〔生物工学会誌

第 96 巻第2号

56–63．2018〕2017 年度 生物工学技術賞 受賞

好熱性微生物を活用した未利用バイオマス資源からの高機能性発酵製品の製造と学術的解明
宮本浩邦 1,2,3,4*・宮本

久 5・田代

幸寛 6・酒井謙二 6・児玉浩明 1,3

Studies on highly functional fermented-products made fromunutilized biomass resources by thermophilic bacteria
Hirokuni Miyamoto1,2,3,4*, Hisashi Miyamoto5, Yukihiro
Tashiro6, Kenji Sakai6, Hiroaki Kodama1,3 (1Graduate Schoolof Horticulture, Chiba University, 648 Matsudo, Chiba 2718510, 2Laboratory for Intestinal Ecosystem, RIKEN IMS,
1-7-22 Suehiro-cho, Tsurumi-ku, Yokohama, Kanagawa 2718501, 3Sermas Co., Ltd., 2-8-8 Ichikawaminami, Ichikawacity, Chiba 272-0033, 4 Japan Eco-science Co., Ltd. (Nikkan
Kagaku), 11-1 Shiomigaoka-chou, Chiba, 260-0034, 5Miroku
Co. Ltd., 706-27 Oowaza Iwaya, Kitsuki, Oita 873-0021,
6Laboratory of Soil and Enviornmental Microbiology,
Division of Systems Bioengineering, Department of
Bioscience and Biotechnology, Faculty of Agriculture,
Graduate School of Bioresources and Bioenvironmental
Sciences, Kyushu University, 6-10-1 Hakozaki, Higashi-ku,
Fukuoka 812-8581, Japan) Seibutsu-kogaku 96: 56–63, 2016.
生している可能性があることが明らかになっている 4)．

はじめに
自然環境では，微生物−植物−動物がさまざまな形でLederberg は，これらの宿主と細菌の共生する様を捉えて，「superorganism」として表現している 6)．和訳する

共生関係にあり，一つひとつの生命の営みとともに，生ならば，「超生命体」であり，植物も動物も同じ見方と態系全体を支えている．たとえば，土壌には，1 グラム

して捉えることができる．一方，Wall らは，土壌の微

1,2)

，その

生物群の多様性が，ヒトの健康に有益であることを提唱

種類は 100 万種を超えるといわれている 3)．このようなしているが 6)，動植物が「超生命体」であると捉えた時土壌において植物は生育し，根圏微生物，ならびに植物には，自然界の微生物の様相とその相互作用のあり方がの体内や体外に生息する微生物群（エンドファイト，エ

いかに重要であるかが推察される．

あたり数十億個を超える細菌が存在しており

4)

ピファイト）をも抱え ，植物体としては，微生物−植

人類が自然界の微生物を利用してきた歴史における代物の共生系を形成している．動物も同様のことがいえる．

表的な事例として，酵母，乳酸菌，枯草菌（納豆菌）に

近年，進展している腸内細菌の研究においては，ヒトの代表される常温領域で活動する中温菌を活用した発酵食

腸内に生息している微生物群，いわゆる腸内フローラを品があげられる．これらの中温菌に関わる研究について形成する細菌群が，数百種類の細菌からなり，ヒトの細は，多くの研究者による国内外の研究成果が集積し，今胞数 37 兆個 5) よりも多く，少なくとも 40 兆個以上が共．一
なおさまざまな研究開発が進められている（図 1a）

著者紹介 1 千葉大学，2 理化学研究所，3（株）サーマス，4 日環科学（株），5（株）三六九，6 九州大学
* 連絡先 E-mail: h-miyamoto@faculty.chiba-u.jp，hirokuni.miyamoto@riken.jp，h-miyamoto@sermas.co.jp

