課題番号：２６指１１０

研究課題名：摂食応答を標的とした消化管炎症の制御法の開発研究主任研究者名 ：河村 由紀
分担研究者名 ：鈴木 春巳、高木

智

キーワード

：炎症性腸疾患、栄養シグナル、肥満、粘膜免疫

研究成果

：

炎症性腸疾患(IBD)では成分栄養療法が有効であり、腸内環境がその病因・病態形成に重要である
事は明確である。本研究ではIBDの臨床検体とマウス腸炎モデルを用いて、栄養状態が消化管炎症に及ぼす影響を、免疫細胞、炎症再生上皮の遺伝子発現・エピゲノム修飾の網羅的解析によって分子レベルで解明し、更にその成果を基に、IBDの新たな診断・治療法を開発することを目的とした。
絶食—再摂食が上皮傷害やその再生にどのような影響を及ぼすかを、マウス腸炎モデルを用いて検討した。マウスに2％デキストラン硫酸(DSS)を5日間飲水内投与し、一部のマウスではday 7-8まで36
時間の絶食とし、その後通常飼料CE2あるいはグルコースと塩の粉末混合物ORSを再摂食させた。
Day 9に組織を採取し解析を行った結果、体重変化には3群の間に有意差は認められなかったが、絶食CE2再摂食群では体重の回復傾向が認められた。絶食-CE再摂食群は、絶食-ORS再摂食群や非絶食群
より大腸長が長く、組織所見でも潰瘍形成が軽度であり、単位腸管あたりのクリプト数で比較した上皮細胞の修復は他群に比べ有意に高かった。すなわち、大腸炎の回復期に適切な絶食時期をもうけるだけで、炎症の緩和と修復を促進することが可能という驚くべき結果が得られた。この際の大腸粘膜におけるサイトカイン発現を定量RT-PCRによって測定すると、DSS腸炎の誘導によりIL-1β、IL17、IL-6の発現が亢進していたが、絶食群でIL-1βとIL-17の発現が顕著に低下していた。絶食-ORS再摂食群でもIL-1βとIL-17の低下傾向は見られたが、絶食-CE2再摂食群の方が有意に低下していた。一方、TNF-αはいずれの群でも大きな変化は認められなかった。このことから、絶食による腸炎からの回復の促進効果は、栄養シグナルの低下による炎症の抑制と、再摂食時の上皮細胞増殖による修復の
亢進の両方のメカニズムが考えられた。また、再摂食時の細胞増殖亢進には腸内細菌由来の乳酸が重要な働きをしていることを既に明らかにしているので、乳酸を含む短鎖脂肪酸の注腸実験を行なった
結果、絶食後の乳酸、酪酸の注腸により腸炎が改善し、上皮細胞の細胞回転が亢進する傾向が見られた。これらの結果より、消化管急性炎症の特定の時期に間欠的絶食期間を設けることで、炎症反応の低下と、上皮細胞修復促進効果が認められることが明らかとなった。これらの成果については論文としてまとめてJ. Clin. Biochemistry and Nutritionに投稿し、受理されている。
免疫細胞への影響については、マウスを36時間の絶食後、消化管二次リンパ組織の細胞数と細胞構成を調べた。絶食後に細胞数は約半数から30％程度まで減少し、小腸を長軸方向に3等分した部位別に見ると、中間部に存在するパイエル板の細胞減少が最も顕著であった。一方でcecal patch及びcecal
follicleの大きさが増大していた。盲腸管腔内環境はもともと食物由来の栄養素に乏しく、腸内細菌とその代謝産物で占められることを考慮すると、パイエル板、cecal patchなど消化管二次リンパ組織の細胞数が、管腔内の栄養源からのシグナルに依存することを示唆する結果であった。さらに、小腸下部に存在するパイエル板では、絶食によりB220陽性B細胞、CD4陽性T細胞、CD8陽性T細胞のいずれもが減少していたが、特にB細胞が自由摂食時の25-30％までが減少していることが明らかとなった。
組織学的には濾胞の扁平化と、CD11c陽性樹状細胞の局在変化も観察された。また、絶食後の再摂食により6時間後には細胞数は約50%程度に回復し、48時間後には100%に回復していた。これら免疫担
当細胞分布の変化は炎症反応にも大きく影響すると予測される。そこで、パイエル板からの細胞の減少のメカニズム解明のため、自由摂食中、絶食中、あるいは絶食—再摂食中のドナーマウスよりパイ
エル板細胞を分離し、これを蛍光ラベルしたのち、自由摂食中、絶食中、あるいは絶食—再摂食中のマウスに移植を行った。移植18時間後にレシピエントマウスからパイエル板、cecal patch、腸間膜リンパ節を採取し、その中の蛍光ラベル細胞数をフローサイトメトリーで算定する事によって、細胞のホーミングを解析した。その結果、ドナーが絶食中/摂食中に関わらず、レシピエントが絶食中であると、パイエル板へのホーミングが顕著に減少する事がわかった。この現象は、空腸、回腸のいずれのパイエル板でも見られた。また、絶食中と再摂食中のドナー由来のパイエル板細胞にそれぞれ異なる
蛍光ラベルを施し、1:1の割合で混合して自由摂取中のレシピエントマウスに移植しても、ホーミング
する細胞数は同等であった。この事から、絶食中にはパイエル板のリンパ球以外の、おそらくストローマ細胞におけるケモカインやホーミング分子の発現が変わる事が予想された。そこで、パイエル板
におけるケモカインとケモカイン受容体の発現について、定量RT—PCRにより自由摂食時と絶食時で比較解析を行なった。その結果、自由摂食時の発現と比較すると、主にB細胞のケモタキシスを誘導する3種類のケモカイン産生が絶食によって低下することが明らかとなったことから、パイエル板ス
トローマ細胞のケモカイン産生能が、栄養シグナルによって変化していると考えられた。さらに再摂食時のリンパ球の動態を詳細に調べた結果、絶食時の細胞数の減少はアポトーシスにはよらないこと、B細胞の減少が顕著であることが明らかになった。さらに、再摂食によって、パイエル板の総細胞数及びナイーブB細胞数は自由摂食時レベルに戻るが、IgA陽性B細胞や、胚中心B細胞の数は再摂食後108時間経過しても回復しないことが分かった。これらの結果から、1）絶食により、パイエル板
におけるケモカインの産生が低下するため、主にB細胞がパイエル板から流出する。2）絶食—再摂食により、パイエル板B細胞はナイーブB細胞に置き換わり、パイエル板リンパ球のrenewalが起こることが明らかとなった。これらの成果は現在投稿準備中である。
肥満の影響については、高脂肪食摂取マウスの消化管組織を観察した結果、形態的に明らかな変化が胃に見られた。20〜30％の頻度で粘液産生細胞の胃粘膜における配置異常が認められ、その一部は経口抗生剤による細菌叢除去の影響を受けることがわかった。癌の疫学的リスク要因を考慮しアルコール投与を加えたが、胃・食道の表層性の急性炎症誘導にとどまった。塩酸＋胆汁酸の飲水内投与でも高脂肪食で誘導される変化の程度や頻度は亢進しなかった。従って、肥満における細胞動態・分化能の異常においてこれらは重要な因子ではないと考えられる。これらの結果に基づき、高脂肪食摂取
マウスの胃粘膜を時系列にそって組織学的に検討し、胃粘膜における細胞配置異常の詳細を調べた。
その結果、壁細胞の減少が初期に起こり始め、それに続いて異所性粘液の産生が見られることが分かった。血清中の炎症性サイトカイン濃度を測定したが、この病理学的変化と相関するサイトカインは

