スパイスの摂取による温熱作用増感効果：未病のバイオマーカーとしての終末糖化産物（AGEs）のヒトにおける変化77＜平成 21 年度助成＞

スパイスの摂取による温熱作用増感効果：
未病のバイオマーカーとしての終末糖化産物（AGEs）のヒトにおける変化上馬塲 和夫 1,3)・小川 弘子 2)・御影 雅幸 2)・許 鳳浩 3)
丁 宗鉄 4)・趙 慶利 5)・横澤 隆子 6)・高橋 芳樹 7)１）

富山大学和漢医薬学総合研究所（現 帝京平成大学東洋医学研究所）２）金沢大学薬学部、
医療法人ホスピィー浦田クリニック統合医療研究所、４）日本薬科大学漢方薬学科、
５）
富山大学医学薬学研究部、６）富山大学産学官連携部門、７）ライフサイエンス研究所
３）

研究の背景と目的

C. 心理学的マーカー：睡眠の質、抑鬱度、疲
労度、QOL（Quality of Life）「未病」という言葉は、各種出版物や薬用酒のその過程では、現代医学的所見だけでなく世

テレビ広告などに頻繁に見かけるようになりまし

界中の伝統医学の研究からも考察することを試みた。最近のように現代医学的な診断がつかない半ました。その結果、伝統医学アーユルヴェーダ

健康人が増加したことが最大原因だと思われます

で述べられている「アーマ」と呼ばれる疾病を起が、さらには生活習慣病の増加と医療費の高騰なこす毒素が、現代医学の AGEs（最終糖化産物）

どから予防医学が注目を浴びるようになったために対応することを推定しました。これは、「蜂蜜と思われます。

を加熱すると有毒になる」という、アーユルヴェ

元来「未病」という用語は、約 2000 年以上前（後ーダの古典 3, 4) の記述から、実際に蜂蜜を、100℃漢）に著されたという黄帝内経素問・四気調神大

30 分 間 加 熱 し た 結 果、8 倍 近 い AGEs（CML：

論に「聖人不治已病．治未病」として初出していcarboxymethylysine：ELISA 法）が生成されるこ「未ます 。日本未病システム学会によりますと、とを確認したからです 5)。実は、蜂蜜は、天然の病」を、以下の M –Ⅰと M –Ⅱに分類しています 2）。

糖質の中でも特殊なもので、自然界の花にあるオ

M –Ⅰ： 自覚症状はないが遺伝子や生化学的検査

リゴ糖や多糖などを、一度ミツバチが自分の胃に等で異常が見られ放置すると重症化する

いれて消化して、単糖類のグルコースと果糖に変もの換して、花粉などのタンパク質と一緒に含ませた

1)

M –Ⅱ：自覚症状はあるが検査では異常がないものものなのです。
現代医学的に未病の生化学的バイオマーカー

ただ、当学会では、未病のマーカーに関する研と な る AGEs（advanced glycation endproducts:

究が進歩することで、未病のマーカーが確立さ

終末糖化産物）は、疾病の成り立ちにおいて大きれれば、M –Ⅱは M –Ⅰに移行するとしています。

な役割を担っていることが知られています 6 - 10）。

そこで、我々は、未病のマーカーとして、以下のAGEs は、血糖と体内の各種タンパク質が、非酵

A、B、C を分類しました。

素的に結合したものですが、糖尿病の進展だけで

A. 生理学的マーカー = 動脈硬化度、心拍変動解析、生体リズムなく、動脈硬化などを含めた老化の仕組みに深く関与していることが知られているのです 6 - 10）。

B. 生化学的マーカー = 酸化ストレス＆抗酸化

これまで、酸化ストレスが動脈硬化や老化に関能、腫瘍マーカー、糖化ストレス：AGEs

係することが知られてきましたが、活性酸素は、

78

浦上財団研究報告書

Vol.19（2012）

シグナル伝達や免疫機能にとって必要なものであらなっています。AGEs の排泄系は、腎臓からのり、それだけでは疾病の前駆状態や老化現象を説

排泄が主体ではありますが、細胞や組織内では、明することはできません。そこで登場した概念が、代謝系により分解されることは知られています。

カルボニル・ストレスです。カルボニル・ストレス

AGEs は細胞膜の RAGE に作用する以外に、細により生成される毒素が、AGEs なのです。しか胞内外の各種タンパク質を凝集させることが知ら

し AGEs は、メイラード生成物として長く知られれており、コラーゲンを異常凝集することで、皮てきたもので、それが疾病発症や老化に関与する

膚や骨の老化や疾病の発症に関与し、クリスタリとは考えられないという説も多くあります。最近

ンを異常凝集させることで、白内障を、ミエリン

で は、AGEs を Toxic AGEs と Non-toxic AGEs

を異常凝集させることで特に糖尿病性神経症などに分類する試みもされています

11)

が、AGEs の毒性は完全に確定されたものではありません。
しかし、竹内や光山らは、Toxic AGEs が血管内皮細胞などのもつ RAGE（Receptor for AGEs）
として各種臓器の異常を来たすことを提唱しています