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る微生物を評価するために，微生物の単離試験が始まっ
た．原材料の一部となっている甲殻類に着目し，甲殻類が持つキチン質を分解する菌を採取することが最初の研究のターゲットとなった．キチン質としてコロイダルキ
チンを添加した選択培地を活用し，発酵物から耐熱性キ
チン分解酵素を有する好熱性細菌 Bacillus sp. CH-4 株，
ならびに MH-1 株を単離することに成功し，これらの菌図 1．中温発酵物と高温発酵物について群が産生する複数種の耐熱性キチン分解酵素の同定に成功した 7,8)．CH-4 株が産生するキチン分解酵素は，至適温度が 75°C のエキソキチナーゼであり，キチンオリゴ
マーを還元末端から加水分解すると同時に，N- アセチル
ガラクトサミニドも加水分解することから，ȕ-N- アセチ
ルヘキソサミニダーゼに属する酵素であった 7)．MH-1
株が産生するキチン分解酵素は，3 種類のエンドキチ
ナーゼ（L，M，S）であり，これらの質量は，71，62，
53 kDa で，それぞれの至適温度は 75，65，75°C であった．これらの酵素群は，基質認識が異なっていたが，図 2．本研究の概要

n = 2 〜 3 のキチンオリゴマーを生成する性質を有していた 8)．2000 年に入り，これらの発酵物の発酵工程を当時最新の複合微生物の評価法であった PCR-DGGE（変性剤濃度勾配ゲル電気泳動）法などを用いて検証し（図3），発酵工程から管理したうえで安定な菌叢となるよ方，これらの中温菌以外にも，環境中にはさまざまな微

うに発酵物を調製し，そのうえで動植物に与える影響に生物が存在している．それらの環境微生物自体の単一菌関する研究を進めた．また，併せて動物の腸内で有効なとしての機能，あるいはその機能分子の利用研究は数多機能を有する発酵物中の機能性乳酸菌，特に腸内と同じくあるが，それら環境微生物群の生態系における役割を

嫌気条件下で生育できる菌を見いだすために MRS 培地

探り，かつ産業に役立てた研究成果は意外に少ない．そを用いた試験を実施し，B. coagulans の近縁株を単離同の中で，筆者らが取り組んできた研究は，50°C 以上の定した．さらに，まだ培養できない未知の菌群を含めた高い温度領域で活動する極限環境微生物の一つである好好熱性複合菌を American

Type

熱性微生物群集が，動植物にどのような影響を与えるの

Culture Collection（ATCC）に国際寄託し（寄託番号 PTA-1773），特許申か，その作用機序の解明であった（図 1b）．20 年以上に請をしたうえで，これらの安定な高温発酵物の菌叢の詳及ぶ研究開発の結果，動植物の健全化の管理に役立つ機

細な解析を進めた．その結果，発酵物は B. thermocloacae

能性肥・飼料，ならびに環境負荷の少ない生分解性プラと B. thermoamylovorans などを中心とした好熱性芽胞

スチックの製造に関わる新しい基幹技術の開発に至った菌群で構成されていることが明らかとなった 9)．

．
（図 2）研究の着手段階

1980 年代より，植物の成長に寄与する堆肥の生産をするために，独自の fed-batch 式の閉鎖系発酵槽で連続発酵する技術開発を進めた．原材料としては，未利用の海産資源，特に食用にならずに，漁港などで廃棄される
小魚や甲殻類などを活用した．当初は，ヒーターによって加熱可能な発酵槽において発酵試験を実施したが，原材料の配合率などの調整によってヒーターをつけずに微生物自体の発熱によって速やかに 70–80°C の発酵温度となることが明らかになった．そこで発酵工程に貢献す
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図 3．好気性高温発酵工程における菌叢変化

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高機能肥料化とその作用機序の解明
これらの好気下で高温発酵した発酵物は，植物の成長に寄与する肥料として活用できることが植物生育試験の結果，明らかとなっていた．そこで，発酵物に含まれている植物成長促進根圏微生物（plant growth-promoting

rhizobacteria: PGPR）の単離が進められた．その中で，植物病原性糸状菌である Fusarium 属菌に対して静菌作．
用を有する Bacillus sp. NP-1 株の単離に成功した（図 4a）

Bacillus sp. NP-1 株は，B. subtilis と B. polyfermenticus の近縁種であり，抗菌物質候補として環状リポペチドを生産していることが明らかになった 9)．また，あらかじめ当該菌溶液を pH あるいは温度を変えてから静菌効果を

