関東森林研究論 文70-2(2020)

クビアカツヤカミキリ（Aromia bungii)のフェロモン等を用いた野外誘引試験所雅彦 1・桐山哲 2・深谷緑 2・松本剛史 1・滝久智 1・高務淳 1・向井裕美 1・浦野忠久 1・高梨琢磨 1・加賀谷悦子 1・岩田隆太郎 2１ 森林総合研究所
２ 日本大学生物資源科学部
要旨：サクラ,モモ等に深刻な被害をもたらす侵入害虫クビアカツヤカミキリ（以下クビアカ）の防除に利用できる誘引物質を探索するために，ラセミ体合成フェロモンと協力剤として糖酢液，エタノール,クビアカ防御物質を用いた野外誘引試験を行い, 誘引効果を比較した。また、クビアカ成虫触角を用いた GC-EAD 分析により，誘引活性成分を探索した。GC-EAD 分析では,今回の合成フェロモンに対して雌雄両性の触角に応答が認められた。野外試験の結果,合成フェロモンは単独での誘引性は弱く,糖酢液との併用で誘引力が強くなることが分かった。また、エタノールにも共力効果が見られる傾向があった。クビアカの防御物質については、主成分がローズオキシドであり、雌雄触角に応答が認められ何らかの作用性が示唆されたが，野外誘引試験では誘引共力効果は認められなかった。
キーワード：クビアカツヤカミキリ, 侵入害虫，野外トラップ試験，集合フェロモン

Results of field attraction trap test using pheromones of a longhorn beetle (Aromia bungii)
Masahiko TOKORO 1, Satoshi KIRIYAMA 2, Midori FUKAYA 2, Takeshi MATSUMOTO 1, Hisatomo TAKI 1, Jun
TAKATSUKA 1, Hiromi MUKAI 1, Tadahisa URANO 1, Takuma TAKANASHI 1, Etsuko KAGAYA 1, Ryûtarô IWATA 2
1: Forestry & Forest Products Research Institute2: Department of Forest Science and Resources, College of Bioresource Sciences, Nihon UniversityAbstract: Aromia bungii is an invasive longhorn beetle that causes severe and widespread damage among various important tree
species in Japan, including cherry and peach trees. Field tests were conducted to search for attractants that would lure them into
traps. The effects of a racemic synthetic pheromone blend as an attractant—either alone or combined with a sugar-vinegar solution,
ethanol, or rose oxide as a synergist—were compared with regard to the number of captured insects. In addition, gas
chromatography–electroantennographic detection (GC-EAD) analysis was used to search for active components in the samples ofadult beetle antennae. The results of that analysis showed that the synthetic pheromone blend alone was a weak attractant; it
induced responses in the antennae of both sexes. When combined with the sugar-vinegar solution or ethanol, the attractant qualityof the synthetic pheromone blend increased. Rose oxide was found to be the primary component of the beetles’ defensive secretion.
It induced a response in both sexes, suggesting that it had some activity; however, the field test showed that rose oxide had nosynergistic attractant effect.
Key-word: Aromia bungii, invasive species, field trap test, aggregation pheromone

Ⅰ はじめに（(E)-2-cis-6,7-epoxynonenal：以下フェロモン) と同定さサクラ,モモ等に深刻な被害をもたらす侵入害虫クビ

れ，中国･安徽省と日本・徳島県での野外誘引試験においアカに関して，防除を目的とした誘引物質の探索がなさて合成品に雌雄ともに誘引され、その活性が確認されたれており, 成虫の揮発性成分が分析されている。近年,(１，６)。また、日本の個体では雌が雄より優位に誘引クビアカ雄分泌揮発性物質から，クビアカフェロモン主されたため，性・集合フェロモンであると定義された。

