平成３０年１１月５日
京都府立大学 生命環境科学研究科
九 州 大 学
熊 本 大 学

植物の根毛側面を硬くするしくみの解明に成功〜根の毛はなぜまっすぐに伸びる？〜
これまで根毛側面の伸長抑制メカニズムの分子機構は全く明らかになっていませんでしたが，この度，熊本大学の檜垣匠准教授は，京都府立大学の佐藤雅彦准教授を中心とする国際共同研究グループ＊に参画し，モデル植物シロイヌナズナを用いて，根毛の微小管を制御し，側面の細胞壁を硬くすることで，根毛が細長く真っ直ぐ伸びながら，その形を維持する仕組みを解明しました。
今後，この仕組みを活用して，側面強度を増強した根毛を持つ植物体を作出することで，栄養源が乏しい土壌中から効率よく栄養を吸収できる植物体を開発できる可能性があります。
本研究成果は，国際学術誌 Nature Plants （ネイチャー・プランツ）に１１月２日午後４時(GMT)にオンライン掲載される予定です。
論文タイトル：PI(3,5)P2 mediates root hair shank hardening in Arabidopsis
著者：Tomoko Hirano, Hiroki Konno, Seiji Takeda1, Liam Dolan, Mariko Kato, Takashi Aoyama, Takumi Higaki, Hisako Takigawa‑Imamura, and Masa H. Satodoi.10.1038/s41477‑018‑0277‑8【研究概要】
植物の表皮細胞の一部が管状に外側に伸びた構造体である「根毛」は，根の表面積を大きくして土壌中の水や養分を吸収する役割があります。
根毛の細長い管状構造を作るためには，先端部分が伸びると同時に根毛の側面部分の伸長を抑制しないと，風船上に膨らんで細長い管状構造を形成できません。また，土の抵抗に逆らって細長く伸びるためには側面の硬さが必要です。

根毛は，膨圧という内部からの圧⼒のはたらきなどにより伸⻑するが，根⽑の硬さが一様だと，風船状に膨らんでしまう。これを防ぐために，根毛の側面には，硬い細胞壁が作られる。

今回，檜垣准教授が参画した国際共同研究グルー
プは，モデル植物シロイヌナズナを用いて，1. リン脂質の一種，ホスファチジルイノシトール3,5‑二リン酸[PI(3,5)P2]を作る酵素である FAB1と低分子量 GTPase ROP10 という分子が，根毛側面の細胞膜上で複合体を形成することで， 研究成果の概略図
シロイヌナズナ根毛側面の細胞膜上では，FAB1 が ROP10 と共同で，根毛側面の細胞膜直下の表層微小管の構造を安 PI(3,5)P2 を合成する。合成された根毛側面の PI(3,5)P2 は，表層微小管の伸⻑と細胞側⾯の細胞壁を硬くする成分の分泌を制御することで，根⽑の側⾯定化すること，を硬くしている。
2. さらに PI(3,5)P2 が目印になり，細胞壁を硬くする成分を根毛側面の細胞壁に運ぶことで，根毛の細長く，真っ直ぐな構造を形成することを明らかにしました。

問合せ先京都府立大【取材】事務局企画課 075‑703‑5212
学【研究】生命環境学部細胞動態学研究室 准教授 佐藤雅彦
TEL/FAX: 075‑703‑5448 E‑mail: mhsato@kpu.ac.jp

九 州 大 学広報室 （電話熊 本 大 学

国際先端科学技術研究機構 檜垣 匠（電話 096‑342‑3975 E‑mail thigaki@kumamoto‑u.ac.jp）

092‑802‑2130）＊国際共同研究グループ
・京都府立大学大学院生命環境科学研究科 細胞動態学研究室
特任助教 平野朋子
准教授 佐藤雅彦
・京都府立大学大学院生命環境科学研究科 細胞工学研究室
准教授 武田征士
・金沢大学 ナノ生命科学研究所
准教授 紺野宏記
・京都大学化学研究所 生体分子情報研究室
助教 加藤真理子
教授 ⻘⼭卓史・九州大学大学院医学研究院系統解剖学分野
助教 今村寿子
・熊本大学 国際先端科学技術研究機構
准教授 檜垣匠
・オックスフォード大学植物科学部 (University of OXFORD Department of Plant Sciences)
教授 Liam Dolan

