▋バイオチップ

ラベルフリー生体分子間相互作用解析装置

OpenPlex

高屈折率のプリズムに金コーティングしたチップです。金表面に様々な反応基を表面処理した豊富な種類のバイオチップを取り揃えており、固定化するリガンド分子に適したバイオチップを選択できます。バイオチップには、リガンドを前処理なしで直接スポットし、固定できます。

バイオチップ

未修飾のベアチップもご用意できます。
バイオチップ

CS-HD

CS-LD

CEp

COOH

アミンカップリング

ビオチン化分子向け
エクストラビジン層

ビオチン化分子向け
エクストラビジン層

GST タグ分子向け
anti-GST 層

カルボン酸
カップリングチオールカップリング

プロテイン A
修飾チップ

プロテイン G
修飾チップ

高密度

低密度

○

●

●

●

○

●

●

●

●

○

○

○

●

●

●

●

●

●

●

●

●

●

●

●

●

●

●

●

●

●

○
○
●

●

●

+ anti-GST*●●

タグタンパク質
炭水化物

○

ポリマー

●

小分子CH-LDCOOH

オリゴヌクレオチド○CH-HD

Protein G

低密度抗体

COg

Protein A

高密度●

COaマレイミド

その他

タンパク質

Clm

NH2エポキシド●CS-EDA/ グルタルアルデヒド）

NHS

ペプチド

CHO（システアミンNHS＋エクストラビジン

NHS

○CTg

CSe/ グルタルアルデヒド）＋エクストラビジン

表面化学DNA/RNACOe
CHO（システアミンホルダ

●
○

●

●

●

●

●

●

●

○

○

●

●
● 推奨

●
○
○
●

細胞から核酸まで生体試料の分子間相互作用をリアルタイムでイメージング●○OpenPlex○ 使用可能* グルタチオン -S- トランスフェラーゼ▋OpenPlex 仕様
原理

表面プラズモン共鳴イメージング（Surface Plasmon Resonance imaging :SPRi）

バイオチップ観察域
フローシステム8.4 x 8.4 mm
SPRi ユニットに直結（ペリスターポンプ）

測定試料

タンパク質、ペプチド、DNA、血清（クルード試料）、細胞、ナノ粒子

脱気

溶存ガス除去装置（デガッサー）

試料容量50 〜 2000 μL（試料ループ容量：200 μL）

注入システムフローセル高さ

6 ポート注入バルブ、マニュアルコントロール
70 μm

通常試料濃度

300 ng/mL（100 〜 1000 kDa）〜 10 μg/ml（4 〜 20 kDa）

フローセル容量11 μL

試料分子量≧ 200 Da

ソフトウェア

検出下限

5 pg/mm2･SPRi-View : 測定用ソフト･SPRi-Analysis : 解析 / レポート作成用ソフト･ScrubberGen : Kinetics 解析用ソフト（オプション）

溶液屈折率1.30 〜 1.37

使用温度範囲

15 〜 28 ℃

光源

高安定性 LED

装置重量

約 13 kg（本体）[W×D×H] 480 × 304 × 490 mm
100 〜 240 V、50 / 60 Hz 、60 W

検出器2/3" カメラ、1384 × 1032 ピクセル

光学分解能

40 μm

外形寸法電源▋外形寸法図（単位 : mm）▋試薬

ランニングバッファー、ブロッキング液、再生液など▋オプションスポッター

スポッターを使用することで、バイオチップ表面に最大 192 スポットのリガンドを固定できます。

Label-free Biomolecular Interaction Analyzer

Surface Plasmon Resonance imaging (SPRi)

490

仕様についてはご相談ください。

304
480

※図はイメージです。

192 スポット例

Virus & Bacterua

カタログNo. HRA-8841C

Printed in Japan 2108SK52

応用分野

細胞、タンパク質、ペプチド、核酸などの生体試料から薬物などの低分子化合物まで、OpenPlex あらゆる分子間の相互作用をラベルフリーかつハイスループッ
トで解析
Label-free Biomolecular Interaction Analyzer

