福岡県保健環境研究所年報第44号，61－65，2017

原著
福岡県内の愛玩動物に付着したマダニにおけるSFTSウイルス及び紅斑熱群リケッチアの保有状況調査
芦塚由紀・小林孝行・吉冨秀亮・中村麻子・梶原淳睦
近年、重症熱性血小板減少症候群(SFTS)や日本紅斑熱などのマダニが媒介する感染症が、福岡県内においても報告されている。今回、福岡県内の愛玩動物に付着したマダニについて、SFTSウイルス及
び紅斑熱群リケッチアの保有状況を明らかにするために調査を行った。2014-2016年度に愛玩動物から採取された計309匹(135プール検体)のマダニについて検査したところ、SFTSウイルス及び日本紅斑熱リケッチア(Richettia japonica)は検出されなかった。Richettia japonica以外の紅斑熱群リケッチア近縁の遺伝子が、フタトゲチマダニ9検体、タカサゴキララマダニ1検体から検出されたが、人への感染例が報告されているリケッチアと近縁のものはなかった。本調査において、屋外飼育犬だけでなく室内飼育犬へのマダニの付着が見られたことから、散歩時のマダニ付着に対する防除や駆除への啓発が重要と考えられる。
［キーワード：マダニ、愛玩動物、SFTSウイルス、日本紅斑熱、紅斑熱群リケッチア］
１

はじめに近年、重症熱性血小板減少症候群(SFTS)や日本紅斑熱などのマダニが媒介する感染症が、福岡県内においても報告されている。SFTSは2013年に国内で初めて報告され、西日本を中心に毎年患者が報告されている。福岡県内では2015-2016年の間に10名の患者が報告されている1)。日本紅斑熱は近年患者数が増加しており、最近は全国で年間200名を超えている状況である。福岡県内においても、年間数例の患者が報告されている。

写真 1 フタトゲチマダニ

写真 2 タカサゴキララマダニ

マダニは発育や産卵のために動物から吸血し、その際に病原体を媒介する。福岡県内の過去の調査研究において、

SFTSウイルス及び紅斑熱群リケッチアの保有状況を明ら日本紅斑熱の媒介種であるヤマアラシチマダニやキチマかにするために調査を行ったので報告する。

ダニ、SFTSウイルスの媒介種であるフタトゲチマダニ（写真1）やタカサゴキララマダニ（写真2）が生息しているこ２とが報告されている2)。当時の報告では病原体は検出され２・１ていないが、近年の患者発生状況を考えると、病原体保有マダニの存在が推測される。

方法
検査材料

福岡県内を4ブロック（福岡、筑後、筑紫、北九州）に分け、各ブロックから1施設以上の検体採取協力動物病院

近年、シカやイノシシ、アライグマなどの野生動物の生（合計8動物病院）が選定された。2014-2016年度に協力動

息域拡大により、マダニが付着した野生動物が人の生活圏物病院において、治療、予防接種、または一時預かり等のに侵入し、そのマダニが人や愛玩動物に付着して病原体を目的で来院した犬及び猫から採取されたマダニ計309匹を媒介することが危惧されている。このため、福岡県では検査材料とした。調査時期は2014年度が9月から12月、2015

2014-2016年度の3年間に、人と動物の共通感染症対策の一年度及び2016度が6月から9月であった。

環として共通感染症発生状況等調査事業を実施した。その中で犬や猫などの愛玩動物に付着したマダニについて、
福岡県保健環境研究所（〒818-0315 太宰府市大字向佐野 39)

２・２

検査方法

採取されたマダニは種類、発育ステージ毎に鑑別及び分類し、成虫は１匹、若虫及び幼虫は5匹を目安としてプー-61-

表1 遺伝子検査に用いたプライマー及びプローブ
検査法

対象

領域

プライマー及びプローブ名

配列

文献

リアルタイム

SFTS ウイルスS 分節

S2-237s

GCAACAAGATCGTCAAGGCATCAGG

3)

