  


 ­­
­ 



  ­­    
 















    
 









 

 ­









­





¡¢£¤¥¦§¨©ª«¬®¯°±²³´µ¶¤·¸¹¡º»¼½¾¿À¿£ÁÂÃÄÅÆÇÈÉ½¾¿¤·¡À¿ÊË´À¿¤·¡½¾¿ÊË´ÌÍÇ¤·ÎÏÐÑ ÒÓÔÕÖÖÖ×ØÙÚÛÜÖÝÖÞßàáâ

ãäåæ

¡çÍÇ   




 


­ 








 






 
­ 

























 

 



 ¡





¢ £



  ¤¥¦ §  ¦¦¨¥¨ ©   ª«¬©
 ¨ §
«¦ ­
«
©

­
®  ¯­ ¦¤­
°
§ ­
ª
¦ ©

«
¦
± 
°
² ±­©
± ¤­©±§  ©
¦± ² « §¦ ²
© ¦
¦ ¤«
© ­
³ °©

 ¨ §« § ¦©
§ ³
¦§® 
¥

¦

©
¨³
­ ©©
©  §
¥
¨






¡





¢ £




 ­ ¤­©­ ­ ­
© «
­
©
¥©
­®
  ´  «
¤© ² ©
©
¯¤­ µª¦

 «
«
¤©
§®   «¤© ¯¤ ­¦
§
¥
«
«
­
¤
§¥
¨  

µª¦
 ®¦
¦©  «¤© ­¦§¥ ©©
­©µ§
©
­¦³
³

«







¡





¢£




±   ª«¬©
 ¨§
«¦ ­
«
©

­
±¶·¸·¹º±ª­ ­ª­±  ª«¹ ±  ª«¹»¼½¾¹···¿±¯¤ 














 






























 >>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>
­





>>>>>>>>>>>>>
¡¢£¤¥¦§¨©ª«¬®
¯°±²¯³´>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>>
µ¶·¸¹º»¹¼½¾¿£º»À¡¸ÁÂÃÄÅÆÇÈÉ ÊËÌÍÎÏÐÑÒÓÔÕÖ×ØÕÙÚ¯ÈÛÜÝÞâãäå>>>>>>>>>>¶
æç

ßàá

èé¬êëìíîïðñï½ò£óôõö÷øÎùÙú¯ûüýþÿ~}|{[\Ú] ^_`ä@ >>>>>>>>ç
ç?






 



 








­


山口獣医学雑誌
第 49 号
１～ 10 頁 2022
Yamaguchi J. Vet. Med., No.49 ： １～ 10． 2022

総

1

説

Hazard Analysis and Critical Control Point （HACCP）
豊福肇〔2022 年 12 月 20 日受付・2023 年１月 20 日受理〕

REVIEW
Hazard Analysis and Critical Control Point
Hajime TOYOFUKU
1) Department of Veterinary Medicine, Joint Faculty of Veterinary Medicine, Yamaguchi University, Yamaguchi, 753-8515, Japan2) The United Graduate School of Veterinary Science, Yamaguchi University, Yamaguchi, 753-8515, Japan

和文抄録
Hazard Analysis and Critical Control Point (HACCP) とは，食品等事業者自らが原材料及び製造工程で発生し，最終製品を喫食した際に健康被害を起こす可能性のある危害要因（ハザード）の中から，重要なハ
ザードを特定した上で，原材料の入荷から製品の出荷に至る全工程の中で，それらの重要なハザードを除去又は許容レベルまで低減させるために特に重要な工程（CCP）を特定した上で，それを管理し，管理が不適切な場合には改善措置を講じることで，製品の安全性を確保しようとする食品安全上のツールである．
HACCP による衛生管理は国際的には普及がすすんでいる．日本では 2021 年６月から，原則としてすべての食品事業者が HACCP に沿った衛生管理が制度化された．本稿では，日本でのこれまでの HACCP と食品衛生の歴史について振り返った．
キーワード：HACCP，Codex

ABSTRACT
Hazard Analysis and Critical Control Point (HACCP) is a food safety tool thatfood business operators themselves identify significant hazards in raw materials andmanufacturing processes and that may cause adverse health effects when eating thefinal product and cannot be controlled by implementing General Hygiene Practice,identify Critical Control Point(s) to eliminate or reduce those significant hazards in an
acceptable levels in all processes from the arrival of raw materials to the shipment of
products, monitoring the control of CCP, taking corrective measures when control of
CCP is inappropriate, and ensures product safety. In Japan, from June 2021, in principle,
food safety management in line with HACCP has been mandatory for all food business
operators. This article reviews the history of HACCP and food hygiene in Japan.
Key words: HACCP, Codex

１）山口大学共同獣医学部獣医疫学教室
２）山口大学大学院連合獣医学研究科
連絡責任者：豊福肇 山口大学共同獣医学部〒753-8515 山口市吉田1677-1 TEL：+81 083-933-5827 FAX：+81 083-933-5920
E-mail：toyofuku@yamaguchi-u.ac.jp

2

山口獣医学雑誌

第 49 号

2022

はじめに
HACCP は食品事業者自らが，食中毒菌汚染等のハザード（危害要因）のなかから，一般衛生管理を実施
してもコントロールできない重要な（significant) ハザードとそれに対する管理手段を Hazard Analysis した上で特定し，原材入荷から製品出荷までの全工程の中で，重要な危害要因を除去又は許容れきるレベルまで低減させるために特に重要な工程（Critical Control Point）を特定し，管理し，製品の安全性を確保する
衛生管理手法である．HACCP は重要なハザードの管理に焦点を当てて，監査可能（auditable）であるため，世界中で普及している．
本稿は HACCP に関する総説というよりは，30 年以上 HACCP にかかわってきた筆者の関与，想い，などをつづったエッセイのようなものとお考えいただければ幸いである．

１．総合衛生管理製造過程の制度（マル総）前１）最初の HACCP トレーニング
1992 年にアメリカの American Meat Institute が開催した HACCP の３日間講習会にアメリカの食肉製品製造業者の品質管理の人たちと一緒に参加し，初めて HACCP に触れた．ハザード分析の演習等，
今でも HACCP の導入研修で行われているものに近かった．受講後の印象はこれなら日本でもできるなと感じた．
２）Canada の FSEP
1993 年，カナダでの学会発表をお手伝いする機会があり，カナダに行った際，学会で知り合った Canadian Food Inspection Agency の方からカナダの任意の手上げ方式の認証制度である Food Safety
Enhancement Program (FSEP) の HACCP 及 び PRPのマニュアルを入手し，それらを食品衛生研究に 紹 介 し た． そ の と き， は じ め て Pre-requisite
Program（PRP：前提条件プログラム）の概念を紹介され，HACCP と PRP の両方が食品の安全確保には必要であることを教わった．日本で最初に PPと言い出したのは私である．この時入手した資料はその後の日本のマル総の審査制度の参考にさせてもらった．４）～５）
３）HACCP 研究班
厚生科学研究の班のひとつで，Codex の食品衛生の一般原則（以下 GPFH）の HACCP 適用のためのガイドラインを読んで理解し，主要用語の日
本語訳を決め，解釈する作業を熊谷先生，小久保先生，小沼先生と私で行った．その成果は食品衛
生学雑誌等に報告した．４～５）
４）EU 輸出禁止事件
EU 域内に輸出される水産食品については，その加工場等が EU の定めた要件に適合しなければならないこととされ，1995 年３月の欧州委員会の担当官による我が国の水産食品加工場への査察の結果，EU の要件に適合していないとして，同年４月７日から日本産水産食品の全面輸入禁止措置がとられた．適合していない理由のひとつが HACCP
プランを作成し，実施していないというものであった．
当時，厚生省の乳肉衛生課は大騒ぎになり，国立公衆衛生院にいた私は，課長がヨーロッパに交渉及び根回しに行く際のお供がいないということ
で，急に呼び出され，乳肉衛生課長と水産省の加工課長の欧州委員会及び関連国の支援取り付けの旅に随行した．また，その後，欧州委員会のイタリ
ア人獣医の査察官が，デンマークの水産加工施設
で実際の査察のやり方を見せてやるから見に来いというので，当時の乳肉衛生課の課長補佐，青森
県と北海道の担当課の課長補佐と一緒に彼の監査を見せてもらった．
彼はGood Hygiene Practice（GHP）の化身のような人で，一見きれいな施設にあっても製品が protect されているか，原材料の受け入れ場
所は汚染から守られているか，生の原材料と包装直前の最終製品の間に交差汚染の可能性はないか等
を細かく見て指摘していたのは今でも覚えている．
その後，欧州委員会との協議を踏まえ，厚生省（当時）は HACCP の要求事項を含む「対 EU 輸出
水産食品取扱い要領」を改正した．当時大手水産食品業者と実際に輸出をしている企業のなかから，
欧州委員会の要求事項を満たせる施設を５，
６施設選定し，欧州委員会の査察官による再度の査察の結果，1995 年 12 月６日に日本産水産食品の輸入が解禁されることとなった．
２．マル総
1995 年，HACCP による衛生管理を食品衛生法に位置づけ，一律の製造基準によらず，工程の各段階において安全性に配慮した多様な方法による食品製造を可能とする総合衛生管理製造過程の制度（以下，マル総という．）が新設された．対象
食品は 1996 年 ５月に乳（牛乳，山羊乳，脱脂乳
及び加工乳），乳製品（クリーム，アイスクリーム，
無糖練乳，無糖脱脂練乳，発酵乳，乳酸菌飲料及山口獣医学雑誌

び乳飲料），食肉製品（ハム，ソーセージ，ベーコン等），1997 年３月 に容器包装詰加圧加熱食品，1997 年 11 月に魚肉練り製品（魚肉ハム，魚肉ソーセージ，鯨肉ベーコン等），平成 1999 年 7
月 に清涼飲料水，2003 年６月 に乳製品（脱脂粉乳）と拡大されたが，製造基準の適用除外という性格上，製造基準のある製品にしか適用できないという限界があった．
食品衛生法に HACCP の考え方を導入したのは当時の厚生省の獣医の幹部の意地と根性と法律事務官の知恵なのだろうと思う．Codex の GPFHに HACCP 付属文書が最終採択される前に食品衛生法に HACCP を入れたというのは今考えると，cool なことだと思う．今のように義務化は難しい．
ならば製造基準の適用除外の条件を HACCP としつつ，製造基準のままでも認定を取得できるとして，HACCP の普及を図った点はすごい知恵だと思う．当時の乳肉衛生課が関係の深かった乳業界と食肉製品製造業界からはじめるため，この 2 食品を最初の承認対象とした．両業界とも大手トップ企業の品質保証の幹部によるマニュアル作成の検討会が開催され，マニュアルが出版された．当時私は両方の検討会に参加していた．
当時の乳肉衛生課は対米食肉輸出，対 EU 水
産輸出を通じて，米国農務省食品安全検査，欧州委員会による査察を経験して，HACCP もそうだが GHP の重要性と日本の弱点が GHP にあることを認識していた．それで，マル総は GHP とHACCP の両方を承認対象にした．輸出施設レベ
ルの GHP のハードを求めたわけではないが，それでもマル総のためには一定程度のハードが必要という印象と HACCP は大手企業のためのものという印象を持たれてしまったことは残念である．
筆者は法律改正時にはまだ公衆衛生院にいたが，施行時には乳肉衛生課に異動し，どのような現地査察を行うか監視チェックリストを作成するのに関与し，また実際の監視チームをリードした．当時は地方厚生局がなかったため，乳肉衛生課内に査察チームが作られ，月曜に出張し，ブロックごとに３，４施設を近隣自治体の食品衛生監視員の方々にも承認を求める施設の査察に同行してもらい，我々がどういう視点で査察をするのかを見てもらい，金曜に厚生省に戻って，それから各チー
ムの今週の監査結果の報告会を土曜の始発電車が動き出すまでやっていた．厚生省の査察チームは施設に朝から晩まで滞在して，HACCP7 原則 12手順の実施状況を監視し，フローダイアグラムの
現場確認，監査チームのハザード分析と施設のハザード分析と比較し，違いがあれば施設と議論す第 49 号

2022

3

る，CCP の設定，Critical Limit ( 以下「CL」という．)の設定根拠及びモニタリングの方法や頻度についても施設と我々の考えたものを比較した．また，モニタリングや改善措置を施設の従業員が実施しているところを観察し，質問をし，モニタリング，
改善措置及び検証記録についても現場及び保管されている記録を見直し，CL からの逸脱を見逃していないか，モニタリングは HACCP プランで規定された方法や頻度で行われているか，CL から逸脱したときには改善措置は HACCP プランに沿って行われていたか，また記録の確認は決められた方法と頻度で行われているか等 HACCP プラ
ンの実施状態について細かくチェックした．自治体の監視員の方々は厚生省の監査チームがそこまでやるとは思っていなかったと後で自治体の方から聞いた記憶がある．
ここで，ちょっと世界の状況を振り返ってみたい．
Codex の食品衛生部会（以下，CCFH という．）
は 1989 年の第 24 回部会において，HACCP は消費者の保護に非常に有益なツールであり，Codex
委員会を通じて普及すべき，そのためには国際的に合意できる定義と原則を作成すべきということで，CCFH 内に作業部会を設けて議論することに合意した．1991 年の第 25 回 CCFH は，第 24 回で設立された WG の勧告を受け入れ，HACCP 適用のための原則は食品衛生の一般原則に付属文書として追加することを決定した．この文書で７原則 12 手順が初めて明らかになった．作業部会の報告書に対する各国からのコメントを求めるた
め，Step3 で回覧することに合意した．1993 年の第 26 回 CCFH で HACCP 適用のためのガイドラインが合意され，次の総会にステップ６，７を省
略して最終採択するように勧告した．しかし，第20 回の総会では，HACCP 適用のためのガイド
ラインは GPFH の付属文書とすることに合意し，1994 年の第 27 回 CCFH でさらに議論することを求め，CCFH は議論の結果，GPFH と HACCP 付
属文書を Step5 に進めることに合意した．その後
1996 年の第 29 回 CCFH では HACCP 適用における弾力性が追加され，次の総会において Step8 として採択するように勧告した．1997 年の第 22 回
総会で GPGH と HACCP 付属文書は最終採択された．
３．食品の製造過程の管理の高度化に関する臨時措置法〔通称 HACCP 支援法〕（平成 10 年法律第59 号）
食品の安全性の向上と品質管理の徹底に対する社会的な要請に対応し，食品製造業界全体に

