博

士

学
内

位

容

の

要

お

よ

び

論

文

旨

審 査 の 結 果 の 要 旨

平 成 21 年 度

平 成 22 年 12 月 30 日

関

西

医

科

大

学

は し

が

き

本集は学位規則（昭和 28 年 4 月 1 日文部省令第 9 号）第 7 条による公表を目的として平成 22 年 3 月 31 日までに本学で学位を授与した者の論文内容の要旨および審査の結果の要旨を収録したものである。

目

＊＊

掲載順

学位記番号

1517

甲

第 853 号

西

氏

名

田

晃

医

甲

第 854 号

楊培

甲第 855 号

梅

村

茂

甲

第 856 号

中

村

正

甲

第 857 号鳥居

甲第 858 号梅田雄

The effect of pharmaceutical adjunctive therapy
with percutaneous coronary intervention in patientswith acute myocardial infarction ..................................... 203

孝

Phosphorylated Smad2/3 immunoreactivity in sporadic
and familial amyotrophic lateral sclerosis and its
mouse model .................................................................... 204

甲第 859 号

溝

上

友

甲

第 860 号青田

泰Imidazoquinoline Acts as Immune Adjuvant for志

Activation of Rat Nucleus Pulposus Cells by Coculture
with Whole Bone Marrow Cells Collected by
the Perfusion Method....................................................... 207

美Preferential expansion of human umbilical cord
blood-derived CD34-positive cells on major
histocompatibility complex-matched amnion-derived
mesenchymal stem cells................................................... 208

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19336739

1524

子

Efficacy of an L- and N-type calcium channel blocker

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19521420

in hypertensive patients with neurovascular compressionof the rostral ventrolateral medulla .................................. 209

1525

Relationship between pigment epithelium-derived

甲第 861 号

松

山

加 耶 子

factor (PEDF) and renal function in patientswith diabetic retinopathy.................................................. 210

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18523656

1526

甲

第 862 号

六

浦

裕

美

甲

第 863 号大西静

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19686706

Depression and Anxiety Correlate Differently with
Salivary Free Cortisol in the Morning in Patientswith Functional Somatic Syndrome................................. 212

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19662526

1527

頁

Functional Alteration of Thymic Stromal
Lymphopoietin-Mediated Allergic T cell Response ........ 205

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18752275

1523

目

metaiodobenzylguanidine uptake, and exercise tolerancein patients with left ventricular dysfunction .................... 202

芳 太 郎

眞

題

Resting muscle sympathetic nerve activity, cardiac

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18832690

1522

文

慧

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/ 18210139

1521

＊＊

Allogeneic intra-BM-BMT plus adult thymustransplantation from same donor has benefits forlong-term survival even after sublethal irradiation or
low-dose BM cell injection.............................................. 201

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16479244
PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18836373

1520

士

久

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19159993

1519

博

論

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19079314

1518

学

次

生

Intra-bone marrow-bone marrow transplantation slows
disease progression and prolongs survival in G93A
mutant SOD1 transgenic mice, an animal model mousefor amyotrophic lateral sclerosis ...................................... 213

1528

人

Synergistic effect of interleukin-6 and endoplasmic
reticulum stress inducers on the high level of ABCG2
expression in plasma cells................................................ 214

進Prevention of contrast-induced nephropathy by chronic
pravastatin treatment in patients with cardiovasculardisease and renal insufficiency......................................... 215

文

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19664292

Involvement of TORC2, a CREB co-activator,
in the in vivo-specific transcriptional controlof HTLV-1 ........................................................................ 216

1531

Drosophila big brain does not act as a water channel,

甲第 864 号中道

尚

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19139722

1529

甲

第 865 号吉田

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19782255

1530

甲

甲

第 866 号

第 867 号

蒋

辰

时

巳

貴 美 子

but mediates cell adhesion ............................................... 217

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19467350

1532

甲

第 868 号

德

田

貴

則

Mechanical Characteristics of Composite
Knitted Stents................................................................... 218

輝

CpG Oligonucleotides Activate the Immune
Response in Burned Mice ................................................ 219

紀Analysis of regulatory T cells and IgG4-positive
plasma cells among patients of IgG4-related sclerosing
cholangitis and autoimmune liver diseases...................... 220

行

Flow cytometric analysis for the mechanism of the new

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19506947

1533

甲

第 869 号

矢吹

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19540526

1534

甲

第 870 号小薮雅

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20087609

1535

甲

第 871 号

大重

英antineoplastic agent temozolomide in glioma cells ......... 221

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20425042

1536

甲

第 872 号

矢

内

勢

司

cells and Meth A tumor cells using hemagglutinating
virus of Japan-envelope ................................................... 223

PubMed: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19578737

1537

甲

第 873 号

明Intra-Bone Marrow Injection of Donor Bone Marrow
Cells Suspended in Collagen Gel Retains Injected
Cells in Bone Marrow, Resulting in Rapid Hemopoietic
Recovery in Mice ............................................................. 224

雄 一 郎

Caspase Inhibitor, ZVAD-fmk, Facilitates Engraftmentof Donor Hematopoietic Stem Cells in Intra-Bone
Marrow-Bone Marrow Transplantation ........................... 225

石

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18599811

1538

甲

第 874 号

今井

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19686047

1539

乙

第 667 号

松

矢

浩

暉

乙

第 668 号

鉢

嶺

大

作

乙

第 669 号大橋

敦

Cerebral blood flow monitoring using a novel laser
doppler flowmeter in asphyxiated infants ........................ 228

士

Presence of donor-derived thymic epithelial cells in

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19419504

1542

乙

第 670 号髙木孝

[B6 → MRL/lpr] mice after allogeneic intra-bonemarrow-bone marrow transplantation (IBM-BMT)......... 229

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19022623

1543

乙

第 671 号

北村

直

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19674362

Involvement of Smad3 phosphoisoform-mediatedsignaling in the development of colonic cancer
in IL-10-deficient mice .................................................... 227

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18497983

1541

Regenerative effects of transplanting autologous
mesenchymal stem cells on corticosteroid-induced
osteonecrosis in rabbits .................................................... 226

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18288561

1540

Anti-tumor effects of fusion cells of type 1 dendritic

行

Effects of baby doctor-team interview on mood statusof pregnant women with high risk delivery ..................... 230

1544

乙

第 672 号

榎

木

千

春

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19411121

1545

乙

第 673 号

吉

村

健

乙

第 674 号

三宅眞

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20446931

Increased nitric oxide production by neutrophils in earlystage of Kawasaki disease................................................ 233

PubMed:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19020897

1546

Enhanced Mesenchymal Cell Engraftment by IGF-1
Improves Left Ventricular Function in Rats Undergoing
Myocardial Infarction ...................................................... 232

理

Comparative Research between Australia and Japan A
Comparison of the Quality of Healthcare in Nursing
Facilities Using Actigraphy.............................................. 234

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

chimerism は 100% であったが，5 週以内に全て GVHD
【1517】
氏で死亡した．

名（本

籍）

西

田

晃

脾臓中の CD4+ T 細胞数は，IBM-BMT+ATT 群が最久（兵庫県）

学 位 の 種 類

博士（医学）

も多く，次に IBM-BMT 単独群で，IBM-BMT+DLI 群

学

甲第 853 号が最も少なかった．興味深いことに，CD4+ T 細胞中に学位授与の日付

平成 21 年 5 月 26 日

おける Foxp3+ CD4+ 制御性 T 細胞数は，IBM-BMT+ATT

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当

群と IBM-BMT 単独群ではほぼ同じであり，IBM-BMT

位

番

号

+DLI 群は優位に低かった．また，両実験とも，IBM-

学位論文題目
Allogeneic intra-BM-BMT plus adult thymus

BMT+ATT 群， 及 び IBM-BMT 単 独 群 の マ ウ ス の 脾transplantation from same donor has benefits for

リンパ球は十分な mitogen に対しての反応性を示した

long-term survival even after sublethal irradiation

が，ホストの主要組織適合抗原（major histocompati-

or low-dose BM cell injection

bility complex: MHC）に対しては低反応であった．

論文審査委員

主査（教授）薗田精昭【考察】（教授）木梨達雄 （教授）福原資郎

1．ドナーからの胸腺移植を併用した IBM-BMT 法は，
低放射線照射，低骨髄細胞数においても，従来の方法に比べ，安全かつ有効な骨髄移植法の一つと論文内容の要旨

なる可能性を示した．

【研究目的】

2．その機構の一つに，移植胸腺からの制御性 T 細胞

骨 髄 移 植（bone marrow transplantation: BMT） は 白が関与している可能性が考えられた．

血病，先天性免疫不全症，あるいは自己免疫疾患に有効性を示してきた．しかし BMT を安全に，かつ有効

なお，本要旨に該当する内容は，Bone Marrow Transplant. 43: 829–837, 2009 に掲載されている．

に行うには，できるだけ放射線量を減らし，少ない細胞数で生着させる必要がある．今回，我々は同種骨髄審査の結果の要旨

内骨髄移植（intra-bone marrow-BMT: IBM-BMT）法に

同種造血幹細胞移植は，造血器腫瘍や再生不良性貧胸腺移植を併用した BMT を行い，低放射線照射また血の根治療法として広く臨床応用されている．しかしは低骨髄細胞数での効果を調べた．

ながら，移植細胞数の少ない場合や低放射線照射を前【研究方法】

処置に用いた場合には生着不全が問題となる．本研究実験 1：低放射線照射（Sublethal irradiation: SubLI）

は，マウスの同種移植系において骨髄内骨髄移植に胸5.5 Gy 放射線照射した 6–8 週齢 BALB/c マウス（H-腺移植を併用することにより，低放射線照射あるいは2d）に，同週齢 C57BL/6（B6）マウス（H-2b）の骨髄細胞

低骨髄細胞数の移植においても高い生存率とドナーキ

7

1×10 個を IBM-BMT 法で移植し，同時に B6 マウス胸メリズムが得られることを明らかにしている．臨床応

腺を腎被膜下に移植（adult thymus transplantation: ATT）

用に際して移植胸腺ドナーをどのように確保するかな

する群，又は脾細胞 1×107 個を注入（donor lymphocyte

どの課題はあるが，将来的に新たな同種移植法の開発

infusion: DLI）する群も作製した．

に繋がる基礎研究であり，学位に値すると考えられた．

実験 2：低骨髄細胞数（Low dose of bone marrow cell
injection: LDBMCI）
7 Gy 放射線照射した BALB/c マウスに，B6 マウスの少 量 の 骨 髄 細 胞 3×106 個 を 同 法 で 移 植 し， 同 時 に
ATT 群，DLI 群も作製した．
【結果】
実 験 1 で は，12 週 で IBM-BMT+ATT 群，IBM-BMT
単独群ともに生存率は 90% 以上であったが，donor
chimerism は IBM-BMT+ATT 群で 73%，IBM-BMT 単独
群で 45% であった．実験 2 では，IBM-BMT+ATT 群は生存率 90% で，donor chimerism は 80% であった．IBMBMT 単独群では生存率は 55% で，donor chimerism は44% であった．IBM-BMT+DLI 群は両実験とも，donor— 201 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

early H/M（心臓／上縦隔比）と delayed H/M，washout【1518】
氏

ratio（WR：洗い出し率）を計測した．さらに，筋交

名（本

籍）

楊

培

学 位 の 種 類

博士（医学）

学

甲慧（兵庫県）

位番

号

感神経活動（MSNA）は微小神経電図法を用いて，1分間の MSNA バースト出現数と 100 心拍の MSNA バー

第 854 号

スト出現数を計測した．

学位授与の日付

平成 21 年 5 月 26 日

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当【結果】
対象を，peak VO2 が 20 ml/min/kg 以上の運動耐容能

学位論文題目

良好群（group I, n=15）と 20 ml/min/kg 未満の運動耐容

Resting muscle sympathetic nerve activity, cardiac

能低下群（group II, n=15）に分類し比較検討した．左metaiodobenzylguanidine uptake, and exercise

室駆出率は両群間で有意差を認めなかった．しかし，tolerance in patients with left ventricular dysfunctiongroup II において，血中ノルエピネフリンと MSNA は論文審査委員

主査（教授）松田博子（教授）中邨智之 （教授）澤田

有意な高値（p<0.05）を，WR は有意な亢進（p<0.05）

敏を，early H/M，delayed H/M は 有 意 な 低 値（p<0.05）を認め，運動耐容能の低下している例ほど交感神経活動の亢進が認められた．group II において，peak VO2

論文内容の要旨

は MSNA と WR と有意な負の相関関係（r=0.58, r=0.56【研究目的】

いずれも p<0.05）を，early H/M, delayedd H/M と有意な心不全の特徴的な生理的所見の一つとして，交感神

正の相関関係（r=0.71, r=0.75 いずれも p<0.01）を認め

経活動の亢進と運動耐容能の低下が一般的に報告された．さらに，group II では MSNA は early H/M と delayedている．しかし，この両所見が心ポンプ機能の良否でH/M と有意な負の相関関係（r=0.78, r=0.66 いずれもいかなる関係を有しているかは明らかではない．すな

p<0.05）を，WR と有意な正の関係（r=0.79, p<0.001）

わち，運動時には，心臓では心拍出量の増加を認め，を認めた．しかし，group I では各々に有意な関係は末梢では運動代謝産物により運動筋血管拡張が生じて認められなかった．以上より，運動耐容能良好群に比おり，この両者のバランスにより運動時の血圧は維持

し運動耐容能低下群では，心臓と末梢の交感神経活動されていると報告されている．心不全では安静時よりが綿密に連携することにより運動耐容能に関与してい交感神経活動の亢進が認められ，この交感神経の亢進ると考えられた．

は，心臓においては運動時の心拍出量を増加し運動筋【結語】

への血流を維持する上で重要である．しかし，末梢に左室機能が保たれている例では交感神経活動が動員

おいては運動筋血管拡張に拮抗して運動筋血管抵抗のされることなく運動耐容能が維持されている．これにさらなる上昇を生じるため運動筋血流の低下を生じて対して，運動耐容能の低下した左室機能不全例では，いると考えられる．そのため心臓と末梢の交感神経活

心臓と末梢の交感神経活動の連携が運動耐容能の規定

動は運動耐容能と関係していると推察される．本研究

因子として重要な役割を果たしていると考えられた．

は，左室機能不全例において末梢交感神経活動と心臓

なお，本要旨に該当する内容は J Nucl Cardiol. 16:

交感神経活動の両者を同時に測定することにより，交244–250, 2009 に掲載されている．

感神経活動の亢進が運動耐容能に貢献しているか否か
審査の結果の要旨を検討した．
【対象・方法】

30 例の左室機能不全例で，運動耐容能，心臓交感

新たな虚血病巣を有さない左室機能不全例 30 例（男神経活動，筋交感神経活動を測定した．運動耐容能低性 25 名，女性 5 名，平均年齢は 57±11 歳）を対象に，下群では，低下の程度に応じて，心臓と末梢の交感神

心電図，呼気分析，動脈圧モニター下に，ランプ負荷

経活動がともに増加していた．心臓交感神経活動が先

法にて座位エルゴメーターを用いた症候限界性心肺運行して亢進し，引き続いて全身の交感神経活動が亢進

動負荷試験を施行し，運動耐容能の指標として peak

する結果，骨格筋の血管が収縮し低灌流になるため，

VO2（最大酸素消費量）を求めた．同時に，心臓超音

あるいは骨格筋交感神経亢進により乳酸の産生が増加

波法にて左室駆出率を，採血にて血中ノルエピネフするため，運動耐容能が低下する可能性が考察されリン濃度を測定した．2〜3 日後に，123I-MIBG 心筋

た．心臓と末梢の両方の交感神経活動を測定して得ら

シンチグラフィーを用いて早期像（early）と後期像れた成果は学位に値すると考える．

（delayed）を撮像し，心臓交感神経活性の指標として— 202 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨化を検討した．
【1519】
氏

第二編では，急性心筋梗塞で PCI を行った連続 199

名（本

籍）

梅

村

茂

雄（大阪府）

例を対象とし，ニコランジル投与群とコントロール群

学 位 の 種 類

博士（医学）の 2 群に分けた．ニコランジルの投与法としては急性学

甲第 855 号

心筋梗塞の診断後，静脈内投与を行った．第一編と同学位授与の日付位番号

平成 21 年 9 月 29 日

様に両群とも PCI の施行前および終了時と 1 ヵ月後に学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当SPECT を用いた defect score と心エコー図検査による

学位論文題目asynergic score を求め，PCI 施行前・後そして 1 ヵ月後

The effect of pharmaceutical adjunctive therapy withのそれぞれのスコア変化を検討した．

percutaneous coronary intervention in patients with

【結果】
第一編：angiographic no-reflow は 32 例で認めた．ベ

acute myocardial infarction
論文審査委員ラパミル投与群（Group 1; n=18）と非投与群（Group 2;

主査（教授）中邨智之（教授）松田博子 （教授）湊n=14）の 2 群間で，PCI 施行前の defect score に有意差直樹を認めないものの，1 ヵ月後では Group 1 で Group 2に対し有意に小さく（p=0.003），asynergic score も同
様 に Group 1 が Group 2 に 対 し 有 意 に 減 少 を 示 し た

論文内容の要旨【はじめに】（p=0.03）．また，Group 1 の defect score と asynergic score

急性心筋梗塞症例に対する経皮的冠動脈インターは angiographic no-reflow が認められなかった群（Groupベ ン シ ョ ン（percutaneous coronary intervension: PCI）

3; n=69）と同様の改善を示した．さらに，多変量解によって責任血管の開存（再疎通）を得ても，心筋救析を行った結果，ベラパミル投与は PCI 後の心筋救

済効果および慢性期の左室機能改善が乏しい症例があ済効果を規定する独立規定因子であった（p=0.002,

る．これら症例では，心筋微小循環障害である no-

OR=22.4）．

reflow が大きく関与している．no-reflow の診断法とし

第二編：ニコランジル投与群（n=101）とコントては血管造影，心筋コントラストエコー，核医学的心ロール群（n=98）の 2 群間で，PCI 施行前の asynergic

筋灌流評価（SPECT）などの評価法によって検討がな

score に有意差は認めないものの，defect score はニコされている．それに対し種々の薬剤追加治療が試みら

ランジル群でコントロール群に対し有意に小さかった

れているものの，未だ一定の見解は得られていない．

（p<0.0001）．さらに，多変量解析を行った結果，ニコ【研究目的】

ランジル投与は PCI 前の心筋リスクエリア内におけ

本研究は急性心筋梗塞に対する PCI への薬剤追加治るバイアビリティを保持する独立規定因子であった

療として，ベラパミル（第一編）およびニコランジル（p<0.0001）．ま た defect score, asynergic score と も に（第二編）の投与が心筋血流，バイアビリティ，そし

1 ヵ月後ではニコランジル群でコントロール群に対して心機能に与える影響を検討した．

有意に減少を示した（p=0.0006, p=0.0015）．

【研究方法】【考察】

第一編では，急性心筋梗塞で PCI を行った連続 101

第一編：急性心筋梗塞における PCI 時に angiographic

例のなかで，PCI 後に血管造影遅延（angiographic no-no-reflow を伴う症例へのベラパミル冠動脈内投与は，reflow）を認めた症例を対象とし，ベラパミル投与群

心筋血流および機能的改善をもたらすと考えられた．

と非投与群の 2 群に分けた．ベラパミルの投与法とし

第二編：急性心筋梗塞における PCI 前のニコランジては angiographic no-reflow を認めた時点で冠動脈内投

ル経静脈投与は，心筋リスクエリア内におけるバイア与を行った．両群とも PCI の施行前後と 1 ヵ月後に心ビリティを保持すると考えられた．

筋血流製剤（Tc-99m Tetrofosmin）を用いた SPECT を【総括】行った．SPECT 解析は心筋を 13 分節に分け，無集積

急性心筋梗塞における PCI はその予後を飛躍的に改（3）から正常（0）の 4 段階にスコア化し，総和を defect

善した．しかし，PCI を行ったものの心筋救済効果がscore として算出した．また，PCI 施行前と 1 ヵ月後に乏しい症例も存在し，その予後は依然として不良であ心エコー図検査を行い，同じく 13 分節に分け壁運動

る．本研究における薬剤追加治療は，急性心筋梗塞の異常を無運動（3）から正常（0）の 4 段階にスコア化

さらなる予後改善に寄与すると考えられ，臨床上積極し， 壁 運 動 異 常 分 画 数（asynergic score） を 求 め た．

的に適用すべきである．

PCI 施行前・後そして 1 ヵ月後のそれぞれのスコア変— 203 —

なお，本要旨に該当する内容は，Nucl Med Commun.