見出されなかった。この病変を更に詳細に検討するため、胃粘膜上皮細胞から酵素的に分離後、ソーティングにより壁細胞以外の細胞を採取し、単一細胞で96種類の遺伝子発現を解析する実験を、フリュイダイムsingle cell analysis system (C1およびBiomark)を用いて行った。健常胃粘膜と病変部胃粘膜細胞の結果を比較したところ、高脂肪食群の病変では、殆どが異所性粘液を産生するSPEM (Spasmolytic
polypeptide expressing metaplasia)という胃癌の前癌病変であるmetaplasia cellsに置きかわっていることが明らかとなった。また、高脂肪食摂取マウスで発現が上昇していた遺伝子の一部はヒトの食道胃接合部癌でも高発現していることを免疫組織染色で確認した。さらに高脂肪食摂取マウスの胃粘膜病変の電顕観察を行い、壁細胞にミトコンドリアストレスがかかっていると考えられる状態を示す所見を見出した。このため、胃内容物中の脂質及び胆汁酸組成の解析を行った。その結果、高脂肪食摂取マ
ウスの胃内には、食事由来のトリグリセリド及びfree fatty acidが存在しており、マウスが肥満となる
につれてその含量が増加していた。更に、胃内容物から胆汁酸も検出されたことから、肥満マウスの胃内には十二指腸液が逆流しており、そこに含まれるリパーゼや胆汁酸その他の消化酵素の作用によりfree fatty acidが増加し、これがミトコンドリアに富む壁細胞において脂質毒性を発揮したと考えられた。この仮説に基づき、分離した胃粘膜上皮細胞の一次培養系及び壁細胞を含む胃オルガノイドの三次元培養系に、種々のfree fatty acidを加えた所、特に不飽和脂肪酸によって、壁細胞にミトコンド
リア機能障害に引き続く細胞死が誘導された。そこで、高脂肪食のラードをリノール酸（不飽和脂肪酸）またはステアリン酸（飽和脂肪酸）に置き換えた餌を作製し、マウスに19週摂食させた結果、リ
ノール酸食投与群では胃体部metaplasia が90％(9/10)のマウスに誘導されたのに対し、ステアリン酸食投与群では20％(2/10)であった。以上の結果より、本実験系では高脂肪食に含まれる脂質より胃内で遊離脂肪酸が生成し、肥満がさらにそれを促進し、壁細胞に対して細胞傷害をもたらした結果、前癌
病変/metaplasiaの形成に至ったと結論づけた。現在、欧米では食道腺癌、食道・胃接合部癌、胃体部癌が急増しており、肥満との相関が指摘されている。本研究により我々は、このような上部消化管に発生する癌について、食物そのものが粘膜上皮細胞の分化・増殖に影響を及ぼす可能性を新たに示した。この成果の一部は2015年11月に開催された日本免疫学会（平田有基、瀬崎拓人、土肥多惠子、河村由紀）および2016年11月に開催された日本消化器関連学会週間JDDWにて報告を行い（平田有基ほか、高脂肪食が引き起こすマウス上部消化管病変）、後者では優秀演題（570演題中top 2.5%）に選ばれた。また、論文としてまとめてJ. Gastroenterologyに投稿し、受理された（doi: 10.1007/s00535-0161291-0）。
ヒト検体を用いた検討については、ヒトIBD検体を用いて施行したトランスクリプトーム解析、網羅的エピゲノム解析の結果を用い、バイオインフォマティックス解析を施行した。絞り込み条件を変えて詳細に検討した結果、IBD特異的エピゲノム変化を抽出した。さらに遺伝子発現プロファイルとプロモーター領域のエピゲノム修飾との統合解析を試みたが、特にDNAメチル化解析結果とIBD特異的遺伝子発現には一致が見られず、IBD特異的エピゲノム変化は遺伝子発現に変化を及ぼさないことが明らかとなった。これらの成果をまとめて現在投稿準備中である。

Subject No.

：26-110

Title：Identification and regulation of nutritional stimuli-inducing signaling pathways ingastrointestinal inflammation
Researchers：Yuki I. Kawamura, Harumi Suzuki, Satoshi Takaki

Key word：Inflammatory Bowel Diseases, nutrient signal, obesity, mucosal immunology

