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Agilent HPLC 用

Agilent HPLC 用カラムセレクションガイド

カラムセレクションガイド

最高の分離と効率的な分析を実現し、高品質の結果を提供するカラムの総合ガイド

本資料に記載の情報、説明、製品仕様等は予告なしに変更されることがあります。
アジレント・テクノロジー株式会社© Agilent Technologies, Inc. 2010
Printed in Japan April 16, 2010
5990－4435JAJP

Our measure is your success.

新製品 .................................................................................................1

HPLC カラム選択ガイドライン .....................................................3
HPLC カラム選択フローチャート ......................................................................................................4
ZORBAX 逆相結合相のクイックガイド ............................................................................................5
ZORBAX 逆相 HPLC カラム選択フローチャート .............................................................................6
カラムと移動相選択のためのガイド：逆相 ..................................................................................8
HPLC カラムの USP 表記 ....................................................................................................................11
pH 1 ～12 でのメソッド開発 ............................................................................................................13
カートリッジ選択ガイド ..................................................................................................................18

分析 HPLC 用カラム .......................................................................19
Poroshell 120 ..........................................................................................................................................20
ZORBAX Eclipse Plus...............................................................................................................................23
ZORBAX Eclipse PAH ..............................................................................................................................30
ZORBAX Eclipse XDB ..............................................................................................................................32
ZORBAX 80Å StableBond .......................................................................................................................40
ZORBAX Rx .............................................................................................................................................49
ZORBAX 80Å Extend-C18.......................................................................................................................52
ZORBAX Bonus-RP..................................................................................................................................56
ZORBAXオリジナル逆相カラム .......................................................................................................61
ZORBAX 順相カラム ............................................................................................................................62
ZORBAX HILIC Plus .................................................................................................................................66
ZORBAXメソッド開発キット ...........................................................................................................68
ZORBAX メソッドバリデーションキット ......................................................................................70
ZORBAX イオン交換カラム – SAX、SCX ........................................................................................71

Agilent e-セミナー

アジレントの eセミナーは、web上で最新技術と最新情報を紹介するプログラムです。

特殊アプリケーション用 HPLC カラム .....................................73
ZORBAX ラピッドレゾリューション High Definition 1.8 µm.........................................................74
ZORBAX ラピッドレゾリューションハイスループット 1.8 µm ................................................77
ZORBAX ラピッドレゾリューション 3.5 µm ..................................................................................85
ZORBAX ソルベントセーバ................................................................................................................90
ZORBAX PrepHT......................................................................................................................................94
Agilent Prep LCカラム.........................................................................................................................100
Ultron ES Chiral カラム .......................................................................................................................103

バイオ分析用カラム ...................................................................105
ZORBAX を用いてタンパク質およびペプチドを分析する逆相メソッド開発方法 ............106
Poroshell 300 ........................................................................................................................................110
ZORBAX 300Å StableBond ..................................................................................................................113
ZORBAX 300Å Extend-C18...................................................................................................................118
ZORBAX アミノ酸分析 (AAA) カラムおよび部品 ........................................................................122
ZORBAX GF-250、GF-450 ゲルろ過カラム ....................................................................................124
Agilent バイオモノリス HPLC カラム ............................................................................................128

トラブルシューティング、メンテナンス、インフォマティックス、
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アジレントのカラムは、酸性、塩基性、中性化合物のすべてに対し、高い生産性と優れたピーク形状を提供します。
従来のクロマトグラフィや超高速クロマトグラフィ、生体分子の分離、複雑な塩基性化合物の分析など、さまざまな分析において、アジレントは、高速で再現性の高い結果を実現する業界最高性能のカラムを提供します。比類のない品質と信頼性をお届けします。

• 新製品 Poroshell120カラム -2µm未満のカラムよりも 50%低い圧力で高効率と高分離能を実現します。

• ZORBAXラピッドレゾリューション HighDefinition(RRHD)カラム –Agilent1290InfinityLCと組み合わせて使用するために最大 120MPa(1200bar)で安定性を実現する、改良された充てん処理を備えた 1.8µmカラムです。
• 新しい EclipsePlusカラム –C18および C8カラムは、優れたピーク形状を提供しつつ、新しいフェニルヘキシル結合相と PAH 分離用の C18 結合相でより多くのアプリケー
ションに対応します。

• ラピッドレゾリューションハイスループット (RRHT) カラム – 1.8 µm カラムを含む、140種類以上の豊富なラインナップから、スピード、分離、感度のニーズに合わ
せて選択できます。

AgilentZORBAXLCカラムを選択するということは、信頼性の高い製品はもちろん、それ以上のものが得られるということを意味します。つまり、世界最大のクロマトグラ
フィサプライヤであるアジレントのサポートや、40年を超える専門知識、テクニカル
サポートも同時に得られることになるのです。インターネット、電話、担当者を通じ、アジレントはお客様の直面する課題解決をサポートいたします。

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1

新製品

新製品 Agilent1290InfinityLCシステム
最高の液体クロマトグラフシステムをお届けします

新製品 Agilent1290InfinityLCには、他のどのシステムよりも広い動作圧力範囲 (2mL/min
で 120MPa(1200bar、5mL/minで 80MPa(800bar))を誇ります。InfinityLCは、比類のな
い性能、柔軟性、メソッド互換性を提供し、LCおよび LC/MSにおける分析上の難題を解決するために、無限の可能性を提供します。

• 1290Infinityバイナリポンプは、アクティブダンピング機能に加えて、10µLというきわめて低いディレイボリュームを兼ね備えています。これらの機能は、新しいAgilentJetWeaverミキサーのマルチレイヤー技術により実現したものです。これにより、超高速グラジエントと優れた UV検出感度が実現しています。

• AgilentMax-Lightカートリッジフローセルをはじめ、
1290Infinityダイオードアレイ検出
器の光学設計は、最高 160Hzのデータレートでの高速スペクトル取り込みなど、新たなレベルの UV感度とベースラインの安定性を提供します。
• 1290Infinityオートサンプラの次世代フロースルー設計は、少量注入と大量注入の両方において、きわめて高い精度を実現します。サンプルループを変更する必要はありません。

• 1290フレキシブルキューブとオートサンプラを組み合わせれば、固定ループ注入モードにより、きわめて短いサンプル注入サイクル時間が実現します。また、ニードル
シートの自動洗浄バックフラッシュにより、きわめて低いキャリーオーバーを実現することも可能です。

• 1290 Infinity カラムコンパートメントの新しいプルアウト式バルブドライブとユー
ザーによる交換が可能なバルブヘッドは、利便性を向上するほか、超ハイスルー
プットのマルチメソッドソリューションや自動メソッド開発ソリューションを可能にします。

• ZORBAXラピッドレゾリューション HighDefinition(1.8µm)LCカラムは、共通するカラ
ムケミストリにより、HPLCから UHPLCへの簡単で迅速、かつ安全なメソッド変換を容易にします。
詳細については、www.agilent.com/chem/1290:jp をご覧ください2

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HPLC カラム選択ガイドライン
HPLC カラム選択およびメソッド開発の方法
特定のアプリケーションに適したカラムの選択は簡単ではありません。しかし、次の項目をご覧いただければ、より簡単にカラムをお選びいただけます。カラム選択に使っていた時間を有効に活用できます。

HPLC カラム選択フローチャート
ここでは、分析対象成分や移動相などの条件に基づいて、メソッド開発のためのカラム選択方法を段階的に説明します。チャートに従うと、最適なカラムの掲載ページが示されます。

逆相 HPLC カラムを選択するためのガイドライン
結合相やカラムコンフィグレーションなどの条件に基づいて、低分子やタンパク質/
ペプチドの分析に最適なカラムの選択方法を示します。

USP 表記と HPLC カラムの対応表
この項では、
アジレントの ZORBAX カラムファミリと USP (米国薬局方) 表記についての対応表を掲載しています。USP、他の薬局方に従ったカラムを簡単に選択できます。

逆相 HPLC メソッド開発
クロマトグラフ上での 2 つ以上のピーク分離は、カラム効率、選択性、保持時間に依存
し、これらすべての要因が pH の影響を受けます。1 つのタイプのカラムで多くの分離を行える場合がありますが、このセクションでは、移動相の pH の変動に基づいたメソッ
ド開発方法を説明します。

www.agilent.com/chem/jp3

HPLC カラム選択ガイドライン

HPLC カラム選択フローチャート
サンプルと移動相に従って、下のカラム選択ガイドを左から右に進んでください。右端に示されているページでカラムの詳細をご覧いただけます。

LC カラムおよび消耗品の全リストについては、『Agilent カラム分析機器部品カタログ 2009-2010 版』をご覧ください。

ヘキサンに可溶

順相モード - 未修飾シリカ

参照ページ

62

順相モード - 化学結合タイプ

参照ページ

62

有機溶媒に可溶

MeOH および
MeOH:H2O または ACN
および ACN:H2O に
可溶

THF に可溶

逆相モード - 化学結合タイプ

参照ページ

19

ゲル浸透 (低分子)

分子量 < 2000
非イオン性

逆相モード - 化学結合タイプ

19

逆相モード - イオン化コントロール

水に可溶

参照ページ

参照ページ

19
逆相モード - イオンペア試薬を使用した
化学結合タイプ

参照ページ

19

イオン性

サンプル

逆相モード - 未修飾シリカ (HILIC)

参照ページ

66

イオン交換モード

参照ページ

71
有機溶媒に可溶

分子量 > 2000

ゲル浸透クロマトグラフィ

ゲルろ過クロマトグラフィ

参照ページ

124
水に可溶

イオン交換モード - ワイドポア充てん剤

逆相モード - ワイドポア充てん剤

参照ページ

71 & 128
参照ページ

113

"Practical HPLC Methodology and Applications," Brian A. Bidlingmeyer, John Wiley & Sons, Inc., New York, p. 109 より許可を得て転載

4www.agilent.com/chem/jp

HPLC カラム選択ガイドライン

ZORBAX 逆相結合相のクイックガイド
ZORBAX RP-HPLC カラム

Eclipse Plus

推奨用途およびアプリケーション

ページ

ü メソッド開発における第 1 の選択肢
ü pH 2 ～ 9 で、塩基性、酸性、中性化合物に対して信頼性の高い分離が可能で、23

なおかつ長寿命

ü 塩基性化合物に対して優れたピーク形状
ü 1.8、3.5、5 µm カラムでの高い分離および効率
ü 長期再現性を実現するための厳しい QA/QC テストを実施
20

Poroshell 120

ü 低圧で高効率を実現するための表面多孔質粒子
ü 2.7 µm 粒子で 2 µm 未満の粒子と同様の効率
ü 選択性を最適化するため、エンドキャップ処理／未処理の C18 相から選択可能
ü 40 MPa および 60 MPa の LC に適合

32

Eclipse XDB

ü 柔軟性の高いメソッド開発のための 4 種類の選択肢
ü pH 2 ～ 9 の広い pH 範囲で高性能を発揮
ü 塩基性、酸性、中性に対する優れたピーク形状
ü 高密度結合とダブルエンドキャッピングで長寿命を実現
ü 1.8 および 3.5 µm カラムを使用して高速、超高速、高分離能を実現
ü キャピラリから分取用まで対応

40
ü 塩基性、酸性、中性化合物のいずれにも対応
ü 低 pH での優れた安定性
ü 高温 (C18 は最高 90 °C、C8、C3、Phenyl、CN、Aq は最高 80 °C) および低 pH で非常にStableBond (SB)安定

ü さまざまな選択性を示す幅広い結合相 (C18、C8、C3、CN、Phenyl、Aq) から選択可能ü 移動相としてギ酸、酢酸、または TFA を使用できるため、LC/MS に使用可能
ü ペプチドおよびタンパク質の分離用に TFA を含む移動相を使用可能
ü 高速分離に対応する 1.8 および 3.5 µm カラム

ZORBAX Rx

ü SB カラムとは異なる選択性で、低 pH での塩基性、酸性、中性化合物を分離
ü Rx-C8 は SB-C8 と同じ製品

Bonus-RPü 水比率の高い移動相での塩基性化合物の分離
ü 中性 pH から低 pH での塩基性、中性、酸性化合物の分離 (低 pH で特に安定)ü 異なる選択性でのペプチドの分離
ü 高速分離に対応する、1.8 および 3.5 µm カラム
ü 遊離塩基構造の pKa より高い塩基性化合物の分離、pH 11.5 までの高 pH での塩基性、

49

56

52

酸性、中性化合物の分離

Extend-C18ü 低分子またはペプチドの LC/MS 分析で水酸化アンモニウムを移動相添加剤として使用
ü 高 pH、中 pH、低 pH の分離で,異なる選択性を提供
ü 高速分離に対応する、1.8 および 3.5 µm カラム

オリジナル ZORBAX カラム

推奨用途およびアプリケーションページ

ü SB カラムとは異なる選択性で、低 pH での塩基性、酸性、中性化合物を分離。
SB より活性シラノール基が多いü より中性に近い pH 値での「混合モード」分離

61

ZORBAXü SB または XDB カラムとは異なる選択性で、中 pH から低 pH の塩基性、酸性、

61

ZORBAX ODS Classic(エンドキャップ処理なし)

中性化合物を分離

www.agilent.com/chem/jp5HPLC カラム選択ガイドライン

ZORBAX 逆相 HPLC カラム選択フローチャート
低分子、高分子分析のために多くの分析者にとって、逆相 HPLC は主要な分析方法の 1 つです。逆相 HPLC では、イオン性および非イオン性の分析対象成分を分析できます。そのため、この ZORBAX カラム選択フローチャートでは、逆相カラムに焦点を合わせてご説明します。このページの概要に従って、低分子および高分子用のメソッド開発に使用する逆相カラムを簡単に選択することができます。
このフローチャートでは、低分子サンプルやタンパク質およびペプチドサンプル用のメソッド開発の際に最初に使用するカラムの選択情報を提供するとともに、結合相とカラムコンフィグレーションを決定するための必要事項についても解説します。

低分子

高分子

MW < 2000

MW > 2000

80 ～ 120 Å

充てん剤のポアサイズ

300 Å

充てん剤のポアサイズは、分析する分子のサイズを基にして選びます。一般的に小さな分子は、ポアサイズが 80 ～ 120 Å 前後で容易に拡散します
が、ペプチドやタンパク質の場合はそうはなりません。そのため、ペプチドやタンパク質のアイソクラティックまたはグラジエント分離には、
ポアサイズ 300 Å の充てん剤 (300SB) を推奨します。

最初のカラム結合相

Eclipse Plus C18

StableBond 300SB-C18

C18 は、中程度の極性から無極性の化合物を良好に保持するため、大部分のサンプルで最初に選択するカラム結合相としてお勧めします。
分解能を C18 相で最適化できない場合、または大きいタンパク質を分析したい場合には、短鎖相を考慮する必要があります。

カラム内径4.6 mm

4.6 mm

カラム内径は、カラムに注入できる検体量 (質量) を注入できるかで規定します。内径が小さいほど良好なピーク形状を維持でき、注入量は少なくてすみます。内径が小さいカラムほど感度が向上するため、LC/MS やサンプル量に制限のあるアプリケーションでは、内径の小さいカラムが主に使用されます。

6

カラムの
種類

内径 (mm)

サンプル負荷量 (近似値) 標準流量

アナリティカル

4.6

0.1 ～ 1.5 mg

0.5 ～ 3 mL/min

ソルベントセーバ

3.0

150 ～ 500 ug

0.3 ～ 1.5 mL/min+

標準 HPLC 機器を使用して溶媒使用量を節約

ナローボア

2.1

50 ～ 120 ug

0.1 ～ 0.5 mL/min++

高感度、サンプル量が少ない場合、LC/MS、溶媒を節約

マイクロボア

1.0

10 ～ 50 ug

10 ～ 100 µL/min++++

高感度、サンプル量が少ない場合、LC/MS

キャピラリ

0.5, 0.3

1 ～ 10 ug

1 ～ 15 µL/min+++++

非常に高感度、LC/MS、ペプチドとタンパク質

ナノ0.1, 0.075

100 ～ 200 ng

200 ～ 500 nL/min++++++

非常に高感度、LC/MS、ペプチドとタンパク質

セミ分取

9.4

1 ～ 10 mg

5 ～ 10 mL/min

mg レベルの分取用分離

分取

21.2

20 ～ 250 mg

20 ～ 60 mL/min

数 100 mg から 1 g レベルの分取

感度向上

アプリケーション
標準分離

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HPLC カラム選択ガイドライン

低分子

高分子

MW < 2000

MW > 2000

標準多孔質粒子径5 µm および 3.5 µm

5 µm

通常の低分子および高分子の分析に使用される標準粒子径は 5 µm です。ただし、これより小さい粒子径も用意されており、これらを使用するとさらに高い効率と分離能が得られます。これらは短いカラム長でも提供されています。

3.5 µm の粒子は、メソッドの再バリデーションを必要とすることなく最大 5 µm、最小 1.8 µm のスケーラビリティを提供するため、最初に使用する粒子径として適しています。

高速分析用粒子径

ラピッドレゾリューション 3.5 µm
ラピッドレゾリューション HT 1.8 µm
ラピッドレゾリューション HD 1.8 µm

ラピッドレゾリューション 3.5 µm

粒子径 3.5 µm のラピッドレゾリューションカラムは、5 µm 粒子と比較して 60 % 高い効率を持ち、粒子径 1.8 µm のラピッドレゾリューション HT
60 MPa (600 bar) およびラピッドレゾリューション HD 120 MPa (1200 bar) は
効率が 200 % 高くなります。さらに短いカラムを使用すれば、低分子の分析時間を大幅に短縮できます。

ペプチドの場合は、粒子径 3.5 µm のラピッドレゾリューションカラムを使用することにより、短いカラムで高分解能グラジエント分析を高速に行うことができます。一方、タンパク質の場合は、ソリッドコアと多孔質外殻を持つ Poroshell カラムを使用すると、最高速の分析を実行できます。

Poroshell 5 µm

カラム長

150 mm

5 µm 粒子で高分解能分離を実現するための標準的なカラム長は 150 mm または 250 mm です。これらのカラムを使用すると 20 ～ 30 分の分析時間で高分解能分析が可能なため、標準的な分析の検討開始には最適です。高速な分析には、より小さい粒子径 (3.5 µm) でより短いカラム (75 mm および
50 mm) を使用する必要があります。

150 mmタンパク質およびペプチド消化物の場合は、長さ 150 mm のカラムからス
タートするのもよい方法です。この長さのカラムを用いた高分解能分析では、標準グラジエント時間は 30 ～ 60 分です。分析を高速にするには、より小さな粒子 (3.5 µm) とより短いカラム (50 mm) を使用する必要があります。

最初に選択するカラム
高分子

低分子

標準分析

高速分析

標準分析

高速分析

Eclipse Plus C18

ラピッドレゾリューションZORBAX 300SB-C18

ラピッドレゾリューション

4.6 x 150 mm, 5 µm
959993-902

Eclipse Plus C18

4.6 x 150 mm, 5 µm
883995-902

ZORBAX 300SB-C18

4.6 x 150 mm, 3.5 µm
959963-902

4.6 x 75 mm, 3.5 µm
959933-902

4.6 x 50 mm, 3.5 µm
865973-902

Poroshell 300SB-C18

ラピッドレゾリュ―ション
HT、600 bar

2.1 x 75 mm, 5 µm
660750-902

Eclipse Plus C18
4.6 x 50 mm, 1.8 µm
959941-902* 1200 bar
ナローボア RRHD、
Eclipse Plus C18
2.1 x 50 mm, 1.8 µm
959757-902* 圧力上限 100 MPa (1000 bar)。1290 Infinity LC または他の UHPLC に最適

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7

HPLC カラム選択ガイドライン

カラムと移動相選択のためのガイド：逆相

HPLC カラムは 2 つの部分、カラムの化学的性質とハードウェアから構成されています。
適切なカラムの化学的性質については、各タイプの結合相のカタログセクションを参照してください。カラムハードウェアと粒子径を選択するには、「Agilent ZORBAX ラピッ「ソルベント
ドレゾリューションおよびラピッドレゾリューション HT カラム」の他、「カラムサイズと高速分離の
セーバおよびキャピラリカラムと PrepHT カラム」も含め、選択」のセクションをご覧ください。

ポアサイズの選択
カラム選択の詳細については、

www.zorbaxmethodjp.com をご覧ください。

溶質の分子量が約 5000 未満の場合は、ポアサイズの小さい (60 ～ 120 Å) カラム充てん
剤を選択します。
それ以外の場合は、ポアサイズ 300 Å のカラム充てん剤を使用します。

粒子径の選択HPLC カラム用の標準粒子径は 5 µm で、メソッド開発には現在 3.5 µm が主流となりつつあります。高速分析または高分離能の分析が必要な場合には、粒子径 1.8 µm や 3.5 µmの充てん剤を使用します。粒子径 1.8 µm で短いカラム長のラピッドレゾリューション
HT カラムを使用すると、高速で高分離能の分析を行うことができ、最高の効率が得られます。通常の動作圧力で動作する粒子径 3.5 µm のカラムは、すべての LC で使用できます。短い (50 mm 以下) 1.8 µm RRHT カラムを使用して標準 LC を最適化できますが、長いカラムでは高圧 LC (400 bar を超える圧力に対応した機種) が必要な場合があります。

カラムコンフィグレーション
分析メソッドの開発に最も多く推奨されるカラムサイズは、4.6 x 150 mm または 4.6 x

75 mm です。より高い分解能が必要な場合は、さらに長い 4.6 x 250 mm のカラムを使用するか、同じ長さでより小さい粒子径のカラムを使用してください。メソッド開発時には、他のアプリケーション条件 (感度、溶媒使用量など) や、装置の種類 (キャピラリ、
ナノ、分取) に対応したカラム内径 (2.1、3.0 mm など) を選択します。

8

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HPLC カラム選択ガイドライン

シリカのタイプと結合相シリカのタイプ
Agilent ZORBAX 逆相カラムでは、3 種類の多孔質シリカ粒子 (オリジナルの ZORBAX
SIL、ZORBAX Rx-SIL、改良型 ZORBAX Rx-SIL) を使用します。ZORBAX Rx-SIL と改良型 ZORBAX
Rx-SIL は、オリジナルの ZORBAX SIL よりも純度が高く酸性度の低いシリカです。シリカの酸度が低いほど、分析対象成分とシリカ表面のシラノール基が相互作用する可能性が低いことを意味し (溶質が塩基性の場合には特にその傾向が高くなります)、ピーク形状の向上に寄与します。新しいメソッドの開発には、改良型 ZORBAX Rx-SIL (Eclipse Plus)
および ZORBAX Rx-SIL (Eclipse、StableBond など) をベースにした逆相カラムの使用を強くお勧めします。しかし、ZORBAX SIL は高品質で信頼性が高く、優れたメソッドが多く開発されてきたため、アジレントでは本製品も引き続き供給します。

結合相最初に選択する結合相としては、C18 または C8 を推奨します。対象のサンプルがこれらの直鎖アルキル相のカラムで十分に分離されない場合は、異なる選択性を示す CN や

Phenyl カラムを試してください。
一般に、タンパク質などの大きな分子量を持つ物質は、短鎖逆相カラム (C3、CN) で最もよく分離され、ペプチドや小分子は長鎖カラム (C8、C18) で分離されます。しかし、このような一般則が成り立たない場合も多くあります。たとえば、短鎖カラムを使用してもペプチドが効率的に分離されることがあり、疎水性ペプチドが長鎖相でより優れた回収率を示すこともあります。そのため、最初は疎水性系列の中程度の相 (C8 など)を選択し、結果とサンプルの溶解度特性に応じて、より疎水性の高い相または親水性の高い相に変更するのが最善です。

www.agilent.com/chem/jp9HPLC カラム選択ガイドライン

pH および移動相
逆相システム用の移動相を選択するには、まず有機溶媒を選択します。アセトニトリ
ル、メタノール、テトラヒドロフラン (THF) のいずれを用いるかによって、選択性とサンプル保持時間は大きく変わります。サンプルの溶解度も溶媒によって異なる可能性が高いため、使用できる溶媒やその組み合わせに影響することもあります。溶媒によっては、特定波長での UV 検出が不可能になることがあります (200 nm でのメタノー
ルなど)。
わずかな条件変動によって結果が大幅に変動する不安定なメソッドを作成しないようにするには、移動相の水溶液部分の pH とイオン強度の両方が重要です。イオン化合物の場合、代表的な化学種の保持時間は pH 値によって大きな変化を示します。このような逆相システムでは、pH を制御して、保持時間とバンド間隔を安定させることが非常に重要です。一般的に pH 範囲が 2 4 の場合、pH の変動に対しての保持時間の変動は～軽微であるため、塩基性化合物や一般的な弱酸を含む大部分のサンプル用メソッド開発を開始するには、この pH 範囲を推奨します。

HPLC カラム

カラムサイズ

固定相

表面の種類

10

ポアサイズ

粒子径

長さ

化学的性質

物理的性質

化学的寿命/感度
リテンションファクタ

効率
速度www.agilent.com/chem/jp

内径HPLC カラム選択ガイドライン

HPLC カラムの USP 表記

米国薬局方 (USP) には、多数の医薬品の分析方法について標準的な情報があります。USP
は、メーカーではなく、充てん剤によってカラムを指定します。USP は L1 の定義を更新しました。下記のリストでは、最新の定義と、このカラム選択ガイドに掲載しているカラムの適合についての一覧を示しています。ラピッドレゾリューションハイス
ループット (RRHT) カラムは現在、L1、L7、および L11 カテゴリに選択できます。

USP 表記の全リストは、『2009-2010 Agilent カラム分析器部品カタログ』(資料番号 59899611JAJP) をご参照ください。

USP 表記USP 充てん剤

カラム

粒子径 (µm)

ポア
サイズ (Å)L1

多孔質シリカまたはセラミックミクロ粒子 (直径 1.5 ～10 µm) に化学結合したオクタデシルシラン

ZORBAX Eclipse Plus C18
ZORBAX Eclipse Plus XDB-C18
ZORBAX SB-C18
ZORBAX Extend-C18
ZORBAX Rx-C18
ZORBAX ODSZORBAX ODS Classic

1.8, 3.5, 5
1.8, 3.5, 5, 7
1.8, 3.5, 5, 7
1.8, 3.5, 5, 7
3.5, 5
3.5, 5, 7
5

95
80
80
80
80
70
70

L3

多孔質シリカ粒子 (直径 5 ～ 10 µm)

ZORBAX SilZORBAX Rx-Sil

5
5

95
80
80
80
70

L7

完全多孔質マイクロシリカ粒子 (直径 1.5 ～ 10 µm) にオクチルシランを化学結合した充てん剤

ZORBAX Eclipse Plus C8
ZORBAX Eclipse XDB-C8
ZORBAX SB-C8
ZORBAX Rx-C8
ZORBAX C8

1.8, 3.5, 5
1.8, 3.5, 5, 7
1.8, 3.5, 5, 7
1.8, 3.5, 5, 7
5

95
80
80
80
70

L8

完全多孔質シリカゲル担体 (直径 10 µm) に単分子層のアミノプロピルシランを化学結合した充てん剤

ZORBAX NH2

5

70

L10

多孔質シリカ粒子 (直径 3 ～ 10 µm) にニトリル基を化学結合した充てん剤

ZORBAX Eclipse XDB-CN
ZORBAX SB-CN
ZORBAX CN

3.5, 5
3.5, 5
3, 5

80
80
70

L11

多孔質シリカ粒子 (直径 1.5 ～ 10 µm) にフェニル基を化学結合した充てん剤

ZORBAX Phenyl
ZORBAX SB-Phenyl
ZORBAX Eclipse XDB Phenyl
ZORBAX Eclipse Plus Phenyl-Hexyl

5
1.8, 3.5, 5
3.5, 5
1.8, 3.5, 5

70
80
80
95

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HPLC カラム選択ガイドライン

USP 表記USP 充てん剤

カラム

ポア
粒子径 (µm) サイズ (Å)

L13

多孔質シリカ粒子 (直径 3 ～ 10 µm) に化学結合したトリメチルシラン

ZORBAX TMS

5

70

L14

強塩基性第 4 級アンモニウムアニオン交換基を化学結合したシリカゲル (直径 10 µm)

ZORBAX SAX

4

70

L20

多孔質シリカ粒子 (直径 3 ～ 10 µm) にジヒドロキシプロパン基を化学結合した充てん剤

ZORBAX GF-250

5

150

L33

分子量範囲 4,000 ～ 400,000 da でタンパク質を分離できる充てん剤。シリカを基本とする球状で、pH 安定性を持たせるように処理されています。

ZORBAX GF-250

4

150

L35

親水性 (ジオールタイプ) 単分子層結合相を持つ、ジルコニウムで安定化した球状シリカ充てん剤

ZORBAX GF-250
ZORBAX GF-450

4
6

150
300

L56

完全多孔質シリカ粒子 (直径 3 ～ 10 µm) に化学結合したプロピルシラン

ZORBAX SB-C3

1.8, 3.5, 5

80

L57

不斉認識タンパク質のオボムコイドをシリカ粒子 (直径約 5 µm、ポアサイズ
120 Å) に化学結合した充てん剤

Ultron ES-OVM

5

120

L60

球形、多孔質シリカゲル、直径 10 µm 以下、アルキルアミド基で共有結合修飾およびエンドキャップ処理された表面

Bonus-RP

1.8, 3.5, 580

12

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HPLC カラム選択ガイドライン

pH 1 ～12 でのメソッド開発
複数のピーク間のクロマトグラフィ分解
能は、カラム効率、選択性、保持時間の3 つの要因に左右されます。塩基や酸など保持時間のイオン化しやすい対象化合物の分離では、これらすべての要素が移動相の pH によって劇的に変わります。たとえば、分離 pH を変更することで保持を向上でき、イオン性の化合物を非イオン化状態で分離できます。移動相の pH を変更するとカラム効率も向上します。その理由は、サ
ンプルのイオン化と残存シラノールの解
離状態が移動相の pH により変わる可能性があるからです。これにより、ピーク
形状不良の原因となる分析対象成分とシリカ基の 2 的次相互作用を最小限に抑えられます。最適な分解能を実現するには、移動相の pH の変更も必要な場合があります。次に、カラム寿命を保ちながら、どのようにメソッド開発を行うかを説明

サンプルの電荷

/中性

+

中性

シリカ表面の電荷

中性

イオン交換による二次相互作用

NO

YES

NO

Eclipse Plus またはStableBond

Eclipse Plus または Bonus-RP

Extend-C18

推奨結合相

中性/-

図 1:塩基性化合物の HPLC 分離における 3 つの pH 領域
この図は、pKa と pH についての塩基性分析対象化合物の保持状態を示しています。このサンプルの pKa は 6.5
です。

します。
図 1 は、低、中、高の pH 領域を示してい低 pH < 3 – 領域 A

中性 pH 7 - 領域 B

高 pH > 9 – 領域 C

ます。この図では、イオン性分析対象成ü RP-HPLC カラムのシラノールが解ü pH に多少の変化が生じても保持ü この領域では、塩基性化合物は遊離していない低 pH でメソッド開の変動を最小限に抑えるために、

離塩基として存在している可能性

発を始めます。これにより、シラ

pKa が少なくとも 1 離れた条件でが高くなります。

ノール/塩基性化合物の相互作用

メソッドを開発します。

ü 塩基性化合物の保持と分解能が高分の分離を各 pH 領域で行う利点を示しています。メソッド開発では、まず低 pH
でクロマトグラフの分離を調べながら、最適な結果が達成されるまで pH を高めていきます。各 pH 領域に対して理想的なカラムが提供されています。