図 6．好熱菌を含む高温発酵物が植物の生育に与える影響評価（概念図）

調べた結果，pH に対して安定性が高く（図 4b），pH 12では阻止円の形成における力価は約 40％低くなるもの

的に，窒素系化学肥料を用いて作物が成長する際には，の，pH 2 では，約 20％が落ちる程度で，基本的に酸に作物中の硝酸濃度が増えるため，高温発酵物に特徴的なもアルカリにも強い傾向を示した．同様に温度に対して作用機序の解明が求められた．さまざまな窒素制御の過も安定性が高く，121°C 条件下においても約 20％力価程を調べた結果，土壌中の脱窒反応が特徴的であることが落ちる程度であった．さらに，当該高温発酵物の土壌が明らかになった．すなわち，N2O（一酸化二窒素）

への施用は，作物を成長させるにもかかわらず作物中の→ N2（窒素）の反応をブロックするアセチレンを用い．一般
硝酸濃度を低減化させる傾向があった（図 5a，b）て土壌からの脱窒過程を調べた結果（アセチレンブロッ
ク法），当該高温発酵物の施用により土壌からの脱窒反応が促進し，それによって作物体に吸収される窒素化合物の量が減少し，結果として過剰な硝酸が蓄積しないことが証明された．また，この過程では，脱窒に関わる遺伝子群のうち，亜硝酸還元酵素（nitrite reductase）の一つである nirS と niK の遺伝子配列において，特徴的な遺伝子断片が PCR-DGGE 法によって検出されたため，これらの亜硝酸還元酵素が脱窒反応に関与していることが示唆された 10)．このように植物体中の硝酸濃度の調節機構の一部は明らかになったものの，脱窒反応だけでは，
高温発酵物が作物の成長を促進する機能とは相反する

図 4．抗カビ活性物質とその安定性の評価

データであるため，植物の成長に寄与する微生物の単離が進められた．その結果，窒素固定遺伝子を有する複数
種の Paenibacillus sp. を単離することに成功し，国際特許申請を実施した（PCT/JP2013/67907）．以上の結果か
ら，当該高温発酵物の土壌への施用によって，図 5c の太字実線で示したようなアンモニア同化反応が進み，植物が成長しうることが示唆された．さらに，DNA マイク
ロアレイの解析データなどから，図 6 で示したようにいくつかの作用によって，植物の生育が制御されている可能性が示唆されており，現在，これらの仮説を含めて当該高温発酵物の機能について詳細な解析を進めている．
高機能飼料化とその作用機序の解明

図 5．高温発酵物の施用による作物の低硝酸化と成長促進

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好気高温発酵物を豚や採卵鶏に与えると，これらの排
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図 7．好熱菌を含む高温発酵物が豚の出産数，死産数，ならびに排泄糞中の短鎖脂肪酸，乳酸の組成に与える影響評価

泄糞の臭気が軽減するとともに，豚舎内での豚の落ち着き度合いや鶏卵の状態が改善する傾向があることが確認されていた．そこで，当該発酵物を液状にし，飲水添加によって豚に継続的に給与する試験が合計 6 か年の間，

2 か所の農場において実施された 11)．発酵液を継続給与した農場の疫学調査では，母豚 1 頭あたりの出産数は約12 頭で，非給与区と給与区は同程度であった．しかしながら，死産率は約 30％減少した（図 7a）（p < 0.0001）．
この時，同じ母豚の糞中の有機酸組成を解析した結果，酢酸，酪酸，プロピオン酸などの短鎖脂肪酸は，有意差
12)．
はないものの，給与後に増加傾向が確認された（図 7b）

近年，酢酸や酪酸は，腸内の生体防御機能を担う主要な分子であることが明らかになっており，興味深い知見である 13,14)．さらに，有機酸組成の特徴としては，排泄糞中の乳酸濃度が有意に低くなった（図 7c）．このような傾向は，採卵鶏においても確認されている．図 8 に示したように，産卵率が改善するとともに，鶏の老齢化に伴って増加する卵の肥大化が抑制される傾向が確認された．
そして，これらの鶏の排泄糞の有機酸組成を調べた結果，