4

山口獣医学雑誌

HACCP の導入を促進するための法律であった．
HACCP 導入に必要な施設整備や，その前段階の衛生・品質管理等のための施設及び体制の整備である「高度化基盤整備」に対する（株）日本政策金融公庫による長期融資支援を行った．
この法律は厚労省と農林水産省の共管なので，筆者は法案の各省協議，法務省への説明等に厚労省代表として参加した．なぜか分からないが，各省協議で当時の通産省にいじめられた記憶がある．この法律ができる前，マル総があるため，厚生省は従来の衛生管理と HACCP による衛生管理は同等であるというスタンスであったが，話している本人が HACCP による衛生管理のほうが優れていると考えているものだから，だんだん，ぼろが出てきて，HACCP による衛生管理のほうが優れているという雰囲気になっていった記憶がある．
４．対米水産食品輸出
EU に水産食品輸出を止められた苦い経験を踏
ま え， 米 国 Food and Drug Administration( 以 下，
「FDA」という．) が水産食品に対する HACCP の導入に関する連邦規則を 1997 年 12 月 18 日から施行し，この規則が我が国から米国へ輸出される水産食品に対しても適用されることとから，その取扱いについて厚生省（当時）は 1997 年 12 月に「対米輸出水産食品の取扱い要領」を定め，対米
輸出水産施設は厚労省が直接監視する枠組を作成した．６）
その後，USFDA の水産食品 HACCP の監視員
向け監視員講習会を受講させてもらい，またその模様を録画したビデオテープも入手した．これを白金台の国立公衆衛生院の階段講堂で，全国の食品衛生監視員に対してライブ吹替で上映し，実習を行った．この VHS ビデオ４本セットは日本語吹き替え版が２年後に日本食品衛生協会から出版されたが，現在は廃盤となっている．内容
は講義とハザード分析，モニタリングから記録，Sanitation Standard Operation Program（SSOP）モ
ニタリングまでを４つのセクションに分け，適切に実施している施設と問題のある施設を FDA の各地域事務所に勤務している監視員が監視した動
画を見た後に，演習課題に取り組み，その結果をワシントン DC から全米の FDA のオフィスに電話して，検討結果を発表させ，その結果について
FDA の本部の監視員が批評した後，質疑応答が行われる内容であった．HACCP ベースの監視をビデオにしたという点では画期的で，かつ今でも唯一のもので，私が国立保健医療科学院で監視指第 49 号

2022

導コースの担任の先生をやっていた時代は，このビデオを見て自習してくることを受講の前提にしていたが，種々の事情で事前受講してこれなかった受講生のため，“朝練”と称して，講義前に毎日 1 時間，一週間かけてビデオを見て，演習をしてもらい，研修の前提条件として予習して頂いた．
５．アメリカ HACCP 留学
1998 年 ７ 月 か ら １ 年 間，USFDA の Office of
Seafood に在籍させてもらって，Seafood HACCPの施行状況をワシントン DC の HQ，ボストン，
シアトル，モービル及びニューヨークの地域事務所において，FDA 監視員による水産加工施設の HACCP 監 視 に 同 行 さ せ て も ら い，Hazards
and Controls Guide（以下 HC ガイド）を用いて，FDA の監視員がどのように施設の HACCP プラ
ンについてアドバイスをして，また問題がある場
合には事務所に戻って警告書を作成するところを見せてもらった．FDA の Office of Seafood においては，問題対応や会議対応の政策検討の生々しい議論をオープンにみせてもらえた．また，モービルの事務所では，カニを茹でて，冷却し，むき身にして包装する施設の作業時間に合わせて，日中及び夜中の監視にも同行し，実際の作業におけるハザードの管理の実際を監視指導する現場を見せて頂けた．シアトルでは日系の FDA 監視員とともに，冷温燻製する魚の工場の HACCP プラ
ンのチェックに同行し，HC ガイドの内容を実際の HACCP プランにどのように反映するのかを議論したのを記憶している，Seafood HACCP の HC
ガイドは魚種別に考慮すべきハザードと製造工程由来で考慮すべきハザードを表で列挙し，そのハ
ザードごとに，管理手段，Critical limits， モニ
タリング方法，改善措置の候補を示している画期的なガイドであり，年々少しずつ更新されており，
今でもこれを超えるガイドラインは出版されていない．７）から８）
６．HACCP から離れていた時期
1999 年 10 月から５年間，WHO の食品安全部に派遣され，FAO/WHO の実施する微生物リス
ク評価の事務局員として 2000 年の Joint Expert
Meeting on Microbiological Risk Assessment(JEMRA) の立ち上げに参加できた．確率論的微生物リスク評価のトレーニングの２週間コースを受講したが，その時はなんとなくわかったような気になるが HACCP のトレーニングと違い，数学の基礎知識とほぼ毎日エクセルに数式を打ち込む
練習をしていないとすぐ忘れしまい，リスク評価

山口獣医学雑誌

モデルを読むことはできるが，作成するまでにはなれなかった．
JEMRA はすでに誕生から 20 歳を迎えており，
CCFH からの科学的アドバイスの求めに応じ，色々なタイプの科学的アドバイスやリスク評価結果を提供している．９）
この間に Codex は 2003 年の第 35 回 CCFH において小規模事業者への弾力的な適用をすすめる
ために HACCP システム適用のためのガイドラインを修正し，2004 年の第 26 回 Codex 総会で採択された．
（FAO/WHO 第 35 回 CCFH 報告書 2003
年 ALINORM 03/13A）また，この時に中小食品事業者が HACCP に取り組む際に障壁があるとの懸念が示され，これに取り組むための指針として，FAO/WHO が“Obstacles to the Application of
HACCP，Particularly in Small and Less Developed
Businesses，and Approaches to Overcome Them”が出版された．
７．制度化に向けて2019 年 食 品 衛 生 法 等 の 一 部 改 正 に よ り，
HACCP に沿った衛生管理が制度化された．2021
年６月１日に完全施行された．10）
制度化では食品事業者は以下のことを実施しなければならない．
① ｢ 一 般 的 な 衛 生 管 理 ｣ 及 び ｢HACCPに沿った衛生管理｣ に関する基準に基づ
き衛生管理計画を作成し，従業員に周知徹底を図る② 必要に応じて，清掃 ･ 洗浄 ･ 消毒や食品の取扱い等について具体的な方法を定めた手順書を作成する③ 衛生管理の実施状況を記録し，保存する④ 衛生管理計画及び手順書の効果を定期的に（及び工程に変更が生じた際等に）検証し（振り返り），必要に応じて内容を見直す
食品衛生上の危害の発生を防止するために特に重要な工程を管理するための取組（ HACCP に基づく衛生管理）を Codex のガイドラインに基づき自ら作成する“HACCP に基づく衛生管理”と，取り扱う食品の特性等に応じた取組（HACCP の考え方を取り入れた衛生管理）として業界団体が作成し厚生省の技術研究会で確認された手引きを参考に，簡略化されたアプローチによる衛生管理を行う“HACCP の考え方を取り入れた衛生管理”がある（小規模事業者等）．これらをあわせて“HACCP に沿った衛生管理”という．

第 49 号

2022

5

８．制度化前後の国際的な動き
2013 年 11 月の第 45 回 CCFH にいて，フィンランドの Sebastian Helm 氏（獣医）が GPFH とHACCP 付属文書の見直しを見据えて 2014 年にフィンランドで関心のある専門家を集めて会議をすると発言し，2014 年から見直しの議論が始まった．2019 年の第 51 回 CCFH において，GPFH とHACCP Annex の CCFH での改訂作業が完了し，（Step 5/8 で総会での採択を勧告），2020 年第 43
回 Codex 総会で，採択された．11）”筆者はこの過程すべてに参加し、日本の立場を表面しつつ、より良いガイドライン作成に貢献した。”
１）構造上の変化
イントロダクションと共通部分の後，第１章として GHP（一般衛生管理），第２章として
HACCP システム及びその適用のためのガイド
ラインが続いている．
２）主な変更点● 食品安全へのマネジメントコミットメント〔食品安全文化を含む（下記４）参照）〕が導入された．
● 一 般 衛 生 管 理 と CCP の 関 係 性 が 明 確 になった．
● すべての食品事業者（以下 FBO という．）
は，自分が製造・加工・販売する食品に影響するハザードを認識するが必要あり，
FBOs はハザードの消費者の健康への影響を理解したうえで，それを適切に管理すべ
きある，としたこと．
● HACCP の定義がなくなり，
HACCP Plan：食品ビジネスにおいて重要なハザードのコントロールを保証する
ため HACCP の原則に従って作成された文書（文書のセット）
HACCP System：HACCP プランの作成，および当該プランに従って手順を実施す
ることが示された．
● Significant hazard の定義が新設された：ハ
ザード分析によって特定されるハザード
で，コントロールのない状態では，許容できないレベルまで発生することが合理的に考えられ，食品の意図する用途のため，そのコントロールが必須なハザード● Food Hygiene System（GHP と HACCP をあわせた概念）という言葉が創設された．
● 共通部分に一般原則が新設された．（下記6

山口獣医学雑誌

●
●

●

●
●
●

３）参照）
GHP requires Greater Attention の概念が導入された．
GHP の“操作のコントロール”に製品及びプロセスの記述，GHP の効果に対する考慮，GHP のモニタリング及び改善措置，検証並びにアレルゲン管理が追加された．
HACCP についてはハザード分析の重要性，及びハザード分析では重要なハザードを特定することをハイライトした．
原則６に妥当性確認と検証のサブセクションを設けた．
原則３を“妥当性確認された CL の設定”とした．
GHP の管理措置と CCP の管理措置の対比表を作成した．

３）共通事項：一般原則● 食品安全及び適切性は，科学に基づく予防的アプローチ（例，食品衛生システム）を用いてコントロールすべきである． GHP
は汚染物質の存在を最小にできる環境で製造及び取り扱われることを保証すべきである．
● 適切に適用された PRP（GHP を含む）は効果的な HACCP システムの土台を提供する．
● 各食品事業者（以下，「FBO」という）は原材料，その他の原材料，製品，調理工程，
食品が製造または取り扱われる環境，に関連するハザードを認識すべきである．
● 食品，食品プロセスの性質，可能性のある
健康に対する悪影響によっては，ハザー
ド を コ ン ト ロ ー ル す る の に GHP（GHP
with Greater Attention）の適用で十分である． GHP の適用だけでは不十分な時には，
GHP と CCP における管理手段の組合せを適用すべきである．
● 許容される食品安全レベルを達成するのに必須の管理手段は，科学的に妥当性確認されるべきである．
● 管理手段の適用は食品の性質及び事業のサイズに応じて，モニタリング，改善措置，
検証および文書化の対象となる．
● 食品衛生システムが，修正が必要かどうかを決めるためにレビューすべきである．
これは定期的に，また食品事業に関連して，
ハザードまたは管理手段に影響しうる重要な変更（新規工程，新原材料，新規製品，

第 49 号●

2022

新しい装置，新しい科学的知見等）が生じた都度実施されねばならない．
フードチェーン全体を通じて．食品安全と適切性を保証するため，すべての関係者と，食品及び食品プロセスに関する適切なコミュニケーションを維持すべきである．

４）食品安全文化
食品安全文化を育てるには以下のエレメントが重要である．
● 安全な食品の生産及び取扱いにマネジメン
ト及びすべての従事者がコミットメントする．
● 正しい方向性をセットするリーダーシップ
及び食品の安全な取扱いにすべての従事者が関与する．
● 食品事業のすべての従事者が食品衛生の重要性を認識する．
● 食品事業のすべての従事者の間で，オープ
ンで，明確なコミュニケーション（逸脱及び期待に関するコミュニケーションを含む）を行う．
● 食品衛生システムの効果的な機能を保証するための十分なリソースがあること．
５）共通部分になる重要な概念
共通部分の第４～第７段落に今回の改訂のなかでも重要な概念が紹介されている．
第４．FBO は食品に影響するハザードを認識する必要あり．FBOs はハザードの消費者の健康への影響を理解し，それを適切に管理すべき．
Good Hygiene Practices (GHPs) はそのビジネスに関連するハザードを効果的にコントロールする土台を提供すべき． FBOs のなかには効果的な GHP の実施が食品安全を取り組むのに十分な場合もある．
第５．食品安全に取り組むうえで実施する GHP
が十分か，特定されたハザードをどのようにコントロールするかはハザード分析を通じて決定することができる． しかし，全ての FBOs にこれを行う専門的知識があることはない．もし，FBO がハザード分析を行えない場合，その FBO は外部のソース（規制機関，学会，または業界団体等）が作成した，適切なハザードの特定とそのコントロールに基づく，適切な食品安全規範に関する情報に依存することができる．例えば，安全な食品を生産するための規制の要求事項は，しばしば規制機関が実施したハザード分析に基づき作成されている．同様に業山口獣医学雑誌

界団体が作成した食品安全手順を記述したガイ
ダンス文書は，特定のタイプの製品のハザードとコントロールに関する知識を有する専門家が実施したハザード分析に基づいている．外部作
成の generic ガイダンスを用いる場合，FBO はガイダンスが自施設の活動に対応しているか，
全ての関連するハザードがコントロールされているか，保証すべきである．
第６． 全 て の GHP は 重 要 で も， い く つ か の
GHPs は食品安全上より大きなインパクトがある． 従って，いくつかの GHP は食品に関する安全性の懸念に基づき，安全な食品を提供する
ために，大きな注意（greater attention）が必要かもしれない．例えば，調理済み食品に直接接触する器具や作業台表面は，壁や天井の清掃より greater attention が必要である．なぜなら食品接触表面が適切に洗浄されていない場
合，
その食品の直接汚染につながるからである．
Greater attention にはモニタリングや検証の頻度を上げることが含まれる．
第７．ある状況では，食品操作の複雑さ，製品及び工程に関連するハザード，技術の進歩（例：
ガス置換包装による賞味期限の延長），製品の使用法（例：特定のダイエット目的の製品）によっては，GHP の実施だけでは食品安全を保証するには十分でないこともある．そのような場合，ハザード分析を通じて GHP によってコントロールされない重要なハザードが特定されれば，そのハザードは HACCP プランで取り組むべきである．
６）HACCP における主な変更点
・ハザード分析の重要性が強調され，3 ステップ
１）潜在的なハザードの列挙，２）HACCP プ
ランで取り組むべき重要なハザードの絞り込み，
３）重要なハザードに対する管理手段の特定であることが明確になった．
・CL は妥当性確認されていなければならないことが明確にされた・妥当性確認とは、HACCP プランの有効性の挙証であり，HACCP プランの通りに安全管理が行われれば，安全な最終製品が提供できるというエ
ビデンスを得ることである．
HACCP プランの有効性の挙証（プラン通りに行えば，安全な製品が提供
できるか）
HACCP プランが実施される前に，その妥当性確認が必要 ; これは以下の要素が一緒になって，食品事業にとって適切な重要なハザードをコント

