第 35 回日本毒性病理学会総会及び学術集会
目次第 35 回日本毒性病理学会総会及び学術集会概要 ………………………… 3
年会長挨拶…………………………………………………………………… 5

会場へのアクセス
会場案内…………………………………………………………… 7……………………………………………………………………… 8

ポスター・商業展示
参加者へのご案内……………………………………………………… 10………………………………………………………… 11

座長の先生方へ……………………………………………………………… 14
発表者の先生方へ…………………………………………………………… 14
協賛法人・企業一覧……………………………………………………… 16

日本毒性病理学会のあゆみ
日程表……………………………………………… 17……………………………………………………………………… 18

司会・座長一覧…………………………………………………………… 20

プログラム
特別講演 ……………………………………………………………… 22
シンポジウム ………………………………………………………… 23
ワークショップ ……………………………………………………… 24
IATP セミナー ………………………………………………………… 24
一般口演 ……………………………………………………………… 25
ポスター ……………………………………………………………… 26
講演要旨
特別講演 ……………………………………………………………… 39
シンポジウム ………………………………………………………… 41
ワークショップ ……………………………………………………… 46
IATP セミナー ………………………………………………………… 50
一般口演 ……………………………………………………………… 51
ポスター ……………………………………………………………… 59
発表者索引………………………………………………………………… 198

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

第 35 回日本毒性病理学会総会及び学術集会
The 35th Annual Meeting of the JapaneseSociety of Toxicologic Pathology
1. 期 日2019 年 1 月 31 日 ( 木 )・ 2 月 1 日 ( 金 )2. 会 場

タワーホール船堀（東京）〒 134-0091 東京都江戸川区船堀 4-1-1
Tel: 03-5676-2211

3. テーマ

医学・生物学の進歩と毒性病理

4. 年会長鈴木 雅実（中外製薬株式会社 研究本部）

5. プログラム委員会

委員長

小川久美子 （国立医薬品食品衛生研究所）

委岩田

聖 （ルナパス合同会社）

甲斐

清徳 （第一三共株式会社）員渋谷

淳 （東京農工大学大学院）

高橋

智 （名古屋市立大学大学院）

田中

雅治 （一般財団法人バイオインダストリー協会）

藤原利久 （株式会社新日本科学）古川賢 （日産化学株式会社）星谷

達 （株式会社ボゾリサーチセンター）

義澤

克彦 （武庫川女子大学）（50 音順）6. 事務局【会期前】 株式会社未来創薬研究所〒 153-8904 東京都目黒区駒場 4-6-1
東京大学駒場オープンラボラトリー

Tel: 03-5452-5726 Fax: 03-5452-5772
Email: jstp35@chugai-pharm.co.jp【会期中2019 年 1 月 31 日・2 月 1 日】
タワーホール船堀（東京）Tel: 03-5676-2211

7. 事務局補佐

株式会社アイペック〒 170-0002 東京都豊島区巣鴨 1-24-12

Tel: 03-5978-4067 Fax: 03-5978-4068
E-mail: jstp35ip@ipec-pub.co.jp

8. ホームページ

http://www.ipec-pub.co.jp/35jstp/
̶3̶

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

年会長挨拶
第 35 回 日本毒性病理学会総会及び学術集会の会長を務めます、中外製薬・研究本部の鈴木雅実です。本学会総会・学術集会は 2019 年 1 月 31 日（木）・2 月 1 日（金）の 2 日間、タワー
ホール船堀（東京都江戸川区）にて開催します。また、1 月 30 日（水）には、スライドカンファ
ランス、ならびに、日本毒性病理学専門家認定試験における問題解説を開催します。
毒性病理学では、医薬品、農薬、環境物質など様々な化学物質により惹起される病態と、その発現機序を病理学的に解明し、化学物質のヒトへの影響を評価しています。その利点は、比較的簡便な手法で、全身の臓器・組織・細胞を観察・評価することができ、永年培われてきた
学問体系を理解・利用することで、病態の原因、経過、発生機序、全身への影響等を推測することができることだと思います。一方、病変の強さ、拡がり等を定量的に解析することは難しく、また、病態の原因、発現機序などの推測は可能であるものの、結論を導くことが難しいという欠点もあります。
近年、遺伝子発現解析、タンパク質発現解析の進歩により、組織・細胞の変化を分子生物学的視点から解析・理解できるようになりました。さらに、ゲノム編集技術の発達により、遺伝
子ならびタンパク質発現を人工的に制御し、組織・細胞の病理形態的変化と分子生物学的変動との関連を追及することができるようになりました。また、イメージング技術の進歩により、
スナップショットの病理組織像の意味を、時空間的な組織・細胞の変化として解釈できるようになりつつあります。このような、「医学・生物学の進歩」を、「毒性病理」研究で利用していくことは、永年培われてきた毒性病理の学問体系に磨きをかけるとともに、病理学的変化の解釈に新たな視点を加え、毒性病理学的研究手法の弱点とされる部分を克服していくものと期待しています。そこで今回の学術集会のテーマを「医学・生物学の進歩と毒性病理」としました。
遺伝子発現解析、イメージングなど第一線でご活躍されている先生方による特別講演・教育講演・
シンポジウムなどを計画しており、今後の毒性病理学を発展させる原動力のひとつになれればこの上ない喜びです。
最後に、本学会総会・学術集会にご参加いただきました会員の皆様が、それぞれ将来の毒性
病理学の発展に夢と使命を見出せるような、楽しく意見交換と交流を行う場にしていきたいと考えています。多くの皆様方のご参加を心よりお待ちしております。

第 35 回日本毒性病理学会総会及び学術集会

年会長
中外製薬株式会社

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鈴木 雅実
研究本部

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

会場へのアクセス
タワーホール船堀は都営新宿線「船堀」駅前、徒歩 1 分です。
会場へは、公共の交通機関をご利用ください。
電車をご利用の場合
都営新宿線

新宿駅

徒歩

馬喰町駅

約5分
JR 山手線

徒歩

秋葉原駅

約 15 分 ( 急行 10 分 )
都営新宿線

岩本町駅

約5分

約 17 分

船

約4分

都営新宿線

馬喰横山駅

約2分

東京モノレール

徒歩

浜松町駅

約4分

大門駅

約4分

京成本線

成田空港

都営大江戸線

京成八幡駅

約 60 分（特急）

森下駅

約 15 分
徒歩
約4分

本八幡駅

都営新宿線

駅

羽田空港

堀

空港から電車をご利用の場合

約 11 分

徒歩
約1分

都営新宿線
約 11 分

空港からバスをご利用の場合
リムジンバス

羽田空港

約 40 分

一之江駅

京成バス

成田空港

都営新宿線
約2分

約 60 分

タワーホール船堀周辺地図

船堀橋東詰 信号
新大橋通り
コンビニ

コンビニ
船堀街道

勤労福祉会館Ｐ

船堀駅 信号

東

駐車場入口

正面入口

銀行

大島

江

一之

船

堀

タワーホール船堀

駅

宿線

新
都営

̶7̶

タワーホール船堀

東京駅

約 30 分 （急行 約 21 分）

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

会場案内
駐車場出口

1階

駐車スペース

駐車場入口

つきじ植むら（和食）

書籍店

サービスヤード

警備室

駐車スペース

キリンシティ
（ビアレストラン）

インフォメーション
エントランスホール

正面入口

2階

ポスター・
商業展示会場（イベントホール

瑞雲・平安）

ランチョンセミナー
懇親会場（イベントホール

ロビー

̶8̶

福寿・桃源）

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

会場案内

4階
楽屋
1

楽屋
2

楽屋3

楽屋4
楽屋5

講師
控室

特別
会議室
講演会場
（大ホール）

研修室

401
会議室

会 議 室

（会議室 407）

会 議 室（会議室 402）

大会本部
スタッフ控室 （会議室 ４０６）

クローク

（会議室 403）

会 議 室（会議室 405）（会議室 404）

５階
楽屋1

（ロビー）

̶9̶

楽屋４

総合受付

楽屋３

楽屋２

講演会場

（大ホール）

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター・商業展示
ブース
番号

ブース
番号

企業名

企業名

1

株式会社ボゾリサーチセンター

13

日本毒性病理学会

2

株式会社鎌倉テクノサイエンス14

実験病理組織技術研究会

3

株式会社 DIMS 医科学研究所

15

日本エスエルシー株式会社

4

株式会社フィリップス・ジャパン

16

株式会社新日本科学5

株式会社ニコンインステック

17

株式会社池田理化

6

株式会社安評センター

18

株式会社ビジコムジャパン

7

日研ザイル株式会社

19

オリンパス株式会社

8

AnaPath/Safety Alliance20

浜松ホトニクス株式会社

9

PDS パソロジー・データシステムズ・リミテッド

21

サクラファインテックジャパン株式会社

10

株式会社イナリサーチ

22

株式会社新組織科学研究所

11

インディカ・ラボ

23

Charles River

12

富士通株式会社

2階
ポスター・
商業展示会場（イベントホール 瑞雲・平安）

P-042

P-041

P-040

P-039

P-038

P-037

P-036

P-035

P-034

P-033

P-032

P-031

P-030

P-029

P-028

P-027

P-026

P-025

P-024

P-023

P-022

P-021

P-020

P-019

P-043

P-018
P-017

P-044

休憩スペース

ドリンクサービス

P-053

P-007

P-054

P-006

P-055

P-005

P-056

P-004

P-057

P-003

P-058

P-002

P-059

P-001

P-060

̶ 10 ̶

P-062

P-008

P-063

P-052

P-064

P-009

P-065

P-051

P-066

P-010

P-067

P-050

P-068

P-011

P-069

P-049

P-070

P-012

P-071

P-048

P-072

P-013

P-073

P-047

P-074

P-014

P-075

P-046

P-076

P-015

P-077

P-045

P-078

P-016

P-061

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

参加者へのご案内●参加者の方へ
1. 総合受付は 5 階ロビーにて行います。受付時間は下記のとおりです。
1 月 31 日（木）9：00 〜 18：00
2 月 1 日（金）8：45 〜 15：00

2. 事 前 登 録 者 は あ ら か じ め 講 演 要 旨 集 と と も に 送 付 さ れ た 参 加 証（ ネ ー ム カ ー ド ）を 持 参し、会期中は必ず着用ください。ネームホルダーは総合受付にご用意いたしますので、ご利用ください。なお、ネームホルダーは大会終了後に総合受付までご返却くださいますよう、
お願いします。

3. 当日参加者は「当日参加申込書」に必要事項を記入の上、「当日参加受付」にて下記参加費を納入
して参加証を受け取り、氏名・所属を記入の上、会期中は必ず身につけてください。
学生の場合は学生証の提示が必要です。
一般会員：12,000 円
学生会員： 6,000 円
非 会 員：18,500 円※講演要旨集 5,000 円含む

4. 講演要旨集は事前に郵送いたしますので、忘れずにご持参ください。
お忘れの場合は一般会員・学生会員：2,000 円、非会員：5,000 円での販売となります。

5. 質問 ・ 討論される方は、マイクの前に並んだ上、座長の指示に従って所属と氏名を述べてから発言してください。

6. 館内はすべて禁煙です。
7. 場内では携帯電話の電源を OFF またはマナーモードにしてください。
8. ドリンクコーナー・休憩所（2 階 ポスター・商業展示会場）でドリンクを無料配布します。休憩の際、ご利用ください。また、無線 LAN によるインターネット接続をご提供しますのでご利用ください。

9.

昼食はランチョンセミナー、あるいは会場 1 階・7 階のレストランなどをご利用ください。

10. クロークは 4 階（会議室 403 ）にございます。
受付時間は下記のとおりです。

1 月 31 日（木）9：00 〜 18：30
2 月 1 日（金）8：45 〜 18：30
懇親会の際には懇親会会場（福寿 ・ 桃源）のクロークをご利用ください。学術集会のクロークは

18 ： 30 で終了とさせて頂きますので、お預けになったお荷物は必ず 18 ： 30 までにお受け取りください。

11. 会場内での呼び出しは緊急時以外にはいたしませんのでご了承ください。 5 階 総合受付前にメッセージボードを設置いたしますのでご利用ください。

12. 会場内での写真撮影・録画・録音は禁止させていただきます。

̶ 11 ̶

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology●評議員会及び総会のご案内
日本毒性病理学会

会員各位

拝啓
新春の候 ますますご清祥のこととお慶び申し上げます。
さて、第 35 回日本毒性病理学会では、通例に従って評議員会及び総会を合同で下記のとおり
開催いたします。
本会議は、活動報告と次年度計画をご承認いただく重要な会議となりますので、ご出席の程何卒よろしくお願い申し上げます。
評議員の皆様には、当日ご出欠を確認させていただきます。
敬具
日本毒性病理学会
日時： 2019 年 2 月 1 日（金）16：10 〜 18：10

会

場： 講演会場（5F

大ホール）

主な議題： ・2018 年度活動報告及び決算報告・役員選出結果と新体制
・2019 年度活動計画及び予算・功労会員・評議員の推薦
・2021 年度年会長選出
・その他

講演会場（5F 大ホール）
舞台
理事会役員席

評議員席

̶ 12 ̶

理事長

中江大

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology●ランチョンセミナーのご案内
1 月 31 日（木）・2 月 1 日（金）両日ともに、2 階 イベントホール（福寿・桃源）にてランチョンセミナーを行います。チケットは、5 階 総合受付の前にて配布します。配布時間は下記のとおりです。

1 月 31 日（木）9：00
2 月 1 日（金）8：50

ランチョンセミナー L1

1 月 31 日（木） 12:05 〜 13:00

2階

イベントホール 福寿

BIA 10-2474 – Preclinical study data, safety evaluation, pharmacokinetic and pharmacodynamic studies
演者：Klaus Weber（AnaPath GmbH）

座

長：岡崎

共

催：AnaPath/Safety Alliance

欣正（AnaPath GmbH）

ランチョンセミナー L2

1 月 31 日（木） 12:05 〜 13:00

2 階 イベントホール 桃源

病理組織学所見における Adversity の考え方と具体例
演

者：西川
前

秋佳（済生会宇都宮病院病理診断科
国立医薬品食品衛生研究所

座

長：三森

国敏（東京農工大学

共催：株式会社ボゾリサーチセンター

ランチョンセミナー L3

2 月 1 日（金） 12:05 〜 13:00

主任診療科長，安全性生物試験研究センター長）

名誉教授）

2 階 イベントホール 福寿

NOD/Shi-scid, IL-2Rγ KO (NOG) マウスの背景データ
演

者：小林欣滋（株式会社新日本科学）

座

長：平川

公昭（株式会社新日本科学）

共催：株式会社新日本科学

ランチョンセミナー L4

2 月 1 日（金） 12:05 〜 13:00

2階

イベントホール 桃源

Immunohistochemical Investigations of Biopharmaceutical Distribution, Immunogenicity and
Immune Complex Findings
演者：Kevin S. McDorman, DVM, PhD, Diplomate, ACVP
(Corporate Vice President, Global Pathology Services, Charles River)

共

催：Charles River●懇親会のご案内
1. 懇親会は 1 月 31 日（木）18：30 から 2 階 イベントホール（福寿・桃源）にて開催します。
2. 事前登録制ですが、総合受付にて若干名を懇親会費 9,000 円（学生 7,000 円）で申し受けます。定員に達した場合は締め切る場合がございます。予めご了承ください。

̶ 13 ̶

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology●座長の先生方へ■ 特別講演・シンポジウム・ワークショップ・IATP セミナー・一般口演の座長の先生方へ
1. ご担当セッション開始時間の遅くとも 20 分前までには、口演座長受付にお越しください。
2. セッション開始 10 分前には、会場内の次座長席にご着席ください。

■ ポスター発表の座長の先生へ
1. ご担当セッション開始時間の遅くとも 10 分前までには、ポスター受付にお越しください。指示棒、リボンをお渡しします。討論時間には参加証（ネームカード）の他に、リボンを必ず着用ください。セッション終了後、指示棒は必ずご返却ください。

●発表者の先生方へ■ 利益相反について
発表者の皆様は可能な限り COI（利益相反）の開示をお願いいたします。企業に所属の場合は別企業と COI 状態にある場
合に開示してください。
口演発表者は発表スライドの 2 枚目（表題の次のスライド）に、ポスター発表者は一番最後に記載してください。

■ 特別講演・シンポジウム・ワークショップ・IATP セミナー・一般口演の発表者の先生方へ
1. 発表時間の遅くとも 30 分前までに、口演発表受付にお越しいただき、発表データを提出（USB メモリ）
してください。動作確認を行っていただきます。
特別講演、シンポジウム、ワークショップ、IATP セミナーのご講演の先生で、パソコンをお持ち込みの場合は、ミニ D-Sub15 ピンの端子が必要となりますので、変換コネクター等をご準備ください。
2. 発表機材は PC 液晶プロジェクターを使用します。スライド ･ ビデオは使用できませんのでご注意く
ださい。
3. 発表は、演壇におかれたパソコン画面を見ながら、ご自身で画面操作をしてください。
4. 前演者の発表が始まりましたら、次演者席にお着きください。
5. 発表データは、会場のパソコンに一時保存いたしますが、これらのデータは本学会終了後、責任を持って廃棄します。

̶ 14 ̶

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

プレゼンテーションデータ作成時の注意• 環境の違いにより、画面レイアウトが乱れるなどの不具合が発生する可能性があります。
会場のパソコン使用環境は以下の通りですので、ご留意ください。
パソコン ：Windows PC（Macintosh は用意しておりません）
OS：Windows 7
解像度：XGA（1024 × 768）
プレゼンテーション用ソフト：PowerPoint 2010 / 2013 / 2016
フォント ：OS（Windows7）標準• USB メモリに保存してご提出ください。

■ 一般口演発表をされる先生方へ
発表時間は、講演時間 8 分、質疑 4 分となります。

■ ポスター発表をされる先生方へ
1. ポスター発表・貼付・撤去時間
貼付時間

1 月 31 日（木）9：00 〜 10：00※ 1 月 31 日（木）10：00 までに、2 階 ポスター・商業展示会場のポスター受付にて受付を行ってください。
撤去時間

2 月 1 日（金）16：00 〜 17：00※ 発表者用リボン、ピンは元の位置に返却してください。
時間までに撤去されないポスターは事務局で処分いたします。
発表日時

コアタイム

1 月 31 日（木）17：20 〜 18：10

2 月 1 日（金）15：10 〜 16：00

2. 各パネルの前に掲示用のピンと発表者用のリ

20 cm

ボ ン を ご 用 意 し ま す の で、 ご 使 用 く だ さ い。
また、コアタイムには参加証（ネームカード）の20 cm 演題番号

70 cm
演題名・発表者名・所属

ほかに、このリボンを必ず着用してください。
3. パネルのサイズは縦 180 cm ×横 90 cm です。演題
番号については主催者側で用意いたします。演題
名と発表者氏名 ･ 所属の表題を下記の図に従って
ご準備ください。
4. 発表は、1 演題あたり発表 5 分、質疑 5 分で行います。発表者は、座長の指示に従って要約発表 ･ 討

180 cm160 cm内容発表

論をお願いします。発表時間は厳守してください。

90 cm

̶ 15 ̶

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

協賛法人・企業一覧
第 35 回日本毒性病理学会総会及び学術集会を開催するにあたり、多くの企業・団体様よりご支援ご協力を賜りました。ここにお名前を掲載して厚く感謝申し上げます。
第 35 回日本毒性病理学会総会及び学術集会
年会長■ 学会後援■ ランチョンセミナー

日本毒性学会（JSOT）
日本獣医病理学専門家協会（JCVP）
実験病理組織技術研究会

AnaPath / Safety Alliance
株式会社新日本科学Charles River
株式会社ボゾリサーチセンター■ 寄付
旭化成ファーマ株式会社
味の素株式会社
アステラス製薬株式会社
エーザイ株式会社
株式会社ＬＳＩメディエンス
小野薬品工業株式会社
杏林製薬株式会社
株式会社札幌総合病理研究所
三栄源エフ・エフ・アイ株式会社
参天製薬株式会社
一般財団法人残留農薬研究所
株式会社ジェネティックラボ
塩野義製薬株式会社
株式会社新日本科学
住友化学株式会社
生化学工業株式会社
第一三共株式会社
大日本住友製薬株式会社
大鵬薬品工業株式会社
武田薬品工業株式会社
田辺三菱製薬株式会社
中外製薬株式会社
帝人ファーマ株式会社
日産化学株式会社
日本香料工業会
日本たばこ産業株式会社
株式会社バイオテック・ラボ
株式会社バイオ病理研究所
ファイザー株式会社
Meiji Seika ファルマ株式会社

鈴木雅実■ 商業展示AnaPath / Safety Alliance
株式会社安評センター
株式会社池田理化
株式会社イナリサーチ
インディカ・ラボ
オリンパス株式会社
株式会社鎌倉テクノサイエンス
サクラファインテックジャパン株式会社
実験病理組織技術研究会
株式会社新組織科学研究所
株式会社新日本科学Charles River株式会社 DIMS 医科学研究所
株式会社ニコンインステック
日研ザイル株式会社
日本エスエルシー株式会社
浜松ホトニクス株式会社
PDS パソロジー・データシステムズ・リミテッド
株式会社ビジコムジャパン
株式会社フィリップス・ジャパン
富士通株式会社
株式会社ボゾリサーチセンター■ 広告
アルテア技研株式会社
インビボサイエンス株式会社
株式会社新日本科学
株式会社バイオ病理研究所■ HP バナー広告
理科研株式会社（50 音順）̶ 16 ̶

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

日本毒性病理学会のあゆみ
会

長 （所

属）

会

一般

開催地

1

東

京

西山

保一 （北里学園）

1985. 3. 25

2

0

0

2

東

京

藤原

公策 （東京大学）

1986. 2. 7-8

1

5

29

3

名古屋

伊東

信行 （名古屋市立大学）

1987. 2. 6-7

1

8

47

4

浜

松

榎本

眞 （安評センター）

1988. 2. 5-6

1

7

55

5

横

浜

蟹澤

成好 （横浜市立大学）

1989. 1. 27-28

1

6

53

6

札

幌

板倉

智敏 （北海道大学）

1990. 2. 13-14

1

6

80

7

東

京

林

裕造 （国立衛試）

1991. 1. 17-18

1

20

53

8

奈

良

小西

陽一 （奈良医科大学）

1992. 1. 23-24

1

19

71

9

東

京

土井

邦雄 （東京大学）

1993. 1. 21-22

2

4

126

10

広

島

伊藤

明弘 （広島大学）

1994. 1. 27-29

1

18

136

11

大

阪

佐久間貞重 （大阪府立大学）

1995. 1. 26-27

2

10

151

12

東

京

高橋

道人 （国立衛試）

1996. 1. 24-25

0

16

147

13

鳥

取

梅村

孝司 （鳥取大学）

1997. 1. 23-24

1

11

151

14

東

京

前川

昭彦 （佐々木研）

1998. 2. 3-4

1

9

143

15

水

戸

真板

敬三 （残農研）

1999. 1. 28-29

0

7

142

16

岐

阜

森

秀樹 （岐阜大学）2000. 1. 26-27

1

12

125

17

淡

路

奈良間

2001. 1. 25-26

1

10

146

18

東

京

津田

洋幸 （国立がんセンター）

2002. 1. 24-25

0

2

119

19

東

京

布谷

鉄夫 （日生研）

2003. 1. 23-24

1

5

102

20

神

戸*

福島

昭治 （大阪市立大学）

2004. 2. 15-18

2

31

172

21

浜

松

今井

清 （安評センター）

2005. 1. 20-21

1

23

100

22

鹿児島

吉田

浩己 （鹿児島大学）

2006. 1. 26-27

1

15

109

23

東

京

三森

国敏 （東京農工大学）

2007. 1. 30-31

0

15

107

24

名古屋

白井

智之 （名古屋市立大学）

2008. 2. 6-7

1

13

106

25

浜

松

真鍋

淳 （第一三共（株））

2009. 1. 27-28

2

17

124

26

金

沢

田中

卓二 （金沢医科大学）

2010. 2. 3-4

2

10

125

27

大

阪

大石

裕司 （アステラス製薬（株）） 2011. 1. 27-28

2

13

144

28

東

京

西川

秋佳 （国立衛研）

2012. 2. 2-3

2

21

108

29

つくば

原田

孝則 （残農研）

2013. 1. 31-2. 1

1

8

107

30

徳

島

泉

啓介 （徳島大学）

2014. 1. 30-31

2

15

114

31

東

京

中山

裕之 （東京大学）

2015. 1. 29-30

1

11

96

32

香

川

今井田克己 （香川大学）

2016. 1. 28-29

2

13

101

33

大

阪

山手

丈至 （大阪府立大学）2017. 1. 26-27

1

22

83

34

沖

縄

吉見

直己 （琉球大学）

2018. 1. 25-26

2

17

108

35

東

京

鈴木

雅実 （中外製薬（株））

2019. 1. 31-2. 1

2

18

87

功 （摂南大学）*Joint international meeting of JSTP/IFSTP̶ 17 ̶

期

シンポジウム特別講演 ワークショップ
その他

回

演題

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

日 程 表
1 月 30 日（水曜日）
講演会場
8:45

懇親会・
各種会議室

1 月 31 日（木曜日）
講演会場

ポスター・
商業展示会場

受付開始

ポスター貼付ランチョン・
懇親会

9:00
9:00 〜

9:00 〜 10:00

10:00

開会式
9:55 〜

一般演題講演

11:00

10:00 〜 11:50

12:00
ランチョンセミナー
12:05 〜 13:00

編集委員会
12:00 〜 13:30（2F：桃源）

13:00

教育委員会

14:00

15:00

第 31 回スライド
カンファランス

13:45 〜 14:45（会議室 402）

ポスター閲覧
/ 商業展示シンポジウム 1
13:１0 〜 15:１0

12:30 〜 17:30

特別講演 1
16:00

理事会
15:00 〜 18:00（会議室 402）

17:00

15:15 〜 16:15

IATP セミナー
1６:20 〜 17:10

ポスター発表Ⅰ
17:20 〜 18:10

18:00

試験問題解説
18:00 〜 19:00

19:00

20:00

懇親会

President’s
Meeting

18:30 〜 20:30

19:00 〜 20:00

21:00

̶ 18 ̶

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

日 程 表
2 月 1 日（金曜日）
講演会場
8:45
9:00

10:00

ポスター・商業
展示会場

ランチョン

各種会議

受付開始
８:４５〜

シンポジウム 2
9:00 〜 10:50

11:00

特別講演 2
10:55 〜 11:55

ポスター閲覧
/ 商業展示12:00

ランチョンセミナー
12:05 〜 13:00

国際用語委員会
12:00 〜 13:00

13:00

14:00

ワークショップ
13:10 〜 15:00

15:00

ポスター発表Ⅱ
15:10 〜 16:00

16:00

ポスター撤去16:00 〜 17:00

17:00

総会
16:10 〜 18:10

18:00

19:00

20:00

21:00

̶ 19 ̶

（会議室 402）

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

司会・座長一覧
セッション名日時

演題番号

司会・座長（所属）

1 月 31 日（木）15:15 〜 16:15

鈴木雅実（中外製薬（株））

特別講演 22 月 1 日（金）10:55 〜 11:55

小川久美子（国立医薬品食品衛生研究所）

シンポジウム 1

1 月 31 日（木）13:10 〜 15:10

髙橋智（名古屋市立大学）

田中

雅治（（一財）バイオインダストリー協会）

シンポジウム 2

2 月 1 日（金）9:00 〜 10:50

義澤克彦（武庫川女子大学）

渋谷

淳（東京農工大学大学院）

古川賢（日産化学（株））

星谷達（（株）ボゾリサーチセンター）藤原利久（（株）新日本科学）岩田

聖（ルナパス合同会社）

横平

政直（香川大学）

桑村充（大阪府立大学）

ワークショップ

2 月 1 日（金）13:10 〜 15:00

W1 〜 4W5 〜 8

一般口演Ⅰ

1 月 31 日（木）10:00 〜 10:50

一般口演Ⅱ

1 月 31 日（木）10:50 〜 11:50

IATP Seminar
Molecular Pathogy

1 月 31 日（木）16:20 〜 17:10
P-01 〜 04
P-09 〜 11

ポスター発表Ⅰ

1 月 31 日（木）17:20 〜 18:10

P-23 〜 26
P-31 〜 34
P-39 〜 42
P-47 〜 50
P-55 〜 57

民（大阪市立大学）

尾崎

清和（摂南大学）

甲斐清徳（第一三共（株））

平田

暁大（岐阜大学）

猪又晃（富士フィルム（株））

梯

アンナ（大阪市立大学）

豊沢

かおる（（株）住化分析センター）

飯田麻里（University of Wisconsin-Madison）

中野

今日子（エーザイ（株））

河部

真弓（（株）DIMS 医科学研究所）

川口

博明（鹿児島大学）高橋尚史（（一財）残留農薬研究所）

佐藤則博（旭化成ファーマ（株））

村上雄一（田辺三菱製薬（株））

山口

裕子（（株）ボゾリサーチセンター）

下井昭仁（（株）イナリサーチ）日比大介（小野薬品工業（株））

豊田

武士（国立医薬品食品衛生研究所）

村井厚子（中外製薬（株））

̶ 20 ̶

ポスター会場︵瑞雲・平安︶

P-16 〜 18

魏

講演会場︵大ホール︶

特別講演 1

会場The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

セッション名日時

演題番号

ポスター発表Ⅰ

1 月 31 日（木）17:20 〜 18:10

P-70 〜 72
P-76 〜 78
P-05 〜 08
P-12 〜 15
P-19 〜 22

ポスター発表Ⅱ2 月 1 日（金）15:10 〜 16:00

P-35 〜 38
P-43 〜 46
P-51 〜 54
P-58 〜 61
P-66 〜 69
P-73 〜 75

朋（マルホ（株））

篠塚淳子（中外製薬（株））

白井紀充（ファイザー製薬（株））

諸木孝泰（大塚製薬（株））

上田誠（日本新薬（株））

松本

泉美（大日本住友製薬（株））

高須

伸二（国立医薬品食品衛生研究所）

能登貴久（参天製薬（株））

土居卓也（（株）LSI メディエンス）安藤亮（北里大学）鈴木

周五（名古屋市立大学）

金子

英志（帝人ファーマ（株））

池崎

信一郎（（株）ボゾリサーチセンター）

鈴木智（大鵬薬品工業（株））

美谷島

克宏（東京農業大学）

髙橋

美和（アステラス製薬（株）））
土屋 紀子（塩野義製薬（株）
佐藤 洋（岩手大学）
小林欣滋（（株）新日本科学）佐藤寛子（田辺三菱製薬（株））

穴山

久志（武田薬品工業（株））

菅野剛（（株）LSI メディエンス）今岡尚子（第一三共（株））

安井雄三（日本たばこ産業（株））

井上薫（国立医薬品食品衛生研究所）

野口

ちひろ（大正製薬（株））

̶ 21 ̶

ポスター会場︵瑞雲・平安︶

P-27 〜 30

佐々木

会場

ポスター会場︵瑞雲・平安︶P-62 〜 65

司会・座長（所属）The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

プログラム
特別講演 1
第 1 日目

1 月 31 日（木） 15:15 - 16:15

講演会場（大ホール）
座長：鈴木

SL-1

雅実（中外製薬（株））

がんゲノム解析からひもとく変異プロセス
油谷 浩幸
東京大学

先端科学技術研究センター

ゲノムサイエンス分野

特別講演 2
第 2 日目

2 月 1 日（金） 10:55 - 11:55

講演会場（大ホール）
座長：小川

SL-2

革新的バイオイメージング技術が拓く次世代毒性病理
今村 健志
愛媛大学

大学院医学系研究科

分子病態医学講座

̶ 22 ̶

久美子（国立医薬品食品衛生研究所）

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

シンポジウム 1
第 1 日目

病理解析技術の進展

1 月 31 日（木） 13:10 - 15:10

講演会場（大ホール）
座長：髙橋
田中

S1-1

智（名古屋市立大学）
雅治（（一財）バイオインダストリー協会）

透明化技術を利用した組織構造解析法○山崎 雅輝中外製薬（株）

S1-2

毒性病理評価における Magnetic Resonance Imaging（MRI）活用の可能性○武田 賢和エーザイ株式会社

S1-3

バイオファーマシューティカル・アセスメント機能ユニット

筑波安全性研究部

毒性評価におけるイメージング質量分析法の活用○樫村 茜 1)，佐藤 寛子 1)，田中 広治 2)，明石 知也 2)，大野 祐子 1)，吉川 佳佑 1)，馬場 伸之 1)，
鍛冶 秀文 3)，田中 雅治 4)1)

田辺三菱製薬（株） 安全性研究所，2) 田辺三菱製薬（株） 薬物動態研究所，3)（株）LSI メディエンス，（一財）バイオインダストリー協会

4)

S1-4

人工知能を用いた病理検査の取り組み―現状と今後の展望―○甲斐 清徳 1)，土屋 卓磨 2)，岩本 和樹 3)，袴田 和巳 4,5)
1)
5)

S1-5

第一三共株式会社，2) 大塚製薬株式会社，3) 富士通株式会社，4) シスメックス株式会社，
エルピクセル株式会社

キメラ変異遺伝子の検出によるヒト軟部腫瘍の診断○野島 孝之金沢大学

シンポジウム 2整形外科

第 2 日目病理診断科

新規 in vivo, in vitro モデルの発展とその応用

2 月 1 日（金） 9:00 - 10:50

講演会場（大ホール）

座長：義澤 克彦（武庫川女子大学）
渋谷 淳（東京農工大学大学院）

S2-1

マウス正常組織由来オルガノイドの化学発がん研究への応用○今井 俊夫
国立がん研究センター

S2-2

研究所

動物実験部門ヒト化 NOG マウスを用いたヒト免疫反応の再現と応用○高橋 武司（公財）実験動物中央研究所

S2-3

オートファジー欠損マウスの解析から何がわかったか？
○小松 雅明
順天堂大学

S2-4

医学部

生理学第二講座

尿路結石モデルマウスの開発とその活用による遺伝学的研究の成果○岡田 淳志，田中 勇太朗，杉野 輝明，海野 怜，田口 和己，濱本 周造，安藤 亮介，戸澤 啓一，
郡 健二郎，安井 孝周
名古屋市立大学大学院

医学研究科

腎・泌尿器科学̶ 23 ̶

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ワークショップ
第 2 日目

毒性評価時に問題となる基礎病変とその考え方

2 月 1 日（金） 13:10 - 15:00

講演会場（大ホール）
座長： 古川 賢（日産化学（株））
星谷 達（（株）ボゾリサーチセンター）

W-1

がん原性試験における腫瘍病変○山口 裕子，山川 誠己，永谷 真理子，池崎 信一郎，星谷 達（株）ボゾリサーチセンター

W-2

病理部

毒性評価上注意すべき胃病変―それって被験物質の影響？―○佐藤 順子（株）LSI メディエンス

W-3

摂餌減少や日内変動に関連した心臓や肝臓の変化○松尾 沙織里中外製薬株式会社

W-4

毒性試験における動脈炎，自然発生か薬剤誘発性か○藤原 利久（株）新日本科学

安全性研究所病理研究部

座長： 藤原岩田

W-5利久（（株）新日本科学）
聖（ルナパス合同会社）

ストレスと副腎○猪又 晃
富士フイルム株式会社

W-6

医薬品・ヘルスケア研究所

大動物の未成熟生殖器における毒性評価上の課題○畠山 洋文 1)，井上 紗季 1)，渡辺 純 1)，武井 由弘 1)，小泉 治子 1)，梶村 哲世 1)，佐藤 伸一 1)，
岩田 聖 2)
1)（株）イナリサーチ

W-7

試験研究センター，2) ルナパス毒性病理研究所

毒性評価時に問題となる基礎病変とその考え方―気管内投与法により誘発される肺病変―○沼野 琢旬，杉山 大揮，森岡 舞，宇田 一成，土井 悠子，河部 真弓，米良 幸典，玉野 静光
株式会社 DIMS 医科学研究所

W-8

Pathological Indicators for Reﬂux-Related Changes in Oral (Gavage) Studies○ Klaus Weber
AnaPath GmbH, Switzerland, Euroﬁns/BSL BIOSERVICE Scientiﬁc Laboratories Munich GmbH

IATP Seminar Molecular Pathogy

第 1 日目

1 月 31 日（木） 16:20 - 17:10

講演会場（大ホール）
座長：甲斐

IATP

清徳（第一三共（株））

The Toolbox for Molecular Pathology
Darlene Dixon, DVM, PhD, DACVP, FIATP
Molecular Pathogenesis Group, National Toxicology Program (NTP) Laboratory, National Institute of Environmental
Health Sciences, Research Triangle Park, North Carolina, USA̶ 24 ̶

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

一般口演Ⅰ
第 1 日目

1 月 31 日（木） 10:00 - 10:50

講演会場（大ホール）
座長：横平 政直（香川大学）
桑村 充（大阪府立大学）

O-01

ラット膀胱発がんに対するニコチンの影響○鈴木 周五，加藤 寛之，不二 哲，内木 綾，高橋 智
名市大・院・医・実験病態病理

O-02*

o-Acetoacetotoluidide による膀胱に対する毒性、発がんプロモーション作用の検討○行松 直，奥野 高裕，魏 民，藤岡 正喜，梯 アンナ，鰐渕 英機
大阪市立大学大学院医学研究科

O-03

分子病理学

新生仔期での甲状腺被曝で特異的に誘発される甲状腺病変○藤本 成明 1)，松山 睦美 2)，中島 正洋 2)
1)

O-04*

原爆放射線医科学研究所，2) 長崎大学

広島大学

原爆後障害医療研究所

非遺伝毒性肝発がん物質特異的に過メチル化・発現下方制御を示した遺伝子の肝発がん物質に対する発現反応性○伊藤 優子 1,2)，中島 康太 1,2)，増渕 康哲 1,2)，菊地 聡美 1)，齋藤 文代 3)，赤堀 有美 3)，
吉田 敏則 1)，渋谷 淳 1)
1)

東京農工大

獣医病理，2) 岐阜大院

連合獣医，3) 化学物質評価研究機構

一般口演Ⅱ
第 1 日目

1 月 31 日（木） 10:50 - 11:50

講演会場（大ホール）
座長： 魏 民（大阪市立大学）
尾崎 清和（摂南大学）

O-05

マウス乳癌転移モデルにおけるリンパ節の転移前ニッチの形成○柴田 雅朗，伊藤 裕子，田中 義久，濱岡 仁美，近藤 洋一
大阪医科大学医学部・生命科学講座解剖学教室

O-06*

Luteolin の去勢抵抗性前立腺癌に対する抑制効果と androgen receptor splice variant の役割○内木 綾 1,2)，加藤 寛之 1)，鈴木 周五 1)，高橋 智 1)
1)

O-07

名古屋市立大学大学院 医学研究科 実験病態病理学，2) 名古屋市立東部医療センター

病理診断科

ジブチルスズのラット胎盤及び胎児毒性への影響○古川 賢 1)，辻 菜穂 1)，小林 由幸 2)，林 清吾 1)，阿部 正義 1)，黒田 雄介 1)，早川 知里 1)，竹内 和也 1)，
杉山 晶彦 3)
1)
3)

O-08

日産化学株式会社 生物科学研究所，2) 日産化学株式会社
岡山理科大学 獣医学部 獣医学科

物質科学研究所，腹腔内投与銀ナノ粒子による BALB/c マウスの急性毒性における抗酸化剤の影響○ Young-Man Cho，水田 保子，赤木 純一，豊田 武士，井手 鉄哉，小川 久美子
国立医薬品食品衛生研究所

O-09

病理部

トキシコゲノミクスによるインフルエンザワクチンおよびアジュバントの次世代安全性評価法の開発○水上 拓郎 1)，平舘 裕希 1)，佐々木 永太 1)，百瀬 暖佳 1)，古畑 啓子 1)，楠 英樹 1)，浅沼 秀樹 2)，
浜口 功 1)
1)

国立感染症研究所

血液・安全性研究部，2) 国立感染症研究所

̶ 25 ̶

インフルエンザウイルス研究センター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター発表Ⅰ
第 1 日目神経系 1

1 月 31 日（木） 17:20 - 18:10

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長：平田 暁大（岐阜大学）
猪又 晃（富士フィルム（株））

P-01

マウスの reserpine 投与における神経毒性検討○佐藤 亮，寺山 由依，西村 悠花里，土屋 卓磨，諸木 孝泰，北浦 敬介，松本 智志，吉川 剛（株）大塚製薬

P-02*

徳島研究所

前臨床研究センター

ステリグマトシスチンのラット発達期曝露による海馬歯状回における神経新生に対する影響○中島 康太 1,2)，伊藤 優子 1,2)，増渕 康哲 1,2)，菊地 聡美 1)，吉田 敏則 1)，小西 良子 3)，渋谷 淳 1)
1)

P-03*

東京農工大・獣医病理，2) 岐阜大・院・連合獣医，3) 麻布大・生命環境科学・食品安全科学

ラット発達期から成熟期までの alpha-glycosyl isoquercitrin の曝露が恐怖記憶の消去学習を促進する○増渕 康哲 1,2)，中島 康太 1,2)，伊藤 優子 1,2)，菊地 聡美 1)，小柳 美穂子 3)，林 新茂 3)，
吉田 敏則 1)，渋谷 淳 1)
1)

P-04*

東京農工大

獣医病理，2) 岐阜大・院・連合獣医，3) 三栄源エフ・エフ・アイ株式会社

カニクイザルの神経黒色症の１例○柚川 藍色，森山 亜紀子，永田 一郎，小林 欣滋，千早 豊（株）新日本科学ポスター発表Ⅱ
第 2 日目安全性研究所神経系 2

2 月 1 日（金） 15:10 - 16:00

ポスター会場（2F
座長： 高須能登

P-05*

瑞雲・平安）

伸二（国立医薬品食品衛生研究所）
貴久（参天製薬（株））

亜硫化ニッケル（Ni3S2）を単回硝子体内投与した Fischer ラットの眼球外に発生した眼窩内腫瘍の病理組織学的解析○山際 慶典 1,2)，政次 美紀 1)，田原 春菜 1)，根本 真吾 1)，倉田 昌明 1)，佐藤 洋 2)
1)

P-06

千寿製薬（株） 総合研究所，2) 岩手大学大学院

獣医学研究科

比較薬理毒性学研究室

外傷性孔脳症と視覚器異常がみられた雌ビーグル犬の 1 例○橋口 収，池崎 信一郎，齋藤 翼，伊倉 佐織，中澤 朋美，笠原 健一郎，
山口 裕子（株）ボゾリサーチセンター

P-07*

病理部

網膜色素変性症動物モデルにおけるキトサンオリゴ糖の抑制効果○小山 千尋 1)，竹之内 明子 1)，金瀬 茜 1)，行光 由莉 1)，榎本 祐子 2)，野口 貴子 3)，黒住 誠司 3)，
佐藤 公彦 3)，岡本 芳晴 4)，義澤 克彦 1)
1)
3)

P-08*

武庫川女子大学大学院 生活環境学研究科 食物栄養学専攻，2) 関西医科大学
甲陽ケミカル株式会社，4) 鳥取大学 共同獣医学科 臨床獣医学

倫理審査センター，

ラット下垂体中間葉および後葉にみられる自然発生性病変の病理組織学的特徴○加藤 由隆，伊藤 強，小山 彩，高橋 尚史，志賀 敦史，岡崎 欣正，原田 孝則（一財）残留農薬研究所

̶ 26 ̶

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター発表Ⅲ
第 1 日目

口腔・消化管 1

1 月 31 日（木） 17:20 - 18:10

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長：梯 アンナ（大阪市立大学）
豊沢 かおる（（株）住化分析センター）

P-09

C57BL/6J 野生型および Polκ 欠損マウスにおけるベンゾ [a] ピレンおよび α- ナフトフラボン併用投与の効果○赤木 純一 1)，Young-Man Cho1)，豊田 武士 1)，横井 雅幸 2,3)，花岡 文雄 2,4)，
大森 治夫 2)，小川 久美子 1)
1)
4)

P-10*

国立衛研・病理，2) 学習院大・理・生命，3) 神戸大・バイオシグナル研セ，
筑波大・生命領域学際研セ

胃癌マウス移植モデルにおける同所移植と皮下移植腫瘍の形態学的特徴と遺伝子発現プロファイルの比較○松尾 沙織里 1)，中野 清孝 2)，西沢 隆 2)，河村 大輔 3)，藤井 悦子 1,2)，加藤 淳彦 1)，
舟橋 真一 2)，石川 俊平 3)，鈴木 雅実 1,2)
1)

P-11

中外製薬（株），2)（株）未来創薬研究所，3) 東京医科歯科大学

新規抗がん物質の特性と作用機序○安藤 さえこ 1)，深町 勝巳 1)，松本 晴年 1)，吉見 直己 2)，酒々井 眞澄 1)1)
名古屋市立大学大学院
腫瘍病理学講座

ポスター発表Ⅳ
第 2 日目

医学研究科

分子毒性学分野，2) 琉球大学大学院

口腔・消化管 2

2 月 1 日（金） 15:10 - 16:00

医学研究科

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長：土居 卓也（（株）LSI メディエンス）安藤 亮（北里大学）

P-12

Azoxymethane and dextrane sulfate sodium 誘発大腸炎関連大腸癌は、糖尿病により増悪する○尾崎 清和，出雲 友扶子，大嶋 成奈優，寺山 由依，松浦 哲郎
摂南大学

P-13

薬学部

病理学

デキストラン硫酸ナトリウム誘発マウス大腸炎モデルにおけるラカンカの効果に関する検討○小川 秀治 1)，美谷島 克宏 1,2)，名倉 かれん 2)，野沢 美波 2)，原田 紗枝 2)，山口 理紗子 2)，
小柳 美穂子 3)，林 新茂 3)，渡邊 厚 1,4)，煙山 紀子 2)，中江 大 1,2)
1)
4)

P-14

東京農大・院・食品栄養，2) 東京農大・食品安全健康，3) 三栄源エフ・エフ・アイ，
旭化成メディカル

イヌの遺伝性消化管腫瘍の同定○平田 暁大 1)，吉嵜 響子 2)，西飯 直仁 3)，川部 美史 4)，森 崇 4)，柳井 徳磨 2)，酒井 洋樹 2)
1)

岐阜大学 科学研究基盤センター 動物実験分野，2) 岐阜大学 応用生物科学部 共同獣医学科
獣医病理学研究室，3) 岐阜大学 応用生物科学部 共同獣医学科 獣医内科学研究室，
4)
岐阜大学 応用生物科学部 共同獣医学科 分子病態学研究室

P-15*

イヌの組織球性潰瘍性大腸炎の病理組織学的検討○畝山 瑞穂 1)，チェンバーズ ジェームズ 1)，中島 亘 2)，内田 和幸 1)，中山 裕之 1)
1)

東京大学

獣医病理学研究室，2) 日本小動物医療センター

̶ 27 ̶

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ポスター発表Ⅴ
第 1 日目

肝臓・膵臓 1

1 月 31 日（木） 17:20 - 18:10

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長：飯田 麻里（University of Wisconsin-Madison）
中野 今日子（エーザイ（株））

P-16*

リポソーム製剤投与が引き起こすイヌ肝臓及び胆嚢における出血性変化○牧田 慶子 1)，柿沼 千早 2)，阪田 佳紀 1)，山川 達也 1)，猪又 晃 1)，原 健史 1)
1)

P-17*

富士フイルム（株） 医薬品・ヘルスケア研究所，2) バイオサイエンス＆テクノロジー開発センター

Participation of heterogeneous macrophages related to M1/M2 types
in D-galactosamine-induced acute rat liver injury○ Nahid Rahman, Munmun Pervin，倉持 瑞樹，Mohammad Karim，井澤 武史，桑村 充，山手 丈至
大阪府立大

P-18*

獣医病理

チオアセトアミド（TAA）誘発ラット急性肝障害モデルでの好中球・マクロファージ誘導における炎症誘導因子（DAMPs）の役割の解明○倉持 瑞樹，井澤 武史，ナヒド ラマン，桑村 充，山手 丈至
大阪府立大

ポスター発表Ⅵ

獣医病理

第 2 日目

肝臓・膵臓 22 月 1 日（金） 15:10 - 16:00

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長： 鈴木 周五（名古屋市立大学）
金子 英志（帝人ファーマ（株））

P-19

NASH モデル TSOD マウスにおける肝臓腫瘍および肝臓組織のメタボローム解析○梯 アンナ，石井 真美，奥野 高裕，多胡 善幸，藤岡 正喜，魏 民，鰐渕 英機
大阪市立大学P-20

大学院医学研究科

分子病理学

F344 系ラットにおける CDAA 食誘発非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）様病態に対して
ラカンカ抽出物が及ぼす影響○宇野 絹子 1)，美谷島 克宏 1,2)，鈴木 佳奈恵 2)，菊池 耕平 2)，仲井 杏海 2)，永吉 司 2)，張 舜恵 1)，
煙山 紀子 2)，小柳 美穂子 3)，林 新茂 3)，小川 秀治 1)，渡邊 厚 1)，中江 大 1,2)
1)

P-21

東京農大・院・食品栄養，2) 東京農大・食品安全健康，3) 三栄源エフ・エフ・アイ

雌性 SDT fatty ラットの非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）様病態の形成過程における血中パラメータの変動○龍 完次朗 1)，美谷島 克宏 1,2,3)，張 舜恵 2)，篠原 雅巳 4)，太田 毅 5)，大畑 敬一 6)，宇野 絹子 2)，
煙山 紀子 3)，小川 秀治 1)，渡邊 厚 1,7)，中江 大 1,2,3)
1)

東京農業大学大学院 農学研究科 食品安全健康学専攻，2) 東京農業大学大学院 農学研究科
食品栄養学専攻，3) 東京農業大学 応用生物科学部 食品安全健康学科，4) 日本クレア（株） 東京 AD 部，
5)
日本たばこ産業（株） 医薬総合研究所，6) シミックホールディングス（株） L-FABP 事業部，
7)
旭化成メディカル（株）

P-22*

脂質代謝関連転写因子 SREBP-1 が小胞体ストレスと慢性炎症に及ぼす影響○高 臨風 1)，煙山 紀子 2)，斎藤 奈津美 2)，渡邊 聖栄子 2)，竹井 亜矢子 2)，田添 晴椰 2)，龍 完次朗 1)，
宇野 絹子 3)，張 舜恵 3)，小川 秀治 3)，渡邊 厚 3,4)，美谷島 克宏 1,2,3)，中江 大 1,2,3)
1)
3)

東京農大・院・農学研・食品安全健康，2) 東京農大・応生・食品安全健康，
東京農大・院・農学研・食品栄養，4) 旭化成メディカル・医療技術材料研̶ 28 ̶

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ポスター発表Ⅶ
第 1 日目

肝臓・膵臓 3

1 月 31 日（木） 17:20 - 18:10

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長：河部 真弓（（株）DIMS 医科学研究所）
川口 博明（鹿児島大学）

P-23

F344 ラットを用いたアセタミドの 28 日間反復投与による肝毒性評価○石井 雄二 1)，菊池 玲美花 1,2)，木島 綾希 1)，高須 伸二 1)，小川 久美子 1)，梅村 隆志 1,2)
1)

P-24

国立医薬品食品衛生研究所

病理部，2) ヤマザキ動物看護大

動物看護学部早期ラット肝発がんに対する Bear Bile Powder の抑制作用○金 美蘭，張 梅，唐 倩，王 自力，王 剣
中国

P-25

西南大学

動物科術学院ジフェニルアルシン酸の F344 ラットにおける慢性毒性試験及び発がん性試験○山口 貴嗣，魏 民，藤岡 正喜，梯 アンナ，鰐渕 英機
大阪市立大学大学院

P-26*

医学研究科

分子病理学

ラット肝臓における GST-P 陽性巣の種々発がん物質休薬後動態の検討○高須 伸二 1)，中村 くるみ 1,2)，石黒 結唯 1,2)，石井 雄二 1)，木島 綾希 1)，小川 久美子 1)，梅村 隆志 1,2)
1)

国立医薬品食品衛生研究所

ポスター発表Ⅷ
第 2 日目

病理部，2) ヤマザキ動物看護大学

動物看護学部

肝臓・膵臓 42 月 1 日（金） 15:10 - 16:00

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長：池崎 信一郎（（株）ボゾリサーチセンター）
鈴木 智（大鵬薬品工業（株））

P-27

犬の肝腫瘍における筋上皮細胞分化の免疫組織化学的解析○桑村 充 1)，辻 佑佳 1)，倉持 瑞樹 1)，井澤 武史 1)，秋吉 秀保 2)，山手 丈至 1)
1)

P-28*

大阪府立大学

獣医病理学教室，2) 大阪府立大学

獣医外科学教室

マウスにおける自然発生性の膵腺房細胞の空胞化についての病理学的検討○安野 恭平 1)，伊倉 佐織 2)，袴田 志野婦 1)，岡戸 恵子 3)，山口 裕子 2)，甲斐 清徳 1)，森 和彦 1)
1)
3)

P-29

第一三共（株） 安全性研究所，2)（株）ボゾリサーチセンター
第一三共 RD ノバーレ（株） トランスレーショナル研究部

若齢の SD ラットにみられた膵臓傍胆管部の嚢胞の 1 例○山下 由真，佐々木 朋，土肥 孝彰
マルホ（株） 開発研究部

P-30*

安全性研究グループ

抗アレルギー薬の膵癌化学予防効果の検討○加藤 寛之，内木 綾，鈴木 周五，高橋 智
名古屋市立大学大学院医学研究科

実験病態病理学̶ 29 ̶

病理部，

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ポスター発表Ⅸ
第 1 日目泌尿器 1

1 月 31 日（木） 17:20 - 18:10

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長： 高橋 尚史（（一財）残留農薬研究所）
佐藤 則博（旭化成ファーマ（株））

P-31*

雄 SDT fatty ラットにおける SGLT2 の発現及び病態解析○張 舜恵 1)，美谷島 克宏 1,2)，中村 優佳 2)，太田 毅 3)，篠原 雅巳 4)，宇野 絹子 1)，煙山 紀子 2)，
中江 大 1,2)
1)

P-32*

東京農大・院・食品栄養，2) 東京農大・食品安全健康，3) 日本たばこ産業，4) 日本クレア

若年（11 週間）の ICR マウスに見られる自然腎尿細管肥大○崔 賢智 1)，孔 ミンジョン 1)，金 惠貞 1)，鈴木 雅実 2)，岩田 聖 3)，朴 チャンヒ 1)
1)

P-33*

C&C 新薬研究所，2) 中外製薬，3) ルナパス合同会社 毒性病理研究所

アセトアミノフェン誘発ラット腎障害モデルにおけるミード酸の抑制効果○竹之内 明子 1)，平塚 未夢 1)，三浦 麻里安 1)，新家 由実子 1)，平山 由佳理 1)，小山 千尋 1)，
木下 勇一 2)，浜崎 景 3)，義澤 克彦 1)
1)
武庫川女子大学 生活環境学部 食物栄養学科，2) 和歌山県立医科大学附属病院
病理診断部門，3) 富山大学 医学部 公衆衛生学講座

P-34*

中央検査部

高コレステロール・高ナトリウム給餌ミニブタにみられた組織学的所見○村瀬 詩織，加藤 正巳，今泉 隆人，荒井 剛志，小沼 克安，松下 久美，遠藤 克己，小池 恒雄，
金原 智美，今井 順，伊藤 格，木村 均（株）日本バイオリサーチセンター

ポスター発表Ⅹ
第 2 日目泌尿器 2

2 月 1 日（金） 15:10 - 16:00

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長： 美谷島 克宏（東京農業大学）
髙橋 美和（アステラス製薬（株））

P-35*

若齢 Crl:CD1（ICR）マウスに自然発生したヒアリン糸球体症の一例○仁科 嘉修，樫村 茜，水川 真緒，藤木 勝也，村上 雄一，馬場 伸之，久米 英介
田辺三菱製薬（株） 創薬本部

P-36*

安全性研究所膀胱発がん物質投与によるγ -H2AX 形成の用量相関性及び経時的変化○山田 貴宣 1,2)，豊田 武士 1)，松下 幸平 1)，森川 朋美 1)，小川 久美子 1)
1)

P-37

国立医薬品食品衛生研究所

病理部，2) 東京農工大学大学院

獣医病理学研究室

BBN 誘発マウス膀胱がんモデルにおける Acetazolamide の予防効果の検討○魏 民，藤岡 正喜，行松 直，奥野 高裕，山口 貴嗣，梯 アンナ，鰐渕 英機
大阪市立大学大学院医学研究科

P-38

分子病理学

膀胱発がん物質投与初期における遺伝子発現解析および新規膀胱発がんマーカーの探索○豊田 武士 1)，山田 貴宣 1,2)，松下 幸平 1)，森川 朋美 1)，小川 久美子 1)1)

国立医薬品食品衛生研究所

病理部，2) 東京農工大学

̶ 30 ̶

獣医病理学研究室

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ポスター発表Ⅺ
第 1 日目呼吸器 1

1 月 31 日（木） 17:20 - 18:10

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長： 村上 雄一（田辺三菱製薬（株））
山口 裕子（（株）ボゾリサーチセンター）

P-39*

Cisplatin のラットへの反復経口投与による肺障害の経時的解析○寺山 由依，佐藤 亮，西村 悠花里，土屋 卓磨，諸木 孝泰，北浦 敬介，吉川 剛
大塚製薬株式会社

P-40*

徳島研究所

前臨床研究センター

ブレオマイシン気管内投与によるラットの肺胞洗浄液検査及び病理組織学的所見に及ぼす投与容量の影響について○杉山 大揮，森岡 舞，沼野 琢旬，樋口 仁美，河部 真弓，米良 幸典
株式会社 DIMS 医科学研究所

P-41

カニクイザルにおけるブレオマイシン誘発肺毒性の評価法検討○熊谷 和善，櫻井 健，前田 優，片岡 広子，玉井 聡，本多 久美，大澤 徹也，
千葉 克芳，甲斐 清徳，森 和彦
第一三共（株）安全性研究所

P-42*

げっ歯類における慢性胸膜炎症及び肺増殖性病変に対するアンブロキソール塩酸塩の修飾作用についての検討○吉田 翔太 1,2)，横平 政直 1)，山川 けいこ 1)，成澤 裕子 1)，蟹江 尚平 2)，橋本 希 1)，今井田 克己 1)
1)
2)

香川大学 医学部 病理病態学・生体防御医学講座
大鵬薬品工業株式会社 研究本部 安全性研究所

ポスター発表Ⅻ
第 2 日目

腫瘍病理学，

呼吸器 2

2 月 1 日（金） 15:10 - 16:00

ポスター会場（2F
座長：土屋
佐藤

P-43*

瑞雲・平安）

紀子（塩野義製薬（株））
洋（岩手大学）

有機ヒ素化合物 Dimethylarsinic acid の経胎盤ばく露によるマウス肺発がん過程におけるヒストン修飾異常○藤岡 正喜，魏 民，奥野 高裕，行松 直，梯 アンナ，大石 裕司，鰐渕 英機
大阪市立大学

P-44

院

医

分子病理学

肺発がん過程における片肺虚脱による promotion 作用と Insulin-like growth factor-1（IGF-1）の関与○横平 政直，橋本 希，山川 けいこ，成澤 裕子，今井田 克己
香川大学

P-45*

医学部

腫瘍病理学

プロゲステロン阻害剤（mifepristone）の雌性 A/J マウス NNK 誘発肺腫瘍への影響○成澤 裕子，横平 政直，山川 けいこ，橋本 希，吉田 翔太，今井田 克己
香川大学

P-46

医学部

腫瘍病理学

ラットにおいて DHPN で誘発されたメソテリン陽性肺増殖性病変の病理組織化学的性状○坂本 義光 1)，多田 幸恵 1)，北條 幹 1)，前野 愛 1)，鈴木 俊也 1)，猪又 明子 1)，守安 貴子 1)，中江 大 2)1)

東京都健康安全研究センター，2) 東京農業大

̶ 31 ̶

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ポスター発表ⅩⅢ
第 1 日目生殖器

1 月 31 日（木） 17:20 - 18:10

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長： 下井 昭仁（（株）イナリサーチ）
日比 大介（小野薬品工業（株））

P-47

胎生期 Di（n-butyl）phthalate 曝露ラットにおける雄ラット精管形成に関する検討○杉山 光 1)，岡山 祐弥 1)，鷹橋 浩幸 2)，池上 雅博 2)，武藤 朋子 3)，和久井 信 1)
1)
3)

P-48*

麻布大学 獣医学部 比較毒性学，2) 東京慈恵会医科大学
一般財団法人 食品薬品安全センター

病理学，

SD ラットにみられた真性半陰陽の 1 例○岡野 拡，高木 みづほ，鈴木 勇，藤原 史織，永谷 真理子，山口 裕子（株）ボゾリサーチセンター

P-49*

病理部

非妊娠カニクイザルにおける子宮の epithelial plaque の 1 例○矢吹 悠乃，柚川 藍色，森山 亜紀子，小林 欣滋
株式会社新日本科学 安全性研究所

P-50

CD-1 及び B6C3F1 マウスの乳腺由来腺腫／腺癌の形態学的差異○爰島 洋子，土居 卓也，土谷 稔（株）LSI メディエンス

ポスター発表ⅩⅣ
第 2 日目

循環器・血液・免疫 1

2 月 1 日（金） 15:10 - 16:00

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長：小林 欣滋（（株）新日本科学）
佐藤 寛子（田辺三菱製薬（株））

P-51

NOS 阻害剤投与による超短期マイクロミニピッグ動脈硬化モデルの開発○川口 博明 1)，谷本 昭英 2)
1)
2)

P-52

鹿児島大学大学院医歯学総合研究科研衛生学・健康増進医学，
鹿児島大学大学院医歯学総合研究科病理学

急性出血性胃炎で死亡したミニブタの血管病変についての病理組織学的検討○奥田 須美子，赤根 弘敏，江田 景，市川 敦子，清水 茂一，秋江 靖樹
シミックファーマサイエンス（株）

P-53*

ビーグル犬の胸部大動脈に移植した人工血管の治癒過程○松田 崇斗 1)，寺尾 壽子 1)，前田 一葉 1)，田崎 雅子 1)，早場 純子 1)，磯部 厚志 1)，長野 嘉介 2)，
数野 公正 1)，萩原 仁美 1)
1)

P-54*

テルモ株式会社，2) 長野毒性病理コンサルティング

カニクイザル（Macaca fascicularis）における自然発症性の肥大型心筋症の一例○小西 静香，沼倉 佑樹，古賀 真昭，小寺 喬，上田 誠
日本新薬（株） 安全性・動態研究部

̶ 32 ̶

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター発表ⅩⅤ
第 1 日目

循環器・血液・免疫 2

1 月 31 日（木） 17:20 - 18:10

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長：豊田 武士（国立医薬品食品衛生研究所）
村井 厚子（中外製薬（株））

P-55

炎症性反応を伴う Wistar Hannover ラットにおける自然発生性 globule leukocyte tumor の 1 例○佐藤 順子，友成 由紀，土居 卓也，土谷 稔（株）LSI メディエンス

P-56

上皮型胸腺腫及び上皮型過形成の Cytokeratin 発現に関する免疫組織学的特徴○友成 由紀，佐藤 順子，黒滝 哲郎，山田 直明，川迫 一史，土居 卓也，菅野 剛，土谷 稔（株）LSI メディエンス

P-57*

創薬支援事業本部

試験研究センター

病理研究部

病理 1 グループ

SD ラットの胸腺にみられた異所性横紋筋組織○小林 亮介 1)，友成 由紀 1)，赤川 唯 2)，関谷 明生 1)，爰島 洋子 1)，土居 卓也 1)，
菅野 剛 1)，土谷 稔 1)1)（株）LSI メディエンス
鹿島安全性第 1 研究部

ポスター発表ⅩⅥ
第 2 日目

試験研究センター

病理研究部，2)（株）LSI メディエンス

その他 1

2 月 1 日（金） 15:10 - 16:00

試験研究センター

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長： 穴山 久志（武田薬品工業（株））
菅野 剛（（株）ＬＳＩメディエンス）P-58

カニクイザルの腰椎椎間板におけるコンドリアーゼの基質特異性と髄核融解作用○南澤 由佳，村松 大，山口 宏明，二井 愛介
生化学工業（株）

P-59*

2,4- ジメチル -4- フェニルテトラヒドロフランの 90 日間反復投与毒性試験および異性体存在比の検討○井手 鉄哉 1)，水田 保子 1)，Young-Man Cho1)，赤木 純一 1)，増本 直子 2)，杉本 直樹 2)，佐藤 恭子 2)，小川 久美子 1)
1)

P-60*

国立医薬品食品衛生研究所

病理部，2) 国立医薬品食品衛生研究所

食品添加物部

1,3-Dichloro-2-propanol の F344 ラットを用いた 28 日間反復強制経口投与による毒性プロファイルの検索○松下 幸平，豊田 武士，森川 朋美，山田 貴宣，小川 久美子
国立医薬品食品衛生研究所

P-61*

病理部

F344 ラットを用いた 5-methyl-2-phenyl-2-hexenal の 90 日間反復投与毒性試験○中村 賢志 1)，木嶋 綾希 1)，石井 雄二 1)，高須 伸二 1)，小川 久美子 1)，梅村 隆志 1,2)
1)

国立医薬品食品衛生研究所

病理部，2) ヤマザキ動物看護大学

̶ 33 ̶

動物看護学部

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター発表ⅩⅦ
第 1 日目その他 2

1 月 31 日（木） 17:20 - 18:10

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長： 佐々木 朋（マルホ（株））
篠塚 淳子（中外製薬（株））

P-62

免疫不全マウス（NOG，NOD SCID 及びヌードマウス）を用いた HeLa 細胞の造腫瘍性試験における病理組織学的検索○押方 孝文，涌生 ゆみ，満石 三喜男，浜村 政夫（株）LSI メディエンス

P-63*

創薬支援事業本部

試験研究センター

病理研究部

病理 2G

NOG マウスの皮下に自然発生した上皮性腫瘍の 2 症例

○ Angeline Ping Ping Teh1)，町田 雪乃 1,2)，打屋 尚章 1)，今井 俊夫 1)
1)

P-64*

国立がん研究センター 研究所 動物実験施設，2) 日本獣医生命科学大学

獣医病理学研究室

高齢 F344 ラットに自然発生した退形成ジンバル腺癌（Anaplastic Zymbal’s gland carcinoma）を疑う 2 例○前野 愛 1)，坂本 義光 1)，北條 幹 1)，湯澤 勝廣 1)，長谷川 悠子 1)，鈴木 俊也 1)，
猪又 明子 1)，守安 貴子 1)，煙山 紀子 2)，美谷島 克宏 2)，中江 大 2)1)

東京都健康安全研究センター
食品安全健康学科

P-65*

薬事環境科学部

生体影響研究科，2) 東京農業大学

応用生物科学部

Spontaneous basal cell carcinoma with ductal differentiation in the rat salivary gland○佐野 智弥 1)，神鳥 仁志 2)，原 陽子 3)1)

武田薬品工業（株）薬剤安全性研究所 , 2)Axcelead Drug Discovery Partners（株），3) 島根県
家畜病性鑑定室

ポスター発表ⅩⅧ
第 2 日目SEND/INHAND

2 月 1 日（金） 15:10 - 16:00

農林水産課

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長： 今岡 尚子（第一三共（株））
安井 雄三（日本たばこ産業（株））

P-66

INHAND: International Harmonization of Nomenclature and Diagnostic Criteria for Lesions - An
Update - 2019
○林 新茂 1)，A ブラッドレイ 2)，DG グッドマン 3)，原田 孝則 4)，R ハーバ 5)，岩田 聖 6)，
M ヤコブセン 7)，CM キーナン 8)，R ケルナ 9)，マーラ ベス 5)，E メセック 10)，T ノルテ 11)，
S リッテンハウゼン 9)，C ロウルフェルテ 12)，J バーレ 13)，義澤 克彦 14)
1)

三栄源エフ・エフ・アイ（株） 安全性科学部，2) チャールスリバー，3) コンサルタント，4) 残留農薬研究所，
米国立環境健康科学研究所，6) ルナパス毒性病理研究所，7) アストラゼネカ，8) キーナン コンサルティング，
9)
フラウンフォッファー，10) ノバルティス，11) ベーリンガーインゲルハイム，12) バイエル，13) イーライリリー，
14)
武庫川女子大学 生活環境学部 食物栄養学科

5)

