1

一般試験法
1.1

機器分析法

1.2

微生物試験法1.3

遺伝毒性試験法

1.4

放射能試験法

1.5

分析法の妥当性確認

2

飲食物試験法2.1

食品成分試験法

2.2

天然有毒物質試験法

2.3

食品添加物試験法

2.4

食品汚染物試験法

2.5

放射性物質試験法２．
１ 食品成分試験法２）タ ー マ ミ ル!は Novozymes 社，プ ロ テ ア ー ゼ は Sigma８０），ア ミ ロ グ ル コ シ ダ ー ゼ は Sigma 社（No.A―
社（No.P―５３
３０４２）の製品を用いる．
３）ろ過補助剤として Fisher Scientific Cerite５４５を用いた
ときに良好な結果が得られる．酸洗浄されたものが市販されているが，酸洗浄されていないものは酸洗浄して使用する．粒度は３０〜６０mesh がよいが，あらかじめ〔器具および装置〕①のように洗浄することによって細かい粒子を除いておくので，あまり厳密に粒度にこだわる必要はない．
４）フィルターの直径が約４cm Pyrex 製がよい．
５）試料の粒度は定量値に影響を与えるので，あまり細かい粒子を含まないように粉末にする．粒度は一定の範囲
（０．
３〜０．
５
mm）にあるほうがよいが，細かい部分を除くと試料の均一性がそこなわれるので，本法では３２mesh 以下とした．
６）単糖類の多い試料，たとえば果物や加工食品などでは乾燥せずにそのまま測定したほうがよい．
７）試料のひょう取は，１g を正確にとることによって，食物
繊維含量の計算が〔注解〕１３）に示すように簡単になる．また，本法の原理からも２検体のひょう取量および操作はできるだけ同じ条件になるようにする．
海藻類や精製された難消化多糖類など，水溶性多糖類を多く含む試料ではひょう取量は０．
１〜０．
５g にしたほうがよい．
８）沸騰水浴中にビーカーを入れたとき，溶液の温度がすば
やく９５℃以上になるようにする．
になるようにする．
９）室温でエタノール濃度が７
５％
（v／v）
１
０）放置時間が長くなると無機質の沈殿が生成し，ろ過がしにくく，誤差の原因となる．
１
１）ろ過に時間がかかると，誤差が大きくなる．１
０分以内が望ましい．時間がかかる場合には，ろ過器，セライト，試料の粒度，沈殿生成時間などを検討する．
１２）残さ中のタンパク質含量の定量には，試料を全量用いる
か，セライトと試料の残さ量をあらかじめひょう量しておき，両者を均一にして，その一部を用いてもよい．全量を用いる場
合はセライトのために突沸が起きやすいので，ケルダールフラ
スコは大きいもの，たとえば３００m l を用いるとよい．
１３）試料ひょう取量を１．
０
００±０．
０
０
１g としたときには，D は次式によって算出できる．
R１＋R２
１− P − A −B × １
０
０
D（％）＝
R１
R２
２

（

）

（２）サウスゲートの変法１）による定量
多糖を系統的に分別してから定量する方法である．前項（１）の酵素―重量法に比べて操作が煩雑であるが，食物繊維の全容を評価することができる．
〔試 薬〕① ０．
０５mol／l リン酸塩緩衝液：前項（１）
酵素―重量法による定量の〔試薬〕の項参照．
② 熱安定α−アミラーゼ溶液：前項（１）
酵素―重量法に
よる定量の
〔試薬〕
の項参照．
③ アミログルコシダーゼ溶液：前項（１）
酵素―重量法による定量の〔試薬〕の項参照２）．
④ ホウ酸ナトリウム・硫酸溶液：ホウ酸ナト リ ウ ム
０．
９５g を H２SO４ に溶かし，１００ml とする．
⑤ カルバゾール・エタノール溶液：カルバゾール１
２
５
mg をエタノールに溶かし，１００ml とする．
⑥ オルシン試薬：HCl・酢酸（１：３）にオルシンを溶かして０．
１％ オルシン溶液とする．この溶液９９容量に，１

195

mol／l FeCl３ 溶液１容量を加えて混和する．FeCl３ 溶液は保存できるが，オルシン溶液は用時調製．
⑦ 標準原液：L−アラビノース，D−グルコース，D−グル
クロン酸ナトリウム〔減圧デシケータ（P２O５）中で一夜乾燥〕のそれぞれ１
２．
５mg を正確にはかり，水に溶かし５０．
０ml とする．
⑧ 標準溶液 i ）ウロン酸：グルクロン酸ナトリウム
標準原液１．
０，２．
０，３．
０，４．
０，５．
０ml を別々の２
５ml のメスフラスコにとり，水を加えて２５．
０ml とする．グル
クロン酸ナトリウムとして１０〜５０μg／ml を含む．
）ヘ キ ソ ー ス：グ ル コ ー ス 標 準 原 液１．
０，２．
０，
３．
０，４．
０，５．
０ml を別々の２５ml のメスフラスコにとり，水を加えて２５．
０ml とする．グルコースとして１０〜５０μg／ml を含む．
）ペ ン ト ー ス：ア ラ ビ ノ ー ス 標 準 原 液１．
０，２．
０，
３．
０，４．
０，５．
０ml を別々の２５ml のメスフラスコにとり，水を加えて２５．
０ml とする．アラビノースとして１０〜５０μg／ml を含む．
〔試験溶液の調製〕① メタノール処理３）：試 料４）約５g
を精密にはかり，１００ml ナス型フラスコにとり，８
５％メ
タノール２
５ml を加えテフロン製かくはん子を入れる．冷却器を付け，水浴中で加熱し内容をスターラーでかくはんする．沸騰してから５分間加熱する．水で冷してから，重量既知のグラスフィルター（１G−３）
で吸引ろ過する．残さを８５％メタノール２
５ml で元のナス型フラスコに戻し，
このメタノール抽出操作を３回繰り返す．最後に残さをす
べてグラスフィルターに移し，残さをジエチルエーテル
２
５ml で 洗 浄 し，風 乾 後，乾 燥 器（９
８〜１
０
０℃）
に１
０分 間
入れ溶媒を除去し，重量をはかる５）．ここで得たメタノー
ル処理試料は密閉容器に保存する．
② デンプンの除去：メタノール処理試料０．
２〜０．
３g を
精密にはかり，
５
０ml 遠心管にとり，
０．
０５mol／l リン酸緩衝"#液６ml と，熱安定α―アミラーゼ溶液５０μl を加え，ア
ルミはくで覆い，沸騰水浴中に入れ，５分ごとにかくはん
し６），内部の温度が９５℃以上になってから３
０分間加熱す（pH４．
５）
４ml お よる．冷却後，０．
１mol／l 酢酸塩緩 衝 液びアミログルコシダーゼ溶液２０μl を加えてよく混和後，アルミ箔で覆い，６０℃水浴中で振とうしながら３０分間反応させる．酵素処理した試料液に４倍量のエタノールを加え１
０分間放置後，遠心して上清を取り除く．さらに残さを８０％エタノール１
０ml で洗浄し，遠心して上清を除く．
この洗浄操作を２回繰り返す．
③ 水溶性非セルロース多糖類〔soluble dietary fiber（SDF）〕の分離と加水分解：② で得た残さに水約３ml を加えて水浴中で加熱し，エタノールを蒸発させる．これに熱水約１０ml を加えてガラス棒でかくはんし，沸騰水浴
中で２０分間加熱し熱水抽出する．次いで遠心し，上清を
１００ml のナス型フラスコに移す．残さの熱水抽出を３回繰り返し，そのつど得られた上清を合わせエバポレータで３０℃以下で１
０ml 以下に濃縮する．この内容物を５０ml
遠心管に移し，少量の水で洗い込み約１０ml とする．これにエタノール４０ml を加え沈殿物を生成させる７）．次い196

２．飲食物試験法

で遠心し，上清を取り除き，残さを８０％ エタノールに懸濁させ，洗浄後遠心して上清を取り除く．
遠心管の中の残さに，０．
５mol／l H２SO４１
０ml を加え，冷却器を付け，沸騰水浴中で２．
５時間加熱する．冷却後，１mol／l NaOH 溶液で pH７．
０８）とする．ろ紙（東洋ろ紙 No．
５
C）でろ過し，少量の水で遠心管を洗い，洗液を合わせて
２
５ml メスフラスコに移し，水を加えて２５．
０ml としヘキ
ソース，ペントースおよびウロン酸定量用試験溶液とする．
④ 水不溶性非セルロース多糖類の分離と加水分解：③で得た遠心管中の熱水抽出後の残さに８０％ エタノール１
０
ml を加え，ガラス棒でかくはんし，
１
８
０
０×g
（約３
５
０
０rpm）
で１
０分間遠心して上清を取り除く．この洗浄を２回繰り返す．残さに０．
５mol／l H２SO４１
０ml を加え，冷却管を付
け，水浴中で２．
５時間加熱する．加熱中，管壁に不溶物が付かないようにときどきかくはんする．もし管壁に不溶物が付着したときは，少量の０．
５mol／l H２SO４ を用いて洗い落す．
冷却後，同容量のエタノール９）を加え混和後，遠心する．
上清は１
００ml のビーカーに移し，残さは５０％ エタノール１
０ml を加え，洗浄し，遠心する．この洗浄を２回繰り返し，そのつど得られた上清を合わせ，
０．
２mol／l NaOH
溶液で約 pH７．
０８）とし，１００ml のメスフラスコに移した
のち水で１
０
０．
０ml とし，ヘキソース，ペントース，ウロン酸の定量用試験溶液とする．
⑤ セルロースの加水分解：④ において５０％ エタノールで洗浄した残さをさらにエタノール２
０ml で洗浄して
１
３
０
０×g
（約３
０
０
０rpm）
で１
０分間遠心し，上清を取り除く．
ジエチルエーテル１
０ml を用いて同様の洗浄を２回繰り返す．風乾後，乾燥器中
（９
５〜１
０
０℃）
で１
０分間乾燥して溶媒を除去する．これに０〜４℃の７２％ H２SO４１
０ml を
加え０〜４℃で２４時間放置する．この際，初めの数時間はガラス棒でときどきかくはんする．放置後，氷水中で少量の水を加え，速やかにかくはんし，重量既知のガラス繊維
ろ紙（東洋ろ紙 GA−２００）を敷いたグーチるつぼ１０）に移し吸引ろ過する．水で遠心管と残さを洗い，ろ液はすべて１０
０
ml のビーカーに合わせ，pH メーターを用いて８mol／l
NaOH で pH４とし，さらに１mol／l NaOH で pH７．
０８）としたのち，１００ml のメスフラスコに移し，水で１００．
０mlとし，ヘキソース，ペントースおよびウロン酸定量用試験溶液とする．
⑥ リグニンの分離：⑤ で得た残さをエタノール２
０ml
で１回，ジエチルエーテル１０ml で２回洗浄したのち風乾する．
〔試験操作〕① 単糖の定量１１） i ）カルバゾール硫酸法
によるウロン酸の定量１２）：氷冷したホウ酸ナトリウム・硫酸溶液５ml ずつを試験管にとり，これに試験溶液１．
０ml（グルクロン酸ナトリウムとして１０〜５０μg／ml を含む）
ま
たはグルクロン酸ナトリウムとして１
０，２
０，３
０，４
０，５
０
μg／ml を含む各標準溶液１．
０ml ずつを静かに加える．室温以上にならないように水冷しながら混和する．ガラス玉で栓をして，沸騰水浴中で１０分間加熱する．次いで室温まで水冷し，カルバゾール・エタノール溶液０．
２ml を加え混和し，沸騰水浴中で１５分間加熱する．室温まで水冷
後，５３０nm における吸光度を測定する．
）フェノール硫酸法によるヘキソースの定量１３）：試験溶液１．
０ml（グルコースとして１０〜５０μg を含む）
または
グルコース，アラビノースおよびグルクロン酸ナトリウム
それぞれ１
０，２
０，３
０，４
０，５
０μg／ml を含む各標準溶液１．
０!

ml ずつを試験管にとり ５％ フェノール溶液１．
０ml を加えてかくはんする．次いで濃硫酸５．
０ml を一気に加えてかくはんし，室温になるまで放置後，４９０nm における吸光度を測定する．
）オルシン比色法によるペントースの定量１４）：試験溶
液１．
０ml（アラビノースとして１０〜５０μg を含む）
または
アラビノース１
０，２
０，３
０，４
０，５
０μg／ml を含む各標準溶
液１．
０ml をそれぞれ試験管にとり，オルシン溶液４．
０mlを加え混和する．ガラス玉で栓をして沸騰水浴中で３０分間加熱し，室温になるまで水冷後，６６０nm における吸光度を測定する．
② 単糖の算出：以上のように測定した吸光度から，それぞれの検量線を用いて試験溶液１ml 中の糖含有量（xμg）
を求め，次式に従ってメタノール処理試料のうち試験溶液の調製 ② に用いた試料（約０．
２〜０．
３g）中の単糖値を算出
する．
i ）SDF 由来の単糖
ウロン酸ナトリウム量（mg）＝ x×２
５×１
０−３

"

）
ヘキソース量１５（mg）＝
x×２
５×１
０−３
−
ペントース量（mg）＝ x×２
５×１
０３
）水不溶性非セルロース多糖類由来の単糖
ウロン酸ナトリウム量（mg）＝ x×１
０
０×１
０−３
１
５
）
−
３
ヘキソース量 （mg）＝ x×１０
０×１０
ペントース量（mg）＝ x×１
０
０×１
０−３
）セルロース由来の単糖
ウロン酸ナトリウム量（mg）＝ x×１
０
０×１
０−３
１
５
）
−
３
ヘキソース量 （mg）＝ x×１０
０×１０
ペントース量（mg）＝ x×１
０
０×１
０−３
）
）ヘキソース量の補正１６（真のヘキソース値の算出）
ヘキソース値＝（フェノール硫酸法で得たヘキソース量）−（ペントース量）
×（ペントースの換算係数）−（ウロン酸ナトリウム量）
×（ウロン酸ナトリウムの換算係数）
換算係数の求め方：グルコース，アラビノース，グルク
ロン酸ナトリウムの標準溶液をフェノール硫酸法で発色させて検量線を作成し，それぞれの傾きを求め，次式に従って換算係数を求める．
ペントースの換算係数

!
"
#

＝

アラビノースの検量線の傾き
グルコースの検量線の傾き

ウロン酸ナトリウムの換算係数＝

グルクロン酸ナトリウムの検量線の傾き
グルコースの検量線の傾き③ 多糖類の算出：SDF，水不溶性非セルロース多糖類，
セルロースの量は各多糖類由来の単糖の量を，次式にあて

２．
１ 食品成分試験法

を組み合わせた定量法である．精度はかなり高いが，煩雑な操作があり，１検体の分析に５日間を要する．しかし，この方法
では水溶性の難消化性多糖類の定量が可能ということから，食物繊維の全容を評価することができる．
この方法は１
９６９年に発表されたのち，Southgate によっても一部修正され，また追試者によっても改良されているため，
ここに採用した方法は Southgate の変法とした．本法による試
験溶液の調製をフローシートで示す（図 I）．

はめて求める．
各多糖類（mg）＝ ヘキソース値×０．
９＋ペントース量×０．
８８＋ウロン酸ナトリウム量×０．
８１
試料中各多糖類の含有量
（％）
＝

197

各多糖類重量
（mg）
W２
×
× 100
W１
S（mg）

S ：メタノール処理試料のうち試験溶液の調製 ②に使用した重量
（２
０
０〜３
０
０mg）
W１：メタノール処理前の試料重量
W２：メタノール処理後の試料重量④ リグニンの定量：風乾したリグニンをさらに７０℃で一夜恒量になるまで乾燥し重量を求める．次に電気炉
（５
０
０
℃）
で灰化し恒量になってから重量を求める．
試料中のリグニン含有量（％）
W２
灰化前重量（mg）−灰化後重量（mg）
＝
×
×１
０
０
S（mg）
W１
S ：メタノール処理試料のうち試験溶液の調製 ②に使用した重量
（２
０
０〜３
０
０mg）
W１：メタノール処理前の試料重量
W２：メタノール処理後の試料重量【注解】２）Boehringer Cat. No．
１５０４３
６，
１，
４−α−D−glucanglucohyd（EC３．
２．
１．
３），多糖類のα−１，４−とα−１，６−結合を加水分
rolase４U／
解する．至適 pH は約５，濃度は１０±１mg／m l ，活性は１mg（２５℃において基質にグリコーゲンを用いた場合），４℃ で２４ヶ月間安定である．市販品はセルラーゼ活性の有無に関する表示がない．したがって，グルコアミラーゼを使用する前に，セルラーゼ活性を測定し，使用の可否を確認しておく．
セルラーゼ活性測定法：結晶セルロース（Avicel）
０．
２g を５００）
０．
４
ml の遠心管にとり，水６ml ，２mol／l 酢酸塩溶液（pH５．
ml およぴアミログルコシターゼ硫安懸濁液１ml を加えよく混和し，トルエン２滴を加え３
７℃で１８時間インキュベートす
１８０
０×g（約３５００rpm）でる．次に水３０m l を加えよく混和し，（孔径０．
４５１０分間遠心する．上清の一部を異物ろ過フィルターμm）にかけるか，または，ろ紙 No．
５C でろ過したろ液１m lをフェノール硫酸法（本文参照）で発色させて，グルコース量を求める．対照試験は酵素溶液のかわりに水１m l を用い，他は同様の操作をする．
遊離したグルコース量（mg）
検量線から求めたグルコース量（μg）

１）サウスゲート（Southgate）
法は試料中の多糖類を系統的に分別し，各区分の個々の糖について測定するという分別と定量

＝

×３
７．
４
１０００

試 料
熱メタノール処理
メタノール処理試料（0.2〜0.3 g）
デンプンの糊化
酵素
エタノール
残 さ

上 清

熱水抽出
上 清
エタノール

残 さ

残 さ
C，2.5時間
0.5 mol / l H2SO4，100 °
エタノール
上 清
100 mlヘキソース，ペントース，
ウロン酸定量用試験溶液（水不溶性非セルロース多糖類に相当する）

0.5 mol / l H2SO4，100 °C，2.5 時間
25 ml
ヘキソース，ペントース，
ウロン酸定量用試験溶液（水溶性非セルロース多糖類に相当する）

残 さ
72％H2SO4，0〜4 °C，24 時間ろ 液
残 さ（リグニンに相当する）

100 mlヘキソース，ペントース，
ウロン酸定量用試験溶液（主にセルロースに相当する）

図 I 試験溶液の調製操作の概略

198

２．飲食物試験法
1.0
グルクロン酸ナトリウム
グルコース

0.8

1.0

グルクロン酸ナトリウム
グルコース

0.8

アラビノース

0.6

吸光度

吸光度

アラビノース

0.4

0.4

0.2

0.2

0

0
0

10

20
30
40
濃 度（μg/ml）

50

図 II カルバゾール硫酸法によるグルクロン酸ナ
トリウムの検量線とグルコースおよびアラビノースの呈色
1.0
グルクロン酸ナトリウム
グルコース

0.8

アラビノース

吸光度

0.6

0.6

0.4

0.2

0

0

10

20
濃

30
40
度（μg/ml）

50

図 III フェノール硫酸反応によるグルコースの検量線とグル
クロン酸ナトリウムおよびアラビノースの呈色

３）低分子の糖類，脂質，色素，ワックスを除去する．
４）風乾または凍結乾燥し，必要があれば乳鉢などで粉砕し，２０mesh のふるいを通過する試料を用いる．ただし，細かくなりすぎると操作が困難となる．
５）メタノール処理で除かれた物質の重量を求めておいてメタ
ノール処理試料量を出発物質の試料量に換算するときに用いる．
６）試料を静かにかくはんして，試料中のデンプンを完全に糊化させることが必要である．
７）全体が白濁して沈殿物が生成し難い場合は，HCl l〜２滴を入れ，pH２〜３にすると沈殿物が生成しやすい．
８）pH メーターを使用する．
９）セルロース，リグニンは５０％ エタノールで不溶物となる．
１０）東洋ろ紙 GA２００をしき，あらかじめ電気炉
（５
０
０℃）
で３
時間加熱処理しひょう量しておく．５
００℃を超えると，ろ紙が溶融するので注意する．
１１）液性により呈色度に差が出るので，試験溶液は中性にしておく必要がある．ただし，水不溶性非セルロース多糖類の試料の場合は，エタノールが２０％ 存在しても，呈色度への影響はない．共存する糖により，呈色がプラスに妨害される．このことは〔注解〕１２），１３）および１４）で記述するが，フェノール
硫酸法で呈色した場合だけ補正することにした．したがって，ウロン酸が少なくヘキソースが多い試料でのウロン酸の含量，

0

10

20
30
40
濃 度（μg/ml）

50

図 IV オルシン鉄塩酸法によるアラビノースの検量線とグル
コースおよびグルクロン酸ナトリウムの呈色

およびペントースの含量が少なくウロン酸が多い試料でのペントースの含量は真の値からはずれることに注意する．
１２）グルコースはグルクロン酸ナトリウムの１８％ 呈色し，アラビノースはほとんど呈色しない（図 II）．
１３）ヘキソースのほかにペントース，ウロン酸も呈色するので，これらによる影響を補正するために，グルコース，アラビ
ノース，グルクロン酸ナトリウムの検量線を作成し補正しなけ
ればならない．アラビノースはグルコースの８７％ 呈色し，グ
ルクロン酸ナトリウムは１９％ 呈色する（図 III）．
１
４）グルクロン酸ナトリウムはアラビノースの１４％ 呈色し，グルコースはほとんど呈色しない（図 IV）．
１
５）ここで得られたフェノール硫酸法による値は補正しなけ
ればならない．
１６）フェノール硫酸法で得た値にはヘキソースのほかにペントース，ウロン酸も含まれる．したがって，ペントース値とウ
ロン酸値を差し引いてへキソースの定量値とする．

2.1.4 脂 質
2.1.4.1 粗 脂 肪（１）ジエチルエーテル抽出法による定量（１）−１ 一 般 法
本法は穀類，種実類，豆類などの粉末にしやすい食品に適用される．
〔装 置〕① ソックスレー脂肪抽出器（図 2.1.4−1）
１）② 円筒ろ紙〔試験操作〕粉末にした試料２〜１０g２）を精密にはかり，
円筒ろ紙中に入れ，試料上に脱 脂 綿 を 一 つ ま み 軽 く 詰め３），適当な容器に入れ，１００〜１０５℃の乾燥器中で２〜３時間乾燥し４），デシケーター中に放冷したのちソックスレ
ー抽出器の抽出管に入れる．
受器 A５）に脱水したジエチルエーテル６）
１／２容量を入れ，装置を組み，８時間抽出する．抽出終了後，手早く抽出管を冷却器から取り外し，円筒ろ紙をピンセットで抜き出し，ただちに冷却器を接続して水浴上で加温する．受器中のジエチルエーテルがほとんど全部抽出管に移ったとき，受器

282

２．
２ 天然有毒物質試験法

２）アフラトキシン１）【注解】１）アフラトキシンは Aspergillus flavus, Aspergillus parasiticus, Aspergillus nomius が産生する蛍光を有する発がん物質である．通常汚染物として扱われるのは，図 I に示した B１，
B２，G１，G２ および代謝物の M１，M２ である．発がん性が最も強いのは B１ で，ラット，マウス，アヒル，ニジマス，サケ，サルなどで経口投与による肝がんの発生が証明されている．
５ppb を含む飼料でラッ
Wogan らは，アフラトキシン B１１
トを６８週間飼育し，すべてのラットに肝がん形成を認めている（文献１）．またヒトでは，原発性肝がんの発症率が高い地域
で，食物のアフラトキシン B１ 汚染濃度から求めた摂取量と発生数の間に相関が認められている（表 I，文献１，２）．
このほかアフラトキシンは，Reye 症候群や Kwashiorkoru〔クワシオルコル（カシオコア）〕などの発生への関与が指摘されている（文献３，４）．
アフラトキシンは上記のように発がん性を含む強い毒性を有することから，試験に際しては実験者，実験室および器具などの取り扱いについて安全性確保に配慮する必要がある．実験者
は手袋，マスクおよび専用の実験着を着用し，皮膚などに付着

O

O

O
O

O

O

O

OCH3

O

O

B1
O

O

O

OCH3

O

OCH3
G2

O

O

O

O

O

O

O

G1

O

O

O

O

O

OH

OCH3
B2

O

O

O

OH

OCH3

O

O

M1

O

O

OCH3
M2

図 I アフラトキシンの B１，B２，G１，G２，M１，M２ の化学構造表 I ヒトの原発性肝がんの発症数とアフラトキシン
摂取量との関係
国

名

ケ
ニ
ア
タ
イ
スワジランドケ
ニア
スワジランドケニアタイ
スワジランドモザンビーク

地
域
および地名

摂取量a）
（mg／kg）

発生数b）

高原乾燥地区
ソ ン ク ラ ー
高 原 地 区
中 間 地 区
中 間 地 区
低地湿潤地区
ラチャブリー
低 地 地 区
インハンバン

３．
５
５．
０
５．
１
５．
８
８．
９
１
０．
０
４
５．
０
４
３．
１
２
２
２．
４

０．
７
２．
０
２．
２
２．
９
４．
０
４．
２
６．
０
９．
７
１
３．
０

a） 成人のアフラトキシン１日推定摂取量b） 人口１
０万当たりの年間の肝がん発生数させた場合は，ただちに０．
１〜０．
５％ の NaClO 溶液で洗い，次いで石けん，水で洗浄する．実験室には，ケモハザードベンチ，
アフラトキシン汚染をモニターするための暗室を備えることが望ましい．また，ビニールシートなどを敷き，実験終了後は１％
NaClO 溶液を噴霧し，安全に処理する．実験に使用した器具
類は０．
５〜１％ の NaClO 溶液に３時間以上浸してトキシンを分解したのち洗浄する．また，トキシンの飛散で汚染を拡大させないために，できる限り溶液状態で扱い，トキシン溶液は，非水溶性有機溶媒を除去したのち，１〜５％ の NaClO 溶液で分解処理したのち廃棄する．
文 献１）WHO：Environmental Health Criteria １
１, Mycotoxins,
WHO, Geneva（１９７９）２）van Rensburg, S.J.：in Mycotoxins in Human andAnimal Health, Rodricks, J.V. et al . eds., Pathotox
Publishers, Inc., p．
６９９
（１
９７
７）
３）Shank R.C.：in Mycotoxins and N―nitroso compounds, Shank R.C. ed., CRC Press, p．
１０７
（１
９８
１）
４）Olson, L.C. et al .：Amer. J.Dis.Child., １２０，１
（１
９７
０）

（１）高速液体クロマ ト グ ラ フ ィ ー に よ る 定 性 お よ び
２）
定量１）
本法は穀類，
豆類，種実類，香辛料類およびそれらの加工品のアフラトキシン B１，B２，G１ および G２ に適用できる．
〔試 薬〕① アフラトキシン標準品３）：B１，B２，G１，G２：
純度９
８．
０％ 以上
② アフラトキシン標準溶液４）：トルエン・アセトニト
リル（９：１）
またはアセトニトリルに溶かし，アフラトキシ
ン B１，B２，G１ および G２ 各２０μg／ml の標準原液を調 製する．各原液１．
０ml を分取して合わせトルエン・アセト
ニトリル
（９：１）
また は ア セ ト ニ ト リ ル で２００．
０ml と する．さらにその５．
０ml を分取し，同様の溶媒で１００．
０mlとし，これをアフラトキシン混合標準溶液（B１，G１，B２，
G２：５ng／ml ）とする．
５）：冷暗所保存③ トリフルオロ酢酸（TFA）④ クリーンアップ用カートリッジカラム：逆相樹脂，陰イオン交換樹脂，陽イオン交換樹脂を混合したものを充てんしたシリンジ型多機能カラム６）〔装置および器具〕高速液体クロマトグラフ：蛍光検出器付き〔試験溶液の調製〕① 粉砕または細切した試料を穀類，
豆類および種実類の場合は５０．
０g をブレンダー容器または共栓付き三角フラスコにとる．これにアセトニトリル・
水
（９：１）
を１
０
０ml 加える．香辛料類の場合は２０．
０g をブ
レンダー容器あるいは共栓付き三角フラスコにとる．これにアセトニトリル・水
（９：１）
を１
６
０ml 加える．５分間ブレンドまたは３０分間振とう後，ろ紙でろ過または遠心する．ろ液５ml を多機能カラムに静かに加え，１分間１mlの流速で流出する．最初に溶出される流出液約１．
０ml７）を試験管にとり，試料溶液とする．
② 誘導体化：試料溶液０．
５ml をスクリューキャップ付きバイアルまたは１
０ml 共栓付き遠心管にとり，N２ 気流を送って溶媒を除去する．残留物に TFA８）を０．
１ml 加

22

１．
１ 機器分析法

オンの測定質量範囲を設定する必要がある．
SRM クロマトグラムを得るためには，プレカーサーイオン，
コリジョンエネルギー，コリジョンガス圧およびモニターする
プロダクトイオンを設定する必要がある．
１６）APCI LC／MS は，アミノ酸，ステロイド，アルカロイド，
ヌクレオシド，抗生物質，糖，ビタミン，ペプチド，農薬など
低中極性化合物の分析に適している．
１７）一般的に，APCI ではキャリブレーションを行わず，ESIで行ったキャリブレーションを使用する．
１８）試料分子をイオン化するために設定する．電圧の場合は２〜４kV，電流の場合は５μA が標準的とされる．
１９）試料分子の脱溶媒を促進させるために加熱する．移動相
流速によって異なるが，イオン源温度方式の場合で１５
０℃ 以下，
加熱キャピラリー方式の場合で１５０〜２５０℃ が標準とされる．
２０）試料分子の脱溶媒を促進させるために加熱する（４００または５００℃ 以下）．
２１）イオン源で噴霧する際，効率的に微細な粒子を生成させるために，移動相や試料とともに噴霧される N２ ガス，ネブラ
イジングガスの場合で毎時５５０L，シースガスの場合で８０psiが標準とされる．
２２）試料分子の脱溶媒を促進させるために使用される N２ ガス
は毎時１０
０L が標準とされる．
２３）移動相流速は毎分２mL 以下
文 献１）最新のマススペクトロメトリー，丹羽利充編，化学同人（１９９５）
２）LC／MS の実際，天然物の分離と構造決定，原田健一，岡尚男編，講談社サイエンティフィク（１９９６）３）バイオロジカルマススペクトロメトリー，上野民夫ら編，
東京化学同人（１９９７）４）Oka, H. et al .：J. Mass Spectrom. Soc. Jpn., ４
６，６
３（１９９８）
５）Nakazawa, H. et al . ： J. Chromatogr. B ，７
３
２，５
５
（１
９９９）
６）Yamashita, M., Fenn, J.B.：J. Phys. Chem., ８
８，
４
４
５
１
（１
９８４）
７）Yamashita，M.，Fenn，J.B.：J．Phys．Chem., ８
８，
４
６
７
１
（１９８４）
８）Kondo, F. et al .：J. Mass Spectrom., ３
２，
１
１
４
０
（１
９
９
７）
９）Horning, E.C. et al .：Anal. Chem., ４
５，
９３
６（１
９
７
３）
１０）Carroll, D.I. et al .：Anal. Chem., ４
７，
２
３６
９（１
９
７
５）

1.1.4 ガスクロマトグラフィー
ガスクロマトグラフィー１）は，固体または表面に液体をコーティングした固定相担体を詰めたカラムに試料の混合物を注入し，移動相として気体（キャリヤーガス）を流す
ことにより，固定相（固体または液体）と移動相（気体）に対する試料成分の吸着や分配などの親和性の差によって各物質を分離し，定性および定量分析する方法である．
本法は，気体試料のみならず気化しうる試料（有機塩素化合物，有機リン系農薬，フタル酸エステル類など）の分析に用いられる．
〔試 薬〕① キャリヤーガス：通常，He，N２，H２，Arなどが用いられる２）．

A

B

D

E

exit

C

G

F

図 1.1.4−1 ガスクロマトグラフの概略図
A：キャリヤーガス導入部および流量制御装置，B：試料導入部，C：
カラム，D：恒温槽，E：検出器，F：記録計，G：キャリヤーガスボ
ンベ② 試薬：測定の妨害になる物質を含まない試薬や溶媒，
たとえば「残留農薬試験用」などを用いる．
③ 標準物質および内標準液：本分析法に適した標準物
質が各種市販されている．標準物質とともに内標準として適切な物質を必要な濃度に溶媒に溶かした溶液を調製し，内標準液として使用する．
〔装 置〕キャリヤーガス導入部および流量制御装置３），
試料導入部４），カラム５），恒温槽６），検出器７）および記録計
またはデータ処理装置８）から成り，その概略は図 1.1.4−1に示すとおりである．必要に応じて燃焼ガス，助燃ガスおよび付加ガスなどの導入装置とその流量制御装置，ヘッド
スペース用試料導入装置９）などを用いる．
〔装置の操作〕分析目的に適したカラムを取り付け，装置の操作は機器の取扱い説明書の指示に従って行う．すな
わち，キャリヤーガスを適切な流量で流し，検出部，デー
タ処理装置を始動させ，試料導入部，検出器，カラム温度，
キャリヤーガス流速などを分析条件に合致するように設定，調整し，記録計に記録される数値が一定（安定）になってから１０），ゼロ点を調節する．
〔試験操作〕試料１１）（気体または液体）をマイクロシリン
ジを用いて試料導入部から注入し，カラムによって分離された成分を検出器を用いて検出し，その結果を記録計またはデータ処理装置を使用してクロマトグラムとして記録させる．標準物質についても，同様の操作を行う．
定 性：試料成分の保持時間と標準物質の保持時間が一致すること，および試料に標準物質を添加したのちのクロマトグラムが，保持時間は変わらずピークのみが高くなってピーク幅が広がらないことによって定性，確認を行う．
定 量：定量には，内標準法および絶対検量線法が行われるが，目的物質のピークに重なって分離できない妨害物
質が存在すると思われる場合には標準添加法による．
① 内標準法：内標準物質として，目的物質に近い保持時間を有し，試料から得られるいずれのピークとも完全に分離する安定な物質を選定する．内標準物質の一定量に目的とする標品（標準物質）を段階的に加えて，標品と内標準物質の比が異なる数種の溶液を調製する．この一定量ずつを注入して得られたクロマトグラムから，内標準物質の１．
１．
４ ガスクロマトグラフィー

ピーク面積（またはピーク高さ）に対する標品のピーク面積（またはピーク高さ）の比を求め，この比を縦軸にとり，標品の量を横軸にとって検量線を作成する．この検量線は，通常，原点を通る直線となる．次に，試料に検量線作成時と同量の内標準物質を加えた試料溶液を調製し，検量線作成時と同一の条件でクロマトグラムを記録させて，内標準
物質のピーク面積（またはピーク高さ）に対する試料中の目的物質のピーク面積（またはピーク高さ）の比を求め，先の検量線から目的物質の量を算出する（ １．
１．
１ 図 XII b
（p．
９）参照）
．
② 絶対検量線法：定量しようとする物質の標品（標準物質）を段階的にとって標準溶液を調製し，この一定量ず
つを正確に注入する．得られたクロマトグラムから，縦軸にピーク面積（またはピーク高さ）をとり横軸に標品の量をとって検量線を作成する．この検量線は，通常，原点を通る直線となる．次に，試料溶液について，検量線作成時と同一の条件でクロマトグラムを記録させ，目的物質のピーク面積（またはピーク高さ）を測定し，検量線を用いて

!
♂

!
♂

目的物質の量を算出する（ １．
１．
１ 図 XII a（p．
９）参照）．
この方法では，全測定操作を厳密に一定の条件に保って行うことが重要であり，特に，注入量の変動は定量値に直接影響を与えるので注意して行う．
③ 標準添加法１２）：試料液から一定量の液を４個以上の容器に正確にとる．このうちの１個を除いた残りの３個以上の液に定量しようとする目的物質の標準溶液を濃度が段階的に異なるように正確に加える．これらの混液および先に除いておいた１個の液を，それぞれ正確に一定量に希釈して測定溶液とする．これら測定溶液の一定量を正確に注入して得られたクロマトグラムから，それぞれのピーク面積（またはピーク高さ）を求める．それぞれの測定溶液に加えられた目的物質の濃度を算出して，標準溶液の添加による目的物質の増加量を横軸に，縦軸にピーク面積（またはピーク高さ）をとってグラフにそれぞれの値をプロット
して関係線を引く．関係線が横軸と交わる点と原点との距離から目的物質の量を求める（ １．
１．
１ 図 XII c（p．
９）参照）
．なお，本法が適用できるのは，絶対検量線法で検量線を作成するとき，検量線が原点を通る直線になる場合であり，全測定操作は厳密に一定の条件に保って行う．
【注解】

!
♂

１）ガスクロマトグラフィー（gas chromatography）は，ペーパークロマトグラフィーの生物学への貢献により１
９
５
２年にノーベル賞を受賞した A.J.P. Martin らが，低沸点化合物の分析を試みたところから始まり，現在の装置の原型は，N.H. Rayが１
９５４年に発表したものである．操作が簡便で特殊な技術を必要とせず，高分離能，高感度で再現性の高い結果が得られ，保守管理も比較的容易な分析装置である（文献１〜６）．
ステンレス，ガラスなどの管にアルミナ，シリカゲルなどを詰めて，移動相として気体を用いることにより試料中の成分物質を分離，検出するものである．種々の性質を有する吸着剤を詰めた充てんカラム（packed column）が開発されており，最近は，内径０．
１
０〜０．
７５mm のガラス製または溶融シリカ製の管の内側に液体を保持させたカラムがよく用いられ，キャピラ
リーカラムと呼ばれている．カラムに充てんされているものや

23

キャピラリーカラムの内壁に保持されているものを固定相という．カラムに導入される試料は気体または液体であるが，液体試料も注入口の温度が高温になっているため瞬時に気体になる
ので，固定相が固体の場合は気−固クロマトグラフィーといい，
試料は主に吸着現象によって分離され，気体や分子量の小さい
有機物の分析に用いられる．これに対して，固定相に液体を用いている場合を気−液クロマトグラフィーといい，現在用いられているカラムの多くのものが気−液クロマトグラフィーに基づいている．
２）キャリヤーガスは，９９．
９％ 以上または９９．
９９％ 以上の純度のものを使用する．H２ ガスを用いる場合は，引火の危険性があるので十分に注意する必要がある．キャピラリーカラムを使用する際は He が用いられることが多い．
３）ガスボンベ出口に二段切替式圧力調節器を付けて装置本
体が高圧にならないようにするとともに，流量調節弁および圧力計などによってキャリヤーガスを一定流量でカラムに送る．
４）試料の一定量をシリンジに正確にとり，試料気化室に注入する．注入口は耐熱性の合成ゴムパッキングから成り，気化
室はカラムより高温に設定して液体試料を瞬時に気化させる．
導入装置には，充てんカラム用とキャピラリーカラム用があり，キャピラリーカラム用試料導入装置には，注入した試料の一部だけをカラムに導入する分割導入（スプリット）方式と，注入した試料の全量をカラムに導入する非分割導入（スプリットレス）方式の装置がある．キャピラリーカラムの許容試料負荷量
は，充てんカラムと比べると約１／１００程度であるため，試料を過剰に負荷するとキャピラリーカラムの特性である高分離能が発揮できないことになる．そこで，気化室に注入され気化した試料成分をキャリヤーガスとともに一定の分割比で系外に放出し，一部のみをカラムに導入するスプリット方式が現在最も一般的に用いられている．希薄溶液試料については，スプリットレス方式により試料成分をカラムに導入する．
５）充てんカラムは，一定の粒度（大きさ）のガスクロマトグ
ラフ用充てん剤を不活性な金属，ガラスまたは合成樹脂などの管に均一に充てんしたもので，通常，内径２〜４mm，長さ１〜５m 程度のカラムが使われる．
気―固クロマトグラフィー用充てん剤としては，シリカゲル，
活性炭，活性アルミナ，モレキュラーシーブなどの無機系のものがあるが，多孔質ポリマー（ポーラスポリマー）が汎用されており，その特徴は極性化合物をそのまま分析できることである．市販品としては，Chromosorb１
０１, Porapak Q, Gaskuropack５４などがある．
気―液クロマトグラフィー用充てん剤には，通常，表面積の大きな不活性な担体に固定相液体を塗布したものが用いられ
る．担体としては，ケイソウ土が最も広く用いられており，
Chromosorb などの６０〜１
２０mesh のものが使われることが多い．液相は多くの種類があるが，大きく分けると無極性，弱極性，強極性に分けられる．無極性の液相としては，SE―３
０，SP
―２
１０
０などのメチルシリコン系のものがあり，極性の高い化合物の分離に適している．Carbowax２０M（ポリエチレングリコール２０M, PEG２
０M ともいう）は強極性の液相で，アルコー
ルや脂肪酸メチルエステルをはじめ，広い範囲の化合物の分離に使用されるが，使用できる最高温度があまり高くないので使用温度に注意する必要がある．メチルフェニルシリコン系の OV―１７や SP―２２５０などは弱極性の液相であり，前二者の中間の特性を持っている．
分析に使用するカラムの選択は，分離しようとする化合物を分析している文献に記載があれば，それと同じカラムかまたは特性の似たカラムを使用する．文献記載のない化合物を分離す24