第 49 号

2022

7

ロールする能力があることを保証すること :– ハザードの特定，
– CCP
– CL
– 管理手段– CCP モニタリングの頻度とタイプ，– 改善措置– 検証の頻度及びタイプ 及び記録すべき情報のタイプ– 管 理 手 段 及 び そ の CL の 妥 当 性 確 認 は
HACCP プランの作成中に行われる． 妥
当性確認は科学的文献のレビュー，数学的モデルの使用，妥当性確認研究の実施，
及び / 又は権威あるソースが作成したガ
イダンス資料を使用することが含まれる．
– CL を設定するのに HACCP チームではな
く，外部の専門家が作成した HACCP ガ
イダンスを使用する場合，検討中のオペ
レーション，製品または製品群にその CLが適用できるか注意が必要である．
– HACCP システムの最初の実施の間及び検証手順が設定された後，製造条件下で製造中に，一貫性をもってコントロールが達成できたことを実証するエビデンスを入手すべきである．
– 食品安全に影響を与える可能性のある
如 何 な る 変 更 も HACCP シ ス テ ム の レ
ビ ュ ー が 必 要 で， か つ 必 要 な 時 に は
HACCP プランの再妥当性確認が必要
HACCP システムが実施されたのち，HACCP
システムが効果的に機能していることを確認する手順を設定すること． これらには次の手順が含まれる：■ PRP の実施状況の適合性■ HACCP プランの実施状況及び効果の適合性■ 消費者からの苦情，違反等の見直し（発生の都度）■ CCP における管理精度の適合性
CCP の検証には以下が含まれる：● 記録の確認・モニタリング記録・改善措置記録等の確認・改善措置内容のレビュー● モニタリングの実施状況（手順等）の確
認● 実地測定● 製品・仕掛品・原材料の検査

8

山口獣医学雑誌

第 49 号● モニタリング測定機器の校正
等々
ま た，2022 年 の 総 会 に お い て 新 し い CCP
decision tree（以下，DT という．）が採択された．
2003 年の第 35 回 CCFH での HACCP ガイドラインの改訂は，WHO の JEMRA 事務局員として参加していたが出向していた WHO の食品安全部内

2022

では HACCP 担当ではなかったので，正直そんなに思い入れはなかった．しかし，今回の改訂はフィンランドの会議からすべての作業部会及び CCFHの部会での議論に参加し，日本の食品衛生法の改正にできるだけ齟齬がないように，主張してきたので，Codex2020 は日本の食品衛生法の HACCP
制度化と一致していると言える．

Codex2022
Ｑ１．重要なハザードは、前提条件プログラム（たとえば GHPs）により、このステップで許容できるレベルまでコントロールで
きるか？＊

はい

このステップは CCP で
はない

いいえ

Ｑ２．このステップに、特定された重要なハザードに対する特定された管理手段が存
在するか？

いいえ

このステップは CCP ではない。
後にあるステップはCCP と し て 評 価 さ れ るべきである **

はいＱ３．後にあるステップは、特定された重要なハザードを予防、排除、または許容できるレベルまで低減することができるか？

はい後にあるステップがCCP であるべきである

いいえ

ステップ、プロセス。
または製品を変更し、管理手段を実施する（implement）****

いいえ

Ｑ４．このステップは、特定された重要なハザードを明確に予防、排除、または許容できるレベルまで低減することができるか？ ***

はい図1

このステップは CCP である

A.１．DT の例－特定の重要なハザードが特定されたステップに適用する※ハザードの重要性（つまり、コントロー
ルがなかった場合の起こりやすさとハザードによる影響の重篤性）と、GHPsなどの前提条件プログラムにより十分にコントロールできるかどうかを考慮する。
GHPs は、日常的な（routine）な GHPs、またはハザードをコントロールするためにより大きな注意を必要とする GHPs（たとえば、モニタリングや記録）であるかもしれない。
※※質問２～４で CCP が特定されない場
合、管理手段（control measure）を実施導入するためにプロセスまたは製品を変更
し、新しくハザード分析を実施するべきである。
※※※同じハザードをコントロールするた
めに、別のステップの管理手段と合わせ技で、このステップの管理手段が機能するかどうかを検討する。その場合、両方のステップを CCPs と考えるべきである。
※※※※新たにハザード分析をした後、DTの先頭に戻る。

CCP 決定のための Decision Treeまとめ
HACCP は世界標準の食品安全管理のツールであり，世界各国の食品安全法規のもとになっている．また，筆者が ISO22000 TC17 において議論に参加した ISO22000-2018 の第８章も Codex 委員会の HACCP
をベースにされている．当然，GFSI でベンチマークされている民間規格（FSSC22000，JFS-C 等）においても Codex HACCP をベースにしている．さらに，アメリカの食品安全近代化法の人用食品の未然予防措置のように，HACCP の進化系だとしている国もあり，今後も HACCP は進化発展していくことが考えられ，
日本もその流れに乗り遅れないようにしなければならない．

参考文献
１）熊谷進・小沼博隆・小久保彌太郎・豊福 肇：危害分析重要管理点（HACCP）システムによる食品の衛生管理 : 危害分析と重要管理点．食品衛生研究，45(8)：23-40．1995．
２）熊谷進・小沼博隆・小久保彌太郎・豊福 肇：危害分析重要管理点（HACCP）システムによる食品の衛生管理．食品衛生学雑誌，37(1)：J1-7．1996

山口獣医学雑誌

第 49 号

2022

9３）豊福肇：カナダ農務省の食品の安全性強化プログラムについて（その１）．食品衛生研究，44(4)：4765．1994．
４）豊福肇：カナダ農務省の食品の安全性強化プログラムについて（その２）．食品衛生研究，44(5)：5976．1994．
５）豊福肇：カナダ農務省の食品の安全性強化プログラムについて（その３）．食品衛生研究，44(12)：29-70．1994．
６）豊福肇：米国 FDA による水産食品 HACCP 規則発表について．食品衛生研究，46(3)：17-38．1996．
７）豊福肇：米国 FDA による HACCP の取組み (1)．食品衛生研究，49(5)：15-26．1999．
８）豊福肇：米国 FDA による HACCP の取組み (2)．食品衛生研究，49(6)：31-43．1999．
９）豊福肇：WHO 食品安全部より．食品衛生学雑誌，44(6)：357．2003．
10）豊福肇：HACCP 義務化における現状と課題．特集：「食品衛生と栄養」．栄養，35(3)：127-135．
2020.
11）豊福肇：コーデックス委員会の食品衛生の一般原則の改訂について．食品衛生研究，71(5)：35-50．
2021．

10

山口獣医学雑誌

第 49 号2022

11

山口獣医学雑誌
第 49 号
11 ～ 18 頁 2022
Yamaguchi J. Vet. Med., No.49 ： 11 ～ 18． 2022

原著

牛糞便由来 EHEC の血清型および病原性関連遺伝子に関する研究
渡邉健太１）西中間菜穂１）清田寛子１）水間なつみ２）度会雅久１）〔2022 年 11 月 29 日受付・2022 年 12 月 15 日受理〕

ORIGINAL ARTICLE
Research on serotypes and pathogenicity-related genes in EHEC from bovine feces
Kenta WATANABE １），Nao NISHINAKAMA １），Hiroko KIYOTA １），
Natsumi MIZUMA ２），and Masahisa WATARAI １），
要約

腸管出血性大腸菌（Enterohemorrhagic Escherichia coli : EHEC）は，ヒトに感染し下痢を引き起こす下痢性大腸菌の一つである．経口感染による食中毒として発生する場合が最も多く，重篤化した場合には死に至る．牛をはじめとした家畜が保菌動物であるとされており，その糞便等が汚染源となる．そこで本
研究では，牛糞便から EHEC を分離し，各病原性関連遺伝子の保有状況ならびに血清型に関する遺伝学的な調査を行った．分離された EHEC 128 株中，stx1 および stx2 の陽性率はそれぞれ 52.3％（67/128），
12.5％（16/128）であり，特に両方の遺伝子を保有する株の比率は 6.3％（8/128）であった．また，eaeの陽性率は 86.7%（111/128）であった．stx1 のみを単独で保有する株は分離されず，stx1 陽性株は全て
eae を保有しているという特徴が認められた．さらに，分離株の血清型を同定するため，EHEC の主要な
O 血清型である O26, O103, O111, O121, O145, O157, O165 を同時に判別できるマルチプレックス PCR を行った．結果，12 株が O26 と判別されたが，O157 を含め，その他の血清型はいずれも認められなかった．
O26 と判別された株の全てが stx1 および eae 陽性であった．近年，O26 による感染事例数は増加傾向にあることから，牛糞便中における O26 を対象とした疫学的な調査を重ね，その結果を注視していく必要があると考える．
キーワード：EHEC，牛糞便，血清型，RAPD 法

ABSTRACTEnterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) is one of the pathogenic E. coli
strains that infect humans and cause severe diarrhea. EHSC most often occurs as foodpoisoning following oral ingestion, and in severe cases, infection can lead to death.
Domestic animals, including cattle, are considered reservoirs of EHEC, and their feces
are a source of contamination. In this study, EHEC was isolated from bovine feces andgenetically tested for the prevalence of each pathogenicity-related gene and serotype.
Of 128 EHEC isolates, 52.3% (67/128) were positive for stx1 and 12.5% (16/128) for
stx2 ; 6.3% (8/128) were positive for both genes. In comparison, the positivity rate for
eae was 86.7% (111/128). Additionally, no strains carrying stx1 alone were isolated, and

１）山口大学共同獣医学部獣医公衆衛生学教室
２）農林総合技術センター畜産技術部 家畜改良研究室
連絡責任者：渡邉健太 山口大学共同獣医学部〒753-8515 山口県山口市吉田1677-1 Tel : 083-933-5821 Fax : 083-933-5821
E-mail:kwata@yamaguchi-u.ac.jp

12

山口獣医学雑誌

第 49 号

2022

all stx1 -positive strains were identified as carrying eae . To identify the serotypes of theisolates, multiplex polymerase chain reaction testing was performed to simultaneously
identify the major O serotypes of EHEC: O26, O103, O111, O121, O145, O157,
and O165. Twelve isolates were identified as O26, but none of the other serotypes,
including O157, were found. All of the strains identified as O26 were positive for both
stx1 and eae . Because the number of cases of infection by O26 has been increasing
recently, it is necessary to perform additional epidemiological studies on O26 in bovine
feces and to carefully monitor the results.
Key words: EHEC, Bovine feces, Serotype, RAPD method

緒言

腸管出血性大腸菌（Enterohemorrhagic Escherichia coli ：EHEC）は，ヒトで重篤な出血性の下痢症を引き起こす病原性細菌である．溶血性尿毒症や脳症などの合併症が発症し，重症化した場合には死に至ることから，公衆衛生学的に特に注意が必要な食中毒原因細菌の一つとして注視されている．EHEC は数十～数百程度の少量の菌数でも感染が成立するため , ヒトからヒトへの感染 , または保菌者から食品への菌の移行により感染が拡大しやすい．無症状病原体保有者も含めると年間約 3,000 例以上が報告されており，有症者の割合は 20 歳未満および 70 歳以上で高いという特徴がある１）．近年においても大規模食中毒事例や死亡事例が報告されている．
一方，EHEC は家畜の腸内細菌として存在することが知られており，特に牛をはじめとした反芻動物は主要な保菌宿主であると考えられている．糞便以外にも口腔や体表からも EHEC が分離されることが報告されている２）．農林水産省が平成 19 年度に実施した国内の肉用牛を対象とした大規模な EHEC 保有状況調査によると，2,436 頭のうち，228 頭（9.4%）から EHEC（血清型 O157 および O26）が分離されている３）．
生の牛肉の喫食に起因した EHEC 集団食中毒事件の発生により生食用食肉の規格基準が改正され，特に生食用牛レバーは提供禁止とするなどの対策が取られているが，前述の通り患者数の根本的な抑制には繋がっておらず，EHEC 感染経路の多様性やその制御困難性が示唆されている．EHEC 感染数をより低下させる
ためには，個々の食品に対する規制に限らず，EHEC 保菌動物の数を減らすことがその対策の一つになり得ると考えられる．そのためにも，家畜牛を中心とした動物における EHEC 保有状況を把握することは極めて重要である．
大腸菌の血清型は，O 抗原と H 抗原の型別の組み合わせによって表現され，多様な血清型が存在することが知られている．我が国における EHEC に関しては，180 を超える O 血清型のうち，EHEC 感染患者および保菌者から分離される菌の９割以上が O157，O26，O111 などの代表的な血清型によって占められている１）．中でも O157 は最も多く，高い病原性と感染力を持つことから，菌分離法や検査・同定法が確立され，その感染予防対策が積極的行われている．また，牛糞便から分離される EHEC においても O157 が占める割合が最も多く４），こうした事実からも EHEC の汚染源として牛が重要であることが強く示唆されている．
そこで本研究では，牛糞便をサンプルとした EHEC の分離状況と，各毒素遺伝子の保有状況ならびに血清型に関する遺伝学的な調査を行った．
材料と方法
１．菌分離
2021 年 11 月に山口県内の A 農場で飼育されている牛（ホルスタイン種，黒毛和種，および無角
和種）16 頭より採取した糞便 1g を生理食塩水に懸濁し，この遠心上清を段階希釈した後，分離培地であるクロモアガー STEC 培地（関東化学）に塗布し，37℃で 20 時間の培養を行った．特徴的な藤色のコロニーが認められたものを EHECと判断し，１サンプルにつき８個のシングルコロ
ニーをランダムに選択し釣菌した．