P-67

製薬企業の SEND 対応事例―SEND に対応した病理組織学的検査体制の構築―○松本 泉美，栃谷 智秋，河内 眞美，藤井 雄太，吉野 有香，宮脇 出
大日本住友製薬株式会社

前臨床研究ユニット

̶ 34 ̶

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-68

INHAND 病理用語を SENDIG v3.1 に対応したフォーマットに変更した病理組織所見用語集の作成○柿本 恒知 1)，諏訪 浩一 2)，枝元 洋 1)，山川 誠己 1)，山口 裕子 1)，星谷 達 1)
1)

株式会社ボゾリサーチセンター
御殿場研究所 情報システム部

P-69

御殿場研究所

病理部，2) 株式会社ボゾリサーチセンター

CDISC SEND CT 病理用語の 2018 年内変遷と INHAND 用語との比較○井上 紗季 1)，畠山 洋文 1)，小泉 治子 1)，堀川 真一 1)，佐藤 伸一 1)，安齋 享征 2)，岩田 聖 2)1)（株）イナリサーチ，2) ルナパス毒性病理研究所

ポスター発表ⅩⅨ
第 1 日目

AI・画像解析1 月 31 日（木） 17:20 - 18:10

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長：白井 紀充（ファイザー製薬（株））
諸木 孝泰（大塚製薬（株））

P-70

製薬企業におけるデジタルパソロジー技術を用いた形態計測に関する調査○吉川 剛 1,2)，洞井 康 1,3)，浅岡 由次 1,4)，櫻井 孝信 1,5)，菊地 聡美 1,6)，山岡 牧子 1,7)，田中 雅治 1,3,8)
1)

日本製薬工業協会 研究開発委員会，2) 大塚製薬株式会社 徳島研究所，3) 田辺三菱製薬株式会社
創薬本部，4) 塩野義製薬株式会社 開発研究所，5) 大正製薬株式会社 安全性・動態研究所，
6)
持田製薬株式会社 総合研究所 薬物動態安全性，7) 杏林製薬株式会社 わたらせ創薬センター，
8)
一般財団法人バイオインダストリー協会 先端技術・開発部

P-71*

画像解析ソフト HALO を用いた病理所見の定量化の検討○水川 真緒，洞井 康，大野 祐子，西川 智美，仁科 嘉修，馬場 伸之，久米 英介
田辺三菱製薬（株）創薬本部安全性研究所

P-72

ヒト肺癌細胞像の自動分類における Fine-tuning した Deep Convolutional Neural Networks の比較検討○塚本 徹哉 1)，寺本 篤司 2)，桐山 諭和 1,3)，山田 あゆみ 2)
1)
3)

藤田医科大学
成田記念病院

ポスター発表ⅩⅩ
第 2 日目

医学部 病理診断学，2) 藤田医科大学
病理診断科

医療科学部

実験法・新規技術 1

2 月 1 日（金） 15:10 - 16:00

放射線学科，

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長：井上 薫（国立医薬品食品衛生研究所）
野口 ちひろ（大正製薬（株））

P-73*

PAXgene 固定パラフィンブロック包埋サンプルの特徴○山崎 雅輝 1)，中野 清孝 2)，名取 修 2)，鈴木 雅実 1,2)，加藤 淳彦 1)
1)

P-74

中外製薬（株），2)（株）未来創薬研究所

低発現分子検出のための蛍光免疫染色の増感法とその特徴○篠塚 淳子 1)，山崎 雅輝 1)，中野 清孝 2)，舟橋 真一 2)，鈴木 雅実 1,2)，加藤 淳彦 1)
1)

P-75

中外製薬（株） 富士御殿場研究所

安全性研究部，2)（株）未来創薬研究所

FIB-SEM を用いたラット腎糸球体上皮細胞の 3 次元構造解析

宮内 泰 1)，○上田 耕平 1)，井村 奈緒子 1)，稲元 伸 2)，大塚 祐二 2)，吉田 晃世 2)1)（株）鎌倉テクノサイエンス

生物試験業務部，2)（株）東レリサーチセンター

̶ 35 ̶

形態科学研究部

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター発表ⅩⅩⅠ
第 1 日目

実験法・新規技術 2

1 月 31 日（木）17:20 - 18:10

ポスター会場（2F

瑞雲・平安）

座長： 上田 誠（日本新薬（株））
松本 泉美（大日本住友製薬（株））

P-76

3D 培養系の形態学的解析手法○藤井 悦子 1,2)，川合 重人 1)，山崎 雅輝 2)，中野 清孝 1)，加藤 淳彦 2)，鈴木 雅実 1,2)
1)

P-77*

株式会社未来創薬研究所，2) 中外製薬株式会社

トリフルオロエタノール及びトリフルロアセトアルデヒドを曝露させたメダカの精巣病変○黒田 雄介 1)，木村 真之 1)，早川 知里 1)，林 清吾 1)，竹内 和也 1)，古川 賢 1)，杉山 晶彦 2)
1)

P-78*

日産化学（株） 生物科学研究所，2) 岡山理科大学

獣医学部

獣医学科

網膜毒性発現機序解明における laser capture microdissection の有用性についての検討○白井 真人，青木 貴志，新野 訓代，藤本 和則，今岡 尚子，甲斐 清徳，森 和彦
第一三共株式会社

安全性研究所̶ 36 ̶

講演要旨

特別講演
シンポジウムワークショップ

IATP セミナー

特別講演The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

特別講演

SL-1
がんゲノム解析からひもとく変異プロセス
油谷 浩幸
東京大学

先端科学技術研究センター

ゲノムサイエンス分野

細胞のがん化は体細胞変異の蓄積の結果引き起こされ、
例えば、喫煙によるC>Aの塩基変異、紫外線によるC>T変異は肺がん、メラノーマそれぞれにおいて顕著である。しかしながら個々の症例において塩基変異を生じる生物学的プロセスを同定することは必ずしも容易ではなかった。この十年間で次世代シーケンス解析によって１万を超える症例から収集されたがんゲノム解析データに基づいて特徴的な変異パターン（mutation signature）
を抽出し、変異原と関連づけることが可能となった。
CpG 部位の C>T 変異はほとんどの腫瘍には共通して観察され、DNA メチル化の影響が示唆される。また、アルキル化剤による治療後に再発したグリオーマ症例では hypermutator となる症例が観察され、アルキル化剤によって塩基変異が誘発されたと考えられた。肝細胞がんの発症は肝炎ウイルス感染に加えて、アルコール摂取、脂肪性肝炎、アフラトキシンなど複数の要因に基づくとされる。我々は日本人 413 例並びに米国人 90 例（合計 503 例）のがん組織・正常組織の全エクソン解析を実施し、mutation signature 解析を行った。日本人、米国人症例に特徴的な signature が抽出され、アルコール摂取に関連すると推定している。アルコール代謝に関与する酵素遺伝子の塩基多型と飲酒習慣の関連についても言及する。

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The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

特別講演

特別講演

SL-2
革新的バイオイメージング技術が拓く次世代毒性病理今村 健志
愛媛大学 大学院医学系研究科 分子病態医学講座

バイオイメージング技術は生物学において将来有望な技術であり、すでに in vitro 実験では必要不可欠な実験ツールになっている。最近、バイオイメージング技術、中でも蛍光イメージング技術を駆使して、生体でがんなどのさまざまな疾患プロセスや複雑な生物学を研究することへの関心が高まっている。特に、種々の蛍光色素や蛍光タンパク質を用いた生体内蛍光イ
メージングは、最新の顕微鏡と組み合わせることで、これまで観察が難しかった生体での細胞動態や細胞機能のイメージングを可能にする。
本講演では、生体でがん細胞をモニターするための蛍光イメージングシステムのアプリケーションについて紹介する。さらに、蛍光イメージングシステムを使用することにより、生体で血管新生、リンパ血管新生およびプロテアーゼ活性などのがん微小環境の役割を研究する例を示す。さらに、がん研究への 2 光子励起顕微鏡を含む蛍光イメージング法の技術開発
や蛍光イメージングのがん研究応用について紹介する。2 光子顕微鏡法は、深部組織における細胞の挙動および機能を調べる強力な方法である。さらに、1,040 nm 以上の励起波長を用いた赤外（IR）-2 光子励起顕微鏡の開発と応用についても紹介する。IR-2 光子励起顕微鏡法は、赤色蛍光タンパク質／色素の適用を可能にし、従来の多光子顕微鏡と比較してより深いイ
メージングを可能にする。
次世代の毒物学的病理において、これら革新的バイオイメージング技術を駆使し、がんの病態を明らかにし、新規治療薬を開発することは有用であろう。

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シンポジウムThe 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

S1-1
透明化技術を利用した組織構造解析法○山崎 雅輝組織の立体構造をそのまま認識することは、2D の組織切片のみでの解析よりも多くの情報を得られる可能性がある。従来、連続の 2D 組織切片を作製することにより、立体構造の再構築を試みる手法はあるが、作製労力に加え最終的に直接立体構
造を観察できない点に難点がある。近年、脳神経領域を中心に厚さのある組織あるいは組織全体を透明化することにより、立体構造を維持したまま、直接観察する方法が開発され、その他の領域にもその用途を拡大している。現在、いくつかの、透明化試薬が入手可能であり、有機溶媒を用いた手法（BABB, DISCO）、水溶性化合物を用いた手法（SeeDB, Scale, CUBIC）
脱脂と固定を組み合わせた手法（CLARITY, SWITCH）など、それぞれの透明化試薬に特徴があるとされている。今回、組織片及び培養細胞から作製された Organoid について、各透明化試薬により透明化を施し、その特徴を透明化能・蛍光色素／
自家蛍光の鮮明度・観察深度などの観点において比較検討をした。各透明化試薬の特徴と観察時の留意点についてご紹介
をしたい。

S1-2
毒性病理評価における Magnetic Resonance Imaging（MRI）活用の可能性○武田 賢和エーザイ株式会社

バイオファーマシューティカル・アセスメント機能ユニット

筑波安全性研究部

Magnetic Resonance Imaging（MRI）は、非侵襲的かつ高感度に生体内の病巣を 3 次元的に捉えるイメージング技術として、臨床での病態診断や病態モデル動物での薬効評価等に幅広く用いられている。MRI は、Computed Tomography（CT）や Positron
Emission Tomography（PET）と比較して、放射線被曝がなく、骨や空気の影響を受けず、高い分解能で横断像や縦断像など任意の断面を撮像できる特長を有する。また、MRI は磁場と電磁波を利用し、生体の水や脂肪に豊富に存在するプロトンの、組織内の密度や磁力による励起後の緩和（元の平衡状態に戻る過程）の違いを画像化することで病変を検出できるため、脳などの水分や脂肪の多い臓器の解析に適すると言われる。
本技術は、非臨床安全性研究の分野においても応用可能であり、同一生体内で病変部位を検出し、その経時的変化や回復性の評価への活用が期待される。毒性病理学的には、臓器中の病変の有無や局在・分布を 3 次元的に確認することで、最適な病理標本作製部位の抽出や、病変の病理組織的特徴とその臓器内分布との関連性の比較・考察への応用などが期待される。
したがって、毒性病理評価への活用としては、生体だけでなく、剖検後に採取した臓器組織を MRI で解析する方法も有効と考える。本演題では、MRIを活用した毒性病理評価の可能性と展望について、弊社のラット固定臓器における中枢神経病変の検討実例および文献情報を交えて紹介する。

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シンポジウム

中外製薬（株）The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

シンポジウム

S1-3
毒性評価におけるイメージング質量分析法の活用○樫村 茜 1)、佐藤 寛子 1)、田中 広治 2)、明石 知也 2)、大野 祐子 1)、吉川 佳佑 1)、馬場 伸之 1)、鍛冶 秀文 3)、田中 雅治 4)

シンポジウム1)田辺三菱製薬（株） 安全性研究所、 2)田辺三菱製薬（株） 薬物動態研究所、 3)（株）LSI メディエンス、
4)（一財）バイオインダストリー協会

イメージング質量分析法（IMS: imaging mass spectrometry）は、質量分析計を用いて組織切片上で測定した分子の局在を 2 次元的画像として取得する技術であり、創薬研究においては、新規標的探索、PK/PD 評価、毒性メカニズム解明等への応用が期待されている。IMS の最大の強みは標識不要で投与化合物等の局在を可視化できることで、通常の毒性試験に容易に組み込むことができる。我々は、IMS を病理組織学的検査と組み合わせることで、毒性機序解明に活用する取り組みを進めている。
（1）既知化合物での検証
Amiodarone（AMD）を 7 日間経口投与したラットの肺、脾臓、腸間膜リンパ節を用いて、リン脂質蓄積による組織学的な空胞化病変と、IMS 解析で得られた AMD・AMD 代謝物・リン脂質の分布を比較した。その結果、AMD・AMD 代謝
物・リン脂質は、空胞化病変の領域において病変のない領域よりも多く検出された。これはリン脂質症の機序（AMD・AMD 代謝物が細胞に蓄積しリン脂質を蓄積することで空胞を形成）を裏付ける結果であり、IMS の毒性メカニズム解明
における有用性が確認された。
（2）創薬毒性評価における活用事例
Caco-2膜透過性の低い Compound Aをマウスに2週間混餌投与したところ、十二指腸粘膜上皮細胞の空胞化が認められた。
本病変の形成に投与物質がどのように影響しているのか考察するため IMS 解析を実施した結果、十二指腸粘膜上皮細胞に限局して Compound A が検出された。このことから、Compound A が、腸内腔から作用したのではなく腸上皮細胞内に取り込まれて、本病変の形成に関与した可能性が示唆された。
このように、毒性評価において IMS が今後ますます活用されていくことが期待される。本講演では、我々の取り組みの一部をご紹介するとともに、IMS の毒性評価における期待と展望についても議論したい。

S1-4
人工知能を用いた病理検査の取り組み̶現状と今後の展望̶○甲斐 清徳 1)、土屋 卓磨 2)、岩本 和樹 3)、袴田 和巳 4,5)
1)第一三共株式会社、 2)大塚製薬株式会社、 3)富士通株式会社、 4)シスメックス株式会社、 5)エルピクセル株式会社

医薬品の研究開発において非臨床安全性試験で病理検査は重要な評価を担うが、創薬シーズのスクリーニングで多大な時間と労力を要するため研究開発の律速になる場合がある。近年、自動車の自動運転に代表されるように、artificial intelligence（AI）の社会生活、製造あるいは科学分野への適用とその技術進歩は目覚しい。その中でも、AI による画像認識能は臨床での X 線、MRI などの画像診断な等にも応用され、病理分野では深層学習をヒトの腫瘍診断にも適用されている事例が多く、論文も見かけるようになってきている。また、日本病理学会では AMED 研究資金を用いて、国立情報学研究所と共同で AIを用いた病理診断支援システムの（Japan Pathology AI Diagnostic Project）開発を行っている。創薬の分野で医薬・医療関係機
関が所属しているコンソーシアムである Life Intelligence Consortium（LINC）において、非臨床安全性試験の開発候補化合物
選抜前のスクリーニング段階で AI を活用し、病理標本の非腫瘍病変（正常と異常）を判別し、病変がみられない低リスク臓器を判定可能なモデルについて検討している。本シンポジウムでは、最近の病理画像の AI 適用の動向と Open TG-GATEs に格納されている肝臓の種々の非腫瘍性病変の AI による解析の LINC での試みの事例を紹介し、毒性試験の病理検査への AI
適用の課題と今後の展望について概説する。

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シンポジウムThe 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

S1-5
キメラ変異遺伝子の検出によるヒト軟部腫瘍の診断○野島 孝之
整形外科

病理診断科

ヒト悪性骨軟部腫瘍の多くでは遺伝的異常を有していることが知られている。代表的には、悪性骨軟部腫瘍の約 30％で特徴的な転座型のキメラ癒合変異遺伝子が報告されている。この遺伝子変異は腫瘍の細胞機能や細胞の増殖制御に関与している。一方、これらの癒合遺伝子の検出は、病理診断が困難なことが多い骨軟部腫瘍の病理診断の補助に有用となっている。
例としてユーイング肉腫／未分化神経外胚葉性腫瘍（PNET）の EWSR1-Fli1、滑膜肉腫の SYT-SSX、胞巣型横紋筋肉腫の PAXFKHR（FOXO1）、低悪性度線維肉腫の FUS-CREB3L2 などが挙げられる。遺伝子は種々の他遺伝子と再配列をすることができ、これらの再配列を検出する手法として、我々は逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（RT-PCR）法、あるいは、蛍光 in situ ハイ
ブリダイゼーション（FISH）法を用いている。これらの方法は簡便であり、日常の病理診断補助に非常に有益となっている。
FISH 法、RT-PCR 法ともに、欠点、長所がいくつもあるが、両者を組み合わせて使用することにより、ヒト悪性骨軟部腫瘍
の診断精度を向上させることができると考える。

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シンポジウム金沢大学

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

シンポジウムS2-1
マウス正常組織由来オルガノイドの化学発がん研究への応用○今井 俊夫
シンポジウム

国立がん研究センター

研究所

動物実験部門オルガノイドはマトリゲルを用いる三次元培養法により樹立・維持される上皮系の胞状細胞群であり、幹細胞を含む器官
固有の細胞で構成される。ヒトがん組織由来のオルガノイドは元組織の遺伝子変異／発現特性を維持していることから、分子標的薬の評価に応用されている。我々は、マウス正常上皮由来のオルガノイドを作製し、レンチウイルスベクターによるがん関連遺伝子の発現再構成により発がん過程が再現できることを報告した。その後、化学物質がマウス正常上皮由来オルガノイドに及ぼす影響について検討を開始し、野生型または一つのがん関連遺伝子の発現を変化させたオルガノイ
ドに対して化学発がん物質を in vitroで暴露した後ヌードマウス皮下に移植すると、腫瘍性病変の組織学的特性を示す結節を形成することを明らかにした。動物モデルを用いる化学発がん研究では、全身の諸器官を対象にできる上、経時的観察により前がん病変から腫瘍性病変への変化を解析できるが、腫瘍性病変の発生まで一般的に長期間を要する。一方、オル
ガノイドの化学発がん研究への応用により、比較的短期間で腫瘍性病変を誘発できること、上皮細胞に対する化学物質の直接的な作用の解析が可能であり、更に化学物質の暴露を in vitroで行うことによる動物の苦痛軽減といった特性を生かすことが期待できる。現在、in vitroで化学物質曝露した後のオルガノイドの変異遺伝子を解析して発がん早期過程で標的となる遺伝子を明らかにし、更にヌードマウス皮下移植後の腫瘍性病変にみられる変異遺伝子と比較する作業を行っている。
発がん早期の起始過程の現象と、その後の進展過程で付加される現象とを分けて解析することで、複雑な化学発がん過程の分子機序に関してより詳細な知見が得られるか考察を試みる。

S2-2
ヒト化 NOG マウスを用いたヒト免疫反応の再現と応用○高橋 武司（公財）実験動物中央研究所

重度免疫不全マウスを用いたヒト血液免疫系のマウス体内の再構築によりヒト免疫反応を生体内で解析することが可能になりつつある。実験動物中央研究所（実中研）では NOG マウスの遺伝子改変を通じて幅広い血液系譜の発生、機能的免疫反応の誘導に取り組んでいる。これらはヒトサイトカイン遺伝子の導入、ヒト HLA 遺伝子の導入、マウス遺伝子の破壊などを含み、次世代型 NOG マウスとして現在までに 60 種類ほどのマウスを樹立し、その特性を解析している。中でもヒト
GM-CSF と IL-3 を発現させた NOG-GM-CSF/IL-3 トランスジェニックマウス（Tg）では NOG マウスと比較してヒト好酸球、好塩基球などの顆粒球、マスト細胞、樹状細胞などのミエロイド系細胞の分化発生が促進される。これらのミエロイド細胞は炎症反応において直接のメディエーターとなる場合が多いため、病態再現という観点からヒト化 NOG-GM-CSF/IL-3Tg
マウスは NOG マウスに比べてより適していると考えられる。我々はこのマウスを用いてヒトアレルギー反応の再現を試みている。本発表ではこのマウスを用いた受動的皮膚アレルギー反応、受動的食物アレルギー反応、喘息様症状の再現について紹介する。特に喘息モデルにおいては、IL-33 をトリガーとして IL-13 産生細胞の誘導、エオタキシンの産生、ヒト好酸球の浸潤、肺粘膜におけるゴブレット細胞の誘導、などヒト病態に類似する症状の再現が可能であり、ヒト化マウスを用いた創薬研究の有用なツールとなることが示唆された。

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シンポジウムThe 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

S2-3
オートファジー欠損マウスの解析から何がわかったか？
○小松 雅明医学部

生理学第二講座

オートファジーは小胞体ないしはその近傍の構造体から出現した隔離膜が伸長して細胞質成分を取り囲んだオートファゴ
ソームが形成される過程と、生じたオートファゴソームがエンドソームないしはリソソームと融合し内容物を消化する二つの過程から構成されている。1990 年代の大隅良典博士らの出芽酵母を用いた先駆的な研究、すなわち出芽酵母における「分子機
オートファジーの発見とそれに引き続くオートファゴソーム形成に必須な ATG（AuTophaGy）遺伝子の同定により、構の基本フレームワーク」、そして「栄養素の供給や細胞内品質管理機構といった基本的な生理作用」が明らかになった。さ
らに、近年のオートファジー研究の爆発的発展を背景に、オートファジーが遺伝情報の維持機構、分化や環境変化に伴う細胞制御、幹細胞の維持・分化、そして老化抑制に深く関与することが明らかになってきた。即ち、オートファジーは生命の謎を解くキープレイヤーであると共に高齢化社会における健康を守るための重要な生体監視システムであることが判明した。しかし、このような生命の根幹に関わる事象の制御は基本的なオートファジーの生理機能だけでは説明できない。
本講演では、オートファジー欠損マウスからわかってきた選択的オートファジーによる転写制御機構、すなわち「ユビキチンリガーゼの分解を介したストレス応答機構」を紹介するとともに、それらの破綻による病態発症機構について討議したい。

S2-4
尿路結石モデルマウスの開発とその活用による遺伝学的研究の成果○岡田 淳志、田中 勇太朗、杉野 輝明、海野 怜、田口 和己、濱本 周造、安藤 亮介、戸澤 啓一、郡 健二郎、安井 孝周
名古屋市立大学大学院

医学研究科

腎・泌尿器科学

尿路結石は、90 数％の無機物質と数％の有機物質で構成される。これまでの尿路結石研究は、無機物質を中心に行われてきたが、その有病率は増加の一途を辿っていた。私たちは、尿路結石の遺伝因子に着目し、遺伝子改変技術の確立したマ
ウスでの結石モデルの確立に取り組んだ。
① 尿路結石モデルマウスの開発
当初はモデルラットに準じ、エチレングリコールの自由飲水を行ったが、結石は形成されなかった。このため、シュウ酸前駆物質（エチレングリコール、グリコール酸、グリオキシル酸（GOx））を多段階の濃度・期間を設定し、胃管・腹腔内投与を行ったところ、GOx の腹腔内投与のみが腎結晶形成を生じた。
② オステオポンチン（OPN）ノックアウトマウス研究
尿路結石のマトリックス蛋白 OPN の機能解析を遺伝子改変マウスを用いて行った。OPN+/+ の腎結石は OPN −/− より有意に多かった。また OPN +/+ の結晶は花弁状に大きく、OPN −/− は砂状で小さかった。さらに OPN 機能ドメインマウス・OPN
抗体研究によって、OPN が結石の促進因子であることを証明した。
③ 尿路結石消失現象とマクロファージ（M φ）の関与の発見
モデルマウスにおいて一度増えた結石が消失する現象を発見した。マイクロアレイ解析により Mφ 関連遺伝子の発現亢
進を認め、M φの結晶貪食を捉えた。また M φの subtype に着目し、M1（炎症型）が結晶形成を促進し、M2（抗炎症型）が抑制することを見いだした。
④ その後の研究の発展
モデルマウスにおけるミトコンドリア障害の発見は、Cyclophilin D 欠損マウス研究と亜系統マウス研究を通じて、現在
オートファジー研究を行っている。またメタボリックシンドローム（MetS）モデルマウス研究から、現在ベージュ細胞研究を行っている。
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シンポジウム

順天堂大学

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ワークショップ

W-1
がん原性試験における腫瘍病変○山口 裕子、山川 誠己、永谷 真理子、池崎 信一郎、星谷 達（株）ボゾリサーチセンター

病理部

がん原性試験は、104 週間という長い投与期間を有し、試験開始から終了まで約 3 年間を要する。誘発性の腫瘍発現の有無を検討する事が最大の目的である。発がん性は統計学的検査結果（Peto 検定結果における腫瘍発生率の有意差の有無）を主
ワークショップとし、用量との関連性、前腫瘍性病変の誘因の有無あるいは類似薬などでの発がん性の情報などを考慮して総合的に評価される。今回は、適切に発がん性を評価するにあたり、考慮すべき下記の 4 点について述べる。
1．造血器系腫瘍あるいは全身性に多発する腫瘍の個体毎発生率の評価：造血器系腫瘍は原発臓器を特定するのが困難なた
め、「Hemolymphreticular system」などの系を臓器名として登録し、これに当該腫瘍を入力する事により個体毎発生率を評価する。血管系腫瘍などの全身性に多発する腫瘍も、上記と同じ方法により個体毎発生率を評価する事が重要である。
2．良性と悪性をあわせた個体毎発生率の評価：増殖性病変は、過形成病変、良性腫瘍、悪性腫瘍へと進展していく考え方が一般的である。よって、良性腫瘍、悪性腫瘍のいずれかで有意差がみられた場合は、良性と悪性をあわせた個体毎発生率の検定結果を考慮する。
3．背景値の重要性：Peto 検定の有意水準は、試験実施施設での背景的発生率が 1％を境に異なる。またロット間差及び年代による変動も考慮するため試験実施施設における背景値は重要である。
4．有意差の有無以外に考慮する事項：げっ歯類の腫瘍発現は 1 年半以降に急激に増加する。被験物質投与の影響により生存率低下あるいは体重増加抑制がみられる場合は腫瘍発現の低下が起こるため注意が必要である。また腫瘍発生率に有意差がみられても偶発性を疑う、逆に稀な腫瘍が有意差なく増加傾向を示す場合は、過形成病変の動向及び周辺情報の確認が必要である。

W-2
毒性評価上注意すべき胃病変̶それって被験物質の影響？̶
○佐藤 順子（株）LSI メディエンス

多くの毒性試験において投与経路として経口投与が選択されるため、被験物質の影響が胃に出ることがある。しかし胃は常に胃酸にさらされる環境にあり、経口投与では毒性とは別の薬物刺激が直接加わり、またストレスにも敏感に反応する臓器でもある。病理評価において真の毒性変化か否かを見極めるには、毒性試験でみられる非特異的な変化を知っておくことが必要となる。今回、そのうちの「ストレス性びらん・潰瘍」と「媒体刺激による胃粘膜の反応」にスポットを当ててみた。
胃では、群に偏らない腺胃粘膜の壊死・びらんが見られることがある。炎症性細胞浸潤や再生等の細胞反応はない、ただゴースト状の壊死部が限局性に見られるのみ。これは薬剤の影響、ストレス、それともアーティファクト？動物はストレスを受けると胃粘膜の細動脈が収縮し、虚血状態となる。また収縮・弛緩を連続する場合もある。この胃の血流量低下、虚血再灌流状態、粘膜防御機構低下により胃粘膜に急性壊死病変が生じる。また胃酸は病変の増悪因子となり、急性にびらん・潰瘍を作り得る。ラット虚血再灌流モデルでは再灌流後 1 時間でびらんが発生し、48 時間で潰瘍まで発展することが報告されている。注意すべきは再灌流後 3 時間までは炎症性細胞の出現がないということである。腺胃粘膜は主細胞、壁細胞および副細胞で構成され、さらに ECL 細胞が基底部に、Globule leukocyte が粘膜上皮間に散在する。こういった様々な構成細胞の割合、量の振れ幅を正常ラットの観察時に把握しておかなければ変化が起こった時に気づくことができない。今回はポリエチレングリコールを媒体とする経口投与の際に認められる胃粘膜反応（Globule leukocyte の増加）について紹介する。

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ワークショップ

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

W-3
摂餌減少や日内変動に関連した心臓や肝臓の変化○松尾 沙織里中外製薬株式会社

毒性試験において、被験物質投与群における摂餌量の減少にしばしば遭遇する。その際、各種評価項目に摂餌量減少による二次的変化が認められ、被験物質による直接的な変化との区別が困難な場合がある。また、動物の摂餌時間と剖検のタ少に関連した各種評価項目の変動を確認する目的でカニクイザルにおける 2 週間の制限給餌試験及び剖検のタイミングによる評価項目への変動を確認する目的でマウスの経時的剖検試験を行った。カニクイザルの制限給餌試験において、制限給
餌群（雄、n=3）には対照群の 25％を 2 週間給餌した。マウスの経時的剖検試験において、Crl:CD1（ICR）の 8 週齢の雄を用い、非絶食下で午前 9 時に剖検する群、午後 13 時に剖検する群、午後 17 時に剖検する群（各群 n=3）を設定した。今回は、カニ
クイザルの心臓及び肝臓の変化、マウスの肝臓の変化の特徴について報告し、摂餌量低下時や同一試験内で剖検タイミン
グが異なる場合の毒性評価の際に考慮すべき点等について言及したい。

W-4
毒性試験における動脈炎，自然発生か薬剤誘発性か○藤原 利久（株）新日本科学

安全性研究所

病理研究部

我々が毒性試験等でしばしば遭遇する動脈炎は単発的で用量相関性を示さず、試験内の対照群や施設の背景データとの比較により、自然発生と判断されることが多い。一方で全身器官・組織に多発したり、高用量群の少数例で観察されたり、薬剤誘発性か自然発生かの判断に迷う事例にも遭遇する。実験動物における自然発生の動脈炎は、薬剤誘発性のものと好発部位や組織所見が類似しているため、病理組織検査だけで両者を区別することが難しい。加えて、自然発生の動脈炎は投薬ストレスや薬剤による干渉で病変が複雑化したり重篤化することがあるため、解釈をより混乱させる。動脈炎は全身のあらゆる器官で発生するが、動物種により好発部位や発生頻度、薬剤による反応性が異なる。イヌで自然発生する特発性多発性動脈炎は心臓、精巣上体および胸腺などで好発し、血管系に作用する薬剤（血管拡張型の降圧剤など）では病態が重篤化することがある。ラットでは、精巣、膵臓および腸間膜の動脈で自然発生し、加齢とともに発生頻度は上昇する。
また、ホスフォジエステラーゼ阻害薬の投与により、腸間膜に動脈炎が発生することが知られている。サルでは発生例数は少ないが、腎臓、心臓、精巣上体および肝臓（胆嚢）などで自然発生する。この様に、動脈炎の解釈は、動物の種差や特性を理解した上で、試験群間での発生頻度の比較、病変の質及び程度（病期）、分布などの病理学的評価、臨床症状や臨床
病理学検査の結果を基に考察することが重要である。さらに、投与した薬剤の薬理学的特性（薬効メカニズムなど）や薬物
動態学的特性（分布など）なども考慮した上で薬剤誘発性か自然発生かを判断すべきであろう。本発表では、主に自然発生の動脈炎の特徴について解説し、毒性試験における評価の一助となることを目的とする。

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ワークショップ

イミングにより、評価項目の変動が被験物質による影響か否かを区別することが難しい場合もある。我々は、摂餌量の減

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ワークショップ

W-5
ストレスと副腎○猪又 晃
富士フイルム株式会社

医薬品・ヘルスケア研究所

副腎は化合物投与に起因した変化がよくみられる内分泌系臓器であり、なかでも副腎皮質細胞の肥大はステロイド合成阻
害作用やホルモン作用を有する化合物で引き起こされる。一方、副腎はストレスホルモンを生合成・分泌する臓器でもあ
ワークショップ

ることから、種々の化合物の高用量投与群において一般状態の悪化などで動物が高いストレス条件下におかれた場合に非特異的な変化として副腎皮質細胞の肥大が起こる。したがって、毒性試験でこれらの変化に遭遇した際に、一般状態、体重及び摂餌量の推移、臓器重量、各種検査値はもとより、病理組織学的検査にあたっては、動物種、性、週齢による組織学的差異、及び関連臓器の変化を含めて総合的に評価することが肝要である。

W-6
大動物の未成熟生殖器における毒性評価上の課題○畠山 洋文 1)、井上 紗季 1)、渡辺 純 1)、武井 由弘 1)、小泉 治子 1)、梶村 哲世 1)、佐藤 伸一 1)、岩田 聖 2)
1)（株）イナリサーチ

試験研究センター、2)ルナパス毒性病理研究所

イヌ及びカニクイザルなどの大動物を用いた一般毒性試験において、発育過程にある生殖器の毒性評価については試験を実施する上で重要な課題である。OECD（Test No.409）、FDA Redbook 2000: IV.B.1、EPA OPPTS 870.4100 などの各ガイドラ
インにおいて、イヌでは 4 〜 6 カ月齢で投与を開始することが望ましく、遅くとも 9 カ月齢を超えないものと定められており、実際には 6 〜 8 カ月齢で試験を開始する場合が多い。一方、カニクイザルでは 2 〜 3 歳齢からの試験開始が一般的である。
性成熟は、イヌでは 7 〜 12 カ月齢、サルでは 4.5 〜 5.5 歳とされており、短中期（2、4、13 週間）反復投与試験では性成熟を迎えていない動物を用いて生殖器毒性を評価することも予想される。雄イヌでは同じ月齢でも生殖器及び副生殖器の成熟度の個体差が大きく、成熟の指標とはならず毒性評価を困難にしている。また、サルはコスト面、動物のサイズ、供給元などの要因により成熟サルを入手することが難しい場合もある。大動物を用いた一般毒性試験では、未成熟動物を供試しているという理解が大事である。体重増加抑制により生殖器の発育が遅延することに度々遭遇するため、体重や他臓器の体重比重量の変動を総合的に判断して生殖器への影響を評価することが必要である。本ワークショップでは、雌雄の生殖器及び副生殖器の発生（未成熟な形態学的特徴）、グレーディング評価の意義、INHAND 及び SEND Controlled Terminology における Immature、Atrophy、Hypoplasia の定義及び鑑別点、大動物を用いた生殖器毒性評価で注意すべき点について解説を行う。また、毒性試験で遭遇するケースについて具体例を挙げて紹介する。

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ワークショップ

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

W-7
毒性評価時に問題となる基礎病変とその考え方̶気管内投与法により誘発される肺病変̶○沼野 琢旬、杉山 大揮、森岡 舞、宇田 一成、土井 悠子、河部 真弓、米良 幸典、玉野 静光
株式会社 DIMS 医科学研究所【背景と目的】 気管内投与法は、気道を介して暴露される物質（ナノマテリアル並びに薬剤）の肺毒性評価に用いることが可能な方法であり、簡便且つ安価、投与量を推定可能なことから、用量反応関係を決定でき、さらには生体反応機序の解較検討した。
【材料と方法】（実験 1）被験物質の毒性評価を行った文献を参照し、各種の媒体について、8 週齢の Crl:CD（SD）雄ラットに単回気管内投与し、投与 3 日後に剖検して、肺胞洗浄液（BALF）及び病理組織学的検査結果の比較を行った。（実験 2）薬剤としてブレオマイシンを、ナノ物質として単層カーボンナノチューブを、それぞれ単回気管内投与し、病理組織学的に検索した。
【結果及び結論】 媒体の投与により誘発された BALF 値の変動、肺の病変並びにその程度は、媒体の種類により変化がみられた。つまり、気管内投与法により被験物質の毒性を議論する際には、無処置群を設定し、BALF の検査と病理組織学的検査により、媒体による影響を把握したうえで薬剤の影響を適切に判断することが必要となる。本発表では、薬剤誘発性の肺の病理組織学的変化ならびに気管内投与法の手技に依存した病変について、また、単層カーボンナノチューブを気管内投与した急性の病理組織像についても併せて報告する。
【本発表内容には、平成 29 年度化学物質安全対策（ナノ材料気管内投与試験法等の国際標準化に関する調査）による研究成果
を含む】

W-8
Pathological Indicators for Reflux-Related Changes in Oral (Gavage) Studies○ Klaus Weber
AnaPath GmbH, Switzerland, Eurofins/ BSL BIOSERVICE Scientific Laboratories Munich GmbH

When evaluating oral toxicity studies, gavage-related findings are not uncommon. Often, reflux-related lesions consist of inflammatoryand degenerative processes in nasal cavities, larynx, trachea, larynx, and lungs. These lesions may be related to the vehicle, e.g., cornoil, liquid paraffin etc. Even well-known vehicles, e.g., carboxymethylcellulose, may cause unusual lesions in the lungs under specificphysical/chemical conditions. Under some conditions, the resulting lesions may be misinterpreted as test item-related lesions, e.g.,
phospholipidosis. Early death may occur, and hence, such alteration affect the study outcome, especially if not recognized and wellinterpreted. Also test items may cause such lesions, e.g., test items hardly to dissolve, test items with thixotropic behavior, or of high pH
values. In some cases, the primary reflux-related lesions may cause secondary lesions that need to be excluded of primary systemic testitem related lesions, e.g., nasal cavity inflammation due to reflux may cause secondary effects in the brain (meningitis, encephalitis).
Rarer are reflux-related findings in the esophagus or even in the pharynx. The latter lesions however, do not occur as isolated changes
but are present in a combination with aforementioned organ affections. In the case of a participation of the forestomach and/or
esophagus, other factors may play a role that need to be excluded, e.g., the selection of gavage probes.

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ワークショップ

明に適した手法である。しかしながら、被験物質を懸濁する媒体由来ないし投与法それ自身による影響についての知見は少ない。そこで今回は媒体を気管内投与することにより誘発される変化、さらに化学物質誘発性の変化の特徴について比The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

IATP セミナー

IATP
The Toolbox for Molecular Pathology
Darlene Dixon, DVM, PhD, DACVP, FIATP
Molecular Pathogenesis Group, National Toxicology Program (NTP) Laboratory, National Institute of Environmental Health Sciences, Research
Triangle Park, North Carolina, USA

セミナー
IATP

With rapid advances in molecular based assays and high-throughput screening (HTS) approaches in toxicologic assessments, thepathologist in the 21st century is faced with great opportunities and challenges. Modern toxicology is moving towards high- throughput
screening (HTS), two- and three-dimensional (2-D and 3-D, respectively) in vitro models, and molecular technologies with the goalof Reduction, Refinement, and Replacement (3 R’s) of animals in toxicity and carcinogenicity testing (MacAuthor Clark, 2017). This
movement towards lower animal species, in vitro model systems, and molecular high-throughput technologies challenges the pathologist
to become partners of multidisciplinary teams and to have a basic understanding of molecular biology terminology and the applicationof tools used in modern toxicology.
Molecular pathology is defined as an emerging discipline that studies disease or toxicant/drug induced changes that involves theexamination of molecules in cells, tissues, organs, or body fluids, and requires a multidisciplinary approach. It is described as acrossover discipline incorporating anatomic and clinical pathology with other disciplines including molecular biology, biochemistry,
and cell biology. Therefore, with the ever advancing and merging fields of molecular biology and toxicology, it is important for thepathologist to have a working knowledge of the terminology and a basic understanding of the approaches used to detect molecular
toxicology events.
There are several approaches available to evaluate changes in the genome, epigenome, and the transcriptome (Zhao et al., 2014). This
presentation will give an overview of technologies used for gene expression assessments to next generation sequencing (NGS, RNAseq)
platforms to NanostringTM technologies and their applications. Additionally, gene silencing approaches (Bar et al., 2016) have becomecommonly employed in biomedical research and their importance will be discussed. Basic molecular biology terminology and molecular
tools and technologies available to toxicologic pathologists for protein analysis in addition to the advantages and disadvantages ofcurrent in vitro 2-D versus 3-D model systems will be covered.
References
1. MacArthur Clark J (2017). The 3Rs in research: A contemporary approach to replacement, reduction and refinement. Br J Nutr 2017
October 30, 1–7.
2. Zhao S, Fung-Leung W-P, Bittner A, Ngo K, Liu X (2014). Comparison of RNA-Seq and Microarray in Transcriptome Profiling of
Activated T Cells. PLoS ONE 9(1): e78644.
3. Bar C, Chatterjee S, Thum T (2016). Long Noncoding RNAs in Cardiovascular Pathology, Diagnosis, and Therapy Circulation.
134:1484–1499.

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一般口演 要旨
O-01 〜 O-09

一般口演The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

O-01
ラット膀胱発がんに対するニコチンの影響○鈴木 周五、加藤 寛之、不二 哲、内木 綾、高橋 智
名市大・院・医・実験病態病理【目的】喫煙は尿路上皮癌のリスク因子であり、ニトロソアミン類など発がん物質とともにニコチンが多く含まれる。尿路上皮癌細胞株を含む種々の細胞でニコチンによる細胞増殖促進効果が報告されており、膀胱に対するニコチンの発癌促進効果および、その機序について動物を用いて検討した。
【材料と方法】発癌促進効果を検討するため、6 週齡雄 F344 ラットに BBN を 4 週間飲水投与後、酒石酸ニコチンを 0、10、20および 40 ppm ニコチン濃度相当で 32 週間飲水投与した。また、ニコチンによる発癌促進効果機序を検討するため、6 週齡
雄 F344 ラットに酒石酸ニコチンを 4 週間飲水投与し、その投与中にニコチン性アセチルコリン受容体阻害剤（hexamethonium
chloride もしくは MLA）を週 5 回腹腔内（計 20 回）に投与した。いずれも屠殺・剖検し、病理組織検討および免疫組織化学染色を行った。
【結果】ニコチン投与群では飲水量および体重増加が濃度依存性に低下し、20 ppm 以上で有意な低下を認めた。病理組織検
討の結果、膀胱尿路上皮癌の発生はニコチン投与濃度依存性に増加し、40 ppm 投与群において有意な差が見られた。加えて、
Ki67、リン酸化 Stat3 の陽性率が、ニコチン投与濃度依存性に有意差をもって増加した。また、4 週間のニコチンおよびニ
コチン性アセチルコリン受容体阻害剤を用いた実験では、ニコチンにより誘導された膀胱および腎盂の単純性過形成病変発生が阻害剤投与群で抑制され、Ki67陽性率も有意に抑制された。腎盂においてはリン酸化Stat3の陽性率も有意に低下した。
【結論】ニコチンは膀胱発がん促進作用を有し、その機序としてニコチン性アセチルコリン受容体を介することが考えられ
る。
一般口演

O-02*
o-Acetoacetotoluidide による膀胱に対する毒性、発がんプロモーション作用の検討○行松 直、奥野 高裕、魏 民、藤岡 正喜、梯 アンナ、鰐渕 英機
大阪市立大学大学院医学研究科

分子病理学

芳香族アミンによる膀胱発がんは以前より知られているが、詳細な発生メカニズムは明らかでない。近年、福井県の化学工場で o-toluidine（OTD）などの芳香族アミンを扱った従業員複数人が膀胱がんを発症し、労災認定を受けた。OTD は IARC
にて Group1（ヒトに対する発がん性がある）に分類されている。o-Acetoacetotoluidide（AAOT）は OTD のアミノ基がアシル化された化合物である。しかし、OTD と化学構造的に類似している AAOT の毒性や発がん性などについての知見はなく、AAOT のリスク評価が急務とされている。AAOT のラット膀胱に対する毒性、発がんプロモーション作用を評価するためラットに AAOT を 4 週間投与する短期毒性試験、既知の膀胱発がん物質である N-butyl-N- (4-hydroxybutyl) nitrosamine（BBN）を
4 週間投与後、AAOT を 31 週投与する 2 段階発がん試験を行った。短期毒性試験の結果、AAOT 投与群でラット膀胱粘膜上皮に対して細胞増殖能の亢進および DNA 障害を用量相関性に生じさせることが明らかとなった。また、尿中代謝物において AAOT より高濃度の OTD が検出されたことから AAOT が OTD に代謝され膀胱に対する毒性を示す可能性が示唆された。
2 段階発がん試験では、AAOT 投与群で膀胱重量の増加、膀胱がんの発生頻度の増加を認めた。AAOT はラットの膀胱に対し毒性、発がんプロモーション作用を有することが明らかとなった。

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The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

一般口演

O-03
新生仔期での甲状腺被曝で特異的に誘発される甲状腺病変○藤本 成明 1)、松山 睦美 2)、中島 正洋 2)1)広島大学

原爆放射線医科学研究所、 2)長崎大学

原爆後障害医療研究所【背景】小児期の放射線被曝により甲状腺癌発症リスクが高まることはよく知られており、福島第一原発事故後にも多くの関心が払われた。一方、小児期被曝は甲状腺機能障害に関与することも示唆されてきた。そこで、新生仔ラットと成体ラットの甲状腺へ局部 X 線照射を行い、甲状腺組織及び甲状腺機能への影響を解析した。
【方法】雄Wistarラット（1週齢および8週齢）を用い、0, 6Gy, 12GyのX線を頸部照射した。8週齢および16週齢時で安楽死させ、甲状腺組織の病理学的解析、甲状腺組織内の各種遺伝子発現を定量した。
【結果】1）甲状腺組織：1 週齢 X 線照射群では、8 週齢時に甲状腺濾胞小型化を伴う特徴的な変化が観察された。変化の程度
は照射線量依存的であった。この変化は 15 週齢時でも継続していた。一方、8 週齢時 X 線照射群では甲状腺組織像に有意な変化はなかった。2）甲状腺遺伝子発現：1 週齢 X 線照射群でのみ thyroglobulin (Tg) mRNA の発現低下、thyroid peroxidase(TPO) mRNA の発現上昇がみられた。3）血中ホルモン：1 週齢 X 線照射群では TSH 値が上昇したが、8 週齢 X 線照射群では影響がみられなかった。
【考察】新生仔期ラットの甲状腺組織及び甲状腺ホルモン調節系は、放射線に高感受性であることが示された。小児期単回被曝により、成体期に及ぶ甲状腺病理組織変化・機能障害が引き起こされる可能性が示唆された。

一般口演

O-04*
非遺伝毒性肝発がん物質特異的に過メチル化・発現下方制御を示した遺伝子の肝発がん物質
に対する発現反応性○伊藤 優子 1,2)、中島 康太 1,2)、増渕 康哲 1,2)、菊地 聡美 1)、齋藤 文代 3)、赤堀 有美 3)、吉田 敏則 1)、渋谷 淳 1)
1)東京農工大

獣医病理、 2)岐阜大院

連合獣医、 3)化学物質評価研究機構【背景及び目的】DNA のメチル化は細胞分裂後の娘細胞に継承される性質を持つため、不可逆的な発がん過程の進行に重要な役割を果たす可能性がある。これまで我々は、遺伝毒性肝発がん物質（GHC）であるジエチルニトロソアミン、非遺伝毒
性肝発がん物質（NGHC）である四塩化炭素（CCl4）の発がん用量をそれぞれ 28 日間反復投与したラットの肝臓を用いて網羅的 DNA メチル化解析を実施し、CCl4特異的に過メチル化により発現減少した遺伝子として Ldlrad4（LDL 受容体）、Proc（血液凝固因子阻害分子）、Cdh17（カドヘリン分子）、Nfia（転写因子）を見出した。本研究では、他の複数の GHC ないし NGHCを投与した際の、これら 4 つの遺伝子産物の反応性を比較・検討した。
【材料と方法】GHC 3 剤（アフラトキシン B1、N- ニトロソピロリジン、カルバドックス）、NGHC 2 剤（チオアセトアミド及びメタピリレン）について発がん用量を 28 日間ないし 90 日間反復投与したラットの肝臓における mRNA 発現と免疫組織学的分布を検討した。
【結果及び考察】NGHC 投与群では、4 遺伝子共に mRNA 発現は投与 28 日目から減少した。発がん物質投与 90 日間で形成された GST-P 陽性巣（前がん病変）において、NGHC 投与群では GHC 投与群に比べて、LDLRAD4 及び PROC 陰性巣が増加した。
一方、CDH17 及び NFIA の発現は遺伝毒性の有無で差を認めなかった。LDLRAD4 は発現増加による肝発がん促進の報告があるものの、この分子は構造上多機能が想定されることから、発がんへのコンテクスチュアルな関与が示唆される。また、担がん患者における血中の PROC レベルが死亡率と逆相関するとの報告がある。以上より、本研究での解析の結果、Ldlrad4と Procは NGHC の in vivo 短期検出指標となる可能性が示唆された。

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一般口演

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

O-05
マウス乳癌転移モデルにおけるリンパ節の転移前ニッチの形成○柴田 雅朗、伊藤 裕子、田中 義久、濱岡 仁美、近藤 洋一
大阪医科大学医学部・生命科学講座解剖学教室【目的】癌転移の成立には転移に適した微小環境が重要で、転移予定先臓器では癌細胞の生着や増殖に適した転移前ニッチが形成されていることが重要である。そこで、マウス乳癌転移モデルを用いて、リンパ節の転移前ニッチの形成について、
分子病理学的に解析した。
【方法】転移性マウス乳癌細胞株 BJMC3879Luc2 を BALB/c マウス雌（右鼠径部）に移植し、発光イメージングにより、経時的にリンパ節転移の有無を解析した。その結果、移植後 4 週に屠殺剖検し（転移前群）、リンパ節を採取した。また、無処置対照群の動物も同様にリンパ節を採取した。リンパ節の病理組織標本より、RNA を抽出し、Real-time PCR を用いて、遺伝子発現を解析し、更に免疫組織学的染色を実施した。
【結果】病理組織学的解析において、転移前群では 2 例の右腋窩部のセンチネルリンパ節に微小転移が観察された。左鼡径部の非センチネルリンパ節について LYVE-1 の免疫組織学的染色を行った結果、転移前群において、著しいリンパ管新生を示した。Real-time PCR 解析では、転移前群で Lyve1、Prox1（リンパ管内皮の増殖を促進）、Vegf-cおよび Vegf-aが著しく上昇していた。
【考察】転移前のリンパ節では、既にリンパ管新生の誘導因子が上昇しており、リンパ管新生が著明であり、非センチネル
リンパ節において転移前ニッチは形成されていた。これは癌細胞とその生着に有利な修飾を受けたリンパ節との間に大循環を介した作用があることが示唆された。
一般口演

O-06*
Luteolin の去勢抵抗性前立腺癌に対する抑制効果と androgen receptor splice variant の役割○内木 綾 1,2)、加藤 寛之 1)、鈴木 周五 1)、高橋 智 1)1)名古屋市立大学大学院

医学研究科

実験病態病理学、 2)名古屋市立東部医療センター

病理診断科【背景】フラボノイドの一種である luteolin は、酸化ストレス抑制やアポトーシス誘導を介して、前立腺発がんを予防することが明らかとなった。本研究では、去勢抵抗性前立腺癌（Castration-resistant prostate cancer; CRPC）に対する luteolin の効果を検証するため、CRPC 細胞（ラット PCai1、ヒト 22Rv1）を用いて検討した。また CRPC 治療薬である enzalutamide に対する治療耐性獲得との関連が報告されている、androgen receptor（AR）のスプライスバリアント、AR-V7 への luteolin の影響も解析した。
【方法】Pcai1、22Rv1 の細胞増殖、アポトーシスに対する luteolin の影響を解析した。去勢ヌードマウスに対して PCai1、
22Rv1 を皮下移植し、luteolin（100 ppm、6 週間混餌投与）の腫瘍増殖、アポトーシスや血管新生に対する影響を検討した。
さらに、22Rv1 細胞あるいは移植腫瘍の薬剤耐性や AR-V7 発現に対する luteolin の影響を解析した。
【結果】Pcai1、22Rv1 の細胞増殖活性および活性酸素種の産生は、luteolin 濃度依存性に有意に抑制され、アポトーシスの亢
進と caspase 3、7 の活性化を伴っていた。また Pcai1、22Rv1 の移植腫瘍の体積は、luteolin 投与により有意に減少し、アポトーシス標識率の上昇と、血管新生の抑制が確認された。22Rv1 において、培地添加および摂餌投与いずれの投与方法においても、luteolin により AR-V7 発現は顕著に抑制され、CRPC の細胞増殖抑制能と相関していた。また、22Rv1 細胞および移植腫瘍に対する enzalutamide の治療効果は、luteolin を併用投与することにより有意に向上した。
【結論】Luteolin は、酸化ストレス、AR-V7 発現抑制やアポトーシス誘導を解して、CRPC に対する治療効果を発揮することが明らかとなった。現在 luteolin による AR-V7 抑制機序について解析中である。

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一般口演

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

O-07
ジブチルスズのラット胎盤及び胎児毒性への影響○古川 賢 1)、辻 菜穂 1)、小林 由幸 2)、林 清吾 1)、阿部 正義 1)、黒田 雄介 1)、早川 知里 1)、竹内 和也 1)、杉山 晶彦 3)1)日産化学株式会社

生物科学研究所、 2)日産化学株式会社

物質科学研究所、 3)岡山理科大学

獣医学部

獣医学科

【目的】ジブチルスズ（DBT）はラットに対して重篤な催奇形性を有することが知られている。本発表では DBT のラットにおける胚子／胎児毒性に対する影響を明らかにするために、胎盤および胚子の病理組織学的検査とイメージングによる Sn の組織内分布について検討した。
【材料及び方法】試験には Han Wistar 妊娠ラット 85 匹を供試した。塩化ジブチルスズ（DBTCl）はオリーブオイルに懸濁し、0 及び 20 mg/kg の用量にて強制経口投与した。DBTCl は妊娠 7 〜 9 日（GD7-9 投与群）と妊娠 10 〜 12 日（GD10-12 投与群）に投与した。妊娠 9.5、11、13、14、15、17 及び 21 日に剖検を行い、胚子／胎児及び胎盤を摘出し、重量測定を行った。一部の胚子／胎児及び胎盤については病理組織学的検査、ICP-MS あるいは LA-ICP-MS による Sn の組織内分布を検索した。
【結果】胚子／胎児死亡率は GD7-9 投与群で、妊娠 15 日以降増加した。胚子／胎児及び胎盤重量は試験期間を通して両投与群で、減少あるいは減少傾向を示した。胎児外表検査では無頭有口を主体とする奇形が、GD7-9 投与群のみで認められた。
LA-ICP-MS によるイメージング解析では GD7-9 投与群の妊娠 9.5 日受胎産物の病理組織切片において、Sn が胚子、外胎盤錘、
卵黄嚢及び脱落膜で検出された。同切片の病理組織学検査ではアポトーシスが胚子においてのみ認められた。胎盤の病理
組織学的検査では両投与群で迷路層及び基底層において一過性のアポトーシス及び有糸分裂阻害が認められ、これにより胎盤胎児部は発育遅延による低形成を示した。
【考察】DBT は妊娠 7 〜 9 日の胚子に対して特異的にアポトーシスを惹起し、これにより奇形及び胚子 / 胎児死亡が誘発されるものと推察した。胎盤に対しては一過性に発育遅延することで小胎盤を惹起し、これにより胎児の子宮内発育遅延が誘
一般口演

発されるものと推察した。

O-08
腹腔内投与銀ナノ粒子による BALB/c マウスの急性毒性における抗酸化剤の影響○ Young-Man Cho、水田 保子、赤木 純一、豊田 武士、井手 鉄哉、小川 久美子
国立医薬品食品衛生研究所

病理部【背景】ナノ銀粒子（AgNPs）はその抗菌作用から生活用品のみならず、食品や医薬品分野でも最も幅広く使われるナノ物質の１つである。これまでに、ナノ物質の毒性を検討する一環として、サイズの異なる AgNPs の腹腔内投与に対する毒性を検討した所、等量の直径 60 及び 100 nm の AgNPs を投与したマウスでは全身状態及び病理組織学的病変に明らかな変化がな
かったのに対し、10 nm 群では投与 5 時間後には立毛及び活動低下、6 時間後には体温低下が認められ、投与翌日にはほぼ全例が死亡した。病理組織学的には主に肝臓の顕著な病変が認められ、銀ナノ粒子のサイズの違いによる毒性の相異が認められた。
【目的】今回、AgNPs の腹腔内投与による急性毒性の機序について抗酸化剤の影響を経時的に検討した。
【材料と方法】7 週齢の雌性 BALB/c マウス（5 匹 / 群）に、N-acetyl-l-cysteine（NAC, 2,000 mg/kg bw, i.g.）、Vitamin C（200 mg/kg
bw, i.g.）、Vitamin E（100 mg/kg bw, i.g.）又は L-buthionine-(S,R)-sulfoximine（1.6 g/kg bw, i.p.）を投与した 1 時間後、10 nm AgNPs
を 0.2 mg/ 匹で腹腔内投与し、6 及び 24 時間後に深麻酔下で採血・解剖し、血清生化学的検査及び病理組織診断を行った。
【結果】NAC + AgNPs 群を除くすべての AgNP 投与群で、投与 6 時間後の血清生化学的検索では、グルコースの有意な増加が認められ、病理組織学的にはこれまでの 10 nm AgNPs 群と同様の肝臓のうっ血、肝細胞の空胞化及び類洞内細胞増加並びに白脾髄の単細胞壊死が有意な高頻度に認められた。このような病変は 24 時間後にも認められた。一方、NAC + AgNPs 群
では、これらの変化は明らかに抑制された。
【結論】AgNPs の腹腔内投与による急性毒性は NAC 投与のみによって抑制された。

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一般口演

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

O-09
トキシコゲノミクスによるインフルエンザワクチンおよびアジュバントの次世代安全性評価法の開発○水上 拓郎 1)、平舘 裕希 1)、佐々木 永太 1)、百瀬 暖佳 1)、古畑 啓子 1)、楠 英樹 1)、浅沼 秀樹 2)、浜口 功 1)
1)国立感染症研究所

血液・安全性研究部、 2)国立感染症研究所

インフルエンザウイルス研究センター

インフルエンザの予防においてワクチンは重要な役割を果たす。本邦では 1953 年に全粒子ワクチン（WPv）が開発され，
1962 年には児童への集団接種が開始されたが発熱などの副反応が多く，1972 年には副反応の軽減を目的として HA スプリ
ットワクチン（HAv）が開発された。近年，有効性を高めるために新規アジュバントや遺伝子組換え技術による VLP ワクチンなどの多様な剤型，経鼻接種方法の応用など多様なワクチンの開発がなされている一方，安全性，毒性評価に関しては
既存の試験法で検証され，製剤間での定量的な比較は困難であった。我々は，ワクチン接種後の生体変化を遺伝子発現に置き換えることで迅速・高感度な安全性評価・予測に資するバイオマーカー（BMs）の同定を試みた。WPv 及び HAv を異常毒性否定試験のプロトコールに準じ，ラットに腹腔内接種し，接種後 4 日間の各臓器の網羅的遺伝子発現解析を実施した。
その結果，1 日目の肺組織において全粒子ワクチン特異的に上昇する BMs 遺伝子の同定に成功した。これらの遺伝子の中から 18 の遺伝子をピックアップし，HAv の安全性・品質評価に有用であることを検証した結果，より高精度かつ短期間で安全性を評価できることを明らかにした。さらに BMs 発現量を数値化することで，Virisome などのアジュバント型インフル
エンザワクチンや CpG-K3 などの新規アジュバントのアジュバント増強活性や定量的な毒性の評価にも応用可能であることも明らかにした。そこで種々の未承認アジュバント添加 HAv を投与した後の BMs の発現誘導と肺における組織障害，血液毒性等の変化について検証した結果，毒性病理変化のスクリーニングに BMs 発現解析が応用可能であることが示唆された。
現在，多数のアジュバントデータベースを作成し，BMs による安全性評価法が可能か検討している。

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ポスター 要 旨

P01 〜 P78

ポスターThe 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-01
マウスの reserpine 投与における神経毒性検討○佐藤 亮、寺山 由依、西村 悠花里、土屋 卓磨、諸木 孝泰、北浦 敬介、松本 智志、吉川 剛（株）大塚製薬徳島研究所

前臨床研究センター【目的】本会の第 27 回学術集会おいて、我々は reserpine 投与マウスを用い、低体温誘発による精巣毒性について報告した。
今回は中枢神経毒性について検討した。
【材料および方法】雄性 ICR マウスに Reserpine を 100 mg/kg の用量で単回腹腔内投与し、投与 2 及び 6 日に剖検し、脳の病理
組織学的検査及び電子顕微鏡検査を実施した。尚、投与前、投与後 2、6 及び 12 時間、投与 2 〜投与 6 日における体温（直腸温）を測定した。
【結果】病理組織学的検査では投与 6 日屠殺例で、脳梁、前交連といった白質において希突起膠細胞の壊死（アポトーシス）あ
るいは空胞化を、小脳の神経核において空胞化が、橋／延髄において空胞化及び神経細胞の色質融解を認めた。投与 6 日屠
殺例の電子顕微鏡検査では大脳白質、小脳核及び橋／延髄の空胞化にはミエリン障害を示唆する変化であることが確認された。橋／延髄の軸索に変性を、神経細胞には rER の減少が認められた。投与 2 日屠殺例では異常は観察されなかった。経時的な体温（直腸温）の測定では、100 mg/kg では投与後 6 時間で体温低下がみられ、投与後 12 時間では 25℃か、もしくは、それを下回る体温低下がみられ、投与 6 日まで 25℃か、もしくは、それを下回る低体温が持続されていた。
【まとめ】本試験でみられた脳の希突起膠細胞の壊死、白質あるいは神経核の空胞化は、精巣と同様に、低体温の持続した状態と関連があることは示唆された。

P-02*
ステリグマトシスチンのラット発達期曝露による海馬歯状回における神経新生に対する影響

1)東京農工大・獣医病理、 2)岐阜大・院・連合獣医、 3)麻布大・生命環境科学・食品安全科学【背景及び目的】ステリグマトシスチン（STC）は我が国ではコメを高頻度に汚染するかび毒であり、アフラトキシン B1生合成の中間物質として知られ、酸化的 DNA 損傷誘発性と共に弱い発がん性が報告されている。本研究では、STC の神経発達毒性を検討する目的で、ラットを用いた発達期曝露実験を行い、児動物における海馬歯状回の神経新生への影響を検討した。
【方法】各群 12 匹の妊娠 SD ラットに、妊娠 6 日目から分娩後 21 日目まで STC（純度：99％）を 0、1.7、5.0 ないし 15.0 ppm の濃度で混餌投与し、児動物を生後 21 日目（離乳時）と生後 77 日目（成熟時）に解剖し、顆粒細胞層下帯における顆粒細胞系譜
細胞数の変動及び歯状回門での GABA 性介在ニューロンの分布を免疫組織化学的に検討し、関連する遺伝子発現変動も検討した。
【結果】母動物では分娩後 5 〜 21 日目で、雄児動物では生後 16 〜 40 日目で用量依存的な体重減少傾向を認めた。また、母動物の剖検時における肝臓絶対重量の低値を 15.0 ppm で認めた。児動物では、15.0 ppm で顆粒細胞系譜のうち、DCX +のtype-3 神経前駆細胞〜未熟顆粒細胞数と PCNA+細胞数の減少、歯状回門における PVALB +ないし CALB1 +GABA 性介在ニューロン数の増加を認めた。15.0 ppm での遺伝子発現解析では、Bdnf、Chrna7の発現増加、 Ntrk2、Chrnb2、Drd2の発現減少を認めた。
【考察】既にアフラトキシン B1で報告したように、STC のラット発達期曝露によっても、離乳時の海馬歯状回における type-3
神経前駆細胞の増殖抑制による神経新生障害を認めた。STC では更に GABA 性介在ニューロン数の増加や神経新生制御系の発現変動を認め、これらはいずれも神経新生障害に対する反応性変化であると判断された。学会では、成熟後での回復性の有無を併せて報告する。
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ポスター○中島 康太 1,2)、伊藤 優子 1,2)、増渕 康哲 1,2)、菊地 聡美 1)、吉田 敏則 1)、小西 良子 3)、渋谷 淳 1)

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-03*
ラット発達期から成熟期までの alpha-glycosyl isoquercitrin の曝露が恐怖記憶の消去学習を促進する○増渕 康哲 1,2)、中島 康太 1,2)、伊藤 優子 1,2)、菊地 聡美 1)、小柳 美穂子 3)、林 新茂 3)、吉田 敏則 1)、渋谷 淳 1)
1)東京農工大

獣医病理、 2)岐阜大・院・連合獣医、 3)三栄源エフ・エフ・アイ株式会社【背景と目的】我々は、抗酸化物質である alpha-glycosyl isoquercitrin（AGIQ）をラットに発達期から成熟期まで曝露すると、恐怖記憶の消去学習が促進することを明らかにした。本研究では、AGIQ 曝露時期と消去学習促進効果の関係を明らかにするために、曝露時期を発達期と離乳後に分け、曝露終了時に文脈的恐怖条件付け試験を行った。
【材料と方法】SD ラットを用い、妊娠 6 日目（GD 6）から分娩後 21 日目（PND 21；離乳時）まで（DEV 群）、PND 21 から PND
76 まで（PW 群）ないし GD 6 から PND 76 まで（WP 群）の間 AGIQ を 0.5％の濃度で混餌投与した。無処置対照群も設けた。
PND 64 から文脈的恐怖条件付け試験を行い、PND 76 の条件刺激提示 90 分後に脳を摘出し、海馬歯状回（DG）の免疫組織化
学的解析及び遺伝子発現解析を行った。
【結果】WP 群のみに消去学習の促進を認めた。DG の顆粒細胞層における FOS +、ARC +及び COX2 +細胞数は、いずれの
AGIQ 曝露群でも変化がみられなかった。遺伝子発現解析では、WP 群で Kif21b及び Notch1 mRNA の高値が、DV 群及び WP
群で Fos及び Vegfa mRNA の高値がみられた。
【考察】WP 群で、キネシンスーパーファミリーに属する Kif21b（恐怖記憶の消去学習に関与していることが最近報告された）発現の上昇、及び血管新生に関わる Vegfa及び Notch1（（-）エピカテキン投与マウスで空間学習の促進と共に海馬歯状回で血管形成の増加が報告された）発現の上昇がみられ、これらが消去学習促進に関与した可能性がある。WP 群で Fos mRNA が高値を示したが、FOS+細胞数に変動がみられないことから、FOS +顆粒細胞あたりの FOS 発現が増加を示して、消去学習の促進に関与する可能性が示唆された。また、AGIQ による消去学習の促進には、妊娠期からの継続的な投与が必要であると判断された。

P-04*
カニクイザルの神経黒色症の１例
ポスター○柚川 藍色、森山 亜紀子、永田 一郎、小林 欣滋、千早 豊（株）新日本科学

安全性研究所【背景と目的】カニクイザルでは多量のメラニン色素沈着が皮膚、脳髄膜下及び血管周囲にみられた神経皮膚黒色症についての報告がある。今回、一般毒性試験に供したカニクイザルの大脳髄膜に顕著な黒色色素沈着がみられ神経黒色症が疑われたので、病理組織学的に精査した。
【材料と方法】当該動物（カンボジア産、5 歳、雌）には、投与期間中、一般状態及び臨床検査結果に異常はみられなかった。
剖検時、大脳の側頭葉や頭頂葉などの髄膜に針尖大〜小豆大の黒色巣が散在性にみられた。脳及び全身諸臓器については常法に従ってホルマリン固定・HE 染色を施し、大脳の黒色巣については特殊染色及び免疫組織学的染色を施し精査した。
【結果】剖検時にみられた黒色巣では、紡錘形または円形の黒色色素含有細胞の集簇及び黒色色素沈着が髄膜下結合組織、大脳の皮質及び血管周囲腔に多巣性にみられた。さらに一部の神経細胞及びグリア細胞の細胞質内にも黒色色素沈着がみられた。これら黒色色素は Fontana-Masson 及び melanoma antibody 陽性のメラニン色素であった。色素含有細胞のほとんど
は NeuN、Iba1、GFAP、Olig2 陰性であったが、一部の細胞は NeuN、Iba1 あるいは GFAP 陽性であった。大脳以外の他の器官・組織に特記すべき異常はみられなかった。
【結論】大脳の髄膜下や血管周囲腔におけるメラノサイトの集簇及びメラニン色素沈着のみならず、大脳の皮質におけるメ
ラノサイトの集簇、さらに神経細胞、小膠細胞及び星状膠細胞の細胞質内にもメラニン色素がみられ、集簇メラノサイトに腫瘍性を示唆する形態学的特徴はみられず、神経黒色症と診断した。メラノサイトは神経堤細胞由来であり、脳の神経細胞及びグリア細胞は神経上皮細胞由来であることから、本病態には神経堤及び神経上皮両細胞の関与の可能性が示唆された。
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ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-05*
亜硫化ニッケル（Ni3S2）を単回硝子体内投与した Fischer ラットの眼球外に発生した眼窩内腫瘍の病理組織学的解析○山際 慶典 1,2)、政次 美紀 1)、田原 春菜 1)、根本 真吾 1)、倉田 昌明 1)、佐藤 洋 2)1)千寿製薬（株） 総合研究所、 2)岩手大学大学院

