課題番号：２５指２０１
研究課題名：生活習慣病などにおける脂質バイオマーカー探索
主任研究者名 ：清水孝雄
分担研究者名 ：キーワード ：エイコサイノイド、脂肪酸、リン脂質、生活習慣病、潰瘍性大腸炎
研究成果：細胞や組織から１５０種類のエイコサノイドを測定すする方法を確立し、論文として発表した(Yamada
et al J. Chrom. B 2015 in press)。また、リン脂質の包括的な測定も開発中である。この方法を使い、リン脂質生合成酵素の LPCAT3 欠損マウス各組織のエイコサノイドやリン脂質を測定した。LPCAT3はアラキドン酸をリン脂質に組み込む酵素であり、その欠損マウスは新生児致死である。各組織のエイコサノイド量に差はなかったが、アラキドン酸含有リン脂質は減少していた。また、肝臓や小腸においてトリアシルグリセロール（TG）の蓄積し、LPCAT3 による局所でのアラキドン酸含有リン脂質の合成が高密度の TG 集積に重要であり、これが効率的な TG 輸送やリポプロテイン形成に寄与している可能性が示唆された(Hashidate-Yoshida, Harayama et al 2015 Elife)。これらの確立した方法を駆使して、患者検体の測定を開始している。

Subject No.

：25-201

Title：Screening of lipid biomarkers associated with lifestyle diseases

Researchers ：Takao Shimizu
Key word：Eicosanoid, fatty acid, phospholipid, lifestyle disease, ulcerative colitis

Abstract：

We established the method to measure eicosanoids (~150) from cells and tissues using LCMS-8050(Yamada et al J. Chrom. B 2015 in press). We also attempted to measure phospholipids (~1000) andobtained comprehensive data from LPCAT3-KO mice. LPCAT3-KO mice showed lower level of PC
containing arachidonic acid in several tissues. From these data using the method, we could
speculate that highly accumulated arachidonate in phospholipid may contribute to cluster andtransfer TG to lipoprotein (Hashidate and Harayama et al 2015 Elife in press).

Researchers には、分担研究者を記載する。

アラキドン酸代謝物の一斉測定例
2014年version
LCMS-8050で感度が数倍上昇した。

1

網羅的SRMによるリン脂質測定例
ホスファチジルコリン (PC) 組成変化
〜 アラキドン酸含有PC

E18.5
LPCAT3 +/+LPCAT3 -/-研究発表及び特許取得報告について

課題番号：25指201
研究課題名：生活習慣病などにおける脂質バイオマーカー探索
主任研究者名：清水孝雄

論文発表
論文タイトル

著者

掲載誌

掲載号

年Sumida, H., Yanagida, K.,
Kita, Y., Abe, J., Matsushima,
Interplay between CXCR2 and BLT1 facilitatesneutrophil infiltration and resultant keratinocyte K., Nakamura, M., Ishii, S.,
J. Immunol.
activation in a murine model of imiquimod-induced
Sato, S., and Shimizu, T.
psoriasis.

12-Hydroxyhpetadecatrienoic acid promotes
epidermal wound healing by accelerating
keratinocyte migration via BLT2 receptor.

Liu, M., Saeki, K., Matsunobu,
T., Okuno, T., Koga, T.,
Sugimoto, Y., Yokoyama, C.,
J. Exp. Med.
Nakamizo, S., Kabashima, K.,
Narumiya, S., Shimizu, T.,andYokomizo, T.

Morimoto, R., Shindou, H.,
Rapid Production of Platelet-activating Factor Tarui, M., and Shimizu, T.
Is Induced by Protein Kinase Cα-mediatedPhosphorylation of Lysophosphatidylcholine
Acyltransferase 2 Protein.

