難溶性OTC 医薬品の製剤特性改善を目的とした
薬物非晶質ナノ粒子形成型固形製剤開発
千葉大学大学院 薬学研究院
うえだ

植田

けいすけ

圭祐

助教

難溶性 OTC 医薬品の製剤特性改善を目的とした
薬物非晶質ナノ粒子形成型固形製剤開発

千葉大学大学院薬学研究院

植田

圭祐

【要旨】

本研究では NMR 測定を中心とした分子レベルでの物性評価に基づき、薬物非晶質ナノ粒
子形成型固形製剤開発及びその消化管吸収性改善能を評価した。モデル難水溶性薬物として
Fenofibrate を用い、噴霧乾燥法により非晶質固体分散体（ASD）を調製した。親水性ポリマーである Hypromellose を用いた ASD を緩衝液中に分散することでナノ粒子の形成が認められ、
NMR 及び Cryo-TEM を用いた解析から薬物非晶質ナノ粒子形成が確認された。薬物非晶質
ナノ粒子形成が認められた ASD 懸濁液についてラットを用いた消化管吸収性試験を行った結果、薬物非晶質ナノ粒子量の増加に伴い、薬物腸管吸収が顕著に促進されることが示された。
消化管膜近傍で形成される非攪拌水相 ( UWL) 中の薬物非晶質ナノ粒子の効果的な拡散が、薬物吸収改善に寄与したと考察した。薬物吸収促進に対する薬物非晶質ナノ粒子の影響を定
量的に評価するために、薬物非晶質ナノ粒子と溶解薬物の見かけの透過速度を算出した結果、
薬物非晶質ナノ粒子の見かけの透過速度は、溶解薬物と比較して 110-130 倍低いことが示された。一方、薬物非晶質ナノ粒子が溶解薬物の数百倍の濃度で形成されている場合、薬物非晶
質ナノ粒子が薬物の吸収改善に大きく寄与することが示された。本研究より、薬物非晶質ナノ粒子の形成が消化管における薬物吸収促進に直接的に寄与し、難水溶性 OTC 医薬品の経口製剤化において薬物非晶質ナノ粒子形成型固形製剤が有用であることが示された。

１、調査・研究目的
現在多くの医薬品が難水溶性を示し、その低い経口吸収性から経口投与製剤としての開発が断念されることがある。難水溶性薬物の経口吸収性を改善する有効な手法として、非晶質状態の薬物をポリマー担体中に分散させた非晶質固体分散体 (ASD) が広く知られている。ASD
は、水分散時に薬物の結晶溶解度を超えて溶解した過飽和溶液を形成し、難水溶性薬物の消化管吸収性改善に寄与する [1, 2]。一方、薬物濃度が非晶質溶解度を超えると薬物が液 - 液相
分離 ( LLPS) を起こし、薬物非晶質粒子を形成する [3, 4]。その結果、バルクの水相中の過飽
和溶解薬物量は非晶質溶解度で頭打ちとなる。一方、薬物非晶質粒子は水相中の薬物のリザーバーとして働き、薬物の吸収過程において薬物分子を迅速に再供給することで、消化管中の薬79

物濃度を非晶質溶解度で維持する [1, 5]。そのため、水分散時に自発的に薬物非晶質ナノ粒子を形成する固形製剤を調製することで、難水溶性薬物の実用的な経口投与製剤の開発が可能となると考えられる。そこで本研究では、NMR 及び Cryo-TEM 測定によりASD 分散時に形成される薬物非晶質ナノ粒子の分子状態を定量的に評価した。さらに薬物非晶質ナノ粒子形成による薬物吸収性改善メカニズム解明を目的とし、ラット腸管を用いた in situ シングルパス腸管灌流（SPIP）法により、薬物消化管吸収性を定量的に比較評価した。