【研究の詳細】
研究の背景
植物の根には，根毛と呼ばれる表皮細胞の一部が管状に外側に伸びた構造体が密生しています。根毛には，根の表⾯積を⼤きくすることで，⼟壌中の⽔や養分を吸収する役割があります。根⽑は，先端部分が特異的に伸⻑する先端成⻑という成⻑様式で伸びることが知られており，この根毛先端が伸びる仕組みについては，数多くの研究がありました。しかしながら，土壌中で根⽑の細⻑い構造を作るためには，先端部分が伸びると同時に根⽑の側⾯部分の伸⻑を抑制しながら，側面部分を硬くしないと，細⻑い管状の構造を作ることはできません。ところが，現在までに根毛側面の伸⻑抑制メカニズムの分⼦機構は全く明らかになってはいませんでした。

研究の成果
平野特任助教，佐藤准教授らの研究グループは，最初に，伸⻑中の根⽑側⾯の細胞膜にホスファチジルイノシト
ール 3 リン酸 5‑キナーゼ，FAB1 とその生成産物ホスファチジルイノシトール 3, 5 二リン酸[PI(3,5)P2] 注１が局在することを見出しました。⻘⼭教授，加藤助教らの先行研究により根⽑の先端成⻑時の根⽑先端には，ホスファチジルイノシトール 4 リン酸 5‑キナーゼ, PIP5K3 とその生成産物ホスファチジルイノシトール 4, 5 二リン酸
[PI(4,5)P2]注２が存在することが明らかになっていたので，PI(3,5)P2 とPI(4,5)P2 を蛍光標識するマーカータンパク質を同時発現するシロイヌナズナ形質転換体を作成して両者の局在性を伸⻑中の根⽑で同時観察した
ところ， PI(3,5)P2 は，根毛の側面に，そして，PI(4,5)P2 は，根毛の先端

図１シロイヌナズナ根毛細胞膜上には，FAB1, PI(3,5)P2 と PI5K3, PI(4,5)P2 が存在する二種類の領域がある。にそれぞれ分かれて存在することが明らかになりました（図１）。このことは，伸⻑中の根⽑の細胞膜に PI(3,5)P2 と PI(4,5)P2 で標識される明確に異なった領域が存在することを意味しています。
次に，根毛の側面に存在する PI(3,5)P2 が根毛の形つくりにどのように働いているかを， PI(3,5)P2 量を人為的に減少させることで調べました。その結果，寒天中で伸⻑させた根⽑の形態は，PI(3,5)P2 量が低下するとともに，太く，波打った形態になり，最図２ PI(3,5)P2 量の減少による根毛形態の変化

終的にはぷっくりと膨らんだような状態に変化しました（図２）。
PI(3,5)P2 量が低下した状態の根毛側面の機械的強度を平野特任助教，紺野准教授が原子間力顕微鏡注３で直接測定したところ，通常の根毛の半分程度の硬さしかありませんでした（図３）。つぎに根毛側面の硬さが低下した原因を調べるために，平野特任助教，檜垣准教授が，根毛の形態形成に関与する表層微小管注４の構造を調べたところ，その図３ PI(3,5)P2 量を減少させると根毛側面が弱くなる。

繊維状構造が極度に断片化していることが明らかになりました（図４）。
さらに，細胞壁に硬さを与えるはたらきのある二次細胞壁の成分であるキシラン注５の存在量が PI(3,5)P2 量の低下に応じて，極度に減少することも明らかになりました（図 5）。さらに Dolan 教授，武田准教授が，細胞骨格の制御に関わる低分子量 G タンパク質の一種である ROP(Rho‑related GTPases from plants)ファミリータンパク質注６の発現を調べたところ，ROP2 と ROP10 が根毛特異的に発現していることがわかりました。
そこで，平野特任助教，佐藤准教授が，PIP5K3

図４ PI(3,5)P2 量を減少させると表層微小管の繊維構造が破壊される。と FAB1 との相互作用を調べたところ，PIP5PK3 は ROP2 と FAB
１は ROP10 とそれぞれ特異的に相互作用していることがわかりました。これらの結果を踏まえて，今村助教が，根毛側面の PI(3,5)P2 量が表層微小管の構築と細胞壁の硬さを制御しているという仮定を導入した数理モデルを構築し，計算機シミュレーションしたところ，「寒天の抵抗で根毛の伸⻑⽅向とは逆の⼒がかかるとき，PI(3,5)P2 量の低下により側面の硬さが低下した根毛は，側面の細胞壁に抵抗による応力とひずみが不均等に生じることによって根毛の側面が歪む座屈注７と呼ばれる現象がおこる。つまり，PI(3,5)P2 量の低下がおこると，根⽑が伸⻑⽅向にひしゃげることで根毛の波打つ形態が発生する。
」ということが明らかとなりました（図 6）。これらの結果より，植物は，PI(3,5)P2 の作用により，図５ キシラン抗体による蛍光免疫染色
PI(3,5)P2 量を減少させると細胞壁のキシラン量が低下する。

