ISSN 2433-9725

Bulletin of the Japanese Association for Truffle Science

Volume 5, Issue 1, March 2022
Special Volume on Elaphomyces Part 1/2

Truﬀology（日本地下生菌研究会会報）
第 5 巻 1 号 （2022 年 3 月）
ツチダンゴ属特集巻

Contents(Volume 5, Issue 1, March 2022)
Preface
Takamichi Orihara: In celebration of publication of Truﬀology volume 5 (in Japanese)

1

Original peer-reviewed articles
Takamichi Orihara, Michael A. Castellano, Muneyuki Ohmae, Yoshinori Kaneko, Kentaro Hosaka:
Taxonomic re-examination and phylogeny of neglected Japanese black deer truﬄes, Elaphomyces
miyabeanus and E. nopporensis (in English)

3

Kohei Yamamoto, Gen Sugawa, Keizo Takeda, Yousuke Degawa: Tolypocladium bacillisporum(Ophiocordycipitaceae): A new parasite of Elaphomyces from Japan (in English)

15

Taiga Kasuya, Mihoko Uzawa, Kentaro Hosaka: Scleroderma capeverdeanum, a subhypogeous fungus
new to Japan, collected from the Eucalyptus plantation in Ibaraki Prefecture (in English)

23

Muneyuki Ohmae, Kohei Yamamoto, Akira Hashimoto, Moriya Ohkuma: First report of a hypogeousbasidiomycete, Hymenogaster citrinus (Agaricales, Hymenogastraceae) from Japan (in Japanese withEnglish abstract)

33

Specimen lists
Haruhiko Sakuraba, Mie Sakuraba: Truffles and truffle-like fungi collected in 2020 and 2021 in
Kagawa Prefecture (in Japanese)

41

Norito Mori: Truﬄes and truﬄe-like fungi collected in 2020 and 2021 in Osaka Prefecture and theadjacent areas (in Japanese)

47

Essays and other articles
oso sugiru: Encounter with Elaphomyces appalachiensis and its observation (in Japanese)

51

Hidehito Okada: Introduction to "Consumption of the ectomycorrhizal fungi Rhizopogon roseolus
and R. luteolus by Chamaesyrphus japonicus (Diptera: Syrphidae)" (in Japanese)

55

Kentaro Hosaka, Hiromi Sasaki: Movie preview: The Truﬄe Hunters (in Japanese)59Online publication; available at: https://jats-truffles.org/truffology/

Truffology 5 (1): 1 (2022)

巻頭言 (Preface)

日本地下生菌研究会会報 『Truﬀology』 発刊 5 周年に寄せて
In celebration of publication of Truﬀology volume 5
折原 貴道 （日本地下生菌研究会 会長）
Takamichi Orihara (President of the Japanese Association for Truﬄe Science)
神奈川県立生命の星 ・ 地球博物館， 〒 250-0031 神奈川県小田原市入生田 499
Kanagawa Prefectural Museum of Natural History, 499 Iryuda, Odawara, Kanagawa 250-0031, Japan
E-mail: t_orihara@nh.kanagawa-museum.jp
Article Info:

Submitted: 18 March 2022

Published: 31 March 2022

日 本 地 下 生 菌 研 究 会 （The Japanese Association for Truffle

成果が得られたと言ってよいだろう。 現状では、 掲載記事は日Science; JATS） は 2016 年に発足し、 今年で 7 年目を迎えた。

本国内の地下生菌を対象としたものにほぼ限られているが、 英

その間、 地下生菌の研究の多面的発展や知識の普及を目的

文による新種記載や新産種報告の記事なども含まれ、 それらをとする、 世界的にもユニークな研究会として、 地下生菌の野外通じて、 徐々にではあるが本誌に対する国際的な認知も広まり観察会やオンライン同定会、 会員による研究発表 （一般講演）

つつある。

やシンポジウム、 メーリングリストでの会員同士の情報交換など、本誌は今年 （2022 年）、 5 周年を迎え、 山本航平編集長

多様な活動を実施してきた。 その成果もあり、 会の発足時にはを中心とする新たな編集体制のもと、 第 5 巻を発行する。 新

およそ 30 名であった会員数は、 6 年目となる 2021 年には 100

た な 試 み と し て、 第 5 巻 で は 地 下 生 子 嚢 菌 ツ チ ダ ン ゴ 属

名を超え、 現在も緩やかではあるが増加している。 一般的な地

Elaphomyces Nees を特集し、 本属に関連する複数の記事を取り

上生きのこ類ではなく、 地下生菌とその関連菌という、 いわば上げる。 本属については、 国内では今井三子 （1900–1976）、

少数派の菌類を主に扱う研究会として、 この会員数の増加ペー

小林義雄 （1907–1993） 両博士による古典的な分類の研究がスは会の発足当初の想定を超えるものであった。

あるが、 近年、 世界的に多数の新種が記載され、 国内での種本研究会の行う事業の中でも、 その中心に位置づけられるの多様性についても改めて着目されつつある分類群である。 本特が、 オンラインで無料公開される本誌 『Truffology （日本地下集が、 日本におけるツチダンゴ属研究の新たな端緒となることを

生菌研究会会報）』 の発行である。 本誌の目指すところは、 第期待したい。

1 巻第 1 号の巻頭言に詳述したように （折原 , 2018）、 査読付末筆になるが、 本誌の出版 ・ 発行にあたり、 継続的かつ献き原著論文だけでなく、 より小規模で投稿の敷居も低い観察記

身的なご協力を賜った編集委員の木下晃彦博士、 大和政秀教

録や、 学術資料として残りにくい国内各地からの採集記録、 そ授、 山本航平博士、 およびオンライン出版にあたりご尽力いた

れに加え地下生菌にまつわるエッセイなど、 多様な性格の記事

だいた本研究会ウェブページ担当の大前宗之氏にこの場を借りを集約するプラットフォームの役目を果たすことである。 それによてお礼申し上げる。

り、 国内のローカルな知見から国際的発信力のある研究まで網羅し、 かつプロの研究者もアマチュアの愛好家も隔てなく学術的に交流し、 新たな知識を得る場として機能することが期待される。2018 年 3 月発行の第 1 巻 1 号から毎年 1 回の発行を継続し、2021 年の第 4 巻 1 号までに合計 31 の記事 （内訳 ： 原著論文

引用文献
折原貴道 （2018） 日本地下生菌研究会の設立、 および日本地下生研究会会報 “Truffology” 発刊を記念して—日本の地下生菌研究のこれまでとこれから—. Truffology 1: 2–4.

10、 観察記録 7、 普及記事 7、 標本リスト 3、 巻頭言 2、 総説 1、
訂正 1） が掲載された。 これにより、 国内の地下生菌に関する知見は飛躍的に増加し、 上述の本誌の目的に対しある一定の© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

1

Online publication; available at: https://jats-truffles.org/truffology/

Online publication; available at: https://jats-truffles.org/truffology/

Truffology 5 (1): 3–13 (2022)

Original peer-reviewed article （原著論文 ； 査読有）

Taxonomic re-examination and phylogeny of neglected Japanese
black deer truﬄes, Elaphomyces miyabeanus and E. nopporensis
クロツチダンゴ Elaphomyces miyabeanus およびコクロツチダンゴ
E. nopporensis の分類学的再検討と系統
Takamichi Orihara 1*, Michael A. Castellano 2, Muneyuki Ohmae 3, Yoshinori Kaneko 4,
Kentaro Hosaka5
折原 貴道 1*, Michael A. Castellano2, 大前 宗之 3, 金子 義紀 4, 保坂 健太郎 5
1

Kanagawa Prefectural Museum of Natural History, 499 Iryuda, Odawara-shi, Kanagawa 250-0031, Japan
神奈川県立生命の星 ・ 地球博物館， 〒 250-0031 神奈川県小田原市入生田 499

2USDA, Forest Service, Northern Research Station, Corvallis, Oregon 97331, USA

3

Hokken Co. Ltd., 7-3 Ekihigashimachi, Mibu-machi, Shimotsuga-gun, Tochigi 321-0222, Japan
株式会社北研，〒 321-0222 栃木県下都賀郡壬生町駅東町 7-3

4

Yamakita-machi, Asigarakami-gun, Kanagawa, Japan
神奈川県足柄上郡山北町

4

Department of Botany, National Museum of Nature and Science, 4–1–1 Amakubo, Tsukuba-shi, Ibaraki 305–0005, Japan
国立科学博物館植物研究部，〒 305-0005 茨城県つくば市天久保 4-1-1* Corresponding author （主著者）
E-mail: t_orihara@nh.kanagawa-museum.jp

Abstract
Two Japanese black deer truffles, Elaphomyces miyabeanus and E. nopporensis, were described from Hokkaido
in 1929 by Dr. Sanshi Imai. Since then, there have been no reliable, formal records of either species. Both species
were collected from the same locality on the same day, and are morphologically similar to each other. We
successfully located authentic specimens including syntypes of each species, which had been scattered and lost,
and we critically examined their morphology. We also collected fresh ascomata of E. miyabeanus / E. nopporensis
from the type locality and central Honshu. Based on examination of the rediscovered authentic specimens andthe fresh ascomata along with the original descriptions by Dr. Sanshi Imai, we concluded that E. nopporensis was
small, dried, old ascomata of E. miyabeanus and should be synonymized into the latter species. Phylogenetic
analyses based on the internal transcribed spacer region of the nuclear ribosomal DNA placed E. miyabeanus
within sect. Ceratogaster subsect. Sclerodermei along with E. anthracinus. The resultant tree also showed that E.
miyabeanus was conspecific with Elaphomyces sp. collected in Norway, suggesting that the species is broadly
distributed across northern Eurasia.

要旨
クロツチダンゴ Elaphomyces miyabeanus およびコクロツチダンゴ E. nopporensis は、 今井三子博士により北海道から 1929年に記載された黒色のツチダンゴ類である。 しかし、 新種記載以降、 両種の確実な報告は無く、 その実態は不明である。
両種は同日、 同一産地 （現在の道立自然公園野幌森林公園付近） にて採集されており、 形態的に酷似している。 著者© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

3

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Orihara et al.: Elaphomyces miyabeanus taxonomy and phylogeny

らは北海道大学総合博物館および日本きのこセンター菌蕈研究所にて、両種のシンタイプを含む複数の標本を再発見した。
さらに、 タイプ産地および本州中部 （山梨県） にて、 両種と形態的特徴の一致する子実体を新たに採集した。 これらの標本および原記載の情報から両種の形態的比較検討を行った結果、 コクロツチダンゴ E. nopporensis は、 乾燥の進んだ、 古い小型のクロツチダンゴ E. miyabeanus 子実体であると結論した。核リボソーム rDNA ITS 領域に基づく分子系統解析の結果、
E. miyabeanus はツチダンゴ属 Ceratogaster 節 Sclerodermei 亜節に含まれ、 E. anthracinus に近縁であること、 ノルウェー産の標本と同一種であることが示された。 この結果から、 本種はユーラシア大陸北部に広く分布していることが示唆された。
Article Info: Submitted: 8 February 2022

Accepted: 21 March 2022

Published: 31 March 2022

Introductionof Elaphomyces. We therefore tried to locate authentic specimens of

The deer truffle genus, Elaphomyces T. Nees (Elaphomycetaceae,

E. miyabeanus and E. nopporensis in several Japanese herbaria andEurotiales, Ascomycota) is one of the largest genera composed ofmade field surveys throughout Japan to locate fresh specimens of

truffle-like fungi. Currently, Elaphomyces comprises approximately

both species. As a result, we successfully located several herbarium

170 infrageneric taxa (according to the MycoBank database,specimens of E. miyabeanus and E. nopporensis collected by S. Imaisearched on 3 January, 2022) both from the Northern and Southern

and taxonomically re-evaluated the two species. Furthermore, weHemispheres. Elaphomyces spp. are ectomycorrhizal, which is

obtained fresh materials of E. miyabeanus from several localities andexceptional in the Eurotiales, and some Elaphomyces spp. are also

examined its phylogenetic position based on the internal transcribed

known as hosts of the fungicolous Tolypocladium spp.

spacer (ITS) region of the nuclear ribosomal DNA (nrDNA).

In Japan, Elaphomyces has attracted attention by mycologists
since very early in the taxonomic history of Japanese truffle-like

Materials and methods

fungi, mainly as hosts of mycoparasitic fungi (e.g., Kawamura, 1914;

Taxon sampling and morphological observation

Kobayasi, 1960; Lloyd, 1916; Umemura, 1923; Yasuda, 1919). It

Authentic herbarium specimens of E. miyabeanus and E.

was Dr. Sanshi Imai (1900–1976) who revealed a potentially highnopporensis collected by S. Imai were investigated in Hokkaido

diversity of Japanese Elaphomyces spp. for the first time, describing

University Museum (SAPA), National Museum of Nature andfive new species as well as the widely distributed E. granulatus Fr.

Science, Japan (TNS) and Tottori Mycological Institute (TMI). The

and E. variegatus Vittad. (Imai, 1929, 1934, 1938, 1939). Of these,

specimens were photographed and were subjected to microscopic

E. miyabeanus S. Imai (Japanese name: Kuro-tsuchidango) and E.

observation.

nopporensis S. Imai (Japanese name: Kokuro-tsuchidango) are theField surveys were conducted in various types of forests infirst two black deer truffles described from Japan (Imai, 1929). Both

Hokkaido and Honshu. Fresh ascomata were collected using a

species were collected several times from “Nopporo Forest” (i.e.,

garden rake and were photographed in the field. After morphological

Nopporo Forest Park as it is known today), Hokkaido Prefecture,observation, the collected ascomata were air-dried for 2 days at 48°C

on the same day. Some of those specimens were parasitized byor freeze-dried and then stored in sterile plastic bags. The specimens

Tolypocladium jezoense (S. Imai) Quandt, Kepler & Spatafora.

are deposited in Kanagawa Prefectural Museum of Natural History,

Morphologically, both species appear similar but E. miyabeanus canJapan (KPM).

be distinguished from E. nopporensis by having larger ascomata, a

For light microscopy, hand-cut sections of dried specimens wereperidium with partial pyramidal warts and slightly larger ascosporespresoaked in 70% ethanol and 3% KOH. After briefly rinsing out those(Imai, 1929). It should also be noted that only mature or old ascomata

sections with distilled water, they were mounted in lacto-glycerol. A

of E. nopporensis were collected by S. Imai.

MT5310L microscope (Meiji Techno Co., Ltd., Saitama, Japan) was

Since the original description, there have been no reliable, formal

used for the observation. Photomicrographs were captured using arecords of either species although similar black truffles have been

WRAYMER NOA-2000 camera (WRAYMER Inc., Osaka, Japan).

sporadically recorded as hosts of T. jezoense from Honshu (Shimizu,

Measurement under the microscope was performed with MicroStudio1997). Also, it was not clear whether the type specimens of either

software (WRAYMER Inc.). Measurement of spores includes outerspecies were extant. To clarify the true diversity of Japanese black

ornamentation and an outermost layer if any. Scanning electron

Elaphomyces spp., we first need to know the taxonomic entity andmicroscopy (SEM) was performed with a HITACHI TM-4000Plus

phylogeny of the species based on the current systematic framework

Tabletop Microscope (Hitachi High-Technologies, Tokyo, Japan).

4© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Orihara et al.: Elaphomyces miyabeanus taxonomy and phylogeny
Small fragments of a dried gleba and spore mass were set on a sample

algorithm (Lefort et al., 2017). For calculating branch supports in thisstage with a double-sided carbon tape and were observed at 15 kV.

analysis, the SH-like approximate likelihood-ratio test (SH-aLRT;
Anisimova & Gascuel, 2006) was conducted instead of bootstrapping.

DNA extraction, PCR amplification and sequencing

Bayesian analyses were conducted with MrBayes 3.2 (Ronquist

DNA was extracted from peridial tissue of a fresh E.

& Huelsenbeck 2003). The ITS dataset was partitioned in the same

miyabeanus specimen (KPM-NC 29301) and dried, syntypes of E.

pattern as in RAxML analysis, and the resultant two partitions were

miyabeanus deposited in TMI using the protocol of Izumitsu et al.

independently subjected to a substitution-model estimation using(2012). PCR amplification of the ITS of nrDNA followed Orihara

jModelTest2 under AIC. The K80+I+G was selected as the best-

et al. (2012) with the exception of reducing the elongation time

fit model for the partial 18S-5.8S-partial 28S, and GTR+G was

before the final elongation step to 60S. The primer pair used wasfor the ITS1-ITS2 partition. Bayesian posterior probabilities (PPs)ITS1F (Gardes & Bruns, 1993) / ITS4 (White et al., 1990). PCR

were estimated by the Metropolis-coupled Markov chain Monteamplification from the syntypes was not successful. Amplified

Carlo method (Geyer, 1991). The two parallel runs were conducted

PCR product was purified with IllustraTM ExoProStarTM

with one cold and seven heated chains each for 3M generations.

(Cytiva, Tokyo, Japan) based on the manufacturer’s instructions.

Temperature parameter of the seven heated chains in both runs was

Sequencing steps of Orihara et al. (2012) were followed.

set to 0.20 (as a default). Trees were saved to a file every 1000th
generation. We determined that the two runs reached convergence

Phylogenetic analyses

when the average standard deviation of split frequencies (ASDSF)

For the ITS dataset, we retrieved nucleotide sequences thatwas continuously lower than 0.01. The ASDSF was monitored

covered all the taxa of sect. Ceratogaster shown in Paz et al. (2017)

every 5000 generations. Trees obtained before reaching convergencefrom the International Nucleotide Sequence Database (INSD).

were discarded as the burn-in, and the remaining trees were used to

We also included sequences of unidentified Elaphomyces spp. andcalculate a 50% majority consensus topology and to determine PP

environmental sequences from ectomycorrhizal (ECM) roots hit

values for individual branches.

by the BLAST search in the NCBI website (https://blast.ncbi.nlm.
nih.gov/Blast.cgi). ITS sequences used for the phylogenetic analyses

Resultsare listed in Table 1. Species in sect. Ascoscleroderma were selected

Investigation of old Elaphomyces specimens in the mycologicalfor outgroups. The dataset was aligned with the online version of

herbaria

MAFFT version 7 (Katoh & Standley, 2013) under default settings

In November 2017, three of the authors (i.e., T. Orihara, M.A.

(i.e., the alignment algorithm is automatically selected from FFT-

Castellano and K. Hosaka) intensively searched old, unsorted

NS-1, FFT-NS-2, FFT-NS-i or L-INS-i). Subsequently, the sites withspecimens of truffle-like fungi deposited in SAPA, and we foundobvious alignment errors were manually adjusted in SeaView version

one E. miyabeanus specimen parasitized by Tolypocladium jezoense

4 (Gouy et al., 2010). We referred to the results of the Gblocks option(= Cordyceps jezoensis S. Imai) and one E. nopporensis specimen,(Castresana, 2000) in SeaView to exclude ambiguously aligned sites

both of which were collected and identified by S. Imai (Fig. 1A–C).

for the following analyses.

The former was one of the syntypes of T. jezoense and the earliest

Maximum likelihood (ML) analyses were performed with RAxML

record of both E. miyabeanus and T. jezoensis known today. The

8.2.10 (Stamatakis, 2014) and the online version of PhyML 3.0

latter was one of the syntypes of E. nopporensis. The first author(Guindon et al., 2010). In the RAxML analysis, the best substitutionsubsequently searched old specimens collected by S. Imai in TMI inmodel for the whole dataset was estimated by the Akaike Information

November 2018, and found several additional specimens identified as

Criterion (AIC) under jModelTest2 (Darriba et al., 2012; Guindon &E. miyabeanus and E. nopporensis including syntypes of both species

Gascuel, 2003). The ITS dataset was partitioned into partial 18S-5.8S-(Fig. 1D–I). All of these dried specimens in SAPA and TMI werepartial 28S and ITS1-ITS2 so that different α-shape parameters,preserved in good condition. We could not find any specimens of E.

GTR rates, and empirical base frequencies could be assigned to eachmiyabeanus and E. nopporensis in TNS.

partition. RAxML analysis was conducted under the GTR+G modelwith rapid bootstrap replicates set to 1000. PhyML analysis was

Field sampling of fresh ascomata

implemented under default settings with the GTR+G model, which

We conducted field samplings several times in the type locality of

was automatically estimated as a best-fit model based on the SMS

E. miyabeanus and E. nopporensis (i.e., the Nopporo Forest Park,© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

5

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Orihara et al.: Elaphomyces miyabeanus taxonomy and phylogeny

Table 1. INSD (GenBank) accession numbers of the ITS sequences used for the phylogenetic analyses (UECM: uncultured ectomycorrhizal roots)
表 1． 分子系統解析に用いた ITS 領域塩基配列の INSD (GenBank) 登録番号
Taxa
E. aculeatus

Locality
SPAIN, Asturias

Voucher no.
IC 27111115 (Herb. pers.
A. Paz)

Reference
Paz et al. (2017)

ITS acc. no.
KX238821

E. aculeatus

SPAIN, Asturias

IC 10041103 (Herb. pers.
A. Paz)Paz et al. (2017)

KX238844

E. anthracinus

NORWAY, Vestland Co., Stord

O-F-22176

Unpubl. data by Larsson, E. andMolia, A.

KR029773

E. anthracinus

NORWAY, Vestland Co., Stord

O-F-22177

Unpubl. data by Larsson, E. andMolia, A.

KR029774

E. anthracinus
E. anthracinus
E. anthracinus
E. anthracinus f. talosporus
E. foetidus
E. leonis

SPAIN, Cantabria
SPAIN, Cantabria
SPAIN, Cantabria
SPAIN, Asturias
SPAIN, Caceres
SPAIN, Cantabria

LIP-0001144 (lectotype)
Herb. pers. A. Paz
Herb. pers. A. Paz
LIP-0001145 (holotype)
LIP-0001138 (epitype)
IC 14111101 (Herb. pers.
A. Paz)Paz et al. (2017)
Paz et al. (2017)
Paz et al. (2017)
Paz et al. (2017)
Paz et al. (2017)
Paz et al. (2017)

KX238803
KX238804
KX238813
KX238805
KX238797
KX238814

E. leucosporus

SPAIN, Cantabria

IC 24051203 (Herb. pers.
A. Paz)Paz et al. (2017)

KX238816

E. leveillei
E. maculatus
E. morettii var. echinatus

SPAIN, Asturias
SPAIN, Cantabria
NORWAY, Vest-Agder

LIP-0001148 (epitype)
LIP-0001149
IC 27091306 (Herb. pers.
A. Paz)Paz et al. (2017)
Paz et al. (2017)
Paz et al. (2017)

KX238856
KX238799
KX238854

E. persoonii

SPAIN, Cantabria

IC 18031201 (Herb. pers.
A. Paz)Paz et al. (2017)

KX238828

E. septatus

SPAIN, Cantabria

IC 10041107 (Herb. pers.
A. Paz)Paz et al. (2017)

KX238807

E. spirosporus
E. virgatosporus

SPAIN, Caceres
SPAIN, Asturias

LIP-0001152 (holotype)
IC 26051213 (Herb. pers.
A. Paz)Paz et al. (2017)
Paz et al. (2017)

KX238796
KX238811

E. iuppitercellus
E. miyabeanus

CAMEROON, East ProvinceJAPAN, Yamanashi Pref.,Narusawa Village

M3 (from an ECM root tip) Castellano et al. (2016)
KPM-NC 29301
This study

KT694140
OM286885

Elaphomyces sp.

MEXICO, Mexico State,
Temascaltepec

GO-2009-040

Unpubl. data by Garibay Orijel, R.
and Pina Paez, C.

KJ594995

Elaphomyces sp.

MEXICO, Mexico State,
San Simon de Guerrero

GO-2009-028

Unpubl. data by Garibay-Orijel, R.
and Pina Paez, C.

KJ594996

Elaphomyces sp.
Elaphomyces sp.
Elaphomyces sp.
Elaphomyces sp.
Elaphomyces sp.
Elaphomyces sp. (sp. 6)

ROMANIA, ECM of Quercus robur
USA
PANAMA
USA, FL
USA, FLNORWAY, Viken, UllensakerLM 2779
FLAS_AC727
AC-2017a
FLAS-F-60353
FLAS-F-61848
O-F-22082

Suz et al. (2014)
Unpubl. data by Corrales, A. et al.
Unpubl. data by Corrales, A. et al.
Unpubl. data by Richter, B. et al.
Unpubl. data by Kaminsky, B. et al.
Unpubl. data by Larsson, E. andMolia, A.

KM576390
MH496798
KY825739
MF074844
MH399885
KR029769

Elaphomyces sp. (sp. 6)

NORWAY, Oslo fylke, OsloO-F-245336

Unpubl. data by Larsson, E. andMolia, A.

KR029770

Elaphomyces sp. (sp. 6)

NORWAY, Viken, Ringerike

O-F-245524

Unpubl. data by Larsson, E. andMolia, A.

KR029771

UECM of Quercus crispula
UECM of Quercus kelloggii

JAPANUSA, CA, Riverside County,
James Reserve

M0400
JR9

Unpubl. data by Ishida T. A.et al.
Unpubl. data by Taniguchi et al.

