厚生省「神経疾患研究委託費」

筋ジストロフィー症の病因に関する臨床的研究

第二堆（三好班）
昭和53年度研究報告書

昭和54年3月

研究報告書の作成にあたって
厚生省心身障害研究助成金「筋ジストロフィー症の病因の究明に関する研究」の研究班は，昭和52年3月をもって一応終了し，昭和53年度からは新しく厚生省神経疾患研究委託費，筋ジストロフィー症研究班として再出発致しました。
新しい研究班は，主研究テーマに基づき4つの姓で構成され，基礎，臨床，
社会医学に亘る従来よりも更に広範囲な研究活動を開始致しました。厚生省当局，国立神経センター，日本筋ジストロフィー協会の御努力，御支援，御理解に深く感謝致します。
「筋ジストロフィー症の病因に関する臨床的研究」班は，その内の第二姓でありますが，私が班長としてお世話をすることになりました。本研究班の特徴
は筋ジストロフィー症を遺伝，臨床，病態生理，および生化学的見地から追求し，本症の原因を究明し，治療法の開発を日ぎすものであります。
本研究班では，仝班員がこれまでの各自の研究実績をふまえ，そこに幾つかの新しいアイデアを加え，研究の推進をはかりました結果，すでに，国際的な水準の研究発表がなされました。本年度の研究報告書は，その研究成果にその後のものを加えて完成を得たものであります。これは，本研究姓の旺員，並びに共同研究者各位の絶大な努力に負うものであり，班長として心からの敬意を表します。
筋ジストロフィー症の病因の究明と治療法の開発を目ぎして，今後も不断の研究を続ける事は社会的にも，学問的にも私達に課せられ．た義務であり，その責任の重大さを痛感致しております。￣
昭和54年3月〈班長〉 三 好 和 夫

一3−

目

次

分 担 研 究 報 告Ⅰ．筋ジストロフィーチキン，マウスの研究

13a）筋ジストロフィーチキン

15b）筋ジストロフィーマウス

49

Ⅱ．筋ジストロフィー症の遺伝・臨床と病態生理

63

a）遺伝

65

b）臨床

76

c）形 態

97

d）生

理

134

e）赤血球など

151f）生化・治療175

昭和53年度研究班機構図及名簿

205

5

究

分

担

研

報

目

次

Ⅰ．筋ジストロフィーチキン，マウスの研究

1）ジストロフィーチキンの筋病理及びこれに対する食餌の影響
東邦大学医学部第四内科

木下2）筋ジストロフィーチキンの発達過程に於ける形態学的観察
九州大学医学部脳研神経内科
黒 岩

15

真

男
21

義五郎

3）筋ジストロフィーチキン骨格筋の再生反応

25

鳥取大学医学部脳幹性疾患研究施設脳神経病理部門 中

村

晴

臣

4）筋ジストロフィー鶏の骨格筋スキンドファイバー
国立武蔵療養所神経センター

30

高

木

5）筋ジストロフィーチキンの赤血球，栓球の細胞化学的研究
都立府中病院神経内科
宇尾野

昭

夫
34

公 義

6）筋ジストロフィーチキンに対するproteaseinhibitor（E−64）の効果−形態学的側面−，及び筋ジストロフィーチキン

骨格筋の組織化学的特徴

40

国立武蔵療養所神経センター疾病研究第一部

埜

中

征

哉

7）筋ジストロフィーチキンに対するprotease inhibitor（E−64）の効果−生化学的側面

45

東京大学医学部脳研神経内科

杉

田

秀

夫

下

真

男

8）ジストロフィーマウスに対するgrowth hormoneの効果
東邦大学医学部第四内科

木499）筋ジストロフィー動物モデルにおける神経成長促進因子の研究

52（Ⅰ）筋ジストロフィーマウスの頸部交感神経節細胞構築の定量的解析（Ⅱ）筋ジストロフィーマウスにおける頸部交感神経節への神経成長促
進因子の効果京都大学医学部第二内科

井

村

裕

夫

10）筋ジストロフィーマウス筋肉中の神経成長促進因子様
免疫交叉性物質レベル
京都大学薬学部生物化学講座

9

58

林

恭

三

23）福山型先天性筋ジストロフィー症の大脳皮質病理

117−verrucose dysplasiaにおける血管構築学的研究−
東京大学医学部脳研神経内科

豊

倉

康

夫

24）Central coreに関する筋病理学的研究

119−臨床例とtenotomyの実験から−
鹿児島大学医学部第三内科

納

光

弘

25）実験的ガングリオシッド・ミオパチーの電子顕微鏡的研究
順天堂大学医学部脳神経内科

佐

125

藤

猛

26）筋肉内ウイルス様粒子の細胞化学的研究
新潟大学脳研究所神経内科

129

福

原

信

義

27）筋ジストロフィー症の単一筋線維筋電図
国立療養所宇多野病院神経内科

134

西

谷

裕

28）ミオトニーの発生機序に関する電気生理学的研究

139−微小電極法による実験的ミオトニー−

宮崎医科大学第三内科

栗

原

照

幸

29）セロトニンと神経筋に関する生理学的研究
長崎大学医学部第一内科

145

高

守

正

治

30）筋ジストロフィー症の細胞膜の物理化学的研究Ⅰ
赤血球の形態国立武蔵療養所神経センター

151

吉

田

瑞

子
155

31）Duchenne dystrophyの赤血球膜におけるK＋動態
名古屋大学医学部第一内科

飯

田

光

男

32）デュシェンヌ型進行性筋ジストロフィー症における赤血球膜カルシウム・フラックス
信州大学医学部第三内科

157

庄

司

進

一

33）赤血球膜Ca−ATPase活性と筋ジストロフィー症
愛媛大学保健管理センター

160

植

田

啓

嗣

馬

渡

志

郎

34）Duchenne型筋ジストロフィー症の赤血球ATP
九州工業大学保健管理センター

16335）デュシャンヌ型ジストロフィー症保因者の赤血球アデニレート

サイクレース活性及び測定における新しい試み
神戸大学医学部第三内科

166

高

橋

桂

一

垂

井

清一郎

36）Myotonic dystrophyにおけるリンパ球異常について
大阪大学医学部第二内科
10169

Ⅱ．筋ジストロフィー症の遺伝・臨床と病態生理
11）Facioscapulohumeral syndrome：The non‑hereditary variety
日赤医療センター神経内科
古 川 哲 雄6512）筋萎縮性疾患の遺伝分析

68−クーゲルベルグベランダー病（KW病）について−
鹿児島大学医学部衛生

古

庄

敏

行

13）先天性ネマリンミオパチーの遺伝機構補遺
新潟大学脳研究所神経内科

72

近藤

喜代太郎

14）Duchenne型筋ジストロフィー症の母子発症例
筑波大学臨床医学系神経内科

76

中

西

塚

越

孝

雄

15）自覚症状を欠き，1例にパーキンソン病を合併した
大腿四頭筋障害を主とするミオパチーの同胞例
信州大学医学部第三内科

80廣16）先天性筋ジストロフィー症の成因に関する研究−2症例の検討−東邦大学医学部第四内科

86

木

下

真

男

17）成長障害，骨変形を伴った筋緊張症の1例

91−特に，その筋生検所見について−
大阪医科大学第一内科

茂

在

敏

司

18）筋ジストロフィー症諸病型における筋病変の特徴について
虎の門病院神経内科

田

97

辺

等

19）諸種神経筋疾患の筋病変におけるfiber type異常と
motor unit内局在病態との関連について
虎の門病院神経内科

102

田

辺

等

20）筋ジストロフィー症と鑑別困難な慢性多発性筋炎に関する検討
虎の門病院神経内科

田

108

辺

等

21）Duchenne型進行性筋ジストロフィー症（DMD）における横細管系（T‑system）の研究−高圧電子顕微鏡による観察−111

信州大学医学部第三内科

小

口

喜三夫

荒

木

淑

22）各種筋疾患におけるFreeze‑fracture法による
筋細胞膜の形態学的研究
宮崎医科大学第三内科

11

115

郎

37）筋ジストロフィー症におけるクレアチン代謝
徳島大学医学部第一内科

175

三

好

38）Duchenne型筋ジストロフィー症におけるカルニチン代謝
九州大学医学部脳研神経内科
黒 岩

和

夫
178

義五郎

39）Duchenne型進行性筋ジストロフィー症におけるcyclic nucleotidesの動態について
大阪医科大学第一内科

180

茂

在

敏

司

40）筋ジストロフィー症における筋膜脂質に関する研究

186−筋ジストロフィー鶏の筋ガングリオシドについて−
自治医科大学神経内科

宮

武

正

41）組織肥満細胞セリンプロテアーゼのインヒビターについて
徳島大学医学部附属酵素研究施設酵素化学部門

真

189

田

幸

弘

42）血清Mbを指標とする筋の筋弛緩剤に対する人ミオパチー筋感受性．
Isolated methodによる事前チェックの試み
徳島大学医学部第一内科

192

川

井

尚

臣

43）ネマリンミオパチーとその類縁疾患に認めた
トリプトファン代謝異常
徳島大学医学部第一内科

196

八木田 正 聖44）蛋白同化作用を有する膵エキスの精製とそれによる筋ジストロフィー症の成因・治療に関する研究
長崎大学医学部第一内科

12

201

高

岡

善

人

Ⅰ．筋ジストロフィーチキン，マウスの研究
a）筋ジストロフィーチキン
b）筋ジストロフィーマウス

1）ジストロフィーチキンの筋病理及びこれ．に対する食餌の影響

木

研究協力者

石

下

塚

真

洋

1：ジストロフィーチキンの筋病理

男

子

亀

井

敦

行

伴う所見と，その他，小円形細胞，線維芽細

我々は，ジストロフィーチキンの筋の病理

胞などの細胞浸潤が認められた．これらの変変化が，どの時期から始まるか，前回にひきつづき経時的に追求してみたが，以下のよう化は胸筋，排腸筋，両方に認められた．その後，これらの変化は漸次消失し，卵字化直後にな結果であった．

なると筋線経は密に配列し，筋核も大部分が周辺部に移動する．対照動物においては，軽対象及び方法度の大小不同がみられるのに対し，ジストロ

対象として，実中研からジストロフィーチ

フィーでは部分的にfloccularchangeが認め

キンの弊卵の分与を受け，印字化させ，胸筋，俳腸筋の変化を観察した．観察には光顕を用られ，またGomori−trichrome変法で赤染する，いわゆるraggedredaberに近い所見もみ

いて，卵軍卵前期から後期にかけてと，将化直られる．また，我々の経験した醇化直前のジ後，2週目，3週目，4か月，15か月後の筋について行った．

筋組織が脂肪組織に置換されていた．卵字化後ストロフィーチキンの一例では，下月支全体の2週目になると，ジストロフィーの筋線経の結

大小不同は更に強くなり，大径線経が多くな

果る．この変化は胸筋でもっとも著明であった．

卵芋卵前半期では，ジストロフィーチキンと対照との間に，明らかな筋病理所見の相違は

また，筋線維肥大とともに，angulatedfiber，

見られず，卯字卵11日日から14日日頃には両raggedredfiber，部分的な変性所見も認めら者共に，筋線維構造の変化と相月包浸潤が出現れた．PAS染色では，筋線経は3種類に分別する．しかし，卵芋卵17日目になる．と，ジストされ，ところどころの筋線経に筋構築の変化

ロフィー，対照動物，両者に差がでてくる．

と，小径線経のgroupingが認められた．対照

すなわち，対照動物においては印字卵前半期に動物では，ジストロフィーに比較して変化はみられた，筋構造の変化と細胞浸潤は消失し，軽度であった．卵字化後3週目では，2週日の正常構造の線経が大多数を占め，筋核は筋線変化が更に著明となる．また，即事化後3週目

経の周辺部に移動しているものが多く，myO−

におけるジストロフィーチキンの胸筋の，銀tube期のものはジストロフィーに比較して染色によるときほぐし標本では，筋線経に節少なかった．これに対しジストロフィーチキ

性の変性所見が認められた．印字化後4か月でンではnoccular chargeにphagocytosisを

は，肥大線経は更に大きくなり，中心核の増加，筋線経の断裂が著しく，その他，筋線維＊東邦大学医学部第四内科

大小不同，raggedred丘ber，小径線経のgrOup−
−15−

図1

即事化直後ジストロフィーチキン
Gomori−trichrome染色×600

図2

媚化後2週目ジストロフィーチキン胸筋
PAS染色×300
−16−

図3

階化後2週目コントロールチキン胸筋
Gomori−trichrome染色×300

図4

媚化後3週目ジストロフィーチキン胸筋
銀染色×200−17一

図5

楷化後4か月ジストロフィーチキン胸筋
Gomori−trichrome染色×150

図6

印字化後15か月ジストロフィーチキン胸筋
Gomori−trichrome染色×150−18−ingも同様に認められた．しかし以後は．比較的緩徐に経過し，15か月たっても基本的に実験食1‥日生研の飼料与と小麦胚芽与を混はあまり著しい相違はみられなかった．
2：ジストロフィーチキンの病態に対する食実験食2‥日生研の飼料与と小麦胚芽与を混合したもの．

餌の影響の2種類を使用した．

ジストロフィーチキンは，臨床的には酵化
後2週目前後に，仰臥位より立位への姿勢変結果換不能として気付かれるが，筋形態学的変化

実験食群では1，2とも普通食群に比較しも同様に，2過日に胸筋の肥大線経を伴った，て，体重増加は少なかったが，運動機能は比

大小不同が著明となった．これらの筋変化に較的良く保たれ，将化後7週目に施行した，食餌が何らかの影響を及ぼすかどうかを確か

仰臥位より立位への姿勢変換運動の10回のめ，治療としての可能性の有無を知るため，
以下の実験を行った．

試験においては，同年齢群，及び伺体重群に比較して，どちらに対しても，より良好な機能を示した（図7）．実験食の大まかな内容は対象及び方法

表1の通りであるが，ジストロフィーチキン

ジストロフィーチキンの酵化後，直ちに実においては，食餌による治療は必ずしも不可験食を与え，従来の食餌によるジストロフィ能ではないとの印象を得た．

ーチキンの発症状態と比較検討した．

numberofsuccessin

Muscularfunctionandbodyweightindystrophicchickens

risingoffanatsurface
whenlaidontheirbacks●fedwithordinaryfood
O fedwithexperimentalfoodl
O fedwithexperimentalfood2

●

○

●●

bodyweight
1000g

図7 実験飼料動物の運動機能−19−表1 実験飼料内容A：o rd ina ry fo od

B ：w h eat g erm（
p er lO Og of d iet）
Cru d e p rote in

20．
48 （
％）

32 ．13cru de fat

3．
19

9．
75

C ru d e fi b er

3．
03

3 ．15

cru de a sh

6．
88

4・
63

v itam in E

30．
00 （
m g）

57 ．
78

n ic otin ic ac id

39．
09

34 ．
47

V it．B ，p a ntOth ena tevi t．B ，p a n tOth en a tefo lic acid ，d ex trin

experimentalfoodl：Al／2＋Bl／2
experimentalfood2：Al／3＋B2／3

考ミンB群を多量に含み，かつ摂取，入手し易按

ジストロフィーチキンを食餌によって治療

い小麦胚芽を選んだ．一応は，実験食群の方しようという試みは，これまでにもあり，Pe−が良好な結果を得たが，問題は実験食群の体

tersonらは高蛋白飼料を用いて，胸筋の脂肪重が，いずれも同年齢の対照群に比較して小含有量の減少をみたという発表をし，また，ない点である．この点はどう考えていいか不Tureenらは，抗オキンタかント剤と含硫アミ明であり，あるいは動物の嗜好に関係がある

ノ酸欠乏食を，ジストロフィー，対照動物，
両者に与え，ジストロフィーでは症状は著しのか，または供給の面に問題があるのか，今後検討の必要がある．運動機能がよく残存しく増悪し，また対照動物でも筋萎縮症状を発ていたのは，あるいは体重の差のためかも知現したと報告し，それらの血中蛋自分画を測れないが，対照動物で同じ位の体重のもの（こ定し比較している．Tappelらも，ビタミンE

れらの年齢は実験群より若い）に比較してもの，不飽和月旨肪酸の抗酸化作用に着目し，反機能は良好であるので，今後，充分な数で慎すう動物の筋萎縮症にビタミンEが有効で重に判定する価値のある方法と考える．今回
は，動物の機能が良好であったので，筋の病あると報告している．

理検索は見合わせて，更に観察を続けること

今回の実験食には，自然界の中でもっともにした．

多くビタミンEを含有し，その他に蛋白や，
TCAサイクルでのATP生成に必要なピタ

一20−2）筋ジストロフィーチキンの発達過程に於ける形態学的観察

黒

研究協力者

石

目

本

進

岩

義五郎

士

後

的

幾

生

長

柄

のhighDPNH diaphorase丘berの百分率をDystrophy chicken筋のdystrophic pro−cessはWhitefiberに於てよ

藤

経時的に示した．又，ふ化後，1日目，1週

り著明で，red

目，2週目，3週目の時期のDPNH forma−

丘berでは少ないと報告されている1）．しかし

Zan deposits数を，ALD筋，PLD筋につい発達過程のどの時期よりdystrophic processて，ほぼ同一のfiberdiameterに対応して数がいかに発現するかの形態学的検討は未だ充え，その数を，dotでfiberdiameter毎に図に表示した．

分とは言えない．従って私達は，dystrophic
Chicken筋の発達過程におけるdystrophic
processの発生について検討を加えた．

結果1）Morphometry
方法WhitefiberであるPLD筋は，ふ化後2週

動物はdystrophicchicken（Iine413）及

日迄は，COntrOl筋と著明な差はみられなか

びCOntrOIchicken（1ine412）を用い，ふ化

ったが，ふ化後3週目になると，dystrophy筋

後，1日日，1週目，2週日，3週目，5週において，fibersizedistributionが広くなり，目，8週日にエーテル麻酔下にて頸動脈切断，

COntrOl筋と比し，径の大きい線経の増加が脱血し，redfiberである前広背筋（ALD）と認められる様になった（図1）．さらに，5週Whitefiberである後広背筋（PLD）の凍結標本を作製した．染色は，HE，DPNHdiapho−rase，SDH，MDH，phosphorylase，aCetyl−

PLD筋標本から筋線維径100本ずつを計測

刀

し，グラフを作製した．DPNHdiaphorase標のphychicken，COntrOIchickenのALD筋，調

metryは，ふ化後，1日目から8週目迄のHE
染色標本を使用した．各々の時期のdystro−〜Jむqこ〇一USコ∈−0卓

Cholineesterase染色等を行なった．morphoT

本では，ふ化後，1週目，2週目，3週日，
5週目，8週目の時期のdystrophychicken，
10

COntrOI chicken2匹ずつを使用し，PLD筋＊九州大学医学部脳研神経内科

図1
ー21−

20

刃
40
Iiberdiameter

50

60W

Sizedistribution of musclefibers

染まるlowDPNHfiberが音昆在する（図2）．

目，8週目になると，dystrophy筋のfiber
sizeの広がりは，より著明にみられた．redfi−

その内high DPNHfiberの全体に対する割

berであるALD筋では，ふ化後8週目におい合を経時的にみると，ふ化後，1週目は，dys−て，ややabersizeのdistributionに差かみとtrophy筋，COntrOl筋共に約30％で差異はめられる程度で，ふ化後初期には，差はみと認めないが，COntrOl筋では，high DPNH

められなかった．

丘berは，以後しだいに減少し，8週目で約52）high DPNH diaphorasefiberの占める％になるのに反して，dystrophy筋では約20割合（経時的推移）％を維持し著明な減少はみられなかった（図3）．又ALD筋は，dystrophy筋，COntrOl筋

PLD筋のDPNH diaphorase染色に於て共に，これらの時期においては全てhighは，こく染まるhighDPNHfiberと，うすく

図2

DPNHdiaphorase染色×268

SL警≡山一USコ∈−○辞dystrophyト一一一

PLD

40

COntrOl

三一

ll

1 ト ー

ー

●−

−L
、 一・t■

20−

0
1

2

3

weeksaRerhatch

図3

PercentageofhighDPNHdiaphorasefibers−22−lweekafter hatch

ldayafterhatch

40

40刃2010棉︻ノ

0

Sl芯已g U巴這∈Le−O J苫∈コU

刃 祁 10Sl芯邑名∪円空﹂0 2心q∈⊃∪10

15

fiber diameter
10

20

15

25い）

fiber diameter

図4

Numberofformazandeposits（NADHdiaphorase）

3weeksafterhatch

四
m
m
60

5−竜宮∪記2LOこEuq∈⊃U

棚
卸

5

20

図5

万

刃

労（▲‖ 刃Ii鵬r diameter

方40

Number offormazandeposits（NADHdiaphorase）−23−

451111DPNH fiberで占められ，差異はみとめられなかった．

dystrophic processはembryoから持続して

3）DPNHdiaphoraseformazandeposits数

いるのか，ふ化後のものかの検討は充分でなの経時的推移い．今回，DPNH formazan depositsの数い事から，同じ結論が考えられた．しかし

ふ化後，1日目は，PLD筋のlow DPNHを計測した結果から，ふ化後1日目は正常だ

fiberで，ほぼ同じfiberdiameterあたりの筋
線維1本あたりのformaZan deposits数にが，少なくともふ化後1週目迄の問には，変化があり，dystrophic processの発現はem−

は，COntrOl，dystrophy筋の間に差をみとめ

bryoの時期からではない可能性が考えられないが，ふ化後1週目より，dystrophy筋におた．dystrophic processの発現機序に関していて，その数がやや増加する傾向がみられ（図4），以後2週目，3週目には差異がより明らは，DPNHdiaphoraseの局在は主に，mito−
Chondtiaである事（他sarcotubularsystem）

かとなった（図5）．一方，ALD筋においてより，mitochondriaの何らかの早期の異常がは，ふ化後，1日日より，PLD筋とくらべる

dystrophic processに関与している事が考えと，COntrOl，dystrophy筋共にその数は多いられる．PLD筋におけるhigh DPNHfiber

が，ALD筋のみについては，dystrophy，COn−の高い割合の持続，及びlowDPNHfiberにtrol筋には差は認められなかった．又PLD筋

おけるDPNH formazan depositsの数の増においては，個々のformazande．posits数の加とdystrophic processの関係は明らかではない．

増加以外にも，dystrophy筋では，個々のformazan depositは，1週日以後やや不明
瞭となり，筋線維中の配列も不規則となる傾向がみとめられた．

文献1）Holliday，T．A．，Julian，L M．，＆As−
mundson，V．S∴Musclegrowthinsele−

考察I）ystrophy chickenでは，White

Ctedlines ofmuscular dystrophic chi−fiberはCkens．Anat．Rec．，160：207−216，1968．

redfiberより，筋変性の程度が強く，早期より変化が生じるといわれている1）．又ChickenのCOntrOl筋では，embryo時は，SDH活性2）Cosmos，E．：Enzymaticactivityofdif−
ferentiating muscle

fibers．Develop．

Biolリ13：163−181，1966．

等の0Ⅹidative enzyme活性が高く，生後，3）Cosmos，E．＆Butler，J．：Differentiation

maturationと共に，しだいに減少するのに反Offibertypesinmuscleofnormaland

して，dystrophy筋では，SDH活性が高いま

dystrophicchickens．Exploratorycon−

ま持続する傾向があり2）3），maturationarrest

CeptS

in

muscular dystrophy and re−が示唆されている4）．今回のmorphometryの1ated disorders．ed．A．T．Milhorat，

結果からはWhitefiberであるPLD筋は3ExcerptaMediaFoundation．197−204，

週目以後に丘ber size distributionが増した

1967．

のに反して，red丘berのALD筋にはあまり差

4）Ashmore，C．R．，＆Doerr，L∴0Xidativeを認めず，早期よりwhitefiberに変化が生じ

metabolismin skeletal muscle of nor・やすい事を認めた．又maturationの異常に

malanddystrophicchickens．Biochem．

関しては，dystrophy筋のPLD筋でhighMed．，4：246−259，1970．

DPNH diaphorasefiberがあまり減少しなー24−3）筋ジストロフィーチキン骨格筋の再生反応

研究協力者

中

村

晴

田

孝

男

頼

臣

今

岡

健

次

進行性筋ジストロフィー症では，筋線経の再生能が問題とされているが，生後約5週目

1．SC核数と筋鞘核数のdystrophychickenにおいても，筋線経の筋線維100本当りのSC核数と筋斡核数は再生を示唆する所見が認められることを報告

結果した（中村ほか，1978）4）．その根拠は，好塩表1の如くで，その平均値の変化を図1に示した．先ずSCについてみると，対照チキンで基性筋線経の出現，衛星細胞（SC）の増加及は，生後5日目以降，いずれも平均値は10以

びその筋細胞への分化などがみられたことで下で，かつ相互の問に有意差はなく，ほぼ一ある．本報告においては，SCの経時的変化に定の値を示している．これに反し，Dyチキン

注目し，ジストロフィー筋の再生を検討した．

では19日日以降，いずれも対照群に比し有意方法

Dystrophychicken（line413）（以下Dyチキン）及び対照チキン（line412）夫々18羽を酸緩衝液加2．5％glutaraldehyde（pH7．3）でKarnovski法）を加えたのち，型の如くEpon
包埋超薄切片を作り，酢酸ウラニール，鉛塩の二重染色を施して，電顔的検索に供した．

仰固定した．その後，四酸化オスミウムによる再国定，あるいは1anthanum染色（Revel−ヱUSコ∈ 001 し邑 ≡U⊃U−O L；ム∈⊃N

胸筋を摘出し，擦りガラス板に貼付して，燐

知

化後5日目から40日日まで，7日間隔にて浅二三使用した．いずれも3羽ずつ6群に分け、将50

SC核数および筋鞘核数の算定にあたっては，横断切片を低倍率電顕にて観察し，各動物ごとに約200本の筋線経について，これに
〜

12

19

26

33

40

関与しているSC核数と筋鞘核数とを数え，
D叫 がter bi†lh

筋線維100本当りの核数に換算し，各群3匹ずつについての平均値と標準偏差を求めた．

図l Changesofmeanvaluesofsatellite
cellnuclei（SN），truemuSClenuclei

各群相互の比較にはt−teStを用いて検討した．

（MN）andofthetotalnumber（TN）indystrophicchickens（Dy）
andcontroIs（C）＊鳥取大学医学部脳幹性疾患研究施設脳神経病理部門ー25−

表l Numberofnucleicountedwithinthebasementmembraneofdeveloping
Superficialpectoralismuscle．Valuesaremean±S．D．
NumberofnucleiperlOOcrosscutmusclefibers
after Totalnuclei SatelLitecellnuclei Ntusclenuclei
birth
C

Dy

C

弓

46．2±9．4

63．5±10．2

9．6±3．8

15．0±6．2

36．6±5．6

48．5±

12

56．1±11．8

119．7±

6，㌢尊さホ4．4±1．1

18．9±6．4

51．7±10．7

100．8±3．9〉壌

19

58．0士8．6

158．1±13．4細さ；：16．1±2．2

21．3±2．8・＝か＊

51．9士7．9

136．8±12．4㍍番卒

26

71．2士6．8

176．7±30．8：ミ

6，3±0．1

25．9±7．㌢

餌．9±6．7

150．8±22．㍗＊

33

87．7士6．1

199．5±32．6串

8．2±1．1

41．1±7．㍗串

79．5±5．0

158．4±39．94087．5士9．6

212．1±36．5台

8．5±1．630．7±4．1掴＊

79．0士8．1

181．4±33．伊

O P＜0．05

粥P＜0．025

Dy…P＜0．01

C

Dy

5．1

州掴Pく0．005

表2 Rateofsatellitecellpertotalnuclei，（％）
Day

Dystrophy

5

20．3士4．0

23．1士6．512

7．8±0．6

15．6士4．7

19

10．5土3．8

13．5士1．726

8．9士0．9

14．4士1．ケ

33

9．3士0．6

21．4士7．2

40

9．7士1．0

14．6士1．㌢●

空室U⊃u一円ちこ邑≡U茎二言SControl

5

12

19

26

】】

40

Daya代erbirth

図2 Satellitecellpopulationintotal
nucleiissignificantlyhighin

Valuesaremean士S．D．●Pくp．05．日P＜0．佗5

dystrophicchickens−at26and40daysの増加を示し，その平均値も20以上となる．

afterbirth．

次に，全細胞数に対するSCの占める割合を求めると，表2及び図2の如くである．即い．他方，Dyチキンに於ては，生後5日目でち，対照チキンでは生後5日目にはSCが約

はSCの割合が約23％で，対照との問に差は20％を占めるが，その後急速に減少し，26日ない．その後SCの割合は低下するとはいえ，日以後は，SCの占める割合は，いずれも平均

常に10％以上の値を示し，特に26日日及び値が10％以下で，かつその変動も極めて少な

40日目の値（夫々14．4±1．9％，14．6±1．5
ー26−％）は，対照チキンにおける値に比し，高値

かしDy群では細胞々休が仲人し，＝1il川・1−川1−を示した（夫々p＜0．05，p＜0．025）．

dria，pOlysome，粗面小胞休左tV欄It／ト：そ：：：ilて；筋鞘核数の変動をみると，対照群では5日が増加し，核の円形化やChrom；lli−l：ノ，L：）、川川1目以降，次第に増加の傾向を示すが，33日，
40日目でほぼplateauに達す．Dy群におい考えられるものが少なからずみられる．t一日＼l■ては対照群よりもはるかに著しい増加傾向が01aeの増加，横管系の出現などが刈日出二′一‥，

みられ，．12日目以降は，33日員を除き，いず

れる・SCや，同一基底膜内にparent fil）t・rl

れも対照群に比し，有意の増加がみられ・た．

共に数個連続してみられるSCの存在（図4）

また，19日日以後の値はいずれも100以上では，myOtube形成へ向う分化の方向を示すL＞

を伴い，aCtiveなSC，あるいはmy

仙駆1t

あり，横断面において多核を示す筋線経の存のと考えられる．また，同一基底持莫内にpare−

在が明らかである．

ntfiber，少数の小径線経，myOblastなどがSC核数と筋鞘核数の和も，12日目以降，同居する状態（図5）は，筋線推形成への過程を示唆するものである．myoblast，あるいDy群で明らかに増加している．
2．SCの形態的変化
分裂像を呈すSCは，生後5日目では，Dy

はmyotubeの一部と考えられる胞体内には，群にも対照群にも少なからず認められる．しれるのであるが，多くの胞体では整然と配列

かし33日目以降では，分裂像は対照群で認めしたmyofilamentsがみられ，その走向の乱

られなくなるが，Dy群ではなお少なからずれたものは，極めて少数に過ぎない．また明みられた（図3）．一般に33日日以降の対照

らかに変性に陥ったと考えられるSCは見出

群SCは，紡錘形を呈して細胞質に乏しく，静しえなかった．

多かれ少なかれmyo頁lamentの束が認めら止状態にあるSCの形をとることが多い．し

図3以上述べたような増殖と分化を示すSC

Asatellitecellinmitosis・40−day−01ddystrophicchicken・×10，000L
図4

Threeactivatedsatellitecellsengulfeachothertheircytoplasm・33−day−01ddystrophicchicken・LanthanumStain x1，700−27−

図5 Anactivatedsatellitecell（SC），myOtube（My）andsmallfiber（Sf）arebeneaththesamebasementmembrane（arrows）ofaparentfiber（Pf）．407
dayTOlddystrophicchicken．×19，000は，大小の空胞をもつ変性筋線経や，変性萎

基底膜内にみられる全細胞数との割合をもっ縮に陥った筋線経に接し，それらと同一の基底膜の内に存在する．しかし，それよりも頻て論じられている．正常動物では出生時，SCは全細胞数の約1／3を占めているが，その後回にみられる部位は，正常とみなされる筋線

比較的速やかに減少して，成熟動物の割合に経の基底膜下である．即ちactivateされた

達するといわれる（Carlson，1973）1）．成熟動

SCは，必ずしも変性筋線経に接して出現するわけではない．

物のSCは，種を問わず，基底膜内の全細胞数の5〜10％を占めるとされる．今回の検索において，対照チキンでえられたSCの割合が，考察

26日以降約8〜9％であったことは，本検索結果にかなりの確実性を与えるものと解されよ

SCを筋鞠核から区別するには，電顕的検索が不可欠であるため，縦断した筋線経におう．DyチキンでSCの割合が，26日以後もな
お全細胞数の約14％を占め，対照チキンよりいて，一定単位あたりのSCの数を計測する
ことは，大変に困難である3）．そのため，筋横断面において，SC数を算定せざるをえない．

高値を示したことは，DyチキンのSCが，高率に分裂，増殖を続けているものと考えられ今回得られた結果からすれば，筋線維100本

る．SCの分裂像が，33日以降もDyチキンに当りのSC数は，Dyチキンで明らかに増加し認められたことは，SC数算定結果を支持す
るものといえよう．

ていると言えよう．一般にSC数に関しては，−28一形態学的にみて明らかに代謝の克進を示す

殖，myOblastやmyotubeの形成は，Dyチキ

SCをactivated SCと総称すれば，それはンの筋病変を特徴づけるものの一つである．

myoblastにほぼ一致するものであろう．勿類似の変化はdystrophy mouseにも見出さ

論，SCの定義はmyofilamentをもたぬことれるもので（Summers＆Parsons，1978）5），であろうが，myOblastにみられるmyofila−筋dystrophyに特有な再生反応というべきものと考えられる．

mentsは必ずしも多くはなく，このmyofila−
mentsが明確になるのは，myOtube形成後であるとされる（Carlson，1973）l）．今回観察さ結論

れたactivated SCないしmyoblastの態度

Dyチキンの浅胸筋電顕像を，生後5日かは，Dyチキンでも正常の分化を示している
ものと思われるし，myOtubeや小径線推内にら40日に亘って経時的に検討し，対照と比較みられたmyo丘1amentsは，大部分のもので星細胞の増殖と分化が活発であり，そのmy−ほぼ正常の配列を示していた．このことは，Otube形成までの分化過程は，ほぼ正常筋とDyチキンにおいて，myOtube形成までの分同様である・2）かかる衛星細胞の反応は，
変性筋線経の出現部とは無関係に広範囲に認化過程がほぼ正常に進行するものと考えられ
る．神経原性因子が関与しているdystrophy
mouseにおいては，myOfilamentsの走行異した結果は，1）生後40日日においても，衛められ，筋ジストロフィーに特有な再生反応と思われる．

常が約50％のmyotubeで認められている（SummPrS＆Parsons，1978）5）．この所見は，
Dyチキンがdystrophymouseと異る点の一
つである．

文

献

1）Carlson，B．M．：The regeneration of
Skeletalmuscle−areview．Am．J．

横紋筋の発育において重要なことは，その線維数が出生時あるいはその直後において決定されており，その後の筋重量増加の85％は筋線経の肥大による（Enesco＆Puddy，1964）2）．これに関与するものの一つは，SCの増Anat．，137：119，1973．
2）Enesco，M．＆Puddy，D．：Increasein
the number of nuclei and weightin
Skeletalmuscleofratsofvariousages．
ibid，114：235，1964．

殖，分化，myOtube形成，筋線経へのゆ合で

3）Moss，F．P．＆Leblond，C．P．：Sate1−

あり，他は筋線維内での蛋白合成，月包体小器

1ite cells as the source of nuclei

管の増加であろう．対照チキンにみる如く，SCの増殖と分化は，生後約4〜5週で不活

musclesofgrowingrats，Anat．Rec．，

in

170：421，1971．

発となるが，Dyチキンでは，なお活発なSC

4）中村晴臣，頼田孝男，今岡健次，埜中征の増殖，分化が認められる．SCが増加してい哉：ジストロフィーチキン骨格筋の経時るだけでなく，筋鞘核数も対照に比し著しく的変化．厚生省筋ジストロフィー症研究増加していることは，aCtivatedSCが絶えず

班昭和52年度報告書，1978，p．95．

ゆ合して，筋線経の多核化と肥大が進行して5）Summers，P．J．＆Parsons，R．：UltraTいるものと考えられる．通常の傷害筋にみら

StruCturalevidenceof

れる筋再生では，壊死に陥った筋線経の基底

abortiverege−

nerationin murine muscular dystro−

膜の内側でSCが増殖し，myOtube形成が生

phy・J・Neurol．Sci．，39：295，1978．

ずる．Dyチキンでも，かかる通常の筋再生像はみられるが，そのほかに，形態的に正常とおもわれる筋線経に接してみられるSCの増−29−4）筋ジストロフィー鶏の骨格筋スキンドファイバー

高

木

昭

夫

積当りの最大張力は，昨年に引続き，筋ジストロフィー鶏の骨格

対照（n＝21）1．4±0，2■kg／cm2筋よりスキンドファイバー標本を作製し，筋細胞の機能を分析した．ジストロフィー筋の（分布0．7−3．2）

収縮系や筋小胞体の性質が対照と異なるか否

筋ジス（n＝21）1．1±0．2■kg／cm2

かを重点的に検討した．昨年度は（1）ジストロ（分布0．4〜3．2）（平均・±標準誤差，p＞0．1）

フィー筋の収縮系のカルシウムイオン（Ca2十）による活性化には異常はみとめられない，であり，両者間に有意の差はみとめない．一（2）筋小胞体のCa摂取容量は正常である，の部の実験では，クレアチン燐酸とクレアチン

2点を明確にした．しかしジストロフィー筋

キナーゼのATP再生系を添加して張力を測が，単位断面積当り，正常一な張力を発生しう定した．しかし添加された一価イオンのためかむしろ張力は低値を呈した．

るかどうかに関しては結論を保留した1）．

（2）Ca2＋摂取速度．自筋の筋小胞体は外液の方法

生後12ケ月以上の成鶏（筋ジス：1ine413，

qq−uPtQke（in pCq6．5）
1．0

対照：1ine412）の主として後広背筋（￣pLD）
から，一部は浅大胸筋からSingle skinned
fiberを作製した．帝大張力（Po）の測定には，
サポニン2）あるいはEGTA3）で処理した化学的スキンドファイバーを使用した．single
fiberの断面積の測定は，Blinksの理論に基づき4），筋線経を静止長の1．5−2倍に伸長して筋径を計測して概算した．筋小胞体からのCa
濾出の測定には，meChanicallyskinnedfiberを使用した．測定法は図2に示してある．実験法の詳細や溶液組成は既法の．如くである5）6）．

1

結

果

（1）Ca2十による最大張力．張力を測定したSi−

2

3

4

mln

図1スキンドファイバーを3×10￣7MCa2十を

nglefiberの直径は対照では50−110JLm，筋含む溶液に0．25−4分間接触させ，Ca
摂取量をその後めカフェイン拘縞の大きさから測定した．10−6MCa2＋のもとで2分間に摂取するCa量を1．0としてある．Ca摂取の時間経過は筋ジス（●）と対照（○）の間に差はない．

ジスでは70−125JJmに分布していた．直径100／∠m以上の筋線経は対照群には4本，筋
ジスには12本あった．20℃における単位断面＊国立武蔵療養所神経センター−30−

Ca2＋が10￣7M以上となるとCa摂取を行う．

CQ−loss（％）

3×10￣7MCa2十（pCa6．5）の含む溶液中にてCa摂取速度を検討した（図1）．15秒から4分までのCa摂取の測定では筋ジスは有意の差を呈きない．
（3）筋小胞体よりのCa濾出．pCa6の溶液中で2分間スキンドファイバーにCaを取込ませた後，0．2mMEGTA，4mMATP等を含む溶液（G−0．2）に5分間接触させた．その間に外液中に濾出するCa量をカフェイン
拘縞の大きさから推定した（図2）．4mM
ATPを含む溶液中でのCa濾出は（図3），
筋ジス

31±4％（n＝15）対8±2％（n＝15）

照Dystrophy Controt（4rnM ATP．0．2mM EGTA）

p＜0．001．

図34mMATP，0．2mMEGTA等を含む溶液（G−0．2）中で5分間に濾出するCa量を測定した（図2参照）．筋ジスでは対照よりCa濾出は冗進していた（p＜0．
001）．

担6 6

cc†
Cq−loss（％）

〆ゝ6

人†P−0．6−．2

陶6
図2

6

Cd

G Cqt

筋小胞体よりのCa濾出の程度の測定法を図示した．まずpCa6の溶液中にて2
分間Ca摂取を行わせた後で，0．2mM
EGTA等を含む溶液（G−0．2）に5分間接触させた（中段の記録，この記録ではATPを除去してあるためrigorが発生している）．その後にカフェイン拘縞を発生させ，その拘縞の大きさを上および下段の記録と比較して，Ca濾出の程度を算出した．

Dystrophy ControI（ATP−free．0．2mMEGTA）
図4

ー31−

G−0．2よりATPを除去した溶液中にて5分間に濾出するCa量を検討した．
この場合も筋ジスにおいて有意にCa濾
出は克進していた（p＝0．05）．

は小胞体が分維操作中に変質をうけやすい．

ATPを除去した溶液中では（図4），
筋ジス

45±6％（n＝7）

対22±7％（n＝7）

照

変性あるいは壊死途上の筋線維よりの小胞体
は機能が障害されており，分離小胞体全体と

p＝0．05．

筋ジストロフィーではいずれの溶液中においしてはこの部分の影響をうけてくる．筋ジスてもCai慮出は克進していた．

の分離小胞体は純度が低く，脂肪細胞や線維芽細胞よりの膜成分を含んでいる．等の理由

考が考えられる．本研究において観察されたの案

筋ジストロフィーの骨格筋は，機能的には

は，筋小胞体よりのCa濾出の克進である．筋

筋脱力，組織学的には局所的筋細胞壊死（se−小胞体にCa2＋を負荷後，外液のEGTA濃度

gmental necrosis）や筋細胞間質の変化を特を2−10mMと上げると対照筋においても徴としている．しかしその生化学的あるいは

Ca濾出が生ずる．0．2mMあるいは2mM

生物物理的な側面に関する知見は，現時点でEGTA中でのCa濾出の程度は，筋ジスにおはきわめて乏しい．我々は，一見正常にみえいて有意に冗進している．この現象は外液るジストロフィーの筋細胞に何か共通して存中のATPを除去した場合にもみとめられ，在する異常があるのか，もし存在するとすれATPの存在の有無とは無関係である．前述

ば如何なる性格のものかに興味をもっていの如く Ca摂取速度は筋ジスにおいても正常である事実より，筋ノJ、胞体のCa保持能力

る．もちろん，スキンドファイバー法は，収縮系や小胞体の機能の解析には適切であるが，筋ジストロフィーの研究上で焦点の1つの低下を推定させるものと判断している．

である形質膜の解析には不適切である．

胞体のCa保持能力の低下の分子レベルでの最後に1−2の問題点を考察したい．筋小機序は如何なるものであろうか．分誰筋小胞

卵字化後1年以上経過した筋ジス鶏の骨格筋には高度の脂肪化と結合織の増生がある．

体をエーテルで処理した際9），あるいは実験的

Single musclefiberの作製もかなり困雉であ

ミオバナーのある種のものでは10），小胞体よる．後広背筋の方が大胸筋よりSinglefiberのりのCa濾出の克進が報告されている．又，小作製はより容易のようであった．・分析に使用

胞体内腔に存在するとされるCa結合蛋白

したSinglefiberは実体顕微鏡及び位相差顕微鏡下において明らかな損傷（例えばSpliト（calsequestrin）の異常の可能性も考慮されるであろう．小胞体膜組成の分析は今後必tingや局所的くびれ等）のない部分を選ん要と思われる．筋小胞体のCa保持能力が低だ．このように肉眼的に正常にみえる Single

下した場合には，代償的に小胞体のCa pump

丘berの機能は驚く程よく保持されているとは，余分な回転をしいられるであろう．遂にいえる．まず前報のごとくトロポニンのCa

は静止筋において細胞質のCa2＋濃度が，正常

感受性は正常の反応を示した．3×10■5Mの10￣8M附近よりは若干増加してくるかもCa2＋により発生する最大張力は対照との間にしれない．このため〃MレベルのCa2＋により有意の差を認めない．筋小胞体のCa摂取容調節される細胞内諸機能の変調をきたすであ量は，正常に保持されている．3×10▲7M
Ca2十という比較的低波度のCa中におけるろう．例えば，解糖系やアクトミオシン系の異常な活性化が生ずるかもしれない．静止時

Ca摂取速度は対照と同程度である．この事実に筋小胞体に存在するCa量に関する情報はは従来の分離小胞体による成績とは異なって正常筋においても乏しい．しかしジストロフ

いる．筋ジスの分馳小胞体のCa摂取速度やィー筋ではこのCa量が減少していることが容量は，低下ないし増加が報告されている7）8）．

予想される．単収縮の張力低下は11）このため

この差異は充分には説明されない．筋ジスでかもしれない．
−32−

この筋小胞体よりのCa濾出の冗進は，筋strength on crosssection and volume

ジス鶏の成長過程のどの時期より認められる

Ofisolatedsinglemusclefibers．J．Phy−
Siol．177：42，1965．

かを決定することが重要であり，現在検討中

5）Takagi．A．andEndo，M∴Guinea pig

である．この現象の病因論上の意義に関する

SOleusandextensordigitorumlongus：

手がかりを与えるものと期待している．

a study on singleTSkinnedfibers．Ex・

結

per．Neurol．55：95，1977．

論

生後1年以上の成鶏でスキンドファイバー

6）Takagi．A．et al：Single−Skinned huTを作製し筋ジストロフィーにみられる異常をman musclefibers：activation by cal−

分析した．実体顕微鏡や位相差顕微鏡下で正Cium●and常と見える筋線経においては，収縮系のCa

strontium，Neurology

28：

497，1978．

イオンによる活性化には異常はない．筋小胞7）Baskin，R．J．：Ultrastructure andcaL体に関しては，Ca摂取容量や摂取速度に異常はない．筋小胞体よりのCa濾出は外液のCium transportindystrophic chicken

ATPの存在の有無にかかわらず克進してい581，1970．

musclemicrosomes．Lab．Invest．23：

8）Scales，D．et al：TheinvoIvement of

た．この現象の機序や意義につき考察した．

SarCOtubularmembraneingeneticmus−

文献Cular dystrophy．Biochim．Biophys．

1）高木昭夫：筋ジストロフィー鶏の肥大筋

Acta465：535，1977．

線経．Skinnedfiber法による研究．「筋ジ9）Fiehn，W．and Hasselbach，W：The

ストロフィー症の病因の究明に関する研

effectofdiethyletheruponfunction of究」沖中王庄 昭和52年度研究報告書．p．

VeSicles of sarcoplasmic reticulum．

119．

Europ．J．Biochem．9：574，1969．

2）Endo，M．：Effects of some detergents10）Seiler，D．and Kuhn，E．：The proper・

On surface−membrane and sarcoplas−

tiesofsarcoplasmicvesiclesfromrats

micreticulum ofskeletalmuscle．F0−

With

1ia Pharmacol・Jap・72：9p，1976．

myotonia，Eur二J．Biochem．12：375，

3）Wood，D．S．et al：Human skeletal
muscle：Propertiesofthe

Skinned

20，25−diazacholesterol induced

1970．

11）Hoekman，T．B．：Isometriccontractile

chemicallyproperties of PLD muscle

fiber．Science187：1075，

innormaland genetically dystrophic chickens．

1975．

Exper．Neurol．53：729，1976．

4）Blinks，J．R．：Influence of osmoticー33−5）筋ジストロフィーチキンの赤血球，栓球の細胞化学的研究宇尾野 公 義＊
研究協力者

別

府

宏

図

西

山

文

朗

八

木

中

島

暗」

野

＊＊

寛

＊＊＊

書＊

緒

平

言

元

夫

コンカナバリンA（ConA）のPBS倍数稀

近年進行性筋ジストロフィー症（DMP）を

釈系列を作製し，これに等量の赤血球浮遊液

SyStemicmembranediseaseとしてとらえる（4×107／ml）を加え，ガラス根上で30分間，

動きがみられ，筋肉のみならず，・赤血球，血室温にて密閉，振盟後，凝集の有無を以下の小板にも共通した膜の異常があり，これによ規準により判定した．既ち，（．H＋）：粗大な凝って疾患が成立すると言う観点から多くの報集塊の形成を見るもの，（十十）：肉眼的に明ら告がなされている1）2）3）．また，このような観点

かな凝集形成を見るもの，（＋）：実体顕微鏡

は，その疾患モデルとされるジストロフィー

下にて凝集形成の明らかなもの，（−）：全く（Dy）鶏についても成立することを，栓球の凝集の認められないもの，の四段階とし，判セロトニン取込の面から追求したのが，昨年定に迷うものはその中間の表示を行った．

度の我々の報告であった4）．今回はその延長と（ii）前固定血球のレクチン結合：

して，特定の糖鎖構造と結合する各種レクチ

赤血球，栓球を2．5％グルタルアルデヒド

ンを利用して，Dy鶏の血球膜に関する電顕的検索を行った．

にて前固定し，PBSで洗i條したのち，フェリテン標識したCon Aまたはヒマ凝集素（Ri−Cinus communis agglutinin：以下RCAと材料と方法略）と370C，30分間反応させ，再びPBSに

Dy鶏（413ライン）3羽，正常対照鶏（412て洗〜任し，脱水，包埋，薄切標本を作製し，ライン）2羽を用いた．1％EDTA添加緩衝
生理食塩水（PBS）2mlをあらかじめ含む注

透過電昆削こて観察した．
Giさ未固定血球のレクチン結合：

射器で頸静脈より18mlの血液を採取し，未固定の赤血球，栓球を標識レクチンと，400×G，1分間の遠心操作を反復し，栓球と4℃，30分間反応させ，Ca＋＋，Mg十十 free

赤血球を分離した．Ca十＋，Mg＋＋freeHanks

Hanks液で洗i條したのち，37℃，30分間in−

液にて洗搬したのち以下の実験を行った．

Cubate L，2．5％グルタルアルデヒドで前固定，1％オスミウム酸で後固定を行い，脱水，（i）コンカナバリンAによる赤血球凝集活性の比較：

包埋，薄切標本を作製した．
Gd赤血球の二次元展開標本による＊都立府中病院神経内科

con A

結合の観察：＊＊杏林大学医学部解剖

赤血球をフェリナン標識Con Aと反応さ＊＊＊東京大学薬学部生体異物研

一34−

界面にて破裂，細胞膜部分のみを水表面に二集が起る．正常鶏では特に凝集が顕著で，相接する膜の間には豊富なクラスター形成が認次元展開し，支持膜をはったグリッドにこれめられる（図3a）．一方，Dy鶏では凝集のを拾い，透過型電顕で細胞膜表面に特異的に程度がゆるやかで，クラスターの形成も乏し附着したフェリチン粒子の分布を観察した5）．

く（図3b），前記凝集活性の比較結果（i）とよせたのち，洗i條，水面に滴下，空気と水との結く対応している．RCAについては未固定標本
でもDy鶏と対照鶏の間に差を見出し得なか

果った．

（i）ConAによる赤血球の凝集活性：

未固定栓球に40CでRCAを反応させたの

正常鶏の赤血球が1／4−1／8mg／mlで凝集を示すのに対し，Dy鶏では1−1／2mg／ml

ち370C，30分間incubateした結果が図2bの濃度ではじめて凝集が見られた（表1）．
（ii）前固定血球のレクチン結合：である．細胞内の膜系（surface connected
SyStem及びdensetubularsystem）に豊富なあらかじめグルタルアルデヒドで固定した

フェリテン粒子の分布が見られるが，形質膜

Dy鶏及び対照鶏の赤血球におけるフェリナ

表面への結合は前固定標本で見た場合（図2ン標識ConAの結合を図l a，bに示す．対a）よりも，むしろ少なくなっている．これ

照鶏では（la）フェリテン粒子が豊富に分布

らの所見に関しても，Dy鶏，対照鶏の間に差はなかった．

し，膜表面から高く伸び出たクラスター形成

Gd二次元展開標本における観察：が観察されるのに対し，Dy鶏では（1b）フェリテン粒子の分布が疎で，クラスター形成も包埋切片標本の観察で，ConA結合の分布

乏しい．RCAに関してはDy鶏と対界との間に差がなく，均等・禰慢性の結合部位の分布に関してDy鶏と対照の間に顕著な差が見出が観察された．

たいと言う意図のもとに，二次元展開標本にされたので，この違いをさらに明瞭にとらえ

栓球については，ConA，RCAともに，今よるフェリテン標識Con Aの結合を観察し回の検索ではDy鶏と対照の差を見出し得な

た．図4aが対照鶏，4bがDy鶏の赤血球でかった．図2aは正常鶏における，前固定栓ある．対照鶏ではフェリテン粒子の分布が密球のRCA結合を示す．形質膜表面に豊富なで，クラスター形成も豊富であるのに対し，
Dy鶏では，疎な分布を示し，クラスター形成

フェリテン粒子の結合が観察される．Dy鶏においても同様な所見であった．

は少なく，包埋切片で細胞割断面のみにて観‖末固定血球のレクチン結合：

察した結果みられた両者の差異を一層明瞭に

末国定赤血球にCon Aを反応させると凝裏づけることが出来た．

表l ConAによる赤血球の凝集活性
O m

Ⅰ
顎C

A

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一35−

図1前固定赤血球表面のフェリテン標識ConA結合
a：正常対照鶏（60，000×）b：Dy鶏（55，000×）
−36一

図2

栓球表面のフェリテン標識RCA結合

b：未固定標本（60，000×）a：前固定標本（58，000×）

図3

未国定赤血球表面のフェリテン標識ConA結合

a：正常対照鶏（58，000×）b：Dy鶏（58，000×）
−37−

図4

赤血球の二次元展開標本における7ェリナン標識ConAの結合
a：正常対照鶏（47，000×）b：Dy鶏（57，000×）
図の端にみられるフェリテン粒子の付着していない明るい部分は，支持膜のみの部分を示す．
考察

は筋線維表面（基底膜十形質膜）を連続性に，生体膜の機能，殊にその糖鎖構造と関連し

均一なべルオキンダーゼ反応陽性の層が覆って，各種レクチンを用いた研究により，多くているのに対し，Dy筋ではこのベルオキンの知見が得られている．我々も，培養筋細胞

ダーゼ陽性層が所々局所的に途切れ，時にはを用いて，筋の分化，変性などの過程でもた

これに形質膜の中断を伴うと報告している．

らされるレクチン結合分布の変化を観察し，また，Schotlandらはfreezefractureを用い横紋筋の成熟過程でRCA結合の著しい減少てDuchenne型DMP筋における膜内粒子のが見られることを報告した6）．Bonillaら7）は減少と分布の不均一を指摘しており8），Wa−

最近Duchenne型DMPの生検筋にベルオキ

kayamaらは赤血球に関して同様の所見を観ンダーゼ標識ConAを反応させて，筋線維表察している9）．これらの形態学的差異は，機能面におけるConA結合に関して，正常筋との的な差異を示す他の報告と合わせて，膜レベ間に差があると報告している．彼らは6例のDuchenne型DMP生検筋において129の筋

ルの異常がDMPにおいても疾患の成立に重要な役割をはたしている可能性を示唆してい線椎を観察し，その33％にConA結合の異ると言えよう．

常を見出したと述べている．即ち，ベルオキ

Con A結合に関して，Dy鶏の赤血球が対ンダーゼ標識ConAを反応させた時，正常筋

照のそれと異ることを観察した今回の実験結−38−

果は，先に報告したDy鶏栓球におけるセロin Duchenne muscular dystrophy．

トニン取込の差4）と合わせて，Dy鶏のSySte−

Arch．Neurol・，28：239，．1973．

mic membrane diseaseとしての側面を強調

3）福永秀敏，堀真一郎，佐橋功，宇尾野公

するとともに，その疾患モデルとしての意義

表：Duchenne型筋ジストロフィー症にを更に認識させる所見と考えられる．

おける血′ト板セロトニンの生化学的組織

また，用いた方法の点から更に論ずるなら化学的研究一保因者判定への新しい試ば，今回併用した二次元展開によるフェリテ

み．臨床神経，17：316，1977．

ン標識レクチンの結合分布の観察法5）は，従来

4）宇尾野公義，別府宏囲，八木陪一，山田の包埋切片法による観察結果を補強する方法

克浩：ジフトロフィーチキンにおける栓として極めてすぐれている．これに推計学的球セロトニンの異常．厚生省心身障害研

な処理を追加するならば，分布の違いを一層究「筋ジストロフィー症の病因の究明に明確にとらえることが可能となろう．

関する研究」枠中班．昭和52年度研究報

今回は差異を見出し得なかったが，未固定

告書：143，1978．

標本を用いた場合の膜のinternalization，

5）Irimura，T．，Nakajima，M．，Hirano，Surfaceconnectedsystemへの標識レクチン

H．＆Osawa，T．：Distributionofferritの取込みなどを比較することにより，Dyとin−COnjugatedlectinsonsialidase−treat−