１．
１ 機器分析法

フィルター

ガス出口

光電子
増倍管

*
C
N

キャリヤーガス

水素

空気
空気

図 II 炎光光度型検出器−＋

A

図 I 水素炎イオン化検出器
Cるときには，化学構造の似た化合物の分析に用いられているカラムを使用するのが普通であるが，いずれにしても試行錯誤で選択する．文献には，通常，２０％ PEG２
０M on Chro-mosorb
W AW８
０／１０
０mesh というように記載されている．これは，担体 と し て 酸 処 理 し た（acid washed, AW）Chromosorb W の
８０〜１００mesh のものを用い，これに液相として PEG２
０M を
２０％ コーティングしたものであることを示している．
キャピラリーカラムは，キャリヤーガスの通過性が良く，長さも１０m 以上と長くなって，単位長さ当たりの理論段数は充
てんカラムと変わらないため，全理論段数は充てんカラムの１０〜２０倍の値を示し，高い分離能を有するのが特徴である．最近
ではガラス製のものより溶融シリカ製のカラムが多く用いられるようになっており，管の内面にガスクロマトグラフ用の固定
相を均一に塗布して保持させ，中空構造にした固定相塗布式のカラムがよく用いられる．通常，内径０．
１０〜０．
７５mm，長さ１０〜１０５m のカラムが用いられるが，内径０．
５３mm や０．
７５mmのものはメガボアカラム，ワイドボアカラムなどといわれることもある．市販のキャピラリーカラムは，１９９０年ころまでは無極性の DB―１，弱極性の DB―５，強極性の DB–WAX などと限られた種類のものだけであったが，その後急速に開発が進み，現在では多種類のカラムが市販されている．極性の強い化合物の分離に，極性の強いカラムを使用した場合には吸着されて溶出してこないことがあり，カラムの選択法は，充てんカラムの場合と同様に構造類似の物質を分離している文献を参照して試
行錯誤によって行う．
通常，新しいカラムを使い始めるとき，または夾雑物の多い試料を注入したあとなどには，カラムを使用温度よりも少し高い温度に保ち，キャリヤーガスの流速を小さくして一晩流してカラムに吸着している物質を流出させる．このとき検出器との接続をはずしておくと，検出器を汚すおそれはなくなる．
６）必要な長さのカラムを収容できる容積を有し，カラム温
度を一定の温度に保つための温度制御装置を持つものである．
キャピラリーカラムを用いる場合は，恒温槽の温度制御が重要である．
７）カラムで分離された成分を検出するために必要な検出器を，その目的に応じて選択して使用する．主な検出器には，次のようなものがあげられる．
① 水素炎イオン化検出器（flame ionization detector, FID）

キャリヤー
ガス

S

図 III 電子捕獲型検出器：キャリヤーガスに H２ を混合してノズル（図 I の N）から流出させ，これに空気または酸素を送って H２ を燃焼させる．この
水素炎にカラムから流出してきたガスを導入すると，有機物が含まれているときには多量のイオンが生成されて電流が流れ，検出される．多くの有機物を高感度で検出できるので広く用いられるが，無機物は検出できない．
② アルカリフレームイオン化検出器（alkaline flame ionization detector, AFID）：FID の ノ ズ ル の 先 端（図 I の N）に
Rb２SO４，CsBr などのアルカリ塩のチップを付けたものである．
N や P を含む化合物を高感度で特異的に検出するので，NPDといわれることもある．
③ 炎光光度型検出器（flame photometric detector, FPD）：
物質が水素炎の中で燃焼するとき，S 化合物は S２＊，P 化合物
は HPO＊となって発光するのを検出するものである．S，P を含む化合物を高感度で特異的に検出する（図 II）．
④ 電子捕獲型検出器（electron capture detector, ECD）
：キャリヤーガス中で放射線源（６３Ni：β線を放出，図 III の S）とコレクター電極（図 III の C）の間に直流電圧をかけて流れる電流を一定になるようにする．ここにキャリヤーガスとともに電子捕獲性（吸引性）の物質（有機ハロゲン化合物，ニトロ化合物など）が入ってくるとイオン電流が減少して検出される．ハロゲン化合物とニトロ化合物に対して極めて高感度で，特異的に検出する．
⑤ 熱伝導度検出器（thermal conductivity detector, TCD）：
金属フィラメントまたはサーミスターを検出素子として使用
し，キャリヤーガスとは熱伝導率の異なる気体成分が通過する
ときの温度の差を，電気抵抗に変えて検出する．キャリヤーガ
ス以外のいろいろなガスの検出に利用できるが，検出感度は低い．
⑥ 質 量 分 析 計（mass spectrometry, MS）
： １．
１．
５（p．
２５）

!
♂

１．
１．
５ ガスクロマトグラフィー／質量分析法
参照．ガスクロマトグラフィーによる物質の定性分析は，通常，保持時間が一致することで確認されるが，質量分析計を検出器として用いることにより，より確実な定性を行うことができる．
８）検出器からの信号を記録し，さらに得られたデータを目的に応じて処理する装置である．
９）試料（液体または固体）をヘッドスペース試料用のバイア
ルに入れて密閉し，試料上部の空間に放出された気体をガスク
ロマトグラフに注入する方法をヘッドスペース法という．水試料中の微量有機成分の分析や，樹脂などの複合材料中の揮発性成分の分析に有用であり，気体を採取する前にバイアルを加熱することもある．
１０）高感度で分析する場合は，一定（安定化）になるのに数日かかる場合がある．このようなときはキャリヤーガスの流量を分析条件よりも少なくしたり，また，初めのうちはカラム温度
を分析温度より高く保っておくほうが，分析条件に合わせたときの平衡化が速い場合も多い．
１１）不揮発性の物質は，適切な試薬と反応させて揮発性物質に誘導体化して分析する．たとえばトリメチルシリル誘導体化
試薬は，多くの種類が市販されており，よく利用されている．
トリメチルシリル化剤のほかに，誘導体化する官能基の種類に合わせて種々の試薬が開発されている．揮発性とするだけでな
く，ECD で検出できるような誘導体を生成させて感度を上げて測定することもできる．
１２）操作は煩雑であるが，正確な測定値が得られる．
文 献１）亀岡 弘，吉江洋一：機器分析のてびき２ 第２版，化学
同人，p．
１
１（１９
９６）
２）柘植 新，大谷 肇：機器分析ガイドブック，日本分析化学会編，p．
７４７（１９９６）３）荒木 峻：ガスクロマトグラフィー 第３版，東京化学
同人（１
９８
１）
４）竹内次夫，柘植 新：新実験化学講座９，分析化学（Ⅱ），
日本化学会編，p．
６０
（１９７
７）
５）舟阪 渡，池川信夫編著：最新ガスクロマトグラフィー−基礎と応用，廣川書店（１９６９）６）Ray, N.H. : J. Appl. Chem., ４，２
１
（１
９
５
４）

1.1.5 ガスクロマトグラフィー／質量分析法
ガスクロマトグラフィー／質量分析法は，ガスクロマト
グラフィーによる分離と質量分析法による検出を結合した
ガスクロマトグラフ／質量分析計を用いて行う分析法である１）．微量物質のクロマトグラムとマススペクトル２）が得られ，定性分析および定量分析を行うことができる．
〔試 薬〕① キャリヤーガス（He ガスが多い）および試料調製用試薬：ガスクロマトグラフィーに用いる場合と同等の純度が保証されるものを用いる３）．
② 反応ガス９）や標準試薬４）：使用機器指定のものを用いる．
〔装 置〕① ガスクロマトグラフ／質量分析計５）：本機
は試料注入部６），分離部７），インターフェイス部８），イオン化部９），質量分析部１０）およびデータの保存と解析用のコンピューターを含むシステム制御部より構成される．
〔装置の操作〕① 装置の始動：ガスクロマトグラフに所定の操作に従ってキャリヤーガスを流し，次いで質量分析計の真空排気を行う．漏れがないことを確認してから，試25

料注入部，分析カラム，インターフェイス部の各温度を設定して昇温する．
② 質量分析部の調整：ガスクロマトグラフ部が安定化したのち，質量分析の調整を所定の操作に従って行う．
i ）イオン源温度およびゲインを指定値範囲内に設定する．
ii ）標準試薬を用いて，感度１１）の調整，分解能１２）の調整，
質量数の校正を行う．
〔試験操作〕初期条件としたガスクロマトグラフ／質量分
析計に試料を注入する．分析カラムから溶出した試料成分のすべてまたは一部のピークについて，質量分析部で検出し，得られたマススペクトルデータをコンピューターに保存する．これを用いて定性分析および定量分析を行う．
定 性：マススペクトルおよびトータルイオンクロマト
グラム１３）あるいはマスクロマトグラム１４）により行う．
定 量：定量分析にはマスクロマトグラムも利用できるが，一般的には選択イオン検出１５）を用いる．
内標準法：定量精度を向上させるために，試料に目的化
合物と構造が同一の安定同位体標識化合物を添加する１６）．
【注解】１）ガスクロマトグラフィーは，物質を移動相であるキャリ
ヤーガスとカラム固定相（液体または固体）の間の分布の差に基づいて分離分析する．その装置であるガスクロマトグラフは，試料の注入部，分析カラム，検出器から成り，分離性能は高い．
しかし，検出器のなかには特異性の高いものもあるが，分離された各成分を保持時間のみで同定するので，その信頼性は必ずしも十分ではない．一方，質量分析計は，微量でマススペクト
ロメトリーを行うことができ，同定の信頼性は極めて高い．これらガスクロマトグラフと質量分析計を結合した分析装置がガ
スクロマトグラフ／質量分析計であり，高い分離能と検出感度
ならびに優れた同定能を有している．
２）化合物をイオン化し，検出して得られたデータをコンピ
ューターで処理し，イオンの質量／電荷数を横軸に，イオンの強度を縦軸に示したものをマススペクトルという．最も強度の強いイオンピークをベースピークといい，他のイオンピークは相対強度（％）を用いて表す．マススペクトルは，その化合物に固有であり，分子構造に関する情報が得られるので同定分析に用いられる．この方法をマススペクトロメトリーという．一般に，正イオンのマススペクトルが分析に用いられるが，ハロゲン基やニトロ基を有する化合物，含リン化合物など電子親和性の高い化合物では，正イオンよりも負イオンのマススペクト
ルを用いる負イオンマススペクトロメトリーが有用な場合があ
る．
３） １．
１．
４
（p．
２２）参照
４）標準試薬として，質量分析部の感度の調整や分解能の調
整，質量数の校正を行うために，ペルフルオロトリブチルアミンなどを用いる．また，分析対象イオンの精密質量を求める場
合に，ペルフルオロケロセンなどの標準物質を用いる．
５）ガスクロマトグラフ／質量分析計の概略を図 I に示す．
６）試料導入部： １．
１．
４（p．
２２）参照
７）分離部： １．
１．
４
（p．
２２）参照
８）ガスクロマトグラフでは，カラムに He や N２ などのキャ
リヤーガスを流して大気圧で分離を行う．一方，質量分析計では，イオン源の内部を高真空に保たなければならない．この両者を結合する部分がインターフェイス部である．主なものにジ

!
♂

!
♂

!
♂

3生活用品試験法
3.1

器具・容器包装および玩具試験法

3.2

香粧品試験法4

環境試験法
4.1

水質試験法

4.2

鉱泉試験法

4.3

底質試験法

4.4

空気試験法

64

１．
２ 微生物試験法

り，最確数法にも応用できる．
２）滅菌注射筒の先に，市販の滅菌済メンブランフィルター（孔径０．
２０μm）ホルダーを装着して行うとよい．その他の試薬のろ過滅菌も同じ
３）吸引瓶も含めて，あるいはメンブランフィルターとファンネルを別々に滅菌する場合もある．後者の場合はホルダーを吸引瓶に取り付けたのち，メンブランフィルターとファンネル
をのせて固定する．なお，メンブランフィルターとろ過装置がセットになり，滅菌済みのディスポーザブルのものが市販されている．
４）培養後のフィルター上の集落数が約５０個となる量が最適
である．
試料量が２
０mL 以下の場合は，まず滅菌希釈水約３０mL を
ファンネルに注加し，それに試料を加えてからろ過する．
５）パッドとしては，厚手のろ紙，スポンジ，グラスフィル
ターなどが利用できる．
液体培地の吸収は，一般に滅菌済のパッドに滅菌済みの液体培地約２mL を静かに添加して行う．
しかし，試料数が多く，採取現場で試料のろ過が行える場合には，現場に滅菌したパッド入りのシャーレを携帯し，フィル
ターをのせて試験室に持ち帰り，パッドの外から培地を添加することもできる．このほうがフィルターと培地の密着度が観察できるので液量の調節が容易で迅速に操作でき，また運搬用の試料瓶などが不要などの利点があるためである．
６）細菌は，メンブランフィルターの孔から吸い上げられた栄養分を利用して，フィルター上で増殖して集落を形成する．
したがって，フィルターの下に空気が残らないようにフィル
ターと培地を十分密着させる必要があり，また，培養中にフィルターが乾燥しないように，密着度の良いシャーレを使用した
り，ふ卵器内に水を入れた容器を置くなどの注意も必要である．
培養後，フィルターを取り出し，集落のコントラストをつける
ために染色したり，集落を形成している細菌の性状を知るために各種試薬を用いた生化学テストや菌体成分に対する抗体を用いた反応をすることができる．また，そのままレプリカの鋳型とすることもできる．

４）染 色 法１）
菌体あるいはその構造物と選択的に反応する色素で試料標本を染色して，細菌の形態構造を光学顕微鏡で観察する．
（１）単染色法２）メチレンブルーを用いて，標本を染色し，大きさ，形態，
顆粒の有無などを観察する．
〔試 薬〕① メチレンブルー溶液３）：メチレンブルー約５ g を９５％ エタノール １
００ mL に溶 解する ．この溶液 ３０mL と０．
０
１％ KOH 溶液１００mL を混合し，ろ紙でろ過す
る．
〔装 置〕① 光学顕微鏡：油浸レンズ付き４）〔試験操作〕塗抹：清浄なスライドグラスに試料を塗抹する５）．
液体試料のときはそのまま，固体試料のときは前もってスライドグラス上に滅菌した水または生理食塩水を１滴のせ，その中に少量の試料を移して白金耳で懸濁し，塗抹する６）．この操作はスライドグラスをコルネット鉗子などで保持して行う７）．
乾燥：室温で放置して乾燥させる．

急ぐ場合もできるだけ温度をかけず，風を送る程度にする．
固定：試料塗抹面を上にして弱い炎の中をゆっくり数回通過させて，固定する．
染色：塗抹面にメチレンブルー溶液を滴下し，室温で約１分間染色する８）．
水洗・乾燥：水が直接試料塗抹面に当たらないように注意して，細い水流で洗液が無色となるまで染色液を洗い流したのち，十分に水を切り，ろ紙で軽くはさんで水分を吸収し，乾燥する．
検鏡：まず，低倍率で焦点を合わせ，視野を選択し，次いで，イマージョンオイルを少量つけ，高倍率の油浸レン
ズに切り換えて観察する９）．
（２）グラム染色法１０）
グラム陰性菌と陽性菌を，菌体成分と反応したクリスタ
ルバイオレットがエタノールにより脱色されるか否かによって染め分ける．
〔試 薬〕① グラム染色液１１）：クリスタルバイオレット
０．
３g を９５％ エタノール２
０mL に溶 解 す る．別 に，シ ュ
ウ酸アンモニウム０．
８g を水８０mL に溶解する．これらの溶液を混合し，一夜以上放置したのち，ろ過し，染色瓶に貯える．
② ルゴール液：I２１g と KI２g を乳鉢ですり混ぜ，完
全に水に溶解し，３００mL とする．
③ サフラニン溶液：サフラニン約２．
５g を９５％ エタノール１
００mL に溶解し，それを水で５〜１０倍に希釈する．
〔装 置〕① 光学顕微鏡：油浸レンズ付き４）〔試験操作〕塗抹・乾燥・固定：（１）単染色法に同じ
染色：塗抹面にグラム染色液を滴下して２０秒間〜１分間８）染色し，軽く水洗（２〜３秒間）する．
媒染：塗抹面にルゴール液を十分にかけて１分間作用させたのち，１〜２回水洗し，ろ紙で水を切る．
脱色，対比染色：塗抹面に９５％ エタノールをかけて軽くゆする．
洗液がほぼ無色になるまでこの洗浄操作を繰り返す（１分以内）．
水洗後サフラニン溶液で２０秒間〜１分間染色する．
水洗・乾燥・検鏡：（１）単染色法に同じ【注解】
１）通常の細菌の大きさは１〜１０μm であり，肉眼では観察できないので，個々の細菌の形態構造は光学顕微鏡や電子顕微鏡で観察する．通常，光学顕微鏡は染色して観察する．ここでは光学顕微鏡観察に汎用される色素を用いた方法を記す．メチレ
ンブルーやフクシンなどの塩基性アニリン色素がよく用いられるが，近年では酵素や蛍光抗体なども広義の染色剤として用いられている．
２）単染色法は染色法の基本となるものであり，色素液としてメチレンブルー液，石炭酸フクシン液，石炭酸ゲンチアナバ
イオレット液などが使われる．
３）細菌の単染色に汎用される Löffler のメチレンブルー液である．細菌と細胞の核を濃染するので，膿や喀痰などの試料に好適である．本色素液は長期間保存したものほど染色性が良い．
４）一般的な細菌の大きさは数μm 以下であるので，通常油浸レンズが必要である．

１．
２．
１細
５）スライドグラスは水をはじかないように清浄にする必要がある．したがって，指でガラス面に触れてはいけない．
６）試料の量は乾燥したときに薄く曇る程度がよい．また試料の菌体はできるだけ若い増殖時期のものを用いるほうがよい．
７）コルネット鉗子のかわりに，ピンセットや試験管挟みを使用することもできる．
８）染色時間は，菌や色素液の種類や状態により少しずつ異なるから，随時延長あるいは短縮して行う．
９）検鏡操作の中で最も難しく，また重要なのは焦点合わせである．
方法は，まず，対物レンズを横から目で見ながら，試料面にできるだけ近づけたのち，接眼レンズからのぞきながら何らかの影が見えるまで，粗動ノブをゆっくりと回して対物レンズを
試料面から離してゆく．その後，微動ノブで調節する．試料面と対物レンズの距離は×１０で約８．
３mm，×４０で約０．
７mm，×１００で約０．
１４mm である．低倍率での操作を省略することもできるが，最近の顕微鏡では低倍率の対物レンズで焦点を合わせれば高倍率でもほぼ合うようになっているので，視野選択の目的とともに，低倍率での焦点合わせを行ったほうがその後の操作は簡単である．
１０）染色機構の詳細は明らかではないが，グラム染色陽性菌と陰性菌で細胞壁が構造的，成分的に異なることに基づくもの
であり，物質の透過性が異なることを利用していると考えられている．グラム染色性が既知の菌種，たとえば，陽性菌として
Bacillus megaterium（桿菌）や Staphylococcus aureus（球菌）など，陰性菌として Escherichia coli（桿菌）や Pseudomonas
aeruginosa（桿菌）などを用いて十分に習熟する必要がある．
１１）ここに示したグラム染色液は Hucker の変法のものであるが，これ以外にも多くのものが知られている．試料の菌の種類や生理状態によって染色の程度が異なることもあるので，染色液の濃度や染色時間などを変えて試験してみるとよい．
たとえば，シュウ酸アンモニウム液で５〜１０倍に希釈して用いたほうがよいことも多い．

５）培 地（１）培地の調製
多種類の調製済み培地が市販されており，これらを使用する場合にはマニュアルに準じて調製するだけで十分である．
（２）培地各論１）
普通ブイヨン
普通寒天培地
標準寒天培地ブレインハートインフュージョン寒天培地
GAM 寒天培地
PGY 培地アルカリ性ペプトン水
BGLB（brilliant green lactose bile）培地
CEM 培地EC（Escherichia coli）培地
EEM（Enterobacteriaceae enrichment mannitol）ブイヨン（高圧蒸気滅菌不可）
ハーナ・テトラチオン酸塩培地（高圧蒸気滅菌不可）
肝片加肝臓ブイヨン
クックドミート培地

菌65

乳糖ブイヨンセレナイトシスチン培地（高圧蒸気滅菌不可）
食塩ポリミキシンブイヨン
チオグリコール酸塩培地（糖不含）
Lovett の培地（EB 培地）
SGP 培地（soluble starch―gelatin―polymixin medium）
ノボビオシン加 mEC（modified Escherichia coli）培地
RV（Rappaport―Vassiliadis）培地
カンピロバクター選択増菌用 Preston 培地
CMGS（chopped meat―glucose―starch）培地
TGC（thioglycoltate）培地
ビブリオ寒天培地（高圧蒸気滅菌不可）
ブリリアントグリーン寒天培地
BTB（bromthymol blue）ティーボール寒天培地
デオキシコレート寒天培地（高圧蒸気滅菌不可）
DHL（deoxycholate hydrogensulfide lactose）寒天培地（高圧蒸気滅菌不可）
EF 寒天培地（高圧蒸気滅菌不可）
EMB（eosin methylene blue）培地
カナマイシン加卵黄 CW（Clostridium welchii）寒天培
地
血液寒天基礎培地
血液寒天培地
卵黄加 KG（Kim―Goepfert）寒天培地
マッコンキー寒天培地
M―エンドウ培地（高圧蒸気滅菌不可）
M―エンテロコッカス寒天培地（高圧蒸気滅菌不可）
MLCB 寒天培地（高圧蒸気滅菌不可）
卵黄加 MYP（mannitol egg yolk polymyxin）寒天培地
卵黄加 NGKG 寒天培地
卵黄加 CW（Clostridium welchii）寒天培地
卵黄加マンニトール食塩寒天培地
スキロー改良培地
SS（Salmonella―Shigella）寒天培地（高圧蒸気滅 菌 不可）
TCBS（thiosulfate citrate bile salts sucrose）寒 天 培
地（高圧蒸気滅菌不可）
Oxford 寒天培地
PALCAM（polymyxin ― acriflavine ― lithium chloride ―cefazideme―esculin―mannit）寒天培地
BCYEα（buffered charcoal―yeast extract agar with

α―ketoglutalate）寒天培地
VAP（vancomycin―anisomycin―polymyxin B）寒天培地
WYO（Wadowsky―Yee―Okuda）寒天培地
SPS 寒天培地（SDS―polymyxin B―sucrose agar）
MMO―MUG（minimal medium ONPG―methylumbeferyl glucuronide）培地
CT―SMAC（cefixime tellurite-sorbitol MacConkey）寒天培地
酵 素 基 質 添 加 培 地（CHROM ０１
５
７寒 天 培 地，RAINBOW ０１５７寒天培地，BCM０
１５７寒天培地）
ASBA（ampicillin―sheep blood agar）培地

66

１．
２ 微生物試験法

CIN 寒天培地
AC 培地
ブドウ糖ブイヨン
ブドウ糖寒天培地
ブルセラブイヨン
ブルセラ寒天培地
デンプン水解用培地
エスクリンブイヨン
エスクリン寒天培地
Falkow 試験用培地
半流動寒天培地
KCN 培地KP（Kauffmann Petersen）有機酸塩培地
クエン酸塩培地i ）シモンズ・クエン酸塩培地）セレウス菌用クエン酸塩培地
クリステンセン尿素寒天培地
LIM（lysine indole motility）培地
マロン酸塩培地
Mφller 培地（アミノ酸脱炭酸試験用培地）
ペプトン水（好塩性試験用培地）
硝酸塩還元試験用培地
SIM（sulfide indole motility）培地
糖分解試験用培地i ）Andrade ペプトン水）糖分解用半流動寒天培地）セレウス菌用糖分解試験用培地）GAM 糖分解用半流動培地
TSI（triple sugar iron）寒天培地
VP（Voges―Proskauer）試験用培地

!

!
"
#

i ）VP 半流動培地）セレウス菌用 VP 試験用培地
ゼラチン液化培地
チオゲル培地Mueller―Hinton 培地
CLIG（cellobiose lactose indol β―glucronidase）寒 天培地
Cary―Blair 輸送培地
グリセリン保存液
TBX（Tryptone Bile X―glucuronide）寒天培地【注解】!

１）ここに示した培地の多くは混合乾燥粉末の状態で市販されている．市販の培地の品質は安定しているので，指示に従って一定量をはかり，水を加えて滅菌することにより，ほとんどの培養目的に支障なく使用できる．

６）生化学的試験（１）インドール試験１）
LIM 培地 もしくは SIM 培地 にて被検菌を培養したの
ち，Kovács のインドール試薬を重層する．嫌気性菌の場
合にはチオグリコール酸塩培地（糖不含）または GAM 糖

分解用半流動培地（被検糖を加えないもの）を用いる．陽性株では試薬層が赤変し，陰性株では変化がない．
Kovács のインドール試薬：p―ジメチルアミノベンズア
ルデヒド５g をイソ（またはノルマル）アミルアルコール
７５mL に溶かしたのち，HCl２
５mL を加える．
２）（２）ONPG 試験（β−ガラクトシダーゼ試験）
ONPG ブ イ ヨ ン：０．
５％ NaCl 加 ペ プ ト ン 水２
５mL に
ONPG 溶液２５mL を添加したもの
試験管に ONPG ブイヨンを２．
５mL ずつ分注し，被検菌を接種し培養する．黄色を呈すれば陽性である．
ONPG 溶液：ONPG（o―ニトロフェニル―β―D―ガラクト
ピラノシド）
６g を０．
０１mol／L リン酸水素二ナトリウム１
L に溶かし，pH を７．
５に調整する．
（３）VP（Voges−Proskauer）試験３）
約３mL の VP 半流動培地の入った小試験管を使用して被検菌を培養後，A 液０．
２mL，B 液０．
４mL を滴下し，室温で１時間放置する．試薬層が赤色ないし深紅色になった
ら陽性とする．
A 液：６％α―ナフトール・アルコール液
B 液：０．
３％ クレアチン加４
０％ KOH 溶液
４）（４）オキシダーゼ試験i ）普通寒天培地上に発育した菌にオキシダーゼ試薬を少量かける．陽性の場合はピンクを経て黒色に変色する．
オキシダーゼ試薬：１％ テトラメチル―p―フェニルレン
ジアミン水溶液）ろ紙にオキシダーゼ試薬をしみ込ませ，菌を塗る．
陽性の場合は濃紫色となる．
（５）硝酸塩還元試験５）
硝酸塩還元試験用培地に被検菌を接種，培養したのち，亜硝酸検出試薬 A 液，B 液を培養液１mL 当たりそれぞれ
０．
２mL 添加しかくはんする．３
０分以内に赤色となれば陽性である．赤色を呈しなければ亜鉛末を微量加える．赤色となれば被検菌は硝酸塩還元試験陰性であり，無色のままであれば陽性とする．
亜硝酸検出試薬 A 液：スルファニル酸０．
８g を５mol／L
酢酸溶液１００mL に溶解する．
亜硝酸検出試薬 B 液：N, N ―ジメチル―１―ナフチルアミ
ン０．
６mL を５mol／L 酢酸１
００mL に溶解する．
（６）カタラーゼ試験i ）新鮮斜面培養菌に３％ H２O２ 水溶液１mL を注ぐ．
気泡が多量にまた継続的に発生すれば陽性である．
）スライドグラスに３％ H２O２ 水溶液を１滴のせ，被検菌１白金耳をよく混合する．気泡が多量にまた継続的に発生すれば陽性である．
（７）リシン脱炭酸試験，オルニチン脱炭酸試験，アルギ
ニン加水分解試験６）
検 査 目 的 の ア ミ ノ 酸 を 加 え た Mφller 培 地 も し く は
Falkow 試験用培地に被検菌を接種し培養する．陽性株は数時間以内に黄色となったのちふたたび紫色にもどり，陰性株は黄色を呈する．ただし，リシン脱炭酸試験は LIM培地を用いても判定が可能で，培地が紫色の場合は陽性で
ある７）．

!

!

１．
２ 微生物試験法

産生し，対応する普通寒天培地培養菌の１．
２．
１．
１４（
）２）
グ
ラム染色法の結果がグラム陰性の無芽胞桿菌であった場合をふん便性大腸菌群陽性とする．
【注解】
１）大腸菌群の細菌のうちには前述（p．
７４）のように動物の腸管由来のものばかりでなく，自然界由来のものもあるので，食品によっては大腸菌群が汚染指標として適切でない場合がある．大腸菌（Escherichia coli）
はヒトや温血動物の腸管の常在菌で，自然界では比較的生存期間が短いので適切な汚染指標となるが，同定のためには IMVIC システムなどを実施せねばならないので，やや煩雑である．このような場合に工夫されたのがEC テストと呼ばれる方法でふん便性大腸菌（fecal coliform）
試
験といわれ，大腸菌群のうち E.coli が最も耐熱性が高いことを利用している．食品衛生法関連の試験法では E.coli と表現されている．IMVIC システムでは４４±０．
２℃ での耐熱性テストを行っているが ，本法ではやや条件を厳しくして ４
４．
５±０．
２℃ で
の培養を採用している．この温度を超すと E. coli でも増殖しにくく，またこれよりも低いと E. coli 以外の菌が増殖してくるので，温度制御は水浴を用いて厳密に行わなければならない．
なお，E.coli 以外の大腸菌群のなかにもまれにこの温度で増殖したり，ガス産生をするものがある．
２）培地の選択性が高く，厳しい温度条件も E.coli に対する特異性を高めるので，通常の定量試験においては EC 培地でのガス産生の有無のみで判定を行い，限度試験で行われるような確認試験は行わない．
食品衛生法における生食用のかき（凍結および生）の試験法に本法が採用されている．この場合には，試料２００g に同量の滅菌リン酸緩衝液を加えてホモジナイザーを用いて粉砕して試料原液とする．試料原液を５倍希釈することにより試料かきの１０倍希釈液を，さらに１０倍希釈することにより１００倍希釈液を調製する．試料原液２ml（試料かきの１g に相当），１０倍および１００倍希釈液をそれぞれ１ml ずつ５本の EC 発酵管に接種して試験し，試料１００g 当たりのふん便性大腸菌群の最確数を求める．食品衛生法では，かき１
００g 当たり２３０以下と規定されている．
３）食品衛生法で加熱摂取冷凍食品の一部（凍結させる直前に加熱処理をほどこさないもの）の試験法として採用されており，
試料０．
０１g 当たり E. coli（ふん便性大腸菌）
陰性と決められている．すなわち試料２５g に滅菌リン酸緩衝液２２５ml を加えてホモジナイザーで粉砕し，これをさらに１０倍に希釈して試料原液とし，その１ml ずつを３本の EC 発酵管に加えて本文に示した試験を行い，E.coli（ふん便性大腸菌）が検出されなければ合格（試料０．
０１g で陰性）である．

３）腸 球 菌１）（１）AC 培地による方法２）
この方法は菌数の少ない試料に適する．
〔試験操作〕定 性：試料を直接あるいは１．
２．
１．
１２）
試
料の採取および調製に従って前処理を行い，その１〜０．
１９ に接種して以下に示すように推定試験，
ml を AC 培地 ５◯確定試験，完全試験を行う．
① 推定試験：培地に試料を接種したあと，
３
６±１℃，４８±３時間培養する．培養後培地の濁りの有無を観察する．
濁りの認められないものは推定試験陰性とし，濁りを認めたものは細菌の増殖，試料の混入によるいずれの濁りにか79

かわらず推定試験陽性とみなし，次の確定試験に移る．
② 確定試験：推定試験で濁りを認めたすべての試験管から１白金耳を新しい AC 培地に移植し，４５±１℃ の恒温水槽で４８±３時間培養する．培養後培地に濁りを認めた
ものは陽性，濁りを認めないものは陰性と判定する．確定
試験陽性の場合は次の完全試験に移る．
③ 完全試験：確定試験陽性試験管から１白金耳をブド
１ に画線し，３ウ寒天培地 ６◯６±１ ℃，２４±２時間培養する．
培養後培地上に発生した集落を釣菌し，ブドウ糖ブイヨン
６０ に 接 種 し て３◯６±１℃，２４±２時 間 培 養 す る．さ ら に
６０ で３６±１℃，４８
６．
５％ NaCl を加えたブドウ糖ブイヨ ン◯±３時間培養して耐塩性を試験する．またブドウ糖寒天斜
１ で３
面培地 ６
◯
６±１℃，２４±２時間培養したものについてグ
ラム染色お よ び１．
２．
１．
１６（
）６）
カタラーゼ試験を行う．この結果，グラム陽性の球菌，カタラーゼ試験陰性で，６．
５％NaCl を加えたブドウ糖ブイヨンに発育する菌が検出されれば腸球菌完全試験陽性とする．
定 量３）：連続１０倍段階希釈した試料の各希釈段階を５９ に加え，定性の項に示した方法に従本ずつの AC 培地 ５◯って操作して腸球菌の有無を検査し，最確数表（表 1.2.1−
1，p．
６１）
により試料中の腸球菌の最確数を求める．試料の処理・希釈および接種量はそれぞれ１．
２．
１．
１２）
試料の採
取および調製および１．
２．
１．
１３（
）３）
最確数法に従って行う．
（２）M–エンテロコッカス寒天培地による方法
菌数の多い試料に適する．
〔試験操作〕定 性：試料を直接あるいは１．
２．
１．
１２）
試
料の採取および調製に従って前処理を行ったものを M―エ９４）に画線またはコンラージ
ンテロコッカス寒天平板培地 ３◯
棒で塗抹し，３６±１℃，４８±３時間培養する．桃色または赤色〜濃赤褐色の集落が認められれば推定試験陽性，着色集落が認められないときには推定試験陰性とする５）．
着色集落を釣菌し，１）AC 培地による方法〔試験操作〕
定性の項に示した方法に従って ② 確定試験および ③ 完全試験を行い，腸球菌か否かの判定を行う．
定 量：連続１
０倍段階希釈した試料の各希釈段階の一
定量を定性の項に示した方法に従って操作し，陽性菌数を計数 す る．試 料 の 処 理・希 釈 お よ び 接 種 量 は そ れ ぞ れ
１．
２．
１．
１２）
試料の採取および調製および１．
２．
１．
１３（
）２）
塗
抹平板培養法に従って行う．
（３）腸球菌の菌種鑑別試験法６）〔試験操作〕分離菌株を普通ブイヨン ① で３６±１℃，２４±２時間培養後，マンニトール，ソルビトールおよびアラ
９ i ）または ）に移
ビノースを加えた糖分解試験用培地 ７◯植して，３６±１℃，４８±３時間培養して培地が酸性色に変化したものを酸産生陽性として表 1.2.1–2 に従って菌種の同定を行う．
【注解】!

１）腸 球 菌 属
（genus Enterococcus）は か つ て 連 鎖 球 菌 属（genus Streptococcus）に含まれており，Lansfield の血清群 D群に属する S. faecalis, S. faecium, S. bovis, S. equinus のうちから S. faecalis と S. faecium が独立したものである．この２種はヒトや温血動物の腸管の常在菌であることから腸球菌

80

１．一般試験法

表 1.2.1−2 腸球菌の菌種鑑別
酸

産

検査材料

生

AC培地

マンニット ソルビット アラビノース
Enterococcus faecalis*E. faecium

＋
＋

＋
−

−
＋

* E. faecalis var. liquefaciens（ゼラチン液化），E. faecalis
var. zymogenes（β溶血性）も含まれる.

（enterococci）
として区別されていたが，広い温度域で増殖可能（１０℃ および４５℃ で発育）
であることを初めとして種々の生物学的性状でも他の Streptococcus とは異なっている．また DNA―DNA hybridization の結果でもかなり相違がみられるので，新しい属 genus Enterococcus が提案された（文献１）．
本菌はヒトや動物の腸管内に常在し，比較的大型のグラム陽性の球菌で通常双球菌状を呈するが，まれに短連鎖状になっているものもある．カタラーゼ陽性で，ブドウ糖，マルトースを分解して酸を生成する．また本菌の多くは乳糖，スクロースを分解する．０．
１％ メチレンブルー牛乳培地に発育し，６０℃，３０分の加熱に耐える．栄養要求が厳しく，多数のアミノ酸およびビタミン類を必須栄養素として要求する．
本菌は１０℃ あるいは４５℃，pH９．
６，６．
５％ NaCl 存在下など厳しい条件下でも生育可能であるので，これらは本菌の同定の 指 標 に な り 得 る．し か し１０℃ で の 発 育 に は 時 間 が か かり，４５℃ あるいは pH９．
６での発育は設定値が少しずれると誤った結果が得られるので，日常検査の指標としては必ずしも適しておらず，至適 pH，温度での他の生化学性状の検査が行われることが多い．本試験法では AC 培地による方法の確定試験に４５℃ での発育，完全試験に６．
５％ NaCl での発育を採用した．また，本菌は NaN３ に対して強い耐性をもつので，NaN３
存在下での発育が同定の指標になり，分離培地などに NaN３ を加えることにより選択性を高めている．
ふん便中の腸球菌の菌数は大腸菌の菌数よりも少ないといわれているが，大腸菌群の場合に比べて性状が類似した菌の自然界での分布が少なく，また外界での増殖率が大腸菌より低いのでし尿汚染指標としての意義はむしろ高いといえる．さらに冷凍条件下を始めとして乾燥，高温などにも強いので大腸菌群が死滅あるいは少数に減少していると思われる冷凍食品，乾燥食
品，加熱食品，環境水などでも腸球菌は耐えて生存している可能性がある．したがって，これらの食品では加工前の汚染状況
を腸球菌検査で推定することができ，むしろ大腸菌群検査より意義があると考えられている．
２）この方法は少数の菌が存在すると推定される食品や水の試験に推奨される．操作手順は図 I に示したとおりである．
３）通常最確数測定に際しては完全試験を行わず，確定試験の段階で陽性管数を求めて最確数を算出することが多い．
また BTB アザイドデキストローズブイヨン（ポリペプトン
２０g，酵母エキス５g，グルコース１
０g，NaCl５g，ブロムチモ
２５g，水１l ，pH７．
０）で の 酸 産
ー ル ブ ル ー０．
０
３２g，NaN３０．
生の陽性管数から直接最確数を求める方法も推奨される（文献
２）．さらに KF レンサ球菌培地（ポリペプトン１０g，酵母エキ
６
３６g，マス１０g，グリセロリン酸ナトリウム１
０g，Na２CO３０．
４g，フェノールレッド０．
０
１
８
ルトース２０g，乳糖１g，NaN３０．
g，水１l ，pH７．
２）もよく用いられている．
４）選択培地としては M―エンテロコッカス寒天培地のほか１ を用いることがある．
に，EF 寒天培地 ３◯
M―エンテロコッカス寒天培地上では E. faecalis は濃赤色〜赤褐色，E. faecium は桃色〜淡赤色の集落を形成する．

36±1 °
C，48±3時間発 育−〈推定試験陰性〉＋〈推定試験陽性〉
AC培地
45±0.5 °C，48±3時間
発 育−〈確定試験陰性〉＋〈確定試験陽性〉
ブドウ糖寒天培地
36±1 °
C，48±3時間
単独集落
ブドウ糖ブイヨン
36±1 °
C，48±3時間

6.5％ NaCI
ブドウ糖ブイヨン

ブドウ糖寒天斜面培地

36±1 °
C
48±3時間発 育36±1 °
C
24±2時間カタラーゼ（−）
グラム陽性球菌〈完全試験陽性〉

図 I AC 培地法による操作手順

一方，EF 寒天培地では E. faecalis は桃色またはえび茶色，E.
faecium は黄色の集落を形成する．
５）定性試験に際して，M―エンテロコッカス寒天培地上の着色菌の存在により腸球菌陽性と判定してもほぼ間違いなく，また定量に際しても通常は着色集落の計数のみが行われ，確定，完全試験は省略される．しかし，いずれの場合にも一部の集落を選んで確定，完全試験を行って確認しておくことが望ましい．
６）腸球菌の菌種（species）は表 1.2.1–2 に記した２種のみであるのでソルビットとアラビノースの分解性をみれば両菌種を判別できるが，他の Streptococcus との判別の意味でマンニットの分解性も試験する．
文 献１）Schleifer, K.H., Kilpper-Balz, R.：Int. J. Syst. Bacteriol., ３４， ３１（１９８５）２）橋本秀夫：モダンメディア，
１６，２９０（１９７０）４）標準平板菌数（一般細菌数）
試料中に存在する細菌のうち，中温で標準寒天培地に発育し得るものの総数を計算する．水試料の場合の一般細菌数に相当する．
〔試 験 操 作〕
１．
２．
１．
１３（
）１）
混釈平板培養法，または１．
２．
１．
１３（
）２）
塗抹平板培養法に従って操作する．ただし，以969

4.4 空気試験法
本試験法は，種々の環境における空気ならびに空気に関連した物理的，化学的あるいは生物学的諸条件を試験し，衛生化学的良否の判断をするために必要な資料を得ることを目的とする１）．
本試験法の対象とする空気環境は，以下のように分類される．
１．生活環境１）普通室内環境２）：住宅，事務所，学校，病院，宿泊施設，映画館，店舗，集会所，そのほか人が日常生活をする屋内ならびにそれに準じる場所の環境．
２）大気環境３）：屋外の自然環境．
３）作業環境４）：工場，事業場，坑道，倉庫，そのほかヒトが作業し労働する場所の環境．
４）排出源５）：空気環境を汚染する原因として，工場，事業場，燃料焼却炉，自動車などから排出される排煙あるいは排ガスがある．
【注解】
１）空気試験法を実施するに当たっては，空気が常に流動的な試験対象であることを考慮し，繰り返し実験を行うことが望ましい．また，データは平均値ではなく，個々のデータを併記することが望ましい．
２）普通室内空気の判定基準として，従来から日本薬学会協定衛生試験法に衛生化学的標準として掲載されていたものを表I に，建築物における衛生的環境の確保に関する法律（通称ビル
衛生管理法）によるものを表 II に，また，学校保健法の学校環
境衛生基準によるものを表 III に示す．
① 表 I による室内空気の判定項目のうち，汚染条件判定項
目は原則として CO２，じんあいおよび細菌とし，そのほか必要に応じて試験した項目を参考とする．各種試験項目の成績は，それぞれ測定値を該当する項目の判定基準表（表 I）に照らして，
それが A，B，C，D および E のいずれの階級に属するかにより，５：４：３：２：１の割合で評価し，採点して表示する．n 個としの試験項目それぞれの A 階級の得点を満点（t１，t２……tn）
たとき，各種試験項目の得点を t′
１，t′
２……t′
n とすれば，総合（t１＋t２＋……tn）／
として 算 出得点率は１
００×（t′
１＋t′
２＋……t′
n）される．衛生上，適ないし不適の判定は，得られた総合得点率
が８５以上，８４〜７５，７４〜６５を適（それぞれ優，良，可）とし，６４以下を不適とする．
なお，表 I の温度条件の判定に関する詳細は，衛生試験法・注解１９９０，付．
追補（１９９５）を参照．
② 揮発性有機化学物質による室内空気汚染による健康被害（シックビル症候群，シックハウス症候群，化学物質過敏症）
が社会的に問題となっている．厚生労働省では，この問題に対応するため「シックハウス（室内空気汚染）問題に関する検討会」
を設置し，１９９７年にホルムアルデヒドの室内空気汚染濃度に関する指針値を策定して以降，次々と可能性のある化学物質について検討した結果，２００
２年までに合計１
３物質と総揮発性有機化合物（TVOC）
について指針値が策定された．それらの化合物名と室内濃度指針値（３０分間平均値）
を以下に示す．ホルムアルデ
２
６mg／m３，キ シ レ ン０．
８
７mg／
ヒ ド０．
１mg／m３，ト ル エ ン０．

m３，パラジクロロベンゼン０．
２４mg／m３，エチルベンゼン３．
８２２mg／m３，クロルピリホス０．
００１mg／m３，
mg／m３，スチレン０．
２２mg／m３，テ ト ラ デ カ ン０．
３３mg／
フ タ ル 酸 ジ―n―ブ チ ル０．
m３，フタル酸ジ―２―エチルヘキシル０．
１２mg／m３，ダイアジノ
０４８mg／m３，フ ェ ノ
ン０．
０００２９mg／m３，アセトア ル デ ヒ ド０．
３４mg／m３．な
ブカルブ０．
０３８mg／m ，総揮発性有機化合物０．
お，WHO の室内濃度指針値も０．
１mg／m３ でわが国と同じである（文献１）．
３）① 環境基本法による大気汚染の環境基準および緊急時を
表 IV に記す．これらの環境基準は，すべてヒトの健康を保護する見地から定められたものである．また，気象状況の影響などにより大気の汚染が著しくなった場合を緊急時といい，一般
緊急時と重大緊急時の二段階になっている．
一般緊急時の汚染レベルに達したときは，都道府県知事は，その事態を一般に周知させるとともに，ばい煙排出者，自動車使用者に対して，ばい煙の排出量の減少または自動車の運行の自主的制限について協力を要請しなければならない．また，重大緊急時の汚染レベルに達したときは，ばい煙排出者に対して，ばい煙の排出量の減少について命令を発動（公安委員会に対する道路交通法上の処置要請を含む）しなければならない．
② 有害大気汚染物質は，ある暴露量以下では健康影響が起こらないとされる物質，すなわち閾値のある物質と，微量であってもがんを発生させる可能性が否定できず，閾値がない物質の二つに大別できる．閾値のある物質については，物質の有害性に関する各種の知見からヒトに対して影響を起こさない最大の量（無毒性量）を求め，それに基づいて大気環境基準を定める
ことが適切である．他方，閾値のない物質については，暴露量から予測される健康リスクが十分低い場合については，実質的には安全とみなすことができるという考え方に基づいてリスクレベルを設定し，そのレベルに相当する環境目標値を定めることが適切である．
大気汚染防止法の改正後の第２条第９項に規定する長期毒性を有する有害大気汚染物質は，長期毒性を有することや大気汚染の原因となり得ることを科学的に明らかにすることは実際上困難なことが多いが，四つの選定基準（大気汚染防止法の規制対象物質（表 V）および主として短期暴露による健康影響が問題とされる物質を除く）のいずれかに該当する物質として選定する．選定された２３４種の物質は，行政において物質の有害性，
大気環境濃度などに関する基礎的情報の収集整理に努めるとともに，事業者などは自主的に排出抑制に努めることが期待される．
有害大気汚染物質に該当する可能性のある物質の選定基準（文献２）：i ）国際がん研究機関，日本産業衛生学会，米国産業専門家
会議，米国環境保護庁が行っている発がん性の観点からの分類に該当する物質で，大気を汚染する可能性がある物質（ただし，物の燃焼などにより非意図的に生成される物質以外であり，年間生産量が１０００t 未満かつ大気中からの検出例のない物質は除く）．
）ドイツの大気質管理技術規則の対象物質，オランダの排出基準設定物質，米国の大気浄化法で排出基準設定またはする
予定の物質および WHO 欧州地域事務局が大気質ガイドライン
改訂作業の対象物質〔ただし書きは i ）と同じ〕．

!