２．PCR
蒸留水を用いてシングルコロニーを懸濁し，
こ れ を 95 ℃ で 10 分 間 の 加 熱 処 理 を 行 っ た 後，
15,000rpm，10 分間の遠心操作により得られた上清をテンプレートとした．使用した全てのプラ
イマーは表１に示す．PCR 用試薬は，KOD-Neoplus（TOYOBO）を使用した．熱処理 94℃２分の後，熱変性 94℃ 10 秒，アニーリング 60℃ 30 秒，
伸長 68℃ 30 秒の増幅反応を 30 サイクル実施し，最終伸長 68℃５分の条件で PCR を行った．得られた増幅産物を 1.2％アガロースゲルで電気泳動

山口獣医学雑誌
した後，Ethidium Bromide を用いて染色し，特異的なバンドの有無を確認した．
３．Random Amplified Polymorphic DNA（RAPD）法RAPD 法については既存の報告に従い実施した５）．テンプレートは上述した菌懸濁液の上清と同一のものを使用した．RAPD 法で使用したプラ
表1

第 49 号

132022

イマー（random）も表１に示す．反応は，94℃
５分，35℃５分，72℃２分を 5 サイクル実施した
後，94℃１分，40℃１分，72℃２分を 37 サイクル実施した．得られた増幅産物を２% アガロー
スゲルで電気泳動を行い，各株におけるバンドパ
ターンの差異を調べた．

解析に用いたプライマー一覧．

3ULPHU1DPH
ƖƗƛŔ
ƖƗƛŕ
ƈƄƈ
2
2
2
2
2
2
2
UDQGRP

6HTXHQFH  )&$*77$$7*7**7**&*$$**

5&$&&$*$&$$7*7$$&&*&7*)$7&&7$77&&&***$*777$&*

5*&*7&$7&*7$7$&$&$**$*&)&&&*$$77&**&$&$$*&$7$$*&5&&&**$7&&*7&7&*&&$*7$77&*)*****7***7$&7$7$77**

5$*&*&&7$777&$*&$$$*$)

7$$*7$&*****7*&77777

5$$*&7&&&*$*&$&*7$7$$)&$$*$*7*&7&7***&77&7

5$$&*&$$*$&$$**&$$$$&)&$$$7***&*77$$7$&$*&&

5

77&&$&&&$7&&$$&&7&7$$)

77&*&*&$&$*&$7**77$7

5

7$&$$7*&$&&*&$$$&$*7)&$**7*$$**7**$$7**77*7&

5

77$*$$77*$*$&&$7&&$$7$$*)**&*7$$$7$$$$7$7*****

5*&&&7&7$$&$$$&*$$77*7&7*&*$7$&&

5HIHUHQFHV












結果と考察
牛糞便から分離した EHEC 128 株の遺伝学的性状解析を行った．16 頭から採取された全ての糞便サンプルより EHEC が分離され，その平均値は 4.04 × 105/g であった．EHEC の主要毒素遺伝子である stx1 ，stx2 ，並びに eae の保有状況を調べたところ，stx1 および stx2 の陽性率はそれぞれ 52.3％（67/128），
12.5％（16/128）であり，特に両方の遺伝子を保有する株の比率は 6.3％（8/128）と低い値であった（表２）．
これに対して，eae の陽性率は 86.7%（111/128）と高い値であった．また，stx1 のみを単独で保有する株

14

山口獣医学雑誌

表2

৊৒औोञ
༳ઙ

ƖƗƛŔ

ƖƗƛŕ

ƈƄƈ

















2

















2

୞ಀ















2022

 離株の stx1 ，stx2 ，eae 保有状況ならびに血清型．牛の品種については，* ホルスタイン種，分** 黒毛和種，*** 無角和種をそれぞれ示す．

१থউঝ



第 49 号

ഷ஬஑

















2

















2

















2

















2



















2

















2

















2

















2

















2

















2

















2

















2

















2

















2

















2






























































































































































































































































































































































































































































































































































































































































































































































































2

2
2

山口獣医学雑誌

第 49 号

2022

15

は分離されず，stx1 陽性株は全て eae を保有しているという特徴が認められた（図１）．特定の遺伝子がいずれも検出されなかった株については，市販の核酸抽出キットを用いて精製した DNA をテンプレート
した PCR も実施したが，結果に差異は認められなかった．Stx はその種類によってヒトに対する毒性が異なることが多くの研究により示されており，Stx2 が Stx1 の 100 倍程度高い毒性を持つとする報告もある６）, ７）．また，eae がコードするインチミンは，菌がヒトの腸上皮細胞に接着する際に機能する病原因子である．stx に加えてこの eae を保有することが EHEC の病原性に重要であるとする報告もあるが ８），その一方で，eae を保有しない株であっても出血性大腸炎が発症した例が報告されており９），単純にこれら
病原性関連遺伝子の種類や有無のみで，その病原性を判断することは難しい．また，Stx1 および Stx2 については，それぞれアミノ酸配列の異なる多くのバリアントが存在することが知られている 10）．今回分
離された EHEC 株が持つ Stx1，Stx2 についても，そのサブタイプまで同定することで，より詳細な分類や病原性の推測が可能となる可能性は高い．
次に，各株の血清型の同定を行った．ヒトでの重症患者由来 EHEC の主要 な O 血清型である O26 ,O103 ,O111 , O121 , O145 , O157 ,O165 を 判 定 す る た め の マ ル チ プ レ ッ ク ス PCR 法 が 構 築 さ れ て お
り 11）, 12），この手法を応用した検討を行った．結果，12 株が O26 と判別されたが，O157 を含め，検証したその他の血清型はいずれも認められなかった（表２）．また，O26 と判別された株の全てが黒毛和種から分離され，stx1 および eae 陽性であった．今回，EHEC の分離に使用したクロモアガー STEC 培地では，血清型によって特徴的な藤色のコロニー形成頻度が異なることが製品マニュアルにも記載されており，他の主要でない EHEC 血清型が，選択培養の時点で除外されていた可能性は否定できない．しかしながら，我が国においてはヒト患者由来，牛糞便由来，いずれの場合においても O157 の分離比率が最も高いことが知られており１）, ４），この点において，本研究結果は既存の報告とは異なるものであった．一方，牛の種別で見た場合，O26 の乳用牛からの分離率が相対的に低いことは過去の研究において既に報告されている 13）．飼育環境を含め様々な要因が考えられるが，濃厚飼料の多給が牛腸管内における O157 の増加および継続的な排菌に関与することを実験的に示した報告例があり 14），本研究における O26 の黒毛和牛に限局した分離状況も，こうした飼料の違いに起因した結果である可能性は高い．O26 を原因とする集団感染事例は毎年国内で発生しており，その感染源は多くの場合特定されていない 15）．また，O157 と比較した
場合，O26 感染事例では発症率が低く，無症状病原体保有者が多いという特徴が認められる１）．しかし，
O26 も O157 と同程度の感染力を持つと考えられており，EHEC 感染事例全体における O157 が占める割合は以前と比較して低下しているのに対して，O26 による事例数は相対的な増加傾向が認められる１）．その直接的な要因は不明であるが，食品への汚染源の一つと考えられる牛糞便中における O26 についても，
今後は疫学的な調査を重ね注視していく必要があると考える．
図1

各遺伝子の保有株数．

16

山口獣医学雑誌

第 49 号

2022

今回，stx1 , stx2 , eae の保有パターンが異なる株が同一サンプル中から同時に分離される場合が複数認められた（サンプル 1, 4, 6, 8, 11, 12, 13, 14）．同様に，O26 株の分離数もサンプルによって１株から８株と差が認められた．そこで，同一サンプルから分離された株間の相同性を確認する目的で RAPD 解析を試みた．O26 株が分離されたサンプルを中心に複数のサンプルを選択し，そこから分離された 8 株間での比較解析を行ったところ，stx1 , stx2 , eae の保有パターンが同一の株であっても，RAPD 法では異なるバ
ンドパターンを示す場合が複数存在し，遺伝学的に異なる複数の株が混在している可能性が示唆された（図２）．EHEC の相同性を解析する手法としては，従来パルスフィールドゲル電気泳動法が広く用いられていたが，IS-printing 法や Multiple-local variable-number tandem repeat analysis 法の使用も拡大している．
RAPD 法は，任意に設計した特異性の低い短いプライマーを用いて PCR を行い，得られたバンドパター
ンにより菌株を識別する方法である 16）．対象とする生物のゲノム情報を全く必要とせず，基本的には全ての生物に応用できるという利点があり，コストや操作の簡便さの面でも優れている一方で，その再現性や確実性は乏しいという欠点が存在する 17）．EHEC の性状解析においても，RAPD 法単独では詳細な相同性の確認や大まかな血清型の分類等を行うことは不可能であるが，今回の解析のように，同一サンプル中から複数の株が分離された場合の 1 次選別やスクリーニング試験として応用できる可能性が考えられる．
本研究で得られた結果については，サンプル数や採材場所が限局的であるため，これだけを以て大局的な議論を行うことはできない．国内外で行われている同様の疫学調査の結果も踏まえた上で，今後も経時的な調査を行い，結果の傾向や再現性を注意深く検討しデータを積み重ねていく必要がある．

図2

 APD 法による分離株の相同性の検討．
R
Sample1,5,8,9,10,11 から分離された 8 株の RAPD 解析の結果を示す．
M は分子量マーカー．

山口獣医学雑誌

第 49 号

2022

17

参考文献
１）国立感染症研究所：IASR, Vol. 43, No.5, 2022.
２）国立感染症研究所：IASR, Vol. 33, No.7, 194-196, 2012.
３）Sakai Y, Tsujiyama Y, Kusukawa M, Murakami M, Katayama S, and Yamada Y：Prevalence andcharacterization of Shiga toxin-producing Escherichia coli O157 and O26 in beef farms. Vet Micro. 150: 140145. 2011.
４）Ezawa A, Gocho F, Saitoh M, Tamura T, Kawata K, Takahashi T, and Kikuchi N：A three-year study ofenterohemorrhagic Escherichia coli O157 on a far m in Japan. J Vet Med Sci. 66: 779-784. 2004.
５）Matsumoto S, Watanabe K, Imamura A, Tachibana M, Shimizu T, and Watarai M： Comparative Analysis
Between Paramecium Strains with Different Syngens Using the RAPD Method. Microbial Ecology. 84: 594602. 2022.
６）Gyles CL：Shiga toxin-producing Escherichia coli : An overview. J Anim Sci. 85:E45-E52. 2007.
７）Ostroff SM, Tarr PI, Neill MA, Lewis JH, Hargrett-Bean N, Kobayashi JM：Toxin genotypes and plasmid
profiles as determinants of systemic sequelae in Escherichia coli O157 : H7 infections. J Infect Dis. 160:
994-998. 1989.
８）Nataro JP and Kaper JB：Diarrheagenic Escherichia coli . Clin Microbiol Rev. 11: 142-201. 1998.
９）Beutin L, Krause G, Zimmermann S, Kaulfuss S, and Gleier K：Characterization of Shiga toxin-producing
Escherichia coli strains isolated from human patients in Germany over a 3-year period. J Clin Microbiol. 42:
1099-1108. 2004.
10）Scheutz F, Teel LD, Beutin L, Piérard D, Buvens G, Karch H, Mellmann A, Caprioli A, Tozzoli R, Morabito
S, Strockbine NA, Melton-Celsa AR, Sanchez M, Persson S, and O’
Brien AD：Multicenter evaluation of asequence-based protocol for subtyping Shiga toxins and standardizing Stx nomenclature. J Clin Microbiol.
50: 2951-2963. 2012.
11）井口純 , 秋吉充子 , 伊豫田淳 , 大西真：腸管出血性大腸菌の主要な O 血清群と病原性遺伝子を判定す
る One-shot マルチプレックス PCR 法の開発と評価．日本食品微生物学会雑誌 . 32: 215-218. 2015.
12）Paddock Z, Shi X, Bai J, and Nagaraja TG：Applicability of a multiplex PCR to detect O26, O45, O103,
O111, O121, O145, and O157 serogroups of Escherichia coli in cattle feces. Vet Microbiol. 156: 381-388.
2012.
13）Sakai Y, Murakami M, Maruyama N, Yamamoto K, Haruna M, Ito K, and Yamada Y：Comparison of thePrevalence of Shiga Toxin-Producing Escherichia coli Strains O157 and O26 between Beef and Dairy Cattlein Japan. J Vet Med Sci. 75(9): 1219-1221. 2013.
14）中澤宗生 , 鮫島俊哉：牛の腸管出血性大腸菌 O157:H7 の排菌と飼料の関連．感染症学雑誌 . 76: 76-77.
2002.
15）国立感染症研究所：IASR, Vol. 37, No.5, 92-93, 2016.
16）Williams JG, Kubelik AR, Livak KJ, Rafalski JA, and Tingey SV：DNA polymorphisms amplified by arbitrary
primers are useful as genetic markers. Nucleic Acids Res. 18: 6531-6535. 1990.
17）Riley LW：Molecular epidemiology of infectious diseases principles and practices. ASM Press. 2004.
18）Cebula TA, Payne WL, and Feng P：Simultaneous identification of strains of Escherichia coli serotype
O157:H7 and their Shiga like toxin type by mismatch amplification mutation assay multiplex PCR. J Clin
Microbiol. 33: 248-250. 1995.
19）Oswald E, Schmidt H, Morabito S, Karch H, Marchès O, and Caprioli A：Typing of intimin genes in humanand animal enterohemorrhagic and enteropathogenic Escherichia coli : characterization of a new intiminvariant. Infect Immun. 68: 64-71. 2000.
20）Bertrand R and Roig B：Evaluation of enrichment free PCR based detection on the rfbE gene of
Escherichia coli O157 application to municipal wastewater. Water Res. 41: 1280-1286. 2007.
21）Stoeck T and Schmidt HJ：Fast and accurate identification of European species of the Paramecium aurelia
complex by RAPD-fingerprints. Microbial ecology. 35: 311-317. 1998.
22）Skotarczak B, Przyboś, Wodecka B, and Maciejewska A： Random amplified polymorphic DNA
fingerprinting as a marker for Paramecium jenningsi strains. Folia biologica. 52: 117-124. 2004.