成分が，トランス 2 シス 6,7 エポキシノネナール

また，クビアカ成虫は，糖酢液（穀物酢・黒糖・白酒混－33 －（受理日 2019 年 10 月 23 日）

合物）に誘引されることが報告された（２，３，４）。さ

突板式のサンケイ化学社製”昆虫誘引器”の黒色を用い，らに、本種は雌雄成虫が防御行動に伴って強い刺激臭の合成フェロモンを誘引源にし，糖酢液（２，３）
、エタノある成分を分泌噴射することが知られており，これは防ール (80% 25-30ml チューブ製剤：サンケイ化学)，ロー御物質であると考えられており、この揮発性成分はローズオキシド（99%：シグマアルドリッチ）を共力剤としズオキシドをはじめ 6 種の化合物が確認されている（５）。

た。合成フェロモン及びローズオキシドは、溶媒として本研究では, クビアカの防除に利用できる誘引物質を2-プロパノール(99.5%)１ml に混合し、ユニパックＣ－４探索するために，クビアカ成虫触角を用いたガスクロマに注入し、ディスペンサーとして，衝突版上部にテープトグラフ触角電位検出（GC-EAD）分析により活性成分で貼付した。共力剤の糖酢液（20ml 黒糖 2：白酒 1：穀を探索した。また同定された雄揮発性フェロモンのラセ物酢 3）は脱脂綿に含浸して，小型の孔開き蓋をしたΦ

ミ体合成品の誘引力，及びそれに対する糖酢液，エタノ

5cm プラカップに入れ，トラップ所定位置に設置した（２，ール，防御物質の共力効果を東京都あきる野市及び群馬３）。

県館林市で市販のトラップを用いて試験し検討した。

誘引試験①は，対照区（溶媒のみ）：C1，フェロモン A(ラセミ体 96%) 50mg 区：P1，フェロモン A 100mg 区：

Ⅱ 材料と方法

WP1 の３試験区,４反復で 6 月 13 日～8 月 30 日まで。

１．供試虫 埼玉県草加市及び栃木県佐野市で採集し誘引試験②は，対照区（溶媒のみ）：C2, フェロモン

た被害材を茨城県つくば市の森林総合研究所内網室内でB（ラセミ体 97％：東京化成）50mg 区：P2, フェロモン保持し，羽化脱出したクビアカ成虫を実験に用いた。こB 50mg +エタノール区：PE2, フェロモン B 50mg＋ロ

れら成虫は、恒温室内の 20℃14L10D の条件下で、はちーズオキシド 50mg 区：PR2, フェロモン B 50mg＋糖みつ水を餌に 2 日以上飼育した後に供試した。

酢液 20ml 区：PS2, フェロモン C（ラセミ体 83％）100mg

２．信号化学物質の分離分析法 クビアカ雌雄成虫の揮発性成分の捕集は，300ml ビーカーの上部をアルミホ＋糖酢液 20ml 区：WS2 の 6 試験区 4 反復とし、6 月 13日～8 月 2 日まで行った。

イルで覆い，固相マイクロ抽出法（SPME）にて行った。

各トラップのバケツ部には捕獲虫の腐敗を防ぐため防御物質捕集の場合は，ピンセットで虫体に刺激を与え400ml のプロピレングリコール（純正化学）を加えた。

た。SPME はスペルコ社製の SPME ホルダーと，100µm

各トラップはランタンスタンド（パイルドライバー：スPDMS，85µm CAR/PDMS，50/30µm DVB/CAR/PDMSノーピーク社製）を用いて約 1.5ｍ高にセットし，1 週間のファイバを用いて行い，GC-EAD 分析， GC-MS 分析

ごとに捕獲虫の回収，ディスペンサーの交換と,トラップに供した。

位置のロ－テーションを行った。捕獲したクビアカ成虫

３．GC-EAD 分析および GC-MS 分析 合成フェロモ数を記録し統計処理を行った。捕獲虫数と処理区との関ン及び成虫揮発性成分に対する GC-EAD 分析は HP 7890

係は、一般化線形混合モデル（GLMM）を用いて解析しGC（アジレント社製）装置と，分析カラム DB5-ms 30mた。応答変数は捕獲中数としポアソン分布に従うと仮定

×0.32mm×0.25mm を用い，昇温分析：40(1)-10-200-30-し、リンク関数は log を採用した。説明変数は誘引処理

310℃(5)，で INJ：250，FID：280， EAD：300℃の条の効果、ランダム項は回収時期とし、各処理区の違いを件で行い，EAD 分析はインターフェース：IDAC，およTukey 法による多重比較検定で評価した。有意水準はび電極ホルダーは Syntech 社製を使用し，電極はクビア0.05 とした。 本解析は R ver 3.3.2（R Development Core