J. Biol. Chem.

Harayama, T., Eto, M.,
Shindou, H., Kita, Y., Otsubo,
Lysophospholipid acyltransferases mediate
E., Hishikawa, D., Ishii, S.,
phosphatidylcholine diversification to achieve Sakimura, K., Mishina, M., and Cell Metabthe physical properties required in vivo.
Shimizu, T.
Tarui, M., Shindou, H.,
Kumagai, K., Morimoto, R.,
Selective inhibitors of a PAF biosynthetic
Harayama, T., Hashidate, T.,
J. Lipid Res.
enzyme lysophosphatidylcholine acyltransferase
Kojima, H., Okabe, T., Nagano,
2.
T., Nagase, T., and Shimizu,T.

92

2014

211

2014

289

2014

20

2014

55

2014

Predominant role of cytosolic phospholipase
A2alpha in dioxin-induced neonatalhydronephrosis in mice.

Yoshioka, W., Kawaguchi, T.,
Fujisawa, N., Aida-Yasuoka,
K., Shimizu, T., Matsumura,F., and Tohyama, C.

Sci. Rep.

4

2014

Diversity and function of membrane
glycerophospholipids generated by theremodeling pathway in mammalian cells.

Hishikawa, D., Hashidate, T.,
Shimizu, T., and Shindou, H.

J. Lipid Res.

55

2014

FASEB J.

in press

2015

The atypical N-glycosylation motif, Asn-CysCys, in human GPR109A is required for normal
cell surface expression and intracellularsignaling.

Yasuda, D., Imura, Y., Ishii,S., Shimizu, T., and Nakamura, FASEB J.
M.

in press

2015

A platelet-activating factor (PAF) receptor
deficiency exacerbates diet-induced obesity
but PAF/PAF receptor signaling does notcontribute to the development of obestiyinduced chronic inflammation.

Yamaguchi, M., Matsui, M.,Higa, R., Yamazaki, Y., Ikari,Biochem. Pharmacol. 93
A., Miyake, M., Miwa, M.,Ishii, S., Sugatani, J. andShimizu, T.

2015

The absence of the leukotriene B4 receptor
BLT1 attenuates peripheral inflammation andspinal nociceptive processing following
intraplantar formalin injury.

Asahara, M., Ito, N., YokomizoT., Nakamura, M., Shimizu, T., Mol Pain.
Yamada, Y.

2015 Dec;11(1)2015

グリセロリン脂質リモデリング進藤英雄

医学のあゆみVol.248 No. 13.

2014肺サーファクタントのリン脂質と呼吸機能進藤英雄

日本肺サーファクタ
ント・界面医学会雑誌

Vol. 45

2014

Koeberle, A., Pergola, C.,
Role of p38 mitogen-activated protein kinase
Shindou, H., Koeberle, SC.,in linking stearoyl-CoA desaturase-1 activity
Shimizu, T., Laufer, SA., andwith ER homeostasis.
Werz O.

研究発表及び特許取得報告について

小笠原理恵、小笠原勝利、松浦絵
ラットII型細胞の分化維持培養法と透過電顕像によ 里、石田欣二、菱川大介、進藤英 日本肺サーファクタ
ント・界面医学会雑 Vol. 45
る形態学的特徴の検討
雄、清水孝雄、遠山稿二郎、諏訪 誌
部章

2014

新規は違法腔内分泌タンパク質Sec14-like 3の生化 菱川大介、進藤英雄、原山武士、 分子呼吸器病、先端Vol. 19.
学的機能解析
小笠原理恵、諏訪部章、清水孝雄 医学社

2015

生体膜リン脂質多様性形成分子メカニズムー徐々に
進藤英雄
わかって来たリン脂質の生合成?

2015

循環PlusVol. 15 No.5.