2、調査・研究方法
2-1. 試薬モデル難 水溶性 薬物として Fenofibrate ( FFB) を用い、ASD 担体として Hypromellose( HPMC) を用いた。すべての実験において pH 6.8 のリン酸緩衝生理食塩水 ( PBS) を分散媒体に用いた。
2-2. 試料調製
FFB 及び HPMC を質量比 1 : 9 及び 1 : 18 の割合で、dichloromethane/methanol = 1 : 1 (v/v)
溶液で溶解させ、噴霧乾燥を行い、FFB/HPMC ASD (1 : 9) 及び FFB/HPMC ASD (1 : 18)を調製した。FFB/HPMC ASD (1 : 9) 及び FFB/HPMC ASD (1 : 18) を FFB 濃度がそれぞれ 1000 µg/mL 及び 500 µg/mL となるように PBS に分散させることで、FFB/HPMC ASD
懸濁液 (1000/9000 µg/mL) 及び FFB/HPMC ASD 懸濁液 (500/9000 µg/mL) を調製した。また、FFB 及び HPMC を質量比 1 : 9 となるよう秤量し、ボルテックスミキサーを用いて3 分間混合することにより FFB/HPMC 物理的混合物 (physical mixture; PM ) (1 : 9) を得た。
FFB/HPMC PM (1 : 9) を PBS に FFB 濃度が 1000 µg/mL となるように加え、FFB/HPMC
PM (1000/9000 µg/mL) 懸濁液を得た。
2-3. 測定方法
2-3-1. 粒子径分布測定
動的光散乱法による粒子径分布測定を行った。測定中の粒子成長を抑制する目的で、4℃にて粒子径測定を行った。
2-3-2. 極低温透過型電子顕微鏡 (Cryo-TEM) 測定
マイクログリッド膜貼付グリッドのフィルム被膜側を 60 秒間親水化処理した後、各試料
液 2 µL をグリッドに吸着させた。過剰な溶液を濾紙で吸い取った後、液体窒素により温度を約−176℃にコントロールした液体エタン内で急速凍結させ測定試料とした。測定試料を80

cryo-holder に液体窒素中で装着し、−176°C 以下の温度を維持して、加速電圧 120 kVの条件で測定を行った。
2-3-3. 溶液 1H NMR 測定
D2O を用いて 調 製した PBS にケミカルシフト用内部 基 準 物質として trimethylsilyl
propanoic acid (TSP) を、定量用内部標準物質として maleic acid (MA) をそれぞれ 500µg/mL となるように加えた。この溶液を用いて前述の方法にて FFB/HPMC PM 及びFFB/HPMC ASD 懸濁液を調製し、NMR 測定用試料とした。Single pulse 測定により37°C において 1H NMR スペクトルを取得した。FFB のプロトン及び MA メチンプロトンピー
クの面積値の比から FFB 濃度を算出した。
2-3-4. 動物実験
SD 系雄性ラット (8 週齢、233–292 g) を用い、pentobarbital の腹腔内投与により麻酔をかけた後、体温を 37℃付近に維持するため、ラットを白熱電球の下に仰向けに寝かせた。
経時的な採血を行うため、左大腿動脈にポリエチレン製のカニューレチューブを挿入した。
続いて正中線に沿って開腹し、ラットの腹腔から小腸を取り出した。Treitz 靭帯からおよそ
2 cm下流の約 10 cm の部位を吸収試験に用いる空腸上部とし、その両端にシリコンチュー
ブを挿入した。各試験サンプルを灌流速度 0.1 mL/min で灌流させた。試験開始後、0.5、
1、1.5、2、及び 2.5 時間後に大腿動脈カニューレから血液約 350 µL を採取した。採取した血液試料中の FFB の活性代謝物である fenofibric acid ( FFA) 濃度を定量した。