が排除され、ピークテーリングは ü シリカ表面の SiOH 基は、pH 4 ～まります。

最小限に抑えられます。

5 で SiO‾ になるため、テーリング ü この領域では保持はほとんど変化

ü 低 pH では、塩基性化合物は正にが発生する可能性があります。

荷電し、その保持は低下すること ü エンドキャッピングされたカラム

せず、そのため堅牢なメソッド開発ができます。

があります。

を選択するか、TEA (トリエチレル ü シリカの分解は、革新的な二座型

ü 酸性化合物はプロトン化され、保アミン、あまり望ましくない) な

持力が増します。

どの添加剤を使用するか、またはSIL の使用、最適な移動相により

ü 通常、保持時間は pH の小さな変極性基内包型の結合相を使用し防止されます。

化に対して安定しており、堅牢なて、相互作用を最小限に抑えまü 水酸化アンモニウムなどを、高メソッドになります。

す。

ü LC/MS には、ギ酸やトリフルオロ ü シリカの溶解は、革新的な結合技
酢酸 (TFA) などの揮発性移動相が術や、エンドキャッピング、Rx-

よく使用されます。

SIL の使用により防止されます。

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シラン、エンドキャッピング、Rx-

pH での優れた揮発性移動相として使用できます。

13

HPLC カラム選択ガイドライン

低 pH (pH 2 ～ 3) でメソッド開発をスタート
選択可能なカラムが多くある中で、メソッド開発のスタートに適したカラムをどのように選択すればよいのでしょうか。メソッド開発のスタートには、緩衝作用を持たせた低 pH 移動相 (約 pH 2 ～3) の使用を推奨します。低 pH の移動相を使用すると、シリカベースカラムを用いた塩基性化合物の分析で最良のピーク形状が得られます。低pH では、シリカ表面のシラノールは完全にプロトン化され、正電荷を帯びた塩基性化合物は強い反応を起こしません。その結果、良好なピーク形状が得られます。酸性化
合物の多くは電気的に中性であるため、低 pH での保持時間は最大化されます。これらは低 pH でメソッド開発を行う主な利点です。
標準的な分析作業では、LC/MS 以外のアプリケーションに対しては、移動相有機溶媒としてアセトニトリルを、水性成分として 20 ～ 50 mM のリン酸緩衝液 (pH 2 ～ 3) を使用
してメソッド開発を開始します。この条件により、イオン化合物の分析で最大の再現性を得るために必要な良好な pH 制御が可能になります。LC/MS アプリケーションでは、
ギ酸または TFA が低 pH 用の移動相としてよく使用されます。

最良のピーク形状のために Agilent ZORBAX Eclipse Plus をまず選択
低 pH でメソッドを開発するには、ZORBAX Eclipse Plus C18 または C8 カラムをまず選択します。Eclipse Plus カラムは、Eclipse ファミリに新たに加わったカラムで、改良型シリカと結合技術を使用して、塩基性化合物に対して良好なピーク形状を示します。

Eclipse Plus カラムは pH 2 ～9 で使用できるため、メソッド開発を柔軟に行うことができます。これらのカラムは最低 pH 2 まで安定性を発揮し、最初のメソッド開発には最適です。

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HPLC カラム選択ガイドライン

低 pH で溶媒と結合相を最適化
メソッド開発の最初のステップにより、満足な分離が非常に速く得られることがあります。しかし、さらに最適化が必要な場合は、アセトニトリルをメタノールまたはテ
トラヒドリフランに交換し、分離をさらに最適化できます。このステップにより満足のいく結果を得ることができますが、さらなる選択性の最適化が必要な場合は、カラム結合相を変更します。
低 pH では、最適化にあたって多くの結合相から最適なものを選択します。結合相の種
類には、Eclipse Plus の他、C18、C8、Phenyl、CN などの Eclipse XDB ファミリも含まれます。別の選択肢としては、SB-C18、SB-C8、SB-Phenyl、SB-CN、SB-C3、SB-Aq の 6 種類のStableBond 結合相があります。
低 pH 領域では、酸性化合物の保持時間を調整する必要が生じることもあります。その場合は、pH を pH 1 ～ 2 まで下げ、StableBond カラムを使用します。StableBond カラムは、
選択性を調整して最高の分離を得ることができ非常に低い pH で最高の安定性を示し、ます。

中性 pH (4 ～ 9) でのメソッド開発 Agilent ZORBAX Eclipse Plus を選択
低 pH では分離できない、または中性 pH の方が可溶性や安定性が高まるサンプルもあります。Eclipse Plus C18 カラムでは、中性 pH 領域でのメソッド開発が可能です。Eclipse

Plus カラムは最高 pH 9 まで安定しているため、中性 pH でも低 pH と同等に信頼性が高くなります。ダブルエンドキャップカラムには、2 つの大きな利点があります。1 つは低 pH と中性 pH で良好なピーク形状を示すこと、もう 1 つは、十分な結合密度を持ち、pH 6 ～ 9 でのカラムのシリカ劣化を防ぐことです。
中性 pH では、塩基性化合物 (アミンなど) は正電荷を帯び、シリカ表面のシラノールは負電荷を帯びています。そのため、中性 pH では、シラノール基をできるだけ表面に出さないようにすると最良のピーク形状が得られます。これにより、Eclipse Plus C18 は、中性 pH で最初に選択するカラムとして最適です。リン酸緩衝液は、緩衝範囲が pH 6.1 ～

8.1 であるため、通常は pH 7 での移動相溶媒の第 1 の選択肢です。中性 pH に対する 2
番目の選択肢は、酢酸緩衝液です。これは pH 3.8 ～ 5.8 で緩衝し、揮発性でもあることから、LC/MS に適しています。

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HPLC カラム選択ガイドライン

別の選択肢 － Agilent ZORBAX Eclipse Plus Phenyl-Hexyl、Eclipse XDBPhenyl、CN、Bonus-RP
低 pH での手順と同様に、中性 pH でのメソッド開発プロセスでも、分解能が十分に得られない場合には、有機溶媒の最適化や代替結合相の選択を行います。中性 pH での代替結合相は、Eclipse Plus Phenyl-Hexyl、Eclipse XDB-Phenyl、Eclipse XDB-CN、Bonus-RP です。
これらは、多くのサンプルに対して選択性が非常に異なるため、メソッド開発プロセスをさらに進めることができます。Bonus-RP カラムには、極性のあるアミド基が導入されており、多くのサンプルで異なる選択性を示すとともに、塩基性化合物も良好な
ピーク形状で分離します。Bonus-RP カラムは最大 100 % の水溶液の移動相で使用できます。

高 pH (9 ～ 12) でのメソッド開発用 Agilent ZORBAX Extend-C18 カラム
が最適
低 pH または中性 pH では、十分な保持や選択性が得られない塩基性化合物があります。
これらのサンプルでは、高 pH 分離が適切な場合があります。最近まで、高 pH では基材であるシリカゲルの溶解によりカラム寿命が短くなることから、シリカ系カラムでしかし、シリカの溶解を防ぐことができる ZORBAXの高 pH 分離は敬遠されてきました。

Extend-C18 などの新しいカラム技術により、満足のいくカラム寿命が実現し、高 pH での選択性の違いを利用できるようになりました。

Extend-C18 カラムによる高 pH での移動相緩衝液には、トリエチルアミンや水酸化アン
モニウムなどの有機緩衝液が最適です。高 pH でカラム寿命を延ばすには、これらの緩衝液の有機溶媒としてメタノールを使用することをお勧めします。

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HPLC カラム選択ガイドライン

スタート
化合物の保持が不十分

サンプル

低 pH 3

初期分離

低 pH から高 pH までのメソッド開発ガイドライン

ステップ 1・ZORBAX Eclipse Plus C18 または C8・pH 2.5 (2 ～ 3) 20 ～ 50 mM バッファ・T = 30 °C (周囲温度 60 °C まで)
・% ACN を 0.5 < k < 20 の範囲で調整
ピーク分離不十分ステップ 2a
カラム温度を変更: Eclipse XDB= 最高 60 °C まで、Stablebond =80 ～ 90 °C まで

ステップ 2ピーク
分離不十分

有機溶媒量 (%) を 5 % (v/v) 増加
または減少
ピーク分離不十分ステップ 3
・有機溶媒を変更 (MeOH または THF)
・有機溶媒の量 (%) を 0.5 < k < 20 の範囲で調整
・ステップ 2 から再スタート

化合物の保持が不十分
酸ステップ 1a・ZORBAX SB-C18 または SB-C8
・pH 1 ～ 3、20 ～ 50 mM バッファ・T = 30 °C (周囲温度 90 °C まで)
・% ACN を 0.5 < k < 20 の範囲で調整
ピーク分離不十分ステップ 1b

ピーク分
離不十分

ステップ 1c
有機溶媒量 (%) を 5 % (v/v)
増加または減少

ピーク
分離
不十分

ピーク分離不十分ステップ 1d・結合相を機能性の異なる Eclipse
XDB-C18、C8、Phenyl に変更
・SB-CN、AQ、Phenyl、Bonus-RP
・ステップ 1 から再スタート

有機溶媒量 (%) を 5 % (v/v) 増加/減少

ステップ 1e

ピーク分離不十分・有機溶媒を変更 (ACN または THF)
・0.5 < k < 20 の範囲に調整

ステップ 5または
中性 (pH 7)

塩基性化合物 (イオンペア形成)
・MeOH 有機溶媒使用、10 mM ヘキサ
25 ～ 50 mM バッファンスルホン酸、(pH 3) を使用
・% MeOH を 0.5 < k < 20 の範囲で調整
ピーク分離不十分ステップ 4

・ZORBAX Eclipse Plus C18 または C8
・pH 7 (6 ～ 9) 20 ～ 50 mM バッファ・T = 30 °C (周囲温度 40 °C まで)
・% MeOH を 0.5 < k < 20 の範囲で調整

ま
た
は

塩基

化合物の保持が不十分

ピーク分離不十分ステップ 5aステップ 6

酸性化合物 (イオンペア形成)
・MeOH 有機溶媒使用、10 mM リン酸
テトラブチルアンモニウム、25 ～50 mM バッファ (pH 7) を使用
・% MeOH を 0.5 < k < 20 の範囲で調整

有機溶媒量 (%) を 5 % (v/v) 増加
または減少
ピーク分離不十分
ピーク
分離不
十分

ステップ 7
・有機溶媒を変更 (ACN または THF)
・0.5 < k < 20 の範囲に調整
・ステップ 6 から再スタート
ピーク分離不十分

ピーク分離不十分ステップ 5c
有機溶媒量 (%) を 5 % (v/v)
増加または減少ステップ 8ステップ 5bピーク
分離
不十分

結合相の推奨温度範囲内で温度を変更

・結合相を機能の異なる ZORBAX Eclipse
XDB-Phenyl または Bonus-RP に変更
・ステップ 5 から再スタート

ピーク分離不十分

ピーク分離不十分・有機溶媒を変更 (ACN または THF)
・0.5 < k < 20 の範囲に調整

ステップ 9ステップ 5d・ZORBAX Extend-C18
・pH 10.5 (9 ～ 11.5)、5-20 mM アンモニアまたは TEA、または 10 ～ 50 mM
有機バッファ、またはホウ酸塩バッ
ファ・T = 25 °C (周囲温度 40 °C まで)
・% MeOH を 0.5 < k < 20 の範囲で調整

高 pH 9ピーク分離不十分ステップ 10a結合相の推奨温度範囲内で温度を変更

ピーク分離不十分ステップ 10
ピーク
分離
不十分

ピーク分離不十分

有機溶媒を変更 (ACN または THF)
0.5 < k < 20 に調整

異なる HPLC モードを試してください
アジレントにお問い合わせください

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HPLC カラム選択ガイドライン

カートリッジカラムシステム
アジレントは、さまざまな HPLC 充てん剤のカートリッジを提供します。
各種ガードカートリッジハードウェアシステムに対応するガードカートリッジについては、
アイコンを確認して選択してください。

カートリッジ選択ガイドアイ
コン カートリッジの種類

Agilent HPLC カートリッジ

ZORBAX ガードカートリッジ:
スタンドアロンシステム

ZORBAX ラピッドレゾリューションおよび
ラピッドレゾリューション HT カートリッジカラム:
3.5 µm および 1.8 µm 充てん剤、スタンド

アロンシステムZORBAX セミ分取ガード HPLC ハードウェア
キット
スタンドアロンシステム

ZORBAX および Agilent 分取カートリッジ
カラムおよびガード HPLC システム:
スタンドアロンおよび一体型ハードウェア
オプション

18

特徴

効果

エンドフィッティングに逆コレットを接続
して、ガードカートリッジを追加できます安価
カラムの寿命延長
迅速なカラム交換が可能
2、3、4、4.6 mm カートリッジを使用可能

カートリッジは両端にフィルタとシーブが付いています

詰まり防止に有効

高効率、スタンドアロン、低デッドボリュー
ムカートリッジ

最高 400 bar (40MPa) まで密閉
ガスケットは必要なし

金属面に対して漏れをなくした樹脂カート
リッジ

PEEK より溶媒耐性が高い

再使用可能なフィッティング

1/16" LC フィッティングへの接続に適合

ハイスループット LC/MS、LC/MS/MS 用

Eclipse XDB を充てん (pH 2 ～ 9 用)
StableBond を充てん (低 pH 領域用)

全種類の分析対象化合物用
低ブリード

1 本または 3 本入りで提供
簡単な低デッドボリュームアセンブリ
金属面に対して漏れをなくしたチューブ(ポリフェニレンスルホン)

最高 2,000 psi (135 bar, 13.5MPa) まで密閉
ガスケット不要

再使用可能なフィッティング

1/16" LC フィッティングへの接続に適合

簡単な低デッドボリュームアセンブリ

カラムの寿命を伸ばす

再使用可能なフィッティング

迅速なカラム交換が可能

一体型または外部ガード用のハードウェア
オプション

内径 21.1 mm および 30 mm のカラムに使用可能

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分析 HPLC用カラム
優れたピーク形状と分解能の実現。
分析開始時にカラム選択で迷うことはありません。
特定のアプリケーションに対して、カラムの検討の時間が十分に取れなくても心配はいりません。ZORBAXカラムは、その豊富な種類から、お客様のサンプルや移動相に適したカラムを選べます。
さらに、アジレントの ZORBAXシリカは他社から購入したものではなく、自社で製造しています。製造工程のすべての段階を自社管理していいるため、ロット間の一貫性、優れた性能、および長期にわたる信頼性の高い結果を確保できます。
この項では、幅広い pH範囲にわたり最適な分解能を得るように設計された、さまざま
な ZORBAXカラムを紹介します。

• Poroshell120カラム –2µm未満のカラムよりも 50%低い圧力で高効率と高分離能を備えています。

• ZORBAXEclipsePlusHPLCカラム –塩基性化合物に対して優れたピーク形状を確実に生成できるように設計されています。

• ZORBAXEclipsePAHHPLCカラム –「平面認識能」を必要とするアプリケーションまたは幾何異性体の分離に理想的です。

• ZORBAXEclipseXDBHPLCカラム –分析メソッドや規制メソッドに対して最適な選択肢です。

• ZORBAXStableBondHPLCカラム –低 pHアプリケーション用の業界標準カラムです。
• ZORBAXRxHPLCカラム –pH9まで優れた安定性を示します。
• ZORBAXExtend-C18HPLC カラム – 高 pH で高分解能分離を可能にする二座型結合相を備えています。

• ZORBAXBonus-RPHPLC カラム – 塩基性化合物に対して優れたピーク形状を示すとともに、代替選択性を持つアルキルアミドカラムです。

• オリジナルの ZORBAXHPLC カラム – タイプ A シリカで作られ、多くの既存の分離メ
ソッドで使用されます。

• ZORBAXHILICPlusカラム –HILICモードのシリカで、極性塩基性化合物に対して優れたピーク形状と保持を示します。

• ZORBAXメソッド開発キット –2本の価格で 3本のカラムが含まれます。それぞれ、最適な選択性を得るための異なる結合相を持っています。

• ZORBAXメソッドバリデーションキット –必要なカラムをお選びください。メソッド
バリデーションを簡単に、低コストに行えます。

• ZORBAXイオン交換カラム –強アニオン交換 (SAX)と強カチオン交換 (SCX)を提供しています。

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分析 HPLC用カラム

Poroshell120• 高効率と高分解能• 2µm未満のカラムよりも 50%低い圧力• 40MPaおよび 60MPa(400barおよび 600bar)の LCに対応• 選択性とピーク形状に優れた 2つの結合相
AgilentPoroshell120カラムは、1.7µmのソリッドコアと 0.5µmの多孔質外殻を持つ 2.7µm粒子です。この小さな粒子径によって、2µm未満のカラムと同様の高い効率が得られますが、圧力は 40～ 50%低くなります。これらの高効率高分離カラムは、どのタ
イプの LCでも使用できます。多孔質外殻とソリッドコアによって拡散距離が制限され、分離スピードが向上する一方で、粒子径が小さいため効率と分離能が向上します。ソ
リッドコアによって、拡散距離が制限され、分離スピードが向上します。カラムは高圧に対応し、複数のカラムを使用すると、可能な限り最高の分離能と効率を実現できます。生体分子の高速、高分解能の分離に理想的な Poroshell300カラムでも同じ原理が使用されています。

カラム仕様
結合相

ポアサイズ

上限温度

pH範囲

エンド
キャップ

カーボン
ロード

SB-C18

120Å

90°C

1.0-8.0

なし

7.5%

EC-C18

120Å

60°C

2.0-8.0

シングル

8%

EC-C8

120Å

60°C

2.0-8.0

シングル

5%

仕様は代表的な値のみを表しています。

20

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分析 HPLC用カラム

Poroshell120
説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

SB-C18EC-C18

EC-C8*

アナリティカル

4.6x150

2.7

683975-902

693975-902

693975-906

アナリティカル

4.6x100

2.7685975-902

695975-902

695975-906

アナリティカル

4.6x75

2.7687975-902

697975-902

697975-906

アナリティカル

4.6x50

2.7689975-902

699975-902

699975-906

アナリティカル

4.6x30

2.7681975-902

691975-902

691975-906

ソルベントセーバ

3.0x150

2.7

683975-302

693975-302

693975-306

ソルベントセーバ

3.0x100

2.7685975-302

695975-302

695975-306

ソルベントセーバ

3.0x75

2.7687975-302

697975-302

697975-306

ソルベントセーバ

3.0x50

2.7689975-302

699975-302

699975-306

ソルベントセーバ

3.0x30

2.7681975-302

691975-302

691975-306

ナローボア

2.1x150

2.7683775-902

693775-902

693775-906

ナローボア

2.1x100

2.7685775-902

695775-902

695775-906

ナローボア

2.1x75

2.7687775-902

697775-902

697775-906

ナローボア

2.1x50

2.7689775-902

699775-902

699775-906

ナローボア

2.1x30

2.7681775-902

691775-902

691775-906*近日販売開始予定

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分析 HPLC用カラム

Poroshell120カラムを用いた環境フェノールの分析
カラム A:

カラム B:

グラジエント:

検出器:
注入:
Agilent1200SL40°C

Poroshell120EC-C18
695975-902
4.6x100mm,2.7µm

1.

ヒドロキノン

6.

o-クレゾール

2.

レソルシノール

7.

2-ニトロフェノール

3.

カテコール

8.

EclipsePlusC18
959964-902
4.6x100mm,1.8µm

4.

A

2,3ジメチルフェノール
9.
4-ニトロフェノール
2,5ジメチルフェノール
10. 1-ナフトール
p-クレゾール

5.

1
2

A:水 0.1%ギ酸
B:アセトニトリル 0.1%ギ酸
2mL/min
初期:8%B
10分:30%B

3

P=332bar

9

4
5
6

0

275nm2mmフローセル
10µL

2

4

6

7
10

8

8

10

Time (min)B

12

パルスダンパなし

3

ミキサなし 3µLヒータ

P=510bar
9

4
5

7
6
8

10

Poroshell120は 2µm未満カラムと同様の効率を低圧で達成します。

0

2

4

6Time (min)22

www.agilent.com/chem/jp

810
EP_Poro120

分析 HPLC用カラム

ZORBAXEclipsePlus• 塩基性化合物でも優れたピーク形状• 酸性化合物、塩基性化合物、中性化合物について、ピーク形状、分解能、寿命など、すべてにおいて最高レベルの性能を発揮• 厳格な QA/QC試験による優れた再現性• 工程すべてを管理することにより、製造プロセスがさらに改善 (特許取得済)• 粒子径 1.8、3.5、5µmの各タイプを揃え、一般分析用、高分解能分析、高速 LC分析用に対応
新しい AgilentZORBAXEclipsePlusカラムは、シリカベースのカラムとして卓越した性能を提供します。効率と分解能が向上し、塩基性化合物でも対称形のピーク形状を示します。アジレントは、充てん剤製造プロセスのすべてを自社でコントロールすること
により、高性能のカラムを提供しています。

EclipsePlusカラムは多岐にわたるサンプルのメソッド作成にとっその高い性能により、て理想的な選択肢です。高速メソッド開発と優れた生産性を実現する必要がある場
合、高分解能な粒子径 1.8µmカラムをお使いください。標準メソッドに対しては、粒子径 5µm のカラムまたはラピッドレゾリューション 3.5µm カラムをお使いください。
すべての粒子径で、メソッドトランスファを簡単に行えます。
厳格な QA/QC試験により、ロット間の再現性が保たれ、長期間にわたり信頼性の高い結果が得られます。

カラム仕様
結合相

ポア
サイズ

表面積

上限
温度

pH範囲*

エンド
キャップ

カーボン
ロード

ZORBAXEclipsePlusC18

95Å

160m2/g

60°C

2.0-9.0

ダブル

9%

ZORBAXEclipsePlusC895Å

160m2/g

60°C

2.0-9.0

ダブル

7%

ZORBAXEclipsePAH

95Å

160m2/g

60°C

2.0-8.0

なし

14%

ZORBAXEclipsePlusPhenyl-Hexyl95Å

160m2/g

60°C

2.0-8.0

ダブル

9%

仕様は代表的な値のみを表しています。

*pH7および温度 40°Cを超える場合は、カラム寿命が大幅に短くなります。シリカを基材とするカラムをpH6～9の範囲で最高の安定性にて使用するには、40°C未満の使用温度、0.01～ 0.02Mの範囲の低濃度緩衝液(特に、リン酸緩衝液と炭酸塩緩衝液)を使用します。

www.agilent.com/chem/jp23

分析 HPLC用カラム

ZORBAXEclipsePlus:優れたピーク形状、最小限のテーリング
カラム:

移動相:

EclipsePlusC18
959996-902
4.6x100mm,5µm

流量:A:60%水
B:40%アセトニトリル
1.0mL/min

温度:

室温

検出器:

UV254nm

資料番号:5989-4934EN

サンプル:

ピリジン、フェノール

1

1.

Pyridine

2.

Phenol2

Eclipse Plus C18
Ace 5 C18
SunFire C18
XBridge C18
Discovery HS C18
Luna C18 (2)Gemini C18
XTerra MS C18
0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

3.0

3.5

Time (min)
LCEC001

1. スルファニルアミド
2. スルファジアジンZORBAXEclipsePlusの優れたピーク形状と効率
カラム A:

XBridgeC18、4.6x150mm、5µm

カラム B:

EclipsePlusC18
959993-902
4.6x150mm,5µm

移動相:
流量:
グラジエント:3. スルファチアゾール
4. スルファメラジン

A1

A:0.1%ギ酸
B:0.1%ギ酸 ACN溶液
1.0mL/min

温度:

0.0分 10%B
15分 30%B
40°C

検出器:

UV254nm

資料番号:5989-4934EN

サンプル:

スルホンアミド

3

2

0

2

B

1

24

2

N = 41000
Tf = 1.13

5

4

4

6
Time (min)

6

8

10

N = 23000
Tf = 1.01

20

5. スルファメタジン
6. スルファメトキサゾール

N = 14000
Tf = 1.25

12

N = 60000
Tf = 1.00
3

4

www.agilent.com/chem/jp

456Time (min)

8

6

10

12
LCEC003

分析 HPLC用カラム

EclipsePlusカラムによるテーリングの抑制と分離の最適化

1
EclipsePlusC18、4.6x50mm

カラム A:

EclipsePlusC184.6x50mm

カラム B:

競合他社 C18、4.6x50mm

移動相:65%ACN:35%25mMリン酸緩衝液 (pH7.4)、

Tf=1.20

EclipsePlusを用いた優れたピーク形状と選択性は、より高い分解能、容易な定量、優れた分離結果を意味します。

競合他社 C18、4.6x50mm

1

1.

ノルトリプチリン

2.

フタル酸ジプロピル

Tf=4.86

2
2
0

0.5

1

1.5

2

min

EclipsePlusC18と C8、および RRHTと RRの比較
カラム A:

EclipsePlusC18
959941-902
4.6x50mm,1.8µm

カラム B:

EclipsePlusC8
959943-906
4.6x50mm,3.5µm

移動相:

水:アセトニトリル (30:70)

流量:

2.0mL/min

温度:

30°C

検出器:

UV230nm

サンプル:

リップクリーム抽出物 ACN溶液(100°C の ACNで溶かし、冷却後0.45µmでろ過)

オキシベンゾン

2.

内部標準

3.

メトキシ桂皮酸オクチル

A
247 bar
N: 8800
Pw : 0.014 min.
TF: 1.20

0
保持時間が短いため、分析時間が大幅に短縮されます。ここでは C8が最適です。RRHTカラムは期待される効率と分解能を実現しますが、C8結合相が最適な場合があります。

1.

B

0

1
N: 5000
Pw : 0.019 min.
TF: 1.09

N: 11600
Pw : 0.047 min.
TF: 1.06

2

N: 6600
Pw : 0.037 min.
TF: 0.99

1

www.agilent.com/chem/jp

2

N: 11800
Pw : 0.093 min.
TF: 1.02

3

4

min

88 bar
N: 6300
Pw : 0.061 min.
TF: 0.98

22 min.
3

4

min

25

分析 HPLC用カラム

鎮痛剤錠剤の高速分析、pH2と pH7での選択性の違い
カラム:

グラジエント:サンプル:

EclipsePlusC8
959946-906
4.6x50mm,5µm
10-60%B/3分
pH2.7:A:0.1%ギ酸 B:0.1%ギ酸 ACN溶液
pH7.0:A:20mMリン酸ナトリウム B:ACN
ジェネリック1.

アセトアミノフェン

2.

カフェイン

3.

アセチルサリチル酸

4.

未知化合物

エキセドリン錠剤

pH 2.73
1

EclipsePlusC18と C8は、どちらも広範囲の pHで、選択性と分析時間を最適化
できます。

2
0

0.5

1

4

1.5

2

2.5

3

3.5

min

pH 7.01
3

2 min.

2
4
0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

3.5

min

EclipsePlusC8は EclipsePlusC18よりも保持時間が短い
カラム A:

EclipsePlusC8
959996-906
4.6x100mm,5µm

カラム B:

EclipsePlusC18
959996-902
4.6x100mm,5µm

移動相:

80%メタノール 8mM(合計)K2HPO4 pH7

流量:1.0mL/min

検出器:

UV215nm

サンプル:

アミトリプチリン 0.05µg/µL(0.5µL注入)

A
3.789

C8カラムは C18カラムよりも保持時間が短く、分析時間が短縮されるため、通常は C8カラムが選択されます。

0

1

2

3

Tf=1.04

4

B

5

6

7

8

9

min

7

8

9

min

5.777

EclipsePlusC8 カラムは、分離が困難な塩基性化合物でも優れたピーク形

Tf=1.00状で同様の分離を達成します。

0

26

1

2

www.agilent.com/chem/jp

3

4

5

6

分析 HPLC用カラム

EclipsePlusを用いた塩基性化合物の高速、超高速分析
カラム A:

カラム B:

移動相:
流量:

EclipsePlusC18
959941-902
4.6x50mm,1.8µm

AO

EclipsePlusC18
959993-902
4.6x150mm,5µm

N+

O

温度:

室温

UV254nm

資料番号:5989-4934EN

サンプル:

ベルベリン、0.4mg/mL、2µL

1.

ベルベリン

OCH3

Tf = 1.00

OCH3

A:50%8mMK2HPO4、pH7
B:50%ACN
1.0mL/min

検出器:

Cl-

0

0.5

1

1.5

2

2.5

min

B

Tf = 1.06

0

0.5

1

1.5

2

2.5

min
EP103

www.agilent.com/chem/jp27

分析 HPLC用カラム

ZORBAXEclipsePlus
EclipsePlus
Phenyl-Hexyl
USPL11959990-912

EclipsePAH
USPL1959990-918

寸法(mm)

粒子径 (µm)

アナリティカル

4.6x250

5

アナリティカル

4.6x150

5959993-902

959993-906

959993-912

959993-918

アナリティカル

4.6x100

5959996-902

959996-906

959996-912

959996-918

アナリティカル

4.6x50

5959946-902

959946-906

ラピッドレゾリューション

4.6x150

3.5959963-902

959963-906

959963-912

959963-918

ラピッドレゾリューション

4.6x100

3.5959961-902

959961-906

959961-912

959961-918

ラピッドレゾリューション

4.6x75

3.5959933-902

959933-906

959933-912

ラピッドレゾリューション

4.6x50

3.5959943-902

959943-906

959943-912

ラピッドレゾリューション

4.6x30

3.5959936-902

959936-906

959936-912

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar 4.6x100

1.8959964-902

959964-906

959964-912

959964-918

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar 4.6x75

1.8959951-902

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar 4.6x50

1.8959941-902

959941-906

959941-912

959941-918

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar 4.6x30

1.8959931-902

959931-906

959931-912

959931-918

ソルベントセーバ

3.0x250

5ソルベントセーバ

3.0x150

5959993-302

959993-306

ソルベントセーバプラス

3.0x150

3.5959963-302

959963-306

959963-312

ソルベントセーバプラス

3.0x100

3.5959961-302

959961-306

959961-312

ソルベントセーバ HD、1200bar

3.0x100

1.8959758-302

ハードウェア 説明

28

EclipsePlusC8USPL7959990-906

EclipsePlusC18
USPL1959990-902

959943-918

959990-318

ソルベントセーバ HD、1200bar

3.0x50

1.8959757-302

ソルベントセーバ HT、600bar

3.0x100

1.8959964-302

959964-306

959964-312

ソルベントセーバ HT、600bar

3.0x50

1.8959941-302

959941-306

959941-312

www.agilent.com/chem/jp

分析 HPLC用カラム

ZORBAXEclipsePlus
EclipsePlusC18
USPL1

EclipsePlusC8USPL7

EclipsePlus
Phenyl-Hexyl
USPL11

EclipsePAH
USPL1959701-912

959701-918

寸法(mm)

粒子径 (µm)

ナローボア

2.1x250

5

ナローボア

2.1x150

5959701-902

959701-906

ナローボア

2.1x50

5959746-902

959746-906

ナローボア RR

2.1x150

3.5

959763-902

959763-906

959763-912

ナローボア RR

2.1x100

3.5

959793-902

959793-906

959793-912

ナローボア RR

2.1x50

3.5959743-902

959743-906

959743-912

959733-906

959733-912

ハードウェア 説明

959790-918

959793-918

ナローボア RR

2.1x30

3.5

959733-902

ナローボア RRHD、1200bar

2.1x150

1.8

959759-902

ナローボア RRHD、1200bar

2.1x100

1.8959758-902

ナローボア RRHD、1200bar

2.1x50

1.8959757-902

ナローボア RRHT、600bar

2.1x100

1.8959764-902

959764-906

959764-912

959764-918

ナローボア RRHT、600bar

2.1x50

1.8959741-902

959741-906

959741-912

959741-918

ナローボア RRHT、600bar

2.1x30

1.8959731-902

959731-906

959731-912

ガードカートリッジ、4個

4.6x12.5

5820950-936

820950-937

820950-938

820950-939

ガードカートリッジ、4個

2.1x12.5

5821125-936

821125-937

821125-938

821125-939

0820888-901

820888-901

820888-901

820888-901

ガードハードウェアキット

www.agilent.com/chem/jp29

分析 HPLC用カラム

ZORBAXEclipsePAH• EPA610で 16の PAHを高分解能で分離• 広範囲の粒子径 (1.8、3.5、5µm)と、高速高分解能分離用のサイズ• 予想される使用条件下での再現性を最大にするために、物質の各バッチは PAHでテス
ト済み• Eclipse Plus カラム高品質の改良されたシリカを使用して優れたパフォーマンスを実現• 「平面認識能」を必要とするアプリケーションまたは幾何異性体の分離に最適
AgilentZORBAXEclipsePAHカラムは、多環芳香族炭化水素の分離にお勧めします。PAHは、
優先汚染物質とみなされ、水中、土壌、および食品に存在する可能性のあるこのような発癌性化合物の分析は非常に重要です。EclipsePAHカラムは、EPAメソッド 610で 16の PAHすべてを高分解で分離します。

カラム仕様
結合相

ポア
サイズ

表面積

上限
温度

ZORBAXEclipsePAH

95Å

160m2/g

60°C

仕様は代表的な値のみを表しています。

30

www.agilent.com/chem/jp

pH範囲
2.0-8.0

エンド
キャップ

カーボン
ロード

なし

14%

分析 HPLC用カラム

RRHTEclipsePAHカラムによる高速高分離分析
EclipsePAH
カラム:
959941-918
mAU
4.6x50mm,1.8µm
2000
移動相:
A=水、B=アセトニトリル%B
グラジエント: 時間 (分)
1750
40
0.00
1500
100
3.5
100
5.2
1250
40
5.5
40

流量:

