2022 年度研究助成事業

成果報告会

要旨集

2023 年 10 月 10 日（火）公益財団法人ニッポンハム食の未来財団

第一部

2022年 度 研 究 助 成 事 業 成 果 報 告 会
個人研究助成 ポスター報告会 プログラム

日時：2023年10月10日（火）13時30分から14時30分
場
所：AP品川アネックス 1階 Dルーム
発 表 者：2022年度研究助成事業 個人研究採択者
コアタイム：偶数演題番号13時30分〜14時00分、奇数演題番号14時00分〜14時30分
演題
番号

課題名

所属機関・氏名頁

01

機能性大麦を用いた腸内細菌叢を標的とする新たな食物アレルギー治療法の開発

502

経皮感作による食物アレルギー発症の新規病態
機序の解明

03

食物アレルギーのアウトグローにおける抗原特異的 IgD の役割

04

経口免疫寛容を強力に誘導する新規 Treg 標的
バイオロジクスの創製

関西医科大学 医学部
小児科学講座 講師 赤川 翔平
順天堂大学大学院
医学研究科アトピー疾患研究センター
助教 安藤 智暁
福井大学医学部付属病院
総合周産期母子総合医療センター
特命助教 伊藤 尚弘
神戸学院大学 薬学部
助教 井上 雅己

05

食物アレルギー予防・治療を目指した核内受容体リガンドによる制御性 T 細胞分化制御解析

島根大学 医学部医学科
講師 小谷 仁司

免疫学講座

9

06

D-アミノ酸含有ビオチニル化ペプチドによる持続的な抗アナフィラキシー効果の検証

医療創生大学 薬学部
准教授 佐藤 陽

衛生薬学部門1007

発酵を利用した低アレルゲン化エビ調味料開発の試み

北海道大学大学院 水産科学研究院
技術専門職員 清水 裕

11千葉大学医学部附属病院 小児科
助教 中野 泰至
国立医薬品食品衛生研究所
食品部第五室室長 中村 公亮
名古屋市立大学大学院 医学研究科
新生児・小児医学 講師 野村 孝泰

1210

母乳中 micro RNA が食物アレルギー発症に及ぼす影響
加工食品の輸出拡大を目指したコーデックス指定アレルゲンならびにアレルゲン様化学物質の網羅的検出法の基盤的検討
胃食道逆流に注目した牛乳アレルギーモデルマ
ウスの免疫機序の解明

11

鶏卵アレルギー小児の長期的観察による食物ア
レルギー寛容誘導機序の解明

1512経口免疫寛容における粘膜組織樹状細胞と腸内細菌叢との相互作用の役割の解明

13

固形食物による消化管アレルギーの予後予測因子についての研究

京都大学大学院医学研究科
客員研究員 田中 孝之
宮崎大学 医学部医学科
感染症学講座免疫学分野
助教 深谷 知宏
自治医科大学附属さいたま医療センタ
ー 小児科 講師 牧田 英士

08
09

14
15
16

LGG 乳酸菌を併用して行う経口免疫療法の有効性を検証する研究
低アレルゲン化小麦の交差反応を利用した安全性の高い小麦アレルギーの予防法と治療法の開発Food protein induced enterocolitis syndromeの診断における血清 TARC 値の有用性に関する研究

独立行政法人国立病院機構相模原病院
小児科 レジデント 三浦 陽子
広島大学大学院
医系科学研究科（薬）准教授 横大路 智治
杏林大学医学部付属病院
小児科学教室 助教 濵野

翔

※敬称略
1
1

6
7
8

13
14

16
17
18
19
20

第二部

2022年 度 研 究 助 成 事 業 成 果 報 告 会
共同研究助成 口頭成果報告会 プログラム

日時：2023年10月10日（火） 15時00分より

場

所：AP品川アネックス 1階

発表者：2022年度研究助成事業

A＋Bルーム
共同研究採択者

15:00 開会挨拶
15:10〜15:30
唾液の次世代プロテオーム解析による、非侵襲的な食物蛋白誘発胃腸炎の診断・症状誘発予測マーカーの開発・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・22
井上 祐三朗
千葉大学大学院 医学研究院総合医科学 特任准教授
15:30〜15:50
食物アレルギー児におけるレジリエンス尺度の開発・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・26
今井 孝成
昭和大学 医学部小児科学講座 教授
15:50〜16:10
食品の味覚成分を利用した食物アレルギー制御法・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・35
神沼 修
広島大学原爆放射線医科学研究所 疾患モデル解析研究分野 教授-----（休憩）16：10 から 16：25---16:25〜16:45
アレルゲンコンポーネントを活用した乳児期の食物アレルゲン感作に関する研究・・・・・・・・・41
佐藤 さくら
国立病院機構相模原病院 臨床研究センター アレルギー性疾患研究部 部長
16:45〜17:05
新規アレルギー抑制分子49

Ly6G によるマスト細胞の機能制御と創薬への応用・・・・・・・・・・・

金沢大学

医薬保健研究域鈴木 亮
薬学系 教授17:05〜17:25
モデルマウスを用いた花粉-食物アレルギー症候群における経口免疫治療の確立と機序解明・・・・・57
藤枝 重治
福井大学学術研究院 医学研究科 耳鼻咽喉科・頭頸部外科 教授
17:25 閉会挨拶
17:30

写真撮影
※敬称略
2
2

評議員・役員・研究助成委員名簿・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・64

当財団案内・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・66

3
3

2022年度研究助成事業

個人研究助成〈ポスター報告〉要旨※報告書全文は当財団Webサイトに掲載予定

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公益財団法人ニッポンハム食の未来財団
2022 年度研究助成事業 個人研究助成 成果報告要旨

研究課題名【演題番号 01】
機能性大麦を用いた腸内細菌叢を標的とする新たな食物アレルギー治療法の開発

フリガナ

アカガワ

代表者名

赤川

ショウヘイ

翔平

所属機関（機関名） 関西医科大学医学部（役職名） 講師

本助成金による発表
論文，学会発表

小児科学講座

第 71 回日本アレルギー学会学術大会（2022 年 10 月 7 日、東京）
シンポジウム 6: Microbiome を考える
「食物アレルギーと microbiome」
演者：赤川翔平、金子一成
第 126 回日本小児科学会学術集会（2023 年 4 月 15 日、東京）
分野別シンポジウム 7：アレルギー疾患の予防「食物アレルギー発症予防と microbiome」
演者：赤川翔平、金子一成

研究結果要約
アレルギー疾患の患者において腸内細菌叢の乱れ（dysbiosis）が認められることが相次いで報告されている 1-8。申請者らは、小児の鶏卵アレルギー患者では酪酸産生菌の減少に特徴づけられる dysbiosis
を来たしていることを明らかにした 9。酪酸は腸管において、過剰な免疫応答を抑制する役割を担う制
御性 T 細胞の分化・誘導を促進するため、dysbiosis の是正が食物アレルギーの新たな治療標的となり得る。一方で、申請者らは食物繊維を豊富に含んだ機能性大麦の継続摂取が酪酸産生菌を増加させるこ「機能とを報告した 10。本研究では、申請者らが過去に取り組んだ小児腸内細菌叢の解析手法をもとに、性大麦の継続的な摂取が、食物アレルギー患者の酪酸産生菌減少に特徴づけられる dysbiosis を是正し、
食物アレルギーの新たな治療法になり得る」という仮説をプラセボ対照二重盲検ランダム化比較試験を用いて検証することを目的とした。対象は 1 歳から 8 歳の鶏卵アレルギー患者 50 名とし、機能性大麦（またはプラセボとして米粉）を 3g 含んだクッキーを 16 週間摂取し、腸内細菌叢の変化および経口負荷試験での鶏卵摂取閾値を 2 群で比較することとした。2023 年 3 月末時点で、8 名のリクルートが完了したが、4 名が脱落し、試験を完遂できたのは機能性大麦群 1 名、プラセボ群 3 名の 4 名のみであり、進捗に大幅に遅延が生じている。そのため、今後は近畿食物チャレンジネットワークを通じた多施設共同研究に変更し、本研究の完遂を目指す。

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公益財団法人ニッポンハム食の未来財団
2022 年度研究助成事業 個人研究助成 成果報告要旨

研究課題名【演題番号 02】
経皮感作による食物アレルギー発症の新規病態機序の解明

フリガナ

アンドウ

代表者名

安藤

トモアキ

智暁

所属機関（機関名） 順天堂大学大学院医学研究科アトピー疾患研究センター（役職名） 助教

本助成金による発表 Frontiers in Immunology (Front Immunol)に論文投稿中（in revision）であり、論文，学会発表
論文が受理され次第、ニッポンハム食の未来財団へ報告する。

研究結果要約
食物アレルギーは食物抗原に対する特異的 IgE の産生（感作）に始まる。近年、経皮感作の重要性が示されている。また、黄色ブドウ球菌毒素-toxin は感作に関与する可能性が指摘されている。一方、これまでの経皮感作モデルで行われてきた皮膚の tape-stripping はそれ自体、腸管の免疫系に影響を及ぼすので、tape-stripping を使用しないモデルの解析が必要である。本研究の目的は、tape-stripping を使用しないマウスモデルを利用し、皮膚における黄色ブドウ球菌毒素の存在が食物アレルギーに与える影響を明確にすることである。マウスの皮膚に-toxin の存在下・非存在下で卵白アルブミン(OVA)を塗布した後、OVA を経胃管投与すると、-toxin が存在する場合だけ、OVA 特異的 IgE 値の上昇とともに食物アレルギーが発症した。-toxin はケラチノサイトに作用して IL-1 の産生を促し、IL-1 依存的な皮膚の樹状細胞の活性化（OVA の取り込みと所属リンパ節への移動）を介して、感作とその後の食物アレルギーを誘導することが明らかになった。この結果は、皮膚に黄色ブドウ球菌毒素 -toxin が存在するだけで、食物抗原に対する感作が誘導されることを示した。従って、本研究成果は、食物アレ
ルギーに対する画期的な予防法の開発につながる可能性を秘めており、大きな意義を有する。

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公益財団法人ニッポンハム食の未来財団
2022 年度研究助成事業 個人研究助成 成果報告要旨

研究課題名【演題番号 03】
食物アレルギーのアウトグローにおける抗原特異的 IgD の役割

フリガナ

イトウ

代表者名

伊藤

ナオヒロ
尚弘

所属機関（機関名） 福井大学医学部附属病院（役職名） 特命助教

総合周産期母子医療センター

1.The dual aspects of IgD in the development of tolerance and the pathogenesis
本助成金による発表
of allergic diseases.
論文，学会発表
Itoh N, Ohshima Y. Allergol Int. 2023;72:227-233.

研究結果要約【背景】食物アレルギー患者数は年々増加しているが、有効な治療法がなく、原因食物の除去が基本である。しかし、誤食によるアナフィラキシーのリスクがあり、その対応には十分に注意を払う必要がある。治療を目指して、経口免疫療法が研究段階的に行われているが、その効果は不十分で、更には好酸球性消化管疾患の合併の可能性もある。
【目的・方法】本研究は食物アレルギーの耐性獲得の誘導による食物アレルギーの治療、好酸球性消化管疾患の発生機序の解明を目的として行う。具体的には、近年食物アレルギーとの関連が明らかとなっている抗原特異的 IgD を検討することで、抗原特異的 IgD がどのように病態に関わっているかを明らかにする。
【結果】マウスでは、好酸球性消化管疾患を誘導した経皮感作食物アレルギーモデルマウスが抗原特異的 IgD は増加していない一方で、免疫療法モデルマウスでは増加したことを明らかにした。ヒトでは、当初予定していた経口免疫療法を行っている検体数が十分収集できず、横断研究を行い、食物アレル
ギーの重症度に応じて抗原特異的 IgD が増加傾向にあることを明らかにした。
【今後の予定】今後は、マウスでは免疫グロブリンの再現性を確認すると共に、サイトカインや腸管組織の解析を追加で行う。ヒトでは、引き続き経口免疫療法の検体を収集する予定である。データが十分揃った時点で英文誌に投稿するとともに国内外の学会で発表する。
7
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公益財団法人ニッポンハム食の未来財団
2022 年度研究助成事業 個人研究助成 成果報告要旨

研究課題名【演題番号 04】
経口免疫寛容を強力に誘導する新規 Treg 標的バイオロジクスの創製

フリガナ

イノウエ

代表者名

井上

マサキ

雅己

所属機関（機関名） 神戸学院大学（役職名） 助教

薬学部

井上雅己, TNFR2 を標的に制御性 T 細胞を増殖するバイオロジクス, イノベーシ
ョン・ジャパン 2022－大学見本市－（オンライン）, 2022.10.4-31.
井上雅己, 制御性 T 細胞の増幅を目指した 2 型 TNF 受容体アゴニストタンパク
本助成金による発表
質の創製, BioJapan 2022（横浜）, 2022.10.12-14.
論文，学会発表柴田紗弥, 井上雅己, 屋田萌生, 角田慎一. 2 型 TNF 受容体シグナルを介したTreg 制御による食物アレルギー抑制効果, 日本薬学会第 143 年会（札幌）,2023.3.26.
研究結果要約制御性 T 細胞（Treg）は、末梢性免疫寛容の中心を担うリンパ球であり、腸管粘膜固有層に多く存在する。近年、食物アレルギー患者では Treg の機能不全が認められ、アレルギー発症との関連が注目されている。これは、Treg の機能を適正にコントロールする方法、とりわけ Treg を特異的に活性化する方法を確立できれば、食物アレルギーの予防や治療に有効となる可能性を示唆する。我々は、これまで、
2 型 TNF 受容体（TNFR2）シグナルが Treg の制御に重要な役割をもつことを見出しており、高い
TNFR2 刺激活性と生体内安定性を有し、生体内で Treg 機能を増強することで過剰な免疫応答を抑制するための新規タンパク質分子として、独自の TNFR2 アゴニスト TNF 変異体にヒト IgG-Fc を融合した「scR2agoTNF-Fc」を創製してきた。本研究では、scR2agoTNF-Fc の生体内外での Treg 増幅効率を調べるとともに、オボアルブミン（OVA）誘導食物アレルギーマウスにおける scR2agoTNF-Fc の病態抑制効果を検証した。scR2agoTNF-Fc は、他のリンパ球に対して Treg を優先的に増幅し、Treg の免疫抑制活性にも寄与した。また、食物アレルギーマウスにおいて、scR2agoTNF-Fc は OVA 摂取後の下痢症状を改善し、リンパ節中の CD4+Foxp3+ Treg を増加させたことから、アレルギー病態の抑制に有用であると考えられた。したがって、TNFR2 を標的とした Treg 増幅は、免疫寛容を強化できる新たな食物アレルギー治療薬の開発に繋がると期待された。

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公益財団法人ニッポンハム食の未来財団
2022 年度研究助成事業 個人研究助成 成果報告要旨

研究課題名【演題番号 05】
食物アレルギー予防・治療を目指した核内受容体リガンドによる制御性 T 細胞分
化制御解析

フリガナ

コタニ

代表者名

小谷

ヒトシ
仁司

所属機関（機関名） 島根大学医学部医学科（役職名） 講師

免疫学講座

本助成金による発表 日本薬学会 第 143 年会(札幌)でのポスター発表
論文，学会発表
28P1-am1-065「T 細胞分化制御活性を有する天然化合物の解析」

研究結果要約
本研究では、健康で幸せな食生活を営み、多くの人々が食を楽しむことを可能とすることを目的として、食物アレルギーの予防・治療に有用な新たな機序の医薬品開発に繋がる研究を行うこととした。制御性 T 細胞の分化制御をする核内受容体 NR4A2/RXR ヘテロダイマーをターゲットとして、制御性 T細胞の分化促進する化合物を探索してきた。特に、核内受容体 NR4A2 はリガンドポケットを持たず、リガンド開発が難しいため、RXR とのヘテロダイマーとして間接的に活性化するリガンドとして、
honokiol とプレニルフラボノイドに関して、ヘテロダイマーの選択性の検討および、他のヘテロダイマ
ーを介した副作用の有無などを調べるとともに、食物アレルギーモデルによる有用性の検討を評価した。
その結果、これらの化合物は NR4A2 に対して RXR を介して転写活性化を示すことを明らかにした。
また、他の核内受容体を介した副作用の有無などをマウスに honokiol を投与した結果、LXR/RXR を介した脂肪肝は起きないことが確認された。さらに、通常時の honokiol の経口投与では、脾臓における制御性 T 細胞の割合が増加することはなく、予想に反し若干であるが減少傾向が確認された。また、食物アレルギーモデルを利用した honokiol による予防・治療効果に関しては、残念ながらモデル動物の症状も弱く、honokiol の効果が確認できなかった。

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2022 年度研究助成事業 個人研究助成 成果報告要旨

研究課題名【演題番号 06】
D-アミノ酸含有ビオチニル化ペプチドによる持続的な抗アナフィラキシー効果の
検証

フリガナ

サトウ

代表者名

佐藤

アキラ
陽

所属機関（機関名） 医療創生大学（役職名） 准教授

本助成金による発表
論文，学会発表

薬学部

衛生薬学部門

1. Akira Sato, Takahiro Fukase, Keiichi Ebina, Biotinylated peptides substituted with D-amino acids with high stability as anti-anaphylactic agents targeting platelet-activating factor, J. Pept. Sci. 2023; 28; e3412.
2. 大平 愼, 佐藤 元汰, 小川 裕大, 根本 妃奈, 矢吹 彩乃, 蝦名 敬一, 松本司, 佐藤 陽, D-アミノ酸含有ビオチン化ヘプタペプチドの抗アレルギー薬としての有用性, 日本薬学会第 143 年会, 2023 年 3 月 27 日, 札幌.