KC791026
KC791026

Hokkaido Pref.). On 1 October 2018, one of the authors (M. Ohmae)

to E. miyabeanus from a subboreal coniferous forest in Yamanashi

collected a single overmature ascoma that was morphologicallyPrefecture, central Honshu (Fig. 2D–H). ITS sequence was

identical to E. nopporensis (Fig. 2A): the ascoma had a rough, black

successfully obtained from this specimen (KPM-NC 29301; Table 1)

peridium that became papery due to dehydration and over-maturity,and subjected to the following phylogenetic analyses. Additionally,

and a shrunken blackish gleba. Subsequently, additional old ascomata

we collected black Elaphomyces ascomata that appeared very similar

were collected at a different site in the type locality on 22 Sep. 2019.

to E. miyabeanus from Ehime Prefecture, Shikoku (KPM-NC 29304),

Trials of ITS sequencing from both specimens failed.

but this specimen was different from E. miyabeanus in the ascospore

We also collected ascomata that were morphologically identical6morphology (Fig. 2I; see “Notes” below for more details).
© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

Orihara et al.: Elaphomyces miyabeanus taxonomy and phylogeny

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Fig. 1. Authentic specimens of E. miyabeanus and E. nopporensis recorded in Imai (1929) and rediscovered from SAPA and TMI herbaria. A–C: SAPA specimensof E. miyabeanus parasitized by Tolypocladium jezoense (upper of A and B; syntype of T. jezoense [Imai, 1929]) and E. nopporensis (lower of A and C; isosyntypeof E. nopporensis). D–I: TMI specimens Newly designated lectotype of E. miyabeanus (D [middle], E, G; TMI 37400) and one of the syntypes of E. nopporensis (F, H,
I; TMI 37401). Both of the specimens were collected by Dr. S. Imai on 4 July 1926. G: Ascospores of E. miyabeanus. H: Ascospores of E. nopporensis. Note that theouter warty spore walls and the inner cores are separated in most ascospores. I: SEM photomicrograph of partially angular ascospore (right) of E. nopporensis
and remnants of spore walls (arrows). Bars: E–F = 1 cm; G–H = 20 µm; I = 10 µm.
図 1． Imai (1929) における記載に用いられたクロツチダンゴ E. miyabeanus およびコクロツチダンゴ E. nopporensis 標本 （北海道大学総合博物館 [SAPA] お
よび日本きのこセンター菌蕈研究所 [TMI] 所蔵）． A–C: SAPA 所蔵のエゾハナヤスリタケ Tolypocladium jezoense に寄生された E. miyabeanus 標本 （A 上部
および B ； 本標本は Tolypocladium jezoense のシンタイプに相当） および E. nopporensis 標本 （A 下部および C ； 本標本は E. nopporensis のアイソシンタイ
プに相当）． D–I: 新たにレクトタイプ指定された TMI 所蔵の E. miyabeanus 標本 （D ［中央］ , E, G; TMI 37400） および E. nopporensis シンタイプ標本 （F, H, I;
TMI 37401）． いずれも今井三子博士により 1926 年 7 月 4 日採集． G: Elaphomyces miyabeanus 子嚢胞子． H: Elaphomyces nopporensis 子嚢胞子． 多くの胞子において、 短い刺状突起に覆われた胞子外壁と， その内部の胞子中心部が分離している． I: Elaphomyces nopporensis の一部角張った子嚢胞子 （右側） および胞子外壁の残骸 （矢印） の SEM 画像．

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Orihara et al.: Elaphomyces miyabeanus taxonomy and phylogeny

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Fig. 2. A–C: Elaphomyces nopporensis (= small, old, dried ascoma of E. miyabeanus) newly collected from the type locality (KPM-NC 25100). A: Ascoma. B–
C: Ascospores; in most ascospores the outer exosporium was shrunken and separated from the inner dark brown core (arrows). D–H: Newly collected E.
miyabeanus specimens (KPM-NC 29301). D: Ascomata. E: Peridiopellis. F: Inner peridial tissue. G: Ascospores. H. Ascospores in various developmental stages
under SEM. Immature ascospores are covered with an evanescent, plate-like, warty layer (arrow). I: SEM photomicrograph of an ascospores of E. anthracinus
collected from Japan (KPM-NC 29304). Arrows indicate evanescent, outermost veil-like materials. Bars: A, D = 1 cm; B–C, E–G = 20 µm, H–I = 10 µm.
図 2．A–C: タイプ産地（野幌森林公園）で発生が確認されたコクロツチダンゴ E. nopporensis（E. miyabeanus の乾燥した小型の老菌）標本（KPM-NC 25100）．A:
子嚢果． B–C: 子嚢胞子． ほとんどの子嚢胞子で胞子外壁が収縮し、 内部の暗褐色の胞子中心部と分離していることが確認される （矢印）． D–H: 本研究において新たに採集されたクロツチダンゴ E. miyabeanus 標本 （KPM-NC 29301; 山梨県南都留郡鳴沢村産）． D: 子嚢果． E: 最外殻皮． F: 殻皮実質の菌糸． G: 子嚢胞子． H: 様々な成熟段階の子嚢胞子の SEM 画像． 未熟な胞子はいぼ状突起のある消失性の胞子最外層に覆われる （矢印）． I: 日本産
E. anthracinus 子嚢胞子の SEM 画像 （KPM-NC 29304 ； 愛媛県北宇和郡鬼北町産）． 矢印は消失性の胞子最外膜を示す．

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Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Orihara et al.: Elaphomyces miyabeanus taxonomy and phylogeny

Bayesian PPs. The total arithmetic and harmonic mean of estimatedPhylogenetic analyses

marginal lnL for runs were -3456.18 and -3490.43, respectively.

The ITS dataset was composed of 607 aligned nucleotide positions
and contained 32 sequences in total, including newly generated

The resulting overall ML and Bayesian topologies were identicalsequence of E. miyabeanus specimen (KPM-NC 29301; GenBank

although statistic support of some branches varied considerablyaccession no.: OM286885). In the RAxML analysis, the final ML

among the three methods (i.e., MLBS/SH-aLRT/PP). We therefore

optimization of log likelihood (lnL) was -3510.721128. In the PhyML

show only the RAxML tree (Fig. 3). The tree mostly recovered overall

analysis, the final lnL was -3570.619692. In the Bayesian inference,

relationships within Elaphomyces sect. Ceratogaster shown by Paz etthe two parallel runs reached convergence after ca. 1.9M generations.

al. (2017) with some minor exceptions (e.g., the relationships among

Accordingly, we discarded the first 1900 trees in each run, and theE. aculeatus Vittad., E. virgatosporus Hollós and E. anthracinus

remaining 1101 trees in each run were summarized to approximate

Vittad. clades). The E. miyabeanus specimen from Yamanashi Pref.,
KX238805 E. anthracinus f. talosporus SPAIN*

62/0.00/0.91
78/1.00/0.90

KX238804 E. anthracinus SPAIN
KX238803 E. anthracinus SPAIN*
KR029774 E. anthracinus NORWAY
KX238813 E. anthracinus SPAIN
KR029773 E. anthracinus NORWAY
KJ594995 Elaphomyces sp. MEXICO

55/1.00/0.78

100/1.00/1.00

KJ594996 Elaphomyces sp. MEXICO

Subsect. Sclerodermei

KC791026 UECM of Quercus kelloggii USA, CA

100/1.00/1.00

KR029771 Elaphomyces sp. NORWAY
KR029769 Elaphomyces sp. NORWAY

71/1.00/0.88

KR029770 Elaphomyces sp. NORWAY

92/1.00/0.60
95/1.00/1.00

Elaphomyces
miyabeanus

OM286885 E. miyabeanus JAPANKX238811 E. virgatosporus SPAIN
100/1.00/1.00

KX238821 E. aculeatus SPAIN
KX238844 E. aculeatus SPAIN

97/1.00/1.00
62/1.00/0.93 98/1.00/1.00
59/1.00/0.98

KM576390 Elaphomyces sp. ECM of Quercus robur ROMANIA

AB218094 UECM of Quercus crispula M0400 JAPANKX238816 E. leucosporus SPAIN

KX238799 E. maculatus SPAIN

83/1.00/1.00

KX238807 E. septatus SPAIN

92/1.00/1.00

KX238796 E. spirosporus SPAIN*

61/1.00/0.94- /1.00/0.52

KX238814 E. leonis SPAIN
KX238854 E. morettii var. echinatus NORWAY

KX238856 E. leveillei SPAIN*

82/1.00/0.99

MH496798 Elaphomyces sp. USA
100/1.00/1.00

100/1.00/1.00

KT694140 E. iuppitercellus CAMEROON
78/0.98/0.84

MH399885 Elaphomyces sp. USA, FL

69/1.00/0.91

MF074844 Elaphomyces sp. USA, FL

86/1.00/1.00

KX238828 E. persoonii SPAIN
KY825739 Elaphomyces sp. PANAMA

0.1 substitutions / site

Sect.
Ascoscleroderma

KX238797 E. foetidus SPAIN*

Fig. 3. RAxML Maximum likelihood (ML) tree of Elaphomyces sect. Ceratogaster based on the nuclear rDNA ITS dataset.
Sequence of E. miyabeanus specimen (OM286885) was generated for this study. Values of RAxML rapid bootstrapping(MLBS), the SH-aLRT test by PhyML and Bayesian PPs are designated above or below branches or at nodes (MLBS/
SH-aLRT/PP). The GenBank accession numbers are shown followed by taxon names as registered in GenBank.
Sequences from holotype, lectotype or epitype specimens are indicated as asterisks (*). Species of Elaphomyces sect.
Ascoscleroderma are selected as outgroups. UECM: uncultured ectomycorrhizal root.
図 3． 核 rDNA ITS 領域のデータセットに基づく， RAxML によるツチダンゴ属 Ceratogaster 節の最尤系統樹． クロツチ
ダンゴ E. miyabeanus 標本から新たに得られた配列 （OM286885） を含む． RAxML 高速ブートストラップ法 （MLBS），
PhyML による SH 補正近似尤度比検定 （SH-aLRT test）， およびベイズ事後確率 （PP） の値を各分岐に示す （MLBS/
SH-aLRT/PP）． 本節の姉妹群に相当する， ツチダンゴ属 Ascoscleroderma 節に含まれる種を外群に用いた． UECM:
uncultured ectomycorrhizal root.
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Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Orihara et al.: Elaphomyces miyabeanus taxonomy and phylogeny
Japan was placed within sect. Ceratogaster subsect. Sclerodermei

Based on these observations, we conclude that E. nopporensis is(Vittad.) Bellanger & P.-A. Moreau and was shown to be closelya small, dried, old, overmature ascoma of E. miyabeanus and should

related to European E. anthracinus, Elaphomyces sp. from Mexico

be synonymized into the latter species. The characteristic large warts

and an environmental ECM sample from the USA. The ITS1-5.8S-

on the surface of E. miyabeanus ascomata apparently fall off on

ITS2 nucleotide identities between E. miyabeanus and E. anthracinus

old ascomata (= E. nopporensis) or are absent on smaller ascomata.

were 95.46% (589 bp / 617 bp; query coverage: 100%). Elaphomyces

We herein designate lectotype of E. miyabeanus from the syntype

miyabeanus formed a species-level clade with unidentified

specimens preserved in TMI. The lectotype specimen (TMI 37400),

Elaphomyces sp. sequences from Norway (i.e., “Elaphomyces sp.

which was collected on 4 July 1926 by S. Imai, consists of many6” according to the taxon-name label by Larsson E. & Molia A.)

ascomata of various developmental stages and is morphologicallyalthough the support by Bayesian PP was unexpectedly low (i.e.,

one of the most well-preserved syntype specimens. Although we

PP = 0.60). The ITS1-5.8S-ITS2 nucleotide identities between E.

successfully obtained an ITS sequence from the specimen collectedmiyabeanus and one of “Elaphomyces sp. 6” were 98.54% (608 bp /from central Honshu (KPM-NC 29301), we will not designate

617 bp; query coverage: 100%).

epitype of E. miyabeanus until fresh ascomata in good condition with
its nucleotide sequences including the barcoding region are obtained

Taxonomynear the type locality.

Taxonomic relationship between E. miyabeanus and E. nopporensis
Imai (1929) noted that he repeatedly collected E. miyabeanus andElaphomyces miyabeanus S. Imai, Transactions of the Sapporo

E. nopporensis on the same days in the same locality (“Nopporo

Natural History Society 11: 35 (1930).

Forest”). However, the number of E. nopporensis specimens were

[MycoBank ID: 271439]

relatively small, and no young ascomata of the species were found= Elaphomyces nopporensis S. Imai, Transactions of the Sapporo(Imai, 1929). The peridium of the species is papery, which is a typical

Natural History Society 11: 36 (1930).

character of dried, old ascomata of black deer truffles, and the surface[MycoBank ID: 272439].

of both species are more or less rough although in E. miyabeanus

Figs. 1, 2A–H.

large pyramidal warts partially remain on the apical or rarely on the

Lectotype (designated here!): JAPAN, Hokkaido Pref., Ishikari

basal part (Imai, 1929). According to Imai (1929), the ascospores of

Prov., Nopporo Forest (the present Nopporo Forest Park), 4 Jul. 1926,

E. nopporensis are smaller than those of E. miyabeanus but their sizes

S. Imai, TMI 37400 [MycoBank Typification ID: 10006470].

overlap within the range of those of E. miyabeanus (i.e., 15–17.5 µm

Description: Ascomata solitary or gregarious, 3–30 mm in

in E. nopporensis vs. 15–22 µm in E. miyabeanus).

diam., rigid, hard, globose to subglobose, often with a slight

Our observation of the rediscovered syntypes of both the species

apical projection and irregular depression, surface black, almost

confirmed that the descriptions by Imai (1929) were mostly accurate,smooth to the naked eye but more or less rough under loupe or

except for the ascospore size of E. nopporensis. In some ascomata

stereomicroscope, often with pyramidal-obtuse warts around thethe ascospores were shrunken and the exosporium and outermost

apical projection and basal depression. Mycelia on the surface ofornamentation were often collapsed or separated from the inner core.

ascomata inconspicuous. Outer peridium thin, up to 0.4 mm thick,

As a result, many of the remaining ascospores were smaller in size

black, rigid, fragile, separable from inner peridium. Inner peridium

than those of the E. miyabeanus specimens, but in well-preserved

up to 2 mm thick, off-white to pale brown with a reddish tinge,

ascomata of E. nopporensis the ascospore size was larger than the

more or less firm, rubbery, evanescent when dry and overmature.

original description and close to that of E. miyabeanus (i.e., 15.2–21.9

Gleba filled with a black spore mass with white sterile veins runningµm; n = 30).

more or less radially. The outermost part of gleba appears as a pale

As noted above, the newly collected ascomata from the type
locality (KPM-NC 25100, 27903) represented typical macroscopic

reddish brown hyphal layer. Spore mass more or less firm whenimmature, becoming powdery at maturity. Odor not distinct.

features of E. nopporensis. Similar to the E. nopporensis syntypes, inOuter peridium and warts of thick-walled (0.7–3 µm), filamentous

most ascospores the outermost spore wall was shrunken and separated

or palisade-like, dark brown hyphae 2.5–5.5 µm broad and firmly

from the inner spore core (Fig. 2B–C). In other cases, ascospores

adherent to one another, running in several directions. Inner peridium

looked heavily depressed or somewhat angular, or only the outermostof whitish to pale brown, filamentous hyphae 2.5–10 µm broad,layer remained (Figs. 1H–I, 2B).

running perpendicularly in two directions, walls 0.6–1.5 µm thick.

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Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Orihara et al.: Elaphomyces miyabeanus taxonomy and phylogeny
Glebal hyphae of densely interwoven, evanescent, partially inflated,revealed that the ascospores had a nearly complete reticulum fully or

dark brown, thin-walled (<1.1 µm) filamentous hyphae 3–10 µm

partially covered with an evanescent vail-like material (Fig. 2I). Those

broad, with inflated, clavulate, terminal cells. Asci not seen, but Imaicharacters match well with the description of the E. anthracinus(1929) described them as 8-spored. Ascospores 15.2–25.5 µm in

by Castellano et al. (2017). We therefore tentatively identify thediam. including ornamentation (average size in lectotype: 21.8 µm;

specimen KPM-NC 29304 as E. anthracinus.

standard deviation: 1.57 [n = 50]), globose, composed of multiple
wall layers: outermost walls 0.8–2 µm thick, dark brown, surface

Discussion

finely reticulate under SEM, densely covered with blunt to acute spines

Taxonomy of black Elaphomyces species, which mostly belong

0.6–2.5(–3) µm long partially adhered to each other to form a minute,to sect. Ascoscleroderma (Clémencet) Bellanger & P.-A. Moreau,

incomplete reticulum, often collapsed or separated from the inner

Ceratogaster and Malacodermei (Vittad.) Tul. & C. Tul., have longwall in old, overly dried specimens; in young ascospores the spiny

been neglected in Japan since Kobayasi (1960) despite the recent

ornamentation is completely or partially covered with evanescent,remarkable progress on global biodiversity of Elaphomyces (e.g.,plate-like, warty layer; inner walls 4–5 µm thick, apparently

Castellano et al., 2011, 2012a, b, c, 2016, 2018, 2021; Paz et al., 2017).

composed of 4–5 layers, but sometimes not distinct especially in old,

However, Hatakeyama & Orihara (2020) reported E. asahimontanus

overmature specimens, dark to medium brown.

Kobayasi, currently endemic to Japan, for the first time since

Habitat, distribution and season: mostly hypogeous but occasionally

Kobayasi (1960), and gave detailed morphology and ecology of the

sub-epigeous under various ectomycorrhizal tree species such as

species. In this study, we focused on two historically forgotten black

Quercus spp. and Abies veitchii; Japan and Norway, but potentiallydeer truffles, E. miyabeanus and E. nopporensis, and concluded thatbroadly distributed across northern Eurasia; summer to winter.

they were identical species. It should be noted that both species had

Japanese name: Kuro-tsuchidango (“kuro” = black, “tsuchidango”

not been collected for more than 80 years. Most known Japanese= deer truffle in Japanese).

Elaphomyces spp. were described more than a half century ago, andOther specimens examined: JAPAN, Hokkaido Pref., Ishikari

require critical reassessment and modern descriptions to incorporate

Prov., Nopporo Forest (the present Nopporo Forest Park), parasitizedthem into the current framework of Elaphomyces systematics.

by T. jezoense, 8 Oct. 1923, S. Imai, deposited in SAPA; ibid, 15 Nov.

This study is an important step to understand the diversity of black

1925, S. Imai, TMI 37402; ibid, 4 Jul. 1926, S. Imai, a syntype of E.

Elaphomyces species in East Asia.

nopporensis, TMI 37401 (duplicate in SAPA); ibid, parasitized by

Both E. miyabeanus and E. nopporensis were originally describedT. jezoense, 7 Oct. 1927, S. Imai, a syntype of E. nopporensis, TMI

by Imai (1929). They were, therefore, published on the same date

37403; ibid, 21 Oct. 1928, S. Imai, TMI 37404; ibid, parasitized byand have equal taxonomic priority (cf. Article 11.5 of the current

T. jezoense, 17 Oct. 1929, S. Imai, TMI 37405; ibid, 30 Oct. 1938, S.

version of the International Code of Nomenclature for algae, fungi,

Imai, TMI 37406; Ebetsu-shi, Nishi-nopporo, Nopporo Forest Park,and plants [Shenzhen Code, 2018]; https://www.iapt-taxon.org/

under Quercus crispula, 1 Oct. 2018, M. Ohmae, KPM-NC 25100;

nomen/pages/main/art_11.html). We adopt the name E. miyabeanus

Sapporo-shi Atsubetsu-ku, Atsubetu-cho-konopporo, Nopporo Forest

for the combined species because E. nopporensis is only represented

Park, near Hokkaido Museum and the Centennial Memorial Tower,by an overly dried, old ascomata and does not represent its typicalunder Q. crispula, 22 Sep. 2019, S. Hatakeyama, KPM-NC 27903;

morphology. As a result, E. miyabeanus will be treated as having

Yamanashi Pref., Narusawa Village, northeastern slope of Mt. Fuji,

a priority over E. nopporensis according to Article 11.5 of theunder Abies veitchii, alt. ca. 2100 m, 19 Sep. 2021, Y. Kaneko, KPM-

Shenzhen Code.

NC 29301.

Elaphomyces miyaeanus shares many morphological characteristics

Notes: We also collected several black ascomata that appeared quitewith E. anthracinus such as an almost smooth black peridial surface,similar to E. miyabeanus from Ehime Prefecture (Kitauwa-gun

blackish spore mass, medium-sized ascospores (20–24 µm) with low

Kihoku-cho, Narukawa Gorge, under Castanopsis cuspidata andornamentation (Castellano et al., 2018). However, E. miyabeanus

Quercus spp., 13 Dec. 2021, T. Teramoto, T. Orihara & K. Yamamoto,differs from the latter species in the peridium being partially covered

KPM-NC 29304). The ascomata were 10–22 mm in diam., and thewith large, pyramidal warts and the ascospore ornamentation forming

surface was almost smooth to the naked eye and lacked large warts.

an incomplete reticulation or more or less isolated spines. In addition,

Ascospores were almost the same in size as E. miyabeanus ascosporesthe young ascospores of E. miyabeanus are covered with a plate-(i.e., 18.5–23.1 µm; average 20.5 µm [n = 25]), but SEM observation

like, warty layer (Fig. 2H). Our ITS phylogeny also supported that

© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

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Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Orihara et al.: Elaphomyces miyabeanus taxonomy and phylogeny
these two species were closely related but genetically distinct (Fig. 3).

kindly helped our search for herbarium specimens at SAPA andKobayasi (1960) and Japanese Society of Cordyceps Research (2014)

TMI, respectively. This study was financially supported by JSPS

recorded E. anthracinus from Japan, but they did not provide a detailed

KAKENHI Grant-in-Aid for Young Scientists (B) (nos. 17K15184),

morphological description. We collected ascomata morphologically

JSPS KAKENHI Grants 24680085, 20K06805 and the Grant-in-Aid

identical to E. anthracinus from Ehime Prefecture, Japan, andfrom Institute for Fermentation, Osaka (IFO). Additional fieldwork

confirmed that E. anthracinus and E. miyabeanus are morphologicallyand other research activities were financially supported by JSPS

distinguishable (Fig. 2I).

Invitation Fellowship for Research in Japan (Short-term) to MAC.

Paz et al. (2017) proposed E. anthracinus f. talosporus A. Paz& Lavoise for the E. anthracinus specimens that have globosepolyhedral ascospores, but no particular genetic divergence wasReferences

found between the two forms. As noted above, the ascospores ofAnisimova M., Gascuel O. (2006) Approximate likelihood-ratio test

dried, old ascomata of E. miyabeanus in poor condition tend tofor branches: A fast, accurate, and powerful alternative. Systematic

become somewhat angular-polyhedral or shrunk. We consider that
this tendency is not related to genetic divergence, but could be causedby several environmental and/or biological factors. For example, such
shrinkage may be caused by the parasitism by T. jezoence because
the glebal hyphae of E. nopporensis are often intermingled with alien,
off-white hyphae (Fig. 1F). It is quite possible that morphology of E.
anthracinus ascospores are also heavily influenced by environmental

Biology 55: 539–552.
Castellano M.A., Beever R.E., Trappe J.M. (2012a) Sequestrate
fungi of New Zealand: Elaphomyces (Ascomycota, Eurotiales,
Elaphomycetaceae). New Zealand Journal of Botany 50: 423–433.
Castellano M.A., Crabtree C.D., Mitchell D, Healy R.A. (2021)
Eight new Elaphomyces species (Elaphomycetaceae, Eurotiales,
Ascomycota) from eastern North America. Fungal Systematics andEvolution 7: 113–131.

and/or biological factors. Critical observation of the ascospores of E.

Castellano M.A., Dentinger B.T.M., Séné O., Elliott T.F., Truong C.,

anthracinus f. talosporus in relation to ascomata conditions will be

Henkel T.W. (2016) New species of Elaphomyces (Elaphomycetaceae,

necessary to clarify the cause of the spore deformation.

Eurotiales, Ascomycota) from tropical rainforests of Cameroon and

The ITS phylogeny indicates that E. miyabeanus is potentiallyconspecific with Elaphomyces sp. from Norway (Fig. 3). Paz et al.
(2017) previously reported that those Norwegian specimens were
genetically divergent from E. anthracinus s.str.. However, theytentatively retained them within E. anthracinus (as “E. anthracinus
f. talosporus” presumably based on the morphology of the shrunken,
irregular-shaped ascospores) because they could not ascertain any
distinct species-level morphological difference. Additional Japanese

Guyana. IMA Fungus 7: 59–73.
Castellano M.A., Elliott T.F., Trappe J.M. (2018) Three new black
Elaphomyces species (Elaphomycetaceae, Eurotiales, Ascomycota)from eastern North America with notes on selected European species.
Fungal Systematics and Evolution 1: 1–12.
Castellano M.A., Guerrero G.G., Jiménez J.G.,Trappe J.M. (2012b)
Elaphomyces appalachiensis and E. verruculosus sp. nov. (Ascomycota
Eurotiales, Elaphomycetaceae) from eastern North America. Revista
Mexicana de Micología 35: 17–22.

records of E. miyabeanus are from both deciduous broad-leaved

Castellano M.A., Henkel T.W., Miller S.L., Smith M.E., Aime M.C.

and coniferous forests in subboreal regions. These results suggest(2012c) New Elaphomyces species (Elaphomycetaceae, Eurotiales,that E. miyabeanus may be widespread in northern Eurasia, and is

Ascomycota) from Guyana. Mycologia 104: 1244–1249.

possibly misidentified as more widely known E. anthracinus. This

Castellano M.A., Trappe J.M., Vernes K. (2011) Australian species ofis an interesting example that clarifying the entities of historically

Elaphomyces (Elaphomycetaceae, Eurotiales, Ascomycota). Australianoverlooked truffle-like fungi in Asia can sharpen our understanding ofSystematic Botany 24: 32–57.

the distribution and systematics of another taxon in a different regionof the world.

