（）

【短報】

産業動物

脳脊髄液中の神経傷害マーカーが高値を示した
化膿性脳炎のホルスタイン種子牛の 症例花鈴 ）上坂遥）

入江辻村歩美 ）渡邉古林与志安 ）猪熊壽））帯広畜産大学獣医学研究部門（〒）十勝農業共済組合（〒‐‐帯広市稲田町西

帯広市川西町基線

番地線雅之 ）堀内））‐）東京大学大学院農業生命科学研究科動物医療センター（〒要謙一 ）東京都文京区弥生−−）

約

カ月齢のホルスタイン種雌子牛が、肺胞音粗励を伴う意識混濁および左右前肢伸張の神経症状を呈した。
神経学的検査では左右眼球の威嚇瞬き反応、角膜反射および眼瞼反射の減弱ないし消失が認められた。脳脊髄液（CSF）は無色透明で圧の亢進は認められなかった。病理解剖では膿瘍形成を伴う重篤な化膿性肺炎がみられたが、中枢神経系の肉眼病変は認められなかった。しかし、組織学的検査では脳幹部を中心に広範に微小グ
リア結節、微小膿瘍および巣状壊死、囲管性細胞浸潤が認められ化膿性脳炎と診断された。CSF 中の神経傷害マーカーとして神経特異的エノラーゼ（NSE）、リン酸化ニューロフィラメント重鎖（pNF-H）および Sシウム結合タンパク質 B（SカルB）を測定したところ、いずれも健常子牛より高値を示した。CSF 中の複数の神経傷害マーカーの測定は牛の神経疾患の病態把握および予後判定に有用と思われた。
キーワード：化膿性脳炎、ホルスタイン種、神経特異的エノラーゼ（NSE）
リン酸化ニューロフィラメント重鎖（pNF-H）、S

牛の主な炎症性脳疾患として脳炎、髄膜炎、髄膜脳炎

カルシウム結合タンパク質 B（SB）

北獣会誌（〜）

高値を示した症例に遭遇したのでその概要を報告する。などがあるが、いずれも広範な脳の部位に傷害が及ぶと症重篤な神経症状を呈し予後は不良となる［ 、］。これら疾患の診断は臨床症状から疑えるが、産業動物領域では高，症例は例

カ月齢のホルスタイン種雌子牛で、肺胞音粗度画像診断装置の臨床現場での利用が困難であり、確定励を主訴に十勝 NOSAI の診療所を受診した。肺炎を診断や予後判定も難しいため、診断的治療を行うことが疑ってフロルフェニコール（フロロコールほとんどである。一方、細菌性髄膜脳炎では、脳脊髄液共立製薬、東京）による抗菌治療を行ったが、第（cerebrospinal fluid：CSF）中の炎症細胞の検出、あには横臥して四肢伸張し、意識混濁となった。体温はるいは原因細菌の分離検出により診断が確定することが．℃と発熱はみられなかったが、脳炎または髄膜炎をある［ 、］。しかし、脳炎の中でも膿瘍形成を代表とする疑い、抗生物質としてオキシテトラサイクリン（OTC

化膿性脳炎症例では炎症領域が限局的であり、CSF 性注状に変化がみられず、診断の手がかりが得られないこと

スルチアミン製剤（アニビタンも多い［ 、］。今回、化膿性脳炎により神経症状を呈した品、兵庫）、解熱鎮痛剤（ネオアス注射液：東亜薬品、ホルスタイン種子牛において、CSF 性状および肉眼病東京）およびステロイド（デキサメサゾン注 KS：共立理所見に異常がみられなかったが、神経傷害マーカーが製薬）を投与したが症状は改善されなかった。第連絡責任者：猪熊〒TEL壽‐

