研究用試薬 OMNIgene®・ORAL 使用方法
口腔内マイクロバイオーム DNA/RNA 採取キット OMR-120(舌上用)はじめにOMNIgene®・ORAL は、舌上からの細菌・ウイルス DNA/RNA の採取および保存のために開発された研究用試薬です。病気の診断や創薬、人に施すような目的での使用はできません。取り扱いには十分ご注意頂きますようお願い致します。
【警告および注意】
OMNIgene・ORAL を利用して舌からサンプルを採取する場合は下記の注意事項に従ってご利用ください。
・ドナー本人の口腔病変や出血がある場合は、本キットを使用する前に、医師や専門家に相談して下さい。
・本キットに含まれる保存溶液はこぼさないよう注意して下さい。
・本キットの使用前チューブにキャップが外れる、もしくは緩むなどで保存溶液が漏れていた場合は、そのキットは使用しないで下さい。
・本キットに含まれる保存溶液が目や皮膚に付着した場合は、大量の水で洗い流してください。また飲み込んだりしないで下さい。
・付属しているスワブ 綿棒）で検体を採取します。パッケージ開封後はスワブチップ 先端）に触ったり、むやみに置いたりしないで下さい。
・検体採取 30 分前は飲食、喫煙やガムを噛んだりすることはしないで下さい。
・小さいキャップをのどに詰まらせると窒息する危険性があります。取り扱いには十分ご注意下さい。
・保管：室温(15～25℃)で保管して下さい。
・チューブ側面に記載された使用期限までに使用してください。
・再利用不可。
※商品に同梱されているすべての添付資料 安全データシート：SDS など)を確認の上、本製品をご利用ください。
※本書および SDS を常に一緒に保管してください。
㈱協同インターナショナル ライフサイエンス部〒216-0033 神奈川県川崎市宮前区宮崎 2-10-9 Tel 044-853-2958
URL: http://www.kyodo-inc.co.jp E-mail: life@kyodo-inc.co.jp

Fax 044-854-1979

ステップ 1. OMNIgene・ORAL 検体の採取方法
1.

パッケージから採取キット本体(保存溶液を含む)を取り出し、使用するまでは清潔な場所に置いて下さい。

2. スワブを持ち手部から取り出します。
*ブレークポイントより上部（先端）には触れないで下さい。

ブレークポイント：スワブ中央の凹み部

3. スワブを舌上に最低 30 秒間擦り、検体を採取して下さい。
*スワブが歯に触れないよう注意して下さい。検体を採取中はスワブの柄を曲げないで下さい。
4. 片手でスワブを保持しながら、キット本体に含まれる保存溶液をこぼさないようにキャップを外して下さい。
*キット本体に含まれる保存溶液はこぼさないで下さい。
スワブ先端が触れないように注意して下さい。
5. スワブをチューブ内に挿入し、ブレークポイント部分から柄を切り離して下さい。スワブ先端がチューブ内の保存溶液に浸かっていることを確認して下さい。

6. キャップをねじ込んでしっかりと閉めて下さい。

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ステップ 2. OMNIgene OMR-110,120,130 による DNA/RNA 保存
OMNIgene・ORAL(OMR-110, 120)および OMNIgene・VAGINAL(OMR-130)は、室温(15～25℃)で保存してください。サンプル採取後は、室温で約 4 週間安定的に保存可能です。
使用期限はパッケージ底部のラベルに印字されています。

ステップ 3. OMNIgene OMR-110,120,130 からの DNA/RNA 精製
OMR-110、120，130 で採取されたサンプルから、市販の核酸抽出キットを用いてマイクロバイオーム DNA 又は RNA を精製することが可能です。
【サンプルから DNA を精製する場合】精製に必要な試薬、機器
・プロテナーゼ K(PK、凍結乾燥品), 80 mg/mL・ボルテックスアダプター（例：Cat No./ID: 13000-V1-24）
・QIAamp PowerFecal Pro DNA Kit（QIAGEN, Cat. No./ID:51804）
・その他、“QIAamp PowerFecal Pro DNA Kit Handbook”内にある試薬及び機器…必要な試薬及び機材やプロトコルの詳細については、上記製品のマニュアルを参照して下さい。
DNA 精製の前処理
1. PK(80 mg/mL) *5µL を採取後のサンプル（保存溶液+スワブ）に添加してから、ボルテックスします。
*PK の調整方法：凍結乾燥品の PK を 80mg/mL になるように Nuclease-Free 水に溶解させます。その後は-20℃で保管します。
PK 酵素の活性が 30mAU/mg 以下の場合、最低 12mAU を採取後のサンプルに追加します。
2. 精製前に、OMNIgene の容器のままサンプルを 50℃のウォーターバスで（1 時間以上)または 50℃の恒温槽(2 時間以上)でインキュベートして下さい。この際に採取キット内のスワブが保存溶液に浸かっていることを確認して下さい。
3. スワブ先端をチューブの内壁に押し付けて、スワブチップに含まれている液を絞ります。
その後スワブは破棄して下さい。
4. PowerBead Pro tube を軽く回転し、ビーズが底に沈殿していることを確認して下さい。
5. OMNIgene チューブからサンプル 250µL を PowerBead ProTube に分注します。
6. CD1 溶液 800µL を加えた後、PowerFecal Pro のプロトコルに従い、ステップ 2 から進めて下さい。その後のプロトコルは QIAamp PowerFecal Pro DNA Kit のハンドブックを参㈱協同インターナショナル ライフサイエンス部〒216-0033 神奈川県川崎市宮前区宮崎 2-10-9 Tel 044-853-2958
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照して下さい。

【サンプルから RNA を精製する場合】精製に必要な試薬、機器・プロテナーゼ K(PK), 80 mg/mL
・Qiagen RNeasy PowerMicrobiome Kit(Cat.N0.26000-50)
・Qiagen Vortex Adapters*必要な機材、及び詳細プロトコルについては上記製品のマニュアルを参照して下さい。
RNA 精製の前処理
1. PK(80 mg/mL)5µL を採取キットに添加してからボルテックスします。サンプルを 50℃のウォーターバスで（1 時間以上)または 50℃の恒温槽(2 時間以上)でインキュベートして下さい。この際に採取キット内のスワブが保存溶液に浸かっていることを確認して下さい。
*PK 推奨品：Epicentre PK (Cat. No. MPRK092) または QIAGEN® Protease (Cat. No.
19155)
2．250µＬのサンプルをガラスビーズチューブに添加します。
3. 以降は RNeasy PowerMicrobiome Kit に従って、ステップ 2 から続けてください。

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