特集感染症―薬剤耐性菌―

薬剤耐性菌検出のために臨床検査室が実施すべき検査法

The test should be performed in a clinical laboratory
to detect multidrug-resistant bacteria
中村 明子

三重大学医学部附属病院 中央検査部／医療安全・感染管理部 主任臨床検査技師

Akiko Nakamura (Chief Medical Technologist)
Mie University Hospital Department of Central Laboratory/Patient Safety and Infection Control

三重県立総合医療センター 中央検査部 主査

海住 博之

臨床検査技師

Hiroyuki Kaiju (Chief Medical Technologist)
Mie General Medical Center Department of Central Laboratory

キ ーワード01

ESBL、AmpC 型βラクタマーゼ、カルバペネマーゼ

よびその検出法等について理解しておく必要がある。

はじめに

本稿では、代表的なβラクタマーゼであるESBL、AmpC、カルバペネマーゼについて概説する。

βラクタマーゼは、βラクタム系抗菌薬を加水分解する酵素されている。
βラクタマーゼには様々な種類があり、基質拡張

02型βラクタマーゼ（ESBL）、AmpC型βラクタマーゼ（AmpC）、ⅰ）概要である。本酵素を産生することにより多剤耐性化する腸内細菌科細菌やブドウ糖非発酵菌群などのグラム陰性桿菌が問題視

メタロβラクタマーゼ（MBL）がよく知られている。また、日本でESBL産生菌について

ESBLはAmblerの分類でクラスA βラクタマーゼに属する。

Klebsiella pneumoniae caebapenemaseは少数ながらも、クラスA βラクタマーゼ（ペニシリナーゼ）
は本来ペニシリン（KPC）、ニューデリー型メタロβラクタマーゼ（NDM-1）、系抗菌薬を分解する加水分解酵素であるが、クラスA βラクタ

OXA型βラクタマーゼの産生株が報告されている。

マーゼをコードする遺伝子の突然変異により、通常分解できなESBL、AmpC、MBLをコードする遺伝情報の多くはプラスミド上に存在するため、菌株・菌種を超えて伝達される特性がある。ESBLの場合、米国臨床検査標準委員会（Clinical andLaboratory Standards Institute:CLSI）
M100-S25に定められた基準を用いて薬剤感受性を判定する場合、スクリーニング試験および確認試験を実施する必要がないとされている。
しかい第Ⅲ世代セファロスポリン系抗菌薬なども分解できるようになった酵素をESBLという。

Klebsiella pneumoniae 、K.
CLSIではEscherichia coli 、Proteus mirabilis の4菌種について判定基準が定
oxytoca 、められている。
しかし、実際にはこれらの菌種以外にも多くの菌種（腸内細菌科細菌科）
でESBLの産生が確認されている。

し、院内感染対策の観点からはESBLを検出する意義が高いた

わが国で分離されるESBL産生株の90%以上がCTX-M系

め、産生が疑われる菌株に対してはスクリーニング試験およびである。CTX-M系はセフォタキシム
（CTX）、セフトリアキソン確認試験を積極的に実施する必要がある。ESBLとMBLには、（CTRX）、セフェピム（CFPM）には高度耐性を示すが、セフタ

CLSIや国立感染症研究所等から提唱された検査法があるが、ジジム（CAZ）
やアズトレオナム（AZT）には見かけ上感性とAmpCの検出については学会発表や論文 による報告に留ま判定される場合がある。一方、TEM系やSHV系の遺伝子型のり、現状では明確な判定基準が定められていない。また、複数

ESBLの多くは、CAZやAZTに高度耐性を示し、CTX、CTRX、種類のβラクタマーゼを同時に産生している菌株もあるため、CFPM等に見かけ上感性と判定される場合が多い
（表1）
。