東京大学大学院農業生命科学研究科
東京都文京区弥生−−FAX−−−−

注射液：
病日％「フジタ」：フジタ製薬、東京）に加えて、フル
注射液：ナガセ医薬

病日

動物医療センター

E-mail : ainokuma@g.ecc.u-tokyo.ac.jp
北獣会

誌

（）

（表

血液および血液生化学検査（第RBC

，×Hb

U／

CPK．％

LDH，／µTP． g／dAlbumin． g／dα-Globulin． g／d．×WBC病日）

AST． g／dPCVPlatelet／µ）， ／µSta

U／U／Seg，β-Globulin． g／dLym，γ-Globulin． g／dA／G．

MonEos

図．大学搬入時（第 病日）
症例は右下横臥で左右前肢の伸張と後躯の震顫を呈した℃、心拍数回／分、呼吸数回／分で脱水が顕著であった。肺胞音粗励で、流涎、両眼結膜充血および膿性鼻汁がみられた。数日前に除角処置を実施したとのことで、左右角根部は湿潤で出血がみられた。神経学的検査では左眼の腹側斜視が認められたほか、左右眼球の威嚇瞬き反応、角膜反射および眼瞼反射が減弱ないし消失していた（図）。前肢では緊張が強く脊髄反射を評価できなかったが、後肢の脊髄反射に異常は認められなかった。
後頭窩から採取した CSF の性状は、無色透明で圧の亢進は認められず（図．
図．症例には左眼の腹側斜視のほか、左右眼球の威嚇瞬き反応、角膜反射および眼瞼反射が減弱ないし消失していた（L）左眼の腹側斜視（R）右眼の角膜反射消失）、細胞数は／µ 未満、比重であった。CSF 中の神経傷害マーカーとして神経特異的エノラーゼ（Neuron specific enolase：NSE）、リン酸化ニューロフィラメント重鎖（Phosphorylatedneurofilament heavy chain：pNF-H）および Sシウム結合タンパク質 B（SカルB）を測定した。NSE と

pNF-H の測定には市販の ELISA キット（それぞれ、Human Neuron Specific Enolase ELISA Kit：Immunospec、USA、および Phosphorylated Neurofilament H
Human ELISA Kit：BioVendor、Czech）を用いた。
また、 S

B の測定は Kojima らの報告［ ］に準じて確立した ELISA 法で測定した。症例 CSF 中の NSE は ． ng／m （対 照頭 平 均 ． ng／m ）、pNF-H は． ng／m（対照頭平均 ． ng／m ）、および S（対照頭 ． ng／m ）で、いずれも対照に比較してB は ． ng／m高値を示した。
図．後頭窩からの脳脊髄液採取
脳脊髄液は無色透明で圧の亢進はみられなかった

血液検査では赤血球系および白血球数の高値を認めた。
分葉核好中球が ， ／µ と増加していたが桿状核好中球は認められなかった。血液生化学検査ではγ-Glb．には意識混濁のまま四肢を突っ張り痙攣するてんかん様g／d の増加を伴った TP の増加が認められ、A／G は ．

発作がときおりみられた。症例は第であった（表病日に予後不良と判断され、病性鑑定のため帯広畜産大学に搬入された。
大学搬入時、症例は右下横臥で左右前肢の伸張と後躯の震顫が認められた（図北獣会誌（））。意識は混濁し、体温．

）。症例は第病日には一般状態が一層悪化したため、安楽殺後に病理解剖を実施した。

（）

病理所見および病原学的検査

考

病理解剖では脳には肉眼的変化がみられなかった（図本症例は察カ月齢時に肺胞音粗励を伴う横臥、四肢伸）。肺では右前葉、中葉および副葉が暗赤色無気肺を張、意識混濁といった神経症状を呈し、病歴と症状、検呈しており、胸壁に癒着していた。同部には直径 ．〜

査所見から細菌感染による脳炎を疑ったものの、CSF． cm 大の膿瘍が散発性に認められた。さらに右肺前性状に異常を認めず、臨床的に診断できなかった。本症

葉には × ×

例の中枢神経病変は病理学的に化膿性脳炎と診断された。

cm 大の緑白色クリーム状の膿汁を容れた大型の膿瘍が認められ、胸壁と重度に癒着していた。

脳全体に炎症が広範に波及する髄膜炎や髄膜脳炎では臨気管内部にも膿汁が認められた。

床症状に加えて CSF に炎症像がみられることで診断が組織学的検査では脳幹部を中心に微小グリア結節、微確定することがある［ 、］。しかし、化膿性脳炎の中でも、小膿瘍および巣状壊死が散在しており、囲管性細胞浸潤

