学位研究紹介

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学 位 研 究 紹 介

脂肪組織由来幹細胞から抽出した Cell
Extract が末梢神経細胞に及ぼす効果の検討
Effects of Cell Extract from Adiposederived Stem Cells on PeripheralNerve Cells
新潟大学大学院医歯学総合研究科歯科麻酔学分野（主任：瀬尾憲司教授）

今井有蔵

また過去には，ラットに対し脂肪組織由来幹細胞（Adipose-derived stem cells：ADSCs）を充填した人工神経を移植することにより，末梢神経の再生を促進したとの報告 4）がある。ADSCs は脂肪組織から獲得することができ，脂肪細胞や神経細胞，心筋細胞などに分化できる多分化能を有していることから，ADSCs が末梢神経を再生させる可能性がある。しかし幹細胞を用いた治療を臨床に応用するためには，細胞の移植による拒絶反応の可能性や，幹細胞の保管や輸送の管理といった課題がある 5）。
一方，細胞構造を破壊することによって作製される細Division of Dental Anesthesiology，Faculty of Dentistry &胞抽出物（Cell Extract：CE）は腫瘍原性や免疫原性のGraduate School of Medicine and Dental Sciences，Niigata

リスクが低く，１年以上の長期保存も可能である 6）。さUniversity（Director: Prof, Kenji Seo）

Yuzo Imai

らに放射線照射後の唾液腺機能の回復 7） や，心筋梗塞後の心機能を回復させる 8）といった様々な臓器再生における CE の有用性が報告されている。しかし，CE を末梢神経再生へ応用した研究はない。そこで本研究では，【背景および目的】

ADSCs 由来 CE（CE-ADSCs）に含まれる各種因子を解析し，CE-ADSCs の末梢神経細胞への効果を検討した。

下顎埋伏智歯抜歯術やインプラント埋入術などは，下【方歯槽神経や舌神経などの末梢神経を損傷することは少なくない。これを原因とする慢性疼痛に対しては，薬物療法】

法や星状神経節ブロック，自家神経移植といった外科的

９ 週 齢 の C57BL/6J マ ウ ス 鼠 径 部 の 脂 肪 組 織 よ り

治療が行われている。しかし薬物療法は副作用や薬物依ADSCs を樹立した。ADSCs を生理食塩水に懸濁し，懸存を助長する可能性 1），星状神経節ブロックは致死的合濁液に対して凍結・解凍操作を３回繰り返すことにより2）が報告されている。さらに自家細胞構造を破壊した。その後，遠心分離操作により上清神経移植では，正常な神経組織の一部を犠牲にしなくてを回収し，CE-ADSCs として実験に使用した（図１）。

併症が生じる可能性

はならい 3）等の制限がある。

図1

続いて，CE-ADSCs に含まれる血管新生関連因子や脂肪組織由来幹細胞（Adipose-derived stem cells: ADSCs）の樹立および細胞抽出物（Cell Extract: CE）の作製．
－ 31 －新潟歯学会誌3252（1）：2022

サイトカインを，それぞれ Mouse Angiogenesis Array【文Kit または Mouse Cytokine Array Kit（R&D Systems,Minneapolis, MN, USA） に て 解 析 し た。 ま た CE-献】

ADSCs を添加した培地を用いて培養することで，CE-１）山口重樹，藤井宏一：〈特集〉痛み治療で用いる

ADSCs の シ ュ ワ ン 細 胞， 後 根 神 経 節（Dorsal root

薬物の副作用とその対策・薬物依存．ペインクリ

ganglion：DRG）ニューロンに対する効果を解析した。

ニック，41：1430-1440，2020．

【結２）Chatrurvedi A，Dash H：Locked-in syndrome

果】

during stellate ganglion block．Indian JAnaesth，54：324-326，2010．

・CE-ADSCs 中には HGF や VEGF などの血管新生関３）素輪善弘，古田鋼郎，沼尻敏明，松田修，西野健

連因子や SDF-1 などのサイトカインが含有していた。

一：末梢神経損傷に対する脂肪組織由来幹細胞移・基本培地（コントロール培地：CM）で培養した群と植治療 in vivo における検討．末梢神経，26：80-比較して，CE-ADSCs を培地に添加した群（CM + CEADSCs）では，シュワン細胞や DRG ニューロンに対しWiberg M，Terenghi G，Kalbermatten DF：て促進的に作用した。

【考87，2015．
４） di Summa PG，Kingham PJ，Raffoul W，
Adipose-derived stem cells enhance peripheral察】

nerve regeneration．J Plast Reconstr Anesthet
Surg，63：1544-1552，2010．

末梢神経が損傷すると，マクロファージやシュワン細５） Su X，Liu Y，Bakkar M，Elkashty O，EI-胞の貪食作用により損傷神経が除去されたのち，シュワ

Hankim M，Seuntjens J，Tran SD：Labial Stem

ン細胞が神経内膜や基底膜に沿って配列し再生の足場とCell Extract Mitigates Injury to Irradiated

して機能する。さらにその配列に沿ってニューロンは軸Salivary Glands．J Dent Res，99：293-301，2020．

索を伸長し，標的細胞とのネットワークを再構築させ

６）Su X，Fang D，Liu Y，Ruan G，Seuntjens J，る 9）。本研究より，CE-ADSCs の培地添加が，これら細Kinsella JM，Tran SD：Lyophilized bone胞に対し促進的に作用したことから，CE-ADSCs が損

marrow cell extract functionally restores

傷神経の再生を担うシュワン細胞やニューロンを活性化

irradiation- injured salivary glands．Oral Dis，させることによって末梢神経再生の促進に関与する可能

24：202-206，2018．
７）Fang D，Su X，Liu Y，Lee JC，Seuntjens J，性を示唆することができた。
CE-ADSCs 中の成分を解析すると，様々な血管新生

Tran SD：Cell extracts from spleen and adipose

関連因子やサイトカインが含有していたが，本研究ではtissues restore function to irradiation- injured

すべての因子を調べたものではない。したがって，CE-salivary glands．J Tissue Eng Regen Med，12：

ADSCs の中に含まれるどの因子が有効であったかを示

e1289-e1296，2018．
８）Angeli FS，Zhang Y，Sievers R，Jun K，Yim S，すことはできず，今後のさらなる研究が必要である。

【結Boyle A，Yeghiazarians Y：Injection of human論】

bone marrow and mononuclear cell extract into
infarcted mouse hearts results in functional

CE-ADSCs 中の何らかの因子が，末梢神経細胞に有効に作用する可能性があり，新たな末梢神経再生の治療

improvement．Open Cardiovasc Med J，6：3843，2012．
９）西脇香織，近藤国嗣，里宇明元，千野直一：末梢神法となり得ることが明らかになった。

経損傷後の神経再生とリハビリテーション（総説）．
リハビリテーション医学，39：257-266，2002．

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