970

４．環境試験法

表 I 普通室内空気試験成績判定基準表
成績表示区分
試験項目

季

節

A

B

C

D

E

) 冷房の *
+場 合+
,

２
４〜２
５
（２
５〜２
６）

２
６
２
３

２
７
２
２〜２
１

２
８
２
０

＞２
９
＜１
９

春 秋

２
２〜２
４

２
５
２
１

２
６
２
０

２
７
１
９

＞２
８
＜１
８

冬

２
２〜２
３

２
４
２
１〜２
０

２
５
１
９

２
６
１
８

＞２
７
＜１
７

５
０〜６
０

６
１〜６
５
４
９〜４
５

６
６〜７
０
４
４〜４
０

７
１〜８
０
３
９〜３
０

＞８
１
＜２
９

夏

０．
４
０〜０．
５
０

０．
５
１〜０．
７
４
０．
３
９〜０．
２
５

０．
７
５〜１．
０
９
０．
２
４〜０．
１
０

１．
１
０〜１．
４
９
０．
０
９〜０．
０
４

＞１．
５
６
＜０．
０
３

春 秋

０．
３
０〜０．
４
０

０．
４
１〜０．
５
７
０．
２
９〜０．
１
７

０．
５
８〜０．
８
２
０．
１
６〜０．
０
８

０．
８
３〜１．
１
５
０．
０
７〜０．
０
３

＞１．
１
６
＜０．
０
２

冬

０．
２
０〜０．
３
０

０．
３
１〜０．
４
５
０．
１
９〜０．
１
２

０．
４
６〜０．
６
５
０．
１
１〜０．
０
６

０．
６
６〜０．
９
９
０．
０
５〜０．
０
２

＞１．
０
０
＜０．
０
１

乾

６．
０〜７．
０

７．
１〜９．
０
５．
９〜５．
０

９．
１〜１
１．
０
４．
９〜３．
５

１
１．
１〜１
２．
９
３．
４〜２．
１

＞１
３．
０
＜２．
０

湿

１
８．
０〜１
９．
０

１
９．
１〜２
０．
９
１
７．
９〜１
５．
１

２
１．
０〜２
４．
９
１
５．
０〜１
２．
１

２
５．
０〜２
９．
９
１
２．
０〜９．
１

＞３
０．
０
＜９．
０

夏

２
２

２
３
２
１〜２
０

２
４
１
９

２
５
１
８

＞２
６
＜１
７

春 秋

２
０〜２
１

２
２
１
９

２
３
１
８

２
４
１
７

＞２
５
＜１
１

冬

１
９

２
０
１
８

２
１
１
７

２
２
１
６

＞２
３
＜１
５

普通の場合

＜０．
０
６
９

０．
０
７
０〜０．
０
９
９

０．
１
０
０〜０．
１
３
９

０．
１
４
０〜０．
１
９
９

＞０．
２
０
０

再循環式機械換気
実施の場合

＜０．
０
９
９

０．
１
０
０〜０．
１
３
９

０．
１
４
０〜０．
１
９
９

０．
２
０
０〜０．
２
４
９

＞０．
２
５
０

＜０．
０
９
９

０．
１
０
０〜０．
１
９
９

０．
２
０
０〜０．
３
４
９

０．
３
５
０〜０．
４
４
９

＞０．
４
５
０

浮 遊 粒 子 状 物 質（ mg ／ m３ ）

＜０．
０
９

０．
１〜０．
２
９

０．
３〜０．
９

１．
０〜１．
９

＞２．
０

細 菌 数（ 落 下 法 ５ 分 間 露 出 ）

＜２
９

３
０〜７
４

７
５〜１
４
９

１
５
０〜２
９
９

＞３
０
０

夏

温

気

気

温（℃）

湿（％）

度
気

動（m／sec）

条
カタ冷却力

件
感覚温度

℃

染

二酸化炭素

汚
条

無煙突暖房の場合（％）（主としてガス，石油ストーブ）

件

温度（気温，感覚温度）の実測値が小数点以下の端数の場合は，４捨５入した値で判定する．

表 II ビル衛生管理法による環境基準! 浮遊粉じんの量０ppm（厚生省令で定める特別の事情がある建築物にあっては，厚生省令で定める数値２０ppm）" 一酸化炭素の含有率 １以下# 二酸化炭素の含有率 １０００ppm 以下① １
７℃ 以上２８℃ 以下$ 温 度② 居室における温度を外気の温度より低くする場合は，その差を著しくしないこと% 相対湿度
４
０％ 以上７
０％ 以下
& 気 流
０．
５m／sec 以下
空気１m３ につき０．
１５mg 以下（粒径１０μm 以下のものについて）'）毒物および劇物取締法，化学物質の審査及び製造等の規制に関する法律（化審法），労働安全衛生法，水質汚濁防止法，
高圧ガス取締法により規制されている物質で，大気を汚染する可能性のある物質〔ただし書きは i ）
と同じ〕
．

(

）その他の科学的知見などにより，大気を経由してヒトへの健康影響の可能性がある物質（国際がん研究機関で２B 以上，
日本産業衛生学会で第２群 B 以上，米国産業専門家会議で A２以上および米国環境保護庁で B２以上に分類されている物質

４．
４ 空気試験法971

表 III 学校保健法による学校環境衛生の基準
検査項目

検査事項

照度および
照明環境

場所

照

度

条件

２
０
０〜７
５
０ルクス
（最大照度：最小照度 ＝１
０：１以下＊＊）（板書，
図書閲覧作業＊）

３
０
０〜１
５
０
０ルクス
（最大照度：最小照度 ＝１
０：１以下＊＊）（机上面）

コンピュータ設置，
５
０
０〜１
０
０
０ルクス
ワープロ，ディスプレ （画面などに反射や影が映らないこと）
ーなど使用

（テレビ，
ディスプレー
画面）
騒

騒音環境
および
騒音レベル

音

レ

教室などの 温熱および空気清浄度＊＊＊
空気環境

ベ

ル

ア）温

教室（生徒在室）

度

教室（授業中）１００〜５００ルクス（垂直面照度）

閉窓時

中央値 ５
０デシベル以下が望ましい

開窓時

中央値 ５
５デシベル以下が望ましい

いかなる時も

上限値 ６５デシベル以下が望ましい

冬期

１
０℃ 以上，１８〜２
０℃ が望ましい

夏期

３０℃ 以下，２５〜２８℃ が望ましいイ）相 対 湿 度

３０〜８０％ が望ましいウ）二酸化炭素エ）気１５００ppm（０．
１５％）以下が望ましい流

人工換気

１０ppm（０．
００１％）
以下が望ましいカ）浮遊粉じん０．
１０mg／m３ 以下が望ましい

ク）輻

射

気

１教室３点以上測定，５分露出

熱ア）ホルムアルデヒド

平均１０コロニー以下が望ましい

黒球温度計と乾球温度計の差 ５℃ 未満
が望ましい
（０．
０
８ppm）
以下であること１
００μg／m３（０．
２０ppm）
以下であること８７０μg／m３エ）パラジクロ
ロベンゼン

普通教室，
音楽室，
図工 夏期に行うことが望ま
室，コンピュータ教室， しい
体育館（授業を行う時
間帯，授業が行われている時は通常の授業時と同様の状態で，児童のいない時は窓を閉めた状態で採取する）

換 気 回

教室（幼稚園，小学校） ４
０人在室，
容積１
８
０m３

２．
２回／時以上イ）ト ル エ ンウ）キ シ レ ン

換

０．
５m／秒以下が望ましい

オ）一酸化炭素キ）落 下 細 菌

ホルムアルデヒドおよび揮発性有機化合
物

判定基準

教室，
図書閲覧室

数

２
６
０μg／m３（０．
０７ppm）
以下であること２
４０μm／m３（０．
０４ppm）
以下であること（中学校）

３．
２回／時以上（高等学校など）

４．
４回／時以上＊

局部照明で照度を得てもよい．
＊＊ やむを得ない場合でも２０：１を超えない．
＊＊＊ 自然環境ではア）〜ウ）の事項について検査を行い，必要に応じてエ）〜ク）を行う．人工的環境ではア）〜ク）
について行う．

で，わが国の大気中で問題となる可能性のある物質，地方公共団体が条令により大気中への排出を規制している物質，米国環境保護庁が自動車関連有害大気汚染物質として検討している物
質などで，自動車から排出されると考えられる物質，化学物質
安全性総点検調査の結果のうちで大気を経由してヒトの健康影
響の可能性のある物質）．
以上の要件に該当する物質とする．
③ 有害大気汚染物質に該当する可能性がある物質リスト（２３４種）の中から，有害性の程度やわが国の大気環境の状況などに鑑み，健康リスクがある程度高いと考えられる物質を優先
取組物質として２２種選定した〔アクリロニトリル，アセトアル
デヒド，塩化ビニルモノマー，クロロホルム，クロロメチルメ

チルエーテル，酸化エチレン，１，２―ジクロロエタン，ジクロロ
メタン，水銀およびその化合物，タルク（アスベスト様繊維を含むもの），ダイオキシン類，テトラクロロエチレン，トリク
ロロエチレン，ニッケル化合物，ヒ素およびその化合物，１，３―ブタジエン，ベリリウムおよびその化合物，ベンゼン，ベンゾ［a］ピレン，ホルムアルデヒド，マンガンおよびその化合物，６価クロム化合物〕．
優先取組物質の選定基準（文献３）：i ）一般環境または工場などの周辺環境において，オランダの大気環境目標値，米国環境保護庁の発がん性評価による１０−５
生涯リスク相当の濃度または WHO 欧州事務局の一般環境大気
質ガイドラインの１／１０の値，および日本産業衛生学会または

972

４．環境試験法表 IV 大気汚染に係る環境基準および緊急時
環境基準

一般緊急時

重大緊急時

０．
２ppm 以上３時間継続
１時 間 値 の１日 平 均 値 が０．
０４ ０．
３ppm 以上２時間継続
ppm 以下であり，かつ，１時間 ０．
５ppm 以上に達したとき
値が０．
１ppm 以下であること
４
８時間平均値が０．
１５ppm 以上に達したとき０．
５ppm 以上３時間継続
０．
７ppm 以上２時間継続

浮 遊 粒 子 状 物 質

１時 間 値 の１日 平 均 値 が０．
１
０mg／m３ 以 下 で あ り，か つ，１
２mg／m３ 以上２時間継続
時間値が０．
２０mg／m３ 以下であること

３mg／m３ 以上３時間継続

二素

１時間値の１日平均値が０．
０
４〜
０．
０
６ppm 以下であること

０．
５ppm 以上に達したとき

１ppm 以上に達したとき

光化学オキシダント

１時間値が０．
０６ppm 以下 で あ
ること

０．
１
２ppm 以上に達したとき

０．
４ppm 以上に達したとき

一

１時 間 値 の１日 平 均 値 が１０ppm 以下であり，かつ，１時間
３０ppm 以上に達したとき
値の８時間平均値が２０ppm 以下であること

二

酸

酸

酸

化

硫

化

窒

化

炭

黄

素

５
０ppm 以上に達したとき

表 V 大気汚染防止法における排出基準・指定物質抑制基準など
許容限度
q＝K ×１０−３H２e

ばい煙
１．硫黄酸化物（排出基準）

２．ばいじんq ：硫黄酸化物の許容排出量（m３N／h）
K ：地域別の常数（m）He：有効煙突高さ（排煙の吹き上げ効果による補正を行った排出口の高さ）
０．
０
３〜０．
５g／m３N
発生施設の種類および規模ごとに定められている．

３．有害物質１．
０mg／m３NCd
３０mg／m３NCl２
HCl
８０mg／m３N
F２，HF，SiF４ フッ素として１〜２０mg／m３N
発生施設の種類ごとに定められている．
Pb
１０〜３０mg／m３N
窒素酸化物
発生施設の種類，規模，新設・既設の別ごとに定められている（省略）
．

!
"
#
$
%
&

粉じん
指定物質

排出基準ではなく構造・使用・管理基準が設定されている（省略）．
抑制基準が設定されている．
（１
９
９
７年８月）

１．ベンゼン

新設
既設

施設の種類および規模ごとに施設の種類および規模ごとに

５
０〜 ６
０
０mg／m３N
１００〜１
５００mg／m３N

２．トリクロロエチレン

新設
既設施設の種類ごとに施設の種類ごとに

１
５
０〜 ３
０
０mg／m３N
３００〜 ５００mg／m３N

３．テトラクロロエチレン

新設
既設施設の設備ごとに施設の設備ごとに

１
５
０〜 ３
０
０mg／m３N
３００〜 ５００mg／m３N

４．ダイオキシン類
製鉄用電気炉

廃棄物焼却炉新設 ０．
５ng-TEQ／m３N
５ng-TEQ／m３N
既設
新設
既設

施設の規模ごとに ０．
１〜５ng-TEQ／m３N
施設の規模ごとに １〜１
０ng-TEQ／m３N

米国産業専門家会議の許容濃度の１／１０００の値のいずれかを超える濃度で検出されている物質およびこれらの物質に準じると考えられるダイオキシン類．
）国際がん研究機関で１に分類されている物質であって，'わが国の大気環境から検出されていることおよびわが国における生産・使用の状況からみて検出される可能性のあること．
以上の要件のいずれかに該当する物質とする．
これらの物質については，行政において物質の有害性，大気４．
４ 空気試験法

表 VI 優先取組有害大気汚染物質の発がん性評価と大気環境基準など
物質名

アクリロニトリル
アセトアルデヒド
塩化ビニルモノマー
クロロホルム１，
２―ジクロロエタン
ジクロロメタン
ダイオキシン類
テトラクロロエチレン
トリクロロエチレン
１，３―ブタジエンベンゼン
ベンゾ［a］
ピレン
ホルムアルデヒド
ニッケル化合物
ヒ素およびその化合物
ベリリウムおよびその化合物
マンガンおよびその化合物
６価クロム化合物

国際がん研究機関の発がん性評価
２B
２B
１
２B
２B
２B
２A
２A
２A
２A
１
２A
２A
１
１
１
−
１

大気環境基準など（μg／m３）（ダイオキシン類：pg―TEQ／m３）
EPA１
０−５

WHO 欧州事務局

環境省

０．
１
５
−
０．
４
０．
４
２
０
−
−
−
０．
０
４
１
−
０．
８
０．
０
４
２
０．
０
０
２
３
０．
０
０
４
２
−
０．
０
０
０
８
３

０．
５＊１

−
−
−
−
−
−
０．
６
２
０
０
２
０
０
−
３
−
−
−
−
−
−
−

−
１
０＊１
−
７
０
０
３
０
０
０
−
２
５
０＊２
２
２
３＊１，
−
２
１．
７＊１，
２
０．
０
０
０
１
１＊１，
１
０
０
０．
０
２
６＊１
２
０．
０
０
６
７＊１，
−
０．
１
５＊２
０．
０
０
０
２
５＊１

国際がん研究機関の発がん性評価の１は，ヒトに対して発がん性を示すこと，２はヒトに対して発がん性を示す可能性のある（２A：可能性高い，２B：可能性低い）ことを表す．WHO 欧州事務（米国環境保護庁）のユニットリスク１
０−５ レベル換算
局欄はガイドライン値を示し，＊１ は EPA
９
９
６年）
である．
値，また，＊２ は WHO 欧州事務局の改訂ガイドライン値（１表 VII 室内空気汚染物質の発生源
発生源
建築設備関係冷却塔
ガス・石油式開放型
燃焼器具
石炭式開放型燃焼器具
薪炊式開放型燃焼器具
イオン式空気清浄器
コピー機
加湿器
内装仕上げ材関係
パーティクルボード
天井タイル
塗料
コンクリート
石こうボード居住者の活動関係
ヒト・動物の代謝
清掃（掃除機）
清掃（洗剤）
殺虫剤
喫煙
趣味，工作
土

壌

汚染源

真菌，細菌
一酸化炭素，二酸化炭素，窒素酸化物，二酸化硫黄，アルデヒド類
同上＋粉じん
同上＋有機化合物
オゾン
同上
真菌，細菌

ホルムアルデヒド
同上＋アスベスト
非メタン系揮発性有機化合物，気化水銀，ホルムアルデヒド，
真菌，細菌，ダニ，粉じん
ラドン
同上

真菌，細菌，ウィルス，アレルゲン，アンモニア，有機ガス
粉じん，真菌，細菌
有機化合物
同上
粉塵，一酸化炭素，窒素酸化物，ホルムアルデヒド，シアン化合物，放射性元素，有機化合物ほか
有機化合物，粉じん，アスベスト
ラドン，レジオネラ菌ほか

973

974

４．環境試験法

環境濃度，発生源などについて体系的に詳細な調査を行うほか，事業者に対して排出抑制技術の情報などの提供に努め，事業者の自主的排出抑制努力を促進する．
これら２２種の優先取組物質のうち，わが国の大気環境基準が設定（２００
１年４月）されているのは４種（テトラクロロエチレン，トリクロロエチレン，ベンゼン，ジクロロメタン）であり，またダイオキシン類は大気環境指針値（１
９
９
７年９月）
が示され
た．
１８種の物質について国際がん研究機構の発がん性評価，米国環境保護庁（EPA）の リ ス ク ユ ニ ッ ト１０−５ レ ベ ル お よ びとWHO 欧州事務局のガイドライン（EPA１
０−５ レベル換算値）
ともにわが国環境省の大気環境基準などを表 VI に示す（文献４）．
４）作業環境の空気汚染は，５０００種類以上の化学物質により生じるが，それらによる労働災害の防止のための危険防止基準の確立やその防止に関する総合的な対策を推進することにより労働者の安全と健康を確保する目的で労働安全衛生法（１９７２年）が制定された．この法律に基づいた作業環境測定の結果から，当該単位作業所の作業環境管理の良否を評価する指標として，
有害物質の管理濃度がある．また，日本産業衛生学会が毎年勧告している許容濃度があり，労働者の有害物質による健康障害を予防するために，労働環境空気中の有害物質の濃度を評価するための判断基準となっている．この許容濃度は，労働者が１
日８時間労働するとして，連日有害物質に暴露される場合に，空気中の有害物質の濃度が許容濃度以下であれば，個人ごとに異なる感受性などを考慮してもほとんどの労働者に健康上の悪影響が見られないと判断される濃度である（文献５〜７）．
この許容濃度の値は，各物質測定項目の〔注解〕で記述する．
なお，米国では産業専門家会議（American Conference ofGovernmental Industrial Hygienists, ACGIH）
が同様の勧告値を出している．
５）① 室内については，タバコ煙，調理用のコンロやオーブン，暖房機，加湿器，事務機器，パーティクルボード，セメン
トボード，その他の建材からの汚染ガスなど，室内空気の質を決定する重要な発生源がある（表 VII，文献８）．
② 大気汚染防止法で定められている排出基準を表 V に示す．
表中の硫黄酸化物とは，燃料その他の物質の燃焼に伴い発生する硫黄酸化物をいい，物質の合成，分解その他の化学的処理に伴って発生する SO２ や SO３ は特定物質として区別される．また，表中のばいじんは，燃料その他の物の燃焼または熱源としての電気の使用に伴い発生するものをいい，物質の破砕，選別
その他の機械的処理または堆積に伴い発生する粒子状物質は粉じんとして区別される．
なお，ばい煙については表 V に見られるように全国一律の排出基準が制定されているが，そのうちのばいじんと有害物質とについては，都道府県は必要のあるとき（ヒトの健康を保護し，または生活環境を保全することが十分でないと認められる区域があるとき）
は，条例で一律基準よりも厳しい上乗せ排出基準を設定することができるようになっている．
③ ダイオキシン類は，ヒトをはじめ自然界の生物の生殖（内分泌）機能をかく乱する物質の一つであり，塩素原子を含む有機化合物から生成される．その摂取は，食品からが大部分（９７％）
であり，わが国ではそのうち６２％ が魚介類からといわれている．
ダイオキシンの耐用一日摂取量
（TDI）
は，１
９
９
８年の WHO 専（毒性等量）／kg／日から１〜４pg―
門家会合で従来の１０pg―TEQ
TEQ／kg／日に変更され，わが国でも厚生労働省と環境省が共同で見直し作業を行い，１９９
９年に当面の TDI を４pg―TEQ／kg／
日とした．一方，大気中の環境基準は，１９９７年９月に０．
８pg―
TEQ／m３N に設定されたが，１９９
９年１２月の環境省告示第６
８号
０
０
０年１月
で０．
６pg―TEQ／m３N とさらに厳しい基準となり，２

１５日より実施されている．また，ダイオキシン類の発生寄与率の高い廃棄物焼却施設等に対しても２
００２年１２月から厳しい排出ガスの基準が適用されており，その基準値は規模により異なるが，たとえば大型の４t／h 以上の焼却能力の炉に対しては，新設炉では０．
１ng―TEQ／m３N，既設炉では１ng―TEQ／m３N の排出基準が定められている．
文 献１）厚生労働省医薬局審査管理課化学物質安全対策室：シックハウス（室内空気汚染）問題に関する検討会中間報告書―第８回〜第９回のまとめについて，２００２年２月
２）大気環境学会：大気環境学会誌，３２，１
１
（１
９９
７）
３）大気環境学会：大気環境学会誌，３２，１２，１
５
（１
９９
７）
４）環境庁：環境庁報道発表資料，１９９８．
７．
１６５）桜井治彦：産業医学活動マニュアル，p．
４２
９，医学書院（１９９４）６）市川 勇，松村年郎：衛生化学，４３，１
６２
（１
９９
７）
７）日本産業衛生学会：産業衛生学雑誌，毎年第４号
８）池田耕一：室内空気汚染のメカニズム，鹿島出版
（１
９９
２）

4.4.1 試料採取法１）【注解】
１）大気環境：環境中のガス状物質を測定する場合の試料採取は，ヒトが通常生活し呼吸する面の高さで行うようにする．
通常地上１．
５m 以上１０m 以下の高さで行う．また，試料採取
点は，周辺の建物や樹木による吹き溜まりや乱気流の発生のない通気性のよい場所にする．
浮遊粒子状物質を採取する場合は，地上からの土砂の巻き上げなどによる影響を排除するため地上３〜１０m の高さで行う．
測定点の水平配置は目的によりさまざまである．たとえば，
ある特定汚染源の影響を調べるときは，その汚染源を中心にして同心円を描き，中心からの放射線と同心円との交点上に測定点を設定する．一般の大気汚染を調べる際には，特定の汚染源の影響を受けない，その地域の代表的試料を採取できる地点を選ぶ．
室内環境：普通室内環境，作業室内環境などがある．例として作業環境をあげると，測定基準が厚生労働省告示大４６号（昭和５１年，昭和６３年一部改定）に定められており，それによると，① 採取点は地上５０〜１５０cm とする．② １作業 場 所５点
以上で採取する．③ 作業が定常的に行われている時間帯において，１０分以上の平均値が得られるような採取法で採取する，などとなっている．実際のやり方としては，作業場所を，３m
四方の mesh に分割して mesh の交点で試料を採取する．
また，作業環境内のガスや粉じんの濃度分布は，時間および空間のいずれに対しても対数正規分布をするので，ある時間帯の，あるいは１作業場所内の平均濃度を求めるときは，算術平均でなく，幾何平均を求めるほうがよい．以上の諸点は，普通
室内環境の試料採取の場合でも同様である．
排出源：主として煙道，煙突その他の排出口から試料を採取する場合である．JIS に詳細に規定されており，JIS K００９５排
ガス試料採取法，JIS Z８８０８排ガス中のダスト濃度の測定方法
は必読すべきである．ガス状物質の試料採取の留意点は，①
煙道の曲がり角では，垂直断面のガス濃度が不均一になるので避けるなど，なるべく代表的試料が採取できるように注意する．
② 水分が採取装置の途中で凝縮すると，水溶性のガスの損失をきたし，誤差を生じるので，導管部分を試料の露点以上に加４．
４ 空気試験法

きい小球のほうが，風があるときに対流による放熱を受けやす
く低い測定値を得る．特に風により黒球温度計が揺れるときは強制対流を生じて測定値に強く影響するので，この場合にはしゃへい板などで風を避ける必要がある．
Vornon は黒球温度計の示度が暖かさの体感とよく一致するとし，実効輻射温 度（effective radiation temperature, ERT）
として黒球温度と気温との差をもって温度指数としたが，これは気湿，気動を考慮していないので体感温度指数としては不十分である．Bedford と Warner は，周囲壁体温度を平均輻射温度（mean radiation temperature, MRT）
として温度指数に用いたが，この測定に黒球温度，乾球温度および気動を用いた．
すなわち輻射体から放射される輻射熱をもとにし，それと同じ
輻射量を放射する黒体の温度を，その輻射体の MRT といい，
一般室内の場合は，
ΣSi×tiΣSi×ti＝ΣSiS
ti ：壁，天井，床などの表面温度（℃）
Si：表面温度 ti の面の表面積 m２で近似的に表される．
この MRT を黒球温度そのほかから次式により求める．
３
７ V（tg−td）
MRT ＝ tg＋２．
（℃）
tg ：黒球温度（℃）
td ：乾球温度
V ：気動（気流，風速）m／sec
MRT ≒

!

８）照 度
ある面の光で照らされる度合，すなわち入射光密度を照
（lx）
を用いる．
度１）といい，単位にルクス
照度の測定法２）には視覚による方法と物理的な方法とがあるが，実用照度計としては光電池照度計を使用する．照度の測定は特別の目的以外には水平照度をもって表す．
〔装 置〕① 光電池照度計：光電池３）A，直接ルクスを目盛った電流計 B，指針調節ネジ C，切替スイッチ D などからなり，電流計の目盛り４）は最高１
０
０
０，３
０
０
０，５
０
０
０lx
などいろいろあるから測定する目的により選択する．
すべて二段目盛りとなっており，切り替えスイッチ Dを切り替えて１０倍の目盛りを読むことができる（図 4.4.2–
9）．その精度はおよそ±１５％ 以下である．
光電池は長く使用していると疲れの現象が現れるから，ときどき検定する必要がある．

A

光
電
池
格
納
部

B

C
短
絡

D

図 4.4.2–9 照度測定装置

５）照度計を水平に置き，まず切り替えスイッ〔試験操作〕

チ D を短絡に合わせ，調節ネジ C を動かしてメーター Bの指針が正しくゼロになるようにする．次に光電池 A を測定する光に数分間あてたのち，切り替えスイッチ D を
１０倍目盛りに合わせ，メーター B の指針の示度を読む．
もしその読みが小さいときは，切り替えスイッチ D を切り替えて低い目盛りの示度を読む．
【注解】
１）照度とはある光源により照らされた場所の明るさで，その強さは光源からの距離の２乗に反比例する．
（lm）の光束を受け１ルクス（lx）とは１m２ 当たり１ルーメン
たときの明るさ１ lx＝１lm／m２ である．また１lx は１カンデラ（光度の単位 cd）の点光源から１m の距離における明るさに相当する．
読書や仕事をするときに明るさ暗さを感じるのは，照度より（ニも光度，すなわち輝源で照らされている面の明るさ cd／m２
トまたはスチルブ）が問題となるが，輝度の測定は複雑なので
通常照度の測定をもって代用している．
物を見るときの必要な条件としては，光の強さ，光の方向，
光の質，げん輝，対比，物の大きさに応じての距離などがあり，
これらの条件が変わることにより見え方も変わってくるので，照明は単に明るさという一条件を表すものに過ぎないことを考えねばならない．
環境の明るさがヒトの精神性質や日常生活に与える影響は極めて大きい．室内の明るさが適切でないと近視，能率低下，疲労，不潔，災害，職業病などの原因になる．図 I は適性照度を主観的快適性に基づいて示したもので照明学会が心理的手法を用いて見えやすさの計量化を行ったものである．
JIS Z９１１０では人工照明について照度基準を示している．照明環境としては照度とその分布，グレア，かげ，光色なども考慮しなければならないが，JIS では照度について広範囲な基準を設けている．基準の詳細については JIS を参照．なお，衛生

100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
10

読みやすさ

２）太陽輻射の室内外における温熱効果，暖房の輻射効果あ
るいは熱源の存在する作業場の温熱条件などについて熱輻射量の測定は重要である．熱輻射量を湿球黒球温度指標（wet-bulb
globe temperature index）
で示した場合，作業内容にもよるが，許容基準として日本産業衛生学会（１９
９
８）
では２
６．
５〜３
２．
５℃，
ACGIH
（１９９
７）では２５．
０〜３
２．
０℃ が勧告されている．
熱輻射量を測定する計器は，いずれも赤外線を受けて吸収する物体を検出素子とし，この物体の赤外線吸収による温度上昇
を温度計により，あるいは電気的に測定するものである．
３）黒球温度計は，H. M. Vornon が温度感覚に及ぼす熱輻
射の影響を測定するために考案したものである．アメリカでは
径８inch のものが使われている．
４）黒球温度計の示度は，熱輻射，対流，伝導による熱収支が平衡に達したとき安定する．したがって，表面積の割合が大1011

感覚を表す言葉
非常に
読みやすい

10
9
8
7
6
5
4
3
2
1

読みやすい
だいたい普通に読める
細かいところまで
完全には見えない

活字の大きさ（mm）

読めるけれど
努力を要する20 30 50 70 100 200 300 400 700 1000
照度（lx）

読めると読めないとの境目0見えると見えないとの境目文字と周囲との輝度対比約80％，観察距離30cm

図 I 照度と読みやすさとの関係

1012

４．環境試験法

表 I 事務所の採光，照明の衛生基準（労働安全衛生法）
精密な作業 ３００lx 以上とすること
照 度

普通の作業 １５０lx 以上とすること

採光・照明

粗な作業

７
０lx 以上とすること① 明暗の対照を少なくすること（局所照明と全般照明を併用）

局所照明に対する全般照明の比は約１／１
０以上が望ましい② まぶしさをなくすること

光源と眼とを結ぶ線と視線とがなす角度は
３０度以上が望ましい

採光・照明の方法

６カ月以内ごとに１回以上とすること

試験法・注解１
９
９
０，付．
追補
（１
９
９
５）
p．
１
２
９
６〜１
２
９
９にその一部が掲載してある．
また労働安全衛生法，事務所衛生基準規則における照度基準
は，労働者の安全と衛生を目的とした常時就業場所の最低基準であり衛生基準を表 I に掲げる．
表中の照度は，主として作業面（一般には床上８５cm，椅子作業７５cm，立作業１００cm，座作業のときは床上４０cm，廊下・
屋外などでは床面または地面）
における水平面照度を示すが，作業内容により鉛直面または傾斜面の照度を示すものもある．
また，作業場所によっては，局所照明を併用することにより基準値の照度を得てもよい．しかしこの場合でも全般照明の照０以上であることが望ましい
度は，局所照明による照度の１／１とされている．具体的な作業場所については JIS を参照．
隣り合った室，室と廊下などの照度の差を，著しくないようにする．特に昼間屋外に通じる入口付近の内部は，屋外の自然光による照度が数万 lx にもなり，目がそれに順応しているため暗く見えるので，鉛直面照度を１００lx 以上にすることが望ましい．
適正照度を維持するために光源に対しては，点灯しなくなったものはもちろん，一定限度まで暗くなったものは有効寿命がきたとして速やかに新品と取り替える．また照明方式や照明器
具の種類により汚れ方も違うが，定期的に掃除すべきである．
２）視覚測光法にはマクベス照度計，労研照度計など，物理測光法には光電池式，光電管式，光電子増倍管などを使用する．
通常光電池照度計を用いる方法が適当である．
この照度計には JIS C１
６
０９により規格が定められ，通常，セレン（Se）光電池が用いられている．光電池にマイクロアンメー
ターを接続して，光電流を照度で目盛ってあるので，直読できる点で簡易型照度計として便利である．なお測定範囲を拡げる
ために，直列，並列に抵抗を接続し，その接続の組み合わせにより二重または三重目盛りとすることができる．必要あれば減光フィルターを付けてさらに測定範囲を広げることができる．
３）光電池については，JIS では透明な導電薄膜と半導体薄層とで被覆された金属板であり，光の照射により起電力を発生するものをいうと規定されており，用途により Se や CdS など

半透明金属膜（0.05 mm厚）

光
セレン半導体層電極

鉄製基盤
透明プラスチック
電流計

図 II セレン光電池

感度（％）

照明設備の点検

100 セレンろ光板を組合わせ80 光電池たセレン光電池
60
40
20
視感度
0
400 450 500 550 600 650 700 750
波長（mμ）

図 III セレン光電池の感度曲線が用いられているが，通常セレン光電池を使用する．
セレン光電池は図 II のように鉄板の上に厚さ約０．
１mm の不透明な Se 結晶膜の層があり，その上に金あるいは白金の半透明薄膜を蒸着させたもので，薄膜に光を当てると Se から放出された電子は金属薄膜のほうに流れるので，鉄板と金属薄膜とに取り付けた電極との間に電位差を生じ，これを電流計により測定する．セレン光電池のスペクトル感度曲線は視感度よりも広範囲であるが，露光板を組み合わせると視感度曲線の山とほぼ一致する（図 III）．
４）照度計により直接ルクスを目盛らずにマイクロアンペア（μA）で示し，別に照度とμA との関係曲線を求めておき，それにより照度を求める方法がある．この方法によると，検定により目盛りに差を認めた際に，その後の操作に間違いがないという利点があるが，操作は繁雑となる．
照度計の目盛りは０〜１００
０，０〜３
００
０，０〜５
０００lx などあるが，
通常は二段切り替えとなっている．たとえば０〜１０００lx の照度
０００lx の目盛りと が あ り，１００lx
計ならば，０〜１
００lx と０〜１以下で測るときは切り替えスイッチを用いて０〜１
００lx の目盛りで読み取る．この切り替えスイッチの記号は器械により異なり，ゼロに相当する部分は短絡，short，ゼロなどの記号が，また低いほうの照度を示すものは１００×１などの記号，１０倍の照度を示すものは１０００×１０などの記号がついている．
JIS の規定では短絡を付けなくてもよいことになっているので，器械により光電池面を覆って短絡とするようにしてあるものもある．また照度計によっては二段切り替えのなかに，光電池面にフィルターをかけることにより感度を１／１０あるいは
１／１００に落して測定範囲を広げたものもある．
普通夜間照度を測定するには０〜１０００lx のものがよく，昼間の室内用には０〜３０００lx のものが適切である．
セレン光電池では温度の影響（JIS による測定温度は原則として０〜４０℃）は少ないが，湿気を嫌うので保存時注意しなけ
ればならない．また使用を続けているうちに，光を当ててから一定示度に達する（初期効果を示す）までに１０〜２０分を要したり，高照度により疲労現象を起こすことがある．光電池は使用しないときには，光に当たらないように必ず照度計のふたをし，

４．
４ 空気試験法m1
m2

1 4
E0＝ 6（ΣEm＋2Eg）

g

i1

14
E0＝ 6ΣE i

i2m4

図 IV ５点法

表 I 悪臭防止法における特定悪臭物質と敷地境界線規制基準値

i4

m3
i3

図 V ４点法

さらに半年に一度ぐらいは示度の補正を行う必要がある．この補正は，電気試験所，大学工学部，その他の電気関係の試験研
究機関に依頼して，標準電池による補正を行うとよい．なお精度の試験は，JIS で定める方法で行い，A 級（±７％ 以下）とB
級（±１５％ 以下）に分ける．
５）マイクロアンメーターを水平にして用いなければならな
い．また切り替えスイッチを短絡に合わせたときにメーター指針が正しくゼロを指さないときは，調節ネジでゼロに合わせなければならない．
光電池は通常水平に置くが，測定目的により適当な方向に向ける．たとえば最大照度を求めるには，光源の方向に直角に光電池面を向けるようにする．また初期効果を示すまでに少なく
とも５分間その光に当てたほうがよい．なお測定者の陰影が入らないように注意しなければならない．
測定時メーターの指針がスケールアウトしないように，必ず最初は１０倍スケールのほうにスイッチを切り替え，低い目盛
り内の照度であることを確かめてから切り替えるようにする．
単位区域ごとの平均照度を求めるには図 IV，V のように５点法または４点法（照度変化が小さいとき）で測定し，平均値を図中に示す式により求める．
室内の自然光による照度は，朝夕を除き，なるべく曇天か快晴の場合を選び室内の壁面より１m 以上離れた場所で測定する．
同時に野外で，建物の屋上など障害物の少ない場所を選び水平面全天空照度（照度計受光面に直射日光が当たらないようにして）を測定し，次の式で昼光率を求める．
昼光率（％）＝