Acknowledgements
We are grateful to Sota Hatakeyama, Fumitaka Nagao, Saori Orihara,
Tatsumi Teramoto and Kohei Yamamoto for providing valuablespecimens or helping our field surveys. Kohei Yamamoto also kindly

Castresana J. (2000) Selection of conserved blocks from multiplealignments for their use in phylogenetic analysis. Molecular Biology
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© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

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Online publication; available at: https://jats-truffles.org/truffology/

Truffology 5 (1): 15–21 (2022)

Original peer-reviewed article （原著論文 ； 査読有）

Tolypocladium bacillisporum (Ophiocordycipitaceae): A new parasite of
Elaphomyces from Japan
国内から採集されたツチダンゴ属生の新種シロアシヒメハナヤスリタケ
Tolypocladium bacillisporum （オフィオコルディセプス科）
Kohei Yamamoto1*, Gen Sugawa2, Keizo Takeda3, Yousuke Degawa2
山本 航平 1*, 須川 元 2, 武田 桂三 3, 出川 洋介 2
1

Tochigi Prefectural Museum, 2-2 Mutsumi-cho, Utsunomiya-shi, Tochigi 320-0865, Japan
栃木県立博物館， 〒 320-0865 栃木県宇都宮市睦町 2-2

2

Sugadaira Research Station, Mountain Science Center, University of Tsukuba, 1278-294 Sugadairakogen, Ueda-shi,
Nagano 386-2204, Japan
筑波大学山岳科学センター菅平高原実験所， 〒 386-2204 長野県上田市菅平高原 1278-294

3Japanese Society of Cordyceps Research, Tsuruoka-shi, Yamagata, Japan
日本冬虫夏草の会，山形県鶴岡市* Corresponding author （主著者）
E-mail: kohei081@yahoo.co.jp

Abstract
The genus Tolypocladium (Ophiocordycipitaceae) includes species that are parasitic on the truﬄe-like ascomycete
Elaphomyces. In addition to the 16 known species of mycoparasitic Tolypocladium from Japan, at least 19
undescribed species have been recorded from there. One of these species, called in Japan as “Shiroashi-himehanayasuri-take”, is a parasite of the Elaphomyces sect. Ceratogaster, and has been collected from Hokkaido Pref.,Japan. We found a new locality for this species in Miyagi Pref., and conducted morphological observations,
isolation, and molecular phylogenetic analyses of the specimens from Japan. The part-spore shape of this species
was different from that of T. jezoense, a macromorphologically similar species and the phylogenies strongly
indicated that “Shiroashi-hime-hanayasuri-take” is an independent species. Accordingly, this undescribed species
is herein proposed as a new species, T. bacillisporum.

要旨
トリポクラジウム属 （オフィオコルディセプス科） には、 トリュフ型の子嚢菌類であるツチダンゴ属に寄生する種が含まれる。
日本国内からは 16 既知種に加え、 少なくとも 19 種の未記載種が報告されている。 その内の一種であるシロアシヒメハナ
ヤスリタケは、 ツチダンゴ属 Ceratogaster 節の一種を宿主とし、 北海道から報告されている。 我々は宮城県内より本種の新産地を見出し、 日本産標本について形態観察、 分離培養、 分子系統解析を行った。 その結果、 本種は子実体の外観が類似するエゾハナヤスリタケとは部分胞子の形が異なり、 系統学的に独立種であることが強く支持された。 以上の結果に基づき、 本種を新種 Tolypocladium bacillisporum として記載した。
Article Info: Submitted: 25 February 2022

© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

Accepted: 24 March 2022

Published: 31 March 2022

15

Yamamoto et al.: Tolypocladium bacillisporum, a new parasite of Elaphomyces

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Introduction

Nature and Science, Tokyo (TNS) in Japan under TPM-M-9859, 9860,

The family Ophiocordycipitaceae (Hypocreales) described by Sung

9861 and TNS-F-82223, respectively.

et al. (2007), includes not only numerous arthropod pathogens but
also mycoparasites of the truffle-like ectomycorrhizal ascomycete

Isolation and observation of mycelial growth

Elaphomyces (Elaphomycetaceae, Eurotiales). Those mycoparasites

Ascospores discharged from mature perithecia onto potato dextrose

were formerly known as Elaphocordyceps spp., but the genus wasagar (PDA; Nissui, Tokyo, Japan) were used to obtain cultures

recently synonymized into Tolypocladium (Quandt et al., 2014).

(Uchiyama, 1999). Plates were incubated at 20°C in the dark until

Besides mycoparasites of Elaphomyces, Tolypocladium also includes

germination. Germinated ascospores were transferred to anotherinsect pathogens, soil inhabitants, and endophytes (Gazis et al., 2014;

plate. The established isolates, C23 from TPM-M-9859, C53 from

Quandt et al., 2014). Since Nikoh & Fukatsu (2000) suggested that

TPM-M-9860 and 202009-1 from TPM-M-9861, were deposited in

the common ancestor of extant cicada pathogenic and mycoparasitic

the Medical Mycology Research Center, Chiba University (Chiba,

Tolypocladium spp. was likely to be a cicada pathogenic fungus, inter-

Japan) under accession numbers IFM 67757 (for C23), IFM 67758

kingdom host jumping within the genus has been receiving increased(C53), and IFM 67759 (202009-1). Mycelial growth on PDA wasattention (Quandt et al., 2016, 2018).

measured based on Yamamoto et al. (2020).

So far, there are 24 described species of Tolypocladium parasitizing
Elaphomyces (Index Fungorum [http://www.indexfungorum.org/],

DNA sequencing and phylogenetic analyses

accessed on 10 Feb. 2022), and at least 16 known species have been

DNA was extracted from cultured mycelia on PDA, as describedreported from Japan (Kobayasi & Shimizu, 1960; Shimizu, 1997).

by Izumitsu et al. (2012), or CTAB method (Ishida et al., 1999).

Furthermore, Shimizu (1997) and Japanese Society of Cordyceps

PCR was performed using KOD FX Neo (Toyobo, Osaka, Japan) as

Research (2014) suggested that 19 taxonomically unsettled species

described by Yamamoto et al. (2021) or using KOD FX (Toyobo) in awere present in Japan. One of these Tolypocladium species with thetotal volume of 25 μL containing 5 µL dNTPs (0.4 mM each), 0.75 µL

Japanese name “Shiroashi-hime-hanayasuri-take” (from the Japaneseof each primer (0.3 µM each), 12.5 µL 2× PCR buffer for KOD FXshiroashi = whitish stipe, hime = small, and hanayasuri-take = T.

(Toyobo), 0.5 µL 1.0 U μL−1 KOD FX, 1.5 µL template DNA, and 4 µL

ophioglossoides (J.F. Gmel.) C.A. Quandt, Kepler & Spatafora;

sterile distilled water. For C23 and C53, amplification of (1) the small

hereafter referred to as “Shiroashi”), was illustrated in a book (Japanese

subunit (18S)-internal transcribed spacer (ITS)-large subunit (28S) of

Society of Cordyceps Research, 2014). This species is parasitic on

nuclear rDNA operon and (2) the translation elongation factor 1-alphaa species of sect. Ceratogaster, which was tentatively identified as(tef1) was performed using the primer pairs NS1 (White et al., 1990)

Elaphomyces cf. anthracinus Vittad., and known only from Hokkaido

and LR5 (Vilgalys & Hester, 1990), and 983F and 2218R (Rehner &Pref., Japan (Japanese Society of Cordyceps Research, 2014), but was

Buckley, 2005), respectively. For 202009-1, amplification of (3) the

recently also found in Miyagi Pref., Japan by the second author. Here,ITS was performed using ITS5 and ITS4 (White et al., 1990). The

we critically examined the morphology and phylogenetic position

PCR conditions were as follows: (1) 94°C for 2 min and 40 cycles ofof this species from Hokkaido Pref. and Miyagi Pref., and provide a

98°C for 10 s, 51°C for 30 s, and 68°C for 3.5 min; (2) 94°C for 2 min,taxonomic treatment.

10 cycles of 98°C for 10 s, 60°C for 30 s, and 68°C for 1 min 45 s,
followed by 30 cycles of 98°C for 10 s, 55°C for 30 s, and 68°C for

Materials and methods

1 min 45 s; (3) 94°C for 5 min and 10 cycles of 98°C for 10 s, 55°C for

Morphological observations

30 s (0.5°C decrease per cycle), and 68°C for 1 min, followed by 25

Morphological observations were conducted based on fresh and freeze-

cycles of 98°C for 10 s, 50°C for 30 s, and 68°C for 1 min. The PCRdried specimens of “Shiroashi” following the methods of Yamamotoproducts were purified using Illustra™ ExoProStar™ (GE Healthcare,

et al. (2020). Hand-cut sections of ascomata and ascospores discharged

Amersham, UK) or Applied Biosystems™ ExoSAP-IT™ (Thermo

from perithecia were mounted in lactoglycerol and observed under aFisher Scientific, Waltham, MA, USA) and sent to Macrogen Japan

light microscope (BX40; Olympus, Tokyo, Japan). All measurements(Tokyo, Japan) or FASMAC (Kanagawa, Japan) for sequencing, using

were made using PhotoRuler version 1.1.3 (http://inocybe.info/). Afterthe same primers for PCR [except for NS1, NS5, NS6, ITS3, ITS4,

observation and isolation, fresh specimens were freeze-dried and

ITS1 (White et al., 1990), and LR5 for (1)]. The resulting bidirectionaloven-dried at 60°C. The specimens were deposited in the herbarium

sequences were edited using 4Peaks 1.8 (http://nucleobytes.com/4peaks)of Tochigi Prefectural Museum (TPM) and the National Museum ofand assembled using MEGA 11 (Tamura et al., 2021). Newly generated

16© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

Yamamoto et al.: Tolypocladium bacillisporum, a new parasite of Elaphomyces

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

sequences were deposited in the DNA Data Bank of Japan (http://www.

ectomycorrhizal associations with Elaphomyces (Paz et al. 2017). The

ddbj.nig.ac.jp) under LC684522–LC684526.

host was Elaphomyces cf. anthracinus (Fig. 1E). The perithecia were

For phylogenetic analyses of the combined dataset of 18S, ITS,

vertically immersed in the fertile head (Fig. 1F–G). Mycoparasitic

28S and tef1, all Tolypocladium species parasitic on Elaphomyces

Tolypocladium spp., such as T. guangdongense (Lin et al., 2008),

for which sequences were available, i.e. T. capitatum (Holmsk.) C.A.

T. japonicum, T. jezoense, T. ophioglossoides, T. tenuisporum

Quandt, Kepler & Spatafora, T. cucullae Y.P. Xiao & T.C. Wen, T.

(Mains) C.A. Quandt, Kepler & Spatafora, and Elaphocordyceps

flavonigrum Noisrip., Tasan., Khons. & Luangsa-ard, T. fractum

×jezoensoides (Kobayasi) Hirok. Sato, S. Ban, Masuya & Hosoya(Mains) C.A. Quandt, Kepler & Spatafora, T. guangdongense (T.H.

are characterized by the clavate stromata (Mains 1957; Kobayasi

Li, Q.Y. Lin & B. Song) V. Papp, T. inusitaticapitatum F.M. Yu, Q.

& Shimizu, 1960). Among them, only T. jezoense parasitizes

Zhao & K.D. Hyde, T. japonicum (Lloyd) C.A. Quandt, Kepler &species of sect. Ceratogaster including E. anthracinus (Kobayasi

Spatafora, T. jezoense (S. Imai) C.A. Quandt, Kepler & Spatafora, T.

& Shimizu, 1960), and T. jezoense is macromorphologically very

ophioglossoides, and T. valliforme (Mains) C.A. Quandt, Kepler &similar to “Shiroashi.” However, the latter formed smaller perithecia

Spatafora, were retrieved from the International Nucleotide Sequence(700–720 × 200–250 μm in T. jezoense vs. 480–590 × 195–235

Databases and included. We also included several insect pathogenic

μm in “Shiroashi”) (Kobayasi & Shimizu, 1960; Fig. 1H), shorter

Tolypocladium spp., i.e. T. dujiaolongae Y.P. Cao & C.R. Li, T.

and narrower asci (450–500 × 13–19 μm vs. 220–370 × 8–12 μm)

fumosum Ruszk.-Mich., J. Pawłowska & Wrzosek, T. inegoense(Kobayasi & Shimizu, 1960; Fig. 1I–J), and ascospores with a large(Kobayasi) C.A. Quandt, Kepler & Spatafora, and T. paradoxum

number of septa (15 vs. 31 or 63) (Japanese Society of Cordyceps(Kobayasi) C.A. Quandt, Kepler & Spatafora, which were suggested

Research, 2014; Fig. 1K). Furthermore, there was almost no overlap

to be close to “Shiroashi” based on the results of National Center for

between the length of the part-spore of “Shiroashi” (3.5–12.3 μm;

Biotechnology Information nucleotide BLAST search (https://blast.

Fig. 1L–M) and those in all of the above-mentioned species (≥10

ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi) and an endophytic species, T. amazonense

μm long) except T. ophioglossoides and T. tenuisporum. These two

Gazis, Skaltsas & P. Chaverri, which is distantly related to the above-

species clearly differ from “Shiroashi” in the length of their perithecia

mentioned species parasitic on Elaphomyces and insects (Gazis et al.,(≥600 μm) (Mains 1957; Kobayasi & Shimizu, 1960). The ascospores2014). Purpureocillium lilacinum (Thom) Luangsa-ard, Houbraken,

of “Shiroashi” germinated on PDA within 1 week and formed whiteHywel-Jones & Samson (Ophiocordycipitaceae) was selected as ancolonies within a month (Fig. 1N–O).

outgroup. The sequences were aligned according to Yamamoto et

18S-ITS-28S rDNA operon (3,395 bp and 2,853 bp) and tef1 (952al. (2020). Topological conflicts with significant support among thebp and 979 bp) sequences were obtained from the isolates C23 andfour trees (18S, 933 bp; ITS, 522 bp; 28S, 859 bp; tef1, 1,006 bp)

C53, respectively. An ITS sequence (498 bp) was obtained fromwere checked directly by topological comparison of the preliminary

the isolates 202009-1. Sequences of each locus were identical except

maximum likelihood (ML) trees. Next, the four datasets were

for the ITS region: a single nucleotide deletion was present in 202009-

combined into a single 3,320 bp dataset and deposited in TreeBASE

1. The BLAST search showed that ITS sequences from Japanese(accession URL: http://purl.org/phylo/treebase/phylows/study/

specimens were most similar to sequences of Tolypocladium spp., but

TB2:S29449). ML analysis of the combined dataset was conducted

the homology was less than 96%. Fig. 2 shows the ML phylogeny ofbased on Yamamoto et al. (2020) using raxmlGUI 2.0 (Edler etthe combined rDNA and tef1 dataset (ln L = −8869.48349). The MPal., 2020) under a general time reversible model of nucleotide

statistics were as follows: tree length = 806, consistency index = 0.65,

substitution, with a discrete gamma distribution (+G) and invariant

retention index = 0.697, and composite index = 0.453. The sequences

sites (+I), as selected by MEGA 11. A maximum parsimony (MP)from isolates of “Shiroashi” and the three abovementioned clavate,

analysis was conducted based on Yamamoto et al. (2020).

mycoparasitic species of Tolypocladium formed a well-supported.

clade (bootstrap support: 94/79). “Shiroashi” is a unique species inResults and Discussion

this clade because it has much smaller part-spores than the otherThe stromata of “Shiroashi” (Fig. 1A–B) were characterized byclosely related species.

the aboveground clavate part, which was olive-colored at maturity

Morphological comparisons and phylogenetic analyses strongly

and yellowish-green when young (Fig. 1C), and undergroundindicated that “Shiroashi” is an undescribed species. Here, we

white rhizomorphs. This species was often found near broad-propose a new name, T. bacillisporum for “Shiroashi” and provide its

leaved trees (Fig. 1D), e.g. Quercus and Carpinus known to formtaxonomic description.

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Yamamoto et al.: Tolypocladium bacillisporum, a new parasite of Elaphomyces

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Fig. 1. Tolypocladium bacillisporum collected in Hokkaido Pref. (A, C–G: TPM-M-9860) and Miyagi Pref. (B, H–M: TPM-M-9861), and ex-type culture C23 (N,O). (A–B) Ascomata. (C) Young stromata in natural habitat. (D) Habitat. Arrow indicates the position of ascomata. (E) Host ascoma showing surface (left)
and gleba (right). (F) Fertile head. (G) Longitudinal section of fertile head. (H) Perithecia. (I) Asci. (J) Apical cap of two asci. (K) Ascospore with 63 septa. (L)Tips of two ascospores. (M) Part-spores. (N–O) Upper (N) and reverse (O) sides of colonies on PDA after 30 d. Bars: A–B, E = 1 cm; F–G = 2 mm; H = 200 μm; I,
K = 100 μm; J, L–M = 10 μm; N–O = 2 cm.

Taxonomyanthracinus and its relatives, are common between the species. But

Tolypocladium bacillisporum Koh. Yamam., Sugawa & K. Takeda,

the part-spores are much smaller than the latter.

sp. nov.

Etymology: From the Latin bacilli = bacillus and sporum = spore,[MycoBank ID: MB 843120]

referring to the bacilliform part-spore of this species.
Fig. 1.

Type: JAPAN, Hokkaido Pref., Tohma-cho, Kaimei-ni-ku, ca. 220 m

Diagnosis: This species is most similar to T. jezoense. The stroma

above sea level, on ascomata of E. cf. anthracinus hypogeous underis macromorphologically similar, and the hosts, Elaphomyces

a secondary forest dominated by Quercus dentata Thunb., 20 Sep.

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Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Yamamoto et al.: Tolypocladium bacillisporum, a new parasite of Elaphomyces

Kyoto,	
  JP	
  (AB027319/AB027365/AB027365/-­‐)	
100/99	

94/79	

Tolypocladium	
  jezoense	

ND	
  (DQ522547/JN049824/DQ518761/DQ522330)	

Shiga,	
  JP	
  (AB027320/AB027366/AB027366/-­‐)	58/-	
100/99	 CN	
  (-­‐/EU039881/-­‐/-­‐)	  T	
CN	  (-­‐/MT386338/-­‐/-­‐)	62/-	Miyagi,	  JP,	
  202009-­‐1	
  (-­‐/LC684524/-­‐/-­‐)	60/-	
98/99	
 Hokkaido,	
  JP,	  C23	  (LC684522/LC684522/LC684522/LC684525)	
  ET	
Hokkaido,	
  JP,	  C53	  (LC684523/LC684523/LC684523/LC684526)	
Kyoto,	
  JP	
  (JN941731/JN943323/JN941410/AB968599)	
81/78	
Osaka,	
  JP	
  (JN941730/JN943324/JN941411/AB968600)	
Amami	
  Isl.,	
  JP	
  (AB027323/AB027369/AB027369/-­‐)	
68/74	
100/95	
 CN	
  (-­‐/KF696557/-­‐/-­‐)	  T	
87/93	 CN	
  (-­‐/MW199076/-­‐/-­‐)	T.	
  japonicum	
T.	
  guangdongense	
T.	
  bacillisporum	

T.	
  paradoxum	
T.	
  dujiaolongae	

ND	
  (DQ522545/-­‐/DQ518759/DQ522328)	
T.	
  fractum	CN	
  (MW798784/MW798788/MW798786	
  /-­‐)	
  T	
T.	
  cucullae	CN	
  (MW798785/MW798789/MW798787	
  /-­‐)	
NO	  (-­‐/AJ786568/-­‐/-­‐)	
62/-	
T.	
  longisegmentatum	
100/100	
 TH	
  (-­‐/MN338090/MN337287/MN338495)	
  ET	
T.	
  ﬂavonigrum	
58/-	
TH	
  (-­‐/MN338091/MN337288/MN338496)	
57/-	
T.	
  inusita;capitatum	
65/89	
96/96	
100/100	
 CN	
  (MW537734/MW537736/MW537719/MW507528)	
CN	
  (MW537733/MW537735/MW537718/MW507527)	
  T	
100/99	
65/73	ND	
  (-­‐/-­‐/DQ118741/DQ118752)	

Hokkaido,	
  JP	
  (AB027322/AB027368/AB027368/-­‐)	PL	  (-­‐/KU925171/KU985053/-­‐)	
  T	
56/-	
FR	
  (AY489689/-­‐/AY489721/AY489615)	
100/100	
 Osaka,	
  JP	
  (JN941739/JN943314/JN941402/AB968598)	
Kagawa,	
  JP	
  (AB027318/AB027364/AB027364/-­‐)	
99/96	 Osaka,	
  JP	
  (JN941735/JN943319/JN941406/AB968602)	
JP	
  (JN941736/JN943316/JN941405/AB968601)	
US	
  (AY489691/-­‐/AY489723/AY489618)	
96/99	CA	
  (AY245648/AY245640/-­‐/-­‐)	T.	
  amazonense	
  (KF747314/-­‐/KF747134/KF747099)	
  ET	
Purpureocillium	
  lilacinum	
  (AY526475/MH855800/FR775484/EF468792)	
  ET	
99/94	T.	
  inegoense	
T.	
  fumosum	
T.	
  capitatum	

T.	
  ophioglossoides	
T.	
  valliforme	

0.02 substitutions/site	

Fig. 2. Maximum likelihood (ML) phylogenetic tree of the combined dataset of 18S, ITS, 28S, and tef1 sequences of Tolypocladium spp.
parasitic on Elaphomyces (black circle) and their relatives on insects (open rhombus). Purpureocillium lilacinum was used as an outgroup.
GenBank accession numbers for 18S, ITS, 28S, and tef1 are shown in parentheses from left to right. Bootstrap (BS) values (1,000 replicates)≥ 50% from ML (left) and maximum parsimony (MP) (right) analyses are shown near the nodes. Branches supported by BS values ≥ 70%from both ML and MP analyses are depicted as thick lines. CA = Canada; CN = China; FR = France; JP = Japan; ND = no data; NO = Norway;
PL = Poland; TH = Thailand; US = USA. T = type specimen; ET = ex-type culture.

2010, K. Yamamoto (holotype, TPM-M-9859; isotype, TNS-F-82223;

solid; ostioles up to 15 per 1 mm2. Stipe grayish-white with greenish

ex-type culture C23 [IFM 67757]).

or yellowish tinge, cylindrical, surface smooth, narrower than fertile

Gene sequences from ex-type culture: LC684522 (18S), LC684522

head, 1.8–2.7 mm wide; striae sometimes present at the border of(ITS), LC684522 (28S), LC684525 (tef1).

the head. Rhizomorphic part white, partially yellowish, frequently

Description: Stromata arise from 1–3 hosts, often solitary, sometimes

branched, fragile, up to 1 mm wide. Perithecia ovoid, verticallycaespitose; epigeous part clavate, not branched, 30–65 mm long;

immersed, ostiole protuberant, 480–590 × 195–235 μm (mean 528.1

underground part rhizomorphic, 8–75 mm long. Fertile head× 218.1 μm, n = 6); wall 12–17 μm thick, composed of 6–7 layers ofyellowish-green when young, turning olive-green as it matures,textura angularis, cells up to 18 μm wide. Asci hyaline, cylindrical,

ellipsoidal to oblong, 5–16 mm long, 3–4.5 mm wide; inside yellow,

8-spored, 220–370 × 8–12 μm (mean 326.4 × 9.16 μm, n = 21); apical© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

19

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Yamamoto et al.: Tolypocladium bacillisporum, a new parasite of Elaphomyces
cap prominent, 2.5–4 μm high, 5–6 μm wide (mean 3.28 × 5.1 μm,

fruiting bodies for PCR. Mycoscience 53: 396–401.

n = 18). Ascospores hyaline, filiform, slightly acute at both ends,

Japanese Society of Cordyceps Research (2014) An illustrated guide

270–355 μm long (mean 313.7 μm, n = 20); septa often 63, rarely 31,

to ecology of Japanese Cordyceps. Seibundo Shinkosha, Tokyo. (infragmenting into part-spores; part-spores cylindrical, bacilliform, 3.5–

Japanese)

12.3 × 1.5–2.5 μm (mean ± SD: 5.6 ± 1.63 × 1.93 ± 0.16 μm, n = 50).
Colonies on PDA growing 11–13 mm within 30 d at 25°C in the dark;
white, surface floccose with aerial hyphae; reverse white to pale yellow.
Distribution, habitat, and fruiting season: On hypogeous ascoma
of Elaphomyces sect. Ceratogaster in broadleaved tree-dominatedforests in the temperate zone of Honshu or subarctic zone of
Hokkaido Pref., Japan. Found in autumn.