6.5
2.0mL/min

温度:

25°C

750

検出器:

DAD220、4nmNoRef.
DADストップタイム =6.0分500

ストップタイム =7.0

Rs=2.2と 2.0
4.6x50mm、3.5µm

Rs=2.2

1000

250
0
1

2

3
Time (min)45
LCEPlusPAH

ZORBAXEclipsePAH
ハードウェア 説明

EclipsePAH
USPL1

寸法(mm)
4.6x250

粒子径 (µm)

アナリティカル

5959990-918

アナリティカル

4.6x150

5959993-918

アナリティカル

4.6x100

5959996-918

ラピッドレゾリューション

4.6x150

3.5959963-918

ラピッドレゾリューション

4.6x100

3.5959961-918

ラピッドレゾリューション

4.6x50

3.5959943-918

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar 4.6x100

1.8959964-918

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar 4.6x50

1.8959941-918

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar 4.6x30

1.8959931-918

ソルベントセーバ

3.0x250

5959990-318

ナローボア

2.1x250

5959790-918

ナローボア

2.1x150

5959701-918

ナローボア RR*

2.1x100

3.5

959793-918

ナローボア RRHT、600bar

2.1x100

1.8959764-918

ナローボア RRHT、600bar

2.1x50

1.8959741-918

ガードカートリッジ、4個

4.6x12.5

5820950-939

ガードカートリッジ、4個

2.1x12.5

5821125-939

ガードハードウェアキット

820888-901*RR:ラピッドレゾリューション 3.5µm

www.agilent.com/chem/jp31

分析 HPLC用カラム

ZORBAXEclipseXDB

CH3
O

Si
CH3
CH3

O

Si

CH3

CH3
CH3
O

Si

CH3

CH3
CH3
O

• 1.8µm～ 7µmの粒子径• 高密度結合とダブルエンドキャッピングで長寿命を実現

Si
CH3
CH3

O

• メソッド開発に合わせ 4 種類から選択可能• 塩基性、酸性、中性の化合物で良好なピーク形状• pH2～ 9の広い pH範囲で高性能を発揮

Si
CH3

高密度結合相とダブルエンドキャッピングを導入した EclipseXDB結合相

AgilentZORBAXEclipseXDB カラムでは、メソッド開発を最適化できるよう、4つの結合相(C18、C8、Phenyl、CN)を提供しています。このため、pH2～ 9 の幅広い領域で良好なピーク形状を実現し、メソッド開発における柔軟性を 1 シリーズのカラムで得るこEclipseXDB カラムは低 pH(2～ 3)でのメソッド開発に適したカラムで、あとができます。
らゆるタイプの化合物で高い分解能と良好なピーク形状が得られます。また、中性pH(6～ 8)での使用も可能です。中性 pH 領域では、残存シラノール基が活性が高くなり、テーリングが起こりやすくなります。こうしたテーリングを抑えるために、Eclipse

XDB カラムでは独自のプロセスにより超高密度結合とダブルエンドキャッピングを導入し、シラノール基の活性をできるかぎり抑えてい ます。その結果、pH2～ 9の範囲で塩基性化合物のピーク形状が向上しています。EclipseXDBカラムには 1.8µm、3.5µm、
5µm、および 7µmの粒子径が用意されており、高速、高分解能の分析および分取スケー
ルの分離を実現します。

カラム仕様
結合相

ポア
サイズ

表面積

上限
温度

ZORBAXEclipseXDB-C1880Å

180m2/g

60°C

pH範囲*
2.0-9.0

ZORBAXEclipseXDB-C880Å

180m2/g

60°C

2.0-9.0

ZORBAXEclipseXDB-Phenyl 80Å

180m2/g

60°C

2.0-9.0

ダブル

7.2%

ZORBAXEclipseXDB-CN

180m2/g

60°C

2.0-8.0

ダブル

4.3%

80Å

エンド
キャップ

カーボン
ロード

ダブル

8%

ダブル

7.6%

仕様は代表的な値のみを表しています。

*EclipseXDBカラムは、幅広い pH範囲で使用できるように設計されています。シリカを基材とするカラムをpH6～9の範囲で最高の安定性にて使用するには、40°C未満の使用温度、0.01～ 0.02Mの範囲の低濃度緩衝液を使用します。

32

www.agilent.com/chem/jp

分析 HPLC用カラム

サンプル:

広範囲の pHで最高のピーク形状が得られる ZORBAXEclipseXDB
カラム:

EclipseXDB-C8
993967-906
4.6x150mm,5µm

移動相:

A:
pH3.075%25mM

A

3

pH3.0:25%ACN
B:pH7.090%20mM
リン酸 pH7.0
10%ACN流量:

1.5mL/min

温度:

40°C

B

2

リン酸緩衝液A:
1.マレイン酸エステル
2.ドキシラミン
3.クロロフェニルアミン
4.トリプロリジン
5.ジフェンヒドラミン
2 B:
1.プロカインアミド
2.N-アセチルプロカインアミド
3.N-プロピオニルプロカインアミド

1

3

4
5
1

0

2.5

5.0
Time (min)

7.5

0

2.5

5.0
Time (min)7.5
LCEC004

幅広い pH範囲で優れたピーク形状が得られるため、ZORBAXEclipseXDBカラムはpH2～ 9 の範囲のメソッド開発で選択するのにふさわしいカラムです。

pH7.0におけるカラム安定性のテスト
カラム A:

他社の C8SIL-タイプ
1826カラムボリューム後

カラム B:

EclipseXDB-C8
993967-906
4.6x150mm,5µm
SOL-タイプ
1843カラムボリューム後

移動相:

A

60%ACN
40%250mMリン酸緩衝液、
pH7.0

流量:

1.5mL/min

温度:

60°C

サンプル:

三環系抗うつ剤B

15

1. ウラシル

5

1

2. ノルトリプチリン

2, 3

3. ドキセピン
4. アミトリプチリン
4

5. トリミプラミン
2

3
4

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12Time (min)

0

1

2

3

4
5
Time (min)6

7

8
LCEC006

ダブルエンドキャッピングと高密度結合を導入した耐久性の高い Rx-Sil粒子 (sol-タイプ)は、ここで使用されているシングルエンドキャッピングの sil-ゲルカラムと比べて、pH7におけるカラム寿命が長くなっています。このテストのような高温 (60°C)、高塩分濃度 (250mM)という条件下では、シリカの溶解が加速するため、sil-ゲルタイプのカラムの寿命が短くなります。

www.agilent.com/chem/jp33

分析 HPLC用カラム

pH3および 60°C におけるカラム安定性のテスト

カラム:

移動相:

ZORBAXSB-C8883975-906
4.6x150mm,5µm

7.0

EclipseXDB-C8
993967-906
4.6x150mm,5µm

6.5

流量:

パージ条件:
70%50mMNaAc-HCl、pH3.0
30%ACN保持力試験条件:
65%メタノール
35%水
1.0mL/min

温度:

60°C

サンプル:

三環系抗うつ剤

K of Amitriptyline

カラム:

6.0

ZORBAXSB-C8
5.5

ZORBAXEclipseXDB-C8
競合他社 C8

5.0
0

6
8
4
Column Volumes of Mobile Phase (X1000)

2

10

12
LCEC005

EclipseXDB カラムは、幅広い pH 範囲で安定しています。低 pH では、エンドキャップされた Eclipse カラムは安定性が極めて高く、pH3 ではエンドキャップされていないカラム、SB-C8 と同程度の安定性を示します。各カラムは 60°C、pH3 の移動相でパージしました。その後、強塩基性化合物を用いたテストにより、エンドキャッピングまたは結合相がシリカ表面から加水分解されているかどうかを調べました。カラムボリューム 12,000 までのテスト範囲でアミトリプチリンのリテンションの値にばらつきが少ないことから、EclipseXDB カラムは極めて安定性が高いことが分かります。他のエンドキャップされたカラムは同様の条件下で安定性が低くなっています。

EclipseXDBと StableBondによる塩基性化合物の選択性の変化
カラム A:

EclipseXDB-C8
966967-906
4.6x75mm,3.5µm

カラム B:ZORBAXRx/SB-C8866953-906
4.6x75mm,3.5µm

移動相:
流量:

70%25mMNaH2PO4、pH3.0
30%メタノール
1.0mL/min

温度:

35°C

EclipseXDB と StableBond カラムは同じシリカを

A

B

2

3

ベースとしていますが、結合相とエンドキャッ
ピングが異なります。そのため、この例で示されているように、同じサンプル、同じ条件において大きく異なる選択性が得られます。

1.

バルビタール2.

スルファメトキサゾール

3.

カフェイン

2

3

1

1

0

0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5
Time (min)00.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5
Time (min)
LCEC00834

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分析 HPLC用カラム

EclipseXDBの選択性の違いを利用した分離の最適化:
日焼け止め剤の分析
カラム A:

A

EclipseXDB-Phenyl
963967-912
4.6x150mm,3.5µm

12

カラム B:

EclipseXDB-C8
963967-906
4.6x150mm,3.5µm

カラム C:

EclipseXDB-C18
963967-902
4.6x150mm,3.5µm

移動相:

15%H20:85%MeOH

流量:

1.0mL/min

温度:

35°C

サンプル:

日焼け止め剤

1.

オキシベンゾン

2.

パディメート-O

3.

サリチル酸エチルヘキシル

3

0
B

2

4

6

8

10

12

14

16

10

12

14

16

1

2
3

0
C

2

4

6

8

1

EclipseXDBの全 3種類の結合相 (C18、C8、Phenyl)を使用した日焼け止め剤の分離では、様々な結合相を分離の最適化に使用できることがわかります。

2

3 種類の結合相全てで十分な分離能が得られていますが、EclipseXDB-Phenyl

3

ではピークの溶出順序が異なるとともに、全体の分析時間も短くなっています。また、3種類の結合相全てで、移動相に添加剤を加えなくても良好な
ピーク形状が得られています。

0

2

4

6

8
10
Time (min)

12

14

16
LCEC007

尿素系農薬の選択性
カラム A:

カラム B:

カラム C:

移動相:

EclipseXDB-C18
993967-902
4.6x150mm,5µm

A

2
3

EclipseXDB-CN
993967-905
4.6x150mm,5µm
EclipseXDB-C18
993967-902
4.6x150mm,5µm

流量:A.60:40MeOH:水
B.60:40MeOH:水
C.77:23MeOH:水
1.0mL/min

温度:

25°C

サンプル:

尿素農薬

4

1

5
6

0

10

B

1

4
6
Time (min)

8

10

2
34
1

0

5
6

2

C
尿素系農薬の分離では、EclipseXDB-CN カラムを使用
するとリテンションタイムが短縮され、Eclipse XDBC18 カラムと比べて良好な選択性が得られます。

30
Time (min)

40

1.

フェヌロン

2.

モニュロン

3.

モノリニュロン

4.

ジウロン

5.

リニュロン

6.

ペンシクロン

50

2
34

0

20

2

5
6

4
6
Time (min)810www.agilent.com/chem/jp

LCEC01035

分析 HPLC用カラム

ZORBAXEclipseXDB
寸法(mm)

粒子径 (µm)

EclipseXDB-C18
USPL1セミ分取

9.4x250

5990967-202

990967-206

アナリティカル

4.6x250

5990967-902

990967-906

990967-912

990967-905

アナリティカル

4.6x150

5993967-902

993967-906

993967-912

993967-905

アナリティカル

4.6x50

5946975-902

946975-906

ラピッドレゾリューション

4.6x150

3.5

963967-902

963967-906

963967-912

963967-905

ラピッドレゾリューション

4.6x100

3.5961967-902

961967-906

ラピッドレゾリューション

4.6x75

3.5

966967-902

966967-906

966967-912

966967-905

ラピッドレゾリューション

4.6x50

3.5935967-902

935967-906

935967-912

ラピッドレゾリューション

4.6x30

3.5934967-902

934967-906

ハード
ウェア
説明
標準カラム (特別なハードウェアは必要としません)

EclipseXDB-Phenyl
USPL11

EclipseXDB-CN
USPL10961967-905

ラピッドレゾリューション

4.6x20

3.5

932967-902

932967-906

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar

4.6x100

1.8928975-902

928975-906

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar

4.6x50

1.8927975-902

927975-906

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar

4.6x30

1.8924975-902

924975-906

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar

4.6x20

1.8926975-902

926975-906

ソルベントセーバ

3.0x250

5990967-302

990967-306

990967-312

ソルベントセーバ

3.0x150

5993967-302

993967-306

993967-312

993967-305

ソルベントセーバプラス

3.0x150

3.5

963954-302

963954-306

963954-312

963954-305

ソルベントセーバプラス

3.0x100

3.5961967-302

961967-306

961967-312

ソルベントセーバプラス

3.0x75

3.5

966954-302

ソルベントセーバ HT、600bar

3.0x100

1.8928975-302

928975-306

ソルベントセーバ HT、600bar

3.0x50

1.8927975-302

927975-306

ソルベントセーバ HT、600bar

3.0x30

1.8924975-302

924975-306

ソルベントセーバ HT、600bar

3.0x20

1.8926975-302

926975-306

ナローボア

2.1x150

5993700-902

993700-906

993700-912

993700-905

ナローボア

2.1x50

5960967-902

960967-906

960967-912

960967-905

ナローボア RR*

2.1x150

3.5

930990-902

930990-906

ナローボア RR*

2.1x100

3.5961753-902

961753-906

ナローボア RR*

2.1x75

3.5

966735-902

ナローボア RR*

2.1x50

3.5971700-902

971700-906

ナローボア RR*

2.1x30

3.5

974700-902

974700-906

ナローボア RR*

2.1x20

3.5972700-902

972700-906

特に指示のない限り、カラム圧力上限は 40MPaです。

*RR:ラピッドレゾリューション 3.5µm**RRHT:ラピッドレゾリューション HT1.8µm

36EclipseXDB-C8USPL7www.agilent.com/chem/jp990967-305

961753-905

分析 HPLC用カラム

ZORBAXEclipseXDB
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

EclipseXDB-C18
USPL1

ナローボア RRHT、600bar**

2.1x100

1.8928700-902

928700-906

ナローボア RRHT、600bar**

2.1x50

1.8927700-902

927700-906

ナローボア RRHT、600bar**

2.1x30

1.8924700-902

924700-906

ナローボア RRHT、600bar**

2.1x20

1.8926700-902

926700-906

マイクロボア RR*

1.0x150

3.5

963600-902

963600-906

マイクロボア RR*

1.0x50

3.5965600-902

965600-906

マイクロボア RR*

1.0x30

3.5961600-902

961600-906

マイクロボアガード、3個

1.0x1755185-5921

5185-5921

ガードカートリッジ、4個

4.6x12.5

5820950-925

820950-926

820950-927

820950-935

ガードカートリッジ、4個

2.1x12.5

5821125-926

821125-926

821125-926

821125-935

820888-901

820888-901

820888-901

820888-901

ガードハードウェアキット

EclipseXDB-C8USPL7

EclipseXDB-Phenyl
USPL11

EclipseXDB-CN
USPL10PrepHTカートリッジカラム (エンドフィッティングキット 820400-901が必要)
PrepHTカートリッジ

21.2x250

7977250-102

977250-106

PrepHTカートリッジ

21.2x150

7977150-102

977150-106

PrepHTカートリッジ

21.2x150

5970150-902

970150-906

PrepHTカートリッジ

21.2x100

5970100-902

970100-906

PrepHTカートリッジ

21.2x50

5970050-902

970050-906

PrepHTガードカートリッジ

17x7.55820212-925

820212-926

ガードカートリッジハードウェアキット

820444-901

820444-901

PrepHTエンドフィッティング、2個

820400-901

820400-901

特に指示のない限り、カラム圧力上限は 40MPaです。

*RR:ラピッドレゾリューション 3.5µm**RRHT:ラピッドレゾリューション HT1.8µm

www.agilent.com/chem/jp37

分析 HPLC用カラム

ZORBAXEclipseXDB
ハードウェア

EclipseXDB-C18
USPL1

EclipseXDB-C8USPL7寸法(mm)

粒子径 (µm)

アナリティカル

4.6x250

57995118-585

7995108-585

アナリティカル

4.6x150

57995118-595

7995108-595

ラピッドレゾリューション

4.6x75

3.5

7995118-344

7995108-344

ソルベントセーバプラス

3.0x75

3.5

7995230-344

ガードカートリッジ、10個

4.0x4

57995118-504

7995118-504

5021-1845

5021-1845
922975-906

説明Agilentカートリッジカラム (ハードウェアキット 5021-1845が必要)

カートリッジホルダー
標準カラム (特別なハードウェアは必要としません)
ラピッドレゾリュ―ション HT

4.6x50

1.8922975-902

ラピッドレゾリューション HT、3個

4.6x50

1.8922975-932

ナローボア RRHT

2.1x50

1.8922700-902

ナローボア RRHT、3個

2.1x50

1.8922700-932

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ (ハードウェアキット 820555-901が必要)

38

ラピッドレゾリューションカートリッジ

4.6x30

3.5933975-902

933975-906

ラピッドレゾリューションカートリッジ、3個

4.6x30

3.5933975-932

933975-936

ラピッドレゾリューションカートリッジ

4.6x15

3.5931975-902

931975-906

ラピッドレゾリューションカートリッジ、3個

4.6x15

3.5931975-932

931975-936

ラピッドレゾリューションカートリッジ

2.1x30

3.5

973700-902

973700-906

ラピッドレゾリューションカートリッジ、3個

2.1x30

3.5

973700-932

973700-936

ラピッドレゾリューションカートリッジ

2.1x15

3.5975700-902

975700-906

ラピッドレゾリューションカートリッジ、3個

2.1x15

3.5975700-932

975700-936

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ

4.6x50

1.8925975-902

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ、3個

4.6x50

1.8925975-932

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ

4.6x30

1.8923975-902

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ、3個

4.6x30

1.8923975-932

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ

4.6x15

1.8921975-902

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ、3個

4.6x15

1.8921975-932

www.agilent.com/chem/jp

分析 HPLC用カラム

ZORBAXEclipseXDB
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

EclipseXDB-C18
USPL1

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ

2.1x50

1.8925700-902

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ、3個

2.1x50

1.8925700-932

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ

2.1x30

1.8923700-902

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ、3個

2.1x30

1.8923700-932

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ

2.1x15

1.8921700-902

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ、3個

2.1x15

1.8921700-932

RRおよび RRHTカートリッジ用ハードウェアキット

EclipseXDB-C8USPL7820555-901

キャピラリフローカラム (ガラス内面ステンレス)
キャピラリ

0.5x250

55064-8286

キャピラリ

0.5x150

55064-8287

キャピラリ RR

0.5x150

3.5

5064-8288

キャピラリ RR

0.5x35

3.5

5064-8298

キャピラリ

0.3x250

55064-8269

キャピラリ

0.3x150

55064-8291

キャピラリ RR

0.3x150

3.5

5064-8271

キャピラリ

0.5x35

55064-8296

キャピラリ

0.3x35

55064-8297

www.agilent.com/chem/jp39

分析 HPLC用カラム

ZORBAX80ÅStableBondR• pH1までの低 pH移動相による分離において、カラム寿命と再現性が非常に良いカラ
O

Si

R1

R

落を抑制しますOH• 6つの異なる化学結合相により広範囲な分析に対応できます (SB-C18、
SB-C8、
SB-CN、
SBR

O

ムです• 特許取得済みの StableColumnChemistryにより、高温下および低 pH下での結合相の脱SiPhenyl、SB-C3、SB-Aq)
R1• 優れたピーク形状を得るために高純度 (Bタイプ)シリカを採用しています
ZORBAXStableBondカラムは、低 pHでの耐久性の鍵となるシロキサン結合の加水分解を抑制するために、ジイソブチル基 (SB-C18)やジイソプロピル (SB-C8、SB-C3、SB-Phenyl、SBCN、SB-Aq) を側鎖に持つユニークな単官能基シラン (特許取得済) を使用しています。
StableBond充てん剤は、酸性移動相で優れた安定性や長いカラム寿命と最良の再現性をROHR維持するために、エンドキャッピングを行っていません。高純度で酸性度の低いシリ
O

Si
R

R1

カの使用により、 酸性化合物、塩基性化合物および中性化合物で素晴らしいピーク形状を示します。そのため、StableBondカラムは多くのメソッド開発で最良の選択肢となります。ZORBAXStableBondカラムは、水溶液比率の高い移動相も含めて一般的な移動相全般を使用できます。

立体的に保護された StableBond結合相

カラム仕様
ポア
サイズ

結合相

表面積

上限
温度*

pH範囲*

エンド
キャップ

カーボン
ロード

ZORBAXSB-C1880Å

180m2/g

90°C

0.8-8.0

なし

8%

ZORBAXSB-C880Å

180m2/g

80°C

1.0-8.0

なし

5.5%

ZORBAXSB-C380Å

180m /g

80°C

1.0-8.0

なし

4%

ZORBAXSB-Phenyl

80Å

180m2/g

80°C

1.0-8.0

なし

5.5%

ZORBAXSB-CN80Å

180m2/g

80°C

1.0-8.0

なし

4%

ZORBAXSB-Aq

80Å

180m2/g

80°C

1.0-8.0なし

独自

2

仕様は代表的な値のみを表しています。

*StableBondカラムは低 pHで最高の性能を発揮するように設計されています。シリカを基材とするカラムをpH6～8の範囲で最高の安定性にて使用するには、40°C未満の使用温度、0.01～ 0.02Mの範囲の低濃度緩衝液を使用します。中性 pHでは、EclipsePlus、EclipseXDB、および Bonus-RPの使用をお勧めします。

40

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分析 HPLC用カラム

StableBondSB-C18は、低 pH、高温下で良好な安定性を示します (pH0.8、90°C)
カラム:

ZORBAXSB-C18
883975-902
4.6x150mm,5µm

カラム:

ZORBAXRx-C18
883967-902
4.6x150mm,5µm

移動相:50%メタノール/50%水
1.0%TFA溶液
テスト溶質 :トルエン
90°C

温度:

カラムの劣化を調べるため、移動相を使用したカラムをパージした後、トルエンのリテンションタイムを測定しました。StableBondSB-C18は、非常に低い pH(0.8)と高温 (90°C)下で 3カ月の使用にも耐えます。ZORBAXRx-C18 も、安定した寿命を示し StableBondSB-C18 に代わるカラムとして使用できます。

StablebondSB-C18(Diisobutyl-C18)
1.0

ZORBAXRx-C18(Dimethyl-C18)
競合他社 A-C18

Relative Retention

0.8

競合他社 B-C18

0.6

競合他社 C-C18
0.4

競合他社 D-C18
競合他社 E-C18

0.2

0.0
0

5,000

10,00015,00020,00025,00030,000Column Volumes of Mobile Phase Purge
LCSB001

SB-CN
短鎖 ZORBAXSB-CN は低 pH(pH2.0、50°C)下で安定性を示します

ZORBAXSB-CN
883975-905
4.6x150mm,5µm

移動相:0.1%TFA、pH2:ACN
1mL/min

流量:
グラジエント:温度:
サンプル:

0～ 100%ACN
50°C

80

% k Remaining

カラム:

100

1-フェニルヘプタン、
50%AC/50%水の 0.1%TFA溶液

6040
Si-(Me)2PrCN
20

ZORBAXStableBondSB-CN や他の短鎖結合相の StableBondは低 pHでも非常に安定しています。従来のジメチル CNなどの短鎖結合相の常識を覆す安定性です。

0
0

1,000

2,000

3,000

4,000

5,000

6,000

Column Volumes
LCSB002www.agilent.com/chem/jp41

分析 HPLC用カラム

SB-CNにより保持力と分離が最適化されます
ZORBAXSB-C18
カラム A:
A
866953-902
4.6x75mm,3.5µm
カラム B:

1

ZORBAXSB-CN
866953-905
4.6x75mm,3.5µm

移動相:30%ACN70%25mMNaH2PO4、pH2.5

流量:1.0mL/min

温度:

35°C

2

4
3

B

1.

エストリオール

2.

ダイゼイン

3.

ケルセチン

4.

ゲニステイン5.

ジエチルスチルベストロール

5

2
4

5

1

0

5

10
15
Time (min)

20

25

0

2

3

4

6
8 10
Time (min)12
LCSB003

この例では SB-CNカラムの使用によって分析時間が 50%短縮されました。大部分の疎水性サンプルの保持時間は半分になっています。同時に、より極性の高い、早く溶出するピークの保持時間はやや増加しています。

多くの RRHT結合相から選択でき、迅速なメソッド開発が可能
カラム A:

カラム B:

カラム C:

カラム D:

移動相:

ZORBAXSB-C18
827975-901
4.6x50mm,1.8µm
SB-C8827975-906
4.6x50mm,1.8µm
ZORBAXSB-Phenyl
827975-912
4.6x50mm,1.8µm
ZORBAXSB-CN
827975-905
4.6x50mm,1.8µm
アセトニトリル (40%):
緩衝液 60%pH=2.425mM

NaH2PO4
流量:
検出器:
サンプル:

mAU
450

トルメチン

2.

ナプロキセン3.

ジフルニサル4.

イブプロフェン

5.

ジクロフェナク

ピーク 3,4,5の溶出順序の変化

A

2

1

400

3

5
4

350
1

B

300

2

3
5
4

250
200

DAD,254nm

150

LC:Agilent1200RRLC

100

1

C

1.85mL/min

リストのとおり、1µL注入

1.

3

2

5
4
1

2

5

D

3

50
4

StableBondでは、5つの異なる結合相が提供されているため、メソッドの最適化に対応できます。
注:SB-Aqは示されていません

42

0
0

1

2

3

4

5

min
MoreRRHT

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分析 HPLC用カラム

5種類の異なる結合相により、選択性の自由度が拡大
カラム A:ZORBAXSB-C18
883975-902
4.6x150mm,5µm

3

1
5
4

カラム B:ZORBAXSB-C8883975-906
4.6x150mm,5µm

カラム C:ZORBAXSB-C3
883975-909
4.6x150mm,5µm

カラム D:

A

2

3

B
1

ZORBAXSB-Phenyl
883975-912
4.6x150mm,5µm

カラム E:ZORBAXSB-CN
883975-905
4.6x150mm,5µm

移動相:18.8分で 0～ 100%B
A:50mMNaH2PO4、pH2.5、95%H2O/5%ACN
B:50mMNaH2PO4、pH2.5、47%H2O/53%ACN

流量:

1.0mL/min

温度:

26°C

検出器:

254nmサンプル:

1.プロカイン
2.リドカイン
3.d-シンコニン
4.ブタカイン
5.テトラカイン

5
4
2

3

C

1
5
4
2

3

D
1

5
4
2

SB-C3は、StableBondが提供する 5種類の選択性の 1つです。この例では、SB-C3を使用したときに最適分解能が得られました。すべて同じ高純度 Rx-SILをベースとしています。そのため、異なる結合相を持つことによって大きな選択性の変化が得られ、信頼性の高いメソッド開発が可能になります。

E

13
5
4

2

0

5

10

15

Time (min)LCSB004

www.agilent.com/chem/jp43

分析 HPLC用カラム

ZORBAX80ÅStableBond
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)
標準カラム (特別なハードウェアは必要としません)

44

粒子径

(µm)

SB-C18USPL1

SB-C8
USPL7

SB-CN
USPL10

SB-C3
USPL56

SB-Phenyl
USPL11880967-201

880975-205

880975-209

880975-212

SB-Aq

セミ分取

9.4x250

5880975-202

セミ分取

9.4x150

5883975-202

セミ分取

9.4x100

5884975-202

セミ分取

9.4x50

5846975-202

アナリティカル

4.6x250

5880975-902

880975-906

880975-905

880975-909

880975-912

880975-914

アナリティカル

4.6x150

5883975-902

883975-906

883975-905

883975-909

883975-912

883975-914

アナリティカル

4.6x50

5846975-902

846975-906

ラピッドレゾリューション 4.6x250

3.5884950-567

ラピッドレゾリューション 4.6x150

3.5863953-902

863953-906

863953-905

863953-912

863953-914

ラピッドレゾリューション 4.6x100

3.5861953-902

861953-906

861953-905

861953-912

861953-914

ラピッドレゾリューション 4.6x75
ラピッドレゾリューション 4.6x50

3.5866953-902

866953-906

866953-905

866953-912

866953-914

3.5835975-902

835975-906

835975-905

835975-912

835975-914

ラピッドレゾリューション 4.6x30

3.5834975-902

834975-906

ラピッドレゾリューション 4.6x20

3.5

832975-902

832975-906

ラピッドレゾリュ―
ション HT、600bar

4.6x150

1.8829975-902

829975-906

829975-905

829975-912

829975-914

ラピッドレゾリュ―
ション HT、600bar

4.6x100

1.8828975-902

828975-906

828975-905

828975-912

828975-914

ラピッドレゾリュ―
ション HT、600bar

4.6x50

1.8827975-901

827975-906

827975-905

827975-912

827975-914

ラピッドレゾリュ―
ション HT、600bar

4.6x30

1.8824975-902

824975-906

824975-905

824975-912

824975-914

ラピッドレゾリュ―
ション HT、600bar

4.6x20

1.8826975-902

826975-906

ソルベントセーバ

3.0x250

5880975-302

880975-306

880975-305

880975-309

880975-312

880975-314

ソルベントセーバ

3.0x150

5883975-302

883975-306

883975-305

883975-309

883975-312

883975-314

ソルベントセーバプラス

3.0x150

3.5

863954-302

863954-306

863954-305

863954-312

863954-314

ソルベントセーバプラス

3.0x100

3.5861954-302

861954-306

861954-305

861954-309

861954-312

861954-314

www.agilent.com/chem/jp846975-914

分析 HPLC用カラム

ZORBAX80ÅStableBond
ハード
ウェア

粒子径

3x100(µm)
1.8

SB-C18USPL1858700-302

SB-C8
USPL7

SB-CN
USPL10

ソルベントセーバ
HD、1200bar

3x501.8857700-302

ソルベントセーバプラス

3.0x75

3.5

866953-302

ソルベントセーバ
HT、600bar

3.0x150

1.8829975-302

829975-306

829975-305

ソルベントセーバ
HT、600bar

3.0x100

1.8828975-302

828975-306

828975-305

ソルベントセーバ
HT、600bar

3.0x50

1.8827975-302

827975-306

827975-305

ソルベントセーバ
HT、600bar

3.0x30

1.8824975-302

824975-306

824975-305

ソルベントセーバ
HT、600bar

3.0x20

1.8826975-302

826975-306

ナローボア

2.1x150

5883700-922

883700-906

883700-905

883700-909

883700-912

ナローボア

2.1x50

5860975-902

860975-906

860975-905

860975-909

860975-912

860975-914

ナローボア RR*

2.1x150

3.5

830990-902

830990-906

ナローボア RR*

2.1x100

3.5861753-902

861753-906

861753-912

861753-914

ナローボア RR*

2.1x75

3.5866735-902

ナローボア RR*

2.1x50

3.5871700-902

871700-906

ナローボア RR*

2.1x30

3.5874700-902

874700-906

説明

寸法(mm)

ソルベントセーバ
HD、1200bar

ナローボア RR*

2.1x20

3.5872700-902

872700-906

ナローボア
RRHD、1200bar

2.1x150

1.8859700-902

859700-906

ナローボア
RRHD、1200bar

2.1x100

1.8858700-902

858700-906

SB-C3
USPL56

SB-Phenyl
USPL11SB-Aq

829975-312
828975-309

828975-312

828975-314

827975-312

827975-314

830990-914
861753-905

871700-914

特に指示のない限り、カラム圧力上限は 40MPaです。

*RR:ラピッドレゾリューション 3.5µm**RRHT:ラピッドレゾリューション HT1.8µm

www.agilent.com/chem/jp45

分析 HPLC用カラム

ZORBAX80ÅStableBond
ハード
ウェア

粒子径

SB-C18USPL1857700-902

SB-C8
USPL7857700-906

SB-CN
USPL102.1x50(µm)
1.8

2.1x150

1.8820700-902

820700-906

820700-905

820700-912

2.1x100

1.8828700-902

828700-906

828700-905

828700-912

828700-914

2.1x50

1.8827700-902

827700-906

827700-905

827700-912

827700-914

2.1x30

1.8824700-902

824700-906

824700-905

824700-912

824700-914

2.1x20

1.8826700-902

826700-906

マイクロボア RR*

1.0x150

3.5863600-902

863600-906

マイクロボア RR*

1.0x50

3.5865600-902

865600-906

マイクロボア RR*

1.0x30

3.5

861600-902

861600-906

マイクロボアガード、3個

1.0x1755185-5920

5185-5920

ガードカートリッジ、2個

9.4x15

7820675-115

820675-115

820675-124

820675-124

820675-115

ガードカートリッジ、4個

4.6x12.5

5820950-920

820950-915

820950-916

820950-922

820950-917

820950-933

ガードカートリッジ、4個

2.1x12.5

5821125-915

821125-915

821125-924

821125-924

821125-915

821125-933

ガードハードウェアキット

9.4x150840140-901

840140-901

840140-901

840140-901

840140-901

0820888-901

820888-901

820888-901

820888-901

820888-901

820888-901

877250-105

877250-112

877250-114

説明

寸法(mm)