膿瘍形成症例では炎症領域は脳実質の一部に限局的となも認められた（図り、CSF 性状では診断に至らないこともある［ 、］。本症）。脳の組織学的病変は脳幹部のほか、中枢神経系全般に広範に認められた。
肺膿瘍の細菌培養により例でも CSF 性状は無色透明で、細胞数の増加もなく、が分離された。

また脳の肉眼病変では明らかではなかったが、組織所見
では、脳幹部を中心に微小グリア結節、微小膿瘍および巣状壊死が脳全体に分布していたため、脳幹症状として横臥（前庭系）、腹側斜視（第 III 脳神経）
、威嚇瞬き反応減弱（第 II および IIV 脳神経）
、角膜反射減弱（第 Vおよび VI 脳神経）
、眼瞼反射減弱（第 V および VII 脳神経）が、小脳症状として横臥および左右前肢伸張が、また大脳症状として意識混濁が発現したと考えられた［ 、］。
今回、病理解剖時に肉眼的病変がみられなかったため、脳病変の細菌検査は実施しなかったが、症状および脳幹部の微小膿瘍の存在からリステリア感染が疑われた。肉眼病変がない場合でも、限局性病変を想定して病理解剖時に微生物学的検査を試みるべきであったと思われた。
感染経路としては、肺に重篤な化膿性炎症が存在したこ

図 ．脳の外観に異常は見られなかった（Bar＝ cm）と、および頭部に除角痕がみられたため、それらとの関係が考えられたが確定できなかった。
今回の症例では、CSF 中の NSE、pNF-H および SB を測定した。NSE は神経細胞および神経内分泌細胞の細胞質特異的に存在する解糖系酵素であり、医学および伴侶動物獣医学領域では脳炎、髄膜炎において［ ‐ ］、また牛では神経細胞変性症例において CSF 中 NSE 濃度の上昇が報告されている［ ］。pNF-H は神経細胞の細胞骨格形成タンパク質で、神経細胞軸索傷害により CSF に漏出し［ - ］、牛の大脳皮質壊死症での高値が報告されている［ ］。さらに、SB はグリア細胞が分泌するカルシウム結合タンパク質で、神経細胞の傷害に伴うグリア細胞の活性化や崩壊に伴って濃度が増加し［ ‐ ］、牛図．延髄の組織検査でみられた囲管性細胞浸潤（bar＝µm）

では炎症性疾患や変性性疾患など組織傷害の認められる症例で高値を示す［ ］。本症例では NSE、pNF-H およびS

B はいずれも健常牛に比べて高値を示しており、脳幹部を中心とした広範な化膿性脳炎による神経細胞およ
北獣会誌

（）

（）

Use of neuron-specific enolase for assessing the se-

びグリア細胞の傷害を反映したものと考えられた。

verity and outcome in patients with neurological

牛の神経疾患の診断においては、MRI や CT などの高度画像診断装置を臨床現場で用いることができず、生前

disorders, Braz J Med Biol Res, 37, 19-26 (2004)

診断および予後判定は困難であることが多い。今回実施［ ］Selakovic V, Raicevic R, Radenovic L : The in-

した CSF 中の神経傷害マーカーの測定は症例の病態把

crease of neuron-specific enolase in cerebrospinal

握および予後判定に有用と思われた。また、本症例のよfluid and plasma as a marker of neuronal damage in

うに複数の神経マーカーを組み合わせることで診断精度

patients with acute brain infarction, J Clin Neurosci,が上がることも期待される。今後、神経傷害マーカーの12, 542-547 (2005)