正常者との差を機能・形態の両面から追求す

edmembranesofhuman erythrocytes．

る試みも必要と考える．

Bioch．Biophys．Acta，413：192，1975．
6）Beppu，H．，Uono，M．，Nishiyama，F．＆

結論

Hirano，H．：Changesin number andDy鶏の赤血球と栓球を用い，膜表面のレ

distribution oflectin−binding sites on

クチン結合に関する電顕的検索を行い，次のcultured muscle cells．Acta Histoch−

結果を得た．

em．Cytochem．，10：139．1977．

（1）一定濃度のConAに対し，Dy鶏の赤血球

7）Bonilla，E．，Schotland，D．L＆Waka−は，対月割こ比Lより低い凝集活性を示した．

yama，Y．：Duchenne dystrophy：focal（2）包埋切片標本においては，フェリナン標識

alterationsin the distribution of Con−

ConAの分布はDy鶏赤血球で対照に比し少CanaValinAbindingsitesatthemuscle

なく，クラスター形成も乏しい傾向を示した．

Cell surface．Ann．Neuro1．，4：117，（3）二次元展開標本においてもDy鶏赤血球の

1978．

Con A結合は，対照よりも味な分布を示し

8）Schotland，D．L．，Bonilla，E．＆VanMe−

た．

ter，P．：Duchennedystrophy：alteration
inmuscleplasmamembranestruCture．

文

献Science，196：1005，1977．

1）Fisher，E．，etal．：Increasederythrocytic

9）Wakayama，Y．，Hodson，A．，Pleasure，

osmoticfragi1ityinpseudohypertrophic

D．et al：Alterationin erythrocyte

musculardystrophy．JAMA．236：955，

membrane struCturein Duchenne mu−

1976．

SCulardystrophy．Ann．Neuro1．，42）Murphy，D．L．，Mendel，J．R．＆Engel，

253，1978．

W．K．：Serotoninandplatelet function

ー39−

二

6）筋ジストロフィーチキンに対するproteaseinhibitor（E−64）の効果−形態学的側面−，及び筋ジストロフィーチキン骨格筋の組織化学的特徴

埜

研究協力者

春

中

原

征

経

哉

彦

石

浦

章

杉 田 秀 妄 ＊＊高 田 邦 安＊＊＊筋ジストロフィーチキン（line413）はその取した筋は液体窒素で冷却したイソペンタン

組織学的特徴より人筋ジストロフィー症に近で凍結し，10JL切片を作成，H＆E，Gomori S

似のものとみなされ，筋ジストロフィー症のtrichrome変法，NADH−TR，PAS，mena−

よい実験モデルとして使用されている．しかdioneTlinked alpha−glycerophosphatedehy−

し人，特にDuchenne型筋ジストロフィー症

drogenase（MAG），Oil−red−0，phosphorylaTとは組織学的，組織化学的にかなり異なる点

Se，nOnSpeCi丘c esterase，aCid phosphatase，もある．この相違は同じ病因であっても種のATPase（preincubation pH9．4，4．6，4．5，

違いにより表現に差が出てくるのか，異なる4．2），Ca染色（GBHA，VOn Kossa，alizarin

病因によるものかは不明である．

red）を行ない各群での比較検討を行った．ヒ

ここではまず筋ジストロフィーチキンの組

ストグラム作成については各例のH＆E染色

織学的，組織化学的特徴を簡単に記し，さらより最終倍率500倍の写真を作成し，400本に筋プロテアーゼ活性を抑制するE−64使用の筋線経の直径を計測した．

後の組織学的所見を記すことにする．
結対象及び方法果1）筋ジストロフィーチキンの組織学的，組対象としたのは生後3月目の健常チキン

織化学的所見（line412）10羽，筋ジストロフィーチキン

膵化後3月目の筋ジストロフィーチキンの（line413）4羽，E−64治療ジストロフィー

浅胸筋（自筋）は対照（line412）と比べるとチキン9羽である．E−64は卵芋化後7日目よ病変は明らかとなっていた．対照でも筋線経り週2回10mg／kg宛チキンの背部皮下に注の大小不同はかなりあるが（図1A），ジスト

射した．主として検索した筋は骨格筋の中でロフィーチキンではそれがさらに著明で，数最も侵される浅胸筋で鎖骨直下，咽骨近位部
で外表筋膜を含めその直下の部を選んだ．採多くの肥大線経，壊死線経，筋核の増加が認められた（図1B）．填死線経が会食細胞の強い浸潤をうけているのは，その浸潤細胞のほ＊国立武蔵療茸所神経センター疾病研究第一部

とんど全てが酸フオスファターゼ染色で陽性＊＊東京大学医学部脳研神経内科であることから証明された（図1C）．

＊＊＊国立武蔵療萱所神経センター疾病研究第二部

ー40−

図1 卵字化後3月目浅胸筋
対照（A）に比べ筋ジストロフィーチキン（B）では肥大線経が多く，単核細胞の集積した壊死線推（矢印），筋核の増加がみられる．壌死線経に集積した単核細胞は酸フオス
ファターゼ強陽性で貪食細胞であることが分る（C）．また筋ジストロフィーチキンではミトコンドリア酸化酵素活性の高い線経が増加する（D）．A，B：H＆E，C：
acidphosphatase，D二NADH−TR，

A〜D

×350

ほか，筋線維内の空胞，ringfiber，fibersplitT

人特にDuchenne型筋ジストロフィーと異なり，H＆EやGomori

二

S trichrome変法でtingなどもしばしばみられる所見であった．

濃染する線推（hyperreactive，dark，Opaque，

僻化後3月目の筋ジストロフィーチキンの線

hypercontracted線推あるいはhyaline線経推径分布を対照と比較し図2に示した．

とも呼ばれるもの）がチキンでほとんど全く

組織化学的所見；対照健常チキンでも浅胸といってよい程みられなかった．塩基性の胞筋はATPaseのアルカリ側で活性が高く，酸体の中にやや大型の核（しばしば明らかな核性側（preincubationpH4．6以下）で活性が小体がみられる）を有する再生線経は人と同低く，哺乳動物でのタイプ2A反応を示し自様チキンでもみられた．結合織や脂肪織は卵字筋であることが示された．組織化学的に顕著

化後3月日迄はあまり著明でなかった．そのな所見としてミトコンドリア酸化酵素染色
41−

（NADH−TR）で濃染する線経が多いこと（図1D），PAS染色で濃染する線経が多い
こと（図3C），nOnSpeCific esteraseなど
esterase染色で活性の高い組経が存在し，しばしばangulatedの形をした線経が高い活性を示し何らかの神経原性の−■要因が加味されていることを示唆する所見のあることなどが挙げられる．Ca染色ではわずかに隙lゾ1三を示す
線経が存在するが，Duchenne型筋ジストロ
図2 卵封ヒ後3月目の健常（line412）及び筋ジフィーなどに比べるとはるかに少なく，反応

ストロフィーチキン（line413）浅胸筋の筋線維径ヒストグラム

として弱い結果を得た．

V′
㍊

●一

′

一

．￣⊂

図3

婿化後3月目筋ジストロフィーチキン（A，C）及びE−64治療後筋ジストロフィー
チキン（B，D）の浅胸筋
E−64治療後のものも（B）対照仏）と同じく壊死線維（矢印）が存在しH＆E染色では差がない．PAS染色では対照（C）に強陽性の線経が多いが治療後（D）ではそれが減少する傾向にあるA〜D：×350−42−2）E−64治療後の組織学的，組織化学的所たものと思われるが，人（特にDuchenne型）

見筋ジストロフィーの所見とはかなり異なる所

E−64で治療した筋ジストロフィーチキン

もあるので，人筋ジストロフィー症と等価のは組織学的には一見ほとんど差がなく，やはものとして評価するにはまだ問題がある1）．筋り肥大筋線経は数多くみられ，会食細胞の浸潤をうけている壊死線経は多数存在した（図ジストロフィーチキンではみられず，人にかなり特異的と思われる所見はいわゆるOpaq−

3A，B）．また筋核の数，線維組織，月旨肪織ue線維（modifiedGomori

Strichrome染色にも差がみられなかった．組織化学的にはで濃染する過収縮をきたしている線維）の存

NADH−TR，Oi1−red−0，nOnSpeCificesterase，

在である．この線経はDuchenne型に多く筋ATPaseなどで治療群，対照群で差は認めら

線経の1％以上にも及び診断的といっても過れなかった．ただPAS染色では治療群で言でないが，他の型（顔面肩肝上腕型，肢帯PASに濃染する線経が減少し，中等度陽性の型）には少ない2）．この線経はCa染色（GB−線経が多い傾向にあった（図3C，D）．
筋線経の直径を測定しヒストグラムを作成

HA，VOnKossa，alizarinred）で強く陽性にしてみると図4のようになった．60〝以上の膜系の異常によりCaの筋線維内への大量流

染まることが多い．筋ジストロフィー症では入が起り，筋線経は過度収縮し，そこに蛋白分解酵素（例えばCa依存性中性プロテアー
ゼ（CANP）3）など）が働き，Z線の消失から
次に筋原線経の消失をみ，筋線経は壊死に陥っていく と考えられる4）．もしこの仮説が正しいとするならば筋ジストロフィーチキンにおける筋線経の変性過程は人とは異なっている可能性も考えられる．
そのほか筋ジストロフィーチキンではミト

20

40

60

10

100

110rM

コンドリア酸化酵素染色（NADH−TR）で濃DIAI一【TtR

染する線経や，PAS染色で濃染する線経が人
図4 未処置筋ジストロフィーチキン及びE−
64で3月治療後の筋ジストロフィーチ
キン涜胸筋の筋線維径ヒストグラム

筋ジストロフィー症より著しく増加するのも異なる点である．さらにesterase染色（non−specificesterase，Cholinesteraseなど）で筋肥大線経の数はむしろE−64治療群に多い

線経の胞体が浪染する線経の多いことは神経が，全体の分布からみると治療群では小径の原性の要因が加味しているのか5），あるいは筋方に移動し健常チキンの分布へと近づいてい線維内でアセテールコリンエステラーゼの神ることが分った．平均直径からみると筋ジス

経筋接合部へのregulationが遅れているのトロフィーチキン未治療群では45．66±2．

か6）何れかの可能性が推定される．

18（SD）〟であり，E−64治療群では41．51±

以上のように組織学的，組織化学的な差が4．51（SD）〟となり治療群の方が小径化の傾向にあった（p＜0．1）．

人と筋ジストロフィーチキンの問に多少あっ考ても，筋ジストロフィーチキンではCANPの音舌性が高く3），蛋白分解酵素が何らかの形で筋変性の過程に関与していることは充分に考察筋ジストロフィーチキンは人にかなり近いえられる．そこで蛋白分解酵素の抑制物質E

病理所見がみられ，実験モデルとしては優れ−64を筋ジストロフィーチキンへ投与してのー43−

効果が期待されたが，今回の実験では明らか

2）Boxler，K．＆JeruSalem，F．：Hyperre・

な病理学的所見の改善の結果は得られなかっactive（hyaline，Opaque，dark）muscle

た．ただ筋線維径のヒストグラムからみると

fibersinDuchennedystrophy．J．Neu−

多少線維径が健常対照に近くなってはいた

ro1．，219：63−72，1978．

3）石浦章一，今堀和友：筋カルシウム依存が，これをE−64の効果として評価すべきものか否かは決定し稚く思われた．今後投与法

性蛋白分解酵素とその抑制物質について．日本臨床，35：3910−3914，1977．

の検討，あるいはE−64以外の物質との併用

4）埜中征哉，杉田秀夫：進行性筋ジストロなど試みたいと考えている．

フィー症にみられる opaque 線経につ結いて．第20回日本神経学会総会，東京，

語

筋ジストロフィーチキンの組織学的，組織
化学的所見を記し，それが人筋ジストロフィ

51Engel，W．K．：Integrativeh車StOChemi−ー症のそれと異なる点があることを指摘しCalapproachtothedefectofDuchenne

た．その差異は病因的に異なるものがあるた

musculardystrophy，inPathogenesisof

めか，同一病因でも種による表現の違いなの

Human Muscular Dystrophy，ed．by

かは不明である．蛋白分解酵素の活性を抑制

Rowland，L．P．，Excerpta Medica，するE−64による治療実験では筋線維径を健Amsterdam，1977，pp．277−309．

1979．

常対照にやや近い分布にもっていくが，組織6）Patterson，G．T．＆Wilson，B・W・：

学的，組織化学的に効果ありと判定する所見

Distribution ofextrajunctionalacetyl−は今回は得られなかった．

cholinesteraseinmuscleofnormalanddystrophicchickens．Exp．Neurolリ50：

文献214−225，1976．

1）杉田秀夫，他：神経進歩（印刷中）．

−44−

7）筋ジストロフィーチキンに対するproteaseinhibitor（E−64）の効果−生化学的側面
＊

杉

田

研究協力者

秀

夫

石

浦

章

化後7日日より週2回背部皮下に注射した．

は じ め にデュシャンヌ型筋ジスト＊＊

末治療群はCOrnOilのみを注射した．

ロフィー症（DMD）罷患筋の筋構造蛋白のうち比較的初

コントロール，未治療及び治療ジストロフ

期から変化が現われるのはトロポニンであィー群何れも各10羽ずつである．注射期間はる．即ちトロポニン亜分画のうちⅠ．C．分画が3ケ月である．
経過中未治療ジストロフィーチキンのうち減少しT分画が割に残存し，更に進行すると6羽は大腸炎の為死亡した．

ミオシンH鎖のSplittingが認められる1）．

臨床的観察にはチキンを背部を下にし床の一方正常ニワトリグリセリン筋にCa依存

上におき独力で起き上れるか否かの性中性プロテアーゼ（CANP）を加え一定時間反応させた後トロポニン，ミオシンを抽出

flip

teLSt を採用した．
検索項目は屠殺時頸静脈より採取した血液

しゲル電気泳動法で調べてみると本質的にを用い血清CPK及びLDHを測定した．

DMDの場合と同じパターンを示す事から
我々はDMDに於ても例えばCANPの様な罷患筋の生化学的検索には骨格筋の中で最プロテアーゼが構造蛋白の変性に関与していも高度に侵されている胸筋を用いCANP活るであろうと想定した．又あ乙雇用でCANP

性及びCathepsinD活性を測定した．

の構造蛋白に対する分解作用はロイペプチ

結ン，E−64によって抑制される事を明らかに

果1）Line413の胸筋CANP活性の経時変

した2）．

化

本研究の目的はE−64をジストロフィーチ

未治療line413及びコントロール1ine412

キン（line413）に連続投与した場合罷患筋に
如何なる影響が生じるかを生化学的に検索すの胸筋についてCANP活性の卵字化後の経時る事にある．

変化を図1に示す．即ち卵字化直後の胸筋のCANP活性は何れも低値を示し両者の間に対象及び方法殆ど差異を認める事は出来ない．しかし1ケ

ジストロフィーチキン（line413）及びコン

月を過ぎる頃から両群の間には明らかな差がトロール（1ine412）を用いた．投与方法はE認められ3ケ月後ではコントロールでは4．5−64が生体内で徐々に吸収されるようにCO−

U／grに対しジストロフィーチキンでは9．5

rn oilにSuSpend L10mg／kgの割合で，卵芋

U／grと約2倍に高値を示している事がわかる．

＊東京大学医学部脳研神経内科＊＊国立武蔵療養所神経センター疾病研究第一部−45−2）Line413についてのEr64投与群の胸TimeCourseofCANPActivity

筋CANP活性の経時変化
0
8︵ひ二で⊃︶ を＞竜ロdN＜U

図2は未治療1ine413とE−64投与群の胸筋のCANP活性の経時変化をみたものである．
投与1ケ月では明瞭な活性の差異は認められないが2ケ月後には両者に有意の差が出現
し，3ケ月後では末治療群の約60％即ち5．7
U／grに低下を示した．図3は3ケ月投与後のCANP活性を比較したものであるが治療群（T）は未治療群（D）に比し平均値は明らか

0

1

2

に低下した．

3

なおT群のうちMonthsQfterhQtChing

丘ip test

は9羽中7羽80％に於て陰性であり，且つ 月iptest 陽性であ

図1筋ジストロフィーチキン1ine413（D）

った2羽は何れもCANP活性は高い値を示

及びコントロールline412（C）胸筋

しており

CANP活性の経時変化

flip testとCANP活性との問に相関のある事を示唆している．未治療群（D）

Q……1ine413（D）

は全例， niptest は陽性であった．

●…・・・line412（C）

Activity of CANP
TimeCourseofCANPActivity
in E・64treqted
DystrophicChicken︵かこで⊃︶ 暑＞宅O dN＜U

8

6

4

2

C
0

1

2

3

図3

Monthsq机erhqtdづng

図2

E−64投与（T）群及び未治療（D）群胸DT

醇化3ケ月後胸筋のCANP活性
T：E−64投与筋ジストロフィーチキン
line413筋CANP活性の経時変化○……E−64投与筋ジストロフィーチキ

D：未治療筋ジストロフィーチキン1ine
413

ンline413（T）

C：コントロールチキンline412●‥・…未治療筋ジストロフィーチキン

0……

Iine413（D）

niptest陰性●・…・・ fliptest 陽性

−46−

も

Activity of CcLthepsin D

nip test

陽性の2羽はCathepsinD活性も特に高い倍を示した（図4）．
血清CPK活性は1ine413はline412より高い値を示すがE−64投与により統計的に有意の低下を示さなかった（図5）．同様の傾向
は血清LDHについても認められた．
考案

ジストロフィーチキンline413の胸筋のCANP活性の経時的変化をみるとコントロールのline412に比し経過と共に明らかに高値を示しており胸筋の筋蛋白の分解にCAN

Pが関与している事を想定させる．
C

図4

D

E−64はin vitYOではCANPの骨格筋構T

造蛋白に対する分解作用を抑制したがねこ 扉−

塀化3ケ月後胸筋のCathepsinD活性略〝βに於いても或程度抑制する事が明らかに記号その他図3に同じなった．
この意味ではE−64は玩1元財投与でもそActivity of Serum CPKの生物学的活性を発揮していると考える事が出来る．しかし血清CPK，LDHなど肉柴酵素活性には全く影響はなくかかる可溶性酵素の増加が人筋ジストロフィー症の場合と同様膜系の異常に起因すると考えるならばE−64
は膜系に対して何ら作用しないと考えられる．Stracherら4）はロイペプテンとペブスタ
テンをジストロフィーチキンの胸筋に直接注射する方法により注射された筋肉の組織学的改善と共に血清CPKが低下する事を報告しているがこの点我々のE−64の結果と一致しない．
E−64によりCANP活性は低下したがライソゾーム酵素であるCathepsinDはかえっ

C

図5

D

て増加を示した．

T

この理由については現在明らかではない．

照化3ケ月後チキン血清CPK活性
略記号その他図3に同じかかる薬剤投与の場合，その効果を判定す
るのに臨床的テスト即ち flip test は極めて次にライソゾーム酵素であるCathepsinD重要である．

についてみるとline412と未治療line413と今回の 貝ip test ではE−64投与群は3ケの間に著しい差はなく，E−64投与line413

月後9羽中7羽は陰性，2羽のみ陽性であっに於いては値はばらつきが著しく平均値はかた．未治療line413は3ケ月後100％陽性とえって未治療群より高値を示した．治療群でなるのでこの結果はE−64が臨床的に有効で

一47−

③

あり進行が遅延している事を想像させる．最近Hudeckiらは

flip test

は治療群9羽中7羽は陰性であ④胸筋のCathepsinDはE−64投与の影響を方法を採用しており我々も今後彼等の方法でflip test

flip test
った．

をスコアで表わす

うけずかえって増加し血清CPK及びLDを調べるべきであると考えていHも不変であった．

る3）．

E−64の投与量については全く経験的であ文

りStracherらのロイペプテンとの比較にお献いて今回は10mg／kg，過2回法を用いたが，

1）H．Sugita and Y．Toyokura：Altera−①投与量の増量，（診注射回数をふやす，（∋注

tionofTroponin Subunitsin Progres−

射期間の延長など今後検索すべき問題を残し

siveMuscularDystrophy（DMP）．Ⅰ，ている．

II．ProceedingsoftheJapanAcademy，

副作用に関しては初回ないし2回日注射直52：256−259，260−263，1976．

後2羽が死亡した以外は認められなかったが

2）S．EbashiandH．Sugita：TheRoleof

勿論内臓諸臓器に対する副作用は慎重に調べ

CalciuminPhysiologicalandPatholo一る必要があろう．

giCal Ptocesses of Skeletal Muscle・

更にCANPは本来骨格筋に存在しておCurrentTopicsinNerveand Muscle

り，生理的な筋蛋白のturnoverに何らかの関

Research，1979．p．73−84．

与をしていると考えられるのでCANP活性3）M．S．Hudecki，C・M・Pollina，A・K・を抑制した場合発育途上の骨格筋の蛋白合成

Bhargava，R．S．Hudecki and R・R・にどの様な影響が出るかは重大な問題であHeffner：DelayedFunctionalDisabili・る．Libby，Goldberg5）らはジストロフィーマ

tyin Dystrophic Chickens Receiving

ウスを用いわ2〝∫わ竹の系でロイぺプテンは蛋

Chemotherapy．Muscle＆Nerve，2：

白合成に影響せず分解を抑制すると報告して57−67，1979．

いるがE−64の場合に蛋白分解がどの様な影

4）A．Stracher，E．B．McGowanandS・A・響をうけるか今後検索する必要がある．

Shafiq：MuscularDystrophy：Inhibiti−
On ofDegenerationin uiuo with Pro−結語

teaseInhibitors．Science，200：50−①筋ジストロフィーチキン（line413）胸筋の51，1978．

CANP活性は卵芋化後経時的に増加し3ケ5）P．LibbyandA．LGoldberg：Leupep−

月目にはコントロールの約2倍になった．

tin，a ProteaseInl1ibitor，Decreases（∋E−64，10mg／kg，週2回背部皮下に連続注

Protein Degradationin Normal and

射し3ケ月目の胸筋のCANP活性は未治

Diseased Muscles．Science，199：．

療群の約60％に低下したがなおコントロ

534−536，1978．

ールよりは高値であった．一−48−

8）ジストロフィーマウスに対するgrowth hormone
の効果

木
研究協力者

山

下

田

真
信

現在，進行性筋ジストロフィー症に対する

男
輿

望

吉

営二郎

含む），非発症，大きく雌雄，2群にわけて，治療は解明されていない．

各群をさらに4組にわけた．両群とも，各我々は，はじめに筋萎縮に対する成長ホル組に，生理的食塩水，SOMACTONlIE／

モンの効果に着目し，ジストロフィーマウス

kg，5IE／kg，10IE／kgを連日，皮下注射に対して，SOMACTON（bovine growth
hormone）や，肢帯型ジストロフィー症患者

終了後にすべてについて筋肉を採取し，組2例，及び筋強直性ジストロフィー症患者2

織学的，組織化学的検討を行った．各組と例，計4例に対して，ヒト成長ホルモンを授も，16〜20匹を使用した．

与してきたが，その間，若干の有効性を示唆する所見を得ている．特に女性肢帯型ジスト

をし6−8週にわたり体重を観察し，実験

実験2：
ジストロフィーマウスに対するSOMA−

ロフィー症患者では，2年間以上にわたり，

CTONの影響について実験を施行した．

ヒト成長ホルモンを試みており，投与の期間

マウスを4群にわけた．

中，明らかな症状の進行はみられず，直立時

Ⅰ群：対照動物群．対照非ジストロ

間，歩行時間，上肢水平位保持時間など，主フィーマウスに，生理的食塩として筋持久力の点で，若干の改善がみられている．又九州労災方式のADL評価では，高水を注射．
II群：対照動物SOMACTON投与

さ30cmのものをまたぐ歩行動作，浴そうの群．非ジストロフィーマウス

出入りをする入浴動作などで，数ポイントのに，SOMACTON

スコアの改善があった．しかし，この結果が，を注射．．

5IE／kg

全く偶発的なものか，ヒト成長ホルモンそのⅠⅠⅠ群：ジストロフィー対照群．ジス

ものによる効果なのか，明らかでない．このトロフィーマウスに，生理的点について，より正確な知識をうるため，成長ホルモンの効果に関する基礎的実験である
動物実験を施行している．

食塩水を注射．
IV群：ジスト

ロフィーSOMAC−TON投与群．ジストロフィーマウスにSOMACTON

実験方法

5

IE／kgを注射．

実験1：以上4群について生後50日前後より約同時期（群によっては，2〜5日ずれを5週間にわたり注射を続け，その間の体重の推移を測定したご実験終了後，筋肉を採取＊東邦大学医学部第四内科

して，組織学的，組織化学的検討を行った．

＊＊国立武蔵療養所神経センター

ー49−

結

おいては，5匹中4匹で，開始時に比べて体果重の増加がみられた．残りは，開始時と体重1．体重の変動
実験1：実験終了時の各群の体重の平均ははかわりなかった．今回の実験では，投与期

雄は23−26g，雌は16〜19gと全体として，間が短期間であった事，供給マウスの数が少雄の方が大きかった．各組の違いでは，実験なかったため，体重増が個体差にかくされて終了時では，それほど大きな差はないが，生しまう可能性が考えられ，今後，供給マウス

後40−70日の間で，SOMACTONlIE／の増加と，長期間での投与観察が必要のよう

kg，5IE／kgに比べて，10IE／kg注射した方に思われる．

が，やや体重の増加が大きい傾向がえられた．

2．病理所見しかし統計学的には，有意な差はなかった．

実験1において採取した筋肉では，赤染物

実験2：第Ⅰ群においては，飼育期間中，体重が9．5〜13．5（平均11．8g）から24gま

質の不規則な増加がみられた．しかし，性差及び投与量との間には，有意な差はみられな

で，第ⅠⅠ群においては，11．3gから22．5gまかった．

で，体重の増加を示した．両群とも，開始時

実験2において採取した筋肉では，ⅠⅠⅠ群，に比べて，約200％の増加を示し，両者の間

ⅠⅤ群において筋線経の大小不同，構造の著しに有意な差はみられなかった．第ⅠⅠⅠ群においい変化を認めた．両群の直径を測定してみたては，9．5gから11．7gに，第ⅠⅤ群においては，9．5gから11．6gに，増加を示した．そ所，第III群においては，TypeI線経は，35．
5±4．0ミクロン，TypeII線経は46．2±5．3

れぞれ123％，125％の増加で，■両群の間に有ミクロン（p＜0．05），第ⅠⅤ群においては，

意な差はみられなかった．非ジストロフィー

TypeI線経は，36．6±1．9ミクロン，Type

マウス群とジストロフィーマウス群では，明II線経は，61．8±2．7ミクロン（p＜0．05）とらかに，前者の方が著明に増加を示した．

の結果がえられた．SOMACTON投与によ第ⅠⅠⅠ群，第ⅠⅤ群における，個々の体重の変り，筋線経の肥大がえられ，特にTypeII線経化は，ⅠⅠⅠ群においては，3匹中2匹，ⅠⅤ群ににおいて著明であった．Ⅰ群，ⅠⅠ群において

0

2

4

6

8

10

12

14

16

18

20

22

図 4群間における体重増加の相違
−50−

24

26

28

託I

32

も，同様な所見がえられた．ⅠⅤ群では，動物によって，幾つかのfascicleにおいて，直径

SOMACTON投与により，筋線経の肥大傾が，80〜100ミクロンに達するマウスとしてはなかったように思える．臨床的に，女性肢は，著しく大きい筋線経が30−40本密集した帯型ジストロフィー症において，2年間以上部分がみられた．又，各群に，赤染物質の増の投与によって，はじめて，わずかであるが，加した筋線経が，みられたが，SOMACTON

改善がみられた事より考えると，今後，動物投与によって，やや目立つ傾向がみられた．

実験においては，長期間の観察が必要と思わ向がえられたが，病勢の進行に明らかな作用れる．成長ホルモンは，種特異性があること
結論がしられており，その面からも，問題がある

今回の投与量の範囲では，SOMACTONが，入手がむずかしい範囲では，同種間の実は，非ジストロフィーマウスにおいても，ジ験は不可能である．筋線経の肥大が臨床上のストロフィーマウスにおいても，体重曲線に何らかの利益をうんだか否かは，今回の観察では，明らかでなかった．

何らの影響を及ぼさなかった．病理学的には，

ー51−

9）筋ジストロフィー動物モデルにおける神経成長促進因子の研究（Ⅰ）筋ジストロフィーマウスの頚部交感神経節細胞構築の定量的解析（ⅠⅠ）筋ジストロフィーマウスにおける頚部交感神経節への神経成長促進因子の効果

井
研究協力者

鈴

木

賂

村

夫

裕

夫

林

恭

三

古

川

昭

栄

＊＊＊

大

井

長

和

西

（Ⅰ）筋ジストロフィーマウスの頸部交感神裕谷

経節細胞構築の定量的解析

ldy／＋以下へテロと略す）に比べ，1／10から
1／1000と著明に低下していた2）．

員

metryにより，筋ジストロフィーマウスにお我々はこの事実に注目して，さらにCytO−
的

神経成長促進因子（nervegrowthfactor，

ける上頸部交感神経節細胞の変化を検討し

以下NGFと略す）は，ニワトリの胚や幼若マ

た．

ウス，ラット等の知覚及び交感神経節に特異的に働き，その分化・成長を促進する作用をもつ物質である1）．

方法生后8週のC57BL／6J種ホモ2匹（オ我々はマウス顎下腹より抽出したNGF試料を，ニワトリの胚の知覚又は交感神経節のス，メス各1匹），ヘテロ・オス2匹，対照としてC57BL種オス1匹を用いた．

培養液中に混合し，この神経節周囲から伸び摘出した上頸部交感神経節は直ちに10％る神経線経の密度と長さの度合いで＋1か

中性ホルマリンで固定し，骨法によりパラフ

ら＋5までの段階に分け，＋4を示すときのィン包埋し，8JJmの連続切片を作成，1％

サンプル濃度を1生物学的活性単位（l Bi0−のCreSylvioletで染色し，夫々の切片標本を10gicalunit）とし，筋ジストロフィーマウス

400倍の写真に拡大した．交感神経節の容積

顎下腹中のNGF活性を測定すると，発症マは全ての写真よりプラニメーターを用いて各

ウス（homozygous：dy／dy以下ホモと略す）

切片の断面積を出し，高さ8／Jmの円錐台のは発症していないマウス（heterozygous：

集合体として測定した．ついでCarl−Zeissのparticlesizeanalyserにより，一つの交感神＊京都大学医学部第二内科

経節当りの細胞数と全細胞の核直径を実測し＊＊京都大学薬学部生物化学

た．符に一つの交感神経節に含まれる細胞数＊＊＊国立療養所宇多野病院手中経内科−52−

については，Hendryの統計的解析法に従い，を修正するための統計的手法である．我々は測定した核数の修正を行った3）．この方法は，これをプログラムに組み，大型コンピュータ

一つ一つの神経細胞の形は様々であるが，一ーを用いて実際の計算を行った．

つの神経細月包はほぼ球形とみなされる1個の核を有しており，連続切片では細胞核が大き結果

くなると標本の厚さとの関係から核の一部を

表1に夫々のマウスの体重，神経節容積，

二重・三重にOVerCOuntしているので，これ実測及び修正した細胞核数，平均核直径を示表l Morphometricanalysisofsuperiorcervicalganglia
Of8Weekolddystrophicandnormalblice
COuntedCOrreCted
nuclear neuronal nuclear

body gangiion neuronai

number／m3
Weight volume nuciear diameter nuCiear diameter（g）（m3）COntrOl m

24．3

0．131

number（皿）

number

15548

9．912

7597

9．717＋4．598

57990

（um）

dy／＋

m

20．7

0．083

11309

7．558

6240

7．657＋1．973

75180

dy／＋

m

17．5

0．080

9050

7．912

5015

8．003＋1．871

62690

dy／dy m ll．2

0．099

11512

8．806

5855

8．893＋2．918

59140

dy／dy f lO．2

0．058

6242

7．619

3413

7．772＋1．781

58840

number ot counted nuclei

number ot COrreCled nucld

4

681012141618

4681012141618

1●

6810121416181Jm

図1Distributionofdiameterofsympatheticganglialnucleiindystrophicandnormalmice−53−

す．ホモはヘテロ及び対照に比べ，体重は約1／2で，ホモ・メスでは神経節容積，細胞核数るが，我々の細胞構築の数量的解析の結果は確かに正常コントロールに比して細胞数及びの著明な低下をみたが，核直径では大差なく，核直径の減少はある程度はみられたが，本動ホモとヘテロでの有意差はみられない．これ物モテリレの顎下腺におけるNGFi舌性の著明を対照と比較すると，細胞核数は18〜55％

な低下に対応する程には著しいものではなか（p＜0．5）と著明に低下しているが，核直径った．この点は筋ジストロフィーマウスにおでは10−20％（p＜0．1）の減少に過ぎない．

ける顎下腺NGF含量が交感神経節にどのよ

次に核直径のヒストグラムを図1に示す．上うに作用するかという根本的な作用機序の精段が実測細胞核数，下段が修正細胞核数の分細が不明な段階では，これ以上の推定は困難布である．比較を簡明にするためにホモ，ヘテロでは1匹当りの平均分布を示した．このであり，今后の研究の展開を待ちたい．
これらのことから，交感神経節細胞構築に

図から，対照に比してホモでは大型及び」、型

対してはNGFはその発育段階過程で異なっ

核直径細胞の平均的な減少がみられ，ヘテロた作用パターンをとる可能性がある．
我々は今后例数をふやすことと，NGF投では小型に比して大型核直径細胞の減少がみられた．

与の影響や，その他の因子についても検討する予定である．

考察
文

1960年Levi−Montalcini4）らは幼若マウス

献にNGFを投与し，上頸部交感神経節の増大

1）林恭三，古川昭栄：神経成長促進因子のを来すことを報告したが，定性的な内容であ研究一一最近の動向一．生化学 49：389，

った．1975年AloeS）らは幼若ラットを用い1977．

て，交感神経節1個当りの細胞数を算定し，2）Furukawa，SJNishitani，H．，and Ha−

NGF投与群は非投与群に比して約2倍の増yashi，K：Level of the nerve growth

加を示したと報告した．しかし，1976年Hen−

factor activitydry3）は測定細胞核数の統計学的修正を行い，glandsofgeneticallydystrophicmouse

幼君ラットのNGF投与によって細胞核数の（C57BL／6J）．Biochem．Biophys．Res．

inthe submaxillary

Commun．76：1202，1977．

増加（20％）より，核直径の増加（50％）に強く作用したと報告している．又，1977年

3）Hendry，Ⅰ．A．：A method to correct

Banks6）らは14日齢マウスを用いて，核直径

adequatelyforthechangein neuronalの増加（15％）より，細胞数（neurondensity）

Size when estimating neuronal num−の増加（50％）に強く作用したと報告している．

bers after nerve growth factor treat−
ment．J．Neurocytology

5：337，1976．

我々は筋ジストロフィーマウス顎下腺中の4）LeviーMontalcini，R．，and Booker，B．：

NGFのbioassayの成績から，筋ジストロフ

Excessive growth of the sympatheticィーマウスの発症に交感神経節又はNGFのganglia evoked by a proteinisolated

関与することを作業仮説として本研究を進めfrom mouse salivary

た．幼若マウスではNGFが交感神経節の核

Natl．Acad．Sci．U．S．46：373，1960．

直径の増大と細胞数の増加をもたらす点から

glands．Proc．

5）Aloe，L．，Mugnaini，EリandLevi−Mon−

すれば，NGF活性の著しい低下がみられた

talcini，R．：Light and electron micro−

筋ジストロフィーマウスでは交感神経節の発SCOpicstudiesontheexcessivegrowth

育阻害がみられることを期待していた訳であOfsympatheticgangliainratsinjectedー54−

心に検討した．

daily from birth6−0HDA and NGF．
Arch．Ital．Biol．113：326，1975．

方6）Banks，B．E．C．，andWalter，S．J．：The法

effectsofpostganglionicaxotomyand

4週齢の筋ジストロフィーマウス，ホモ4

nerve growth factor on the superior

匹，ヘテロ4匹，C57BLマウス3匹に7Cervicalganglia ofdevelopingmice．J．

SNGF2）20J

Neurocytology

射した．対照として同齢ホモ3匹，ヘテロ3

6：287，1977．

g／gを毎日7日間頸部皮下に注匹，C57BL3匹に生食を7日間投与した．最しⅠⅠ）筋ジストロフィーマウスにおける頸部終投与より24時間后に上頸部交感神経節を

交感神経節への神経成長促進因子の効果

摘出，10％中性ホルマリンで固定し，8〟mの連続切片を作成，1％のCreSylvi01etで染日色した．夫々の切片標本を400倍の写真に拡

的

我々は筋ジストロフィーマウスでは顎下腹大し，Carl−Zeissのparticlesizeanalyserでの神経成長促進因子（nervegrOWthfactor以

一つの交感神経節当りの細胞核数と全細胞の下NGFと略す）の生物学的活性が発症していないマウス．（heterozygous：dy／＋以下へ

核直径を実測した．略球形の核が大きくなると標本の厚さとの関係から重複計測するたテロと略す）に比し，発症マウス（homozy−

め，Hendry3）の統計的解析法に従い測定した

gous：dy／dy以下ホモと略す）で著明に低下

核数を修正した．

していることを見出した1）．

結

そこでNGF投与の筋ジストロフィーマウ

図1にNGF投与と対照として生食投与のスへの影響を上頸部交感神経節への作用を中NGF treAted
Dy／
Dy

Dy／
・

果

NaCt tr亡
dted
C57BL

Dy／
Dy

DyJ・

C57BL

P＜0．
01

P＜0．
05

P＜
0．
05

mm3
0．2
ganglion
V01Ume o，l

l l

l H

1 1 1

1∝00
COrreCted
neUrOna15∝のnunnber

pnn
12

11

lt ll t t

−1Udear ll
diameterlO
9
8

−
1

l

llt

1

−
●
l

l

9
20
body
Weight lOl−lt

Each blackcorumn represents measured profiIes of onelmOUSe・

図1

MorphologicalchangesofsupeiorcervicalgangliaafterNGFtreatment−55−

C57BL

C57BL

〃m

4

6

81012141618

図2

4

6

81012141618

4681012141618

Distributionofcountednucleardiametersineachgroup

結果を示した．NGF投与で体重の変化はほ考察

とんどみられなかった．神経節容積はNGF

正常幼君ラットやマウスにNGFを投与す投与でホモ78％（p＜0．01），ヘテロ28％

ると，上頸部交感神経節の容積や細胞数の増（p＜0．05），対照24％（p＜0．05）と増加

加，細胞の大型化が起きることが知られていした．修正細胞核数昼NGF投与で，ホモ23％（p＞0．5），ヘテロ42％（p＜0．1）と増る3）4）．一方筋ジストロフィーマウスにおいては4週齢，8過齢（前章参照）共，上頸部交加したが，対照では5％の増加にとどまった．

感神経節の大型細胞が減少していた．今回の修正平均核直径はホモで16％（p＜0．5）増NGF投与実験によって大型細胞が増加し，加したが，ヘテロ1％，対照7％の増加であ神経節容積が増大することを観察した．これった．

らの成績は，林らによって示されたホモ顎下図2は測定核直径のヒストグラムである．

腹中のNGF減少と照合すると興味ある所見

夫々の群で一部匹数が異なるため1匹当りのである．しかし4週齢ではすでにホモマウス

ヒストグラムとして図示した．NGF投与群

は臨床症状が進行しており，NGF投与によってもその症状改善効果は認められなかっで；ホモ，ヘテロ共大型細胞の増加がみられたが，対照ではほとんど変動がみられなかった．上頸部交感神経節の大型細胞の増加がた．

maturationと関係しており，このmaturati−ー56−

onが発病と何らかの関係を持つのであれば，Cularweightform．Biochemistry

マウスのageによってNGFの影響程度が異2202，1967．

6：3）Hendry，Ⅰ．A．：A method to correct

なる可能性が示唆された．

adequatelyforthechangeinneuronal文

Size when estimating neuronal num−献bers after nerve growth factor treat−1）Furukawa，S．，Nishitani，H・，andHaya−

ment．J．Neurocytology

shi，K．：Level of the nerve grOWth
factor activityin the submaxillary

5：337，

1976．

glandsofgenetica11ydystrophicmouse4）Bank，B．E．C．，andWalter，S．J．：The（C57BL／6J）．Biochem．Biophys．Res・

effectsofpostganglionicaxotomyandnerve grOWth factor on the superior

Commun．76：1202，1977．

Cervicalgangliaofdevelopingmice．J．

2）Varon，S．，Nomura，J．，andShooter，E・
M．：Theisolation ofthemouse nerve

Neurocytology

growthfactorproteininahighmoleT

一57−

6：287，1977．

10）筋ジストロフィーマウス筋肉中の神経成長促進因子様免疫交叉性物質レベル

林

研究協力者

古

恭

川

昭

三

嘉

大

井

＊＊

井

村

裕

神経成長促進因子（nervegrOWthfactor：

夫

長

露＊
＊＊＊

西

谷

裕

のそれの約1／2に低下していることを見出し

NGF）は交感神経節細胞および胎生期の知覚

た．

神経節細胞に作用しその分イヒ，成長，機能維
持に必須の物質であり1）2），すでにいくつかの材料と方法

神経疾患患者血清中のNGFレベルが測定さ筋ジストロフィーマウス：生後4週かられ疾患との関連性が示唆されている3）4）5）．

11週の筋ジストロフィーマウス（C57BL／6J）

通常NGF活性はニワトリ胚の知覚神経節は実験動物中央研究所から入手した．後肢筋の組織培養によって測定される6）が組織中あ肉に冷却したphosphate buffered saline

るいは血i青中のNGF含量はその測定限界が（PBS）を25％W／Vとなるように加えホモそれ以下で正確な定量は困雉である．そこで著

ジナイズした．ホモジネートは3500rpmで者らは微量定量化を目的として種々NGFの15分間遠心し，上清中のNGFレベルを測定

radioimmunoassay法について検討した．そした．

の結果，血清中には125トβNGFと強く結合

マウス顎下腹βNGF抗血清の調製：生後する高分子量物質の存在が明らかとなり，aS−

80日齢のオスマウス顎下腹よりVaronらのSay系からこの物質を除去することが必須と

方法7）で精製した7SNGFをCM−Sephadex

考えられた．このため著者らはNGF特異抗G−50カラムクロマトグラフィーにより各体で被覆したポリスチレンチューブを用いてサブユニットに分馳し均一なβNGF（βサブ

生体試料中のNGF量を測定するOne−Siteユニット）を得た．このβNGFlOO〝gを

radioimmunoassay法を検討し，生体内の微Vaitukaitisら8）の方法によりウサギ（ニュー

量のNGFを定量することに成功した．

ジーランドホワイト種）の皮下に等容量のこの方法を用いて筋ジストロフィーマウス

Freund後肢骨格筋中のNGF様免疫交叉性物質

s Complete Adjuvantとともに3週間間隔で4回授与した．Ouchterlony9）法によ（NGFTlikeimmunoreactivity：NGF−LI）

りβNGFのみの特異性を確認したのち耳静を定量した．その結果，発症マウスの骨格脈より採血し，血清を分推した．

筋中のNGFレベルは発症していないマウス

βNGfl特異抗体の分離精製：分離した抗NGF血清を33％飽和硫安で塩析した沈で＊京都大学薬学部生物化学講座

んを0．05Mリン酸緩徳液で透析した後，＊：＊京都大学医学部第二内科＊＊＊国立療養所宇多野病院神経内科

CNBr−Sepharose4B（7ml）にマウス顎下一58−

Count BoIInd

YaSh vell to

R且dloaetlYlty

renoYe unbollnd
さntlbody⊂；；Solld Pba托β一輝Gf SpeClflc血tlbodァ

⑳ …岬
窃診 …125ト血1d囲▲

0．05HTrb−Cl t〉uffeT⊂Ontalnlng O．075HW且Cl，0．1王もSA，and O．02王80dluⅧLaZlde

図10utlineofprotocol for one−Siteradioimmunoassayofβ一nervegrOWthfactor（NGF）

腺7SNGF（10mg）を結合させたNGF−Se−

時間放置した後，同じ緩衝液で2回洗浄し，pharoseカラムを用いStoeckellO）らの方法にチューブに残った放射活性をダイナポット

従いβNGF特異抗体を精製した．

AutoLOGICγカウンターで測定した．図1にその模式図を示す．

125Ⅰ−βNGFの調製：βNGFlO〃g（10／バ），
0．4Mリン酸緩衝液pH7．4（50JLl），125Ⅰ−Na

結

lmCi（10JLl）を混合し，タロラミンTlOJLg

果正常ヒト血清320／Jlと125トβNGF（12，（10JLl）を加え30秒間反応後，SephadexG・50000cpm）を混合し，中性条件下でSepharose

カラムによ り遊馳▲の125Ⅰを除去した．
125Ⅰ−βNGFの比活性は30−60JLCi／JLgで，特異抗体との免疫学的結合は80％以上であった．
one−Site radioimmtlnOaSSay：βNGFの特異抗体を0．05Mトリスー塩酸緩衝液pH
8．5で1／Jg〜5〝g／mlの濃度に調製し，ポ豊30

リスチレンチューブに200JJlずつ分注する．

トl
、
Iq

4℃で一夜放置した後過剰の抗体溶液は回収する．回収した抗体は数回くり返して使用可

20

能である．ついで0．05Mトリスー塩酸緩衝液
pH8．0（0．075M塩化ナトリウム，0．1％ウシ
血清アルブミン，0．02％アジ化ナトリウム）で2回洗浄し，乾燥後低温で保有する．この

0

2

4

6

8

10

12

14

16

18

ng／山beunlめeledβ一¶GF

特異抗体被覆チューブに測定試料を200〟1ずつ加え4℃で24時間放置する．試料を除き

図2

CalibrationcurveuSingavarying

上記緩衝液で2回洗浄する．次に125Ⅰ−βN

concentrationofunlabeled

GFを200／mouseβrnervegrOWthfactor

1（約20，000cpm）加え4℃で24−59−

CL6Bカラムによるゲル濾過を行った結果がであった．

図3（実線）である．125トβNGFのみのゲ
ル濾過（破線）では単一のピークが見られた

Cpln

が血清の存在下では高分子量領域にかなりのlOOO

放射活性が観察された．この結果から血清中に125Ⅰ−βNGFと結合する物質が存在するものと考えられた．このような現象は125Ⅰ−

800

600

βNGFの1000倍量の非標識βNGF存在下でもみられ，この物質はβNGFと非特異的400に結合し，しかもβNGFとの結合量の著し200く高い物質であると推定される．さらにこの物質と結合した125トβNGFはβNGFの特異抗体との抗原抗体反応性が著しく低下する

0

0

20

80

Condlt10n8：叫leH苫買：蒜緑諾。リ三，mあるいは微量の血i青が混入した動物組織を試

ColⅧn al托；0．5Ⅹ105cm
葛心ffer；0．051t80dltmph08phate buffeT，plI6．8
FTaCtlon8；1．2ml

料としてradioimmunoassayを行う場合，こを共存させない
図3

ことが必須である．著者らのOne−Site radio−

Gel filtrationoftheincubation
mixtureofhumanserumand125I−β−immunoassay法は図1に示すごとく特異抗NGFonacolumnof SepharoseCL

体をチューブ表面に吸着，不溶化する方法のため，試料，125トβNGF

60
Tube No．

ことも観察された．これらの結果から，血i青れらの試料と125トβNGF

40

6Bを順次洗浄後にassay系に加えることが可能である．
Agt…

18−11veeb

はOne−Site radioimmunoassay系を●●．†HJ・⊥

●●

●
●●
●●

T土

V

準曲線とほぼ同じ阻害勾配を示し，この方法

八●■1＝■●一︼一⁝一■︑︳○倍数希釈曲線を破線で示したがβNGFの標

■折り−

8
0

今回測定したマウス筋肉ホモジネート上i青の

T・11

〇
O
1

線（実線）で約2ng／mlまで測定可能である．

l−5vteb●用いたときの非標識βNGFによる125トβ
NGFのチューブへの結合阻害をみた標準曲

7−8Yeeb．訂﹂JJ﹁図2

OによりNGFレベルの定量が可能であることO●●がわかった．
この測定法により3群の週齢の発症マウス
および発症していないマウス後肢骨格筋中のNGF−LIレベルを測定した結果を図4に

dy／◆
■▼t明色

示す．顎下腹でみられるような雌雄1）2）差は全

dy／dy dy／◆

◆／十

dy／中

十／十

dy／◆

dy／dy

◆／◆

払t（ ）；22．ぬ411．7士1．319．6鶴．98．Oh．811メ2．日．9和J
押IlH■山く認められず，すべての週齢で発症マウス骨
格筋中のNGF−LIレベルは発症していない
マウスのそれより低い値を示したがその差

図4

Levelofthecrossreactingmaterial（S）withβ−nervegrOWthfactorin

は若い群ほど大きいことが明らかとなった．

themuscleofdystrophicmouse

すなわち10〜11週齢，7〜8週齢ではその蓋は約2倍であったが4−5週齢では4倍以上（C57BL／6J）

−60−

考

案

U．：Nerve Growth Factor，Physiol．

血清中には125Ⅰ−βNGFと結合する高分子

Rev．，48：534−569（1968）

2）林恭三，古川昭栄：神経成長促進因子

量物質が存在し，radioimmunoassay法によってNGF−LIレベルを測定する際の大きな−最近の動向−生化学，障害となる．

49：389−410（1977）

著者らはβNGF特異抗体でポリスチレン

3）Siggers，D．C．，Rogers，J．G．，Boyer，S．

チューブを被覆したβNGF特異抗体不溶化

H．，Margolet，LリDorkin，H．，Banerjee，

チューブを用いることによりこの高分子量物

S．P．＆Shooter，E．M．：IncreasedNer−

質と125Ⅰ−βNGFの相互作用を抑え，筋肉組

Ve Growth FactorβTChain Cross−Re−

織中のNGF−LIの測定に成功した．しかし血清中のNGF−LIレベルは測定感度に

actingMaterialinFamilialDysauton0−問題がありより高感度な測定法の開発ととも

634（1976）

mia，N．Engl．J．Med．，295：629−に血清中に存在するNGFと非特異的に結合

4）Bigazzi，M・・Revoltella・R・・！Casciano・する物質との反応性や，さらに血流中のNG

S．＆

Fの存在形態を明らかにすることが急務であNerve Growth Factorinthe Serum ofる．
NGFはマウスでは顎下腹に大量に含まれa Patient with Medullary Carcinomaているが他の多くの組織にも微量ながら存在

no1．，6：105−112（1977）

Vigneti，E．：High Level of a

Of the Thyroid Gland，Clin．Endocri・する．Murphyll）らは培養ラット骨格筋細胞が5）Fabricant，R．N．，Todaro，G．J．＆Eld−

マウスβNGFと生物学的，免疫学的にきわridge，R．：ⅠncreasedLevelsofaNerve

GrowthFactorCrossReactingProtein

めて類似した物質を産生することを報告している．しかし現在のところ，産生されたNGF

in様物質が筋組織中でどのような役割を担って＝CentralCet，Neurofibromatosis，Lan−

t：4−7（1979）

いるのか明らかではない．今回，筋ジストロ6）Varon，S，，Nomura，J．，Perez−Polo．J．

フィー発症マウスと発症していないマウスのR．，Shooter，E．M．＆ Kennedy，J．P．

骨格筋におけるNGF−LIレベルに明確な

Jr．：TheIsolation and Assay of the

差が兄い出された．発症マウス骨格筋中にはNerve Growth Factor Proteins，Me−

Ca依存性中性プロテアーゼ12）やセリンプロ

thodsofNeurochemistry（ed．Fried，R）

テアーゼの活性の上昇が報告13）されており，Vol．IIl：203−228，MarcelDekker，New

NGF−LIレベルに何らかの影響をおよぼYork（1972）

している可能性も考えられる．しかし発症直7）Varon，S．，Nomura，J．＆Shooter，E．

後のマウス（4〜5過齢）で特にNGF−LI

M．：TheIsolationoftheMouseNerveが低いことや，すでに著者らが報告した2）14）よGrowth Factor Proteinin a Highうに7−8週齢のマウス顎下腹中のNGF活

Mocecular Weight Form Biochemist−

性レベルにも著しい差が兄い出されているこ

ry，6二2202−2209（1967）となどを考えあわせると，筋ジストロフィー症と骨格筋におけるNGF−LIレベルとの間

8）Vaitukaitis，J．，Robbins，J．B．，NieshT
lag，＆に何らかの相関性が示唆される．

Ross，G．T．：A Method for

ProducingSpecificAntiserawithSma−
llDoseofImmunogen，J．Clin．Endocri−

文

献no1．，33：988−991（1971）

1）Levi−Montalcini，R．＆ Angeletti，P．

9）Ouchterlony，0．：Antigen−Antibodyー61−ReactionsinGels．IV．Types of Reac−

Muscle Cells

tionsinCoordinatedSystemsofDiffu−

Acad．Sci．USA，74：4496−4500（1977）

inCulture，Proc．Natl．

sion，Acta Pathol．Microbiol．Scand．，

12）今堀和友：細胞内蛋白質分解酵素の新しい役割（1979）

Suppl．32：231−246（1953）

第20回日本医学会総会（東京）講演要旨集，p16

10）Stoeckel，K．，Gagnon，C．，Guroff，G．＆Thoenen，H．：Purification of Nerve13）Katunuma，N．，Yasogawa，N．，Kito，K．，

Growth Factor Antibodies by Afnnity

Sanada，Y．，Kawai，H．＆Miyoshi，K．：

Chromatography，J．Neurochem．，26：

AbnormalExpressionofaSerinePro−

1207−1211（1976）teaseinHumanDystrophic Muscle．J．
Biochem．83：625−628（1978）11）Murphy，R．A．，Singer，R．H．，Saide，J・

14）古川昭栄，西谷

D．，Pantazis，N．J．，Blanchard，M．H．，

裕，林恭三：筋ジスト

Byron，K．S．，ArnaSOn，B．G．W．＆

ロフィーマウス顎下腹中の神経成長促進

Young，M．：SynthesisandSecretionof

因子（nervegrOWthfactor）の活性レベa High Molecular Weight Form of

ル，医学のあゆみ，109：143−145（1979）

Nerve Growth Factor by Skeletal−62−

ⅠⅠ．筋ジストロフィー症の遺伝・臨床と病態生理

a）遺

伝

b）臨

床

C）形

態

d）生

理

11）Facioscapulohumeral syndrome：
Thenon−hereditaryvariety

古

川

哲

顔面肩甲上腕（FSH）型筋萎縮分布を示す

雄

症例

1

27才，女性疾患には，進行性筋ジストロフィー症以外に胎生期，出産後の発育は正常であったが，も，神経原性筋萎縮症，多発性筋炎，代謝性18ヵ月の時，40℃近くの発熱があった．扇桃

筋疾患などが知られており，1症候群を形成

腺炎の診断をうけ，治療により1週間ほどでする1）．この中には，さらに新しい疾患が含ま解熟した．1カ月後，顔がまがっていることれている可能性も残されている．

に気づかれ，同時に左上下肢の力が弱いこと

次に記載する症例は，従来の報告とは異なに気づいた．家庭医により，ポリオと左側のった特徴を有する．

Bell麻痺との診断をうけた．10才，医師に異状肩甲を指摘された．15才，大学病院でFSH型筋ジストロフィー症を疑われたが，筋電図では高振幅電位がみられ，左三角筋の生検では特別￣な変化はみられなかった．19才，左大腿四頭筋生検でもこれという変化が認められなかった．27才，図1のような筋萎縮分布を示し，特に左側に著しい．顔面筋も弱く，兎眼がみられる（図2）．血清CPK値は237（正常＜100）．筋電図では，軽度の神経原性の変化を認めた．家族歴はない．