1）

微生物検査を担当する検査技師が各βラクタマーゼの特徴おESBLはその酵素活性がクラブラン酸（CVA）やスルバクタム表1.ESBLの薬剤感受性パターン
βラクタマーゼ
ペニシリナーゼESBL（TEM・SHV型）
ESBL（CTX型）

S: 通常は S を示す

10

Amblerの分類
A

遺伝子の所在プラスミド

R: 通常は R を示す

菌種
すべての腸内細菌科
細菌

ABPCR
R
R

AMPC/ ABPC/CVA
SBT
S
S
S
S
S
S

抗菌薬の耐性化
PIPC

CEZ

CMZ

FMOX

CTX

CAZ

CFPM

AZT

MEPM

IPM

R
R
Rv
R
R

S
S
S

S
S
S

Sv
R

S
Rv

S
v
R

S
Rv

S
S
S

S
S
S

v: 産生量依存性に S・I・R と様々な表現系を示す

THE CHEMICAL TIMES
査法である。用手法試薬としては、E-testの阻害試験用スト

床検査室での本酵素の検出には、この性質を利用する試験がリップ（シスメックス・ビオメリュー）が挙げられる。
② ディスク法による阻害試験
CLSI（M100-S25）に定められたディスク法によるESBLのⅱ）スクリーニング検出基準を表3に示す。本法はディスク拡散法による薬剤感① CLSIによる基準

受性試験用のディスクを使用するため、自動機器や耐性菌CLSI（M100-S25）に定められているESBL産生株のスクパネル未導入の施設でも実施しやすい。CVAの添加によりリーニング基準を表3に示す。前述のとおり、本基準の適阻止円径が5mm以上拡大した場合にESBL産生株と判定す

K. pneumoniae 、K. oxytoca 、P.
用はEscherichia coli 、ディる。実際のディスク配置例5)と判定例を図2に示す。また、mirabilis の染色体上にAmpCをコードする遺伝子を保有し感染症 ―薬剤耐性菌―多い。

特集（SBT）、タゾバクタム（TAZ）により阻害される（表2）2)3)4)。臨

スクが予めセットされている試薬としてはAmpC/ESBL鑑別ない4菌種のみに限定されている。
しかし、
AmpCをコードすディスク（関東化学）
が挙げられる。

る遺伝子を保有する腸内細菌科細菌科の菌種であっても、同時にESBLを産生する場合もあるため、上記4菌種以外に③ その他の方法阻害試験等のための培養を要しない検査法として、シカ対するスクリーニングも必要である。

ベータ（関東化学）が挙げられる。結果パターンによる判定② その他の方法

を表4に示す。

抗菌薬を含有したスクリーニング培地が各社から市販さ03れている。酵素基質培地を用いている製品（図1）もあり、その有用性が報告されている。

AmpC産生菌について

ⅰ）概要

ⅲ）確認試験

AmpCは、クラスC βラクタマーゼ、セファロスポリナーゼと① 微量液体希釈法もよばれ、セファロスポリン系抗菌薬を加水分解する酵素であ

CLSI（M100-S25）に定められている微量液体希釈法によEnterobacter spp, Serratia
る。腸内細菌科細菌科のうち、るESBLの検出基準を表3に示す。本法は自動機器にも広くブドウ糖非発酵のspp.,Citrobacter freundii などの菌種や、搭載されており、検出感度・特異度に優れ、信頼性の高い検CPDX
CAZ

AMPC/CVA
CTX

C.freunndii（ ESBL産生）
E. coli (ESBL産生)

AZT
クラブラン酸の阻害により阻止円の拡張を認めるため、ESBL産生株と判定。

阻止円径 a – b ≧5ｍｍであり、CVAによる阻害試験陽性であるため、ESBL産生株と判定。

図1.抗菌薬を含有する酵素基質培地の例（C3GR培地関東化学）

表2.各種βラクタマーゼの阻害剤への反応パターン

表3.

