信州医誌，68⑸：271～338，2020信州大学において審査された医学博士論文要旨
氏
名（所属教室）

学位授与
番
号

授与年月日

博

士

論

文

名

学位審査委員
主

査

副

査

川上
徹 甲第1178号 Ｈ31. 3.31 STAT3 mutations in natural killer cells are
中沢洋三（内科学⑵）
associated with cytopenia in patients withchronic lymphoproliferative disorder of naturalkiller cells（NK 細胞における STAT3変異は
NK 細胞慢性リンパ増殖異常症患者の血球減少と関連する）

駒津光久
古庄知己

代
健 甲第1179号 Ｈ31. 3.31 Suppression of mouse AApoAII amyloidosis 関 島 良 樹（加齢生物学）
progression by daily supplementation with ox­
idative stress inhibitors（酸化ストレス抑制剤の継続摂取によるマウス AApoAII アミロイ
ドーシスの進行抑制）

山田充彦
竹下敏一

池 村 憲 明 甲第1180号 Ｈ31. 3.31 Inhibitory effects of antihypertensive drugs on 小 泉 知 展（分子薬理学）
human cytochrome P450 2J2 activity : potent
inhibition by azelnidipine and manidipine（シトクロム P450 2J2に対する降圧薬の阻害効
果：アゼルニジピンとマニジピンによる強力な
阻害）

山田充彦
桑原宏一郎

横田
陽 甲第1181号 Ｈ31. 3.31 Frequency and clinical features of hearing loss 関 島 良 樹
caused by STRC deletions（STRC 遺伝子欠失（耳鼻咽喉による難聴の頻度と臨床像の検討）
科学）

塩沢丹里
中沢洋三

西岡
宏 甲第1182号 Ｒ 1. 9.30 Convex Bone Deformity after Closed Reduc­tion of Nasal Bone Fracture（鼻骨骨折整復術（形成再建
後の変形治癒は突出側に残りやすい）外科学）

宇佐美真一 栗 田
浩
福島菜奈恵

俊介
西 牧 史 洋 甲第1183号 Ｈ31. 3.31 Relationship Between the Quantity of Oral 野見山哲生 杠Candida and Systemic Condition/Diseases of
中沢洋三
（歯科口腔
the Host : Oral Candida Increases with Ad­
外科学）
vancing Age and Anemia（口腔カンジダ菌量と宿主の全身状態 / 疾患との関係：口腔カンジ
ダ菌は加齢および貧血の進行とともに増加する）
杉 浦 亜 弓 甲第1184号 Ｒ 2. 3.31 Past history of hepatocellular carcinoma is an 竹 下 敏 一
independent risk factor of treatment failure in（内科学⑵）
patients with chronic hepatitis C virus infec­
tion receiving direct- acting antivirals（肝細胞癌既往は，Ｃ型慢性肝炎に対する直接作用型
抗ウイルス剤治療の不成功に関連する独立因子である）

No. 5, 2020

山田充彦
伊藤研一

271

審査学位論文要旨

王
暁 経 甲第1185号 Ｒ 2. 3.31 A high-cholesterol diet promotes steatohepati­ 平塚佐千枝 駒 津 光 久（代謝制御学）
tis and liver tumorigenesis in HCV core gene
菅野祐幸
transgenic mice（高コレステロール食は HCV
コア遺伝子トランスジェニックマウスにおける脂肪性肝炎と肝腫瘍の発生を促進させる）
小澤真希子 甲第1186号 Ｒ 2. 3.31 Clinical features of IgG4-related periaortitis/ 桑原宏一郎 花 岡 正 幸
periarteritis based on the analysis of 179 pa­
菅野祐幸（内科学⑵）
tients with IgG4-related disease : a case-con­trol study（IgG4関連疾患179名の解析によるIgG4関連動脈周囲炎の臨床的特徴の解明）
花岡正幸
五 味 大 輔 甲第1187号 Ｒ 2. 3.31 Fluorine-18-fluorodeoxyglucose-positron（包括的がんemission tomography evaluation in metastatic治療学）
bone lesions in lung cancer : Possible predic­
tion of pain and skeletal-related events（肺癌
骨転移症例の FDG-PET 検査における骨関連
疼痛の有無および骨関連事象の予測）

栗田
浩
藤永康成

上條
泰 甲第1188号 Ｈ30. 9.30 Do the efficacy and safety of treatment with 柴
landiolol, an ultra-short-acting β1-selective（救急集中blocker, differ in the urgent management of
治療医学）
rapid atrial fibrillation between patients com­plicated with cardiac versus non-cardiac dis­ease（非心疾患に合併した頻脈性心房細動に対するランジオロール塩酸塩の有効性および安全
性の検討）

祐司

川眞田樹人
瀬戸達一郎

竹 内 勇 介 甲第1189号 Ｈ31. 3.31 Clinical features and new diagnostic criteria 中 沢 洋 三
for the syndrome of periodic fever, aphthous（小児医学）
stomatitis, pharyngitis, and cervical adenitis(PFAPA)（周期性発熱・アフタ性口内炎・咽頭炎・頸部リンパ節炎症候群（PFAPA）の臨
床学的特徴と新診断基準）

古庄知己
竹下敏一

古 川 聖 美 甲第1190号 Ｒ 2. 3.31 NLRP3 upregulation in A549 cells co-cultured 樋 口 京 一with THP-1 macrophages under hypoxia via（病態解析
deregulated TGF-β signaling（低酸素環境下診断学）
で THP-1マクロファージと共培養したＡ549細胞における TGF-β 経路を介した NLRP3発現
増加）

花岡正幸
瀬戸達一郎

傍島
淳 甲第1191号 Ｒ 2. 3.31 Organ accumulation and carcinogenicity of 瀧
（運動機能学）
highly dispersed multi-walled carbon nano­tubes administered intravenously in transgen­ic rasH2 mice（遺伝子改変 rasH2マウスを用いた高分散した多層カーボンナノチューブの静脈内投与による臓器集積と発癌性評価）

小泉知展
菅野祐幸

272

伸介

信州医誌

68

審査学位論文要旨

的 場 久 典 甲第1192号 Ｈ31. 3.31 Cecal tumorigenesis in AhR-deficient mice 小 泉 知 展（分子病理学）
depends on cecum-specific MAPK pathway
activation and inflammation（AhR ノックアウ
トマウスの回盲部における腫瘍発生は回盲部に特異的な MAPK 経路の活性化と炎症反応に依
存する）

竹下敏一
平塚佐千枝

鴨 居 史 樹 甲第1193号 Ｒ 2. 3.31 A new technique to determine the tension in 杠
（運動機能学）
extensor pollicis longus reconstruction（長母指伸筋腱再建における，緊張度決定の新たな手
法）

俊介

福島菜奈恵
藤永康成

松 井 周 平 甲第1194号 Ｒ 2. 3.31 Endogenous calcitonin gene-related peptide 菅 野 祐 幸（麻酔蘇生学）
deficiency exacerbates postoperative lymph­
edema by suppressing lymphatic capillary for­mation and M2 macrophage accumulation（内因性カルシトニン遺伝子関連ペプチド欠乏は，リンパ管形成とＭ2マクロファージ集積を抑制することで，術後リンパ浮腫を悪化させる）

多田
剛
田渕克彦

近 藤 恭 史 甲第1195号 Ｈ31. 3.31 Factors predictive of the presence of a CSF1R 鷲 塚 伸 介（加齢生物学）
mutation in patients with leukoencephalopa­thy（白質異常症における CSF1R 遺伝子変異陽性を予測する患者要因の検討）

古庄知己
藤永康成

杉山健二郎 甲第1196号 Ｒ 2. 3.31 Mid-Frequency Hearing Loss Is Characteris­ 関 島 良 樹
tic Clinical Feature of OTOA-Associated Hear‑（耳鼻咽喉
ing Loss（OTOA 遺伝子変異による難聴の臨床
科学）的特徴は中音域の難聴である）

中沢洋三
田渕克彦

鈴木都史郎 甲第1197号 Ｈ31. 3.31 Intestinal Injury by Heat Conduction from
（泌尿器科学）
Surgical Sealing Devices（シーリングデバイ
スからの熱伝導による腸管損傷）

塩沢丹里

清水公裕
瀬戸達一郎

戴
昆 甲第1198号 Ｒ 2. 3.31 Deficiency of the adrenomedullin-RAMP3 sys­ 菅 野 祐 幸（循環病態学）
tem suppresses metastasis through modifica­tion of cancer-associated fibroblasts（アドレノメデュリン（AM）-RAMP3系の欠損は，癌関連線維芽細胞の性質を変化させ，臓器間転移を抑制する）

多田剛
田渕克彦

佐 藤 充 人 甲第1199号 Ｈ31. 3.31 Amelioration of intracellular Ca2＋ regulation 関 島 良 樹
by exon-45 skipping in Duchenne muscular（内科学⑶）
dystrophy-induced pluripotent stem cellderived cardiomyocytes（デュシェンヌ型筋ジス
トロフィーiPS 細胞由来心筋細胞におけるエク
ソン45スキッピングによる細胞内 Ca2＋動態の
改善）

桑原宏一郎
古庄知己

関島良樹
枝 光 智 大 甲第1200号 Ｒ 2. 3.31 Aryl Hydrocarbon Receptor Directly Regulates Artemin Gene Expression（芳香族炭化（皮膚科学）
水素受容体は神経栄養因子アルテミン遺伝子を直接制御する）

竹下敏一
菅野祐幸

No. 5, 2020273

審査学位論文要旨

生 山 裕 一 甲第1201号 Ｒ 2. 3.31 Comparison of clinical characteristics of pa­ 藤 永 康 成（内科学⑴）
tients with Mycobacterium avium complex
disease by gender（肺 MAC 疾患患者の性別による臨床的特徴の比較）

本田孝行
清水公裕

御子柴飛鳥 甲第1202号 Ｈ31. 3.31 Detecting copy number alterations of onco­ 柴genes in cell-free DNA to monitor treatment（皮膚科学）
response in acral and mucosal melanoma（末梢血中の Cell-free DNA のコピー数異常を用いた肢端型・粘膜型メラノーマ患者での治療効
果の評価）

祐司

竹下敏一
菅野祐幸

小 沢 陽 子 甲第1203号 Ｈ31. 3.31 A comparison of the features of fluorine-18 小 泉 知 展
fluorodeoxyglucose-positron emission tomog­（内科学⑴）
raphy (FDG-PET) between IgG4-related dis­ease with bilateral hilar lymphadenopathy andsarcoidosis（両側肺門リンパ節腫脹を伴う IgG4関連疾患とサルコイドーシスの PET-CT 所見の比較検討）

菅野祐幸
関島良樹

井 田 耕 一 甲第1204号 Ｈ31. 3.31 Effectiveness of a genetic test panel designed 伊 藤 研 一
for gynecological cancer : an exploratory study（産科婦人（婦人科癌用に設計された遺伝子検査パネルの科学）
有用性：探索的研究）

小泉知展
古庄知己

橋本
瞬 甲第1205号 Ｒ 2. 3.31 Prevalence and Risk Factors of Carpal Tunnel 関 島 良 樹（運動機能学）
Syndrome in Japanese Aged 50 to 89 Years（日本における50～89歳の手根管症候群の罹患率と危険因子）

野見山哲生
田渕克彦

栗 原 大 河 甲第1206号 Ｒ 2. 3.31 DNA repair protein RAD51 enhances the
樋口京一
CRISPR/Cas9-mediated knock-in efficiency in（分子細胞
brain neurons（DNA 修復タンパク質 RAD51
生理学）
は脳の神経細胞での CRISPR/Cas9を介した遺伝子ノックイン効率を上昇させる）

沢村達也
新藤隆行

上野
学 甲第1207号 Ｈ31. 3.31 Therapeutic effects of Choreito, a traditional 柴（泌尿器科学）Japanese (Kampo) medicine, on detrusor over­activity induced by acetic acid in rats（酢酸誘発性排尿筋過活動ラットにおける猪苓湯の治療
効果）

祐司

小泉知展
駒津光久

山田充彦

桑原宏一郎
小泉知展

山 鹿 隆 義 甲第1209号 Ｈ31. 3.31 Relationship between Physical Activity and 伊 藤 研 一（包括的がん
Health-related Quality of Life in Hospitalized治療学）
and Terminally Ill Cancer Patients（入院中終
末期がん患者の身体活動と健康関連 QOL の関
係）

増木静江
髙橋
淳

渡 辺 宏 晃 甲第1208号 Ｈ31. 3.31 In vitro inhibitory effects of sesamin on CY­（分子薬理学）P4F2 activity（In vitro におけるセサミンのCYP4F2活性に対する阻害効果）

274

信州医誌

68

審査学位論文要旨

北原順一郎 甲第1210号 Ｈ31. 3.31 Aldosterone to Potassium Ratio after Adreno­ 桑原宏一郎 藤 永 康 成（内科学⑷）
corticotropin stimulation in Unilateral Primary石塚修
Aldosteronism Diagnosis（片側性原発性アル
ドステロン症の診断における ACTH 負荷後のアルドステロン / カリウム比）
正印
航 甲第1211号 Ｈ31. 3.31 Prognostic Impact of Cardio-renal-anemia 山 田 充 彦
Syndrome in Patients at Risk for Heart Fail­（内科学⑸）
ure from the IMPACT-ABI study（心不全リ
スクを有する患者における予後予測因子としての心腎貧血症候群：IMPACT-ABI サブ解析）

駒津光久
柴
祐司

品川
潤 甲第1212号 Ｈ31. 3.31 Prevalence and clinical features of hearing loss 古 庄 知 己
caused by EYA4 variants（EYA4遺伝子変異（耳鼻咽喉による難聴の有病率と臨床像の検討）
科学）

関島良樹
沢村達也

岡 晋一郎 甲第1213号 Ｈ31. 3.31 Clinical characteristics and in vitro analysis of 古 庄 知 己
MYO6 variants causing late-onset progressive（耳鼻咽喉hearing loss（MYO6遺伝子変異による遅発性科学）
進行性難聴の臨床的特徴と in vitro 解析）

関島良樹
沢村達也

加 藤 太 門 甲第1214号 Ｈ31. 3.31 Impact of Ambulation Status in Patients with 柴End-stage Renal Disease on Hemodialysis due（内科学⑸）
to Diabetic Nephropathy : The PREDICT Study（糖尿病性腎症による血液透析患者における歩行状態の影響）駒津光久
増木静江

No. 5, 2020

祐司

275

審査学位論文要旨

学位審査委員氏
名（所属教室）

学位授与
番
号

岩波
潤
（成人保健学）甲第31号

Ｈ31. 3.31 Brake Operation and Palmar Perspiration Re­ 杉 山 暢 宏
flect Older Adult Driversʼ Ability to Predict
Hazards : Driving Simulation Research（高齢ドライバーの危険予測能力を反映するブレーキ
操作と手掌部発汗：ドライビングシミュレータを用いた研究）

上村智子
小林正義

堀
敦詞
（医療生命
科学）

甲第32号

Ｈ31. 3.31 Characterization of galactosyl and lactosyl sul­ 矢 﨑 正 英
fatide species in human serum by MALDITOF mass spectrometry（マトリックス支援
レーザー脱離イオン化飛行時間型（MALDITOF）質量分析によるヒト血清中ガラクトシル
スルファチド分子種とラクトシルスルファチド
分子種の特徴付け）

松田和之
日髙宏哉

髙枝果奈
（老年保健学）甲第33号

Ｒ 2. 3.20 Reliability and acceptability of using a social 小 林 正 義
robot to carry out cognitive tests for commu­
nity-dwelling older adults（地域在住高齢者へのコミュニケーションロボットによる認知機能検査の信頼性と受容性）

杉山暢宏
上村智子

植松明和
（医療生命
科学）

甲第34号

Ｒ 2. 3.20 Relationship between Sympathetic Nerve Ac­ 伊 澤
tivity Evaluated by Pulse Rate Variability andBlood Pressure Early in the Morning in Sleep
Disordered Breathing（脈拍変動によって評価した交感神経活動と睡眠呼吸障害における早朝
血圧との関係）

淳

矢﨑正英
藤本圭作

山口大輔
（成人保健学）甲第35号

Ｒ 2. 3.20 Assessmemt of Depressive Tendency, Coping 市 川 元 基Strategies,and Type D Personality in JapanesePatients with Coronary Artery Disease（日本
人の冠状動脈疾患患者における抑うつ傾向，
コーピング方略，およびタイプＤパーソナリティ
に関する検討）

下里誠二
松永保子

齋門良紀
（成人保健学）甲第36号

Ｒ 2. 3.20 Correlation between radiographic sagittal 木 村 貞 治alignment, range of motion, muscle strengthand quality of life in adults with spinal defor­
mities（成人脊柱変形患者の単純レントゲンにおける矢状面アライメント，関節可動域，筋力，
生活の質の相関関係）

横川吉晴
百瀬公人

武市尚也
（医療生命
科学）

甲第37号

Ｒ 2. 3.20 Comparison of impedance measured by the 矢 﨑 正 英forced oscillation technique and pulmonary
functions, including static lung compliance, in
obstructive and interstitial lung disease（閉塞性肺疾患及び間質性肺疾患における肺コンプラ
イアンスと多周波強制オッシレーション法を用いた呼吸インピーダンスとの関係）

石田文宏
藤本圭作

276

授与年月日

博

士

論

文

名

主

査

副

信州医誌

査

68

審査学位論文要旨

STAT3 mutations in natural killer cells are associated with cytopenia in patients withchronic lymphoproliferative disorder of natural killer cells（NK 細胞における STAT3変異
は NK 細胞慢性リンパ増殖異常症患者の血球減少と関連する）
川上徹（論文の内容の要旨）

STAT3 Y640F も陽性だった。STAT5B のホットス【背景と目的】NK 細胞慢性リンパ増殖異常症（CLPD-

ポット変異は１例も認めなかった。アンプリコンシー

NK）は NK 細胞の形質をもった大顆粒リンパ球の持ケンス法では，５例で STAT3変異を認め，１例で続的な増加を特徴とする稀な疾患である。CLPD-NK

TNFAIP3 変 異 を 認 め た 。STAT5B 変 異 は 認 め な

患者は緩徐な臨床経過をたどり，一部では血球減少やかった。STAT3変異陽性例のうち，セルソーティン

神経症状，自己免疫性疾患を合併する。最近，CLPD-

グが可能だった３例では，変異はＴ細胞の分画ではな

NK 症例の一部にシグナル伝達分子の STAT3の活性

く，NK 細胞の分画で認められた。STAT3変異は全型変異が認められることが報告され，血球減少との関て SH2ドメインに分布していた。STAT3変異陽性例

連も示唆されているが，詳細な変異プロファイルや臨と陰性例の間で臨床像を比較すると，変異陽性例は有床像との関連については不明である。また，Ｔ細胞顆

意に貧血を合併しやすく（５例中５例：100 ％対12例

粒リンパ球白血病では，STAT3以外に STAT5B や

中０例：０％；P＝0.00016），有意にヘモグロビン値

TNFAIP3の変異が認められるとされるが，CLPD-

が低く（中央値 6.6 g/dL 対13.9 g/dL；P＝0.0044），

NK での変異頻度は分かっていない。今回，CLPD-

好中球数が低い傾向にあった（中央値 1,220/μL 対

NK の遺伝子変異プロファイルと臨床像との関連を明ら

3,100/μL；P＝0.070）。17例を合併症により，血球減かにするため，CLPD-NK 患者を対象として STAT3，少を有する群（５例），神経症状を有する群（４例），

STAT5B，TNFAIP3について遺伝子解析を行った。

合併症を有しない群（８例）に分類すると，血球減少【対象と方法】CLPD-NK 17例を対象とした。末梢血を有する群でのみ STAT3変異は認められた。

あるいは骨髄液から単核球を分離し，DNA を抽出【考察と結論】CLPD-NK を STAT3変異と臨床像にした。まず，全例を対象として，アリル特異的 PCR

よって３群に分類可能であることを初めて示した。

（AsPCR）で STAT3と STAT5B のホットスポット

STAT3解析は CLPD-NK の病態解析や診療に分子変異（STAT3；Y640F，D661Y，STAT5B；N642H，

マーカーとして有用な情報となりうることが示唆され

Y665F）の解析を行った。また，アンプリコンシーケ

た。

ン ス 法 で STAT3 ，STAT5B ，TNFAIP3 の 解 析 を（論文審査の結果の要旨）行った。アンプリコンシーケンス法に用いるプライマーはNK 細胞慢性リンパ増殖異常症（CLPD-NK） は各遺伝子の全コーディング領域をカバーするように設NK 細胞の形質をもった大顆粒リンパ球の持続的な増計し，Ion Torrent システムで解析を行った。一部の加を特徴とする稀な疾患である。一部に STAT3の活例ではセルソータを用いてＴ細胞（CD2陽性，CD3陽性）性型変異が認められることが報告されているが，詳細と NK 細胞（CD2陽性，CD3陰性，CD16または CD56

な変異プロファイルや臨床像との関連は不明である。

陽性）を分取し，それぞれ DNA を抽出してアンプリ

また，Ｔ細胞顆粒リンパ球白血病では，STAT3以外

コンシーケンス法を行った。検出した変異はダイレクに STAT5B や TNFAIP3の変異が認められるとされトシーケンス法，AsPCR あるいはライブラリ再作成

るが，CLPD-NK での変異頻度は不明である。今回，後のアンプリコンシーケンス法で確認した。臨床デー

CLPD-NK 患 者 を 対 象 と し て STAT3 ，STAT5B ，タを収集し，変異の有無により比較を行った。統計ソ

TNFAIP3について遺伝子解析を行った。

フトは EZR を用いた。

CLPD-NK 17例を対象とした。末梢血あるいは骨【結果】CLPD-NK の合併症は好中球減少４例，赤芽髄 液 の 単 核 球 か ら DNA を 抽 出 し ， ア リ ル 特 異 的球低形成を伴う貧血３例，自己免疫性溶血性貧血２例，

PCR（AsPCR） で STAT3と STAT5B のホットス

神経症状４例であった。AsPCR では，３例で STAT3

ポット変異の解析を行った。また，アンプリコンシーの D661Y 変異が陽性であった。 そのうち１例ではケンス法で STAT3，STAT5B，TNFAIP3の解析を

No. 5, 2020277

審査学位論文要旨行った。一部の例ではセルソータでＴ細胞と NK 細

すると，変異陽性例は有意にヘモグロビン値が低胞を分取し，それぞれ解析に用いた。臨床データを収く（中央値 6.6 g/dL 対13.9 g/dL；P＝0.0044），好集し，変異の有無により比較を行った。

中 球 数 が 低 い 傾 向 に あ っ た（ 中 央 値 1,220/L 対

その結果，川上は次の結論を得た。

3,100/L；P＝0.070）。

１．AsPCR では，３例で STAT3の D661Y 変異が陽５．血球減少を有する群（５例），神経症状を有する性， うち１例では STAT3 Y640F も陽性だった。

群（４例），合併症を有しない群（８例）に分類す

STAT5B のホットスポット変異は認めなかった。

ると，血球減少を有する群でのみ STAT3変異は認

２．アンプリコンシーケンス法では，５例で STAT3変異を認め，１例で TNFAIP3変異を認めた。
STAT5B 変異は認めなかった。

められた。
これらの結果より，CLPD-NK を STAT3変異と臨床像によって３群に分類可能であることが示された。

３．STAT3変異陽性例のうち，セルソーティングがSTAT3解析は CLPD-NK の診療において有用な情報可能だった３例では，変異は NK 細胞の分画でのとなりうることが示唆された。よって，主査，副査はみ認められた。

一致して本論文を学位論文として価値があるものと認

４．STAT3変異陽性例と陰性例の間で臨床像を比較めた。

Suppression of mouse AApoAII amyloidosis progression by daily supplementation with oxidative stress inhibitors（酸化ストレス抑制剤の継続摂取によるマウス AApoAII アミロイ
ドーシスの進行抑制）
代健（論文の内容の要旨）

基本的な酸化ストレスレベルを確認するため，線維を【背景・目的】マウス AApoAII アミロイドーシスは，投与せず，普通水を摂取した Control（Con 群）を設

老化に伴い ApoA-II タンパク質がアミロイド線維置した。実験期間中のマウスの体重，飲水量と摂食量（AApoAII）を形成し，脳以外の全身に沈着する全身を測定し，解剖後には病理組織切片を作成し，アミロ

性アミロイドーシスの一種である。これまでに，アルイド沈着程度と酸化ストレスレベルを評価した。またツハイマー病や脳アミロイドアンギオパチーなどの研

血漿中の ApoA-I，ApoA-II，ApoE タンパク質と血究で酸化ストレスがアミロイド沈着に関連することが

清高密度リポタンパク（HDL）濃度を測定した。肝

報告されており，我々もアミロイド線維の沈着は小胞

臓での酸化ストレスやアミロイド沈着に関連する遺伝

体ストレス応答とアポトーシスを惹起すること（Luo

子の発現量を real-time PCR 法で測定した。酸化ス

et al Lab Invest 2015），摂取カロリー制限は酸化スト

トレス抑制剤の用量がアミロイドーシス抑制効果に及レス等を改善し，アミロイド沈着も軽減すること（Liぼす影響を解析するために，２倍濃度（２mM tempol& Sawashita et al PLoS One 2017）を報告してきた。

と３mM apocynin）添加水の投与実験を行った。

しかし，酸化ストレス抑制がアミロイドーシスの進展【結果と考察】アミロイドーシス誘発８週間後では，に及ぼす効果とメカニズムについては十分には明らか

A-NT，Tem，Apo のいずれの群もアミロイド沈着になっていない。本研究では AApoAII アミロイドー

程度が低く，３群間に有意差は無かった。12週間後でシスを誘発したマウスに酸化ストレス抑制剤を摂取さは A-NT 群と比較して，Tem，Apo 両群でアミロイ

せて，AApoAII アミロイドーシス抑制効果とそのメド沈着が有意に軽減していた。特に，酸化ストレス抑カニズムについて検討した。

制剤の摂取により胃，皮膚と肝臓のアミロイド沈着がc【方法】８週齢 R1.P1-Apoa2 雌マウスに AApoAII 線

明らかに軽減した。過酸化脂質の指標である4-HNE

維（１μg/匹）を投与してアミロイドーシスを誘発し，染色と MDA 量の測定から，他の臓器に比較して酸無添加水（A-NT 群），活性酸素除去剤である tempol

化ストレスのレベルが比較的高い肝臓，胃及び皮膚で１mM 添加水（Tem 群）あるいは NADPH 酸化酵素抑は，Con 群，A-NT 群と比較して Tem 群，Apo 群で制剤である apocynin 1.5 mM 添加水（Apo 群）を自は軽減が認められた。肝臓の Apoa1，Apoa2遺伝子の由摂取させ，それぞれ８週間，12週間後に屠殺した。

発現量，血漿中の ApoA-I，ApoA-II タンパク質濃

278

信州医誌

68

審査学位論文要旨

度と HDL 濃度はいずれの群間にも有意差は認められ投与せず，普通水を摂取した Control（Con 群）を設なかった。酸化ストレス抑制剤は小胞体ストレス関連置した。実験期間中のマウスの体重，飲水量と摂食量

遺伝子（Hspa5と Atf4）と酸化ストレス関連遺伝子を測定し，解剖後には病理組織切片を作成し，アミロ（Sod2）の発現を抑制し，Tem 摂取群でミトコンド

イド沈着程度と酸化ストレスレベルを評価した。また

リア調節遺伝子（Ppargc1α）の発現を促進した。高血漿中の ApoA-I，ApoA-II，ApoE タンパク質と血用量酸化ストレス抑制剤の摂取ではアミロイド沈着抑

清高密度リポタンパク（HDL）濃度を測定した。肝制効果の増大は認められなかった。酸化ストレス抑制

臓での酸化ストレスやアミロイド沈着に関連する遺伝剤の摂取が酸化ストレスを軽減させた臓器（胃，皮膚，子の発現量を real-time PCR 法で測定した。酸化ス肝臓）で，有意なアミロイドーシス抑制効果を示した

トレス抑制剤の用量がアミロイドーシス抑制効果に及ことは，酸化ストレスがアミロイドーシスの発症や進ぼす影響を解析するために，２倍濃度（２mM tempol

展に関与することを示唆している。また，抑制剤の摂と３mM apocynin）添加水の投与実験を行った。

取が ApoA-II や HDL の代謝には影響しないことが明らかになり，アミロイドーシス抑制のメカニズム解
明には，さらなる研究が必要である。

その結果，代健は次の結論を得た。
１．酸化ストレス抑制剤の摂取による AApoAII アミ
ロイドーシス抑制効果を証明した。

【結論】 酸化ストレスの抑制が AApoAII アミロイ

２．抑制効果は臓器によって異なり，酸化ストレスレ

ドーシスの抑制に有効であることが明らかになった。

ベルが高い臓器で有意な沈着減少が見られた。

この結果はアミロイドーシスの治療方法として酸化ス

３．酸化ストレス抑制剤は血中 ApoA-II，ApoA-I 濃

トレスを抑制する処方が有効であることを示唆してい度と HDL コレステロール濃度，肝臓での mRNAる。

発現量には影響しなかった。
（論文審査の結果の要旨）

４．酸化ストレス抑制剤は小胞体ストレス関連遺伝子

マウス AApoAII アミロイドーシスは，老化に伴い発現の抑制とミトコンドリア調節遺伝子の発現を促

ApoA-II タンパク質がアミロイド線維（AApoAII）を形成し，脳以外の全身に沈着する全身性アミロイ

進した。
５．酸化ストレス抑制剤の用量を増やしても効果の増

ドーシスの一種である。これまでに，アルツハイマー

強は認められなかった。

病や脳アミロイドアンギオパチーなどの研究で酸化ス

酸化ストレスがアミロイドーシスの発症や進展に関トレスがアミロイド沈着に関連することが報告されて与することが明らかになった。更に，臓器の基礎的酸

おり，我々もアミロイド線維の沈着は小胞体ストレス

化ストレスレベルや小胞体ストレスが抑制効果と関係

応答やアポトーシスを惹起すること（Luo et al Lab

することが示唆されたが，詳細なメカニズムについて

Invest 2015）， 摂取カロリー制限は酸化ストレス等

は更に検討する必要がある。

を改善し， アミロイド沈着も軽減すること（Li &これらの結果はアミロイドーシスの治療方法としてSawashita et al PLoS One 2017）を報告してきた。し酸化ストレスを抑制する処方が有効であることを示唆

かし，酸化ストレス抑制がアミロイドーシスの進展にしている。

及ぼす効果とメカニズムは十分には明らかになっていない。本研究では AApoAII アミロイドーシスを誘発

よって，主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

したマウスに酸化ストレス抑制剤を摂取させて，
AApoAII アミロイドーシス抑制効果とそのメカニズ
ムについて検討した。
８ 週 齢 R1.P1-Apoa2 c 雌 マ ウ ス に AApoAII 線 維（１μg/匹） を投与してアミロイドーシスを誘発し，無添加水（A-NT 群），活性酸素除去剤である tempol
１mM 添加水（Tem 群）あるいは NADPH 酸化酵素抑制剤である apocynin 1.5 mM 添加水（Apo 群）を自由摂取させ，それぞれ８週間，12週間後で屠殺した。
基本的な酸化ストレスレベルを確認するため，線維をNo. 5, 2020279

審査学位論文要旨

Inhibitory effects of antihypertensive drugs on human cytochrome P450 2J2 activity : potent
inhibition by azelnidipine and manidipine（シトクロム P450 2J2に対する降圧薬の阻害効
果：アゼルニジピンとマニジピンによる強力な阻害）
池

村

憲

明

（論文の内容の要旨）

マニジピン，ニカルジピン，テルミサルタン，デラプ【背景と目的】シトクロム P450 2J2（CYP2J2）は主

リル，キナプリルの阻害様式は競合型を示し，一方，に心臓に発現しており，肝臓や小腸にも存在する。加アムロジピン，フェロジピン，ニフェジピン，ニルバ

えて，様々な腫瘍の細胞内にも高発現している。腫瘍

ジピン，ニソルジピンおよびニトレンジピンの阻害様

細胞内の CYP2J2はアラキドン酸を代謝しエポキシ

式は混合型を示した。最も強力な阻害作用を示した降エイコサトリエン酸を生成することで腫瘍の増殖や圧薬はマニジピンであった（Ki＝0.0294 μM）。ドッ

転移を促進することが示唆されている。したがって，

キングシミュレーション解析の結果，酵素とリガンド

腫瘍細胞内の CYP2J2の機能を強く阻害する化合物の結合安定性を示す相互作用エネルギーU 値はマニ

は，がん治療の新たな戦略として期待される。一方，

ジピンおよびニトレンジピンで最も低かった（－56.9

CYP2J2は生体内物質の他，多くの薬物の代謝にも関kcal/mol）。降圧薬による阻害の代謝依存性について与している。最近では，ソラフェニブ，スニチニブな検討した。NADPH 存在下で CYP2J2と降圧薬を20分