PCR

Nested-PCR

紅斑熱群リケッチア

S2-400a

TGCTGCAGCACATGTCCAAGTGG

3)

S2-317MGB

5’FAM-CTGGTTGAGAGGGCA3’MGB

3)R1TCAATTCACAACTTGCCATT

4)

17kDa 抗原R2

TTTACAAAATTCTAAAAACC

4)

Rr17.61p

GCTCTTGCAACTTCTATGTT

5)

Rr17.492n

CATTGTTCGTCAGGTTGGCG

5)(Richettia japonica)
gltA

紅斑熱群リケッチア

Rj5

CGCCATTCTACGTTACTACC

4)

Rj10

ATTCTAAAAACCATATACTG

4)

RpCS.877p

GGGGACCTGCTCACGGCGG

6),7)

RpCS.1273r

CATAACCAGTGTAAAGCTG

6),7)

RpCS.896f

GGCTAATGAAGCGGTAATAA

6),7)

RpCS.1258n

ATTGCAAAAAGTACAGTGAAC

6),7)

ルし１検体とした（計135プール検体）。SFTSウイルスの検３

査は、国立感染症研究所の“ マダニからのSFTSウイルス

３・１

3)

結果及び考察マダニを採取した愛玩動物について検出マニュアル” に準拠して実施した。プールしたマダ

表 2 にマダニを採取した愛玩動物の種類を示す。3 年間

ニはバイオマッシャーⅡを用いてすり潰し、IsogenⅡ(ニで 74 匹の愛玩動物からマダニが採取された。そのうち 71

ッポンジーン)を添加してRNA抽出を行い、リアルタイム匹(97.3%)は犬であった。愛玩動物では犬がワクチン接種

RT-PCR法によりSFTSウイルスの検査を行った。さらに抽出等の目的で来院する機会が多いことが要因として考えら残渣からISOGENOME (ニッポンジーン)を用いてDNA抽出をれる。表 3 に愛玩動物の飼育場所を示す。74 匹中 34 匹4)行い、“リケッチア感染症診断マニュアル” 等に準拠して（45.9%）は屋外、19 匹（25.6%）は室内飼育であったこ

紅斑熱群リケッチアの遺伝子検査を行った。遺伝子検査にとから、室内飼育の愛玩動物もマダニ付着が見られること用いたプライマー及びプローブを表1に示す。17kDa蛋白抗がわかった。

原をコードする遺伝子を標的とし、日本紅斑熱リケッチア(Richettia japonica)DNA を 特 異 的 に 検 出 す る た め の３・２採取されたマダニの種類

Rj5-Rj10プライマーによるnested-PCRと、紅斑熱群リケッ

表 4 に 3 年間の愛玩動物からのマダニの種類別採取数を

チ ア DNA を 検 出 す る た め の R1—R2 プ ラ イ マ ー 及 び示す。3 年間で計 309 匹が採取された。種類は、2 属 5 種

Rr17.61p-Rr17.492nプライマーによるnested-PCRを行っのマダニが採取され、その中でフタトゲチマダニが 286 匹た。紅斑熱群リケッチアDNAが検出された場合は、さらに（92.6％）と最も多く、次いでキチマダニが 14 匹（4.5%）、

ク エ ン 酸 合 成 酵 素 A 遺 伝 子 (gltA) を 標 的 と し た

ヤマアラシチマダニが 6 匹(1.9%)、その他はタカサゴキラ

RpCS.877p-RpCS.1273r

ラマダニが 2 匹、オオトゲチマダニ 1 匹採取された。

プライマー及びRpCS.896f-RpCS.1258nプライマーを用いてnested-PCRを

図 1 に月別のマダニ採取割合を示す。6-11 月はフタト行った。PCR産物は2%アガロースゲル電気泳動でバンドのゲチマダニの割合が多く、特に 6-8 月は成虫の割合が多か有無を確認し、バンドが確認された検体については塩基配った。8 月-10 月は若虫の割合が多くなり、11 月はほとん列を決定し、近隣結合(Neighbor-joining, NJ) 法によりどがフタトゲチマダニの幼虫であった。キチマダニは 10系統樹解析を行った。解析ソフトウェアは塩基配列解析ソ月から増え、12 月に採取されたマダニは 3 匹であったが、フトウェアMolecular Evolutionary Genetics Analysis