Abstract：

As elemental diets are effective therapy for inflammatory bowel disease (IBD), intralumenal environment
including ingested food, indigenous flora, bacterial component, microbial metabolites and fermentation products
closely related to the etiology and pathophysiology of IBD. The aim of this project is to identify the nutritional
stimuli-inducing signaling pathways related to gastrointestinal inflammation, and eventually to apply the result
to the development of remedies against IBD.
In a previous study, we showed that fasting-refeeding in mice induces transient hyperproliferation ofcolonic epithelial cells, which is dependent on the lactate produced as a metabolite of commensal bacteria(Okada T, et. al. Nat Commun, 4, 1654, 2013). In this project, we attempted to manipulate colonic epithelial cell
turnover with intermittent fasting to prompt recovery from acute colitis. Acute colitis was induced in mice byadministration of 2% dextran sulfate sodium in the drinking water for 5 days. From day 6, mice were fasted for
36 h and refed with normal diet (CE2), glucose powder, or lactylated high-amylose starch. On day 9, mice refedwith CE-2 showed a trend to gain more body weight than other groups, but this difference was not statisticallysignificant. Histologically, the fasting group (refed CE-2) showed higher numbers of regenerating crypts. When
expression of inflammatory cytokines was evaluated at mRNA levels, the fasting group showed dramaticallydecreased levels of IL-1β and IL-17. The fasting group (refed glucose) showed lower levels of these cytokines
compared with the ad libitum-fed group but this did not reach statistical significance. In contrast, TNF-α levels
did not change. These results indicated that intermittent fasting suppressed the crypt loss as well as inflammatory
cytokines. Based on our previous result, we next investigated whether increase in intracolonic lactate isbeneficial to reduce colitis. For this purpose, an enema of lactate, acetate, or butyrate was performed in the micerefed with glucose. Intrarectal administration of lactate or butyrate, but not acetate, induced crypt regeneration,suggesting that fasting followed by the high concentration of lactate in the colon induced a beneficial effect in
the resolution phase of DSS colitis (Okada T, et. al. J Clin Biochemistry & Nutrition, in press).
In this project, we also elucidated the influence of starvation and refeeding on immune cells using
murine models. Starvation for 36 h dramatically decreased the number of cells in Peyer's patches (PP). In
addition, we found the significant decrease in the number of B cells and the change in the localization of CD11c+
dendritic cells in PP located in the lower part of small intestine after starvation. After starvation of 36 h, mice
were refed with normal diet (CE2). After refeeding of 48 h, starvation-induced reduction of the number of cells
in PP was recovered to the basal level. To clarify dietary-inducing mechanisms to maintain the number of
immune cells in gut-associated lymphoid tissues, the expressions of chemokines and their receptors were
examined in starved or refed mice. We found that the level of some chemokines related to B cell retention in PP
was strikingly decreased during starvation. These results indicate that the nutritional stimuli-inducing signaling
pathways affect production of chemokines by stromal cells in PP, resulting the changes of the number of
immune cells in gut-associated lymphoid tissues (Nagai M, et. al., in preparation for submission).

Researchers には、分担研究者を記載する。

We also analyzed the gastrointestinal tract of mice with high fat diet (HFD)-induced obesity. During~8-20 weeks of HFD feeding, totally 35% of mice developed macroscopically distinct metaplastic patchy lesions
in stomach. This metaplastic patchy lesion was histologically characterized by severe loss of parietal cells
expressing HK-ATPase, a parietal cell marker, and the expression of ectopic Alcian blue-positive mucin. The
decrease of the number of parietal cells was clearly observed as early as 8 weeks after starting HFD. We
performed blood biochemical tests and measured cytokine levels, but there was no significant difference between
mice developed macroscopically distinct metaplastic lesions in stomach and mice without macroscopicallydistinct lesion. To characterise further this metaplastic patchy lesion, we purified HK-ATPase-negative
non-parietal cells from the gastric corpus by flow cytometry and performed RT-PCR with single epithelial cells
by using Fluidigm single cell analysis system (C1 and Biomark). In total, we analyzed 93 genes from 165 control
cells and 156 cells isolated from metaplastic lesion of HFD-fed mice. Evidently, different patterns of gene
expression between the control mucosa and the metaplastic lesion were revealed. In the control mucosa,
differentiated cell types were easily identified, which included Muc5ac (gastric type mucin)-positive epithelial
cells, Pgc (pepsinogen)-positive chief cells, Hdc (histidine decarboxylase)-positive enterochromaffin-like cells, a
few Atp4a and Atp4b (HK-ATPase subunit)-positive parietal cells, and Gif (gastric intrinsic factor)-positive cells.
In sharp contrast, the cells isolated from metaplastic lesion were almost homogenous. The majority of them
expressed Pigr, Gkn3, Vil1, Wfdc2, PCNA, and CD44, all of which were difficult to detect in any cells from thenormal mucosa. In addition, the majority of cells isolated from metaplastic lesion strongly expressed Tff2, Tff1,
Muc6, and Pgc. A few of them, but none of the control cells, expressed the stem-cell marker Lgr5. These results
indicated that metaplastic cells that ectopically expressed genes normally expressed by enterocytes andstem/progenitor cells with proliferation potential replaced most of the epithelial cells in the metaplastic lesion of
HFD-fed mice and this lesion was similar to previously reported precancerous lesion, spasmolytic polypeptide
expressing metaplasia (SPEM). Immunohistology confirmed the enhanced expression of metaplastic-specificproteins such as VIL1, PIGR, and GKN3 in surgically resected human gastric adenocarcinoma as compared withbackground mucosa. To further characterize the changes in the stomachs of HFD-fed mice, we performed
morphological analysis using electron microscopy. In control mice, the gastric corpus pits were mostly occupied
by parietal cells containing cytoplasmic tubulovesicles and numerous mitochondria. In contrast, HFD-fed micedisplayed a decrease in the frequency of parietal cells in the corpus mucosa. Furthermore, the parietal cells of
HFD-fed mice, but not those of the control mice, contained abnormal mitochondria with dense crystalline
inclusions. These pathological changes suggest the presence of mitochondrial stress in HFD-fed parietal cells. To
investigate the possibility that components of the diet are toxic to gastric parietal cells, we compared thecomposition of the HFD with the gastric contents of the HFD-fed mice. We measured triacylglycerides (TGs),
FFAs, and bile acids by liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC–MS/MS). FFAs were present
with the reflux of duodenal juice in the stomachs of HFD-fed mice, and their levels increased as the mice
became obese. Bile acids, which were not detected in the HFD, were detected in the stomachs of HFD-fed mice.
In addition, the higher concentrations of TGs were detected in obese mice. These results indicate that FFAs areliberated from TGs in the gastric lumen of HFD-fed mice, possibly causing stress signal from the mucosal
surface. To test whether FFAs affected cell viability in vitro, we isolated epithelial cells from the gastric corpus
mucosa by flow cytometry and performed short culture with a mixture of fatty acids that mimics the fatty acidcomposition of the HFD. The addition of a concentrated mixed fatty acid solution to the culture medium induced
Researchers には、分担研究者を記載する。

parietal cell death in a dose-dependent manner. Among the individual fatty acids examined, linoleic acid andoleic acid decreased cell viability more than stearic acid and palmitic acid. These results indicated that
unsaturated FFAs are more toxic than saturated ones to gastric epithelial cells. Based on this in vitro result, we
performed in vivo study feeding linoleic acid-rich diet and stearic acid-rich one. After 19 weeks, nine out of 10
mice on the linoleic acid-rich diet developed macroscopically distinct metaplastic lesions. In contrast, increased
mucin was seen only in two out of 10 mice on the stearic acid-rich diet. These results supported the notion that
free linoleic acid derived from the diet facilitated the development of metaplasia (Hirata Y, et. al. J
Gastroenterology, doi:10.1007/s00535-016-1291-0, 2016).
Using mucosal tissue samples from IBD patients, we have done global study of gene expression andepigenetic changes and have integrated these data to find out the nutritional stimuli-inducing signaling pathway
related to gastrointestinal inflammation. Bioinformatics analysis identified IBD-specific patterns of histone
modifications and DNA methylation.