図 8．（a）高温発酵物溶液が採卵鶏の飼育成績，（b）高温発酵
物溶液が採卵鶏の排泄糞中の乳酸値に与える影響評価．

豚同様に高温発酵物溶液を給与した鶏の排泄糞中の乳酸濃度が減少していた．健康な動物の排泄糞中の乳酸濃度は低レベルか，検出されないことが知られている 15,16)．
このような時には，乳酸を酢酸や酪酸などの有用な有機酸に変換可能な乳酸資化菌が機能しうる 12)．そこで，豚においては乳酸資化菌の機能を探索することを目的として，乳酸資化菌の一つである Megasphaera elsdenii の選
択培地の構築を進めた 17)．その結果，豚において特徴的な M. elsdenii の単離にすでに成功している．さらに，一般的に用いられている抗生物質，乳酸菌，酵母，枯草菌
に対する上乗せ効果も確認されている．これらの成果を踏まえて，高温発酵物の給与後の家畜・家禽類に認められる飼育成績や環境負荷低減（糞臭の軽減と堆肥の発酵促進）と宿主側の腸内フローラとの関係がさらに明らか

図 9．高温発酵物が家畜・家禽類の腸内フローラと飼育成績に与える影響評価になると思われる（図 9）．
高温発酵物が動物に与える影響については，げっ歯類

きた．マウスやラットを用いた試験では，高温発酵物給を用いたモデル動物を用いた研究も並行して進められて与後の腸内フローラや腸管の発現遺伝子，ならびにタン

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図 12．高脂肪食条件下のマウスの CT スキャン画像
図 10．高温発酵物が動物の腸内環境に与える影響（概念図）

図 13．高温発酵物が魚類の飼育成績に与える影響

図 11．Bacillus hisashii N11T（BP-863）の発見

託するとともに（NITE 国際寄託番号 BP-863），国際特許取得のため PCT 出願し，現在，日本，中国，EU において特許の権利化を実現させている 23)．

パクレベルの解析を実施しており，粘膜免疫系に与える
18)

なお，高温発酵物の飼料としての適用は，魚類でも試影響を明らかにしている（図 10） ．B 細胞や NK 細胞のされている．ヒラメ，真鯛，鯉をモデルとした研究にお活性化とともに，分泌型 IgA の産生促進が確認されておいて効能が確認されており 22,24,25)，特に筋肉中の遊離ア

18)，他の生理作用としても，肝臓や筋肉における過酸

ミノ酸の増加，過酸化脂質の減少，病原菌であるエドワ

化脂質の低減や抗酸化活性の増加が確認されている 19)．

．
ジエラに対する抗病性などが報告されている（図 13）

また，ガス代謝や糖質，アミノ酸代謝レベルへの影響な

今後，魚類に効果を示す優占菌群の同定やその作用機序

ど多彩な機能が示唆されている．一方で，フィルター滅を解明する試験を実施予定である．

り

菌した高温発酵液は十分な効果を発揮できなかったため，これらの生理的機能は，高温発酵物中の生菌によっ

食品廃棄物からの高光学活性 L- 乳酸の生産てもたらされることが推察された．そこで，無菌マウス

前述のように，好気高温発酵物には，種々の Bacillusに高温発酵液を給与したノトバイオートを構築し，盲腸属細菌が含まれていることが明らかとなっているが，実内に生着性のある好熱菌群の単離試験を実施した．その際に効果を発揮している環境（土壌中・腸内）は，嫌気

結果，ヤシ酒の発酵微生物 B. thermoamylovorance の近的条件である．そこで同時並行で，嫌気発酵における発縁菌，ならびに有胞子性の乳酸菌 B. coagulans などの複酵物の機能の検証を進めていた．栄養源として標準生ゴ

20)．中でも，前者

ミを用いて，発酵物を接種し，温度 30–65°C で，10％は標準菌株との DNA-DNA ハイブリダイゼーションな

アンモニア水で 24 h ごとに pH 7.0 へと調整して回分発

どの結果に基づいて，新菌種として B. hisashii と命名さ酵を行った結果，30°C および 37°C では，全生産物に対数種の好熱菌，耐熱菌群が単離された21)れた（図 11） ．また，当該菌株は，内臓脂肪の蓄積軽22)減効果も有することから（図 12） ，当該菌株を国際寄60する割合として 75.5–80.5％で酪酸を生産することが明らかとなった（図 14）．前述のように，動物の腸内にお
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図 14．好熱菌複合菌を用いた食品廃棄物からの高純度 L 型乳酸の生産特性図 16．デンプン分解能を有する新規好熱性 Bacillus sp. によるL 型乳酸生産プロセス