獣医学研究科

比較薬理毒性学研究室【緒言】亜硫化ニッケル（Ni3S2）はラットへの単回硝子体内投与により眼球内腫瘍を誘発することが知られている。硝子体内投与医薬品の発がん評価確立検討の一環で Ni3S2を単回硝子体内投与したラット 1 例に、既報に報告の無い眼球外の眼窩に腫瘍が発生したため、その病理組織学的特徴を報告する。
【材料と方法】Ni3S2を用量 0.5 mg/ 眼で右眼に単回硝子体内投与し、8 ヵ月が経過した雄性 F344/DuCrlCrlj ラットにみられた眼窩腫瘤を材料とした。動物はセボフルラン吸入麻酔下で放血致死させ、摘出した眼窩腫瘤及びその他肉眼病変の HE 染色
標本を作製し、光学顕微鏡で観察した。また、腫瘤の免疫組織化学染色および透過型電子顕微鏡による超微形態解析を実施した。
【結果】腫瘤は乳白色で右眼窩内に充満し、眼窩から突出して眼球を眼窩から押し出していた。また、頭蓋腔内の右三叉神経の腫大、右下顎リンパ節・頸部リンパ節の腫大を認めた。HE 染色で眼窩内腫瘤は小型の楕円形〜紡錘形の核を有する紡錘形細胞が束状に交錯しながら増殖しており、頭蓋骨・眼瞼・頭蓋腔・鼻腔へ浸潤していた。免疫組織化学染色では S-100
蛋白に陽性、α-SMA、NSE、Melan-A に陰性で、透過型電子顕微鏡観察では細胞周囲に断片的な基底膜様構造が見られたほか、細胞間の線維増生が見られた。腫大した下顎 / 頸部リンパ節では眼窩腫瘤を構成する細胞と同様の腫瘍細胞が観察され、リンパ節転移が確認された。
【考察及び結論】光顕的形態特徴、電顕での基底膜様構造及び S-100 蛋白に陽性を示したことから、本腫瘍を眼窩内悪性神経鞘腫と診断した。本結果から、Ni3S2はFischerラットへの硝子体内投与により眼球外にも腫瘍を生じることが明らかとなった。

P-06
外傷性孔脳症と視覚器異常がみられた雌ビーグル犬の 1 例（株）ボゾリサーチセンター

病理部【背景】孔脳症は、周産期や胎児期等に、感染症、循環障害、遺伝子異常、外傷などが原因で、脳に嚢胞または空洞が生じる病変として知られている。獣医学領域では反芻動物での報告が多いものの、実験用ビーグル犬での報告はほとんどない。
今回、視覚障害を示し、孔脳症を疑うビ−グル犬に遭遇し、脳及び視覚器（眼球、視神経）について病理学的に検討する機会を得た。
【材料・方法】症例は、社内背景データ収集のために水道水を 1 年間経口投与した雌の 1 例（TOYO Beagle、北山ラベス、
18 ヶ月齢）である。本例は一般毒性試験で実施する各種検査、眼検査を行った。病理組織学的には、脳、視覚器を用いて、HE 染色、ルクソールファストブルー染色（LFB）、マッソントリクローム染色、免疫染色（Iba1）を行った。
【結果】肉眼的には、脳は大脳右半球の前頭葉から頭頂葉にかけて陥凹巣（20 × 10 × 5 mm）及び脳脊髄液貯留がみられた。陥凹巣に接する脳実質は、硬膜との部分的な癒着がみられた。右視神経は小型化がみられた。組織学的には、大脳は、くも膜下腔から右側脳室にかけて空洞がみられ、空洞周囲の脳実質は萎縮していた。癒着部位は、脳実質に広範な線維化がみられ、同部位に褐色色素の沈着及び Iba1 に陽性を示すミクログリアの増加がみられた。右眼球は神経節細胞層を主とする
網膜萎縮が、同側視神経は径の縮小及び細胞数の減少がみられ、LFB で染色性の低下を伴っていた。
【まとめ】本症例は、側脳室まで空洞が連続していたことから程度の強い孔脳症と考えられ、脳実質傷害がみられたことか
ら、外傷に起因する可能性が示唆された。視覚器の組織学的異常と脳病変との関連性は不明であったが、追加検索を実施し、その結果についても合わせて報告する。

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ポスター○橋口 収、池崎 信一郎、齋藤 翼、伊倉 佐織、中澤 朋美、笠原 健一郎、山口 裕子

ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-07*
網膜色素変性症動物モデルにおけるキトサンオリゴ糖の抑制効果○小山 千尋 1)、竹之内 明子 1)、金瀬 茜 1)、行光 由莉 1)、榎本 祐子 2)、野口 貴子 3)、黒住 誠司 3)、佐藤 公彦 3)、岡本 芳晴 4)、
義澤 克彦 1)1)武庫川女子大学大学院
4)鳥取大学

生活環境学研究科
臨床獣医学

共同獣医学科

食物栄養学専攻、 2)関西医科大学

倫理審査センター、 3)甲陽ケミカル株式会社、【背景及び目的】網膜色素変性症は最終的に失明を来す代表的な眼科疾患で、病態の理解と治療法の開発が必要である。
N- メチル -N- ニトロソ尿素（MNU）誘発ラット網膜変性症及び遺伝性網膜変性症モデル（C3H マウス）でのキトサンオリゴ糖による病態抑制効果について検証した。
【方法】1．7 週齢雌 SD ラットに 4 mg/kg MNU もしくは生理食塩水を単回腹腔内投与した。4%COS 水（2 mL ／匹）を MNU 投
与 3 日前から投与後 7 日まで 1 日 1 回（MNU 投与日は投与 2 時間前及び 6 時間後）、強制経口投与した。MNU 投与後 7 日に両側眼球と血清を採取し、眼球の病理評価を実施した。網膜の形態計測（網視細胞比率・網膜障害率）に加えて、d-ROMs テス
トにより血清中酸化ストレス度を測定した。2．C3H 母マウスに出産日から解剖日まで 2%COS 水もしくは蒸留水を自由飲水させた。13 及び 18 日齢仔マウスの眼球を病理評価し、視細胞比率を算出した。
【結果】1．4%COS 水併用群では MNU 単独群に比べ中心部網膜視細胞比率が高く、網膜障害率は低下を示し、視細胞障害の抑制がみられた。MNU 投与群では血清 d-ROMs 値が高値を示したが、4%COS 水併用群では軽減した。2．18 日齢 C3H マウ
スでは蒸留水群で網膜外層の減少が顕著であったが、2%COS 水併用群では網膜外層が残存した。
【結論】COS 水は MNU 誘発視細胞障害及び C3H マウスの遺伝性網膜変性を軽減させた。MNU 並びに C3H マウスの視細胞障
害には酸化ストレスによる細胞死が関与することが報告されており、COS による酸化ストレスの軽減が病態抑制に関与しているのかもしれない。COS はヒト網膜色素変性症の病態抑制効果が期待できるものと考えられた。

P-08*
ラット下垂体中間葉および後葉にみられる自然発生性病変の病理組織学的特徴
ポスター○加藤 由隆、伊藤 強、小山 彩、高橋 尚史、志賀 敦史、岡崎 欣正、原田 孝則（一財）残留農薬研究所【背景】ラット下垂体にみられる自然発生性病変は、その発生率の高さから前葉の過形成や腺腫がよく知られている。そのため、毒性試験で中間葉および後葉における病変に遭遇することは前葉に比べると稀である。本発表では特に中間葉および後葉に着目し、自然発生性病変について病理組織学的特徴をまとめた。
【方法】過去に実施した Wistar Hannover および Fischer 344 ラットを用いた発がん性試験において、104 週時に計画殺された対照群の個体のうち、下垂体中間葉および後葉に病変のあるものを選択、病理組織学的特徴を検索した。
【結果】下垂体中間葉にみられた主な病変として、（1）中間葉過形成、（2）中間葉腺腫、下垂体後葉にみられた病変として、（3）頭蓋咽頭管遺残、（4）頭蓋咽頭腫が挙げられた。以下にそれらの特徴を簡潔に述べる。（1）中間葉過形成は巣状で、正常中間葉細胞と比べると細胞質の染色性はやや好塩基性を増す。（2）中間葉腺腫は後葉へ浸潤増殖するものと前葉へ浸潤増殖するものがあるが、後者は前葉腺腫との鑑別が難しい症例がある。（3）頭蓋咽頭管遺残は、管状、腺房状、紡錘状の型があり、それぞれが混在することが多い。（4）1 例のみ確認され、本例では扁平上皮への分化が顕著で、嚢胞内の層状の角化物が特徴的である。発表では、特殊染色および免疫染色法の結果も併せて報告する。

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ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-09
C57BL/6J 野生型および Polκ 欠損マウスにおけるベンゾ [a] ピレンおよび α- ナフトフラボン
併用投与の効果○赤木 純一 1), Young-Man Cho1)、豊田 武士 1)、横井 雅幸 2,3)、花岡 文雄 2,4)、大森 治夫 2)、小川 久美子 1)
1)国立衛研・病理、 2)学習院大・理・生命、 3)神戸大・バイオシグナル研セ、 4)筑波大・生命領域学際研セ【背景】ベンゾ [a] ピレン（BaP）は主に CYP1A1 によって代謝活性化され、また BaP 自身が芳香族炭化水素受容体（AhR）のリガ
ンドとして CYP1A1 の発現を亢進させる。そこで我々は CYP1A1 阻害剤との複合曝露が BaP の発がん性に影響するか調べるため、マウスを用いて CYP1A1 の阻害剤である α- ナフトフラボン（ANF）と BaP の併用投与を行った。さらに、BaP の活性代謝物であるベンゾ [a] ピレンジオールエポキシドのグアニン付加体を正確に乗り越える活性を持つ DNA ポリメラーゼ κ（カッパ）の欠損の影響についても検討した。
【目的】CYP1A1 阻害剤の併用投与および Polκ の欠損が BaP 誘発腫瘍発生に影響するかどうか明らかにする。
【材料と方法】雄のPolκ欠損（Polk−/−）マウスおよび同腹仔のC57BL/6J野生型マウスにBaPおよびANFを40週間混餌投与した。
【結果】0.01% BaP 単独投与により野生型マウス、Polk −/−マウスのいずれも前胃において単純過形成の有意な増加が見られたが、腫瘍性病変の有意な増加は見られなかった。これに対して、BaP と ANF 併用投与群では野生型マウスで前胃の乳頭腫の増加が見られた。さらに、BaP と ANF 併用投与群では、野生型および Polk −/−マウスのいずれにおいても BaP 単独投与群に比べて扁平上皮癌の発生数が有意に増加していた。
【結論】ANFとの併用投与により、野生型およびPolk−/−マウスのいずれにおいてもBaPの発がん性が増強されると考えられる。

P-10*○松尾 沙織里 1)、中野 清孝 2)、西沢 隆 2)、河村 大輔 3)、藤井 悦子 1,2)、加藤 淳彦 1)、舟橋 真一 2)、石川 俊平 3)、鈴木 雅実 1,2)1)中外製薬（株）、 2)（株）未来創薬研究所、3)東京医科歯科大学【目的】免疫不全マウスを用いたヒト腫瘍細胞の移植モデルは癌研究において重要なモデルと考えられる。その移植部位により腫瘍微小環境が大きく異なると考えられるが、形態学的特徴や微小環境と腫瘍細胞の相互作用について詳細な解析は少ない。そこで、今回ヒト食道 - 胃境界部腺癌由来の OE19 細胞を用いて同所移植（ORT）と皮下移植（SC）腫瘍の病理組織学的解析と遺伝子発現解析を組み合わせ、移植部位の相違によるモデルの特徴を評価した。
【材料および方法】SC モデルでは OE19 細胞を scid マウスに皮下移植し、移植後 3 週に採取した。また、ORT モデルでは、同細胞をマウス胃壁の漿膜下に移植し、移植後 3 及び 6 週に採材を行った。採取した組織よりパラフィン包埋薄切 HE およびマッソン・トリクローム染色標本を作製し、光学顕微鏡下で観察した。また、採取した組織より mRNA を抽出し、ヒトおよびマウス特異的な RNA sequencing を行った。
【結果】病理組織学的に、SC腫瘍は周囲組織との境界が明瞭で、間質が乏しい傾向にあり、大型の管腔形成がみられた。一方で、
ORT 腫瘍は周囲組織との境界が不明瞭で、豊富な間質内へ小型管腔が浸潤している像や、周囲組織における多数の脈管侵襲像が認められた。遺伝子発現解析では腫瘍微小環境や migration に影響を及ぼすことが知られている複数の腫瘍 - 間質相互作用が ORT モデルにおいて選択的に亢進していることが明らかとなった。
【結論】以上より、病理組織学的解析および遺伝子発現解析を組み合わせて SC と ORT を比較したところ、OE19 細胞の ORTモデルではより浸潤性が強く、SC と比較して間質との相互作用が亢進していることが明らかとなった。

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ポスター

胃癌マウス移植モデルにおける同所移植と皮下移植腫瘍の形態学的特徴と遺伝子発現
プロファイルの比較

ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-11
新規抗がん物質の特性と作用機序○安藤 さえこ 1)、深町 勝巳 1)、松本 晴年 1)、吉見 直己 2)、酒々井 眞澄 1)
1)名古屋市立大学大学院

医学研究科

分子毒性学分野、 2)琉球大学大学院

医学研究科

腫瘍病理学講座

私たちは天然中鎖脂肪酸をリードとしパルミトイルピペリジノピペリジン（PPI）を創製した（特許第 5597427 号）。PPI は
STAT3 の転写活性を抑制することで細胞増殖抑制効果を発揮する。細胞実験において PPI はある有効用量で腫瘍選択性を発揮するという特性をもつ。構造活性相関解析により PPI の腫瘍選択性にはピペリジン環の N（窒素）原子の求核性が重要であることを発見した。ピペリジン環の求核性を修飾することで、腫瘍選択性をさらに向上させた化合物 DPHE/DPH の創製に
私たちは成功した（特許審査請求中）。ヒト大腸がん HCT116 細胞株に対する DPHE/DPH の細胞増殖抑制効果を既存の抗がん物質と比較した。各薬物の IC50は、DPHE<DPH<PPI<5FU<S3I-201（a specific STAT3 inhibitor）であった。HCT116 細胞株において DPHE/DPH はアポトーシスを誘導することがわかった。In silico解析（DS 2017R2）にて DPHE/DPH は転写因子 STAT3 のSH2 ドメインに結合することが予測された。Luciferase assay では DPHE/DPH はヒト大腸がん SW837 細胞株において STAT3の転写活性を抑制した。DPHE/DPH は pSTAT3、Bcl-2、p53 のタンパク発現に影響を及ぼすことがわかった。これらの所見より、DPHE/DPH は STAT3 の抑制を介して抗がん効果を発揮している可能性がある。

P-12
ポスター

Azoxymethane and dextrane sulfate sodium 誘発大腸炎関連大腸癌は、糖尿病により増悪する○尾崎 清和、出雲 友扶子、大嶋 成奈優、寺山 由依、松浦 哲郎
摂南大学

薬学部

病理学

【目的】糖尿病による発癌リスクの上昇が臨床ならびに実験的に報告されている。その機序として高インスリンとともに高血糖や慢性炎症が考えられている。そこで、AOM/DSS により誘発した大腸炎関連大腸癌に、さらに糖尿病を発症させた動物を用い、高血糖が発癌に与える影響を解析した。
【方法】6 週齢で AOM+DSS による大腸発癌処置を全例のマウスに施した。試験群として AOM+DSS 処置のみの C 群と 8 週齢でアロキサン投与により 1 型糖尿病を誘発させた D 群を設定し、20 週齢（C20 および D20 群）および 25 週齢（C25 および D25 群）で剖検し、大腸の病変を比較検討した。
【結果】20 週齢では腫瘍の多くは直腸に発生した粘膜内に留まる腺癌であった。D20 群の直腸の腫瘍発生率（93.8％）および
マウス 1 個体当たりの腫瘍個数（2.3 個）は C20 群（86.7％および 2.2 個）とほぼ同等の値を示し、腫瘍サイズも 2 群間で差を認めなかった。25 週齢では、ほぼ全例の直腸に腺癌を認め、D25 群のマウス 1 個体当たりの腫瘍個数（3.2 個）および腫瘍サイズ（3.00 mm）は C25 群（2.4 個および 2.37 mm）と比べると、有意ではないが糖尿群でやや増加傾向を示した。さらに、D25
群の悪性度の高い浸潤癌の発生率は 47.1％であり、C25 群の 6.7％と比較すると著しい増加を示した。結腸における発癌は
20 週齢では少なかったが、25 週齢では両群ともに増加した。D25 群の腺癌の発生率（41.2％）およびマウス 1 個体当たりの腫瘍個数（1.82 個）は C25 群（33.3％および 0.67 個と比較すると糖尿群でやや増加していたが、有意な変化ではなかった。
【結論】1 型糖尿病マウスでは、高血糖により大腸炎関連大腸癌の悪性度が高くなることが明らかとなった。また、病変の増強には、糖尿病の罹患期間の長期化が必要であることも示唆された。

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ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-13
デキストラン硫酸ナトリウム誘発マウス大腸炎モデルにおけるラカンカの効果に関する検討○小川 秀治 1)、美谷島 克宏 1,2)、名倉 かれん 2)、野沢 美波 2)、原田 紗枝 2)、山口 理紗子 2)、小柳 美穂子 3)、林 新茂 3)、
渡邊 厚 1,4)、煙山 紀子 2)、中江 大 1,2)
1)東京農大・院・食品栄養、 2)東京農大・食品安全健康、 3)三栄源エフ・エフ・アイ、 4)旭化成メディカル【目的】ラカンカは中国原産の瓜科植物の果実であり、その抽出物は甘味料として利用されるほか、抗酸化作用があることが明らかになっている。本研究では、食品成分による大腸炎の予防・改善効果を見出す目的の下、デキストラン硫酸ナト
リウム（DSS）
誘発マウス大腸炎モデルを用いてラカンカ抽出物（ラカンカ）の効果を確認した。
【方法】実験は、C57BL/6JJcl 系雄性マウス（8 週齢）を用い、対照群・1.25%DSS 投与群・1.25%DSS+0.15% ラカンカ投与群・1.25%DSS+0.5% ラカンカ投与群・1.25%DSS+1.5% ラカンカ投与群の 5 群（1 群 6 匹）を設定した。実験期間は 5 週間とし、DSS は 1 週間混水投与後に 1 週間休薬期間を設け、これを繰り返した。ラカンカは実験期間中、連続して混餌投与した。実験期間中には体重・摂餌量・摂水量をモニターし、実験期間終了時には体重測定後に動物を屠殺・剖検し、大腸を含む主要臓器を摘出して臓器重量を測定し、大腸の長さを測定したほか、炎症関連遺伝子の発現解析・各臓器の病理組織学的解析を実施した。
【結果】DSS は、大腸の長さの短縮、大腸粘膜における広範囲の強い炎症及び大腸における TNF-α 遺伝子発現の増強を誘発した。ラカンカの併用投与は、これらの変化を軽減するか、その傾向を示した。
【結論】以上の結果より、ラカンカは、DSS 誘発大腸炎に対して抑制的に作用することが明らかになった。

P-14
イヌの遺伝性消化管腫瘍の同定

1)岐阜大学
3)岐阜大学

科学研究基盤センター 動物実験分野、 2)岐阜大学 応用生物科学部 共同獣医学科 獣医病理学研究室、応用生物科学部 共同獣医学科 獣医内科学研究室、 4)岐阜大学 応用生物科学部 共同獣医学科 分子病態学研究室【緒言】ヒトの遺伝性疾患の動物モデルの多くは、人為的な遺伝子操作により作出されたマウスモデルである。ヒトの家族性大腸腺腫症（Familial adenomatous polyposis, FAP）は、APC遺伝子の変異を原因とする優性遺伝性疾患で、大腸における腺腫性ポリープの発生を特徴する。また、そのモデル動物として、Apc（Min/+）マウスが広く用いられている。近年、ジャックラッセルテリア（J.R. テリア）という犬種で消化管ポリープの症例が増加している。今回、この疾患が FAP に相当するイヌの遺伝性疾患であるか検討した。
【材料・方法】消化管ポリープが生じた J.R. テリア 20 頭を対象とした。内視鏡または外科的に切除されたポリープについて
病理組織学的に解析した（胃病変 22 例、大腸病変 16 例）。血液あるいはパラフィン包埋組織から DNA を抽出し、PCR ダイ
レクトシークエンス法によりAPC遺伝子変異の検索を行った。遺伝子検索には、対照として他疾患のJ.R.テリア6頭を用いた。
【結果】ポリープは胃、大腸に発生し、特に幽門部と直腸に集中していた。12 頭では多発性にポリープが認められ、5 頭では胃と大腸の両方で発生していた。病理組織学的に、胃病変は過形成（2 例）、腺腫（9 例）あるいは腺癌（10 例）と診断された。
大腸病変は、腺腫の１例を除き全て腺癌であった。免疫組織学的に、腺腫および腺癌において、腫瘍細胞の核および細胞質内への β カテニンの蓄積が認められた。遺伝子解析では、全症例で同一の APC遺伝子変異（c.462A>T 及び c.463A>T）が認められた。前者はミスセンス変異、後者はナンセンス変異であった。一方、他疾患の J.R. テリアでは同遺伝子変異は認められなかった。
【考察】J.R. テリアに発生する消化管腫瘍は、ヒトの FAP に相当する遺伝性疾患であり、FAP の新たなモデルとして有用であると考えられる。
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ポスター○平田 暁大 1)、吉嵜 響子 2)、西飯 直仁 3)、川部 美史 4)、森 崇 4)、柳井 徳磨 2)、酒井 洋樹 2)

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ポスター

P-15*
イヌの組織球性潰瘍性大腸炎の病理組織学的検討○畝山 瑞穂 1)、チェンバーズ ジェームズ 1)、中島 亘 2)、内田 和幸 1)、中山 裕之 1)
1)東京大学

獣医病理学研究室、 2)日本小動物医療センター【背景】組織球性潰瘍性大腸炎（HUC）は若齢のボクサー犬に特異的に発生する炎症性腸疾患であり、ヒトの Whipple 病と類似した組織像を示す。HUS の発症には遺伝的背景に加え大腸菌感染が深く関与する。近年フレンチブルドッグ等の非ボクサ
ー犬種においても HUC の発生が報告されているが、詳しい病理組織学的知見は乏しい。今回、非ボクサー犬種の HUC 症例
に対し大腸菌感染との関連を調べるとともに、オートファジー関連マーカーを用いた病理組織学的検討を実施したので報告する。
【材料と方法】HUC と診断された犬 4 症例（フレンチブルドッグ 3 例、バセットハウンド 1 例）の結腸組織について HE 染色、
PAS 染色、グラム染色およびワルチンスターリー染色を行った。また CD204、E.coli LPS、Iba1、LC3、p62、Ubiquitin について免疫染色を実施した。
【結果と考察】全症例で、粘膜固有層において顆粒状細胞質を有するマクロファージの集簇が観察され、同細胞質顆粒は PAS
陽性であった。また、一部マクロファージの細胞質内にグラム陰性短桿菌が認められた。マクロファージは CD204 強陽性、
Iba1 弱陽性であり、細胞質内に E.coli LPS 陽性の小粒子が多数観察された。全症例でマクロファージの細胞質に p62 の蓄積が認められたが、LC3 の蓄積は 1 症例で僅かに認められるのみであった。いずれの症例でも Ubiquitin の蓄積は認められなかった。以上の結果から、非ボクサー犬種に発生した HUC はボクサー犬と同様の病理組織学的特徴を示し、大腸菌感染との関連が示唆された。また、HUC の発症機構に選択的オートファジーの調節異常が関与する可能性が考えられた。

P-16*
リポソーム製剤投与が引き起こすイヌ肝臓及び胆嚢における出血性変化
ポスター○牧田 慶子 1)、柿沼 千早 2)、阪田 佳紀 1)、山川 達也 1)、猪又 晃 1)、原 健史 1)
1)富士フイルム（株） 医薬品・ヘルスケア研究所、 2)バイオサイエンス＆テクノロジー開発センター【背景及び目的】近年、薬効向上もしくは毒性軽減を特長としたドキシルなどのリポソーム製剤が複数上市されている。今回、
我々は、ドキシル（Doxil、ドキソルビシン（DOX）内包リポソーム）及び空リポソーム（DOX 非内包リポソーム）をイヌに投与した際に肝臓及び胆嚢にみられた変化について病理学的に精査するとともに、その発生機序について考察した。
【方法】8 ヶ月齢の雄性ビーグルにドキシルまたは空リポソームを単回静脈内投与し（4 例／群）、投与 24 時間後に剖検を行い、肝臓及び胆嚢について病理組織学的検査を実施した。
【結果・考察】ドキシル投与群及び空リポソーム群において、剖検時に肝臓（胆嚢外膜の周囲）及び胆嚢（体部から底部の漿膜面）に赤色巣が各群 2 例ずつ認められた。病理組織学的検査において、肝臓において中心静脈、小葉下静脈もしくはグリソン鞘の血管周囲への出血及び中心静脈周囲のリンパ管拡張、胆嚢では外膜下に出血を認めた。また、イヌの肝臓の血管内皮下に種特異的に分布するマスト細胞の細胞内顆粒の減少を認めた。これらの変化は両投与群間で頻度及び程度に明らかな差はみられず、投与後 24 時間で認められていること、細胞浸潤を伴わないことから急性期の変化であると考えられた。
以上より、今回みられた出血性変化の発生機序は、イヌ種特異的に分布するマスト細胞及びマスト細胞から放出されたヒスタミンなどの生理活性物質が関与しているものと考えられた。

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ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-17*
Participation of heterogeneous macrophages related to M1/M2 types in D-galactosamineinduced acute rat liver injury○ Nahid Rahman、Munmun Pervin、倉持 瑞樹、Mohammad Karim、井澤 武史、桑村 充、山手 丈至
大阪府立大

獣医病理

[Background and Aim] Macrophages in pathological lesions are heterogeneous. Generally, M1/M2-macrophages play roles as injury andremodeling, respectively. Hepatic lesions induced by a single injection of D-galactosamine (D-GalN; 800 mg/kg, ip) were investigatedbased on M1/M2 polarization.
[Materials and Methods] Blood and liver samples were collected on 8 hr and 1, 2, 3 and 5 days after injection.
[Results] Extensive lesions characterized by sporadic coagulative necrosis, inflammatory cells and reparative fibrosis were seen ondays 1 and 2 with a significant increases of AST and ALT levels. On days 3 and 5, the lesions recovered to normal. M2-macrophages
reacting to CD163 increased on days 1 and 2, and then, M1-macrophages positive for CD68 increased on day 2, with simultaneous
increments of M1-related cytokines (TNF-α, IL-6, INF-γ) and M2-related cytokines (TGF-β1, IL-10, MCP-1, IL-4). MHC class II- andCD-204-positive macrophages showed increase in number on days 1 and 2; the former tended to M1 polarization and the latter to M2
polarization.
[Conclusion] Because Kupffer cells showed a positive reaction for CD163, D-GalN-induced lesions may be characterized by aquick appearance of CD163-positive Kupffer cell-derived M2 macrophages; thereafter, M1-/M2-macrophages with heterogeneous
immunophenotypes participated in extensive hepatic lesions consisting of both injury and reparative fibrosis.

P-18*○倉持 瑞樹、井澤 武史、ナヒド ラマン、桑村 充、山手 丈至
大阪府立大

獣医病理

【背景・目的】薬物性肝障害の進展には、傷害組織から放出される Damage associated molecular patterns（DAMPs）が重要な役割を担う。高用量 TAA 誘発ラット急性肝障害の解析から、DAMPs として High mobility group box 1（HMGB1）が炎症の進展に重要な役割を担う可能性が示された。今回、TAA 誘発ラット急性肝障害モデルにおける炎症の進展について、HMGB1 に着目し、詳細な解析を行った。
【材料・方法】7 週齢 F344 雄ラットに生食または TAA（50 mg/kg）を単回腹腔内投与し、投与後 6 時間から 72 時間まで採材した。
さらに、TAA 投与後 6 時間に HMGB1 中和抗体を投与し、病態を解析した。
【結果】TAA 投与後 6 時間で中心静脈周辺に肝細胞の好酸性変化、18 時間で肝細胞壊死と単核球・好中球浸潤が軽度みられ、
AST、ALT 値は 24 時間で最大となった。HMGB1 免疫染色では、対照群では肝細胞の核に陽性像を認め、6 時間で傷害部
において細胞質に陽性を示す肝細胞が現れ、12 時間で顕著となり、その後核内に復帰した。好中球誘導ケモカインである
CXCL1 は 6 時間から発現増加し、18 時間がピークであった。中和抗体投与によって、好中球数と CXCL1 発現、マクロファージ数と CCL2 発現が低減し、肝障害が抑制された。
【結論】TAA 誘発急性肝障害では、傷害肝細胞において HMGB1 が核外へ移行し、好中球やマクロファージを誘導・集簇させることで炎症の進展に寄与していることが示された。

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ポスター

チオアセトアミド（TAA）誘発ラット急性肝障害モデルでの好中球・マクロファージ誘導における炎症誘導因子（DAMPs）の役割の解明

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ポスター

P-19
NASH モデル TSOD マウスにおける肝臓腫瘍および肝臓組織のメタボローム解析○梯 アンナ、石井 真美、奥野 高裕、多胡 善幸、藤岡 正喜、魏 民、鰐渕 英機
大阪市立大学

大学院医学研究科

分子病理学

非アルコール性脂肪肝炎（NASH: nonalcoholic steatohepatitis）は、生活習慣病と関連がある疾患であり、ウイルス性慢性肝炎と同様に肝硬変や肝細胞癌に進展する。本研究では、肥満や糖尿病を自然発症する TSOD マウスを NASH モデルマウスとして用い、肝臓において病理組織学的解析、免疫組織学的検討および CE-TOFMS, CE-QqQMS を用いたメタボローム解析を行った。TSOD マウスでは、ヒト NASH 様の組織変化を背景として多数の細胞巣と肝腫瘍の発生が認められた。TSOD マウスの肝臓では脂肪沈着や線維化、炎症細胞浸潤といった NASH 様の変化が肝組織に認められた。細胞増殖およびアポトーシ
スは、TSOD マウスの細胞巣と肝臓腫瘍では TSNO マウスと比較して有意に上昇した。また、TSOD マウスの肝臓の変異性細胞巣において 8-hydroxy-2’-deoxyguanosine 陽性率は有意に増加した。それに関連して、肝臓腫瘍では解糖系の活性化、酸化ストレスに対する抵抗性を示す GSH/GSSG の増加が観察された。さらに、腫瘍では arginine レベルの有意な上昇と glycine
や methionine の有意な現象が認められ、arginine の増加が arginase の発現減少により引き起こされることが明らかとなった。
メタボロームの変化から肝腫瘍に対する mTOR シグナリングの活性化が認められた。

P-20
ポスター

F344 系ラットにおける CDAA 食誘発非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）様病態に対して
ラカンカ抽出物が及ぼす影響○宇野 絹子 1)、美谷島 克宏 1,2)、鈴木 佳奈恵 2)、菊池 耕平 2)、仲井 杏海 2)、永吉 司 2)、張 舜恵 1)、煙山 紀子 2)、小柳 美穂子 3)、
林 新茂 3)、小川 秀治 1)、渡邊 厚 1)、中江 大 1,2)
1)東京農大・院・食品栄養、 2)東京農大・食品安全健康、 3)三栄源エフ・エフ・アイ【目的】甘味料として用いられるラカンカ抽出物は、抗酸化作用による抗炎症・抗がん性など、様々な効果を持つものと報告されている。本研究では、コリン欠乏メチオニン低減アミノ酸（CDAA）食により誘導する NASH 様の病態に対するラカン
カ抽出物の予防ないし病態軽減に関する効果について、Fischer344（F344）系ラットを用いて検討した。
【材料及び方法】6 週齢の雄 F344 系ラットに、CDAA 食（RESEARCH DIETS 社）または基礎食（CLEA Rodent Diet CE-2、日本
クレア（株））、また、ラカンカ抽出物水溶液（0.6％（w/v））または蒸留水を、2 週間投与した。飼育期間中には、一般状態観察ならびに体重・摂餌量・摂水量の測定を行った。解剖時には、麻酔下で腹大動脈より採血した後に放血殺し、速やかに肝臓を採取し重量を測定した後、一部を凍結保存、残りを 4％パラフォルムアルデヒド液にて固定した。肝臓は、病理組織学的解析及び遺伝子発現解析に供した。
【結果】CDAA 食群の肝では、重量増加・肝細胞脂肪化・線維化、炎症関連遺伝子発現増強がみられた。ラカンカ抽出物は、炎症関連遺伝子発現増強を抑制し、線維化を減弱する傾向を示した。
【結論】以上の結果より、ラカンカ抽出物は、F344 系ラットにおける CDAA 食誘発 NASH 様病態を抑制するものと示唆された。

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ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-21
雌性 SDT fatty ラットの非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）様病態の形成過程における血中パラメータの変動○龍 完次朗 1)、美谷島 克宏 1,2,3)、張 舜恵 2)、篠原 雅巳 4)、太田 毅 5)、大畑 敬一 6)、宇野 絹子 2)、煙山 紀子 3)、小川 秀治 1)、
渡邊 厚 1,7)、中江 大 1,2,3)
1)東京農業大学大学院

農学研究科 食品安全健康学専攻、 2)東京農業大学大学院 農学研究科 食品栄養学専攻、応用生物科学部 食品安全健康学科、 4)日本クレア（株） 東京 AD 部、 5)日本たばこ産業（株） 医薬総合研究所、
6)シミックホールディングス（株） L-FABP 事業部、 7)旭化成メディカル（株）
3)東京農業大学【目的】本研究は、腎障害の尿中バイオマーカーとして用いられている肝臓型脂肪酸結合蛋白（L-FABP）の、非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）の血清バイオマーカーとしての有用性について検討する目的で、2 型糖尿病のモデル動物であり、NASH 様病態も誘発する雌性 SDT fatty ラットを用いて、NASH 様病態の進行における経時的推移を調べた。
【材料及び方法】本試験は、各 12 匹の 6 週齢雌性 SDT fatty ラットおよび対象群の SD ラットに基礎飼料（CE-2）を自由摂取させて 10 週間飼育し、2 週毎に採血して血清 GLU・TG・T-CHO・INS・L-FABP を測定し、実験終了時に剖検して肝臓・腎臓・血液を採取し、病理組織学的および血液生化学的解析を実施した。
【結果】SDT fatty ラットの血清 GLU は、8 週齢から高値となり、それ以降も増加した。血清 T-CHO・TG は、常に高値で、10 週齢以降特に顕著であった。血清 INS・L-FABP は、10 週齢をピークに高値を示した後に減少した。16 週齢の肝では、顕著な肝細胞の脂肪化と肥大、軽度の炎症と線維化を観察し、NASH 様の病態と診断した。
【結論】以上の結果より、血清 L-FABP は雌性 SDT fatty ラットの NASH 様病態の初期に増加し、L-FABP は NASH の血清バイ
オマーカーとして有用であるものと示唆された。

P-22*
脂質代謝関連転写因子 SREBP-1 が小胞体ストレスと慢性炎症に及ぼす影響

1)東京農大・院・農学研・食品安全健康、 2)東京農大・応生・食品安全健康、 3)東京農大・院・農学研・食品栄養、
4)旭化成メディカル・医療技術材料研【目的】Sterol regulatory element-binding proteins（SREBPs）は脂質合成を司る転写因子であり、その過剰な活性化は肥満や脂質代謝異常を促進すると考えられている。本研究では、SREBPs が代謝調節だけでなく、NASH をはじめとした慢性炎症にも関与する可能性を明らかにするため、in vitroおよび in vivoでの解析を行った。
【方法】In vitro実験は、HepG2 細胞を用い、siRNA による SREBP-1 ノックダウン処理による遺伝子発現変動について、既知の遺伝子発現に関する real time-PCR による解析に加え、RNA-Seq. による網羅的解析を実施した。In vivo実験は、改変コリン欠乏メチオニン低減アミノ酸（mCDAA）食により C57BL6 系雄性マウスに誘発した NASH 様病態の肝臓を用いて、RNASeq. により抽出された遺伝子とその産物の発現を解析した。
【結果】SREBP-1 をノックダウンした HepG2 細胞においては、SREBP-1 の発現が減弱した。RNA-Seq からは IL-21R の発現減弱が抽出され、これは real time-PCR により確認された。また、SREBP-1a または SREBP-2 を過剰発現させた HEK293 細胞においては、IL-21R の発現が有意に増強した。NASH 様病態を誘発したマウス肝では、IL-21R の発現増強を real time-PCR お
よび免疫組織化学染色で観察した。
【考察】以上の結果より、SREBP-1 または SREBP-2 が、IL-21R の発現調節を介して、NASH における慢性炎症の発生に関与している可能性が示唆された。

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ポスター○高 臨風 1)、煙山 紀子 2)、斎藤 奈津美 2)、渡邊 聖栄子 2)、竹井 亜矢子 2)、田添 晴椰 2)、龍 完次朗 1)、宇野 絹子 3)、張 舜恵 3)、
小川 秀治 3)、渡邊 厚 3,4)、美谷島 克宏 1,2,3)、中江 大 1,2,3)

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ポスター

P-23
F344 ラットを用いたアセタミドの 28 日間反復投与による肝毒性評価○石井 雄二 1)、菊池 玲美花 1,2)、木島 綾希 1)、高須 伸二 1)、小川 久美子 1)、梅村 隆志 1,2)
1)国立医薬品食品衛生研究所

病理部、 2)ヤマザキ動物看護大

動物看護学部【目的】食品やたばこ煙等に含まれるアセタミドは、ラット肝臓に発がん性を有するものの、種々の遺伝毒性試験は陰性であり、その発がん機序は未だ明らかとなっていない。本研究では gpt delta ラットを用いた一般毒性・遺伝毒性包括試験によるアセタミドの評価に先立ち、F344 ラットを用いた 28 日間の反復投与試験を実施して、肝毒性を評価すると共にその発がん機序への関与を探った。
【方法】雄性 6 週齢の F344 ラットに、アセタミドを 1.25、2.5 又は 5.0％の濃度で 28 日間混餌投与し、血清中の肝毒性パラメーターの検索、病理組織学的及び免疫組織化学的検索を行った。
【結果】5.0％群では投与 1 週目から体重増加抑制が見られ、3 週目以降、体重は減少した。血清 ALT は 1.25％群から、AST及び ALP は 2.5％群から有意に上昇し、2.5％群では肝細胞の有糸分裂像及び単細胞壊死とオーバルセルの過形成が認められた。また、肝細胞に好塩基性の細胞質内封入体が散見され、フォイルゲン染色陽性を示した。さらに、同群では cleaved
caspase3 及び Ki67 陽性細胞が増加した。一方、1.25％群でこれらの病理組織学的変化は認められず、5.0％群ではオーバル
セルの過形成は認められたものの、その他の変化はいずれも減少又は消失した。
【考察】5.0％群における各変化の減少又は消失は、一般状態の悪化に伴うものと考えられた。肝細胞のアポトーシス及び核成分に由来する細胞質内封入体は、細胞増殖に伴う分裂異常によって生じたものと考えられた。また、発がん用量近傍の中間用量における顕著な細胞増殖活性の上昇がアセタミドの肝発がん性に寄与する可能性が示唆された。本試験における最高用量は最大耐量を越えており、最低用量は肝毒性の無影響量であると判断した。これらの結果より、包括試験の最高
用量を 2.5％に設定した。

P-24
早期ラット肝発がんに対する Bear Bile Powder の抑制作用ポスター○金 美蘭、張 梅、唐 倩、王 自力、王 剣
中国

西南大学

動物科術学院【目的】熊科動物黒熊の胆嚢から得られた胆汁を乾燥させ作られた天然薬 Bear Bile Powder（BBP）は抗菌、解熱、鎮痛、抗炎症、抗腫瘍作用などを有していることが知られている。しかし、BBP が早期肝発がんに対して抑制作用を有するか否かはまだ知られていない。本実験ではラット早期肝発がんに対するに BBP の抗腫瘍作用について検討し、その作用機序を解明することを目的とした。
【方 法 】6 週 齢 の 雄 SD ラ ッ ト 40 匹を 4 群（1 群：DEN 単 独 群、2 群：DEN+PBO、3 群：DEN+PBO+BBP-L、4 群：DEN+
PBO+BBP-H）に分け、全群に 200 mg/kg diethylnitrosamine（DEN）でイニシエーション処置を行い、実験開始 2 週後より第 2 〜4 群には 0.5％ PBO を混餌投与するとともに第 3, 4 群には 200 mg/kg または 400 mg/kg BBP を 9 週間経口投与した。また、細胞増殖活性を高めるために実験開始 3 週後に全群に対して 2/3 肝部分切除を行った。投与終了後に体重や肝重量を測定し、肝臓に対して病理組織学検査、Ki67 や GST-P 免疫染色、real-time RT-PCR による遺伝子発現解析を行った。
【結果】その結果、BBP 高用量群の最終体重と絶対肝重量は DEN+PBO 群に比べ減少傾向を示した。さらに、GST-P 陽性細胞
巣の数、面積においても明らかな減少傾向を示した。特に低用量群では統計学的有意な差もあった。また、BBP 投与群のKi67 陽性細胞率は DEN+PBO 群に比べ有意に減少した。遺伝子発現解析では、細胞増殖に関連する p27, アポトーシスに関連する p53, p21, Bax, Bcl-2, caspase3, caspase 8, caspase 9 の発現レベルが BBP 高用量群において DEN+PBO 群に比べ有意に増加した。
【結論】これらの結果から、BBP はラット早期肝発がんに対して抑制作用を有し、その抑制機序には細胞増殖抑制やアポトーシス促進などが含まれている可能性が示唆された。
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ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-25
ジフェニルアルシン酸の F344 ラットにおける慢性毒性試験及び発がん性試験○山口 貴嗣、魏 民、藤岡 正喜、梯 アンナ、鰐渕 英機
大阪市立大学大学院

医学研究科

分子病理学

【背景】茨城県神栖市の地下水や土壌には、合成有機ヒ素化合物であるジフェニルアルシン酸（以下、DPAA）が存在し、不法投棄による汚染地域の住民に神経毒性症状が報告されていた。本研究の目的は、ラットにおける DPAA の慢性毒性及び発がん性を評価することである。
【方法】雌雄の F344 ラットに 0、5、10 及び 20 ppm の濃度の DPAA を 52 週間（慢性毒性試験）及び 104 週間（発がん性試験）飲水投与した。
【結果】慢性毒性試験：雌ではコントロール群と比較して、20 ppm の DPAA 群で ALP 及び γ-GPT の有意な増加、10 及び20 ppm 群で TCHO の有意な増加が認められた。20 ppm の DPAA 群の雌雄全例でファーター乳頭部における総胆管の拡張及び開口部の狭窄が認められた。さらに 20 ppm の DPAA 群の雌雄では肝内の胆管上皮過形成の有意な発生数の増加が認められた。発がん性試験：5、10、20 ppm の DPAA を投与した雌雄の F344 ラットではどの臓器及び組織においても腫瘍発生率の有意な増加は認められなかった。
【結論】これらの結果より、DPAA は F344 ラットにおいて、胆管上皮に対して毒性を示すことが明らかとなった。さらに本試験の条件下において、DPAA の無毒性量は雄で 10 ppm、雌で 5 ppm と推定された。また発がん性試験では、DPAA は雌雄の F344 ラットにおいて、発がん性を有しないことが明らかとなった。

P-26*
ラット肝臓における GST-P 陽性巣の種々発がん物質休薬後動態の検討

1)国立医薬品食品衛生研究所

病理部、 2)ヤマザキ動物看護大学

動物看護学部【背景】我々はこれまでに、遺伝毒性発がん物質の diethylnitrosamine により誘発される GST-P 陽性巣は休薬後に増加する一方、発がん機序が不明な furan では休薬後に減少することを見出した。本研究では、他の遺伝毒性発がん物質あるいは furan 類で同様の結果を示すかを検討する目的で、遺伝毒性発がん物質として 2-amino-3-methylimidazo[4,5-f]quinolone（IQ）、estragole（ES）、furan 類として 2-methylfuran（2-MF）および 2-pentylfuran（2-PF）を用いてそれぞれが誘発する GST-P 陽性巣の休薬後動態を解析した。
【材料と方法】6 週齢雄性 F344 ラットに IQ（100 ppm）を混餌により、2-MF（30 mg/kg/day）、2-PF（100 mg/kg/day）または ES（150 mg/kg/day）を強制経口により 13 週間投与した。その後、7 週間の休薬期間を設けた。投与終了後および休薬後に肝臓を摘出し、GST-P 陽性巣の定量解析を行った。
【結果】IQ 投与群では休薬前後で GST-P 陽性巣の数および面積に顕著な差は認められなかった。一方、2-MF、2-PF および
ES 投与群では休薬後にその何れもが減少した。特に、2-MF および ES では休薬後に GST-P 陽性細胞がモザイク状に認められる陽性巣が散見された。
【考察】IQ と ES では、GST-P 陽性巣の休薬後動態が異なっていたことから、遺伝毒性発がん物質が誘導する GST-P 陽性巣は共通の性質を有しているわけではなかった。一方、furan 類では何れも退縮が観察されたことから、退縮する細胞が含まれていることは furan 類が誘導する GST-P 陽性巣に共通の性質であると考えられた。また、モザイク状の退縮像は、GST-P の大きさに依存した変化であり、2-PFで観察されなかった原因は誘導されたGST-P陽性巣が非常に小型であったためと考えた。
従って、退縮する GST-P 陽性細胞は何れも退縮しない陽性細胞と混在していると結論した。
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ポスター○高須 伸二 1)、中村 くるみ 1,2)、石黒 結唯 1,2)、石井 雄二 1)、木島 綾希 1)、小川 久美子 1)、梅村 隆志 1,2)

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-27
犬の肝腫瘍における筋上皮細胞分化の免疫組織化学的解析○桑村 充 1)、辻 佑佳 1)、倉持 瑞樹 1)、井澤 武史 1)、秋吉 秀保 2)、山手 丈至 1)
1)大阪府立大学

獣医病理学教室、 2)大阪府立大学

獣医外科学教室【背景】犬の筋上皮細胞は乳腺や唾液腺の腫瘍でみられ、通常、正常な胆管周囲にはみられない。我々は、肝臓原発の筋上皮の表現型を示す癌を経験した。本例および犬の代表的な肝臓腫瘍について、筋上皮の表現型について検討した。
【材料と方法】11 歳、雌、ミニチュアダックスフンドの肝臓外側左葉に存在した灰白色充実性孤在性軟性腫瘍と犬の代表的な肝臓悪性腫瘍について HE 染色、免疫組織化学染色で検査を行った。
【結果】本例は、組織学的に類円形核と少量の弱好酸性〜空胞状の細胞質を持つ腫瘍細胞が胞巣状、索状、びまん性に増殖していた。免疫組織化学的には、腫瘍細胞は CK AE1/AE3、CK5、CK14、vimentin、Sox9 と筋上皮細胞マーカー α-smoothmuscle actin、p63、calponin に陽性を示した。本腫瘍は、筋上皮の表現型を示す癌と診断された。さらに、本腫瘍と犬の代
表的な肝臓の悪性腫瘍を免疫組織化学的に比較したところ、胆管癌において筋上皮細胞に分化する腫瘍細胞が見られた。
胆管癌の腫瘍細胞では CK19 の発現も見られたが、本腫瘍では CK19 陰性であった。肝細胞癌では筋上皮に分化する腫瘍細胞は見られなかった。
【考察】本例は、筋上皮の表現型を示す犬の肝臓癌の希少例と考えられた。胆管癌では、筋上皮細胞へ分化する潜在能をもつ腫瘍細胞が存在する可能性が示唆された。

P-28*
マウスにおける自然発生性の膵腺房細胞の空胞化についての病理学的検討
ポスター○安野 恭平 1)、伊倉 佐織 2)、袴田 志野婦 1)、岡戸 恵子 3)、山口 裕子 2)、甲斐 清徳 1)、森 和彦 1)
1)第一三共（株） 安全性研究所、 2)（株）ボゾリサーチセンター
3)第一三共 RD ノバーレ（株） トランスレーショナル研究部

病理部、【目的】マウスでは自然発生性の膵腺房細胞の空胞化が稀にみられるが、詳細な検討はなされていない。今回、マウスにみられる自然発生性の膵腺房細胞の空胞化について病理学的検討を実施した。
【動物】C57BL/6J マウスを遺伝的背景としたとある遺伝子のノックアウト（KO）マウス（17 週齢、n=15）、ICR（CD-1）マウス（110
週齢、n=298）、B6C3F1 マウス（110 週齢、n=110）、及び rasH2 マウス（32 週齢、n=399）
を用いた。
【結果】KO マウスの 2 例、ICR（CD-1）マウスの 4 例、B6C3F1 マウスの 1 例、及び rasH2 マウスの 3 例において腺房細胞の空胞化がみられた。HE 染色では空胞の多くは腺房単位で観察され、病変は膵臓全域に地図状にみられた。空胞は腺房細胞の基底側のエルガストプラズムと管腔側のチモーゲン顆粒の間に微細空胞状にみられ、同時にチモーゲン顆粒の減少を伴っていた。また、空胞は内部に弱好塩基性の物質を含み、これは periodic acid Schiff 反応に陽性を示し、免疫組織化学的染色では小胞体ストレスセンサー及び分子シャペロンマーカーである抗 calreticulin 抗体に陽性を示した。電子顕微鏡検査では、
空胞は腺房細胞のエルガストプラズムと管腔の間の粗面小胞体の拡張として観察され、小胞体の拡張が数珠状に連なる像が観察された。拡張した小胞体内ではモザイク状の電子密度を示すタンパク質様成分の貯留がみられた。
【結論】本研究に用いた症例の膵腺房細胞空胞化はミスフォールディングタンパク質の貯留による粗面小胞体の拡張によるものであった。発生頻度は稀であったが、複数の系統に跨って認められたことから、マウスの背景病変として認識すべきと考えられた。

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ポスター

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P-29
若齢の SD ラットにみられた膵臓傍胆管部の嚢胞の 1 例○山下 由真、佐々木 朋、土肥 孝彰
マルホ（株） 開発研究部

安全性研究グループ【緒言】毒性試験に用いた SD ラットにおいて、先天異常を疑う膵臓傍胆管部の嚢胞の症例を経験したので報告する。
【症例】4 週間反復投与毒性試験の被験物質投与群として試験に供された 10 週齢の雌性 Crl:CD（SD）ラットにおいて、投与期間終了時の剖検にて、膵臓傍胆管部に直径約 10 mm の嚢胞が認められた。嚢胞内には無色の液体が貯留していた。なお、投与期間中に一般状態、体重、摂餌量に異常は認められず、血液学的検査及び血液生化学検査においても異常は認められなかった。
【結果】組織学的検査の結果、嚢胞壁は単層の立方上皮に内張りされており、内腔側に粘液様の胞体をもつ上皮細胞も存在した。嚢胞壁はさらに膠原線維層及び平滑筋層に囲まれており、軽度〜中等度の炎症性細胞浸潤が認められた。炎症の程度が強い領域では、膠原線維及び平滑筋の層構造が不整となり、上皮の内張りが破壊され、嚢胞内腔への炎症性細胞の漏出が認められた。他に、膠原線維内に膵管類似の管状構造が多数認められる領域や膵臓腺房細胞類似の細胞が認められる領域も存在した。免疫組織化学染色の結果、嚢胞壁を内張りする上皮は SOX9 陽性であった。なお、嚢胞以外、他の臓器に異常は認められなかった。
【まとめ】若齢かつ一般状態等の検査値及び嚢胞以外の臓器の病理学的検査に異常を認めなかったことから、本症例の病因
は自然発生性の先天異常を疑った。嚢胞の由来としては、解剖学的な位置、上皮の形態及び平滑筋層の存在から肝外胆管
と考えた。

P-30*
抗アレルギー薬の膵癌化学予防効果の検討
ポスター○加藤 寛之、内木 綾、鈴木 周五、高橋 智
名古屋市立大学大学院医学研究科

実験病態病理学【背景】膵癌は治療抵抗性で予後は極めて不良であり、その予防法の検討は重要な課題である。近年、Ι 型アレルギー疾患
である喘息やアレルギー性鼻炎患者を対象とする疫学調査で、喘息罹患患者で特に長期治療患者は非罹患者に比べ、膵癌発症率は有意に低下することが明らかとなった。本研究ではこれらの事象についてハムスターを用いた膵発癌モデルにより検証を行った。
【方法】6 週齢 Syrian Golden Hamster に 4 回の N-nitrosobis(2-oxopropyl)amine 10 mg/kg 皮下投与後、13 週間高脂肪食投与と共に被検物質を飲水投与した。実験 1）12 匹ずつ 4 群に分け、対照群と常用的にアレルギー患者に投与されるロイコトリエン拮
抗薬（Montelulast, Mont）0.2 mg/kg/day、選択的 H1 受容体拮抗薬（Levocetirizine, Levo）0.1 mg/kg/day、選択的 β2 アドレナリン
受容体作動薬（Bambterol, Bamb）0.2 mg/kg/day をそれぞれ飲水投与した。実験 2）実験 1 で膵発癌を抑制する可能性が見られた Mont を 0.1, 0.2, 0.4 mg/kg/day 投与群と対照群の 4 群（15 匹ずつ）に分け実験を行った。
【結果】実験 1）体重、臓器重量は Levo 群で体重の有意な増大が見られたが、他群で明らかな有意差は見られなかった。膵
癌は Levo, Bam 群では膵癌の incidence, multiplicity に変化は見られなかったが、Mont 群ではいずれも低下傾向が見られた。
実験 2）各群体重、臓器重量に有意差は見られなかった。膵癌の incidence に有意な差はみられなかったが、multiplicity において Mont 0.4mg/kg/day 投与群で有意な低下を認めた（0.4±0.5 v.s. 対照群 1.1±1.0, P<0.05）。また、Mont 投与濃度と膵癌発生に有意な相関が見られた（Pearson -0.3, P<0.05）。
【結論】Mont は膵発癌の化学予防剤として有望な可能性がある。現在詳細なメカニズム解析を行っており、その結果と共に発表する。
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ポスター

P-31*
雄 SDT fatty ラットにおける SGLT2 の発現及び病態解析○張 舜恵 1)、美谷島 克宏 1,2)、中村 優佳 2)、太田 毅 3)、篠原 雅巳 4)、宇野 絹子 1)、煙山 紀子 2)、中江 大 1,2)
1)東京農大・院・食品栄養、 2)東京農大・食品安全健康、 3)日本たばこ産業、 4)日本クレア【背景】SGLT2 阻害剤は、2 型糖尿病の高血糖を低下させる作用及び腎保護作用が報告されており、臨床応用されている薬品として知られている。SDT fatty ラットは 2 型糖尿病及び合併症の薬理評価に使われているが、この動物の糖尿病病態における加齢及び SGLT2 発現の影響は十分に解明されていない。
【目的】本研究では、SDT fatty ラットの腎について加齢による病態及び SGLT2 の発現を解析した。
【材料と方法】実験は、雄性 SDT fatty または SD ラットを通常食で飼育し、17・60 週齢時に剖検して腎臓を採取し、ホルマリン固定または凍結保存した後、病理組織学的観察並びに遺伝子発現解析を行った。
【結果】SDT fatty ラットの腎においては、加齢に伴い、糸球体において萎縮と線維化の増加、尿細管部間質において重度の線維化及び炎症性細胞浸潤、尿細管において変性・壊死及び重度の尿円柱が増強した。これらの変化は、SD ラットの 17 週
齢において明らかでないか、ごく軽度であり、60 週齢において軽度 - 中等度の変化として観察された。腎の SGLT2 の遺伝子発現及び免疫組織化学陽性細胞は、SDT fatty・SD ラットいずれも 17 週齢に比べて 60 週齢で増強し、SDT fatty ラットの 17
週齢と SD ラットの 60 週齢が同程度であった。
【結論】以上の結果より、SDT fatty ラットにおいては、ヒトと同様、加齢によって腎病変が悪化することから、ヒト 2 型糖尿病のモデル動物として有用であることが明らかになった。さらに、当該動物で加齢により腎のSGLT2発現が増加したことは、
ヒト糖尿病の背景メカニズムの解明に資する結果である。

P-32*
若年（11 週間）の ICR マウスに見られる自然腎尿細管肥大
ポスター○崔 賢智 1)、孔 ミンジョン 1)、金 惠貞 1)、鈴木 雅実 2)、岩田 聖 3)、朴 チャンヒ 1)
1)C&C 新薬研究所、2)中外製薬、 3)ルナパス合同会社

毒性病理研究所

Renal tubular hypertrophy is often observed in chronic progressive nephropathy in old aged mice and is believed to be a compensatory
mechanism related to a decline in renal function. However, published incidence data of tubular hypertrophy in young mice is hard tofind. In the 4-week acute repeated toxicity study, renal tubular hypertrophy was observed in 2 ICR mice. To investigate the origin andpathogenesis of kidney finding, we performed additional histopathological analysis. Kidney samples of two females were additionallysectioned 25–50 μm apart serially and stained with H&E. Hypertrophic tubules were lined by tall cuboidal to columnar cells. The
cytoplasm was pale and eosinophilic and the nuclei were located apically. In the serial sections, hypertrophic tubules were observed
continuously and they were unilateral in both cases which suggests these are incidental events rather than systemic effects. In addition, acystic structure was observed between the hypertrophic tubules in both cases and considered to be the cause of the tubular hypertrophy.
As the mice were young and there were no accompanied lesions like inflammation, tubular dilatation, atrophy, or necrosis, and not muchtime to progress nephropathy, this change was considered to be spontaneous and related to renal developmental process. We would liketo suggest this lesion as one of the spontaneous lesions observed in young ICR mice.

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P-33*
アセトアミノフェン誘発ラット腎障害モデルにおけるミード酸の抑制効果○竹之内 明子 1)、平塚 未夢 1)、三浦 麻里安 1)、新家 由実子 1)、平山 由佳理 1)、小山 千尋 1)、木下 勇一 2)、浜崎 景 3)、義澤 克彦 1)1)武庫川女子大学 生活環境学部 食物栄養学科、 2)和歌山県立医科大学附属病院 中央検査部 病理診断部門、
3)富山大学 医学部 公衆衛生学講座【背景及び目的】アセトアミノフェン（APAP）による腎障害は、中間活性代謝産物 N-acetyl-p-benzoquinone imine を介して発症することが推察されている。我々は APAP 単回投与により腎障害モデルを作成し、日常摂取する不飽和脂肪酸であるミード酸（MA）の腎障害抑制効果について検証した。
【方法】7 週齢 SD 系雄ラットに 500 mg/kg APAP を単回腹腔内投与し、投与後 24、48 時間に血清及び腎臓を採取した。基礎食（0%MA）あるいは 4.8％ MA 食を APAP 投与 7 日前から解剖時まで摂取させ、基礎食＋溶媒投与群、4.8％ MA 食＋溶媒投与
群、基礎食＋ APAP 投与群、4.8％ MA 食＋ APAP 投与群を設定した。腎障害パラメータ（BUN、CRE）、腎臓の組織学的検査（HE）、薬物代謝酵素（CYP2E1）及び酸化ストレスマーカー（HO-1・TG）の免疫染色を実施した。血中酸化ストレス測定のため d-ROMs テスト、抗酸化力測定のために BAP テストを FREE Carrio Duo で実施した。
【結果】基礎食＋ APAP 投与群では BUN 及び CRE 値の顕著な増加がみられ、髄質外帯を中心に近位尿細管壊死及び拡張が観察された。尿細管壊死は免疫組織学的に CYP2E1 が発現する部位に観察され、HO-1 と TG の発現も認められた。MA 摂取群
では尿細管壊死の程度は減弱し、HO-1 の発現が低下した。
【結論】MA 摂取群では、基礎食群に比べて腎障害パラメータの有意な減少が認められ、MA の腎障害抑制効果が確認され、その効果は MA 摂取により腎臓での酸化ストレス発現の抑制が関与していることが示唆された。現在、酸化ストレスマーカ
ーについて追加検討中である。

P-34*
高コレステロール・高ナトリウム給餌ミニブタにみられた組織学的所見（株）日本バイオリサーチセンター【背景】ミニブタでは、血漿中コレステロール（Cho）画分の組成や動脈硬化病変の性状や分布がヒトのそれと類似していることから高 Cho 食による動脈硬化症モデルが作出されている。ヒトでは動脈硬化と関連した腎硬化症や腎血管性高血圧症が知られているが、実験動物としてこれらを再現できるモデルはない。
【目的】ミニブタの腎臓の解剖学的特徴がヒトと同様な特徴を示すことに着目し、今回、高 Cho 食に加えて高ナトリウム（Na）
食を与え、血管、腎臓及びその他臓器における変化を検索した。
【材料と方法】8 ヶ月齢の雌のミニブタ（Göttingen）6 例に、7 か月間高脂肪・高 Cho・高 Na 食（Cho 1.5％、牛脂 5％、Na 5％）を 800 g/head/day 給餌した。その間間欠的に血液学的検査を行った。7 ヶ月後、血管内超音波検査及び剖検を行い、心臓、肺、肝臓、膵臓、脾臓、腎臓、胸部大動脈、腹大動脈の組織学的変化を観察した。
【結果】血液学的検査では投与 1 週から T-Cho、HDL 及び LDL の上昇が認められた。摘出した臓器においては絶対重量の増大が認められ、脾臓では相対重量の増加も認められた。また、脾臓の表面は粗造であった。血管内超音波検査では、ヒトと同様な急性心筋梗塞などの原因になるプラーク像が観察された。病理組織学的には冠状動脈及び腹大動脈において顕著な
粥状動脈硬化、肝組織における脂肪の取り込み、赤脾髄に泡沫細胞の集簇が認められた。また腎臓において、好塩基性尿細管の増加、糸球体構成細胞の空胞化、腎乳頭における間質の水腫が認められた。
【結論】高脂肪・高 Cho・高 Na 食を与えた今回の動物では、複数動脈における粥腫、肝臓及び脾臓への脂肪蓄積に加え、腎臓に何らかの障害が引き起こされていることが示された。

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ポスター○村瀬 詩織、加藤 正巳、今泉 隆人、荒井 剛志、小沼 克安、松下 久美、遠藤 克己、小池 恒雄、金原 智美、今井 順、伊藤 格、
木村 均

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ポスター

P-35*
若齢 Crl:CD1（ICR）マウスに自然発生したヒアリン糸球体症の一例○仁科 嘉修、樫村 茜、水川 真緒、藤木 勝也、村上 雄一、馬場 伸之、久米 英介
田辺三菱製薬（株） 創薬本部

安全性研究所【背景・目的】ヒアリン糸球体症は糸球体に免疫複合体の沈着を認め、メサンギウム細胞の増殖を認めない病態である。老齢マウスでは自然発生病変として認められるが、若齢における報告はほとんどない。今回、若齢 ICR マウスにおいて高度の免疫複合体沈着を示すヒアリン糸球体症を経験したため報告する。
【症例】本症例は環境モニタリング用に飼育されていた 15 週齢の雌性 Crl: CD1（ICR）マウスで、急激な体重減少のため安楽死処置された。血液生化学検査では BUN およびクレアチニンが高値を示した。剖検の結果、腎臓の褪色と表面粗造、頸部
皮下浮腫、胸腺の不明瞭、脾臓の小型化および肝臓の白色巣が認められた。腎臓について、HE 染色、各種特殊染色（PAS、PAM、コンゴ赤、マッソントリクローム（MT））、抗 IgG・抗 IgM 抗体を用いた免疫染色による光顕検査および電顕検査を実施した。
【結果】糸球体の大型化、尿細管の拡張・萎縮・再生および間質の炎症細胞浸潤がびまん性に認められた。糸球体において、
係蹄内の好酸性均質無構造物の高度な沈着が全節性に認められたが、メサンギウム細胞の増殖は認められなかった。糸球
体沈着物は PAS に強陽性、コンゴ赤に陰性、MT 染色に赤染し、IgG・IgM ともに強陽性を示した。PAM 染色と電顕検査により、糸球体沈着物は係蹄内に存在することが確認された。
【結論】病理組織学的検査より、糸球体沈着物は免疫複合体であることが確認され、メサンギウム細胞の増殖は認められなかったことから、本症例はヒアリン糸球体症と診断した。若齢 ICR マウスのヒアリン糸球体症という非常に珍しい症例であり、一般毒性試験における ICR マウスの背景病変として有用な知見と考えられた。

P-36*
膀胱発がん物質投与によるγ -H2AX 形成の用量相関性及び経時的変化
ポスター○山田 貴宣 1,2)、豊田 武士 1)、松下 幸平 1)、森川 朋美 1)、小川 久美子 1)
1)国立医薬品食品衛生研究所

病理部、 2)東京農工大学大学院

獣医病理学研究室【背景】我々はリン酸化 H2AX（γ-H2AX）の免疫染色により、ラット 28 日間反復投与毒性試験において膀胱発がん物質を検出し得る可能性を報告した。本研究では、γ-H2AX 形成の用量相関性及びより短期間での検出可能性を検討するため、2 種類の膀胱発がん物質（BBN：遺伝毒性、メラミン：非遺伝毒性）を用いた経時的解析を実施した。
【方法】各群 5 匹の雄性 F344 ラット（6 週齢）に、BBN（飲水）を 0、1、10、100、200、500 ppm 又はメラミン（混餌）を 0、0.3、1、3％の濃度で 2 日間及び 4 週間経口投与した。膀胱粘膜上皮における病理組織学的検査及び γ-H2AX 形成並びに Ki67（細胞増殖マーカー）発現の免疫組織化学的解析を行った。
【結果】4 週時点で、BBN の 100 ppm 以上の投与群及びメラミンの 3％投与群で過形成等の組織学的病変が見られた。BBN 投
与群では、γ-H2AX 及び Ki67 陽性細胞は 2 日・4 週いずれの時点でもそれぞれ 10 ppm 及び 100 ppm 以上の投与群で用量依存的に有意に増加した。メラミン投与群では、γ-H2AX 及び Ki67 陽性細胞は 2 日・4 週時点で共に 3％群で有意に増加した。膀
胱粘膜三層の層別解析の結果、γ-H2AX 陽性細胞は BBN 投与群では比較的均等な分布であった一方、メラミン投与群では基底層に偏った分布を示した。γ-H2AX 形成機序の検討として、γ-H2AX-Ki67 の二重蛍光染色を行った結果、BBN 投与群では共発現細胞及び γ-H2AX 単独陽性細胞が見られた一方、メラミン投与群では γ-H2AX 陽性細胞の大半が Ki67 発現細胞と一致していた。
【結論】今回の結果から、γ-H2AX 形成に用量相関性が見られること及びより短期間の投与でも膀胱発がん物質を検出できることが示唆された。さらに、Ki67 との共発現解析の結果から、γ-H2AX 形成機序の解析によって膀胱発がん過程における遺伝毒性の関与の有無を判別できる可能性が示された。
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ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-37
BBN 誘発マウス膀胱がんモデルにおける Acetazolamide の予防効果の検討○魏 民、藤岡 正喜、行松 直、奥野 高裕、山口 貴嗣、梯 アンナ、鰐渕 英機
大阪市立大学大学院医学研究科

分子病理学【背景】がん微小環境は一般的に低酸素、酸性状態であり、酸性条件下ではがん細胞の浸潤・遊走能が増強されると考えられている。炭酸脱水酵素（carbonic anhydrase, CA）は二酸化炭素の水和反応を可逆的に触媒する酵素で、pH 調節、CO2 輸送などにおいて重要な役割を果たしている。これまでの我々の研究では、浸潤性膀胱がんにおいて CA2 の発現の増加が認められている。今回 BBN 誘発マウス膀胱がんモデルを用いて、CA 阻害剤である Acetazolamide（Ace）を投与することにより、その膀胱発がん予防効果、浸潤抑制効果について検討した。
【方法】0.05% N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine（BBN）を 6 週齢 C57BL マウスに 10 週間飲水投与した。その後、BBN 単独
群、BBN → Cisplatin（Cis）
群、BBN → Ace 群、BBN → Ace+Cis 群に分け、12 週間 Ace を強制胃内投与、Cis を腹腔内投与した。
実験開始から 22 週間後に膀胱がんの発生頻度、浸潤の程度について検討した。
【結果】膀胱重量は BBN 単独群に比較して BBN → Ace+Cis 群で有意に減少した。また、膀胱がんの発生頻度は BBN 単独群に比較して BBN → Ace+Cis 群で有意な発生頻度の低下を認めた。その他の投与群と BBN 単独群間では膀胱重量、膀胱がんの発生頻度共に有意な差は認めなかった。さらに、筋層浸潤がんについては BBN → Ace 群、BBN → Ace+Cis 群では BBN 単独群に比較して、有意に浸潤が抑制されていた。
【結論】CA 阻害剤 Ace と従来の抗がん剤である Cis を併用することによりマウスにおける膀胱がんの予防効果、浸潤抑制効
果が示された。

