公益社団法人中央畜産会

1

子馬のロドコッカス感染症の要約
子馬のロドコッカス感染症は、１～３ヵ月齢の子

理組織学的検査では膿痬周囲にマクロファージの浸馬に多く認められる疾患で、重度な化膿性肺炎や腸潤を認める。ギムザ染色やグラム染色ではマクロフ炎ならびに付属リンパ節炎を主徴とする難治性の細ァージに貪食された多数の菌体を見出すことができ菌感染症である。本症は感染初期の臨床症状に乏しる。肺病変のほかには、まれに消化管にも感染性のく、畜主が子馬の異常に気付いた時点では病態はか病変がみられる。すなわち、小腸パイエル板の化膿なり進行し、病状は悪化していることが多い。本症

性肥大、前腸間膜リンパ節の膿瘍形成、結腸におけの死亡例では肺や腹腔に膿痬が認められることかる腸壁の膿瘍形成および粘膜面の潰瘍形成などであら、感染経路は気道ないし消化管で、感染源は子馬る。病原体であるRhodococcus equiはグラム陽性球の飼育環境の土壌と考えられている。本病は散発的桿菌で、土壌中に生息し、馬の飼育環境中に広く存発生を特徴とするが、時に地方病的に集団発生を引在する。本菌には強毒株と無毒株がある。強毒株はき起こす場合もある。わが国では毎年晩春から夏に３種類の類似した85kb、87kbおよび90kbの病原性かけて北海道の軽種馬生産地で発生が認められていプラスミドのいずれかを保有しており、これらのプる。日高地方の罹患率は～5％、致死率は約8％と推

ラスミド上に毒力関連抗原遺伝子の存在が近年明ら測されている。本症の治療期間は長く、診断が遅れかにされた。本症にはワクチンなどの予防法が確立た例では予後不良となり、死亡率が極めて高くなる

されていないため、感染子馬を如何に早期診断し、ため軽種馬生産地では経済的損失の大きな幼駒感染治療を開始するかが予後を左右する。本症の診断法

症として問題となっている。病理学的には肺の化膿としては、発熱などの臨床症状に加えて、気管洗浄

性肉芽腫性気管支肺炎が主病変である。急性例では液を用いた分離培養法やPCR法、あるいはスクリー

赤色肝変化病巣の中心に微小膿痬を認め、慢性例でニング法として有用な血清抗体を検出するELISA法

は肺膿痬の形成がみられる。肺膿痬の大きさは小豆がある。治療法としては、ゲンタマイシンとセファ

大から鶏卵大までさまざまで、多くは多発性であロチンの静脈内投与あるいはリファンピシンとアジる。肺病巣は、後葉前部および副葉に好発する。病

スロマイシンの経口投与が有効である。

2

子馬のロドコッカス感染症について

Ⅰ

発生の歴史と分布

１．発生の歴史
子馬のロドコッカス感染症は、１～３ヵ月齢の子馬に認められる疾患で、重度な化膿性肺炎や腸炎ならびに付属リンパ節炎を主徴とする難治性疾患である。1923年、スウェーデンのMagnussonは、本症の起因菌であるRhodococcus equiを、初めて発見した。それ以降、ヨーロッパ、北米、南米、オースト
ラリア、ニュージーランド、南アフリカ共和国など
多くの国で本症の発生報告がなされている。わが国でも1940年代に子馬病の原因菌の一つとして本菌が記載されており、原川らが1949年に青森県の子馬感染例から本菌を初めて分離した。1960年以降になると、競走馬生産の中心地である北海道日高地方においても、本症の発生報告がなされるようになった。
本症の発生時期は毎年４月下旬から９月上旬で、30～50日齢の頃に発病し、50～70日齢の頃に死亡する場合が多い。日高地方では年間20頭前後の子馬が本症で死亡あるいは予後不良で淘汰されている。本症
は通常散発的に発生するが、特定の牧場では地方病的に毎年発生する。諸外国では本症の罹患率は５～17％、致死率は40～80％と報告されている。わが国の日高地方における罹患率は～5％であり、その致
死率は約8％と推定されている。
なお、ヒト医療においては、後天性免疫不全症患者におけるR. equi感染が問題となっている。

２．本症と強毒株
日高地方において、1993年から1995年の４年間に実施された細菌学的調査によれば、R. equiは肺膿瘍などの病変部と主要臓器並びに腸管内容物から多数分離され、ほとんどの株が15～17kDa抗原（毒力関連抗原）を発現していた。また、これらの抗原は85、87および90kbのプラスミド（病原性プラスミド）にコードされていた。以上のことから、毒力関連抗原を発現する病原性プラスミド保有株は馬に対する強毒株であることが明らかになった。なお、2010年から2012年の３年間の日高地方の調査では、
強毒株は87kbの病原性プラスミドを持つ株が全体の８割を占めており、残りは90kbの病原性プラスミドを持つ株であった。これは飼育環境中の強毒株における比率を反映しているものと推測され、３種類の病原性プラスミド保有株間での馬に対する病原性に大差はない。また、R. equiは正常な子馬の糞便からもしばしば分離されるが、そのほとんどは病原性プラスミドを保有しない無毒株で、罹患馬の腸管内容物から分離される多量のR. equiには、高率に強毒株が含まれている。子馬を用いて行った感染実験
では、強毒株は本症を再現できたが、無毒株は再現できなかった。また本症は土壌中のR. equiの感染によって引き起こされるが、馬の飼育環境の土壌中に存在する本菌のほとんどは無毒株であり、強毒株に汚染された牧場で本症の発生が多い。

3

Ⅱ

病原体

１．菌の分類と特徴

トーシスによって菌体を貪食すると細菌を含有する細胞質内の小胞体にライソゾームが結合して細菌は消化

子馬のロドコッカス感染症の原因菌であるR. equiされる。R. equiの場合は小胞体へのライソゾームの結は、1923年にスウェーデンのMagnussonによって化合が阻害されるため、マクロファージの細胞質内で膿性肺炎を示す子馬の肺膿瘍から分離され、旧学名