18

山口獣医学雑誌

第 49 号2022

19

山口獣医学雑誌
第 49 号
19 ～ 24 頁 2022
Yamaguchi J. Vet. Med., No.49 ： 19 ～ 24． 2022

原著

大規模肉用牛農場で発生した牛呼吸器病症候群とその対策
大山ゆき１），亀山光博２）〔2022 年 12 月７日受付・2023 年３月９日受理〕

ORIGINAL ARTICLE
Bovine Respiratory Disease Complex (BRDC) on Large Cattle Farms and Countermesures
Yuki Ohyama １）,Mitsuhiro Kameyama ２）
1) Yamaguchi Prefectural Chubu Livestock Hygine Center
2) Yamaguchi Environmental Health Center

要約

牛呼吸器病症候群（BRDC）は病原体，環境及び生体の要因が複雑に影響し合って発生する経済的損失の大きい重要疾病である．2018 年以降，当所管内の約 500 頭を飼養する肉用牛農場において BRDC による死廃事故が多発し，その発生予防の取組について 2019 年度から総合的な対策を講じてきた．
2020 年度は，2019 年度の取組に加え，踏込消毒槽の消毒液交換の徹底及び肥育素牛導入前後の煙霧消毒を実施した．さらに健康観察のためのサーモグラフィーの導入や，異常の有無や診療状況の記録簿の作成，従業員間の情報共有を行い，異常牛の早期発見に努めた．また，2019 年度のワクチンプログラムの検証結果に基づき，より効果的なプログラムを作成し検討した．取組の結果，農場従業員に広く飼養衛生管理の意識が浸透し，農場の衛生対策の改善が図られ，新たなワクチンプログラムによる細菌・ウイルスに対する免疫獲得の向上が確認された．また，2018 年度に比べ，呼吸器病に係る初診頭数及び診療費が大幅に減少した．
キーワード：BRDC，ワクチンプログラム，抗体検査，飼養衛生管理

ABSTRACTBovine Respiratory Disease Complex (BRDC) is a serious disease caused by the complex
interaction of pathogens and environmental and biological factors, and causes great economic
loss. Since 2018, there have been many cows slaughtered owing to BRDC a beef cattle farm,
which raise approximately 500 cattle within our jurisdiction. Comprehensive measures havebeen taken since 2019 to prevent such occurrences. In 2020, in addition to the efforts taken in
2019, frequent exchange of the disinfectant solution in the step-in disinfection tank and fumedisinfection before and after the introduction of cows has been performed. We also introduced
thermography for health observation, created a record book for the presence or absence ofabnormalities and medical care, and shared information at professional meetings to detect
BRDC-affected cattle at an early stage. Additionally, on the basis of verification results of the2019 vaccination program, we created and examined a more effective program. As a resultof these efforts, compared with 2018, we confirmed that farm employees were more aware

１）山口県中部家畜保健衛生所
２）山口県環境保健センター
連絡責任者：大山ゆき 山口市嘉川671-5〒754-0897 山口市嘉川671-5

TEL：083-989-2517 FAX：083-989-2518
E-mail：ohyama.yuki@pref.yamaguchi.lg.jp

20

山口獣医学雑誌

第 49 号

2022

of the need to improve hygiene management, including improved farm hygiene measuresand improved immunity to bacteria and viruses through the new vaccination program.
Furthermore, compared with 2018, the number of first visits and medical expenses related torespiratory diseases decreased significantly in 2020.
Key words: BRDC, Vaccination program, Antibody test, Rearing Hygiene Management

１

はじめに

牛呼吸器病症候群（BRDC）とは，病原体 , 環境及び生体の要因が複雑に影響し合って発生する経済的損
失の大きい重要疾病である１）．BRDC は発熱 , 発咳，鼻汁が初期症状であり，その後 , 症状の悪化により食欲減退 , 呼吸促迫，沈うつ等を呈し，呼吸困難に至る . 死亡率が高く，回復しても発育不良になることが多い疾病である１）.
今回，BRDC が多発する一農場において，2019 年度以降被害低減に向け総合的な対策を講じたので，その成果について報告する .
２

農場概要
当該農場は肉用牛一貫経営農場であり，農場主及び従業員５名が約 500 頭を飼育していた . 肥育
素牛の大部分は乳用種（去勢），交雑種であり，10 ～ 60 日齢の牛を毎月 10 ～ 20 頭程度県外市場から導入していた . 導入後は，約２か月齢まで哺育舎で飼育し，２か月齢から子牛舎 A で，３か月齢から子牛舎 B で群飼した後は６か月齢から21 か月齢まで肥育舎で肥育し出荷していた .
経緯
当該農場は，これまで年間を通して哺育舎，子牛舎 A，子牛舎 B で呼吸器病が頻発しており，特に 2018 年度は例年に比べ BRDC による死廃が多発した .BRDC が農場に対し多大な被害を与えていたため，2019 年４月から家畜保健衛生所，農場，
診療獣医師及び製薬会社が連携して定期的に検討会を開催し，様々な面から対策を実施した２）.
2020 年度には前年度の取組を継続しながら新たな取組も行った .

４ 取組と結果（１）農場における取組
こ れ ま で 農 場 で は， 煙 霧 機（pulsFOG K-10：
SP 型，pulsFOG 社，Germany） に よ る 煙 霧 消 毒を月１回実施していた . 消毒薬にはヨウ素系殺菌消毒剤を 2,000 倍希釈したものを使用した .2019年度は煙霧消毒の頻度を月１回から週２回に増加し，煙霧消毒の効果を増強させるため，畜舎入口に扉を設置するなど，実施時の密閉性を向上させた . さらに，2020 年度は導入前後，及び移動時にも実施した . また、2019 年度，各牛舎入口に洗浄用と消毒用の踏込槽をそれぞれ設置した .2020 年
度は洗浄用踏込槽に人工芝を敷き，より靴底の汚れが落ち易くなるよう工夫し，さらに消毒液を毎日交換するよう徹底した（図１）.
2020 年度の新しい取組として，毎日の健康観
察における牛群の検温にサーモグラフィー (FLIR
C2，新栄電子計測器，神奈川県 ) を導入した（図２）. これまでは電子体温計による個別の体温測

図1

図２

３

人工芝を設置した踏み込み消毒槽

サーモグラフィーを用いた健康観察山口獣医学雑誌

図３

2022

21

ミーティングによる情報共有定であったため，サーモグラフィーにより牛群の中から発熱を呈している牛を瞬時に発見し対応できるよう作業の効率化を図ることができた . また、飼養牛ごとの記録簿を作成することで誰でもすぐに異常の有無や診療状況等を確認できるようにした . さらに，ミーティング時に従業員間で情報共有を図り，異常牛の早期発見に努めた（図３）.
（２）新たなワクチンプログラムの検討2019 年度のワクチンプログラムの検証結果に基づき，ワクチンプログラムを変更した（図３）.従来は導入時に２価のウイルス性呼吸器病生ワクチ
ン，２週間後に Mannheimia haemolytica (Mh) 不活
化単味ワクチン，４週間後に６価のウイルス性呼吸器病生ワクチンを接種していた .
2019 年 度 の 検 証 で， 子 牛 か Mh の 他 にPasteurella multocida （Pm） が 検 出 さ れ た た め，
Mh 単味不活化ワクチンから３価の混合ワクチン〔Mh，Pm，Histophilus somni (Hs)) に変更した . 加
えて，2019 年度の検証で１回の接種では免疫応答が十分ではなかったため，導入時と４週間後の

図４第 49 号

２回接種に変更した . また，従前はウイルス性呼吸器病に対し、導入時に鼻腔内投与型の牛伝染性鼻気管炎（IBR）・牛パラインフルエンザ（PI3）
混合生ワクチン，4 週間後に IBR・牛ウイルス性下痢２価（BVD1，BVD2）・PI3・牛 RS ウイルス
（RS）・牛アデノウイルス７型（AD7）混合生ワ
クチンを接種していたが，６価の混合生ワクチンに関しては導入２週間後に接種することで，導入子牛が早期に免疫の獲得が期待できるように変更
した .
ワクチンプログラムを変更したことによる抗体の推移を確認するため，2020 年２月に導入した
牛 10 頭について２～７月に毎月採血し，抗体価を測定した . 抗体価測定は，株式会社微生物学研
究 所 に 依 頼 し，IBR，BVD1，BVD2，RS に つ いては中和試験，PI3，AD7，Hs については HI 試
験，Mh，Ph についてはエライザで実施した . 中
和抗体価，HI 価ともに２倍以上を免疫応答ありとした。検討の結果，子牛①のようにワクチン接種による抗体価の上昇が概ね認められた個体（図５）と，子牛④のように，導入時から抗体価が高く，ワクチンプログラムの変更点

22

山口獣医学雑誌

第 49 号

2022

すべてのワクチン株に対して抗体価の上昇がみられない個体（図６）が認められた . ワクチンによる免疫応答に個体差がみられる原因として，導入時期が子牛①は生後 36 日齢，子牛④は 14 日齢とばらつきがあり，移行抗体の影響により個体差が認められたと推察された .
導入牛 10 頭の結果から，BVD1，BVD2，PI3，

AD7 については８～９割の個体で免疫応答が認められたが，IBR，RS については３～４割程度であった（表１）.
呼吸器病関連細菌に関する検査もウイルスと同様に行った結果，Hs については５割であったが，
Mh，Pm については８～９割の個体で免疫応答が認められた（表２）.

図５

抗体検査結果（ウイルス・免疫応答あり）

図６

抗体検査結果（ウイルス・免疫応答なし）

表１

抗体検査結果（ウイルス・導入牛 10 頭）

表２抗体検査結果（細菌・導入牛 10 頭）

５成果
本事例では 2019 年度の取組に加え，さらなる飼養衛生管理の改善，農場独自の取組，新ワクチ
ンプログラムの検討を実施した . その結果，呼吸器病に係る初診頭数は 2018 年度 163 頭，2019 年
度 83 頭，2020 年度 12 月末時点 37 頭と大幅に減少した（図７）. 対策を開始した 2019 年度以降の初診頭数は月５～ 10 頭ほどで推移し，2020 年６月のように０頭となる月もあった .
また，初診頭数が減少したことに伴い呼吸器病に係る年間診療費も 2018 年度に対して大幅に減少した（図８）. 対策後，ワクチンや消毒薬に関する経費が増加したものの，全体としては費用が減少した . 診療頭数が減ったことで，費用の面だ
けでなく，診療に関わる従業員の労力も節減された.

山口獣医学雑誌

図７

第 49 号2022

23

呼吸器病に係る初診頭数の推移

図８

呼吸器病に係る診療費６考察2020 年度の取組により , 従業員に広く飼養衛生管理の意識が浸透・向上し , 衛生対策の改善が図られた . また , 新たなワクチンプログラムによる免疫獲得の向上が確認された , これらの取組により BRDC の発生頭数が減少し , それに伴い診療費も減少した .
しかし , 新たなワクチンプログラムでも十分な免疫が獲得できない個体も確認された . その原因として ,導入月齢が０～２か月とばらつきがあり , 子牛へのワクチンによる能動免疫の誘導に移行抗体が干渉したと考えられた３）. 対策として , 導入する子牛の導入元を限定することや , 新たなワクチンプログラムの効
果が十分に発揮できるよう , 導入月齢を統一することが挙げられる . しかし , 一度の市場で 10 ～ 20 頭の子牛を導入することを考慮すると , このような対策は困難と思われ , 当該農場では個々の月齢に応じたワ
クチン接種時期の検討が必要であると考えられた . また , 今回のワクチンプログラムはプライムブースト
ワクチン戦略（Prime Boost Immunization Strategy:PBVS）に基づいたプログラムである .PBVS のなかでも ,特に異種 PBVS と呼ばれる戦略では , １回目のワクチン接種に対して , ２回目以降のワクチン接種に１回目と異なるワクチン , 投与経路あるいは免疫付与のメカニズムを用いることで , より免疫系が刺激され ,より高い抵抗性が得られるとされている４）. 細菌性呼吸器病に対するワクチンは同じ注射型の不活化ワク
チンを２回接種しているため ,Hs に関して十分な免疫応答が得られなかった可能性がある . ウイルス性呼24

山口獣医学雑誌

第 49 号

2022

吸器病に対するワクチンは１回目が鼻腔粘膜ワクチン , ２回目が注射型ワクチンのため , 異種 PBVS に準じているが , それでも IBR,RS の免疫応答が３～４割程度であった .BRSV に関しては , 投与経路を「鼻腔- 注射 - 注射」とし , ワクチン種類を「生 - 不活化 - 不活化」としたところ , 他の接種法と比較して BRSV
抗体が高かったことが報告されている５）. 従って , 細菌性呼吸器病に対するワクチンは２回目に不活化ワ
クチン , ウイルス性呼吸器病に対するワクチンは２回目 , ３回目に不活化ワクチンを接種する検討も必要である .
今後も BRDC の発生を抑制するため , 農場や関係者と緊密な連携をとり , 農場の現状に応じた実現可能な対策について指導していきたい .
ワクチンプログラム検証のため , 抗体検査の実施及び御助言をいただいた株式会社微生物学研究所 , さ
さえあ製薬株式会社の諸先生方に深謝いたします .