3、調査・研究成果
3-1. FFB ナノ粒子の物性評価
動的光散乱法を用いた粒子径分布測定を行った結果、調製直後の FFB/HPMC ASD 懸濁液 (1000/9000 µg/mL) 及び FFB/HPMC ASD 懸濁液 (500/9000 µg/mL) は、それぞれ
161.0 nm 及び 157.6 nm の平均粒子径を示し、FFB ナノ粒子の形成が認められた ( Figure 1)。
各 FFB/HPMC ASD 懸濁液を 37℃で保存し、経過時間ごとに粒子径分布測定を行った結果、ナノ粒子の粒子径が保存に伴い増加することが示された。2.5 時間保存後には FFB/HPMC
ASD 懸濁液 (1000/9000 µg/mL) 及び FFB/HPMC ASD 懸濁液 (5000/9000 g/mL) はそれ
ぞれ 478.4 nm 及び 407.3 nm の平均粒子径を示した。一方、ASD 懸濁液間での粒子径増加
傾向に有意差は認められず、仕込み FFB 濃度に依存した粒子径分布や粒子成長速度の違い
は小さいことが示唆された。
Figure 2 に調製直後及び 37℃で 2.5 時間保存後の各 FFB/HPMC ASD 懸濁液の cryoTEM 画像を示す。調製直後のいずれの FFB/HPMC ASD 懸濁液においても、100 –250 nm

81程度の液滴様の球形粒子が観察された。これらの結果から、FFB/HPMC ASD 懸濁液において形成されたナノ粒子は非晶質状態であることが示唆された。2.5 時間保存後の FFB/
HPMC ASD 懸濁液の cryo-TEM 画像においては、350 nm 程度の粒子径を有する比較的大きな球形粒子が観察された。一方、粒子径が 150 –250 nm 程度の粒子も調製直後の試料と同様に確認された。先に示した動的光散乱法による粒子径分布測定結果においては、保存により FFB/HPMC ASD 懸濁液の薬物非晶質ナノ粒子の平均粒子径が増加したことが示されている。しかし cryo -TEM の観察結果より、両 FFB/HPMC ASD 懸濁液中では 2.5 時間保存後においても 150 –250 nm 程度の比較的小さな薬物非晶質ナノ粒子が残存していることが確認された。
3-2. FFB 溶解量の定量
バルクの水中に溶解した薬物濃度を評価する目的で、各懸濁液中に分散した粒子を遠心処理により取り除き、上清中の FFB 濃度を定量した。Table 1 に各懸濁液中の溶解 FFB 濃度を示す。FFB/HPMC PM 懸濁液 (1000/9000 µg/mL) 中の FFB 溶解量は 0.23 µg/mL であった一方、分散直後の FFB/HPMC ASD 懸濁液 (1000/9000 µg/mL) 及び FFB/HPMC
ASD 懸濁液 (500/9000 µg/mL) 中の FFB 溶解量は約 2 µg/mL を示した。FFB の非晶質化によって FFB 溶解量が 8.4–8.6 倍改善し、FFB/HPMC ASD 懸濁液において FFB が過飽和溶解状態を形成していることが示された。一方、FFB/HPMC ASD 懸濁液間の FFB 溶
解量には差が認められず、FFB 仕込み濃度に関わらず FFB の溶解量は約 2 µg/mL で頭打
ちになることが認められた。さらに、37℃で 2.5 時間保存後の両 FFB/HPMC ASD 懸濁液
中の FFB 溶解量は保存前と比較して変化しておらず、FFB の過飽和状態が維持されている
ことが示された。
3-3. 溶液 1H NMR 測定
Figure 3 に各懸濁液の NMR スペクトル及び FFB の芳香環プロトン由来のピークが認められる低磁場領域の拡大図を示す。FFB/HPMC PM 懸濁液では HPMC に由来する 1H ピー
クが観測された一方、FFB に由来する 1H ピークは認められなかった。一方、FFB/HPMC
ASD 懸濁液 (1000/9000 µg/mL) 及び FFB/HPMC ASD 懸濁液 (500/9000 µg/mL) においては、HPMC ピークに加えて FFB ピークが観察された。しかし、FFB/HPMC ASD 懸濁液
中に溶解している FFB 濃度は約 2 µg/mL (Table 1) と低いため、NMR スペクトルにおいて認められた FFB ピークはバルクの水中に溶解した FFB に由来するものではなく薬物非晶質ナ
ノ粒子中の FFB に由来すると考察した。FFB/HPMC ASD 懸濁液 (1000/9000 µg/mL) 及
び FFB/HPMC ASD 懸濁液 (500/9000 µg/mL) 中において、薬物非晶質ナノ粒子に由来す
る FFB ピークの面積値から算出した FFB 濃度は 995 µg/mL 及び 498 µg/mL であり、仕込み濃度に近い FFB 濃度を示した。以上の結果より、FFB/HPMC ASD 懸濁液中の FFBは大部分が薬物非晶質ナノ粒子として分散していることが示された。