9, 11)。

の原因としてしられています 12)。
我々は、老化や疾病の基礎病変となる未病の病態は、図 1 のようにして形成させるのではないかと推定しました。
このような未病の病態の治療に関して、現代医学的研究からは AGEs の形成を抑制する製剤

AGEs の体内外の動態として、図 1 に示すようや AGEs とタンパク質との異常凝集を切る薬剤に、外来的（Exogenous）に食事から入るものと、などの開発がなされています。しかし我々は、伝内在的（Endogenous）に、血糖と体内の各種タン

統医学アーユルヴェーダや漢方医学で、疾病の発パク質が非酵素的に結合して生成されるものか症に「毒素」が関与すると言われ、その毒素を浄AGEs の分布と代謝
生体外

加熱・酸 化糖 + タンパク質→→→AGEs

生体内高血糖 + 生体タンパク質

食事による経口摂取→Toxic AGEs = Glycer-AGEs

腎から排泄

慢性腎臓病では排泄されにくい肝での排泄

慢性肝臓病では解毒されにくい生体内蓄積（皮膚や他の臓器：蛍光、通電性能、結合組織の弾力性の差）

細胞内分解機構①ユビキチン - プロテアソーム系
温熱ストレスなどで活性化②ライソゾーム - オートファジー系
インスリン低下で活性化

細胞外

細胞内

①マトリックス ⇒ シミには AGE 蓄積⇒蛍光強い皮膚は弾力性低い
・コラーゲンの疑集 ⇒ 皺、硬化、AGE が通電性変化 ⇒ ツボ電気的特性
・クリスタリンの疑集 ⇒ 白内障
・ミエリン ⇒ 神経障害
②血漿 ⇒ RAGE ⇒ 内皮細胞機能障害（eNOS 抑制）⇒動脈硬化（心腎相関）、マクロファージ活性化 ⇒ 炎症や細胞遊走

細胞内タン
パクの疑集
⇒ 各種細胞機能障害

未病の病態（老化や疾病の基礎病変）①内皮細胞機能障害を主体とする全身の細胞機能障害②マトリックスを含む組織の生物学的・物理学的特性変化
図1

AGEs の体内外の動態（in と out）と未病の病態への関与

スパイスの摂取による温熱作用増感効果：未病のバイオマーカーとしての終末糖化産物（AGEs）のヒトにおける変化

79化する治療がおこなわれていることから、伝統医も、類似の変化が図 6 のように起きていることが学的治療法である各種薬草や、とりわけアーユル

推定されます。

ヴェーダで頻用するスパイスが、AGEs に影響することを推定しました

現代医学的研究においても、Rattan らは、線維芽細胞の連続加温により線維芽細胞が長寿になる

現代医学的研究においても、生体では、自己浄ことを報告し15)、Thomas ら16）が、その仕組みと化システムが働いています。とりわけ、ユビキチ

してユビキチンを含む HSPs が誘導されて、プロン・プロテアソーム系とライソゾーム・オートファ

テアソームが活性化し、その結果 AGEs が分解さジー系の２つが知られています。HSPs、ユビキチ

れると仮説しているのです。

ン、プロテアソーム、オートファゴゾームなどが関

また、GGAと温熱負荷との相互作用について与して、細胞内の異常タンパク質を分解すると推は、京都府立医大の岡山らの報告があります。こ

定されています。

こでは、温熱による HSP 70 の誘導と NF –κB 抑

実際、アーマを言及しているアーユルヴェーダ
でも、健康増進、あるいは疾患治療において、体13)制が、GGAを併用することで促進されることが知られています。

。この浄化療法でさらにスパイスを調理に使うことで食物中のは、体内の余分な毒素を排泄して健康の維持増進

AGEs 含有量を少なくすることができることも、や若返りを目指すものです。アーユルヴェーダに体内の AGEs プールを減少させる効果がありま

おいては、有効な治療法として認知されているもす。食物中の AGEs の 10 ％が血管内に吸収されのの、現代医学的・科学的見地からは、その有効ることが報告されているからです。図 1 に示すよ性や機序についての研究は殆どありませんが、ア

うに、体内の AGEs 蓄積は体内由来と体外摂取由ーユルヴェーダの浄化療法では薬草オイル塗布と来の AGEs によっています。後者の外因性 AGEs

発汗法と呼ばれる薬草サウナを行います。

は、メイラード反応生成物として知られ、主に食系的な浄化療法が施されます

我々は、浄化療法でおこなわれる薬草中の親油品の加熱によって生成されます。そのため、本研

性成分やサウナによる温熱負荷が、体内の AGEs

究では、スパイス特にウコンを使った加熱調理にの分解を促進するのではないかと推定しました。

よる AGEs 生成の抑制も検討しました。

その結果、未病の生化学的マーカーである AGEs

また、横澤らが報告していますように 23 - 27)、が細胞内自己浄化システムによって分解されるこ

内在的な AGEs 生成が、スパイスや生薬の抗酸化とを推定しました。

作用で抑制されることも当然起こることも推定さ

特に、ウコン中に多く含まれていると四童子やれます。

小川らが報告 14) しているジテルペノイド・ゲラニ

スパイスのヒトにおける薬物動態については報

ルゲラニオール（GGOH）は、セルベックスとし告は少ないのですが、我々はウコンをヒトに経口て知られている Geranylgeranil aceton の構造類投与することで、クルクミンが血中に吸収される似体であり、六反らも強い HSP 70（Heat Shockことを報告しました 17) 。さらに、スパイスの実