学会発表
タイトル
A comprehensive monitoring method for lipid
mediators using a high-speed LC/MS with
continuous ionization polarity switching

発表者

学会名

山田真希、北芳博、徳岡涼美、小 62nd ASMS
平貴博、清水孝雄
Conference

場所
Baltimore, MD（アメリカ合衆国）

Development and evaluation of a comprehensive
monitoring method for eicosanoid species using 山田真希、北芳博、小平貴博、徳Metabolomics 2014 山形県鶴岡市
a high-speed LC/MS with continuous ionization 岡涼美、清水孝雄
polarity switching

年月2014年6月15日〜19日

2014年6月23日〜26日

Sec14L3, a novel protein recognizing liposome
Takao Shimizu
curvature and packing defects

Scripps Seaside
Forum of theUniversity of
LIPID MAPS Annual
California San
Meeting 2014
Diego's Scripps
Institution ofOceanography

May 13-14,
2014

Development of glycerophospholipid profiling
methods using ternary gradient liquid
chromatography/ high-speed triple quadrupole
mass spectrometry

Suzumi Tokuoka, Yoshihiro
Kita, Masaki Yamada, Takao
Shimizu

Scripps Seaside
Forum of theUniversity of
LIPID MAPS Annual
California SanMeeting 2014
Diego's Scripps
Institution ofOceanography

May 13-14,
2014

Monoacylglycerol lipase mediates fever via
hypothalamic prostaglandin E2 production

Scripps Seaside
Yoshihiro Kita, Kenji Yoshida,
Forum of theSuzumi M. Tokuoka, Fumie
University ofLIPID MAPS AnnualHamano, Kenji
California San
Meeting 2014
Sakimura,Masanobu Kano, Takao
Diego's Scripps
Shimizu
Institution of
Oceanography

May 13-14,
2014

Deficiency of monoacylglycerol lipase
attenuates diet-induced obesity in an
endocannabinoid system-independent manner

Scripps Seaside
Forum of theKenji Yoshida, Yoshihiro Kita,
University ofSuzumi Tokuoka, Kenji
LIPID MAPS AnnualCalifornia San
Sakimura, Masanobu Kano, Takao Meeting 2014
Diego's Scripps
Shimizu
Institution ofOceanography

May 13-14,
2014

Rapid phosphorylation and activation oflysophosphatidylcholine acyltransferase2 via
protein kinase c

Hideo Shindou, Ryo Morimoto,Megumi Tarui, Takao Shimizu

FASEB

Sheraton At The
Falls, 300 3rd
Street Niagara
Falls, NY14303

第56回 日本脂質生化学会

近畿大学 東大阪キャンパス、大阪
2014年6月7日
府東大阪市小若江
3-4-1

垂井 愛、進藤 英雄、森本 亮、
原山 武士、橋立 智美、熊谷 和 第56回 日本脂質
夫、長野 哲雄、長瀬 隆英、清水 生化学会孝雄

近畿大学 東大阪キャンパス、大阪
2014年6月7日
府東大阪市小若江3-4-2

山口 賢彦、比嘉 涼子、山崎 泰
脂肪組織の慢性炎症化過程に関わる血小板活性化因
広、五十里 彰1、石井 聡、三輪子の機能解析
匡男、清水 孝雄、菅谷純子

High-throughput screeningによるPAF生合成酵素（LPCAT2）阻害剤の同定

June 1-6, 2014

研究発表及び特許取得報告について

第56回 日本脂質生化学会

近畿大学 東大阪キャンパス、大阪
2014年6月7日
府東大阪市小若江
3-4-3

吉田 憲司、北 芳博、徳岡 涼
モノアシルグリセロールリパーゼ欠損は高脂肪食負第56回 日本脂質
美、崎村 建司、狩野 方伸、清水荷による肥満を抑制する
生化学会
孝雄