1013

室内水平面照度
そのときの水平面全照度

９）臭 気１）
空気の異臭の有無を判定する．
【注解】１）空気が衛生的であり，かつ快適であるためには，種々の条件が良好でなければならないが，無臭であることも必要条件の一つである．
臭気の存在は快適感を妨げ，また有害物質の混在も予想させる．臭気はヒトに不快さを生じ，ときにおう吐，頭痛，呼吸の抑制などの症状を呈する．嗅覚は大脳皮質との間に機能的連携があるので，強い臭気が情緒的反応，皮膚温度，血圧，内臓器官活動などにも影響を与えることがある．
臭気の原因は，種々の揮発生物質やガス体であり，普通室内では口腔，皮膚，毛髪，発汗，衣服，食物，家具，便所，塗料，
燃料，燃焼など，また屋外に原因する大気汚染，排水，汚水，
動物舎，堆肥などによるものである．作業場内では各種有害物
質の揮発によることが多い．
臭気については，普通室内では特に基準がないが，悪臭防止法（１９９５年改正，法律第７１号）
では悪臭規制ために臭気指数による規制基準値が定められている．
悪臭防止法は，工場および事業場より発生する悪臭について

特定悪臭物質名
アンモニア
メチルメルカプタン
硫化水素
硫化メチル
二硫化メチル
トリメチルアミン
アセトアルデヒド
プロピオンアルデヒド
ノルマルブチルアルデヒド
イソブチルアルデヒド
ノルマルバレルアルデヒド
イソバレルアルデヒド
イソブタノール
酢酸エチル
メチルイソブチルケトン
トルエン
スチレン
キシレン
プロピオン酸
ノルマル酪酸
ノルマル吉草酸
イソ吉草酸

敷地境界線基準値の範囲（ppm）
１
〜５
０．
０
０
２ 〜 ０．
０
１
０．
０
２ 〜 ０．
２０．
０
１ 〜 ０．
２０．
０
０
９ 〜 ０．
１０．
０
０
５ 〜 ０．
０
７
０．
０
５ 〜 ０．
５０．
０
５ 〜 ０．
５０．
０
０
９ 〜 ０．
０
８
０．
０
２ 〜 ０．
２０．
０
０
９ 〜 ０．
０
５０．
０
０
３ 〜 ０．
０
１
０．
９ 〜２
０
３
〜２
０
１
〜６
１
０
〜６
０
０．
４ 〜２
１
〜５
０．
０
３ 〜 ０．
２０．
０
０
１ 〜 ０．
０
０
６
０．
０
０
０
９〜 ０．
０
０
４
０．
０
０
１ 〜 ０．
０
１

必要な規制を行い，その他悪臭防止対策を推進することにより，生活環境を保全し国民の健康の保護に資することを目的にしている．１９７１年の制定時には，特定悪臭物質５物質（硫化水素，メ
チルメルカプタン，硫化メチル，アンモニア，トリメチルアミン）について，工場の敷地境界における規制基準値が定められ，悪臭規制が行われてきた．その後，特定悪臭物質には，低級脂肪酸類，低級アルキルアルデヒド類，有機溶剤系臭気物質などが順次追加指定され，現在，２２物質が指定されている．表 I に，
特定悪臭物質名とその敷地境界規制濃度を示す．
しかし，この特定悪臭物質の濃度規制の方法では対応できな
い悪臭汚染があり，これらの複雑な複合臭への対応策として臭気指数による方法が１９９５年に導入された．この法律改正により，個々の特定悪臭物質の濃度規制では生活環境の保全が十分でないと認められる区域では，悪臭物質の濃度規制にかえて臭気指数の規制基準を定めることができるようになった．
敷地境界線における規制基準の範囲は臭気指数１０〜２１の範囲とされている．
なお，室内空気の臭気の簡便な判定法として，臭気の強さの段階を判定する Yaglou の方法がある．これについては衛生試
験法・注解１９９０，付．追補
（１
９９
５）
４．
４．
２．
１
（９）
を参照．

（１）臭気指数の測定１）
臭気指数は，本来は環境大気中の悪臭物質についての工場敷地境界の基準の判定に用いられるが，室内空気にも適用可能である．
〔試料ガスの採取〕４．
４．
１．
１２（
）３）
により行う．バッグのフィルムの材質は無臭性が高く，透過性および吸着性の少ないポリエステル製またはこれと同等以上の性能を有するものが使われる．必要な試料量は約１０l であり，環境試
料では臭気が感じられるときに６〜３０秒以内で適切に採取する．排出口試料では１〜３分程度で採取する．
〔オペレーターと嗅覚パネル〕オペレーター数人と６名４．
４ 空気試験法

式に従って算出される．
M −０．
５
８
M −N

Z ＝１
０ × log（t×１
０）
t ：最初に試験を行った希釈倍数
M ：最初に行った希釈倍数での平均正解率
N ：２度目に行った希釈倍数での平均正解率
もし２度目の希釈倍数での平均正解率が再度０．
５８を上回ったときは，さらに１０倍希釈倍数をあげて０．
５
８以下になるまで同様の試験を繰り返す．すなわち，平均正解率が０．
５８をはさむまで試験を実施する．このときの臭気指数の算出は，上式の t，M ，N をそれぞれずらして当てはめ
ればよい．
【注解】
１）臭気指数とは，人間の嗅覚でその臭気を感知できなくなるまでの気体の希釈倍数を基礎として算出される値で，悪臭防止法（１
９９５年改正，法律第７１号）
では悪臭規制ために臭気指数による規制基準値が定められている．この測定は，ヒトの嗅覚により測定する方法であり，複合臭にも的確に対応でき，悪臭汚染の被害を受けている住民の被害感とも一致した結果が得られやすい利点を有している．
臭気指数の測定は，本来は環境大気中の悪臭の工場敷地境界の基準の判定に用いられるが，室内空気にも適用可能である．
各悪臭物質については４．
４．
５の項にあるが，ここでは複合臭の判定に用いる方法として記載した．
臭気指数の測定は，臭気用バッグに捕集した試料ガスを，三点比較式臭袋法により臭気が感知されなくなるまでの希釈倍数を求めることにより行われる．この試験は，数名のオペレータ
ーと６名以上の嗅覚パネルにより実施される．従来行われていた注射器法〔衛生試験法・注解１９
９
０，付．
追補
（１
９
９
５）
の４．
４．
２．
１
９）を参照〕の欠点である容量不足，吸着損失，準備の手間，客観性の不足などの欠点を除いた方法として考案された．注射器のかわりに容積３l のバッグ
（におい袋）を用い，上記の欠点を補っている．
２）パネルの嗅覚が正常かを調べるための試験方法で，T & T
オルファクトメーターという嗅覚検査用の試薬を用いて行われる．
表 I にその基準臭の種類とパネルスクリーニング試験で使用される濃度およびにおいの質を示す．
この基準臭以外にテストには，無臭性の高い流動パラフィン
およびにおい紙（長さ１４cm，幅７mm の無臭性のろ紙）が必要である．この試験は５―２法で行うので，オペレーターは，５本のにおい紙のうち任意の２本に基準臭を，残りの３本に無臭液をつけ，５本をセットにして被験者に渡す．被験者は１本ずつにおいをかぎ，においのあると思われる２本のにおい紙の番号を選び，それを解答用紙に記入する．各基準臭について試験を行い，五つとも正解したヒトをパネル選定試験合格者とする．
なお，嗅力は変化するので合格者は５年ごとに再試験を受ける
必要がある．

表 I T & T オルファクトメーターの基準臭とその濃度
基準臭の種類

使用する濃度（w／w）

β―フェニルエチル
アルコール
メチルシクロペンテノロン
イソ吉草酸
γ―ウンデカラクトン
スカトール

０
１
０−４．

花のにおい

においの質

５
１
０−４．
０
１
０−５．
５
１
０−４．
−
５
．
１
０ ０

こげ臭
腐敗臭
果実のにおい糞臭1015３）従来の注射器法では一つの試料の検体をパネルがかぎ，においの有無を判定していたが，本法ではトライアングルテストを採用している．すなわち，３個の袋のうち２個の袋は無臭で残りの１個の袋に所定の希釈倍数に希釈したサンプルを入れる．パネルはこの３個の袋の中のにおいをかぎ，においがあると思われる袋の番号を解答する．この改良により，測定結果の精度および客観性が高くなっている．
文 献１）岩崎好陽：臭気の嗅覚測定法，（社）
臭気対策研究協会，（１９９７）２）環境庁大気保全局大気生活環境室：臭気指数測定マニュ
アル
（１
９９
６）

１
０）換 気
ある室に対して，その室以外の場所から空気が流入し，流入した空気によって逐次その室の空気が希釈，交換されることを換気と呼ぶ１）．
換気量は，単位時間内に置換される空気の量（m３／h）
で２）表す ．また，１時間に置換される空気の量を室内容積で除した値（１時間の空気の置換回数）
は，換気回数として表される３）．本試験法では，換気量の測定方法，室内の汚染
物質濃度を許容濃度以下に，また熱源による室温を許容最高温度以下に維持するために必要な最小限の換気量の求め方を述べる．
【注解】
１）室内の空気は，ヒトの呼吸，行動や作業に伴う発汗または粉じん，建材，家具，事務機器類から発散される臭気，一酸
化炭素，じんあい，細菌，揮発性有機化合物あるいは熱，水蒸気などを含む．換気は，室内に新鮮な空気を供給するとともに，これらの汚染条件を除去することが目的である．
汚染度が高い外気による換気は，室内空気の汚染を高める場
合があり，室内発生源により汚染した空気との混合による問題が発生する．しかし，最近の室内空気調和技術の発展により，室内からの排気を再循環により利用することは困難ではない．
２）① 換気の方法：機械力（給・排風機）
による強制換気と風力および室内外空気の温度差に基づく自然換気とがある．
機械換気： i ）第１種機械換気方式［図 （I a）］は，給気用，排気用送風機を併用する方式で，室内の気流分布や静圧の制御を容易に行うことができる．完全な機能を要求される場合および大容量の空気調和設備や換気設備に採用される．
）第２種機械換気方式は，吸気側にのみ送風機を設ける方式で，排気側は排気口のみ設ける．排気口が直接外気に開口す
る方式
［図 （
I b）
］と間接的に排気される方式
［図 （
I c）
］の２種が
ある．給気用送風機により室内は正圧に保たれるので，室内へ清浄空気を供給する場合やボイラーなどに燃焼用空気を供給する場合に適する．
）第３種機械換気方式は，排気側にのみ送風機を有し，給気側には給気口が設けられている．給気口が直接外気に開口す
る方式
［図 （
I d）
］と間接的に外気とつながる方式［図 （I e）］がある．この方式は，構造上室内が負圧になるので，汚染している
室内空気が隣接する他室に流出しない．したがって，臭気や水蒸気が発生する厨房，便所，浴室などに有効である．
）局所換気方式は，機械換気の他の分類方法の一つで全般換気方式に対するものである．室内の汚染発生源が局部的に限定されている場合に，発生源の近くに排気フードを配置し，汚

!

"

#

1016

４．環境試験法
風量調節用ダンパ
風量調節用ダンパ

給気用送風機エアフィルター

排気用
送風機

室内静圧
（正，負に設定可能）（a）第 1 種機械換気方式
風量調節用ダンパ
給気用送風機排気口

エアフィルター

排気口

室内静圧
（正）
（b）第 2 種機械換気方式 ─ 甲（c）第 2 種機械換気方式 ─ 乙
風量調節用ダンパ

給気口

室内静圧
（負）

給気口

排気用
送風機

（d）第 3 種機械換気方式 ─ 甲（e）第 3 種機械換気方式 ─ 乙

図 I 機械換気方式の種類

文 献１）新版ビルの環境衛生管理，上巻，新版ビルの環境衛生管理編集委員会編，財団法人ビル管理教育センター
（１
９
８
９）

換気回数
風速
温度差
（回／h）
（m／sec）

室の種類
鉄筋コンクリート造洋室
木造大壁洋室木造真壁和室〃
内外壁板張り３〜１．
０
０〜１．
５ ＜５℃ ０．
０．
５〜１．
５
〃
〃
０．
５〜３．
０
〃
〃
＜１０℃ ２．
５〜６．
５〃＜５℃ １．
５〜４．
５〃

壁の一側が外気に露出した室
〃 両側が
〃
〃
三側が
〃
に
よ 〃 四側が〃る
窓また出入口のない室

１
１．
５
２
２
０．
５〜０．
７
５

の

差

!

表 I 自然換気回数の例

窓を閉じたとき 室 位置

染物質が室内に拡散する前にフードに効率よく吸い込んで処理する方法である．生産工程中の粉塵や有害ガスの発生処理などに使用される例が多い．
自然換気：温度差による自然換気は，外気の流入口と排気口との大きさに著しく差がなければ，換気量は一般に室内外の温度差の平方根に比例する．その温度差が５℃ 以上になれば換気の原動になる．
自然換気による換気量の算出法については衛生試験法・注解
１９９０，付．追補（１
９
９５）
４．
４．
２１
（１
０）
〔注解〕
２）
を参照．
表 I に示すように，窓を閉じた場合の自然換気回数は一般に和風住宅が大で，鉄筋コンクリート造りが最少である．また，外気に露出する壁面が多いほど換気回数は大になる．
② 換気の基準：在室人員が明らかな場合と不明の場合とで，換気の基準が異なる．
i ）在室人員が明らかな場合，第１種機械換気方式では３５であるが，温湿度調整期間中にはこの１／２の大きm３／h・人（A）
さとなる．また，第３種機械換気の直接外気をとる甲方式では（B）であるが，間接的に外気をとる乙方式では４５３５m３／h・人となる．
m３／h・人（C））在室人員が不明の場合， i ）の A，B，C の換気の基準を
表 II に示す．
なお，興業場（東京都建築安全条例）では，７５m３／m２・h の能力を有する機械換気施設を必要とし，空調の場合は外気供給２５（学校環境衛生基準）では閉
m３／m２・h 以上である．また，学校
５回／h
窓時自然換気回数は２．
５回／h 以上が必要であり，１〜２．
の場合授業中に窓を５〜１０分間解放する必要がある．

表 II 空気調和・衛生工学会による室内換気量の規格
収容人員不定の時室別必要換気量（m３／m２・h）
室

種

私
事

務

類

A，
B

C

室

８

１
０

室 種
営

業

食

類

A

B

C

堂 ２
５ ２
５ ３
０

室

１
０

１
２

厨

従業員詰所

１
２

１
５

便 所 （ 数 個 ）

３
０ ３
０

喫

室

１
５

２
０

じんあい・臭気を
生じる場所

３
０ ３
０

小 会 議 室２０２５

有毒・可燃ガス発
生場所

３
５ ３
５

売場・作業室

２
５

３
０

煙

A，B，C は本文参照．

房 ６
０ ６
０ ７
５

４．
４ 空気試験法
100

D
）
25

l/

A

D'

量（

10

0.3

〃
20 〃
〃 15 〃〃 12 〃〃 10 8〃〃〃CB

図 4.4.2−11 スモーク・テスト装置
Pettenkopfer
Pettenkopfer
恕限量
恕限量
（1）
（1）

CO

20

Pettenkopfer
Pettenkopfer
恕限量
恕限量
（2）
（2）

2

発

生

30

5

F

E

時
・
人

60
50
40

Rietschel
恕限量

必要換気量（m3／時・人）

80

1019

0.2 0.16 0.12 0.1 0.08 0.06 0.05 0.04 0.03 0.02
0.01
室内CO2（％）− 新鮮外気CO2（0.03％）

図 I 室内 CO２ 濃度を基準にした必要換気量計算図表

細かい繊維をなびかせる方法なども利用できる２）．
【注解】
１）本法は，冷暖房器，給排気装置，換気孔を取り付ける最も有効な位置を決定する場合などに利用される．

② 多人数の集まる場所で，人体からの発熱による温度上昇を換気により T 度以下に抑える場合には，上記と同じ原理で次式を用いればよい．
V ＝

H
０．
３（T −t）

H ：発生熱量（kcal／h）
T −t：高温空気と流入する低温空気との温度差

発煙装置としては NH４Cl による湿式法と発煙管による乾式法とがあり，乾式法は SnCl４ あるいは TiCl４ を軽石に吸着させて管内に封入し，両端を切り送気すれば，空気中の湿気によりSn（OH）
２ あるいは H２TiO３ の白煙を生じる．
２）線香の煙や真綿の落下状態により，室内の気流の分布と同時に気流の階級を測定できる（表 I，II および図 I）．

発熱量は，年齢，体重，作業の程度などで異なるが，成人男
子の安静時で１００〜１１０kcal／h，女子や子供はそれぞれ男子の
８０％ および５０〜６０％ と考えてよい．

表 I 線香の煙で気流を測る気流の階級
気流階級

１１）気流の方向および空気の分布（１）気流の方向および流線分布の測定法（スモ−クテス
１）
トによる方法）室内の換気あるいは冷暖房において空気の流入状態，空気の流線分布などを求めるときに適用される．
〔装 置〕① スモークテスト装置（図 4.4.2−11）：本装
置は２個の洗気瓶，B，C と二連球 A とからなり，B およ
び C にはそれぞれ塩酸およびアンモニア水を入れ，二連
球 A で空気を送れば B と C から出たガスは円筒 D の中で混和し，NH４Cl の微粉を含んだ白煙となって噴出される．
円筒 D を D′のような形にして先端にゴム管を付けると，高い場所などを検査する場合に便利である．E，F の活栓は，空気の量を調節するためのものである．
使用しないときは活栓を閉めておく，〔試験操作〕試験場所において，周囲の空気の流れをできるだけ乱さないように注意して NH４Cl の白煙を少しず
つ静かに発生させて微弱な気流の方向を観察する．
気流は，試験者の身体で遮られることがあるから，試験者の身体の位置を移して数回測定を行う．
流線分布を測るには，まず空気の流入口と思われる場所
で流線の方向を求め，その流れをたどり，ときどき NH４Clの白煙を少量ずつ発散させながら，主要流線の終末までの経過を明らかにし，これを適当な室内断面を示す略図に記入する．流線分布は時間的に，また在室者の動静により相当変動するから，数回試験を行う必要がある．
なお，このスモークテストのほか，線香の煙や真綿など

０
１
２
３
４
５
６

煙の状態
まっすぐ上がる
やや左右に揺れる
ややなびく
２よりもさらになびく
煙が横になびく煙が勢いよく横になびく煙が乱れてちりぢりになって横になびく

表 II 高さ５０cm から真綿を落して測る気流の階級
気流階級

真綿が真下よりそれる距離

０
１
２
３
４
５
６

５cm 未満
６〜２
０
２
０〜３
０
３
０〜４
０
４
０〜５
０
５
０〜６
０
６
０以上

北
ガラス窓

壁
壁

壁押
入
ふ
す
ま
壁
風向

縁側 羽根の数は気南 流階級を示す

図 I 真綿の落下状態で測った室内の気流分布

1020

４．環境試験法（２）空気の分布率測定法
空気の分布率とは，室内の各所における空気状態の均一性を知るために用いる比率であり，一般には水平の分布率が用いられる１）．
分布率の根拠となる条件には種々あるが，室に対する給気の分布を問題とするときは一般に CO２ 濃度が用いられ
る２）．
〔試験操作〕室内を状況に応じて一定の大きさの区画に分画し，それぞれの中心において，できれば同時に，あるいはできるだけ速やかに一定の順序と時間間隔で CO２ 濃度を測定する．このとき，測定者により空気をかく乱しな
いように注意する．
測定値について，平均値 M および標準偏差または平均偏差を求める．
空気分布率は，次式により計算する３）．
i ）標準偏差（σ）
を用いる分布率
（δ）
：
M −σ
δ＝
×１
０
０
（％）
M
n
１
２
σ＝
Σ（Xi−M ）n i＝１!）平均偏差（∆ ）を用いる分布率（δ′）

M −∆
×１
０
０
（％）
M
１ n
∆＝
Σ ｜Xi−M ｜n i＝１
Xi ：室内の，同一水平面上にある各測定点における測定値（X１，X２，・・・Xn）
M ：上記測定値の算術平均値
【注解】
δ′
＝

１）空気状態の適否を示す要素は，汚染と室内気候との二つに大別されるが，分布率はそのいずれに対しても適用できる．
ただし，分布率を求めようとする場合，室内空気の状態が一様であることが前提であり，違う場合には適用できない．
２）分布率が高いことは，室内空気が十分かくはんされていて，室のどの部分の CO２ 濃度も一様であることを示す．
CO２ 濃度以外に利用できる空気条件としては，気温，気流，
カタ冷却力などである．ただし，分布率の数値そのものはそれぞれ非常に異なる．気流の分布などは非常に重要であるが，分布率そのものは変動が激しいので余り適当でない．
３）実用上では， i ）と ）との間には大差はないが，空気分０以上が望ましい．
布率の値は，CO２ 濃度による場合は８
一般室内で空気状態の均一さが要求されるときには，分布率１００％ をもって理想とするが，室内空気全体が良好な状態であることを前提として，はじめて有意義となる．このことは，分布率よりも室内空気の性状自体のほうが問題であり，余り分布率を重要視しないほうがよいことを示している．
自然換気あるいは無換気に近い状態では，室内空気を流動させる要因は自然対流以外にないので，分布率を算出することはほとんど意味をなさない．
したがって，分布率を問題にするのは，一般室の場合，その室に対する機械的給排気の計画ならびに機械類の状態などの良否を判定するときである．

!

4.4.2.2 大気環境
１）気 圧１）
通常，ヘクトパスカル（hPa）または mmHg を単位に用いる．
１Pa ＝１０ダイン／cm２
１気圧 ＝１０
１３hPa ＝１０
１．
３kPa ＝７
６
０mmHg
＝１
０
１
３．
２
５mb
〔装 置〕４．
４．
２．
１１）に同じ．水銀気圧計，アネロイド
気圧計または自記気圧計を用いる．
〔試験操作〕４．
４．
２．
１１）
に同じ．
【注解】
１）気圧の詳細は，４．
４．
２．
１１）の項に同じである．
大気圧は，１気圧１０１３hPa を中心 に９２
０〜１
０５３hPa の 間 を変動する．
一般に高気圧圏内では，気圧の低い周囲に向かって風が吹き出すため，中心近くでは上層空気の沈降が起こる．この気塊の沈降は，空気の急速な圧縮でもあり，温度上昇を伴う．そのため，高気圧圏内では気温が上昇し，水蒸気の凝集がないため晴天となる．
低気圧圏内では，気圧の高い周辺から空気の流入が起こり，中心付近では空気が押し上げられ，気塊の上昇がみられ，気温が低下する．これに伴い，水分は水蒸気となって凝集して雲となり，天候が悪化する．
また，高気圧圏では沈降性気温逆転が，低気圧圏では前線性の気温逆転が発生し，いずれも大気汚染度に影響を与える因子となる．

２）気 温１）
気温は，セ氏（℃）
で表す．
〔器 具〕① アスマン通風湿度計：４．
４．
２．
１２）
に同じ．
② 棒状温度計：４．
４．
２．
１２）
に同じ．
③ 最高最低温度計：４．
４．
２．
１２）
に同じ．最高温度計は水銀柱で留点式のもの，最低温度計はアルコール柱で示針入りのもの．
④ 自記温度計：４．
４．
２．
１２）に同じ．
⑤ 白金抵抗温度計：長期間の連続測定が必要な時に用いる．
〔試験操作〕日射あるいは放射を防ぎ，かつ通風のよい
百葉箱の中に温度計を垂下し２），温度を読みとる．１日の最高温度および最低温度を知りたい場合は最高最低温度計
を用いる．
【注解】
１）４．
４．
２．
１２）の〔注解〕に同じ．
２）白金抵抗温度計は，金属などの導体が温度の変化によって電気抵抗値が変わる．この抵抗値の変化から温度を求める．
３）大気温度を測定する場合は，通常芝生などで反射を防いだ場所の約１．
５m の高さに百葉箱を置き，日射の吸収を防ぐた
めに白色に塗装して，その中に温度計を垂下する．

３）湿 度１）
湿度は，相対湿度
（％）
で表す．

48

１．一般試験法

異なる少なくとも４種類の検量線用標準液を調製する．試
験溶液にも標準溶液と同濃度になるように，内標準元素溶液を添加する．検量線用標準液と試験溶液の液性，塩濃度はできる限り一致させる．
iii）この検量線用標準液を用い，測定対象元素のイオン
カウント数と内標準元素のイオンカウント数の比を計測す
る．検量線用標準液の濃度に対してこの比をプロットする
ことにより検量線を作成する．
iv）この検量線を用いて，試験溶液のイオンカウント数と内標準元素のイオンカウント数の比から濃度を算出する．
③ 標準添加法１７） i ）測定対象元素濃度が異なる少なく
とも３種類の検量線用標準液を調製する．
ii ）試験溶液から少なくとも四つの溶液を等量に採取する．
iii）測定対象元素を含まない溶液一つと i ）で調製した三つを ii ）に添加し，測定溶液とする．
iv）各測定溶液中の測定対象元素のイオンカウント数を測定溶液中の既知の濃度に対してプロットすることにより検量線を作成する．検量線の横軸の切片から測定溶液中の元素濃度を算出する．
④ 同位体希釈法１８） i ）天然同位体存在比とは異なる
同位体組成を有する濃縮同位体（「スパイク」と呼ぶ）
溶液中の測定対象元素濃度を測定する．スパイク溶液中の測定対
象元素濃度を C（mol／l）とする．
sii ）試験溶液中およびスパイク溶液について，測定対象
元素濃度の同位体 a および b のイオンカウント数を測定する．このとき得られた試験溶液中およびスパイク溶液中の同位 体 a のイオンカウント数を１としたときの同位体b のイオンカウント数の比をそれぞれ Rn および Rs とする．
iii）V ml の試験溶液 に，Vs ml のスパイク溶液 を 添 加

し，十分にかくはんしたあとに混合溶液中の同位体 a お
よび b におけるイオンカウント数を測定する．このとき得られた同位体 a のイオンカウント数を１としたときの同位体 b のイオンカウント数の比を R とする．
iv）試験溶液中の測定対象元素濃度
（C ）
を
（１）
により算
出する．
Cs×Vs
（Rs−R ）
C ＝×
（１）
（R −Rn）
V
C ：試験溶液中の測定対象元素濃度（mol／l ）Cs ：スパイク溶液中の測定対象元素濃度（mol／l ）V ：試験溶液量（ml ）Vs ：スパイク溶液量（ml ）R ：測定溶液（試験溶液とスパイク溶液の混合液）
中の同位体比Rn：試験溶液中の同位体比
Rs ：スパイク溶液中の同位体比【注解】１）ICP 質量分析法は，１
９８０年に Houk らによって最初の装置が報告され，従来の原子吸光分光法や ICP 発光分光法などの光学的な分析法にかわる微量元素の分析法として広く普及しつ
つある．本法の測定原理を簡潔に表すならば，高温のプラズマによって測定対象元素をイオン化させたあと，質量数と電荷の比（m／z）によって分離させ，イオンの数を数えるといえる．本法は，同じく ICP を励起源とする ICP 発光分光法に比べ，（１）２〜３けた高感度である（２）スペクトル干渉が少ない（３）同位体分析ができるという特徴がある．
２）表 I に測定に推奨される質量数を周期表に示した．本法の適用範囲は，金属元素および類金属元素であるが，他の測定

表 I ICP／質量分析法によって測定可能な元素と測定推奨質量数
１A

２A

３A

４A

５A

６A

７A

８

１B

２B

３B

４B

５B

６B

７B

０

１

H

He

２

Li
７

Be
９

B
１
１

C

N

O

F

Ne

３

Na
２
３

Mg
２
４

Al
２
７

Si

P

S

Cl

Ar

４

K
３
９

Ca
４
４＊

Sc
４
５

Ti
４
７

V
５
１

Cr
５
３＊

Mn
５
５

Fe
５
７＊

Co
５
９

Ni
６
０

Cu
６
５

Zn
６
６

Ga
６
９

Ge
７
２

As
７
５

Se
８
２

Br
７
９

Kr

５

Rb
８
５

Sr
８
８

Y
８
９

Zr
９
０

Nb
９
３

Mo
９
５

Tc

Ru
１
０
１

Rh
１
０
３

Pd
１
０
５

Ag
１
０
７

Cd
１
１
１

In
１
１
５

Sn
１
１
８

Sb
１
２
１

Te
１
２
５

I
１
２
７

Xe

６

Cs
１
３
３

Ba
１
３
７

L

Hf
１
７
８

Ta
１
８
１

W
１
８
２

Re
１
８
５

Os
１
８
９

Ir
１
９
３

Pt
１
９
５

Au
１
９
７

Hg
２
０
２

Tl
２
０
５

Pb
２
０
８

Bi
２
０
９

Po

At

Rn

７

Fr

Ra

A

L

La
１
３
９

Ce
１
４
０

Pr
１
４
１

Nd
１
４
６

Pm

Sm
１
４
７

Eu
１
５
３

Gd
１
５
７

Tb
１
５
９

Dy
１
６
３

Ho
１
６
５

Er
１
６
６

Tm
１
６
９

Yb
１
７
２

Lu
１
７
５

A

Ac

Th
２
３
２

Pa

U
２
３
８

Np

Pu

Am

Cm

Bk

Cf

Es

Fm

Md

No

Lr

１．
１ 機器分析法
法に比べ本法の適用が必ずしも適当とはいえず，本試験法の適用外の元素であっても，ICP／質量分析法によって測定可能な元素についても表記する．さらに，硫黄（S）については，注解１３）に示す手法により，ICP／質量分析法による測定が報告されている（文献３）．周期表中に＊を付した元素は，注解１４）に示す Arに起因するイオン干渉の影響を低減させることのできる装置では，異なる質量数が推奨される．以下にその質量数と起因する
干渉イオンを示す．
Ca：推奨質量数４０，干渉イオン Ar＋
Cr：推奨質量数５２，干渉イオン ArC＋
Fe：推奨質量数５６，干渉イオン ArO＋３）試薬：市販の試薬には精密分析用，原子吸光分析用，有害金属測定用などがある．
４）装置調整用溶液：低，中および高質量数の元素の組み合わ
８９Y，
２０５Tl）
１０３Rh，
２０８Pb）
１１５In，，（２４Mg，，（９Be，
せとして，（７Li，
２０９Bi）などが利用されている．
５）標準原液：標準試料の専門商社より，ICP／質量分析用に調製された単一および多元素標準液が市販されている．濃縮同位体は，日本アイソトープ協会を通じて入手可能である．同位体希釈法に用いるスパイク溶液は天然存在比と異なる同位体組成であり，天然存在比の元素でコンタミネーションしないように注意を要する．
６）試料導入部：イオン化部に試料を導入する部分で，ネブライザーおよびスプレーチャンバーより構成される．試料の粘性によらず一定の送液を行う目的で，多くの機種ではペリスタ
ルチックポンプが装備されている．
（１）ペリスタルチックポンプ：負圧吸引に比べ，一定量の送液を行えることから多くの機種で取り入れられている標準装備である．試料の送液だけでなく内標準液の同時送液，廃液の排出をコンピュータ制御によって行える機種もある．通常０．
３〜

１．
０ml ／min の範囲で送液を行う．
（２）ネブライザー：送液された試料溶液を霧化する部分．同軸形ネブライザーもしくはクロスフロー形ネブライザー（図 I）が装備されており，高塩濃度，高粘度試料用にバビントン形ネ
ブライザーが用意されている．その他に，超音波振動によって霧化の効率を上げ，感度を向上させる超音波ネブライザー，
２
０〜３
０μl
／min の送液で感度を落とすことなく測定できるマイクロコン
セントリックネブライザーなどがオプションで装備できる．
（３）スプレーチャンバー：ネブライザーで霧化したのち，粒子が小さい霧のみを選別しイオン化部へと送る部分．ネブライ
ザーから送液された量の約１〜３％ のみがイオン化部へと導入される．
７）イオン化部：イオン化部は図 II に示したようなトーチおよ び 誘 導 コ イ ル よ り 構 成 さ れ る．プ ラ ズ マ の 点 灯 周 波 数は，２７．
１２MHz あるいは４０．
６８MHz と２種類の機器が市販されているが，それぞれの長所と短所があっても，分析上の性能に大きな差はない．スプレーチャンバーより送られた試料はキャリヤーガスによってプラズマ中心部へと導入される．
８）インターフェース部：プラズマにより生成したイオンを，大気圧下から高真空の質量分析計内に導入するための境界部分
で，サンプリングコーンおよびスキマーコーンより構成される（図 III）．
（１）サンプリングコーン：ニッケル製や銅製のものが一般的であるが，耐フッ酸用に白金製のものも用意されている．先端が約１２０°の円錐形で口径１mm のオリフィス（イオンが通過する穴）を持つ．
（２）スキマーコーン：ニッケル製や銅製のものが一般的であるが，耐フッ酸用に白金製のものも用意されている．先端が約６０°の円錐形で口径０．
３〜１．
０mm のオリフィスを持つ．
四重極型の ICP／質量分析計では，プラズマとインターフェー

試料溶液

キャリヤーガス

キャリヤーガス
試料溶液
a. 同軸形ネブライザー49

b. クロスフロー形ネブライザー

図 I ネブライザー

誘導コイル
トーチ
試料
＋
キャリヤーガス

補助ガス
プラズマガス

図 II イオン化部

イオンカウント数

１．
１ 機器分析法

試料溶液の濃度53ができる点で有効である．
１８）同位体希釈法による濃度の求め方：同位体希釈法は容量のひょう量と同一元素の同位体比の測定のみで定量が可能であるため，分析精度が他の方法に比べて高い．非スペクトル干渉は定量値に影響を与えない．前処理の前にスパイクを添加しておくため，測定元素の回収率は影響を与えない．この方法は，二つ以上の安定同位体が存在する元素について適用可能である．試験溶液の同位体組成（通常は天然存在比）とスパイク溶液の同位体組成が正確にわかっている必要がある．スパイク溶液
中の測定対象元素濃度の測定は，原子吸光光度法や ICP／発光
分光法でも可能であるが，同位体希釈法の分析精度を確保するため同位体希釈法によることが望ましい．
質量数によってイオンの透過率の異なることが観察される質量分析計においては既知の同位体比の溶液を用いて同位体比を校正する必要がある．

添加した元素濃度

図 VIII 標準添加法１７）標準添加法による濃度の求め方（図 VIII）：
標準添加法は，スペクトル干渉が補正され，イオンカウント
数と濃度の関係が低濃度域まで良好な直線性を保っているときに有効である．標準添加法は非スペクトル干渉を補正すること

文 献１）機器分析ガイドブック，日本分析化学会編，p．
１０１
（１
９９
６）
２）Jarvis, K. E. et al .：Handbook of Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry, Blackie Academic &Professional（１９９２）３）Suzuki, K. T. et al.：J. Chromatogr. B, ６
７
０, ６
３
（１
９９５）

1042

４．環境試験法

準溶液とする．
Cu 標準溶液 １．
０ml ＝２．
０μg Cu⑥ Zn 標準溶液：２．
４．
１．
４４（
）１）
の
〔試薬〕
に準じて，Zn
保存溶液を調製する．
Zn 保存溶液 １．
０ml ＝１０００μg Zn
保 存 溶 液 を HCl０．
５mol ／l で，１０００倍 に 希 釈 し て Zn
標準溶液とする．
Zn 標準溶液 １．
０ml ＝１．
０μg Zn⑦ Cd 標準溶液：２．
４．
１．
４５（
）１）
の
〔試薬〕
に準じて，Cd
保存溶液を調製する．
Cd 保存溶液 １．
０ml ＝１０００μg Cd
保 存 溶 液 を HCl０．
５mol ／l で，１０００倍 に 希 釈 し て Cd
標準溶液とする．
標準準溶液 １．
０ml ＝１．
０μg Cd
⑧ Pb 標準溶液：２．
４．
１．
４８（
）１）
の
〔試薬〕
に準じて，Pb
保存溶液を調製する．
Pb 保存溶液 １．
０ml ＝１０００μg Pb
保存溶液を HCl０．
５mol ／l で，１００倍に希釈して Pb 標
準溶液とする．
Pb 標準溶液 １．
０ml ＝１
０．
０μg Pb〔装置および器具〕① 各金属用中空陰極ランプ② 原子吸光光度計：フレーム原子化部を持つもの．その他の詳細は２．
４．
１．
４各個試験に同じ．
〔試料の採取〕① 作業環境および大気環境：４．
４．
１．
２１）
（１）
または
（２）
と同様に，ハイボリウムまたはローボリウム
エアーサンプラーを用い，グラスファイバー１）あるいは石英ファイバーろ紙上に試料を採取する．
② 排出源：４．
４．
１．
２１（
）３）
と同様に操作して，円筒ろ紙
上に試料を採取する．
２）試料が付着したろ〔試験溶液および空試験溶液の調製〕
紙の一定面積を正確に切りとり，これを細切して２００mlのビーカーに入れ，２
３％ HNO３ ３
０ml および過酸化水素
水（３０％）
５ml を加え，時計皿で覆い，ホットプレートまたは沸騰水浴上で１時間加熱する．室温まで冷却したのち
時計皿を１０ml の温水で洗い，洗液を No．
５B のろ紙でろ過する．次いで固形物がなるべくビーカー内に残るように注意しながら上清を先のろ紙を用いてろ過する．
ビーカー内の残留物に，３５％ HNO３ ２
０ml を加え，ホットプレートまたは沸騰水浴上で１０分間加熱する．冷後，先のろ紙でろ過し，さらにビーカー内の残留物を温水で洗い，洗液を先のろ紙でろ過する．すべてのろ液を１００mlのビーカーに移し，水浴上で完全に乾固する．これに１．
４mol ／l HCl１
０ml を加え，沸騰水浴上で加温して溶かし，冷後，２５ml のメスフラスコに移し，水を加えて２５．
０mlとし，試験溶液とする．
別に，試料を採取していないろ紙の一定面積を用いて，同様に操作して空試験溶液とする．
〔試験操作〕２．
４．
１．
４原子吸光光度法と同様に操作し，目的金属の吸光度（ピーク高）
を求め，検量線に照らして試験
溶液および空試験溶液中の目的金属の濃度（μg／ml ）を求める．
検量線の作成：表１．
１．
６―１を参考にしながら，目的金属標準溶液を HCl０．
５mol ／l で希釈して４〜５段階の検量線用標準系列を作り，原子吸光法を行って得られた吸光度
（ピ
ーク高）
と濃度
（μg／ml ）の関係をプロットして検量線を作成する．
計 算：試料空気中の目的金属濃度（μg／m３）は次式から求める．
目的金属濃度（μg／m３）１S０＝（a−a０）× ２
５×
×
S
２
７
３
V×
２
７
３＋t
２
５：試験溶液量（ml ）a ：試験溶液中の目的金属濃度（μg／ml ）a０：空試験溶液中の目的金属濃度（μg／ml ）S ：測定に用いたろ紙の面積（cm２）
S０：試料を採取したろ紙の面積（cm２）
V ：試料空気量（m３）
t ：試料採取時の平均温度（℃）
【注解】１）グラスファイバーろ紙には Zn を多く含むものがあるので，注意を要する．
２）大 気 環 境 中 の Cu，Zn，Cd，Pb，Mn，Fe，Co，Ni（特に Mn，Fe）は，一部ケイ素との融合物として存在している．これらの金属の全量値を求める場合は，HF を用いてケイ酸塩を分解する．操作は次のようである．
試料が付着したろ紙の一定面積を５０ml のテフロンビーカーに入れ，水５ml と HF
（４
６％）
２０ml を加えて１５０〜２
００℃ のホットプレート上で加熱し，乾固する．冷却後，４６％ HF ５ml
０％を加えてふたたび乾固する．次いで，６０％ HNO３１０ml と３過酸化水素水２ml を加えて時計皿で覆い，ホットプレート上で１時間加熱する．次に時計皿を除き，蒸発乾固する．これに HCl
０．
５mol ／l １０ml を加え，ホットプレート上で１０分間加熱した
のち，No．
５B のろ紙でろ過する．ろ液を２５ml のメスフラス
コに移し，冷却後，水を加えて２５ml とし試験溶液とする．

