藻類 Jap.J. Phycol.30:63‑
67. March 10，1981Col
αciumv
esiculosu
mEHRB.の培養と形態加藤季夫
東京都立大学理学部牧野標本館(158 東京都 l
止問谷区深沢 2‑1‑1)

SueoKATO: Laboratorycultur
eandmorphologyo
fColaciumv
esiculosu
mEHRB. (Eugleno.
phyceae)Colacium v
esiculosu
m EHRB. growingon Cyclojうswas collected from small ponds in
Saitamaand ChibaPrefecturesand unialgalculturesofthisalg
a wereestablishedinthelaborator
y. Toexamine th
efor
mat
io
nand morphologyo
fattachments
tr
uctu
r
es suchassolates wereculture
dinfourmedia;soil‑
water，soil‑stal
ks and cu
shionhol
dfasts，twoi
Cramer‑MyersandnewlydevisedAF‑
6. Inaddition，
theywereculturedtogether
water‑pea，yclopsin pondw
ater
. C.v
esiculosum LB 1
3
15(CultureCollectio
nofAlgae，TexaswithC
Univ
ersity)，whichwasr
eportedtolackstalks，was alsoculturedinthe same way asmentioned above. Allthr
eei
solates produced dichotomously branched stalksin AF‑6
yclops. The f
ieldobserva‑medium and brownc
u
s
hio
nhol
d
f
a
st
son t
hee
xos
ke
le
ton
so
fC
t
i
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hec
u
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sshow t
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h
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esen
c
eo
rabsenceo
fattachments
tr
u
ctur
esolacium.
can notb
e used asataxonomicc
riterioninthegenusCu/ture;
Key lndex Words: attachmentstructures; Colacium vesiculosum; cEuglenophyceae;morphology.

yclops，Daphniaな
Colacium は細胞の前端部で C315株も同じ方法を用いて無菌化した。
より得たし 8 1

どの甲殻類の殻面上に着生する藻で，わが国では，神単離および保存用埼地には淡水産鞭毛藻の培養に有効

谷(1960)が愛知県岡崎市内の神社の池から C.arbus‑

な AF‑6 培地 (Table2) を用い， 培養は 20.C，culaSTEIN を採集し，その形態について報告してい30001ux，12‑
12時間明暗周期の照明で行った。
第養実験には Table3に示した AF‑6培地， soil‑る。
筆者は日本各地の池や沼から動物プランクトンを採water培地 (SW培地

PRINGSHEIM 1946)， soil‑集し，それらに着生していた Colaciumの単離培養を964)，Cramer‑water‑pea培地 (SWP培地;STARR1行ってきた。得られた培養株のうち， C.v
esiculosum952)
Myers培地 (CM培地;CRAMERandMYERS1EI‑IRB. と同定できる 2株とテキサス大学より得た C.の 4種類の培地を用いた。それぞれの培養株の一部を

vesiculosumLB 1315株(STARR 1978) について，新しい培地に接種後， 2，4，8，24
週間自に，細胞の形4種類の培地を用いた単藻培養および C
yclops との態および柄とクッションの形成に注目して観察を行っolaciumの分類基準とし混合培養を行い，特に，従来 Cた。さらに，クッション形式の有無については，時計て用いられてきた付着器の柄とクッション (cushion

皿に入れた猪過滅菌水(千葉県市原市の池の水) 4ml

holdfast) 形成の有無とその形態について調べたので，の中に藻などが着生していない C
yclopssp.10個体

その結果について報告する。と，各培養株の数千細胞を共に入れて二者混合培養を行い， 2日後に調べた。

材料と方法

本研究で用いた C.v
esiculosumは Table1に示

固定には 1 %オスミウム酸水溶液の蒸気，核の染色には酢酸カーミン， ピレノイドの染色にはプロピオン

した C‑8株， C‑67 株および LB1315 株である。

酸カーミン (ROSOWSKI and HOSHAW 1970)，生体C‑8株と C‑67株は，それぞれ Cyclopssp. に着生

染色には 0.1%中性赤水溶液をそれぞれ用いた。なお，していた藻をピペット洗浄法 (PRINGSHEIM1946)で柄の観察には位相差顕微鏡を用いた。

単離し，無菌化したものである。また，テキサス大学

.
KATO，S64Table 1. Sou
rceofC.v
esiculosum.

C‑8C‑67ShinrinPark，SaitamaOct.2
1，1976KatolchiharaCity，
Chiba

Apr.24，1977KatoPringsheim

1943England

LB1315*Isolator

DateCollectin
glocalityStr
ainNo.

*
CultureCollectiono
fAlgae，Universityo
fTexasatAustin (STARR1978).
Table2. Compositiono
fAF・6medium

単離培養したものである。そのサンプル中では Cycl‑ops 1個体あたり数十細胞の Colaciumが着生していAdditionmg/liter

NaN03140

いる付着器の柄とクッションを形成していなかった。

NH4N0322

一方，

MgS04
'7H2030

ル中では，Cyclops1傭体あたり数百細胞の Colacium

KH2PO'1K2HPO'1，
2H20CaCI210が着生し，510た。これらの着生細胞では，褐色のクッションを形成

CaCO.

