Leja®

Standard Counting Chamber は、CASA 及び顕微鏡観察による精子計数、濃度検査用のディスポーザブルなテストチャンバー(カウンティング)で、世界でその品質・性能が評価されています。

◆ 無 毒 性

無毒性接着剤、インク、コーティング剤を使用していますので精子運動への影響がありません。
◆ 希釈不要特殊な空気抜き機構により、粘性の高い無希釈試料でもスムーズに注入が行えます。
◆ 無泡

独自製法による精度の高いチャンバー厚(±５%)を保証。また、特殊コーティングによって、注入時の泡の発生がありません。
◆ 効率

ディスポーザブルのため毎回の洗浄の必要がなく、連続して多検量検査を行うことができます。
◆ 品

質Leja 社は ISO9001 NEN46001 認証の製造会社です。スライド一枚ずつ厳格な検査を受け箱詰め出荷され、高品質です。
◆ 品質保証Leja 社は出荷後いつでも全てのスライドに品質保証を行いまH

比較項目om¥27,000

SC-20-01-C

2 チャンバー/枚 深さ 20μmm ( ヒト )μ5ℓ

¥24,000

SC-20-01-02-B

2 チャンバー/枚 深さ 20μmm ( ヒト/ブタ )5μℓ¥24,000--

SC-20-01-04-B

4 チャンバー/枚 深さ 20μmm ( ブタ )3μℓ

¥24,000++

SC-20-01-08-B

8 チャンバー/枚 深さ 20μmm ( ブタ )2μℓ

¥33,000++--

SC-100-01-02-A

2 チャンバー/枚 深さ100μmm ( ヒト )25μℓ

¥32,000+-+++

SC-100-01-02-B

2 チャンバー/枚 深さ100μmm ( ラット )25μℓ¥28,000++++++/++

++

--

粘土計測

+++

--

--

--

--

気泡の発生

++

-+++

+

運動性計測

+++ +++

濃度計測精度+++悪い : -ytμℓ

粘性の高い標本可: +¥32,000

3--

良い : ++

販売価格

2 チャンバー/枚 深さ 12μmm++

良好 : +++

容量

4 チャンバー/枚 深さ 10μmm+++ +++ +++ ++/++様SC-12-01-C--

画像解析CASA適応性

仕SC-10-01-04-B-++型 式μ1ℓ+++ ++/-

+++

使い易さ

oc

aem

M

akleurnlV
elC

isiollCelV
Celroja

ic
M

Leeterす。Web を利用した、認証サービスを受けられます。

不可 : --

参考文献◆Douglas-Hamilton DH, Smith NG, Kuster CE, Vermeiden JP, Althouse GC. Particle distribution in low-volume capillary-loaded chambers.
J Androl. 2005 Jan-Feb; 26(1): 107-14.
◆Douglas-Hamilton DH, Smith NG, Kuster CE, Vermeiden JP, Althouse GC. Capillary-loaded particle fluid dynamics: effect on estimation of sperm concentration.
J Androl. 2005 Jan-Feb; 26(1):115-22.
◆WHO Laboratory manual for the examination of human semen and sperm-cervical mucus interaction. (4th ed.)Cambridge University Press, 1999.
ISBN 0 521 64599 9

顕微鏡の調整について顕微鏡を一台一台調整するのはなぜ？
顕微鏡はそれぞれ条件が違います。同じ精液サンプルを複数の顕微鏡で測定した場合、違う結果がでることがあります。顕微鏡同士の差を補正するため、補正係数（F）を計算して、精子濃度を正確に算出する必要があります。補正係数（F）は、特定の顕微鏡と特定の対物レンズに対し、必ず 1 回行う必要があります。

調整の手順

Figure 1.