＜引用文献＞
１）浅井鉄夫 , 臼井優 , 海野年弘 , 大林哲 , 加藤敏英 , 金澤明美 , 田村豊 , 原田和記 , 保木秀一：牛呼吸器症
候群（BRDC）における抗菌剤治療ガイドブック．農林水産省 ,1:2-3.2015２）鶴田祐哉 , 伊藤博志：大規模肉用牛農場で発生した牛呼吸器病症候群 (BRDC) とその対策 . 山口県獣医師会雑誌 , 第 46 号 ,17-22.2020
３）家畜感染症学会：新しい子牛の科学 . 緑書房 ,1:194-195.2021
４）Woodland DL: Trends Immunol,25(2),98-104.2004
５）Erickson NEN, Berenik A, Lardner H, et al.: Can Vet J,62(1),37-44.2021

25

山口獣医学雑誌
第 49 号
25 ～ 30 頁 2022
Yamaguchi J. Vet. Med., No.49 ： 25 ～ 30． 2022症

例

胆嚢粘液嚢腫を疑った粘液産生性胆管癌の猫の１例
原口友也１）＊，下ノ原望２），大草朋子１，３），伊藤嵩人１），辻󠄀󠄀󠄀󠄀󠄀󠄀１），

板本朗代１），脇本美保１），山下祐里１），壹岐

茜１），沖汐恵１），新田直正１）〔2022 年 11 月７日受付・2022 年 12 月 16 日受理〕

CLINICAL CASE
Mucinous biliary carcinoma in a cat suspected with gallbladder mucocele.
Tomoya HARAGUCHI １）＊ ,Nozomi SHIMONOHARA ２）,Tomoko OKUSA １, ３）,
Takato ITO １）,Kanako TSUJI １）,Tokiyo ITAMOTO １）,Miho WAKIMOTO １）,
Yuri YAMASHITA １）,Akane IKI １）,Megumi OKISHIO １）and Naomasa NITTA １）
Fammy Animal Medical Center1), IDEXX Laboratories, Inc.2),
The United Graduate School of Veterinary Science, Yamaguchi University3)

要

約

14 歳 10 カ月齢，避妊済み雌の雑種猫が食欲廃絶を主訴に来院した．症例は黄疸が認められ，血液生化学
検査と腹部超音波検査で胆嚢粘液嚢腫（GBM）および肝外胆管閉塞（EHBO）が疑われた．内科療法に対する反応が乏しいため開腹手術を実施したところ，胆嚢内に粘弾性物質の貯留が認められた．EHBO の解除が困難であったため，胆嚢壁の生検と胆嚢 - 十二指腸吻合術を実施した．胆嚢壁は胆管癌と診断された．症例に改善は認められず術後６日目に死亡し剖検を行った．剖検では総胆管に発生した胆管癌が肝臓・周辺組織に浸潤しており，腺細胞から粘液分泌が確認された．猫の粘液産生性胆管癌は塊状病変を形成せず，生前診断が困難なケースがある．猫で GBM 様の病変が見られた際には稀なケースではあるが粘液産生性の胆管癌を鑑別診断に加える必要があると考えられた．
キーワード：猫，胆嚢粘液嚢腫（GBM），粘液産生性胆管癌

ABSTRACTA 14 year-10-month-old intact female domestic shorthair cat with anorexia was presented
to our hospital. We suspected gallbladder mucocele (GBM) and extrahepatic bile obstruction(EHBO) on the basis of abdominal ultrasonography and blood examination findings. Medical
therapy for GBM and EHBO did not improve the symptoms. An exploratory laparotomy
showed a dilated and slightly white, discolored gallbladder and a markedly dilated extrahepatic
bile duct. Total cholecystectomy was planned as surgical treatment for the GBM; however,
because of severe adhesion between the gallbladder and liver, the gallbladder was first incised
and the contents removed. The EHBO remained unresolved despite bile duct irrigation.
１）ファミー動物医療センター
２）アイデックスラボラトリーズ株式会社
３）山口大学大学院連合獣医学研究科
連絡責任者：原口友也 ファミー動物医療センター〒747-0053 防府市開出本町12番9号 Tel : 0835-22-4711 Fax : 0835-22-5494
E-mail:tomoya.haraguchi@gmail.com

26

山口獣医学雑誌

第 49 号

2022

Therefore, biopsy of the gallbladder wall and cholecystoduodenostomy were performed tocreate a bile outflow route. Postoperative recovery was poor, and the cat died 6 days after thesurgery. Necropsy was performed, and histopathological examination resulted in a diagnosisof bile duct carcinoma. The tumor was mucilaginous. Feline mucinous biliary carcinoma might
be difficult to diagnose. When GBM is suspected in cats, mucinous biliary carcinoma must be
considered.
Key words: Cat, Gallbladder mucocele (GBM), Mucinous biliary carcinoma

はじめに
猫の胆管癌は，悪性肝胆道系腫瘍の 22-41% を占める．本腫瘍は，塊状，結節性，びまん性など様々な形態を呈するため，時に診断に苦慮する事がある．胆管に発生した胆管癌は，原発性の肝外胆管閉塞（Extrahepatic bile obstruction; EHBO）を引き起こすことが良く知られている５，６）．EHBO は続発性に発生することも多く，一般的な基礎疾患として胆嚢粘液嚢腫（Gallbladder mucocele; GBM）が挙げられる．GBM
は犬において遭遇頻度の高い疾患であるが，猫の GBM は稀な疾患であり症例報告が数例ある程度であ
る．１，４，９）
今回，我々は食欲廃絶を主訴に来院した老齢猫において黄疸を認め，血液生化学検査および腹部超音波検査で GBM および EHBO を疑った症例において，胆管癌と診断された症例と遭遇し，診断の過程でいく
つかの知見を得たため，その概要を報告する．
症例
14 歳 10 カ月齢，避妊済み雌の雑種猫が１週間前からの食欲廃絶を主訴に来院した．初診時の身体検査において，鼻閉および重度の削痩（BCS：2/5）と可視粘膜の黄染が認められた．血液検査
では，CBC の異常は認められなかったが血液生
化学検査において肝酵素および血漿ビリルビン
値の顕著な増加，総蛋白質濃度の増加が認められた（表１）．腹部単純 X 線検査では，上腹部にX 線不透過性亢進と消化管内にガス貯留所見が認められた．腹部超音波検査では，胆嚢内にエコー輝度が高く可動性のない無血流の胆嚢内容物を認め，胆嚢管と肝内胆管の拡張が認められた（図１
A-C）．腹腔内に明らかな腫瘤病変は確認できなかった．
これらの検査所見より，本症例は GBM および
EHBO であると仮診断した．

表1. 血液生化学検査

表 1. 血液生化学検査

BUN

21.6

mg/dL

TP

9.0

g/dL

CRE

1.03

mg/dL

Alb

3.8

g/dL

ALT

944

U/L

NH3

34

μg/dL

ALP

964

U/L

V-Lip

13

U/L

T-Chol

302

mg/dL

Na

144

mEq/L

Glu

123

mg/dL

K

3.5

mEq/L

T-Bil

13.1

mg/dL

Cl

99

mEq/L

生化学検査において，肝酵素および血漿ビリルビン値の顕著な上昇と総蛋白質の増加を認めた（太字）．
CBC においては異常値は認められなかった．

生化学検査において、肝酵素および血漿ビリルビン値の顕著な上昇と総蛋白質の増加を認めた（太字）。
CBCにおいては異常値は認められなかった。

山口獣医学雑誌

A

第 49 号

27

2022

C

B

図1.
腹部超音波検査
図１．
腹部超音波検査
胆嚢内に可動性のない無血流の内容物 (A) を認め，胆嚢管 (B) と肝内胆管 (C) の拡張が認められた．
胆嚢内に可動性のない無血流の内容物(A)を認め、胆嚢管(B)と肝内胆管(C)の拡張が認められた。

治療と経過
初期治療として症例の安定化を目的とし，抗生剤投与（ABPC 30mg/kg １日２回，静脈内投与，ビクシリン注射用 1g，Meiji Seika ファルマ株式会社，
東京；エンロフロキサシン 5mg/kg １日１回，皮下投与，犬猫用バイトリル 2.5% 注射液；エランコジャパン株式会社，東京．）と酢酸リンゲル
液（ソルアセト F 輸液，テルモ株式会社，東京）を用いた輸液療法を行った．併せて胆嚢周囲の消炎目的でプレドニゾロン 0.5mg/kg 筋肉内投与（プレドニゾロン注射液 NZ，日本全薬工業株式会社，福島）を行った．また，鼻閉に対して既往歴より
ネコヘルペスウイルス感染症の再燃が疑われたため，組み換え型ネコインターフェロン１U/kg（インターキャット，東レ株式会社，東京）を皮下投与した．
しかし，症例の全身状態は改善せず血漿ビリル
ビン値の上昇が認められたため内科的な治療による改善は困難であると判断し，第６病日に胆嚢摘出術と EHBO 解除を目的として腹部正中切開による試験開腹術を実施した．
麻酔前投与薬としてミダゾラム 0.2mg/kg（ミダゾラム注 10mg「サンド」，サンド株式会社，東京）を静脈内投与したのちに，プロポフォール 10mg/kg（プロポフロ 28，ゾエティスジャパン株式会社，東京）静脈内投与（Dose to effect）で導入した．麻酔はイソフルラン（イソフルラン吸入麻酔
液「VTRS」，マイラン EPD 合同会社，東京）で維持し，疼痛管理はプレドニゾロン 0.5mg/kg 筋
肉内注射，レミフェンタニル塩酸塩 １- ５μ g/
kg/min（アルチバ静注用２mg，ヤンセンファー
マ株式会社，東京）を用いて行なった．術中点滴には，リンゲル５ml/kg/hr（リンゲル液「オーツカ」，大塚製薬株式会社，東京）とドパミン塩酸
塩２. ５- ５μ g/kg/min（ドパミン塩酸塩点滴静注
液 100mg「ファイザー」，マイラン製薬株式会社，大阪）の持続点滴を用いた．
開腹時には褪色した胆嚢が認められ，胆嚢には大網が癒着していた．胆嚢を頭側に反転すると顕著に拡張した肝外胆管が確認された（図２A-C）．

A

頭側

B

頭側

R

尾側

R

尾側

図２．手術所見－１
図2. 手術所見-1
開腹するとすぐに，褪色し大網が癒着した胆嚢が認められた（Ａ；矢印）胆嚢を頭側に反転すると顕著に拡張した肝外胆管が確認された（Ｂ；丸印）
開腹するとすぐに、褪色し大網が癒着した胆嚢が認められた(A;矢印)

胆嚢を頭側に反転すると顕著に拡張した肝外胆管が確認された(B;丸印)

28

山口獣医学雑誌

スキャンラン鉗子とバイポーラー電気メス，滅菌
綿棒を用いて大網を剥離し肝内側右葉と方形葉か
ら胆嚢の剥離を試みた．胆嚢は肝葉と重度に癒着しており胆嚢管までの分離が困難であったため，
胆嚢頸部までの分離とした．次いで 11 号メスにて胆嚢切開を行った．胆嚢内容物は，粘性の高いゼリー状の凝塊で充満しており犬の GBM に類似した外観を呈していた（図３A）．胆嚢内容物
は細菌培養検査に供し，残存内容物はサクション
にて吸引・除去した．胆嚢切開部より栄養カテー
テル（アトム多用途チューブ８Fr，アトムメディ
カル株式会社，埼玉）にて順行性に総胆管の閉塞解除を試みたが，再疎通は困難であった．総胆管周囲に腫瘤病変は認められなかったが，総胆管は周辺組織と重度に癒着し硬結していた（図３B）．
そのため，十二指腸切開による逆行性総胆管洗浄は困難であると判断し，胆嚢壁の生検と総胆管周囲硬結部の針生検を行い，胆嚢 - 十二指腸吻合に
A

R

頭側

B

R

第 49 号

2022

よる迂回路形成を実施した（図３C）．また，この際に外側右葉と十二指腸からもサンプリングを行い病理組織検査に供した．同時に食道チューブ設置も行い，術後の給餌ルートを確保し手術を終了した．
生検した胆嚢は病理組織検査で胆管癌と診断された（図４）．また，総胆管周囲の針生検の細胞診でも同様に胆管癌と診断された．外側左葉に腫瘍病変は認められず，胆管肝炎および空胞変性と診断された．十二指腸は軽度から中等度のリンパ球形質細胞性腸炎と診断された．胆汁培養検査の結果は陰性であった．
症例は，術後も全身状態およびに血液生化学検
査所見の改善は認められず，術後 6 日目に斃死した．斃死後，飼い主様の同意を得て剖検を実施した．開腹時の肉眼所見では黄土色の腹水貯留が認められ，胆嚢 - 十二指腸間に重度の癒着が認められた．病理組織検査でも，胆嚢管周囲と拡張した

頭側

C

頭側

R

図３．手術所見－２
胆嚢内容物は粘性の高いゼリー状の凝塊で充満しており犬GBM に類似した外観を呈していた（Ａ；矢印）
図3.
手術所見-2
総胆管周囲に腫瘤病変は認められなかったが周辺組織と重度に癒着し硬結していた（Ｂ；丸印）
胆嚢内容物は粘性の高いゼリー状の凝塊で充満しており犬GBMに類似した外観を呈していた(A;矢印)
胆嚢摘出は困難と判断し胆嚢－十二指腸吻合術を実施した（Ｃ；丸印）
総胆管周囲に腫瘤病変は認められなかったが周辺組織と重度に癒着し硬結していた(B;丸印)
胆嚢摘出は困難と判断し胆嚢-十二指腸吻合術を実施した（C;丸印）

図４．病理組織検査（生検した胆嚢壁）
図4.
病理組織検査（生検した胆嚢壁）
胆嚢壁に浸潤して粘液産生を伴う（矢印）上皮系腫瘍細胞を認めた

胆嚢壁に浸潤して粘液産生を伴う（矢印）上皮系腫瘍細胞を認めた

山口獣医学雑誌

肝外胆管が含まれる部位の癒着が最も重度であり，拡張した胆管の周囲から隣接する肝臓への腫瘍細胞の浸潤と周辺組織の重度な線維化が認められた（図５A-B）．肝臓に浸潤した腫瘍は腺管構造を形成しており，その内腔に粘液の貯留が確認された（図６A）．残存する腫瘍化していない胆第 49 号292022

嚢粘膜上皮からは，犬の GBM で認められるような粘液産生は認められなかった（図６B）．これらの所見より，本症例は肝臓・胆嚢への浸潤を伴う総胆管原発の胆管癌により二次的に GBM 様所見を呈した GBM 類似疾患であったと考えられ
た．
B

A

＊

図５．病理組織検査（剖検）胆嚢管周囲と拡張した肝外胆管が含まれる部位が最も癒着が重度であった（Ａ；丸印）
図5. 病理組織検査（剖検）拡張した胆管（＊）の周囲から隣接する肝臓への腫瘍細胞の浸潤と周辺組織の重度な線維化（Ｂ）

胆嚢管周囲と拡張した肝外胆管が含まれる部位が最も癒着が重度であった（A;丸印）
拡張した胆管（＊）の周囲から隣接する肝臓への腫瘍細胞の浸潤と周辺組織の重度な線維化（B）
A
B

図６．病理組織検査（剖検）
肝臓に浸潤した腫瘍は腺管構造を形成し，内腔には粘液が貯留していた（Ａ）
図6.
病理組織検査（剖検）
腫瘍化していない残存する胆嚢粘膜上皮（矢頭）からは，粘液産生は認められなかった（Ｂ）
肝臓に浸潤した腫瘍は腺管構造を形成し、内腔には粘液が貯留していた （A）
腫瘍化していない残存する胆嚢粘膜上皮（矢頭）からは、粘液産生は認められなかった（B）

