研究室紹介

はじめに
大阪医科大学産婦人科学教室は，本学の前身である大阪高等医学専門学校に，１９２９年６月１５日，初代教授柚木祥三郎が着任したことより始まります．その後，小島秋教授，杉本 修教授，植木 實教授によって発展がな

大阪医科大学産婦人科学教室

され，２００
６年４月１６日より大道正英が第５代の教授として教室を主宰しています．臨床・研究面においては，周産期，腫瘍，不妊，内視鏡および更年期女性内科学・排尿・骨盤再建を５本の柱と位置づけ，それぞれの研究を生殖内分泌研究チーム

臨床に還元するトランスレーショナルリサーチをテーマに各種プロジェクトに着手しています．各分野の臨床・研究内容の詳細は当教室のホームページ（http : //www.
osaka-med.ac.jp/deps/gyn/index.htm）でご覧 に な っ ていただければ幸いです．
本稿では，現在われわれの教室で行っている，生殖および内分泌関係の臨床および基礎研究を紹介いたします．

臨床研究主任教授)大道 正英

体外受精治療における GnRH アンタゴニスト投与
下の recombinant FSH の有用性の検討
遺伝子組み換えヒト卵胞刺激ホルモン recombinant

FSH（recFSH）は，原材料を尿に依存しないため，ヒト生体成分に由来する感染因子を回避できることと，均質で高純度な FSH 製剤であることから hMG 製剤に比較し卵胞発育に有用であるとされています．
私たちは，recFSH の効果を検討する目的で，子宮内膜症性不妊症の体外受精治療症例において，GnRH アンタゴニスト周期で recFSH の投与を行い，hMG 投与群との臨床成績の比較検討を行っています．また，recFSH投与下の採卵時に得られた顆粒膜細胞におけるエストロゲンレセプター（ER），FSH レセプターの遺伝子発現を，
講師

奥田喜代司

講師

山下能毅

講師

田辺晃子

hMG 投与群と比較検討し，受精率や良好胚率に及ぼす影響について検討しています．
*

早産における Progesterone による子宮筋収縮抑制メカニズムわが国の新生児救命率は世界最高水準にあり，周産期医療レベルは海外から高い評価を受けておりますが，早助 教
佐々木 浩

院 生
苅田正子

助 教
林 篤史

産児の予後改善には限界があり，早産をいかに予防するかはいまだに周産期医療上の大きな課題です．
現在日本で認められている早産予防治療である子宮収縮抑制剤（β刺激薬，硫酸マグネシウム）
は妊娠を延長させる効果としては限定的であり，新生児の予後を改善しないことがわかってきました．
つまりエビデンスレベルの高い治助 教
井川佳世恵

58

院 生
林 美佳

レジデント
吉田 陽子

日本生殖内分泌学会雑誌（2009）14 : 58-61

レジデント
山本 輝

療法は存在せず，新たな治療法の確立が急務とされています．
そのためには妊娠維持・陣痛のメカニズムを解明することが重要ですが，動物種によりそのメカニズムが大きく異なるため，モデル動物での機序がヒトに応用できないのが解明を遅らせている原因と考えられています．
ラット，ウサギ，ヒツジなどにおいては，陣痛発来直ID

AF-１AF-2ID

AF-１１AF-2165

PR-A

AF-3
1前に母体血中のプロゲステロン濃度が急速に低下するこ

PR-Bとにより陣痛の引き金になることがわかっています．まPR―A は，inhibitory domain（ID）を有しており，ER や PR―B の転写活性を抑制している．
PR―B は，activating factor―３（AF―３）によって，ID の機能を抑制する
ことにより，プロゲステロン応答配列（PRE）を有するプロモーター対して，PR―A より強い転写活性を示す．
７０.
Leonhardt et al. Steroid ６８２００３７６
１―７

た，プロゲステロン阻害薬の投与で人工流産・早産が発生することや， プロゲステロンは卵膜における PGF２α，PGE２の産生や子宮頚管の熟化を抑制することより，妊娠継続には必要なホルモンという認識が一般的です．し図１３
Progesterone receptor（PR）１１q２
２―２