研究結果要約
血小板活性化因子（PAF）は、アナフィラキシーの発症に関わる生理活性脂質として知られており、その活性を阻害することで致死的なアナフィラキシーを改善できる。最近私達は、生体内安定性に優れ、PAF との特異的結合能を有しその活性を抑制する D-アミノ酸含有ビオチニル化ヘプタペプチドを見出した。本研究では、このペプチドのアナフィラキシー治療薬としての開発・実用化を目指して、疾患モデル動物を用いてペプチドの有効性を検証した。その結果、今回用いた 3 種類のペプチド（peptide 1～3）のうち、N 末端側のアミノ酸（1 個）を D 体化した peptide 2 は、L 体アミノ酸のみからなる peptide
1、N 末端側 C 末端側の両アミノ酸（計 2 個）を D 体化した peptide 3 と異なり、アナフィラキシーによる体温低下を劇的かつ持続的に抑制した。さらに、peptide 2 は、アナフィラキシーの病態形成に関わるマスト細胞における IgE 依存および非依存性の脱顆粒やロイコトリエン遊離を劇的に抑制に関与した。以上の結果から、今回用いたペプチドのうち、peptide 2 は、PAF 活性阻害のみならず、マスト細胞の作用を抑制することにより持続的な抗アナフィラキシー効果を示すと考えられた。今後はこの抗ア
ナフィラキシー効果のさらなる作用機序を解明していく予定である。

1010

公益財団法人ニッポンハム食の未来財団
2022 年度研究助成事業 個人研究助成 成果報告要旨

研究課題名【演題番号 07】
発酵を利用した低アレルゲン化エビ調味料開発の試み

フリガナ

シミズ

代表者名

清水

ユタカ
裕

所属機関（機関名） 北海道大学 大学院水産科学研究院（役職名） 技術専門職員
学会発表：
Ulfah Amalia、清水 裕、渡辺 一彦、佐伯 宏樹．
発酵スターターの使用によるエビ発酵調味料 TERASI の潜在的アレルゲン性低減化の試み．
本助成金による発表 第 77 回日本栄養・食糧学会大会．2023 年．2D306c.
論文，学会発表
発表論文：
Ulfah A, Shimizu Y, Saeki H.
Food safety evaluation of commercial Terasi, Indonesian fermented shrimp
paste, from the viewpoint of food allergy. Fisheries Science. 2023;89:253–61.
研究結果要約
本研究では、インドネシアの伝統的な小エビ発酵食品である TERASI をモデル食品とした、低アレル
ゲン性エビ発酵調味料の製造について検討した。まず、インドネシアにて市販される TERASI を 20 種類調査したところ、市販 TERASI の多くにアレルゲン性が残存していることが判明した。次に、日本近海で漁獲された 2 種の小エビ（アキアミ、イサザアミ）に、種々のスターターを添加して TERASI を調製し、それに含まれるエビの主要アレルゲン（トロポミオシン、TM）の IgE 結合能を、エビアレルギ
ー患者血清を用いて調査した。スターターには、市販あるいは自作した TERASI、または米麹を用いた。
その結果、原料をアキアミとした場合は、市販 TERASI の一部、および米麹を用いた TERASI において、一部の患者で IgE 結合能の低下が見られたが、他のスターターでは明確な IgE 結合能の低下は確認できなかった。一方で、イサザアミを原料とし、アキアミからスターターを使用せずに調製した TERASI
または市販の TERASI をスターターとした TERASI は、供した全ての患者において、スターター不使用の物よりも大幅な IgE 結合能の低下が観られた。以上の結果は、原料とスターターを適切に組み合わせることで、製造工程における TM の分解を促進し、最終製品のアレルゲン性を低減できることを示し
ている。

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2022 年度研究助成事業 個人研究助成 成果報告要旨

研究課題名【演題番号 08】
母乳中 micro RNA が食物アレルギー発症に及ぼす影響

フリガナ

ナカノ

代表者名

中野

タイジ

泰至

所属機関（機関名） 千葉大学医学部附属病院（役職名） 助教

小児科

本助成金による発表なし
論文，学会発表

研究結果要約
我々はハイリスク出生コホート研究（CHIBA study）において 4 か月までの母乳栄養が 1 歳時点での卵白感作のリスク因子となることを報告した（Nakano et al. Pediatr Allergy Immunol. 2020）。母乳
中には様々な免疫活性物質の他に microRNA(miRNA)も豊富に存在しており、免疫に関わる miRNA
も豊富に存在していることが分かっている。母乳中 miRNA は消化管の中でも安定に存在することも分かっており、母乳を介して児に影響を与えている可能性が高い。しかし、母乳中 miRNA が乳児期の食物アレルギー発症に関わっているかは未だ明らかにされていない。そこで本研究では母乳中 miRNA が食物アレルギーにどのように関わっているかを検討することを目的として本研究を発案した。我々の出生コホート研究の母乳サンプルを用いて 3D-Gene® Human miRNA Oligo chip を用いて miRNA の発現解析を行った。母乳中には 2283 個の miRNA が検出された。1 歳時点で卵白感作の有無で比較すると miR-342-5p, 551b-5p, 3192-5p が卵白感作群で 8 倍以上発現が低下していた。この中で miR-3425p は VEGF, TGFb signaling に関わっており卵白感作に関わっている可能性が示唆された。

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2022 年度研究助成事業 個人研究助成 成果報告要旨

研究課題名【演題番号 09】
加工食品の輸出拡大を目指したコーデックス指定アレルゲンならびにアレルゲン
様化学物質の網羅的検出法の基盤的検討

フリガナ

ナカムラ

代表者名

中村

コウスケ

公亮

所属機関（機関名） 国立医薬品食品衛生研究所 食品部第五室（役職名） 室長

本助成金による発表
論文，学会発表【発表論文】
なし【学会発表】
なし

研究結果要約近年、食物アレルギーの発症の報告は世界的に増加傾向にある。発症の抑制には、食品への「アレルギー表示」が有効な方法の一つである。しかしながら、アレルギー表示対象の食品は国や地域で異なっており、食品の国際貿易という観点から、食物アレルギー対応食品を保証できるようなアレルゲンを網羅して検知する有用な方法は示されていないことが問題となっている。そこで本研究では、食品の食物
アレルゲン表示の適正さを確認するための分析法として、液体クロマトグラフ質量分析計 LC-MS/MSを用いた亜硫酸塩類の誘導体化物とアレルゲンタンパク質由来のペプチドを同時に検出する方法を開発した。本研究より、第 3 級アミノ基とオクタデシル基を有するカラムを使用し、移動相にギ酸を含む
水/アセトニトリルを用いてグラジエント溶出を行うことで、ヒドロキシメタンスルホン酸および特定原材料 8 品目（小麦、そば、乳、卵、甲殻類[えび・かに]、落花生、くるみ）の指標ペプチドの同時分析が可能であることが示唆された。すなわち、添加回収試験では回収率、併行精度、室内再現精度はいずれも良好な結果が得られ、また 10 種類の市販加工食品の測定において各原材料表示と本分析法により検出結果が一致したことから、本研究で開発した方法は、食品に含まれる亜硫酸塩類およびアレルゲ
ンタンパク質の同時検出が可能であることが示唆された。

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公益財団法人ニッポンハム食の未来財団
2022 年度研究助成事業 個人研究助成 成果報告要旨

研究課題名【演題番号 10】
胃食道逆流に注目した牛乳アレルギーモデルマウスの免疫機序の解明

フリガナ

ノムラ

代表者名

野村

タカヤス

孝泰

所属機関（機関名） 名古屋市立大学大学院医学研究科（役職名） 講師

新生児・小児医学

本助成金による発表なし
論文，学会発表

研究結果要約
乳児期の食物アレルギーは、初めての経口摂取で発症することも少なくなく、最近ではアトピー性皮膚炎などで障害を受けた皮膚を介した経皮感作が注目される。本研究では、乳児期の胃食道逆流による経気道感作が牛乳アレルギーの発症機序の一端を担っていると仮説を立て、動物モデルを用いた解析を行った。2020 年度の実験で、牛乳と酸の混合物（牛乳＋酸）の気道感作による牛乳アレルギーモデルマ
ウスを確立した。2021 年度の実験で、本モデルが TLR4 依存的な反応であることが明らかになった。
モデルは確立したものの、その免疫機序の詳細は不明である。我々は初期の自然免疫の反応に注目し、網羅的な解析を駆使することでその機序を明らかにする。本年度は、肺胞マクロファージの RNA-seq、
肺のサイトカインのマルチプレックス解析などを計画したが、結果的にはより強力な解析手法である、肺の single cell RNA-seq 解析を行うことができた。
また、TLR4 依存性を認めたが、牛乳と酸の感作に特異的な反応であるか確認するため、他の感作モ
デルでの TLR4 依存性を確認する必要があると考えた。

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公益財団法人ニッポンハム食の未来財団
2022 年度研究助成事業 個人研究助成 成果報告要旨

研究課題名【演題番号 11】
鶏卵アレルギー小児の長期的観察による食物アレルギー寛容誘導機序の解明

フリガナ

タナカ

代表者名

田中

タカユキ
孝之

所属機関（機関名） 京都大学大学院医学研究科（役職名） 客員研究員

本助成金による発表
今年度は、なし
論文，学会発表

研究結果要約
わが国の即時型食物アレルギーの原因食物として最も頻度が高いのは鶏卵であり、特異的 IgE 抗体測定や食物経口負荷試験を用いた通常の診療で耐性獲得に至る患者も多いが、IgE 低値でも症状誘発が見られる症例や耐性獲得が進まない症例など、問題も残っている。今回我々は鶏卵アレルギー患者をリクルートしてコホートを作成し、経口食物負荷試験と同時に免疫学的な解析を行うことにより、実臨床の中で１：鶏卵への耐性獲得例・そうでない例の免疫学的な違いを明らかにし、２：鶏卵除去指導の指標として食物負荷試験の補助となるバイオマーカーを同定することを目的に研究を進めている。
2021 年 2 月より症例のリクルートを開始し、2023 年 3 月末時点までに 232 症例が参加した。各症例はリクルート時の鶏卵摂取量でグループ分けしていて、卵白摂取不可の「持続群」が 98 人と最も多く、
加熱卵白１ｇ以上、１０ｇ未満「段階増量群」が 37 人、加熱卵白１０ｇ以上摂取可の「耐性獲得群」が61 人、鶏卵アレルギーの既往のない「コントロール群」が 36 人となっている。初回のおよび 2 回目の検体提供時に PBMC を凍結保存しており、これらの解析を通じて次年度以降、
１，食物負荷試験結果と相関するバイオマーカーの探索
２，低リスク群と高リスク群患者の間で有意に差のある指標の同定
３，上記の指標が耐性獲得の中でどのように変化するかの追跡の 3 点の解明を引き続き進めていく。

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公益財団法人ニッポンハム食の未来財団
2022 年度研究助成事業 個人研究助成 成果報告要旨

研究課題名【演題番号 12】
経口免疫寛容における粘膜組織樹状細胞と腸内細菌叢との相互作用の役割の解明

フリガナ

フカヤ

代表者名

深谷

トモヒロ
知宏

所属機関（機関名） 宮崎大学医学部医学科感染症学講座免疫学分野（役職名） 助教

1 深谷知宏、宇都倫史、冨永萌、佐藤克明. Gut dysbiosis abrogates the establish本助成金による発表 ment of oral tolerance through the dysregulation of the crosstalk between
CD103+ conventional dendritic cells and innate lymphoid cells in mesenteric
論文，学会発表
lymph nodes. 第 51 回日本免疫学会総会・熊本・2022

研究結果要約
近年、アレルギー疾患発症の低年齢化が指摘されており、乳児期での抗生剤の使用とその後のアレル
ギー疾患の発症増加との関連が報告されている。一方、消化管は外来抗原に常に曝されており、病原微生物には防御免疫反応を惹起し、食物抗原には経口免疫寛容として知られる不応答性を成立させバランスを保っている。また、食物アレルギーや炎症性腸疾患ではこのバランスの破綻が関与すると考えられている。さらに、宿主と腸内細菌叢との共生“Symbiosis”が粘膜免疫バランスに影響を与えることが明らかになりつつあり、その喪失の一因として腸内細菌叢の多様性の低下“Dysbiosis”が考えられている。現在までに、“経口免疫寛容の破綻”と“Dysbiosis”との関連が指摘され、抗生剤曝露によるアレ
ルギー疾患発症リスクの増加への関与が推察されているが、その作用機序について不明な点が多く残されている。
本研究では、幼若期の抗生剤曝露によるアレルギー疾患を導く経口免疫寛容の破綻機構の解明を目的として、その作用機序について免疫応答の司令塔として作用する樹状細胞と腸内細菌叢の相互作用に着眼し検討を行った。その結果、抗生剤曝露により消化管粘膜組織樹状細胞の腸内細菌叢との相互作用に基づく免疫寛容誘導能の喪失が関与し、結果的に経口免疫寛容の破綻を誘発することにより、アレルギ
ー疾患の発症・増悪を導くことが明らかとなった。

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公益財団法人ニッポンハム食の未来財団
2022 年度研究助成事業 個人研究助成 成果報告要旨

研究課題名【演題番号 13】
固形食物による消化管アレルギーの予後予測因子についての研究

フリガナ

マキタ

代表者名

牧田

エイシ

英士

所属機関（機関名） 自治医科大学附属さいたま医療センター小児科（役職名） 講師

牧田英士、黒田早恵、板橋佳恵、菅原大輔、市橋光: 卵黄 FPIES の短期予後予測
本助成金による発表
における血清 TARC 値の有用性、第 71 回日本アレルギー学会学術大会、2022 年
論文，学会発表
10 月 7-9 日、東京

研究結果要約消化管アレルギー Food protein induced enterocolitis syndrome （FPIES）は特定の食物を摂取した後に嘔吐などの消化器症状のみを呈するアレルギー性疾患であるが、診断や予後予測のためのバイオ
マーカーは確立されていない。本研究では固形食物 FPIES の予後予測に有用なバイオマーカーについて検討した。まず、FPIES の急性期に上昇するバイオマーカーの探索のために、TARC、MMP3、SCCA2、プロカルシトニン(PCT)を候補に挙げ負荷試験陽性症例の症状出現前後で測定したところ、TARC、
MMP3、PCT が有意に上昇していた。次に、TARC、MMP3、PCT が FPIES の疾患特異的なマーカー
であるか、他疾患との鑑別に有用であるかを調べるために、FPIES 群と対照群（感染性胃腸炎・敗血症）で比較検討を行った。結果はいずれも FPIES 群で有意に高値だったが、ROC 解析により特に TARC と
MMP3 が有用であることがわかった。これらの結果を基に、FPIES の急性期の TARC、MMP3、PCTと次回(約 1 年後)の負荷試験結果(寛解の有無)との関連を調査したところ、次回負荷試験陽性群は陰性群よりも TARC は有意に高値で、MMP3 と PCT は統計学的有意差を認めないものの次回負荷試験陽性群の方が高値であった。今後、症例集積を継続し、長期予後についても検討を行う方針である。FPIESの診断や予後予測に有用なバイオマーカーの確立により、診療の向上が期待される。

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公益財団法人ニッポンハム食の未来財団
2022 年度研究助成事業 個人研究助成 成果報告要旨

研究課題名【演題番号 14】
LGG 乳酸菌を併用して行う経口免疫療法の有効性を検証する研究

フリガナ

ミウラ

代表者名

三浦

ヨウコ

陽子

所属機関（機関名） 独立行政法人 国立病院機構 相模原病院（役職名） 医師本助成金による発表
第 59 回
論文，学会発表

日本小児アレルギー学会学術大会

APAPARI2022 合同開催

研究結果要約（目的)症状誘発閾値が低い重症なピーナッツ・鶏卵・小麦アレルギー児に対し、乳酸菌を併用した少量を目標とした経口免疫療法(OIT)の効果を検証した。
（方法）少量 OIT に乳酸菌を併用し(介入群)、12 ヶ月後に 2 週間除去後の中等量の食物経口負荷試験を実施し、中等量耐性獲得の有無を乳酸菌併用なしの OIT(対照群)と比較した。介入群で、開始時、1 ヶ月後、12 ヶ月後の腸内細菌叢の変化を測定した。
（結果）中等量を耐性獲得したのは、ピーナッツ OIT で介入群 21%(4/19) vs 対照群 11%(2/19)、鶏卵
OIT で 0%(0/18)vs 6%(1/16)、小麦 OIT で 0%(0/12) vs 0%(0/11)であり有意差は認めなかった。ピーナッツ OIT では、Lactobacillus 属は開始時と比較して 1 ヶ月後と 12 ヶ月後に増加した（p = 0.03、0.08)。また、Lactobacillus 属と酪酸産生菌の Subdoligranulum 属は、中等量耐性獲得群の方が未獲得群よりも、開始時と比較して 12 ヶ月後に有意に定着した（p = 0.01、0.02)。
（結語）ピーナッツの乳酸菌併用 OIT では、アレルギー反応抑制反応が誘導される可能性が示唆された。OIT の有効性に関しては、今後の症例集積後の検証が望まれる。

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公益財団法人ニッポンハム食の未来財団
2022 年度研究助成事業 個人研究助成 成果報告要旨

研究課題名【演題番号 15】低アレルゲン化小麦の交差反応を利用した安全性の高い小麦アレルギーの予防法と治療法の開発

フリガナ

ヨコオオジ

代表者名

横大路

トモハル

智治

所属機関（機関名） 広島大学大学院医系科学研究科（薬）（役職名） 准教授

本助成金による発表
論文，学会発表（発表論文）
Yamada Y, Yokooji T, Kunimoto K, Inoguchi K, Ogino R, Taogoshi T, Morita
E, Matsuo H. Hypoallergenic Wheat Line (1BS-18H) Lacking ω5-Gliadin Induces Oral Tolerance to Wheat Gluten Proteins in a Rat Model of Wheat Allergy. Foods. 2022;11(15):2181.
（学会発表）
猪口紘生，山田行徳，國本恭平，横大路智治，荻野龍平，垰越崇範，森田栄伸，松尾裕彰．小麦アレルギーラットモデルを用いた低アレルゲン化小麦による経口免疫寛容誘導の解析，日本薬学会・日本薬剤師会・日本病院薬剤師会第 61 回 中国
四国支部学術大会，2022 年 11 月

