終了報告論文

油症等のダイオキシン類による人体影響と遺伝要因との関連の解明に関する研究
研究期間（平成 25 年度～27 年度）

梶原淳睦 *、平川博仙 *、堀塚谷裕子 *、宮脇就英 *、高橋浩司 *、安武大輔 *、新谷依子 *、飛石和大 *、崇 *、櫻井利彦 *、新谷俊二 *、高尾佳子 *、西古江増隆 *＊、岸巧 *、香月進 *、玲子 ***、月森清巳 ****
要

旨油症事件は PCB 及びダイオキシン類が食品に混入して摂食された食中毒事例であり、PCB 及びダイオキシン類によるヒト健康への影響解明の基礎資料として研究されてきた。平成 13 年から 26 年までに油症認定患者 2,277 名(平成 27 年 2 月現在）の約 39.8％（907 名）の血液中ダイオキシン類濃度を測定し、濃度分布の実態を解析した結果、油症患者の血液中ダイオキシン類濃度は一般住民の血液中ダイオキシン類濃度と比較して、毒性の強い 2,3,4,7,8-PeCDF 濃度が平均で約 10 倍、最大値で 100 倍近い高い濃度を示した。油症患者のダイオキシン類の人体影響と遺伝要因との関係では、芳香族炭化水素受容体（AhR）等の遺伝子型との関連を解析した。次に、同居家族認定の油症患者の血液中ダイオキシン類濃度を集計し比較すると一般人に近い値であった。また、母児間のダイオキシン類移行について解析した
結果、母体から胎児への移行は胎盤で抑制されていると考えられ、子の血液中ダイオキシン類濃度は母乳摂取による影響が大きいことが示唆された。
［キーワード : 油症，ダイオキシン類，PCDF, 血液，健康影響，次世代］
１

はじめにン･PCB 類一斉分析法を用い、事件発生後 40 年が経過した油症事件は 1968 年に発生した世界初の PCB 及びダイオ後も油症患者の血液中に残るダイオキシン類の同族体ごキシン類が食品に混入して摂食された食中毒事例であり、との詳細な濃度を明らかにした。これらのダイオキシン事件発生初期より長期に亘り調査研究されてきた。ダイオ類濃度の測定データと全国の油症一斉検診結果を油症デキシン類の人体影響を解明するには、油症事件のようなダータベースに蓄積し、油症患者の血液中ダイオキシン類イオキシン類がヒトに大量に摂取された事例を詳細に追濃度と検診項目の異常や臨床症状、AhR 等の遺伝子型を跡調査することが非常に有効な手段と考えられている。こ比較することで 3)、ダイオキシン類のヒトの健康への影のため、油症研究は PCB 及びダイオキシン類によるヒト健響が明らかになると考えられている。さらに、平成 24

康への影響解明の基礎資料として注目されてきた。当研究年(2012 年)12 月に油症診断基準追補(同居家族の条件追所は長期に亘り油症患者の認定に必要な血液中の PCB、補)が加わり、同居家族による油症患者が認定されている。

PCQ 及び PCDF 濃度の分析を担当してきた。その過程で、この同居家族認定の油症患者の血液中ダイオキシン類濃少量(5g)の血液を用いた PCB 及びダイオキシン類の一斉度を集計し、従来の油症認定患者と比較した 4)。次に、油分析法 1)､2)を開発した。その結果、全国油症一斉検診時に症研究から発展し、妊婦の血液中のダイオキシン・PCB 類多くの被験者から採血し血液中のダイオキシン類の濃度等濃度を測定することにより胎児期・乳幼児におけるダイを同族体ごとに明らかにすることが可能になった。

オキシン類の曝露量を調査し、先天性異常や発育障害との関本研究では、当研究所で開発した微量高感度ダイオキシ連といった次世代への影響を調査した。

*福岡県保健環境研究所（〒818-0135 福岡県太宰府市大字向佐野３９）**九州大学医学部（〒812-8582 福岡市東区馬出 3 丁目 1 の 1）***北大環境健康科学研究教育センター （〒060-0812 札幌市北区北 12 条西 7 丁目）****福岡市立こども病院（〒810-0063 福岡市中央区唐人町2丁目5の1）