ナローボア
RRHD、1200bar
ナローボア RRHT、

SB-C3
USPL56

SB-Phenyl
USPL11SB-Aq

600bar**
ナローボア RRHT、

600bar**
ナローボア RRHT、

600bar**
ナローボア RRHT、

600bar**
ナローボア RRHT、

600bar**

ガードハードウェアキット

863600-905

PrepHTカートリッジカラム (エンドフィッティングキット 820400-901が必要)
PrepHTカートリッジ

21.2x250

7877250-102

877250-106

PrepHTカートリッジ

21.2x150

7877150-102

877150-106

877150-114

PrepHTカートリッジ

21.2x150

5870150-902

870150-906

870150-914

PrepHTカートリッジ

21.2x100

5870100-902

870100-906

870100-914

PrepHTカートリッジ

21.2x50

5870050-902

870050-906

870050-914

PrepHTガードカート
リッジ、2個

17x7.55820212-920

820212-915

820212-915

ガードカートリッジ
ハードウェアキット

820444-901

820444-901

820444-901

PrepHTエンドフィッ
ティング、2個

820400-901

820400-901

820400-901

特に指示のない限り、カラム圧力上限は 40MPaです。

*RR:ラピッドレゾリューション 3.5µm**RRHT:ラピッドレゾリューション HT1.8µm

46

www.agilent.com/chem/jp

820212-915

820212-933

820444-901

820444-901

820444-901

820400-901

820400-901

820400-901

分析 HPLC用カラム

ZORBAX80ÅStableBond
ハード
ウェア

SB-C18USPL1

SB-C8
USPL757995218-585

7995208-585

4.6x150

57995218-595

7995208-595

ラピッドレゾリューション

4.6x75

3.5

7995218-344

7995208-344

ガードカートリッジ、10個

4.0x4

57995118-504

7995118-504

5021-1845

5021-1845
822975-906

寸法(mm)

粒子径 (µm)

アナリティカル

4.6x250

アナリティカル

説明

SB-Phenyl
USPL11

Agilentカートリッジカラム (ハードウェアキット 5021-1845が必要)

カートリッジホルダー
標準カラム (特別なハードウェアは必要としません)
ラピッドレゾリュ―ション HT(RRHT)

4.6x50

1.8822975-902

ラピッドレゾリュ―ション HT(RRHT),3個

4.6x50

1.8822975-932

ナローボア RRHT

2.1x50

1.8822700-902

ナローボア RRHT,3個

2.1x50

1.8822700-932

ラピッドレゾリューションカートリッジ (ハードウェアキット 820555-901が必要)
ラピッドレゾリューションカートリッジ

4.6x30

3.5

833975-902

833975-906

ラピッドレゾリューションカートリッジ、3個

4.6x30

3.5

833975-932

833975-936

ラピッドレゾリューションカートリッジ

4.6x15

3.5

831975-902

831975-906

ラピッドレゾリューションカートリッジ、3個

4.6x15

3.5

831975-932

831975-936

ラピッドレゾリューションカートリッジ

2.1x30

3.5873700-902

873700-906

ラピッドレゾリューションカートリッジ、3個

2.1x30

3.5873700-932

873700-936

ラピッドレゾリューションカートリッジ

2.1x15

3.5875700-902

875700-906

ラピッドレゾリューションカートリッジ、3個

2.1x15

3.5875700-932

875700-936

833975-912

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ (ハードウェアキット 820555-901が必要)
ラピッドレゾリューション HTカートリッジ

4.6x50

1.8825975-902

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ、3個

4.6x50

1.8825975-932

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ

4.6x30

1.8823975-902

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ、3個

4.6x30

1.8823975-932

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ

4.6x15

1.8821975-902

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ、3個

4.6x15

1.8821975-932

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ

2.1x50

1.8825700-902

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ、3個

2.1x50

1.8825700-932

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ

2.1x30

1.8823700-902

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ、3個

2.1x30

1.8823700-932

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ

2.1x15

1.8821700-902

ラピッドレゾリューション HTカートリッジ、3個

2.1x15

1.8821700-932

RRおよび RRHTカートリッジ用ハードウェアキット

www.agilent.com/chem/jp820555-901

47

分析 HPLC用カラム

ZORBAX80ÅStableBond
寸法(mm)

説明

粒子径 (µm)

SB-C18USPL1

キャピラリフローカラム (ガラス内面ステンレス)

48

キャピラリ

0.5x250

55064-8258

キャピラリ

0.5x150

55064-8256

キャピラリ

0.5x35

55064-8254

キャピラリ RR

0.5x150

3.5

5064-8262

キャピラリ RR

0.5x35

3.5

5064-8260

キャピラリ

0.3x250

55064-8257

キャピラリ

0.3x150

55064-8255

キャピラリ

0.3x35

55064-8253

キャピラリ RR

0.3x150

3.5

5064-8261

www.agilent.com/chem/jp

分析 HPLC用カラム

ZORBAXRx• Rx-C18は低 pH用カラムとして、EclipseXDB-C18および StableBondSB-C18と同様にお奨めできるカラムです。高温での分析には StableBondの方が適しています。このカラムは、SB-C18カラムより高いカーボン量を持っています (Rx=12%、SB=10%)• Rx-C18は低 pHでのアプリケーションで優れた安定性と良好なピーク形状を示します• Rx-C18はジメチルオクタデシルシランを使用しており、エンドキャッピングされていません。pH8まで安定して使用できます• Rx-C8カラムは SB-C8と同じ製品です

カラム仕様
結合相

ポア
サイズ 表面積上限
温度

ZORBAXRx-C18

80Å

180m2/g

60°C

pH範囲* キャップ
2.0-8.0
なし

ZORBAXRx-C880Å

180m2/g

80°C

1.0-8.0

エンド

なし

カーボン
ロード

12%
5.5%

仕様は代表的な値のみを表しています。

*シリカを基材とするカラムを pH6～9の範囲で最高の安定性にて使用するには、40°C未満の使用温度、0.01～ 0.02Mの範囲の低濃度緩衝液を使用します。

Rx-C18によるジアゼパムの分離
ZORBAXRx-C18
カラム:
880967-302
3.0x250mm,5µm
移動相:
流量:

1
2

35%H2O:65%MeOH
0.5mL/min

1.

エチルパラベン2.

ジアゼパム

Rx-C18カラムを使用した、ジアゼパムと内部標準エチルパラベンの USP分析例です。内径 3.0mmのソルベントセーバ Rx-C18カラムを使用すると、4.6x250mmカラムで分析した場合に比べ、溶媒使用量が 60%減少できます。

0.0

2.5
Time (min)

5.0

7.5
LCRX001

www.agilent.com/chem/jp49

分析 HPLC用カラム

Rx-C8と SB-C8を用いた分析例（同じ性能を持つカラム）
ZORBAXRx-C8
カラム A:
880967-901
4.6x250mm,5µm
カラム B:

サンプル:

ZORBAXSB-C8880975-906
4.6x250mm,5µm
サルファ薬
水中に各 0.125mg/mLA流量:

1.5mL/min

グラジエント:tn で 10%B、25分以上 35%Bに増加、
5 分で 10%B に減少、10 分で 10%B

2
3

26°C

DAD:

254nmサルファジアジン

2.

サルファピリジン

3.

サルファメラジン

4.

サルファメタジン

5.

サルファメトキシピリダジン

6.

サルファクロルピリダジン

7.

サルファメトキサゾール

8.

サルファジメトキシン
8

5

を保持

TCC:

1.

4
1
6
7

5

10

15

20

25

Time (min)
2

B

3

5

8

4
1
6
7

5

10

15

20

25

Time (min)RxC8_SBC850

www.agilent.com/chem/jp

分析 HPLC用カラム

ZORBAXRx
ハード
ウェア

Rx-C18USPL1

Rx-C8
USPL7**5880967-202

880967-201

5880967-902

880967-901

4.6x150

5883967-902

883967-901

4.6x150

3.5

863967-902

863953-906

ラピッドレゾリューション 4.6x100
ラピッドレゾリューション 4.6x75

3.5861967-902

861953-906

3.5866967-902

866953-906

ソルベントセーバ

3.0x250

5880967-302

880975-306

ソルベントセーバ

3.0x150

5883967-302

883975-306

ソルベントセーバプラス

3.0x150

3.5

863967-302

863954-306

ソルベントセーバプラス

3.0x100

3.5861967-302

861954-306

ナローボア

2.1x150

5883700-902

883700-906

ナローボア RR*

2.1x100

3.5861767-902

861753-906

ガードカートリッジ、2個

9.4x15

7820675-115

820675-115

ガードカートリッジ、4個

4.6x12.5

5820950-914

820950-913

ガードカートリッジ、4個

2.1x12.5

5821125-915

821125-915

ガードハードウェアキット

9.4x150840140-901

840140-901

0820888-901

820888-901

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

セミ分取

9.4x250

アナリティカル

4.6x250

アナリティカル
ラピッドレゾリューション

ガードハードウェアキット

PrepHTカートリッジカラム (エンドフィッティングキット 820400-901が必要)
PrepHTカートリッジ

21.2x250

7PrepHTカートリッジ

21.2x150

7877150-106

PrepHTカートリッジ

21.2x150

5870150-906

PrepHTカートリッジ

21.2x100

5870100-906

PrepHTカートリッジ

21.2x505PrepHTガードカートリッジ、2個

5877967-102

877250-106

870050-906
820212-914

820212-915

ガードカートリッジハードウェアキット

820444-901

820444-901

PrepHTエンドフィッティング、2個

820400-901

820400-901*RR:ラピッドレゾリューション 3.5µm**Rx-C8は SB-C8と同じ製品です

www.agilent.com/chem/jp51

分析 HPLC用カラム

ZORBAX80ÅExtend-C18• pH11.5までの高 pHで高効率で長寿命• ユニークな二座型結合相とダブルエンドキャッピングにより高 pH での安定を
C18

O

示します

Si

• ポリマーベースのカラムよりカラム効率がよく、ピーク形状も良好です• 塩基性化合物の保持・分離能・ピーク形状 が向上します• ペプチドの高感度 LC/MS 分離に最適ですSi

れにより、シリカベースのカラムを用いた高 pH 移動相での高分解能分離が可能にな

AgilentZORBAXExtend-C18 カラムには、最新の二座型結合技術が活用されています。こO

C18

りました。高 pHでは、非電荷塩基性化合物は基材であるシリカと相互作用しません。その結果、高い分離効率と良好なピーク形状が得られるとともに、分離能も向上しま

Silica Support

す。また、高 pH での分離は、高 pH 溶液で安定性と溶解性が増す化合物の分析に最適です。高 pH 移動相用の緩衝液としては、トリエチルアミン、ピロリジン、グリシ
ン、ホウ酸塩、水酸化アンモニウムなどが挙げられます。水酸化アンモニウム系移動相 (pH10.5)は、ペプチドや低分子化合物の LC/MS 分析に適した移動相成分で、TFA を使用した低 pH 移動相よりも優れた感度が得られます。Extend-C18 カラムは pH2～ 11.5の範囲で安定性を発揮し、あらゆるタイプの化合物を良好なピーク形状で分離しま

Extend-C18 結合相には、新開発の二座型結合技術(C18-C18間)が使用されています

す。また、Extend-C18 カラムは低 pH 領域でも優れた選択性を発揮します。

カラム仕様
結合相

ポア
サイズ

表面積

上限
温度*

pH範囲**

エンド
キャップ

カーボン
ロード

ZORBAXExtend-C18

80Å

180m2/g

60°C

2.0-11.5

ダブル

12.5%

仕様は代表的な値のみを表しています。
*温度上限:pH8までは 60°C、pH8～ 11.5は 40°C。

**pH6を超える場合は、使用温度を 40°C以下に下げ、低い緩衝液濃度 (0.01～ 0.02M)または有機緩衝液を使用することで、シリカベースカラムの最高のカラム安定性が得られます。

52

www.agilent.com/chem/jp

分析 HPLC用カラム

Extend-C18による高 pH移動相での塩基性抗ヒスタミン剤の分析
pH7
ZORBAXExtend-C18
773450-902
4.6x150mm,5µm

カラム:

移動相:

7
4
2, 3
1

pH7:
30%20mMNa2HPO4
70%MeOH

5
6

pH11:
30%20mMTEA
70%MeOH
流量:1.0mL/min

温度:

室温

検出器:

254nmサンプル:

抗ヒスタミン剤

05Time (min)

pH11

7
4

1.

マレイン酸エステル

2.

スコポラミン3.

プソイドエフェドリン

4.

ドキシラミン5.

クロロフェニラミン

6.

トリプロリジン7.

ジフェンヒドラミン

3
5
1
2

プソイドエフェドリンとスコポラミンは、低 pH～中性では保持するのが難しい成分です。プソイドエフェドリンの分析には、イオン交換法がよく用いられます。Extend-C18カラムは、
高 pHでこれら化合物を電荷のない状態で保持し、分離能を向上させます。

0

6

10

5Time (min)LC80001

高 pH でも長寿命の Extend-C18

移動相:

30

ZORBAXExtend-C18
773450-902
4.6x150mm,5µm

流量:20%メタノール
80%0.1M炭酸塩緩衝液、pH10
1.0mL/min

温度:

室温

ZORBAXExtend-C18

高い pH ではシリカの溶解が起こるためにカラムが機能しなくなります。他社カラム W と比較すると、この例から、高 pH においては
ZORBAXExtend-C18 のほうが長寿命であることが分かります。カラム寿命は溶解したシリカ量から測定しています。

Amount of Dissolved Silica (mg)

カラム:

競合他社カラム W
20

10

0
0

3

5

9

12

15

Volume Eluent (L)LC80002www.agilent.com/chem/jp53

分析 HPLC用カラム

Extend-C18は低 pHでも良好なピーク形状を保ちます
ZORBAXExtend-C18
カラム:
773450-902
4.6x150mm,5µm
移動相:
流量:

80%25mMNaH2PO4、pH3.0
20%メタノール
1.0mL/min

温度:

35°C

検出器:

254nm

サンプル:

塩基性化合物

1

3

1.

テオブロミン2.

ジメチルキサンチン3.

テオフィリン

4.

カフェイン

4

2
Extend-C18を使用すれば、これらの塩基性化合物を低 pH領域で良好なピーク形状で分離します。
Extend-C18は高pH、低 pH領域でも使用できます。

0

1

2

3

4

5

6

Time (min)7
LC80003

ZORBAX80ÅExtend-C18
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

Extend-C18
USPL1

標準カラム (特別なハードウェアは必要としません)54

アナリティカル

4.6x250

5770450-902

アナリティカル

4.6x150

5773450-902

アナリティカル

4.6x50

5746450-902

ラピッドレゾリューション

4.6x150

3.5

763953-902

ラピッドレゾリューション

4.6x100

3.5

764953-902

ラピッドレゾリューション

4.6x75

3.5

766953-902

ラピッドレゾリューション

4.6x50

3.5735953-902

www.agilent.com/chem/jp

分析 HPLC用カラム

ZORBAX80ÅExtend-C18
ハード
ウェア

粒子径 (µm)

Extend-C18
USPL1

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar 4.6x100

1.8728975-902

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar 4.6x50

1.8727975-902

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar 4.6x30

1.8724975-902

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar 4.6x20

1.8726975-902

ソルベントセーバ

3.0x250

5770450-302

ソルベントセーバ

3.0x150

5773450-302

ソルベントセーバプラス

3.0x150

3.5

763954-302

ソルベントセーバプラス

3.0x100

3.5

764953-302

ソルベントセーバプラス

3.0x50

3.5735954-302

ソルベントセーバ HT、600bar

3.0x100

1.8728975-302

ソルベントセーバ HT、600bar

3.0x50

1.8727975-302

ソルベントセーバ HT、600bar

3.0x30

1.8724975-302

ソルベントセーバ HT、600bar

3.0x20

1.8726975-302

ナローボア

2.1x150

5773700-902

ナローボア

2.1x50

5760450-902

ナローボア RR*

2.1x100

3.5761753-902

ナローボア RR*

2.1x50

3.5735700-902

ナローボア RRHT、600bar**

2.1x100

1.8728700-902

ナローボア RRHT、600bar**

2.1x50

1.8727700-902

ナローボア RRHT、600bar**

2.1x30

1.8724700-902

ナローボア RRHT、600bar**

2.1x20

1.8726700-902

マイクロボア RR*

1.0x150

3.5

763600-902

マイクロボア RR*

1.0x50

3.5765600-902

マイクロボア RR*

1.0x30

3.5

761600-902

マイクロボアガード、3個

1.0x1755185-5923

ガードカートリッジ、4個

4.6x12.5

5820950-930

ガードカートリッジ、4個

2.1x12.5

5821125-930

0820888-901

説明

寸法(mm)

ガードハードウェアキット

PrepHTカートリッジカラム (エンドフィッティングキット 820400-901が必要)
PrepHTカートリッジ

21.2x150

5770150-902

PrepHT

21.2x100

5770100-902

PrepHT

21.2x50

5770050-902

17x7.55820212-930

PrepHTエンドフィッティング、2個
PrepHTガードカートリッジ、2個
ガードカートリッジハードウェアキット

820400-901

820444-901

特に指示のない限り、カラム圧力上限は 40MPaです。

*RR:ラピッドレゾリューション 3.5µm**RRHT:ラピッドレゾリューション HT1.8µm

www.agilent.com/chem/jp55

分析 HPLC用カラム

ZORBAXBonus-RP

R1
O

Si

PG

R

R1
CH3
Si

CH3

CH3

アジレントの ZORBAXBonus-RP カラムはアルキル鎖中にアミド基 (高極性) が導入され

R1
O

CH3
Si

Si

• 低 pH～中性領域で非常にシャープなピーク形状で塩基性化合物を分離できます• ユニークな選択性を示します• 導入された極性基と立体的保護基のある斬新な技術を使用しています• 100%水溶液の移動相が使用可能ですています。この斬新な結合相は塩基性化合物とシリカ担体との間の相互作用を減少さPGRせ、非常に扱い難い塩基性化合物のピーク形状を向上させます。ピーク形状とカラム
寿命は、三重エンドキャッピングによって一層、改善されています。さらに、ジイソ

R1

プロピル基を側鎖に導入し、低 pH における酸加水分解から結合相を保護しています。

CH3

します。

R1

カラム仕様

Bonus-RP カラムは、C18 および C8 アルキル結合相とは異なるユニークな選択性を示

CH3

O

Si

PG

R1
ユニークな極性アルキルグループを持つ
Bonus-RP 結合相

56

R
結合相

ポア
サイズ

表面積

上限
温度*

pH範囲

エンド
キャップ

カーボン
ロード

ZORBAXBonus-RP80Å

180m2/g

60°C

2.0-9.0

トリプル

9.5%

仕様は代表的な値のみを表しています。

*温度上限:pH8までは 60°C、pH8～ 9は 40°C。

www.agilent.com/chem/jp

分析 HPLC用カラム

Bonus-RPを使用した塩基性化合物のピーク形状の向上
Alkyl-C8
カラム:
4.6x150mm、5µm

1.

ドキシラミン2.

クロロフェニラミン

移動相:

3.

トリプロリジン

流量:75%25mMNH4OAc、pH5.5
25%ACN
1.5mL/min

温度:

40°C

検出器:

254nm1

2

TF
1. 1.82. 1.73. 2.1

Bonus-RPは代表的な C8結合相と比較して塩基性化合物のテーリングが小さ3くなっています。中性領域では解離したシラノール基と塩基性化合物との相互作用が大きくなるので、テーリングが起こりやすくなります。BonusRP 結合相の極性基はシラノール基と塩基性化合物との相互作用を減少させることで、ピーク形状を改善します。

0

カラム:

ZORBAXBonus-RP
883668-901
4.6x150mm,5µm

移動相:
流量:

80%25mMNH4OAc、pH5.5
20%ACN
1.5mL/min

温度:

40°C

検出器:

254nm

1

2

3

4 5 6
Time (min)

7

8

9

10

LCBR001

3

TF
1. 1.1
2. 1.1
3. 1.10

11.

ドキシラミン2.

クロロフェニラミン

3.

トリプロリジン

2

1

2

3
4
Time (min)www.agilent.com/chem/jp

5

6
LCBR00257

分析 HPLC用カラム

移動相:

60%25mM

リン酸緩衝液、pH7.0:40%ACN
流量:

1.5mL/min

温度:

23°C

Toluene Plate Height, cm

ZORBAXBonus-RPは低 pHから中性領域で安定しています
ZORBAXBonus-RP
カラム:
883668-901
0.00184.6x150mm,5µm

競合他社アルキル/アミドカラム

Bonus-RP

0.00160.00140.0012

Bonus-RP は 3 重エンドキャッピングを採用しているため、pH7 での安定性が向上しています。カ
ラムボリュームは 10,000 で、ほぼ 1ヶ月分の稼働に相当します。

0.00100

5,000

10,00015,00020,00025,00030,00035,000Column Volume of Purge
LCBR003

Dimethyl-C18/amide、Bonus-RP
ZORBAXBonus-RP
カラム:
883668-901
4.6x150mm,5µm

流量:
温度:

エージング:
50%MeOH
50%0.1%TFA
試験:
80%MeOH
20%H2O
1.0mL/min
エージング:

60°C
試験:
23°C

側鎖による立体的保護により、類似の極性アルキル結合相よりも低 pH 領域での安定性が向上し、カラム寿命が長くなっています。

0.0055

Dimethyl-C18/amide

0.0050Toluene Plate Height, cm

移動相:

Bonus-RP

0.00450.00400.00350.00300.00250.00200

10,00020,00030,00040,000Column Volume of Purge
LCBR004

58

www.agilent.com/chem/jp

分析 HPLC用カラム

ZORBAXBonus-RPはユニークな選択性を示します
ZORBAXBonus-RP
カラム A:
A
883668-901
mAu
4.6x150mm,5µm

1.

セファレキシン

2.

セファクロール3.

カラム B:

セフロキシム4.

セフォキシチン

EclipseXDB-C8
993967-906
4.6x150mm,5µm

15
10

3

移動相:

75% 25 mM クエン酸ナトリウム、5pH6025%MeOH

流量:1.0mL/min

2

0

2

4

4

6

室温

検出器:

254nm

B

サンプル:

3µL

mAu

10

1

15
Bonus-RP を使用するとピーク溶出順序は大きく変わります。この例では、最初の 3ピークの溶出順序が変
化します。

8

Time (min)温度:

セファロスポリン

1

3

10
4

5

2

0
0

2

4

6

8

Time (min)10
LCBR005

ZORBAXBonus-RP
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

Bonus-RP
USPL60

5880668-901

標準カラム (特別なハードウェアは必要としません)
アナリティカル

4.6x250

アナリティカル

4.6x150

5883668-901

ラピッドレゾリューション

4.6x250

3.5884950-577

ラピッドレゾリューション

4.6x150

3.5

863668-901

ラピッドレゾリューション

4.6x100

3.5

864668-901

ラピッドレゾリューション

4.6x75

3.5

866668-901

ラピッドレゾリューション

4.6x50

3.5

835668-901

www.agilent.com/chem/jp59

分析 HPLC用カラム

ZORBAXBonus-RP
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

Bonus-RP
USPL60

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar

4.6x100

1.8828668-901

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar

4.6x75

1.8

830668-901

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar

4.6x50

1.8

827668-901

ソルベントセーバ

3.0x250

5880668-301

ソルベントセーバ

3.0x150

5883668-301

ソルベントセーバプラス

3.0x150

3.5

863668-301

ソルベントセーバプラス

3.0x100

3.5

864668-301

ソルベントセーバ HT、600bar

3.0x100

1.8828668-301

ソルベントセーバ HT、600bar

3.0x50

1.8

827668-301

ナローボア

2.1x150

5883725-901

ナローボア

2.1x50

5861971-901

ナローボア RR*

2.1x150

3.5

863700-901

ナローボア RR*

2.1x100

3.5861768-901

ナローボア RR*

2.1x50

3.5

861700-901

ナローボア RRHT、600bar

2.1x100

1.8828768-901

ナローボア RRHT、600bar

2.1x50

1.8827768-901

マイクロボア RR*

1.0x150

3.5863608-901

マイクロボア RR*

1.0x50

3.5865608-901

マイクロボア RR*

1.0x30

3.5

861608-901

マイクロボアガード、3個

1.0x1755185-5922

ガードカートリッジ、4個

4.6x12.5

5820950-928

ガードカートリッジ、4個

2.1x12.5

5821125-928

0820888-901

ガードハードウェアキット

PrepHTカートリッジカラム (エンドフィッティングキット 820400-901が必要)
PrepHTカートリッジ

21.2x250

7878250-101

PrepHTカートリッジ

21.2x150

7878150-101

PrepHTカートリッジ

21.2x150

5868150-901

PrepHTカートリッジ

21.2x100

5868100-901

PrepHTカートリッジ

21.2x50

5868050-901

PrepHTエンドフィッティング、2個
PrepHTガードカートリッジ、2個
ガードカートリッジハードウェアキット
特に指示のない限り、カラム圧力上限は 40MPaです。
*RR:ラピッドレゾリューション 3.5µm

60

www.agilent.com/chem/jp

820400-901
17x7.55820212-928
820444-901

分析 HPLC用カラム

ZORBAX オリジナル逆相カラム
アジレントオリジナルの ZORBAX カラムはタイプ A シリカで作られており、多くの酸性や中性化合物の分析に使用することができます。このカラムは高い活性レベルを持
ち、そのため異性体 (シス-トランス異性体、幾何異性体)や、その他シラノール活性が選択性を高める化合物の分離に有効 です。オリジナル ZORBAX カラムは多くの確立されたメソッドで使用することができます。
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)ODS(C18)

粒子径 (µm) USPL1

C8USPL7

フェニル

USPL11CN
USPL10TMS
USPL13

標準カラム (特別なハードウェアは必要としません)
セミ分取

9.4x250

5880952-202

880952-206

アナリティカル (エンドキャップあり)

4.6x250

5880952-702

880952-706

880952-712

884950-507

880952-710

アナリティカル (エンドキャップなし)

4.6x250

5884950-543

アナリティカル

4.6x150

5883952-702

883952-706

883952-712

884950-526

883952-710

ソルベントセーバ

3.0x250

5880952-302

ソルベントセーバ

3.0x150

5883952-302

ガードカートリッジ、2個

9.4x15

7820675-115

820675-115

820675-115

820675-124

ガードカートリッジ、4個

4.6x12.5

5820950-902

820950-906

820950-912

820950-905

820950-924

ガードハードウェアキット

840140-901

840140-901

840140-901

840140-901

840140-901

ガードハードウェアキット

820888-901

820888-901

820888-901

820888-901

820888-901

877952-102

877952-106

877952-105

820400-901

820400-901

820400-901

ガードカラム (ハードウェアが必要)

PrepHTカートリッジカラム (エンドフィッティングキット 820400-901が必要)
PrepHTカートリッジ
PrepHTエンドフィッティング、2個

21.2x250

7

www.agilent.com/chem/jp61

分析 HPLC用カラム

ZORBAX順相カラム
順相クロマトグラフィ用として、AgilentZORBAX製品ラインには結合および非結合シリカ充てん剤が揃っています。

ZORBAXRx-SIL• 高純度 (>99.995%) の多孔質シリカ微細球製 (ポアサイズは固体シリカ微粒子の間の距離です)• 1.8と 5µmの粒子径を用意• 他の種類のシリカよりも強力• ZORBAX-SILよりも弱い酸性で、金属含有量が少ない• 低い酸性度と低い金属含量という特徴により、ZORBAXRx-SILは、酸性の強いシリカでピーク対称性が悪い極性化合物の順相分離に理想的• 強い親水性を持つ化合物を有機溶媒を多くした移動相で HILICモードで分離する用途に有用

ZORBAXEclipseXDB-CN• 高純度 Rx-SILから製造• 塩基性化合物の順相分析に最適• ZORBAXRx-SILよりも速く平衡化し、同じ順相分析の多くに使用

ZORBAXCN• ZORBAXSILに結合されたシアノプロピルジメチルシラン単分子層• ZORBAXSILよりも速く平衡化し、同じ順相分析の多くに使用• 詰まりにくく、シリカよりも親水性ではありません

ZORBAXNH2• ZORBAXSILに結合されたアミノプロピルシラン相• 順相分離と弱アニオン交換、および極性化合物の逆相 HPLC に使用• ビタミン Aと Dは順相モードで分離されます• 炭水化物と糖類は逆相モードで分離されます62

www.agilent.com/chem/jp

分析 HPLC用カラム

カラム仕様
結合相

ポア
サイズ

表面積

pH範囲

エンド
キャップ

ZORBAXRx-SIL

80Å

180m2/g

0-8.0

なし

カーボン
ロード

ZORBAXEclipseXDB-CN80Å

180m /g

2.0-8.0あり

ZORBAXSIL

70Å

300m2/g

0-8.0

なし

ZORBAXCN

70Å

300m2/g

2.0-7.0あり

7%

ZORBAXNH2

70Å

300m2/g

2.0-7.0

あり

4%

2

4.3%

オクチルフェノキシエタノール表面活性剤 (n=10)の高分離，ZORBAXCN
カラム:

ZORBAXCN
880952-705
4.6x250mm,5µm

移動相:

第 1:ヘプタン
第 2:2-メトキシエタノール/イソプロパノール (50/50)

流量:

2mL/minグラジエント:温度:

10分で 2～ 20%第 2移動相、20%で直線保持
50°C

検出器:

278nmサンプル:

オクチルフェノキシ (ポリエチレンオキシ)
エタノール界面活性剤 (n=10)

0

5

10

15
Time (min)20
LCNP001

www.agilent.com/chem/jp63分析 HPLC用カラム

ZORBAXRx-SILが基材の順相カラム
ハードウェア

Rx-SIL
USPL3EclipseXDB-CN
USPL10寸法(mm)

粒子径 (µm)

セミ分取

9.4x250

5880975-201

アナリティカル

4.6x250

5880975-901

990967-905*
993967-905*

説明

標準カラム (特別なハードウェアは必要としません)

アナリティカル

4.6x150

5883975-901

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar

4.6x100

1.8828975-901

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar

4.6x50

1.8827975-901

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar

3.0x100

1.8828975-301

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar

3.0x50

1.8827975-301

ナローボア

2.1x150

5883700-901

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar

2.1x100

1.8828700-901

ラピッドレゾリュ―ション HT、600bar

2.1x50

1.8827700-901

ガードカートリッジ、2個

9.4x15

5820675-119

ガードカートリッジ、4個

4.6x12.5

5820950-919

820950-935

ガードカートリッジ、4個

2.1x12.5

5821125-919

821125-935

ガードハードウェアキット

0840140-901

ガードハードウェアキット

0820888-901
877250-101

993700-905*

ガードカラム (ハードウェアが必要)

820888-901

PrepHTカートリッジカラム (エンドフィッティングキット 820400-901が必要)
PrepHTカートリッジ

21.2x250

7PrepHTカートリッジ

21.2x250

717x7.5

5

PrepHTエンドフィッティング、2個
PrepHTガードカートリッジ、2個

820400-901

ガードカートリッジハードウェアキット

820212-919
820444-901*これらのカラムは逆相溶媒を充てんした状態で出荷されます。イソプロパノールで洗浄してから順相溶媒を使うようにしてください。これらのカラムは HILICモード
でも使用できます。

64

www.agilent.com/chem/jp

分析 HPLC用カラム

ZORBAXOriginalSILが基材の順相カラム
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

SIL
USPL3

CN
USPL10NH2USPL8

糖分分析

標準カラム (特別なハードウェアは必要としません)
セミ分取

9.4x250

5880952-201

880952-205

880952-208

アナリティカル

4.6x250

5880952-701

880952-705

880952-708

840300-908*

アナリティカル

4.6x150

5883952-701

883952-705

883952-708

843300-908*

ナローボア

2.1x50

5

ガードカートリッジ、2個

9.4x15

5820675-119

820675-111

820675-111

ガードカートリッジ、4個

4.6x12.5

5820950-901

820950-905

820950-908

ガードカートリッジ、4個

2.1x12.5

5860700-708

ガードカラム (ハードウェアが必要)