Kobayasi Y., Shimizu D. (1960) Monographic studies of Cordyceps. 1.
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Other specimens examined: JAPAN, Hokkaido Pref., Tohma-

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cho, same locality as holotype specimen, on hypogeous ascomata

Molecular Biology and Evolution 17: 629–638.

of E. cf. anthracinus, 11 Sep. 2011, K. Yamamoto (TPM-M-9860;

Paz A., Bellanger J.-M., Lavoise C., Molia A., Ławrynowicz M.,

living culture, C53 [IFM 67758]). Miyagi Pref., Sendai-shi, Taihaku-ku,

Larsson E., Ibarguren I.O., Jeppson M., Læssøe T., Sauve M., Richard

Kagitori, ca. 136 m above sea level, on hypogeous ascomata ofF., Moreau P.-A. (2017) The genus Elaphomyces (Ascomycota,

E. cf. anthracinus under a Carpinus standing by a stream in mixed
forest dominated by Abies ﬁrma Siebold & Zucc., 27 Sep. 2020,
G. Sugawa (TPM-M-9861; living culture, 202009-1 [IFM 67759]).
Note: Ascoma of TPM-M-9860 and microstructures of TPM-M-9859
are illustrated as “Shiroashi-hime-hanayasuri-take” in the page 259 ofJapanese Society of Cordyceps Research (2014).

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Quandt C.A., Kepler R.M., Gams W., Araújo J.P.M., Ban S., Evans H.C.,
Hughes D., Humber R., Hywel-Jones N., Li Z., Luangsa-ard J.J., Rehner
S.A., Sanjuan T., Sato H., Shrestha B., Sung G.-H., Yao Y.-J., Zare R.,

We are grateful to Mr. Yoshitaka Kaitsu (Japanese Society of

Spatafora J.W. (2014) Phylogenetic-based nomenclatural proposals

Cordyceps Research) for obtaining permission for field sampling

for Ophiocordycipitaceae (Hypocreales) with new combinations infrom Tohma Town Office and supporting the field survey conducted

Tolypocladium. IMA Fungus 5: 121–134.

by the first author. We also thank Dr. Kentaro Hosaka for depositing
specimens in TNS.

Quandt C.A., Patterson W., Spatafora J.W. (2018) Harnessing thepower of phylogenomics to disentangle the directionality andsignatures of interkingdom host jumping in the parasitic fungal genus
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Online publication; available at: https://jats-truffles.org/truffology/

Online publication; available at: https://jats-truffles.org/truffology/

Truffology 5 (1): 23–32 (2022)

Original peer-reviewed article （原著論文 ； 査読有）Scleroderma capeverdeanum, a subhypogeous fungus new to Japan,
collected from the Eucalyptus plantation in Ibaraki Prefecture
茨城県のユーカリ植栽地において採集された日本新産の半地下生菌， Scleroderma capeverdeanum
Taiga Kasuya1*, Mihoko Uzawa2, Kentaro Hosaka3
糟谷 大河 1*, 鵜沢 美穂子 2, 保坂 健太郎 3
1

Department of Biology, Keio University, 4-1-1 Hiyoshi, Kohoku-ku, Yokohama-shi, Kanagawa 223-8521, Japan慶應義塾大学生物学教室， 〒 223-8521 神奈川県横浜市港北区日吉 4-1-1

2

Ibaraki Nature Museum, 700 Osaki, Bando-shi, Ibaraki 306-0622, Japan
ミュージアムパーク茨城県自然博物館， 〒 306-0622 茨城県坂東市大崎 700

3

Department of Botany, National Museum of Nature and Science, 4-1-1 Amakubo, Tsukuba-shi, Ibaraki 305-0005, Japan
国立科学博物館植物研究部，〒 305-0005 茨城県つくば市天久保 4-1-1* Corresponding author （主著者）

E-mail: tkasuya@keio.jp

Abstract
A subhypogeous sclerodermataceous fungus was collected in the Eucalyptus plantation of Ibaraki Prefecture,
central Japan. Based on morphological observations and phylogenetic analyses using nuclear ribosomal DNA
sequences, the present fungus was identified as Scleroderma capeverdeanum, belonging to Sclerodermataceae(Boletales). Scleroderma capeverdeanum is new to Japan and characterized by small-sized (4–10 mm in diam.),sessile basidiomata, yellowish to yellowish brown exoperidium with brownish, areolate to verrucose scales, andechinulate basidiospores. Japanese specimens of S. capeverdearnum are probably associated with introduced E.
globulus, and therefore they are most likely exotic species introduced from Australia.

要旨
茨城県のユーカリ植栽地において、 ニセショウロ型の半地下生菌の一種が採集された。 本菌について、 形態的特徴の観察および子実体より得られた核リボソーム DNA の塩基配列 を用いた系統解析を行った。その結果、本菌はイグチ目ニセショウロ科に属する Scleroderma capeverdeanum と同定された。 本種は日本新産であり、 子実体が小型 （直径 4–10 mm） で無柄である点、 外皮が黄色から黄褐色で、 網目状からいぼ状にひび割れ、 褐色を帯びた鱗片を有する点、 そして担子胞子が針状突起に覆われる点により特徴づけられる。 日本産標本は Eucalyptus globulus と共生し、 オーストラリアからの外来種であると推察される。 本菌の和名をユーカリキヒメニセショウロとする。
Article Info: Submitted: 14 December 2021

© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

Accepted: 19 March 2022

Published: 31 March 2022

23

Kasuya et al.: Scleroderma capeverdeanum new to Japan

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Introduction

studies of macrofungal diversity at the Eucalyptus plantation in

The genus Scleroderma Pers. is currently classified in the order

Ishioka of Ibaraki Prefecture, central Honshu, Japan, three specimens

Boletales based on molecular phylogenetic analyses (Binder &of a subhypogeous sclerodermataceous fungus were collected. Based

Bresinsky, 2002; Binder & Hibbett, 2006; Watling, 2006). Previously,

on morphological observations and phylogenetic analyses usingca. 40 species of the genus were recognized from tropical, subtropical

nuclear ribosomal DNA sequences, the present fungus was identified

to temperate regions of the world (Baseia et al., 2016; Guzmán, 1970;

as Scleroderma capeverdeanum M.P. Martín, M. Dueñas & Telleria.

Guzmán et al., 2013; Nouhra et al., 2012; Ortiz-Rivero et al., 2021;

This species was originally described from Cape Verde, Macaronesia,

Zhang et al., 2013, 2020). In Japan, fifteen species of Scleroderma

off the coast of northwestern Africa (Crous et al., 2016) and it iswere hitherto recorded (Kasuya et al., 2002; Kasuya & Guzmán,

known only from the type locality. Our morphological observations

2007; Yoshimi, 2002). The genus forms epigeous, subhypogeus

and phylogenetic analyses of the Japanese specimens revealed thator hypogeous basidiomata (Beaton & Weste, 1982; Giachini et al.,it is the second distributional record of S. capeverdeanum in the

2000; Guzmán, 1970; Guzmán et al., 2013; Nouhra et al., 2012),

world. Moreover, our study demonstrates that S. capeverdeanum

and many species have been confirmed as ectomycorrhizal with ais presumably associated with Eucalyptus spp. In this paper,

wide range of host plants such as Pinaceae, Fagaceae, Salicaceae andmorphological, phylogenetic and ecological characteristics ofMyrtaceae (Mrak et al., 2017; Nouhra et al., 2012). Japanese species

Japanese specimens of S. capeverdeanum are discussed.

of Scleroderma were usually observed under betulaceous, fagaceousor pinaceous trees (Kasuya et al., 2002; Kasuya & Guzmán, 2007;
Yoshimi, 2002).

Materials and methods
Sample collecting and morphological observations

Some species of Eucalyptus (Myrtaceae) were introduced from

Fresh subhypogeous basidiomata were collected among plant

Australia to Japan early in the 20th century to meet the country’s

debris and rich soil in the exotic Eucalyptus plantation dominateddemand for pulpwood (Shibata & Yoshikawa, 1956). Recently, toby E. globulus Labill. at Otsuka, Ishioka, Ibaraki Prefecture (Fig. 1)

supply the demand for gardening, greening, and feeds of Koala which

during October to December, 2020. Specimens were photographed

are kept at zoos, several plantations of Eucalyptus spp. are maintained

and observed macroscopically. Fresh basidiomata of specimens

in Japan (Inuma et al., 2015; Komaki et al., 2000). Eucalyptus is anwere dried using a food dehydrator (Snackmaster Express FD-60;

ectomycorrhizal tree genus and several species of Scleroderma have

Nesco/American Harvest, Milwaukee, WI, USA) under 46 °C for

been known as its ectomycorrhizal symbionts (Bashir & Khalid,

46 hours. For light microscopy, hand-cut sections of both fresh and2015; Beaton & Weste, 1982; Giachini et al., 2000; Rose et al.,dried specimens were mounted in water, 3% KOH or 70% ethanol

1981). However, only two species, i.e., S. cepa Pers. and S. ﬂavidum

reagent. Dimensions of basidiospores were measured from water-

Ellis & Everh. have previously been recorded in exotic Eucalyptus

mounted sections. More than 50 randomly selected basidiospores

plantations in Japan (Yoshimi, 2002). During the course of our recent

were measured under a light microscope at 1000× magnification. All

Fig. 1. Habitat in the locality of Scleroderma capeverdeanum. A: Eucalyptus globulus trees. B: Numerous fallen leaves and old bark of E. globulus are densely
deposited on the ground.

24© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Kasuya et al.: Scleroderma capeverdeanum new to Japanmeasurements were performed with Photoruler 1.1.3 (http://inocybe.

specimen were used for the phylogenetic analyses. Additionally,

info/_userdata/ruler/PhotoRuler.html). In addition, the surface features

42 ITS and 26 LSU sequences of sclerodermataceous fungi wereof basidiospores were observed by scanning electron microscopy

retrieved from the NCBI GenBank databases (https://www.ncbi.nlm.

(SEM). For SEM, a small portion from glebal tissue was put onto

nih.gov/) and included in the analyses (Table 1). DNA sequences weredouble-sided adhesive tape on a specimen holder and coated withinitially aligned using MUSCLE v.3.6 (Edgar, 2004a, b), followed byplatinum-palladium using a JFC-1600 Ion Sputter Coater (JEOL,

manual alignment in the data editor of BioEdit ver. 7.0.1 (Hall, 1999).

Tokyo, Japan). Specimen was examined with a JSM-6480LV SEM

A total of 36 ITS and 89 LSU nucleotide positions were respectively(JEOL, Tokyo, Japan) operating at 5 kV. Three specimens examined

excluded from the analyses because of the presence of ambiguously

in this study were deposited at mycological herbaria of Ibaraki Naturealigned regions. Phylogenetic analyses were performed independently

Museum (INM) and National Museum of Nature and Science (TNS)

for ITS and LSU sequences under maximum parsimony (MP) andin Japan.

maximum likelihood (ML) criteria. MP analyses were conductedunder the equally weighted parsimony criterion using PAUP version

DNA preparation, PCR and sequencing

4.0b10 (Swofford, 2002). The analyses were performed using the

DNA extraction, PCR and DNA sequencing were carried out

heuristic search option with tree-bisection-reconnection (TBR)

according to the methods introduced by Kasuya et al. (2012). First,

and MULTREES option, and 1000 replicates of random addition

small fragments of glebal tissue from freshly collected samples

sequence were conducted. Support for the individual nodes waswere soaked in DMSO buffer (Seutin et al., 1991) with thetested by means of bootstrap analysis (Felsenstein, 1985) under the

addition of 100 mM Tris-HCl (pH 8.0) and 0.1 M sodium sulfite

equally weighted parsimony criterion. A bootstrap analysis was based(Na2SO3) at 4 °C, following the procedures of Hosaka (2009),

on 10,000 bootstrap replicates using the heuristic search option with

Hosaka & Castellano (2008), and Hosaka et al. (2010). DNA of

TBR and MULTREES options with ten random additional sequences.

the above specimens was extracted from the tissue fragments

ML analyses were performed using MEGA X (Kumar et al., 2018)

stored in DMSO buffer. DNA extractions used the modified

after testing the best models. According to the lowest BIC (Bayesian

CTAB extraction followed by glass milk purification methods as

Information Criterion) scores, Kimura 2-parameter (Kimura, 1980)

summarized by Hosaka (2009) and Hosaka & Castellano (2008).

with gamma distributed rate heterogenetic and a proportion of

DNA sequence data were obtained from the nuclear ribosomal

invariant sites (K2+G+I) and Tamura-Nei (Tamura & Nei, 1993) withITS region and a part of LSU. For amplifying the ITS region, thegamma distributed rate heterogenetic and a proportion of invariant

primer combination of ITS5 and ITS4 (White et al., 1990) was

sites (TN93+G+I) were chosen as the optimal substitution models

used. For amplifying the LSU, the combination of LR0R and LR5

for the analyses of the ITS and LSU datasets, respectively. Initial(Vilgalys & Hester, 1990) was used. PCR were carried out using

trees for the heuristic search were obtained automatically by applying

20 µl reaction volume, each containing 1 µl genomic DNA, 1 µl

Neighbor-Join and BioNJ algorithms to a matrix of pairwise distances

dNTP (4 mM), 1 µl each primer (8 µM), 0.5 units Taq polymerase

estimated using the Maximum Composite Likelihood (MCL)(Takara Bio Inc., Tokyo, Japan), 2 µl MgCl2 (25 mM), and 2 µl

approach, and then selecting the topology with superior log likelihood

bovine serum albumin (BSA). Cycling parameters for ITS region

value. For the ML analyses, clade robustness was assessed using

and LSU followed Kasuya et al. (2012). PCR products werea bootstrap analysis with 1000 replicates. Sequences of Pisolithus

electrophoresed in 1% agarose gels stained with ethidium bromide

arhizus (Scop.) Rauschert were selected for outgroups, which wereand visualized under UV light. When amplification bands werestrongly supported as the sister of the major clade containing theconfirmed, PCR products were then purified using the ExoSap-IT

genus Scleroderma (Baseia et al., 2016; Binder & Hibbett, 2006;(Millipore, Molsheim, France) and directly sequenced using the

Hosaka, 2009; Phosri et al., 2009).

Big Dye Terminator Cycle Sequencing Kit (Applied Biosystems,
Norwalk, CT, USA), following the manufacturer’s instructions.

Results

A total of two newly generated sequences from this study wereMorphological observations

deposited in GenBank (Table 1).

Japanese specimens were morphologically identical to S.
capeverdeanum in their sessile, small-sized basidiomata (Fig. 2A–

Phylogenetic analyses
Newly generated ITS and LSU sequences from the Japanese© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022B), yellowish to yellowish brown exoperidium covered by brownish,
areolate to verrucose scales (Fig. 2B–C), and globose, densely
25Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Kasuya et al.: Scleroderma capeverdeanum new to Japan

Table 1. Specimen identification, voucher specimen and/or isolate numbers, origin and GenBank accession numbers for ITS and LSU sequences used forthe present phylogenetic analyses
Species names
Pisolithus arhizus
P. arhizus
Scleroderma areolatum
S. areolatum
S. areolatum
S. aurantium
S. aurantium
S. bermudense
S. bermudense
S. bovista
S. bovista
S. bovista
S. bovista
S. bovista
S. bovista
S. bovista
S. bovista
S. bovista
S. bovista
S. capeverdeanum
S. capeverdeanum
S. cepa
S. cepa
S. citrinum
S. citrinum
S. columnare
S. columnare
S. dictyospora
S. dunensis
S. dunensis
S. dunensis
S. echinatum
S. laeve
S. laeve
S. laeve
S. laeve
S. laeve
S. meridionale
S. michiganense
S. michiganense
S. polyrhizum
S. polyrhizum
S. polyrhizum
S. radicans
S. radicans
S. septentrionale
S. septentrionale
S. sinnamariense
S. sinnamariense
S. sinnamariense
S. verrucosum
S. verrucosum
S. verrucosum
S. xanthochroum
S. yunnanense
S. yunnanense
S. yunnanense
Scleroderma sp.
Scleroderma sp.
Uncultured ectomycorrhizal fungus

GenBank accession no.
ITS
LSU
Italy
FR748132n/a
Wat.139161; 92fbisPISOLIn/an/a
AF336262
588; n/an/a; O3C_4
USA: New York
JX030282n/an/a; Scl_1-1-Qm1H
USA: New York
JX030288
n/a
AWW211; n/aUSAn/aEU718149
n/a; 8_5
China: Sichuan
HM237174 n/a
HB#E02; HBS2
Pakistan
KF802172n/a
BZ3961; n/aBelizen/a
DQ644137n/a; BA 06.04.22
Guadeloupe
FR682092
n/aMG061001_01; n/aGermany: Thuringia
JQ669943
n/a
n/a
Japan
AB099901
n/aNara_ScB84e3; n/aJapan: Shizuoka, Gotenba
AB211267
n/a
TNS-F-82197 (= Kasuya B251); n/a Japan: Yamanashi, Narusawa OL764485
OL752409
TNS-F-82195 (= Kasuya B236); n/a Japan: Nagano, Nagano
OL764484
OL752408
TNS-F-82200 (= Kasuya B804): n/a Japan: Toyama, Toyama
OL764487
OL752412
K80S09; n/a
New Zealand
GQ267487
n/aTrappe26575; n/aUSA
EU819517
EU718178n/a; O1Q_1
USA: New York
JX030277
n/a
W#1149; n/an/an/aAF336264
TNS-F-82205 (= Kasuya B4288); n/a Japan: Ibaraki, Ishioka
OL764491
OL752414
MA-Fungi 87406*; n/aCape Verde: Santiago Island
KU747111
KU747110
JMP0081; n/aUSA
EU819439n/a184; n/an/an/aAF336265n/a; ecmSC2
Czech
JX679368
n/a
AWW212; n/aUSAn/aEU718151
CUB Microbiology KHS3; n/a
Thailand: Chachoengsao
AB459512n/aMS43; n/an/an/aAF336273
MS55; n/an/an/aAF336267
UFRN-Fungus 2551; n/aBrazilKU747116n/a
UFRN-Fungus 2553; n/aBrazilKU747118n/a
UFRN-Fungus 2206; n/aBrazilKU747121n/aMS34; n/an/an/aAF336268
ZLR46; n/a
China
MW553325 MW553729
TNS-F-82199 (= Kasuya B803); n/a Japan: Ishikawa, Komatsun/aOL752411
MCA242; n/aUSA
EU718117n/a
OSC27936; n/aUSA
EU718120n/a27936; n/an/an/aDQ683003
AWW218; n/aUSA
EU718121
EU718152
E00278311; MICSCL2
USA:Wisconsin, Sheboygan
FM213347n/an/a; Scl_3-1-2L
USA: New York
JX030206n/an/a; 11_3
China: Sichuan
HM237173 n/an/a; Scl_1-1-4Nc
USA: North Carolina
JX030195n/a594; n/aUSA
n/a
DQ683000
PDD103563; n/a
New Zealandn/a
KP191692
PDD103558; n/a
New Zealandn/a
KP191693
J. Nitare (12.9.1986); SEPSCL2
Sweden: Norrbotten
FM213336
n/a
A.D. Parker (2.10.1997); SEPSCL3
USA: Wisconsin, Lone RockFM213338
n/a
SINSCL_8; n/a
Thailand: Pranomprai, Roi Et
FM213363
n/a
NAST-FB11; CMU53-210-2
Thailand
HQ687222n/aMS46; n/an/an/aAF336270
SV-5602; n/a
Burkina Faso
FJ840461
n/a
BCC-MPM2605; n/a
Spain: Catalonia
AJ629886n/a
5; n/an/an/aAF336271
AWW311; n/a
Malaysia
EU718126
EU718154
KUN-HKAS 79633A; Ji001A
China: Yunnan
JQ639040
n/a
KUN-HKAS 79633B; Ji001B
China: Yunnan
JQ639041
n/a
KUN-HKAS 79633C; Ji001C
China: Yunnan
JQ639042
n/a
TNS-F-82198 (= Kasuya B714); n/a Japan: Ishikawa, Komatsu
OL764486
OL752410
MEL2295738A; n/aAustralia
n/aEU718181n/a; L5001_Sclerod_Cam_Euc02
Cameroon
FR731681
n/aHerbarium voucher; isolate

Origin*Holotype of Scleroderma capeverdeanum.
"n/a" means information not available. Sequences newly generated in the present study were shown in bold.

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Zhang et al. (2013)
Zhang et al. (2013)
Present study
Wilson et al. (2011)
Tedersoo et al. (2011)

echinulate basidiospores (Fig. 2D–E). However, subhypogeous

It had an aligned length of 865 characters including gaps, of which

habit of Japanese specimens is different from the type specimen of

36 characters were constant, 509 variable and phylogeneticallyS. capeverdeanum, which was described as epigeous (Crous et al.,uninformative, and 320 phylogenetically informative. The MP2016). A detailed description and illustrations of the salient features

analysis of the ITS dataset yielded 10,000 most parsimonious

of Japanese specimens are given below.

trees, of which 149 trees were found in the first step of the heuristic
search. Consistency index (CI), retention index (RI) and rescaled

Phylogenetic analyses
The ITS dataset was consisted by 42 ingroup and 1 outgroup taxa.
26

consistency index (RC) of the most parsimonious trees are 0.4487,
0.7205, 0.3233, respectively. The highest log likelihood of the© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Kasuya et al.: Scleroderma capeverdeanum new to Japan

Fig. 2. Morphological features of Scleroderma capeverdeanum. A: Basidiomata in the natural habitat (INM-2-217835). B: Surface of mature basidioma (INM2-217835). C: Vertical sections of mature basidiomata showing exoperidium and gleba (TNS-F-82205). D: Basidiospores (TNS-F-82205). E: Scanning electron
microscopy image of basidiospores (TNS-F-82205). Bars: A–B = 1 cm; C = 5 mm; D = 10 µm; E = 5 µm.

resulting ML tree of the ITS dataset is -2446.64. A discrete Gamma

informative. The MP analysis of the LSU dataset yielded 10,000

distribution was used to model evolutionary rate differences among

most parsimonious trees, of which 36 trees were found in the firstsites [5 categories (+G, parameter = 0.5939)]. The rate variation

step of the heuristic search. CI, RI and RC of the most parsimonious

model allowed for some sites to be evolutionarily invariable [(+I),

trees are 0.3631, 0.5807, 0.2108, respectively. The highest log

41.58% sites]. The MP and ML analyses resulted in trees that werelikelihood of the resulting ML tree of the LSU dataset is -2656.84.

identical in topology. Hence, only the MP tree of the ITS dataset

A discrete Gamma distribution was used to model evolutionary rateis shown in Fig. 3. By MP and ML, ITS sequences generated fromdifferences among sites [5 categories (+G, parameter = 0.4036)].

Japanese and Cape Verdean samples of S. capeverdeanum were

The rate variation model allowed for some sites to be evolutionarily

placed within a strongly supported clade (MP BS = 100%, ML BS

invariable [(+I), 63.46% sites]. The MP and ML analyses resulted= 99%; Fig. 3) and were distinct from those of the other members ofin trees that were identical in topology. Hence, only the MP tree

Scleroderma.

of the LSU dataset is shown in Fig. 4. By MP and ML, LSU

The LSU dataset was consisted by 26 ingroup and 1 outgroupsequences generated from Japanese and Cape Verdean samples of S.

taxa. It had an aligned length of 1006 characters including

capeverdeanum were placed within a strongly supported clade (MPgaps, of which 89 characters were constant, 836 variable and

BS = 96%, ML BS = 100%; Fig. 4) and were distinct from those ofphylogenetically uninformative, and 81 phylogeneticallythe other members of Scleroderma.

© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

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Kasuya et al.: Scleroderma capeverdeanum new to Japan

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Fig. 3. Phylogenetic tree generated from maximum parsimony (MP) analysis based on the nuclear ribosomal ITS region of
selected sclerodermataceous species. Bootstrap support values (BS) of MP and maximum likelihood (ML) greater than 50% areshown for each node (MP/ML), and BS less than 50% are indicated by an asterisk (*).

Fig. 4. Phylogenetic tree generated from maximum parsimony (MP) analysis based on the nuclear ribosomal LSU of selectedsclerodermataceous species. Bootstrap support values (BS) of MP and maximum likelihood (ML) greater than 50% are shown foreach node (MP/ML), and BS less than 50% are indicated by an asterisk (*).