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

27: 247–254, 2006，同誌 29: 956–962, 2008 に掲載され写も亢進している．AD の神経原線維変化（NFT）がている．

免疫組織化学的に抗 pSmad2/3 抗体に陽性で，NFT を有する神経細胞では pSmad2/3 の核の染色性が低下し審査の結果の要旨ていたという報告もあり，これらの細胞では pSmad2/3

急性心筋梗塞に対する経皮的冠動脈インターベンの核内移行が阻害された結果 TGF-β のもつ神経保護ション（PCI）によって責任血管を再開通しても，約効果が発揮されず，神経変性をきたすことが示唆され3 割の症例では no-reflow とよばれる心筋微小循環障害

る．

のために心機能の改善が悪い．本臨床研究で梅村氏は筋萎縮性側索硬化症（amyotrophic lateral sclerosis：

PCI 直後にベラパミル冠動脈内投与（投与群 18 例，

以下 ALS）患者の血清・髄液でも TGF-β 濃度，mRNA

非投与群 14 例）または PCI 前にニコランジル静脈内量が増加しているとの報告があることから，AD の場

投与（投与群 101 例，非投与群 98 例）を行い，これ合と似たような機序で病態形成がおこなわれている可らの薬物療法が PCI 後の心筋血流・心機能改善をもた能性が考えられる．ALS のうち，家族性筋萎縮性側らすことを明らかにした．本研究は臨床上すぐに活用

索硬化症（FALS）とその病態モデル動物である G93A

できる成果をあげたものであり，学位に値する．

変異 SOD1 transgenic（G93A Tg）マウス，および別型と考えられる孤発性筋萎縮性側索硬化症（SALS）を対象に，pSmad2/3 を指標にした免疫組織化学的解析をおこなうことを目的とする．

【1520】
氏

【方法】

名（本

籍）

中

村

正

孝（山梨県）

対象として，SALS 患者 8 例，FALS 患者 3 例（A4V

学 位 の 種 類

博士（医学）

SOD1 mutation）と正常対照者 8 例の剖検腰髄，およ

学

甲

位

番

号

第 856 号

び，雌の G93A Tg マウス 12 匹と週齢をあわせた雌の学位授与の日付

平成 21 年 9 月 29 日

正常対照マウス 12 匹の腰髄をもちいた．ホルマリン

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当

固定パラフィン包埋組織から得られた切片に

学位論文題目

pSmad2/3 に対する抗体を適用し酵素抗体法で免疫組

Phosphorylated Smad2/3 immunoreactivity in sporadic

織化学を施行した．なお，SALS に蓄積するユビキ

and familial amyotrophic lateral sclerosis and its

チン封入体の主要構成成分として，核タンパク質の一mouse model種である TAR DNA binding protein-43（TDP-43）が同論文審査委員

主査（教授）山田久夫

定されていることから，pSmad2/3 と ubiquitin，およ（教授）杉本哲夫 （教授）河本圭司

び pSmad2/3 と TDP-43 に対する蛍光二重免疫組織化学法でも検索した．
【結果】

論文内容の要旨

SALS 患者腰髄前角では，運動ニューロン細胞体の【目的】

細胞質内に出現する円形硝子封入体（RHIs）とスケ

Transforming growth factor（TGF）-β は セ リ ン― ス レ

イン様封入体（SLIs）は pSmad2/3 抗体に対し，中等

オニンキナーゼ型受容体に結合し，このシグナルに度ないし強度の陽性を示していた．これらの封入体をよってリン酸化された Smad2/3（pSmad2/3）が，核内もつニューロンの核は中等度の陽性であったが，封入に移行し転写調節因子として働くことが知られてい体 を 持 た な い ニ ュ ー ロ ン の 核 は 強 陽 性 で あ っ た．

る．正常成人の中枢神経系では TGF-β 濃度は低いが，SALS 疾患特異的な Bunina 小体は陰性であり，この小虚血や外傷などの神経損傷において急速に発現量が増体をもつニューロンの核は強陽性であった．さらに，

加するという事実，マウスの中大脳動脈閉塞による梗

RHIs における蛍光二重染色の所見では，pSmad2/3 と塞範囲が TGF-β の脳室内前投与により縮小すること

ubiquitin，TDP-43 と の 共 存 が 観 察 さ れ た． 一 方，や，ラットの海馬神経細胞でアミロイド β の神経毒作

FALS 患者と G93A Tg マウスに見られるレビー小体様用が TGF-β の前投与により有意に減少するという実硝子封入体（LBHI）は pSmad2/3 抗体に対し陰性を呈験結果から，TGF-β には神経保護効果があると，一般していたが，運動ニューロンの核は pSmad2/3 抗体にに信じられている．

対し強度の染色性を示していた．

一方，Alzheimer 病（AD）の患者でも血清・髄液の【考察】

TGF-β 濃度が上昇しており，脳内で TGF-β 遺伝子の転— 204 —SALS 患者，FALS 患者，Tg マウスすべてにおいて，

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

pSmad2/3 を含有する封入体を持たないニューロンの核 で は pSmad2/3 染 色 性 が 増 強 し て い た こ と か ら，

【1521】SALS 患者，FALS 患者，Tg マウスでは TGF-β シグナ

氏

ル伝達が活性化された状態であると考えられた．しか学 位 の 種 類

博士（医学）

し pSmad2/3 を含有する RHIs のある SALS 患者の前角学

甲ニューロンの核では pSmad2/3 染色性が増強していな

学位授与の日付

平成 21 年 9 月 29 日

かったことから，この封入体を有する細胞では，AD

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当の場合と同様，pSmad2/3 の核への輸送障害が生じて

学位論文題目いる可能性が示唆された．pSmad2/3 が SALS 患者の

名（本
位

番

籍）
号

鳥

居

芳太郎（滋賀県）

第 857 号

Imidazoquinoline Acts as Immune Adjuvant for

RHIs と SLIs に存在するメカニズムは現時点で不明でFunctional Alteration of Thymic Stromal

あるが，pSmad2/3 が ubiquitin や TDP-43 と共存し，かLymphopoietin-Mediated Allergic T cell Response

つ封入体が一様の染色性を示したことから，一連の論文審査委員タンパク質が封入体形成に関与したものと推察され（教授）池原主査（教授）木梨達雄
進 （教授）薗田精昭

る．さらに，FALS 患者や Tg マウスにみられる LBHIs
は pSmad2/3 陰性であったことから，SALS 患者の場
合と SOD1 変異である FALS 患者や Tg マウスの場合とでは封入体形成過程や神経変性機序が異なると考え

論文内容の要旨【背景・目的】られる．

近年，先進諸国ではアレルギー疾患の増加が顕著で先に報告のあった AD と同様に今回の研究から，本あり，その制御が重要な課題となっている．アレル

来核内に局在すべき pSmad2/3 が，SALS 患者の細胞

ギー性炎症は Th2 細胞から産生されるサイトカイン

質内封入体にも局在することが明らかとなった．この（IL-4, IL-5, IL-13, TNF-α）によって引き起こされる異ことは，TGF-β シグナル伝達系の異常が AD と SALS

常な免疫反応であり，近年，アレルギーカスケードのに共通する神経変性機序である可能性を示唆してい上流でアレルギー誘導因子として作動する胸腺間質

る．今後，Smad 系の細胞質―核間移動の異常を他のリンパ球増殖因子：thymic stromal lymphopoietin（TSLP）

神経変性疾患で検討することにより，神経変性の機序の存在が明らかにされた．TSLP はアトピー性皮膚炎を理解する手がかりが得られると考える．
な お， 本 要 旨 に 該 当 す る 内 容 は Acta Neuropathol.

患者の上皮細胞（ケラチノサイト）や気管支喘息患者

115: 327–334, 2008 に掲載されている．

（dendritic cells: DC）を活性化する．活性化された DCの 気 道 粘 膜 に 過 剰 発 現 し， ミ エ ロ イ ド 樹 状 細 胞は炎症性 Th2 サイトカイン産生 T 細胞を誘導する．そ

審査の結果の要旨の際，DC 上に発現する OX40 リガンド（OX40L）が本研究は，孤発性および家族性筋萎縮性側索硬化症

この炎症性 Th2 細胞を誘導する責任分子である．

患者の剖検標本とモデル動物を用いた免疫組織化学的

従来，アレルギー疾患の治療法は，アレルギーカス

研 究 で，TGF-β シ グ ナ ル 伝 達 系 の 主 要 因 子 で あ る

ケードのエフェクターである B 細胞や好酸球，肥満

pSmad2/3 の細胞内局在と染色強度が疾患型や封入体細胞，そしてこれらが産生する化学伝達物質をターの種類によって異なることを明らかにし，封入体形成

ゲットとして開発された．本研究の目的は，従来のや神経変性機序を考察したものである．未知の部分がターゲットと異なり，アレルギーカスケードの起点に多い神経難病の病態解明に有用な知見を提供している

位置する DC 機能の制御によりアレルギー疾患の治療とみなされ，博士（医学）の学位に値すると判断した．

法の開発を目指すことにある．我々が候補とした薬剤
は抗ウィルス外用剤（Imiquimod：（Aldara®・ベセル
ナクリーム®））として臨床使用されている imidazoquinoline 合 成 化 合 物 の 誘 導 体 R848 で あ る．R848 はToll-like receptor（TLR8）のリガンドであり，DC を介して強力な Th1 誘導能を有するアジュバンドである．
この免疫アジュバンドの刺激によって炎症性 Th2 細胞
分化誘導能の制御が可能になれば，アレルギー疾患の有効な治療法の開発につながる．この作業仮説のもとに，R848 の TSLP 刺激-DC（TSLP-DC）に及ぼす影響— 205 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨を検討した．

現するが，TSLP/R848-DC ではそれが抑制された．ま【方法】

た TSLP-DC は Th1 誘導サイトカイン IL-12 は産生し健常人ドナーの末梢血からマグネチックビーズ法お++

よびセルソーターを用いて CD11c DC，CD4 naive T++

ないが，TSLP/R848-DC では IL-12 産生が認められた．
TSLP/R848-DC と CD4+ naive T 細 胞 の 共 培 養 の 系 に細胞，CD4 memory T 細胞である CRTH2 T 細胞を単IL-12 の中和抗体を添加すると IFN-γ 産生が減弱し，離した．

さらにリコンビナント OX40L を添加すると炎症性1．TSLP または R848 の刺激による DC の OX40L を含Th2 サイトカインの産生増加が認められた．すなわち，

めた表面マーカーの発現，サイトカイン産生能，

R848 は DC の IL-12 産生誘導と OX40L の発現抑制をおよび Th 細胞誘導能を検討した．

同時に惹起することにより，TSLP-DC の持つ炎症性2．TSLP または R848 の刺激による DC を，純化した
allogeneic CD4+ naive T 細胞ならびに CD4+ memory

Th2 誘導能を阻害することが証明された．
【考察】

T 細胞とそれぞれ共培養し，Th1 細胞および Th2

Imidazoquinoline の誘導体である R848 は TLR8 のリ細胞の誘導能を細胞内サイトカイン染色により検ガンドである．今回我々は，R848 が TSLP による炎定した．

症性 Th2 誘導性 DC を制御性 Th1 誘導性 DC に変換す

3．T 細 胞 suppression assay を 用 い て，TSLP/R848-DC

ること，そしてこの機能変換は DC の細胞表面に発現によって誘導されたヘルパー T 細胞の増殖抑制能する OX40L の発現抑制と DC が産生する IL-12 に依存（制御能）を検討した．

することを明らかにした．我々は，先に TLRs 2 & 4 の【結果】

リガンドとして知られる BCG によっても同様の現象

1．R848 による，TSLP- 刺激 DC の持つ炎症性 Th2 誘を誘導出来ることを報告している（Int Immunol 2008）．

導能の阻害の検証

R848 と BCG は，それぞれ異なる受容体に刺激を与え+

TSLP-DC は CD4 naive T 細 胞 を 炎 症 性 Th2 サ イ ト

るが，細胞内においては同じシグナル伝達経路を使っカイン産生の T 細胞へ誘導した．しかし，TSLP/R848-ている可能性がある．この機構の解明は，従来とは根+DC と CD4 naive T 細胞の共培養ではその誘導が阻害され，大量の IFN-γ と IL-10 を産生する T 細胞を誘導

本的に異なる抗アレルギー薬の開発に貢献する．
なお，本要旨に該当する内容は J Immunol. 181: 5340–

した．

5349, 2008. に掲載されている．

2．R848 による，TSLP- 刺激 DC の持つ memory Th2
審査の結果の要旨

維持能の阻害の検証
TSLP-DC は Th2 細胞へと分化したエフェクター T

アトピー性皮膚炎を誘発するサイトカイン TSLP は細胞の増殖を促進し，Th2 サイトカイン産生をより増末梢血由来骨髄性樹状細胞（DC）に作用して naive T

強することでアレルギー性炎症の維持に寄与している細胞を Th2 型 T 細胞に分化させる活性を誘導する．鳥ことが明らかにされた．また TSLP/R848-DC は Th2 型

居氏らは，抗ウイルス外用剤である Imidazoquinoline

CD4+ memory T 細胞の増殖と炎症性 Th2 サイトカインの誘導体であり，TLR8 のリガンドある R848 が，TSLPの産生も抑制した．以上から，R848 は TSLP-DC の持

刺激 Th2 誘導性 DC を制御性 Th1 誘導性 DC に変換でつ炎症性 memory Th2 維持能を阻害することが示されきることを明らかにし，その機序として STAT5 リン

た．

酸化抑制，OX40L の低下と IL-12 産生誘導が関与して

3．R848 刺激 DC の誘導する T 細胞の制御性機能の検いることを示した．これは R848 がアトピー性皮膚炎

討の抗アレルギー薬として資する可能性を示唆してお

TSLP/R848-DC から誘導された T 細胞は共培養されり，学位に値する研究と認められる．

+

た naive T 細胞や Th2 型 CD4 memory T 細胞の増殖能を抑制した．そして IL-10 中和抗体を添加するとこの抑制は解除されたことから，T 細胞産生の IL-10 に依
存 す る 抑 制 メ カ ニ ズ ム と 推 察 さ れ た． す な わ ち，
TSLP/R848-DC により誘導される Th1 細胞は機能的にも制御性 T 細胞であることが確認された．
4．R848 による炎症性 Th2 誘導阻害能のメカニズムを検討
TSLP-DC は炎症性 Th2 誘導因子である OX40L を発— 206 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

NPCs+BMCs by AS 群とした．⑤細胞増殖能は，培養
2 週後の椎間板髄核細胞の増殖数と [3H]-thymidine の【1522】
氏

名（本

籍）

梅

田

眞

uptake，cell cycle の G1 phase の測定で評価した．細胞志（大阪府）

学 位 の 種 類

博士（医学）

外器質の合成能は，RT-PCR のアグリカンの発現と 3

学

甲第 858 号次元培養下における，[35S]-sulfate の uptake を評価し学位授与の日付

平成 21 年 9 月 29 日

た．増殖因子の評価として，TGF-β を培養 2 日後に測学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当

位

番

号

定した．

学位論文題目【結果】
新鮮全骨髄液中における CD4 と CD8 陽性 T 細胞のActivation of Rat Nucleus Pulposus Cells by
Coculture with Whole Bone Marrow Cells Collected

割合と赤血球／白血球比は吸引法に比べ，灌流法ではby the Perfusion Method

有意に少なかった．②培養後 14 日目の椎間板髄核細論文審査委員胞の増殖数，[3H]-thymidine の uptake，cell cycle のいず

主査（教授）薗田精昭

れにおいても，全骨髄細胞群は NPCs alone 群と NPCs+（教授）木梨達雄 （教授）福原資郎

MSCs 群に比べで有意に活性化していた．③ RT-PCRのアグリカンの発現と [35S]-sulfate の uptake はどちらも，全骨髄細胞群が，NPCs alone 群と NPCs+MSCs 群

論文内容の要旨に 比 べ で 有 意 に 活 性 化 し て い た． ④ 培 養 2 日 後 の【はじめに】
近年，変性椎間板に対する治療として，動物モデル

TGF-β 分泌量は，全骨髄細胞群が，NPCs alone 群とで椎間板内への遺伝子導入やサイトカイン療法が報告

NPCs+MSCs 群に比べで有意に活性化していた．②かされているが，長期的な安全性については不明な点がら④の測定について，NPCs+BMCs by PF 群と NPCs+

多い．自己細胞移植では，椎間板細胞や間葉系幹細胞

BMCs by AS 群には有意差を認めなかった．

が使われており，良好な結果を得ている．しかし，椎【考察】
新鮮全骨髄細胞は，培養された間葉系幹細胞に比間板細胞や間葉系幹細胞は体外で培養するため，専用

べ，椎間板髄核細胞の細胞増殖能力と細胞外器質の合設備の整備が必要となり，実施施設が限られる．
従来の方法である吸引法で採取した新鮮全骨髄細胞

成能力を亢進させることが可能であった．また，椎間の使用は，末梢リンパ球や赤血球が混入するため，そ板細胞の増殖能力と細胞外器質の両方を活性化する因の使用は困難であった．今回我々は，末梢血の混入を

子の 1 つである TGF-β の産生量が全骨髄細胞群で，防ぐことが可能な灌流式骨髄細胞採取法により採取し有意に亢進していた．今回使用した間葉系幹細胞は，た新鮮全骨髄細胞と椎間板髄核細胞を共培養し，椎間培養後の接着細胞のみを回収するため，造血幹細胞や板髄核細胞への影響を検討した．

より未分化な幹細胞が除去される可能性がある．一

【研究方法】

方，新鮮全骨髄細胞ではそれらすべてが含まれてお① Fisher344/slc ラ ッ ト 雄（体 重 220–250 g） を 使 用り，全骨髄細胞群は NPCs+MSCs 群に比べ，良好な結した．②骨髄細胞は，灌流法と吸引法の 2 種類で採取果が得られたと考えられた．さらに，従来の吸引法にした．灌流法は，大腿骨転子部より生理食塩水を 5 ccより採取した新鮮全骨髄細胞は，末梢血の混入が多注入し，大腿骨顆部より骨髄細胞を採取した．吸引法

く，使用には制約があったが，灌流法は末梢血の混入

は，大腿骨顆部より骨髄細胞を吸引し採取した．②髄を防ぐことが可能である．このため，灌流法は椎間板

液中の末梢血の混入を検討するため，CD4 と CD8 陽

再生において有用な骨髄採取法となる可能性が示唆さ

性 T 細胞の割合を測定し，さらに，赤血球／白血球比

れた．
なお，本要旨に該当する内容は，J Orthop Res. 27:を計測した．③椎間板髄核細胞は尾椎より摘出した．
④ 3 グループを作成（i）椎間板髄核細胞の単独培養；

222–228, 2009 に掲載されている．

NPCs alone 群，（ii）椎間板髄核細胞と間葉系幹細胞との共培養；NPCs+MSCs 群，（iii）椎間板髄核細胞と新審査の結果の要旨

鮮全骨髄細胞との共培養；全骨髄細胞群とした．さら

本研究は，ラット椎間板髄核細胞を新鮮全骨髄細胞に，全骨髄細胞群を，2 グループに細分化（i）灌流法（吸引法及び灌流法で採取）と共培養することにより，により採取した新鮮全骨髄細胞と椎間板髄核細胞とのG1 期細胞比率の低下，II 型コラーゲンとプロテオグ

共培養；NPCs+BMCs by PF 群，（ii）吸引法により採リカンの発現増加が見られることを明らかにしてい取した新鮮全骨髄細胞と椎間板髄核細胞との共培養；

る．この椎間板髄核細胞の活性化機序として，細胞増— 207 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文

殖能力と細胞外基質の両方を活性化する TGF-β の関

内容の要旨および審査の結果の要旨② 羊膜由来付着性細胞の増殖能，表面分子の発現，多与を示唆している．また，灌流法で採取した骨髄細胞

分化能を解析した．

は，従来の吸引法に比べて末梢血の混入が少なく，臨③ 羊膜由来付着性細胞と臍帯血由来 Lin−CD34+ cells

床応用する際に有利であると考えられた．本研究は，の 共 培 養 に よ る HPC-proliferation assay，Long-term

変性椎間板の再生治療の可能性を示唆した点で価値あ

culture-initiating cell（LTC-IC）assay を行い，in vitro

る研究と認められる．

での羊膜由来付着性細胞の造血支持能を評価した．
なお，Short tandem repeat（STR）マーカーを用いた
DNA 解析・Mixed lymphocyte reaction（MLR）解析
により，本研究に用いた羊膜由来付着性細胞が胎児由来であることを確認した．

【1523】
氏

名（本

籍）

溝

上

友

学 位 の 種 類

博士（医学）学

甲美（和歌山県）位番

号④ さらに，共培養系の培養上清中のサイトカイン濃度を ELISA assay にて解析した．

第 859 号

学位授与の日付

平成 21 年 9 月 29 日

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当【結果】① 臍帯血由来 Lin−CD34+ cells には，その形態的な評
価・増殖能・分化能より未分化な造血前駆細胞が

学位論文題目

多数含まれていることが判明した．
② 羊膜由来付着性細胞は，その形態的な評価・増殖

Preferential expansion of human umbilical cord
blood-derived CD34-positive cells on major

能・表現型・多分化能（骨芽細胞・脂肪細胞・軟

histocompatibility complex-matched amnion-derived

骨細胞への分化）より MSC としての能力を有する

mesenchymal stem cells

ことが判明した．

論文審査委員③ この羊膜由来付着性細胞は，臍帯血由来 Lin−CD34+

主査（教授）薗田精昭（教授）木梨達雄 （教授）福原資郎

cells を短期（HPC-proliferation assay）だけでなく長期（LTC-IC assay）にわたってもサポートし，そのサ ポ ー ト 能 力 は， 同 一 胎 児 由 来 の 組 合 せ の 場 合

