目次

特別寄稿：食品の微生物学的リスクアナリシス……………………………………………………………山本茂貴……………………

１

特集：カンピロバクター食中毒と薬剤耐性
今回のシンポジウムにあたって………………………………………小久江栄一 ………………… ７

１． カンピロバクターの生態学………………………………………中馬猛久 …………………… ８

２． 食鳥処理場におけるカンピロバクターの汚染実態……………小野一晃 …………………… １２

３． 健康家畜由来カンピロバクターの薬剤感受性調査……………石原加奈子 ………………… １６

４． ヒト食中毒由来カンピロバクターの薬剤耐性…………………横山敬子 …………………… ２２

５． カンピロバクターの薬剤感受性試験法の現状…………………高橋敏雄 …………………… ２６

会務報告 ………………………………………………………………………………………………… ３
３

動物用抗生物質・合成抗菌剤略語表（系統別およびアルファベット別） ……………………… 38

会員名簿 ………………………………………………………………………………………………… 49

山本茂貴／食品の微生物学的リスクアナリシス／24（2002） 1

食品の微生物学的リスクアナリシス
山本茂貴
国立医薬品食品衛生研究所・食品衛生管理部（〒 158-8501 東京都世田谷区上用賀 1-18-1）

物学的リスクアセスメントについて，その概要と１．はじめに

これまでコーデックス委員会等で討議されている内容を中心に紹介したい。

食品由来の健康危害を防除するため，これまで

リスクアナリシスの枠組みを理解する上で重要も 様 々 な 試 み が 成 さ れ て き た。GMP（Goodなのはハザードとリスクの相違を知ることであManufacturing Practice）を初めとする衛生管理

る。ハザードとは日本語で危害と訳されており，

手 法 が 確 立 さ れ，現 在 で は，HACCP（Hazard

人の健康を害する原因物質もしくは状態を意味す

Analysis Critical Control Point：危害分析重要管理る。それには微生物学的危害，化学的危害，物理点）システムが世界の主流となってきている。我学的危害の 3 つがある。リスクはその危害が人のが国でも HACCP システムへの取り組みがようや

健康を害する確率，つまりそれらの危害原因物質

く始まり，輸出用水産食品における HACCP シス

により，人が十万人中何人病気になるかといったテムの導入は輸出企業にとって最重要課題であ表現で表されるものである〔6〕。

る。国内向けの食品でも，乳・乳製品および加熱

２．リスクアナリシスとは食肉製品で HACCP システムの導入がなされており，魚肉練り製品，容器包装後加熱食品さらに清涼飲料へと導入対象品目が拡大してきている。

リスクアナリシスにはリスクアセスメント，リHACCP システムにおいては，危害分析を行わな

スクマネージメントおよびリスクコミュニケー

ければならないが，生物学的危害（特に微生物にションの 3 つが含まれている（図１）。微生物学よる危害）に関する分析にリスクアセスメントに基づく方法を用いていくことが提案され〔1, 2〕，
FAO/WHO の専門家部会でも規格基準の設定にリスクアナリシスの考えを導入することが提案された〔3〕。さらに 1998 年には食品の輸出入にリス
クアナリシスの考えを導入すること〔4〕，1999 年

リスクアセスメント＊

リスクマネージメント＊

科学ベース

政策ベース

に は コ ー デ ッ ク ス 食 品 衛 生 部 会（Codex:
FAO/WHO 合同食品規格国際会議）において討議され，食品の微生物学的リスクアセスメントに関するガイドラインが出された〔5〕。食品の微生
物学的リスクアセスメントのガイドラインはリス
クアセスメントに関する枠組みを示しているが，その具体的な方法論は現在 FAO/WHO 合同の専図１

門家部会で検討中である。本稿では，食品の微生

矢印は相互のコミュニケーションを示している。

1

リスクアナリスの 3 要素とその関係

2 動物抗菌会報 24（2002）

的リスクアナリシスは決してリスク分析ではななどの問題点が指摘されている。

い。日本語でのリスク分析は言葉の感じからリス２）Exposure Assessment

クアセスメントをイメージさせる。微生物学的リ病原体または毒素の摂取量の推計を行うこと。

スクアナリシスはリスクコントロール，つまり，食品中での微生物の動態，食品中の他の細菌から微生物による食中毒のコントロールととらえる方の阻害物質の影響，また，製造工程や調理の段階がより正しいイメージとなろう。その観点からすでダイナミックに変化するので最終的な摂取量をるとリスクアナリシスは，リスクアナリシスとし

推計することは困難である。さらに，食習慣が地てそのまま使用する方がよりよいと考える。リス

域により異なることも問題となる。

クアナリシスの中でリスクマネージメントとリス

３）Hazard Characterization

クコミュニケーションはコーデックス委員会でも食品中に含まれる病原微生物による危害の重篤

未だ最終合意が得られていないが，リスクアナリ

度と期間の質的または量的確率推計を行うこととシスにとってリスクマネージメントは最も重要ななっている。つまり，発症菌量の推計が中心とな

コンポーネントである。リスクマネージメントのる。アメリカでは囚人やボランティアを用いて実枠組みの中でリスクエバリュエーションは最初に験的に解析したデータがあるが，人道的見地から行われるステップである〔7〕。日本の場合，リスも今後そのような実験は困難となるであろう。実

クエバリュエーションはリスクマネージメントを験動物を用いた実験も外挿の問題や動物愛護の観行う主体である行政が必ず行うことにはなってい点から問題がある。また，宿主の感受性の差，病ない。その点が，今後の行政システムの改革が必

原体の感染力および感染率の多様性，発症率の要とされ，さらには厚生労働省以外にリスク評価

差，さらに食品そのものによる病原性への影響等

機関が設置されようとしている理由の一つであろのデータが不足している事が問題点として指摘さう。リスクコミュニケーションにしても専門の担れている〔21〕。

当者が設置されたことはなく，強いていえば政府

４）Risk Characterization

における官房長官がそれを実行していることにな

特定の集団に対して潜在的な微生物危害を質的る。しかし，リスクコミュニケーションはマスコ

あるいは量的に推計すること。先にも述べたが，ミ対応のみならず，一般消費者，業界関係者，リ

量的推計は現時点で困難である。質的推計には食スクマネージャー，リスクアセッサーを含む全て

品の喫食経験，病原体の生態，疫学データおよびの関係者が情報交換し，情報を共有することであ製造工程に関連した危害の専門家による判断が必る〔8, 9〕。

要となる。質的推計の際の表現は，リスクが高い，

さて，化学物質に対するリスクアセスメントは中等度，低い，リスク無しといった記述であった

これまでコーデックス委員会などでもかなり議論り，段 階 的 な 数 値 と な る。Risk Characterization

されており，ほぼ方法論的に確立している。先にを行う上で，シナリオ（食品の製造から消費まで述べたように，微生物学的リスクアセスメントにの流れおよび危害発生点の予測）の不確実性，

ついては，1995 年に FAO/WHO によりガイドラ

データの不確実性，およびデータの多様性を明確

イン〔3〕が出され，コーデックス委員会でも食にして分析することが必要となる。

品衛生部会において 1999 年にガイドラインが出された〔5〕。このガイドラインによれば，リスク

３．定量的リスクアセスメント

アセスメントとは次の 4 項目を行うことである。
１）Hazard Identification

微生物学的リスクアセスメントはこれまで定性

食中毒発生時の疫学調査データ，人の疾病デー的に行われてきた。定性的とは，例えば，危険度

タ，食品中の細菌の種類および菌数，毒素に関すをランク付けし 5 段階で評価するというような方るデータなどを用いて危害を同定することである

法である。しかし，近年，リスクアセスメントをが，調査費用の不足と疫学データが不足している

定量的に行うことが主流となってきている〔10-山本茂貴／食品の微生物学的リスクアナリシス／24（2002） 3

表 1 国際的リスクアセスメントにおける優先課題
１． Salmonella spp. と鶏肉，Salmonella Enteritidis と鶏卵 1)
２． Listeria monocytogenes と Ready-to-Eat Food
３． Campylobacter jejuni/coli と鶏肉
４． Vibrio parahaemolyticus とカキ 1), 2)
５． EHEC と牛挽肉および発芽野菜
1)
2)

日本からアセスメントチームに参加している
Vibrio parahaemolyticus とカキだけではなく，V. parahaemolyticus と魚介類，Vibrio cholera とエビについてもリスクアセスメントを行っている

14〕。定量的リスクアセスメントには，確定論的なってくるであろう。同等性の評価は，輸入国とリスクアセスメントと確率論的リスクアセスメン

輸出国の衛生措置が異なる場合，お互いに透明でトがある。確定論的リスクアセスメントは，デー

科学的根拠を持って行う必要がある〔3, 4〕。そのタの平均値と標準偏差を考慮し，最悪のケースをためには，リスクアセスメントを行った上で，そ想定してリスクを推定する方法である。これらの国の規格基準が設定される必要がある。この場

は，データが少ない段階でも可能であり，比較的合のリスクアセスメントは定量的リスクアセスメ

早く結論がでることが特徴である。しかし，危険ントであることが望ましい。そのため，Codex 委

度を過度に重く推定したり，逆に過度に軽度に推員会の食品衛生部会は国際的な微生物学的リスク

定したりする危険がある。一方，確率論的リスク

アセスメントが必要であることを認識し，その実

アセスメントは，まだデータが少なく研究ならび施を FAO/WHO に依頼した。その際，最優先すべに調査を行う必要があるが，モンテカルロシミュ

き事項として表 1 に示す 5 項目について優先的にレーションによる確率論的方法を導入することに国際的リスクアセスメントを行うこととした〔15〕。

より，現実社会の現象に近い形で行えるようになってきている。
モンテカルロシミュレーションは農場から消費

５．FAO/WHO 合同の微生物学的リスクア
セスメントに至るまで各段階においてデータ分布の状態を確率分布として表し，最終的に人が摂食する菌数を

Codex 委員会食品衛生部会の依頼を受け，2000

分布として表すことが可能となる。モンテカルロ

年 か ら 2001 年，鶏 肉 と 卵 に お け る Salmonella

シミュレーションは最初の分布範囲内の乱数を発spp. と S. Enteritidis ならびに調理済み食品におけ

生させ，各過程における分布内の数値が推計され

る Listeria monocytogenes が最初の国際的アセスメることにより，最終的な摂食菌数の一つの値が推ントの対象となり，草案作成が開始された〔16-計される。これらを数千回，数万回繰り返すこと

20, 22〕。さらに，2001 年からは鶏肉とカンピロバ

により最終的摂食菌数の分布が推計される。次

クターおよび水産食品と Vibrio（コレラを含む）のに，各菌数による感染および発症確率が推計され国際リスクアセスメントも開始された。Salmonellaていればどれくらいの人が感染・発症するかが推と Vibrio のリスクアセスメントには日本からも参計されることになる。

加しており，Salmonella の Hazard Characterization
における定量データが多数提供できた〔23〕。

４．衛生措置の同等性の評価

卵の Exposure Assessment では，卵の生産，流通・保存，液卵加工，調理・消費の 4 段階に分け

国際貿易において，輸出国と輸入国の食品衛生て，SE による汚染率と汚染菌数を分析した（図管理手法の同等性をどのように評価するかが今後

2）。卵の SE 汚染のリスクアセスメントとしてこの課題である。WTO（世界貿易機関）による SPS

れまでに実施された 3 例について，その根拠とし(Sanitary Phytosanitary) 協定とも関連して重要とたデータ，数学的取り扱い方法などを比較分析

4 動物抗菌会報 24（2002）

図 2 鶏卵のフードチェーン
農業から消費に至るまで大きく分けて 4 つの段階がある

し，今後新たに行われるリスクアセスメントのために，参考となる方向性を示した。また，関連文

参考文献

献を精査し，データベースを作成した。
サルモネラの Hazard Characterization では，経１）Notermans S, Mead GC: Incorporation of elements

口投与試験と現実の食中毒事例のそれぞれから得of quantitative risk analysis in the HACCP system.

られた，摂食菌数と発症率との相関を比較した。

International Journal of Food Microbiology, 30,

食中毒事例については 1950 年代からこれまでの

157-173 (1996)

全世界の報告例をまとめたが，このうち半数以上

２）Buchanan RL, Whiting R: Risk assessment. Aが日本からのデータであった。大量調理施設マmeans for linking HACCP plans and public

ニュアルに基づく検食システムによって，食中毒

health. Journal of Food Protection, 61, 1531-1534

事件が発生した場合にも原因食品が確保される(1998)

ケースが増えたことと，各地方衛生試験所におい

３）FAO and WHO: Application of risk analysis toて原因菌数を定量する努力が払われたためであfood standards issues．Report of the joint

り，これらの実例は国際的に非常に高く評価され

FAO/WHO expert consultation. Geneva, Switzerland,

た。

13-17 March 1995 (1995)

さらに Risk Characterization では，単位人口当

４）WHO: Food safety and globalization of trade in

たりの食中毒発症者数を推定するとともに，種々

food．A challenge to the public health sector.

の対策の効果を比較した。例えば，常温流通時のWHO/FSF/FOS/97. 8 Rev 1 (1998)

消費期限として流通段階で 14 日を設定した場

５）CODEX Alimentarius Commission: Principles and合，食中毒発生数を減らす効果はほとんどなかっ

guidelines for the conduct of microbiological risk

た。一方，７℃ 以下での流通にすると患者数は半

assessment. CAC/GL-30 (1999)

減すると推定された。流通段階を７日に限定すると，低温流通と同等の効果が予測された。

６）山本茂貴 : 食品のリスクアナリシス . 食品衛生研
究 , 48, 67-70 (1998)

国際的リスクアセスメント手法を用いた国内に

７）FAO and WHO: Risk management and food safety.