研究結果要約
早期の食物摂取は免疫寛容を誘導し，食物アレルギーの発症を予防する。一方，積極的な食物摂取は感作を誘導し，食物アレルギーの発症リスクを高める可能性もある。これまでに我々は，小麦アレルギ
ーの原因抗原であるω5-グリアジンを欠失した低アレルゲン化ホクシン小麦（1BS-18H）の作出に成功
し，1BS-18H のω5-グリアジンに対する感作能が市販の小麦よりも低いことをラットモデルで明らかにしている。本研究では，1BS-18H グルテンの経口投与で市販の小麦グルテンやω5-グリアジンに対する免疫寛容が誘導できるのかをラットモデルで解析し，小麦アレルギーの発症予防における 1BS18H の有用性を評価した。
グルテンやω5-グリアジンの感作前にホクシンや 1BS-18H 由来のグルテンを経口投与した群では，溶媒のみを投与した群よりも各特異 IgE 抗体価が低かった。さらに，溶媒投与群に各抗原を静脈内負荷した群では直腸温の低下が認められたが，ホクシンや 1BS-18H グルテン投与群では抗原負荷による直腸温の低下が認められなかった。以上の結果は，1BS-18H の摂取が市販の小麦よりも安全に小麦アレ
ルギーの発症を予防することができる可能性を示唆するものである。今後，ヒト臨床研究で 1BS-18Hの安全性と経口免疫寛容誘導能を解明することで 1BS-18H を用いた小麦アレルギーの発症予防・減感
作療法の開発に繋げたい。

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公益財団法人ニッポンハム食の未来財団
2022 年度研究助成事業 個人研究助成 成果報告要旨

研究課題名【演題番号 16】
Food protein induced enterocolitis syndrome 診断における血清 TARC 値の有用性に関する研究

フリガナ

ハマノ

代表者名

濵野

ショウ
翔

所属機関（機関名） 杏林大学医学部小児科学教室（役職名） 任期助教

本助成金による発表
2023 年日本小児アレルギー学会（予定）
論文，学会発表

研究結果要約
食物蛋白誘発胃腸症（Food protein induced enterocolitis syndrome：FPIES）は原因食物摂取後に数時間してから嘔吐や活気不良を呈する疾患であり、近年国内外で報告数が急増している。FPIES は症状が非特異的であり、診断に有用なバイオマーカーがないため、その診断は難渋し、他疾患鑑別のために過剰な検査がなされることも多い。本研究は FPIES 診断のためのバイオマーカーを探索することを目的とした。方法は食物経口負荷試験で診断された FPIES 群と感染性胃腸炎や腸重積症といった疾患
により嘔吐を呈した非 FPIES 群の嘔吐出現前後のサイトカイン推移を比較検討した。結果は FPIES 群
12 例（月齢中央値 16 か月）、非 FPIES 群 12 例（月齢中央値 25 か月）であり、非 FPIES 群は感染性胃腸炎 7 例（ノロウイルス 6 例、アデノウイルス 1 例）、腸重積症 7 例であった（一部重複例あり）。嘔吐 4 時間後では IL-8(p=0.0029)、TNF-α(p=0.03)が FPIES 群で高く、嘔吐 24 時間後ではTARC(p<0.0001)が FPIES 群で高値であった。またアトピー性皮膚炎患者で TARC と同様に上昇する
MDC は FPIES では上昇しなかった。この結果より、嘔吐 4 時間後は IL-8 が、24 時間後は TARC がFPIES の診断バイオマーカーになると考えられる。

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2022年度研究助成事業

共同研究助成〈口頭成果報告〉

要旨
研究結果要約
研究目的
研究計画及び研究手法
結果と考察
今後の研究活動について
参考文献

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唾液の次世代プロテオーム解析による、非侵襲的な食物蛋白誘発胃腸炎の診断・症状誘発予測マーカーの開発（2022）

研究課題名

唾液の次世代プロテオーム解析による、非侵襲的な食物蛋白誘発胃腸炎の診断・症状誘発予測マーカーの開発

フリガナ

イノウエ

代表者名

井上

ユウザブロウ祐三朗

所属機関（機関名）千葉大学大学院医学研究院（役職名）特任准教授
氏

共同研究者

名（フリガナ）

総合医科学

所属機関・役職名

役割分担

東海大学医学部
総合診療学系 小児科学 臨床検体収集
教授
かずさＤＮＡ研究所
ゲノム事業推進部
プロテオーム解析
ユウスケ）
ユニットリーダー

山田 佳之(ヤマダ ヨシユキ)
川島 祐介
（カワシマ

本 助 成金 によ る 発なし
表論文，学会発表

研究結果要約
食物蛋白誘発胃腸炎( FPIES: Food protein‐induced enterocolitis syndrome)は、食物アレルゲン摂取後に嘔吐・下痢・下血などの消化器症状を来たす非 IgE 依存性食物アレルギーの一つである。FPIESの診断や耐性獲得の確認には、食物経口負荷試験(OFC)が有用であるが、IgE 依存性食物アレルギーと異なり、症状誘発を予測可能なバイオマーカーがないため、時に誘発症状が重篤となることが問題である。非侵襲的に評価可能であり、診断や症状誘発予測に有用なバイオマーカーが確立されれば、より安
全かつ簡便な診断・評価が可能となることが期待される。
そこで本研究では、唾液の次世代プロテオーム解析により、非侵襲的な FPIES の診断・症状誘発予測マーカーを確立することを目的とし、卵黄 FPIES 患者を対象とした OFC において採取された唾液および血液の次世代プロテオーム解析により、FPIES の診断・症状誘発予測マーカーとなりうるタンパク質の同定を目指している。
2023 年 8 月末までに、OFC 陽性例
採取症例

6 例（血液採取症例

3 例を含む）と OFC 陰性例

9 例（血液5 例を含む）より臨床検体が採取され、プロテオーム解析に十分な検体数に達したため、2023

年 9 月より解析を開始する予定である。
(2024 年 3 月末まで計画延長課題のため途中状況として記載 )2222

唾液の次世代プロテオーム解析による、非侵襲的な食物蛋白誘発胃腸炎の診断・症状誘発予測マーカーの開発（2022）

研究目的

ため、EY-FPIES の病態を解明し、その予防や早食物蛋白誘発胃腸炎( FPIES: Food protein‐

期の寛解誘導へのアプローチを検討することはinduced enterocolitis syndrome)は、食物アレル重要である。

ゲン摂取後に嘔吐・下痢・下血などの消化器症状

そこで本研究では、唾液の次世代プロテオームを来たす非 IgE 依存性食物アレルギーの一つで解析により、非侵襲的な FPIES の診断・症状誘ある。FPIES の多くは、原因食物に対する特異的発予測マーカーを確立することを目的とし、卵黄IgE 抗体が陰性であるため、抗原特異的リンパ球

FPIES 患者を対象とした OFC において採取さ刺激試験や便粘液好酸球検査などが、診断補助目れた唾液および血液の次世代プロテオーム解析

的に施行されるが、その特異性は高くない。また、により、FPIES の診断・症状誘発予測マーカーと内視鏡検査・病理検査は侵襲的であり、専門施設

なりうるタンパク質の同定を目指す。

以外で施行することは困難である。FPIES の診断や耐性獲得の確認には、食物経口負荷試験

研究計画及び研究手法(OFC)が有用であるが、IgE 依存性食物アレルギ＜研究対象者＞

ーと異なり、症状誘発を予測可能なバイオマーカ

千葉大学医学部附属病院または共同研究機関

ーがないため、時に誘発症状が重篤となることがにおいて、下記選択基準を満たし、除外基準に該問題である。非侵襲的に評価可能であり、診断や当しない、診療上必要な卵黄 OFC を施行する予症状誘発予測に有用なバイオマーカーが確立さ定の患者に対して、承認の得られた同意説明文書

れれば、より安全かつ簡便な診断・評価が可能とを保護者に渡し、文書および口頭による十分な説なることが期待される。

明を行い、十分理解を得たうえで自由意志に基づ

近年、乳幼児における卵黄による FPIES(EY-

く文書による同意を得た。

FPIES)の報告が増加している。食物アレルギー選択基準の発症予防の観点から、授乳・離乳の支援ガイド

以下の基準にすべて該当する患者(2019 年改訂版)では、生後 5-6 か月から固ゆで卵

1. 同意取得時に 6 か月以上 6 歳未満の患者

黄の摂取が勧められている一方で、少数であって2. 病歴あるいは過去の加熱卵黄を用いた OFC

も加熱卵黄摂取で重篤な誘発症状を認める EY-から卵黄 FPIES と診断され、卵黄の完全除

FPIES 患者の増加は、乳児期における「安全な卵去を継続している患者
3. 卵黄 FPIES 診断時の卵黄に対する特異的

黄摂取の開始」に課題を投げかけている。
EY-FPIES が増加している原因は不明であり、IgE 抗体が、全て Class 2 以下である患者

病態解析はあまりされていない。しかし、卵黄

4. 保護者から本研究参加に対するインフォー

FPIES は、牛乳 FPIES と比較して罹病期間が高ムドコンセントを得た患者
5. 保護者が医師・看護師などとの意思疎通がいため、除去による QOL 低下がより問題となる

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23

唾液の次世代プロテオーム解析による、非侵襲的な食物蛋白誘発胃腸炎の診断・症状誘発予測マーカーの開発（2022）

点で、全血 0.5ml を採取（逆流採血）し、血清を可能である患者-30℃で凍結保存する。

除外基準
以下の基準のいずれかに該当する患者● 卵黄摂取 1 時間後

1. アトピー性皮膚炎・乳幼児喘息の合併を認● 卵黄摂取 2.5 時間後● 可能であれば、症状誘発時

める患者
2. 心疾患、肝疾患、腎疾患などの、アレルギー● 末梢静脈ルートを留置せず卵黄 OFC を施

疾患以外の基礎疾患の既往歴があり、現在行したが、症状誘発への対応のために末梢治療中の患者

静脈ルートを確保する場合には、可能であ
れば、同時に全血 0.5ｍｌを採取する。

3. 卵黄 FPIES 診断時に、卵黄に対する特異的
IgE 抗体のいずれかが Class 3 以上(3.5
UA/mL 以上)、または測定されていない患＜プロテオーム解析＞
凍結保存された唾液および血清のプロテオー者

ム解析は、共同研究機関のかずさ DNA 研究所に

4. その他，医師が不適当と判断した患者測定を依頼し解析を行う。最新鋭のデータ非依存＜卵黄 OFC・臨床検体採取＞
卵黄 OFC（5ｇの加熱卵黄性解析（DIA）ベースの質量分析計(Q-Exactive
HF-X, Thermo Fisher Scientific 社あるいは Or-

単回摂取）前後にbitrap Exploris 480 MS, Thermo Fisher Scien-

おいて、下記の臨床検体を採取した。
唾液採取

tific 社)を使用し、高深度プロテオーム解析をお以下の時点で、自然分泌唾液 1mL をシリンジ

こなう。得られたタンパク定量値は、Perseus ソに採取し、ろ紙に滴下後乾燥（あるいは滅菌チュ

フトウェア（MaxQuant 社）を用いてデータ処理、ーブに保管）させ、-30℃で凍結保存する。

統計解析を行い、発現変動タンパクの同定や機能● 卵黄 OFC 開始 30 分前解析を行う。また、バイオマーカー候補タンパク● 卵黄摂取 1〜1.5 時間後測定の検証実験は ELISA 法を用いる。測定され● 卵黄摂取 2.5〜3 時間後（すでに症状誘発をたタンパク濃度については、JMP15 ソフトウェアを用いて多重比較検定を行う（p<0.05 を有意認める場合は省略）
食事摂取から 30 分以上空けてから唾液採取をとする）。また、ロジスティック回帰分析によるおこなう。また、唾液採取 5 分前に、水あるいはROC 曲線から、診断の有用性についても検討を

白湯を適量摂取あるいは「うがい」をおこない、行う。

口腔内をできるだけ洗浄する。
結果と考察及び今後の研究活動について

血液採取

研究代表者である井上が、2022 年 4 月に千葉

末梢静脈ルートを留置した場合には、以下の時大に異動したため、異動後に研究計画倫理審査を
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唾液の次世代プロテオーム解析による、非侵襲的な食物蛋白誘発胃腸炎の診断・症状誘発予測マーカーの開発（2022）

9. 東千葉メディカルセンター開始した。コロナ禍のため倫理審査が遅れ、7 月

小児科の倫理審査委員会の承認が得られた。その後に共新型コロナ第 7 波、第 8 波では、小児のコロナ

同研究施設の実施承諾が得られ、研究開始は2022 年 9 月からとなった。

感染者が多かったため、診療制限のため卵黄FPIES の負荷試験の施行が困難であったが、

なお、以下の共同研究施設において、臨床検体

2022 年 12 月頃より、臨床検体収集が可能となっを採取している。
1. 千葉大学医学部附属病院

2. 東海大学医学部総合診療学系
3. 千葉県こども病院
4. 亀田総合病院

た。

小児科

2023 年 8 月末までに、下記の臨床検体が採取

小児科学

され、プロテオーム解析に十分な検体数に達した

アレルギー・膠原病科ため、2023 年 9 月より、プロテオーム解析を開小児科

5. 慶應義塾大学病院始する予定である。

小児科

6. 神奈川県警友会けいゆう病院
7. 群馬県立小児医療センター

1. OFC 陽性例 6 例（血液採取症例 3 例をむ）

小児科

2. OFC 陰性例 9 例（血液採取症例 5 例を含アレルギー・む）。

リウマチ科
8. 佐久医療センター

小児科

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食物アレルギー児におけるレジリエンス尺度の開発（2022）

研究課題名

食物アレルギー児におけるレジリエンス尺度の開発

フリガナ

イマイ

代表者名

今井

タカノリ
孝成

所属機関（機関名）昭和大学（役職名）教授氏

医学部小児科学講座
所属機関・役職名

名（フリガナ）

役割分担

清水 美恵
岐阜協立大学看護学部
質問票作成・解析(シミズ ヨシエ)
准教授
相良 順子
聖徳大学教育学部児童学科
質問票作成・解析助言(サガラ ジュンコ)
教授
1.発表論文
清水美恵,今井孝成,松本勉,野々村和男,神谷太郎,岡田祐樹,本多愛子,思春期アレ
ル ギ ー 児 の レ ジ リ エ ン ス 尺 度 開 発 , 日 本 小 児 ア レ ル ギ ー 学 会 誌 , 36, 499本 助 成金 によ る 発 507,2022.
表論文，学会発表 2.学会発表
清水美恵,今井孝成,松本勉,本多愛子,岡田祐樹,神谷太郎,野々村和男,思春期アレ
ルギー児レンジリエンス尺度の因子モデルの検討, 第回日本アレルギー学会学術大会, 2022.
研究結果要約
共同研究者

研究目的：アレルギー児と食物アレルギー児の保護者のレジリエンス尺度の開発と信頼性と妥当性を明らかにすること
方法

昭和大学病院および協力施設に受診中のアレルギー児（小学４年から中学３年）およびその保護者を対象にアンケート調査を行なった。アレルギー児調査は用紙調査、保護者調査は WEB 調査とした。それぞれ背景因子およびレジリエンスに関する質問項目に対して回答を求めた。両調査とも
昭和大学の倫理委員会の承認を得た。

結果

アレルギー児対象調査は有効回答 179 人を解析した。対象の平均年齢は 11.6 歳(SD1.66)、男児

60.9%であった。アレルギー児レジリエンス 28 項目を対象に探索的因子分析(最尤法、プロマック
ス回転)を行った結果、4 因子 15 項目（問題解決志向、探求志向、他者とのつながり、ネガティブ
感情の共有）が構成された。食物アレルギー児の保護者調査は 359 人を解析した。平均年齢 40 歳
（SD5.6 歳）、母親が 87.5%であった。アレルギー児の保護者レジリエンス 46 項目を対象に探索的因子分析(最尤法、プロマックス回転)を行った結果、5 因子 20 項目が構成された(問題解決志向、看護師の支え、他者と感情の共有、家族の支え、医師の支え)が構成された。両尺度も確認的因子分析を行い、十分に適合していることを確認した。
考察

アレルギー児と食物アレルギー児の保護者のレジリエンス尺度を開発した。本項目を活用することで、レジリエンスの弱い患児や保護者への効率的なサポートが可能となる。

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食物アレルギー児におけるレジリエンス尺度の開発（2022）

研究目的

リスク管理が必要であり、保護者の負担や不安が研究目的：アレルギー児レジリエンス尺度の開発

とても大きい。こうしたなか児と同様に疾患に対と食物アレルギー児の保護者のレジリエンス

するレジリエンスの個人差は保護者自身のみな調査、その信頼性と妥当性を明らかにすることらず児の生活にも影響を与えうる。しかしこれまで食物アレルギー児の保護者を対象としたレジ

レジリエンスとは“困難な状況であるにもかかリエンス研究はない。

わらずうまく適応する過程・能力・結果”や“重以上のことから、食物アレルギーを含めたアレ

篤なストレス状況下で一時的には落ち込みながルギー児および食物アレルギー児の保護者のレらも、そこから立ち直っていく過程や結果であり、ジリエンスの個人差を精緻に捉えるために、レジ適応的な機能を維持しようとする、深刻な状況にリエンス尺度の開発が必要であり、意義深い。