図1 症例1全身図2 症例1顔面＊日赤医療センター神経内科

−65一

症例

2

15才，女性症例

349オ，女性生後15ケ月の時，馬蹄腎を発見され手術を5才1ヵ月の時，高熱，堰気，嘔吐があり，うけた．退院時，立ち上がるのに力が弱いの

数日で回復した．2ヶ月後，母親は，彼女がに気づき，両親は顔面の表情が乏しいことに右足をひきずり，背中がまっすぐでないこと気づいた．3オ，大学病院で顔面筋々力低下，に気づいた．また，一人で立ち上れず，笑顔尖足，Gowers徴候陽性を指摘された．筋電図が作れなかった．家庭医はでは神経原性変化が疑われたが，右前径骨筋
生検では特別な変化はみられなかった．

断した．その後，筋力低下はあまり進まなか

小児麻痺

と診

ったが，川肢，躯幹の変形に対し，種々の整以後，顔面筋の筋力低下は徐々に回復し，

形外科的手術をうけた．49才，顔面筋は弱く，15才では，わずかに認められる程度である．

両側の兎眼がみられた．口笛がふけない．肩四肢，躯幹の筋萎縮はjumptypeを示し，右甲，上腕，腰帯部，前径骨筋に著しい萎縮を側の方に強い（図3）．血清CPKは29．家族認めた．血清CPKは40．筋電図ではPOly，歴はない．

phasicunitのみを認めた．家族歴はない．
以上3症例は，いずれも発症がはやく，発熱，あるいは手術後に亜急性に発症し，最初の診断はいずれもポリオとされている．特に初期には，はっきりとした左右差がみられている．その後の進行は，非常にゆっく りで，一部の症状は軽快を示している．家族歴は詳
しく調べてもいずれも陰性で，血族結婚もな
1965年，神林ら2）は，3才時，百日咳（？）に羅患後発症した神経原性の顔面，躯幹，四肢近位筋萎縮症を発表しており，この症例は上記の3例と酷似している．さらに発症がはやいと考えられる例には，片側顔面神経麻痺を伴なったFSH型神経原性筋萎縮症の双生児例3）があり，これも近縁である可能性がある．HansonとRowland4）は，M6bius症候群を呈したFSH型筋ジストロフィー症を記載しており，彼らは，尭症のはやいこと，左右差の強いこと，進行のおそいこと，家族歴のない点を共通の特徴として強調している．同様の例は，宮崎ら5）によっても報告されている．
上記の3症例の発症には，初期に何らかの感染が関与している可能性も考えられるが，診察した時点ではそのような所見は得られな

図3

症例2全身

かった．これらが，はたしてgene−determinedの病気でないかどうかは，さらに検討を要す
るが，．とりあえず，FSH syndromeの中の−66−

nonThereditary varietyとして記載しておき

一側性顔面神経麻痺を伴った顔面肩甲上たい．詳細は別に報告した6）．

院型神経原性筋萎縮症．第67回日本神経学会関東地方仝発表．東京．1978．11．25．

文献4）HanSOn，P．A．and Rowland，L P．：

1）Furukawa，T．and Peter，J．B．：The

M6biussyndromeandfacioscapulohu一muscular dystrophies and related dis−meral muscular dystrophy．

Orders・J・A・M．A．，239：1537−1542，

Neurol・，24：31−39，1971．

1654−1659，1978．

Arch．

5）宮崎真佐男，俵哲，寺尾章，荒木淑郎，

2）神林敬一郎，室根郁男，白川健一，近藤

調輝男：幼児期よりcongenital facial

喜代太郎，椿忠雄，貝津徳男，古川哲雄，

diplegiaを呈した非定型性顔面屑甲上腕

吉田皆迫：Facialdiplegiasyndromeと型筋ジストロフィー症の1例．臨床神経，proximalmuscularatrophyを合併した

16：32−38，1976．

6）古川哲雄：神経筋疾患における遺伝学的3症例．臨床神経，5：658，1965（抄録）．
3）岩本奈津，高昌星，小口喜三夫，柳沢信夫，塚越広：双生児に認められた先天性間鼠責．神経進歩，1979（印刷中）．

−67−12）筋萎縮性疾患の遺伝分析
クーゲルベルグベランダー病（KW病）について

古
研究協力着

金

庄

久

納

禎
光

敏

行

秀

中

島

洋

明

正＊＊井

形

昭

弘

なお，一般集団の人口は1975年施行の国勢

著者らは，昨年の班会議において進行性筋調査による鹿児島県人口とした．

ジストロフィー症1）（Limb・Girdleタイプ）およ
びその類縁疾患2）（Charcot−MarieTTooth病，
脊髄小脳変性症，痙性脊髄麻樺，重症筋無力症，

資料の分析

Kugelberg−Welander病）の6疾患について，（1）単純遺伝様式の仮説への適合性の検定

家系調査を行い，遺伝分析を試みた結果を報告した．本年度は鹿児島県内発症のKugel−

本資料収集は，ほぼ単独確認によるので，両親とも正常の家系資料を用い，発端者をも

berg−Welander病（以下KW病と略）をとり含めた同胞の総数によって表1の如く集計

あげ，さらに詳細な家系調査を行い，遺伝様表l KW病の分柾比の検定
正常×正常（いとこ結婚率：12．5％）

式の解析と遺伝子型と環境の相互作用の解明を試みたので報告する．
資同胞群 の大 きさ S料

1971年1月から1978年10月までの期間

家系 数 ■ 同胞 総数
S N s
N s

患者 数

2

6

に把握した，鹿児島県内のすべてのKW病を

3

6

18

7

発端者として家系調査を行った（32家系，患

4

7

28

10

者数42名）．KW病の診断にあたっては，臨

5

4

20

4

床症．状および臨床経過，血清酵素学的検査，

6

5

30

8

筋電図および可能な限りの筋生検を行い，総合的に判断した．その結果，1）主として近

7
8

1

8

1

位筋をおかして遠位筋におよび，2）経過は

9

3

27

4

N ＝ 32

T ＝133

R ＝4 2長く予後は良好で，3）筋電図および筋生検

合所見は主として神経原性変化をしめすなどの

計

12

8

条件をみたすものをKW病と定義した．

分柾比 P・＝字詰＝0・0991＊鹿児島大学医学部衛生

誤差 S．Ep・＝＊＊国立療贅所南九州病院神経内科＊＊＊鹿児島大学医学部第三内科−68−（T− R）（R−N）（T−N）30．0297

し，分離比（P ）および標準誤差（S．E。・）病の頻度が著しく異なるが，ここでは必ずしを推定したところP．＝0．0991，S．E。・＝0．

も資料数が充分でないので，これらを無視し0297が得られた．これは分離比の期待値0．25て，一般集団中のKW病の頻度（Pg）を0．

に比べ，著しく低く，その差は統計的有意水

00195〜0．00465％とする．
本資料から同胞再現率（Q）は0．1786±0．

準に達し，したがって本仮説に適合しない．

0512が得られた．

（2）近親婚率
両親とも正常な家系で，いとこ結婚率を求多因子遺伝仮説への適合性は，Q＝√￣戸言めると0．125±0．0585が得られた．これを鹿から推定するが，分析結果はQ＞√一百・の関児島県集団のいとこ結婚率（約0．04）に比べ

係かみちれ，本仮説にも適合しない．
（4）非遺伝性の可能性の確認

ると著しく高い．

資料のKW病のうち，一部は非遺伝性のも（3）多因子遺伝の仮説への適合性の検定のも含まれることも考えられるので，次の2一般集団（1975年度鹿児島県人口）中のつの方法で検討を行った．

KW病の頻度を性別，年令別に調査したとこ
ろ，表2の如くである．性別，年令別にKW

表2
年

令

年令別，性別一般集団中のKW病の頻度

男

女

5 − 9

ノ
合

計

2

（
0．
00 2994 2％ ）

2

（
0 ．
00 15269 ％ ）10− 143（
0．
0 038489 ％ ）1（
0．
00 13349 ％ ）

4

（
0 ．
002 6169 ％ ）15− 194（
0．
0 05602 7％ ）2（0．
0 02865 4％ ）

6

（
0 ．
00 42496 ％ ）20− 241（
0．
0 021269 ％ ）1（0．
0 01663 2％ ）

2

（
0 ．
00 18667 ％ ）25− 295（0．
0 089844 ％ ）1（0．
0 01659 9％ ）

6

（
0 ．
0 0 5 17 7 ％ ）3 5− 3 9

2（0．
0 03956 7％ ）

2

（
0 ．
00 18369 ％ ）40− 4 41（
0．
0 01669 7％ ）1（0．
0 01479 2％ ）

2

（
0 ．
00 15687 ％ ）3（0．
0 065294 ％ ）1（0．
0 01576 7％ ）

4

（
0 ．
00 36573 ％ ）

19

（
0、
0 0465±0．
00 107）9（0．
0 0195±0 ．
000 65）28（
0 ．
00 322±0．
000 61

3 0− 3 4

45− 4 950− 54合計

表3 単発同胞群の観察値と期待値

同 胞数

同 胞 群 t■K W が単 発 し た 同
胞 群 数 （観 察 数 ）

S

N s

A

B

2

6

4

5 ．1 4

1 ．1 43

6

5

3 ．2 8

1 ．7 24

7

4

4 ．3 2

0 ．3 25

4

4

4 ．0 50 ．0 56

5

3

2 ．1 90 ．8 128

20

1 8 ．9 8

1 ．0 2ー69−

K W が単発 す る
同胞群 の期 待数
A −B

（a）単発同胞群について値が得られた．

KW病が単発した同胞群数とその期待数（b）親の年令効果の比較を行ったものである．KW病がすべて

一般に遺伝性疾患あるいは先天性異常の出

単一劣性遺伝子によると仮定して，KW病を

現に出生時の親の年令効果がみられる場合が生む確率をp＝1／4，正常者を生む確率をq＝ある．KW病についてもこの点を検討するた3／4とすれば，ヘテロ同士の結婚でS人の子め出生時の親の年令別に頻度を求めたとこのうちKW病を1人もださなかった家系のろ，表4の如き結果を得た．調査資料が少な

頻度qS，1人だけKW病である家系の頻度

いためか分布の変動が大きく，決定的なこと

SpqS▼1，KW病を1人も生まなかった結婚ははいえないが数字の上からは出生時の親の年含まれないから，これを除いた1−qSだけ発見

令が若年層の方に多い傾向がみられる．

され，そのうちSpqSrl家系がKW病の単発す（5）発病年令分布

る確率になる．したがって，いまS人の同胞

遺伝的異質性のものが混入するため，分離のうちKW病を少なくとも1人出した同胞比や同胞再現率を乱していることも考えられ群数をNsとすると，KW病を1人しか含まるので，発病年令を検討し異質性の検定を行ない同胞群の期待数は，NsSpqS￣l／1−qSであった．すなわち図1で示したように，KW病

たえられる．

のほとんどは20才頃までに発病するが，その本資料について分析した結果，表3の如く，後も発病し，若年令層群と高年令層群が存在

KW病が単発した同胞群数（A）とKW病がするようでもあるが，資料が必ずしも多くな単発する同胞群の期待数（B）との差は著しいのでこの点ははっきりしない．

く小さいが，数字の上ではAがBより大きい
表4

出生時の親の年令分布

〔正×正〕
母
出

生

年

令

時

計
1 5− 1915 − 1920 − 24父
25 − 29
3 0 − 34

2 0− 2 4

2 5− 2 9半■

0 ・00 0圭

1 ・00 0 圭

0 ・33 3芋

0 ・00 0 宗

0 ・43 8 宗圭

0 ・33 3 喜＝0 ・
4 44

30 −3 435 − 39

40 −444 5− 4 9

0 ・5 00宗

0 ・18 8 圭

0・167

0 ・20 0 簾

0 ・33 3 ≠0 ・143 圭

0・
4 00

半

0・
0 00 圭

0・
3 33

圭

1・
0 00

年
圭

3 5 − 39
4 0 − 44
令
4 5 − 49

圭

0・
333 半

0 ・00 0半

0 ・00 00・
3 33 半

0 ・00 050 −
第0 ・22 2 宗

0 ・39 4 ．
宗

0 ・3 13 宗

0・
2 00 圭0・
3 75 圭

計
㌣

．
3 57

諾

宗

．
277

−70−

0・
3 08

蒜 ＝0 ・3 14

0−

4

5

−

9

10−14

15−19

20−24

25−

29

30−

34

35−40

（歳）
図1KW病者の発病年令分布考察およびまとめり小さい場合は単一遺伝仮説に問題があるこ

KW病が遺伝性疾患であることはすでにとはよく知られている．今後，調査例数を増述べた如く，（1）同胞再現率および同胞罷病率

して，遺伝的異質性，非遺伝性など充分考慮が一般集団の頻度に比べて著しく高いこと，して分析する必要がある．

（2）KW病の両親が共に正常の組合せのいと文

こ結婚率が一般集団のいとこ結婚率に比べて献著しく高いことなどから疑いない事実と思わ

1）古庄敏行，福山幸夫，大沢真木子，小川れる．昨年来，本病の遺伝機構の解析を試み

加代子，塚本明子，近藤喜代太郎：先天てきたが，単一遺伝子仮説および多因子仮説

型進行性筋ジストロフィー症の遺伝的分のいずれにも統計的に適合しなかった．しか析．沖中班「筋ジストロフィー症の病因

し，本病のいとこ結婚率が一般集団のそれにの究明に関する研究」 昭和51年度研究比べて著しく高いことから劣性遺伝形式をとることが予想・されないではない．人の遺伝形

2）古庄敏行，納光弘，井形昭弘：筋萎縮性質は血液型を除き多くは不完全浸透する場合

疾患の遺伝分析．沖中班「筋ジストロフ

が多い．もし本病が単一劣性遺伝で不完全浸ィー症の病因の究明に関する研究」 昭

透をすると仮定すれば，浸透率は0．0991／0．

和52年度研究報告書197−200，1978．

報告書91−94，1977．

25＝0．3964である．しかし，浸透率が0．7よ−71−13）先天性ネマリンミオパテーの遺伝機構補遺
近

藤

喜代太郎

本症（CNMとする）の臨床像は均一で大量

結

果のネマリン小体によって特徴づけられている

1．患者数と臨床的特徴および近親者

が，遺伝的には異種性といわれる．しかし私発端者は男24，女26で性差がなく，年令はゼロから30オ代にわたっていた．発端者の兄

共は計35同月包群を分析し，つぎの結果を得，当班の前身である「沖中班」昭和52年度班会

弟5，姉妹4，母3，母方祖母1はCNMを議で報告した；1）CNMには幼児期の死亡例有していた．この他，母1，母方祖母1，同が多いが，のちに安全となり，子をもつ患者

叔父1，同叔母・2，兄弟1に種々の非特異的もある，2）無症状の近親者にネマリン小体をもつものがある，3）染色体異常，単劣性，な神経筋症状を認めたが，これらは直ちにはCNMと診断しなかった．また，ほぼ無症状の伴性劣性は否定できる，4）単優性を仮定し，父2，母2，母方祖母1，姉妹1．の筋生検で，1）に伴なう淘汰の様相と2）による遺伝子

ネマリン小体が認められた．

の伝達，集団内保有への影響に配慮すれば，臨床症状はほぼ定型的で変動は比較的少な

CNMの家族性発生をほぼ説明できる2）．
今回の報告の目的は，その後の資料を加えかったが，発端者とその罷患同胞計59中15てこれらを再検討し，CNMがもし単一疾患におき，死因はつねに呼吸筋力低下であるとであればいかなる遺伝機構をもつかをより確推定された．

が死亡しており，しかもその2／3は5才未満

実に推定することである．

2．否定できる発病機構
染色体は2例で調べられ，ともに正常であ材料と方法った．出生前因子は記載のあった26中，2に遅発性例を除き，筋生検で確認された定型
例，男24，女26を発端者とする計44家系47

性器出血，3に難産，各1に悪づ互，抗生物質
使用，人工中絶の試み，があるだけであった．

同胞群を用いた．うち3家系は湯浅ら（1977）

出生順位効果はなかった．

が報じた自験例であり，残りは日本をふくむ
各回の症例報告のほとんどすべてに相当す

伴性劣性遺伝は患者数に性差がなく，父方から伝わった男児例があることから否定される．図1はこの資料を図示したものである．

た．

この資料について，CNMの臨床像，とくに単劣性遺伝は曜患親がかなりあること，両死亡状況，家族性発生の特徴，無症状の近親

親の近親婚の増加がないことから否定されの筋生検所見などを総合的に検討し，後述すた．

る種々の発病機構と比較し，各機構ごとに理

3．直ちには否定できない発病機構論的に期待される特徴と，観察された特徴とかかる可能性にはつぎのふたつがある．

の矛盾のもっとも小さいものをひとつ選ん

伴性優性．病的遺伝子がⅩ染色体にあるとだ．

1）患父の娘はすべて罷患するが，息子は正＊新潟大学脳研究所神経内科

常，2）患母の子は性と関係なく1／2が罷患，−72−

．吏﹂脂潮境怒G中日皿疋心帝国．琴革箪軍票雲慧警官霊ユニ芸でふ．嘩聖土成簑塞′て八つけや ﹂東凶舟卜神聖eJ吏ぐ巾叶漣磐劇踵シ衰ヨ頼朝．吏﹂ヤ鱒時準等爆踵ュ埠量雲喋↓周．神事囁柊望環．﹂脂巨染

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一指輯S付出局■把持狐狐狐鵬

トまt．︻●石gjS

彊絹結結い損㍉担絹抱−打彊h■●ま﹁Lと■J︼宣亡■；巴二733）孤発例の男女比は1：2となる．CNMでは親に無症状のネマリン小体保有者がある，6）1）の事例はなく，またネマリン小体または非特異的神経筋症状の保有までをふくめた孤発例が多い，7）多世代の家系が少ない，

患母12の息子は6／17（35．3％），娘は8／24（33．3％）が曜患するので，50％に達しな資料をみると，1），3），4），5），6），7），は明白に成立する．分柾比は，片親がCNM，い点を除けば，2）は満足される．孤発例と小体または非特異的症状をもつ10同胞群を考えられるものは男15，女14で，3）は満足

用い，Weinberg法で計算すると，CNMにつされない．ただし，恩親はすべて母であり，

いて0．2（p±1．96、／∇石は0．076〜0．324），

ネマリン小体または非特異的な症状の保有者

非特異的症状をCNMとみなして患者にふも圧倒的に母方に多いことが偶然でないな

くめても0．3（0．158〜0．442）で，0．5との差ら，CNMには母方から遺伝しやすい機序がは有意であった．一方，期待と観察が合わなあるのかもしれない．

いのは2）で，父母は同数に侵されるべきでなどの特徴が期待される．

細胞質遺伝．遺伝物質が細胞質にあれば，あるのに，CNM，小体または非特異的症状を精子は後者を欠くので，遺伝はつねに母方をもつ母9に対し，父には小体保有が2あるに通じておき，発病傾向に性差がなければ，母すぎなかった．かかる差は偶然にもおきよう

自身と息子，娘の同数が侵される．前節での
べたようにCNMにはこの特徴があるが，父が，前節でのべたような，母を通ずる遺伝機

方に患者のあるGonatasら1）（1966）の家系は例があるように，おなじ障害があっても，女

細胞質遺伝とは両立しない．

子は結婚の機会に恵まれやすいため，かかる構も排除できない．しかし他の筋萎縮症にも結局，上記の2機構は直ちには否定できな結果になったともおもわれるので，2）がみ

いが，積極的根拠もない．

られないだけで単優性を否定し得ない．

4．肯定すべき発病機構
冒頭でのべたように，単優性遺伝がこれで考あることが前報で示唆されている．この場合，

察

症例報告の統計的分析から疾患の本体に迫

一般に1）片親羅患，2）近親婚の増加はなる方法には問題点もあるが，CNMのようない，3）子は性と関係なく1／2が曜恩，4）

極稀な疾患では有用である．本研究はCNM

孤発例の男女比は1：1，などが期待される．

の諸特徴を総合して，もしCNMが単一疾患

しかしこれらは生殖期後におきる良性の疾患ならばどのような発病機構を考えればもっとでは観察されるが，単優性疾患がきわめて悪も合理的であるかを推定するものである．

性で子がのこらない場合は1），3）はみられ

本研究ではCNMの発病機構として7つ

ず，患者は新突然変異による孤発例のみで，の仮設を挙げ，観察された諸特徴をもっともその頻度は突然変異率の2倍になるにすぎな

よく説明できるのは単優性遺伝であることを

しヽ

示した．

CNMは幼小児期の死亡率が高いが，成人

多くの単優性疾患は比較的良性であるが，した患者の一部は子をもち，また無症状のネ
マリン小体保有者によっても遺伝子が次代に

これは，人類の歴史のなかで生じた多くの優伝えられるので，上述の両極端の中間にある性突然変異のうち，淘汰されずに今日に伝えられるのは子がのこるような疾患に限られたたといえる．そこでCNMが単優性なら，1）めである．CNMは早期死亡が多い点ではこ一部の発端者の片親は羅患するがかるい，2）の条件を欠くが，重症度の変動がきわめて大父母は同様に罷患する，3）分維比は0．5よ

きいため，軽症患者の一部は子をもち，またり小さい，4）表現動揺性が大きい，5）近無症状のネマリン小体保有者は淘汰と中立に一74−

なって，上記の条件を満たす．CNMが単優性

文であることが認識しにくかったのは，かかる

献1）Gonatas，N．K．，ihy，G．M．，Godfrey，E．

特殊性のためとおもわれる．

H．：Nemalinemyopathy，theoriginof
nemaline structures．N．Engl．J．Med．

結論

274：535−539，1966．

CNMは単優性遺伝に従うと考えるのが合2）椿忠雄，近藤喜代太郎，福原信義，湯浅理的である．早期死亡のためつよい淘汰をうけるが，軽症者，無症状者によってその遺伝

竜彦：Nemalinemyopathyの遺伝．厚生省「筋ジストロフィー症の病因の究明に子が次代に伝えられる．

関する研究」昭和52年度研究報告書，
1973，pp．206−208．

ー75−14）Duchenne型筋ジストロフィー症の母子発症例

中

研究協力者

玉

西

城

孝

允

雄

之

葛

原

茂

樹

症例1 発端者は2・歳3ケ月の男子．出産は正常，発語は1歳6ケ月と遅く，1歳5ケ月の時の保健所検診でハイハイしかできず，運動機能の発達遅延を指摘された．処女歩行

Duchenne型筋ジストロフィー症（以下DMDと略す）の女性Carrierにおいて血清
CPKの上昇，俳腹筋の仮性肥大，又生検筋にmyopathyに相当する所見がみられることがあるのは比較的よく知られたことであるが1），は2歳である．当院入院時，身長84．7cm，体重12．5kg，頭部の変形（−），胸腹部に異常所

臨床的に筋力低下，筋萎縮等のmyopathyと見（−），神経学的所見として動作性IQ64，
脳神経領域に異常所見はみられないが，肩甲しての症状を示すことは極めて稀であり，Emery2），古川ら3）のCarrierの報告例においても動揺性歩行，軽度の筋力低下を示す程度・下部，上腕の筋萎縮と肩甲帯，腰帯に4の筋力低下が認められた．また排腹筋に仮性肥大である．最近，岩本ら4）は筋萎縮を伴った明ら
かなmyopathyの症状と筋鞘核内封入体を著明な筋萎縮と筋力低下がみられ，その症状あり，．登はん性起立，動揺性歩行がみられた．
検査所見ではCPK2000単位以上（正常値20単位以下），アルドラーゼ6単位，GOT164単
位，GPT183単位と上昇，筋電図では四肢での重いことと障害された筋の分布にも特徴が

low−amplitude，Shortdurationmotorunit

みられ，稀有な症例と考えたので報告した．

potentialが認められた．左大腿四頭筋の筋生認めたCarrierの例を報告している．今回，我々もDMDのCarrierと考えられる母親に家系図は図1の如くであり，血族結婚はな

検では筋線経の円形化，大小不同，中心核のく，CPKの上昇も以下報告する2例以外には認められなかった．

増加が目立ち，Opaquefiberも多数認められた．またperimysial，endomysialの結合織の増加が著明で丘ber necrosis，phagocytosisも散見された．電顕ではmitochondriaの異常，nemaline等は見出されなかった．
症例2 （発端者の母）35歳女性．
生下時の異常なし，処女歩行は2歳，乳幼児期より走れず，小学校入学時は階段が昇れず，中学校卒業時，歩行中よくつまずき，転倒しやすかった．28歳の時両下肢の痛みの為
近医受診，筋萎縮を指摘された．2年前より

図1 家系図貧血出現，最近，全身倦怠感，息苦しさが悪

数字は症例の番号化した．又昭和53年夏頃より出現した右鼠■● 発症例

径部月重癌のため，当院外科を受診，右大腿ヘルニアと診断された．その際筋ジストロフイ＊筑波大学臨床医学系神経内科−76−

ーが疑われ，当院神経内科受診．
全身蒼白で結膜，口唇，爪に貧血（十），心尖部中心にLevineII度の収縮期雄二lJ；あり．神
経学的には顔面筋に軽度，両肩甲帯，十鵬．i一ら
位弧 腰帯，大腿近位部に著明な筋萎祢i冬日。ど・め，萎縮した筋群や3十一4程度の筋力低 卜かみられた．両下腿月井腹筋に仮性肥大があり，硬くゴツゴツした感じとしてふれた．深部反射はアキレス腱を除いて消失し，登はん性起立と動揺性歩行がみられた（図2）．
H．N．35 F．

R．Deltoideus．一ノーし一一一一√ノー＋一一・什一一

R．Quaかceps．

R．Gastr。Cnem．山山ル⊥叫点りrTN
lOms氏：

図2

図3 症例2の筋電図．近位筋にShort

症例2の全身像
肩甲，上肢帯，腰，大腿近位部に筋萎縮，両隣腹筋に仮性肥大を認める．

図4

duration，lowamplitudemotorunit
potentialがみられる．

症例2の左排腹筋生検．染色H・E・×100
筋線経の大小不同，中心核の増加，筋線経のfibersplitting脂肪組織の増加がみられる．
−77−

検査所見ではHb7g／dl，赤血球数306万

ず，36歳の時上肢近位部の筋力低下を示し，と減少，CPKは582単位（正常値20単位以以前あった筋の仮性肥大が消失した．第2例下），GOT37単位，GPT45単位，LDH736
単位と高値を示した．心電図，染色体の数おは35歳で発症，上肢三角筋，大腿四頭筋の筋力低下とCPKの上昇を認めた3）．我々の経験よび形に異常なし．筋電図では四肢近位筋にした症例の如く，著明な筋萎縮を示し，CPK

著明なShort−duration，Iowamplitudemotor

値の中等度以上の上昇を示した例は極めて少

unitpotentialがみられた（図3）．左膝腹筋

なく，最近報告された岩本らの例4）に似ていの筋生検では肥大線経と萎縮線経が入りまじる．又障害筋の分布が月支帯型筋ジストロフィり，筋線経の大小不同が目立った．又中心核ー症に類似していることも注目すべき点と思の増加，筋線経のfibersplitting，脂肪組織のわれるが，これについては岩本らの報告例も増加もみられたが筋の変性像，phagocytosis

同様である．岩本らの報告例に比べ，本症例の所見はなかった（図4）．ATPase染色でもは，発症年齢が早いことが異なる．岩本らのfiber typeは分化しており，atrOphyのtype症例も同様であるが，症状の進行が殆んど認

predominancyは認められず，比較的良性のめられない時点で，なおCPKのかなりの上

myopathyと考えられた．又電顕でも，nema−

昇のみられることおよび筋萎縮の分布の特徴

line，mitochondriaの異常等，特殊なCOnge−

については，今後の検討を待ちたい．

nital myopathyの所見は認められなかった．
結

考

察

語

Duchenne型筋ジストロフィー症の女性保

症例1の男子は1歳5ケ月の時既に，運動因者と・考えられる母に明らかなmyopathy

機能の発達遅延が認められ，2歳3ケ月の現の症状を認めた症例を報告した．症例は処女在，肩甲帯，腰帯の筋力低下，肪腹筋の仮性

歩行2歳で，幼児期に発症し，肢帯型筋ジス

肥大を認め，登はん性起立と動揺性歩行を示

トロフィー症に近い筋萎縮の分布を示し，筋電図で筋原性の変化を，又，筋生検で，明らかし，血清CPK値の著明な上昇と，筋電図，筋生検の所見からDuchenne型筋ジストロフィ

なmyopathyに相当する所見を得た．進行がー症と考えられる．また，症例2の母にも臨殆んどみられない現時点でなお，CPKが582

床症状を認めたが，本家系には血族結婚はな

単位（正常値20単位以下）とかなりの高値をく月支帯型筋ジストロフィー症は考えにく く症
例2についてはDMDの女性保因者の発症例示している点を含め，注目すべき稀有な症例と考えられる．

（manifestingcarrier）と考えた．
三好5），Penn6）らはDMDの女性発症者につ文献いては否定的な報告を行っているが，DMD

1）杉EEl秀夫：酵素学的（CreatinePhospho−の女性保因者（Carrier）にCPKの上昇，排kinase，Aldolase）に見た神経筋疾患の腹筋の仮性肥大，筋生検上myopathyの所見

臨床的ならびに実験的研究〔1〕臨床的は比較的よく認められる．臨床症状を示す

研究（進行性筋ジストロフィー症を中心

DMDの女性保因者についてはEmeryの報として）精神神経誌 62：106，1960．

告以来注目されるようになった．即ちEmeryの報告した2例は腰帯中心の筋力低下と，俳2）Emery，A．E．H．：Clinical manifesta・
tionsin two carriers af Duchenne

腹筋の仮性肥大，CPKの軽度上昇をみたが，muscular dystrophy．Lancet：1126，

筋萎縮は認められなかった2）．また，古川らの1963．

報告した第1例は幼児期に発症，以後進行せ

3）古川哲雄ら：Duchenne型筋ジストロフ−78一5）三好和夫ら：進行性筋ジストロフィー症

イー症の女性保因者に関する遺伝学的考

女性CarrierにおけるMyoglobin亜分察，臨床神経 5：628，1965．
4）岩本奈津ら：母および娘の保因者にmy−

画の異常，人類遺伝誌13：150，1968．

Opathy，母に筋鞘核内封入体を認めた

6）Penn et al：Muscular dystrophyin

Duchenne型筋ジストロフィー症の一家

young girls，Neurology

系，臨床神経19：112，1979．

1970．

−79−

20：147，

15）自覚症状を欠き，1例にパーキンソン病を合併した
大腿四頭筋障害を主とするミオパテーの同胞例

！家

研究協力者

目

馬

越

日

大

報告があるが，我々はこれに類似し，より軽キンソン病の合併をみたので，Quadriceps

義

現病歴：小学校頃から動作緩慢，下腿肥大があり，昭和51年，右上肢の動作時振戦が出
現．靴下を中腰の姿勢でははけないことを指摘された．昭和53年7月動揺性歩行を指摘さ

myopathyとの関連を検討した．

家族歴高

主訴：右上肢のふるえ，動作緩慢
既往歴：35才 脂肪肝（肝生検にて診断）

2同胞例で，1例にパー症

林がいとこ同志である（図1）．
症例1 発端者
秋○英○，39歳，男（三内4920−78）

的従来Quadricepsmyopathyとして若干の症で自覚症状を欠く

小例

この家系では発端者及び長兄以外

れ，左上肢のこわばった感じがあったため10月18日，信州大学第3内科を受診．Parkinson−には脱力を認めない．パーキンソン病を認めたのは発端者のみで，近親結婚を認め，両親

【コ 男
○ 女

甲 発症者・年鶴ヂ芸諾・死亡輔53

525046 ヅ39 4 31

図1 家系図両親がいとこ同志で，発端者および長兄に脱力を認め，発端者にのみパーキンソン病の合併を認めた．
＊信州大学医学部第三内科

ー80−ism，大腿筋萎縮，下腿三頭筋の肥大を認めた
ため，11月27日同科に入院した．経過中脱力はまったく 自覚していない．なお外来でL−
DOPA投与後，振戦は著しく減少した．
入院時現症二一般内科的に心・肺・腹部は異常なく，腰椎前攣を認める．神経学的には，知能は正常で，右顔面の筋力低下と右に強い
仮面横顔貌，Myerson徽候を認める．筋萎縮が両側大腿前面に軽度あり，下腿三頭筋の肥大を認める（図2）．また両側上肢，頸部に軽度の筋固縮と右側にやや強い振戦を認める．
筋力は上肢ではほぼ正常で，大腿四頭筋に軽度の筋萎縮と脱力のほか，大・中腎筋に軽度の筋力低下があり，右上肢の深部反射の低下と両側膝蓋腱反射の低下を認めた．ミオトニ
ア，感覚障害はなく，腹をつき出して歩く動
揺性歩行の傾向はあるが，登はん性起立は認めない．検査所見では赤沈は1−4mm／hと正常だが血清CPKは756国際単位（正常値30−230）と軽度上昇し，GOT41，GPT43．
γ−GTP，ChEは正常．耐糖能，甲状腺機能は
図2 症例1の全身像．仮面様顔貌，両側大腿前正常である．筋電図では，左右の大腎筋でShortduration，lowamplitude NMU，他の面の軽い筋萎縮，下腿三頭筋の肥大を認める．

図3 大腿班頭筋生検所見．中心核をもつ筋線経が53％と増加している．また軽度の問質結合織の増加があるが，筋線経の壌死，phagocytosisはない・
×100 HE染色−81−

pOlyphaT

IIfiber88％と著明なTypeIIfiberpredom−

sicNMUを認めた．運動神経最大伝導速度はinanceを示した（図4）．Gomoriのtrichrome

右尺骨神経で61．8m／sec，右脛骨神経で48．

染色では軽度の問質結合織の増加をみるが，上下肢筋の多数で持続時間の短い

8m／secと正常であった．脳波で1まe波が頻ミトコンドリア異常を疑わせる所見はなく，発したが，髄液・CTスキャンは正常であっ電顕的にもミトコンドリアの異常，特殊物質

た．左大腿四頭筋生検の結果は，HE染色では筋束の基本構築は良く保たれ，筋線維自体の沈着などは認めなかった．

の壊死，phagocytosisなどの変化はなかった古（⊃重○，53歳，男

症例2

発端者の長兄（図3）．しかし，筋線維直径のヒストグラム

現在農業に従事し，自覚症状は全くない．

では80〜140〟の大径線経の増加が著明であ小学校頃から登山・運動後しばしば下腿がつった（図4）．また中心核をもつ線経が53％

っぼり歩けなかった．また体格は同胞内ではと増加していた．軽度の問質結合織の増加と最も発端者に類似している．加齢につれ，膵

脂肪浸潤はあるが，炎症所見はなかった．

腹筋部のつっぼりと痔痛の発作は軽減した．

ATPase染色では萎縮線経はTypeI fiber，

現症：筋萎縮を両側大腿に軽度に認め，下Type II fiberにともに認められ，mOSaic

腿三頭筋の月巴大も認める．筋緊張は正常で，patternがみられ，TypeI fiber12％，Type

筋力は上肢筋は正常であるが，大腿四頭筋，

S出凹円Hh hO 出凹的︼≒喜

0

20

40

60

80

100120140160180

200

D工AHETER（ド）図4Histogramoffibersizesinamusclebiopsy（Quadriceps
femorismuscle）

80−140JJの大径線経の増加が著明で，TypeIfiber12％TypeII
fiber88％とTypeIIfiberpredominanceを示した．
−82−

大腎筋でごく軽度低下している．下肢遠位筋

predominanceを認めた．

力は正常．ミオトニア，動揺性歩行，登はん

4．発端者にパーキンソン病の合併を認め性起立はない．検査所見では血清CPKは674

た．

国際単位と軽度上昇し，GOT62，GPT39．

5．遺伝型式は常染色体性劣性遺伝が考え

筋電図では前腕筋でShortduration，lowam−

られた．

plitudeNMUを認め（図5），上下肢の多数の筋で持続時間の短いpOlyphasic NMUを

考

認めた．

察

本症例2例の臨床的特徴は，自覚症状を欠いているが，大腿四頭筋の軽い萎縮と脱力を

rt M．brachioradialis

きたし，周辺の下月支近位筋の軽い脱力，下腿三頭筋の肥大を認め，1例にパーキンソン病を合併していることである．大腿四頭筋は種々のタイプの進行性筋ジストロフィー（以下DMPと略す），多発筋炎，nemalinemyo−
pathy，Centralcore diseaseなどの先天性ミ
オパチ一，その他種々のミオパテーでおかさ
れ，近位性脊髄性筋萎縮症でもおかされる．
このうち成人に発症する多発筋炎では，大腿四頭筋に限局Lで慢性進行性に増悪する例が報告されている．1939年Denny−Brownら1）㌔㌔予㌧

は42才の女性の大腿四頭筋に，5年の経過の㌔▼㌧ヽ

限局した脱力と筋萎縮を認め，20年後Turner

㌧■三㌔㌔
㌔阜￣㌧〜
1■

㌔㌔
㌔卓、

とHeathfield2）は，同一患者で脱力と筋萎縮が三角筋，上腕二頭筋にも進展していることを確認している．筋生検では，炎症所見が

㌔

㌔㌔

ゝ

ないにもかかわらず，筋線維直径の大小不㌔ ▼七㌧

同・壊死が認められ，慢性多発筋炎と診断されている．またNevinら3）のlateonsetmus−

ゝ

㌧

＿J

llTlV

Cular dystrophy，Shy

図5とMcEachern4）のmenopausal muscular dystrophyでは大腿四頭筋のほか，腎筋，肩甲帯筋もおかされ，筋lOmSe⊂

症例2の前腕筋でShortduration，low
amplitudeNMUを認めた．

生検はDenny−Brownの例とほぼ同じ所見で，多発筋炎と考えられている．我々の症例は同胞発症例で遺伝的負荷が考えられ，筋生

以上をまとめると次のようになる．

検でも炎症細胞浸潤，筋線経の壊死が認められず，多発筋炎の可能性は少ない．

1．同胞8名中2名に大腿四頭筋を主とす
る軽度の筋力低下と筋萎縮，下腿三頭筋の肥

1922年Bramwel15）は中年発症で，大腿四大を認めた．

頭筋の萎縮，脱力を主とする2症例を報告し，以後同様の筋萎縮の分布を示す疾患群は2．筋電図で上月支にもミオバナーが疑われた．

quadricepsmyopathyと呼ばれるようになっ

3．筋生検で筋原性変化とTypeII fiber

た．彼の例は大腿四頭筋のうちでも，萎縮部
ー83−

と肥厚部が混在しているのが特徴で，歩行障

Kugelberg−Welander病の場合，筋生検で中害が強い．それ以前にErb6）がDMPの一型と心核，肥大鼠して報告した例は，59才の男性で12年の良筋原性変化を混在することもあるが，grOup

性経過をとり，大腿筋の脱力・筋萎縮と下腿

atrophy，angulatedatrophiedfibersなどの三頭筋の肥大を認めている．この例は上肢は神経原性変化を認めるのが一般的で，Type

全く正常で，詳細は不明であるが，筋萎縮・IIfiberpredominanceを示す．症例1では筋筋肥大の分布は我々の症例に類似している．

電図的にも神経原性変化が明らかでなく，筋生

またWaltonら7）は大腿四頭筋のうちVaStuS

検でgrOup atrOphyも認められずFurukawa

medialisの萎縮とVaStuSlateralisの肥大をの例とは異なる．本例のTypeIIfiber preT

認めるが，大腿四頭筋力の著明な低下を示

dominanceについては，三好ら12）はBecker

す2症例を報告し，肢帯型DMPのforme

型DMPの近位萎縮筋において，TypeIIfiber

frusteと位置づけている．これらの報告例は，

predominanceを示した例を報告してお結合織，脂肪織の増加などのいずれも筋萎縮・脱力が強いのに対し，我々のり，ミオバナーでもTypeII predominance症例では，（D幼小児期に既に下腿三頭筋の肥を示す例があることを示している．この点大があり，発症していた可能性があること，

で症例1は三好らの例に類似しており，本症②成人になっても自覚症状がまったくないこ

例の特徴となりうるかもしれないが，本態はとから非常に良性の経過をとるミオバナーと考えられる点が異なる．Walton8）はDMP

不明である．またパーキンソン病でBrookeら13）はTypeII fiber atrophyを認めているをが，症例1でパーキンソン病がどの程度，筋Progressive，genetically determined，

primary degenerative myopathy

生検所見に関与しているか不明であり，今後と定義し検討を要する14）15）．

ている．我々の症例は進行性がほとんどないが，遺伝的に常染色体性劣性遺伝が疑われ，

ミオパテ一，特にDMPに錐体外路症状を筋電図上，上肢筋にも筋原性変化が認められ合併した例は我々の調べた限りではほとんどる点を考えれば，Waltonらのいう肢帯型Dなく，Westphal16）がDMPでミオクローヌ

MPのforme frusteである可能性は否定でス，舞踏病アテトーゼなどを合併した例を報きない．同時に今まで注目されていない良性のミオバナーである可能性もある．Van

告しているにすぎず，症例1のようにパーキ
ンソン病を合併している例の報告はない．家

Wijngaarden9），Espirら10）は，quadricepsmyo−

系内で他のパーキンソン病発症者がいないの

pathyで家族内発症の例を報告しているが，で，ミオパテ丁とパーキンソン病との偶然のこのうちEspirらの例は経過が非常に良好合併である可能性が考えられるが，ミオバナ

で，自覚症状が軽微であり，大腿四頭筋以外の骨格筋もおかされる点で我々の例に芙真似しーが軽度であるため，パーキンソン病の筋国ているが，常染色体性優性遺伝が考えられるに，ミオバナーとパーキンソン病との症状の点で異なる．

進行を観察してゆく予定である．

編が出現して来院したと考えられる．今後更また症例1の筋生検によるATPase染色
結ではTypeII fiberpredominanceを認めた．

論

Quadricepsmyopathyに類似し，自覚症ガ

TypeII predominanceは神経原性筋萎縮症でしばしば認められる．Furukawaら11）はを欠き，1例にパーキンソン病を合併した2chronicneurogenicquadricepsamyotrophyと同胞例を報告した．遺伝性，臨床および検査して2例の報告を行い，Kugelberg−Welander所見から肢帯型進行性筋ジストロフイニーない病のf，OrmefruSteと位置づけている．

し良性のミオパテーの可能性が考えられたが−84−パーキンソン病については偶然の合併の可能9）VanWijngaarden，G．K．，Hagen，C．J．

性が考えられた．

et al：Myopathy of the quadriceps
muscles．J．Neurol．Sci．，7：201，1968．

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Akagami，N．etal：G．：Quadricepsmyopathy occurringin

Chronic neurogenic quadriceps amyo：

middleage．J．Neurol．Neurosurg．Psy−

trophy．Ann．Neuro1．，2：528，1977．
12）三好和夫，日下香苗ら：近位萎縮筋におChiatry，24：18，1961．
3）Nevin，S．：Two casesofmuscularde−

いてTypeII fiber predominanceを認

generationoccurringinlateadultlife，

めたBecker型筋ジストロフィー症と思with a review ofthe recorded cases of

われる2家系3症例．厚生省心身障害

late progressive muscular dystrophy

研究費補助金「筋ジストロフィー症の病（late progressive myopathy）．

因の究明に関する研究」，昭和52年度研

Q．J．

究報告書，p．245，1978．

Med．，5：51，1936．
McEachern，D．：The

13）Dubowitz，V．＆Brooke，M．H．：Muscle

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Walton，J．N．，Vo1．2，Major Problems

phy．J．Neurol．Neurosurg．Psychia−

in Neurology，W．B．Saunders C0．，

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thy．Proc．R．Soc．Medリ16：1，1922．

14）朝長正徳，田辺等：パーキンソン病生検

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のあ吟）み，79：368，1971．

Dtsch．Z．Nerven−15）朝長正徳，田辺等：パーキンソン病における骨格筋の変化：とくに電昆引象につい．

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16）Westphal，A．：Weiterer Beitrag zur

Neurosurg．Psychiatry，19：106，1956．

Fraget8）Walton，J．N．＆Gardner−Medwin，D．：

DystrophiamusculorumprOgreS−

siva und eXtrapyramidaler Symptom−

Disorders of voluntarymuscles．ed．−3．

enkomplex

Churchill Livingstone，Edinburgh

198，1927．

＆

London，1974，p．563．

ー85−．Klin．Wochenschr．，5：16）先天性筋ジストロフィー症の成因に関する研究−2症例の検討−

＊

木

研究協力者

下

岩 崎 泰 雄

真

男

石

塚

洋

子

瀬

川

昌

也

ている．

先天性筋ジストロフィー症の成因について
は，猶種々の論議のあるところであり，家族諸検査成績では，Creatinephosphokinase

歴を認めながらも遺伝性疾患とするよりは，（CPK）については後述する．生後2ケ月で感染との関連性を考える報告も見られる．

行った生検では（図1）線維直径の大小不同，

我々は，最近副腎皮質ステロイドに反応を示変性に加え，著しい炎症細胞の浸潤を認める

す2例を経験したので本症の発症機序を考え部分が，かなり広範囲で存在した．その他のる上で，興味ある2例と考え報告する．

生化学的検査などは，特に変化はなし．CTス
キャンでは，白質を中心としたびまん性の著症

しい低吸収域を認めた（図2）．

例1症

3歳4ケ月の男児，満期正常分娩，両親に血縁なし，患児の兄は出生期，多発性関節拘例2

3歳7ケ月男児，満期正常分娩，両親血縁縞を有し，生後9ケ月で死亡．本例は，出産なし，第一子で伺胞はなし．新生児以後の精時，全身性の筋の低緊張を指摘され，その翌

神運動発達は遅延，処女歩行は2歳頃であっ日より少し筋が固く，受動運動に抵抗を示す

たが，腹を前に，尻を後に突き出し，著しい様になってきた．肘，手，股，膝，足の諸関

動揺性歩行を呈した．2歳9ケ月初診時，発節に，いずれも軽度の伸展障害を認め，それ語わずか3語，走行，跳躍全く不能，臥位よぞれわずかずつ可動城の制限を認める．腱反り起立時登はん性起立を認める．腱反射は膝射はすべて消失している．その後の精神運動

蓋腱のみ陽性で，他は陰性，四月支近位筋の低発達は著しく遅延，3歳4ケ月現在，発語は緊張，脱力，萎縮が明らかであり，膝関節の「パパ」「ママ」「ある」「ない」など，数える

軽度伸展制限，足関節の背屈制限を認む．CP

程であり，しかも，いずれも極めて不明瞭，

K12，400単位．生検所見では（図3）線維直第三者にははっきり聞きとれない程である．
しかし，理解力の方はやや良く，話かける言

径の大小不同，変性に加えて，小血管を中心とする細胞浸潤が明らかであり，この様な部語はある程度了解し，身体各部の問いかけに，分が標本中かなり広汎に存在した．又一部は，指で指して答える．起坐は可能，起立，歩行小径線経のグループが散在していた．

不能，全身の筋の低緊張，脱力は著しく，特〈ステロイド投与に対する反応〉
筋生検に両例とも明らかな炎症所見が，存に眉，腰の症状は強く，筋量も高度に減少し在した事を根拠に，両例に副腎皮質ステロイ＊東邦大学医学部第四内科

ド治療を試みた．

＊＊瀬川小児神経学クリニックー86−

図1症例1

筋生検所見

H．E．×200

問質中心に著しい炎症細胞の浸潤を認める部分がある．

図2

症例1

脳CTスキャン像

白質中心にlowdensityareaがdiffuseに認められる．
−87一図3 症例2 筋生検所見 H．E．×200
非特異的ミオパテー像に加えて炎症細胞の浸潤が著明な部分が多い．

Cqsel

hdon；ne（m計／k9）

」■■■

birIh

図4

l

症例1 副腎皮質ステロイド
投与後の血清CPKの変化−88−l（ma八g）

2．⁚︒mh●tbnill

叩
脚
b行Ih

l

2

3

4

岬n
呼

図5

症例2 副腎皮質ステロイド
投与後の血清CPKの変化

症例1では，生後3ケ月目より，体重1kg

時点において，再び2mg／kgとすると明ら当り，2mgのプレドニンを投与開始，1週間

かな低下を示した（図5）．

継続後，CPKは3655単位より，2500に低下，一方，臨床的にも改善が見られ，約10ケ月

続いて次の1週間で1147となり，CPK活性投与を続けた時点において歩行はかなり改善に関しては著しい効果がありと判定した．しかし，臨床的には明らかな効果不明のため約され走る事も可能になってきている．しかし4ケ月で漸減，最終的には，CPK616の時点抑制と考えて，投与量を調節してはいるが，で投与を中止したが，CPKは，再上昇をし始

投与量を減らすと，必ずCPKが上昇するため，1歳9ヶ月頃2235の時点で再びプレドニ

め，今後の方針に何らかの工夫が必要と考えンを開始し，最低365になった．しかし，こている現状である．

この間，身長が全く伸びずステロイドの成長の時点においての臨床的な改善は明らかでなく中止する．3歳を過ぎてから，また，1099

考となったため，第3回目の使用を開始して経案

以上2症例に関して，まず問題となるのは過観察している（図4）．

福山型先天性筋ジストロフィー症と診断しう

症例2に関しては，2歳9ケ月時，CPK

るか否かであるが，中枢神経症状，筋症状，12400の時点で，2mg／kgのプレドニンを開CPKなどから見て，診断は可能と考えられ，始し，1週間で8913，2週間で3293となり，特に症例1は，同胞発症歴もあり，臨床的に最低1266までなったが，投与量を漸減する

は，福山型先天性筋ジズトロフィー症に相違と，CPKが上昇し，投与量を増加すると，する点はないと考えられる．ただ問題は，筋CPKが低下する傾向が続き，11400になった

生検所見であり，従来福山型先天性筋ジストー89−ロフィー症に細胞浸潤を認めた報告がなく，く，小児の多発筋炎にしばしば見るperifasc−

この点のみが福山型筋ジストロフィー症にしicular atrophyなどからも非常に早期に発症ては，問題になると考えられる．先天性筋ジストロフィー症の脳CTスキャンの所見としした多発筋炎と考えることもできる．

て福山らがまとめた報告の中に白質にびまんフィー症に相違する点はないと思われる症例

性にlow densityを認めた3例があり，本例と，同じく先天性発症であるが，家族歴のない症例とを報告し，両者におけるステロイドのCT像はそれとほぼ一致するものと考えられる．

以上，臨床的には福山型先天性筋ジストロ

投与の効果を述べ，先天性筋ジストロフィー

第1例に比較すると第2例は家族歴もな症の発現の機序に関する一考察とした．

ー90−

17）成長障害，骨変形を伴った筋緊張症の1例−特に，その筋生検所見について−

茂
研究協力者

在

敏

司

小

西

慎

吾

増

井

竹

中

正

純

福

田

義」
市

蔵

Schwartz−Jampel症候群は，特異な顔貌，

き，全身の非常にぎこちなく遅い動作を示し，低身長，骨および関節の異常と筋緊張冗進を

また手を強く握らせた後の手指の開排の遅延伴う症候群として現在までに26症例23報告を認めた．これは寒冷に影響を受けず，perCu・（但しCatelらが1951年に報告した例ではSSionmyotoniaは認められなかった．安静時

筋緊張冗進については記載がない）がみられ，
わが国では，井形，納らにより第1例が報告の骨格筋は，非常に緊張し，触れると硬い．

されている．我々は，同様症例を検索する機が，不十分である．筋力低下は明らかでない．

会を得，かつ筋生検において興味ある所見を

IQは107で，脳神経系，知覚系には異常を認得たので文献的考案を加えて報告する．

めない．深部反射は一様に低下し，病的反射

この筋緊張元進は全身麻酔時やや軽減するは認められなかった．その他，内科的にも特症例：男児，7歳．

記すべき異常を認めなかった．

主訴：低身長と歩行障害．

血液，血清学的検査所見：CPKが241IU

家族歴：両親は，従兄妹結婚，母方の祖父

BB0％，MB2％，MM94％，Alb4％と母も血族結婚である．家系内に同病者は認められない．

軽度増加を示し，IgAが10mg／dl以下と低既往歴：満期安産，出生時体重は3．1kgで液化学，S−GOT，S−GPT，LDH，Al−p，アルドラーセp，など血液酵素に異常を認めなかっ値を示す以外には，血液一般検査，血沈，血乳児期の発育に異常を認めない．
現病歴：歩行開始は，1年2ケ月，4歳時

た．

に歩行時に足をひきずり，階段の上昇が困雉

内分泌検査所見：副腎機能，甲状腺機能にとなる．5歳時，他の子供に比し動作が遅く，異常を認めず，TRH負荷試験，LH−RH負荷

かつぎこちなく，低身長に気付く．その後動試験，50gGTT，L−DOPA負荷によるGH刺作の遅れが目立つようになり，昭和53年8月

激試験を行ったが，いずれの検査にも異常を認めなかった．

14日大阪労災病院小児科入院に至る．
現症：身長103．4cm（−3．36SD），体重他，尿検査，髄液検査，脳波，心電図，染16．2kg（−1．90SD），体格は筋肉質で，ハト胸，blepherophimosisを伴う特異な顔貌を呈色体検査にも異常を認めなかった．

し，歩行時に一見運動失調を思わせるがごと形成（図3）腰椎側攣，寛骨臼の変形（図1）が認められた．

レ線検査所見：頭蓋骨の変形と顔面骨の低＊大阪医科大学第一内相ー91−

図1 本症例の全身像
向って左，側面像
中 ，正面像
向って右，1歳低年齢の正常児．

症例 M．H．7歳含一一ヽ√・・−

一

図2

一一■‥‥‥■‥刷‥‥−…‖…‥‥・

本症例に認められたmyotonicdischarge

−92−

図3

ATPase染色（preincubation pH9．4）×40
著明なtypeIfiber predominanceを認める．

筋電図検査所見：検査針挿入および機械的（卦Cholinesterase染色にて，運動終板の多刺激に続いて典型的なmyotonic discharge

くは変形し，elongationがみられた（図4）．

を認めた（図2）．しかし随意最大収縮時の①NADH−TR染色にて軽いmOth−eateninterferencepatternには異常を認めず，弱収様像を呈する線椎もみられた．

縮時の個々のNMUの性状は正常であった．

⑤Phosphorylase染色，PAS染色では，特記すべき所見を認めなかった．

筋生検所見：右大腿四頭筋にて施行．
（Ⅰ）光顕所見（組織学的，組織化学的）：（II）電践所見：図5のごとく

mitochondr−（彰少数ではあるが，散在性に肥大傾向を示

iaの腫脹，破綻，空胞化，およびCristaの形

し，HE染色で無構造にエオジンに濃染する態の変化などが認められ，一部にmyelin様変性線経が認められた．その他，核の中心移

構造物の形成がうかがえた．また一部にZ−動，あるいはendomysialfibrosisを伴う小径

1inesの消失が認められた．

変性線経の小集団の存在も認められた．

myelin様構造物は，mitochondria内のも②ATPase染色（PreincubationpH9．4，のの他，SarCOlemmaに近接してSarCOplas−

4．6，4．2）にて筋線維径は10−60／上の間に分

ma中にも比較的多く認められ，また極少数

布し，平均線維径はtypeIfiber30．4JL，typeではあるが，核内にも核膜に近接して認めら

ll丘ber31．8βであった．即ち各型線経の太れた．しかし，myOfibril は，全般にその構造さは年齢的にはほぼ正常範囲にあり，特に肥がよく保たれていた．

大傾向はみられなかった．しかし筋線経の型

以上が，本症例の筋組織の電顕観察による別頻度をみるとtypeIfiberが74％をし主なる変化であるが，いずれも非特異的なもめ，著明なtypeI predominanceを認めた

ので，myOtOnicsyndromeの他，種々の疾患（図3J．

において認められるものである．

一93−

図4

Cholinesterase染色×400
運動終板のelongationが認められる．

図5

右大腿四頭筋電顕像
A．mitochondriaの腫脹および破綻，Z−1inesの消失が認められる．
B．mitochondriaのCristaの形態の変化が認められ，一部にmyelin様構造物の形成がうかがえる．