考察

犬の GBM は，ムチンに富んだ粘性の高い粘液が蓄積することで胆嚢が拡張している状態を指す．本疾患の発生機序の詳細は明らかではないが，病理組織学的には，胆嚢粘膜に嚢胞性粘液性過形成が認められることから，胆嚢壁を形成する粘液産生細胞からの過剰な粘液産生による胆嚢内への粘液貯留と考えられている３）．発生の素因としては副腎皮質機能亢進症や甲状腺機能低下症などの内分泌疾患や高脂血症，胆嚢の運動性低下が報告されている３）．発生初期には無症状で進行すると胆道系の閉塞，胆嚢穿孔や破裂に伴う胆汁性腹膜炎を引き起こすため，早期の外科的介入が必要な疾患であると考えられている７）．
いっぽう，猫の GBM に関する報告は３例のみと情報は少ない１，４，９）．これらの症例においては，犬とは異なり全症例で EHBO を併発していた．文献では，GBM により産生された粘液が総胆管に詰まり
EHBO を発症すると結論付けている．本症例においても，過去の報告と同様に胆嚢内に粘液の貯留を認
め EHBO を発症していたが，本症例で認めた GBM 様の所見は胆管癌により EHBO を引き起こし腫瘍細胞から分泌された粘液が胆嚢内に逆流し二次的に形成されたものであったと推測された．この様な類似疾患も存在するため，猫の GBM の診断には病理組織検査が必要であると考えられた．

30

山口獣医学雑誌

第 49 号2022

猫における胆管系腫瘍には，胆管細胞腺腫と胆管癌があり高齢猫で発生することが多い５，６）．胆管癌は肝内性と肝外性に分類され，肝内腫瘍と比較し肝外の発生は稀であると言われている．極めて活動的な挙動を示し，転移率は 67-80% と報告されており，効果的な治療法はなく予後は極めて悪いとされている５，６）．
胆管癌は，塊状，結節性，びまん性の３つのタイプに分かれる．塊状，結節状病変に対しては外科的切除が勧められるが半年以内に死亡することがほとんどである５，６）．本症例における硬結な病変部は，胆汁漏出による二次性の炎症性変化であると考えられたが，病理組織学的診断は胆管癌であった．びまん性の胆管癌は，周辺組織に浸潤し反応性の線維形成を伴うことが多く腫瘤病変として認識されにくいことから，
病理組織学的検査の重要性が再確認された．
人では粘液産生胆管腫瘍の報告があり，胆管内の乳頭状増殖と粘液の産生を特徴とし，通常の胆管癌と比較して予後良好な症候群であるという報告がある８）．著者の調べた限りでは猫においては粘液産生性胆管腫瘍の報告はない．本症例の病理組織検査では，人の粘液産生性胆管腫瘍と類似する所見が認められておらず，臨床的な挙動も大きく異なるため，人の粘液産生性胆管腫瘍と猫の粘液産生性胆管腫瘍は全く異なる疾患であると考えられた．本症例は，食欲廃絶状態が１週間継続した状態で来院しているが，問診によると食欲廃絶に至るまで慢性的な食欲不振が続いていたとのことであった．より早い段階で来院があれば EHBO に至る以前に腫瘍細胞が分泌した粘液により GBM 様の腹部超音波検査所見が得られていた可能性が考えられた．また，過去の報告では，猫の GBM 全例で EHBO を必発していたため，より早期に
腹部超音波検査および血液生化学検査の実施が出来ていれば生前に GBM との鑑別が行えていた可能性が示唆された．
犬の GBM は腹部超音波検査所見によりステージ分類がなされている２）．胆管癌に続発した GBM 類似疾患であった本症例は，腹部超音波検査で中等度に進行した犬の GBM と同様の「胆嚢内に等 - 高エコーの可動性がなく血流のない貯留物」が確認されたため，GBM が疑われた．しかし，過去の報告では猫のGBM は犬の GBM 早期の所見と同様に「胆嚢内に低エコーで可動性のない粘液の貯留が認められた」と報告されている．この様に，猫の GBM は犬の GBM とは病態の異なる疾患であることが推測されるため，
腹部超音波検査所見での診断には注意が必要であると考えられた．
本研究から，猫の粘液産生性胆管癌は塊状病変を呈さないことがあり生前診断が困難である可能性が示唆された．加えて，GBM を続発させる可能性があり，猫で GBM が疑われた場合には基礎疾患として胆管癌の存在を考慮する必要があると考えられた．

参考文献
１．Bennett S.L., Milne M., Slocombe R.F. and Landon B.P.（2007）：Gallbladder mucocele and concurrent
hepatic lipidosis in a cat. Aust Vet J.85, pp 397-400.
２．Besso J.G., Wrigley R. H., Gliatto J.M., Webster C. R.（2000)：Ultrasonographic appearance and clinicalfindings in 14 dogs with gallbladder mucocele. Vet Radiol Ultrasound 41. pp261-271.
３．Fossum T.W. (2008): 消化器系の外科 . スモールアニマルサージェリー，第 3 版（若尾義人他訳），pp503-504. インターズー社，東京．
４．Gaillot H.A., Penninck D.G. and Webster C.R.L.（2007）：Ultrasonographic features of extrahepatic biliary
obstruction in 30 cats. Vet Radiol Ultrasound 48. Pp439-447.
５．North S. and Banks T. (2011)：肝臓胆道系および膵外分泌系の腫瘍 . Small Animal Oncology. 腫瘍性疾患の基礎と臨床 , 丸尾幸嗣他訳，pp166. インターズー社，東京．
６．Ogilvie G. K. and Moore A.S. (2003): 脾臓，肝臓，膵臓の腫瘍．猫の腫瘍，
桃井康行他訳，
pp289．インター
ズー社，東京．
７．Smalle, T.M., Cahalane, A.K. and Köster, L.S. (2015)：Gallbladder mucocele: A review. J. S. Afr. Vet. Assoc.
86(1):1318.
８．浦田孝広・真口宏介・高橋邦幸・潟沼朗生・小山内 学・松崎晋平・深澤光晴・栗田 亮・土屋貴愛・
一箭珠貴・桜井康雄・野路武寛・安保義恭・篠原敏也（2008）：粘液産生胆管腫瘍の臨床病理学的および診断学的検討．胆道 22 巻 1 号，pp71-80.
９．Woods K.S., Brisson B.A., Defarges A.M. and Oblak M.L.（2012）：Congenial duplex gallbladder and biliary
mucocele associated with partial hepatic cholestasisi and cholelithiasis in a cat.

山口獣医学雑誌
第 49 号
31 ～ 36 頁 2022
Yamaguchi J. Vet. Med., No.49 ： 31 ～ 36． 2022

資

31

料

子牛の中耳炎に対するデジタルレントゲンを用いた撮影方向の検討
藤原優美１）竹山哲矢１）國貞宥妃１）外川智周１）田浦保穗２）佐々木直樹１）〔2022 年４月 29 日受付・2022 年 11 月２日受理〕

Documentation
Investigation of imaging direction using digital radiography for otitis media in calves
Yumi FUJIWARA １）Tetsuya TAKEYAMA １）Yuki KUNISADA １）Tomochika SOTOKAWA １）
Yasuho TAURA ２）Naoki SASAKI １）
1) Large Animal Clinical Research Laboratory, Joint Faculty of Veterinary Medicine, Yamaguchi University
2) Joint Faculty of Veterinary Medicine, Yamaguchi University(1677-1, Yoshida, Yamaguchi-shi, Yamaguchi, 753-8515)

和文抄録
中耳炎のデジタルレントゲン (DR) 診断を確立するために，山口県内の２農場における９頭の子牛（中耳炎非罹患牛５頭，中耳炎罹患牛４頭）を供試し，鼓室胞を描出できる撮影方向を検討した．その結果，中耳炎疑いの牛に対して確定診断のための DR を用いた画像診断が有効であった．また，20°腹内背外斜位像が最も推奨できるＸ線照射方向であった．
キーワード：子牛，中耳炎，デジタルレントゲン診断

Summary
To establish a digital radiography diagnosis of otitis media, 10 calves (5 without otitis
media and 4 with otitis media, from two farms in Yamaguchi Prefecture) were tested todetermine the direction of imaging to depict the tympanic vesicle． The results showedthat digital radiography was effective for definitive diagnosis in cattle with suspected
otitis media． Additionally, the 20-degree ventral-dorsal-external oblique image was themost recommended X-ray exposure direction．
Key words: Calf,Otitis media, Digital X-ray diagnosis

１）山口大学共同獣医学部大動物臨床学研究室 ２）山口大学共同獣医学部連絡責任者：佐々木直樹 山口大学共同獣医学部 大動物臨床学研究室〒753-8515 山口県山口市吉田1677-1 TEL．083-933-5940 FAX．083-933-5940
E-mail：nsasaki@yamaguchi-u.ac.jp

32

山口獣医学雑誌

緒第 49 号2022

言

中耳炎は，側頭骨内の鼓室の炎症であり，牛，豚および羊では微生物が耳管を経て鼓室に侵入することにより生じることが多い［１，２］．牛では Pasteurella multocida および Mycoplasma bovis が病原巣から分離されている［１，２］．中耳炎の主な臨床症状は発熱，耳介下垂，眼瞼腫脹，肺炎症状などであり，重篤化すると神経症状が現れ，慢性に経過すると発育不良や死廃の転帰をとる場合がある［２］．
中耳炎の診断には，小動物領域においては CT が使われており，鼓室胞壁が厚く CT 値が高いことが中耳炎の特徴である［３］．大動物領域においても中耳炎診断に CT が有用であるとされる［４，５］が，大動物領域での CT の利用は大規模診療施設に限られている．そのため，画像診断により中耳炎を視覚的ならびに客観的に評価するために，デジタルレントゲン（DR）を用いた診断を検討した．
向から鼓室胞を描出し，中耳炎を DR で診断可能か検討した．すなわち，中耳炎非罹患牛では頭部側方
像（水平方向），20°
腹内背外斜位像，45°
腹内背外斜位像，または 45°
背内腹外斜位像とした（図１）．
同様に中耳炎罹患牛では，患耳側に DR カセッテを設置し反対側からＸ線を照射する４方向のいずれか
ついて検討した．鼓室胞において，中耳炎非罹患牛
では「輪郭明瞭，内部透過性，網目状紋様」，中耳炎罹患牛では「輪郭不明瞭，内部不透過性亢進，網目状紋様の消失」の画像が得られることを検討した．
なお，立位保定のため，周囲の人物や動物は十分に距離を取り安全に撮影を行った．

材料及び方法
供試牛は山口県の２農場における子９頭であり，耳介下垂の有無や既往歴から中耳炎非罹患牛（Ａ～Ｅ）５頭（ホルスタイン種５頭，平均日齢 94，雄４頭，雌１頭）と中耳炎罹患牛（Ｆ～Ｉ）４頭（黒毛
和種１頭，ホルスタイン種３頭，平均日齢 94，雄４頭）に分類した．非罹患牛，罹患牛における個体別の基
礎情報（品種，日齢，性別），症状［体温（℃），耳介
下垂の有無，肺音，その他の症状］，撮影方向の一覧
は表１，表２に記載した．
ポ ータブ ルレントゲン 画 像 検 査 装 置（70kV，２mAs，FUJIFILM Corporation）を用いて下記の４方

表１．中耳炎非罹患牛における個体別の基礎情報（品種，日齢，性別），症状［体温（℃），耳介下垂の有無，肺音，
その他の症状］，撮影方向一覧୰⪥⅖
ရ✀ ᪥㱋 ᛶู య
㠀⨯ᝈ∵

⪥௓ୗᆶ

⫵㡢
୧⫵⢒ບ

$

࣍



ܴ





%

࣍



ܴ





&

࣍



ܲ





'

࣍



ܴ





(

࣍



ܴ





ࡑࡢ௚ࡢ⑕≧

᧜ᙳ᪉ྥேတ㸩ྑ㰯Ồྑ㢕ࣜࣥࣃ⠇ r⭡ෆ⫼እᩳ఩
㍍ᗘ⭘⬽ᛴᛶ⫵⅖
ീr⫼ෆ⭡እᩳ఩ീᕥ๓ⴥ᤬㢌㒊ഃ᪉ീr⭡ෆ⫼ྑ㰯⮋Ồ㍍ᗘᛴᛶ⫵⅖㧥㡢እᩳ఩ീ㢌㒊ഃ᪉ീr⭡ෆ⫼୧⫵⢒ບ ேတ㸩⫵⅖እᩳ఩ീἾ≧ୗ⑩౽║⬡║⤖⭷඘ṇᖖr⭡ෆ⫼እᩳ఩ീ⾑Ẽ⟶࣭Ẽ⟶ᨭ⅖
㢌㒊ഃ᪉ീr⫼ෆ⭡
ṇᖖ
៏ᛶ⫵⅖
እᩳ఩ീ

品種はホルスタインをホ，黒毛和種を黒と表現した．
表２．中耳炎罹患牛における個体別の基礎情報（品種，日齢，性別），症状（体温（℃），耳介下垂の有無，肺音，その他の症状），撮影方向一覧୰⪥⅖⨯ᝈ∵ရ✀ ᪥㱋 ᛶู య

⪥௓ୗᆶ

⫵㡢

ࡑࡢ௚ࡢ⑕≧

᧜ᙳ᪉ྥ

)

㯮



ܴ



ྑ

⢒ບ

ྑ⪥࠿ࡽ₢ᾮ₃ฟ៏ᛶ⫵⅖

㢌㒊ഃ᪉ീr⭡ෆ⫼እᩳ఩ീr⭡ෆ⫼እ
ᩳ఩ീ

*

࣍



ܴ



ᕥྑ

ṇᖖ

ୗ⑩Ẽ⟶ᨭ⫵⅖ྑ㣕⠇⅖ేⓎr⭡ෆ⫼እᩳ఩ീ

+

࣍



ܴ





ṇᖖ

࠿᭶๓࡟ྑ୰⪥⅖࡜デ᩿ᚋ⪥㐨Ὑίࡀ⾜ࢃࢀࡓࡀ୰⪥⅖⥅⥆r⭡ෆ⫼እᩳ఩ീr⫼ෆ⭡እᩳ఩ീ

,

࣍



ܴ



ྑ

ṇᖖ

࠿᭶๓࡟ྑ୰⪥⅖࡜デ᩿ᚋ⪥㐨Ὑίࡀ⾜ࢃࢀࡓࡀ୰⪥⅖⥅⥆r⭡ෆ⫼እᩳ఩ീr⫼ෆ⭡እᩳ఩ീ

品種はホルスタインをホ，黒毛和種を黒と表現した．

山口獣医学雑誌

第 49 号

33

2022

4
4
45 °
45 °
1

20 °
45 °

1

20 °
45 °

2

2
3

1

3
図１．Ｘ線照射方向
12
図 1.
X 線照射方向
矢印１：頭部側方像，矢印２：20°
腹内背外斜位像，矢印３：45°
腹内背外斜位像，矢印４：45°背内腹外斜位像，：DR カセッテ， ：右鼓室胞， ：左鼓室胞2