82

3-4. ラット腸管における FFB 吸収性評価
Figure 4 に FFB/HPMC PM 懸濁液及び各 FFB/HPMC ASD 懸濁液をラット腸管へ投与後の血漿中 FFA 濃度 - 時間プロファイルを示す。FFB/HPMC PM 懸濁液 (1000/9000µg/mL) と 比 較 して、FFB/HPMC ASD 懸 濁 液 (1000/9000 µg/mL) 及 び FFB/HPMC
ASD 懸濁液 (500/9000 µg/mL) からの FFB 吸収性はそれぞれ約 40 倍及び 23 倍改善した。
また、FFB/HPMC ASD 懸濁液 (500/9000 µg/mL) 投与群と比較して FFB/HPMC ASD
懸濁液 (1000/9000 µg/mL) 投与群の吸収性は、約 1.8 倍高い値を示した。ラット小腸における FFB の吸収 flux を評価する目的で、2- コンパートメントモデルを用いた解析を行った。
の吸収 flux を評価する目的で、2-コンパートメントモデルを用いた解析を行った。FFAFFA の静脈内単回投与後の薬物動態パラメータを利用して算出した FFB のラット小腸におの静脈内単回投与後の薬物動態パラメータを利用して算出した FFB のラット小腸における見かけの吸収 flux ( Japp ) を Table 2 に示す。FFB/HPMC PM 懸濁液 (1000/9000 µg/
ける見かけの吸収 flux (Japp)を Table 2 に示す。FFB/HPMC PM 懸濁液(1000/9000 µg/mL)mL) と比較して、FFB/HPMC ASD 懸濁液 (1000/9000 µg/mL) 及び FFB/HPMC ASD 懸と比較して、FFB/HPMC ASD 懸濁液(1000/9000 µg/mL)及び FFB/HPMC ASD 懸濁液
濁液 (500/9000 µg/mL) 投与群の Japp はそれぞれ約 38 倍及び 21 倍上昇した。以上の結果よ(500/9000 µg/mL)投与群の Japp はそれぞれ約 38 倍及び 21 倍上昇した。以上の結果より
り FFB 過飽和形成により FFB の吸収速度が顕著に改善することが示された。加えて、FFB
FFB 過飽和形成により FFB の吸収速度が顕著に改善することが示された。加えて、FFBの吸収速度は、薬物非晶質ナノ粒子量の増加に伴い更に向上することが示唆された。
の吸収速度は、薬物非晶質ナノ粒子量の増加に伴い更に向上することが示唆された。