−94一

考

案

Syndrome of the contir山ous musclefiber

本症例は典型的myotonic dischargeを伴activity，armadilloman，neurOmyOtOnia，

う全身性筋緊張克進にblepharophimosisを

pseudomyotonia，quntalsquanderなどと呼伴う特異な顔貌，低身長，頭蓋骨を含む骨格ばれているものである．Schwartz−Jampel症の異常をあわせ持ち，1962年Schwartzおよ候群の臨床的特徴は，顔面をのぞいてその全

びJampell）により報告され，現在一般的に身性，持続性の点からみると，いわゆるmyo−

Schwartz−Jampel症候群と呼ばれているもgenic myotoniaの患者にみられる筋緊張冗のに相当するものである．本症例において認進よりも，このneuromyotoniaにむしろ近い

められた筋生検所見の特徴は，（D軽度の筋原

ように思われる．事実，Schwartz−Jampel

性変化，（∋組織化学的検索（ATPase染色）で認められた，著明なtypeIfiberpredomi−

Syndromeの報告例の多くに（9例）電気生理学的にmyotonic dischargeの他に，neur0−

nance，（ヨコリンエステラーゼ染色による運

myotoniaに似たspontaneous activityが認

動性筋終板のelongationである．このようなめられている．すなわちSchwartz−Jampel症所見の1つ1つは色々な場合にみられる非特候群では，多くの例で電気生理学的にmy0−

異的変化である．しかし著明なtypeIfiber

genic myotoniaとneuromyotoniaに近い状

predominanteおよび運動性終板の変形は，現在の一般的な考えからは支配神経異常の存態をあわせもっていると云えるであろう．この電気生理学的異常性によって，Schwartz−

在を示唆するものである．特に，筋構成線維

Jampel症候群の異様な歩行その他の動作の型の配分の異常は実験的に交叉神経支配によ障害は理解されるものである．我々の例では，

りもたらされ得ることはよく知られている．

myotonicdischargeは認めているが，残念なしかし，本症例の筋電図検査では，脱神経やがら，まだspontaneousactivityの有無に関reinnervationを示す神経原性異常所見は認められていない．従って，本症例にみられるして十分な観察がおこなわれていない．また

typeIfiber predominanceは，いかなる病

既に報告されているSchwartz−Jampel症候
群例の中にも，SpOntaneOuS COntinuousacti●

態にもとづくものか，本症例群の病態，あるVityの記載のない例がみられるが，これらにいは，筋構成線維型を規定する因子と関連し

おいてもまた我々の例においても本症候群をて興味ある所見である．
さて，Schwarz−Jampel症候群の臨床的特形成する重要な症状一異様な動作障害−の基本的病態としてSpOntaneOuSCOntinuousac＿

徴はbJephalophimosisを伴う表情にとぼtivityの存在することは当然である．

しい特有の顔貌や骨異常のほかに特に病態生理学的に注目されるのはmarionette likeと筋組織化学との関連で注目されるのは，Sa−

gait，windiny dollなどと表現される特有なlmonsら（1969）3），Romanulら（1974）4）の実動作の異常である．これは先天性筋緊張症や験である．彼らは，家兎のCOmmOnperOneal

筋緊張性ジストロフィー症に認められるSti−

nerveを10／secの頻度（normal slow red

ffnessと比べると，よく似てはいるが，その筋

muscle硬直が全身性であり，運動により軽減し雉く，
長く持続する性質が強い点でやや異なっていpulseの頻度に相当するという）で持続的にるように思われる．1961年Isaacs2）は，全身のfastfiber（白色筋）よりなる前脛骨筋が組織

筋硬直を主徴とし，異様な歩行障害を呈し，学的にも電気生理学的にもslowfiber（赤色筋電図でSpOntaneOuS COntinuous activity筋）に変化することを報告している．この観を呈する症例を報告している．これは現在

察は筋線経の型が，持続する電気生理学的状

以上に述べた，臨床病態，電気生理的病態

fiberの活動時にみられる神経のim−刺激すると4週から8週で，本来ほとんどが−95−

態の変化により変りうる事を示すものであり，極めて興味深いものである．Schwartz−
Jampel症候群例およびneuromyotOnia症
例で，筋について組織化学的な検索が行なわ

索する機会を与えるとともに，当研究址にて発表する事を許可された，大阪医科大学小児科，美濃 真教授，大阪労災病院小児科，林正樹，岡林良三両先生に深謝致します．

れているものは少なく，かつ筋線維型の配分状態に必ずしもふれられてはいない．しかし

文

献

Schwartz−Jampel症候群で，Fariello（19781）Schwartz，0．andJampel，R．S．：Conge−

年）5）の報告例ではtypeIfiberpredominanT

nitalblephalophimosisassociatedwithce（typeI丘ber一約63％）が認められ，又auniquegeneralizedmyopathy・Arch・

neuromyotonia症例においてBlack（1972年）6）は，typeIIfiberが完全に欠損し，type
I丘berLか認められなかったことを報告しOphthalmol，6g：52，1962．
2）Isaacs，H．：Asyndromeofcontinuous
muscle丘beractivity．J．Neurol．Neuro−ている．

surg．Psychiat．，24：319，1961．

以上の事より，本症例において認められた

3）Salmons，S．andVrbovま，G・：Thein飢1・

typeIfiber predominanceは一電気生理学

ence of activity on some contractile

的観察が，現時点では，不十分ではあるが一charaeteristicsofmammalianfastand

諸症状をひきおこしていると思われる電気生slow muscles．J．Physiol，201：535，

理学的異常にもとづきひき起こされたもので1969．

ある可能性が大きいと考えられる．

4）Romanul，F．C．AリSreter，F・A・，Sa1−

筋線経の型は交叉神経支配実験にみられる

mons，S．andGergely，J．：Theeffectof

如く，支配神経によりその型を変えることはchanged pattern of activity on histo・

よく知られており，そこに支配神経からのchemical characteristics of musclefi・

trophic factorの存在が考えられている．

bers．In：A．T．Milhorat（Ed，），Explo−

上述の如き考察からすれば神経の筋に対す

ratory ConceptsinMuscular Dystro−

る電気生理学的影響そのものがtrophic fa−
ctorの1つであることを推測せしめるもの

phyII（ProceedingofanInternational

である．

ber，1973）（InternationalCongressSeri−

Conference，Carefree，Arizona，Octo−

es，No．333），ExceptaMedica，Amster−

結

dam．1974．p．344．

論（1）Schwartz−Jampel症候群の1例を里示

5）Fariello，R．，Moloff，K．，Murphy，E・G・，した．（2）生検筋の検索において，特に著明なReilly，B．J．andArmstrongD．：Acase

typeIfiber predominanceが認められた．

of Schwartz−Jampel syndrome with（3）typeI丘ber predominanceの原因としてunusual muscle biopsyfindings．Ann

臨床症状の中核をなす異様な動作障害の基本

Neurol，3：93，1978．

としての電気生理学的異常−恐らくは，ne−6）Black，J．T．，Garcia・Mullin，RリGood，

uromyotoniaに近い病態−が関与していE．，andBrown，S．：Musclerigidityina

る可能性を文献的に考察した．

newborndueto continuous peripheral
nerve hyperactivity・Arch Neurol，

本症例の直接診療に当られ，かつ我々に枚

27：413，1972．

一96−18）筋ジストロフィー症諸病型における筋病変の特徴について田

研究協力者

野 沢 胤 美
塩

目

ぎ†

辺

沢

瞭」

原

窟＊・†

筋病変の検索は，一般病理組織学的（パラ的フィン切片によるHE，Azan．PAS，KB各筋ジストロフィー症（DMP）の臨床病型には，周知のごと内 渇 雅 信く，Duchenne型，benign

染色，Bodian鍍銀法など），組織化学的（クDuchenne型〜Becker型，肢帯（LG）型））オスタット切片によるHE，trichrome変lmalignAntLG型（三好）を含む］，顔面肩法などの一般染色を併せ，主として酵素組織

甲上腕（FSH）型，先天型（福山型）；眼筋型・化学的にDPNH−TR，SDH，myOSin ATP

眼筋咽頭型・遠位型ミオバナーなどがあり，それらの呼称が臨床診断としても用いられて

ase，phosphorylase，Cholinesteraseなど），

いる．これらの分類上，その病態要素として定法）によりおこなった．また各病型ごとの遺伝形式・発症時期・筋障害部位特異性など

臨床経過，重症度，他検査所見（筋電図，血の点については，それぞれにある程度明確な

清CPK値およびisozyme分画，その他の一差異を認め得る．然し，それらの臨床病型に般検査など）と対比検討した．筋生検により対応する筋病変については，各病型ごとの差検索した部位は，症例ごとに一般原則上長も異を見出すのは一般に困難とされ，業績にも乏しい．我々はこの観点から再検討を試み以適した筋を選んだが，結果的には全例四肢近下の知見を得たので報告する．

は上腕二頭筋6，上腕三頭筋9，三角筋5，大電顕的方法（グルタール・オスミウム二重固位筋のうちそれぞれ1か所で，42検体の内訳
腿四頭筋14，その他8であった．

対象および方法
自験DMP（虎の門病院，入院・外来・集団・居宅検診例，1970年以降）約350例のうち，適応を考慮して筋生検を施行した病型診断確定例（いずれも入院例）42症例につき提示した．内訳はDuchenne型11，肢帯型16，顔面
肩甲上腕型5，先天（福山）型10例であった．

結果

DMP全体に共通する変化としては，筋線
維大小不同 （萎縮・正常大・肥大線経を含む
散在性変化すなわちspectrum型のhistogr−am），筋線維構築異常（myolysis，mOtheaten
様変化，ミトコンドリア異常など），反応性病

尚別に筋強直性（筋緊張性）ジストロフィー
31例の筋病変とも対比した．

態（少数のphagocytosis，ごく一部の血管周
囲性小円形細胞浸潤など），中心核，endomy−＊虎の門病院神経内科

Siumの線維化，脂肪浸潤などがあげられる．

＊＊虎の門病院病理学科

DMP諸病型ごとに比較的特色ある病変と†坤中記念成人病研究所

しては，次下の諸点があげられる（図1）．
−97−

D u ch enne 型 （
11）

LG 型

0㊥

F S H 型（
5）

先天 型㈹

＃抵描嘉基

酬

捌

鍬在〟杉安劣杉杉耕Sp littin g、

m o th ea ten ・等
m itoch on d ria 異 常
rin g fi b e r

〟
棚方捌
100％

100％

100％

100％

図1病型別差異の著明な筋病変

1）Duchenne型：G）問質とくにendomy−

ど）が多く，④typeI predominance，typeSium，またperimysium，epimysiumにも線

I atrophy，fibertype分別異常などがみられ維化がとくに著明で偽小葉状の筋線維束が形

易い．⑤変化の軽い筋では問質線維化に乏し成される．（診問質の線維化の著明な部位にみくむしろSmall angulatedfiberがモザイクられる小動脈壁は肥厚し，とくに中膜筋層の厚さの増大をみとめる．（∋進行による筋病変様に配列している像のみられることがある．

の程度の差が，症例ごとに，あるいは部位ごとに目立っている．④筋fiber typeについて

項（D〜（9）があるが，とくに（診反応性小円形は全体としてSameneSS prOpertyを示すこ

的に目立ち，③fibertype分別異常，typeIIとが多いが，症例によりtypeI predomina−

hypertrophyもみられた．

3）FSH型：（9LG型に類似した特徴（前細胞浸潤やphagocytosisが他型に比し相対

nce，typeIIdeficiency，中間型fibertypeの4）先天（福山）型：（∋Duchenne型に比し，混在をみることがある．⑤筋線経のSplitting，

初期より，また同年代でその病変の程度はは

moth eaten状構築異常，ミトコンドリア異るかに高度である．（診筋線維径は全体として

常，ringfiber，myOlysis・neCrObiosis，反応

一様に細く，③構築上のnetWOrkが粗で，④性変化なども時にはみられるが，LG型やfiber typeの未分化性を示唆する分別異常がFSH型に比して出現率は低い．
2）LG型：①splittingがとくに高率にみしばしば認められる（②③（彰は未分化性を示

られ，②再生現象が目立ち，③mitochondria

唆する所見）．⑤一部にごく僅かの神経原性変化が加味されているが一般的な所見ではな異常を伴う萎縮線維（moth eaten様変化な

い．

−98−

各病型の筋病変histogramについて：前

rum patternを示すが，（診LG型では肥大線

記4病型についてmegahistogram．（各例ごとに筋線維300個以上計測したものの合成）を作経の比率が高く右方への延長をみる，③FSH型では平均直径は前2者よりやや高いが，萎製したものを総括的に観察すると，次のよう縮線経としての左方推移が目立っている．（彰な特徴があげられる（図2）．（∋Duchenne型

先天（福山）型では前述のように平均直径がは約55JLを中心としたほぼ典型的なSpeCt−

低いことが示される．

Duchenne型
帥

／′へ

LG型
㈹

先天型
3日冗

60／J

図2

Megahistogram上の特徴（5JL巾単位）
−99−

考

らわしい面もあるが，別の本報告（演題20）

察においで慢性型多発性筋炎の側から論ずる．

「目的」の項に示した趣旨で検索した結果

4）筋ジストロフィーと，いわゆる神経原を検討し次の如く考察を加えた．
1）筋ジストロフィー各病型のうち，代表性病態の関係は，とくに筋電図上highampli−

的な上記4型について示したが，臨床病態（症tude，longdurationなどの要素が混在すると状・経過・CPK値などの検査所見や，遺伝形の症例報告の蓄積や，筋病変における式）の差異ほどの明確な対比は碍にくかった．

萎縮

群集的要素の指摘などが，その混在説の論

然し，病型ごとの筋病変の共通点以外に前記

拠となっている．然し真の神経原性変化の合のような重要ないくつかの相違点を見出し得
たことも事実である．それを小括すれば，（D

併のない大部分の筋ジストロフィーにおいてDuchenne型におけるfibrosisと血管病変

非特異的な二次的病態と考える方向が先ず重（とくに壁の肥厚）と特異なfibertype異常，

要と思われる．たとえば，fibrosisに伴う血管反応性変化ないし再生現象，②LG型におけ肥厚などのため筋内循環障害をおこした結るSplitting，mOtheaten状構築変化，mitoch−

果，小区域の虚血性萎縮巣が群集萎縮様変化

ondria異常など，③FSH型における反応性を示している可能性，また組織反応により筋変化（細月包浸潤・phagocytosisなど）と構築

束内末梢神経に影響を与えたり（多発性筋炎

異常，④先天型における未分化性の遺残などの病態の一部に類似），fibrosisそのものが筋があげられる．またmegahistogram上の差

内神経の障害を起したりする場合が考えられは，上記の見かけ上の神経尿性要素は，先ずる．さらに二次的側攣や，筋萎縮のための骨・異についても注目される．
2）以上の変化のうち，fibrosisは筋ジスト

勤帯への負荷なども根障害としての神経原性

ロフィー全体に共通の問題であるが，疾患病型による一般的な差異は単に重症度や経過の変化を惹起する可能性もある．以上の神経原性変化とは，mOtOrunit内の2次運動ニューみの問題ではなく，やはり筋病変を構成する

ロン障害という意味のいわゆる諸要素の多系統性における比率の差異である

neurogenicpattern であるが，もちろん広義classical

ことが示唆され，多系統性遺伝におけるphe−には，fibertypeの分化，筋線維内myosinのnotypeの出現度の差に帰し得る問題とも考

酵素活性駄与と調節，myOtuleの分化などにえられる．但し血管病変については，fibrosis

神経性因子の関与していることは周知のごとの特に著明な部位の小動脈に中膜の肥大を認くで，その意味においては神経原性因子を考め，年令に関係なくむしろDuchenne型にこえ今後の筋病態追究の思考過程に導入してゆの傾向が強いことからも，fibrosisの結果硬くべき知見であろう．
5）筋強直性（筋緊張性）ジストロフィー化した外見莫方向への圧力学的な影響で中膜筋層の真性肥大が生じた過程とも考えられる．

では，他のDMP群に比し，中心核と鎖状配慮

他の構築異常な丘ber type異常についても多列，筋鞘核増加，ring fiber，SarCOplasmic

系統性遺伝におけるphenotype上の差と考massなどが著明に出現する．個々の所見はえられる所見が多い．

特異的ではないにしても，これらが程度と出

3）また一般に，筋ジストロフィーにおけ現頻度とにおいて他病型よりもはるかに差異

る反応性病変については，狭義の炎症ではなのあることは周知の事実である．この点も，

く，myOlysis等によって生じた筋線経の変性

やはり前述の多系統遺伝上のphenotypeのに対し組織反応を起した要素と，neCrObiosis

特徴として捉えることが可能と思われる．まにおける再生現象とがこれに相当する背景とたBecker型DMP（いわゆるbenignDuche−

考えられる．鑑別診断上は日常の診療でまぎnne）については，Duchenne型の病変とLG−100−

型の病変とを併有している印象が強いが，む2）田辺等：筋生検．総合臨床，24：84か一一

しろ後者に類似している．

867，1975．

3）Dubowitz，Ⅴ．＆Brooke，M．H．：Mus−結語

clebiopsy：Amodernapproach．Sau・

以上代表的な筋ジストロフィー諸病型の筋nders，London，Philadelphia，Toronto，

病変を比較再検討した．共通的病態の他に，

pp168−252，1973．

病型による差異もいくつか捉え得ることを示4）Engel，W．K．：Duchennemusculardy−

し，それが，より本質的なphenotype上の差

strophy．A histochemically basedis−

であるか，非特異的な二次的病態であるかという点を中心に考察を加えた．

Chemia hypothesis and comparison

withexperimentalischemiamyopathy．
InThe

striated

muscle（eds：Pear−son，C．M．andMostofi，F．K．），Willi−

参考文献

ams＆Wilkins，Baltimore，p453．1973．

1）田辺等：筋ジストロフィー症における筋生検．神経内科，3：209−219，1975．

ー101−19）諸種神経筋疾患の筋病変におけるfiber type異常と
motor unit内局在病態との関連について

田

研究協力者

野 沢 胤 美
塩沢

目

着†

辺

瞭三

神経筋疾患の診療上，適応に叶った筋生検は有力な補助手段の一つである．とくに，筋病変に結果として現われた特徴から，逆に「その原因病態の主座がmotor unit内のどこに要と考えられ，従来神経原性・筋原性の2大別がその表現として用いられている．我々は，さらに，筋線推大小関係のパターンの再検討
から，とくに2次ニューロン内局在の推定に役立ついくつかの基本型を区別し（古典的神経原性・筋原性の 横割り〟 的分頬のうち神経原性の部分の細分化），また一方，筋fiber

神経炎11，neurOpathyを加味した多発性筋炎症候群12，糖尿病性neuropathy12，平山病
4，頸椎症9，その他26であった．
方法上，筋病変は主としてregularの組織
学的・組織化学的方法により検索し，当初の発端例（約30例）より得られた作業仮設を，ち，とくに再生現象等と比較検討したので報告する（図1）．

対象は，確定診断の得られた諸種神経筋疾
患のうち，高度の破壊病変など要素分析上特異性の低いものを除き，本目的に適した840例を対象とし，主として組織学的・組織化学的方法により検討した．筋fiber type異常については840例全例につき検索したが，この＊虎の門病院神経内科＊＊虎の門病院病理学科

窟＊・†24，脊髄性進行性筋萎縮症（SPMA）16，
Kugelberg−Welander病（KW）12，Werdnig−
Hoffmann病（WH）5，Charcot−Marie−
Tooth病（CMT）8，脊髄小脳変性症（SCD）
各病型で筋病変を有するもの19，脊髄空洞症
5，GuillainTBarre症候群（GB）9，多発性

type異常（いわゆる 縦割り〟的分類）のう

対象及び方法原

うち，筋線維大小関係の検討（motorunit内
神経原性病態のうち，前角細胞・前根・以下の末梢神経各部障害との対応）については，更に症例を厳選して172例について総括した．その内訳は，筋萎縮性側索硬化症（ALS）

的あるか」を生前に推定することは，とくに重内 潟 雅 信以後の白旗例の臨床的検討，既存の知見との対比などにより，帰納法的に実証ないし修正して現在に至っている．また診断は，筋病変上は従来よりの 神経原性〝 変化としてのみの情報を含め，臨床症状・経過・他検査所見・遺伝形式などを総合的に検討し確定したもの
で，その上で作業仮設をふまえた下記の検討を行った．一方盲検的に筋病変のみを解析した推定病態を逆に確定診断と対比し，90％以上の適中を経験した．

†枠中記念成人病研究所

ー102−

O
1次
運動ニューロン

0①②

m otor
unit

2 次運動
ニューロン
◎

骨格筋

④

type I 系

l
l
0
l
l
l
I
I
l
l
l
l
T ￣￣￣￣ ￣ ￣ 一一
1
0 ①
；
l
l
l
l
王
l
l
l
l
l
l
l
l
l
i
I

②

③￣

神経原性
① （
前角）細胞障害② （前）根障害③末梢神経障害④

筋原性①筋線維障害type II系

図1筋病変に反映するmotorunit内局在因子（模式図）

結果

縮線経のmitochondriaの酵素浪縮現象が明

一般に筋病変を特徴づける要素は多彩であるが，我々はこのうち，とくに群集萎縮，即らかである），②（a） 大群集萎縮〟（初期より，筋小束単位程度の大きさの群集萎縮がみ

ちhistogramで2峯性を示す，いわゆる神経られる．本質は萎縮の程度よりもその群をな

原性変化に着目し，初期像より認められる基す萎縮線維数の数の大きいことにある），（b）

本的パターンとして，発端例よ引図2の上部

なだらかな移行性〟（大群集萎縮に近いが程に示した5種類を抽出し，作業仮設とした．

度が軽く，且つ小束毎に明らかな区画に乏し

1）筋線維大小関係の基本的パターン：（∋

い移行を示す），（C） 極度の萎縮繰推〟の散在・小群集萎縮の多発〟（萎縮角化線維2−3個群集（初期像よりやや開大した問質中に，一ないし数個程度の群集が，ほぼ均等に散在す

見核のみと誤認されるような，あるいは細胞

る．進行すると一部が癒合して一見大群集萎質部の僅かに附着しているようなごく細い萎

縮に類似するようにみえるところもあるが，縮線経より成るが，周辺を詳細に観察するこ

本質的には他部に小群集萎縮の基本が観察さとにより確実に萎縮線経であることがわかる

れる．とくにALS，SPMAでは，この小群集

やや軽度の萎縮筋線経との移行性が見出さ

萎縮の形は経過中よく保たれている．また萎れ），（卦小角化線経の散在，一部群集（初期像
−103−

1

狂
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j j x董●● ●●● ！蔓‡米
…j j 妻葦
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XX
X●

よりモザイク状に軽度〜中等度の小角化線経

peに関してはSameneSSprOpertyが主体で，が散在することがむしろ特徴で，進行するに再生現象は一部に存在するにしても（少数例

したがって小群集〜大群集へ移行する）．以上の小規模なfibertypegroup■ingのみ）むしろのうち，作業仮設としては，①は前角細胞障

例外的な所見であった．次にWH，GB，平山

害，②は前根障害（a，b，C），（卦はそれ以病，頸椎症等では②a），b），C）3種の所下の末梢神経障害と考えられた（但し脳幹部表l Fibertypeに関する筋病変

運動神経に対比するときは前角→脳幹部起始細胞，前根→脳幹部起始根とする）．

A．非選択的変化（Samenessproperty）
B．選択的変化（Differentness property）
1）単系統性異常（Dysproportion）

2）検索症例の確定診断との対比：前記諸疾患の大部分を●＝1例としてプロットした
ところ図2の下部に示したような結果が得ら（i）typeIれた．このうち＊印は各疾患について質的・（ii）typeII

量的に最も著明で特徴的なパターンであった①萎縮（atrophy）②肥大（hypertrophy））（ （∋構築異常（struCturalchange）

2）分布異常（Abnormaldistribution）（D群集（grouping）（i）typeI l（診群集萎縮（groupedatrophy）（ii）typeII J③混在率増加（predominance）

ことを示す．（むALS，SPMAでは，初期より経過中，小群集萎縮の多発が本質的な所見で，これが前角細胞障害とその経過を反映するパ
ターンであることが示唆され，作業仮設が支C．分別琴常（Abnormaldiscrimination）
1）再生過程（Regeneratingprocess）
2）分化障害（Disturbanceofdifferentiation）

持された．小群集萎縮部の各筋線経はmito−
Chondria酵素の濃縮現象を示すが，fiber ty一

表2 筋病変におけるmotorunit内局在病態因子（まとめ）大 小関 係パ ター ン ・内訳

イ小群 集萎 縮の 多発（
小角化線経よりなる）

m o to r u n it 内

fib e r ty p e

推 定病 態局 在■＊gr Ou p lng

A LS
SP M AK W の一部など

ta rg etⅥ
筋原性要素〝（
targ eto id ）
加
味
伝b er

前角 細
胞 障害

一一 （＋）

一 一＋

−〜 ＋

前根 障
害

＋〜 ＋＋

一 一＋＋

一〜 ＋

CM T
諸種 ニ ュー ロパ 末梢神
経障害
チー（
K W の 一 部）

十 一 十十

一 一十十

＋

−

ー

（
純粋 型）

神経原性〝
変化

2 峯性
tw o
population

W H
（
KW

■大群 集萎 縮●■な だ らか な移行 性」極度 の萎縮 線維（
散 在 ・群 集）

G・
B 症候群
（
K W ・C M T の一部 ）■′ト角 化線経 の散 在（
一部 群集）

濫・C M T の

一部 ）
平 山病
預椎 症

君 ヒ （誓 。票 r。慧 ブ・ヒストグラム所見

DM P
その 他 のミオバ ナー

筋 線維障害・・疾患名は代表的なものを例示−105−

兄のいずれかが全例にみられ，前根障害とその性状との間に密接な関係が示唆される．とと考えられる．すなわち，所見の 読みすぎ〟による誤診の自粛であった．然し，逆に得らくにWHでは（診a）のパターンと，fibertype

れた意味のある所見を逃さず臨床に還元するの分別異常（未分化性および再生現象両者の要素が考えられる），非萎縮線経の著明な群趣旨から言えば，この点を再検討する必要もあると考えられる．そのためには（む所見を充集肥大が特徴的であった．GBではむしろ分把握するに足る良質の標本を得ることと，浮腫状に肥大した筋線経と，浮腫状に開大それに塞く解析に習熟することが先ず重要でした問質（とくにendomysium）中に②C）のパターンが存在することが特徴的と言えあろう．パラフィン切片のみならず，優れたる．平山病・頸椎症では（塾の各パターンがそチを含めた解析が必要で，その上でクリオスタット切片で，組織化学的アプロー
読みす

れぞれ種々の程度に混在する．各種neuropaTぎ〟 を抑えて所見を抽出することであろう．

thyでは③のパターンが共通である．以上の（∋次に，生検部位の選択を充分事前に検討し，

うち，KWとCMTでは，むしろ①②③の各（経過と疾患の性状を考慮して）optimalな特徴が症例によりかなり混在している所見が部位1筋を原則として選定することであろ得られることが多い．KWの中には病変の軽う．程度はすべての症例で一致することはむ

度の筋ではfibertypegrouping（再生現象）のみを示し，大小関係パターンのみではとく

しろ考えにくく，本質的な変化と，程度の差とを区別することにも習熟する必要があろう．

に異常を認めない場合も少なくない．target3）また疾患により，前記の仮設として分fiber，targetOidfiberの出現率は，末梢神経類したmotorunit内局在病態が，比較的限局障害，前根障害と考えられる病変に高い傾向

していると考える場合（ALS，SPMA；WH，がある．

GBなど）と，各部位に共存する病態が考えられる場合（KW，CMTなど）とが存在するこ3）筋fibertype異常との関係：筋fibertypeの種芙酎こついては，著者らは表1のごとく分とも，逆にこの結果から示唆される．たとえ頬しているが，このうち，fiber typegrOuping，

ばKWは，神経原性・筋原性要素の混在と一fiber type grouped atrophy，およびfiber

般に言われているが，症例により，また経過

type分別異常の一部はre−innervationを反によりその部位的因子の関与の比率はかなり変化に富んでいるものと考えられる．

映した所見として神経原性病態の診療上重4）これらの基本的な大小関係パターンの要である．この点を加味して以上の所見を表

成因の相違については，人体における 疾恩〟

2に総括した．

と同様な実験的裏付けは困難であるが，二次考

ニューロンの神経細胞の分布，神経線経の走察1）以上の結果より，作業仮設が芙証され行，病変の性状・経過，再生現象などが互いつつあるが，今後の症例の対比・蓄積によりに密接に関連し合っているものと考えられ

監査修正の要もあろうかと思われる．然し前る．また，target（targetoid）丘ber，fibertype

述のように，その基本的着眼点としては．日常

異常に反映された再生現象や，いわゆる筋原の診療上有用な面が多いと考えられる．とく性要素の加味などは末梢神経障害にとくに，に盲検による筋病変の解析と確定診断との間に合致率が高いことからも支持されている．

また一部の前根障害に優位に認められることも，mOtOrunit内局在推定上併せて参考とな
る指標と考えられる．

2）古くから，筋電図と同様，この方面の区別としては，神経J京性，筋原性の2大別に止まっていたのは，意味のあることであった
−106−

結

語

参考文献

以上我々は，（》表題の検討をおこない，筋病
変より2次ニューロン内の局在病態を推定す

1）田辺等，内潟雅信．大石英俊，塩沢瞭一，

る指標の一端を得た．②筋fiber typeとの関内障害部位因子の検討−172例につい野沢胤芙：筋痛変におけるmotor unit

係，③その他target丘ber，筋原性要素の加味ての解析−，第20回日本神経学会総などを含め，臨床的意義を考慮して報告した．

会，東京，1979．
2）田辺等：筋生検．神経学（沖中重雄：監①筋ジストロフィーの成因・治療に関する研究の上からも，これらの研究が直】妾・間接に貢献し得るものと考えられる．

修），VO12，p．369，南江堂，東京，1976．
3）田辺等：神経疾患診断上の問題点，とくに 神経原性・筋原性〝病変，および 丘ber
type選択性〟筋病変について．脳と神経
26：274，1974．

ー107−20）筋ジストロフィー症と鑑別困難な慢性多発性筋炎に関する検討
＊，†

田

研究協力者

目

辺

等

野

沢

胤

美

内

潟

雅

信

塩

原

＊＊，†

満

北

村

元＊＊＊，†
仕沢瞭

表1 検討対象（計27例，いずれも孤発例）

的筋ジストロフィーの孤発例と慢性多発性筋
1）DMP − ＞慢性多発性筋炎：22

炎とは，日常その鑑別が困難である場合が少Duchenne

なくない．とくに筋ジストロフィーに関する基礎的研究で，臨床診断に基いて症例が蓄積されて新知見が得られた場合でも，その基になる臨床総合診断に誤りがあった場合に重要な問題を残す．以下筋ジストロフィーと，慢

→

3

LG型

→

4

FSH型

→

2

先天型

一十

3

病型不明

一→10

2）慢性多発性筋炎．・．・．・→旦塑里：5性多発性筋炎とで，相互に当初鑑別困難であ→LG型 3→FSH型2った例で，精査の結果診断の確定したものにつき，その毒監別上有用であった点を抽出してクリオスタット切片によるHE，trichrome

報告する．（継続研究）

変法等），組織化学的（パラフィン切片による対象および方法

レギュラーの酵素組織化学），電顕的（グルタ

対象は，虎の門病院入院精査例のうち（いール・オスミウム2重囲定法）を併用して検ずれも孤先例），（9当初筋ジストロフィーを疑索した．

い，後に慢性多発性筋炎であることが判明した22例と，（∋当初慢性多発性筋炎を疑い，後結果1）病態類似性・相違性に関する臨床的着に筋ジストロフィーであることが判明した5日艮点：①孤発性の筋ジストロフィーの場合

例，計27例で，その内訳は表1に示す．
方法上，それぞれの症例につき，詳細に病歴聴取・現症・経過・、一般検査所見・家系調（とくに精査を要することが多い），（∋筋ジス
トロフィーの発症年令，③発症状況，④進行

査等を再検討し，とくに筋電図・血精CPK

状況に問題があるとき，⑤部位特異性（筋萎値・筋生検等と対比して解析考察した．筋病

縮・筋力低下・児建反射異常等の分布の特徴）

変は組織学的（パラフィン切片一般染色と，に問題のあるとき，⑥血清CPK値とそのis−
OZyme分画にとくに問題があるとき（急性多＊虎の門病院神経内科

発性筋炎または筋線維破壊を伴う型では血清＊＊虎の門病院病理学科＊＊＊虎の門病院臨床化学科

CPK総活性上昇，回復初期にMB分画の一†沖中記念成人病研究所

過性上昇を示すが，血管問質型ないしは慢−108−

性多発性筋炎の場合にはCPK値上昇は乏し

2）筋病変についての検討：a）筋ジストい），（D筋電図上，myOgenic patternの分布

ロフィーにおいても，fibrosis，動脈壁肥厚，がpatchyであったり，明らかな神経原性変再生現象，phagocytosis，少数の細胞浸潤（小化が混在するとき，⑧筋病変（別項），（9治療

円形細月包浸潤を主とするが，血管周囲性ない

上，ステロイド療法・リハビリテーション効しmyolysisの周囲など）は慢性多発性筋炎

果などが，予想以上に筋ジストロフィーとしと同様に認められる．b）然し，両者の宣監別て良好であった場合などは，当初筋ジストロ

上，慢性多発性筋炎については，次の諸項目

フィーを疑った場合でも慢性多発性筋炎とのが比較的特徴的であった（表3）．このうち，鑑別を十二分におこなう必要のあることが強要約すれば，慢性多発性筋炎における，反応

調される（表2）．

性病態の特徴，筋の虚血性病変の特徴，神経原性変化（筋内または筋外末梢神経障害が主

表2 筋ジストロフィーと慢性多発性筋炎との病態類似性・相違性に関する主要着眼点体）の盲昆在，typeIIatrophy，patChyな病変などが強調される．

1．孤発型（仝例）‥・………………………22例

考2．発症年令（DMPとして非典型）………14

察1）筋ジストロフィーの場合，遺伝性の明3．発症」犬況（比較的急激）……………・・・12

らかな場合は鑑別は容易である．然し多発性

4．進行状況（途中で緩徐化）……………13
5．部位特異性（不規則・非定型）………18

筋炎でも，アトピー性皮膚炎や気管支喘息等

6．血清CPK（程度の異常，MB比率）…12に共存するものは稀に家系内発症を示すもの

7．筋電図（neurogenic盲昆在）もある．

8．筋病変［別示］

・…………102）反応性病態については，筋炎の場合は……………・・………・20

9．治療効果（良好）……‥t‥＝…………‥18

いわゆる液性免疫・細胞性免疫の関与で，その本質的な病態となっているが，筋ジストロ
フィーでも，再生現象としてもかなり顆似の表3 慢性多発性筋炎の鑑別に有力な所見所見を示し，また，myOlysisをおこした組織の局所的非特異的反応としていわゆる炎症所①筋線維束の変化にむらが多い（診しばしば大なり小なり群集萎縮をみる

見に一部類似する病態が得られることがある．この意味でも，表3に示した諸要素の総③typeII atrophyを示すことが多い

合判断は重要であろう．
3）両者の鑑別があくまでも困雉な場合に⑥筋構築異常の種類が多彩（9問質の線維化が不規則（とくに血管周囲●は，ステロイド療法やリハビリテーションにに強い）よる治療を試み，また経過を観察する．この⑥脂肪浸潤が比較的少ない場合治療は充分に行う必要があり，例えばス（診血管周囲の溶出・浮腫が想定され易い

テロイド投与の量・期間が乏しい場ノ含，とく⑧血管壁の肥厚・空砲化・線維化を認め易に慢性型筋炎では充分に成果の上らないことが少なくない．両者をもし誤るのであれば，⑨一部の明らかな細胞浸潤をみることが多筋炎をジストロフィーと誤るよりも，ジスト

い．

⑲血管周囲の筋線経の変化がとくに強い

ロフィーを筋炎と誤った方が実際の治療・Ca−
reの面で患者のためには相対的に有益であ⑪蛍光抗体所見（γ−G：IgG．A．M陽性な

ろう．然し臨床総合診断をもとにして，患者

ど）

直接の病態につき基礎研究を展開してゆく場−109−

合には，その診断は確実でなければならない．
やむを得ず判定保留となることもあるが，本検討が，その一端に資し得れば幸である．

参考文献
1）田辺等：多発性筋炎症候群．内科，31：
1206，1973．

2）田辺等：多発性筋炎症候群（その1）．脳結と神経，26：854，1974；（その2），26：

語

950．1974．

以上，日常の筋ジストロフィーの診療上，とくに孤発例につき問題となる，慢性多発性3）田辺等，野沢胤美，内潟雅信，大石英俊，

筋炎との鑑別につき検討し，知見を整理して

山根清美：多発性筋炎150例の臨床的検報告した．

討および知見補遺．第19回日本神経学会
総会，東京，1978．

−110−21）I）uchenne型進行性筋ジストロフィー症（DMD）
における横細管系（T−SyStem）の研究
高圧電子顕微鏡による観察−

小

目

口

喜三夫

的

Karnovsky法によりランタン金属をT−SyS−

ランタン金属をtracerとするRevel−Kar−tem内に浸入させ，シリーズアルコールとプ

novsky法による電顕の観察から膜構造物のひとつであるT−SyStemがDMDにおいて

ロピレンオキサイドで短時間脱水後，epOn−aralditeに包埋した．厚さ1〜1．5JLの標本

形態的異常を示すことを報告してきたが，今を作製し，この標本を無染色のままで高圧電回は同法により，1−1．5JLの厚いepOnTar・a−

顕日立H・700を用い200kVの加速電圧で観察した．

ldite包埋無染切片を高圧電顕（200kV）を用いて検索し，T−SyStemの変化を観察することを目的とした．

結くコントロール〉

対象及び方法果
無染厚切片で観察したT−

SyStemはA帯とⅠ帯の移行部に存在し，標本DMD3例および正常コントロール2例．

が1／

routineの方法により生検された筋をRevel−以上の厚さがあるため，超薄切片では破線として観察されたT−SyStemは，上下，左

図1DMD．左側筋線経では正常に近いT−SyStemが観察される．右側筋線経のplasmamembraneは凸凹を示すが，ランタン金属がplasmamembrane
を通過することはない．不規則なT−SyStemの走行と多数の縦走T−
SyStemがみられ，管径動揺も著しい．
＊信州大学医学部第三内科−111−（×6，000）

右の隣りどうしのT−SyStemと連続性を持っma membraneを通過することは，調べ得たた網状管状構造として観察された．T−SyStem

限りではみとめられなかった（図1，右側線の径はtriadの部位で2〜3倍の大きさとな椎）．筋原線経と平行に走るT−SyStemの頻度

り，かつ他部よりhighdensityを示した．筋が押し．多くの縦走T−SyStemの径は，A帯の原線経と平行に走行するT−SyStemも少なか伸j端部では数倍の太さとなっていた（図2）．

らず観察された．

更にT−SyStemの走行が著明に不規則とな

くDMD〉

正常の筋線経も観察されるが（図り，糸くず様の形態を示すものがみられた（図1左側筋線推），他に電顕観察上，T−SyStem3）．多くのT−SyStemと連続性をもち，T−以外の微細構造の変化のないと思われる筋線

systemよりもlowdensityで，かつ広い面積

椎において，T−SyStemの規則的な走行性はをもつregionがあり（図4），さらにレース網

全く失なわれている．plasma membraneは状構造を示すものが観察された（図5）．

不規則な凸凹を示すが，ランタン金属がplas−

図2

DMD．縦走TTSyStemの増加がみられる．多くの縦走T−SyStemは
A帯の両端で太くなっている．

図3（×11，500）

DMD．T−SyStemは糸くず様走行を示している．（×26，000）
一112−

図4

図5

DMD．T−SyStemよりもlowdensityでかつ広い面積をもつregion（arrowheads，arrOWS）がみられる．
（×16，500）

DMD．T−SyStemは著明な不規則性を示している．T−SyStemよりlowdensityでレース網状様構造がみられるregion（arrowheads）がみられる．（×16，000）

考察
近年高圧電子顕微鏡の発達に伴い，立体的

temはA一I junctionに規則正しく配列する
ようになる．また，赤筋の方が白筋よりもT−構造を持つ器官は，1／∠以上の厚い標本で，systemの発達は悪いと述べている．Obaら4）

threedimensionalな観察が可能となった．

はdystrophic mouseのT−SyStemはコント

Peacheyら1）2）はカエルの筋を用い，高圧電ロールに比較し，発達が悪いことを報告して顕でT−SyStemの立体的構造を明らかにしいる．我々5）はRevel−Karnovsky法で処理した．石川ら3）はmouseの横隔膜を用い，neW

た超薄切片の電量削こよる観察で，ヒトDMD

bornからのT−SyStemの加令的変化およびにおけるT−SyStemの異常，即ちT−SyStem

赤筋自筋の相違を報告した．即ちnew bornの分布異常，走行異常，管径の動揺増加，さのらにT−SyStem−SRのanastOmOSisの存在に

mOuSeではT−SyStemの発達が悪く，縦ついて報告した．今回の1〜1．51

走TTSyStemが多い．成長するに従いT−SyS−
ー113−

の厚い無

染色切片の高圧電貴（200kV）による観察でも同様の変化がみとめられた．

今後，DMDの筋組織培養を使用し，T−SyST
temの発生発達に異常が存在するか究明す

特にT−SyStemと連続性をもち，かつT−Sy−

る必要がある．

Stemよりもlow densityでレース網状構造をもつものが観察されたが（図4，5），これ

文

献はT−SyStem−SRのanastomosisによりラン

1）Peachey，LD．：InDower，D．B．（Ed．），

タン金属がSR内に浸入したものと考えられ

TheBasic Neuroscience．Raven Pre−る．Fahimiら6）は，熟外傷を加えた病的状態

SS，NewYork，1975，p，81．

でSR内にランタン金属の浸入をみとめてい

2）Peachey，LD．＆Eisenberg，B．R．：

Helicoidsin the T system and striati−

る．
Waughら7）はmouseの横隔膜の観察で，OnSOffrogskeletalmuscle丘bersseen

SR内へのランタン金属浸入を報告した．彼

by high voltage electron microscopy．

らはT−SySem−SRのanastomosisはみとめておらず，SRと細胞外との連続性を推定しBiophys．J．，22：145，1978．
3）Ishikawa，H．＆Tsukita，S．：ThreeT
dimensional distribution ofthe T−SyS−ている．

temin mouse skeletal muscle．

我々の観察ではヒトのコントロールにおい

Proc．

て検索した限り，超薄切片でも厚切片の高圧

FifthInt．Conf．onHighVoltageElec−

電顕の観察でもSR内へのランタン金属の浸tronMicroscopy，NakanishiPrintCo．，

入はみとめられなかった．標本はランタン金属処理を行なう前にグルタールアルデヒドにKyoto，1977，p．359．
4）Oba，T．，Kanie，R．，et al∴Electrome−

より固定されておりランタン金属処理中のChanicalandmorphologicalobservati・

artifactの可能性はないと考えられる．従っons on single musclefibersin develo−てT−SyStemの変化，およびT−SyStem−SRのpingdystrophicmouse．Exp．NeurolりanastomosisはDMD筋における重要な異常

62：214，1978．

5）小口喜三夫，塚越広：進行性筋ジストロ所見と思われる．
DMDで観察されたT−SyStemの異常が，フィー症およびその他の神経筋疾患にお筋の発生期から存在したものなのか，あるいけるT−SyStemの電顕的研究，臨床神経，は一旦正常に発達したT−SyStemが，変化を18：266，1978．

起したものかが問題となる．石川ら3）の報告に

6）Fahimi，H．D．＆Cotran，R．S．：Perme−

よると，発達初期に縦走T−SyStemが多く存

abilitystudiesinheatinducedinjuryof

在し，かつT−SyStemの位置の不規則性があ

Skeletalmuscle usinglanthanum as a

ることなどから，DMDにおけるT−SyStem

丘ne structural tracer．Am．J．Patho1．，の変化，すなわち分布異常，縦走TTSyStemの62：143，1971．

存在は発生期からのT−SyStemの異常に，さらに管径の動揺，T−SyStem・SRのanastomo−

7）Waugh，R．A．，Spray，T．L．，et al．：

Sisなどの変化が加わったものと考えられる．

lum．J．CellBio1．，59：254，1973．

Fenestrations of sarcoplasmic reticu−

ー114−22）各種筋疾患におけるFreeze−fracture法による
筋細胞膜の形態学的研究

荒

木

研究協力者

淑

岡

郎

本

定

昭

進行性筋ジストロフィー症（PMD）の原因

面），及びextracellularsurface（粗なparti−

は不明であるが最近，患者赤血球膜の異常がCleより成る；E面）をatrandomに10ヶ所

形態学的および生化学的見地から注目されてずつ1JL平方あたりのparticleの数を数え，MD群，MND群，正常群で比較検討を行なった．

おり，我々も昨年の本班会議総会においてPMD患者赤血球を走査電顕を用い検索し，正常者の赤血球に比し容易に変化しやすいことを報告した．
今回，細胞膜の変化をより詳細に検索する目的で，生検筋を対象にFreeze−fracture法を

1）正常群のP面のparticleの数は274±用いた電顕でその微細構造について検索したので報告する．

18／JLm2，E面のparticleの数は164±11／JL
m2であった．

結果2）MD群のP面のparticleの数は126±

対象

対象は全て生検により得られた骨格筋を用

24／JLm2，E面のparticleの数は68±13／JLm2
であった．

いた．その内訳は筋ジストロフィー症（MD3）MND群ではP面のparticleの数は群）5名（PMD2名，＿筋強直性ジストロフィ
ー症3名），運動ニューロン疾患（MND群）

240±24／JLm2，E面のparticleの数は143±11／〟m2であった．

6名，それに筋疾患のない患者3名から外科

即ち，正常群とMD群との間には，P面，手術中に得られた筋をcontrolとした．

E面共に減少しており，それに比LMND群
では正常群と差は認められなかった．

方法

生検筋を2．5％グルタールアルデヒドで固考定後，30％グリセリンで処理し，真空蒸着装置を用い，液体窒素で約−110℃，2−8×
10￣6Torrの真空下で割断を行ない，白金パラ
ジウム，カーボンで蒸着し，電顕的に検索した．検索方法としてprotoplasmic surface（dense，且packed particleより成る：P

接進行性筋ジストロフィー症（PMD）の原因の1つとして患者赤血球膜の異常が生化学
及び形態学的見地から注目されている．形態学的異常としては1974年Mathesonら1）の報告以来，多くの報告がなされているが，未だ確証は得られていない．
我々も昨年の本姓会議総会において走査電＊宮崎医科大学第三内科

顕を用い患者赤血球について検討し，正常赤−115−

血球に比し，容易に変化しやすいことを報告

未だ少数例であり，今後さらに症例数を増やした2）．

すと共に赤血球についても検討を加える予定

はたして細胞股の異常がPMDで存在するである．

のか否かをさらに検討する目的で今回我々はFreeze−fracture法による生検筋の細胞膜の

ま

と

め

1）PMD及びMND，正常者での生検筋を検討を行なった．
Freeze−fracture法の導入は1966年Bran−

FreezeTfracture法を用い筋細胞膜の形態学

ton3）がこの方法により細胞単位膜の内面的研究を行なった．
2）PMD群では正常群に比し，P面，E面がリビッド2重層の問で破断され，その表面が観察可能であると報告して以来，この方法0）particleの数の減少がみられた．

が膜の内表面（破断面）の観察に最適である

3）MND群では正常群との間に差をみい
だしえなかった．

ことが立証された．
PMDにおいてFreeze−fracture法を用い文た研究としては1977年Schotlandら4），1978

献年Wakayamaら5）の報告があるにすぎない．

1）Matheson，D．W．＆Howland，J・L・：

Schotlandら3）は生検筋を用い検討しておErythrocyte Deformationin Human

り，PMDのP面，E面では正常に比Lparti−

Muscular Dystrophy．Science184：

Cleの分布が均一ではなく，且減少している

165，1974．

ことを報告し，このことはPMDではmuscle

2）荒木淑郎，岡本定昭，北野正二郎：進行

surface membraneの異常があり，その変化

性筋ジストロフィー症患者の赤血球隈には月臭の内部分子構造にある可能性を示唆し関する形態学的研究．筋ジストロフィーた．

症の病因の究明に関する研究，沖中鑑．

最近Wakayamaら5）は

昭和52年度研究報告書．p．311．

Duchenne型PM3）Branton，D．：Fracturefacesoffrozen
membranes．Proc．Natl．Acad．Sci．U．

D患者赤血球について検討し，赤血球膜のP面，E面でも同様の粒子の減少を報告し，ge・

S．A．55：1048，1966．

neralized membrane abnormalityの存在を

4）Schotland，D．Lッ

強調している．

Bonilla，E・＆Van

我々の成績でも対照群に比し，PMD群でMeter，M．：Duchenne Dystrophy：Al−

はP面，E面共にparticleの減少がみられて

terationinMuscle Plasma Membrane

いる．さらに我々はMNDの患者との比較を

StruCture．Science 196：1005，1977．

行なった結果正常対照群と何ら異なる所見は

5）Wakayama，YリHodson，A・，Pleasure，

みられなかった．このような神経原性の筋萎

D．，Bonilla，E．＆Schotland，D・L∴

縮と比較検討した研究はまだなされていな

Alterationin Erythrocyte Membrane
StruCtureinDuchenneMuscularDyst−
rophy．Ann．Neurol．4：253，1978．

しかしながら，検索したPMDの症例数はー116−23）福山型先天性筋ジストロフィー症の大脳皮質病理−VerruCOSe dysplasiaにおける血管構築学的研究−

倉

豊

研究協力者

岩

田

康

夫

栗

崎

＊

誠

福山型先天性筋ジストロフィー症において

博

司

飯

田

政

雄

皮質内では分枝を出さず，皮質表面にまで達は，大脳皮質のVerruCOSe dysplasiaがしばしないで消失する，と記載したが，その後しば認められるが，この奇型を正面から扱った研究は少なく未だ不明の点も少なくない1）

GrceviCら2）もこれをほぼそのまま認めている．すなわち，第2屑の消失と第3層の吹き出し〟 そして中心動脈，これが，これまで
われわれは，14歳と19歳で死亡した2例のVerruCOSe dysplasiaに対する考えであの福山型先天性筋ジストロフィー症の剖検る，と言える．

例3）の大脳皮質表面に広汎に見られたVerru−
COSe dysplasiaにつき，主としてその血管構

この点を再検討するため，われわれは，大脳半球内側面のprecuneus附近の皮質を，脳表築に関する検討を行った．

に対してVerticalおよびtangentialの方向

これらの例では脳表全体にわたり脳回は一に連続切片とし，nOduleの細胞構築と血管構

見琉状のVerruCOSenOduleでおおわれ，ぶつ築の関係を立体的に把握することを試みた．

ぶつとした魚子状を呈している．個々のnod−

Tangentialな割面で見ると，nOduleの表

uleはその直径が数mm程度に及ぶ円形の隆面近くでは，直径100〜150JJのSinusoid状
血管をとりまいて，halo状の糸田陀体のない領域

起をなしている．
組織学的に見ると，これらのnoduleは，皮があり，その外に，方向性を失った錐体細胞

質第2屑の顆粒細月包の消失と，第3層の錐体が不規則な集団をなしている．その更に外側

細胞の表層への 吹き出し〟 から成っておりにはmicrosulcusを形成する分子屑様の部分

noduleの周囲には，microsulcusを形成するがあり，この中に，tangentialに走る動脈が見傾向が見られる．これに対し，第4屑以下にられる．更に表層に達すると，中心血管は900

は目立った変化がな．い．．特徴的なことは，nOd−
uleの中心に見られる太い血管の存在であ方向を変換し，皮質表面に沿って走るようにり，このような血管の壁は，ほとんど内皮細察される．

なり，ついには軟膜の静脈につながるのか観中心血管の軟膜静脈への連絡は，丹念に探胞のみから成り，Sinusoid状である．

せばVerticalsectionでも観察することがでMorelとWildil）は，本奇型におけるこのよ
うな異常血管に初めて注目し，このnodule

きる．これに対し，中心血管が動脈につながをuniteneuro−VaSCulaireと呼んだ．彼らは，るような像は，今回の検索からは全く見出し得なかった．

中心血管は自質内から逆行する動脈であり，中心血管を逆に皮質深層に向って辿ってい＊東京大学医学部脳研神経内科＊＊国立療委所下志津病院

くと，第3屑に達するまではほとんど分枝をー117−

出さず，中心血管のまわりは，細月包体のない

2屑がなく，第3屑は外表にhalo状の分子屑様の部分がとりまいている

いる．すなわち，MorelとWildi以来の記載状態が続く．更に深層に至ると，このようなとは，血管の解釈において正反対の結果が得

halo状部分はなくなり，分枝を出すようになられたわけである．

るが，これらの分枝は毛細管，または，ampu1−

図2は，われわれの得た結果を示す毒突式図である．中心静脈を囲むようにしてVerruCO−

1aを有するVenuleであり，動脈枝との吻合

吹き出し〟

て

は全く見られない．中心血管は，更i．こ自質にまで追跡できるが，ここでもこの血管は末だ

SenOduleが生じている．

静脈の性質を備えており，検索し得た範囲での 吹き出し〟 は，発生初期より存在し，脳は，動脈との吻合は見られなかった．

表をSea1−Offしているgliallimiting memb−

このようなdysplasiaの中核をなす第3屑

図1は，検索した中心血管の1本を，細胞

raneの破壊によるものではないかと思われ構築と共に模式的に示したものである．左端

るが，中心静脈の存在は，そのような脳表のに，表面からの深さを〟mで示してあり，そ破壊が，主として静脈周囲性に生じている可の隣りには，相隣り合う領域のVerticalsec−

能性を示唆するものではないかと考えられtionから推定した．この部分の正常」犬態でのる．

細胞構築を示してある．これに対し右側には，
tangentialsectionで，中心血管のまわりに見られるneuronの形態から再構築したnodule部の細胞構築を示してある．中心血管は致膜
静脈とつながり，動脈とは関係していないため，中心静脈（centralvein）と呼ぶべき種類のものである．この部分で1ま，第4屑以下はほぼ正常と同じであるのにもかかわらず，第yce−−u−aH rinQ

昭d＝皇紀蓑∴点灯U蚕棚刷刷附榊

図2

verrucosenOduleの構造を示す模式図

文1）Morel，F．＆

献
Wildi，E∴Dysgenesie

nodulairedissemineedel，ecorcefront−
ale．Rev．Neurol．（Paris），87：251−
270，1952．

2）Grcevic，N．＆Robert，F．：VerruCOSe
dysplasia of the cerebral cortex・J・
Neuropathol．Exp．Neuro1．，

20：399−411．1961．

3）栗崎博司，高津成美，井上聖啓，岩田誠．
豊倉康夫，原田健司：先天性筋ジストロ
フィー症の2剖検例．第20回日本神経病理学会総会，1979年5月24日．

図1 中心血管の模式図−118−24）Central coreに関する筋病理学的研究−臨床例とtenotomyの実験から−

＊

研究協力者

納

光

弘

福 永 秀 敏

徳

永

井

形

昭

秀

次

大

勝

洋

祐

＊＊

弘

北

野

は じ め に治

男症

最近，われわれは極めて特異な病像を示す
親子例で，母親では筋生検上明らかなCOreを認めるにもかかわらず，同様な臨床的特徴を例

症例1：N．S．56歳，女性，鹿大3内78−0232

主訴：上月支挙上困難，歩行障害有する子供2人においてはCOreを見出し

家族歴：本例並びに本例の両親はいずれも得なかった症例を経験した．そこで，ここに血族結婚ではないが，図1の様に家系内に，Centralcore diseaseの自験例について検討

ここに呈示する3例を含めて7例，略同様の病像を示す人を認める．

し，並びにtenotomyによるCOreの生成実験を行ったので，両者の成績を対比しつつCOreの成因について筋病理学的考察を行った．

既往歴：7歳の時，traChomaに罷思し，51
歳の時，虫垂切除術をうけている．

∽e2case3 ■●A晩cted
図1 家 系 図＊鹿児島大学医学部第三内科＊＊国立療養所宇多野病院神経内科−119−側攣，両股関節の内転制限を認め，また異状
肩甲が見られた．神経学的には，知能は正常で，眼球運動を含む脳神経には特に異常はなかったが，側頭筋，眼輪筋，口輪筋，胸鎖乳突筋に軽度の筋力低下を認めた．また肩甲筋，
上肢近位筋に中等度の筋萎縮と筋力低下も認
め，下肢では内転が弱く，下肢近位筋に軽度の筋力低下を認めた．

