（【短報】）

産業動物が分離された
ホルスタイン種乳牛の疣贅性心内膜炎の千葉

村田芙花 ）森山咲）

吉本汐莉 ）木内建）

渡邉謙一 ）‐）帯広畜産大学獣医学研究部門（〒）十勝農業共済組合（〒‐帯広市稲田町西

帯広市川西町基線）東京大学大学院農学生命科学研究科薫）

番地

宮腰誠）

古林与志安 ）猪熊線）‐

東京都文京区弥生が分離された。病理解剖の結果、症例−）

症例の血液からでは三尖弁、僧帽弁および肺動脈弁に、症例動脈弁と三尖弁に疣贅物が認められ、疣贅性心内膜炎と確定診断された。また、

キーワード：−

約

臨床症状および臨床検査所見から疣贅性心内膜炎が強く疑われたホルスタイン種成乳牛の遺伝子断片が検出された。本論文は壽））動物医療センター（〒要症例

では大症例の疣贅物からはを原因菌とする疣贅性心内膜炎の臨床例の初報告である。

、疣贅性心内膜炎、ホルスタイン種
北獣会誌

疣贅性心内膜炎は、全身性細菌感染の結果、弁膜に生，畜産大学に搬入された。搬入時、体温〜回／分、呼吸数

牛の疣贅性心内膜炎の主な原因菌としては、蒼白および頸静脈怒張拍動を呈した（図sp．、sp．
が知ら）．℃、心拍数じた疣贅病変により、循環障害を呈する疾患である［ ‐ ］。

、

（回／分であり、削痩が著明で、可視粘膜）。また、PLテスターにて全分房に乳房炎が確認された。聴診によりれている［ 、］。しかし、近年、食肉衛生検査所における疣贅性心内膜炎症例の病原解析により、の関与が示唆されている［ ‐ ］。しかし、による疣贅性心内膜炎の臨床例についての報告はない。今回、血液培養により生前にが分離されたホルスタイン種乳牛の疣贅性心内膜炎を症例経験したため、その概要を報告する。

症症例例：ホルスタイン種、雌、歳

カ月齢で、食欲不振を主訴に十勝 NOSAI の家畜診療所を受診した。第病日、第四胃変位整復術を実施したが、食欲は改善せず、第病日以降、頸静脈怒張と不整脈が認められた。さらに、血液検査にて血清蛋白分画が重度慢性炎症像を呈したことから、疣贅性心内膜炎が疑われ、第連絡責任者：猪熊
〒

北獣会

壽‐

東京大学大学院農学生命科学研究科
東京都文京区弥生

TEL−誌（病日に帯広−）

FAX

−−−−

図

．第 病日の症例 外貌削痩が著明で、可視粘膜蒼白および頸静脈怒張拍動がみられた

動物医療センター

E-mail : ainokuma@mail.ecc.u-tokyo.ac.jp

（）表．血液および血液生化学検査所見（大学搬入時）
症例

図RBC×

Hb． g／d

PCV

症例／µ×

症例

症例

ASTU／U／． g／dTP． g／d． g／d％％Albumin． g／d． g／dMCV．f．f

α-globulin．％．％

MCHC． g／d． g／dβ-globulin．％．％

Platelet．×WBC，

Sta％％

Seg％％

Lym％％

Mon％％／µ／µ／µ．×／µ， ／µ．症例 の心臓超音波検査、右側長軸四腔断面像
三尖弁疣贅物（A：矢頭）と三尖弁逆流（B）が確認された
RA：右 心 房、RV：右 心 室、LA：左 心 房、LV：
左心室

γ-globulin．％．％

A／G．

．

図．第 病日の症例 外貌著しい削痩を認め、両後肢飛節関節周囲の腫脹が認められた

疣贅物が認められた（図）。腎臓、肝臓および脾臓にはアミロイド沈着が確認された。乳房は硬結感を呈していた。
症例：ホルスタイン種、雌、歳

カ月齢で、削痩と起立難渋を主訴に十勝 NOSAI の家畜診療所を受診した。
第病日、左後肢跛行、頸静脈怒張、心雑音が確認され、さらに血清蛋白分画が慢性炎症像を呈したため、疣贅性図．症例 の心臓内景右心室（RV）および右心房（RA）を切開したところ、三尖弁（TV）に直径 cm 大の疣贅物（矢印）がみられた
写真では疣贅物も切開して展開している

心内膜炎を疑い経過観察したが、改善の見込みがないた
め第病日帯広畜産大学に搬入された。搬入時、体温．℃、心拍数回／分、呼吸数 回／分、著しい削痩を認め、両後肢飛節関節および趾間が腫脹していた（図）。さらに PL テスターを用いて左前および右前分房収縮期雑音が聴取されたため、心臓超音波検査を行ったに乳房炎が確認された。また聴診にて、収縮期雑音およところ、三尖弁における疣贅物および逆流が確認されたび拡張期雑音が聴取されたため、心臓超音波検査を実施（図したところ、大動脈弁の疣贅物と逆流、および三尖弁逆）。血液および血液生化学検査では、貧血、γ-グロブリンの著増、A／G 比の低下が確認された（表）。