R. equiは生存できると考えられている。

Corynebacterium equiと命名された。その後の細胞壁

２．菌の遺伝学的特徴

糖脂質の化学組成に基づく化学分類（1980年）により、Mycobacterium、GordoniaおよびCorynebacterium

R. equiの染色体DNAの全塩基配列は2010年に解読属の20菌種がRhodococcus属に分類変更され、本菌もされ、標準株（103S株）の全塩基数は5043kb、GC含

そこに再分類された。現在ではRhodococcus属には56

量は68.8％である。

種が属しているが、病原性が知られているのはR. equiを含めた数種類のみである。

３．菌の培養とコロニー形態

R. equiは好気性、非運動性のグラム陽性球桿菌で、本菌の培養は30℃で48～72時間行う。特に選択培地

多糖体の莢膜を持つ（図１）。本菌は本来、土壌中に（NANAT培地：表１）上での増殖は遅く、典型的なコ生息する細菌（土壌１g当り数百から数百万個存在）

ロニーの観察には３～５日を要する。血液寒天培地にで、強毒株（マウスへの実験的接種における50％致死よる24時間培養では、溶血性は示さず、半透明灰白色

量が106個）と無毒株（＞108個）が存在する。発症子の光沢を持つ小さなコロニーが認められる（図２）。

馬の病変部から分離される菌株のほとんどは強毒株で３～５日後には３～６mmの大きな粘液様に膨隆したあり、土壌および糞便から分離される株の多くは無毒

サーモンピンクの典型的なコロニー形態を示す。しば株である。牛、羊、豚などの家畜の飼育環境や畑ある
いは公園などの土壌からは無毒株しか分離されないが、馬の飼育環境からは強毒株が分離される。また本症が地方病的に発生している牧場の飼育土壌は発生のない牧場に比べ、強毒株の汚染度合いが高い。強毒株
は菌体表層に15～17kDaの毒力関連抗原（Virulemceassociated protein antigen：VapA）を発現しており、これをコードする遺伝子は強毒株が保有している３種
類の病原性プラスミド（85、87および90kb）に存在している。
本菌はマクロファージに貪食された後も死滅、消化されず、細胞質内の小胞体内で生存し複製することができる。通常の細菌ではマクロファージがエンドサイ

図１．R. equiの電子顕微鏡像：CPが莢膜

4

表１．NANAT培地の組成
基礎培地 普通寒天培地あるいはハートインフュージョン寒天培地などに酵母エキス10ｇ/ℓとグルコース10
ｇ/ℓを追加する。
自家製の馬肉エキスを加えるとさらに発育が良い。
抗菌剤等 滅菌した培地を55℃に冷やした後、４種類の添加剤を加える
・ナルジクス酸
20μg/mℓ・ノボビオシン
25μg/mℓ・シクロヘキシミド
4μg/mℓ・亜テルル酸カリウム 50μg/mℓ※４種類の添加剤は滅菌蒸留水で100倍液を作製し、冷凍保存する。感染子馬の臓器材料など真菌の汚染がないと思われる
検体からの分離培養にはシクロヘキシミドを除いたNANAT培地が良い。

図２．血液寒天培地のR. equi：コロニーは光沢のある半透明灰白色で、溶血性は示さないそ109個/mℓの菌液を準備し、これを滅菌生理食塩水
で10倍（10 8個）および100倍（10 7個）に希釈する。
これらの菌液を４～５週齢のマウス（ddyなど）の尾静脈内に0.2mℓ接種して１週間観察する。マウスは、接種菌が強毒株であれば５～６日で死亡するが、無毒株であれば死亡しない。強毒株のマウス50％致死量（LD50）は静脈内接種で２～４×106個であるが、接種経路によって大きく変動する。例えば、腹腔内接種のLD50は静脈内接種菌量の10倍となる。
２）毒力関連抗原の検出
図３．NANAT選択培地のR. equi：コロニーは濃灰色露滴状で融合性

強毒株は15～17kDa抗原（VapA）を発現するので毒力マーカーとして利用できる。抗原検出にはウエスタ
ンブロット法を用る。先ず菌体抗原をSDS－ポリアク

しば近隣のコロニーと融合する。長く放置するとコロ

リルアミド電気泳動（SDS－PAGE）した後、ニトロセ

ニーは黄褐色を帯びる。NANAT培地では、培養２～

ルロース膜に転写し、R. equi感染子馬血清あるいは15

３日後に亜テルル酸カリウムを還元し、２～３mm大～17kDa抗原（VapA）に対するマウスモノクローナルの濃灰色のコロニーが観察される（図３）。なお、本抗体と反応する毒力関連抗原を検出する（図４）。なお、菌を38℃で継代培養を続けると無毒株化する。これは本法は多数検体の検査には不向きであるので、多数検

病原性プラスミドの脱落した菌の方がプラスミドを保

体を一度に検査できるコロニーブロット法が開発され有する菌よりも増殖速度が速いため、継代を重ねるうている（図５）。純培養した分離株を滅菌ツマヨウジでちにプラスミド脱落株の比率が高くなることによると拾い、寒天培地のシャーレに縦横６×７個となるよう考えられている。

に穿刺して36時間培養の後、穿刺部に形成されたコロ４．菌の生物学的性状

ニーをそのままニトロセルロース膜に転写する。これを105℃、１分間オートクレーブで熱固定する。この後

R. equiはグラム染色陽性で、抗酸性を示す。これははウエスタンブロット法と同じく、モノクローナル抗結核菌と同様にミコール酸を含む莢膜が存在すること

体で15～17kDa抗原（VapA）の存在を確認する。ここによる。カタラーゼ、ウレアーゼ（18時間以上）陽で注意することは15～17kDa抗原（VapA）の発現が培性。硝酸塩還元。炭水化物とカゼイン分解能を欠く。

養温度とpHに影響される点である。抗原は培養温度

運動性と溶血性なし。また、R. equiはequi factorsと38℃、培地のpH6.5で最も良く発現する。菌の培養は何呼ばれる菌体外酵素（ホスホリパーゼCとコレステ