現病歴：乳幼児期の知的並びに身体的発育は正常であったという．15歳頃から起立時，少し筋脱力を覚えるようになり，また歩行は遅かった．24歳頃から上肢の挙上が困難となり，その後徐々に筋力低下は進行し，42歳頃には階段昇降が困雉となった．現在も歩行は
短距離なら可能である．
現症：一般内科的には，身長145cm，体重

検査成績：末梢血，尿，電解質，血清蛋白
甲状腺機能は全て正常．GPT17，LDH505，

35kgとやせている．脊柱は胸腰椎とも左に側攣があり，翼状肩甲が著明で，漏斗胸，右CPK65（正常値25以下）．
筋電図は，胸鎖乳突鼠 三角筋，大腿四頭筋で筋原性の変化を示した．運動神経伝導速度は，前腰骨神経で51m／secと正常であっ股関節脱臼，右膝関節の軽度屈曲制限，外尿
膝などの種々の筋骨格系の異常を認める．
神経学的には，知能は正常で，視力，視野，
眼球運動，日艮底，聴力は全く異常なく，高口たっているが，側頭筋，口端筋，胸鎖乳突筋た．
症例3：N．S．13歳，男性，鹿大3内，78

で軽度から中等度，三角筋，上肢近位筋，肩−1607

蓋も認めない．筋萎縮，筋力低下は全身にわ

甲諸筋，母指球筋で中等度，骨間筋で強度，

現病歴：症例1の長男である．幼少時の発また下月支では遠位筋，近位筋とも軽度である

育は異常なく，小学校時，徒歩は中位で，現が，外転は中等度侵されていた．

在でも学校の運動は普通通り行っている．

検査成績：末梢血，尿，血清電解質，血i青現症：体格は普通で，一般内科的には特に蛋白，肝機能，甲状腺機能は全て正常であっ異常を認めない．神経学的には，眼輪筋，口た．GOT32，GPT19，LDH376，CPK26（正輪筋，胸鎖乳突筋，肩甲筋に軽度の筋力低下

常値は25以下），HBD150単位．
筋電図では，骨問筋でCOmplexNMUを認がみられ，また翼状屑甲と高口蓋を認めた．
四肢はややSlenderであるが，上肢近位筋にめたが他の筋では低電位で振幅の短かい筋原

極めて軽度の筋力低下がある．しかし日常生

性の変化であった．運動神経伝導速度は，排活には全く不自由はない．
検査成績：末梢血，尿，電解質，肝機能，骨神経で45m／sec，正中神経で49m／secと甲状腺機能は全く正常である．GOT45，GPT

正常範囲であった．
症例2：U．S．17歳，女性，鹿大3内，78

26，LDH558，CPK81（正常は35以下）．
筋電図では，上肢近位筋で筋原性変化が認−0231

主訴：上肢挙上困雉

められた．

既往歴：特記すべきことなし
現病歴：症例1の長女である．正常分娩で筋 生 検

乳幼児期の知的並びに身体的発育は正常．小症例1：光顕的には筋線経は比較的よく保学校の時のかけっこは遅い方であった．13歳

たれており，脂肪化や線維化は軽度であった．

頃から高い所の物を取る時，手の上げにくい

筋線経の直径は20βから90JJに及び，大小ことに気付いた．その後，筋力低下は上肢を不同と軽度の中心核の増加が認められた．またTrichrome染色やHE染色では，明らかな中心に緩徐に進行している．
現症：一般内科的には身長165cm，体重

coreは指摘できなかったが，COreと思われる

43kg．筋骨格系では，高口蓋，漏斗胸，腰椎部に一致して筋断裂を多数認めた．さらに，ー120−

図2 症例1，大腿四頭鼠 横断像
筋の大小不同，筋断裂 中心核の増加，nemalinerodを認める．Gomori S
Trichrome染色，×250

図3 症例1，大腿四頭筋，横断像
多数のCOreをType1線経に認める．NADH染色，×250−121−

Trichrome染色ではrodと思われる赤染する

懐やZ帯の消失が観察された．更にCOreの部

小顆粒の集合（図2）とまれに辺縁の赤染す分ではミトコンドリアやSarCOplasmic reti−

る筋線経を認めた．

Culumは明らかに減少していた（図4）．

一方，NADH染色では多数の明らかなcor
reをtype1線経にのみ認めた．1個の筋線維あたりのCOreの数は1個のものから数個のものまで多数にわたっていた（図3）．

次にCOre部及びそれ以外にも筋草宮下に多数のrodが観察された．
症例2

二光顕的には，筋繰経はよく保たれており，脂肪化や線維化はなく軽度の大小不また筋線椎の縦断像ではCOreは，筋線経の同が認められた．NADH染色では散在性に

縦断面の全長に亘るものから部分的なものまで多彩であった．

縞様のムラのある筋線経も観察されたが，CO−次にATPase（pH9．4）染色ではCOreの部
分もよく染色され，分別も良好でヒストグラ

線維優樟二で，かつやや小さい傾向にあった．

ムではtype1線推77％，type2線維23％とtype1線維優位であった．

く，軽度のグリコーゲン顆粒の増加とSarCO−

reは認めなかった．ATPase染色ではtype2
電顕的には，筋原線経の構築は特に異常なplasmicreticulumの拡大がみられた．

電顕的には，筋原線椎の構築はCOreの部分

症例3：筋線経はよく保たれており，脂肪以外では異常なく，またCOreの部分でも比較化や線維化はなく，筋線経の軽い大小不同と的良く保たれていたが，まれに筋原線椎の破まれに変性した筋線椎を認めた．NADH染

図4

症例1，電顔像
COre部に多数のrodを認める． ×6750

一122−

色では，筋構築はよく保たれておI）coreは認

蛇行像を認め，3日目ではSnakecoil様の筋

められなかった．PAS染色では，筋靴下で活繰維ととい二少数のCOreが出現し，5日目で性の強い部分がみられた．ATPase（pH9．4）

は，lリ】らかなcoreとともに空胞を持つ筋線経も観察された．7日日になるとCOreの内径は染色ではtype2線推優位であった．
電顕的には，筋原線経の構築は正常でCOre最大となり，またTrichrome染色ではCOre

やrodは観察されず，筋軍籍下に多数のグリコの内部に，rOdと′県われる赤色の顆粒が出現ーゲン顆粒と筋原線維間に空胞が観察された．

った．21日目ではCOreはますます小さくな

し，14日目ではCOreのl勺径はやや小さくなり，COreの消失した筋線緋もみられる様にな

実

り，56日目ではCOreは全く．ばダ）JJれず，ほと験

方法：体重250〜300gmのラット（Spra−

んど正常に近い筋線維となっていた．

gue−Dawky系）をエーテル麻酔後，アキレス

そこでCOreが出現し消失していく週flItを

腱を完全に切断し，再び連結しないようにセ

数量的に表現するため各々の時期で5（日岡のロハン紙で断端をくるんだ．腱切断後，1，
2，3，5，7，14，21，56日目にそれぞれ横断像についてCOreの最小直径とCOreをイJ−

数匹ずつ剖検し，ヒラメ筋をisometric cla−

腱切断後，5日目ではCOreの最小直径の−平mpで固定後切断した．その後，急速凍結しク

均とその標準偏差は11．66±1．79mm，7日する筋線経の最小直径をそれぞれ計測した．

リオスタットで10βの連続切片を作成した

目では9．48±2．03mm，14日目では3．73±

後，組織化学的検討を行った．対照は，アキ1．55mmであった．また筋線経の最小直径とレス腱切断を施行していない村側後肢のヒラメ筋を使用した．

の比を求めると5日目では0．60，7日目では
0．65，14日目では0．28となり，1睡切断後7日目にCOreの大きさは筋線椎に比し，最大とな

結果二月建切断後のヒラメ筋の組織化学的変ることが判明した（図5）．

化を経時的に観察すると，切断後1日目で，既にtype1線経に筋構築の乱れと思われる

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1 1 ．6 6＋ 1 ．7 9b

1 9 ．3 4＋ 2 ．1 6

a ／b

0 ．6 0＋ 2 ．
0 3

3 ．7 3 ＋ 1 ．5 5

1 4 ．5 2 ＋ 2 ．
4 5

9 ．
48

1 3 ．1 0 ＋ 2 ．1 5

0 ．6 50 ．2 8

図5 腱切断後のラット，ヒラメ筋の組織化学的変化
一123−

■
潔＝
−

ま

と

7日日にCOreの内径は最大となり，その後次め

第に消失し56日目にはCOreは全く消失する

臨床的には，顔面肩甲上腕型の筋ジストロ

ことが明らかとなった．

フィー症に類似した病像を呈する親子3例をつまりCOreの出現は可逆的なものであり，経験した．
筋生検では，母親ではtype1線維優位で，筋萎縮などに伴う再生現象の一つとして出現

かつtype1線経に多数のCOreを認めたが，するものである事が推察され，われわれの臨

子供2人ではいずれもtype2線維優位でCO−

床例における筋生検像の差異も，この様な経reは見出し得なかった．

時的経過の表現と理解されうる．

そこでCOreの持つ意味について検討する

また，症例1ではCOreとともにrodも同目的で，ラットを使用してtenotomyの実験

時に認められ，両者は密接な関連があり，いを行った．月建切断後のヒラメ筋の経時的観察

ずれも筋再生の非特異的表現である事を推論を行うとCOreは腱切断後3日日より出現し

した．

ー124−

25）実験的ガングリオシッド・ミオパテーの
電子顕微鏡的研究

佐
研究協力者

永

藤

井

克

猛
孝

井

筋ジストロフィー症では筋線経の変性の初

口由美子

卵レシチン4mg，コレステロール10期において形質膜や筋小胞体膜の異常が起こ

mg，メチル化BSAl mg（人工膜）．

るのではないかということが推定されてい第3群：グルコサミン含有ガングリオシッ

る．一方，筋線維からの筋原線経，筋小胞体，

ド1mg，卵レシチン4mg，コレステロ

ミトコンドリアなどの各分画を抗原として動ール10mg，メチル化BSAl mg．

物に実験的アレルギー性筋炎をつくり，光学

第4群：家兎筋クロロホルム・メタノール

顕微鏡的に筋病変を観察した研究は報告され抽出残盲歪．

ている．ガングリオンッドは筋線経の膜構成

実験2：抗原とFCAとの等量混合物をモ

脂質のひとつとして重要であるが，筋ジスト

ルモットの皮下に2週間間隔で3回注射しロフィー症あるいは多発性筋炎の際の変化についてはほとんど知られていない．

た．
第1群：Mycobacterium tuberculosis

われわれは家兎筋から抽出したカ∵／グリオ、（MB）50〟gのみ．

シッドを抗原としてモルモットを感作した場

第2群：MB＋mono−Sialoガング［）オシ合，筋線経にいかなる変化が起こるかを明らッド160／Jg．

かにするため，血i青中CPK測定および骨格

第3群：MB＋di・Sialoガ∵／グ））オシッド

筋の電子顕微鏡による検索を行ったので，現在までに得られた成績について報告する．

200JJg．

第4群：MB＋tri・Sialoカ∵／グ））オシッド
200J

方

結

実験1：FoIchの方法により家兎筋からガングリオシッドを抽出し，抗原を次の4種類に分け，等量のFreund

g．

法

果

実験1，2とも二最終回の注射後正常の10数

scompleteadjuvant

倍におよぶ著明な血清CPKの上昇がみられ（FCA）と混合，各群5匹のモルモットの背部皮下に2回注射した．

たが，実験2の第1群のようにadjuvantだ
けを注射したモルモットでもCPKの上昇が

第1群：家兎筋ガングリオンッド1mg，起こった．

牛血清アルブミン（BSA）1mg．

光学顕微鏡にて俳腹筋，大腿直筋および大第2群：家兎筋力∵／グリオンッド1mg，

腿屈筋群を観察した．大体の傾向として筋線経の変化の程度は排腹筋より近位筋の方が強＊順天堂大学医学部脳神経内科

かった．

＊＊東京都老人総合研究所基礎生化学−125−

（実験1）第1，2，3群では好塩基性を呈実験1の第4群では1匹のみに強い筋線椎する変性線経が散在していた．第1群が最もの壊死がみられた．即ち，筋原線経の蛇行，変化が強く，第2群，第3群の順で軽度にな

凝締盲，hypercontructionなどが著明で，いわっていた．このような好塩基性線推内に微細ゆるSegmentalあるいはfloccular degene−あるいはやや粗大な大小の頼粒が多数出現し

rationをLlt＿し，myOPhagiaが著明であったていた．しかし，筋原線経の横紋構造は比較（図2A）．

的よく保たれていた．なかには筋鞘核の増加，

血管周囲のリンパ球浸潤は第1群で2匹，macrophageの侵入，myOblastの出現などを第3群では1匹のみに極めて軽度のものが認伴っているものもあった（図1A）．

められるに過ぎなかった．

図1

図2

実験1（心第1群の好塩基性変性線維

実験1仏）第4群の筋原線経の壊死（H．E．）（H．E．）（B）崩フィラメントの崩壊（B）第2群の電顕 多数のミエリ（×9，000）

ン小体（×7，000）−126一

電子顕微鏡で観察すると，第1，2，3群

第2群では筋原線経の変化は悍J■ト／では筋形質内に多数の粗大顆粒やミエリン様た．しかし，1匹にのみ問質に多敗のリニ ′、小体が出現していた（図1B）．これらの形成

球浸潤がみられた（図3）．

過程は，ミトコンドリアの外膜や筋小胞体団莫

第3，4群では筋原線経の強い変件か十川の電子密度が増大し，次いでこれらの膜が層にみられた．好塩基性変化が主体を【liめてい状，さらに渦巻状に重層していわゆるミエリ
ン様小体を形成する．このミエリン小体の内たが，第4群では2匹にflocullar degenerこ1−tionを示す線経も多数混在していた．また仝部には変性したミトコンドリアやグリコーゲ

例において筋線維内にカルシウム沈着と思わン顆粒を含む筋形質の一部が取りこまれていれる好塩基性物質が出現していた．

た．リソゾーム内にもこれらの変性したオル
ガネラが取り込まれていることもあり，さらに自己融解空胞が形成されていた．筋鞘膜部の形質膜も同様に変性し，ミエリン小体と連続しているものもみられた．
第1，2，3群ではこのようにオルガネラの変性が強いのにもかかわらず，筋原線椎の構造は比較的よく保たれていた．粗大顆粒が無数に形成され，筋形質内に充満しているよ
うなものではじめて筋原線経の崩壊が認められた．このような特異なオルガネラの変化は
第1，2群が強く，第3群では5匹中1匹だ
けにみられた．
第4群では他群とは対照的に筋原線経の変性の方が著明であった．即ち筋原線経の正常配列は全く乱れ，筋フィラメントは糸層状の図3 実験2 第2群の細胞浸潤（H．E．）

集塊となっていた（図2A）．このような筋原線経の変化のはじまりは，Z帯構成線経の蛇行，筋原線維束からの筋フィラメントの醜聞

考察と結論などから始まる．ミトコンドリアの数が異常神経組織から抽出したガングリオシッドでに増加している筋線椎も多数認められた．筋

家兎を免疫すると末梢神経の特異な変性が起

原線経が全く崩壊しているものではミトコン

こることが報告されている（永井，1976）1）．

ドリア，筋小胞体などのオルガネラも濃縮，本研究では筋肉から抽出したガングリオンッ

変性していたが，ミエリン小体の形成などはドでモルモットを免疫した場合，筋線経のオ認められなかった．

ルガネラに特異な変化が起こることを明らか（実験2）第1群はadjuvantだけの注射ににした．また予備的な報告をしたように2），ガもかかわらず，1匹は高度，他の4匹は軽度ングリオシッドを抽出した残i査，即ち蛋白成

ないし中等度の筋線経の変性がみられた．好分を主としたもので免疫した場合，筋原線経

塩基性顆粒を有する線経，あるいは筋原線経の方に変性が先に起こることが分った．換言の崩壊の方が強いfloccular degenerationがすれば抗原の種類が異なると，筋線椎の変性

混在していた．しかし，問質の細胞浸潤はみ様式が異なるであろうことを示唆した．
さらにガングリオシッドの中で，dトあるいられなかった．
−127−

文はtri−Sialoガングリオシッドの方が筋線維

献1）Nagai，Y．．Momoi，T・，Saito，M・，Mitsu−

変性効果が大きかった．
しかしながら，実験2の第1群のように，

zawa，E．，＆ Ohtani，S．：Gangliosideadjuvantだけを注射した対照群でも程度はsyndrome，aneWautOimmuneneurol0−

軽くなるが，筋線経の変化がみられ，adjuva−

gic disorder，eXperimentallynt自体にも筋線維傷害性があることが分っwith brain gangliosides．Neurosci．
Letter

た．そのため今後は合成adjuvantを使用す

induced

2：107−111，1976．

2）佐藤猛：ミオバナーおよび多発性筋炎のるなどしてガンブリオンッドの特異性をさら超微形態学，日内会誌 66：784−792，に詳細に検索する予定である．

1977．

一128−

26）筋肉内ウイルス様粒子の細胞化学的研究
＊

福

は

じ

め

原

信

義

グルタールアルデヒド国定のみで後固定せにPicornavirus様粒子が筋肉中で観察されたという報告は多数あるが，これがウイルスそのものであるとして，筋疾患の病因と結びつけて考えるものと，ウイルスではなく，非ず，エボン・アラルタイト混合樹脂に包埋し，超薄切片を作製②

超薄切片を0．5−5％uranyl acetate

で1分間染色特異的な構造物であるとするものとがある．

③

0．01〜0．2M−EDTAで30分〜1時

また，Hanson＆Urizar（1975）のように，間反応死後変化である可能性を示しているものもあ④

Leadcitrateで5秒〜1分間染色る．今回，交通事故による複雑骨折のため切（9 水洗後電顕観察

断した下肢の俳腹筋で，多数のpicornaviruS比較のため，aCid−maltasedeficiencyの患様粒子を観察したニ〉この粒子が，果して，ウ者（45才女性）の右上腕二頭筋の生検材料でイルスである可能性があるのかどうか検討す

同様の染色を行って観察した．

るため，細胞化学的に核酸の検出を試みた．
結

方法と材料

果

1〕光顕的観察：凍結切片のGomori tri−

症例：35才男，既往歴・家族歴には特別のChrome染色では，angular丘bersが散在し，ことはない．交通事故により右大腿部の複雑

ごく少数の骨折をうけ，3時間後に右下肢の切断をうけting

た．俳腹筋の一部を切断後30分以内に，2．5線経の壊死，細胞浸潤は認められなかった．

％グルタールアルデヒドで固定した．
核酸の検出に用いた方法は：

問質の結合織，血管にも異常はなかった．アA〕Heinen（1978）2）の方法：

常はみられないが，intermyofibri11ar space（∋1％オスミュウム酸で後固定後，エボがやや開き，微細顆粒状物質が散在してみら，

opaquefibersrimmedvacuoles，

fiber−Split−がみられたが，筋ラルタイト包埋縦断標本では，基本構築に異ン・アラルタイト混合1封脂に包捜し，超薄切
片を作製② 超薄切片をCis−dichlorodiammine pl・れた．
2〕電顕的観察：固定の遅れのため，糸粒

atinum（ⅠⅠ）（1mg／mlin0．01M−NaClO。）

体，T−SyStemはやや膨化していたが，myOfi−
brilsの基本構築はよく保たれていた．Myo6−に入れ，37℃3日間暗室で反応

brilsの間に図1のように，平均直径22nmの（∋ 水洗後，無染色で電顕観察

高電子密度の粒子が密集し，三角形または六B〕Bernhard（1969）3）の方法：

角形の結晶構造の配列をしていた（図1）．各①1％オスミュウム酸で後固定，または粒子の平均中心間距離は25mmであった．このいわゆるウイルス様の結晶構造は，Subsar−
COlemmalで，Z帯の近くに位置することが＊新潟大学脳研究所手中経内科

ー129−

図1ウイルス様粒子

図2 cisTplatinum（II）染色−130−×43，000

×52，000

図3

図4

Bernhard染色acid−maltasedeficiencyのCis−platinum（II）染色×18，000

したがって，このウイルス様粒子は明らかに多く，筋鞘核の中にはみられなかった．

核酸を有するものと考えられた．

3〕細胞化学的染色：
1）Cis，platinum（II）染色（Heinenの方

2）Bernhard染色二用いたuranylaceta−法）：Myofibrils，糸粒体は，Cis−platinum（II）

te，EDTAの濃度により，ウイルス様結晶粒にはほとんど染まらないが，ウイルス様結晶

子の染色性はわずかに濃度が，0．5％uranyl

粒子は濃染してみえた（図2）．リボゾーム，

acetate1分間，0．2M−EDTA1時間，Lead

核クロマチンも同様に濃く染まった．一方，Citrate5秒間の組み合わせでも膿染してお対比に用いたacid−maltase deficiencyの筋り（図4），RNAを有するものと考えられた．

肉のグリコーゲンは，染まらなかった（図3）．
−131−

考

の症例のように，剖検時の骨格筋で多数のウ

察

筋肉中に，この症例のようなウイルス粒子

イルス様粒子をみいだしたのに，剖検の3時様の結晶配列をなす構造物がみられたという間前になされた筋生検では，全くウイルス様報告は，表1の如く，今までに34例の報告が粒子がみられなかったとし，このウイルス様みられる．形態的には，picornavirusの粒子

粒子の出現は，死後変化または，死戦期の非に似た配列をなしているために，Chou

特異的現象であるとしているものもある．

＆

このウイルス様粒子の細胞化学的性質につGutmann（1970）をはじめとして，ウイルス粒子そのものと推定している報告が多い．しいては，（Dグリコーゲンではなく（Oshiro，かし，筋からのウイルス分柾の試みは今まで5例でなされているが，Tangetal（1975）1976），DNAか？（Chou，19714）），②グリコの1例でのみ分離に成功しているにすぎな

相反する2説があった．すなわち，Oshiroは，い．Tangetal（1975）の例は，生検筋の組

ェボン包埋標本のアミラーゼ処理で，このウ織培養によりCoxsackievirus type A9を分

イルス様粒子は消化されないので，グリコー推したため，筋ジストロフィー症の臨床診断

ゲンではないと結論し，Co11ins＆Gilbert

であったが，慢性多発性筋炎であろうとして（1977）は同様の方法でグリコーゲンであると結論している．Chou（1971）4）は，著者の用ーゲンである（Collins＆Gilbert，1977）のいる．しかし，多発性筋炎，または皮膚筋炎と診断されているのは，今までの報告34例中，いたBernhardの方法により，このウイルス9例のみであり，あとはALS，熱暑病など筋様粒子の染色性が低下したので，グリコーゲのウイルス感染とは関係のなさそうなものばンではないが，RNAでもないとした．Picor−

かりである．また，Hanson＆Urizar（1975）

navirusは，RNAvirusであるので，Chouの表1筋肉におけるpicornavirus様粒子の報告について
htt nt山thorいtⅣ）【11∧k▲l Dx．

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8

20tZS）■■

l：kclVP〜γ．8：8101〉〜∫

ー132−

8

28
22（251一成績ではそれまで推定されていたpicornavi−

病因に結び十つけて考えるのは困難であり，非rusということは否定されることになる．

特異的変化と思われる．

著者の用いたCis・platinum（II）染色は，Cis−
dichlorodiammine platinum（II）が核酸と

ま

と

め

06（Gua）・N7（Gua）chelationをなすことを利用するもので，特異性が非常に高く，核酸以角形または六角形の結晶様配列をなすいわゆ

外では，ムコ多糖類の硫酸基がCis−platinum

るウイルス様粒子が多数みられた．cis・plati−（ⅠⅠ）に反応する位のものである．核クロマ

num（II）染色とBernhardの染色により，こチン，リポゾームは濃染するが，蛋白はわずの粒子はRNAを有すると考えられた．

交通事故により切断した下肢の排腹筋に三かにみえるのみであり，グリコーゲンはこの実験でも明らかなように全く染まらない．細

文

献

胞化学的研究方法としては，染まることに意

1）Fukuhara，N．：Electronmicroscopical

味のあるpositiveの方法はよいが，染まらな

demonstrationofnucleicacidsinvirus−

いことに意味のあるnegativeの方法は，そのlikeparticlesintheskeletalmuscleof

物質が果して染まらないのか，それともはじ

atrafhcaccidentvictim．Acta．neuro−

めからその切片に存在しないのかが常に問題

pathol．（Berl．），47：55，1979．

となる．従って，アミラーゼ処理，RNAaseに

2）Heinen，E．：Cis−dichlorodiamminepトよる反応などは結果の判定に注意を要する．

atinum（II）asstainforelectronmicroT対比のために用いたacid−maltasede丘ciency

SCOpic preparations．Histochemistry，の筋肉では，多数のグリコーゲン顆粒が膜に

51：257，1977．

固まれて出現するのが特徴であり，その構造

3）Bernhard，W．：A new staining proce−から判断してグリコーゲン顆粒が多数存在し

dureforelectronmicroscopicalstudy．

ていながら，CisTplatinum（II）により染まらJ．Ultrastruct．Res．，27：250，1969．

なかったと判定できる．

4）Chou，S．M．：Prospectsofviraleti0−以上のことから，この症例でみられた・ウイ

logyin polymyOSitis．In：Clinical stu−

ルス様粒子はグリコーゲンではなく，RNAdiesinmyology（ed．B．A．Kakulas），

よりなっていると考えられ，picornavirusまp．17，Amsterdam：Excerpta．Medica．，

たはリボゾームであろうと考えられる．いず1971．

れにしても，今までの報告例の分析からは，

ー133−27）筋ジストロフィー症の単一筋線維筋電図
＊

西

研究協力者

小

目

的

西

哲

谷

郎

裕
北

野

男

池

上

佳

典

算出は従来通りMCD値として用手的に計測した．

Singlefiber EMGは個々の筋線経の活動電位を分旺してとらえることができ，その治各々の活動電位の時間的変動を解析するのに筋線維密度（Fiber Density：F．D・）はat
randomの20ヶ所以上のポイントにおける適している．従ってこれらを用いて，筋ジス

振幅200JLV以上でrise time300JLSeC以内

トロフィー症の筋線維異常の病態生理を解析の同一神経支配下のSharpな練波成分数をすることが可能となる．今回は昨年度の班会平均して求めた．

議にひき続いてjitter現象及び平均線波間

平均辣波間距離（MISI）は同一神経支配下

距離（meaninterspikeinterval：MISI）をの2個以上のmultipleactionpotentialにお筋ジストロフィー症，各種神経筋疾患においいて，最大敗波間距随をその間に含まれる娩

て検討し，その特徴を明らかにすることを試

波数から1を引いた値で割って求めた．このみた．

場合約5mSeC以上の時間的遅れを示す活動電位（1atecomponent）は他の棟波群より匪

方法と対象

れて孤立的に出現するためMISIの計算より

電極直径25／′の単一筋線維筋電図針を用いて，随意的弱収縮下の−側総指伸筋で単一省いた．ここでは同一個人より得られた10個〜20個のMISIを平均した値をMISIと呼筋線維筋電図を得た．対象は進行性筋ジスト

ぶことにした．

ロフィー症（Duchenne型，肢帯型，myOtO−

IPIとIDIとの関係は図1に示す．図1のnic）及び他の神経筋疾患である．一部の症例

上段は1つのpOtentialpairの通常連続記録

では筋発射間隔（interdischargeinterval：を示している．下段左側はpairの最初のact−

IDI）と同一神経支配下の2つの筋線経の煉ion potentialでtriggerして一定のSWeep

波間距馳（interpotentialinterval：IPI）とのspeed（500JLSeC／cm）でSWeep L，記録用紙関連を検討するため不均一な筋反射を行なわを20cm／secのSpeedでraster modeで記

せてIDIを変動させ，得られたpairの活動電録したものである．この記録方法では現象は位をdatarecorder（TEAC R410）に記録し，上方に向ってI，II，III，lVの順に同一pair

再生して分析した．長いIPIを持つ1atecom−が記録されている．pairのIPIとIDIの関係

ponentのjitter現象が，一定のSWeepSpeedは下段右図に示すように1つのIPI（例えば（500JLSeC／cm）で観察できるようにdual

II）を横軸にとり，その直前に出現するpair

Sweep speedの方式を採用した．jitter倍の（Ⅰ）との時間的間隔（IDI：即ちⅠとⅠⅠの間隔）を縦軸にとってその交点をⅠⅠとしてプロットする．このような操作を同一pairにおい＊国立療姜所宇多野病院神経内科−134−Duchenne型，肢帯型の順でF．D．が高値を示す傾向がみられた．

一・→lime丁 ● ● ■ 一

同一個人より観察された10−20個のMI
SIの平均値をMISIとしてプロットするとⅣルーー1「（図2），正常対照とF．D．の増加する運動ニューロン疾患（ALS及びKWD）では有意差がないが，筋ジストロフィー症ではMISIが有意に長くなり，多発性神経炎では正常と筋ジストロフィー症の中間の値を示した．
IPIとIDIの関連では，対照のpairでは，lIDIの変動でわずかのIPIの短縮又は延長が

t

3

∃

m

巾

Pu
I父

馴

lPl

観察されることがあるが顕著ではない．全身型重症筋無力症患者でのpairでは，IDIと関こ

係なく非′削こ大きなIPIの変動がみられる．
図l Correlationofinterpotentialinterval

筋ジストロフィー症より得られたpairではIDIの変動でIPIが明らかに短縮又は延長（IPI）withinterdischargeinterval（IDI）

するpairが多くみられる．IDIの変動につれて100−200個の点をプロット

してIPIとて電極の位置がわずかに移動することがある

IDIの関係を検討した．

が，この場合には，ずれの前後でpairの互いの振幅が変化し，IPIが不連続的に短縮又．は結果延長するため，電極のずれによるIPIの変動

筋線椎密度（F．D．）は正常対照20例ではであることが解る．

1．42±0．23（mean±2SD）で，筋ジストロフ
ィー症では有意にF．D．の増加がみられ，昨年

筋ジストロフィー症より得られた約5m
SeC以上の時間的遅れを．持って出現する1ate度の報告と同じく，myOtOnic dystrophy，

COmpOnentのIDIとIPIの関係は図3で，（Cases） 【m SeC】 0、
5・吐 ．
5㌔N orm al （
10）

1・
．
0

1．
．
5

DuChenne
D ystrophy （13）
Lim b−
girdleD ystrophy （7）…

M yotonic
Dystrophy（
3）
M oto「N叫rOn
Disease （8）
Potyneuropat
（
8hy
）

・

鳥 了

上 72 ・

・

図2

・ 圭；
；
‥

2・

・

・・ 弓 ご6；転…

7Meaninterspikeinterval（MISI）ofvariousdisorders
−135−

・

Y．芯．

16

Hale

Y．N．

15

Ilale

pMp（Duchenne type）

PHD（DuCbeme type）
工pI

HCl）−

（℡lSe亡）く

90JlSe亡HCDI146ノ柑e亡が一180）（yl175）rDt（t日日己C）

200
−：・

．ゝ

100

：こ益軒

へ二十・・J−
0

11

12

6

13

7

8

工p工

IPI
（℡llかe⊂）（n占七gI
H．T．

22

fenale誌3︒︒2︒︒1n．T．

mD（Lh沌−glrdle type）
HCD暮

484JuSeC（Nt200）

14

yCI〉−

9

りpe）

▲18eC

詰〆

8

64

（N−100）

︒︒︒

7

Hale

PhD（Duchenne

10
IPI

7

IPI
（ロ．8亡仁）（ヰ8eC）

図3

Correlationofinterpotentialinterval（IPI）withinterdischargeinterval（IDI）
Latecomponentofprogressivemusculardystrophy（PMD）
K．T．18f■emalepHD（Llnb−glrdle type）
PHD（Duchenne
工D工

HCD…

type）

ID工

HCl）≡196−uSeC（n sec）

26811SeC（N＝175）（n sec）（N＝107）

ユ王

ヽ・

一︐

5

6

7

8

5

エア工

6

7

工で工

（n8ee）

図48

Correlationofinterpotentialinterval（IPI）withinterdischargeinterval（IDI）doubledischarge−136−（n5eE）

IDIの短縮によって顕著にIPIが短縮する．

のpairにjitter現象の異常がみられblock−

Iate componentと近似したdouble dischar−ing現象を示すものもみられる2）．特にlategeがDuchenne型で時に観察されるが，このCOmpOnenStのjitter値は大きい傾向を示場合には，IDIの短縮に伴って顕著にIPIがし，神経・筋接合部由来のjitter現象の他に，延長し（図4），IDIが100−80rnsec以下にな

筋線維伝導のVariabilityに由来する jitter

ると活動電位が消失してしまう．又，double

現象（myogenic jitter）の関与が示唆されdischargeは以下の特徴を持っていた．（1）先た2）．

に出現する活動電位の波形と近似しているがSta1bergは対立する電極を有する多極針

振幅は小さい．（2）電極の位置をわずかに動かを用いて不均一な間隔で筋線経を刺激して同すと，1atecomponentの多くは電極が2つの一筋線経のpropagation velocityを観察し，活動電位の中間に位置しているため，一方のpropagation velocityが変動する現象を見出活動電位の振幅が小さくなる（電極が筋線経

してVelocityrecoveryfunction（VRFと略）より遠ざかる）と，他方の振幅が大きくなりと名付けた1）．このVRFは正常筋でも認めら（電極が筋線経に近づく），いわゆるシーソー

れるが，筋ジストロフィー症においては顕著現象を示す．doubledischargeの場合は同一なVRFを示す筋線経が増加すると報告して筋線維由来のため電極をわずかに動かすとシいる3）．しかし彼の用いた多極針では筋線経のーソー現象は示さず，両者共振幅は大きくな

せいぜい200〜300〝の長さの状態を観察しているにすぎない．我々はend plateから電るか小さくなるかで，同一の動きを示す．

極に達するまでの筋線経におけるVRFを2

考察

つの筋線経のVRFの差として，IPIの変動を

筋線維密度は筋ジストロフィー症及び各種指標にして観察した．そしてlatecomponent

神経疾患で増加がみられ，これは直径25／JのではIDIの短縮でIPIが顕著に短縮し，1ate

電極がpick up Lうる半径約300JLの半球内

COmpOnentのVRFが主項著であることが明に同一神経支配下の筋緑経が増加する事を意らかとなった．VRFの顕著なpairのIDIと味している．末梢神経障害によるCOllateral

IPIとの関係を模式的に図5に示す．図中のSprOutingなどのreinnervationや，muSCle
Splitting，muSCleatrophyなどの筋の形態異常の程度が筋線維密度の増加に反映される．
筋線維密度が顕著に増加する運動ニューロン疾患ではMISIは正常と差がなく，各種筋
ジストロフィー症では有意にMISIの延長がみられた．これは筋ジストロフィー症の筋線経の大小不同の形態を反映していると考えられる．即ち小径の筋線経は大径に比べ筋線維
伝導速度が遅いため大径線経の活動電位より遅れて出現する1）3）．
Jitter現象は同一神経支配下の2つの筋線
経のIPIが時間の経過でゆれる現象であり，正常では主に神経・筋接合部のtransmission

図5

Correlationofinterpotentialinterval（IPI）withinterdischargeinterval（IDI）

timeのVariabilityに由来すると考えられている．筋ジストロフィー症においては約20％−137−bで示されるIPIの変動はIDIが一定の時のでjitter値は大きくなる．

Variabilityであり，土の時はVRFは関与せ（3）latecomponentと近似したdouble dis−

ず神経・筋接合部由来C7）jitter現象と考えら

ChargeはDuchenne型でよく観察され，電極れる．図中のaに相当するIPIのVariabilityの位置のずれに対する振幅め変動に特徴がみはbにVRF即ちmyogenic jitterが加わっられたことの他に，IDIに対するIPIの変動たためIPIの変動が大きくなったと考えられがlatecomponentとは反対で，IPIが充分短る．特にlate componentではIDIのわずか

くなると消失することが明らかとなった．

の変動でtotalのjitter現象は大きくなり，
文

このため1ate componentのjitter値が大きくなると考えられる．

献1）E．Stalberg：Propagation velocity

inDouble dischargeでは遅れて出現する活

human muscle fibersin situ．Acta

動電位は先に出現する活動電位と同一筋線維

Physiol．Scand．，70：Suppl．287：1

由来のため，IDIが短縮するとIPIは延長し−112，1966．

ついには遅れて出現する活動電位が筋線経の

2）西谷裕，小西哲郎他：筋ジストロフィー

refractoryphaseにはいるため消失すると考症の単一筋線維筋電図（SinglefiberEM

えられる．この時IDIが80〜100msec以下G）．筋ジストロフィー症の病因の究明にになると消失することはDenslow4）の指摘す関する研究（沖中虹）昭和52年度報告書る所と一致している．

pp276−2813）E．Stalberg：Electrogenesisinhuman
まとdystrophic muscle，in Pathogenesis ofめ（1）各種筋ジストロフィー症では平均MISI

human muscular dystrophies．pp570

は対月別こ比べ有意に高値を示し，筋線経の大L587，Excerpta．Medica．Amsterdam．

小不同の形態によると考えられる．

（1977）．

（2）筋ジストロフィー症のjitter現象には4）J．S．Denslow：Double dischargesin

VRF由来のmyogenic jitterが加わり，jit−humanmotorunits．J．Neurophysiol．

ter値が大きくなる．特にVRFが顕著な1ate

11：209−215，1948．

COmpOnentではわずかの筋発射間隔の変動

一138−28）ミオトニーの発生機序に関する電気生理学的研究−微小電極法による実験的ミオトニー−

＊

栗

原

照

幸

によるartifactなしに細胞内記録をするたは じ め にミオトニーは種々の疾患に伴って起る他1），

めにはミオトニーをつくる以前にあらかじめ

先天性にヤギにもみられ，又種々の化学薬

筋のtriadを選択的に破壊した6）．それには

品2）3）によっても起ることが知られている．微400mM glycerol溶液に横隔膜標本を60分

小電極を用いて筋細胞内記録を行うためには，対象となる筋肉は筋腹で切断せず，陸か浸し，二大にCaとMgを夫々5mMずつ加えた1）ンガー液に20分浸し，最後に5mg／Lの濃ら腱までの全長が必要で，ヒトからこのよう度でdantrolenesodiumを加えたタイローズ

な標本を得ることは困雉な場合が多い．本研

液に20分浸す．Triadの破壊は高張のglyce−

究ではラットの横隔膜標本を用いて，アント

rol溶液から等張のリンガー液に横隔膜標本

ラセンー9−カルポン酸でミオトニーをわ7 〝左を移す時osmoticshockで起こり，これのみか℃で作成し，ミオトニーにみられる種々のでも98％の等尺性張力を阻止できるが，更に興味ある現象を微小電極を用いて記録した．

残りの2％の張力を除くために5mg／Lの

特にmyotonic burst，Warming−up現象，

濃度でdantrolenesodiumをタイローズ液に

microoscillation，ミオトニーの筋細胞膜にお加えた溶液へ浸すと99．7％の等尺性張力をける微小な脱分極（myotonic micropotenti−

除くことができる4）．これによって筋収縮の機als）について検討を加えた．ガラス管微小電械的動きによる筋膜の傷害電流を起きなくす

極によって細胞内連続記会読を可能とするためることが可能となり，又本法は筋細胞膜よりには，著者らの開発した晴乳動物骨格筋に対末梢で筋収縮を阻止するため，筋細胞膜で起するE−C Uncouplingの方法4）5）6）により筋収る電気生理学的変化には影響を与えずにmy−

縮を阻止した．

OtOnicburst等の細胞内連続記録ができる．
筋細胞内記録はガラス管微小電極を自作
方法

し，抵抗5−15megohmのものを選んで実験

体重150−250gのウイスター系ラットのに用いた．膜電位はオシロスコープより読み

横隔膜標本をKrnjeviC等7）の方法でつくり，とり，筋活動電位，myOtOnicburst等は一旦

95％02と5％C02の混合ガスを用いて標本テープレコーダーに記録して後にキモグラフ

を酸素化した．ミオトニーを玩乙原和でつく

で写真をとり計測した．

るためには上記標本にアントラセンー9−カルポン酸を1×10￣4M／Lのi農度でタイローズ

結液中に盲昆合した音容液に浸した．

果

膜電位，微小終板電位に対する上記のE＿C

ミオトニーにみられる種々の現象を筋収縮

Uncouplingの影響は表1A及びBに示す様にE−C Uncouplingの前後で膜電位を比較し＊宮崎医科大学第三内科ても差がなく，又meppのquantum sizeにー139−ついても10ヶ所のendplateで各々100個ずつのmeppよりquantum sizeを計算したがに記録すると図1−Aの様に上下2つの筋細胞内記録でどちらとも筋収縮のartifactの統計的に有意差を認めなかった．つまりE−C

ため基線の動揺がありよい記録ができない．

Uncouplingを本法で行っても膜電位及び微これに対してE−C Uncouplingの後に（図1

小終板電位には悪影響なく筋収縮を阻止できることを確認した．

−B），burstを記録すると筋収縮によるarti−

Myotonic burstをE−C Uncouplingせず

tonic burstの最中にゆっくりした脱分極がfactなしにburstの最後まで記録でき，myO−．＿＿＿＿＿＿＿ ＿＿＿＿＿

100＿＿＿、、」．．＿＿＿＿＿＿＿＿＿葺き￠珊

m〜∝

図1AはE−CUncouplingをせずにmyotonicburstを記録すると，筋収縮のため基線の動揺（矢印）がみられた．
BはE−CUncouplingの後にmyotonicburstを記銀すると，筋収縮のartifactなしにburstの最後まで記録できた．

一140−

表1

A：E−C Uncouplingの前後で膜電位をあり，やがてabortivespikes，microoscilla−

比較したが有意差はなかった．
B：E−C Uncouplingの前後で微小終板

tionでburstが終っている．
次にWarming−up現象については，約1秒電位（mepp）を比較したが有意差はなかった．

に1回のSlowmyotonicdischargeが起っている時に10Hzの神経刺激を行う と，好莫電
位は図2の様にhyperpolarizationを起し，A．Resting Membrane Potential（mV）
M e a n ＋S ．D ．

slowmyotonic dischargeも一時消失し，次に

10 7−8 3 ．8 ＋ 5 ．2

ゆっく

5 0

−8 l ．3mVにもどると再びmyotonic dischargeがN o ． o f M u sc le
C o n tro I
A fte r E −C
U n c o u p ＝n g

F tb e r s＋ 6 ．2起っている．つまりWarming−upには反復神経刺激によるhyperpolarizationが関係して

B・＝eppquantumsize＝OendplatesI

C on troIいるように考えられる．次にオシロスコープのChannellを高増幅，Channe12を低増幅

A fte r E −C U n c o u p lin g

8 u n n t llm
1 ．

りと脱分極を起して膜電位が元の−72

土 I

0 ．
5 7 土 0 ．1 2S ▲¶▲n lln n t■
11m

m V

1 ．

0 ．7 5でmyOtOnicburstを記録すると，高増幅記録

土 I S ．
＿n ．

土 0 ．1 6m 〉

では膜電位の動揺がみられ（図3），burstの

2 ．

0 ．
q 7 土 0 ．1 0

ク．

∩ ．7 【； 土 ∩ ＿1 山

5 ．

0 ．q 8

土 0 ．1 0

5 ．

0 ．
9 5

土 0 ．
2 5

起っている最中にもmicrooscillationが認められた．そして5mV以上のOSCillationがある

叫．

0 ．5 7 土 0 ．1 0

句．

0 ．
q 9

土 0 ．1 0とaction potentialのburstが続き，3mV

5 ．

0 ．6 2

土 0 ．1 6

5 ．

0 ．
句5 上 〔 ．1 2

程度では閥値以下と考えられてaCtion poten−

6 ．

0 ．q 9土 0 ．1 1

6 ．

0 ．
5 8 土 0 ．
2 9tialを伴わない状態がみられた．

7 ．

0 ．5 5

土 0 ．1 7

7 ．

0 ．
5 9 土 0 ．18

8 ．

0 ．5 7◆ 0 ．1 ち只＿∩．
6 ち ◆ ∩．
ク∩

9 ．

0 ．
5 9

土 0 ．1 0

9 ．

0 ．
6 9 土 0 ．16

10 ．

0 ．7 5

土 0 ．1 6

10 ．

0 ．
q 8 土 0 ．1∩

0 ．5 2

土 0 ．日m ea n

mV

m ean

0 ．
6 5 ± 0 ．川

又図4の様に，ミオトニーの筋細胞膜には一見meppの様な微小な脱分極波を記録した．この図は3つのmyotonic musclefiberより記録したもので，終板以外の部位で記録され，又振幅も1．04〜2．11mVとmeppより

m V

大きく，頻度も0．78〜14．52回／秒認められ，

l加my血niCdi；Chdrqei

墾空地鯉

輌蠣即

効劫噂柳輌

頭卸卿鱒晦鱒咋確鱒iき蒋群舞

図2 緩徐なミオトニーの発火が起っている際に，10Hzの神経刺激を行うと，hyperpol−
arizationを起して，上記の発火は一時消失し，放置すると再び脱分極がゆっくり起って緩徐なミオトニーの発火が始った．Warming−up現象と膜電位の変化をみた．

一141−

■tcr00●tl＝■Il011日l

図3

オシロスコープのChannellを高増幅，Channe12を低増幅でmyotonicburstを記録すると，高増幅記録では膜電位の動揺がみられ（矢印），myOtOnicburstの起っている最中にもmicrooscillationが認められた．

考Myotonicmicropotential
lmmpI

察

本研究では化学薬品によって実験的にg乃∽力竹で作成したミオトニーについて電気生理学的検討を加えた．ヒトにみられるミオト
ニーと今回の実験モデルとの間にどのような共通点があるか，又どの点で異るかについては今後更に明らかにしなければならない．
ヒトのミオトニーにおいて筋細胞好臭のクロ

人目l t．
「．二一二∴▼二二一

ールイオンに対する透過性が減少していると■￣「』■＝亨「『■』亡『いうLipicky等8）の報告があるが，アントラ
センー9−カルボン酸によっても筋細胞膜のクロールイオンに対する透過性が減少することが明らかにされており，この点に関しては共通点がある．
本研究で明らかとなった点は（1）ミオトニー
はtriadを破壊しても起ること，（2）Myotonic＿」1mv

burstには膜電位の低下を伴うこと，（3）War−

0．l s
図4

ming−up現象をin uitroで作成し，この現象

3つのmyotonic musclefiberより記録には膜電位の変化が関係すること，（4）Micr0−

された微小な脱分極波で終板以外の部位

0SCillationとmyotonic burstとの関係をみで記録される点meppと異り，myOtOnic
micropotentialと称した．

たこと，（5）終板と無関係な微小な脱分極波を新たに記録し，これをmyotonicmicropoten−
tialと称したことである．

波の分布もKatzのquantum theoryに従わ以上の5項目に関して二大に考察する．

ない点等meppと明らかに異るためmyoto−（1）ミオトニーはtriadを破壊しても起ると

nic micropotentialと称した．

いうことは，筋の興奮収縮連関の一連の経過

一142−

で筋細胞膜より末梢において収縮を阻止してMicrooscillationはmyotonic burstの終もミオトニーの電気的変化は起るということりに近くなってから認められる以外myoto−である．ミオトニーは神経筋伝達遮断剤を用

nic burstの最中でも高増幅記金利こよれば認いても起ることは以前から知られているのでめられる．Microoscillationにひき続いて筋

この事実と本研究結果を合わせて考えると，活動電位が生じている場合のmicrooscillati−

ミオトニーは筋細胞膜の生理的異常で起るこ

onの振幅は5．03±0．28（S．D．）mVで，micr0−とが実験的に証明されたことになる．

0SCillationに筋活動電位がひき続いて起き（2）Myotonic burstには膜電位の低下を伴うということは，本実験でETC Uncouplingていない場合の振幅は3．46±0．42（S．D．）
mVと後者の方で低値である．Microoscilla−により筋収縮を阻止してから微小電極記録を

tionがある振幅以上で筋の興奮閥倍以上で行っているので傷害電流によるものではな

あれば，myOtOnicburstを生じる可能性があく，膜電位の低下が本当に起ると考えられ，ると考えられる．

膜電位が低下すれば筋活動電位の振幅も減（5）終板とは無関係な微小な脱分極波

じ，abortive spikeやmicrooscillationとな

微小電極を用いた細胞内記録を行うと，ミってmyotonic burstが終ることが説明できオトニーの標本だけに，終板部位とは無関係る．これはミオトニーに特徴的な放電としてに，meppとは異る新たな脱分極波を記録しdive bomber sound という表現があるが，た．この振幅は1．04−2．11mVで頻度は0．

その電気生理学的本態としては膜電位が漸減

78〜14．52回／秒であり，myOtOnicmicropo−

するため筋活動電位が徐々に小さくなって，

tential（mmp）と称した9）．その意義は微小電スピーカーで聞くならば降下爆撃音としてと極周囲に起る小さな脱分極で，対象筋ではみらえることが説明できる．臨床筋電図では多られないことからミオトニーの筋膜の異常に数の筋線経で夫々独立に，発火頻度と振幅のよるものと考えられるが，今後の検討を要す

漸減が起っている状態が複雑に重なり合ってる．ヒトのミオトニーに関してはmicroosci1−

いるので，単一筋細胞内記録によるmyoto−

1ationの報告はあるがl），mmpについては未だ記載がない．ヒトのミオトニーについて微nicburstより複雑な音の変化となる．
（3）Warming−up現象には膜電位の変化が小電極法による分析が必要で，実験的ミオト関係する．神経を反復刺激すると正常の筋肉でも膜電位は増加し，これをposttetanichy−

ニーと対比させながら今後検索を続けることが大切である．

perpolarizationと呼ぶ．ミオトニーの標本で結も神経反復刺激により膜電位が増加し，安定語

化して神経刺激前にみられたミオトニーのラットの横隔膜標本に，アントラセンー9−

SpOntaneOuS burstが一時止まり，又神経刺

カルボン酸を用いてミオトニーをわZ∽兢竹で激による筋活動電位も刺激前より大となり，作成し，微小電極法を用いてミオトニーの発

それもhyperpolarizationにより説明でき

生機序に関して電気生理学的に検討した．特る．つまりミオトニーにみられるWarming−にmyotonicburst，Warming−up現象，micr0−up現象は，一般に認められるposttetanic

0SCillation，及びミオトニーの筋細胞膜におhyperpolarizationという現象がミオトニー

ける微小な脱分極myotonic micropotential

についても起り，一過性に起るhyperpolari−（mmp）について述べた．

Zationがその本態であると考えられる．

御校閲をいただいた宮崎医科大学第三内（4）Microoscillationとmyotonic burstとの関係

科，荒木淑郎教授に深謝します．
−143−

文

献

excitation−COntraCtion uncoupling．

Arch．Neuro1．，32：168，1975．

1）McComas，A．J．＆Mrozek，K．：The
electrical properties of muscle

fibre6）Kurihara，TリAraki，S．etal．：Electron

membranesin dystrophia myotonica

microscopic studies of the t−SyStem：and myotonia congenita・J・NeuroL

The effects ofhyperosmolarglycerol

Neurosurg．Psychiatry，31：441，1968．

and dantrolene sodium onmammalian2）Winer，N．，Martt，J．M．etal・：Induced

muscles．

myotoniainmanandgoat・J・Lab・＆

Jpnリ

Clin．Med．，66：758，1965．
3）Bryant，S．H．＆

Folia Psychiatr．Neurol．

30：179，1976．

7）Kmjevic，K．＆Miledi，R．：Adrenaline
andfailureofneuromusculartransmis−

Morales−Aguilera，A．：Chloride conductancein normal

Sion．Nature，180：814，1957．

andmyotOnic musclefibres and the8）Lipicky，R．J．，Bryant，S．H．et al．：

action of monocarboxylic aromatic

Cable parameters，SOdium，pOtaSSium，

acids．J．Physio1．，219：367，1971．

Chloride，andwatercontent，andpotas−4）Kurihara，T．＆Brooks，J・E・：Excita−

sium effluxinisolated externalinter−tion−COntraCtion uncoupling：The ef−

costalmuscleofnormalvolunteersand

fectofhyperosmolarglyceroIsolution

patients with myotonia congenita．J．
Clin．Invest．，50：2091，1971．

anddantrolenesodiumonmammalian9）Kurihara，T．：Experimental Myoto−muscleinvitro．Arch．Neuro1．，32：

nia．Folia Psychiatr．Neurol．Jpn．，

92，1975．

5）Kurihara，T．＆

31：653，1977．

Brooks，J．E．：The

mechanismofneuromuscularfatigue：
A study of mammalian muscle usingー144一29）セロトニンと神経筋に関する生理学的研究

研究協力者

緒

井

高

守

正

手

芳

■彦

言

治
森

健一郎

トニンの介在も示唆されている．本研究ではわれわれは，コリン作働性シナプス伝達がア

異論の少なくない血管説（ischemic myopa−

ミンの影響も受け，複雑な機構の下にあるこ

thy theory）を離れ，セロトニンの神経筋伝とを明らかにし，また神経筋伝達，骨格筋収達，筋に対する直接作用を調べ，セロトニン・

縮弛緩とアミンとの関係の上で，Ca＋＋やCyC−

ミオバナー成立のメカニズムを検討した．

licnucleotidesが情報伝達物質として介在することを提唱して来たlト4）．筋ジストロフィー症の病因，病態に関連しても，骨格筋とアミ方法

わ官がタが0生理学的実験は，ネンブタール麻酔ンの関係が論じられており，われわれは2）ヒ（20mg／kg）下の家兎を用い，その下肢を血ト・ジストロフィー筋張力のエビネフリンに液循環を阻害しないよう膝および足関節で七）対する異常反応を，Mawatariら5）はエビネフ

よく固定した上，排骨神経一前脛骨筋で行っリンによるadenyl cyclase activationが異た．筋温度は30℃に一定とした．筋収縮に関常であることを報告，アミンがジストロフィする実験では，前腰骨筋および腱の一端を周ー筋小胞体，細胞膜異常に関与していること

囲から切り馳してfreeとしたものに，水平方が示唆される．セロトニンもこの点で論じら、向にステンレス鋼線を掛けてisometricstra−

れているアミンの一つである．病理組織学上ingaugemyographに連結し，耳介静脈よりDuchenne型ジストロフィー症類似の実験的

持続微量クラーレ注入下で筋直接刺激によっ

ミオパテーが，セロトニンと動脈結紫6）あるいて誘発される最大単収縮張力および最大強縮はセロトニンとイミプラミンの投与7）によっ張力（100Hz刺激で誘発）を記録した．単収てつくられ，その成立に血管説6）および筋に対縮張力曲線からは，最大単収縮力Pt，張力発する直接作用説8）の両論がある．またヒト・ジ

生からPtを経てその1／2の張力まで弛緩すストロフィー症との類似性について議論の余地が残されている9）．MAOinl1ibitor（Pargy−

る時間T．′2R，活動電位発生時から張力の一次微分ピーク値までの時間 丁椚／dt，張力の1ine）によるDuchenne型ジストロフィー症

二次微分ピーク値（貴大加速度）d2pt／dt2を測類似の実験的ミオバナーの報告10）もあり，そ定し，強縮張力（P。）曲線からは，その一次の成立については，ノルエビネフリン増加に

微分ピーク値dP。／dtを算出した．in vitYD実よる過剰アセチルコリン原因説11），血管性影

験には，正常リンケリレ液（95％02＋5％

響および筋直接作用の可能性があるが，セロCO2，33℃）濯流下で，ラット横隔膜神経筋標
本を準備し，細胞内電極法で自発性微小終板＊長崎大学医学部第一内科

電位（MEPP）振幅，放電頻度，および静止−145−

膜電位を記録した．骨格筋内血流は，Electr0−

adrenergic receptorを介したpostsynaptic

magnetic80WTmeterを用いて，家兎前腰骨のhyperpolarization作用による．そこでセ筋からのVenOuS Outflowをインク書きオシ
ログラフ上に記録して測定した．

