皐終幸艮佳手詈『4 ーアミノ＿ 5- ヒドロキシ— 2,7ーナフタレンジスルホン酸モノナトリウム塩のラットを用いた経口投与による急性毒性試験（試験番号財団法人91‑025)

畜産生物科学安全研究所

要約

4—アミノ— 5ーヒドロキシー 2,7ーナフタレンジスルホン酸モノナトリウム塩（略称： AHNDs) のラットを用いた急性毒性試験を経口投与により実施し，以下の成績を得た。

'1. 投与量雄・雌2,OOOmg/kg (0ECD毒性試験法ガイドラインの限界用量）

2. 最小致死量
雄・雌：＞2,000mg/kg

3. 一般症状及び体重
雄，雌とも 2,000mg/kg投与において死亡動物は認められず，一般状態の変化も認められな＇かった。また，体重も順調な増加を示した。

4. 音l］検所見
観察期間終了後の生存動物の剖検肉眼検査において，雄，雌のいずれにおいても異常は認められなかった。

ー試験目的
この試験は，4- アミノ— 5ーヒドロキシー 2,7 ーナフタレンジスルホン酸モノナトリウム塩をラットに経口投与し，本被験物質の急性毒性を明らかにする目的で実施した。

試験材料及び方法

1. 被験物質（資料 1,2)

4ーアミノ ‑
5‑、ヒドロキシ ‑2,7ーナフタレンジスルホン酸モノナトリウム塩（以下， AHNDSと略す）はから提供され純度 87.
4%) を使用した。 AHNDSの詳細は資料 1に示したたもの（ロット番号とおりである。

なお，試験に用いた AHNDSについては，投与計1及び投与後に分析し，この闊安定であったことを確認した（資料 2)。

2. 供試動物及び飼育条件（賓料 3 5)動物は， C
rj:CD(SD)系の SPFラットを日本チャールス・リパー（株）より 4週齢（雄 11匹，雌 11匹）で導入し，12日間試験環境に馴化させ，その間に検疫を行い，発育が順調で一般状態の良好な雌雄各 11匹から無作為にそれぞれ 5匹を抽出し 5週齢で供試した。投与時の平均体重（体重の飩囲）は，雄 144(13715Q)g，雌 121(114127)gであった。

動物の飼育は，馴化期間及び投与後の観察期間とも室温 22土3℃，湿度 55士10%,換気
回数 10回以上1時（オールフレッシュエア一方式）,"'照明 12時間（午前 6時点灯，午後 6時消灯に設定されたバリアーシステム動物飼育室で，ステンレス製金網ケージ〔 276WX426DX20011mm〕に 2〜3匹ずつ雌雄別に収容して行った。飼料〔日本農産工業閥製，固型飼料ラボ MRストック， LotN
o.91.07.58,91.09.66, 汚染物質の分祈結果：資料 3〕と水 (1 /.lfflカートリッジフィルター沈過後紫外線照射による殺菌水道水，汚染物質の分折結果：資料 4) は自由に摂取させた。
なお，動物の飼育期間を通じて，試験成績の信頼性に影響を及ぽした：と思われる環境要因の変化は認められなかった（温度・湿度の測定結果：資料 5)。

2

3. 試験群の構成及び投与量投与量設定のための予備試験を実施した結果，雌雄とも 2,000mg/kg投与によっても死亡動物はみられず， AI‑INDSは急性毒性の弱い物質であると推測された。従って，試験群は，雄，雌とも各 5匹とし， OECDの毒性試験法ガイドラインで規定された限界用量である 2,000mg/kgの 1用量群を設定して行った。

4. 被験物質の調製及び投与方法（資料 6)
被験物質は，メチルセルロース（和光純薬工業闘製，lOOcP, LotNo.ECE2497の 1.
0"/vX水溶液（局方精製水，共栄製薬閥製， LotN
o.180651) を媒体にし，物理的に投与可能な最大濃度であった 20"/v況の懸濁液に調製した。投与液量は体重 1kgあたり 10ml.とした。投与液は調製後分析し，所定濃度に調製されていることを確認した（資料 6)。
投与方法は，胃ゾンデを用いて強制的に動物の胃内に単 1叫経口投与（投与時刻：午前 10時15分〜 10時20分）した。なお，動物は投与計1日午後 5時から投与後 3時間まで紐食し，水のみを与えた。

5. 観察事項
観察期間は投与後 14日間とし，その間の一般症状の観察と生死の確認は，投与日においては投与後 1時間までと投与後約 3時間及び 6時間までにそれぞれ 1圃ずつ行い，これを投与〇日とした。また，翌日（投与後 1日）以降は，前日の午後 5時から当日の午後 5時までを 1日とし，実際の観察は午前 9時から午後 5時までの間に少なくとも 1圃行った。
体重は投与直前（投与 0日），投与後 1,3, 7及び 14日に測定し，測定日間の体重増加量を算山した。
剖検は，観察期間終了後に動物をエーテル麻酔死させて行った。

3

試験成績

1. 死亡率及び致死量(Table1)

雌雄とも 2,000mg/kg投与において死亡動物は認められず，従って，最小致死量は，雄，雌とも 2,000mg/kg以上であった。

2. 一般症状(Table2, Appendix1)

雄，雌とも観察期間を通じて一般状態の変化は認められなかった。

3. 体重の推移(Table3, Appendix2)

雄，雌とも体重は順調に増加し，体重に対する被験物質投与の明らかな影響は認められなかった。

4. 剖検所見(Table4, Appendix3)

観察期間終了後の剖検において，雄，雌とも臓器の肉眼的な異常は認められなかった。

考察

AHNDSのラットにおける急性毒性試験を経口投与により実施した。その結果， OECDの毒性試験法ガイドラインで規定された限界用量である 2,000mg/kgの投与においても死亡は認められず，最小致死量は 2,000mg/kg以上であると推定された。
また，一般症状，体重増加並びに剖検所見においても本被験物質の毒性影響を示唆する変化は認められなかった。
以上の結果より， AI‑INDSはラットに対する急性毒性の弱い物質であると結論された。

4

Acut
etoxi
cityinrats

Table 1Sex

Dose

Numberof(mg/kg)

animalsDayexamined゜゜゜゜゜゜゜゜゜゜゜゜゜゜゜Male20005Female

2000

5Numberofa
nimals diedMini
mum
Mortality let
haldose1

2 3 4

5 6 14(mg/kg)

0/5>
20000/
5>
2000

Table 2

23．n
Slg

ーCli
ni
cal

Inci
denceofclini
cal si
gn
si
nr
ats

Male

2000oa;
5b 0/
5 0/
50/
50/
50/
50/
5Female20000/
50/
50/
50/
50/
5SexDose0Day(mg/kg) Hrs ~ 1

34 14

6Abnormalities

a: Numberofani
mals with signs
b: Numberofani
mals observed

0/5 0/5Table3

Bodyw
ei
ght‑M
eanv
aluesinr
ats(g)

Sex

Dose

NumberofDay{mg/kg) ani
mal
sex
a
mined

゜

1

37

1
420
00

582土21(58)1
44土 6 172土 5仮炉 189土 7Q7) 2
24土14(35) 2Female 200057
7土12(16)40土 3(19) 1
48土 7(8) 16
1土10(13) 1
121土 3 1池le.E
achv
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essedasmean土 S
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Table 4

Sex

Summaryofnecropsyf
indi
ng inrats

Dose

Numberof

Numberofanimals(mg/kg)ani
malswith abnormali
ties

Female2000520005Male︒︒

exami
ned