Researchers には、分担研究者を記載する。

２６指１１０：摂食応答を標的とした消化管炎症の制御法の開発研究
平成26年度

平成27年度

平成28年度A. マウス絶食−再摂食モデルを用いた栄養シグナルによる免疫・炎症機構の解明
絶食によるパイエル板細胞数と細胞構成の変化を見いだした
適切な絶食の誘導により消化管炎症を緩和出来ることを見いだした

絶食によるパイエル板細胞数減少メカ
ニズムの一部解明〜
絶食の誘導により病変部でのIL-1β、IL17の減少を見いだした絶食−再摂食により変化するケモ
カインを同定、細胞の解析から絶食によるパイエル板細胞のリニューアル機構を発見
絶食で増加する短鎖脂肪酸が上皮細胞修復を促進する

B. 肥満マウスモデルを用いた栄養シグナルによる免疫・炎症機構の解明 食餌性の遊離脂肪酸が、ミトコン
ドリアに富む壁細胞に対して脂質肥満マウスでの消化管粘膜の肥満マウスで胃粘膜前癌病変を見出し、毒性を発揮し、細胞傷害をもたら異常を見いだした。一部には遺伝子発現などを詳細に検討
常在菌の関与も見られた
す前癌病変の新規発生機構
C. ヒト炎症性腸疾患検体を用いた栄養シグナル異常の探索
トランスクリプトーム、網羅的エピゲノム解析結果の統合解析

炎症性腸疾患特異的エピゲノム変化を抽出した
エピゲノム変化は炎症性腸疾患特異的遺伝子発現には関連しない

D. 新規標的分子のヒト検体を用いた検証ならびに機能・メカニズム解析
手術標本、生検、血清検体の収集

マウスモデルで見出された消化管
粘膜における細胞増殖亢進、
metaplasic cellsで発現亢進していた遺伝子発現が、ヒト検体でも認められることを確認した

栄養シグナルによる粘膜免疫制御
絶食−再摂食によるパイエル板内細胞数の変化絶食−再摂食によるパイエル板内細胞の変化

絶食によるパイエル板におけるケモカイン発現の低下
Ad libitum
Starved•

絶食により主にB細胞がパイエル板から流出する•

絶食によるパイエル板からのB細胞流出は、パイエル板におけるケモカイン産生の低下による•

消化管二次リンパ組織であるパイエル板の細胞数は、管腔内の栄養源からのシグナルに依存することを解明（投稿準備中）•

絶食−再摂食によるパイエル板リンパ球renewalにより病態を修飾可能か消化管の炎症病理における栄養シグナルの関与
高脂肪食摂取により肥満マウスに誘導される
胃粘膜の変化高脂肪食摂取により胃粘膜に誘導される胃粘膜の変化〜single cell analysis〜

遊離脂肪酸は胃粘膜上皮細胞、特に壁細胞に脂質毒性を発揮する
Control

DAPI

Fatty acid mix

H/K ATPase EthD-III 50 μm•

高脂肪食に含まれる脂質より胃内で遊離脂肪酸が生成する•

壁細胞が遊離脂肪酸により傷害され、前癌病変/metaplasiaの形成に至る•

食物そのものが粘膜上皮細胞の分化・増殖に影響をもたらすことを明らかにした（J Gastroenterologyに論文報告済み）•

肥満と関連して、食道腺癌、食道・胃接合部癌、胃体部癌が急増している原因の一つか炎症性腸疾患における栄養シグナル
絶食による大腸炎の軽減

自由摂食

栄養シグナル依存性のサイトカイン産生減少

上皮修復への有機酸の関与

絶食期間有り•絶食による炎症シグナルの低下による炎症抑制•

絶食ー再摂食時の上皮細胞増殖による修復の更新•

消化管急性炎症の特定の時期に間欠的絶食期間を設けることで、腸炎からの回復を促進することを明らかにした（J Clin Biochemistry and Nutritionに論文報告済み）•

絶食後の乳酸、酪酸の注腸により腸炎を改善可能か課題番号：２６指１１０

研究課題名：消化管の炎症病理における栄養シグナルの関与

主任研究者名 ：河村 由紀
分担研究者名 ：鈴木 春巳
キーワード：炎症性腸疾患、栄養シグナル、炎症病理

研究成果

：

炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎、クローン病）は腹痛・発熱などを繰り返し、病状の寛解・再燃は長期にわたり患者を苦しめる。内科的治療として5アミノサリチル酸製剤、ステロイド、TNF-α中和生物製剤、免疫調節剤が用いられているが、長期間の治療中にこれらのいずれにも応答しない、あるいは次第に応答性を失っていく症例が多く、現時点で根治療法はない。一方で、炎症性腸疾患の治療として成分栄養療法が有効であり、栄養療法からの離脱が病勢再燃の引き金となることから、栄養状態
が炎症性腸疾患の病因・病態形成に重要である事は明確であるが、栄養シグナルが消化管の炎症病理をどのように修飾しているのか、その分子メカニズムは明らかとなっていない。消化管の炎症に関連する栄養シグナルを同定することが出来れば、攪乱されている栄養シグナルの是正を標的とする、既存の治療法とは異なる分子機構に基づく予防・治療法の開発に繋がることが期待されるため、消化管の炎症病理に関連する栄養シグナルの同定は喫緊の課題である。本研究ではマウスに高脂肪食摂取ま
たはカロリー制限を行うモデルを用いることで、摂食状態が消化管の炎症病理を修飾する分子メカニ
ズムを解明する。
C57BL/6マウスに高脂肪食（60% kcal% fat）を8〜20週間自由摂取させた後、消化管組織を観察した
結果、形態的に明らかな変化が見られるのは胃であることがわかった。すなわち、高脂肪食摂取マウ
スでは、20〜30％の頻度で粘液産生細胞の胃粘膜における配置異常が認められた。高脂肪食摂取マウ
スにさらに抗生剤を経口投与することで細菌叢除去を行ったところ、高脂肪食摂取による粘液産生細胞の配置異常は細菌叢除去の影響を受けることが明らかとなった。食道癌や、胃噴門部癌の疫学的リ
スク要因も考慮し、高脂肪食摂取マウスにさらにアルコール投与、または塩酸＋胆汁酸の投与を加え、食道・胃粘膜の変化を組織学的に解析した。アルコール投与では胃・食道の表層性の急性炎症誘導にとどまった。また、塩酸＋胆汁酸の飲水内投与においても高脂肪食で誘導される変化の程度や頻度は亢進しなかった。従って、肥満における細胞動態・分化能の異常においてこれらは重要な因子ではないと考えられる。これらの結果に基づき、高脂肪食摂取マウスの胃粘膜を時系列にそって組織学的に検討し、胃粘膜における細胞配置異常の詳細を調べた。その結果、壁細胞の減少が初期に起こり始め、それに続いて異所性粘液の産生が見られることが分かった。血清中の炎症性サイトカイン濃度を測定したが、この病理学的変化と相関するサイトカインは見出されなかった。この病変を更に詳細に検討するため、胃粘膜上皮細胞から酵素的に分離後、ソーティングにより壁細胞以外の細胞を採取し、単一細胞で96種類の遺伝子発現を解析する実験を、フリュイダイムsingle cell analysis system (C1およびBiomark)を用いて行った。健常胃粘膜と病変部胃粘膜細胞の結果を比較したところ、高脂肪食群の病変では、殆どが異所性粘液を産生するSPEM (Spasmolytic polypeptide expressing metaplasia)という