P-38
膀胱発がん物質投与初期における遺伝子発現解析および新規膀胱発がんマーカーの探索

1)国立医薬品食品衛生研究所

病理部、 2)東京農工大学

獣医病理学研究室【背景と目的】近年の大規模遺伝子発現解析によって、膀胱がんの進展に関わる遺伝子の詳細が明らかにされつつある。一方、
膀胱発がんの初期過程における遺伝子の動態にはいまだ不明な点が多い。本研究では、複数の膀胱発がん物質をラットに短期間経口投与し、膀胱発がん過程の最初期における遺伝子発現動態の解析および新規免疫組織化学的マーカーの探索を実施した。
【方法】6 週齢の雄 F344 ラットに、0.05% N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine（BBN）、3％ウラシル、0.8％ o- トルイジン、
1％ o- アニシジンを 4 週間混餌（BBN のみ飲水）投与した。投与後 2 日から 4 週、および 2 週間の休薬後にかけて経時的に膀胱を採材した。PCR アレイ（QIAGEN）を用いて、ヒト膀胱がんにおける全ゲノム解析で関連が指摘されている 5 項目（細胞周期・DNA 損傷・Hedgehog 経路・クロマチン修飾・クロマチン再構築因子）各 84 遺伝子について、RT-PCR による発現解析を行った。各投与群で高発現を示した遺伝子を対象に、膀胱粘膜上皮における発現を免疫組織化学的に検討した。
【結果と考察】4 週間の投与終了時点で、細胞周期・DNA 損傷・Hedgehog 経路関連遺伝子は各投与群において多数の発現変動がみられ、これらは膀胱発がん過程の初期に重要である可能性が示唆された。一方、クロマチン修飾／再構築関連因子の発現変動は比較的少なく、初期段階よりも発がん後期あるいは進展に関与すると考えられた。複数の投与群で高発現を示した遺伝子のうち、29 遺伝子についてラット膀胱組織における発現を免疫染色により検討した。その結果、少なくとも 7
因子（Runx2, Cdc6, Birc5 等）が、BBN 投与群の膀胱粘膜上皮細胞において発現増加していることが確かめられた。今後、他時点での遺伝子発現解析および免疫組織化学的検討を実施する予定である。

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ポスター○豊田 武士 1)、山田 貴宣 1,2)、松下 幸平 1)、森川 朋美 1)、小川 久美子 1)

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ポスター

P-39*
Cisplatin のラットへの反復経口投与による肺障害の経時的解析○寺山 由依、佐藤 亮、西村 悠花里、土屋 卓磨、諸木 孝泰、北浦 敬介、吉川 剛
大塚製薬株式会社

徳島研究所

前臨床研究センター【目的】Cisplatin（CP）は、様々な悪性腫瘍の治療に使用される白金化合物である。腎臓や聴覚など様々な毒性がしばしば問題となるが、肺障害に関する報告は少ない。そこで、今回我々はラットに CP を反復経口投与し、肺障害に関して経時的に解析を行った。
【方法】6 週齢の雄 SD ラットに CP（0、3.5 mg/kg/day）を反復経口投与し、投与 1、3、7、14、28 回目の翌日（Day 2、4、8、
15、29）にそれぞれ 5 例ずつ解剖を行い、組織学的および免疫組織学的解析を行った。
【結果】Day 4 の剖検例に肺胞上皮細胞の壊死および 2 型肺胞上皮の過形成がみられた。Day 8 では、肺胞上皮細胞の壊死、2 型肺胞上皮の過形成・腫大、間質の好中球浸潤がみられた。さらに、一部の例では硝子膜形成、血管内皮の傷害を伴う出血、間質のマクロファージおよび好中球浸潤、および間質の線維化がみられ、線維化領域で α-SMA 陽性筋線維芽細胞の発現が顕著であった。Day 15 では、継続して肺胞上皮細胞の壊死および 2 型肺胞上皮の過形成・腫大、間質のマクロファージおよび好中球浸潤がみられ、Day 29 ではその程度は増強され一部で線維化を伴っていた。
【結論】CP のラットへの反復経口投与によって投与初期から肺胞上皮が傷害され、投与一週間で肺病変が増悪し急性の間質性肺炎へ移行する例がみられる。一方、病変が憎悪しない場合には肺胞上皮細胞の傷害が投与期間を通じて観察され、線維化が進行し投与 1 か月で間質性肺炎が形成される可能性が考えられた。

P-40*
ポスター

ブレオマイシン気管内投与によるラットの肺胞洗浄液検査及び病理組織学的所見に及ぼす投与容量の影響について○杉山 大揮、森岡 舞、沼野 琢旬、樋口 仁美、河部 真弓、米良 幸典
株式会社 DIMS 医科学研究所【背景と目的】ブレオマイシンはがん治療に用いられる薬物で、副作用として肺線維症を引き起こす事が知られている。げ
っ歯類においてもブレオマイシン誘発による肺線維症モデルは古くから薬理試験に用いられている。しかしながら、気管内投与した際の投与容量の違いによるブレオマイシンの肺への影響についてはあまり知られていない。本研究では、ブレオマイシン気管内投与による経時的な各種肺障害のパラメータ、病理組織学的並びに免疫組織学的変化と、投与容量の違いによる肺への障害の程度について検討を行う。
【材料と方法】動物は 8 週齢の雄 Crl:CD（SD）ラットを用い、ブレオマイシンを 1 mg/kg の投与量にて、1 mL/kg 若しくは 2 mL/kg の投与容量で単回気管内投与した。観察期間中は一般状態及び体重測定を行い、投与 3、10 及び 28 日後に剖検して肉眼的病理学検査及び器官重量測定を行った。また肺胞洗浄液（右肺）を採取し、細胞分類及び生化学的検査を行った。現在、肺（左葉）及び主要臓器について病理組織学的検査を実施中であり、免疫組織学的に肺線維化の程度についても検索し、ブレオマ
イシン気管内投与による投与 3、10 及び 28 日後における経時的変化と、投与容量の違いによる肺への障害の程度について報告する。

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ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-41
カニクイザルにおけるブレオマイシン誘発肺毒性の評価法検討○熊谷 和善、櫻井 健、前田 優、片岡 広子、玉井 聡、本多 久美、大澤 徹也、千葉 克芳、甲斐 清徳、森 和彦
第一三共（株）安全性研究所

ブレオマイシン塩酸塩の 0（溶媒：生理食塩液）、3、及び 12 mg/12 mL/body を雄性カニクイザル（3 例／群）に単回気管内投与し、（SP-D）
測定を経時的（投与前、Day 2、肺毒性を経時的に評価した。胸部 CT 検査、血液ガス分析、及び血漿 surfactant protein D
4、8、及び 15：投与日を Day 1 とする）に行い、Day 15 に肺の病理組織学的検査を実施した（0 mg 群は 1 例のみ安楽死処置）。
胸部 CT 検査では、3 mg 群で Day 15 に肺葉の一部で軽度のすりガラス影、12 mg 群で Day 4 に右肺前葉を除く全葉に軽度か
ら中等度のすりガラス影、Day 8 以降にほぼ全葉に軽度から重度のすりガラス影を認めた。血液ガス分析では、3 mg 群で著変を認めず、12 mg 群で Day 8 から二酸化炭素分圧の高値、酸素分圧及び動脈血酸素飽和度の低値を認め、Day 15 でこれら変化が増悪した。血漿 SP-D は 3 mg 群で著変を認めず、12 mg 群では Day 8 で最大値を示し、Day 15 も高値であった。肺の病理組織学的検査では、3 mg 群の肺葉の一部で軽微から軽度の肺胞マクロファージ及び炎症細胞浸潤、扁平上皮化生を含む細気管支‐肺胞上皮過形成、並びに線維化が認められた。12 mg 群では 3 mg 群より重度の変化がほぼ全葉に認められ、異物巨細胞形成、肺胞水腫、及び硝子膜形成もみられた。以上より、胸部 CT 検査は血液ガス分析や血漿 SP-D 測定と比べ、カニクイザルにおける肺毒性を早期かつ経時的に検出出来る有用な評価法であると考えられた。

P-42*○吉田 翔太 1,2)、横平 政直 1)、山川 けいこ 1)、成澤 裕子 1)、蟹江 尚平 2)、橋本 希 1)、今井田 克己 1)
1)香川大学

医学部

病理病態学・生体防御医学講座

腫瘍病理学、 2)大鵬薬品工業株式会社

研究本部

安全性研究所【背景と目的】肺胞サーファクタント蛋白質（SPs）は肺胞構造の維持機能や感染に対する免疫防御機能等を有する。我々はこれまでに、肺の炎症性病変や増殖性病変において SP が高発現していることを報告してきた。アンブロキソール塩酸塩（AH）
は去痰剤として臨床使用されており、SPs の分泌を促進する作用を有する。本実験では、AH がこれらの肺病変に対して及ぼす修飾作用について検討した。
【材料と方法】チタン酸カリウム繊維である TISMO ® を A/J マウスに開胸下にて胸腔内投与して作出したマウス胸膜炎症・肥厚モデル、NNK を A/J マウスに単回腹腔内投与して作出したマウス肺発がんモデル、DHPN を F344 ラットに 2 週間飲水投与して作出したラット肺発がんモデルを用いた。それぞれのモデル動物に AH を 0、12、又は 120 ppm の濃度で 16 週間（A/J マウス）、又は 28 週間（F344 ラット）混餌投与し、体重測定、血液学的検査、血液化学的検査、肉眼的及び病理組織学的検査（胸膜肥厚長計測、腫瘍数カウント及び免疫染色を含む）を実施した。
【結果】胸膜肥厚 A/J マウスモデルでは、TISMO 投与に起因して一旦減少した体重や末梢血中の炎症（白血球数）が、AH の混餌投与によって大幅に回復した。一方で、病理組織学的な胸膜炎関連所見および胸膜の肥厚長に有意差は認められなかった。
IL-1β に対する免疫染色についても AH の影響を推測する明らかな差は見られなかった。また、マウス及びラットの肺発がんモデルにおいても、AH 混餌投与による腫瘍の発生率や個体あたりの病変数に有意差は認められなかった。
【結論】AH は炎症に対する抑制作用（抗炎症作用）を有するが、肺腫瘍に対する直接的な修飾作用は示さないと考えられた。

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ポスター

げっ歯類における慢性胸膜炎症及び肺増殖性病変に対するアンブロキソール塩酸塩の修飾作用についての検討

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-43*
有機ヒ素化合物 Dimethylarsinic acid の経胎盤ばく露によるマウス肺発がん過程におけるヒストン修飾異常○藤岡 正喜、魏 民、奥野 高裕、行松 直、梯 アンナ、大石 裕司、鰐渕 英機
大阪市立大学

院

医

分子病理学

【背景】無機ヒ素化合物の主な体内代謝物である Dimethylarsinic acid（以下、DMA）を胎仔期に曝露した雄において、その成熟後（84 週齢）、肺がんを生じることをこれまでに我々は明らかにしている。また、同様に DMA 経胎盤ばく露させた雄性新生
仔マウス肺において、ヒストン H3K9me3 の有意な増加が生じていることを報告している。したがって、DMA 経胎盤ばく露による肺発がん機序にエピゲノム異常の関与が強く示唆されている。しかし、その標的遺伝子および遺伝子発現変動に関する知見は十分でない。
【目的】DMA 経胎盤曝露雄性新生仔マウス肺におけるヒストン H3K9me3 の標的遺伝子および遺伝子発現変動について検討を行った。また DMA 経胎盤ばく露 6 週齢マウス肺における影響について検討を行った。
【方法】妊娠期の雌 CD-1 マウスに DMA を 0、200 ppm の用量で胎齢 8 日から 18 日までの 10 日間飲水投与し、得られた雄性新生仔および 6 週齢マウスより肺を回収し解析に供した。
【結果】マウス新生仔肺におけるヒストン H3K9me3 の ChIP-seq 解析を実施した結果、無処置群と比較して DMA 経胎盤ばく
露群の X 染色体領域で H3K9me3 を標的とする領域が多くみられた。また、網羅的遺伝子解析の結果、X 染色体不活性化
lncRNA である Xist の発現増加が DMA 経胎盤ばく露群でみられた。さらにパスウェイ解析の結果、Fibrosis の有意な増加、糖代謝の亢進および脂質代謝の抑制が示唆された。6 週齢マウス肺における細胞増殖能の解析の結果、DMA 経胎盤ばく露群で有意な増加がみられた。
【結論】DMA 経胎盤曝露後 6 週経過マウスにおいても、細胞増殖能の亢進がみられたことから、マウス肺発がん過程において DMA ばく露によって生じたエピゲノム記憶の関与が示唆された。

P-44
ポスター

肺発がん過程における片肺虚脱による promotion 作用と Insulin-like growth factor-1（IGF-1）の関与○横平 政直、橋本 希、山川 けいこ、成澤 裕子、今井田 克己
香川大学

医学部

腫瘍病理学

【背景および目的】ラット肝中期発がん性試験法（伊東モデル）では、肝切除を行うことで肝再生変化に伴う肝発がん
promotion 作用を応用している。我々は肺発がんでも同様の現象が起こるかについて着目し、研究を行っている。今回、片肺虚脱時の残肺における肺発がん promotion 作用の有無とそれに関わる因子についての検討を行った。
【材料と方法】齧歯類（ラットおよびマウス）に肺発がん物質を投与後、片肺（左肺）の肺門部を結紮し片肺を虚脱壊死させた。
残肺（右肺）の腫瘍性病変について解析した。さらに、残肺のマイクロアレイの解析を行い、注目した IGF-1 の免疫組織学的検討を行った。
【結果】左肺虚脱により、残肺（右肺）重量が対照群の両肺の合計重量とほぼ同様になると伴に、腫瘍数の有意な増加が見られた。これは片肺の虚脱に伴う残肺の代償性変化に伴う promotion 作用と考えられるが、同時に、残肺（右肺）のマイクロア
レイ解析により Insulin-like growth factor-1（IGF-1）の発現が亢進することが判明した。さらに、IGF-1 の免疫組織化学染色を行ったところ、齧歯類の発がん物質誘発による気管支肺胞過形成、気管支肺胞腺腫および気管支肺胞腺癌のいずれも IGF-1の高発現が確認された。また、肺結紮の有無にかかわらず、肺増殖性病変においては IGF-1 が強く発現していた。
【結論】今回の実験から、片肺虚脱により残肺に肺発がん promotion 作用が確認され、特に、IGF-1 の promotion 作用への関与が示唆された。IGF-1 は成長ホルモン（GH）による刺激で分泌され、インスリン様効果に加えて細胞増殖能を有するとされている。今後、IGF-1 の腫瘍マーカーへの応用を目指して研究を続けたい。

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ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-45*
プロゲステロン阻害剤（mifepristone）の雌性 A/J マウス NNK 誘発肺腫瘍への影響○成澤 裕子、横平 政直、山川 けいこ、橋本 希、吉田 翔太、今井田 克己
香川大学

医学部

腫瘍病理学

A/J マウスは雄性よりも雌性で肺腫瘍が好発する。我々はこれまでに、雌性 A/J マウスにおける 4-(methylnitrosamino)-1-(3pyridyl)-1-butanone（NNK）誘発肺腫瘍細胞でのエストロゲン受容体やプロゲステロン受容体の発現を報告し、このことから
肺発癌過程での性ホルモンの関与が示唆された。そこで今回、マウス誘発肺発がん過程におけるプロゲステロンの影響について、プロゲステロン阻害剤である mifepristone（MIF）を用いて検討した。
7 週齢の雌性 A/J マウスを 4 群に分け、実験開始 0、1 週目に Group 1 と 2 は NNK（2 mg/0.1 ml saline/mouse）を腹腔内投与した。
その後、13 週目に Group 1と 3 にはMIF 錠（90-day release, 7.5 mg/pellet/mouse）
を、Group 2と4 には対照として placebo錠（PL）を、上背部の皮下に埋め込んだ。26 週目に採血および屠殺剖検を行った。
Group 1（NNK+MIF）において、Group 2（NNK+PL）と比較して肺腫瘍の発生数ならびに肺腺癌の大きさは減少傾向を示したが、有意な差は認められなかった。血清中のプロゲステロン濃度では、肉眼的肺結節数との間に負の相関が認められた。また、子宮ではMIFの作用と考えられるcystic endometrial hyperplasiaが、Group 1と3（いずれもMIF投与群）のみの全例で認められた。
以上より、MIF は NNK 誘発雌マウス肺腫瘍形成において、明らかな抑制効果は認められなかった。このことは、A/J マウスの肺腫瘍形成における雌雄差にプロゲステロンの関与は低いものと考えられた。

P-46
ラットにおいて DHPN で誘発されたメソテリン陽性肺増殖性病変の病理組織化学的性状

1)東京都健康安全研究センター、 2)東京農業大【目的】多層カーボンナノチューブ（MWCNT）を経気管投与したラット肺に発生した早期扁平上皮化生と考えられる病変はメ
ソテリン・胎盤型グルタチオン Sトランスフェラーゼ（GST-P）およびサイトケラチンが陽性であり、特にメソテリンはこの病変のマーカーであると示唆された。これまで、ヒトにおいては肺・膵・卵巣などの腺癌でのメソテリン発現が報告されているが、ラットにおいては正常中皮および中皮腫の細胞以外で報告がなかった。本研究は、ラット肺増殖性病変におけるメソテリン発現の意義を探究するため、DHPN 誘発性病変について解析した。
【材料・方法】実験は、F344 系雄性ラット（6 週齢、20 匹）に 0.1% DHPN 水溶液を 2 週間飲水投与し、投与後 30 週において生存した 18 匹を屠殺して肺を摘出し、病理組織学的に解析した。
【結果・考察】肺増殖性病変としては、18 匹中 18 匹に細気管支・肺胞過形成、5 匹に腺腫、3 匹に腺癌を認めた。メソテリンは、過形成で 6/18 例、腺腫で 2/5 例、腺癌で 1/3 例で陽性であった。なお、18 匹中の過形成総病変数は 637 個であり、このうちメソテリン陽性病変数は 8 個で、過形成病変における発現率は 1.26％と低かった。本研究では、現在、詳細な解析を実行中である。

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ポスター○坂本 義光 1)、多田 幸恵 1)、北條 幹 1)、前野 愛 1)、鈴木 俊也 1)、猪又 明子 1)、守安 貴子 1)、中江 大 2)

ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-47
胎生期 Di（n-butyl）phthalate 曝露ラットにおける雄ラット精管形成に関する検討○杉山 光 1)、岡山 祐弥 1)、鷹橋 浩幸 2)、池上 雅博 2)、武藤 朋子 3)、和久井 信 1)
1)麻布大学

獣医学部

比較毒性学、 2)東京慈恵会医科大学

病理学、 3)一般財団法人

食品薬品安全センター【背景と目的】フタル酸エステル類である Di(n-butyl)phthalate（DBP）は、硬いプラスチック製品に柔軟性を与える可塑剤として現在広く用いられている有機化合物である。DBP は内分泌かく乱作用をもつとされており、曝露された雄ラットにおいて精巣のライディッヒ細胞のテストステロン産生を阻害することなどが報告されている。しかし、同じく重要な生殖器系である精管に対する DBP の影響は現在ほとんど報告がなされていない。そこで、本研究では、精子を尿道へと導く重要な管である精管に対する DBP 胎生期曝露による影響を検討した。
【材料と方法】実験には雄の SD ラットを用いた。DBP は 100、300、0 mg/kg/day の 3 パターンの用量を設定し、妊娠 12 〜21日までの間、母ラットに連日経口投与を行った。また、週齢による変化を観察するため、若齢期から成獣期にいたるまで、7、9、14、17 週齢の 4 つのポイントを設定し、各群に 10 匹ずつ用いた。それぞれの動物は各週齢において剖検し、得られた精管は 10％中性緩衝ホルマリン溶液にて固定を行い、常法に従って 4 μm の組織切片を作製した。各組織切片は各種の染色を施し、観察および計測を行った。
【結果】胎生期 DBP 曝露群と対照群において、精管上皮細胞の高さは、7 週齢と 9 週齢においては有意な差が得られなかった。
しかし、14 週齢および 17 週齢においては正常な個体と比較して有意に低値を示した。
【結論】週齢の増加による精管上皮細胞の高さの変化は、14 週齢以降の成獣期に近づくにつれて低値を示したことから、精巣におけるテストステロンレベルの低下に伴う副次的な萎縮性の変化であり、DBP 胎生期曝露による遅延的な影響を受けていると考えられた。

P-48*
SD ラットにみられた真性半陰陽の 1 例
ポスター○岡野 拡、高木 みづほ、鈴木 勇、藤原 史織、永谷 真理子、山口 裕子（株）ボゾリサーチセンター

病理部【背景】真性半陰陽は、卵巣と精巣の両方あるいは卵精巣を有する先天異常であり、種々の動物での報告があるもののラットではわずかである。今回、真性半陰陽を疑う症例に遭遇した為、病理学的検索を行った。
【症例】SD ラット〔Crl:CD（SD）（30 週齢）について検索した。
〕【結果】外表への開口部から陰茎、包皮腺、尿道球腺、精嚢、前立腺及び膀胱が正常な雄と同位置にみられた。さらに尿道から連続して頭側に腟、子宮頸、子宮角がみられた。左子宮角は正常な雌と同様の長さ／径を示し、子宮角に沿うように管状構造がみられ、その先に小型の精巣上体、生殖腺らしき構造が認められた。右子宮角は、左子宮角の 1/3 程度の長さで、紐状構造物、精巣上体と続き、その先端に生殖腺らしき構造が認められた。その他の器官に肉眼的な異常はみられなかった。
組織学的に左生殖腺は、数個の大型卵胞と間質腺細胞と思われる円形で明るい細胞が密に存在する領域と、精索間質組織（セルトリ細胞様）をライディッヒ細胞様細胞が取り囲む構造で占められる領域で構成されていた。右生殖腺は、主に膠原線維、血管、精索間質組織（セルトリ細胞様）から成り、褐色色素の沈着の他、鉱質沈着を伴った管状組織が多数みられた。また
周囲には脂肪織炎がみられた。左右生殖腺ともに、明らかな精上皮細胞は認められなかった。両側の精巣上体および子宮は高度に分化していた。左子宮角に沿う管状構造物は精管であり、右側の紐状構造物は精管、血管、末梢神経より構成されていた。また、腟及び精嚢、前立腺の導管は尿道に開口していた。
【まとめ】本例は左側が卵精巣、右側が雌雄不別の生殖腺からなる一側性の真性半陰陽と診断した。組織学的に生殖腺は未発達であるものの両性の副生殖器は発達している事が特徴的だった。

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ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-49*
非妊娠カニクイザルにおける子宮の epithelial plaque の 1 例○矢吹 悠乃、柚川 藍色、森山 亜紀子、小林 欣滋
株式会社新日本科学

安全性研究所【背景と目的】子宮の epithelial plaque は、旧世界ザルと新世界ザルの数種においてのみみられる着床初期に起こる生理的な変化で、大型類人猿やヒトではみられない。今回、我々は非妊娠カニクイザルの子宮において epithelial plaque に遭遇したので、その病理学的特徴について報告する。
【材料と方法】当該動物（中国産、約 4 歳、雌）は標本作製技術検討用に供された無処置動物で、一般状態に異常は認められず、
剖検時に特記すべき肉眼的異常所見は認められなかった。常法に従って、ホルマリン固定・HE 染色および免疫組織学的染色を実施した。
【結果】子宮内膜被覆上皮直下において、対面の 2 ヵ所に増殖巣がみられた。増殖細胞は胞巣状・小塊状を呈して内膜表層から下方に向かって増殖していた。増殖巣辺縁では正常な子宮内膜被覆上皮と連続しており、子宮内腔へ向かっての乳頭状増殖や子宮内膜深層への浸潤性増殖はみられなかった。増殖細胞は多形性を呈し、大型核や多核、核分裂像も比較的多く観察され、cytokeratin 陽性、vimentin 陰性を示した。
【結論】以上の組織形態学的ならびに免疫組織学的特徴より epithelial plaque と診断した。非妊娠カニクイザルでの epithelial
plaque の発生は稀であり、多形に富む増殖活性の高い細胞で構成されていることから、子宮内膜由来の腫瘍性変化や脱落膜反応との鑑別が求められ、薬剤の安全性評価において留意すべき自然発生病変と考えられた。

P-50
CD-1 及び B6C3F1 マウスの乳腺由来腺腫／腺癌の形態学的差異
ポスター○爰島 洋子、土居 卓也、土谷 稔（株）LSI メディエンス【背景及び目的】老齢雌マウスでは、乳腺腫瘍が認められる。CD-1 マウスと B6C3F1 マウスの乳腺の腺腫／腺癌が形態学的に異なっていることに注目し検討した。
【材料及び方法】149 例の雌 CD-1 マウスから得られた乳腺由来 15 腺癌及び 2 腺腫、520 例の雌 B6C3F1 マウスから得られた乳腺由来 12 腺癌及び 2 腺腫を病理組織学的に検査した。そのうち CD-1 マウス由来 14 腺癌及び 2 腺腫と B6C3F1 マウス由来 7 腺癌及び 1 腺腫について、AB-PAS 染色と Smooth muscle action（SMA）の免疫組織化学染色も実施した。
【結果】CD-1 の全腺癌及び 1 腺腫では、腫瘍性腺上皮細胞が腺房／管状〜充実性に増殖していた。一方、B6C3F1 マウスの全腺癌及び全腺腫では、多形性や異型を伴わない小型円形〜紡錘形細胞が腺房／管状構造を形成する腫瘍性腺上皮細胞と共に増生していた。このような細胞は、腫瘍性腺上皮細胞と基底膜の間に認められ、免疫組織化学染色において SMA に陽性を示した。これらの特徴から、紡錘形細胞は筋上皮細胞であると考えられた。このような筋上皮細胞の増生は CD-1 の 1 腺腫のみに認められた。
【結論】B6C3F1 マウスの乳腺の腺腫／腺癌は筋上皮細胞の増生を伴うのに対し、CD-1 マウスの乳腺のほとんどの腺腫／腺癌は筋上皮細胞の増生を伴わなかった。

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ポスター

P-51
NOS 阻害剤投与による超短期マイクロミニピッグ動脈硬化モデルの開発○川口 博明 1)、谷本 昭英 2)1)鹿児島大学大学院医歯学総合研究科研衛生学・健康増進医学、 2)鹿児島大学大学院医歯学総合研究科病理学

マイクロミニピッグは世界最小のミニブタであり、ヒトの解剖・生理をよく反映している。比較的、扱いやすい大きさの実験動物であり、生活習慣病などのヒト疾患モデル動物の作成に適していると考えられている。我々はマイクロミニピッ
グに 8 週間の高脂肪高コレステロール食を給餌することで動脈硬化を誘発するモデルをすでに確立しており、このモデルでは、脂質代謝、動脈硬化の分布や組織像がヒトの動脈硬化と類似していた。本研究では、高脂肪高コレステロール食に加えて、さらに nitric oxide synthase 阻害剤である NG-nitro-L-arginine methyl ester（L-NAME）を追加投与し、血管内皮機能を阻害することにより、超短期に動脈硬化を発症するモデルを開発した。結果、L-NAME の追加投与で動脈硬化病変の増悪が認められ、2 週間で肉眼的に確認出来る動脈硬化の発生が大動脈にみられたが、L-NAME 投与による血中脂質代謝マーカーへの影響はみられなかった。この超短期動脈硬化モデルは、化学物質や薬剤の動脈硬化増悪性評価（毒性試験）に応用できる可能性が考えられた。とくに、最近注目されている抗がん剤による心血管毒性の評価系にも利用できることが示唆された。

P-52
急性出血性胃炎で死亡したミニブタの血管病変についての病理組織学的検討
ポスター○奥田 須美子、赤根 弘敏、江田 景、市川 敦子、清水 茂一、秋江 靖樹
シミックファーマサイエンス（株）【目的】第 34 回日本毒性病理学会学術集会で発表した急性出血性胃炎で死亡したミニブタについて、諸臓器の血管病変について精査したので報告する。
【材料及び方法】本症例は社内保有動物として飼育していたが、1 週間前より摂餌量が減少し、突然死した 11 ヶ月齢の雄ク
ラウン系ミニブタである。諸臓器について、HE 染色、各種特殊染色及び免疫組織化学染色を行った。
【結果及び考察】前回報告した、胃を中心とする諸臓器の小動脈及び細動脈の線維素性血栓とは異なり、小動静脈の内腔に糸球体様の閉塞性の管腔内増殖が認められ、その細胞は紡錘形を示していた。この血管内増殖性病変は、主に心臓及び肝臓の線維化病巣内、肝臓と胆嚢の間膜、腎臓で観察された。本症例は猫で報告されている猫全身性反応性血管内皮腫症に類似していると考えられた。猫の他に、牛での報告があり、ヒトでは類似する疾患として反応性血管内皮症、良性の皮内
血管内皮および周皮増殖症がある。ブタでの報告はなく、今回特殊染色、免疫染色の結果を踏まえて報告する。

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ポスター

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P-53*
ビーグル犬の胸部大動脈に移植した人工血管の治癒過程○松田 崇斗 1)、寺尾 壽子 1)、前田 一葉 1)、田崎 雅子 1)、早場 純子 1)、磯部 厚志 1)、長野 嘉介 2)、数野 公正 1)、萩原 仁美 1)
1)テルモ株式会社、 2)長野毒性病理コンサルティング【背景】動脈瘤や解離といった血管疾患の治療として、人工血管置換術が行われている。人工血管は、血栓形成による内腔の閉塞が生じることなく、開存性が維持されることが重要であるものの、内腔を長期的に観察し、その治癒過程に言及した報告は少ない。本研究では、イヌ胸部大動脈に人工血管を移植し、内腔の治癒過程を 26 週間にわたり病理学的に検索した。
【方法】ビーグル犬の左胸部を開胸し、胸部下行大動脈を人工血管（トリプレックス ®）と置換した。4 週間後（6 例）、26 週間
後（12 例）に血管造影検査を行い、剖検した。摘出した人工血管は、長軸方向に分割後、内腔を肉眼的に観察し、10％中性
緩衝ホルマリン液で固定した。その後、パラフィン標本を作製し、HE 染色、マッソン・トリクローム染色、PTAH 染色を施し、病理組織学的に観察した。
【結果】血管造影検査の結果、4 週間後、26 週間後に狭窄等の異常は認められず、内腔は開存していた。人工血管内腔面を肉眼的に観察したところ、4 週間後では赤色部が広く観察されたのに対し、26 週間後では減る傾向が認められた。病理組織学的検査の結果、4 週間後の人工血管内腔面は広範囲に血栓で覆われ、宿主血管と人工血管との両吻合部近傍に、線維化および血管内皮様細胞が観察された。一方、26 週間後の人工血管内腔面は、線維化および血管内皮様細胞が広範囲に観察され、血流面との境界は平滑だった。内皮様細胞による被覆率は、4 週間後で 78±16％、26 週間後で 97±4％を示した。
【考察】人工血管内腔面は、血栓が付着後、両吻合部から中央に向かい線維化が進行すること、内皮様細胞による被覆も吻合部から生じやすく、経時的に内腔面を覆うことが示された。これにより血栓が付着しにくい安定した組織が構築されると考えられた。

P-54*
カニクイザル（Macaca fascicularis）
における自然発症性の肥大型心筋症の一例
ポスター○小西 静香、沼倉 佑樹、古賀 真昭、小寺 喬、上田 誠
日本新薬（株） 安全性・動態研究部【背景】カニクイザルの心筋症に関する数例の報告において、肥大型と診断された症例はない。今回、11 歳齢の雄のカニク
イザルに自然発生した肥大型心筋症の症例を報告する。
【症例】本例は薬物動態試験に供された中国産の雄のカニクイザルであり、4–9 歳の間に少量の被験物質を数種類繰り返し投与された。飼育中の一般状態観察および定期的な血液検査において異常は見られなかった。11 歳齢時に、ペントバルビタールによる深麻酔下で放血致死させた。
【結果及び考察】肉眼的に、心室中隔、左心室および右心室壁の肥厚が認められた。組織学的には、左心室壁および／あるいは中隔に心筋細胞の肥大、錯綜配列、空胞化、ならびに間質の線維化が認められ、右心室壁でも軽度の間質の線維化を伴う軽度の心筋細胞の肥大が認められた。異型な巨大核を伴った心筋細胞の肥大は左心室壁と中隔で高度であった。心筋細胞の錯綜配列は中隔で高度であり左心室壁では認められなかった。マッソントリクローム染色で青染する間質の線維化が左心室壁と中隔の広範囲に観察され、これら線維化領域に一致して心筋細胞の空胞化が左心室壁で中等度に、中隔で軽微に認められた。これらの形態学的特徴から、本例を肥大型心筋症と診断した。投与された各種被験物質に心毒性の情報がないこと、同様の試験に使用された他の 2 個体において類似の変化が認められなかったことから、本症例は自然発生性の変化と考えている。過去に心筋細胞の肥大と錯綜配列が同一症例で発生したカニクイザルの報告はなく、本例はカニクイ
ザルにおける自然発生性の肥大型心筋症の初の報告である。

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ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-55
炎症性反応を伴う Wistar Hannover ラットにおける自然発生性 globule leukocyte tumor の1例○佐藤 順子、友成 由紀、土居 卓也、土谷 稔（株）LSI メディエンス

We encountered neoplastic lesions of hematopoietic cells forming numerous small to large nodules in the spleen, and growth in
the Glisson sheath in the liver in a 110-week-old male Wistar Hannover rat (Crl:WI(Han)). Many of the neoplastic cells contained
distinct eosinophilic granules or droplets. We investigated the histological features of this tumor based on the results of special andimmunohistochemical staining. [Macroscopic findings] Three protruding areas on the surface of the spleen (5-8 mm diameter) andmultiple pale white or yellow nodules on the cut surfaces were observed. [Microscopic findings] Multiple variable-sized nodules
containing atypical proliferative cells, lymphocytes, eosinophils and histiocytes were noted in the white pulp, marginal zone andred pulp of the spleen, and Glisson sheath of the liver. Proliferative cells consisting of a few types of atypical cells with or withoutcytoplasmic eosinophilic granules or intermediate types were observed. The granules were positive for PAS and elastase stains, andbluish purple for PTAH, and showed no metachromasia with toluidine blue stain. In immunohistochemical staining, the proliferative
cells with or without granules were positive for granzyme B, rat mast cell protease 2 and Ki-67, while negative for Iba1, ED1, κlightchain, CD3 and 20. These results led to a diagnosis of globule leukocyte tumor. The inflammatory reaction may have been caused by anactive substance of cytoplasmic granules.

P-56
上皮型胸腺腫及び上皮型過形成の Cytokeratin 発現に関する免疫組織学的特徴
ポスター○友成 由紀、佐藤 順子、黒滝 哲郎、山田 直明、川迫 一史、土居 卓也、菅野 剛、土谷 稔（株）LSI メディエンス

創薬支援事業本部

試験研究センター

病理研究部

病理 1 グループ【諸言】Wistar Hannover ラット（WH）の胸腺腫は正常胸腺の皮髄構造を模倣した組織構築を特徴とする。Cytokeratin（CK）18が皮質様の富リンパ球領域の胸腺上皮、CK14 が髄質様分化領域の胸腺上皮に陽性を示す事から、CK 発現の異なる胸腺上皮が WH の胸腺腫の特徴的な組織構築に関与する可能性を報告した（第 34 回本会）。一方、老齢 F344/DuCrlCrlj ラット（F344）
では、上皮型胸腺腫が発生し、管腔構造を特徴とする上皮型過形成も高率に発現する。これらの病変での胸腺上皮の CK18と CK14 発現状況は不明である。
【方法】F344 の過形成 2 例及び胸腺腫 1 例を用い、病理組織学的特徴及び胸腺上皮の免疫組織学的特徴（CK18、CK14 発現）を調べた。
【結果】過形成では胸腺髄質領域で管腔構造の増加が認められた。管腔構造では単層の立方上皮が管状に配列し、その周囲を扁平な上皮が取り巻いていた。胸腺腫では管腔構造に加え、腔が不明瞭となり、丈の低い上皮が胞巣塊または不規則に数層連なる索状構造を形成する領域も多く認められた。管腔構造が不明瞭な領域では、構成上皮の形態的な区別は不明であった。免疫組織化学的には過形成、胸腺腫共に、管腔構造の内側の上皮は CK18 に周囲の上皮は CK14 に陽性であった。
管腔構造が不明瞭な領域でも胞巣塊や索状構造の内側の層の上皮はCK18、外側の層の上皮はCK14陽性を示す傾向があった。
【結論】上皮優勢の過形成及び胸腺腫では、CK 発現の異なる胸腺上皮が内側と外側の層状関係を構築しつつ増殖することが分かった。胸腺上皮の CK 発現の違いが、上皮型胸腺腫と皮髄構造を模倣した胸腺腫の組織像の違いに関与する可能性が示唆された。

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ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-57*
SD ラットの胸腺にみられた異所性横紋筋組織○小林 亮介 1)、友成 由紀 1)、赤川 唯 2)、関谷 明生 1)、爰島 洋子 1)、土居 卓也 1)、菅野 剛 1)、土谷 稔 1)
1)（株）LSI メディエンス

試験研究センター 病理研究部、2)（株）LSI メディエンス 試験研究センター 鹿島安全性第 1 研究部【背景・目的】ラットにおいて、胸腺組織内に横紋筋組織が稀に観察されるが、文献的な報告は見当たらないため、その解剖学的、組織学的特徴を検索した。
【材料と方法】組織検査で偶発的に横紋筋組織がみられた 11 週齢、雄の Crl:CD（SD）ラット 1 例の胸腺を横断で 5 分割してパラフィン包埋した。亜連続切片を作製し、HE、マッソントリクローム、と銀染色を行なった。
【結果】ホルマリン固定後の胸腺割面において、横紋筋組織は境界明瞭な微小白色斑として認められた。主な組織学的特徴
として、横紋筋組織は胸腺小葉間に局在し、周囲の薄い膠原線維で胸腺組織と区画されており、直径 20 〜 40 μm の成熟した筋線維が数個〜数十個まとまった一本の束として横断面で観察された。一部では 1 〜数個の筋線維束が近傍に複数観察された。亜連続切片により全体を観察すると、横紋筋組織は胸腺左葉の前方部 4/5 程度を縦断方向に走行するまとまった筋
束で、前方では左葉の腹側表面に接し、後方に向かい徐々に胸腺小葉間に入り、最終的に筋線維数を減じ、消失していた。
これらの前方末端は胸腺外まで延びていたため確認できず、後方末端では筋線維の消失とともに筋束周囲の膠原線維が胸腺小葉間結合組織に融け込んでいた。特殊染色において、胸腺内横紋筋組織は正常な骨格筋と同様の染色性を示していた。
【考察】観察された横紋筋組織は、局在や組織学的特徴から、胸腺の発生段階で形成された異所性組織と考えられ、アーティファクトではないと判断した。胸腺髄質には、免疫組織化学的、電顕的に横紋筋への分化傾向を示す myoid cell の存在が知られているが、本変化は胸腺小葉間に局在する成熟した横紋筋線維であることから、myoid cellとの関連性は低いと考えた。

P-58
カニクイザルの腰椎椎間板におけるコンドリアーゼの基質特異性と髄核融解作用ポスター○南澤 由佳、村松 大、山口 宏明、二井 愛介
生化学工業（株）【背景】グリコサミノグリカン分解酵素であるコンドリアーゼは、タンパク質分解酵素であるキモパパインと比べて基質特異性が高いことから、腰椎椎間板ヘルニアにおける髄核融解術に適していると考えられている。両酵素の椎間板への影響については、様々な動物種で評価されているが、椎間板および隣接する椎体への影響の詳細は明らかではない。本試験では、コンドリアーゼおよびキモパパインの基質特異性による影響の違いについて、カニクイザルを用いて病理組織学的に比較検討した。
【材料と方法】カニクイザルに、コンドリアーゼを臨床用量の 12 〜 494 倍相当、キモパパインを同じく 12 倍相当の用量で腰椎椎間板内へ投与し、投与後 1 〜 26 週に病理組織学的検査を行った。
【結果】コンドリアーゼを投与した椎間板および隣接する椎体において、グリコサミノグリカン分解作用による病理組織学的変化が認められた。椎間板および椎体に認められた組織変化は、投与後 4 週で最も顕著に認められ、投与後 26 週には沈静化した。一方、キモパパインを投与した椎間板では、コンドリアーゼと同質の変化が認められたが、椎体への影響はより広範囲に及んでいた。さらに、キモパパインによる組織変化の程度は、コンドリアーゼの最高用量で認められた組織変化と比べて重度で、投与後 26 週においても組織変化は増悪した。
【結論】コンドリアーゼによる病理組織学的変化は、キモパパインと比べて、酵素作用による影響はより軽度かつ選択的であった。コンドリアーゼは、腰椎椎間板ヘルニアにおける髄核融解術において、より望ましい基質特異性を有することが組織学的にも示された。

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The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ポスター

P-59*
2,4- ジメチル -4- フェニルテトラヒドロフランの 90 日間反復投与毒性試験および異性体存在比の検討○井手 鉄哉 1)、水田 保子 1), Young-Man Cho1)、赤木 純一 1)、増本 直子 2)、杉本 直樹 2)、佐藤 恭子 2)、小川 久美子 1)
1)国立医薬品食品衛生研究所

病理部、 2)国立医薬品食品衛生研究所

食品添加物部【背景】2,4- ジメチル -4- フェニルテトラヒドロフランは指定添加物として食品への使用が認められている香料で、「類又は誘導体として指定されている 18 項目の香料（18 類）」のうちエーテル類に分類され、比較的使用量が多い。現在、代表的な 18
類の安全性については再検討が進められていることから、本香料のラットを用いた反復投与毒性試験を実施した。加えて、本香料には 4 つの異性体が存在し、異性体によって毒性が異なる可能性もあることから、被験物質中の異性体存在比の検討も行った。
【方法】6 週齢の F344 ラット雌雄各群 10 匹に 2,4- ジメチル -4- フェニルテトラヒドロフランを 0（対照）、6、24 及び 96 mg/kg
体重／日で 90 日間強制経口投与し、投与期間中の一般状態観察、体重・摂餌量測定、解剖時の血液学的・血清生化学的検
査、器官重量測定、並びに病理組織学的検査を実施した。被験物質中の異性体存在比は、定量 NMR とキラルカラムを備えた GC/MS を用いて測定した。
【結果】いずれの投与群においても一般状態、体重および摂餌量に変化はみられなかった。血液学的検査では高用量群の雌雄で MCV・MCH の減少がみられ、血清生化学的検査では高用量群の雌雄で TP の増加、雄で Alb の増加が認められた。また、
高用量群の雌雄で肝臓の絶対・相対重量の増加、腎臓の相対重量の増加がみられ、肝臓の相対重量の増加は中間用量群の雌でも認められた。病理組織学的検査では、高用量群の雌雄でび漫性肝細胞肥大、雄で尿細管硝子滴沈着と再生尿細管が観察された。また、被験物質中には 4 つの異性体がほぼ等量ずつ存在していることが明らかになった。
【考察】今回の毒性試験に用いた 2,4- ジメチル -4- フェニルテトラヒドロフランには 4 つの異性体がほぼ等量ずつ存在し、その無毒性量は雌雄ともに 24 mg/kg 体重／日であると判断した。

P-60*
ポスター

1,3-Dichloro-2-propanol の F344 ラットを用いた 28 日間反復強制経口投与による毒性プロファイルの検索○松下 幸平、豊田 武士、森川 朋美、山田 貴宣、小川 久美子
国立医薬品食品衛生研究所

病理部【背景】1,3-Dichloro-2-propanol（1,3-DCP）は肉や魚の加工品やチーズ等の様々な食品に含まれる汚染物質であり、肝臓や腎臓等に明確な発がん性を示すものの一般毒性及び遺伝毒性に関する情報は限定的である。我々は gpt delta ラットを用いた中期
遺伝毒性／発がん性評価系による 1,3-DCP の発がん機序の解明を目的とした研究を進めており、本学会では用量設定試験において野生型 F344 ラットを用いて検索した 1,3-DCP の毒性プロファイルについて報告する。
【方法】6 週齢雄性 F344 系ラットに 25、50 及び 100 mg/kg の 1,3-DCP を 28 日間反復強制経口投与し、対照群には蒸留水を投与した。全例の全身諸臓器の病理組織学的検索を行い、計画屠殺例では血液学的及び血清生化学的検査並びに肝臓における免疫組織学的及び遺伝子発現解析を実施した。
【結果】100 mg/kg 群の全例が実験開始 2 日目に死亡／切迫屠殺となり、肝臓に重度の小葉中心性肝細胞壊死、腎臓に近位尿細管の空胞化及び壊死がみられた。25 及び 50 mg/kg 群では体重及び摂餌量に変動はなく、赤血球パラメータの有意な低値、肝臓及び腎臓の絶対／相対重量の有意な高値がみられ、50 mg/kg 群では ALT が有意な高値を示した。25 及び 50 mg/kg
群の肝臓では小葉中心帯において c-caspase 3 陽性を示す単細胞壊死及び Ki67 陽性細胞の増加がみられ、細胞周期関連遺伝
子のmRNA発現量が有意な高値を示した。glutathione S-transferase placental form
（GST-P）
陽性反応が小葉中心帯にみられたが、GST-P 陽性細胞巣は認められなかった。
【考察】100 mg/kg 群の死因として急性肝障害が示唆された。25 及び 50 mg/kg 群の肝臓では細胞増殖活性の亢進がみられ、発がんプロモーション作用との関連が考えられた。今後、全身諸臓器の病理検査結果を加えて 1,3-DCP の毒性プロファイルを検討する予定である。
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ポスター

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P-61*
F344 ラットを用いた 5-methyl-2-phenyl-2-hexenal の 90 日間反復投与毒性試験○中村 賢志 1)、木嶋 綾希 1)、石井 雄二 1)、高須 伸二 1)、小川 久美子 1)、梅村 隆志 1,2)
1)国立医薬品食品衛生研究所

病理部、 2)ヤマザキ動物看護大学

動物看護学部【目的】5-Methyl-2-phenyl-2-hexenal（MPH）は指定添加物「類又は誘導体として指定されている 18 項目の香料」（18 類）のうち、「芳香族アルデヒド類」に分類されている食品香料である。FAO/WHO 合同食品添加物専門家委員会（JECFA）におけるグルー
プ評価では「安全性の懸念はない」と判断されているが、MPH の個別の毒性ファイルについてはほとんど情報がない。本研
究では、本剤の安全性評価に資する知見の収集を目的とし、F344 ラットを用いた 90 日間反復投与毒性試験を実施した。
【方法】雌雄 6 週齢の F344 系ラット（各群 10 匹）に、コーン油を溶媒として本剤を 0、8、24、70 mg/kg 体重／日の用量で 90 日
間強制経口投与した。投与量は食品香料としてのヒト推定暴露量の100,000倍を最高用量とした。試験期間中の一般状態観察、体重、摂餌量測定、並びに解剖時の血液学的検査、血清生化学的検査、器官重量測定及び病理組織学的検索を行った【結果】試験期間中、動物の死亡および一般状態の異常は認められなかった。体重および摂餌量は雌雄ともに全ての投与群において対照群と同様に推移した。血液学的検査および血清生化学的検査では投与に起因する変化は認められなかった。
臓器重量では肝臓の絶対および相対重量の有意な増加が雌の 70 mg/kg 体重／日群で、精巣の絶対重量の有意な増加が雄の70 mg/kg 体重／日群で認められたが、病理組織学的検索ではいずれの臓器においても被験物質投与の影響と考えられる変化は認められなかった。
【結論】以上より、本試験における MPH の無毒性量は雌雄ともに 70 mg/kg 体重／日と判断した。

P-62○押方 孝文、涌生 ゆみ、満石 三喜男、浜村 政夫（株）LSI メディエンス

創薬支援事業本部

試験研究センター

病理研究部

病理 2G

【目的】再生医療等製品の造腫瘍性試験の背景データ取得を目的に、3 系統の免疫不全マウス（NOG、NOD SCID 及びヌードマウス）に HeLa 細胞の移植を行い、病理組織学的検索を行った。
【方法】3 系統の雄マウスを、系統ごとに HeLa 細胞を移植した陽性対照群（N=10）及び MRC-5 細胞（ヒト胎児肺線維芽細胞）の移植を行い、を移植した陰性対照群（N=10）の2群に分けた。各群とも6週齢時に右背部皮下に細胞（1×10 6 cells/0.1 mL/body）
移植後 16 週に解剖し、全身臓器について HE 染色標本を作製し、検査した。
【結果】3 系統とも陽性対照群の全動物で HeLa 細胞を移植した部位の皮下に灰白色の充実性の腫瘍がみられた。病理組織学
的に腫瘍は、類円形の腫瘍細胞の充実性増殖からなり、全例において広範囲の壊死領域がみられ、分裂像やアポトーシスも散見された。また、NOG マウスの 1 例で肺に、NOD SCID マウスの 1 例で腋窩リンパ節に転移が認められた。これに加え、3 系統の陽性対照群のほぼ全例で脾臓及び肝臓の顆粒球系の髄外造血、骨髄の顆粒球系造血細胞の増加がみられた。ヌード
マウスでは、髄外造血の程度が他の系統と比較して強い傾向にあった。さらに、NOD SCID マウスでは、リンパ節の好中球
浸潤、ヌードマウスでは、リンパ節の好中球浸潤、脾臓及びリンパ節の形質細胞の増加が認められた。
これらの変化については、腫瘍形成に対する生体反応であると考えられた。陰性対照群では腫瘍はみられなかった。また、
陽性対照群でみられたいずれの病変も各系統で認められなかった。
【まとめ】それぞれの免疫不全動物において、HeLa 細胞の腫瘍形成に伴う生体反応が異なることが示された。今後、免疫染色を含め、各系統間の詳細な形態学的比較を行う予定である。

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ポスター

免疫不全マウス（NOG，NOD SCID 及びヌードマウス）を用いた HeLa 細胞の造腫瘍性試験における病理組織学的検索

ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-63*
NOG マウスの皮下に自然発生した上皮性腫瘍の 2 症例
○ Angeline Ping Ping Teh1)、町田 雪乃 1,2)、打屋 尚章 1)、今井 俊夫 1)
1)国立がん研究センター 研究所

動物実験施設、 2)日本獣医生命科学大学

獣医病理学研究室【背景】NOG マウスは重度免疫不全マウスであり、患者由来異種移植（patient-derived xenograft: PDX）モデルの樹立に汎用されている。NOG マウスにおける自然発生腫瘍については胸腺リンパ腫を除いて、上皮性腫瘍を含めほとんど報告はみられない。今回、皮下にみられた自然発生性と考えられる 2 症例について、病理組織学的特徴および由来組織について検討を行ったので報告する。
【肉眼所見】症例（1）は 38 週齢の雌性 NOG マウスで、10 週齢時、右腹部皮下にヒト子宮体がんを移植したが生着しなかった。
剖検時、左頸部から上腕部の皮下に、長径 1.8 cm の灰白色腫瘤がみられた。症例（2）は 61 週齢の雌性 NOG マウスで、7 週齢時に右腹部皮下にヒト子宮体がんを移植したが生着しなかった。剖検時、右腰部皮下に大腿骨および骨盤を巻き込む長径
2.8 cm の淡桃色腫瘤を認めた。
【方法】摘出した腫瘤をホルマリン固定後、パラフィン包埋切片を作製し、HE 染色および各種免疫組織化学染色（AE1/AE3,
Vimentin, NFP, Ki67, ERα 等）を実施した。
【結果と考察】両腫瘍は、病理組織学的に核異型が強く細胞境界が不明瞭な腫瘍細胞の胞巣状増殖像を呈していた。広範な壊死巣内にあってもスリット状の血管周囲に腫瘍細胞が巣状に残存していた。症例（1）において腫瘍細胞が周辺の筋・骨組織内へ浸潤し、骨髄組織も腫瘍に置換されていた。両腫瘍とも AE1/AE3 に陽性であるが ERα には陰性で、Vimentin および
NFP にも陰性を示したことから、上皮性腫瘍と判断された。本腫瘍の由来組織について更なる検索を実施中である。両症
例ともヒトがん移植部位にはヒトがん組織の増殖を認められなかった。長期飼育下の NOG マウス皮下にみられた自然発生性の上皮性腫瘍については報告がみられないが、移植したヒトがん組織と区別するためにも引続き基盤データの蓄積が重要と考えられた。

P-64*
ポスター

高齢 F344 ラットに自然発生した退形成ジンバル腺癌（Anaplastic Zymbal’s gland
carcinoma）を疑う 2 例○前野 愛 1)、坂本 義光 1)、北條 幹 1)、湯澤 勝廣 1)、長谷川 悠子 1)、鈴木 俊也 1)、猪又 明子 1)、守安 貴子 1)、煙山 紀子 2)、
美谷島 克宏 2)、中江 大 2)1)東京都健康安全研究センター

薬事環境科学部

生体影響研究科、 2)東京農業大学

応用生物科学部

食品安全健康学科【背景】ラットにおけるジンバル腺由来の腫瘍の自然発生は少なく、中でも退形成ジンバル腺癌（Anaplastic Zymbal’s gland
carcinoma）についてはほとんど報告がない。本演題では、慢性毒性試験に用いたラット 2 匹に観察された、退形成ジンバル
腺癌を疑う症例について報告する。
【材料・方法】症例は、低用量の多層カーボンナノチューブを投与した F344 雄性ラットの経過観察中に皮下結節を認めたものである。その後体重減少あるいは腫瘍組織の著しい増大を来したため、症例 1 は 89 週齢、症例 2 は 77 週齢で安楽殺し、
耳介基部の腫瘍組織を摘出し、定法に従って病理組織学的解析に供した。
【結果・考察】両症例とも、腫瘤は、直径約 30 mm 大で、表面が潰瘍化し出血を伴っていた。腫瘤の割面は、黄白色で、広範な壊死が認められた。病理組織学的には、楕円形から多角形の腫瘍細胞が密接してシート状に増殖する部位と、紡錘形の腫瘍細胞が増殖する部位とが不規則に混在しており、両者の移行像と周辺組織への浸潤がみられ、一部に扁平上皮化生や角化もみられた。肺への転移を認めたが、腫瘍組織周辺を含む各組織切片において、既存のジンバル腺組織を確認できなかった。また、症例 1 では骨形成がみられ、症例 2 では腫瘍細胞の多型性が強かった。腫瘍細胞は、いずれの症例
でも、vimentin 陽性のものと cytokeratin 陽性のものとが混在したが、アルシアンブルー・PAS・CD68・S100・αSMA・von
Willebrand factor・desmin は陰性であった。以上の結果より、腫瘍細胞の由来を直接的に特定できないものの、発生部位が耳介基部であり、扁平上皮様の形態を示す上皮性の腫瘍細胞と間葉系の腫瘍細胞が混在して増殖していることから、両症例とも退形成ジンバル腺癌を疑った。

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ポスター

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P-65*
Spontaneous basal cell carcinoma with ductal differentiation in the rat salivary gland○佐野 智弥 1)、神鳥 仁志 2)、原 陽子 3)
1)武田薬品工業（株）薬剤安全性研究所、 2)Axcelead Drug Discovery Partners（株）、3)島根県

農林水産課

家畜病性鑑定室

Macroscopically, a mass was observed in the subcutaneous tissue of the submandibular area in a 17-week-old male Sprague-Dawley
rat. Histopathologically, pale basophilic basaloid tumor cells with round to oval-shaped nuclei formed multiple solid lobules and/or nests and was highly invaded to the salivary gland. A small number of duct-like structures, composed of a monolayer of cuboidal
epithelia without surrounding cells or basal lamina, were also observed in the tumor. Immunohistochemically, the tumor cells showed
positive reactions for p63, cytokeratins, proliferating cell nuclear antigen, and vimentin, but negative reactions for alpha-smoothmuscle actin and S100. Ultrastructurally, the basaloid tumor cells contained multiple ribosomes and mitochondria in the cytoplasm,
and a few desmosomes in the intercellular portion. However, there were no ultrastructural features that would suggest the presence of
myoepithelium or squamous cells. According to the INHAND, this tumor could be categorized as a solid type of adenocarcinoma withductal differentiation. On the other hand, the basal cell in the excretory duct is known to be able to differentiate to all types of cells in
the normal salivary gland and may be related to the tumorigenesis of this tumor. Additionally, morphological and immunohistochemical
characteristics of the tumor cells resemble to the basal cells. Therefore, it could be diagnosed as a basal cell carcinoma from thehistogenetic point of view.

P-66○林 新茂 1)、A ブラッドレイ 2)、DG グッドマン 3)、原田 孝則 4)、R ハーバ 5)、岩田 聖 6)、M ヤコブセン 7)、CM キーナン 8)、
R ケルナ 9)、マーラ ベス 5)、E メセック 10)、T ノルテ 11)、S リッテンハウゼン 9)、C ロウルフェルテ 12)、J バーレ 13)、
義澤 克彦 14)
1)三栄源エフ・エフ・アイ（株） 安全性科学部、 2)チャールスリバー、 3)コンサルタント、 4)残留農薬研究所、 5)米国立環境健康科学研究所、6)ルナパス毒性病理研究所、7)アストラゼネカ、8)キーナン コンサルティング、9)フラウンフォッファー、10)ノバルティス、
11)ベーリンガーインゲルハイム、 12)バイエル、 13)イーライリリー、 14)武庫川女子大学 生活環境学部 食物栄養学科

The INHAND Proposal has been operational since 2005. A Global Editorial Steering Committee (GESC) helps coordinate overall
objectives of the project. Development of harmonized terminology for each rodent organ system or non-rodent species is the
responsibility of the Organ Working Groups (OWG) or Non-rodent Working Groups (NRWG) respectively, drawing upon experts
from North America, Europe and Japan.Great progress has been made with 14 rodent organ systems published to date: Respiratory,
Hepatobiliary, Urinary, Central/Peripheral Nervous Systems, Male Reproductive and Mammary, Zymbals, Clitoral and Preputial
Glands in Toxicologic Pathology and the Integument and Soft Tissue, Female Reproductive System, Digestive System, Cardiovascular
System, Skeletal System, Special Senses and Endocrine System in the Journal of Toxicologic Pathology as supplements and on a website: www.goReni.org. Recommendations of the Apoptosis/Necrosis Working Group have been published. There are 5 non-rodent
working groups: non-human primate, dog, minipig, rabbit and fish: with draft manuscripts in progress. A new group has been formed toaddress terminology in non-rodent ocular toxicity studies. INHAND guides offer terminology, diagnostic criteria, differential diagnoses
and guidelines for recording lesions in toxicity and carcinogenicity studies. The guides provide representative photo-micrographs ofmorphologic changes, information regarding pathogenesis, and key references.