対する個人の抵抗力などと定義され、病気や病気によるリスクを受けながらも健康を維持する概研究計画及び研究手法

念として注目されている。

Ａ．調査

これまでにレ ジリエンスの個人差を測定する

ア)調査１(アレルギー児のレジリエンス尺度の開

尺度がさまざま開発され(心臓病患者の BRS 尺

発)度)、その尺度に基づく疾患ごとのレジリエンス

１)研究デザイン：横断的観察研究

研究が行われてきた。しかし、食物アレルギーを

２)調査セッティング：昭和大学病院、まつもと小含むアレルギー疾患をもつ思春期児のレジリエ

児アレルギークリニック、済生会守山市民病院

ンス研究が非常に少なく、これはアレルギー疾患

小児科、なかむらこどもクリニック、なないろ

児固有のレジリエンスの個人差をとらえる尺度

こどもとアレルギーのクリニック、旗の台アレが存在しない点が原因の一つである。アレルギー

ルギー・こどもクリニック、すずか小児科・皮疾患を有する児のレジリエンス尺度を評価する

膚科クリニック、遊座医院

先行研究としては、慢性疾患児のレジリエンス尺

３)調査対象者：

度を用いて、アトピー性皮膚炎をもつ児童のレジ(1)アレルギー専門医に診断されたアレルギー

リエンスと攻撃行動との関連が検討された。しか疾患(食物アレルギー、気管支喘息、アトピー

し、この尺度は、気管支喘息、I 型糖尿病、ネフ性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、アレルギー性

ローゼ症候群児を対象として作成されているた結膜炎のいずれか)を有する

め、アトピー性皮膚炎児のレジリエンス定義に合(2)小学４年生から中学３年生

致していない可能性がある。

(3)調査依頼時点でアレルギー疾患に関して継またアレルギー疾患の中でも特に食物アレル

続受診しているギーは日々の食生活の管理とアナフィラキシー

４)調査対象除外基準：

2727

食物アレルギー児におけるレジリエンス尺度の開発（2022）(1)精神運動発達遅滞等があり設問の回答が困疾患(食物アレルギー、気管支喘息、アトピー

難と判断される対象

性皮膚炎、アレルギー性鼻炎、アレルギー性(2)医師が調査に不適格と判断する対象

結膜炎のいずれか)を有する(2)小学４年生から中学３年生

５)調査方法：外来受診時に調査票を手渡し、家庭(3)調査依頼時点でアレルギー疾患に関して継等で回答し郵送返却してもらう。
▶︎調査項目続受診している(1)属性(年齢、学年、性別、疾患名、疾患の重症

４)調査対象除外基準：(1)精神運動発達遅滞等があり設問の回答が困度(重症度はいずれも関連ガイドラインの指標に基づく))尚、疾患名、疾患の重症度に対難と判断される対象(2)医師が調査に不適格と判断する対象

しては、保護者に回答を求める。
(2)レジリエンス尺度

レジリエンスの構成

５)調査方法：外来受診時に調査票を手渡し、家庭要素である、「よい学校環境」、「自己統制、等で回答し郵送返却してもらう。

「計画性」、「大人とのよい関係」、「個人ない▶︎調査項目要素(内的強さと問題解決スキル)」、「環境要(1)属性(年齢、学年、性別、疾患名、疾患の重症素としての外的サポート」に関して、自尊感度(重症度はいずれも関連ガイドラインの指情尺度(眞榮城・菅原・酒井・菅原, 2007)、学標に基づく))尚、疾患名、疾患の重症度に対校生活享受感尺度(古市・玉木, 1994)、精神しては、保護者に回答を求める。
(2)調査１で抽出されたレジリエンス尺度(4 因的健康を測定する尺度(岡安・由地・高山,
1998)を用いて調査する。

子 15 項目)(3)ストレス尺度として、a.学校生活享受感尺度
から 10 項目、b.児童用メンタルヘルスチェイ)調査２(アレルギー児のレジリエンス尺度の妥ックリストから 4 因子 12 項目を抽出して使当性の検証とストレス反応)
１)研究デザイン：横断的観察研究用した。

２)調査セッティング：昭和大学病院、まつもと小児アレルギークリニック、済生会守山市民病院

ウ)調査３(食物アレルギー児の保護者のレジリエ

小児科、なかむらこどもクリニック、なないろ

ンス調査)

こどもとアレルギーのクリニック、旗の台アレ

１)研究デザイン：疫学研究

ルギー・こどもクリニック、すずか小児科・皮２)調査セッティング：昭和大学病院

膚科クリニック、遊座医院

３)調査対象者：

３)調査対象者：

アレルギー専門医に診断された食物アレルギ(1)アレルギー専門医に診断されたアレルギーー児の保護者2828

食物アレルギー児におけるレジリエンス尺度の開発（2022）

答 179 人を解析対象とした。対象の平均年齢は

４)調査対象除外基準：

11.6 歳(SD1.66)、男児 60.9%であった。アレルギ

医師が調査に不適格と判断する対象
５)調査方法：WEB 調査。外来受診時に調査にア

ー疾患は、アトピー性皮膚炎 9 名(5.0％)、食物

クセスできる QR コードを示し、家庭等で回答

アレルギー18 名 (10.1％)、気管支喘息 65 名してもらう。

(36.3％)、アトピー性皮膚炎と食物アレルギー16▶︎調査項目名(8.9％)、アトピー性皮膚炎と気管支喘息 22 名

(1)属性(年齢、性別、学歴、同居家族、子どもの(12.3％)、食物アレルギーと気管支喘息 16 名

数とアレルギー疾患の有無、食物アレルギー(8.9％)、アトピー性皮膚炎と食物アレルギーと気やアナフィラキシーに関する理解度や負担

管支喘息 33 名(19.7％)であった。
アレルギー児レジリエンス 28 項目の天井効果

度、不安度)(2)レジリエンス尺度として、a.育児関連レジリと床効果を確認し、7 項目に天井効果を認めたた

エンス、b.ストレス反応、c.保護者の重要なめ分析から除外した。21 項目を対象に探索的因

他者との関係、d.保護者のこどもに対する将子分析(最尤法、プロマックス回転)を行った結果、

来指向性を調査する。それぞれ既存の尺度か

4 因子 15 項目（問題解決志向、探求志向、他者ら本調査に向けて抽出等をして作成した。

とのつながり、ネガティブ感情の共有）が構成された(Table 1)。続いて、確認的因子分析を行い、適合度指標はχ2 ＝117.88、df＝84、GFI＝.92、Ｂ．解析
解 析 に は SPSS Ver. 22.0(IBM) と Amos

AGFI＝.89、CFI＝.95、RMSEA＝.05、AIC＝Ver.22.0(IBM)を用いた。

189.88 であり、データは十分に適合しているとレジリエンス尺度の記述統計を算出し、因子解いえた。 信頼性の内的整合性は、α係数算出と析を行う。抽出された因子は Cronbach のα係数

I-T 相関分析を行い確認した。第 3 因子のα係数を算出し、下位尺度の相関係数を算出する。各尺(α ＝.65)と第 4 因子のα係数(α＝.65)の値が低度の記述統計(平均，標準偏差，α係数)を算出す

いが、項目数の少なさを考慮すると許容できる範る。調査２においては、アレルギー児レジリエン

囲であり、 I-T 相関の値からも十分な信頼性がス尺度と各尺度との相関係数を算出し、共分散構確保された。 構成概念妥当性については、外的造分析を用いてモデルの適合度を確認する。

な側面の証拠として「自尊感情」「コーピング方
略」「小学生用レジリエンス」を用いて、アレルギ

結果と考察

ー児レジリエンス尺度との相関関係を検討した

ア)調査１(アレルギー児のレジリエンス尺度の開(Table 2)。結果、概ね中程度の相関が得られた。

発)

一方、アレルギー児レジリエンス尺度の「ネガテ

結果：回収は 183 人(回収率 29.5%)、うち有効回

ィブ感情の共有」と「全体的自己価値観」、
「俯瞰

29
29

食物アレルギー児におけるレジリエンス尺度の開発（2022）

力」との間に有意な相関が示されなかった。これ対する評価に左右されるという要素はない。そのは、ネガティブ感情の共有は、アレルギーによるため「ネガティブ感情の共有」と「全体的自己価

ネガティブな感情を他者と共有したいというこ

値観」「俯瞰力」との間に有意な関連がみられなとを示すものであり、ネガティブ感情の共有には、かったと考えられる。本研究は概ね予測と一致し相手の心情や状況を深く洞察することや自己にており、本尺度の構成概念妥当性が確保された。

3030

食物アレルギー児におけるレジリエンス尺度の開発（2022）

指標 は、GFI＝0.94、 AGFI＝0.89、 CFI＝0.92、イ)調査２(思春期アレルギー児のレジリエンスモ

RMSEA＝0.09 であり、十分な値といえなかった。

デルの検討)
結果：237 人を解析した(回収率 38.2%)。平均年

モデルの修正では、相関係数 r＞0.40 を基準に問齢 11 歳、男子 61.5%であった。アレルギー疾患

題解決志向と無力感（e1 と e8）、探究志向とネガ

は食物アレルギーが 72%、気管支喘息が 63%、

ティブ感情の共有（e2 と e3）の誤差変数間に共アトピー性皮膚炎が 51%罹患していた。このうち分散を仮定し、さらにネガティブ感情の共有と自それぞれ重症が 7.8%、3.4%、2.5%であった。

然体志向との間の相関係数は r＝0.32 であったが、調査１で作成したアレルギー時のレジリエン

両者は人に伝えたい傾向という点で共通しておス尺度を用いたレジリエンスモデルと、学校生活

り、ネガティブ感情の共有と自然体志向（e3 と享受感尺度および児童用メンタルヘルスチェッe4）の誤差変数間に共分散を仮定し検証を行った。

クリストに関して共分散構造分析を行ったモデルの適合度は、GFI＝0.97、 AGFI＝0.94、(Table 3)。

CFI＝0.98、RMSEA＝0.05 であり、基準に満たしたモデルが示された(Figure 1)。

結果、レジリエンスモデルにおける各適合度のTable 3 各尺度の相関係数と平均値、標準偏差（n=233）

Figure 1 思春期アレルギー児レジリエンスモデルの共分散構造分析3131

食物アレルギー児におけるレジリエンス尺度の開発（2022）

ウ)調査３(食物アレルギー児の保護者のレジリエ

続いて、確認的因子分析を行い、適合度指標はンス尺度の開発)

χ2 ＝301.495、AIC=101.495、BIC=-287.945、

結果：359 人を解析した（回収率 89.8%）。平

TLI=0.9、RMSE=0.075 であり、データは十分に

均年齢 40 歳（SD5.6 歳）、母親が 87.5%であっ

適合しているといえた。信頼性の内的整合性は、た。最終学歴は大学・短大が 67.7%、高校・専門

α係数算出を行ったがいずれの因子も十分な信学校が 21.4%、大学院が 10.0%であった。正規職

頼性が確保された。

員が 51.0%、専業主婦が 22.0%、パート・アルバ

第 1 因子は総じて困ったときに対策を講じてイト・派遣職員が 19.8%であった。同居家族に配実行する項目が含まれていたので、「問題解決志偶者なしが 18 人であった。子供の数は、一人っ向」と命名した。第 2 因子は看護師の支援に関す子が 34.3%、二人兄弟が 49.0%、三人兄弟がる項目で構成されていたので、「看護師の支え」

16.4%、四人兄弟が 1 人であった。

と命名した。第 3 因子は第 3 者にイベントや感情

アレルギー児の保護者レジリエンス 46 項目のを聞いてもらいたい、話したい項目で構成されて天井効果と床効果を確認し、6 項目に天井効果をいたので「他者に共感を求める志向」と命名した。

認めたため分析から除外した。40 項目を対象に第 4 因子は家族の支援に関する項目で構成され探索的因子分析(最尤法、プロマックス回転)を行ていたので、「家族の支え」と命名した。第 5 因った。共通性が低い項目や因子負荷量が 0.4 以下、子は医師の支援に関する項目で構成されていた

また複数項目に渡って因子負荷量が 0.5 以上の項

ので医師の支え」と命名した。

目を削除した結果、5 因子 20 項目が構成された第１因子である問題解決志向の平均値を境に(Table 4)。

２群に分割して、対象の背景因子を比較した。結Table 4 因子分析（最尤法、プロマックス回転）

32
32

食物アレルギー児におけるレジリエンス尺度の開発（2022）

果年齢、性別、学歴職業等に群間差は認めなかっ

齢、性別、学歴職業等に群間差は認めなかった。

た。一方で食物アレルギーの病気のメカニズムに一方で食物アレルギーの病気のメカニズムに関関する知識の習熟度(p=<0.001))や除去に関するする知識の習熟度(p=0.0069))や除去に関する知知識の習熟度(p=0.001)、誘発症状に対応する力

識の習熟度(p=0.0042)、誘発症状に対応する力のの習熟度(p=0.01)は問題解決志向の高い群の方習熟度(p=0.0322)は医師の支えを要する群の方が有意に習熟度は高かった。一方で食物アレルギが有意に習熟度は高かった。一方で食物アレルギ

ーの食生活の準備の負担度や誤食への不安度、アーの食生活の準備の負担度や誤食への不安度、ア

ナフィラキシー誘発への不安度などは群間差をナフィラキシー誘発への不安度などは群間差を認めなかった。第 2 因子である看護師の支えの平認めなかった。

均値を境に２群に分割して、対象の背景因子を比今後の研究活動について較した。結果年齢が低いほうが看護師の支えを要する傾向を認めた(p=0.046)。これ以外に性別、学本研究によって、アレルギー児および食物アレ

歴、職業、子どもの数、食物アレルギーに関する

ルギー保護者のレジリエンス尺度を提示するこ

知識や習熟度、不安、負担感等には群間差を認めとができた。

なかった。第 3 因子である他者への共感を求める

今後は研究３では一部解析したが、レジリエン

ことの平均値を境に 2 群に分割して、対象の背景

スの個人差に影響を与える背景因子等を探索す

因子を比較した。結果年齢が低いほうが他者へのること。また前向きにこの尺度を利用することで、共感を求める傾向を認めた。また食生活の準備等

レジリエンスの弱いもしくは高い患児および保の 負 担 感 (p=0.02) 、 誤 食 さ せ る こ と の 不 安

護者を選別することができる。この個別性を把握(p=0.012) 、 ア ナ フ ィ ラ キ シ ー 誘 発 の 不 安した上で、医療従事者等が指導など介入していく(p=0.013)は、他者への共感を求める群のほうがことで、より充実したアレルギー診療および日々有意な高かった。第 4 因子である家族の支えの平の生活を送ることができるのかを評価すること

均値を境に 2 群に分割して、対象の背景因子を比が求められる。

較した。結果年齢の低いほうが家族の支えを要す
る傾向を認めた(p=0.009)。家族の理解が得られ

参考文献

ず負担でない方が、家族の支えを要する傾向を認

1) 溝口剛，兼武明理. アトピー性皮膚炎患児のめた(p=<0.001)。これ以外に性別、学歴、職業、

ディストレスについての研究―児童期から思こどもの数、食物アレルギーに関する知識や習熟

春期におけるディストレスの変化に着目して度、不安、負担感等には群間差を認めなかった。

―. 大分大学教育福祉科学部研究紀要

第 5 因子である医師の支えの平均値を境に 2 群

2015;37:75-88.
2) 岡田恵利，他．思春期に至った食物アレルギーに分割して、対象の背景因子を比較した。結果年

33
33

食物アレルギー児におけるレジリエンス尺度の開発（2022）

会誌. 2014;23(1):1-7.

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育児関連レジリエンス尺度. 日本小児看護学

34
34

食品の味覚成分を利用した食物アレルギー制御法（2022）

研究課題名

食品の味覚成分を利用した食物アレルギー制御法

フリガナ

カミヌマ

代表者名

神沼

オサム

修

所属機関（機関名）広島大学原爆放射線医科学研究所（役職名）教授
氏
共同研究者

名（フリガナ）

後藤 穣
（ゴトウ

ミノル）

疾患モデル解析研究分野

所属機関・役職名
日本医科大学耳鼻咽喉科
准教授

役割分担
臨床検体解析

Uda N, Ogata S, Yamasaki N, Miura S, Hosomi N, Mori A, Gotoh M, Kaminuma
本 助 成金 によ る 発 O. Re-evaluation of over-the-counter histamine H1-receptor antagonists based on
表論文，学会発表 their effects on murine models of allergen-induced nasal hyperresponsiveness. J
Pharmacol Sci, 150:275-278, 2022.