どの分子標的薬を腫瘍細胞内で代謝することが報告さ

間プレインキュベートした後，基質を添加して酵素活れている。これらの分子標的薬は血管内皮増殖因子受性を測定したところ，アゼルニジピンおよびフェロジ

容体のチロシンキナーゼ活性を阻害することで抗腫瘍

ピンのみ IC50値の低下が認められた。そこで，両薬物効果を示すが，主な副作用として高血圧を生じる。そを用いて不活性化の速度論的解析を行った結果，アゼのため，高血圧が生じた患者には降圧薬の投与が推奨

ルニジピンのみ CYP2J2活性を濃度依存的かつプレイされている。 もし併用される降圧薬の中に強力なンキュベーション時間依存的に阻害した（kinactivation/

CYP2J2阻害作用を示すものがあれば，副作用の軽減

KI＝105 l/mmol/min）。アゼルニジピンによる不活性のみでなく分子標的薬の有効性を高める可能性がある化は NADPH 依存性を示した。

と考えられる。しかし，降圧薬の CYP2J2活性に対す【考察】検討した降圧薬のうち，マニジピンが CYP2­る阻害作用は詳細に検討されていない。そこで本研­J2の最も強力な可逆的阻害剤であることが明らかと究では，降圧薬の CYP2J2阻害作用とその機構を inなった。マニジピンが最も強く阻害する要因として，

vitro の系で明らかにすることを目的とした。

CYP2J2の触媒活性部位への結合安定性が他の DCCBs【方法】CYP2J2組換え酵素を用いて，ルシフェリン-に比べて高いことが示唆された。また，マニジピンは2J2/4F12 O-脱アルキル化酵素活性に対する降圧薬

他の DCCBs と異なり，構造内に嵩高く疎水性の高い（37化合物）の阻害効果を検討した。阻害が認められジフェニルメチルアミノ基を有していることから，こた場合，50 ％阻害濃度 IC50 値の他，阻害様式およびの官能基の存在が強力な阻害作用を示す要因であるこ阻害定数 Ki 値を算出した。次いで，代謝依存的阻害とも推察された。これまでに，CYP2J2の最も強力なが認められた場合，不活性化の速度論的解析を行い，可逆的阻害剤としてダナゾール（Ki＝0.02 μM） が最大不活性化速度定数 kinactivation 値および半値阻害剤

報告されているが，マニジピンはダナゾールに匹敵す

濃度 KI 値を算出した。CYP2J2のホモロジーモデル

る強力な阻害作用を示すことが明らかとなった。アゼを用いて降圧薬のドッキングシミュレーション解析を

ルニジピンは CYP2J2を不活性化することが明らかと行った。

なった。この不活性化は NADPH 依存性を示すこと【結果】検討した全てのジヒドロピリジン系カルシウ

から，CYP2J2による代謝を介して生成されたアゼル

ム拮抗薬（DCCBs），テルミサルタン，デラプリルおニジピンの活性代謝物が CYP2J2活性を不可逆的に阻よびキナプリルは CYP2J2活性を濃度依存的に阻害し害（代謝機構依存的阻害）する可能性が示唆された。

た（IC50＝0.116～9.19 μM）。アゼルニジピン，バルアゼルニジピンのような不活性化剤は酵素が新たに生

ニジピン，ベニジピン，シルニジピン，エホニジピン，

合成されるまで阻害作用が持続することから，可逆的

280

信州医誌

68

審査学位論文要旨

阻害剤よりも阻害作用が強くかつ持続することが考え

性化速度定数 kinactivation 値および半値阻害剤濃度 KI 値られた。

を算出した。また CYP2J2のホモロジーモデルを用い【結論】マニジピンは CYP2J2の強力な可逆的阻害剤て降圧薬のドッキングシミュレーション解析を行った。

であり，アゼルニジピンは強力な代謝機構依存的阻害

その結果，池村憲明は次の結論を得た。

剤であることを明らかにした。これらの降圧薬は分子１．検討した全てのジヒドロピリジン系カルシウム拮

標的薬の有効性を高める薬剤として有用である可能性

抗薬，テルミサルタン，デラプリルおよびキナプリが示唆された。

ルは CYP2J2活性を濃度依存的に阻害した（IC50＝（論文審査の結果の要旨）

0.116～9.19 μM）。

腫瘍細胞内の CYP2J2はアラキドン酸を代謝しエポ２．アゼルニジピン，バルニジピン，ベニジピン，シキシエイコサトリエン酸を生成することで腫瘍の増ルニジピン，エホニジピン，マニジピン，ニカルジ

殖や転移を促進することが示唆されている。したがっピン，テルミサルタン，デラプリル，キナプリルのて，腫瘍細胞内の CYP2J2の機能を強く阻害する化合物

阻害様式は競合型を示し， 一方， アムロジピン，

は，がん治療の新たな戦略として期待される。一方，

フェロジピン，ニフェジピン，ニルバジピン，ニソ

CYP2J2は生体内物質の他，多くの薬物代謝に関与す

ルジピンおよびニトレンジピンの阻害様式は混合型

る。最近では，ソラフェニブ，スニチニブなどの分子を示した。

標的薬を腫瘍細胞内で代謝することが報告されている。
これらの分子標的薬は，主な副作用として高血圧を生じる。そのため，高血圧が生じた患者には降圧薬の投３．CYP2J2活性に対する最も強力な可逆的阻害剤はマニジピンであった（Ki＝0.0294 μM）。
４．アゼルニジピンおよびフェロジピンは CYP2J2活与が推奨されている。もし併用される降圧薬の中に強性に対して代謝依存的な阻害作用を示した。さらに，力な CYP2J2阻害作用を示すものがあれば，副作用のアゼルニジピンは CYP2J2活性を不活性化すること軽減のみでなく分子標的薬の有効性を高める可能性がが示唆された。

ある。そこで本研究では，降圧薬の CYP2J2阻害作用

これらの結果より，分子標的薬治療によって高血圧とその機構を in vitro の系で明らかにした。

が生じた際に，マニジピンおよびアゼルニジピンを選CYP2J2組換え酵素を用いて，ルシフェリン -2J2/

択することで副作用軽減のみではなく抗腫瘍効果を高4F12 O-脱アルキル化酵素活性に対する降圧薬（37化める可能性が示唆された。今後，がん治療における合物）の阻害効果を検討した。阻害が認められた場合，

CYP2J2活性を阻害する降圧薬の役割を明らかにする

50 ％阻害濃度 IC50 値の他，阻害様式および阻害定数ため，さらなる研究に期待する。よって，主査，副査

Ki 値を算出した。次いで，代謝依存的阻害が認めらは一致して本論文を学位論文として価値があるものとれた場合，不活性化の速度論的解析を行い，最大不活認めた。

Frequency and clinical features of hearing loss caused by STRC deletions（STRC 遺伝子欠失による難聴の頻度と臨床像の検討）
横田陽（論文の内容の要旨）

ばれる，イントロン領域まで含んだ数十～数万塩基に【背景と目的】先天性難聴のうち，50～70 ％は遺伝的わたる大きなゲノムの構造変化が，遺伝性疾患の原因な原因が関与している。現在，非症候群性難聴の原因として注目されている。

として約100種類の遺伝子が同定されており，これら

CNV による難聴の報告は30程度と少ないが，ひと

遺伝子上の１～数塩基の変異による先天性難聴が数多つに STRC 遺伝子の欠失がある。STRC 遺伝子は常く報告されている。これらの変異に関しては，現在，染色体劣性遺伝形式の非症候群性難聴（DFNB16）の

本邦では次世代シーケンサーを用いた難聴の遺伝学的原因遺伝子である。STRC 遺伝子は蝸牛内の外有毛検査が保険収載され，診断が可能になってきている。

細胞の stereocilia に発現しており，STRC 遺伝子に一方，このような小さな領域の遺伝子変異と異なり，よる難聴は蝸牛増幅の障害で起きると考えられる。本

コピー数変化（CNV : Copy number variation）と呼研究では，日本人難聴者における STRC 遺伝子欠失No. 5, 2020281

審査学位論文要旨

による難聴の頻度と臨床像を検討した。その中で，現遺伝学的検査の診断率を向上させられるかを検討した。

在保険診療で行われている次世代シーケンサーのリー

日本人難聴者1,025名，健聴者コントロール152名をドデータを用いて，STRC 遺伝子の CNV を検出でき

対象に，難聴の原因遺伝子68遺伝子をターゲットにしるか，難聴の遺伝学的検査の診断率を向上させられる

た次世代シーケンサーによる網羅的解析を行った。

かについても検討した。

CNV 検出方法については， 次世代シーケンサーの【対象と方法】日本人難聴者1,025名，健聴者コント

リードデータから解析し，CNV が検出されたものに

ロール152名を対象に，難聴の原因遺伝子68遺伝子を対して，アレイ CGH にてその結果の整合性を確認しターゲットにした次世代シーケンサーによる網羅的解た。

析を行った。CNV 検出方法については，次世代シー

その結果，横田は次の結論を得た。

ケンサーのリードデータから解析し，CNV が検出さ

１．難聴者1,025名において17名（1.7 ％）が STRC

れたものに対して，アレイ CGH にてその結果の整合

遺伝子欠失（２copy loss）による難聴と考えられ性を確認した。

た。

【結果】難聴者1,025名において17名（1.7 ％）が STRC

２ ． 難 聴 者 1,025 名 に お い て １ copy loss は 26 名

遺伝子欠失（２copy loss）による難聴であった。難聴（2.63 ％）であった。これは健聴者集団における頻者 1,025 名 に お い て １ copy loss は 26 名（ 2.63 ％ ）度（４/152＝2.63 ％）と同じであった。

であった。これは健聴者集団における頻度（４/152＝

３．難聴者1,025名において３copy（１copy gain）は2.63 ％）と同じであった。３copy の頻度は難聴者で19名（1.85 ％）で検出された。健聴者コントロー

1.85 ％であり，健聴者からも３copy は検出された。

ルにおいても検出されており，難聴という pheno­

また，難聴の原因別では難聴者全体で第６位，軽中等type には関係がないと考えられた。

度難聴者においては GJB2遺伝子についで第２位の割合であった。

４．難聴の原因別では難聴者全体で第６位，軽中等度
難聴者においては GJB2遺伝子についで第２位の割臨床像では，先天性難聴を呈し，新生児聴覚スク合であった。

リーニングでも検出可能であった。また難聴の程度は５．臨床像では，先天性難聴を呈し，新生児聴覚スク

中等度で進行しないことを示した。常染色体劣性遺伝

リーニングでも検出可能であった。また難聴の程度

形式をとるが，見かけ上，常染色体優性遺伝形式をとは中等度で進行しないことを示した。

る家系でも見られることがある（pseudodominant）。

６．常染色体劣性遺伝形式をとるが，見かけ上，常染

STRC 遺伝子のほか，CATSPER2遺伝子も同時に欠色体優性遺伝形式をとる家系でも見られることがあ失する症例が多く（88.2 ％＝15/17），難聴のほか男る（pseudodominant）。

性不妊も合併する可能性が高い。

７．STRC 遺伝子のほか，CATSPER2遺伝子も同時【結論】軽中等度の先天性難聴の原因として STRC 遺に欠失する症例が多く（88.2 ％＝15/17），難聴の伝子は重要である。STRC 遺伝子欠失による難聴はほか男性不妊も合併する可能性が高い。

非進行性で，男性不妊を合併する可能性がある。

８．次世代シーケンサーで２copy loss と検出された（論文審査の結果の要旨）

18例うち，17例はアレイ CGH でも同様の結果でSTRC 遺伝子は常染色体劣性遺伝形式の非症候群あったが，１例はアレイ CGH で CNV を検出でき性難聴（DFNB16）の原因遺伝子である。STRC 遺伝

ず，偽陽性であった。

子を含む領域では非常に相同性の高い pseudogene が以上より，STRC 遺伝子欠失による難聴は頻度が存在するため，ゲノム再構成が生じやすいと考えられ高く，特に軽中等度難聴の原因遺伝子として重要であている。STRC 遺伝子は蝸牛内の外有毛細胞の ste­

ると思われた。今回明らかになった詳細な臨床像はreocilia に発現しており，STRC 遺伝子による難聴はSTRC 遺伝子欠失症例の予後の予測や介入を選択す蝸牛増幅の障害で起きると考えられる。本研究では，る上で重要な情報として活用可能である。 また，

日本人難聴者における STRC 遺伝子欠失による難聴

STRC 遺伝子欠失の検出に関して現在の保険診療にの頻度と臨床像を検討した。その中で，現在，保険診おいても応用できる可能性が示された。

療で行なった次世代シーケンサーのリードデータを用
いて，STRC 遺伝子の CNV を検出できるか，難聴の282

したがって主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。
信州医誌

68

審査学位論文要旨

Convex Bone Deformity after Closed Reduction of Nasal Bone Fracture（鼻骨骨折整復術後の変形治癒は突出側に残りやすい）西岡宏（論文の内容の要旨）が多かった。鼻骨突出側の治療は難しく，術者は術中【背景】鼻骨骨折は発症頻度が高いものの，手術は比に視覚的変化のみならず，超音波検査などを併用して，

較的容易とされ，術後画像評価も行われないことが多変形改善のための工夫が必要と考えられる。再手術のい。一方，鼻骨骨折整復後の変形治癒症例を外来で目負担は大きいため，初回の手術で正確に整復することにすることもある。鼻骨骨折治療後の変形治癒が，どが求められる。

の程度の頻度で，どのような傾向で生じるかは明らか（論文審査の結果の要旨）になっていない。本研究の目的は，鼻骨形態を術前後

鼻骨骨折は発症頻度が高く，手術は比較的容易とさに3DCT 画像を用いて，比較検討し，変形治癒の傾向

れ，術後画像評価も行われないことが多い。一方，鼻を把握し，治療結果に対する患者満足度調査結果との骨骨折整復後の変形治癒症例を外来で目にすること関連を検討し，治療へのフィードバックを図るものでもある。鼻骨骨折治療後の変形治癒が，どの程度の頻ある。

度で，どのような傾向で生じるか，またその結果に対【方法】2010年５月から2016年１月までに当院を受診して患者満足度はどうなのか，鼻骨形態を術前後にした鼻骨骨折新鮮例100例を対象とした。術前に骨折

3DCT 画像を用いて検討した。

の形態に応じ，斜鼻型（両側），斜鼻型（片側），鞍鼻型，鞍鼻型＋斜鼻型の混合型に分類した。手術は全身麻酔下に非観血的に行い，斜鼻型では陥没側を挙上後，突出側を潰した。鞍鼻型では挙上後に必要に応じて前頭突起の幅を狭く矯正した。混合型では先に鞍鼻型の矯正を行い，その後に斜鼻型の矯正を行った。術前と術後３か月を経過した時点で3DCT を施行し，画像上変形が残っているか，骨のずれに応じて治療効果を３段階（優・良 ･ 可）で評価した。また，患者本人による，鼻形態の満足度３段階（満足 ･ 普通 ･ 不満）評価

その結果，西岡は以下の成績を得た。
１．術前後に3DCT を行えた86例中17例に変形治癒を認めた。
２．変形治癒を認めた斜鼻型（Bilateral）６例全例に突出変形が残存していた。
３．混合型は整復は困難であり，突出変形が残りやすい傾向があった。
４．斜鼻型（Unilateral），鞍鼻型は良好に整復されていた。
５．変形治癒を認めなかった症例は術後患者満足度もを受けた。

高かったが，変形治癒を認めた一部の症例では患者【結果】術前術後に3DCT が行えたのは100例中86例

満足度も低下した。

（斜鼻型（両側）45例，斜鼻型（片側）８例，鞍鼻型

これらの結果より，鼻骨骨折の整復術では，全身麻12例，混合型21例）。術後結果が「優」が69例，「良」

酔下に整復しても突出変形が残りやすいことが証明さが17例，「可」 は認めなかった。 変形治癒が生じ，れた。鼻骨突出側の治療は難しく，変形改善のため，「良」の判定であった斜鼻型（両側）では６例全例に視診，触診のみではなく，超音波検査などを併用する

突出変形が残存し，陥没変形は認めなかった。
「優」

工夫が必要である。変形が残存した場合，患者満足度と評価された症例ではすべて術後鼻形態も「満足」とも低下したが，再手術の負担は大きいため，初回の手評価された。「良」と評価された症例では患者から一術で正確に整復することの重要性が示された。

部「普通」と評価された。
「不満」と患者に評価された症例は認めなかった。

主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

【結論】鞍鼻型，斜鼻型（片側）は整復位が良好なことが多かった。混合型は変形治癒を生じやすかった。
斜鼻型（両側）では全身麻酔下に整復を行っても，突出側に偏位が残りやすい。また CT 上の変形治癒に応じて患者満足度も変化し，突出側部分を指摘する患者
No. 5, 2020283

審査学位論文要旨

Relationship Between the Quantity of Oral Candida and Systemic Condition/Diseases of the
Host : Oral Candida Increases with Advancing Age and Anemia（口腔カンジダ菌量と宿主の全身状態 / 疾患との関係：口腔カンジダ菌は加齢および貧血の進行とともに増加する）
西

牧

史

洋

（論文の内容の要旨）ながら，口腔カンジダ菌の増加に対する宿主の全身状【背景と目的】カンジダ菌は，共生真菌生物ならびに態 / 疾患の影響は不明のままである。本研究の目的は，粘膜組織の日和見病原体である。カンジダ菌は習慣的

口腔カンジダ菌量と宿主の全身状態 / 疾患との間に関に口腔内に存在し，そして多くの全身的および局所的連性があるかについて調査検討することである。

要因により口腔内のカンジダ菌が増加すると言われて本研究では，長野県安曇野市および塩尻市で国保特いる。しかしながら，口腔カンジダ菌の増加に対する

定健診を受けた30歳以上の1,935人中から無作為に抽宿主の全身状態 / 疾患の影響は不明のままである。本

出された563人（261人の男性と302人の女性）が本研

研究の目的は，口腔カンジダ菌量と宿主の全身状態 /究の対象者となった。口腔内のカンジダ菌量はうがい疾患との間に関連性があるかについて調査検討するこ液をサンプルに，カンジダマンナン抗原濃度を測定しとである。

て計測した。カンジダマンナン抗原濃度と特定健診結【方法】長野県安曇野市および塩尻市で国保特定健診

果との関連を統計学的に分析した。

を受けた30歳以上の1,935人中から無作為に抽出された563人（261人の男性と302人の女性）が本研究の対象者となった。口腔内のカンジダ菌量はうがい液をサンプルに，カンジダマンナン抗原濃度を測定して計測した。カンジダマンナン抗原濃度と特定健診結果との関連を統計学的に分析した。

その結果，西牧史洋は次の結論を得た。
１．う蝕歯または欠損補綴歯が多い者，唾液 pH が低い者ほどカンジダ菌量は多かった。
２．80歳を越える者，また，赤血球数が低い者で口腔カンジダ菌量は多かった。
３．HbA1c 値が高いもので，口腔カンジダ菌量が多【結果】カンジダマンナン抗原濃度は，単変量解析にい傾向を認めた。

おいて， 年齢（p＜0.01）， 未処置のう蝕歯数（p＜これらの結果により，口腔カンジダ菌量と宿主の全0.01），義歯の数（p＜0.01），唾液の pH（p＜0.01），
HbA1C（p＜0.05），および，赤血球数（p＜0.01）と相関していた。多変量解析結果では，年齢（p＜0.01），

身状態 / 疾患との関連が示唆された。
主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

未治療の虫歯の数（p＜0.01），補綴歯数（p＜0.01），
唾液の pH（p＜0.01），および，赤血球数（p＜0.01）
は，カンジダマンナン抗原濃度を左右する独立因子であった。カンジダマンナン濃度は80歳以上，未治療または補綴歯数が多い，唾液 pH が低い，赤血球数が少ない者で高かった。また，カンジダマンナン濃度は，HbA1c が上昇した者においても高い傾向を認めた。
【結論】本研究の結果より，口腔カンジダ菌量と宿主の全身状態 / 疾患との間に密接な関係があることを示唆された。口腔カンジダ菌は宿主の免疫能低下で増加する可能性が示された。
（論文審査の結果の要旨）
カンジダ菌は，共生真菌生物ならびに粘膜組織の日和見病原体である。カンジダ菌は習慣的に口腔内に存在し，そして多くの全身的および局所的要因により口腔内のカンジダ菌が増加すると言われている。しかし
284

信州医誌

68

審査学位論文要旨

Past history of hepatocellular carcinoma is an independent risk factor of treatment failurein patients with chronic hepatitis C virus infection receiving direct- acting antivirals（肝細胞癌既往は，Ｃ型慢性肝炎に対する直接作用型抗ウイルス剤治療の不成功に関連する独立因子
である）
杉

浦

亜

弓

（論文の内容の要旨）かになった。肝細胞癌既往有無と各種臨床検査値（各【目的】Ｃ型慢性肝炎のインターフェロン（IFN）治

マーカーのカットオフ値，血小板＜15.2万/μL，アル療は副作用が多くウイルス学的著効（sustained viro­

ブミン＜4.0 g/dL，FIB-4 index≧3.25，APRI≧1.0，

logical response : SVR）率は50 ％程度と十分ではな

M2BPGi≧3.0 COI，Autotaxin≧2.2 mg/L） を用いかった。2014年に登場した直接作用型抗ウイルス剤て，DAAs 治療不成功に関連する因子について多重（Direct Acting Antivirals : DAAs）治療では95 ％以

ロジスティック回帰分析を行ったところ，肝細胞癌既往

上の SVR 率が得られるようになった。しかし，ウイ

有は DAAs 治療不成功に関する独立した因子であっルス排除に至らない症例も存在する。本研究では，肝た（オッズ比：3.56，95 ％信頼区間：1.32～9.57，

細胞癌既往に注目し，この臨床的特徴と肝細胞癌既往

p＝0.01）。

が DAAs 治療効果に与える影響を明らかにすること【結語】肝細胞癌既往有例の臨床的特徴としては，肝を目的とした。

線維化進展が示された。さらに，DAAs 治療不成功【方法】2015年４月～2017年10月に DAAs 治療を導入に関連して，肝細胞癌既往有は独立した有意の因子でしたＣ型肝炎838例（年齢中央値：69歳， 男性：

あった。DAAs 治療は病態進展前，特に肝細胞癌を44.1 ％）を対象とした。治療法別の内訳は，DCV＋発症する前の出来るだけ早期に治療介入することが望

ASV：288例，LDV/SOF：267例，OBV/PTV/r：22

ましいと考えられた。

例，EBV＋GRZ：60例，SOF＋RBV：201例であった。

（論文審査の結果の要旨）

肝細胞癌既往有群と既往無群に分けて，臨床的背景，

Ｃ型肝炎は感染から10年の経過で慢性肝炎，20年で各種検査値，DAAs 治療効果を比較検討した。非侵肝硬変へと進展し，30年で肝癌を合併するという慢性襲的肝線維化マーカーとして，FIB-4 index と APRI的な経過を経ていく疾患である。治療としてインターは計算式を用いて，M2BPGi と Autotaxin は保存血清

フェロン（IFN）が用いられていたが，副作用が多くを用いて一括測定した。

ウ イ ル ス 学 的 著 効（ sustained virological respon­【結果】全体の SVR 率は94.7 ％（794/838例）であっ

se : SVR）率は50 ％程度と十分ではなかった。2014年

た。肝細胞癌既往有群は79例（9.4 ％）であった。既に登場した直接作用型抗ウイルス剤（Direct Acting

往有群（79例）と既往無群（759例）の比較では，既Antivirals : DAAs）治療では95 ％以上の SVR 率が得

往 有 群 は 有 意 に 高 齢 で あ り（ 72 歳 vs. 69 歳 ，p＝られるようになった。実際に長野県における DAAs

0.003），男性の割合が多かった（60.8 ％ vs. 42.4 ％，治療成績でも，SVR 率は96 ％と高い治療効果を得て

p＝0.002）。臨床検査値では，既往有群が既往無群に比いる。しかしながら少数例ではあるが DAAs failure

較して，血小板数（11.5万 vs. 15.2万/μL，p＜0.001），

症例（治療不成功例）が存在する。肝細胞癌の併存がアルブミン値（3.9 vs. 4.2 mg/dL，p＜0.001）は低DAAs failure のリスク因子であることは報告されてく，肝線維化マーカーである FIB-4 index（4.7 vs.

いるが，肝細胞癌既往例と DAAs 治療効果に関して

3.0 ，p＜0.001 ），APRI（ 1.1 vs. 0.7 ，p＝0.009 ），は未だ検討されていない。2015年４月～2017年10月にM2BPGi（3.80 vs. 1.78 COI，p＜0.001），Autotaxin

DAAs 治療を導入した長野県内18施設におけるＣ型（1.91 vs. 1.50 mg/L，p＜0.001）はいずれも有意に

慢性肝炎症例960名の内，データ欠損症例である122名高かった。また，SVR 率は既往有群で有意に低かっを除外した838名を対象とし，肝細胞癌の既往有群とた（87.4 ％ vs. 96.5 ％，p＝0.001）。これらのことよ既往無群の２群に分け，後方視的に患者背景と臨床検

り，肝細胞癌既往有群の臨床的特徴としては，高齢で査値の比較検討を行った。

男性に多く，肝線維化がより進展していることが明ら
No. 5, 2020

その結果，杉浦亜弓は以下の結論を得た。
285

審査学位論文要旨

多数例の検討により，Ｃ型慢性肝炎の規治療薬であ１．肝細胞癌既往有例の臨床的特徴としては高齢で男る DAAs 治療に対する治療不成功のリスク因子とし性が多かった。
２．肝細胞癌既往有例の臨床検査値では血小板低下やて，肝細胞癌の既往が挙げられることの報告である。

肝線維化マーカーの上昇を認め，肝線維化進展が示

肝細胞癌既往有例では，病態が進行し肝線維化進展唆された。

が示唆された。 また肝細胞癌既往有例では DAAs

３．肝細胞癌既往有群は既往無群と比して有意にDAAs failure 率が高かった。

failure 率が高く，さらに肝細胞癌再発率が高いことから，DAAs 治療は病態進展前，特に肝細胞癌を発４．DAAs failure に関連する因子の多変量解析を行うと肝細胞癌の既往のみが抽出され，肝細胞癌の既症する前の出来るだけ早期に治療介入が望ましいと考えられた。

往が DAAs failure に関連する独立した因子である可能性が考えられた。

したがって主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

A high-cholesterol diet promotes steatohepatitis and liver tumorigenesis in HCV core genetransgenic mice（高コレステロール食は HCV コア遺伝子トランスジェニックマウスにおける脂肪性肝炎と肝腫瘍の発生を促進させる）
王（論文の内容の要旨）

暁経(NRF2) axis, enhanced fibrogenesis, and consequently【 Background and Aim 】Previous epidemiologicalaccelerated hepatic tumorigenesis.

studies have suggested a link between high-choles­【Conclusion】These results demonstrate that dietary

terol intake and liver disease progression, including

cholesterol facilitates liver tumorigenesis by induc­hepatocellular carcinoma (HCC). However, the precise

ing steatohepatitis and up-regulating cellular stressmechanism of hepatotoxicity and hepatocarcinogenesis

and pro-inflammatory NF-κB and detoxifying p62/

caused by excessive cholesterol consumption remains

Sqstm1-NRF2 signals. Therefore, high dietary cho­unclear.

lesterol should be avoided for HCV-infected patients【 Methods 】We aimed to investigate the impact ofto prevent development of steatohepatitis, liver fibro­

dietary cholesterol using hepatitis C virus core genesis, and HCC.

transgenic (HCVcpTg) mice, which spontaneously（論文審査の結果の要旨）

developed HCC with age. Male HCVcpTg mice werePrevious epidemiological studies have suggested atreated for 15 months with either a control diet or anlink between high-cholesterol intake and liver dis­isocaloric diet containing 1.5 ％ cholesterol, and liverease progression, including hepatocellular carcinoma

phenotypes and tumor-associated signaling path­(HCC). However, the precise mechanism of hepato­ways were evaluated.

toxicity and hepatocarcinogenesis caused by exces­【Results】The high-cholesterol diet-fed HCVcpTg

sive cholesterol consumption remains unclear.

mice exhibited a significantly higher incidence ofWe aimed to investigate the impact of dietary cho­liver tumors compared with the control diet micelesterol using hepatitis C virus core gene transgenic(100 ％ vs. 41 ％, P＜0.001). The diet induced steato­(HCVcpTg) mice, which spontaneously developed

hepatitis with pericellular fibrosis and evoked higher

HCC with age. Male HCVcpTg mice were treatedmRNA expression of pro-inflammatory and pro-for 15 months with either a control diet or an isoca­

fibrotic mediators along with greater oxidative andloric diet containing 1.5 ％ cholesterol, and liver phe­endoplasmic reticulum stress in the liver. Moreover,notypes and tumor-associated signaling pathways

long-term consumption of cholesterol-rich diet acti­

were evaluated.

vated nuclear factor-kappa B (NF-κB) and p62/se­questosome 1 (Sqstm1)-nuclear factor erythroid 2
286

その結果，王 暁経は以下の結論を得た。
１．The high-cholesterol diet-fed HCVcpTg mice
信州医誌

68

審査学位論文要旨

exhibited a significantly higher incidence of liverol facilitates liver tumorigenesis by inducing steato­tumors compared with the control diet mice.

hepatitis and up-regulating cellular stress and pro-

２．The high-cholesterol diet induced steatohepati­

inflammatory NF-κB and detoxifying p62/Sqstm1-

tis with pericellular fibrosis and evoked higher

NRF2 signals. Therefore, high dietary cholesterolmRNA expression of pro-inflammatory and pro-should be avoided for HCV-infected patients to pre­fibrotic mediators along with greater oxidative andvent development of steatohepatitis, liver fibrosis,

endoplasmic reticulum stress in the liver.

and HCC.

３．Long-term consumption of cholesterol-rich diet

これらの結果は，高コレステロール食の長期摂取にactivated nuclear factor-kappa B (NF-κB) and p62

よる肝腫瘍発生促進作用を明らかにし，その分子機構/sequestosome 1 (Sqstm1)-nuclear factor erythroidを理解するうえで重要な知見を提示していると考えら

2 (NRF2) axis, enhanced fibrogenesis, and conse­

れた。従って，主査，副査は一致して本論文を学位論

quently accelerated hepatic tumorigenesis.