SBT

ESBL
AmpC
ESBLとAｍｐCの複合産生
MBL
KPC
OXA
MBLとESBLの複合産生+-

CVA MCIPC+-++--+(a)+(a)+(b)+(b)---±-+-+-+---+（c） +（c）BA+（d） +（d）(a) AｍｐCの阻害剤（BAやMPIPC）の存在条件下のみで阻害試験が陽性化することがある(b) ESBLの阻害剤（CVA）の存在条件下のみで阻害試験が陽性化することがある(c) MBLの阻害剤（SMAやEDTA）の存在条件下のみで阻害試験が陽性化することがある(d) ESBLの阻害剤（CVA）の存在条件下のみで阻害試験が陽性化することがある-－ ; 赤変＋ ; 黄色もしくはシカベータⅠの赤変に比べ弱い

確認試験

ESBL
AmpC
MBL

シカベータ
シカベータ
シカベータC
CVA
MBL
+++

ディスク
拡散法

M100-S25によるESBLの判定基準
E. coli、K. pneumoniae、K. oxytoca

P. mirabilis

阻止円径が以下のいずれかを満たす場合

阻止円径が以下のいずれかを満たす場合

・セフポドキシム（CPDX)
・セフタジジム（CAZ)
・アズトレオナム（AZT)
・セフォタキシム（CTX)
・セフトリアキソン（CTRX)

・セフポドキシム（CPDX)
・セフタジジム（CAZ)
・セフォタキシム
（CTX)

≦17mm
≦22mm
≦27mm
≦27mm
≦25mm

MIC値（μｇ/ｍL）が以下のいずれかを満たす場合

微量液体
希釈法

表4.シカベータによるβラクタマーゼ産生能の確認
シカベータⅠCLSISMA EDTA

スクリーニング基準

βラクタマーゼ名

図2.ディスク法によるESBL確認試験

ディスク
拡散法

微量液体
希釈法

・セフポドキシム（CPDX)≧8μｇ/ｍL・セフタジジム（CAZ)≧2μｇ/ｍL・アズトレオナム（AZT)≧2μｇ/ｍL・セフタジジム（CAZ)≧2μｇ/ｍL・セフトリアキソン（CTRX) ≧2μｇ/ｍL

≦22mm
≦22mm
≦27mm

MIC値（μｇ/ｍL）が以下のいずれかを満たす場合
・セフポドキシム（CPDX)
・セフタジジム（CAZ)・セフタジジム（CAZ)≧2μｇ/ｍL≧2μｇ/ｍL≧2μｇ/ｍL

以下の抗菌薬の単剤と阻害剤（CVA)存在下での阻止円径を比較する。
いずれかの薬剤で阻害剤存在下での阻止円径が単剤に比べで5ｍｍ以上拡大した場合に確認試験陽性と判定する・CAZ、CAZ/CVA
・CTX、CTX/CVA
以下の抗菌薬の単剤と阻害剤（CVA)混合条件下でのMIC値を比較する。
いずれかの薬剤で阻害剤混合条件下でのMIC値が単剤に比べで3管（8倍）以上低下した場合に確認試験陽性と判定する・CAZ、CAZ/CVA
・CTX、CTX/CVA

11

THE CHEMICAL TIMES

特集
感染症 ―薬剤耐性菌―

グラム陰性桿菌はAmpCをコードする遺伝子を染色体上に元ESBLなどのクラスA型 βラクタマーゼに比べAmpCはβラクタ来保有している（染色体性AmpC）。通常の状態では、AmpCをマーゼ阻害剤のうちSBT、TAZ、CVAの影響を受けにくく、ボロコードする遺伝子の転写活性が抑制されているため、その産生ン酸（BA）、クロキサシリン（MCIPC）によって酵素活性が阻害量は少ない。
しかし、抗菌薬に曝露される等の刺激によりこの酵される（表2）。臨床検査室での本酵素の検出には、この性質をに変異が起こると本酵素を過素の調節遺伝子（ampR ､ampD ）利用する試験が多い。