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© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Kasuya et al.: Scleroderma capeverdeanum new to Japan

Taxonomyof S. capeverdeanum were observed among these litter and rich

Scleroderma capeverdeanum M.P. Martín, M. Dueñas & Telleria,soil, as subhypogeous nature. Although the detailed environmental

in Crous et al., Persoonia 36: 413 (2016)

information on the type locality of S. capeverdeanum was not shown
Fig. 2.

by Crous et al. (2016), subhypogeous or epigeous nature of its

Description: Basidiomata (Fig. 2A–B) subhypogeous, globose,basidiomata presumably depend on their habitat. The present species

depressed globose to subglobose, small-sized, 4–10 mm broad,is morphologically similar to S. ﬂavidum in its subhypogeous, sessile

sessile, arising from whitish mycelial strands attached to plant debris

basidiomata with yellowish surface of peridium and echinulate

and soil. Peridium ca. 0.5–1 mm thick, two-layered. Exoperidium

basidiospores (Yoshimi, 2002). However, S. flavidum is clearly(Fig. 2B–C) very thin, yellow to yellowish brown, covered by brown

distinguishable from S. capeverdeanum by its larger basidiomata

to dark brown, areolate to verrucose scales. Endoperidium papery,(3–5 cm in diam.; Yoshimi, 2002) and larger basidiospores (12–16

firm but brittle when dry, whitish. Apical part of peridium irregularlyµm broad including surface ornamentation; Coccia et al., 1990).

dehiscent and opening lacerate pore when mature. Gleba (Fig. 2C)

Another species having yellowish basidiomata, S. sinnamariense

compact when young, becoming powdery when mature, grayish.

Mont. is also distinguished from S. capeverdeanum by its substipitate

Basidiospores (Fig. 2D–E) globose, 8.5–11 µm in diam. including

basidiomata and subreticulate basidiospores (Guzmán, 1970; Guzmán

surface ornamentation, dark brown in 3% KOH, dark reddish brown in& Ovrebo, 2000). Although basidiospores of S. cepa are echinulate

70% ethanol reagent; surface densely echinulate composed of hyaline

and it forms sometimes yellowish basidiomata, it is distinct from S.

spines up to 1.5 µm long. Under SEM, spines of basidiospore surface

capeverdeanum because it has larger basidiomata (up to 4 cm broad;irregularly covered with scaly to tabular materials (Fig. 2E). Basidia

Guzmán, 1970), and thicker peridium (up to 3 mm; Coccia et al.,not observed. Rudimentary hyphae interwoven, septate, thin-walled,1990). Brownish scales on peridium appear in mature basidiomata

4–8 µm broad, hyaline in 3% KOH and 70% ethanol reagent; surfaceof S. capeverdeanum. Although S. verrucosum (Bull.) Pers. also has

sparsely covered with amorphous, hyaline gelatinous materials.

similar verrucose scales on the peridium (Sims et al., 1995), it has

Habitat: Subhypogeous, usually solitary or small groups among plantlarger basidiomata (up to 4 cm broad; Coccia et al., 1990; Guzmán,debris and rich soil under Eucalyptus globulus trees (Fig. 1). Fruiting1970) and larger basidiospores (11–15 µm in diam. including surface

in the Japanese localities occurs in autumn to winter (October toornamentation; Yoshimi, 2002) than S. capeverdeanum.

December).

Results of our phylogenetic analyses (Figs. 3, 4) show theSpecimens examined: JAPAN, Ibaraki Prefecture, Ishioka,

monophyly of the present species, as indicated by Crous et al. (2016).

Otsuka (alt. approx. 140 m asl.), October 12, 2020, coll. T.

Crous et al. (2016) reported that the holotype of S. capeverdeanum

Kasuya, INM-2-217835; same place, October 12, 2020, coll. T.

was collected under Furcraea foetida (L.) Haw. (Asparagaceae)

Kasuya, TNS-F-82205, GenBank accession no.: OL764491 (ITS),

and Lantana camara L. (Verbenaceae), and no relationships with

OL752414 (LSU); same place, December 21, 2020, coll. T. Kasuya,

Eucalyptus were shown in their original description. However,INM-2-217836.

the ITS sequence of S. capeverdeanum from the root sample of E.

Known distribution: Cape Verde (Crous et al., 2016) and Japan (newgrandis W. Hill in Cameroon (GenBank FR731681; Tedersoo etrecord).

al., 2011) was identical with that of fruit body data (Fig. 3). In CapeJapanese name: Yûkari-ki-hime-nise-shoro (“yûkari” = Eucalyptus;

Verde, there are exotic Eucalyptus plantations in wide range of islands“ki-hime” = yellowish, small-sized; “nise-shoro” = the Japanese namein addition to introduced F. foetida and L. camara communities

of Scleroderma).

(Frahm et al., 1996). While it is unclear whether the mycorrhizal hostof the present species is restricted to Eucalyptus, S. capeverdeanum

Discussion

presumably prefers the habitat dominated by eucalypt trees. Their

As outlined above, studied Japanese specimens were morphologicallypotential association with F. foetida and L. camara, however, warrants

almost identical to the original description of S. capeverdeanum (Crous

further studies.

et al., 2016). However, basidiomata of Japanese materials were

Based on the present ITS phylogeny (Fig. 3), S. capeverdeanum

subhypogeous while the type specimen of the present species wasclusters with two sequences of root sample collected from E.

described as epigeous (Crous et al., 2016). Numerous fallen leaves

grandis in China (GenBank HM237173 and HM237174), as S.

and old bark of E. globulus are densely deposited on the groundpolyrhizum (J.F. Gmel.) Pers. and S. aurantium (L.) Pers., and one

in the locality of Japanese specimens (Fig. 1B) and basidiomata

sequence from Pakistan as S. aurantium (GenBank KF802172;© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

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Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

Kasuya et al.: Scleroderma capeverdeanum new to Japan
Bashir & Khalid, 2015), as a sister group. Moreover, phylogenetic
tree of the LSU dataset (Fig. 4) shows that three sequences fromgrowing in different areas of the Punjab Province, Pakistan. Australian
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specimen housed at MEL (2295738A) is the voucher of EU718181,
and it was collected on soil (grass nearby) under a rosaceous plant,
Prunus cerasifera Ehrh. var. atropurpurea H. Jaeger. Althoughrelationships between the above Australian specimen and any
myrtaceous plants is not shown, KP191692 and KP191693 wereobtained from two specimens (103558 and 103563 housed at PDD,
respectively) identified as S. radicans, and both were collected

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D., Edwards J., Roets F., Hubka V., Taylor P.W.J., Heykoop M.,

from under Leptospermum (Myrtaceae) trees. These facts suggest

Martín M.P., Moreno G., Sutton D.A., Wiederhold N.P., Barnes

that the S. capeverdeanum and its phylogenetically related taxa

C.W., Carlavilla J.R., Gené J., Giraldo A., Guarnaccia V., Guarro

presumably have some type of preference to myrtaceous plants forJ., Hernández-Restrepo M., Kolařík M., Manjón J.L., Pascoe I.G.,

their habitat. Although further studies on the ecological nature of S.

Popov E.S., Sandoval-Denis M., Woudenberg J.H.C., Acharya K.,

capeverdeanum and its relatives are needed to clarify the relationship

Alexandrova A.V., Alvarado P., Barbosa R.N., Baseia I.G., Blanchette

between them and their associated plants, we treat S. capeverdeanum

R.A., Boekhout T., Burgess T.I., Cano-Lira J.F., Čmoková A., Dimitrov

as an introduced fungal species to Japan from outside because
any native species of Eucalyptus, Leptospermum, Furcraea andLantana are not known in the country. While it is unknown whether
the origin of S. capeverdeanum is Cape Verde or not, this species
was probably introduced to Japan from Australia with E. globulus.
Further investigations of Scleroderma in worldwide eucalypt

R.A., Dyakov M.Y., Dueñas M., Dutta A.K., Esteve-Raventós F.,
Fedosova A.G., Fournier J., Gamboa P., Gouliamova D.E., Grebenc
T., Groenewald M., Hanse B., Hardy G.E.St.J., Held B.W., Jurjević
Ž., Kaewgrajang T., Latha K.P.D., Lombard L., Luangsa-Ard J.J.,
Lysková P., Mallátová N., Manimohan P., Miller A.N., Mirabolfathy M.,
Morozova O.V., Obodai M., Oliveira N.T., Ordóñez M.E., Otto E.C.,
Paloi S., Peterson S.W., Phosri C., Roux J., Salazar W.A., Sánchez

forests will demonstrate the origin and geographic distribution of S.

A., Sarria G.A., Shin H.-D., Silva B.D.B., Silva G.A., Smith M.Th.,

capeverdeanum.

Souza-Motta C.M., Stchigel A.M., Stoilova-Disheva M.M., Sulzbacher
M.A., Telleria M.T., Toapanta C., Traba J.M., Valenzuela-Lopez N.,

Acknowledgements
We are very much obliged to Ms. Kyung-Ok Nam and Ms. Megumi
Otsuka of the National Museum of Nature and Science for help withassisting molecular experiments. We also thank Mr. Minoru Nakajima,
Mr. Wajiro Yoshitake and Mr. Yoshinori Inaba for facilitating thefieldwork. We are grateful to Dr. Tamao Hatta of Chiba Institute of
Science for his skillful technical assistance and for helpful suggestions
to SEM observation. This work was supported by research grants
from the committee of the introduced species management of Ibaraki
Prefectural Government and the comprehensive surveys of plants,
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32© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

Online publication; available at: https://jats-truffles.org/truffology/

Truffology 5 (1): 33–40 (2022)

原著論文 （査読有） (Original peer-reviewed article)

地下生担子菌 Hymenogaster citrinus （ハラタケ目ヒメノガステル科） の日本初記録
First report of a hypogeous basidiomycete, Hymenogaster citrinus(Agaricales, Hymenogastraceae) from Japan大前 宗之 1*, 山本 航平 2, 橋本 陽 3, 大熊 盛也 3

Muneyuki Ohmae1*, Kohei Yamamoto2, Akira Hashimoto3, Moriya Ohkuma3
1

株式会社北研， 〒 321-0222 栃木県下都賀郡壬生町駅東町 7-3
Hokken Co. Ltd., 7-3 Ekihigashimachi, Mibu-machi, Shimotsuga-gun, Tochigi 321‒0222, Japan2

栃木県立博物館 , 〒 320-0865 栃木県宇都宮市睦町 2-2
Tochigi Prefectural Museum, 2-2 Mutsumi-cho, Utsunomiya-shi, Tochigi, 320-0865, Japan3

国立研究開発法人理化学研究所バイオリソース研究センター微生物材料開発室， 〒 305-0074 茨城県つくば市
高野台 3-1-1
Microbe Division / Japan Collection of Microorganisms RIKEN BioResource Research Center, 3-1-1 Koyadai, Tsukubashi, Ibaraki, 305-0074, Japan* 主著者 (Corresponding author)

E-mail: trick.dontokoi.fungi@gmail.com

要旨
栃木県の石灰岩の分布域における地下生菌調査において、 石灰岩の露出する斜面に生育したコナラ、 シデ属の樹下より外皮が黄色を帯びるヒメノガステル属の子実体を採集した。 形態観察および核リボソーム DNA の internal transcribedspacer 領域を用いた分子系統解析の結果、 本菌を Hymenogaster citrinus （和名 ： レモンツブタケ ［新称］） と同定した。
本種の国内における報告は初である。

Abstract
During our field survey of hypogeous fungi, we found yellowish basidiomata of Hymenogaster species in Tochigi
Prefecture, central Honshu, Japan. They occurred on calcareous soil under Quercus serrata and Carpinus sp. ina limestone area. Based on the morphological observation and molecular phylogenetic analysis using internaltranscribed spacer of nuclear ribosomal DNA, we identified the basidiomata as Hymenogaster citrinus. This is thefirst record of the species from Japan.
Article Info: Submitted: 10 February 2022 Accepted: 19 March 2022

Published: 31 March 2022

序論

（Kaounas et al., 2011；Soop et al., 2016）。 本属は北半球 （ヨーロッヒメノガステル属 Hymenogaster Vittad. は地下生菌よりなる分類群

パ [Montecchi & Sarasini, 2000 ； Soehner, 1962]、 北 米 [Dodge &であり、 地上生のワカフサタケ属 Hebeloma (Fr.) P. Kumm.、 ヒメ

Zeller, 1934 ； Smith, 1966 ； Trappe et al., 2009]、 アジア [Liu, 1998 ；ムサシタケ属 Alnicola Kühner、 Psathyloma Soop, J.A. Cooper &𠮷見 ・ 本郷、 1986]） を中心に分布し、 ブナ科、 マツ科、 カバノ

Dima および地下生の Wakeﬁeldia macrospora (Hawker) Hawker

キ科、 シナノキ科、 ヤナギ科などの樹木と外生菌根共生を営むとともにハラタケ目ヒメノガステル科 （担子菌門） に属する

（Csizmár et al., 2021 ； Stielow et al., 2011 ； Tedersoo et al., 2010 ；© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

33

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

大前ほか ： 日本新産種 Hymengaster citrinus
Trappe et al., 2009）。 本属は多数の種を含み、 Index Fungorum

化カリウム水溶液 （5% KOH） あるいはラクトグリセロール （水 ：（http://www.indexfungorum.org/、 2021 年 12 月 4 日閲覧） にお

グリセロール ： 乳酸 = 1:1:1 (v/v/v)） で封入し、 プランアクロマート

いて 186 分類群 （種、 変種および品種） が記録されている。 し対物レンズを装着した光学顕微鏡 （BX50、 オリンパス、 東京）

かし、 本属は多数の後行シノニムを含むことに加え （Stielow et al.,で観察した。 なお、 乾燥標本より観察する際は、 70% エタノー

2011）、これらの分類群の中には、現在ではハラタケ目、イグチ目、ルで脱気後、 5% KOH に 5 分間以上浸漬し、 組織を膨潤させラッパタケ目、 ヒステランギウム目、 ベニタケ目にまたがるさまざまた後に観察した。 組織は顕微鏡のカメラ用鏡筒に取り付けた一な属に編入された種も多く含まれる （Smith et al., 2018）。

眼レフカメラ （D5100、ニコン、東京） で撮影し、PhotoRuler ver. 1.1

日本においてヒメノガステル属は， マメツブタケ H. arenarius（http://www.inocybe.info/） を用いてサイズを計測した。 担子胞Tul. & C. Tul. （Dodge & Zeller, 1937 ； Hennings, 1903 [H.

子の長径と短径の比率は Q 値で示した。 生標本は食品乾燥機

suzukianus Henn. として ] ； 小林、 1938 ； 𠮷見 ・ 本郷、 1986）、

で温風乾燥、 または凍結乾燥機で凍結乾燥を行い、 栃木県立

シ ロ ツ ブ タ ケ H. tener Berk. （ 𠮷 見、 2008 ； 𠮷 見 ・ 高 山、

博物館 （TPM） および神奈川県立生命の星・地球博物館 （KPM）

1986）、 サザレイシタケ H. paciﬁcus Kobayasi （Kobayasi, 1937 ；の菌類標本庫に収蔵した。

小林、 1938；𠮷見、 1971、 2008）、 オオミノショウロタケモドキ H.

DNA はグレバ組織より、 Izumitsu et al. (2012) の方法に従い

fusisporus (Massee & Rodway) G. Cunn. （ 𠮷 見、 1973、 1993、抽出した。 本菌の核リボソーム DNA の internal transcribed spacer2008） お よ び H. ozeensis Kobayasi （ 小 林、 1979） の 5 種 が（ITS） 領域 （ITS1-5.8S-ITS2） は、 V9G （de Hoog & Gerrits van

記録されている （勝本、 2010）。 このうち日本産 H. fusisporus

den Ende, 1998） /LR5 （Vilgalys & Hester 1990） のプライマーペ

は、 𠮷見氏により最初 Hysterangium stoloniferum Tul. & C. Tul.

アを用い、 PCR により増幅した。 PCR には、 2 × Buffer for KODとして報告後 （𠮷見、 1973）、 H. fusisporus と再同定され （𠮷FX Neo 12.5 µL （東洋紡、 東京）、 2 mM dNTPs 5 µL、 各プ

見、 1993）、 さらに Hys. afﬁne Massee & Rodway と再々同定さライマー （20 pM） 1 μ L、 超純水 3 μ L、 0.5 μ L KOD FX Neo

れており （𠮷見ほか、 2002）、 学名が定まっていない。 しかし、（東洋紡）、 鋳型 DNA 2 µL の計 25 µL を混合し、 反応液とし本種はグレバに寒天質の組織が存在し、 子実体基部から根状た。 反応液はサーマルサイクラー （GeneAmp PCR System 9700、菌糸束が生じるなどの特徴から （𠮷見、 1973）、 ヒメノガステル

Applied Biosystems、 マサチューセッツ、 アメリカ） を用い、 次属ではなく、 ヒステランギウム目の一種と推定される。 また、 H.

のサイクル条件で PCR を実行した―94℃ 2 分 変性 （1 サイク

ozeensis の担子胞子は小型 （8–11 × 3–4 µm）、 平滑で、 稀にル） ； 98℃ 10 秒 変性、 55℃ 30 秒 アニーリング、 68℃ 1 分

分岐するとして記載されていることから （小林、 1979）、 メラノガ

伸長 （35 サイクル） ； 68℃ 7 分伸長 （1 サイクル）。 得られた

ステル属 Melanogaster 等のヒダハタケ科の地下生菌が疑われPCR 産物は FastGene Gel/PCR Extraction kit （日本ジェネティク

る。 よって現在、 狭義のヒメノガステル属として認められる日本

ス、 東京） を用い、 説明書に従い精製した。 精製した DNA は産本属菌は、 H. arenarius、 H. paciﬁcus、 H. tener の 3 種と推定

BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit （ThermoFisher、 ウォされる。 これらに加え、 佐々木ほか （2016） は本属未同定種 3リントン、 イギリス） を用い、 PCR と同じプライマーおよび内部プ種を報告し （Hymenogaster spp. 1–3）， このうち、 Hymenoagster

ライマーの ITS2、ITS3 （White et al., 1990） を用いてサイクルシー

sp. 1 については H. niveus Vittad. と同種の可能性を示唆していケンスを実施後、 SeqStudio （ThermoFisher） によりサンガーシー

る。 学名が付与された 3 種および佐々木ほか （2016） の本属

ケンスを行った。 得られた塩基配列は NCBI （National Center

未同定種は、 いずれもおよそ長径 20 µm 以下の担子胞子を有for Biotechnology Information） に登録した （アクセッション番号する。

OM438164）。

筆者ら （大前 ・ 山本） は栃木県内の石灰岩分布地域にお日本産標本の塩基配列は NCBI BLAST 検索 （https://blast.

ける地下生菌調査を実施中、 外皮が黄色を帯びるヒメノガステ

ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi） に 供 試 し （Altschul et al., 1990）、

ル属菌を採集した。 予備的な顕微鏡観察において、 本菌はINSD （International Nucleotide Sequence Databases） に 登 録 さ

担子胞子の大部分が長径 20 µm を超えていたことから、 本邦れた本菌に近縁な塩基配列 （相同性 ≥ 95%） を多数取得し未報告種であることは明白であった。 そこで詳細な形態的観察た。 これらに加え、 Stielow et al. （2011） によるヨーロッパ産および分子系統解析を実施した結果、 本菌を日本新産種 H.

Hymenogaster 属菌の分類学的改訂において使用された塩基

citrinus Vittad. と同定したので、 ここに報告する。

配列を多数追加し、 分子系統解析用のデータセットとした （表1）。 データセットは MAFFT ver. 7.490 （Katoh & Standley, 2013 ；

材料および手法

https://mafft.cbrc.jp/alignment/server） の L-INS-i アルゴリズムによ

新鮮な子実体およびその乾燥標本を顕微鏡観察に供試した。

るマルチプルアライメントを実行後、 SeaView ver. 4 （Galtier et al.,

剃刀を使用して作成した徒手切片は、 水 （水道水）、 5% 水酸

1996） を用いて手動で修正した。 最終的なデータセット （669 bp）

34© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

大前ほか ： 日本新産種 Hymengaster citrinus
表 1. 分子系統解析に用いた塩基配列 （本研究で取得した配列は太字で示した）
Table 1. Sequences used for phylogenetic analysis (sequence obtained in this study is indicated in bold)
Putative host listed in
the original literature
Quercus sp.
Quercus cerris
Tilia tomentosa
Quercus robur
Tilia tomentosa
Quercus robur, Populus alba
Corylus avellana
Quercus robur
Quercus robur
Carpinus betulus
Tilia sp.
Quercus sp.
Fagus sylvatica
Carpinus betulus
Carpinus betulus
Carpinus betulus
Carpinus betulus
Quercus sp.
Quercus serrata, Carpinus sp.
Carpinus betulus, Quercus robur,
Quercus cerris

GenBank Accession
number
GU479273
GU479361
MW354971
GU479313
MW354969
GU479296
GU479329
GU479347
GU479337
GU479317
GU479270
GU479284
GU479280
GU479285
GU479248
GU479279
GU479247
EU784360
GU479283
GU479360
OM438164
GU479358

Stielow et al. 2011
Stielow et al. 2011
Csizmár et al. 2021
Stielow et al. 2011
Csizmár et al. 2021
Stielow et al. 2011
Stielow et al. 2011
Stielow et al. 2011
Stielow et al. 2011
Stielow et al. 2011
Stielow et al. 2011
Stielow et al. 2011
Stielow et al. 2011
Stielow et al. 2011
Stielow et al. 2011
Stielow et al. 2011
Stielow et al. 2011
Brock et al. 2009
Stielow et al. 2011
Stielow et al. 2011
This study
Stielow et al. 2011

Hungary
Hungary

Carpinus betulus, Quercus cerris
Tilia platyphyllos, Carpinus betulus,
Quercus petraea, Corylus avellana

GU479336
GU479300

Stielow et al. 2011
Stielow et al. 2011

Hymenogaster luteus var. luteus
Hymenogaster luteus var. subfuscus

Hungary
Hungary

Carpinus betulus
Carpinus betulus, Fagus sylvatica,
Quercus petraea, Tilia platyphyllos

GU479302
GU479334

Stielow et al. 2011
Stielow et al. 2011

Hymenogaster megasporus
Hymenogaster olivaceus
Hymenogaster pruinatus
Hymenogaster raphanodorus

Hungary
Spain
HungaryUSA

Pinus sylvestris
Quercus pubescens
Quercus douglasi, Pinus sabiniana,
Arctostaphylos spp.

GU479352
AF325642
GU479308
AY945302

Stielow et al. 2011
Peinter et al. 2001
Stielow et al. 2011
Smith et al. 2005

Hymenogaster rehsteineri
Hymenogaster rehsteineri
Hymenogaster sp.
Hymenogaster sp.
Hymenogaster sp.
Hymenogaster subalpinus
Hymenogaster thwaitesii"Environmental sample as mycosymbiontof Epipactis helleborine"

Hungary
Hungary
PolandUSA
USA
USA
Germany
Czech Republic

Carpinus betulus, Ulmus glabra
Picea abies
Sambucus nigra
Epipactis helleborine

GU479305
GU479363
JX559775
MZ919198
FJ789604
AF325640
GU479265
GU327479

Stielow et al. 2011
Stielow et al. 2011
unpublishedunpublished
Gladish et al. 2010
Peinter et al. 2001
Stielow et al. 2011Těšitelová et al. 2012

"Environmental sample as mycosymbiontof Cephalanthera damasonium"

Germany

Cephalanthera damasonium

AY634136

Bidartondo et al. 2004

"Environmental sample from soil""Environmental sample from soil""Environmental sample from soil"

Italy
Italy
FranceQuercus pubescens
Quercus pubescens-

JF926963
JF926964
FN397318

Belfiori et al. 2011
Belfiori et al. 2011
Napoli et al. 2010

Species

Country

Hymenogaster bulliardii
Hymenogaster bulliardii
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster citrinus
Hymenogaster griseus

Germany
Hungary
Hungary
Hungary
Hungary
Hungary
Hungary
Hungary
Hungary
Hungary
Germany
Germany
Germany
Germany
Germany
Germany
Germany
United Kingdom
Germany
HungaryJapan
Hungary

Hymenogaster griseus
Hymenogaster intermedius

Referenceは raxmlGUI 1.5 （Silvestro & Michalak, 2012） を用いた最尤法で表示し、Affinity Designer（Serif Europe、ノッティンガム、イギリス）

による分子系統解析に供試した。 データセットは ITS1、 5.8S、で編集した。

ITS2 の 3 領域に分割し、 塩基置換モデルには GTR+GAMMA
モ デ ル を 用 い た。 外 群 に は H. intermedius Stielow, Bratek &結果および考察

Hensel および H. rehsteineri Bucholtz を用い、 1,000 回のブートス

日本産標本 （図 1） は黄色を帯びる外皮、 果実様の甘い芳香

トラップ解析 （ML rapid bootstrap） により各枝の信頼性 （MLBS）を放つグレバ、 大型 （長径 20 µm 以上） で、 褐色、 しわ状、を算出した。 得られた系統樹は FigTree v.1.4.3 （Rambaut, 2016）

いぼ状またはうね状のオーナメントを持つ担子胞子をそれぞれ有© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

35

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

大前ほか ： 日本新産種 Hymengaster citrinus

図 1． 日本産 Hymenogaster citrinus （MO1219）． C–E および F1 は 5% KOH， F2 はラクトグリセロールで封入． A–B ： 子実体． C ： 外皮． D ： 子実層および基層板． E ： 担子器． F. 担子胞子． スケールバー ： A–B = 5 mm; C–D = 50 µm; E–F = 20 µm.
Fig. 1. Japanese Hymenogaster citrinus (MO1219). C–E and F1 were mounted with 5% KOH. F2 was mounted with lacto-glycerol. A–B. Basidiomata; C. Peridium;
D. Hymenophore and tramal plate; E. Basidia with two sterigmata. Basidia were mostly collapsed possibly due to autolysis; F. Basidiospores. Scale bars: A–B =5 mm; C–D = 50 µm; E–F = 20 µm.