１．接眼マイクロメーター（方眼）をセットします。（または、予備として顕微鏡に付属する方眼目盛付きの接眼レンズをご使用下さい。） Figure 1 にある、接眼レンズ越しに見た方眼の様子を参考にて下さい。

接眼レンズ越しに見た、接眼マイクロメーター（方眼）の略図。

２．対物マイクロメーターを、“0” が接眼マイクロメーターの方眼の縁と完全に揃うようセットします。
（Figure 2 参照）。 対物マイクロメーターの長い線同士の距離は、100 μm です。
３．接眼マイクロメーターの方眼の一番左の端から一番右の端までの長さを計り、この数値を 10（方眼の数、Figure 2 を参照）で割って、1 ボックス当たりの幅を計算します （= D）

500 μmFigure 2.
接眼レンズ越しにみた接眼マイクロメーター（方眼）と対物マイクロメーターの略図。

例； Figure 2 では、方眼の一番左の端から一番右の端までの長さは 500 μm となっています。

従って、 D  50 μm10以下の式を用いて、顕微鏡の補正係数を計算します。
F = 補正係数
D = 小ボックスの幅
T=F 1,000,000
T  D2

Leja スライドのチャンバーの高さ（深さ）例； Leja 20 ミクロン・スライドをご使用の場合、D 値は上記３項によって算出

F

1,000,000 1,000,000 20T  D220  502

補正係数（F）を使って小ボックス 1 個当たりのサンプルの容積の濃度を修正することにより、精液サンプルの濃度を正確に計算できます。

Leja®ス ラ イ ド と 接 眼 レ ン ズ 用 方 眼 目 盛 を 使 っ た 手 動 に よ る 精 子 数 の 測 定
Leja®スライドと接眼レンズ用方眼目盛を使った手動による精子数の測定は手動で精子数を測定する前に、ご使用の顕微鏡のための補正係数（F）を調べる必要があります。顕微鏡、あるいは対物レンズを変えない限り、この F 値の算出を繰り返す必要はありません。F 値の算出については、マニュアルをご参照ください。

カウンティングの手順：測定に当たっては、以下の 2 つの数値に注意して下さい。

S= カウントした精子の数 （最低でも 200 以上）

B= カウンティングに使用したボックスの数 （Figure 1 の方眼目盛では、100 ボックスあります）

Figure 1.

通常では、カウンティングは最も左上のボックスから始め、列を右方向に進み、次に列-2、列-3…、と数えていきます。
列から列へと進む際に同じ精子細胞を重複して数えることがないよう、下記のルールに従って下さい。



精子の頭部のみを数える （ボックスの中の尾の部分は 1 と数えない）。

●

接眼レンズ越しにみた方眼目盛の略図。

完全にボックス内に頭部が収まっている場合のみ、 1 として数える。

頭部がボックスの枠線にかかっている場合、頭部の半分以上が入っているボックスのカウントとして扱う。

濃度の計算の手順：

NSB

1. 始めに、カウントしたボックス 1 つあたりの精子数の平均値を出します。
2. 濃度（C）を 100 万/ml （= 10 ml ）に直すため、この N 値に顕微鏡の補正係数（F）を掛けます。
6-1

C  N F

重要事項：Leja®スライドには複数のチャンバーがあります。 上記の濃度は、カウントを行った特定のチャンバーに対してのものです。スライドに注入する前にサンプルが薄めてあった場合、未処理の精液の元々の濃度を計算ためには希釈率を考慮する必要があります。

S egr e-S i lb erb erg 効 果 の た め の 補 正
原則として Segre-Silberberg 効果は全ての毛細管の側面にあてはまるため、チャンバーにサンプルを注入する際の細胞の動きにも影響します。そのため、分析チャンバー中央部での測定濃度が、実際より低い数値に出ます。この Segre-Silberberg 効果の補正の必要性は、ポアズイユ流の発生、チャンバーの高さ、カウンティングチャンバー表面の特質、表面張力、サンプルの流入速度や粘性など、多くのファクターによります。水分の多い液体中の精子の場合、補正係数は 1.30、粘性の高いサンプルの場合は 1.00 に近い数値を用います。他のファクターは全て定数値なので、Segre-Silberberg 効果に関連する変数はサンプルの粘性のみです。流入時間と粘性度は高い関連性がありますので、21 mm の毛細管を使って Leja®チャンバーにサンプルを充填する時間を計ることで特定のサンプル用の補正係数を計算できます。
チャンバーの高さが 100 ミクロンの場合、Segre-Silberberg 効果はほとんどありませんので、補正係数を使用する必要はありません

数

Leja 社 日本総代理店

測定マニュアルをご用意しております。郵送、またはメールでお送りいたしますのでご用命ください。