かしながらヒトにおいては，陣痛発来時の母体血中のプロゲステロン濃度は不変であるため，濃度自体に減少がみられなくても受容体の反応性の低下といったプロゲスばかりが注目され，手術・抗癌剤治療・放射線治療が健テロンの作用を抑制する機構（functional progesterone

康障害に及ぼすスクリーニングや治療は，一般的には考withdrawal）の存在が予測されています．

慮されておりません．長期臥床，抗癌剤および併用されプロゲステロン受容体（PR）は核内受容体で，主にるステロイド，放射線治療，卵巣摘出による人工閉経は，PR―A と PR―B の２つの isoform が存在します．PR―A は動脈硬化や骨粗鬆症のハイリスクであり，われわれは各PR―B に存在する転写活性ドメインを欠如しているた

種婦人科悪性腫瘍の治療後女性に対し，術前と術後，抗癌．
め，PR―B の抑制受容体として考えられています（図１）剤治療前後，放射線治療前後に骨密度定量と，動脈硬化のつまり妊娠中は PR―B により子宮収縮が抑制されます

指標として PWV 計測を行い，異常があれば治療を開始が，陣痛発来とともに PR―A の発現が上昇し，PR―B のすることで，癌克服後のヘルスケアを行っております．

抑制力が相対的に減弱することで子宮収縮が引き起こされることが予想されています．しかしながら PR―A 上昇

基礎研究のメカニズムや，ましてや PR によるオキシトシン反応)黄体化顆粒膜細胞におけるプロゲステロンレセプター性，プロスタグランジン反応性に対する制御機構はいまの発現だ明らかにされていません．そこでわれわれは，「早産

プロゲステロンは増殖した子宮内膜を分泌期化するにおける Progesterone による子宮平滑筋収縮抑制メカが，中枢に作用してゴナドトロピン分泌を調節し，これニズム」
を研究対象にし， PR―A, PR―B の発現の変化と，以外に子宮筋などの平滑筋のトーヌスの低下などの作用

プロゲステロンによるオキシトシン感受性，プロスタグを有しますが，卵巣内での役割はまだ不明な点が多く存

ランジン感受性の変化に対する影響を分子生物学的に検在します．核内レセプターであるプロゲステロンレセプ

討し，早産予防の新たな治療法としての可能性を探って３に存在し，翻訳領域にはター（PR）は，染色体１q２
２―２

おります．

エクソン１から８があり，２種類の異なった転写開始点+を有しています（PR―A，PR―B）（図１）．PR―A は，in-

子宮内膜症性嚢胞に対する嚢胞焼灼術と摘出術の臨床的予後の比較検討

hibitory domain（ID を有しており，ER や PR―B の転写

臨床的には術後の月経痛などの疼痛を３年間追跡調査

活性を抑制しており，一方，PR―B は，activating factor

し，子宮内膜症に対する腹腔鏡下手術の評価も行ってい―３（AF―３）によって，ID の機能を抑制することにより，ます．また，腹腔鏡下嚢胞内壁焼灼術は嚢胞摘出術に比プロゲステロン応答配列（PRE）を有するプロモーター

べて卵巣機能への影響が少ないと考えられていますが，に対して，PR―A より強い転写活性を示すとされていま

その有用性はいまだ議論のあるところです．そこで，ラす．また，プロゲステロンは卵の premature degeneration

ンダム化比較試験によりこれらの手技の手術時間，原始の防止に重要との指摘や，排卵早期のプロゲステロンの卵胞の有無や血中 FSH 値等の形態学的・内分泌学的検上昇は体外受精―胚移植における胚の質の低下を起こす

討，さらには術後妊娠率の比較検討を行っています．

ことが報告されており，プロゲステロンと生殖生理との,関係は今後さらに検討が必要であると考えられます．そ婦人科悪性腫瘍の治療が動脈硬化と骨密度に与える影響

こで，われわれは，体外受精治療において得られた顆粒

婦人科悪性腫瘍治療においてはとかく悪性腫瘍の予後

膜 細 胞 を 用 い て 黄 体 化 顆 粒 膜 細 胞 に お け る PR―A/B

研究室紹介

59

PR-B

PR-A

P=0.40P=0.082.221.81.61.41.21.8.6.4.203.532.521.51.50

非子宮内膜症

図２

子宮内膜症

非子宮内膜症

子宮内膜症

PR―A，PR―B mRNA expression ratio の比較

mRNA expression ratio を real time PCR で測定し，卵胞内のプロゲステロン濃度および胚のグレードなどの臨床データとの相関の検討を行い，顆粒膜細胞における PR