おける微生物学的リスクアセスメントも平行してReport of joint FAO/WHO consultation. Rome,行っている〔24〕。定量的リスクアセスメントでItaly, 27 to 31 January 1997 (1997)

は，データがまだまだ不足していることから，食８）FAO and WHO: The application of risk communication

中毒の疫学データの充実や定量的リスクアセスメ

to food standards and safety matters. Report of a

ントに必要なデータ形式での調査研究を推進する

Joint FAO/WHO Expert consultation Rome, Italy,

必要がある。

2-6 February 1998 (1999)

山本茂貴／食品の微生物学的リスクアナリシス／24（2002） 5

９）中山智紀 : FAO/WHO 合同専門家会議「食品安全へのリスクコミュニケーションの適用」に出席して . 食品衛生研究 , 48, 55-61 (1998)10）藤川浩 , 小久保彌太郎 : 食品における微生物学

的安全性確保のための定量的リスク評価 . 日本食品微生物学会雑誌 , 16, 87-97, (1999)
11）Cassin MH, Paoli GM, Lammerding AM: Simulation
modeling for microbial risk assessment. Journal of
Food Protection, 61, 1560-1566 (1998)

characterization of Salmonella in broilers andeggs. MRA 00/03, FAO/WHO (2000)
19）Ebel E, Kasuga F, Schlosser W, Yamamoto S:
Exposure assessment of Salmonella Enteritidis in
eggs. MRA 00/04, FAO/WHO (2000)20）Kelly L, Anderson W, Snary E: Exposure
assessment of Salmonella spp. in broilers. MRA
00/05, FAO/WHO (2000)
21）WHO/FAO draft guidelines on hazard characterization

12）Vose D: Risk Analysis. A Quantitative Guide. 2ndfor pathogens in food and water. WHO/FAO/RIVM

edition. John Wiley & Sons Ltd, West Sussex,

workshop on hazard characterization of pathogens in

England (2000)

food and water. 13-17 June 2000, Bilthoven, The

13）Haas CH, Rose JB, Gerba CP: Quantitative
Microbial Risk Assessment. John Wiley & Sons
Ltd, West Sussex, England (1999)
14）Lammerding AM: An overview of microbial foodsafety risk assessment. Journal of Food Protection,
60, 1420-1425 (1997)15）Report of the thirty second session of the CODEX
committee on food hygiene. (1999)

Netherlands. MRA 00/06, FAO/WHO (2000)
22）FAO and WHO: Report of a joint FAO/WHO
expert consultation on risk assessment of
microbiological hazards in foods. Rome, Italy, 1721 July 2000 (2000)
23）Kasuga F: Archiving of food samples fromrestaurants and caterers. 1st International Conferenceon Microbiological Risk Assessment. Foodborne16）Buchanan R, Lindqvist R: Hazard identification

Hazards, July 24-26, 2002, Inn and Conference

and hazard characterization of Listeria monocytogenes

Center, University of Maryland, USA organized

in ready-to-eat foods. MRA 00/01, FAO/WHO (2000)

by JIFSAN and RAC (Risk Assessment Consortium)17）Ross T, Todd E, Smith, M: Exposure assessment24）山本茂貴：食品中の微生物のリスク評価に関研

of Listeria monocytogenes in ready-to-eat foods.

る研究．2002，厚生科学研究費補助金

MRA 00/02, FAO/WHO (2000)

全総合研究事業

18）Fazil A, Morales RA, Lammerding AM, Vicari AS,
Kasuga F: Hazard identification and hazard

報告書

平成 13 年度

生活安総括・分担研究6 動物抗菌会報 24（2002）

Microbiological Risk Analysis in Foods
Shigeki YAMAMOTO
National Institute of Health Sciences, Kamiyoga 1-18-1, Setagaya-ku, Tokyo 158-8501, Japan
Recently, microbiological risk analysis is conducted by several countries to control microbiological hazards in food.
Risk analysis is composed by three components, risk management, risk assessment and risk communication.
Microbiological risk assessment is conducted by four steps, hazard identification, exposure assessment, hazard
characterization, and risk characterization. Hazard identification is the first step to identify hazards in foods.
Exposure assessment is to estimate the probability of the number of microbiological agents when foods are
consumed. Monte Carlo simulation is used in this step. Hazard characterization is to estimate the probability of
attack rate in each dose of microbiological agents in food consumed. Risk characterization is to estimate the final
probability of incidence of diseases in some population, and involving with uncertainty and variability.
FAO/WHO are conducting international microbiological risk assessment as the results of discussion in Codex
Commission of Food Hygiene. First combinations are to conduct the microbiological risk assessment of Salmonella
Enteritidis in eggs, Salmonella spp. in poultry meat, and Listeria monocytogenes in ready-to-eat foods from 2000 to
2001. Second combinations are Vibrio spp. in sea foods and Campylobacter in poultry meat from 2001 to 2002.

討論（座長：小久江栄一，農工大）

質問（佐藤靜夫，全農家畜衛研）

答（山本茂貴）リスクアセスメントに必要と考えられる野外デー

元となるデータがどの個体から出ているかを記載

タが不足していると思われます。わが国ではアメリして欲しいと思います。3・6・12 と或るグループに

カの様にデータを収集する方法が整備されていない

ついて，順番にデータを採って貰えると，そこからと思います。

母集団が推計出来ます。

答（山本茂貴）質問（藤倉孝夫，動物衛研 OB）

質問の収集方法の整備が検査方法の統一を言ってリスクアセスメントを応用・適用する前提としておられるのならば，厳密に統一する必要はありませリスクエクスクルージョン（危険度排除）の為の方ん。但し，精度としての特異性が何パーセントで，策が必要ではないかと思いますが，如何ですか。評

感度（検出精度）が何パーセントというデータを必価に使用するのは良いのですが，どのレベルなら安要とします。ある農家において，サルモネラワクチ

全か，危険かなど，政府だけのレベルで使用していン投与に依ってフリーにし，汚染率のデータを採っるのではないでしょうか。

てきました。どの位国が予算をかけられるのかに依答（山本茂貴）ると思います。

このやり方だけを先に行うことは有り得ません。

質問（小川益男，日本食品分析センター）

政府がデータを取るためだけに行う，という事は無生産・流通等の場で Exposune Assessment に有効

く，消費者から，生産者・関係者を通して行うのでなデータを採る上で注意すべき点を御教示下さい。

心配は無いと考えます。

山本茂貴／食品の微生物学的リスクアナリシス／24（2002） 7

特集：カンピロバクター食中毒と薬剤耐性
Symposium : Food Poisoning Caused by Campylobacter andAntibiotic Resistance
今回のシンポジウムにあたって
小久江栄一（動物用抗菌剤研究会理事長）

例年秋になると，次年度の動物用抗菌剤研究会

またその席では，リスクアセスメントについて

シンポジウムにどんなテーマをとり挙げようかのも話しが多く出た。その頃は丁度，BSE 問題の相談で，何名かの理事の先生方が日獣大に集ま影響でリスク評価という用語がさかんに一般新聞る。総会に集まっていただく方々を満足させる誌にも出ていた。実はこの分野は日本が最も不得

テーマを見つけなくてはならない。いつも苦労す

手とするサイエンスである事を，私を始めお集まるのだが，今回はかなりすんなりと「リスクアセ

りの先生方も感じておられた。少し勉強しなけれスメント」と「カンピロバクター」という二つのばならないね，ということでこれを特別講演のキーワードが決まった。鶏に使うフルオロキノロ

テーマに決めた。この 10 月初めの VICH 会議で，ン由来のカンピロバクター耐性菌問題が，いろい

リスクアセスメントの量的査定というセンセー

ろな学術誌や新聞紙上をにぎわせていたことが原

ショナルな講演があったし，その前 9 月には，因であろう。またその集まりの何ヶ月か前に，あFDA から動物用抗菌薬由来耐性菌がもたらす公る理事の先生らもカンピロバクター中毒らしき症

衆衛生学的危険度の質的査定の草案が出された。

状を体験したという話しもインパクトを与えた。

今にして思えば，我々の企画はタイムリーだった

そしてすぐに，カンピロバクターの生態や汚染実なという感想を持つ。本研究会先生方の，日頃の態，薬剤耐性や感受性試験法などのサブテーマがご努力の成果であろう。誇りに思います。

決まり，お話していただく講師の人選も出来た。

本特集は 2002 年４月 27 日に開催された本会主催の第 29 回シンポジウムの講演要旨である。

7

8 動物抗菌会報 24（2002）

カンピロバクターの生態学
中馬猛久
鹿児島大学農学部獣医公衆衛生学教室（〒 890-0065 鹿児島市郡元 1-21-24）

年代の情報をもとに編集された教科書や資料など

１．はじめにでは C．jejuni/coli の同定の際のキーポイントとして CET 耐性とナリジクス酸（NA）感受性が掲げ

カンピロバクター属の菌のうちヒトの食中毒のてあるが，80 年代に入り世界的に NA 耐性の C.

原因となる Campylobacter jejuni と C. coli をとりjejuni/coli が報告されはじめ，90 年代には日本であげ，家畜の生産段階から食肉の消費段階を通しもこのような耐性株が人の患者やブロイラーからて，これらの菌の生態を概説し，抗菌剤耐性菌の分離されている。

出現状況および耐性獲得メカニズムの一端を紹介

３．カンピロバクターによる食中毒の発生状況する。

２．カンピロバクターの特徴と薬剤感受性
厚生省による年ごとの原因細菌別食中毒発生件
カンピロバクター属の菌のうちヒトの食中毒の数をみると，C. jejuni/coli による食中毒は 1996原因となるものは C. jejuni と C. coli である。実際年まで 20 から 60 件程度で推移している。ところには，C. jejuni が原因である食中毒事例がほとんが，97 年 は 257 件，98 年 は 553 件，99 年 は 493

どであり，C. coli が原因の事例は少ない。これら件と急激に上昇してきている。この傾向は他の食2 菌種は生化学的性状での鑑別点が乏しく，C.

中毒菌にもみられている。この数字は単に食中毒

jejuni/coli として表記されたり，食中毒などの統の事故が増えてきていることを示すものではな

計上では区別されていないことが多い。この 2 菌い。1996 年の病原性大腸菌 O157 による大規模な種の主な性状は，グラム陰性らせん状，カタラー

食中毒事件以降，患者数一人の散発事例の届出がゼ，オキシダーゼ陽性，42℃ で発育，酢酸インド

一部の自治体から増加したことによるものであろ

キシル陽性などである。馬尿酸加水分解試験でこう。これに伴い，厚生省の統計も 1998 年から患れらを鑑別することができ，C. jejuni は陽性，C.

者数 1 人の散発事例の表が追加されるようになっcoli は陰性である。PCR でも両菌を鑑別するこた。この年の C. jejuni/coli による食中毒 553 件のとができる。

うち 2 人以上の事例は 63 件，1 人の事例は 490 件

元来，C. jejuni/coli はアンピシリン（ABPC），テである。この統計からそれまでの集団食中毒ばか

トラサイクリン（TC），エリスロマイシン（EM），

りでなく単独での食中毒が非常に多く発生していナリジクス酸（NA）およびニューキノロン系抗菌

ることがわかる。

剤 な ど に 対 し 感 受 性 を 示 し，セ フ ァ ロ チ ン

４．原因食品（CET），トリメトプリム（TMP）などに耐性を示す。しかしながら，現時点では，様々な薬剤に対C. jejuni/coli による食中毒は潜伏期が他の菌よし耐性を示す菌株が多く分離されている。1970
8中馬猛久／カンピロバクターの生態学／24（2002） 9

り比較的長く，菌自体も微好気性で空気に触れる

15 株が TC 耐性，11 株が EM 耐性（すべて C.coli），と速やかに死滅してゆき乾燥にも弱いことから，

22 株が OFLX および NFLX 耐性であった〔4〕。週

菌を分離することが困難であり，原因食品を特定齢ごとにブロイラーのカンピロバクター保菌状況

しにくいが，最も重要な原因食品は鶏肉であるとを調査した結果から，鶏群が一度本菌に汚染され考えられている。実際，スーパーなどで市販されると出荷時にはほぼ 100％に近いブロイラーが保ている手羽先とササミ 69 検体中 41 例（59％）か

菌してしまうことが知られている。

ら菌数が少ないながらも C. jejuni/coli が検出さブロイラーにニューキノロン系抗菌剤を投与すれた。また，これらの鶏肉からの薬剤耐性菌の分ると一旦カンピロバクターの排菌がなくなるが，離頻度は，キノロン系抗菌剤である NA ，オフロ

投与 3 日後にはキノロン耐性カンピロバクターのキサシン（OFLX），ノルフロキサシン（NFLX）

排菌が始まることが Jacobs-Reitsma〔6〕らによっ

耐性 20％，TC 耐性 46％，EM 耐性 2.4％であり，て証明されている。C. jejuni はニューキノロン系

人の下痢症患者からの分離頻度とほぼ一致してい抗菌剤にさらされることにより，DNA gyrase をた。

コードする遺伝子の一塩基が変異して容易に耐性を獲得することがわかっている〔2〕。

５．食鳥処理場での汚染
７．ブロイラーへのカンピロバクター汚染源
鶏群ごとに盲腸内容物と解体後の鶏肉から C.
jejuni/coli を分離し，分離状況と分離菌株の薬剤

ブロイラーの生産段階における C. jejuni/coli に感受性を比較した結果，盲腸から菌が分離されなよる汚染経路を調べたところ，4 ヶ所すべての種

かったにもかかわらず鶏肉からは菌が分離された鶏場から C. jejuni が分離され，それらの雛を導入

鶏群，盲腸から分離された菌と鶏肉から分離されした 15 農場のうち 4 農場は C. jejuni が陽性であった菌の薬剤感受性パターンが大きく異なる鶏群がた。これらの菌株の RFLP を解析したところ，種あった。これらの菌株は，PCR-RFLP（Restriction

鶏と同一タイプが分離されたのは 1 農場であり，Fragment Length Polymorphism）を用いた解析に他の 3 農場は異なったタイプであった。さらに，

よっても異なるパターンを示したことから，食鳥同一農場であっても入雛群毎に異なるタイプのカ処理場内で異なる鶏群間で C. jejuni/coli による汚ンピロバクターに汚染されていた。このことから染が拡大している可能性が考えられた。チラー処

ブロイラーのカンピロバクター汚染は種鶏由来で理前後の同一と体から菌を分離し PCR-RFLP にある可能性は低いことが示唆された〔1〕。
ブロイラー農場をとりまく環境の一要因としてよって解析を行ったところ，チラー処理によるカ
ンピロバクターの消毒効果は低いが交差汚染は拡

スズメに着目し，C. jejuni/coli の分離を試み、薬大していないことが推察された〔5〕。また脱羽機

剤感受性を調べた結果，13 株中 3 株で ABPC 耐からの滴下水から菌を分離し同様な解析を実施し性，NA 耐性，NFLX 耐性が認められた。これら

た結果，脱羽機内で鶏群間の交差汚染が起こっての耐性株は産業動物由来と推測され，耐性株を保いる例が認められた。

有するスズメは産業動物またはそれらの飼料と接触したものと考えられる。スズメが保有するカン

６．ブロイラー育成農場での汚染

ピロバクターがブロイラーへの汚染源のひとつであるのかもしれない〔3〕。

1995 年から 99 年まで鹿児島県下のブロイラー
農場 68 ヶ所，212 鶏群のカンピロバクター保菌状

文

献況を調べたところ，42 鶏群（19.8％）
が C. jejuni 陽性、26 鶏群（12.3％）が C. coli 陽性であった。分離

１） Chuma T, Makino K, Okamoto K., Yugi H.:

された C. jejuni/coli 68 株中，11 株が ABPC 耐性，

Analysis of distribution of Campylobacter jejuni

10 動物抗菌会報 24（2002）
and Campylobacter coli in broilers by using

Vet Med Sci, 62, 1291-1295 (2000)

restriction fragment length polymorphism of４） Chuma T, Ikeda T, Maeda T, Niwa H, Okamoto K:

flagellin gene. J Vet Med Sci, 59, 1011-1015 (1997)

Antimicrobial susceptibilities of Campylobacter

２） Chuma T, Niwa H., Maeda T, Okamoto K:

strains isolated from broilers in the southern part

Acquisition of quinolone resistance and pointof Japan from 1995 to 1999. J Vet Med Sci, 63,

mutation of gyrA gene in Campylobacter jejuni
isolated from broilers and in vitro- induced

1027-1029 (2001)
５）Chuma T, Ikeda T, Okamoto K: Cross contamination

resistant strains. Proceedings of 10th Internationalof chickens with Campylobacter in a chiller tank.