文として価値があるものと認めた。

The present results showed that dietary cholester­

Clinical features of IgG4-related periaortitis/periarteritis based on the analysis of 179 patients with IgG4-related disease : a case–control study（IgG4関連疾患179名の解析によるIgG4関連動脈周囲炎の臨床的特徴の解明）
小 澤

真希子

（論文の内容の要旨）した。その中で検査所見が不十分であった44名を除外【背景と目的】IgG4関連疾患はその発症に自己免疫機し，179名を対象に解析した。検討方法としては，画序の関与が考えられる全身性の疾患であり，臨床的な像所見上 IgG4関連動脈周囲炎がある群とない群で，特徴として血中 IgG4値が上昇すること，画像所見と患者背景，疾患活動性マーカー，IgG4関連疾患の他して諸臓器の腫大や結節，肥厚性病変を呈すること，の合併について比較検討した。次に，ステロイド治療

病変局所に IgG4陽性形質細胞浸潤を認めること，ス

後に血管内腔が拡張した群と拡張しなかった群で，患テロイド治療に良好に反応することがあげられる。

者背景，疾患活動性マーカーを比較検討した。

IgG4関連疾患で大動脈周囲に壁肥厚を認める画像【結果】IgG4関連動脈周囲炎は179例中65例（36.3 ％）所見を呈するものが指摘され，後腹膜線維症に包括さに認められた。動脈周囲炎の病変分布は Type１～５

れていたが，胸部大動脈，総腸骨動脈など広範な血管の５種類に分類した。この内，腹部大動脈の腎動脈系に壁肥厚が分布する症例の存在も明らかになり，

分岐部以下から総腸骨動脈まで病変が連続している

IgG4関連血管病変が想定された。また，2008年以後，

Type２が29例（44.6 ％）で最も多かった。また，病原因不明の炎症性大動脈瘤の手術標本で IgG4陽性細変は腹部大動脈の腎動脈分岐部以下に最も多く認めた胞が多数浸潤しているものがあることが報告されるよ（＞80 ％）。IgG4関連動脈周囲炎陽性群と陰性群の比

うになり，病理学的にも IgG4関連動脈病変の存在が較では，診断時の年齢は陽性群で有意に高く，活動性明らかになった。これら IgG4関連動脈周囲炎は一般

マーカーは IgG，IgG4，免疫複合体，sIL-2R が陽性群

的にステロイド治療に良好な反応を示すが，一方でで有意に高値であった。IgG4関連疾患の他臓器病変

IgG4関連動脈周囲炎に対するステロイド治療によりは動脈周囲炎陽性群で腎病変が有意に多かった。IgG4

動脈径の拡張が増大し，動脈瘤を形成した症例も報告

関連動脈周囲炎陽性群65例の中でステロイド治療をされている。今回，IgG4関連動脈周囲炎の頻度，病受けたのは43例（66 ％）であり，治療後，全患者が動変の分布，IgG4関連動脈周囲炎発症の危険因子，ス脈の壁肥厚の改善を認めたが，一方，９例（21 ％）テロイド治療後に血管内腔が拡張する危険因子などので血管内腔が拡張した。ステロイド治療による血管内同定を目的に本検討を行った。

腔拡張の増悪因子として，単変量解析と多変量解析の【対象患者及び方法】2003年１月１日から2015年12月

両方で治療前の血管内腔拡張が同定された。

31日までに IgG4関連疾患と診断された223名を対象と【結論】IgG4関連動脈周囲炎は，腎動脈分岐部以下のNo. 5, 2020287

審査学位論文要旨

腹部大動脈から総腸骨動脈までに病変が分布するもの

関連疾患の他の合併症について比較検討した。更にスが多く，動脈周囲炎を伴わない IgG4関連疾患症例にテロイド治療後の血管内腔拡張の有無で患者背景と疾比し，診断時年齢が高く，IgG，IgG4，免疫複合体，

患活動性マーカーを比較検討した。

sIL-2R が高値であった。ステロイド治療前に血管内

その結果小澤は次の結論を得た。

腔が拡張している症例は治療開始後に血管内腔拡張が１．IgG4関連動脈周囲炎は腹部大動脈の腎動脈分岐部以下に最も多く認めた。

増悪する危険性が示唆された。
（論文審査の結果の要旨）

２．IgG4関連動脈周囲炎の有無で比較すると単変量

IgG4関連疾患で大動脈周囲に壁肥厚を認める画像

解析では診断時の年齢，IgG，IgG4，免疫複合体，所見を呈するものが指摘され後腹膜線維症に包括されsIL-2R が有意に高値であり，多変量解析では IgGていたが胸部大動脈，総腸骨動脈など広範な血管系に高値のみが有意となった。

壁肥厚が分布する症例の存在も明らかになり，IgG4

３．他臓器病変合併は腎・尿路系の病変が多い傾向が見られた。

関連血管病変が想定された。また2008年以後，原因不明の炎症性大動脈瘤の手術標本で IgG4陽性細胞が多４．ステロイド治療を受けた症例全例で IgG4関連動数浸潤しているものがあることが報告されるようにな

脈周囲炎における動脈壁肥厚は改善したが21 ％でり病理学的にも IgG4関連動脈病変の存在が明らかに

血管内腔の拡張を認めた。

なった。これら IgG4関連動脈周囲炎は一般的にステ

５．血管内腔が拡張する危険因子としてステロイド治

ロイド治療に良好な反応を示すが一方で IgG4関連動療前の血管内腔の拡張が同定された。

脈周囲炎に対するステロイド治療により動脈径の拡張

これらの結果より IgG4関連動脈周囲炎は腎動脈分が増大し動脈瘤を形成した症例も報告されている。今岐部以下の腹部大動脈から総腸骨動脈までに病変が分回 IgG4関連動脈周囲炎の頻度，病変分布，発症の危布するものが多く，動脈周囲炎を伴わない IgG4関連

険因子，ステロイド治療後の血管内腔拡張の危険因子

疾患症例に比し診断時年齢が高く，IgG，IgG4，免疫などについて検討した。

複合体，sIL-2R が高値であった。ステロイド治療前2003年から2015年までに IgG4関連疾患と診断されに血管内腔が拡張している症例は治療開始後に血管内た223名の患者のうち詳細な検討が可能であった179名

腔拡張が増悪する危険性が示唆された。よって主査，を対象に解析した。検討方法としては IgG4関連動脈

副査は一致して本論文を学位論文として価値があるも周囲炎の有無で患者背景，疾患活動性マーカー，IgG4のと認めた。

Fluorine-18-fluorodeoxyglucose-positron emission tomography evaluation in metastaticbone lesions in lung cancer : Possible prediction of pain and skeletal-related events（肺癌骨転移症例の FDG-PET 検査における骨関連疼痛の有無および骨関連事象の予測）
五

味

大

輔

（論文の内容の要旨）

学部附属病院で診断・治療を受けて，初診診断時に相【背景と目的】フルオロデオキシグルコース-ポジトロ

澤病院ポジトロン断層撮影センターで FDG-PET 検

ン放出断層撮影（FDG-PET）検査は，癌の診断，遠査を受けた139名の患者のうち，転移性骨病変を認め隔転移の検索に有用で，病期分類および治療方針のた49名の患者（男性27人，女性22人）を後方視的に評決定のために重要な検査である。癌原発巣における価した。肺癌の組織型は非小細胞肺癌42名，小細胞肺

FDG-PET 検査に関する研究は多数なされているが，癌７名であった。転移性骨病変は合計185個を認め，転移性骨病変に関する FDG-PET の臨床的意義の報

FDG の取り込み・集積を骨病変ごとに最大標準化取告はされていない。本研究は，肺癌患者における転移り込み値（SUVmax）を計測して評価した。肺癌原発性骨病変の FDG 取り込みと疼痛や骨関連事象（病的巣の SUVmax も測定し，SUVmax の骨病変 / 原発巣病

骨折などで手術や放射線治療を必要とする状況）など

変の比率（B/P 比）も計算した。診療録から骨転移の臨床経過との関連性を評価するために行った。

の疼痛の有無や骨関連事象を評価した。

【方法】2010年４月から2015年６月までに信州大学医【結果】骨の SUVmax および B/P 比は，骨関連疼痛の

288

信州医誌

68

審査学位論文要旨ある患者で，疼痛のない患者に比し有意に高値であっポジトロン断層撮影センターで FDG-PET 検査を受た。FDG-PET 検査後の臨床経過において，骨関連事

けた139名の患者のうち，転移性骨病変を認めた49名

象を生じた患者は，認めない患者と比較しても，同様の患者（男性27人，女性22人）を後方視的に評価した。

に骨の SUVmax および B/P 比は有意に高かった。さ

肺癌の組織型は非小細胞肺癌42名，小細胞肺癌７名

らに，肺癌原発巣の SUVmax は，非小細胞肺癌と小であった。 転移性骨病変は合計185個を認め，FDG

細胞肺癌患者で同程度であったが，転移性骨病変におの取り込み・集積を骨病変ごとに最大標準化取り込

ける SUVmax および B/P 比は，非小細胞性肺癌患者

み値（SUVmax）を計測して評価した。肺癌原発巣のと比較して小細胞性肺癌患者で有意に低値であった。

SUVmax も測定し，SUVmax の骨病変 / 原発巣病変【結論】転移性骨病変を有する肺癌患者における FDG-の比率（B/P 比）も計算した。診療録から骨転移のPET 検査は，転移性骨病変の疼痛の有無とその後の疼痛の有無や骨関連事象を評価した。

骨関連事象の発生を予測するのに有用であることが示

その結果，五味は次の結論を得た。

唆された。加えて，非小細胞性肺癌患者と小細胞肺癌患者の間で，骨転移病変の SUVmax および B/P 比に統計学的有意差を認めたことから，骨転移部位での生物学的活性に差異がある可能性が示唆された。

１．有痛性骨病変は非有痛性骨病変に比し，SUVmax，
B/P 比で有意に高値を示した。
２．同様に骨関連事象を生じた骨病変の SUVmax，
B/P 比も有意に高値を示した。

（論文審査の結果の要旨）

３．原発巣の SUVmax に組織学的な差を認めないもフルオロデオキシグルコース-ポジトロン放出断層のの，小細胞肺癌の骨病変は非小細胞肺癌と比較し撮影（FDG-PET）検査は，癌の診断，遠隔転移の検て，SUVmax，B/P 比ともに有意に低値を示した。

索に有用で，病期分類および治療方針の決定のためにこれらの結果より，転移性骨病変を有する肺癌患者

重要な検査である。癌原発巣における FDG-PET 検における FDG-PET 検査は，転移性骨病変の疼痛の査に関する研究は多数なされているが，転移性骨病変有無とその後の骨関連事象の発生を予測するのに有用に関する FDG-PET の臨床的意義の報告はされていであることが示唆された。加えて，小細胞肺癌患者とない。本研究は，肺癌患者における転移性骨病変の非小細胞肺癌患者の間で，骨転移病変の SUVmax お

FDG 取り込みと疼痛や骨関連事象（病的骨折などでよび B/P 比に統計学的有意差を認めたことから，骨手術や放射線治療を必要とする状況）などの臨床経過

転移部位での生物学的活性に差異がある可能性が示唆との関連性を評価するために行った。

された。

2010年４月から2015年６月までに信州大学医学部附属病院で診断・治療を受けて，初診診断時に相澤病院

主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

Do the efficacy and safety of treatment with landiolol, an ultra-short-acting β1-selective
blocker, differ in the urgent management of rapid atrial fibrillation between patients complicated with cardiac versus non-cardiac disease ?（非心疾患に合併した頻脈性心房細動に対するランジオロール塩酸塩の有効性および安全性の検討）
上條

泰（論文の内容の要旨）

薬物治療の有効性および安全性を評価した報告は少な【背景と目的】現在，頻脈性心房細動（AF）に対するい。本研究の目的は，非心疾患に合併した AF に対す薬物治療として β 遮断薬，ジギタリス，ジルチアゼム

るランジオロール塩酸塩の有効性および安全性を明らなどが推奨されている。β 遮断薬であるランジオロー

かにすることである。

ル塩酸塩は，β1選択性が高く半減期が極めて短いため，【方法】2011年１月から2016年10月に信州大学医学

特に緊急時の介入において速効性が期待できる薬剤で部附属病院へ入院し，入院中に生じた心拍数（HR）ある。しかし，頻脈性 AF に対する薬物治療のエビデ

120/分以上の頻脈性 AF に対しランジオロール塩酸塩

ンスは主に心疾患に合併した AF を対象とした研究にを使用した症例を対象とし，入院時主病名に基づき基づくものであり，非心疾患に合併した AF に対する「心疾患群」および「非心疾患群」に分け比較検討を

No. 5, 2020289

審査学位論文要旨行った（後ろ向き研究）。選定除外基準は，20歳未満，安全性の評価：有害事象の発生は両群ともわずかで投与中に電気学的除細動を施行または死亡，カルテ記あった（5.45 ％，n＝3 vs. 2.17 ％，n＝2；P＝0.288）。

録が不十分，非心疾患群のうち心疾患既往または左室

臨床的評価：ランジオロール塩酸塩の無効と30日死駆出率50 ％未満とした。評価項目について，有効性

亡との関連性につき多変量 Cox 回帰モデルを使用し評価項目を「ランジオロール塩酸塩の使用開始２時間評価したところ，両者に強い関連性を認めた（ハザーの時点で HR 110/分以下かつ20 ％以上減少」，安全性

ド比，5.043；95 ％ CI，1.516-16.777；P＜0.01）。

評価項目を「ランジオロール塩酸塩投与による有害事【結語】ランジオロール塩酸塩は，非心疾患を合併し象の発生」，臨床的評価項目を「ランジオロール塩酸

た頻脈性 AF に対し安全かつ速やかに心拍数を低下さ

塩投与開始後30日以内の全死亡」とした。なお，本研

せ，全身炎症に気をつければより効果的に心拍数を制

究では心疾患を「心臓に起因する疾患（虚血性心疾患，

御できるかもしれない。ランジオロール塩酸塩の無効

心不全，弁膜症など），心臓が病巣となる感染症（感が予後に影響を及ぼす可能性があることが示唆された。

染性心内膜炎，急性心膜炎など）」と定義した。また，（論文審査の結果の要旨）

術後 AF の概念に基づいた分類として，手術中または現在，頻脈性心房細動（AF）に対する薬物治療と術後に生じた AF を「手術群」，その他を「非手術群」

して β 遮断薬，ジギタリス，ジルチアゼムなどが推奨としてサブグループ解析を行った。

されている。β 遮断薬であるランジオロール塩酸塩は，【結果】選択基準を満たした症例は133例（心疾患群55

β1選択性が高く半減期が極めて短いため，特に緊急時

例，非心疾患群78例）であった。年齢，性別，体重にの介入において速効性が期待できる薬剤である。しかつき両群に差はなく，心疾患群で心疾患を既往に持し，頻脈性 AF に対する薬物治療のエビデンスは主に

つ症例は35.6 ％であった。ランジオロール塩酸塩投

心疾患に合併した AF を対象とした研究に基づくもの

与前に使用していた薬剤で，ループ利尿薬，ACE-I/

であり，非心疾患に合併した AF に対する薬物治療のARB，硝酸剤，β 遮断薬，ジギタリス，アミオダロン，

有効性および安全性を評価した報告は少ない。今回，スタチン，ドブタミンが心疾患群で多く使用されてい非心疾患に合併した AF に対するランジオロール塩酸

た。

塩の有効性および安全性を後方視的に評価した。

有効性の評価：全体で非心疾患群と心疾患群で有効

2011年１月から2016年10月に信州大学医学部附属病率に有意差があり（58.2 ％，n＝32 vs. 35.9 ％，n＝院へ入院し，入院中に生じた心拍数（HR）120/分以

28；P＝0.02），非手術群における有意差は特に顕著

上の頻脈性 AF に対しランジオロール塩酸塩を使用しで あ っ た（ 58.2 ％ ，n＝23 vs. 35.9 ％ ，n＝7；P＜た症例を対象とし，入院時主病名に基づき「心疾患0.05）。両群ともランジオロール塩酸塩の投与により群」および「非心疾患群」に分け比較検討を行った。

心拍数は有意に低下し（心疾患群：投与前145±17/分，

有効性評価項目を「ランジオロール塩酸塩の使用開始

投与後103±22/分，P＜0.001；非心疾患群：投与前２時間の時点で HR 110/分以下かつ20 ％以上減少」，

145±18/分，投与後114±23/分；P＜0.001），心疾患

安全性評価項目を「ランジオロール塩酸塩投与による群は非心疾患群に比べて心拍数がより低下した（27.2

有害事象の発生」，臨床的評価項目を「ランジオロー±16.8 ％ vs. 20.9±12.4；P＝0.04）。血圧は収縮期，

ル塩酸塩投与開始後30日以内の全死亡」とした。

拡張期ともにランジオロール塩酸塩投与前後で明らか

その結果，上條 泰は以下の結果を得た。

な変化はなかった。ランジオロール塩酸塩投与開始２

１．心疾患群，非心疾患群ともにランジオロール塩酸

時間以内に洞調律に復帰した例，ランジオロール塩酸塩の投与により心拍数は有意に低下していた（心疾塩の投与量や投与時間は両群に差はなかった。頻脈性患群：投与前145±17/分，投与後103±22/分，P＜

AF に対するランジオロールの有効性との関連性につき

0.001；非心疾患群：投与前145±18/分，投与後114

ロジスティック回帰分析に基づき多変量解析を行い，独±23/分；P＜0.001）。

立因子として抽出された項目は心疾患（OR，2.877

２．心疾患群と非心疾患群でランジオロール塩酸塩の；95 ％ CI，1.216-6.807；P＝0.02），術後（OR，2.753

有効率に有意差がみられた（58.2 ％，n＝32 vs.

；95 ％ CI，1.239-6.118；P＝0.02），CRP（Ｃ反応蛋白）値上昇（OR，0.958；95 ％ CI，0.920-0.997；
P＝0.04）の３つであった。
290

35.9 ％，n＝28；P＝0.02）。
３．頻脈性 AF に対するランジオロールの有効性と強い関連性が認められたものは，心疾患（OR，2.877
信州医誌

68

審査学位論文要旨；95 ％ CI，1.216-6.807；P＝0.02），手術後（OR，

1.516-16.777；P＜0.01）。

2.753 ； 95 ％ CI ，1.239-6.118 ； P＝0.02 ），CRP

これらの結果より，ランジオロール塩酸塩は非心疾（Ｃ反応蛋白）値上昇（OR，0.958；95 ％ CI，0.920-

患を合併した頻脈性 AF に対し安全かつ速やかに心拍0.997；P＝0.04）の３項目であった。

数を低下させ，全身炎症に気をつければより効果的に

４．有害事象の発生は両群ともわずかであった（5.45

心拍数を制御できる可能性があること，ランジオロー
ル塩酸塩の無効が予後に影響を及ぼす可能性があるこ％，n＝3 vs. 2.17 ％，n＝2；P＝0.288）。
５．ランジオロール塩酸塩の無効と30日死亡との間に強い関連性を認めた（ハザード比，5.043；95 ％ CI，とを示唆している。よって，主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

Clinical features and new diagnostic criteria for the syndrome of periodic fever, aphthous
stomatitis, pharyngitis, and cervical adenitis (PFAPA)（周期性発熱・アフタ性口内炎・咽頭炎・頸部リンパ節炎症候群（PFAPA）の臨床学的特徴と新診断基準）
竹内（論文の内容の要旨）【背景】周期性発熱・アフタ性口内炎・咽頭炎・頸部勇介

IFN-γ，IP-10，MIG は BD Cytometric Bead Array
により，IL-18は，ELISA により測定した。

リンパ節炎症候群（PFAPA）は，口内炎，頸部リン

PFAPA 新診断基準については，Thomas の診断基パ節炎，扁桃炎・咽頭炎を伴う発熱発作を反復する原準や我々の臨床症状，検査結果などをもとに，臨床にお因不明の自己炎症性疾患である。PFAPA は1987年にいて鑑別が重要となる感染症例（n＝104）と，MEFVMarshall らによって1987年に初めて報告され，1989の exon10に M694I 変異を有する家族性地中海熱（n＝年に PFAPA と命名された。PFAPA は５歳以下に発67）を対象として検討した。

症することが多く，月１回１週間以内の高熱を反復し，【結果】

CRP などの炎症検査所見が極めて高値になる。随伴

１．PFAPA 患者257例の平均発症年齢は2.7±1.6歳

症状も特徴的で，白苔を伴う扁桃炎 / 咽頭炎，口内炎，で，90.1 ％は５歳以下での発症であった。発熱周期

圧痛を伴う頸部リンパ節炎，咽頭痛，嘔吐，頭痛など

は1.2±0.8か月，最高体温は39.7±0.6 ℃で，発熱期を随伴する。家族歴を有する症例が約半数にみられ，間は4.5±1.3日であった。

浸透率の低い常染色体優性遺伝が示唆されるが，原因

２．PFAPA 患者の62 ％で反復性発熱や慢性扁桃炎，

遺伝子の同定には至っておらず，なぜ周期的に発熱す

扁桃摘出歴の家族歴を有した。

るのかは不明である。1999年に Thomas らによって

３．咽頭炎 / 扁桃炎は238人中251人（94.8 ％）にみ提唱された診断基準は，スクリーニングには有用であられ， そのうち白苔を伴う扁桃炎は226人中163人

るが，感染症の反復などとは区別ができず，PFAPA（72.1 ％）にみられた。圧痛を伴う頸部リンパ節炎はの確定診断には不十分である。

252人中147人（58.3 ％）に，口内炎は251人中130人【目的】PFAPA 患者の臨床的特徴を明らかにし，臨（51.8 ％）にみられた。また，咽頭痛は45.4 ％，嘔吐

床的に有用な PFAPA における新診断基準を作成すは21.4 ％，頭痛は33.6 ％にみられた。

る。

４ ．PFAPA の 発 作 中 の WBC は 12,500±4,700/μl ，【対象と方法】2000年４月から2018年４月まで信州大

CRP は6.7±4.6mg/dl，血清アミロイドＡは669.2±

学病院や関連施設において，Marshall らや Thomas ら

449.8μg/ml であり，非発作時には陰性化した。血清の診断基準を参考に，長期的に診療した結果，PFAPA

IgD は199人中72人で上昇（36.2 ％）で上昇がみられと診断した日本人257名（男児143名，女児114名）をた（23.0±12.2mg/dl）。

対象とした。PFAPA 患者の臨床所見や検査結果は，

５．治療効果については，シメチジン内服では95人中カルテ記載を基に後方視的に検討した。PFAPA 患者

49人（51.6 ％）が，発作時プレドニゾロン頓用内服の発熱時の好中球表面 CD64の発現は，抗 CD64抗体

は全例で，扁桃摘出は29人中25人（86.2 ％）で有効を用いて FACS Calibur cytometer で測定した。血清であった。

サイトカインについては，IL-1β，IL-6，IL-8，TNF-α，６ ．PFAPA 発 作 時 に は ，IL-6 ，IL-8 ，IL-18 ，No. 5, 2020291

審査学位論文要旨

TNF-α，IFN-γ，G-CSF，IP-10，MIG，MCP-1の上扁桃炎・咽頭炎を伴う発熱発作を反復する原因不明の昇が認められ，特に IFN-γ は，正常コントロールや自己炎症性疾患である。PFAPA は５歳以下に発症す

細菌感染症では検出感度未満であったが，PFAPA 発ることが多く，月１回１週間以内の高熱を反復し，CRP

作時のみ17.8±21.1pg/ml と上昇が認められた。

などの炎症検査所見が極めて高値になり，白苔を伴う

７． 好中球表面 CD64発現は，PFAPA 発作時， 正

扁桃炎 / 咽頭炎，口内炎，圧痛を伴う頸部リンパ節炎，常コントロール，細菌感染症でそれぞれ11,421.1±

咽頭痛，嘔吐，頭痛などの特徴的な所見を随伴する。

8421.1 ， 1,384.5±642.9 ， 4,455.0±1,304.9 と家族歴を有する症例が約半数にみられ，浸透率の低い

PFAPA 発作時に著明に亢進していた。

常染色体優性遺伝が示唆されるが，原因遺伝子の同定

８．PFAPA 新診断基準は，「８日未満の繰り返す発には至っておらず，なぜ周期的に発熱するのかは不明

熱」を必須項目とした。発熱の回数は，感染症例とのである。1999年に Thomas らによって提唱された診

検 討 で ， 年 間 ３ 回 の 発 熱 で 感 度 99.2 ％ ・ 特 異 度

断基準は，スクリーニングには有用であるが，感染症

67.3 ％ ， 年 間 ４ 回 の 発 熱 で 感 度 98.0 ％ ・ 特 異 度の反復などとは区別ができず，PFAPA の確定診断に80.8 ％であったため，「少なくとも４回」とした。副は不十分である。

項目は，４項目該当時での感染症との比較による感度・特異度はそれぞれ93.8 ％・94.2 ％，家族性地中海熱との比較では93.8 ％・95.6 ％で，５項目該当時
で ， 両 者 と 感 度・ 特 異 度 は そ れ ぞ れ 80.2 ％・100

PFAPA 患者の臨床的特徴を明らかにし，臨床的に有用な PFAPA における新診断基準を作成した。
その結果，竹内らは次の結論を得た。
１．PFAPA 患者257例の平均発症年齢は2.7±1.6歳％であった。

で，90.1 ％は５歳以下での発症であった。発熱周９．本研究での Thomas 基準による感度・特異度は，期は1.2±0.8か月，最高体温は39.7±0.6 ℃で，発感染症との比較で81.7 ％・87.0 ％，家族性地中海熱

熱期間は4.5±1.3日であった。

との比較で81.7 ％・100 ％であった。
【考察】本研究では，PFAPA 患者257例における臨床

２．PFAPA 患者の62 ％で反復性発熱や慢性扁桃炎，
扁桃摘出歴の家族歴を有した。

像，検査結果，家族歴，治療反応性を解析し，さらに，

３．咽頭炎 / 扁桃炎は238人中251人（94.8 ％）にみ鑑別疾患で重要となる感染症と家族性地中海熱と比較られ，そのうち白苔を伴う扁桃炎は226人中163人

し，PFAPA の新診断基準を検討した。PFAPA 患者（72.1 ％）にみられた。圧痛を伴う頸部リンパ節炎における発作時の好中球表面 CD64の高発現は，ウイ

は252人中147人（58.3 ％） に， 口内炎は251人中

ルス感染症や，細菌感染症や家族性地中海熱との鑑別

130人（51.8 ％）にみられた。また，咽頭痛は45.4 ％，に有用である可能性が，また，血清 IFN-γ の上昇は，嘔吐は21.4 ％，頭痛は33.6 ％にみられた。

Ｔ細胞や NK 細胞による産生亢進によると報告され

４ ．PFAPA の 発 作 中 の WBC は 12,500±4,700/μl ，ており，それらの細胞が発作の病態に関与している可CRP は6.7±4.6 mg/dl，血清アミロイドＡは669.2

能性が示唆された。PFAPA の新診断基準では，一般±449.8 μg/ml であり，非発作時には陰性化した。

臨床で重要となる感染症との識別に最も適切な発作回

血清 IgD は199人中72人で上昇（36.2 ％）で上昇が数は４回であった。PFAPA は初期にはすべての臨床みられた（23.0±12.2 mg/dl）。

症状を満たさない例もあるため，副項目該当数につい５．治療効果については，シメチジン内服では95人中ては，４項目を満たした時点で PFAPA を疑い，５49人（51.6 ％）が，発作時プレドニゾロン頓用内

項目を満たした場合，PFAPA と確定診断することで，服は全例で，扁桃摘出は29人中25人（86.2 ％）で感染症と家族性地中海熱とを十分な感度・特異度で識有効であった。

別できることが示された。新診断基準では，従来の６ ．PFAPA 発 作 時 に は ，IL-6 ，IL-8 ，IL-18 ，

Thomas 基準と比較し，感度は副項目数が４項目で，TNF-α，IFN-γ，G-CSF，IP-10，MIG，MCP-1の特異度は５項目で同等ないしは優れており，本研究に上昇が認められ，特に IFN-γ は，正常コントロール

おいて PFAPA の新診断基準として提案した。

や細菌感染症では検出感度未満であったが，PFAPA（論文審査の結果の要旨）

発作時のみ17.8±21.1 pg/ml と上昇が認められた。

周期性発熱・アフタ性口内炎・咽頭炎・頸部リンパ７． 好中球表面 CD64発現は，PFAPA 発作時， 正節炎症候群（PFAPA）は，口内炎，頸部リンパ節炎，常コントロール，細菌感染症でそれぞれ11,421.1

292

信州医誌

68

審査学位論文要旨±8421.1 ，1,384.5±642.9 ，4,455.0±1,304.9 と症や家族性地中海熱との鑑別に有用である可能性が，

PFAPA 発作時に著明に亢進していた。

また，血清 IFN-γ の上昇は，Ｔ細胞や NK 細胞が発作

８．PFAPA 新診断基準は，「８日未満の繰り返す発熱」の病態に関与している可能性が示唆された。PFAPA

を必須項目とした。発熱の回数は，感染症例との検の新診断基準では，一般臨床で重要となる感染症との討で，年間３回の発熱で感度99.2 ％・特異度67.3 ％，識別に最も適切な発作回数は４回が適切であった。副

年間４回の発熱で感度98.0 ％・ 特異度80.8 ％で項目該当数については， ４項目を満たした時点であったため，「少なくとも４回」とした。副項目は，

PFAPA を疑い，５項目を満たした場合，PFAPA と４項目該当時での感染症との比較による感度・特異確定診断することで，感染症と家族性地中海熱とを十度はそれぞれ93.8 ％・94.2 ％，家族性地中海熱と分な感度・特異度で識別できることが示された。新診の比較では93.8 ％・95.6 ％で，５項目該当時で，断基準では，従来の Thomas 基準と比較し，感度は両者と感度・ 特異度はそれぞれ80.2 ％・100 ％で副項目数が４項目で，特異度は５項目で同等ないしはあった。

優れており，新たな PFAPA の診断基準として，広９．本研究での Thomas 基準による感度・特異度は，

く日常臨床に利用されることが期待され，PFAPA 患

感染症との比較で81.7 ％・87.0 ％，家族性地中海者の早期診断や，PFAPA 患者の QOL を大きく改善

熱との比較で81.7 ％・100 ％であった。

する基準であると考え，主査，副査は一致して本論文

本研究から，PFAPA 患者における発作時の好中球を学位論文として価値があるものと認めた。

表面 CD64の高発現は，ウイルス感染症や，細菌感染

NLRP3 upregulation in A549 cells co-cultured with THP-1 macrophages under hypoxia via
deregulated TGF-β signaling（低酸素環境下で THP-1マクロファージと共培養した A549細胞における TGF-β 経路を介した NLRP3発現増加）
古

川

聖

美

（論文の内容の要旨）【 結 果 】A549 細 胞 を 低 酸 素 環 境 下 で THP-1 マク ロ

【背景と目的】NLRP3は，マクロファージや線維芽細

ファージと24時間共培養したところ，A549細胞の胞，上皮細胞など様々な細胞で発現が確認されており，

NLRP3発現量が有意に増加した。しかし，IL-1β の分ASC や caspase-1と共にインフラマソームを構成し，泌量は通常酸素と低酸素で変化はなかった。 また，IL-1β の成熟を介して炎症に関与する。一方で，インIL-1β の阻害剤である IL-1R antagonist を用いたとこ

フラマソーム非依存的な働きとして NLRP3が TGF-βろ，NLRP3発現誘導に IL-1β は関与していなかった。

経路を制御し線維化に関与するという報告もある。当次に NLRP3発現への TGF-β 経路の関与を検討した。

教室では，ヒトⅡ型肺胞上皮細胞（A549細胞）とヒ

上清中の TGF-β1量は共培養で増加したが，通常酸素

ト単球由来 THP-1マクロファージを低酸素環境で共と低酸素では変化はなかった。しかし，siRNA を用培養することで，IL-1β や TGF-β1を介して，A549細いて A549細胞と THP-1マクロファージの TGF-β1の胞の上皮間葉転換（EMT）が促進することを報告し発現抑制したところ，低酸素環境下での共培養によりている。本研究では，低酸素環境下で THP-1マクロ増加した A549細胞の NLRP3の発現量は抑制された。

ファージと共培養した A549細胞の NLRP3発現が増A549細胞の TGF-β1への感受性が高まっている可能加する機序を解析した。

性が考えられたため，TGF-β1受容体（TGFBR1と【材料および方法】ヒトⅡ型肺胞上皮細胞由来の A549

TGFBR2）の発現量を検討したところ，TGFBR1は低細胞とヒト単球由来の THP-1細胞を PMA で刺激し，酸素刺激と共培養で増加した A549細胞でより発現量

マクロファージに分化させた細胞を使用した。共培養が増加していた。TGFBR1の阻害剤である SB431542

は6well plate に A549細胞を播種し，上清のみが通過を添加した A549細胞では，NLRP3の発現量が抑制さできる１μm の穴の開いたインサートに THP-1マクれた。また，TGF-β1経路の抑制因子である SMAD7のロファージを播種し，普通酸素（21 ％）または低酸

発現量が低酸素状況下の共培養で減少していた。TGF-

素（１％）で24時間培養した。

β1経路の主流は SMAD2/3のリン酸化による経路だが，No. 5, 2020293

審査学位論文要旨

SMAD3の阻害剤である SIS3では，NLRP3の発現増加は抑制されなかった。一方で，SMAD 非依存的な量が有意に増加した。
２．IL-1β の分泌量は通常酸素と低酸素で変化はなく，経路である p38 MAPK の阻害剤である SB203580にIL-1β の 阻 害 剤 で は NLRP3 の 発 現 は 抑 制 さ れ な

よって，NLRP3の発現増加が抑制された。

かった。

【考察】本研究の結果から，低酸素環境で THP-1マク

３．上清中の TGF-β1量は共培養で増加したが，通常

ロファージと共培養した A549細胞では，TGF-β1/

酸素と低酸素では変化はなかった。しかし，A549

p38 MAPK 経路を介して NLRP3の発現が誘導される細胞と THP-1マクロファージの TGF-β1を発現抑ことが示唆された。TGFBR1の増加および SMAD7の制により，A549細胞の NLRP3の発現量は抑制され減少を伴っていることから，低酸素環境で共培養する

た。

ことで，A549細胞の TGF-β1に対する感受性が増加

４．A549細胞の TGF-β1への感受性が高まっている可能性が考えられたため，TGF-β1受容体（TGFBR1していると考えられる。
（論文審査の結果の要旨）と TGFBR2）の発現量を検討した。低酸素下での

NLRP3は，マクロファージや線維芽細胞，上皮細THP-1 マ ク ロ フ ァ ー ジ と の 共 培 養 で TGFBR1 と胞など様々な細胞で発現している。インフラマソーム

TGFBR2発現量が上昇していたが，TGFBR2は他を構成し，IL-1β の成熟を介して炎症に関与する。イの条件でも同程度増加していたことから，NLRP3

ンフラマソーム非依存的に，NLRP3が TGF-β 経路を発現誘導への関与は否定的であった。 一方で，制御し線維化に関与するという報告もある。病態解析

TGFBR1は低酸素下で共培養した A549細胞でより診断学教室では，ヒトⅡ型肺胞上皮細胞（A549細胞）

発現量が増加していた。TGFBR1の阻害剤であるとヒト単球由来 THP-1マクロファージを低酸素環境

SB431542を添加により，NLRP3の発現量が抑制さで 共 培 養 す る こ と で ，IL-1β や TGF-β1 を 介 し て ，れた。

A549細胞の上皮間葉転換（EMT）が促進することを報告している。今回，低酸素環境下で THP-1マクロファージと共培養した A549細胞の NLRP3発現が増加する機序を解析した。

５．TGF-β1経路の抑制因子である SMAD7の発現量が低酸素下の共培養により，減少した。
６．TGF-β1経路の下流シグナルについて，SMAD3の阻害剤である SIS3では，NLRP3の発現増加は抑ヒトⅡ型肺胞上皮細胞由来の A549細胞と，ヒト単制されなかった。一方で，p38 MAPK の阻害剤で球由来の THP-1細胞を PMA で刺激しマクロファー