胃癌の前癌病変であるmetaplasia cellsに置きかわっていることが明らかとなった。また、高脂肪食摂取マウスで発現が上昇していた遺伝子の一部はヒトの食道胃接合部癌でも高発現していることを免疫組織染色で確認した。さらに高脂肪食摂取マウスの胃粘膜病変の電顕観察を行い、壁細胞にミトコン
ドリアストレスがかかっていると考えられる状態を示す所見を見出した。このため、胃内容物中の脂質及び胆汁酸組成の解析を行った。その結果、高脂肪食摂取マウスの胃内には、食事由来のトリグリ
セリド及びfree fatty acidが存在しており、マウスが肥満となるにつれてその含量が増加していた。更
に、胃内容物から胆汁酸も検出されたことから、肥満マウスの胃内には十二指腸液が逆流しており、そこに含まれるリパーゼや胆汁酸その他の消化酵素の作用によりfree fatty acidが増加し、これがミトコンドリアに富む壁細胞において脂質毒性を発揮したと考えられた。この仮説に基づき、分離した胃粘膜上皮細胞の一次培養系及び壁細胞を含む胃オルガノイドの三次元培養系に、種々のfree fatty acidを加えた所、特に不飽和脂肪酸によって、壁細胞にミトコンドリア機能障害に引き続く細胞死が誘導された。そこで、高脂肪食のラードをリノール酸（不飽和脂肪酸）またはステアリン酸（飽和脂肪酸）に置き換えた餌を作製し、マウスに19週摂食させた結果、リノール酸食投与群では胃体部
metaplasia が90％(9/10)のマウスに誘導されたのに対し、ステアリン酸食投与群では20％(2/10)であった。以上の結果より、本実験系では高脂肪食に含まれる脂質より胃内で遊離脂肪酸が生成し、肥満がさらにそれを促進し、壁細胞に対して細胞傷害をもたらした結果、前癌病変/metaplasiaの形成に至ったと結論づけた。現在、欧米では食道腺癌、食道・胃接合部癌、胃体部癌が急増しており、肥満との相関が指摘されている。本研究により我々は、このような上部消化管に発生する癌について、食物そのものが粘膜上皮細胞の分化・増殖に影響を及ぼす可能性を新たに示した。この成果の一部は2015年
11月に開催された日本免疫学会および2016年11月に開催された日本消化器関連学会週間JDDWにて報告を行い、後者では優秀演題（570演題中top 2.5%）に選ばれた。また、論文としてまとめてJ.
Gastroenterologyに投稿し、受理された（doi: 10.1007/s00535-016-1291-0）。

課題番号：２６指１１０

研究課題名：栄養シグナルによる粘膜免疫制御

主任研究者名 ：河村 由紀
分担研究者名 ：高木 智
キーワード：炎症性腸疾患、栄養シグナル、免疫制御

研究成果

：

炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎、クローン病）は、若年発症の重篤な慢性炎症性疾患である。炎症性
腸疾患は近年著しい増加傾向にあり、生活様式の変化（食生活の欧米化、特に肉食の増加、衛生状態の改善など）がその一因と考えられている。しかしながら、食事内容の欧米化や衛生状態の改善に伴う腸内環境の変化が、炎症性腸疾患の発症・遷延化をどのように修飾しているのか、その分子メカニ
ズムは明らかとなっていない。炎症性腸疾患の治療として成分栄養療法が有効であることも栄養シグナルの病因・病態形成における重要性を示唆しているが、一方で長期にわたる栄養療法のコンプライ
アンスは低く、QOLの改善にもつながらない。また、栄養療法からの離脱が病勢再燃の引き金となることも多い。炎症性腸疾患に関連する栄養シグナル異常が同定され、既存の治療法とは異なる分子機構に基づく予防・治療法開発により栄養シグナル異常がコントロール可能となれば、患者は厳格な食事制限から解放されることが期待される。QOLの著しい改善という点でも、摂食刺激により炎症応答が引き起こされるメカニズムの解明が急務である。そこで本研究ではマウスに絶食-再摂食などの摂食状態の変化を起こすモデルを用いることで、栄養関連シグナルが消化管粘膜免疫系に及ぼす影響を詳細に解析した。
マウスを36時間の絶食後、腸管関連リンパ組織を採取し、粘膜免疫担当細胞を分離した後、その細胞数、細胞構成、分布に及ぼす影響を検討した。腸管関連リンパ組織としては小腸のパイエル板（小腸の部位別に採取）、盲腸のcecal patchおよびリンパ濾胞を採取し、その細胞数を算定するとともに、フローサイトメトリーにより細胞構成を解析した。その結果、36時間の絶食後に細胞数は約半数
から30％程度まで減少することが明らかとなった。小腸を長軸方向に3等分した部位別に見ると、中間部に存在するパイエル板における細胞の減少が最も顕著であった。一方で、Cecal patchおよびcecal
follicleの大きさは絶食後に増大していた。盲腸管腔内の環境はもともと食物由来の栄養素に乏しく、腸内細菌とその代謝産物で占められることを考慮すると、パイエル板、cecal patchなどの消化管二次リンパ組織の細胞数が、管腔内の栄養源からのシグナルに依存することを示唆していると考えられる。細胞構成の変化としては、小腸下部に存在するパイエル板において、絶食によりB 細胞の減少が認められた。組織学的には濾胞の扁平化と、CD11c＋樹状細胞の局在変化も観察された。続いて、絶食後に再摂食を行うモデルを用い、再摂食後に腸管関連リンパ組織を採取し、粘膜免疫担当細胞を分離した後、その細胞数、細胞構成、分布に及ぼす影響を検討した。絶食により減少した細胞数は再摂食の6時間後には約50％程度に回復し、48時間後には100％に回復していた。これら免疫担当細胞分布の変化は炎症反応にも大きく影響すると予測される。そこで、パイエル板からの細胞の減少のメカニ
ズム解明のため、自由摂食中、絶食中、あるいは絶食−再摂食中のドナーマウスより分離した免疫担当細胞を蛍光ラベルしたのち、自由摂食、絶食中、あるいは絶食−再摂食中のマウスに移植した。移植18時間後にレシピエントマウスからパイエル板、cecal patch、腸間膜リンパ節を採取し、その中の蛍光ラベル細胞数をフローサイトメトリーで算定することによって、細胞のホーミングを解析した。
その結果、ドナーが食事中／絶食中に関わらず、レシピエントが絶食中であるとパイエル板へのホーミングが顕著に減少することが明らかとなった。この現象は、空腸、回腸いずれのパイエル板でも見られた。また、絶食中と再摂食中のドナー由来のパイエル板細胞にそれぞれ異なる蛍光ラベルを施し、１：１の割合で混合して自由摂取中のレシピエントマウスに移植しても、ホーミングする細胞数は同等であった。以上の結果より、絶食中にはパイエル板のリンパ球以外の、おそらくストローマ細胞におけるケモカインやホーミング分子の発現が変わると予想された。そこで、パイエル板におけるケモカインとケモカイン受容体の発現について、定量RT—PCRにより自由摂食時と絶食時で比較解析を行った。その結果、自由摂食時の発現と比較すると、主にB細胞のケモタキシスを誘導する3種類のケモカイン産生が絶食によって低下することが明らかとなったことから、パイエル板ストローマ細胞のケモカイン産生能が、栄養シグナルによって変化していると考えられた。さらに再摂食時のリンパ球の動態を詳細に調べた結果、絶食時の細胞数の減少はアポトーシスにはよらないこと、B細胞の減少が顕著であることが明らかになった。また、再摂食によって、パイエル板の総細胞数及びナイーブ
B細胞数は自由摂食時レベルに戻るが、IgA陽性B細胞や、胚中心B細胞の数は再摂食後108時間経過しても回復しないことが分かった。これらの結果から、1）絶食により、パイエル板におけるケモカイ
ンの産生が低下するため、主にB細胞がパイエル板から流出する。2）絶食—再摂食により、パイエル
板B細胞はナイーブB細胞に置き換わり、パイエル板リンパ球のrenewalが起こることが明らかとなった。これらの成果は現在投稿準備中である。