Workshop on Campylobacter, Helicobacter, and

Int J Med Microbiol, 291 (suppl.), 88-89 (2001)

Related Organisms. 6 (1999)

６） Jacobs-Reitsma WF, Kan CA, Bolder N M.: The

３） Chuma T, Hashimoto S, Okamoto K: Detection of

induction of quinolone resistance in Campylobacter

thermophilic Campylobacter from sparrows bybacteria in broilers by quinolone treatment. Lett

multiplex PCR, The role of sparrows as a source

Appl Microbiol, 19, 228-231 (1994)

of contamination of broilers with Campylobacter. J

Ecology of Campylobacter
Takehisa CHUMA
Department of Veterinary Public Health, Faculty of Agriculture, Kagoshima University, Kagoshima 800-0065, Japan

Campylobacter jejuni and Campylobacter coli are one of the causes of human food poisoning. In this paper, theecology of these bacteria through the broiler production and consumption is outlined. The incidence of antibiotic
resistant Campylobacter and a part of the mechanism for acquisition of the resistance are also discussed.

討論（座長：五十君靜信 国立医薬食衛研， 阪野哲也 全農家畜衛研）

質問（小川益男，日本食品分析センター）

です。防疫のためにはブロイラーへの感染源，感染経ブロイラー農場での鶏の感染率は，かなり低いとこ

路を特定することが重要課題だと思います。

ろから 100％近くまでとかなりばらつきがあるようで質問（小川益男，日本食品分析センター）

す。この差が生ずる原因は何でしょうか。

水が汚染源とは考えられないとのことですが，鶏舎答（中馬猛久）内のトレーの水からカンピロバクターがよく分離さ一旦ある鶏舎のブロイラーがカンピロバクターにれるので，飲水が鶏舎内の感染拡大に大きな役割を果汚染すると，糞便，敷料，飲水を介して他のブロイラーに感染し，出荷時には鶏舎内のほぼ 100％の鶏が陽性たしているのではないでしょうか。
答（中馬猛久）となってしまいます。採材のために農家を訪問した時

鶏舎内の飲水から菌が分離されるのは，ブロイラーの印象では，衛生意識が高く管理が行き届いた農家やが感染した後からです。水の供給源に菌が侵入して汚成績のよい農家の鶏群におけるカンピロバクターの染源になることはまずあり得ません。しかし，一度検出率は低いと感じています。原因は今のところ不明

鶏舎内に菌が侵入すると飲水や敷料を含め鶏舎全体

中馬猛久／カンピロバクターの生態学／24（2002） 11に蔓延していきます。そういう意味では飲水は鶏舎り，水が汚染されれば水平感染が起こります。

内の感染拡大に大きな役割を持っているといえると

質問（小川益男，日本食品分析センター）

思います。

一度，農場内で感染が起こると，鶏舎内の感染率を質問（佐藤夫，全農家衛研）

18 日齢胚の盲腸内からのカンピロバクター遺伝子

高めるシステムがあるのでは。
答（中馬猛久）の証明，種鶏の生殖器からの菌分離など介卵伝染のそれはあると思います。

心配があるデータを示されたが，野外調査では否定

質問（小川益男，日本食品分析センター）的な結果で安心できるが，この問題はどのように考野鳥が感染を拡大するうえで重要では。

えたらよいでしょうか。

答（中馬猛久）答（中馬猛久）全てを調査したわけではないので，何が感染拡大の現段階では垂直感染を完全に否定するには至って

原因，侵入経路であるかは分かりません。実際にクいません。しかし，例え垂直感染があるとしても稀リーンな農場もあるので，経営者も衛生管理を意識すであり，ブロイラー鶏群のカンピロバクター陽性率べきと思います。

の高さや種鶏から分離される菌株との遺伝子型の相違を考慮すると，主たる汚染源は鶏舎周辺の環境または動物と考えるのが妥当だと思っています。
質問（田村豊，動薬検）

農場段階での野鳥の重要性は理解できましたが，農場から食肉の間でどの工程がカンピロバクターの菌数の抑制に重要と思われますか。
答（中馬猛久）ブロイラーの生産から消費過程でカンピロバク

質問（阪野哲也，全農家畜衛研）
カンピロバクターは腸内細菌叢に近いと考えられるのでしょうか，体内あるいは農場から完全に排除することが可能と考えられますか。
答（中馬猛久）
現段階では，一度汚染すると排除することは困難です。生産現場で鶏どおしの接触を避けても無理でしょう。
発言（藤倉孝夫，動物衛研 OB）

ターが増殖するのは動物の腸管に限られ，他の過程

コバルト 60 照射による動物性食品の微生物汚染除で菌数が増えることはないので，糞便から直接また去について，国際会議でも取上げられ，数カ国で効は間接的に肉へ汚染する過程が問題だと思われま

果をあげています。この方法をも選択肢の一つとしす。直接的には中抜き工程での腸管破損による汚染て検討しても良いのでは。

があります。私どもの実験成績からは脱羽工程にお発言（佐藤夫，全農家衛研）

ける個体および鶏群間での交差汚染が明らかにな

WHO が食肉の放射線殺菌を提案しているが，我国り，脱羽工程でと体の汚染が広がると考えられます。

では将来的にもその実用は考え難いので，他の方法に質問（小川益男，日本食品分析センター）

よるカンピロバクター対策を考えていくべきではな

水が感染源になることはないでしょうか。あるいいでしょうか。

は，水そのものが original として保持している可能性

発言（山本成貴，国立医薬食衛研）

はないでしょうか。また，農場内での感染経路はど

リスクマネージャーがオプションの一つとして考の様なものですか。

えるならば，リスクアセスメントにより評価する必要

答（中馬猛久）があります。通常は消費者意識（リスクコミニュケー

我々の調査農場では，水道水を使用しているので水ションによる）が，放射線を容認しないので，対策のが原因とは考えられません。農場内で糞便などによ一部になっていません。

12 動物抗菌会報 24（2002）

食鳥処理場におけるカンピロバクターの汚染実態
小野一晃
埼玉県衛生研究所（〒 338-0824 さいたま市上大久保 639-1）

ふきとりおよび鶏肉検体からの Campylobacter

１．はじめにの分離法は，食品衛生検査指針（微生物編 ; 1990年）に準拠し，検体に 10 倍量になるように Preston

近年，わが国におけるカンピロバクター食中毒増菌培地〔2〕を添加し，42℃，24 時間微好気状

は，欧米諸国同様，増加傾向にある。カンピロバ

態（O2 : 5%, CO2 : 10%, N2 : 85%）で培養後，その 1

クターは家畜や家禽の腸管内に広く分布し，と畜

白 金 耳 を CCDA 培 地〔3〕に 塗 抹 し，同 様 に 42

場や食鳥処理場での解体過程で生肉を汚染するこ℃，48 時間培養後コロニーを釣菌し，常法〔1〕とが知られている〔1〕。そこで，カンピロバクに基づき，菌種の同定を行った。

ターの汚染実態を明らかにするため，埼玉県内の

３．結果および考察

中抜き方式の食鳥（ブロイラー）処理場において，各工程ごとに，と体・器具のふきとり検査を行い，生肉の汚染が処理工程のどの段階で起こる

図 1 に処理場における処理工程（中抜き処理のかを調査した。食鳥処理場には複数の養鶏場か法）中のと体のふきとり箇所を，また，表 1 に本らニワトリが搬入され，細菌の汚染状況は飼育さ

菌の分離状況を示す。生鳥の体表は処理場に搬入れた農場によって異なることから，調査は 1 つのされた段階で既に汚染されていた。菌分離率は湯養鶏場の同一群のニワトリについて，と殺・解体

漬（60℃，約 1 分間処理）の段階で一旦は減るもの作業工程に従い，部分肉（むね肉，もも肉，手のの，次の脱羽の工程で脱羽機のフィンガーに羽先など）にカットされるまで連続して実施した。

よって汚れた羽毛や漏出した腸内容物が撹拌されるため，脱羽後のと体からは 3 回すべての調査と２．材料および方法

も菌が分離された。Oosterom ら〔4〕は脱羽機周
囲の空気中から C. jejuni を分離し，八嶋ら〔5, 6〕

埼玉県内の中抜き方式の処理場（1 施設）におも脱羽直後が最も細菌に汚染されていたことを指いて，「食鳥処理場における HACCP 方式による摘し，脱羽工程において，フィンガー部分の洗浄

衛生管理指針」（厚生省；1992 年）に基づき計 3
回（夏期，冬期，夏期）調査を行った。各工程ごとに，と体・器具のふきとり検査を行い，と体については，胸部を滅菌タンポンでふきとり（5 ×，3 羽分をまとめて 1 検体とし，菌分離を5cm2）行った。また同時に，そこで解体された部分肉（製品），および盲腸内容物から菌分離を行い，鶏図１

肉の汚染が処理工程のどの段階で起こるのかを調中抜き方式による処理工程▲：と体ふきとり箇所

査した。
12

小野一晃／食鳥処理場におけるカンピロバクターの汚染実態／24（2002） 13

表１ と体ふきとり検体からのカンピロバクターの分離状況
陽性検体数／検体数
処理工程

１回目

２回目

３回目

懸鳥後
湯漬後
脱羽後
掛け換え後
内臓摘出後
洗浄後
冷却後

４／４
１／４
４／４
４／４
４／４
４／４
１／４

２／４
２／４
４／４
４／４
４／４
４／４
０／４

４／４
２／４
４／４
４／４
２／４
０／４
０／４

３羽分をまとめて１検体とした分離されたのはすべて C. jejuni

表２

検体名

１回目 ２回目 ３回目

鳥かご
湯漬水
脱羽機フィンガー
鳥掛け換え作業員手指
自動中抜き機
内臓取り出し部キャタピラ
冷却槽スクリュー
冷却水

＋
−
−
＋
＋
＋
−
−

＋
−
＋
＋
＋
＋
−
−

＋
−
＋
＋
＋
＋
−
−

分離されたのはすべて C. jejuni

表３と，と体から腸内容物の漏出を抑えることによりと室のふきとり検体および使用水からのカン
ピロバクターの分離状況解体された部分肉からのカンピロバクターの分離状況
陽性検体数／検体数

汚染が減少したことを報告している。
また，脱羽後の中抜き工程では，腸管の破損に

検体名

１回目

２回目

３回目

よりさらにと体に汚染が広がることが考えられ

ササミ
むね肉
もも肉
手羽元
手羽先
肝臓

１／３
３／３
２／３
２／３
３／３
２／３

０／３
３／３
３／３
３／３
３／３
３／３

０／３
１／３
３／３
３／３
３／３
０／３

〔7〕
，1 回目と 2 回目の調査では洗浄後のと体からも高率に菌が分離され，脱羽工程での汚染はと体洗浄の工程まで減少せずに持続した。しかし，3 回目の調査では，内臓摘出後のと体からの菌分離率は，掛換え後に比べて半減し，さらに，洗浄分離されたのはすべて C. jejuni

後のと体からは菌は全く分離されなかった。これは前 2 回の調査後，と体の洗浄を見直し，中抜き

鳥かご，脱羽機フィンガー，鳥掛け換え作業員の後の洗浄工程において 20ppm の塩素水で頻繁に手指，自動中抜き機，内臓取り出し部位のキャタと体の表面を洗い流すように改善した効果によるピラが本菌に汚染され，湯漬水，冷却水からは菌ものと考える。

は分離されなかった。

洗浄後残存した菌は次の冷却処理により著しく

この処理場において解体された部分肉（製品）

減少し，中抜き処理の最終工程である冷却後のとから菌分離を行った結果は表 3 に示すとおり，む体からは菌はほとんど分離されなかった。これはね肉，もも肉，手羽元，手羽先および肝臓から高冷却水中の塩素（最高 60ppm）の消毒効果によ率に菌が分離された。しかし，ササミからの分離

り，体表の菌が死滅したためと考える。しかし，

は 1 回目の調査の 1 例のみであった。冷却後のと前段階のと体の洗浄が不十分であると冷却槽の中体のふきとり検体からは，2 回および 3 回目の調を循環している冷却水はすぐに汚れてしまい，塩