さらに，高温発酵物中の機能性バクテリアの分離試験を実施したところ，グラム染色陽性・内生胞子形成・通性嫌気性の耐熱性桿菌である Bacillus sp. MO-04 株を見いだした．本株は B. thermolactis R-6488T と 99.4％の高
図 15．好熱菌複合菌を活用した高純度 L 型乳酸の生産技術

ける酪酸の役割は認知されており 14)，腸内免疫において大きな役割を担う制御性 T 細胞（Treg）の誘導に関わっていることから，発酵物の生理的作用を考慮するにあたって興味深い知見と言えた．次に，制御温度の上昇に伴う有機酸産生能の挙動を観察した結果，酪酸生産濃度が減少し，L- 乳酸生産にシフトしていた．生産量としては，50°C で L- 乳 酸 生 産 濃 度 が 最 大 と な り， 選 択 性

91.6％の最大値を示すとともに複合微生物による乳酸発
酵の中では，初めて L- 乳酸光学純度 100％を達成した（図15）．さらに，PCR-DGGE 法による細菌群集構造解析の結果，B. coagulans 細菌が L- 乳酸生産に寄与している
26)

い相同性（16S rRNA 遺伝子配列）を示したものの，系
統 分 類 解 析 と 形 状 に よ り， 新 種 B. kokeshiiformis sp.

nov. MO-04T を提唱した 29)．さらに，新たに分離されたBacillus sp. MC-07株はB. thermoamylovorans LMG18084Tと 99.2％（16S rRNA 遺伝子配列）の相同性を示し，デンプン分解性・好熱性（最適増殖温度 50°C，最高増殖温
度 62°C）の L- 乳酸生産細菌であった．発酵温度 50°C で振動制御法による pH の影響を検討した結果，MC-07 株
および LMG18084T 株の両株とも pH 7.0 で最大乳酸生産
濃度を示したが，MC-07 株は LMG18084T 株よりも高い
乳酸生産能［光学純度，100％；生産濃度，16.6 g/L；
選択性，92.1％；収率，0.977 g/g；生産性，0.701 g/(L·h)］を示した．さらに，MC-07 株はわずか 0.001％ (w/v) 有
機窒素源含有培地で乳酸生産が可能であった．これらの．近年，生分解性プラスチック

結果は，MC-07 株を用いた培養系が，糖化酵素を用いず，であるポリ乳酸の原料として，光学活性乳酸（L- 乳酸ま

安価な培地でデンプン質バイオマスからの直接 L- 乳酸

たは D- 乳酸）生産に関する研究が精力的に行われていに高温下で変換できる系であることを示唆している（図るが 27)，筆者らは当該高温発酵物を複合微生物種菌として活用することによって，食品廃棄物からの高機能性製

16）30)．本研究は高温下における食品廃棄物からの高効
率的な光学活性 L- 乳酸生産プロセス技術を開発しただ品への変換が可能であることを示唆したことになる．次

けではなく，複合微生物による発酵工学研究の新しい発に，これらの生産効率をさらに向上させるために，いく

想・基盤となり得るものである．

ことが明らかとなった

つかの仮説を立てて検証した結果，発酵初期の低 pH 化の制御が乳酸生産において重要であることが明らかとな複合微生物系における標的微生物の新たな分離法の開発

り，新たな pH 切替制御法（pH 振動制御→一定制御）を

自然界では，90％以上もの難培養の微生物が存在し確立し，pH 振動制御法と比較して最高のパフォーマンているが，近年の遺伝子解析技術の発展に伴い，微生物ス（発酵時間，360％短縮；L- 乳酸生産濃度，57％向上；を単離することなく生態系，環境や発酵プロセスを評価