２）ベリリウム１）【注解】１）Be は生産量の約２０％ が金属 Be として，中性子反射材
あるいは中性子減速材などの原子炉材料，ロケットやミサイルのノズル材料，電気的リレーの材料などに用いられる．生産量の約７
０％ は硬度の高い合金としてダイヤモンド工具，時計，ス
プリング，航空機の製造に用いられ，残り約１０％ は BeO としてセラミックやガラスの製造に使用される．
Be 化合物は生理的 pH で不溶性沈殿となるものが多く，消化管から吸収されにくいので，経口的摂取による中毒は少なく，呼吸器からの吸入により中毒する例が多い．呼吸器から吸入された場合，高濃度であれば急性肺炎となり，その死亡率は高い．
低濃度の Be の吸入は慢性的に進行する肺の肉芽腫を生じることがある（ベリリウム症）．この予後は不良であり死亡率は２５％に達する．
可溶性の Be 化合物に皮膚が暴露されると，アレルギー様湿しんを伴う皮膚炎や皮下結節を生じる．
このように毒性が強いので，日本産業衛生学会では，Be として０．
００２mg／m３という厳しい基準値を勧告している． ACGIHの閾限界値も０．
００２mg／m３ であるが，ヒトに発がんの疑いの４．
４ 空気試験法
ある物質に指定されており，あらゆる経路の被暴を総合してこの濃度による被暴量を超えてはならないとしている（ACGIH，
２００３）．

（１）原子吸光光度法による定量１）〔試 薬〕① Be 標準原液：金属 Be（９９．
５％ 以上）０．
１
０
０
g を正確にはかりとり，８
７％ H２SO４１
０ml を加 え，加 熱溶解する．これに水を加えて１０００ml とし，これを Be 標
準原液とする．
Be 標準原液 １ml ＝１００μg Be② Be 標準溶液：Be 標準原液１０ml をメスフラスコにとり水を加えて１００ml とし，これを Be 標準溶液とする．
Be 標準溶液：１ml ＝１
０μg Be〔試料の採取〕① 作業環境および大気環境：４．
４．
１．
２１）
（１）
または２）
と同様に操作する．
② 排出源：４．
４．
１．
２１）
（３）
と同様に操作する．
〔試験溶液および空試験溶液の調製〕４．
４．
４１）
と同様に
操作する．
〔試験 操 作〕① 試 験 溶 液 vml お よ び 空 試 験 溶 液 vml
ずつをそれぞれ分液漏斗にとり，＊これに２５％ クエン酸
二アンモニウム溶液１０ml を加える．これにブロムチモ
ールブルー試液２滴を加えて溶液の色が黄色から緑色になるまでアンモニア水で中和する２）．これに４
０％
（NH４）
２SO４
溶液１
０ml および水を加えて，１００〜２
５０ml の間の一定量とする．これに１
０％ EDTA 溶液１
０ml３），アセチルア
セトン５ml および４―メチル―２―ペンタノン（＝メチルイソブチルケトン，MIBK）
２
０．
０ml を加えて１分間激しく振り混ぜる．MIBK 層の分離後，MIBK 層を分取し，この液について N２O ―アセチレン炎を用い４），測定波長２３４．
９nm において原子吸光光度法を行い，試験溶液および空試
験溶液中の Be 量（μg）
を求める５）．
検量線の作成：Be 標準溶液０〜２０．
０ml を段階的にとり，それぞれ水を加えて２５．
０ml とし，Be 標準系列とする．この Be 標準系列をそれぞれ分液漏斗にとり，〔試験操作〕の＊印以下と同様に操作し，Be 量
（μg）
と吸光度
（ピ
ーク高）
の関係をプロットして検量線とする．
計 算：試料空気中の Be 濃度（μg／m３）は次式から算出
する．
１
２
５ S０
Be（μg／m３）＝（a−a０）
× × ×
v S
２
７
３
V×
２
７
３＋t
a ：試験溶液 v ml 中の Be 量
（μg）
（μg）
a０：空試験溶液 v ml 中の Be 量
S ：試験に用いたろ紙面積（cm２）
S０：試料を採取したろ紙面積（cm２）
V ：試料空気採取量（m３）t ：試料採取時の平均温度（℃）
【注解】１）Be をアセチルアセトン錯体として MIBK で抽出し，原子吸光法で定量する方法である．
２）この操作により，試験溶液の pH はほぼ７．
０となる．Be―
アセチルアセトン錯体の生成は pH５〜９の間でほぼ一定値を示す．
３）共存イオンをマスクする目的で加える．

1043

４）Be は C２H２―air 炎では感度が悪い．N２O―C２H２ 炎を用いる高温バーナーを使用すると非常に感度がよくなる．
５）Be１０μg に対し，２００００倍量（２００mg）の Na＋ ，Mg２＋ ，
Al３＋，K＋，Ca２＋，Fe３＋，Cu２＋，Zn２＋，Cd２＋，Pb２＋が共 存 しても妨害しない．
文 献１）Stokinger, H. E．：Berylium：Its Industrial Hygiene
Aspects, Academic Press（１９６６）２）ACGIH：TLVs for Chemica１Substances in the Work
Environment
（２
００
３）

３）バナジウム１）
大気環境および作業環境の測定に用いる．
【注解】１）V は自然界に広く分布し，地殻構成元素比を示すクラー
ク数は０．
０１５
（第２３位）
であり，一般土壌中の含有量について平均１００mg／kg，多くは３００mg／kg とされている．また，V は石炭，石油など化石燃料中に比較的多く含まれ，火力発電，産業，
暖房などに用いられる燃料の消費量が増大するに伴って，大気汚染の影響が注目されるようになってきた．
石炭中には，V が有機物と結合して存在するものと考えられており，V 含有量として１５〜３５mg／kg，９２mg／kg，１７６mg／kgという分析結果が報告されている．灰分中 V 含有量については
０．
００
１〜０．
１
１％ という幅広い分析結果も見られる．
V は，石油中の各種有機金属成分の大部分を占め，V２O５ 換
算 含 有 率 が 中 央 ア ジ ア 原 油 に０．
０１％，ベ ネ ズ エ ラ 原 油 に
０．
０６％ とされている．
石炭および石油に含まれる V は人類活動における燃料としての利用によって大気中に放出され，これが雨水によって河川および海に注がれ，その年間推定量は１９７１年の資料によると，自８００００
然現象による河川水中溶解分３２０００t，河川水中粒子分２t，総量３１２０００t と報告されている．また，人類活動に伴う石２００t，総炭燃焼による発生分３５００t，石油燃焼による発生分８
量１２０００t と示されている．
１t
海水中の V 濃度は２μg ／l とされ，年間海水保持量は３．
と示されている．
生活環境中の V は，主要都市の大気中 V 濃度としては，１９６０〜１
９６
５年にかけてアメリカ合衆国の各地で測定された資料によ
ると０．
０
０
０〜０．
０
７
１μg／m３ の幅がみられる結果が報告されている．
また，１９６４〜１
９６
５年にかけてヘルシンキで大気浮遊ばいじん
中に V が測定された報告がある．これは，工業地区，半工業地
区，住宅地区の別に人口密度を考慮して６カ所で調査された結果で，浮遊ばいじん中 V は地区別平均値が０．
１０２〜０．
３９９μg／
m３ であり，この濃度差には雨や雪のほか，風の影響が関係している．
日本では，１
９６８年４月から１９７０年３月にかけて国設大気汚染監視網（９測定点）における浮遊粉じん中の V の測定結果があるが，年間平均値に０．
０４４〜０．
２４５μg／m３ の幅がみられた．食
品中の V は分析例が非常に乏しいが，１９７４年の Schreder の
５μg／g，果物類０．
１μg／
資料によると，殻類１．
１μg／g，野菜１．
g，肉類０．
１μg／g，海産物１．
７μg／g，油脂類３〜４０μg／g という報告がある．また，１９７８年直井らの資料によると，米２３０〜
９０ng／g，レタス２０ng／
８２０ng／g，食パン７０ng／g，鶏卵３７０〜６g，ワイン０．
０６〜０．
２６mg／l という報告もある．
V が体内に吸収される経路には２通りあり，飲食物を通じて1044

４．環境試験法

消化器から吸収される場合と，吸入空気中の微細粒子が肺から血液に溶けて吸収される場合に分けられる．日常の生活環境から体内に摂取される V 量には，１日摂取量で空気から９．
５μg／
day，食物・水から１１６μg／day であり，大部分（９２％ 以上）が飲食物を通じて摂取されることがわかる．
人体内の V 量については，成人欧米人の体内総量で約２０mg，
この９０％ 以上が脂肪組織中に含まれ，血液中には全体の約０．
５％ に相当する V を含み，その約８５％ が赤血球に含まれる．
V は V２O５ または NH４VO３ の形で，特殊鋼の原料として使用され，また，触媒としてあるいは陶器のうわぐすりとしても使用されている．
したがって，これらの工業や V の原料であるカーノタイト，
パイロライトといった鉱石の精錬などの場合には V による中毒を起こす可能性がある．
また，重油中には V がメゾポルフィリンメチルエステルのキレートとして油溶性の形で存在しており，重油の燃焼灰中には最高８０％ もの V の酸化物が含まれていることがある．
このため煙道あるいはバーナーの掃除などの機会に中毒を起こした例がかなり報告されている．
人体影響の面から注意されるのは吸入による障害であり，特に，V２O５ は毒性が強い．V２O５ による障害は，呼吸器の刺激あるいは体内での代謝障害によって起こり，産業職場では比較的顕著な症状を呈する急性・慢性中毒者が発生している．
一般生活環境で の 大気中V による中毒例はなく，多くはバナジウム製造工場などの作業者に中毒患者がみられる．
中毒症状としては，皮膚蒼白，貧血，衰弱，めまい，せき，
舌苔，神経障害などであり，顔面，特にあごとほほににきび様
ふきでものができることがある．また，呼吸器系に炎症を起こした例も多い．
生理作用としては，血清コレステロールの減少と肝のリン脂質の減少が顕著である．前者はコレステロール生合成の重要なステップであるヒドロキシメチルグルタル酸のメチルクロトン酸への転換を妨害することにより，また後者は，リン脂質中の脂肪酸を酸化する作用があることによるとされている．
労働衛生上の許容限度は，V２O５ の粉じん，フュームの場合〔ACGIH（２００３）〕とされている．
０．
０５mg／m３（１）原子吸光光度法による定量１）〔試 薬〕① V 標準溶液：２．
４．
１．
４１）
と同様に操作してV保存溶液を調製する．この V 保存溶液を HCl ０．
５mol ／ lで２００倍に希釈して V 標準溶液とする．
V 標準溶液１ml ＝０．
５０μg V〔装置および器具〕① ２．
４．
１．
４１）
に同じ
〔試料の採取〕① 作業環境および大気環境：４．
４．
１．
２１）
の１）
または２）
と同様に操作する．
② 排出源：４．
４．
１．
２１（
）３）
と同様に操作する．
〔試料溶液および空試験溶液の調製〕４．
４．
４１）
と同様に
操作する．
〔試験操作〕
炭素管フレームレス原子化の条件２）
シースガス
（N２）
量：２．
０l ／minlamp current：９．
０mA
乾燥（drying）
：３
０
０℃，２
０秒
灰化
（ashing）
：１
５
０
０℃，３
０秒
原子化
（atomizing）
：２
８
５
０℃，１
０秒
定 量：２．
４．
１．
４１（
）１）
と同様に操作する．試験溶液および空試験溶液の注入量は１０．
０μl とし，次の条件で測定
４）．
する３）
検量線の作成：V 標準溶液を０．
５mol／l HCl で希釈して１ml 中に０．
０〜０．
５μg の間の V を含む数段階の標準系列を調製する．この標準系列それぞれ１０．
０μl を炭素管フレ
ームレス原子吸光光度計に注入し，原子吸光法を行う．各標準系列の V 濃度
（μg／ml ）とピーク高との関係をプロットして検量線とする５）．
は次式から算出
計 算：試料空気中の V 濃度
（μg／m３）する．
V 濃度（μg／m３）１S０＝（a−a０）
×２
５×
×
S
２
７
３
V×
２
７
３＋t
a ：試験溶液中の V 濃度
（μg／ml ）a０：空試験溶液中の V 濃度
（μg／ml ）S ：試験に用いたろ紙の面積（cm２）
S０：試料を採取したろ紙の面積（cm２）
３V ：試料空気採取量（m ）t ：試料採取時の平均温度（℃）
【注解】１）V の原子吸光法には N２O―C２H２ 炎を用いる方法もあるが，炭素管フレームレス法を用いれば特に高温バーナーを必要とせず，簡便にしかも高感度の測定ができる．
２）V は原子化に高温を必要とするので，しばしばメモリー現象がみられる．
その場合は１試料を測定し終わったら，２
９０
０℃，１０s でクリーニングを行い，蒸留水を注入して測定条件例に従って測定し，
V のメモリーが消失したことを確認して，次の測定を行うようにする．
３）原子化のとき，
シースガスを止めて行えば感度が上昇する．
４）対象が道路粉塵のようにマトリックスの多い試料である
場合は，標準添加法を用いてマトリックスの影響を除くことが望ましい．
５）この範囲で検量線は直線となり，０．
２μg／ml の V 標準溶液による５回測定の標準偏差は１．
６７％ である．

４）ク ロ ム１）
【注解】１）空気中の Cr による障害は，ほとんど６価の Cr 化合物によるものであり，皮なめし，クロムメッキ工場などで中毒事故の起こることが多い．
６価 Cr はその強い酸化作用により，接触部位の皮膚や粘膜を刺激し，腐食する．したがって，症状は手指，前腕，顔面のような露出部にまず現れ，発赤・丘しんが生じ，やがて湿疹化する．また，アレルギー様皮膚炎に移行することもある．
６価 Cr を含むヒュームやミストの吸入はしばしば鼻の障害を起こす．鼻中隔粘膜に充血を生じ，化膿し，鼻中隔の腫脹および肥厚を経て潰傷を形成し，さらに進めばせん孔を生じる．
また，呼吸器を刺激して炎症を起こす．
ACGIH の閾限界値（TLV）
は金属 Cr，Cr３＋いずれも Cr とし
０５mg／m３ である〔ACGIH，て０．
５mg／m３ であるが，Cr６＋は０．
２００
３〕
．

４．
４ 空気試験法（１）原子吸光光度法による定量１）〔試 薬〕① Cr 標準溶液：２．
４．
１．
４２〔
）試薬〕
に準じて，
Cr 保存溶液を調製する．
Cr 保存溶液１．
０ml ＝１０００μg Cr００倍 に 希 釈 し て Cr
Cr 保 存 溶 液 を０．
５mol／ l HCl で１標準溶液とする．
Cr 標準溶液１．
０ml ＝１０．
０μg Cr② La 溶液：La２O３５９g をとり，１
８％ HCl２
５０ml を少量ずつ加えて溶かし，水を加えて５００ml とする．
③ NaCl 溶液：NaCl５
５g をとり，０．
５mol／ l HCl を加えて溶かし，５００ml とする．
〔装置および器具〕① 原子吸光装置：フレーム原子化部を有するもの．
その他の詳細は２．
４．
１．
４１〔
）装置〕
に同じ．
② Cr 中空陰極ランプ〔試料の採取〕① 作業環境および大気環境：４．
４．
１．
２１）
（１）
または
（２）
と同様に操作する．
② 排出源：４．
４．
１．
２１）
（３）
と同様に操作する．
２） 試料が付着した〔試験溶液および空試験溶液の調製〕
ろ紙の一定面積を正確に切りとり，これを細切して白金るつぼに入れ，電気炉中約５５０℃ で灰化する．冷却後，４４％
H２SO４ 数滴と４６％ HF２０ml を加えホットプレート上で穏やかに加熱する．H２SO４ の白煙が発生し始めたら強熱し，白煙の発生が終わるまで加熱を続ける．冷却後，４４％
H２SO４ 数滴と４６％ HF５ml を加え，ふたたび白煙が発生しなくなるまで加熱する．
次いで，Na２CO３１g を加え３），ふたをしてバーナー直火
で徐々に温度を上げ，約５分間溶融する．冷却後，１８％HCl２５ml を注意して加え，沸騰水浴上で加熱して融成物を完全に溶かし，５０ml のメスフラスコに移す．これにLa 溶液２ml を加えたのち，水を加えて５０．
０ml とし，試験溶液とする．
別に，試料を採取していないろ紙の同一面積を用い，同様に操作して空試験溶液とする．
４）〔試験操作〕
定 量：２．
４．
１．
４２）〔試験操作〕① と同様に操作し，Crの吸光度（ピーク高）
を求め，検量線に照らして試験溶液および空試験溶液中の Cr 濃度（μg／ml ）を求める．このとき，フレームの条件は多燃料フレーム，たとえば，アセチ
レン３．
５l ／min，空気１
０l ／min とする．
検量線の作成：Cr 標準溶液０〜２０．
０ml を段階的に５０
ml のメスフラスコにとり，それぞれに NaCl 溶液１０mlと La 溶液２ml を加え た の ち，０．
５mol／ l HCl を 加 え て
５０．
０ml とし，Cr 標準系列とする．この溶出液について
原子吸光光度法を行い，吸光度（ピーク高）と濃度（μg／ml ）の関係をプロットして検量線を作成する．
計 算：試料空気中 の Cr 濃 度（μg／m３）は次式から求
める．
１
S０
Cr 濃度
（μg／m３）＝（a−a０）
×５
０× ×
S
２
７
３
V×
２
７
３＋t
５
０：試料溶液量（ml ）a ：試料溶液中の Cr 濃度（μg／ml ）1045（μg／ml ）a０：空試験溶液中の Cr 濃度
S ：測定に用いたろ紙の面積
（cm２）
（cm２）
S０：試料を採取したろ紙の面積
V ：試料空気量（m３）
t ：試料採取時の平均温度（℃）
【注解】１）Cr の原子吸光法を行う際に，La 溶液を添加すると，共存イオンによる干渉を除くことができる．本法では La イオン
を４０００μg／ml になるように添加することとした．
２）Cr 化合物には酸に不溶解性のものが多く，酸分解法で試
験溶液を調製した場合，定量値がばらつくことがある．本法では再現性のよい結果を得るため，試験溶液の調製にアルカリ融解法を用いた．
air―C２H２ フレーム原子吸光法で Cr を定量するときの共存イ
オンによる干渉は，試料溶液中に La４０００μg／ml を加えることに よ り，抑 制 で き る．Cr０．
５μg／ml に 対 し，Al３＋，As３＋，
Ba２＋ ，Ca２＋ ，Cd２＋ ，Co２＋ ，Cu２＋ ，Fe２＋ ，Hg２＋ ，K＋ ，Li＋ ，
Mg２＋，Mn２＋，Mo４＋，Na＋，Ni２＋，Pb２＋，Sb３＋，Se４＋，Si４＋，００μg／ml ま で，Pb２＋はSn２＋，Ti４＋，V５＋，Zn２＋は い ず れ も２１００μg／ml まで共存しても妨害しない（表 I）．
３）HF で処理したのちの残さが多い場合は Na２CO３ の添加０倍が適当である．Na２CO３
量を増す．Na２CO３ は残さの５〜１を増した場合は，増分１g につき，融成物の溶解に使用する３の 項 の NaCl 溶 液 を１０ml の
mol／l HCl を６ml ，〔試 験 操 作〕
割合でそれぞれ増す．
４）多燃料フレームを使用することにより，感度が向上する．
この条件での感度（１％ 吸収）
は０．
０４８μg／ml 程度である．

表 I 共存元素の影響（Cr 添加量０．
５００μg／ml ）元素名

Al （III）
As （III）
Ba （II）
Ca （II）
Cd （II）
Co （II）
Cu （II）
Fe （II）
Hg （II）
K （I）
Li （I）
Mg （II）
Mn （II）
Mo（IV）Na （I）Ni （II）
Pb （II）
Sb （III）
Se （IV）
Si （IV）
Sn （II）
Ti （IV）
V （V）
Zn （II）

濃度
（ppm）
２
０
０
２
０
０
２
０
０
２
０
０
２
０
０
２
０
０
２
０
０
４
０
０
２
０
０
２
０
０
２
０
０
２
０
０
２
０
０
２
０
０
２
０
０
２
０
０
２
０
０
１
０
０
２
０
０
２
０
０
４
０
０
２
０
０
２
０
０
２
０
０
２
０
０

Cr 測定値（μg／ml ）０００μg／mlNa５０００μg／ml Na５La４０００μg／ml
０．
４
７
２
０．
５
０
０
０．
５
０
５
０．
４
８
５
０．
５
０
０
０．
２
７
１
０．
５
０
５
０．
３
１
４
０．
５
０
３
０．
５
０
８
０．
４
９
５
０．
４
２
８
０．
５
０
０
０．
５
０
０
０．
５
０
２
０．
２
４
２
０．
５
０
５
０．
５
０
０
０．
５
０
５
０．
５
０
０
０．
４
８
８
０．
４
９
５
０．
２
７
１
０．
４
０
０
０．
５
０
５

０．
４
９
５
０．
５
０
０
０．
５
０
０
０．
５
０
０
０．
５
０
５
０．
４
９
５
０．
５
０
５
０．
５
０
０
０．
５
０
０
０．
５
０
０
０．
４
９
５
０．
５
０
０
０．
５
０
５
０．
５
０
１
０．
５
０
０
０．
５
０
０
０．
４
５
７
０．
４
９
５
０．
５
０
５
０．
５
０
０
０．
５
０
３
０．
５
０
５
０．
５
０
５
０．
４
９
５
０．
５
０
０

1048

４．環境試験法
ワッシャ
空気
O-リング
袋ナット
テフロン製
（アルミニウム製）

図 I 水銀捕集管の密封の例

またメチル水銀蒸気もよく捕集され，容易に無機水銀となる．
KMnO４ は製品によって Hg を含有していることが多いので，約１時間煮沸して MnO２ の沈殿を生成させたのち，ろ過してろ液を用いる．この操作により空試験の吸光度をほとんど０にすることができる．
２）還元気化法を行う場合には，あらかじめ試験溶液に H２SO４
を加えて２
０％
（v／v）
H２SO４ 溶液になるように調製する．

【注解】
１）水銀捕集管を図 4.4.4−3 に示すように水銀測定装置の所
定の位置（C の個所）に装着し，〔試験操作〕に従って吸着している水銀を追い出し，水銀が検出限界近くまでなっていることを確認する．次にこの捕集管をただちに両端をネジ式のテフロン製でふたをし，すばやく密封する（図 I）．
そののち，捕集管が手で触れられる程度に冷却された時点でふたたび両端を確実に密封する．密封した捕集管はただちに，
たとえば酸素透過度の低い包材の袋に入れ３重にポリシーラー
で密封しておく．
またこれら捕集管の保存または移動にはポリプロピレンの留め金付き密閉容器を用いるとよい．
２）紫外部吸収セルよりうしろの位置に第３捕集管（未使用）を付加することにより，再測定用の試料を得るとともに排ガスを浄化することができる．

（２）湿式捕集・原子吸光光度法による定量
排出源排ガスのように水分含量の多い試料の場合は，乾式捕集法が使用できないので，KMnO４ 溶液を捕集液とす
る湿式捕集法を用いる．
〔試 薬〕① 吸収液：三角フラスコに０．
５mol ／ l H２SO４
１
０
０
０ml および KMnO４１g を入れ，漏斗をかぶせて約１時
間静かに煮沸したのち，冷後ろ過し，これを吸収液とす
る１）．
② 水銀標準溶液：２．
４．
１．
４６）に同じ．
〔試験溶液および空試験溶液の調製〕４．
４．
１．
１１）に準拠し，インピンジャーまたは吸収瓶に吸収液２０ml をとり，
１ l ／min の速度で試料空気を通じる．
次いで１０％ 塩酸ヒドロキシルアミン溶液を滴加して，
KMnO４ の色を脱色したのち，水を加えて全量１
０
０．
０ml
２
）
とし，試験溶液とする ．
別に，吸収液２０．
０ml に１０％ 塩酸ヒドロキシルアミン
溶液を滴加して，KMnO４ の色を脱色したのち，水を加えて１００．
０ml としたものを空試験溶液とする．
〔試験操作〕２．
４．
１．
４６）に従って行う．
計 算：試料 空 気 中 の Hg
（mg／m３）は次式から求められる．
１
Hg（mg／m３）＝（a−a０）
×
２
７
３
V×
２
７
３＋t
a ：試料採取した捕集管の Hg 量
（μg）
（μg）
a０：試料を採取していない捕集管の Hg 量
V ：試料空気採取量（l ）t ：試料採取時の平均温度（℃）
【注解】１）この吸収液は Hg 蒸気を効率よく捕集する．通常，吸収瓶は１本で十分である．

６）アンチモン１）【注解】１）Sb の用途，毒性などについては２．
４．
１．
４９）を参照．
ACGIH の定める作業環境中の閾限界値（TVL）は，Sb 化合物
を Sb として求めた場合０．
５mg／m３ として い る．ま た，１９９７
年版で新たに SbO３ の製造過程で生成する物質に発がんの疑いがあると指摘している．

（１）原子吸光光度法による定量１）〔試 薬〕① TOPO・４―メチル―２―ペンタノン（＝メチル
イソブチルケトン，MIBK）
溶液：TOPO〔tri―n―octyl phosphine oxide（C２４H５１OP）〕
１g を MIBK に溶かして１
０
０ml
とする．
② KI・アスコルビン酸溶液：KI３０g および L―アスコ
ルビン酸１０g を HCl１
０ml に溶かし，さらに水を加えて
１００ml とする．この溶液は使用のつど調製する．
③ Sb 標準溶液：金属 Sb（９９．
９％ 以上とする）
１
０
０．
０mg
に H２SO４２
５ml を加え，注意して加熱溶解する．これをメスフラスコに移し，２
５％ H２SO４ を加えて１０００ml とし，
これを Sb 標準原液とする．
Sb 標準原液１．
０ml ＝１００．
０μg Sb
Sb標準原液１００．
０mlをメスフラスコにとり，２
５％H２SO４を加えて１０００ml とし標準溶液とする．この溶液は，使用のつど調製する．
〔試料の採取〕① 作業環境および大気環境：４．
４．
１．
２１）
と同様に操作する．
② 排出源：４．
４．
１．
２１）
（３）
と同様に操作する．
〔試験溶液および空試験溶液の調製〕４．
４．
４１）
と同様に
操作する２）．
〔試験操作〕定 量：試験溶液 v ml（通常１
０．
０ml ）
およ
び空試験溶液 v ml ずつをそれぞれの１００ml の分液漏斗にとり，＊これに HCl１
０ml および KI・アスコルビン酸
溶 液１０．
０ml ず つ を 加 え，数 分 間 放 置 す る．次 い でTOPO・MIBK 溶液１０ml を加えて３０秒間振り混ぜる．
MIBK 層の分離後，MIBK 層を分取し，この液について
測定波長２
３
１．
１nm において原子吸光光度法を行い，吸光度を測定し，検量線に照らして試験溶液および空試験溶液
中の Sb の量（μg）
を求める．
検量線の作成：Sb 標準溶液１０．
０ml 以下を段階的にとり，それぞれ水を加えて１０．
０ml としたのち，これを＊以下と同様に操作して吸光度を測定する．
吸光度と Sb の量（μg）の関係をプロットして検量線を作成する．
計 算：試料空気中の Sb 濃度は，次式から求められる．

４．
４ 空気試験法

Sb（μg／m３）＝（a−a０）
×

２
５
×
v

１

２
７
３
V×
２
７
３＋t
a ：試験溶液中の Sb 量
（μg）
（μg）
a０：空試験溶液中の Sb 量v ：試験に用いた試験溶液量（ml ）３V ：試料空気採取量（m ）t ：試料採取時の平均温度（℃）
【注解】１）この方法の原理は，Sb 化合物を KI・アスコルビン酸を（tri―n―octyl phosphine
加えることにより，SbI３ とし，TOPO
oxide）と錯化合物を生成させて，MIBK で抽出して原子吸光光度法を行うものである．直接原子吸光光度法に比べて，抽出により濃縮ができるため感度を向上させることができるのと，共存イオンの影響を受けない利点がある．
０
００倍共存しても影響はなく，（NH４）
Fe３＋が２
２SO４ や NaCl
といった塩類が１０％ 程度共存する試料でも何ら妨害なく定量することができる．
２）本法は NO２−によって妨害を受けるので，試料を湿式分解した場合は NO２−を完全に除くことが必 要 で あ る．も し，０％ スルファミNO２−の残留の可能性がある場合は，分解後１ン酸溶液を添加して NO２−を除去する．

７）セ レ ン１）（１）蛍光光度法による定量２）〔試 薬〕① Se 標準溶液：２．
４．
１．
４１
１）
に同じ．
② ２，
３―ジアミノナフタレン溶液：２．
４．
１．
４１
１）
に同じ．
③ EDTA 溶液：０．
１mol／l エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム溶液〔試料の採取〕４．
４．
２１）と同様に操作する．
〔試験溶液および空試験溶液の調製〕試料の付着したろ紙の一定面積を正確に切り取り，細切して１００ml のビー
カーに入れ，HNO３３０ml を加えホットプレート上で加熱する．液量が約１０ml になればいったん放冷し，６０％
HClO４１０ml および HNO３２
０ml を加え徐々に温度を上げて HClO４ の白煙が発生したらただちに放冷し，HNO３
１０ml を追加し，ふたたび HClO４ の白煙が発生するまで加熱する．この操作を溶液がほとんど無色となるまで繰り返したのち，ビーカーを時計皿で覆い，HClO４ がビーカ
ー壁を流れ落ちるまで加熱し，放冷する．これに水１００mlを加え No．
５３のろ紙を用いてろ過し，ろ液を２５０ml のメスフラスコに入れる．ビーカー内の残留物およびろ紙を水で洗い，洗液をメスフラスコに合わせ，水を加えて全量を２
５０ml とし，試験溶液とする．別に試料を採取したろ紙と同面積の新しいろ紙を用いて同様に操作し，空試験溶液とする．
〔試験操作〕定 量：試験溶液および空試験溶液のそれ
ぞれ１０．
０ml ずつをそれぞれビーカーにとり，＊１
０％ HCl１
０ml ，１０％ スルファミン酸アンモニウム溶液２ml３）および塩酸ヒドロキシルアミン２g を加え４），沸騰水浴上で
１
０分間加温する５）．冷後，これに０．
１mol／l EDTA 溶液２
ml を加えたのち，pH メーターを用い，１０％ HCl あるい

1049

は１
０％ NaOH 溶液を加えて pH を１．
０〜２．
０に調整し，次００ml とする．これに２，３―に０．
１mol／l HCl を加えて１ジアミノナフタレン溶液５ml を加えたのち，時計皿で覆い，５０℃ の水浴中で３０分間放置する６）．冷後，ビーカーの内容液を分液漏斗に移し，シクロヘキサン２０．
０ml を加え，５分間振とうし，静置したのち，シクロヘキサン層
５ml ずつで２回洗浄を分取し，これを０．
１mol ／ l HCl２
する．シクロヘキサン層は，速やかに乾燥ろ紙を用いてろ過し７），ろ液について，励起波長３７８nm，蛍光波長５２０nmにおける蛍光強度を測定し，検量線に照らして試験溶液および空試験溶液中の Se 濃度（μg／ml ）を求める．
検 量 線 の 作 成：Se 標 準 溶 液 を 水 で 希 釈 し て０．
０
２
０〜
０．
１
０μg／ml の Se 標準系列を作り，この標準系列それぞれ１
０ml ずつを２００ml のビーカーにとり，試験操作の＊印以下と同様に操作し，蛍光強度と Se 標準系列の濃度（
μg／ml ）の関係をプロットして検量線を作成する．
計 算：試料空 気 中 の Se 濃 度（μg／m３）は次式から求める．
１
S０
Se（μg／m３）＝（a−a０）
×２
５
０×
×
S
２
７
３
V×
２
７
３＋t
a ：試験溶液中の Se 濃度（μg／ml ）a０：空試験溶液中の Se 濃度（μg／ml ）S ：試験に用いたろ紙の面積（cm２）
S０：試料を採取したろ紙の面積（cm２）
V ：試料空気採取量（m３）t ：試料採取時の平均温度（℃）
【注解】１）Se は As と同様金属と非金属の中間的性質を持つメタロ
イド（亜金属）に属する．
Cu，Ni，Pb，Hg などの硫化物鉱石中に金属セレナイドとして共存している．
Se は半導体，充電池などの電子工学的用途に広く用いられるほか，ガラス原料，無機顔料，ステンレス鋼研磨剤などにも使用されている．
Se は必須元素であり，微量は生体に必要であるが，過量になると中毒症状を呈する．必須元素としての作用は，ビタミンE 類似のもので，主として筋肉の退化防止に効果がある．ヒトにおける欠乏症は知られていないが，ヒツジ，ウシ，ウマなど
では筋肉が退化した白筋症（white muscle desease）が発生し，
０．
１〜０．
２mg Se／kg の投与で治癒した例がある．
過量の摂取あるいは暴露は中毒を起こすが，中毒を起こす量は Se の化学形により異なる．Na２SeO３ のような可溶性塩の大量投与では呼吸困難，強直けいれん，後弓反張，血圧降下がみられ，ラットの LD５０ 値は７mg／kg である．一方金属 Se の LD５０値は６７００mg／kg とされている．作業環境でヒトが暴露される機会が多いのは，Se 金属のヒュームか，酸化セレンの粉じんであるが，この場合の症例としては単純な刺激作用であることが多い．すなわち，鼻，眼，気管の刺激，せき，頭痛，金属性
味覚などである．大量の Se を吸入した場合は，呼気ににんにく臭が認められる．
可溶性 Se 塩の投与実験によると，吸収率は高く，消化管か
らほぼ１００％ 吸収される．そして，その約半量は速やかに尿中に排泄され，約３０％ は肺から揮発性 Se 化合物として排泄されて，呼気がにんにく臭を帯びる．

1056

４．環境試験法

上影響は小さい．
本法を用いた連続自動測定用機器が市販されている．連続自動測定法については衛生試験法・注解１
９
９
０，付．
追補
（１
９
９
５）
の
４．
４．
４
（１６）２）を参照．
２）吸収液は試薬特級または指定試薬の KI を脱イオン水を用いて，リン酸緩衝液で１％ 濃度とし，pH７±０．
２になるように，１０％ NaOH または H３PO４ で調整する．市販の試薬 KI には不純物として，チオ硫酸塩を含んでいることがある．チオ硫
２NaI＋Na２S４O６ の反応のとおり，I２
酸塩は２Na２S２O３＋I２を消費する．したがって，KI はチオ硫酸塩を含まないものを用いるのが望ましい．また，調製後の吸収液に I２ を添加しチオ硫酸塩を除く方法もある．
３）オキシダントまたは O３ がすべて吸収液中に捕集されて，KI と完全に反応するとして，O３ と等モルの I２ 溶液を調製する．
４）スクラバーとしては SO２ などの還元性物質を除去するた
め CrO３ 含浸紙を用いている．
５）インピンジャーは１本を用い，恒温水槽などを用いて２０±１℃ に保ちながら，試料大気を約３０分間通気する．通気後インピンジャー内溶液の水分損失量を脱イオン水を加えて１０．
０ml に補正し，１
５分間同一温度に保ったのち吸光度を測定する．
５２nm であるが，この付近に最大吸収を
I３−の最大吸収波長は３示す干渉物質は認められないので，３５０nm の一定波長で吸光度を測定すればよい．
インピンジャーによる O３ 捕集率の１例を図 I に示す．捕集用インピンジャーはわが国では１本を用いるとしているが，１l ／min で通気した場合２０℃ でも I２ ガスの揮散が認められる．イ
ンピンジャーを４本直列につなぎ，同様の操作を行い，O３ を60 ppb オゾン 1本目
60 ppb オゾン 2本目
290 ppb オゾン 1本目
290 ppb オゾン 2本目

100

保持率（％）

80
60
40
20

0

10

20
30
液 温（℃）

40

図 I ヨウ化カリウム溶液のオゾンガス捕集（京都府：１９８３）
表 I ヨウ化カリウム溶液のオゾンガス捕集
オゾン

６
０ppb

２
９
０ppb

吸光度（３
５
２nm）
液温
（℃） １本目 ２本目 ３本目 ４本目

捕集した実験では表 I のとおり２０℃ でほぼ完全に捕集されるが２本目の吸収液からも I２ が認められる．
したがって，捕集時の温度を２０±１℃ に制御する必要がある．
文 献１）オキシダント自動測定機の指示値に対する温度影響等について，常時監視物質測定等検討会（１９８６）２）環境大気常時監視マニュアル，環境庁大気保全局（２）化学発光法によるオゾンの連続自動測定法１）O３ とエチレンが反応すると発光することを利用した方法で，オキシダントのうちの O３ のみを特異的に定量することができる．
測定範囲は０〜１．
０ppm である．
〔試 薬〕① 校正用ガス：O３ は保存できないので，そのつど O３ 発生器で発生させ中性ヨウ化カリウム吸光光度
法で濃度を決める．
〔装 置〕① 連続自動測定器：試料採取部２），化学発光
分析計，指示記録計３）などから構成される．
化学発光分析計は，図 4.4.4−6 に示すように流量制御
４部 ），反応槽５），光電測光部６），発光用ガス７）などからなっている．
〔試験操作〕化学発光分析計および指示記録計のスイッチを入れる．指示が安定してから校正用ガスを用いてゼロ
およびスパンの調整を行う８）．次いでポンプなどを作動させて試料ガスを連続的に導入し，目的成分の濃度を連続的に測定する．
【注解】１）一般に化学反応に伴う反応物質の励起，あるいは原子がほかの分子や原子に衝突することで，原子が励起されそれが基底状態に戻るとき，光子を放出する現象を化学発光（chemiluminescence）という．この化学発光原理を利用して，大気中の目的成分を測定する方法が化学発光法である．
目的成分濃度と化学発光効率の間に次の式が成り立つ．
I（t）（photon／s）
dC（t）（反応分子数／s）＝ E（photon／反応分子数）×dt
I ：化学発光強度
E ：化学発光効率t ：時間
C ：目的成分濃度
したがって，I を測定することにより，C（濃度）が得られる．
化学発光法による微量の大気汚染物質の測定には，微少発光の測定技術の進歩によるところが多い．

合計

１
０
２
０
３
０
４
０

０．
０
８
７
０．
０
８
０
０．
０
７
０
０．
０
５
９

０．
０
０
４
０．
０
０
９
０．
０
１
６
０．
０
２
０

０．
０
０
２
０．
０
０
３
０．
０
０
６
０．
０
０
８

０
０．
０
０
２
０．
０
０
４
０．
０
０
４

０．
０
９
３
０．
０
９
４
０．
０
９
６
０．
０
９
１

１
０
２
０
３
０
４
０

０．
４
１
９
０．
３
７
９
０．
３
２
８
０．
２
５
５

０．
０
２
４
０．
０
４
５
０．
０
７
６
０．
１
０
３

０．
０
０
３
０．
０
０
６
０．
０
１
７
０．
０
３
６

０
０．
０
０
３
０．
０
０
８
０．
０
０
９

０．
４
４
６
０．
４
３
３
０．
４
２
９
０．
４
０
３

（京都府：１９８３）

排出試料ガス入口

流量制御部

排出

発光用ガス
入口

反
応
槽

光電測光部

流量制御部

図 4.4.4−6 化学発光分析計の構成例

指示記録計

４．
４ 空気試験法
オゾンの化学発光には気相と固相または液相との反応による不均一系と，気相と気相との反応による均一系がある．現在，
化学発光法を原理にしたガス分析計は均一系の方式である．この方式は気相反応で生じる固有の発光の波長を選択的に取り出すことによって，他の方法に比較して共存物質を含む試料に対しても干渉が少なく効率のよい測定方法であり，応答速度が早く，完全な連続測定ができる．
（C２H４），
O３と反応して化学発光する成分として，エチレン
ブチレン，ジメチルブテン，ブテン―２―ジメチルブタジエン，ジメチルヘキサジエン，硫化水素，硫化メチル，メチルメルカプ
タン，トリメチルアミンがある．
発光波長領域はオレフィン類とトリメチルアミンは可視部に，硫黄化合物は紫外部にある．オレフィンのうち C２H４ と O３との化学発光が大気測定用に実用化されている．
C２H４ と O３ 化学発光機構は C２H４ の O３ 酸化によって生成した励起ホルムアルデヒド（HCHO）
が基底状態に戻るとき発光が起きるとされている．
O
O3 ＋ CH 2

H
→

O

O

CH 2 → H C

C

H

H

（（

H

O O

（

H

→

H

H
C

C
H

H

O

H

･
C O

･
O

*

C

＋

O

H

（

HCHO* → HCHO ＋ hv

発光スペクトルは図 I に示すとおり，３００〜６００nm に発光領域があり，極大発光波長は４５０nm にある．また，測定器の構成は図 II に示す．
２）試料採取部は試料中の粉じんを除く，除塵フィルターとして，四フッ化エチレン系のろ紙を用いるが，試料大気のフィルター面への衝突により，O３ が破壊されるのでろ紙は薄く，孔径の大きいものを選ぶ．また，試料導入管には O３ 減少率を小さくするため，四フッ化エチレン系の材質を用い，長さはできるだけ短く，採取時の線速度を大きくして，試料大気との接触

発光強度

時間を短くする必要がある．
３）測定値は瞬間値として得られるが，必要に応じて演算回路が組み込まれて，１時間平均値も得られ記録される．
４）流量制御部は試料大気流量と，化学発光用のエチレンを