論文内容の要旨（MHC 一致）の方が，別の胎児由来の組合せの場合骨髄移植の生着率向上のための基礎実験により，マ④ 培養上清中の種々のサイトカイン濃度を測定した

ウス造血幹細胞（HSC）と骨髄ストローマ細胞／間葉

ところ，GM-CSF のみが，同一胎児由来の組合せの系幹細胞（MSC）との間に，主要組織適合遺伝子複場合に，別の胎児由来の組合せの場合よりも有意に合体拘束性（MHC restriction）が見られることが明ら高値であった．他のサイトカイン（M-CSF, G-CSF,

かになっている（Blood, 1997 & Stem Cells, 1997 & Stem

SCF, LIF, IL-6）については，有意差は認められな

Cells, 2001）．本研究では，ヒトにおいても同様の MHC

かった．

【目的】

（MHC 不一致）よりも高いことが判明した．

restriction が機能しているかを解析する目的で，ヒト羊【考察】

膜由来の付着性（ストローマ）細胞の MSC としての本研究により，ヒト羊膜由来付着性細胞は MSC と特性の有無ならびに，臍帯血由来造血前駆細胞（HPC）

しての性状を有し，臍帯血由来 HPC の増殖・分化をとの間に MHC restriction が存在するか否かについて検支 持・ 促 進 す る 能 力 が あ る こ と， こ の 両 者 の 間 に討した．

MHC restriction が 存 在 す る こ と が 明 ら か に な っ た．

【研究方法】

LTC-IC assay 後回収された細胞の造血コロニー形成率

選択的帝王切開術施行の正期産妊婦より同意を得たが MHC 一致の組合せで高いことから，その機序とし後，臍帯血と羊膜を採取した．臍帯血より密度勾配遠ては，臍帯血由来 HPC と羊膜由来 MSC 間の相互作用心法にて得られた単核細胞（使用時まで凍結保存）よに MHC が何らかの影響を及ぼしている可能性，GM-り 成 熟 細 胞 を 除去し，さらにソーティングによりCSF などのサイトカインによる影響などが考えられ

HPC 濃縮画分（Lin−CD34+ cells）を精製した．羊膜をる．現在，このメカニズムについて更なる検討を加え酵素処理して得られた単細胞を rhb-FGF 含有培地で培るとともに，SCID マウスへの移植実験による in vivo

養し，付着性細胞を得た．

での評価をすすめている．

① Lin−CD34+ cells の Clonal cell culture assay を行い，HPCの含有率を解析した．

MHC 一致羊膜由来 MSC には，MHC 不一致のものと比べてより高い臍帯血由来 HPC の増殖の支持・促— 208 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨進能があることから，MHC 一致羊膜由来 MSC を臍帯血移植に導入できれば，臍帯血移植の問題点（移植細【1524】

胞数不足や血球回復の遅延）を克服できる可能性が示氏された．すなわち，羊膜由来 MSC を臍帯血由来 HPC

学 位 の 種 類

博士（医学）の feeder cells として使用し，増殖した HPC を臍帯血学

甲移植に使用するという可能性，あるいは羊膜由来 MSC

学位授与の日付

平成 21 年 9 月 29 日を臍帯血由来 HPC と共に移植することにより造血系

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当の早期からの十分な回復を促進し，臍帯血移植の問題

学位論文題目

名（本
位

番

籍）
号

青

田

泰

子（兵庫県）

第 860 号点（血球回復遅延による感染症のリスク）を克服でき

Efficacy of an L- and N-type calcium channel blocker

る可能性などである．羊膜由来 MSC を用いた新しいin hypertensive patients with neurovascular

臍帯血移植法を開発・確立するために，臨床応用に必

compression of the rostral ventrolateral medulla

要な安全性の確認などを含め，今後さらに研究を進め

論文審査委員

主査（教授）髙橋伯夫てゆきたい．

（教授）松田博子 （教授）中邨智之

なお，本要旨に該当する内容は Haematologica 94:
618–628, 2009 に掲載されている．
論文内容の要旨【研究背景】

審査の結果の要旨
本研究は，ヒト羊膜由来の付着性細胞が間葉系幹細延髄の腹側表面に存在する頭側延髄腹外側野

胞 の 性 状 を 有 し， ヒト臍帯血由来の造血前駆細胞（rostral ventrolateral medulla, RVLM）は交感神経活動（HPC）の増殖・分化を支持・促進する能力があるこの制御中枢であり，血管運動中枢ともよばれる領域でとを示している．さらに，主要組織適合遺伝子複合体

ある．1978 年の Jannetta らによる報告以来，RVLM へ（MHC）が HPC と一致する羊膜由来付着性細胞によの動脈による圧迫と本態性高血圧の関連についての報

り強い増殖促進効果があることから，MHC 拘束性の告が散見されるようになった．我々のグループも本態存在を示唆している．臨床的にも，従来の臍帯血移植

性高血圧患者の一部では RVLM への動脈による圧迫法の問題点（移植細胞数の不足や造血回復の遅延）を，が交感神経活動の亢進を介して高血圧の成因に関与す

羊膜由来付着性細胞との共培養あるいは共移植によっる可能性（Hypertension 1997, J Hypertens 1999），およて克服できる可能性を示唆しており，学位に値する価び圧迫解除術により交感神経活動が抑制され高血圧が値ある研究と認められる．

治癒する症例が存在すること（Stroke 1999）を報告した．さらに RVLM への動脈による圧迫，難治性高血圧を認める慢性腎不全患者において中枢性の交感神
経活動抑制薬であるクロニジンが著効を示し，十分な降圧と腎機能の改善が得られた症例を報告した（Hypertens Res 2009）．従って RVLM への圧迫を認める本態性高血圧患者においては，交感神経活動を抑制する降圧薬が有用であると考えられるが詳細は不明である．
【研究目的】
そこで本研究では，L 型カルシウムチャネルのみならず，N 型カルシウムチャネルに対する拮抗作用により交感神経活動の抑制作用を有するシルニジピンの，
RVLM への圧迫を認める本態性高血圧患者における有用性について検討した．
【研究方法】
対 象 は 2006 年 4 月 か ら 2008 年 3 月 ま で に 関 西 医科 大 学 附 属 枚 方 病 院 を 受 診 し， 診 察 室 血 圧 が140/90 mmHg 以上の未治療本態性高血圧患者である．
過去 6 ケ月以内に脳・心血管障害を発症した患者や慢— 209 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

性腎不全患者，妊娠女性や悪性疾患患者を対象から除圧迫を認める本態性高血圧患者においては交感神経活

外した．全例に対し，延髄部の高分解能 MRI 3D thin-

動を抑制する薬剤が有用である可能性が示唆される．

slice T2 強調像（使用装置：GE Signa Excite 1.5 テスラ，

今後は L 型のみに対するカルシウム拮抗薬や他の交感

スライス厚：1.4 mm）を撮像した．患者情報を知らさ

神経抑制薬の効果についての検討が必要であると考えれていない 2 人の放射線科専門医師が，RVLM への圧られる．

迫の有無を評価し，RVLM への圧迫を認める（NVC+）
群と認めない（NVC–）群に分類した．全例において

なお，本要旨に該当する内容は，Hypertens Res. 32:
700–705, 2009 に掲載されている．

シルニジピン 10 mg/日を 16 週間単独投与し，治療に審査の結果の要旨

よる血圧，血漿ノルエピネフリン（NE）値，心エコー図より求めた左室心筋重量係数（LVMI）の変化を 2

延髄外腹側野が接する動脈で拍動性に刺激を受ける群間で比較検討した．

（圧迫）ことで機械的に交感神経活動を高める，その【結果】

結果，高血圧をもたらし，本態性高血圧症の約半数で対 象 と な っ た 46 例 は NVC+ 群 24 例 と NVC– 群 22

画像診断的にこれに該当する集団があると報告した．

例に分類された．NVC+ 群 24 例のうち，13 例におい交感神経活動を抑制する N 型 Ca チャンネルをも遮断ては左側 RVLM への動脈による圧迫を認め，7 例におする Ca 拮抗薬の効果を検証したところ，圧迫群ではいては右側，4 例においては両側への圧迫を認めた．

降圧度と交感神経活性抑制度が大であったことから，

年齢，性別，body mass index，血圧，脈拍数，BUN，

この説を臨床的に支持したものである．

CRE，CRP，HbA1c，脂質値は 2 群間で有意差はなかった．一方，NVC+ 群では NVC– 群に比し血漿 NE 値が有
意に高値（392±152 pg/mL vs. 512±158 pg/mL, p<0.05）
であり，交感神経活動が亢進していることが再確認された．シルニジピン投与による収縮期血圧（NVC–【1525】
氏

名（本

籍）

松

山

加耶子（大阪府）

group: 24.1±16.7 vs. NVC+ group: 38.5±14.7 mmHg,

学 位 の 種 類

博士（医学）

p<0.05），拡張期血圧（14.3±11.8 vs. 26.0±14.8 mmHg,

学

甲p<0.05），NE 値（60±199 vs. 186±174 pg/mL, p<0.05），

学位授与の日付

平成 21 年 9 月 29 日

LVMI（1.3±18.3 vs. 20.2±23.5 g/cm , p<0.05） の 低 下

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当は NVC+ 群において NVC– 群に比し有意に大であっ学位論文題目2

位番

号

第 861 号た．

Relationship between pigment epithelium-derived【考察】

factor (PEDF) and renal function in patients

RVLM への動脈による圧迫を認める本態性高血圧患

with diabetic retinopathy

者で は 交 感 神 経活動が亢進していること，および論文審査委員RVLM への圧迫解除術により高血圧が治癒することよ（教授）岩坂壽二 （教授）髙橋伯夫

主査（教授）中邨智之

り，RVLM への動脈による圧迫を認める高血圧は本態性高血圧ではなく二次性高血圧に分類される可能性が考えられる．今後この新しい二次性高血圧を確立する
ためには，その病態生理や治療法についての更なる検

論文内容の要旨【はじめに】

討が必要である．

糖尿病の代表的な合併症として網膜症と腎症があ治療法としては，圧迫解除術を選択肢の一つとしてる．日本の成人中途失明の原因では，糖尿病網膜症が考慮することができる．しかし，圧迫解除術は侵襲性

現在第 2 位である．糖尿病網膜症では，高血糖の持続が高く圧迫を認める高血圧患者全例に適応を拡大する

により網膜血管障害が起こり，それが高度になると，ことは困難であり，有効な降圧薬治療手段を模索すべ

網膜出血や網膜毛細血管瘤が見られる単純糖尿病網膜きである．本研究では，N 型カルシウムチャネル拮抗症（mild to moderate nonproliferative diabetic retinopathy:

作用に基づく交感神経活動の抑制作用を有するシルニ

M-NPDR）となり，やがて網膜毛細血管床の閉塞が見ジピンは，RVLM への圧迫を認める本態性高血圧患者

ら れ る 前 増 殖 糖 尿 病 網 膜 症（severe nonproliferativeにおいて圧迫を認めない患者に比し，より強い交感神

diabetic retinopathy: S-NPDR）と呼ばれる状態になる．

経活動抑制効果による降圧効果，および左室肥大の退さらに進行すると，網膜無灌流領域が広範囲に生じ，縮効果を有することが示された．従って RVLM への網膜は虚血状態となる．この虚血刺激により，血管新— 210 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

生促進因子の発現が増加し，網膜新生血管が生じる．

（n=65）であった．PDR では NDR，M-NPDR，S-NPDR

こ の 状 態 を 増 殖 糖 尿 病 網 膜 症（proliferative diabeticと比べ血中 Cr は有意に高値であった．（P<0.05）

retinopathy: PDR）という．血管新生は，vascular endo-

また血中 PEDF 濃度が高値である症例は，血中 BUN，

thelial growth factor（VEGF）などの血管新生促進因子

血中 Cr ともに血中濃度も高値であり，統計学的に正と pigment epithelium-derived factor（PEDF）などの血管の相関がみられた．（P<0.0001）

新生抑制因子とのアンバランスによって起こるとされ【考察】
糖尿病網膜症の病期の進行した症例では，進行のしている．
一方，糖尿病腎症は糖尿病患者の生命予後を左右すていない症例と比べ血中 PEDF さらに血中 BUN，Cr

る合併症の一つであり，進行性の疾患である．細小血濃度が有意に高値であった．さらに血中 PEDF と BUN

管病変を基礎にした糖尿病性糸球体硬化症である．糖または血中 PEDF と Cr には正の相関がみられた．糖尿病腎症が見られる患者は糖尿病網膜症が悪化しやす

尿病網膜症と糖尿病腎症はともに慢性炎症が微小血管いとの報告がある．また糖尿病腎症モデルラットの腎障害の原因であるため糖尿病網膜症と糖尿病腎症の間では PEDF の発現が低下し，血中の PEDF 濃度も低下には密接な関係がある．PEDF には抗炎症作用がある

していると報告されている．しかし，ヒトでの詳細はと報告があり，PEDF は微小血管障害を抑制すると考不明である．当教室では以前から糖尿病網膜症と血中えられる．腎機能障害で血中 PEDF が上昇する原因はPEDF 濃度の関係について研究を行ってきた．そこで，不明であるが，網膜症や腎症の原因である慢性炎症お今回，我々は腎機能と網膜症また血中の PEDF 濃度のよび，血管障害の進行に反応して，血中 PEDF が上昇し関係について検討した．

ている可能性が考えられた．糖尿病網膜症患者の血中【研究方法】PEDF の上昇は微小血管障害の程度を表し，糖尿病網られた 2 型糖尿病患者 243 人（男性 125 名，女性 118 名）

膜症や糖尿病腎症の進行の指標となると考えられた．
なお，本要旨に該当する内容は，Mol Vis. 14: 992–

で年齢は 18〜87 歳，平均年齢 61.7 歳である．眼底検996, 2008 に掲載されている．

対象は学内倫理委員会の承認を得，採血に同意が得

査，蛍光眼底造影検査を施行して，網膜症のない群（no apparent diabetic retinopathy: NDR），M-NPDR，S-

審査の結果の要旨

NPDR，PDR の 4 病期に分類した．さらに血液を採取

Pigment epithelium-derived factor（PEDF）は糖尿病網

し，血中 HbA1c，血中尿素窒素（BUN），血中クレアチ膜症をはじめとする眼内血管新生の抑制因子として重ニン（Cr）を測定．また血中 PEDF 濃度を測定するた要な役割を果たすとされている．しかしながら同じ糖めに血液を 3000 回転，20 分間遠心分離し，platelatepoor plasma を抽出し，–20°C で冷凍保存，その後尿素尿病の合併症として重要な糖尿病腎症との関係は知ら処理を行い，PEDF sandwich ELISA Kit（Chemicon Inter-

中に PEDF が増加しており，しかもその濃度は糖尿病

national Tercula. CA, USA）にて測定した．

網膜症の重症度とともに増加し，増殖糖尿病網膜症で【結果】最も高いことを証明した．さらに，BUN，クレアチニン

血 中 PEDF 濃 度 は，NDR 群 で 5.29±1.04 μg/ml（平れていない．本研究は，2 型糖尿病患者の多数例の血を指標とした腎機能の検索において，血中 PEDF と均±SD，n=20），M-NPDR 群では 5.07±0.72 μg/ml（n=BUN 値，血中 PEDF とクレアチニン値の間にはそれ

37），S-NPDR 群 は 6.61±0.63 μg/ml（n=98），PDR 群

ぞれ相関がみられ，しかも網膜症の重症度に相関しては 7.69± 0.65 μg/ml（n=88）であった．病期の進行しBUN，クレアチニンが増加することを証明した．腎機た症例では血中 PEDF 濃度はより高値となった．特に能の指標となる他の検査と比べての PEDF の特異度，PDR では M-NPDR に比べ血中 PEDF 濃度が有意に高網膜症や腎障害の際の PEDF の産生組織が明らかでな値であった．（P<0.05）

いなど，解明されるべき課題はあるが，血中 PEDF は

血中 BUN 濃度は，NDR 群で 15.6±1.0 mg/ml（n=17）
で M-NPDR 群では 18.5±1.1 mg/ml（n=24），S-NPDR 群

全身の微小血管障害の指標となりうる可能性を示した研究であり，学位に値すると考えられた．

は 19.9±0.9 mg/ml（n=59），PDR 群は 27.1±2.5 mg/ml（n=65）で あ っ た．PDR で は NDR，M-NPDR，S-NPDR と比べ血中 BUN は有意に高値であった．（P<0.05）
血 中 Cr 濃 度 は，NDR 群 で 0.69±0.06 mg/ml（n=17）
で M-NPDR 群では 0.71±0.06 mg/ml（n=24），S-NPDR 群
は 1.01±0.19 mg/ml（n=59），PDR 群 は 1.94±0.3 mg/ml— 211 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

慢性疼痛（11），頭痛（6），他の機能性胃腸障害（3），【1526】
氏

自律神経失調（8）であった．検査前に薬物は変更し

名（本

籍）

六

浦

裕

ないようにし，激しい運動や，アルコール，カフェ

美（京都府）

学 位 の 種 類

博士（医学）

インの摂取も制限した．また，健康なコントロールを学

甲公募して 29 名のデータを得た．

位

番

号

第 862 号

学位授与の日付

平成 22 年 3 月 23 日

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当PSP を施行した同日起床後の唾液を，Salivette を用いて採取し，SRL に依頼してフリー・コルチゾール値

学位論文題目を測定した．HPA axis 機能の評価には，起床後複数回

Depression and Anxiety Correlate Differently with唾液採取が理想だが，患者の負担を考慮し，かつデー

Salivary Free Cortisol in the Morning in Patients

タの信頼性が示されている起床後 30 分の 1 回採取とwith Functional Somatic Syndrome

した．

論文審査委員

主査（教授）木下利彦

質問紙はうつの尺度として Beck Depression Inventory（教授）中邨智之 （教授）中村加枝

II（BDI-II）， 不 安 の 尺 度 と し て State-Trite Anxiety
Inventory（STAI），最近の気分を Profile of Mood State（POMS）の各日本語版，Quality of life（QOL）を 8 item

論文内容の要旨

short-form health survey（SF8）を用いて測定した．統【はじめに】

計ソフトは SPSS 11.5 を用い，T 検定，Mann-Whitney

Functional Somatic Syndrome（FSS）は，世界的に広くみられ，医学的に説明可能な程度を越えて苦痛や訴検定，2 元配置の分散分析，多変量解析などを行った．
【結果】

えが強く，治療抵抗性で医療コスト増大の原因ともな

FSS はコントロールに比べ，有意に抑うつ不安が強く，QOL が低かった．コルチゾール値の平均値では，る疾患群をさす概念である．
関西医大心療内科では，先行研究として，FSS に対

FSS，コントロールの男女で差を認めなかったが，コする急性ストレス負荷に対する自律神経系の反応

ルチゾールと心理テストの関係性において，FSS は（psychophysiolosical stress profile, PSP） に 関 す る 研 究

コントロールと反対の傾向を示した．すなわち，FSSを行ったところ，低反応であるという結果であり，機で は BDI-II，POMS-depression，fatigue，confusion な ど

能不全の可能性が示唆された．そこで今回，FSS に関が負相関，精神的 QOL 指標 MCS が正相関を示したのして生化学的指標を用いた研究を計画した．

に対し，コントロールでは STAI-state，trait，POMS-

一般にストレス状況下では，視床下部―脳下垂体―

depression, fatigue, confusion が正相関，MCS は負相関

副腎系（HPA axis）を介して，コルチゾールの分泌がを示した．多変量解析では，コルチゾール値に影響を増加する．FSS 患者は医学的に説明のつかない症状に及ぼしている要素は FSS で POMS-D と身体的 QOL 指

苦しんだ結果疲弊状況にあり，自律神経反応のように

標 PCS，コントロールでは STAI-trait であった．

HPA axis も機能不全である可能性が推定される．そこ【考察】

で，① FSS 患者の HPA axis 反応は健常人と，異なる

FSS の HPA axis 機能は，抑うつの程度が軽いとは結果を示す，②なかでも疲弊と関連の強いうつ状態がhyper-functional，抑うつ程度が重いと hypo-functional

強いほど，コルチゾール分泌が低下するという仮説をな反応を示した．すなわち通常ストレス下で亢進する

立て，これについて検証した．

コルチゾール分泌が，うつ状態が強いほど低下すると【研究方法】

いう，機能不全状態にあった．FSS 患者は，HPA axis

2006 年 8 月から 2008 年 3 月までの期間，関西医大

機能だけでなく自律神経反応も低反応であることが心療内科で治療を受けた患者のうち，神経生理学的な

我々の先行研究で指摘されており，疲弊した状態から検査を受ける価値があると主治医が判断した 67 名の

各種機能不全を呈していることが推定される．またう

中で，Barsky ら（1999）の定義に基づき①医学的に説つに関する研究史では，程度が強いほどコルチゾール

明のつかない身体症状が主症状で，精神障害によるもが高値であるという報告が多く，今回の結果は FSSのを除く，②主観的な症状スケールが 3/10 以上，6 か患者特有の傾向だと考えられる．

月以上継続している，③症状のために社会的日常的活

なお，本要旨に該当する内容は，Appl Psychophysiol
Biofeedback. 34: 291–298, 2009 に掲載されている．

動が制約を受けている，という 3 点を満たすもの 45
名を FSS と診断した．機能性胃腸障害（6），過敏性腸症候群（3），線維筋痛症（6），慢性疲労症候群（2），— 212 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

審査の結果の要旨

マ ウ ス） の 発 症 を 確 認 し た 時 点（生 後 約 12 週） で過敏性腸症候群など機能性心身症の大部分が含まれ5.5Gyx2 あるいは 6.0Gyx2 の放射線照射を行い，24 時