ガードハードウェアキット
ガードハードウェアキット

0840140-901

840140-901

840140-901

820888-901

820888-901

820888-901

877952-101

877952-105

877952-108820400-901

820400-901

820400-901

820950-908*

820888-901*

PrepHTカートリッジカラム (エンドフィッティングキット 820400-901が必要)
PrepHTカートリッジ

21.2x250

7PrepHTエンドフィッティング、2個
PrepHTガードカートリッジ、2個 17x7.5

5

ガードカートリッジハードウェアキット
*これらのカラムは逆相溶媒を充てんした状態で出荷されます。イソプロパノールで洗浄してから順相溶媒を使うようにしてください。これらのカラムは HILICモード

でも使用できます。

www.agilent.com/chem/jp65

分析 HPLC用カラム

ZORBAXHILICPlus• 低分子の極性分析対象成分に対して優れた保持• EclipsePlusシリカをベースにし、優れたピーク形状を実現• LC/MSアプリケーションで高い感度を実現• EPAメソッド 1694に推奨
AgilentZORBAXHILICPlusカラムは、
親水性相互作用クロマトグラフィ (HILIC)アプリケー
ションで使用するためのカラムです。HILICは、通常は極性の小さい化合物の保持と分解に使用されます。HILICPlusカラムは、ZORBAXEclipsePlusカラムで使用される高性能シリカに基づく非結合シリカカラムです。このシリカは、優れたピーク形状を実現し、多くの極性塩基性分析対象成分に不可欠です。これらのカラムは、一般に HILIC分離に必要な広範囲の平衡化を削減するために、出荷時には HILICモード (アセトニトリ
ル :水を含む)で使用するように前処理されています。HILICPlusカラムは、高分離用の

3.5µm 粒子径と、質量分析計または標準 UV 検出器に対応するための内径 2.1 および
4.6mmが用意されています。

カラム仕様
結合相

ポアサイズ

表面積

pH範囲

非結合シリカ95Å

160m2/g

0-8.0

仕様は代表的な値のみを表しています。

66

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分析 HPLC用カラム

ZORBAXHILICPlusカラムでの EPA1694のグループ 4の分離
カラム:

ZORBAXHILICPlus
959793-901
2.1x100mm,3.5µm

移動相:90%アセトニトリル:10%水0.25mL/min

流量:

グラジエント: 7分で 55%アセトニトリルの直線グラジエント
55%に保持
温度:

25°C
シメチジン

メトホルミン

x102
1.00
0.95
0.90
0.85
0.80
0.75
0.70
0.65
0.60
0.55
0.50
0.45
0.40
0.35
0.30
0.25
0.20
0.15
0.10
0.05
0

アルブテロール
ラニチジン

x102
1.00
0.95
0.90
0.85
0.80
0.75
0.70
0.65
0.60
0.55
0.50
0.45
0.40
0.35
0.30
0.25
0.20
0.15
0.10
0.05
0
0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

3.0

3.5

4.0

4.5

5.0

5.5

6.0

6.5

7.0

7.5

8.0

8.5

9.0

9.5

10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 12.5 13.0 13.5 14.0 14.5 15.0 15.5 16.0 16.5 17.0 17.5 18.0 18.5 19.0 19.5 20.0 20.5 21.0 21.5 22.0 22.5 23.0 23.5 24.0 24.5

EPA1694

カラム USCJP0004を用いて2回分析。分析間の平衡化時間は10分。

ZORBAXHILICPlus
説明

ZORBAXHILICPlus

寸法(mm)
4.6x100

粒子径 (µm)

部品番号

3.5

959961-901

ZORBAXHILICPlus

4.6x50

3.5959943-901

ZORBAXHILICPlus

2.1x100

3.5

959793-901

ZORBAXHILICPlus

2.1x50

3.5959743-901

www.agilent.com/chem/jp67

分析 HPLC用カラム

ZORBAX メソッド開発キット
アジレントは、迅速なメソッド開発を可能にするキットをお求めやすい価格で提供しています。各キットには 3本のカラムが含まれています。6つの新しいキットが追加されました。Agilent自動メソッド開発 LC用に推奨します。キットには、さまざまな結合相のラピッドレゾリューション HT(1.8µm) カラムを含むものと、さまざまな結合相のラピッドレゾリューション (3.5µm)カラムを含むものがあり、いずれもメソッド最適化を簡単に行うことができます。これらのキットには、広範囲の化合物に対して優れたピーク形状と最適な性能が得られる EclipsePlusファミリカラムが含まれています。

選択性を最適化するための RRHTメソッド選択性開発キット

EclipsePlusPhenyl-Hexyl
959741-912
2.1x50mm,1.8µm

mAU
20
10
0
0.5

EclipsePlusC18
959741-902
2.1x50mm,1.8µm

1

1.5

2

2.5

3

3.5

min

1.5

2

2.5

3

3.5

min

1.5

2

2.5

3

3.5

mAU
20
10
0
0.5

Bonus-RP827768-901
2.1x50mm,1.8µm

mAU
20
10
0
0.5

1

min
RRHT_MDEV

EclipsePlusPhenyl-hexylカラムのみがすべての成分を分離できました。

68

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分析 HPLC用カラム

ZORBAXメソッド開発キット
3本のカラムをキット化
説明

部品番号

ラピッドレゾリューション HT(RRHT)選択性メソッド開発キット、内径 2.1mm
2.1x50mm、1.8µm、600barカラム:EclipsePlusC18、EclipsePlusPhenyl-Hexyl、BonusRP各 1 本を含む

5190-1431

ラピッドレゾリューション HT(RRHT)pH選択性メソッド開発キット、内径 2.1mm
2.1x50mm、1.8µm、600barカラムを含む:EclipsePlusC18、SB-C18、Extend-C18
各 1 本を含む

5190-1432

ラピッドレゾリューション HT(RRHT)選択性メソッド開発キット、内径 4.6mm
4.6x50mm、1.8µm、600barカラム:EclipsePlusC18、EclipsePlusPhenyl-Hexyl、BonusRP 各 1 本を含む

5190-1433

ラピッドレゾリューション HT(RRHT)pH選択性メソッド開発キット、内径 4.6mm
4.6x50mm、1.8µm、600barカラム:EclipsePlusC18、SB-C18、Extend-C18 各 1 本を

5190-1434

ラピッドレゾリューション選択性メソッド開発キット、内径 4.6mm
4.6x100mm、3.5µmカラム:EclipsePlusC18、EclipsePlusPhenyl-Hexyl、Bonus-RP
各 1 本を含む

5190-1435

ラピッドレゾリューション pHメソッド開発キット、内径 4.6mm
4.6x100mm、3.5µmカラム:EclipsePlusC18、SB-C18、Extend-C18 各 1 本を含む

5190-1436

含む

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分析 HPLC用カラム

ZORBAXメソッドバリデーションキットZORBAXメソッドバリデーションキットは、同じ種類 HPLCカラム (結合相、粒子径、コンフィグレーション) を別製造ロットから入手する必要があるお客様に提供されています。別のロットのカラムを依頼するには、以下の手順でアジレントまたは担当販売
店にお問い合わせください。

• バリデーションキット (別ロットのカラム) をご請求ください (部品番号 899999-888
をお使いください)。

• 使用中のカラムの部品番号をご指定ください。
• 使用中のカラムのロット番号をご指定ください。
• 別ロットから入手したいカラムの本数をご指定ください (例:現在、1本のカラムを所有し、別ロットから 2本追加したい)• 納期については担当営業にお問い合わせください。担当者から回答させていただきます。カスタムカラムの納期は、ロットの状況によって変わります。

HPLC カスタムカラムの発注方法
カタログに載っていないカスタムカラムも次の手順で簡単に発注いただけます。

ヒントとテクニック• カスタムカラム見積書 (SPQ)を請求してください (部品番号 899999-999をお使いくだカスタム LCカラムのご注文は、担当営• カラム径 (例:4.6x50mm)、結合相の種類 (例:StableBondC3)、粒子径 (例:5µm)、ポア
サイズ (例:80Å)をご指定ください。

業/販売店までご連絡ください。

さい)。

• 納期については担当営業にお問い合わせください。担当者から回答させていただきます。カスタムカラムの納期は、ロットの状況によって変わります。

カスタムカラムは標準のカラムに対して、最小限の追加料金で価格設定されています。

70

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分析 HPLC用カラム

ZORBAXイオン交換カラム –SAX、SCX
• 堅牢な ZORBAXシリカをベースとした ZORBAXSAXと 300SCXカラム• pH2～ 7の範囲で安定• 高い効率、高速分離を提供• 有機移動相溶媒に対応
AgilentZORBAX強イオン交換カラムは、
強陰イオン交換 (SAX)と強陽イオン交換 (300SCX)
カラムの両方を用意しています。最も効率性が高くなるようにそれぞれのカラムには結合済み 5µm 球状 シリカ粒子が充てんされています。

ZORBAXSAX充てん剤には第 4級アミンが結合されています。この充てん剤の製造には三官能基有機シラン試薬が使用されており、水系移動相に対する安定性が最大化されています。本カラムは、芳香族/脂肪族カルボン酸やスルホン酸など、水溶性化合物の分離に理想的です。

ZORBAXSCX充てん剤には芳香族スルホン酸基に結合されたポアサイズ 300Åのシリカ粒子が使用されています。このカラムは塩基性の水溶性化合物や生体分子の分離に使
用します。

カラム仕様
結合相

ポアサイズ

表面積

最大圧力

70Å

300m2/gpH範囲
2.0-7.0

機能

ZORBAXSAX

第 4級アミン

350bar

ZORBAX
300SCX300Å50m2/g

2.0-7.0

スルホン酸

350bar

仕様は代表的な値のみを表しています。

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分析 HPLC用カラム

1

咳止め薬 -ZORBAX300SCX
カラム:

ZORBAX300SCX
880952-704
4.6x250mm,5µm

移動相:100mMNaH2PO4 (pH6.5)

流量:

3mL/min

温度:

20°C

検出器:
サンプル:

1.

ピリラミン

2.

テオフィリン3.

グリセリルグアイアコラート

210nm

4.

カフェイン

風邪薬

5.

フェニレフリン

2
3

0

4

5

2
4
Time (min)

LCIE001

ZORBAXイオン交換カラム –SAX、SCX
説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

セミ分取

9.4x250

アナリティカル

4.6x250

アナリティカル

SAX

300SCX

5880952-203

880952-204

5880952-703

880952-704

4.6x150

5883952-703

883952-704

アナリティカル

4.6x50

5846952-704

ソルベントセーバ

3.0x50

5860700-304

ナローボア

2.1x150

5883700-704

ナローボア

2.1x50

5

ガードカートリッジ、4個

4.6x12.5

6

ガードハードウェアキット

72

www.agilent.com/chem/jp

860700-704
820950-903

820950-904

820888-901

820888-901

特殊アプリケーション用 HPLC カラム
ハイスループット分析からキャピラリ、分取分析まで、再現性の高い結果を提供
どれだけ多くのサンプルがあっても、非常に複雑なサンプルでも、さまざまなカラム
やコンフィグレーションをテストする時間を無駄にせず、再現性の高い結果を実現できるでしょう。
以下のカラムファミリは、特定のアプリケーションや分取の課題に対して優れた性能を提供します。

• 新製品 ZORBAX ラピッドレゾリューション High Definition (RRHD) 1.8 µm カラム – Agilent
1290 Infinity LC 等の UHPLC で使用するために最大 120 MPa (1200 bar) での安定性を実現します。複雑なサンプルの高速、高分離を実現するために、50、100、150 mm の長さが用意されています。

• ラインナップが増えた ZORBAX ラピッドレゾリューション (3.5 µm) およびラピッドレ
ゾリューションハイスループット (1.8 µm) カラム – 分解能を落とさずに高速分析を実現し、生産性を高めます。Eclipse Plus、Eclipse XDB、StableBond、他の ZORBAX 結合相も用意しています。

• ZORBAX ソルベントセーバカラム – 内径 4.6 mm のカラムで溶媒使用量を 50 % 削減し、大部分の標準 HPLC や LC/MS 検出器と互換性があります。費用効率の高いアプリケー
ションに理想的です。

• アジレントの ZORBAX 分取カラム、分取カートリッジカラム、ガードカラムは、高純度、高回収率、ハイスループットを実現するように設計されています。これらは、幅広い選択性を備えており、メソッド開発の柔軟性を高めるためにさまざまな結合相が用意されています。

• Ultron ES Chiral カラム – 2 つの補完的なタンパク質ベースのキラル固定相を持ち、光学異性体分離用に最適です。医薬品分析アプリケーションに理想的です。

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特殊アプリケーション用 HPLC カラム

ZORBAX ラピッドレゾリューション
High Definition 1.8 µm• 1290 Infinity LC および他の UHPLC 機器で最適な結果を達成できる高圧 (120 MPa = 1200bar) カラム• 1.8 µm の粒子径により最高の分離能を実現• 優れたピーク形状を実現する ZORBAX Eclipse Plus C18 と、選択性および低 pH での安定性に優れた ZORBAX StableBond C18 を用意• すべての LC に対応するために、同一の結合相を使用した 3.5 および 5 µm ZORBAX カラムと同じ選択性を実現

ZORBAX ラピッドレゾリューション High Definition (RRHD) カラムは、ZORBAX 1.8 µm 粒子
カラムのラインナップを拡張したものです。この新しい RRHD カラムは、改良された充てん処理を使用して、Agilent 1290 Infinity LC または他の UHPLC 機器で使用した場合に最大 120 MPa (1200 bar) の安定性を実現します。RRHD 1.8 µm カラムは、非常に複雑なサンプルの高速、高分解能 (真の High Definition) での分離を可能にするために、50、100、150mm の長さが用意されています。

カラム仕様
160 m2/g

pH 範囲
2.0-9.0

エンド
キャップ
あり

80Å

180 m2/g

1.0-8.0*なし

80Å

180 m2/g

1.8-8.0*

なし

結合相

ポアサイズ

表面積

ZORBAX Eclipse Plus C18

95Å

ZORBAX SB-C18
ZORBAX SB-C8*StableBond カラムは低 pH で最高の性能を発揮するように設計されています。シリカを基材とするカラムをpH 6 ～8 の範囲で最高の安定性にて使用するには、40 °C未満の使用温度、0.01 ～ 0.02 M の範囲の低濃度緩衝液を使用します。pH 6 ～ 8 では、Eclipse Plus C18 カラムを選択してください。

74

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特殊アプリケーション用 HPLC カラム

RRHD カラムを用いたカンゾウの分離
カラム A:ZORBAX RRHD SB-C18
857700-902
2.1 x 50 mm, 1.8 µm

カラム B:

858700-902
2.1 x 100 mm, 1.8 µm

カラム C:

859700-902
2.1 x 150 mm, 1.8 µm

移動相:

流量:

10 ～ 100% B /30 分
A :0 .1 % ギ酸 (fa)
B : アセトニトリル、0.1 % fa
F = 0.4 mL/min

グラジエント:

各カラムとも 30 分のグラジエント

温度:

室温

検出器:

280 nm UV

装置:

1290 Infinity LC

50 mm

7 ピーク

A

Rs: 0

mAU
200
150
100
50
0

2

0

2

4

6

8

10

12

4

14

16

18

min

100 mm8 ピーク

B

Rs: 1.37

mAU
200
150
100
50
0

2

0

2

4

6

8

10

12

4

14

16

18

min

150 mm9 ピーク

C

Rs: 2.40

mAU
200
150
100
50
0

2

0

2

4

6

8

10

12

4

14

6

16

18

min
RRHD_Licorice

www.agilent.com/chem/jp75

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

RRHD カラムでの 1 分未満の分離
カラム:

ZORBAX RRHD SB-C18
857700-902
2.1 x 50 mm, 1.8 µm

グラジエント:H2O (0.05 % トリフルオロ酢酸)/10 ～ 40 % ACN/1 分

温度:

60 °C

注入量:

0.5 µL x 100 ppm each

検出器波長:

275 nm

データレート:160 Hz3mAU
500

0.5 分で 6 成分を分離
400
300

F = 2.0 mL/min
P = 975 bar

1
2

200

0.5 min 1.

6

100

5
4

0
0

.05

.1

.15

.2

.25

.3

.35

.4

.45

min

2-メチル-4-イソチアゾール-3-オン

2.

5-クロロ-2-メチル-4-イソチアゾール-3-オン

3.

カルベンダジム

4.

ベンゾイソチアゾール-3(2H)-オン

5.

2-フェノキシエタノール

6.

メチルパラベンRRHDSub1m

高圧で使用できるラピッドレゾリューション HD カラム(最大圧力:120 MPa = 1200 bar)(µm)

EclipsePlus C18
USP L1

3.0 x 1001.8959758-302

SB-C18USP L1858700-302

3.0 x 501.8959757-302

857700-302

2.1 x 150

1.8959759-902

859700-902

859700-906

2.1 x 1001.8959758-902

858700-902

858700-906

2.1 x 501.8959757-902

857700-902

857700-906

説明

寸法(mm)

ソルベントセーバ HD、

粒子径

SB-C8
USP L71200 bar
ソルベントセーバ HD、

1200 bar
ナローボア RRHD、1200 bar
ナローボア RRHD、1200 bar
ナローボア RRHD、1200 bar

76

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特殊アプリケーション用 HPLC カラム

ZORBAX ラピッドレゾリューション
ハイスループット (RRHT) 1.8 µm• 完全多孔質、粒子径 1.8 µm の充てん剤を用いた高耐圧 (60 MPa = 600 bar) のラピッド
レゾリューション HT カラムは、超高速、高分解能分析を可能にします。
• 精密に設計された粒子によって、他の 2 µm 未満の素材より 25 % 低い圧力で最高の分解能が得られます。

• 分析時間が最大 95 % 短縮されます。
• HPLC メソッドをより速やかに開発できます。
• 140 を超える RRHT カラムから選択できるため、従来のメソッドを問題なく移行できます。

• 短いカラムで複雑なサンプルの分析をより高速に最大のピークキャパシティで行うことができます。

• 3.5、5、7 µm の粒子径に適合し、完全なメソッド拡張性を得ることができます。
• 短い (50 mm 以下) カラムを従来の LC で使用できます。
Agilent ZORBAX ラピッドレゾリューション HT (1.8 µm) カラムは、完全多孔質の 1.8 µm 粒子を使用して、超高速分析と最大の分解能を実現します。長さ 250 mm のカラムと比較すると、最大で 95 % まで分析時間を短縮できます。新しい高性能 ZORBAX Eclipse Plus とStableBond、
Extend、
Bonus-RP) を含む 140 以上の RRHT
その他の ZORBAX カラム (Eclipse XDB、カラムから選択でき、迅速なメソッド開発により、分解能を低減することなく小さい
粒子径への移行を可能にします。粒子径が小さいため、同じ長さの 3.5 µm カラムの 2 倍の効率を得ることができ、その長さで最高の効率と分解能が達成されます。これにより、最高の分解能とピークキャパシティを維持した状態で、より短いカラムで複雑なサンプルを分析できるようになります。1.8 µm ラピッドレゾリューション HT カラムは、
高速、高分解能 HPLC を新たなレベルに導きます。
この高耐圧カラムは、耐圧の上限まで Agilent 1200 ラピッドレゾリューション LC で使用できます。また、RRHT-1100 変換キットを使用して性能を最大限に引き出すことにより、より短いカラムを Agilent 1200 や 1100 などの他の多くの LC でも使用できます。

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特殊アプリケーション用 HPLC カラム

高速 LC 用 1100 シリーズ変換キット
これらのキットを使うと、バイナリポンプ付きの Agilent 1100 システムを RRHT LC カラ
ム用の低容量システムに簡単に変換できます。各キットには、全キャピラリ、フローセル、スタータカラム、システム変換に関する詳細な説明があります。注 :標準メ
ソッドとカラム用に変換された 1100 を使用できます。

キット選択

説明

部品番号

可変波長検出器 (VWD) 用

カラム:4.6 x 50 mm、1.8 µm (3)VWD 用フローセル、5 µl キャピラリ、µ-LC インライン
フィルタ

5188-5323

ダイオードアレイ検出器(DAD および DAD SL) および多波長検出器 (MWD) 用

5188-5324
カラム:4.6 x 50 mm、1.8 µm (2)DAD 用フローセル、5 µl キャピラリ、µ-LC インライン

ダイオードアレイ検出器とマススペクトル用

カラム:2.1 x 50 mm、1.8 µm (2)DAD 用フローセル、1.7 µl キャピラリ、ZDV ユニオン

フィルタ

ラピッドレゾリュ―ション HT:最大 20 倍の高速化
カラム A:ZORBAX SB-C18
827700-902
2.1 x 50 mm, 1.8 µm

カラム C:ZORBAX SB-C18
827700-902
2.1 x 50 mm, 1.8 µm

グラジエント:流量:

1. C3-アルキルフェノン

1

2. C4-アルキルフェノン

4

2

A

3

5

3. C5-アルキルフェノン

6
7

カラム B:

移動相:

78

ZORBAX SB-C18
883975-902
4.6 x 150 mm, 5 µm

温度:

A : 40 °C
B : 40 °C
C : 95 °C

検出器:

UV 254 nm

サンプル:

アルキルフェノン

8

4. C6-アルキルフェノン

9

5. C7-アルキルフェノン
0

2

4

6
Time (min)8

6. C8-アルキルフェノン

10

7. C9-アルキルフェノン
4

B

0

2

1

A : H2O
B : ACN
0.0 分 50% B
A : 11 分 100%B
B : 1.2 分 100%B
C : 0.4 分 100%B
A : 1.2 mL/min
B : 1.0 mL/min
C : 2.4 mL/min

5188-5328

0.2

0.4

8. C10-アルキルフェノン

3

5

0.6
Time (min)9. C12-アルキルフェノン

6
7

0.8

8

9

1.0

4

C

0

1

2
3

0.2
Time (min)www.agilent.com/chem/jp

5

6

7

8

9

0.4
LCRR001

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

RRHT は、ラピッドレゾリューションカラムの 2 倍の効率です
カラム A:

カラム B:

移動相:

ZORBAX SB-C18
835975-902
4.6 x 50 mm, 3.5 µm
ZORBAX SB-C18
827975-901
4.6 x 50 mm, 1.8 µm

流量:25% 水、75% MeOH
1.5 mL/min k Values

温度:

室温

検出器:

254 nm

この図は、ラピッドレゾリューション HT カラムが同じカラム長の 3.5 µm のカラムの 2倍の効率に達することを示しています。この高効率は、高分離、ハイスループット分
析に使用できます。

段数 (N)A2

段数 (N)

1.

3476

1.

6560

2.

4585

2.

8958

3.

5673

4.

6180

B

3.

11508

4.

12266

2
3
4

1

0

3

1.

ウラシル

2.

フェノール

3.

4- クロロニトロベンゼン

4.

トルエン

4
1

0.0

1
Time (min)0.5Time (min)1.0
LCRR002

RRHT カラムによるピーク負荷の増加
カラム A:

カラム B:

移動相:

Eclipse XDB-C8
928700-906
2.1 x 100 mm, 1.8 µm
Eclipse XDB-C18
961753-902
2.1 x 100 mm, 3.5 µm
A : H2O
B : ACN

A
mAU
120
100
80
60
40
20
0

1
1
11

0

2

4

ピ ー ク キ ャ パ シ A : 461
B : 343ティ:
流量:0.5 mL/min

グラジエント:温度:

0.0 分 - 50% B
20.0 分 - 100% B
40 °C

検出器:

UV 254 nm

サンプル:

アルキルフェノン

B
mAU
100
1

80

6

8

10
12
Time (min)

14

16

18

1. ウラシル
2. C3-アルキルフェノン

6. C7-アルキルフェノン

3. C4-アルキルフェノン

8. C9-アルキルフェノン

4. C5-アルキルフェノン

9. C10-アルキルフェノン

5. C6-アルキルフェノン

10. C12-アルキルフェノン

7. C8-アルキルフェノン

11. C14-アルキルフェノン

60

11

40
20
0
0

2

4

6

8

10
12
Time (min)

14

16

18
LCRR004

www.agilent.com/chem/jp79

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

分析時間を大幅に短縮する RRHT カラム
カラム A:

Eclipse XDB-C18
990967-902
4.6 x 250 mm, 5 µm

カラム B:

Eclipse XDB-C18
963967-902
4.6 x 150 mm, 3.5 µm

カラム C:

Eclipse XDB-C18
966967-902
4.6 x 75 mm, 3.5 µm

カラム D:ZORBAX Eclipse XDB-C18
935967-902
4.6 x 50 mm, 3.5 µm

カラム E:

Eclipse XDB-C18
925975-902
4.6 x 50 mm, 1.8 µm

移動相:

73% MeOH:27% 20 mM
リン酸緩衝液、pH 7.0

流量:

1 mL/min

温度:

室温

検出器:

254 nm
A

1
2

B

1

5

2

1

5

2

D

3

1
2 3 4

1

E

0

5

5
2

3 4

6

4

6

5

7

6

7

6

4

3

C

4

3

7

7

1.

ウラシル

2.

ナプロキセン3.

メファナム酸

4.

ブチルパラベン5.

プロプラノロール

6.

ナフタレン

7.

フタル酸ジプロピル

6 7

2

4

6
Time (min)

8

10

12
LCRR003

この図は、ラピッドレゾリューション HT カラムを使うことによって分析時間を劇的に短縮できることを示すものです。クロマトグラム A では、長さ 25cm、内径 5µm のカラムで分離が 11.5 分かかったことを示しています。クロマトグラム B、C で示されているラピッドレゾリューションカラム (3.5 µm) では、分離をほとんど変えることなく、分析時間は大幅に短縮されていることを示しています。ラピッドレゾリューション HT カラムでは分析時間が 2.2 分にまで短縮されており、この時間は分析時間の 80％にあたります。しかも、ベースライン分離は保たれたままです。

80

www.agilent.com/chem/jp

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

高温でも長寿命な RRHT カラム

ZORBAX SB-C18
827700-902
2.1 x 50 mm, 1.8 µm

移動相:A : 60 % H2O
B : 40% ACN

流量:

1 mL/min

温度:

80 °C

検出器:

UV 254 nm

サンプル:

QC Test Mix

Plates
12000

10000

8000

6000

4000

2000

0

1
499
718
853
988
1153
1305
1506
1641
1776
1911
2046
2181
2319
2508
2643
2778
2913
3085
3220
3468
3603
3738
3887
4054
4189
4324
4537
4756
4892
5033
5201

カラム:

Injection Number

LCRR005

効率の比較 - RRHT (1.8 µm) とラピッドレゾリューション (3.5 µm) カラム
カラム長

分離能力

分離能力

N (3.5 µm)*

N (1.8 µm)

高分離

150

21,00032,500100

14,00024,00075

10,50017,000**50

7000

12,000

30

4200

6000

20

—

3500

15

2100

2500

超高速

分解能 a N1/2
*同じ長さの 5 µm HPLC カラムは 40% 少ない段数 (N 値) になります。内径 4.6 mm**カスタムカラムとして入手可能

www.agilent.com/chem/jp81

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

高圧用ラピッドレゾリューション HT カラム (最大圧力: 600 bar、9000 psi)(µm)

EclipsePlus C18
USP L1

4.6 x 150

1.8959994-902

ラピッドレゾリュ―
ション HT、600 bar

4.6 x 1001.8959964-902

ラピッドレゾリュ―
ション HT、600 bar

4.6 x 75

1.8959951-902

ラピッドレゾリュ―
ション HT、600 bar

4.6 x 501.8959941-902

959941-906

959941-912

959941-918

927975-902

927975-906

727975-902

ラピッドレゾリュ―
ション HT、600 bar

4.6 x 301.8959931-902

959931-906

959931-912

959931-918

924975-902

924975-906

724975-902

ラピッドレゾリュ―
ション HT、600 bar

4.6 x 201.8926975-902

926975-906

726975-902

ソルベントセーバ
HT、600 bar

3.0 x 1001.8959964-302

959964-306

959964-312

928975-302

ソルベントセーバ
HT、600 bar

3.0 x 501.8959941-302

959941-306

959941-312

927975-302

927975-306

727975-302

ソルベントセーバ
HT、600 bar

3.0 x 30

1.8924975-302

924975-306

724975-302

ソルベントセーバ
HT、600 bar

3.0 x 201.8926975-302

926975-306

726975-302

ナローボア RRHT、

2.1 x 150

1.8959794-902

2.1 x 1001.8959764-902

959764-906

959764-912

959764-918

928700-902

928700-906

728700-902

2.1 x 501.8959741-902

959741-906

959741-912

959741-918

927700-902

927700-906

727700-902

2.1 x 30

1.8959731-902

959731-906

959731-912

924700-902

924700-906

724700-902

2.1 x 201.8926700-902

926700-906

726700-902

説明

寸法(mm)

ラピッドレゾリュ―
ション HT、600 bar

粒子径EclipsePlus C8USP L7

Eclipse Plus
Phenyl-Hexyl
USP L11

EclipsePAH
USP L1

EclipseXDB-C18
USP L1959964-906

959964-912

959964-918

928975-902

EclipseXDB-C8USP L7

Extend-C18
USP L1

728975-902

728975-302

600 bar
ナローボア RRHT、

600 bar
ナローボア RRHT、

600 bar
ナローボア RRHT、

600 bar
ナローボア RRHT、

600 bar82

www.agilent.com/chem/jp

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

高圧用ラピッドレゾリューション HT カラム (最大圧力: 600 bar、9000 psi)
粒子径

SB-CN
USP L10

ラピッドレゾリュ―ショ 4.6 x 150
ン HT、600 bar

1.8

SB-C18USP L1829975-902

ラピッドレゾリュ―ショ 4.6 x 100
ン HT、600 bar

1.8828975-902

ラピッドレゾリュ―ショ 4.6 x 75
ン HT、600 bar

1.8

ラピッドレゾリュ―ショ 4.6 x 50
ン HT、600 bar

1.8827975-901

827975-906

827975-912

827975-905

827975-914

ラピッドレゾリュ―ショ 4.6 x 30
ン HT、600 bar

1.8824975-902

824975-906

824975-912

824975-905

824975-914

ラピッドレゾリュ―ショ 4.6 x 20
ン HT、600 bar

1.8826975-902

826975-906

ソルベントセーバ HT、

3.0 x 150

1.8829975-302

829975-306

829975-312

829975-305

3.0 x 100*

1.8828975-302

828975-306

828975-312

828975-305

3.0 x 501.8827975-302

827975-306

827975-312

827975-305

3.0 x 30

1.8824975-302

824975-306

3.0 x 201.8826975-302

826975-306

ナローボア RRHT、600 bar 2.1 x 150

1.8820700-902

820700-906

820700-912

820700-905

ナローボア RRHT、600 bar 2.1 x 100

1.8828700-902

828700-906

828700-912

ナローボア RRHT、600 bar 2.1 x 50

1.8827700-902

827700-906

ナローボア RRHT、600 bar 2.1 x 30

1.8824700-902

824700-906

ナローボア RRHT、600 bar 2.1 x 20

1.8826700-902

826700-906

説明

寸法(mm)(µm)

SB-C8
USP L7829975-906

SB-Phenyl
USP L11829975-912

829975-905

SB-Aq
829975-914

828975-906

828975-912

828975-905

828975-914

Rx-SIL
USP L3

Bonus-RP
USP L60828975-901

828668-901

830975-906

830668-901
827975-901

827668-901

828975-314

828975-301

828668-301

827975-314

827975-301

827668-301

828700-905

828700-914

828700-901

828768-901

827700-912

827700-905

827700-914

827700-901

827768-901

824700-912

824700-905

824700-914

600 barソルベントセーバ HT、

600 barソルベントセーバ HT、

600 barソルベントセーバ HT、

824975-305

600 barソルベントセーバ HT、

600 bar*SB-C3 (部品番号 828975-309) でも使用できます。

www.agilent.com/chem/jp83

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

ラピッドレゾリューション HT カラムおよびカートリッジ (最大圧力: 400 bar、6000 psi)
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

ラピッドレゾリュ―ション HT

4.6 x 50

粒子径

(µm)

1.8
1.8
1.8
1.8

ラピッドレゾリューション HT、3 個 4.6 x 50
ナローボア RRHT

2.1 x 50

ナローボア RRHT、3 個

2.1 x 50

EclipseXDB-C18
USP L1

EclipseXDB-C8USP L7

SB-C18USP L1

SB-C8
USP L7

Extend-C18
USP L1922975-902

922975-906

922975-902

822975-906

722975-902

922975-932

922975-932

922700-902

922700-902

922700-932

922700-932

ラピッドレゾリューション HT カートリッジ (ハードウェアキット 820555-901 が必要)
ラピッドレゾリューション HT カー
トリッジ

4.6 x 501.8925975-902

825975-902

ラピッドレゾリューション HT
カートリッジ、3 個

4.6 x 501.8925975-932

825975-932

ラピッドレゾリューション HT カー
トリッジ

2.1 x 501.8925700-902

825700-902

ラピッドレゾリューション HT
カートリッジ、3 個

2.1 x 501.8925700-932

825700-932

ラピッドレゾリューション HT
カートリッジ

4.6 x 30

1.8923975-902

823975-902

ラピッドレゾリューション HT
カートリッジ、3 個

4.6 x 30

1.8923975-932

823975-932

ラピッドレゾリューション HT
カートリッジ

2.1 x 301.8923700-902

823700-902

ラピッドレゾリューション HT
カートリッジ、3 個

2.1 x 301.8923700-932

823700-932

ラピッドレゾリューション HT
カートリッジ

4.6 x 151.8921975-902

821975-902

ラピッドレゾリューション HT
カートリッジ、3 個

4.6 x 151.8921975-932

821975-932

ラピッドレゾリューション HT
カートリッジ

2.1 x 151.8921700-902

821700-902

ラピッドレゾリューション HT
カートリッジ、3 個

2.1 x 151.8921700-932

821700-932

820555-901

820555-901

RR および RRHT カートリッジ用ハードウェアキット

84www.agilent.com/chem/jp

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

ZORBAX ラピッドレゾリューション 3.5 µm• メソッド開発のスタートに用いるカラムとして最適• 分析時間と溶媒使用量を減らし、サンプルスループットを高めます• 長さの短いカラムで高効率が得られます• 分析カラム (4.6 mm) およびナローボア (内径 2.1 mm) を用意しています• 5 µm カラムに匹敵する寿命を誇ります
ZORBAX ラピッドレゾリューションカラムは粒子径 3.5µm の充てん剤を使用しています。このカラムを使用した場合、5µm の充てん剤を使用しているカラムと比べると、さまざまなアプリケーションで分析時間が短縮され、サンプルのスループットが増大します。ラピッドレゾリューションカラムには長さ 15 ～ 150 mm、内径 1 ～ 4.6 mm のものがあり、ハイスループット分析、LC/MS、コンビナトリアルケミストリ、その他の高速分析に最適な構成を選ぶことができます。ZORBAX ラピッドレゾリューションの

3.5 µm の粒子は機械的強度に優れているので、充てん状態が非常に安定しており 5 µm
カラムに匹敵する寿命を誇ります。ZORBAX ラピッドレゾリューションカラムは、大部分の ZORBAX 結合相で利用することができます。

RR カラムは分解能を向上させ分析時間を短縮

1.