２

研究方法２－１

調査対象キシン類濃度を分析した油症認定患者 907 名の平成 26
年末現在の平均年齢は 65.6 歳（31-97 歳）で、内訳は男

平成 25-27 年の全国の油症検診受診者の総数は 2,079

性 422 名、女性 485 名であり、これは平成 27 年 2 月の全名(速報値)で､受診者の検診データを油症データベース認定患者（2,277 名）の約 39.8％に相当する。図 1 に血に登録した。このうち血液中ダイオキシン類検査対象者

液中 2,3,4,7,8-PeCDF 濃度の濃度分布を示した。血液中は総数 1,008 名（認定患者 572 名、未認定者 436 名）で2,3,4,7,8-PeCDF 濃度の分布は 2.7～1,792pg/g lipid とあった。平成 27 年度の検診データは解析中であるため、広範囲であるが約 57％の認定患者は 50pg/g lipid 未満

平成 13 年(2001 年)から平成 26 年(2014 年)までの 14 年であった。

間に血液中ダイオキシン類濃度を分析した油症認定患者
は 907 名の検査結果を用いて解析した。

図１ 油症認定患者の血液中2,3,4,7,8-PeCDF濃度分布（n=907）（pg/g lipid）

化学物質の先天性異常への影響を解明するため、北海
10未満： 97人, （11%）

130 以上：226人（25%）

道コホートで採取された、先天性心疾患の出産例及び対照群の 345 件のさい帯血中ダイオキシン・PCB 類濃度を10～20未満： 189人,（21%）

測定した。
120～130未満：8人（0.9%）
110～120未満：10人（1.1%）

２－２

分析方法

血液中ダイオキシン･PCB 類の抽出･精製方法は①凍結

100～110未満：21人（2.3%）
20～30未満： 101人, （11%）
90～100未満： 21人, （2.3%）
80～90未満： 26人, （2.9%）30～40未満： 70人（7.7%）

70～80未満： 19人, （2.1%）

乾燥による血液の脱水、②高速溶媒抽出装置（ASE）によ40～50未満： 57人, （6.3%）
60～70未満： 30人, （3.3%）

50～60未満, 32人（3.5%）

る脂肪抽出、③カラムクロマトグラフィー(硝酸銀-シリカゲル、活性炭)による精製の 3 段階の工程で構成されている。胎盤等ははさみで細切後血液と同様凍結乾燥－ASE－カラムクロマトグラフィーによる抽出・精製、さい帯は凍結乾燥後はさみで細切－ASE－カラムクロマトグラ
フィーによる抽出・精製を行った。体脂肪は溶媒による抽出後カラムクロマトグラフィーによる精製を行った。
試料中のダイオキシン類（PCDD（７種類）、PCDF（10種類）、ノンオルソ PCB（４種類））の同定・定量には、溶媒除去大容量注入装置（SCLV injection system，SGE製）を装着した高分解能ガスクロマトグラフ／質量分析計（HP 6890GC／Micromass AUTOSPEC ULTIMA）を用いた。
モノオルト PCB（８種類）を含む PCB 類（66 種類）は高分解能ガスクロマトグラフ／質量分析計を用い、スプリットレスインジェクション方式で測定した。OH-PCB の測定は液体クロマトグラフ／質量分析計（LC/MS/MS）を用いた。
油症検診で蓄積された症状や血液中ダイオキシン濃度等のデータはデータベース化され､必要に応じ遺伝子情報等との比較、解析および評価に使用されている。また、
平成 20 年度に油症患者の健康実態調査が行われ、油症発症当時からの症状や治療内容、家族状況等が調査・集計された。
３