剰に産生するようになり、より広範囲のセフェム系抗菌薬やモノバクタム系抗菌薬を分解できるようになる。またこれとは別に、遺伝子変異により基質が拡張したAmpC型βラクタマーゼが知られている。

ⅱ）スクリーニング

前述のとおり、AmpC産生菌は、第Ⅰ･Ⅱ世代セファロスポリン系抗菌薬やCMZ、FMOX、LMOXに対し耐性を示すことが知ら

AmpC産生菌は、第Ⅰ･Ⅱ世代セファロスポリン系抗菌薬やセれているものの、CLSIや感染症法等に明確なスクリーニング基

ファマイシン系抗菌薬であるセフメタゾール（CMZ）、およびオ

準は定められていない。三重県臨床検査技師会では、暫定的にキサセフェム系抗菌薬であるフロモキセフ（FMOX）やラタモ

表6に示すスクリーニング基準を定め5)、県内施設における検査キセフ（LMOX）に対し耐性を示す（表5）。

法の標準化・検出感度の統一を図っている。

ディスク配置CTX

CAZ

CTX+BA*

CTX/CVACTX/CVA+BA*

判定例
CAZ+BA*

CAZ/CVACTX/BACTX

CAZ/BACAZ

CTX/CVA CTX/
CVA/BA CAZ/CVA CAZ/
CVA/BA

CAZ/CVA+BA*

AmpCスクリーニング陽性株はESBLのスクリーニング基準も満たしているため、ESBLとAmpC とを鑑別するディスク配置としている。

単剤に比べ、ボロン酸添加ディスクの阻止円が5ｍｍ拡大したため、AmpC型βラクタマーゼ産生菌と判定。

図3.ディスク法によるAmpC確認試験
表5.AmpCの薬剤感受性パターン
βラクタマーゼ

Amblerの分類

誘導型AmpC
構成型AmpC
プラスミド性AmpC

S:
R:r:s:
v:

C

遺伝子の所在菌種

抗菌薬の耐性化

ABPC

AMPC
/CVA

ABPC
/SBT

PIPC

CEZ

CMZ

FMOX

CTX

CAZ

CFPM

AZT

MEPM

IPM

R

R

rv

R

rrv

v

s

R

S

S

R

R

v

S

R

v

v

v

v

S

R

S

S

R

R

R

v

R

R

R

R

R

S

R

S

S

Providencia spp.
M. morganii
染色体C.freundii
E. coli
すべてのプラスミド
腸内細菌科細菌

通常はSを示す
通常はRを示す
ほとんどの場合がRであるが、産生量依存性にIやRとなる場合がある
ほとんどの場合がSであるが、産生量依存性にIやRとなる場合がある
産生量依存性にS・・
I Rと様々な表現系を示す

表6.腸内細菌科細菌のAｍｐCおよびカルバペネマーゼ産生スクリニーング基準（暫定）ディスク拡散法
微量液体希釈法

AmpC

ディスク拡散法12

微量液体希釈法

MBL

阻止円径が以下のいずれかを満たす場合
・セフポドキシム（CPDX) ≦17mm
・セフタジジム（CAZ)≦22mm
・アズトレオナム
（AZT)
≦27mm
・セフォタキシム
（CTX)
≦27mm
・セフトリアキソン（CTRX) ≦25mm
MIC値（μｇ/ｍL）
が以下のいずれかを満たす場合＋