10

見されなかった。このように，自然採集物では付着訴

Fe‑citrate22を形成していない場合が多く認められた。

CitricacidBiotin0.
002

細胞の形態 C‑8と C‑67両株とも，培養中に観察さVit. B10.
01れた遊泳細胞は西洋ナシ形，卵形あるいは紡錘形で，

Vit.B
60.
001

その大きさは長さ 19‑29μm幅 10‑12μm，体長の約V
it. B12Tracemetals0.
0012倍の長さの鞭毛(Iocomotoryflagellum)で活発に5ml泳ぎまわった (Fig.1)。 葉緑体は皿状でpH6.
6個，細胞の内側jに向かつて突出したピレノたり 5‑10たが，いずれの着生細胞も分類上重要な形質とされてC‑67株を単離鳩養した市原市の溜池のサンプ
そのため肉眼でも Cyclops が緑色に見えしていたものも観察されたが，柄を形成したものは発1mlo
fthetracemetalssolutioncontains:
6H20;0.
08mgMnCI3，4H20;O.
0.
2mgFeCI3，001mgZnS04・7H20;0.
0004mg CoCI2，
6H20;
0.
0008mgNa2Mo04; 1.5mgNa2‑EDTA.

1細胞あイド (innerpyrenoid)をそれぞれ l個持っていた。
自然採集物では，細胞内に多量のパラミロン粒が蓄秘されていてピレノイドは観察しにくい場合が多いが，Jのものではパラミロン粒が少なく培養中の対数増殖:JtIピレノイドの観察は容易であった。限点は 4‑5μmの長さで，貯蔵胞の上部に近接していた。核は径 6‑7結果と考察

μm の球状で，細胞の尾部に位置していた。粘液体は採集時の付着器の有無観察に用いた C.vesiculosum

球形で小さく，散在していた。の C‑8株は，森林公園内の小さな池のサンフ。ルから一方，基物 I
こ着生した細胞はその鞭毛を失なってお一‑冶n一rnotformed; r:rare.

一nvea++pes
一一hEhy huω均一 ιr

一目印
一十nti一oω一c.h:cushionholdfasts; s:stalks; +:formed; ーs++一r03++ぽ一r

F且 一sy一M一c.h

一s一c.hρLVLB 1315sSoil‑
water
‑
pea

混 一 ・HC‑
67c.hSoil‑
water

+++

C‑
8AF‑6m一Str
ainNo.

rcι

Table3. Theformationo
fstalksandbrownc
ush
ionhold
f
ast
so
fC.v
esicu
losu
mi
nfou
rmediaandi
nmixedcultu
rewithC
yclopssp.

Attachment str
uctu
re
so
fColacill川.
.

一①Figs.1‑5. Cells and attachment stru
cturesofColacilll11 v
esi
cu
losl
t川 s
train C‑8. Scal
e=20μminFigs.1‑5.1.Freeswimmingc
ell showing inner pyrenoids (p)，2‑
week‑oldcu
ltur
ein AF‑6; 2.8‑celled colony withoutstalks and cushion holdfasts， 2‑week‑old cultureinAF‑
6; 3. 8‑celled colony with dichotomously branched shor
tst
alk，4‑week‑
old cultureinAF‑6; 4.A colony with dichotomously branched long stalks，4‑week ‑
oldcultur
ein AF‑6;
yclot
s，2・day ol
d cu
lt
ur
ei
nst
er
i
led
5̲ 4‑
c
eled colony with a brown cushi
on holdfas
t on C
pond water.
Figs.6‑
8̲ Celsand attachment str
uctu
resofColacilllnvesiCllloSllln strain LB 1315.
w巴ek‑olclcult
urei
n AF
Scal
e=20μ m in Figs.6‑
8. 6.4‑celel
c colony wi
th shor
ts
t
al
ks，4‑
6;7.Col
onies with shor
ts
tal
ks，.
j‑
week‑old cultu
re in AF‑6;8. Celswith a brown cush‑ionholdfast(c.h.)on C
pclots，2‑
clay‑olcl culturei
nst巴rliecl pond water.

65KATO，S.

66り，尾部の先端部はふつう丸くなっていた。その大きLB 1315株，採集時に柄とクッションを形成していな5個でさは遊泳細胞とほぼ等しく，薬縁体の数は 6ー 1

かった C‑8株，柄を形成していなかった C‑67株のあった。以上の観察結果は LEMMERMANN (1913)，

3株とも，

JOHNSON(1934)，ROSOWSKlandKUGRENS(1973)らの場合その殺菌に細胞端から付着器を形成した。このによる欧米産のものについての報告とほぼ一致した。

yclops との混合培養
AF‑6培地および C

ことは，付着器を形成しない点に基づいて記載された

Colacium でも，ある適切な条件下では，それら付着付着器の形成 C‑8株と C‑67株の遊泳細胞を AF‑6器を形成する可能性が大きいことを示している。した培地に接種すると， 2週間自には鞭毛を失ない.そのがって，付着器の有無を分類基準に用いることは適切前端部で液面でないと考えられる。