れの方法も培地のpHを6.5～7.0とし、38℃で培養する。

ロールオキシダーゼ）を産出し、この特性に基づく
CAMP試験ではCorynebacterium psudotuberculosisおよびStapylococcus aureusとの相乗溶血活性を示し､本菌の簡易同定法として利用される。
莢膜はグルコース、マンノースおよびグルクロン酸などからなる多糖体で、中沢らは菌体凝集試験により27種の血清型に、Prescottらはゲル内沈降反応により７種の血清型に分類しているが、莢膜型と病原性に関連は認められていない。
また、R. equiには、結核菌と同様にミコール酸が細胞壁のペプチドグリカン層の外側にアラビノガラクタ
ンと共有結合して存在している。

５．病原性試験
１）マウス病原性試験
マウスを用いた病原性試験は、先ず分離株を普通ブ
イヨンなどの液体培地で30℃、48時間培養して、およ図４．ウエスタンブロット法による毒力関連抗原の検出：
レーン１と３は強毒株（ATCC33701株とL1株）、
レーン２と４はそれぞれのプラスミド脱落株。Ａは感染子馬血清による反応、Ｂは15〜17kDa抗原（VapA）に対するモノクローナル抗体による反応。

5４）PCR法を用いた迅速同定法
R. equiの強毒株が有する毒力関連抗原をコードする
VapA遺伝子の塩基配列をもとに、PCR法が開発され、気管洗浄液中の強毒株の迅速同定に利用されている。
子馬の気管洗浄液や糞便などの検査材料から、市販のDNA抽出キット（InstaGane matrix, BioRad社など）を用いてDNAを抽出する。PCRプライマーおよび反応液は表２に示すものを準備する。PCR反応は、変性
94℃、90秒、アニーリング55℃、１分

エクステンション72℃、２分を30サイクル行い、このPCR反応液を
アガロース電気泳動し、エチジウムブロマイドで染色すると564bpのVapA遺伝子の増幅産物が確認できる（図７）。
表２．R. equiのVapA遺伝子を検出するためのPCR法
プライマー：IP1（5'-GACTCTTCACAAGACGGT-3’）
IP2（5'-TAGGCGTTGTGCCAGCTA-3’）

図５．15〜17kDa抗原（VapA）に対するモノクローナル抗体を用いたコロニーブロット法

３）病原性プラスミドの検出と型別
R. equi強毒株の病原性プラスミドは85kb、87kb、90kbの３種類が知られている。これら病原性プラスミドの検出と型別は、強毒株の同定や疫学調査に有用である。
R. equi強毒株からの病原性プラスミドの抽出は、まず菌株を液体培地で36時間培養する。対数増殖期の菌体をアルカリ法で溶菌させてプラスミドを抽出し、精

成分

容量/反応

マスターミックス
10xPCRBuffer
5μl
dNTP（各dNTP25mMを含有） 4μl
プライマーIP1
適量
プライマーIP2
適量
TaKaRaTaq（５U/μl）
0.5μl
滅菌蒸留水
適量

最終濃度
１x
各dNTP200μM
1μM
1μM
2.5U
ー

テンプレートDNA
テンプレートDNA

10μl

ー

トータル容量50μl

ー※参考文献 Sekizaki et al. (1995) Gene 155:135-136
Takai et al. (1995) J Clin Microbiol 33: 1624-1627

製してアガロース電気泳動、エチジウムブロマイド染
色すると大きさの異なるプラスミドが確認できる（図６）。これらプラスミドの型別は、抽出したプラスミ
ドを制限酵素EcoRIで処理し、電気泳動によるそれら
バンドパターンを比較・分類することで、12種類に型別される。

図7．R. equiのVapA遺伝子のPCR法：馬の呼吸器の常在菌と病原菌13種類（レーン１〜13）、R. equi強毒株（ATCC33701株：レーン14とL1株：レーン16）およびそれらのプラスミド脱落株（レーン15と17）。15〜
17kDa抗原遺伝子を有するR. equi強毒株（レーン14と16）のみに564bpの特異バンドが認められる。

図６．病原性プラスミドの検出：レーン１から８はR. equi
分離株で、Mは85kbプラスミド（ATCC33701株）と90kbプラスミド（L1株）を混合したマーカー

6注）Mはマーカー。レーン１〜13の菌種は、それぞれ
1; Actinobacillus equuli, 2; Bordetella bronchiseptica,
3; Enterobacter aerogenes, 4; Enterococcus faecalis,
5; Escherichia coli, 6; Klebsiella pneumoniae,
7; Mycobacterium avium complex, 8; Pasteurella spp.,
9; Pseudomonas aeruginosa, 10; Staphylococcus aureus,
11; Streptococcus equi subsp. equi,12; Streptococcus equi subsp. zooepidemicus,
13; Streptococcus pneumoniae.

Ⅲ

馬飼育環境におけるR. equi の生態汚染が広がるものと考えられる。事実、本菌は厩舎

１．感染経路内の空気中からも分離され、特に乾燥した風が吹く

本症の感染経路は経気道および経口である。これ日には浮遊菌数が多く検出される。これは、飼育環までの疫学調査から、わが国の症例ではそのほとん

境土壌が感染源となって気道感染が起きる可能性をどが肺炎を原発病巣としており、腸炎や腸付属リン

強く示唆している。

パ節炎は肺の化膿性病巣からの滲出物が気管の線毛運動により上向性に咽喉頭まで押上げられ、これら

３．強毒株を指標とした環境汚染調査

R. equiを含む滲出物（喀痰）を嚥下して消化管に至

これまでに述べたように、本菌には強毒株と無毒り、小腸のパイエル板のM細胞などを介してR. equi株が存在する。北海道日高地方および青森県の軽種が取り込まれることで病変が形成されると考えられ

馬生産牧場の土壌および馬糞便中の強毒株を検索している。しかしながら腸管病変だけを有する症例もたところ、過去に本症の発生があった牧場は強毒株

存在することから、小数ではあるが直接経口感染にに濃厚に汚染されていることが判明した。無作為により腸炎や腸付属リンパ節炎が引き起こされる場合選んだ牧場では、全く強毒株が分離されなかった牧もある。