すべてキチマダニであった。タカサゴキララマダニは 8 月(MEGA 5.1) を用い、検定はブートストラップ法（500回サに採取され、オオトゲチマダニは 11 月に採取された。愛ンプリング）により行った。

玩動物付着マダニの種類には季節変動が見られ、マダニの動物への嗜好性だけでなく、野外で活動しているマダニの相を反映していることが推察される。

-62-

表 3 愛玩動物の飼育場所

表 2 マダニを採取した愛玩動物の種類

表4年度

犬猫不明

計年度

室内

屋外

屋内外不明

計

2014

2302252014

411010252015

3110322015

11171332

4607171934

120742016

1700172016

計

71

1274

計

3 年間の愛玩動物からのマダニの採取数
発育ステージ

マダニの種類2016年度
2014，2015年度

計

100%

成虫♂

9成虫♀

65

若虫

90

幼虫

122

採小計286取成虫♂

7割

成虫♀

6

合 50%

若虫

1小計

14

成虫♀

3幼虫

3小計

6

タカサゴキララマダニ

成虫♀

2オオトゲチマダニ

若虫

1

フタトゲチマダニ

キチマダニ

ヤマアラシチマダニ

合計

(26)

(47)

(76)

(129)

(18)

(10)

(3)

(309)

*括弧内は
採取マダニ数

90%
80%
70%

タカサゴキララマダニ
オオトゲチマダニ

60%

ヤマアラシチマダニ
キチマダニ
フタトゲチマダニ幼虫

40%

フタトゲチマダニ若虫
フタトゲチマダニ♀

30%

フタトゲチマダニ♂

20%
10%
0%
6月

7月

8月

9月

10月

11月

12月

計

309
図 1 マダニの月別採取割合

３・３

マダニにおける SFTS ウイルス及び紅斑熱群リケれているリケッチアと近縁のものは検出されなかった。

ッチアの検査結果
採取されたマダニは、種類毎、発育ステージ毎に分類し、４まとめ

3 年間で計 135 プール検体を検査した。その結果をまとめ2014-2016 年度に福岡県内の計 74 匹の愛玩動物（犬またものを表 5 に示す。SFTS ウイルス及び Richettsia

たは猫）から採取されたマダニ計 309 匹を調査した。マダjaponica は検出されなかった。Richettsia japonica 以外

ニの種類は 92.6％がフタトゲチマダニ、4.5％がキチマダの紅斑熱群リケッチア近縁の遺伝子が、10 検体から検出ニであった。その他はヤマアラシチマダニ、タカサゴキラされた。図 2 に紅斑熱群リケッチアの系統樹を示す。フタラマダニ、オオトゲチマダニであり、マダニの種類には季ト ゲ チ マ ダ ニ か ら 検 出 さ れ た 遺 伝 子 に は Richettsia

節変動が見られた。採取されたマダニについて検査したと

sp.LON-13 に近縁のものが 8 検体、Rickettsia sp. Hf332

ころ、SFTS ウイルス及び Richettia japonica は検出されに近縁のものが 1 検体あった。また、タカサゴキララマダなかった。Richettia japonica 以外の紅斑熱群リケッチ

ニからは Candidatus Rickettsia に近縁の遺伝子が 1 検体

アについては近縁の遺伝子が、フタトゲチマダニ 9 検体、検出された。紅斑熱群リケッチアについては、Rickettsia

タカサゴキララマダニ 1 検体から検出されたが、人への感

heilongiiangesis 、 Rickettsia helvetica 、 Rickettsia

染が報告されているリケッチアと近縁のものはなかった。

tamurae など、国内で人への感染例が報告されているもの

今回の調査では、採取されたマダニから SFTS ウイルスがあるが8),9),10),11)、本調査では、人への感染例が報告さ及び Richettia japonica は検出されなかったが、国内で-63-表5SFTS ウイルス及び紅斑熱群リケッチアの検査結果
検査結果