ろ，前者はαTblocker（phentolamineo．1mg／

ロトニン効果の場合について検討したとこkg）で消失，後者はβ−blocker（propranololl mg）で消失，Lysergicaciddiethylamide

結果および考按〔神経筋伝達〕ネンブタール麻酔下家兎の（10mg／kg）は何らの影響ももたらさなかっ

一方の耳介静脈から0．03％d−Tubocurari−

た．従ってセロトニンの神経筋伝達に及ぼすneを微量持続注入器で投与，0．35Hzの低頻作用はSerOtOnin−induced epinephrine rele−度反復神経刺激で誘発する前脛骨筋活動電位

ase12）のメカニズムが働いているものと推察

振幅が50％低下するブロック状態を維持しされる．

た．次に他方の耳介静脈からセロトニン5

次にラット横隔膜神経筋標本を用いた糸田月包

mg／kgを注入した結果，直後ブロックの部分

内電極法で，MEPPに対するセロトニンの影的回復（originalamplitudeの67〜80％）を響を観察した（図2）．濯流液中40ノJg／mlセ

みたのち，ブロックが悪化（original ampli−

ロトニン添加によって，preSynaptic acetyl−

tudeの5〜14％）する二相性反応（anti−Curare

choline releaseを表現するMEPP放電頻度

およびCurare・pOtentiating）がみられた（図は増大し，pOStSynapticeffectの指標として

1）．同様の二相性反応は，エビネフリン（5のMEPP振幅は増大，静止膜電位は過分極〟g／kg）投与でもみられ（図1），別報1）3）で報告したわれわれの検討によれば，anti−Curareに傾く所見を得，前述玩1正和の場合と矛盾しないものであった．また，これはエビネフ

作用はα−adrenergic receptorを介したpresT

リン5〃g／ml添加で得られる所見（図2）とynapticのアセチルコリン遊維促進作用によも同じであった．しかし，この玩J雇用実験るものであり，Curare−pOtentiating作用はβ−の碍果には，SerOtOnergicreceptorの介在がCurareinfusion

epinephrine

4叫如【pin甲herine
叫gん11

t貯bre

︑

≡≡≡≡妻

Se代ItOnin

bfore

二

葦要妻≡︒r㍉董竿︑十吊MEPP

Ill仙100msee

MEPPamplitude（汀Ⅳ）f陀qUenCy（persecJ
Restingn℃rnbrane
POtential（n〝）

0．7

0．86

0．91

1，03

3

15

4

11．9

60

72

70

78

図

2

考慮されなければならないかもしれない13）

ニン5mg／kgを投与すると，活動電位不変〔筋細胞内要素〕骨格筋細胞内収縮弛緩要のまま，d2Pt／dt2減少に伴った単収縮力Pt低素に対するセロトニンの作用を，β−adrener−

下が最も顕著な変化で，強縮力P。および

gicstimulant（isoproterenol）effectと対比

dPo／dtの変化は軽ないし中等度低下にとどして検討した．家兎前脛骨筋をクラーレ微量

まった．このtwitch depressant actionは持続注入下で直接電気刺激し，活動電位にひLysergicaciddiethylamide（10mg／kg）できつづいて誘発される等尺性単収縮張力，強阻止され，α−，β−adrenergicblockersの影響

縮張力およびそれらの一次，二次微分曲線をは受けなかった．効果は注入後20−30分でピ記録，分析した（図3）．それぞれの指標の意

ークに達し，約1時間で投与前レベルに復し

義付けには active state の概念を導入した14）．時間要素としてのactivestatedurati＿

た．対比したisoproterenol（5JLg／kg）の効
果は，逆にtwitch potentiating actionでOnおよびdecayはそれぞれTdPt／dt，Tll2R
で表現，つよさ要素としてのactivestatein−tive stateの他の要素には変化をみなかっtensity of shorteningはd2Pt／dt2，aCtive

た．効果は5〜10分でピークに達し，20分後Stateintensity ofload−bearingはP。であらまでに消失した．図4は15例の検討の結果をわした．dPo／dtは，直列弾性要素に異常がな

まとめたものである．セロトニンのtwitch

あり，Tl′2Rの延長に伴うものであった．ac−

ければ，カー速度関係，CrOSS・bridge形成率を

depressant actionの主原因となったd2Pt／示すものとした．耳介静脈の一方からセロト

dt2の低下は，aCtivestateの概念に従えば，
ー147−

輌嵐

肘脈

鮎mtmin

洒虚
pt厚遇

AC血Il
I粕Ienぬ1

三一、．

止√Ⅰ人′＿A′＿●llI血tⅠ5に・・明日HlOm軋ヾ

12g叩肘−d瑚√」レ＿＿＿ん＿＿＿Ⅰ■′−一一一一・・一4−−−−−÷㍍￣㌫

嶺鹿層畢

Ⅰ川又m
ト・．」l旧m乳、

Ⅰ5Rm毎
：

こ

5α）mW

d軸t人−VJ−Ⅴ図3、興奮収縮連関発生に際しての筋小胞体Ca＋＋Emct or drugs on COntraC川e pr叩erlies
p ro p e H beS
dn ▲
gS

P l
0

d P 埴

T 値 R

■l lt l

●
lれ

Ⅰ
叫

fb

d Iも 伽●●Ca十十transport system異常を暗示し，近年

●

空
音
壱

●●
−10

●
●
●
●

量

＿2 0

●
●

●
●
應

●

●●

Thorpe＆Boegman15）による生化学面からの●セロトニン作用研究の結果とも矛盾しない．

●
●
●
●

また軽，中等度の強縮張力曲線に対するセロ

●
●●
●●

●
●

遊離を反映するものであり4），Subcellular

トニンの影響は，aCtOmyOSinのMg＋十一aCti−

Vated ATPasei舌性に対する抑制作用を生化●学的に証明した報告16）と矛盾しない．一方is−●−3 0

OprOterenOlのtwitch potentiating action●●の原因となったTl′2Rの延長は，aCtivator
●

′
芯
釣

苫

Ca＋十とtroponinによってmodulateされる●●

CrOSS−bridge turnoverに対するβ−adrener−◆2 0

gicstimulantの影響4）を示唆している．
屋●●〔骨格筋内血流〕Electromagneticflowme−●

terを用いて，セロトニン，α−，β−Stimulants

●
と
2
屋

十10

●
●
●

投与時の前脛骨筋からのVenOuS Outflowを測定した（図5）．セロトニンもisoproterenol

0

●
●
●●
●

●●
●
●●

●●
●
●●

●
●●
●●

も増大作用を示した．神経筋伝達についていえば，両アミンとも筋内血流に対してmon0−−148−

EffktsoIDrugSOnl如0仙SOutf］owfhM．Tibialisanterior（Rabbiり

細0nin
mLhれ
4
2
0

図

5

Neurol．29：420−424，1973．

phasic作用であるのに，神経筋伝達には二相性の影響をもたらした．筋細胞内要素につい2）Takamori，M．：Contractility and su・ていえば，一方はtwitch depressant他方はpersensitivity to adrenalinein dystro−

twitchpotentiating作用であるのに，筋内血phic muscle．J．Neurol．Neurosurg．

流に対する影響は両アミン同一である．これ

Psychiatry

38：483−492，1975．

らの事実から，セロトニンの神経筋に対する

3）Takamori，M．：Nerve，muSCle，and

作用は血管性因子を介したものではないこと

SerOtOnin．J．Neurol．Neurosurg．Psy−
Chiatryが推察される．

40：89−96，1977．

4）Takamori，M．，et al．：Active state結

properties ofdenervated andimmobi−語

セロトニンが1つのmyopathy成立の上lizedmuscle：Comparisonwithdystro・に役割を演ずるとすれば，そのメカニズムに

phic muscle．Neurology

は血管性因子の関与しない以下の3つがある

608，1978．

28：603−ことを示唆する：（1）presynaptic action to5）Mawatari，S．，etal．：Adenylcyclasein

release excessive acetylcholine，（2）postsy−

normaland pathologichumanmuscle．

naptic action to alter polarization of theArch．Neurol．30：96−102，1974．

musclefibermembrane，（3）inhibitoryeffect6）Mendell，J．R．，etal．：Duchennemuscu−

On the subcellular calcium transport sys−

lar dystrophy：Functionalischemia

tem and actin−myOSininteraction．

reproducesits characteristiclesions．
Science172：1143−1145，1971．

文7）Mendell，J．R．，etal．：Imipramine−SerO−

献

tonininduced myopathy．Neurology

1）Takamori，M．，etal．：Theroleofcyc−
1ic3′，5−adenosine

26：968−974，1976．

monophosphatein

8）Meltzer，H．Y．：Skeletalmusclenecro−

neuromuscular transmission，Arch．

−149−

Sis following membrane−aCtive drugS

ques of tissue culture．J．Physiol．

plus serotonin．J．Neurol．Sci．28：

188：107−120，1967．
13）Dretchen，K．，et al．：Ⅰnteractions of

41−56，1976．

9）Munsat，T．L．，et al．：Experimental
SerOtOnin

myopathy．Neurology

SerOtOninwithneuromuscularblocking

27

agents．Eur．J．PharmaCOl．18：121−127，1972．

二772−782，1977．

10）Yu，M．K．，et al．：Pargyline−induced14）Takamori，M．，etal．：Contractilepro−

myopathy with histochemical charac−

perties of human skeletal muscle：

teristicsofDuchennemusculardystro−

Normal and thyroid disease．Arch．

phy．Neurology

Neurol．25：535−546，1971．

24：237−244，1974．

11）Fenichel，G．M．，etal．：Anexperimen−

15）Thrope，W．R．，and Boegman，R．J．：

tal myopathy secondary to excessive

Calcium uptake by sarcoplasmic reti−

acetylcholinerelease．Neurology24：

CulumOffunctionallyischemicmuscle．
Exp．Neurol．42：238−240，1974．

41−45，1974．

12）Douglas，W．W．，et al．：Effect of aceT16）Mothersill，C．，et al．：Inhibition oftylcholineandothermedullarysecreta−actomyosin ATPase by high concent−gogues and antagonists on the mem−

rationsof5−hydroxytryptamine．EnzT

brane potential of adrenal chromafhn

yme

Cells：An analysis employing techni・

一150−

21：480−487，1976．

30）筋ジストロフィー症の細胞膜の物理化学的研究Ⅰ
赤血球の形態
＊

吉

瑞

田

子
＊

研究協力者

岩

崎

祐

安

藤

一

也

本研究は，疾患による赤血球膜の物理化学

溶液中で固定した．残りの1／2量の血液をそ的性質の変化を明らかにすることを目的との10倍量の1％glutaraldehydeを含む同じ

し，その一環として，本年は特に赤血球形態

溶液中で固定した．固定は30分から2時間半についての研究を行なった．

おこなった．国定液は使用する直前に窒素封Matheson等1）が1974年に筋ジストロフィ

入70％glutaraldehydeを用いて調整した．

ー症患者の赤血球の走査電子露微鏡像の異常

溶液種は表1に示される7種類を使用し，水を発表して以来，今日迄筋ジストロフィー症

はパイレックス容器による再蒸溜水を用い患者の赤血球形態について，種々研究され討た．

議が続けられてきた．しかし，研究者により溶液の浸透圧はセミ ミクロオズモメーター

赤血球の形態観察の条件や試料作製の方法が（Knauer社SNOI）で測定した．赤血球と溶異なるため，今まで発表された研究の結果を液は遠沈法（700rpm，10分間）で分匪した．

比較検討することは因雉である．試料作製法

固定された赤血球は，再蒸溜水で洗i條後，の相違とは，（∋採血法の異なり，②使用溶液

2，2−dimethoxypropan，次いで100％aceTの相違，および③採血後形態観察までの処理

toneで脱水した．acetoneをisoamylaceta−

方法の相違である．③には採血後に全血液をteに置換後，isoamyl acetate中の赤血球を国定し赤血球を得る場合と，赤血球を洗盲條後

plasticcoverslipの上にのせ，更にisoamyl

国定する場合の2通りがある．

acetateを液体炭酸ガスで置換して，臨界点

我々はまず正常者の血液で上記②および（卦

乾燥を行なった（日立−HCP−2）．Ion−COa−による赤血球形態変化を明らかにし，その結

ter（EikoIB・3）でPt−PdをCOatingした

果を基にして，疾病者と正常者の差異を比較

あと日立一S−430型走査電子顕微鏡を用い検討した．

て，0度から70度問の貴通角度に試料台を傾斜して観察，写真撮影を行なった．電顕的観実験方法

察に用いた試料の一部を固定する前に光学顕

血液は正常成人1名，Duchenne型筋ジス

微鏡でも観察，走査電顕像との対比を行なっトロフィー症患者5名，およびほぼ同一年齢

た．

の正常対照者4名よりヘパリン採血した．

赤血球異常形態は，Bessis等2）の分類方法

採血直後，1／2量の血液は，その10倍量のに従いeChinocyteI以上，StOmatOCyteI以

使用する音容液中に浮遊し，3回洗i條過程を経上の変形を異常とした．ただし表1では，正て，同じ溶液で作られた1％glutaraldehyde

常形（discocyte）以外を異常形態とみなし，＊国立武蔵療養所神経センター

数％， ＋＋＋〝 は お お よ そ50％，

異常赤血球の出現率を求めた． ＋〟は0から

−151−

表1
Occurrence ofdefomed RBC
pH
PlasmaAIseverssolution

7．3

290

6．0

331

7

4

7

4

5

5

5

5

7

4

7

0

Phosphatebufferedsaline

Osmoticpressure Fixationwithout Fixationafter
mOsm／1washing washing281

COntainingMg＋＋andCa＋＋

1／15M Phosphatebuffer
O．9％NaCI
Ringerssolution

l／15MPhog）hatebuffer
COntaining5．4％dextrosel／7M Veronalbuffer＋：zerotoseveralpercents，

＋＋＋＋＋

150

＋＋

十十十

284
288

十
＋

＋＋＋＋
＋＋＋＋＋

442

十十十

＋＋＋＋＋

348

＋＋＋＋＋

＋

＋十十

：almostlOO％ofRBC：approximately50％and

saredeformed．

球の形態異常を起こす場合があることに注意＋＋＋＋十〝 は100％近い異常変形の出現すべきである．また同じ溶液で採血直後に固率を示す．

定した場合と洗i催した場合に赤血球異常変形

結の出現がまったく異なる場合がある．AIse−果

表1に示すように血液保存に使われるAl−

ver溶液とPBS（＋）中の赤血球異常変形のSeVer溶液とCa2＋，Mg2＋が含まれる））ン酸緩
衝食塩水（PBS（＋））中の赤血球は採血直後

出現は，いずれの場合も非常に少なかった．

に固定した場合も，洗〜條後固定した場合にもPBS（＋）中の赤血球にechinocyte型が増加

しかし採血後4℃で，24時間を経過すると共に異常形態の出現率が非常に少なかった．

して来た．以上の結果，調べた7種類の溶液

一万，1／15Mリン酸緩衝液，0．9％NaCl，

中，AIsever溶液がもっとも赤血球形態の異Ringer溶液を用いた場合には，採血直後に固常を起こしにくいことが解った．

定した場合も，洗i條後固定した場合にもSt0−

そこでAIsever溶液を固定液及び洗i條液

matocyte型の異常形態が出現した．洗准後に使用して，5名のDuchenne型筋ジストロ

国定した場合に多く出現したが，特にRinger

フィー症患者と4名の正常対照者の赤血球形

溶液で洗i條した場合は100％近くの赤血球が態を，採血直後に1％glutaraldehyde音容液でLStOmatOCyte型となった．1／15M））ン酸緩衝

固定した場合と，溶液中に浮遊し，6時間，

液＋5．4％ブドウ糖溶液の場合，採血直後国4℃で放置後3回洗i條過程を経て固定した場

定した赤血球に偏平型を示すものが多かっ合について比較検討した．AIseveri容液の組た．さらに洗i條過程を経ると，100％近い赤血
表2 CompositionofAlsev＆，ssolution

球が偏平型に突起を生じた型を示した．1／7
MVeronal緩衝液で採血直後固定した場合，

Sodium Citrate

総ての赤血球がechinocyteI，IIを示した．

Sodium Chloride

しかし洗i條した赤血球は正常のdiscocyteを

Dextrose

示した．以上見るように，生体細胞の実験に

Citric Acid

しばしば使われる溶液で処理した丈で，赤血
ー152−

表3

Percentageofabnormalerythrocytesin▼DuchennepatientsandcontroIs

age 器票霊 浩志琵慧霊㌘ 霊芝inAIsever S
Stomatocyte echinocyte stomatocyte echinocyte
％
％
％
％
3

2

3

6

4

1

1

4

2

7

1

1

3
1

7

3

5

2

2

6

8

2

6

1

1

1

5

1

9

2

6

1

0

2

3

0

7

0

4

6

8

1

3

3

9

0

1

1

1

0

6

l

3

1

1

5

9

3

0

5

8

8

5

1

1

7

0

4
2
9
1
1

3

2

7
1

2

2

6

3

4

9
8
1

0
1

Duchenne

81

ControIs

成は表2の如く，クエン酸ナトリウム，クエ

有に使用されるAIsever溶液を用いた時に，ン酸，塩化ナトリウム，ブドウ糖で，溶液の赤血球を採血直後に固定した場合，洗〜條過程

pHは6．0，浸透圧は約330mOsmである．

を経た場合，さらにそのi容液中で24時間放置

その結果を，赤血球の異常形態echinocyte

後のいずれの場合にも，赤血球異常形態の出I以上とStOmatOCyteI以上を統計処理し，現が少ないことが解った．この溶液を用いて，表3に示す．患者と対照者の赤血球は処理過
程のいかんにかかわらず数パーセントの異常患者と対照者の赤血球形態を比較検討した結果，両者間にはまったく差は認められなかっ形態を示した．しかし患者と対照者の赤血球た．その赤血球形態の1例を写真（図）で示

異常形態出現率に差は認められなかった．

す．重症度8のDuchenne型ジストロフィー

またヘパリン採血の血液中の赤血球を光学顕微鏡で観察したが，患者と対照者の赤血球症の患者と対照者の赤血球で，採血直後に固定したものである．
Miller等3）は赤血球形態のpH依存性を調形態の差はまったく認め．られなかった．

べて，患者の赤血球は正常対照者のそれに比考察
1974年以来現在まで患者の赤血球形態異べてpHの変化を受けやすく，異常形態の出常の議論か続いたのは，それぞれの研究者には，StOmatOCyte型が増加することを，Duch−

よって試料の処理方法が異なっていたことがenne型，MyotoniC型ジストロフィー症の患

重要な原因のひとつであると考えられる．す

現が増加すると述べている．特に低いpHでなわち赤血球の処理条件が，赤血球の種々の者の赤血球（pH6の溶液）について示した．
しかし本研究において，pH6．0のAIsever溶

形態異常を起こし，それが疾患による形態異液中で，患者の赤血球も正常なdiscocyte型

常に重複して現われている可能性がある．

を示し，StOmatOCyte型は数パーセントにす

本研究では，まず赤血球形態に，処理条件

ぎなかった．残念ながらMiller等はpH6のと疾患による影響ができる限り重複しない赤溶液の組成を示していないので，我々の結果

血球処理条件を選び出した．その結果，生体と比較検討はできないが，Miller等の結果に細胞にしばしば使用される溶液の中にも，正常赤血球の昆琵著な形態異常を起こすものがあは音容液による影響が重複していると考えられる．

ることが判明した．調べた溶液の中，血書夜保また1％glutaraldehydeが加わると，Al−−153−

Patient
X2，000Normalcontrol
X2，000図

Erythrocytesofapatientwith Duchennemusculardystrophyandofnormal
COntrOl．Fixedimmediatelyafterbleedingwith1％glutaraldehydein
AIseverssolution（pH6．0，430mOsm）．Notethedominanceoftypical

discocytesinbothpreparations．

最後に患者の血液を提供下さった，国立療

sever溶液の浸透圧は430〜450mOsmとなり，生理的浸透圧−約300mOsmより高圧

養所東埼玉病院となるが赤血球の形態異′削は認められなかっの血液を提供下さった，東京女子医科大学

石原博幸先生，正常対照者

た．

金子行子先生に感謝いたします．

また光学顕微鏡下で患者の血液中の赤血球の形態に異常が認められなかったが，この結文

果は生体中でも赤血球は正常な形態を保って

献1）Matheson，D．W．＆ Howland，J．L．：

いると予想される．

Erythrocyte Deformationin Human

1974年以来の多くの研究者によって，患者

Muscular Dystrophy．Science184：の赤血球は非生理条件の影響を受けやすい可165（1974）

能性があることを指摘されているので，今後

2）Bessis，M．，Weed，R．I．＆Leblond，P．

赤血球の脆弱性とその原因を調べる予定であF．：Red Cell Shape：Springer−Verlag，る．

New York，Heidelberg（1973）
3）Miller，S．E．，Roses，A．D．＆Appel，S．

結論

H．：Scanning Electron Microscopy

走査電子顕微鏡像による，Duchenne型筋

StudiesinMuscularDystrophy．Arch．
Neurol．33：172（1976）

ジストロフィー症患者と正常対照者の赤血球形態に差は認められなかった．
一154−31）Duchennedystrophyの赤血球膜におけるK＋動態

飯

研究協力者

足

立

暗

田

光

男

小長谷

ぎ

正

明

室

賀

辰

夫

＊＊

祖父江 逸 郎

は

じ

め

向

山

呂

邦

浮遊させ，同様にしてKイオン透過量を測定にDuchenne dystrophyの赤血球についてのした．Kイオン量はオリオン社製Kイオン電病態の検索は数多くみられるが，その大部分

極mode193−19にpHメーターを接続し，そはghostを使っての結果である．そこで我々の電位変化をⅩ−Yレコーダーに記録した．

は細胞レベルにおける病態生理の解析をH的

赤血球の分離は0−4℃下において行い，KにKイオン動態を検索した．

イオン測定は37℃の容器内に赤血球を浮遊させ，撹拝しながらi則定した．また各測定対象および方法

毎に酢酸鉛音容液を添加する事により溶血の有対象はDuchenne患者8例，同年代正常男

無を確認した．

子8例である．検索はヘパリン採血し遠心分離して得た赤血球を二つの異なる条件下にて結果行った．（Ⅰ）赤血球を0．15M塩化コリンー

Ai容液内におけるKイオン透過量は図1の10mM Tris−HCl buffer pH・7．4（A溶液）で如くであった．両群共に測定開始後1分以内

洗浄し，次にA溶液内での赤血球からのKイ
オン透過量を経時的に測定した．（ⅠⅠ）生食水

はKイオン透過量はカーブを描いて増量し，以後はゆるやかな勾配の直線を示した．測定を洗浄液として得た赤血球を360mMsucro・

開始1分での透過量（ng±SE／104ケ赤血球）

Se＋15mMNaCl十0．1mMKCl（B溶液）には正常者群で48．76±3．37，患者群では70．

︵U日出も︐01＼餌u︶ ＋滅

1分

2分

図1 A溶液内におけるKイオン透過量＊名古屋大学医学部第一内科＊＊国立武蔵療茸所神経センター

−155−

3分

0

︵U的銘も︐Ot＼餌u︶＋出

1分
図2

2分

3分

B溶液内におけるKイオン透過量

93±8．14で両群間には明らかな差がみられ

く比較ではない点によるとも推定されうる．

た．しかし1分以後は両群間の差はしだいに従って赤血球のイオン動態の変化はその検索減少し，3分の時点ではそれぞれ77．82±6．
20と77．34±7．50で差はなくなり，以後は両方法の内容との関連から検討する必要がある
ように思われる．

群ともほぼ等しい勾配の直線でわずかずつ増量した（PbACは酢酸鉛）．

ま

と

め

B溶液内での結果は図2の如くであった．

（1）Duchennedystrophy患者の赤血球から

両群共に透過量は直線勾配を示した．測定開のKイオンeffIuxをincubation medi−

始1分以内では両群間の透過量差は判別出来

umにNa，Kイオンを含む条件下と含まなかったが，以後しだいに差が認められるよない条件下とで検索した．

うになり，3分後の透過量は正常者群で20．

（2）赤血球からのKイオン透過量について両41±1．95，患者群で56．04±5．5で両群間に明条件下ともに患者群と正常者群との間に差異がみられた．

瞭な差が生じた．3

分以後も差は持続して認められたが，両群ともに0．1mMウアパイン
文添加による透過量変化はみられなかった．

献1）Probstfield，J．L．，Wang，Y・，Arthur，H・考察L∴CationtransportinDuchennemus−

我々の結果によると，Duchennedystrophy

culdr dystrophy erythrocytes・Proc・患者群の赤血球膜からのKイオン透過量は正Soc．Exp．Biol．Med．，VOl．141，479−

常者群とは明らかに差がみられた．しかもin−

481．1972．

CubationmediumにNa，Kイオンが存在す

2）Howland，J．L．：Abnormalpotassium

る場合もしない場合も共にみられた事は，こconductance associated withの変化は受動輸送のみならずNa−Kポンプ

musculardystrophy．Nature，VOl・251，の関与する機構にも存在する可能性が推測さ

genetic

October25，724−725，1974．

れうる．

3）Shaafi，R．I．，Rodan，S・B・，Hintz，R・Lリ

Duchenne dystrophy患者の赤血球の細胞

Jernandez，S．M．，Rodan，G．A．：Abnorma−

レベルにおけるイオン動態については若干の

litiesinmembranemicroviscosity and報告1ト3）がある．それらには異常を肯定する報

iontransportingeneticmusculardys−

告と否定する報告とがみられる．しかしそれ

trophy．Nature，VOl．254，AprillO，525

らの結果の不一致は全て同じ操作方法に基づ−526，1975．

一156−32）デュシェンヌ型進行性筋ジストロフィー症における赤血球膜カルシウム・7ラックス

庄

要

司

進

説明可能である1）￣4）．そこでDMD赤血球はカ

約テすユシェンヌ型進行性筋ジストロフィー症

ルシウムイオン濃度が上昇する機序が働いての患児赤血球について形態上・生化学上の異いるかどうかをPPSSiveinfluxとCa−pump常が報告されているが，これらの多くが血球

ATPase内カルシウム濃度上昇を示唆している．これ

個々に測定することにより検討した．

の働きで行なわれるeffluxとをを直接確かめるため，赤血球へのCa2十のpas−
siveinfluxとATPを消費するeffluxを

材料及び方法

個々に測定した．Ca・pumpATPaseをblock

患者はDMDで8歳から19歳，対照は同性

LないでCa2十の取り込みをみると，CytOSOl，

同年齢の筋や血液疾患のない患者を用いた．

membraneの各TCA soluble fractionでは患者と対照とからの採血はペアーで行ない同

2．5mMのmediumに比べ0．数％と低く，．対

一日，同一時刻，同一処理で実験した．
静脈採血後直ちに1／10vol・のヘパリンを照との間に有意差はなかった．LaC13250／JM
でCa−pump ATPase

をblockするとCa2十加え混和，0℃に保有実験室へ運搬した．

の取り込みは数十倍に増え，特にmembrane

赤血球の洗浄は氷冷した0．16M NaClの

TCA soluble fractionの方がCytOSOI TCA
SOlublefractionの2倍位になった．これでも5vol．以上を用い3回行なった．
influxexperiment：洗浄後の赤血球を2

デュシェンヌの患児の赤血球と対照とでは有vol．の0．16M NaCl，45Ca2＋，2．5mM Ca2十，意差はなかった．Caeff1uxの速度は細胞内±250JLMLaC13のmediumに浮遊させ，振盟

Ca2＋濃度と相関し，1mM前後でプラトーに

下に37℃で90分間incubate後aliquotを取達した．これもデュシェンヌと対照とで有意り，さらに4℃で100時間incubateしてali−差はみられなかった．

quotを取った．aliquotは直ちに4℃で10，000×g，1分の遠心にて血球とmediumを目

的分推し，血球は0．16MNaClで3回洗浄後，デュシェンヌ型進行性筋ジストロフィー症

l mlの0．1％saponinを加え溶血させ，17，（DMD）の患者の赤血球について，Na＋，K＋000×g，30分の遠心にてghostsとCytOSOlの異常，K＋

を分離した．medium，ghosts，CytOSOlのそのinflux・effluxの冗進，形態異常（echino−

れぞれのTCA−SOluble fractionを下記のCyteやspherocyteの増加），変形能の低下等

SCintillationfluidに加え液体シンチレーショが報告されている．一方赤血球内のカルシウ

ンカウンターで測定した．

のtransportを行なう

ATPase

ムイオン濃度上昇によって上記の異常は全て

scintmationfluid： toluenelOOOml，triton

X−100500m1，POP4g，POPOPO．1gの処方で作製した．

＊信州大学医学部第三内科

ー157−effluxexperiment：

Ca−pump ATPase

洗浄後の赤血球を，をblockした場合を示

2／3vol．の0．16M choline chloride，0．15

し，図1の場合より数十倍influxが増加して

mM TrisTHCl（pH7．Oat37℃），2JLM A

おり，特にmembraneのTCA−SOluble fra−

23187（giftLilly），1．5〜7．5mM

CtionにCytOSOlより多くinfluxが認められ

Ca2＋，45Ca2十に浮遊させ37℃，2分間incuba−

た．これでは明らかにDMDと対照との間にte後直ちに0．16Mcholinechloride，0．5％

差が認められなかった．

humanserumalbuminで1回，0．16MKCl，

effluxexperiment：from

図3に一例を示す．

0．5％human serumalbuminで2回洗浄．

incubationによりloadされたCa2＋はintra−

Ca2＋をloadした赤血球を120mM KCl，15

Cellularからmediumにeffluxされて来る．

mM

NaC1，2mMCa2＋，15mMTris−HCl（pH7．4at37℃）に浮遊させ，37℃振j畳下にincubate．前，2分，7分，12分にaliquotを取り直ちに10，000×g，1分間の遠心でme−diumと血球を分経，以下influxexperimentと同様にmedium，ghosts，CytOSOlの各TC
A−SOluble fractionを得てCOuntした．
結果

influxexperiment： 6pairsの結果を図1と図2に示す．図1はLaCl。を加えない

90mir1

100hr

370
Calcium＋

40

ェnflux：VaShed RBC wasincubatedmediumでincubateした場合のCytOSOlとin O．16比NaCl′2．5mH・RCl′2．5仙Ca2＋■45ca2＋′

membraneの各TCA−SOluble fractionand250川LaC13のCa2十濃度のmediumのTCA−SOluble fracti−

図2

Ca・pump ATPaseのblockerを用いた場合のCalciuminflux

onのCa2＋濃度との比を％で表わしてある．
0．数％のOrderでDMDと対照の間に有意差は無かった．図2はLaC13を250ノ′M加えて
l

0．4
0．3
0．2

0．1

2

；与でin
Calcium

712
mln at370

Calcium Efflux：Ca−10aded RBC va5・王20hrincubatedin120mH XCl．15mM NaCl，2mH

工nflux：VaShed RBC vas lIICubatedin0．16HNaCl′2．5mHRCl′2．5mHCa2＋land45ca2＋

ca2＋′15mMTris−HCHpH7．4at3701

図3

図l Calciuminflux−158−

Calciume仔luxの一例

この間membrane TCA−SOluble fractionのluxがDMDで上昇している可能性を示唆し

Ca2十は不変であった．mediumのCa2＋増加速

たが今回の結果はそれと対立するものと言え度とintracellularのCa2十の減少速度から算る．

出したCa−efflux測定は良く一致した．この
efflux測定値とintrace11ularのCa2十濃度は相関を示した．図4にこの関係を示した．これはintracellular calcium濃度で約1mM

今回のefflux speedの値は従来の報告7）と良く一致していた．
なお今後proteinboundcalciumの動きを検討する必要があろう．

でefflux speedがプラトーに達することを文示している．これでもDMDと対照との間に差は認められなかった．

献1）Dunn，M．J．：Red blood cell calcium
andmagnecium：Effectsupon sodium

。r
O。こ
0二言
●

●0
○

and potassium transport and cellular■ち

0●morphology，Biochim．Biophys．Acta
352：97−116，1974．

2）Blum，R．M．and Hoffman，J．F．：Ca・
induced K transportin human red
O D叩●CohtrOl

Cells：Localization ofthe Ca・SenSitive
Site to theinside of the membrane，Biochem．Biophys．Res．Commun．
46：1146−1152，1972．

図43）Weed，R．I．andChailley，B．：Calcium−

Calciumeffluxspeedとintracellular
Calciumconcentration

pHinteractionsin the production of
Shape changein erythrocytes，Nouv．

考察

Rev．Fr．Hematol．12：775−788，1972．

行なった条件下ではDMDと対照の間に差4）Weed，R．I．etal．：Metabolicdepende−は認められなかった．従来DMDのCalcium

nce of red cell deformability，J．Clin．

fluxに関する報告は，1977年のDiseらがCa

Invest．48：795−809，1969．

uptakeを0．15JLM A23187が無い条件下と

5）Dise，C．A．etal．：Enhancedsensitivity

有る条件下で測定し，対照とDMDで差がな

tocalciuminDuchennemusculardys−

いと報告した5）ものと，やはり1977年Hods−

trophy，Biochem．Biophys．Res．Com−

OnとPleasureがCa・pump ATPaseの活性

mun．79：1286−1292，1977．

をghostで測定しDMDで対照に比べ21％

6）Hodson A・and Pleasure，D．：Eryth−上昇していたこととこの酵素がMgATPに

rocyte cation−aCtivated adenosine tri−

対照より大きなaffinityを有していたという

phosphatasesin Duchenne muscular

報告6）がある．前者のinfluxの値は1．59J

dystrophy，J．Neurol．Sci．32：361−

moles／1cells／10minat37℃でmediumが1

369，1977．

mMなので，今回のLaC1，を加えないCalci−

7）Sarkadi，B・et al．：Transport paraTuminfluxのCytOSOlの値に対応している．

meters and stoichiometry of active

しかしCa・pumpATPaseをblockしていな

Calciumionextrusioninintact human

いので真のinfluxと言うよりは〔influx−eff−

red cells，Biochim．Biophys．Actalux〕をみていると言える．後者の報告はe仔一

464：93−107，1977．

一159−33）赤血球膜Ca−ATPase活性と筋ジストロフィー症

植

研究協力者

畑

目

的

中

良

田

夫

1967年，BrownらはDuchenne型筋ジスト

啓嗣

佐々木 重 雄野 島 元 雄を横断して存在していて，普通の処理法では，活性中心がマスクされているのではないか．

ロフィー症の赤血球隈のNa・K−ATPaseの②Na，Kの月貫のtransferにCOuplingして活性に異常があることを指摘した1）が，その働くとされるATPaseはOuabainによって後，Pearsonらはこの異常が血清因子によっ阻害される性質を有するとされているが，Ou−ていることを示唆した2）．

abainの薬理効果が明瞭に現われる心筋や脳

その後，我が国でも荒木ら3），馬渡ら4）の報
告がみられるが，各報告者によって成績が異害される部分は極めて少なく，Na−KATP−なり，赤血球膜に果たして異常があるのか，

aseの活性の大部分が，nOn−SpeCificなATP−

ないのか，異常があるとすれば，それがpri一

aseによっている．

maryなものか，SeCOndaryなものか，現在まためと理解される．

とは違って，赤血球ではOuabainによって阻だ結論は得られていない．

そこで私共は，この2点に留意し，新たに1972年，NicoIsonらは赤血球膜は二層の膜ATPase活性を測定する方法を考案しphospholipidよりなり，その中に横断する蛋て6），Duchenne型の膜ATPaseに果たして

白，外層にのみ存在する蛋白，内層にのみ存異常が認められるか否かについて検討を加え在する蛋白などが存在しているとのmode15）てみることとした．

を提示した（図1）が，私共はこれからみて，赤血球膜で一致した成績が得られ稚い理由と

方

しては，

法

血液1mlをヘパリンtubeに注入し，血清（∋赤血球膜のNa−K−ATPaseの活性値は並びに白血球層を除いた赤血球屑を，生理食もともと極めて低いために，本ATPaseは膜塩水で3回洗擬し，次で20mM histidine−
Imidazole−Tris−buffer（pH7．2）を加えると，・
溶血を来たすが，この試料では活性が極めて低いために，freezing・thawingの操作を3回繰り返して活性値測定の試料とした．次で0．
2mMEDTAを含む上記histidine一Imidazole−
Tris−bufferで洗i條をくり返して，Hbの色の消えた試料を膜試料として使用した．

lNS旧E
図1NicoIsonのモデル5）

ATPaseのassaySyStemには，ATP−Tris．3mM，MgC123mM，NaC180mM，KCl15
mM，CaC120．1mM，それに20mM histi−dine−Imidazole−Tris−bufferとSampleを加＊愛媛大学保健管理センター＊＊愛媛大学医学部整形外科−160−

えてtotall ml（pH7．2）とし，37℃，1時であるが，膜の内側に局在するとされるal−

間incubateして遊離する））ン酸をFiske−dolaseをLehninger法8）で，膜の外側に局在

Subbarrowの方法7）によって測定して，活性するとされる acetylcholine esteraseをEll・値を求めた．

man法9）で測定して検討してみると，両者はいずれも100に近い値を示した．しかしATJ｝−

結果・考察

aseは879−1183と著明に上昇したので，溶血させたのみの試料とそれにfreezing−

ATPaseのみが，freezing−thawingによってthawingを3回くり返した試料についてブ舌性活性値に上昇がもたらされるものと考えられる．

値を比べてみた（表1）．assaysystemには
Na，K，Mg，Caと全てのイオンを加えてい以上はいずれもhemolysateによる成績でるので，この値はtotal ATPaseと表示してあったが，これが膜の如何なるATPaseをi則いるが，freezing−thawingによって，活性値走していることになるのか，またMg−ATP−は8．9倍にまで増加した．目的の項で予測し

ase，Na−K−Mg−ATPase，あるいはCa−Mg・

たように単に溶血のみさせた試料ではATP−

ATPaseとの関係はどうなっているかを検

aseの活性値は極めて低く，その活性中心は討してみた．値はいずれもLowry法10）によっ

maskされているものと理解される．

て測定した蛋白量で割った比活性として表示している（表3）が，tOtalATPaseでみると，

表l Effectsoffreezing−thawingorftotal
ATPaseactivities

膜試料はhemolysate試料に比べ約13倍に精製されている．

（hemolyzedredbloodcells）
no freezlng

1

表3

2

hemolysateandmembranes

3

freezlng

ATPaseactivitiesofthefrozen

1

9．1

2

8．9

3

8．1

activities（8．9）

hemolysate membraneATPpmolesATPhydrolyzed／hr／ml
次にfreezing−thawingによって活性値が増量する酵素は他に無いものかを検討してみた（表2）．
frozenさせた活性値をnon−frozenの活性値で割った値に100を掛ける，つまりこの値
では，freezing−thawingさせて活性値に影響を与えなければ100に近い値がでてくるはず

ATP，Mg
ATP，Mg，Na
ATP，Mg，K
ATP，Na，K
ATP，Mg，Na，K
ATP，Mg，Ca
ATP，Mg，Na，
K，Ca

8

35

33

289

36

328

35

325

11

35

36

373

43

416

46

607

nmolesATPhydrolyzed／hr／mgprotein
hemolysateにATPのみを加えたもので

こ表2

Effectsoffreezing−thawingoncell

は8，それにMgを加えると33，Na，K．Mg

membraneenzymeSを加えると36，Ca，Mgを加えると43，metal
activities

を全部加えると46と活性値は増加している

frozen／non−frozenXlOO

aldolase

99−103acetylcholineesterase

96−109

totalATPaseが，これらのイオンに対する類似のresponse
は膜試料についても認められるのでhemoly・Sateについての成績はそのまま膜の成績を879−1183

示唆しているものと考えた．
−161−

ところでDuchenne型のATPaseである

同程度の値をとっているので，primaryか，（表4）が，平均値をみると，Duchenne型がSeCOndaryかは尚不明であるが，Duchenne

369，父親が462，母親が378の値を示した．

型のhemolysateのATPase，ひいては，その父親の値に比し，患児は低値をとっている．

股ATPase活性に異常が存在するものと考

表4

える．

TotalATPaseactivities（Duchenne
type）

No．

文

patients fathers mothers

5
6
7
8
9

369
（345）

282

Patel，A．B．：Erythrocyteabnormalityin（282）

human myopathy．Science，157：1577，
1967．

440

2）Peter，J．B．，Worsfold，M．andPearson，C．

431
318

M．：Erythrocyteghostadenosinetriphos−523

phatase（ATPase）inDuchennedystrophy．
J．Lab．Clin．Med．，74：103，1969．

424
379

3）Araki，S．andMawatari，S∴

329

462
（465）

献

1）Brown，H．D．，Chattopadhyay，S．K．and

492
34
49
57／4 27／／444／

4346435476380／333345304379328

3

average△OD66。／60min

erythrocyte一ghost

Ouabain andadenosinetriphospha−tase．Arch．Neuro1．，24：187，1971．

3784）Mawatari，S．，Schonberg，M．and Olarte，（390）

M．：Biochemicalabnormalitiesof eryth−rocyte membranesin Duchenne dystro−

ここで次の2点が問題になるものと考え

phy．Arch．Neuro1．，33：489，1976．

る．第1は母親も低値を示している点である

5）Steck，T．L．：The organization of pr0−

が，この場合，患児の値が比較的揃っているteinsinthehumanredbloodcellmembra−のに対し，母親には大きなバラツキが認めら

ne．J．CellBio1．，62：1，1974．

れるので，母親ではStrOmaに含まれる何か，

6）Ueda，K．，Lawrence，P．J．andTyler，F．H．：

おそらくその中のactivatorによって値が修

Arapidandconvenientassayforthetotal

飾を受けていることが推測される．

membranousATPasecontent ofredblood

第2の点であるが，（）で示した患児の兄

COlorimetric determinationofphosphoruS．

この場合，本症例が果たしてDuchenne型であるのか，肢帯型であるのかの検討が更に必J．Biol．Chemリ

66：375，1925．

8）Sibley，J．A．andLehninger，A．L．：Determi

要なものと考えている．
結Cellhemolysates．inpress
7）Fiske，C．H．and Subbarow，Y．：The

弟例では，父親とほぼ等しい値が認められた．

nationofaldolaseinanimaltissues．J．Biol．
Chem．，177二論

859，1949．

9）Ellman，G．L．，Courtney，K．DリAndres，V．

Duchenne型の赤血球膜に異常が認められand Fleatherstone，R．M．：A new and

たとする報告は数多く認められるが，又，逆rapid colorimetric determination of ace・の成績も多い．

tylcholinesteraseactivity．Biochem．Phar−maco1．，7：88，1961．

そのため，成績不一致の機構を解析して，新しいATPase活性測定法を考案し，それに10）Lowry，0．H．，Rosebrough，N．J．，Farr，A．

よってDuchenne型筋ジストロフィー症の赤L and Randall，RJ．：Protein measure−

血球膜の異常の有無を検討してみた．

mentwith the Folinphenol reagent．J．
Biol，Chem．，193：265，1951．

その結果，患児と同年令の小児でも父親と一162−34）Duchenne型筋ジストロフィー症の赤血球ATP
＊

馬

研究協力者

伊規須

英

渡

輝

志

郎

後

藤

幾

生

黒

岩

義五郎

は じ め にTrs−HCl（pH7．4）溶液で3回洗浄した後，Duchenne型筋ジストロフィー症（DMD）

同溶液に，へマトクット値が約40％となるよにおける赤血球の種々の異常の報告の中にうに再浮遊した．反応させた場合は，いずれは，adenosinetriphosphate（ATP）と密接

も37℃，2時間で，場合によって5mMブドな関係があるものが多い．例えば，ATPasel），

ウ糖，0．1Mウアパインあるいは1mMプロ

adenylatecyclase3），およびproteinkinase2）

プラノロールを加えた．反応は冷温の0．6N

はATPを基質とする酵素であり，adenine4）

過塩素酸でイ亭止させ，ATPおよび等L酸はベ

はATPの前駆物質である．さらにATPはーリンガ一・マンハイム社製の測定キットを

赤血球の形態5）とも関係が深い．これらのこと

使用して測定した．

から，DMDにおいては，赤血球のATPの含有量やその動態に異常がある可能性は考えら

結果れる．したがって，私共はDMD赤血球の血清CPK値はDMD患者では，いずれもATP量を測定し，合わせて赤血球において増加していたが，対照では全べて正常範囲では唯一のATP再産生系である解糖代謝（gly−

あった．血清ブドウ糖値はDMDと対照群とCOlysis）の最終産物である乳酸の量も測定の間に差がなかった．

した．さらに，これらATPおよび乳酸に対す赤血球のATPおよび等L酸の量はDMDとるブドウ糖，ウアパイン，プロプラノロール

同年齢対照群との間には有意差がなかった．

の影響を検討した．

しかし，成人と子供（DMDおよび同年齢対照）と問には差があり，子供が高値であった

対象および方法（表1）．37℃，2時間の反応（incubation）

DMDの対照として，DMD患者と同施設にで，赤血球のATPは減少し，乳酸は増加した

入院中の同性，同年齢群の脳性麻痺患者を選が，5mMフサドゥ糖を添加したものは，ATPはび，血液はDMD患者と同日，同時刻に採血

ほとんど減少せず，乳酸はさらに増加した．

し，成人男子血液も同日，同時刻ごろに採血

ウアパインはATPの減少（消費）および乳酸

し，ともに同時に同様の処理および測定を行の増加の傾向を明らかに抑制した．プロプラった．これら血液の一部からCoulter Coun−

ノロールは，ウアパインと全く逆の影響をし，

terModelSを使用して平均赤血球容積など促進的に作用した．しかし，いずれにおいて（MCV，MCH，MCHC）も測定した．

も，同年齢対照群とDMDとの間には有意差血清を分離後，赤血球は120mMNaCl，5を認めなかった（表2，表3）．

mM KCl，2mM MgC12を含んだ30mM

平均赤血球容積（MCV）および平均赤血球
ヘモグロビン（MCH）においても，DMDと＊九州工業大学保健管理センター＊＊九州大学医学部神経内科

同年齢対照群との間には差がなかったが，子−163−

表1赤血球のATP（FEmOles／gHb）
DMD

子供対照

成人対照

10

12

11，2±4．5

11．5±3．2

36．7＝ヒ8．0

73．92±0．16

3．98±0．16

3．28±0．14※

ATP（平均±S．D．）

業子供（DMDおよび子供対照）と成人の有意差（p＜0．01）

表21）MDと対照患者赤血球の反応（37℃，2時間）前後のATP値（pmoles／gHb，平均±S．E．）
D M D（9例）
反

応

前

反

応

後

（a）ぶ

ど

薬

う

糖

物

4．08±0．16

3．86：±0．18

2．60±0．13

2．68±0．12

2．13±0．08

1．96±0．15

3．22±0．15

3．27±0．12目
日

1mM propranolol什）（巾

0．1mM ouabain（b）

5m Mぶどう糖什）
3．62±0．14

3．65±0．15

lmM propranolol（−03．30±0．12

3．23±0．13

O．1mM ouabain（−0

3．96±0．10

3．86±0．16

薬

物

表3

H

DMDと対照患者赤血球の反応（37℃，2時間）前後の乳酸値（JL mOles／gHb，平均±S．E．）
D M D（9例）

反

応

前

応

後

反回

ぶ

ど

薬

（b）

子供対照（7例）

う糖

子供対照（7例）

4．23＝ヒ0．27

4．45±0．36

10．86±0．53

11．51±0．67

H

物

H

l mM propranolol

いう

11．37±0．55

12．01±0．67

O．1mM ouabain（＋う10．07±0．51

10．76±0．66

5mMぶどう糖（巾15．69±0．31

16．13±0．72

l mMpropranolol（十）18．89±0．45

19．53±0．61

0．1mM ouabain（−H

13．14±0．29

13．60±0．67

薬

物

H

−164−

表4

DMDにおける平均赤血球容積および平均赤血球ヘモグロビン
人

D

M

数

年
令
（
平 均 ±S ．
D．
）

M C V （f l）

M C H （
pg ）

慧

諾

D

11

10 ．
8 ±4 ．
583．
5 ± 3 ．1

27 ．
9 ± 1 ．2

33 ．
2 ：
±0 ．5

子供 対照

11

11 ．
6 ±3 ．
3

84．
3±2．
7

27 ．
9 ＝
ヒ1 ．
3

33 ．
0 ± 0 ．9

成 人対照

7

36 ．
6 ：
±8 ．
0

90 ．
6±2．
4●

30．
7±0．
8●

33 ．
8 ± 0 ．9

＊子供（DMDおよび子供対照）と成人との有意差（p＜0．001）

供と成人男性との間にはMCV，MCHに有意差があった（表4）．

も著しい特異的異常はないことを示している．しかし，成人と子供との間には，いくつかの明らかな差があり，DMD赤血球の研究

考察においては対照群の選択とその材料の処理に

本研究は，DMDと同施設に入院中の同性，は配慮を要することを示している．

同年齢対照群とを，同日，同時刻に採血し，同時に処理および1則足した結果を比較したも文献のである．しかしながら，赤血球ATPおよび

1）Brown，H．D．，Chattopadhyay，S．K．et

乳酸の量にも，ブドウ糖，ウアパインおよびal．：Erythrocyte abnormalityin hu−

プロプラノロールの作用においても，DMD

man myopathy・Science157：1577，と同年齢対照群との問には有意差を認めなか1967．

った．私共の結果は，最近のDanonら6）の報告

2）Roses，A．D．，Herbstreich，M．H．etと異なっている．彼らは，DMDにおいては赤al．：Membrane protein kinase altera−

血球のATP量が多く，ブドウ糖添加におけtionin Duchennemuscular dystrophy．

る乳酸の産生が高いと報告している．この矛盾の原因は不明であるが，Danonらは対照群

Natureの血液はDMDと同日，同時には採取してい254：350，1975．

3）Mawatari，S．，Schonberg，M．etal．：
Biochemicalabnormalitiesoferythr

ない．

0−

CytemembranesinDuchennemuscular

0．1mMウアパインは，DMD赤血球のA

dystrophy：ATPaseandadenylcycla−

TPの消費および乳酸の産生を抑制し，しかSe．Arch．Neurol．33：489，1976．

も対照群と差を認めなかった．このことは，

4）Solomons，C．C．，Ringel，S．P．et al．：

DMDの赤血球膜（ghost）におけるNa十十K＋Abnormaladeninemetabolism ofery−ATPaseはウアパインに対する反応性が正throcyteinDuchennemusculardystro−

常と異なるという多くの報告とは矛盾していphy．Nature

268：55，1977．

る．この矛盾の理由も当面明らかではないが，

5）Matheson，D．W．，Howland，J．L．：Ery−

本研究では，膜ではなくて洗浄赤血球を用い

throcyte deformationinhuman mus−たものである．赤血球膜の作製には，種々の人為的条件が加わり，その作製の方法の差にCulardystrophy．Science184：165，

より，DMDと対照との間には差を生じる可能性は否定出来ない．

6）Danon，M．J．，Marshall，W．E．，etal．：

私共の結果は，DMD赤血球におけるATP

dystrophy．Arch．Neurol．35：592，

1974．

Erythrocyte metabolismin muscular

量およびATPの産生と消費には，少なくと

1978．

−165−

35）デュシャンヌ型ジストロフィー症保因者の赤血球アデここレートサイクレース活性及び測定における新しい試み

高

研究協力者

橋

桂

高

尾

尚

後

藤

和

子

難

波

妃久子

藤

田

拓

男

デュシャンヌ型筋ジストロフィー（DMD）の保因者の検出は優生学的に極めて重要であ

陣

内

研

i則定条件は，
1）14C−ATPを用いる方法

る．従来，血清CPK，LDH5，心電図，筋電

トリス塩酸緩衝液

40mM，pH7図，生検筋の組織学や蛋白合成，赤血球膜の

MgC12

10mM

燐酸化，リンパ球のCap形成，筋力テスト，

CAMP

体内カリウムのi則定などがその目的に用いら

テオフイリン

れている．51年馬渡らは本症の赤血球膜のア

8r14C−ATP o．5mM（1JLCi，比活性 29．2mCi／m

デニレートサイクレース（AC）の基礎値の高l

値とエビネフリン（E）に対する反応の低下

mM
5mM

mol）

を報告し，母親でも同様の傾向があると述べクレアチン燐酸

ているが，保因状況との関連など不詳であクレアチンキナーゼ100日／mlるl）．ここでは，14C−ATPを基質としたAC

赤血球ゴーストの新しい測定法を開発し，これを用いて保因

20mM

0．3−0．65mg（50〃1）者及び正常女性の赤血球について比較検討し仝容量150JJlを，37℃，20分間インキュた結果を報告する．また最近開発したRadio−

ベートし，8mMcAMP50JLlを加え直ち

immunoassay（RIA）とサンプルのアセテルに100℃で3分間煮沸し遠沈し，上清の一化及びアルミナのバッチ法を組合せたACの定量を下記のカラムにかける．

測定方法も紹介する．

2）アルミナ，Dowexl X8蟻酸型カラム．
0．8gのアルミナカラム（0．5×4cm）に反対象および方法

応液上清を吸着させ0．05Mのトリス蟻酸

8名の保因者と同年齢の正常者8名を検索した．赤血球をデキストラン法で分触し，10

緩衝液（pH7．5）10mlで溶出し，溶出液を直］妾予め同緩衝液で平衡化したDowexmMト））ス塩酸緩梼液（pH7．4），1mM

l X8（200−400メッシュ，0．5×3cm）

NaCl，1mMMgC12，1mMジチオスレイ
トールで溶血洗濯したものを用いた．ACのに吸着させる．アルミナカラムをはずし，5mlの蒸ラ留水でDowexl X8のカラム＊神戸大学医学部第三内科

後，Z Nの蟻酸3−4mlでCAMPを溶を洗う．更に0．05Nの蟻酸10mlでづ容出−166−

mで吸光度

0．58，66，70±8．58であり，後者の基礎括性値を測定し，既知のCAMP溶液と比較して回は有意（p＜0．01）に高く，paired testでも収率を計算する．他の一部を適当なシンチ

p＜0．05で有意であった．保因者分類，血清レーションカクテル（例えばmodifiedTri−

CPKとACの値の相関は明らかでなかった．

tosolなど）と混じ液体シンチレーションカ3）のRIAによる方法で105ノバの反応液に対出する．一部を稀釈して265／

ウンターで10分間計測する．

し乾燥アルミナを150mg〜300mg用いると3）RIAによる方法

ATPは98．8％以上吸着され3H−CAMPの上記の14C−ATPを用いる方法のCAM

回収率も84．6％以上で良好であった．この吸P，テオフイリンを除き0．25mMの塩酸パ着法とアセテル化を組合せたRIAで極めてパベリンを用いる．14CLATPの代りに1

特異性の高い10￣15moleオーダーのCAMPのmMのATPを用い全容量200JLlで37℃，測定が可能となり，これを用いて赤血球膜の30分間インキュベートし，100℃で3分間

AC活性の測定がより正確に行なえるように煮沸する．遠沈し上清をアセテル化し，アルミナに吸着させ，pH6．2の50mM酢酸なった．

緩衝液で溶出L RIAを行った．詳細は別に

考案

ヒト赤血球膜のAC活性及びそのカテコラ

報告予定．

ミン感受性の有無はその極めて低い音舌性のた

赤血球膜の蛋白量はLowry法で測定した．

めに種々論議されたが2），Kaiserらによってその存在が確められた3）．従ってその測定には
結果

高感度且つ特異性が要求される．現在広く用

3H−CAMPを用いて複合カラムの回収率

いられている方法はSolomonらの方法を計算すると95．3±0．9％（平均±標準誤差，で4），α−32P−ATPを用いα位ラベルC7）特検数5）で吸光度により計算した回収率とも異性を利用してDowex50（OH）とアルミナ

よく相関し，後者の実用性が証明された．AC

カラムを用いて生成した32P−CAMPを検出の反応は30分迄略直線的に増加した．膜蛋白するものであるが，32P−ATPの入手，放射能量は検索した0．1〜0．45mg／試験管の間でC減衰の計算，計測誤差などに問題がある．こ

AMPの生成量と比例した．カラムの音容出パ

こではルーティン化も考慮して14C−ATPをターンを既知の化合物で検討すると，0．05M

基質に用いる方法を開発し上述の如く特にヒトリス蟻酸緩衝液と蒸漕水によりアテソシ
ン，アデニンのすべてとヒポキサンチンの大ポキサンチンの混入をさける方法を得て実用化した．