カフェイン

カラム A:

2.

ドキシラミン3.

クロロフェニラミン

4.

トリプロリジン

カラム B:ZORBAX Bonus-RP
883668-901
4.6 x 150 mm, 5 µm

1

4ZORBAX Bonus-RP
866668-901
4.6 x 75 mm, 3.5 µm

カラム C:ZORBAX Bonus-RP
861700-901
2.1 x 50 mm, 3.5 µm

移動相:

80% 25 mM NH4Ac、pH 5.5
20% ACN
1.5 mL/min
1.5 mL/min
0.3 mL/min

流量:

A

温度:

40 °C

検出器:

254 nm

2
3

0
B

1

2

3
4
Time (min)

5
C

1

4
1

4

2

2

3

3

ラピッドレゾリューション 3.5 µm カラムは、LC/MS に最適な
ナローボアタイプも用意しています。

0

6

1

2
Time (min)

3

0

1
2
Time (min)LC3_501

www.agilent.com/chem/jp85

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

ラピッドレゾリューションカラムによるメソッド開発
カラム:

移動相:

ZORBAX SB-C18
866953-902
4.6 x 75 mm, 3.5 µm

1.

ジルチアゼム2.

ジピリダモール

3.

ニフェジピン

A : 25 mM NaH2PO4、pH 3.0
B : MeOH
A : 20:80
AB : 30:70
C : 40:60

4.

リドフラジン5.

フルナリジン

流量:

2.0 mL/min

温度:

35 °C

検出器:

254 nm

B
1

2

C
1

1

3
5
23

5

4

2 3

4

0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0
Time (min)Time (min)Time (min)LC3_502

ラピッドレゾリューション 4.6 x 75 mm、3.5 µm カラムは、メソッド開発のスタートに用いるカラムとして好適です。カラムと移動相の組み合わせが目的の分離を達成できるかどうか迅速に決定できます。

ZORBAX ラピッドレゾリューション 3.5 µm Eclipse Plus カラム
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

ラピッドレゾリューション

4.6 x 150

ラピッドレゾリューション

4.6 x 100

ラピッドレゾリューション

4.6 x 75

ラピッドレゾリューション

4.6 x 50

ラピッドレゾリューション

4.6 x 30

ソルベントセーバプラス

3.0 x 150

ソルベントセーバプラス

3.0 x 100

ナローボア RR*

2.1 x 150

ナローボア RR*

2.1 x 100

ナローボア RR*

2.1 x 50

ナローボア RR*

2.1 x 30

ガードカートリッジ、4 個

4.6 x 12.5

ガードカートリッジ、4 個

2.1 x 12.5

3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
5
5
0

ガードハードウェアキット
*RR:ラピッドレゾリューション 3.5 µm

86

www.agilent.com/chem/jp

EclipsePlus C18
USP L1

EclipsePlus C8USP L7

Eclipse Plus
Phenyl-Hexyl
USP L11

EclipsePAH
USP L1959963-902

959963-906

959963-912

959963-918

959961-902

959961-906

959961-912

959961-918

959933-902

959933-906

959933-912

959943-902

959943-906

959943-912

959936-902

959936-906

959936-912

959963-302

959963-306

959963-312

959961-302

959961-306

959961-312

959763-902

959763-902

959763-912

959793-902

959793-906

959793-912

959743-902

959743-906

959743-912

959733-902

959733-906

959733-912

820950-936

820950-937

821125-936

821125-937

820888-901

820888-901

959943-918

959793-918

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

ZORBAX ラピッドレゾリューション 3.5 µm Eclipse XDB カラム
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

ラピッドレゾリューション

4.6 x 150

ラピッドレゾリューション

4.6 x 100

ラピッドレゾリューション

4.6 x 75

ラピッドレゾリューション

4.6 x 50

ラピッドレゾリューション

4.6 x 30

ラピッドレゾリューション

4.6 x 20

ソルベントセーバプラス

3.0 x 150

ソルベントセーバプラス

3.0 x 100

ソルベントセーバプラス

3.0 x 75

ナローボア RR*

2.1 x 150

ナローボア RR*

2.1 x 100

ナローボア RR*

2.1 x 75

ナローボア RR*

2.1 x 50

ナローボア RR*

2.1 x 30

ナローボア RR*

2.1 x 20

マイクロボア RR*

1.0 x 150

マイクロボア RR*

1.0 x 50

マイクロボア RR*

1.0 x 30

マイクロボアガード、3 個

1.0 x 17

ガードカートリッジ、4 個

4.6 x 12.5

ガードカートリッジ、4 個

2.1 x 12.5

3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
5
5
5
0

ガードハードウェアキット

EclipseXDB-C18
USP L1

EclipseXDB-C8USP L7

EclipseXDB-Phenyl
USP L11

EclipseXDB-CNUSP L10963967-902

963967-906

963967-912

963967-905

961967-902

961967-906

966967-902

966967-906

966967-912

935967-902

935967-906

935967-912

934967-902

934967-906

932967-902

932967-906

963954-302

963954-306

963954-312

961967-302

961967-306

961967-312

961967-905
966967-905

963954-305

966954-302
930990-902

930990-906

961753-902

961753-906

961753-905

966735-902
971700-902

971700-906

974700-902

974700-906

972700-902

972700-906

963600-902

963600-906

965600-902

965600-906

961600-902

961600-906

5185-5921

5185-5921

820950-925

820950-926

820950-927

820950-935

821125-926

821125-926

821125-926

821125-935

820888-901

820888-901

820888-901

820888-901*RR:ラピッドレゾリューション 3.5 µm

www.agilent.com/chem/jp87

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

ZORBAX ラピッドレゾリューション3.5µm StableBond カラム
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

ラピッドレゾリューション 4.6 x 150
ラピッドレゾリューション 4.6 x 100
ラピッドレゾリューション 4.6 x 75
ラピッドレゾリューション 4.6 x 50
ラピッドレゾリューション 4.6 x 30
ラピッドレゾリューション 4.6 x 20
ソルベントセーバプラス

3.0 x 150

ソルベントセーバプラス

3.0 x 100

ソルベントセーバプラス

3.0 x 75

ナローボア RR*

2.1 x 150

ナローボア RR*

2.1 x 100

ナローボア RR*

2.1 x 75

ナローボア RR*

2.1 x 50

ナローボア RR*

2.1 x 30

ナローボア RR*

2.1 x 20

マイクロボア RR*

1.0 x 150

マイクロボア RR*

1.0 x 50

マイクロボア RR*

1.0 x 30

マイクロボアガード、3 個 1.0 x 17
ガードカートリッジ、4 個 4.6 x 12.5
ガードカートリッジ、4 個 2.1 x 12.5
ガードハードウェアキット

粒子径

(µm)

3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
5
5
5
0

SB-C18USP L1

SB-C8
USP L7SB-CN
USP L10

SB-Phenyl
USP L11863953-902

863953-906

863953-905

863953-912

863953-914

861953-902

861953-906

861953-905

861953-912

861953-914

866953-902

866953-906

866953-905

866953-912

866953-914

835975-902

835975-906

835975-905

835975-912

835975-914

834975-902

834975-906

832975-902

832975-906

863954-302

863954-306

863954-305

863954-312

861954-302

861954-306

861954-305

861954-312

861753-905

861753-912

SB-Aq

863954-314
861954-309

861954-314

866953-302
830990-902

830990-906

861753-902

861753-906

830990-914
861753-914

866735-902
871700-902

871700-906

874700-902

874700-906

872700-902

872700-906

863600-902

863600-906

865600-902

865600-906

861600-902

861600-906

5185-5920

5185-5920

820950-920

820950-915

820950-916

820950-917

820950-922

820950-933

821125-915

821125-915

821125-924

821125-915

821125-924

821125-933

820888-901

820888-901

820888-901

820888-901

820888-901

820888-901*RR:ラピッドレゾリューション 3.5 µm

88

SB-C3
USP L56

www.agilent.com/chem/jp

871700-914

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

ZORBAX ラピッドレゾリューション 3.5 µm Rx、Bonus-RP、Extend-C18 カラム
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

ラピッドレゾリューション

4.6 x 250

ラピッドレゾリューション

4.6 x 150

ラピッドレゾリューション

4.6 x 100

ラピッドレゾリューション

4.6 x 75

ラピッドレゾリューション

4.6 x 50

ソルベントセーバプラス

3.0 x 150

ソルベントセーバプラス

3.0 x 100

ナローボア RR*

2.1 x 150

ナローボア RR*

2.1 x 100

ナローボア RR*

2.1 x 50

マイクロボア RR*

1.0 x 150

マイクロボア RR*

1.0 x 50

マイクロボア RR*

1.0 x 30

マイクロボアガード、3 個

1.0 x 17

ガードカートリッジ、4 個

4.6 x 12.5

ガードカートリッジ、4 個

2.1 x 12.5

3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
3.5
5
5
5
0

ガードハードウェアキット

Rx-C18USP L1

Rx-C8
USP L7

Bonus-RP
USP L60884950-577

Extend-C18
USP L1863967-902

863953-906

863668-901

763953-902

861967-902

861953-906

864668-901

764953-902

866967-902

866953-906

866668-901

766953-902
735953-902

863967-302

863954-306

863668-301

763954-302

861967-302

861954-306

864668-301

764953-302

830990-906

863700-901

861753-906

861768-901

761753-902

861700-901

735700-902

863608-901

763600-902

865608-901

765600-902

861608-901

761600-902

861767-902

5185-5922

5185-5923

820950-914

820950-913

820950-928

820950-930

821125-915

821125-915

821125-928

821125-930

820888-901

820888-901

820888-901

820888-901*RR:ラピッドレゾリューション 3.5 µm

www.agilent.com/chem/jp89特殊アプリケーション用 HPLC カラム

ZORBAX ソルベントセーバ• 内径 4.6 mm のカラムと比較して、移動相の使用量と廃液生成を 60 % 削減します。
• シグナル/ノイズ比 (S/N 比) が 2～ 3 倍向上• 中程度の流量で LC/MS 性能を最大限に発揮• 一般的な従来型の LC 機器構成でも修正を加えずに使用可能• 粒子径 1.8、3.5、5 µm を提供
Agilent ZORBAX ソルベントセーバカラムの内径は 3.0 mm です。これは、内径 4.6 mm のカラムよりも溶媒使用量を 50 % 減らします。ソルベントセーバカラムは、LC/MS にも理想的です。0.5 mL/min の一般的な流量で、これらのカラムはほぼすべての LC インタ
フェースに対応しています。これらのカラムは、内径 4.6 mm のカラムより感度が 2 ～3 倍高まります。ソルベントセーバカラムは、従来型の HPLC 機器で使用でき、費用効率の高い分析を行うのに適した選択肢です。

ソルベントセーバカラムは溶媒使用量と廃棄量を 60 ％ 削減
カラム A:ZORBAX SB-C18
883975-902
4.6 x 150 mm, 5 µm

カラム B:ZORBAX SB-C18
883975-302
3.0 x 150 mm, 5 µm

移動相:
温度:
サンプル:

20% ACN:80% 0.2 M Na2HPO4+ 0.1 M クエン酸、pH 2.6
室温

溶媒消費量が少ないため、A

抗菌剤

廃液量も減少1

B1.

スルファメラジン2.

フラゾリドン3.

オキソリン酸

4.

スルファジメトキシン

5.

スルファキノキサリン

6.

ナリジクス酸144

内径 4.6 mm および 3.0 mm のカラムを使用した抗菌剤の分離例では、装置には変更を加えずカラムをソルベントセーバカラムに代えただけで、溶液使用量が 50 % 減ったことが示されています。これは分析コストの大幅な削減を意味します。

6
6

2
3

0

2
3

5

Time (min)

40

0

5

Time (min)40
LCSS00190

www.agilent.com/chem/jp

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

RRHT カラムとソルベントセーバカラムの使用による溶媒の削減:
ダイエットソーダ
カラム A:

Eclipse Plus C18
959993-902
4.6 x 150 mm, 5 µm
F = 1.0 mL/min (P = 96 bar)

カラム B:

ソルベントセーバ HT、600 bar

Eclipse Plus C18
959941-302
3.0 x 50 mm, 1.8 µm
F = 0.43 (P = 181 bar)
移動相:

温度:

A : 200 mM リン酸塩
B : アセトニトリル
A : B (79:21)
25 °C

検出器:

UV 220 nm、16、ref = 420、20

フローセル:
流量:

3 mm、2 µL
1s
注入量 4.6 では 3 µL、3.0 では 1.5

装置:

1200SL

サンプル:

ろ過したダイエットソーダ 0.2 µm

11 mL/分析

1

A

移動相:
流量:

サッカリン
カフェイン

3.

アスパルテーム

4.

安息香酸

2
4

3
4

2

6

8

min

10

1.6 mL/分析

B

溶媒使用量を 85% 削減
2

3

4
RRHT_dietsoda

ソルベントセーバは LC/MS 分析に理想的なカラムです
カラム:

1.
2.

ZORBAX SB-C18
861954-302
3.0 x 100 mm, 3.5 µm
A : 70% メタノール + 0.4% ギ酸
B : 30% 水 + 0.4% ギ酸
0.425 mL/min

A

LC-UV

mAU

検出器:

A : UV 254 nm
B : ポジティブイオン APCIC : ポジティブイオンエレクトロスプレー

サンプル:

ステロイド

0

B
標準流量が 0.5 mL/min であるソルベントセーバカラムでは、MS インタフェースをエレクトロスプレーから APCI に変更しても、カラムを変更せずにサンプルを評価、分析することができ、LC/MS 分析に理想的なカラムです。

トリアムシノロン

2.

ヒドロコルチゾン

3.

酢酸コルチゾン

4.

デオキシコルチコステロン

5.

ヒドロキシプロゲステロン

6.

プロゲステロン

4

2

140
120
100
80
60
40
20
0

1.

1

3

2

4

5

6

6

8
Time (min)

10

12

14

16

4

6

8
Time (min)

10

12

14

16

4

6

8
Time (min)

10

12

14

16

LC-APCI-MS

35000000
30000000
25000000
20000000
15000000
10000000
5000000
0

0

C

2

LC-ESI-MS

25000000
22500000
20000000
17500000
15000000
10000000
7500000

02

www.agilent.com/chem/jp

LCSS00391

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

ZORBAX Eclipse Plus
説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

ソルベントセーバ

3.0 x 250

ソルベントセーバ

3.0 x 150

ソルベントセーバプラス

3.0 x 150

5
5
3.5
3.5
1.8
1.8

ソルベントセーバプラス

3.0 x 100

ソルベントセーバ HT、600 bar

3.0 x 100

ソルベントセーバ HT、600 bar

3.0 x 50

EclipsePlus C18
USP L1

EclipsePlus C8USP L7

Eclipse Plus
Phenyl-Hexyl
USP L11959993-302

959993-306

959963-302

959963-306

959963-312

959961-302

959961-306

959961-312

959964-302

959964-306

959964-312

959941-302

959941-306

959941-312

EclipsePAH
USP L1959990-318

ZORBAX 80Å Eclipse XDB
説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

ソルベントセーバ

3.0 x 250

ソルベントセーバ

3.0 x 150

ソルベントセーバプラス

3.0 x 150

ソルベントセーバプラス

3.0 x 100

ソルベントセーバプラス

3.0 x 75

ソルベントセーバ HT、600 bar

3.0 x 100

ソルベントセーバ HT、600 bar

3.0 x 50

ソルベントセーバ HT、600 bar

3.0 x 30

ソルベントセーバ HT、600 bar

3.0 x 20

5
5
3.5
3.5
3.5
1.8
1.8
1.8
1.8

EclipseXDB-C18
USP L1

EclipseXDB-C8USP L7

EclipseXDB-Phenyl
USP L11

EclipseXDB-CNUSP L10990967-302

990967-306

990967-312

990967-305

993967-302

993967-306

993967-312

993967-905

963954-302

963954-306

963954-312

963954-305

961967-302

961967-306

961967-312

966954-302
928975-302

928975-306

927975-302

927975-306

924975-302

924975-306

926975-302

926975-306

ZORBAX 80Å StableBond
説明

寸法(mm)

ソルベントセーバ

3.0 x 250

ソルベントセーバ

3.0 x 150

ソルベントセーバプラス

3.0 x 150

ソルベントセーバプラス

3.0 x 100

ソルベントセーバ HD、1200 bar

3 x 100

ソルベントセーバ HD、1200 bar

3 x 50

ソルベントセーバ HT、600 bar

3.0 x 150

ソルベントセーバ HT、600 bar

3.0 x 100

ソルベントセーバ HT、600 bar

3.0 x 50

ソルベントセーバ HT、600 bar

3.0 x 30

ソルベントセーバ HT、600 bar

3.0 x 20

92

粒子径

(µm)

5
5
3.5
3.5
1.8
1.8
1.8
1.8
1.8
1.8
1.8

SB-C18USP L1

SB-C8
USP L7SB-CN
USP L10

SB-C3
USP L56

SB-Phenyl
USP L11

SB-Aq

880975-302

880975-306

880975-305

880975-309

880975-312

880975-314

883975-302

883975-306

883975-305

883975-309

883975-312

883975-314

863954-302

863954-306

863954-305

863954-309

863954-312

863954-314

861954-302

861954-306

861954-305

861954-309

861954-312

861954-314

829975-302

829975-306

829975-305

828975-302

828975-306

828975-305

827975-302

827975-306

827975-305

824975-302

824975-306

824975-305

826975-302

826975-306

858700-302
857700-302

www.agilent.com/chem/jp829975-312
828975-309

828975-312

828975-314

827975-312

827975-314

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

ZORBAX 300A StableBond
説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

ソルベントセーバプラス

3.0 x 150

ソルベントセーバプラス

3.0 x 100

ソルベントセーバプラス

3.0 x 75

3.5
3.5
3.5

300SB-C18
USP L1300SB-C8
USP L7300SB-CN
USP L10300SB-C3
USP L56863974-302

863974-306

863974-309

863974-309

861973-306
866953-302

ZORBAX 80Å Bonus-RP および Rx
Bonus-RP

Rx-C18USP L1

Rx-C8
USP L7880668-301

880967-302

880975-306

883668-301

883967-302

883975-306

863668-301

863967-302

863954-306

864668-301

861967-302

861954-306

説明

寸法(mm) 粒子径 (µm) USP L60

ソルベントセーバ

3.0 x 250

ソルベントセーバ

3.0 x 150

ソルベントセーバプラス

3.0 x 150

ソルベントセーバプラス

3.0 x 100

ソルベントセーバ HT、600 bar

3.0 x 100

ソルベントセーバ HT、600 bar

3.0 x 50

5
5
3.5
3.5
1.8
1.8

828668-301
827668-301

ZORBAX 80Å Extend-C18
説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

ソルベントセーバ

3.0 x 250

ソルベントセーバ

3.0 x 150

ソルベントセーバプラス

3.0 x 150

ソルベントセーバプラス

3.0 x 100

ソルベントセーバプラス

3.0 x 50

ソルベントセーバ HT、600 bar

3.0 x 100

ソルベントセーバ HT、600 bar

3.0 x 50

ソルベントセーバ HT、600 bar

3.0 x 30

ソルベントセーバ HT、600 bar

3.0 x 20

5
5
3.5
3.5
3.5
1.8
1.8
1.8
1.8

www.agilent.com/chem/jp

Extend-C18
USP L1770450-302
773450-302
763954-302
764953-302
735954-302
728975-302
727975-302
724975-302
726975-302

93

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

ZORBAX PrepHT• 分析スケールから分取スケールに簡単にスケールアップが可能• 2000 mg までの高速分取分離• 高効率性、高収率をもたらす 5 µm、7 µm の粒子径
• 取り付けやすいフィンガータイトコネクションシールにより、5000 psi/350 bar までの圧力に対応できます

Agilent ZORBAX PrepHT カラムを使えば高純度、高回収率、ハイスループットも簡単に実現できます。PrepHT カラムは、どのような状況下でも最適な分離能と試料負荷量を実現するため、Eclipse XDB、StableBond、Bonus-RP、Extend-C18 といった豊富な種類の中から結合相をお選びいただけます。

ZORBAX PrepHT カラムには 5 µm、7 µm の粒子径の充てん剤が詰められており、非常に高い分離能をもたらします。この高い分離能は高い試料負荷量をもたらし、高い収率、純度で化合物を分取することを可能にします。直径が大きく強度の高い ZORBAX 粒子は100 mL/min までの流量を可能にし、スループットを高めます。
ZORBAX PrepHT カラムは分離能を落とすことなく分析スケールから分取スケールにす
ばやくスケールアップできるよう設計されています。複雑な分離目的に使用するサイズの大きいカラム (内径 21.2 mm 以上、長さ 150 mm 以上) には、高い効率性と高い試料
負荷量のバランスを慎重に 検討した結果、7 µm の粒子径を選びました。

94

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特殊アプリケーション用 HPLC カラム

高純度、高回収率分析を実現する ZORBAX PrepHT カラム
サンプル:

抗狭心症薬

ZORBAX SB-C18 カラムを使ったマスベースのAbundance (mAU)

フラクションコレクションは、各化合物で高
い純度、回収率を実現しています (資料番号5988-7113EN のアプリケーションノート)。3 種
類の抗狭心剤の分離は一回の分析で成功し、高い回収率、>90% の純度を得ることができました。分離の程度によっては、2000 mg までの分離も可能です。

DMSO

0

1

1.

ニフェジピン

2.

ニモジピン

3.

ニソルジピン

2

3

4
Time (min)

1

2

5

3

DAD

6

7
MSD

Vial 2 – 343
Vial 1 – 347

Vial 3 – 389

8000000
6000000
4000000
2000000
0

1

2

3

4
Time (min)5

6

7
LCPHT01

ニフェジピン

ニフモジピン[mg][mg]

ニフソルジピン[mg]

フラクション 1 18.90

0.11

0.16

ニフェジピン純度

98.6%

フラクション 2 0.29

17.66

0.77

ニフモジピン純度

94.4%

フラクション 3 0.49

1.66

18.36

ニフソルジピン純度89.5%

回収率 [mg]

19.68

19.43

19.29

回収率 [%]

101.3

102.0

101.9

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特殊アプリケーション用 HPLC カラム

分析カラムから Prep ZORBAX SB-C18 カラムへのスケールアップ
流量

カラム

寸法

カラム 1

50 x 150 mm(mL/min)100

注入 (µL)

検出器セル

部品番号

2200

0.3 mm 石英製

カスタムカラムカラム 2

21.2 x 150 mm

18

400

0.3 mm 石英製

877150-102

カラム 3

9.4 x 150 mm

3.5

80

0.3 mm 石英製

883975-202

カラム 4

4.6 x 150 mm

0.85

2.0

3 mm SST

883975-902

PrepHT へのスケールアップ
2

3500

3

1.

テオブロミン2.

テオフィリン3.

カフェイン

Abundance (mAU)

3000
2500
2000

Column 1

1500

1
Column 2

1000
Column 3
500
Column 4

0
0

2.5

5.0

7.5

10.0
12.5
Time (min)

15.0

17.5

20.0
LCPHT_ScaleUp

同じ 1100 ポンプを使用すると、分離能を低下させずに内径 4.6 mm から 50 mm へのスケールアップが可能です。メソッドを再作成して調整する所要時間が短縮されるため、スループッ
トが向上します。

96

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特殊アプリケーション用 HPLC カラム

ZORBAX PrepHT 80ÅStableBond (ハードウェア 820400-901 が必要)
ハード
ウェア

SB-C18USP L1

SB-C8
USP L7

SB-Aq

SB-CN
USP L10

SB-Phenyl
USP L117877250-102

877250-106

877250-114

877250-105

877250-112

7877150-102

877150-106

877150-114

21.2 x 150

5870150-902

870150-906

870150-914

21.2 x 100

5870100-902

870100-906

870100-914

PrepHT カートリッジ

21.2 x 50

5870050-902

870050-906

870050-914

PrepHT ガードカートリッジ、2 個

17 x 7.55820212-920

820212-915

820212-933

820212-933

820212-915

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

PrepHT カートリッジ

21.2 x 250

PrepHT カートリッジ

21.2 x 150

PrepHT カートリッジ
PrepHT カートリッジ

ZORBAX PrepHT 300ÅStableBond (ハードウェア 820400-901 が必要)
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

300SB-C18
USP L1300SB-C8
USP L7300SB-C3
USP L56300SB-CN
USP L10PrepHT カートリッジ

21.2 x 250

7897250-102

897250-106

897250-109

897250-105

PrepHT カートリッジ

21.2 x 150

7897150-102

897150-106

897150-109

PrepHT カートリッジ

21.2 x 150

5895150-902

895150-906

895150-909

PrepHT カートリッジ

21.2 x 100

5895100-902

895100-906

895100-909

PrepHT カートリッジ

21.2 x 50

5895050-902

895050-906

895050-909

PrepHT ガードカートリッジ、2 個

17 x 7.55820212-921

820212-918

820212-924

820212-924

ガードカートリッジハードウェアキット
ガードカラムエンドフィッティング、ポリマーシール、およびシール挿入
ツール (シールホルダーとシールプッシャ) を含む

820444-901

820444-901

820444-901

820444-901

PrepHT エンドフィッティング、2 個

820400-901

820400-901

820400-901

820400-901

ZORBAX PrepHT Original (ハードウェア 820400-901 が必要)
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

PrepHT カートリッジ

21.2 x 250

PrepHT エンドフィッティング、2 個

粒子径

(µm)

ODS (C18)
USP L1C8USP L7CN
USP L10NH2USP L8SIL
USP L37877952-102

877952-106

877952-105

877952-108

877952-101

820400-901

820400-901

820400-901

820400-901

820400-901

www.agilent.com/chem/jp97

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

ZORBAX PrepHT Eclipse XDB (ハードウェア 820400-901 が必要)
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

EclipseXDB-C18
USP L1

EclipseXDB-C8USP L7

PrepHT カートリッジ

21.2 x 250

7977250-102

977250-106

PrepHT カートリッジ

21.2 x 150

7977150-102

977150-106

PrepHT カートリッジ

21.2 x 150

5970150-902

970150-906

PrepHT カートリッジ

21.2 x 100

5970100-902

970100-906

PrepHT カートリッジ

21.2 x 50

5970050-902

970050-906

PrepHT ガードカートリッジ, 17 x 7.52個

5820212-925

820212-926

820444-901
ガードカートリッジハードウェアキット
ガードカラムエンドフィッティング、ポリマーシール、およびシール挿入ツール (シールホルダーとシールプッシャ) を含む

820444-901

PrepHT エンドフィッティング、2 個

820400-901

820400-901

Extend-C18
USP L1ZORBAX PrepHT Bonus-RP and Extend-C18(ハードウェア 820400-901 が必要)
ハード
ウェア

98

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

Bonus-RP
USP L60

PrepHT カートリッジ

21.2 x 250

7878250-101

PrepHT カートリッジ

21.2 x 150

7878150-101

PrepHT カートリッジ

21.2 x 150

5868150-901

770150-902

PrepHT カートリッジ

21.2 x 100

5868100-901

770100-902

PrepHT カートリッジ

21.2 x 50

5868050-901

770050-902

PrepHT ガードカートリッ 17 x 7.5
ジ、2 個

5

820212-928

820212-930

ガードカートリッジハードウェアキット
ガードカラムエンドフィッティング、ポリマーシー
ル、およびシール挿入ツール (シールホルダーとシー
ルプッシャ) を含む

820444-901

820444-901

PrepHT エンドフィッティング、2 個

820400-901

820400-901

www.agilent.com/chem/jp

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

ZORBAX PrepHT Rx-SIL (ハードウェア 820400-901 が必要)
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

PrepHT カートリッジ

21.2 x 250

7PrepHT カートリッジ

21.2 x 250

7PrepHT ガードカートリッジ、2 個

17 x 7.5

5

Rx-SIL
USP L3

Rx-C18USP L1877250-101
877967-102
820212-919

820212-914

ガードカートリッジハードウェアキット
ガードカラムエンドフィッティング、ポリマーシー
ル、およびシール挿入ツール (シールホルダーとシー
ルプッシャ) を含む

820444-901

820444-901

PrepHT エンドフィッティング、2 個

820400-901

820400-901

ZORBAX PrepHT アクセサリ
ハード
ウェア

説明

部品番号

ガードカートリッジハードウェアキット

820444-901

PrepHT エンドフィッティング、2 個

820400-901

交換用シール

820385-901

www.agilent.com/chem/jp99

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

Agilent Prep LC カラム• 大容量の試料精製に適した高い試料負荷量• カラム内径 4.6mm から 50mm まで簡単にスケールアップが可能。迅速なメソッド開発を実現• 高速精製に最適なハイスループット 21.2mm ID カートリッジ• pH10 において際立ったカラム安定性、試料負荷量を誇る
Agilent Prep LC カラムはミリグラムからグラム単位の製品の精製を行うため、高い試料負荷に耐えることができるよう設計されています。分取カラムサイズは内径 21.2mm、30 mm、50 mm、全長 50 ～ 250 mm の範囲からお選びいただけます。カラムは 5 µまたは 10 µm の粒子サイズで入手することができ、どの次元でも高い効率性を発揮します。こうしたカラムの品揃えで、ほとんどすべての分取試料を取り扱うことができます。

Agilent Prep 内径 21.2 mm カラムは Agilent 分取カートリッジハードウェアと共にお求めいただけます。このカートリッジハードウェアによって、異なる長さのカラムを使って、簡単、確実に試料負荷量を高めることができます。ガードカラムもこれらのカラ
ムに簡単に組み込むこ とができ、分析カラムをしっかり保護します。メソッド作成とより大きいカラムへのスケールアップに先立って最適化を行うため、内径 4.6 mm の分
析スケールカラムも用意しています。バルク充てん剤もお求めいただけます。
分取カラムは、極性、非極性にかかわらず幅広い種類の化合物の精製に適した C18
結合相を充てん剤として使用することができます。また、未結合のシリカカラムもお求めいただけます。

カラム仕様
カーボン
ロード

pH 範囲

400 m2/g

60 °C*

2.0-10.0

シングル

24%

400 m2/g**

1.0-8.0

N/A

N/A

ポアサイズ

表面積

C18

100Å

シリカ

100Å

仕様は代表的な値のみを表しています。

*温度上限: pH 8 までは 60 °C、pH 8 ～ 10 は 40 °C。
**修飾しないシリカの温度上限は移動相の pH に依存します。

100

エンド
キャップ

上限温度

結合相

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特殊アプリケーション用 HPLC カラム

塩基性化合物での Agilent Prep C18 の優れた負荷量カラム:

移動相:

Agilent Prep C18443905-902
4.6 x 150 mm, 5 µm
50 % 0.1 %TFA:
50% ACN流量:

1 mL/min

サンプル:

10 µL

ドキセピン /アミトリ
プチリン
0.5 ～ 50 mg/mL

Agilent Prep カラムの分離能と負荷量は競合

他社のカラムよりも優れています。

他社 W-C18

Agilent Prep C18

mAU
mAU

4000

 = 1.6

3500
3000
2500
2000
1500
1000
500
0
0

1

2

3

4 5 6
Time (min)7 = 1.57

40
35
30
25
20
15
10
5
0

8

0

9

1

2

3

4 5 6
Time (min)7

8

9
LCPLC01

ステロイド:Agilent Prep カラムを用いた簡単なスケールアップ
カラム A:

Agilent Prep C18443905-902
4.6 x 150 mm, 5 µm
A

カラム B:

443905-102
21.2 x 150 mm, 5 µm

カラム C:

413910-302
30.0 x 150 mm, 10 µm

0413910-502
50.0 x 150 mm, 10 µm

B

カラム D:
移動相:
流量:55 % 水 : 45 % ACN
0.7 mL/min
14.87 mL/min
29.77 mL/min
85.37 mL/min

温度:

室温

検出器:

240 nmサンプル:

2 µL
42.4 µL
170 µL488 µL

1

2

4

1.