近畿大学 東大阪キャンパス、大阪
2014年6月6日
府東大阪市小若江
3-4-4

多価不飽和脂肪酸含有リン脂質合成に関わる新規リ
衛藤 樹、進藤 英雄、清水 孝雄
ゾホスファチジン酸アシル転移酵素(LPAAT4)の同定

第56回 日本脂質生化学会

近畿大学 東大阪キャンパス、大阪2014年6月6日
府東大阪市小若江
3-4-4

新規肺胞腔内分泌タンハ_ク質Sec14-like 3の生化
菱川学的機能解析

札幌医科大学 記念
第13回 肺サーファ
ホール 札幌市中央クタント分子病態
2014年6月21日
区南 1 条西 17 丁研究会
目

PKCαを介した血小板活性化因子合成酵素LPCAT2の 森本 亮、進藤 英雄、垂井 愛、リン酸化
清水 孝雄

大介

Regulation of membrane phospholipids in health
Takao Shimizu
and disease

55th
International
Conference on the University of
Bioscience ofAberdeen,
June 23-27,
Lipids: Lipids as Aberdeen AB24 3FX 2014
Mediators ofScotland
Health andDisease.

55th
International
Conference on the University of
Identification of a novel lysophosphatidic
Miki Eto, Hideo Shindou, Takao Bioscience ofAberdeen,
June 23-27,
acid acyltransferase enzyme (LPAAT4)with
Shimizu
Lipids: Lipids as Aberdeen AB24 3FX 2014
preference for polyunsaturated fatty acyl-CoA
Mediators of
Scotland
Health andDisease.
55thInternational
Conference on the University of
Bioscience ofAberdeen,
June 23-27,
Lipids: Lipids as Aberdeen AB24 3FX 2014
Mediators of
Scotland
Health andDisease.

Phosphorylated lysophosphatidylcholine
acyltransferase 2 (LPCAT2) mediates rapid
platelet-activating factor (PAF) production
following PAF- or ATP-stimulationin
macrophages

Ryo Morimoto, Hideo Shindou,
Megumi Tarui, Takao Shimizu

Identification of novel pulmonary surfactant
lipid-related protein, Sec14-like 3

Daisuke Hishikawa, Hideo
FASEB The LungShindou, Takeshi Harayama, Rie Epithelium inOgasawara, Akira Suwabe, andHealth andTakao Shimizu
Disease
Lipid Mediators
in Health andDisease inKalolinska
Institute

Characterization of lysophospholipid andacyltransferase in vitro and vivo

Takao Shimizu

生体膜リン脂質多様性形成メカニズム

進藤 英雄, 森本 亮, 垂井
第87回日本生化学
愛, 衛藤 樹, 原山 武士, 清水会大会
孝雄

Vermont Academy,July 27-August
Saxtons River,1, 2014
Vermont, USA
Sweeden
KalolinskaAugust 27,Instituteストック2014
ホルム スウェーデン

国立京都国際会館

2014年10月15日〜18日

第87回日本生化学会大会

国立京都国際会館

2014年10月15日〜18日

吉田 憲司, 北 芳博, 徳岡 涼
モノアシルグリセロールリパーゼ欠損は高脂肪食負第87回日本生化学美, 崎村 建司, 狩野 方伸, 清
荷誘導性肥満を抑制する会大会
水 孝雄

国立京都国際会館

2014年10月15日〜18日

ドコサヘキサエノイル-CoA (DHA-CoA) 特異的新規
衛藤 樹, 橋本 唯史, 進藤
リゾホスファチジン酸アシル転移酵素LPAAT4の同定
雄, 岩坪 威, 清水 孝雄
およびアルツハイマー病との関連についての解析

英 第87回日本生化学会大会

国立京都国際会館

2014年10月15日〜18日

北芳博、吉田憲司、徳岡涼美、浜発熱応答にはモノアシルグリセロールリパーゼ依存
第87回日本生化学
野文三江、山崎真弥、崎村建司、的なプロスタグランジンE2産生が必要である会大会
狩野方伸、清水孝雄

国立京都国際会館

2014年10月15日〜18日

菱川 大介, 進藤 英雄, 原山
新規肺胞腔内脂質結合タンパク質Sec14-like 3の生
武士, 小笠原 理恵, 諏訪部
化学的機能解析章, 清水 孝雄

研究発表及び特許取得報告について

３液グラジエントクロマトグラフィーを用いた高速徳岡涼美、北芳博、山田真希、清 第87回日本生化学
選択反応モニタリング（SRM）質量分析法によるリ
水孝雄
会大会
ン脂質プロファイリングメソッドの開発