1くの試験管鐙に着生した細胞が多数観察された。これらの細胞は付着器の柄とクッションのいずれも形成しておらず，透明な粘液物質で互いに結付着器の形態

びついていた (Fig.2). 4週間目には，試験管壁に柄AF‑6培地中で形成した柄は，長さ数μmから 10数μm

C‑8株， C‑67株および LB1315株がおよび透明なクッション状の構造物を形成した細胞がと短く，二文状に分岐し，それぞれの柄の先端には卵形見られた。 4種類の培地を用いて，柄とクッションのあるいは長円形の細胞が倒生して同た (Figs.3，6，7)。

形成を調べた結果が Table3に示してある。 C‑8とこの観察結果は STEIN(1878)，LEMMERMANN(1913)，

C‑67の商株とも AF‑6以外の培地でも柄を形成した。

SKUJA(1948)，GREEN(1953)，ROSOWSKlandKu‑

しかし， C‑67株は C M模地を用いた場合， 5回の実GRENSU973) らの報告とよく一致した。 また，これ験のうち l回だけ柄を形成したのみであった。
C‑67株は S W培地， SWP模地中で褐色のクッシ.v
esiculosum 3株の形態は， C. mucronatum
ら C
BOURR.andCHAD.や C.libellaeRosow.andWILL.

ョンを形成したが， C‑8株ではいずれの培地でもそのの柄の形態 (ROSOWSKland WILLEY 1975，加藤形成は確認されなかった。 ROSOWSKlandKUGRENS

未発表) とは明らかに異なっていた。稀に; C‑8株

(1973)は C.vesiculosumの 4株を SW培地と SWPと C‑67株では， ROSOWSKlandKUGRENs(1973)も培地で培養したところ， 4株とも褐色のクッションを報告している 100μm以上の長い柄をもっ細胞からな形成したと報告しているが，今回の実験ではそれと異るロロニーが，試験管の底部に形成された (Fig.4)。

なる結果が得られた。この相違は主に用いた土壊の質C
yclops との混合培養で C‑8株， C‑67株およびの起因すると恩われる。 C‑8株に褐色のタッシ g ン形

LB1315株が形成したクッショ νは，ふつう円盤状で成を起こさせるため，二者混合培養を行い，遊泳細胞あり，水酸化鉄等を沈着して褐色を呈していた (Figs.

を Cyclops の殻面に着生させた。 2臼後，褐色のク5，8)。このクッションに関しては，柄と異なり，他のyclops の殻面に形成されているのが観ッションが C種との聞に明瞭な相違点をみいだすことはできなかっ察された。 C‑67株についても同様な実験を行ったとた。

ころ， C‑8株と同じ結果が得られた。
テキ+ス大学の C.v
esiculosumLB1315
株では柄終りに， 13頃から御指導いただいている都立大学加の形成は観察されず，クッションの形成も稀であった

崎英男名誉教授，ならびに培養に関して助言して下さと ROSOWSKl and KUGRENS (1973) は報告して L、った三浦宏一郎博士，筑波大学管平高原実験センター

る。今回の培養実験では，用いた 4種類の培地のうち徳増征二博士，日本大学農獣医学部大島海一博士に深AF‑6培地でのみ柄の形成が認められた。またクッシ

く感謝する。

yclopsの殻面
ョンは二者混合培養を行った時のみ，C上に形成された。

Colacium では，付着器の柄とクッシ g ンの有無が種レベルでの重要な分類基準とされてきた (HUBER‑PESTALOZZl1955)0 しカ し， ROSOWSKlandKUGR‑
ENS (1973) はそれらが環境条件によって影響されやすく，分類基準として適切であるか否かについては今後の研究に待たなければならないと述べている。
今回の培養実験では，柄を形成しないとされていた

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sio・STEIN，FnthiereIII. Der Organismus der Flagellaten
1. Wilhelm Engelmann，Leipzig.

、‑‑‑‑‑‑、ノヘ‑、ー"v、新刊紹介
Farr，E.R.，Leussink，J.A. and Stafleu，F.A. (eds.
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95
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このような完備した目録ができたことにより， 属名の綴字や引用等を安定させることに役立ち，また今後無用なホモニムを作ったりする混乱を防ぐ立味でも，その有用性は極めて大きいものである。
この目録の藻類に関係する部分を通覧してみると， 科への配置には色々不備のあることもわかる。綴字上の問
題点について， 紅藻・掲藻・緑藻で，現在ふつうに使われている綴りと違うものがある。今後はこの目録で正しいとして採用されたものを使って行くべきであると考えられるので，気付いたものを以下に列記する。
償用の綴り

目録の正しい綴り

Audouinella
Chlamydomonas
CymatheγeGriffithsiaHildenbrandia
L
ithothamnion
Monospora
Nemastoma
PeyssonneliaAuduinella
Chlamidomonasただし科名 Chlamydomonadaceae
Cymathaeγe
GriffitsiaHildbrandtia ただし科名 Hildenbrandiaceae
Lithothamnium
Monosporus
Nemostoma(北大理植吉田忠生)
Peyssonnelia