査では菌は分離されなかったが，このと体を解体

素による消毒効果は激減してしまう。浅川ら〔8〕処理した部分肉からは高率に菌が分離された。こは塩素消毒槽は 50ppm 程度の塩素では効果がなの原因として Berndtson ら〔9〕は，湯漬の工程いことを指摘している。このため，と体の洗浄をでと体の毛穴が開き，次の脱羽の工程で毛穴の中十分に行い，できるだけ汚染の少ないと体が冷却に菌が入り込み，これ以降の工程ではと体が冷え槽に入るように改善することが消毒効果を維持すて毛穴が閉じてしまうため，体表の塩素消毒の効

るうえで重要である。

果も十分ではないことを指摘した。本調査におい処理場の菌の汚染箇所を知る目的で，と室および使用水から菌分離を行った結果を表 2 に示す。

ても塩素消毒後の部分肉からは 3 回の調査とも高率に菌が分離された。

14 動物抗菌会報 24（2002）

牛，豚肉については，肉の流通過程で乾燥や冷

LH, Hetty K: Survival of Campylobacter jejuni

凍の影響により，菌が死滅することが考えられ，

during poultry processing and pig slaughtering. J

市販されている肉のカンピロバクター汚染は少な

Food Prot, 46, 702-706 (1983)

い〔10〕。一方，鶏肉は解体される工程から常に湿

５）八 嶋

潤で乾燥することがなく，また，比較的短時間で消費者の手にわたることから，カンピロバクターの汚染率がきわめて高い〔10〕。このため食鳥処務，小 倉 安 弘，田 中 由 理 子，小 野 口 勝

巳，松村重義：食鳥処理場における微生物汚染防止対策．食品と微生物，5, 67-72 (1988)
６）八嶋務，小野口勝巳，松村重義：食鳥肉のカ

理場内の解体ラインでいかに生肉の汚染を防ぐか

ンピロバクター汚染と防止法．食品衛生研究，

が食中毒予防の大きなポイントになると考える。

37, 31-41 (1987)
７）神 保 勝 彦，小 久 保 弥 太 郎，金 子 誠 二，桐 谷 礼

文献子，松本昌雄：食鳥処理場および市販食肉のカ
ンピロバクター・ジェジュニ汚染状況．東京都

１）伊藤立衛生研究所年報，37, 129-135 (1986)

武：食水系感染症と細菌性食中毒．坂崎利一編，123-153，中央法規，東京（1991）８）浅川

豊：カンピロバクターによる食中毒の現２）Bolton FJ, Robertson L: A selective medium for

状と最近の知見．食品衛生研究，36, 21-29 (1986)

isolating Campylobacter jejuni/coli. J Clin Pathol,９）Berndtson E, Tivemo M, Engvall A: Distribution andnumbers of Campylobacter in newly slaughtered35, 462-467 (1982)
３）Bolton FJ, Hutchchinson DN, Coates D: Blood- freebroiler chickens and hens. Int J Food Microbiol,

selective medium for isolation of Campylobacter
jejuni from feces. J Clin Microbiol, 19, 169-171

15, 45-50 (1992)
10）Ono K, Yamamoto K: Contamination of meat with

(1984)

Campylobacter jejuni in Saitama, Japan. Int J Food４）Oosterom J, De Wilde G.JA, De Boer E, De Blaauw

Microbiol, 47, 211-219 (1999)

Contamination of Meat with Campylobacter spp. in a Chicken Processing Plant
Kazuaki ONO
Saitama Institute of Public Health, 639-1 Kamiokubo, Saitama city, Saitama 338-0824, Japan
Survey studies were conducted at a chicken processing plant in Saitama prefecture to determine the source of meat
contamination with Campylobacter spp. In the poultry processing plant, there is significant contamination with
Campylobacter spp. in chicken carcasses, equipment and worker’s hands. The rates of isolation of Campylobacter spp.
in swab samples taken from chicken carcasses were up to 100% after hanging but decreased during the scalding
process (60℃ for 1 min). This contamination increases during the defeathering process because dirty feathers or
faeces leaked from the intestine were mixed in by the fingers of the defeathering machine. Contamination of thechicken carcass perished until the washing process, but in the present study, setting up new washing steps with 20
ppm chlorinated water after evisceration and manually removing the intestinal organs from the carcass were effective
to reduce the contamination with Campylobacter spp.

小野一晃／食鳥処理場におけるカンピロバクターの汚染実態／24（2002） 15

討論（座長：五十君靜信 国立薬食衛研，阪野哲也 全農家畜衛研）

質問（中馬猛久，鹿児島大学）
食鳥処理場におけるふきとり検査における培養法，検出感度および菌数を教えて下さい。
答（小野一晃）

カンピロバクターは腸管内に存在すると聞いているが，レバーから分離される理由は。
答（小野一晃）
レバーのカンピロバクターは，食鳥処理場におけ

滅菌タンポンで 5 × 5cm2 をふきとり，Preston 培地

る処理工程中の二次汚染により，そのほとんどが表による増菌法で定性検査を行いました。検出感度に面に存在しますが，一部は内部からも分離されまついて，今回は検討しておりません。菌数は約 106 〜

す。血流を介して肝臓内部に移行したと考えます。

7

質問（山本茂貴，国立医薬品食品衛研）

質問（中馬猛久，鹿児島大学）

皮付きの流通を中止すれば，鶏肉の汚染菌数を減

10 個 /ml です。
食鳥処理の各過程での汚染菌数の増減はどうなっているのでしょうか。
答（小野一晃）
処理場に搬入された時点で多くのニワトリの体表らすことが可能と考えられますか。
答（小野一晃）
可能と思われますが，肉としての商品価値は低下してしまう恐れがあります。

は既にカンピロバクターに汚染されています。「湯質問（五十君漬」の 段 階 で 一 旦 は 減 る も の の，次 の「脱 羽」と酸素での殺菌方法はどうでしょうか。

「中抜き」の工程で再び汚染菌数が増える傾向にあ

答（小野一晃）

ります。

検討する価値は有ると思います。

質問（田村豊，動薬検）

信，国立医薬品食品衛研）

16 動物抗菌会報 24（2002）

健康家畜由来カンピロバクターの薬剤感受性調査
石原加奈子
農林水産省動物医薬品検査所 （〒１８５８- ５１１ 国分寺市戸倉１１
- ５１
- ）

体，産卵鶏 160 検体および肉用鶏 116 検体の糞便

１．はじめにとし，シードスワブ１号（栄研）を用いて検体を輸送後，CEM 培地による増菌培養も併用してカンピロバクターは家畜には症状を示すことな

CCDA 培地により，菌分離を行った。分離株につく腸内に定着しているが，人には腸炎を引き起こ

いて，生化学的性状検査（オキシダーゼ、カタ

し，欧米では最も発生事件数の多い散発性食中毒

ラーゼ，酢酸インドキシル加水分解能，馬尿酸塩の原因菌である。最近では，人の細菌性腸炎の治

加水分解能，温度別発育試験（43，37 および 25療薬であるフルオロキノロンに対する耐性株が人℃），1％グリシン，0.04％ TTC，1.5％ NaCl およ

症例や畜産食品等から分離され，話題となっていび 3.5％ NaCl 添加培地での増殖性，TSI 培地による。

る硫化水素産生能，糖分解能）〔5〕および PCR 法

当所では，昭和 51 年度に初めて全国的な動物〔2〕により菌種同定を行った。分離された菌株は由来細菌（大腸菌，サルモネラ，黄色ブドウ球菌）

1 検体 2 株について，以下の試験に供試した。

の薬剤感受性調査を実施した。それ以降，数回に２）血清型別

わたり定期的な全国調査が実施されてきている

C. jejuni について Penner の血清型別を，カンピが，最近，「食用動物における抗菌性物質使用のロバクター免疫血清（デンカ生研）および感作血

人の健康への影響」について国際的に議論されて球調製試薬（デンカ生研）を用いて，受身血球凝いることから，平成１１年度より，健康家畜糞便集反応により行った。

由来細菌として人獣共通感染症の原因菌であるサ

３）薬剤感受性試験

ルモネラおよびカンピロバクターと，薬剤感受性

薬剤感受性試験は，日本化学療法学会標準法に動向の指標菌として腸球菌および大腸菌の薬剤感準拠した寒天平板希釈法により行った 〔4〕。セフ

受性調査を実施している。初年度は全国の家畜保チオフル（CTF），ジヒドロストレプトマイシン

健衛生所に家畜糞便の採材を依頼し，当所におい（DSM），ゲンタマイシン（GM），スペクチノマイて菌の分離・同定並びに分離株の薬剤感受性試験

シン（SPCM），エリスロマイシン（EM），スピラを実施したが，平成 12 年度からは一連の試験をマイシン（SPM），タイロシン（TS），オキシテト

各都道府県で実施している。今回は，平成 12 年

ラサイクリン（OTC），ク ロ ラ ム フ ェ ニ コ ー ル

度に収集したカンピロバクターの薬剤感受性につ（CP），ナ リ ジ ク ス 酸（NA），オ キ ソ リ ン 酸

いて報告する。

（OXA），エンロフロキサシン（ERFX）
，オフロキ
サシン
（OFLX），ト リ メ ト プ リ ム
（TMP）
，ス ル

２．材料および方法

ファジメトキシン（SDMX）を供試した。薬剤感受性測定用の基礎培地には 5％馬脱線維素血液添加

１）分離・同定

ミューラーヒントン寒天培地（Oxoid）を用い，検体は，健康な肥育牛 155 検体，肥育豚 148 検

接種菌は 5％馬脱線維素血液添加ミューラーヒン
16

石原加奈子／健康家畜由来カンピロバクターの薬剤感受性調査／24（2004） 17

トン寒天培地で 48 時間培養したものをミューラー

株，E 群 1 株，G 群 18 株，I 群 3 株，J 群 2 株，K

ヒントンブロス（Difco）に浮遊させ，約 10６CFU/ml

群 2 株，N 群 4 株，O 群 2 株，Y 群 2 株，Z5 群 1に調整し，ミクロプランターを用いて接種した。

株，複合型 7 株および型別不能 26 株であった（表培養条件は 37℃，微好気（O2 5％，CO2 10％，N2

3）。

85％），48 時間とした。

３）薬剤感受性試験

供試菌株の MIC 分布が二峰性を示した薬剤に分離 302 株の薬剤感受性は供試 16 薬剤中，10ついて，低い MIC を示した群を感受性，高い MIC

薬剤において，MIC 分布に二峰性が認められ，OTCを示した群を耐性とし，その中間値をブレークポ（57.6％），NA および OXA（30.5％），DSM（27.8％）

イントとした。

が高い耐性率を示した（表 4）。また，分離株の主要菌種である C. jejuni および C. coli の薬剤感受性

３．結

果について比較すると，C. coli の MIC 値は C. jejuniと比べ高い傾向にあり，また耐性率もいずれの薬剤においても有意に高かった（表 5）。特にマクロ１）分離・同定
肥育牛 155 検体中 38 検体（24.5％），肥育豚 148 検

ライド系においては，C. coli が 46.7％と高い耐性

体中 61 検体（41.2％），産卵鶏 160 検体中 48 検体率を示したのに対し，C. jejuni には耐性株は認め（30.0％）および肉用鶏 116 検体中 30 検体（25.9％）られなかった。また，分離された由来ごとに耐性から計 302 株のカンピロバクターが分離された率を見てみると，オールドキノロンを除くいずれ（表 1）。同定された菌種の内訳は C. jejuni 174 株，の薬剤についても肥育豚由来が最も高い値を示

C. coli 107 株，C. fetus 13 株，C. hyointestinalis 6

し，マクロライド系の EM では肥育牛 5.0％，肥（表 2）。
株，C. lari 1 株および その他 1 株であった

育豚 43.4％，産卵鶏 2.4％および肉用鶏 1.9％で，フルオロキノロン（ERFX および OFLX）では肥２）血清型別C. jejuni 174 株の血清型は，肥育牛由来株は，A
群 1 株，B 群 6 株，D 群 22 株，R 群 4 株，Z6 群

育牛 15.0％，肥育豚 22.6％，産卵鶏 4.9％および肉用鶏 7.4％であった。

2 株，
複数の血清と反応を示した複合型 3 株および型別不能 5 株に分類され，産卵鶏および肉用鶏由４．考察

来株は A 群 24 株，B 群 18 株，C 群 3 株，D 群 17
平成 12 年度の調査結果では，前年度同様に肥表 1 カンピロバクター分離率

育牛，産卵鶏および肉用鶏からは主に C. jejuni

畜種

分離検体数／検体数

分離率（％）

が，肥育豚からは主に C. coli が分離された〔6〕。

肥育牛
肥育豚
産卵鶏
肉用鶏

38 ／ 155
61 ／ 148
48 ／ 160
30 ／ 116

24.5
41.2
30.0
25.9

C. jejuni の血清型は肥育牛由来が 5 群以上であったのに対し，産卵鶏および肉用鶏由来では，13 群以上であった。人のカンピロバクタ−症の感染源として重視されている鶏においてはより多様な株

表 2 カンピロバクター分離株数
菌種
hyointestinalis

lari

6

1

6

1

由来動物

jejuni

coli

fetus

肥育牛
肥育豚
産卵鶏
肉用鶏

43
1
77
53

3
98
5
1

13

計

174

107

13

spp.