3
矢印 1：頭部側方像,矢印 2：20°腹内背外斜位像,矢印 3：45°腹内背外図 1. X 線照射方向

4
像,矢印 4：45°背内腹外斜位像,：DR カセッテ,：右鼓室胞,
3
矢印 1：頭部側方像,矢印
2：20°腹内背外斜位像,矢印
3：45°腹内背外斜位
一方，20°腹内背外斜位像は非罹患牛Ｂ，Ｃ，
結果
Ｄおよび罹患牛Ｆ，Ｇ，Ｈで実施した．非罹患牛
頭部側方像は，非罹患牛Ｂ，Ｃ，Ｅおよび罹患
5
室胞
4
像,矢印 4：45°背内腹外斜位像,：DR カセッテ,：右鼓室胞,：左鼓
Ｄの左右鼓室胞は輪郭明瞭，内部透過性，網目状牛Ｆで実施した．非罹患牛，罹患牛ともに左右の紋様が認められた（図３）．同条件の非罹患牛Ｂ，鼓室胞が重なり，診断に適する画像が得られな
65室胞Ｃにおいても同様な結果が得られた．罹患牛Ｇのかった（図２）．
6778

図 2. 非罹患牛 B 頭部側方像(左),罹患牛 F(右中耳炎)頭部側方像(右),89 B 10cm，罹患牛Ｆ（右中耳炎）頭部側方像（右），：10cm
図 2.図２．非罹患牛Ｂ頭部側方像（左）非罹患牛
頭部側方像(左),罹患牛F(右中耳炎)頭部側方像(右),

9

10cm

：

10
11

10
11

1
2

20°
腹内背外斜位像（左），罹患牛Ｇ（右中耳炎）20°
腹内背外斜位像（右），図 図３．非罹患牛Ｄ
3. 非罹患牛 D20°腹内背外斜位像(左),罹患牛G(右中耳炎)20°腹内背外斜73位像(右),

4：左鼓室胞，：右鼓室胞，：左鼓室胞,：10cm：右鼓室胞,
7

：10cm

34

山口獣医学雑誌

第 49 号

2022

中耳炎と診断された（図４）．同条件の罹患牛 F
左鼓室胞は輪郭明瞭であるのに対し，右鼓室胞はにおいても同様な結果が得られた．
輪郭不明瞭，内部不透過性亢進，網目状紋様の消45°背内腹外斜位像は非罹患牛Ａ，Ｅおよび罹失が認められ右中耳炎と診断された（図３）．同
患牛Ｈ，Ｉで実施した．非罹患牛Ａは左右鼓室胞条件の罹患牛Ｆ，Ｈ，においても同様な結果が得の一部が隠れていた（図５）．同条件の非罹患牛られた．
Ｅにおいても同様な結果が得られた．罹患牛Ｉのさらに，45°腹内背外斜位像は非罹患牛Ａおよ
1
左鼓室胞は明瞭に描出できたが，右鼓室胞の一部
び罹患牛Ｆ，Ｉで実施した．非罹患牛Ａの左鼓室
2
図 3. 非罹患牛 D20°腹内背外斜位像(左),罹患牛G(右中耳炎)20°腹内背外斜が隠れていた（図５）．同条件の罹患牛Ｈにおい
胞の輪郭は明瞭であったが，右鼓室胞の一部が隠ても同様な結果が得られた．
れて不明瞭であった（図４）．罹患牛Ｉの右鼓室
3位像(右),：左鼓室胞,：右鼓室胞,：10cm
胞は輪郭不明瞭，内部不透過性亢進が認められ右

4

5
6

45°
腹内背外斜位像（左），罹患牛Ｉ（右中耳炎）45°腹内背外斜位像（右），図 図４．非罹患牛Ａ
4. 非罹患牛 A45°腹内背外斜位像(左),罹患牛I(右中耳炎)45°腹内背外斜7位像(右) ,

：左鼓室胞，：右鼓室胞，：10cm：左鼓室胞,：右鼓室胞,：10cm

1
図５．非罹患牛Ａ 45°
背内腹外斜位像（左），罹患牛Ｉ（右中耳炎）45°背内腹外斜位像（右），2

図 5. 非罹患牛
A45°背内腹外斜位像(左),罹患牛I(右中耳炎)45°背内腹外斜：左鼓室胞，：右鼓室胞，：10cm

3

位像(右) ,

4

：左鼓室胞,：右鼓室胞,：
考

10cm

8

察

中耳炎が認められた場合の処置として，抗生物質および抗炎症剤投与の内科的治療や，耳道洗浄や鼓室胞切開術等の外科的治療が実施される［２，６，７］．外科的治療の場合は鼓膜穿孔が必要となるが，これは侵襲性のある治療となるため，中耳炎と診断できた症例に対し外科的治療を施すことが望ましい．
中耳炎罹患牛では鼓室胞内の液体貯留や鼓室胞壁の肥厚，石灰化により，「輪郭不明瞭，内部不透過性
亢進，網目状紋様の消失」の画像が得られる［２，８］．今回，左右鼓室胞を同時に描出できる角度を検討

山口獣医学雑誌

第 49 号

2022

35

するために４方向から撮影を行った．頭部側方像は健康牛，右中耳炎である罹患牛ともに左右鼓室胞が重なり読影不可能であった．そのため，健康牛と罹患牛を判別できず診断に用いることはできないと考えられた．45°
腹内背外斜位像においては健康牛の左鼓室胞は輪郭明瞭であったが，右鼓室胞は一部隠れていた．
したがって，左右鼓室胞の重なりは回避できる角度であるが，耳介が鼓室胞描出の障壁となる場合がある
ため診断に適さない角度であると考えられた．45°背内腹外斜位像においては健康牛の左右鼓室胞の一部が隠れていた．さらに罹患牛の左鼓室胞は明瞭に描出可能であったが，右鼓室胞の一部が隠れていた．このように健康牛，罹患牛ともに鼓室胞の一部が隠れてしまうことで鼓室胞が不明瞭となっていたことは鼓室胞と DR カセッテの位置が離れていたことが原因と考えられる．これらの３方向では鼓室胞の明瞭な描出が困難であったが，20°腹内背外斜位像では左右鼓室胞が重なることがなく，他の障壁もないことから明瞭に描出可能な角度であった．
小動物領域で一般的に中耳炎診断に用いられる CT 撮影には，牛を寝かせるために鎮静剤を必要とする．
また，キシラジン鎮静によって保定横臥位または自然横臥位をとり DR にて画像撮影を行った報告もある［６］．しかし，今回の方法では立位保定のみで行うことが可能であった．立位保定が困難な症例には前者を，肺炎の併発などでキシラジンの使用を避けたい症例や立位保定が可能な症例には後者である今回の方法を採用するのが望ましいと考えられた．
以上のことから中耳炎疑いの牛に対して確定診断のためには，20°腹内背外斜位像が最も有効であった．
今後，除角済みの成牛等，子牛以外においても中耳炎の DR 診断に応用可能と考えられた．

引用文献
１）森田剛仁 : 動物病理学各論，2 版 : 382，文英堂出版，東京． 2017．
２）David F，Gilles F，André D et al．
：Otitis media in dairy calves:A retrospective study of 15 cases (1987 to
2002)，Can Vet J，45: 661-666． 2004．
３）J． Classen ，A． Bruehschwein，A． Meyer-Lindenberg et al．：Comparison of ultrasound imaging andvideo otoscopy with cross-sectional imaging for the diagnosis of canine otitis media，Vet J，217: 68-71．
2016．
４）A． Finnen，L． Blond，D． Francoz et al．：Comparison of Computed Tomography and RoutineRadiography of the Tympanic Bullae in the Diagnosis of Otitis Media in the Calf，J Vet Intern Med，25: 143147． 2011．
５）Je´roˆme VB，Gillian A．P，Brett W et al．：Clinical Signs，Computed Tomographic Imaging，andManagement of Chronic Otitis Media/Interna in Dairy Calves，J Vet Intern Med，18: 907-910． 2004．
６）北山篤，黒岩武信，坂田学ら：難治性中耳炎の黒毛和種肥育牛における鼓室胞切開術のための画像診
断学的アプローチ，家畜診療，67(9): 541-547． 2020．
７）Maeda T，Shibahara T，Kimura K et al．：Mycoplasma bovis-associated Suppurative Otitis Media andPneumonia in Bull Calves，Journal of Comparative Pathology，129: 100-110． 2003．
８）Forrest LJ: The cranial and nasal cavities． Canine and feline，Textbook of Veterinary Diagnostic
Radiology，4th ed．:78-80，WB Saunders，Philadelphia． 2002．

36

山口獣医学雑誌

第 49 号2022

山口獣医学雑誌










37

2022

        



第 49 号



­



¡¢£¤¥¦´¸¹³º¨¢» ¼½¾¿µ¶·ÀÁÂÃÄÅÆÇÈÉÊ¼½¾¿ËÌÍ¿ÏÐ ÑÒÓÔÕ ÁÂÖ×àÁÂáËºÀëìÚÛíî«íî³Î¬®ðÃ÷øù«ìçûËúüýüýþÿ~}}|Æ_`@?

³Î¼½¾

Ë§ª Ø³ÁÂÙ§ÚÛÜÝÞßï ÁÂãäðÃåß·¶³ìñ¢»òóÏôõö·ò

±²³â ÁÂãäÃåß·¶³æçèéê

ú§¨©§ª«¬®¯°>ÚÛ=<ø;

Ëº

Ï

{[üý\]Ù³^À³Î¼½¾¿Ö×:/.-

[§«, +*-)(-'&%$#-"/ö^!£0

}|78}
á9A öBCDÿE § 3  1234â5+ 6£ªá~FG üýHIJÈ+4K¤.-LÚÛMNOPQ«·Æ ¶·(RÉ
UVWMXNY) HI±#Za öJ*-)(-'&4'&*-(-ë çûËüýÏïcÏde§»cÏ%$#JÈ
f gÆk@?Øßhêl³ë

ì±

v3É



l-"m>!.-FJÈSTUÚÛT*-(-bþêµ¶·i0ÊijÍ

Ú§



[ÚÛM.-LMMnI opqrpstuöJ
wxHI>!Jyz§JÈ




*

-4

ï

mÝ)F4ÀÆFm²aF*C^>D


( -4

4ÿÿ

 









 ­












  



 





 

4

  


*

-4

,



)

4.54D
D

B£D
8

(

-4

D  
­ 










­





­








­





­



 

D} MM«cØØJ\|\|DD æçÝ¼½¾¿Ëá³ÎÚÛëáë¬®ìÏÐÝåß«Dÿ çD}}´Ø§§ÚÛÝD
8 ÇÈ.-Úµ¶û´\ªû
ÅÆ



£

>ÚÛ=<ø;ëëß³



ÀÌÍ

>


«Ú

D~ ¼½¾¿

b´\



ì

 ÿ
~uD
ÿóD8
ò·Pá


»DDÝ 8Du»óDò·PáúqDÝ» *âuïóD
ÿò·Pá



O

38

山口獣医学雑誌

第 49 号

2022
 
 





­




¡¢£¤¥¦§¤¨©ª«¬®¬¬¬¯°±²
³ ´µ¶·¸¹º·»¼½°·¾·°¿ÀÁ ´ÂÃÄÅÓ ·ÔÆÇÈÉÊËÌÍÎÂÃ°ÏÐÑÒ¡¢ÕÔ°Ö×ØÙ ··´¥ÚÛÜÝÞ·´ßà·´·áâã·äåæç·Åèé°êë ìíîØÂï·ðêñ ìíòó·ðê



ô



 õìíö÷øù úûüýü þû¬ÿû~}¹º|{ [\«« ûûÿû]}^èò_úñþ
³ [\«ù û«ÿû~}^èò_ú³ÙñþÁ [\~û ³ÿûü}^èò_úñþ ] ^_`@?`>=] <;ã :¸/.-,+*) ('´&%$# ^_ì"!0 <;1¯¡.-2!0 <;¡ã3´è£ñ.-¡®4»¢5»607ì89A
BC¡DE

­­
ÜøF×GHIHI×
Ö××JKGÓÝ ´LM­
#3.-Ù.-ì"!01¯¡NO PQ`RS´àTIÂHIU»òVöWàÉìíîïðñ½¾àXYZ#ab0cda² 8Ief²¡®ghijkl








­
ÜøFÜjmnmèJK ×Ö
×
×
Ü
×
mGÒß
ø
Ñ´ã3`opqr`Ês `]t©`u©`èãHIvwìHt©xy²´µ¶­
ÜøÒÔmnèJK ×
Ö
××
Ü
×
mGÔ
øÑ´z¿À¿ ¦§¤¥©¨©²¿´µ¶  â]
­
m
­­

­
­­¡¢º· ½· ²






 
 
 
 


èéêë

ìíîïðñ à
Åã
ò óô
õÒÓ
Ô
ÞÖ
Ö
Ö
×
ØÙÚÛÜ
Ö
Ý
Ö
Ðö÷
µÀ Ö
Ý
ß
ø
Ò
×
ÞÜ
Ü
Ò
Ô
Á Ö
Ý
ß
ø
Ò
×
ÞÜ
ÓÓ
Ô
µ¹

¦ ¨ ¹
°

©
Â ¥
®
­
«
®

®

¤
©
©
¤
Ã
Ã
²²²®
¨ ª«
¹
°

©
®
­®

¤

ù ú û

üýþÿùú
~}Ø|{[\Ü
Ö
Ó
×
×
Ðö

  
 




 ¢£
          







 
 

 

    ­ 




 
  
    













     


 


 

 





      

 




    












 








 

 
  


 



 
¡­­





       



 



     
   

 