4、考察
4、考察
難水溶性薬物は消化管中の非攪拌水相(UWL)の透過が消化管吸収における律速段階となる [6]。ナノ粒子は UWL 中を拡散することで、UWL 中の薬物濃度勾配を減少さ
難水溶性薬物は消化管中の非攪拌水相 ( UWL) の透過が消化管吸収における律速段階となせ、小腸上皮細胞近傍の薬物濃度を高めることが報告されている [7]。以上の結果より、る [6]。ナノ粒子は UWL 中を拡散することで、UWL 中の薬物濃度勾配を減少させ、小腸上皮
ASD 懸濁液において薬物非晶質ナノ粒子が UWL 中を拡散し、FFB 吸収性が改善したと細胞近傍の薬物濃度を高めることが報告されている [7 ]。以上の結果より、ASD 懸濁液におい考察した。また、小腸における薬物吸収経路として、受動拡散に加え、エンドサイトーて薬物非晶質ナノ粒子が UWL 中を拡散し、FFB 吸収性が改善したと考察した。また、小腸にシスを介した能動的な物質取り込み経路が存在する。例えば、代表的なエンドサイトー
おける薬物吸収経路として、受動拡散に加え、エンドサイトーシスを介した能動的な物質取り込
シス経路として知られるクラスリン介在性エンドサイトーシス及びカベオラ介在性エみ経路が存在する。例えば、代表的なエンドサイトーシス経路として知られるクラスリン介在性エ
ンドサイトーシスは、主に約 200 nm 以下の粒子の取り込みに寄与することが報告されンドサイトーシス及びカベオラ介在性エンドサイトーシスは、主に約 200 nm 以下の粒子の取り込ている [8]。薬物非晶質ナノ粒子の粒子径は数百 nm であったことから、これらのエンみに寄与することが報告されている [8]。薬物非晶質ナノ粒子の粒子径は数百 nm であったことか
ドサイトーシス経路を介して、薬物非晶質ナノ粒子が小腸から直接取り込まれ FFB のら、これらのエンドサイトーシス経路を介して、薬物非晶質ナノ粒子が小腸から直接取り込まれ吸収性が改善したことが示唆された。
FFB の吸収性が改善したことが示唆された。
消化管における FFB の吸収 flux に対する、溶解 FFB 及び薬物非晶質ナノ粒子それぞ
消化管における FFB の吸収 flux に対する、溶解 FFB 及び薬物非晶質ナノ粒子それぞれのれの寄与を定量的に解析することを目的として、ラット小腸における溶解 FFB 及び薬寄与を定量的に解析することを目的として、ラット小腸における溶解 FFB 及び薬物非晶質ナノ粒
物非晶質ナノ粒子の見かけの透過係数(Papp, dissolved 及び Papp, droplet)を用いて、Japp を以下の式
子の見かけの透過係数 (Papp, dissolved 及び Papp, droplet ) を用いて、Japp を以下の式で定義した。
で定義した。
𝐽𝐽!"" = 𝑃𝑃!"",$%&&'()*$ 𝐶𝐶$%&&'()*$ + 𝑃𝑃!"",$+'"(*, 𝐶𝐶$+'"(*,

ここで、Cdissolved 及び Cdroplet はそれぞれ溶解した FFB 濃度及び薬物非晶質ナノ粒子濃度を
ここで、C dissolved 及び C droplet はそれぞれ溶解した FFB 濃度及び薬物非晶質ナノ粒子濃度示す。FFB/HPMC PM 懸濁液では薬物非晶質ナノ粒子がなく、溶解 FFB 以外は µm オーを示す。FFB/HPMC PM 懸濁液では薬物非晶質ナノ粒子がなく、溶解 FFB 以外は µm オー
ダーのサイズの FFB 結晶として存在している。そのため、FFB/HPMC PM 懸濁液投与時
ダーのサイズの FFB 結晶として存在している。そのため、FFB/HPMC PM 懸濁液投与時にに得られた Japp は大部分が溶解 FFB に起因するものであると仮定し、FFB/HPMC PM 懸濁液中の Japp (Table 2)及び FFB 溶解量(Table 1)を用いて Papp, dissolved を算出した。FFB/HPMC
PM 懸濁液から得られた Papp, dissolved、溶液 NMR により得られた FFB/HPMC ASD 懸濁液
中の非晶質薬物濃度、及び FFB 溶解量(Table 1)を用い、FFB/HPMC ASD 懸濁液の Papp,
83