研究発表及び特許取得報告について

課題番号：26指110
研究課題名：摂食応答を標的とした消化管炎症の制御法の開発研究主任研究者名：河村由紀
論文発表
論文タイトル

著者

掲載誌

掲載号

年

Intermittent fasting prompted recovery fromdextran sulfate sodium-induced colitis in mice

Okada, T.,
Otsubo, T.,
Hagiwara, T.,
Inazuka, F.,J Clin Biochemistry
Kobayashi, E.,
in pressand Nutrition
Fukuda, S., Inoue,T., Higuchi, K.,
Kawamura, Y. I.,
Dohi, T.

2017

Fatty acids in high-fat diet potentially induce
gastric parietal-cell damage and metaplastia inmice

Hirata Y, Sezaki
T, TamuraNakano M,
Oyama C,
Hagiwara T,
J Gastroenterology
Ishikawa T,
Sezaki T, Fukuda
S, Yamada K,
Higuchi K, Dohi
T, Kawamura YI.

doi:
10.1007/s00535016-1291-0

2016

Induction of IFNl3 as an additional effect of
nucleotide, not nucleoside, analogues: a new
potential target for HBV infection

Murata K, Asano
M, Matsumoto A,
Sugiyama S,
Nishida N, Tanaka
E, Inoue T,
Sakamoto M,
Enomoto N,
Gut
Shirasaki T,
Honda M, Kaneko
S, Gatanaga H,
Oka S, Kawamura
YI, Dohi T, Syuno
Y, Yano H,
Mizokami M.

doi:
10.1136/gutjnl2016-312653

2016

Otsubo T,
Hagiwara T,
Retrotransposition of long interspersed nucleotide
Okamura T,
element-1 is associated with colitis but not tumors
Ishizaka Y,
in a murine colitic cancer model
Kawamura YI,
Dohi T

PLOS ONE10

2015

研究発表及び特許取得報告について

Otsubo T,
Hagiwara T,
Tamura-Nakano
Aberrant DNA hypermethylation reduces theM, Sezaki T,
expression of the desmosome-related molecule
Miyake O,
Cancer Medicine
periplakin in esophageal squamous cell carcinoma Hinohara C,
Shimizu T,
Yamada K, Dohi
T, Kawamura YI.

4

2015

Dohi T,
Kawashima R,
Pathological activation of canonical nuclear-factor Kawamura YI,
κB by synergy of tumor necrosis factor α andOtsubo T,
TNF-like weak inducer of apoptosis in mouse
Hagiwara T,
acute colitis
Amatucci A,
Michaelson J,
Burkly LC.

69

2014

15

2014

21

2014

Cytokine

Obata Y,Furusawa Y, Endo
TA, Sharif J,
Takahashi D,
Onawa S,
Fujimura Y,
The epigenetic regulator Uhrf1 facilitates
Takahashi M,
Nature Immunology
functional expansion of colonic regulatory T cells
Ikawa T, Otsubo
T, Kawamura YI,
Dohi T, Tajima S,
Ohara O, Hori S,
Ohno H, Koseki
H, Hase K.

Therapeutic adenoviral gene transfer of a
glycosyltransferase for prevention of peritoneal
dissemination and metastasis of gastric cancer

Kawamura YI,
Adachi Y, Curiel
DT, Kawashima
Cancer Gene Ther
R, Kannagi R,
Nishimoto N and
Dohi T.

Human thymoproteasome variations influence
CD8 T cell selection

Nitta T, Kochi Y,
Muro R, Tomofuji
Y, Okamura T,
Murata S, Suzuki Science Immunol
H, Sumida T,
Yamamoto K,
Takayanagi H.

in press

2017

T cell activation RhoGTPase-activating protein(TAGAP) plays an important role in TH17 celldifferentiation

Tamehiro N,
Nishida K,
YanobuImmunol Cell Biol
Takanashi R, Goto
M, Okamura T,
Suzuki H.

doi:10.1038

2017

研究発表及び特許取得報告について

Takikita S, Muro
R, Takai T,
Otsubo T,
Kawamura YI,
Dohi T, Oda H,
A histone methyltransferase ESET is critical for T
Kitajima M,
J Immunolcell development
Oshima K, Hattori
M, Endo TA,
Toyoda T, Weis J,
Shinkai Y, Suzuki
H.