細胞研究

創薬・製薬研究

タンパク質・抗体研究

DNA/RNA 研究

ウィルス研究特長

リアルタイムイメージング
試料注入前後で、フローセルの差分画像ををリアルタイムでイメージングでき、リガンドとアナライトの結合の定性的な結果が迅速に得られます。また、カイネティックスカーブについてもマルチチャンネルでリアルタイムにモニタリングできます。

アプリケーション
モノクローナル抗体によるエクソソームマーカーの検出と表面糖鎖解析

タンパク質・抗体研究

バイオチップ上にスポットされた複数のリガンド（スポッターの使用で最大192リガンド）に対する分子間相互作用が一度に解析でき、多検体試料のスクリーニングにおいて、ハイスループットな解析が可能になります。
バイオチップには、リガンドを前処理なしで直接スポットし、固定できます。

バイオチップ表面に糖鎖結合タンパク質であるレクチン 8 種とエクソソーム

エクソソームとモノクローナル抗体の相互作用からエクソソームの表面抗原マーカーとして知られている表面抗原 CD9、CD63、CD81 を特異的に認識する

CD9、CD63、CD81 が確認でき（図 1）、エクソソームとレクチンのカイネティクス

モノクローナル抗体をリガンドとして固定し、アナライトとしてヒト血清由来カーブから 8 種類のレクチンとの結合を確認できました（図 2）。のエクソソームを流しました。

また、リアルタイムイメージングすることで反応量の違いを確認できました（図 3）。

試料投入

ΔReflectivity(%)

細胞・血清などクルード試料や疎水性試料など多様な試料を測定
タンパク質、抗体、抗原、糖鎖、ペプチド、DNA、薬剤、細菌といった同種・異種の分子間相互作用が解析できます。流路の広いフローセルを採用したことで、細胞や血清のようなクルード試料（粗精製試料）もアナライトできます。また、疎水性、高濃度、酸性、塩基性の試料もリガンドとして用いることができるため、生化学、生物物理、創薬（天然物創薬）といった幅広い分野で利用できます。

平衡定数（K D）

結合速度定数（ka）
解離速度定数（kd）

2

anti-CD9
anti-CD63
anti-CD81

1.5
10500

1000 1500 2000
時間（秒）

0.4

00500

1000 1500 2000
時間（秒）（図 4）により、結合の定性的な結果が迅速に得られるため、抗体医薬品の開発などにおける多検体のスクリーニング用途での活用が期待できます。

準備

測定

1. バイオチップ表面にリガンドをスポットし、チップ表面と反応させ固定（最大192スポット）

アナライトをバイオチップ表面に流し、各種パラメーターを測定

抗体 1

抗体
医薬品 A抗体 2抗体
医薬品 B抗体
医薬品 C抗体 3

リガンドごとのカイネティックスカーブを取得

654

スポッティング
直後の反射像

3結合状態

21

解離状態

00

リガンドはバイオチップ表面にスポットすると反応が起こり固定化されます。

プロセス
バッファ

50100150時間（秒）

アナライト

200250測定後の差分画像

結合すると反射率が 高くなり、スポットが明るくなることが差分画像からわかります。

反射率変化（%）

リガンド 1リガンド 2リガンド 3リガンド 4

反射率変化（%）

2. 装置にバイオチップをセット
3. ブロッキング液を送液し、非特異的反応をブロック

リガンド 1リガンド 2リガンド 3リガンド 465432抗体 410050

100150時間（秒）200

抗体 5抗体 6

図 4. FcRlla- 抗体

250抗体 723

測定原理 : 表面プラズモン共鳴イメージング（SPRi）
SPRi：Surface Plasmon Resonance Imaging

4非特異的抗体（ヤギ IgG）

5678

同時に、カイネティックスカーブ（図 5）から反応速度論的パラメータを測定することで、

抗体
抗体 2抗体 5
医薬品
C結合の強さ、結合 / 解離速度、持続性といった相互作用の情報を定量的に比較することができました。

抗体
医薬品 A

金コーティングしたプリズムに偏光を照射するとある入射角で反射光強度の急激な低下が起こります（表面プラズモン共鳴）。
リガンドとアナライトの結合により、リガンド分子の質量が増加し、それによって変化する反射率を計測することで、分子間相互作用を解析できます。
また、
OpenPlexは、反射光をCCDカメラでとらえることで、定性的な結果をイメージングできます。