300

400
500
波 長
（nm）

600

図 I エチレン−オゾンの化学発光スペクトル（JIS B７
９
５
７，解説）

1057

フィルター
反応そう

試料空気
光電子増倍管
増幅器

指示記録計

高圧電源
エチレン 圧力計
流量計
調整器

流量計
ポンプ
P
試料空気
流量調整弁

エチレン
流量調整弁 エ
チ
レ
エチレン
ン
除去装置

図 II オゾン自動測定器（化学発光法）フローシステムの例（JIS B７９５７，解説）

一定流量で混合するために必要なものである．そこで所定流量制御のために抵抗管（オリフィス），圧力調整器，ニードル弁のほか流量監視のために浮子式面積流量計，圧力計，試料大気吸引ポンプで構成されている．試料大気導入流量は０．
３〜１．
５l ／
min（１l ／min が多い）である．
０ml ／min（２０ml ／min が多い）であ
また，C２H４ 流量は２５〜３
る．試料大気流量と C２H４ との混合比は，測定値に敏感に影響するので，試料大気流量は，厳密に制御する必要がある．
５）反応槽は試料大気と発光ガスが接触して，化学発光させる部分であり，反応槽内の気体混合部は，同心円二重管ノズル
を用い，中央から試料大気，周囲から C２H４ を噴出して混合させる．したがって，反応槽の形状は種々工夫されている．
６）化学発光波長ピークは，４５０nm の可視部であるので，化学発光を選択的に透過させる光学フィルターを介し，光電子増倍管が用いられている．
７）発光用 C２H４ は高圧ガス容器詰めの高純度ガスを一定の混合比になるよう制御して用いられるが，可燃性ガスであるから
高圧ガス保安法の規定などに従い十分注意して取り扱う．
７５％ 以下のガス（バナナ
このため C２H４ の爆発下限界濃度２．
ガス）を用いる測定器もある．原理的には純 C２H４ を用いる測定器と変わらないが，感度調節が必要であり，純ガス用と共用することはできない．
反応槽で発光後，測定器から排出されるガス中には C２H４ が含まれている．これは環境の汚染源になるとともに，炭化水素類の測定の干渉にもなるので，除去処理を行わなくてはならな
い．市販の測定器には C２H４ の除去装置が付属しており，触媒による燃焼除去を原理とした方法がほとんどである．この方法（炭化水素として）除去能力は９９．
９％では６カ月使用後の C２H４以上あるとの報告がある．
８）目盛り校正はゼロおよびスパンについて，校正用 O３ ガスで行う．
ゼロ点校正用ガスは，高圧ガス容器詰めの高純度空気，または活性炭およびソーダーライムなどを通して浄化した精製空気を用いる．スパン校正は最大目盛り値の９０％ 値付近の濃度のO３ ガスで行う．
また，最大目盛り値の中間点指示値の確認も行う．校正用 O３
ガスは保存できないのでそのつど O３ 発生器で発生させる．O３の発生方法はゼロガスを水銀放電管を通す方法で行い，校正用O３ ガス濃度の決定は，１％ 中性ヨウ化カリウム吸光光度法によると定められている．目盛り校正の頻度は測定する周辺状況
によっても異なるが，試料大気導入管，除塵フィルターなどの維持管理をよくすれば，吸光光度法オキシダント測定法に比較

1058

４．環境試験法
基準セル
光
源

回
転
セ
ク
タ

試料セル

試料ガス入口

分
光
部

検 出 器

演算増幅部

指
示
記
録
計

増
幅
器

指
示
記
録
計

排出
試料セル

光
源

光
学
フ
ィ
ル
タ
ー

回
転
セ
ク
タ

検
出
器

試料ガス入口排出図 4.4.4−7 紫外線吸収分析計の構成例
して，感度の安定性，再現性がよいため少なくてよい．

160（３）紫外線吸収法によるオゾンの連続自動測定法１）O３ の２５４nm 付近の紫外線における吸収を利用して測定する方法で，４．
４．
４１
１（
）２）
と同じく O３ のみを特異的に測定できる．
測定範囲は０〜０．
５ppm である．
〔試 薬〕① 校正用ガス：４．
４．
４１
１）
（２）
に同じ．
２
）
〔装 置〕 ① 連続自動測定器：試料採取部３），紫外線吸収分析計，指示記録計４）などから構成される．紫外線吸収分析計は図 4.4.4−7 に示すように非分散形と分散形とがあって，これらは，光源５），光学フィルター６），試料セル７），
検出器８），増幅器，演算増幅器９）などからなっている．
O３ 測定には分散形が用いられる．
〔試験操作〕紫外線吸収分析計および指示記録計のスイッチを入れる．指示が安定したならば校正用ガスを用いてゼロおよびスパンの調整を行う１０）．次いでポンプなどを作動させ試料ガスを導入し，目的成分の濃度を連続的に測定
する．
【注解】

120

１）O３ 紫外線領域に吸収極大波長を持っており，その吸光度から O３ 濃度を測定することができる．
O３ の紫外線吸収スペクトルを図 I に示す．
O３ は２５４nm に極大吸収波長を有し，一般大気中に共存する
CO，CO２，NO，NO２ の影響は比較的受けにくいとされている．
２）紫外線吸収法測定器は分散形，および非分散形があるが，O３ 測定には分散型が採用されている．測定器の構成例は図 IIに示す．
測定器の構造は単一光源，単一受光部で，試料大気導入路と，同じ試料大気を O３ を分解器によって分解した空気の導入路を設けている．この流路を切り換えることによって，試料と O３
不含空気を交互に測定光路セルに導入させる．
すなわち，試料大気中の O３ を分解した試料を，比較用ゼロ
５４nm 付近の吸光度を測ガスとし，試料大気中の O３ による２定し，その差を演算回路で処理して O３ 量を求める．この方法
では，光学系の汚れや共存ガスの影響をほとんど受けずに測定できる．
また応答速度も早く，完全な連続測定ができる．測定下限界は１５ppb 程度である．
３）試料採取部は試料中の粉じんを除く，除じんフィルター

吸収係数（cm−1）

Inn & Tanaka
Ny & Choong

Vigroux

80

40

200

220

240
260
波長（nm）

280300

図 I オゾンの吸収スペクトル

試料空気
ゼ
ロ
試
ガ
料
ス オゾン
空
ラ 分解器
気
排気
イ
電磁弁 ラ
ン
イ
光学フィルタ
ン
光源
光電管
増幅器

指示記録計

試料セル

図 II 紫外線吸収法（オゾン）分析計の構成例

として，四フッ化エチレン系のろ紙が用いられる．また，ろ紙の目づまりにより，測定試料セル内が陰圧になると測定干渉原因になるため，孔径の大きいフィルターを用いる必要がある．
その他の条件，取り扱いは化学発光法と同様である．
４）測定値は瞬間値として得られるが，必要に応じて演算回路が組み込まれて，１時間平均値も得られ，のこぎりの歯状に記録される．
５）光源としては重水素放電管，中圧水銀灯，キセノン放電管，水素放電管が用いられていたこともあったが，現在は原則として低圧水銀灯を用いている．
６）光学フィルターは特定波長領域の吸収または光学的多層膜の干渉を利用して，紫外線を得るために用いる．
７）試料セルは試料大気を一定流量で流し，O３ によって紫外線を吸収させる．材質は軽金属合金の内面に四フッ化エチレン
樹脂を塗付した管である．
８）検出器は光電管または光電子増倍管が用いられる．
９）演算増幅器はゼロ側と測定側の吸光度を比較演算して，指４．環境試験法

0.16

試料空気は図 4.4.5−1 の C１ カラムでメタン，O２ のグループと，それ以外の炭化水素のグループに分けられ，O２
およびメタンは C２ のカラムに送られ，O２ とメタンに分離される．
一方，C１ のカラムに残った炭化水素はバルブ V の切り換えでキャリヤーガスが逆流してバックフラッシュされ，一団となって検出器に送られ，非メタン炭化水素としてピークを示す．次いで O２ とメタンが分離されて検出器に送

上限曲線

0.14
0.12
0.10
0.08
0.06

られてピークを示す．これらのピーク面積から非メタン炭化水素およびメタンがいずれもメタン換算濃度（ppmC）として求められる．
測定範囲は０〜５ppmC から０〜５
０ppmC である．
【注解】

0.04
0.02

0.24 ppm
0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

1.2

1.4

早朝の非メタン炭化水素濃度（ppm）

図 I 非メタン炭化水素とオキシダントの関係〔菅野三郎，福井昭三：環境公害学，廣川書店，p．
７
７
（１
９
７
９）
〕

すなわち，朝６時〜９時の間の非メタン炭化水素濃度を０．
２４ppm 以下に抑えれば，その日のオキシダント値は最高でも環境基準の０．
０６ppm を超えることはない．これを根拠にわが国では午前６時〜９時の非メタン炭化水素の環境基準を０．
２
０〜０．
３
１
ppm C の範囲以下にすることが望ましいとされている．

（１）水素炎イオン化検出法による連続自動測定法１）
大気中の常成分として存在し光化学スモッグ生成に関与しないメタンと，光化学スモッグ生成に関与する非メタン
炭化水素に分別して定量する．
〔試 薬〕漓 スパンガス：メタンを高純度空気で希釈し
てその濃度
（ppm）
を表示したボンベ入りのもの２）．
滷 ゼロガス：高純度空気でボンベ入りのもの，または精製装置を用いて炭化水素を除いた空気３）．
〔装 置〕漓 自動測定器を図 4.4.5−1 に示す．
〔試験操作〕水素炎イオン化分析計４）および指示記録計５）の電源を入れる．試料ガス，燃料ガス６），助燃用空気７）を所定の流量で分析計に流す．点火ボタンを押して検出器のジェットノズルに点火する．
指示が安定したら校正用ガスを導入してゼロおよびスパンの調整８）を行う．次いでポンプなどを作動させて試料ガスなどを導入し，目的成分の濃度を連続的に測定する．

分離部

試料空気

制御部
排気

SL

C2
V
R

検出器

C1

増幅器

指示
記録計

消炎
検知器

ガス流量
制御部

NMHC

排出

１）大気中の炭化水素類を個々の成分について，分別して連続測定することは困難である．そこで，CH４ を除いたそれ以外の非メタン炭化水素を一括して測定する測定器が用いられている．
大気中にはメタンが全炭化水素濃度のかなりの割合（１．
５〜１．
８ppm）で存在しているが，メタンはほとんど光化学反応活性がない．このため，光化学反応活性をもつ炭化水素の評価にはメタンを除いた炭化水素，すなわち，非メタン炭化水素によることが適当である．昭和５
２年３月，大気保全局長通知により午前６時から９時までの３時間について，非メタン炭化水素の
平均値０．
２
０〜０．
３１ppmC（メタン換算）以下が指針値として示され，また，この指針では，非メタン炭化水素を直接法を標準法として測定することも定められている．
測定機構はメタンを分離カラムで，酸素と分離したのち，水素炎イオン化検出器に導入して測定し，次いで CH４ 溶出後，ただちに分離管をキャリヤーガスでバックフラッシュして，非メタン炭化水素を水素炎イオン化検出器に導入して測定するもの
で，直接法と呼ばれている．全炭化水素を求めるにはメタンと非メタン炭化水素の測定値の和を求め る．測 定 範 囲 は０〜５ppmC から０〜５
０ppmC が可能であり，環境の状況によって選択できる．また，環境庁の指針値を測定するには０〜５ppmC
では，なお感度は十分でないと思われる．
測定器の構造は通常，試料採取部，分離部，水素イオン分析部および指示記録計からなっている．
このほか燃料用水素，助燃用空気およびキャリヤーガス N２
供給部が備えられている．流路（A）に O２ と CH４ の分離，低沸点炭化水素保持用，および高沸点炭化水素保持用の３種類のカラムが直列に連結されている．まず，試料大気中の O２ と CH４を非メタン炭化水素から分離し，さらに O２ と CH４ を分離して，CH４ を検出器で測定する．CH４ が測定された時点で，流路を

NMHC

0

CH4

オキシダント一日最高値（ppm）

1084

燃料ガス
助燃ガス
キャリヤーガス

Ｖ：試料導入・流路切換弁， SL：試料計量管
C1，C2：分離管， R：抵抗管

図 4.4.5−1 非メタン炭化水素測定方式（直接法）の構成例

図 I クロマトグラムの例
NMHC：non methane hydrocarbons

４．
４ 空気試験法（B）に切り替え，分離カラムをバックフラッシュして，非メタン炭化水素を測定する．こうして得られるクロマトグラムの例
を図 I に示す．CH４，O２ と非メタン炭化水素の分離カラム充て７５およびアピエゾ
ん剤はポラパック Q，シリコン５
５０，OV―２
ングリースなどが用いられている．O２ と CH４ の分離には活性炭カラムを用いる．
検出されるピークの形状は，非メタン炭化水素構成成分によっても異なるので，必ずしもピーク高と濃度には比例関係がな
い．そのためピーク面積を積分する方法がとられている．また，キャリヤーガスに空気を用いると炭化水素組成によって O２ の影響が異なる，いわゆる O２ 効果が生じるため，キャリヤーガ
スには N２ を用いる．測定値は炭化水素組成にかかわらず，炭素数に比例した感度が得られる．
自動測定器による分析周期は，通常１０分で，この間高濃度
CH４ および非メタン
測定の繰り返しをしたとしても，なお O２，
炭化水素が分離できることが必要である．直接法による非メタン炭化水素濃度は，CH４ に換算して ppmC で表示する．
２）スパンガスは他の標準ガスと異なり，合成空気などの高純度空気で希釈した CH４ が用いられる．試料大気とスパンガ
ス中の O２ 濃度に差があると水素炎中での燃焼条件に影響する．
このため，ゼロ点や感度に変化が生じるので，スパンガスと試料大気の O２ 濃度が同じでないと炭化水素濃度は正確に測定できない．したがって，校正用スパンガス中の O２ 濃度は，空気
９４６％ に近いものを用いる．これによって，酸中の O２ 濃度２０．
素濃度による測定値の影響は０〜１
０ppmC レンジで１％ 以下にすることができるといわれている．
０．
５〜２
０．
９％ で，不純物としての全
３）ゼロガスは O２ 濃度２炭化水素が０．
１ppmC 以下の高純度空気で，高圧容器詰めのもの，あるいは空気精製装置を用いて浄化した空気などを用いる．
一般にはキャリヤーガスを用いてゼロ点調整をしている測定器が多い．
４）水素炎イオン化検出法は，水素炎イオン化検出器を用いて有機化合物を測定する方法であり，一般の FID ガスクロマ
トグラフの検出器と同じものである．試料空気中に有機物が含まれていると，水素炎の熱エネルギーにより炭素がイオン化され，炎が導電性を持つようになる．このとき流れる電流量は試料の流量を一定にした場合，有機物の濃度によって決まることから，電流量を測定することによって，その濃度を求めることができる．
水素炎中でのイオン化効率は炭化水素が最も高く，構成元素に O２，N２，ハロゲンが含まれると低下するが環境中の炭化水素を測定する目的の自動測定の場合，ほぼ炭素数に比例した出力が得られると考えてよく，CH４ を基準にした炭素数濃度で評

点火栓
コレクター電極
排気
ジェットノズル

助燃用空気
試料空気

水素

図 II 検出器の構造例

1085

価することができる．
検出器（図 II）は，水素炎噴出用のジェットノズルに同心円的に配置されたコレクター電極，またはジェットノズルをはさんで対向するコレクター電極と，対電極との間に電位差を与え，イオン化によって生じるイオン電流を増幅器に導くようになっている．
５）測定値は各成分が１０分間を１周期として得られ，次の測定値が得られるまで記録は保持されている．またこの６回の測定値を平均して１時間平均濃度としてトレンド状またはのこぎりの歯状に記録される．
６）燃料ガスは純水素（９９．
９９９％ 以上）を用い，高圧容器詰め，または水素発生器により供給する．H２ は爆発性があるため，水素発生器により，H２O の電気分解法で発生させ，シリカゲルで脱水して用いることが多い．なお，測定器周辺は換気をよくするとともに，水素検知器により H２ 漏れを検知し，電源を自動しゃ断する機構を設けるなどの防爆対策が必要である．
７）助燃用空気は測定器に内蔵されている精製装置によって触媒接触燃焼法で空気を処理して，ポンプで供給される．空気流量は ０.５〜１l ／min である．
８）目盛り校正はゼロおよびスパンについて標準ガスで行う．
ゼロ点は分析過程で O２ 出現直前に自動補正されるため特に校正しない．またピーク面積を積分して濃度を算出する方法がとられているので，ゼロ点の変動は無視できることからも，ゼロ点校正用標準ガスを用いない測定器が多い．スパン校正は最大目盛り値の９０％ 値付近の濃度の CH４ で，３分析周期の間，ス
パンガス導入口から設定流量および圧力で導入して行う．
３周期目の測定値がスパンガス表示濃度と一致するように校正する．
通常，自動測定器では CH４ による目盛り校正のみで，非メタンの感度校正はできない．このため標準ガスとして CH４，C３H８の混合ガス（空気バランス）を用いて非メタン炭化水素の感度を確認しておくことが望ましい．

５）アニリン１）【注解】１）アニリンは bp１８４〜１
８８℃ の液体で，光および空気に触れると褐色になる．アニリン約 ３．
５g は水１００ml に溶け，エタノール，ベンゼンなどの溶媒とはよく混ざり合い，鉱酸とは塩類をつくる．工業的には種々の有機化合物の製造原料となり，染料，薬品，インクなどが作られる．アニリンの主代謝物は p–アミノフェノールと，さらにこれがアセチル化された p–アセ
チルアミノフェノールであり，いずれもグルクロン酸や硫酸の抱合体として尿中に排泄される．ほかに，少量の o–アミノフ
ェノールも生成する．アニリンは代表的な血液毒（メトヘモグロビン血症）であり，体内で P４５０により一酸素添加されてフェニルヒドロキシルアミンに代謝される．フェニルヒドロキシルアミンはオキシヘモグロビン（Fe２＋）と反応し，フェニルヒド
ロキシルアミンがニトロソベンゼンに酸化され，同時にオキシ
ヘモグロビンも酸素結合能を有しない鉄イオン３価のメトヘモ
グロビン（Fe３＋）に酸化される（coupled oxidation，共役酸化）．
生成したニトロソベンゼンは NADPH＋H＋により還元されてふたたびフェニルヒドロキシルアミンとなり，連鎖反応的にメ
トヘモグロビン生成に関与する．メトヘモグロビン血症になると，血液は酸素結合力を失い，溶血をきたしてチョコレート色となる．許容濃度は日本産業衛生学会（２００２）
で１ppm，ACGIH（２００３）
で２ppm である．

４．
４ 空気試験法1093

表 I 低沸点有機硫黄化合物
物質名

構造式

分子量

沸点（℃） 密度（２
０℃）

硫化水素
硫化カルボニル
硫化メチル
二硫化メチル
メチルメルカプタン
エチルメルカプタン
n―プロピルメルカプタン
iso―プロピルメルカプタン
n―ブチルメルカプタン
iso―ブチルメルカプタン
sec―ブチルメルカプタン
tert―ブチルメルカプタン

H２S
COS
（CH３）
２S
（CH３S―）
２
CH３―SHC２H５―SH
C３H７―SH（CH３）
２CH―SH
C４H９―SH（CH３）
２CHCH２―SH― CH３）―CH―SH
CH３CH２（
（CH３）
３C―SH

３
４．
０
８
６
０．
０
７
６
２．
１
４
９
４．
２
０
４
８．
１
１
６
２．
１
４
７
６．
１
６
７
６．
１
６
９
０．
１
９
９
０．
１
９
９
０．
１
９
９
０．
１
９

−５
９．
６
−５
０．
２
３
７
１
１
０
５．
９
５
３
５
６
８
６
０
９
８
８
９
８
５
６
５

−
−
０．
８
５
１．
０
６
−
０．
８
４
０．
８
４
０．
８
２
０．
８
４
０．
８
３
０．
８
３
０．
８
０

4

９）臭化メチル１）
【注解】

1

12
7
3
5

2

11
6

10
9
8

0

2

4

6

8

10

12

14

16

保持時間
（分）

図 I 低沸点有機硫黄化合物のガスクロマトグラム
１．硫化水素 ０．
００２５μl ，２．硫化カルボニル ０．
００１２５μl ，３．
メチルメルカプタン ０．
００１２５μl ，４．エチルメルカプタン
０．
００１１８μl ，５．硫化メチル ０．
０００８２μl ，６．iso―プロピルメ
ル カ プ タ ン ０．
０００９６μl ，７．n―プ ロ ピ ル メ ル カ プ タ ン
０．
０００９４μl ，８．tert―ブチルメルカプタン ０．
０００７７μl ，９．sec―ブチルメルカプタン ０．
０００８８μl ，１
０．iso―ブチルメルカプ
タン ０．
０
０
０
８
０μl，
１
１．n―ブチルメルカプタン ０．
０
０
０
８１μl，
１
２．
二硫化メチル ０．
０
０
０
６
８μl.
カラム：溶融石英ガラス製充てんキャピラリーカラム，Supel― Q PLOT（Supelco）（０．
５
３mm i.d.×３０m），カラム温度：
４５℃（１min），４
５〜２１０℃（１０℃／min），２
１
０℃（２min）
，検 出
器温度：２
５
０℃，注入口温度：１
２０℃，キャリヤーガスおよび流量：清浄 N２，
１
０ml ／min，メイクアップガスおよび流量：清浄 N２，２０ml ／min，検出器：炎光光度型検出器
（FPD）

文 献
１）大気汚染物質測定法指針，環境庁大気保全局，p．
１
３
７，
３
３
２，
３７０，４
４５，４５
９
（１９
８８）

１）臭化メチル（methyl bromide, MB, CH３Br）はmp−９３℃，
bp４．
５℃ の無色，無臭の液体である．bp が低いので常温ではガス体で，０℃ における比重は１．
７３２，蒸気密度は３．
２３
（空気
＝１）
で不燃性．腐食性はなく，安定であるが，火炎に触れると容易に分解する．一般には，穀類の駆虫にくん蒸剤として用いられ，工業的には化学合成上のメチル化剤あるいは冷却装置の冷媒として利用される．MB は無臭なのでクロルピクリンを約
１％ 混合してくん蒸剤として用いられる．対象はコクゾウ虫，
アズキゾウ虫，コクヌストなどの貯穀害虫や，センチュウ，ケラ，ネキリムシなどの駆除に各国で広く用いられている（文献
１）．わが国においても古くから貯蔵穀物，種実，生鮮果実，たばこおよび土壌の病害虫除去の目的で広く使用されている．また，かつて米国カリフォルニア州で発生したチチュウカイミバ
エ（Diptera, Tephritidae, Cerratitis capitata）の防除に使用された．人体に対しては，ガスの吸入によって神経系および循環系の障害を起こし，また高濃度のガスが皮膚や粘膜に触れると火傷を招く．急性中毒では肺浮腫，心循環不全，神経障害が三大主徴となり，重症の場合ほど心肺症状と神経症状が著明に現れる．すなわち，高濃度の臭化メチルを吸入すれば，２〜４８時間の潜伏期を経て頭痛，めまい，悪心，おう吐，循環障害などが起こり，肺障害に伴って中枢神経系の障害が現れる．慢性中
毒の場合は，視力障害，言語障害，四肢の麻ひ，神経混乱，幻覚，ふるえ（振せん），失神発作などを起こし，症状の多くは数日中に消失するが四肢の麻ひ，視力障害は２〜５カ月も続くことがある．労働環境における臭化メチルの許容濃度は１ppm である（ACGIH，２００
３）．また，特定化学物質等障害予防規則では，くん蒸が行われた場所で作業を行う場合に，あらかじめ空
気中の臭化メチル濃度が１５ppm を超えない状態があることを確認するよう定めている．
文 献１）農薬ハンドブック，（社）日本植物防疫協会，p．
１４２
（１
９９
２）

（１）ガスクロマトグラフィーによる定量
くん蒸現場における測定に用いる．
〔試 薬〕漓 エタノール：残留農薬試験用
滷 臭化メチル標準溶液：１００mlのメスフラスコにエタ
ノール９
０mlを入れ，ドライアイス・アセトン中で冷却し，

1094

４．環境試験法

あらかじめドライアイス・アセトンで冷却した臭化メチル
約１g を先のメスフラスコ中にとり，速やかに精ひょうして１）臭化メチル量（W mg）を求めエタノールで１００mlとす
る．この１．
０mlを１００mlのメスフラスコにとり，エタノールで一定量とする．
臭化メチル標準溶液１ml
１１×mg CH３Br
＝ W×
１
０
０ １
０
０
〔装置および器具〕漓 ガスクロマトグラフ：水素炎イオ
ン化検出器付き滷 採気瓶：４．
４．
１．
１２（
）２）
に同じ．
〔試料の採取〕４．
４．
１．
１２（
）２）
と同様に操作して試料を採取する．
〔試験操作〕
ガスクロマトグラフィーの条件
カラム：ガラスカラム，液相２０％ UCON２）
５
０LB５
５
０
X，クロモソルブ W（HP）
またはガスクロムQ（６０〜８０mesh ま た は８０〜１
００mesh）（３．
０〜４．
０mm i.d.×３．
０m）
３），
温 度：５
０℃
（４min）
５
０〜１
５
０℃
（１
６℃／min，昇温）
注入口および検出器温度：１５０℃
キャリヤーガスおよび流量：N２，
３０ml／min
検出器：水素炎イオン化検出器（FID）
定 量：試料を採取した採気瓶から５．
０mlをガスタイトシリンジにとり，ガスクロマトグラフに注入し，得られる臭化メチルのピーク高を検量線に照らして試料空気中の臭化メチル量（μg）
を求める．
検量線の作成：標準溶液をエタノールで段階的に希釈し，その１〜２μlずつをガスクロマトグラフに注入する．
ピーク高と臭化メチルの量（μg）の関係をプロットして検量線とする４）．
計 算：試料空気中の臭化メチル濃度
（ppm）
は，次式
から求める．
１
０
０
０
２
２．
４
臭化メチル
（ppm）＝ a ×
×
２
７
３
９
４．
９
５×
２
７
３＋t
a：試料空気中の臭化メチル量
（μg）
t：気温
（℃）
【注解】
１）約１g を速やかに精ひょうする．
２）ガラスカラムに充てんした UCON オイルは光に弱いので保存時はアルミ箔などでしゃ光する必要がある．
３）５０℃，４分以内で臭化メチルを定性，定量するために新しいカラムで行うときは，臭化メチルのピークをあらかじめ確認する必要がある．したがって，昇温の意味は臭化メチル以外の不純ピークをカラムから追い出すためである．
４）検量線はそのつど作成する．

１０）ホスゲン１）【注解】１）ホ ス ゲ ン（COCl２，phosgene）
は 比 重１．
４
３
２
（０℃），
bp８．
２

℃，蒸気密度３．
４１（空気＝１）の無色有臭性のガスである．水溶性は低く水中で CO２ と HCl に分解する．
COCl２ は合成染料や有機化合物合成に使用されるが，揮発性
塩素化炭化水素（CCl４，CHCl３，フレオンなど）が炎や加熱金属面に接触したときやテフロンなどの燃焼したときに発生する．
また第一次大戦では毒ガスとして使われた．
（約１６７
COCl２ の 毒 性 は Cl２ の 約１０倍 強 い．空 気 中１／６０００ppm）では２分で肺に障害を与え，１０ppm では１０分で，また５ppm では３０分で死に至る．
臭気限界５．
６ppm，咽喉刺激の最低限界３．
１ppm，眼の刺激の最低限界 ４．
０ppm，せきの最低限界 ４．
８ppm であるから，これらの感覚の最低限界は致死濃度に相当する．
毒性は COCl２ の加水分解生成物の HCl と CO２ により発現すると考えられる．病状は急激なものと緩和なのものとがあるが，通常後者である．肺刺激性が強く，水溶性が小さいので肺深部に達して水腫を生じる．５〜１
０ppm 以上で数分間に上気道や胸部の灼熱感，せきやおう吐，胸痛をきたし水腫を起こす．２５ppm
３０分間吸入では生命に危険とな る．長時間暴露で慢性気管支炎や気道がんが認められている．
労働衛生上の許容濃度は日本産業衛生学会（２００２），ACGIH
（２
００
３）
ともに０．
１ppm である．
文 献１）日本産業衛生学会：産衛誌，４０，１
２９
（１
９９
８）

（１）アニリン法による定量１）〔試 薬〕漓 吸収液：蒸留したアニリン０．
２５g にメタノール１
００mlを加えて溶かし２），さらに水を加えて１
０
０
０
３
）
mlとし，これに HCl を加えて pH６〜７に調整する ．
滷 抽出溶媒：ヘキサンおよび１―ペンタノールを同量混合する．
澆 ホスゲン標準溶液：１，
３―ジフェニル尿素９
４．
８mg を
メタノールに溶かして１００．
０mlとし，その１．
０mlを吸収液でうすめて５００．
０mlとする．
ホスゲン標準溶液１ml＝０．
２μl COCl２ガス
（０℃，１
０
１．
３kPa）
〔試験溶液の調製〕吸収液 v ml
（通常１
０〜２
０ml）
ずつを
２本の吸収瓶にとり，４．
４．
１．
１１）
に準じ，１l ／min の速度で試料空気を通じて得られた溶液を試験溶液とする．
〔試験操作〕定 量：試験溶液全量を分液漏斗にとり，吸収瓶を吸収液で洗って洗液を分液漏斗に合わせ，さらに吸収液を加えて約５０mlとしたものに，＊３．
２mol ／ l H２SO４
５ml４）を加えて混合したのち，抽出溶媒１０．
０mlを加えて激しく振り混ぜる．静置して水層を捨て，抽出液の吸光度を２５７nm 付近の吸収極大波長で測定する．
対照液は，抽出溶媒を用いる．
検 量 線 の 作 成：５個 の 分 液 漏 斗 に ホ ス ゲ ン 標 準 溶 液
２．
０，４．
０，６．
０，８．
０および１
０．
０mlをとり，吸収液を加えて，それぞれ５０．
０mlとしたものについて定量の項の＊印
以下と同様に操作し，ホスゲン量（μl ）と吸光度の関係をプロットして検量線とする．
計 算：試料中の塩化水素濃度（ppm）は次式から求める．
１
ホスゲン（ppm）＝ a ×
２
７
３
V×
２
７
３＋t

４．
４ 空気試験法

1101

41
10

Abundance（×10−5）

9
8

40

7
30＋31

6
27

5

12
3

4

8
12 4

2

56
7

1
0

4

28

21

3

6

11
10

29

25

13

14 15

18
17 19

35

363738

39

33
32 34

24
20

22

26

23

16

9
8

10

12

14

16

18

20

22

24

26

28

30

保持時間
（分）

図 I 低沸点有機ハロゲン化合物の TIC クロマトグラムの例

５）ガスクロマトグラフ／質量分析計によっては，マスクロマ
トグラフィーで SIM 法と同等の検出感度を得られるものがあるので，定量用イオンはデータ処理で設定してもよい．
６）一連の操作を自動化した試料導入装置が市販されている．
メーカーにより導入装置の構成や使用条件はかなり異なるので，装置に適した条件設定を行う必要がある．
７）これに相当する市販品として，Hewlett Packard 社の HP–１などがある．このほかに US. EPA Method６２４に対応する
カラムがある．
８）測定対象物質により検出感度は異なるが，本法での検出下限値は絶対注入量で約７〜２０pg であり，大気試料４００ml を濃縮した場合は約０．
０１〜０．
０２μg／m３ に相当する．
９）大気環境基準の参考値が提示された物質では，通常下限０の値が示されている．
値とは基準値などの１／１
文 献１）環境庁大気保全局大気規制課編：有害大気汚染物質測定
マニュアル（１９９６）２）有害大気汚染物質測定の実際編集委員会編：有害大気汚
染物質測定の実際（１９９７））１４）低沸点有機ハロゲン化合物１（ジクロロジフルオロ
２）
メタン およびトリクロロフルオロメタン３））【注解】１）これらの物質は，フロンと呼ばれているものの一種である．フロンは，フッ素と炭素からなる化合物であるフルオロカ
ーボン類（フッ素化炭化水素）の俗称である．また，これらの２物質は，塩素，フッ素，炭素からなる化合物でクロロフルオロ
カーボン（CFC）とも呼ばれるものである．
フロンは，不燃性，熱に安定，物質の溶解性が大きい，圧力によって液化しやすいなどの優れた性質を有し，また無味無臭，
低毒性などの利点がある．このため，冷蔵庫の冷媒，化粧品などスプレー製品の噴射剤，ウレタンフォームなどの製造に用いる発泡剤，プリント基板や光学レンズなどの洗浄剤などに広く使用されていた．
しかし，これらの物質は難分解性で化学的に安定なため，対流圏ではほとんど分解されずに，成層圏に達し，オゾン層を破壊することがわかり，全廃になった．臭素を含むハロンについても同様にオゾン層を破壊することから，１９９６年以降全廃となった．
フロンのコード番号の付け方：
次のようにコード番号が付けられている．
１の位の数字がフッ素原子（F）の数を，１０の位の数字が水素
原子（H）の数＋１を，１００の位の数字が炭素原子（C）の数−１を示す．
（例）フロ ン１
１は１の 位 が１で あ り，F が１個，１０の 位 が１であり，H がゼロ，１００の位がゼロであり，C が１個であることを示している．
塩化フッ化炭化水素（chloro fluoro hydrocarbon）は Ck・He・
Clm・Fn で表示され，２k＋２＝e＋m＋n の関係がある．フロンの呼称番号は，その番号に９０を加えたとき，１００の位の数字がC 数（k），１０の位の数字が H 数（e）
，１の位の数字が F 数（n）を示し，塩素原子（Cl）数（m）は m＝２k＋２−e−n となる．
（例）フロン１１１
１＋９０＝１０１となり
C＝１，H＝０，F＝１
Cl は２×１＋２−０−１＝３
したがって，分子式は CCl３F となる．
ハロン（halon）
ハロゲンと炭素の化合物で，ハロゲノカーボンの頭と尾をとって名づけられたもので，用語としてはフロンと似ているが，
フロンはわが国のみで用いられている用語であるがハロンは国
際的に通用する用語である．
ハロンは，無味・無臭の不燃性ガスで，全廃以前は消火剤として使用されており，比較的閉じられた空間の火災に対して消火能力を発揮した．水や泡消火のように鎮火後の汚れがないことから航空機や船舶の室内火災，コンピュータルーム，博物館などの貴重品の保管場所において常設されていた．
ハロンとして，世界的に使用されたものは，次の３種である．
コード番号
化学式
halon１３０１
CF３Br
１２１１
CF２ClBr
２４０２
CF２BrCF２Br
これらのうちわが国では，ハロン１３０１が多く使用された．

1102

４．環境試験法

ハロンのコード番号の付けかた：
次のようにコード番号が付けられている．
１の位の数字が臭素原子（Br）の数を示す．
１０の位の数字が塩素原子（Cl）の数を示す．
１００の位の数字がフッ素原子（F）の数を示す．
１０００の位の数字が炭素原子（C）の数を示す．
（例）ハロン１
３
０
１
１の位が１であり，Br が１個
１０の位が０であり，Cl がゼロ
１００の位が３であり，F が３個１０００の位が１であり，C が１個であることを示している．
フロンなどによるオゾン層破壊：
フロンは安定な化学物質で，地表付近の大気中で破壊されず
長時間かけて成層圏に達し，そこで紫外線により破壊されて活性な塩素を放出する．この活性な塩素が成層圏のオゾンを破壊する．これにより地表に到達する有害な紫外線（UV–B，UV–C）
量が増加しヒトの健康や生態系に悪影響を及ぼす．
そこで，１
９
８
５年３月に
「オゾン層の保護のためのウィーン条約」が採択され，その後１
９
８
７年９月に
「オゾン層を破壊する物
質に関するモントリオール議定書」が採択され，フロンの具体的な規制内容が示された．さらに 改 正 は１９９
０年６月 に 行 われ，１９９２年１１月には規制が強化されて，特定フロン５種，特定ハロン３種，その他のフロン１０種，四塩化炭素，１，１，１–ト
リクロロエタン，代替フロン３
４種，代替ハロン３
４種は１
９
９
６
年以降全廃，臭化メチルは１９
９
５年以降１
９
９
１年比の１
０
０％ 以下
に規制された．モントリオール議定書，オゾン層破壊のメカニ
ズム，代替フロン，わが国のフロン観測結果などの詳細については，衛生試験法・注解１
９
９０，
付．
追補
（１
９
９
５）
p．
１
８
６
９を参照．
２）ジクロロジフルオロメタン（CCl２F２，dichlorodifluoromethane，freon–１２）：全廃以前は，電気冷蔵庫，エアコン，カー
クーラーなどの冷媒，ウレタンフォームなどの製造時の発泡剤，エアロゾル製品の噴射剤に使用された．環境大気中の調査例として環境省環境保健部環境安全課が全国自治体に委託調査を行った結果例は昭和５２年度の濃度０．
０４
３〜０．
７３ppb，検出頻度は
３８／９７となっている．
なお，労働衛生上の許容濃度は５００ppm（日本産業衛生学会，
１９９８），１０００ppm（ACGIH，１
９
９
７）
である．
３）トリクロロフルオロメタン（CCl３F，trichloro fluoromethane，Freon–１１）：全廃以前は，発泡剤，冷媒，エアロゾルな
どの用途のほかにフィルム，エレクトロニクス部品などの洗浄剤として使用された．環境大気中の調査例として環境省環境保健部環境安全課が全国自治体に委託調査を行った結果例は昭和
７となっている．
５２年度の濃度０．
０２〜０．
９ppb，検出頻度は７
１／９
なお，労働衛生上の許容濃度は１０００ppm（日本産業衛生学会，
１９９８）である．
文 献１）環境省環境保健部環境安全課編：平成１
４年度版化学物質と環境（２００３）（１）ガスクロマトグラフィーによる定量１）
大気環境，作業環境の測定に適する．
〔試 薬〕① 清浄 N２ ガス：３mm i.d.×１m のステンレ
ス製カラム３本に，空焼きして活性化したガスクロマトグ
ラフ用モレキュラーシーブ５A，活性炭およびモレキュラーシーブ１
３X を充てんして直列に連結し，N２ ガスボンベに連結する．このカラムを通過した N２ ガスを清浄 N２ ガスとする２）．
② 清浄 He ガス：① と同様にモレキュラーシーブ，活性炭を充てんしたステンレス製カラムを He ボンベに連結する．
このカラムを通過した He ガスを清浄 He ガスとする．
③ ジクロロジフルオロメタン：純度９９％ 以上のボン
ベ入りガス④ トリクロロフルオロメタン：純度９９％ 以上のボン
ベ入りガス⑤ ジクロロジフルオロメタン標準ガス：４．
４．
１．
１２（
）２）
に清浄 N２ ガの図 4.4.1−9 の C に示す採気瓶（内容積 V０l ）スを充てんする．ボンベ入りジクロロジフルオロメタンガ
ス ２．
５mlをガスタイトシリンジ３）にとり，先の採気瓶に注入し，約１時間室温に放置してジクロロジフルオロメタ
ン標準原ガスとする．
別の採気瓶（内容積 V１ml）に清浄 N２ ガスを充てんし，注射筒で N２ ガスを少量抜いて採気瓶をわずかに減圧にする．これに標準原ガス V１／１
０
０mlをガスタイトシリンジを用いて注入し清浄 N２ ガスで常圧にもどす．この希釈操作を繰り返して，最終的に標準原ガスを１０６ 倍に希釈し，ジクロロジフルオロメタン標準ガスとする．用時調製．
ジクロロジフルオロメタン標準ガス１ml
１
＝ ２．
５×
×１
０−６μl Cl２CF２
２
７
３
V０×
（０℃，
１
０
１．
３kPa）
２
７
３＋t
V０：採気瓶の内容積（l ）t ：標準原ガス調製時の気温（℃）⑥ トリクロロフルオロメタン標準ガス：⑤と同様の採気瓶（内容積 V０l ）に清浄 N２ ガスを充てんする．５℃ に冷
（
却
し
た
ト
リ
９
ク
ロ
２
フ
ル
オ
メ
タ
ン
純
度
％
以
上
μ
）
l
を約５℃ に冷却したマイクロシリンジに手早くとり４），先の採気瓶に注入し，約１時間室温に放置してトリクロロフ
ルオロメタン標準原ガスとする５）．
トリクロロフルオロメタン標準ガス１ml
１
＝０．
４
９×
μl CCl３F
２
７
３
V０×
（０℃，
１
０
１．
３kPa）
２
７
３＋t
（l ）
V０：採気びんの内容積t ：標準原ガス調製時の気温（℃）
次いで，この標準原ガスを ⑤ と同様に清浄 N２ ガスで最終的に１０５ 倍に希釈し，トリクロロフルオロメタン標準ガスとする．この標準ガスは用時調製する．
トリクロロフルオロメタン標準ガス１ml
＝０．
４
９×

１
２
７
３
V０×
２
７
３＋t

×１
０−５μl CCl３F
（０℃，
１
０
１．
３kPa）

V０：採気瓶の内容積（l ）t ：標準原ガス調製時の気温（℃）⑦ 濃縮管用充てん剤：３０〜６０mesh のガラスビーズ〔装置および器具〕① 採気瓶：４．
４．
１．
１２（
）２）
の採気瓶
の図 4.4.1−9 の C に示したものを用いる．この瓶はあらかじめ内容積の２０倍以上の清浄 N２ ガスで内部を清浄にしておく．
② ガスクロマトグラフ：電子捕獲型検出器
（ECD）
付き