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ポスター

INHAND: International Harmonization of Nomenclature and Diagnostic Criteria for
Lesions - An Update - 2019

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ポスター

P-67
製薬企業の SEND 対応事例̶SEND に対応した病理組織学的検査体制の構築̶
○松本 泉美、栃谷 智秋、河内 眞美、藤井 雄太、吉野 有香、宮脇 出
大日本住友製薬株式会社

前臨床研究ユニット

FDA への SEND（Standard for Exchange of Nonclinical Data）申請が、NDA に続き IND 申請でも義務化され、2017 年 12 月 17 日
以降に開始された単回及び反復投与毒性試験、がん原性試験については、FDA 申請時に SEND データの提出が要求される。
このため、FDA 申請を行う製薬企業にとって、SEND 対応は必須となっている。当社においても、2016 年から社内 SEND
対応チームを立ち上げ、SEND に対応できる体制構築を進めてきた。SEND データ作成では、定められた標準フォーマット
に準拠したデータの格納が必要であり、またその際には元の用語を統制用語（CT）にマッピングすることが推奨されている。
SEND データ作成の課題の一つとして、記述的用語が使われている病理組織学的検査のデータでは、マッピングや用いるCT が不適切な場合、所見の意味が異なってしまう懸念が挙げられる。さらに、データ数、用語のバリエーションが多い病
理組織学的検査の SEND データ作成は、パソロジスト以外の担当者が適切に対応することが難しい。当社では、病理組織学的検査の SEND 対応として、以前より進めてきた INHAND を活用した所見名の統一に加え、データ格納及びマッピングの社内ルールの策定、報告書と SEND データの対応表の作成などを行い、SEND データ作成の容易化、迅速化に繋がる体制を構築したので、今回紹介する。パソロジストが、適切な所見名を用いるとともに、SEND を意識した対応を行うことで、
SEND データ作成時の負担軽減や、データの均質化が可能となり、また、将来的なデータ活用に繋がる可能性も考えられる。

P-68
ポスター

INHAND 病理用語を SENDIG v3.1 に対応したフォーマットに変更した病理組織所見用語集の作成○柿本 恒知 1)、諏訪 浩一 2)、枝元 洋 1)、山川 誠己 1)、山口 裕子 1)、星谷 達 1)
1)株式会社ボゾリサーチセンター

御殿場研究所 病理部、 2)株式会社ボゾリサーチセンター 御殿場研究所 情報システム部【背景】FDA への毒性試験データの申請は、2020 年 3 月までに SENDIG v3.1 への対応が義務付けられている。v3.1 では、非腫瘍性病変（NONNEO）についても統制用語（CT）を使用して MISTRESC を作成しなければならない。NONNEO CT は 200 語
弱の基礎所見が主であり、600 語以上ある INHAND 用語で所見を取得した場合、CT とその修飾語から構成され、修飾語は別の SUPPMI.XPT に収納しなければならない。この規定に従い、INHAND 用語を適切な CT とその修飾語に置き換えた用語集を作成した。また、この用語集のマインドマップも併せて作成した。
【方法】SENDIG v3.1 に従って、MI.XPT 及び SUPPMI.XPT に入力する要件を備えた Excel ファイルを作成した。すべてのINHAND 用語について、適切な CT 及びその修飾語に置き換え、これを MIORRES に収納した。基礎用語は MISTRESC に、修飾語は編集には Excel を用い、オリジナルの INHAND 用語は INHAND に収納し、修飾語は QVAL に収納した。CT に適
切な病理用語のない用語について INHAND 用語はそのまま各変数に収納した。さらに実際の SEND データ作成を想定し、MI.XPT 及び SUPPMI.XPT と同じ変数が入ったワークシートも併せて作成した。マインドマップは MindManager を用いて作成した。
【結果／結論】NONNEOのCTはINHAND用語の1/3しかないにも関わらず、かなりの部分をカバーできていることがわかった。
今回作成した用語集を実際の病理所見用語として使用すれば、v3.1 への対応は容易と考えられる。被験物質投与と関連のない所見は本用語集を用いることで省力化でき、申請者は被験物質投与の影響とした所見の SEND データの作成に集中できる。
一方、データ解析に用いるという立場では、v3.1 の改訂に有用性を見いだせないだけでなく、基礎所見のみの MISTRESC
を解析に用いることは誤ったデータ解釈を行う危険性さえある。
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ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-69
CDISC SEND CT 病理用語の 2018 年内変遷と INHAND 用語との比較○井上 紗季 1)、畠山 洋文 1)、小泉 治子 1)、堀川 真一 1)、佐藤 伸一 1)、安齋 享征 2)、岩田 聖 2)
1)（株）イナリサーチ、2)ルナパス毒性病理研究所

FDA 医薬申請については SEND（Standard for Exchange of Nonclinical Data）対応が求められるようになり、2019 年には CDISCから提案されている SEND IG（Implementation Guide）3.1 が適用の予定である。SEND IG3.1 では非腫瘍性病変については
SEND CT（Controlled Terminology）にある用語の同義語はなるべくマッピングするように求められ、SEND CT にない用語はStudy Data Reviewer's Guide（SDRG）への記載が必要となる。従って、将来 SEND 対応が求められる試験について毒性病理検査を実施する場合には、INHAND 用語と共に SEND CT 用語についても注目しておく必要がある。
SEND CT 用語は CDISC のホームページに公開されており、3 か月に一度更新されている。今回我々は 2018 年におけるSEND CT 病理組織用語の変遷を解析した。9 月末時点の用語数は非腫瘍性病変 185、腫瘍性病変 298 であり、INHAND の用語数と比較すると非腫瘍性病変数が少なかった（約 1/4 程度）。2018 年に追加あるいは削除された用語を INHAND 用語との比較も併せて紹介したい。あわせて、弊社で実施した SEND Data SET 作成の経験から、SEND 病理学検査データ作成における注意点や対策についても言述したい。

P-70
製薬企業におけるデジタルパソロジー技術を用いた形態計測に関する調査

1)日本製薬工業協会

研究開発委員会、 2)大塚製薬株式会社 徳島研究所、 3)田辺三菱製薬株式会社 創薬本部、開発研究所、5)大正製薬株式会社 安全性・動態研究所、6)持田製薬株式会社 総合研究所 薬物動態安全性、
わたらせ創薬センター、 8)一般財団法人バイオインダストリー協会 先端技術・開発部

4)塩野義製薬株式会社
7)杏林製薬株式会社【背景】日本製薬工業協会（JPMA）の研究開発委員会は先端創薬実現に向けた産産連携活動の一環で「病理組織変化の形態計測技術の開発」というテーマにタスクフォース（TF）として取り組んできた。近年画像解析処理技術を用いた病理スライドの形態情報の定量化技術は急速に発展しているが、創薬においてはデジタルパソロジー技術（DPT）を応用した病理組織変化の自動計測への活用事例は乏しく、現状も不明である。今回我々は DPT を用いた形態計測の現状、必要性、可能性あるいは技術開発についての課題等を調査するためにアンケートを実施した。
【方法】調査は JPMA 研究開発委員会の加盟 35 社を対象に、薬効及び安全性病理評価の部門に分けて実施した。形態計測に関する経験、実績及び課題、病理組織学的評価に関する質問、定量化ソフトの開発あるいは将来展望について質問を行い、形態計測技術開発に関する自由意見も収集した。アンケートは JPMA 事務局を通じて配信及び回収を行い、回収したアンケ
ートは事務局で匿名化した後に TF が受領し集計を行った。
【結果及び考察】加盟 35 社中 26 社から有効回答を得た。回答企業の多くは形態計測で病変を定量化するメリットは客観性や説得性を得られる事と考えているが、高い精度と客観性を兼ね揃えた解析条件の設定に苦慮している事が分かった。また創薬において DPT を応用したソフトウェアのニーズは高く、技術の進歩により病理評価業務の一部は、将来コンピュータ
ーに置き換わる可能性があると考えている。本調査結果は創薬活動における DPT を応用した形態計測技術開発の必要性を明らかにし、病理組織変化の解析ソフトウェアを開発する際の有益な情報となり得ると考えられた。

̶ 95 ̶

ポスター○吉川 剛 1,2)、洞井 康 1,3)、浅岡 由次 1,4)、櫻井 孝信 1,5)、菊地 聡美 1,6)、山岡 牧子 1,7)、田中 雅治 1,3,8)

ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-71*
画像解析ソフト HALO を用いた病理所見の定量化の検討○水川 真緒、洞井 康、大野 祐子、西川 智美、仁科 嘉修、馬場 伸之、久米 英介
田辺三菱製薬（株）創薬本部安全性研究所【背景と目的】病理組織標本の画像解析は、形態変化の数値化により、病理評価結果の客観性や説得力の向上に活用できる。
しかし、特殊染色・免疫染色標本が用いられることが多く、HE 染色標本では解析実績のある所見は少ない。今回我々は病理画像解析ソフトウェア HALO（indica labs.）を用いて、解析報告の少ない所見（腎臓の再生尿細管、胸腺萎縮、耳下腺萎縮他）について定量解析を試みた。
【材料と方法】
病理変化がみられたラットの腎臓、胸腺、耳下腺のHE染色標本をバーチャルマイクロスコープAperioで撮影し、デジタル画像を取得した。HALO の Classifier module を使用して画像中の構成成分を識別し組織全体面積に対する割合を定量化した。さらに一部の組織については、他の module を使用して詳細に解析した。
【結果】Classifier moduleにより、腎臓の再生尿細管が識別され、その割合は正常個体では0％、有所見個体では約20％であった。
胸腺では皮質と髄質が識別され、正常個体で平均 80％だった皮質の面積比が胸腺萎縮所見（軽度）のある個体では平均 58％であった。耳下腺では、Classifier module で腺房と導管が識別され、その他の module を組み合わせることで、各腺房細胞の細胞質面積測定が可能となり、正常個体では平均 62％、腺房萎縮所見（軽度）のある個体では平均 40％であった。また、他の所見についても定量解析を実施中である。
【結論】HALO を用いることで HE 染色標本での種々の病理所見の定量化が可能となり、より客観的な病理評価ができ得ることが示唆された。また、今回所見が認められた部位以外の領域の識別も可能であったことから、他の所見へ応用できる可能性が見いだされた。

P-72
ポスター

ヒト肺癌細胞像の自動分類における Fine-tuning した Deep Convolutional Neural Networksの比較検討○塚本 徹哉 1)、寺本 篤司 2)、桐山 諭和 1,3)、山田 あゆみ 2)
1)藤田医科大学

医学部

病理診断学、 2)藤田医科大学

医療科学部

放射線学科、 3)成田記念病院

病理診断科

非小細胞肺癌の中でも、細胞診画像による腺癌と扁平上皮癌の鑑別は困難な場合が多い。本研究では、既に大量の自然画像を学習した Deep Convolutional Neural Networks（DCNN）アーキテクチャーの流用（fine-tuning）が画像識別能力の改善に有効かどうかを検討した。対象には、気管支鏡生検時の液状検体細胞診標本（BD SurePath Liquid-based Pap Test）を Papanicolaou
染色し、顕微鏡デジタルカメラで撮影した腺癌、扁平上皮癌、小細胞癌の肺細胞診検体画像を用いた。Fine-tuning したアーキテクチャーとして、AlexNet、GoogLeNet、VGG-16 の 3 つの DCNN を用いた。オリジナルの DCNN は 3 層の畳み込み層（Convolution layer）、3 層のプーリング層（Pooling layer）、2 層のフル結像層（Fully connected layer）を持ち、腺癌、扁平上皮癌、小細胞癌の 3 つの癌細胞の識別確信度を得、その識別結果は 71.9％であった。それに対して、AlexNet は、5 つの畳み込み層、5 つのプーリング層、3 つのフル結合層を持ち、総合的な識別確信度は 75.5％に向上した。一方、GoogLeNet は、22 の layerを持つがフル結合層を欠く構造で識別確信度 70.8％と低値であった。また、VGG-16 は、16 個の layer からなり識別確信度
76.8％と良好な結果を得た。以上から、Fine-tuning が細胞診の画像分類に有効であることが示唆された。今後、更なる識別率向上のため、DCNN の構造最適化を行う必要があると考えられた。

̶ 96 ̶

ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-73*
PAXgene 固定パラフィンブロック包埋サンプルの特徴○山崎 雅輝 1)、中野 清孝 2)、名取 修 2)、鈴木 雅実 1,2)、加藤 淳彦 1)1)中外製薬（株）、 2)（株）未来創薬研究所

病理標本作製にあたり形態保持と RNA 品質保持を両立することは、形態学的解析と網羅的遺伝子解析を活用しバイオロジ
ーを理解するために重要である。形態保持と RNA 品質保持両方に優れる固定液とされる PAXgene-fixed paraffin-embedded（XFPE）サンプルの HE 染色の染色態度、RNA 品質の保持についてその他のサンプル作製法（modified methacarn-fixed paraffinembedded, paraformaldehyde-fixed paraffin-embedded using the AMeX method, formalin-fixed paraffin-embedded, fresh frozen,
PAXgene-frozen）と比較した。また、XFPE に対し laser capture microdissection（LCM）が適応できるかについて検討した。
XFPE は細胞形態を観察するに堪えうるものであり、アルコール固定サンプルと類似の染色態度、すなわち赤血球のゴース
ト化、細胞の Shrinkage、多少エオジンの赤味が強いことなどが特徴として挙げられた。RNA 品質保持は、fresh-frozen に次いで高く、ホルマリン系固定液にみられる RNA の断片化が少なく、Next generation sequencing 解析に耐えうる品質であった。
また、XFPE は 1 年間以上の保存後でも RNA 品質を保持されていた。さらに、LCM への適用において、5,000 μm2以上の大きさで切り取った場合良い RNA 品質を保持していた。XFPE は形態学的解析と網羅的遺伝子解析の活用に重要なツールとなると考えられる。

P-74
低発現分子検出のための蛍光免疫染色の増感法とその特徴

1)中外製薬（株） 富士御殿場研究所

安全性研究部、 2)（株）未来創薬研究所

低発現分子を蛍光免疫染色で検出するには増感法が必要となる。今回、低発現分子として知られる Leucine-rich repeatcontaining G-protein coupled receptor 5（LGR5）の検出法として、高輝度色素である Qdot を用いた増感法、ラベル色素の集積により増感させる Tyramide Signal Amplification（TSA）、及び比較対照である Alexa 色素を用いた labeled streptavidin biotin（LSAB）法を用い LGR5 に対する染色を施し、各染色法の特徴について比較検討した。検出感度としては TSA が高く、タン
パクの細胞内局在を詳細に観察するという点においては Qdot 法が明瞭に検出できることがわかった。また、共焦点顕微鏡
での撮像条件の設定幅は、Qdot が TSA に比較し広く、比較的容易に設定できることが確認された。これらの結果は、それぞれの増感法の原理に依存するものと考えられ、TSA はラベル色素を集積することから感度は高いがバックグラウンドも上がりやすい、一方、色素自体の輝度が高い Qdot 法は S/N（シグナル／ノイズ）比が高いためバックグラウンドを抑えられることが理由として考えられた。

̶ 97 ̶

ポスター○篠塚 淳子 1)、山崎 雅輝 1)、中野 清孝 2)、舟橋 真一 2)、鈴木 雅実 1,2)、加藤 淳彦 1)

ポスター

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P-75
FIB-SEM を用いたラット腎糸球体上皮細胞の 3 次元構造解析
宮内 泰 1)、○上田 耕平 1)、井村 奈緒子 1)、稲元 伸 2)、大塚 祐二 2)、吉田 晃世 2)1)（株）鎌倉テクノサイエンス

生物試験業務部、2)（株）東レリサーチセンター

形態科学研究部【背景・目的】透過型電子顕微鏡（TEM）および走査型電子顕微鏡（SEM）は、これまで様々な生体試料の構造解析に使用されてきたが、これらは 2 次元的な画像（TEM：平面画像、SEM：表面画像）しか作成することはできない。そこで、我々はFIB-SEM トモグラフィー技術を利用し、生体試料の 3 次元超微細構造解析を実施した。
【材料と方法】SD ラットの腎臓から糸球体を含む皮質の一部を採取し、FIB-SEM 用に特別な固定および染色を施し、樹脂包埋した。樹脂包埋サンプルの表面を収束イオンビーム（FIB）によりナノメートル単位でエッチング加工し、露出した表面画
像を SEM にて取得した。この工程を繰り返すことで等間隔に連続する 2 次元画像を取得し、各画像において糸球体毛細血
管壁構造の構成成分を中心に色付けした。また、今回は糸球体上皮細胞のミトコンドリアにも注目し色付けした。色付け
した 2 次元画像を積層し、3 次元立体像を構築した。
【結果】FIB-SEM を用いた 3 次元超微形態構造解析により、SD ラットの腎糸球体上皮細胞はボーマン腔側に長い突起を持つこと、また糸球体上皮細胞のミトコンドリアは非常に細長い形態であることが新たに示された。本法は、生体試料内の様々な細胞およびミトコンドリアをはじめとする細胞内小器官の超微形態を解析する上で、今後有用な方法と成り得ると考え
られる。

P-76
3D 培養系の形態学的解析手法
ポスター○藤井 悦子 1,2)、川合 重人 1)、山崎 雅輝 2)、中野 清孝 1)、加藤 淳彦 2)、鈴木 雅実 1,2)
1)株式会社未来創薬研究所、 2)中外製薬株式会社【目的】近年、臓器・組織の立体構築と機能を有する 3D 培養系が様々な医学・生物学研究に盛んに用いられている。本研
究領域においても形態学的解析が重要と考えられるが、適切な観察方法に関する情報は少ない。そこで、病理学的手法とwhole mount 法を組み合わせた 3D 培養系の適切な形態学的解析法を検討した。
【材料および方法】病理組織学的観察のために大腸癌幹細胞株より作製した organoid を 4％パラホルムアルデヒド固定後
agarose 液に懸濁し、遠心により同一平面上に沈殿させ AMeX 法にてパラフィン包埋を行った。HE 染色、AB-PAS 染色、免疫組織化学的染色（Ki-67、villin）および免疫蛍光染色（LGR5）を実施し、光学顕微鏡・共焦点レーザー顕微鏡にて評価した。
また、Whole mount による構造体全体の観察として、phalloidin の whole mount 染色・透明化を実施し、共焦点レーザー顕微鏡にて観察を行った。
【結果】上記の方法により作製した薄切染色標本では、同一切片上に多数の organoid が観察され、organoid の多様な形態が確認された。さらに、AB-PAS、免疫組織化学的染色、免疫蛍光染色による観察も可能であった。Organoid の立体構造を俯瞰的に把握するためには連続切片を作製し、観察する必要があったが、whole mount 法による観察では管腔形成を含む
organoid の立体構築を容易に観察することが可能であった。
【結論】同一平面上で複数の organoid の観察が可能な病理学的手法の確立により organoid の詳細な形態学的解析が可能となった。また、whole mount 法では俯瞰的な立体構造を容易に把握することができ、目的に応じて両者を選択あるいは組み合わせ形態学的解析を進めることが推奨される。

̶ 98 ̶

ポスター

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-77*
トリフルオロエタノール及びトリフルロアセトアルデヒドを曝露させたメダカの精巣病変○黒田 雄介 1)、木村 真之 1)、早川 知里 1)、林 清吾 1)、竹内 和也 1)、古川 賢 1)、杉山 晶彦 2)
1)日産化学（株） 生物科学研究所、 2)岡山理科大学

獣医学部

獣医学科

【背景・目的】トリフルオロエタノール（TFE）及びトリフルオロアセトアルデヒド（TFALD）は、ラットにおいて精巣病変（精母細胞や精子細胞への傷害等）を誘発することが報告されている。今回、メダカに TFE 及び TFALD を曝露させ、魚類の精巣における影響を病理組織学的に検索した。
（3 〜 6 か月齢）を用いた。被験物質を一定量添加した 2 L の試験液に【材料と方法】実験動物は成熟雄メダカ（Oryzias latipes）
メダカを止水式で飼育した。曝露期間は 8 日間とし、試験液は 2 日に 1 回交換した。曝露濃度に関して TFE は 0、62.5、125、250 及び 500 mg/L（5 匹／群）、TFALD は 0、15.625、31.25、62.5、125 及び 250 mg/L（6 匹／群）を設定した。曝露期間終了後にメダカを安楽殺し、ブアン液で固定後、HE 染色を施し、病理組織学的検索を実施した。
【結果】TFE 曝露群では 125 mg/L で 1 匹死亡、250 mg/L 以上は全匹が死亡又は途中殺となった。TFALD 曝露群では 125 mg/L
以上で全匹が死亡又は途中殺となった。生存動物における病理組織学的検査の結果、TFE 曝露群では 62.5 mg/L 以上、
TFALD 曝露群では 15.625 mg/L 以上で精母細胞及び精子細胞の変性・壊死が認められ、高用量では明らかな精子細胞の減少も認められた。
【結論】今回の検討によって、TFE 及び TFALD はメダカにおいても精巣病変を誘発することが分かった。また、本病変は主に精母細胞及び精子細胞に影響が認められたことから、ラットの精巣病変と同様の機序である可能性が考えられた。

P-78*
網膜毒性発現機序解明における laser capture microdissection の有用性についての検討

第一三共株式会社

安全性研究所【目的】網膜は複数の層から成り、各々の細胞層が毒性標的となりうる。網膜毒性は医薬品開発上の大きな問題であり、毒性回避やリスクアセスメントのために分子生物学的な機序解明が必要となることが多いが、眼球を丸ごと試料として解析
すると層特異的なシグナルの変化がマスクされる可能性がある。そこで、我々は顕微鏡下で任意の組織を採材できる laser
capture microdissection（LCM）が網膜毒性の機序解明に有用であるか、既知網膜毒性物質である N-methyl-N-nitrosourea（MNU）
を用いて検討した。
【方法】7 週齢の雌 Crl:CD（SD）ラットに MNU の 60 mg/kg を単回腹腔内投与し、6 時間後に解剖して眼球を採材した。毒性標的部位である外顆粒層及び杆状体錐状体層を凍結切片から LCM で採取したサンプル（LCM サンプル）と解剖時に目視で水晶体、硝子体及び角膜を取り除いた後に眼球を丸ごと凍結したサンプル（WE サンプル）から RNA を抽出し、GeneChip 解析結果を比較した。
【結果と考察】WE サンプルでは炎症関連遺伝子の発現変動が強くみられた。一方、LCM サンプルでは炎症関連遺伝子の変動は少なかったのに対して複数の解糖系に関連する遺伝子の発現が変動しており、両サンプルの遺伝子変動に差があることが明らかになった。また、WE サンプルには外顆粒層及び杆状体錐状体層が含まれるにも関わらず、LCM サンプルでみられた糖代謝関連遺伝子を初めとする複数の遺伝子の発現がみられなかった。これらのことから、眼球全体をホモジナイ
ズして解析した際には検出できない毒性部位特異的な遺伝子変動が LCM により検出・解析できることが明らかになり、網膜毒性の機序解明に LCM は有用であることが示唆された。

̶ 99 ̶

ポスター○白井 真人、青木 貴志、新野 訓代、藤本 和則、今岡 尚子、甲斐 清徳、森 和彦

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

The 35th Annual Meeting of the JapaneseSociety of Toxicologic Pathology
Date

Jan 31 (Thu) and Feb 1 (Fri), 2019

Venue

Tower Hall Funabori
4-1-1 Funabori, Edogawa-ku, Tokyo 134-0091, Japan
Tel: 03-5676-2211

President

Masami Suzuki(Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.)

Program Committee
Chair
Committee

Dr. Kumiko Ogawa (National Institute of Health Sciences)Dr. Hijiri Iwata (LunaPath LLC)
Dr. Kiyonori Kai (Daiichi Sankyo Co., Ltd.)
Dr. Makoto Shibutani (Tokyo University of Agriculture and Technology)
Dr. Satoru Takahashi (Nagoya City University Graduate School of Medical Sciences)Dr. Masaharu Tanaka (Japan Bioindustry Association)
Dr. Toshihisa Fujiwara (Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.)Dr. Satoshi Furukawa (Nissan Chemical Corporation)
Dr. Toru Hoshiya (BoZo Research Center Inc.)
Dr. Katsuhiko Yoshizawa (Mukogawa Women’s University)

OfficeForerunner Pharma Research Co., Ltd.
The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology
Komaba Open Laboratory, The University of Tokyo
4-6-1 Komaba, Meguro-ku, Tokyo 153-8904
E-mail: jstp35@chugai-pharm.co.jp[Office During Conference]
Tower Hall Funabori
Tel: 03-5676-2211 Fax: 03-5676-2501[Congress Secretariat]
IPEC, INCORPORATION
1-24-12 Sugamo, Toshima-ku, Tokyo 170-0002
Tel: 03-5978-4067 Fax: 03-5978-4068
E-mail: jstp35ip@ipec-pub.co.jp

http://www.ipec-pub.co.jp/35jstp/

̶ 103 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of
Toxicologic Pathology
Table of Contents
Greetings………………………………………………………………………… 105
Access to the Site……………………………………………………………… 106
Floor Plan ……………………………………………………………………… 107
General Information…………………………………………………………… 109
To the Presenters………………………………………………………………… 112
Timetable ……………………………………………………………………… 114
ProgramSpecial Lecture…………………………………………………………… 116
Symposium………………………………………………………………… 116
Workshop………………………………………………………………… 117
IATP Seminar……………………………………………………………… 118
Oral Presentation………………………………………………………… 119
Poster Presentation ……………………………………………………… 120
Abstracts
Special Lecture…………………………………………………………… 137
Symposium………………………………………………………………… 139
Workshop………………………………………………………………… 144
IATP Seminar……………………………………………………………… 148
Oral Presentation………………………………………………………… 149
Poster Presentation ……………………………………………………… 157
Author’s Index…………………………………………………………………… 198

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Greetings
I, Masami Suzuki from the Research Division of Chugai Pharmaceutical Co., Ltd., am honored toserve as President of the 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology, tobe held from Thursday January 31st to Friday February 1st 2019 at Tower Hall Funabori (Edogawaku, Tokyo), together with a Slide Conference and the Commentary Session of the JSTP Diplomat
Examination on Wednesday, January 30th.
Toxicologic pathology deals with the pathological effects on humans of chemical substances, such as
therapeutic drugs, pesticides, and environmental substances. The advantages of pathological evaluation
are that organs, tissues, and cells of the body can be observed and evaluated systemically by a relatively
simple method and that reference to an established body of knowledge makes it possible to infer the
etiology, pathological processes, pathogenesis, and effects on the body as a whole. On the other hand,
it is difficult to pathologically quantify the severity or extent of a lesion, and although the etiology
or mechanism of pathogenesis can be estimated, it is difficult to draw a definitive conclusion from
pathological evaluation.
In recent years, genetic and proteomic expression analysis has advanced sufficiently to enable thechanges in tissues and cells to be studied and understood from a perspective of molecular biology.
In addition, the development of gene editing technologies has made it possible to manipulate theexpression of genes and proteins, to pursue how morphological changes in tissues and cells are related tomolecular biological changes. Furthermore, progress in imaging technologies has now made it possible
to understand the true meaning of a snapshot view of a histological lesion as a spatiotemporal changeof tissues and cells. When these “advances in the field of medicine and biology” are applied to thefield of toxicologic pathology, they will pave new paths that provide insights into the interpretation ofpathological changes, and may supply a means to overcome the weak points of pathological methods.
To this end, the theme we have selected for this year’s meeting is “Advances in medical and biologicalscience applied for toxicologic pathology”. Speakers that are on the cutting edge in the field of gene
expression analysis and imaging techniques have been invited to give special lectures, educational
lectures, and symposiums, and I would be delighted if this event became a driving force for progression
in the field of toxicologic pathology.
Lastly, I am hoping that this meeting will provide a pleasant occasion for participants to interact andexchange opinions, thus allowing the discovery of future visions and purposes in the advancement of
toxicologic pathology. I am sincerely looking forward to welcoming you in Tokyo.

President of the 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Masami Suzuki
Research Division, Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.

̶ 105 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Access to the Site

NaritaUeno

Kinshicho

Shinjuku
BakurochoTokyo

Bakuroyokoyama

Shinagawa

Haneda Airport Terminal 1

Shinbashi
Hamamatsucho

Moto-Yawata

Chiba

Ichinoe

Funabori

JR Sobu Line
JR Sobu Rapid Line
Shinjyuku Line
Tokyo Monorail

Haneda Airport Terminal 2

By Train[From Shinjuku Station]
Take “Toei Subway Shinjuku Line” bound for Motoyawata to Funabori Station (Traveling time; 30-minutes). It is
about one minute walk to the venue from the north exit of Funabori Station.
[From Tokyo Station]
Take “JR Sobu Line (Rapid)” to Bakurocho Station, transfer to Toei Subway Shinjuku Line at Bakuro-yokoyama
Station for Funabori Station.
It is about one minute walk to the venue from the venue from the north exit of Funabori Station.

By Limousine Bus from the Airports[From Haneda Airport (HND)]
Take the airport limousine bus to Toei Subway Shinjuku Line, Ichinoe Station. Then take Toei Subway Shinjuku
Line bound for Shinjuku to Funabori Station (Traveling time: 2-minutes). It is about one minute walk to the venue
from the north exit of Funabori Station.
[From Narita Airport (NRT)]
Take the Keisei bus to Toei Subway Shinjuku Line, Ichinoe Station. Then take Toei Subway Shinjuku Line boundfor Shinjuku to Funabori Station (Traveling time: about 2-minutes). It is about one minute walk to the venue from thenorth exit of Funabori Station.

̶ 106 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Floor Plan
Parking exit

1st Floor
Parking entrance

Information
Entrance Hall

Entrance

2nd Floor

Poster and Exhibition Luncheon Seminarand Banquet-Event hall-(Zuiun or Heian)-Event hall-(Fukujyu or Togen)̶ 107 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Floor Plan
4th Floor

Conference room
(407)

Conference room
(402)
Cloak
(403)
Conference room(404)

Staff room
(405)

Organizer’s office(406)

5th Floor

Lecture-Big hall-

GeneralReception

̶ 108 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

General Information
To the Participant
1.

General Reception will be open from 9:00 am to 6:00 pm on Jan. 31 (Thu) and from 8:45 am to
3:00 pm on Feb. 1 (Fri), and it is located on the 5th floor of Tower Hall.

2. Overseas participants who applied early registration are required to visit the Registration Counter,
5th floor of Tower Hall with the confirmation sheet which sent by E-mail. We accept only cash, nocredit card accepted. Also ticket at the door is available.
3. For on-site registered participants, please fill out the on-site registration form and make thepayment for Registration fees at the on-site registration desk, and wear provided name cards
throughout the congress. Students must present their student IDs.

♦ Member: 12,000 yen ♦ Student Member: 6,000 yen ♦ Non-Member: 18,500 yen*Included abstract book fees (5,000 yen)
Honorary and meritorious members are free of charge. Please come to a General Reception desk on
the day.
4. The abstract book will be mailed to the members in advance, so please bring it on the day.
Extra copies of the abstract book will be available at 2,000 yen for Members, 5,000 yen for NonMembers and 2,000 yen for Students per issue.
5. For questions and discussions, please follow the chairman’s instructions and state your name andaffiliation first by using the provided microphone.
6. Smokings are not allowed inside the venue.
7.

Please turn off your cell phones or set them to be silent mode inside the venue.

8. Free drinks and free Wi-Fi service will be available on the 2nd floor, Poster-Exhibition Room.
9.

Lunch boxes will be provided during luncheon seminars. You can also use restaurants in thevicinity of the venue.

10. Cloakroom
Place: 403, the 4th floor of Tower Hall
Dates and Time: Jan. 31 (Thu) 9:00 - 18:30, Feb. 1 (Fri) 8:45 - 18:30
11. The paging service will not be available in the venue. Please use the message board located at theGeneral Reception, the 5th floor of Tower Hall.
12. Photography and video or sound recording will not be allowed in the venue.
13. For the payment of annual membership fee, new member enrollment, and the alteration
registration, please come to JSTP Secretariat desk (5th ﬂoor of Tower Hall).
Dates and Times: Jan. 31 (Thu) 9:00 - 17:00, Feb. 1 (Fri) 8:45 - 15:00

̶ 109 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

General Assembly and Board of Councillors
Place:
Date and Time:
Agenda:
		
		
		
		

Big Hall, the 5th floor of Tower Hall
Feb. 1 (Fri) 16:10–18:10
Performance and annual review in 2018
Results for the election of Board Members and an introduction of the new Board
Budget and planning for annual Performance in 2019
Recommendation Meritorious Members and Councillors
Election of president for 2021 annual meeting
OthersBig Hall, the 5th floor

Stage
Seats for Board Directors

Seats for Councillors

̶ 110 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Luncheon Seminar[Luncheon Seminar L1]
Place:
Fukuju Event hall, 2F
Date and Time: Jan. 31 (Thu) 12:05–13:00
Title :BIA 10-2474–Preclinical study data, safety evaluation, pharmacokinetic andpharmacodynamic studies
Speaker :Klaus Weber (AnaPath GmbH)
Chairman :Yoshimasa Okazaki (AnaPath GmbH)
Co-sponsor :AnaPath/Safety Alliance[Luncheon Seminar L2]
Place:
Togen Event hall, 2F
Date and Time: Jan. 31 (Thu) 12:05–13:00
Title :
Toxicological point of view on the adversity of histopathological lesions in experimental
animals induced by pharmaceutical drugs
Speaker :Akiyoshi Nishikawa, MD, PhD(Division Director, Clinical Pathology, Saiseikai Utsunomiya Hospital)(Former Director, Biological Safety Research Center, National Institute of Health Sciences)
Chairman :Kunitoshi Mitsumori, DVM, PhD(Professor Emeritus, Tokyo University of Agriculture and Technology)
Co-sponsor :BoZo Research Center Inc.
[Luncheon Seminar L3]
Place:
Fukuju Event hall, 2F
Date and Time: Feb. 1 (Fri) 12:05–13:00
Title :		Historical control data in NOD/Shi-scid, IL-2Rγ KO (NOG) mice
Speaker :Kinji Kobayashi (Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.)
Chairman :Kimiaki Hirakawa (Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.)
Co-sponsor :Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.
[Luncheon Seminar L4]
Place:
Togen Event hall, 2F
Date and Time: Feb. 1 (Fri) 12:05–13:00
Title :
Immunohistochemical Investigations of Biopharmaceutical Distribution,
Immunogenicity and Immune Complex Findings
Speaker :Kevin S. McDorman, DVM, PhD, Diplomate, ACVP
(Corporate Vice President, Global Pathology Services, Charles River)Co-sponsor :Charles River
The ticket for Luncheon Seminar will be distributed at the General Reception, the 5th floor at 9:00 am
on Jan. 31 (Thu) and 8:50 am on Feb. 1 (Fri).

Fellowship Banquet
Place:

Fukujyu and Togen, Event Hall, the 2nd floor of Tower Hall

Date and Time:

Jan. 31 (Thu) 18:30–* The Fellowship Banquet requires Early registration, and on-site registration will be available at
9,000 yen (7,000 yen for students) at the General Reception desk on Jan. 31 (Thu). First come, firstserved. Please note that we may close registration due to limited seating.

̶ 111 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

To the Presenters
In Regards to COI
Please disclose COI (Conf lict of Interest) at your best
knowledge. When you are corporate employees, pleased isplay COI t ags to prevent f rom COI f rom ot he r
corporations. Presenters for Oral Presentation are required
to show COI on the second slide (next to titles). Presenters
for Poster Presentation are required to show COI on the last
position.

Request to Special Lecture, Symposium, Workshop, IATP Seminar andOral Presentation
1.

Data and PCs
Please bring your UBS memory sticks in 30 min. advance at the latest to the PC center (5th floor ofTower Hall). For PC users, please reconfirm your presentation data at a PC center, and bring your PC
to the PC operator ahead on the left side of the venue at least 15 min. before your session.

2. Available PC equipments for presenters are PC projectors ONLY. Please note the followings when
you present your slide by using your own PC.
3. When the prior presenter starts his/her presentation, please sit in the next-presenter seat.
4. The monitor, key board and mouse will be provided on the rostrum. Please operate your PC on the
rostrum by yourself by looking at the screen and use the cursor of the mouse or a laser pointer as apointer.
[Windows]
1) Please bring your USB memory stick or your own PC. (It is recommended to bring personal
USB memory sticks or PCs to avoid any troubles that may be caused by differences in the user
environment.)
2) Windows 7 based PCs with Microsoft Power Point 2010, 2013 and 2016 are available.
3) Please bring USB memory sticks acceptable for windows.
4) Please do not store any other data other than your presentation in your USB memory stick.
5) An irrelevant data will be deleted completely by the congress secretariat.
̶ 112 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology[Macintosh]
1) Please bring your own PCs.
2) No USB memory sticks are allowed.
[Please note the followings in regards to Windows PCs and Macintosh PCs.]
1) Monitor output with a D-sub15 pin is required. If your PC requires an adaptor for D-sub15 pin,please arrange the one on your own. Please note that connections other than D-sub15 pin are notallowed.
2) Please make sure to bring the power cable.
3) Please bring an extra copy of your data in case of any unexpected media problems.
4) Please bring your PC with you when you finish your presentation.

Request to Poster Presenters
1.

Poster Panel size: Height 180 cm and Width 90 cm.
Poster number tags (20 cm × 20 cm) in the upper left side of the poster panel will be provided by
the congress secretariat. Please indicate your abstract title, name, and affiliation in the upper areaof the poster panel. The Placement space for the poster is Height 160 cm and Width 90 cm. The
space for the Poster number should be secured when you place your poster from the top edge.
(Please be careful of the placement to avoid getting difficult to see if your poster would be placed
to the bottom.)Japanese language is acceptable.
Date

Time

Jan 31 (Thu)

17:20-18:10

Feb 1 (Fri)

15:10-16:00

2. Please come to the 2nd floor, Poster-Exhibition
Room when displaying posters.
20 cm

3. Pushpins and presenter’s ribbons are available

20 cm

70 cm

PosterNo.

Abstract title・Name・
Affiliationfor each poster panels. Please wear it during
Q&A.
4. Please proceed your presentations by chairman’s
instructions.
10 min are allowed for each presenters (5 min forpresentation and 5 min for Q&As).
Please be strict to your presentation time.

160 cmPlacement Space
for Poster

90 cm

̶ 113 ̶180 cmThe 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Timetable
Jan. 31 (Thu)Jan. 30 (Wed)
LectureMeetings/
BanquetLecturePoster/Exhibition

Open

Postersetup

Luncheon seminar/
Banquet

8:45
9:00
9:00-

10:00

9:00-10:00

Opening
ceremony
9:55-

Oral
presentation

11:00

10:00-11:50

12:00

Luncheonseminar

Editorialcommittee

Educational
committee

14:00

15:00

12:05-13:00

12:00-13:30(2F: Togen)

13:00

31st Slide
conference

Symposium 1

13:45-14:45(conference room 402)

Posterviewing/
Exhibition

13:10-15:10

12:30-17:30

Speciallecture1

16:00

Board meeting
15:00-18:00(conference room 402)

17:00

15:15-16:15

IATP
Seminar
16:20-17:10

Posterpresentation I
18:00

19:00

20:00

17:20-18:10

Explanation of
exam questions
18:00-19:00

Globalpresident’s
meeting

Banquet18:30-20:30

19:00-20:00

21:00

̶ 114 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Timetable
Feb. 1 (Fri)
Lecture
8:45
9:00

10:00

11:00

Poster/Exhibition

LuncheonseminarMeeting

Posterviewing/
Exhibition

LuncheonseminarInternational
Terminology Committee
12:00-13:00(conference room 402)

Open
8:45-

Symposium 2
9:00-10:50

Speciallecture 2

10:55-11:55

12:00

13:00

14:00

12:05-13:00

Workshop
13:10-15:00

15:00

Posterpresentation II
15:10-16:00

16:00

17:00

Board of Councillors
The General assemblyAwards ceremony
Closing ceremony

Posterremoval
16:00-17:00

16:10-18:10

18:00

19:00

20:00

21:00

̶ 115 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

ProgramSpecial lecture 1
Day 1, January 31, Thursday

15:15 - 16:15

Lecture (Big hall 5F)
Chair: Masami Suzuki (Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.)

SL-1

Mutational Processes in Human Cancer
Hiroyuki Aburatani
Genome Science Division, Research Center for Advanced Science and Technology, The University of Tokyo

Special lecture 2
Day 2, February 1, Friday

10:55 - 11:55

Lecture (Big hall 5F)
Chair: Kumiko Ogawa (National Institute of Health Sciences)

SL-2

Next generation toxicologic pathology by innovative bio-Imaging techniques
Takeshi Imamura
Department of Molecular Medicine for Pathogenesis, Ehime University Graduate School of Medicine

Symposium 1
Day 1, January 31, Thursday

13:10 - 15:10

Lecture (Big hall 5F)

Chair: Satoru Takahashi (Nagoya City Univ. Grad. Sch. Med. Sci.)		
Masaharu Tanaka (Japan Bioindustry Association)

Advancement of pathological analysis
S1-1

Tissue clearing technique in analysis for morphology○ Masaki Yamazaki
Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.

S1-2

Utilization of magnetic resonance imaging (MRI) in histopathological evaluation○ Yoshikazu Taketa
Tsukuba Drug Safety, Biopharmaceutical Assessments Core Function Unit, Eisai Co., Ltd.

S1-3

Application of imaging mass spectrometry for toxicity assessment○Akane Kashimura1), Hiroko Sato1), Kouji Tanaka2), Tomoya Akashi2), Yuko Ono1),
Keisuke Yoshikawa1), Nobuyuki Baba1), Hidefumi Kaji3), Masaharu Tanaka4)
1)

Safety Research Laboratories, Mitsubishi Tanabe Pharma Co., 2)DMPK Research Laboratories,
Mitsubishi Tanabe Pharma Co., 3)LSI Medience Co., 4)Japan Bioindustry Association

S1-4

Application of artificial intelligence to pathological examination -Current status and future direction○ Kiyonori Kai1), Takuma Tsuchiya2), Kazuki Iwamoto3), Kazumi Hakamata4,5)
1)

S1-5

Daiichi Sankyo Co., Ltd., 2)Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd., 3)Fujitsu Limited, 4)Sysmex Corporation, 5) LPixel Inc.

Pathologic diagnosis of human soft tissue tumors by detection of chimeric fusion gene
○ Takayuki Nojima
Departments of Orthopedic Surgery and Pathology, Kanazawa University

̶ 116 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Symposium 2
Day 2, February 1, Friday

9:00 - 10:50

Lecture (Big hall 5F)

Chair: Katsuhiko Yoshizawa (Mukogawa Women's University)
		Makoto Shibutani (Tokyo University of Agriculture and Technology Graduate School)

Progress and its application of the newly developed in vivo, in vitro models
S2-1

An application of mouse normal tissue-derived organoids to chemical carcinogenesis research○ Toshio Imai
Department of Animal Experimentation, National Cancer Center Research Institute

S2-2

Induction of human immune reactions in humanized NOG mice and the application○ Takeshi Takahashi
Central Institute for Experimental Animals

S2-3

Lesson from autophagy-deficient mouse models○ Masaaki Komatsu
Department of Physiology, Juntendo University School of Medicine

S2-4

Establishment of a mouse model of urinary stone formation and the model-utilized genetic
researches○Atsushi Okada, Yutaro Tanaka, Teruaki Sugino, Rei Unno, Kazumi Taguchi, Shuzo Hamamoto,
Ryosuke Ando, Keiichi Tozawa, Kenjiro Kohri, Takahiro Yasui
Department of Nephro-urology, Nagoya City University Graduate School of Medical Sciences

Workshop
Day 2, February 1, Friday

13:10 - 15:00

Lecture (Big hall 5F)

Chair: Satoshi Furukawa (Nissan Chemical Corporation)
		Toru Hoshiya (BoZo Research Center Inc.)

Understanding for the basic histological findings in toxicity studies
W-1

Tumor in carcinogenicity study○ Yuko Yamaguchi, Seiki Yamakawa, Mariko Nagatani, Shinichiro Ikezaki, Toru Hoshiya
BoZo Research Center Inc.

W-2

Gastric lesions to take note of in toxicity evaluationIs that an effect of the test substance?
○Junko Sato
LSI Medience Corporation

W-3

Cardiac and hepatic changes related to reduced food consumption and diurnal variation○ Saori Matsuo
Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.

W-4

Arteritis in toxicity study, spontaneous or drug induced○ Toshihisa Fujiwara
Shin Nippon Biomedical Laboratories, LTD.

̶ 117 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Workshop
Day 2, February 1, Friday

13:10 - 15:00

Lecture (Big hall 5F)

Chair: Toshihisa Fujiwara (Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.)		
Hijiri Iwata (LunaPath LLC)

Understanding for the basic histological findings in toxicity studies
W-5

Stress and adrenal glands○Akira Inomata
Pharmaceutical & Healthcare Research Laboratories, Fujifilm Corporation

W-6

Toxicological Assessment Issues in Immature Reproductive System of Non-Rodent Animals○ Hirofumi Hatakeyama1), Saki Inoue1), Jun Watanabe1), Yoshihiro Takei1), Haruko Koizumi1),
Tetsuyo Kajimura1), Shin-ichi Sato1), Hijiri Iwata2)
1)

W-7

Ina Research Inc., 2)LunaPath LLC

Considerations and evaluation for basic lung pathological lesions caused by the intratracheal
instillation○ Takamasa Numano, Taiki Sugiyama, Mai Morioka, Kazunari Uda, Yuko Doi, Mayumi Kawabe,
Yukinori Mera, Seiko Tamano
DIMS Institute of Medical Science, Inc.

W-8

Pathological Indicators for Reflux-Related Changes in Oral (Gavage) Studies○ Klaus Weber
AnaPath GmbH, Switzerland, Eurofins/ BSL BIOSERVICE Scientific Laboratories Munich GmbH

IATP Seminar

Molecular Pathogy

Day 1, January 31, Thursday

16:20 - 17:10

Lecture (Big hall 5F)
Chair: Kiyonori Kai (Daiichi Sankyo Co., Ltd.)IATP

The Toolbox for Molecular Pathology
Darlene Dixon, DVM, PhD, DACVP, FIATP
Molecular Pathogenesis Group, National Toxicology Program (NTP) Laboratory, National Institute ofEnvironmental Health Sciences, Research Triangle Park, North Carolina, USA

̶ 118 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Oral presentation I
Day 1, January 31, Thursday

10:00 - 10:50

Lecture (Big hall 5F)

Chair: Masanao Yokohira (Kagawa University)		
Mitsuru Kuwamura (Osaka Prefecture University)

O-01

Effects of nicotine on rat urinary bladder carcinogenesis○ Shugo Suzuki, Hiroyuki Kato, Satoshi Fuji, Aya Naiki-Ito, Satoru Takahashi
Dept. Exp. Pathol. Tumor Biol., Nagoya City Univ.

O-02* Study on toxicity and carcinogenic promoting effect to bladder of o-Acetoacetotoluidide○ Nao Yukimatsu, Takahiro Okuno, Min Gi, Masaki Fujioka, Anna Kakehashi, Hideki Wanibuchi
Department of Pathology, Osaka City University Graduate School of Medicine

O-03

Histological and functional changes in the thyroid in rats neonetally exposed to X-rays○ Nariaki Fujimoto1), Mutsumi Matsuu-Matsuyama2), Masahiro Nakashima2)
1)

RIRBM, Hiroshima University, 2)ABDI, Nagasaki University

O-04* Expression characteristics of genes hypermethylated and downregulated specifically to nongenotoxic hepatocarcinogens in analysis in other hepatocarcinogens○ Yuko Ito1,2), Kota Nakajima1,2), Yasunori Masubuchi1,2), Satomi Kikuchi1), Fumiyo Saito3),
Yumi Akahori3), Toshinori Yoshida1), Makoto Shibutani1)
1)

LVP, TUAT, 2)UGSVS, Gifu Univ., 3)Chem. Eval. Res. Inst.

Oral presentation II
Day 1, January 31, Thursday

10:50 - 11:50

Lecture (Big hall 5F)

Chair: Min Gi (Osaka City University)
		Kiyokazu Ozaki (Setsunan University)

O-05

Premetastatic niche formation in the lymph nodes of a metastatic mouse mammary cancer model○ Masa-Aki Shibata, Yuko Ito, Yoshihisa Tanaka, Hitomi Hamaoka, Yoichi Kondo
Dept. of Anatomy and Cell Biology, Div. of Life Sci, Osaka Medical College

O-06* Chemotherapeutic effects of luteolin on castration-resistant prostate cancer through inhibition ofandrogen receptor splice variant○Aya Naiki-Ito1,2), Hiroyuki Kato1), Shugo Suzuki1), Satoru Takahashi1)
1)

O-07

Dept. Exp. Path. Tumor Biol., Nagoya City Univ., 2)Path. Div., Nagoya City East Med. Ctr.

Effect of Dibutyltin on Placental and Fetal Toxicity in Rat○ Satoshi Furukawa1), Naho Tsuji1), Yoshiyuki Kobayashi2), Seigo Hayashi1), Masayoshi Abe1),
Yusuke Kuroda1), Chisato Hayakawa1), Kazuya Takeuchi1), Akihiko Sugiyama3)
1)

Biological Research Laboratories, Nissan Chemical Corporation, 2)Chemical Research Laboratories,
Nissan Chemical Industries, 3)Veterinary Clinical Pathology, Faculty of Veterinary Medicine,
Okayama University of Science

O-08

Effects of antioxidants on acute toxicity of silver nanoparticles intraperitoneally administeredin BALB/c mice
○ Young-Man Cho, Yasuko Mizuta, Jyun-ichi Akagi, Takeshi Toyoda, Tetsuya Ide, Kumiko Ogawa
Division of Pathology, National Institute of Health Sciences̶ 119 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

O-09

Application of toxicogenomics in next generation preclinical and lot release testing for influenza
vaccine and adjuvant○ Takuo Mizukami1), Yuki Hiradate1), Eita Sasaki1), Haruka Momose1), Keiko Furuhata1),
Hideki Kusunoki1), Hideki Asanuma2), Isao Hamaguchi1)
1)Department of Safety Research on Blood and Biologicals, National Institute of Infectious Diseases,
Influenza Virus Research Center, National Institute of Infectious Diseases

2)

Poster presentation I
Day 1, January 31, Thursday

17:20 - 18:10

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)
Chair: Akihiro Hirata (Gifu University)
Akira Inomata (Fujifilm Corporation)

Nervous system 1
P-01

Examination neurotoxicity of mouse treated with administration of reserpine○ Makoto Sato, Yui Terayama, Yukari Nishimura, Takuma Tsuchiya, Takayasu Moroki, Keisuke Kitaura,
Satoshi Matsumoto, Tsuyoshi Yoshikawa
Nonclinical Research Center Tokushima Research InstituteP-02* Effect of developmental exposure to sterigmatocystin on adult neurogenesis of the hippocampal
dentate gyrus in rats
○ Kota Nakajima1,2), Yuko Ito1,2), Yasunori Masubuchi1,2), Satomi Kikuchi1), Toshinori Yoshida1),
Yoshiko Sugita-Konishi3), Makoto Shibutani1)
1)

LVP, TUAT, 2)UGSVS, Gifu Univ., 3)LFSS, Azabu Univ.

P-03* Exposure to alpha-glycosyl isoquercitrin from gestational stage to adult stage facilitates fear
extinction learning in rats
○ Yasunori Masubuchi1,2), Kota Nakajima1,2), Yuko Ito1,2), Satomi Kikuchi1), Mihoko Koyanagi3),
Shim-mo Hayashi3), Toshinori Yoshida1), Makoto Shibutani1)
1)

LVP, TUAT, 2)UGSVS, Gifu Univ., 3)San-Ei Gen F.F.I., Inc.

P-04* A case of neuromelanosis in the brain of a cynomolgus monkey○Airo Yukawa, Akiko Moriyama, Ichiro Nagata, Kinji Kobayashi, Yutaka Chihaya
Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.

Poster presentation II
Day 2, February 1, Friday

15:10 - 16:00

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Shinji Takasu (National Institute of Health Sciences)		
Takahisa Noto (Santen Pharmaceutical Co., Ltd.)

Nervous system 2
P-05* Histopathological analysis of an extraocular orbital tumor induced by single intravitreal injectionof nickel subsulfide (Ni3S2) in a Fischer rat○ Yoshinori Yamagiwa1,2), Miki Masatsugu1), Haruna Tahara1), Shingo Nemoto1), Masaaki Kurata1),
Hiroshi Satoh 2)
1)

Central Research Laboratories, Senju Pharmaceutical Co., Ltd., 2)Veterinary Pharmacology and Toxicology
Laboratory, Graduate School of Veterinary Sciences, Iwate University

̶ 120 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-06

A case of traumatic porencephaly with optic organ abnormality in beagle dog○ Osamu Hashiguchi, Shinichiro Ikezaki, Tsubasa Saito, Saori Igura, Tomomi Nakazawa,
Kenichiro Kasahara, Yuko Yamaguchi
Pathology Department, BoZo Research Center Inc.

P-07* Inhibitory Effects of Chitosan Oligosacchride Supplementation on Retinal Degeneration Models○ Chihiro Koyama1), Akiko Takenouchi1), Akane Kanase1), Yuri Yukimitsu1), Yuko Emoto2),
Takako Noguchi3), Seiji Kurozumi3), Kimihiko Sato3), Yoshiharu Okamoto4), Katsuhiko Yoshizawa1)
1)
3)

Department of Food Sciences and Nutrition, Mukogawa Women’s University, 2)Kansai Medical University,
Koyo Chemical Co., Ltd., 4)Veterinary Medicine, Tottori University

P-08* Histological Characterization of Spontaneous Lesions Occurring in the Pars Intermedia and Pars
Posterior of the Rat Pituitary Gland○ Yoshitaka Katoh, Tsuyoshi Ito, Aya Koyama, Naofumi Takahashi, Atsushi Shiga, Yoshimasa Okazaki,
Takanori Harada
The Institute of Environmental Toxicology

Poster presentation III
Day 1, January 31, Thursday

17:20 - 18:10

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Anna Kakehashi (Osaka City Univ. Grad. Sch. Med.)		
Kaoru Toyosawa (Sumika Chemical Analysis Service, Ltd.)

Oral cavity and GI tract 1
P-09

Effects of co-administration of benzo[a]pyrene and α-naphthoflavone in male C57BL/6J wild-typemice and Polκ-knockout littermates○Jun-ichi Akagi1), Young-Man Cho1), Takeshi Toyoda1), Masayuki Yokoi2,3), Fumio Hanaoka2,4),
Haruo Ohmori2), Kumiko Ogawa1)
1)Div. Pathol., Natl. Inst. Health Sci., 2)Dept. Life Sci., Facl. Sci., Gakushuin Univ., 3)Biosignal Res. Ctr., Kobe Univ.,
Life Sci. Ctr. Surviv. Dynamics, Tsukuba Adv. Res. Alliance, Tsukuba Univ.

4)

P-10*

Comparison of morphology and gene expression profiles between orthotopic and subcutaneoustransplantation of a gastric cancer mouse model○ Saori Matsuo1), Kiyotaka Nakano2), Takashi Nishizawa2), Daisuke Komura3), Etsuko Fujii1,2),
Atsuhiko Kato1), Shin-ichi Funahashi2), Shumpei Ishikawa3), Masami Suzuki1,2)
1)

P-11

Chugai Pharmaceutical Co., Ltd., 2)Forerunner Pharma Research Co., Ltd., 3)Tokyo Medical and Dental University

Anticancer property and mechanisms of a action of newly synthesized drugs○ Saeko Ando1), Katsumi Fukamachi1), Harutoshi Matsumoto1), Naoki Yoshimi2), Masumi Suzui1)
1)

Department of Molecular Toxicology, Granduate School of Medical Science and Medical School, Nagoya City
University, 2)Department of Pathology and Oncology, Faculty of Medicine, University of the Ryukyus

̶ 121 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster presentation IV
Day 2, February 1, Friday

15:10 - 16:00

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Takuya Doi (LSI Medience Corporation)
		
Ryo Ando (Kitasato University)

Oral cavity and GI tract 2
P-12

Hyperglycemia deteriorates malignancy of colon cancer associated with colitis induced byazoxymethane and dextran sodium sulfate in alloxan-induced type-1 diabetic mice
○ Kiyokazu Ozaki, Yuko Izumo, Nanayu Oshima, Yui Terayama, Tetsuro Matsuura
Lab of Pathology, Setsunan University

P-13

Ameliorating effect of Luo hanguo extract on dextran sulfate sodium-induced colitis in mice
○ Shuji Ogawa1), Katsuhiro Miyajima1,2), Karen Nagura2), Minami Nozawa2), Sae Harada2),
Risako Yamaguchi2), Mihoko Koyanagi3), Shim-mo Hayashi3), Atsushi Watanabe1,4),
Noriko Kemuriyama2), Dai Nakae1,2)1)

Dept. Food Nutr. Sci., Grad. Sch. TUA., 2)Tokyo Univ. Agricul., 3)San-Ei Gen F.F.I., Inc., 4)Asahi Kasei Medical
Co., Ltd.

P-14

Gastrointestinal polyps in dogs with germline mutations of APC gene: a canine counterpart ofhuman familial adenomatous polyposis○Akihiro Hirata1), Kyoko Yoshizaki2), Naohito Nishii3), Mifumi Kawabe4), Takashi Mori4),
Tokuma Yanai2), Hiroki Sakai2)
1)

Division of Animal Experiment, Life Science Research Center, Gifu University, 2)Laboratory of Veterinary
Pathology, Faculty of Applied Biological Science, Gifu University, 3)Laboratory of Veterinary Internal Medicine,
Faculty of Applied Biological Science, Gifu University, 4)Laboratory of Veterinary Clinical Oncology, Faculty ofApplied Biological Science, Gifu University

P-15*

Histopathologic study of histiocytic ulcerative colitis in dogs

○ Mizuho Uneyama1), James Chambers1), Ko Nakashima2), Kazuyuki Uchida1), Hiroyuki Nakayama1)
1)Department of Veterinary Pathology, the University of Tokyo, 2)Japan Small Animal Medical Center

Poster presentation V
Day 1, January 31, Thursday

17:20 - 18:10

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Mari Iida (University of Wisconsin-Madison)		Kyoko Nakano-Ito (Eisai Co., Ltd.)

Liver and Pancreas 1
P-16*

Hemorrhagic changes in canine liver and gallbladder induced by liposomal formulations○ Keiko Makita-Suzuki1), Chihaya Kakinuma2), Yoshinori Sakata1), Tatsuya Yamakawa1),
Akira Inomata1), Takefumi Hara1)
1)

Pharmaceutical & Healthcare Research Laboratories, FUJIFILM Corporation, 2)Bioscience & Technology
Development Center, FUJIFILM Corporation

̶ 122 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-17*

Participation of heterogeneous macrophages related to M1/M2 types in D-galactosamine-induced
acute rat liver injury○ Nahid Rahman, Munmun Pervin, Mizuki Kuramochi, Mohammad Karim, Takeshi Izawa,
Mitsuru Kuwamura, Jyoji Yamate
Veterinary Pathology, Osaka Prefecture University

P-18*

The role of damage-associated molecular patterns (DAMPs) for neutrophil and macrophagemigration in thioacetamide (TAA)-induced rat liver injury○ Mizuki Kuramochi, Takeshi Izawa, Rahman Nahid, Mitsuru Kuwamura, Jyoji Yamate
Veterinary Pathology, Osaka Prefecture University

Poster presentation VI
Day 2, February 1, Friday

15:10 - 16:00

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Shugo Suzuki (Nagoya City Univ. Grad. Sch. Med.)		
Hideshi Kaneko (Teijin Pharma Limited)

Liver and Pancreas 2
P-19

Metabolome analysis in the liver tumors and tissues of NASH model TSOD mice
○Anna Kakehashi, Naomi Ishii, Takahiro Okuno, Yoshiyuki Tago, Masaki Fujioka, Min Gi,
Hideki Wanibuchi
Dept. Mol. Pathol., Osaka City Univ. Grad. Sch. Med.

P-20

Effects of Siraitia Grosvenorii Extract on NASH-like lesions in F344 rats fed a choline-deficient,methionine-lowered, L-amino acid-defined diet
○ Kinuko Uno1), Katsuhiro Miyajima1,2), Kanae Suzuki2), Kohei Kikuchi2), Ami Nakai2),
Tsukasa Nagayoshi2), Soon Hui Teoh1), Noriko Kemuriyama2), Mihoko Koyanagi3),
Shim-mo Hayashi3), Shuji Ogawa1), Atsushi Watanabe1), Dai Nakae1,2)
1)

P-21

Dept. Food Nutr. Sci., Grad. Sch., Tokyo Univ. Agricul., 2)Tokyo Univ. Agricul., 3)San-Ei Gen F.F.I., Inc.

Chronological Changes of Serum Parameters in the Course of the Nonalcoholic Steatohepatitislike Lesion in female SDT fatty Rats
○ Kanjiro Ryu1), Katsuhiro Miyajima1,2,3), Soon Hui Teoh 2), Masami Shinohara4), Takeshi Ohta5),
Keiichi Ohata6), Kinuko Uno2), Noriko Kemuriyama3), Shuji Ogawa1), Atsushi Watanabe1,7),
Dai Nakae1,2,3)
1)

Dept Nutr Sci Food Safety, Grad Sch, Tokyo Univ Agricul,, 2)Dept Food Nutr Sci, Grad Sch, Tokyo Univ Agricul,
Dept Nutr Sci Food Safety, Facul Appl Sci, Tokyo Univ Agricul,, 4)Tokyo Animal Diet Dept, CLEA Japan, Inc.,
5)
Biol/Pharmacol Res Lab Central Pharm Res Inst, Japan Tobacco Inc., 6)CMIC HOLDINGS Co., Ltd.,
7)
Asahi Kasei Medical Co., Ltd.
3)

P-22* Effects of Lipid Metabolism-related Gene SREBP-1 on ER Stress and Chronic Inflammation○ Linfeng Gao1), Noriko Kemuriyama2), Natsumi Saito2), Mieko Watanabe2), Ayako Takei2),
Seiya Tazoe2), Kanjiro Ryu1), Kinuko Uno3), Soon Hui Teoh3), Shuji Ogawa3), Atsushi Watanabe3,4),
Katsuhiro Miyajima1,2,3), Dai Nakae1,2,3)
1)

Dept. Nutr. Food Safety, Grad. Sch. Agricul., Tokyo Univ. Agricul., 2)Dept. Nutr. Food Safety, Facul. Appl.
Biosci., Tokyo Univ. Agricul., 3)Dept. Food Nutr. Sci., Grad. Sch. Agricul, Tokyo Univ. Agricul., 4)Asahi Kasei
Medical Co., Ltd.

̶ 123 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster presentation VII
Day 1, January 31, Thursday

17:20 - 18:10

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Mayumi Kawabe (DIMS Institute of Medical Science, Inc.)		
Hiroaki Kawaguchi (Kagoshima University)

Liver and Pancreas 3
P-23

Evaluation of hepatotoxicity in F344 rats after repeated 28-day administration of acetamide○ Yuji Ishii1), Remika Kikuchi1,2), Aki Kijima1), Shinji Takasu1), Kumiko Ogawa1), Takashi Umemura1,2)
1)

Division of Pathology, National Institute of Health Sciences, 2)Faculty of Animal Health Technology, Yamazaki
University of Animal Health Technology

P-24

Suppressive effects of Bear Bile Powder on early hepatocarcinogenesis in SD rats
○ Meilan Jin, Mei Zhang, Qian Tang, Zili Wang, Jian Wang
Laboratory of Veterinary Pathology, College of Animal Science and Technology, Southwest University, China

P-25

Chronic toxicity and carcinogenicity study of diphenylarsinic acid in F344 rat○ Takashi Yamaguchi, Min Gi, Masaki Fujioka, Anna Kakehashi, Hideki Wanibuchi
Department of Molecular Pathology, Osaka City University Graduate School of Medicine

P-26* The kinetics of GST-P positive foci after cessation of treatment with various carcinogens in theliver of rat○ Shinji Takasu1), Kurumi Nakamura1,2), Yui Ishiguro1,2), Yuji Ishii1), Aki Kijima1), Kumiko Ogawa1),
Takashi Umemura1,2)
1)

Division of Pathology, National Institute of Health Sciences, 2)Faculty of Animal Health Technology, Yamazaki
University of Animal Health Technology

Poster presentation VIII
Day 2, February 1, Friday

15:10 - 16:00

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Shinichiro Ikezaki (BoZo Research Center Inc.)		
Satoshi Suzuki (Taiho Pharmaceutical Co., Ltd.)

Liver and Pancreas 4
P-27

Immunohistochemical study on myoepithelial phenotype in canine hepatic tumors○ Mitsuru Kuwamura1), Yuka Tsuji1), Mizuki Kuramochi1), Takeshi Izawa1), Hideo Akiyoshi2),
Jyoji Yamate1)
1)

Laboratory of Veterinary Pathology, Osaka Prefecture University, 2)Laboratory of Veterinary Surgery, Osaka
Prefecture University

P-28* Pathological examination of spontaneous vacuolation of pancreatic acinar cell in mice
○ Kyohei Yasuno1), Saori Igura2), Shinobu Hakamata1), Keiko Okado3), Yuko Yamaguchi2),
Kiyonori Kai1), Kazuhiko Mori1)
1)

Medicinal Safety Research Laboratories, Daiichi Sankyo Co., Ltd., 2)Pathology Department, BoZo ResearchCenter Inc., 3)Translational Research Department, Daiichi Sankyo RD Novare Co., Ltd.

̶ 124 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-29

Pancreatic parabiliary lobe cyst
○ Yuma Yamashita, Tomo Sasaki, Takaaki Doi
Toxicological Research Group, Drug Development Research Laboratories, Maruho Co., Ltd.

P-30* Chemopreventive effects of anti-allergic drug on pancreatic carcinogenesis○ Hiroyuki Kato, Aya Naiki-Ito, Shugo Suzuki, Satoru Takahashi
Dep. Exp. Pathol. Tumor Biol., Nagoya City Univ.

Poster presentation IX
Day 1, January 31, Thursday

17:20 - 18:10

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Naofumi Takahashi (The Institute of Environmental Toxicology)		Norihiro Sato (Asahi Kasei Pharma Corporation)

Urinary system 1
P-31*

SGLT2 Expression in the Kidney of Male SDT Fatty Rats

○ Soon Hui Teoh1), Katsuhiro Miyajima1,2), Yuka Nakamura2), Takeshi Ohta3), Masami Shinohara4),
Kinuko Uno1), Noriko Kemuriyama2), Dai Nakae1,2)1)3)Dept. Food Nutr. Sci., Grad. Sch. Tokyo Univ. Agri., 2)Dept. Nutr. & Food Safety, Tokyo Univ. Agri.,Japan Tobacco Inc., 4)CLEA Japan Inc.

P-32* Spontaneous renal tubular hypertrophy observed in young (11-week) ICR mouse○ Hyun-Ji Choi1), Min-Jung Kong1), Hye-Jeong Kim1), Masami Suzuki2), Hijiri Iwata3), Chan-Hee Park1)
1)

C&C Research Laboratories, 2)Chugai Pharmaceutical Co., Ltd., 3)LunaPath LLC

P-33* Inhibitory Effects of Mead Acid Supplementation on Acetaminophen-Induced Renal Toxicity in Rats
○Akiko Takenouchi1), Miyu Hiratsuka1), Maria Miura1), Yumiko Shinke1), Yukari Hirayama1),
Chihiro Koyama1), Yuichi Kinoshita2), Kei Hamazaki3), Katsuhiko Yoshizawa1)
1)

Department of Food Sciences and Nutrition, School of Human Environmental Sciences, Mukogawa Women’s
University, 2)Division of Diagnostic Pathology, Wakayama Medical University Hospital, 3)Department of Public
Health, Faculty of Medicine, University of Toyama

P-34* Histological findings in minipigs fed with high-cholesterol and high-sodium diet
○ Shiori Murase, Masami Kato, Takahito Imaizumi, Tsuyoshi Arai, Yoshiyasu Konuma,
Hisami Matsushita, Katsumi Endo, Tsuneo Koike, Tomomi Kanehara, Jun Imai, Tadashi Itoh,
Hitoshi Kimura
Nihon Bioresearch Inc.

̶ 125 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster presentation X
Day 2, February 1, Friday

15:10 - 16:00

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Katsuhiro Miyajima (Tokyo University of Agriculture)		Miwa Takahashi (Astellas Pharma Inc.)

Urinary system 2
P-35* A spontaneous hyaline glomerulopathy in a young Crl:CD1(ICR) mouse○ Hironobu Nishina, Akane Kashimura, Mao Mizukawa, Katsuya Fujiki, Yuuichi Murakami,
Nobuyuki Baba, Eisuke Kume
Safety Research Laboratories, Sohyaku. Innovative Research Division, Mitsubishi Tanabe Pharma Co., Ltd.

P-36* The dose and time dependency of γ-H2AX formation induced by bladder carcinogens○ Takanori Yamada1,2), Takeshi Toyoda1), Kohei Matsushita1), Tomomi Morikawa1), Kumiko Ogawa1)
1)

P-37

Div. Pathol., Natl. Inst. Health Sci., 2)Lab. Vet. Pathol., Tokyo Univ. Agri. Tech.

Evaluation of inhibitory effects of acetazolamide on the mouse bladder carcinogenesis○ Min Gi, Masaki Fujioka, Nao Yukimatsu, Takahiro Okuno, Takashi Yamaguchi, Anna Kakehashi,
Hideki Wanibuchi
Department of Molecular Pathology, Osaka City University Graduate School of Medicine

P-38

Gene expression analysis in the early stage of bladder carcinogenesis and search for novel
biomarkers of bladder carcinogen○ Takeshi Toyoda1), Takanori Yamada1,2), Kohei Matsushita1), Tomomi Morikawa1), Kumiko Ogawa1)
1)

Division of Pathology, National Institute of Health Sciences, 2)Laboratory of Veterinary Medicine,Tokyo University of Agriculture and Technology

Poster presentation X I
Day 1, January 31, Thursday

17:20 - 18:10

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Yuichi Murakami (Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation)
		Yuko Yamaguchi (BoZo Research Center Inc.)

Respiratory system 1
P-39* Time-dependent analysis of peumotoxicity caused by repeated oral administration of Cisplatin
in rats○ Yui Terayama, Makoto Sato, Yukari Nishimura, Takuma Tsuchiya, Takayasu Moroki, Keisuke Kitaura,
Tsuyoshi Yoshikawa
Nonclinical Research Center, Tokushima Research Institute, Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd.

P-40* Effects of administration volume on bronchoalveolar lavage fluid test and histopathologicalfindings in rat treated with bleomycin intratracheally○ Taiki Sugiyama, Mai Morioka, Takamasa Numano, Hitomi Higuchi, Mayumi Kawabe, Yukinori Mera
DIMS Institute of Medical Science, Inc.

̶ 126 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-41

Diagnostic Investigation of Bleomycin-Induced Lung Toxicity in Cynomolgus Monkeys○ Kazuyoshi Kumagai, Ken Sakurai, Yu Maeda, Hiroko Kataoka, Satoshi Tamai, Kumi Honda,
Tetsuya Ohsawa, Katsuyoshi Chiba, Kiyonori Kai, Kazuhiko Mori
Medicinal Safety Research Laboratories, Daiichi Sankyo Co., Ltd.

P-42* Effects of the expectorant drug, ambroxol hydrochloride, on chemically induced lung inflammatory
and proliferative lesions in rodents○ Shota Yoshida1,2), Masanao Yokohira1), Keiko Yamakawa1), Yuko Narusawa1), Shohei Kanie2),
Nozomi Hashimoto1), Katsumi Imaida1)
1)
2)

Onco-Pathology, Department of Pathology and Host Defense, Faculty of Medicine, Kagawa University,
Toxicology Laboratory, Discovery and Preclinical Research Division, TAIHO Pharmaceutical Co., Ltd.

Poster presentation X II
Day 2, February 1, Friday

15:10 - 16:00

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Noriko Tsuchiya (Shionogi & Co., Ltd.)		Hiroshi Satoh (Iwate University)

Respiratory system 2
P-43* Epigenetic modification abnormality in lung carcinogenesis in mice transplacental exposure oforganic arsenic compound Dimethylarsinic acid
○ Masaki Fujioka, Min Gi, Takahiro Okuno, Nao Yukimatsu, Anna Kakehashi, Yuji Oishi,
Hideki Wanibuchi
Osaka City University Graduate School of Medicine

P-44

The promotion effects of lung tumor with Insulin-like growth factor-1, IGF-1, expression by left
pulmonary ligation in rodents○ Masanao Yokohira, Nozomi Hashimoto, Keiko Yamakawa, Yuko Narusawa, Katsumi Imaida
Onco-Pathology, Faculty of Medicine, Kagawa University

P-45* The effects of progesterone inhibitor (mifepristone) on lung tumorigenesis in female A/J mice
○ Yuko Narusawa, Masanao Yokohira, Keiko Yamakawa, Nozomi Hashimoto, Shota Yoshida,
Katsumi Imaida
Onco-Pathol., Fac. Med., Kagawa Univ.

P-46

Histopathological characteristics of mesothelin-positive proliferative lesions in the lung of rats
treated with DHPN
○ Yoshimitsu Sakamoto1), Yukie Tada1), Motoki Hojo1), Ai Maeno1), Tosinari Suzuki1), Akiko Inomata1),
Takako Moriyasu1), Dai Nakae2)
1)

Tokyo Metropol. Inst. Pub. Health, 2) Tokyo Univ. Agricul.

̶ 127 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster presentation X III
Day 1, January 31, Thursday

17:20 - 18:10

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Akihito Shimoi (Ina Research Inc.)		
Daisuke Hibi (ONO Pharmaceutical Co., Ltd.)

Reproductive system
P-47

Male SD rats exposed in utero to di(n-butyl)phthalate: investigation of deferent duct

○ Mitsuru Sugiyama1), Yuya Okayama1), Hiroyuki Takahashi2), Masahiro Ikegami2), Tomoko Muto3),
Shin Wakui1)
1)

Department of Toxicology, Veterinary Medicine, Azabu University, 2)Department of Pathology, The Jikei Univ.
Sch. Med., 3)Food and Drug Safety Center

P-48* True hermaphroditism in a SD rat○ Hiromu Okano, Mizuho Takagi, Isamu Suzuki, Shiori Fujiwara, Mariko Nagatani, Yuko Yamaguchi
Pathology Department, BoZo Research Center Inc.

P-49* A Case of Epithelial Plaque in the Uterus of a Non-Pregnant Cynomolgus Monkey○ Haruno Yabuki, Airo Yukawa, Akiko Moriyama, Kinji Kobayashi
Drug Safety Research Laboratories, Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.

P-50

Morphological difference of mammary adenomas and adenocarcinomas between CD-1 andB6C3F1 mice
○ Hiroko Kokoshima, Takuya Doi, Minoru Tsuchitani
LSI Medience Corporation

Poster presentation X IV
Day 2, February 1, Friday

15:10 - 16:00

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Kinji Kobayashi (Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.)		
Hiroko Sato (Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation)

Cardiovascular and Hematolymphoid system 1
P-51

Development of ultra-short term atherosclerosis model induced by nitric oxide synthases inhibitorin Microminipig○ Hiroaki Kawaguchi1), Akihide Tanimoto2)
1)

Department of Hygiene and Health Promotion Medicine, Kagoshima University Graduate School of Medical and
Dental Sciences, 2)Department of Pathology, Kagoshima University Graduate School of Medical and Dental Sciences

P-52

Histopathological Investigation of a Minipig Who Died of Acute Hemorrhagic Gastritis○ Sumiko Okuda, Hirotoshi Akane, Hiro Eda, Atsuko Ichikawa, Shigekazu Shimizu, Yasuki Akie
CMIC Pharma Science Co., Ltd.

̶ 128 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-53* Healing after vascular grafting in the thoracic aorta of beagle dogs

○ Takato Matsuda1), Hisako Terao1), Kazuha Maeda1), Masako Tasaki1), Junko Souba1), Atsushi Isobe1),
Kasuke Nagano2), Kimimasa Kazuno1), Hitomi Hagiwara1)
1)

Terumo Corporation, 2)Nagano Toxicologic-Pathology Consulting

P-54* A case of spontaneous hypertrophic cardiomyopathy in cynomolgus macaque(Macaca fascicularis)○ Shizuka Konishi, Yuki Numakura, Masaaki Koga, Takashi Kotera, Makoto Ueda
Pharmacokinetics and Safety Assessment Dept., Nippon Shinyaku CO., LTD.

Poster presentation X V
Day 1, January 31, Thursday

17:20 - 18:10

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Takeshi Toyoda (National Institute of Health Sciences)
		
Atsuko Murai (Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.)