Protein 70）誘導増強作用があることを報告して験において我々は、ex vivo 実験を行うことにし21)。また、温熱ストレスによってユビキチ

ました。これまでの生薬研究の多くは、試験管内

ン–プロテアソーム系の細胞内浄化システムが活や動物実験がほとんどでしたが、スパイスやカレ性化されることが知られていますので 16)、アーーには多種類の生薬と数多くの成分が含まれておユルヴェーダの浄化法の主体となる薬草サウナでり、一つの成分の作用に還元することは困難です。

います

80

浦上財団研究報告書

Vol.19（2012）

また温熱負荷は、動物とヒトとでは体温調節機構

れる AGEs や、自己浄化システムに関わる HSPs

が異なっており、単純に外挿できません。それらに関連して検討することとしました。

の問題を解消する研究手法として、我々は、多種類の漢方薬からなる複合製剤のヒトにおける抗酸化作用を、ex vivo 実験で明らかにし海外誌に報
18 )。その経験から、ヒトに生薬を投与

告しました

研究方法
1） 試験管内実験

した後の血清や血中細胞を使って ex vivo 実験を

GGOH, クルクミンの HSP 70 誘導促進作用の観察することが、複合成分からなる天然物のヒトでの定法にて空腹時健常ヒトリンパ球を比重遠心法

研究に適していると考えました。

1）- 1

にて得ました（10 ５/cmm）。また、正常角質ヒト

対 象 ス パ イ ス と し て、 数 多 く の ス パ イ ス の細胞（HaCaT 細胞）も入手し 10 ５個 /cmm に調整中で、ウコン（ ハウス食品（株）製ターメリック

しました。既報にてウコン 3 g を経口投与（牛乳

Curcuma longa L. ）は、我々がヒトにおける動態200 ml にウコン粉末 3 g を混合して摂取）した時を既に明らかにし、3 g までの安全性を確認し報のクルクミンの血中濃度は、１時間後にピークに

17 )。また市場でも単品で広く摂取されなったことから、同じ方法にて経口投与し、そのていることから、今回もウコンを使うこととしま

１時間後に採血して、その時の血清を得て HSPs

した。森光らがスパイスの抗 AGEs 生成作用をスの誘導促進効果を調査しました。さらに標品のクリーニングしていますが、ウコンは阻害が強い

GGOH、クルクミンも上記ヒトリンパ球、正常角

告しました

19 )

。また、ウコンのクルクミンには、プ質細胞に添加して、温熱刺激（37 ℃と 41 ℃, 30 分）

ロテアソームを活性化させる作用が Ali らによっ

後、3 – 6 時間培養による HSP 70 産生量の変化を、て報告されています 20 )。

ウエスタンブロット法にて測定しました。

方でした

実際に、ウコンを摂取した際の、そのクルクミ

使用製剤： ウコン 3 g を内服し１時間後の血漿ンの血中濃度において、正常リンパ球と正常角化標品のクルクミン

皮膚細胞の双方を使って、クルクミンが HSP 70

標品の GGOHの温熱による誘導を調査した研究はこれまでには300 – 900

10 – 30nM

nM

対象細胞： 健常ヒトリンパ球（10 5 個 /cmm）
正常角質ヒト細胞（HaCaT 細胞）

ないため、今回の研究では検討しました。
また、HSP 70 の誘導促進作用がある GGOH を（10 ５個 /cmm）

高含量含む薬草として、小川＆四童子らは、聖書

温熱刺激： 37、41 ℃ 30 分間に出てくる有名な精油フランキンセンスを報告し評価方法： 各細胞における HSP 70 の発現（ウています 14)。そのため、GGOH の作用をみる温熱

エスタンブロット法）

ヒト試験として、GGOH 自体よりも、フランキン
センス精油の薬草ミストサウナを行いました。

1）- 2

調理による AGEs 生成の抑制の調査

体内 AGEs 生成の標準的方法を修飾し、実際の以上のように背景のもと、本研究では、Ex vivo

調 理 状 況 に 合 わ せ る た め、BSA（bovine serum

実験も含む試験管内の実験を行った後、単回 &albumin）を糖添加下 100 ℃で 30 分間加熱し、ス

反復ヒト試験も行うことで、薬草成分（クルクミ

パイスやスパイス中成分の抑制効果を調査しまし

ン、GGOH）、それらを含有する薬草（ウコン、フた。BSAの最終濃度 10mg/mL、グルコース 25mM、

ランキンセンス精油）、温熱（ミストサウナ、温浴）

フルクトース 25 mM に、50 mM リン酸バッファーとの相互作用を、未病のバイオマーカーと推定さ（ pH7.4）で調製し、混合液を得、沸騰湯煎中で 30 分