４．
４ 空気試験法のもので，ガスクロマトグラフのキャリヤーガス流路を試料導入部の直前において変更し，濃縮管に接続できるもの．
なお，キャリヤーガスには清浄 He ガスを用いる．
③ 濃縮管：４．
４．
５ ８）（１）の図4.4.5 − 2に示す４．
６mm
i.d.×８〜１
０cm の U 字管に，濃縮管用充てん剤を充てんする．この濃縮管は約１５０℃ で清浄 N２ ガスを流しながら空焼きし，試験操作と同様に操作するとき妨害ピークを示さないことを確認して使用する．
〔試 料 の 採 取〕清 浄 N２ ガ ス を 満 た し た 採 気 瓶 を 用 意
し，４．
４．
１．
１２（
）２）
の通気法により試料を採取し，採気瓶をアルミ箔で包んでしゃ光する６）．
〔試験操作〕採気試料を４．
４．
５８（
）１）
の
〔試験操作〕の濃縮操作に準じて濃縮したのち，ガスクロマトグラフに導入して定量する．
ガスクロマトグラフィーの条件
キャピラリーカラム７）：cyanopropyl methyl phenyl
silicone（０．
５３mm i.d.×３０〜６０m，膜 厚３．
０μm）
カラム温度：４
０℃
（１
０min）
，
４
０〜１
３
０℃
（４℃／min，
昇温）
検出器温度：２
３０℃
注入口温度：２
３０℃
キャリヤーガスおよび流量：He，５ml／min８）
メイクアップガスおよび流量：N２，３０〜４０ml／min８）
定 量：採気瓶に採取した試料空気５mlをガスタイト
シリンジにとり，濃縮管に直接注入して濃縮操作を行った
のち，４．
４．
５８（
）１）
の定量操作に従ってガスクロマトグラ
フに導入して分析する．
得られたクロマトグラムから対象ガスに相当するピーク
面積（またはピーク高）
を読み取り，検量線に照らして試料中の対象ガス量（μl ）を求める．
検量線の作成：各標準ガス０．
２〜２mlをそれぞれ段階的にガスタイトシリンジを用いてとり，濃縮管に注入して濃縮操作を行ったのち，ガスクロマトグラフに導入し，得られるピーク面積（またはピーク高）と各標準ガスの量（μl ）との関係をプロットして検量線を作成する．
計 算：試 料 空 気 中 の 各 有 機 ハ ロ ゲ ン 化 合 物 の 濃 度（ppb）は，次式から求められる９）．
各有機ハロゲン化合物（ppb）＝

a×１
０６
b×

２
７
３
２
７
３＋t

a：試料空気中の各有機ハロゲン化合物の量（μl ）b：濃縮管に注入した試料空気量（５ml）
t：ガスクロマトグラフィーを行ったときの気温（℃）
【注解】１）本法は空気中のジクロロジフルオロメタンおよびトリク
ロロフルオロメタンを採気瓶に採取し，採取試料の一部を直接濃縮管に注入して定量する方法である．環境庁の大気汚染物質
測定法指針の方法と同じであるが，ガスクロマトグラフのカラ
ムをパックドカラムから分離能の高いキャピラリーカラムに変更した．
２）本法は超高感度で微量成分まで分析できるため，使用するガス中の微量炭化水素類も妨害となるので除く必要がある．

1103

そのため N２ ガスおよび He ガスを本文に記したような３本の不純物除去管を通し清浄 N２ ガス，清浄 He ガスとして用いる．
３）ガスタイトシリンジは，使用前に清浄 N２ ガスを用いて空試験を行い，妨害成分のないことを確認する．妨害成分が認められた場合には清浄 N２ ガスで十分洗浄して確認後，使用する．
４）トリクロロフルオロメタンは bp が２
３．
７℃ と低いため，
塩
化ビニリデンの場合と同様に使用するマイクロシリンジも冷蔵庫中で冷却して用い，その操作も速やかに行う必要がある．
５）トリクロロフルオロメタンの５℃ における密度は１．
５０３である．また，分子量は１３７．
４であるから，標準原ガスの濃度
C は，
１
２２．
４
０×１．
５０
３×
×
C（μl ／ml ）＝ ２．
１３
７．
４
２７３
V０×
２７
３＋t
１
＝ ０．
４
９×
２７３
V０×
２７
３＋t
６）光分解を防ぐために採気瓶をしゃ光する．
７）空気中の低沸点ハロゲン化合物を濃縮法により測定する
場合，使用するキャピラリーカラムは固定相液体が微極性または中極性の液相で，０．
５３mm i.d.×３０m，膜厚１〜５μm が適当である．
これに相当する市販品として，
東京化成工業のHalo–Matics
６２６column（０．
５３mm i.d．
×３０m，膜 厚３．
０μm）や Supelco 社
VOCOL fused silica capillary column（０．
５３mm i.d.×３０m，
膜厚３．
０μm）などの低沸点ハロゲン化炭化水素分析用のものがある．
８）最適カラム分離効率を得るためにはキャリヤーガスとして He を流量４〜６ml ／min で使用するのが望ましい．N２ は最
適カラム分離効率が得られるキャリヤーガス流量範囲が狭いた
め不適である．また，ECD 検出器を用いるためメイクアップ
ガスは N２ がよく，He は不適である．
９）本法におけるこれら両化合物の定量下限は，a の値でジクロロジフルオロメタンは０．
２５×１
０−６μl 未満，トリクロロフ
ルオロメタンは０．
５×１
０−６μl 未満である．したがって，試料
空気量を５ml とするとそれぞれ０．
０５ppb と０．
１ppb となる．

（２）ガスクロマトグラフィー／質量分析法による定量１）
大気環境の測定に適する．
〔試 薬〕① ジクロロジフルオロメタン：４．
４．
５１
４（
）１）
に同じ．
② トリクロロフルオロメタン：４．
４．
５１
４（
）１）
に同じ．
③ ジクロロジフルオロメタン標準ガス：４．
４．
５１
４（
）１）
に同じ．
④ トリクロロフルオロメタン標準ガス：４．
４．
５１
４（
）１）
に同じ．
他の試薬は４．
４．
５１
３（
）１〔
）試薬〕
と同様の試薬を使う．
〔装置および器具〕４．
４．
５１
３（
）１〔
）装置および器具〕と同様の器具および装置を使う．
〔試料の採取〕４．
４．
５１
３（
）１〔
）試料の採取〕と同様の試料採取を行う．
〔試験操作〕４．
４．
５１
３（
）１〔
）試験操作〕と同様の試験操作を行う．
【注解】
１）本法はステンレス容器（キャニスター）に大気試料を採取し，ガスクロマトグラフ／質量分析計で分析する方法である．専用の試料導入装置を用いて試料の４００〜８００ml 程度を濃縮でき

1104

４．環境試験法るため，大気濃度として ppb レベルの測定ができる．本法は有害大気汚染物質測定マニュアルにおける容器採取―ガスクロマ
トグラフィー／質量分析法と同じである．本法では，ここでの測定対象物質のほか，４．
４．
５１３）の塩化メチレン，１，２―ジクロロエタン，４．
４．
５１５）の低沸点有機ハロゲン化合物５物質が同時に測定できる．

１５）低沸点有機ハロゲン化合物（クロロホルム１），四塩
２
）
１，
１―トリク
化炭素 ，テトラクロロエチレン３），１，
ロロエタン４）およびトリクロロエチレン５））【注解】１）クロロホルム（CHCl３, chloroform, trichloromethane）
は合成樹脂の原料，溶剤などとして用いられている．昭和６３年７月，化審法に基づく指定化学物質に指定されている．平成９年２月に有害大気汚染物質の指定を受けた．
労働衛生上の許容濃度は日本産業衛生学会
（１
９
９
８）
，ACGIH（２００３）ともに１０ppm である．
２）四塩化炭素（CCl４，carbon tetrachloride，tetrachloromethane）はフロンの原料，溶剤などとして用いられていた．昭和６
２年７月に化審法に基づく指定化学物質に指定され，その後平成元年４月に第二種特定化学物質に指定されている．また，フロンと同様にオゾン層の破壊物質としてあげられており，オゾン層保護法により１
９
９
６年以降全廃された．
労働衛生上の許容濃度は日本産業衛生学会
（２
０
０
２）
，ACGIH（２００３）ともに５ppm である．
ethylenetetrachloride,３）テトラクロロエチレン（CCl２＝CCl２，
tetrachloroethene，perchloroethene）
は洗浄力が後述するトリ
クロロエチレンなどより穏やかなことからフロンの製造原料としての用途を除くと，ドライクリーニングに最も多く使用されていた．トリクロロエチレンとともに昭和６２年５月に化審法に基づく指定化学物質に指定され，その後平成元年４月に第二種特定化学物質に指定されている．また，平成５年４月に大気環境指針（暫定値）が定められ，平成９年２月に有害大気汚染物質の指定を受けて，大気環境基準値として２００μg／m３ が定められた．
労働衛生上の許容濃度は２５ppm〔ACGIH
（２
０
０
３）
〕
である．
１，
１，
１―trichloroethane,４）１，１，
１―トリクロロエタン（CH３CCl３，
methylchloroform，chloroethane）
は金属脱脂などの洗浄剤として用いられている．この物質はトリクロロエチレンやテトラ
クロロエチレンなど洗浄剤として用いられているものの中で最も毒性が低いことから使用量がほかのものに比べ多かった．しかし，フロンと同様にオゾン層の破壊物質としてあげられており，オゾン層保護法により１
９
９６年以降全廃された．
労 働 衛 生 上 の 許 容 濃 度 は２５０ppm（日 本 産 業 衛 生 学 会，
２００２），３５０ppm〔ACGIH
（２０
０
３）〕
である．
５）ト リ ク ロ ロ エ チ レ ン（CHCl=CCl２，trichloroethylene,
ethinyltrichloride, trichloroethene）
は強い洗浄力を持つこ とから金属脱脂洗浄剤や溶媒抽出溶剤などとして広く用いられていたが，現在はテトラクロロエチレンとともに第二種特定化学物質に指定されている．また，平成５年４月に大気環境指針（暫定値）が定められ，平成９年２月に有害大気汚染物質の指定を受けて，大気環境基準値として２００μg／m３ が定められた．
労働衛生上の許容濃度は２５ppm〔日本産業衛生学会
（２
０
０
２）
〕
，
５
０
ppm
〔ACGIH
（２０
０３）〕
である．
大気汚染防止法改正による有害大気汚染物質対策に関する規定：平成８年５月９日，「大気汚染防止法の一部を改正する法律」
が公布され，有害大気汚染物質対策に関する規定が盛り込
まれた．この中で，２３４種類の化学物質が有害大気汚染物質としてリストアップされ，２２物質については優先的に対策に取り組むことになった．さらにトリクロロエチレン，テトラクロロ
エチレン，ベンゼンの３物質は大気環境基準値が定められ，その後２
００１年４月にジクロロメタンが追加指定された．大気環
境基準は以下のとおり．
トリクロロエチレン：年平均値として２００μg／m３ 以下．
テトラクロロエチレン：年平均値として２００μg／m３ 以下．
ジクロロメタン：年平均値として１５０μg／m３ 以下．
ベンゼン：年平均値として３μg／m３ 以下．
環境省環境管理局がまとめた大気環境中における平成１３年
度全国調査結果は以下のようになっている．
（０．
００
６〜３．
１）
，検出
① クロロホルム：平均値は０．
２９μg／m３
頻度は３５０／３７７９となっている．
（０．
０２
６〜
② テトラクロロエチレン：一般環境は０．
５２μg／m３７，発生源周辺は０．
５４μg／m３
（０．
０５７
４．
４）
，検出頻度は２
１３／２５５
４，道路沿道は０．
５１μg／m３
（０．
０４
４〜
〜３．
３）
，検出頻度は６７／８０２．
４），検出頻度は５３／６３６となっている．
③ トリクロ ロ エ チ レ ン：一 般 環 境 の 平 均 値 は１．
１μg／m３
（０．
０２
２〜９．
５）
，検出頻度は２１０／２５２
１，発生源周辺の平均値は２．
１
（０．
０２
４〜２６）
，検出頻度は６
８／８１
６，道路沿道の平均値は
μg／m３
（０．
０２
６〜４．
８）
，検出頻度は５４／６４８となっている．
０．
９６μg／m３
四塩化炭素および１，
１，
１–トリクロロエタンは優先取り組み物
質に指定されていないが，これらは有害大気汚染物質に該当する可能性のある２３４物質に掲げられている．環境大気中における有害大気汚染物質の調査例として環境省環境保健部環境安全課が全国自治体に委託調査を行った結果例は次のようである．
① 四塩化炭素：平成８年度の濃度 nd〜２．
５２μg／m３，検出頻６．
度は１２０／１２② １，
１，
１–トリクロロエタン：平成１３年度の濃度０．
１
７〜０．
４２
８．
μg／m３，検出頻度は４８／４
文 献１）環境省環境保健部環境安全課編；平成１
４年度版化学物質
と環境
（２
００
３）
２）環境省大気保全局大気規制課：有害大気汚染物質測定マ
ニュアル
（１
９９
６）
３）環境省環境管理局：平成１３年度地方公共団体等における有害大気汚染物質モニタリング調査結果（２
００２年１０月）（１）ガスクロマトグラフィー／質量分析法による定量１）
大気環境，作業環境の測定に適する．
〔試 薬〕① 試料捕集剤：カーボンモレキュラーシーブ２）② クロロホルム：純度９９％ 以上③ 四塩化炭素：純度９９％ 以上④ テトラクロロエチレン：純度９
９％ 以上
⑤ １，
１，
１–トリクロロエタン：純度９９％ 以上⑥ トリクロロエチレン：純度９９％ 以上⑦ トルエン– d８⑧ 二硫化炭素：１μl をガスクロマトグラフ／質量分析
計に注入したとき，測定対象物質および内標準物質のクロマトグラムに妨害を生じないもの３）．
⑨ 過塩素酸マグネシウム：元素分析用
（粒径３
０
０〜７
０
０
μm）
⑩ クロロホルム，四塩化炭素，テトラクロロ エ チ レ

４．
４ 空気試験法

ン，１，
１，
１–トリクロロエタン，トリクロロエチレン標準
溶液：各測定対象物質の標準物質１００mg をはかり，二硫
化炭素に溶かし１００mlの定容としたものを標準原液とする（１０００μg／ml）．さらに，この標準原液を二硫化炭素で０に希釈して混合標準溶液を調製する．
１／１
混合標準溶液１ml＝各測定対象物質１００μg⑪ 内標準溶液：トルエン– d８ の１００mg を精ひょうし，
二硫化炭素１００mlに溶解し，さらに１／１０に希釈して１００μg／mlの内標準溶液を調製する４）．
〔装置および器具〕① 試料捕集管：３〜４mm i.d.のガラ
ス管にカーボンモレキュラーシーブ０．
２g と０．
１g を２層に充てんし，両層の間と両端を石英ウールで押さえる．毎
分５０ml程度の清浄 N２ ガスを流して捕集管内の空気を十分置換したのち，清浄 N２ ガスを流したまま３００℃ 程度で空焼き洗浄したのち，両端を密栓したもの５）．
② 除湿管：捕集管を接続できるように両端を４〜６mm
o.d.に絞ったガラス管（２０mm i.d.×１
０
０mm）
に過塩素酸
マグネシウムを充てんし，両端を石英ウールで押さえたもの．両端を密栓し，使用時まで活性炭入りの密閉容器に保存する．
③ 抽出瓶：容量２mlのスクリューキャップバイアル④ ガスクロマトグラフ／質量分析計：SIM 測定またはマスクロマトグラフィーができるもの〔試料の採取〕４．
４．
１．
１３（
）２）
による試料採取を行う．除湿管の両端の栓をとり捕集管と接続し，除湿管を付けた捕集管側からおよそ０．
１l ／min の流量で大気試料を２
４時間
（約１
４
０l ）
吸引する．捕集時はアルミ箔でしゃ光し，試料採取後捕集管の両端を密栓し分析時まで保存する．
別に，未使用の捕集管を試料採取以外は同様に持ち運んで扱い，トラベルブランク試料とする．
〔試験溶液の調製〕４．
４．
１．
１３（
）２）
と同様に行う．捕集管から両層の吸着剤を一緒に取り出してスクリューキャップ
バイアルに入れ，二硫化炭素１mlを加えて栓をし，泡が出なくなるまでときどき振り混ぜたのち６），内標準溶液（１００μg／ml）
１μl を加えたものを試験溶液とする．トラベルブランク試料を同様に処理してトラベルブランク溶液とする７）．さらに全く未使用の捕集管を同様に処理したものを操作ブランク溶液とする．
〔試験操作〕
ガスクロマトグラフィー／質量分析法の条件
カラム：methylsilicone（０．
３２mm i.d.×６
０m，
膜厚５．
０
８
）
μm）
カラム温度：４０℃（３min），
４０〜８０℃（４℃／min，昇温）
，
８
０〜２
１
０℃
（１
０℃／min，昇温）
注入口温度：２
００℃
注入方法：スプリット
注入量：１μl
キャリヤーガスおよび流量：He，１
００kPa
インタフェース温度：２００℃
イオン源温度：２
３０℃
イオン化電圧：７０eV
検出器：選択イオン検出（SIM）法またはマスクロマト

1105

グラフィーができるもの．
モニターイオン：
クロロホルム８３，８５
四塩化炭素１１７，１
１９テトラクロロエチレン１
６
６，
１
６
４，
１
２
９
１，
１，
１–トリクロロエタン９７，９９
トリクロロエチレン１
３
０，１
３
２，９
５
トルエン–d８９８
定 量：試験溶液の一定量をマイクロシリンジにとり，ガスクロマトグラフ／質量分析計に注入し，各測定対象物
質と内標準物質のモニターイオンによるクロマトグラムを記録する．得られたクロマトグラムから，各測定対象物質の内標準物質に対する相対ピーク面積を求め，試験溶液の相対ピーク面積を検量線に照らして，試験溶液中の各測定
対象物質の量を求める．
検量線の作成：溶液濃度として０〜１．
０μg／mlの範囲で５段階程度の混合標準濃度系列を調製する．これに内標準液を０．
１μg／mlの濃度になるように標準溶液に添加する．
濃度系列に調製した混合標準溶液を試験溶液と同様にガ
スクロマトグラフ／質量分析計に注入し，クロマトグラムを得る．得られたクロマトグラムから，各測定対象物質の内標準物質に対する相対ピーク面積を求め，相対ピーク面積と各測定対象物質の濃度との関係をプロットし検量線を
作成する．
計 算：２
０℃における試料空気中の各測定対象物質
（μg／
３
m）
は，次式から求められる．
各測定対象物質（μg／m３）１
０
０
０×E（As−At）
＝
×
２
７
３＋２
０
v
V×
２
７
３＋t
As ：検量線から求めた試験溶液中の各測定対象物
質の重量
（ng）
At ：各測定対象物質のトラベルブランク値（ng）
操作ブランク値と同等と見なせる場合は操作ブ
ランク値を用いる．
E ：試験液量（ml）v ：ガスクロマトグラフ／質量分析計への注入液量（μl ）V ：ガスメータで測定した空気量（l ）t ：試料捕集時の平均気温（℃）
【注解】
１）本法は空気中のクロロホルム，四塩化炭素，テトラクロ
ロエチレン，１，１，
１–トリクロロエタン，トリクロロエチレンを捕集剤に乾式採取し，溶媒抽出した試料の一部をガスクロマト
グラフ／質量分析計に注入して定量する方法である．有害大気
汚染物質測定方法マニュアル（１９９６）
における低沸点有機化合物
測定の吸着捕集–溶媒抽出–ガスクロマトグラフィー／質量分析
法と同じである．本法で同時に ４．
４．
５１３）の塩化メチレン，１，２–ジクロロエタンと ４．
４．
５１６）のベンゼンの測定ができる．モ
ニターイオンの例を 表 I に，TIC クロマトグラムの例を図 I に示す．
ここで取り扱う５種の測定対象化合物は，ガスクロマトグラ

1106

４．環境試験法
5
18.58

9
24.33
7
20.07
2
4
16.10 17.84
6
3
18.81
17.38

1
11.46

0

2

4

6

8

10

12

14

16

18

20

8
22.55

22

24

保持時間
（分）

図 I 低沸点有機ハロゲン化合物の TIC クロマトグラムの例

表 I 低沸点有機ハロゲン化合物のモニターイオンの例
ピーク
No.

化合物名

モニター
イオン

１

ジクロロメタン（塩化メチレン）

８
４，８
６，４
９

２

１，
２―ジクロロエタン

６
２，６
４

３

クロロホルム

８
３，８
５

４

１，
１，
１―トリクロロエタン

９
７，９
９

５

ベンゼン

７
８，７
７

６

四塩化炭素

１
１
７，
１
１
９

７

トリクロロエチレン

１
３
０，
１
３
２，９
５

８

トルエン―d８９８９テトラクロロエチレン

１
６
６，
１
６
４，
１
２
９

フの電子捕獲型検出器（ECD）に対して特異的に鋭敏な感度を示すので，ECD 付きガスクロマトグラフを用いて分析することもできる．この方法については，衛生試験法・注解１９
９０，付．
追補（１９９５）
，p．
１
８
７
３を参照．
２）これに相当する市販品として Supelco 社の Carbosieve S–Ⅲ（２００〜２５０μm）などがある．
３）作業環境測定用試薬（和光純薬工業）が使用できる．
４）標準溶液は使用時に調製する．市販の標準原ガスを使用してもよい．その場合，標準原ガスをゼロガスを用いて容量比
混合で１０倍に希釈して調製する．
５）両端を溶封したものは長期間の保存が可能であるが，密栓した捕集管はなるべく使用直前に調製し，原則として洗浄後，１週間以内に使用する．
３
００℃ を超える温度で長時間空焼きすると炭素の酸化が進み，カーボンモレキュラーシーブの性能が変化することがあるので注意する．これに相当する市販品として Supelco 社の ORBO９１がある．
６）あらかじめ８０〜１
２０％ の抽出効率が得られるように，抽出時間を確認しておく．
７）移送中に捕集管の汚染がある可能性があるため，この操作を行う．測定値がトラベルブランク値による定量下限値より小さい場合は欠測扱いとする．
８）こ れ に 相 当 す る カ ラ ム と し て，Supelco 社 の SPB–１，
Hewlett Packard 社の HP–１などがある．
文 献１）環境庁大気保全局大気規制課：有害大気汚染物質測定マ
ニュアル
（１
９９
６）
２）有害大気汚染物質測定の実際編集委員会編：有害大気汚
染物質測定の実際
（１
９９
７）

１
６）スチレン１），ベンゼン２），トルエン３）およびキシレン４）【注解】１）スチレン（C６H５−CH＝CH２）：無色，淡黄色液体 bp１４５〜
１４６℃，特異な臭気を持つ．容易に重合してスチレンポリマーを作るので，合成樹脂原料として用いられる．生理作用は，肺の刺激，中枢神経障害などである．特異の悪臭を持つため，悪臭防止法の対象物質として昭和４７年に指定された．工場敷地
境界線において０．
４〜２．
０ppm の範囲内で地域別に排出規準が決められている．労働衛生上の許容濃度は，日本産業衛生学会（２００２）
では２０ppm，ACGIH（２００３）
では２０ppm である．
環境省環境保健部環境安全課がまとめた全国調査結果によると，平成１０年度の大気環境中の濃度は０．
０３９〜２．
７μg／m３，検出頻度４２／４２となっている．
０〜８
１℃，mp５．
４℃，d０．
８７８７（１５２）ベンゼン（C６H６）は bp８℃），蒸気１ l の重量は３．
２５g，２０℃ における屈折率は１．
５０１６である，引火性が強く，また点火時著しくすすを発生して燃焼４．
４ 空気試験法
する．本品０．
０８g は２２℃ の水約１００ml に溶ける．エタノー
ル，ジエチルエーテル，クロロホルム，CS２，CCl４ その他一般の有機溶剤と任意の比で混和する．労働衛生上の許容濃度は，
ACGIH
（２００
３）では０．
５ppm である．日本産業衛生学ではベン（１ppm），１０−４（０．
１
ゼンの過剰発がん生涯リスクレベルを１
０−３ppm）と評価している（１９９７）．
環境省環境管理局がまとめた大気環境中における平成１
３年
（０．
４
９
度全国調査結果によると，一般環境の平均値は１．
９μg／m３５
３３，発生源周辺の平均値は２．
２μg／〜４．
３），検出頻度は２
０
８／２
m３
（０．
５２〜５．
１），検出頻度は６６／７
９２，道路沿道の平均値は２．
９
（１．
０〜５．
２），検出頻度は９４／１
１４０となっている．
μg／m３
は bp１
１
０．
６℃，mp −９５℃，d０．
８６６３）トルエン
（C６H５― CH３）
（２０℃），２０℃ における屈折率は１．
４９６７である．労働衛生上の許容濃度は，日本産業衛生学会
（２
０
０
２）
，ACGIH
（２
０
０
３）
ともに
５０ppm である．
環境省環境保健部環境安全課がまとめた全国調査結果によると，平成１０年度の大気環境中の濃度は１．
１〜８５μg／m３，検出
頻度４２／４２となっている．
〔C６H４―
（CH３）
は bp１
４
４℃，mp −２５℃，d４）o―キ シ レ ン
２〕
０．
８８６１
（２０℃），２０℃ における屈折率は１．
４９６７である．m ― キ
シレンは bp １
３９．
３℃，mp−４７．
４℃，d ０．
８
６
８
４
（２
０℃），
２
０℃ に
３〜１４℃ のおける屈折率は１．
４９７３である．p―キシレンは mp １
無色板状あるいはプリズム状結晶で bp１
３
７〜１
３
８℃，d０．
８６１
０４（２０℃），２０℃ における屈折率は１．
４９５７５である．労働衛生上の許容濃度は，o―，m―，p―キシレンのいずれについても，日本産業衛生学会（２００２），ACGIH
（２
０
０
３）
ともに１０
０ppm としている．
環境省環境保健部環境安全課がまとめた全国調査結果による
３
３〜９．
５と，平成１０年度の大気環境中の濃度は o―キシレンが０．
５５〜３５μg／m３，検出頻度４２／４２μg／m３，m―，p―キシレンが０．
となっている．
発散のおそれのある作業：石炭乾留，ガス工業，ベンゼン，
トルエンおよびキシレンの製造，色素工業，ペンキ，ワニス，
ラッカーの製造ならびにこれらのクリーナー，シンナーの製造，ゴム加工，人造皮革，製缶，ドライクリーニング，写真製版，インキ製造などの作業場で発散する．
生理作用：ベンゼン蒸気の吸入による急性中毒は，意気喪失，
めまい，興奮，意気喪失後興奮，頭痛，呼吸促迫，胸部圧迫感，視覚障害，けいれん，四肢虚弱，速脈，顔面蒼白，精神錯乱，こん睡などを引き起こし，死亡することがある．
高濃度の蒸気を吸入すると，呼吸麻ひを起こして仮死状態に陥り死亡する．
経口的に摂取した場合は急性の胃炎を引き起こす．
慢性中毒の初期症状は，頭痛，めまい，不快感，食欲減退，疲れやすい，呼吸促迫，眼炎，咽喉および気道粘膜の炎症などである．中毒が進行すると，催吐，おう吐・悪寒，粘膜出血などが起こり意識も衰える．さらに気管出血および紫斑を生じた
り，神経系統に支障をきたし，血液変化が見られるようになる．
ベンゼン中毒の最も特有な病理作用は，血液細胞および造血器
官の破壊作用で，ベンゼン蒸気にさらされると白血球数が減少
し，次いで赤血球数が低下してくる．すなわち白血球数減少症
は，中毒したときの特有な血液所見であり，これは中毒の初期より重篤期においてよく見られるから，白血球数を測定することは，中毒の簡易な発見法としてあげられている．なお赤血球の減少と大きさの増大は，中毒の初期に鋭敏に現れるといわれている．
ベンゼン同族体の毒性は，ベンゼンが特に強く，生体内でフェノール化される．トルエン，キシレンではメチル基が酸化を受け，おのおののアルコール，アルデヒド，安息香酸あるいはトルイル酸となり，グリシン抱合を受け，馬尿酸あるいはメチ
ル馬尿酸となり尿中に排泄される．毒性はベンゼンに比較して少ないとされている．
労働衛生上の許容濃度の数値は，ほとんどすべての労働者が１日８時間または週４０時間の平常作業において，毎日のように反復被暴しても悪影響を受けないであろうと思われる時間に重点を置いた有害物質の平均濃度とされている．べンゼンについてはグループ１すなわちヒトに発がん性がある工業物質に分類
している
（１
９９
６）
．
また ACGIH（１９９７）
では，作業環境における生物学的被暴指
標値（biological exposure indices：BEIs）
が導入さ れ て い る．
有機溶剤の BEI の一部を表 I に示す．
BEI とは，化学物質に対する生物学的反応の警告レベルもし
くは化学物質を吸入，摂取または経皮吸収を問わず，被暴した労働者の組織，体液，呼気中の化学物質またはその代謝産物の警告レベルを表すものである．また BEI が導入されたのは，
TLV の概念展開における一つの段階であって，BEI は，労働者保護のための尺度を個人の健康にも提供しようというものである．
特定化学物質予防規則では，ベンゼンを取り扱う作業に労働者を従事させることを原則的に禁止し，密閉容器内などの作業者が直接ベンゼンに触れない方法で作業し，しかも局所排気装置が設けてある場所に限って許可している．そして，作業者に対し，６カ月ごとに，頭痛，めまい，心悸高進，倦怠感，四肢７）
表 I 有機溶剤の生物学的指標値（BEI／ACGIH―１９９
有機溶剤

測定対象

測定時期

BEI（ACGIH）

ベンゼン

尿

S―フェニル
メルカプツール

作業終了後 ２５μg／g Cr１）

トルエン

血液
尿

トルエン
馬尿酸

作業終了後 １mg／l
作業終了後 ２．
５g／g Cr１）

キシレン（o―，m―，p―）尿

メチル馬尿酸作業終了後 １．
５g／g Cr１）

スチレン

血液

スチレン

尿

マンデル酸

作業終了後
次の作業前
作業終了後
次の作業前
作業終了後
次の作業前

フェニルグリオキシル酸
１）
クレアチニン

1107

０．
５
５mg／l
０．
０
２mg／l
８
０
０mg／g Cr１）
３
００mg／g Cr１）
２
４０mg／g Cr１）
１００mg／g Cr１）1108

４．環境試験法のしびれ，食欲不振，出血傾向の有無，全血比重赤血球数，白血球数の検査をすることを義務づけている．
文 献１）環境省環境保健部環境安全課編：平成１４年度版 化学物
質と環境（２００３）２）環境省環境管理局：平成１
３年度地方公共団体等における有害大気汚染物質モニタリング調査結果
（２
０
０
２年１
０月）

（１）ガスクロマトグラフィーによる定量１）
大気環境および作業環境に用いる．
〔試 薬〕① 清浄 N２ ガス：３mm i.d.×１m のステンレ
ス製カラムに，ガスクロマトグラフ用モレキュラーシーブ
５A２）を充てんし，N２ ガスボンベに連結する．このカラムを通過した N２ ガスを，清浄 N２ ガスとする．
② ベンゼン：純度９９％ 以上③ トルエン：純度９９％ 以上④ o―，m―，p―キシレン：純度９９％ 以上⑤ ス チ レ ン：純 度９９％ 以 上（安 定 剤 と し て０．
００３％
tert―butyl catechol を含む）
⑥ アセトン：残留農薬試験用⑦ スチレン，ベンゼン，トルエン，キシレン標準ガス：
内容積約１l で容積既知の採気瓶
〔４．
４．
１．
１２（
）２）
採気瓶法
の図 4.4.1−9 の B に示すもの〕（内容積 V０l ）の内部を，アセトンで洗浄し，乾燥させる．これを減圧にし，清浄 N２
ガスで常圧に戻す操作を繰り返して，内部を清浄 N２ ガス
で置換したのち，減圧にしておく．スチレン，ベンゼン，
トルエン，o―，m―および p―キシレンを２０℃ に保ち，それぞれ１μl ずつをマイクロシリンジにとり，減圧真空にした採気瓶に注入し，室温になるまで放置したのち，採気
瓶内が大気圧になるまで清浄 N２ ガスを満たし標準原ガス
とする．
別の採気瓶
（内容積 V１ ml）に清浄 N２ ガスを充満し，こ００mlをガスタ
れを減圧とする．これに標準原ガス V１ ／１
イトシリンジを用いて注入し，清浄 N２ ガスで常圧にもどし，これをスチレン，ベンゼン，トルエン，キシレン標準
ガスとする．
調製した標準ガス１ml中に含まれる各成分のガス量を次の式により算出する．
２．
４×１
０×１／V０×
（２
７
３＋t）
／２
７
３
v（μl ）＝s×d ／M ×２
v ：標準ガス１ml中に含まれる成分の量（μl ，原
ガス調製時の気温，１
０
１．
３kPa）
s ：注入気化させる標準物質の量（μl ）３）d ：注入気化させる標準物質の密度（２０℃）
M ：注入気化させる標準物質の分子量V０：採気瓶の内容積（ml）
t ：標準原ガス調製時の気温（℃）
なお，１l の採気瓶に各標準物質（液体）
１μl を注入した場合に標準ガス１ml中に含まれる各成分ガス量は次のとおりとなる．

標準物質

標準ガス１ml 中のガス量

スチレン
ベンゼン
トルエン
o―キシレンm―キシレン
p―キシレン０．
００
１９μl（０℃，
１
０
１．
３kPa）
０．
０
０
２
５μl（０℃，
１
０
１．
３kPa）
０．
０
０
２
１μl（０℃，
１
０
１．
３kPa）
０．
０
０
１
９μl（０℃，
１
０
１．
３kPa）
０．
０
０
１
８μl（０℃，
１
０
１．
３kPa）
０．
０
０
１
８μl（０℃，
１
０
１．
３kPa）

⑧ 捕集管用充てん剤：ポーラスポリマービーズ４）で，常温で対象物質を吸着し，約２００℃ に加熱することによって容易に脱着するもの．
〔装置および器具〕① ガスクロマトグラフ：水素炎イオ
ン化検出器
（FID）
付き
② 捕集管：４．
４．
１．
１３（
）１）
の図 4.4.1−14 A に示したものに，捕集管用充てん剤０．
５g を充てんし，清浄 N２ ガス
を通じながら約２
５０℃ で１時間以上空焼きし，〔試験操作〕
に従って空試験を行い，妨害ピークのないことを確認しておく．
〔試料の採取〕図 4.4.1−19 のように装置をセットし，
０．
２〜０．
５l ／min の流速で試料空気一定量（０．
５〜２l ）
を通じる．
〔試験操作〕
ガスクロマトグラフィーの条件
カラム：ガラスカラム，液相〔５％ didecylphosphate（DDP）＋５％ ベントン３
４〕，シマライトAW／
DMCS
（６
０〜８
０mesh），３mm i.d.×３．
０m
カラム温度：９０℃
注入口温度：１
５０℃
検出器温度：１
８０℃
キャリヤーガスおよび流量：清浄 N２，３０〜５０ml／min
検出器：水素炎イオン化検出器（FID）
定 量：試料を採取した捕集管を図 4.4.1−18 に示すようにガスクロマトグラフに連結する．捕集管にキャリヤー
ガスを通じ，その流量が安定し，かつ妨害ピークを示さないことを確かめてヒーター（I）のスイッチを入れ，約１分
間で２００℃ に昇温加熱し，試料をガスクロマトグラフに導入する．得られたクロマトグラム５）から各対象ガスに相当するピーク６）高またはピーク面積を読みとり，検量線に照らして対象ガスの量
（μl ）
を求める．
検量線の作成：標準ガス０．
２〜２．
０mlを段階的にガスタ
イトシリンジにとり，捕集管に注入したのち，清浄 N２ ガ
ス約１l を通じ，次いで定量の項と同様に操作し，得られたクロマトグラムから対象ガスの量（μl ）とピーク高または面積との関係をプロットして検量線を作成する．
計 算：試料空気中のスチレン，ベンゼン，トルエンおよびキシレン各異性体の濃度 C（ppm）
は，次式から算出
する．
v
C＝
２
７
３
V×
２
７
３＋t
C ：試料ガス中の濃度（ppm）
V ：試料空気採取量（l ）v ：検量線から求めた分析対象成分量
（μl ）

４．
４ 空気試験法1109

表 I スチレン，ベンゼン，トルエンおよびキシレンの分子量と密度

分子量
密度（２
０℃）

スチレン

ベンゼン

トルエン o―キシレン m―キシレン p―キシレン

１
０
４．
２
０．
９
０
５
９

７
８．
１
０．
８
７
９

９
２．
１
０．
８
６
６

１
０
６．
１
０．
８
６
８

１
０
６．
１
０．
８
６
１

１
７）フェノール１）

ベンゼン
3.392

トルエン
3.88

p −キシレン
10.357 m −キシレン
12.812o −キシレン
13.683スチレン
17.397

8.993
0

１
０
６．
１
０．
８
８
０

10

20

保持時間
（分）

図 I スチレン，ベンゼン，トルエンおよびキシレンのクロマ
トグラム
カラム：５ ％ DDP＋５ ％ ベントン３
４（シマライト AW／DMCS，６０〜８０mesh，３mm i.d.×３．
０m），カラム温度：９０℃，注入口温度：
３０１
５０℃，検出器温度：１８０℃，キャリヤーガスおよび流量：清浄 N２，〜５０ml ／min，検出器：FID

t ：試料採取時の平均温度（℃）
【注解】
１）本法のほか，真空瓶採取−低温濃縮法を用いて測定することもできる．
２）モレキュラーシーブ５A を不純物除去剤として使用する
５
０℃ で４時間場合には，あらかじめ N２ ガスを通じながら約２以上加熱し，活性化して使用する．
３）スチレン，ベンゼン，トルエン，o―，m―および p―キシ
レンの分子量および２０℃ における密度は表 I のようである．
４）このポーラスポリマービーズは，２，
６―ジフェニルパラフェニレンオキサイドポリマー〔Tanax GC（６０〜８０mesh）〕またはこれと同等以上の性能を有するものを用いる．
５）ベンゼン，トルエン，キシレンおよびスチレンの各異性体を分離する能力を有するもの．図 I にクロマトグラムの例を示す．本法の定量下限は絶対量としてスチレン０．
０００９μl ，ベンゼン０．
００１μl ，トルエン０．
０００９μl ，キシレン０．
０
０
０
８μl で
ある．
６）必要に応じてガスクロマトグラフィー／質量分析法を用いてピークの確認を行う．
文 献
１）悪臭物質の測定の方法，環境庁告示７２，１９９
３年９月８日（１）４−アミノアンチピリン法による定量２）
フェノール類はすべて反応するので特異性に乏しい．フェノールが主汚染物と分かっている作業環境の測定に用いる．
〔試 薬〕① 吸収液３）：Na２B４O７・１
０H２O１．
９g をとり，
水に溶かして１０００mlとする．
② ４−アミノアンチピリン溶液：３．
１．
４．
３８）
に同じ．
③ ２％ K３［Fe（CN）
溶液：３．
１．
４．
３８）
に同じ．
６］
④ フェノール標準溶液：フェノール０．
２
１０g を正確にとり，水に溶かして１０００mlとする．次いでこれを吸収液で正確に１００倍にうすめて標準溶液とする．
フェノール標準溶液１ml
＝０．
０
０
０
５ml C６H５OH
（０℃，
１
０
１．
３kPa）
〔試験溶液の調製〕吸収液２０ml を吸収瓶にとり，
４．
４．
１．
１
１）
と同様に操作して試料を採取し，吸収液を加えて２５mlとし，試験溶液とする．
〔試験操作〕試験溶液およびフェノール標準溶液を吸収液で段階的に希釈したもの各５mlをそれぞれの試験管にとり，これにそれぞれ４―アミノアンチピリン溶液１mlおよび K３Fe（CN）
６ 溶液１mlずつを加えて振り混ぜ，５分間放置したのち５１
０nm 付近の極大波長におけるそれぞれの吸光度を測定し，検量線を作成して，試験溶液中のフェノール濃度 a（ml／ml）
を求める．対照液は吸収液について同様に操作したものを用いる．
計 算：試料空気中のフェノール濃度
（ppm）
は，次式
から求められる．
１
０
０
０
フェノール
（ppm）＝ a × ２
５×
２
７
３
V×
２
７
３＋t
V ：試料空気量（l ）t ：試料採取時の平均温度（℃）
【注解】１）フェノールの用途，毒性などについては，３．
１．
４．
３８）を
参照．なお労働衛生上の許容濃度は日本産業衛生学会
（１
９９８）
，
ACGIH
（１
９９
７）
ともに５ppm である．
２）本法の原理については３．
１．
４．
３６）を参照．
３）本法は pH８〜１０の間で一定の呈色をする．この吸収液を用いると pH９．
３になり，緩衝液の役目も果たす．また Na２BO４溶液中で得られた呈色は数日間安定であるという利点がある．

（２）ガスクロマトグラフィー／質量分析法による定量１）
本法は大気環境，作業環境の測定に適する．
２）〔試 薬〕① 試料捕集剤：XAD―７（１
５〜５
０mesh）② 内標準溶液：フェノール―d５ を容器に合わせて適量をはかりとり，トルエンに溶かして，最終濃度４μg／ml
溶液を調製する．