dropletを算出した。FFB/HPMC ASD 懸濁液(1000/9000 µg/mL)では Papp, droplet の値は 15.3 ×

得られた Japp は大部分が溶解 FFB に起因するものであると仮定し、FFB/HPMC PM 懸濁液
中のJapp (Table 2) 及び FFB 溶解量 (Table 1) を用いて Papp, dissolved を算出した。FFB/HPMC
PM 懸濁液から得られた Papp, dissolved 、溶液 NMR により得られた FFB/HPMC ASD 懸濁液
中の非晶質薬物濃度、及び FFB 溶解量 (Table 1) を用い、FFB/HPMC ASD 懸濁液の Papp,
droplet を算出した。FFB/HPMC ASD 懸濁液 (1000/9000 µg/mL) では Papp, droplet の値は15.3 × 10 − 6 cm/s、FFB/HPMC ASD 懸濁液 (500/9000 µg/mL) では 16.8 × 10 − 6 cm/s とな
り、同程度の値を示した。両 FFB/HPMC ASD 懸濁液中で形成される薬物非晶質ナノ粒子のサイズ分布やその安定性には有意な違いが認められていない結果は、両 FFB/HPMC ASD 懸
濁中の Papp, droplet が同等の値を示した結果を支持するものであった。また、Papp, dissolved は Papp,
droplet の 110–130 倍となり、薬物非晶質ナノ粒子のラット小腸における見かけの透過係数は溶解

FFB と比較して顕著に小さいことが示された。一方、薬物吸収速度は各成分の透過性及びそれぞれの成分の濃度に依存する。FFB/HPMC ASD 懸濁液において C dissolved は約 2 µg/mL であったのに対し、FFB/HPMC ASD 懸濁液 (1000/9000 µg/mL) 及び FFB/HPMC ASD 懸濁液 (500/9000 µg/mL) 中の Cdroplet はそれぞれ 995 µg/mL 及び 498 µg/mL であり、C dissolvedの 250–500 倍近い値となっている。その結果、溶解 FFB と比較して透過効率が顕著に小さいにも関わらず薬物非晶質ナノ粒子が FFB 吸収性改善に大きく寄与したと考察した。
非晶質製剤による難水溶性薬物の吸収性改善は、薬物過飽和の形成による受動拡散を介した吸収改善が重要であると考えられてきた。本研究で用いた FFB の最大過飽和度 ( 非晶質溶
解度 / 結晶溶解度 ) は約 8.5 倍であり、過去に報告されている難水溶性薬物の最大過飽和度も数倍から数十倍程度のものが多い [9, 10]。薬物の結晶溶解度が非常に低い超難水溶性薬物の場合、非晶質製剤等を利用した薬物過飽和形成のみでは時に吸収性改善が不十分であることが予想される。しかし、本研究で示されたように、薬物の非晶質溶解度と投与量の関係によっては、薬物非晶質ナノ粒子の形成が薬物吸収改善に大きく寄与することが示された。溶解した薬物濃度を大きく上回る量の薬物非晶質ナノ粒子の形成により、これまでの過飽和製剤を凌駕する消化管吸収性改善を実現できる可能性がある。

5、まとめ
FFB/HPMC ASD 懸濁液からの FFB 吸収性は FFB/HPMC PM 懸濁液と比較して顕著に改善することが示された。また、薬物非晶質ナノ粒子量に依存した吸収性改善が認められた。
FFB 過飽和形成による吸収改善に加え、LLPS により生じた薬物非晶質ナノ粒子が小腸上皮細胞から直接取り込まれることにより、FFB の消化管吸収性を改善したと考察した。本研究で得られた知見は、難水溶性薬物の経口吸収性を効果的に改善する薬物非晶質ナノ粒子形成型固形
製剤設計の一助になると期待される。

84

6、調査・研究発表 ( 口頭または誌上発表 )Yoshikawa, E., Ueda, K., Hakata, R., Higashi, K., & Moribe, K. (2024). Quantitative
Investigation of Intestinal Drug Absorption Enhancement by Drug-Rich Nanodroplets
Generated via Liquid–Liquid Phase Separation. Molecular Pharmaceutics.