研究結果要約
食物が、味覚受容体を介して T 細胞に影響を与える可能性を示した独自成果を基盤として、T 細胞における各種味覚受容体の発現と、その機能的役割を明らかにすることを目指した。マウスナイーブ CD4
陽性 T 細胞から各種 T 細胞サブセットを分化誘導し、それらに発現する味覚受容体を RNA-seq で網羅的に解析し、定量 RT-PCR 法で検証した。ヒト T 細胞と異なり、マウス T 細胞には Taste 2 receptor
遺伝子（Tas2r）は殆ど発現していなかった。一方、各種 T 細胞が、Tas1r を異なるパターンで発現することを見いだした。また、T 細胞が重要な役割を果たすマウスアレルギー性鼻炎モデルに対する効果を検討したところ、TAS2R アンタゴニスト GIV3727 が、抗原誘発即時型鼻炎反応および鼻粘膜好酸球
浸潤を有意に抑制した。味覚受容体に作用することによって、アレルギー病態を制御できる可能性が示された。各種免疫細胞における味覚受容体の発現と機能の全容解明と、独自のゲノム編集技術や T 細胞
クローンマウス等を用いたさらなる解析を進めることによって、食物の味覚成分を介した T 細胞機能制
御が、アレルギーの予防・治療法開発の端緒となるか見極めると共に、食の健康機能に与える新たな付加価値の検証と、食品関連産業の活性化にも結びつけてゆきたい。

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35

食品の味覚成分を利用した食物アレルギー制御法（2022）の治療効果に、抗原特異的 T 細胞受容体（TCR）

研究目的
食物アレルギーは、近年の患者数増加に伴い、刺激を起点とする T 細胞応答だけでなく、TAS2R

通常給食を摂取できない児童が１割を越える等、を介した T 細胞機能への影響が関わる可能性が大きな社会問題となっている。食物アレルギーを

初めて明らかになった。

含めたアレルギー疾患の治療法は、基本的に対症

そこで本研究は、これら共同研究グループの独療法が主体となるが、特にアレルギー性鼻炎領域

自成果に立脚し、それぞれが専門とする臨床検体

では、経皮免疫療法（SCIT）および舌下免疫療法

解析法や、免疫学的および実験動物学的解析法を（SLIT）がいち早く実用化され、唯一本疾患の根活用して、T 細胞に発現する味覚受容体を介した治が目指せる治療法として注目されている。食物T 細胞機能制御法を樹立することにより、全く新アレルギー領域でも、経口免疫療法（OIT）が奏しいコンセプトの食物アレルギー治療法を開発功する事例が多く報告されている。しかしその実することを目的として実施した。

際は、専門医の指導の元、統一されたプロトコー
ルで原因抗原を経口摂取させ、症状出現時の救急対応に万全を期した上で慎重に取り組む必要がある等、いまだその普及に至るまでの障壁は大きい。また、免疫療法の治療効果に至る分子メカニ
ズムも充分に解明されておらず、このことが、食物アレルギー治療におけるブレイクスルーを阻む大きな問題となっている。
研究代表者と共同研究者は最近、スギ花粉症患者に対する SLIT の臨床研究を実施する中で、AIT の新たなメカニズムを示唆する研究成果を

図１．スギ花粉症患者 T 細胞に対する TAS2R アゴニス
トの作用
スギ花粉症患者 CD4 陽性 T 細胞を、TAS2R アゴニス
ト denatonium (DN)、phenylthiocarbamide（PTC）存在下で抗 CD3/CD28 抗体により刺激培養し、サイトカ
イン mRNA 発現を定量 RT-PCR で解析した。TAS2R
アゴニスト添加により、IL-4 発現が特異的に増強された。

得た。すなわち、本療法が効果を示した患者群と無効であった患者群間で、CD4 陽性 T 細胞に発現する遺伝子を網羅的に比較解析したところ、いくつかの味覚受容体 Taste 2 receptor（TAS2R）の発現が、両軍間で有意に異なることを見いだした。さらに、TAS2R の作用薬をヒト T 細胞に作研究計画及び研究手法

用させると、活性化に伴うサイトカイン発現量が１）T 細胞に発現する味覚受容体の解析

変化したことから、T 細胞に発現する味覚受容体

マウス脾臓よりナイーブ T 細胞を分取し、抗は機能的であることが示された（図１）1)。SLIT

CD3/CD28 抗体ビーズおよび各サブセット分化3636

食品の味覚成分を利用した食物アレルギー制御法（2022）に必要なサイトカイン／抗サイトカイン抗体類

しゃみ反応を計測し、即時型鼻炎反応と共培養することにより、各種 T 細胞サブセット（immediate nasal response：INR）を評価した。

を得た。ｍRNA を抽出して RNA-seq 解析に供

最終チャレンジの 6 時間後にヒスタミンを点鼻し、各種味覚受容体の発現を網羅的に解析した。

投与してくしゃみ反応を惹起し、鼻粘膜過敏性亢

発現が検出された受容体については、リアルタイ

進（nasal hyperresponsiveness：NHR）の程度

ム RT-PCR 法により、発現レベルを定量的に解を評価した。その直後に安楽死処置を行って鼻腔析して比較検討した。

洗浄を行い、鼻腔洗浄液（nasal lavage fluid：NALF）中の炎症細胞数を計数して、鼻粘膜炎症

２）マウスアレルギー性鼻炎モデルに対する味覚細胞浸潤を評価した。TAS2R アンタゴニスト

受容体作用薬の効果

GIV3727 は、1～4 回目の抗原チャレンジ実施 30

ヒト T 細胞における TAS2R の発現を見いだし

分前に 50 mg/kg を皮下投与した。

た共同研究グループの先行研究 1)に基づき、当初
TAS2R 作用薬の効果を in vitro で検証する実験結果と考察を計画した。しかし、結果的にマウス T 細胞にお１）結果ける TAS2R の発現が検出されなかったことから、

分化誘導した Th1、Th2、Th9、Th17 および研究計画を一部変更した。まず、T 細胞だけでな

iTreg 細胞において、各サブセットに特異的なサ

く、それ以外の各種免疫細胞も病態に関与するアイトカインまたは転写因子の遺伝子発現が確認

レルギー疾患モデルを用い、in vivo での検討をできた（図２）。それらいずれの遺伝子発現も低行うこととした。また、当初計画した食物アレル

レベルであったナイーブ T 細胞と、各 T 細胞サ

ギーモデルを用いた解析を行った場合、口腔内をブセットにおける味覚受容体の発現を、RNAseq

はじめとする消化管粘膜上の味覚受容体を介す法で網羅的に解析した。
検討した 35 種類の Tas2r

る影響と、免疫細胞細胞に対する影響の区別が困については、いずれのサブセットでも明らかな発難と判断した。そこで、申請者らが樹立した、消Naive化管以外が標的臓器となって発症する、マウスのIfng

アレルギー性鼻炎を用いた検討を行うこととし

Il4

た。

Il5

Th1

Th2

Th9

Th17 Treg

Il9

申請者らの先行研究 2)に従い、BALB/c マウス

Il10に卵白アルブミン（OVA）＋アジュバント（Alum）

Il17を腹腔内投与することにより感作した。最終感作

Foxp3の 2 週間後から、OVA を一日一回、5 日間連日点

図２．マウス T 細胞サブセットの分化
ナイーブ T 細胞および分化誘導した T 細胞サブセット
における特異的サイトカインおよび転写因子の遺伝子発現を比較解析した。

鼻チャレンジした。4 回目のチャレンジ直後にく37
37

食品の味覚成分を利用した食物アレルギー制御法（2022）

現は認められなかった。一方、Tas1r は各 T 細胞

れた TAS2R 遺伝子 が 1)、マ ウス T 細胞 のにおいて異なるレベルの発現がみられた。そこで、

RNAseq 解析では殆ど検出されなかった理由は各サブセットにおける TAS1R 遺伝子の発現を、明らかではないが、今回検出できなかった

リアルタイム RT-PCR 法で定量的に検証した。

TAS2R 類についても、定量 PCR 法等を用いた解

ナイーブおよび分化した各 T 細胞サブセットは、

析や、ヒト／マウス間の相違も含め、今後さらに

Tas1r を一定レベル発現していた。Tas1r3 の発詳細な解析が必要と考えられた。

現は、ナイーブ T 細胞に比較的高発現する一方、

一方 TAS1R は、各細胞において異なるレベル

いずれのサブセットでも分化に伴う発現低下がの遺伝子発現がみられ、特にナイーブ細胞は、ヘ認められた。Tas1r2 もサブセット間で異なる発テロダイマーとしてうま味受容体を構成する

現が確認できたが、その発現レベルは Tas1r1 お

TAS1R1 および TAS1R3 を比較的高発現していよび Tas1r3 と比較して著しく低かった。

た。本研究をさらに発展させ、T 細胞やその他の次に、申請者らが樹立した、T 細胞依存性に発免疫細胞に発現する味覚受容体の機能に関する症するマウスのアレルギー性鼻炎モデルを用い、研究も進める必要がある。

GIV3727 の効果を検討した。感作マウスに抗原

マウス TAS2R に対する GIV3727 の作用が検を点鼻チャレンジすると、INR および NHR の発討された報告は乏しいが、25μM の GIV3727 を症が確認された（図４）。GIV3727 の投与によっ作用させると、少なくとも 6 種類のヒト TAS2Rて、抗原誘発 INR は有意に抑制された一方、NHRが有意に阻害されることが報告されている 3)。今は影響を受けなかった。また抗原チャレンジに伴回、TAS2R がマウス T 細胞に殆ど発現していな

い、鼻粘膜への好酸球や好中球等の炎症細胞浸潤

かったにも関わらず、GIV3727 がマウスアレルが惹起された。GIV3727 は、好酸球浸潤を有意にギー性鼻炎モデルにおける一部の症状に有効性抑制し、好中球浸潤については抑制傾向を示した。

を示したことは興味深い。申請者らは、感作マウ
スにおける抗原誘発 NHR および鼻粘膜好酸球浸
潤反応に対し、IgE/マスト細胞の役割は比較的小２）考察
本助成研究の成果として、各種 T 細胞サブセッ

さい一方、抗原特異的 T 細胞が強く関与している

トが、複数の味覚受容体を異なるパターンで発現ことを明らかにしている 4)。従って、抗原誘発しており、その受容体に作用することによって、NHR に対する GIV3727 の抑制作用が認められアレルギー病態を制御できる可能性が示された。

なかったことは、マウス T 細胞に TAS2R が発現

TAS2R 遺伝子については、ヒトおよびマウスでしていなかった結果と合致すると共に、GIV3727

それぞれ 25 および 35 種類程度の存在が知られが好酸球の局所浸潤反応に直接影響を与えた可る。申請者の先行研究において、ヒト CD4 陽性

能性が示唆された。

T 細胞のマイクロアレイ解析で複数種が検出さ

一方 GIV3727 は、感作マウスにおける INR、

38
38

食品の味覚成分を利用した食物アレルギー制御法（2022）

すなわち抗原誘発くしゃみ反応を強く抑制した。

ってもたらされる成果は、アレルギー治療を目指

アレルギー性のくしゃみ反応は、細胞表面に結合す医薬品開発動向に新たな潮流を生むだけでな

した IgE が抗原によって架橋されてマスト細胞

く、食がもたらす健康機能にも新たな付加価値をの脱顆粒が惹起され、細胞外に放出されたヒスタ

与えうることから、将来的には、食習慣や食育、ミン等のケミカルメディエーターの作用により各種食品における味覚に基づく差別化や、食品産起こることが知られる。少なくともヒトマスト細業における商品開発動向等、人々の健康生活に胞で、TAS2R の発現が確認されていることから様々な形で影響を与えることが期待される。

5)、GIV3727 は、マスト細胞の脱顆粒反応に直接

参考文献

影響を与えた可能性が考えられた。
今後、これら好酸球やマスト細胞に加え、

1）Gotoh M, Kaminuma O, Nakaya A, Kata

GIV3727 の投与によって抑制傾向がみられた好yama K, Watanabe N, Saeki M, et al. In

中球等も含め、味覚受容体を介する細胞機能へのvolvement of taste receptors in the effect

影響やその細胞間の相違に加え、それがアレルギ

iveness of sublingual immunotherapy. All

ー病態に与える影響に関し、さらに詳細な解析を

ergol Int. 2018; 67: 421-424.
2）Kaminuma O, Nishimura T, Saeki M, Ya

進める必要がある。

masaki N, Ogata S, Fujita T, et al. L-ty
pe amino acid transporter 1 (LAT1)-speci

今後の研究活動について

fic inhibitor is effective against T cell-me

今後は、解析対象とする免疫細胞種も拡大し、

diated nasal hyperresponsiveness. Allergo

１細胞解析法等の最新技術も駆使することによl Int. 2020; 69: 455-458.

って、各種免疫細胞における味覚受容体の発現と3）Slack JP, Brockhoff A, Batram C, Menzel

機能の全容解明を目指した研究展開をはかりた

S, Sonnabend C, Born S, et al. Modulat

いと考えている。それらに加え、申請者が独自に

ion of bitter taste perception by a small

開発した新たなゲノム編集技術や 6)、抗原特異的

molecule hTAS2R antagonist. Curr Biol.

T 細胞由来のクローンマウス 等を活用した研7)

2010; 20: 1104-1109.

究を進展させることによって、食物の健康影響に

4）Nishimura T, Kaminuma O, Saeki M, Ki

おける新たなメカニズムを、確固たる科学的根拠

tamura N, Matsuoka K, Yonekawa H, etと共に実証してゆきたい。

al. Essential contribution of CD4+ T cell

その成果に基づき、特定の味覚受容体を介してs to antigen-induced nasal hyperresponsi

T 細胞他の免疫機能を制御することが、食物アレ

veness in experimental allergic rhinitis.

ルギーの予防・治療に結びつくか見極めることをPLoS One. 2016; 11: e0146686.
5) Ekoff M, Choi JH, James A, Dahlén B,

目指したいと考えている。それらの研究活動によNilsson G, Dahlén SE. Bitter taste recep

39
39

食品の味覚成分を利用した食物アレルギー制御法（2022）

tor (TAS2R) agonists inhibit IgE-depende

Res. 2021; 62: i53-i63.

nt mast cell activation. J Allergy Clin I

7) Kaminuma O, Katayama K, Inoue K, Sa

mmunol. 2014; 134: 475-478.

eki M, Nishimura T, Kitamura N, et al.

6) Miura K, Ogura A, Kobatake K, Honda

Hyper-reactive cloned mice generated by

H, Kaminuma O. Progress of genome edi

direct nuclear transfer of antigen-specificting technology and developmental biolog

CD4+ T cells. EMBO Rep. 2017; 18: 88

y useful for radiation research. J Radiat

5-893.

4040

アレルゲンコンポーネントを活用した乳児期の食物アレルゲン感作に関する研究（2022）

研究課題名

アレルゲンコンポーネントを活用した乳児期の食物アレルゲン感作に関する研究

フリガナ
サトウ サクラ代表者名
佐藤 さくら
所属機関（機関名）国立病院機構相模原病院 臨床研究センター アレルギー疾患研究部（役職名）部長氏 名（フリガナ）
所属機関・役職名
役割分担伊藤 嘉浩
国立研究開発法人理化学研究所
検体測定（イトウ ヨシヒロ）
主任研究員
高橋 亨平
国立病院機構相模原病院
アドバイザー（タカハシ キョウヘイ） 小児科 医師
症例登録
緒方 美佳
国立病院機構熊本医療センター
症例登録
（オガタ
ミカ）
小児科 副部長
共同研究者
小池 由美
長野県立こども病院
症例登録（コイケ ユミ）
アレルギー科 部長
谷口 裕章
甲南医療センター
症例登録（タニグチ ヒロアキ）
小児科 医長藤田 英寿
愛和病院 小児科
症例登録（フジタ ヒデトシ）
副院長
本 助 成金 によ る 発
表論文，学会発表
研究結果要約
乳幼児期の食物アレルギーでは、食物アレルゲンへの感作の程度や複数のアレルゲンへの感作パター
ン、発症時期、原因食物、症状誘発の閾値、重症度などの組み合わせにより、多様な臨床像を呈する。
本研究はアレルゲンコンポーネントを活用した潜在クラス分析により多様な乳幼児の食物アレルギーの臨床像を明らかにすることを目的とする。
食物アレルゲンへの感作を認める 4-8 ヵ月の乳児を対象に、食物アレルギーに関する臨床情報およびアレルゲン特異的 IgE 抗体検査（Drop Screen A-1、ImmunoCAP ISAC）を行い、集積したデータを用いて潜在クラス分析を行う。2022 年度は対象症例の保存血清を用い、Drop Screen A-1 にて 41 種類のアレルゲン特異的 IgE 抗体価を網羅的に測定した。
対象は 93 例（月齢中央値：6.7 ヵ月）で、90％に湿疹を認め、95%は 1 抗原以上の食物除去を指示されて、63%は１抗原以上の即時型食物アレルギーを認めた。食物アレルゲンの感作率は、卵白が 91 %、ミルクが 82%、小麦が 65%、大豆が 44%、ピーナッツが 41%の順であった。感作率は 1 歳 6 ヵ月時には、卵白が 95%、小麦が 71%、大豆が 61%、ピーナッツが 67%と上昇し、ミルクが 73%と低下した。
今年度の研究で、生後 6 ヵ月前後の乳児が鶏卵、牛乳、小麦への感作だけでなく、ピーナッツ感作を認め、1 歳 6 ヵ月では感作率は上昇することが明らかになった。今後、目標症例数を登録し、アレルゲ
ンコンポーネント特異的 IgE 抗体価の結果および臨床情報を用い、潜在クラス分析を行う予定である。

41
41

アレルゲンコンポーネントを活用した乳児期の食物アレルゲン感作に関する研究（2022）

研究目的

より異なるだけでなく、一人の患者でも原因食【研究背景】

物により異なる。これまで単一の食物抗原に関

1）食物アレルギーの有病率する自然歴は報告されているが、感作の程度、

食物アレルギーの有病率は増加傾向である。

感作パターン、原因食物の組み合わせなど臨床

本邦では乳幼児の 10%前後が食物アレルギーを像別の予後は明らかではない。

発症し、ここ 10 年程度で 3 歳児は約 2 倍、学童は約 1.7 倍に増加している 1。 医療・栄養・

4）アレルゲンコンポーネントへの感作と臨床像

教育など多分野で人的資源や金銭的資源を要す

近年、多くのアレルゲンコンポーネント（IgEるなど食物アレルギーは社会的な問題となって抗体結合能のあるタンパク質分子）に対する特いる。

異的 IgE 抗体が測定可能となった。診断有用性の高い特異的アレルゲンコンポーネント（鶏卵2）食物アレルギーの発症予防のオボムコイド、小麦のω5 グリアジン、ピー