流がみられた（図）。血液および血液生化学検査では病理解剖を実施したところ、三尖弁、僧帽弁および肺動血清総蛋白とγ-グロブリンの著増、A／G 比の低下が確脈弁に、それぞれ直径 cm、認された（表mm およびmm 大の）。病理解剖では大動脈弁に
北獣会

××cm

誌

（）

（表）

．病原学的検査所見

材料および方法
血液症例

症例

−−−−

・血液培養
好気
嫌気・16S rRNA 遺伝子解析
疣贅物
・一般好気性細菌培養

図．症例 の心臓超音波検査、左室流出路長軸像
大動脈弁の疣贅物（A：矢頭）と大動脈弁周辺の乱流（B）が確認された
RA：右 心 房、RV：右 心 室、LA：左 心 房、LV：左心室、AO：大動脈

sp．

−

sp．
・16S rRNA 遺伝子解析
乳汁・一般好気性細菌培養 NT

MSSA

・16S rRNA 遺伝子解析−−

NT：検査せず、MSSA：メチシリン感受性黄色ブドウ球菌

た［ ］。その後、PCR 産物の塩基配列を決定し、GenBankに登録されている既知の細菌遺伝子との相同性を調べた。
その結果、症例の三尖弁疣贅物および症例弁と三尖弁疣贅物からはの大動脈と一致した塩基配列が得られた。同様の方法で、末梢血中の細菌遺伝子の検出を試みたが、症例、ともに細菌遺伝子は検出されなかった。また、両症例で剖検時に得られた乳汁の病原学的検査を行ったところ、症例の乳汁の好気性細菌培養でメチシリン感受性黄色ブドウ球菌（MSSA）が分離さ
図．症例 の心臓内景左心室（LV）、左心房（LA）および大動脈（AO）を切開したところ、大動脈弁に直径 cm 大（矢頭）および cm 大（矢印）の疣贅物がみられたれた以外は、遺伝子検査でも細菌は検出されなかった。

考察

今回、疣贅性心内膜炎および×× cm、三尖弁に直径 ． cm 大の疣贅物が確認された（図症例の生前の血液からが分離され、また疣贅物から出されたことから、これら）。

は病原学的検査所見の遺伝子断片が検症例の心内膜疣贅物形成に感染が関与していることが強く示唆された。
疣贅性心内膜炎の原因菌としては細菌培養検査は外部の検査センターに委託した。生前、に行った血液培養検査は、頸静脈から採取した血液を、て［ 、］、sp．
、sp．に加え［ ］や［血液培養用ボトル（日本ベクトン・ディッキンソン、東［ 、］、、 ］など、様々な菌種が報告さ京）を用いて増菌培養した後、チョコレート寒天培地もれている。これらの細菌は疣贅物を用いた好気性細菌培

しくは養により分離されている［ ‐ ］。一方、今回検出された％羊血液寒天培地／BTB 培地にて好気的条件下で分離培養を行った。症例が分離された（表を〜およびともに）。一方、剖検時に採取した疣贅物℃で 〜 時間かけて好気性細菌培養検査を実施したところ、症例の三尖弁と僧帽弁の疣贅物からはsp．とsp．が分離されたが、症例から細菌は分離されなかった。さらに、剖検時にはグラム陽性通性嫌気性球菌であり、発育が遅く、栄養要求性が高いため、〜℃における血液寒天培地上を用いた通常の好気性細菌培養では分離されない［ 、 ］。しかし、血液培養ボトル内において間の増菌処理後に分離培養を行うと、〜日も分離可能である［ ］。

得られた疣贅物から DNA を抽出し、16S rRNA 遺伝子

血液培養には無菌的採血が必要で手技も煩雑であを標的とした PCR 法により、細菌遺伝子の検出を行っ

り［ 、 ］、また、牛の血液培養では偽陰性が多いとされ

北獣会誌

（）

（）ているため［ ‐ ］、一般的に実施されることが少ない。し引用文献

かし、血液培養は牛の疣贅性心内膜炎を診断する最も適切な検査とされている［ ］。ただし、血液培養検査は時［ ］Reef VB, McGuirk SM : Valvular Heart Disease,間を要するため、血液からの細菌遺伝子の検出を試みた

Large Animal Internal Medicine, Smith BP , 5th ed,が、両症例とも PCR 陰性であった。これは血液中の細436-441, Mosby Elsevier, St. Louis (2015)

菌数が少なかったため、今回用いた検出法の検出限界を［ ］Peek SF, McGuirk, SM : Endocarditis, Diseases of下回っていた可能性が考えられ、血液中の細菌遺伝子のDairy Cattle, Divers TJ, Peek SF, 2nd ed, 53-56, Saun-

検出にも前処理として増菌操作が必要であると思われた。

ders Elsevier , St. Louis (2008)