スパイスの摂取による温熱作用増感効果：未病のバイオマーカーとしての終末糖化産物（AGEs）のヒトにおける変化

81

Westernblotting
図2

リンパ球や角質細胞を用いた実験のプロトコール

間加熱。対照として 4 ℃ 30 分間放置した混合液をあセンスなどの精油サウナの安全性については、てました。30分加温後、3500 rpm10分の遠心で上清伝統的に長く利用されてきたことから、安全性を得て、蛍光法（蛍光強度 Ex.350nm、Em. 450 nmには問題ないと考えられました。また方法の科から AGEs 濃度を推定）で測定し、IC 50 を求めま

学性についても、医療法人ホスピィー統合医療した。

研究所倫理委員会にて承認を得、ヘルシンキ宣

加えて、蜂蜜・牛乳の加熱におけるスパイスの言を順守する形で実験を遂行しました。

AGEs 生成抑制効果も同様に調査しました。ただ2）- 1

し、この場合、AGEs は、CML として ELISA に

被験者：健常成人男性 13 名て測定しました。
（SRL ㈱に依頼）

単回ヒト試験
文書による同意を取得後、試験に参加させました。

2） ヒト試験

29 – 56 歳：37 ± 11 歳、BMI = 23 ± 2 kg/m

対象被験者：TRP – V1 受容体の遺伝子多型の有無作為に２つのグループ（G1, G2）に分け、無などで温熱への反応性が大きく左右されるこそれぞれの群でクロスオーバー試験にて薬草とが予測されます。100 名の志願者に足浴をさ

蒸気浴を行ないました。G 1 は GGOH 含有のせて温度への反応性が十分な均一集団を、本実

フランキンセンス精油を含むミストサウナ

験の被験者として選別しました。被験者には実を、G 2 は精油を含まないミストサウナとし、験の前に再度同意取得とスクリーニングを行

生理的、心理的、生化学的作用を比較しましい、１週間前からスパイス類を避け、7 日前かた。G 1 と G 2 の間隔は１週間以上としました。

らシャワーのみの生活を指示しました。選択基

測定は、舌下温、VAS（不快度）変化、LF/

準：20 – 50 歳台男女、健常成人（検診で肝、腎、HF（交感神経指標）変化率、H /（H+L）（副心、肺疾患がない）、除外基準：重篤な肝、心、交感神経指標）変化率、及び ELISA 法にて腎、肺疾患で加療している、投薬をうけている、

血漿 AGEs を測定しました

妊婦、妊娠を希望女性。割り付けはくじびき法
で、無作為に２～３群に割り付けました。
倫理的配慮：ウコン摂取の安全性や、フランキン

2

臥位式薬草サウナベッド（洞内サーモスタット付き）：首から下だけを加温する薬草サウナドー
ムを作成しました。

82

浦上財団研究報告書

Vol.19（2012）

設定温：43 ℃、20 分（頭顔部の加熱を避けるました。また、サウナの生理的・心理的・生化

構造：顔面を外部に出す）学的作用を比較しました。統計解析：two-way

GGOH を含有するフランキンセンス精油：プラナロ

ANOVA.

ム社製（標準品）は、3 リットルのお湯に 0.3 ml

さらに、RT – PCR 法にて、白血球中温熱ストレ（GGOH 約 600 μg）滴下しミストサウナとしまス関連酵素である HSPA1B（HSP 70 の mRNA）、した。なおフランキンセンス精油は、四童子＆UBE2K（ ユ ビ キ チ ン 縮 合 酵 素 の mRNA）及 び