結果及び考察３－１ 油症患者の血液中ダイオキシン類の分析結果
平成 13 年度から 26 年度までの 14 年間に血液中ダイオ３－２ 血液中ダイオキシン類濃度の半減期と AhR の一塩基多型(SNP)の関係 3)
AhR 遺伝子のプロモーター領域の SNP（C⇒T の変異）調査結果と血液中ダイオキシン類濃度の半減期の関係を
血液中 2,3,4,7,8-PeCDF 濃度が 50pg /g lipid 以上の油症患者を対象に解析すると、調査対象の油症患者の SNP
では T/T 型は人数が少なく解析対象にならなかった。C/C型と C/T 型で比較すると C/C 型よりも C/T 型において半減期が長いという結果であった。しかし、半減期の長さは、症状の違いと関係していると報告されており、特に皮膚的症状が強い患者の半減期が短い。C/T 型の患者の方が、症状が弱いという可能性が考えられる。油症発生
後 40 年が経過しており、因果関係が逆の可能性もある。
つまり、症状が強く出ていた患者が短い半減期で早く排出され、先に症状が弱くなる可能性も考慮する必要がある。また、T/T 型の調査対象の油症患者が少なかったことも考慮する必要がある。今後さらに対象人数を増加し、状況を合わせることにより適切な推定が可能であると考える。
３－３

同居家族による油症患者認定者の血液中ダイオキシン類の分析結果 4)

平成 24 年(2012 年)12 月に油症診断基準追補(同居家族の条件追補)が加わったことから、これまでに 250 名以上が同居家族による油症患者と認定されている。このうち

平成 25 年度に 51 名、平成 26 年度に 24 名の同居家族認

３－５ さい帯血中ダイオキシン、PCB 類濃度の評価 6)

定患者が油症検診を受診した。油症認定患者 907 名のう北海道コホートで採取された、先天性心疾患の出産例

ち同居家族認定患者 75 名とその他の油症患者 832 名及び及び対照群の 345 件のさい帯血中のダイオキシン類の総平成 16 年度に福岡県で実施した一般住民の血液中ダイTEQ、PCDD、PCDF、non-ortho PCB 及び mono-ortho PCB

オキシン類濃度を比較すると、同居家族認定患者を除く濃度はそれぞれ 5.7、3.1、1.2、1.4 及び 0.1 pg TEQ/g

油症認定患者の平均総 TEQ（WHO2005）は 94pg TEQ/g

lipid で総 TEQ は血液に比べ 34％の低い値であった。総lipid 、同居家族認定患者および対照群の一般住民の平PCB 濃度は 49ng/g lipid であり、さい帯血中の総 PCB 濃

均総 TEQ（WHO2005）はそれぞれ 36、37pg TEQ/g lipid

度も血液に比べ 30％低い値であった。また、異性体別にであった。同居家族認定患者と一般住民の平均総 TEQ

見ると 6 塩素異性体が全体の 34.3％を占め、5-7 塩素異（WHO2005）はほぼ同じ値であった。同居家族認定者を除性体で 61.9％を占めた。
個別異性体では PCB-153 が総 PCB

く油症認定患者、同居家族認定患者および対照群の一般濃度の 16.4％を占め、総 PCB 濃度と極めて顕著な正の相住民の血液中 2,3,4,7,8-PeCDF 濃度の平均値はそれぞれ関を示した。PCB-153 濃度と総 TEQ にも正の相関が見ら

120、29 および 17pg /g lipid であった。同居家族認定れた。このことは血液中 PCB-153 濃度を測定することで患者の血液中 2,3,4,7,8-PeCDF 濃度の平均値は認定患者ダイオキシン類濃度が推定できる可能性を示唆してお全体の平均値より低く､一般人に近い値であった。一方、り、ダイオキシン類のリスク評価を測定が容易な PCB 濃

同居家族認定患者の血液中 2,3,4,7,8-PeCDF 濃度の分布度の測定で代替できる可能性が示唆された。

は 4.4～320 pg /g lipid であり、50pg/g lipid を超える受診者が 10 名存在した。これらの方々は従来の認定基30000準でも患者認定されると考えられた。