カの長い触角用に加工した銀電極を用いた。触角は供試Team）を用い、GLMM 構築にはパッケージ lme4 を、多雌雄成虫を 2~5℃低温下に 10 分以上静置後，解剖用微小重比較検定にはパッケージ multcomp を用いた。

鋏 で切り 取り， 電解質 ゲルを 介して 電極に 設置し
GC-EAD 分析に供試した。
GC-MS 分析は HP 6890 GC 直結HP5973N MSD 装置（アジレント社製）で、分析カラムは DB5-ms（30m×0.25mm×0.25mm：アジレント社製）を用い GC-EAD 分析と同じ昇温条件で行った。
４．
野外誘引試験 野外誘引試験は Xu et al. (2017)（６）の手法に準じて，あきる野市（誘引試験①2017 年）と館図－１．設置トラップ(黒)とフェロモンディスペンサー

林市（誘引試験②2018 年）で行った。誘引トラップは衝－34 －70-2(2020)

関東森林研究Ⅲ 結果と考察れた。また、フェロモン 50mg よりフェロモン 100mg で

１． GC-EAD 分析，GC-MS 分析の結果有意に高い誘引効果が認められ，施用量の高い方が有効

野外試験に用いる合成フェロモンに対するクビアであると示唆された。特に雌に誘引効果が高く，性フェカ成虫の触角応答を GC-EAD 分析により確認した。フ

ロモン的傾向が強いという Xu et al.(2017) （６）の報告

ェロモンＡ，Ｂ，Ｃ共にクビアカ雌雄成虫いずれの触に合致した（図－４）。

角に対しても活性応答ピークが主成分に対して明確に認められた。また主成分ピークの直前に異性体と思われる微小なマイナーピークに対しても弱い明確な応答が認められた（図－２）。

➤AB
図－４． あきる野市でのクビアカ合成フェロモンＡ(ラ➤セミ体 96%）を用いた野外誘引試験の結果、各試験区 4反復の捕獲総数 有意水準 ＜0.05

図－２．合成フェロモンＡに対するクビアカツヤカミキ

異なるアルファベット間には有意差があることを示す

リ雌雄成虫の触角を用いた GC-EAD 分析の結果
FID：GC 検出器 EAD：触角応答
A：雌触角 B : 雄触角・野外誘引試験②の結果（図－５）➤：EAD 活性ピーク

糖酢液等共力剤を用いた誘引試験②の結果，合成フェロモン B および C の誘引力は，糖酢液により明らかな相雌雄成虫の分泌する防御物質揮発性成分に対する乗効果を発揮することが確認され（PS2,WS2）。先の報告

GC-MS 分析の結果，主成分がローズオキシドとその異性（１，２）を支持する結果であった。また糖酢液構成要体であることが分かり，GC-EAD 分析の結果，雌雄触角素であるエタノール（PE2）も，フェロモン単独に比べに対する応答も確認できた（図－３）。これは Wei et al.て多くの成虫が捕獲できる傾向が見られ，共力剤として(2013)（５）により中国の個体で報告された集合フェロ利用できる可能性が示唆された(図－５)。

モン候補成分と同じ主要揮発性成分であったが，むしろ外敵を撃退し不快にする防御物質主成分と考えられ警報

40

フェロモン的に作用する可能性が考えられた。

35BC♂ ♀

30＊＊

Rose oxide

2015105Aa

AaC2P2＊＊＊

ABab

ab

Aa0

雌成虫噴射揮発性成分 (佐野 )