していた。 本特徴は Stielow et al. （2011） が分子情報に基づい子性であることは確認された （図 1E）。 本種が主に 2 胞子性でた解析とともに改訂した H. citrinus の特徴とよく一致した。 ヒメノ

あることは、 Dodge & Zeller （1934）、 Hawker （1954）、 Soehner

ガステル属菌は成熟が進むにつれて担子器が崩壊することが知(1962)、 Pegler et al. （1993） などにより述べられている。

られ （Hawker, 1954）、 日本産標本においても自己融解が原因

分子系統解析の結果、 日本産標本は Stielow et al. （2011）と推定される細胞の崩壊がほぼ全ての担子器で認められた。 そにより H. citrinus として同定された標本を多数含む、 統計的にのため、 担子器の形状や大きさの観察は困難であったが、 2 胞

高く支持されたクレードに内包された （図 2 ； MLBS = 86%）。

36© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

大前ほか ： 日本新産種 Hymengaster citrinus
Hymenogaster megasporus Hungary (GU479352)
88

Hymenogaster griseus Hungary (GU479336)

96

Hymenogaster thwaitesii Germany (GU479265)

82

Hymenogaster griseus Hungary (GU479358)
Hymenogaster citrinus Germany (GU479280)
Hymenogaster citrinus Germany (GU479284)
Environmental sample as mycosymbiont of Cephalanthera damasonium Germany (AY634136)

91

Hymenogaster citrinus Hungary (GU479347)
Hymenogaster citrinus Germany (GU479270)
Environmental sample from soil Italy (JF926964)

78

Environmental sample from soil Italy (JF926963)
Hymenogaster citrinus Hungary (GU479329)
62
64
66

99

Hymenogaster citrinus Hungary (MW354969)
Hymenogaster citrinus Hungary (GU479313)
Hymenogaster citrinus Hungary (GU479317)
Hymenogaster citrinus Hungary (GU479337)
Hymenogaster sp. USA (MZ919198)

86

Environmental sample from Soil France (FN397318)
71

Hymenogaster citrinus Hungary (MW354971)
Hymenogaster citrinus Hungary (GU479296)

Hymenogaster
citrinus

Hymenogaster sp. Poland (JX559775)
Environmental sample as mycosymbiont of Epipactis helleborine Czech Republic (GU327479)
Hymenogaster citrinus Tochigi, Japan (OM438164)
8192

Hymenogaster citrinus Germany (GU479285)
Hymenogaster olivaceus Spain (AF325642)

61

Hymenogaster citrinus Germany (GU479279)
93

Hymenogaster citrinus Germany (GU479247)
Hymenogaster citrinus Germany (GU479248)

55

Hymenogaster citrinus Germany (GU479283)
Hymenogaster citrinus Hungary (GU479360)
Hymenogaster citrinus United Kingdom (EU784360)
77
100

Hymenogaster pruinatus Hungary (GU479308)
Hymenogaster bulliardii Hungary (GU479361)
Hymenogaster bulliardii Germany (GU479273)

100

Hymenogaster luteus var. luteus Hungary (GU479302)
Hymenogaster luteus var. subfuscus Hungary (GU479334)
Hymenogaster raphanodorus USA (AY945302)

100

Hymenogaster sp. USA (FJ789604)

67

Hymenogaster subalpinus USA (AF325640)
Hymenogaster rehsteineri Hungary (GU479363)

99
59

Hymenogaster intermedius Hungary (GU479300)
Hymenogaster rehsteineri Hungary (GU479305)
0.02

図 2． Hymenogaster citrinus および近縁種の ITS 領域を用いた最尤法系統樹 （最大対数尤度 -2241.924131）． ノードに最尤法によるブートストラップ値（≥ 50%） を示した． 信頼性の高い枝 （≥ 80%） は太線で示した．
Fig. 2. Maximum likelihood (ML) phylogeny of Hymenogaster citrinus and its allied taxa based on internal transcribed spacer (ITS) region of nuclear ribosomal
DNA. The tree with highest log likelihood (-2241.924131) is shown. ML Bootstrap values ≥ 50% are shown in nodes. Thickened branches indicate strong ML
bootstrap support ( ≥ 80%).

ま た、 日 本 産 標 本 は ハ ン ガ リ ー 産 H. citrinus （GU479296、初記録である。

MW354971） などと非常に高い相同性 （≥ 99.4%） を示した。 本

ヒメノガステル属は同一種内における標本間の形態的なクレードは主にヨーロッパ産子実体標本により構成され、 一部には変異が大きく、 これが従来、 形態的な分類において多くのアメリカ産標本 （MZ919198）、 土壌由来の環境配列 （JF926963、議論を生むと同時に、 多くのシノニムを生む要因となっていJF926964、 FN397318） および、 ラン科植物の菌根菌として検出

る （Montecchi & Sarasini, 2000 ； Soehner, 1962 ； Stielow et

された配列 （AY634136 、 GU327479） も含まれていた。

al., 2011）。 Hymenogaster citrinus も 例 外 で は な く、 Stielow et

以上の形態的な類似性および分子系統解析に基づき、 日本

al. （2011） は本種のシノニム、 あるいはシノニムと疑われる種と産標本を H. citrinus と同定した。 本報告は、 H. citrinus の日本

し て H. bucholtzii Soehner、 H. olivaceus Vittad.、 H. tomentellus© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

37

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

大前ほか ： 日本新産種 Hymengaster citrinus
R. Hesse、 H. sulcatus R. Hesse を挙げている。 従来、 H. citrinus

1B） は暗褐色からほぼ黒色、 部分的に鮮黄色に着色し、 基層の肉眼的な大きな特徴として、 外皮が黄色を帯びることが挙げ

板が密に折りたたまれ、 多数の迷路状の小室を形成する。 果実られ、 白色の種は H. olivaceus として、 しばしば区別されてきた臭の匂いをもつ。

（Montecchi & Sarasini, 2000 ； Pegler et al., 1993）。 しかし、 Stielow

顕微鏡的特徴：外皮（図 1C）は外層および内層の 2 層、あるいは、

et al. （2011） は分子情報に基づいた解析により、 H. olivaceus を

内層を欠き 1 層により構成される。 外層は厚さ 19.1–41.2 µm、H. citrinus に含め、 外皮の色が変化に富む理由について、 発生

褐色から暗褐色の菌糸が錯綜する。 内層は厚さ 38.9–65.7 µm、環境の土壌の種類および子実体の発生時期の違いの影響を挙

類球形からやや角ばった細胞により構成され、 細胞は 3.9–30.9

げている。 Stielow et al. （2011） は本種が石灰粘土質土壌で発生

× 4.5–16.8 µm、 壁は無色から淡黄褐色でやや厚壁 （約 1 µm）。

した場合において外皮が黄色を帯びるとしており、 日本産標本も基層板 （図 1D） は幅 32.1–60.3 µm、 ゆるく錯綜した菌糸によっ同様に石灰粘土質土壌より採集されたため、 この推定を支持するて構成され、 菌糸は幅 2.9–5.4 µm、 無色、 薄壁。 偽担子器は結果となった。 さらに、 Stielow et al. （2011） は大きな変異幅がみ

24.9–40.5 × 10.5–14.1 µm、 こん棒型、 フラスコ型または円筒形、られる本種の特徴として、 匂いと胞子のオーナメントを挙げている。

通常無色、 稀に淡褐色から褐色に着色する。 担子器 （図 1E）

匂いは果実臭から不快な匂いをするものまで幅があり、 彼らは子は 2 胞子性、 大半は自己融解 （autolysis） が原因と推定される

実体内の季節的な細菌叢の違いが影響を与えているのではない

消失または著しい変形が認められたためサイズは未計測。 担子かと推定している。 担子胞子のオーナメントについては、 オーナメ

胞子 （図 1F） は (18.7–) 26.3–35 (–39.3) × (8.1–) 10.2–14.9 µm （平ントを含む外壁 （perisporium） を欠く担子胞子を有する本種標本

均値±標準偏差 ： 30.7 ± 4.0 × 12.1 ± 1.5 µm ； オーナメントおよびが確認されており、 典型的ないぼおよびしわ状のオーナメントからくちばし状突起を含む）、 Q = 2.0–3.1 （平均値 2.6）、 紡錘形か

連続的な変異が見られるとしている。 なお、 日本産標本は黄色をら長紡錘形、 ときにレモン型、 先端はしばしば乳頭状に突出し、帯びる外皮に加え、 果実臭があり、 担子胞子はしわ状、 いぼ状基部は顕著なくちばし状突起 （長さ 3–7 µm） が付属する。 胞のオーナメントを有しており、 典型的な特徴の H. citrinus であった。

子壁は琥珀色で平滑、 表面を褐色で不規則なしわ状、 いぼ状、Hymenogaster citrinus（基準産地 イタリア；Vittadini, 1831）はヨー

うね状のオーナメントを有する胞子外壁に覆われる。 全ての組織

ロッパ （Montecchi & Sarasini, 2000；Soehner, 1962）、北米 （Dodge

においてかすがい連結を欠く。

& Zeller, 1934）、 アジア （Liu, 1998 ； Liu & Tao, 1988 ； 本研究）

和名 ： レモンツブタケ （新称）。 種小名 citrinus はレモン色を意に分布するが、 ヨーロッパ以外からの情報、 分布は限定的であ味し、 日本産標本も外皮が黄色を帯びることに由来する。

る。 ヒメノガステル属菌は日本で最も頻繁に見つかる地下生菌の分布 ： ヨーロッパ （例 ： Stielow et al., 2011 ； Vittadini, 1831）、 北

一つである。 しかし、 H. citrinus は特徴的な外観および担子胞

米 （Zeller & Dodge, 1938）、中国 （Liu, 1998 ； Liu & Tao, 1988）、子を有するにも関わらず、 これまで報告がなかったことから、 本

日本 （本研究）。

種は日本においては稀産種と推定される。 日本産標本は石灰供試標本 ： 栃木県鹿沼市、 石灰岩地域に生育したコナラおよ岩の分布地に生育したコナラ、 シデ属樹下より採集されており、

びシデ属樹下の石灰質土壌上のリター下、 2021 年 11 月 20 日、本菌は石灰質土壌を好む可能性がある。 ヨーロッパにおいて本大前宗之 ・ 山本航平採集、 MO1219、 TPM-M-9844 （重複標

種はさまざまな種類の土壌から発生するが、 前述の通り外皮が本 KPM-NC 29306）。

黄色を帯びる典型的な H. citrinus は石灰質土壌で主に採集されている （Hawker, 1954 ； Montecchi & Sarasini, 2000 ； Pegler et al.,

謝辞

1993 ； Stielow et al. 2011）。 石灰岩を基岩とする地域は採石場とし本研究を行うにあたり、 貴重な文献をご提供いただいた国立科て開発されやすく、 外生菌根性の樹木が生育する石灰岩地域の学博物館の保坂健太郎博士、 ならびに標本収蔵を快くお引き

保全は、これらと共生する外生菌根菌を保全する上で重要である。

受け頂いた、 神奈川県立生命の星 ・ 地球博物館の折原貴道
博士に厚く御礼申し上げます。

分類
Hymenogaster citrinus Vittad., Monogr. Tuberac. (Milano): 21(1831) [MycoBank ID: MB217699]
図 1.
肉眼的特徴 ： 子実体 （図 1A–B） は 5–15 × 5–11 mm、 類球形

引用文献
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38© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

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40

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Online publication; available at: https://jats-truffles.org/truffology/

Truffology 5 (1): 41–45 (2022)

標本リスト (Specimen list)

2020 年および 2021 年に香川県内で採集された地下生菌
Truﬄes and truﬄe-like fungi collected in 2020 and 2021 in Kagawa Prefecture
櫻庭 春彦 *, 櫻庭 三恵
Haruhiko Sakuraba*, Mie Sakuraba
香川県高松市
Takamatsu-shi, Kagawa, Japan
E-mail: stnpaby8533@mc.pikara.ne.jp
Article Info: Submitted: 6 January 2022

Published: 31 March 2022

2020 年および 2021 年に香川県内で採集された地下生菌のう

謝辞

ち、 著者らが採集または同定した標本を報告する （図 1–10、本報告を作製するにあたり、 大前宗之様、 折原貴道様、 木下

表 1）。 標本のうち、 Redeckera sp. は千葉大学教育学部の大晃彦様、 佐々木廣海様、 保坂健太郎様、 山本航平様には、

和政秀氏に、 スクレロガステル属の一種は国立科学博物館植標本の同定や最新情報など多くのご教示をいただき厚く御礼申

物研究部の保坂健太郎氏に、 スイチチショウロとコガネショウロ

し上げます。 採集および観察については、 青木修一氏、 菊間

タケは、 神奈川県立生命の星 ・ 地球博物館の折原貴道氏に

泰氾氏、 嶋田友久氏、 中村香代子氏、 林 鈴以氏、 三谷 進氏送付した。 その他の標本はいずれも栃木県立博物館 （TPM）に大変お世話になりました。 ここに深謝いたします。

菌類収蔵庫に収蔵されている。

図 1． Tuber sp. スケール ： 1 cm.

図 3． Sclerogaster sp. スケール ： 5 mm.

図 2． Redeckera sp. スケール ： 1 cm.

図 4． Gautieria sp. スケール ： 1 cm.

© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 202241

42
高松市栗林町
木田郡三木町

ショウロ属の一種（和名なし）

ヒステランギウム属の一種

ホンセイヨウショウロ

Rhizopogon sp.

Redeckera sp.

Hysterangium sp.

Tuber japonicum

高松市塩江町
仲多度郡まんのう町 広葉樹林， 地表に露出

ジャガイモタケ旧トゲミノショウロ属 （シクエストレート型ベニタケ属） の一種

ウツロイモタケアカダマタケ

ガウチエリア属の一種

Heliogaster columellifer

Gymnomyces (= Russula) sp.

Hydnocystis japonica

Melanogaster utriculatus

Gautieria sp.

櫻庭春彦

2020 年 11 月 15 日 青木修一

スクレロガステル属の一種

Sclerogaster sp.

コナラの樹下， 地中

ヒメノガステル属の一種

Hymenogaster sp.

仲多度郡まんのう町 広葉樹林， 地表に露出

仲多度郡まんのう町 コナラ林近傍， マダケ根元， 地中

広葉樹林， 地中

Octaviania subg. Parcaea sp. ホシミノタマタケ属パルカイ亜属の一種 木田郡三木町

ヒメノガステル属の一種

2020 年 12 月 19 日 三谷 進
広葉樹林， 地中

Octaviania subg. Parcaea sp. ホシミノタマタケ属パルカイ亜属の一種 木田郡三木町

Hymenogaster sp.

2020 年 12 月 19 日 櫻庭春彦

2020 年 12 月 20 日 櫻庭三恵

2020 年 12 月 19 日 櫻庭三恵

2020 年 12 月 19 日 櫻庭春彦

2020 年 12 月 19 日 三谷 進

2020 年 12 月 13 日 櫻庭三恵

櫻庭春彦

2020 年 12 月 5 日

Octaviania subg. Parcaea sp. ホシミノタマタケ属パルカイ亜属の一種 仲多度郡まんのう町 広葉樹林， サカキ樹下， 地中

仲多度郡まんのう町 広葉樹林， 地表に露出

櫻庭春彦

三谷 進
2020 年 12 月 5 日

2020 年 12 月 5 日

Octaviania subg. Parcaea sp. ホシミノタマタケ属パルカイ亜属の一種 仲多度郡まんのう町 広葉樹林， ヒサカキ樹下， 地中

Zelleromyces (= Lactarius) sp. チチショウロ

アラカシ樹下， 地中

ウスベニタマタケ

Turmalinea persicina
綾歌郡綾川町アラカシ樹下， 地中

Octaviania subg. Parcaea sp. ホシミノタマタケ属パルカイ亜属の一種 綾歌郡綾川町

仲多度郡まんのう町 コナラの樹下， 地中

坂出市王越町

綾歌郡綾川町

KG2020-20 TPM-M-9907

KG2020-19 TPM-M-9906

KG2020-18 TPM-M-9905

KG2020-17 TPM-M-9904

KG2020-16 TPM-M-9903

KG2020-15 TPM-M-9902

KG2020-14 TPM-M-9901

KG2020-13 TPM-M-9900

KG2020-12 TPM-M-9899

KG2020-11 TPM-M-9898

櫻庭春彦

櫻庭春彦

櫻庭春彦

櫻庭春彦

櫻庭春彦

櫻庭春彦

櫻庭春彦

櫻庭春彦

櫻庭春彦

KG2020-30 TPM-M-9916

KG2020-29 TPM-M-9915

KG2020-28 TPM-M-9914

KG2020-27 TPM-M-9913

KG2020-26 TPM-M-9912

KG2020-25 TPM-M-9911

KG2020-24 TPM-M-9910

KG2020-23 TPM-M-9909

KG2020-22 TPM-M-9908

折原貴道・
KG2020-21
保坂健太郎

山本航平

ツチダンゴ属の一種

Elaphomyces sp. (sect.
Malacodermei)

2020 年 11 月 29 日 櫻庭三恵

櫻庭春彦

2020 年 11 月 27 日 嶋田友久

ジャガイモタケ

Heliogaster columellifer

高松市栗林町アラカシ樹下， 地表に露出

櫻庭春彦

シイ、 カシ林 （アカマツ混在）， 地表に露出 2020 年 11 月 23 日 櫻庭三恵

アカショウロRhizopogon succosus

櫻庭春彦
櫻庭春彦

高松市栗林町シイ、 カシ林 （アカマツ混在）， 地表に露出 2020 年 11 月 23 日 櫻庭三恵

櫻庭春彦

シイ、 カシ林 （アカマツ混在）， 地表に露出 2020 年 11 月 23 日 櫻庭春彦

2020 年 11 月 22 日 櫻庭春彦

山本航平

櫻庭春彦

2020 年 11 月 14 日 櫻庭三恵

2020 年 11 月 15 日 櫻庭三恵

折原貴道

櫻庭三恵

チチショウロ

広葉樹林， 地表に露出

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

送付

図 3． 保 坂 健 太 郎 氏 に乾燥 図 2． 大和政秀氏に送付

乾燥

乾燥2020 年 11 月 8 日

備考

乾燥 図 1． 夏期に成熟するタイプ

乾燥

KG2020-08 TPM-M-9895

KG2020-07 TPM-M-9894

KG2020-05 TPM-M-9892

KG2020-04

KG2020-03 TPM-M-9891

KG2020-02 TPM-M-9890

乾燥

標本の
状態

KG2020-09 TPM-M-9896

櫻庭春彦

バウチャー
標本番号

KG2020-01 TPM-M-9889

オリジナル
標本番号

佐々木廣海・
KG2020-10 TPM-M-9897
2020 年 10 月 31 日 櫻庭三恵
折原貴道

2020 年 10 月 25 日 櫻庭春彦

櫻庭春彦

木下晃彦

Zelleromyces sp.

三豊市財田町

仲多度郡まんのう町 コナラ林近傍， マダケ根元， 地中

仲多度郡まんのう町 コナラ樹下， 地表に露出

仲多度郡まんのう町 広葉樹林， 地表に露出

櫻庭春彦

2020 年 10 月 24 日 菊間泰氾

2020 年 10 月 9 日

折原貴道

大前宗之

櫻庭春彦

木下晃彦

櫻庭春彦

同定者

Octaviania subg. Parcaea sp. ホシミノタマタケ属パルカイ亜属の一種 高松市栗林町

Zelleromyces (= Lactarius) sp. チチショウロ

仲多度郡まんのう町 広葉樹林， 地表に露出

アナアキアカダマタケ

Melanogaster sp.
広葉樹下， 地表に露出

仲多度郡まんのう町 広葉樹下， 地表に露出

Zelleromyces (= Lactarius) sp. チチショウロ

三谷 進

2020 年 10 月 2 日

櫻庭春彦

広葉樹林， 地表に露出

スギ林 （広葉樹混在）、 地表に露出

2020 年 8 月 16 日

櫻庭春彦

櫻庭三恵

採集者

櫻庭春彦

2020 年 7 月 19 日

2020 年 1 月 13 日

採集日

ウバメガシ樹下 （アカマツ混在）， 地表に露出 2020 年 7 月 20 日

ウバメガシ樹下， 地表に露出

シイ、 カシ林， 地表に露出

発生環境 （植生）

仲多度郡まんのう町 広葉樹林， 地表に露出

木田郡三木町

高松市栗林町

セイヨウショウロ属の一種

Tuber sp.

仲多度郡琴平町

採集地

ヒメノガステル属の一種

和名

Hymenogaster sp.

学名

表 1. 2020 年および 2021 年に香川県で採集された地下生菌

櫻庭 ・ 櫻庭 ： 香川県産標本リスト

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

ホンセイヨウショウロ

ヒメノガステル属の一種

Tuber japonicum

Hymenogaster sp.

発生環境 （植生）アオゾメクロツブタケ

アナアキアカダマタケ

アオゾメクロツブタケ

ステファノスポラ属の一種

アオゾメクロツブタケ

アカショウロオオショウロ

ショウロ属の一種

アオゾメクロツブタケ

アナアキアカダマタケ（和名なし）

ショウロ属の一種

ホンセイヨウショウロ

スイチチショウロ

Rossbeevera eucyanea

Melanogaster sp.

Rossbeevera eucyanea

Stephanospora sp.

Rossbeevera eucyanea

Rhizopogon succosus

Rhizopogon boninensis

Rhizopogon sp.

Rossbeevera eucyanea

Melanogaster sp.

Aroramyces sp.

Rhizopogon sp.

Tuber japonicum

Lactarius spinosporus

アラカシ樹下， 腐植中

アラカシ樹下， 腐植中© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022
ウバメガシ、 アカマツ樹下， 法面に露出

ウバメガシ、 アカマツ樹下， 法面に露出

ウバメガシ、 アカマツ樹下， 法面に露出

アラカシ樹下， 地表に露出

スギ樹下， 法面に露出

アラカシ樹下， 腐植中

さぬき市

2021 年 10 月 30 日 櫻庭三恵

ヒメノガステル属の一種

Hymenogaster sp.

仲多度郡まんのう町 コナラ樹下， 腐植中

2021 年 10 月 30 日 櫻庭三恵

2021 年 10 月 30 日 櫻庭三恵

ガウチエリア属の一種

Gautieria sp.

仲多度郡まんのう町 コナラ樹下， 腐植中

Octaviania subg. Parcaea sp. ホシミノタマタケ属パルカイ亜属の一種 仲多度郡まんのう町 コナラ樹下， 腐植中

櫻庭春彦

山本航平

櫻庭春彦

折原貴道

仲多度郡まんのう町 アベマキ樹下， 地表に露出

櫻庭春彦

アカショウロRhizopogon succosus

2021 年 10 月 30 日 櫻庭春彦

ホンセイヨウショウロ

Tuber japonicum

櫻庭春彦

櫻庭春彦

大前宗之

山本航平

山本航平

櫻庭春彦

櫻庭春彦

折原貴道

櫻庭春彦

櫻庭春彦

折原貴道

折原貴道

折原貴道

2021 年 10 月 24 日 櫻庭春彦

櫻庭三恵

櫻庭三恵
2021 年 10 月 9 日

菊間泰氾

櫻庭春彦

2021 年 9 月 19 日

2021 年 10 月 3 日

櫻庭春彦

2021 年 9 月 18 日

2021 年 9 月 26 日

櫻庭春彦

櫻庭三恵

2021 年 9 月 18 日

2021 年 9 月 13 日

櫻庭春彦

櫻庭春彦

2021 年 9 月 12 日

櫻庭春彦

2021 年 9 月 11 日

櫻庭春彦

2021 年 9 月 11 日
2021 年 9 月 11 日

嶋田友久

2021 年 9 月 11 日

KG2021-28 TPM-M-9944

KG2021-27 TPM-M-9943

KG2021-26 TPM-M-9942

KG2021-25 TPM-M-9941

KG2021-24 TPM-M-9940

KG2021-23 TPM-M-9939

KG2021-22 TPM-M-9938

KG2021-21

KG2021-20 TPM-M-9937

KG2021-19

KG2021-18 TPM-M-9936

KG2021-17 TPM-M-9935

KG2021-16 TPM-M-9934

KG2021-15 TPM-M-9933

KG2021-14 TPM-M-9932

KG2021-13 TPM-M-9931

KG2021-12 TPM-M-9930

KG2021-11 TPM-M-9929

KG2021-10 TPM-M-9928

櫻庭春彦

櫻庭春彦

KG2021-08 TPM-M-9926

KG2021-07 TPM-M-9925

櫻庭三恵 佐々木廣海 KG2021-09 TPM-M-9927

櫻庭春彦

櫻庭春彦

KG2021-06 TPM-M-9924

KG2021-05 TPM-M-9923

2021 年 8 月 28 日

櫻庭春彦

2021 年 7 月 17 日

KG2021-03 TPM-M-9921

KG2021-02 TPM-M-9920

KG2021-01 TPM-M-9919

KG2020-32 TPM-M-9918

2021 年 8 月 22 日

櫻庭春彦

2021 年 7 月 11 日

2021 年 10 月 24 日 櫻庭春彦

仲多度郡まんのう町 アラカシ樹下， 地表に露出

ショウロ属の一種

嶋田友久

仲多度郡まんのう町 コナラ樹下， 腐植中

仲多度郡まんのう町 アベマキ樹下， 法面に露出

Zelleromyces (= Lactarius) sp. チチショウロ

Rhizopogon sp.