Cardiovascular and Hematolymphoid system 2
P-55

Spontaneous globule leukocyte tumor with inflammatory reaction in a Wistar Hannover rat○Junko Sato, Yuki Tomonari, Takuya Doi, Minoru Tsuchitani
LSI Medience Corporation

P-56

Immunohistochemical characteristics of cytokeratin expression in epithelial type thymoma andthymic epithelial hyperplasia○ Yuki Tomonari, Junko Sato, Tetsuro Kurotaki, Naoaki Yamada, Kazufumi Kawasako, Takuya Doi,
Takeshi Kanno, Minoru Tsuchitani
Pathology Department, LSI Medience Corporation

P-57* Ectopic striated muscle of the thymus in a SD rat○ Ryosuke Kobayashi1), Yuki Tomonari1), Yui Akagawa2), Akio Sekiya1), Hiroko Kokoshima1),
Takuya Doi1), Takeshi Kanno1), Minoru Tsuchitani1)
1)

Pathology Department, Nonclinical Research Center, LSI Medience Corporation, 2)Kashima Safety Assessment
Department A, Nonclinical Research Center, LSI Medience Corporation

̶ 129 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster presentation XVI
Day 2, February 1, Friday

15:10 - 16:00

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Hisashi Anayama (Takeda Pharmaceutical Co., Ltd.)		
Takeshi Kanno (LSI Medience Corporation)

Miscellaneous 1
P-58

Selective chemonucleolysis with condoliase in cynomolgus monkeys○ Yuka Minamisawa, Dai Muramatsu, Hiroaki Yamaguchi, Aisuke Nii
SEIKAGAKU CORPORATION

P-59* A 90-day repeated oral dose toxicity study of 2,4-dimethyl-4-phenyltetrahydrofuran and thedetermination of its isomer abundance ratio○ Tetsuya Ide1), Yasuko Mizuta1), Young-Man Cho1), Jun-ichi Akagi1), Naoko Masumoto2),
Naoki Sugimoto2), Kyoko Sato2), Kumiko Ogawa1)
1)

Division of Pathology, National Institute of Health Sciences, 2)Division of Foods Additives, National Institute of
Health Sciences

P-60* Investigation of toxicological profiles of 1,3-dichloro-2-propanol in 28 days repeated dose study
in F344 rats
○ Kohei Matsushita, Takeshi Toyoda, Tomomi Morikawa, Takanori Yamada, Kumiko Ogawa
Division of Pathology, National Institute of Health Sciences

P-61*

A 90-Day Repeated Oral Dose Toxicity Study of 5-methyl-2-phenyl-2-hexenal in F344 Rats

○ Kenji Nakamura1), Aki Kijima1), Yuji Ishii1), Shinji Takasu1), Kumiko Ogawa1), Takashi Umemura1,2)
1)Div. Pathology, NIHS, 2)Faculty of Animal Health Technology, Yamazaki University of Animal Healty
Technology

Poster presentation XVIIDay 1, January 31, Thursday

17:20 - 18:10

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Tomo Sasaki (Maruho Co., Ltd.)		
Junko Shinozuka (Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.)

Miscellaneous 2
P-62

Histopathological examination of tumorigenicity study of HeLa cells in immunodeficient mice
(NOG, NOD SCID and nude mice)○ Takafumi Oshikata, Yumi Wako, Mikio Mitsuishi, Masao Hamamura
Pathology Department, LSI Medience Corporation

P-63* Spontaneous subcutaneous epithelial tumors in NOG Mice: A report of 2 cases○Angeline Ping Ping Teh1), Yukino Machida1,2), Naoaki Uchiya1), Toshio Imai1)
1)

Ctr. Anim. Div., Natl. Cancer Ctr. Res. Inst., 2)Dept. Vet. Pathol., Nippon Vet. Life Sci. Univ.

̶ 130 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-64* Two cases suspected as anaplastic zymbal’s gland carcinomas in aged F344 rats

○Ai Maeno1), Yoshimitsu Sakamoto1), Motoki Hojo1), Katsuhiro Yuzawa1), Yuko Hasegawa1),
Toshinari Suzuki1), Akiko Inomata1), Takako Moriyasu1), Noriko Kemuriyama2),
Katsuhiro Miyajima2), Dai Nakae2)
1)

Department of Pharmaceutical and Environmental Sciences, Tokyo Metropolitan Institute of Public Health,
Department of Nutritional Science and Food Safety, Faculty of Applied Biosciences, Tokyo University of Agriculture2)

P-65* Spontaneous basal cell carcinoma with ductal differentiation in the rat salivary gland○ Tomoya Sano1), Hitoshi Kandori2), Yoko Hara3)
1)

Drug Safety Research Laboratories, Takeda Pharmaceutical Company Limited, 2)Axcelead Drug Discovery
Partners Inc., 3)Department of Agriculture, Livestock Hygiene Research Office, Shimane Prefecture

Poster presentation XVIII
Day 2, February 1, Friday

15:10 - 16:00

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Masako Imaoka (Daiichi Sankyo Co., Ltd.)		Yuzo Yasui (Japan Tobacco Inc.)SEND and INHAND
P-66

INHAND: International Harmonization of Nomenclature and Diagnostic Criteria for Lesions- An Update - 2019
○ Shim-mo Hayashi1), A Bradley2), DG Goodman3), Takanori Harada4), R Herbert5), Hijiri Iwata6),
M Jacobsen7), CM Keenan8), R Kellner 9), B Mahler5), E Meseck10), T Nolte11), S Rittinghausen9),
C Ruehl-Fehlert12), J Vahle13), Katsuhiko Yoshizawa14)
1)

Global Scientific and Regulatory Affairs, San-Ei Gen F. F. I., Inc., 2)Charles River, 3)Independent Consultant,
The Institute of Environmental Toxicology, 5)NIEHS, 6)LunaPath LLC, 7)AstraZeneca, 8)CM Keenan ToxPath
Consulting, 9)Fraunhofer ITEM, 10)Novartis Institute for Biomedical Research, 11)Boehringer Ingelheim PharmaGmbH & Co. KG, 12)Bayer AG, 13)Eli Lilly & Co., 14)Department of Food Sciences and Nutrition, School of
Human Environmental Sciences, Mukogawa Women’s University

4)

P-67

Example of SEND Implementation in Pharmaceutical Company -Establisent of Histopathological
Examination System for SEND○ Izumi Matsumoto, Tomoaki Tochitani, Mami Kochi, Yuta Fujii, Yuka Yoshino, Izuru Miyawaki
Preclinical Research Unit, Sumitomo Dainippon Pharma Co., Ltd.

P-68

Creation of a histopathological glossary using INHAND nomenclature modified CDISC SENDCT
according to the SENDIG v3.1
○ Kochi Kakimoto1), Kouichi Suwa2), Hiroshi Edamoto1), Seiki Yamakawa1), Yuko Yamaguchi1),
Toru Hoshiya1)
1)

Department of Pathology, Gotemba Laboratories, BoZo Research Center Inc., 2)Department of Information
System, Gotemba Laboratories, BoZo Research Center Inc.

P-69

Changes of pathological terminology of CDISC SEND CT in 2018 and comparison with INHAND
terminology○ Saki Inoue1), Hirofumi Hatakeyama1), Haruko Koizumi1), Shin-ichi Horikawa1), Shin-ichi Sato1),
Takayuki Anzai2), Hijiri Iwata2)
1)

Ina Research Inc., 2)LunaPath LLC

̶ 131 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster presentation XIX
Day 1, January 31, Thursday

17:20 - 18:10

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Norimitsu Shirai (Pfizer Inc.)		
Takayasu Moroki (Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd.)AI and MorphometryP-70

A questionnaire survey on the image analysis of the digital pathology technology ofpharmaceutical companies○ Tsuyoshi Yoshikawa1,2), Yasushi Horai1,3), Yoshiji Asaoka1,4), Takanobu Sakurai1,5),
Satomi Kikuchi1,6), Makiko Yamaoka1,7), Masaharu Tanaka1,3,8)
1)

R&D Committee, Japan Pharmaceutical Manufacturers Association (JPMA), 2)Tokushima Research Institute,
Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd., 3)Sohyaku. Innovative Research Division, Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation,
4)
Research Laboratory for Development, Shionogi & Co., Ltd., 5)Drug Safety and Pharmacokinetics Laboratories,
Taisho Pharmaceutical Co., Ltd., 6)DMPK and Safety Assessment, Research Center, Mochida Pharmaceutical Co., Ltd.,
7)
Watarase Research Center, Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd., 8)R&D Department, Japan Bioindustry Association

P-71*

Quantitative evaluation of histopathological changes using imaging analysis software HALO
○ Mao Mizukawa, Yasushi Horai, Yuko Oono, Satomi Nishikawa, Hironobu Nishina, Nobuyuki Baba,
Eisuke Kume
Safety Research Laboratories Mitsubishi Tanabe Pharma Coporation

P-72

Comparison of fine-tuning deep convolutional neural networks for classification of lung cancer
types from cytological images○ Tetsuya Tsukamoto1), Atsushi Teramoto2), Yuka Kiriyama1,3), Ayumi Yamada2)
1)

Department of Diagnostic Pathology, Fujita Health University School of Medicine, 2)Faculty of RadiologicalTechnology, Fujita Health University School of Health Sciences, 3)Department of Diagnostic Pathology,
Narita Memorial Hospital

Poster presentation XX
Day 2, February 1, Friday

15:10 - 16:00

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Kaoru Inoue (National Institute of Health Sciences)		
Chihiro Noguchi (Taisho Pharmaceuical Co., Ltd.)New analysis methods and techniques 1
P-73*

Characteristic for PAXgene fixed paraffin embedded samples○ Masaki Yamazaki1), Kiyotaka Nakano2), Osamu Natori2), Masami Suzuki1,2), Atsuhiko Kato1)
1)

P-74

Chugai Pharmaceutical Co., Ltd., 2)Forerunner Pharma Research Co., Ltd.

Intensive immunofluorescence staining methods for low expression protein and the characteristics○Junko Shinozuka1), Masaki Yamazaki1), Kiyotaka Nakano2), Shin-ichi Funahashi2),
Masami Suzuki1,2), Atsuhiko Kato1)
1)
2)

P-75

Safety Assessment Dept., Fuji Gotenba Research Labs. Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.,
Forerunner Pharma Research Co., Ltd.

Three-dimensional structure analysis of podocytes in rat kidney using FIB-SEM

Yasushi Miyauchi1), ○ Kouhei Ueda1), Naoko Imura1), Shin Inamoto2), Yuji Otsuka2), Akiyo Yoshida2)
1)

Department of Bio Research, Kamakura Techno-Science, Inc., 2)Morphological Research Laboratories,
Toray Reseach Center, Inc.

̶ 132 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster presentation XXI
Day 1, January 31, Thursday

17:20 - 18:10

Poster and Exhibition (Zuiun/Heian Event hall 2F)

Chair: Makoto Ueda (Nippon Shinyaku Co., Ltd.)		
Izumi Matsumoto (Sumitomo Dainippon Pharma Co., Ltd.)New analysis methods and techniques 2
P-76

Method for morphological analysis of 3D cell cultures○ Etsuko Fujii1,2), Shigeto Kawai1), Masaki Yamazaki2), Kiyotaka Nakano1), Atsuhiko Kato2),
Masami Suzuki1,2)
1)

P-77*

Forerunner Pharma Research Co., Ltd., 2)Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.

Testicular lesions by exposure to trifluoroethanol or trifluoroacetaldehyde in medaka○ Yusuke Kuroda1), Masayuki Kimura1), Chisato Hayakawa1), Seigo Hayashi1), Kazuya Takeuchi1),
Satoshi Furukawa1), Akihiko Sugiyama2)
1)

Biological Research Laboratories, Nissan Chemical Corporation, 2)Veterinary Clinical Pathology,
Faculty of Veterinary Medicine, Okayama University of Science

P-78*

Investigation of the usefulness of laser capture microdissection on mechanism analysis of retinal
toxicity○ Makoto Shirai, Takashi Aoki, Noriyo Niino, Kazunori Fujimoto, Masako Imaoka, Kiyonori Kai,
Kazuhiko Mori
Medicinal Safety Research Laboratories, Daiichi Sankyo Co., Ltd.

̶ 133 ̶Abstracts
Special Lecture
Symposium
Workshop
IATP SeminarSpecial Lecture

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Special Lecture

SL-1
Mutational Processes in Human Cancer
Hiroyuki Aburatani
Genome Science Division, Research Center for Advanced Science and Technology, The University of Tokyo
Carcinogenesis is caused as a result of accumulation of somatic mutations, where distinct base change patterns, such as C>A due tosmoking, C>T mutation by ultraviolet are frequently observed in lung cancer and melanoma, respectively. However, it has been difficult
to reveal the biological processes contributing in each cancer case. Based on cancer genome data collected from more than 10,000 casesby the next generation sequencing analysis over the past decade, various mutation signatures were extracted. In the recurrent glioma
cases after treatment with an alkylating agent, hypermutator phenotype was often observed with distinct base change pattern, which waspresumably induced by the alkylating agent.
Various factors are involved in liver cancer development, e.g. hepatitis virus infection, alcohol intake, steatohepatitis and aflatoxin. We
examined whole exome of 503 liver cancer cases in total, 413 Japanese cases and 90 cases from the TCGA dataset. Mutation signature
analysis revealed an mutation pattern prevalent in Japanese male cases. Such signature is also observed in other cancer types andcorrelated with alcohol intake and genetic variants of alcohol metabolism genes.

̶ 137 ̶The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Special Lecture

Special Lecture

SL-2
Next generation toxicologic pathology by innovative bio-Imaging techniques
Takeshi Imamura
Department of Molecular Medicine for Pathogenesis, Ehime University Graduate School of Medicine

Bio-imaging technique is a promising technique, and has already been applied for in vitro experiments in cellular biology. Recently,
there has been a growing interest in applying this fluorescent imaging technique to study different disease process and complex
biology such as cancer in vivo. Particularly, the intravital fluorescent imaging using various fluorophores and/or fluorescent proteins, inconjunction with appropriate microscopy, allows visualization of cell behavior as well as cell function in vivo.
In this talk, I will talk about applications of the fluorescent imaging systems to monitor cancer cell in vivo. In addition, I will show
the study the roles of tumor microenvironment such as angiogenesis, lymphoangiogenesis, and activity of proteases in vivo by using
fluorescent imaging systems. In addition, I would like to talk about a technological development of fluorescent imaging methods
including two-photon microscopy, and the application of the fluorescent imaging approaches to cancer research. Two-photon
microscopy is a powerful method to investigate behavior and function of cells in deep tissues. Moreover, I would like to present the
setup and application of infrared-(IR)-two-photon microscopy using excitation wavelengths above 1,040 nm. IR-two-photon microscopy
enables us the application of red fluorescent proteins/dyes and deeper imaging compared with conventional multi-photon microscopy.
It will be useful to investigate the cancer biology and test the effectiveness of therapeutic agents in the mext generation toxicologic
pathology using these innovative bio-Imaging techniques.

̶ 138 ̶Symposium

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

S1-1
Tissue clearing technique in analysis for morphology○ Masaki Yamazaki

Further information could be obtained if you recognize three-dimensional (3D) structure itself compared to analysis for two-dimensional(2D) structure from sectioned slides. In the conventional manner for recognition of 3D structure, there is a method to reconstruct 3D
structure images from serial sections, but the effort to make the serial sections is required and also the final images are still artificial.
Some improvement is wanted in these points. Recently, mainly in the field of cranial nerve, the methods to clear thick tissues or wholeorgans were developed and it enable to observe 3D structure directly and the technique is widely spread to the other field. Now, there areseveral commercial available clearing reagents like organic solvent-based (BABB, DISCO), aqueous-based (See DB, Scale, CUBIC),
and hydrogel-based (CLARITY, SWITCH). There are some reports that these methods have each characteristics. We performed
clearing tissues and organoids created from a cell line by several clearing solutions and compared the characteristics in terms of clearing
capability, fluorescence signal preservation or depth of observation and so on. These characteristics and points to consider about
observation will be introduced.

S1-2
Utilization of magnetic resonance imaging (MRI) in histopathological evaluation○ Yoshikazu Taketa
Tsukuba Drug Safety, Biopharmaceutical Assessments Core Function Unit, Eisai Co., Ltd.

Magnetic resonance imaging (MRI) is a powerful noninvasive tool to detect lesions three-dimensionally with high sensitivity in clinicalmedicine and pharmacological evaluation in animal models. Compared to other bioimaging devices such as computed tomography (CT)and positron-emission tomography (PET), MRI has higher spatial resolution without radiation exposure and can provide optional crosssections. MRI is said to be suitable for the analysis of the organs with high water and fat contents such as brain since MRI visualizes
the density and relaxation (the return process to equilibrium state of magnetization after excitation) of proton in the tissue. This in vivo
approach can also be applied to the preclinical drug safety examination, e.g., for detecting the lesion and evaluating its time course, as
well as its reversibility in the same animal. For the toxicologic pathology evaluation, it allows detection and localization of the lesions,thus assisting with selection of sections for subsequent histopathologic examination, and to see the relationship between the histologicalfeatures of the lesion and its intra-organ distribution. Therefore, imaging of the fixed tissue specimens with MRI would be a powerfultool for toxicologic pathology evaluation. This presentation will introduce utilization and possibility of MRI analysis for toxicologic
pathology evaluation, including our examination of neural lesions in rat formalin-fixed brain and current literature reports.

̶ 139 ̶Symposium

Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Symposium

S1-3
Application of imaging mass spectrometry for toxicity assessment○Akane Kashimura1), Hiroko Sato1), Kouji Tanaka2), Tomoya Akashi2), Yuko Ono1), Keisuke Yoshikawa1), Nobuyuki Baba1),
Hidefumi Kaji3), Masaharu Tanaka4)
Symposium1) Safety Research Laboratories, Mitsubishi Tanabe Pharma Co., 2) DMPK Research Laboratories, Mitsubishi Tanabe Pharma Co.,
3)LSI Medience Co., 4)Japan Bioindustry Association

Imaging mass spectrometry (IMS) is a technology to analyze molecules on tissue section and obtain a 2D image of molecular
localization. It is expected to help to elucidate pharmacological and toxicological mechanisms of drugs or explore new target molecules.
Because it requires no labeling, we can readily conduct IMS analyses in toxicity studies with histological examination.
(1) IMS analysis in known animal model
We analysed amiodarone (AMD)-treated rat tissues by IMS and compared the distribution of AMD, its metabolites, and phospholipids
with the areas of histological vacuolar changes. In the lesion areas, these molecules were detected with relatively higher intensities thanin the normal areas. The results are consistent with the known mechanism of AMD-induced phospholipidosis. IMS is a useful techniqueto understand the mechanisms of organ toxicity.
(2) A case applying IMS to toxicity assessment
Vacuolation of mucosal epithelium in mouse duodenum was found in the 2-week dietary administration study of Compound A, which
has low membrane permeability. We conducted IMS analysis in the duodenum and IMS revealed Compound A was localized in themucosal epithelial cells. It indicated that Compound A induced the vacuolation not on the luminal surface but in the epithelial cells.
In this symposium, we will introduce some of our data and discuss the contribution of IMS in future toxicity assessment.

S1-4
Application of artificial intelligence to pathological examination-Current status and future direction○ Kiyonori Kai1), Takuma Tsuchiya2), Kazuki Iwamoto3), Kazumi Hakamata4,5)1)Daiichi Sankyo Co., Ltd., 2)Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd., 3)Fujitsu Limited, 4)Sysmex Corporation, 5) LPixel Inc.

Pathological examination assumes important role in the non-clinical assessment in research and development of drugs. However
histopathological examination may be a rate-limiting factor in the timeline in the screening of seeds in drug discovery because thehistopathological examination takes long time and many resources. In resent, artificial intelligence (AI) has been applied to social life,
manufacturing and life science fields, and progress of AI technology is spectacular as typified by automated driving of motor vehicle.
Particularly, image recognition function of AI has been used for diagnosis of X ray and MRI images. Deep learning of pathologicalimages has been utilized for diagnosis of tumor in human. Moreover the Japanese society of pathology is conducting Japan Pathology AI
Diagnostic Project in corroborate with National Institute of Informatics using AMED budget. In the drug discovery, a histopathologicaldiagnostic model of AI to classify normal or abnormal specimens and identify low risk organs in which non-neoplastic lesions are
not observed, are exploring in Life Intelligence Consortium (LINC). The current status of AI application to pathological images and acase of AI analysis on several non-neoplastic hepatic lesions archived Open TG-GATEs will be introduced, and issues to utilize AI for
pathological examination of toxicity studies and future direction will be also overviewed in the symposium.

̶ 140 ̶Symposium

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

S1-5
Pathologic diagnosis of human soft tissue tumors by detection of chimeric fusion gene
○ Takayuki Nojima

Most of human bone and soft tissue sarcomas have genetic aberrations. About 30% of bone and soft tissue sarcomas are associatedwith chromosomal translocations, which involve the exchange between two chromosomes. This leads to formation of chimeric fusion
genes that alter cellular function, often dysregulating proliferation, and resulting in clinically and genetically distinct neoplasms. On
the other hand, the detection of these fusion genes has become useful for pathological diagnosis. Examples include EWSR1-Fli1 in
Ewing sarcoma/PNET, SYT-SSX in synovial sarcoma, PAX-FKHR (FOXO1) in alveolar rhabdomyosarcoma, and FUS-CREB3L2 in low
grade fibromyxoid sarcoma. A gene may rearrange with various partners. We use fluorescence in situ hybridization (FISH), to detect
gene rearrangement and reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) to assess for fusion transcripts for routine diagnostic
ancillary tools. There are some disadvantages in FISH and RT-PCR, respectively, but by combining FISH and RT-PCR, accuracy ofpathologic diagnosis of human bone and soft tissue sarcomas can be improved.

̶ 141 ̶Symposium

Departments of Orthopedic Surgery and Pathology, Kanazawa University

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Symposium

S2-1
An application of mouse normal tissue-derived organoids to chemical carcinogenesis
research○ Toshio Imai
Symposium

Department of Animal Experimentation, National Cancer Center Research Institute

Organoids are 3D-cultured round cystic epithelial cell groups, which consist of each organ-innate cells including stem cells. Organoids
derived from human carcinoma tissues maintain genetic mutations and gene expression patterns of their original ones and used
for evaluation of molecularly targeted drugs. We culture normal mouse epithelia-derived organoids, and cancer-associated genetic
reconstitution using lentivirus has been shown to recapitulate carcinogenesis. And then, we stared to evaluate effects of chemicals on
carcinogenesis in organoids. Organoids treated with several genotoxic carcinogens in vitro have been presented to develop subcutaneous
nodules with histopathological characteristics resembling carcinoma tissues in nude mice. Currently, gene mutation analyses ofchemical exposed-organoids in vitro are proceeding to detect early genetic targets in chemical carcinogenesis, followed by additional
mutation analyses of subcutaneous carcinoma tissues in nude mice for comparison between them. It is expected that such stage-specificapproaches provide new insights into molecular mechanisms of chemical carcinogenesis.

S2-2
Induction of human immune reactions in humanized NOG mice and the application○ Takeshi Takahashi
Central Institute for Experimental Animals

Humanized mouse technology has been enabling in vivo analysis of human immune reactions. The development of severe
immunodeficient mouse strains is the core of the technology. Since Central Institute for Experimental Animals (CIEA) established NOG
mice in 2000, more than 60 NOG sub-strains have been produced by gene modifications, which include introduction of human cytokine
genes, HLA genes, or targeted disruption of mouse genes, and their characteristics have been analyzed.Among them, NOG-human
GM-CSF/IL-3 Tg mice (NOG-GM-CSF/IL-3 Tg) are particularly useful, since the development of human granulocytes like eosinophils
and basophils, mast cells, and dendritic cells is significantly enhanced in this model compared to NOG mice. These myeloid cells are
directly responsible for inflammation in many diseases and thus NOG-GM-CSF/IL-3 Tg would be more suitable for modelling humandiseases than NOG mice. In this presentation, we are going to introduce our attempts to recapitulate some allergic symptoms including
passive cutaneous anaphylaxis (PCA), passive food allergy, and asthma. In the asthma model, IL-33 triggered a series of disease
symptoms; e.g. induction of IL-13 producing cells, production of Eotaxin, infiltration of human eosinophils, and hyperplasia of Goblet
cells in lung mucosal tissues, which resembled human pathology. These results suggest that NOG-GM-CSF/IL-3 Tg are very useful fordeveloping novel therapeutic ways to treat these diseases.

̶ 142 ̶Symposium

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

S2-3
Lesson from autophagy-deficient mouse models○ Masaaki Komatsu

The discovery of Autophagy-related genes (ATGs) by Dr. Yoshinori Ohsumi opened the door to solve the molecular mechanisms of
autophagy. But, the research on autophagy does not still mature, rather it contains a large number of issues that should be addressed.
To date, a series of ATG genes has been identified, but working mechanism of each ATG gene product remains unclear. Moreover,while growing lines of evidence shed light on the importance of non-conceptual mode of autophagy such as selective autophagy, therole in our life course is still a mystery. Further, while autophagy is considered to be involved in various vital events such as cellulardifferentiation, stem cell homeostasis and anti-aging, those regulatory mechanisms through autophagy are still not clear. In my talk, I
show a molecular mechanism(s) for a selective autophagy-mediated stress response and introduce links between the deregulation andtumor development.

S2-4
Establishment of a mouse model of urinary stone formation and the model-utilized
genetic researches○Atsushi Okada, Yutaro Tanaka, Teruaki Sugino, Rei Unno, Kazumi Taguchi, Shuzo Hamamoto, Ryosuke Ando, Keiichi Tozawa,
Kenjiro Kohri, Takahiro Yasui
Department of Nephro-urology, Nagoya City University Graduate School of Medical Sciences

Urinary stones consist of about 90% inorganic substances and several % organic substances. Previous studies have been conducted
mainly on inorganic substances, but the prevalence has been steadily increasing. We focused on the genetic factors of stone disease andworked on establishing a stone formation model using mice that established gene recombinant technology.
1. Development of urinary stone model mice
Several types of oxalate precursor (ethylene glycol, glycolic acid, glyoxylate (GOx)) were administered at multiple stages ofconcentration, time period, and methods, and only intraabdominal administration of GOx could induce the kidney crystal formation.
2. Osteopontin (OPN) knockout mouse research
The functional analysis of OPN, the matrix protein of urinary stone was performed using gene recombinant mice. OPN+/+ showedsignificantly more stone formation than OPN−/−. The morphology of OPN+/+ crystals revealed large flower-shape, but OPN−/− crystals
small sand-like. Furthermore, OPN functional domain transgenic mice and OPN antibody research proved that OPN was a promotorof stone formation.
3. Involvement of crystal elimination and macrophage (Mφ)
We discovered a phenomenon in which the crystals generated in the model mouse could disappeared. Microarray analysis revealed
that expression of Mφ-related genes increased, and detected crystal phagocytosis of Mφ. In addition, we found that M1 (inflammatorytype) promoted crystal formation and M2 (anti-inflammatory type) suppressed.
4. Development of subsequent research
Using Cyclophilin D deficient mice, involvement of mitochondrial disorders was showed and we are undergoing autophagy research.
And we are conducting beige cell research from MetS model mouse studies.
̶ 143 ̶Symposium

Department of Physiology, Juntendo University School of Medicine

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Workshop

W-1
Tumor in carcinogenicity study○ Yuko Yamaguchi, Seiki Yamakawa, Mariko Nagatani, Shinichiro Ikezaki, Toru Hoshiya
BoZo Research Center Inc.

Workshop

The carcinogenicity study has a long administration period of 104 weeks, and it takes about 3 years from the start to the end of thestudy. The primary objective is to examine the presence or absence of induced tumor development. Carcinogenicity is mainly evaluatedbased on the statistical test result (Peto test result), taking the relevance to the dose, the presence or absence of incentives for preneoplastic lesions, similar drug information, etc. into consideration. We describe the following four points in evaluating carcinogenesis
appropriately.
1. Evaluation of individual incidence of hematopoietic tumors or tumors frequently occurring systemically: Because hematopoietic
tumors are difficult to identify the primary organ, we register “Hemolymphoreticular system” as an organ name and evaluate theindividual incidence by entering the tumor there.
2. Evaluation of incidence of individuals with benign and malignant tumors in combination.
3. Importance of historical data: The significance level of the Peto test differs depending on the background occurrence rate at the test
execution facility at 1%.
4. Matters to be considered except for the presence/absence of significant difference: We must consider factors related to the reductionof tumor incidence such as decreased survival rate or suppression of body weight gain, and the state of development of hyperplastic
lesions.

W-2
Gastric lesions to take note of in toxicity evaluationIs that an effect of the test
substance?
○Junko Sato
LSI Medience Corporation

Many toxicity studies are conducted by oral administration, so test substance-related lesions may be present in the stomach. It should
be noted that the stomach is always exposed to stomach acid, receives direct stimulus of drugs other than toxic influence on mucosal
surface during oral administration, and is sensitive to stress. In order to determine whether a lesion is a true toxic change in thepathological evaluation, it is necessary to understand nonspecific changes of the stomach in toxicity studies.In the glandular stomach,mucosal necrosis/erosion without dose dependence can be seen. There is no biological reaction such as inflammatory cell infiltration andregeneration, and only ghost-like necrosis of mucosa is focally seen. Is this a test substance-related change, a stress-related change, or
an artifact? In an animal with stress, arterioles of the gastric mucosa contract and become ischemic. An acute necrotic lesion occurs in
the gastric mucosa due to this gastric blood flow reduction, ischemia reperfusion, and mucosal defense reduction. Furthermore, gastricacid becomes an exacerbating factor of the lesion, and acute erosion/ulcer can be formed. In a rat ischemia reperfusion model, it has
been reported that erosion occurs 1 hour after reperfusion and develops into ulcers in 48 hours. Interestingly, there is no infiltration of
inflammatory cells until 3 hours after reperfusion.

̶ 144 ̶Workshop

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

W-3
Cardiac and hepatic changes related to reduced food consumption and diurnal
variation○ Saori Matsuo
Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.

W-4
Arteritis in toxicity study, spontaneous or drug induced○ Toshihisa Fujiwara
Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.

Arteritis noted sporadically without dose dependency in toxicity studies is often judged to be a spontaneous lesion by comparison withthe data in its control group or background control data. When arteritis is observed in multiple organs/tissues and is in a high-dose groupwith a low incidence, it is difficult to judge histopathologically whether it is spontaneous or drug induced. Since the spontaneous arteritis
is similar to drug-induced arteritis in its finding sites and features. In addition, spontaneous arteritis disturbs a toxicological evaluation
because spontaneous arteritis becomes severe by treatment stress and drug interference. Arteritis occurs in any systemic organs, but thecommon site, occurrence frequency, and lesion feature are different among animal species. It is important to evaluate the arteritis bycomparison of the data on clinical signs and clinical pathology as well as the histopathological data (difference in incidence, characterand degree of the lesion, and site). Pharmacological and pharmacokinetic properties (tissue distribution of drugs, etc.) also support its
toxicological evaluation. The purpose of this presentation is to contribute to a toxicological evaluation of arteritis.

̶ 145 ̶Workshop

In toxicity studies, test article treatment occasionally causes a reduction in food consumption, making it difficult to distinguish primarychanges in the measured item from secondary changes that are related to reduced food consumption caused by test article treatment.
Additionally, the timing of food intake and necropsy might affect whether changes in the results of measured items are due to thetest article or not. To clarify what changes are related to reduced food consumption, we conducted a 2-week food restriction study incynomolgus monkeys, and to investigate the effect of timing of food intake and necropsy, we performed sequential necropsies in mice.
In the cynomolgus monkey study, animals in the food-restricted group were supplied 25% of food compared to the control group. In themouse study, 8 week-old Crl:CD1 (ICR) fed mice were necropsied at 9 am, 1 pm, and 5 pm (n=3 per group). In this presentation, I will
introduce features of histopathological changes in the heart and liver in the cynomolgus monkey study, and the liver in the mouse study.
Furthermore, I will focus on the points to consider in toxicological evaluation when animals show reduced food consumption or when
animals are necropsied at a different time of day in the same study.

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Workshop

W-5
Stress and adrenal glands○Akira Inomata
Pharmaceutical & Healthcare Research Laboratories, Fujifilm Corporation

Workshop

The adrenal gland is the most common endocrine organ affected by chemically induced changes. Among these changes, hypertrophyof adrenocortical cells is reported to be caused by steroidogenesis inhibitors and steroid hormones. The adrenal gland is also the organ
where biosynthesis and secretion of stress hormones take place, and therefore adrenocortical cell hypertrophy can be induced by anonspecific stress subsequent to a poor physical condition in animals administered the high dose of a chemical drug. Thus, we needto monitor and evaluate carefully animal general conditions, body weight, food consumption, organ weight, and clinical laboratory
test results when we encounter adrenal histological changes in toxicity studies. In histopathology, the histological features derived
from species, gender and age differences, and the changes in the other related organs should also be taken into account for an overall
assessment of adrenal glands.

W-6
Toxicological Assessment Issues in Immature Reproductive System of Non-Rodent
Animals○ Hirofumi Hatakeyama1), Saki Inoue1), Jun Watanabe1), Yoshihiro Takei1), Haruko Koizumi1), Tetsuyo Kajimura1), Shin-ichi Sato1),
Hijiri Iwata2)
1)Ina Research Inc., 2)LunaPath LLC

In general toxicity studies using non-rodent animals such as dogs and cynomolgus monkeys, toxicity evaluation of the developmental
process of reproductive organs is an important issue.According to regulatory guidelines, such as OECD Test No. 409, FDA Redbook
2000: IV.B.1 and EPA OPPTS 870.4100, dosing in dogs should begin at 4 to 6 months of age, and no later than 9 months of age. In
practice, dosing is most commonly initiated at 6 to 8 months of age. In cynomolgus monkeys, studies commonly start at 2 to 3 yearsof age. Since sexual maturity is considered to be at 7 to 12 months in dogs and at 4.5 to 5.5 years in monkeys, short- and medium-term
repeated dose studies of 2, 4 and 13 weeks may also evaluate reproductive toxicity using animals that have not reached sexual maturity.
As individual differences in the maturity of reproductive organs are large in male dogs at the same age, this parameter is a poor indicatorof maturation, making toxicity evaluation difficult. Factors such as cost, animal size and limited suppliers can make it difficult to obtainmatured monkeys. Therefore, it is important to understand that immature animals are commonly used in general toxicity studies in large
animals. Since development of the reproductive organs is often delayed due to the suppression of weight gain, it is necessary to include
judgement of the changes in body weights and the relative organ weights of other organs in an overall evaluation.

̶ 146 ̶Workshop

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

W-7
Considerations and evaluation for basic lung pathological lesions causedby the intratracheal instillation○ Takamasa Numano, Taiki Sugiyama, Mai Morioka, Kazunari Uda, Yuko Doi, Mayumi Kawabe, Yukinori Mera, Seiko Tamano
DIMS Institute of Medical Science, Inc.

W-8
Pathological Indicators for Reflux-Related Changes in Oral (Gavage) Studies○ Klaus Weber
AnaPath GmbH, Switzerland, Eurofins/ BSL BIOSERVICE Scientific Laboratories Munich GmbH

When evaluating oral toxicity studies, gavage-related findings are not uncommon. Often, reflux-related lesions consist of inflammatoryand degenerative processes in nasal cavities, larynx, trachea, larynx, and lungs. These lesions may be related to the vehicle, e.g., cornoil, liquid paraffin etc. Even well-known vehicles, e.g., carboxymethylcellulose, may cause unusual lesions in the lungs under specificphysical/chemical conditions. Under some conditions, the resulting lesions may be misinterpreted as test item-related lesions, e.g.,
phospholipidosis. Early death may occur, and hence, such alteration affect the study outcome, especially if not recognized and wellinterpreted. Also test items may cause such lesions, e.g., test items hardly to dissolve, test items with thixotropic behavior, or of high pH
values. In some cases, the primary reflux-related lesions may cause secondary lesions that need to be excluded of primary systemic testitem related lesions, e.g., nasal cavity inflammation due to reflux may cause secondary effects in the brain (meningitis, encephalitis).
Rarer are reflux-related findings in the esophagus or even in the pharynx. The latter lesions however, do not occur as isolated changes
but are present in a combination with aforementioned organ affections. In the case of a participation of the forestomach and/or
esophagus, other factors may play a role that need to be excluded, e.g., the selection of gavage probes.

̶ 147 ̶Workshop[Background and Purpose] The intratracheal instillation method can be used for assessing lung toxicity of test materials, nanomaterials
and drugs, exposed via respiratory tract. The method is simple and inexpensive, and suitable for searching dose-related relationshipand bio-reaction mechanisms due to exact lung burden estimation. A little is known about effects of vehicle for test materials or the
instillation method itself. We compared the method-derived alterations with the lesions induced by the vehicle or test material.
[Materials and Methods] Male Cr1: CD (SD) rats, 8-week old, were given a single Ii of various vehicles and necropsied 3 days after. The
results of BALF: bronchoalveolar lavage fluid test and histopathological examination were compared. Bleomycin as a drug, SWCNT:
single-walled carbon nanotubes as a nanomaterial, were used, and given by a single, and their effects were examined.
[Results and Conclusion] BALF values, lung lesions and their degree were dependent on the vehicle type. Therefore, when assessing test
material toxicity by the instillation method, a non-treat group should be set to clarify the vehicle effects to discriminate from those of
test the material on examinations of BALF and histopathology. We here report the lung histopathological alterations caused by the drug
and the method itself, including the acute lung histopathology in the SWCNT instillation. [This presentation contains results of “2017chemical substance safety measures”].

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

IATP Seminar

IATP
The Toolbox for Molecular Pathology
Darlene Dixon, DVM, PhD, DACVP, FIATP
Molecular Pathogenesis Group, National Toxicology Program (NTP) Laboratory, National Institute of Environmental Health Sciences,
Research Triangle Park, North Carolina, USA

IATP Seminar

With rapid advances in molecular based assays and high-throughput screening (HTS) approaches in toxicologic assessments, thepathologist in the 21st century is faced with great opportunities and challenges. Modern toxicology is moving towards high- throughput
screening (HTS), two- and three-dimensional (2-D and 3-D, respectively) in vitro models, and molecular technologies with the goalof Reduction, Refinement, and Replacement (3 R’s) of animals in toxicity and carcinogenicity testing (MacAuthor Clark, 2017). This
movement towards lower animal species, in vitro model systems, and molecular high-throughput technologies challenges the pathologist
to become partners of multidisciplinary teams and to have a basic understanding of molecular biology terminology and the applicationof tools used in modern toxicology.
Molecular pathology is defined as an emerging discipline that studies disease or toxicant/drug induced changes that involves theexamination of molecules in cells, tissues, organs, or body fluids, and requires a multidisciplinary approach. It is described as a“crossover discipline” incorporating anatomic and clinical pathology with other disciplines including molecular biology, biochemistry,
and cell biology. Therefore, with the ever advancing and merging fields of molecular biology and toxicology, it is important for thepathologist to have a working knowledge of the terminology and a basic understanding of the approaches used to detect molecular
toxicology events.
There are several approaches available to evaluate changes in the genome, epigenome, and the transcriptome (Zhao et al., 2014). This
presentation will give an overview of technologies used for gene expression assessments to next generation sequencing (NGS, RNAseq)
platforms to NanostringTM technologies and their applications. Additionally, gene silencing approaches (Bar et al., 2016) have becomecommonly employed in biomedical research and their importance will be discussed. Basic molecular biology terminology and molecular
tools and technologies available to toxicologic pathologists for protein analysis in addition to the advantages and disadvantages ofcurrent in vitro 2-D versus 3-D model systems will be covered.
References
1. MacArthur Clark J (2017). The 3Rs in research: A contemporary approach to replacement, reduction and refinement. Br J Nutr 2017
October 30, 1–7.
2. Zhao S, Fung-Leung W-P, Bittner A, Ngo K, Liu X (2014). Comparison of RNA-Seq and Microarray in Transcriptome Profiling of
Activated T Cells. PLoS ONE 9(1): e78644.
3. Bar C, Chatterjee S, Thum T (2016). Long Noncoding RNAs in Cardiovascular Pathology, Diagnosis, and Therapy Circulation.
134:1484–1499.

̶ 148 ̶

Oral Presentation
O-01 〜 O-09

Oral Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

O-01
Effects of nicotine on rat urinary bladder carcinogenesis○ Shugo Suzuki, Hiroyuki Kato, Satoshi Fuji, Aya Naiki-Ito, Satoru Takahashi
Dept. Exp. Pathol. Tumor Biol., Nagoya City Univ.

[Aim] Tobacco smoking is a major risk factor for human cancers including urinary bladder carcinoma. Nicotine is a major componentof tobacco smoke, but it is not clear whether nicotine is carcinogenic on the urinary bladder. In the present study, we examined the
carcinogenicity of nicotine with animal models.
[Materials and Methods] For determination of promotion effects of nicotine, 6-week-old male F344 rats were treated with BBN
for 4 weeks, and administered nicotine in drinking water for 32 weeks. To investigate the mechanism of nicotine effects, 6-weekold rats were administered nicotine in drinking water for 4 weeks with/without inhibitors of nicotinic acetylcholine receptor(nAChR; hexamethonium chloride or MLA). Rats were sacrificed and urinary bladder and kidneys were removed. Histological andimmunohistochemical analyses were performed.
[Results] The body weights in the 20 and 40 ppm nicotine treated rats were significantly reduced. Nicotine significantly increased theincidence and number of urothelial carcinomas dose-dependently. Ki67 and pStat3 labeling indices in non-tumor bladder urothelial
lesions were significantly increased by nicotine. In a 4 week study, nAChR inhibitors decreased nicotine-induced urothelial simple
hyperplasia and Ki67 labeling index in the bladder and renal pelvis, and pStat3 labeling index in renal pelvis.
[Conclusion] These data suggest that nicotine enhances urinary bladder carcinogenesis via nAChR and Stat3 signaling pathways.

Study on toxicity and carcinogenic promoting effect to bladder ofo-Acetoacetotoluidide○ Nao Yukimatsu, Takahiro Okuno, Min Gi, Masaki Fujioka, Anna Kakehashi, Hideki Wanibuchi
Department of Pathology, Osaka City University Graduate School of Medicine

Bladder carcinogenesis by aromatic amines has been known, but the underlying mechanisms are not fully understood. Recent years,
employees who handled aromatic amines such as o-toluidine (OTD) at a chemical factory in Fukui developed bladder cancer and got
workers’ accident certification. OTD is classified as a Group 1 carcinogen by IARC. Acetoaceto-o-toluidide (AAOT) is a compound inwhich the amino group of OTD is acylated. However, there is no knowledge about toxicity or carcinogenicity of AAOT which is similar
to OTD and risk assessment is urgently required. To evaluate the toxicity and carcinogenic promoting effect of AAOT on bladder ofrat, we conducted a short-term toxicity study in rats administered AAOT for 4 weeks, and two-stage carcinogenicity study in which
AAOT was administered for 31 weeks after administration of known bladder carcinogen, N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) nitrosamine(BBN) for 4 weeks. In the short-term toxicity study, it was revealed AAOT causes cell proliferation and DNA damage in the urinary
bladder epithelium of the rats administered AAOT in a dose dependent manner. In addition, it was suggested AAOT was metabolized
to OTD and toxicity to bladder due to the detection of OTD at higher concentration than AAOT in urinary metabolites. In the two-stage
carcinogenicity study, it was revealed AAOT causes increased bladder weight and incidence of bladder cancer. It was found that AAOT
has toxicity and carcinogenic promoting effect on bladder of rat.

̶ 151 ̶Oral Presentation

O-02*

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Oral Presentation

O-03
Histological and functional changes in the thyroid in rats neonetally exposed
to X-rays○ Nariaki Fujimoto1), Mutsumi Matsuu-Matsuyama 2), Masahiro Nakashima2)
1)RIRBM, Hiroshima University, 2)ABDI, Nagasaki University[BACKGROUD] Exposure to ionized radiation in childhood is recognized as a risk factor for thyroid cancer and possibly for otherthyroid disorders. Despite its potential importance, there have been no investigations with animal models to explore the effects of
neonatal radiation exposure on thyroid function.
[METHODS] Neonatal rats (one-week-old Wistar rats, male) were subjected to cervical X-irradiation at 6 and 12 Gy. For comparison,adult rats (8-week-old) were X-irradiated at the same doses. Thyroid histology was examined by computer-assisted microscopy. Gene
expression in the thyroid was quantified by qRT-PCR.
[RESULTS] In neonatal rats received cervical X-irradiation, thyroid follicle size significantly decreased at the age of 8 weeks old as well
as at 16 weeks old. No morphological changes were noted in the thyroid of rats exposed to X-rays at 8 weeks old. Thyroglobulin mRNAlevels were significantly decreased in the neonatally-irradiated groups, while thyroid peroxidase mRNA expression was increased.
[CONCLUSIONS] Our results clearly demonstrated that neonatal rat thyroid was sensitive to ionized radiation, developing specificmorphological changes characterized by smaller thyroid follicles along with changes in the gene expression related to thyroid function.

Oral Presentation

O-04*
Expression characteristics of genes hypermethylated and downregulated specificallyto non-genotoxic hepatocarcinogens in analysis in other hepatocarcinogens○ Yuko Ito1,2), Kota Nakajima1,2), Yasunori Masubuchi1,2), Satomi Kikuchi1), Fumiyo Saito3), Yumi Akahori3), Toshinori Yoshida1),
Makoto Shibutani1)
1)LVP, TUAT, 2)UGSVS, Gifu Univ., 3)Chem. Eval. Res. Inst.

Background and Aim. We have previously reported that Ldlrad4, Proc, Cdh17 and Nfia showed promoter region hypermethylationand transcript downregulation specifically to carbon tetrachloride, a non-genotoxic hepatocarcinogen, in comparison with
N-diethylnitrosamine, a genotoxic hepatocarcinogen, in the liver of rats treated for 28 days. In this study, we examined responses ofthese 4 genes in the liver of rats treated with other genotoxic or non-genotoxic hepatocarcinogens.
Materials and Methods. Rats were repeatedly administrated genotoxic hepatocarcinogens, aflatoxin B1, N-nitrosopyrrolidine andcarbadox, or non-genotoxic hepatocarcinogens, thioacetamide and methapyrilene hydrochloride, for 28 or 90 days. The livers were
subjected to analyses for real-time RT-PCR and immunohistochemistry.
Results and Discussion. On both day 28 and 90, transcript downregulation was found in all of 4 genes by treatment with non-genotoxic
hepatocarcinogens. In immunohistochemical analysis in the preneoplastic GST-P-positive foci, LDLRAD4 and PROC formed negativefoci to increase in number by non-genotoxic hepatocarcinogens compared with genotoxic hepatocarcinogens. In contrast, CDH17 and
NFIA did not show specific expression changes in response to non-genotoxic hepatocarcinogens. These results suggest that Ldlrad4 andProc may be the early in vivo markers for detection of non-genotoxic hepatocarcinogens.

̶ 152 ̶

Oral Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

O-05
Premetastatic niche formation in the lymph nodes of a metastatic mouse mammary
cancer model○ Masa-Aki Shibata, Yuko Ito, Yoshihisa Tanaka, Hitomi Hamaoka, Yoichi Kondo
Dept. of Anatomy and Cell Biology, Div. of Life Sci, Osaka Medical College

Accomplishment of cancer metastasis requires a suitable microenvironment in premetastatic phase (premetastatic niche). Premetastatic
niche formation of the lymph nodes (LNs) was analyzed molecular pathologically in a mouse mammary cancer model.
Methods: BJMC3879Luc2 cells (metastatic mouse mammary cancer cell line) were subcutaneously inoculated into female BALB/cmice, and subsequently conducted bioluminescent imaging for detection of cancer metastasis. As a result, mice were killed at 4-weekpost-implantation (premetastatic group) as well as untreated control mice. LNs were histopathologically and immunohistochemicallyexamined, and then real-time PCR analysis was conducted using FFPE LNs.
Results: Micrometastasis of the sentinel LNs was histopathologically detected in 2 mice from the premetastatic group.
Immunohistochemistry for LYVE-1 in non-sentinel LNs showed a tremendous increase in lymphangiogenesis in the premetastatic groupas compared with the control group. In real-time PCR analysis, levels of Lyve1, Prox1, Vegf-c and Vegf-a were markedly elevated in thepremetastatic group.
Conclusion: In premetastatic LNs, lymphangiogenetic factors were already elevated and in fact LYVE-1-positive lymphangiogenesis
was occurred in non-sentinel LNs. The results suggested that the LNs in premetastatic phase are possibly received modifications with asuitable micro-environment for adherent of cancer cells from primary cancer site via greater circulation.

Chemotherapeutic effects of luteolin on castration-resistant prostate cancer throughinhibition of androgen receptor splice variant○Aya Naiki-Ito1,2), Hiroyuki Kato1), Shugo Suzuki1), Satoru Takahashi1)1)Dept. Exp. Path. Tumor Biol., Nagoya City Univ., 2)Path. Div., Nagoya City East Med. Ctr.

[Background] We recently reported that luteolin with antioxidant properties has chemopreventive potentials against prostate
carcinogenesis. The present study focused on the effect of luteolin on castration-resistant prostate cancer (CRPC). We also focused onandrogen receptor splice variant 7 (AR-V7), which contributes to cell proliferation and therapeutic resistance of CRPC.
[Methods] Effect of luteolin on cell proliferation, apoptosis, AR-V7 expression and chemotherapeutic effect of enzalutamide in CRPC
cells (rat: PCai1, human: 22Rv1) and on tumor growth of subcutaneously-implanted PCai1 or 22Rv1in castrated-nude mice wereanalyzed.
[Results] Luteolin suppressed cell proliferation in a dose-dependent manner and induced apoptosis with activation of caspase-3 and 7 inboth PCai1 and 22Rv1. Dietary luteolin also suppressed tumor growth via increase of TUNEL-positive apoptotic cells and decrease ofvessel density in PCai1 and 22Rv1 xenograft model. Luteolin dramatically suppressed AR-V7 protein expression in 22Rv1 in vitro andex vivo. Furthermore, luteolin enhanced the chemotherapeutic effect of enzalutamide in 22Rv1 cells and xenografts due to suppressionof AR-V7 expression.
[Conclusion] Luteolin is a potential chemotherapeutic agent for CRPC via inhibition of AR-V7 and induction of apoptosis.

̶ 153 ̶Oral Presentation

O-06*

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Oral Presentation

O-07
Effect of Dibutyltin on Placental and Fetal Toxicity in Rat○ Satoshi Furukawa1), Naho Tsuji1), Yoshiyuki Kobayashi2), Seigo Hayashi1), Masayoshi Abe1), Yusuke Kuroda1),
Chisato Hayakawa1), Kazuya Takeuchi1), Akihiko Sugiyama3)
1) Biological Research Laboratories, Nissan Chemical Corporation, 2) Chemical Research Laboratories, Nissan Chemical Industries,3)Veterinary Clinical Pathology, Faculty of Veterinary Medicine, Okayama University of Science

In order to elucidate the role of chorioallantoic and yolk sac placenta in the embryonic/fetal toxicity in dibutyltin dichloride (DBTCl)exposed rats, we examined the histopathological changes and the tissue distribution of dibutyltin in the placentas and embryos. DBTCl
was orally administered to the groups at doses of 0 mg/kg during gestation days (GD)s 7-9 and 20 mg/kg during GDs 7-9 (GD7-9TG), and GDs 10-12 (GD10-12 TG). The fetal mortality was increased and malformations characterized by craniofacial dysmorphism
were detected in the GD7-9 TG. The embryonic/fetal weight and placental weight showed a decrease in both DBTCl-treated groups.
Histologically, some embryos on GD 9.5 in the GD7-9 TG underwent apoptosis without any changes of yolk sac. In the LA-ICPMS, tin was detected in the embryo, allantois, yolk sac, ectoplacental cone and decidual mass surrounding the conceptus on GD 9.5
in the GD7-9 TG. Thus, it is considered that the embryo in this period is specifically sensitive to DBTCl-induced apoptosis, comparedwith other parts. The chorioallantoic placentas in both DBTCl-treated groups showed the developmental delay and hypoplasia in the
fetal parts of placenta. Thus, it was speculated that the DBTCl-induced malformations and fetal resorption resulted from the apoptosis
in the embryo caused by the direct effect of DBTCl. The DBTCl-induced placental lesions were a non-specific transient placental
developmental retardation, leading to intrauterine growth retardation.

Oral Presentation

O-08
Effects of antioxidants on acute toxicity of silver nanoparticles intraperitoneallyadministered in BALB/c mice
○ Young-Man Cho, Yasuko Mizuta, Jyun-ichi Akagi, Takeshi Toyoda, Tetsuya Ide, Kumiko Ogawa
Division of Pathology, National Institute of Health Sciences[Background] Silver nanoparticles (AgNPs) are, largely due to their antimicrobial properties, one of the most commonly usednanomaterials in consumer products and even in food products and biomedical purposes. Recently, we reported that intraperitoneallyadministered AgNPs in 10 nm diameter showed acute toxicity in BALB/c mice but the same amount of AgNPs in 60 and 100 nm
diameter did not.
[Aim] This study aimed to evaluate the effects of antioxidants on acute toxicity of intraperitoneally administrated AgNPs in BALB/cmice.
[Materials and Methods] One hour after the administration of N-acetyl-l-cysteine (NAC, 2000 mg/kg bw, i.g.), Vitamin C (200 mg/
kg bw, i.g.), Vitamin E (100 mg/kg bw, i.g.) or L-buthionine- (S,R)-sulfoximine (1.6 g/kg bw, i.p.), 10 nm AgNPs (0.2 mg/mouse) was
intraperitoneally administered to 7-week-old female BALB/c mice (5 mice/group) and then sacrificed 6 and 24 hours after treatment.
[Results] In biochemistry, glucose was increased in all AgNPs treated groups, except for NAC + AgNPs group. In histopathology, thelesions observed in AgNPs only group, congestion, vacuolation in the liver, increased cellular component in the liver sinusoid andapoptosis in white pulp of the spleen were found at 6 hours, while these lesions were eliminated by NAC pre-treatment but not byothers. These lesions were remained until 24 hours.
[Conclusion] Acute toxicity of intraperitoneally administered 10 nm AgNPs was reduced by only NAC of pre-treated antioxidant.

̶ 154 ̶

Oral Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

O-09
Application of toxicogenomics in next generation preclinical and lot release testingfor influenza vaccine and adjuvant○ Takuo Mizukami1), Yuki Hiradate1), Eita Sasaki1), Haruka Momose1), Keiko Furuhata1), Hideki Kusunoki1), Hideki Asanuma2),
Isao Hamaguchi1)1)Department of Safety Research on Blood and Biologicals, National Institute of Infectious Diseases, 2)Influenza Virus Research Center,

National Institute of Infectious Diseases

Influenza vaccine is considered a key prophylactic strategy used to combat influenza. In Japan, whole particle inactivated influenza
vaccine (WPv) was first developed and used to immunize school children as part of a universal vaccination program. Due to the highincidence of fever following vaccination, Hemagglutinin (HA) split vaccine (HAv) was introduced in 1972 and this vaccine successfully
reduced the rate of adverse events. In order to understand molecular signatures following influenza vaccination, we performed
global gene expression analysis after WPV and HAv vaccination. On day 1 after vaccination the lung tissue showed a unique gene
expression signature, where we identified 18 biomarker genes (BMs) that distinguish WPv from HAv. Using these BMs, we were able
to statistically evaluate lot-to-lot differences in influenza vaccines. Next, we evaluated the virosome influenza vaccine and the CpG-K3
adjuvanted HAv, and found that both adjuvanted HAv (aHAv) induced BMs, thus enabling the quantification of immunogenicity andtoxicity. Finally, we tested whether the unauthorized aHAv induced our BMs in a manner which correlates to histopathological changes
following vaccination. Our results indicated that some unauthorized aHAv may induce much higher BM expression than that of WPv
and also induce leukocyte toxicity and inflammation of lung tissue. These findings suggested that our BMs may predict the safety andtoxicity of newly developed aHAv.

Oral Presentation

̶ 155 ̶Poster Presentation
P-01 〜 P-78

Poster Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-01
Examination neurotoxicity of mouse treated with administration of reserpine○ Makoto Sato, Yui Terayama, Yukari Nishimura, Takuma Tsuchiya, Takayasu Moroki, Keisuke Kitaura, Satoshi Matsumoto,
Tsuyoshi Yoshikawa
Nonclinical Research Center Tokushima Research InstituteIn the 27nd Academic Assembly of the Society, we reported the testicular toxicity induced by hypothermia using reserpine-administeredmice. We examined the central nervous system toxicity of mice this study.
Materials and methods: Male ICR mice received a single intraperitoneal injection of reserpine at a dose of 100 mg/kg and autopsiedon day 2 and 6, followed by histopathological examination and electron microscopic examination of the brain. Body temperature (rectal
temperature) was measured before administration on day 1, 2, 6 and 12 hours after administration, and 2 to 6 day after administration.
Result: Histopathological examination showed the necrosis of oligodendrocyte and vacuolation in the white matter such as the corpus
callosum, anterior commissure on day 6 of administration. Electron microscopic examination of day 6 of administration confirmed thatvacuolation of the cerebral white matter, cerebellar nuclei and pons/medulla oblongata were observed. No abnormalities were observedin the day 2 sacrifice cases. In measurement of body temperature over time (rectal temperature), body temperature decreased at 6 hours
after administration at 100 mg/kg, body temperature decreased at 25°C or less at 12 hours after administration.
Conclusion: The necrosis of the brain oligodendrocytes, the white matter or the nucleus of the nerve nucleus found in this study are
related to the sustained state of hypothermia like the testes.

P-02*○ Kota Nakajima1,2), Yuko Ito1,2), Yasunori Masubuchi1,2), Satomi Kikuchi1), Toshinori Yoshida1), Yoshiko Sugita-Konishi3),
Makoto Shibutani1)
1)LVP, TUAT, 2)UGSVS, Gifu Univ., 3)LFSS, Azabu Univ.

Background and Objective. Sterigmatocystin (STC), a mycotoxin which frequently contaminates rice in Japan, is known as anintermediate of aflatoxin B1. To investigate neurodevelopmental toxicity of STC, we performed a developmental exposure study usingrats and examined the influence on hippocampal neurogenesis in offspring.
Methods. Twelve pregnant SD rats per group were fed STC (purity: 99%) at concentrations of 0, 1.7, 5.0 or 15.0 ppm in diet fromgestational day 6 to postnatal day (PND) 21.
Results. Dams during PND 5-21 and male offspring during PND 16-40 revealed tendencies of dose-dependent body weight reduction.
At PND 21 necropsy, dams revealed lower absolute liver weight at 15.0 ppm. In offspring, decreases in the number of DCX+ type3 cells and PCNA+ cells in the granule cell lineages of the dentate gyrus (DG), and increases in the number of PVALB+ and CALB1+GABAergic interneurons in the DG hilar region were observed at 15.0 ppm. Gene expression analysis at 15.0 ppm in the DG showed
increased expression of Bdnf and Chrna7, decreased expression of Ntrk2, Chrnb2, and Drd2.
Discussion. Similar to aflatoxin B1, aberrations in neurogenesis due to suppressed proliferation of type-3 neural progenitor cells was
also observed on weaning by developmental exposure to STC. STC additionally increased the number of GABAergic interneurons andchanged transcript levels of genes related to neurogenesis-regulatory system, suggestive of reparative changes to aberrant neurogenesis.

̶ 159 ̶Poster Presentation

Effect of developmental exposure to sterigmatocystin on adult neurogenesis of the
hippocampal dentate gyrus in rats

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-03*
Exposure to alpha-glycosyl isoquercitrin from gestational stage to adult stage
facilitates fear extinction learning in rats
○ Yasunori Masubuchi1,2), Kota Nakajima1,2), Yuko Ito1,2), Satomi Kikuchi1), Mihoko Koyanagi3), Shim-mo Hayashi3),
Toshinori Yoshida1), Makoto Shibutani1)
1)LVP, TUAT, 2)UGSVS, Gifu Univ., 3)San-Ei Gen F.F.I., Inc.

Introduction. We recently revealed that exposure to alpha-glycosyl isoquercitrin (AGIQ) from gestational stage to adult stage facilitatesfear extinction learning in rats. The present study was performed to clarify the effective exposure period of AGIQ for this facilitation.
Materials and Methods. AGIQ was fed at 0.5% in a diet to SD rats from gestational day 6 (GD 6) to postnatal day (PND) 21 (DEV
group), PND 21 to PND 76 (PW group) or from GD 6 to PND 76 (WP group). A contextual fear conditioning test was conducted fromPND 64 and brains were removed 90 minutes after presentation of a conditional stimulus on PND 76.
Results. A facilitation of fear extinction was observed only in the WP group. No change in the number of FOS+, ARC+ or COX2+ cells
in the granule cell layer was observed in any exposure group. High transcript levels of Kif21b, Notch1, Fos and Vegfa in the dentate
gyrus was found in the DEV group and/or the WP group.
Discussion. KIF21B is a recently identified memory re-writing motor protein, and VEGFA and NOTCH1 are related to angiogenesis
upregulated in relation with a facilitation of spatial learning. FOS is a synaptic plasticity-related molecule and obtained result suggested
increased expression of FOS in FOS+ cells. Thus, upregulation of Fos, Kif21b, Notch1 and Vegfaby AGIQ exposure suggests aninvolvement of multiple mechanisms on the facilitation of extinction learning. Continuous exposure from gestational stage may benecessary for this effect.

P-04*
Poster Presentation

A case of neuromelanosis in the brain of a cynomolgus monkey○Airo Yukawa, Akiko Moriyama, Ichiro Nagata, Kinji Kobayashi, Yutaka Chihaya
Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.

Neurocutaneous melanosis characterized by widespread melanin pigmentation in both the skin and brain has been known in cynomolgus
monkeys. We histopathologically investigated a case of spontaneous neuromelanosis in a female cynomolgus monkey.
The animal (purpose bred, Cambodia origin, 5 years old) showed no abnormalities in clinical signs or clinical pathology. At necropsy,
black foci approximately 0.1–4.0 cm in diameter were diffused in the meninges of parietal and temporal lobes of the brain. HE,
histochemical, and immunohistochemical specimens were prepared from the brain.
In histopathology of the brain, multifocal black pigment and aggregation of black-pigmented spindle or round cells were distributed
throughout the leptomeningeal connective tissue, cerebral cortex, and perivascular spaces. A few neurons and glial cells had
intracytoplasmic black pigment. The pigment was positive in Fontana-Masson staining and for melanoma antibodies. Though mostpigmented cells were negative for NeuN, Iba1, GFAP, and Olig2 in immunohistochemistry, a few were positive for NeuN, Iba1, or
GFAP. No other abnormal findings were observed in any organ/tissue.
The melanocytes or melanin pigments were observed not only beneath the leptomeninges and in the perivascular spaces, but also in the
cerebral cortex, and in neurons, microglia, or astrocytes. These cells had no neoplastic characteristics. Based on the histopathologicalfeatures, we diagnosed neuromelanosis.

̶ 160 ̶

Poster Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-05*
Histopathological analysis of an extraocular orbital tumor induced by single
intravitreal injection of nickel subsulfide (Ni3S2) in a Fischer rat○ Yoshinori Yamagiwa1,2), Miki Masatsugu1), Haruna Tahara1), Shingo Nemoto1), Masaaki Kurata1), Hiroshi Satoh 2)
1)Central Research Laboratories, Senju Pharmaceutical Co., Ltd., 2)Veterinary Pharmacology and Toxicology Laboratory, Graduate School of

Veterinary Sciences, Iwate University[Introduction] Single intravitreal injection of nickel subsulfide (Ni3S2) is known to induce intraocular neoplasms in rats. As a part ofinvestigations for evaluating carcinogenicity of intravitreal drugs, we intravitreally administered Ni3S2 once in the right eye in rats at
a dose of 0.5 mg/eye. The aim of this report is to characterize an extraocular tumor found 8 months after the treatment in a male F344/
DuCrlCrlj rat histopathologically.
[Methods] The animal was euthanized by exsanguination under sevoflurane anesthesia. The mass of right orbit and other macroscopic
lesions were enucleated, and histopathological, immunohistochemical, and ultrastructural examinations were performed.
[Results] Milky white orbital mass was projected with squeezing the right eyeball. Swelling of cranial trigeminal nerve and cervicaland right submandibular lymph nodes were observed. The mass was composed by proliferation of spindle-shaped cells with fascicular
growth pattern, and invaded in cranium and nasal cavity. The cells were positive for S-100 and negative for α-SMA, NSE, and Melan-A.
Ultrastructurally, basement membrane-like structures were sparsely observed around the tumor cell membrane. Metastasis were found in
the swollen lymph nodes.
[Conclusion] Based on these results, this lesion was diagnosed as orbital malignant schwannoma. This study indicates that single
intravitreal injection of Ni3S2 has also a potential to induce extraocular neoplasm in Fischer rats.

P-06○ Osamu Hashiguchi, Shinichiro Ikezaki, Tsubasa Saito, Saori Igura, Tomomi Nakazawa, Kenichiro Kasahara, Yuko Yamaguchi
Pathology Department, BoZo Research Center Inc.

Porencephaly is a rare brain lesion characterized by cyst or cavitation, and brain injury such as infection, circulatory disorder, andtraumatic injury has been considered to be the pathogenesis. In the present study, a case of the dog with brain lesion accompanied byvisual disorder was subjected to the histopathological examination.
[Materials and Methods] The animal was an 18-month-old female beagle dog (TOYO Beagle, KITAYAMA LABES Co., Ltd.) which
was orally treated with water for 12 months.
[Results] Macroscopically, excessive accumulation of cerebrospinal fluid was observed. In the cerebrum, the concavity focus (20 × 10 ×5 mm) was observed from right frontal lobe to parietal lobe with partial adhesion of parenchyma of the brain and dura mater. The right
optic nerve was small. Microscopically, excavation from the subarachnoid cavity to right lateral cerebral ventricle (LCV) and cerebral
parenchymal atrophy were observed in the brain. In the adhered region, fibrosis, brown pigment deposition, and increased microglia
were observed. In the right eye, retinal atrophy mainly in ganglion cell layer was observed. Furthermore, the right optic nerve showed
reduced diameter, decreased number of cells, and reduced dyeability with LFB.
[Conclusion] These results suggest that the brain lesion was severe porencephaly, and the pathogenesis was traumatic injury because theparenchymal lesions were observed. The relationship between the brain lesion and ocular lesion was not clear.

̶ 161 ̶Poster Presentation

A case of traumatic porencephaly with optic organ abnormality in beagle dog

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-07*
Inhibitory Effects of Chitosan Oligosacchride Supplementation on Retinal
Degeneration Models○ Chihiro Koyama1), Akiko Takenouchi1), Akane Kanase1), Yuri Yukimitsu1), Yuko Emoto2), Takako Noguchi3), Seiji Kurozumi3),
Kimihiko Sato3), Yoshiharu Okamoto4), Katsuhiko Yoshizawa1)
1)Department of Food Sciences and Nutrition, Mukogawa Women’s University, 2)Kansai Medical University, 3)Koyo Chemical Co., Ltd.,
4)Veterinary Medicine, Tottori University[Background] Retinitis pigmentosa (RP) is an ophthalmic disease that eventually leads to blindness. The development of new strategy
for the therapy is necessary. The effects of chitosan oligosaccharide (COS) on N-methyl-N-nitrosourea (MNU) induced retinaldegeneration in rats and hereditary retinal degeneration in C3H mice were examined.
[Methods] 1. Female SD rats at 7 weeks of age were given a single i.p. injection of 40 mg/kg MNU. 4% COS was orally administeredonce daily from 3 days before MNU until 7 days after (2 hrs before and 6 hrs after MNU injection). Eyes and serum were collected
7 days after MNU. Photoreceptor cell ratio, retinal damage ratio and serum oxidative stress (d-ROMs test) were measured. 2. 2% COS
water was freely ingested by pregnant C3H mice from the weaning until 13 and 18 days of age. Photoreceptor cell ratio of infant mice
were calculated.
[Results] 1. In the 4%COS combined group, central retinal photoreceptor cell ratio was higher than in the MNU treated group, and theretinal damage ratio was reduced. The d-ROMs values were reduced in 4%COS combined group compared to those of MNU treatedgroup. 2. At 18 days of C3H mice, the width of retinal outer layer decreased significantly in the DW group, compared to that of the COS
combined group.
[Conclusion] COS suppressed photoreceptor damages in these rodent models involved in oxidative stress. Reduction of oxidative stressby COS may be important. COS appears to be effective in suppressing of human RP.