1110

４．環境試験法③ フェノール標準溶液：フェノール（C６H５OH）
５０mgをはかり，トルエンに溶かし，５０mlとしたものを標準原液とする．
フェノール標準原液１ml＝１mg C６H５OH
さらに標準原液を希釈して，０．
８〜１
００ng／mlの標準溶液を調製する．標準溶液３mlに内標準液５０μl を加える．
④ トルエン：残留農薬試験用１０００倍濃縮検定品〔装置および器具〕① 試料捕集管：ガラス管（４mm i.d.
×７０mm）の間にシリル化した石英ウールをはさみ，XAD―７を前段に１００mg，後段に５０mg の２層に充てんし両端をシリル化した石英ウールで固定したもの．両端を溶封して使用時まで保存する３）．
② ガスクロマトグラフ／質量分析計：SIM 測定またはマスクロマトグラフィーができるもの．
〔試料の採取〕捕集管の両端を切り，４．
４．
１．
１３（
）２）
に従
って前段側
（１
０
０mg）
から，およそ０．
２l ／min の流量で大気試料を８時間（約１
００l ）吸引する４）．試料を採取した捕集管は，両端に密栓をし，分析時まで冷暗所で保存する．
〔試験溶液の調製〕試料を捕集した XAD―７樹脂（前段・後段）
を取り出し，共栓試験管に入れ，トルエン３mlで超音波抽出する．抽出液に内標準溶液５０μl を加えて試験溶液とする５）．
別に未使用の試料捕集管について同様に抽出操作を行い，空試験液とする．
〔試験操作〕
ガスクロマトグラフィー／質量分析法の条件６）
カラム：結 合 型 ポ リ エ チ レ ン グ リ コ ー ル
（０．
２
５mm
７）
i.d.×３
０m，
膜厚０．
２
５μm）
カラム温度：５０℃〜２
００℃（８℃／min，昇温），２
００℃（２min）
注入口温度：２５０℃
注入方法：スプリットレス（パージオフ時間２min）
注入量：１μl
キャリヤーガスおよび流量：He，１．
７
６kg／cm２
インタフェース温度：２００℃
イオン源温度：２００℃
イオン化電圧：７０eV
検出器：選択イオン検出（SIM）法またはマスクロマト
グラフィーができるもの．
モニターイオン：９
４
（定量用）
，６
５
（確認用）
，９
９
（フェ
ノール―d５）
定 量：試験溶液の一定量をマイクロシリンジにとり，ガスクロマトグラフ／質量分析計に注入し，フェノールと内標準物質のモニターイオンによるクロマトグラムを記録する．フェノールの内標準物質に対する相対ピーク面積を求め，試験溶液の相対ピーク面積を検量線に照らして，試験溶液中のフェノールの量を求める．
検量線の作成：標準溶液の一定量をマイクロシリンジにとり，同様にガスクロマトグラフ／質量分析計に注入し，得られたクロマトグラムから，フェノールの内標準物質に対する相対ピーク面積を求め注入したフェノール量と相対ピーク面積との関係をプロットして検量線を作成する．

A

B

C

B

C

B

A：ガラス管（4mm i.d. ×6mm o.d. ×70mm），B：石英ウール，
C：捕集剤（XAD−7 15/50）

図 I 試料捕集管
計 算：２０℃ におけ る 試 料 空 気 中 の フ ェ ノ ー ル（ng／m３）
は，次式から求められる．
フェノール（ng／m３）＝（a−b）
×

L２
×
L１

１
２
７
３＋２
０
V×
２
７
３＋t

a ：試料液中の対象物質の検出量（ng）
b ：空試験液中の対象物質の検出量
（ng）
（μl ）
L１：GC への注入量
L２：調製した試料液の量（μl ）V ：空気量（m３）t ：試料捕集時の平均気温（℃）
【注解】
１）捕集管からフェノールが検出されることがあるので，大気採取量を１００l とした場合の定量限界は２７ng／m３ 程度である．労働環境上の許容濃度５ppm 程度のフェノールは，本法により定量できる．
作業環境など測定対象化合物が高濃度の場合は，検出器として質量分析計にかえ，水素炎イオン化型検出器を用いたガスク
ロマトグラフィーでも定量することができる．
８時間ソック２）XAD―７樹脂はあらかじめ，メタノールで４スレー抽出し，減圧乾燥したものを使用する．
３）試料捕集管を図 I に示す．これに相当する市販品としてSupelco 社の ORBO TUBE―４７がある．
４）試料採取量が１００l を超えると，破過することがある．
５）捕集管に測定対象物質を含むことがあるので，未使用の捕集管について同様の抽出操作を行い，空試験液とする．
６）結合型ポリエチレングリコールカラムによるフェノールとp―クレゾール，o―クレゾールおよび m―，p―クレゾールの分
０７，１０８を加える離は良好であり，モニターイオンに m／z＝１
ことによりこれらを同時に分析することが可能である．
７）これに相当するカラムとしてSupelco 社の SUPELCOWAX,
J&W 社の DB–wax, Hewlett Packard 社の HP–WAX がある．
文 献１）環境庁環境保健部保健調査室編：平成７年度化学物質分析法開発調査報告書

１８）ジクロロベンゼン１）【注解】１）o―ジクロロベンゼン（o―dichlorobenzene）
は d１．
３
０
６
（２
０℃）
，
bp１８
０〜１
８
３℃ の無色透明で芳香性のある液体である．主として合成化学の原料として，また混合溶剤などにも使われる．
４５８，bp２）p―ジクロロベンゼン（p―dichlorobenzene）は d１．
１７４℃ の白色結晶で殺虫剤などに使われている．
急性中毒では中枢神経抑制作用があるが，麻酔作用は弱い．
肝および腎臓に障害を与える．１
０００ppm で７時間後にラット

４．
４ 空気試験法の半数，１０時間後に全部が死亡した．５
００ppm 程度では７時間
後にも全部生存していたが，眠気，歩行障害，眼の刺激，呼吸困難を生じた．慢性中毒では動物に対して９０ppm 程度を６〜７
カ月間暴露した場合，皮膚や粘膜に刺激はあったが，体重，臓器重量，組織所見，血液所見に変化は認められていない．
o―ジクロロベンゼンの労働衛生上の許容濃度は，日本産業衛生学会（２００２），ACGIH
（２０
０３）
ともに２
５ppm である．
０ppm である．
一方，p―ジクロロベンゼンは，両者とも１
環境省環境保健部環境安全課がまとめた全国調査結果によると，平成１１年度の大気環境中の濃度は o―ジクロロベンゼンが０／３
０，p―ジクロロベンゼンが
０．
０３
４〜０．
４
２μg／m３，検出頻度２６／４３となっている．
０．
１６〜１７μg／m３，検出頻度は３
文 献１）環境省環境保健部環境安全課編：平成１
４年度版
質と環境（２００３）

化学物（１）ガスクロマトグラフィーによる定量１）
大気環境，作業環境の測定に用いる．
〔試 薬〕① o―，m―および p―ジクロロベンゼン：純度
９８％ 以上のもの．
② ヘキサン：残留農薬試験用のもの③ ジクロロベンゼン標準溶液：p―ジクロロベンゼン
１００mg をはかりとり，１０mlのメスフラスコ中に入れ，ヘ
キサン約５mlを加えて溶かしたのち，２０℃ の o―ジクロロ
ベンゼンおよび m―ジクロロベンゼンをそれぞれ８０μl ずつマイクロシリンジを用いて注入し，ヘキサンを加えて
１０．
０mlとする．この溶液から５．
０μl をマイクロシリンジにとり，ヘキサンを加えて１０．
０mlとし，これをジクロロ
ベンゼン標準溶液とする．
ジクロロベンゼン標準溶液１μl
＝０．
０
０
５
２μg o―C６H４Cl２
＝０．
０
０
５
２μg m―C６H４Cl２
＝０．
０
０
５
０μg p―C６H４Cl２④ ポーラスポリマービーズ：常温において炭素数６以上の炭化水素を吸着し，かつ，２００℃ 前後で速やかに吸着
成分を脱離するパラフェニレンオキサイド系などのポリマービーズであって，
３
５
０℃ 以上の耐熱性能を有するもの（６０〜８０mesh，市販名テナツクス GC など）．
〔装置および器具〕① ガスクロマトグラフ：電子捕獲型
検出器
（ECD）
付きで，ガスクロマトグラフのキャリヤー
ガス流路を試料導入部の直前において変更し，試料捕集管に接続できるもの．なお，キャリヤーガスにはモレキュラ
シーブ５A を充てんした不純物除去管を通した洗浄 N２ ガスを用いる２）．
② 試料捕集管３）：４．
４．
１．
１３（
）１）
の図 4.4.1−14（A）に示したものにポーラスポリマービーズを０．
６g 充てんしたもので，ビーズの両端は石英ウールで固定する．
〔試料の採取〕あらかじめN２ガスを流しながら２５０℃に加熱して空焼きし，〔試験操作〕と同様に操作するとき，各ジクロロベンゼンの保持時間に妨害成分のないことを確認した試料捕集管を用い，４．
４．
１．
１３（
）１）
により０．
２l ／min の速度で試料空気を採取する４）．

1111〔試験操作〕
ガスクロマトグラフィーの条件
０％ diethylene
カラ ム５）：ガ ラ ス カ ラ ム， i ）液 相１
glycol succinate（DEGS）／ク ロ モ ソ ル ブ W

!

DMCS
（６
０〜８
０mesh）
または ）液相 polyethylene glycol―HT（PEG―HT）／クロモソルブ WAW
DMCS
（６
０〜８
０mesh）（，３．
０mm i.d.×２．
０m）
カラム温度：８０〜１
２０℃
注入口および検出器温度：２５０℃
キャリヤーガスおよび流量：清浄 N２，３０〜５０ml／min
検出器：電子捕獲型検出器（ECD）
定 量：試料を採取した試料捕集管を４．
４．
１．
１３（
）１）
の
図 4.4.1−18 に示すようにガスクロマトグラフに接続する．
試料捕集管にキャリヤーガスを流し，その流量が安定し，かつ，検出器の応答のないことを確認したのち，試料捕集管の温度を室温から２５０℃ まで約１分間で加熱昇温させ，被検成分をガスクロマトグラフに導入する．試料分析中は試料捕集管の温度を２
５０℃ に保持するものとする．
検量線の作成：ジクロロベンゼン標準溶液を段階的に希釈し，その５．
０μl をガスタイトシリンジに取り，室温の状態で試料捕集管に注入したのち，上記と同様の操作のクロマトグラフィーを行い，o―，m―，p―の各ジクロロベン
ゼンの量
（μg）
とクロマトグラムのピーク面積
（またはピ
ーク高）
の関係をプロットして検量線を作成する．
計 算：試料中の o―，m―，p―の各ジクロロベンゼン量（μg）
を検量線から求め，次式により試料空気中のジクロ
ロベンゼン濃度（ppb）を算出する６）．
ジクロロベンゼン（ppb）＝ a ×

２
２．
４
×
１
４
７．
０

１
０
０
０
２
７
３
V×
２
７
３＋t

a ：試料空気中の o―，m―，p―の各ジクロロベンゼ
ン量（μg）
V ：試料空気採取量（l ）t ：試料空気採取時の温度（℃）
【注解】
１）本法は空気中のジクロロベンゼンをポーラスポリマービーズを充てんした捕集管に常温で吸着捕集したのち，加熱脱離し，ガスクロマトグラフィーで定量する方法である．環境省の大気汚染物質測定法指針の方法と同じである．
試料濃度が０．
１ppm 以上の場合は採取瓶に試料を採取し，その数 ml を直接ガスクロマトグラフに注入して定量することができる．なお，ガスクロマトグラフの検出器は ECD を用いているが，FID を用いるとモノクロロベンゼンと同時測定も可能である．ただし，この場合は、感度が１／２０程度と低くなる．
２）不純物除去管は，N２ ガス中の微量の炭化水素を除去する
５０℃ で４時間以上加熱目的で用い，N２ ガスを通じながら約２し，活性化したものを用いる．
３）この試料捕集管は，その両端をフッ素樹脂製キャップあるいはシリコンゴム栓で密封したのち，さらにシリカゲルの入った気密性のよい金属製の容器に入れ，外部からの汚染に十分注意し，できるだけ速やかに使用する．特に試料捕集管の運搬用容器として樹脂製のものは用いてはいけない．
４）試料採取にバッグ類を用いるとバッグ壁面への吸着が著

1112

４．環境試験法

しいので用いてはいけない．直接試料空気を試料捕集管に捕集する．捕集したのちのジクロロベンゼンは２４時間経ても安定である．試料採取流量は０．
２〜０．
５ l ／min でもさしつかえないが，採取量は他の炭化水素などの妨害を考慮すると２ l 以下が望ましい．
５）ここに掲げた充てん剤でガスクロマトグラフィーを行うと，クロマトグラム上のピークは m―，p―，o―の順に出現する．
６）本法における定量下限は，大気汚染物質測定法指針では
a が０．
００２μg 未満としている．したがって試料空気量を２ l とすると０．
１５ppb となる．

１９）ニトロベンゼンおよびクロロニトロベンゼン１）【注解】１）ニトロベンゼンはアニリンと同様に血液毒であり，蒸気を吸入するときは，肺で吸収され，頭部の充血，めまい，耳鳴，
悪心，おう吐，呼吸困難，血圧降下などをきたす．顔面および口唇にはチアノーゼを呈する．慢性症状としては顔面あるいは全身に著しいチアノーゼを呈し，貧血に陥り，衰弱し，呼吸困難を訴える．
指定検査項目としては， i ）血液検査（メトヘモグロビンの検出）， ）尿検査（ウロビリノーゲン）， ）一般検査（チアノーゼ）がある．
ニトロベンゼンの労働衛生上の許容濃度は，日本産業衛生学会（２００２），ACGIH（２００３）ともに１ppm である．
２〜３
３℃，bp ２４５〜２
４６℃o―クロロニ ト ロ ベ ン ゼ ン は mp ３の黄色結晶で水に不溶，エタノール，ベンゼン，ジエチルエー
テルにはよく溶ける．
環境省環境保健部環境安全課がまとめた全国調査結果によると，平成３年度の大気 環 境 中 の 濃 度 は０．
０
０
２
２〜０．
１
６μg／m３，９となっている．
検出頻度４２／４
６℃，bp ２
３６℃ の淡黄色m―クロロニトロベンゼンは mp ４
結晶で水に不溶，熱エタノール，クロロホルム，ジエチルエー
テル，二硫化炭素，酢酸にはよく溶ける．
２〜８
４℃，bp ２４２℃ の黄色p―クロロニトロベンゼンは mp ８
結晶で水に不溶，熱エタノール，ジエチルエーテル，二硫化炭
素にはよく溶ける．
０
１
４〜０．
０
４
５μg／
o―ク ロ ロ ニ ト ロ ベ ン ゼ ン が 平 成３年 度０．
m３，検出頻度は３／５４，m―クロロニトロベンゼンが平成６年度
０
３
６〜０．
１
１
不検出，p―クロロニトロベンゼンが平成３年 度０．
４となっている．
μg／m３，検出頻度は５／５
生理作用：吸入，摂取および経皮吸収により，眼，鼻，咽喉などの刺激，頭痛，めまい，吸収困難，チアノーゼ，貧血，血尿，血色素尿症，吐き気，おう吐，腸けいれん，興奮と幻覚症
状，筋肉の衰弱と不協調，アレルギー性皮膚炎などを起こす．
p―クロロニトロベンゼンの労働衛生上の許容濃度は，日本産業衛生学会（２００２），ACGIH
（２
０
０
３）
ともに０．
１ppm である．

!

"

文 献
１）環境省環境保健部環境安全課編：平成１
４年度版
質と環境（２００３）

化学物（１）ガスクロマトグラフィー／質量分析法による定量〔試 薬〕① ニトロベンゼンおよびクロロニトロベンゼ
ン標準溶液：２
０℃ のニトロベンゼン８．
３ml または o―，m―，p―各クロロニトロベンゼン各１０mg をとり，それぞれヘキサンに溶かして１０００mlとする．次いで，ヘキサン

でそれぞれ１０倍に希釈して各標準溶液とする．
各標準溶液１ml＝１μg C６H５NO２またはo―，m―，および p―C６H４NO２Cl② 試料捕集管充てん剤：ポーラスポリマービーズ（テナ
ックス GC またはこれと同等の性能をもつもの）
（６
０〜８
０
mesh）
〔装置および器具〕① 試料捕集管１）：４．
４．
１．
１３（
）１）
の
図 4.4.1−14 の（A）に示したものに，試料捕集管充てん剤
０．
４g を充てんし，その両端を石英ウールで固定する．
② ガスクロマトグラフ／質量分析計２）：SIM 測定またはマスクロマトグラフィーができるもの．
〔試料の採取〕あらかじめ N２ ガスを流しながら２３０℃ に加熱して空焼きし，〔試験操作〕と同様に操作するとき，ニトロベンゼンおよび各クロロニトロベンゼンの保持時間に妨害成分のないことを確認した試料捕集管を用い，
４．
４．
１．
１
３
）
３）により０．
２l ／min の速度で試料空気を採取する ．
〔試験操作〕
ガスクロマトグラフィー／質量分析法の条件
カラム：５％ phenylmethylsilicone（０．
２５mm i.d.×６０４）m，膜厚０．
２５μm）
カラム温度：８０℃（１min）
，８
０〜１
４
０℃
（２
０℃／min，昇
温）
，
１
４
０〜２
０
０℃
（４℃／min，昇 温）
，
２
０
０℃
（５
min）
注入口温度：２
００℃
キャリヤーガス：He，４
２kPa
インタフェース温度：２７０℃
イオン源温度：２００℃
イオン化電圧：７０eV
検出器：選択イオン検出（SIM）法またはクロマトグラ
フィーができるもの．
モニターイオン：o―，m―，p―クロロニトロベンゼン
m／z１
１
１，１
２
７，１
５
９
ニトロベンゼン m／z７７，１２３
定 量：試料を採取した 捕 集 管 を４．
４．
１．
１３（
）１）
の図
4.4.1−18 に示すようにガスクロマトグラフ側に連結する．
捕集管にキャリヤーガスを通じ，その流量が安定し，かつ妨害ピークを示さないことを確かめてヒーター（G）のス
イッチを入れ，約１分間で２０
０℃ に昇温加熱し，試料をガスクロマトグラフに導入する．イオンをモニターして得られたマスクロマトグラムから各測定対象化合物に相当す
るピーク面積を読み取り，検量線に照らして対象化合物の量（μg）
を求める５）．
検量線の作成：ニトロベンゼンおよび各クロロニトロベ
ンゼン標準溶液を適宜段階的に希釈して０．
１〜１０μg／mlの濃度に調製した標準溶液１μl をマイクロシリンジにとり，捕集管に注入したのち，清浄 N２ ガス（流速３ml／min）
を約３分間通じ，次いで定量の項と同様に操作し，得られたクロマトグラムから各対象物質の量（μg）とピーク面積との関係をプロットして検量線を作成する．
計 算：試料空気中のニトロベンゼン，クロロニトロベ
ンゼンの濃度は次式から求める．

４．
４ 空気試験法５）４．
４．
６１）〔注解〕６）
参照．
（標準寒天培地，３
７℃，２４時６）記載例：浮遊細菌５２個／m３間，スリットサンプラー法）

３）落下真菌数（１）寒天平板を用いる方法
空気中より，一定時間内に一定面積の寒天平板培地に落下して発育する真菌の総数を計数する．
〔培 地〕① １．
２．
２．
１３（）２）② に同じ．
② １．
２．
２．
１３（
）２）⑥ に同じ．
〔寒天平板の調製〕４．
に同じ．
４．
６１）
〔試験操作〕試料採取：４．
４．
６１）
に同じ．
培 養：２
５±１℃，５〜７日間１）．
集落数の算定：４．
４．
６１）
に同じ．
菌数計算：４．
４．
６１）
に同じ．
【注解】
１）培養中に Trichoderma 属，Monillia 属，Rhizopa 属などの育成の速い真菌が成育してシャーレ全面を覆って菌数計測に支障をきたすおそれのあるときは，早めに計数する必要がある．

４）浮遊真菌数１）（１）スリットサンプラーによる方法１）
空気中に浮遊する真菌およびじんあいなどに含まれる真菌の総生菌数を計数する．
〔培 地〕① １．
２．
２．
１３（）２）② に同じ．
② １．
２．
２．
１３（
）２）⑥ に同じ．
〔試験操作〕１．
２．
２．
１４（
）５）
に従って行い，２５±１℃ で５〜７日間培養して生菌数を計算し２），空気１m３ 中の真菌数
を求める．
【注解】
１）１．
２．
２．
１４）
（５）
〔注解〕
参照
２）４．
４．
６３）
（１）
〔注解〕
参照

4.4.7 騒音・振動
１）騒 音
騒音とは不快な音，好ましくない音など，ヒトの生活活
動に不必要な音の一切をいう１）．
騒音の大きさは普通騒音計または精密騒音計を用いて測定し，デシベル（dB）を単位とする騒音レベルで表す２）．
【注解】１）騒音とは，やかましい音，不快な音，じゃまな音など「好
ましくない音」の総称である．このように人間の耳で音を聞いて初めて騒音か否かを主観的に判断し，非科学的な言葉で表現するところに特徴がある．
騒音は水や大気汚染など他の公害に比較して局地的であり，多発的であり，また，あとに処理物質を残さないことに特色がある．なお，騒音公害（noise pollution）とは，人為的な原因で発生した騒音が継続的にあるいは反復して一般住民に不快感，
睡眠妨害，会話妨害，NITTS（noise−induced temporary thres-

1135

hold shift，
騒音性一過性域値変動），
NIPTS（noise−induced permanent threshold shift，騒音性永久性域値移動）などの好ま
しくない影響を与える現象を称する．
騒音の影響としては次の事柄が知られている．
i ）聴力への影響：一時的難聴と永久的難聴の２種類がある．
一時的難聴の場合は，ある程度大きい音を聞いた直後に一時的に聴力が鈍くなることがあるが，間もなく回復する．一方，永久的難聴は騒音の大きい工場などに起こる職業病として知られている．難聴は今のところ治療法がないので予防のための騒音対策，耳栓の使用，労働時間の短縮，配置転換などが必要で，定期的な聴力検査による早期発見が大切である．
）聴取妨害：二つの音が同時に耳に入り，一方の音（騒音）のため他の音（会話，電話，テレビなどの音声）が聞こえなくなるマスキングにより起こる．深夜のカラオケ騒音，新幹線騒音，
瀬戸大橋鉄道騒音，道路交通騒音，米軍機発着訓練騒音などの苦情が住民から出されている．
）精神的心理的影響：騒音は情緒的影響，仕事，勉強，休
息，睡眠などの生活妨害を起こす．不快感，いらいらなどの情（A）を境に反応が明らかに異な緒的影響では騒音レベル５
５dB
る．高度に不快と反応するヒトの百分率を H（％），訴えを提起する世帯の百分率を C（％）とすれば，
C ＋４．
３，H ＝２（Ldn−５０）
H ＝１２．
３√という関係がほぼ成立する．ここで Ldn は２４時間について昼夜の補正 を 加 え た エ ネ ル ギ ー 平 均 レ ベ ル（day−night soundlevel，昼夜騒音レベル）を示す．
（A）の定常騒音に連続的に暴露されると，騒音レベルが９０dB作業の遂行に極めて有害な影響を与える．特に監視，情報収集，分析など複雑なまたは注意力を要する仕事で影響が大きい．日
常習慣的作業に対してはあまり影響を与えないが長時間に及べば累積効果としての悪影響も出てくる．また騒音は作業の全体速度よりも作業速度の変動を増加させる．騒音レベルが９０dB（A）以下であっても，２kHz 以上の周波数の高周波騒音や間欠
騒音あるいは突発的な騒音は極めて有害な影響を与える．
（A）以上でしだいに著
睡眠に対する騒音の影響は，約３５dB明となる．たとえばトラック走行音により覚醒する割合は，４
０
dB
（A）
（A）
で５％，７０dBで３０％ と増え，脳波の変化 を 基 にすると順に１０％ と６０％ に増えるという．
（A）
以上に）生理機能への影響：騒音レベルが５０〜７０dBなると，主として交感神経の緊張に由来すると考えられる末梢血管の収縮，心臓の拍出量の減少，瞳孔の散大，血圧の上昇，
唾液分泌量減少，胃収縮の回数と強さの減少，皮膚の電気抵抗減少，筋電位の上昇などが観察される．これらの症状は回復可能であるが，騒音により繰り返し起きると動脈や心臓病の原因となる．
自律神経の騒音に対する反応が高まるとともにホルモン系の反応に影響が出て，ACTH（副腎皮質刺激ホルモン）の分泌とそれに起因する副腎皮質ホルモンの分泌の増加が起こり，性ホル
モンのバランスも乱れる．尿中カテコールアミンの排出速度や血中コルチゾールの増加がみられる．これらの変化から心臓・血管系障害や妊娠妨害，胎児や新生児の成長への影響が現れると考えられる．
２）音が空気中を通過すると空気の粒子が振動して濃淡が生じることにより，大気の圧力が上昇または下降する．この大気圧の変動を音圧と呼ぶ．音として聞く音圧の範囲は広く，１kHz
では音圧の最小と最大の比は１：１
０６ にもなる．この音圧をデシベル（dB）で表示したものが音圧レベルである．dB は次の式で求められる．
P
dB ＝２０log１０
P０

!
"

#

４．環境試験法

100

音圧レベル
（dB）

100

80

80

0

0
20

4 6 100 2

4 6 1000 2

2

10−12

20

20

10−6

10−10

40

40

20

10−8

60

60

10−4

2×10−1
2×10−22×10−310−14

2×10−410−16

2×10−5

表 I 騒音の環境基準

音圧（W/m2）

120 phon

120

強さ（Pa）

1136

4 6 10000 2周波数（c / s）

図 I Fletcher と Munson の音の等感曲線

ここには基準音圧で，P０＝２×１
０−５Pa ＝２×１
０−４ dyne／cm２＝０．
０００２dyne／cm２ を用いる．P ははかるべき音圧である．音圧が１０倍になれば音圧レベルは２０dB 増え，１００倍になれば
４０dB 増える．
耳の感度は周波数により異なり，同じ音圧の音も周波数が異なると大きさが違って感じられる．ある音を１kHz の音圧レベ
ルが P dB の音と同じ大きさに聞いたとすれば，その音の大きさのレベルが P phon であるという．すなわち１kHz において
は dB＝phon である．図 I は純音の大きさのレベルと音圧レベルとの関係を示したものである．
騒音の許容値は，１９９７年日本産業衛生学会の勧告では１日連続８時間以内の常習的な騒音暴露が１
０年以上続いた場合でも日常生活に支障をきたす程度の永久的難聴を起こさない値として提案されている．１日連続８時間の労働の場合，この値は騒音計の（A）
特性で測定した８５dB（A）にほぼ相当する．１日の暴
露時間が短ければ許容値は高くなる．また断続的な場合には暴露時間を合計して連続暴露時間とみなす．以上の許容値は健康な成人が１日８時間以内騒音に暴露される場合のものであり，公害としての騒音に一般住民が種々の条件で暴露されている場
合に当てはめることはできない．
普通の声での会話到達距離は騒音レベルが５０デシベルの場
合に約７m，６０デシベルで２m，７０デシベルで０．
７m とされ，会議室では４０デシベル以下，事務室では５０デシベル以下が望ましいとされている．電話は騒音６０デシベルで可能，７０デシベルでやや困難とされている．国際基準化機構（ISO）騒音専門
委員会は知的作業に要求される平均限界を４５デシベル，事務室などの最大許容限界を６５デシベルとしている．文部省は学校の教室内の騒音レベルは，開窓時，教室中央で５５デシベル
以下ならば授業に支障がないとしている．
騒音の環境基準（１９９８年）
を表 I に示す．評価手法は等価騒音レベルによるものとする．昼間は午前６時から午後１０時までの間，夜間は午後１０時から翌朝午前６時までの間とする．
ここに AA とは特に静穏を要する医療施設などが集合している場所，A とは住宅専用地域，B とは住宅が主である地域，Cとは住宅と併せて商業，工業が混在する地域を示す．なお表 I

地域の類型

昼間

夜間

AA
A および BC

５０デシベル以下
５５デシベル以下
６０デシベル以下

４０デシベル以下
４５デシベル以下
５５デシベル以下の数値はすべて A 特性で測定した数値で示している．
また，道路に面する地域は表 II のように別に定められている．なお，幹線道路に面する地域では，別に昼間は７０デシベ
ル以下，夜間は６５デシベル以下，と定めている．
航空機騒音では騒音のあるときとないときの差が大きいので，環境基準には WECPNL（加重等価連続知覚騒音レベル，
weighted equivalent continuous perceived noise level）が採用されている．これは航空機のピーク騒音レベルの平均値に時
間帯別の飛行回数による補正を加えたもので，WECPNL で表す．略算法は次式で示される．
０log１０ N −２
７
WECPNL＝ LA＋１０
（N１＋N４）
N = N２＋３N３＋１
LA：１日のすべての航空機騒音のピークレベルエネルギ
ーの平均［dB］
N ：騒音発生時刻により補正した航空機の発着回数
N１：午前０時から午前７時までの航空機の飛行回数
N２：午前７時から午後７時までの航空機の飛行回数
N３：午後７時から午後１０時までの航空機の飛行回数
N４：午後１０時から午前０時までの航空機の飛行回数
基準値は，もっぱら住居の用に供される地域（地域 I）
では７０
dB 以下，それ以外の地域で通常の生活を保全する必要のある地域（地域 II）では７５dB 以下とされている．新幹線騒音では連続して通過する２０本の列車の騒音レベルピーク値の上位半数をパワー平均することになっており，基準値はデシベルで示され，地域 I が７０デシベル以下，地域 II が７５デシベル以下と定められている．
作業場における衝撃騒音の許容基準については，日本産業衛生学会は，１労働日の衝撃騒音の総暴露回数が１
００回を基準として持続時間からピーク音圧レベルを求め，これに暴露日数に対する補正を加えたものを許容基準としている．

（１）普通騒音計を用いる測定法〔装 置〕普通（または精密）騒音計１），騒音の量を騒音レベルではかるための規定の特性を備えた電気音響機器
で，計量法で定められた計量器である．その原理は騒音の音圧をマイクロフォンで交流の電気量に変え，それを増幅してその実効値を指示計器で指示させるものである．
その構成の概略は図 4.4.7−1 のようである．
〔試験操作〕① 内蔵電池
（乾電池）
が規定の電圧を保っていることを確かめてから，付属の校正用音源で感度を調整する．次にスイッチを入れ，減衰器（１０デシベルきざみ）の表 II 道路に面する地域の騒音の環境基準
地域の区分

昼間

夜間

A 地域のうち２車線以上の道路に面する地域
B 地域のうち２車線以上の道路に面する地域および C 地域のうち車線を有する道路に面する地域

６
０デシベル以下

５５デシベル以下

６
５デシベル以下

６０デシベル以下

1137

４．
４ 空気試験法

マ
イ
ク
ロ
ホ
ン

可
変
減
衰
器

増
幅
器

聴A
感
補A
正C
回
路

電

増
幅
器

源

整
流
回
路

出
力
指
示
計
器

図 4.4.7−1 普通騒音計（精密騒音計）の構成

つまみを動かして指針が指示器の適当な位置にくるようにする．指針の数値と減衰器の数値を加えたものが，騒音レベル（使用した補正回路についての）である．周波数補正回路は原則として A 特性を用いる２）．
② 暗騒音：測定対象の音がないときの騒音を暗騒音という．対象の音があるときとないときの両方の騒音計の指示差が１０デシベル 以上のときは，暗騒音の補正を必要としないが，１０デシベル未満のときは表 4.4.7−1 に従って暗騒音の補正をする３）．
③ 騒音計の指示の読み取り：変動する音の騒音レベル
は，指示値を多数回読み取り，原則としてその平均値をもって表示する．
指示が変動しないか，または変動がごくわずかな場合は，その指示値を読み取ってこれを騒音レベルとし，指示が規則的に変動する場合は，その最大値，最小値および変動のしかたを明記する．
周期的あるいは間欠的に発生し，その指示がだいたい一定な音（たとえばつち音や電車の通過音）の騒音レベルは，発生ごとにその最大値を読みとり，数回平均値をもって表示する．必要ある場合にはその度数などを付記する．
指示が不規則にかつ大幅に変動する場合（たとえば街頭演説）には，ある任意の時刻から始めて，ある時間ごと（た
とえば５秒ごと）に指示値を読み取り，測定値が十分な数（たとえば５０個）になるまで続ける．得られた測 定 値 の
９０％ レンジの上端値を求めるか等価騒音レベルを求める．
【注解】て数点について騒音レベルを測定し，その測定の場所および音源の種類などを明記する．なお学生，聴衆などがいるときといないときのいずれについても測定することが望ましい．
工場，作業場，事務室など：正常作業中に測定するのが普通である．特別に騒音を出す機械がある場合は，その機械の使用者の頭部付近とともに，その機械に近い他の作業者の頭部付近の音も測定する．特別の音源がない場合は，その作業場のほぼ中央の点で測定する．
住宅，病院，旅館など：昼間以外に夜の就寝時の騒音も問題となるから，適当に数点を選んで夜間についても測定することが望ましい．
２）周波数補正回路は原則として A 特性を用いる．環境基準
も A 特性で定められているが，C 特性も測定しておくことが望ましい．
各特性の基準形を図 I に示す．C 特性はほぼ全周波数にわたって一様の指示を示すが，A 特性は低周波数の応答を抑えている．したがって C 特性と A 特性で測定して大きな差が出れば，低周波数の音が多く存在することになる．またうるさい音と感じるのは高周波数の音であるから，A 特性を用いて測定すればうるささと相関した値が得られる．なお測定値には必ず使用した特性を付記する．
３）たとえば対象の音があるとき８５デシベル，ないとき８０デシベルという値が得られたとすると，その差は５デシベルであるので表 4.4.7−1 に従い，２デシベルを８５デシベルから差し引いた８３デシベルが対象の音によるものとする．

10
（A）

（C）
（B）

0
レスポンス
（dB）

出力端子

−10

（B, C）（A）−20
適用周波数範囲

−30
−40
−50
20 31.5 50

100

200

500

50
90
％
レ
ン
ジ
の
下
端

累
積
度 25
数

中
央
値

90
％
累積度数曲線 レ
ン
ジ
の
上
端

100
95
％
累
積
度
50 数
の
％

5
0
0
72 74 76 78 80 82 84 86 88 90 92 94 96
騒音レベル（ホン）図 II 騒音の累積度数曲線の例

表 4.4.7−1 暗騒音の影響に対する指示の補正（単位：デシベル）

補正値5000 10000
8000
20000

図 I 周波数補正特性の基準形

１）詳細は JIS Z８７
３
１騒音レベルの測定方法
（１
９
９
９）
を参照．
測定する場所は原則として次のように選ぶ．
街頭など：測定点は車道と歩道の区別のある所では車道側の歩道端，区別のないところでは道路端において原則として地上
１．
２m とする．
公園および広場など：音源に近い点，その他適当な点を選ぶ．
工場，娯楽場，学校などの付近：建物などから外部に出る音が問題になる場合には，問題になっている場所（たとえば近接した住宅，事務所の窓際など）で測定する．
教室，講堂，音楽堂，映画演劇場など：騒音が問題になる点（たとえば主として外部騒音の入ってくる窓際，給排気孔などに近い席，教壇，ステージなどから最も離れた席など）を含め対象の音があるときとないときの指示の差1200 2000

周波数（c / s）

４

５
−２

６

７

８
−１

９

1138

４．環境試験法

４）たとえば指示が不規則かつ大幅に変更する場合には，図 IIのように累積度数曲線を作って９０％ レンジの上端値か等価騒音レベルを求める．

表 I 振動の規制に関する基準
発生源

地域の区分

昼間

夜間

工場振動 第１種区域 ６０dB 以上６５dB 以下 ５５dB 以上６０dB 以下

文 献１）日本産業衛生学会，産衛誌，３
９，１
２
９
（１
９
９
７）

２）振 動
ここで対象とする振動は，環境基本法で定める公害に関２）連する振動をいう１）．振動の大きさは振動レベル計を用いて鉛直方向の振動について測定し，デシベル（dB）を単位とする振動レベルで表す．
【注解】
１）環境基本法で定める振動公害とは，人為的な原因で断続的あるいは継続的に発生した地盤振動が，一般住民に感覚的な苦情を生じさせたり，家屋の壁にひび割れなどの物的被害を生じさせたりするなど好ましくない影響を与える現象を総称する．振動公害の被害は一般的に住民に及ぼす心理的，感覚的な影響によるものが主体であり，かなり主観的な要素が多いこと，被害が比較的局部的であること，多発的であること，のちに処理を必要とする物質を残さないこと，など騒音公害と共通する特色をもつ．振動は人体への伝達様式により次のように分けられ，公害振動の法的対象となるものとならないものとがある．
i ）人体を支持する物体の表面から人体に振動が伝達され全身に作用する場合を全身振動と呼ぶ．公害振動はこの一種であり，発生源は，主として工場などの事業所，建設・土木工事現場，鉄道や自動車などの交通機関である．一方，全身振動であっても，工場や工作機械のオペレーター，乗物の運転手などへの全身振動は労働環境の範疇であり公害振動としては扱わな
い．乗物の乗り心地に関係する振動および地震など自然現象に基づく振動も公害振動の対象とならない．
）人体の局所に振動が作用する場合を局所振動と呼ぶ．障害は１００〜１
５
０Hz の振動により生じることが多い．削岩機やチェーンソーなどの把持により手指に振動が伝わり，白ろう病として知られる職業性レイノー（Raynaud）
症候群を引き起こすことがよく知られている．労働環境における職業病予防の観点か
ら重要な振動であるが，労働災害であり，公害振動の対象ではない．
）人体が浸漬している媒体の振動が人体に伝播し影響を及ぼす場合で，可聴域を下回る低周波（２０Hz 以下）の音波を超低周波音と呼ぶ．コンプレッサーの振動，航空機のエンジンテス
ト，高速鉄道のトンネル出口，高速走行の自動車などで発生し，頭痛，吐き気，めまい，思考妨害，睡眠妨害，建物の物的被害などを起こすほかに，建物の窓をがたつかせるなど二次的に騒音を発生させる原因となるが，公害振動の対象とはなっていない．
２）公害振動における振動の大きさは，振動規制法により規制され，建設作業に伴う振動，道路交通振動および工場・事業所における事業活動に伴う振動に対して敷地境界での規制基準
値を以下のように定めている．なお，いずれも規制の対象となる振動は鉛直方向のものだけである．
i ）建設作業振動：平成８年現在の基準では，特に静穏を要する区域（A），住宅区域（B）
および住宅と商店，工場が混在する区域（C）では，いずれも午後７時から翌日の午前７時の間で
７５dB を超えないこと，またその他の区域では午後１
０時から翌
日の午前６時の間で７５dB を超えないこと，としている．
）道路交通振動および工場・事業所における事業活動に伴

!

"

!

第２種区域 ６５dB 以上７０dB 以下 ６０dB 以上６５dB 以下
道路交通 第１種区域
振動
第２種区域

６
５dB を超えない６
０dB を超えない７
０dB を超えない６
５dB を超えないう振動：平成８年現在の基準を表 I に示す．表中，第１種区域とは上記の A および B の区域，第２種区域とは C の区域および工場が主である区域である．また，おのおのの区域で学校，
病院，図書館，養護老人ホームなどがある場所では，各区分の基準値を５dB 減じることができる．昼間とは午前５，６，７または８時から午後７，８，９または１
０時まで，夜間とは昼間以外の時間あるいは午後７，８，９または１０時から翌日の午前５，６，
７または８時までの時間の範囲内で都道府県知事が定めた時間をいう．

（１）振動レベル計を用いる測定法１）〔装 置〕振動レベル計２）：JIS C１
５
１０の振動レベル計
で定めるもの．振動量を振動レベル３）ではかるための規定の諸特性を備えた計量器である．
〔試験操作〕① 装置の設置：振動レベル計の振動ピック
アップを設置する測定点は，測定しやすくかつ測定地点を正しく代表すると認められる場所とし，原則として屋外の地表で，振動の発生源である工場，事業所，建設作業場，
５）．
道路の敷地境界線で，住居に面する部分とする４）振動ピックアップは，測定点において緩衝物がなくかつ十分踏み固めなどの行われている固い平坦な地面に水平に設置し，できるだけ地面に密着させ，また，振動でずれた
りぐらつかないよう固定する．温度，風，電気，磁気などの影響を受けないよう注意し，必要ならば適当なしゃへいを行う．
② 測定：装置の電源電圧が正常であることを確かめ，電源スイッチを入れる．指示が安定してから，増幅部の校正回路がついているものではゲイン校正を行う．振動感覚補正回路は原則として鉛直振動特性を選び６），衝撃的な振動については，振動レベル計が過負荷状態にならないようレ
ベルレンジ切り換え器で測定レンジを選定する．機器の指示器またはレベルレコーダーを用いて指示値を読みとる７）．
③ 暗振動の補正８）：ある場所において特定の振動を測定対象とする場合に，対象の振動がないときのその場所における振動を暗振動という．対象の振動があるときと，ないときとの振動レベル計の指示値の差が１０dB 以上ある場合は暗振動の補正を必要としない．指示値の差が１０dB
未満３dB 以上であって暗振動が定常的な振動のような場
合には，表 4.4.7−2 に示す補正値を指示値から減じたもの

表 4．
4．
7−2 暗振動に対する指示値の補正（単位：dB）
対象の振動があるときとないときとの指示値の差

３

補正値

−３

４

５

−２

６

７

８

−１

９