アベマキ、 ヤブツバキ樹下， 腐植中

仲多度郡まんのう町 コナラ樹下， 地表に露出

所属未確定 （incertae sedis） コガネショウロタケ

アラカシ樹下， 腐植中

Zelleromyces (= Lactarius) sp. チチショウロ

木田郡三木町

仲多度郡まんのう町 アベマキ樹下， 法面に露出

仲多度郡まんのう町 アラカシ樹下， 地表に露出

仲多度郡まんのう町 コナラ樹下， 腐植中

仲多度郡まんのう町 アラカシ、 マダケ樹下， 地表に露出

仲多度郡まんのう町 アラカシ樹下， 地表に露出

高松市栗林町

高松市栗林町

高松市栗林町

綾歌郡綾川町

木田郡三木町

綾歌郡綾川町

仲多度郡まんのう町 アラカシ樹下， 地表に露出

綾歌郡綾川町

綾歌郡綾川町

バウチャー
標本番号KG2020-31 TPM-M-9917

オリジナル
標本番号

嶋田友久・
KG2021-04 TPM-M-9922
山本航平

櫻庭春彦

櫻庭春彦

櫻庭春彦

中村香代子 櫻庭春彦

林 鈴似

2021 年 6 月 6 日

アミメツチダンゴ

Elaphomyces muricatus
2021 年 6 月 6 日

嶋田友久

2021 年 6 月 5 日

仲多度郡まんのう町 ツブラジイ樹下， 腐植中

ツチダンゴ属の一種

Elaphomyces sp. (sect.
Malacodermei)

櫻庭春彦

櫻庭三恵

2021 年 2 月 14 日

2021 年 1 月 31 日

櫻庭三恵

櫻庭春彦

木下晃彦

2021 年 1 月 30 日

2020 年 10 月 9 日

同定者
櫻庭春彦

採集者

2020 年 12 月 20 日 櫻庭三恵

採集日

Octaviania subg. Parcaea sp. ホシミノタマタケ属パルカイ亜属の一種 仲多度郡まんのう町 広葉樹下， 腐植中

ヒサカキ樹下， 腐植中

仲多度郡まんのう町 コナラ樹下， 腐植中

仲多度郡まんのう町 広葉樹林， 地表に露出

仲多度郡まんのう町 コナラ林近傍， マダケ根元， 地中採集地

Octaviania subg. Parcaea sp. ホシミノタマタケ属パルカイ亜属の一種 綾歌郡綾川町

ガウチエリア属の一種

和名

Gautieria sp.

学名

表 1. （続き）
備考

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥 図 6． 折原貴道氏に送付

乾燥

乾燥 図 5． 折原貴道氏に送付

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥 ミヤマタンポタケ類似種寄生

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥 図 4． 外皮消失せず

標本の状態

櫻庭 ・ 櫻庭 ： 香川県産標本リスト

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

43

44

ホシガタベニダンゴ

ヒメノガステル属の一種

ウスベニタマタケ（和名なし）

ツチダンゴ属の一種

Entoloma asterosporum

Hymenogaster sp.

Turmalinea persicina

Aroramyces sp.

Elaphomyces sp. (sect.
Malacodermei)

ヤブツバキ樹下， 腐植中

アラカシ樹下， 腐植中

綾歌郡綾川町

綾歌郡綾川町
コナラ樹下， 腐植中

アラカシ樹下， 腐植中

仲多度郡まんのう町 コナラ樹下， 腐植中

さぬき市

仲多度郡琴平町

アベマキ樹下， 腐植中

ツヅレシロツチダンゴ類似種

ヒステランギウム属の一種

アカショウロヒメノガステル属の一種

ショウロ属の一種

ショウロ属の一種

Elaphomyces aff. mutabilis

Hysterangium sp.

Rhizopogon succosus

Hymenogaster sp.

Rhizopogon sp.

Rhizopogon sp.

クロマツ樹下， 砂地， 地表に露出

アミメツチダンゴ

Elaphomyces muricatus
仲多度郡まんのう町 アラカシ樹下， 腐植中

観音寺市有明町

ショウロ

Rhizopogon roseolus

モミ （植栽） 樹下， 地表に露出

アカマツ樹下， 法面に露出

アカマツ樹下， 法面に露出

ネズミモチ樹下， 腐植中

ネズミモチ、 アカマツ樹下， 法面に露出

ヤブムラサキ、 ネズミモチ樹下， 腐植中

アラカシ、 ヒサカキ樹下， 腐植中

ヒサカキ、 ヤブツバキ樹下， 腐植中

高松市塩江町

高松市栗林町

高松市栗林町

高松市栗林町

高松市栗林町

三豊市財田町

三豊市財田町

三豊市財田町

Octaviania subg. Parcaea sp. ホシミノタマタケ属パルカイ亜属の一種 綾歌郡綾川町

ジャガイモタケガウチエリア属の一種

Gautieria sp.

Heliogaster columellifer

ヒサカキ、 ネズミモチ樹下， 地表に露出
アセビ、 サカキ樹下， 腐植中

コナラ樹下， 腐植中

ウツロイモタケHydnocystis japonica
三豊市財田町

Octaviania subg. Parcaea sp. ホシミノタマタケ属パルカイ亜属の一種 綾歌郡綾川町

コナラ樹下， 腐植中

ヒメノガステル属の一種

Hymenogaster sp.

仲多度郡琴平町

仲多度郡まんのう町 広葉樹下， 地表に露出

Octaviania subg. Parcaea sp. ホシミノタマタケ属パルカイ亜属の一種 綾歌郡綾川町

アオゾメクロツブタケ

Rossbeevera eucyanea

コナラ樹下， 腐植中

アカショウロRhizopogon succosus

発生環境 （植生）

仲多度郡まんのう町 コナラ樹下， 腐植中

採集地

綾歌郡綾川町（和名なし）

和名

Aroramyces sp.

学名表 1. （続き）

櫻庭春彦

2021 年 11 月 3 日

バウチャー
標本番号

KG2021-36 TPM-M-9952

KG2021-35 TPM-M-9951

KG2021-34 TPM-M-9950

櫻庭春彦
櫻庭春彦
櫻庭春彦

2021 年 12 月 12 日 櫻庭三恵
2021 年 12 月 25 日 嶋田友久

櫻庭春彦

櫻庭春彦

櫻庭春彦

櫻庭三恵

2021 年 12 月 4 日

2021 年 11 月 28 日 櫻庭春彦

2021 年 11 月 23 日 櫻庭春彦

2021 年 11 月 23 日 櫻庭春彦

櫻庭春彦

櫻庭春彦

2021 年 11 月 23 日 櫻庭三恵

櫻庭春彦

2021 年 11 月 23 日 櫻庭春彦

櫻庭春彦

2021 年 11 月 21 日 櫻庭春彦

2021 年 11 月 21 日 櫻庭春彦

櫻庭春彦

櫻庭春彦

2021 年 11 月 21 日 櫻庭春彦

櫻庭春彦

2021 年 11 月 21 日 青木修一

櫻庭春彦

2021 年 11 月 20 日 櫻庭三恵

2021 年 11 月 20 日 櫻庭春彦

KG2021-51 TPM-M-9967

KG2021-50 TPM-M-9966

KG2021-49 TPM-M-9965

KG2021-48 TPM-M-9964

KG2021-47 TPM-M-9963

KG2021-46 TPM-M-9962

KG2021-45 TPM-M-9961

KG2021-44 TPM-M-9960

KG2021-43 TPM-M-9959

KG2021-42 TPM-M-9958

KG2021-41 TPM-M-9957

KG2021-40 TPM-M-9956

KG2021-39 TPM-M-9955

KG2021-38 TPM-M-9954

櫻庭春彦・
KG2021-37 TPM-M-9953
2021 年 11 月 20 日 櫻庭三恵
山本航平

櫻庭春彦

櫻庭春彦

2021 年 11 月 20 日 櫻庭春彦

櫻庭春彦

2021 年 11 月 20 日 櫻庭春彦

櫻庭三恵 佐々木廣海 KG2021-33 TPM-M-9949

2021 年 11 月 14 日 櫻庭三恵

櫻庭三恵

2021 年 11 月 6 日

KG2021-32 TPM-M-9948

KG2021-31 TPM-M-9947

KG2021-30 TPM-M-9946

KG2021-29 TPM-M-9945

オリジナル
標本番号

2021 年 11 月 3 日
櫻庭春彦

櫻庭春彦

折原貴道

嶋田友久

2021 年 11 月 2 日

同定者
折原貴道

採集者

2021 年 10 月 30 日 櫻庭春彦

採集日

備考

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥 図 10

乾燥

乾燥 図 9． 外皮消失

乾燥

乾燥 ヒポミケス属寄生乾燥

乾燥 ミヤマタンポタケ類似種寄生

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥 図 8

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥 図 7

標本の状態

櫻庭 ・ 櫻庭 ： 香川県産標本リスト

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

櫻庭 ・ 櫻庭 ： 香川県産標本リスト

図 5． Lactarius spinosporus. スケール ： 1 cm.

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

図 8． Entoloma asterosporum. スケール ： 1 cm.

図 9． Gautieria sp. スケール ： 1 cm.

図 6． コガネショウロタケ（a：子実体基部；b：子実体断面）．

スケール ： 1 cm.

図 10． Hysterangium sp. スケール ： 1 cm.

図 7． Aroramyces sp. スケール ： 1 cm.

© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

45

Online publication; available at: https://jats-truffles.org/truffology/

Online publication; available at: https://jats-truffles.org/truffology/

Truffology 5 (1): 47–49 (2022)

標本リスト (Specimen list)

2020 年および 2021 年に大阪府およびその近隣県で採集された地下生菌
Truﬄes and truﬄe-like fungi collected in 2020 and 2021 in Osaka Prefecture
and the adjacent areas
森 紀翔
Norito Mori
近畿大学農学部環境管理学科， 〒 631-8505 奈良県奈良市中町 3327-204
Department of Environmental Management, Faculty of Agriculture, Kindai University, 3327-204 Nakamachi,
Nara-shi, Nara 631-8505, Japan
E-mail: barobaroba2012@gmail.com
Article Info: Submitted: 21 January 2022

Published: 31 March 2022

2020 年および 2021 年に著者が大阪府 ・ 奈良県 ・ 兵庫県で採地下生菌数種を採集しているが、これらは別途報告予定である。

集した地下生菌について報告する （表 1）。 採集した標本はす
べて 50–60°C で熱乾燥を行った。 一部の標本は神奈川県立

謝辞

生命の星 ・ 地球博物館収蔵庫 （KPM-NC） および大阪市立

吉成経氏と前田創氏には、 アミメツチダンゴと春型タンポタケ

自然史博物館収蔵庫 （OSA-MY） に収蔵されている。 発生環（MSF8） の発生地をご案内いただいた。 近畿大学生態系管理

境の保全のため、 一部の種は採集場所を府レベルに留める。

学研究室の葛西弘氏には、 ウスベニタマタケ （MSF34） の発

著者はリストに掲載した種の他にも大阪府内のユーカリ植栽地で生地情報をご提供いただいた。 深く感謝申し上げる。

図 1． アミメツチダンゴ Elaphomyces muricatus （春型タンポ

図 3． ショウロ Rhizopogon roseolus．

タケ Tolypocladium sp. が寄生）．

図 2． Hymenogaster sp.
© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

図 4． Rossbeevera sp. スケール : 1 cm.

47

48
採集地

ヒメノガステル属の一種 （白色）

（和名なし）（和名なし）

ヒメノガステル属の一種 （白色）ヒメノガステル属の一種 （白色）ヒメノガステル属の一種 （褐色）ヒメノガステル属の一種 （白色）ヒメノガステル属の一種 （白色）

ツチダマタケ属の一種

ツチダマタケ属の一種

シラタマタケツチダマタケ属の一種

ツチダマタケ属の一種

ツチダマタケ属の一種

Hymenogaster sp.

Hydnangium sp.

Hydnangium sp.

Hymenogaster sp.

Hymenogaster sp.

Hymenogaster sp.

Hymenogaster sp.

Hymenogaster sp.

Rossbeevera sp.

Rossbeevera sp.

Protubera nipponica

Rossbeevera sp.

Rossbeevera sp.

Rossbeevera sp.

ホシミノタマタケ

ショウロ

Rhizopogon roseolus

ショウロ

ヒメノガステル属の一種 （白色）Hymenogaster sp.

Octaviania kobayasii

アミメツチダンゴ

Elaphomyces muricatus

Rhizopogon roseolus

大阪府

イボセイヨウショウロ

Tuber longispinosum

ツチダマタケ属の一種

チチショウロ

Zelleromyces (= Lactarius) sp.

ヨイノホシミノタマタケ ?

ヒメノガステル属の一種 （白色）Hymenogaster sp.

Rossbeevera sp.

スクレロガステル属の一種

Sclerogaster sp.

Octaviania cf. hesperi

大阪府

ヒメノガステル属の一種 （白色）Hymenogaster sp.

奈良県

奈良県

奈良県

大阪府

大阪府

奈良県

大阪府

大阪府

大阪府

大阪府

大阪府

大阪府

大阪府

大阪府

大阪府

大阪府

大阪府

大阪府

大阪府

大阪府

兵庫県

奈良県

奈良県

大阪府

兵庫県

アカショウロRhizopogon succosus

兵庫県

奈良市

橿原市

橿原市

八尾市

八尾市

八尾市

八尾市

奈良市

八尾市

八尾市

八尾市

八尾市

八尾市

八尾市

八尾市

箕面市

箕面市

箕面市

三田市

生駒市

生駒市

枚方市

神戸市

神戸市

都道府県 市区町村

アカダマタケ

和名

Melanogaster utriculatus

学名

表 1. 2020 年および 2021 年に大阪府およびその近隣県で採集された地下生菌

クロマツ樹下， 地表に露出

シイ ・ カシ等の林内， リター下

シイ ・ カシ等の林内， リター下

アラカシ樹下， リター下

アラカシ樹下， リター下

アラカシ樹下， リター下

アラカシ樹下， リター下

コナラ樹下， 法面に露出

アラカシ樹下， リター下

アラカシ樹下， リター下

アラカシ樹下， リター下

アラカシ樹下， リター下

クヌギ ・ ナラガシワ ・ ウバメガシ樹下， リター下

アラカシ樹下， リター下

アラカシ樹下， リター下

ユーカリ樹下， リター下

ユーカリ樹下， リター下

マテバシイ ・ ウバメガシ等の林内， リター下

クロマツ林内， 地表に露出

クヌギ ・ アラカシ等の林内， リター下

森紀翔
森紀翔

2021 年 10 月 10 日
2021 年 10 月 22 日

森紀翔
森紀翔

2021 年 10 月 3 日
2021 年 10 月 10 日

森紀翔

森紀翔
2021 年 9 月 27 日

2021 年 9 月 24 日

森紀翔

森紀翔

2021 年 7 月 24 日
2021 年 9 月 20 日

森紀翔

森紀翔

森紀翔

森紀翔

森紀翔

森紀翔

森紀翔

森紀翔

森紀翔

2021 年 7 月 11 日

2021 年 7 月 10 日

2021 年 7 月 4 日

2021 年 7 月 3 日

2021 年 7 月 3 日

2021 年 5 月 23 日

2021 年 5 月 14 日

2021 年 4 月 20 日

2021 年 3 月 31 日

森紀翔

森紀翔

2021 年 3 月 17 日
2021 年 3 月 17 日

森紀翔

森紀翔

2021 年 3 月 14 日

アベマキ樹下， 地中
2021 年 3 月 14 日

森紀翔

2021 年 3 月 14 日

クリ ・ カシ等の林内， 地表に露出

森紀翔

アベマキ ・ アラカシ ・ アカマツ等の林内， 地上に2020 年 11 月 5 日
転がった状態で発見

森紀翔

森紀翔

森紀翔

2020 年 10 月 18 日
2020 年 11 月 3 日

シデ属 ・ アラカシ等の樹下， リター下

腐朽した材上クヌギ ・ カシ類樹下， 地中

2020 年 10 月 13 日

森紀翔

アカマツ樹下， 地表に露出

2020 年 10 月 11 日

採集 ・
同定者
森紀翔

採集日

アカマツ ・ モミ ・ シイ等の林内， 地上に転がった
2020 年 10 月 11 日
状態で発見

発生環境 （植生）

MSF28

MSF27

MSF26

MSF25

MSF24

MSF23

MSF22

MSF21

MSF18

MSF17

MSF16

MSF15

MSF14

MSF13

MSF12

MSF11

MSF10

MSF9

MSF8

MSF7

MSF6

MSF5

MSF4

MSF3

MSF2

MSF1

オリジナル
標本番号

KPM-NC 25099

KPM-NC 25098

バウチャー
標本番号

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

乾燥

標本の
状態

図3

図2

内部にカビ発生

春型タンポタケ （Tolypocladiumsp.） が寄生． 図 1

備考

森 : 大阪府およびその近隣県の地下生菌標本リスト

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

採集地

大阪府

ウスベニタマタケ（和名なし）

ヒメノガステル属の一種 （白色）

（和名なし）

ヒメノガステル属の一種 （白色）ヒメノガステル属の一種 （白色）

ホシミノタマタケ属パルカイ亜属の一種

ジャガイモタケコイシタケ

Turmalinea persicina

Hydnangium sp.

Hymenogaster sp.

Hydnangium sp.

Hymenogaster sp.

Hymenogaster sp.

Octaviania subg. Parcaea sp.

Heliogaster columellifer

Russula sp.

ツチダマタケ属の一種

ヒメノガステル属の一種 （白色）Rossbeevera sp.

Hymenogaster sp.

兵庫県

ネズミツチダマタケ© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022
奈良県

奈良県

奈良県

奈良県

大阪府

大阪府

大阪府

大阪府

奈良県

奈良県

大阪府

ヒメノガステル属の一種 （白色）Rossbeevera griseovelutina

奈良県

奈良市

奈良市

奈良市

奈良市

吹田市

八尾市

奈良市

奈良市

八尾市

神戸市

堺市

生駒市

都道府県 市区町村

Hymenogaster sp.

和名

スクレロガステル属の一種

学名

Sclerogaster sp.

表 1. （続き）

乾燥
乾燥

MSF30
MSF31

森紀翔
森紀翔

2021 年 11 月 3 日
2021 年 11 月 5 日

カシ類樹下， リター下
カシ類樹下， リター下

乾燥

乾燥
乾燥
乾燥
乾燥
乾燥

MSF37

MSF42
MSF43
MSF44
MSF45
MSF46

森紀翔
森紀翔
森紀翔
森紀翔
森紀翔
森紀翔
森紀翔

2021 年 12 月 10 日
2021 年 12 月 18 日
2021 年 12 月 27 日
2021 年 12 月 31 日
2021 年 12 月 31 日
2021 年 12 月 31 日
2021 年 12 月 31 日

アラカシ樹下， リター下
ユーカリ樹下， リター下
シイ ・ カシ林内， リター下
イチイガシ樹下， リター下
イチイガシ樹下， リター下
イチイガシ ・ モミ樹下， リター下， 地表に露出
シイ樹下， 地中

乾燥

乾燥
乾燥

MSF34
MSF35

森紀翔
森紀翔

2021 年 11 月 26 日
2021 年 12 月 4 日

ツブラジイ樹下， リター下
ユーカリ樹下， リター下

乾燥
乾燥

MSF32
MSF33

森紀翔
森紀翔

2021 年 11 月 14 日
2021 年 11 月 19 日

アラカシ樹下， リター下
イチイガシ樹下， リター下

OSA-MY-9541

乾燥

MSF29

森紀翔

2021 年 10 月 24 日

標本の状態

腐朽した材上

バウチャー
標本番号

オリジナル
標本番号

採集 ・
同定者

採集日

発生環境 （植生）

図6

図5

図4

備考

森 : 大阪府およびその近隣県の地下生菌標本リスト

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

図 5． ウスベニタマタケ Turmalinea persicina． スケール : 1 cm.

図 6． Octaviania subg. Parcaea sp.

49

Online publication; available at: https://jats-truffles.org/truffology/

Online publication; available at: https://jats-truffles.org/truffology/

Truffology 5 (1): 51–54 (2022)

エッセイ (Essay)

コロモツチダンゴとの出会いと観察
Encounter with Elaphomyces appalachiensis and its observation
oso sugiru
三重県津市
Tsu-shi, Mie, Japan
E-mail: toolate@s7.coreserver.jp
Article Info:

Submitted: 6 March 2022

Published: 31 March 2022

1. はじめに足の踏み場も無いほどゴロゴロ地面に露出している。 次に見付

本種に初めて出会ったのは 2021 年 1 月 10 日。 この日は朝かかったのはまだ和名の無い Elaphomyces citrinus 近縁種（図 1）。

ら地元のフィールドへ向かった。 我が家から車で 15 分ほどの近ツヅレシロツチダンゴに近縁で、 真っ黄色の菌糸に覆われてい所なのだが、 周辺にガヤドリナガミノツブタケやシュイロクチキタ

るためよく目立ち、 また地表に黄色い菌糸が湧き出しているた

ンポタケ、 アマミカイキタンポタケと言った比較的珍しい冬虫夏め、 その下を掘ることで簡単に見つけることができる。

草が発生する魅力的な環境が広がっている。 今回訪れた場所
も複数種類の地下生菌とそれらを宿主とする冬虫夏草が安定して発生するので 「行きさえすればとりあえず何かしらには出会え
る」 という安心感がある。
このフィールドはシイやカシなどのブナ科広葉樹を主体とした雑木林で、 まばらにヤブツバキやネジキなどの低木が混じる。
すぐ近くに大きなレジャー施設と遊歩道が存在するため舗装道が整備されており、 車を停めて徒歩数メートルで目的地に到着できる。 ただ人通りがそれなりにあり、 匍匐前進している私に気付いた車が一旦停止し、 しばらく様子見して走り去ることがよくある。 この前は徒歩で遊歩道へ向かうご家族の小さなお子さんが大きな声で 「ねぇーだれかいるー」 と言いながら通り過ぎた時は流石に恥ずかしかった。 この場所は定期的に猟友会が山に入っており、 たまにショットシェルの薬莢が落ちているので視認性を高めるために蛍光色のカッパを着ているのだが、 確かに効図 1． Elaphpmyces citrinus 近縁種の子実体と断面． 黄色い菌糸と果はあるようだ。

白い内皮の間に硬質の外皮がある．

2. 発見の経緯

ここまではこのフィールド既出の種ばかりで、 いつも通りの探索

探し始めて早々に冬虫夏草のハナヤスリタケの幼菌が見つかだった。 しかし、 E. citrinus 近縁種を掘り出した周囲の地面にライる。 この場所では広義のアミメツチダンゴを宿主とする冬虫夏草

ラック色の見慣れない菌糸が広がっていることに気が付いた。 最が数多く発生し、 他にもハナヤスリタケと同時期に発生するヌメ

初はカビの仲間か何かだと思ったが、 積もった腐植ではなく地

リタンポタケや、 もう少し経つと以前は 「春型タンポタケ」 と呼面に広がっていることに違和感があり、 また菌糸の質感も色こそばれていたタンポタケ類が発生する。 なお、 アミメツチダンゴは違えど E. citrinus 近縁種の黄色い菌糸にそっくりに見えたので© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

51

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

oso ： コロモツチダンゴとの出会いと観察
掘ってみることに。 するとコロコロと紫色の塊が転がり出て来た。

子実体は大きい物でも 1.5 cm ほどで、 やや潰れた球形。 子

それでも最初に見た時は地下生菌だと思えなかった。 それは

実体は全体がライラック色～淡赤紫色の菌糸に覆われており、「淡い薄紫色の地下生菌」というものが自分の知識の中に無かっこの菌糸は子実体周囲に広がり、 時に地表に露出して本種発たため。 なのでカビに覆われたドングリの残骸か何かでは？とも見の目印になる。 さらにこの菌糸は薄皮のようにペリペリと剥が考えたが、 指で触った質感はしっとりとして弾力があり、 中に硬すことができ、 これが和名の由来なのではないかと思われる。

質の植物体が入っている手触りではなかったので、 試しに膝のツヅレシロツチダンゴのような硬質の外皮は存在せず、 ライラッ

上に乗せてカッターナイフで真っ二つに切断。 するとスムーズ

ク色の菌糸から直接内皮に移行する。 内皮は厚さ 1 mm ほどでに刃が入り、 引き抜く時に切断面から灰青色の粉がこぼれた。

断面は灰白色だが、 成熟したものは染みるように胞子と同じ灰ここでようやくこれが地下生菌だと確信できた。 そして真っ二つ

青褐色を帯びていることが多い。 胞子はこれもツヅレシロツチダにした塊をそっと開いてみると、 薄紫色の菌糸の内側に白い層、ンゴの仲間らしい灰青褐色で、 それだけに子実体を覆う菌糸のその内側には灰青褐色の胞子 ・ ・ ・ 。 明らかにツヅレシロツチ