・ セファマイシン系抗菌薬（CMZ）に耐性傾向がある場合
・ オキサセフェム系抗菌薬（FMOX・LMOX）のいずれかに耐性傾向を示す場合＋

・ セファマイシン系抗菌薬（CMZ）に耐性傾向がある場合＋
・ オキサセフェム系抗菌薬（FMOX・LMOX）のいずれかに耐性傾向を示す場合

・セフポドキシム（CPDX) ≧8μｇ/ｍL・セフタジジム（CAZ)≧2μｇ/ｍL・アズトレオナム（AZT)≧2μｇ/ｍL・セフタジジム（CAZ)≧2μｇ/ｍL・セフトリアキソン（CTRX) ≧2μｇ/ｍL
阻止円径が以下のいずれかを満たす場合
・セフポドキシム（CPDX) ≦17mm
・セフタジジム（CAZ)≦22mm
・アズトレオナム
（AZT)
≦27mm
・セフォタキシム
（CTX)
≦27mm
・セフトリアキソン（CTRX) ≦25mm
MIC値（μｇ/ｍL）が以下のいずれかを満たす場合
・セフポドキシム（CPDX) ≧8μｇ/ｍL
・セフタジジム（CAZ)≧2μｇ/ｍL・アズトレオナム（AZT)≧2μｇ/ｍL・セフタジジム（CAZ)≧2μｇ/ｍL・セフトリアキソン（CTRX) ≧2μｇ/ｍL

・ カルバペネム系抗菌薬（IMP/CS、MEPM）のMIC値が上昇・阻止円径が縮小している場合

THE CHEMICAL TIMES達される。また、本酵素を産生する菌株はβラクタム系以外の抗ⅲ）確認試験とがある。そのため、医療関連感染対策の面からも特に注意が菌薬への耐性遺伝子を併せ持つことも多く、多剤耐性を示すこ① ディスク法によるDDST・阻害試験必要である。

スクリーニング基準と同様に明確に定められた判定基準① クラスB カルバペネマーゼがないため、三重県臨床検査技師会では暫定的な判定基準

クラスB カルバペネマーゼは活性中心に亜鉛が存在すを作成している5)。MCIPCを用いたダブルディスクシナジー

るため、メタロβラクタマーゼ（MBL）とも呼ばれ、染色体性とプラスミド性のMBLがある。Stenotrophomonas
maltophilia は染色体性にMBLを産生しカルバペネムに元テスト（DDST）、BAを用いた阻害試験を実施し6)7)、阻害剤の影響により阻止円径が5mm以上拡大した場合にAmpC産来耐性を示すことが知られている。わが国で分離頻度が高生株と判定する。BAはAmpCだけでなくKPC型 カルバペネマーゼの阻害剤でもあるため、結果の解釈には注意が必要

いMBLの遺伝子型はプラスミド性のIMP型であり、近年、スである。実際のディスク配置例と判定例を図3に示す。また、テルス型と称されるIMP-6型のMBLを産生する腸内細菌

ディスクが予めセットされている試薬としてはAmpC/ESBL科細菌が増加傾向にある。
② クラスA カルバペネマーゼ鑑別ディスクが挙げられる。

クラスAに属する、KPC型カルバペネマーゼは、1996年に② 阻害試験等のための培養を要しない検査法として、
シカベー

米国の医療機関でK. pneumoniae から初めて確認された。

タが挙げられる。判定例を表4に示す。

04

感染症 ―薬剤耐性菌―

伝子は、プラスミド上にあることが多く、菌株や菌種を超えて伝グ培地の有用性も報告されている。

特集

また、各社から販売されている抗菌薬を含有したスクリーニン

その後、米国および欧州を中心に、世界的に蔓延している。

カルバペネマーゼ産生菌について③ クラスD カルバペネマーゼ
OXA型 βラクタマーゼはクラスDに属し、現在100を超えるTypeが報告されている。オキサシリナーゼとも呼ばⅰ）概要

れ、主にオキサシリン、メチシリンを加水分解する酵素でネム系抗菌薬を含むすべてのβラクタム系抗菌薬を加水分解していなかったが、近年Acinetobacter baumanii やK.