る機能性身体症候群（FSS）における，視床下部下垂間後に eGFP transgenic C57BL/6 マウス（eGFP Tg マウ

体副腎系機能と心理指標との関係を検討した論文であス）の骨髄細胞を用い骨髄内骨髄移植を行った．コンる．患者 45 名と健常者 29 名の早朝唾液中コルチゾー

トロールとしては mSOD1 Tg マウスから mSOD1 Tg マ

ルと，抑うつ，不安，感情状態の 3 種類の心理テスト

ウスへ IBM-BMT を行った群や無処置の mSOD1 Tg マとの相関を検討し，患者群では抑うつ指標とコルチウスを用いた．IBM-BMT 後 14 日目に骨髄細胞の置きゾール値が負の相関を示し，健康対照では正の相関を

換わりを確認するためフローサイトメーターを用い末示すことが判明した．機能性身体症候群の病態解明に

梢血の解析を行った．経時的に体重変化，握力，四肢ついての貴重な所見であると考え，学位に値すると判運動機能を観察し，疾患の進行を評価した．また食物断した．

の自己摂取が不可能となった時点で還流固定を行い，免疫染色による二重染色を行い蛍光顕微鏡にて観察を行った．染色には抗 Iba-1 抗体，抗 GFAP 抗体，抗 O4抗体，抗 NeuN 抗体，抗 CD45 抗体を用いた．
【結果】【1527】
氏

名（本

籍）

大

西

静

eGFP Tg マウスの骨髄の投与を受けた群において生（大阪府）

学 位 の 種 類

博士（医学）

は，mSOD1Tg マウスから IBM-BMT を行われた群や学

甲第 863 号

無処置のコントロール群と比較して有意差をもって生

学位授与の日付

平成 22 年 3 月 23 日

存期間の延長，神経機能の回復を認めた．移植された学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当eGFP 陽性ドナー骨髄由来の細胞は骨髄内腔にはもち

位

番

号

ろん，全身諸臓器への分布が認められた．疾患の障害

学位論文題目
Intra-bone marrow-bone marrow transplantation部位である脊髄においてもドナー骨髄由来の細胞が認

slows disease progression and prolongs survival

められ，それらの細胞はミクログリアやマクロファー

in G93A mutant SOD1 transgenic mice, an animalジなど貪食細胞で発現がみられる Iba-1 が陽性であっmodel mouse for amyotrophic lateral sclerosis

た．脊髄前角内でのそれらの細胞数はコントロールに

論文審査委員

比べ有意差をもって増加していた．しかし，その他の主査（教授）薗田精昭

神経系のマーカーは陰性であり，神経細胞への分化転（教授）杉本哲夫 （教授）福原資郎

換は認められなかった．
【考察】
本研究においては骨髄内骨髄移植という新たに開発

論文内容の要旨された移植の方法を用い，効率よく野生型の骨髄細胞【はじめに】
筋萎縮性側索硬化症（ALS）は，発症後数年以内に，を移植することにより発症後でも細胞移植療法を行え

主に呼吸不全によって死に至るきわめて予後不良な進ば，正常骨髄由来の細胞が障害された脊髄へ遊走する

行性の致死性神経変性疾患である．この疾患に対することが示され，またマウスの生存期間が延長し，神経細胞移植療法は近年注目されてきており，家族性の機能の改善が見られることが解明された．本研究の結ALS モデルマウスを用いた実験などで症状進行抑制

果は細胞移植療法の改良，もしくは他の治療法との併や神経機能改善などの効果が確認されているがその改用により筋萎縮性側索硬化症を治癒させうる可能性を善の機序については未だ解明されていない．

示唆していると考えられる．
なお，本要旨に該当する内容は Brain Res. 1296: 216–

【研究目的】
本研究の目的は発症が確認された遺伝子変異 ALS

224, 2009 に掲載されている．

モデルマウスに対し，骨髄内骨髄移植（IBM-BMT）法を用いて，正常マウスの骨髄細胞を移植し，疾患の審査の結果の要旨

進行に対する効果を検討し，また，効果がみられた場

本研究は，骨髄内骨髄移植（IBM-BMT）という新合にはその機序に関して検討を行うことである．

たに開発された移植方法を用いて，野生型の骨髄細胞【研究方法】

を筋萎縮性側索硬化症（ALS）モデルマウスに移植す現在 ALS のモデル動物として広く研究応用されてることにより，発症後でもマウスの生存期間が延長

い る B6SJL-TgN（SOD1-G93A） マ ウ ス（mSOD1 Tg

し，神経機能の改善が見られることを明らかにしてい— 213 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

る．その機序として，ドナー由来のミクログリア細胞株と si-RNA によるノックダウンによって小胞体ストの脊髄前角における増加が関与する可能性を示唆しレス下での細胞増殖を WST-1 細胞増殖アッセイにてた．以上より，本研究は，IBM-BMT を応用すること評価した．最後に，リンパ節内での形質細胞におけるにより将来的に ALS の病態を改善させうる可能性を

ABCG2 の発現とアポトーシスの関係について，リン示唆しており，医学上価値ある研究と認められる．

パ節のパラフィン包埋切片での ABCG2 と活性化カス
パーゼ 3 の二重免疫組織染色を用いて検討した．
【結果】
反応性リンパ組織やキャッスルマン病，ホジキン
リンパ腫，末梢性 T 細胞リンパ腫，血管免疫芽球性 T【1528】
氏

名（本

籍）

中

道

尚

細胞リンパ腫などにおいて，ABCG2 を高発現する形

人（大阪府）

学 位 の 種 類

博士（医学）

質細胞が増加していた．これらのリンパ組織は，サイ学

甲第 864 号

トカイン産生が亢進され，形質細胞に小胞体ストレス

学位授与の日付

平成 22 年 3 月 23 日がかかっている病態と考えられる．そこで形質細胞株

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当に IL-6 と小胞体ストレス誘導物質を加えたところ，

Synergistic effect of interleukin-6 and endoplasmic

排出の増加も確認された．小胞体ストレス誘導物質下

reticulum stress inducers on the high level of ABCG2での形質細胞株の増殖能の検討では，ABCG2 発現の

位

番

号

学位論文題目

ABCG2 の mRNA 量およびタンパク量が増加し，薬剤

ノックダウンにより増殖能の低下がみられた．また，expression in plasma cells
論文審査委員

主査（教授）池原

リンパ節において ABCG2 高発現の形質細胞は低発現

進（教授）薗田精昭 （教授）木梨達雄の形質細胞と比較してアポトーシスに陥っている割合が有意に低かった．ABCG2 発現調節機構を検討した
ところ，プロモーター領域のメチル化が ABCG2 の発論文内容の要旨

現を抑制していること，IL-6 と小胞体ストレス誘導物【背景・目的】質により活性化 XBP-1 と HIF-1α が増加して ABCG2

ATP binding cassette（ABC）transporter family は細胞遺伝子のプロモーター活性を上昇させることがわかっ

膜に存在するトランスポーターであり，ATP に依存した．

た内因的物質や外因性物質，そしてその代謝産物の輸【考察】送に関与する．Mitoxantrone 耐性乳癌細胞株から分離

ABCG2 は炎症反応性リンパ組織やサイトカイン産同定された ABCG2 は，多種類の抗がん剤の輸送排出

生リンパ腫に出現する形質細胞の一部に高発現するこなどに働く．この蛋白は，未熟な造血幹細胞に発現しとが明らかにされた．形質細胞株の研究では，ABCG2ており，Hoechst33342 色素の排出能をもつ side popu-

は IL-6 と小胞体ストレスによって誘導され，薬物排

lation 分画を構成する．最近では胎盤の survival factor

出に働くことが示された．また細胞死の回避に作用すであることも報告されている．本研究は，末梢リンパることも示唆された．これらの所見は，ABCG2 が記組織における ABCG2 発現細胞の同定を試み，その発

憶 B 細胞や形質細胞の長寿命分画との関連を示唆す

現機構と役割を明らかにすることを目的としている．

るものであり，形質細胞腫瘍の Cancer stem cell の解明【方法】

や治療法の開発にも貢献することが期待される．
なお，本要旨に該当する内容は，Lab Invest. 89: 327–

保存されている様々な疾病を持つリンパ節もしくは扁桃のパラフィン包埋切片を，免疫組織染色にて検336, 2009 に掲載されている．

討した．次に，形質細胞の細胞株を用い，インターロ
イキン 6（IL-6）と小胞体ストレス誘導物質での刺激

審査の結果の要旨の 有 無 に よ る ABCG2 の mRNA 量 を real-time reverse

耐 性 乳 癌 細 胞 株 か ら 分 離 同 定 さ れ た ATPA bindingtranscription-PCR にて評価し，ABCG2 のタンパク発現

cassette transporter subfamily G member 2（ABCG2） は量と機能をフローサイトメトリーにて確認した．更

造血幹細胞などの幹細胞に発現し，side population のに，ABCG2 の発現調節機構の検討には，プロモーター形成に必要である．申請者は反応性リンパ節における領域のメチル化の解析，クロマチン免疫沈降法，ルシ

形質細胞の一部に ABCG2 が高発現していることを見フェラーゼアッセイを施行した．また，ABCG2 発現

いだし，形質細胞株を使ってその役割を検討した．

の形質細胞における役割を検討するために，形質細胞

ABCG2 の発現は小胞体ストレスと IL-6 の刺激による— 214 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文プロモーター活性の上昇に一致して増加し，同時に薬内容の要旨および審査の結果の要旨【研究方法】

物排出の増加もみられた，一方，小胞体ストレス下に待機的冠動脈造影や経皮的冠動脈形成術を施行した

ABCG2 の発現を低下させると生存率が低下した．こ腎機能障害を認め冠動脈疾患を有する 431 例を対象とれらの所見は，ABCG2 により，形質細胞のアポトーした．全症例に対して造影剤暴露直前の s-Cr と造影シスが回避されることを示唆しており，形質細胞の機剤暴露後の s-Cr を測定した．慢性維持透析患者や一能を考える上で興味深い研究で，学位に充分値するも時的透析，血行動態に影響を与える可能性のある低左のとして評価された．

心機能（左室駆出率 < 35%），急性冠症候群，心不全例を除外した．造影剤腎症は造影剤投与後 2 日以内で，他の原因がなく 25% 以上の s-Cr の増加，あるいは絶対値で 0.5 mg/dl 以上の増加を認めるものと定義した．

【1529】
氏

プラバスタチン投与群は脂質異常症改善を目的として

名（本

籍）

吉

田

進（奈良県）

少なくとも造影剤暴露 28 日前に投与されているもの

学 位 の 種 類

博士（医学）とし，全ての対象に対して，造影剤暴露 12 時間前に学

甲

造影剤腎症の予防のため 1 ml/kg/dl の補液を行い造影

位

番

号

第 865 号

学位授与の日付

平成 22 年 3 月 23 日

剤暴露 12 時間後まで投与した．この対象をプラバス

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当

タチン投与群とスタチン非投与群で臨床背景を比較し，また造影剤腎症群と非造影剤腎症群に分類し，こ

学位論文題目
Prevention of contrast-induced nephropathy by chronicの 2 群に対して造影剤腎症の発生率を評価した．さらpravastatin treatment in patients with cardiovascularに造影剤腎症発生予防の関連独立因子について多変量

disease and renal insufficiency

解析にて検討した．

論文審査委員【結果】

主査（教授）松田博子（教授）中邨智之 （教授）澤田

全対象中 36 例（8.4%）に造影剤腎症を認めた．プ敏

ラバスタチン投与群とスタチン非投与群では血漿コレ
ステロール値に有意差は認めなかった（183.1±37.5
vs. 181.9±40.1 mg/dl, p=0.762）．造影剤腎症群は，造論文内容の要旨

影剤暴露前の高度腎機能障害例（p（ =0.003），高容量造【はじめに】
近年，画像診断や治療のための造影剤使用が増加し影剤使用例（p（ =0.034）において高率であり非造影剤ているが，造影剤の使用は腎機能の悪化を招く可能性

腎症群はプラバスタチン投与例（p（ =0.01）において高がある．また，腎機能低下症例は造影剤腎症を生じる率であった．さらに多変量回帰分析でもプラバスタ

高リスク群であり，さらに慢性腎疾患による腎機能障害の増加により，造影剤使用後に起こる造影剤腎症にチン投与の有無（x2=6.549, p=0.011, odds ratio=0.34），
造影剤量（x2=4.484, p=0.034, odds ratio=1.01），造影剤

関心が寄せられている．冠動脈造影検査や経皮的冠動

暴露前の腎機能障害の程度（x2=6.294, p=0.009, odds

脈形成術後の造影剤使用により起こる造影剤腎症は，

ratio=2.78）は造影剤腎症の独立因子であった．糖尿冠動脈疾患のある患者において有病率や死亡率を増加

病，高齢者は造影剤腎症の予測因子ではなかった．

すると報告されている．

【考察】

脂質異常症改善薬であるスタチンはコレステロール

脂質異常症改善薬であるプラバスタチン前投与は造低下作用以外に抗酸化作用，抗血栓作用，抗炎症作用

影剤腎症を減少させる．特に造影剤使用前に腎機能障や血管内皮の安定化等多面的作用が報告されており，害のある例では必要最少量の造影剤量とプラバスタ

腎臓に対して保護的に働き，結果として造影剤腎症をチン投与は予防として考慮されうる．
造影剤腎症の発症機序としてフリーラジカルの刺激予防する可能性がある．

による腎髄質血流低下や，尿細管上皮細胞障害，活性【研究目的】
待機的冠動脈造影や経皮的冠動脈形成術が臨床上必酸素の腎細胞への直接的な障害が原因となる．スタ要な心血管病を有し，腎機能障害（糸球体濾過量 60

チンの抗酸化作用，抗炎症作用は活性酸素を抑制し造ml/min 未満，もしくは血清クレアチニン s-Cr 1.1 mg/dL

影剤腎症を予防する可能性が考えられる．特にスタ以上）を合併する症例に対して，脂質異常症改善薬とチンの中で水溶性であるプラバスタチンは肝臓に対すして長期プラバスタチン前投与症例は造影剤腎症の発る悪影響はあるが，心筋，脈管と腎臓に及ぼす悪影響症の予防効果があるかを検討した．

は弱く膵臓 β 細胞からのインシュリン分泌は妨げられ— 215 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨ない等報告されておりより効果的な可能性がある．
なお，本要旨に該当する内容は，J Cardiol. 54: 192–

した ATL 発症予防法の開発を目標に，個体内特異的

198, 2009 に掲載されている．

【研究方法】

なウイルス発現抑制機構の解明を試みた．
（1）HTLV-1 転 写 調 節 領 域（LTR） 下 に お い て EGFP

審査の結果の要旨と Tax の融合タンパク（Gax）を発現する組換えレ

軽度腎機能障害を有する冠動脈造影および経皮的冠

トロベクターを導入したマウス EL4 T リンパ腫細胞

動脈形成術待機患者 431 例中，高コレステロール血症（EL4-Gax）1×106 個を 6 週令マウス腹腔内に移入の 194 例の患者にプラバスタチンを 28 日以上投与し，し，3 週間後，腹腔内より採取直後（in vivo）およ投与群と非投与群で，造影剤腎症の発生率を比較した．

び ex vivo 培 養 48 時 間 後 に お け る Gax の 発 現 を，プラバスタチン投与群では 8 例（4.1%）だったのにた

EGFP の蛍光および total RNA の定量的 RT-PCR で測いし，非投与群では 28 例（11.8%）で，非投与群で発定した．

生率が有意に高かった．多変量回帰分析では，造影剤（2）ゲノム DNA を亜硫酸処理後，ウイルス組込み部

投与前の血清クレアチニン値，造影剤使用量，プラバ

位特異的なプライマーを用いた genomic PCR によりスタチンの投与の有無が，造影剤腎癌の独立因子であ得られた PCR 断片の塩基配列を解析することで，ることが示された．プラバスタチン長期投与が造影剤

プロモーター DNA の CpG メチル化を定量化した．

腎症を予防することを示した本研究は学位に値すると（3）クロマチン免疫沈降法（ChIP assay）を用いて，考える．

転 写 調 節 領 域 へ の CREB，CBP/p300，TORC1〜3，
TFIIB，RNA polymerase 等転写因子の結合，およびヒストンのアセチル化あるいはメチル化を解析した．

【1530】
氏（4）TORC1〜3 の shRNA を発現するレトロウイルス

名（本

籍）

蒋

时

文（中国）

ベクターを EL4-Gax 細胞に感染させ，それぞれの学 位 の 種 類

博士（医学）

遺伝子発現を抑制することで，HTLV-1 転写制御に学

甲おける各 TORC 蛋白の関与を解析した．

位

番

号

第 866 号

学位授与の日付

平成 22 年 3 月 23 日

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当（5）Western blotting 法および免疫染色法を用いて，invivo および ex vivo における TORC2 の発現および細胞内局在の変化を解析した．AMPK の活性につい

学位論文題目ては，活性化型（リン酸化型）AMPK（pAMPK）のInvolvement of TORC2, a CREB co-activator, in
the in vivo-specific transcriptional control of HTLV-1
論文審査委員発現を Western blotting 法にて定量した．

主査（教授）木梨達雄【結果】（教授）薗田精昭 （教授）福原資郎（1）EL4-Gax 細胞を同系マウス腹腔内に接種したところ，ヒト感染個体の場合と同様に，個体内においては Gax の発現が抑制され，ex vivo 培養で発現が再論文内容の要旨

開した．

【目的】

（2）Tax 発現 EL4 細胞ゲノム中の 5'-LTR 領域におけるCpG メチル化は，発現抑制前後で大きな変化が観Human T-cell leukemia virus type 1（HTLV-1）は成人
T 細 胞 白 血 病（ATL） や HTLV-1 関 連 脊 髄 症（HAM/

察されなかった．

TSP）の原因ウイルスであり，日本国内においては約（3）HTLV-1 の転写調節において主要な役割を果たす

110 万人が感染している．HTLV-1 がコードする転写

こ と が 知 ら れ る CREB, CBP/p300 の 転 写 エ ン ハ ン

活性化因子 Tax は，ATL や HAM の発症に重要な役割

サーへの結合およびその結果予想されるヒストンを果たすことが示されているが，感染個体内においてH3 のアセチル化は，いずれも発現抑制前後においはその発現は抑制されている．ところが，感染末梢血て変化が見られなかったにもかかわらず，基本転写を体外（ex vivo）で培養すると短時間で発現が再開す

因子 TFIIB および RNA polymerase のプロモーターることから，個体内においては一過的な発現抑制機構への結合は，転写量と比例して増減していた．

が存在することが想定され，これが未発症感染キャリ（4）CREB と基本転写因子の結合を媒介することが知ア個体における数十年にも及ぶ長い潜伏期を規定するられている，CREB の co-activator TORC（transducer

一因と考えられている．そこで，感染細胞の制御を介

of regulated CREB activity）1〜3 に注目し解析した— 216 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

ところ，個体内では TORC1 および TORC2 の発現が【1531】

減少していた．

氏（5）ChIP assay および shRNA によるノックダウン実験

名（本

籍）

辰

巳

貴美子（大阪府）

か ら，3 種 類 の TORC family 蛋 白（TORC1〜3） の学 位 の 種 類

博士（医学）

なかで TORC2 が EL4-Gax 細胞での HTLV-1 転写調学

甲節に最も重要な役割を果たすことが示された．

学位授与の日付

平成 22 年 3 月 23 日

（6）Gax 発現抑制前後における TORC2 の細胞内局在

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当を解析したところ，in vitro および ex vivo 培養時には学位論文題目

核・細胞質両方に発現が確認されたのに対し，in vivo

位

番

号

第 867 号

Drosophila big brain does not act as a water channel,

においては核での発現が消失した．一方，TORC2 のbut mediates cell adhesion

リン酸化を介して核―細胞質移行を調節することが論文審査委員

主査（教授）木梨達雄

知られる AMP 依存的リン酸化酵素 AMPK の活性を（教授）杉本哲夫 （教授）松田博子

解析したところ，in vivo において活性化されていた．
【考察】
論文内容の要旨

TORC2 は，種々のストレスシグナルや活性化シグナルに応答し，グルコース代謝や神経細胞の記憶調節【はじめに】

等，CREB を介した転写調節における中心的な役割を

ショウジョウバエの神経形成領域発達過程におい果たすことが，近年，明らかとなってきており，感染て，Notch，Delta などの neurogenic 遺伝子は相互作用

個体内における HTLV-1 の発現制御も，これらの調節をしながら機能している．
neurogenic 遺伝子の一つである big brain（以下 bib）と同期していることが強く示唆された．
今後，TORC2 を介して HTLV-1 の発現を調節する

遺伝子は，哺乳類の脳の主要な水チャネルで ある

個々の細胞外刺激の実態を明らかにすることにより，感染キャリア個体内における感染細胞制御による ATL

aquaporin4（以下 AQP4）とアミノ酸配列に高い相同性があることが確認されている．しかし bib の遺伝子発症予防法開発への応用が期待される．

産物である Bib 機能は現在のところ不明である．

なお，本要旨に該当する内容は，Retrovirology, 6: 73,【研究目的】
Bib の機能（水透過性，イオン透過性，細胞接着機

1–16, 2009. に掲載されている．

能）を明らかにする．
【方法】

審査の結果の要旨
Human T-cell leukemia virus type 1（HTLV-1）は，成① bib および AQP4 遺伝子の発現細胞株の作成および人 T 細胞白血病（ATL）や HTLV-1 関連脊髄症（HAM/
TSP）の原因ウイルスであるが，ウイルスの転写を抑免疫染色とビオチンアッセイ
bib 遺 伝 子 あ る い は AQP4 遺 伝 子 の cDNA を L cell