乳酸選択性，10％向上；乳酸生産性， 630％向上；L- 乳するために，複合微生物系における微生物群集構造，メ酸光学純度，100％）を得ることができた
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28)．

タゲノムやトランスクリプトーム解析などの利用が可能

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図 17．複合微生物系から標的微生物分離のための体系的フィー
ドバック分離法

図 18．好熱菌，ならびに高温発酵物を活用した社会貢献の事例となった．一方，難培養性，あるいは未同定の微生物を飼料として活用できるとともに，2）生分解性プラスチッ

分離できれば，株レベルで基礎的な微生物特性（増殖条ク原料の L 型乳酸を生ゴミから高効率に生産可能である

件，基質特異性など）を知ることができ，各微生物の機ことを示している．当該技術は，その開発の過程で得ら能や微生物間の相互機能も直接証明できる．さらに，単れた知見を含めて，持続可能な循環型社会の構築，なら離微生物群を用いて発酵プロセスの再構成や改良・向上」
びに国連が提唱している「持続可能な開発目標（SDGs）

も可能となることから，複合微生物系からの標的微生物のためにも次世代に貢献できる技術シーズであると言えの分離はきわめて重要である．

る．発酵肥・飼料としての利用については，現在では多標的微生物の純粋分離が困難である理由として，①培くの製品の原料の一部として用いられている．循環型農

養条件の不適当な微生物が固体培地で増殖（コロニーを業を構築するための発酵資材としての利用や畜産製品の形成）しない，②分離微生物の同定に時間と労力を要す．今後，ブランド化についても一翼を担っている（図 18）

る（1 週間程度）うえに，同定結果から標的微生物でな

さらなる技術開発によって社会貢献できることを期待しいことが多い，などが考えられる．換言すれば，コロニーてさらなる研究の進展を図っている．

形成効率を向上し，標的微生物類縁菌を迅速にスクリーニングできれば，高効率かつ迅速な分離法となり得る．
そこで，複合微生物系の標的微生物をスクリーニングし分離する新しい方法として，『体系的フィードバック分離法』を考案した（図 17）．要約すれば，標的微生物が増殖できる培養条件を文献情報から分離条件にフィード
バックし，得られたコロニーを直接コロニー MALDI-

TOF MS に供して，対象株（たとえば標的微生物の基準株）との MS スペクトルの類似性から標的微生物候補
株をスクリーニングする手順である．体系的フィード
バック分離法により，高温発酵物中の複合微生物系による発酵プロセスから標的細菌 3 種と標的細菌と類縁である 3 種の分離に成功し，本分離法の有効性を確認することができた 31)．今後，本分離法は，自然環境の複合微生物系の評価をさらに詳細に実施する過程の手順の一つとして活用可能であると捉えている．
おわりに本技術は，好熱性微生物を活用した発酵産物が，1）
化学肥料，農薬，抗生物質などの過剰な薬剤の使用を避けながら農畜水産業の生産効率を向上させる機能性肥・

62

謝

辞

ベンチャー企業と大学との間で培われた 20 年以上にわたる
産学連携研究の成果をご評価いただきまして感謝申し上げます．本賞の研究成果に至る過程では，榎本重男氏（都路グループ会長）をはじめ従業員の皆様には，循環型社会の構築のためのフィールド試験の場をご提供いただき，多岐にわたるご支援を頂きました．心より御礼申し上げます．また，新規事業化の推進のためにご支援いただいた京葉ガス（株）と京葉
プラントエンジニアリング（株）の歴代の社長の皆様，役員，
ならびに関係者の皆様に深謝申し上げます．その結果として，産学連携型の千葉大学発ベンチャー・（株）サーマスの設立に至り，本受賞に至りました．基礎研究においては，さまざま
なアドバイスをしていただいた石村巽先生（慶應義塾大学・名誉教授，サーマス最高顧問），末松誠先生（慶應義塾大学・
元医学部長，客員教授），ノトバイオート試験の遂行にお力添えを頂いた伊藤喜久治先生（東京大学・元教授），微生物の単離法において技術指導していただいた堀内三吉先生（東京医科歯科大学医学部講師），モデル動物試験における検証にご協力いただいた松下映夫先生（水産大学校元教授・サーマス最高顧問），DNA マイクロアレイの解析にご協力いただいた西内巧先生（金沢大学准教授），近年のオミクス解析でご協力い
ただいた服部正平先生（早稲田大学教授），大野博司先生（理，ならびに福田真嗣先
化学研究所 IMS グループディレクター）