ある SB203580によって，NLRP3の発現増加が抑制

ジに分化させた細胞を使用。共培養は6well plate にされた。

A549細胞を，上清のみが通過できる１μm の穴の開い

これらの結果から， 低酸素環境で THP-1マクロ

たインサートに THP-1マクロファージを播種し，普ファージと共培養した A549細胞では，SMAD7の減通酸素（21 ％）または低酸素（１％）で24時間培養

少および TGFBR1の増加により，TGF-β1に対する感後，A549の mRNA やタンパクおよび上清中のサイト

受 性 が 増 加 し ，TGF-β1/p38 MAPK 経 路 を 介 し てカインについて解析した。

NLRP3の発現が誘導されることが示唆された。

その結果，古川は次の結果を得た。

主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値

１．A549細胞を低酸素環境下で THP-1マクロファーがあるものと認めた。

ジと24時間共培養により，A549細胞の NLRP3発現

Organ accumulation and carcinogenicity of highly dispersed multi-walled carbon nanotubes
administered intravenously in transgenic rasH2 mice（遺伝子改変 rasH2マウスを用いた高分散した多層カーボンナノチューブの静脈内投与による臓器集積と発癌性評価）
傍島淳（論文の内容の要旨）

特性や電気的特性から様々な製品に応用されている。

【背景】 多層カーボンナノチューブ（Multi walled

MWCNTs を，drug delivery system（DDS），imag­

carbon nanotubes : MWCNTs）はその優れた機械的

ing，再生医療の足場材などの生体材料として用いよ

294

信州医誌

68

審査学位論文要旨

う と の 試 み が あ る 。 し か し 現 時 点 で MWCNTs がた。このため，これまでの静脈投与実験に比較して，臨床応用されていない理由は，MWCNTs がアスベス

臓器への集積が少なかったと考える。現在の技術を用トに似た繊維状ナノ粒子であり， 循環系に入った

いれば MWCNTs を静脈内投与しても不要な臓器へ

MWCNTs が他臓器に移動し腫瘍を誘導する可能性にの集積することなく，DDS や imaging に活用できる

関しての安全性が確認されていないことである。本研ことを示すことができた。発癌性評価の結果は，２種

究では MWCNTs を遺伝子改変発癌性 rasH2マウスに類の MWCNTs 群，Vehicle 群のいずれにも，肺，胸静脈内投与し，内臓臓器への集積と腫瘍誘導の有無を腺，脾臓，胃，会陰に腫瘍を生じたマウスがいたが統調査した。

計学的な有意差はなく， いずれの臓器においても【 方 法 】MWCNTs を 遺 伝 子 改 変 発 癌 性 rasH2 マ

MWCNTs による腫瘍発生はなかった。腫瘍を認めた

ウスに静脈内投与し，毎週死亡・衰弱の確認と体重測

組織標本は詳細に検討されたが，MWCNTs はいずれ定を実施した。また最終評価の26週後に犠牲にして，の標本にも認められなかった。 高度に分散された規定された全ての臓器の組織評価と採血検査を行い，

MWCNTs を遺伝子改変発癌性マウスに投与するといMWCNTs の存在と腫瘍の有無を調べた。評価したう，最も過酷な評価方法で腫瘍が発生しなかったこと

MWCNTs は，Thin と Thick の２種類で，それぞれは重要な結果である。少なくとも本研究で用いた体重high dose（体重１kg あたり0.7 mg）群，low dose

１kg あたり約0.7 mg 以下の MWCNTs を十分に分散（体重１kg あたり0.07 mg）群の２群ずつ作製し，分させて静脈内注射を行えば，体内で腫瘍を発生する可散液と超音波分散機により現在の技術で最も高度に分能性が極めて低いことが明らかになった。

散させて静脈内投与した。negative control 群は poly­【結論】循環系に入った高分散した MWCNTs の最も

sorbate 80単独群（Vehicle 群）を用いた。

過酷な発癌性評価として，遺伝子改変発癌性 rasH2マ【結果】全ての群の平均体重の変化は有意差はなかっ

ウスを用いて静脈内投与試験を初めて行った。一部のた。組織学的所見で肺には全ての群で腫瘍の発生を認個体に MWCNTs の膵臓への集積を認めたが，全てめたが，群間に有意差を認めなかった。Vehicle 群のの臓器で腫瘍の発生率は増加しなかった。高分散した

１例で胸膜由来と考える中皮腫を発生したがそれ以外

MWCNTs を静脈内投与しても発癌する可能性は少なは全て腺腫であった。次に腫瘍が多く発生していたの

いと考える。本研究の結果は，MWCNTs の吸い込みは脾臓で，Thick-MWCNTs（high dose）以外で腫による循環系への移動や，癌治療薬の DDS や病変部瘍を認めた。肺と同様に，脾臓でも群間に有意差はなの imaging など生体材料として用いる際の，臓器へかった。その他には胃で Vehicle と Thick-MWCNTsの集積と発癌性の評価に重要な情報を提供する。

（low dose）に１匹ずつ腫瘍が認められ，いずれも群（論文審査の結果の要旨）間に有意差を認めなかった。これらの腫瘍を発生した

多層カーボンナノチューブ（Multi walled carbon

部位に MWCNTs があるかを観察したが，いずれのnanotubes : MWCNTs）は生体材料として用いる試み

部位にも存在しなかった。Vehicle 群と比較して，２があるが，循環系に入った MWCNTs が他臓器に移種類の MWCNTs を２用量で投与した全ての群の各動し腫瘍を誘導する可能性に関しての安全性が確認さ臓器の腫瘍発生数に，有意な差はなかった。膵臓ではれていない。MWCNTs を遺伝子改変発癌性 rasH2マ

Thin-MWCNTs（high dose）群の２匹で，解剖時にウスに静脈内投与し，臓器への蓄積と腫瘍誘導の有無，

外観から MWCNT の沈着が認められた。 ２匹とも血液検査を調査した。MWCNTs を超音波分散機で分MWCNTs の沈着は認めるものの，腫瘍は形成してい散させ，７週齢のオスの rasH2マウスの静脈内に投与なかった。全てのマウスのその他の臓器の組織標本にした。MWCNTs の形状，濃度の違いにより，以下のMWCNTs の沈着は認めなかった。

４群を作成した。Thin（low dose）群，Thin（high【考察】MWCNTs の投与量は，１kg あたりでは highdose）群，Thick（low dose）群，Thick（high dos）

dose 群で0.7 mg，low dose 群で0.07 mg と過去の報

群 で あ る 。negative control 群 と し て 分 散 剤 単 独

告と比較してかなり多い量であるが，MWCNTs の集（Vehicle）群を用いた。術後安楽死させた後に解剖を積を認めたのは２臓器と少なかった。本研究では現在行い，光学顕微鏡にて組織学的評価で腫瘍の有無を確の最も高度と考えられる技術を用いて MWCNTs を認した。

十分分散させたため，MWCNTs の凝集体が少なかっ
No. 5, 2020

その結果，傍島 淳は以下の成績を得た。
295

審査学位論文要旨

１．肺は全ての群で腫瘍の発生を認めた。脾臓では３．血液検査で，MCV と MCHC の値が Vehicle 群

Thick（ high dose ） 以 外 で 腫 瘍 を 認 め た 。 胃 でと比較して，MWCNTs 群全てで有意に高かった。

Vehicle 群と Thick（low dose）群に１匹ずつ腫瘍

その他の血液検査では各群間で有意差はなかった。

が認められ，会陰に Thin（low dose）群と Thick

４．サイトカインの計測では Eotaxin が Vehicle 群と（high dose）群で１匹ずつ腫瘍を認めた。いずれの比較して，MWCNTs 群全てで有意に高値であった。

臓器も腫瘍発生部位に MWCNTs は存在しなかっその他のサイトカインでは有意差はなかった。

た。Vehicle 群と比較して２種類の MWCNTs を２以上の結果より，本研究で用いた体重１kg あたり用量で投与した全ての群の各臓器の腫瘍発生数に有0.7 mg 以下の MWCNTs を十分に分散させて静脈内

意差はなかった。

注射を行えば，体内で腫瘍を発生する可能性が極めて

２．膵臓で Thin（high dose）群の２匹で MWCNTs の低いことが明らかになった。このことは，MWCNTs

沈着は認めた。その周囲に腫瘍は形成していなかった。

を生体材料として用いる際の安全性に関して重要な示

全てのマウスの他の臓器の組織標本で MWCNTs

唆を与えるものであり，主査，副査は一致して本論文の沈着は認めなかった。

を学位論文として価値があるものと認めた。

Cecal tumorigenesis in AhR-deficient mice depends on cecum-specific MAPK pathway activation and inflammation（AhR ノックアウトマウスの回盲部における腫瘍発生は回盲部に特異的な MAPK 経路の活性化と炎症反応に依存する）
的

場

久

典

（論文の内容の要旨）

た。AhR ノックアウトマウスおよび野生型マウスの【背景と目的】Aryl hydrocarbon receptor（AhR）はチオグリコレート誘導腹腔マクロファージを調製し，ダイオキシン受容体として知られる転写因子である。

LPS と ATP の刺激の際のまたは種々の細菌を培養

近年，AhR ノックアウトマウスの回盲部に，炎症反系に投与した際のサイトカイン・ケモカインの産生

応と Wnt/β-カテニン経路の活性化を伴いながら腫瘍を測定した。ヒトの大腸癌を adenoma-carcinoma se­が発生することが報告された。しかし，AhR 依存性

quence と sessile serrated pathway に由来するものの β-カテニンの分解に関して，いくつかのグループに分類し，それぞれの前駆病変も含めて AhR の発現により相反する結果が報告された。AhR ノックアウについて免疫染色を用いて解析した。

トマウスの回盲部における腫瘍発生に関与する Wnt/

【結果】50週齢までに28匹中10匹の AhR ノックアウ

β-カテニン経路以外の経路を明らかにするために，

トマウスの回盲部に病変が発生したが，発生率は先行

我々は，腫瘍の形態学的な特徴，腫瘍および腹腔マク研究と比較して大きく低下していた。病変はヒトの大ロファージにおけるサイトカイン・ケモカインの産生

腸の鋸歯状病変に類似した過形成性病変から腫瘍性病などについて検討した。また我々は，ヒトの大腸癌に変へと進展するものであり，前者の段階から病変部における AhR の発現についても検討した。

マクロファージ・好中球の浸潤を認めた。増殖能を表【材料および方法】C57BL/6マウスを普通飼育室で飼す Ki-67の陽性細胞は，病変部において腺管の底部か育した。28匹の AhR ノックアウトマウス，23匹の野ら表層の方向に増加していた。先行研究と異なり，β-生型マウス，12匹の AhR と ASC のダブルノックア

カテニンの免疫染色では病変部での強染・核移行は認

ウトマウス，16匹の ASC ノックアウトマウスについめなかった。AhR ノックアウトマウスの病変部では，て，最大50週齢まで飼育して解析を行った。これらのIl-1β，Il-6，Ccl2，Cxcl5などのサイトカイン・ケモ

マウスの終末回腸～直腸について，ホルマリン固定しカインの発現が上昇していたが，c-Myc の発現上昇はてパラフィンブロックを作成し，HE 染色標本を作製認めなかった。興味深いことに，病変部において Erk，

して形態学的に解析した。必要に応じて種々の免疫染

Src，EGF 受容体のリン酸化の亢進と Amphiregulin

色を行った。AhR ノックアウトマウスの病変部およの発現上昇を認めた。AhR ノックアウトマウスの腹び野生型マウスの回盲部から total RNA を抽出し，腔マクロファージを LPS と ATP で刺激した際には，種々の分子の発現について定量 PCR を用いて解析し野生型マウスのものと比較して IL-6のみ産生の亢

296

信州医誌

68

審査学位論文要旨

進を認めた。 ヒトの大腸の鋸歯状病変においては，する免疫染色では病変部で強染・核移行は認めな

AhR ノックアウトマウスの病変との形態学的な類似かった。

性にもかかわらず，上皮細胞における AhR の発現は２．AhR ノックアウトマウスの病変部と野生型マウ上昇していた。

スの回盲部から total RNA を抽出し，定量 PCR で【結論】我々の結果は，AhR ノックアウトマウスの回解析した。炎症性サイトカイン IL-1β，IL-6や，ケ盲部の病変の発生率，形態学的特徴，発生に関わるシ

モカイン CCL2，CXCL5などの発現が上昇していグナル伝達経路を明らかにし，病変の発生の新たな機た。

序を提示したものと考える。施設間の環境変化に伴う

３．AhR ノックアウトマウスの病変部で活性化して腸内細菌叢の変化が，AhR ノックアウトマウスにおいるシグナル伝達経路について免疫染色により解析

ける炎症反応に対する感受性やマクロファージの機能した。病変部では，Erk，Src，EGF 受容体のリンに変化をもたらし，腫瘍発生率の低下・腫瘍発生の遅酸化が亢進していた。定量 PCR による解析では病延などをもたらした可能性が示唆される。

変部でアンフィレギュリンの発現上昇を認めた。

（論文審査の結果の要旨）

４．チオグリコレート誘導マウス腹腔マクロファージ

AhR ノックアウトマウスでは回盲部に腫瘍が自然（Mφ）におけるサイトカイン・ケモカインの産生に発生し，腫瘍発生には１）Wnt/β-カテニン経路の活ついて調べた。AhR ノックアウトマウスの Mφ で性化と IL-1β・IL-6の発現上昇および Stat3のリン酸は野生型マウスの Mφ と比較して，LPS 単独また化を伴う炎症反応の２つの経路が関与すること，２）

は LPS と ATP による刺激の際の IL-6の産生が亢

腸内細菌叢による炎症反応が腫瘍発生に重要であるこ進していた。

と，が報告されている。本研究では，腫瘍の形態学的５．免疫染色によりヒトの大腸癌における AhR の発現

特徴や，腸内細菌叢が腫瘍発生を促進する機序などにについて解析した。Adenoma-carcinoma sequence

ついて解析した。

においても sessile serrated pathway においても，背景粘膜→前駆病変→大腸癌と進展するにつれてその結果，的場久典は次の結論を得た。

AhR の発現は亢進していた。

１．28匹の AhR ノックアウトマウスのうち10匹に病変が発生し，先行研究と比較して発生率は低下して以上より，AhR ノックアウトマウスの病変の形態

いた。病変は過形成性病変から腫瘍性病変へと進展

学的特徴が明らかになり， 先行研究とは異なりし，前者の段階からマクロファージ・好中球を主体

MAPK 経路の活性化が腫瘍発生に重要であることがとする炎症細胞浸潤を伴っていた。Ki-67に対する示された。
よって，主査，副査は一致して本論文を学位論文と免疫染色では病変の進展に伴い陽性細胞が腺管の底部から表層の方向に増加していた。β-カテニンに対して価値があるものと認めた。

A new technique to determine the tension in extensor pollicis longus reconstruction（長母指伸筋腱再建における，緊張度決定の新たな手法）
鴨

居

史

樹

（論文の内容の要旨）【対象および方法】対象は2006年～2014年の間に再建【背景と目的】長母指伸筋腱断裂の治療には，腱移植術を行った長母指伸筋腱断裂患者のうち，関節症性変や腱移行が行われる。腱移植では移植した長掌筋腱を化を認めない症例を対象とした。３人の術者によって橋渡しして力源には本来の長母指伸筋が使用され，腱手術が行われた。長掌筋腱を用いた腱移植は，受傷後移行では示指伸筋腱が力源として使用される。腱移植

３か月以内で術中に長母指伸筋の断端を近位に引いてと腱移行の臨床結果は同等であると報告されている。

その滑走距離が１cm 以上ある例，あるいは術前の徒長母指伸筋腱再建の良好な結果を得るには，再建時の手筋力検査で示指伸筋の筋力が弱い例を対象として適切な腱の緊張度が重要である。我々は，長母指伸筋行った。その他の例は示指伸筋腱を用いた腱移行を腱断裂に対して，新たな緊張度決定の手法を行ったの行った。腱移植，腱移行ともに編み込み縫合を行った。

で報告する。

腱の緊張度の決定時に，母指爪先中央が手術台より２

No. 5, 2020297

審査学位論文要旨

cm の高さになるように挙上し，仮縫合を行った。仮伸筋腱が力源として使用される。腱移植と腱移行の臨

縫合後，再度同肢位で確認し，母指爪先中央が手術台

床結果は同等であると報告されている。長母指伸筋腱より２cm より低ければ，より緊張を強くして再縫合

再建の良好な結果を得るには，再建時の適切な腱の緊を行った。術後リハビリは，ダイナミックスプリントか張度が重要である。我々は，長母指伸筋腱断裂に対しギプス固定を行った。評価として母指 IP 関節の自動て，新たな緊張度決定の手法を行ったので報告する。

屈曲角度，母指 IP 関節の自動伸展角度，Total Active

2006年～2014年の間に再建術を行った長母指伸筋腱

Motion（TAM），Disabilities of the Arm，Shoulder

断裂患者のうち，関節症性変化を認めない症例を対象

and Hand（DASH）score，母指の挙上距離を計測しとした。３人の術者によって手術が行われた。長掌筋

た。

腱を用いた腱移植は，受傷後３か月以内で術中に長母【結果】長母指伸筋腱断裂を認めた25例中，関節症性

指伸筋の断端を近位に引いてその滑走距離が１cm 以

変化のない20例を対象とした。男性８例，女性12例。

上ある例，あるいは術前の徒手筋力検査で示指伸筋の

平均年齢59歳であった。７例が腱移植，13例が腱移行

筋力が弱い例を対象として行った。その他の例は，示を行った。術後平均観察期間は44か月であった。母指指伸筋を用いた腱移行を行った。手術は，腱移植，腱IP 関節の自動伸展角度は有意に改善した。母指 IP 関

移行ともに編み込み縫合を行った。腱の緊張度の決定

節の自動屈曲角度に有意差は認めなかった。％TAM，時に，母指爪先中央が手術台より２cm の高さになる

DASH score ともに有意に改善した。これらの計測にようにし，仮縫合を行った。仮縫合後，再度同肢位でおいて腱移植と腱移行の間では，有意差を認めなかっ

確認し，母指爪先中央が手術台より２cm より低けれた。術後ダイナミックスプリントとギプス固定で有意ば，より緊張を強くして再縫合を行った。術後リハビ差は認めなかった。

リは，ダイナミックスプリントかギプス固定を行った。

【考察】長母指伸筋腱断裂の再建で，２cm が適切なギプス固定は通院が困難な症例を対象とした。評価と緊張である理由として，筋の活動収縮の緊張のピーク

して１）母指 IP 関節の自動伸展角度，２）母指 IP 関

は，筋肉が伸長した最大距離から中間の位置にあると節の自動屈曲角度，３）Total Active Motion（TAM），

言われている。本研究で，正常な健側母指の挙上距離

４ ） Disabilities of the Arm, Shoulder and Hand

は平均3.9 cm であった。そのため，中間値である２（DASH）score，５）母指の挙上距離を計測した。

cm が適切かつ十分な緊張を得られる挙上距離であると推測した。この緊張度決定の手法は，３人の術者，
腱再建法の違い，術後リハビリの違いがあっても，満足する結果を得た。過去に緊張度決定の手法がいくつか報告されているが，それらは適切な緊張度の決定が難しく再現性に疑問がある。本手法は，簡便で，定量的であり，術後良好な臨床成績を得ることができた。
そのため，緊張度を容易に判断できる，優れた手法でその結果以下の成績を得た。
１．自動伸展角度は術前－29°±16から術後８°±10と有意に（p＜0.001）改善した。
２．自動屈曲角度は術前65°±12から術後61°±13と有意差は認めなかった。
３．％TAM は術前50 ％±15から術後90±12と有意に（p＜0.001）改善した。
４．DASH score は術前28.5±21.0から術後7.7±8.0と有意に（p＜0.001）改善した。

ある。
【結論】長母指伸筋腱再建に対して新たな緊張度決定の手法を用い良好な結果を得ることができた。この方

５．母指の挙上距離は1.2 cm±1.0であった。
腱移植と腱移行の術後評価は，母指の自動伸展角度，

法は簡便かつ定量的であり，また術者間でも統一され

自動屈曲角度，％TAM，母指の挙上距離で有意差をた方法で緊張度を決定することができる。また，腱移認めなかった。また，術後のリハビリテーションは手植，腱移行と異なった手技を用いても，術後母指の機術結果に影響を与えなかった。

能に良好な結果を得ることができ，長母指伸筋腱再建に対してすぐれた手法である。

以上より，我々は新たな緊張度決定の手法を用い，
長母指伸筋腱再建に対して良好な結果を得ることがで（論文審査の結果の要旨）きた。この方法は簡便かつ定量的であり，また術者間

長母指伸筋腱断裂の治療には，腱移植や腱移行が行でも統一された方法で緊張度を決定することができる。

われる。腱移植では移植した長掌筋腱を橋渡しして力また，腱移植，腱移行と異なった手技を用いても，術源には本来の長母指伸筋が使用され，腱移行では示指

後母指の機能に良好な結果を得ることができ，長母指

298

信州医誌

68

審査学位論文要旨

伸筋腱再建に対してすぐれた手法の一つと考えられた。

して価値があるものと認めた。

よって，主査，副査は一致して本論文を学位論文とEndogenous calcitonin gene-related peptide deficiency exacerbates postoperative lymphedema by suppressing lymphatic capillary formation and M2 macrophage accumulation（内因性カルシトニン遺伝子関連ペプチドの欠乏は，リンパ管形成と M2マクロファージ集積を抑制することで，術後リンパ浮腫を悪化させる）
松

井

周

平

（論文の内容の要旨）

CGRP－/－を用いた。尻尾の皮膚と皮下組織を３mm【背景と目的】リンパ浮腫は外科治療や放射線治療な

幅で全周性に掻破し，大きな血管やリンパ管の損傷をどの後遺症として発症し，慢性的に経過して患者の避けながら，術後リンパ浮腫モデルを作成した。尻尾QOL を著しく低下させる病態である。我々は，リン直径の変化を測定し，リンパ浮腫の発生と消退を評価

パ管形成の分子メカニズムの解明が，リンパ浮腫の新した。①では10日目（day 10）に，尻尾の皮下にインしい治療法につながると考えた。

ドシアニングリーンを投与し，造影写真を撮影してリ

カルシトニン遺伝子関連ペプチド（CGRP）は，カンパ管の形態を評価した。①と②では免疫染色を行い，ルシトニン遺伝子の選択的スプライシングにより産生リンパ管と血管形成，マクロファージ動員の程度と極されるペプチドである。中枢，末梢神経系に広く分布

性，CGRP 発現を評価した。さらに，①と②ではリア

し，主に感覚神経から分泌される。CGRP は主に神経

ルタイム PCR を行い，リンパ管形成因子，リンパ管伝達因子や血管拡張因子として捉えられてきたが，近マーカー，サイトカイン，マクロファージマーカーな

年，血管形成促進，炎症やアポトーシス調節といったどの遺伝子発現を評価した。免疫染色とリアルタイム

多彩な生理作用が報告されている。CGRP はカルシト

PCR は，①ではモデル導入前（day０），day 10，day

ニン，アドレノメデュリン，インターメディンなどが20，②では day 10において行った。

属するカルシトニンスーパーファミリーの一員である。

【結果】

これらは，７回膜貫通Ｇタンパク質共役受容体，カル① CGRP－/－では WT と比較して浮腫が増悪した。

シトニン受容体様受容体（CLR）を共有する。CLR

両者の浮腫の差は day 10で最大となった。CGRP－/－のリガンドに対する親和性は３つの受容体活性調節タ

では整った蜂の巣状のリンパ管が観察できなかった。

ンパク（RAMP1-3）によって決定される。

day 10でリンパ管形成が CGRP－/－で WT に劣った。

Kurashige らは RAMP1ノックアウトマウスを用い一方，血管形成に差はなかった。CGRP－/－ではリ

た 創 傷 治 癒 モ デ ル に お い て ，RAMP1 発 現 マ ク ロ

ンパ管形成因子およびリンパ管マーカーの遺伝子発現

ファージがリンパ管形成に重要な役割を果たすことをが低下していた一方で，炎症促進性サイトカインの遺報告した。しかしながら，CGRP は RAMP1/CLR 複伝子発現が亢進していた。CGRP－/－では M2マクロ合体のみではなく，RAMP2/CLR，RAMP3/CLR 複

ファージマーカーの遺伝子発現が低下していた。免疫合体にも結合する。さらに，RAMP1/CLR 複合体に染色でも M2マクロファージ動員が低下していた。

は，他のカルシトニンスーパーファミリーも結合する② MCLs を投与して M2マクロファージを枯渇させため，CGRP がリンパ管形成に直接的に関与するかはた。MCLs を投与した WT では M2マクロファージの不明である。

遺伝子発現が低下し，免疫染色でも M2マクロファー

本研究では CGRP ノックアウトマウス（CGRP－/

ジ動員が低下した。MCLs を投与した WT ではリン－）を用い，リンパ浮腫における CGRP の病態生理

パ浮腫が増悪し，リンパ管形成が抑制され，リンパ管学的意義を検討した。

形成因子の遺伝子発現が低下していた。

【材料および方法】８～10週齢雄の① 野生型マウス（WT）③ CGRP－/－に対して CGRP を投与したところリと CGRP－/－ ， ② マ ン ノ シ ル 化 ク ロ ド ロ ネ ー ト

ンパ浮腫が改善した。

（MCLs）を尾静脈投与した WT と CGRP－/－，③ 浸【結論】CGRP 欠乏によって，M2マクロファージの動

透圧ポンプを用いて CGRP を投与した WT および員とリンパ管形成シグナルが抑制される結果，術後リ

No. 5, 2020299

審査学位論文要旨

以下の結果を得た。

ンパ浮腫の消退に必要なリンパ管形成が阻害され，浮腫が増悪することを明らかとした。CGRP は術後リン

１．CGRP－/－では WT と比較して浮腫が増悪した。

パ浮腫に対する新しい治療標的になると考えられる。

両者の浮腫の差は day 10で最大となった。CGRP－（論文審査の結果の要旨）/－では整った蜂の巣状のリンパ管が観察できな

カルシトニン遺伝子関連ペプチド（CGRP）のリン

か っ た 。day 10 で リ ン パ 管 形 成 が CGRP－/－ でパ管形成に対する作用の詳細は不明だった。本研究でWT に劣った。 一方， 血管形成に差はなかった。

は CGRP ノックアウトマウス（CGRP－/－）を用い，

CGRP－/－ではリンパ管形成因子およびリンパ管

リンパ浮腫における CGRP の病態生理学的意義を検マーカーの遺伝子発現が低下していた一方で，炎症討した。

促進性サイトカインの遺伝子発現が亢進していた。

８～10週齢雄の① 野生型マウス（WT）と CGRP－

CGRP－/－では M2マクロファージマーカーの遺伝/－，② マンノシル化クロドロネート（MCLs）を尾子発現が低下していた。免疫染色でも M2マクロ静脈投与した WT と CGRP－/－，③ 浸透圧ポンプを

ファージ動員が低下していた。

用いて CGRP を投与した WT および CGRP－/－を用

２．MCLs を投与して M2マクロファージを枯渇させいた。尻尾の皮膚と皮下組織を３mm 幅で全周性に掻た。MCLs を投与した WT では，M2マクロファー

破し，大きな血管やリンパ管の損傷を避けながら，術ジの遺伝子発現が低下し，免疫染色でも M2マクロ後リンパ浮腫モデルを作成した。尻尾直径の変化を測

ファージ動員が低下した。MCLs を投与した WT

定し，リンパ浮腫の発生と消退を評価した。①では10ではリンパ浮腫が増悪し，リンパ管形成が抑制され，日目（day 10）に，尻尾の皮下にインドシアニング

リンパ管形成因子の遺伝子発現が低下していた。

リーンを投与し，造影写真を撮影してリンパ管の形態

３．CGRP－/－に対して CGRP を投与したところリを評価した。①と②では免疫染色を行い，リンパ管とンパ浮腫が改善した。

血管形成，マクロファージ動員の程度と極性，CGRP

以上，CGRP 欠乏によって M2マクロファージの動発現を評価した。さらに，①と②ではリアルタイム

員とリンパ管形成シグナルが抑制されることで，術後PCR を行い，リンパ管形成因子，リンパ管マーカー，

リンパ浮腫の消退に必要なリンパ管形成が阻害され，サイトカイン，マクロファージマーカーなどの遺伝子浮腫が増悪することを明らかにした。これは，CGRP

発現を評価した。免疫染色とリアルタイム PCR は，は術後リンパ浮腫に対する新しい治療標的になりうる①ではモデル導入前（day０），day 10，day 20，②

ことを示唆する。よって，主査，副査は一致して本論では day 10において行った。

文を学位論文として価値があるものと認めた。

Factors predictive of the presence of a CSF1R mutation in patients with leukoencephalopathy（白質異常症における CSF1R 遺伝子変異陽性を予測する患者要因の検討）
近

藤

恭

史

（論文の内容の要旨）査の実施は問われないが遺伝学的検査なしでは他の疾【背景と目的】神経軸索スフェロイドおよび色素性グ患と見分けがつかないことが多く，一方で全ての白質

リアを伴う成人発症白質脳症（ALSP）はコロニー刺異常症を伴う認知症症例に対し CSF1R 検査を行うこ

激因子１受容体遺伝子（CSF1R）変異に起因する若とは困難である。本研究では，CSF1R 検査が行われ年性認知症を呈する疾患である。近年，CSF1R 変異た白質異常症の臨床症候および脳画像所見を統計学的陰性の ALSP 患者においてアラニル tRNA 合成酵素に解析することにより CSF1R 変異陽性と関連する患

２遺伝子（AARS2）変異が報告され，CSF1R-related

者要因を探索し，また現行の診断基準の正確性を再評

leukoencephalopathy，AARS2-related leukoenceph­

価した。

alopathy お よ び CSF1R/AARS2-negative ALSP に【対象と方法】2011年12月から2019年８月の期間に，分類することが提唱されている。CSF1R-related leu­

臨床的に ALSP が疑われ全国の施設から CSF1R 検査

koencephalopathy の診 断基準 におい て， 準確 診群依頼を受けた145症例のうち，依頼元の主治医から所（probable）もしくは疑診群（possible）は CSF1R 検定の臨床症候および脳画像所見を収集できた135例

300

信州医誌

68

審査学位論文要旨

を解析対象とした。CSF1R 変異陽性確率を予測する

本症は遺伝学的検査なしでは他の疾患と見分けがつかモデル式を作成するためにロジスティック回帰分析

ないことが多く，一方で全ての白質異常症を伴う認知（変数増加法）を行った。135例のうち35例は CSF1R-症症例に対し CSF1R 検査を行うことは困難である。

related leukoencephalopathy の診断基準を策定した

本研究では，CSF1R 検査が行われた白質異常症の臨床

今野らの研究と重複しており，診断基準の正確性に関症候および脳画像所見を統計学的に解析し，CSF1R

する検討では対象から除外した。現行の診断基準に従変異陽性と関連する患者要因を探索した。

い各症例を振り分け，診断基準の感度および特異度を

対象は2011年12月から2019年８月の間に，臨床的に算出した。

CSF1R-related leukoencephalopathy が疑われ CSF1R【結果】CSF1R 検査を行った白質異常症135例のうち，検査が行われた135例。所定の臨床情報提供書を用い

CSF1R 変異陽性が28例，CSF1R 変異陰性が107例

臨床症候および脳画像所見を収集し解析した。CSF1Rであった。ロジスティック回帰分析の対象となった欠変異陽性確率を予測するモデル式を作成するために，

測データのない症例は，CSF1R 変異陽性群が20例，欠測データのない92例を対象にロジスティック回帰分

CSF1R 変異陰性群が72例であった。CSF1R 変異陽性析を行った。

確率を予測するモデル式により，CSF1R 変異陽性確

その結果，近藤恭史は次の結論を得た。

率を上昇させる患者要因として，若年発症，パーキン

１．CSF1R 検査が行われた白質異常症135例のうちソニズム，脳梁萎縮および拡散強調像高信号病変が見

CSF1R 変異陽性例は28例（21 ％）であった。変異出された。60歳以下で発症し有意な要因をすべて有すは全てチロシンキナーゼドメインにみられ，特にる症例が CSF1R 変異陽性となる確率は90 ％以上でCSF1R のエクソン18-19に集中していた。

あった。発症が高齢になるほど CSF1R 変異陽性確率

２．CSF1R 変異陽性確率を上昇させる患者要因としは低下し，有意な要因が一つもない症例の CSF1R 変て，若年発症，パーキンソニズム，脳梁萎縮および異陽性確率は20 ％以下であった。また CSF1R 変異陽

拡散強調像高信号病変が見出された。60歳以下で発性確率を低下させる患者要因として不随意運動および症し有意な要因をすべて有する症例が CSF1R 変異

脳幹・小脳の萎縮が見出され，どちらかを有する症例陽性となる確率は90 ％以上であった。

が CSF1R 変異陽性となる確率は18 ％以下であった。

３．CSF1R 変異陽性確率を低下させる患者要因とし

CSF1R-related leukoencephalopathy の診断基準準確て不随意運動および脳幹・小脳の萎縮が見出され，診群もしくは疑診群には CSF1R 変異陽性群16例のう