ヒドロコルチゾン

2.

テストステロン (1mg/mL 中のメタノール溶液)
2

6

8

10

12

1
2

0

2

C

4

6

8

10

12

1
2

0

2

D

4

6

8

10

12

1
2

Agilent Prep C18 は優れたスケーラビリティを示します。
したがって、メソッド変換がシンプルになります。

0

2

4

www.agilent.com/chem/jp

6Time (min)

8

10

12
LCPLC02101

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

Agilent Prep LCカラム
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

C18

シリカ

440910-902

440910-901

443910-902

443910-901

標準カラム (特別なハードウェアは必要としません)
分取検討用

4.6 x 250

分取検討用

4.6 x 150

分取検討用

4.6 x 100分取検討用

4.6 x 250

分取検討用

4.6 x 150

分取検討用

4.6 x 100分取検討用

4.6 x 50

10
10
10
5
5
5
5

449910-902
440905-902

440905-901

443905-902

443905-901

449905-902

449905-901

446905-902

446905-901

PrepHT カートリッジカラム (エンドフィッティングキット 820400-901 が必要)*
PrepHT

21.2 x 250

10410910-102

410910-101

PrepHT

21.2 x 150

10413910-102

413910-101

PrepHT

21.2 x 50

10446910-102

PrepHT

21.2 x 150

5443905-102

443905-101

PrepHT

21.2 x 100

5449905-102

449905-101

PrepHT

21.2 x 50

5446905-102

446905-101

820400-901

820400-901

10
10
10
5
5
10
10
10
5

410910-302

410910-301

413910-302

413910-301

419910-302

419910-301

449905-302

449905-301

446905-302

446905-301

410910-502

410910-501

413910-502

413910-501

419910-502

419910-501

449905-502

449905-501

10420212-902

420212-901

ガードカートリッジハードウェアキット

820444-901

820444-901

PrepHT 外付け用ガードハードウェアキット

420420-901

420420-901

420910-902

420910-901

PrepHT エンドフィッティング、2 個
標準カラム (特別なハードウェアは必要としません)

Prep 3030.0 x 250

Prep 3030.0 x 150

Prep 3030.0 x 100

Prep 3030.0 x 100

Prep 3030.0 x 50

Prep 5050.0 x 250

Prep 5050.0 x 150

Prep 5050.0 x 100

Prep 5050.0 x 100

ガードカラム (ハードウェアが必要)

PrepHT ガードカートリッジ、21.2 x 10
2個

バルク充てん剤 (1 kg)

10*すべての PrepHT カートリッジカラムにはガードハードウェアキット (P/N 820400-901) が必要です。内径 21.2mm のカラムにもガードカラムが必要な場合、PrepHT ガードハードウェアキット (P/N 820444-901) も必要です。ガードカラムを内径 30 mm のカラムで使用する場合、外部カラムハードウェアキット (P/N 420420-901)が必要です。

102

www.agilent.com/chem/jp

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

Ultron ES Chiral カラム• 誘導体を経由せず、直接ラセミ体を分離できます• 酸性および塩基性の医薬品(キソバルビタール、イブプロフェン、プロフェナミンなど) の光学異性体を分離するには Ultron ES-OVM をご使用ください• 他のカラムで分離困難な塩基性化合物も、Ultron ES-Pepsin Chiral カラムで簡単に分離できることがあります• ES-OVM カラムと ES-Pepsin カラムには、オボムコイドタンパクとペプシンタンパクを結合させた 120 Å、5 µm のシリカ充てん剤が使用されています• どちらのタイプのキラルカラムも、移動相としてアセトニトリルやエタノール、リン酸緩衝液を使用できます

Ultron ES キラルカラムは、多数のキラル化合物を光学異性体分離するためのキラル認識部位を備えた不溶化タンパク質カラムです。2 つの補完的なタンパク質ベースのキラル固定相を持つように設計されているため、誘導体化しないエナンチオマーの HPLC 分離に最適です。増加する医薬品の分離にも適しています。

フルオキセチン (Prozac) の光学異性体の分離
カラム:

Ultron ES-OVM Chiral702111651
4.6 x 150 mm, 5 µm

移動相:25:75 (v/v) EtOH / 20 mM KH2PO4, pH 5.5 (adjusted with
NaOH)

温度:

Ambient

検出器:

UV (225 nm)

サンプル:

Mixture Fluoxetine (Prozac) entantiomers
05

Courtesy of D. S. Risley and V. S. Sharp of Lilly Research Laboratories, Eli Lilly and Co.

www.agilent.com/chem/jp

1015
Retention Time (min)

20

25

30
LCUC001

103

特殊アプリケーション用 HPLC カラム

エチアジド (利尿剤) の ULTRON ES-OVM カラム
による分離
カラム:

CI
H2N
S
O
O

Ultron ES-OVM Chiral702111651
4.6 x 150 mm, 5 µm
10

20

H
N H C2H5
C
S NH
O

O

Time (min)移動相:20 mM KH2PO4 (pH 4.6)

流量:

1 mL/min

温度:

25 °C

検出器:

220 nm

LCUC002

ワルファリンエナンチオマーの光学異性体の分離
100 fg/mL での定量 %RSD の R および S 上限
カラム:

イオンソース

Ultron ES-OVM Chiral702111610
2.0 x 150 mm, 5 µm

温度:

30 °C

注入量:

5 µL

50 ～ 500 m/z

5 L/min

乾燥ガス温度:

300 °C

スキャン
スピード:

500 msec

200 °CMRM 取り込み (Q1 ピーク幅 = 1.2
amu、Q2 ピーク幅 = 0.70 amu)
デルタ EMV:

1000V

x102

83 % A = H2O + 5 mM ギ酸アンモ

ニウム

17 % B = ACN
0.5 mL/min

ストップタイム : 7.0 分

Agilent 6410A トリプル四重極
LC/MS/MS、マルチモードソース付

イオンモード: ESI、ネガティブ

5.50
5.25
5.00
4.75
4.50
4.00
3.75
3.50
3.25
3.00
2.75
2.50
2.00
1.75
1.50
1.25
1.00
0.75
0.50
0.25
0

R %RSD = 3,6

S %RSD = 4,9Warfarin

MS 条件

質量範囲:

乾燥ガス (窒素):

ベポライザ

ニードル洗浄: フラッシュポート (50 : 25 : 25
H2O、IPA : MeOH : H2O、5 秒)

流量:

キャピラリ電圧:

ネブライザガス (窒素): 40 psi

オートサンプ
10 °C
ラ温度:

移動相:

プロダクトイオンスキャン

2000 V

3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 4.0 4.1 4.2 4.3 4.4 4.5 4.6 4.7 4.8 4.9 5.0 5.1

Recuento vs. Tiempo de Adquisición

Ultron ES Chiral カラム

104

説明

寸法(mm)

アナリティカル

4.6 x 250

アナリティカル

4.6 x 150

アナリティカル、ガード付

4.6 x 150

ナローボア

2.0 x 150

ガードカラム4.0 x 10www.agilent.com/chem/jp

粒子径 (µm)

10
5
5
5
5

ES-OVM
USP L57

ES-Pepsin

724111653
702111651

822111651

702111651A

822111631A

702111610
712111630

832111630

バイオ分析用カラム増え続けるサンプル種類と内容の多様化。
バイオ関連の HPLC アプリケーションに対して、ラボの準備は万全でしょうか?
塩基性ペプチド分離、高感度、高分解能のアミノ酸分析抗体の高速サイズ排除分離など、バイオ関連の HPLC アプリケーションの数は、空前のペースで増え続けています。耐性能と分析速度に対するラボの久性と再現性に優れたアジレントの ZORBAX カラムは、
ニーズにお応えします。
以下のページでは、逆相 HPLC、サイズ排除クロマトグラフィ、イオン交換クロマトグ
ラフィ、疎水的相互作用クロマトグラフィ用のカラムについての情報と仕様をご覧いただけます。

• Poroshell 300 カラム – タンパク質、ポリペプチド、抗体を高速高分解能で分離するためのユニークで強力な粒子を備えています。

• ZORBAX ワイドポア 300StableBond カラム – ペプチドやタンパク質に対して長寿命、高分解能、良好なピーク形状を実現します。TFA を含む一般的な移動相で使用可能です。
• ZORBAX ワイドポア 300Extend カラム – pH 10 でのタンパク質やペプチドの LC/MS に理想的です。

• ZORBAX Eclipse アミノ酸分析 (AAA) HPLC カラム – アミノ酸を高速に分離するための効
1 回の注入から次の注入までの時間を 14 分 (長さ 7.5 cm のカラ率の高いカラムです。
ム) に短縮できます。長さ 15 cm のカラムでも 24 分 です。
• ZORBAX GF-250/450 ゲルろ過カラム – タンパク質のサイズ排除用に特別に設計された
丈夫で再現性の高いカラムです。サイズ排除カラムは有機溶媒や変成剤を添加した移動相にも適合するため、タンパク質の凝集を防止して分子量を正しく推定できます。また、GF-250 と GF-450 カラムを直列接続して使用した場合の分離可能な範囲は、
球状タンパク質に対して 4,000 ～ 900,000 です。

• Agilent バイオモノリス HPLC カラム – 抗体 (IgG、IgM)、プラスミド DNA、ウィルス、
ファージ、その他のマクロ生体分子の高速高分解能の分離を実現します。

www.agilent.com/chem/jp105

バイオ分析用カラム

ZORBAX を用いてタンパク質およびペプチドを分析する

逆相メソッド開発方法

この章で説明するタンパク質およびペプチド用 ZORBAX カラム選択方法では、これらの物質を分析するメソッド開発に役立つ情報が得られます。分子量 2000 未満の低分子ペプチドのメソッド開発については、このガイドの低分子および高分子のメソッド開発方
法に従ってください。高分子を効率的に分離するには、大きなポアサイズ (300 Å) を持つカラムが必要です。分子量の大きいペプチ
ドおよびタンパク質のメソッド開発については、下記のガイドラインを参照してください。このカラム選択ガイドの以下のセクションでは、ワイドポアカラムの選択方法について説明します。

タンパク質およびペプチドについて最初に選択するカラムと分析条件
ペプチド、ポリペプチド、タンパク質

ペプチド、ポリペプチド、タンパク質

MW < 50 kDA

MW < 1,000 kDA
最初に選択する結合相

StableBond 300SB-C8

Poroshell 300SB-C18

300 SB カラムは、TFA を含む移動相で比類のない長寿命を持つワイド
ポアカラムです。この特性により、ペプチドおよびタンパク質の分離に最初に選択するカラムとして理想的です。

Poroshell 300SB カラムは、革新的な粒子技術を使用して、タンパク質を迅速に分離します。Poroshell カラムを使用すると、短い分析時間で効率のよいピークを簡単に得ることがで きます。

• C8 は中程度の疎水性を特徴とするため、最初に選択する結合相と• C18 は、保持時間を最大にするため、ほとんどのペプチド、ポリペ
プチド、タンパク質に対する Poroshell で最初に選択するのに適しして優れています。

• C18 と C8 は、一般にペプチドおよびタンパク質消化物用に選択しますが、タンパク質にも使用できます。

• C3、C4、CN は、一般に高分子の疎水性ポリペプチドおよびタンパ
ク質用に選択される結合相ですが、ペプチドにも使用できます。

た結合相です。

• C8 は一般的に中程度の大きさのタンパク質用として選択されます
が、ポリペプチドや非常に分子量の大きいタンパク質にも使用できます。

• C3 は抗体や大きなタンパク質の分析で選択されますが、ペプチドやポリペプチドにも使用できます。

最初の分離条件

106

カラム:

StableBond 300SB-C8
4.6 x 150 mm、3.5 または 5 µm
883995-906
863973-906

移動相:

A : 95% H2O : 5% ACN、0.1% TFA
B : 5% H2O : 95% ACN、0.085% TFA

グラジエント:60 分で 0 ～ 60% B

温度:

35 ～ 40°C

流量:

1 mL/min

カラム:

Poroshell 300SB-C18
2.1 x 75 mm、5 µm
660750-902

移動相:

A : 95% H2O : 5% ACN、0.1% TFA
B : 5% H2O : 95% ACN、0.085% TFA

グラジエント:

10 分で 0 ～ 60% B

温度:

35 ～ 40°C

流量:

2 mL/minwww.agilent.com/chem/jp

バイオ分析用カラム

低 pH で単純な水/有機溶媒グラジエントからスタート
通常は、水/アセトニトリルに 0.1 % TFA を添加したグラジエント溶出で、すべての対象成分が溶出します。300 Å ポアサイズのカラムを使用した高分解能グラジエント溶出には、通常 30 ～ 50 分必要です。Poroshell カラムを使用すれば、流量を上げて分析時間を短縮することができ、しかも優れた分離能を維持します。さらに分離能を改善するには、グラジエント時間を延長する、カラム長を短くする、または流量を上げるという方法があります。

サンプル溶解度の最適化
どの pH 領域を使用する場合も、最良のピーク形状と回収率を達成するためには、サンプルを完全に溶解することが重要です。ZORBAX
300StableBond および Poroshell 300SB では、強酸性または中性の溶媒を使用することができ、一方 ZORBAX 300Extend-C18 では中性溶媒および希釈した塩基性溶媒を使用できます。

タンパク質とペプチドを溶解させる溶媒の選択• 水/リン酸バッファ

最も弱い• 希釈した酸 (TFA、酢酸、HCl)• 中性 pH 、6 ～ 8 M グアニジン HCl またはイソチオシアネート• 5 % HOAc/6 M 尿素
• 希釈した酸 + 水/有機溶媒 (ACE、MeOH、THF)• 希釈した塩基 (水酸化アンモニウム)• DMSO、または 0.1 % ～ 1 % TFA を溶解した DMSO

最も強い• ホルムアミド

温度を上げるタンパク質およびペプチドの分離は温度の影響を受けます。カラム温度を上げることにより、タンパク質や凝集した疎水性ペプチドの分解と回収率が劇的に改善されることがあります。

StableBond 300SB – 最高 80 °C

Poroshell 300SB – 最高 80 °C

移動相 pH の最適化
低 pH で希望の結果が得られなければ、中～高 pH を試します
最適化した低 pH メソッドで理想的な分離が得られない場合は、中または高 pH 移動相を検討します。酸性のアミノ酸は pH を上げることにより負に荷電し、一部の塩基性アミノ酸は電荷を失うことがあるため、pH の上昇によって選択性が大幅に変化する可能性があります。
ZORBAX 300Extend-C18 は、中～高 pH 分離に対する優れた選択肢です。

カラム:

300Extend-C18
4.6 x 150 mm、5 µm
773995-902

移動相:

A : 20 mM NH4OH を H2O に溶解
B : 20 mM NH4OH を 80 % ACN に溶解

グラジエント:30 分で 5 % ～ 60 % B

温度:25 ～ 30 °C (<60 °C)
1 mL/min

流量:www.agilent.com/chem/jp107

バイオ分析用カラム

ペプチド、ポリペプチド、タンパク質の分析分離に最初に選択するカラム
低 pH

中 ～ 高 pHMW < 50 kDa
300SB-C8

MW < 1000 kDa
Poroshell 300SB-C18

MW < 25 kDa
300Extend-C18

4.6 x 150 mm、3.5 µm

2.1 x 75 mm、5 µm

4.6 x 150 mm、3.5 µm

863973-906

660750-902

763973-902

逆相 LC/MS メソッドを使用したタンパク質およびペプチドの分離
タンパク質およびペプチドの LC/MS 分析は、
タンパク質のキャラクタライゼーションや翻訳後修飾されたタンパク質の正確な同定、さらには合成および天然ペプチドの分子量決定のために重要な情報を提供します。プロテオミクスアプリケーションにおける 2D
分離でも、タンパク質の同定を行うために LC/MS が使用されます。そのため、タンパク質およびペプチドの LC/MS 分析は重要な分離分野であり、目的に適合したカラムや移動相を正しく選択する必要があります。一般に、LC/MS 用には小さなサイズのカラムが使用され、移動相に TFA を添加すると MS の感度が低下するため、この添加剤の使用を避けるのが普通です。

タンパク質およびポリペプチドの LC/MS 分離で最初に選択するカラム

分析 LC/MS アプリケーション - サンプル量が限られていない場合は、内径 2.1 mm カラムで優れた感度が得られます。Poroshell カラムの場合は、それよりも小さな内径が使用されます。

中 ～ 高 pH低 pH

MW < 50 kDa
300SB-C8

MW < 1000 kDa
Poroshell 300SB-C18

MW < 25 kDa
300Extend-C18

2.1 x 150 mm、3.5 µm

1.0 x 75 mm、5 µm

2.1 x 150 mm、3.5 µm

863750-906

661750-902

763750-902

高感度/プロテオミクスアプリケーション
タンパク質およびペプチドの高感度アプリケーションには、キャピラリカラムが使用されます。タンパク質とタンパク質消化物の分離には
内径 0.5 mm カラムが使用され、タンパク質消化物には内径 0.3 mm カラムが最も一般的に使用されます。これらは水酸化アンモニウム移動相を使用して高 pH で分析できます。ナノカラム (内径 0.1 および 0.075 mm) はプロテオミクス用の 2D LC/MS システムでよく使用され、最初の選択肢としては C18 結合相が使用されます。

108

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バイオ分析用カラム

高感度キャピラリカラム
低 pH

中 ～ 高 pHMW < 50 kDa
300SB-C18

MW < 1000 kDa
Poroshell 300SB-C8

MW < 25 kDa
300Extend-C18

0.5 x 150 mm、3.5 µm

0.5 x 75 mm、5 µm

0.3 x 150 mm、3.5 µm

5064-8268

5065-4468

5065-4464

プロテオミクス/2-D LC/MS 用ナノカラム

SCX (1 次元)

逆相 (2 次元)0.3 x 35 mm、5 µm

0.075 x 150 mm、3.5 µm

5065-9912

5065-9911

移動相についての検討事項
低 pH

中 ～ 高 pH

タンパク質およびペプチドの LC/MS 分離には、一般に TFA は使用されません。通常、最初のステップとして、TFA を 0.1 ～ 1.0 % ギ酸に置き換えます。濃度 1 % までの酢酸を代わりの移動相修飾剤として使用することもできます。低 pH では、移動相に TFA を添加した場合に最良の分離を得られることがあります。場合によっては、カラムから流出後にプロピオン酸などの別種の酸で TFA を置き換えることができます。

高 pH では LC/MS 分析用の移動相添加剤として 10 ～ 20 mM NH4OH を使用することもできます。

www.agilent.com/chem/jp109

バイオ分析用カラム

Poroshell 300

Porous Shell

SOLID
CORE

5 µm

• 表面多孔質粒子構造により生体分子を高分解能分離• タンパク質(最大 1,000kDa)とモノクローナル抗体の分離で高い効率と回収率を実現• Poroshell 300SB(低 pH)、300Extend-C18(高 pH)でカラム寿命が向上• 4 種類の結合相 (300SB-C18、300SB-C8、300SB-C3、300Extend-C18) で回収率と選択性を最適化

Agilent Poroshell 300 カラムはタンパク質やペプチドの高速分離に理想的なカラムです。
表面多孔質粒子により、流量を大きくしてもシャープで効率の良いピーク形状が損なわれることはありません。一般にペプチドやタンパク質分析では、拡散の遅い目的成
分 の ピ ー ク の 拡 が り を 抑 え る た め に 、分 離 は ゆ っ く り と 行 わ れ ま す 。し か し 、Poroshell カラムでは、多孔質シリカ表面薄層と硬質シリカコアを組み合わせた独自の粒子構造が導入されています。そのため、タンパク質の拡散距離が短縮され、500 ～ 1,000

kDA までのペプチドとタンパク質の高速 HPLC 分離が可能になっています。StableBond
結合相と結合した Poroshell カラムは、
TFA およびギ酸移動相で優れた安定性と感度を発揮します。Poroshell 300Extend- C18 カラムを使用すれば、pH 2 ～ 10 の範囲で無類の分離性能が得られます。ZORBAX Poroshell カラムは分析用タンパク質分離および LC/MS 分離に有用です。

カラム仕様
結合相

ポアサイズ

上限温度*

Poroshell 300SB-C18、C8、C3
Poroshell 300Extend C18

300 Å

90 °C

300 Å

pH 8 超で 40 °C
pH 8 未満で 60 °C

仕様は代表的な値のみを表しています。

110

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pH 範囲
1.0-8.0

エンド
キャップ
なし

2.0-11.0ありバイオ分析用カラム

Poroshell 300 カラムはタンパク質やペプチドを数秒で分離
カラム:

Poroshell 300SB-C18
660750-902
2.1 x 75 mm, 5 µm

1.

A:0.1% TFA in H20
B:0.07% TFA in ACN

2.

Neurotensin

3.

RNase

流量:

3.0 mL/min

4.

Insulinグラジエント:5-100% B in 1.0 min

5.

Lysozyme

温度:70°C, 260 bar pressure

6.

Myoglobin

検出器:

215 nm7.

Carbonic Anhydrase

サンプル:

Proteins and Peptides

8.

Ovabumin

移動相:

5
4

Angiotensin II

3
1
7

2

6
8

この例における 8 種類のポリペプチドとタンパク質の分離は 60 秒未満で完了しています。それぞれのピー
ク形状はシャープで高い効率を持ちます。

0

1.0

0.5
Time (min)

LCPO001

Poroshell 300SB によるペプチドマップ分析時間の短縮
カラム A:

Poroshell 300SB-C18
660750-902
2.1 x 75 mm, 5 µm

カラム B:ZORBAX 300SB-C18
883750-902
2.1 x 150 mm, 5 µm

移動相:

A:95% H2O, 5% ACN, 0.1% TFA
B:5% H2O, 95% ACN, 0.07% TFA

流量:

1 mL/min0.208 mL/min

グラジエント:0-100%B = 12 min
0-100%B = 120 min

温度:

70 °C

サンプル:

20 µL (0.22 µg/1 µL)
BSA Tryptic Digest(15 hours, 70 pmol)

A

1

2

3

4
Time (min)

5

6

7

8

10

20

30

40
Time (min)

50

60

70

80

B

タンパク質トリプシン消化物の分析では、1 回のクロマトグラフ分析に 1 時間以上もかかることがあります。ZORBAX Poroshell カラムを使用す
れば、同様の複雑な分離を 1/10 の時間で分析することができます。

LCPO002www.agilent.com/chem/jp111

バイオ分析用カラム

MicroBore Poroshell 300 カラムは LC/MS で最高の感度を実現します

カラム:

Poroshell 300SB-C18
661750-902
1.0 x 75 mm, 5 µm

移動相:

A:水 + 0.1% ギ酸
B:ACN + 0.1% ギ酸
600 µL/min

流量:

グラジエント: 5.5 分で 20 ～ 100% B
温度:

80 °C

MS 条件

LC/MS : ポジティブイオン
ESI – Vcap 6000 V
乾燥ガス流量 : 12 L/min
乾燥ガス温度 : 350 °C
ネブライザ : 45 psi
フラグメンタ電圧 : 140 V
スキャン : 600-2500
刻み幅 : 0.15 amu
ピーク幅 : 0.06 分
1 µL

サンプル:

1EB

80000000
0.5
0.75
1.0
2.5
5.0

60000000

40000000

20000000
0

0.5

1.0

1.5

2.0
2.5
Time (min)

3.0

3.5

4.0
LCPO003

内径の小さい (2.1 mm、1.0 mm、0.5 mm) ZORBAX Poroshell カラムは、LC/MS に理想的なカラムです。サンプル量が限られている場合、高感度 LC/MS 分析には内径 1.0mm または 0.5 mm の Poroshell カラムが最適です。Poroshell カラムでは、0.5 ～ 5 pmole の微量タンパク質での高感度 MS 分析が可能です。また Poroshell カラムは、安定剤や組織培地の存在下でも MS によるタンパク質の高速検出に使用できます。

Poroshell 300
ハード
ウェア

Poroshell
300SB-C8
660750-906

Poroshell
300SB-C3660750-909

Poroshell
300Extend-C18
670750-902

5661750-902

661750-906

661750-909

671750-902

寸法(mm)

粒子径 (µm)

ナローボア

2.1 x 75

マイクロボア

1.0 x 75

キャピラリ

0.5 x 75

5

ガードカートリッジ、4 個

2.1 x 12.5

ガードハードウェアキット
マイクロボアガード、3 個

112

5Poroshell
300SB-C18
660750-902

説明

1.0 x 175065-4468

5821075-920

821075-918

821075-924

0820888-901

820888-901

820888-901

55185-5968

5185-5968

5185-5968

www.agilent.com/chem/jp

5185-5968

バイオ分析用カラム

ZORBAX 300Å StableBond
Agilent ZORBAX 300StableBond カラムは、タンパク質とペプチドを再現性良く分離するための理想的な選択肢です。その主な理由は次の 2 つです。第一に、タンパク質とペプチ
ドなどの巨大分子を効率的に分離するには検体が結合相表面に近接する必要があるた
め、ワイドポア (300 Å) カラムが非常に有効です。第二に、タンパク質やペプチド分離に使用される低 pH 領域での TFA 含有移動相の使用に対して 300StableBond カラムは卓越した耐久性を示します。低 pH 領域での LC/MS 分離ではギ酸や酢酸を移動相として使用することも可能です。300StableBond カラムには異なる 4 種類の結合相 (C18、C8、C3、タンパク質やペプチドへの選択性と回収率を最適化する
および CN) が提供されており、ことができます。300StableBond カラムを高温条件 (最高 80 ～ 90°C) で使用すれば、分離の困難なタンパク質の回収率と効率をさらに向上させることができます。300SB-C18
および 300SB-C8 カラムは複雑なタンパク質やタンパク消化物の分離に理想的なカラム
立体的に保護された 300StableBond 結合相です。キャピラリ (0.3、内径 0.5 mm) およびナノ (0.075、内径 0.1 mm) サイズのカラムは、タンパク質消化物の逆相 LC/MS 分離に最適です。 キャピラリおよびナノカラムは、1Dまたは 2D プロテオミクス分離に使用できます。

カラム仕様
結合相

ポア
サイズ

表面積

上限
温度*

pH 範囲*

エンド
キャップ

カーボン
ロード

ZORBAX 300SB-C18

300 Å

45 m2/g

90 °C

1.0-8.0

なし

2.8%

ZORBAX 300SB-C8300 Å

45 m2/g

80 °C

1.0-8.0

なし

1.5%

ZORBAX 300SB-C3

300 Å

45 m2/g

80 °C

1.0-8.0

なし

1.1%

ZORBAX 300SB-CN

300 Å

45 m2/g

80 °C

1.0-8.0なし

1.2%

仕様は代表的な値のみを表しています。

*300StableBond カラムは低 pH で最高の性能を発揮するように設計されています。シリカを基材とするカラムを pH 6 ～8 の範囲で最高の安定性にて使用するには、40 °C未満の使用温度、0.01 ～ 0.02 M の範囲の低濃度緩衝液を使用します。中性または高 pH では、300Extend-C18 の使用をお勧めします。

www.agilent.com/chem/jp113

バイオ分析用カラム

100

カラム:

ZORBAX 300SB-C3
883995-909
4.6 x 150 mm, 5 µm

90

移動相:

80 分で 0 ～ 100% B のグラジエン
ト

A : 0.5% TFA 水溶液
B : 0.5% TFA アセトニトリル溶液

アイソクラティック保持力試験
条件 :1- フェニルヘプタン 50%
A、50% B
流量:

1.0 mL/min

温度:

60 °C

% k Phenyltheptane Remaining

短鎖 ZORBAX 300SB-C3 は低 pH、高温で安定です80

ZORBAX 300 SB-C3
競合他社 C4

70

60

50
40
0

1,000

2,000

3,000

4,000

5,000

6,000

7,000

8,000

Volume of Mobile Phase (mL)
LCSB005

1.

RNase

6.

CDR

大型ペプチドの分離に適した 4 種類の 300SB 結合相

2.

インスリン

7.

ミオグロビン

カラム A:

3.

シトクロム C8.

炭酸脱水酵素

4.

リゾチーム

9.

S-100b5.

パルアルブミン

10. S-100a4

5

カラム B:ZORBAX 300SB-C18
883995-902
4.6 x 150 mm, 5 µm

1

ZORBAX 300SB-C8883995-906
4.6 x 150 mm, 5 µm

カラム C:ZORBAX 300SB-C3
883995-909
4.6 x 150 mm, 5 µm

カラム D:ZORBAX 300SB-CN
883995-905
4.6 x 150 mm, 5 µm

移動相:

2, 3

A

リニアグラジエント、
40 分で 25 ～ 70% B
A : 0.1% TFA 水溶液
B : 0.09% TFA 80% アセトニトリル/
20% 水溶液

9
10

B

6, 7

2

1

4

5

8

3

9
10

C

2

1

3

4

7

5

8
6

流量:

1.0 mL/min

温度:

60 °C

サンプル:

各タンパク質 3 µg

300SB- C18、C8、C3 および CN 結合相はペプチド混合物に

8

7
6

9
10

D

2

1

3

対してそれぞれ異なる分離を与えます。このことはタン
パク質分離をすばやく最適化する上での重要なパラメー
タになります。300SB-CN カラムはより親水性の高いポリペプチドに対して独自の選択性を示します。

4

5

7

8
6

9
10

0

5

10

15

20
Time (min)

25

30

35

40
LCSB006114

www.agilent.com/chem/jp

バイオ分析用カラム

UV と MS 検出を用いたキャピラリカラムによる HPLC 分析

50 分で 5 ～ 55% B、55 ～ 57 分で85% B にA : 0.1% ギ酸水溶液
B : 0.1% ギ酸アセトニトリル溶液

流量:5.5 µL/min

検出器:

206 nmMS 条件

LC/MS : ポジティブイオン ESILC/MSD トラップ - Vcap 4000 V
乾燥ガス流量 : 7 L/min
乾燥ガス温度 : 250 °C
ネブライザ : 15 psi
キャピラリ出口電圧 : 50 V
最大積算時間 : 300 ms
総平均 : 3
分離幅 : 3 m/z
フラグメンタ振幅 : 1.0 V
100 nL
ベータカゼイン消化物 (4 pmol)

サンプル:

60
40
20
0
10

x10

移動相:

UV

80
UV at 206 nm

ZORBAX 300SB-C18
5064-8263
0.3 x 150 mm, 5 µm

% Relative Abundance

カラム:

100

ZORBAX 300SB-C18 キャピラリカラム(内径 0.3mm)を用いて タンパ
ク質消化物を分離します。UV およびエレクトロスプレー MS で検出。MS 検出により、ペプチド断片を検出できます。

15

20

25

30
35
Time (min)

40

45

50

15

20

25

30
35
Time (min)

40

45

50

MS

0.8
0.6
0.4
0.2
0.0
10

LCSB007

ZORBAX ナノカラム、LC/MS による高感度タンパク質
消化物分析
カラム:

ZORBAX 300SB-C18
5065-9911
0.075 x 150 mm, 3.5 µm

移動相:
流量:

A : 水 + 0.1% ギ酸、
B : ACN + 0.1% ギ酸、
600 nL/min

グラジエント:25 分で 2% B から 52% B に

検出器:

ポジティブイオンナノエレクトロ
スプレー MSサンプル:

8 種類のタンパク質の100 fm (1 µL) 消化物

Intens.