調査年度

採取動物数 採取マダニ数

検体数＊SFTSV

日本紅斑熱リケッチア

紅斑熱群リケッチア*

─20142511741陰性

─

2015

3211354陰性

陰性

2016177940陰性陰性

計

74309

135

Richettsia sp.(5)Candidatus Richettsia(1)Richettsia sp.(4)* 括弧内は紅斑熱群リケッチア近縁遺伝子が検出された検体数●2016 Fr23
●2016 Fr22
●2016 Fr19b)●2015 Fr5587

フタトゲチマダニ由来●2015 Fr52
●2015 Fr38a)

34●2015 Fr1769●2015 Fr1
AB516964.1/ Rickettsia sp. LON-13◆AY280709.1/ Rickettsia heilongjiangensis

73◆U59724.1/ Rickettsia japonica●2016 Fr23AB114803.1/ Rickettsia sp. Hf332●2016 Fr223996 ●2016 Fr33

●2016 Fr19

フタトゲチマダニ由来●2015 Fr55
89CP001612.1/ Rickettsia africae●2015 Fr52

CP000848.1/ Rickettsia rickettsii

62 66●2015 Fr38

52CP001227.1/ Rickettsia peacockii●2015 Fr178237U59734.1/ Rickettsia sibirica●2015 Fr1

AF022817.1/ Rickettsia honei

AB516961.1/ Rickettsia sp. LON-13

93

23

44CP000683.1/ Rickettsia massiliae◆ AB473811.1/ Rickettsia heilongiiangesis

82 U59721.1/ Rickettsia rhipicephali

AF027124.1/ Rickettsia honei

U74756.1/ Rickettsia montana

CP001227.1/ Rickettsia peacockii

3588

CP000848.1/ Rickettsia rikettsii

9766

AB114819.1/ Rickettsia sp.

60

U17008.1/ Rickettsia parkeri

61

DQ100163.1/ Rickettsia monacensis◆AF394896.1/ Rickettsia tamurae

22AF445384.1/ Rickettsia sibrica

CP000847.1/ Rickettsia akari

CP001612.1/ Rickettsia africae ESF-5

71

U59718.1/ Rickettsia australis

39AE006914.1/ Rickettsia conorii

CP000053.1/ Rickettsia felis

CP000683.1/ Rickettsia massiliae

8047◆U59723.1/ Rickettsia helvetica

35

U11020.1/ Rickettsia rhipicephali●2016 Fr33

57

フタトゲチマダニ由来

AB114798.1/ Rickettsia sp.
99

AF503167.2/ Candidatus Rickettsia

91

U11017.1/ Rickettsia montana

40

41CP000409.1/ Rickettsia canadensis str. Mc

82

35 AB114804.1/ Rickettsia sp. Hf332

56

NC003103.1/ Rickettsia conorii◆D16515.1/ Rickettsia japonica

53

フタトゲチマダニ由来

U59732.1/ Rickettsia parkeri

99◆AJ427881.1/ Rickettsia helvetica●2015 Fr34
NC000963.1/ Rickettsia prowazekii
タカサゴキララ
NC006142.1/ Rickettsia typhi
マダニ由来CP000087.1/ Rickettsia bellii