どちらかを有する症例が CSF1R 変異陽性となる確ち13例が，CSF1R 変異陰性群84例のうち72例が該当

率は18 ％以下であった。

し，現行の診断基準の感度は81 ％，特異度は14 ％で本研究において，CSF1R 変異陽性確率を上昇させあった。現行の診断基準における疑診群には一定数のる患者要因は若年発症，パーキンソニズム，脳梁萎縮，他の白質異常症が含まれる可能性がある。

拡散強調像高信号病変であり，CSF1R 変異陽性確率【結論】CSF1R 変異陽性確率を上昇させる患者要因はを低下させる患者要因は不随意運動および脳幹・小脳若年発症，パーキンソニズム，脳梁萎縮，拡散強調像の萎縮であった。これらの患者要因の有無は CSF1R

高信号病変であり，CSF1R 変異陽性確率を低下させ解析を行うかどうか判断する際に参考となる。よってる患者要因は不随意運動および脳幹・小脳の萎縮で主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があった。これらの患者要因の有無は CSF1R 検査を行あるものと認めた。

うかどうか判断する際や今後の診断基準の改定の際に参考となる。
（論文審査の結果の要旨）
CSF1R-related leukoencephalopathy は，コロニー刺激因子１受容体遺伝子（CSF1R）変異に起因する前頭葉機能低下を前景とした若年性認知症，白質異常症，脳梁萎縮・異常信号を呈する疾患である。本症の診断基準において準確診群（probable）もしくは疑診群（possible）は CSF1R 検査の実施は問われないが，No. 5, 2020301

審査学位論文要旨

Mid-Frequency Hearing Loss Is Characteristic Clinical Feature of OTOA-Associated Hearing Loss（OTOA 遺伝子変異による難聴の臨床的特徴は中音域の難聴である）
杉 山

健二郎

（論文の内容の要旨）を伴う CNV＋SNV コンパウンドヘテロの４症例を同【背景と目的】小児期までに発症する感音性難聴のう定した。さらに，同遺伝子の SNV をホモ接合体としち，少なくとも50 ％は遺伝子変異が原因とされていて持つ症例も１例同定された。結果として OTOA 遺る。 現在， 非症候群性難聴の原因として約100種類

伝子変異が原因と考えられる患者が７例同定され，常の遺伝子が同定されており，これら遺伝子の１～数塩

染色体劣性遺伝形式をとる日本人難聴患者における頻基の変異による先天性難聴が数多く報告されている。

度は0.3 ％（７/2262） であることを明らかにした。

このような小さな遺伝子変異に加え，コピー数変化

また，OTOA 遺伝子変異による難聴の臨床的特徴と（CNVs : Copy number variations）と呼ばれる1kbp

して，難聴の程度が中等度から高度であり，比較的早を超えるような大きなゲノムの構造変化（欠失・挿期発症の傾向があることを明らかにした。これに加え，

入・重複）が，遺伝性疾患の原因として注目されてい本研究では同遺伝子変異による難聴の新規の臨床的る。OTOA 遺伝子は，常染色体劣性遺伝形式をとる

特徴として，中音域の閾値上昇を伴う皿形の聴力像を非症候群性難聴の原因遺伝子の１つ（DFNB22）であ呈することを明らかにした。同様の聴力像を示す難聴る。OTOA 遺伝子にコードされている otoancorin タ

遺伝子としては TECTA 遺伝子が知られているが，ンパクは，内耳コルチ器に存在する蓋膜とラセン板縁TECTA 遺伝子も OTOA 遺伝子と同様に蓋膜の形成の接着に関与していると考えられている。同遺伝子変に関与するとされている。これら２つの遺伝子変異に異による難聴は上記の CNVs（欠失）が比較的多く関認められる聴力像の類似性は蓋膜機能低下による難聴与しているといわれている。しかしながら，現在までという共通の難聴発症メカニズムを反映している可能に日本人難聴患者からの報告はなく，OTOA 遺伝子性がある。

変異による難聴の臨床的特徴は明らかになっていない。

【結論】OTOA 遺伝子による難聴を日本で初めて報告

そこで，本研究では，日本人難聴患者における OTOAした。常染色体劣性遺伝形式をとる難聴者のなかで遺伝子変異による難聴の頻度と臨床像を明らかにする

OTOA 遺伝子による頻度は0.3 ％であり，その特徴ことを目的に研究を行った。

的な臨床像は中音域の難聴であることを明らかにした。

【対象と方法】常染色体劣性遺伝形式をとる日本人難（論文審査の結果の要旨）

聴患者2,262人を対象に，既知難聴遺伝子68遺伝子の

OTOA 遺伝子は常染色体劣性遺伝形式をとる非症

NGS 解析を行い，OTOA 遺伝子の SNV および短い欠候群性難聴（DFNB22）の原因遺伝子である。OTOA

失・挿入変異の解析を行った。また NGS 解析の Read

遺伝子は蝸牛内のらせん板縁に発現しており蓋膜の接Depth データを用いて CNVs 解析も行った。CNV が着因子（GPI アンカータンパク）である Otoancorin

検出された症例に関してはアレイ CGH 解析を行い，をコードしている。したがって，OTOA 遺伝子変異

その結果の整合性を確認した。

による難聴は蓋膜の離脱により蝸牛増幅障害が生じ【結果】日本人常染色体劣性遺伝形式をとる難聴患者

ることが原因と考えられている。OTOA 遺伝子変異に

2,262名を対象に解析を行ったところ，234人（10.3 ％，よる難聴には遺伝子欠失（Copy number variations :234/2262）に何らかの CNV を同定した。本研究で最CNVs）が比較的多く関与しているといわれている。

も高頻度に検出されたのは STRC 遺伝子であった。

現在までに日本人難聴患者からの報告はなく，また，

STRC 遺伝子に次いで２番目に高頻度に CNV が検出

OTOA 遺伝子変異による難聴の臨床的特徴は明らかされたのが OTOA 遺伝子であり，14症例より同遺伝になっていなかった。本研究では，常染色体劣性遺伝

子の CNV が検出された（0.6 ％，14/2262）。OTOA

形式をとる日本人難聴者において OTOA 遺伝子変異

遺伝子の CNV が検出された14症例のうち，OTOA

および遺伝子欠失による難聴者の頻度と臨床像を検討

遺伝子の２コピー欠失２症例，また OTOA 遺伝子のした。

１コピー欠失に加え対側アリルに一塩基多型（SNV）
302

日本人劣性遺伝形式をとる難聴者2,262名を対象に，
信州医誌

68

審査学位論文要旨

難聴の原因遺伝子68遺伝子をターゲットにした次世代

して中音域の難聴を呈することを明らかにした。

シーケンサーによる網羅的解析を行い点変異の検出を

５．OTOA 遺伝子欠失症例では，全例上流に存在す行った。また Read Depth データを用いて Copy num­

る２つの遺伝子も同時に欠失していた。これらの遺

ber variation（CNV）解析も行った。CNV が検出さ伝子を含む領域は前後に高い相同性持った反復配列れたものに対してはアレイ CGH 解析しその結果の整があるため， 相同組み換えによるゲノム再構成

合性を確認した。

（CNV）が生じやすいホットスポットとして機能していることが考えられた。

その結果，杉山は次の結論を得た。
１．難聴者2,262症例において２症例が OTOA 遺伝

６．検出された OTOA 遺伝子の SNV はすべて exon16

子欠失の2 copy loss を，９症例が１copy loss であり，までであった。OTOA 遺伝子の820kb 下流には同うち４名に対側アレルに同遺伝子の Single nucleotide遺伝子の exon20以降と99 ％相同性をもった配列

variant（SNV）を，１症例に同遺伝子の homo 接合（pseudo gene）が存在するため，その部位の SNV

体の SNV を検出し，OTOA 遺伝子による難聴の頻の検出が困難であることが考えられた。

度は0.3 ％（７/2262）であることを明らかにした。

以上より，OTOA 遺伝子欠失による難聴は，中音２．難聴者2,262名において３copy（１copy gain）も域の難聴を呈することが明らかとなった。今回明らか

３症例検出されたが，コントロール152例からも３になった OTOA 遺伝子変異による難聴の臨床像は，

copy の１例が検出されており，難聴という pheno­

予後の予測や治療介入を選択する上で重要な情報としtype には関連がないと考えられた。

て活用可能と考える。また，同遺伝子に限らず，偽遺３．次世代シークエンサーを用いた CNV 解析結果と伝子などの高い相同性を持つ領域の変異検出について

アレイ CGH の解析結果はすべて一致していた。

は，CNV 解析や long read sequencing が必要となる

４．OTOA 遺伝子変異・ 欠失による難聴は， 先天性・幼少期発症の難聴を呈し，難聴の程度は中等度から重度で様々であった。また新しい臨床的特徴とことが示唆された。
以上より主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

Intestinal Injury by Heat Conduction from Surgical Sealing Devices（シーリングデバイスか
らの熱伝導による腸管損傷）
鈴 木

都史郎

（論文の内容の要旨）

ブブレードの背面温度を測定し，温度推移を観察した。

【背景と目的】手術用シーリングデバイスはアクティ

第２に小腸を術野外に取り出して小腸の離断操作を行

ブブレードから発熱することが知られているが，手術

い，同時にアクティブブレードの背面に小腸の別部位

中，特に腹腔鏡手術中の熱伝導に伴う腸管損傷の研究の漿膜面を押し当て，小腸漿膜面に熱変性を起こさせはあまり行われていない。この研究は手術用シーリン

た。熱変性が起こった小腸から病理標本を作製し，病グデバイスの安全な使用法を確立するために，アク

理医により熱損傷の組織学的評価を行った。

ティブブレードからの熱伝導による小腸の損傷を物理【結果】アクティブブレード背面の最高到達温度は，的および組織学的に評価する目的で行われた。

LigaSure V®と BiClamp®で特に高く80 ℃前後まで上【材料及び方法】腹腔鏡手術をシミュレートした動物昇した。 一方 LigaSure Maryland Jaw®は特に低くモデル（豚）を用いて，７種類のバイポーラシーリン

60 ℃前後であった。他のデバイスは多少ばらつきがグデバイス（ENSEAL TRIO®，ENSEAL Round®，あるものの，ほぼ70 ℃前後まで上昇した。また術野ENSEAL G2 Articulating®
，LigaSure V®
，LigaSure

内での使用を継続した状態でアクティブブレード背面

Blunt Tip®，LigaSure Maryland Jaw®，BiClamp®）の温度が50 ℃以下まで冷却される時間を調べたとこと ２ 種 類 の 超 音 波 メ ス（ HARMONIC ACE®
＋，

ろ，THUNDERBEAT®は特に長く平均56秒かかり，

THUNDERBEAT®）を比較した。第１に腹腔鏡操作

ENSEAL TRIO®は平均13.4秒と特に短かった。他ので各デバイスを用いて小腸を離断した。その際アクデバイスは30秒前後かかることがわかった。熱によるティブブレードの背面に温度計を接触させてアクティ

腸管損傷の組織学的評価において，ENSEAL TRIO®

No. 5, 2020303

審査学位論文要旨と ENSEAL Round®，ENSEAL G2 Articulating®，

温度計を接触させてアクティブブレードの背面温度を

LigaSure Maryland Jaw®， HARMONIC ACE®
＋，

測定し，温度推移を観察した。第２に小腸を術野外にTHUNDERBEAT®は熱損傷が粘膜まで到達すること

取り出して小腸の離断操作を行い，同時にアクティブが確認された。LigaSure V®のみ粘膜下層までの熱損傷

ブレードの背面に小腸の別部位の漿膜面を押し当て，に留まっていたが，LigaSure Blunt Tip®と BiClamp®

小腸漿膜面に熱変性を起こさせた。熱変性が起こったにおいては粘膜筋板までの熱損傷を認めた。

小腸から病理標本を作製し，病理医により熱損傷の組【結論】今回の研究で用いられたすべてのデバイスは，織学的評価を行った。

アクティブブレードの背面の最高温度が60 ℃以上まその結果，鈴木都史郎は次の結論を得た。

で到達しており，これは接触した組織に蛋白変性が起１． アクティブブレード背面の最高到達温度は，こることを示す。またデバイスの使用後50 ℃以下まLigaSure V®と BiClamp®で特に高く80 ℃前後までで冷却されるのに，ほぼ手術すべてのデバイスで30秒上昇した。一方 LigaSure Maryland Jaw®は特に低以上かかっており，デバイス使用後の接触でも周囲組

く60 ℃前後であった。他のデバイスは多少ばらつ

織に熱損傷を引き起こす可能性があることが分かった。

きがあるものの，ほぼ70 ℃前後まで上昇した。ま

組織学的評価ではすべてのデバイスで粘膜下層以上のた術野内での使用を継続した状態でアクティブブ

熱損傷が誘発された。アクティブブレードの背面の接レード背面の温度が50 ℃以下まで冷却される時間

触だけでも，その熱損傷は腸管の漿膜面に留まらず深を調べたところ，THUNDERBEAT®は特に長く平部にまで達することが証明され，周囲組織に接触させ

均56秒かかり，ENSEAL TRIO®は平均13.4秒と特ながらデバイスを使用することは非常に危険であるこに短かった。他のデバイスは30秒前後かかることがとが分かった。

わかった。

（論文審査の結果の要旨）

２． 熱による腸管損傷の組織学的評価において，手術用シーリングデバイスはアクティブブレードかENSEAL TRIO®と ENSEAL Round®，ENSEAL

ら発熱することが知られているが，手術中，特に腹腔G2 Articulating®， LigaSure Maryland Jaw®，

鏡手術中の熱伝導に伴う腸管損傷の研究はあまり行わ

HARMONIC ACE®
＋，THUNDERBEAT®は熱損れていない。この研究は手術用シーリングデバイスの傷が粘膜まで到達することが確認された。LigaSure

安全な使用法を確立するために，アクティブブレード

V®のみ粘膜下層までの熱損傷に留まっていたが，からの熱伝導による小腸の損傷を物理的および組織学

LigaSure Blunt Tip®と BiClamp®においては粘膜的に評価する目的で行われた。

筋板までの熱損傷を認めた。

腹腔鏡手術をシミュレートした動物モデル（豚）をこれらの結果により，手術用シーリングデバイスの用いて， ７種類のバイポーラシーリングデバイス

種類に関係なく，アクティブブレードの背面は高温に（ENSEAL TRIO®，ENSEAL Round®，ENSEAL G2

なり，腸管に接触することで熱損傷を引き起こす可能

Articulating®，LigaSure V®，LigaSure Blunt Tip®，

性があることが分かった。腹腔鏡手術において手術用

LigaSure Maryland Jaw®，BiClamp®）と２種類の超シーリングデバイスを周囲組織に接触したまま使用す音波メス（HARMONIC ACE®
＋，THUNDERBEAT®
）

ることは，大変危険であり行うべきではないと考えらを比較した。第１に腹腔鏡操作で各デバイスを用いてれた。よって，主査，副査は一致して本論文を学位論

小腸を離断した。その際アクティブブレードの背面に文として価値があるものと認めた。

Deficiency of the adrenomedullin-RAMP3 system suppresses metastasis through modification of cancer-associated fibroblasts（アドレノメデュリン（AM）-RAMP3系の欠損は，癌関連線維芽細胞の性質を変化させ，臓器間転移を抑制する）
戴

昆（論文の内容の要旨）

AM の活性は， 主として受容体活性調節タンパク【背景】アドレノメデュリン（AM）は全身で広く産

RAMP2および RAMP3により制御されている。我々

生され， 多彩な生理活性を有するペプチドである。

はこれまで，AM ノックアウトマウス（AM－/－）が

304

信州医誌

68

審査学位論文要旨

血管の発生異常により胎生致死となること，RAMP のいたことから，RAMP3の下流に Src-Cas-PDPN 系が中でも RAMP2のノックアウトマウス（RAMP2－/－）存在することが明らかとなった。

の み が AM－/－ と 同 様 の 表 現 型 を 示 す こ と か ら ，次に，転移巣周辺から CAF を初代培養して検討を血管の発生および恒常性維持における AM-RAMP2系

進 め た 。PAN02 細 胞 の 培 養 上 清 刺 激 下 に お い て ，の重要性を明らかとしてきた。一方，AM は様々な

RAMP3－/－由来 CAF では αSMA の発現低下を認癌においても産生されている。我々は成体において，血めた。また RAMP3－/－ CAF では，細胞質内スト

管内皮細胞の RAMP2を欠損誘導できるマウス（DI-レスファイバーの形成が抑制されている一方で，細胞E-RAMP2－/－）を樹立し，B16F10メラノーマ細胞

膜直下のアクチン形成が亢進しており，間葉上皮移行の皮下移植実験を行った。DI-E-RAMP2－/－ではコ（MET）を生じていると考えられた。さらに RAMP3

ントロールマウスと比較して，皮下移植した原発巣の－/－ CAF では，PAN02細胞との共培養系において，サイズが縮小するのに対し，原発巣摘出後の肺への転細胞の遊走，増殖が抑制されていた。アレー解析にお移が亢進することを見出し，AM-RAMP2系による血いて，RAMP3－/－ CAF では癌増殖因子の発現低

管恒常性維持作用が，癌の転移を抑制することを報告

下と共に， 抑制因子の発現亢進を認めた。 そこで，した（Cardiovasc Res, 2016）。一方で膵癌は予後不良

RAMP3－/－ CAF の細胞上清を PAN02細胞に添加で，術後肝転移しやすいことが重要な問題点である。

すると，間葉系マーカーである Vimentin の発現低下

また，ヒト膵癌サンプルでは RAMP3の発現が上昇しが認められ，PAN02細胞の増殖，遊走も抑制された。

ていることも報告されている。 本研究では DI-E-

実際に RAMP3－/－ CAF と PAN02細胞を混合して

RAMP2－/－と RAMP3－/－マウスを用いて，臓器マウスに移植すると，癌のサイズは抑制され，肝転間転移における AM-RAMP2，３系の意義を検討し移も減少したことから，RAMP3－/－ CAF は癌増殖た。

や転移を抑制する，いわば良性の CAF となっている【方法と結果】PAN02膵癌細胞を脾臓に移植し，３と考えられた。最後に，RAMP3－/－に対して AM

および４週間後，肝臓への転移を検討した。DI-E-

を 持 続 投 与 し ，AM-RAMP3 系 を 阻 害 し た 状 態 で ，

RAMP2－/－では，原発巣サイズが縮小するのに対AM-RAMP2系を選択的に活性化したところ，癌転移し，肝臓への転移は亢進しており，先の実験結果のは RAMP3－/－よりもさらに抑制された。

再現性が確認された。DI-E-RAMP2－/－における【結論】 以上から，DI-E-RAMP2－/－では，AM-肝臓の転移巣を観察すると，癌周囲の線維化亢進と，

RAMP3系の代償性亢進が，PDPN の発現亢進を生じ，

αSMA 陽性の癌関連線維芽細胞（CAF）の増加を認

癌の悪性度が増強したと考えられた。一方，RAMP3

め，これらの CAF はポドプラニン（PDPN）陽性で－/－では悪性度の高い PDPN 陽性 CAF が減少したあった。臨床上，PDPN 陽性 CAF が存在する癌は，結果，癌転移が抑制されたと考えられた。選択的な予後不良であることが報告されている。一方，DI-E-

RAMP2活性化と RAMP3阻害が癌転移抑制の新たなRAMP2－/－では，RAMP2発現低下と共に RAMP3

治療法になることが期待される。

発現が代償性に亢進していた。そこで次に，RAMP3（論文審査の結果の要旨）－/－マウスを用いて，同様の臓器間転移モデルの検膵癌は予後不良で，術後肝転移しやすいことが重要討を行った。RAMP3－/－マウスは，RAMP2－/－な問題点である。アドレノメデュリン（AM）は多彩と異なり正常に生まれ，成体が得られた。RAMP3－

な作用を有するペプチドであり，その活性は受容体/－を用いて癌転移実験を行うと，DI-E-RAMP2－/

活性調節タンパク RAMP2，３により制御される。こ－とは逆に，肝臓への転移が抑制されていた。さらに，れまで，AM-RAMP2系が癌転移を抑制することを明

DI-E-RAMP2－/－とは異なり，癌周囲の PDPN 陽

ら か と し た が ， 癌 転 移 に お け る AM-RAMP3 系 の性 CAF が減少していた。そこで，線維芽細胞におけ詳細は不明である。本研究では DI-E-RAMP2－/－とる RAMP3と PDPN の関係の検討を進めた。胎児由RAMP3－/－を用いて， 臓器間転移における AM-

来線維芽細胞（MEF）で RAMP3をノックダウンさ

RAMP2，３系の意義を検討した。

せると，PDPN の発現も低下した。さらに PAN02細その結果，戴 昆は次の結論を得た。

胞の細胞上清で刺激した RAMP3－/－の MEF では，

１．DI-E-RAMP2－/－では， 原発巣サイズが縮小

PDPN 発現調節に関わる Src，Cas の活性も低下してす る の に 対 し ， 肝 転 移 は 亢 進 し て い た 。DI-E-

No. 5, 2020305

審査学位論文要旨めた。

RAMP2－/－における肝臓の転移巣を観察すると，
癌周囲の線維化亢進と，代償性の RAMP3や筋線維

６．RAMP3－/－ CAF と PAN02細胞を混合してマ芽細胞マーカーであるポドプラニン（PDPN）陽性

ウスに移植すると，癌サイズは抑制され，肝転移も癌関連線維芽細胞（CAF）の増加を認めた。

減少したことから，RAMP3－/－ CAF は癌増殖や転移を抑制する，いわば良性の CAF となっている

２．RAMP3－/－では，DI-E-RAMP2－/－とは逆に，と考えられた。

肝転移が抑制されていた。さらに，DI-E-RAMP2－/－とは逆に，癌周囲の PDPN 陽性 CAF が減少

７．RAMP3－/－に対して AM を持続投与し，AMRAMP3系が遮断された状態で，AM-RAMP2系をしていた。

選択的に活性化したところ，癌転移は RAMP3－/

３．AM-RAMP3の下流に Src-Cas-PDPN 系が存在－よりもさらに抑制されたすることが明らかとなった。
４．RAMP3－/－由来 CAF では αSMA の発現低下

これらの結果より，DI-E-RAMP2－/－では，癌のを認め，また RAMP3－/－ CAF では，細胞質内悪性度が増強する一方，RAMP3－/－では悪性度のストレスファイバーの形成が抑制されている一方で，高い PDPN 陽性 CAF が減少し，癌転移が抑制される

細胞膜直下のアクチン形成が亢進しており，間葉上ことが明らかとなった。選択的な RAMP2活性化と皮移行（MET）を生じていると考えられた。

RAMP3阻害が癌転移抑制の新たな治療法になること

５．RAMP3－/－ CAF では，PAN02細胞との共培が期待される。
以上の結果から，主査，副査は一致して本論文を学養系において，細胞の遊走，増殖が抑制されていた。
アレー解析において，RAMP3－/－ CAF では癌促位論文として価値があるものと認めた。

進因子の発現低下と共に，抑制因子の発現亢進を認

Amelioration of intracellular Ca2＋ regulation by exon-45 skipping in Duchenne muscular
dystrophy-induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes（デュシェンヌ型筋ジスト
ロフィーiPS 細胞由来心筋細胞におけるエクソン45スキッピングによる細胞内 Ca2＋動態の改
善）
佐

藤

充

人

（論文の内容の要旨）

レームに変換させるエクソン・スキップ治療であり，【背景と目的】 デュシェンヌ型筋ジストロフィー

近年，臨床応用が始まっている。本研究では DMD 患（DMD）はジストロフィン（DMD）遺伝子の変異に者から作成した iPS 細胞を心筋細胞へと分化誘導し，より筋形質膜に局在するジストロフィンが欠損し，進AO 薬によりイン・フレーム化することで，ジストロ行性に骨格筋や心筋が侵されるＸ連鎖性疾患である。

フィンの発現回復，細胞内 Ca2＋ 動態の改善が得られ幼少期より全身の筋萎縮・筋力低下のみならず拡張型

るかについて検討した。

心筋症を来たし，進行に伴い呼吸筋にも障害が加わる【対象と方法】DMD 遺伝子エクソン46-55欠失を有すが，近年の人工呼吸管理技術の向上により呼吸不全でる24歳日本人男性の末梢血Ｔリンパ球から，OCT4，の死亡が減少し，最大の死因は心不全となっている。

SOX2，KLF4，L-MYC をエンコーディングしたベ

DMD では DMD 遺伝子の欠失 / 重複などの変異によ

クターをエレクトロポレーションによりトランスフェ

り，アミノ酸の読み取り枠にずれが生じる（アウト・クションし，iPS 細胞株を樹立した。分化誘導因子

オブ・フレーム変異）ことでジストロフィンが産生さ（CHIR99021，Activin A，BMP-4，XAV939） を用れない。一方，読み取り枠が維持されるイン・フレー

い心筋細胞へ分化誘導を行った（Day０）。分化誘導

ム変異では不完全ながらも機能を有するジストロフィ

後 Day 13に AO 薬（phosphorodiamidate morpholino

ンが産生され， より軽症なベッカー型筋ジストロ

oligomers ; PMO を使用）を用いてエクソン45スキッフィー（BMD）の病型をとる。DMD に対する最もピングを行い，エクソン45-55欠失のイン・フレーム

有望な治療方法はアンチセンス・オリゴヌクレオチド

変異型に変換した。Day 20で RT-PCR 法によりエク（AO）を用いてアウト・オブ・フレームをイン・フ

ソン・ スキップ効率を検討した（PMO の容量は５

306

信州医誌

68

審査学位論文要旨

μM と10 μM を用いた）。次に Day 40でウェスタンブ

とから，エクソン45-55領域全てを対象としたマルチ

ロッティングおよび免疫細胞染色によりジストロフィ

エクソン・スキップ治療は多くの患者に適応され，かンの発現回復について評価した。Day 60で Fluo-4をつ高い治療効果を得られる可能性がある。我々の結果

2＋2＋

用いた細胞内 Ca イメージングにより細胞内 Ca 動

はエクソン45-55領域のマルチエクソン・スキッピン

態の改善が得られるかについて検討した。

グ治療が DMD の心筋障害に対しても有用である可能【結果】正常な Karyotype の保持，多能性幹細胞マー性を示唆し，得られた DMD 患者 iPS 細胞由来心筋はカーの発現，細胞移植によるテラトーマ形成を確認し，エクソン・スキップ治療の細胞モデルとして有用であiPS 細胞株の樹立を確認した。心筋への分化誘導を行ると考えられた。

い，分化誘導 Day７以降で自発的な細胞の収縮が認（論文審査の結果の要旨）められ，免疫染色および FACS 解析でトロポニンＴ

デュシェンヌ型筋ジストロフィー（DMD）はジスの発現が認められた。RT-PCR によるエクソン・ス

トロフィン（DMD） 遺伝子の変異によりジストロ

キップ効率を評価したところ，統計学的有意差は得らフィンが欠損し，進行性に骨格筋や心筋が侵されるＸれなかったが PMO 容量依存性にエクソン45スキップ

連鎖性疾患である。以前は呼吸筋障害による呼吸不全

が 行 わ れ る 傾 向が認められた（PMO ５μM 40 ％ ，が最大の予後因子であったが，近年の人工呼吸管理技

10 μM 55 ％ ，p＝0.25 ）。 また， ウェスタンブロッ術の向上により，最大の死因は心不全や致死性不整脈

ティングおよび免疫細胞染色にてジストロフィンの発となっている。現時点において，DMD に対する最も

2＋

現回復を確認し得た。Fluo-4を用いた Ca イメージン

有望な治療方法はアンチセンス・オリゴヌクレオチド

グでは，エクソン・スキップ前後で不規則な自発性細（AO）を用いたエクソン・スキップ治療であり，臨2＋

胞質内 Ca 上昇の頻度低下，すなわち不規則な収縮

床応用が始まっている。本研究では DMD 患者から作を呈する心筋細胞の減少が認められた（PMO 非投与

成した iPS 細胞を心筋細胞へと分化誘導し，AO 薬に

群 69.0 ％，PMO 投与群 32.0 ％，p＜0.01）。次に細よりイン・フレーム化することでジストロフィンの発胞内 Ca トランジェントに関連するパラメータにつ

現回復および細胞内 Ca2＋ 動態の改善が得られるかにいて評価した結果，エクソン・スキップ後の心筋細胞ついて検討した。

2＋

では time to peak，full duration at half-maximal am­

DMD 遺伝子エクソン46-55欠失を有する24歳日本

plitude および decay time（Tau）の短縮（p＜0.01），

人男性のＴリンパ球から iPS 細胞株を樹立した。分化

Fluo-4の蛍光強度変化（F/F0）の上昇（p＜0.01）が誘導因子（CHIR99021，Activin A，BMP-4，XAV認められた。これらのパラメーターの変化の結果は，939）を用い心筋細胞へ分化誘導を行い，エクソン45

主に筋小胞体に存在するリアノジン受容体２およびをスキップする AO 薬（PMO） を用いてエクソン

2＋

SERCA2の細胞質内 Ca 放出および再取り込み機能

45-55欠失のイン・フレーム変異型に変換した。RT-の改善を示唆するものであり，ジストロフィン回復に

PCR 法 に よ り エ ク ソ ン・ ス キ ッ プ 効 率 を 検 討 し ，2＋より細胞内 Ca 動態の改善が示唆された。

ウェスタンブロッティングおよび免疫細胞染色により【考察】DMD エクソン46-55欠失 iPS 細胞由来心筋にジストロフィンの発現回復を評価した。また Fluo-4

対してエクソン45スキップを行い，エクソン45-55欠を用いた細胞内 Ca2＋イメージングにより細胞内 Ca2＋失へと誘導することでジストロフィンの発現を回復し，動態の改善が得られるかを検討した。

2＋

心筋細胞内の Ca 動態の改善が得られることを示した。機序については明らかではないが，ジストロフィ2＋

その結果，佐藤充人は次の結論を得た。
１．DMD 患者 iPS 細胞由来心筋細胞への PMO 投与

ン回復が筋小胞体における Ca 動態の改善に寄与しによるエクソン45スキップによりジストロフィンのていることが考えられる。筋小胞体が関与した細胞内発現回復が得られ，用量依存性にエクソン・スキッ

2＋

Ca 濃度上昇は心室性不整脈の原因となることが報プが起こる傾向を認めた。

告されており，ジストロフィン回復によりそれらの致

２．エクソン・スキップ前後で不規則な自発性細胞内

死性不整脈発生の抑制効果が期待される。DMD 患者

Ca2＋ 上昇の頻度低下（不整な収縮を呈する心筋細の約60 ％がエクソン45-55領域内に変異を有しており，胞の減少）が認められた。

またエクソン45-55を全て欠失した BMD は非常に症

３．エクソン・スキップ後の心筋細胞では，リアノジ状の軽い臨床像を呈することが明らかとなっているこン受容体２，SERCA2による筋小胞体からの Ca2＋

No. 5, 2020307

審査学位論文要旨

放出・再取り込み機構に由来する細胞内 Ca2＋ トラ

また本研究結果はエクソン45スキップ治療の有効性を

ンジェントの改善が認められた。

支持し，得られた DMD 患者 iPS 細胞由来心筋はエク

これらの結果よりエクソン・スキップ治療は心筋細ソン・スキップ治療の細胞モデルとして有用であると胞に対しても有効と考えられ，心室性不整脈の予防，考えられた。よって主査，副査は一致して本論文を学

心機能改善に寄与する可能性があることが示唆された。

位論文として価値があるものと認めた。

Aryl Hydrocarbon Receptor Directly Regulates Artemin Gene Expression（芳香族炭化水素
受容体は神経栄養因子アルテミン遺伝子を直接制御する）
枝

光（論文の内容の要旨）

智大ArtnΔXRE マウスと野生型マウスに3-MC を外用し発【背景と目的】芳香族炭化水素受容体（AhR ; Aryl

現を調べた結果，野生型マウスに比較して ArtnΔXRE

hydrocarbon Receptor）は，環境汚染物質であるダマウスの表皮で誘導される Artn の発現は有意に抑制

イオキシン類や多環芳香族炭化水素を主なリガンドされた。さらに，AhR-CA マウスの表皮で高発現すとして認識し活性化する転写因子である。恒常的活性る Artn の発現も，AhR-CA : : ArtnΔXRE マウスでは抑化型 AhR（AhR-CA） を表皮特異的に発現させた制された。これらの結果から，Artn 遺伝子の52 kb

AhR-CA マウスは，アトピー性皮膚炎に類似した痒

上流に位置する XRE はエンハンサーとして機能しみの激しい皮膚炎を発症する。AhR-CA マウスの表て お り ，AhR が Artn 遺 伝 子 の 発 現 を 直 接 制 御 す

皮では，神経栄養因子アルテミン（Artn）が高発現ることが証明された。次に，AhR-CA マウスの病態する結果，表皮内に末梢神経が伸長し痒み過敏状態がへの AhR-Artn 経路の寄与を調べるために，AhR-