根毛側面を強固にすることで，土中などで根毛をまっすぐ伸ばすことができることがわかりました。

今後の展望
PI(3,5)P2 量を人為的に操作することにより，側面強度を増強した根毛を持つ植物体を作出することで，栄養源が乏しい土壌中から効率よく栄養を吸収できる植物体を開発できる可能性があります。

図６ PI(3,5)P2 量の減少に従って，根毛の側面部分の硬さが減少することにより，根毛基部が座屈することによって，寒天中での根毛の形態が変化する。

用語説明
注１：ホスファチジルイノシトール 3, 5‑二リン酸 [PI(3,5)P2]
ホスファチジルイノシトールは，リン酸基にイノシトールが結合しているリン脂質の一種である。ホスファチジルイノシトールのイノシトール環の３位と５位の水酸基がリン酸化されたものが，ホスファチジルイノシトール 3,5‑二リン酸 [PI(3,5)P2]である。PI(3,5)P2 は，ホスファチジルイノシトール‑3 リン酸 5‑キナーゼ, FAB1 によりホスファチジルイノシトール 3‑リン酸(PI3P)の 5 位の水酸基をリン酸化することで，合成される。

注２：ホスファチジルイノシトール 4, 5‑二リン酸
ホスファチジルイノシトールは，リン酸基にイノシトールが結合しているリン脂質の一種である。ホスファチジルイノシトールのイノシトール環の 4 位と５位の水酸基がリン酸化されたものが，ホスファチジルイノシトール 4,5‑二リン酸 [PI(4,5)P2]である。
PI(3,5)P2 は，ホスファチジルイノシトール‑4 リン酸 5‑キナーゼ, PIP5K によりホスファチジルイノシトール 4‑リン酸(PI4P)の 5 位の水酸基をリン酸化することで，合成される。

注３：原子間力顕微鏡 [Atomic Force Microscope (AFM)]
走査プローブ顕微鏡の一種であり，試料と探針の原子間に働く力を検出して，試料を走査することにより画像を得たり，試料の硬さを直接測定できる。

注４：表層微小管
微小管は，αチューブリンとβチューブリンが構成単位となって形成される中空の繊維状構造であり，微小管の中でも，細胞分裂していない細胞の細胞膜直下に存在する微小管のことを表層微小管と呼ぶ。表層微小管は，ある特定の方向に配向することにより，細胞壁に付加されるセルロース微繊維の方向を制御することで，細胞の伸⻑⽅向を決定する役割がある。

注５：キシランβ１−４結合したキシロースの主鎖に様々な側鎖が結合した分子式（C5H8O4）n の構造を持つ多糖類である。植物の二次細胞壁に多く含まれる。

注６：ROP(Rho‑related GTPases from plants)ファミリータンパク質Ras スーパーファミリー低分子量 GTPase は，GTP 結合型と GDP 結合型の ROP が存在し，両者が相互変換することで，シグナル伝達など様々な細胞内制御機構の分子スイッチとして働く。ROP ファミリータンパク質は，Ras スーパーファミリーに属するタンパク質ファミリーで，主にアクチンや微小管などの細胞骨格の形成制御の分子スイッチとして機能している。

注７：座屈圧縮力を受けた物体がその力の軸の横方向に折れ曲がること。

発表雑誌

Nature Plants ** doi.10.1038/s41477‑018‑0277‑8

論文タイトル：PI(3,5)P2 mediates root hair shank hardening in Arabidopsis
著者：Tomoko Hirano, Hiroki Konno, Seiji Takeda1, Liam Dolan, Mariko Kato, Takashi Aoyama, Takumi Higaki, Hisako
Takigawa-Imamura, and Masa H. Sato

研究サポート

本研究は科学研究費補助金（新学術領域研究・学術研究支援基盤形成 「先端バイオイメージング支援プラットフォーム（ABiS）」を含む），京都府立大学重点戦略研究などの支援のもとに行われました。