場から高い頻度で分離された牧場まで様々であった。強毒株の汚染調査により、その牧場における本２．生態と感染源

症発生の可能性と危険度を推察できる。また、この感染源は馬の飼育環境中の土壌である。本菌は古調査は予防衛生面からも汚染牧場の飼育環境の改善

くから土壌細菌と考えられてきたが、本格的な疫学の指標として有用であると考えられる。一方、子馬調査はWoolocockらがNANAT選択培地を開発した

糞便中にも高濃度に本菌が存在する。子馬糞便中の2

1980年以降に行なわれた。馬の飼育土壌からは10

強毒株の割合を調べたところ、同一牧場の土壌と親～104個/gの範囲で本菌が必ず分離できる。R. equi

馬糞便中の強毒株割合に比較して、有意に高かっは10～40℃で発育可能である。土壌浸出液でも増殖た。さらに感染子馬の糞便中には健康子馬に比較し可能である。また、発育至適pHは７～８であるが、て極めて高濃度の強毒株が存在することから、感染

pH4.8～8.1の土壌からも分離されている。本菌は表子馬の糞便は重要な牧場環境汚染源と考えられる。

土に多く存在し、地下30cm以下の土壌からはほと

馬生産歴の長い牧場ほど感染子馬による強毒株汚染

んど分離できない。また、家畜の飼育環境のみならが進行し、本症の発生頻度が高くなり、地方病的発ず、広く土壌から分離される。本菌は腸内細菌の一生がみられる傾向がある。Magnussonは本症が地面も持ち合わせ、新生馬から３カ月齢までの子馬の方病的に発生する牧場の妊娠馬を、全く本症の発生、その後、腸内細腸管内で増殖し（103～105個/g）がない牧場に避難させて、そこで子馬を出産させる

菌叢が形成されるにつれて菌数は減少する。成馬でことにより本症を予防したと1923年の論文で報告しは通常は病気を起こさず、通過菌（≦10 個/g）と考ている。このような対策は、強毒株に汚染された牧

えられている。しかし、パドックなどに排泄された場におけるR. equiの感染の機会を断つことになり、糞便中で菌は1,000倍以上に増殖し飼育環境を汚染すロドコッカス感染症を未然に防ぐために有効な手段る。この様に、R. equiは馬の腸管と土壌を循環し、であると考えられる。

2

7

Ⅳ

臨床所見

１．臨床症状本症は１～３ヵ月齢の子馬にみられ、とくに30～
50日齢の子馬に多発する。罹患した子馬は、通常
38.5～40.0℃の発熱を示し、漸次、発咳など呼吸器症状を呈するようになる。また、挙動不安あるいは体動を嫌うようになり、横臥姿勢をとることが多くなる。実験感染例では、10日～２週間の潜伏期の後、体温の上昇が始まる。発熱後、数日間は元気や食欲に変化は認められず、朝・夕の体温測定をしていないと異常に気付かないことが多い。症状が進行すると、鼻翼の拡張や腹式呼吸がみられるようになり、呼吸困難に陥った症例では、可視粘膜はチアノーゼを示す。このような子馬は哺乳しなくなり、しだいに衰弱し、ときには意識障害を起こす。聴診では、肺の粗励音のほか、ラッセル音や警笛音を聴く
場合もある。このような重症例は、治療を施さなけ
れば、数日以内に死亡することが多い。罹患馬は、ときには数週間にわたる慢性経過をたどる。慢性例
では体温の上昇、沈鬱、呼吸困難、呼吸頻回、頻脈などが認められる。また、このような子馬はふつう元気がなく、発育が悪いこともある。膿性鼻漏や弱々しく深い咳が認められることもあるが、必発の図８．R. equi自然感染子馬の球節炎（元家畜衛生試験場
石野清之博士提供）

症状ではない。聴診では、肺の硬化による乾性の粗
励音あるいは明瞭な気道音として聴取される。肺硬ず、臨床的に明瞭な消化器症状が観察されることは化部が広範囲におよぶ場合あるいは肺表面にある場

まれである。野外例では、これといった症状もなし

合は、打診によって、鈍性領域として認められる。

に死亡しているところを発見され、病理解剖ではじ罹患した子馬はふつう、運動負荷に耐えられず、小めて肺に多発性膿瘍が認められる症例もあれば、突さなストレスでも虚脱に陥るなど、急激な症状の悪

然に高熱を発し、呼吸速迫あるいは呼吸困難に陥る化をきたすことがある。また、四肢関節に関節炎を症例もある。また、本症以外の疾病で病理解剖され発症する子馬もいる（図８）。そのような症例では、た子馬においても、ときおりR. equiが分離される肺複数の関節が腫脹し、跛行を呈する。この様なR.

膿瘍が見出されることから、本症には、ほとんど症

equiによる関節炎は、肺や消化器の病巣から血行を状を現さない軽症例や不顕性感染例があるものと考介してR. equiが播種され、四肢構成骨の骨髄炎からえられる。

化膿性関節炎を発症する敗血症性の場合と非化膿性

妊娠馬における垂直感染は成馬の発症がほとんどで関節液からはR. equiが検出されない免疫介在性のないことなどから、その可能性は非常に低いと考え関節炎が知られている。さらに、ブドウ膜炎（眼房られるが、本邦でも流産胎仔からR. equiが検出され水に水性、硝子性、線維素性あるいは膿性の滲出物た報告もある。

を認める）が見られることもある。多くの症例で、病理解剖時に消化管病変が認められるにもかかわら8

２．血液所見
主な血液所見としては、白血球数、フィブリノー
ゲン、α-グロブリンの増加がみられ、血液塗抹標
本では好中球の左方移動と好酸球の減少が認められる。実験感染例では、血小板数の減少、アンチトロ
ンビンⅢの減少、血清亜鉛の減少なども認められ、これらは本症罹患馬の早期発見および病勢の診断に有用な所見と考えられる。また本症では菌血症を起こすことが報告されているが、時期や期間などの詳細は明らかではない。