小川らの既報において最も多く GGOH を含有

PSMC1（プロテアソーム 26S の mRNA）の発現量（2.3 mg/ml）する精油であったことから今回のを測定しました。表１にタイムテーブルを示します。

実験に用いました。

2）- 2

反復ヒト試験

評価項目：AGEs は、カルボニル蛋白を ELISA

被験者：健常成人 24 名（男 / 女＝ 16/8, 22 – 48 歳：

キット（製造元：Bio Cell., Ltd., New Zealand、

36±9、BMI = 25 ± 3 kg/m2 ）を、文書による

販売元：日本老化制御研究所）を用いて測定し同意を取得後、無作為に 3 つのグループ（G1,

心拍数記録計（GMS 製）

フランキンセンス 精油の添加法

サンプリングタイム 1ms

サウナ開始直後に、IH ヒーターの中の 3 リットルのお湯に30 滴（0.3 ml : GGOH 600μg）添加
今回は、マスクはしないで実験↓

MEMcalc による周波数解析↓

自律神経機能推定
図3

薬草温熱療法ベッドでの温熱療法

表1

単回ヒト試験のタイムテーブル

前 5 分間
目）

0分

サウナ
10 分目

サウナ
20 分目
終了直前

サウナ後
30 分目

サウナ後
100 分

血圧

●
座位

●
臥位

●
臥位

●
臥位

●
座位

●
座位

VAS

●

●

●

●

●

●

舌下温

●

●

●

●

●

●

時間経過
検査項目

心拍変動
血漿 AGEs

●

●

●

●

サウナ
RT‒PCR

スパイスの摂取による温熱作用増感効果：未病のバイオマーカーとしての終末糖化産物（AGEs）のヒトにおける変化

83

G2, G3）に分けました。表 2 にタイムテーブル

キ ッ ト（ 製 造 元：Bio Cell., Ltd., New Zealand、を示しました。

販売元：日本老化制御研究所）を用いて測定しま

G1）温熱のみ  8 名  （41℃ 10 分間入浴  7 日間）した。評価方法：血漿 AGEs 値への作用の比較。

38±8 歳、男 / 女＝ 5/3、

出現率：χ二乗検定、対照実験との差：t – 検定、BMI  25±3    kg/m2

2 way-ANOVA

G2）ウコンのみ  8 名  （ウコン 3g 内服 / 日、

なお、前記ヒト試験は、浦田クリニック統合医療

シャワーのみ  7 日間）32 ± 10 歳、研究所倫理委員会の審議の後、ヘルシンキ宣言

男 / 女＝ 7/1、BMI  2 5±2  kg/m2にのっとった形で行われました。

ウ コ ン： ハ ウ ス 食 品（ 株 ）製 ウ コ ン（Curcuma longa L）3 g（クルクミン
約 90 mg 含有）を牛乳 200 ml で 2分間で摂取。

結果と考察
1） 試験管内実験1）- 1

対照群：牛乳のみ 200 ml 摂取。

：ヒト正常リンパ球での HSP 70 の誘導作用（図 4）G3）ウコン＋温熱   8 名  （ ウコン 3g 内服 /HSP 70 誘導促進作用として、nM オーダーの日後 1hr 目に 41℃ 10 分間   7 日間）

GGOH による作用は、10 nM オーダーのクルクミ

36±9 歳、男 / 女＝ 4/4、ンによるものに近いことから、GGOH はクルクミ

BMI  25±3  kg/m2ンに比べ、約 10,000 倍の力価を持つことが示され評価方法：血漿AGEsは、カルボニル蛋白をELISA
表2ました。また、ウコン経口摂取 1.5 時間後のヒト

反復ヒト試験のタイムテーブル

初回

1 週間後

時間経過
検査項目

前

血圧・舌下温①②③④

血漿 AGEs

●

●

●

●

図4

1hr 後 3hr 後 ウコン前
1hr

2 週間目

ウコン後
1hr
温浴直前

41℃
10 分
浴直後

浴開始後
2hr

⑤

⑥

⑦
●

正常リンパ球での、クルクミン、GGOH による HSP70 誘導促進作用●

84

浦上財団研究報告書

Vol.19（2012）

血漿を添加しても、HSP 70 誘導促進作用が観察

気中に含まれる GGOH がごく微量でも皮膚角質細されました（ 図 4）。ヒト血漿には、平均 200 nM胞への作用が出現する可能性が高いと推定されま程度の総クルクミンが含有されることが、我々のした。また、フランキンセンスに含まれる GGOH

既報 17) で得ていることから、その成分が作用しが経皮吸収、あるいはウコンの中の GGOH が吸収たことが推定されます。ただ、今回、クルクミン

された場合、血中には低濃度しか出現しないことの実際の濃度を測定できなかったことから断定はが推定されますが、10 nM の低濃度で GGOH が作

できないものでした。

用することから、実際に生体においても効果を発1）- 2

揮する可能性は考えうるものと推定されました。

正常ヒト角質細胞（HaCaT 細胞）でのHSP70 誘導促進作用（図 5）1）- 3

クルクミン 100 nM、GGOH（10, 20, 30 nM）によ

調理時の AGEs 生成に対するスパイスによる抑制効果る温熱増強作用（HSP 70 誘導）を培養時間を追っ

BSA と糖による AGEs 生成は、体内環境を想てウエスタンブロット法にて調査しました。その定し、37 ℃、1 ～ 2 週間加熱することで得られま

結果、3 – 6 hr 培養において、クルクミンの作用よすが、本研究では調理環境を想定し、約 100 ℃、りも、5 – 10 倍濃度が薄い GGOH が、2 – 3 倍も顕