P-08*
Poster Presentation

Histological Characterization of Spontaneous Lesions Occurring in the Pars
Intermedia and Pars Posterior of the Rat Pituitary Gland○ Yoshitaka Katoh, Tsuyoshi Ito, Aya Koyama, Naofumi Takahashi, Atsushi Shiga, Yoshimasa Okazaki, Takanori Harada
The Institute of Environmental Toxicology[Background] In the rat pituitary gland, various spontaneous lesions including hyperplasia and neoplasia often occur in the pars distalis
but are rare in the pars intermedia or posterior. Consequently, the incidence of spontaneous lesions in the pars intermedia or posterior
is generally lower than those in the pars distalis in toxicological studies with rats. We have attempted histological characterization of
spontaneous lesions that occurred in the pars intermedia or posterior of the rat pituitary gland.
[Materials and Methods] Pituitary lesions in the pars intermedia or posterior were selected from controls in 2-year carcinogenicity
studies with F344 or Wistar Hannover rats and were subjected to histological characterization.
[Results] Major lesions observed in the pars intermedia were hyperplasia and adenoma and those in the pars posterior werecraniopharyngeal duct remnant and craniopharyngioma. The pars intermedia hyperplasia was focal and consisted of faintly basophilic
cells. The pars intermedia adenoma often showed an invasion into the pars posterior or distalis and the latter case was difficult todistinguish from anterior adenoma. The craniopharyngeal duct remnant had acinar, tubular, or fusiform structures and often showed
mixture of these structures. Craniopharyngioma was observed in one control rat and was characterized by prominent squamous
differentiation and cystic lamellar keratinizing debris. The results of immunohistochemical analysis will be also presented.

̶ 162 ̶

Poster Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-09
Effects of co-administration of benzo[a]pyrene and α-naphthoflavone in male
C57BL/6J wild-type mice and Polκ-knockout littermates○Jun-ichi Akagi1), Young-Man Cho1), Takeshi Toyoda1), Masayuki Yokoi2,3), Fumio Hanaoka2,4), Haruo Ohmori2), Kumiko Ogawa1)
1)Div. Pathol., Natl. Inst. Health Sci., 2)Dept. Life Sci., Facl. Sci., Gakushuin Univ., 3)Biosignal Res. Ctr., Kobe Univ., 4)Life Sci. Ctr. Surviv.

Dynamics, Tsukuba Adv. Res. Alliance, Tsukuba Univ.

[Background] Metabolic activation of benzo[a]pyrene (BaP) is mainly catalyzed by cytochrome P450 (CYP) 1A1 and BaP itself induces
CYP1A1 expression via activation of aryl hydrocarbon receptor (AhR). To examine whether combined exposure CYP1A1 inhibitor
affects to carcinogenic potential of BaP, we performed co-administration of α-naphthoflavone (ANF), a CYP1A1 inhibitor, with BaP
in mice. In addition, we also examined effects of deficiency in DNA polymerase κ (Polκ), which possesses an activity of correctly
bypassing guanine adduct of 7,8-dihydro-7,8-dihydroxybenzo[a]pyrene, a metabolically activated form of BaP.
[Aim] To investigate whether co-treatment of CYP1A1 inhibitor and the deficiency of Polκ affects to BaP-induced tumor development.
[Materials and Methods] Male Polκ knockout (Polk−/−) mice and wild-type C57BL/6J (WT) littermates were fed BaP and ANF in basal
diet for 40 weeks.
[Results] Administration of 0.01% BaP significantly increased simple hyperplasia in the forestomach in both Polk−/− and WT mice;
however, no significant increases of tumor lesions were observed. In contrast, co-administration of BaP + ANF caused significant
increase of papillomas in the forestomach in WT but not Polk−/− mice. Moreover, co-administration of BaP + ANF significantly
increased multiplicity of squamous cell carcinomas in both Polk−/− and WT mice than BaP alone.
[Conclusion] Co-administration of ANF increased the carcinogenic potential of BaP in both Polk-/- and WT mice.

P-10*○ Saori Matsuo1), Kiyotaka Nakano2), Takashi Nishizawa2), Daisuke Komura3), Etsuko Fujii1,2), Atsuhiko Kato1),
Shin-ichi Funahashi2), Shumpei Ishikawa3), Masami Suzuki1,2)
1)Chugai Pharmaceutical Co., Ltd., 2)Forerunner Pharma Research Co., Ltd., 3)Tokyo Medical and Dental University[Objective] With xenograft tumor models, the tumor microenvironment is thought to largely differ depending on the site of engraftment,
but the detailed features have not been well studied. Here we have orthotopically and subcutaneously transplanted a cell line of humanesophageal-gastric junction cancer (OE19), and analyzed the characteristics by pathological and gene expression analysis.
[Materials and Methods] OE 19 cell were trasplanted into the subcutis (SC) or the serosa of the gastric wall (ORT) in scid miceand sampled at 3 weeks or 3 and 6 weeks after transplantation, respectively. Tissue sections were stained with H & E and Masson’s
trichrome stain and read under light microscope. Addtionally, mRNA was obtained from the samples, and human and mouse speciesspecific RNA sequencing was carried out.
[Results] Histopathologically, the SC tumors were well circumscribed, had scant stroma, and large ductal structures were formed.
ORT tumors were poorly circumscribed, with small ductal structures invading into abundant stroma, and also with multiple areas ofvascular invasion. The gene expression analysis revealed that several tumor-stromal interactions that are known to affect the tumor
microenvironment and migration were selectively enhanced in ORT tumors.
[Conclusions] By combining pathological and gene expression analysis, we found that with OE19 ORT tumors were more invasive andthere was enhanced stromal interaction compared to SC tumors.

̶ 163 ̶Poster Presentation

Comparison of morphology and gene expression profiles between orthotopic andsubcutaneous transplantation of a gastric cancer mouse model

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-11
Anticancer property and mechanisms of a action of newly synthesized drugs○ Saeko Ando1), Katsumi Fukamachi1), Harutoshi Matsumoto1), Naoki Yoshimi2), Masumi Suzui1)
1) Department of Molecular Toxicology, Granduate School of Medical Science and Medical School, Nagoya City University,2)Department of Pathology and Oncology, Faculty of Medicine, University of the Ryukyus

After discovering in vitro antiproliferative activity of a natural medium chain fatty acid, we eventually obtained a novel lead compound,palmitoyl piperidinopiperidine, named PPI (patented in 2014). PPI inhibited transcriptional activity of STAT3 in several human colon
carcinoma cell lines. We found that this drug selectively kills carcinoma cells at an effective dose level in vitro, and that this effectis attributed to nucleophilicity of the nitrogen atom in PPI’s structure by performing QSAR analysis. We then developed two drugs
named DPHE and DPH (patent pending) by improving nucleophilicity of PPI. The IC50 values were DPHE<DPH<PPI<5FU<S3I-201(a specific STAT3 inhibitor). DPHE/DPH induce apoptosis in HCT116 cells. In silico docking simulation exhibits that PPI can bindto SH2 domain of STAT3. DPHE/DPH inhibit transcriptional activity of STAT3 in human SW837 cells. These two drugs also affectprotein expression levels of pSTAT3, Bcl-2, and p53. The finding suggests that DPHE/DPH is able to exert anticancer effects via atranscriptional inhibition of STAT3.

P-12
Poster Presentation

Hyperglycemia deteriorates malignancy of colon cancer associated with colitis
induced by azoxymethane and dextran sodium sulfate in alloxan-induced type-1
diabetic mice
○ Kiyokazu Ozaki, Yuko Izumo, Nanayu Oshima, Yui Terayama, Tetsuro Matsuura
Lab of Pathology, Setsunan University

Cancer risk from diabetes has been reported to increase clinically and experimentally, and its risk is considered to be due tohyperinsulinemia, hyperglycemia and chronic inflammation. In this study, we investigated the effect of hyperglycemia on the colon
carcinogenesis. All female ICR mice were given azoxymethane (AOM) followed by dextran sodium sulfate (DSS) treatment. Then,they were allocated into 2 groups: control group (C) and diabetic alloxan-treated group (D). Mice were killed at 20 weeks (C20 and
D20 groups), and at 25 weeks (C25 and D25 groups). At 20 weeks, almost all tumors were detected in the mucosa of the rectum.
The incidence and multiplicity of adenocarcinoma in D20 group (93.8% and 2.3) were similar to those in C20 group (86.7% and2.2), and there was no significant difference in tumor size between 2 groups. At 25 weeks, the multiplicity and tumor size of rectal
adenocarcinoma in D25 group (3.2 and 3.00 mm) did not significantly increase but tended to rise compared to those in C25 group (2.4
and 2.37 mm). In addition, invasive adenocarcinoma of D25 group (47.1%) remarkably and significantly increased compared to that of
C25 group (6.7%). Therefore, the present study suggests that longer duration of hyperglycemia deteriorate malignancy of colon cancer
induced by AOM and DSS in alloxan-induced type-1 diabetic mice.

̶ 164 ̶

Poster Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-13
Ameliorating effect of Luo hanguo extract on dextran sulfate sodium-induced colitis
in mice○ Shuji Ogawa1), Katsuhiro Miyajima1,2), Karen Nagura2), Minami Nozawa2), Sae Harada2), Risako Yamaguchi2),
Mihoko Koyanagi3), Shim-mo Hayashi3), Atsushi Watanabe1,4), Noriko Kemuriyama2), Dai Nakae1,2)1)Dept. Food Nutr. Sci., Grad. Sch. TUA., 2)Tokyo Univ. Agricul., 3)San-Ei Gen F.F.I., Inc., 4)Asahi Kasei Medical Co., Ltd.

[Background] Luo hanguo is a fruit of a cucurbitaceous vine endemic to China, and its extract is used as a sweetener and known to haveanti-oxidative effects. In this study, in order to find out the preventing or ameliorating effects of food ingredients on colitis, the effect of
Luo hanguo extract (LHG) was examined in dextran sodium sulfate (DSS)-induced colitis model in mice.
[Materials and Methods] Male C57BL/6JJcl mice (8 weeks old) were divided into 5 groups (6 animals/group), and groups of control,
1.25% DSS, 1.25% DSS + 0.15% LHG, 1.25% DSS + 0.5% LHG and 1.25% DSS + 1.5% LHG were set. The experimental period was
5 weeks. DSS was administered by admixing into the drinking water, via cyclical administration (cycles of 7 days of DSS followed by
7 days of water). The LHG was administered continuously by admixing into the basal diet throughout the experimental period. At theend of the experiment, the animals were sacrificed and necropsied. The main organs, including the large intestine, were removed andweighed, and the length of the large intestine was measured. Additionally, analysis of inflammation-related genes and histopathologicalexamination were conducted.
[Results] DSS caused the shortening of the length, extensive and marked inflammation and upregulation of TNF-alpha in the colon.
Concomitant administration of LHG ameliorated or at least showed a tendency to ameliorate these changes.
[Conclusion] The above results indicate that LHG inhibits DSS-induced colitis.

P-14○Akihiro Hirata1), Kyoko Yoshizaki2), Naohito Nishii3), Mifumi Kawabe4), Takashi Mori4), Tokuma Yanai2), Hiroki Sakai2)
1)Division of Animal Experiment, Life Science Research Center, Gifu University, 2)Laboratory of Veterinary Pathology, Faculty of Applied
Biological Science, Gifu University, 3)Laboratory of Veterinary Internal Medicine, Faculty of Applied Biological Science, Gifu University,4)Laboratory of Veterinary Clinical Oncology, Faculty of Applied Biological Science, Gifu University[Introduction] Jack Russell Terriers (JRTs) with gastrointestinal polyps (GIPs) are recently increasing in Japan and there is a possibility
that it is a novel hereditary disorder in dogs. In this study, we investigated pathological features of the GIPs in JRTs and association with
germline mutations of APC gene, which was causative gene of familial adenomatous polyposis (FAP).
[Materials and Methods] Twenty JRTs with GIPs were examined. GIPs were analyzed pathologically. For mutation analysis of the APC
gene, genomic DNA extracted from whole bloods or paraffin sections of JRTs with GIPs, or those of JRTs without GIPs as normal
controls (n=6) were analyzed by PCR-direct sequencing method, and the sequence of their APC gene were compared.
[Results] Polyps were found in either or both of the stomach and colorectum in JRTs and most of the polyps were located in the gastricantrum and rectum. Notably, the polyps developed multifocally in 12 of 18 dogs including 5 dogs that had the lesions in both thestomach and colorectum. All gastric lesions were histopathologically diagnosed as adenocarcinomas or adenomas, except for a few
epithelial hyperplasias. All colorectal lesions, except for one adenoma, were adenocarcinomas. The DNA sequencing analysis revealed
that all JRTs with GIPs harbored the same germline mutation in the 5’ part of the APC gene.
[Conclusions] This disease in JRTs would be a canine counterpart of human FAP and would provide valuable information as a novel
FAP model.

̶ 165 ̶Poster Presentation

Gastrointestinal polyps in dogs with germline mutations of APC gene: a canine
counterpart of human familial adenomatous polyposis

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Poster Presentation

P-15*
Histopathologic study of histiocytic ulcerative colitis in dogs
○ Mizuho Uneyama1), James Chambers1), Ko Nakashima2), Kazuyuki Uchida1), Hiroyuki Nakayama1)1)Department of Veterinary Pathology, the University of Tokyo, 2)Japan Small Animal Medical Center[Background and Aim] Histiocytic ulcerative colitis (HUC) is a specific form of inflammatory bowel disease in young Boxer dogs anddisplays similar pathologic features to that of Whipple’s disease in human. The genetic background and Escherichia coli infection are
involved in pathogenesis of HUC. Recently, cases of HUC in non-Boxer breeds such as French Bulldog has been reported; however,the pathologic description of them is limited. In this study, we investigated the association of E. coli infection and pathologic features
including autophagic status in non-Boxer HUC.
[Materials and Methods] Colon tissues from 4 HUC dogs (3 French Bulldogs and 1 Basset Hound) were stained with HE, Gram,
Warthin-Starry, PAS and examined immunohistochemically for CD204, E. coli LPS, Iba1, LC3, p62 and Ubiquitin expression.
[Results and Discussion] Infiltration of macrophages with granular and PAS positive cytoplasm in the lamina propria was observed in
all cases. Gram negative, small rod-shaped bacteria were detected in macrophage cytoplasm. Macrophages were strongly positive for
CD204 and weakly positive for Iba1, and many E. coli LPS positive particles were found in the cytoplasm. All cases displayed p62
accumulation in macrophage, but only weak expression of LC3 was detected in one case. These results indicate that HUC in non-Boxer
breeds and HUC in boxer share same pathologic features. Our results also suggest that dysregulation of selective autophagy may be
associated with HUC pathogenesis.

P-16*
Poster Presentation

Hemorrhagic changes in canine liver and gallbladder induced by liposomal
formulations○ Keiko Makita-Suzuki1), Chihaya Kakinuma2), Yoshinori Sakata1), Tatsuya Yamakawa1), Akira Inomata1), Takefumi Hara1)
1)Pharmaceutical & Healthcare Research Laboratories, FUJIFILM Corporation, 2)Bioscience & Technology Development Center, FUJIFILM

Corporation[Background] Liposomal drugs have been recently approved that attenuate adverse effects and/or improved the efficacy of contained
agents, such as Doxil (liposomal doxorubicin (DOX)). In the present study, we examined pathological changes in canine liver andgallbladder following injection of Doxil or empty liposome (DOX-free liposome).
[Method] A single dose of Doxil or empty liposome was administered intravenously to eight-month-old male beagles (N=4/group) andgross necropsy was conducted at 24 h post-injection. The liver and gallbladder were then examined histopathologically.
[Result and Discussion] Reddish foci were observed in the liver (sub-adventitia of gallbladder) and gall bladder (serosa from bodyto bottom) at necropsy in 2 of 4 animals per treatment group. In histopathology, there were perivascular hemorrhage around central/
sublobular vein, or Glisson’s sheath, dilated lymphatic vessels around central vein in the liver, and hemorrhage in adventitia of thegallbladder. Decreased cytoplasmic granules in mast cell, beneath endothelium of hepatic vein, a location unique to canines werealso noted. No differences were observed in the incidence and severity of hemorrhagic changes between the two groups. These wereconsidered as acute changes, because they occurred within 24 h post-injection accompanying little cellular infiltration. Based on thesefindings, we speculate active substances released from mast cells contributed to the pathogenesis of hemorrhagic changes.

̶ 166 ̶

Poster Presentation

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P-17*
Participation of heterogeneous macrophages related to M1/M2 types inD-galactosamine-induced acute rat liver injury○ Nahid Rahman, Munmun Pervin, Mizuki Kuramochi, Mohammad Karim, Takeshi Izawa, Mitsuru Kuwamura, Jyoji Yamate
Veterinary Pathology, Osaka Prefecture University[Background and aim] Macrophages in pathological lesions are heterogeneous. Generally, M1/M2-macrophages play roles as injury andremodeling, respectively. Hepatic lesions induced by a single injection of D-galactosamine (D-GalN; 800 mg/kg, ip) were investigatedbased on M1/M2 polarization.
[Materials and Methods] Blood and liver samples were collected on 8 hr and 1, 2, 3 and 5 days after injection.
[Results] Extensive lesions characterized by sporadic coagulative necrosis, inflammatory cells and reparative fibrosis were seen ondays 1 and 2 with a significant increases of AST and ALT levels. On days 3 and 5, the lesions recovered to normal. M2-macrophages
reacting to CD163 increased on days 1 and 2, and then, M1-macrophages positive for CD68 increased on day 2, with simultaneous
increments of M1-related cytokines (TNF-α, IL-6, INF-γ) and M2-related cytokines (TGF-β1, IL-10, MCP-1, IL-4). MHC class II- andCD-204-positive macrophages showed increase in number on days 1 and 2; the former tended to M1 polarization and the latter to M2
polarization.
[Conclusion] Because Kupffer cells showed a positive reaction for CD163, D-GalN-induced lesions may be characterized by aquick appearance of CD163-positive Kupffer cell-derived M2 macrophages; thereafter, M1-/M2-macrophages with heterogeneous
immunophenotypes participated in extensive hepatic lesions consisting of both injury and reparative fibrosis.

P-18*○ Mizuki Kuramochi, Takeshi Izawa, Rahman Nahid, Mitsuru Kuwamura, Jyoji Yamate
Veterinary Pathology, Osaka Prefecture University[Background/Purpose] Damage-associated molecular patterns (DAMPs), which are released from injured cells, play important rolesin the pathogenesis of chemical-induced liver injury. We have already reported that DAMPs, particularly high mobility group box 1(HMGB1) may associate with TAA-induced rat acute liver injury. Here, we analyzed the roles of HMGB1 in TAA-induced rat liver
injury in more details.
[M & M] 7-week-old male F344 rats were injected with TAA (50 mg/kg BW, ip). Samples were collected on 6 hours to 72 hours.
Additionally, as a neutralizing model, anti-HMGB1 neutralizing antibody was injected.
[Results] On 6 hours, hepatocytes showed eosinophilic change, and then, on 18 hours necrotic hepatocytes appeared accompanied bymononuclear cell and neutrophil infiltration around the central veins. The levels of AST and ALT peaked on 24 hours. IHC for HMGB1
showed positive in nuclear on control samples. On 6 hours, injured hepatocytes showed positive reaction in their cytoplasm; it was seenon 12 and 18 hours. The expression of CXCL1, neutrophil chemotactic factor, and the number of neutrophils were increased on 6 hours;on 18 hours showed the peak. The expression and the number were suppressed by HMGB1 neutralizing.
[Conclusion] In TAA-induced hepatocyte injury, HMGB1 moves from nuclear to cytoplasm on injured hepatocytes, and induces theexpression of CXCL1, thereby promoting migration of neutrophil; thereafter, macrophage infiltration occurs, leading to hepatic injury.

̶ 167 ̶Poster Presentation

The role of damage-associated molecular patterns (DAMPs) for neutrophil andmacrophage migration in thioacetamide (TAA)-induced rat liver injury

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Poster Presentation

P-19
Metabolome analysis in the liver tumors and tissues of NASH model TSOD mice
○Anna Kakehashi, Naomi Ishii, Takahiro Okuno, Yoshiyuki Tago, Masaki Fujioka, Min Gi, Hideki Wanibuchi
Dept. Mol. Pathol., Osaka City Univ. Grad. Sch. Med.

The TSOD mice exhibits both obesity and diabetes associated with marked pancreatic islets hypertrophy and hyperinsulinemia, thus
resembling a common form of obese type 2 diabetes in humans. To uncover mechanisms of nonalcoholic steatohepatitis (NASH)associated hepatocarcinogenesis, we performed the histopathological, immunohistochemical and metabolome analysis of 20-week-old
TSOD mice liver tissues and tumors using the CE-TOFMS and CE-QqQMS. In the livers of TSOD mice, development of liver tumors
and increase in depositions of lipids, fibrosis and inflammatory cell infiltration were observed resembling the histopathological changesof human NASH liver tissue. In TSOD mice liver preneoplastic foci and tumors, increases of cellular proliferation and apoptosis were
obvious. Furthermore, in TSOD mice preneoplastic foci increase of 8-hydroxy-2’-deoxyguanosine was found in the nuclei. Metabolome
analysis demonstrated significant activation of glycolysis and elevation of GSH/GSSG reflecting the resistance of tumors to oxidative
stress. Furthermore, significant increase of arginine and decrease of glycine and methionine levels were found. The changes in argininelevel were likely be related to the decrease of arginase expression in tumors. The metabolome alterations could be induced to theactivation of mTOR pathway in the liver tumors of TSOD mice.

P-20
Poster Presentation

Effects of Siraitia Grosvenorii Extract on NASH-like lesions in F344 rats fed a cholinedeficient, methionine-lowered, L-amino acid-defined diet
○ Kinuko Uno1), Katsuhiro Miyajima1,2), Kanae Suzuki2), Kohei Kikuchi2), Ami Nakai2), Tsukasa Nagayoshi2), Soon Hui Teoh1),
Noriko Kemuriyama2), Mihoko Koyanagi3), Shim-mo Hayashi3), Shuji Ogawa1), Atsushi Watanabe1), Dai Nakae1,2)1)Dept. Food Nutr. Sci., Grad. Sch., Tokyo Univ. Agricul., 2)Tokyo Univ. Agricul., 3)San-Ei Gen F.F.I., Inc.

[Aim] The siraitia grosvenorii (SG) is a fruit of a cucurbitaceous vine endemic to China, and its extract is used as a sweetener andknown to exert various effects including anti-inflammatory and anti-carcinogenic, through the antioxidant property. The present study
was conducted to clarify its preventing or ameliorating effects on nonalcoholic steatohepatitis (NASH)-like lesions induced in Fischer
344 (F344) rats fed a choline-deficient, methionine-lowered, L-amino acid-defined (CDAA) diet.
[Materials and Methods] Male F344 rats (6 weeks old) were fed the CDAA or a control diet, and water solution of the SG extract(0.6%(w/v)) or distilled water for 2 weeks. At necropsy, the liver was removed, weighed and stored as frozen tissue or fixed in 4%
paraformaldehyde, to be used in histopathological examination and gene expression analyses.
[Results] The SG extract inhibited the overexpression of liver inflammatory genes and fibrosis, induced in the liver by the CDAA diet.
[Conclusion]It is suggested that the SG extract attenuates NASH-like lesions induced in F344 rats fed the CDAA diet.

̶ 168 ̶

Poster Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-21
Chronological Changes of Serum Parameters in the Course of the Nonalcoholic
Steatohepatitis-like Lesion in female SDT fatty Rats
○ Kanjiro Ryu1), Katsuhiro Miyajima1,2,3), Soon Hui Teoh 2), Masami Shinohara4), Takeshi Ohta5), Keiichi Ohata6), Kinuko Uno2),
Noriko Kemuriyama3), Shuji Ogawa1), Atsushi Watanabe1,7), Dai Nakae1,2,3)
1)Dept Nutr Sci Food Safety, Grad Sch, Tokyo Univ Agricul,, 2)Dept Food Nutr Sci, Grad Sch, Tokyo Univ Agricul, 3)3Dept Nutr Sci Food

Safety, Facul Appl Sci, Tokyo Univ Agricul,, 4)Tokyo Animal Diet Dept, CLEA Japan, Inc., 5)Biol/Pharmacol Res Lab Central Pharm Res
Inst, Japan Tobacco Inc., 6)CMIC HOLDINGS Co., Ltd., 7)Asahi Kasei Medical Co., Ltd.

[BACKGROUND] The present study aimed to examine a potential usefulness of L-FABP, a urinary biomarker of renal disorders, as aserum biomarker of NASH, using female SDT fatty rats.
[METHODS] Twelve each of female SDT fatty and control SD rats, 6 weeks old, were fed a basal diet ad libitum for 10 weeks. Blood
sampling was performed every 2 weeks, and necropsy was performed at the end of the experiment to obtain liver, kidney and blood
samples for the analyses.
[RESULTS] In SDT fatty rats, serum GLU increased at 8 weeks of age and further thereafter. Serum T-CHO and TG were highthroughout and became significant after 10 weeks of age. Serum INS and L-FABP increased until 10 weeks of age and then decreased.
In the liver at 16 weeks of age, prominent hepatocellular fatty change and hypertrophy, and mild inflammation and fibrosis wereobserved, which was diagnosed as NASH-like lesion.
[DISCUSSION] The above resultsindicate that serum L-FABP increases in the early phase of NASH-like lesions in female SDT fatty
rats, and may be useful as a serum biomarker of NASH.

P-22*○ Linfeng Gao1), Noriko Kemuriyama2), Natsumi Saito2), Mieko Watanabe2), Ayako Takei2), Seiya Tazoe2), Kanjiro Ryu1),
Kinuko Uno3), Soon Hui Teoh3), Shuji Ogawa3), Atsushi Watanabe3,4), Katsuhiro Miyajima1,2,3), Dai Nakae1,2,3)
1)Dept. Nutr. Food Safety, Grad. Sch. Agricul., Tokyo Univ. Agricul., 2)Dept. Nutr. Food Safety, Facul. Appl. Biosci., Tokyo Univ. Agricul.,3)Dept. Food Nutr. Sci., Grad. Sch. Agricul, Tokyo Univ. Agricul., 4)Asahi Kasei Medical Co., Ltd.

[Aim] Sterol regulatory element-binding proteins (SREBPs) are transcription factors that regulate lipid synthesis. Overexpression of
SREBPs promote obesity and disorders of the lipid metabolism. The aim of this study was to investigate in vitro and in vivo a potentialof SREBPs not only to regulate metabolism, but also to be involved in chronic inflammation occurring cases including NASH.
[Methods] In vitro, altered gene expression by the SREBP-1 knocking-down with siRNA was assessed in HepG2 cells, using real timePCR to analyze known gene expression, and RNA-Seq. for the comprehensive exploration. In vivo, the expression of the genes detectedby the RNA-Seq. in HepG2 cells, and their product proteins in the NASH-like liver induced in male C57BL6 mice fed a modified
choline-deficient, L-amino acid-defined (mCDAA) diet.
[Results] In the SREBP-1-knocked-down HepG2 cells, the SREBP-1 expression was decreased. RNA-Seq. revealed the decrease of
the IL-21R expression, which was confirmed by real time-PCR. In addition, the IL-21R expression was significant increased by theoverexpression of SREBP-1a and SREBP-2 in HEK293 cells. Furthermore, the increased IL-21R expression was confirmed by both realtime-PCR and immunohistochemistry in the NASH-like liver of mice fed the mCDAA diet.
[Conclusion] The present results indicate that SREBP-1 and SREBP-2 may participate in the chronic inflammation occurring in NASH
through the regulation of the IL-21R expression.

̶ 169 ̶Poster Presentation

Effects of Lipid Metabolism-related Gene SREBP-1 on ER Stress and Chronic
Inflammation

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Poster Presentation

P-23
Evaluation of hepatotoxicity in F344 rats after repeated 28-day administration of
acetamide○ Yuji Ishii1), Remika Kikuchi1,2), Aki Kijima1), Shinji Takasu1), Kumiko Ogawa1), Takashi Umemura1,2)
1)Division of Pathology, National Institute of Health Sciences, 2)Faculty of Animal Health Technology, Yamazaki University of Animal HealthTechnology[Introduction] Acetamide is known to be a hepatocarcinogen in rats. However, the underlying mechanisms remain unknown. In thisstudy, we investigated hepatotoxicity in rat after repeated 28-day administration of acetamide and its possible contribution to thehepatocarcinogenesis prior to the scheduled comprehensive toxicity study using gpt delta rats.
[Method] Six-week old male F344 rats were fed a diet containing 1.25, 2.5 and 5.0% acetamide for 28 days.
[Results] Serum ALT level was increased from 1.25% group, AST and ALP levels being increased from 2.5% group. In the 2.5% group,
mitosis and single cell necrosis of hepatocyte, oval cell hyperplasia and basophilic hepatocytoplasmic inclusion body with positive
Feulgen reaction were found. Immunohitstochemical staining showed increases in cleaved caspase 3 and Ki67 positive cells. These
histopathological changes were not observed in 1.25% group, and were slightly or not found except oval cell hyperplasia in 5.0% group.
[Discussion] Hepatocyte apoptosis and cytoplasmic inclusion body might result from abnormal cell division. Considering that the
middle dose was close to the carcinogenic dose, cell proliferation observed in 2.5% group might contribute to acetamide-induced
hepatocarcinogenicity. These results suggest that the NOAEL of hepatotoxicity in this study was 1.25%. Since a dose of 5.0% exceeded
the maximum tolerated dose of acetamide, the highest dose in the comprehensive study will be set to be 2.5%.

P-24
Poster Presentation

Suppressive effects of Bear Bile Powder on early hepatocarcinogenesis in SD rats
○ Meilan Jin, Mei Zhang, Qian Tang, Zili Wang, Jian Wang
Laboratory of Veterinary Pathology, College of Animal Science and Technology, Southwest University

Bear Bile Powder (BBP) is a natural medicine made with drying obtained from gall bladder of black bear, is known to haveantimicrobial, antipyretic, analgesic, anti-inflammatory, antitumor effect. However, whether BBP have antitumor effect to early
hepatocarcinogenesis in rats, is still unclear. To clarify the suppressive effects of the BBP on early hepatocarcinogenesis in SD rats, SD
rats in the promotion periods were oral administered 200 or 400 mg/kg BBP for 2 or 9 weeks. The grouping is as follows: gr. 1: DEN
alone; gr. 2: DEN+PBO; gr. 3: DEN+PBO+BBP-L (200 mg/kg); gr. 4: DEN+PBO+BBP-H (400 mg/kg). The final body weights andabsolute liver weights in the gr. 3 and gr. 4 were significantly decreased compared to the gr. 2. The number and area of GST-P positivefoci were showed decrease tendency in the gr. 3 or 4 as compared to the gr. 2. In particular, there was also a statistically significant
difference in the low dose group. Therefore, the Ki67 positive ratio of the gr. 3 and gr. 4 were significantly decreased compared to thegr. 2. In the analysis of gene expression, p27 related to cell proliferation, p53, p21, Bax, Bcl-2, caspase 3, caspase 8, caspase 9 related
to apoptosis in the gr. 4 were significantly increased as compared to the gr. 2. These results may suggest that the BBP high dose to early
hepatocarcinogenesis in rats has a suppressive effect and the induction of apoptosis and the inhibition of cell proliferation are involvedin those mechanisms.

̶ 170 ̶

Poster Presentation

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P-25
Chronic toxicity and carcinogenicity study of diphenylarsinic acid in F344 rat○ Takashi Yamaguchi, Min Gi, Masaki Fujioka, Anna Kakehashi, Hideki Wanibuchi
Department of Molecular Pathology, Osaka City University Graduate School of Medicine[Background] Diphenylarsinic acid (DPAA), a chemical warfare-related neurotoxic organic arsenical, is present in the groundwaterand soil in some regions of Japan due to illegal dumping after World War II. The purpose of these studies was to evaluate the potential
toxicity and carcinogenicity of DPAA when administered to rats in their drinking water.
[Methods] DPAA was administered to male and female F344 rats at concentrations of 0, 5, 10, and 20 ppm in their drinking water for 52(chronic toxicity study) and 104 (carcinogenicity study) weeks.
[Results] Chronic toxicity study: In females 20 ppm DPAA significantly increased ALP and gamma-GTP, and 10 and 20 ppm DPAA
significantly increased TCHO compared to controls. Dilation of the common bile duct outside the papilla of Vater and stenosis of thepapilla of Vater was observed in all male and female rats administered 20 ppm DPAA. Moreover, the incidence of intrahepatic bile
duct hyperplasia was significantly increased in male and female rats treated with 20 ppm DPAA. Carcinogenicity study: There were no
significant increase of tumor incidence in any organ or tissue of the 5, 10, 20 ppm DPAA-treated male or female F344 rats.
[Conclusion] These results suggest that DPAA is toxic to the bile duct epithelium in F344 rats. The NOAEL of DPAA were estimated tobe 10 ppm for males and 5 ppm for females under the conditions of this study. Carcinogenicity study demonstrated that DPAA is not acomplete carcinogen in male or female F344 rats.

P-26*○ Shinji Takasu1), Kurumi Nakamura1,2), Yui Ishiguro1,2), Yuji Ishii1), Aki Kijima1), Kumiko Ogawa1), Takashi Umemura1,2)
1)Division of Pathology, National Institute of Health Sciences, 2)Faculty of Animal Health Technology, Yamazaki University of Animal HealthTechnology[Introduction] We previously reported that GST-P positive (GST-P+) foci induced by diethylnitrosamine, a genotoxic carcinogen,were increased after cessation of the treatment, but those by furan, unclassified carcinogen, were decreased. To investigate whether
other genotoxic carcinogens or furan derivatives induce the same phenomena, we examined their kinetics using 2-amino-3methylimidazo[4,5-f]quinolone (IQ) or estragole (ES) as a genotoxic carcinogen, or 2-methylfuran (2-MF) or 2-pentylfuran (2-PF) as
furan derivatives.
[M&M] 6-week old male F344 rats were given IQ (100 ppm) in diet or 2-MF (30 mg/kg), 2-PF (100 mg/kg) or ES (150 mg/kg) by
gavage for 13 weeks. Quantitative analysis for GST-P+ foci was performed just after the cessation of the treatment and 7 weeks later.
[Results] In the IQ group, the number and area of GST-P+ foci were not significantly changed after cessation. Those in the 2-MF, 2-PF
and ES group were decreased. GST-P+ foci having mosaic appearance were scattered in the 2-MF and ES group.
[Discussion] Difference in the kinetics between the IQ and ES groups indicates that GST-P+ foci induced by genotoxic carcinogens
might not have common features. The same phenomenon as in the case of furan was observed in 2-MF and 2-PF groups, indicating that
GST-P+ foci induced by furan derivatives commonly possess regression of GST-P+ hepatocytes. Mosaic appearance might result fromthe fact that regressing GST-P+ hepatocytes exist in normal-appearing GST-P+ foci.

̶ 171 ̶Poster Presentation

The kinetics of GST-P positive foci after cessation of treatment with various
carcinogens in the liver of rat

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Poster Presentation

P-27
Immunohistochemical study on myoepithelial phenotype in canine hepatic tumors○ Mitsuru Kuwamura1), Yuka Tsuji1), Mizuki Kuramochi1), Takeshi Izawa1), Hideo Akiyoshi2), Jyoji Yamate1)1)Laboratory of Veterinary Pathology, Osaka Prefecture University, 2)Laboratory of Veterinary Surgery, Osaka Prefecture University

Myoepithelial cells are found in the canine mammary and salivary tumors. However, normal bile duct has no myoepithelial cells. We
encountered a unique hepatic tumor with myoepitheial phenotype. We examined myoepitheial phenotype of representative canine
hepatic tumors.
[M&M] An 11-year-old female miniature dachshund dog was presented with a solid soft gray color mass on the hepatic lateral left lobe.
We examined this tumor and representative canine hepatic tumors histopathologically and immunohistochemically.
[Results] Histologically, the mass consisted of neoplastic proliferation of cells with round nuclei and eosinophilic and vacuolated
cytoplasm arranged in alveolar, trabecular and diffuse patterns. Immunohistochemically, the neoplastic cells were positive forpancytokeratins (CK AE1/AE3), CK5, CK14, vimentin, Sox9 and myoepithelial markers (α-smooth muscle actin, p63 and calponin).
Based on the morphological and immunohistochemical findings, a diagnosis of carcinoma with myoepithelial phenotype was made. We
found that myoepithelial differentiated tumor cells in cholangiocarcinoma showed similar immunohistochemical features, except for the
CK19 positivity. Neoplastic cells with myoepithelial phenotype were not observed in hepatocellular carcinoma.
[Discussion] The present case is the first report of hepatic carcinoma with myoepithelial phenotype in veterinary medicine. Some
neoplastic cells in cholangiocarcinoma may have potential to differentiate into the myoepithelial cells.

P-28*
Poster Presentation

Pathological examination of spontaneous vacuolation of pancreatic acinar cellin mice○ Kyohei Yasuno1), Saori Igura2), Shinobu Hakamata1), Keiko Okado3), Yuko Yamaguchi2), Kiyonori Kai1), Kazuhiko Mori1)
1)Medicinal Safety Research Laboratories, Daiichi Sankyo Co., Ltd., 2)Pathology Department, BoZo Research Center Inc.,

3)Translational Research Department, Daiichi Sankyo RD Novare Co., Ltd.

[Aim] Vacuolation of pancreatic acinar cell is spontaneously observed in mice, but these cases are rare and have not been well
documented. Herein, we present a detailed pathological examination on this lesion.
[Animals] Gene X knockout (KO) mice with backgrounds of C57BL/6J mouse, ICR(CD-1) mice, B6C3F1 mice, and rasH2 mice wereused.
[Results] The number of animals with the fine vacuoles in pancreatic acinar cell was 2/15 in KO mice, 4/298 in ICR(CD-1) mice, 1/110
in B6C3F1 mice, and 3/297 in rasH2 mice. The vacuoles were usually observed in a unit of the acinus and these lesions were spreadthrough the pancreas geographically. In the acinar cell, the vacuoles were located between the ergastoplasm and zymogen granules atthe basal and luminal aspects, respectively. These vacuoles contained weakly basophilic material which was positive for periodic acid
Schiff reaction. Immunohistochemically, the vacuoles were positive for calreticulin antibody, a molecular chaperone which is a sensor
of endoplasmic reticulum stress. Electron microscopy revealed globular dilatation of rough endoplasmic reticulum (rER) and showed
beaded appearance. Accumulation of proteinous material showing mosaic electron density was observed in the enlarged rER.
[Conclusion] The vacuolation of the pancreatic acinar cell is considered to be accumulation of misfolding proteins and enlargement of
rER. The typical lesions were observed in various strains and considered as a rare spontaneous lesion in mice.

̶ 172 ̶

Poster Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-29
Pancreatic parabiliary lobe cyst
○ Yuma Yamashita, Tomo Sasaki, Takaaki Doi
Toxicological Research Group, Drug Development Research Laboratories, Maruho Co., Ltd.

[Introduction] We report a case of a cyst observed at the parabiliary lobe of the pancreas in a young Sprague-Dawley (SD) rat.
[Case] The animal was a 10-week-old female SD rat in a test article group in a 4-week repeated dose toxicity study. A cyst containing
clear fluid was observed during necropsy at the parabiliary lobe of the pancreas. There were no abnormalities in clinical signs, bodyweight, food consumption, hematology and blood chemistry.
[Result] The cyst wall was lined by flattened cuboidal epithelial and mucus-secreting cells. It was surrounded by abundant collagenfibers and a smooth muscle layer accompanied by mild to moderate inflammatory cell infiltration. There was destruction of the cystic
wall in the area of moderate inflammation. In addition, there were pancreatic duct-like tubular structures and pancreatic acinar-like cells
between the collagen fibers. Epithelial cells were positive for SOX9. There were no abnormalities in other organs.
[Conclusion] Considering the age of the animal and the lack of other findings, the cyst is presumed to be a spontaneous congenitalabnormality. On the basis of the location of the cyst, morphology of epithelial cells and presence of surrounding smooth muscle layer,
the origin of the cyst was most likely the common bile duct (hepatoenteric duct).

P-30*○ Hiroyuki Kato, Aya Naiki-Ito, Shugo Suzuki, Satoru Takahashi
Dep. Exp. Pathol. Tumor Biol., Nagoya City Univ.

[Background] New strategy for preventing pancreatic cancer is urged because of its poor prognosis and none of effective therapeutics.
Recent study showed a consistent inverse association between pancreatic carcinoma and allergic disease such as asthma or nasal
allergies.
[Materials and Methods] In this study, to assess the chemopreventive effects of anti-allergic drug, we used syrian golden hamsters modelat which were injected four times subcutaneous administration of N-nitrsobis(2-oxopropyl)amine and were administrated test substrates
with quick fat diets. Exp 1) Forty-eights hamsters divided into 4 groups, Montelukast (Mont) 0.2 mg/kg./day, Levocetirizine (Levo) 0.1
mg/kg/day, Bambterol (Bamb) 0.2 mg/kg/day each in driniking, and control. Exp 2) Sixty hamsters divided into 4 groups, Mont 0.1, 0.2,
0.4 mg/kg/day and control.
[Results] Exp 1) The body and organ weights were increased in Levo group compared to control. No differences were found inincidence and multiplicity of pancreatic cancer in Levo or Bamb. While Mont group had tended to decrease both incidence andmultiplicity of pancreatic cancer compared to control group. Exp 2) The body and organ weights were not different among the groups.
The multiplicity of pancreatic cancer were significantly suppressed by Mont 0.4 mg/kg/day treatment (0.4 ± 0.5 v.s. Control 1.1 ± 1.0,
P<0.05).
[Conclusion] Montelukast have potential as a chemopreventive agent for pancreatic cancer. The analysis of mechanisms in vitro isundergoing.

̶ 173 ̶Poster Presentation

Chemopreventive effects of anti-allergic drug on pancreatic carcinogenesis

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-31*
SGLT2 Expression in the Kidney of Male SDT Fatty Rats
○ Soon Hui Teoh1), Katsuhiro Miyajima1,2), Yuka Nakamura2), Takeshi Ohta3), Masami Shinohara4), Kinuko Uno1),
Noriko Kemuriyama2), Dai Nakae1,2)1)Dept. Food Nutr. Sci., Grad. Sch. Tokyo Univ. Agri., 2)Dept. Nutr. & Food Safety, Tokyo Univ. Agri., 3)Japan Tobacco Inc.,

4)CLEA Japan Inc.

[Background] SGLT2 inhibitors are clinically used to reduce hyperglycemia in human type 2 diabetes and renal complications. The
SDT fatty rat was widely used in pharmacological studies of type 2 diabetes and complications, but the pathophysiological features withregard to aging and SGLT2 expression in their kidney have not yet been reported.
[Aim] This study pathologically analyzed the progression of diabetic changes and SGLT2 expression in the kidney of SDT fatty rats.
[Materials and Methods] Male SD and SDT fatty rats were sacrificed at 17 and 60 weeks old, when kidney samples were immediately
fixed or kept frozen to be used in analyses.
[Results] In the kidney of SDT fatty rats, fibrosis and adhesion of the glomeruli, regeneration and hyaline cast in the tubules, interstitial
fibrosis and inflammatory cell infiltration were progressed with age. The gene expression and positive regions of immunohistochemistryof SGLT2 were increased in 60 weeks of age from 17 weeks in both of the SDT fatty and SD rats, and the magnitudes were in the samerange between 17 weeks old SDT fatty and 60 weeks old SD rats.
[Conclusion] Renal disorders were progressed with age in the SDT fatty rats similarly to the humans, indicating that the animal isuseful as a model of human type 2 diabetes. In addition, it is noteworthy that the present study revealed the aging-caused increase of the
SGLT2 expression in the kidneys of SDT fatty rats.

P-32*
Poster Presentation

Spontaneous renal tubular hypertrophy observed in young (11-week) ICR mouse○ Hyun-Ji Choi1), Min-Jung Kong1), Hye-Jeong Kim1), Masami Suzuki2), Hijiri Iwata3), Chan-Hee Park1)
1)C&C Research Laboratories, 2)Chugai Pharmaceutical Co., Ltd., 3)LunaPath LLC

Renal tubular hypertrophy is often observed in chronic progressive nephropathy in old aged mice and is believed to be a compensatory
mechanism related to a decline in renal function. However, published incidence data of tubular hypertrophy in young mice is hard tofind. In the 4-week acute repeated toxicity study, renal tubular hypertrophy was observed in 2 ICR mice. To investigate the origin andpathogenesis of kidney finding, we performed additional histopathological analysis. Kidney samples of two females were additionallysectioned 25–50 μm apart serially and stained with H&E. Hypertrophic tubules were lined by tall cuboidal to columnar cells. The
cytoplasm was pale and eosinophilic and the nuclei were located apically. In the serial sections, hypertrophic tubules were observed
continuously and they were unilateral in both cases which suggests these are incidental events rather than systemic effects. In addition, acystic structure was observed between the hypertrophic tubules in both cases and considered to be the cause of the tubular hypertrophy.
As the mice were young and there were no accompanied lesions like inflammation, tubular dilatation, atrophy, or necrosis, and not muchtime to progress nephropathy, this change was considered to be spontaneous and related to renal developmental process. We would liketo suggest this lesion as one of the spontaneous lesions observed in young ICR mice.

̶ 174 ̶

Poster Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-33*
Inhibitory Effects of Mead Acid Supplementation on Acetaminophen-Induced Renal
Toxicity in Rats
○Akiko Takenouchi1), Miyu Hiratsuka1), Maria Miura1), Yumiko Shinke1), Yukari Hirayama1), Chihiro Koyama1),
Yuichi Kinoshita2), Kei Hamazaki3), Katsuhiko Yoshizawa1)
1)Department of Food Sciences and Nutrition, School of Human Environmental Sciences, Mukogawa Women’s University, 2)Division of

Diagnostic Pathology, Wakayama Medical University Hospital, 3)Department of Public Health, Faculty of Medicine, University of Toyama[Background] A mode of action of acetaminophen (APAP)-induced renal toxicity is supposedly via N-acetyl-p-benzoquinone imine. In
this renal toxicity model we explored the inhibitory effects of mead acid (MA), which is an n-9 PUFA of dietary supplementation.
[Methods] 7-week-old male SD rats received a single intraperitoneal injection of 500 mg/kg APAP and serum and kidney samples
were collected at 24 and 48hrs after. Basal or 4.8%MA diets were given from one week before the APAP injection until sacrifice.
Experimental groups were basal diet + vehicle, 4.8%MA diet + vehicle, basal diet + APAP, and 4.8% MA diet + APAP. Biomarkers
of renal toxicity (BUN, CRE), histopathology of kidney and immunohistochemistry for drug-metabolizing enzyme (CYP2E1) andoxidative stress (HO-1, TG) were performed. The d-ROM and BAP tests were conducted to detect oxidative stress and anti-oxidative
activity in serum, respectively.
[Results] In the basal diet + APAP group, the BUN and CRE levels were significantly increased and acute necrosis and dilatation in therenal outer medullary area were present. Tubular necrosis was detected mainly in proximal tubules which was positive for CYP2E1.
HO-1 and TG signals were also seen in these epithelia. In contrast, these tubular changes and expression of HO-1 signal were reduced in
the rats fed the MA diet.
[Conclusion] MA supplementation inhibited APAP-induced renal toxicity via the decreased level of oxidative stress in kidney.

P-34*○ Shiori Murase, Masami Kato, Takahito Imaizumi, Tsuyoshi Arai, Yoshiyasu Konuma, Hisami Matsushita, Katsumi Endo,
Tsuneo Koike, Tomomi Kanehara, Jun Imai, Tadashi Itoh, Hitoshi Kimura
Nihon Bioresearch Inc.

[Background] It has been reported that minipigs have similarities to humans in composition of plasma cholesterol (Cho) and propertiesof atherosclerosis lesions. Therefore, minipigs which are fed with high-fat and Cho diet are used as an atherosclerosis model. Renal
damages related to atherosclerosis are known as human diseases, but these animal models have not been established.
[Aim] Minipigs, which have similar anatomical structure of the kidney to humans, were fed with high-Na and Cho diet, and histologicalchanges in the vessels, kidneys and other organs were assessed.
[Materials and Methods] Six female Göttingen minipigs aged 8 months were fed with 800 g of high-fat (beef tallow: 5%), Cho (1.5%),
and Na (5%) diet daily. Hematological analysis was performed intermittently. After 7 months, the animals were necropsied. Histologicalchanges in the thoracic aorta, abdominal aorta, heart, lungs, liver, pancreas, spleen and kidneys were examined.
[Results] T-Cho, HDL and LDL were increased in the 1st week. The following findings were also noted: formation of obvious atheroma
in the coronary arteries and abdominal aorta, accumulation of lipid particles in the hepatic tissues, foamy cell infiltration in the splenic
red pulps, basophilic changes in the renal tubules, vacuolation of glomerular constitutive cells and interstitial tissue edema in the renal
papilla.
[Conclusion] Some kinds of renal damages and formation of atheroma were caused in minipigs by feeding high-fat, Cho and Na diet.

̶ 175 ̶Poster Presentation

Histological findings in minipigs fed with high-cholesterol and high-sodium diet

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Poster Presentation

P-35*
A spontaneous hyaline glomerulopathy in a young Crl:CD1(ICR) mouse○ Hironobu Nishina, Akane Kashimura, Mao Mizukawa, Katsuya Fujiki, Yuuichi Murakami, Nobuyuki Baba, Eisuke Kume
Safety Research Laboratories, Sohyaku Innovative Research Division, Mitsubishi Tanabe Pharma Co., Ltd.

[Background] Hyaline glomerulopathy is the glomerular lesion whose features are immune complex deposition and no proliferation of
the mesangial cells. Spontaneous hyaline glomerulopathy is very rare in young mice. Here, we report a case of hyaline glomerulopathy
with severe immune complex deposition in a young mouse.
[Case] The animal was a 15-week-old female ICR mouse kept for environmental monitoring, and was euthanized because of an abrupt
body weight loss. The necropsy findings were as follows; discoloration and roughness of surface of the kidney, edema of the cervicalsubcutis, small in the thymus and spleen, and white spot in the liver. The kidney was examined by HE stain, special stains; PAS, PAM,
Congo red, and Masson’s trichrome (MT), immunohistochemistry; anti-IgM and anti-IgG, and electron microscope (EM).
[Result] Glomerular enlargement, dilatation, atrophy, and regeneration of renal tubule, and interstitial inflammation were observed.
Eosinophilic material deposited severely in the glomerular. Mesangial cells were not proliferated. The material was strongly positive foranti-IgM, anti-IgG, PAS, and was stained red by MT. Congo red was negative. PAM and EM revealed the material deposited inside of
the glomerular tufts.
[Conclusion] These results indicate that the eosinophilic material is immune complex. Based on the histological features, we diagnosed
hyaline glomerulopathy. This case is helpful knowledge as the spontaneous lesion in toxicological studies.

P-36*
Poster Presentation

The dose and time dependency of γ-H2AX formation induced by bladder carcinogens○ Takanori Yamada1,2), Takeshi Toyoda1), Kohei Matsushita1), Tomomi Morikawa1), Kumiko Ogawa1)
1)Div. Pathol., Natl. Inst. Health Sci., 2)Lab. Vet. Pathol., Tokyo Univ. Agri. Tech.

[Background] We have reported that immunostaining for γ-H2AX, a biomarker of DNA damage, can detect bladder carcinogens in
28-day toxicity study of rats. The aim of the present study was to examine the dose response and time course of γ-H2AX formation in
the rat urinary bladder treated with carcinogen.
[Methods] Six-week-old male F344 rats were orally treated with 0, 1, 10, 100, 200, or 500 ppm BBN, a genotoxic bladder carcinogen,and 0, 0.3, 1, or 3% melamine, a non-genotoxic bladder carcinogen, for 2 days and 4 weeks. Immunohistochemistry for γ-H2AX andKi67, a cell proliferation marker, was performed in the bladder epithelium.
[Results] In the BBN groups, γ-H2AX formation and Ki67 expression were significantly increased from 10 ppm and 100 ppm,
respectively, with a clear dose-dependency at both day 2 and week 4. In the melamine groups, significant increases in γ-H2AXand Ki67-positive cells were observed only in the highest dose (3%) at both periods. In double-immunofluorescence staining, while
γ-H2AX- and Ki67-positive cells were almost colocalized in the urothelium of rats treated with melamine, γ-H2AX single positive cells
were detected in the BBN groups.
[Conclusion] Our results demonstrated that γ-H2AX formation shows the clear dose dependency and can detect bladder carcinogens
earlier than 4 weeks. Furthermore, it may be possible to determine whether genotoxic mechanism is associated with bladdercarcinogenesis by analyzing the colocalization of γ-H2AX-Ki67.

̶ 176 ̶

Poster Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-37
Evaluation of inhibitory effects of acetazolamide on the mouse bladdercarcinogenesis○ Min Gi, Masaki Fujioka, Nao Yukimatsu, Takahiro Okuno, Takashi Yamaguchi, Anna Kakehashi, Hideki Wanibuchi
Department of Molecular Pathology, Osaka City University Graduate School of Medicine

The extracellular pH of tumor tissues is often acidic, and an acidic microenvironment is closely associated with migration and invasionof tumor cells, leading to more aggressive behavior. carbonic anhydrases (CAs) play an important role in maintaining pH homeostasis.
Expression of CAs have been associated with the invasion and progression of human urothelial carcinoma (UC). The purpose of thepresent study is to evaluate the effects of CAs inhibitor acetazolamide (Ace) on the BBN-induced mice bladder carcinogenesis. Malemice were treated with 0.05% BBN in their drinking water for 10 weeks, then followed by Cisplatin (Cis) or/and ACE treatment for
12 weeks. At the end of week 22, the incidence of total UCs was significantly decreased in the BBN-Ace+Cis group. Moreover, theincidences of muscle invasive UC were significantly decreased in the BBN-Ace and BBN-Ace+Cis groups. These findings demonstrated
the inhibitory effects of Ace against the invasion of UC in mice, and suggested that combination treatment of Ace and Cis may provide a
new therapeutic strategy to improve the outcomes of UC patients.

P-38○ Takeshi Toyoda1), Takanori Yamada1,2), Kohei Matsushita1), Tomomi Morikawa1), Kumiko Ogawa1)
1)Division of Pathology, National Institute of Health Sciences, 2)Laboratory of Veterinary Medicine, Tokyo University of Agriculture andTechnology[Background] Although recent large-scale genome analysis revealed genes associated with bladder carcinogenesis, the roles in the earlystage of bladder tumorigenesis are still unknown. In the present study, the gene expression profile in the bladder mucosa of rats treatedwith bladder carcinogens was analyzed to clarify their effect on cancer development in the early stage, and to detect novel biomarkers of
bladder carcinogens.
[Methods] Six-week-old male F344 rats were administered 0.05% N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine (BBN), 3% uracil, 0.8%
o-toluidine, and 1% o-anisidine in diet or drinking water for 4 weeks. Expression levels of genes in 5 categories, which are known to
be associated with bladder carcinogenesis, were analyzed by PCR array. Immunohistochemical staining for genes that showed highexpression was performed.
[Results and Discussion] Increased expression of genes associated with cell cycle, DNA damage, and Hedgehog signaling pathway
was induced by all 4 chemicals examined, suggesting the important roles in the early stage of bladder carcinogenesis. Because changesof expression pattern of chromatin modification enzymes and remodeling factors were relatively low in the all treatment groups, they
may be important in the later stage or progression. Among the factors showing increased expression in several groups, at least 7 factors(Runx2, Birc5, Cdc6, etc.) were confirmed to be highly expressed in the bladder urothelium.

̶ 177 ̶Poster Presentation

Gene expression analysis in the early stage of bladder carcinogenesis and search fornovel biomarkers of bladder carcinogen

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Poster Presentation

P-39*
Time-dependent analysis of peumotoxicity caused by repeated oral administration of
Cisplatin in rats
○ Yui Terayama, Makoto Sato, Yukari Nishimura, Takuma Tsuchiya, Takayasu Moroki, Keisuke Kitaura, Tsuyoshi Yoshikawa
Nonclinical Research Center, Tokushima Research Institute, Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd.

Introduction: Cisplatin (CP) is well-known for its nephro and ototoxicity, however there are few reports on the peumotoxicity. In thepresent study, we try to investigate the time-dependent peumotoxicity caused by oral administration of CP in rats.
Methods: Six-week-old male SD rats were orally administered CP (0, 3.5 mg/kg/day) repeatedly, and 5 rats were sacrificed on thefollowing day 1, 3, 7, 14 and 28 of administration (Day 2, 4, 8, 15, 29).
Results: On Day 4, necrosis of pneumocytes and hyperplasia of type 2 pneumocytes were observed. On Day 8, necrosis ofpneumocytes, hyperplasia/hypertrophy of type 2 pneumocytes were observed in all treated rats, and interstitial macrophage andneutrophil infiltration were also observed. In addition, hyaline membrane, multifocal hemorrhage with vascular endothelium injury, andinterstitial fibrosis with marked expression of α-SMA positive myofibroblasts were observed in some animals. On Day 15, pneumocyte
injury was continuously observed, and on Day 29, the lung lesions were exacerbated with fibrosis.
Conclusion: Repeated oral CP administration causes pneumocytes injury, and some animals turned into acute interstitial pneumonia at
one week of administration. When the lung lesions did not exacerbate at early stage of administration, the pneumocyte injury continues
throughout the administration period and fibrosis progresses, then CP administration causes interstitial pneumonia at 1 month ofadministration.

P-40*
Poster Presentation

Effects of administration volume on bronchoalveolar lavage fluid test andhistopathological findings in rat treated with bleomycin intratracheally○ Taiki Sugiyama, Mai Morioka, Takamasa Numano, Hitomi Higuchi, Mayumi Kawabe, Yukinori Mera
DIMS Institute of Medical Science, Inc.

[Background and Aim] Bleomycin is well known to cause pulmonary fibrosis as a side effect. Bleomycin-induced pulmonary fibrosis
animal model has been used in pharmacological studies. However, there is a little knowledge about the effects of intratracheal
administration volume on the pulmonary examinations. We investigate the volume effects of bleomycin administered intratracheally bysearching for chronological changes in lung toxicity parameters including BALF (bronchoalveolar lavage fluid) test, histopathologicaland immunohistochemical examinations at different administration period and volumes.
[Materials and Methods] Male Crl:CD(SD) rats aged 8 weeks old were treated with a single intratracheal bleomycin administration at adose of 1 mg/kg in the volume of 1 or 2 mL/kg. General condition and body weight were measured and necropsied at 3, 10 and 28 days
after the administration, and gross pathology and organ weight measurement were performed. Besides, BALF was collected from theright lung and subjected to cell sorting and biochemical analysis. The left lung and major organs were used for histopathology. The lungfibroblastic lesion caused by bleomycin are under immunohistochemical examination. In this presentation, we will report the results ofchronological changes in lung toxicity parameters, histopathological and immunohistochemical findings at various bleomycin-treatment
periods, and the effects of administration volume on the pulmonary injury will be discussed.

̶ 178 ̶

Poster Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-41
Diagnostic Investigation of Bleomycin-Induced Lung Toxicity in Cynomolgus Monkeys○ Kazuyoshi Kumagai, Ken Sakurai, Yu Maeda, Hiroko Kataoka, Satoshi Tamai, Kumi Honda, Tetsuya Ohsawa, Katsuyoshi Chiba,
Kiyonori Kai, Kazuhiko Mori
Medicinal Safety Research Laboratories, Daiichi Sankyo Co., Ltd.

Time-course changes of lung toxicity was investigated in male cynomolgus monkeys (3 animals/group) which were injected
intratracheally with bleomycin hydrochloride as a single dose of 0 (saline as vehicle), 3, and 12 mg/12 mL/body (Day 1: day of
instillation). A time-course analysis was done for chest CT, blood gas analysis, and plasma surfactant protein D (SP-D) during the predosing or on Day 2, 4, 8, and 15. Lung histopathology was done on Day 15 (only one male at 0 mg/kg was euthanized). Chest CT
showed slight ground-glass opacities (GGO) in part of the lobes at 3 mg on Day 15. The scan showed slight to moderate GGO in all
lobes except the right anterior lobe on Day 4 and more severe GGO in almost all lobes at 12 mg on Day 8 or later. Higher pCO2, lower
pO2 and SO2 were detected at 12 mg on Day 8 and deteriorated on Day 15 (no change: 3 mg). Higher plasma SP-D was noted on Day 8
and it showed the highest values on Day 8 at 12 mg (no change: 3 mg). In lung histopathology, minimal to slight alveolar macrophageand inflammatory cell infiltrate, bronchoalveolar hyperplasia with squamous cell metaplasia, and fibrosis were observed in part of thelobes at 3 mg. Almost all lobes showed more severe changes mentioned above as well as multinuclear giant cell formation, alveolar
edema, and hyaline membrane at 12 mg. In conclusion, chest CT is considered useful for detecting lung toxicity serially in cynomolgus
monkeys in its earlier stage than the others.

P-42*○ Shota Yoshida1,2), Masanao Yokohira1), Keiko Yamakawa1), Yuko Narusawa1), Shohei Kanie2), Nozomi Hashimoto1),
Katsumi Imaida1)
1) Onco-Pathology, Department of Pathology and Host Defense, Faculty of Medicine, Kagawa University,2)Toxicology Laboratory, Discovery and Preclinical Research Division, TAIHO Pharmaceutical Co., Ltd.

[Background and Aim] Ambroxol hydrochloride (AH) is an expectorant medicine, inducing surfactant proteins (SPs) in the lung. SPs
expression has been reported in lung inflammatory and proliferative lesions. To determine whether AH exerts modulatory effects onthese lung lesions, three experiments were conducted.
[Materials and Methods] Pleuritis was induced by intrathoracic administration of dipotassium titanate (TISMO®) fibers in A/J mice.
Neoplastic lung lesions were induced by NNK in A/J mice and by DHPN in F344 rats. AH were treated at 0, 12 or 120 ppm in basal dietfor 16 weeks in A/J mice or 28 weeks in F344 rats. Clinical and pathological examinations were performed.
[Results] A/J mice treated with TISMO showed decrease in their body weights, increase in white blood cell (WBC) counts, and pleural
thickening with pleuritis and poor general condition. A/J mice treated with TISMO and 120 ppm AH showed significant recovery of
the body weight and WBC counts to the same levels compared as A/J mice without TISMO. However, regardless of AH administration
or not, no significant inter-group differences were observed in histopathological changes including the immunohistopathologicalexpression of IL-1β in the lung and maximum pleural thickness. In the NNK and DHPN experiments, no significant effects associatedwith AH were observed.
[Conclusion] AH exerts anti-inflammatory effects though AH does not have any direct suppressive effect on lung tumorigenesis inrodents.

̶ 179 ̶Poster Presentation

Effects of the expectorant drug, ambroxol hydrochloride, on chemically induced lunginflammatory and proliferative lesions in rodents

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Poster Presentation

P-43*
Epigenetic modification abnormality in lung carcinogenesis in mice transplacental
exposure of organic arsenic compound Dimethylarsinic acid
○ Masaki Fujioka, Min Gi, Takahiro Okuno, Nao Yukimatsu, Anna Kakehashi, Yuji Oishi, Hideki Wanibuchi
Osaka City University Graduate School of Medicine

In our previous studies, male mice exposed to the fetal stage of the organic arsenic compound Dimethylarsinic acid (DMA) have beenshown to develop lung cancer after maturation. It also reports that a significant increase in histone H3K9me3 occurs in the lung of amale newborn mouse exposed to DMA transplacental exposure. However, its target gene and gene expression fluctuation have not beenclarified. In this study, we clarify the target genes of histone H3K9me3 and microarray analysis were performed in the lung of maleneonatal mouse exposed to DMA transplacental. Also, we investigate the influence on DMA transplacental 6-week old mouse lung.
DMA was administered to pregnant female CD-1 mice at a dose of 0,200 ppm from gestation day 8 to 18, and lungs were collected fromthe obtained male neonates and 6-week old mice.As a result of the analysis in neonatal mouse lung, a targeting region of H3K9me3 wasmore in X chromosome than in the control group. Also, as a result of the microarray analysis, increased expression of Xist, which is the
X chromosome-inactivated lncRNA, in the DMA exposure group. Furthermore, as a result of pathway analysis, it was suggested that
Fibrosis increased significantly, glucose metabolism increased and suppressed lipid metabolism. In 6-week old mouse lung, there was
the significant increase of Ki67 index in the DMA transplacental exposure group. It was suggesting epigenome memory contribution
caused by DMA exposure in mouse lung carcinogenesis.

P-44
Poster Presentation

The promotion effects of lung tumor with Insulin-like growth factor-1, IGF-1,
expression by left pulmonary ligation in rodents○ Masanao Yokohira, Nozomi Hashimoto, Keiko Yamakawa, Yuko Narusawa, Katsumi Imaida
Onco-Pathology, Faculty of Medicine, Kagawa University[Aim and Materials and Methods] To induce strong promotion effect for lung tumor, the effects of left pulmonary ligation to lung tumor
initiated by 4-(methylnitrosamno)-1-(3-pyridyl)-1-butanone (NNK) or N-bis (2-hydroxypropyl) nitrosamine (DHPN) in A/J mice orF344 rats, respectively, were examined. The expressions of mRNA in right lung of A/J mice were also examined by DNA microarray
analysis on Day 7 after left pulmonary ligation.
[Results] The number of tumors initiated by carcinogens in right lung after left pulmonary ligation was increased significantly withincreasing of the weight in mice and rats. In addition, expression of several mRNA markers, including insulin like growth factor-1, IGF1, was increasing in right lung of mice on Day 7. The strong expression of IGF-1 for the lung proliferations induced by carcinogen was
confirmed immunohistochemically in mice and rats.
[Conclusion] The results of present experiments demonstrated the clear promotion effects by pulmonary ligation with induction of IGF1. The results also indicate IGF-1 is a potential marker of the lung tumors and further study is scheduled in our laboratory with the aim
to establish IGF-1 as a tumor marker.

̶ 180 ̶

Poster Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-45*
The effects of progesterone inhibitor (mifepristone) on lung tumorigenesis in female
A/J mice○ Yuko Narusawa, Masanao Yokohira, Keiko Yamakawa, Nozomi Hashimoto, Shota Yoshida, Katsumi Imaida
Onco-Pathol., Fac. Med., Kagawa Univ.

In A/J mice, female mouse is more sensitive than male on lung tumorigenesis. We reported that the expression of estrogen receptor
and progesterone receptor in 4-(methylnitrosamino)-1-(3-pyridyl)-1-butanone (NNK)-induced lung tumors in female A/J mice. Sex
hormones are suggested to involve in lung tumorigenesis. The present study was conducted to investigate the effects of progesterone in
the lung tumorigenesis by progesterone inhibitor, mifepristone (MIF).
Female A/J mice at 7-week-old were separated into four groups. Groups 1 and 2 were treated with interperitoneal injections of NNK(2mg/0.1ml saline/mouse) at Weeks 0 and 1. At Week 13, MIF pellet (90-day release, 7.5 mg/pellet/mouse) was implanted under the skinin Groups 1 and 3, and placebo pellet (PL) was in Groups 2 and 4. All mice were sacrificed after sampling their blood at Week 26.
In Group 1 (NNK+MIF), the number of tumor and the area of adenocarcinoma in the lungs were trend to decrease than Group 2(NNK+PL). The concentration of progesterone in the serum showed a negative correlation with the number of macroscopic lungnodules. Cystic endometrial hyperplasia, considering the effect of MIF, was observed only MIF treated groups (Groups 1 and 3).
These results suggest MIF has little suppression effect to NNK-induced lung tumorigenesis. Therefore, the cause of sex differencein lung tumorigenesis of A/J mice needs to be taken into account the other mechanisms than sexual hormones effects, especiallyprogesterone.

P-46○ Yoshimitsu Sakamoto1), Yukie Tada1), Motoki Hojo1), Ai Maeno1), Toshinari Suzuki1), Akiko Inomata1), Takako Moriyasu1),
Dai Nakae2)1)Tokyo Metropol. Inst. Pub. Health, 2)Tokyo Univ. Agricul.

Background: We previously reported that mesothelin-positive alveolar proliferative lesions were observed in rats treated with multiwall carbon nanotube administered by the intratracheal instillation, and they were diagnosed as early stage squamous metaplasias.
Mesothelin has been reported to be positive in lung, pancreas and ovary adenocarcinomas of humans, but only in mesothelial andmesothelioma cells of rats. The present study was conducted to assess expression of mesothelin in lung proliferative lesions induced in
the lung of rats treated with DHPN.
Methods: Male F344 rats (6 weeks old, n=20) were treated with 0.1% DHPN in the drinking water for 2 weeks, kept for 30 weeks andkilled for the histological examination.
Results and Discussion: Histologically, alveolar hyperplasias, adenomas and adenocarcinomas were observed in 18, 5 and3, respectively, in 18 rats surviving at the end of the study. Among them, 6/18 alveolar hyperplasias, 2/5 adenomas and 1/3
adenocarcinomas were mesothelin-positive. The total number of hyperplasias in 18 rats was 637, among which only 8 lesions (1.26%)
were mesothelin-positive. Detailed assessments are in progress.