３．Ｘ線所見
Ｘ線透過度を減じた明瞭な気管支炎あるいは肺膿瘍を認めることがある（図９）。臨床経過とあわせて、予後判定に有用である。

図９．感染子馬のレントゲン写真。肺病変部はＸ線の透過度が減少し、白く見える。

9

Ⅴ

診

断

本症の診断は、罹患子馬では臨床細菌学的および血気管最下部

清学的検査によって行われる。また死亡例では病理学的検査によって診断される。日高地区では、30日齢と45日齢時（あるいは28日齢と35日齢）の２回に渡り定期健康診断として血清学的検査（ELISA法）を行い、呼吸器症状を示す子馬ではさらに気管洗浄液を材料とした菌分離を行うことによって精度の高い診断が可能になった事例がある。

１．臨床細菌学的診断30〜50cm

臨床的には気管洗浄液や糞便および病理解剖時に70〜90cm

採取した臓器・組織などを分離材料とし、選択培地

図11．気管洗浄液の採取部位（NANAT培地）を用いてR. equiの分離を行う。
１）気管洗浄液の検査
気管洗浄液の採取は、馬用の気管支内視鏡を用いて実施することが望ましいが、そのような機器がなくてもシリコンチューブとディスポーザブル注射器を用い

表３．気管洗浄液の採取方法
手順の分離培養、（2）塗抹（サイトスピン）標本での免疫染色および（3）細胞診に用いられる。またVapA遺伝
子領域を用いたPCR法も行われており、短時間での診断が可能となっている。

必要に応じて子馬に鎮静処置を行う。

2

気管洗浄液の回収に適した高さに子馬の頭頚部を調整する（胸、頚、頭をほぼ水平にする。頭の位置が高いと生理食塩水が肺に流入するため発咳し、低いと鼻口から生理食塩水が流出する。
）。

3

気管洗浄用シリコンチューブを経鼻ルートで気管分岐の手前まで挿入する。

4

生理食塩水20mlを入れたディスポーザブル注射器（50ml）
をシリコンチューブに接続する。

5

注射器の内筒を少し引いて空気が吸引できることで、シリコンチューブの先端が気管最下部付近に達していることを確認する（食道にチューブが入っていると空気が吸引できない）。

6

生理食塩水を注入し、気管最下部に貯留した洗浄液を素早く回収する。

（1）気管洗浄液からの分離培養
気管洗浄液からの菌分離は確定診断法として極めて有用である。菌分離は血液寒天培地と選択培地（NANAT培地）を用いて行う。病状の進展度により作

1て比較的容易に気管洗浄液を採取することができる（図10、11、表３）。採取した気管洗浄液は、（1）R. equi

操気管洗浄液１mℓから数個～106個までの菌が分離されるので、洗浄液は原液から1,000倍までの希釈液れる場合もある。これは子馬が土壌中に生息する本を上記２種類の培地に接種する。強毒株が分離され菌を呼吸と共に吸入したことによると考えられ、後れば本症を強く疑う。しかしながら、健康な子馬の述する細胞診の結果と併せて診断する必要がある。

気管洗浄液からも数個から数10個のR. equiが分離さ分離株が強毒株か無毒株かはコロニーブロット法やPCR法などで識別する。
（2）気管洗浄液を用いた免疫染色法
気管洗浄液中の細胞成分を遠沈収集後、スライドグラスに直接塗抹あるいはサイトスピンを用いて塗抹標本を作製し、冷風乾燥する。アセトン固定後、一次血清として抗R. equi強毒株モノクローナル抗体を反応させる。その後、間接蛍光抗体法の場合は、二次血清としてFITC標識抗マウスIgGを反応させ、常法にしたがって蛍光顕微鏡で観察する。また酵素抗体法の場合は、二次血清としてペルオキシダーゼ
標識抗マウスIgGを反応させ、発色基質で発色させ

図10．R. equiの気管洗浄法

10て光学顕微鏡で観察する。R. equi強毒株に感染した

３）死亡子馬の臓器からの菌分離
死亡した子馬の病理解剖時に採取した臓器等の材料から菌分離を行う場合は、死後の経過時間が長い場合
は、NANAT選択培地を用いるほうが良い。安楽死させた症例では、血液寒天培地あるいは普通寒天培地でも良い。発症子馬の膿瘍中には106～108個/gの菌が多量に存在しているので、他の検査臓器がそのような膿瘍で汚されないように気をつける。検査臓器１gを秤り取り、滅菌乳鉢中に滅菌生理食塩水５mℓおよび滅菌海砂を共に入れ、乳棒で乳剤とする。病変部材料は
図12．気管洗浄液を用いたR. equiの間接蛍光抗体法

10－5まで希釈した乳剤液0.2mℓをNANAT培地シャーレに接種する。

２．血清学的診断
１）ELISA（Enzyme-Linked Immuno Sorbent
Assay）法
あらかじめR. equiの菌体から抽出した抗原を吸着させた96穴のマイクロプレートを準備し、これに検査を行う子馬の血清（一次抗体）を100倍希釈して反応させ、その後、ペルオキシダーゼ標識抗ウマIgG血清（二次抗体）を加え、標識酵素と基質の発色反応により特異抗体の量を測定する（図14）｡本法は特異抗体の検出感度が高い上に多数の検体を効率良く検査できることから、日高地方で臨床検査法として応用されて
図13．気管洗浄液の塗抹標本（ギムザ染色）：多数の好中球と細菌を貪食し大型化したマクロファージ（矢印）が観察されるいる。野外臨床例において、呼吸器症状を示した子馬

子馬から採取した検体では、マクロファージなどの

なお上述のELISAはR. equi無毒株の菌体に対する抗細胞質内に特異的な陽性所見が認められる（図12）。

体を検出するものであるが、強毒株の菌体表面に存在（3）気管洗浄液の細胞診
前記と同様に塗抹標本を作製し、パパニコロウ染
色、ギムザ染色、グラム染色などを行う。これらはの多くで初診日に高い抗体価を検出できることから、早期診断法としての評価も高い。