制する機構が in vivo で存在することが知られていた．

（内因性細胞接着機能を有さないマウス皮下結合組織

本研究はウイルスがコードする転写調節因子 Tax と由来細胞）に遺伝子導入し，それぞれの安定発現細胞

GFP の融合遺伝子を HTLV-1 プロモーター LTR 下に発株を確立した（以下，それぞれ Bib-L cell，AQP4-L cell

現するレポーター遺伝子を作成し，それを発現する細と略）．
次に各々の L cell の固定標本を作成し，1 次抗体と胞を用いて，in vivo では LTR 転写活性が抑制される
ことを再現した．LTR プロモーター活性にはメチル化

し て 抗 Bib ま た は 抗 AQP4 抗 体 を，2 次 抗 体 と し て制御ではなく，転写エンハンサーである CREB と co-Alexa Fluor 555 を用いて反応させ，共焦点レーザー顕activator である TORC2 が重要であること，さらに in

微鏡で観察した．Bib-L cell をまずビオチンで，次にvivo での制御には TORC2 の発現低下が関与することアビジンで反応後，その結合蛋白を抗 Bib 抗体で解析を見出し，TORC2 発現調節がウイルスの発現に重要した．

な役割をもつことが示唆された．これらの結果は，長②細胞接着機能評価

い潜伏期間をもつ ATL 発症の解明につながる重要なBib-L cell あ る い は AQP4-L cell を，1×106 個/ml に知見と考えられ，学位に値する成果と考えられる．

調整後，37°C で 60 分間インキュベーションしながら回転させ，グルタルアルデヒドで反応中止後，蛍光顕微鏡で細胞数を計測した．次に transfection していない
L cell を DiI で 標 識，Bib- あ る い は AQP4-L cell を DiO— 217 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨で標識し，DiI と DiO でラベルされた細胞を，1 : 1 で初めて示したが，この bib の細胞接着能がショウジョ

混ぜ合わせ，蛍光顕微鏡で細胞数を計測した．

ウバエの神経形成領域の発達過程に重要な役割を果た③細胞の電気生理学的評価

している可能性が示唆された．

Bib-L cell のイオン透過性を whole cell パッチクラン
プ法により調べた．具体的には，+50 と −150 mV 間のなお，本要旨に該当する内容は FEBS Lett. 583: 2077–
2082, 2009. に掲載されている．

固定膜電位における電流を記録し電圧電流曲線作成し審査の結果の要旨た．

ショウジョウバエの big brain は哺乳類の水チャネル④細胞の水透過性の評価
AQP4 と Bib を transient に発現した COS7 cell を 30 分であるアクアポリン 4 のホモログであり，神経形成領間カルセインに反応させ，等張液を低張液に交換し域の発達過程で必須の働きをしている．辰巳氏は bigて，細胞容積変化に伴うカルセインの蛍光強度を共焦

brain が予想に反して水チャネルとしての機能を持た点レーザー顕微鏡で持続的に測定し，細胞容積変化かず，接着分子として機能しうることを示した．big

ら水透過性を求めた．

brain を発現した L 細胞は膜電位や浸透圧の変化刺激【結果】に応答しなかったが，ヘテロ親和性の細胞間凝集を引① Bib の細胞表面への発現の確認

き起した．これらの結果は神経領域形成過程における免疫染色およびビオチンアッセイで，Bib は L cell

big brain の機能に細胞接着が関与することを示唆し，の細胞膜上に発現していることが確認された．

哺乳類ホモログの機能解明につながると考えられ，学② Bib の細胞接着機能

位に値する研究成果と判断される．

Bib-L cell は，AQP4-L cell 同様，凝集した集団を形成し細胞接着機能を持つことが認められた．また Bib
を介する細胞接着は，ホモ親和性のみならずヘテロ親和性も認められた．

【1532】③ Bib の細胞膜イオン透過性に及ぼす機能

氏

Bib-L cell の電圧電流関係は，control（vector のみ発

名（本

籍）

德

田

貴

則（大阪府）

学 位 の 種 類

博士（医学）

現させた L cell）と差がなかった．すなわち，Bib 特有

学

甲のイオン透過性は認められなかった．

学位授与の日付

平成 22 年 3 月 23 日

④ Bib の細胞膜水透過性に及ぼす機能

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当AQP4 を発現させた細胞では，カルセインの蛍光強

位

番

号

第 868 号

学位論文題目度は素早く減衰した．一方，Bib を発現させた細胞で

Mechanical Characteristics of Composite Knitted

は，control と蛍光強度の変化に優位差は認めず，Bib

Stentsの水透過性は認められなかった．

論文審査委員【考察】
bib は AQP4 とアミノ酸配列に高い相同性があるが，（教授）岩坂壽二 （教授）木原主査（教授）湊直樹
裕

AQP4 の特徴である水透過性は Bib には認められなかった．また，Bib のイオン透過性も確認できなかった．これらの結果は「oocytes に発現させた bib はチ

論文内容の要旨【はじめに】

ロシンキナーゼシグナルによって調節される cation

金属ステントの力学特性はステントのメッシュデザ

channel としての役割を有する」とした既報（Yanochko,

インの他，金属の物性などによって規定される．高い

et al. J Neurosci, 22: 2530–2540, 2002）とは異なる．こ拡張力を有するステントは一般に曲げ変形に対する復の差異は，bib の基本的なチロシンリン酸化レベル，

元性も高い．高拡張力のステントを屈曲した管腔臓器

あるいは，L cell のチロシンキナーゼ活性に起因するに留置すると，曲げ変形時に発生する復元力が組織にものかもしれない．この点を明確にするにはさらなる対して過度の面圧を与える原因となり，潰瘍形成や組研究が必要である．

織穿孔を起こすことがある．また高度の曲げ変形時に一方，今回確認できた Bib のヘテロ親和性接着機能は隣接するストラット同士が接触し，内方に突出するから，Bib は他の膜蛋白あるいは膜脂質を介して相互ように変形するためキンク発生の原因となる．金属ス

作用していると考えられた．

テント金属ステントのこれらの欠点を解決するため

今回我々は，bib が細胞間接着機能を有することを我々は，曲げ剛性の異なる 2 種類の材料を組み合わせ— 218 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

た複合材料編成ステントを作成した．

曲に関連した弾性復元力だけである．従ってステント【研究目的】

全体の曲げ荷重値は低く抑えられたと考えている．

金属線と繊維線を用いて複合材料編成ステントを作

金属材料と繊維材料の複合材料編成ステントは，金成し，その機械的特性を同一構造の金属ステントと比属単一ステントと比較して同等以上の拡張性能を保持較することする一方で，よりすぐれた管腔形状への追従性や耐【研究方法】

キンク性を示す．

直径 0.12 mm のニッケルチタン合金線（Ni-Ti）とポ
リパラフェニレンベンゾビスオキサゾール（PBO）の

なお，本要旨に該当する内容は，Cardiovasc Intervent
Radiol. 32: 1028–1032, 2009 に掲載されている．

multifilament fiber（ZYRON AS ®; TOYOBO, Osaka,
Japan）を，Strecker Stent と同一の編み方で円筒編物審査の結果の要旨とした複合材料編成ステントを 2 種類作成した（N-Z

現在市販の，金属のみで作製されたステントは，留stent）．N-Z stent の Ni-Ti のループ長（L）は L=1.84 mm

置時の屈曲病変への追従性や耐キンク性能がまだ不十（N-Z stent（L=1.84））と L=2.08 mm（N-Z stent（L=2.08））

分であり，長期的な組織障害や，ステント損傷を起この 2 種類とした．比較対照として Ni-Ti のみを用いたしうる．本研究は，金属ステントと同等の内腔保持力

同一 textile pattern の金属ステント N-N stent（L=1.92）

をもち，追従性や耐キンク性に優れたステントの開発を作成した．各々のステントに対し直径方向の面荷重研究であり，ナイチノール金属と PBO（ポリパラフェ（横圧縮荷重），および片端固定したステントに対してニレン ベンゾビス

自由端への直径方向の集中荷重（曲げ荷重）を加え，編み合わせた複合材料ステントを作成した．この新し

ステントの屈曲と荷重値の関係を評価した．また 180

い複合材料ステントと従来の金属単一ステントに関し

度屈曲時のキンク発生状況を肉眼的に評価した．

て，直径方向圧迫時の拡張力，90 度屈曲時の復元力，【結果】

180 度屈曲時の耐キンク性能の比較をした結果，複合

オキサゾール）繊維を 1 対 1 にステント径が 53% 減少した時点での横圧縮荷重値

材料編成ステントは金属単一ステントと同等以上の拡は，N-Z stent（L=1.84） で 6.44N，N-Z stent（L=2.08）

張力を持ち，屈曲部への追従性や耐キンク性能は金属で 6.14N，N-N stent（L=1.92）で 4.96N であり，複合材

単一ステントより優れていた．今後の新しいステント

料編成ステントは金属ステントと同様以上のの荷重値

開発の基礎となる知見を提供しており，学位に値するを示した．また曲げ角度 90 度における曲げ荷重値はと判断した．

N-Z stent（L=1.84）で 0.005N，N-Z stent（L=2.08）で0.003N，N-N stent（L=1.92）で 0.034N であり，複合材料
編成ステントの曲げ荷重値は有意に低かった．さらに複合ステントはループピッチに関係なく曲げ角度 180【1533】

度においても明らかなキンクを発生しなかったが，氏

N-N stent は明らかなキンクを発生し内腔が閉塞した．

学 位 の 種 類

博士（医学）

【考察】

学

甲

名（本
位

番

籍）
号

矢

吹

輝（広島県）

第 869 号

複合編製ステント同士の比較では，ピッチが短いほ

学位授与の日付

平成 22 年 3 月 23 日

うがより荷重値は高値を示した．一方，L=2.08 mm の学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当

複合ステントは L=1.92 mm の単一金属ステントよりも

学位論文題目高い横圧縮荷重値を示した．金属線のピッチが広いに

CpG Oligonucleotides Activate the Immune Response

もかかわらず高い荷重値を示したのは，繊維線の長軸

in Burned Mice

方向の伸縮性が少なく，金属線の変形を妨げたためと

論文審査委員

考える．また，曲げ荷重値に関して複合材料編成ス（教授）薗田精昭 （教授）木梨達雄

主査（教授）岡本祐之

テントは編み密度の類似した単一金属編製ステントと比較して低い値を示し，肉眼的に明らかなキンクも発生しなかった．複合材料編成ステントでは金属ループと隣接するのは繊維ループであり，これらが曲げ変形

論文内容の要旨【はじめに】

時に干渉し合っても後者が容易に変形して反発力が発

熱傷後に認められる免疫抑制状態は敗血症を引き起生しない．また線維線材は曲げ荷重が殆どゼロであこし多臓器不全発生の引き金となるものの，その発生り，曲げ変形時の曲げ荷重の主な原因は金属線材の屈機序には不明な点が多く，有効な治療方法もないのが— 219 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

現状である．本実験ではマウス熱傷モデルを作製し，促進効果を発揮すると推測された．また in vivo，in

熱傷受傷後の免疫能を抗原提示蛋白である MHC classvitro いずれにおいても投与が，脾マクロファージのII 発現や炎症性サイトカイン産生にて観察するととも

MHC class II 発現増加効果を示したことより，CpG オに，免疫刺激物質として知られる CpG オリゴヌクレ

リゴヌクレオチドによるマクロファージ活性化作用がオチドによる免疫賦活効果を検討した．

確認できた．

【研究方法】【まとめ】

熱 傷 マ ウ ス モ デ ル は BALB/c マ ウ ス（雄 8–10 週）

マウスを用いた熱傷モデルでは，脾マクロファージに熱湯スチームを 4 秒間暴露することによって熱傷面

における MHC class II 発現と炎症性サイトカインの産積 20% の全層熱傷を作製した．CpG オリゴヌクレオ生抑制を示したものの，CpG オリゴヌクレオチド投

チドは免疫賦活作用の報告されている CpG1826，な

与によりそれらが改善した．免疫刺激物質である CpG

らびに対照として配列は酷似しているもの免疫賦活作

オリゴヌクレオチドが感染合併症のリスクを有する熱用を有しない CpG1982 を使用した．熱傷後の免疫状態を評価するために受傷後 0, 4, 7, 14, 21 日後にマウス

傷患者の治療に有用である可能性が示唆された．
なお，本要旨に該当する内容は，J Surg Res. 161: 111–

から摘出した脾マクロファージ上の MHC class II 発現118, 2010 に掲載されている．

の変化をフローサイトメトリーにて測定した．さらに
CpG オリゴヌクレオチドの効果を Ex vivo で検討する

審査の結果の要旨

ため熱傷 14 日目のマウスより採取した脾マクロファー

熱傷後に生じる免疫抑制は易感染状態を誘導し患ジと各種濃度の CpG オリゴヌクレオチドを共培養し者の予後を左右する大きな要因となる．本研究はマMHC class II 発現の変化を経時的に観察した．また熱

ウスの熱傷モデルにおける脾臓マクロファージの傷後における炎症性サイトカイン（IL-12. TNFα. IL-6.

MHCclass II の 発 現 と IL-12，TNF-α な ど の サ イ ト カ

IL1β）産生ならびに CpG オリゴヌクレオチドによるイン産生に焦点を当てて，熱傷受傷後に免疫能が抑制効果を検討するため，脾マクロファージに CpG1826

されることを確認した．さらに CpG オリゴヌクレオならびに CpG1982 を添加し共培養した後に上清中のチドがマクロファージ活性作用をもたらし，重症熱傷

サイトカイン濃度を測定した．さらに In vivo におけの治療に有用である可能性を示唆し，学位に値する研る CpG オリゴヌクレオチドの効果を検討するため，究と考えられた．

受傷 4 日目に腹腔内投与し，その 10 日後に脾マクロ
ファージ上の MHC class II 発現を観察した．
【結果】
脾マクロファージ上 MHC class II 発現は熱傷受傷後【1534】

4 日目より低下したことより，受傷後早期より免疫抑氏

制状態に陥ることが観察された．CpG1826 との共培

学 位 の 種 類

博士（医学）

養は MHC class II 発現の改善を示し，熱傷による免疫学

甲抑制に対し有効であった．熱傷後に低下を認めたサイ

学位授与の日付

平成 22 年 3 月 23 日

トカイン産生量は CpG1826 刺激によって速やかに増学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当加した．In vivo における CpG 投与実験においては受

学位論文題目

傷後 14 日目における MHC class II 発現の低下が抑制

名（本
位

番

籍）
号

小

薮

雅

紀（岡山県）

第 870 号

Analysis of regulatory T cells and IgG4-positive

された．

plasma cells among patients of IgG4-related【考察】sclerosing cholangitis and autoimmune liver diseases

マクロファージの抗原提示能は T 細胞増殖や B 細論文審査委員

主査（教授）權

胞の抗体産生などにも影響するため MHC class II 分子（教授）池原進 （教授）木梨達雄

雅憲の発現は適切な免疫応答に必須である．本実験より熱
傷受傷後に脾マクロファージにおける MHC class II 発
現とサイトカイン産生低下をきたすことが観察され，このような免疫抑制が感染を助長し敗血症時の多臓器

論文内容の要旨【研究目的】不全の発生に関与していると考えられた．CpG オリ

自己免疫性膵炎（autoimmune pancreatitis: AIP）は，

ゴヌクレオチド投与による炎症性サイトカイン産生の膵腫大と主膵管の狭細像を呈し，血清 IgG，IgG4 の上亢進が，自然免疫活性化効果や Th1 リンパ球への分化

昇や自己抗体の出現など，その発症に自己免疫機序の— 220 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文

関与が疑われる膵疾患である．本症には膵以外の臓器内容の要旨および審査の結果の要旨計測することは有用であると考えられた．

病変（硬化性胆管炎，硬化性唾液腺炎，後腹膜線維症

Robinson らは，高濃度の抗原が曝露されると Th2 反など）を合併することがあり，全身性疾患である可能

応が抑制され Th1 優位の反応に切り替わり，その結果性も指摘され，IgG4 関連硬化性疾患などの概念も提IL-10 産生制御性 T 細胞が増加し，産生された IL-10

唱されている．膵外病変のなかでも硬化性胆管炎は高が B 細胞の IgG4 クラススイッチを促すと報告してい率に合併し，原発性硬化性胆管炎（primary sclerosing

る．今回 IgG4-SC において IgG4 と Foxp3 の陽性細胞

cholangitis: PSC）と類似の画像所見を呈する．そのた数に正の相関が認められたことは，Tregs の増加がめこの IgG4 関連硬化性胆管炎（IgG4-related sclerosing

IgG4 陽性細胞の浸潤に関与している可能性があり，cholangitis: IgG4-SC）と PSC の区別が臨床的に問題とまた PSC, AIH, PBC では相関が認められなかったことなるが，その病態については未だ不明な点が多い．

より，これらの疾患においては Tregs の機能が IgG4-

近年，様々な自己免疫性疾患の発症に制御性 T 細胞
（regulatory T cells: Tregs）が，関与していることが数多

SC のものとは異なる可能性が示唆された．
なお，本要旨に該当する内容は，J Gastroenterol. 45:

く報告されている．そこで今回我々は，IgG4-SC と自732–741, 2010 に掲載されている．

己免疫性肝疾患について免疫組織学的検討を行った．
【研究方法】

審査の結果の要旨

今回我々は IgG4-SC 患者の 16 症例を肝内胆管に病

新規疾患概念の IgG4 関連硬化性胆管炎（IgG4-SC）

変があるタイプ（Intra）と病変部が肝外胆管のみのは原発性硬化性胆管炎（PSC）との鑑別が問題となり，タイプ（Extra）に分け，Intra の 8 例を PSC 患者 26 例，

病態にも不明な点が多い．申請者は各種自己免疫性肝

自己免疫性肝炎（autoimmune hepatitis: AIH）患者 9 例，

疾患を対象に IgG1, IgG4, FoxP3 に対する免疫組織学

原発性胆汁性肝硬変症（primary biliary cirrhosis: PBC）

的検討を行い，IgG4 陽性細胞/IgG1 陽性細胞比の上昇

患者 9 例の肝組織で免疫組織学的な検討を行った．抗が IgG4-SC の補助診断となりうること，また制御性 T

IgG1 抗 体， 抗 IgG4 抗 体， 抗 Foxp3 抗 体（Tregs の 特細胞による IgG4 産生制御機構の存在を示唆し，学位

異的転写因子）にてそれぞれ免疫染色を行い，各々のに値すると考えられた．

陽 性 細 胞 数 と 単 核 球 数 と の 比 率（IgG1/Mono, IgG4/
Mono, Foxp3/Mono）を計測した．
【結果】
IgG4 陽性細胞数と単核球数との比率（IgG4/Mono）【1535】

は IgG4-SC が他の自己免疫性肝疾患（PSC, AIH, PBC）

氏

名（本

籍）

大

重

英

行（大阪府）と 比 較 し て 有 意 に 高 く，IgG1/Mono は 逆 に IgG4-SC

学 位 の 種 類

博士（医学）

で は 低 値 で あ っ た．IgG4/Mono と IgG1/Mono の 比 率学

甲（IgG4/G1） は IgG4-SC が PSC, AIH, PBC と 比 較 し て

学位授与の日付

平成 22 年 3 月 23 日

有 意 に 高 く，IgG4-SC の み が 1 以 上 の 値 で あ っ た．

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当Foxp3/Mono では PBC が IgG4-SC, PSC と比較して有意

学位論文題目位番

号

第 871 号に 高 く，IgG4-SC と PSC で は IgG4-SC の 方 が PSC よFlow cytometric analysis for the mechanism of the new

り有意に高値であった．また，IgG4-SC 患者でのみ，

antineoplastic agent temozolomide in glioma cells

IgG4/Mono と Foxp3/Mono の正の相関（R=0.75）が認

論文審査委員

主査（教授）螺良愛郎

められた．

（教授）中邨智之 （教授）日下博文【考察】
IgG4-SC と PSC は臨床像が大きく異なる．IgG4-SC
は PSC と異なりステロイドに良好な反応を示し，予後が良好であるため両者を正確に鑑別する必要があ

論文内容の要旨【研究目的】

る．今回の検討において，IgG4/Mono と IgG1/Mono の

悪性神経膠腫の本邦での治療薬として，2006 年 7

比 率（IgG4/G1） は IgG4-SC が PSC, AIH, PBC と 比 較

月本邦で 20 年ぶりに神経膠腫の新規治療薬である

して有意に高く，IgG4-SC のみ値が 1 以上であった．

temozolomide が承認された．temozolomide は，内服可

このことは IgG4-SC では IgG4 陽性細胞数が IgG1 陽性

能な第 2 世代のアルキル化剤で世界的にも悪性神経膠細胞数より多いことを示しており，IgG4-SC と PSC と腫の標準治療薬となりつつあり，注目されている．その鑑別において IgG4 陽性細胞数と IgG1 陽性細胞数をの作用機序に関しては，まだ十分に解明されていな— 221 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