R² = 0.4763

25000

PCB＃１５３ (ng/g lipid）

３－４ 母児のダイオキシン類の曝露量と継世代移行量の評価 5)
油症患者の母親と油症発症後に生まれた子の血液中ダイオキシン類濃度を比較しダイオキシン類の継世代移行量を解析した。油症発生後に出産した者で、油症検診時に血液中ダイオキシン類濃度を測定している者は、親 342000015000
100005000人、子 54 人であった。母の血液中ダイオキシン類濃度と0子の血液中ダイオキシン類濃度関係を見ると母の PCDF0濃度が高い方が、子の PCDF 濃度が高いことが分かった。

510152025TEQ ( pg/g lipid )次に子に与えた栄養別、子の血液中ダイオキシン類濃度

Correlation between TEQ and PCB-153

を比較すると、「混合」群、「ミルク」群、「母乳」群の順に子の PCB 濃度分布幅が大きくなることが分かった。従って、子の血液中ダイオキシン類濃度は母乳摂取による影響が大きいことが示唆された。

４まとめ
油症研究は PCB 及びダイオキシン類によるヒト健康への影響解明の基礎研究と考えられてきた。平成 13 年から 26年までに油症認定患者 2,277 名(平成 27 年 2 月現在）の約 39.8％（907 名）の血液中ダイオキシン類濃度を測定
し、濃度分布の実態を解析した結果、油症患者の血液中ダイオキシン類濃度は一般住民の血液中ダイオキシン類濃度と比較して、毒性の強い 2,3,4,7,8-PeCDF 濃度が平均で約 10 倍、最大値で 100 倍近い高い濃度を示した。油症患者のダイオキシン類の人体影響と遺伝要因との関係では、芳香族炭化水素受容体（AhR）等の遺伝子型との関連を解析した結果、C/T 型において半減期が長いという結果が示唆された。次に、平成 24 年(2012 年)12 月に油症診断基準追補(同居家族の条件追補)が加わった同居家族

認定の油症患者の血液中ダイオキシン類濃度を集計し比文献

較すると、同居家族認定患者の血液中ダイオキシン類濃1) T. Todaka, et al.: New protocol for dioxin analysis

度は一般人に近い値であった。また、油症患者の母児間of blood. Fukuoka Igaku Zasshi. 94. 148-157. 2003.のダイオキシン類移行について解析した結果、子の血液

2) T. Iida and T. Todaka.: Measurement of dioxin in

中ダイオキシン類濃度は母乳摂取による影響が大きいこhuman blood: Improvement of analytical method.とが示唆された。

Industrial Health. 41. 197-204. 2003.
3) 松本伸哉他, :カネミ油症患者のダイオキシン類の半５

行政的意義，貢献

本研究の成果は油症患者をはじめヒト血液中のダイオ減期と芳香族炭化水素受容体(AhR)の SNP の関係. 福岡医学雑誌,106(5),139-143, 2015.

キシン類汚染度を正確に把握し，ダイオキシン類の人体蓄

4）梶原淳睦他,:油症認定患者の血液中ダイオキシン類濃積量評価及び健康影響の解明等はダイオキシン対策のた度の分布. 福岡医学雑誌,106(5),149-153, 2015.

めの基礎資料となるものと思われる。有害物質を精密に計5)和氣徳夫他，: ダイオキシン類曝露による継世代健康測してデータを蓄積すること，さらに迅速に分析するための影響と遺伝的感受性要因との関連に関する研究，環境研

方法を開発することは，県民の健康被害を未然に防ぐことに究総合推進費平成 26 年度報告書，2015

繋がり，ダイオキシン類の汚染問題が発生した場合の円滑で

6)J.Kajiwara, et al.: CONGENER-SPECIFIC COMPARISON

速やかな行政対応に寄与する。開発された分析方法は，本研

OF DIOXIN AND PCB CONCENTRATIONS IN UMBILICAL CORD

究所におけるダイオキシン類分析法として運用されるのみ

BLOOD COLLECTED IN HOKKAIDOU, JAPAN, Organohalogen

ならず、高精度かつ迅速な試験法として，他の分析機関等へ

Compounds. 77. 405-408. 2015の技術移転も期待される。