乳幼児期の食物アレルギーでは、鶏卵やピーナッツの Ara h 2 など）への感作例は全身性のナッツの早期摂取による発症予防の可能性が示

症状誘発の可能性が高く、交差抗原性に関与し唆されている 2, 3。人工乳については、摂取時期ているアレルゲンコンポーネント

により牛乳アレルギーの発症を抑制する場合と（Pathogenesis-related protein (PR)-10、プロ

増加する場合が報告されている 4-6。しかしながフィリンなど）への感作は、軽微な症状のみのら、食物アレルゲンへの感作（特異的 IgE 抗体

可能性が高いことが報告されている 8。アレルゲ陽性）のみで発症しない場合や、発症する時

ンコンポーネントへの感作の程度は予後と関連期、重症度など症例により異なることから、発し、臨床像により経年的な変化が異なることも症予防のために介入すべき対象・時期・方法は報告されている 9-12。

現時点で確立されていない。
【研究目的】
3）多様な食物アレルギーの臨床像

アレルゲンコンポーネントを活用した潜在ク

乳幼児期の食物アレルギーでは、食物アレル

ラス分析により多様な乳幼児の食物アレルギー

ゲンへの感作の程度や複数のアレルゲンへの感の臨床像を明らかにすることを目的とする。

作パターン、発症時期、原因食物、症状誘発の閾値、重症度などの組み合わせにより、多様な研究計画及び研究手法

臨床像を呈する 7。また多くは加齢とともに耐性【研究デザイン】

獲得するが、耐性獲得のし易さや時期は患者に後ろ向きおよび前向きコホート研究（多施設共4242

アレルゲンコンポーネントを活用した乳児期の食物アレルゲン感作に関する研究（2022）

同研究）

性皮膚炎の有無・重症度、気管支喘息の有無等②血液検査
項目：血算、総 IgE、アレルゲン特異的 IgE、【研究方法】
本研究は、後ろ向きコホート研究（研究１）とアレルゲンコンポーネント特異的 IgE、TARC

前向きコホート研究（研究２）で構成される。

測定ポイント：生後 6±2 か月、12±2 か月、18±2 か月＜ 研 究 1＞

③即時型食物アレルギー※2 の有無
評価時期：生後 6±2 か月、12±2 か月、18±

対象

2 か月

研究対象患者のうち、選択基準をすべて満たし、かつ除外基準のいずれにも該当しない患者を対
※2

象とする。

即時型食物アレルギーの診断基準（1）原因食物に対する感作陽性（特異的 IgE 抗・選択基準

体価 0.1kU/ml 以上、SPT 陽性）、かつ①生後 4-8 か月にアレルギー疾患を疑われて当院（2）原因食物摂取によるアレルギー症状（問診を受診した患者②血液検査を行い 1 つ以上のアレルゲンにまたは食物経口負荷試験に基づく）

感作※1 を認めた患者＜特異的 IgE 抗体価の測定＞③残血清の「研究利用に同意し、血清が保存されている患者

保存されている血清検体を用いる。

・除外基準

・粗抗原の特異的 IgE 抗体価測定①研究責任者が研究対象者として不適当と判断

血清を理化学研究所に送付し、Drop Screen A1（日本ケミファ（株））を用いて 41 項目のアレ

した患者
※1

食物アレルゲン特異的 IgE 抗体価 0.1kU/ml

ルゲンについて測定する。主な測定項目はランパ

以上

ク、ミルク、小麦、ヤケヒョウヒダニ、スギなど。
・アレルゲンコンポーネントの特異的 IgE 抗研究・調査項目

体価測定
ImmunoCAP ISAC（サーモフィッシャーダイ＜調査項目＞

アグノスティックス社）にて 112 項目のアレルゲ

研究対象者について、下記の臨床情報を診療録より取得する。

ンコンポーネントについて測定する。測定項目は①背景因子

卵白（Gal d 1, 2, 3, 4, 5）、小麦（Tri a 14, Tri a19）、大豆（Gly m 4, 5, 6）、ピーナッツ（Ara h

性別、生年月日、栄養方法、家族歴、アトピー

4343アレルゲンコンポーネントを活用した乳児期の食物アレルゲン感作に関する研究（2022）

1, 2, 3, 6, 8, 9）など。

目標症例数
研究 1：250 例＜研究 2・3＞

研究 2・3：250 例(暫定値)対象

統計解析の方法

研究対象患者のうち、選択基準をすべて満たし、集積したデータを用いて潜在クラス分析を行

かつ除外基準のいずれにも該当しない患者を対い、症例のクラス分類を行う。「鶏卵アレルギー象とする。

で早期に寛解する」や「感作は認めるが、症状な・選択基準

く経過する」などの複数のクラスを同定し、各ク①生後 4-8 か月にアレルギー疾患を疑われて当院

ラスの特異的 IgE 抗体価や臨床的特徴についてを受診した患者分析を行う。ウォード法による階層クラスター分②血液検査を行い 1 つ以上のアレルゲンに析を行う。

感作※1 を認めた患者

潜在クラス分析において、必要な症例数を定め

・除外基準

る決められた方法はなく、検出力はクラスがどの①研究責任者が研究対象者として不適当と判断

程度分離されているかに大きく依存している。そ

した患者
※1

のため、事前の検出力分析は必ずしも必要ないと

食物アレルゲン特異的 IgE 抗体価 0.1kU/ml

考えられている。ただし、目安として最低でも以上

250 症例が解析の必要症例数として使用されることがあり、研究 1: 後方視的解析はこの症例数を目標とする。その解析結果を用い、研究 2: 前

研究・調査項目
研究１に準ずる

方視的研究で必要とされる症例の数を算出して調整する。また、同データを用いて、1 歳時点で【評価項目】のプロファイルを用いて症例がどのクラスター

主要評価項目：各クラスターの即時型食物アレルに所属するかを分類する精度について併せて検討を行う(研究 3)。

ギーの割合
副次評価項目：各クラスターの 6、12、18 か月のレルゲンコンポーネント IgE 抗体

結果と考察

価、各クラスターの食物アレルギ【結果】2022 年度は、主に研究１について実施した。

ーの原因食物、重症度、予後

研究２については、研究分担施設での研究実施許【統計的事項】

可をもらい、症例登録を開始した。

44
44

アレルゲンコンポーネントを活用した乳児期の食物アレルゲン感作に関する研究（2022）＜研究１＞であった（図３）。尚、アレルゲンコンポーネント

・患者背景

特異的 IgE 抗体価については、現在、ISAC にて

対象は 93 例で、月齢の中央値が 6.7 ヵ月、男

測定中である。

児が 63 例（68%）、すべての症例に喘鳴の既往はなく、湿疹を 84 例（90%）に認めた。1 抗原以上

・臨床経過の食物除去を指示されていたのは 88 例（95%）、

１歳６ヵ月時点で、喘鳴の既往を認めたのは 3

１抗原以上の即時型食物アレルギーを認めたの例（3%）、１抗原以上の即時型食物アレルギーはは 59 例（63%）であった（表１）。

67 例（72%）であった。その内訳は、鶏卵 37 例、即時型食物アレルギーの内訳は、鶏卵 29 例、

牛乳 31 例、小麦 18 例、大豆・魚 2 例、ピーナッ

牛乳 29 例、小麦 17 例、大豆 2 例、ピーナッツ・

ツ・エビ・イカ・バナナが各 1 例であった。

魚・エビ・バナナが各 1 例であった。
対象 93 例の保存血清を用い、Drop Screen A1 にて 41 種類のアレルゲン特異的 IgE 抗体価を網羅的に測定した（図１、２）。
全体的に吸入アレルゲンより食物関連アレルゲンへの感作率が高かった。感作率が 20%以上であったアレルゲンについて、感作率が高かったのは、粗抗原の食物アレルゲンでは、卵白が最も高く、次いでミルク、小麦、大豆、ピーナッツ、牛肉、ゴマ、鶏肉の順であった。吸入アレルゲンでは、
ハウスダスト、イヌ皮屑、ヤケヒョウヒダニの順
表１ 登録時の患者背景
症例数

93例

⽉齢（ ヵ⽉）6.7（ 5.7 – 7.8）

男児

63（ 68% )帝王切開

9（ 10% )喘鳴の既往

0（ 0% )

湿疹の合併

84（ 90% )１ 抗原以上の⾷物除去88（ 95% ）１ 抗原以上の即時型⾷物アレルギー59（ 63% )4545

アレルゲンコンポーネントを活用した乳児期の食物アレルゲン感作に関する研究（2022）

46
46

アレルゲンコンポーネントを活用した乳児期の食物アレルゲン感作に関する研究（2022）

・食物アレルゲン特異的 IgE 抗体価および感作

ント特異的 IgE 抗体価の結果と合わせて、評価す率の推移る必要がある。

感作率が上位 5 番目までの食物アレルゲンに本研究では、集積したデータを用いて潜在クラ

対する特異的 IgE 抗体価の推移を図 4A・B に示

ス分析を行い、複数のクラスを同定し、各クラス

す。登録時、12 ヵ月時、18 ヵ月時の特異的 IgEの特異的 IgE 抗体価や臨床的特徴について分析

抗体価（IU/mL）の中央値は、卵白では 8.7、8.0、を行う予定である。2022 年度は個人情報保護法

3.1、オボムコイドは 0.67、2.2、0.25、ミルクはの改訂に伴う国立病院機構内における臨床研究

0.63、0.12、0.82、小麦は 0.11、<0.1、<0.1、大の取り扱いが変更され、当院倫理委員会での審議

豆は<0.1、<0.1、0.15、ピーナッツは<0.1、<0.1、が大幅に遅れた。本研究においても、その影響に<0.1 であった。登録時、12 ヵ月時、18 ヵ月時のより研究開始が遅くなり、当初の研究スケジュー

感作率（%）については、卵白が 91、96、95、オルに遅れを生じた。また＜研究１＞の選択基準を

ボムコイドが 55、81、85、ミルクが 82、76、73、満たす症例が想定より少なかったため、＜研究２

小麦が 65、71、71、大豆が 44、67、61、ピーナ＞の前向きコホートを解析対象に組み入れ、最終

ッツが 41、63、67 であった。

的に目標症例数への到達を目指すこととした。このため現時点で主要評価項目についての評価は＜研究２・３＞

実施できていないが、2023 年度以降も症例登録

2023 年 3 月時点で登録症例は 21 例であった。

を継続し、研究を完遂する予定である。

当初の見込みより対象症例が少ないため、2024
年度は研究協力施設を増やし、症例登録を進める

今後の研究活動について予定である。

本研究により、乳児期の食物アレルゲンへの感
作状況が明らかになり、離乳食を早期に導入する【考察】のに最適な対象の感作パターンや、感作パターン

現時点までに、乳児期の食物アレルゲン、吸入から食物アレルギーの発症リスクの高い対象がアレルゲンへの感作状況が明らかになった。乳児

明らかになることで、発症予防法の開発に寄与し、期に多い鶏卵、牛乳、小麦のアレルゲンへの感作

感作パターン別の最適な治療介入方法を確立すだけでなく、ピーナッツ感作を約 40%に認めておる上で、貴重なデータとなると考えられる。研究り、食物アレルギー発症のリスクがある乳児では、で得られた成果を確認するために、今後、別のコ

これらの食物を離乳食に導入する際には注意が

ホート集団による解析が必要になる。

必要と考えられた。今後、アレルゲンコンポーネ47
47

アレルゲンコンポーネントを活用した乳児期の食物アレルゲン感作に関する研究（2022）

参考文献

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Hamada K, Sugiura S, Ito K. Early Discontinuation of Cow's Milk Protein Ingestion Is Associated with the Development48
48

新規アレルギー抑制分子

Ly6G によるマスト細胞の機能制御と創薬への応用（2022）

研究課題名

新規アレルギー抑制分子

フリガナ

スズキ

代表者名

鈴木

リョウ
亮

所属機関（機関名）金沢大学（役職名）教授
氏

共同研究者

Ly6G によるマスト細胞の機能制御と創薬への応用

医薬保健研究域

名（フリガナ）

薬学系

所属機関・役職名

役割分担

平嶋 尚英
名古屋市立大学医薬学総合 Ly6G 改変細胞・DDS 治療（ヒラシマ ナオヒデ） 研究院（薬学） 教授
の研究
中村 亮介
国立医薬品食品衛生研究所 EXiLE 法を用いたアレル（ナカムラ リョウスケ）医薬安全科学部・第３室長 ギー疾患転写制御機構解析

本 助 成金 によ る 発
表論文、学会発表

研究結果要約
アレルギー疾患(食物アレルギー等)は、世界的患者数の増加や新型コロナワクチン摂取に伴う副反応(アナフィラキシー等)など、重大かつ身近な問題として注目されている。アレルギー疾患は、多様な疾患症状を示すため、予防や根治が難しく対症療法が中心となっているのが現状である。そのため、アレ
ルギー(マスト細胞)応答を制御する新たなアレルギー制御因子の解明が期待されている。我々は、マスト細胞によるアレルギー応答の多様性の制御機構を追究する過程で、アレルゲンと IgE の親和性が浸潤細胞の種類に違いを生じさせ、アレルギー炎症を調節していることを明らかにした。本研究では、アレルギー応答制御における、マスト細胞と好中球の相互作用をはじめ、好中球に特異的に発現する蛋白質（Ly6G）の機能を明らかにすることを試みた。その結果、好中球に特異的に発現する Ly6G 蛋白質は、マスト細胞への結合能や分泌反応調節作用を有していることが明らかになった。更に、疾患モデルを用いた研究においても、Ly6G 蛋白質がアレルギー炎症を調節している可能性が示唆された。

49
49

新規アレルギー抑制分子

Ly6G によるマスト細胞の機能制御と創薬への応用（2022）

症状の調節が行われていると考えられている 1)。

研究目的
アレルギー疾患（食物アレルギー、アナフィラ

我々は、マスト細胞によるアレルギー応答の多キシーショック等）は、世界的患者数の増加や新様性の制御機構を追究する過程で、アレルギー疾型コロナワクチン摂取に伴う副反応（アナフィラ

患モデルを用いた研究から、アレルゲンと IgE のキシー等）など、これまで以上に重大かつ身近な親和性が浸潤細胞の種類に大きな違いを生じさ問題として注目されている。また、最近の国会答せ、アレルギー炎症を調節していることを明らか弁でもアレルギー疾患が取り上げられるなど、にした 2)。特に、高親和性アレルゲンによるマス

益々社会問題化しているのが現状である。アレル

ト細胞の活性化によって、アレルギー炎症を誘導

ギー疾患は、多様な疾患症状（発症部位、病態、した組織では、炎症組織に浸潤する好中球の数が

重症度、加齢変化等）を示すため、予防や根治が有意に増加しており、更に、マスト細胞と好中球

難しく、疾患の複雑化・慢性化、更には患者 QOL

が相互作用している様子が観察された。これまで、（quality of life）の低下を招くなど、解決すべき

自然免疫において重要な役割を有する好中球が、課題である。

アレルギー応答において、どの様な役割を担ってこの様なアレルギー疾患に対する予防や治療いるのかなど、好中球によるアレルギー応答の調については、疾患原因（アレルゲン）への曝露除節機構を追究してきた。その過程で、in vitro 共

去をはじめ、抗アレルギー薬や抗炎症薬など、医存培養系を用いた研究からも、脱顆粒したマスト

薬品による対症療法が中心である。また、根治療細胞と好中球が接着している様子が観察されて法として期待されているアレルゲン特異的免疫おり、これらの接着を介した相互作用によって、療法についても、長期に渡る治療期間の問題や治

アレルギー炎症の病態を調節している可能性が療にアレルゲンを摂取するため、危険を伴うのが示唆された。更に、マスト細胞と好中球の接着部

現状である。そのため、アレルギー（マスト細胞）

位では、好中球に特異的に発現する蛋白質 Ly6G

応答を調節する新たなアレルギー制御因子の解が 3)、マスト細胞と好中球の接着部位で移動して明が期待されている。

いることを見出した。本研究では、アレルギー応

様々なアレルギー疾患の発症には、マスト細胞

答制御における、マスト細胞と好中球の相互作用が重要な役割を担っており、アレルゲン（食物、をはじめ、好中球に特異的に発現する蛋白質

花粉、医薬品等）が IgE 受容体を活性化すると、

Ly6G の機能を明らかにすることを試みた。

ヒスタミンをはじめとする炎症性メディエータ
研究計画及び研究手法が分泌され、疾患が惹起される。その結果、アレ
ルギー炎症組織では、マスト細胞と様々な免疫細マスト細胞と好中球の相互作用及び両者の相胞が相互作用し、治癒や増悪などアレルギー疾患

互作用を介した好中球蛋白質 Ly6G の機能解析

50
50

新規アレルギー抑制分子

Ly6G によるマスト細胞の機能制御と創薬への応用（2022）を行うため、マスト細胞には骨髄由来マスト細胞

白質の機能を詳細に追究するため、Ly6G 以外のを用い、好中球には骨髄単離好中球を用いた。骨

Ly6 ファミリー蛋白質に関しても、各種組織から髄由来マスト細胞は、マウス骨髄細胞を採取し、遺伝子の取得と各種プラスミドの作製、及び各種

Interleukin-3 及び Stem cell factor 存在下で 1

リコンビナント蛋白質の作製・精製を行った。リ

か月間培養し、マスト細胞に分化したものを用いコンビナント蛋白質の発現及び精製の確認には、た。骨髄単離好中球は、骨髄細胞を採取し、精製電気泳動による CBB（Coomassie Brilliant Blue）

キットを用いたネガティブセレクション法によ

染色法やウエスタンブロッティング法を用いて、り単離した。分化・精製率の確認には、各種マー各種特異的抗体により行った。また、マスト細胞

カー蛋白質（骨髄由来マスト細胞：FcεRI、上の結合分子を同定する前段階の実験として、作CD117）及び（骨髄単離好中球：Ly6G）を用い製した各種リコンビナント蛋白質を用いて、マスて行った。これらの骨髄由来マスト細胞や骨髄単ト細胞上に Ly6G に対する結合分子が存在する