色の異質さが際立つ （図 3）。 ネット上に公開されている本種にダンゴに近縁な地下生菌だった （図 2）。

関する 2012 年の論文 （Castellano et al., 2012） の記載内容と比較し、 本種をコロモツチダンゴとしてよいと判断した。
また、 このフィールドだけの現象かも知れないが、 不思議とE. citrinus 近縁種と隣接して発生することが多いように思われる（図 4）。 実際、 黄色い菌糸とライラック色の菌糸がぶつかり合う

図 2． 見慣れないライラック色の菌糸に包まれた地下生菌． 胞子の色からもツヅレシロツチダンゴに近縁なグループであることが推測される．

3. コロモツチダンゴ （Elaphomyces appalachiensis Linder ）ツチダンゴの仲間だと分かっても、 本種が何という種なのかはこの段階では全く見当もつかなかった。 なので私は山の中でスマートフォンを取り出し 「えっと ・ ・ ・ ツヅレシロツチダンゴ系の菌糸って白とか黄色だよね ・ ・ ・ ？ライラック〜紫色ってある？ （2021 年 1 月 10 日 13:30 原文ママ）」 と Twitter に書き込んだ。 すると数分で菌友のガガンボ氏から 「コロモツチダンゴですかね？」 とのリプライが届きハッとした。 コロモツチダンゴが赤色系の地下生菌であることは知っていたが、 詳しく特徴が述べられている文献はコロモツチダンゴを E. apparachiensis と同定し図 3． コロモツチダンゴの表面と断面． 硬質の外皮が存在しない．

た報告 （室井 ・ 津田、 2003） くらいで、 その他は載っていても本種に特異的に感染する冬虫夏草のミヤマタンポタケの宿主としてオマケ程度に紹介されているくらい。 とにかく情報が少なく、ただ漠然と和名の響きから 「薄皮に包まれているのかな？」 と思い込んでいたので頭に浮かばなかった。
数個体をタッパーに入れて持ち帰り、 観察の時間を確保する
ために早めにフィールドを後にした。 帰宅した後、 室内で詳細に観察する。 ホームページ掲載用に真っ二つに切った子実体をピンに刺して固定し、 暗い部屋で各部位をマクロ撮影。 これ

図 4． Elaphpmyces citrinus 近縁種とコロモツチダンゴの菌糸が隣により本種の特徴がハッキリ理解できた。

接する様子．

52© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

oso ： コロモツチダンゴとの出会いと観察ように地面に湧いている様子を何度も目にしている。 ただ、 これは発生環境が共通しているので単に共存しているだけかも知れないが ・ ・ ・ 。

4. 顕微鏡観察と考察
上記の論文に胞子の電子顕微鏡写真があったので自分でも確かめようとしたのだが、その後の観察結果に悩まされることとなる。
胞子の顕微鏡観察自体は簡単で、 油浸対物レンズを用いると表面構造がすぐに確認できた。 しかし、 撮影した写真を編集し

図 6． ロウツブタケ属菌 （Hydnobolites sp.） の胞子とイラスト．

ていて妙なことに気が付いた。表面に「網目」が見えるのだ（図 5）。
次に、 同様に補助線を入れたコロモツチダンゴの胞子を見てみる （図 7）。 左右の撮影方法も先ほどと同じ。 左を見ると網目状に見えているのは同じだが、 右を見ると胞子の輪郭が整った
円形に見えている。 つまり「同じ高さの何かが表面を均一に覆っている」 ということになる。 そしてこの均一に覆っているものこそ、
隙間無く並んだ細かい棒状突起だと思われる。 それをイラストにしたものが図 7 中央である。

図 5． コロモツチダンゴの胞子の顕微鏡写真． あるはずの無い網目模様が見える．

論文の記載では （自分の翻訳能力を信じるならば）、 本種の成熟した胞子表面は 「細かい棒状突起」 に覆われるとあり、 論文
中の電子顕微鏡写真でもその様子が確認できる。 明らかに目の前の結果と食い違う。 別種なのか？それにしてはそれ以外の特徴が一致しすぎている ・ ・ ・ 。
そこで過去に撮影した様々な子嚢菌類の胞子写真を引っ張り出してみた。 特に胞子表面に網目構造を持つ種を中心に写図 7． コロモツチダンゴの胞子とイラスト．

真を集め、 見え方の違いを比較した。 その最中にイグチ類のス
ペシャリストである牛研氏の 「メルツァー試薬で染色してから観さらに、 牛研氏に教えていただいた通り、 メルツァー試薬で察すると表面構造が観察しやすい」 との情報提供があったこと、染色したサンプル （図 8） を見て、 この網目が隆起ではなく亀そしてとある胞子の顕微鏡写真を見たことで自分なりに答えに辿裂であると思える見え方の特徴にも気付いた。 隆起は山の裾野

り着くことができた。

のように滑らかに消えて行くが、 亀裂は地割れのように突然現れ

結論から言うと 「網目」 ではなく 「亀裂」 だった。

る。 「Minecraft」というゲームをご存知の方であれば、地形の「山」

まず、 表面構造が見やすいようにコットンブルーで染色した ロと 「渓谷」 をイメージすると分かりやすいと思う。 実際に網目がウツブタケ属菌 （Hydnobolites sp.） の胞子を見てみる （図 6）。

途切れる場所を見てみると、 隆起した網目は少しずつ薄くなる

左が深度合成したもので、 右がピントを胞子の中心に合わせたが、 コロモツチダンゴの網目は途切れる際にスパッと消えていもの。 この属の胞子は球形で表面に網目状の隆起を持つのがる。 このことからも本種の網目に見えていたものは亀裂だったの特徴で、 分かりやすいように赤色で補助線を入れてみると、 左だと確信することができた。 それを念頭に置いてからもう一度確は表面に網目構造が見え、 右は胞子の輪郭がガタガタしている

認すると、 細かな点に見ていたものも論文の電子顕微鏡写真ののが分かる。 これは隆起した網目を横から見た 「断面」 的な見ように、 亀裂になる前にスポット状に穴が空いた状態だったのだ

え方のため凸凹しており、中央のイラストのような形状だと分かる。

と納得することができ、 満足のいく顕微鏡観察となった。

© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

53

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

oso ： コロモツチダンゴとの出会いと観察

構造がモチーフ。 その他、 無数のベルトはグレバ内にまばらに見られる糸状の菌糸、 フードの紐はミヤマタンポタケの子実体、 帽子やコートに通された赤い紐は菌糸に巻き込まれた木の根を模している。 私の管理するホームページ （http://toolate.
s7.coreserver.jp/personification/） に詳細な設定が書かれているので、 お暇な時にでも覗きに来てただけると幸いである。

謝辞
今回のコロモツチダンゴについては、 その正体も、 胞子観察の図 8． メルツァー試薬で染色したコロモツチダンゴの胞子． 表面の亀裂

ヒントも Twitter を通じて教えていただくことができました。 似たよの出来方によって表面が網目状にも細点状にも見える．

うなことは今までも何度か経験しており、 改めてインターネットとその集合知、 そこに居る愛好家、 専門家の方々の凄さを思い

5. おわりに知らされた気がします。 ガガンボ氏、 牛研氏、 本当にありがとう

今回コロモツチダンゴの表面構造が自分なりに納得できたことでございました。

新たな疑問が浮上した。 それは 「今までの胞子の表面構造の観察でも実は勘違いがあったのではないか」 ということ。 実は、引用文献

すでに何種類か心当たりがある。 光学顕微鏡ではどうしても電Castellano M.A., Guerrero G.G., Jiménez J.G., Trappe J.M. (2012)

子顕微鏡ほど正確に表面構造を見ることができない。 なので自Elaphomyces appalachiensis and E. verruculosus sp. nov. (Ascomycota

分の目にも機器の目にも限界があるのだと自覚し、 とりあえず

Eurotiales, Elaphomycetaceae) from eastern North America. Revista「疑ってかかる」 ことの大切さを痛感した。

Mexicana de Micología 35: 17–22.

また、 2021 年は定期的にこのフィールドを訪れ、 コロモツチ
ダンゴからミヤマタンポタケが発生していないかを観察し続けた。

室井哲夫 ・ 津田浩治 （2003） ミヤマタンポタケの宿主， コロモツチ
ダンゴの学名について． 冬虫夏草 23: 27–28.

残念ながら発見には至らなかったが、 コロナ禍で十分な回数を稼げていないこともあるので、 2022 年も観察を継続したいと思う。
余談だが、 非常に好きなキノコとなったので擬人化してみた （図 9）。 髪型は顕微鏡観察にて印象に残った胞子表面の図 9． コロモツチダンゴ擬人化の 「団 衣 （ダン コロモ）」 嬢．

54© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

Online publication; available at: https://jats-truffles.org/truffology/

Truffology 5 (1): 55–57 (2022)

その他普及記事 (Other articles)

事例紹介 ： ヤマトヒメナガヒラタハナアブ （双翅目ハナアブ科） による外生菌根菌ショウロおよびホンショウロの摂食
Introduction to "Consumption of the ectomycorrhizal fungi Rhizopogonroseolus and R. luteolus by Chamaesyrphus japonicus (Diptera: Syrphidae)"岡田 英士
Hidehito Okada
神戸大学理学部生物学科， 〒 657-8501 兵庫県神戸市灘区六甲台町 1-1
Department of Biology, Faculty of Science, Kobe University, 1-1 Rokkodai, Nada-ku, Kobe, Hyogo 657-8501, Japan.
E-mail: hidefungi@gmail.com
Article Info:

Submitted: 17 March 2022

Published: 31 March 2022

地下生菌は、 一般に胞子の風散布機能を失っている。 そのた

県内の二箇所のフィールドからショウロ属 （ショウロとホンショウ

め、 動物や昆虫による摂食が主な胞子散布様式であると考えら

ロの 2 種） を採取し、 バーミキュライトを敷いたタッパーの中でれてきた。 しかしながら、 どのような動物や昆虫が地下生菌を数週間追培養し、 羽化した昆虫を採取した。 当初、 節足動物

摂食するかについては知見が少ない。 本稿では、著者によるショ（特にキノコバエ類） が羽化してくるだろうと予想しており、 実際、

ウロ Rhizopogon roseolus (Corda) Th. Fr., Svensk, 1909 とホンショ

Cordyla 属のキノコバエ類が採取できた （図 1）。

ウロ R. luteolus Fr. & Nordholm, 1817 の 2 種のショウロ属菌からヤマトヒメナガヒラタハナアブ Chamaesyrphus japonicus Shiraki,
1956 の幼虫を発見した研究 （Okada et al., 2021） と発見に至った経緯を紹介する。
地下生菌について興味を持ち始めたのは学部 1 回生の頃だった。 元々菌類と他生物との生物間相互作用に興味があり、ちょうど大学入学に伴い研究テーマを探していたところ、 地下に子実体を形成し胞子散布を動物に依存するという地下生菌の特異な生態に魅力を感じたことがきっかけだった。 身近な地下生菌類を用いて研究を行いたいと考えたところ、 地元の海岸で安定して採取できるショウロ属が目にとまった。 早速文献を調べてみると、 日本産のショウロ属の胞子散布に関するまとまった研究はないものの、 北アメリカのショウロ属は齧歯類 （Clethrionomys

図 1． ショウロ Rhizopogon roseolus の子実体から羽化した Cordyla 属のcalifornicus, Glaucomys sabrinus など） に胞子散布を依存する

キノコバエ類． スケール ： 1 mm.

ことが知られていた （Fogel & Trappe, 1978 ； Maser ＆ Maser,1988）。 したがって、 日本のショウロ属も同様の動物による胞子この際、 追培養していた子実体 （子実体の内部は既に液化散布が予想された。 加えて、 子実体にはキノコバエ類などの幼していた） を実体顕微鏡で観察していたところ、 子実体内部で虫も確認されるので、 小型哺乳類などによる長距離散布以外に何かが動いているように見えた。 よく観察すると、 子実体内部にも節足動物などによる短距離の胞子散布もあるのでないかと考

何かいるようであった。 子実体をカミソリで分解してみたところ、えた。 よって、 動物による散布も調べつつ、 子実体を採取して、明らかにキノコバエ類の幼虫とは異なる大型の双翅目幼虫を発ショウロ属を摂食する昆虫の調査も始めた。 具体的には、 兵庫

見した （図 2A）。 他の子実体も分解して内部を調べると同様の© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

55

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

岡田 ： ヤマトヒメナガヒラタハナアブの菌食図 3． ショウロから羽化したヤマトヒメナガヒラタハナアブ Chamaesyrphus
japonicus の成虫． スケール ： 2 mm.

ることがわかった （市毛、 2014 ； 桂、 2004）。 さらに、 成虫の出現時期もショウロ属の子実体の形成時期と重なっている （市毛、2014 ； 桂、 2004）。 これらのことは、 ヤマトヒメナガヒラタハナア
ブがショウロ属を特異的に利用している可能性を示唆している。
今回の発見は、 ヤマトヒメナガヒラタハナアブによるショウロ属の摂食を報告しただけでなく、 地下生菌を利用するハナアブという特殊化した関係を明らかにした点で意義深いものであると考図 2． A：ヤマトヒメナガヒラタハナアブ Chamaesyrphus japonicus の幼虫．

えている。 近年、 菌根菌の胞子散布者の重要性が広く議論さB ： ヤマトヒメナガヒラタハナアブの幼虫の消化管． 摂食した胞子によりれるようになってきた （Vašutová et al., 2019）。 特に、 地下生菌

褐色に見える． スケール ： A = 1 mm; B = 2 mm.

類の胞子散布に関しても興味深い研究が立て続けに発表されている。 例えば、 Stephens et al. (2020) は 4 種のツチダンゴ属

双翅目幼虫が複数発見された。 幼虫を解剖してみたところ消化菌に関して地下深くに子実体を形成する種ほど匂いが特徴的で管は大量の胞子により褐色になっており、 胞子を摂食しているこ

齧歯類に選ばれやすいことを、 Caiafa et al. (2021) は パタゴニアとがわかった （図 2B）。 ここで、 幼虫の胞子散布者としての寄において鳥類が地下生菌を含む菌根菌を広く摂食し胞子散布

与を調べるために、 幼虫の消化管内容物を調査したところ未消を担っていることを明らかにした。 このような状況下で、 地下生化の胞子が見つかった （著作権の関係上胞子の写真は掲載で菌の多様性が高い本邦ではまだまだ面白い研究が展開できるきなかったが、 詳細は Okada et al. (2021) を参照されたい）。 胞可能性が高いのではないかと考えている。 現在著者は菌根共子が実際に発芽能力を持つかは不明であるが、 外形がはっきり

生系の研究を主に行っているが、 菌類を含む生物間相互作用

残っていることや油球をもった胞子も観察されたことを考慮するについて明らかにしたいという思いは変わっておらず、 ショウロと、 発芽能力を持っている可能性が高いと考えられる。 ただし、属の胞子散布者など菌類と動物の相互作用に関する研究も続

胞子散布者としての能力を評価するためには、 幼虫の移動距

けていきたい。

離や、 土壌に潜って地下で蛹化するかどうか （菌根菌の場合は土壌中の宿主樹木に近い位置に胞子が運ばれることも重要であると考えられる） なども調べる必要がある。

謝辞

この正体不明の幼虫を同定するために、 残った幼虫と子実体

本研究を行うに当たって、 Entomological Science 誌に掲載されを同じケースにいれて培養を続けた。 6 週間ほどで成虫が羽化た論文の共著者である末次健司氏、 末吉昌宏氏には多くの助したので、 標本を森林総合研究所の末吉昌宏氏に調べていた

言をいただきました。 また、 伊東正憲氏は快く文献を提供してだいたところ、ヤマトヒメナガヒラタハナアブと同定された （図 3）。

いただきました。 この場をお借りし、 厚くお礼申し上げます。

興味深いことに、 ヤマトヒメナガヒラタハナアブの成虫の報告は少なく、 幼虫の食性に至っては一切不明であった。 加えて、 これまでに成虫が採取された場所はすべて海岸のクロマツ林であ56© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

岡田 ： ヤマトヒメナガヒラタハナアブの菌食

引用文献

Okada H., Sueyoshi M., Suetsugu K. (2021) Consumption of theCaiafa M.V., Jusino M.A., Wilkie A.C., Díaz I.A., Sieving K.E., Smithectomycorrhizal fungi Rhizopogon roseolus and R. luteolus by

M.E. (2021) Discovering the role of Patagonian birds in the dispersal

Chamaesyrphus japonicus (Diptera: Syrphidae). Entomologicalof truffles and other mycorrhizal fungi. Current Biology 31: 5558–5570.
Fogel R., Trappe J.M. (1978) Fungus consumption (mycophagy) by small
mammals. Northwest Science 52: 1–30.
市毛 勝義 （2014） Chamaesyrphus japonicus ヤマトヒメナガヒラタハナ
アブを愛媛県で採集． はなあぶ 38: 39–41.
桂 孝次郎 （2004） ヤマトヒメナガヒラタハナアブの雄の発見と生態的新知見． はなあぶ 17: 7–12.
Maser C., Maser Z. (1988) Interactions among squirrels, mycorrhizal
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Stephens R.B., Trowbridge A.M., Ouimette A.P., Knighton W.B., Hobbie
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Vašutová M., Mleczko P., López-García A., Maček I., Boros G., ŠevčíkJ., Fujii S., Hackenberger D., Tuf I.H., Hornung E., Páll-Gergely B.,
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mycorrhizal fungi. Mycorrhiza 29: 413–434.

358–369.

© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

57

Online publication; available at: https://jats-truffles.org/truffology/

Online publication; available at: https://jats-truffles.org/truffology/

Truffology 5 (1): 59–60 (2022)

その他普及記事 (Other articles)

映画 『白いトリュフの宿る森』 試写会体験記
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保坂 健太郎 1*, 佐々木 廣海 2
Kentaro Hosaka1*, Hiromi Sasaki2
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国立科学博物館植物研究部， 〒 305-0005 茨城県つくば市天久保 4-1-1
Department of Botany, National Museum of Nature and Science, 4-1-1 Amakubo, Tsukuba-shi, Ibaraki 305-0005, Japan2

神奈川県藤沢市
Fujisawa-shi, Kanagawa Prefecture, Japan* Corresponding author （主著者）

E-mail: khosaka@kahaku.go.jp
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Submitted: 18 January 2022

Published: 31 March 2021

去る 2022 年 1 月 27 日、 東京にあるソニー ・ ピクチャーズ エン

そしてトリュフの生み出す富に群がる人々などをめぐる群像劇ドタテインメント虎ノ門オフィスにて開催された、 映画 『白いトリュ

キュメンタリー、 というのがこの映画の本質なのだと思う。

フの宿る森』 マスコミ向け試写会に参加する機会に恵まれた。

しかしやはりトリュフ映画。 トリュフを探す場面はたくさん登場

映画は 2022 年 2 月 18 日 （金） から公開されるので、 本記事する。 日本地下生菌研究会の採集会などで見られる風景とはが出版される頃には、 すでに多くの会員が映画を楽しんでいる

ガラッと違う雰囲気を、 存分に味わってほしい。 この映画を見るかもしれない。 が、執筆時点では日本国内の「トリュフ関係者（広までに、 ヨーロッパでのトリュフ狩りについて漠然と抱いていたイ義）」 でこの映画を見たのは保坂 ・ 佐々木の 2 名だけであるとメージとは異なる、 意外な場面がいくつかあった。 例えば映画

自負しているので、 一足先に （そして内容を忘れてしまわないの冒頭では、 初老の男性 （トリュフハンターの一人） と愛犬がうちに） 映画の感想を記しておきたい。

トリュフを探して山の中を進んでいくのだが、 かなりの急斜面を映画の舞台は北イタリアのピエモンテ州。 だから登場人物は登っている場面もあった。 広大な平野部で探すものと思っていみんなイタリア語 （Wikipedia によれば一部はピエモンテ語） でたが、 必ずしもそうではないらしい。 また、 かなり雪が降り積もる話す。 てっきりイタリア映画かと思っていたが、監督はアメリカ人。

時期にトリュフ狩りに出かけていく様子も描かれていた。 会員の映画が公開されたのは 2021 年 3 月ということだ。 原題はズバリ

みなさんも雪の日に地下生菌探しはなかなかしないだろうし、 実“The Truffle Hunters” となっていて、これがなぜ邦題で「白いトリュ

際にあまり採れないと思う。 でも、 真冬にもう少し頑張ってみてフの～」 になったのかは聞きそびれたが、 「トリュフ ・ ハンター」

も良いかもしれない。

とするよりはずっと、 この映画のもつどこかミステリアスな雰囲気をうまく反映している気がする。

もうひとつ意外だったのは、 トリュフ犬がトリュフを見つける場面である。 いまさら豚が主力であると思っている人はいないと思最初に断っておきたいのだが、 この映画は決して地下生菌のうが、 豚はトリュフを見つけると興奮して齧ってしまい、 人間と取探し方、 見分け方を勉強するためのハウツーものではない。 あ

り合いになるからダメ。 よく躾けられた犬はトリュフをきれいなまま

まりいないと思うが、 もし多種多様な地下生菌が掘り出される場

人間に渡してくれるから最高、 というようなことを聞いたことがある面を期待しているとしたら、 残念ながらその希望はかなわない。

のではないだろうか？でも映画の中のトリュフ犬は、 トリュフを発

なにしろ登場するトリュフはただ一種。 アルバ産の白トリュフ、 す

見するとまさに興奮状態で、 トリュフから引きはがすのに一苦労

なわち Tuber magnatum だけなのだ。 映画のチラシにも 「夜な（爪の跡もついてしまう）、 といった感じだ。 もちろん豚の興奮と夜なおじいさん達が～」 とか 「最高のドッグムービー」 などのは意味合いが異なると思うが、 犬とボールで遊んだあとに、 ボー文字が並ぶ。 つまり、 白トリュフとそれを探す人々とトリュフ犬、ルの表面がツバでねっとりと濡れている様子が、 そのままトリュフ© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

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Truffology - Volume 5, Issue 1, 2022

保坂 ・ 佐々木 ： トリュフ映画に当てはまることがあるのかもしれない。

たり年でもあり、「素晴らしき、きのこの世界」 に引き続き本作 「白そのほかにも、 トリュフ狩りの最高のポイントは自分の子供にもいトリュフの宿る森」 が公開される。 再びみんなで集まって存分

教えないとか、 トリュフ狩り仲間も高齢化が進んでいるとか、 ライに地下生菌探しができる日が来るときにそなえ、 このトリュフ映

バルを出し抜くために卑怯な手を使うとか （これはネタバレにも画を見て気分を盛り上げておくことをおススメする。 なお、 予告

なるのであえて詳しくは紹介しないが、 かなり残酷な手を使うこと

映像を含めた映画の情報は、 公式ホームページ （https://www.

もあるらしい）、 異国の雰囲気満載の映画なのだが、 ヨーロッパ

truffle-movie.jp） より確認できる （注 ： ただし、 当初の上映予のトリュフ狩りの本質はマツタケ狩りと共通する点がとても多そう

定は 3 月 24 日までとされている）。

だ。研究会の会員に関連していそうなこととしては、トリュフがひっ
そり埋もれていると思うと居ても立っても居られずに家を抜け出し謝辞

森へ行く、そんなおじいさんが奥さんに叱られる場面も登場する。

試写会の参加にあたり、 株式会社アンプラグドの天野 あゆみさ

みなさんも自分の胸に手を当てて考えるべきかもしれない。

ん、 ソニー ・ ピクチャーズ エンタテインメントの森島奈津子さん、

2020 年以降は新型コロナウイルス騒ぎがあり、 あまり外にも行けずストレスを感じている人も多いと思う。 しかしきのこ映画の当

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ハート & ハートの山中佐知子さんには大変お世話になりました。
この場をお借りして御礼申し上げます。

© The Japanese Association for Truffle Science (JATS), 2022

Online publication; available at: https://jats-truffles.org/truffology/

ISSN 2433-9725

Truﬀology （日本地下生菌研究会会報） 第 5 巻 1 号
編集長

山本 航平 （栃木県立博物館）

編集担当

折原 貴道 （神奈川県立生命の星 ・ 地球博物館）
木下 晃彦 （国立研究開発法人 森林研究 ・ 整備機構 森林総合研究所）
大和 政秀 （千葉大学教育学部）

Truﬀology (Bulletin of the Japanese Association for Truﬄe Science) Vol. 5 No. 1
Editor-in-Chief Kohei Yamamoto (Tochigi Prefectural Museum, Japan)
Editors

Takamichi Orihara (Kanagawa Prefectural Museum of Natural History, Japan)
Akihiko Kinoshita (Forestry and Forest Products Research Institute, Japan)
Masahide Yamato (Faculty of Education, Chiba University, Japan)

発行日 ：2022 年 3 月 31 日

発行 ・ 出版 ： 日本地下生菌研究会〒 250-0031 神奈川県小田原市入生田 499
神奈川県立生命の星 ・ 地球博物館
URL ：https://jats-truﬄes.org/truﬀology/© 2022 The Japanese Association for Truﬄe Science (JATS). Published by JATS. All rights reserved.