カルバペネマーゼは、セファロスポリン系抗菌薬やカルバペある。元来カルバペネム系抗菌薬を分解する性質は保有

pneumoniae からOXA型のカルバペネマーゼ検出例がする酵素である。そのため本酵素を産生する細菌を起炎菌とす報告されている。OXA型カルバペネマーゼは、クラブランる感染症は治療に難渋することが多い。本酵素をコードする遺陰性コントロール菌株
K. pneumoniae
ATCC BAA-1706
MEPM
陽性コントロール菌株
もしくは
K. pneumoniae
ETPATCC BAA-1705
被検菌株

1:10希釈液

1）E. coli ATCC25922のMcF0.5菌液を調製
2）調製した菌液1に対し、生理食塩水又はブロスを10加え、11倍の希釈液を作る･･･A
3）Aの菌液をミュラーヒントン培地へ塗布する
4）MEPMもしくはエルタペネム（ETP）
ディスクを培地の中心に置く。
5）白金耳又は綿棒で被検菌株、陽性コントロール菌株、陰性コント
ロール菌株をディスクの端から外側へまっすぐ塗布する。

ATCC25922(McF0.5)1E.coli10

生理食塩水または ブロス

陰性コントロール
K.pneumoniae（ATCC BAA-1706）

MEPMに対する大腸菌阻止円と被検菌が交差する箇所で矢じり状となっている。MHT陽性であり、カルバペネマーゼ産生と判定。

陽性コントロール
K.pneumoniae（ATCC BAA-1705）

被検菌

図4.MHTの実施方法および判定例
表7.MBL産生腸内細菌科細菌のMIC値菌株
番号12345678

菌名

ABPC

PIPC

CEZ

CCL

CTM

CTX

CAZ

CFDN

CPR

CZOP

CMZ

IPM/CS

MEPM

K. pneumoniae
E. coliEnterobacter sp.
E. cloacae
E. coliE. coliE. coliE. coli>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0

16.0>64.0>64.0>64.0>64.0>64.0>64.0>64.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>16.0>32.0>32.0>32.0>32.0>32.0>32.0>32.0≦8.0>16.0
16.0>16.0>16.0>16.0>16.0
16.0
8.0＞2.0＞2.0＞2.0＞2.0＞2.0＞2.0＞2.0＞2.0≦8.0＞16.0
＞16.0
＞16.0
＞16.0
≦8.0＞16.0
＞16.0

＞16.0
＞16.0
＞16.0
＞16.0＞16.0＞16.0≦2.0＞16.0

＞32.0
＞32.0
＞32.0
＞32.0
＞32.0
＞32.0
16.0
＞32.0

2.0
≦0.5
＞8.0
＞8.0
＞8.0
≦0.5
≦0.5
2.0＞8.0
8.0＞8.0＞8.0＞8.0
≦0.5
≦0.5
1.0感染症法上のCRE届出基準
1）MEPMのMIC値が2μg/mL以上である場合
2）IPMのMIC値が2μg/mL以上かつCMZのMIC値が64μg/mLである場合

三重大学病院（2013.1～12）

13

THE CHEMICAL TIMES

特集
感染症 ―薬剤耐性菌―

酸やEDTAによる阻害試験の検出感度が低く、modifiedては注意が必要である9)。

Hodge test(MHT）の有用性も確立されていないため、現KPCに対してはBAを用いた阻害試験が実施される。BAは在のところは遺伝子検査に頼らざるを得ない。

AmpCの阻害剤でもあるため、本試験単独ではなく、他の試験
（MHT等）と組み合わせて結果を判定することが必要でⅱ）スクリーニングある。

感染症法上、
カルバペネム耐性腸内細菌科細菌の判定基準③ 阻 害 試 験 等 の た め の 培 養 を 要しな い 検 査 法 として 、はあるものの、現時点では腸内細菌科細菌のカルバペネマーCarbaNP試験（自家調製試薬）やシカベータが挙げられる。

ゼ産生に関する明確な基準が示されていない。カルバペネ

CarbaNP試験は複数種のβラクタマーゼを産生する菌株にマーゼ産生株は必ずしもIPM やMEPMに試験管内で耐性を示対しても実施可能であり、市販試薬の発売が待たれる。