計

1

60
106
82
54

1

302

6

24

12

25

肉用鶏

計

3

163
2

1
1

0.1

3

3

C

18

6

43
2
77
2
46

39

94
32
150

8

61
58

97
13

73
62

0.78

3

3

I

37
1

100
153

G

12

0.39

1

1

E

1

79

0.2

39

7

10

22

D

* : non tested
a : TMP については 100 ≦を示す
b : SDMX を除く薬剤については 100< を示す

CTF
DSM
GM
SPCM
EM
SPM
TS
OTC
CP
NA
OXA
ERFX
OFLX
SDMX
TMP

抗菌剤 ≦ 0.05

12

6

1

12

B

A

産卵鶏

肥育豚

肥育牛

由来動物

5

38
6
1
62
91
4
23
60
3
63

1.56

2

2

J

2

2

K

2

2

O

4

4

R

7
2
47
44
82
25
15
130
95
6
5
24
3

172
5
39
130
10
60
84

6.25

76
3
23
57
9
10
51
3
11
8

12.5

MIC (μg/ml)
3.13

2

2

Y

1

1

Z5

1
1
1
15
25
15
7
13
1
24
1

4
2

25

複

合

型

2

2

1

1

1

1

6
3
1

12
301

5
32
4
5
4
14
52
20
2

2

121
14

100

1

17
1

50

a

11
*

5
48
51
52
46
1
57
40

160
67

200

b

1

1

*
*
*
*
*
*
*
*
*
*
*
*
*
37
*

400

1

1

*
*
*
*
*
*
*
*
*
*
*
*
*
238
*

400<

1

1

1

1

1

1

5
52
52
57
174
62
62
41
41

50
12.5
1.56
3.13

84

株数

(30.5)(30.5)(13.6)(13.6)(1.7)(17.2)(17.2)(18.9)(57.6)(27.8)

(%)

耐性菌

1

50
25
25
100
6.25

25

ブレーク
ポイント

1

1

1

31

12

174

53

77

1

43

計

100<
0.78
0.39
6.25
1.56
3.13
6.25
25
3.13
6.25
0.78
0.1
0.39
100<
100 ≦

100<
100<
0.78
12.5
100<
100<
100<
100<
25
100<
100<
6.25
12.5
100<
100 ≦

MIC50 MIC90

2

2

14

5

型別
Z6 A/B A/Y A/Z B/D B/U C/D C/G D/N D/S I/S 不能

表 4 Campylobacter 302 株の MIC 分布

4

4

N

表 3 C. jejuni 血清型

18 動物抗菌会報 24（2002）

石原加奈子／健康家畜由来カンピロバクターの薬剤感受性調査／24（2004） 19

表 5 Campylobacter jejuni/coli の MIC 分布
MIC (μg/ml)
抗菌剤

菌種

Range

MIC50

MIC90

CTF

jejunicoli
jejunicoli
jejunicoli
jejunicoli
jejunicoli
jejunicoli
jejunicoli
jejunicoli
jejunicoli
jejunicoli
jejunicoli
jejunicoli
jejunicoli

50-100<25-100<0.39-100<
0.78-100<0.2-0.78
0.2-3.13
1.56-12.5
3.13-25
0.1-12.5
0.78-100<
0.39-6.25
0.1-100<
1.56-25
1.56-100<
0.2-100<
0.2-100<
1.56-12.5
0.78-100<
1.56-100<
3.13-100<
0.39-100<
0.39-100<≦ 0.05-12.5≦ 0.05-12.5
0.2-25
0.1-50

100<
100<
0.39
100
0.39
0.39
6.25
12.5
0.78
3.13
1.56
12.5
6.25
25
1.56
100
3.13
6.25
3.13
12.5
0.39
1.56
0.1
0.2
0.39
0.39

100<
100<
0.78
100<
0.39
0.78
6.25
12.5
1.56
100<
3.13
100<
12.5
100<
100
100<
6.25
50
12.5
100
1.56
100<
0.39
6.25
0.78
25

DSM
GM
SPCM
EM
SPM
TS
OTC
CP
NA
OXA
ERFX
OFLX

ブレークポイント

耐性菌株数 (％)

25
25

6 ( 3.4)
66 (61.7)50

4 ( 3.7)

25

50 (46.7)

25

50 (46.7)

100
6.25
6.25

50 (46.7)
73 (42.0)
94 (87.9)

50
50
6.25
6.25
1.56
1.56
3.13
3.13

13 ( 7.5)
28 (26.2)
13 ( 7.5)
28 (26.2)
12 ( 6.9)
28 (26.2)
12 ( 6.9)
28 (26.2)

供試菌株数：C. jejuni 174 株，C. coli 107 株
ブレークポイントの設定されたすべての薬剤に関して，菌種間の耐性率に有意差が認められた (p<0.05)が定着していることが示された。また，薬剤感受レース遺伝子の 1 塩基が変異することにより容易性については，C. coli は C. jejuni よりいずれの薬に耐性を獲得するため〔1, 3, 7〕，経口投与剤によ剤においても高い耐性率を示し，特に人のカンピる群治療が行われる肉用鶏でのフルオロキノロン

ロバクター症の治療における第一次選択薬である

耐性株の出現・増加が懸念されている。しかし，

EM では C. jejuni には耐性株が認められなかった

今回の調査では，肉用鶏由来株のフルオロキノロのに対し，C. coli では 46.7％と高い耐性率が認め

ン耐性率は肥育牛と比べても低く，推測される畜られた。しかし，現在国際的に議論されているフ産現場での抗菌剤の使用実態を反映する結果ではルオロキノロンについては，C. coli の方が 26.2％

なかった。

と高い耐性率を示したものの，C. jejuni においても 6.9％の耐性率が認められた。なお，抗菌剤の５．おわりに使用が制限されている産卵鶏と広範に抗菌剤が使用されている肉用鶏の薬剤耐性率には大きな差は

近年，世界保健機関（WHO）において，食用動認められなかった。一般に，カンピロバクターの物における抗菌性物質の使用を制限する必要性がフルオロキノロンに対する感受性は，多くのグラ議論されており，薬剤耐性モニタリングおよびリム陰性菌と比較すると低く，また DNA ジャイ

スク分析の実施に併せて慎重使用（プルーデント

20 動物抗菌会報 24（2002）ユース）の励行が勧告されている。特にカンピロ

Soussyバクターについては，その農場内や市場などにおmutational alterations of gyrA associated with

ける疫学情報および家畜由来や人症例由来株の薬

fluoroquinolone resistance in Campylobacter jejuni

剤感受性調査についてもリスク分析を実施するたand Campylobacter coli. Microb Drug Resist, 7,めの十分なデータが集積されていない。その基礎

257-61 (2001)

CJ,

Tankovic

J:

Singleordouble

データを得るためにも，今後ともこのような家畜

２）Lintond D, Lawson A J, Owen R J, Stanley J: PCR

由来細菌の薬剤感受性調査を実施していくと同時

detection, identification to species level, andに，畜産現場においても抗菌剤の慎重使用の徹底

fingerprintingが望まれる。

Campylobacter coli direct from diarrheic samples.

ofCampylobacter

jejuniandJ Clin Microbiol, 35, 2568-2572 (1997)

謝辞３）Gerald Z, Yu L, Bala S, Frederick A: Ciprofloxacin
resistance in Campylobacter jejuni isolates. Detection

本調査を実施するに当たり，ご協力いただきまof gyrA resistance mutations by Mismatch

した全国の家畜保健衛生所の職員各位に深謝いたAmplification Mutation Assay PCR and DNA

します。

sequence analysis. J Clin Microbiol, 37, 3276-3280(1999)

要約４）三橋進，五島瑳智子，徐慶一郎，河喜多龍祥，

小酒井望，西野武志，大沢伸孝，田波

近年の薬剤耐性菌に関する国際的議論を背景に，国内において健康家畜糞便由来カンピロバク

洋：最小

発育阻止濃度（MIC）測定法再改訂について．日
本化学療法学会雑誌，29，76-79 (1981)

ターの薬剤感受性調査を実施した。健康な肥育

５）Nachamkin I: Campylobacter and Arcobacter. In:牛，肥育豚，産卵鶏および肉用鶏の糞便 579 検体

Manual of clinical microbiology, 7th ed. (Murrayから計 302 株のカンピロバクターが分離された。

PR, Baron EJ, Pfaller MA, Tenover FC, Yolken RH

これらの耐性率はオキシテトラサイクリン 57.6ed), USA, 716-726 (1999)％，キノロン 30.5％，ジヒドロストレプトマイシ

６）高橋敏雄，守岡綾子，石原加奈子，木島まゆみ，

ン 27.8％，マクロライド 17.1 〜 18.9％，フルオロ

小島明美，大園智子，船橋かおり，田村

キノロン 13.6％であった。いずれの薬剤について

内における家畜由来耐性菌について．動物用抗菌も C. coli が C. jejuni と比べて高い耐性率を示し，剤研究会報，23，9-16 (2001)

特にマクロライドに対して，C. jejuni は耐性を示さなかった。

豊：国７）Wang Y, Huang WM, Taylor DE: Cloning andnucleotide sequence of the Campylobacter jejuni
gyrA gene and characterization of quinolone

引用文献

resistance mutations. Antimicrob Agents Chemother,37, 457-63 (1993)

１） Bachoual R, Ouabdesselam S, Mory F, Lascols C,石原加奈子／健康家畜由来カンピロバクターの薬剤感受性調査／24（2004） 21

Nationwide Monitoring of Antimicrobial Resistance in Campylobacter Isolated
from Healthy Food-Producing Animals in Japan
Kanako ISHIHARA
National Veterinary Assay Laboratory, 1-15-1, Tokura, Kokubunji, Tokyo 185-8511, Japan
Based on the international discussion about antimicrobial resistance, nationwide monitoring of antimicrobial
resistance in Campylobacter isolated from healthy food-producing animals has been carried out in Japan. A total of
302 Campylobacter strains (1 or 2 strains from each sample) were isolated from 579 feces of bovine, porcine, layers
and broilers during the period of September 2000 to March 2001. The frequencies of Campylobacter strains resistantto each drugs were as follows: oxytetracycline 57.6%, quinolones 30.5%, dihydrostreptomycine 27.8%, macrolide 17.1
〜 18.9% and fluoroquinolones 13.6%. In the C. coli strains, the frequencies of resistance to all antimicrobials werehigher than those in the C. jejuni strains. It was noted that all of C. jejuni strains were susceptible to macrolide.

討論（座長：五十君靜信 国立医薬食衛研， 阪野哲也 全農家畜衛研）

質問（小川益男，日本食品分析センター）
各家保に対して，共通した検体の取り方を行うために，どのような依頼をしているか。
答（石原加奈子）
この耐性菌調査は，農林水産省の生産振興総合対策事業の一環として実施しており，事業実施要綱の中特に決まっていませんが，カンピロバクターについては過去のデータが少なく，続けたいと思います。
質問（佐藤夫，全農家畜衛研）

C. coli と C. jejuni の分布が動物により異なるので，
C. coli のデータは豚での抗菌剤使用を反映していると考えて良いか。

で，各都道府県内の一部の地域に偏ることのないよ

答（石原加奈子）

う，調査対象家畜（肥育牛，肥育豚，産卵鶏，肉用

C. coli は，豚以外の検体からは，ほとんど分離され鶏）の各畜種ごとに 6 以上の畜産経営（農家）を選定ていないため，耐性率の差が豚に対する抗菌剤使用

し，健康な対象家畜の糞便を採取するように規定しを反映しているのか，菌種による耐性獲得能の差を反ている。

映しているのかは現在のデータだけではわからない。

また，各都道府県の担当者を集めた研修会におい人のカンピロバクター症の治療に用いられるマクロて，その詳細を説明し，カンピロバクターについては

ライド系抗生物質およびフルオロキノロン剤の耐性

シードスワブを用いた冷蔵での材料の輸送をお願いについては特に注目されているが，腸球菌のマクロラしている。

イド耐性および大腸菌のフルオロキノロン耐性はブ

質問（五十君靜信，国立医薬食品衛研）

ロイラーにおいて多く認められている。このことからどのくらいの期間，調査が必要なのですか。

考えると，豚由来株の耐性率が高いのは，その構成菌

答（石原加奈子）

種による影響が大きいのではないかと考える。

22 動物抗菌会報 24（2002）

ヒト食中毒由来カンピロバクターの薬剤耐性横山敬子
東京都立衛生研究所（〒 169-0073 東京都新宿区百人町 3-24-1）に起因する。しかし，患者の喫食調査ならびに施１．発生状況

設などの疫学調査結果は，推定原因食品または感染源として，鶏肉関連調理食品（トリ刺し，鶏Campylobacter jejuni（以 下 C. jejuni）は，1982

鍋，焼き鳥など）およびその調理過程の不備（二年に食中毒起因菌に指定されて以来，食中毒事例

次汚染，加熱不十分）を強く示唆している。私共

数おいてサルモネラ，腸炎ビブリオ，黄色ブドウの最近の調査でも，鶏肉表面および内臓からの本球菌に次ぐ発生頻度を示している。近年，その頻菌陽性率は 80 〜 90％に達していることを明らか

度は欧米諸国と同様，わが国においても増加傾向にしている。なお，欧米では生牛乳を原因食とすにある。厚生省食中毒統計によると，全国における事例が多いが，わが国では加熱殺菌乳が流通しる本食中毒の年間事例数（1996 年以降は患者数 2ており，当該食品による発生例はみられていな

名以上）は，1995 〜 1996 年では 20 〜 46 件であっい。この他，井水，湧水および簡易水道水を感染た が，1997 年（73 件），1998 年（63 件）お よ び

源とした水系感染事例が，わが国では少なくとも1999 年（77 件）と急増している。患者数は大規模

12 例確認されており，その原因の大部分は不十食中毒事例が減少したこともあり，1,400 〜 2,500

分な消毒によるものであった。

人前後を推移している。本食中毒の発生は 5 〜 6

３．疫学解析

月に多く，7 〜 8 月はやや減少，再び 9 〜 10 月頃に上昇傾向を示している。東京都では 1999 年以

食中毒の感染源特定などの疫学解析手法として降，冬季での発生が特に急増している。
一方，散発下痢症における本菌の検出率は，小一般的なものが血清型別である。現在カンピロバ

児では約 15 〜 25％で下痢症起因菌の第１位を占クターの血清型別について，国際型別委員会では

め，成人でも約 5 〜 10％前後の高い検出率を示し

Lior 法と Penner 法の 2 種類が承認されている。

ている。特に小児では受診当初感冒と診断される

Lior 法は易熱性抗原を標的としたスライド凝集反ことが多く，実際の患者数はかなりの数に上るも応による方法で，Penner 法は耐熱性抗原を感作のと推察される。

抗原とした受身血球凝集反応による方法である。
東京都では，以前から Lior 法を採用し，疫学

２．感染源解析を行っているが，両者を併用しより詳細な疫学解析を行うのが望ましい。

C. jejuni 食中毒発生時における感染源の特定は散発下痢症患者由来 C. jejuni の血清型では LIO4

極めて困難である。それは少量感染（102 個以上）の検出率が最も高く LIO1， LIO2， LIO7，TCK1，の成立，長い潜伏時間（2 〜 5 日）
，加えて通常のTCK12 なども高率に検出される。集団事例由来