（リコンビナント抗体）

アナライト：フローセルに流す分子抗体 3抗体
医薬品 A

抗体 4抗体 2抗体
医薬品 A抗体 8抗体
医薬品 B抗体1抗体
7
図 5. カイネティックスカーブ 抗体 9
（リコンビ抗体 7抗体 5（リコンビナント抗体）

抗体 4（リコンビナント抗体）

抗体 6抗体医薬品 B抗体 3抗体 4（リコンビナント抗体）

抗体 8抗体 1抗体 3抗体 1抗体 9 c-kit) とリガンドとして細胞表面上のレセプターを特異的に認識する特異的抗体（抗骨髄由来の肥満細胞を流すことで、細胞表面抗原と抗体の結合を確認しました。

1×10 細胞 /ml

非特異的抗体のスポットでは結合が見られず、特異的抗体のスポットでは細胞表面上のレセプターとの結合が確認できました。
また、細胞量の違いによる結合量の変化をイメージングすることができました。

反射光

バイオチップ抗体
医薬品 C

ため、新しいの細胞アッセイ系を構築しスクリーニングを実施できます。

5プリズム

光源抗体
医薬品 B抗体 2抗体 6

非特異的抗体（ヤギ IgG）をバイオチップにスポットし、アナライトとしてマウスリガンド入射光

抗体
医薬品 B抗体 7

流路が大きく、動物細胞といった粒径が大きい試料もアナライトとして測定できる

9アナライト金コーティング◉アナライト：ヒト血清由来エクソソーム◉リガンド：レクチン 8 種、anti-CD9、anti-CD63、anti-CD81

ナント抗体）＊本実験は東京大学大学院 工学系研究科
津本研究室のご協力のもと行われました。

動物細胞を用いたスクリーニング例

特異的抗体（抗 c-kit 抗体）1抗体 9

リアルタイムイメージング結果

細胞研究

バッファ抗体 81×104 細胞 /ml＊ リガンド：チップに固定されている分子図 3. リアルタイムイメージング結果

結果
リガンドごとの結合・解離状態を測定し、リアルタイムイメージング抗体
anti- anti- antiCD9 CD63 CD81

リアルタイムイメージングによる抗体スクリーニング検査

流すことで、相互作用を一度に解析できました。リアルタイムイメージング

測定フロー

レクチン
ConA SBA MAM LF SSA AAL UEA-I Lotus

2500

図 2. エクソソームとレクチンのカイネティックスカーブ
から 8 種類のレクチンとの結合を確認

多数の抗体をリガンドとし、受容体タンパク質（FcRIIIa）をアナライトとしてイメージングConA
SBA
MAM
LF
SSA
AAL
UEA-I
Lotus

0.62500

創薬・製薬研究

反応特異性

フローストップ

0.80.2

図 1. エクソソームの表面抗原に特異的な抗体のカイネティックスカーブ

分子間相互作用を測定することで、リガンド・アナライト間における以下の情報が得られます。

反応速度2.50バッファへの切り替え

10.5

取得情報

相互作用の強さ

試料投入

フローストップ バッファへの切り替え

3

ΔReflectivity(%)

ハイスループット

1×106 細胞 /ml

CCD カメラ

リアルタイムイメージング結果◉アナライト：マウス骨髄由来肥満細胞◉リガンド：特異的抗体（抗 c-kit 抗体）/ 非特異的抗体（ヤギ IgG）