するVapAに対する抗体を検出できるELISAも開発されている。
ⅰ）抗原とプレートの作製方法

日常的に使用される染色法で、実施が簡単であるわ

R. equi（ATCC6939株）を酵母エキスとブドウ糖りには有益な情報が得られる。すなわち本症罹患子を加えた普通寒天培地で３～４日間培養する。回収

馬の気管洗浄液の塗抹標本では多数の好中球とマクロファージが認められ、マクロファージの細胞質内には貪食された菌体がしばしば観察され、経験を積
むと菌の形態などからR. equiをある程度推測できるようになる（図13）。
２）糞便からの菌分離
本症の子馬の糞便からは多量のR. equiが分離されるが、健康馬の糞便からもR. equiはしばしば分離される。したがって、臨床的に本症状が疑われる子馬の糞便からR. equiが分離された場合には、菌数や病原因子（強毒株であること）を検査したうえで、総合的に診断する必要がある。通常、感染子馬の糞便からは≧105個/gのR. equiが分離される。

図14．R. equiの特異抗体を検出するELISA

11

した菌２gを10mℓの0.1％Tween20リン酸緩衝液に溶解し、37℃で90分間振盪した後、15,000rpm、30
分間遠心し、上清をTween20抽出抗原とする。タン
パク含量を測定し、10μg/mℓとなるように炭酸緩衝液（pH9.6）で希釈し、96穴プレート（Sumilon
MS-8496F）の奇数番号の穴に入れて４℃、16時間停止する。
⑦ELISAリーダー（波長492nm）で吸光度を測定する。
⑧抗原吸着穴の吸光度（OD値）から抗原非吸着穴の吸光度を引き、抗体価をOD値で示す。
ⅴ）判定

以上の吸着を行う。抗原液を洗浄後、ブロックエー

抗体の陽性基準値はOD値0.3以上とする。この値

ス（雪印乳業、粉末４gを100mℓ精製水に溶解）では健康な200頭以上の馬の血清の平均値に３倍の標

ブロッキングを37℃、１時間以上行う。このプレー準偏差値を加えた値として算出したものである。

トは－80℃で数週間保存可能。
ⅱ）被検血清と二次抗体ⅵ）注意点
検査には必ず陽性血清と陰性血清を準備し、全て被検血清はブロックエースで100倍に希釈して用のプレートに加える。気候・天候などにより発色反いる。二次抗体は、ペルオキシダーゼ標識抗ウマ

応の速度が影響を受けるので、陽性血清の発色を基

IgGヤギ血清（Cappel社、コスモバイオ販売）を購準にして反応時間を調節する。

入後ブロックエースで10倍に希釈し、100～500μℓ２）ゲル内沈降反応に小分けして－20℃に保存したものを事前に準備し本法は、感染した子馬の血中に産生される菌体外ておく。二次抗体の希釈倍数は陽性血清(感染子馬酵素（equi factors）に対する抗体を測定する方法で、の血清を予め準備）のOD値が1.2～1.5の範囲とな

R. equiの液体培養上清中の菌体外酵素を濃縮し、ゲルるようロット毎に決定する（通常3,000～10,000倍希内沈降反応用抗原として用いる。この方法は簡便であ釈）。頻回の凍結融解は避けるようにする。

るが、感度が低く、ELISA法が普及した現在ではほとⅲ）基質液
基質液はオルトフェニレンジアミン二塩酸20mg
を50mℓのリン酸水素ナトリウム・クエン酸緩衝液（pH4.8）に溶解し、過酸化水素水（25％）10μℓを加える。酵素・基質の反応停止には３N硫酸を用いんど利用されていない。海外では、equi factorsに対する抗体を相乗溶血性（CAMP試験）の中和阻止試験で測定する方法も開発されている。

３．病理学的診断る。

主な剖検所見は化膿性気管支肺炎である。急性例でⅳ）操作法

は赤色肝変化巣の中心に微小膿瘍を認め、慢性例では①希釈した被検血清をプレートの奇数穴（抗原吸肺膿瘍の形成がみられる。肺膿瘍の大きさは小豆大か着 ）と 偶 数 穴 （抗 原 非 吸 着 ）に100μℓを 加 え 、ら鶏卵大までさまざまで、ふつう多発性である（図37℃で1時間反応させる。

15）。肺病巣は、後葉前部および副葉に好発する。病②プレートを洗浄液（0.02％Tween20・PBS）で３回洗浄する。
③二次抗体をプレートの全ての穴に100μℓずつ入れ、25℃で30分反応させる。
④プレートを洗浄液（0.02％Tween20・PBS）で３回洗浄する。
⑤基質液をプレートの全ての穴に100μℓ加え、25℃
で20分反応させる。
⑥反応停止液を全ての穴に100μℓ加え、酵素反応を

12

理組織学的検査では膿瘍周囲にマクロファージの浸潤を認める。グラム染色ではマクロファージに貪食されたグラム陽性の菌体が多数観察される（図16）。肺病
変のほかには、腹腔内の膿瘍形成（図17）や消化管における感染性変化、すなわち、前腸間膜リンパ節や腸付属リンパ節の膿瘍形成、小腸パイエル板の化膿性肥大（図18）、結腸壁や粘膜面における膿瘍や多発性潰瘍の形成（図19）なども見られる。

図15．子馬の肺における多発性膿瘍（NOSAI日高
博士提供）

樋口徹

図17．子馬の腹腔内に形成された膿瘍（NOSAI日高徹博士提供）

樋口

図16．ロドコッカス肺炎の病理組織像（グラム染色）：肺胞内に浸潤した多数の好中球とグラム陽性のR. equiを貪食したマクロファージが認められる

図18．小腸パイエル板の肥大

図19．結腸の粘膜の肥厚と潰瘍の多発13

Ⅵ

実験感染モデルにおける病態解析
準値（OD値≧0.3）を超えて上昇し始める。

１．実験感染モデル子馬の作出

３．病理解剖学的所見

初乳非摂取の子馬にR. equi強毒株104個を気管内に噴霧接種すると、感染が成立し発病する。この菌

実験感染馬における肺病変の進展を経時的にみる

量は馬の飼育環境に存在する菌数（土壌中：104個と、初めて発熱が認められた日（発症初日）に剖検

/g、糞便：10 個/g）に比較的近似した菌量である。

された子馬の肺には、すでに針頭～粟粒大の多発性6膿瘍が形成されており、その周囲には炎症の急速な２．臨床経過からみた各種診断法の有用性

広がりを示す赤色肝変化病巣がみとめられた。発症

典型的な感染モデル子馬における臨床症状と各種

３日目に剖検された子馬では、個々の肺膿瘍は小豆診断法による診断時期を図20に示した。すなわち、R.