部分が溶出され，0．05Nの蟻酸により残りの

我々は先にDMDの筋膜AC活性の異常をヒポキサンチンとイノシンが溶出されること報告した5）6）．馬渡らも筋膜ACのEに対するが明らかになった．この方法により8−14C−

反応低下を報告し7），更に本症の赤血球膜AC

ATPを用いても盲検値が100−140cpmとの基礎活性の上昇とEに対する反応低下を報なり赤血球の如き低活性のACも測定可能となった．この方法を用いて測定した正常人の告した8）．その際母親の赤血球のAC活性の高い傾向があり，Eに対しては一定の傾向がみ

赤血球ACの基礎活性値は1．38±0．24pm0−

られない結果を記載している．しかし保因者

1e／mg蛋白／20分（平均±標準誤差），イソプ
ロテレノール（0．1mM）存在下で1．49±0．

分類や保因状況との関連は不詳である．ここではこれらのことを明らかにし保因者検出の44，NaF（10mM）存在下で57．21±10．64，

目的にAC活性が用い得るか否かを検討し上保因者のACはそれぞれ3．14±0．43，2，94±

記の結果を得た．Eに対する赤血球ACの反−167−

応は正常者でも様々であり（未発表）現在更に検討を進めている．

1ate cyclasein non−nuCleated erythro−
CyteS

Of

severalmammalianspecies．

Biochem．Pharmacol．18：2576−

DMDの保因者の赤血球ACの基礎値が高いことはDMD患者のそれと共通の所見であ2578，1969．

り遺伝的異常が想定されるが，DMDの赤血

3）Kaiser，G．，Quiring，K．，Gauger，D．，

球月莫ATPase異常が血清や緩衝液の条件でPalm，D．，Becker，H．，Schoeppe，W．：

影響されることを考えると8），上記の所見につOccurrence of adenylate cyclase acti−

いてもその解釈は慎重であらねばならない．

Vity

paired testでp＜0．05の危険率で保因者のinhuman erythrocytes．Blut．

29：115−122，1974．

判定が可能なる結果を待たが，更に特異な反4）Solomon，Y．，Londos，C．，Rodbell，M．：

応が見出されて，これが利用出来ることカr望

A highly sensitive adenylate cyclase

ましい．保因者分類，血清CPKとACとの関assay．Anal．Biochem．58：541−

係も更に症例を増やして検討する余地があ

548，1974．

5）Takahashi，K．，Takai，T．，Imura，H．：

る．

CyclicAMPandcyclicGMPinskele−

結論

tal muscles．Proc．Symp．Chemical．
Physiol．Pathol．（JSCC），13：19−21，

14C−ATPを基質とするAC活性測定とア
ルミナバッチ法とサクンニル化を組合せ
RIAを行なうAC活性の測定法を開発した．

1973．

6）Takahashi，K．，Takao，H．，Takai，T，：前者を用いてDMDの保因者の赤血球のAC

Adenylate cyclase

を同時操作で測定し，保因者のAC基礎値がFukuyama Type muscular dystrophy．

inDuchenne and

KobeJ．Med．Sci．24：193−198，1978．

有意に高いことを見出した．保因状況との関

7）Mawatari，S．，Takagi，A．，Rowland，L

連も検討した．

P∴Adenylate cyclasein normal and文献pathologichumanmuscle．Arch．Neu−rol．30：96−102，1974．

1）Mawatari，SリSchonberg，M．，01arte

M．：Biochemicalabnormalitiesofery−8）Siddiqui，P．Q．R．，Pennington，R．J．

throcytemembranesinDuchennedys−

T．：Effect of ouabain

trophy．Arch．Neurol．33：489−493，

Cytemembraneadenosinetriphosphate

1976．

in Duchenne muscular dystrophy．J．
neurol．Sci．

2）Sheppard，H．，Burghardt，C．：Adeny−−168−

upon erythro−

34：365−372，1977．

36）Myotonic dystropIlyにおけるリンパ球異常について

垂

井

清一郎

＊

研究協力者

平

岡

高

諦

橋

光

雄

木

谷

照

夫

序

ストロフィー症Duchenne型2例，肢帯型7進行性筋ジストロフィー症や筋緊張性ジス

例，先天性筋緊張症（Thomsen）1例についトロフィー症の原因は未だ不明であるが，最ても検索した．

近，患者赤血球の異常，特に膜異常の存在がDrug−inducedmyotonja：Wister系雄性

報告されて以来，これら疾患における全身的

ラット，体重230−280gにDAC（G．D．Sear−

な膜系の変化が想定されている．

le＆Co．より供与）10mg／kg／dayJ（一部のラ

私共はこれらの患者の末梢白血球を電顕形

ットには3週後よりDAC40mg／kg／dayに増量）を腹腔内に授与した．1週毎にNembu−

態学的に観察した所，筋緊張性ジストロフィー症患者リンパ球内に，高頻度に，膜系の変tal麻酔（NembutalSodium20mg／kg，腹化を示唆する異常ミエリン様構造物を初めて腔内）下に筋電図を施行し，股動脈より採血を行った．

見出したので報告する．さらに生体膜の重要成分であるコレステロールの合成阻害剤，20，

電顕試料作製には，ヘパリン加採血後，デ25−Diazacholesterol（DACと略）の投与に

キストランにて白血球を分赦し，2％GA固よりラットで，drugTinduced myotoniaを発

定45分，1％OsO4後固定1時間後上昇エタ

現せしめえたが，この時点での末梢血リンパノール系にて脱水し，エボン包理を行った．

球内にヒトの症例と頸似のミエリン様構造物

なおいずれの過程も，遠沈，再浮遊を繰り返の出現を観察したので合わせて報告する．

しfreecellの状態で操作を行った．酸性ホスファターゼ反応はGomoriの方法に準じた．

対象ならびに方法
筋緊張性ジストロフィー症：検索した症例

結果は12家系13例．年齢は16歳から51歳まで，

筋緊張性ジストロフィー症：13例中7例

内女性3例で，4例にはっきりした遺伝関係を認めた．全症例とも理学的検査でミオトニの末梢血リンパ球内に異常ミエリン様構造物

ア現象が明らかであり，筋電図を施行した10パ球には高頻度にみられた．正常対照および例仝例にmyotonicdischargeを確認した．ま

進行性筋ジストロフィー症，先天性筋緊張症

た内分泌学的検索を施行し得た8症例全例にではこの様なミエリン様構造物はみられなか

何らかの内分泌異常がみられ，また血清免疫った．

がみられた．遺伝関係の明らかな症例のリングロブリン，特にIgGの低値を5症例に認め異常ミエリン様構造物の多くは細胞質内にた．対照として健常者5例の他，進行性筋ジ遊離して存在する様に見える．しかし多数のミエリン様構造物を観察すると．その一部は＊大阪大学医学部第二内科

生理的に存在する細胞小器官と関連している−169−

ことが明らかとなった．図1は粗面小胞体とがlysosomal natureであることを示していの関連を示すミエリン様構造物を示している．
以上の所見はミエリン様構造物が終りにる．densityの高い顆粒はparallel tubular
arrayと呼ばれる構造を示し，これは正常対は，lysosome内にとt）こまれ，恐らく分解を照リンパ球にもみられるものである．図2a

受けるであろうことを示唆している．本症リは，周囲の細粒子状内容物と共に，一層の膜ンパ球にみられたミエリン様構造物を，細胞にとり囲まれたミエリン様構造物を示す．これはSeCOndarylysosomeと考えられる．多内膜系より現われてlysosome内での分解に数のparalleltubular arrayの構造を示す頼の様な過程が考えられた．すなわち，小胞体

粒の他に，小さいミエリン様構造物がみられる
が，これらは膜に囲まれておらず，細胞基質や核膜という既存の何莫系よりできたミエリン

中に遊離して存在する．図2bは，lysosome

遊離型となり，終りにはIysosome内にとりのmarker enzymeである酸性ホスファター

こまれ分解されるという過程である．この様ゼ反応を施したリンパ球を示している．反応な異常ミエリン様構造物の存在は，本症のリ物を明瞭に識別するため，Ur染色のみを行っているので全体にdensityが低い．上端にミ

ンパ球における膜系の異常を強く示唆していエリン様構造物を含む膜に反応を認め，これミエリン様構造物が，GA固定時の人工産至る一連の過程としてみた場合，図3の矢印

様構造物が，同部より切り離され細胞質内にる．

図1筋緊張性ジストロフィー症患者のリンパ球
粗面小胞体との関連を示す異常ミエリン様構造物（矢印）
一170一×32，000

図2

同症患者のリンパ球（a）secondarylysosomeと思われる顆粒内にあるミエリン様構造物（矢印）と細胞基質内に遊離しているミエリン様構造物（△印）×27，500（b）酸性ホスファターゼ反応．ミエリン様構造物を入れる頼粒（矢印）に反応がみられる．

×26，000

物として生じ得ることは周知の事実である．
しかし，私共は固定および包理の全過程を
freecellの状態で行っている為，この様な人
工産物は対照では全くみられない．さらに組織片を用いた時にもこの様な人工産物が生じないとされているGA，Os04の同時二重回走法を施し，本症のミエリン様構造物が，人工産物でないことを確認している．
なお，本症のリンパ球以外の血球には異常がみられなかった．
Drug−induced myotonia：投与開始3−4
週後にinsertionvoltageの延長が，そして5
週後には全てのラットに図4に示す様にmy−

図3 同症患者のリンパ球内の異常ミエリン様構造物の生成，分解過程（矢印）．

OtOnic dischargeが明らかに観察された．図
5aは投与開始5週後のリンパ球を示す．ヒ−171−

20，25−DiazacholesteroI Cholesterol∴三一二㌦∴主∵10mgof20．25−DiaLZaCholesterol／kgofb．wJdayintraperitonea

ytorats

500JJV L
Pro10ngationoftheinsertionvoltagewithmyotonicdischargeaft訂5weeksof the treatment

図4 20，25−Diazacholesterol投与ラットの筋電図

図5（a）20，25−Diazacholesterol投与ラットのリンパ球内ミエリン様構造物（b）同好中球のZebrabody様構造物

一172−×26，000
×28，500

トの症例と近似のミエリン様構造物を認め

ニア現象，脱毛等の出現がみられた．動物実る．これらは対照ラットおよび投与開始4週

験にても，ミオトニア，白内障をおこすなど

後までは認められなかった．図5bは投与開ヒト筋緊張性ジストロフィー症のモデルとし始5週後の好中球を示すが，いわゆるzebraて研究されている．私共の結果は，ミオトニ

body様の層状構造がみられた．ヒトの症例でアの出現と平行して，末梢血リンパ球に，ヒは好中球に異常がみられず，ヒトの症例とのトの症例に顆似の変化が生じ得ることを示

違いを示した．

し，ヒトの症例でのリンパ球の形態学的変化
が，筋細胞でミオトニアをおこしていると同考

案

一の膜異常に起因していることを示唆してい筋緊張性ジストロフィー症は筋症状の他にる．ヒトの症例と異なり，好中球にも変化の多くの月蔵器に異常のみられる系統的な疾患でみられた事は，生理・化学的成績から既に指ある．本症の免疫学的異常としては血清γ−

摘されているように，DAC−induced myoto−globulin低値がよく知られている．γ−globu−

niaとヒト筋緊張性ジストロフィー症が，必linの半減期の短縮1），IgGの代謝冗進2）が証明

ずしも全く同一の病態でない、ことを示していされているが，その本態は不明である．二最近

るであろう．

の報告3）で，本症において，破傷風トキソイド

DrugTinduced myotoniaをおこす薬剤とやSalmonella typhi H antigenに対する特しては，DACの他にTriparanol，Chloroq−

異的な抗体産生能の低下が示されたが，これuine，Clofibrate等が報告されている二私共ははリンパ球の膜系の異常と関連するのかも知れない．

既にTriparanol，Chloroquineをラッ′トに投与することにより，末梢血リンパ球豆ミエリ

1972年，SingerとNicoIsonにより細胞膜

ン様構造物の出現，好中球の顆粒変化をきた構造に関してfluid mosaic modelが提唱さすことを報告した5）．この事はミオトニ■ァとリれて以来，細胞膜機能と流動性との関連が注

ンパ球内ミエリン様構造物の出現が，DAC投目されているが，本症リンパ球の細胞膜の流与のみに限られた現象ではないことを考えさ動性については興味あるところである．これせる．

に関して，最近本症末梢リンパ球の細胞膜上のリセプターのCapping現象をみた報告4）が

結

語なされたが，正常リンパ球と差が無いとされ（1）筋緊張性ジストロフィー症13例中7例ている．一方進行性筋ジストロフィー症では，の末梢血リンパ球内に異常ミエリン様構造物

いずれの型でも，また保因者にもcapping現を認めた．進行性筋ジストロフィー症Duche−

象の低下がみられ，細胞膜の異常が示唆されnne型2例，肢帯型7例，先天性筋緊張症1例
ではみられなかった．

ている．私共が白血球を形態学的に検索した
進行性筋ジストロフィー症は，Duchenne型
2例，肢帯型7例と例数は少ないが，これら（2）異常ミエリン様構造物は，既存膜系に由来し，その病的変化の表現と考えられた．

では異常がみられず，膜系異常の現われ方は，（3）20，25−Diazacholesterol投与によりラ

筋緊張性ジストロフィー症と進行性筋ジスト

ットにdrug・induced myotoniaを作製した．

ロフィー症とでは異なっている．

ミオトニア出現と平行して末梢血リンパ球内

DAC（図4）はコレステロールの生合成をにミエリン様構造物の出現，好中球顆粒のデスモステロールの段階で阻害し，血中コレ

Zebrabody様の変化がみられた．

ステロール値を下げるため，高コレステロー（4）以上の所見は，筋緊張性ジストロフィー

ル症患者に使用された．副作用としてミオト症において，形態学的にも膜系異常を認めたー173−

BurstonandI．J．Forbes：Immunologi−

最初の報告と考えられる．

Calfunctionin dystrophia myotonica・文

Brit．Med．J． 3：81．1973．

献1）H．H．Zinneman andJ．Rotstein：A4）N．A．Pickard，H−D．Gruemer，H・L・

studyofgammaglobulinindystrophia

Verrill，E．R．Isaacs，M・Robinow，W・

myotonica．J．Lab．＆

E．Nance，E．C．MyersandB．Goldsmi・

Clin・Med・

th：Systemicmembranedefectinthe

47：907，1956．

2）RD．Wochner，G．Drews，W・Stroberand T．A．Waldmann：Accelerated

proximal muscular dystrophies・N・

breakdownofimmunoglobulinG（IgG）

5）木谷照夫，山本 章，多古月 基，米沢 毅，

Engl．J．Med．299：841．1978．

inmyotonic dystrophy：a hereditary平岡

error ofimmunoglobulinCatabolism．

夫：薬物による白血球顆粒の形態変化に

J．Clin．Invest．45：321，1966．

ついて．日本血液学会雑誌 36：242，

3）D．I．Grove，S．J．0

1973．

Callaghan，T・0・一174−

諦，倉田義之，那須輝史，西川光37）筋ジストロフィー症におけるクレアチン代謝
＊夫

‖
不

TT
女

三

川

＊故事学

茂

賀

字 書

＊三＊三＊聖

健 幸 正

田 井 田
木
吉 今 八

＊章＊治＊浩

孝

良 沢 勢

平 金 伊

研究協力者

Creatine−Creatinephosphate系は，筋収縮

基質として，0．1Nリン酸緩衝液pH7．0，

エネルギー供給系に必須であり，筋ジストロ

30℃，1時間に生成されるurea量をdiacety−

フィー症とくにDuchenne型（DMD）では，

lmonoxime−thiosemicarbazide法を用いてCreatinemia，Creatinuria，逆に尿中creatini−

測定した．

neの排泄減少が特異である．私たちはその理

筋蛋白量の測定は，biuret法を用いた．

由をcreatineの分解過程に求めて研究を行なった．結果としては，まず，Creatine一→Sar−
COSine＋ureaに働く

結Creatinase（creatine

果

amidinohydrolase，EC3，5，3，3，）の

1）筋中遊離アミノ酸分析結果（図1）
健常人骨格筋の多くにSarCOSineのpeak

人骨格筋中における存在をはじめて明らかにが確認され，その計測値は20〜100／JmOles／

し，また，DMD完引こおいてはこの活性が低下

100gwetwt．である．また，ureaは，40−110

していることを示した．

平均70mg／100gwet wt．であり，血中urea（5−15mg／dl）よりも高かった．これに対対象と方法し，DMD筋2例では，SarCOSineのpeakは

対象は，健常人およびDMDを中心とするみられず，ureaも4〜8mg／100gwetwt．と各種筋疾患である．資料は，剖検または生検低下していた．図1に，健常人骨格筋代表例によりえた骨格筋である．この資料について，のアミノ酸自動分析計によるpatternを上段

筋中遊離アミノ酸分析とCreatinase活性ののアミノ酸標準混液と対比して示した．sar−

測定を行なった．筋中遊維アミノ酸の分析に

COSineは，ニンヒド］）ン反応が弱．く，右とな

は日立アミノ酸自動分析器KLA5型を用いりのglycineよりも，実際にはJLmOleにしてた．筋資料は，4％過塩素酸を加えてhom0−3倍に多い．

genize L，水酸化カリウムにて中和し，その2）筋Creatinase活性測定の成績（表1）

減圧蒸留乾回物をクエン酸リチウム緩衝液に

表1に，Creatine充分量の存在下，30℃，1

音容解したものを用いた．

時間に生成するurea量の実際の0．D．の一Creatinase活性測定用筋資料は，生理的食
塩水を加えてhomogenize L，遠心分離した部を示した．健常対照では，いずれも酵素液

上清を用いた．Creatinase活性は，Creatineをみられ，量的には60〜90FLmOles／gprotein／（筋抽出液）量にdependしたureaの生成がhourであった．下段の脊髄性進行性筋萎縮症＊徳島大学医学部第一内科（SPMA）筋では，高濃度の資料での数値が
ー175−

l；

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l
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一
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一

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一一
J：

図1正常骨格筋におけるSarCOSineの存在（アミノ酸自動分析計による）なかった．

欠けているが，ほぼ同様の成績と思われる．
これに対し，DMD筋では，0．10〜0．25FLm0−

考1es／g protein／hourと誤差範囲内に低く，酵察

本研究は，はじめに述べたように，DMDに素液量にdependしたureaの生成はみられおける特異なCreatinuriaに着日し，その庶
表1生成urea量からみた筋Creatinase活性（creatineを基質とする）

因をCreatineの分解過程に求めて行なったものである．creatineの分解は，Creatinineの（diacetylrmnOX nne thiosemicarbazide法．OD525nrn）
筋 抽 出液水C r e＋
a t in e

健常対 照
N i．
，Y ．

健常 対照
Ok．
，Y ．

D

H
D
K o ‥リ．

D

u

D

1 i．
．N ．

S P

u ▲

I t‥ T．

他に，SarCOSineとureaに分解される経路があり，これにCreatinaseが働く．Creatinase

十C a S e
希釈 系列

筋 抽出 液筋 抽 出液20X

0 ．1 7 0

0 ．0 3 0はpseudomonasでは知られている1）2）3）4）が，40X

0 ．1 1 60 ．
0 10

人筋中でその存在を指摘した報告はこれまで

80X

0 ．
084

0 ．
0 10

にない．私たちは，人骨格筋において，Crea−

16 0 x0 ．
038

0tinaseの存在をはじめて明らかにした．

20x

0 ．19 20 ．0 2 0

4 0X

0 ．10 00 ．
0 10

即ち，まず，筋中遊離アミノ酸の分析により，人骨格筋中にSarCOSineの存在すること，
血中よりもhighlevelのureaの存在するこ

80X

0 ．
050

0

16 0 X

0 ．
026

0

20X

0 ．
08 1

0 ．
067

とを確認した．次いで私たちは，健常人骨格

40 X

0 ．
070

0 ．
034

筋において，Creatineを基質とする筋homo・

2 0X

0 ．0 8 30 ．0 6 1

genate反応系で酵素量にdependしたurea

40X

0 ．
074

0 ．
030

80X

0 ．
066

0 ．
023

40 X

0 ．1 1 3

0 ．
020

80X

0 ．
070

0 ．0 1 0の生成のみられることを確かめ，Creatinase
反応のあることを知った．
この筋Creatinaseは，まだその酵素学的性

牽

Creatine絶品

0．019

格が充分つかめておらず，本実験でえられた染Standard（Urea30∩電／dt）0．523

活性値は本酸素の真の活性値よりは過小とな−176−

っていることが考えられる．

とformaldehydeに分解される．また，gly−

これに対し，DMD筋では，筋中遊醒アミノ

cineは，腎でtransamidinaseによりargini−

酸分析におけるSarCOSineのpeakは認めら

neと結合してglycocyamineとなり，肝でれず，ureaも低下していた．また，Creatinasemethionineよりメチル基をうけて再びCrea−

は誤差範囲内に低く，酵素液量にdependしtineに戻る．これが私たちの推定したCyCle

たureaの生成がみられず，Creatinaseの減である．なお，formaldehydeは，あるいは少もしくは活性低下を思わせたが，筋の萎縮

active carbonとしてactive methionineのも強いので，なお検討中である．

生成に働くかもしれない．

人骨格筋にCreatinaseが存在するという本研究における成績に基づいて，私たちは結論

Creatineの新しい代謝経路を，仮にCreatine

1）正常人骨格筋中にSarCOSineの存在す

pseudo−ureaCyCleと名付けて，推定した（図ること，血中よりもhighlevelのureaの存在

2）．

することを確かめ，さらにCreatineを基質と肝からきたCreatineは，筋でCreatine ki−

する筋homogenate反応系でureaの生成がnaseによりphosphorylationを受ける．ここ認められることから，Creatinaseが人骨格筋

で，CK逆反応によってhighenergyphosph−

中に確かに存在することを明らかにした．こateがとれる際，一部はともに水1分子がとのことから，人骨格筋中に新しいCreatine代

れてCreatinineができると考えられる．一

謝経路，即ち，Creatinepseudo−ureaCyCleと方，Creatineは，CreatinaseによってSarCO−も称すべきものの存在を推定した．

Sineとureaに分解される．このureaは尿中2）DMD筋では，この代謝経路の中で，へ排泄されるが，このことは現在知られていCreatinaseの減少もしくは活性低下を思わせる肝中のOrnithinecycleの他に，筋中に，こる成績がえられたが，筋の萎縮も強いので，

ういう別の形のurea cycleのあることを示

なお検討中である．

したことに他ならない．ついで，SarCOSine

文は，SarCOSinedehydrogenaseにより，glycine

献1）Akamatsu，S．，Kanai，Y．：Bacterial【箭】

decompositionofcreatine，Ⅰ．Creatin0−

mutase，Enzymologia，15：122（1951）

C r e a t in e − P【 肝 】

c K （正 ）糎

諾2）Akamatsu，S．，Miyashita，Y．：Bacteri−n in 。

aldecompositionofcreatine，III．The
C r e a t in epathway of creatine decomposition，いこ 芸

Enzymologia，15：173（1951）

nne t hy I・3）Appleyard，G．，Woods，D．D．：Thepa−

S a r C O S in e ＋ u r e a
nl e t h io n in e
9

H C H O
孟 性ホJL ムアルデヒ ド

S a rCO S ln ede hy d ro g en a sethwayofcreatinecatabolismbypseu−

domonas ovalis，J．Gen．Microbio1．，
14：351（1956）
g ly c o c 押 m i n e く（g u an id oa ce ta te ）4）Yoshimoto，T．，Oka，Ⅰ．，Tsuru，D．：

Purification，Crystallization，andsomea r g ln in e

Properties ofCreatineAmidinohydroT【腎 ⊃lasefromPseudomonasputida，J．Bio・【尿中】

図2 creatine pseudo−ureaCyCle（仮称）Chem．，79：1381（1976）

ー177−38）Duchenme型筋ジストロフィー症におけるカルニテン代謝

黒

岩

義五郎
＊＊

研究協力者

後

藤

幾

生

小

林

卓

＊＊＊

郎

馬

渡

志

郎

名（7〜13歳）を用いた．

は じ め にカルニテンは筋肉のエネルギー源としてか

方法はPearsonら5）の方法に従い，DTNB

なりの部分を占める脂肪酸，とくに長鎖脂肪の呈色反応にて測定した．試料としてはヘパ酸のミトコンドリア内のとりこみに関与してリン採血の血菜0．5mlおよび尿0．5mlを用いる1）．すなわち脂肪酸はCoAと結合したのいた．尿中カルニテンの値は目差変動がある

ち，ミトコンドリア内のカルニナンアシルト

ため，3日連続採尿を行い，その平均値を用

ランスフェラーゼⅠのもとでアシルカルニテ

いた．クレアチンおよびクレアチニンはンになり．ミトコンドリアに入りこみ，さらBonsnesら6）の方法で測定した．

にアシルカルニナントランスフェラーゼⅠⅠによりアシルCoAとなる．これがβ一酸化をへて，エネルギー源となる．このようにカルニ

結果

正常コントロールの血中および尿中カルニ

テンは筋肉代謝に大きく関与し，また骨格筋

テン量はDiMauroらおよびMaebashiらのや心筋に大量に含まれる2）．

値とほぼ一致した．また尿中カルニナンの男筋ジストロフィー症は筋肉の破壊を伴う疾

女差は見られなかった．Duchenne型筋ジス患であり，その代謝障害が示唆されるが，今トロフィー症においても，血中，尿中ともにまでにMaebashiら3）は筋ジストロフィー症

カルニテンの量はコントロールと差は見られの尿中カルニテン排泄が有意に低値を示すとなかった．同時に測定した尿中クレアチンは報告している．一方，DiMauroら4）はコントロ

有意に筋ジストロフィー症に増加していた．

ールと全く差がないと報告している．そこで，血中，尿中カルニナン倍はDuchenne型筋ジ

我々は血中および尿中カルニテンを測定し，ストロフィー症のCPK，クレアチン，重症度

性および年齢の同一対照例と対比したので報などとは全く相関を認めなかった（表1）．

告する．

考

案

対象および方法

今回我々はDuchenne型筋ジストロフィー

対象はDuchenne型筋ジストロフィー症

症の血中および尿中カルニテンを測定した19名（6−17歳），コントロールとしで慢性が，コントロールと差は見られなかった．こ気管支喘息の男児12名（7〜14歳），女児10の結果はDiMauroら4）の報告と一致し，Maebashiら3）の報告と異なる．この差の原因は＊九州大学医学部脳研神経内科

不明であるが，検査方法の差および尿のサン＊＊国立赤坂療養所

プリングに差があると思われる．またここで＊＊＊九州工業大学保健管理センター−178−

表l PlasmaandurinarycarnitineinDuchennemusculardystrophyandc。ntr。1S
DMD（n＝19）

Controlboys（n＝12）

Controlgirls（n＝10）

Plasma carnitine〝mOIs／100ml

4．02±1．03（range）（1．62−−5．63）

4．10±0．91

n．d．

（2．83−−5．98）

Urinarycarnitine

JLmOIs／day

66．0±34．6

63．9±67．3

53．1±27．9（range）（17・3−−148・7）（5．1−−256．3）（16．4−−89．6）〟mOIs／100ml

7・6±7．811．3±8．2

7．6±3．3

0・13±0．06

0．55±0．14

0．56±0．26

0・40±0．17

0．12±0．07

0．13±0．11

Urinarycreatinine
g／day
Urinarycreatine

ValuesareshownaSmean±S．D．
DMD：Duchennemusculardystrophy
n．d．：not determined．

注目されるのは，筋ジストロフィー症でクレ285−334．

アチンとカルニナンが全く異なる動態を示す

2）Cederblad，G．，Lindstedt，S．and Lundことである．クレアチンとカルニナンはほぼ

holm，K．：（1974）Clin．Chim．Acta

同じ分子量をもち，肝臓でアミノ酸より合成

53：311−321．

あるいは食物より体内に入り，筋肉内に高濃3）Maebashi，M．，Kawamura，N．and

度で存在する点非常によく類似しているが，Yoshinaga，K．：（1974）Nature 249：

このように差が見られるのは興味深く，さら173−174．

に検討を要すると思われる．

4）DiMauro，S．and Rowland，LP．：

以上，我々はDuchenne型筋ジストロフィ（1976）Arch．Neurol．33：204−205．

ー症において血中，尿中カルニナンを測定し5）Pearson，D．J．，Chase，J．F．A．and Tu

たが，差が見出せなかった．

bbs，P．K：（1969）MethodsEnzymol．
14：612−622．

文献6）Bonsnes，R．W．and Taussky，H．H．：（1945）J．Biol．Chem．158：581L591．

1）Fritz・，Ⅰ・B・：（1963）AdvanceinLipid

Res・，AcademicPress，NewYork，pp．

−179−

39）Duchenne型進行性筋ジストロフィー症におけるcyclic nucleotidesの動態について

茂

研究協力者

福
頼

田

市

在

蔵

経

−＊
フt

敏

司

木 曽 昭 彦富 田 照 雄＊方は じ め に河崎

法：早朝空腹時安静臥位で採血した静脈

近年，Duchenne型進行性筋ジストロフィ

血を，500mMEDTA−4Na液入りの容器に分ー症（DMD）において赤血球，リンパ球，血小板などの血球成分にも異常が指摘され，骨注混和後，4℃，2，123×g，10分間遠沈して得られた末梢静脈血血染（PVP），並びに格筋障害とあわせ，DMDの成因に関連して

4℃，191×g，20分間遠沈して得られた多血

systemicmembranedefectl）の存在が注目さ

小板血渠（PRP）に超音波処理を加え，血小れている．我々は既に，DMD患者血小板凝集板を破壊した試料について，YAMASA cA−能の低下について報告2）してきたが，今回は，MP，CGMPassaykitを用いradioimmuno・

この凝集能と関係が深く，かつ，筋の分化，

assay法にて測定した．なお，PRPはJn小板

脱分化および濱田胞膜透過性とも密接な関係が凝集能測定に用いるのとほぼ同一条件下で得あるとされているCyClic nucleotidesの動態られるようにした（表1）．得られたCyClicについて検討した．

nucleotides値と骨格筋病変進展度，心電図所
見との対比検討を行った．

対象並びに方法
対結象：DMDlO9症例で平均年齢は14．5±

果

4．3歳である．その内訳は，厚生省機能障害度

DMDlO9症例のPVP−CAMP，CGMP値，分芙削こよるⅠⅠ度4例，ⅠⅠⅠ度2例，ⅠⅤ度3例，

cAMP／cGMP比各平均値は各々18．3±3．8，

Ⅴ度39例，Ⅴ1度38例，VIl度17例，Ⅵ月度6例

7．1±3．0（pmOl／ml），2．8±0．9で，健常対照群である．脊椎胸廓変形度は脊椎前後攣，同側

では各々20．3±4．5，4．4±1．7（pmOl／ml），5．1±

攣および胸部変形の三所見をもとに，変形の1．7であり，DMD群においてCAMP値，CA−ない 〈−〉群（57例）から変形合併異常数にMP／CGMP比は対照群に比しともに有意に従いく＋〉群（17例），〈＋卜〉群（22例），〈寸ト〉

低下し（p＜0．001），逆にCGMP値は有意の群（13例）に区分した．また，虚血性心電図増加をみた（p＜0．001）．一方，PRP中の濃変化に注目し，QT時間幅の単独延長例を

度はDMD群では各々23．7±7．0，6．0±2．

QT延長群（37例），ST低下のみられるもの

6（PmOソm．），4．5±1．8，対照群では各々23．7±

をST下降群（27例）およびそれらのみられ

5．1，4．3±1．5（pmOl／ml），5．9±1．6であり，ないものを正常範囲内群（45例）とした．

cAMP値は両者間に差をみず，CGMP値は
DMD群が軽度の高値を示した（p＜0．001）．
また，PVP，PRP間の濃度比較では，DMD＊大阪医事斗大学第一内科−180−

表l CompetitiveradioimmunoassaymethodsforcAMPandcGMP
Sampleく100／のSuccinylatingreagent：anhydridecitrate（9）く100／′月〉

trie叫amirで（1う

0．3M−lmi血de bJffer
Succinylati sampleく100／上の12キSuccinykAMPtyTOSinenethylest訂（1FLCi）

く100／戒〉

aTTt SUCCinyLtAMPsen爪
antLsucdnykGMP squm

．2㌔su∝inyLtGMPtyrosinemethylest訂（1FLCi）
く100〝 〉出

Aftermixedwell．in〇Ubation for12〜48h仇rS．4℃
Dexuamtd clⅦrCOal

Centrif咤ath3000「．pれfα・5min．．4℃

FTee SupFnatant（bmrd）く500jLA）

封Counting by Gamma−Counter

群においてCAMP値はPRP中で（p＜0．

B．脊椎胸廓変形度との対比（表3）001），CGMP値は逆にPVP中でより高値を

血清遅出酵素値は変形の進行に伴い漸減す示した（p＜0．01）．

る傾向が明らかであったが，PVP，PRPいず

A．厚生省機能障害度との対比（表2）れにおいてもCyClic nucleotidesの濃度と脊CPK，aldolase，LDHなどの血清遊出酵素
総活性値は，各障害度群症例数にバラツキが

椎胸廓変形度の問に密接な関係はみられなかった．

あるが，障害度の進行と密接な関係を示し，

C．心電図所見との対比（表4）ⅠⅠⅠ，ⅠⅤ群でピークをとり，以後障害度の進行

前述の心電区l区分三群問における対比でに伴い漸減する．PVP，PRP中のCAMP，は，CAMP値はPVP，PRP中ともに三群間

CGMP浪度も障害度ⅠII，IV群で高い値がみられた．但し，この群の症例数が少ないため更に有意差をみなかった．一方，CGMP値は
PVP，PRP中ともにST下降群で高値を示し，に症例を増し，検討する必要がある．また，その結果，CAMP／cGMP比はST下降群で低CGMP値に関しては障害度Ⅵ1，ⅦⅠ群でも高値値となった．因みに，ST下降は一般に疾患の進傾向がみられた．

展とともにその頻度を増すものである．一方．
ー181−

表2

BehaviorofserumenZymeS＆Cyclicnucleotidescorrespondtodysfunction
gradingcriteriaoftheMinistryofHealth，JapaninlO9patientswith
Duchennemusculardystrophy（DMD）

L abo ・
a tO ry
ite m sAgen．

S ubJ∝t
C o n t ro Is

80
4

Ⅰ

Ⅱ
Ul
ぎ

Ⅳ

■
て
qI
b

v

38

Ⅵ

17
Ⅶ

69 2 ．
8■■■11 ．
6 ■◆■62 1 ．
0●●●1 8 ．
3
± 510 ．
0 ±3．
5

8 ．
3

12 ．
6

15 ．
3

Ⅶ

17 ．
2

（5 ．
5 ％）± 2 ．3

T o ta l

109＊＊＊

Pく0．001＊＊＊

表3

1 8 ．0（15 ．
6 ％）± 2 ．
96±4．
5 ± 1．
7

14 ．
5

（
34 ．
9 96 ）± 4 ．
4
ヽ
l−
∽
＞ヽ
凸

元う

± 18 ．
5± 10 ．
6 ± 1．
0

8 ．
0

2．
7

14 3 ．
7

43．
8

（
35．
8 ％） ± 3 ．
3
．
萎
◆
gJ

P V P −CyC 此 ∩血 ∝山由S± 4 ．15（2 ．
7 ％） ± 1 ．
39

LD H

24 ．
2

（1 ．
8 ％）± 03

A ld J as e

CAM P
CG M P
笛
mU ′
￣
爪
の （
mU ・
m t） （mU ′′n ）（（y r ） （叩d M ） （p Td H 鵬）

6（3 ．
7 ％） ± 5 ．
2

C PK± 4 63 ．
8 i± 2 ．
2

P R P −Cy cl■
C ru C l∝心血S
d M P
CG M PCA M P（叩d 鵬） （p Td rnl） 詔 和

5 ．
1

2 3 ．7

■
4 ．
3

5．
9

±1．
7

±5 ．
1

±1．
5

± 1．
6

6．
4 ■

2 ．
9■

23 ．
4

5 ．7

4．
2

± 1．
1

±0．
3

：
±4 ・
2

±0．
5

±0 ．
8

4．
4

1．
2封．
5… 2 5 ．
7事■■il・
胤 0… ・
23．
48．
8 ■■■ 2 ．
8

± 157 ．
7 ±7．
0

！
32 ．
5 ● 8 ．6 ■■■ 3 ．
8

± 10
0 ．
4 ±4．
3

±2 ．
8

±0．
4

± 12 ．
0 ±2．
8

±0 ．
2

L ‖0．
0… 16 ．
7■
●● 1．
0相．
0… ■
21．
6

7．
5…

2 ．9 ■⊇
32 ．
2■■ 6 ．2 ■5．
28
± 3 36 ．
5 ±6．

± 1 ．0± 7 ．8± 0 ．1 ！

！
± 150 ．
7 ±2．
0

±0．
8

±0 ．
9

17 ．
3…
795 ．
1暮
事
■10 ．
1■
■
■ 670 ．
8◆●■】

6．
3 … ■ 3 ．0 ■…

21 ．
2 ＊ 5 ．1 ■4．
6

± 3 23 ．
4 ±5．
6

±2 ．
0

±6 ．
3

・
一
± 1．
7

封5 ．
8

± 2 29 ．
4 ±4 ．
4

暮6 ．
1 ＊■＊ 4 97 ．
9■事
事18 ．
4■

± 2 74 ．
8 ±3 ．
1± 150 ．
5 ±2．
8

±1．
0

±1．
9

6」
9 ■■＊ 2 ．9 ■●■ 2 3 ．
8

5 ．7 … ■ 4 ．
8

±2．
9

±2 ．
4

±0 ．
8

±6．
0

± 2 ．1

2 96 ．
9＊◆■3 ．9 ＊＊ 3 37 ．
0＊■■ 1 9 ．1

8．
7 ＊■＊ 2 ．5 ＊＊＊ 2 6 ．
4

7．
7 ■■書 3 ．
7

± 2 6．
6 ±2 ．
3± 78 ．
4 ±4 ．
1

±4 ．
0

±3．
0

170 ．
2＊■
■2 ．5

306 ．
5■
■■18 ．08．
2 ■■◆ 3 ．6

± 37 ．
0 ± 1．
1± 27 ．
4 ±4 ．
52 ．
5 ■■＊＝
8．
6 ＊■＊■
2 4 ．18±4 ．
0±1．
0 l± 8 ．

±0．
8

卜
±8 ．
0

±6．
0

± 1．
3

± 1．
5

14 ．
5

0 9．
0■
■■7 ．
8 ■＊＊ 5 5 ．
0■■
■18 ．
3■
綿

7 ．1 ■■■ 2 ．
8 ＊＊■ 2 3 ．7

6．
0 ■＊＊ 4 ．5 ＊＊＊± 4 ．3± 366 ．
5 ±5 ．
7

±3 ．
0

±2．
6

± 25 1 ．
3 ±3 ．
8

±0．
9

±7 ．
0

±1．
8

PVP＝画匝ralvenouspasrTLa

Pく0．01（vs・COntJ・OJs）PRP＝Plate．etrichpZasrna
Pく0．05Behaviorofserumenzymes＆Cyclicnucleotidescorrespondtochestandspinal
COlumndeformitygradingsinlO9patientswithDuchennemusculardystrophy（DMD）

＼ ＼＼で

慧

乱 b摩 b＼C o n tro Is

払
⊂
「⊃
q
b
＞
ヽ
蓋
名
【
≡
＝
I
8
雪
g
の
．
●
J
岩

（
−）

（
＋）

（
≠ ）

（
≠ ）

s u b t o ta l

T otal

A ge
∩．

80
57

24 ．
2

43 ．
8

± 4 ．1
j2 ．
7

±1 ．
0
± 10 ．
6 ：

14 ．
4

（
15 ．
6 ％）± 4 ．1
22

A l弱

LD H

P V F cyc llC r d ∝心血s

cA M P
cGM P
cA M Pm U／
爪の （m U ／爪 ）（
mu ／
m ）（
（
y r） （pm J ／m ） i惑 わ
F 血／
鵬）（

（
52 ．
3 ％）± 4 ．
0
17

C P K

17 ．
6

2 ．7

143 ．
7

20 ．
3

± 18 ．
5 ±4．
58＊■ 18 ．
3■
暮
7 68 ．
4■■ 10 ．
2＊■● 随8 ．
± 3 76 ．
0 ±6．
4± 27 3 ．
2 ± 4 ．1

弱4 ．
6■
暮7 ．
5 日 ＊5 18 ．
6書■ 1 8 ．
4
± 246 ．
3 ±2．
8± 114 ．
5 ± 4 ．1

45 3 ．
3■■4 ．
7 ＊＊■4 15 ．
2＊■ 18 ．
1■

PR P −Cy CllC 札にl∝心血scA M P
cG M P
cA M P
（
F鵬 ／
巾の （
F 血／
山） ← ●

4．
4

5．
1

23 ．
7

4．
3

5．
9

±1．
7

±1．
7

± 5 ．1

± 1．
5

± 1．
6

6．
8 ■■■ 2 ．
9 ＊■■ 2 3 ．
5
±2．
7

±0 ．
9

±7 ．
5

8 ．1 ＊＊＊ 2 ．
5 ■＊＊ 2 3 ．7
±3 ．
3

±0 ．
8

±6 ．
3

6．
8 ＊＊＊ 2 ．
9 ＊＊＊ 2 3 ．2
±0 ．
8

±6．
3

4
±・
260 ．
8 ±3．

± 157 ．
8 ±3 ．
4

±2 ．
7

17 ．
4

5■
23 1 ．
7■
■ 3．

339 ．
6■
■ 1 8 ．3

7 ■♯＊ 2 4 ．
7 ．
7 ■＊＊ 2 ．
9（
11 ．
9 ％）± 3 ．
2

± 1朗 ．
8 ±1．
8

± 99．
0

±4．
0

（
20 ．
2 ％）± 3 ．
0
13

52

16 ．
5

（
47 ．
7 ％） ± 3 ．
7
10 9

43 4 ．
3…

± 3．
5

3＊
●
5．
3 ＊＊♯ 43 0 ．
1＊■ 18 ．

：±264 ．
0 ±3．
3

5± 146 ．
5 ±3．

±0．
9

±7．
4

7．
4 ＊＊＊ 2 ．
7 ＊＊■ 2 4 ．
2
±3．
2

±0．
8

±6 ．
8

14 ．
5

1 ＊＊＊ 2 ．
8 ＊＊＊ 2 3 ．7
8 ■＝ 550 ．
0■
事 18．
3事
■
■ 7．
60 9 ．
0＊＊ 7．

± 4 13± 36 6 ．
5 ±5．
7± 25 1 ．
3 ±3．
8＊＊＊ Pく0．001
PVP＝匹ri匝alvm plaSJa＊＊
Pく0．01（vS．COnひds）PRP＝Plabtet ridlPlaSl渦＊Pく0．05−182一± 3 ．0

±0 ．
9

±7 ．
0

5．
7 ■＊＊ 4 ．
6 ＊＊■
±2 ．
4

±1．
7

6 ．8 ■＊＊ 3 ．8 ■■■
±2．
6

±1．
3

5 ．
8 ■＊＊ 4 ．5 ＊■
±2．
2

±2．
1

6．
5 ■＊■ 4 ．
6＊
±3．
7

±2 ．
3

6．
2 ＊＝ 4 ．6 ＊＊
±2．
8

±3．
1

6 ．
0 ■■■ 4 ．
5 ＊＊♯
±2．
6

± 1．
8

表4

CorrelationsbetweenECGfindingsandlaboratoryfindingsin109patients
withDuchennemusculardystrophy（DMD）

L ah ：■■
d tOry ・
te m S

A g e

C P K

A ld がa s e

L D H

n．
E CG

m U ／
′
爪β） （m U ／爪 ） （m U ／mry r） （

柚か騨

●6 ．
㌢ ■＊

讐 空 軍 t iれ

★1th −
lth0 1人
O T Fd 叩 佃■b ta lQ
鴨1 4 ．137（3 3 ．
9 ％）±3 ．
6

w a vesV ，≧ 1 ・0

鴨 −V ，≧ 1 ．
5± 1 ．0±18 ．
5

6 7 2 ．2 … ■ 9 ．
0 ■■■56 6 ．
9 ■± 3 7 6 ．3
± 7 ．2± 2 36 ．
8

1 7 ． ■■

6 ．
7 ◆◆■

± 0 ．
9
2 ．9 ●■■± 4 ．2

± 0 ．
9

14 ．
5
6 0 9 ．0 ＝ ● 7 ．
8 ■■■5 50 ．
0 ●●● 1 8 ．
3 ■◆●± 4 ．3± 3 6 6 ．5
± 5 ．7± 2 51 ．
3± 3 ．
8

7 ．1… ■± 3 ．
0

2 ．8 ■■●
± 0 ．
9

23 ．
7

7 ．
㌢ ●●

2 ．8 ■■●

23 ．
9

31
1 3 ．1
（
2 8 ．
4 ％）
±5 ．
3

6 6 9 ．5 ＝ ■ 8 ．
3

79
14 ．
2
（
7 2 ．5 ％ ）±4 ．
3

6 2 2 ．6 ●■＊ 8 ．
0 ■…

56

14 ．
3
±4 ．
3

± 409 ．
2

± 378 ．
4■■

6 10 ．
5 ■■● 1 8 ．
3■± 4 ．857 5 ．
2 ■＝± 5 ．861 1．
9 …■7 ．
6 ■■■± 3 5 8 ．3

± 3 ．
4
18 ．
0 ◆◆■◆± 2 68 ．
0

± 3 ．
6

56 8 ．
7 ■暮■ 1 7 ．
7r …

± 4 ．7565 ．
9 ■■■ 7 ．
㌢ ■■± 396 ．
2

± 2 8 4 ．1

± 2 7 5 ．1

± 3 ．
6

50 4 ．
5 ■暮■ 1 8 ．
6

＝
ヒ4 ．5

± 2 54 ．1●●pく0．01± 3 ．0
7 ．
0日 ■
± 2 ．
4
7 ．
0日 ■
± 2 ．
7
7 ．
2 ■■●

± 3 ．1± 2 ．1± 0 ．
7
2 ．6 ●H± 0 ．
7

事4 ．6 日 ● 3 5 2 ．
0± 1 ．6
「 芸

6 ．
0t H

± 1 ．34 ．
5 ■＝± 2 ．66 ．
0 ■書●± 7 ．3± 1 ．84 ．
4 H 事± 2 ．5± 1 ．4

6 、
0 ■■■
4 ．
3 ■■◆
2 3 ．5：±6 ．
8± 2 ．3± 1 ．5
2 3 ，5

6 、
0 ◆●■

± 6 ．
9
2 4 ．5± 0 ．7

4 ．3 日 ■

± 2 ．
5

± 1 ．
3

6 ．2 ■＝

4 ．4 ◆■■
± 1 ．
9
± 1 ．
9

± 7 ．
5

（VS・Cmtrds）PVP＝匹r叶紆alvenMSS

ねsma

PRP＝囲atelet r■Ch plasnu

CorrelationsbetweenplasmacGMPlevelsandserumCPKlevelsin17
patientswithDuchennemusculardystrophy（DMD）−DysfunctiongradingcriteriaⅥloftheMinistryofHealth，Japan．−

10．0

20．0（pmよ′′■t）

戸ayⅦd；MP

10．0

20．0（叩d′′山）

戸aSma。GMP

一183−

±

8 1 ．
9

．2 3 1 5 ．7
± 13 5 ．
2

上 3 ．7 ■＝± 3 ．2± 7 ．0

± 0 ．
7
2 ．
7 ■●＋

じ7 ．
3■

± 6 ．
7

± 0 ．
8

2 ．7 ■叫．5

32 5 ．
0± 1 ．6± 12 5 ．
0± 7 ．423 ．
7

2 ．7 ◆■暮

5 ．
9

23 ．
4
■！5 ±
．5 ●■
± 7 ．
0
．8
「5 ・
掌 ；．7
23 ．
9

± 2 ．8●●◆pく0．00l

表5± 1 ．9± 1 ．
7
2 ．9 ＝ ◆

（
m g′
／
朗 ）

23 ．
7
4 ．
3
± 5 ．1
±

8 ．
4 ●■■

21
15 ．
9
（
1 9 ．3 ％ ）±3 ．
4

卜R B B B

1 0 ．6

F かi 喝 e n

± 3 ．
5

（
5 1 ．4 ％ ）
D

±

5 ．1

P R P −C y C lic n u c le c t id e s
C A M P
cG M P
cA M P
P
（
画
／
鵬 ） （
F 血 ／鵬 ） 詞

27
16 ．
9
5 5 1 ．8 ■●● 6 ．
9 印書
4 99 ．
6 ●■● 1 8 ．
6（2 4 ．
8 ％）± 4 ．5± 3 8 2 ．7
± 4 ．4± 2 12 ．
0
± 3 ．
6
10 9

D

：M

143 ．
7

45
1 3 ．45 9 1 ．4
■7 ．
5 ＝＊
5 70 ．
7 ＝ ■ 18 ．
6 ■N 0 0T F d 〝℃訳 0∩■
N o S T c叫 鴇
（4 1 ．
3 ％）± 4 ．2± 3 4 8 ．7
± 4 ．8± 280 ．
8
± 4 ．
3

S T ・
d e p re s s io n

D

2 ．7

4 ．
4
± 1 ．780

Q T
M

4 3 ．82 0 ．3± 4 ．
5

C on t r o IsD

2 4 ．2± 4 ．1P V P −C y C Iic n u c le o t id e s
A M PCcG M PC A M P
） （F Td ／
′
′
鵬 ） （
画
．
′
鵬 ） て 百両 P

3 2 2 ．7
± 10 3 ．
1
32 4 ．
5± 1 14 ．
5異常Q波，1R／Sv．の増大，不完全右脚ブロック

板解離の高頻度出現の一つの要因となっていは疾患の早期からしばしばみられ，DMD心る可能性も推測される．血小板トロンボステ筋における病理学的所見と対比してDMDに

ニンは骨格筋のアクトミオシンと非常に似かおける特徴的心電斑所見とされている．しかよった性質を有するとされ，microfilament

し，これら心電図所見を呈する症例におけるの形で血小板膜と近接して存在し，膜機能とPVP，PRP中のCyClicnucleotides濃度は，密接な関係があると推測されている7）．この膜

DMD一般と全く同じであった．

機能とCyClic nucleotidesの間にも密接な関係があり，CAMPは膜透過性を克進させるとD．血清退出酵素値との対比（表5）
血清CPK，aldolase，LDH総活性値およびされている．然るに近年，DMDの成因に関し

LDHアイソザイム分画との対比を行ったて・SyStemicmembranedefectの概念が注E］

が，CyClicnucleotidesとの間には，全体的にされているが，血小板における異常と同様のは有意な関係はみられなかった．機能障害度機構が骨格筋にも存在し，骨格筋障害発生の

各群間個別での対比を行うと，軽症群では相一因となっている可能性もあり，その意味で

関傾向を示すもこの群の症例数が少ないためも，採取が比較的簡単な血小板レベルにおけ有意差は得られなかった．ただ，障害度ⅥⅠ群る研究は有意義であり，更に詳細な研究が待でのみPVP−CGMP値と血清CPK，aldolase，

たれる．DMD筋においてはCAMP濃度の低

LDH各捻子舌性イ直との問に有意な正相関がみ下がみられ，このことがクレアチン尿やアミられたが，その意義，機序は不明で更に検討

ノ酸尿の原因の可能性があるとする報告8）や，を要す．

DMD筋ではadenylcyclase．phosphodieste−
rase双方の活性値の低下がみられ，他の筋変考性疾患に比し特徴的であるとする報告9）もあ案

る．これに対し，ジストロフィーラット，ジ

DMD患者において，PVP中のセロトニン（5−HT）浪度は正常域にあるが，血小板中ストロフィーチキンでは逆にこれら両者の活では異常低値を示す．この所見から，DMDで性値は冗進しているとする報告10）もあり，Ⅹ−は血小板凝集能に異常をきたし，一過性血栓1inkeddystrophy（DMD）と他の筋変性疾患

形成による筋肉の虚血性壊死をきたすとの考では，筋内の代謝面でなんらかの本質的な差

え3）もある．しかし，我々はDMDにおける血異が存在している可能性が推測される．一方，小板凝集能はむしろ低下しており，かつ，血DMD患者血柴についてCyClic nucleotides

小板解誰現象を高率に認めることを昭和50，を検討した鬼頭らはDMD症例においてP

51年度の報告4）において明らかにした．

VP−CAMP値は重症度の進行に伴い低値を一般に，CAMPはカルシウムを介して血小示し，PVP−CGMP値は軽症群で高値をとる

板凝集能を抑制し，CGMPは促進的に作用すと報告11）している．しかし，我々の成績では少るとされており5），また，血小板cGMP−phos−

なくも脊椎胸廓変形度とPVP中cyclicnucleo−

phodiesterase活性と凝集能との間に有意のtidesの濃度との問には特別の関係はみられず，

負の相関がみられるとの報告6）もある．我々のわずかに日常生活機能障害度ⅠⅠⅠ，ⅠⅤ群におい成績では患者PVP・CAMP値は対照群に比し有意に低下するも，PRPTCAMP値は両者間てCAMPが，III，IVならびにVII，ⅥJJ群においてCGMPが高値をとる傾向を示したに留まる．

に差がなかった．このPVPとPRP中のCyC−

細胞内ではCAMPは主に細胞膜部に，CGMP

lic nucleotides法度の差に関しては，血小板

は主に核内に局在するとされているが，ⅠⅠⅠ，の有無と関連して考えられるものであり，かIV群におけるPVP−CAMP，CGMP値の増加

つ，このことが患者血′J、板凝集能低下，血小は筋細胞中におけるCAMP，CGMPの血中へ
一184−

の遊出を示すものかもしれない．しかし，factorの検討．厚生省心身障害医療研究

DMDにおけるPVP中cyclic nucleotides「筋ジストロフィー症の病因の究明に関に関しては対照に比し平均的にCAMPは低する研究」昭和50，51年度沖中班研究報

く，CGMPは高い値を示していることは興味疾い．このようなCyClic nucleotidesのDMD

告書，209，1976：159，1977．
5）Mills，D．C．B．etal．：血小板受容体：血と正常対照群との差は自律神経系の関与によ

小板一生理と病態−（編集Gordon，J．

るものか，循環異常を反影するものか，肝なL．，監訳山中学，日本メディカルセンタ

どにおける代謝異常によるものか，あるいはDMDにおけるなんらかの本質的な異常と関連するものか色々の場合が想定され，今後の研究が必要である．

ー），143，1978．

6）山崎博男，他：脳卒中と血小板凝集能．
内科． 36：576，1975．
7）Berridge，M．J∴Theinteraction of
CyClic nucleotides and calciuminthe

結論

COntrOlofcellularactivity（Bloodpla・

1）健常対照群に比L DMD患者では，PVP−
CGMP値が高値を示した．

telets）．Advancesincyclicnucleotides
research，Raven Press，New York，

2）PVP−CAMP値は健常対照群に比L DMD
群で低値を示したが，PRP中では差をみなかった．

6：54，1975．

8）KHOKHLOV，A．P．et al．：Pathoge−
nesis ofcreatinuria andaminoaciduria
in neuromuscular disease．ZH．NEV−文献

ROPATOL．PSIKHIATR．IM．S．S．

1）Pickard，N．A．et al．：Systemic mem−

KORSAKOVA，77：1025，1977．

branedefectintheproximalmuscular9）Canal，N．et al．：The metabolism ofdystrophy．N．Engl．J．Med．，229：