7、引用文献1. Taylor, L.S. and G.G.Z. Zhang, Physical chemistry of supersaturated solutions andimplications for oral absorption. Adv. Drug Deliv. Rev., 2016. 101: p. 122-142.
2. Miller, J.M., et al., A win–win solution in oral delivery of lipophilic drugs:
Supersaturation via amorphous solid dispersions increases apparent solubility without
sacrifice of intestinal membrane permeability. Mol. Pharm., 2012. 9 ( 7 ) : p. 2009-2016.
3. Ilevbare, G.A. and L.S. Taylor, Liquid–liquid phase separation in highly supersaturated
aqueous solutions of poorly water-soluble drugs: Implications for solubility enhancing
formulations. Cryst. Growth Des., 2013. 13 ( 4 ) : p. 1497-1509.
4. Mosquera-Giraldo, L.I. and L.S. Taylor, Glass–liquid phase separation in highly
supersaturated aqueous solutions of telaprevir. Mol. Pharm., 2015. 12 ( 2 ) : p. 496-503.
5. Indulkar, A.S., et al., Exploiting the phenomenon of liquid–liquid phase separation forenhanced and sustained membrane transport of a poorly water-soluble drug. Mol.
Pharm., 2016. 13 ( 6 ) : p. 2059-2069.
6. Sugano, K., Estimation of effective intestinal membrane permeability considering bile
micelle solubilisation. Int. J. Pharm., 2009. 368 ( 1 ) : p. 116-122.
7. Sugano, K., Possible reduction of effective thickness of intestinal unstirred water layer
by particle drifting effect. Int. J. Pharm., 2010. 387 ( 1 ) : p. 103-109.
8. Rejman, J., et al., Size-dependent internalization of particles via the pathways ofclathrin- and caveolae-mediated endocytosis. Biochem. J., 2004. 377 ( 1 ) : p. 159-169.
9. Almeida e Sousa, L., et al., Assessment of the amorphous “Solubility” of a group of
diverse drugs using new experimental and theoretical approaches. Mol. Pharm., 2015.
12( 2 ) : p. 484-495.
10. Indulkar, A.S., et al., Crystallization from supersaturated solutions: Role of lecithin andcomposite simulated intestinal fluid. Pharm. Res., 2018. 35 ( 8 ) : p. 158.

85

Table 1.
Dissolved FFB concentration in FFB/HPMC PM suspension (1000/9000 µg/mL), FFB/
Table 1. Dissolved FFB concentration in FFB/HPMC PM suspension (1000/9000 µg/mL),
HPMC ASD suspension (1000/9000 µg/mL), and FFB/HPMC ASD suspension (500/9000
FFB/HPMC
ASD suspension (1000/9000 µg/mL), and FFB/HPMC ASD suspension (500/9000µg/mL) at 37°C ( n = 3, mean ± S.D.)µg/mL) at 37°C (n = 3, mean ± S.D.)
Table 1. Dissolved FFB concentration in FFB/HPMC PM suspension (1000/9000 µg/mL),
FFB concentration
FFB/HPMC ASD suspension (1000/9000 µg/mL), Dissolved
and FFB/HPMC
ASD suspension (500/9000
Sampleµg/mL) at 37°C (n = 3, mean ± S.D.)
Freshly prepared
2.5 h stored

FFB/HPMC
PM suspension
Sample(1000/9000 µg/mL)

FFB/HPMC ASD
PM suspension
FFB/HPMC
suspension(1000/9000 µg/mL)
FFB/HPMC
FFB/HPMC ASD suspension(1000/9000µg/mL)(500/9000 µg/mL)

Dissolved FFB concentration
0.23 ± 0.04 µg/mL
Freshly prepared
2.5 h stored

0.23 ± 0.04 µg/mL
1.98 ± 0.10 µg/mL
1.98 ± 0.01 µg/mL

1.98 ± 0.03
0.10 µg/mL
µg/mL
1.94

1.98 ±± 0.02
0.01 µg/mL
µg/mL
1.96

FFB/HPMC ASD suspension

1.94 ± 0.03 µg/mL
1.96 ± 0.02 µg/mL(500/9000 µg/mL)
Table 2. AUC of FFA and apparent flux of FFB (Japp) calculated from the plasma concentrationtime
in SPIP test (n = 3–4, mean ± S.D.)
Tableprofile2.
AUC of FFA and apparent flux of FFB ( Japp ) calculated from the plasma concentrationTable 2. AUC of FFA and apparent
flux of FFB (Japp)) calculated from the plasmaJapp
concentrationtime profile in SPIP
test ( n = 3–4, mean ±AUC
S.D. (μg·h/mL)
Sampletime profile in SPIP test (n = 3–4, mean ± S.D.)(× 10−3 µg/cm2·s)