大であり、病巣はさらに周囲に波及する様相を呈し

equi接種から臨床症状が発現するまでの期間は約２ていた。実験感染馬で、発症初日および３日目以降週間で、これが本症の潜伏期間と考えられる。臨床の約２週間、ゲンタマイシンとセファロチンの投与

症状としては、発熱、肺の聴診音の異常、食欲・元あるいはリファンピシンの経口投与によって治療さ気消失が認められる。発熱に３～４日先行して気管れた症例の剖検では、前記の肺膿瘍に相当する部位

洗浄液から強毒株が分離され始め、その直後より糞が、限局性の灰白色硬化巣として認められたもの

便からも強毒株が分離されるようになる。気管洗浄の、肺炎病巣は認められなかった。以上の所見は、液を用いた蛍光抗体法では、発症初日～２日目には本症における肺病変の進行・拡大がきわめて速いこ陽性所見が得られる。気管洗浄液の細胞診では多数とを示すものであった。そして、本症における早期の好中球やマクロファージが認められる。血清抗体

発見、早期診断および早期治療の重要性が明らかに

価（ELISA抗体）は発症後、４～５日目から陽性基

なった。

41.0
呼吸浅く、増数
咳

40.0
体

横臥

腹式呼吸

温

聴診で肺粗励
発症日

39.0

（℃）
38.0

気管洗浄液からの菌分離
気管洗浄液塗抹標本での蛍光抗体法
糞便からの菌分離

37.0

ELISA（OD≧0.3）
0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24
菌接種後日数

図20．臨床症状と各種検査法による診断時期

14

Ⅶ

治療と予防

１．治療法
治療開始時期については、できるだけ早いほうが好ましいことは言うまでもない。ロドコッカス感染症は約２週間の潜伏期間があり、発病時点では多くの場合病変はすでにかなり進行している。したがって、初診

189株中１株で耐性が認められたのみであったことから、今後も耐性菌の出現に注意して使用することで、本症の治療には有効であることが確認されている。

２．予防法
１）強毒株汚染の防止と除去

時より投薬を開始すれば当然最も高い効果が期待でき

感染子馬の糞便中には非常に多量の強毒株が排泄さる。本症は臨床症状や血液検査だけで他の感染症と鑑別れる。汚染牧場の子馬も３ヵ月齢まで強毒株を含んだすることは極めて困難であり、気管洗浄液の細胞診と組糞便を排泄する。これらは厩舎、パドックおよび牧草み合わせた細菌培養やPCR検査が、今日の主要な判断基

地の汚染源となるので、できる限り除去するように心準となっている。しかしながら、細菌培養には数日間を掛ける。また、感染子馬の発生した厩舎では壁などを要し、PCR検査は特別な機器を所有する施設に依頼する

逆性石鹸等の消毒薬で、床面は生石灰の散布などによ必要がある。迅速な検査手法の確立と整備が望まれる。

り消毒する必要がある。これらの消毒は定期的に行う本症の治療法としては、1986年にゲルフ大学で行わことが望ましい。また、汚染された土壌を全て消毒すれた国際ワークショップで、マクロライド系抗菌薬でることは不可能であることから、本症が発生した牧場あるエリスロマイシンと結核菌に有効なリファンピシ

で生後間もない子馬が使用するパドックなどについてンの併用が効果的であったとの臨床報告以来、この組は、本菌が土壌中で生息する深度０－20cmまでの表土

み合わせによる治療が欧米では一般的に行われている。

を取り除き、客土することで表土中の菌数を減少させ、

しかしながら、エリスロマイシンは副作用としてしば

強毒株による暴露の機会を減らすことは大変有効であしば重篤な下痢を誘発することが知られており、本邦る。糞便などが厩舎の近くに野積みされている光景をの軽種馬生産地ではエリスロマイシンよりも消化管へ良く見かける。糞便は本菌を極めて大量に含み、そのの副作用が少ないとされるクラリスロマイシンとリフ後も菌は増殖することから、これらも感染源として重ァンピシンの併用による治療が主流である。なお、競要である。風向きと厩舎との関係などを考慮して、堆

走馬総合研究所栃木支所で行った実験馬を用いた治療

肥場の設置場所を十分に検討する必要がある。堆肥の実験では、セファロチンとゲンタマイシンの併用ある発酵熱でR. equiは十分に殺滅される。堆肥を牧草地に

いはリファンピシンの単独投与でも、それぞれ治療効

還元することは土壌の栄養面から推奨されている。し

果を認めている。しかしながら、in vitroの薬剤感受かしながら熟成不十分な糞便を散布することは、本症の性試験ではR. equiはセファロチンにあまり感受性を示

みならず、寄生虫感染症の面からも危険な行為である。

さないことや、ゲンタマイシンはR. equiを貪食したマ

本症の予防法として、本症が多発する牧場の子馬へ

クロファージの細胞質内への移行性に乏しいことなの高度免疫血清の投与や死菌ワクチンの開発に関する研

ど、実際の症例での治療効果に限界がある可能性も考究が一部で進められているが、実用化されてはいない。

えられる。また、リファンピシンの単独投与は、容易

２）子馬の健康診断に耐性菌の出現を誘導する可能性の高いことが懸念さ

R. equi感染症の発生が問題となっている牧場では日れている。R. equiの薬剤耐性に関して、平成22年から

常的な健康管理と定期的な健康管理の２本建てで本症

24年にかけて北海道日高地方の軽種馬で実施された調の予防と早期発見に努める。これらに費やす労力は感査では、βラクタム系のベンジルペニシリン、アンピ

染子馬の治療費に比べれば経済的にも安価である。日シリン、セファロチン、セファゾンに対しては高い耐常的健康管理として最も重要なのは毎日の体温測定で、性率が認められたが、アミノグリコシド系（ゲンタマ