̶ 181 ̶Poster Presentation

Histopathological characteristics of mesothelin-positive proliferative lesions in thelung of rats treated with DHPN

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Poster Presentation

P-47
Male SD rats exposed in utero to di(n-butyl)phthalate: investigation of deferent duct
○ Mitsuru Sugiyama1), Yuya Okayama1), Hiroyuki Takahashi2), Masahiro Ikegami2), Tomoko Muto3), Shin Wakui1)
1)Department of Toxicology, Veterinary Medicine, Azabu University, 2)Department of Pathology, The Jikei Univ. Sch. Med.,3)Food and Drug Safety Center[Background] Di (n-butyl) phthalate (DBP) which is a phthalate ester is an organic compound widely used at the present time as aplasticizer giving flexibility to a hard plastic product. DBP has an endocrine disrupting effect and inhibits testosterone production of
Leydig cells in exposed male rats. However, little is known about the effect of DBP on the deferent ducts are important component of
the reproductive system. In this study, we investigated the effect of DBP fetal exposure on the deferent ducts.
[Materials and Methods] Male SD rats were applied for the present study. Three patterns of DBP 100, 300, 0 mg/kg/day were used as
doses, and orally administered to the mother rats for GD12 to 21. To observe changes due to age, four points of 7, 9, 14 and 17 weeks
old were set up from young to adult stage, and 10 animals were used for each group. Each animal was autopsied at each age and a 4 μm
tissue section was prepared. Each tissue section was stained using several staining methods and measured and observed.
[Results] In the DBP group and the control group, the height of deferent duct epithelial cells were similar between 7 weeks and 9 weeks
of age. However, at 14 weeks of age and 17 weeks of age, it was significantly lower than that of normal individuals.
[Conclusion] From the present study, it is a secondary change of the deferent ducts in atrophy caused by a decrease in testosterone levelin the testes, which is thought to be delayed by prenatal DBP exposure.

P-48*
Poster Presentation

True hermaphroditism in a SD rat○ Hiromu Okano, Mizuho Takagi, Isamu Suzuki, Shiori Fujiwara, Mariko Nagatani, Yuko Yamaguchi
Pathology Department, BoZo Research Center Inc.

True hermaphroditism which has both ovary and testis either as ovotestis or as separate organs has been reported in rats rarely. A
30-week-age Crl:CD(SD) rat suspected to be true hermaphroditism was examined pathologically. The penis, urinary bladder andmale accessary genitals were observed at the same location as these of normal males. The vagina, uterine cervix and uterine horns
were observed continuously from the urethra to cranial. Normal left uterine horn and the ductal structure along left uterine horn wereobserved. Next, the small epididymis and gonad-like structure were observed. Right uterine horn which had the length about 1/3 of theleft uterine horn was observed. Next, the corded structure, epididymis and gonad-like structures were observed. Histologically, Left
gonad was the region which had several large follicles and interstitial gland-like cells densely and the region which had many sex cord
stromal tissues like Sertoli cells surrounded by many Leydig-like cells. Right gonad had collagen fibers, vessels and sex cord stromal
tissues like Sertoli cells. The defined sperm cells were unrecognized in either gonad. The bilateral epididymides and uterine horns were
well differentiated. The ductal structure and the corded structure was the deferent duct mainly. The vagina opened to the urethra. Thiscase was diagnosed as unilateral true hermaphroditism. It was characteristic that the gonads were undeveloped, but accessary genitals
developed histologically.

̶ 182 ̶

Poster Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-49*
A Case of Epithelial Plaque in the Uterus of a Non-Pregnant Cynomolgus Monkey○ Haruno Yabuki, Airo Yukawa, Akiko Moriyama, Kinji Kobayashi
Drug Safety Research Laboratories, Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd.

[Background and Aim] Epithelial plaque has been known as an endometrial response to initial implantation and observed in several Old
and New World monkeys. This change has never been reported in great apes or humans. We encountered a case of epithelial plaque inthe uterus of a non-pregnant cynomolgus monkey, and this was histopathologically investigated.
[Materials and Methods] The animal (bred in China, approximately 4 years old, female, untreated) showed no abnormalities in clinicalobservation or at necropsy. The collected uterus was examined histopathologically and immunohistochemically.
[Results] Two proliferative foci were observed facing each other and directly under the luminal epithelia of the endometrium. The cells
that composed both foci showed nest and cluster structures and downward growth from the luminal epithelia. The proliferative fociand normal luminal epithelia connected to each other at marginal parts. Pleomorphism, karyomegaly, multinuclear, and mitosis were
frequently observed in these foci. These cells were positive for cytokeratin, and negative for vimentin.
[Conclusion] Based on the morphological and immunohistochemical characteristics, this case was diagnosed as epithelial plaque.
This spontaneous lesion is required to distinguish from endometrial neoplasm and decidual reaction in safety assessment for drug
development.

P-50○ Hiroko Kokoshima, Takuya Doi, Minoru Tsuchitani
LSI Medience Corporation[Background and Aim] Mammary gland tumors are commonly observed in aged female mice. We found morphological difference of
mammary adenomas and adenocarcinomas between CD-1 mice (CD-1) and B6C3F1 mice (B6C3F1).
[Materials and Methods] 15 adenocarcinomas and 2 adenomas from 149 aged CD-1 females and 12 adenocarcinomas and 2 adenomas
from 520 aged B6C3F1 females were histopathologically examined. Additionally, Alcian blue-Periodic acid-Schiff (AB-PAS)
reaction and immunostaining for smooth muscle actin (SMA) were performed in 14 adenocarcinomas and 2 adenoma of CD-1 and 7
adenocarcinomas and 1 adenoma of B6C3F1.
[Results] In all adenocarcinomas and 1 adenoma of CD-1, glandular neoplastic cells proliferated with alveolar/tubular and/or solid
growth pattern. Meanwhile, in all adenocarcinomas and adenomas of B6C3F1, small round to spindle cells without pleomorphism or
atypia proliferated, with glandular neoplastic cells forming alveolar/tubular structure. These round to spindle cells were observed in
the interspace between the neoplastic glandular cells and the basement membrane. They were positive for SMA. These characteristics
suggest that these cells may be myoepithelial cells. These myoepithelial cell proliferation was observed in the only 1 adenoma of CD-1.
[Conclusion] There is a morphological difference of mammary adenocarcinomas and adenoma between CD-1 and B6C3F1 in terms of
the absence of myoepithelial cell proliferation in the former and its presence in the latter.

̶ 183 ̶Poster Presentation

Morphological difference of mammary adenomas and adenocarcinomas between CD-1
and B6C3F1 miceThe 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-51
Development of ultra-short term atherosclerosis model induced by nitric oxide
synthases inhibitor in Microminipig○ Hiroaki Kawaguchi1), Akihide Tanimoto2)
1)Department of Hygiene and Health Promotion Medicine, Kagoshima University Graduate School of Medical and Dental Sciences,2)Department of Pathology, Kagoshima University Graduate School of Medical and Dental Sciences

Microminipig is the world smallest minipig, enabling easy handling, and the anatomical and physical similarities to human make thisminipig a suitable species for human lifestyle disease research. We had established atherosclerosis model induced by feeding high fat
and cholesterol diets (HFCD) for 8 weeks in Microminipig. In this study, we developed ultra-short term atherosclerosis model inducedby feeding HFCD and administration of NG-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME) as nitric oxide synthase inhibitor for 2 weeks in
Microminipig. HFCD induced hypercholestemia while there were no effects of L-NAME on blood lipid metabolism. HFCD inducedaortal atherosclerosis was accelerated by L-NAME administration. This ultra-short term atherosclerosis model may be useful for theatherosclerosis acceleration evaluation (toxicological study) of chemicals and medicines.

P-52
Poster Presentation

Histopathological Investigation of a Minipig Who Died of Acute Hemorrhagic Gastritis○ Sumiko Okuda, Hirotoshi Akane, Hiro Eda, Atsuko Ichikawa, Shigekazu Shimizu, Yasuki Akie
CMIC Pharma Science Co., Ltd.

[Aim] We report on the vascular lesions in various organs of the minipig died of acute hemorrhagic gastritis that we have presented atthe 34th Annual Meeting of Japanese Society of Toxicological Pathology.
[Materials and Methods] An 11-month-old male crown minipig which has been kept as an in-house animal showed a decreased foodconsumption and suddenly died one week later. For various organs, HE staining, various special staining and immunohistochemical
staining were performed.
[Results and Discussion] Unlike previously reported fibrinoid thrombus of small arteries and arterioles in various organs mainly in thestomach, glomerular-like obstructive intraluminal proliferation was found in the lumen of the small arteries and veins, and the cells were
spindle-shaped. This intravascular proliferative lesion was mainly observed in fibrotic lesions of the heart and liver, between the liverand gall bladder, and in the kidney. This case was thought to be similar to feline systemic reactive angioendotheliomatosis. This is also
reported in cattle, and in humans, similar diseases are reactive angioendotheliomatosis, benign cutaneous intravascular endothelial andpericytic proliferative condition. As there are no reports in pigs, we report on the results of special staining and immunostaining thistime.

̶ 184 ̶

Poster Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-53*
Healing after vascular grafting in the thoracic aorta of beagle dogs
○ Takato Matsuda1), Hisako Terao1), Kazuha Maeda1), Masako Tasaki1), Junko Souba1), Atsushi Isobe1), Kasuke Nagano2),
Kimimasa Kazuno1), Hitomi Hagiwara1)
1)Terumo Corporation, 2)Nagano Toxicologic-Pathology Consulting[Background] Vascular grafts (VGs) should exhibit long-term patency without thrombotic obstruction after implantation. However, few
studies have described the healing process of VGs, especially on the luminal surface. To examine healing of the luminal surfaces ofVGs, we performed a long-term implantation study using a canine model.
[Materials and Methods] VGs (Triplex®) were implanted in the descending thoracic aortas of beagle dogs. At 4 or 26 weeks after
implantation, the dogs were evaluated for graft patency using angiography, and were sacrificed. VGs were macroscopically observed
and paraffin sections were stained with HE, Masson’s trichrome, and PTAH.
[Results] Angiography showed no abnormalities, and confirmed VG patency. Gross examination revealed a wide red region on theluminal surface at 4 weeks, which tended to decrease by 26 weeks. Histopathology at 4 weeks revealed extensive thrombus within
the lumen, and the presence of fibrous tissue and vascular endothelial-like cells at nearby the anastomosis sites. At 26 weeks, fibrous
tissue and vascular endothelial-like cells were observed extensively on the luminal surface, and the VG lumen was smooth. Vascularendothelial-like cell coverage was 78% ± 16% at 4 weeks and 97% ± 4% at 26 weeks.
[Discussion] Our study demonstrates that thrombus is replaced by fibrous tissue and coverage by vascular endothelial-like cells at bothanastomosis sites, with the entire luminal surface covered with stable tissue formation.

P-54*○ Shizuka Konishi, Yuki Numakura, Masaaki Koga, Takashi Kotera, Makoto Ueda
Pharmacokinetics and Safety Assessment Dept., Nippon Shinyaku Co., Ltd.

In several reports on cardiomyopathy in cynomolgus macaques, there are no cases diagnosed as hypertrophic type.A male cynomolgus
macaque originated from China had been repeatedly administered small amounts of several test substances in pharmacokinetic studies
between 4 and 9 years of age. It showed no significant abnormalities in clinical findings or routine blood tests. At 11 years of age,
the animal was euthanized by exsanguination under deep pentobarbital anesthesia.Macroscopically, the interventricular septum (IVS)
and left ventricular (LV) and right ventricular (RV) walls of the heart were thickened. Histologically, the lesions exhibited marked
hypertrophy, disarray and vacuolation of cardiomyocytes with atypical karyomegaly and moderate interstitial fibrosis in the LV wall
and/or IVS. The RV wall also showed mild hypertrophy of cardiomyocytes with mild interstitial fibrosis. Based on these morphologicalfeatures, this case was diagnosed as hypertrophic cardiomyopathy. The substances that had been administered to the animal were notobserved to induce cardiotoxicity. Furthermore, two age-matched normal cynomolgus macaques used for similar tests showed nosimilar cardiac changes. Therefore, this case was considered to be a spontaneous lesion. There have been no reports of cardiomyopathy
in cynomolgus macaques in which cardiomyocyte hypertrophy and disarray occur together. This is the first report of spontaneous
hypertrophic cardiomyopathy in a cynomolgus macaque.

̶ 185 ̶Poster Presentation

A case of spontaneous hypertrophic cardiomyopathy in cynomolgus macaque(Macaca fascicularis)

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-55
Spontaneous globule leukocyte tumor with inflammatory reaction in a Wistar
Hannover rat○Junko Sato, Yuki Tomonari, Takuya Doi, Minoru Tsuchitani
LSI Medience Corporation

We encountered neoplastic lesions of hematopoietic cells forming numerous small to large nodules in the spleen, and growth in
the Glisson sheath in the liver in a 110-week-old male Wistar Hannover rat (Crl:WI(Han)). Many of the neoplastic cells contained
distinct eosinophilic granules or droplets. We investigated the histological features of this tumor based on the results of special andimmunohistochemical staining. [Macroscopic findings] Three protruding areas on the surface of the spleen (5–8 mm diameter) andmultiple pale white or yellow nodules on the cut surfaces were observed. [Microscopic findings] Multiple variable-sized nodules
containing atypical proliferative cells, lymphocytes, eosinophils and histiocytes were noted in the white pulp, marginal zone andred pulp of the spleen, and Glisson sheath of the liver. Proliferative cells consisting of a few types of atypical cells with or withoutcytoplasmic eosinophilic granules or intermediate types were observed. The granules were positive for PAS and elastase stains, andbluish purple for PTAH, and showed no metachromasia with toluidine blue stain. In immunohistochemical staining, the proliferative
cells with or without granules were positive for granzyme B, rat mast cell protease 2 and Ki-67, while negative for Iba1, ED1, κ lightchain, CD3 and 20. These results led to a diagnosis of globule leukocyte tumor. The inflammatory reaction may have been caused by anactive substance of cytoplasmic granules.

P-56
Poster Presentation

Immunohistochemical characteristics of cytokeratin expression in epithelial typethymoma and thymic epithelial hyperplasia○ Yuki Tomonari, Junko Sato, Tetsuro Kurotaki, Naoaki Yamada, Kazufumi Kawasako, Takuya Doi, Takeshi Kanno,
Minoru Tsuchitani
Pathology Department, LSI Medience Corporation[Introduction] Thymomas in Wistar Hannover rats (WH) resemble the normal structure of thymus; thymic epithelium (TE) in the cortex
like area and medulla like area show positive for cytokeratin (CK) 18 and CK14, respectively. The features of thymomas in WH aresuggested to depend on the CK expression patterns of each TE (34th JSTP annual meeting). Meanwhile, epithelial type thymomas
and thymic epithelial hyperplasias are observed in aged F344/DuCrlCrlj rats (F344). The characteristics of CK expression patterns are
unknown.
[Materials & Methods] Two hyperplasias and one thymoma in F344 were examined for histopathological features andimmunohistochemical expression patterns of CK18 and CK14.
[Results] Tubular structures at the medulla were noted in hyperplasias. Single layer cuboidal TEs were lying surrounded by flattened
TEs. In thymoma, tubular structures were noted, but the lumina were indistinct. Low cuboidal TEs forming alveoli or cords were also
noted. Inner and outer TEs at tubules and alveoli and/or cords tended to be positive for CK18 and CK14, respectively.
[Conclusion] Epithelial type thymoma and thymic epithelial hyperplasias were characterized by inner and outer TEs expressing different
CKs. The characteristics might be contributed to the difference in structure between epithelial type thymomas and thymomas noted inWH.

̶ 186 ̶

Poster Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-57*
Ectopic striated muscle of the thymus in a SD rat○ Ryosuke Kobayashi1), Yuki Tomonari1), Yui Akagawa2), Akio Sekiya1), Hiroko Kokoshima1), Takuya Doi1), Takeshi Kanno1),
Minoru Tsuchitani1)1)Pathology Department, Nonclinical Research Center, LSI Medience Corporation, 2)Kashima Safety Assessment Department A, NonclinicalResearch Center, LSI Medience Corporation[Background] Striated muscle tissue (StMT) is found in rat thymus on rare occasions, but the lesion has not been reported. We
examined the anatomical and histological characteristics of StMT.
[Materials and Methods] We examined the thymus of an 11 week old male Crl:CD(SD) rat in which StMTs were incidentally found inhistology. The thymus was transversely cut into fifths, embedded in paraffin, and then cut into semi-serial sections. These sections were
stained with H.E., Masson’s trichrome, and silver.
[Results] StMTs were observed transversely as a fascicle composed of matured muscle fibers with a diameter of 20 to 40 μm. The
muscle fascicle was localized in thymic interlobular space and surrounded by thin collage fibers. Semi-serial sections showed fascicles
of StMTs running longitudinally up to the anterior four-fifths of the left lobe of the thymus. StMTs contacted the ventral surface of thethymus in the anterior portion, and gradually penetrated into the thymic tissue toward the posterior potion. The anterior end of StMTs
could not be identified in these sections. In the posterior end, the muscle fibers were vanishing and collagen fibers around the muscle
fascicle integrated into thymic interlobular connective tissues.
[Discussion] We conclude that StMTs are ectopic muscle tissues in the thymus based on their localized nature and histologicalcharacteristics. Our results suggest that StMTs are not associated with myoid cell in the thymic medulla.

P-58○ Yuka Minamisawa, Dai Muramatsu, Hiroaki Yamaguchi, Aisuke Nii
SEIKAGAKU CORPORATION[Background] Condoliase, a glycosaminoglycan degrading enzyme, has been considered to be suitable for selective chemonucleolysis
of lumbar disc herniation due to its substrate selectivity, compared to chymopapain, a protease. Although the selective effects of bothcompounds on the intervertebral disc were examined in several animal species, the detailed process of changes in the disc as well as theadjacent vertebral body has not been clarified. In this study, the selectivity of chemonucleolysis with condoliase and chymopapain wascompared histopathologically in cynomolgus monkeys.
[Materials and Methods] Animals were treated with condoliase at 12 to 494-fold the clinical dose or with chymopapain at 12-fold theclinical dose. Histopathology was performed at 1 to 26 weeks after injection.
[Results] Histopathological changes related to the glycosaminoglycan degrading action of condoliase were observed in the disc,and effects extended to the vertebral body. These changes were most remarkable at week 4 and then subsided at week 26. Althoughchymopapain showed qualitatively similar changes, the effects extended more widely in the vertebral body. The degree of these changes
was more severe than at the maximum dose of condoliase, and the changes were exacerbated even at week 26.
[Conclusion] Histopathological changes caused by condoliase were less severe and more selective than those seen with chymopapain.
Condoliase is expected to be more suitable for selective chemonucleolysis.

̶ 187 ̶Poster Presentation

Selective chemonucleolysis with condoliase in cynomolgus monkeys

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-59*
A 90-day repeated oral dose toxicity study of 2,4-dimethyl-4-phenyltetrahydrofuran
and the determination of its isomer abundance ratio○ Tetsuya Ide1), Yasuko Mizuta1), Young-Man Cho1), Jun-ichi Akagi1), Naoko Masumoto2), Naoki Sugimoto2), Kyoko Sato2),
Kumiko Ogawa1)
1)Division of Pathology, National Institute of Health Sciences, 2)Division of Foods Additives, National Institute of Health Sciences[Introduction] 2,4-dimethyl-4-phenyltetrahydrofuran is one of flavoring agents permitted for use in food in Japan. To ensure the safetyof it, we conducted a repeated oral dose toxicity study using rats. In the case of this compound, 4 isomers could exist. Generally, it isimportant to reveal the abundance ratio of the isomers as they could have different biological activities, so the isomer abundance ratio in
the test article was determined.
[Methods] A 90-day repeated dose oral gavage of 0, 6, 24 and 96 mg/kg BW/day toxicity study was conducted using F344 rats (n=10
per sex/group). Examinations of clinical signs, body weight, food consumption, hematology, serum biochemistry, organ weight andhistopathology were performed. The isomer abundance ratio was determined by quantitative 1H-NMR and GC/MS equipped with achiral column.
[Results] Decreased MCV and MCH were detected in the high-dose males and females. Increased serum TP and absolute/relative liverand kidney weight were detected in the high-dose males and females, as well as increased serum Alb in the high-dose males and relative
liver weights in the mid-dose females. Histopathology revealed diffuse hepatocellular hypertrophy in the high-dose males and females
and renal tubular hyaline droplet accumulation and regeneration in the high-dose males. In addition, 4 isomers existed in almost equalamount in the test article.
[Discussion] The NOAEL for the present test article was evaluated to be 24 mg/kg BW/day in both the sexes.

P-60*
Poster Presentation

Investigation of toxicological profiles of 1,3-dichloro-2-propanol in 28 days repeateddose study in F344 rats
○ Kohei Matsushita, Takeshi Toyoda, Tomomi Morikawa, Takanori Yamada, Kumiko Ogawa
Division of Pathology, National Institute of Health Sciences[Aim] 1,3-Dichloro-2-propanol (1,3-DCP) is a contaminant in various foods such as meat products. Although 1,3-DCP is carcinogenic in
the liver and kidney, the toxicity and genotoxicity are still unclear. Prior to investigation of the mechanisms of carcinogenicity using gpt
delta rats, toxicological profiles of 1,3-DCP were evaluated in this study.
[Methods] Six-week-old male F344 rats were given 0, 25, 50, and 100 mg/kg of 1,3-DCP by gavage for 28 days. General toxicity in all
rats and immunohistochemistry and gene expression in the liver of selected groups were examined.
[Results] All rats of 100 mg/kg group were died/sacrificed at day 2 with severe centrilobular necrosis in the liver. In 25 and 50 mg/
kg groups, while body weights and food consumption showed no changes, decreases in RBC-related parameters and increases in liverand kidney weights were detected. ALT was increased in 50 mg/kg group. In the liver of 25 and 50 mg/kg groups, c-caspase 3- andKi67-positive cells were increased in the central zone, and increased expression of cell cycle-related genes was observed. Althoughglutathione S-transferase placental form (GST-P)-positive hepatocytes were present in the central zone, there were no obvious GST-P
foci.
[Discussion] Acute liver injury may be cause of death in 100 mg/kg group. Increased cell proliferation in the liver of 25 and 50 mg/kg
groups may be related to tumor promotion. The toxicological profiles of 1,3-DCP will be discussed with further analysis.

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Poster Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-61*
A 90-Day Repeated Oral Dose Toxicity Study of 5-methyl-2-phenyl-2-hexenal
in F344 Rats
○ Kenji Nakamura1), Aki Kijima1), Yuji Ishii1), Shinji Takasu1), Kumiko Ogawa1), Takashi Umemura1,2)
1)Div. Pathology, NIHS, 2)Faculty of Animal Health Technology, Yamazaki University of Animal Healty Technology[Introduction] 5-Methyl-2-phenyl-2-hexenal (MPH) is one of the designated additives classified into “Aromatic aldehyde” as a flavoring
agent. Although MPH was evaluated to be “No safety concern” by JECFA, there have been no reports in terms of safety assessment for
MPH itself. In the present study, we performed a 90-day repeated oral dose toxicity study of MPH in F344 rats to clarify toxicological
profiles of MPH.
[Methods] Six-week-old male and female F344 rats were given MPH at doses of 0, 8, 24 and 70 mg/kg body weight/day by gavagefor 90 days. The highest dose was determined based on 100,000-times of estimated human exposure as food flavoring agent. Typicalparameters assessed in a subchronic toxicity study were examined.
[Results] No mortality and clinical signs were observed throughout the experimental period in any of the groups. Body weight andfood consumption in all treated groups of both sexes were almost the same as in the control group each. In hematology and serum
biochemistry, no toxic effects were observed. In organ weights, absolute and relative liver weights were significantly increased in 70
mg/kg bw/day group of females, and absolute testes weight was significantly elevated in 70 mg/kg bw/day group of males. However, notreatment-related histopathological changes were observed in all organs.
[Discussion] Based on the overall results, the NOAEL of MPH in this study was determined to be 70 mg/kg BW/day, the highest dosetested, in both male and female rats.

P-62○ Takafumi Oshikata, Yumi Wako, Mikio Mitsuishi, Masao Hamamura
Pathology Department, LSI Medience Corporation

Aim: Histopathological features of 3 strains of immunodeficient mice (NOG, NOD SCID and nude mice) transplanted with HeLa cells
were evaluated to obtain background data for a tumorigenicity study.
Methods: Male mice were allocated to 2 groups, positive control (PC, N=10) and negative control (NC, N=10), for each strain andtransplanted with HeLa and MRC-5 cells, respectively. The cells were transplanted in the dorsal subcutis and then necropsied 16 weeks
thereafter. HE-stained samples of all organs were prepared and examined microscopically.
Results: In 3 strains of animals in the PC Gr, a tumor was found in the transplantation site. Histopathologically, the tumor consistedof round cells showing a solid growth, and extensive necrosis in all cases. Metastasis was noted in one NOG mouse in the lung andin one NOD SCID mouse in the axillary lymph node (LN). Granulocytic hematopoietic cell proliferation in the spleen, liver and bonemarrow were observed in 3 strains in the PC Gr. Furthermore, neutrophil infiltration in the LNs in NOD SCID and nude mice, besides
an increase of plasma cells in the spleen and LNs in nude mice. These changes were considered to be biological reactions to tumor. No
tumor was observed in the NC Gr.
Conclusion: Strain-specific biological responses associated with tumor formation by HeLa cells were observed in each strain of
immunodeficient mice. Detailed morphological comparison between the 3 strains including immunostaining will be presented.

̶ 189 ̶Poster Presentation

Histopathological examination of tumorigenicity study of HeLa cells
in immunodeficient mice (NOG, NOD SCID and nude mice)The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-63*
Spontaneous subcutaneous epithelial tumors in NOG Mice: A report of 2 cases○Angeline Ping Ping Teh1), Yukino Machida1,2), Naoaki Uchiya1), Toshio Imai1)
1)Ctr. Anim. Div., Natl. Cancer Ctr. Res. Inst., 2)Dept. Vet. Pathol., Nippon Vet. Life Sci. Univ.

The severely immunodeficient NOG mice are widely used for establishment of patient-derived xenograft (PDX) tumor model.
Spontaneously developed epithelial tumors in NOG mice have rarely been reported. 2 cases of subcutaneous tumors spontaneously
observed in NOG mice were evaluated here. Case 1 and 2 were female NOG mice, in which patient uterine endothelial cancer tissue
was implanted subcutaneously to right flank each at 10 weeks and 7 weeks of age respectively, were euthanized 28 weeks and 54 weeks
later, respectively, due to mass discovered at undesirable site. At necropsy, a subcutaneous mass involving left cervical region to upper
foreleg was found in case 1. While a subcutaneous mass involving the femur and pelvis was found in case 2. Histopathologically,both tumors were composed by alveolar proliferation of tumor cells with severe nuclear atypia and obscure cellular boundary. Tumor
cells were arranged in peritheliomatous pattern in large areas of coagulative necrosis. Invasion of tumor cells into adjacent soft tissue,
and replacement of bone marrow cavity was observed in case 1. In both cases, tumor cells were expressed AE1/AE3 and negative forvimentin, NFP and ER alpha. The tumors were diagnosed to be epithelial origin. Fibrous tissue was found at the site of human cancer
implantation with no proliferation of human cancer tissue. The origin of organ of the tumors is still currently investigated.

P-64*
Poster Presentation

Two cases suspected as anaplastic zymbal’s gland carcinomas in aged F344 rats
○Ai Maeno1), Yoshimitsu Sakamoto1), Motoki Hojo1), Katsuhiro Yuzawa1), Yuko Hasegawa1), Toshinari Suzuki1), Akiko Inomata1),
Takako Moriyasu1), Noriko Kemuriyama2), Katsuhiro Miyajima2), Dai Nakae2)
1)Department of Pharmaceutical and Environmental Sciences, Tokyo Metropolitan Institute of Public Health, 2)Department of Nutritional
Science and Food Safety, Faculty of Applied Biosciences, Tokyo University of Agriculture[Background] Neoplasms of zymbal’s gland, especially anaplastic ones, are rare in rats used in toxicity studies. This report describes
about 2 cases that were suspected to be spontaneous anaplastic zymbal’s gland carcinomas.
[Materials] In male F344 rats used in the low dose group of a carcinogenicity test of multi-walled carbon nanotube, subcutaneous
nodules were found in 2 rats, which were euthanized at 89- (case I) and 77 week-old (case II) due to the body weight loss and/or the
progressive expansion of the tumor. The tumors were then excised and processed for analyses.
[Results & Discussion] In both cases, the tumor nodules, approx. 30 mm in diameter, with ulceration, were located at near the ear pinna.
Histologically, elliptical to polygonal cells proliferating as a solid sheet and fusiform cells were irregularly mixed. They were mutuallytransited and invaded to adjacent tissues. Squamous metaplasia and keratinization were observed. The lung metastases but not intact
zymbal acini were observed. Case I contained ossified area, while case II was characterized by the pleomorphic appearance. Tumor cells
were positive for cytokeratin or vimentin, but negative for CD68, S100, αSMA, VWF and desmin. From given results, both cases weresuspected as anaplastic zymbal’s gland carcinomas, despite unidentified origins, because of the tumor location and the intermingled
pattern of squamoid and mesenchymal tumor cells.

̶ 190 ̶

Poster Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-65*
Spontaneous basal cell carcinoma with ductal differentiation in the rat salivary gland○ Tomoya Sano1), Hitoshi Kandori2), Yoko Hara3)
1)Drug Safety Research Laboratories, Takeda Pharmaceutical Co. Ltd., 2)Axcelead Drug Discovery Partners Inc., 3)Department of Agriculture,

Livestock Hygiene Research Office, Shimane Prefecture

Macroscopically, a mass was observed in the subcutaneous tissue of the submandibular area in a 17-week-old male Sprague-Dawley
rat. Histopathologically, pale basophilic basaloid tumor cells with round to oval-shaped nuclei formed multiple solid lobules and/or nests and was highly invaded to the salivary gland. A small number of duct-like structures, composed of a monolayer of cuboidal
epithelia without surrounding cells or basal lamina, were also observed in the tumor. Immunohistochemically, the tumor cells showed
positive reactions for p63, cytokeratins, proliferating cell nuclear antigen, and vimentin, but negative reactions for alpha-smoothmuscle actin and S100. Ultrastructurally, the basaloid tumor cells contained multiple ribosomes and mitochondria in the cytoplasm,
and a few desmosomes in the intercellular portion. However, there were no ultrastructural features that would suggest the presence of
myoepithelium or squamous cells. According to the INHAND, this tumor could be categorized as a solid type of adenocarcinoma withductal differentiation. On the other hand, the basal cell in the excretory duct is known to be able to differentiate to all types of cells in
the normal salivary gland and may be related to the tumorigenesis of this tumor. Additionally, morphological and immunohistochemical
characteristics of the tumor cells resemble to the basal cells. Therefore, it could be diagnosed as a basal cell carcinoma from thehistogenetic point of view.

P-66○ Shim-mo Hayashi1), A Bradley2), DG Goodman3), Takanori Harada4), R Herbert5), Hijiri Iwata6), M Jacobsen7), CM Keenan8),
R Kellner 9), B Mahler5), E Meseck10), T Nolte11), S Rittinghausen9), C Ruehl-Fehlert12), J Vahle13), Katsuhiko Yoshizawa14)
1) Global Scientific and Regulatory Affairs, San-Ei Gen F. F. I., Inc., 2) Charles River, 3) Independent Consultant, 4) The Institute ofEnvironmental Toxicology, 5)NIEHS, 6)LunaPath LLC, 7)AstraZeneca, 8)CM Keenan ToxPath Consulting, 9)Fraunhofer ITEM, 10)Novartis
Institute for Biomedical Research, 11)Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co. KG, 12)Bayer AG, 13)Eli Lilly & Co., 14)Department ofFood Sciences and Nutrition, School of Human Environmental Sciences, Mukogawa Women’s University

The INHAND Proposal has been operational since 2005. A Global Editorial Steering Committee (GESC) helps coordinate overall
objectives of the project. Development of harmonized terminology for each rodent organ system or non-rodent species is the
responsibility of the Organ Working Groups (OWG) or Non-rodent Working Groups (NRWG) respectively, drawing upon experts
from North America, Europe and Japan.Great progress has been made with 14 rodent organ systems published to date: Respiratory,
Hepatobiliary, Urinary, Central/Peripheral Nervous Systems, Male Reproductive and Mammary, Zymbals, Clitoral and Preputial
Glands in Toxicologic Pathology and the Integument and Soft Tissue, Female Reproductive System, Digestive System, Cardiovascular
System, Skeletal System, Special Senses and Endocrine System in the Journal of Toxicologic Pathology as supplements and on a website: www.goReni.org. Recommendations of the Apoptosis/Necrosis Working Group have been published. There are 5 non-rodent
working groups: non-human primate, dog, minipig, rabbit and fish: with draft manuscripts in progress. A new group has been formed toaddress terminology in non-rodent ocular toxicity studies. INHAND guides offer terminology, diagnostic criteria, differential diagnoses
and guidelines for recording lesions in toxicity and carcinogenicity studies. The guides provide representative photo-micrographs ofmorphologic changes, information regarding pathogenesis, and key references.

̶ 191 ̶Poster Presentation

INHAND: International Harmonization of Nomenclature and Diagnostic Criteria for
Lesions - An Update - 2019

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-67
Example of SEND Implementation in Pharmaceutical Company-Establisent of Histopathological Examination System for SEND○ Izumi Matsumoto, Tomoaki Tochitani, Mami Kochi, Yuta Fujii, Yuka Yoshino, Izuru Miyawaki
Preclinical Research Unit, Sumitomo Dainippon Pharma Co., Ltd.

SEND (Standard for Exchange of Nonclinical Data) submission to FDA has been mandated for NDA and IND, and SEND data are
required for single and repeated dose toxicity studies and carcinogenicity studies started on December 17, 2017 or later. Therefore,
pharmaceutical companies that conduct FDA submission need to implement SEND. We made an in-house SEND-implementation teamsince 2016 and have been working on building a system that enables conformation to SEND. For SEND data creation, it is necessary
to configure data according to the standard format, and it is recommended to map original terms to controlled terminology (CT). SEND
data creation of histopathological examination in which descriptive terms are used is considered as an issue, because the meanings ofthe finding may change if mapping and used CT are inappropriate. Furthermore, it is difficult for non-pathologists to appropriately
create SEND data of histopathological examinations with a large number of data and variety of terms. Regarding to SEND data creationof histopathological examination, we made internal rules for data configuration and mapping, in addition to unification of the terms
utilizing INHAND that we have conducted since before. Thus, we have established a system which makes SEND data creation easierand faster. In this presentation, we introduce our histopathological examination system for SEND.

P-68
Poster Presentation

Creation of a histopathological glossary using INHAND nomenclature modified CDISC
SENDCT according to the SENDIG v3.1
○ Kochi Kakimoto1), Kouichi Suwa2), Hiroshi Edamoto1), Seiki Yamakawa1), Yuko Yamaguchi1), Toru Hoshiya1)
1)Department of Pathology, Gotemba Laboratories, BoZo Research Center Inc., 2)Department of Information System, Gotemba Laboratories,
BoZo Research Center Inc.

[Background] Submission of the SEND datasets according to the SENDIG v3.1 to the US FDA will be required for all pre-clinicalstudies within scope in 2019/2020. In this version, the MISTRESC is important for standardizing the value in MIORRES and where
possible must use the controlled lists of not only NEOPLASM but also NONNEO. The NONNEO terms predominantly uses INHAND
nomenclature, but are only about 200 comprised of base pathological process. INHAND nomenclature has about 600 of non-neoplastic
lesions, therefore, the NONNEO terms are expected to be deficient. Here, we created a glossary with requirements for SENDIG v3.1
using all INHAND terms and examined how many terms were short on the NONNEO list. In addition, we created mind-maps of thisglossary.
[Methods] According to the SENDIG v3.1, we create the Excel file containing the same variables as MI.XPT and SUPPMI.XPT using
all INHAND terms. The terms were separated one base pathological process and its modifiers; the former was translated into theappropriate term in the NONNEO or NEOPLASM, and the later was stored in the QVAL. The mind maps of the glossary were createdusing MindManager.
[Results/Conclusion] The NONNEO terms could cover the majority of the INHAND terms. Since our glossary was comprised all
INHAND terms modified by NONNEO terms, it seems to be an efficient and useful tool for creating SEND datasets. However, suchstorage methods according to SENDIG v3.1 are questionable values for data analysis.

̶ 192 ̶

Poster Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-69
Changes of pathological terminology of CDISC SEND CT in 2018 and comparison with
INHAND terminology○ Saki Inoue1), Hirofumi Hatakeyama1), Haruko Koizumi1), Shin-ichi Horikawa1), Shin-ichi Sato1), Takayuki Anzai2), Hijiri Iwata2)
1)Ina Research Inc., 2)LunaPath LLC

As for FDA medicine application, preparation of SEND Data set is required, and SEND IG (Implementation Guide) 3.1 proposedby CDISC will be applied in 2019. According to SEND IG 3.1, synonyms of non-neoplastic lesions with SEND CT (Controlled
Terminology) in the study report are required to map as much as possible, and terms not in SEND CT need to be entered in Study
Data Reviewer’s Guide (SDRG). Therefore, it is necessary to pay attention to the SEND CT terminology together with the INHAND
terminology, if we conduct a pathological examination for toxicity study that requires SEND compliance in the future.
SEND CT is published on homepage of CDISC and has been updated once every three months. In this study, we analyzed the changes of
SEND CT pathological terminology in 2018. The total number of terms was 185 as non-neoplastic lesion and 298 as neoplastic lesion at
the end of September. The total number of non-neoplastic terms in SEND CT was few compared with it of INHAND terms (about 1/4).
We would like to introduce the SEND CT terms added or deleted in 2018, together with the comparison with INHAND terminology. In
addition, we would like to state the notes and countermeasures in preparing of SEND pathology data from our experiences of making
SEND Data SET.

P-70

○ Tsuyoshi Yoshikawa1,2), Yasushi Horai1,3), Yoshiji Asaoka1,4), Takanobu Sakurai1,5), Satomi Kikuchi1,6), Makiko Yamaoka1,7),
Masaharu Tanaka1,3,8)
1)R&D Committee, Japan Pharmaceutical Manufacturers Association (JPMA), 2)Tokushima Research Institute, Otsuka Pharmaceutical Co.,

Ltd., 3)Sohyaku. Innovative Research Division, Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation, 4)Research Laboratory for Development, Shionogi& Co., Ltd., 5)Drug Safety and Pharmacokinetics Laboratories, Taisho Pharmaceutical Co., Ltd., 6)DMPK and Safety Assessment, ResearchCenter, Mochida Pharmaceutical Co., Ltd., 7)Watarase Research Center, Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd., 8)R&D Department, Japan
Bioindustry Association[Background] JPMA has been working as a task force (TF) on the theme of “Development of image analysis technology forhistopathologic changes” as part of the collaboration for realizing cutting-edge drug development. Digital pathology technology (DPT)
has developed in recent years, but there are few applications of the DPT in drug development. From these situations we conducted aquestionnaire to survey the current status, needs, possibility or development of image analysis with DPT.
[Methods] The subjects were 35 members of the R&D committee. The questionnaire was for each of Efficacy and/or Safety Pathology
Divisions. The questions consisted of the experiences, implementation and issues regarding histopathologic examination, needs forimage analysis software, and future views. The survey was anonymized through the JPMA secretariat and returned to the TF, and the TF
analyzed it.
[Results & Conclusions] Valid responses were obtained from 26 companies and most of the companies think the benefit of image
analysis is to obtain objectivity and persuasiveness, but are struggling with analysis conditions with accuracy and objectivity. There is astrong needs for image analysis software applied DPT, and most of the companies think the part of the histopathologic evaluation will be
replaced by computer in the future. In conclusion, these results clarify the needs for the development of image analysis software applied
DPT and provide useful information in the development of the software.

̶ 193 ̶Poster Presentation

A questionnaire survey on the image analysis of the digital pathology technology ofpharmaceutical companies

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-71*
Quantitative evaluation of histopathological changes using imaging analysis software
HALO○ Mao Mizukawa, Yasushi Horai, Yuko Oono, Satomi Nishikawa, Hironobu Nishina, Nobuyuki Baba, Eisuke Kume
Safety Research Laboratories Mitsubishi Tanabe Pharma Coporation[Background] Quantitative analysis of histopathological changes provides convincing and objective data. However, only a few analyses
have been reported in HE slides. In this study, we quantified some histopathological changes in HE slides using an imaging analysis
software HALO.
[Material and Method] Whole slide images of the kidney, thymus, and parotid gland were obtained from each HE slides of rats with(treated rats) or without (control rats) histopathological changes using virtual microscope Aperio. The images were analyzed by HALO;
the analytical target structures were distinguished and quantified with classifier module. In addition, some of the distinguished structures
were analyzed with another module.
[Results] In the kidney, basophilic tubule was distinguished and quantified. The basophilic tubule area were 0% in control rats and
20% in treated rats. In the thymus, cortex and medulla were distinguished and quantified. The cortical area was 80% in control rats and
58% in treated rats (with cortical atrophy). In the parotid gland, acinus and duct were distinguished with classifier module, then, acinus
cytoplasm area was quantified with another module. The cytoplasm area was 62% in control rats and 40% in treated rats (with acinar
atrophy).
[Conclusion] We could quantify the various histopathological changes in HE slides and distinguish other than the target structures,
suggesting that HALO allows more objective evaluation.

P-72
Poster Presentation

Comparison of fine-tuning deep convolutional neural networks for classification oflung cancer types from cytological images○ Tetsuya Tsukamoto1), Atsushi Teramoto2), Yuka Kiriyama1,3), Ayumi Yamada2)1)Department of Diagnostic Pathology, Fujita Health University School of Medicine, 2)Faculty of Radiological Technology, Fujita Health

University School of Health Sciences, 3)Department of Diagnostic Pathology, Narita Memorial Hospital

Lung cancer is a leading cause of death worldwide. Depending on the recent progress of therapeutics, accurate classification of cancer
types (adenocarcinoma, squamous cell carcinoma, and small cell carcinoma) is required. However, improving the accuracy and stabilityof diagnosis is challenging especially in cytological diagnosis. We have previously developed an automated classification scheme forlung cancer cytological images using a deep convolutional neural network (DCNN), resulting in accuracy of 71.9%. In this study, we
have evaluated 3 fine-tuning DCNNs including AlexNet, GoogLeNet, and VGG-16 to improve accuracy of classification. AlexNet
consists of 5 convolutional, 5 pooling, and 3 fully connected layers; the last layer was modified to classify 3 lung cancer types. Overall
accuracy was 75.5%. GoogLeNet possesses 22 layers without fully connected layers with modification to output 3 cancer categories.
Accuracy was as low as 70.8%. VGG-16 is constituted with 16 simple layers and resulted in the best value of 76.8% in accuracy.
Considering these data, fine-tuning, although depending on the architectures, could be useful for classification of lung cancer cytologicalimages.

̶ 194 ̶

Poster Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-73*
Characteristic for PAXgene fixed paraffin embedded samples○ Masaki Yamazaki1), Kiyotaka Nakano2), Osamu Natori2), Masami Suzuki1,2), Atsuhiko Kato1)
1)Chugai Pharmaceutical Co., Ltd., 2)Forerunner Pharma Research Co., Ltd.

In procedure for preparation of pathological sample, it is important that preservation of both morphology and RNA quality forunderstanding biological insight. PAXgene-fixed paraffin-embedded (XFPE) is known as a pathological sample to satisfy the need forpreservation of morphology and high-quality RNA. In this study, we compared the stain patter of H&E and RNA-quality to the othersample preparation procedures (modified methacarn-fixed paraffin-embedded, paraformaldehyde-fixed paraffin-embedded using the
AMeX method, formalin-fixed paraffin-embedded, fresh frozen, PAXgene-frozen). Furthermore, we assessed whether XFPE can beapplicable for laser capture microdissection (LCM). In XFPE, the morphological feature was similar to that in alcohol-based fixedsamples; ghosted red blood cells, cell shrinkage and eosinophilic cell cytoplasm. And the quality of the RNA extracted from XFPE wasexcellent following by fresh-frozen. XFPE can keep high RNA-quality because less RNA-fragmentation occur comparing to fixations
made from formaldehyde. And it can be applied for next generation sequencing analysis. In addition, the quality of RNA was maintained
after storage over one year later. RNA quality was found to be best preserved when tissue was cut into pieces of over 5,000 μm2. XFPE
can be a good tool when used with LCM and RNA-Seq, giving well-balanced RNA quality and tissue morphology.

P-74○Junko Shinozuka1), Masaki Yamazaki1), Kiyotaka Nakano2), Shin-ichi Funahashi2), Masami Suzuki1,2), Atsuhiko Kato1)
1)Safety Assessment Dept., Fuji Gotenba Research Labs., Chugai Pharmaceutical Co., Ltd. 2)Forerunner Pharma Research Co., Ltd.

Enhanced visualization technique is needed to detect low expression proteins. Leucine-rich repeat-containing G-protein coupled receptor
5, or LGR5, is known as a low expression protein. In this study, some enhanced visualization methods in immunofluorescence staining
were conducted for detection of LGR5; the Qdot method (a high-brightness fluorophore), Tyramide Signal Amplification (TSA) (highsensitivity is achieved by an accumulated deposition of labeling dye), and the Alexa labeled streptavidin biotin (LSAB) as a control. The
detection sensitivity was highest in TSA, whereas subcellular localization of the protein was most clear in the Qdot method. In addition,
range of setting condition for taking photos by conforcal microscopy was wider in the Qdot method to TSA, so that it was confirmedthat the condition setting for the Qdot method is easier than that of TSA. It is thought that these results depend on each principle, namely
an accumulation of dye by TSA leads to high background, though it can achieve high sensitivity. While, the Qdot method with highbrightness fluorophore can repress the background because of the high S/N (signal/noise) ratio.

̶ 195 ̶Poster Presentation

Intensive immunofluorescence staining methods for low expression protein and thecharacteristics

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

Poster Presentation

P-75
Three-dimensional structure analysis of podocytes in rat kidney using FIB-SEM
Yasushi Miyauchi1), ○Kouhei Ueda1), Naoko Imura1), Shin Inamoto2), Yuji Otsuka2), Akiyo Yoshida2)1)Department of Bio Research, Kamakura Techno-Science, Inc. 2)Morphological Research Laboratories, Toray Reseach Center, Inc.

[Background and Aim] Transmission electron microscopes (TEM) and scanning electron microscopes (SEM) have been used formorphological analysis of various biological specimens, but they can only create 2-dimensional images (TEM: flat image, SEM:
surface image) of the specimen. Therefore, we utilized FIB-SEM tomography technique for 3-dimensional ultrastructure analysisof the biological sample.
[Materials and Methods] A small part of renal cortex containing glomeruli was collected from the SD rat, and the tissue was
fixed, stained and embedded in resin for FIB-SEM. The surface of the resin sample was etching in nanometer scale using
focused ion beam (FIB) and the image of exposed surface was captured by SEM. This process was repeated to obtain sequential
2-dimensional images. The components of glomerular capillary wall in each image were detected and colored. Mitochondria in
podocytes were also colored. Then, the 2-dimensional images with colored parts were organized into a 3-dimensional structure
image.
[Results] The 3-dimensional ultrastructure analysis using FIB-SEM showed the new fact that podocytes extended long footprocesses to Bowman’s capsule and mitochondria inside of podocytes had long-slender shape in the kidney of SD rat. Thismethod is considered to be useful for analyzing ultrastructure of various types of cells and organelles such as mitochondria inbiological specimens.

P-76
Poster Presentation

Method for morphological analysis of 3D cell cultures○ Etsuko Fujii1,2), Shigeto Kawai1), Masaki Yamazaki2), Kiyotaka Nakano2), Atsuhiko Kato2), Masami Suzuki1,2)1)Forerunner Pharma Research Co., Ltd., 2)Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.

[Objective] 3D cell culture reproduces the 3D structure and function of organs and tissues, and is widely used in medical and biologicalresearch. But there is little information concerning appropriate methodology for morphological analyses. Thus, we have attempted to
combine a pathological method with whole mount observation.
[Materials and Methods] For histopathological observation, organoids derived from a colon cancer stem cell line were fixed in 4%
paraformaldehyde, suspended in agarose solution, centrifuged onto a singular plane and embedded into paraffin by the AMeX method.
H&E, AB-PAS, immunohistochemistry (IHC, Ki-67, villin), and immunofluorescence (IF, LGR5) slides were prepared. Then whole
mount samples were stained for phalloidin, cleared and analyzed by confocal microscopy.
[Results] Histopathological slides enabled observation of multiple organoids on the same section, and the varying structures of theorganoids were identified. AB-PAS, IHC and IF staining was also possible. Consecutive sections were required for an overall 3D viewof the structures, but by whole mount the 3D structures including formation of ducts was easily observed.
[Conclusions] A pathological method that enables the observation of multiple organoids on a single plane enabled detailed
morphological analysis. Additionally, comprehension of the overall view of the 3D structure was possible by whole mount. Thus werecommend these methods should be used according to the aim of a study.

̶ 196 ̶

Poster Presentation

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

P-77*
Testicular lesions by exposure to trifluoroethanol or trifluoroacetaldehyde in medaka○ Yusuke Kuroda1), Masayuki Kimura1), Chisato Hayakawa1), Seigo Hayashi1), Kazuya Takeuchi1), Satoshi Furukawa1),
Akihiko Sugiyama2)
1)Biological Research Laboratories, Nissan Chemical Corporation, 2)Veterinary Clinical Pathology, Faculty of Veterinary Medicine, Okayama

University of Science[Background] Trifluoroethanol (TFE) and trifluoroacetaldehyde (TFALD) induced testicular lesions (injury to spermatocytes andspermtids, etc.) in rats. In this study, medaka exposed to TFE or TFA were histopathologically examined.
[Materials and Methods] Male adult medaka (Oryzias latipes) (3 to 6 months old) were used. Medaka were bred in 2 L test solution
using the static method. The exposure period was 8 days, and the test solution was exchanged once every 2 days. The exposure
concentrations were set at 0, 62.5, 125, 250 and 500 mg/L (5 males in each group) for TFE and 0, 15.625, 31.25, 62.5, 125 and 250 mg/L
(6 males in each group) for TFALD.
[Results] In the middle of the exposure period, 1 male died at 125 mg/L in the TFE group, and all males died or were euthanized at
250 mg/L or more in the TFE group and at 125 mg/L or more in the TFALD group. In surviving males, degeneration and necrosis of
spermatocytes and spermatids were observed at 62.5 mg/L or more in the TFE group and at 15.625 mg/L or more in the TFALD group,and obvious reduction of spermatids was also observed at high concentrations.
[Conclusion] TFE and TFALD also induced the testicular lesions in medaka. It was considered that the lesion in medaka might be asimilar mechanism to the testicular lesion induced in rats because effects of spermatocytes and spermatids were observed in the lesion in
medaka.

P-78*○ Makoto Shirai, Takashi Aoki, Noriyo Niino, Kazunori Fujimoto, Masako Imaoka, Kiyonori Kai, Kazuhiko Mori
Medicinal Safety Research Laboratories, Daiichi Sankyo Co., Ltd.

[Background] The retina consists of several layers and each of them can be a toxic target. Therefore, analysis of retinal toxicity
mechanism using whole eye samples may be difficult because of dilution of layer-specific signal changes. We investigated usefulness oflaser capture microdissection (LCM) to assess mechanism of retinal toxicity by GeneChip analysis.
[Materials and Methods] Female Crl:CD(SD) rats were administered N-methyl-N-nitrosourea (MNU) once intraperitoneally at 60 mg/
kg, and necropsied at 6 hours after the dosing. LCM samples were prepared to collect outer nuclear layers (ONL) and rod and cone
photoreceptor layers (PRL) from frozen sections, which are known to be toxic targets of MNU. Whole eye (WE) samples were preparedby macroscopically removing lens, vitreous bodies, and corneas and then immediately freezing the rest eyes at necropsy.
[Results] GeneChip analysis on these samples revealed that the expressions of inflammatory genes dynamically changed in WE samples.
Meanwhile, the expression of genes related to glycolysis altered in LCM samples. In addition, expression changes of most of theseglycolytic genes were not be detected in WE samples, although WE samples contained ONL and PRL.
[Conclusion] It is suggested that layer-specific changes of gene expressions in the retina can be detected by collecting the layer using
LCM, and LCM is useful in the mechanistic studies of retinal toxicity by GeneChip analysis.

̶ 197 ̶Poster Presentation

Investigation of the usefulness of laser capture microdissection on mechanism
analysis of retinal toxicity

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

発表者索引
A
阿部

正義

O-07

油谷

浩幸

SL-1

赤川

唯

P-57

赤木

純一

O-08, P-09, P-59

赤堀

有美

O-04

赤根

弘敏

P-52

明石

知也

S1-3

秋江

靖樹

P-52

秋吉

秀保

P-27

安藤

亮介

S2-4

安藤

さえこ

P-11

安齋

享征

P-69

青木

貴志

P-78

荒井

剛志

P-34

浅沼

秀樹

O-09

浅岡

由次

P-70

藤井

悦子

P-10, P-76

平田

暁大

P-14

藤井

雄太

P-67

平塚

未夢

P-33

藤木

勝也

P-35

平山

由佳理

P-33

藤本

和則

P-78

北條

幹

藤本

成明

O-03

本多

久美

藤岡

正喜

O-02, P-19, P-25,
P-37, P-43

洞井

康

藤原

史織

堀川

真一

P-48

藤原

利久

星谷

達

W-4

深町

勝巳

P-11

舟橋

真一

P-10, P-74

古畑

啓子

O-09

古川

賢

臨風

魏

民

馬場

伸之

S1-3, P-35, P-71

Bradley, A

P-66

C
Chambers, James

P-15

千葉

克芳

P-41

千早

豊

P-04

Cho, Young-Man
崔賢智

O-08, P-09, P-59
P-32

D

P-69
W-1, P-68

I
敦子

P-52

井手

鉄哉

O-08, P-59

伊倉佐織

P-06, P-28

池上

雅博

池崎

信一郎

P-22

今井

順

O-02, P-19, P-25,
P-37, P-43

今井

俊夫

P-66

今泉

隆人

P-34

今村

健志

SL-2

O-07, P-77

Goodman, DG

B

P-41
P-70, P-71

市川

G
高

P-46, P-64

H

P-47
W-1, P-06

今井田

P-34
克己

S2-1, P-63
P-42, P-44, P-45

萩原

仁美

今岡

尚子

P-53

P-78

袴田

和巳

井村

奈緒子

S1-4

P-75

袴田

志野婦

稲元

伸

P-28

P-75

浜口

功

猪又

明子

O-09

P-46, P-64

濱本

周造

猪又

晃

S2-4

W-5, P-16

浜村

政夫

井上

紗季

P-62

W-6, P-69

濱岡

仁美

石黒

結唯

O-05

P-26

浜崎

景

石井

真美

P-33

P-19

花岡

文雄

石井

雄二

P-09

P-23, P-26, P-61

原

健史

石川

俊平

P-16

P-10

陽子

磯部

厚志

P-65

P-53

伊藤

格

P-34
P-08

Dixon, Darlene

IATP

土肥

孝彰

原

P-29

土居

卓也

原田

紗枝

P-13

P-50, P-55, P-56, P-57

強

悠子

孝則

伊藤

土井

原田

P-08, P-66

W-7

伊藤

裕子

P-64

O-05

伊藤

優子

O-04, P-02, P-03
S1-4

E

長谷川

悠子

橋口

収

P-06

橋本

希

岩本

和樹

P-42, P-44, P-45

江田

景

畠山

洋文

岩田

聖

P-52

W-6, P-69

枝元

洋

早川

知里

井澤

武史

P-68

O-07, P-77

榎本

祐子

清吾

友扶子

P-07

林

出雲

O-07, P-77

遠藤

克己

P-34

林

新茂

P-03, P-13, P-20, P-66

Harbert, R

P-66

樋口

仁美

P-40

平舘

裕希

O-09

F
不二

哲

O-01

̶ 198 ̶W-6, P-32, P-66, P-69
P-17, P-18, P-27
P-12

J
Jacobsen, M

P-66

金

P-24

美蘭

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

K
甲斐

清徳

S1-4, P-28, P-41, P-78

鍛冶

秀文

S1-3

梶村

哲世

W-6

アンナ

O-02, P-19, P-25,
P-37, P-43

梯
柿本

恒知

P-68

柿沼

千早

P-16

金瀬

茜

P-07

神鳥

仁志

P-65

金原

智美

P-34

蟹江

尚平

P-42

菅野

剛

P-56, P-57

小池

恒雄

P-34

小泉

治子

W-6, P-69

爰島洋子

P-50, P-57

小松

雅明

S2-3

河村

大輔

P-10

近藤

洋一

O-05

ミンジョン

P-32

孔

拓郎

O-09

水川

真緒

P-35, P-71

水田保子

O-08, P-59

百瀬

暖佳

克安

P-34

小寺

喬

P-54

小山

彩

P-08

小山

千尋

小柳

美穂子

熊谷

和善

P-41

久米

英介

P-35, P-71

倉持瑞樹

P-17, P-18, P-27

倉田

昌明

P-05

黒田

雄介

O-07, P-77

黒滝

哲郎

P-56

黒住

誠司

P-07

N

O-09
P-17, P-18, P-27

P-03, P-13, P-20

茜

片岡

広子

P-41

加藤

淳彦

P-10, P-73, P-74, P-76

加藤寛之

O-01, O-06, P-30

加藤

正巳

P-34

加藤

由隆

P-08

河部

真弓

W-7, P-40

川部

美史

P-14

川口

博明

P-51

川合

重人

P-76

M

川迫

一史

P-56

町田

雪乃

P-63

数野

公正

P-53

前田

一葉

P-53

Keenan, CM

P-66

前田

優

P-41

Kellner, R

P-66

前野

愛

P-46, P-64

P-13, P-20, P-21,
P-22, P-31, P-64

Mahler, B

P-66

牧田

慶子

P-16

楠
桑村

英樹
充

木島

綾希

P-23, P-26

木嶋

綾希

政次

美紀

P-05

P-61

菊池

耕平

増渕

康哲

O-04, P-02, P-03

P-20

菊池

玲美花

増本

直子

P-59

P-23

菊地

聡美

松田

崇斗

P-53

O-04, P-02, P-03, P-70

松本

晴年

P-11

P-32

松本

泉美

P-67
P-01

木村

均

P-34

木村

真之

松本

智志

P-77

木下

勇一

松尾

沙織里

P-33

桐山

諭和

松下

久美

P-34

P-72

北浦

敬介

松下

幸平

P-36, P-38, P-60

P-01, P-39

小林

欣滋

松浦

哲郎

P-12

P-04, P-49

小林

亮介

松山

睦美

O-03

P-57

小林

由幸

米良

幸典

W-7, P-40

O-07

河内

眞美

Meseck, E

P-66

P-67

古賀

真昭

南澤

由佳

P-58

P-54

健二郎

満石

三喜男

P-62

S2-4

三浦

麻里安

P-33

郡

水上

小沼

樫村

惠貞

P-67

P-02

P-06

金

出

良子

健一郎

紀子

宮脇

小西

笠原

煙山

P-75

P-54

P-17

W-3, P-10

̶ 199 ̶P-13, P-20, P-21,
P-22, P-31, P-64

泰静香

P-07, P-33

克宏

宮内

小西

Karim, Mohammad

S1-3, P-35

美谷島

森

和彦

森

崇

O-09
P-28, P-41, P-78
P-14

森川

朋美

森岡

舞

W-7, P-40

森山

亜紀子

P-04, P-49

守安

貴子

P-46, P-64

諸木孝泰

P-01, P-39

村上

雄一

P-35

村松

大

P-58

村瀬

詩織

P-34

武藤

朋子

P-47

長野

嘉介

P-53

永田

一郎

P-04

永谷

真理子

永吉

司

P-20

名倉

かれん

P-13

P-36, P-38, P-60

W-1, P-48

Nahid, Rahman

P-18

内木

綾

O-01, O-06, P-30

中江大

P-13, P-20, P-21, P-22,
P-31, P-46, P-64

仲井

杏海

P-20

中島

康太

O-04, P-02, P-03

中村

賢志

P-61

中村

くるみ

P-26

中村

優佳

P-31

中野

清孝

P-10, P-73, P-74, P-76

中島

亘

P-15

中島

正洋

O-03

中山

裕之

P-15

中澤

朋美

P-06

成澤

裕子

P-42, P-44, P-45

名取

修

P-73

根本

真吾

P-05

二井

愛介

P-58

新野

訓代

P-78

西飯

直仁

P-14

西川

智美

P-71

西村

悠花里

P-01, P-39

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

仁科嘉修

P-35, P-71

酒井

洋樹

P-14

高橋

智

西沢

隆

P-10

坂本

義光

P-46, P-64

高橋

武司

S2-2

野口

貴子

P-07

阪田

佳紀

P-16

高須

伸二

P-23, P-26, P-61

野島孝之

O-01, O-06, P-30

S1-5

櫻井

健

P-41

竹井

亜矢子

P-22

Nolte, T

P-66

櫻井

孝信

P-70

武井

由弘

W-6

野沢

美波

P-13

佐野

智弥

P-65

竹之内

沼倉

佑樹

P-54

佐々木

永太

O-09

武田

賢和

S1-2

沼野

琢旬

W-7, P-40

佐々木O-07, P-77

久美子

P-07, P-33

朋

P-29

竹内

和也

佐藤

寛子

S1-3

玉井

聡

P-41

佐藤

順子

W-2, P-55, P-56

玉野

静光

W-7

O-08, P-09, P-23,
P-26, P-36, P-38,
P-59, P-60, P-61

佐藤

公彦

P-07

田中

広治

S1-3

佐藤

恭子

P-59

田中

雅治

S1-3, P-70

O
小川

明子

小川

秀治

佐藤

亮

P-01, P-39

田中

義久

O-05

P-13, P-20, P-21, P-22

大畑

敬一

佐藤

伸一

W-6, P-69

田中

勇太朗

S2-4

P-21

大森

治夫

佐藤

洋

P-05

唐

P-09

大澤

徹也

関谷

明生

P-57

谷本

昭英

P-51

P-41

太田

毅

柴田

雅朗

O-05

田崎

雅子

P-53

P-21, P-31

大石

裕司

渋谷

淳

O-04, P-02, P-03

田添

晴椰

P-22

P-43

岡田

淳志

志賀

敦史

P-08

Teh, Angeline Ping Ping

S2-4

岡戸

恵子

清水

茂一

P-52

張

P-28

岡本

芳晴

新家

由実子

P-33

寺本

篤司

P-72

P-07

岡野

拡

篠原

雅巳

P-21, P-31

寺尾

壽子

P-53

P-48

岡山

祐弥

篠塚

淳子

P-74

寺山

由依

P-01, P-12, P-39

P-47

岡崎

欣正

白井

真人

P-78

栃谷

智秋

P-67

P-08

奥田

須美子

早場

純子

P-53

友成

由紀

P-55, P-56, P-57

P-52

奥野

高裕

杉本

直樹

P-59

豊田

武士

O-02, P-19, P-37, P-43

大野

祐子

杉野

輝明

S2-4

O-08, P-09, P-36,
P-38, P-60

S1-3, P-71

O-07, P-77

啓一

S2-4

孝文

晶彦

戸澤

押方

杉山

P-62

杉山

光

土谷

稔

土屋

卓磨

P-47

大嶋

成奈優

P-12

大塚

祐二

杉山

大揮

W-7, P-40

P-75

尾崎

清和

諏訪

浩一

P-68

P-12

酒々井

P
朴

チャンヒ

P-32

Pervin, Munmun

P-17

R
Rahman, Nahid

P-17

Rittinghausen, S

P-66

Ruehl-Fehlert, C

P-66

龍

完次朗

P-21, P-22

S
齋藤

文代

O-04

斎藤

奈津美

P-22

齋藤

翼

P-06

眞澄

P-11

倩

P-24

舜恵

P-63

P-20, P-21, P-22, P-31

P-50, P-55, P-56, P-57
S1-4, P-01, P-39

辻

菜穂

O-07

辻

佑佳

P-27

塚本

徹哉

P-72

鈴木

勇

P-48

鈴木

佳奈恵

P-20

鈴木

雅実

P-10, P-32, P-73,
P-74, P-76

鈴木

周五

内田

和幸

P-15

O-01, O-06, P-30

鈴木

俊也

打屋

尚章

P-63

P-64, P-46

宇田

一成

W-7

上田

耕平

P-75

上田

誠

P-54

T

U

多田

幸恵

P-46

梅村 隆志

多胡

善幸

P-19

畝山

瑞穂

P-15

田口

和己

S2-4

海野

怜

S2-4

田原

春菜

P-05

宇野

絹子

高木

みづほ

P-48

鷹橋

浩幸

P-47

V

高橋

尚史

P-08

Vahle, J̶ 200 ̶P-23, P-26, P-61

P-20, P-21, P-22, P-31

P-66

The 35th Annual Meeting of the Japanese Society of Toxicologic Pathology

W
涌生

ゆみ

和久井

信

P-62
P-47

王

剣

P-24

王

自力

P-24

鰐渕

英機

O-02, P-19, P-25,
P-37, P-43

渡邊厚

P-13, P-21, P-22, P-20

渡辺

純

W-6

渡邊

聖栄子

P-22

Weber, Klaus

W-8

Y
矢吹

悠乃

P-49

山田

あゆみ

P-72

山田

直明

P-56

山田

貴宣

P-36, P-38, P-60

山際

慶典

P-05

横井

雅幸

P-09

山口

宏明

P-58

吉田

晃世

P-75

山口

理紗子

P-13

吉田

翔太

P-42, P-45

山口貴嗣

P-25, P-37

吉田敏則

O-04, P-02, P-03

山口裕子

W-1, P-06, P-28,

吉川

佳佑

S1-3

P-48, P-68

吉川

剛

P-42, P-44, P-45

吉見

直己

P-11

P-01, P-39, P-70

山川

けいこ

山川

誠己

W-1, P-68

吉野

有香

P-67

山川

達也

P-16

吉嵜

響子

P-14

山岡

牧子

P-70

義澤

克彦

P-07, P-33, P-66

山下

由真

P-29

柚川

藍色

山手

丈至

P-17, P-18, P-27

行松

直

山崎

雅輝

S1-1, P-73, P-74, P-76

行光

由莉

P-07

湯澤

勝廣

P-64

柳井

徳磨

P-14

安井

孝周

S2-4

安野

恭平

P-28

Z

横平

政直

P-42, P-44, P-45

張

̶ 201 ̶梅

P-04, P-49
O-02, P-37, P-43

P-24

第 35 回日本毒性病理学会総会及び学術集会
講演要旨集
編

集

第 35 回日本毒性病理学会総会及び学術集会事務局
株式会社未来創薬研究所〒153-8904 東京都目黒区駒場 4 丁目 6 番 1 号
東京大学駒場オープンラボラトリー
責任者 鈴木 雅実

印刷・製本 株式会社アイペック

病理組織標本作製はࠕࣂ࣮ࢳࣕࣝࢫࣛ࢖ࢻཷクࢆ㛤ጞࡋࡲࡋࡓࠖ
HE染色や特殊染色および免疫組織化学染色などの明視野スライドから蛍光重染色などの暗視野スライドまで、
病理用スライドをバーチ
大切な研究用データを半永ࠉࠉャル化することで、久的に保存することが可能になりました！

●組織標本作製
HE染色標本作製(医薬品, 化学物質, 農薬GLP：複数場所試験, non-GLP)
特殊染色標本作製（ PAS, MT, Azan, Sirius Red,o Golgi染色 など多数)
免疫組織化学染色(CD関連, IL抗体, TUNEL, 8-OHdG,4HNE染色等多数)
凍結切片・凍結非脱灰標本作製(脂肪染色・免疫染色対応）

病理組織標本作製および検査株式会社 バイオ病理研究所%LRSDWKRORJ\,QVWLWXWH&R/WG●組織学的検査
一般病理組織学的検査
開発スクリーニングにおける病理組織学的検討
作用メカニズム・作用部位等の基礎検討における組織学的検討
病態動物における組織学的検討●病理学的研究コンサルタント
研究企画から最終報告書まで

ࠛ
大分県国東市国東町小原1200-2
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(0DLOPDLO#ELRSDWKRORJ\MS
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TEL:045-473-6211 /FAX:045-473-2884

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