30 分間の加熱を行いました。

著に HSP 70 を誘導することが示されました。ここ

まず、蜂蜜を 100 ℃ 30 分間調理した時のAGEs

でも GGOH が六反らの報告しているように 21)、高増 加 に つ い て、AGEs の 中 の CML を ELISA に て

い HSP 70 誘導作用を持つことが示唆されました。

測定し、ウコンを添加してその阻害作用を検討しフランキンセンスなどの精油は、まず皮膚細胞にた結果、ウコンは、1 %（ W/V）にて、8 倍増加する

接触することになりますが、今回の結果では、蒸AGEs を 3 倍までに抑制しました。調理で使うウ

図5

HaCaT 細胞での、クルクミン、GGOH による 温 熱 増 強 作 用（ HSP70 誘導）

スパイスの摂取による温熱作用増感効果：未病のバイオマーカーとしての終末糖化産物（AGEs）のヒトにおける変化

コンは、1 ％程度と推定されますので、実際の調理することが示唆されます。

の場でも、ウコンが AGEs 生成を阻害している可2） ヒト試験

能性は高いと推定されました。

2）- 1

85

単回ヒト試験

さらに、BSA ブドウ糖の加熱による AGEs（蛍精油の有と無での臥位式薬草サウナでは、いず光法による測定）の増加に対して、ウコンの脂溶

れも舌下温の約 1 ℃上昇を認めました。フランキ

性、水溶性分画、テトラヒドロクルクミン、クル

ンセンス精油（GGOH 含有）添加サウナでは、終クミン、アミノグアニジンがどのように作用する

了後 100 分目で、生理的には副交感神経機能が優かを検討しました。細胞系ではなく調理時での位となり（図 7）、心理的には有意に快適性が高く、結果でありますが、BSA とブドウ糖加熱による

生化学的には血漿 AGEs が低下傾向にありました

AGEs 増加に対して、細胞レベルで AGEs 生成阻（図 8）。

害作用が知られているアミノグアニジンと同程度

フランキンセンスは、伝統的に聖書の時代からリの AGEs 生成阻害作用を、ウコンのクルクミンがラクゼーションに用いられてきた精油であること示しました（図 6）。表 3 には、各分画の IC 50 ％をを考えると、快適な体験を促すことは予想される示します。ウコンの脂溶性分画は主成分はクルク

結果であります。GGOH には、心理的作用は報告

ミンと推定されますので、アミノグアニジンとクされておらず、ラベンダーの酢酸リナリルなどのルクミンに、調理時のAGEs 生成抑制作用が存在

精油成分も、副交感神経を有意にする作用が人体：クルクミン

図6

BSA の加熱によって生成する AGEs（蛍光法）へのウコンの影響

表3

ウコン成分の AGEs（蛍光法）生成抑制作

ウコン

ウコン
水溶性分画

ウコン
脂溶性分画

AGEs 蛍光強度より〔| g/mL〕

646

1799

642

カルボニル化蛋白より〔| g/mL〕

605

2700

636

クルクミン

テトラヒドロクルクミン

アミノグアニジン

99（0.27 mM）

661
（1.78 mM）

167
（1.51 mM）

カルボニル化343
蛋白より〔| g/mL〕 （0.93 mM）

257（0.69 mM）

249
（2.26 mM）

AGEs 蛍光強度より〔| g/mL〕

値は IC 50

86

浦上財団研究報告書

Vol.19（2012）

Mea ±SMea ±S’
図7

単回温熱負荷試験における自律神経機能の変化
p = 0.09%

図8

Mea ±S
N=1

フランキンセンス精油（GGOH 含有）の有無での血漿中 AGEs のミストサウナによる変化

で報告されていることから 22)、フランキンセンス

テアソーム 26S）すべての酵素活性が、香りがなに含有される向精神作用成分インセンソールなど

い場合よりも大きく誘導されたという 図 10 の結がその作用を担っていることが推定されました。

果も含めて考察するに、AGEs 分解系が活性化さフランキンセンス精油を添加したサウナにおいれたために出現した現象と推定されました。

て、前後で血中 AGEs が低下傾向を示しました（図反復ヒト試験においても、初日の AGEs は、温8）。これは、フランキンセンス精油のありなしとで、熱療法で増加を認めている（図 10）ことからも、フRT-PCR による 3 種類の酵素のｍ RNA 発現を調

ランキンセンス精油添加群では、単回試験で AGEs

査したところ（図 8）、フランキンセンスを使用したが低下したことは、その作用を支持するものです。

場合、3 種類（HSP 70、ユビキチン縮合酵素、プロスパイスの摂取による温熱作用増感効果：未病のバイオマーカーとしての終末糖化産物（AGEs）のヒトにおける変化

2）- 2

87

間、さらに温熱と薬草療法を併用した群も、共に、反復ヒト試験

反復ヒト試験での温熱療法は、41 ℃ 10 分間温対照実験と比較して、血漿 AGEs の有意な低下あ浴のみとし、薬草療法は、ウコン 3 g / 日内服としるいは低下傾向が見られました。それらの結果かました。これは、家庭で実践できるようにとの配ら考察するに、薬草療法（ウコン経口摂取）も温慮から温熱療法のスタイルを決定したものです。