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生（慶應義塾大学准教授）に厚く御礼申し上げます．その他，
さまざまな形でご支援，ご協力いただきました皆様に心より感謝申し上げます．最後に，研究資金のご支援を賜りました
千葉市産業振興財団産学共同事業，経済産業省・戦略的基盤
高度化支援事業，農林水産省・地域食料産業等再生のための研究開発等支援事業，独立行政法人科学技術振興機構，全国中小企業団体中央会ものづくり・商業・サービス革新事業における担当者，関係者の皆様に心より御礼申し上げます．

文献1) Faegri, A., Torsvik, V. I., and Goksor, J.: Soil Biol.
Biochem., 9, 105–112 (1977).
2) Torsvi, V., Goksoyr, J., and Daae, D. L.: Appl. Enviorn.
Microbiol., 56, 782–787 (1990).
3) Gans, J., Wolinsky, M., and Dunbar, J.: Science, 309,
1387–1390 (2005).
4) 宮本浩邦（大野博司 編）：共生微生物−生物と密接に関わるミクロな生命体，p. 247–256，化学同人 (2016).
5) Eva Bianconi, E., Piovesan, A., Facchin, F., Beraudi, A.,
Casadei, R., Frabetti, F., Vitale, L., Pelleri, M. C.,
Tasani, S., Piva, F., Perez-Amodio, S., Strippoli, P., andCanaider, S.: Ann. Hum. Biol., 40, 463–471 (2013).
6) Lederberg, J.: Science, 288, 287 (2000).
7) Sakai, K., Narihara, M., Kasama, Y., Wakayama, M.,
and Moriguchi, M.: Appl. Enviorn. Microbiol., 64,
3397–3402 (1994).
8) Sakai, K., Okota, A., Kurokawa, H., Wakayama, M., andMoriguchi, M.: Appl. Enviorn. Microbiol., 64, 3397–
3402 (1998).
9) Niisawa, C., Oka, S., Kodama, H., Hirai, M., Kumagai,Y., Mori, K., Matsumoto, J., Miyamoto, H., andMiyamoto, H.: J. Gen. Appl. Microbiol., 54, 149–158(2008).
10) Ishikawa, K., Ohmori, T., Miyamoto, H., Ito, T.,
Kumagai, Y., Sonoda, M., Matsumoto, J., Miyamoto, H.,
and Kodama, H.: Appl. Microbiol. Biotechnol., 97,
1349–1359 (2013).
11) Miyamoto, H., Kodama, H., Udagawa, M., Mori, K.,
Matsumoto, J., Oosaki, H., Oosaki, T., Ishizeki, M.,
Ishizeki, D., Tanaka, R., Matsushita, T., Kurihara, Y.,
and Miyamoto, H.: Res. Vet. Sci., 93, 137–142 (2012).
12) Ito, T., Miyamoto, H., Kumagai, Y., Udagawa, M.,
Shinmyo, T., Mori, K., Ogawa, K., Miyamoto, H., andKodama, H.: J. Biosci. Bioeng., 121, 659–664 (2016).
13) Fukuda, S., Toh, H., Hase, K., Oshima, K., Nakanishi, Y.,
Yoshimura, K., Tobe, T., Clarke, J. M., Topping, D. L.,
Suzuki, T., Taylor, T. D., Itoh, K., Kikuchi, J., Morita,
H., Hattori, M., and Ohno, H.: Nature, 469, 543–547(2011).
14) Furusawa, Y., Obata, Y., Fukuda, S., Endo, T. A.,
Nakato, G., Takahashi, D., Nakanishi, Y., Uetake, C.,
Kato, K., Kato, T., Takahashi, M., Fukuda, N. N.,
Murakami, S., Miyauchi, E., Hino, S., Atarashi, K.,
Onawa, S., Fujimura, Y., Lockett, T., Clarke, J. M.,
Topping, D. L., Tomita, M., Hori, S., Ohara, O., Morita,