形成されている。先行研究でのクロマチン免疫沈降

CA : : ArtnΔXRE マウスの皮膚炎や掻破行動を観察した。

シ ー ケ ン ス で ，Artn 遺 伝 子 上 流 の AhR 結 合 配 列

アトピー性皮膚炎患者に特徴的な痒み過敏状態を評価（XRE ; Xenobiotic Responsive Element）を含む領域するために，マウスの皮膚に微弱な触覚刺激を加えてに AhR-CA が結合することが明らかにされた。しか誘導される掻破行動を観察したところ，AhR-CA マ

しながら，この AhR-CA 結合領域は Artn 遺伝子のウスにおいて高頻度で誘導される掻破行動は AhR-

約52 kb 上流と，一般的に知られている AhR 結合領

CA : : ArtnΔXRE マ ウ ス で 有 意 に 抑 制 さ れ た 。 ま た ，域と比較して遠く離れているため，エンハンサーとしArtn 中和抗体を投与することで，AhR-CA マウスにて機能し Artn 遺伝子を直接制御しているのか不明でおいて観察される連続的な掻破行動は抑制された。一あった。そこで，本研究では CRISPR/Cas により XRE

方，AhR-CA : : ArtnΔXRE マウスや Artn 中和抗体投与を含む AhR-CA 結合領域を欠失させた ArtnΔXRE マ

マウスのいずれも，皮膚炎は有意な改善には至らなウスを作製し，AhR が Artn 遺伝子を直接制御するかったことから，AhR-CA マウスの皮膚炎発症にはか否か調べた。さらに，皮膚炎や掻破行動に対する

AhR により誘導される他の経路が関与することも示

AhR-Artn 経路の寄与を調べた。

唆された。これらの結果から，AhR による Artn の【結果】初めに，AhR の活性化により Artn の発現が直接的な発現誘導が痒み過敏に寄与することが示され，誘導されるか確かめるために，AhR アゴニストであAhR-Artn 経路を抑制する薬剤がアトピー性皮膚炎

る3-メチルコランスレン（3-MC）をマウス皮膚に塗の痒みに対する新しい治療薬になることが期待される。

り表皮における Artn の発現誘導を調べた。その結果，（論文審査の結果の要旨）

Keratin5-Cre マウス（コントロール）で Artn の発現

恒常活性化型 AhR を表皮特異的に発現させた AhR-

flox/flox

マウス

CA マウスは，アトピー性皮膚炎に類似した表現型を（表皮特異的 AhR 欠失マウス）ではその誘導が有意発症する。先行研究により，AhR-CA マウスの表皮に抑制された。このことから，3-MC は AhR 依存的では神経栄養因子 Artemin（Artn）が高発現しておに Artn 遺伝子の発現を誘導することが確認された。

り，Artn 中和抗体によって痒み過敏が改善すること

次 に ，AhR が Artn 遺 伝 子 上 流 の XRE を 介 し てが示された。Artn 遺伝子上流の DNA には AhR-CA

Artn 遺伝子を直接制御するか明らかにするために，蛋白質が結合する領域があることが ChIP-seq より明が誘導される一方，Keratin5-Cre : : AhR

308

信州医誌

68

審査学位論文要旨

らかにされているが， この場所は Artn 遺伝子から

３．AhR-CA マウスと比較して，AhR-CA : : ArtnΔXRE

52 kb と遠く離れた場所に位置するため，エンハン

マウスの表皮における Artn の発現誘導は抑制されサーとして機能しているのか不明だった。

た。

本研究では，CRISPR/Cas によるゲノム編集技術

４．AhR-CA マウスと比較して，AhR-CA : : ArtnΔXRE

を用いて，AhR-CA 結合領域の XRE を含む配列を欠マウスでは機械刺激により誘導される掻破行動が減失した Artn

ΔXRE

少した。

マウスを作製し，Artn 遺伝子が AhR
ΔXRE

によって直接制御されるか調べた。また，Artn

マ

５．AhR-CA マウスで観察される連続掻破行動は，ウスを用いて AhR-CA マウスの病態に対する Artn

アルテミン中和抗体の投与により減少した。

の寄与を調べた。

これらの結果より，Artn 遺伝子52 kb 上流の XREは機能しており，AhR は Artn 遺伝子を直接制御してその結果，枝光は次の結論を得た。
１．AhR アゴニストをマウス皮膚に塗ることで AhRいることが明らかにされた。AhR により誘導される

依存的に表皮において Artn の発現が誘導された。

Artn は痒み過敏状態の形成に寄与しており，AhRArtn 経路がアトピー性皮膚炎に対する新しい治療薬

２．Artn 遺伝子上流の XRE を欠失することで，AhR アゴニストによる Artn の発現誘導は抑制さになることが期待された。よって，主査，副査は一致れた。

して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

Comparison of clinical characteristics of patients with Mycobacterium avium complex disease by gender（肺 MAC 症患者の性別による臨床的特徴の比較）
生

山（論文の内容の要旨）【背景 / 目的】肺 MAC 症（Mycobacterium avium

裕

一性166名） であった。 診断時の平均年齢は， 女性患者よりも男性の方が高かった（P＜0.001）。画像所見

complex : MAC ） は 肺 非 結 核 性 抗 酸 菌 症（ non-に関して，男性では57名（83.8 ％）は NB 型，６名

tuberculous mycobacteria : NTM）の最も多い原因で，（8.8 ％）は FC 型（7.4 ％）であった。女性では155

本邦においては NTM のうち89 ％を占める。日本で名（93.4 ％） が NB 型， ７名（4.2 ％） は FC 型では近年肺 MAC 症患者は中年女性患者において増加しあった。男性，女性の間に有意差を認めなかった（Pている。これらの患者では，特に画像上の分類で結節＝0.067）。BMI でも有意な差を認めなかった。男性

気管支拡張型（Nodular bronchiectasis type : NB 型）の方が女性より多剤併用療法が施行された患者は少なが多いとされている。一方，男性の肺 MAC 症患者でく（P＜0.001），喫煙歴，アルコール摂取量は有意には，線維空洞型（Fibro-cavitary type : FC 型）が多多かった（P＜0.001）。血液検査では，診断時のリンく予後も悪いとされているが，一遍のみの報告で，男

パ球数，TP，ALB は男性の方が女性より有意に低値女差を比較した報告はない。 本研究の目的は， 肺であった（それぞれ P＝0.034，P＝0.01，P＜0.001）。

MAC 症の男性患者の臨床的特徴を明らかにすること

さらに，男性の方が女性より有意に悪性腫瘍，COPDである。

の合併が多かった（P＝0.002，P＜0.01）。結核歴や【方法】2003年から2016年の間に信州大学医学部附属関節リウマチ，糖尿病，間質性肺炎については，両者

病院外来を受診した患者を診療録より後方視的に抽出で有意な差を認めなかった。

した。本研究では，肺 MAC 症は，米国胸部疾患学会

カプランマイヤー曲線にて増悪までの期間を両者で（ATS）と米国感染症学会（IDSA）から合同で発表

比 較 し た 。 男 女 で 有 意 な 差 を 認 め な か っ た（ P＝された statement によって診断した。臨床データは診0.67）。

断時から１か月以内に得られた。画像は，HRCT に【結論】本研究期間における男性肺 MAC 症におけるて NB 型，FC 型，その他に分類された。病勢の悪化

NB 型の割合は，既報と比較し増加していた。病勢のは，症状の増悪，画像の増悪，または微生物学的な増増悪までの期間は男女で有意な差を認めなかった。

悪として判断された。
【結果】研究期間中，対象患者は234名（男性68名，女No. 5, 2020

（論文審査の結果の要旨）
肺 MAC 症（Mycobacterium avium complex : MAC）
309

審査学位論文要旨

は肺非結核性抗酸菌症（non-tuberculous mycobacte­

も男性の方が高かった（P＜0.001）。

ria : NTM）の最も多い原因で，本邦において肺 MAC

２．画像所見に関して，男性では57名（83.8 ％）が症は NTM のうち89 ％を占め，近年肺 MAC 症患者はNB 型，６名（8.8 ％）が FC 型（7.4 ％）であった。

中年女性患者において増加している。これらの患者で女性では155名（93.4 ％）が NB 型，７名（4.2 ％）は，特に画像上の分類で結節気管支拡張型（Nodular

が FC 型であった。男性，女性の間に有意差を認め

bronchiectasis type : NB 型）が多いとされている。一なかった（P＝0.067）。

方，男性の肺 MAC 症患者では，線維空洞型（Fibro-

３．男女で BMI に有意な差を認めなかった。男性のcavitary type : FC 型）が多く予後も悪いとされてい方が女性より多剤併用療法が施行された患者は少なるが，男女差を比較した報告はない。本研究の目的は，く（P＜0.001），喫煙歴，アルコール摂取量は有意

肺 MAC 症の男性患者の臨床的特徴を明らかにするこに 多 か っ た（ P＜0.001 ）。 診断時のリンパ球数，とである。

TP，ALB は男性の方が女性より有意に低値であっ2003年から2016年の間に信州大学医学部附属病院

た（それぞれ P＝0.034，P＝0.01，P＜0.001）。

外来を受診した患者を診療録より後方視的に抽出し４．男性の方が女性より有意に悪性腫瘍，COPD のた。本研究では，肺 MAC 症は，米国胸部疾患学会

合併が多かった（P＝0.002，P＜0.01）。

（ATS）と米国感染症学会（IDSA）から合同で発表

５．カプランマイヤー法にて比較し，増悪までの期間

された statement によって診断した。臨床データは診に男女で有意な差を認めなかった（P＝0.67）。

断時から１か月以内の結果を用いた。画像は，HRCT

これらの結果より，本研究期間における男性肺 MAC

にて NB 型，FC 型，その他に分類した。病勢の悪化症における NB 型の割合は，既報と比較し増加していは，症状の増悪，画像の増悪，または微生物学的な増ること，および，病勢の増悪までの期間は男女で有意悪などより総合的に判断した。

な差を認めないことが明らかとなった。よって，主査，
副査は一致して本論文を学位論文として価値があるもその結果，生山は次の結論を得た。
１．研究期間中，対象患者は234名（男性68名，女性のと認めた。

166名）であった。診断時の平均年齢は，女性よりDetecting copy number alterations of oncogenes in cell-free DNA to monitor treatment
response in acral and mucosal melanoma（末梢血中の Cell-free DNA のコピー数異常を用いた肢端型・粘膜型メラノーマ患者での治療効果の評価）
御子柴

飛 鳥

（論文の内容の要旨）

一方で肢端型，粘膜型メラノーマでは，Copy num­

【背景と目的】進行期メラノーマの治療はここ数年でber alterations（CNA）の頻度が高いとされ，癌遺伝

目覚ましく進歩した。個々人にあった治療を進めてい子である KIT，CDK4，CCND1でもしばしばコピー

く上で，治療効果を正確に反映するバイオマーカーが数が増加し，メラノーマの増殖との関連が指摘されて必要である。現在，Lactate Dehydrogenase（LDH）

いる。そこで，肢端型，粘膜型メラノーマにおいて，が広く使われているが，非特異的なことも多く，病勢

KIT，CDK4，CCND1の CNA の頻度を調べた。さを反映するマーカーが必要とされている。Circulating

らに， 末梢血中から DNA を分離し KIT，CDK4，

tumor DNA（ctDNA） は， 末梢血中の腫瘍由来の

CCND1の Copy number ratio（CN ratio）を定量し，DNA であり腫瘍細胞と同様の遺伝子異常を有していメラノーマの病勢を反映するバイオマーカーになりうる。メラノーマでは，BRAF や NRAS の変異 DNA

るか検討することとした。

をターゲットとして，ctDNA が解析されている。メ

【材料及び方法】本研究では，メラノーマ患者37人

ラノーマはサブタイプごとに，遺伝子変異に特徴を有（肢端型27人，粘膜型10人）を対象とした。Droplet

しており，表在拡大型では BRAF 変異の頻度が高い。

digital PCR を用いて CN ratio を解析し，CN ratio は

しかし，黄色人種に多い肢端型，粘膜型では特異的な標的遺伝子 / APOB 遺伝子（reference gene）×２で遺伝子変異が少なく，ctDNA の解析が進んでいない。

計算した。Copy number gain（CN gain）は，カット

310

信州医誌

68

審査学位論文要旨

オフ値より大きい値と定義した。

に反映するバイオマーカーが求められている。現在，【結果】 対象患者の腫瘍組織を用いて遺伝子変異

Lactate Dehydrogenase（LDH） が広く使われてい（BRAF，NRAS，KIT）の頻度を調べた。いずれのるが，腫瘍と非特異的に上昇することがある。画像評

遺伝子変異も有しない症例が肢端型では55.6 ％，粘価は正確であるが頻回に施行できない。Circulating

膜型では90 ％と半数以上であり，変異型 ctDNA はバイ

tumor DNA（ctDNA）は末梢血中の腫瘍由来 DNA

オマーカーとして不適であった。一方，KIT，CDK4，であり腫瘍細胞と同様の遺伝子異常を有する。メラ

CCND1の CN ratio を定量すると，１つ以上の遺伝ノーマでは，BRAF や NRAS の変異 ctDNA が解析

子で CN gain を認める症例は肢端型では62.9 ％，粘されている。メラノーマは病型ごとに遺伝子異常が異膜型では70 ％と高頻度であった。また免疫染色の結なり黄色人種に多い肢端型，粘膜型では特異的な遺伝

果から，CN ratio が高いことがタンパク質の高発現

子変異が少なく，ctDNA に焦点をあてた解析が進んに関与していると思われた。これらの結果から KIT，でいない。 一方で， これらの病型は Copy number

CDK4，CCND1の CN ratio を肢端型，粘膜型のメラ

alterations（CNA）の頻度が高い。癌遺伝子である

ノーマ患者の末梢血でモニタリングできないか検討す

KIT，CDK4，CCND1でもコピー数の増加が報告さることとした。腫瘍組織の CN ratio が上昇していたれている。そこで，腫瘍組織を用いて KIT，CDK4，

患者24人を対象とし，末梢血の DNA を用いて腫瘍由CCND1の Copy number ratio（CN ratio）を調べた。

来の CN gain を検出できるか調べた。KIT と CCND1

さらに，末梢血中から DNA を抽出し KIT，CDK4，では末梢血の CN ratio は健常人と比較してメラノー

CCND1の CN ratio を定量し，メラノーマの病勢を反マ患者で有意に上昇していた。また，臓器転移（リン映するバイオマーカーになりうるかを検討した。

パ節転移を除く）がある患者は，ない患者と比較し血本研究では，メラノーマ患者37人（肢端型27人，粘漿の CN ratio が有意に上昇しており，その中でも腫膜型10人）を対象とした。腫瘍組織と血漿について

瘍組織の CN ratio が高い患者では特に末梢血の CN

Droplet digital PCR を用いて CN ratio を解析した。

ratio が高かった。以上より，組織の CN ratio が高く「CN ratio＝標的遺伝子 / APOB 遺伝子（reference

かつ全身の腫瘍量が多い患者では末梢血の CN ratio

gene）×２」と計算して求めた。カットオフ値以上のが上昇しており，KIT，CDK4，CCND1の CN ratio

値を Copy number gain（CN gain）と定義した。腫がバイオマーカーになり得ると考えた。実際に，腫瘍瘍組織の免疫染色を行った。

組織の CN ratio が高く臓器転移がある場合，病勢の変化に応じての末梢血の CN ratio が変化した。ただし，腫瘍組織の CN ratio が高い点，臓器転移がある点の両者を満たさない場合，末梢血の CN ratio は病勢に応じて変化せず感度は高いと言えなかった。

その結果，御子柴は次の結果を得た。
１．肢端型の62.9 ％，粘膜型の70 ％に KIT，CDK4，
CCND1の CN gain を認めた。
２．KIT，CDK4において CN gain は蛋白質発現に関与していた。

【 結 論 】 肢 端 型 ， 粘 膜 型 の メ ラ ノ ー マ で は KIT ，３．腫瘍組織の CN ratio＞５かつ臓器転移がある患

CDK4，CCND1の CN gain を高頻度に認め，これら者において末梢血の CN ratio は上昇しており，モの CN gain はタンパク質発現を介して腫瘍の病態にニタリングが可能であった。

関わると思われた。また，腫瘍組織の CN ratio が高これらの結果より，肢端型，粘膜型のメラノーマでく，臓器転移（リンパ節転移を除く）がある患者におは KIT，CDK4，CCND1の CN gain を高頻度に認めいては，末梢血の CN ratio が病勢に応じて変化した。

ており，組織の CN ratio＞５かつ臓器転移がある症

LDH は簡便かつ頻回に採取でき汎用性あるマーカー

例では末梢血の CN ratio は有用なバイオマーカーにであるが，非特異的に上昇することがある。画像検査

なりうると思われた。

は正確だが頻繁な実施は困難である。肢端型，粘膜型のメラノーマでは，末梢血の CN ratio を LDH や画像

よって，主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

検査とともに用いることでより正確な病勢の評価が可能になると考えた。
（論文審査の結果の要旨）
進行期メラノーマの診療において，治療効果を正確
No. 5, 2020311

審査学位論文要旨

A comparison of the features of fluorine-18 fluorodeoxyglucose-positron emission tomography (FDG-PET) between IgG4-related disease with bilateral hilar lymphadenopathy andsarcoidosis（両側肺門リンパ節腫脹を伴う IgG4関連疾患とサルコイドーシスの PET-CT 所見の比較検討）
小沢

陽子（論文の内容の要旨）

周囲および動脈周囲領域で有意に高率な FDG 集積を，

【背景・目的】IgG4関連疾患（IgG4-rerative disease :サ症群では，鎖骨上および腹部のリンパ節，筋肉や軟IgG4-RD）とサルコイドーシス（サ症）はいずれも部組織において有意に高率な FDG 集積を認めた。さ様々な臓器に病変を呈する全身疾患であり，両疾患とらに，肺門リンパ節の SUVmax は IgG4-RD 群（中も胸部 Computed Tomography（CT）では両側肺門央値4.20）よりもサ症群（中央値7.20）で有意に高値

リ ン パ 節 腫 脹（ bilateral hilar lymphadenopathy :であった（p＝0.002）。

BHL）を呈することが多く，肺病変はリンパ路沿い【考察】両群の FDG 集積に有意な差が認められた理に進展する。 また，fluorine-18 fluorodeoxyglucose

由について考察する。最近，IgG4-RD においては，

positron emission tomography（FDG-PET）では高細胞外マトリックスタンパク質の一種である Lami­

率に肺門リンパ節に FDG 集積を認める。両疾患とも

nin511-E8に対する自己免疫反応が関与していること

呼吸器症状が軽微で炎症反応を伴わない症例が多いこが報告されており，自己抗体が病因であると認識されとから，臨床的には鑑別が難しく，画像的にサ症が疑るようになってきた。この自己抗体およびその他の抗われていた症例のなかに未診断の IgG4-RD が含まれ原となるタンパクの分布が病変に影響を与えているとていることも報告されている。BHL を伴う IgG4-RD考えた。一方，サ症は P. acnes の感染を背景に，宿とサ症において，FDG-PET における FDG 集積の分

主側の素因が関与して Th1タイプの過剰な免疫反応

布と程度の違いを明らかにする目的で本研究を行った。

が生じ，P. acnes が潜伏感染する部位へ肉芽腫形成を【方法】対象は2004年１月から2015年12月の期間に当来す機序が考えられている。最近，我々は気管支肺胞院を受診し，BHL を伴う IgG4-RD と診断された25例

洗浄液を解析し，病変部位で IgG4-RD が Th2優位，と，病理学的にサ症（病期Ⅰ-Ⅱ）と診断された15例

サ症が Th1優位であることを報告した。詳細な機序である。全例が相澤病院で FDG-PET 検査を施行さは不明であるが，両疾患の病因や病態の違いが FDGれた。臨床情報は電子カルテから抽出し，後方視的にの集積に影響していると考えた。また，SUVmax の解析した。３人の放射線科医が臨床情報なしに FDG

差には，両疾患におけるグルコーストランスポーター

集積の有無を判定し，肺門リンパ節の FDG 最大標準

（GLUT）の発現の違いが関与している可能性がある化取り込み値（SUVmax）は相澤病院で定量し，２と考えた。さらに，両疾患の臨床において FDG-PET

群間で FDG の集積分布と SUVmax を比較検討した。

は悪性腫瘍の発見と疾患活動性の評価に有用と考えら

データの解析は，性差，FDG 集積の有無にはカイ２れる。本研究で示した両疾患の典型的な FDG 集積を乗検定を， 血液検査データ，SUVmax の比較には認識することで，異常集積を的確に検出し，悪性腫瘍

Mann-Whitney のＵ検定を用い，ｐ値＜0.05を有意の診断に寄与できる。また，サ症では突然死のリスクとした。

になる活動性心病変の評価に有用である。 一方，【結果】IgG4-RD 群（男性21人，女性４人，年齢中央

IgG4-RD においては，CT で検出が困難であった血

値69歳）はサ症群（男性３人，女性12人，年齢中央値

管病変の活動性を FDG 集積で初めて指摘できた症例

55.4歳）に比して有意に男性が多く高齢であった。血があり，血管破裂のリスク回避も期待される。

液検査では，血清 Cr，CRP，IgG，可溶性 IL-2レセ【結論】両疾患は肺のリンパ路沿いに病変が進展し，プター，白血球数，好酸球分画（数）が IgG4-RD 群

高率に BHL を呈するが，FDG の集積分布と肺門リンで有意に高値であった。また，サ症群では ACE が有パ節の SUVmax には有意な違いが認められた。両疾意に高値であった。FDG 集積を両群で比較すると，患の病因と病態の違いが，FDG の集積分布と強度に

IgG4-RD 群では涙腺，顎下腺，膵臓，前立腺，尿道影響していると考えた。

312

信州医誌

68

審査学位論文要旨（論文審査の結果の要旨）齢であった。血液検査では，血清 Cr，CRP，IgG，IgG4関連疾患（IgG4-rerative disease : IgG4-RD）

可溶性 IL-2レセプター，白血球数，好酸球分画（数）とサルコイドーシス（サ症）はいずれも様々な臓器にが IgG4-RD 群で有意に高値，サ症群では ACE が病変を呈する全身疾患であり，両疾患とも胸部 Com­

有意に高値であった。

puted Tomography（CT）では両側肺門リンパ節腫

２．IgG4-RD 群では涙腺，顎下腺，膵臓，前立腺，脹（bilateral hilar lymphadenopathy : BHL）を呈す

尿道周囲および動脈周囲領域で有意に高率な FDGることが多く，肺病変はリンパ路沿いに進展する。ま集積を，サ症群では，鎖骨上および腹部のリンパ節，た，fluorine-18 fluorodeoxyglucose positron emission

筋肉や軟部組織において有意に高率な FDG 集積を

tomography（FDG-PET）では高率に肺門リンパ節認めた。

に FDG 集積を認める。両疾患において，BHL を呈し，

３．肺門リンパ節の SUVmax は IgG4-RD 群（中央FDG-PET を施行した症例を集め，FDG 集積の程度

値4.20）よりもサ症群（中央値7.20）で有意に高値と分布に関して比較検討を行った。

であった。

対象は当院で診断された IgG4-RD で BHL を伴う

これらの結果により，両疾患は肺のリンパ路沿いに25例と，病理学的にサ症（病期Ⅰ-Ⅱ）と診断された病変が進展し，高率に BHL を呈するが，FDG の集積

15例である。全例が相澤病院で FDG-PET 検査を施

分布と肺門リンパ節の SUVmax には有意な違いが認行された。臨床情報，FDG 集積分布，肺門リンパ節められた。両疾患の病因と病態の違いが，FDG の集の FDG 最大標準化取り込み値（SUVmax）について

積分布と強度に影響していると考えられた。
従って，主査，副査は一致して本論文を学位論文と比較検討した。

して価値があるものと認めた。

その結果，下記の結果を得た。
１．IgG4-RD 群はサ症群に比して有意に男性が多く高Effectiveness of a genetic test panel designed for gynecological cancer : an exploratory
study（婦人科癌用に設計された遺伝子検査パネルの有用性：探索的研究）
井田（論文の内容の要旨）

耕一証されている「druggable 変異」から，実際に個別医【研究の背景と目的】近年，次世代シーケンサー

療を受ける患者は３-13 ％に留まる。つまり，既存パ（NGS）の開発・普及により日常検査レベルで遺伝子

ネルは効率，費用対効果といった面で，未解決の多くの網羅的解析が可能となり，特に癌における preci­の問題が存在する。こうした問題に対応すべく，当教sion medicine にこの技術が応用され始めた。すなわ

室では婦人科癌で変異報告のある28の actionable かち，癌の発生や進行に関与する複数の遺伝子の変異をつ druggable な 遺 伝 子 に 絞 っ た 新 規 遺 伝 子 パ ネ ル

解析する遺伝子パネル検査により，当該腫瘍のドライ

TANRE-G（Targeted variants ANalysis RElated toバー変異を同定し，その遺伝子変異に対する治療薬がGynecological cancers）を設計して，婦人科癌におけ選択される医療が，いわゆるクリニカルシークエンス

る precision medicine の効率化・コスト削減を図り，として実現しつつある。一方，本邦で保険適応となっさらに自施設の NGS 解析の精度検証を目標とした。

た遺伝子パネル検査は腫瘍横断的にデザインされてい【方法】既報の婦人科癌に関する文献や，CIViC，るため，NCC オンコパネルが114遺伝子，Foundatio­

OncoKB，ClinicalTrials.gov などの公開データベース

nOne CDx が324遺伝子と，多数の遺伝子が包括的にを参照し， 婦人科癌で変異頻度の高い actionable/

搭載されており，婦人科癌に関連の乏しい遺伝子も多druggable な28遺伝子を選択した。なお TP53遺伝子

い。また，これら既存の遺伝子パネル検査は56万円とには治療可能性を有する標的薬が現時点で存在しない

高額であり，末期癌患者とその家族には負担が大きいため除外した。2016年から2017年に信州大学医学部附上に，ここで見いだされる遺伝子変異のうち，治療標属病院で治療した再発・難治性の婦人科癌11症例（子的となる可能性のある「actionable 変異」が見いださ

宮体癌４例，卵巣癌４例，子宮頸癌３例）を後方視的れる患者は30-50 ％であり，さらに，標的治療薬が検に選択し，すべて初回手術より検体を得て，同一症例No. 5, 2020313

審査学位論文要旨（論文審査の結果の要旨）において適切にホルマリン固定された組織より腫瘍と正常子宮筋層（コントロール）の DNA を抽出し，ペ近年，患者の癌組織の遺伝子変異を網羅的に調べ，ア解析を行った。年齢の中央値は57歳（44-78歳）で，その変異に基づいて薬剤を選択する，いわゆるクリニ

11症例中６例がⅢ-Ⅳ期の進行癌であった。シーケン

カルシークエンスが普及してきた。しかし，既存のクス解析には Ion PGM を用い，変異抽出には Torrent

リニカルシークエンスに用いられている遺伝子パネル

Variant Caller（5.8.0.19）と Integrative Genomics

では，婦人科癌に関連の乏しい遺伝子が多く含まれ，

Viewer Version 5.01（０）を用いた。遺伝子変異や検査費用が50万円以上（保険適応で約20万円）と高価

コピー数変異の解析には IonReporter Software 5.6をである。さらに遺伝子変異を同定しても実際に治療に使用し， 変異候補抽出は公開データベースである

至る患者は数％程度に留まり，効率と費用対効果におSIFT，Polyphen-2，ClinVar を用いて行った。また

いて未解決の問題が多く存在する。こうした問題に対抽出された遺伝子変異候補に対しては Sanger 法を用応すべく，婦人科癌で変異報告のある28の actionable

いて，そしてコピー数変異については免疫染色法によ（治療の標的となりうる変異）かつ druggable（薬剤りそれぞれ検証を行った。

選択が可能な変異）な遺伝子に絞った新規遺伝子パネ【結果】腫瘍および正常組織 DNA の標的配列領域のルを設計し，自施設で DNA 抽出と次世代シーケン

平均 read 数はそれぞれ3400×と350×であり，解析サー（NGS）による変異解析を行い，婦人科癌におに十分であった。Actionable 変異は全11症例で32かける precision medicine の効率化とコスト削減を図っ所が同定され，内訳は missense 変異22か所（69 ％），た。さらに本解析の精度検証を行った。

nonsense 変異６か所（19 ％），frameshift-deletion 変

その結果，井田耕一は以下の結論を得た。

異 １ か 所（ ３ ％ ），amplification ３ か 所（ ９ ％ ） で１．Actionable 変異は，全11症例の再発・難治性のあった。腫瘍毎の actionable 変異は，子宮体癌４例

婦人科癌において32か所で同定され，内訳は mis­に18変異（コピー数変異なし），卵巣癌３例に５変異

sense 変異22か所（69 ％），nonsense 変異６か所（うちコピー数変異２），子宮頸癌１例に２変異（うち（19 ％），frameshift-deletion 変異１か所（３％），

コピー数変異１）が同定された。それぞれの変異はamplification３か所（９％）であった。

Sanger 法 で も 確 認 さ れ ，amplification に つ い て は

２．自施設の NGS 解析において，一般的に必要とさ免疫染色で当該分子の発現増強が確認された。このれる標的配列領域のリード数を十分確保できた。

TANRE-G における actionable 変異の検出率は11例

Actionable 変異の検出率は本パネルが11症例中８中８例（73 ％）であり，既存の NCC オンコパネル

例（73 ％）であり，保険適応のある NCC オンコパ

（45 ％）と同等であった（p＝0.115）。また TANRE-G

ネル（45 ％）と同等であった（p＝0.115）。全てのの検査コストは94,000円（850USD）に削減できた。

変異はサンガー法や免疫染色により再確認された。

【結論】本探索的研究により，当科で設計した婦人科

３．DNA 抽出から NGS による変異解析までの費用

癌用の新規遺伝子パネル TANRE-G は，大幅な検査を約10万円に削減できた。

コスト削減を達成しつつ，婦人科癌においては既存の以上より，本パネルには婦人科癌における preci­

パネルと同等の actionable 変異抽出率を保てており，

sion medicine の効率化とコスト削減を実現できる可

既存パネルに比較して費用対効果が大きいことが示さ能性があり，解析精度は既存のパネルとほぼ同等であれた。本パネル検査は，今後進められる婦人科癌のることを確認できた。したがって，主査，副査は一致

precision medicine において，有力なツールとなる可

して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

能性が考えられた。

Prevalence and Risk Factors of Carpal Tunnel Syndrome in Japanese Aged 50 to 89 Years（日本における50～89歳の手根管症候群の罹患率と危険因子）
橋（論文の内容の要旨）【背景】手根管症候群（carpal tunnel syndrome :
314

本

瞬
CTS）は最も頻度の高い絞扼神経障害であるが，一般住民に対して臨床症状と神経伝導速度検査を用いて
信州医誌

68

審査学位論文要旨

診断を行い，罹患率を調査した報告は少ない。また東を手根管症候群と診断している点，手根管症候群既往

アジアにおける CTS の疫学調査は韓国からの１文献の調査では手術既往のある者のみを手根管症候群と判のみである。本研究の目的は，住民台帳より無作為に定している点は軽症の手根管症候群を見逃している可抽出したコホートに対して臨床症状と神経伝導速度検能性がある。先行研究において CTS の関連因子とし査を用いて診断を行い，CTS の疫学を調査することて女性，肥満，糖尿病，長期血液透析，甲状腺機能異である。

常，関節リウマチ，手の過使用，振動工具作業，手が【方法】本研究は当教室が行っている高齢者の検診を小さいことなどが挙げられている。本研究では女性，兼ねた運動機能に関する疫学調査“おぶせスタディ”

高い BMI，関節リウマチ，弾発指，女性における短の研究の一つである。
“おぶせスタディ”は，長野県

い第３中手骨長が CTS 関連因子であったが，糖尿病，小布施町の住民基本台帳から無作為に抽出した50歳か

甲状腺機能異常，重労働，振動工具作業などの因子はら89歳の住民を対象とした。10歳毎の各年代の男女がCTS と関連を認めなかった。

それぞれ約50人ずつ合計約400人になるまで参加を依【結論】本研究は50歳から89歳の日本人の年齢調整罹頼した。既往歴，飲酒，喫煙などの生活習慣，精神状

患率は4.7 ％であること，CTS 関連因子には女性，高態や職業などのアンケート調査と，医師による骨密度，

い BMI，関節リウマチ，弾発指，女性における短い

筋力，神経機能の測定，Ｘ線撮影などからなる。本研

第３中手骨長があることを明らかにした。

究では手関節周囲の骨折の既往歴がある者と，質問票（論文審査の結果の要旨）にデータ欠損がある者は除外した。CTS に対して手手根管症候群（carpal tunnel syndrome : CTS）は根管開放術を行ったと答えた者は CTS の既往ありと最も頻度の高い絞扼神経障害であるが，一般住民に対した。正中神経領域の感覚異常があり，正中神経の神して臨床症状と神経伝導速度検査を用いて診断を行い，経伝導速度検査で遅延を認めた者を CTS 有病者とし罹患率を調査した報告は少ない。また東アジアにおけた。CTS の既往ありと CTS 有病者を合わせて，CTS