197

2016

Overexpression of RhoH permits to bypass the
pre-TCR checkpoint

Tamehiro N,
Hiroyo Oda H,
Shirai M, Suzuki
H

PLoS ONE102015

The thymic cortical epithelium determines the
TCR repertoire of IL-17-producing γδT cells

Nitta T, Muro R,
Shimizu Y, Nitta
S, Oda H, Ohte
Y,T Goto M,
Yanobu R, Narita
EMBO Rep
T, Takayanagi H,
Yasuda H,
Okamura T,
Murata S, Suzuki
H.

16

2015

The Ras GTPase-activating protein Rasal3
supports survival of naive T cells

Muro R, Nitta T,
Okada T, Ideta H,
PLOS ONETsubata T, Suzuki
H.

10

2015

An epistatic effect of apaf-1 and caspase-9 onchlamydial infection

Rhaman MA,
Shirai M, Aziz
MA, Ushirokita R, Apoptosis
Kubota S, Suzuki
H, Azuma Y.

20

2015

Differential function of Themis CABIT domains
during T cell development

Okada T, Nitta T,
Kaji K, Takashima
A, Oda H,
Tamehiro N, Goto PLoS ONE
M, Okamura T,
Patrick MS,
Suzuki H.

9

2014

Suzuki-Yamazaki
IL-10 production in murine IgM+CD138hi cells is N, Yanobudriven by Blimp-1 and downregulated in classTakanashi R,
Eur J Immunol
switched cells
Okamura T,
Takaki S.

47

2017

Specific disruption of Lnk in murine endothelial
progenitor cells promotes dermal wound healing
via enhanced vasculogenesis, activation of
myofibroblasts, and suppression of inflammatory
cell recruitment

7

2016

Lee JH, Ji ST,
Kim J, Takaki S,
Asahara T, Hong
YJ, Kwon SM.

Stem Cell Res Ther

研究発表及び特許取得報告についてInterferon-γ constrains cytokine production ofgroup 2 innate lymphoid cells.

Kudo F, Ikutani
M, Seki Y,
Otsubo T,
Kawamura Y,
Immunology
Dohi T, Oshima
K, Hattori M,
Nakae S, Takatsu
K, Takaki S.

147

2016

Lymphocyte adaptor protein LNK deficiency
exacerbates hypertension and end-organ
inflammation

Saleh MA,
McMaster WG,
Wu J, Norlander
AE, Funt SA,
Thabet SR, Kirabo
A, Xiao L, Chen
J Clin Invest
W, Itani HA,
Michell D, Huan
T, Zhang Y,
Takaki S, Titze J,
Levy D, Harrison
DG, Madhur MS.

125

2015

Lnk/Sh2b3 controls the production and functionof dendritic cells and regulates the induction of
IFN-γ-producing T cells

Mori T, Iwasaki
Y, Seki Y, Iseki
M, Katayama H,
J Immunol
Yamamoto K,
Takatsu K, Takaki
S.

193

2014

Lnk prevents inflammatory CD8+ T-cellproliferation and contributes to intestinal
homeostasis

Katayama H, MoriT, Seki Y, Anraku
M, Iseki M,
Ikutani M,
Eur J Immunol
Iwasaki Y,
Yoshida N,
Takatsu K, Takaki
S.

44

2014

Nov/CCN3 regulates long-term repopulating
activity of murine hematopoietic stem cells via
integrin αvβ3

Ishihara J,
Umemoto T,
Yamato M,
Shiratsuchi Y,
Takaki S, Petrich
BG, Nakauchi H,
Eto K, Kitamura
T, Okano T.

99

2014

Int J Hematol

学会発表
タイトル

高脂肪食が引き起こすマウス上部消化管病変

発表者

学会名

平田 有基、瀬崎
第58回日本消化器
拓人、樋口 和秀、河村 由紀、 病学会大会 (ワーク 神戸
ショップ)
土肥 多惠子.

場所

年月2016年11月

研究発表及び特許取得報告について

山田 和彦、河村
由紀、萩原 輝デスモゾーム関連分子であるperiplakinの発現は 記、土肥 多恵
第71回日本消化器
徳島
予後不良因子になる．−DNAメチル化と免疫染 子、山田 純、野外科学会
原 京子、山下色での検討−
智、橋本 政典、
矢野 秀朗.

2016年7月

潰瘍性大腸炎における粘膜固有層免疫細胞のエピゲノム異常 シンポジウム2-炎症性腸疾患・
腸内環境と免疫の基礎と臨床−

河村由紀、大坪武史、大島健志朗、豊田哲郎、萩原輝記、河村裕、 第52回消化器免疫東京
小西文雄、矢野 学会 (Symposium)
秀朗、斉藤幸雄、
服部正平、土肥多惠子

2015年7月

消化器疾患で見られる糖鎖異常とエピジェネ
ティックな遺伝子サイレンシング

河村由紀

第34回糖質学会(招東京
待講演)

2015年7月

Enhanced expression of doublecortin-like kinase
1 (DCLK1) in the background mucosa of coloncancerHirata Y, Sezaki
T, Hagiwara T,
Edogawa S,
Okada T, Inoue T,
Yano H, Gohda Y, DDW2015
Suda R, Hirose Y,
Kawamura YJ,
Higuchi K, Dohi
T, Kawamura YI

Washington D.C.

2015年5月

Integrative analysis of DNA methylome andtranscriptome detected loss of a desmosome
protein in esophageal squamous cell carcinoma

Kawamura YI,
Otsubo T,
Hagiwara T,
Tamura-Nakano, DDW2015
Sezaki T, Hirada
Y, Igari T, Yamda
K, Dohi T

Washington D.C.

2015年5月

Intestinal mucosal injury induced by anti-cancer
agents is mediated by TWEAK/Fn14 and IL-13

Sezaki T, Hirata
第43回日本免疫学
Y, Kawamura YI,
京都会総会
Dohi T.

2014年12月

Sialic-acid-binding Ig-like lectins, potential
peripheral markers for mucosal damage ofinflammatory bowel disease

Kawamura YI,
Maeyashiki C,
Hagiwara T,
Otsubo T,
Akiyama J, Dohi
T.

2014年10月

United Eurpean
Gastroenterology
2014

Wienna研究発表及び特許取得報告について

Aberrant DNA methylation of a desmosomerelated molecule in esophageal squamous cell
carcinoma

Hagiwara T,
Otsubo T,
Tamura-Nakano
M, Yamada K,
第87回日本生化学
京都会大会
Hinohara C,
Miyake O,
Shimizu T, Dohi
T, Kawamura YI.