FFB/HPMC
PM suspension
Sample(1000/9000 µg/mL)
FFB/HPMC
suspension
FFB/HPMC ASD
PM suspension(1000/9000 µg/mL)
FFB/HPMC ASD suspension(500/9000 µg/mL)(1000/9000µg/mL)

FFB/HPMC ASD suspension(500/9000 µg/mL)

Japp

AUC
0.20(μg·h/mL)± 0.010.04 2·s)(× 0.4110−3 ±µg/cm

8.00
0.20 ± 2.02
0.01

15.65
4.87
0.41 ± 0.04

4.54
8.00 ± 1.90
2.02

8.80 ±±4.30
15.65
4.87

4.54 ± 1.90

8.80 ± 4.30

86Figure 1. Plot of the mean particle
Figure 1.

FFB/HPMC ASD suspension (1000/9000 μg/mL)

Figursizee 1.inPlotof the mean
FFB/HPMC
ASD particle
suspension

FFB/HPMC
suspension(500/9000
μg/mL)
FFB/HPMCASDASDsuspension(1000/9000
μg/mL)

size against
in FFB/HPMC
ASD suspension
storage time.
against storage time.

against storage time.

Mean particle size (nm)FF B/ H P MC ASD suspension

Mean particle size (nm)Plot of the mean particle size in

FFB/HPMC ASD suspension (500/9000 μg/mL)
500

500 400
400 300
300 200
200 100
0

100
0

0

0

0.5

Figure 2. Cryo-TEM images of FFB/HPMC

suspensionimages(1000/9000µg/mL) and
FiFigure
gurASDe 2.2.Cryo-TEM
of FFB/HPMC
suspension
ASD FFB/HPMC
suspension ASD(1000/9000µg/mL)(500/9000
and

0.5

suspension (500/9000 µg/mL) before
and after storage at 37°C.

1.5Time (h)11.5Time (h)

2

2

2.5

2.5

FFB/HPMC ASD suspension (1000/9000 µg/mL)
preparedsample µg/mL)
FFB/HPMC ASDFreshly
suspension(1000/9000

C r y o -T E M i m a g e s o f F F B /µg/mL) before andafter storage
at 37°C.
FFB/HPMC
suspension(500/9000( 1000/9000
HPMCASDASD
suspensionµg/mL)
andFafter
37°C.
µ g /mbefore
L ) a nd
F B /storage
H P M Cat ASD

1Freshly prepared sample

100 nm

100 nm

100 nm

100 nm

2.5 h stored sample

2.5 h stored sample

100 nm

100 nm

100 nm

100 nmFFB/HPMC ASD suspension (500/9000 µg/mL)

Freshly prepared sample
FFB/HPMC ASD suspension (500/9000 µg/mL)

Freshly prepared sample

100 nm

100 nm

100 nm100sample
nm
2.5 h stored
2.5 h stored sample

100 nm

100 nm87

100 nm

100 nmFigure 3.
Solution 1H NMR spectra of (a)FFB/ H PMC PM suspension(1000/9000 μg/mL), (b) FFB/HPMC
ASD suspension (1000/9000 μg/mL),and (c) FFB/HPMC ASD suspension(500/9000 μg/mL).

Figure 4.
Plasma concentrationtime rofilesof FFA in the in situ SPIP testsof FF B/ H PMC PM suspension( 1000/9000 μg/mL) , FFB/HPMC
ASD suspension (1000/9000 μg/mL),and FFB/HPMC ASD suspension(500/9000 μg/mL) ( n = 3–4, mean ±S.D.).

88