る CTS の疫学調査は韓国からの１文献のみである。

罹患者とした。CTS に関連する因子を単変量および本研究の目的は，住民台帳より無作為に抽出したコ

多変量ロジスティック回帰分析を使用して検討した。

ホートに対して臨床症状と神経伝導速度検査を用いてP＜0.05を有意水準とした。

診断を行い，CTS の疫学を調査することである。

【結果】対象者数は379人で，女性14人，男性３人の長野県小布施町の住民基本台帳から無作為に抽出し計17人が CTS 罹患者であった。CTS 罹患率は女性た50歳から89歳の住民379人を対象とし，CTS 罹患の7.4 ％，男性1.6 ％，全体で4.5 ％であった。50歳か有無と既往歴の調査，骨密度・筋力・神経機能の測定，

ら89歳の日本人の人口構成に合わせて調整した年齢調

四肢・脊椎のＸ線写真撮影，血液検査を行った。本研

整罹患率は女性7.2 ％，男性1.8 ％，全体で4.7 ％で究では手関節周囲の骨折の既往歴がある者と，質問票あった。各年代別の罹患率の違いに明確な傾向は認めにデータ欠損がある者は除外した。CTS に対して手られなかった。統計学的に CTS 罹患と関連していた根管開放術を行ったと答えた者は CTS の既往ありと因子は女性， 高い BMI， 関節リウマチ， 弾発指でした。正中神経領域の感覚異常があり，正中神経の神あった。女性では短い第３中手骨長も CTS 罹患の因

経伝導速度検査で遅延を認めた者を CTS 有病者とし子であった。

た。CTS の既往ありと CTS 有病者を合わせて，CTS【考察】本研究の利点は，被験者の無作為抽出を行っ罹患者とした。CTS に関連する因子を単変量およびたため選択バイアスが小さい点である。このように地

多変量ロジスティック回帰分析を使用して検討した。

域住民から無作為抽出を行った一般者を対象として

P＜0.05を有意水準とした。

CTS の疫学調査を行った研究は過去にわずかである。

その結果以下の成績を得た。

一方，過去の研究の多くは病院受診患者を対象者とし

１． 女性14人， 男性３人の計17人が CTS 罹患者でて調査した研究である。本研究では参加を拒否した者あった。CTS 罹患率は女性7.4 ％，男性1.6 ％，全がおり，検診なので疾病に興味のある者が参加する可体で4.5 ％であった。

能性があるため，各疾患の罹患率が高く見積もられる

２．50歳から89歳の日本人の人口構成に合わせて調整可能性がある。認知症の者を除外していないので想起した年齢調整罹患率は女性7.2 ％，男性1.8 ％，全バイアスの危険性がある。２つの検査を共に満たす者体で4.7 ％であった。

No. 5, 2020315

審査学位論文要旨

３．各年代別の罹患率の違いに明確な傾向は認められ

整罹患率は4.7 ％であること，CTS 関連因子には女性，高い BMI，関節リウマチ，弾発指，女性におけなかった。
４．統計学的に CTS 罹患と関連していた因子は女性，

る短い第３中手骨長があることを明らかにした。よっ高い BMI，関節リウマチ，弾発指であった。女性て，主査，副査は一致して本論文を学位論文として価では短い第３中手骨長も CTS 罹患の因子であった。

値があるものと認めた。

これらの結果より，50歳から89歳の日本人の年齢調

DNA repair protein RAD51 enhances the CRISPR/Cas9-mediated knock-in efficiency inbrain neurons（DNA 修復タンパク質 RAD51は脳の神経細胞での CRISPR/Cas9を介した遺伝
子ノックイン効率を上昇させる）
栗

原

大

河

（論文の内容の要旨）

EGFP ドナーを用いた相同組換え修復が起きることに【背景と目的】これまで遺伝子の機能を生体で解析すより，β-actin 遺伝子のＮ末端に EGFP cDNA がノッ

るにはマウス ES 細胞を用いた遺伝子ターゲティング

クインされる。相同組換えのノックイン効率に関係すが行われていた。通常，マウス ES 細胞からマウスをる要因として二つのことが考えられる。一つは，ド作成するまでには膨大な労力と時間が必要だが，近年ナーベクターの持つ相同領域の長さを改良することで開発された CRISPR-Cas9システムでは幅広い生物種ある。相同領域の長さを長くすることで，ゲノムとので迅速なゲノム編集が可能になり，遺伝子機能の解析

親和性があがり，相同組換えの効率が高まることが報が盛んに行われている。

告されている。そこで私は，ドナーベクターの相同領

CRISPR-Cas9システムを用いると，相同組換え修域の長さを改良した３種類のベクターを作成した。１

復による遺伝子ノックインも可能だが，相同組換え修

つ目は３末端を1.0 kbp に伸ばしたもの，二つ目は３

復は分裂細胞においてのみ起こることから，非分裂細末端を2.0 kb に伸ばしたもの，三つ目は二つ目のド胞である神経細胞では，相同組換え修復による遺伝子

ナーベクターの５末端を1.6 kbp に伸ばしたものを作

ノックインは困難であり，これまでに神経細胞におい成した。もう一つは DNA 修復過程の分子メカニズムて相同組換え修復による遺伝子ノックインは報告されを操作することである。相同組換え修復で中心的役割ていなかった。

を果たしている DNA 修復タンパク質 Rad51を過剰発しかし，私たちは2016年に CRISPR/Cas9システム

現させることにより，遺伝子ノックイン効率が上昇すと子宮内エレクトロポレーション法を組み合わせるこることが非神経細胞で報告されている。そこで私は，とにより，脳神経細胞で遺伝子をノックインすること

DNA 修復タンパク質 Rad51を過剰発現することによに成功した。

り，神経細胞においても遺伝子ノックイン効率が上昇

この方法を用いると神経細胞への遺伝子ノックイン

するのかを調べた。

が可能になるが，遺伝子ノックイン効率はおよそ２％【結果】両端にそれぞれ0.5 kb の相同領域をもつドだった。この効率は，単一のニューロンの形態およびナーベクターを用いた場合には，ノックイン効は２％分子機能を解析する上では非常に適しているが，脳機程度であったのに対し， 相同領域の長さを1.6 kb-

能を解析するためにはより多くの神経細胞において遺2.0 kb に伸長したドナーベクターを用いると，遺伝

伝子を改変することが必要である。そこで本研究では子ノックイン効率は14 ％程度まで上昇した。また，

遺伝子ノックインの高効率化を目的とした。

子宮内エレクトロポレーション法を行う際に相同領域【方法】本研究では CRISPR/Cas9システムと子宮内が1.6 kb-2.0 kb のドナーベクターと RAD51発現ベエレクトロポレーション法を組み合わせることによりクターを同時に導入することで，ノックイン効率が

遺伝子ノックインを行った。E15.5の子宮内胎児脳の25 ％まで上昇することを見出した。

脳室に EGFP ドナープラスミド，Cas9/gRNA の発現【結論】今回の研究ではドナーの相同領域の長さを伸プラスミド，レポータープラスミドを導入し，子宮内長 し ， か つ RAD51 を 過 剰 発 現 さ せ る こ と に よ り ，エレクトロポレーションを用いて遺伝子導入した。

ノックイン効率を10倍以上に上昇させることに成功し

316

信州医誌

68

審査学位論文要旨た。また，RAD51過剰発現による神経細胞への影響せた場合においても変わりはなかった。また，スパイを発生過程での神経細胞の移動やスパインの密度など

ンの密度も，RAD51の過剰発現の有無に関わらず同の形態への影響も認められなかった。また，異なるプ程度だった。このように，RAD51を過剰発現させたラスミドベクターを用いても異なる遺伝子座において神経細胞では細胞移動，スパイン密度には異常は観察

もノックイン効率を上昇させることがわかった。このされなかった。

ことから，RAD51遺伝子の過剰発現によるノックイ

また，異なるベクターの組み合わせでも RAD51過ン効率の上昇は，特定の遺伝子だけで機能する現象で剰発現によりノックイン効率は上昇するのかを検証しはないことが分かった。

た。

本研究により，脳神経細胞に外来遺伝子を高効率で

β アクチン遺伝子の別の領域を切断するガイド

ノックインできる技術が確立できたと考えている。今RNA 発現ベクターとドナーベクターを用いた場合に後，さらなる高効率化が可能となれば，遺伝子変異においても RAD51過剰発現により遺伝子ノックイン効より引き起こされる神経疾患の治療法の開発や精神疾率が２倍程度上昇することが分かった。

患に関連する遺伝子群の機能解析に応用できるものと考えている。

次に，脳神経細胞に豊富に発現していることから
β ア ク チ ン 遺 伝 子 と は 異 な る CamK2a 遺 伝 子 で も（論文審査の結果の要旨）

RAD51共発現によってノックイン効率は上昇するの

遺伝子ノックインの高効率化を目指すために，相同かを調べた。その結果，RAD51共発現下では EGFP

領域の長さを1.6 kb-2.0 kb に伸長したドナーベク

ノックイン効率がおよそ2.5倍に上昇した。

ターを用いると，以前行った相同領域が0.5 kb のド

今回の研究ではドナーの相同領域の長さを伸長し，ナーベクターでの遺伝子ノックイン効率が２％程度でかつ RAD51を過剰発現させることにより，ノックイあったのに対し，14 ％程度まで上昇した。また，子ン効率を10倍以上に上昇させることに成功した。そし宮内エレクトロポレーション法を行う際に相同領域がて，RAD51過剰発現による神経細胞の移動やスパイ

1.6 kb-2.0 kb のドナーベクターと RAD51発現ベクンの密度などの形態への影響も認められなかった。まターを同時に導入することで， ノックイン効率がた，異なるプラスミドベクターを用いても，異なる遺25 ％まで上昇することを見出した。

伝子座においてもノックイン効率を上昇させることがしかし，これまでに RAD51を神経細胞に過剰発現わかった。このことから，RAD51遺伝子の過剰発現させた報告はなく，本技術を脳機能解析に用いるためによるノックイン効率の上昇は，特定の遺伝子だけでには，RAD51過剰発現が神経細胞に悪影響を及ぼさ機能する現象ではないことが分かった。

ないことを調べておくことにした。

本研究により，脳神経細胞に外来遺伝子を高効率でそこで，RAD51を過剰発現させた神経細胞では細胞移動，スパイン密度に影響があるかを調べた。

ノックインできる技術が確立できた。よって，主査，
副査は一致して本論文を学位論文として価値があるもこの神経細胞の分布様式は，RAD51を過剰発現さのと認めた。

Therapeutic effects of Choreito, a traditional Japanese (Kampo) medicine, on detrusor overactivity induced by acetic acid in rats（酢酸誘発性排尿筋過活動ラットにおける猪苓湯の治
療効果）
上

野

（論文の内容の要旨）

学る猪苓湯の治療効果を検討した。

【目的】漢方薬である猪苓湯（Choreito, CRT）は，過【方法】10週齢雌 Sprague-Dawley ラットを，２週間活動膀胱（OAB）およびその他の下部尿路症状（LUTS）の通常飼料飼育をしたあと膀胱内に生理食塩水を灌流の治療に広く使用されている。その薬理効果は抗炎症する群（normal group），同様に２週間通常飼料飼育作用を有することで，LUTS 治療に有効であると考え食をしたあと膀胱内に酢酸（Acetic Acid，AA）を灌られている。本研究では，酢酸誘発性排尿筋過活動

流する群（AA group），および２週間の猪苓湯混餌ラットモデルを使用して排尿筋過活動（DO）に対す飼料飼育をしたあと膀胱内に酢酸を灌流する群（AANo. 5, 2020317

審査学位論文要旨

with CRT group）に分けた。それぞれの群で膀胱内る群（AA group），および２週間の猪苓湯混餌飼料

圧測定を行い，基底圧，排尿圧，排尿間隔，１回排尿飼育をしたあと膀胱内に酢酸を灌流する群（AA with量，膀胱容量を測定した。膀胱内圧測定後，膀胱を摘CRT group）に分けた。それぞれの群で膀胱内圧測

出して組織学的解析を行った。また，レーザー血流計定を行い，基底圧，排尿圧，排尿間隔，１回排尿量，を使用して膀胱微小循環の評価を行った。

膀胱容量を測定した。膀胱内圧測定後，膀胱を摘出し【結果】 膀胱内圧測定において normal group，AAて組織学的解析を行った。また，レーザー血流計を使group，AA with CRT group の排尿間隔時間はそれ用して膀胱微小循環の評価を行った。
その結果，上野 学は次の結論を得た。

ぞれ7.2±1.6分，2.1±0.3分，4.2±0.4分であり，１回排尿量はそれぞれ1.2±0.3 ml，0.4±0.1 ml，0.7

１．膀胱内圧測定において，normal group に比べて±0.1 ml であった（いずれも p＜0.01）。膀胱微小循

AA group で有意に排尿間隔時間の短縮，１回排尿環解析においては，酢酸灌流によって増加した膀胱血量の減少を認めた。AA with CRT group では，AA流が猪苓湯投与によって軽減した。膀胱組織学的解析

group に比して有意に排尿間隔時間が延長，１回排においては，HE 染色における観察で normal group

尿量が増加していた。よって，酢酸に誘発される排に比して AA group では尿路上皮下の間質浮腫変化

尿筋過活動（排尿間隔時間，１回排尿量，膀胱容量が強く，AA with CRT group で浮腫性変化が軽減しの低下）は，猪苓湯投与により抑制されたと考えらた。免疫染色では，HIF-1α および UPⅢはすべてのれた。

群の尿路上皮で発現したが，群間での明らかな違いは

２．膀胱微小循環解析においては，酢酸灌流によって増加した膀胱血流が猪苓湯投与によって軽減した。

観察されなかった。
【結論】猪苓湯は，ラット実験モデルで膀胱内酢酸灌

３．膀胱組織学的解析においては，HE 染色における流によって誘発された DO を緩和させた。また，猪観察で normal group に比して AA group では尿路上苓湯は，尿路上皮損傷の軽減と過剰血流の調節を介し皮下の間質浮腫変化が強く，AA with CRT groupて，OAB に治療効果をもたらす可能性がある。

で浮腫性変化が軽減した。

（論文審査の結果の要旨）

４．免疫染色では，hypoxia-inducible factor 1α（HIF1α）

漢方薬である猪苓湯（Choreito，CRT）は，過活動および uroplakin Ⅲ（UPⅢ）はすべての群の尿路

膀胱（OAB）およびその他の下部尿路症状（LUTS）

上皮で発現したが，群間での明らかな違いは観察さの治療に広く使用されている。その薬理効果は抗炎症れなかった。膀胱内0.2 ％酢酸灌流は，低酸素によ作用を有することで，LUTS 治療に有効であると考える影響は少ないことが示唆された。

られている。本研究では，酢酸誘発性排尿筋過活動

これらの結果より，猪苓湯は，ラット実験モデルでラットモデルを使用して排尿筋過活動（DO）に対す

膀胱内酢酸灌流によって誘発された DO を緩和させる猪苓湯の治療効果を検討した。

た。また，猪苓湯は，尿路上皮損傷の軽減と過剰血流

10週齢雌 Sprague-Dawley ラットを，２週間の通常飼料飼育をしたあと膀胱内に生理食塩水を灌流するの調節を介して，OAB に治療効果をもたらす可能性があると考えられた。
よって主査，副査は一致して本論文を学位論文とし群（normal group），同様に２週間通常飼料飼育食をしたあと膀胱内に酢酸（Acetic Acid，AA）を灌流すて価値があるものと認めた。

In vitro inhibitory effects of sesamin on CYP4F2 activity（In vitro におけるセサミンのCYP4F2活性に対する阻害効果）
渡

辺

宏

晃

（論文の内容の要旨）

セサミンが血管収縮因子である20-ヒドロキシエイコ【背景・目的】ゴマは栄養価が高く健康によいとされ，

サテトラエン酸（20-HETE）の産生を抑制すること

世界中で広く利用されている食品である。ゴマやそのによって惹起される可能性が示唆されている。20-

主要なリグナンであるセサミンは血圧を低下させるこ

HETE は 主 に シ ト ク ロ ム P450 4F2（ CYP4F2 ） にとがメタ解析により示されている。その機序として，

よってアラキドン酸から生成されるが，in vitro 実験

318

信州医誌

68

審査学位論文要旨

において，セサミンはヒト肝臓や腎臓のミクロゾーム

アラキドン酸の ω-水酸化を濃度依存的に阻害するこおよび CYP4F2組換え酵素による20-HETE 産生を阻と（IC50 値1.87 μM）が報告されている。これらの知害することが報告されている。しかし，セサミンが見から，セサミンは用いる基質によらず，CYP4F2活CYP4F2の機能をどのような機序で阻害するのかは明性を阻害することが示された。さらに，本研究では，

らかではない。本研究では，CYP4F2活性に対するセセサミンが CYP4F2を不活性化することを明らかに

サミンの影響を in vitro で明らかにすることを目的とした。この不活性化はプレインキュベーション時間依した。

存的および濃度依存的であり，かつプレインキュベー【方法】ヒト CYP4F2組換え酵素を用いて，ルシフェ

ション時に NADPH が必要であった。これらの結果

リン－4F2/3 O-脱アルキル化酵素活性に対するセサ

は ， セ サ ミ ン に よ る CYP4F2 の 不 活 性 化 が セ サ ミ

ミンの阻害効果を検討した。阻害が認められた場合，ンの代謝を介して引き起こされる可能性を示唆した。

50 ％阻害濃度 IC50 値の他，阻害様式および阻害定数

また，これまでに17-オクタデシン酸や HET0016がKi 値を算出した。次いで，代謝依存的阻害が認めら

CYP4F2を阻害することが知られているが，CYP4F2れた場合，不活性化の速度論的解析を行い，最大不活を不活性化することにより阻害作用を示す化合物はセ性化速度定数 kinactivation 値および半値阻害剤濃度 KI 値

サミンが初めてである。セサミンの CYP4F2に対するを算出した。

不活性化能（kinactivation/KI）は316 L/mmol/min であり，

【結果】セサミンは CYP4F2活性を濃度依存的に阻害

CYP2C9に対する不活性化能（138 L/mmol/min）より

し，IC50値（mean±S.D.）は0.381±0.031 μM であっも約2.3倍高かったことから，セサミンは CYP4F2にた。CYP4F2によるルシフェリン－4F2/3 O-脱アルキ

対してより強力な不活性化剤であることが明らかとル化反応は sigmoid 型の反応様式を示したことから，なった。

Hill 式に当てはめて速度論的パラメーターを算出した【結論】 セサミンはヒト CYP4F2の不活性化剤であところ，セサミンは Vmax を低下させたが，S50を上昇ることが示された。 セサミンの抗高血圧作用は20-させた。一方，セサミンは Hill 係数 n には影響を及HETE 産生に関与する CYP4F2をセサミンが不活性

ぼさなかった。これらの結果から，セサミンは混合型化することによって惹起される可能性が示唆された。

の阻害様式を示すことが示唆された。見かけの Ki 値

（論文審査の結果の要旨）

は0.272±0.041 μM であった。

ゴマやその主要なリグナンであるセサミンは血圧をセ サ ミ ン が CYP4F2 活 性 に 対 し て 代 謝 依 存 的 な低下させることがメタ解析により示されている。その阻害作用を示すか否かを明らかにするため， プレ

機序として，セサミンが血管収縮因子である20-ヒド

インキュベーションの影響を検討した。セサミンはロキシエイコサテトラエン酸（20-HETE） の産生

NADPH 存在下で組換え酵素とプレインキュベーショ

を抑制することによって惹起される可能性が示唆さンすることによって CYP4F2阻害を顕著に増強した

れ て い る 。20-HETE は 主 に シ ト ク ロ ム P450 4F2（プレインキュベーション時間が20分と０分のときの（CYP4F2）によってアラキドン酸から生成されるが，IC50 値はそれぞれ0.0634±0.0106 μM，0.399±0.013

in vitro 実験において，セサミンはヒト肝臓や腎臓のμM）。そこで，CYP4F2に対するセサミンの代謝依存

ミクロゾームおよび CYP4F2組換え酵素による20-

的な阻害の様式と強さを明らかにするため，不活性化

HETE 産生を阻害することが報告されている。しかし，の速度論的解析を行った。セサミンは CYP4F2活性セサミンが CYP4F2の機能をどのような機序で阻害をプレインキュベーション時間依存的かつ濃度依存的するのかは明らかではない。本研究では，CYP4F2に阻害し，kinactivation 値および KI 値はそれぞれ0.354±

活性に対するセサミンの影響を in vitro で明らかにす－10.020 min ，1.12±0.05 μM であった。セサミンによる不活性化は NADPH 依存性を示した。

ることを目的とした。
ヒト CYP4F2組換え酵素を用いて，ルシフェリン－【考察】本研究において，セサミンは CYP4F2組換え

4F2/3 O-脱アルキル化酵素活性に対するセサミン

酵素のルシフェリン－4F2/3 O-脱アルキル化活性をの阻害効果を検討し，50 ％阻害濃度 IC50 値の他，阻効果的に阻害することが明らかとなった。先行研究に

害様式および阻害定数 Ki 値を算出した。次いで，代おいて，セサミンは１μM で CYP4F2組換え酵素によ謝依存的阻害の検討，不活性化の速度論的解析を行い，るトコフェロールの ω-水酸化を強く阻害することや，

最大不活性化速度定数 kinactivation 値および半値阻害剤

No. 5, 2020319

審査学位論文要旨

が20分と０分のときの IC50 値はそれぞれ0.0634±

濃度 KI 値を算出した。
その結果，渡辺は次の結果を得た。

0.0106 μM，0.399±0.013 μM）。

１．セサミンは CYP4F2活性を濃度依存的に阻害し，

３．セサミンは CYP4F2活性をプレインキュベーショ

IC50値（mean±S.D.）は0.381±0.031 μM であった。

ン時間依存的かつ濃度依存的に阻害し，kinactivation 値

Hill 式に当てはめて速度論的パラメーターを算出しおよび KI 値はそれぞれ0.354±0.020 min－1，1.12±

たところ，セサミンは Vmax 値を低下させたが，S50

0.05 μM で あ っ た 。 セ サ ミ ン に よ る 不 活 性 化 は値を上昇させた。一方，セサミンは Hill 係数 n に

NADPH 依存性を示した。

は影響を及ぼさなかったため，セサミンは競合型とこれらの結果より，セサミンはヒト CYP4F2の不非競合型が混在する混合型の阻害様式を示すことが活性化剤であることが示された。セサミンの抗高血圧示唆された。見かけの Ki 値は0.272±0.041 μM で作用は20-HETE 産生に関与する CYP4F2をセサミンあった。

が不活性化することによって惹起される可能性が示唆

２．セサミンは NADPH 存在下で組換え酵素とプレインキュベーションすることによって CYP4F2阻された。よって，主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

害を顕著に増強した（プレインキュベーション時間

Relationship between Physical Activity and Health-related Quality of Life in Hospitalized
and Terminally Ill Cancer Patients（入院中終末期がん患者の身体活動と健康関連 QOL の関係）
山

鹿（論文の内容の要旨）

隆義

項目を比較した。また PA に影響する因子を調査する【背景】がん治療の改善により，進行がん患者の生存ためロジスティック回帰分析を実施した。

期間が延長している。そうした中で終末期となっても【結果】本研究の最終的な解析対象は週150分以上群が進行がん患者の健康関連 QoL（HRQoL）を維持・向

43名，週150分未満群が52名の合計95名であった。本

上する支援が求められている。近年，がん患者の身体研究の対象者のほとんどが欧米のがんの身体活動ガ活動（PA）が ADL や HRQoL の改善に有効であるとイドラインで推奨されている中等度の負荷の基準値されているが，外来患者を対象とした欧米での研究結以上の PA には至っていなかった。軽度以上の負荷の果であり，入院中の進行がん患者の PA と HRQoL のPA が週150分以上群は， 週150分未満群と比較し，関係は明確となっていない。本研究は本邦における入EORTC QLQ-C30の全体的な健康状態， 身体機能，院中の進行がん患者における PA と HRQoL の関係を役割機能，感情機能，および社会機能が統計学的に有明らかにするために実施した。

意に高かった。ABMS，m-FIM においても PA が週【方法】信州大学医学部附属病院に入院中の進行した

150分以上群で統計学的に有意に高かった。一方で，悪性腫瘍および / または転移性悪性腫瘍の患者を対象

がん関連症状にはついて有意差を認めなかった。PAとした。PA は一軸加速度計を使用し一週間測定した。

に影響する因子は，ABMS がもっとも有力な因子としQOL はがん疾患特異的 QOL 尺度である Europeanて挙げられた（OR＝2.249，95 ％ CI：1.062-4.764）。

Organization for Research and Treatment of Cancer【結語】入院中の進行がん患者は欧米のがんの身体活（EORTC QLQ-C30）で評価した。基本的動作能力は

動ガイドラインの推奨値の PA を得ることは困難でRevised Version of the Ability for Basic Movement

あったが，軽度以上の負荷の PA でも QOL に関係すScale（ABMS），日常生活動作能力は Functional In­

ることが明らかとなった。進行がん患者は歩行のよう

dependence Measure の運動項目（m-FIM）で評価

な軽度の PA を週150分以上実施することが HRQoLをした。がん関連症状の評価は，Edmonton Symp­に有効である可能性を示された。

tom Assessment System Revised（ESAS）を用いた。

（論文審査の結果の要旨）

統計学的解析は，軽度以上の負荷の PA が週150分以

がん治療の改善により，進行がん患者の生存期間が上群と週150分未満群の２群に分類し，２群間で測定延長している。その様な背景の中で終末期となっても

320

信州医誌

68

審査学位論文要旨

進行がん患者の健康関連 QoL（HRQoL）を維持・向終的な解析対象は週150分以上群が43名，週150分未満

上する支援が求められている。近年，がん患者の身体群が52名の合計95名であった。

活動（PA）が ADL や HRQoL の改善に有効であるとその結果，山鹿隆義は次のような結論を得た。

されているが，外来患者を対象とした欧米での研究結

１．本研究の対象者のほとんどが欧米のがんの身体活果であり，入院中の進行がん患者の PA と HRQoL の動ガイドラインで推奨されている中等度の負荷の基関係は明確となっていない。本研究は本邦における入準値以上の PA には至っていなかった。

院中の進行がん患者における PA と HRQoL の関係を

２．軽度以上の負荷の PA が週150分以上群は，週150分未満群と比較し，EORTC QLQ-C30の全体的な明らかにするために実施した。
信州大学医学部附属病院に入院中の進行した悪性腫瘍および / または転移性悪性腫瘍の患者を対象とした。PA は一軸加速度計を使用し一週間測定した。
QOL はがん疾患特異的 QOL 尺度である European
Organization for Research and Treatment of Cancer

健康状態，身体機能，役割機能，感情機能，および社会機能が統計学的に有意に高かった。
３．ABMS，m-FIM も PA が週150分以上群で統計学的に有意に高かった。
４．PA に影響する因子は，ABMS がもっとも有力な（EORTC QLQ-C30）で評価した。基本的動作能力は因子として挙げられた。

Revised Version of the Ability for Basic Movement

これらの結果より，入院中の進行がん患者は欧米のScale（ABMS），日常生活動作能力は Functional In­

がんの身体活動ガイドラインの推奨値の PA を得るこ

dependence Measure の運動項目（m-FIM）で評価と は 困 難 で あ っ た が ， 軽 度 以 上 の 負 荷 の PA で もをした。がん関連症状の評価は，Edmonton Symp­

QOL に関係することが明らかとなった。進行がん患

tom Assessment System Revised（ESAS）を用いた。

者では，歩行のような軽度以上の負荷の PA を週150

統計学的解析は，軽度以上の負荷の PA が週150分以分以上実施することが HRQoL に有効である可能性を

上群と週150分未満群の２群に分類し，２群間で測定示された。よって，主査，副査は一致して本論文を学

項目を比較した。また PA に影響する因子を調査する位論文として価値があるものと認めた。

ためロジスティック回帰分析を実施した。本研究の最Aldosterone to Potassium Ratio after Adrenocorticotropin Stimulation in Unilateral Primary
Aldosteronism Diagnosis（片側性原発性アルドステロン症の診断における ACTH 負荷後のア
ルドステロン / カリウム比）
北 原

順一郎

（論文の内容の要旨）

カリウム値の比率が片側性 PA の診断に有用である可【背景】原発性アルドステロン症（PA）は，二次性高能性が報告されている。今回我々は ACTH 負荷前の血圧の中で最も多い原因疾患であり頻繁に心血管合併

血清カリウム値と負荷後の PAC より算出した PAC症を引き起こす。PA の治療方針はアルドステロンを/ カリウム比及び SIT の負荷後 PAC についてデータ

過剰分泌する副腎が片側性か両側性かによって異なるを収集しその値が片側性病変の診断に有用か評価した。

ため，その判定が非常に重要である。現在はその判定【対象と方法】2010年４月から2019年３月までに信に副腎静脈サンプリング（AVS）が推奨されている

州大学病院， 長野市民病院， 伊那中央病院で迅速が，AVS の実施には技術的，侵襲的，医療経済的な

ACTH 負荷試験かつ / または SIT を実施後 AVS を問題もあることから，AVS の適応をより精密に決定施行した PA 患者79例のうちアルドステロン拮抗薬使する指標が求められている。 生理食塩水負荷試験

用例２例と AVS で副腎静脈挿入が失敗した５例を除（SIT）が PA の確定診断のみでなく，片側性 PA の外した72例を評価した。日本内分泌学会及び日本高血診断にも有用であることが最近報告されているが，検圧学会のガイドラインに従い PA を診断した。AVS

査中の循環血漿量の増加や検査時間がかかることが難での優位側アルドステロン / コルチゾール（A/C）÷

点である。一方，以前の研究では ACTH 負荷後の血対側 A/C が４を超えたものを片側性，それ以下の場

清アルドステロン濃度（PAC）と初回来院時の血清合を両側性と定義した。片側性，両側性それぞれの背No. 5, 2020321

審査学位論文要旨

景を比較しまた前述の検査結果の各指標について受信（論文審査の結果の要旨）

者動作特性曲線（ROC）及びその局面下面積（AUC）

本研究では原発性アルドステロン症（PA）においを使用し診断精度を評価した。

て片側性病変の可能性が高い症例を鑑別するのに有用【結果】片側性では初診時 PAC が高値，初診時カリな指標について，迅速 ACTH 負荷試験における負荷

ウム濃度は低値， カリウム補充の症例が多かった。

後血清アルドステロン濃度（PAC）/ 負荷前血清カリ

SIT は42例で実施され，240分後の PAC（PAC240）のウム値比，及び生理食塩水負荷試験（SIT）の負荷後

ROC はカットオフ値133.7 pg/mL で，感度は92.3 ％，PAC についてデータを収集し評価した。2010年４月

特異度は93.1 ％，AUC 0.92だった。迅速 ACTH 負から2019年３月までに信州大学病院，長野市民病院，

荷試験は58例で実施された。０，30，60分の PAC の伊那中央病院で迅速 ACTH 負荷試験かつ / またはROC の AUC はそれぞれ0.888，0.926，0.948だった。

SIT を実施後 AVS を施行した PA 患者79例のうちア０，30，60分の PAC / コルチゾールの ROC の AUC は，

ルドステロン拮抗薬使用例２例と AVS で副腎静脈挿それぞれ0.887，0.888，0.922だった。 迅速 ACTH

入が失敗した５例を除外した72例について AVS で負荷試験前にカリウム（低カリウム血症がある場合

Lateralization index＞４を片側性，それ以下を両側性

カリウム製剤を補充し補正した）は39例で測定されて病変と定義し，各病変の背景と，前述の検査結果の各

おり，０，30，60分の PAC/ACTH 負荷試験前のカ指標について受信者動作特性曲線（ROC）を用いてリウムの ROC の AUC は， それぞれ0.979，0.984，

診断精度を評価した。

0.971であった。PAC30 / カリウムはカットオフ値136.8

その結果，北原は以下の結果を得た。

pg/mEq で感度は100 ％，特異度は95.5 ％であり，最１．片側性では初診時 PAC が高値，初診時カリウムも有用な指標であった。初診時 PAC，ACTH 負荷試験

濃度は低値，カリウム補充の症例が多かった。

の PAC ０分，初期カリウム，および ACTH 刺激試験

２．SIT は42例で240分後の PAC（PAC240 ）の ROC

前の補正カリウムの ROC の AUC はそれぞれ0.918，

はカットオフ値133.7 pg/mL で，感度は92.3 ％，特0.888，0.907，0.953で，補正カリウムの AUC は初

異度は93.1 ％，AUC 0.92だった。

診時カリウムの AUC よりも大きかった。22例で SIT

３．迅速 ACTH 負荷試験は58例で実施され，カリウと迅速 ACTH 負荷試験及び負荷前のカリウム測定がムは負荷試験直前または24時間以内に39例で測定さ実施されており，SIT の PAC240と迅速 ACTH 負荷試れた。０，30，および60分の PAC / 負荷試験前カリ