すとは限らず、MBL産生株に対するMIC値がIPM・MEPM共に（表7）。そのためカルバ≦0.5μg/mlを示す株の報告例8)もある
ペネム系抗菌薬のみでスクリーニングを行うと、本酵素の産生を見逃す可能性がある。

05

おわりにブドウ糖非発酵菌では、第3世代セファロスポリン系抗菌薬で厚生労働省院内感染対策サーベイランス事業（JANIS）の報あるCAZやS/CにIもしくはRを示した場合には、カルバペネマー

告10)によると、近年、わが国でもグラム陰性の多剤耐性菌の検ゼ産生の可能性があるため、確認試験を実施する必要がある。

出数が増加し、治療や感染対策に難渋する場面も多く見られるようになった。細菌の耐性獲得と新規抗菌薬および検査法の開ⅲ）確認試験

発は「いたちごっこ」であり、検査に要する知識も次々と更新さ① ホッジ試験変法（modified Hodge test:MHT）
腸内細菌科細菌のカルバペネマーゼ産生能を判別する試験であるホッジ試験変法の実施方法と判定例を図4に示す。本れている。我々微生物検査を担当する検査技師は、耐性菌に関する的確な知識と正しい検査技術を会得し、感染制御の基となる正確な検査結果を提供していく必要がある。

検査法の感度は90%以上とされ、KPCや大部分のMBLは検出できるものの、OXA型やその他の一部のカルバペネマーゼは検出できないため、結果の解釈には注意が必要である。
② ディスク法によるDDST・阻害試験
MBLに対してはメルカプト酢酸ナトリウム（SMA）を用いたDDSTおよび、(エチレンジアミン4酢酸)EDTAを用いた阻害試験が用いられる。腸内細菌科細菌に対してDDSTを実施する場合、SMAと抗菌薬ディスク間の距離を規定の20mmよりも近づけたほうが判定しやすい場合がある（図5)。また、EDTAはMBLに直接作用するのではなく、培地
5）に含まれる亜鉛をキレートして除去することにより、酵素反応に亜鉛を必要とするMBLの活性を間接的に低下させており、厳密な意味では、阻害剤ではない。さらに、EDTAは、亜鉛だけでなく、細菌の生育に不可欠な、他の二価の金属イオンも同様に吸着除去する能力を持つため、EDTAの存在下では、細菌の生育が非特異的に阻害される現象が見られる

Acinetobacter 属やE. coli などでは、ことがある（例えば、発育阻止帯が出現する株がある）ため、結果の判定にあたっ
K. pneumoniae

ディスク間距離15mm

SMA

参考文献

1. D. L. Maraskolhe, V. S. Deotale, D. K. Mendiratta, P. Narang, J. Clin. Diagn.
Res. 8(6), DC05-DC08 (2014).
.
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56(10), 250-256（2010）
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微生物講習栄検査研究班編, 腸内細菌科のβラクタマーゼ検査法（三重.
県臨床検査技師会, 三重, 2014）

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微生物学雑誌 25(Suppl.1), P330 (2015).

9. 薬剤耐性菌研究会, 耐性菌Q&A, http://yakutai.dept.med.gunma-u.
ac.jp/society/QandA.html（参照2015-10-5）
10.筒井敦子, 鈴木里和, 山根一和, 山岸拓也, 荒川宜親, IASR, 32(1), 3-4.
（2011）

P. aeruginosa
CAZ

SMA

MEPM

ディスク間距離20mm

IMP

SMAの阻害による阻止円の拡大を認めたた
め、MBL産生と判定。
（ディスク間距離20mmに比べ、15mmの方が阻止円が若干大きい。）

SMAの阻害による阻止円の拡大を認めたた
め、MBL産生と判定。

図5.SMAによるDDSTを用いたMBLの確認試験

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