FID

EAD

Bb25

雌成虫触角 (佐野)PE2

PR2PS2WS2

図－５．館林市におけるクビアカ合成フェロモンと糖酢液等に対する野外トラップ試験の結果

図－３． SPME により捕集された雌成虫揮発性成分のC2：対照区, P2：ﾌｪﾛﾓﾝ B 50mg 区, PE2：ﾌｪﾛﾓﾝ B 50mg+ｴ

クビアカ雌成虫触角に対する GC-EAD 分析の結果

ﾀﾉｰﾙ区, PR2：ﾌｪﾛﾓﾝ B 50mg＋ﾛｰｽﾞｵｷｼﾄﾞ区，PS2：ﾌｪﾛﾓﾝ
B 50mg＋糖酢液区, WS2：ﾌｪﾛﾓﾝ C 100mg＋糖酢液区

２．野外誘引試験の結果

各試験区 4 反復の捕獲総数

・野外誘引試験①の結果（図－４）

雌雄別に異なるアルファベット間には有意差あり

合成フェロモン Aは対照区に比べて誘引効果が認めら－35 －

有意水準 ＜0.05

糖酢液トラップで捕獲された雌の保有卵数から，一定

Identification of volatiles released from the livingの産卵を終えた個体が誘引されている可能性が示唆され

adult Aromia bungii Faldermann. 中国森林病虫ている（２，３）
。これは成虫が増卵，寿命延長を目的と(Forest Pest and Disease), 32(5): 8-10.(2013)

して樹液を後食するためと考えられる。合成フェロモン(6) Xu, Tian., Yasui, Hiroe., Teale, Stephen A., Fujiwara-Tsujii,

は成虫活動期の前半に効果的で，集合･性フェロモンの効

Nao., Wickham, Jacob D., Fukaya, Midori., Hansen, Laura.,

果は雌に少し偏る捕獲で，交尾経験が誘引効果に影響すKiriyama, Satoshi , Hao, Dejun ., Nakano, Akio., Zhang,

る可能性も示唆されており，糖酢液との併用で誘引効果

Longwa., Watanabe, Takahito., Tokoro, Masahiko, Millar,を補完している可能性が考えられる。

Jocelyn G., Identification of a male-produced sex-aggregation

防御物質と考えられ,雌雄成虫分泌物主成分であるロ

pheromone for a highly invasive cerambycid beetle, Aromia

ーズオキシドの野外誘引試験の結果は，誘引共力効果は

bungii. Scientific Reports 7, Article number: 7330 (2017)

全く認められず，むしろ忌避的に作用する可能性が示された(図－５)。
本研究により、合成フェロモンと糖酢液の組み合わせがクビアカの誘引物質として有効であることが明らかになった。
謝辞：・供試虫の採集及び誘引試験において，東京都あきる野市市役所，あきる野総合運動公園，館林市市役所，及び東武トレジャーガーデンの関係者の方々に協力していただきました。
・合成品フェロモン A はジョセリン・ミラー博士 (カリフォルニア大学)から提供していただきました。
・元日本大学生物資源科学研究科の中山雄飛研究員に野外試験等に関するご協力を賜りました。
・本研究は森林総合研究所の交付金プロジェクトⅠ、【サクラ等の外来害虫クビアカツヤカミキリの根絶法の開発】の成果の一部です。
・本研究は農研機構生研支援センター「イノベーション創出強化研究推進事業」の支援を受けて行いました。
引用文献(1) 深谷緑, 桐山哲, 安居拓恵, 辻井直, 中野昭雄, 渡邉崇人, 所雅彦, Millar, Jocelyn G., 第 29 回日本環境動物昆虫学会年次大会要旨集, B-9: 55 (2017)(2) 桐山哲, 所雅彦, 深谷緑, 中山雄飛, 滝久智, 加賀谷悦子, 岩田隆太郎, 第 29 回日本環境動物昆虫学会年次大会要旨集,B-9:, 56 (2017)(3) 中山雄飛, 桐山哲, 深谷緑, 岩田隆太郎, 所雅彦 第7 回関東森林学会大会講演要旨集: 50, 24 (2017)(4) Wang, J.-t., Sun, L.-w., Sun, L.-y., Liu, T.-z., Zhang,L.-y.,: Research on the occurrence character andcontrol measure of Aromia bungii. 河北農業科学(Journal of Hebei Agricultural Sciences), 11(2): 41-43,
79. (2007)(5) Wei, J.-R, Liu, X.-B., Niu, Y.-L., Wang, J-J.,－

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