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Products
PCR用酵素Blend Taq®／Blend Taq® -Plus増幅効率、伸長性に優れたTaqベースのブレンド型PCR用酵素です。
Blend Taq®はBarnesらの方法をベースに作られたPCR用酵素で、Taq DNA PolymeraseとProofreading活性を持つDNAPolymeraseを混合することにより、増幅効率、伸長性に優れたPCRを実現します。

1

優れたDNA増幅効率

TAクローニング可能4・Blend Taq®およびBlend Taq® -Plus-のPCR産物は、・微量の鋳型からも効率良くPCRを行うことができます。

共にTAクローニングに使用可能です。

2

優れた伸長性ホットスタートPCR対応 Blend T5・本酵素はBarnesらの方法をベースに作られた酵素であaq -P®

lus-・Blend Taq® -Plus-には、抗Taqモノクローナル抗体

り、PCRにおける伸長性が向上しています。

anti-Taq highを加えており、特別な操作無しにホット・human β-globin gene 17.5kbの増幅を確認しています。

スタートPCRが可能です。エキストラバンドを抑え、3

簡単な条件設定特異性の高いPCRを実現します。

・TaqベースのPCR用酵素のため、Taqと同じサイクル条件でPCRを行うことができます。（実施例1）

1

他社ブレンド型PCR用酵素との検出感度の比較

human β-globin gene 3.6kbをターゲットにしてM

12345678

Blend Taq®、Blend Taq® -Plus-および他社ブレンド型酵

Lane
M : 1kbラダーマーカー
Lane 1、2 : ゲノム40ng
Lane 3、4 : ゲノム20ng
Lane 5、6 : ゲノム10ng
Lane 7、8 : ゲノム 5ng※以下、同様。

素を使用してPCRを行いました。5ngから40ngのゲノム
DNAと10pmolesのプライマーを用い、50μlの系で酵素を1.25U使用しました。
図1．Blend Taq®

その結果、Blend Taq®、Blend Taq® -Plus-はゲノム

M5ngにおいても良好な増幅が認められ（図1、2）、他社ブレ

12345678M12345678678ンド型酵素（図3）に比べ、優れた増幅効率を示しました。
PCRサイクル条件
94℃、 2min↓
94℃、30sec
55℃、30sec

図2．Blend Taq® -Plus-

図3．他社ブレンド型酵素

35 cycles

72℃、 3min2

他社ブレンド型PCR用酵素との伸長性の比較

human β-globin gene およびhuman Myosin heavy

1234567812345chain geneの異なる長さのものをそれぞれ用意し、ターゲットとしました。PCR用酵素として、Blend Taq ® 、Blend Taq ®
-Plus-および他社ブレンド型酵素を使用してPCRを行いました。
種々の量のゲノムDNAと15pmolesのプライマーを用い、50μlの系で酵素を1.25U、他社ブレンド型酵素では各社推奨容量を使用しました。

図4．Blend Taq®

図5．A社ブレンド型酵素

Lane 1 : β-globin
1.3kb（100ng）
Lane 2 : β-globin
2.8kb（100ng）
Lane 3 : β-globin
3.6kb（100ng）
Lane 4 : Myosin h.c. 5.2kb（100ng）
Lane 5 : Myosin h.c. 6.2kb（100ng）

Lane 6 : β-globin 8.5kb（100ng）
Lane 7 : β-globin 17.5kb（200ng）
Lane 8 : β-globin 23.0kb（200ng）

その結果、Blend Taq®、Blend Taq® -Plus-はターゲット長が23.0kbでも良好な増幅が認められ、他社ブレンド型酵素に比べ、優れた伸長性を示しました。

2※（）内は使用template量を示す。

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図6．Blend Taq® -Plus-312345678
Lane 1 : β-globin
1.3kb（100ng）
Lane 2 : β-globin
2.8kb（100ng）
Lane 3 : β-globin
3.6kb（100ng）
Lane 4 : Myosin h.c.
5.2kb（100ng）
Lane 5 : Myosin h.c.
6.2kb（100ng）
Lane 6 : β-globin
8.5kb（100ng）
Lane 7 : β-globin
17.5kb（200ng）
Lane 8 : β-globin
23.0kb（200ng）※（ ）内は使用template量を示す。

図7．B社ホットスタートPCR用酵素

TAクローニング

human β-globin gene 582bpをターゲットにしてBlend Taq®、Blend Taq® -Plus-、rTaqを用いてPCRを行いました。
得られたPCR産物をP社TAクローニングキットを用いてライゲーション反応を行い（16℃、1時間）、Competent high DH5αを形質転換して選択培地上にプレーティングし、青白判定を行いました。
その結果、Blend Taq®およびBlend Taq® -Plus-のPCR産物もrTaqと同様75％以上のwhiteコロニーが得られました（図8）。
またコロニーダイレクトPCRにてインサートを確認したところ、いずれの酵素の場合もwhiteコロニーの90％以上が目的のインサートを有していました。

コロニー数（／1ngベクター）

350300Blend Taq®およびBlend Taq® -PlusはTaq DNA Polymeraseに比べ、3〜4倍の正確性を持っています（弊社データより）。
実施例3のように1〜2kb程度の比
較的短いターゲットならBlend Taq®、
Blend Taq ® -Plus-でクローニング可能です。これより長いインサートのクローニングには、正確性の高いKOD -Plus-、KOD -Plus- Ver.2をお勧めいたします。

whiteコロニー250

blueコロニー
200150100500Blend Taq®

Blend Taq® -Plus-rTaq

図8．各酵素から得たPCR産物の形質転換効率（青白判定結果）

参考文献

1) Barnes, W. M., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91: 2216-2220（1994）
品 名 及 び 内 容

PCR用酵素Blend Taq ®
Blend Taq ® (2.5U/μl)
10×Buffer for Blend Taq®
2mM dNTPs

包装保存温度

Code No.

価

格50U×1本250U×1本1,000U×1本1,000U×3本-20℃

BTQ-101T
BTQ-101
BTQ-102
BTQ-103¥5,000¥19,000¥62,000¥170,000

50U×1本250U×1本-20℃

BTQ-201T
BTQ-201¥6,000¥21,000

ホットスタートPCR用酵素

Blend Taq ® -PlusBlend Taq ® -Plus-(2.5U/μl)
10×Buffer for Blend Taq ®
2mM dNTPs

品 名 及 び 内 容
1stストランドcDNA合成キット

ReverTra Ace -α-® （逆転写酵素＋dNTPs他）
逆転写酵素

ReverTra Ace®
RNase Inhibitor
Oligo(dT)20 Primer

包保存温度

Code No.

価

100回用-20℃

FSK-101¥53,000

1-30

-20℃

TRT-101T¥6,0005-772,500U×1本-20℃

SIN-101¥9,0005-85＊2,000U×1本＊

格

２００４〜２００５
総合カタログ装1nmole-20℃

FSK-201¥8,000（1-31）

Random Primer (9mer)

2.5nmoles-20℃

FSK-301¥8,000（1-31）

Nucleotides dNTPs Mixture (2mM)

各2μmoles-20℃

NTP-201¥8,0003-22、4-26

Nucleotides dNTPs Mixture (10mM)

各2μmoles-20℃

NTP-301¥8,0003-22、4-26

0.1ml×10本

液体窒素

DNA-903¥17,000

3-23

コンピテントセル

Competent high DH5α＊：この印のついた製品には、上記以外に他の容量でも販売しております。詳しくは、弊社までお問い合わせください。

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