い．今回我々は，神経膠腫の cell line である U87MG,

TMZ 500 μg/ml 投与群では 1〜4 日目で有意な集積を

U373MG, 9-LMG を用いて FCM（flow cytometry）にて，認めた．その後 4〜5 日目は G2M 期に細胞の集積傾

その殺細胞効果，作用機序について検討した．

向を認め，特に TMZ 200 μg/ml 投与群では 5 日目，【材料と方法】

TMZ 500 μg/ml 投与群では 4，5 日目に有意な集積を実験方法認めた．9-LMG でも 2〜3 日目に S 期への集積を認

ヒ ト glioma 株 化 細 胞 で あ る U373MG 株 化 細 胞，め，その後は G2M 期に集積を認めた．U87MG でも

U87MG 株化細胞とラット glioma 株化細胞である 9-同様に 2 日〜3 日目に S 期への集積傾向を認め，そLMG 株化細胞のそれぞれにつき control 群，effectiveの後 G2M 期に集積を認めた後，8 日目，9 日目にdose 50（ED50）に近い中等度 TMZ 投与群（100〜250

subG1 期に集積を認めた．

μg/ml），高度 TMZ 投与群（300〜500 μg/ml）投与群を（3）U87MG で観察された 8 日目，9 日目の subG1 期の作 成 し た． 投 与 当 日 を 1 日 目 と し 2，3，4，5 日 目 に細胞を形態的に観察すると核の泡沫状変化を認め，cell count を行なった．U87MG では 8 日目，9 日目の

TUNEL 染色では陽性でアポトーシスが示唆された．

細胞数もカウントしそれぞれの FCM によるヒストグ【考察】

ラム解析を 7-AAD と BrdU の 2 重染色を行ない解析しTemozolimide は摂取後，速やかに加水分解・脱炭酸

た．通常のヒストグラムは 1 種類の色素のみで DNAを受け，DNA メチル化作用をもつ 5-（3-methyltriazen-

を染めることで描かれるが，2 種類の色素で染める事

1-yl）imidazole-4-carboxamide（MITC） に 変 換 さ れ る．

により 3D 表示が可能である．これにより，2 次元分

これにより主にグアニン O6 位にメチル化を起こし細析では一見わからない S 期の増加を視覚的に認識する

胞毒性を発揮する反応を引き起こす．

ことが可能となる．

様々な機序により形成された DNA 障害に反応して，培養方法

細胞は細胞周期を停止する機構を各細胞周期に持ってdMEM に gentamycin（5%）を加えた液体をシャーおり，これをチェックポイントという．各細胞周期に

レボトル内に満たし培地とした．開始細胞数は 5×105

対応して，G1 期，S 期，M 期，G2 期チェックポイント

からで cell line は U373MG（human），U87MG（human），と呼ばれ，様々な抗癌剤により，作用機機序は異なる．

9-LMG（rat） の 3 系 統 を 用 い た．Temozolomide は 蒸

細胞種により異なるという意見もあるが，我々の行

留 水 に て 溶 解 し て 速 や か に 投 与 し た． 培 養 は CO2なった実験ではいずれの細胞株でも同様の傾向がみら

incubator を用いて 37°C，CO2 5.0% を保持し行なった．

れ，特に BrdU を用いて S 期のブロックを鋭敏に観察

細胞周期の測定することができた．そして，U87MG 株化細胞に限っ測定器機として BD 社の FACS calibur を用いた．統計学的解析には統計解析ソフトである Stat Mate III をて の 観 察 で あ る が，8 日 目 に ア ポ ト ー シ ス を 示 す
SubG1 期への集積がみられた．

用い，χ2 乗検定を行った．そして，P 値 < 0.05（*），P

以上より temozolomide の flow cytometry 法による作

値 < 0.001（**）で有意差ありとした．細胞周期に関し

用機序解析の結果としては S 期，G2M 期の両方に経ては FCM により得られたヒストグラムを G0G1 期，S時的に細胞周期ブロックを認めた．また 8 日目には期，G2M 期に分割し，それぞれの細胞周期にある細SubG1 期への集積傾向もみられアポトーシスの関連性

胞比を検討した．7AAD と BrdU から得られた dot gramも示唆された．

から gating を行ない，G0G1，S，G2M 期の細胞比を算出

Temozolomide の主要な作用は今迄，血液系の細胞した．

でなされてきたが，その作用機序は主にアポトーシス【結果】であると報告されてきた．しかし，グリオーマ細胞に（1）TMZ による増殖抑制：U373MG では 250〜500 µg/ml

おいては主に細胞周期停止によるものであることが明で，U87MG や 9-LMG では 100〜400 μg/ml で 50% 程らかになってきており，我々の実験もそれを支持する

度の殺細胞効果を認めた．U373MG では，5 日目でものであった．

TMZ 200 μg/ml と 500 μg/ml 投与群で有意な細胞数

特に temozolomide に関して，今迄に 7AAD，BrdU を

減 少 を 認 め た．9-LMG で は 3 日 目 以 降 で TMZ

用いて 2 重染色を行ない 3D 表示することでより明瞭

100 μg/ml 投与群と 400 μg/ml 投与群で有意な細胞数に描出した論文は他になく，特に S 期のブロックを鋭減少を認めた．

敏に観察する意味でも意義があったと考えられた．

（2）TMZ の細胞周期への影響を FCM により解析：【結語】

U373MG では 2〜4 日目に G0G1 期から S 期への集積

temozolomide をグリオーマ株化細胞である U87MG，

傾 向 が あ り，TMZ 200 μg/ml 投 与 群 で は 4 日 目 で

U373MG，9-LMG を作用させ，その作用機序を flow

— 222 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文cytometry にて評価した．早期の S 期のブロックと，

内容の要旨および審査の結果の要旨【研究方法】

その後の G2M 期のブロックを認め，それを 7AAD とまず，DC1 を誘導するために，BALB/c の骨髄細胞

BrdU を用いて 2 重染色を行なうことでより明瞭に解（BMC） を GM-CSF と 共 に 培 養 し，DC type0（DC0）析できた．2 重染色法は視認性に優れ，flow cytometryを誘導した後，さらに，DC0 を IL-12，IFN-γ と共に培法は抗癌剤の作用機序を解析するのに有用であった．

養した．このようにして誘導された BMC 由来の DC0，

これらの解析により，より効率的な集学的治療が期待

DC1 を，不活化センダイウィルス（HVJ-E）を用いて，される．

20 Gy の放射線照射を行った Meth A とで，融合細胞をなお，本要旨に該当する内容は，Brain Tumor Pathol.
27: 7–15, 2010 に掲載されている．

作製した．この後，Meth A を皮下接種した BALB/c マ
ウスに，BALB/c の骨髄由来の DC1 を投与した（DC1単独）群と，BALB/c の骨髄由来 DC1 と放射線照射さ審査の結果の要旨れた Meth A（r-Meth A）の融合細胞を投与（皮下注射）

悪性神経膠腫の治療薬として，最近新薬として開発した（融合細胞）群を作成し，腫瘍発育，生存率，生された temozolomide は，世界的に使用されつつある

存期間について検討した．また，Meth A を静脈内投が，その抗癌作用機序解析を試みた．TMZ について，与し，肺転移モデルを作成し，同様の治療を行い，生3 種 類 の 神 経 膠 腫 の cell line を 用 い て flow cytometry

存率，生存期間，肺転移巣効果を検討した．

（FCM）にて，7-AAD と BrDU の二重染色法により，細【結果】胞周期を解析し，その作用機序が早期の S 期と G2M

Meth A 皮下接種実験では，DC0，r-Meth A，DC0 と期のブロックによる抗腫瘍効果であることを明らかに

Meth A の融合細胞，DC0 と r-Meth A の融合細胞を投した．この解析は，今後のより効果的な集学的治療の与（皮下注射）したが，DC0，r-Meth A は，わずかに腫応用への一助となることが期待でき，学位に値すると

瘍の発育抑制効果がみられ，DC0 と r-Meth A の融合考えられた．

細胞は，さらに，腫瘍の発育抑制効果がみられたが，いずれも未治療群との有意差は認めなかった．DC0と Meth A の融合細胞に至っては，全く腫瘍の発育抑制効果がみられず，投与部位に，腫瘍の形成が見られ【1536】
氏

た．従って，次に，DC1 を使用した Meth A 皮下接種

名（本

籍）

矢

内

勢

司（大阪府）

実験を行った．未治療群，DC1 単独群に比べ，DC1

学 位 の 種 類

博士（医学）と r-Meth A の融合細胞群が有意に腫瘍の発育抑制効

学

甲第 872 号果がみられた．しかしながら，生存期間については，

学位授与の日付

平成 22 年 3 月 31 日

未治療群に比べ，延長効果を認めたにもかかわらず，

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当DC1 単独群と比べると，DC1 と r-Meth A の融合細胞

位

番

号

群は，有意な延長効果は認めなかった．

学位論文題目Anti-tumor effects of fusion cells of type 1 dendritic

肺転移モデルにおいては，DC1 と r-Meth A の融合

cells and Meth A tumor cells using hemagglutinating

細胞群は，未治療群，DC1 単独群に比べ，有意に生virus of Japan-envelope

存期間の延長効果が見られた．肺転移巣に関しても，

論文審査委員

主査（教授）福原資郎

DC1 と r-Meth A の融合細胞投与では転移抑制効果が（教授）螺良愛郎 （教授）薗田精昭

みられた．今回使用した DC1，DC1 と r-Meth A の融合 細 胞 の 作 用 機 序 を RT-PCR を 用 い て 検 討 し た が，
DC1 は，IFN-γ, IL-12 など Th1 サイトカインだけでな

論文内容の要旨

く，IL-4, IL-10 など Th2 サイトカインも発現しており，【背景及び研究目的】

DC1 と r-Meth A の融合細胞においても，同様だが減樹状細胞（DC）は，強力な T 細胞活性化能を有す

弱した結果を示した．IL-4 の発現に関しては，1 h 培る抗原提示細胞（APC）であり，現在，悪性腫瘍の治養後で増強しており，担癌宿主への投与後の増強が示療として，DC を用いた免疫療法が注目を集めている．

唆された．又，Meth A 細胞における TGF-β の mRNA

今回，我々は，骨髄由来の DC type1（DC1）と放射線の発現はみられず，TGF-β の Meth A の増殖における照射を行った Meth A（マウス線維肉腫細胞株）を融

関与は，否定的であった．

合させ，皮下投与し，抗腫瘍効果を検討した．

【考察】
DC1 と放射線照射処理を行った悪性腫瘍細胞との— 223 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

融合細胞投与は，腫瘍の発育を抑制し，生存期間を延をレシピエントの静脈内に投与し，投与された細胞は長させうると考えられた．また，我々の実験では，誘流血に乗り骨髄に達するのを期待しているのに対し導された DC1 は，Th1 サイトカインだけでなく，Th2て，骨髄内骨髄移植では，ドナーの骨髄細胞を直接にサイトカインも発現し，さらに，DC1 と放射線照射

レシピエントの骨髄内に注入するために，ドナーの骨処理を行った悪性腫瘍細胞との融合細胞は，担癌宿主髄細胞を効率よくレシピエントの骨髄内に投与可能で投与後に Th2 サイトカインを増強することが示唆されある．ところが，骨髄は血管が豊富であるため，骨髄た．以上より，Th2 サイトカインの抑制と Th1 サイト内に投与されたドナー骨髄細胞の一部は末梢血中に流カインの増強がさらなる抗腫瘍効果の発現に必要であ出する．
本研究で用いたコラーゲン・ゲルは，in vitro での 3

ると考えられる．
なお，本要旨に該当する内容は，Int J Oncol, 35: 249–

次元培養のために開発されたゲルであり，4°C では液体であるが温度を上げるとゲル化する．今回の研究で255, 2009 に掲載されている．

は，IBM-BMT を行う時に，このコラーゲン・ゲルを審査の結果の要旨

用いてドナー骨髄細胞をレシピエントの骨髄内により

本研究は骨髄由来樹状細胞（DC）とマウス線維肉

多く保持することを試み，またその造血に対する効果

腫細胞株を不活化センダイウイルスを用いて融合細胞を検討した．

を作成し，その抗腫瘍効果を検討したものである．マ【研究方法】

ウスに皮下接種された腫瘍細胞の増殖は，融合細胞治

1．コラーゲン・ゲルを用いた骨髄移植法

療群において未治療群と DC 単独群に比し優位に抑制

ドナー骨髄細胞を PBS あるいはコラーゲン・ゲル

され，宿主の生存期間は DC 単独治療群とほぼ同じ延に 4°C で浮遊させ 37°C に暖めた後，レシピエントマ

長効果を示した．肺転移モデルでは未治療群と DC 単

ウスの脛骨骨髄内に 10 μl 投与した．

独群に比し優位に生存期間の延長を示した．本研究2．ドナー骨髄細胞のレシピエント骨髄内への保持効は，腫瘍細胞と DC との融合細胞におけるワクチン効

果の検討

果の有用性を示したものであり学位に値する．

前日に 10 Gy の放射線を照射したレシピエントである C57BL/6 マウス（B6 マウス）に PBS あるいはコラー
ゲン・ゲルに浮遊させた eGFP-Tg マウスの骨髄細胞（107 cells/10 μl）を投与し，1 時間後に屠殺，レシピエン
ト骨髄内のドナー骨髄細胞の割合を検討した．

【1537】
氏

名（本

籍）

石

明（中国）

学 位 の 種 類

博士（医学）

学

甲

位

番

号

3．day 12 colony-forming units in spleen（CFU-S）assay
前日に 9 Gy の放射線照射を行った B6 マウスに 105

第 873 号個の eGFP-Tg マウスの骨髄細胞を投与し 12 日後に屠学位授与の日付

平成 22 年 3 月 31 日

殺し，脾臓に形成された造血コロニーをカウントした．

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当

4．骨髄移植後長期間の観察

学位論文題目

前 日 に 7 Gy の 放 射 線 照 射 を 行 っ た B6 マ ウ ス にIntra-Bone Marrow Injection of Donor Bone Marrow

eGFP-Tg マウスの骨髄細胞（106 cells/10 μl）を投与し，Cells Suspended in Collagen Gel Retains Injected

1 ヶ月後，100 日後の末梢血におけるドナー造血系細Cells in Bone Marrow, Resulting in Rapid胞の割合を検討した．

Hemopoietic Recovery in Mice

【結果】

論文審査委員

主査（教授）薗田精昭

1． コ ラ ー ゲ ン・ ゲ ル を 用 い た IBM-BMT は 従 来 の（教授）木梨達雄 （教授）福原資郎

IBM-BMT と比較して，より多くのドナー骨髄細胞をレシピエント骨髄内に保持することが可能であった．

論文内容の要旨

IBM-BMT 後 1 時間でレシピエントマウスを屠殺【はじめに】

し，ドナー骨髄細胞を注入した脛骨のドナー骨髄細骨髄移植は血液疾患，免疫不全疾患，自己免疫疾患

胞の割合を検討したところ，コラーゲン・ゲルを用の治療として広く行われている．我々は最近，効率のいた IBM-BMT では PBS を用いた IBM-BMT と比較

よい骨髄移植法である骨髄内骨髄移植法（IBM-BMT

して，より多くのドナー骨髄細胞が認められた．

法）を開発した．従来の骨髄移植が，ドナー骨髄細胞

2．コラーゲン・ゲルを用いた IBM-BMT では PBS を— 224 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨用いた場合と比較して，より高い造血活性が認められた．

【1538】

day 12 CFU-S は，造血系の非常に未熟な前駆細胞

氏

名（本

籍）

今

井

雄一郎（滋賀県）の造血活性を反映するとされているので，day 12

学 位 の 種 類

博士（医学）CFU-S アッセイを行い，コラーゲン・ゲルあるいは学

甲PBS を用いた IBM-BMT の造血活性を検討した．コ

学位授与の日付

平成 22 年 3 月 31 日

ラーゲン・ゲルを用いた IBM-BMT の方が PBS を用

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 1 項該当いた IBM-BMT よりも多くのコロニー形成が認めら

学位論文題目

れた．

位

番

号

第 874 号

Caspase Inhibitor, ZVAD-fmk, Facilitates Engraftment

3．コラーゲン・ゲルを用いた IBM-BMT ではドナー

of Donor Hematopoietic Stem Cells in Intra-Boneの造血活性の増強は長期間保持される．

Marrow-Bone Marrow Transplantation

骨髄移植 1 日前にレシピエントに対し 7 Gy の放論文審査委員射線照射を行い，移植 1 ヶ月後あるいは 100 日後の主査（教授）薗田精昭（教授）木梨達雄 （教授）福原資郎

末梢血におけるドナー由来造血系細胞の割合の検討を行った．コラーゲン・ゲルを用いて IBM-BMT を行った群では PBS を用いた群と比較して，1 ヶ月後，100 日後共に，多数のドナー由来白血球が認められ++論文内容の要旨【研究目的】+

た．また，CD3 細胞，B220 細胞，Gr-1 細胞のいず

効率良く骨髄移植を行うためにはドナーの造血幹細れの分画においても多数のドナー由来細胞が認めら

胞活性をいかに維持するかが重要である．関西医科大

れた．

学

【考察】

病理学

第一講座では，骨髄内骨髄移植（Intra-

Bone Marrow-Bone Marrow Transplantation; IBM-BMT）

IBM-BMT は従来の骨髄移植と比較して非常に有効を開発し，それがドナー造血幹細胞の速やかな回復，な骨髄移植法であるが，骨髄内に投与された骨髄細胞

骨髄移植の前処置である放射線照射量の減量や移植片の一部は末梢血中に漏出する．コラーゲン・ゲルはこ対宿主病の発症率減少／軽症化につながることを報告の漏出を抑制するために有効であり，ドナー骨髄細胞

してきた．

の，より効率的な移植が可能であった．その結果として，より高いドナーの造血活性が認められた．

apoptosis は細胞自らが DNase を活性化し，DNA を断片化することによって誘導される細胞死であるが，我々が用いたコラーゲン・ゲルは，ブタのアキレス

donor 骨髄細胞における apoptosis は骨髄移植の成功率

腱から作られたものであり，ヒトにこの方法が直接応を低下させる可能性があると考えられる．apoptosis に用可能かどうかは不明であるが，ドナー骨髄細胞をレおける DNase 活性化の前段階として caspase が活性化

シピエントの骨髄内により多く留めることは，骨髄移される．したがって caspase 阻害剤による donor 骨髄細植に有効であると考えられるため，さらに，より有効胞の apoptosis 抑制は，IBM-BMT におけるドナー造血で安全な方法を開発することが必要と考えられた．

系細胞の生着率を改善する可能性が考えられる．

なお，本要旨に該当する内容は，Stem Cells. 26: 2211–

そこで本研究では広域 caspase 阻害剤・ZVAD-fmk
を併用した IBM-BMT と併用しない IBM-BMT におけ

2216, 2008. に掲載されている．

る donor 骨髄細胞の生着率を比較検討した．
審査の結果の要旨【方法】

骨髄内骨髄移植法は，従来の骨髄移植法（骨髄細胞1．in vivo における検討を静脈内に投与する）に比べて格段に効率的な移植方

IBM-BMT の donor を C57BL/6 マ ウ ス と し recipient法である．しかし，骨髄は血管が豊富なことから，骨を BALB/c マウスとする同種移植の系を用いた．実験

髄内に投与された骨髄細胞の一部は末梢血中に流出す群は以下の 5 群とした．①群：放射線照射のみ，②る．本研究は，コラーゲン・ゲルがこの流出を有意に群：通常の IBM-BMT のみ，③群：IBM-BMT に加え，抑制し，レシピエント造血組織において，従来の骨髄ZVAD-fmk を day-1 に donor へ投与，④群：IBM-BMT

移植法よりも高いドナー由来造血活性をもたらすことに 加 え，day 0 に ZVAD-fmk を recipient へ 1 回 投 与，を明らかにしている．以上より，医学的に価値ある研⑤群：IBM-BMT に加え，day 0 と day 3 の 2 回，ZVAD-

究と認められる．

fmk を recipient に投与．
いずれの群においても recipient に対しては day-1 に— 225 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文7 Gy の放射線照射を行い，①群以外の群では day 0 に
5

内容の要旨および審査の結果の要旨の 結 果，ZVAD-fmk の in vivo 投 与 に よ り day12 CFU-S

1×10 個のドナー骨髄細胞を用いて IBM-BMT を行っの増加，レシピエント骨髄中のドナー由来細胞の増た．そして day 12 に recipient を屠殺し，colony-forming

加，移植 1 ヶ月後の末梢血キメリズムの改善を認めてunits in spleen（CFU-S）数，および骨髄細胞中の donor

いる．ZVAD-fmk の in vitro 処理により，マウス骨髄細胞の割合を検討した．

由来 KSL 細胞分画の apoptosis の割合が減少したことさらに，移植 1 ヶ月後の末梢血での donor 造血細胞

か ら， 間 接 的 で は あ る が ZVAD-fmk に よ る マ ウ スの割合に関しても検討を加えるため以下の実験を行っ

HPC の apoptosis の抑制が示唆された．本研究は，骨た．②群，⑤群において recipient に対しては day-1 に髄内骨髄移植における caspase 阻害剤の有用性を示唆

7

6 Gy の放射線照射を行い，day 0 に 1×10 個のドナーした点で価値ある研究と認められる．

骨髄細胞を用いて IBM-BMT を行った．
2．in vitro における検討
培養した全骨髄細胞および c-kit+/Sca-1+/lineage- cells（KSL cells）を用いて ZVAD-fmk の apoptosis に及ぼす