1.5

1.0

0.5

ZORBAX ナノ HPLC カラム (内径 0.075mm ) は、LC/MS によるタンパク質消化物の高感度分析を実現します。

2.5

5.0

7.5

www.agilent.com/chem/jp

10.0

12.5
15.0
Time (min)

17.5

20.0

22.5
LCSB008115

バイオ分析用カラム

ZORBAX 300A StableBond
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

300SB-C18
USP L1300SB-C8
USP L7300SB-CN
USP L10300SB-C3
USP L56

標準カラム (特別なハードウェアは必要としません)
セミ分取

9.4 x 250

5880995-202

880995-206

880995-205

880995-209

アナリティカル

4.6 x 250

5880995-902

880995-906

880995-905

880995-909

アナリティカル

4.6 x 150

5883995-902

883995-906

883995-905

883995-909

アナリティカル

4.6 x 505860950-902

860950-906

860950-905

860950-909

ラピッドレゾリューション

4.6 x 150

3.5863973-902

863973-906

863973-905

863973-909

ラピッドレゾリューション

4.6 x 100

3.5861973-902

861973-906

ラピッドレゾリューション

4.6 x 503.5865973-902

865973-906

865973-905

865973-909

ソルベントセーバプラス

3.0 x 150

3.5863974-302

863974-306

ソルベントセーバプラス

3.0 x 100

3.5

ナローボア

2.1 x 250

5881750-902

ナローボア

2.1 x 150

5883750-902

ナローボア RR*

2.1 x 150

3.5

ナローボア RR*

2.1 x 100

3.5861775-902

861775-906

ナローボア RR*

2.1 x 50

3.5865750-902

865750-906

マイクロボア

1.0 x 2505861630-902

マイクロボア RR*

1.0 x 150

3.5863630-902

マイクロボア RR*

1.0 x 503.5865630-902

865630-906

マイクロボアガード、3 個

1.0 x 1755185-5920

5185-5920

ガードカートリッジ、2 個

9.4 x 157820675-124

ガードカートリッジ、4 個

4.6 x 12.5

5820950-921

ガードカートリッジ、4 個

2.1 x 12.5

5

ガードハードウェアキット
ガードハードウェアキット

883750-906

883750-905

883750-909

820675-124

820675-124

820675-124

820950-918

820950-923

820950-924

821125-918

821125-918

821125-924

821125-924

0840140-901

840140-901

840140-901

840140-901

0820888-901

820888-901

820888-901

820888-901

863750-906*RR:ラピッドレゾリューション 3.5 µm

116863974-309

861973-306

www.agilent.com/chem/jp863630-906

バイオ分析用カラム

ZORBAX 300A StableBond
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

300SB-C18
USP L1300SB-C8
USP L7300SB-CN
USP L10300SB-C3
USP L56897250-105

897250-109

PrepHT カートリッジカラム (エンドフィッティングキット 820400-901 が必要)
PrepHT カートリッジ

21.2 x 250

7897250-102

897250-106

PrepHT カートリッジ

21.2 x 150

7897150-102

897150-106

897150-109

PrepHT カートリッジ

21.2 x 150

5895150-902

895150-906

895150-909

PrepHT カートリッジ

21.2 x 100

5895100-902

895100-906

895100-909

PrepHT カートリッジ

21.2 x 50

5895050-902

895050-906

820400-901

820400-901

820400-901

820400-901

820212-921

820212-918

820212-924

820212-924

820444-901

820444-901

820444-901

820444-901

PrepHT エンドフィッティング、2 個
PrepHT ガードカートリッジ、2 個

17 x 7.5

5

ガードカートリッジハードウェアキット

895050-909

キャピラリフローカラム (ガラス内面ステンレス)
キャピラリ

0.5 x 250

55064-8266

キャピラリ

0.5 x 150

55064-8264

キャピラリ

0.5 x 35

55064-8294

キャピラリ RR*

0.5 x 150

3.5

5064-8268

キャピラリ RR*

0.5 x 35

3.5

5065-4459

キャピラリ

0.3 x 250

55064-8265

キャピラリ

0.3 x 150

55064-8263

キャピラリ

0.3 x 35

55064-8295

キャピラリ RR*

0.3 x 150

3.5

5064-8267

5065-4460

キャピラリ RR*

0.3 x 1003.5

5064-8259

5065-4461

キャピラリ RR*

0.3 x 503.5

5064-8300

5065-4463

キャピラリ RR*

0.3 x 35

3.5

5064-8270

5065-4462

ナノフローカラム (PEEK フューズドシリカ)
ナノ RR*

0.1 x 150

3.5

5065-9910

ナノ RR*

0.075 x 150

3.55065-9911

ナノ RR*

0.075 x 50

3.55065-9924

5065-9923

トラップ/ガード 5 個

0.3 x 555065-9913

5065-9914

5065-9915

5065-9915

トラップ/ガードハードウェアキット:*RR:ラピッドレゾリューション 3.5 µm

www.agilent.com/chem/jp117

バイオ分析用カラム

ZORBAX 300Å Extend-C18• 堅牢性が高く、高 pH から低 pH (pH 2 ～ 11.5)の広い 範囲でポリペプチドとペプチドを分離します• 高 pH と低 pH では異なる選択性を示します• 高 pH 領域で疎水性ペプチドに対して優れた効率と回収率を示します• 水酸化アンモニウムの移動相を使用する LC/MS 分析に最適です
Agilent ZORBAX 300Extend-C18 は pH 2 ～ 11.5 の範囲でペプチドを高効率分離するワイド
ポア HPLC カラムです。ユニークな二座結合相が高低両方の pH 領域で優れた寿命と再現性を提供します。
高 pH 領域でのペプチドやポリペプチドに対する保持特性と選択性はこれらの分子が荷電することによって著しく変化します。疎水性ポリペプチドの優れた回収率を得るには、室温、高 pH での分離が有効です。ペプチドとポリペプチド
Extend-C18 結合相には、新開発の二座構造 C18-C18結合が使用されていますの LC/MS 分析感度を向上させたい場合も、単純な水酸化アンモニウム含有移動相を用いて高い pH で分析するのが有効です。

カラム仕様
結合相

ポア
サイズ

表面積

上限
温度*

pH 範囲

エンド
キャップ

カーボン
ロード

ZORBAX 300Extend-C18

300 Å

45 m2/g

60 °C

2.0-11.5

ダブル

4%

仕様は代表的な値のみを表しています。

*温度上限: pH 8 までは 60 °C、pH 8 ～ 11.5 は 40 °C。

118

www.agilent.com/chem/jp

バイオ分析用カラム8

高 pH でも長寿命な 300Extend-C18

ZORBAX Extend-C18
773450-902
4.6 x 150 mm, 5 µm

移動相:

20% 20 mM NH4OH、pH 10.5
80% メタノール

流量:1.5 mL/min

温度:

エージング 24 °C
試験 40 °C

4-クロロ-1-ニトロベンゼン
トリミプラミン6k Values

カラム:

4

10,000 カラム容積は、およそ 1 ヶ月の稼働時間に相当します。

20
0

10,00020,00030,00040,00050,000Column Volumes of Mobile Phase
LC30001

移動相:

カラムエージング:
50% メタノール : 50 % 水+ 1 % TFA
カラム試験:
60% メタノール : 40 % 水
テスト溶質 : トルエン

流量:1.5 mL/min、連続温度:

エージング : 90 °C
試験:室温

300Extend-C18 カラムは高低両方の pH (pH 2 ～ 11.5) で使用できます。図から明らかなように、300Extend-C18
は低 pH で再現性のある分離を長期間維持するのに必要な安定性を備えています。そのため、高低両方の pH
範囲(TFA と水酸化アンモニウム移動相) において、1 本のワイドポアカラムで選択性を最適化できます。

Fraction of Toluene k Remaining

Extend-C18 と StableBond SB-C18 の低 pH での安定性
ZORBAX SB-C18
カラム A:
883975-902
4.6 x 150 mm, 5 µm
1.0
ZORBAX Extend-C18
カラム B:
773450-902
4.6 x 150 mm, 5 µm
0.8
ZORBAX Rx-C18
カラム C:
883967-902
4.6 x 150 mm, 5 µm
0.6Stablebond SB-C18 (Diisobutyl-C18)
0.4

Extend-C18 (二座構造 C18)
0.2

Rx-C18 (Dimethyl-C18)

0.0
0

5,000

10,00015,00020,00025,00030,000Column Volumes of Mobile Phase
LC30002www.agilent.com/chem/jp119バイオ分析用カラム

Extend-C18 を使用したアンギオテンシンの LC/MS 分析
ZORBAX Extend-C18
カラム:
773700-902
2.1 x 150 mm, 5 µm
移動相:

酸性条件:

流量:

0.2 mL/min

グラジエント:15 分で 15 ～ 50% B

温度:

35 °C

MS 条件

ポジティブイオン ESI- Vf 70V、Vcap 4.5 kV、
N2- 35 psi、12 L/min、325 °C

サンプル:

2.5 µL サンプル (各 50 pmol)
アンギオテンシン I、II、III

0

500

100

4.0E7

80
AIII

1.0E7

20

0

0
0

2.5

5.0 7.5 10Time (min)12.5

1468.81277.91326.31373.3

433.0

40

+3
659.8

AI

8.477

AII

2.0E7

+2

60

9.621

3.0E7

m/z

1000

0

500

1296.6

12.5

649.0

5.0 7.5 10Time (min)

5.499

高 pH

1179.1

0
2.5

5.0E7
TIC (200-1500 m/z)

最大:367225

1025.2

20
0

アンギオテンシン I

40

844.8

AI

1.0E6

659.7
720.3
767.3

2.0E6

227.1

60

0

B

433.0

12.050

AII + AIII

3.0E6

+2

+3

80

250.9

低 pH

4.0E6

340.3
398.0
458.0

最大:10889100

13.261

アンギオテンシン I

5.0E6
TIC (200-1500 m/z)

A

649.5

A : 0.1 % TFA 水溶液
B : 0.085 % TFA 80 % アセトニトリル (ACN) 溶液
塩基性条件:
A : 10 mM NH4OH 水溶液
B : 10 mM NH4OH 80 % ACN 溶液

1000

+1
m/z
LC30003

参考:B.E. Boyes. Separation and Analysis of Peptides at High pH Using RP-HPLC/ESI-MS, 4th WCBP,San Francisco, CA Jan 2000.
低分子ペプチドと高分子ペプチドのいずれについても、高 pH と低 pH で選択性が変化しています。高 pH では、荷電状態が変化するため、3 種類のアンギオテンシ
ンすべてを分離できます。さらに、水酸化アンモニウム移動相を使用して高 pH で分析することにより、アンギオテンシン I のスペクトルが著しく明瞭になります。
Extend-C18 カラムは、低分子ペプチドを高 pH で分析する際にも効果を発揮します。

120

www.agilent.com/chem/jp

バイオ分析用カラム

ZORBAX 300Å Extend-C18
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

部品番号

アナリティカル

4.6 x 250

5770995-902

アナリティカル

4.6 x 150

5773995-902

ラピッドレゾリューション

4.6 x 150

3.5763973-902

ラピッドレゾリューション

4.6 x 100

3.5761973-902

ラピッドレゾリューション

4.6 x 503.5765973-902

ナローボア RR*

2.1 x 150

3.5763750-902

ナローボア RR*

2.1 x 100

3.5761775-902

ナローボア RR*

2.1 x 503.5765750-902

ガードカートリッジ、4 個

4.6 x 12.5

5820950-932

ガードカートリッジ、4 個

2.1 x 12.5

5821125-932

0820888-901

ガードハードウェアキット
キャピラリフローカラム (ガラス内面ステンレス)
キャピラリ RR*

0.3 x 150

3.5

5065-4464

キャピラリ RR*

0.3 x 1003.5

5065-4465

キャピラリ RR*

0.3 x 75

3.5

5065-4466

キャピラリ RR*

0.3 x 503.5

5065-4467*RR:ラピッドレゾリューション 3.5 µm

www.agilent.com/chem/jp121バイオ分析用カラム

アミノ酸標準試料
それぞれのアミノ酸標準試料には次のアミノ酸が含まれます。

• グリシン• L-シスチン• L-ヒスチジン• L-チロシン• L-ロイシン• L-メチオニン• L-セリン
• L-アラニン• L-フェニルアラニン• L-グルタミン酸• L-プロリン• L-イソロイシン• L-アルギニン• L-トレオニン• L-バリン
• L-リジン• L-アスパラギン酸

ZORBAX アミノ酸分析 (AAA) カラム
および部品

ZORBAX Eclipse アミノ酸分析 (AAA) カラム• 24 種類のアミノ酸の高分解能、高速分析• アミノ酸分析析用としてテスト済み• OPA および FMOC プレカラム誘導体化法を使用• Agilent 1100/1200 オートサンプラでオンラインによる誘導体化プロトコルを使用して簡単に自動化

Agilent ZORBAX Eclipse AAA 高効率カラムは、更新および改良されたプロトコルに従ってアミノ酸を迅速に分離します。注入から次の注入までの全分析時間は、7.5 cm のショー
トカラムでわずか 14 分 (分析時間は 9 分)、長さ 15 cm のカラムで 24 分 (分析時間は 18分) です。Agilent 1100/1200 HPLC を使用した 1 回の自動分析で、OPA と FMOC の誘導体化
特性の両方を用いて、優れた感度 (DAD、FLD で 5 ～ 50 pmol) と信頼性を達成します。

ZORBAX Eclipse アミノ酸分析 (AAA) カラム
寸法(mm)

粒子径 (µm)

部品番号

日常の分析

4.6 x 150

5993400-902

FLD を使用した日常分析、

4.6 x 1503.5963400-902

日常の分析、
ハイスループット

4.6 x 753.5966400-902

ソルベントセーバ、
高感度、高分解能

3.0 x 150

3.5961400-302

ガードカートリッジ、4 個

4.6 x 12.5

5820950-931

ハードウェア 説明

高分解能

ガードハードウェアキット

122

www.agilent.com/chem/jp820888-901

バイオ分析用カラム

アミノ酸標準試料, 10 x 1 mL アンプル*
説明

部品番号

1 nmol/µL

5061-3330

250 pmol/µL

5061-3331

100 pmol/µL

5061-3332

25 pmol/µL

5061-3333

10 pmol/µL

5061-3334

アミノ酸補助キット
ノルバリン、サルコシン、アスパラギン、グルタミン、トリプトファン、4-ヒド
ロキシプロリン各 1 g を含む

5062-2478*寿命を考慮して必要量を購入してください。5062-2478 は 1 g バイアルとして出荷されます

アミノ酸分離試薬
説明

部品番号

OPA 試薬, 0.4 M ホウ酸緩衝液 o-フタルアルデヒド (OPA)、
3-メルカプトプロピオン酸、各 10 mg/mL, 6 x 1 mL アンプル

5061-3335

FMOC 試薬, アセトニトリルに 2.5 mg/mL、9-フルオレニルメチルクロロギ酸、1 mL, 5061-3337
10 アンプル
ホウ酸緩衝液, 100 mL

5061-3339

DTDPA (ジチオジプロプリオニック) 試薬, システイン分析用, 5g

5062-2479

ZORBAX Eclipse-AAA プロトコルを用いた 24 種類のアミノ酸の高分離

1.

Asp

カラム:

2.

Glu

8.

Thr

14. Val

20. Leu

3.

Asn

9.

Cit

15. Met21. Lys

移動相:

ZORBAX Eclipse AAA
963400-902
4.6 x 150 mm, 3.5 µm

流量:A : 40 mM Na2HPO4、pH 7.8
B : ACN : MeOH : 水、45:45:10 v/v
2 mL/min

温度:

40 °C

検出器:

蛍光検出器

サンプル:

24 種類のアミノ酸

7.

Gly

13. Cys

19. Ile4.

Ser

10. Arg

16. Nva

22. Hyp

5.

Gln

11. Ala17. Trp23. Sar

6.

His

12. Tyr

18. Phe24. Pro

3

8

2

7

4

1

22

16 17
18
19
15

9

10

14

20

12

11

24

6

24 種類のアミノ酸の高分離分析は 18 分で完了しました。ラピッドレゾリューション 4.6 x 75 mm Eclipse AAA
カラムを選択すれば、これらのアミノ酸を 9 分で分離

23

21
5

できます。

0

5

10

15

20

25

Time (min)LCPAH01

www.agilent.com/chem/jp123バイオ分析用カラム

ZORBAX GF-250、GF-450 ゲルろ過カラム• 短い分析時間で高い効率性、再現性• 親水性のジオール結合相で優れたタンパク質回収率• 有機修飾剤、変成剤に対応• 広い pH 範囲 (pH 3 ～ 8) に使用可能
Agilent ZORBAX GF-250、GF-450 ゲルろ過カラムは、タンパク質やその他の生体分子のサイズ分離に最適です。GF-250 と GF-450 カラムをつなげて使用すれば、球状タンパク質の場合、分離範囲は 4,000 ～ 900,000 となります。GF-250/GF-450 ゲルろ過カラムは親水性ジオール結合相を使用することによって高いタンパク質回収率 (通常 > 90％) を示し、独自のジルコニア修飾を施したシリカによって pH 3 ～ 8 と広い pH 範囲に対応しています。GF-250、GF-450 カラムには正確に大きさを揃えた多孔質シリカ微細球が充てんされており、ポアサイズと粒子径のばらつきが小さくなっています。その結果、流量 3 mL/min までのタンパク質分離において、効率が高く、堅牢で再現性の高いカラムとなっています。これらのカラムは移動相内の有機修飾剤 (< 25 %) と変成剤に対応しており、タンパク凝集を取り除いて正しくタンパク質の大きさを判定することができます。一般的な分析用途としては、単量体、二量体、凝集体の分離、脱塩、タンパク
質分子量の推定と修飾タンパク質の分離があります。

カラム仕様
結合相

ポア
サイズ 粒子径

表面積

ZORBAX GF-250 150Å

4 µm

MW 範囲
4,000-400,000

ZORBAX GF-450 300 Å

6 µm

10,000-900,000 50 m2/g

140 m2/g

pH 範囲 流量
3.0-8.0 3.0 mL/min

350 bar

最大圧力3.0-8.0

350 bar未満

3.0 mL/min
未満

仕様は代表的な値のみを表しています。

124

www.agilent.com/chem/jp

バイオ分析用カラム

5

ZORBAX GF-250 SEC カラムを用いたタンパク質標準の分離
カラム:

ZORBAX GF-250
884973-901
9.4 x 250 mm, 4 µm

移動相:200 mM リン酸ナトリウム、pH 7.0

流量:

2 mL/min

温度:

室温

検出器:

254 nmサンプル:

4

サイズ排除用BioRad ゲルろ過標準
1. サイログロブリン 670,000 Da
2. ウシ ガンマグロブリン 158,000 Da
3. トリ オブアルブミン 44,000 Da
1
4. ウマミオグロビン 17,000 Da
5. ビタミン B-12 1、350 Da

ここで分離されたタンパク質標準試料は一般的に使用されている標
準試料セットです。ZORBAX GF-250 カラムはこのサンプルに対して優れた分離能を示しています。サイログロブリンの分離能をさらに上げるために GF-450 カラムを追加連結することも可能です。

0

www.agilent.com/chem/jp

1

2

3

2

3

4
Time (min)

5

6

7

8
LCGF001125バイオ分析用カラム

高速サイズ排除分離

高速ゲルろ過分析 2

カラム:

ZORBAX GF-450
884973-902
9.4 x 250 mm, 6 µm

カラム:

移動相:

PBS (リン酸緩衝食塩水)、pH 7.4

移動相:

流量:

3 mL/min

温度:

室温

検出器:
サンプル:

200 mM

リン酸一ナトリウム
pH 7.0/0.1 % アジド

流量:2 mL/min

220 nm

検出器:

225 nm

BSA および BSA 二量体

サンプル:

50 mM 中に 10 µg
リン酸ナトリウム pH 7.0

A:BSA および BSA 二量体 (二重注入)

B:抗体分離

1

2

2

2
1.

BSA 二量体

1.

IgG 二量体および会合体

2.

BSA 単量体2.

マウス IgG 1K (MOPC 31C)

3.

アジド

3.

塩:トリス、Na2HPO4、NaCl

1

3

Inj. #1

Inj. #2

0

5
Time (min)126

ZORBAX GF-450
884973-902
9.4 x 250 mm, 6 µm

3

3
1
10

0

1

www.agilent.com/chem/jp

2

3

4
5
6
7
Retention Time (min)

8

9

10
LCGF002

バイオ分析用カラム

長寿命の ZORBAX GF-250 カラム

安定性の高いアジレント GF-250:標準タンパク質の K*

競合他社カラム:標準タンパク質の K*

3.0

3.0

2.5

2.5
BSA
Ovalbumin

1.5

Lysozyme
NaN3

1.0

Ovalbumin

1.5

Lysozyme
NaN3

1.0
0.5

0.5
0.0

BSA

2.0
K*

K*

2.0

0.0
0

1000
2000
Column Volumes

3000

0

1000
2000
Column Volumes

3000
LCGF004

ZORBAX GF-250、GF-450 ゲルろ過カラム
ハード
ウェア

説明

寸法(mm)

粒子径 (µm)

部品番号

GF-250、150Å

9.4 x 250

4884973-901

GF-250、150Å

4.6 x 250

4884973-701

GF-450、300Å

9.4 x 250

6884973-902

GF-250 Diol、ガードカートリッジ、2 個

9.4 x 156820675-111

GF-250 Diol、ガードカートリッジ、4 個

4.6 x 12.5

6820950-911

GF-450 Diol、ガードカートリッジ、2 個

9.4 x 156820675-111

GF-450 Diol、ガードカートリッジ、4 個

4.6 x 12.5

ガードカラム (ハードウェアが必要)

6820950-911

ガードハードウェアキット

0840140-901

ガードハードウェアキット

0820888-901

PrepHT カラム
PrepHT GF-250、150Å

21.2 x 250

6877974-901

PrepHT GF-450、300Å

21.2 x 250

6877974-910

PrepHT エンドフィッティング、2 個

820400-901

PrepHT GF-250、ガードカートリッジ、2 個

17 x 7.55820212-911

PrepHT GF-450、ガードカートリッジ、2 個

17 x 7.55820212-911

ガードカートリッジハードウェアキット

www.agilent.com/chem/jp820444-901

127バイオ分析用カラム

Agilent バイオモノリス HPLC カラム• 大型生体分子分離用に設計されたポリマーベースのモノリス HPLC カラム• 流速に依存しない分離を実現。拡散、ポア、およびボイドボリュームがないため、移動相と固定相の間の高速移動が可能• モノリスディスクは 5.2 mm x 4.95 mm (カラム容量 100 µL) で、拡散による物質移動を排除• 超高速分離によって、メソッド開発時間とコストを削減そのため、分析時間とバッ
ファを大幅に削減可能

Agilent バイオモノリス HPLC カラムは、
抗体 (IgG、
IgM)、
プラスミド DNA、
ウィルス、
ファー
ジ、その他のマクロ生体分子の高速高分解能の分離を実現します。カラムの種類は、
強カチオン交換、強アニオン交換、弱アニオン交換、プロテイン A の各相を用意しています。バイオモノリス HPLC カラムは、Agilent 1100 / 1200 HPLC システムを含む HPLC
および分取 LC システムに適合します。

カラム仕様
寸法
カラム容量

5.2 mm x 4.95 mm
100 µL

最大圧力

150 bar (15 MPa、2200 psi)*

最低/最高使用温度

使用: 4 ～ 40 °C
保管: 4 ～ 30 °C
使用範囲: 2-13**

推奨 pH

洗浄: 1-14***
使用材質

ハードウェア:ステンレス製
パッキング材: ポリ (グリシジル メタクリレート-co-エチレン
ジメタクリレート) 多孔モノリス

カラー識別リング

バイオモノリス QA:青バイオモノリス DEAE:緑
バイオモノリス SO3:赤バイオモノリス プロテイン A: 白

保管期限/使用期限

プロテイン A:12 ヶ月

SO3、QA、DEAE: 24 ～ 36 ヶ月* ：プロテイン A は 75 bar (7.5 MPa、1100 psi)** ：プロテイン A は 2-11*** ：プロテイン A は 2-13

128

www.agilent.com/chem/jp

バイオ分析用カラム

DEAE カラムを用いたファージ精製のモニタリング
DEAE
5069-3636
5.2 x 4.95，mm

移動相:

A : 125 mM リン酸バッファ、pH 7.0
B : 125 mM リン酸バッファ + 1M
NaCl、pH 7.0

120

50

Time 36 min
Time 158 min
Time 191 min% Buffer B

45

流量:

1 mL/minグラジエン
ト:

100% バッファ A (2.5 分)
0 ～ 100% バッファ B (10 分)
100% バッファ A (2 分)

検出器:

UV、280 nm装置:

高圧グラジエント HPLC
システム、Agilent 1200

Relative Absorbance (mAU)

40
35

2

100

80

30
25

60

20

Phages andother components

40

15

3

1

10

% Gradient

カラム:

20
5
0

0
0

2

4

6

8

10

12

Time (min)ファージ増殖が進むにつれて、宿主細胞が溶解されているためにゲノム DNA (gDNA) 濃度は高くなります。発酵の最終段階で、gDNA は断片に分解し始めます。精製培地ではこれらの gDNA 断片を簡単に除去できないため、ゲノム DNA の分解前に発酵サイクルを停止させることが重要です。上記は、36 分、158 分、191 分にバイオリアクターから採取した 3 種類のサンプルのクロマトグラムです。 ピーク 1 はファージ、培地、宿主細胞、ピーク 2 はインタクト gDNA、ピークは断片化
された gDNA を表します。

www.agilent.com/chem/jp129

バイオ分析用カラム

プロテイン A カラムによる IgG 発酵滴定濃度の測定

移動相:
流量:

プロテイン A5069-3639
5.2 x 4.95，mm

240

A : 1x PBS、pH 7.0
B : 0.5 M 酢酸、pH 2.6
1 mL/min190

グラジエント:

100% バッファ A
100% バッファ B
100% バッファ A (各段階
0.5 分)

検出器:

UV、280 nm装置:

高圧グラジエント HPLC
システム

Relative absorbance (mAU)

カラム:

140

1mL/min

2 mL/min

90

40

Agilent 1200
_10Time (min)標準 IgG を 2 つの流量、1 mL/min と 2 mL/min で測定します。これらは、それぞれ 10 カラム容量/分と20 カラム容量/分に相当します。 サンプル中の IgG 濃度を数分以内に速やかに測定できます。

1600

The calibration curve
1400
1200

Peak area

1000
800

y = 728.55x
R2 = 0.9975

600
400
200
0
C (mg/mL)

上記は、ヒト IgG の 2 倍希釈系列の検量線です。 IgG の初期濃度は 2 mg/mL です。 IgG ピーク面積を積分し、プロットしました。本分析の直線性範囲は、開発および製造細胞培養に必要な範囲をカバーしています。

130

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バイオ分析用カラム

Agilent バイオモノリス HPLC カラム
カラム

説明

主要アプリケーション

部品番号

バイオモノリス QA

第 4 級アミン結合相 (強アニオン交換) は使用 pH 範囲 2 ～ 13 で完全に荷電し、負電荷により生体分子と結合します。

ü アデノウイルスのプロセスモニタリン

5069-3635

グと品質管理ü IgM 精製のモニタリングと品質管理
ü DNA 不純物除去のモニタリング
ü エンドトキシン除去のモニタリング
ü HSA 純度分析

バイオモノリス DEAE

ジエチルアミノエチル結合相 (弱アニオン ü バクテリオファージ精製のプロセスモ
交換) は、使用 pH 範囲 3 ～ 9 で負電荷をニタリングと品質管理帯びるため、生体分子の選択性を拡大し ü プラスミド DNA 精製のプロセスモニタ
ます。
リングと品質管理

5069-3636

バイオモノリス SO3

スルホニル結合相 (強カチオン交換) は使
用 pH 範囲 2 ～ 13 で完全に荷電し、正電荷により生体分子と結合します。

ü タンパク質や抗体などの大型生体分子5069-3637

バイオモノリス プロテイン A

プロテイン A アフィニティカラムは、IgG
クラス 3 を除くすべての IgG (ヒトとマウス) の分析分離用に設計されています。

ü IgG の定量 (発酵滴定濃度計算)

5069-3639

www.agilent.com/chem/jpの高速高分離ü ヘモグロビン A1c の高速分析

131テクニカルサポート
ハードウェア、ソフトウェア、アプリケーション、機器の修理、またはトラブル
シューティングに関して質問がございますか? アジレントの技術者がお客様のご質問にお答えします。豊富な分析経験を持つテクニカルサポート担当者が、その知識と経験をご提供します。
本カタログ記載の製品に関するご質問は、担当営業またはカストマコンタクトセンタ

0120-477-111 までお問い合わせください。ホームページ（www.agilent.com/chem/jp）でもさまざまな情報を紹介しています。

Agilent ZORBAX HPLC カラムで分析上の問題を解決
ZORBAX カラムのサイト(www.zorbaxmethodjp.com) では、
アプリケーションにお勧めのカラムと詳細情報をご覧いただけます。

132• よくある質問 (FAQ)• ダウンロードとユーティリティ• 据付およびメンテナンスビデオ• 対話式トラブルシューティング• ワランティ情報• テクニカルサポートの問い合わせ先情報

新製品 .................................................................................................1

HPLC カラム選択ガイドライン .....................................................3
HPLC カラム選択フローチャート ......................................................................................................4
ZORBAX 逆相結合相のクイックガイド ............................................................................................5
ZORBAX 逆相 HPLC カラム選択フローチャート .............................................................................6
カラムと移動相選択のためのガイド：逆相 ..................................................................................8
HPLC カラムの USP 表記 ....................................................................................................................11
pH 1 ～12 でのメソッド開発 ............................................................................................................13
カートリッジ選択ガイド ..................................................................................................................18

分析 HPLC 用カラム .......................................................................19
Poroshell 120 ..........................................................................................................................................20
ZORBAX Eclipse Plus...............................................................................................................................23
ZORBAX Eclipse PAH ..............................................................................................................................30
ZORBAX Eclipse XDB ..............................................................................................................................32
ZORBAX 80Å StableBond .......................................................................................................................40
ZORBAX Rx .............................................................................................................................................49
ZORBAX 80Å Extend-C18.......................................................................................................................52
ZORBAX Bonus-RP..................................................................................................................................56
ZORBAXオリジナル逆相カラム .......................................................................................................61
ZORBAX 順相カラム ............................................................................................................................62
ZORBAX HILIC Plus .................................................................................................................................66
ZORBAXメソッド開発キット ...........................................................................................................68
ZORBAX メソッドバリデーションキット ......................................................................................70
ZORBAX イオン交換カラム – SAX、SCX ........................................................................................71

Agilent e-セミナー

アジレントの eセミナーは、web上で最新技術と最新情報を紹介するプログラムです。

特殊アプリケーション用 HPLC カラム .....................................73
ZORBAX ラピッドレゾリューション High Definition 1.8 µm.........................................................74
ZORBAX ラピッドレゾリューションハイスループット 1.8 µm ................................................77
ZORBAX ラピッドレゾリューション 3.5 µm ..................................................................................85
ZORBAX ソルベントセーバ................................................................................................................90
ZORBAX PrepHT......................................................................................................................................94
Agilent Prep LCカラム.........................................................................................................................100
Ultron ES Chiral カラム .......................................................................................................................103

バイオ分析用カラム ...................................................................105
ZORBAX を用いてタンパク質およびペプチドを分析する逆相メソッド開発方法 ............106
Poroshell 300 ........................................................................................................................................110
ZORBAX 300Å StableBond ..................................................................................................................113
ZORBAX 300Å Extend-C18...................................................................................................................118
ZORBAX アミノ酸分析 (AAA) カラムおよび部品 ........................................................................122
ZORBAX GF-250、GF-450 ゲルろ過カラム ....................................................................................124
Agilent バイオモノリス HPLC カラム ............................................................................................128

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アジレント・テクノロジー株式会社© Agilent Technologies, Inc. 2010
Printed in Japan April 16, 2010
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