図３―A，PR―B の発現が卵および胚の発育への関与について研究しています．最近，子宮内膜症では，PR−A の高い,顆粒膜細胞におけるミトコンドリア DNA の発現お発現が卵成熟および胚発育を阻害している可能性を報告

よび欠損が，卵胞発育異常や，卵の受精能低下を引きしています（図２）．

起こすメカニズムの解明*

子宮内膜症病変におけるプロゲステロンレセプター３
５歳 以 上 の 高 齢 不 妊 患 者 に お け る 顆 粒 膜 細 胞 のの発現はジエノゲストの治療効果に影響するか？

mtDNA の点変異や欠損が報告されており，ミトコンドジエノゲストはプロゲステロン受容体に対する選択的リア異常と不妊症との関連性が注目されつつあります．

なアゴニスト作用を示し，卵巣機能抑制および子宮内膜

mtDNA は，１細胞あたり，１００〜２，０００個ぐらい存在し，細胞の増殖抑制により子宮内膜症に対する有効性を示す

固有の DNA，リボソーム，tRNA が存在し半独立の増経口治療剤です．チョコレート嚢胞，腹膜病変などの各殖系をなしています．１６５６９塩基対から成り，約１kb の種子宮内膜症病変別の効果を検討する目的で，ジエノゲ非翻訳領域を除くと，その大部分が１３種類のタンパク質

スト投与後の腹腔鏡手術で得られた各病変別の PR―A/Bとその翻訳に必要な２種類のリボソーム RNA と２２種類

mRNA expression ratio を，real time PCR で測定し，の転移 RNA の遺伝子をコードとする領域となっていま

PR―A，PR―B の発現量とジエノゲストの治療効果の相す（図３）．顆粒膜細胞における mtDNA の発現を検討

関性について検討しています．

したところ，子宮内膜症患者において，顆粒膜細胞にお+ける mtDNA 発現は，非子宮内膜症患者に比べて高かっ

アンドロゲンレセプター（AR）の CAG リピートが卵胞発育に及ぼす影響

たが，受精率，良好胚率が低いことから，子宮内膜症下AR は顆粒膜細胞に局在しており，遺伝子は Xq１
１．
２―

では，代償性に顆粒膜細胞に mtDNA が発現する可能性

１２に存在し，８つのエクソンからなり，N-terminal acti-

７０５，２００７）．
を報告しました（Fertil Steril ８８：１
７０３―１vation domain は，エクソン１のコドン５８を開始点とす

さらに，顆粒膜細胞における mtDNA 発現が，体外受精る多型性の CAG リピートを有しています．そのリピー治療の臨床成績にどのような影響を及ぼすかを検討した

ト数と AR の機能が負の相関を示すことは，男性においところ，LH を含有する hMG 投与周期において，LH をて数多く報告されています．また，雄性個体において女含有しない recombinant FSH（recFSH）投与周期に比性ホルモンが生殖機能や脂質代謝などさまざまな生理機較し mtDNA 発現が高かったことから，LH が mtDNA能に重要であることが明らかになりつつありますが，雌の発現を惹起している可能性が示唆されました．加齢に性における男性ホルモンの重要性に関しては多くの謎がよる mtDNA の発現低下は明らかではなかったことか存在します．

ら，顆粒膜細胞における mtDNA 発現と，卵成熟および現在，われわれは不妊症例の顆粒膜細胞における AR胚発育にどのように関与するかはいまだ不明な点が多くの発現を real time PCR で測定すると同時に，患者リン存在します．そこで，各年齢層の体外受精治療時に採取

パ球から得られた DNA に対してダイレクトシークエンした顆粒膜細胞における mtDNA の発現について，Realスを行い，CAG リピート数と卵胞発育や受精率などのtime

臨床データとの相関性について検討しています．

響を受けるか，また，卵胞発育および胚発育にどのよう

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日本生殖内分泌学会雑誌

Vol.14 2009

PCR 法で定量し，mtDNA の発現が加齢により影co-activator
SRC-1
Knock down!