生物工学

第96巻

第2号（2018）

15)

16)

17)
18)

19)

20)

21)

22)

T., Koseki, H., Kikuchi, J., Honda, K., Hase, K., andOhno, H.: Nature, 504, 446–450 (2013).
Belenguer, A., Duncan, S. H., Holtrop, G., Anderson, S.
E., Lobley, G. E., and Flint, H. J.: Appl. Enviorn.
Microbiol., 73, e6526–e6533 (2007).
Duncan, S. H., Belenguer, A., Holtrop, G., Johnstone, A.
M., Flint, H. J., and Lobley, G. E.: Appl. Environ.
Microbiol., 73, e1073–e1078 (2007).
Kajihara, Y., Yoshikawa, S., Cho, Y., Ito, T., Miyamoto,H., and Kodama, H.: Anaerobe, 48, 160–164 (2017).
Satoh, T., Nishiuchi, T., Naito, T., Matsushita, T.,
Kodama, H., Miyamoto, H., and Miyamoto, H.: J.
Biosci. Bioeng., 114, 500–505 (2012).
Miyamoto, H., Shimada, E., Satoh, T., Tanaka, R.,
Oshima, K., Suda, W., Fukuda, S., Nishiuchi, T.,
Matsuura, M., Mori, K., Miyamoto, H., Ohno, H.,
Hattori, M., Kodama, H., and Matsushita, T.: J. Biosci.
Bioeng., 116, 203–208 (2013).
Miyamoto, H., Seta, M., Horiuchi, S., Iwasawa, Y.,
Naito, T., Nishida, A., Miyamoto, H., Matsushita, T.,
Itoh, K., and Kodama, H.: J. Appl. Microbiol., 114,
1147–1157 (2013).
Nishida, A., Miyamoto, H., Horiuchi, S., Watanabe, R.,
Morita, H., Fukuda, S., Ohno, H., Ichinose, S.,
Miyamoto, H., and Kodama, H.: Int. J. Sys. Evol.
Microbiol., 65, 3944–3949 (2016).
経済産業省・21–22 年戦略的基盤高度化支援事業報告書（関東経済産業局編）

23) 国際出願番号：PCT/JP2011/52735「好熱性微生物を用いた混合物，溶解液，及び医薬品」特許番号：（国内）：［特許第 5578375 号］（中国）：［ZL2011 8 0009184.2］（EU）：［No.2556835］

24) Tanaka, R., Miyamoto, H., Kodama, H., Kawachi, N.,
Udagawa, M., Miyamoto, H., and Matsushita, T.: J.
Gen. Appl. Microbiol., 56, 61–65 (2010).
25) Tanaka, R., Miyamoto, H., Inoue, S., Shigeta, K.,
Kondo, M., Itoh, T., Kodama, H., Miyamoto, H., andMatsushita, T.: J. Biosci. Bioeng., 121, 530–535 (2016).
26) Tashiro, Y., Matsumoto, H., Miyamoto, H., Okugawa, Y.,
Pramod, P., Miyamoto, H., and Sakai, K.: Bioresour.
Technol., 146, 672–681 (2013).
27) Poudel, P., Tashiro, Y., and Sakai, K.: Biosci. Biotechnol.
Biochem., 80, 642–654 (2016).
28) Tashiro, Y., Inokuchi, S., Poudel, P., Okugawa, Y.,
Miyamoto, H., Miyamoto, H., and Sakai, K.: Bioresour.
Technol., 216, 52–59 (2016).
29) Poudel, P., Miyamoto, H., Miyamoto, H., Okugawa, Y.,
Tashiro, Y., and Sakai, K.: Int. J. Sys. Evol. Microbiol.,64, 2668–2674 (2014).
30) Poudel, P., Tashiro, Y., Miyamoto, H., Miyamoto, H.,
Okugawa, Y., and Sakai, K.: J. Indust. Microbiol.
Biotechnol., 42, 143–149 (2015).
31) Poudel, P., Tashiro, Y., Miyamoto, H., Miyamoto, H.,
Okugawa, Y., and Sakai, K.: J. Biosci. Bioeng., 123, 63–
70 (2017).

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