できれば朝晩２回の測定が望ましい。本症の臨床症状

イシン、アミカシン）、マクロライド系（エリスロマ

として最も早く認められるのは発熱で、実験感染例でイシン、クラリスロマイシン、アジスロマイシン）、

は発症３日以内に治療を開始すれば、早く回復するこフルオロキノロン系（シプロフロキサシン、エンロフとが証明されている。定期的な健康管理としては、本ロキサシン）およびその他のイミペネム、ミオサイク症の感染や発病が最も起りやすい時期である30～45日

リン、リネゾリドに対しては耐性株は認められなかっ（あるいは28～35日）齢時の臨床検査、血清ELISA抗た。なお、リファンピシリンに対しては、検査した体の測定、血液検査などの実施が推奨される。
15

おわりに
子馬のロドコッカス感染症はわが国の馬産地において毎年発生し、多くの被害がでています。本症に感染した子馬の臨床症状は比較的乏しいため、しばしば発見が遅れて死亡する症例や、慢性経過をたどり、最終的に予後不良となってしまう症例が多くみられます。近年の研究の進展により、本症の病原体であるR. equiに関する数多くの知見が得られてきており、本症の早期診断に有用な指針も数多く示されています。これらを参考に、感染子馬を早期に発見すれば治療が可能であることもわかってきました。本冊子の初版は、日高家畜衛生防疫推進協議会が主体となり、北里大学（獣医衛
生学研究室

高井伸二教授）およびJRA競走馬総合研究所が共同で行った生産地疾病等調査研究で得られた成果を普及するために、平成８年７月に編集・発行されました。第２版の本冊子はそれ以降に実施された調査・研究で得られた新たな知見や数々の情報を盛り込んで改訂したものです。本冊子に記載した情報が、本邦のロドコッカ
ス感染症の減少に多少なりとも貢献できれば幸いです。
日本中央競馬会競走馬総合研究所
片山 芳也

16

刊行の馬感染症シリーズ
1 . 馬伝染性貧血診断のための寒天ゲル内沈降反応の術式……………………………昭和51年
2 . 馬伝染性子宮炎…………………………昭和55年

30. 馬伝染性貧血の診断術式（第 3 版）……平成13年
31. 馬の水胞性口炎（第 2 版）………………平成13年
32. 馬の感染症（第 2 版）……………………平成13年……………………昭和56年

33. 腺疫（第 2 版）……………………………平成14年

4 . 馬のサルモネラ症………………………昭和56年

34. 馬原虫性脊髄脳炎（第 2 版）……………平成15年

5 . ベネズエラ馬脳炎………………………昭和57年

35. 馬のウエストナイルウイルス感染症

3 . 馬ウイルス性動脈炎

6 . アフリカ馬疫
7 . 馬鼻肺炎……………………………昭和58年…………………………………昭和59年

8 . 馬鼻肺炎ウイルス感染症のための寒天
ゲル内沈降反応の術式と応用……………昭和59年
9 . 馬伝染性貧血診断のための寒天ゲル内沈降反応の術式（第 2 版）………………昭和59年
10. 馬ピロプラズマ病
11. 馬の水胞性口炎………………………昭和61年…………………………昭和62年

36. 馬の真菌症…平成15年………………………………平成16年

37. 馬の感染症（第 3 版）……………………平成17年
38. 馬インフルエンザ（第 2 版）……………平成17年
39. 馬鼻肺炎（第 3 版）………………………平成19年
40. 馬パラチフス（第 2 版）…………………平成20年
41. 消毒法Ｑ＆Ａ（第 1 版・補訂版）………平成20年
42. 馬ウイルス性動脈炎（第 3 版）…………平成21年
43. 馬伝染性貧血の診断術式……………………………昭和63年（第 3 版・補訂版） ………………………平成22年

13. 馬ウイルス性動脈炎（第 2 版）…………平成元年

44. 馬の寄生虫病（第 1 版・補訂版）………平成22年

14. 馬のポトマック熱45. アフリカ馬疫（第 2 版）…………………平成23年

12. 馬の寄生虫病

15. 消毒法Ｑ＆Ａ………………………平成 2 年……………………………平成 3 年

16. 馬トリパノゾーマ病
17. 馬インフルエンザ………………………平成 6 年（第 1 版・補訂版） ………………………平成23年
47. 腺疫（第 3 版）…………………………平成23年………………………………平成 6 年

48. 馬ピロプラズマ病（第 3 版）……………平成24年………………………………………平成 8 年

49. 馬インフルエンザ（第 3 版）……………平成24年

18. 馬の感染症
19. 腺疫……………………平成 5 年

46. 馬のゲタウイルス感染症

20. 子馬のロドコツカス感染症……………平成 8 年

50. 消毒法Ｑ＆Ａ……………………………平成24年

21. 馬鼻肺炎（第 2 版）………………………平成 9 年

51. 馬原虫性脊髄脳炎（第 2 版・補訂版）…平成24年

22. 馬伝染性子宮炎（第 2 版）………………平成 9 年

52. 馬伝染性子宮炎（第 3 版）………………平成25年

23. 馬原虫性脊髄脳炎

53. 馬の感染症（第 4 版）……………………平成25年………………………平成10年

54. 馬のゲタウイルス感染症

24. 馬パラチフス……………………………平成10年

25. 馬の日本脳炎……………………………平成10年（第 1 版・補訂版） ………………………平成26年

26. 馬ピロプラズマ病（第 2 版）……………平成11年

55. ウマロタウイルス病（第 2 版）…………平成26年

27. 馬のゲタウイルス感染症………………平成11年

56. 馬の寄生虫病（第 1 版・補訂版）………平成26年…………………平成12年

57. 馬の日本脳炎（第 2 版）…………………平成26年

28. 馬ロタウイルス感染症
29. 馬ウイルス性動脈炎

58. 馬パラチフス（第 3 版）…………………平成27年（第 2 版・補訂版） ………………………平成12年

17日本中央競馬会助成事業
地方競馬益金補助事業

平成８年７月

第１版発行

平成28年２月

第２版発行

公益社団法人 中央畜産会〒101-0021

東京都千代田区外神田2-16-2

第２ディーアイシービル9F
TEL.03-6206-0832

H28.2（M&C）