熱療法単独も、併用も共に AGEs を低下させてお対照実験は、温熱療法を行う 7 日前後での AGEs

り、薬草療法の併用した場合の複合作用を支持すの変化としました。その間は、シャワーだけとしる結果は得られないことになりました。

ました。温熱療法を 7 日間継続した群も、薬草療

これは、通常のアーユルヴェーダの浄化療法で法（ウコン 3 g 摂取とシャワー 7 日間）のみの 7 日

は、単回試験のように薬草のサウナを行うところ

リアルタイム PCR による mRNA 発現の変化比■ 香りなし1.2■ 香りあり

1.0

0.8

0.6

0.4

0.2

0.0

HSPA1

UBE2

PSMC

HSPAA1B : HSP70のmRNA 発現
UBE2K : ユビキチン縮合酵素の mRNA 発現
PSMC1 : プロテアソーム 26SのmRNA 発現

図9ミストサウナでのフランキンセンス精油（GGOH 含有 ) の有無の白血球中温熱ストレス
関連酵素 mRNA 発現の、サウナ前後での変化比（N=3 の平均値）

血漿AGEs の変化比

前値
図 10

温浴時

処置継続
1週間後

ウコン内服後 41℃ 10 分温浴継続による AGEs の変化

88

浦上財団研究報告書

が、今回は、既報 17) にクルクミンの薬物動態を得

Vol.19（2012）謝辞ていたことから、経口投与による薬草療法を行っ

本研究は、平成 21 年度浦上財団の補助金によったわけですが、伝統的な手法を行わなかったことたことを感謝します。また、浦田クリニック統合も一因と推定されました。今後のさらなる検討が医療研究所の八塚幸枝氏、株式会社リンポテック

必要と考えられました。

社の小森啓一郎氏、大隅一興氏の協力を得ました。

結論
スパイスとりわけウコンは、様々なレベルで未病のバイオマーカーである AGEs の生成を抑制することが示され、GGOH など薬草成分が、細胞の自己浄化システムに作用することが示唆されました。
まずウコンは、調理時に AGEs 生成を抑制する作用が示されました。これは含有されるクルクミンが担う作用と推定されます。また、正常リンパ球、正常皮膚角質細胞を使った実験において、ク
ルクミンと GGOH は、細胞内浄化系を活性化する
HSP 70 の温熱による誘導を促進する作用が示されました。HSP 70 や他の HSPs（とりわけユビキチン）は、細胞内自己浄化系を活性化することが知られていますので、試験管内において、クルク
ミンや、フランキンセンスなど精油に高濃度に含有される GGOH が、未病の生化学的マーカーである AGEs の浄化を促す結果が示唆されました。
それら試験管内のデータを支持するヒト試験結果として、単回ヒト試験において、GGOH を高濃度に含有するフランキンセンスの蒸気サウナにより、HSP 70、ユビキチン縮合酵素、プロテアソー
ム 26S の酵素タンパクのｍ RNA の発現が促されました。そして、反復ヒト試験によって、薬草摂取と温熱療法において、血中 AGEs が 1 週間の反復試験によって低下することが示唆されました。
ただ、反復ヒト試験においては、薬草療法（スパイス）が温熱療法の効果を増強させる複合作用を支持する結果は得られませんでした。今後のさらなる研究が必要と思われます。

ここに深謝します。
文献1) 小曽戸丈夫，浜田義利 (1971) 意釈黄帝内経素問, 築地書館.
2) 福生吉裕：現代における未病医学とは. in 日本未病システム学会編集：次世代の医学・医療がわかる未病医学入門, pp 2-7, 金芳堂, 京都, 2006.
3) 日本アーユルヴェーダ学会訳：チャラカサンヒター総論篇. せせらぎ出版, 大阪, 2011.
4) Bhishagratna, K.L. 英訳, 伊東弥恵治原訳：スシュルタ
大医典総論編. 人間と歴史社, 東京, 2005.
5) 小川弘子, 八塚幸枝, 許鳳浩, 上馬塲和夫, 浦田哲郎, 御影雅幸：アーユルヴェーダの概念と現代医学の対応– アーマとAGEs の類似性およびウコンによるAGEs
生成抑制 –. 第 30 回日本アーユルヴェーダ学会大阪研
究総会抄録集 pp 25, 2008.
6) Thornalley, P.：Dietary AGEs and ALEs and risk to humanby their interaction with the receptor for advanced glycation
endproducts (RAGE) -an introduction. Mol. Nutr. Food Res.
51:1107-1110, 2007.
7) 稲城玲子, 宮田敏男, 黒川清：カルボニルストレスの病態生理学.  Molecular Medicine 40 : 178-184, 2003.
8) 為本浩至, 川上正舒：AGEs と血管障害. 総合臨床. 50：
2625-2626, 2001.
9) 光山勝慶：RA 系による血管内皮細胞障害の新しい分子機序.  医学のあゆみ. 228 : 434 - 438, 2008.
10) 高橋素子, 谷口直之：老化とグライケーション. THE
LUNGS perspectives 15 : 203 - 207, 2006.
11) Takeuchi, M., Yamagishi, S. : TAGE (toxic AGEs) hypothesis
in various chronic diseases. Med. Hypotheses. 63 : 449 52,2004.
12) 上馬塲和夫、許鳳浩、小川弘子、八塚幸枝：未病と治未病.  和漢医薬総合研究所年報 37 巻、7 - 47, 2010.
13) 上馬塲和夫 ：アーユルヴェーダとヨーガ改訂第 2 版,
金芳堂, 京都, 2010.
14) 小川弘子、四童子廣好：精油中に含まれる発癌抑制性ゲラニルゲラノイン酸及びその関連化合物. Jpn J
Aromatherapy 7(1) :1-7, 2006.