大気条件下で本菌は急速に死滅する生理学的特徴

株では LIO7 が多く検出される傾向にあった。
22

横山敬子／ヒト食中毒由来カンピロバクターの薬剤耐性／24（2002） 23

４．臨床症状５．治療

本菌感染者の主な臨床症状は下痢，腹痛，発患者の多くは，自然治癒し予後も良好である場

熱，悪 心，嘔 吐，頭 痛，悪寒，倦怠感などであ合が多く特別治療を必要としないが，重篤な症状

り，他の感染型細菌性食中毒と酷似するが，潜伏や敗血症などを呈した患者では，対症療法と共に時間が一般に 2 〜 5 日間とやや長いことが特徴で適切な化学療法が必要である。第一選択薬剤としある。感染性腸炎研究会資料によると，入院患者ては，エリスロマイシンなどのマクロライド系薬の 98％に下痢が認められ，その便性状は水様便剤が推奨される。セフェム系薬剤に対しては多く（87％），血便（44％），粘液便（24％）である。特の菌株が自然耐性を示すため治療効果は望めなに粘血便がみられる場合は，細菌性赤痢，腸管出い。

血性大腸菌，腸炎ビブリオ，サルモネラなどによる腸炎との鑑別を要する。下痢は 1 日に 10 回以上

６．薬剤感受性試験

に及ぶこともあるが，通常 2 〜 6 回で 1 〜 3 日間続き，重症例では大量の水様性下痢のために急速フルオロキノロン系薬剤に対しては，近年耐性に脱水症状を呈する。腹痛は 87％，嘔吐は 38％菌が増加しており世界的な問題となっている。私にみられた。発熱時の平均体温は 38.3℃ で，サル共は，都立病院において分離された散発下痢症由モネラ症に比べるとやや低い。 乳幼児では特に来 C. jejuni の キ ノ ロ ン 系 抗 菌 剤 4 種（NFLX，重症例が多く，また母親から乳児への垂直感染例

OFLX， CPFX， NA）に対する耐性菌出現頻度にも報告があり小児科領域においては軽視出来ない

ついて調査を行っている。1989 年は 4％程度で重要な菌である。しかし，一般的には C. jejuni 感

あ っ た が，1993 年 以 降 増 加 傾 向 が 顕 著 と な り染症の予後は，一部の免疫不全患者を除き死亡例

1999 年には耐性菌の占める割合が 30％になったも無く良好な経過をとる。

（図 1）。従って本剤を使用する際は，この点を念図1

C.jejuni に対する各種薬剤の MIC の年次別推移

24 動物抗菌会報 24（2002）

頭に入れた処方が必要であろう。

の国から帰国した患者から多く検出された。これ

一方，第一選択薬剤に用いられるエリスロマイ
シンに対する耐性菌出現頻度は 1％程度と低く，増加傾向も今のところ認められていない。

は，C. jejuni のキノロン耐性株の増加が世界的な問題であることを示唆している。
この様な耐性菌増加の原因の一つとして，本菌

日本国内では 1993 年以降キノロン系薬剤に耐の感染源として最も重要視されている鶏肉，すな性を示す株が増加しているが，海外旅行者由来

わち鶏の感染症を治療する目的で，飼料中に投与

C. jejuni の NA 耐性状況を調べたところ，国内とされることがあるフルオロキノロン剤の影響が考同様に耐性株が増加していることが明らかとなっえられ，今後ともトリとヒトの関係を監視していた。インド，ネパール，タイ，インドネシアなど

く必要がある。

Antimicrobial Resistance of Campylobacer jejuni Strains Isolated from Sporadic Diarrheal Patients in Tokyo
Keiko YOKOYAMATokyo Metropolitan Research Laboratory of Public Health, 24-1, Hyakunin-cho 3-chome, Shinjuku-ku, Tokyo 169-0073, Japan
Campylobacter enteritis is probably the most frequent case of acute bacterial diarrhea world- wide. Recently, in
European countries, the increasing of fluoroquinolone-resistant strains of Campylobacter jejuni has been noted.
Then, antimicrobial susceptibility to norfloxacin (NFLX), ofloxacin (OFLX), ciprofloxacin (CPFX), nalidixic acid(NA), and erythromycin (EM) of total of 800 strains of C. jejuni isolated from sporadic diarrhea cases in Tokyo (1989〜 1994, 1998 〜 1999) have been examined．
Number of the overall resistant strains were 104 strains (13.0%) to NFLX, 102 (12.8%) to OFLX, 102 (12.8%) to
CPFX, 130 (16.3%) to NA, and 7 (0.9%) to EM. By year, resistant rates to fluoroquinolones and NA were below 5.0%
during 3 years period from 1989 through 1991, but they increased significantly since 1993 and accounted for 30.0% in
1999. On the other hand, the resistant to EM has been observed only in 7 strains.

横山敬子／ヒト食中毒由来カンピロバクターの薬剤耐性／24（2002） 25

討論（座長：五十君靜信 国立薬食衛研，阪野哲也 全農家畜衛研）

質問（佐藤靜夫，全農家畜衛研）

答（横山敬子）耐性パターンをみるとエリスロマイシン耐性株がGBS 由来 C. jejuni の血清型別を，LIO 型と PEN 型

ほとんどないので，人での治療にニューキノロン剤をを組み合わせて行った結果，GBS 患者から分離される

使用しなくても良いと思われます。また，養鶏産業で血清型は LIO 7 / PEN19 が過半数を占めていました。

は世界的にニューキノロン剤使用規制の動きが有る

結城（獨協大学）らは，GBS 発症機序として，特定の様ですが，この点どの様に思われますか。

免 疫 学 的 背 景 を 有 す る 患 者 が GM1 様 リ ポ 多 糖 と答（横山敬子）Penner 19 型の型物質を有する C. jejuni に感染した場

現在，カンピロバクターのエリスロマシンの耐性率

合，抗 GM1-IgG 抗体が産出され，運動神経が障害さはあまり高くないのですが，例えば，下痢などの場合，れて筋力が低下するという分子相同性仮説を提唱し原因菌が分からないときには，ニューキノロン系薬剤ています。

の処方が現状だそうです。これを投与しても，カンピ

また，キノロン耐性率については GBS と関係のない

ロバクターには効かないことがあるそうです。カンピ

下痢症患者から分離された血清型 LIO7 株も，約 78％

ロバクターが原因とわかっていればエリスロマイシがキノロン系薬剤に耐性でした。何故，LIO7 の耐性ンを投与するべきだと思います。

率が高いのかは不明です。

養鶏産業でのニューキノロン剤使用を抑制しようとの世界的な動きは，ヒトへの治療の立場から見ると望ましいと思います。
質問（高橋敏雄，農水省動薬検）

質問（阪野哲也，全農家畜衛研）
実際に，ニューキノロン剤耐株であったために，治療に障害をきたした事例があるでしょうか。
答（横山敬子）

ギラン・バレー症候群（GBS）患者由来株に Lior7

カンピロバクター自体は，それ程重大な下痢症状を型が多くかつ，その 80％がキノロン剤耐性を示してい引き起こすものでは無いので，高齢者や乳幼児でなます。この疫学的背景も含め，考察をお聞かせ下さい。

ければ，悪化するということは無いと思われます。

26 動物抗菌会報 24（2002）

カンピロバクターの薬剤感受性試験法の現状
高橋敏雄
農林水産省動物医薬品検査所 （〒１８５８- ５１１ 国分寺市戸倉１１
- ５１
- ）

既に米国では，カンピロバクターが食中毒原因菌

１．はじめにの第一位となっている。
また，最近ではフルオロキノロンに対して耐性

抗菌性物質が，畜産分野でも利用されるようにを示すカンピロバクターが，ヒトの症例や畜産食

なって約半世紀が過ぎようとしている。動物用抗品などから分離されるとの文献報告が散見され菌性物質は，主として細菌感染症の治療や成長促る。2000 年 10 月，米国 FDA は，家禽用経口投与

進などを目的として広く畜産に利用された結果，型フルオロキノロン剤の承認取り消し通知を発出

畜産の安定経営や安全な畜産物の安定供給に多大した。その背景にはヒトのカンピロバクター食中な貢献をしてきた。反面，動物に対して各種の抗毒の感染源は畜産食品，特に家禽肉であり，畜産

菌性物質を使用することが広く普及するに伴い，分野で獲得されたフルオロキノロン耐性のカンピ

食用動物における耐性菌の出現という新たな問題

ロバクターに汚染された食品をヒトが摂取するこが提起された。そこでは特に，食用動物に抗菌性と，あるいはそれに接触することが，ヒトの健康物質を使うことにより薬剤耐性菌が選択され，新において脅威となった点が挙げられている。いずたに出現した耐性菌もしくは耐性遺伝子が食物連れにせよ，この裏付けとなっているものが，分離鎖を介して人へ伝播し，人の細菌感染症の治療を菌株の薬剤感受性試験データを中心とした疫学情困難にするという潜在的な危険性に対して焦点が報とリスク分析の結果であったことは明白な事実

当てられてきた。今回のテーマである薬剤感受性である。

試験は，抗菌性物質に対する細菌の感受性の程度

現在，耐性菌問題に対する獣医領域の主要な対を調べるための検査法で，耐性菌を検出するため

応策は人の医療分野と同様であり，国際的な共通の最も基本的な方法であり，この耐性菌問題の根認識となっている「慎重使用の原則」の遵守であ幹に係わる事項であるとも考えられる。

る。すなわち，抗菌性物質の使用の現場においてカンピロバクター（主に Campylobacter jejuni）

は，原因菌の薬剤感受性試験データや添付文書なは，家禽などの食肉を原因食品としたヒトの下痢

どの有用な基本情報（抗菌スペクトル，薬物動態症（食中毒）の原因菌として国際的に注目されてなど）に基づく慎重な薬剤選択が益々重要であいる。本菌は食品媒介性病原菌のひとつであり，る。

感染源としての保菌動物の関与などを考えると，本稿においては，その抗菌剤選択の基礎となる

公衆衛生上ならびに家畜衛生上も極めて重要な細in vitro 薬剤感受性試験法の一般論をブレークポ菌である。ここ数年来，本菌は国内の細菌性食中

イントの考え方も含めて概説するとともに，これ毒事件での原因菌としては，サルモネラや腸炎ビまで国際的に議論の多いカンピロバクターの薬剤

ブリオとともに常に上位に位置し，原因菌別の食感受性試験法の現況について紹介したい。

中毒事件数でみると全体の約 25％を占めている。
26

高橋敏雄／カンピロバクターの薬剤感受性試験法の現状／24（2002） 27

２．薬剤感受性試験法の種類
現行の薬剤感受性試験法は，大きく拡散法と希３．NCCLS の役割
NCCLS の薬剤感受性試験法小委員会では希釈

釈法とに分けられる〔4〕。

法と拡散法の標準法を制定しており，現在では１）ディスク拡散法

NCCLS 法が薬剤感受性試験法の最も標準的な国

ディスク拡散法は，わが国において臨床検査室際法として認知されてきている。NCCLS は規制

におけるルーチンの薬剤感受性試験法としては最力をもたない任意団体であるが，その標準法が広も普及した方法であり，一濃度法，三濃度法およ範に受容されてきた背景には，広く意見を求めコび濃度勾配ディスク法の三種類がある。一定量のンセンサスを得るための組織活動がある。1968

薬剤を含んだディスクを予め被検菌を接種した寒年に設立されて以来，全米を中心に臨床検査室，天培地の上に置いて培養すると，薬剤は次第に寒臨床検査業者，医薬品製造メーカー，政府機関関天培地中を拡散し，ディスクを中心に一定の濃度

係者，微生物学者および医師などの参加を得て，勾配をつくる。その結果，被検菌の感受性の度合

独特の意見合意のプロセスを経て最終的な標準法

いに応じてディスク周囲に発育阻止帯が形成さまたは指針を提起している。

れ，その阻止円の広さで感受性の程度を調べるもNCCLS における意見合意のプロセスは，標準のである。一般に，本法には，)国際法である米化すべきプロジェクトの決定に始まり，意見合意

国臨床検査標準化委員会（National Committee forの各段階における文書の刊行，臨床検査の現場か

Laboratory Standards：NCCLS）法，*国内法でらのコメントへの対応，文書の改訂，最終合意のある一濃度ディスク法（昭和），三濃度ディスク法得られた段階での文書の刊行及び施行後の見直し（栄研）および，+濃度勾配ディスク法（Ｅテスまで，ひとつの標準法の提起までに 5 〜 6 年の検ト）などが知られている。理論的には，出現した討期間を費やしてきている。NCCLS 文書には，阻止円の直径から最小発育阻止濃度（minimum

意 見 合 意 の 段 階 に 応 じ て，proposed（提 案），

inhibitory concentration：MIC）の近似値を推定す

tentative（暫定案）および approved（承認条項）

ることは可能であるが，基本的にはブレークポイの三段階が設定されている。

ントを中心に感受性か耐性かを定性的に判定するものであると考えるべきである。

４．ブレークポイントの意義

２）希釈法
本法は，薬剤を寒天培地で希釈する寒天平板希

ブレークポイントとは，薬剤感受性試験で得ら

釈法と液体培地で希釈する液体培地希釈法に大別れた抗菌性物質の MIC 値を臨床効果などとの関される。希釈法は拡散法に比べるとコストの面で連性をもたせ，抗菌剤選択の際のより有効な指標

やや高くつくが，MIC を具体的に知ることができとなるように設定されたものである。一般にブるため，病原微生物に対する抗菌力の詳細な比較

レークポイントは，細菌学的ブレークポイントとをする際に有用性の高い方法である。また，液体

臨床的ブレークポイントに大別される。前者は，培地希釈法としては，半自動化された微量液体希我々がこれまで実施してきている耐性菌調査のよ釈法が主流となっており，必要に応じて最小殺菌

うな全国レベルの調査において得られた薬剤の濃度（minimum bactericidal concentration：MBC）

MIC 値の分布が二峰性を示した場合に，両ピーについても測定することは可能である。希釈法にクの谷間の値をもって設定され，疫学調査におけついては，日本化学療法学会と NCCLS がそれぞる耐性菌の検出などの目的での応用価値が極めてれ標準法を提唱しているが、現在では NCCLS 法高い。一方，臨床的ブレークポイントとは，薬物が国内外ともに広く普及しつつある。