測定値と重症度や予後との関連を調べ、臨床的意義を明［］上坂花鈴、小山憲司、堀内雅之、古林与志安、猪熊らかにする必要がある。

壽：脳脊髄液中 Neuron-specific enolase が高値を示した後躯麻痺黒毛和種子牛の本研究の一部は JSPS 科研費 H

医誌、の助成を受けた［ものです。

、 ‐ （症例、産業動物臨床）］Ueno T, Ohori Y, Ito J, Hoshikawa S, Yamamoto
S, Nakamura K, Tanaka S, Akai M, Tobimatsu Y,

引用文献

Ogata T : Hyperphosphorylated neurofilament NF-H
as a biomarker of the efficacy of minocycline ther-［ ］Mackay RJ, Van Metre DC : Meningitis (suppura-apy for spinal cord injury, Spinal Cord, 49, 333-336

tive meningitis, bacterial meningitis), Large Animal(2011)

Internal Medicine, Smith BP, 5th ed, 946-948, Mosby［Elsevier, St. Louis (2015)

Spataro R, Bella VL : CSF neurofilament proteins as［ ］Mackay RJ, Van Metre DC : Brain abscess, Large

diagnostic and prognostic biomarkers for amyo-Animal Internal Medicine, Smith BP, 5th ed, 948-949,
Mosby Elsevier, St. Louis (2015)［ ］DiversTJ,Lahunta

AD : Neurologic

Disease,trophic lateral sclerosis, J Neurol, 265, 510-521 (2018)［NF-H as a biomarker for evaluating the severity ofElsevier Saunders, St. Louis (2018)spinal cord injury patients, a pilot study, Spinal［ ］Kojima Y, Chiba S, Horiuchi N, Kobayashi Y,Cord, 50, 493-496 (2012)［fluid as a potential biomarker for neurological dis-］Singh A, Kumar V, Ali S, Mahdi AA, Srivastava
RN : Phosphorylated neurofilament heavy ; A poten-eases in calves. J Vet Med Sci, 77, 605-607 (2015)

tial blood biomarker to evaluate the severity of［ ］Lorenz MD, Coates JR, Kent M : Ataxia of theacute spinal cord injuries in adults, Inter J Cri Ill Inj

head and the limbs, Handboook of Veterinary Neurology, 5th ed, 250-281, Elsevier Saunders, St.Louis］Hayakawa K, Okazaki R, Ishii K, Ueno T, Izawa
N, Tanaka Y : Phosphorylated neurofilament subunit

Rebhunʼs Disease of Dairy Cattle, 3rd ed, 624-626,Inokuma H : Evaluation of S100B in cerebrospinal］Rossi D, Volanti P, Brambilla L, Collett T,Sci, 7, 212-217 (2017)［(2011)］川上侑記、上坂花鈴、轉馬創、長濱光朗、渡邉謙一、堀内雅之、古林与志安、猪熊壽：脳脊髄液中［ ］Lorenz MD, Coates JR, Kent M : Blindness, aniso-

神経特異的エノラーゼおよびリン酸化ニューロフィラ

coria, and abnormal eye movement, Handboook ofメント重鎖濃度が高値を示した大脳皮質壊死症育成牛

Veterinary Neurology, 5th ed, 330-345, Elsevier Saun-のders, St. Louis (2011)［症例、北獣会誌、］Sakatani

S,、‐（Seto-OhshimaA,）shinohara

Y,［ ］Hajduková L, Sobek O, Prchalová D, Bílková Z,

Yamamoto Y, Yamamoto H, Itohara S, Hirase H :Koudelková M, Lukášková J, Matuchová I : Biomark-

Neuronal-acyivity-dependent release of S100B fromers of brain damage ; S100B and NSE concentra-astrocytes enhances kainate-induced gamma oscilla-tions in cerebrospinal fluid a normative study, Bio-tions

Med Res Intern, 2015 ; 2015 : 379071. doi : 10.1155/
2015/379071. Epub 2015 Sep 1 (2015)［ ］Lima JE, Takayanagi OM, Garcia LV, Leite JP :
北獣会誌

（）

［, J Neurosci, 28, 10928-10936 (2008)］Jon S, Antonio B : S100B in neuropathologic
states-the CRP of the brain?, J Neurosci Res, 85,1373-1380 (2007)