CyClic−3′・5㌧adenosine

841，1978．

monophospha−te（CAMP）indiseasedmuscle．J．Neu・

2）Fukuda，I．，Mozai，T．etal．：Studieson

ro1．，208：259，1975．

hemorheological factorsin pseudohy−10）Horvath，B．Z．et al．：Adenyl cyclase

pertrophic muscular dystrophy．Bull．

inthepectoralmuscleofnormalchic−

Osaka Med．Sch．，24：23，1978．

kens and chickens with hereditary3）Murphy，D．L et al．：Serotonin andmuscular dystrophy．Enzyme，13：

plateletfunctioninDuchennemuscular

311，1972．

dystrophy．Arch．Neuro1．，28：239，

11）鬼頭昭三，他：筋疾患における血染中および＼筋内CyClicAMP，CyClicGMPに関

1973．

4）茂在敏司，他：Duchenne型進行性筋ジする研究．厚生省心身障害医療研究「筋ストロフィー症におけるHemorheol0−

ジストロフィー症の病因の究明に関する

gical factorについて：進行性筋ジスト研究」昭和50年度沖中班研究報告書，

ロフィー症におけるHemorheological

185，1976．

ー185−40）筋ジストロフィー症における筋膜脂質に関する研究筋ジストロフィー鶏の筋ガングリオシドについて

＊

宮

研究協力者

渥

美

哲

正

武

＊＊

至

前

沢

政

次

＊＊＊

有

賀

敏

夫

筋ジストロフィー症における筋線維崩壊の筋をホモゲナイズLAndoら6）の方法に従原因として膜異常の存在を示唆する数多くのって粗ガングリオシドを得て総ガングリオシ

研究がなされている1）．著者らは筋ジストロフ

ドを定量，薄層クロマトグラフィーを行ってィー症の患者および筋ジストロフィー鶏の赤

個々のガングリオシドに分離後，島津二波長

血球について，形態，膜脂質およびⅧ莫酵素のクロマトスキャナーを用いて定量した．

検討を行ない報告した2）3）．ガングリオシドは，膜の脂質二重層の外表面に存在する糖脂質で結果及び考案

あり，免疫学的抗原，コレラ，テタヌストキ

鶏筋ガングリオシド含量及びそのパターン

ンンなどの受容体として機能し，さらに膜表

は表1，および図1（2，3，4）に示す如

面の荷電にも重要な役割をはたしている．最くである．鶏カ∵／グリオンドについての報告

近ヒト及び動物（ネズミ，トリ）の筋ジスト

はまだ見あたらないが，対照鶏筋のガングリ

ロフィー症において，赤血球の電気泳動度が異オシド含量は，Puroら（1969）7）のラット，なる報告がある4）．シァル酸含有物質の異常がウサギ，ブタやLassagaら（1972）8）のウサギ

疑われるため筋ジストロフィー鶏およびフ○ロ

及びMaxら（1970）9）のネコ，ウサギ，ラッ

テアーゼ・インヒビター治療を行った筋ジス

トなどの筋ガングリオシド含量とほぼ同じでトロフィー鶏を用いて，筋組織ガングリオシ

ある．そのパターンは，GM3が最も多くそのドの分析を行ない，さらに治療による影響の

他にGD，，GMl，GTla，および未知成分Ⅹの検討を行なった．

計5ケのガ∵／グリオシドが主である．ヒト筋力∵／グ））オシド（図1の10）とはGM3，GD3
方は共通するがその他は異なっており，種によ

法

1． 材料

る差が認められる．Lassagaら（1972）8）のウ筋ジストロフィー鶏，プロテアーゼ・イン

サギや，Maxら（1970）9）のネコ，ウサギ，ラヒビター治療筋ジストロフィー鶏および対照

ットでは，hematosideが主なガ∵／グ））オシド

鶏の各々3，8，8羽の前胸筋を用いた5）．

であるとしていることと一致する．しかし2． ガングリオシドの分析

Maxら9）はネコ，ウサギ，ラットでは種が異なってもガングリオシドパターンは類似してい＊自治医科大学神経内科＊：＊自治医科大学第一内科ると報告しており，種の違いによる異同は今後さらに明らかにされるべき点であろう．

＊＊＊都立臨床医学総合研究所中間代謝部門−186−

表l Gangliosidesinchickmuscles
Controinontreatedtreateddystrophyn＝8

dystrophy
n＝8

m＝3

tLg／g protein tlg／g Protein

叩′9Protein

GH3

8．8

±

0．7

25．3

±

11．2

15．6

±

GD3

5．1±

0．4

12．1

±

5．3

10．6

±1．5

3．0

GM1

5・7

±

0．4

10．7

±

4．7

8．1

±

1．6

GTla

4．0

±

0．3

12．1

±

5．4

8．2

±

1．6

±

0．3

12．5

±

5．5

7．5

±

1．5

士

2．1

50．0

±

9．7

Ⅹ

3．5

℡ota1

27．2

72．7

±

32．2

ついでX，GTla，GD。，GMlの順に増加している．GMlの増加率は最も少ない（表1及び
図1の5，6，7）．
Maxらはウサギ脱神経筋においてGM。を主とするガングリオシドが増加し9），筋ジスト

肌・・㌦恥・︹現ロフィーラットの筋では逆にカ∵／グリオンドの減少を報告している10）．一方Albarracinら（1974）11）はビタミンE欠乏によるウサギの実験的ジストロフィー症の筋ガングリオシドが2倍に増加していると報告している．筋ガ
ングリオシドの増加の意味については，筋の膜成分の増加やガングリオシド代謝の変化などが想定される．今後分離筋膜でのガングリ
1

図1

2

二l

・4

Si

も

7

さ

91011

オシドの分析が必要である．

ガングリオシドの薄層クロマトグラフ

プロテアーゼ・インヒビター治療をした筋

1：脳 2，3，4：対照鶏筋 5，6，

ジストロフィー鶏の筋力∵／グリオシドの含量

7：筋ジストロフィー鶏筋 8，9，：プ
ロテアーゼ・インヒビター治療筋ジスト

は，未治療群よりは低い傾向にあったが対照に比し明らかに増加していた．ガングリオシ

ロフィー鶏筋10：ヒト筋11：ヒト培ドの増加パターンは未治療群と類似してい

養線維芽細胞．

た．筋ガングリオシドの増加は治療群で末治痺群より低い傾向にあったが，検定の結果，

筋ジストロフィー鶏の筋ガングリオシド含

有意差は認められなかった．今後治療の時期，量は，対照鶏に比し2．6倍と明らかに増加期間などを変えて検討してみることも必要とし，そのパターンではGM3の増加が著しく，考えられる．
−187−

文

献

tions of severalspecies．Anal Bioch−

1）Rowland，LP．：Pathogenesis of mus−em．89：437−450，1978．

7）Puro，K．，Maury，P．and Huttunen，J．

Culardystrophies．Arch．Neurol．33：
315−321，1976．

K．：Qualitative2）渥美哲至，宮武正，大林民典他：Duche−andquantitative

terns of gangliosides

nne型ジストロフィー症の赤血痕の形態

in

pat−●

extraneuraltissues．Biochim．Biophys．Acta

および生化学的研究．筋ジストロフィー

187：230−235，1969．

症の病因の究明に関する研究，沖中址，

8）Lassaga，F．E．，Ⅰ．Albarracin de Las−

昭和51年度報告書，173頁．

saga and Caputto，R．：Rabbit muscle

3）吉田充男，渥美哲至，吉武正他：筋ジス

gangliosides．J．Lipid Res．13：810−

チキン赤血球膜に関する研究．筋ジスト

815，1972．

ロフィー症の病因の究明に関する研究．

9）Max，S．R．，Nelson，P．G．andBrady，R．

沖中班，昭和52年度報告書，141頁．

0．：The effect of denervation on the4）Bosmann，H．B．，Gersten，D．M．，Grig−

compositionofmusclegangliosides．J．

gs，R．C．，et al．：Erythrocyte surface
membrane alterations．Arch．Neurol．

10）Max，S．R．and Brady，RO．：Altera・

Neurochem．17：1517−1520，1970．

33：135−138，1976．

tionofthegangliosidecompositionof5）杉田秀夫他：筋ジストロフィーチキンに

skeletal muscle

in

対するproteaseinhibitor（E−64）の効

dystrophy．Nature

233：55−56．1971．

果．本報告書， 45頁．

murine muscular11）Albarracin，Ⅰ．，Lassaga：F．E．andCapu・

6）Ando，S．，Chang，N．C．and Yu，R∴

tto，R．：Changes of gangliosides andHigh performance thin−layer chroma−

otherlipidsin skeletal muscle fromtography and densitometric determi−

rabbitswith experimental dystrophy．

nation of brain ganglioside composiT

J．Lipid Res．15：89−93，1974．

一188−41）組織肥満細胞セリンプロテアーゼのインヒビターについて

￣＊

真

田

幸

弘
＊

研究協力者

勝

沼

信

彦

野

田

隆

＊＊

遠

藤

文

夫

実験と材料

は じ め に

我々がラット骨格筋より抽出，結晶化した1）

キモスタナン及び水溶性キモスタチンは微

セリン性プロテアーゼが筋ジストロフィー症

生物化学研究所の青柳高明先生より提供されにおいて異常な活性上昇を示すことは，すでたものを使用した．ヘパリン，Compoundに報告した2）3）．このプロテアーゼが個々に分

48／80は各々和光純薬工業珠式会社，Si騨Tla

離精製した筋構成蛋白質の中で，ミオシン，

Chemical社製のものを使用した．本プロテトロポニン，トロポミオシンを比較的よく分

アーゼ活性測定はKatunuma9）らの方法に従離し4），さらにはnativeな筋原線経に対してった．酵素蛋白量はE主監。（280nm）＝10．2をも非常に高い分解能を有する5）ことから筋ジ用いた．ポリアクリルアミドディスク電気泳

ストロフィー症における異常な筋蛋白減少に

動は，DaviS10）の方法に従って行なった．

本酵素が関与しているのではないかと示唆し結果と考察てきた．最近本酵素の一次構造分析や免疫学的性質を検討した結果，このプロテアーゼが表1に本プロテアーゼに対する種々のイン組織肥満細胞由来の酵素である6）ことが判る

ヒビターをID5。値で示した．キモスタテンはと同時に螢光抗体法によっても筋細胞間質に水溶性も含めて強力なインヒビターであり，散在する月巴満細胞の顆粒中に強く活性が存在

また肥満細胞顆粒中に多量に含まれるヘパリすることが認められた7）．筋ジストロフィー症

ンも本酵素を阻害することがわかった．肥満における本酵素活性の上昇はBois8）がすでに細胞の脱顆粒因子の1つであるCompound

本症の骨格筋において肥満細胞が増加すると48／80は本酵素を全く阻害しなかった．ラッ

報告している事実と一致し，肥満細胞顆粒中

ト血清中にも強力なインヒビターが存在してに大量に存在するこのプロテアーゼの生理的おり，これを通常のポリアクリルアミドディ

意義を追求することは本症における筋蛋白減

スク電気泳動法で分離すると図1に示す様に

少機構の解明に役立つものであると考えられ少なくとも3成分のインヒビターが血清中にる．
本酵素の種々のインヒビターについてはは存在することがわかった．このうち第3のすでに報告9）されているが今回は更に本酵素

trypsinであると考えられた．

ピークはその移動度から判断して11），α1−anti−
水溶性キモスタテンおよびン＼パリンの本酵の血清中インヒビターを含めた新しいインヒ
ビターについて報告する．

素に対する反応阻害様式を分析した結果，両者共，酵素に不可逆的に結合して阻害をおこ事徳島大学医学部附属酵素研究施設酵素化学部門

すことが判った．

＊＊熊本大学医学部小児科−189−

表11nhibitorsoftheskeletalmuscle

聞達続投与したが，骨格筋中の本酵素活性のprotease

低下は認められなかった．これらの物質の阻H様式を考え合わせると恐らくこれらの物質

lNHIBITOR

ID50

は玩

NG／〃G PROTEASEためにその効果が現われないと考えられた．
Compound48／80投与の効果については勝沼

CHYMOSTATIN
INSOLUBLEせl．2

SOLUBLE鷺

9．6

ら7）が報告している．
このプロテアーゼが組織内での蛋白分解過的．0

HEPAR川j正犯においてその細胞膜透過性が悪い

程にどの様に関与しているかを11るために予yLhJG PROTEASE

備的な実験を行なったが現在のところ肥満細RAT SERUM

20．0

胞顆粒に含まれるヘパリンやこのプロテアー

COMPOUND q8／80

NO EFFECT

ゼの様な高分子物質が脱顆粒を起こした後にどの様な移行をし，どの場所でその生理的反応を行なうのか全く不明である．本プロテア

IN MATER

ーゼについてはもし脱頼粒後直ちに血中に移行するとすれば血中に大量に存在するこのプ
ロテアーゼインヒビターと結合して不活性化
されるであろう．しかしながら脱顆粒後血中に移行以前にその周辺組織で本酵素が作用するとすれば本酵素が容易にnativeな筋原線経を分解する作用を有している5）ことから，筋蛋白分解に関与する可能性も充分考えられる．またその時は同時に顆粒中に大量に含まれる本酵素のインヒビター，ヘパリンとの相互関係も重要な意味を持ってくるであろうと
1

10
20
NuMBER OF GEL SLICES

考えている．

50

文

図1Inhibitoryeffectsofratserumproteins

献1）Sanada，Y．，Yasogawa，N．and Katu−

afterpolyacrylamide gel disc electro−
phoresisnuma，N∴Crystallizationand amino

ラット血清50〟1をポリアクリルアミドacid composition of a serine protease

ディスク電気泳動を行った後にゲルを均from rat skeletal muscle．Biochem．

等に分離し，水冷の酵素反応緩衝液に4Biophys．Res．Commun．82：108，

時間放置した後に各々の分画の酵素反応阻害度を測定した．

1978．

2）Sanada，Y．，Yasogawa，N．and Katu−
numa，N．：Serine proteasein micewith hereditary muscular dystrophy．

次にこれらのインヒビターを直接ラットに

J．Biochem．83：27，1978．

滋0でこのプロテアーゼ活性を投与してみzZ
抑制しようと試みた．水溶性キモスタテンに

3）Katunuma，N．，Yasogawa，N．，Kito，K．，

ついては，0．1mg〜2．0mg／100g体重当り，Sanada，Y．，Kawai，H．and Miyoshi，

ヘパリンは10mg／100g体重当り，3〜7日

K．：Abnormal expression of a serine

一190一proteaseinhuman dystrophic muscle．

COnCentrationin muscle andliver of

J．Biochem．83：625，1978．

dystrophic mice．Amer．J．Physiol．

4）Yasogawa，N．，Sanada，Y．and Katu−

206：338，1964．

numa，N．：Susceptibilities of various9）Katunuma，N．，Kominami，E．，Koba−

myofibrillar proteins to muscle serine

yashi，K．，Banno．Y．，Suzuki，K．，Chi−protease．J．Biochem．83：1355，

Chibu，K．，Hamaguchi，Y．and Katu−

1978．

numa，T．：Studiesonnewintracellular5）Sanada，Y．，Yasogawa，N．and Katu−

proteasesin various organs of rat（1）numa，N．：Effect ofa serine protease

Purification and comparison of their

Onisolated myofibrils．J．Biochem．

properties・Eur．J．Biochem．52：37，

85：481．1979．

1975．

6）Woodbury，R．G．，Everitt，M．，Sanada，

10）Davis，B・J．：DiscelectrophoresisII，Y．，Katunuma，N．，Lagunoff，D．and

Method and application to human se−

Neurath，H∴Amajorserineproteaserum prOteins．Ann．N．Y．Acad．Sci．

inratskeletalmuscle：Evidenceforits

121：404，1964．

mastcellorigin．Proc．Natl．Acad．Sci．
USA．75：5311，1978．
7）勝沼信彦，真田幸弘，野田11）TraviS，H．，Johnson，D．and Pannell，R∴Properties of human q．−antitryp−隆，遠藤文

Sin・ProteinaseInhibitor，Eds．Fritz，H．，

夫：昭和53年度厚生省神経疾患研究委

Tschesche，H．，Greene，LJ．and Tru−

託費「筋ジストロフィー症の基礎的研究」

SCheit，E．，p．31739，Springer−Verlag，

班会議

Berlin，1974．

8）Bois，P．：Mast cells and histamineー191−42）血清Mbを指標とする筋の筋弛緩剤に対する人ミオパテ一筋感受性．Isolatedarmmetl10d
による事前チュックの試み

＊正＊正

広

末 林

藤 井 好

＊彰＊三＊夫

＊臣

近 今 三

幸 和

尚

井

＊勝＊徳＊稔

光

朝 本 垣

岩 虫 稲

研究協力者

私達は全身麻酔時のSuccinylcholinechlo−が独自に改変応用したものである（図1）．すride（SCC）が筋に中毒性に作用し，血中のミ

なわち，手背と前腕内側の静脈に注射針を刺

オグロビン（Mb）が上昇することを別に発表

し入れておき，上腕をマンシェットで水銀柱してきた1）．また，SCCを中心とする筋弛緩剤

200mmHg（小児の場合は160mmHg）までの筋中毒作用に対する感受性が筋の発達分化

上げ駆血する．次いで手背静脈より生理的食と関連があることを述べた7）．

塩水（以下生食）で希釈し0．025−0．5mg／ml

本文では，SCCなどによると考えられる悪としたSCC溶液20ml（小児では体重に応じ性高熱などを麻酔施行前にチェックするためて減量する）を静注し，5分以後前腕内側よの私達の試みについて述べる．isolated arm

り2分30秒毎に15分まで，および駐血帯解

methodを用いて，血清Mbを指標とするも除後に採血（2−4ml）し，血中Mbを測定のであるが，その方法と，それによる健常人，した．症例によってはSCC静注5分後に駆ならびに筋ジストロフィー症（PMD）の成績

血圧を最高血圧−10mmHgに下げ，前腕のについて述べる．

血流かわずかに生じるように工夫した．
このテストを健常人ならびにDMD例，
対象と方法

次いでGOF（G：笑気，0：酸素，F：フロ

対象は健常成人VOlunteer（7例），Duchen−ーセン）全身麻酔下の手術麻酔例で試みた・

ne型PMD（DMD）症例（9例）および手術
麻酔例（6例）などである．
血中Mbの測定は当村にて開発2）したラジ
オイムノアッセイ（二抗体法）によった．感度は1ng／ml，血清の正常値は30ng／ml以下である．
SCCに対する感受性テストはFeldman
ら3），岩月ら4）6）のisolatedarmmethodを私達＊徳島大学医学部第一内科

図1Isolatedarmmethod＊＊徳島大学医学部麻酔科

ー192−

成

績

健常成人（volunteer）とDMDについての感受性テスト（前述）の成績を述べる．SCCの静注量は，体重50kgの人において0．5−5．0mg／前腕とした．体重の差異によって

1）

無麻酔でのisolated arm method

健常成人（7例）では，MbはSCC溶液静注5分後一時下降し，15分および駆血帯解除

血清Mb量︵叩／血︶この量を増減したが，以下それぞれ50kg体
重当量の表現法を用いる．

後で」二昇の傾向を示した．しかし，SCC静注
前値にくらべ明らかな上昇を示さなかった．
図2に各種静注量の成績を示した．
前

図3

5

駆
血
開
始

10

15

駆 時間
血
（分）
解一、
除全
機関

血蒲Mbt
g
︵
／
n
両︶

Duchenne型筋ジストロフィー症におけるSCC投与後の血清ミオグロビン量の変動−Isolated armmethod−

た．しかし，生食のみ静注した対照例（2例）
でもSCC静注例に近い上昇（300−350ng／ml）がみられた．図3にDMDの1．0mg当量／
前腕の成績を示す．
2）GOF麻酔下でのisolatedarmmethod
SCC静注のみでは健常成人ならびにDMD
前

駆

喜
図2

5

10

日5

董毒

駈

時間

でMbの明らかな上昇がみられなかったので，このテストをGOF麻酔下の成人手術麻酔例で行った．

分

健常成人におけるSCC投与後の血清ミ6例を検索したが，うち4例はSCC静注

オグロビン量の変動−Isolated armmethod−

後5分，血圧を少し下げた後より上昇し始め，最高値に達する時間は7分30秒〜17分で検索例によってやや異なるが，値は52ng／ml〜210ng／mlと明らかな上昇を示し，駆血帯DMD（7例）では血清Mbは，SCC（0．5

解除後（全開）急速に前借近くに復した（図〜5．0mg当量／前腕）静注例で溶液静注後54）．他の2例も上昇の傾向を示したが，正常分で一時下降し，その後上昇し，15分ないし値（30ng／ml）を越える上昇はみられなかっ

駆血帯解除後ではSCC静注前値（100−270
ng／ml）に較べ上昇（300〜500ng／ml）を示し

た．

ー193−

健常成人でSCCの静注量を種々変えて本
感受性テストを行ったが血清Mbの上昇は捉えられなかった．
また，さきに私達は，女性DMDの手術麻酔時にGOF＋SCCによって血清Mbの著し
い上昇をみており5），DMD筋はSCCに感受性が高いと考えているところである．このテストをDMD症例でも試み，健常成人より高い血清Mb値をえた．しかし，その程度は特異的でなく，GOFを併用しての成績を待って結論をえたい．
このように健常成人，DMDともに単にS
CCのみの静注では血清Mbの上昇が認めら
15

S 駆
C 血
C ll
前 輪

駆 時間
血（分）

れなかったのでFluothaneを併用しないと≡毒

Mbは上昇しないのではないかと考え，GOF
麻酔下の手術麻酔例たっいてこのテストを試

図4

手術麻酔例におけるSCC前腕投与後の血清ミオグロビン量の変動みた．そしてこの場合には成績に示したようにMbの明らかな上昇を認めた．すなわち，−Isolated armmethod−

このisolatedarmmethodによって，SCC単独
静注では血清Mbは上昇せず，GOFを併用することによってはじめてMbが上昇すると考察

いう新しい事実を明らかにした．これはGOF
麻酔によってSCCの筋中毒作用が増強され私達は血清Mbの上昇を指標として手術ることを示すものである．

麻酔時SCCが筋に中毒性に作用することをすでに述べたようにSCC投与の小児手術

別に発表してきた1）．またSCCによる血清Mbの上昇が年齢によって異なり，小児では麻酔例では成人例にくらべ血清Mbが高く高く（200−2000ng／ml），成人では低く（100上昇する．従って本感受性テストでも同じく，

ng／ml前後），筋の発達分化と関連があると小児例の方がMb値は高くなるはずであり，の考えをすでに述べてきた7）．

目下，小児例でもGOF麻酔下の手術麻酔例
で方法に工夫を加えながら本テストを試行しSCCなどによって惹起されると考えられつつある．結果は別に発表したい．

る手術麻酔時の悪性高熱および亜悪性高熱（私達の仮称で手術麻酔時に筋硬直，発熱，

現在試行中のSCCに対する感受性テスト

あるいは着色尿をきたし，発熱の程度が悪性は現在まだ，開発途上のものであり今後さら

高熱にくらべ軽く，予後のよいもの）ではとに方法を改良し，悪性高熱や亜悪性高熱の感

もに血清Mbの著しい高値が見られたので受性テストを完成させ，併せて，他のミオパ血清Mbを指標としてこれらの疾患を麻酔

テ一筋のSCCに対する感受性を検索したい

前に捉えるため筋のSCCに対する感受性テと考えている．

ストを試みている．方法は前述したごとく，結isolatedarmmethodを応用し，SCCに対す論

1．悪性高熱や亜悪性高熱を麻酔前に捉える筋の感受性を血清Mbの上昇によって捉るため試みている血清Mbを指標としたSCえるものである．
一194−

Cその他に対する感受性テスト法を述べ，本Medリ

92：341−352．1978．

3）Feldman，S．A．and Tyrrell，M．F．：A法が使用にたえることを示した．
2．億常人ならびにDMDで本テストを用

newtheoryoftheterminationofaction

いてSCCに対する感受性を検索したがSCC

Of the muscle relaxants．Proc．Roy．

のみでは特異的な血清Mbの上昇は認めな

Soc．Med．，63：692−695，1970．

かった．しかし，手術時のGOF全身麻酔例で4）岩月賢一，橋本保彦，鴫

武：新しい筋本テストによるSCCの感受性を検したとこ

弛緩薬AH8165について．麻酔ろ，はじめてMbの上昇を認めた．このこと

342−344，1977．

26：5）三好和夫，川井尚臣，日下香苗，八木田によってGOFがSCCの筋中毒作用を増強

正聖，平良 章，福永恵一，高田泰治，させることが明らかになった．

仁木伸二：Duchenne型筋ジストロフィ

文ー症の女性発病者とその胎児．筋ジスト

献1）三好和夫，川井尚臣，岩朝 勝，近藤 彰，

ロフィー症の病因の究明に関する研究．

斉藤隆雄，稲垣 稔：血清ミオグロビン

厚生省沖中姓昭和52年度研究報告書，の上昇を指標とする薬剤中毒性ミオパテ

p．222−226，1978．

・−．臨床神経，18：835−836，1978．
2）Miyoshi，K

6）岩月賢一：私信
7）三好和夫，川井尚巨，岩朝 勝，近藤 彰，

Saito，S．，Kawai，H．，KonT

Yagita，M．：Radioimmunoassay for

末広 正，虫本光徳，今井幸三，林 正，
稲垣 稔：血清Mbを指標とする筋弛

humanmyoglobin：methodsand resu−

緩剤感受性．文部省特定研究「難病」班，

ltsin patientswith skeletalmuscle or

難病の発症機構に関する基礎的研究．昭myocardial disorders．J．Lab．Clin．

和53年度研究業績，p．211−214，1979．

do，A．，Iwasa，M．，Hayashi，T．and−195−43）ネマリンミオパチーとその類縁疾患に認めた
トリプトファン代謝異常
＊聖

正

田

木
八

＊人＊苗

下

和 香

山

日

好

亀

間

三

＊仁＊央＊夫

平

詫

晴 通 和

中

＊章＊仲＊臣

川

康 尚

土

良 肥 井

平

研究協力者

著者らは，さきに，ネマリンミオバナーの後の各24時間尿中のkynurenicacid（KA），

病者と一見健常な母親にトリプトファン代謝

xanthurenicacid（ⅩA）をSatoh，Price法

異常所見のあることを見出し，一部発表しで測定した．同時にkynurenineなど数種のた1）2）．その後，症例を増やしてこのことを確

中間代謝産物を併せて測定した．また，ⅩAの認するとともに，本症と芙頁緑のミオバナーに高い例では，ビタミンB6欠乏の影響を除去すもそれぞれ若干異なる同様代謝異常をみとめるため，予めpyridoxalphosphate（PALP）

た3）．本文は，本症ならびに≡揖緑のミオバナーを授与した．

をトリプトファン代謝のキヌレニン経路の各種酵素の欠乏ないし欠損症とみなす立場での成績

1．ネマリンミオパテーおよび類縁のミオパ

べる．

テーの症例

対象と方法

1） ネマリンミオパテ一

対象症例は，臨床所見と筋生検組織像より本症4家系の4病者（S．K．15歳F，0．T．9

診断づけたネマリンミオバナーの4家系（自歳M，M．T．29歳M，I．K．28歳M）は，幼少

験2，木下ら経験1，井形ら経験1）および

時より歩行障害あり，全身性の筋萎縮とdys−

先天性筋線維タイプ不釣合1家系，ビタミンB6依存性ミオバナーと診断した1家系，Ha−morphicface，高口蓋，尖足，凹足などの骨

rtnup類似症1家系の病者とそれぞれの一見

萎縮，タイプⅠ線維優性で，多数の筋線維中格系の異常を認め，生検筋組織で，小〜中群

健常な両親およびその他の家系月である．疾にネマリンロッドを認めた．それぞれの母は患対照としては，筋ジストロフィー症，神経

一見健常（1例に高口蓋あり）であった．父

原性筋萎縮症をしらべた．

は健常である．
2）先天性筋線維タイプ不釣合

トリプトファン代謝の検索方法

症例Sig．T．3歳M，生下時より頁oppyin−

L−トリプトファン100mg／kg（但し，体fantで処女歩行1歳11ケ月，その後も登は重50kg以上は5g）を経口負荷し，その前とん性起立，動揺性歩行を呈したが非進行性で＊徳島大学医学部第一内科

縮が目立ち，仰臥位での頭部挙上不能で，dys−

あった．全身の筋萎縮とくに四肢近位筋に萎ー196−morphicface，高口蓋を認めた．生検筋組織
では，小群萎縮，タイプⅠ線経の軽度の萎縮

負荷後のKA，ⅩA排出量は，Sak．家病者（15歳F）では，KA17．1，ⅩA1．3とKAのとタイプⅠⅠ線経の著明な肥大がみられた．し著明な増加を認め，XA正常であった．一見健

かし，ネマリンロッドはみられなかった．

常なその母（40歳F）もKA13．9，ⅩA1．6と本症例では父も病者であり，同様の臨床所
見と筋組織所見がみられた．

KAの排出増加を認めた．父はKA1．8，XA

3）ビタミンB6依存性ミオバナー（著者ら）

家系も同様成績であり，0家病者（9歳M），

症例Sir．，H．56歳M，幼少時より全身性に

0，ⅩA2．0とやはり病者と母にKAの排出増

やせて細長い体形であったが，筋力低下には加を認め，父は正常値であった．M家では，気づかなかった．52歳より，両下肢の筋こわ病者（29歳M）KAl1．5，XA2．5，母KA8．

0．9とともに正常値であった（表1）．他の3KA8，0．XAl．9，一見健常なその母KAlO．

ばり感と歩行障害を来たした．全身性に筋萎

9，XA1．3とその母KA12．3，ⅩA1．2と病縮があり，仰臥位での頭部挙上不能．顔面細者，母とその母にKAの排出増加を認めた．

長く高口蓋の傾向を認めた．生検筋組織では，Ⅰ家でも病者とその母にKAの排出増加（8．

タイプⅠⅠ線経の萎縮があり，しかし，ネマリ

7，12．5）がみられた．

ンロッドは認めなかった．

すなわち，本症病者および一見健常なその

4）Hartnup類似症（著者ら仮称）

母にトリプトファン負荷後，KAの尿中異常症例l Sin．，T．22歳M（弟例）と症例2
Sin．，M．25歳M（兄例）．

排出増加が認められた．
なお，その他の筋疾患Duchenne type of

両親は近親婚で一見健常である．兄弟両例

musculardystrophy，Charcot−Marie−Tooth

とも10歳頃より失調性歩行と知能低下に気病，Spinalprogressivemuscularatrophyでづかれ，以後，増悪，寛解がみられ，小脳失は，負荷前借はKA，XAとも正常範囲であ調，知能低下（IQ弟38，兄39）と四肢筋萎縮，り，負荷後もDMDKA2．6，XA1．0，CMT

側攣症，尖足があり，インジカン尿（＋），ア
ミノ酸の尿中排出増加は認めなかった（中性KA3．4，XA2．2，SPMAKA2．7，ⅩA1．3といずれも正常値であった．

アミノ酸の排出はむしろ減少していた）．俳腹

3）先天性筋線推タイ70不釣合筋生検組織では，いわゆる神経原性変化と筋Sig．家は，父‥百、子が本症の発症例であり，

原性変化が混在してみられた．ネマリンロッ

息子病者（3歳M）では，負荷後，KAlO．0，

ドは認めなかった．
2．ネマリンミオパテーおよび類縁のミオパ

ⅩA3．7とKAの著明な排出増加，ⅩAの軽度増加を認めた．このⅩAの増加はVB6投与

テ一におけるトリプトファン代謝（表1）によっても正常化しなかった．父病者もKA

1）健常対照におけるKA，ⅩA尿中排出9．3，ⅩA2．2と同様成績であった．息子病者の母は，KA5．3，XA1．6とほぼ正常値であっ量た．

健常人では，負荷前1日排出量はKA，ⅩA
ともに0．5JLmOles／kg／day以下であった．負荷後はKA，ⅩAとも排出が増加して，KA2．

4）ビタミンB6依存性ミオバナー（著者

0−5．0，XAo．7〜2．0であった．

Sir．家の病者（56歳M）はKAlO．7，ⅩA22．

ら）

2）ネマリンミオバナーにおけるKA，XA
尿中排出量

8とKAの排出増加とさらに著明なXAの排本症では，負荷前排出量はKA，ⅩAともには大量のVB6の投与により影響をうけ減少

出増加を認めた．このKA，XA，とくにXAした．病者の娘（一見健常）もKAl1．3，

正常範囲であった．
−197−

表1

ネマリンミオバナーと類縁ミオパテ一におけるキヌレン酸，キサン
ツレン酸尿中排出量（し一トリプトファン100mg／毎負荷）
年令性

キ ヌ レ ン酸

キサンツレン 酸

病 者

15

F

1 7 ．I

I．
3

母

4 0

F

13 ．
9

I．
6

父

4 3

M

1．
8

0 ．9

3

M

1 0 ．03 ．7

父 （病 者 ）

3 3

M

9 ．
3

2 ．2

母

3 0

F

5 ．
3

1 ．6

5 6

M

1 0 ．72 2 ．8症

例

ネ マ リン ミオ パ チー
S a k．
家

先 天 性 筋 根 絶 タ イ プ不 釣 合
S ig ．
家病者

ビタ ミン B 6 依 存 性 ミオパテー
S ir ．
家

病者

pALも 芸

投与

∫；：：〕

8 ．0
8 ．3

娘

2 8

F

l l ．3I 5 ．7

息子

3 0

M

3 ．5

1．
9

弟病 者

2 5

M

1．
0

0 ．
7

兄病者

2 2

M

0 ．1

0 ．1

父

5 1

M

0 ．
6

0 ．
4

母

5 0

F

0 ．1

0 ．
2

2 ．
0 −5 ．
00 ．
7 −2 ．
0

H a r tn up 類似症
S in ．
家

健

常

対

象

（〝mOlesメ〝′day）

ⅩA15．7と同様成績であった．息子（健常）考はKA3．5，XA1．9とともに正常値であった．

察

ネマリンミオノヾチーとその類縁のミオノヾチ

5）Hartnup類似症（著者ら仮称）

一に，それぞれ若干異なるトリプトファン代

Sin．家において，弟病者は負荷後KA1．0，

謝異常のあることを明らかにした．
トリプトファンのキヌレニン代謝経路を図ⅩAo．7，兄病者はKAo．1，ⅩA0，1と両例ともKA，ⅩAの排出が異常低値であった．ま1に示し，前述の各疾患をこの経路の酵素のた，両親（近親婚）は父KAo．6，ⅩAo．4，母欠損症とみなす立場から，それぞれに推定さ

KAo．1，XA0．2とともに異常低値であった・しれる障害部位を酵素に対応させて本図に書きかし，トリプトファンの吸収は正常であった・

込んである．
−198−

トリプトファン
一一一一トリプトファンビロラーゼ

フォルミル手ヌレニン

ヌレニンフォルムアミダーゼ

Hartnup類似症）
手ヌレ二ナーゼ
手ヌレン西妻（KA）

二十手又レニン（KYN） 一一†ェァントラ二ル出l

手ヌレニン・トランスアミナーゼl阜ヌレニン3−ヒドロキシラーゼ（ネマリンミオパテー）

（∨百6）

l
l

キサンツレン琶（XA）⊥

3−ヒドロキシ手ヌレニン（3H K）

手ヌしこナーゼ（V．B6）3−ヒドロキシアントラ二ル酸（3−日A）（ピタ三富豊津禦）T■ン′ソ

コンパウンドⅠ

コンパウンドⅡノ￣￣t

タイ等芸墓石合J

キノリン酸

図1トリプトファン代謝経路

ネマリンミオバナーにおけるトリプトファ
ン代謝異常の特徴は，トリプトファン負荷後上ではネマリンミオバナーを思わせたが，生検筋組織でTypeIfiber atrophyとType

尿中にKAの著しい排出増加を認めたこと

IIfiber hypertrophyを認め，nemaline rod

であり，さらに，本症病者のみならず一見健は発見出来なかった．本症のトリプトファン

常な母，さらにその母にも同様代謝異常を認

代謝は，ネマリンミオバナーと異なり，トリめたことである．著者らはこの代謝異常を考プトファン負荷後，KAの排出増加に加えて慮に入れて，本症の遺伝型をⅩ染色体優性とⅩAの排出増加を認めた．この機序として，3

考えた4）．本症におけるこのKAの排出増加−ハイドロキシアントラニル酸→コンノヾウン

の機序として，KAのみ増加し，ⅩAが正常でドⅠの反応を触媒する3−ハイドロキンアン

あることから，キヌレニン→3−ハイドロキ

トラニル酸オキンケサーゼないしそれ以下の障

ンキヌレニンの反応を触媒するキヌレニンー

害を考えた．なお，本症の遺伝型は父，息子が3−ハイドロキシラーゼ欠損症を考えた．

病者であることから常染色体優性と思われる．

先天性筋線維タイプ不釣合は，臨床所見のビタミンB6依存性ミオバナー（著者ら）は，
一199−

臨床的に一見ネマリンミオパテーとは異なる

XAの増加があり，これらとくにXAはVB6が，頭部挙上筋力低下や高口蓋などの顆似所の大量投与により低下した．一見健常な娘も見もある．本症では，トリプトファン負荷後，同様成績であった．4）Hartnup類似症（著者

KA，ⅩAとくにⅩAの著明な排出増加があら仮称）では，兄弟病者と近親婚の両親に，り，このXAはVB6の大量投与で影響をうけ

KA，ⅩA両者の異常低値を認めた．

低下した．本症はVB6酵素であるキヌレニナ
ーゼのVB6依存症と推定した．なお，遺伝型をキヌレニン経路の酵素異常とみる立場か

3．以上の成績より，これらのミオバナー
ら，つぎのごとく推定した．1）ネマリンミ

は不明である．
Hartnup類似症（著者ら仮称）の兄弟例は，

オバナーは，Ⅹ染色体優性，キヌレニンー3

主症状は小脳失調と知能低下であるが，下腿−ハイドロキシラーゼ欠損．2）先天性筋線維の筋萎縮と側攣症，尖足がある．臨床症状でタイプ不釣合は，常染色体優性，3−ハイド

類似のHartnup病とはアミノ酸尿がない点

ロキシアントラニル酸オキンゲナーゼないしで異なる．トリプトファン代謝は，負荷後，それ以下の障害．3）ビタミンB6依存性ミオバ

KA，XAに加えてキヌレニン以下の中間代謝

ナーは，遺伝型不明，キヌレニナーゼ異常．

産物の尿中排出量が異常に低値であり，トリ4）Hartnup類似症は，常染色体劣性，トリプ

プトファン尿がなくキヌレニンフォルムアミ

トファンピロラーゼ異常，と推定した．

ダーゼ欠損症を推定した．遺伝型は常染色体
文

劣性と思われる．

献1）三好和夫，八木田正聖， 詫間通央，

以上，各疾患に推定した各酵素異常が該当疾患の発症にいかに結びついているかは，現中平晴仁，原田秀夫，上里隆信，日下

時点では不明である．しかし，これら疾患に関しては，従来，特殊な代謝異常は知られてお香苗，川井尚臣：ネマリン・ミオバナ
ーのトリプトファン代謝．文部省特定らず，著者らが明らかにしたそれぞれに特徴

研究月牲病」姓，昭和52年度研究業績，

あるトリプトファン代謝異常とこれに基づい

241−245p．

て推定した特異な酵素異常の考えは，この種

2）三好和夫，八木田正聖，詫間通央，中の疾患の本質的解明に意義あるものと思う．

平晴仁，原田秀夫，上里隆信，日下香苗，川井尚臣：ネマリン・ミオパテ一結に認めたトリプトファン代謝異常．第論

19回日本神経学会総会，昭和53年51． ネマリンミオバナーおよびこれと類縁のミオバナーの病者とその家系員に，L−ト

月東京．臨床神経18：842，1978．

リプトファン100mg／kgを経口負荷し，負荷

3）三好和夫，八木田正聖，平良章，日下

前と後の24時間尿中のKA，ⅩAの排出量を香苗，中平晴仁，詫間過失，川井尚臣，

測定した．

他：トリプトファン代謝異常からみる
ネマリンミオパテーと類縁ミオバナ

2．その結果，1）ネマリンミオバナーでは，負荷後，KAの排出増加を認め．XA正常．
一見健常な母とその母も同様成績であった．

ー．第76回日本内耳斗学会講演会，昭和54年4月東京．

父は正常であった．2）先天性筋線維タイプ不4）三好和夫，八木田正聖，中平晴仁，亀釣合では，KAの増加とXAの軽度増加を認

山和人，詫間通央，平良章，日下香苗，め，父病者も同様成績であった．母は正常値

川井尚臣：ネマリン・ミオバナーの遺であった．3）ビタミンB6依存性ミオバナー

伝．日本人顆遺伝学会第23回総会，昭（著者ら）では，KAの増加とさらに著明な

和53年10月新潟．
−200−44）蜜白同化作用を有する膵エキスの精製とそれによる筋ジストロフィー症の成因・治療に関する研究
＊入

善

岡

高

＊美＊毅

勝一

口

江 森
＊

尾

＊宏＊昭＊之

田

光 孝 寄

畑

辻 福 松

＊允＊人三

直 龍

迫

日

瀬 野

一南

研究協力者

PXの臨床観察は従来通り，当教室，川棚

的

昨年8月から新しく共同研究者となった宮崎医大第2生化学松尾詩之教授（1977年度ノDMPセンター，米国の3ヶ所で続行中である．

ーベル賞受賞者となったDr．Schallyのため
LH−RHのアミノ酸組成を最終的に決定し成績た），南野直人らは私どもの念願である粗製膵

松尾らが精製中のPXは生物学的検定法でエキス（PX）の完全精製を実現する．彼等の従来の約1／10量の蛋白含量でほぼ同等の力得た力価の高い精製PXを量産化できれば，これを用いて高岡らはDMP患者の臨床実験

価の分画を得つつある．しかもその再現性はの有効，無効をdoubleblindによって完結す

題も徐々に解決しうる見込みである．今回はる．それまでは従来通り部分的精製PXを

まだ実験段階であるため，その詳細は省略す

DMP患者に応用して臨床観察を続ける．

る．

きわめて高いので今後純粋単錐と量産化の問次にPX連用5年以上のDMP患者の経過
方法

昨年度報告したPXの新抽出法（ブタ膵臓について述べる．国内の患者の成績（表1）は，ほぼ昨年と同じである．PX効果判定の規をpH9．0，80℃，3分間加熟して抽出した液準として（十十）を症状の一部が改善したか，進からpH4．0沈澱を除去，pH2．0の上清中か行が停止に近いもの，（＋）を症状の悪化が近ら限外濾過で分子量10，000〜1，000の分画をくなったもの，とすると顔肩上腕筋型4名は集める）で得る凍結乾燥品を粗製PXとする．

全例（一汁）であり，その中一番PX使用期間のその一部分は当教室で精製，臨床サンプルと長い第1号患者を後で示す．肢帯型18名中する．残りの大部分は松尾らが精製し，得た10名（＋），デュセンヌ型21名中2名（内1分画の力価は当教室のBioassay（家兎）と組名は後述する米国人）は（＋ト），別の2名が（＋）

織培養（L−Cells）で検定する．

で残りは無効であった．
毎年報告しているPX，第1号のFSHは図＊長崎大学医学部第一内科＊＊国立療誓所川棚病院

1の如く装具着用による起立時間は60分か＊＊＊宮崎医科大学第二生化学

ら70分に延長，下肢挙上時間もなお上昇中で−201−

表l PX5年以上連用のDMP患者に対する臨床効果

例数 （
男，女）
名

発症年令
（
平均）

P X
開始年令
（
平均）

P X 使用期間
年

月

年

名

月

名

オ

オ
19− 37（28 ．
0）

6 ， 3 − 8 ， 9

4

0

4

（1 ， 3 ）10− 19
（
14 ．
8）

18

（8 ， 1 0 ）

4 −27
（
14 ．
2）

12− 42（28 ．
4）

5 ． 5 − 7 ， 11

0

10

21

（
2 1， 0 ）

1 − 6
（
3．
6）

5 − 17（10 ．
4）

5 ， 5 − 8 ， 1

22（・）効果 十十：症状の一部が改善したか，進行が停止に近いもの．
＋；症状の悪化が遅くなったもの．

ロ
一
0
〇 〇
一 〇
4
2
0
︳ V

■亘豊丘Tぎー〇二；●r ︻三r；；i︼；01 ぎ■蔓羞

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▲ ﹁

2

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′ ○ ︻ ノーミ芯雷 言○−

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0

州．J川．
即01971

1札
1釘2

1州．
1㍍】

hl．
1川．
l耶I l乃

1日．
J札
相川

ルー．
柑n lml

1引L
川Tl

図1FacioscapulohumeraldystrophyagedI45，．female

あるが，握力，体重はむしろ減少気味である．

って以来調子が良くないと訴えてきた．このその理由としては二大のことが考えられる．従ことは，私どもに尿素因子の重要性を認識さ来は，カルシウムと尿素窒素の両因子が強くせる結果ともなった．現在松尾，南野らによ

減少する力価の高いサンプルを国内では黄もって尿素因子について再現性の高い抽出法が永く PXを使用している8名（本患者を含む）

確立されつつある．この量産化が実現されると米国の患者10名に使用していた．しかるに
昨年度は色々の悪条件が重なってこれらの患時こそDMPの治療法の根本的解決につながるものと期待している．

者にもカルシウム因子は強いが尿素因子が強川棚DMPセンターで観察中の比較的力価

くない普通のサンプルを便わざるを得なかっの高いPXとその約6割の力価のPXを使用た．これを契機にPX N0．1の患者と別のFSHしているA，B両群の間にも効果の点でまだ

l名および米国の患者2名からサンプルが変有意差はみられない．

−202−

写真1の米国人デュセンヌ型患者（R．T．）

ヶ月に1回受診している神経専ll■J医か臨Jk締はすでに報告した如く，17歳で症状悪化の一過の報告を送ってくるが，経過はlりくノ＼トト11

20歳まで生きられないとされ昭と同じく良好である．すなわちT家のりセノー

和47年6月車椅子に乗って両親に附添われ子（発端者）が4年3ケ月と6ケ月，11宜しノ，て長崎までたどりついた．以来6年8ケ月（現

伯母とその息子，娘の3人が4年1ケ几1）X

在23歳6ケ月）となり昨年夏休みには法律勉を連用中で表2はその一覧表であり，写真2

強のため，スエーデン迄旅行できた．

はH家の伯母である．

途をたどり

このT家をfollow−up中のDr．Norman

彼の話題が縁となってPX注射を希望してきた米国人DMP患者の中follow−upしてく（表2）の紹介でPXを始めたE・G・氏は大戟れる神経専門医のきまった10名をvolunte−

中海兵隊貝であった．その後次第に臥床の状

erとして選び，PXを送っている．5年間連用態となり米国NIHに入院した．Myopathy

中のデュセンヌ型4名はR．T．君のように芳

ofunknownetiologyとされていたが，PX開しい成績ではなく，10歳未満でPX注射を開始1ケ月で夫人も医師も驚くほど性慾が異常始した2名も10歳を過ぎるとともに車椅子に克進し筋力も向上している．この性慾克進を必要とした．

は昨年度，7歳と8歳のデュセンヌ型坊やがしかるにFSHの一家系は祖母以下3世代
にわたり7人の同病患者がいるが，生存中のPXでpenisの肥大をみたと私どもが報告したことと一致している．

6人中5人（表2）がPX使用中である．2

17才の時（PX開始時）20才まで生きないとされていた．

写真1

米国人デュセンヌ型DMP（R．T．君）

一203一

表2
氏

名

続

柄

米国のA家系（K家，T家）：FSH Dystrophy
年
令

性

P X の
使用 期間

4

年
S ．K ．

伯母

64♀

R ．K ．

息子

41

⊂戸＿ 4

家

J ．H ．

娘

34

♀

T

J ．T ．

母

55

家

P ．T ．

息子（発 端 者 ）33

K

臨床症 状 の改善 点

医師

月
上 肢筋 力増 強

P a u l P a lm b a u m

′
′1 ′
′

上腕 二 頭筋 筋力 増強

E r n st J ． P e n k a

4

′
′1 ′
′

頭頂 迄 上肢挙 上 可能 とな る

P a u l P a lm b a u m

♀

4

′
′3

′
′

口笛 が 吹 け る よ うに な る
起 立時 間延 長

♂

4

′
′6

′
′

1

D o n a ld E ．・
N orm an
0 ．5 マ イ ル 歩 行 可 能 と な る体 毒 1 0 ポ ン ド増 加
（1979．3）

結論

永い間try and errorの連続で力価の変動に悩んでいたPXの抽出も新しい化学者の協力を得て急速に純粋単離，量産化完成という最終目標に向って進行中である．DMP患者に対するPXの効果もFSH型については米国においても日本同様良好の成績と考えられるがテナユセンヌ型についてはさらに力価の強いPXでChallenge Lたいと考えている．

（K家の伯母 64才 女性）
PXを4年1ヵ月使用中
写真2

米国FSHDystrophyの一例−204−昭和53年度研究班機構図及名簿厚生省神経疾患研究委託費

筋ジストロフィー研究班
姓

名

第 一

王
圧

研

究

課

題

班

長

筋ジス トロフィー症の基礎的研究

江 梧

第 二 班

筋ジス トロフィー症の病因に関する臨床的研究

三 好 和

第 三 班

筋ジス トロフィー症の臨床病態および疫学的研究

祖父江

第筋ジス トロフィー症の療詔に関する臨床社会学的研究

中 島 敏

四 班

昭和53年度第二班（三好班）機構図
プロジェクトプロジェクトリーダー

1）遺伝・臨床
2）病態・生理黒岩

豊 倉・佐 藤

a．形態
b．生理
C．生化

西

谷

杉

田

（i）代謝・酵素・その他（ii）プロテアーゼ（iii）膜系など
3）治療法の開発

好a．￣プロテアーゼインヒビター
b．ホルモン

C．筋成長因子d．神経成長因子など

ー207−

節 郎
夫

逸 郎
夫

昭和53年度第二班（三好班）名簿
区

分

氏

所
所

名

班

長

三

好

和

夫

幹

事

黒

岩

義 五郎

属

施
在

設

名
地

所属にお
け る地 位連絡 の際 の電 話

教

授

08 86 −3 1 −3 111

九州大学医学部脳神経病研究施設神経内科 教

授09 2−64 1 −1151

授

0 3−8 15 −5 411

助 教 授

03 −81 3 −3 111

副 院 長

07 5−46 1 −5 121

助 教 授

03 −81 5−54 11

助 教 授

0992 −6 4−22 11

助 教 授

02 52 −2 3−6 161

部

長

03 −40 0−1 311

教

授

026 3 −35 −46 00

徳 島大 学 医学部 第一 内科〒7 70 徳 島 市蔵本 町3 −18 −15〒8 12 福 岡 市東区 馬出3 −1 −1

豊

倉

康

夫

東京大学医学部脳研 究施設神 経 内科

教

〒 113 東京都 文京区本界汀−3 −1佐藤猛

順 天堂 大学 医学 部脳神 経 内科

西

谷

裕

国立療 養所 宇 多野病 院神経 内科〒 113 東京都文京区本郷2 −1 −1〒616 京都市右京区鳴滝音戸 山町8
運 営 幹 事

杉

甲

秀

夫

東京大学医学部脳研究施設神経内科〒 113 東京都文京区本郷7 −3 −1

珪

員

古

庄

敏

行

鹿 児 島大学 医学 部衛生 学〒89 0 鹿 児 島市宇宿 町12 08 −1

近藤

喜代 太郎

新 潟大 学脳 研究 所神経 内科

哲

日赤 医療 セ ンター神経 内科〒95 1 新 潟市旭 町通 一番 町754
古川

雄〒150 東京都渋 谷区広尾4 −1 −2 2
≠
家 越

廣

信 州大 学医学 部 第三 内科〒39 0 松 本市旭 3 − 1 − 1

木

下

真

男

東 邦大 学医学 部 第四 内科

教

授

03 −468 −12 51

埜

中

征

哉

国立武蔵療養所神経センター疾病研究第一部 室長

04 23 −4 1 −27 11

助手

02 52 −2 3 −6 161

講師

02 63 −35 −4 600

教

授

08 59 −33 −11 11

助 教 手
受

0 958 −47 −2 1 11〒153 東京都 目黒区大橋2 −17−6〒187 東京都小平市小川東町2 620
福

原

信

義

新 潟大 学脳 研究 所・
神 経内科〒9 51 新 潟市 旭町 通一 番町75 4

小

口 書 三夫

信 州大 学 医学部 第三 内科〒3 90 松 本 市旭 3 − 1 − 1

中

村

晴

臣

鳥取大学医学部脳幹性疾患研究施設神経病理部門〒 683 米 子 市西町 86番地

高

守

正

治

長 崎 大学 医学部 第一 内科〒 852 長崎 市坂本 町 7 − 1

高

木

昭

夫

国立武蔵療養所神経センター疾病研究第一部 室長

0 423 −41 −2 7 11

中

西

孝

雄

筑 波 大学 臨床 医学系 神経 内科

教

授

0 298 −53 −3500

講師

0 9858 −5 −15 10

教

授

0 726 −83 −122 1〒187 東京都小平市小川東町2620〒300 ー31 茨城県新治郡桜村大字妻木字天久保
栗

原

照

幸

宮崎 医科 大学 第三 内科〒889−16 宮崎県宮崎郡清武町木原5200

茂

在

敬

司

大 阪 医科大 学 第一 内科〒56 9 高 槻市大 学町 2 − 7
−208−

区
姓

分

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所
所

名
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i青一郎

属

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在

設

名
地

大 阪大学 医学 部 第二 内科

所属 にお
け る地位

連 絡 の際 の電話

教

授

06 −45 1−00 51

教

授

0899 −24 −7 111

副 院 長

0 423 −23 −51 11

講師

0 263 −35 −4600

助手

0 886 −31 −3 11 1

講師

0886 −3 1 −3 111

助 教 授

0 93 −87 1 −193 1

講師

07 8 −34 1 −7 451

講師

0 52 −74 1 −2 11 1

教

授

0 9858 −5 −1510

助 教 授

02 854 −4 −2 111

04 23 −4 1 −2 711〒553 大阪市福島区福島1 −1 −50
植

田

啓

嗣

愛 媛大学 保健 管理 セ ン ター
〒 790 松 山市道後 樋 又10 − 13

宇尾 野

公

義

東 京都立 府 中病 院神 経 内科
〒182 東京都府中市武蔵台2−9 −2

庄 ＿司

進

一

信州 大学 医学 部第三 内科〒 390 松 本 市旭 3 − 1 − 1

八木 田

正

聖

徳 島大学 医学部 第一 内科〒 770 徳 島市歳本 町3 −18 −15

川

井

尚

臣

徳 島大学 医学部 第一 内科〒 770 徳 島市蔵本 町3 −18 −15

馬

渡

志

郎

九州工 業大 学保 健管 理 セ ンター〒804 北 九州市戸畑区仙水町 1−1

高

橋

桂

一

神 戸 大学 医学部 第三 内科〒650 神戸市生田区楠町13 ・14合併地

飯

田 光

男

名 古屋 大学 医学 部 第一内科
〒4 66 名古屋 市昭 和区鶴 舞町 65

荒

木

淑

郎

宮 崎 医科 大 学 第三内科
〒889−16 宮崎県宮崎郡清武町木原5200

宮

武

正

自治 医科 大 学神 経内科〒329−04 栃木県河内郡南河内町大字薬師寺3m −1

吉

田

端

子

国立武蔵療養所神経センター疾病研究第四部 研 究 員

高

岡

善

人

長 崎大 学 医学部 第一 内科

井

村

裕

夫

京 都大 学 医学部 内科 第二 講座〒187 東京都小平市小川東町2620
教授

09 58 −4 7 −2 111

教

授

07 5 −75 1 −3 111

助 教 授

07 5 −7 51 −2 111

助 教 授

08 86 −31 −3 111

部長

0 3 −58 3 −6 871

講師

099 2 −6 4 −2 211

理事

0 3−20 3 −12 11〒8 52 長 崎市 坂本 町 7 − 1〒606 京都市左京区聖讃院川原町54
林恭三

京 都大 学薬 学部 生物 化学

幸弘

徳 島大学医学部附属酵素研究施 設〒60 6 京都市左京区書田下阿達町真

田酵 素化学 部 門
〒770 徳 島市 蔵本 町3 −18 −15
田辺等

虎 の 門病 院 神経 内科〒107 東京都港区赤坂虎の門2−2−2

納

光

弘

鹿 児 島大 学 医学 部第 三内科〒890 鹿 児島 市宇宿 町12 08 −1

経理事務担当者

小

川

秀

雄

日本筋 ジ ス トロフ ィー協 会〒162 東京都新宿区西早稲田2 −2 −8l】ー209−