M74042.1/ R.australis
8473100

CP000847.1/ Rickettsia akari

0.020

EF380355.1/ Rickettsia monacensis strain

図 2. 紅斑熱群リケッチアの系統樹

100 ◆AB114825.1/ Rickettsia tamurae

CP000053.1/ Rickettsia felis

系統樹の検定はブートストラップ法（500 回サンプ

AE017197.1/ Rickettsia typhi
100

CP001584.1/ Rickettsia promazekii

CP000409.1/ Rickettsia canadensis str. Mc

99

KP769801.1/ Candidatus Rickettsia
67●2015 Fr34

タカサゴキララマダニ由来
CP000087.1/ Rickettsia belliiリング）により行った。
a)17KDa 蛋白抗原遺伝子（390bp）b)

gltA 遺伝子 （321bp）● 本研究のマダニ検体から検出された遺伝子（採取年度-検体番号）

0.020◆ 国内で人への感染が報告されているリケッチア-64-

SFTS ウイルスの媒介種とされているフタトゲチマダニが文献

愛玩動物に多く付着していることがわかった。また、

1) 国 立 感 染 症 研 究 所 ： 感 染 症 発 生 動 向 調 査 週 報

Richettia japonica の媒介種であるヤマアラシチマダニ（https://www.niid.go.jp/niid/ja/idwr.html）．とキチマダニの付着が見られた。これらのマダニは室内飼

2) 石 橋 哲 也 ら ： 福 岡 県 保 健 環 境 研 究 所 年 報 , 第 36号,85-88, 2009.

育犬にも付着が見られたことから、散歩時のマダニ付着に注意する必要がある。さらに、マダニ由来病原体としては、3) 国立感染症研究所：マダニからのSFTSウイルス検出マ
ニュアル.

紅斑熱群リケッチアについても分布や病原性など不明な点が多いことから、今後も県内に生息するマダニについて

4) 国立感染症研究所：リケッチア感染症診断マニュアル,
2000.

調査が必要と考えられる。

5) H. Noda et a1.: AEM, 63, 3926-3932, 1997.
謝辞

6) V. ROUX et a1.: Int. J. Syst. Bacteriol., 47, 252-261,

本調査は福岡県医師会及び福岡県獣医師会の協力によ1997.

り、福岡県人獣共通感染症発生状況等調査事業の中で実施

7) H. Hiraoka et a1.: J. Vet. Med. Sci., 67, 1217-1222, 2005.

しました。関係各位に深謝いたします。また、マダニの調

8) 安藤秀二ら：IASR,Vol.31,136-137, 2010.

査を実施するにあたり、マダニの鑑別方法等について研修

9) 岸本寿男ら：日本内科学会雑誌,104巻,2011-2019,2016.

を実施していただきました山口大学共同獣医学部の前田健教授、高野愛准教授、馬原アカリ医学研究所の馬原文彦

10) 高田伸弘ら：IASR,Vol.27,40-41, 2006.

先生、藤田博己先生に深謝いたします。

11) K. Imaoka et a1.: Case Rep. Dermatol., 3, 68-73, 2011.

（英文要旨）

Survey of severe fever with thrombocytopenia syndrome virus and spotted fever group
Rickettsia in ticks from companion animals in Fukuoka
Yuki ASHIZUKA, Takayuki KOBAYASHI, Hideaki YOSHITOMI, Asako NAKAMURA
and Jumboku KAJIWARA
Fukuoka Institute of Health and Environmental Sciences,
Mukaizano 39, Dazaifu, Fukuoka 818-0135, Japan
Tick-borne infectious diseases, such as severe fever with thrombocytopenia syndrome (SFTS) and Japanese spotted fever werereported in Fukuoka recently. In 2014–2016, we collected 309 ticks from companion animals in Fukuoka to investigate thepresence of SFTS virus and spotted fever group Rickettsia. SFTS virus and Rickettsia japonica were not detected. DNA of several
spotted fever group Rickettsia were detected in samples of Haemaphysalis longicornis and Amblyomma testudinarium. However,no Rickettsia with reported pathogenicity to human were detected. Many ticks were found attached to dogs that lived bothoutdoors and indoors. Therefore, after walking indoor dogs outside, it is necessary to check for and remove ticks.
[Key words ; Tick, companion animal, SFTS, Rickettsia japonica, Japanese spotted fever]-65-