2014年9月

The distinct roles of proximal TCR kinase
regulate gdT cell development

Muro R, Nitta T,
Takayanagi H,
Suzuki H.

第45回 日本免疫学
那覇
会学術集会

2016年12月

NAD(P)H:quinone oxidoreductase (Nqo1)
regulates irritant contact dermatitis throughhomeostasis of epidermal gd T cells

Kitajima M,
第45回 日本免疫学
Kimura A, Suzuki
那覇
会学術集会
H.

2016年12月

Muro R, Nitta T,
Tamehiro N, Oda
Differential requirement of ZAP/Syk kinases for
H, Kitajima M,
ThymUS2016
the early development of gdT ceslls in the thymus
Takayanagi H,
Suzuki H.

Hawaii2016年6月

Muro R, Nitta T,
The critical roles of RhoH for development of IL- Tamehiro N, Oda Gamma/Delta T Cell
London, UK
17-producing γδT cell
H, Takayanagi H, Conference
Suzuki H.

2016年6月

Irritant contact dermatitis is regulated byantioxidative enzyme NAD(P)H:quinone
oxidoreductase (Nqo1)

Kitajima M,
Kimura A, Suzuki AAI MeetingH.

2016年5月

Differential roles of TCR-proximal signaling
adaptors in T cell development

Suzuki H,
Tamehiro N,
Muro R, Oda H,
Nitta T.

第44回 日本免疫学
札幌
会学術集会

2015年11月

NAD(P)H:quinone oxidoreductase (Nqo1)
regulates irritant contact dermatitis

Kitajima M,
第44回 日本免疫学
Kimura A, Suzuki
札幌
会学術集会
H.

2015年11月

Identification of a novel factor on Th17 celldifferentiation

Tamehiro N,
Suzuki H.

第44回 日本免疫学
札幌
会学術集会

2015年11月

AhR-Nqo1 axis selectively inhibits LPS-induced
IL-6 production through degradation of IB
protein

Kimura A,
Yoshimura A,
Suzuki H.

第44回 日本免疫学
札幌
会学術集会

2015年11月

Overexpression of RhoH permits to bypass the
pre-TCR checkpoint

Tamehiro N, Oda Venice Thymus
H, Suzuki H.
Meeting 2015

Seatle、USA

Venice, Italy

2015年4月

研究発表及び特許取得報告について

Rasal3, a newly identified Ras GTPase activating Muro R, Nitta T,
protein is important for survival of naïve T cells in Okada T, Tubata
the peripheryT, Suzuki H.

第43回日本免疫学
京都会総会

2014年12月

胸腺皮質上皮細胞によるγδT細胞の分化制御

新田 剛、室 龍之介、新田 幸子、小田 浩代、
鈴木 春巳

第24回 KTCC

京都

2014年6月

RhoH欠損マウスで認められる乾癬様皮膚炎の解析

爲廣紀正、小田浩代、鈴木春巳

第24回 KTCC

京都

2014年6月

Themis regulates cytokine production in mature
naive T cells

Okada T, Nitta T,
Oda H, Tamehiro 7th ThymOZ
N, Patrick MS,
meeting
Suzuki H.

Helon Island,
Australia

2014年4月

IL-10 derived from IgM+CD138hi cells support
the antigen-specific antibody production

Yamazaki N,
Takaki S.

第45回 日本免疫学
宜野湾
会学術集会

2016年12月

Lnk/Sh2b3, an autoimmune disease-associatedgene, prevents adipose tissue inflammation bycontrolling IL-15-dependent cell functions

Mori T, Yamazaki 第45回 日本免疫学
宜野湾
N, Takaki S.
会学術集会

2016年12月

Chronic IL-33 treatment results in pulmonary
arterial hypertrophy mediated by ILC2s andeosinophils.

Ikutani M,
Tsuneyama K,
Kudo F, Takatsu
K, Takaki S.

2016年12月

An autoimmune disease-associated gene,
Lnk/Sh2b3 controls inflammation in adipose
tissue and reduces the risk for onset of diabetes
Interferon-γ negatively regulates cytokine
production of group 2 innate lymphoid cells

第45回 日本免疫学
宜野湾
会学術集会

The 16th
Mori T, Yamazaki International
N, Takaki S.
Congress of
Immunology.
The 16th
International
Kudo F, Takaki S.
Congress of
Immunology.

Melborne,
Australia

2016年8月

Melborne,
Australia

2016年8月

Germinal center B cell survival and optimal IgE
production are controled by Lnk/Sh2b family
adaptor protein Aps/Sh2b2

Iseki M, Kudo F,
Takaki S

第44回日本免疫学
札幌会学術集会

2015年11月

An autoimmune disease-associated gene,
Lnk/Sh2b3 controls inflammation in adipose
tissue and reduces the risk for onset of diabetes

Mori T, Yamazaki 第44回日本免疫学
札幌N, Takaki S
会学術集会

2015年11月

Inhibitory effects of interferon-γ on cytokine
production in group 2 innate lymphoid cells

Kudo F, Takaki S

第44回 日本免疫学
札幌
会学術集会

2015年11月

Lnk/Sh2b3 adaptor protein controls cytokine
responses of dendritic cells, and regulates theinduction of IFN-γ-producing T cells

Mori T, Iseki M,
Takaki S.

第43回日本免疫学
京都会学術集会

2014年12月

研究発表及び特許取得報告について

第43回日本免疫学
京都会学術集会

2014年12月

Lnk/Sh2b family adaptor protein Aps/Sh2b2 in B
Iseki M, Kudo F,
cells contributes to germinal center B cell survival
Takaki S.
and optimal IgE production in vivo

第43回日本免疫学
京都会学術集会

2014年12月

Suppression of cytokine production from group 2 Kudo F, Seki Y,
innate lymphoid cells by interferon-γ
Takaki S.

第43回日本免疫学
京都会学術集会

2014年12月

IgM+ plasma cells contribute to the sufficient
production of IgG by secreting IL-10 and IL-13

Yamazaki N,
Takaki S.

その他発表(雑誌、テレビ、ラジオ等)
タイトル

発表者

発表先

場所

年月日

該当なし

特許取得状況について※出願申請中のものは(

発明名称)記載のこと。
登録番号該当なし※該当がない項目の欄には「該当なし」と記載のこと。
※主任研究者が班全員分の内容を記載のこ

特許権者(申請者）
登録日(申請日)（共願は全記載）

出願国