離好中球を用いて、マスト細胞と好中球の相互作のかなどについて、フローサイトメータを用いた用における好中球蛋白質 Ly6G によるアレルギ

結合実験を行った。マスト細胞を各種リコンビナ

ー応答調節機構を明らかにすることを試みた。そント蛋白質で処理後、マスト細胞上に結合していのため、マウス骨髄由来マスト細胞と骨髄単離好るリコンビナント Ly6G 蛋白質を抗 Ly6G 抗体や中球をマトリゲルコートしたガラスボトムディ

抗 His-tag 抗体を用い、フローサイトメータによッシュ上で培養する共存系を確立し、アレルゲンって検出した。更に、プルダウン法やファーウエによる特異的刺激応答に伴うマスト細胞と好中スタン法を用いて、マスト細胞に発現する Ly6G

球の接着を伴う相互作用、好中球蛋白質 Ly6G の結合分子について追究した。

培養上清中への遊離、及び近傍のマスト細胞への先に作製・精製したリコンビナント蛋白質や
Ly6G ペプチドを用いて、マスト細胞の各種炎症

移動について定量・定性的な解析を行った。
次に、Ly6G 及び Ly6 ファミリー蛋白質による性メディエータの分泌反応やシグナル伝達調節

アレルギー応答制御機構を追究するため、各種リ機構に及ぼす影響について追究した。分泌反応のコンビナント蛋白質の作製を行なった。リコンビ

解析には、マスト細胞を各種リコンビナント蛋白

ナント蛋白質は、研究目的や用途に応じて、大腸質や Ly6G ペプチド処理後、アレルゲンの刺激応

菌発現系（BL21（DE3）、ClearColi BL21（DE3）答に伴う、分泌顆粒内酵素（β-hexosaminidase）

等）やヒト細胞発現系（HEK 293 細胞等）を用の定量や各種炎症性サイトカイン（TNFα等）やいた。リコンビナント蛋白質の培養・精製条件のケモカイン（CCL2 等）について ELISA 法を用

最適化をはじめ、これらの発現系を用いてリコン

いて定量した。また Ly6G 蛋白質によるマスト細ビナント Ly6G 蛋白質を作製した。また Ly6G 蛋胞シグナル伝達調節機構については、各種シグナ

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51

新規アレルギー抑制分子

Ly6G によるマスト細胞の機能制御と創薬への応用（2022）

ル分子や転写調節因子の活性化状態について追そこで、両者の接着を介した相互作用を更に詳細究した。また、IgE 非依存的刺激によるアレルギに解析するため、マスト細胞のアレルゲン刺激応

ー応答への Ly6G 蛋白質の機能を明らかにする答に伴う好中球との相互作用についてライブイ

た め 、 IgE 非 依 存 的 刺 激 と し て 、 ATP 、

メージング法を用いて追究した。その結果、マス

Mastoparan、Compound48/80 を用い、刺激応答

ト細胞を活性化すると、マスト細胞の分泌反応にに伴う分泌顆粒内酵素（β-hexosaminidase）や伴い好中球の形態が球状から紡錘形に変化し、マ

各種炎症性サイトカイン（TNFα等）やケモカイ

スト細胞方向に遊走し、両者が接着し相互作用しン（CCL2 等）について mRNA 発現量の定量的ている様子が観察された（図 2）。そこで、好中球

PCR 及び ELISA 法を用いた定量解析を行った。

に特異的に発現する Ly6G 蛋白質を染色したと最後に、アレルギー疾患モデルを用いた解析を実施した。疾患モデルとして、マスト細胞依存的なモデルとして使用されるアレルギー疾患モデル（PCA: passive cutaneous anaphylaxis）を用いた。マウスの両耳にアレルゲン特異的 IgE を皮内投与により受動的に感作した。翌日、アレルゲンを投与し、アレルギーモデルを作製した。また、アレルギー炎症反応の測定には、Evans Blue 色
素を用いた血管透過性を指標に定量した。
図１ アレルギー炎症組織でのマスト細胞と好中球

結果と考察
我々は、これまでアレルギー応答の多様性の制
御機構について追究してきた。そして、アレルゲ
ンと IgE の親和性に着目した研究から、高親和性
アレルゲンによって誘導されたアレルギー炎症組織では、マスト細胞と好中球が相互作用することによって、アレルギー応答を調節している可能性を見出した（図 1）。また、マスト細胞と好中球の共存培養系を用いた実験から、アレルゲンによってマスト細胞を特異的に活性化するとマスト

図 2 マスト細胞の活性化による好中球の遊走と相互作用

細胞と好中球が接着している様子が観察された。

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新規アレルギー抑制分子

Ly6G によるマスト細胞の機能制御と創薬への応用（2022）

ころ、Ly6G 蛋白質が好中球からマスト細胞の細腸菌発現系やヒト細胞発現系の最適化を行うと胞膜へ移動していることが明らかになった。そこ

伴にリコンビナント蛋白質（Ly6G 及び Ly6 ファ

で、好中球からマスト細胞へ移動した Ly6G 蛋白ミリー）を作製し、マスト細胞への結合量をフロ質について定量解析を行なったところ、アレルゲ

ーサイトメータで解析した。その結果、未刺激状

ン刺激に伴って、接着している部分で Ly6G 蛋白

態では Ly6G 蛋白質が約 20％程度のマスト細胞質の移動が顕著に起こっていることが分かった。

で結合していた。一方、アレルゲン刺激を行なっ

また、マスト細胞と好中球の接着部位では、細胞たマスト細胞では、Ly6G 蛋白質の結合率が増加

骨格蛋白質（F-actin）の集積も観察されており、している様子が観察された。このことから、マス両細胞は接着することによって情報交換や機能

ト細胞の細胞膜上には Ly6G 蛋白質に対する結調節を行っている可能性が示唆された。

合因子が存在すると推察され、その結合因子が、次に、好中球からマスト細胞への Ly6G 蛋白質

Ly6G 蛋白質によるマスト細胞の機能調節を行っの移動メカニズムを明らかにするために、マストている可能性が示唆された。また、Ly6G 以外の細胞と好中球の共存培養系を用いて、好中球からLy6 ファミリー蛋白質についても、マスト細胞への Ly6G 蛋白質の遊離過程について追究した。マの結合能を有することも確認した。そのため、プスト細胞と好中球を共存培養した後、マスト細胞

ルダウン法やファーウエスタン法を用いて、マスをアレルゲンで刺激し、培養上清中の Ly6G 蛋白

ト細胞に発現する Ly6G 結合分子について確認

質をウエスタンブロッティング法で定量解析しを試みた。しかし現時点において、Ly6G 蛋白質

たところ、アレルゲン刺激１時間後の培養上清にに結合するマスト細胞上の分子の同定には至っ

おいて Ly6G 蛋白質量が増加し、刺激後 3〜6 時ていない。そのため現在は、各種条件の最適化を間では減少している様子が観察された。このこと行っている状況である。

から、アレルゲン刺激によるマスト細胞の活性化

また先の実験から、マスト細胞の活性化に伴っに伴って、マスト細胞の分泌顆粒内に含有していて好中球に発現する Ly6G 蛋白質が好中球からるプロテアーゼなどが 4)、相互作用（接着）部位

切断されマスト細胞表面に移動・結合することがの局所で高濃度に分泌され、好中球の Ly6G 蛋白

明らかになった。そこで、Ly6G 蛋白質によるマ質が切断されることによって、培養上清中に遊離

スト細胞応答調節機構を明らかにするため、し、近傍のマスト細胞に移動したのではないかと

Ly6G 蛋白質による炎症性メディエータ分泌反応考えられた。

への影響について解析した。はじめに、ヒスタミ

次に、マスト細胞の活性化に伴って培養上清中ン分泌（脱顆粒反応）の指標として用いられる分に切断された Ly6G 蛋白質のマスト細胞への結泌顆粒内酵素（β-hexosaminidase）の定量を行合能について解析した。そのため本研究では、大なった。その結果、Ly6G 蛋白質処理によりアレ

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53

新規アレルギー抑制分子

Ly6G によるマスト細胞の機能制御と創薬への応用（2022）

ルゲン刺激に伴う脱顆粒反応が有意に抑制され観察された。更に、IgE 非依存的刺激（ATP、ており、また、その抑制効果は Ly6G 蛋白質の濃Mastoparan、Compound48/80）の場合には、分度依存的であることも明らかになった（図 3）。次

泌顆粒内酵素（β-hexosaminidase）の分泌につに、各種炎症性サイトカイン（TNFα等）やケモ

いて、アレルゲンとは異なる細胞応答を示す可能

カイン（CCL2 等）について ELISA 法を用いて性が存在することが分かり、現在、分子メカニズ

定量解析を行なったところ、予想に反して、Ly6G

ムについて追究している。これらのことから、蛋白質を処理した細胞では、有意に分泌反応が増

Ly6G 蛋白質にはマスト細胞の分泌反応を調節す

強していることが分かった（図 3）。そこで、Ly6G

る機能配列が存在する可能性が示唆された。

蛋白質の分泌機能配列を明らかにするため、次に、Ly6G 蛋白質によるシグナル調節機構のLy6G 蛋白質を断片化した Ly6G ペプチドを用解析を行った。マスト細胞に発現する重要シグナ

いて、マスト細胞の脱顆粒反応（β-ル分子（キナーゼ等）について、ウエスタンブロ

hexosaminidase）の定量解析を行なった。その結ット法を用いた蛋白質の活性化を指標に追究し果、未処理の細胞と比較して、Ly6G ペプチド#4

た 5)。特に、マスト細胞の脱顆粒反応に重要であ及び#9 処理によりマスト細胞のアレルゲン刺激

る Lyn、Syk、
LAT、PLCγをはじめ、MAPK（Erk、に伴う脱顆粒量が有意に減少していた。さらに、

p38、JNK）などの転写調節因子などについて解Ly6G ペプチドによるマスト細胞のサイトカイン

析を行なったところ、Ly6G 処理した細胞ではア（TNFα）及びケモカイン（CCL2）分泌への影

レルゲン刺激に伴って幾つかのシグナル分子

響を解析したところ、未処理の細胞と比較して（Syk、LAT、PLCγ、Akt、Erk、p38 など）に

Ly6G ペプチド#4 処理により抗原刺激に伴う

おいて活性化状態が持続している傾向が観られTNFαや CCL2 の分泌量が増加している様子がた。

図 3 Ly6G によるマスト細胞の分泌制御

5454

新規アレルギー抑制分子

Ly6G によるマスト細胞の機能制御と創薬への応用（2022）

最後に、Ly6G 蛋白質による生体レベルでのア質をはじめ Ly6 ファミリー分子が、マスト細胞

レルギー応答調節の可能性について検討した。そ上の Ly6 ファミリー結合分子を介して、マストのため、マスト細胞依存的なモデルとして多くの細胞の機能調節を行なっていることを示唆して研究で使用されているアレルギー疾患モデル

おり、新たなアレルギー調節因子としての可能性（PCA: passive cutaneous anaphylaxis）を用いが期待される。また、Ly6G 蛋白質は、各種炎症て、アレルギー応答調節機構の解析を行なった 2)。

性メディエータ（脱顆粒反応やサイトカイン・ケ

その結果、Ly6G 蛋白質を投与したマウスでは、

モカイン分泌）の分泌反応において、相反するマ

マスト細胞の活性化に伴う炎症応答の指標としスト細胞（分泌）応答を誘導するなど、改めてマて用いた血管透過性（Evans Blue 色素の組織内スト細胞の分泌調節機構の複雑さが明らかにな浸潤）が、未処理の場合と比較して有意に抑制さった。そのため、アレルギー反応を誘導する各種

れていることが分かった（図 4）。このことから、

炎症性メディエータの分泌反応について、単一顆

Ly6G 蛋白質は生体レベルでもアレルギー応答を粒レベルでより詳細に解析する必要性があると調節している可能性が示唆された。

考えられる。生体レベルでの調節作用に関しても、他のアレルギー疾患モデルでの研究が実施されることによって、Ly6 ファミリー分子による機能

今後の研究活動について
本研究で実施した、in vitro 及び in vivo での調節作用の実体が明らかになるものと期待され研究成果から、Ly6G 蛋白質が、アレルゲン刺激

る。この様に、Ly6G によるマスト細胞の機能調応答に伴うマスト細胞の機能調節作用を有して節メカニズムが明らかになれば、新たなアレルギいる可能性が示唆された。これらの研究成果は、

ー制御メカニズムが解明され、アレルギー応答の機能ほとんど明らかになっていない Ly6G 蛋白

機能調節因子として、アレルギー疾患治療に向け

図 4 Ly6G によるアレルギーモデルでのマスト細胞活性調節

55
55

新規アレルギー抑制分子

Ly6G によるマスト細胞の機能制御と創薬への応用（2022）

28;343(6174):1021-5.

た新たな展開が期待される。

3）Lee PY, Wang JX, Parisini E, Dascher CC,
参考文献

Nigrovic PA. Ly6 family proteins in neutro-1）Elieh Ali Komi D, Wöhrl S, Bielory L. Mast

phil

Cell Biology at Molecular Level: a Compre-

biology.

J

Leukoc

Biol.

2013

Oct;94(4):585-94.
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2）Suzuki R, Leach S, Liu W, Ralston E, Scheffel

May 5;778:44-55.

J, Zhang W, Lowell CA, Rivera J. Molecular5）Blank U, Huang H, Kawakami T. The highediting of cellular responses by the high-af-

affinity IgE receptor: a signaling update.

finity receptor for IgE.Science. 2014 Feb

Curr Opin Immunol. 2021 Oct;72:51-58.

56
56

モデルマウスを用いた花粉-食物アレルギー症候群における経口免疫治療の確立と機序解明（2022）

研究課題名

モデルマウスを用いた花粉-食物アレルギー症候群における経口免疫治療の確立と
機序解明

フリガナ

フジエダ

代表者名

藤枝

シゲハル

重治

所属機関（機関名）福井大学学術研究院（役職名）教授
氏

共同研究者

名（フリガナ）

医学研究科

耳鼻咽喉科・頭頸部外科

所属機関・役職名

役割分担

三浦 謙治
(ミウラ ケンジ)

筑波大学生命環境系 生物科学
専攻 分子細胞生物学分野 植 Bet v 1 作製、供給
物分子生物細胞学研究室 教授

宮寺 浩子(ミヤデラ ヒロコ)

筑波大学
助教

医療医学系遺伝医学

細胞分析

1.モデルマウスを用いた花粉-食物アレルギー症候群の病態解明と治療戦略
加藤幸宣
第 35 回 日本口腔咽頭科学会 シンポジウム
本 助 成金 によ る 発
2.新規モデルマウスを用いた花粉-食物アレルギー症候群の病態解明
表論文、学会発表加藤幸宣、加藤永一、森川太洋、吉田加奈子、意元義政、坂下雅文、大澤陽子、
高林哲司、藤枝重治
第 71 回日本アレルギー学会学術大会 一般演題
研究結果要約花粉-食物アレルギー症候群 (Pollen-Food Allergy Syndrome：PFAS) は、近年増加傾向にあるが、有効な治療法がなく、社会問題となっている。研究代表者は、シラカンバ花粉で全身感作させたマウスにリンゴエキスを経口投与することで、これまでに全く報告例のない新規 PFAS モデルマウスの作製に成功した。アレルゲン免疫療法は、アレルギー疾患に対する根治治療として近年注目されている治療法である。特に、口腔粘膜を利用した舌下免疫療法 (sublingual immunotherapy；SLIT) は、スギやダニ
アレルギーに対して大変有用かつ安全に行うことができる方法であり、アレルギー性鼻炎に対する治療法として広く行われている。一方で、PFAS に対する免疫治療はまだ一般的ではなく、研究段階である。
研究代表者は、PFAS の根治治療に着目し、抗原の舌下投与による免疫治療の確立を目的とした研究を行っている。本研究において、recombinant Bet v 1 を用いた舌下免疫療法が PFAS モデルマウスにおける口かき回数の減少に有効であることが示された。新規 PFAS モデルマウスにおける舌下免疫療法を用いたアレルゲン免疫療法 (PFAS-SLIT モデルマウス) の確立と作用機序の解明により、舌下免疫療法
が PFAS における根治治療の新規治療戦略となる可能性を追求し、原因食物の摂取が可能となることが期待できる。

57
57

モデルマウスを用いた花粉-食物アレルギー症候群における経口免疫治療の確立と機序解明（2022）の主要抗原である Bet v 1 とリンゴに含まれる

研究目的
花粉-食物アレルギー症候群 (Pollen-Food Al-

Mal d 1 との交差反応である。一方で、シラカン

lergy Syndrome：PFAS) は原因食物摂取後、数バ花粉症患者の半数はリンゴを食べても無症状

分以内に口唇・口腔の掻痒感、しびれ、粘膜浮腫である。また、PFAS 症状を認めてもリンゴ特異をきたす疾患である。時に消化器症状、呼吸器症

的 IgE が陰性となる症例も存在する。申請者が行状をきたすことや、重症例ではアナフィラキシー

った疫学調査では、花粉症に先行して PFAS 症状を生じることもある。近年罹患率は上昇傾向にあを認める人が 31.5%存在した (図 2)。つまり花粉り、生活の質に多大な影響を与えることから注目症が感作未発症でも PFAS を発症し得る。花粉症

されている。申請者は 2016 年福井大学医学部附の感作発症と PFAS の発症は必ずしも同期せず、

属病院に所属する職員に対して、PFAS に関する

様々なケースが存在するため、アレルギー疾患の疫学調査を行った。PFAS 症状を有する人は、中でも PFAS の病態は複雑である。

1328 人中 258 人であり、19.1%と高い割合を示
PFAS に関する基礎的研究は、他のアレルギーしていた (図 1)。

疾患に比べて報告が乏しい。アトピー性皮膚炎やPFAS は、食物抗原により口腔粘膜症状を呈す

アレルギー性鼻炎、気管支喘息、食物アレルギーる IgE 依存性即時型アレルギーであるが、感作抗といった種々のアレルギー疾患ではモデルマウ

原と誘発抗原が同一である食物アレルギーとはスが存在し、マウスによる様々な報告がなされて異なり、花粉抗原感作陽性者において食物アレルいる。一方、PFAS に関するモデルマウスは存在