国立京都国際会館

2014年10月15日〜18日

Membrane remodeling by lysophospholipid
acyltransferases

Hideo Shindou and Takao
Shimizu

Roscoff(Brittany),
FranceNovember 1519, 2014

Identification of lysophosphatidic acidacyltransferase 4 (LPAAT4), a possible rolefor incorporating DHA into
glycerophospholipids

Max Planck-The
Miki Eto, Hideo Shindou, Takao University ofShimizu
Tokyo Center
Symposium 2014

Harnack House.
The Conference
Venue of the Max
2014年12月17日
Planck Society
Ihnestr. 16-20 14195 (Berlin)

Calcium signaling triggers platelet-activating
Ryo Morimoto
factor (PAF) biosynthesis

Max Planck-The
University ofTokyo Center
Symposium 2014

Harnack House.
The Conference
Venue of the Max
2014年12月17日
Planck Society
Ihnestr. 16-20 14195 (Berlin)

LPA（lysophosphatidic acid） acts on non-Edg
type receptors

清水孝雄

都医学研究所 １０ｔｈ 都医学研
国際シンポジウム

東京都世田谷区
都医学研究所清水孝雄

6th InternationalConference on
新宿 京王プラザ 2015年2月10日
Phospholipase A2
ホテル東京
〜12日
and Lipid
Mediators

Diversity of membrane phospholipids:
biosynthetic mechanism and biologicalsignificanceMonoacylglycerol lipase knockout mice are
吉田憲司 、北芳博、徳岡涼美、resistant to high fat diet-induced obesity in
崎村建司、狩野方伸 、清水孝雄
an endocannabinoid system-independent manner

Conferences
Jacques Monod

2015年2月9日

6th International
Conference on
新宿 京王プラザ 2015年2月10日
Phospholipase A2
ホテル東京
〜12日
and Lipid
Mediators

Lysophosphatidic acid acyltransferase 4(LPAAT4), a novel enzyme with activity forincorporating DHA into glycerophospholipids

6th International
Conference on
Miki Eto, Hideo Shindou, Takao
新宿 京王プラザ 2015年2月10日
Phospholipase A2
Shimizu
ホテル東京〜12日
and Lipid
Mediators

Development of glycerophospholipid profiling
method for biological samples using ternary
gradient liquid chromatography/selectedreaction monitoring mass

6th International
Conference on
徳岡涼美、北芳博、山田真希、清新宿 京王プラザ 2015年2月10日
Phospholipase A2
水孝雄
ホテル東京
〜12日
and Lipid
Mediators

Roles for monoacylglycerol lipase ininflammation and metabolic syndrome

6th International
北芳博、吉田憲司、徳岡涼美、浜 Conference on
新宿 京王プラザ 2015年2月10日
野文三江、崎村建司、狩野方伸、 Phospholipase A2
ホテル東京
〜12日
清水孝雄
and LipidMediators

生体膜リン脂質脂肪酸多様性形成メカニズムの解析 進藤

英雄

第二回
JFAS(Japan/Joy of 東京都千代田区
Fatty Acids
アキバホールSecrets/Society)生体膜脂質の多様性形成と多様な役割

英雄

第9回 レドックス・ライフイノベーションシンポジウム

進藤2015年2月15日

神奈川県横浜市
2015年3月12日
理化学研究所横浜〜13日
キャンパス

研究発表及び特許取得報告について

その他発表(雑誌、テレビ、ラジオ等)
タイトル

発表者

発表先

場所

年月日

特許権者(申請者）（共願は全記載）

登録日(申請日)

出願国

該当なし
特許取得状況について※出願申請中のものは()記載のこと。

発明名称該当なし※該当がない項目の欄には「該当なし」と記載のこと。
※主任研究者が班全員分の内容を記載のこと。

登録番号