【1539】

影響を検討した．

氏

名（本

【結果】

学 位 の 種 類

博士（医学）

1． 未 熟 な 造 血 前 駆 細 胞 の 造 血 活 性 の 指 標 で あ る

学

乙

位

番

籍）
号

松

矢

浩

暉（大阪府）

第 667 号

CFU-S の検討では，②群のコロニー形成が平均 1.7

学位授与の日付

平成 21 年 5 月 26 日

個 で あ っ た の に 対 し， ③〜 ⑤ 群 で は 4 個 以 上 と学位授与の要件

学位規則第 5 条第 2 項該当ZVAD-fmk 使用群においてコロニー形成の増加が認

学位論文題目められた．なお①群ではコロニー形成は認められなRegenerative effects of transplanting autologous

かった．

mesenchymal stem cells on corticosteroid-induced

2．recipient 骨髄における donor 由来造血系細胞の割合

osteonecrosis in rabbitsは，①群：0%，②群：25% であったのに対し，③

論文審査委員群：41%，④群：33%，⑤群：50% と ZVAD-fmk 使（教授）池原主査（教授）福原資郎
進 （教授）薗田精昭

用群において donor 由来細胞の増加が認められた．
3．移植 1 ヶ月後の末梢血では，ZVAD-fmk を用いた群において，用いなかった群に比して，donor 造血細胞は高い割合を示した．

論文内容の要旨【はじめに】

4．培養細胞においては，ZVAD-fmk は全骨髄細胞の骨髄移植や臓器移植，自己免疫疾患，脊髄損傷など

apoptosis を僅かに抑制し，KSL cells に対しては有に対しステロイド剤は非常に有益な治療薬である．し意に apoptosis を抑制した．

かしながらステロイド投与には重篤な副作用があり，【考察】

特に大腿骨頭壊死症は重大な合併症の一つである．大caspase 阻害剤・ZVAD-fmk は未熟な造血前駆細胞の腿骨頭壊死の発生には血栓や脂肪塞栓，血管炎，髄内apoptosis を抑制し recipient における donor 造血細胞の血腫など多くの発生要因があり，現在のところ骨頭壊造血促進を誘導し，IBM-BMT における生着促進効果

死の発生を予防する方法はなく，また，発生後は外科をもたらした．この効果は長期に認められた．また，的加療になることが多い．

悪性腫瘍等の重大な副作用は，移植後 6 ヶ月まで認め

骨髄細胞は造血系幹細胞だけでなく骨芽細胞や内皮られなかった．したがって donor 造血系細胞のアポ細胞にも分化する間葉系幹細胞も含まれており，この

トーシス抑制による生着率改善法は，ヒトの骨髄移植

間葉系幹細胞は骨形成や血管新生に重要な役割を果たにも適応できる可能性が示唆された．
なお，本要旨に該当する内容は Stem Cells Dev. 19:

している．今回われわれはメチルプレドニゾロン（以461–468, 2010 に掲載されている．

たステロイド誘発性骨壊死家兎の長管骨に培養した間

下，MPSL）を投与することにより骨壊死を発生させ葉系細胞移植を行い再生のメカニズムを解析した．

審査の結果の要旨【研究方法】

本研究は，caspase 阻害剤 ZVAD-fmk による骨髄移生後 28〜32 週齢の雌日本白色家兎（3〜4 kg）を用植効率とマウス造血前駆細胞（HPC）の apoptosis 抑制

い，20 mg/kg の MPSL を 左 大 殿 筋 に 筋 肉 注 射 し た．

効果について，in vitro 及び in vivo で検討している．そMPSL 投与後 2 日目に左大腿骨より自家骨髄細胞を採— 226 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文取し，それらを 5 日間培養し間葉系細胞を採取した．

内容の要旨および審査の結果の要旨

cell cycle の G0/1 期の割合は上昇する．今回，MPSL

実験系は以下の 3 グループを作成した：（1）MPSL 単

alone 群と MPSL+saline 群の G0/1 期は正常骨髄細胞に独投与群（MPSL alone 群），（2）MPSL 投与後 7 日目に，比べ有意に高値であり，一方 MPSL+MCs 群では正常

間葉系細胞（1×107/2 ml）を右大腿骨骨髄腔内に移植と同程度であった．以上よりステロイド投与により骨した群（MPSL+MCs 群），（3）MPSL 投与後 7 日目に，髄細胞の増殖能が低下し，間葉系細胞を移植すること

生理食塩水（2 ml）を右大腿骨骨髄腔内に移植した群に骨髄細胞の増殖能が回復したと考えられた．

（MPSL+ saline 群）．

以上の所見よりステロイド誘発性骨壊死に対し培養評価項目は以下の 4 項目を行った．
（1）骨壊死の評

間葉系細胞を直接骨髄内に移植する効果として，①骨価として HE 染色を行い，骨壊死発生率を比較した．

髄内圧上昇の阻害，②虚血性変化とアポトーシスの抑（2）虚血性変化の評価として VEGF 染色を行った．
（3）

制効果，③間葉系細胞による骨髄細胞の活性化が考えアポトーシスの評価として TUNEL 染色を行った．
（4）
骨髄細胞活性を評価するために flow cytometory を用いられた．予防および治療がなされたものと考えられた．
なお，本要旨に該当する内容は，Mod Rheumatol. 18:て cell cycle の G0/1 期の割合を評価した．

132–139, 2008 に掲載されている．

統計学的有意差については，χ2 検定と Student’s t 検定を用いて行い，危険率 5% 未満をもって有意差とし審査の結果の要旨

た．

ステロイド療法に好発する大腿骨頭壊死の原因は不【結果】

明であり，壊死から生じる骨折は患者の ADL を損な（1）骨壊死の発生率は MPSL alone 群が近位，遠位とう．本研究は，ステロイド誘発性骨壊死家兎において，もに 53.3% であり全体では 80% に骨壊死を認めた．

自家骨髄細胞の骨髄内移植と同様に，自家骨髄由来のまた MPSL+ saline 群では近位，遠位ともに 47.4% で間葉系培養細胞の骨髄内移植が骨壊死を予防することあり全体では 68.4% に骨壊死を認めた．一方 MPSLを明らかにした．同時に，ステロイド誘発骨壊死発生+MCs 群では骨壊死は認められず，骨死発生率は有のメカニズムを検討している．この研究成果は，直ち意に低下していた．

に臨床応用可能であり，予防法の確立に資するもので（2）VEGF 染色による虚血性変化の評価では MPSL

学位に値する．

alone 群，MPSL+saline 群では陽性部位を多く認めたが，MPSL+MCs 群ではほとんど認められなかった．
（3）TUNEL 染色によるアポトーシスの評価も MPSL
alone 群，MPSL+saline 群では陽性部位を多く認めた【1540】

が，MPSL+MCs 群ではほとんど認められなかった．

氏（4）cell cycle の評価では，G0/1 期の割合は MPSL alone

名（本

籍）

鉢

嶺

大

作（大阪府）

学 位 の 種 類

博士（医学）

群で 70%，MPSL+saline 群で 68% であり，正常骨髄学

乙細胞の 63.5% より有意に高値であった．一方，MPSL

学位授与の日付

平成 21 年 9 月 29 日

+MCs 群 で は 63% で あ り，MPSL alone 群 や MPSL+

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 2 項該当

saline 群に比べ有意に低下しており，正常骨髄細胞

学位論文題目G0/1 期とほぼ同程度であった．

位

番

号

第 668 号

Involvement of Smad3 phosphoisoform-mediated【考察】

signaling in the development of colonic cancer in

今回我々の実験では MPSL alone 群の骨壊死発生率

IL-10-deficient miceは 80% に 対 し て，MPSL+saline 群 は 68.4% と 低 値 で論文審査委員

主査（教授）螺良愛郎

あった．これは注入する際に作成した骨孔から骨髄内（教授）伊藤誠二 （教授）權

雅憲

圧が減少し骨壊死の発生率が低下したものと考えられた．しかし saline を注入しても骨壊死発生率は高値であったが，MPSL+MCs 群では骨壊死発生率は 0% で

論文内容の要旨あった．特殊染色において骨髄内の虚血性部位やアポTGF-β は細胞の分化，分裂，motility，死を調節する

トーシス部位は MPSL alone 群と MPSL+saline 群に多多機能な蛋白である．特に腸管においては，TGF-β はく認められたが，MPSL+MCs 群ではほとんど認めら

大腸上皮粘膜の細胞増殖を tumor suppressor として抑れなかった．

制の働きをするだけではなく，免疫細胞の負の調節に

一般に細胞増殖能が低下もしくは停止状態のときにおいても大きな役割を担う．大腸の上皮粘膜で の— 227 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

TGF-β の減少や TGF-β1 に反応しなくなることが大腸

しては大腸癌のみで認めた．大腸癌 10 例中 5 例で p53の炎症進行，進展に関連している．しかしながら IL-の発現を認めたが発現細胞は非常に少なく染色も弱10-desficient mice において TGF-β の過剰な活動は腫瘍かった．

の抑制よりも進行に関連する可能性がある．腫瘍の進【結語】

展における TGF-β の役割は両方でありそれは腫瘍の大腸炎自然発症モデルである IL-10 knock out マウス

時期（stage）による．TGF-β の機能の違いは細胞内のにおいて Smad3L のリン酸化は慢性大腸炎に関連する

異なるシグナル伝達によると考えられている．TGF-β

大腸癌の癌化において重要な役割を担っている可能性の主のシグナル伝達には Smad 蛋白が関わる．Smad3 をがあると考えられた．今後はさらにヒューマンでの潰異なる二つの phophoisoform（C-terminally phophorylated

瘍性大腸炎に合併する大腸癌においても検討が必要でSmad: pSmad3C & linker-phophorylated Smad: pSmad3L）ある．
なお，本要旨に該当する内容は，Int J Oncol. 32: 1221–に変化させることにより，TGF-β は TGF-β type receptor
I だけではなく，c-Jun N-terminal kinase（JNK）も活性

1226, 2008 に掲載されている．

化する．TGF-β type receptor I/pSmad3C pathway は上皮細胞の増殖を抑制し，一方 JNK/pSmad3L pathway は

審査の結果の要旨

hepatic stellate cell のような mesenchymal cell を促進さ

本研究は，潰瘍性大腸炎モデル動物である IL-10 遺せることで ECM の付着を促進させる．（しかしなが伝子欠損マウスを用い，慢性腸炎における発癌過程にら）長期に慢性腸炎を患うことによる大腸癌の発生において，TGF-β シグナル伝達経路での smad3 リンカー

Smad3 のシグナル伝達がどのように関連しているかは部リン酸化の関与を明らかにした．また，p53 染色と不明である．

の比較において，今後，ヒト潰瘍性大腸炎における大今回の研究では，これらの phosphoisoform の活性化を評価し，慢性腸炎から大腸癌の進行に Smad3 phospho-

腸癌の早期診断のバイオマーカーとなる可能性を示し，学位に値する研究と考えられた．

isoform が関連するかどうか検討した．
【方法】
IL-10 knock out マウス（n=18）を 4 週から 32 週にわたり経時的に屠殺した．それらの全大腸をホルマリン【1541】

固定しパラフィン切片にした．病理学的検討を行うた

氏

め薄切（5 μm）し hematoxylin and eosin（H&E）染色お

学 位 の 種 類

博士（医学）

よび免疫染色をおこなった．免疫染色に際しては，

学

乙Smad3 に対する抗体として，Smad3 のリン酸化された

学位授与の日付

平成 21 年 9 月 29 日

linker 部 位 に 特 異 的 で あ る 抗 体（anti-pSmad3L） と学位授与の要件

学位規則第 5 条第 2 項該当

Smad3 の C 末端に特異的である抗体（anti-pSmad3C）

学位論文題目

名（本
位

番

籍）
号

大

橋

敦（大阪府）

第 669 号を用いた．免疫染色の評価には染色されている範囲の

Cerebral blood flow monitoring using a novel laser

割合によりスコア化した．

doppler flowmeter in asphyxiated infants【結果】

論文審査委員

IL-10 knock out マウス（n=18）において，7 週目よ主査（教授）河本圭司（教授）日下博文 （教授）中村加枝

り腸炎を発症し 8 週で dysplasia を認めた．12 週にて半数が大腸癌を有し 16 週以降は全例が癌を有した．
Smad3 のリン酸化を検討するため大腸正常上皮粘膜，
腸炎粘膜，dyspasia，癌での pSmad3L，pSmad3C，p53 の論文内容の要旨【はじめに】

免疫染色を行った．pSmad3C の発現（つまり Smad3C

新生児仮死児における低酸素性虚血性脳症（hypoxicの リ ン 酸 化） に は 大 腸 正 常 上 皮 粘 膜， 腸 炎 粘 膜，

ischemic encephalopathy: HIE）は，新生児医療が発達

dyspasia，癌を通して有意な差は認められなかった．

した今日でも重篤な後遺症を残すことが少なくない．

一 方 pSmad3L の 発 現（つ ま り Smad3L の リ ン 酸 化）

HIE は生後早期の循環動態の不安定性に起因する脳血は dyspasia では 12 例中 5 例に大腸癌では全例で認め流障害がその主因と考えられており，その時期の脳血られた．大腸正常上皮粘膜，腸炎粘膜では Smad3L の流量（cerebral blood flow: CBF）の正確なモニタリング

リン酸化は認められず癌化するにつれ Smad3L のリン

は，HIE の児の神経学的予後の予測において有用であ酸化が上昇していることが分かった．p53 の発現に関る．しかし，従来の超音波や近赤外分光を用いた方法— 228 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文では短時間しか測定が行えないため，CBF を出生直内容の要旨および審査の結果の要旨の予測により有用であった．

後から長時間連続的に測定した報告はない．

また，SI48 以外の循環動態因子は，神経学的予後良そこで新たに開発された長時間，連続的に CBF 測

好群と不良群の間で有意差を認めなかったことから，

定 が 可 能 で あ る レ ー ザ ー ド ッ プ ラ ー 血 流 計（laser

脳血流の変動は循環因子だけでは規定されていない可

Doppler flowmeter: LDF）を用いて重症新生児仮死児の能性が示唆された．すなわち見かけ上，循環動態が安CBF の連続測定を行った．

定していても，SI48 >0.24 を呈するような CBF の変動【対象と方法】が大きい症例では，神経学的予後が不良となる可能性

新生児仮死（Apgar スコア 1 分値：7 点未満，またが高いため，HIE の予後を改善するためには，二酸化は血清乳酸脱水素酵素：580U/L 以上と定義）で入院

炭素分圧の調節など，脳血流を安定させる治療を考慮した 11 例を対象に，LDF を用いて出生直後から 96 時する必要があると思われた．
なお，本要旨に該当する内容は，Pediatr Int. 51: 715–

間，CBF を連続測定（毎心拍毎に計測）した．
方法としては，LDF プローブを前額に留置し，得719, 2009 に掲載されている．

られたデータを専用ソフトを用いてコンピュータに記録した．そして連続的な CBF の変動を定量的に評価

審査の結果の要旨するために，モニタリング開始から 96 時間の変動係

新生児乳幼児における低酸素性虚血性脳症（HIE）

数（標準偏差値を平均値で除した値）を Stability Index

は重篤な後遺症を残すことがある．この原因は生後早（SI）として算出した．そしてモニタリング開始から期の脳循環血流障害が要因であることから，新しく開48 時間の SI の平均を SI48，モニタリング開始 48 時間発された継続的に脳血流測定が可能であるレーザーから 96 時間の SI の平均を SI96 として神経学的予後良

ドップラー血流計を用いて脳血流を測定した．モニタ

好群（A 群：n=6）と不良群（B 群：n=5）の間で比較

リング開始 48 時間後の変動が予後判定に重要であっした．また CBF，平均動脈血圧や心拍数についてもた．今後，本法は HIE の予後改善に有用であり，学二群間で検討した．

位に値すると考えられた．

神経学的予後は頭部 CT や MRI または脳波検査と小児神経科医による評価で判定した（平均観察期間：11
か月）．
【結果】

【1542】（1）SI48 は神経学的予後不良群（B 群）で有意に高値で

氏

名（本

籍）

髙

木

孝

士（東京都）

あった（A 群 0.228±0.043，B 群 0.285±0.033，p<0.05）

学 位 の 種 類

博士（医学）

が，SI96 は有意差を認めなかった（A 群 0.257±0.052，

学乙B 群 0.249±0.058，p=0.81）．

学位授与の日付

平成 21 年 9 月 29 日

（2）SI48 について 0.24 を cut off 値とすると，0.24 以上の学位授与の要件

学位規則第 5 条第 2 項該当場合の神経学的予後不良を予測する鋭敏度は 100%，

学位論文題目

特異度は 66.7% であった．

位

番

号

第 670 号

Presence of donor-derived thymic epithelial cells（3）平均動脈血圧や心拍数は神経学的予後良好群（Ain [B6 → MRL/lpr] mice after allogeneic intra-bone群）と不良群（B 群）の二群間で有意差を認めな

marrow-bone marrow transplantation (IBM-BMT)

かった．

論文審査委員【考察】

主査（教授）薗田精昭（教授）福原資郎 （教授）木梨達雄

新生児仮死では，CBF が血圧変動の影響を受けて増加することが報告されている．したがって CBF の連続モニタリングは新生児仮死児の神経学的予後の予測に有用であると考えられているが，従来の方法では論文内容の要旨【はじめに】

連続測定が困難であった．新たに開発された LDF は

我々はこれまで通常の骨髄移植法（静脈内注入法）

皮膚の脆弱な新生児においても非侵襲的に長時間のでは効果の無かった，MRL/lpr マウスの自己免疫疾連続モニタリングが可能であり，今回の検討が実施で患に対して，骨髄内骨髄移植（intra-bone marrow-bone

きた．その結果，仮死新生児における出生直後からのmarrow transplantation: IBM-BMT）法を用いて MRL/lpr

CBF モニタリングは，従来の循環動態の指標とされマウスの造螓細胞と間葉系細胞の両者を正常マウスのている平均動脈血圧や心拍数に比較して神経学的予後

ものと置換することにより，治療が出来ることを明ら— 229 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

審査の結果の要旨かにした（Kushida et al., Blood, 2001）．本研究では，骨髄細胞由来胸腺上皮細胞（thymic epithelial cells: TEC）

本研究は，正常成体 GFP トランスジェニックマウの関与について検討を行った．

ス骨髄細胞を MRL/lpr マウスに骨髄内骨髄移植（IBM-【研究方法】BMT）することにより，MRL/lpr マウスにおける自己自己免疫疾患を発症した 3〜4 ヶ月齢の雌 MRL/lpr

免疫病態が改善することを示している．その機序としマウスを宿主とし，致死量の放射線照射（4 時間間隔，て，正常成体マウス骨髄細胞に由来する GFP 陽性胸4.5 Gy×2 回）を行い，次の日にドナーの 6〜8 週齢の腺上皮細胞（TEC）の関与を示唆した．以上の結果は，green fluorescence protein（GFP）遺伝子導入雌 C57BL/6

1）正常成体マウス骨髄細胞中に TEC に分化する前駆7（B6-GFP）マウスの骨髄細胞（3×10 個）を IBM-BMT細胞が存在すること，2）TEC が自己免疫性疾患の制法を用いて移植した．8 週後に脾臓細胞，及び胸腺細御や免疫学的な寛容に関与することを示しており，学胞のキメリズム，サブセット及び機能の解析を行なう

位に値する研究と認められる．

とともに，胸腺組織を髄質の TEC のマーカーである
MTS-10，皮質の TEC のマーカーである cytokeratin18，
さらに TEC の分化の転写因子である forkhead box N1（FOXN1），TEC の組織特異抗原の発現を調整する転【1543】

写因子 autoimmune regulator（AIRE）で免疫染色をし，

氏

ドナー由来のこれらの細胞の存在を共焦点レーザー顕学 位 の 種 類

博士（医学）
乙

名（本
番

号

北

村

直

行（大阪府）

微鏡にて解析した．

学【結果】

学位授与の日付

平成 21 年 9 月 29 日

1）IBM-BMT 法による MRL/lpr マウスの脾臓 T 細胞，

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 2 項該当B 細胞，及び胸腺細胞は全てドナーの B6-GFP マウ

学位論文題目ス由来の細胞に置換され，そのサブセットもド位

籍）

第 671 号

Effects of baby doctor-team interview on mood status

ナーとほぼ同じであった．MRL/lpr マウス特有のof pregnant women with high risk delivery

aberrant T 細 胞 も 消 失 し て い た． 自 己 抗 体 も B6-

論文審査委員

主査（教授）神崎秀陽

GFP マウスと同じレベルまで低下し，またリンパ（教授）木下利彦 （教授）福永幹彦

球はホストに対して免疫寛容を示した．
2）胸腺組織では，GFP 陽性かつ MTS-10 陽性のドナー由来の髄質 TEC が見られ，また GFP 陽性で且つcytokeratin 18 陽性のドナー由来の皮質 TEC も観察

論文内容の要旨【目的】

された．さらに，GFP 陽性で且つ FOXN-1，ある

妊婦は一般に自身のみならず，胎児の健康への不安

いは AIRE が陽性を示す TEC も観察された．興味を有するが，未熟児や早産児を出産する可能性のある深いことに，FOXN-1 陽性 TEC は MRL/lpr マウス

