研究用試薬

腸 内 フ ロ ー ラ 用 DNA 採 取 キ ッ ト

OMNIgene®・GUT 使用方法
OMNIgene®・GUT は、糞便からの細菌・ウイルス DNA の採取および保存のために開発された研究用試薬です。病気の診断や創薬、人に施すような目的での使用はできません。取り扱いには十分ご注意頂きますようお願い致します。
※商品に同梱されているすべての添付資料（安全データシート：SDS など)を確認の上、本製品をご利用ください。
※本書および SDS を常に一緒に保管してください。
SDS ダウンロード用 URL：https://www.kyodo-inc.co.jp/bio/nucleic_acid/sds.html

ステップ 1. 糞便の採取方法【警告および注意】
・OMNIgene・GUT は体外用です。
・チューブトップのパーツ(黄色部分)を絶対に外さないで下さい。
・チューブ内に含まれる保存溶液をこぼさないよう注意して下さい。
・保存溶液が目や皮膚に付着した場合は、大量の水で洗い流してください。また飲み込まないで下さい。
・液状の糞便検体を採取する場合は、別途 OM-AC2(スプーン式)によるマニュアルを参照してください。https://www.kyodo-inc.co.jp/documents/bio/omnigene-gut/step01_01.pdf
・使い終わった容器などは各自治体の規則に従い廃棄して下さい。
・保管：室温(15～25℃)で保管して下さい。
・小さいキャップをのどに詰まらせると窒息する危険性があります。取り扱いには十分ご注意下さい。

キット内容物、および各名称㈱協同インターナショナル〒216-0033 神奈川県川崎市宮前区宮崎 2-10-9 Tel 044-853-2958 Fax 044-854-1979
URL: http://www.kyodo-inc.co.jp E-mail: kikaku@kyodo-inc.co.jp

1.

【重要：検体採取前の準備】糞便検体に尿やトイレの水が混入しないよう採取して下さい。採取にあたり、トイレットペーパーを使用することも可能です。

2.

チューブ先(黄色部分)を持ちながら、キャップ(紫色)のみを回して外します。無くさないようにして下さい。
*チューブ先のパーツ(黄色部分)は外さないで下さい。チューブ内の保存溶液をこぼさないよう注意して下さい。

3.

ヘラを使って糞便検体を少量採取します。

4.

糞便検体をチューブ先へ入れます。この作業を繰り返し行い、充填範囲内に糞便検体を完全に充填して下さい。
*糞便検体をチューブ内に押し込まないようにして下さい。

5.

チューブ先を真横へすりきるように糞便検体を平にして、余分な検体を取り除きます。
*必要に応じてチューブ周辺をトイレットペーパーまたはティッシュでふき取って下さい。

㈱協同インターナショナル〒216-0033 神奈川県川崎市宮前区宮崎 2-10-9 Tel 044-853-2958 Fax 044-854-1979
URL: http://www.kyodo-inc.co.jp E-mail: kikaku@kyodo-inc.co.jp

6.

紫色のキャップでしっかりと閉じるまで回して下さい。
*キャップの向きに注意して下さい。キャップの上部が天面を向くようにしてください。

7.

キャップで閉じたチューブを最低 30 秒間しっかりと攪拌させて下さい。

8.

チューブ内の糞便検体と保存溶液がよく混ざったか確認して下さい。
*図 A のように大きな塊が見られる場合は、小さくなるまで攪拌させて下さい。

9.

ヘラは入っていた袋に入れるか、トイレットペーパーに包み、適切に廃棄してください。

ステップ 2. DNA 保存
OMR-200 で糞便検体を採取後は、室温(15～25℃)で約 60 日間安定的に保存可能です。な
お OMR-200 の使用期限はチューブ側面に記載しております。
採取した糞便検体を⾧期間保存する場合は以下の方法を推奨します。
室温

4℃

-20℃

-80℃

OMNIgeneGUT

約 60 日間推奨しません。

数か月

1 カ月※

クライオチューブ

約 60 日間

数年間※OMNIgeneGUT のチューブのまま-80℃で⾧期間保存すると、チューブ本体が脆くなる可能性があります。クライオチューブに、移し替えて下さい。
詳細については以下のサイトもご覧下さい。
https://www.kyodo-inc.co.jp/documents/bio/omnigene-oral-s/step2_01_PD-PR-00695.pdf㈱協同インターナショナル〒216-0033 神奈川県川崎市宮前区宮崎 2-10-9 Tel 044-853-2958 Fax 044-854-1979
URL: http://www.kyodo-inc.co.jp E-mail: kikaku@kyodo-inc.co.jp

ステップ 3. DNA 精製
OMR-200 で採取された糞便検体は、市販の抽出キットを用いて精製することが可能です。
【QIAGEN/PowerFecal DNA Kit による精製】
精製に必要な器具、試薬
・QIAGEN 製 QIAamp Power Fecal DNA Kit (Cat. No. 12830-50)・広径チップ(チップ先端をカットしたもので代用可)*この他については PowerFecal DNA Kit のマニュアルも参照してください。
精製手順1. Solution C1 をご用意ください。使用前に Solution C1 に沈殿物が見られる場合は、溶解するまで 60℃でインキュベートして下さい。
2. 精製前にサンプル（OMR-200）を 10 秒間よく攪拌して下さい。
3. OMR-200 のチューブからサンプル 250µL を Dry Bead Tube へ分注して下さい。
*分注する際は広径チップまたはチップ先端をカットしたものを使用して下さい。
4. Dry Bead Tube へ PowerBead Solution(750µL)を添加して下さい。その後、静かに混合します。
5. Solution C1 を 60µL 添加し、数回攪拌します。65℃で 10 分間インキュベートします。
6. 以降は QIAamp PowerFecal のプロトコルに従って、ステップ 5(bead vortexing)から続けて下さい。
【QIAGEN/PowerFecal Pro DNA Kit による精製】
精製に必要な器具、試薬・QIAGEN 製 QIAamp PowerFecal Pro DNA Kit (Cat. No. 51804)
・広径チップ(e.g. VWR89049-160)/またはチップ先端をカットしたもので代用可*この他については PowerFecal Pro DNA Kit のマニュアルも参照してください。
精製手順
1. 精製前に振とう又はボルテックスにてサンプル（OMR-200）をよく攪拌して下さい。
2. PowerBead Pro tube を軽く回転し、ビーズが底に沈殿していることを確認して下さい。
3. OMR-200 のチューブからサンプル 250µL を PowerBead Pro tube へ分注して下さい。
*分注する際は広径チップまたはチップ先端をカットしたものを使用して下さい。
4. 800µL の Solution CD1 を PowerBead Pro Tube へ添加し静かに混合します。
5. 以降は QIAamp PowerFecal Pro DNA kit のプロトコルに従って、ステップ 2（beadvortexing）から続けてください。
PD-PR-00434 Issue4/2018-02㈱協同インターナショナル〒216-0033 神奈川県川崎市宮前区宮崎 2-10-9 Tel 044-853-2958 Fax 044-854-1979
URL: http://www.kyodo-inc.co.jp E-mail: kikaku@kyodo-inc.co.jp