SRC3
CBP

E2
ERαα

転写促進

SRC1
c-Myc / IGF-1

c-myc or IGF-1 promoter region

co-repressor
SMRTX

HDAC2 RAL N-CoR

ERα

図５

c-Myc / IGF-1

c-myc or IGF-1 promoter region
図４に関与するかを検討しています．また，ミトコンドリア可能性があり現在研究を行っています．

病の原因として，全長の約３分の１に相当する４，６９６塩.

基対の欠失が報告されていますが，この欠失が高齢不妊（MPA）の古典的作用から受容体を介した組織特異的症において胚の発育を阻害するかについて，ミトコンドな転写調節機構の解明

ホ ル モ ン 治 療 薬 medroxyprogesteroneacetate

リア DNA（mtDNA４６７７）を導入したミトコンドリア遺私たちは，以前，乳癌細胞に MPA を添加すると PI３伝子疾患モデルマウス（Mito―Mice）を作製することでK/Akt/NFkB を介して cyclinD１の発現が上昇し，細胞検討を行う予定です．

増殖作用を示すことを報告し，この作用には，PR―A で-エストロゲンとラロキシフェンの分子制御機構はなく，PR―B が関わっていることを解明しましたが，ラロキシフェンは SERM（選択的エストロゲン受容（Saitoh M, Ohmichi M, et al. Endocrinology １４６：体モジュレーター）として，エストロゲン受容体を介し４９１７，２００５），子宮内膜癌における MPA の PR を介したて組織選択的に作用し，骨や心血管系に対しては促進的抗腫瘍作用メカニズムはわかっていません．MPA に対に，子宮や乳房に対しては抑制的働きます．ですから骨する標的遺伝子を解明し，それを制御できれば，MPAに対してはエストロゲン様に作用し骨吸収抑制作用をもの効果をより高めることができ，治療抵抗性となったつ骨粗鬆症治療薬であります．われわれは，ラロキシフェtype１や難治性である type２子宮内膜癌に対する新たなン投与はエストロゲンの様に卵巣癌の発症が助長されな治療戦略につながることが期待されます（図５）．そこい meta analysis の結果に着目し，ラロキシフェンが組で私たちは，子宮内膜癌における MPA が結合する pro-織選択的に作用をするメカニズムを研究しています．ヒgesterone response element（PRE）を含むプロモーター

ト卵巣癌細胞株を用い c―Myc および IGF―１の遺伝子発マクロアレイを作成し，MPA により誘導されるアポトー現の分子機構について検討しました．その結果，卵巣癌シス関連遺伝子，癌抑制遺伝子を同定し MPA の PR―A

細 胞 に エ ス ト ロ ゲ ン を 添 加 す る と c―Myc，IGF―１のまたは PR―B を介した作用についてその機序の解明に取mRNA が増加しますが，その機序はそれぞれのプロモーり組んでいます．

ター領域に ER とともに co-activator である SRC―１がリクルートされることによるものであり，またラロキシ
フェンによっ て 標 的 遺 伝 子 が 増 加 し な い の は co−repressor がリクルートされるためであることを報告しました（Oncogene ２
７：２
７３７２-７４５，２００８）（図４）．

おわりに以上，当教室で行われている生殖および内分泌に関連した研究について紹介させていただきました．
昨今の大学病院の産婦人科は，そのほとんどのマンパ最近，膜貫通型レセプターである GPR３０（G protein-ワーを臨床に割かれ，研究面においては厳しい状況ですcoupled receptor ３０）が発見され，さらにこの GPR３０が，幸いわれわれの教室では新入教室員の増加により，を介してエストロゲンにより Akt がリン酸化するといっ研究もできる体制を取れています．今後も，大学人とした報告があります．私たちは，この GPR３０が卵巣癌細ての責務・特権は夢のある研究ができることであること胞株に発現していることを確認しており，今後の研究にを自覚し，魅力ある研究室作りに努力していきたいと考おいても標的遺伝子の発現調節に関しても関与している

えています．

研究室紹介61