妊婦（以下，ハイリスク妊婦）はその傾向がより強い．

と B6-GFP マウスはほぼ同数で，移植前後でも変ハイリスク妊婦は母体・胎児集中治療室（Maternal

化 は 無 か っ た が，AIRE 陽 性 TEC は MRL/lpr マ ウ

Fetal Intensive Care Unit：以下，MFICU）に入院するこスで上昇しており，移植後は B6-GFP と同じレベとが多いが，その場合，さらに孤立感といった情緒障

ルまで低下していた．

害が加わることも多い．

【考察】

本研究は，MFICU に入院したハイリスク妊婦への骨髄細胞には，間葉系幹細胞が含まれていると考え

産前訪問によるカウンセリング（以下，産前訪問）のられているが，胸腺髄質と皮質の両方の TEC に分化効果を明らかにすることを目的に，以下の二点を検討する前駆細胞も含んでいることが示唆された．IBM-した．

BMT 方法は，これらの細胞を生着させることが出来る① MFICU に入院したハイリスク妊婦の情緒障害の頻ものと考えられた．骨髄細胞由来の TEC は，免疫学的寛容や自己免疫疾患の制御にも関与している可能性

度および種類②ハイリスク妊婦に対して新生児医療に携わる医師とがある．

臨床心理士で構成された心理カウンセリングチーム

なお，本要旨に該当する内容は，J Autoimmun. 31:（以下，カウンセリングチーム）が産前訪問を行う

408–415, 2008 に掲載されている．

ことによって及ぼす妊婦の情緒障害への効果— 230 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文【対象と方法】

内容の要旨および審査の結果の要旨

3．各種因子と情緒障害の関係

2006 年 12 月から 2007 年 9 月に関西医大枚方病院

個別の各種因子と情緒障害の関係を明らかにするた

MFICU に入院したハイリスク妊婦のうち，本研究へめに，以下のような様々な条件間で T スコアを比較しの参加に同意し，胎児死亡や死産となることなく分娩た：①死産・流産の既往のある場合とない場合，②生を当院で行い，分娩後も経過を追跡しえた 52 名を対産児の分娩歴のある場合とない場合，③妊娠週数が象とした．

30 週未満と 30 週以降の場合，④多胎妊娠の場合と単対象の年齢は 33.0±4.8 歳（以下，平均値±標準偏胎妊娠の場合．

差；範囲 19〜42 歳），入院時の妊娠週数は 29.0±3.8

その結果，多胎妊娠の場合においてのみ，単胎妊娠週（範囲 21.3〜37.6 週），出産時週数は 34.0±3.8 週（範の場合に比して有意に C 領域（「混乱」）の T スコアが囲 25.3〜41.1 週）であった．

高かった．

産前訪問は，カウンセリングチームが，入院後 1 週【考察と結論】

以内に初回を行い，以後，週 1 度のペースで行った．

ハイリスク妊婦は約半数が「活気・活力の低下」を，

内容は「自己紹介を兼ねた産前訪問の意義の説明」，

また約 1/4 が「緊張・不安」や「抑うつ・落胆」といっ「未熟児に起こりやすい疾患とその予後の解説」，そした情緒障害を有していることが明らかとなった．新生て「不安や不満，要望に関する聞き取り」の 3 つのセッ

児科医と臨床心理士による産前訪問は，これらの情緒ションから構成した．

障害を改善する可能性があることが示唆された．
なお，本要旨に該当する内容は，Pediatr Int. 51: 498–

対象には産前訪問前後に，情緒評価票（Profile ofMood States：以下，POMS）を記入してもらった．POMS

501, 2009 に掲載されている．

は対象の気分，感情の状態を客観的に測定するもの
で，①緊張と不安（Tension-Anxiety：以下，T-A 領域），

審査の結果の要旨②抑うつと落胆（Depression-Dejection：以下，D 領域），

妊婦は一般に自身のみならず，胎児の健康への不安③怒りと敵意（Anger-Hostility：以下，A-H 領域），④を有するが，未熟児や早産児を出産する可能性のある

活気・活力（Vigor：以下，V 領域），⑤疲労（Fatigue：

妊婦（ハイリスク妊婦）はその傾向が強い．

以下，F 領域），⑥混乱（Confusion：以下，C 領域）の本研究は「ハイリスク妊婦の約半数が【活気・活力

6 領域を同時に評価できる．所要時間は 15 分程度で，の低下】を，約 1/4 が【緊張・不安】や【抑うつ・落胆】

被検者への物理的負担は少ない．具体的には，被検者という情緒障害を有していること」，さらに「彼らには 65 の質問項目に 0 点から 4 点のポイントで回答す対する専門家チーム（新生児科医と臨床心理士）による．検者は各領域別に合計したポイントを換算表で Tる産前カウンセリングは情緒障害を改善する可能性がスコアと呼ばれる指数に変換する．T スコアは中央値あること」を初めて明らかにしたもので，学位を授与

が 50 となるように作成されたもので，T-A 領域，D 領

するに値するものである．

域，A-H 領域，F 領域，C 領域においては 60 を超える
場合，また V 領域においては 40 未満の場合にそれぞれの領域での情緒障害があると判定する．
なお本研究は関西医科大学倫理委員会の承認を得て
行った．
【結果】
1．情緒障害の頻度と種類
POMS によって，産前訪問前の情緒障害の頻度と種類を検討した結果，T-A 領域で 28.8%，D 領域で 23.1%，
A-H 領域で 3.8%，V 領域で 48.1%，F 領域で 7.7%，C 領
域で 11.5% の対象にそれぞれの情緒障害が認められた．
2．産前訪問の情緒障害に及ぼす効果
ハイリスク妊婦の情緒障害に対する産前訪問の効果を明らかにするために，T スコアを産前訪問前後で比較した．その結果，T-A 領域，D 領域，A-H 領域，C領域において産前訪問後に有意な改善が認められた（Paired Student’s T-test で P<0.05）．
— 231 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

植時に Rhodamine particle を混注し，細胞の生存率の【1544】
氏

経時的変化を共焦点レーザー顕微鏡にて観察した．細

名（本

籍）

榎

木

千

春（鹿児島県）

胞移植後 3 日目の左室心筋組織内の SDF-1α を ELISA

学 位 の 種 類

博士（医学）

法にて定量した．血管新生の程度は移植後 3 日目，30

学

乙第 672 号

日目において，von Willebrand factor 抗体を用いて免疫

学位授与の日付

平成 21 年 9 月 29 日

組織学的に検討した．ホスト心筋細胞のアポトーシス

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 2 項該当は TUNEL 法にて検討した．心筋繊維化は Massontri-

位

番

号

学位論文題目

crom 染色で行った．心機能評価は心筋梗塞後 3 日と移植後 30 日に心臓超音波法にて行った．各群においEnhanced Mesenchymal Cell Engraftment by IGF-1
Improves Left Ventricular Function in Ratsて 12 ヶ月間の生存率を検討した．

Undergoing Myocardial Infarction【結果】in vitro で 10 μg/ml の IGF-1 は MCs の細胞増殖と接着

論文審査委員

主査（教授）池原進（教授）岩坂壽二 （教授）松田博子

を有意に促進し，低酸素環境下での細胞死を有意に抑制した．LY はこれら IGF-1 の効果を阻害した．In vivoの研究において移植された MCs の生着数（Rhodamine

論文内容の要旨

particle に 対 す る 生 着 率 %） は 6 時 間 後 と 3 日 後 で【はじめに】

MCs 群 と IGF-1+MCs 群 間 に 有 意 差 を 認 め た．IGF-

重症虚血性心疾患の患者に対してはこれまで心臓移

1+LY+MCs 群では IGF-1+MCs 群と比較して MCs の生

植以外に根本的な治療法はなかった．しかし再生医療

着数は有意に減少した．また，30 日後にはいずれのに関する基礎的研究の進歩は，心臓に血管や筋肉を再群においても GFP 陽性細胞は存在しなかった．左室

生させることを可能にしつつある．骨髄幹細胞移植は心筋内 SDF-1α は IGF-1+MCs 群において PBS 群に比心臓再生医療において臨床的に応用されているが，そ較して有意に高値であった．20 μm 以下の血管数はの有効性に関しては報告者間に大きな差異がある．心IGF-1+MCs 群において PBS 群に比較して有意に増加

筋への骨髄幹細胞移植における問題点の一つは，移植していた．移植後 30 日の心筋繊維化は，IGF-1+MCsされた細胞の低生着率である．心筋に移植された骨髄群において PBS 群に比較して有意に抑制されていた．

幹細胞は低酸素，低栄養環境下で死滅することがこれまたホスト心筋の心筋梗塞辺縁部での TUNEL 陽性細らの細胞の低生着率の原因であるといわれている．そ胞は IGF-1+MCs 群において PBS 群に比較して有意にこで，心筋に移植した骨髄幹細胞の生着率を改善する

減少していた．移植後 1 ヶ月の心機能評価では IGF-

ためには生存を促す細胞内シグナル伝達系を活性化す

1+MCs 群は PBS 群に比較して左室拡張末期径が有意ることが重要であると考えられる．Insulin-like growthに小さく，%FS が有意に高値であった．12 ヶ月の生

factor (IGF-1)-phosphatidylinositol-3 kinase（PI3K）は細存率は IGF-1+MCs 群が PBS 群に比較して有意に高値

胞の接着促進と細胞死の抑制に重要な役割を果たしてであった．IGF-1+MCs 群におけるこれらの効果は移いることが知られている．そこで我々は培養骨髄間葉

植時に LY を混注することによって阻害された．

系細胞（MCs）移植に際し IGF-1 を同時投与すること【結論】

によって移植した細胞の生着率を改善し，心機能や生IGF-1 は PI3K/Akt シグナル伝達系を介して心筋梗塞

存率を向上させるうえで有効であるか否かを検討し周辺部に局所注入した MCs の生着率を改善させた．

た．

この IGF-1 による生着率改善は心筋梗塞周辺部の血管【方法】

新生を促進し，ホストの心筋細胞死を抑制した．これGreen fluorescence protein（以下 GFP）発現 S-D ラッに伴い心機能は改善し，生存率は向上した．以上の結トの大腿骨，脛骨から得た骨髄細胞を培養して MCsを得た．まず in vitro において IGF-1 の細胞増殖，接果から，骨髄由来 MCs 移植に際し IGF-1 を同時投与することは，移植した細胞の生着率を改善し，心機能着促進，細胞死抑制効果を検討した．次に in vivo のや生存率を向上させるうえで有効であることが示唆さ実験として S-D ラットの心臓を左前下行枝で結紮し，れた．
な お，本 要 旨 に 該 当 す る 内 容 は，Int J Cardiol. 138:

6

1 ヵ月後に MCs 5×10 個を心筋梗塞辺縁部に局所注入した．実験群として，PBS のみ，MCs，IGF-1（10 μg/ml）

9–18, 2010 に掲載されている．

+ MCs，IGF-1 の み，IGF-1+LY294002（PI3K 阻 害 薬）
(LY: 5 μM）+MCs の 5 群を作成した．MCs 生着率は移— 232 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

Insulin-like growth factor（IGF-1）は，細胞の接着促進【対象】’05 年から ’08 年に関西医大枚方病院およびその関と細胞死の抑制に重要な役割を果たしているといわれ

連施設に入院した小児のうち，以下の疾患に該当するているが，本研究は，ラットの培養骨髄間葉系細胞と患者を対象とした．

IGF-1 を同時に心筋梗塞周辺部に局所注入することに・A 群：急性期（発症 7 日以内）の本症患児（14 例）

よって，ホストの血管新生を促進し，ホストの心筋の・B 群：各種細菌感染症（肺炎，扁桃炎，中耳炎，尿審査の結果の要旨

細胞死を抑制し，その結果，心機能や生存率を向上さ

路感染症，胃腸炎，菌血症）患児（14 例）せることを明らかにした研究で，学位に充分値するも・C 群（正常コントロール）：小手術（鼡径ヘルニアのとして評価された．

など）で入院した患児（12 例）【方法】
1）検体採取上記の対象患者から以下の時期に全血 1,000 μ1 を採【1545】
氏

取した．

名（本

籍）

𠮷

村

学 位 の 種 類

博士（医学）学

乙健（大阪府）

位番

号

・A 群：IVIG 前（平均 4.5 病日）および IVIG 後（平均7.5 病日）第 673 号

・B 群：抗生物質投与前（平均 4.1 病日）

学位授与の日付

平成 22 年 3 月 23 日

・C 群：術前一般検査の採血時

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 2 項該当2）NO 測定

学位論文題目

細胞内 NO を標識する蛍光色素 diaminofluorescein-

Increased nitric oxide production by neutrophils in

FM diacetate を，好中球を含む細胞浮遊液に添加，イン

early stage of Kawasaki disease

キュベーションや溶血処理の後，フローサイトメー

論文審査委員

主査（教授）中邨智之

ターで好中球の平均蛍光強度（MFI）を測定し NO 産
生量とした．

（教授）岩坂壽二 （教授）伊藤誠二

3）ROS 測定
細胞内の ROS（主に hydroxyl radical や peroxynitrite）
論文内容の要旨を標識する蛍光色素 hydroxyphenyl fluorescence と好中【はじめに】球刺激物質である phorbol myristate acetate を，好中球

川崎病（以下，本症）は，乳幼児に好発する急性熱を含む細胞浮遊液に添加，インキュベーションや溶血性疾患で，中小動脈の全身性血管炎である．本症では処理の後，フローサイトメーターで MFI を測定し ROS

免疫グロブリン大量療法（IVIG）が著効するが，3–5%

産生量とした．

に冠動脈病変（CAL）を残すため，それらの難治例に

4）検討項目対する治療法の確立が急務である．

以下の項目について統計学的に比較検討した．

病因はいまだに解明されていないが，活性化された① A 群，B 群，C 群における NO 産生量

単球やマクロファージから産生される TNF-α, IL-1,② A 群，B 群，C 群における ROS 産生量

IL-6, IL-8 などのサイトカインやケモカインが病態に③ A 群における NO 産生量と発症後日数との相関

関与していると考えられている．

④ A 群における IVIG 前・後での NO および ROS 産
生量の変化

最近，好中球が本症の急性期の病態に深く関わっている，との報告が散見される．とくに好中球で産生さ【結果】れる一酸化窒素（NO）が本症血管炎の主因であると① NO 産生量：A 群（69.8±54.9：平均値±標準偏差，する報告が多い．しかし多くは NO 合成酵素の mRNA

単位：MFI，以下同様）において，B 群（33.3±13.8）

発現量や血中・尿中の NO 代謝産物（NOx）を測定しや C 群（25.7±14.8）よ り 有 意 に 高 値（p<0.05）でたもので，NO 産生量を直接測定した報告はない．

あった．また CAL 合併例が高値を示した．

そこで，本研究では，本症病初期の病態進展におけ② ROS 産生量：A 群（41.2±17.2）と B 群（51.7±6.7）

る好中球および NO の関与を明らかにする目的で，好において C 群（25.1±16.0）より有意に高値（p<0.05）

中球の NO 産生量および活性酸素種（ROS）産生量をであったが A 群と B 群の間には有意差を認めなかっ

測定した．

た．
③ NO 産生量と発症後日数との間には有意な負の相関— 233 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨が見られた（r=0.55, p<0.05）．
④ IVIG 投与後，NO 産生量は有意に低下した（p<0.05）【1546】

が，IVIG 不応例では変化がみられなかった．一方，氏

ROS 産生量については有意な変化はみられなかっ

学 位 の 種 類

博士（医学）

た．

学

乙

名（本
位

番

籍）
号

三

宅

眞

理（大阪府）

第 674 号

学位授与の日付

平成 22 年 3 月 23 日

最近の報告では，本症の病初期には，好中球が血管

学位授与の要件

学位規則第 5 条第 2 項該当

壁に多数，浸潤しており，また NO 合成酵素の mRNA

学位論文題目【考察】

も好中球において早期から発現するとされ，好中球のComparative Research between Australia and Japan

血管炎への関与が少なくないと考えられている．

A Comparison of the Quality of Healthcare in Nursing

本研究では，病初期の本症患者好中球の NO 産生量

Facilities Using Actigraphy

を測定し，NO 産生量が亢進していることを確認する

論文審査委員

主査（教授）木村とともに，その産生亢進状態は IVIG によって正常化（教授）岩坂壽二 （教授）中村加枝

穣

することを初めて明らかにした．このことは病初期の本症において，好中球が病態に少なからず関与していることを示唆しており，本症の治療戦略に新たな可能性を呈示するものと思われた．

論文内容の要旨【はじめに】

なお，本要旨に該当する内容は，Eur J Pediatr. 168:
1037–1041, 2009 に掲載されている．

日本の高齢化は世界に例をみない速度で進行しており，質が高くコストの軽減をはかる高齢者介護が必要とされている．一方，オーストラリアでは早くから高齢者対策に取り組んでおり，北欧諸国の審査の結果の要旨
川崎病は，乳幼児に好発する原因不明の全身性血管

高

福祉に比べ

中

負担で

中

高

負担，

福祉を提供して炎であるが，その血管傷害への好中球の関与が示唆さいる．本研究では介護の社会的環境やサービスの異なれている．吉村氏は一酸化窒素（NO）産生に着目しりが高齢者の生活リズムにどのような影響があるか「川崎病急性期の末梢血好中球の NO 産生能は，細菌を，オーストラリアの介護に注目し，日本との比較か感染症のそれよりも亢進していること」，「特に重症例

ら高齢者介護について検討を行った．

でその傾向が強いこと」を明らかにし，病勢の予知因【研究方法】

子となりうる可能性を報告した．本研究は，川崎病対象者は日本の高齢者介護施設に入居する施設高齢14 例を他の細菌感染症例と比較してその特徴を明ら者 10 名と自立している日本の独居高齢者 11 名，およかにした臨床研究であり，学位に値する．

び，オーストラリアの高齢者介護施設に入居する施設
高齢者 9 名の 3 つの異なる環境の高齢者のグループを対象にした．
両国の最も異なる介護サービスは，オーストラリア
では介護予防や認知リハビリテーションを重視し，高齢者介護施設では入居者のニーズに合わせた活動（Diversional Therapy）を提供して本人の自立を促す介護が行われていることである．
3 つのグループの高齢者の生活リズムを客観的に評価する為に，腕時計型の小型高感度加速度センサー付
き行動計（MicroMin-MonitionggerTM 以下，アクチグラ
フ：AMI 社 製 Ambulatory Monitoring Inc., Ardsley, NY,USA）を対象者の利き手でない側の手首に 3 日間着用した．アクチグラフから得られたデータはソフトウェ
ア AW2（Action-W, Version2, AMI 社製）を用いて分析した．
【結果】
3 グループの中で最も活動量が多かった時間帯は，— 234 —

関西医科大学

平成 21 年度

博士学位論文内容の要旨および審査の結果の要旨

オ ー ス ト ラ リ ア の 施 設 高 齢 者 の 13–14 時 の 時 間 帯

グループの中で最も活動の多い時間帯であった．睡眠

224.6±75.5（counts/min） で， 日 本 の 施 設 高 齢 者 の効率も日本の施設高齢者より高値を示したことから，

136.8±63.8（counts/min）と比較して有意に多いこと

オーストラリアで実践されている高齢者のコンプライが認められた（p<0.05）．一日における睡眠時間の占

アンスに合わせた支援である Diversional Therapy や自める割合は有意な差は認められなかったが，Wake

立支援を促す介護サービスが身体活動を高め，生活のafter Onset Sleep（睡眠時の覚醒時間）において，日本

リズムを適切に保つことが明らかになった．

の 施 設 高 齢 者 が 3 グ ル ー プ の 中 で 最 も 長 か っ た．

高齢期の身体的，心理的な自立支援の提供は高齢者

Longest wake Episodes（睡眠時における最も長い覚醒の生活リズムを整えることで介護予防に有用であり，

時 間） に お い て も， オ ー ス ト ラ リ ア の 施 設 高 齢 者

如いては介護の負担軽減に貢献できることが示唆され（p<0.05）および日本の独居高齢者（p<0.01）と比較た．
なお，本要旨に該当する内容は，Geriatr Gerontol Int.

して日本の施設高齢者は有意に長かった．また，日本の独居高齢者の Sleep efficiency（睡眠効率）は，日本

10: 167–176, 2010 に掲載されている．

の施設高齢者（p<0.01）およびオーストラリアの施設
高齢者（p<0.05）と比較して有意に高値を示した．こ

審査の結果の要旨

れらの結果からオーストラリアの施設高齢者は日本の本研究は，客観的指標として行動計を用いてオース

施設高齢者に比較して日中の活動量が多く睡眠効率がトラリアと日本の高齢者介護の社会的環境やサービス高いことが示された．

の異なりが高齢者の生活リズムに影響をもたらすこと【考察】を明らかにした．高齢者のコンプライアンスにあわせアクチグラフから得られたデータから各グループのた身体的，心理的な自立支援の提供が生活リズムを整

生活のリズムについて比較検討した結果，両国の生活

え，介護の負担軽減に貢献できることを結論づけた意様式の異なりが活動のリズムから明らかになった．日

義のある研究である．よって，本研究は学位を授与す

中の活動において，オーストラリアの施設高齢者はるに値するものと認める．

Diversional Therapy が 行 わ れ る 13–14 時 の 時 間 帯 が 3— 235 —