ゲンが交差反応することで惹起される。欧米では、しない。そのために PFAS の研究は他のアレルギ

シラカンバ花粉 (感作抗原) 感作陽性者の約半数

ー疾患の分野に比べて、未解明で遅れをとっていが、リンゴ (誘発抗原) を食べると PFAS 症状をる部分が多い。発症を防ぐには原因食物摂取の回認めると言われる。この反応は、シラカンバ花粉

避が唯一の方法というのが現状であり、これは複5858

モデルマウスを用いた花粉-食物アレルギー症候群における経口免疫治療の確立と機序解明（2022）

数の食物摂取が制限される PFAS 患者にとって研究代表者が新たに作製した PFAS モデルマ

は深刻な問題である。PFAS モデルマウスを作製

ウスでは、シラカンバ花粉 (100 µg / mice) の腹してその発症機序を解明することは、非常に重要

腔内投与による全身感作後に同抗原 (1 mg /な課題である。PFAS の病態が解明されれば、

mice) を経鼻感作させる。その後、リンゴエキス

PFAS の原因食物の特定法や花粉症患者に対す(50 µl / mice) を経口投与する (図 3) 。

る PFAS 発症予防策、PFAS 患者に対する治療方法を確立することが期待される。申請者は、新規

リンゴはシラカンバ花粉と交差反応を示す代

PFAS モデルマウスを作製し、モデルマウスを用

表的な食物である。PFAS モデルマウスではリン

いて PFAS の病態解明を行ってきた。本研究でゴエキス経口投与後に、アレルギー性鼻炎モデル

は、PFAS の治療方法、予防策に着目し、経口免でみられる鼻かき (図 4A) とは全く異なる口か疫治療の確立、作用機序の解明を行う。

き動作 (図 4B) を認める。リンゴエキス経口投与
後 10 分間の口かき回数では、「シラカンバ免疫+研究計画及び研究手法
PFAS は、近年注目されている疾患であるが、比較的新しい概念であり、基礎研究の報告が大変
少なく、これまでモデルマウスは存在しなかった。
しかし、アレルギー疾患の病態解明・治療開発においてモデルマウスの作製は必須である。研究代
表者はアレルギー疾患モデルマウスの作製・研究に精通しており、ブタクサ花粉症モデルマウスを用いた論文を発表した 1)。

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59

モデルマウスを用いた花粉-食物アレルギー症候群における経口免疫治療の確立と機序解明（2022）

リンゴエキス経口投与群」のみ、明らかに口かきの花粉-食物にも応用できる。また、感作抗原・誘回数が上昇する (図 5) 。

発抗原を様々に設定することで、未知の花粉-食口かき動作は PFAS 症状と酷似しており、ナイ物アレルギーを見出すことも可能となる。

ーブマウスにリンゴを投与しても決して認められない。シラカンバ感作陽性マウスに、リンゴエ

本研究では、PFAS の根治治療としての免疫治

キスを耳介注射すると、耳介の発赤・耳介厚上昇

療を追求するために、PFAS モデルマウスを用いを認め、血管が透見できなくなる (図 6) 。食物てシラカンバ-リンゴを対象とした SLIT の確立

プリックテスト陽性所見は PFAS 診断基準の一を計画した。

つであり、PFAS モデルマウスはこれを満たして
結果と考察

いる。

・PFAS モデルマウスにおける SLIT を用いたア
レルゲン免疫療法 (PFAS-SLIT モデル) の確立

研究代表者は新規 PFAS モデルマウスに関する英語論文を発表した 2)。Bet v 1 との関連、IgE/
肥満細胞/好塩基球の関与、上皮由来サイトカイ

Day 0、14、28 にシラカンバ花粉 (100ug/mice)ンとの関連、ILC2s の関与、頸部・鼻・口腔粘膜の腹腔内投与による全身感作を行い、その後 Day

における局所 Th2/好酸球性炎症について検証し、38-41 に同抗原 (1mg/mice) を経鼻感作させる。

PFAS の病態解明を行った。交差反応を標的とし舌下免疫療法として Day 14-37 にかけて毎日舌

た PFAS モデルマウスは世界初であり、画期的な下投与を行う。舌下投与は無麻酔で舌下に試薬をモデルである。シラカンバ花粉やリンゴをマウス１分間保持した後飲み込む。その後、Day 42 にに適用することは実臨床に即しており、また

リンゴエキス (50ul/mice) を経口投与する。リン

PFAS 症状として口かき動作を評価することは

ゴエキス経口投与後の口かき回数を 10 分間カウ

正確、かつ明快な検証方法である。この方法は、ントする (図 7)。この方法により、舌下免疫療法

シラカンバ-モモ、ブタクサ-メロンといった、他による減感作の効果を検証した。

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モデルマウスを用いた花粉-食物アレルギー症候群における経口免疫治療の確立と機序解明（2022）

舌下投与に用いる試薬として、① リンゴエキ

舌下免疫の試薬としてシラカンバエキス (10ス (10 ul / mice)、② recombinant Mal d 1 (r Mal

ul / mice) を用いた場合、リンゴエキス経口投与d 1) (0.03 mg / 10 ul / mice)、 ③ r Mal d 1 (0.30

後の口かき回数は、SLIT を行わなかった群に比mg / 10 ul / mice)、④ シラカンバエキス (10 ul

べて、減少する傾向にあった (図 9) 。更に、高濃度 r Bet v 1 (0.30 mg / 10 µl / mice) を用いた

/ mice)、⑤ recombinant Bet v 1 (r Bet v 1) (0.03

群では、SLIT を行わなかった群に比べて、有意mg / 10 ul / mice)、 ⑥ r Bet v 1 (0.30 mg / 10に口かき回数が減少した (図 9) 。従って、PFAS-

ul / mice)を用いる計画を予定した。感作抗原と誘SLIT モデルマウスにおいては、高濃度の r Bet v

発抗原それぞれのエキス、低濃度コンポーネント、1 が最も SLIT としての効果が得られることが明

高濃度コンポーネントで比較検証し、最も効果的らかとなった。

な試薬を判定することとした。

共同研究者である三浦謙治先生により、精製度の高い r Bet v 1、r Mal d 1 の抽出に成功した。

舌下免疫の試薬としてリンゴエキス (10 µl /研究代表者は効果的な舌下免疫の試薬としてコmice) を用いた場合、リンゴエキス経口投与後のンポーネント (Bet v 1、Mal d 1) の使用が鍵で口かき回数は、SLIT を行わなかった群とほぼ同あると考えている。本研究により、PFAS-SLIT モ等であった。つまり、リンゴエキスの連日舌下投デルマウスにおいて r Bet v 1 を用いた舌下免疫

与では免疫療法としての効果は得られなかった治療が有効性を示した。リンゴエキス舌下投与に(図 8) 。

61
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モデルマウスを用いた花粉-食物アレルギー症候群における経口免疫治療の確立と機序解明（2022）

関しては免疫療法としての効果は得られなかっ象とした研究報告では、シラカンバ-リンゴのたが、コンポーネントである Mal d 1 が効果的とPFAS に対して Bet v 1 を用いた SLIT の効果はなる可能性がある。

0-90％と様々であり、一定していない。また、リ

今後、三浦先生より譲受した r Mal d 1 を舌下免

ンゴエキスを使用した SLIT の効果に関しては良疫として使用し、コンポーネントによるアレルゲ

い結果が得られていない。

ン免疫療法の効果検証を進める。
本研究結果は、日本口腔咽頭科学会、日本アレ

PFAS に対する免疫治療の確立が遅れている

ルギー学会で成果発表を行った。更に得られた結のは、動物実験が不十分であることに原因がある。

果を解析し、論文の執筆・投稿準備を進める。

様々なアレルギー疾患と同様に、研究を円滑に進

今後の研究課題として、確立させた PFAS-

めるためにマウスを用いた実験が必須である。そSLIT モデルマウスを用いて、PFAS に対するア

こで、我々は、PFAS モデルマウスを新たに作製

レルゲン免疫療法に関わる因子を同定し、発症機し、モデルマウスを用いて PFAS の病態を解明し序を解明する。具体的には、舌下免疫療法によるてきた。本研究では、更に PFAS の根治治療とし

血清 IgE や活性化 T 細胞の変化を検証する。制ての免疫治療を追求している。我々の研究により、御性 T 細胞や制御性 B 細胞はアレルギー免疫応

r Bet v 1 を用いた SLIT が PFAS モデルマウス

答を抑制する代表的な細胞である。また、IL-10における口かき回数の減少に有効であることがは炎症反応の抑制性サイトカインであり、制御性示された。今後の研究活動においては、PFAS-

T 細胞や制御性 B 細胞から放出され、抗原特異的

SLIT モデルマウスを用いて、舌下免疫治療の確

免疫反応の抑制に関与する。PFAS-SLIT モデル

立、制御性 T 細胞を中心とした作用機序の解明をマウスにおいて、これらの免疫応答抑制因子の関行うことを目的とする。研究終了時には、PFAS

与を解析することが重要な課題であると考えてモデルマウスにおけるシラカンバ-リンゴを対象いる。

としたアレルゲン免疫治療が確立される。また、
制御性 T 細胞を中心としたメカニズムを明らか

今後の研究活動についてにすることができる。

アレルゲン免疫療法は、アレルギー疾患に対する根治治療として近年注目されている治療法でこれまで PFAS 患者は、発症を防ぐためには原ある。口腔粘膜を利用した舌下免疫療法（SLIT）

因食物摂取の回避が唯一の方法であった。本研究は、スギやダニアレルギーに大変有用であり、まで確立された PFAS モデルマウスに対する経口

た安全に行うことができる治療法として広く行

免疫治療をヒトに応用することによって、PFAS

われている。一方で、PFAS に対する免疫治療はに対する新たな治療戦略を供給できる。そして、

まだ一般的ではなく、研究段階である。ヒトを対シラカンバ-リンゴを対象とした PFAS 患者が、

6262

モデルマウスを用いた花粉-食物アレルギー症候群における経口免疫治療の確立と機序解明（2022）

リンゴをはじめ原因果物を摂取することが可能

参考文献となる。更に、シラカンバ花粉感作陽性者におい1）Kato Y, Akasaki S, Muto-Haenuki Y, Fujiedaて PFAS を有する患者は、リンゴ以外にモモやサ

S, Matsushita K, Yoshimoto T. Nasal Sensiti-

クランボといった他の果物にも口腔アレルギー

zation with Ragweed Pollen Induces Local-症状を呈しうる。本研究で得られる免疫治療は、

Allergic-Rhinitis-Like Symptoms in Mice.

これらの果物に対しても有効的と考えている。

PLoS One. 2014 Aug 13;9(8):e103540.
2）Kato Y, Morikawa T, Kato E, Yoshida K,

また全国的に生息しているブタクサ花粉やカ

Imoto Y, Sakashita M, Osawa Y, Takabayashi

モガヤ花粉はウリ科 (メロン、スイカなど) と交

T, Kubo M, Miura K, Noguchi E, Fujieda S.

差反応を示す。全人口の約 3 分の 1 が発症していInvolvement of activation of mast cells via

るスギ花粉症はトマトによる PFAS が報告され

IgE signaling and epithelial cell-derived cy-ている。日本全土に PFAS 患者は存在する。研究tokines in the pathogenesis of pollen-food al-

代表者が作製した PFAS モデルマウスは、シラカ

lergy syndrome in a novel murine model. J

ンバ-リンゴのみではなく、様々な花粉-食物に応Immunol. 2021 Jun 15;206(12):2791-2802.

用できる。ブタクサ花粉症モデルマウスにメロン

3）Yamada Y, Kidoguchi M, Yata A, Nakamura

エキスを経口投与すると、口かき回数が上昇する

T, Yoshida H, Kato Y, Masuko H, Hizawa N,

ことは既に確認している。つまり、申請者の作成

Fujieda S, Noguchi E, Miura K. High-Yield

した新規モデルマウスを利用することで様々な

Production of the Major Birch Pollen Aller-

タイプの PFAS に対する免疫治療を研究するこ

gen Bet v 1 With Allergen Immunogenicity inとが可能である。そして二次予防として、感作さ

Nicotiana benthamiana. Front Plant Sci.

れた個人に対する PFAS 発症を予防する。従っ2020 Apr 2;11:344.

て、PFAS の根治治療・発症予防策に大いに貢献することが期待できる。

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役員・評議員・研究助成審査委員名簿（ 2023年 9月 29日 現 在 ）

1.役員
理事長

井手

弘

常勤

元日本ハム北海道ファクトリー（株）代表取締役社長

副理事長

岩間

清

非常勤

日本ハム（株）中央研究所

専務理事

沖浦智紀

常勤

日本ハム（株）中央研究所より出向

一色賢司

非常勤

（一財）日本食品分析センター
北海道大学名誉教授

伊藤節子

非常勤

同志社女子大学名誉教授

理事

監事

医学部

所長

学術顧問

宇理須厚雄 非常勤

藤田医科大学

客員教授

大社啓二

非常勤

社会福祉法人大寿庵

高松伸枝

非常勤

別府大学

畑江敬子

非常勤

お茶の水女子大学名誉教授

村田容常

非常勤

東京農業大学岸田周平

非常勤

日本ハム（株）経理財務部

次長

荒川 隆

非常勤

（一財）食品産業センター

理事長

井川伸久

非常勤

日本ハム（株）代表取締役社長

大石泰之

非常勤

日本ハム（株）執行役員 品質保証部長、お客様志向
推進部、ライフスタイル研究室、中央研究所担当

大谷敏郎

非常勤

(公財)日本植物調節剤研究協会

菊田行紘

非常勤

TMI 総合法律事務所

河野陽一

非常勤

理事長

食物栄養科学部

教授

教授

2.評議員

評議員

柴田瑠美子 非常勤
清水 誠

非常勤

理事長

弁護士

（地独）東金九十九里地域医療センター 理事長
千葉大学名誉教授
国立病院機構福岡病院アレルギーセンター
顧問・非常勤医師（小児科）
東京大学名誉教授
東京農業大学客員教授
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64

3.研究助成審査委員
委員長

村田容常

東京農業大学副委員長

一色賢司(一財）日本食品分析センター
北海道大学名誉教授

穐山

浩

星薬科大学

五十部誠一郎日本大学

伊藤浩明

あいち小児保健医療総合センター

川村

香川大学

農学部

教授

隆

龍谷大学

農学部

教授

倉園久生

元徳島大学

下条直樹

千葉大学予防医学センター

特任教授

白川

仁

東北大学大学院農学研究科

教授

立花宏文

九州大学大学院農学研究院

主幹教授

鍋谷浩志

東京家政大学藤澤隆夫

国立病院機構三重病院

松本健治

国立成育医療研究センター研究所

三橋富子

元日本大学短期大学部

森山達哉

近畿大学

好田

東京農工大学大学院農学研究院

楠

理

委員

正

教授
学術顧問

薬学部 教授
生産工学部

特任教授
センター長

研究支援・産官学連携センター

栄養学部

農学部

栄養学科

教授

名誉院長
部長

教授

学部長
教授

2022 年 度 事 業 の 審 査 は 以 下 の 委 員 に も ご 担 当 い た だ き ま し た 。

駒井三千夫

東北大学名誉教授

柘植郁哉

藤田医科大学

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65

医学部

客員教授

教授

公益財団法人ニッポンハム食の未来財団
１．目

案内

的

食物アレルギーや食品分野における研究、研究支援及び啓発活動を行い、もって世界の人々においしさの感動と健康の喜びを提供することを目的とする。

２．事業内容本法人は、前条の目的を達成するため、次の事業を行います。
(1) 食物アレルギーや食品分野に関する講演会等の開催(2) 食物アレルギーや食品分野に関する印刷物の刊行及び広報活動(3) 食物アレルギーや食品分野に関する試験研究及び調査(4) 食物アレルギーや食品分野に関する研究を行う者に対する助成(5) 食物アレルギーや食品分野に関する指導者の育成及び啓発活動への支援(6) 食物アレルギーや食品分野に関する研究及び啓発活動に関し功績のある者の表彰(7) その他この法人の目的を達成するために必要な事業

３．沿革2015 年 1 月 27 日に日本ハム株式会社により「一般財団法人ニッポンハム食の未来財団」として設立されました。
内閣総理大臣より公益認定を受け、2017 年 4 月 1 日より「公益財団法人ニッポンハム食の未来財団」
として活動しています。

４．情報公開等
Website; https://www.miraizaidan.or.jp/

X（旧Twitter）; https://twitter.com/syokunomirai/
Instagram; https://www.instagram.com/syokunomiraizaidan/

YouTube; https://www.youtube.com/channel/UCnJDGexmLgLr6betsgvYKUQ

５．2023 年度主な事業活動
・2023 度研究助成の実施、2024 年度研究助成の公募 及び 2022 年度研究助成の成果報告会の実施
・第 9 回食物アレルギー対応食 料理コンテストの実施
・主催セミナー(「栄養士・食従事者向け」及び「保育者向け」)の実施
・2023 年度団体活動支援助成の公募及び実施
・当財団 Web サイトからの情報発信
以上

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2023 ᖺ 9 ᭶ 29 ᪥Ⓨ⾜䛈305-0047 Ⲉᇛ┴ࡘࡃࡤᕷ༓⌧ 2-1-6ࡘࡃࡤ◊✲ᨭ᥼ࢭࣥࢱ࣮A-24
TEL
FAX
E-mailWebsite029-893-4466
029-893-4360
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https://www.miraizaidan.or.jp/

X㸦ᪧTwitter）https://twitter.com/syokunomirai/
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