スパイスの摂取による温熱作用増感効果：未病のバイオマーカーとしての終末糖化産物（AGEs）のヒトにおける変化
15) Rattan, S.I.S.：Hormetic Modultion of Aging and Longevity
by Mild Heat Stress. Dose-Response 3 : 553 - 546, 2005.
16) Thomas, M., Forbes, J.M., MacIsaac,R., Jerums, G., Cooper,
M.E.：Low-Molecular Weight Advanced Glycation End
Products: Markers of Tissue AGE Accumulation and More?,Ann. N.Y. Acad. Sci. 1043 : 644 - 654, 2005.
17) Hui S., Hayashi T., Sakurai T., Jin S., Ishii S., Murai T.,
Uebaba K., Ogawa H., Chiba H., Kurosawa T.: Quantitative
analysis of curcuminoids in human plasma by means of
HPLC with UV detection. Rinsho Kagaku, 38(1):59 67, 200918) Ogawa H, Xu FH, Uebaba K, Origasa H, Kondoh K,
Mikage M: Antioxidant potentiality of a Kampo formulation
measured by an ex vivo study. J Alter Comple Med, 15 (3),89267-274, 2009.
19) Morimitsu Y, Yoshida K, Esaki S, Hirota A: Protein
glycation inhibitors from thyme (Thymus vulgaris). Biosci
Biotechnol Biochem 59 (11) : 2018-21, 1995.
20) Ali RE, Rattan SIS: Curcumin's biphasic hormetic response
on proteasome activity and heat-shock protein synthesis in
human keratinocytes. Ann. N.Y. Acad. Sci. 1067-394-399,
2006.
21) 六反一仁：分子シャぺロン誘導剤を用いた消化器疾患の治療戦略. 日薬理誌 121 : 15 - 20, 2003.
22) 上馬塲和夫、許鳳浩、小川弘子ら：ラベンダーによるアロマトリートメントにおける変性意識体験の促進効
果.  Jpn J Aromatherapy 8 (1) : 29 - 38, 2008.

90

浦上財団研究報告書

Vol.19（2012）

Promotion of thermo-bioactivity by spices in humans:
Changes of AGEs, biomarkers of presymptomatic stage
Kazuo Uebaba
Institute of Natural Medicine, University of Toyama(present: Institute of Eastern Medicine, Teikyo Heisei University)
Mibyou (未病 : presymptomatic stage) was described for the first time in the classicalChinese Medical textbook. Mibyou system medical association in Japan proposed 2 typesof Mibyou, M1 and M2. They say that by developing biomarkers of Mibyou, M2 would be
included into M1. Considering traditional eastern medicines which said some toxins cause
diseases, we have proposed three types of Mibyou markers, 1.physical, 2.chemical, andpsychological markers, and found that AGEs (Advanced glycation endproducts) should be
the most reasonable biomarker of Mibyou.
Many spices have been used in the traditional medicines for health maintenance. We
have examined AGEs decreasing effects of turmeric by three stages of experiment, in vitro,in vivo human single study and multiple dose study.
In vitro study, AGEs decreasing effect of turmeric during cooking of turmeric. And
we have examined effects of turmeric on HSPs dynamics self-detox mechanism in vitro
and ex vivo study in humans. In vitro study, normal human lymphocytes and normal
human keratinocytes showed increased HSP 70 manifestation by incubation with turmeric,and GGOH (geranylgeraniol) which was contained in turmeric and essential oil from
frankinscence.
In vivo study, 13 subjects took 20 minutes herbal sauna with the essential oil fromthe frankinscence in a single study. Blood AGEs concentration of the subjects decreased,
and mRNAs (RT-PCR) of the enzymes related to self-detox such as HSP 70, Ubiquitine
conjugating enzyme and 26S subunit of proteasome manifested more than in no herb. AGEs
may be detoxified by the herbal treatments. In the multiple dose study with 24 subjects in
3 groups who had herbs and heat (oral intake of turmeric 3 g/day with every day hot baths:
41℃ 10 min) alone or in combination. Plasma AGEs decreased significantly in all themodes of combination of turmeric and heat, oral turmeric 3 g alone every day, heat alone
and combination of them. All three groups showed decrease of plasma AGEs significantly
comparing with pre-stages, which have not support the combination effects of turmeric andhot-bath groups have not yet been obtained.
As conclusion, turmeric and GGOH showed HSPs stimulating effects in vitro study,
and in vivo human studies, which supported AGEs alleviating effects, although combination
effects of turmeric and heat stress have not yet been obtained. Further studies were needed.