増菌操作と PCR の組合わせにより、迅速に、かつコン［ ］北川

均：細菌性心内膜炎、獣医内科学

第版

タミネーションのリスクを低減した原因菌検出ができる

大動物編、日本獣医内科学アカデミー編、 ‐ 、文可能性もあるため、今後組合せ法の有用性について検討

永堂出版、東京（する必要がある。心内膜炎を含めた敗血症における血液［ ］森本和秀、久保田泰徳、藤田敦子、川本千代実、茨中の細菌量は少ないため、医療分野では感度を上昇させ

木義弘：るために内膜炎のセットの血液培養を実施するのがゴールドスタンダードとされている［、 ］。また、皮膚常在菌や環）が分離された牛の疣贅性心症例、日獣会誌、、‐（）［ ］Kutzer P, Schulze C, Engelhardt A, Wieler LH,

境常在菌がコンタミネーションした場合に、真の起因菌

Nordhoff M :かどうかの判断においても、複数の血液培養が必要とさ

gen in bovine valvular endocarditis, J Clin Microbiol,

れる［ 、 ］。今回の疣贅性心内膜炎

46, 3291-3295 (2008)

症例は、どちらもセットのみの血液培養で分離されたを起因菌, an emerging patho-［ ］Post K, Rushton S, Billington S : Valvular endo-としているが、疣贅物からも病原体遺伝子が検出されてcarditis associated withinfection inいるため、コンタミネーションの可能性は低いと考えらa bovine, J Vet Diag Invest, 15, 473-475 (2003)［ ］大楠清文、江崎孝行：感染症診断における遺伝子解れた。
グラム陽性球菌である系とニューキノロン系抗生物質およびバンコマイシンが有効であるが［ ］、今回の析技術の適応、日臨微生物誌、には一般にβ‐ラクタム［ ］猪熊‐

め予後は不良であったと考えられる。また、食の安全の（［ ］岩上慎哉、新谷紗代、高橋英二、松本高太郎、古岡えられた。

欠損のホルスタイン種成乳牛の‐は、［析により分離・検出されてきたが［ ‐ ］、今回、生前の血（

壽：心内膜炎の併発がみられた心室中隔症例、北獣会誌、、）］河村美登里、星野尾歌織、小川寛大、本多俊次、恵谷美江、兼廣愛美、菊池浩久、阿川啓雄：
A：を分離することができた。しかし、による疣贅性心内膜炎を伴う子牛の敗血症、日獣会誌、による疣贅性心内膜炎と他の細菌による疣贅性心内膜炎の臨床所見や検査所見の相違点は明らかにされ、

）

秀文、猪熊

液から初めて）症例、北獣会誌、が検出された敗血症症例については淘汰を図るべきと考剖検後の疣贅物を用いた細菌培養および分子生物学的解（

壽、松田浩典、千葉史織、古林与志安、藏本損のホルスタイン種育成牛の瞭な疣贅物を形成しており、心不全症状も呈していたた

これまで、牛の疣贅性心内膜炎に関与する‐

忠：肺動脈弁の疣贅性心内膜炎を併発した心室中隔欠症例はいずれも心内膜に明観点からも、血液培養または分子生物学的な方法で細菌、

［］猪熊、

‐

（）

壽、秋月久美子、古林与志安、古岡秀文：ておらず、今後調査が必要と思われた。なお、今回の多発性乳房膿瘍に罹患したホルスタイン種乳牛にみら症例はいずれも乳房炎を併発していたが、心内膜炎とのれた左心系心内膜炎の関連は不明であった。今後、牛体における（の常在箇所を調査し、より詳細な感染経路を明らかにすることが、［による疣贅性心内膜炎の予防の一助とな

症例、北獣会誌、 、‐）］Ruoff K :Bergeyʼs Manual of Sys-tematics of Archaea and Bacteria, Whitman W, Digi-ると思われた。

tal Ed., Wiley, Hoboken (2015)［］吉田桂子、古川一郎、相川勝弘、荒木美緒、横田宏一郎、廣井恵津子、佐多辰、松阪龍雄：牛及び豚
北獣会誌（）

（の疣贅性心内膜炎から分離された

pected of bacterial endocarditis, Vet Rec, 133, 263-の266 (1993)

性状及び迅速・特異的同定法としての PCR 法の開発、
日獣会誌、 、［‐（）

北［］Lee A, Mirret S, Reller L, Weinstein M : Detec-］Lamy B, Dargere S, Arendrup MC, Parienti JJ,

tion of bloodstream infections in adult : How many

Tattevin P : How to optimize the use of blood cul-blood cultures are needed? J Clin Microbiol, 45, 3546

tures for the diagnosis of bloodstream infections? A-3548 (2007)

state-of-the art, Front Microbiol, 7, 697 (2016)［）［］Bilk S, Nordhoff M, Schulze C, Wieler LH, Kutzer］Houe H, Eriksen L, Jungersen G, Pedersen D,

P : Antimicrobial susceptibilities and occurrence ofKrogh HV : Sensitivity, specificity and predictive

resistance genes in bovine

value of blood cultures from cattle clinically sus-

Vet Microbiol, 149, 488-491 (2011)

獣会誌（）

isolates,