動態指標（最高血中濃度，血中半減期，組織移行性，抗菌作用の特性など）および実際の臨床試験

28 動物抗菌会報 24（2002）

データに基づき，臨床的有効性の境界点として主衛生分野と家畜衛生分野の種々な機関においてはに理論的に設定された MIC 値である。細菌学的ディスク法，寒天平板希釈法および微量液体希釈

ブレークポイントが，菌種−薬剤別に設定される法など，その手法は多種多様であり，全く統一化のに対し，臨床的ブレークポイントは，基準値をが図られてこなかった。1999 年以降，国内で実菌種別ではなく，人の感染症別（呼吸器感染症，施している家畜由来細菌の薬剤耐性モニタリング

敗血症および尿路感染症）に設定されている〔2〕。

調査（JVARM）においては，試行的に一濃度ディ

いずれにせよ，日本化学療法学会が独自に提案しスク拡散法（推定 MIC 値の算出）と寒天平板希釈ているこの臨床的ブレークポイントは，全て人の法を併用してきた。各供試薬剤の MIC 値を指標と医療上のブレークポイントである。残念ながら，した場合，両法間には必ずしも高い相関性は認め

現在のところ獣医学領域においては，この種のブられなかった。

レークポイントの設定は行われていない。一方，

しかし，幸いにもつい最近 NCCLS はカンピロ

NCCLS が菌種別に提案しているブレークポイン

バ ク タ ー に つ い て は 唯 一，寒 天 平 板 希 釈 法 をト（感受性 S −中間Ｉ−耐性Ｒの判定基準値）の「approved standard」として，その標準的試験法

設定は，日本化学療法学会のそれに比べて臨床的を明示した 〔1〕。そこで以下に，NCCLS によりな 意 味 合 い が 弱 い と 考 え ら れ る。最 近 で は，提唱された試験方法の概略を紹介する。

NCCLS の提唱する標準試験法とそのブレークポ

１）供試材料

イントが国際的にも広く採用され始められている。

)感受性測定用培地：5％羊脱線維素血液加ミューラーヒントン寒天培地*菌浮遊用液：ミューラーヒントンブロース，

５．カンピロバクターにおける薬剤感受性試験法の現状と問題点

滅菌精製水または生理食塩液+薬剤原液の希釈用液：滅菌精製水またはリン酸塩緩衝液

カンピロバクターは，耐性菌調査における対象,供試薬剤：後述

菌種であるサルモネラ，腸球菌および大腸菌とは

２）薬剤の調製

明確にその発育条件が異なる。この培養気相条件)薬剤の入手や感受性測定用培地の種類などがカンピロバク
ターの薬剤感受性試験における重要な変動要因のひとつとなっている。すなわち，本菌は微好気性菌であるというその細菌学的特性から，一般細菌

常用標準品またはその同等品を入手して供試する。
*薬剤（標準品粉末）の保存方法の試験方法をそのまま適用できない本質的な問題

薬剤は，吸湿防止のためにデシケーター中で– 20℃ 以下で保存する。使用に際しては，点がある。本菌の薬剤感受性試験法については，

常温に戻してから秤量する。吸湿牲のものも

NCCLS や日本化学療法学会なども標準的な方法あるので，秤量は相対湿度 45％以下の条件下をこれまで明示してこなかった。そのため，前述で行う。

のようにカンピロバクターは耐性菌問題において+薬剤の溶解

現在，最も注目される細菌であるにも係わらず，水溶性の薬剤は原則として，滅菌精製水を世界各国の耐性菌モニタリング調査実施機関では用いて溶解する。水に不溶性ないし難溶性の様々な試験法が独自に考案・応用されてきたのが薬剤については，必要に応じてエタノールや現状である。例えば，主要なモニタリングシステ

水酸化ナトリウム溶液などの溶媒を用いて，ムである米国の NARMS では主に微量液体希釈法

できるだけ少量に溶解した後，精製水で希釈を，デンマークの DANMAP ではディスク法と寒して薬剤原液を調製する。薬剤原液は，いず

天平板希釈法をそれぞれ採用している。この状況

れも通常，5,120μg/ml 又はμg
（力価）
/ml の

は，日本国内においても同様であり，医療・公衆濃度に調製する。

高橋敏雄／カンピロバクターの薬剤感受性試験法の現状／24（2002） 29

殆どの薬剤原液は、ポリエチレンまたはポ
リプロピレン製の滅菌びんに入れて，– 70 ℃

*薬剤含有感受性測定用培地の調製
ミューラーヒントン寒天培地を溶解，滅菌

以下の保存条件で，約 6 ヶ月間は使用可能でして 48 〜 50℃ に保持する。使用時に 5％のある。ただし，一度溶解したものは全てその割合で羊脱線維素血液を添加し，感受性測定

日のうちに使用しなければならない。

用培地とする。直径 90mm サイズのシャーレ,薬剤濃度の調整法を使用する場合には，前項で調製した薬剤の供試薬剤を秤量後，規定の溶媒で溶解する

各希釈液 2ml を入れ，これに培地 18 ml を加が，予め下記の計算式に基づき必要溶媒量をえて薬剤と十分混合した後に固化させる。最計算しておく。

終的な寒天培地の厚さは，3 〜 4mm にしな

溶媒量計算式；ければならない。同時に，薬剤無添加の対照

溶媒量（ml）＝薬剤の力価（μg/ml）×秤量（mg）

平板も作成する。室温で固化させた寒天培地
は，使用前に，約 30 分間程度ふ卵器内で寒÷原液の濃度（μg/ml）
３）MIC 測定法の実際

天表面を乾燥させ，表面に水滴が付いていな)薬剤の希釈いことを確認する。

表 1 に示した具体的な方法に従い，5,120μg/ml
を薬剤原液とした 2 倍段階希釈列を作成する。

+接種用菌液の調製
5％羊脱線維素血液加ミューラーヒントン
寒天平板培地で 37℃ 48 時間又は 42℃ 24 時

表１

寒天平板希釈法に用いる抗菌薬の希釈調製法

マスター液希釈培養した被検菌株のコロニーをミューラーヒ

濃度（μg/ml）
A液
B液
C液
D液
E液

5,120
1,280
160
20
2.5

間，微好気下（10％CO2，５％O2，85％N2）でントンブロース，精製水または生理食塩液に処方

直接浮遊させる。その菌液は約 1 〜 4 × 108
CFU/ml（McFarland 標準液 No. 0.5 に相当）とA 液 1 容＋蒸留水 3 容
B 液 1 容＋蒸留水 7 容C 液 1 容＋蒸留水 7 容
D 液 1 容＋蒸留水 7 容なるように濃度調整後，さらに 10 倍希釈して接種用菌液とする。なお，濃度調整した菌液は，調製後 30 分以内に使用しなければな

抗菌薬の溶液段階

マスター液（μg/ml）

容量
（ml）

＋蒸留水
（ml）

中間濃度
（μg/ml）

寒天での 1：10 希釈での最終的な濃度（μg/ml）

log2

1
2
3

A 液（5,120）
A 液（5,120）
A 液（5,120）

―
1
1

―
1
3

5,120
2,560
1,280

512
256
128

9
8
7

4
5
6

B 液（1,280）
B 液（1,280）
B 液（1,280）

1
1
1

1
3
7

640
320
160

64
32
16

6
5
4

7
8
9

C 液（ 160）
C 液（ 160）
C 液（ 160）

1
1
1

1
3
7

80
40
20

8
4
2

3
2
1

10
11
12

D 液（
D 液（
D 液（

20）
20）
20）

1
1
1

1
3
7

10
5
2.5

1
0.5
0.25

0
–1
–2

13

E 液（

2.5）

1

1

1.25

0.125

–3

30 動物抗菌会報 24（2002）

らない。
,接種用菌液の平板への接種

染症用治療薬として汎用性が高い。従って，鶏肉などの摂取によるフルオロキノロン耐性カンピロ

前項で調製した接種用菌液を，ミクロプラ

バクターのヒトの健康や医療に及ぼす影響に関す

ンター（直径 3mm の金属製のピン）などにるリスク評価は，フルオロキノロン剤が鶏大腸菌

とり，これを静かに薬剤含有平板もしくは対症とマイコプラズマ感染症の治療薬として認可さ照平板にスポットする。接種の順番は最初にれている日本国内においても急務の課題となって対照平板へ接種し，次いで各薬剤ごとに最もきている。リスク分析に資するデータの中心とな

低濃度の薬剤を含む平板培地から接種を開始

るものは，やはり各分野での耐性菌調査成績であし，次第に高濃度の培地に接種していく。雑り，その適正なリスク評価の実施を促していく上菌の混入がないことを確かめるために，少なで，基本となるものが本稿のテーマである薬剤感

くとも最初と最後に対照平板に接種する。平

受性試験手法の統一であると理解している。

板表面の菌液が乾いた後，シャーレを反転

国内での動物由来株のフルオロキノロン耐性にし，35 〜 37℃ 微好気下（10％CO2，５％O2，

関する過去の調査成績は，極めて少なく，その出

85％N2）で培養し，判定を行う。

現頻度の推移を厳密に比較・考察することは困難-エンドポイントの決定であるが，一部の地域・年次限定的な成績によれ

原則，接種菌の薬剤含有培地での発育が対ば，フルオロキノロン耐性の出現率は，ヒト由来

照培地のそれに比べて 80％以上減少してい株，食肉由来株および動物由来株ともに，増加する薬剤の最低濃度をエンドポイントと判定る傾向が窺える。獣医領域でも最初の承認時であし，その値を MIC とする。単一のコロニー

る 1991 年以降，経口投与型を中心にフルオロキ

または軽微な発育は無視し，発育阻止とみなノロン剤の消費量が増加傾向を示し，その多くがす。

鶏に用いられている現状などが，その原因のひと.精度管理つであると推察されるが，現実には種々な要因が薬剤感受性試験法の精密性と正確性を確保する目的で，Campylobacter jejuni ATCC 33560

複雑かつ多元的に絡み合っており，その背景を直接的に特定することはできない。

（本菌種の基準株）を精度管理用菌株に定め，今後とも国内においては，カンピロバクターのシプロフロキサシン，ナリジクス酸，エリス

フルオロキノロン耐性に関しては，)全国レベル

ロマイシン，テトラサイクリン，ドキシサイ

での畜産分野における各種細菌の抗菌剤感受性動

クリン，ゲンタマイシンおよびメロペネムの向を監視し，その試験成績を集積・解析するとと本菌株に対する精度管理限界値（MIC 値範

もに，*家畜由来耐性株とヒト由来耐性株との関囲）を試験成立要件として規定している。更連性について，分子疫学手法を駆使して遺伝学的に詳細な精度管理の手法については，参考文に解析していくことや，+動物由来耐性株のヒト

献を参照されたい。

医療に及ぼす影響に関するリスク分析を関係機関の協力・連携の下で実施することが必要である。

６．おわりに

これまで，一連のリスク分析の妨げとなった原因のひとつが各国における薬剤感受性試験手法の諸外国での最近の報告と同様に，国内において不統一性であるとも考えられる。永年の懸案事項

も 1999 年度以降の全国調査により健康な家畜家であったカンピロバクターの国際標準法が今回，禽の糞便から分離されたカンピロバクターについNCCLS により初めて提案されたことを契機に，て抗菌剤感受性を測定した結果，フルオロキノロ

JVARM も含めた国内の各関係機関を手始めに世ン耐性株が分離株全体の 20％前後に確認された界各国のモニタリング手法が統一され，カンピロ〔3〕。広域な抗菌スペクトルをもつフルオロキノ

バクターの薬剤耐性に関する調査研究が確実に進ロン剤は，一般的に食中毒も含めたヒトの腸管感

展し，我々関係者の大命題でもある「動物から人高橋敏雄／カンピロバクターの薬剤感受性試験法の現状／24（2002） 31

への薬剤耐性の伝播に関する適正なリスク評価の℃ 微好気下（10％ CO2，５％ O2，85％ N2）で行う実施」に少しでも近づけることを期待したい。

ことなどが挙げられる。標準法の提唱を契機に，国内の各関係機関をはじめ，世界各国のモニタリ

要約

ング手法が統一され，カンピロバクターの薬剤耐性に関する調査研究が各関係機関の連携の下で確

カンピロバクターは，微好気性菌である特性か

実に進展していくことを期待したい。

ら，一般細菌の試験方法をそのまま適用できないという本質的な問題点を抱えている。そのため，参考文献

本菌は耐性菌問題において現在，最も注目されている細菌のひとつであるにも係わらず，世界各国

１）National Committee for Clinical Laboratory Standards:の耐性菌モニタリング調査の実施機関では様々なPerformance Standards for Antimicrobial Disk

試験法が独自に応用されてきたのが現状であっand Dilution Susceptibility Tests for Bacteria

た。一連のリスク分析の妨げとなった原因のひと

Isolated from Animals. Second edition, Approved

つが，各国における薬剤感受性試験手法の不統一

Standard. NCCLS document Replaces M31-A2,性であると言えるかもしれない。幸いにも，永年vol. 22, no.6. NCCLS, Villanova. (2002)の懸案であったカンピロバクターの国際標準法が２）日本化学療法学会抗菌薬感受性測定法検討委員

今年，NCCLS により初めて提案された。本法は会：委員会報告，呼吸器感染症および敗血症にお寒天平板希釈法であり，その特徴としては)感受

けるブレークポイント．42，905-914．
（1994）

性測定用培地は５％羊脱線維素血液加ミューラー

３）高橋敏雄，守岡綾子，石原加奈子ら：国内におけ

ヒントン寒天培地を使用すること，*接種用菌液

る家畜由来耐性菌について．動物抗菌会報，23，

は平板上の菌コロニーをミューラーヒントンブ
ロースなどに浮遊させて 1 〜 4 × 10８CFU/ml となるように菌数を調整し，さらに通常 10 希釈したものを使用すること，+接種後の培養は 35 〜 37

9-16．
（2001）
４）山口恵三：抗菌薬感受性測定法．日本臨床，52，
350-354．
（1994）

32 動物抗菌会報 24（2002）

Present Situation on Drug Sensitivity Test of Campylobacter
Toshio TAKAHASHINational Veterinary Assay Laboratory, 1-15-1, Tokura, Kokubunji, Tokyo 185-8511, Japan
There are some of essential issues that the protocols of drug sensitivity test of general bacteria could not beapplied easily to those of Camplyobacter such as microaerophile. Although Campylobacter is recognized to be one of
the most noteworthy bacteria in the process of recent discussion on the antimicrobial resistance, the various
methods have been adopted individually in antimicrobial resistance monitoring program around the world. It is
possible that a lack of unity of the protocols in each country is a cause to prevent accomplishment of a serial risk
analysis. Fortunately, the international standard method of drug sensitivity test of Campylobacter remaining unsettled
has been proposed by NCCLS in this year. The characteristics of present agar dilution method are as follows; )using Muller-Hinton agar supplemented with 5% defibrinated sheep blood as the medium for the sensitivity
determination, * using a bacterial suspension which is directly taken from colonies on the blood agar, adjusted toapproximately 1 〜 4 × 108 CFU per ml and diluted generally to 10 times as inoculum to the medium, + Incubating
the agar plate at 35 to 37 ℃ under microaerophilic condition (10％CO2, 5％O2, 85％N2).
Taking the opportunity of NCCLS proposal of the standard method, we hope that the research on antimicrobial
resistance of Campylobacter based on the monitoring tool harmonized among foreign countries as well as thedomestic laboratories would be certainly advanced in cooperation with the related organization.

討論（座長：五十君靜信 国立薬食研，阪野哲也 全農家畜衛研）

質問（阪野哲也：全農家衛研）

答（高橋敏雄：動薬検）ディスク法は定性に適してはいる反面，定量的使

カンピロバクターだけでなく，大腸菌などにおい用には未だ不適とのことですが，カンピロバクターても，ディスク法は必ずしも定量的な方法であると以外の大腸菌などにおいては如何でしょうか。

はいえないと思います。

会務報告／24（2002） 33

会

務報

１．平成 1４年度定期総会の報告

告成した。会報 24・増刊号に掲載する。

平成 14 年度定期総会は，平成 14 年 4 月 27 日

③出版事業（土）午前 10 時から日本獣医畜産大学の 312 講義「動物用抗菌剤マニュアル」の執筆者を決室 に お い て，後 述 の 第 29 回 シ ン ポ ジ ウ ム に 先定し，執筆を依頼し，編集作業にとりか立って行われた。

かった。
（２）平成 1３年度収支決算報告

最初に小久江 栄一理事長から挨拶の後，恒例に従って同氏が議長となり，執行部から提出され

別表 1 のとおり決算報告があり，引き続き監査た以下の各議案について審議が行われた。

報告が行われた。

（１）平成 13 年度事業報告

以上 2 議案が一括審議され可決・承認された。
（３）平成 1４年度事業計画

年度内に次の事業が実施されたとの報告がなされた。

基本方針として，動物（魚類を含む）における

１）会報第 23 号を発行・配布した。

化学療法の基礎および応用面に関する問題点なら

２）会員名簿を印刷・配布（会報第 23 号に掲

びに動物の耐性菌に関する問題点を取り上げると載）した。

ともに，薬剤感受性試験方法の国際標準化ならび

３）平成 13 年度定期総会を開催した（平成 13に抗菌剤ごとの耐性限界値の制定を行う。併せ年 4 月 5 日）。

て，会の事業拡大と会員の増加を図ることが提案

４）第 28 回シンポジウムを開催し（上記総会された。

に引き続き実施），その内容を会報 23 号に

平成 14 年度の事業計画として，上記の平成 13

掲載した。

年度事業をほぼ継承・発展させる考えから，下記

５）新規事業事項が提案された。

①犬および猫における抗菌剤の使用実態調査

１）抗菌性物質および耐性菌に対する技術・知

事業

識の普及

動物病院における抗菌剤の使用状況に関

会報 24 号，同号増刊号（耐性菌問題検するアンケート調査方法などについて検討

討委員会がまとめた，ガイドラインを掲した。

載）を発行・配布する。

②動物用抗菌剤耐性菌の公衆衛生に及ぼす影

２）動物用抗菌剤耐性菌の公衆衛生に及ぼす影

響の検討事業響の検討事業

平成 12 年度に実施した薬剤耐性菌の実

薬剤感受性試験法検討小委員会（江口，態についての文献調査の結果を会報 23 号

甲斐，高橋，田村，片岡，桑野委員）を設に掲載した。

置し，動物用抗菌剤の薬剤感受性試験法の平成 13 年度に実施した VICH の耐性菌作基準を検討する。

業部会で作成された食糧生産動物に使用す

３）出版事業る新動物用医薬品登録のための抗菌剤耐性「動物用抗菌剤マニュアル」を出版する。

に関する承認前情報ガイダンスの随意情報

４）犬および猫における抗菌剤の使用実態調査となっている in vitro 変異頻度および腸管事業
開業獣医師が回答しやすいアンケートを内における抗菌活性に関する試験基準を作33

34 動物抗菌会報 24（2002）

作成し，多摩臨床研究会に協力を依頼して

立医薬品食品衛生研究所）が「微生物学的リスク

アンケート調査を実施し，小動物獣医医療

アセスメントの動向」と題して，食品の微生物学分野における抗菌剤の使用実態について

的リスクアセスメントについてその概要と国際的データをまとめる。

動向について説明いただいた。次いで，「カンピ５）新規事業

ロバクター食中毒と薬剤耐性」と題するシンポジ

魚類用抗菌剤耐性菌と公衆衛生の検討委

ウムで，中馬猛久先生（鹿児島大学）が「カンピ員会を青木，畑井両委員を中心に組織し，ロバクターの生態学」について，小野一晃先生

具体的実施方法などについて検討する。

（埼玉県衛生研究所）が「食鳥処理場におけるカ６）平成 14 年度定期総会の開催。
（４）平成 1４年度予算

ンピロバクターの汚染実態」，石原加奈子先生（農水省動物医薬品検査所）が「健康家畜由来カ

別表 2 の予算案が執行部から提出され，補足説明が行われた。

ンピロバクターの薬剤感受性調査」，横山敬子先生（都立衛生研究所）が「ヒト食中毒由来カンピ

上記 2 議案を一括審議のうえ，承認・可決した。

ロバクターの薬剤耐性」，高橋敏雄先生（農水省
動物医薬品検査所）が「カンピロバクターの薬剤感受性試験法の現状」について講演された。各講

２．第２９回シンポジウムの開催
上記の総会に引き続き，4 月 27 日午前 10 時 30分から同所において第 27 回シンポジウムが行わ

演後の討論も終始活発で，大変有意義なシンポジ
ウムとなった。これらの内容は本号に特別寄稿ならびに特集として掲載されている。

れた。まず，特別講演として，山本茂貴先生（国会員の拡充・投稿論文募集のお願い
会員の拡充については毎年お願いしている剤 の 使 用，残 留 や 耐 性 菌 に 対 す る 関 心 も 高と こ ろ で は あ り ま す。こ れ ま で の と こ ろ 本

まっており，本会もこれら分野への事業の拡会々員の内訳をみると，家畜衛生や公衆衛生充を計りつつあります。そこで，本会の活動

関係の官公庁，製薬や飼料会社の勤務獣医師

をより活発なものとするため，各会員の周辺が大半で，臨床関係者や水産関係者はあまりにおられる方々に積極的に入会を呼びかけて多くありません。

下さい。

近年，本会では薬剤耐性菌問題や抗菌剤のまた，会報のさらなる充実を図るため，本適正使用に係わる内容に重点をおいた運営を研究会の主旨に合致した研究論文の投稿を広行っています。特に，重要な課題についてはく受け付けております。23 号に投稿規程を掲

専門家による委員会を設置し，検討を重ねて載しておりますので，積極的な投稿をお願いおります。今まで以上に牛，豚，鶏のみなら致します。

ず小動物の臨床獣医師にも役立つ抗菌剤の適入会希望者は，葉書に住所（会報等発送先），

正使用に関する情報の提供ができると考えて

氏名，年齢，勤務先名を明記し，本会事務局

います。また，水産・魚病関係における抗菌に連絡下さい。（年会費 3,000 円）

会務報告／24（2002） 35

（別表１）
収入の部
科

平 成１
３年 度 収 支 決 算 書
目

個 人 会 費賛 助 会 費
繰
越
金
雑
収
入
合

比較増減

予算額

決算額

450,000
490,000
587,609200,000

597,000 147,000
520,000 30,000
587,609
138,435

増計1,727,609 1,843,044 115,435

目

予算額

備

減

考

3,000 × 199 名分
10,000 × 52 口分
61,565 シンポジウム，会報資料販売

支出の部
比較増減
科

決算額

備
増

事

務

当
費
費
費
費
費

180,000
50,00015,00040,0005,000
60,00010,00056,82034,0003,000
15,170650
4,000
0123,180
16,00012,00024,8304,350
56,00010,000

会

議 費
総
会
費
役 員 会 議 費
専門部会会議費

100,000
15,00035,00050,00060,191
1,470
24,021
34,70039,80913,530 総会資料印刷代
10,97915,300 会場使用料，交通費等事

業 費
資 料 配 付 費
講 演 会 費会 報 発 行 費
資 料 収 集 費
他 の 事 業 費

920,000
200,000
200,000
350,000
20,000150,000

387,137
0120,281
266,85600532,863
200,000
79,719 謝礼，施設利用料等
83,144 編集・印刷費，送料等
20,000150,000

雑予

10,000517,609

0
0

事
印
通
消
交
雑

小

費

考

減

務

手
刷
信

耗

品
通

備

費
費
計

504,148

次年度繰越

1,338,896

合

計

コピー代
切手代・はがき代
事務用品
通勤費，都内交通費

10,000517,6091,727,609 1,843,044 115,435

繰越金 1,338,896 東京三菱銀行普通預金 585,681
郵便貯金
722,386
監査の結果，以上の通り相違ありません
平成１4 年 4 月 12 日

郵便為替
現金

0
30,829

印
監事 小野浩臣 ○印
監事 佐藤靜夫 ○36 動物抗菌会報 24（2002）

（別表２）
収入の部
科

平 成１
４年 度 収 支 予 算 書
平成１４年度 平成１３年度
予算額
予算額

目

個 人 会 費賛 助 会 費
繰
越
金
雑
収
入
合

450,000
520,000
1,338,896
200,000

比較増減増減450,000
490,000 30,000
587,609 751,287
200,000

計2,508,896 1,727,609 781,287目

平成１４年度 平成１３年度
予算額
予算額

備

考

3,000 × 150 名分
10,000 × 52 口分（24 会員）
シンポジウム（70 ＋ 20）

支出の部

科

事

務

備
増

当
費
費
費
費
費

180,000
50,00015,00040,0005,000
60,00010,000180,000
50,00015,00040,0005,000
60,00010,000

議 費
総会
費
役 員 会 議 費
専門部会会議費

200,000
25,00075,000100,000

100,000 100,000
15,000 10,000
35,000 35,000
50,000 50,000

事
印
通
消
交
雑

費

比較増減

務

手
刷
信

耗

品
通

会

事

業 費
資 料 配 付 費
講 演 会 費会 報 発 行 費
資 料 収 集 費
他 の 事 業 費

雑
費
予 備 費
次年度繰越
合

計

1,320,0000
200,000
650,000
20,000450,000

920,000 400,000
200,000
200,000
200,000
350,000 300,000
20,000150,000 300,000

10,000298,896
500,000

10,000517,609258,7130 500,000

2,508,896 1,727,609 781,287

考減

印刷代，コピー代
切手代
事務用品
通勤費，都内交通費

総会資料印刷代
会場使用料，交通費等謝礼，要旨印刷代
編集・印刷費，送料等
文献・資料収集費
新規事業費

会務報告／24（2002） 37

役員及び所属

（任期

平成１２年４月〜平成１
５年３月）

顧

問

柴田重孝

（元 麻 布 大 学）

阪野哲也

（全農家畜衛研）

顧

問

高橋

勇

（日獣畜大名誉教授）

桜井健一（埼玉県農林総研）

顧

問

鈴木

昭

（元北里大）

理事

左向敏紀（日獣畜大）

理事長

小久江栄一 （東京農工大）神保勝彦（東京都衛研）

副理事長

澤田拓士

高鳥浩介

（国立薬食衛研）（日獣畜大）

事務局担当理事理事

高橋雄二（畜産安全研）片岡康（日獣畜大）

田村（農水省動薬検）青木宙

豊（東京水産大）野沢雄一郎 （神奈川食衛検）

内田幸治（ファイザー製薬）

中田勝久（大日本製薬）江口正志（独法 動衛研）

中村政幸

（北里大）

遠藤俊夫

（田辺製薬）

畑井喜司雄 （日獣畜大）

貝塚一郎

（動薬協）

福安嗣昭

（麻布大）

金井

（群馬県中部家保）森田邦雄（厚生労働省）

金子一幸

（麻布大）

八木澤守正 （日本抗生学協）

鎌田

寛

（日本大）

山根義久

（東京農工大）

熊谷

進

（東京大）

小野浩臣

（日獣畜大）

桑野昭（第一製薬）

佐藤靜夫（全農家畜衛研）

久

監事（理事名は五十音順，敬称略，各役員所属は平成１４年４月現在）

賛

助

会

員

第一製薬株式会社

フジタ製薬株式会社

コーキン化学株式会社

ノバルティス

協和発酵株式会社

ファルマシアアップジョン株式会社

ファイザー製薬株式会社

バイエル株式会社

デンカ製薬株式会社

エーザイ株式会社

三共株式会社

日本全薬工業株式会社

明治製菓株式会社

武田シェリング・プラウ

旭ヴェット株式会社

アニマルヘルス株式会社

アニマルヘルス株式会社

田辺製薬株式会社

フォートダッジ株式会社

ベーリンガーインゲルハイム

ヒブロ・ジャパン株式会社

シオノギ ベトメディカ株式会社

全農飼料畜産中央研所

大日本製薬株式会社

全農家畜衛生研究所

株式会社科学飼料研究所

日本抗生物質学術協議会

三鷹製薬株式会社

日本動物薬事協会（以上２6 会社・団体，順不同）