験の PAC30 / カリウムの ROC の直接比較での AUC

ウム値比の ROC の AUC は，それぞれ0.979，0.984，

はそれぞれ0.929と0.964だった（p＝0.627）。

および0.971であり，PAC30 / カリウムはカットオフ【考察】カリウム補充後実施された迅速 ACTH 負荷

値136.8 pg/mEq で感度100 ％，特異度95.5 ％であ試験における PAC30 / カリウムは，片側性原発性アルり，最も有用な指標であった。

ドステロン症の診断に有用であった。SIT での PAC

４．22例で SIT と迅速 ACTH 負荷試験及び負荷前のも同様に有用であったが SIT では迅速 ACTH 負荷試

カリウム測定が施行され，SIT での PAC240 と迅速験と比較し循環血漿量増加と長時間の検査時間がデメ

ACTH 負荷試験での PAC30 / カリウムの ROC の直リットとなるため迅速 ACTH 負荷試験がより臨床的

接比較では PAC30 / カリウムの方が高値であったがには有用と考えられた。Limitation としては，迅速有意差はなかった。

ACTH 負荷試験と SIT を両方実施した患者が少ない

これらの結果より迅速 ACTH 負荷試験におけること，本研究での SIT は仰臥位で実施されたが，座PAC30 / カリウムは，SIT での PAC240 と同様有用で，位で実施された場合に結果は異なる可能性があること，

SIT の循環血漿量増加と長時間の検査時間を考慮する

AVS のみに基づき片側性病変の判定が行われたため，と，迅速 ACTH 負荷試験がより臨床的に有用と考え非手術例では病理学的検査ができず，一部の APA がられた。

見逃された可能性があることが考えられた。
【結論】迅速 ACTH 負荷試験の PAC30 / カリウムは

よって，主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

SIT と比較して，片側性 PA の診断に臨床的に有用と考えられた。

322

信州医誌

68

審査学位論文要旨

Prognostic Impact of Cardio-renal-anemia Syndrome in Patients at Risk for Heart Failurefrom the IMPACT-ABI study（心不全リスクを有する患者における予後予測因子としての心腎貧血症候群：IMPACT-ABI サブ解析）
正印

航（論文の内容の要旨）

12.8対68.5±17.9（ml/min/1.73m2）であった。平均

【目的】近年高齢化に伴い，心不全有病率は急激な増4.6年の追跡期間において，129例で MACE 発生を認

加を認めている。高齢者心不全は急性増悪による入院め， 発生率は RAS 群において有意に高値であったを繰り返し，予後不良であることが知られているが，（13 ％対６％，P＜0.001）。Kaplan-Meier 分析においそれを予防するための適切な介入時期，方法についてても RAS 群は非 RAS 群と比し，有意差をもって予は不明である。貧血，慢性腎不全は心不全の増悪要因

後は不良であり（32 ％対14 ％，P＜0.001），４群間として良く知られており，それぞれが相互に悪影響をの比較においても同様の結果を示した。Cox 比例ハ

及ぼすことで病状悪化を招くことが示されており，こザードモデルによる多変量解析では，年齢，性別，従

うした疾患概念は心腎貧血症候群（CRAS）と呼ばれ来のリスク因子で調整を行った結果，RAS は MACEる。CRAS は症候性心不全に関する有用な予後予測の発生率と有意な関連性を示した（HR 1.86；95 ％因子であることが示されてきた一方で，心不全リスク

CI 1.20-2.89，P＝0.005）。

を有する，あるいは器質的心疾患を有するが心不全症【考察】CRAS における各臓器障害の発生機序は複雑

候は有しない心不全リスクステージにおける意義の報且つ多岐に渡るが，慢性腎不全，貧血が先行して心障告はない。本研究の目的は，慢性腎不全，貧血の合併

害を生じる場合に主に以下の機序が考慮される。腎不が，心不全リスクあるいは器質的心疾患を有する無症

全による内臓浮腫や酸化ストレス，尿毒症等により生候性患者（心不全リスクステージＡまたはＢ）におい

じる慢性炎症及び，貧血による組織低酸素は交感神経，ても心血管イベントの予測因子となるかを調べること

レニン-アンジオテンシン-アルドステロン系の賦活化である。

を招き，それにより生じる体液，塩分貯留は心負荷増【方法】2005年から2012年まで信州大学循環器内科に大による心障害と，更なる慢性炎症を惹起する悪循環

心血管疾患で入院し，ABI 値を測定した患者3,131人を生じる。加えて，アンジオテンシンⅡ，アルドステのうち，心不全リスクのみを有するが心不全症候の無ロンは直接繊維化による心筋リモデリングを誘発するい患者（心不全リスクステージ Stage A）および器質ことが知られている。

的心疾患を有するが心不全症候の無い患者（心不全リ

高齢化に伴う心不全患者数増大は，医療負担，経済

スクステージ Stage B）でかつ非透析患者が本試験に負担共に非常に大きく，我々が直面する喫緊の課題で登録された。これらを慢性腎不全，貧血の有無でそれぞある。重症化を防ぐための効果的な介入手段の確立がれ４群に分け，更に両疾患を有する群を RAS（Renal-

望まれるが，現状で貧血，腎不全を合併した心不全患

anemia syndrome）群，その他を非 RAS 群として者へ対する治療介入の有効性は定まっておらず，そのMACE（心血管死，心不全入院の複合エンドポイント）

一方で stage A/B 心不全リスクステージ患者を対象

発生との関係につき調査した。

とした研究も乏しい。本研究において，心不全症候は【結果】計1,801例の患者が登録され，RAS 群が217例，なく心不全リスクを有する状態のみであっても，

非 RAS 群が1584例であった。平均年齢は69.6±10.6

RAS の合併例は有意な MACE の予後予測因子であり，歳で76 ％が男性であった。平均左室駆出率は66.9±

より慎重な観察が必要な患者群であることが示された。

12.3 ％で，stage A 心不全が全体の73 ％を占めた。

更なる調査が必要であるが，今回の結果は，より早期基本特性として，RAS 群は非 RAS 群と比し，年齢，段階でのリスク層別化及び慢性腎不全，貧血への治療

糖尿病，腹部大動脈瘤，陳旧性脳梗塞の有病率が高値

介入が，こうした患者の予後改善に繋がる手段の一つで，脂質異常症の有病率が低値であり，stage A 心不となりうる可能性を示唆するものと考えられた。

全の割合に差はなかった。Hb 値は RAS 群11.4±1.1
対 非 RAS 群 14.3±1.5（ g/dL ），eGFR 値 は 40.2±
No. 5, 2020

（論文審査の結果の要旨）
貧血，慢性腎臓病（CKD）は慢性心不全（CHF）
323

審査学位論文要旨にしばしば合併し，相互に悪影響を及ぼし互いの病状認め，心血管死が78人，心不全入院が62人であったを悪化させうる。こうした悪循環を形成する病態は（重複有）。RAS 群における MACE，心不全入院のCardio-renal-anemia syndrome（CRAS）と呼ばれ，発症率は非 RAS 群と比し有意に高値であった。

症候性心不全の独立した予後予測因子であることが知３．Kaplan-Meier 法による累積イベント発生率はられている。しかしながら，心不全ステージ分類におRAS 群で有意に高値であった（RAS 群 32 ％，非ける心不全リスク段階の患者，すなわち心不全リスク

RAS 群 14 ％）。貧血，CKD 単独合併例との比較でのみを有するが心不全症候の無い患者（心不全リスク

も同様に RAS 群の MACE 発生率は有意に高値でステージ Stage A）および器質的心疾患を有するが心あった。

不全症候の無い患者（心不全リスクステージ Stage

４．Cox 比例ハザードモデルによる多変量解析では，

B）の予後に対する貧血，CKD の影響については不明

年齢，性別，従来のリスク因子で調整を行った結果，である。本研究は，心不全リスクステージ Stage A，Ｂ

RAS は MACE の発生率と有意な関連性を示した

患者において貧血，CKD の合併，即ち Renal-anemia（HR 1.86；95 ％ CI 1.20-2.89，P＝0.005）。

syndrome（RAS）が心血管イベントに対する予後予

これらの結果から，RAS の合併は症候性心不全と測因子となりうるかを評価した。

同様に，Stage A，Ｂ心不全リスクステージにおいてその結果，以下の結果を得た。

も心血管イベントの有意なリスク因子であることが示

１．RAS 群（n＝218）では，非 RAS 群（n＝1583）

された。急増する高齢化心不全に対して，より早期でと比し有意に年齢及び，高血圧，糖尿病，脳梗塞既の心血管疾患及びリスク因子に対する適切な予防，治往，腹部大動脈瘤既往の割合が高値，脂質異常症の療介入手段の検討が望ましく，そのためにも心不全の割合は低値であり，Stage A 心不全リスクステージ

初期段階におけるリスク層別化が必要と考えられる。

の割合に差はなかった。

本研究はその一助となることが期待され，主査，副査

２．平均4.6年間の追跡期間において，MACE（心血管死，心不全入院）は1,801人中129人（7.2 ％）では一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

Prevalence and clinical features of hearing loss caused by EYA4 variants（EYA4遺伝子変異による難聴の有病率と臨床像の検討）
品

川潤（論文の内容の要旨）

Number Variant（CNV）解析も併せて実施した。解EYA4遺伝子は，常染色体優性遺伝形式をとる非症

析により候補となる EYA4遺伝子変異をもつ症例に候群性難聴（DFNA10）の原因遺伝子である。これ関しては詳細な臨床情報をカルテから収集し分析した。

までに，アメリカ，ベルギー，オランダ，ドイツ，韓

その結果，12家系より難聴の原因と考えられる

国，中国等さまざまな国から難聴の原因として30変異

EYA4遺伝子変異12種類を見出した。うち，11種類はが報告されているが，その頻度および詳細な臨床的特新規変異（フレームシフト変異３種類，ミスセンス変徴は不明であった。そこで，本研究では，DFNA10

異３種類，ナンセンス変異２種類，スプライシング変の臨床的特徴と有病率を明らかにすることを目的に，

異１種類，１copy number loss ２種類）であった。

日本人難聴患者の大規模コホートを対象に EYA4遺また，１種類は過去に韓国より報告のある既知変異で伝子変異のスクリーニングを実施した。

あった。常染色体優性遺伝形式をとる日本人難聴患者対象としては，信州大学の管理する日本人難聴 DNA

1,336例のうち12例より候補となる変異が見つかった

データベースに登録されている難聴患者7,408例中，ことより，頻度は常染色体優性遺伝形式をとる難聴患

家族歴より常染色体優性遺伝形式をとる難聴と考えら者の0.90 ％であることが明らかとなった。

れる症例1,336例を選択し， 次世代シーケンサーをまた，本研究で見出された EYA4遺伝子変異を有用いて過去に難聴の原因遺伝子として報告のある68遺する症例および過去に報告のある症例の臨床情報を元

伝子の網羅的解析を行った。また，次世代シークエンに検討を行ったところ，truncating 変異を有する症例

ス解析で得られた read depth データを用いて，Copy

では，全ての周波数で閾値上昇を認める平坦型の難聴

324

信州医誌

68

審査学位論文要旨を呈する傾向があるのに対し，non-truncating 変異

た。また，次世代シークエンス解析で得られた readを有する症例では高周波数において閾値上昇を示す高

depth デ ー タ を 用 い て ， Copy Number Variant

音漸傾型の聴力像を呈する傾向があることを明らかに（CNV）解析も併せて実施した。解析により候補とな

し，DFNA10における新しい遺伝子型と表現型の相る EYA4遺伝子変異をもつ症例に関しては詳細な臨関関係を示すことができた。また，EYA4遺伝子変異

床情報をカルテから収集し分析した。

によって引き起こされる難聴の進行は，本研究で変異その結果，品川は次の結論を得た。

の見出された症例と過去の報告の症例の臨床像の分析

１．常染色体優性遺伝形式をとる難聴患者1,336例にから，0.63 dB/年程度であるとことを明らかにした。

おいて12例（0.90 ％）が EYA4遺伝子変異による（論文審査の結果の要旨）

難聴と考えられた。

EYA4遺伝子は，常染色体優性遺伝形式をとる非症

２．EYA4遺伝子変異による難聴は，後天発症であり，候群性難聴（DFNA10）の原因遺伝子である。EYA4

発症年齢にはバラつきがあることを明らかにした。

遺伝子は EYA ファミリーのひとつで，EYA tran­

３．EYA4遺伝子変異による難聴は，進行性であり，

scriptional coactivator and phosphatase 4というタン

その進行速度は0.63 dB/年程度であることを明ら

パクをコードしている遺伝子であり，SIX family を代かにした。

表とした複数の遺伝子と複合体を形成することで転写

４．EYA4遺伝子変異による難聴は，truncating 変異

活性化因子として働く。その結果，眼の発達やコルチを有する症例では，全ての周波数で閾値上昇を認め器の発達・維持に関与するとされている。現在までに，る平坦型の難聴を呈する傾向があるのに対し，さまざまな国から難聴の原因として30変異が報告され

non-truncating 変異を有する症例では高周波数にているが，その頻度および詳細な臨床的特徴は不明でおいて閾値上昇を示す高音漸傾型の聴力像を呈するあった。そこで，本研究では，DFNA10の臨床的特傾向があることを明らかにした。

徴と有病率を明らかにすることを目的に，日本人難聴

以上より，EYA4遺伝子変異による難聴は，後天発患者の大規模コホートを対象に EYA4遺伝子変異の症の進行性難聴の原因のひとつであると考えられた。

スクリーニングを実施した。

今回明らかになった詳細な臨床像は EYA4遺伝子変

日本人難聴患者7,408例中，家族歴より常染色体優異による難聴の予後の予測や介入を選択する上で重要

性遺伝形式をとる難聴と考えられる症例1,336例を選な情報として活用可能である。したがって，主査，副択し，次世代シーケンサーを用いて過去に難聴の原因

査は一致して本論文を学位論文として価値があるもの

遺伝子として報告のある68遺伝子の網羅的解析を行っと認めた。

Clinical characteristics and in vitro analysis of MYO6 variants causing late-onset progressive hearing loss（MYO6遺伝子変異による遅発性進行性難聴の臨床的特徴と in vitro 解析）
岡晋一郎（論文の内容の要旨）

染色体優性遺伝形式をとる難聴家系1,336例，常染色【背景と目的】MYO6遺伝子は常染色体優性遺伝形式

体劣性遺伝形式をとる難聴家系5,564例，遺伝形式不および常染色体劣性遺伝形式をとる非症候群性難聴の明の家系1,174例）を対象に，次世代シークエンサー

原因遺伝子として知られているが，その臨床的特徴やを用いて，過去に難聴の原因遺伝子として報告のある

難聴の発症メカニズムに関しては不明な点も多い。今63遺伝子の網羅的解析を行い，MYO6遺伝子変異によ回，我々は日本人難聴患者の大規模コホートを用い，る難聴と考えられた症例についてその臨床的特徴を検MYO6遺伝子変異による難聴の頻度と，その臨床的特討した。また，MYO6遺伝子変異による難聴発症メカ徴を明らかにするとともに，in vitro 機能解析を行いニズムを推定することを目的に，日本人難聴患者より難聴発症メカニズムを明らかにすることを目的に研究同定されたミスセンス変異を MYO6 cDNA に導入し，を行なった。

espin1遺伝子発現ベクターと一緒に上皮細胞に導入し，【対象・方法】信州大学の管理する日本人難聴 DNA

espin1により上皮細胞表面に誘導される微絨毛形成にデータベースに登録されている難聴患者8,074例（常及ぼす影響を検討した。

No. 5, 2020325

審査学位論文要旨【結果】日本人難聴患者8,074例の解析により，33家系

頻度，発症年齢，聴力像，進行性について検討した。

より難聴の原因と考えられる MYO6遺伝子変異が27

また，野生型および変異型 MYO6遺伝子と espin1遺種類（うち22変異は新規変異）見出された。33家系の伝子を共発現させた場合に形成される微絨毛の長さや，

うち家族歴が不明な１例を除き，32例は常染色体優性

Myosin6タンパク質の細胞内局在について検討した。

遺伝形式をとる難聴家系であった。したがって，常染色その結果，岡 晋一郎は次の結論を得た。

体優性遺伝形式をとる日本人難聴患者1336家系のうち

１．常染色体優性遺伝形式をとる日本人難聴患者のう

32家系が MYO6遺伝子変異による難聴であり，2.40

ち，MYO6遺伝子変異を原因とする症例は2.40% と％を占めることが明らかとなった。また，MYO6遺伝

比較的高頻度であり，KCNQ4，TECTA，WFS1

子変異による難聴の特徴として，若年発症・進行性のなどの遺伝子に次いで重要な原因となっていること難聴であることが明らかとなった。難聴の進行としてを明らかにした。

は，特に40歳以降に急激な進行を来すことが明らかと

２．日本人難聴患者より見出された変異の多くはトラなった（今回検討した症例の全年齢における難聴の進ンケーティング変異（ナンセンス変異，スプライシ

行度は0.57 dB/年であったが，40歳以降に限定すると

ング変異，フレームシフト変異）であり，ハプロ不1.07 dB/年となり，40歳以降では難聴の進行が加速

全により難聴を生じると考えられることを明らかにすることが示された）。また，MYO6遺伝子変異によした。

る難聴発症メカニズムを推定することを目的に実施し３．MYO6遺伝子変異による難聴は，遅発性・進行性

た in vitro 実験では，野生型 myosin6と espin1を共発

難聴（特に40代以降で難聴の進行が加速する）であ現した細胞では長い微絨毛が形成されるのに対し，難ることを明らかにした。

聴患者より見出された変異型 myosin6と espin1とを共４．細胞実験においては，野生型 MYO6を発現させ発現した細胞では，短い微絨毛しか形成されないことた場合には微絨毛の形成は阻害されず長い微絨毛がが明らかとなった。

形成された。一方，変異型 MYO6遺伝子を発現さ【結論】MYO6遺伝子は常染色体優性遺伝形式をとる

せた場合には，細胞内での Myosin6タンパクの局

難聴の重要な原因遺伝子の一つであることが示された。

在は変化しないものの，長い微絨毛は形成されなまた，上皮細胞で微絨毛の形成が阻害されたことより，かった。

蝸牛有毛細胞においては不動毛の機能維持が阻害され，これらの結果より，MYO6遺伝子変異による難聴症

不動毛の奇形をきたすことにより難聴を発症している

例ではハプロ不全により遅発性・進行性難聴を生じる可能性が示唆された。

と考えられ，若年時には正常型 MYO6遺伝子の発現（論文審査の結果の要旨）量が多く聴力が維持されるが，加齢とともに正常型

MYO6遺伝子は常染色体優性遺伝形式，常染色体劣MYO6遺伝子の発現が減少することで不動毛の形成・性遺伝形式をとる難聴の原因遺伝子であるが，比較的維持に異常をきたし遅発性・進行性の難聴を呈するこ

まれな原因遺伝子であることより，変異の種類や頻度，とが示唆された。

また臨床的特徴や難聴発症のメカニズムに関しては不明な点も多い。今回，日本人難聴患者8,074例を対象

よって，主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

に次世代シークエンサーを用いた大規模スクリーニング解析を行い，日本人難聴患者より見出された MYO6
遺伝子変異による難聴患者の臨床的特徴を検討した。
また，MYO6遺伝子変異により難聴が生じるメカニズ
ムを明らかにすることを目的に，日本人難聴患者より同定されたミスセンス変異を MYO6 cDNA に site di­rected mutagenesis 法により導入し，espin1遺伝子発現ベクターと一緒に上皮細胞に導入し，espin1により上皮細胞表面に誘導される微絨毛形成に及ぼす影響に関して in vitro 系を用いた検討を行った。
臨床情報としては，MYO6遺伝子変異による難聴の
326

信州医誌

68

審査学位論文要旨

Impact of Ambulation Status in Patients with End-stage Renal Disease on Hemodialysis due
to Diabetic Nephropathy : The PREDICT Study（糖尿病性腎症による血液透析患者における歩行状態の影響）
加

藤

太

門

（論文の内容の要旨）して優意に高かった（12か月 95.1 ％ vs 87.1 ％，24か【目的】透析患者は全世界的に増加しており，本邦で月 89.2 ％ vs 69.8 ％ 24か月 p＝0.01）。また主要下も年間30,000人ほどの新規透析導入患者が存在する。

肢イベント回避率も有位に高かった（12か月 92.7 ％また透析患者は予後が不良で，合併疾患が多いことがvs 81.7 ％，24か月 81.6 ％ vs ％ 24か月 p＝0.01）。

知られており，心血管死や末梢動脈疾患の合併が多い。

また多変量解析の結果，歩行可能であることは重症下一方でフレイルは近年種々の疾患の予後と関連がある

肢虚血もしくは死亡の独立した予測因子だった（HRことが報告されており，慢性腎不全患者透析患者の予

0.32，95 ％ CI 0.11-0.87 p＝0.03）。

後にも影響することが報告されている。しかしながら【考察】透析患者の予後とフレイルの関係については歩行可能状態と透析患者の予後の関連については十分関係があることが報告されている。しかしながら歩行

な報告はない。今回糖尿病性腎症を背景とする血液透可能患者と歩行不可能患者とを比較したデータはあま析患者の重症下肢虚血回避生存と歩行状態の関連につり知られていない。筋力，認知機能，歩行スピードないて検討した。

どでフレイルを算出する方法などもあるが，歩行でき【方法】本研究は前向き，多施設共同，観察研究で，るかできないかというのは医師間，またはコメディカ

2012年の４月から2013年の８月までに松本市，安曇野

ルとも共通認識しやすい指標であり，またリハビリ

市の10施設の透析センターから糖尿病性腎症による血テーションやフットケアの目標としても歩行の維持と液透析患者を登録し，６か月毎に臨床症状，歩行状態，

いうのは設定しやすい目標となることから大変有用な

Ankle-Brachial index（ABI），血管内超音波検査を指標である。本研究では透析患者の歩行状態と重症下検査し２年間の死亡率，重症下肢虚血の発症を追跡し肢虚血回避生存に関連があることを示し，歩行可能で

た PREDICT 研究のサブ解析である。全参加者にはあることは重症下肢回避生存の予測因子であることを書面で研究内容を説明し，同意を得た。この研究は信明らかにした。歩行できない透析患者は予後が悪いだ

州大学医学部の倫理委員会で承認された（承認番号

けではなく，下肢切断のリスクも高く，より早期の介

2366）。主要評価項目は重症下肢虚血回避生存とし副入が必要である可能性がある。
（論文審査の結果の要旨）

次評価項目は，生存と主要下肢イベント（全死亡，大切断，再血行再建術）とした。

本邦では透析患者増加しており，年間約30,000例の【結果】173名を登録し４名は他地域への転居，３名は同患者に透析が新規導入されている。一般的に透析患者

意の撤回，２名は診療データの欠損のため除外され最終は予後が不良で，合併疾患が多いことが知られており，的に164名を追跡した。重症下肢虚血回避生存患者は重心血管死や末梢動脈疾患の合併が多い。一方でフレイ症下肢・死亡患者よりも若く（65 vs 71歳 p＝0.003），歩行

ルは近年種々の疾患の予後と関連があることが報告さ可能な患者が多かった（84 ％ vs 48.7 ％ p＝0.003）。

れており，慢性腎不全患者や透析患者の予後にも影響

また重症下肢虚血回避生存患者は大切断，死亡患者よすることが報告されている。今回糖尿病性腎症を背景

りもアルブミンが高く（3.8 vs 3.4 g/dL p＝0.0003），とする血液透析患者の重症下肢虚血回避生存と歩行状

ヘモグロビンが高く（10.7 vs 10.2 g/dL p＝0.008），

態（歩行可能もしくは歩行不可能）の関連について検CRP は低く（0.1 vs 0.15 mg/L p＝0.03），BNP が低討した。

かった（177.1 vs 280.6 pg/mL p＝0.04）。

本研究は多施設共同，前向き観察研究で2012年の４

主要評価項目の結果では，歩行可能グループの重症

月から2013年の８月までに松本市と安曇野市の10施設

下肢回避生存は有意に歩行不能群と比較して高く（12の透析センターから糖尿病性腎症による血液透析患者

か月 94.3 ％ vs 84.5 ％，24か月 84.9 ％ vs 62.7 ％ p＝を登録し，６か月毎に臨床症状，歩行状態，Ankle-

0.006），生存についても歩行可能群は非歩行群と比較

Brachial index（ABI），血管内超音波検査を検査し２年

No. 5, 2020327

審査学位論文要旨

間の重症下肢回避生存，生存と主要下肢イベント（全死亡，大切断，下肢血行再建）を評価した PREDICT
study のサブ解析として，登録患者は173中164例を評
価，解析した。
その結果，次の結論を得た。

４．歩行可能状態は，重症下肢回避生存の独立した予測因子であった。
これらの結果より，糖尿病性腎症による透析患者の歩行状態は重症下肢回避生存と関連があると結論付けた。フレイルの評価についていくつかの報告があるが，１．重症下肢虚血回避生存の患者は重症下肢虚血もし歩行状態は評価が容易で医師間，多職種間でも共有しくは死亡した患者より若く，歩行可能な患者が多やすい評価項目であり大変有用な評価項目である。まかった。

た歩行不可能患者は生命予後が悪いだけではなく，重２．歩行可能患者の重症下肢回避生存率は歩行不可能
患者よりも有意に高かった。
３．歩行可能患者の生存率と主要下肢イベント回避率
は歩行不可能患者よりも有意に高かった。

328

症下肢虚血のリスクも高いため，より早期に介入する必要がある可能性がある。
主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

信州医誌

68

審査学位論文要旨

Brake Operation and Palmar Perspiration Reflect Older Adult Driversʼ Ability to Predict
Hazards : Driving Simulation Research（高齢ドライバーの危険予測能力を反映するブレーキ
操作と手掌部発汗：模擬運転研究）
岩波潤（論文の内容の要旨）と も に 全 例 が ブ レ ー キ を 操 作 し て い た 。PSR（ M【背景】高齢者による自動車運転事故が増加し社会問（SD），mg/min/cm2 ）は危険予測場面では高齢者群

題となっている。高齢ドライバーの運転事故には加齢が0.38（0.26），若年者群が0.20（0.22），危険場面でに伴う認知機能の低下が関連しているが，免許更新時

は高齢者群が0.40（0.24），若年者群が0.25（0.28）の高齢者講習で使用されている認知機能検査は紙筆検で，両場面ともに高齢者の PSR が有意に大きかった

査であり，認知機能を直接反映する運転技能評価の開（p＜.05，p＜.01）。高齢者群のうち，危険予測場面で発が望まれている。

ブ レ ー キ を 操 作 し た 23 名 の PSR の 反 応 量 は 0.48

開発中の模擬運転テストは，自動車運転認知行動評（0.23）で，ブレーキを操作しなかった20名の反応量価装置（特許第5366248号，信州大学）を用いて被験0.31（0.25）より有意に多かった（p＜.001）。また，多者に運転映像を提示し，映像に合わせてハンドル，ア重ロジスティクス回帰分析の結果，危険予測場面のブ

クセル，ブレーキを操作させ，被験者が危険を認知

レーキ操作に関連する要因として PSR 量が抽出されまたは予測した際に生じる手掌部発汗反応（Palmar

た（OR＝484.2，95 ％ CI［2.82-83066.6］，p＝.02）。

sweating response ; PSR）と皮膚電位反射（Skin po­

ブレーキの反応潜時（M（SD），sec.）は，危険予

tential reflex ; SPR）を評価するものである。研究の測場面では高齢者群が3.20（1.51），若年者群が1.58

目的は，模擬運転テストの危険場面と危険予測場面に（0.79）であり，若年者群が有意に短かった（p＜.001）。

おけるブレーキ応答，PSR，SPR を高齢者と若年者

危険場面では高齢者群が1.26（0.57）， 若年者群がで比較検討することである。

0.83（0.34）であり，若年者群が有意に短かった（p＜【方法】60歳以上の高齢者群（n＝43，平均年齢69.8.001）。ブレーキの応答潜時は両群ともに危険場面で歳）と若年者群（n＝36，平均年齢21.3歳）を対象に有意に短かった（p＜.000）。SPR の反応潜時（M（SD），

常温環境下で模擬運転テストを行い，可変抵抗器で導sec.）は，危険予測場面では高齢者群が3.22（2.22），

出したブレーキ，アクセル，ハンドルの応答と，PSR

若年者群が4.49（2.58）であり，高齢者群が有意に短（発汗計 SKN-2000，SKIOS），SPR（皮膚電位計

かった（p＜.05）。危険場面では高齢者群が2.23（0.87），

SPN-01，SKINOS）の出力信号を A/D 変換し，同時若年者群が1.93（1.18）であり有意差は認めなかった。

記録した。運転映像は住宅地走行映像（５分）を用い，また，SPR の反応潜時は両群ともに危険場面で有意見通しの悪い丁字路の左折を「危険予測場面」，歩行に短かった（p＜.001）

者が飛び出す場面を「危険場面」と定義し，各場面５【考察】危険場面でみられた両群の素早いブレーキ操

秒間のブレーキ操作，PSR，SPR を評価した。両群作と PSR は，危険認知による咄嗟の（反射的）反応のブレーキ操作の有無を χ2 検定で比較し，PSR の反と考えられる。一方，危険予測場面では高齢者群の応量，ブレーキの応答潜時，SPR の応答潜時を Stu­

46.5 ％にブレーキ操作の欠如が認められ，不注意にdentʼs t test で比較した。また，ブレーキ操作と関連よる危険の見落としや発見の遅れなど，予測機能の低する要因を調べるために，ブレーキ操作の有無を目的下が関係していると思われた。多重ロジスティック回

変数，年齢，性別，PSR を説明変数とする多重ロジ

帰分析の結果は，危険予測場面におけるブレーキ操作

スティクス回帰分析を行った。統計解析の有意水準はと PSR の関連性を示しており，模擬運転テストにお５％とした。

ける高齢者の危険予測能力の評価には，ブレーキ操作【結果】危険予測場面では若年者の全例がブレーキをに加えて PSR の測定が有効と思われた。

操作していたが，高齢者群では20名（46.5 ％）がブ

PSR は加齢による反応量の低下が知られているが，レーキを操作しておらず，両群の度数分布に有意差を本模擬運転テストでは，危険場面，危険予測場面とも認めた（p＜.001）。危険場面では高齢者群，若年者群に高齢者群の PSR が有意に多く，模擬運転テストとNo. 5, 2020329

審査学位論文要旨

群，若年者群ともに全例がブレーキを操作していた。

いう新規課題に対する高齢者の緊張度の高さが影響した可能性がある。今後の研究では，参加者の年齢，性２．PSR は危険予測場面，危険場面ともに高齢者のPSR が有意に大きかった。

別，および運転経験が模擬運転テストのパフォーマン
スに及ぼす影響を検討する必要がある。

３．高齢者群のうち，危険予測場面におけるブレーキ（論文審査の結果の要旨）

操作群の PSR は，非操作群より有意に大きかった。

近年社会問題化している高齢者の自動車運転事故へ

４．危険予測場面のブレーキ操作に関連する要因として PSR 量が抽出された。

の対策として，免許更新時に認知機能検査が行われているが，認知機能をより直接的に反映する運転技能評

５．ブレーキの応答潜時は，危険予測場面，危険場面
ともに若年者群が有意に短かった。

価の開発が望まれている。
岩波潤は高齢者の模擬運転特性を検討するために，

６．ブレーキの応答潜時は，高齢者群，若年者群ともに危険場面で有意に短かった。

自動車運転認知行動評価装置を用いて本研究を行った。
高齢者と若年者両群の被験者に住宅地走行映像（５７．SPR の応答潜時は，危険予測場面では高齢者群分）を提示し，映像に合わせてハンドル，アクセル，が有意に短かった。危険場面では有意差は認めなブレーキを操作させ，これらの応答と，被験者が危かった。

険を認知または予測した際に生じる手掌部発汗反応

８．SPR の反応潜時は高齢者群，若年者群ともに危（Palmar sweating response ; PSR）ならびに皮膚電位

険場面で有意に短かった。

反射（Skin potential reflex ; SPR）を同時記録した。

これらの結果より，模擬運転テストにおける高齢者

両群のブレーキ操作の有無を χ 検定で比較し，PSRの危険予測能力の評価には，ブレーキ操作に加えての反応量，ブレーキの応答潜時，SPR の応答潜時を

PSR の測定が有効であることが明らかとなった。本

Studentʼs t test で比較した。またブレーキ操作と関研究は，参加者の年齢，性別，および運転経験が模擬連する要因を調べるために，ブレーキ操作の有無を目

運転テストのパフォーマンスに及ぼす影響をさらに詳

的変数，年齢，性別，PSR を説明変数とする多重ロ

細に検討する必要性を示しており，より精緻な運転技

ジスティクス回帰分析を行った。

能評価法の開発に寄与すると共に，高齢者における運2

転技能低下の病態メカニズム解明にも貢献することがその結果，岩波 潤は以下の結論を得た。
１．危険予測場面では若年者の全例がブレーキを操作していたが，高齢者群では46.5 ％がブレーキを操期待される。したがって，主査，副査は一致して本論
文を学位論文として価値があるものと認めた。

作しておらず有意差を認めた。危険場面では高齢者

Characterization of galactosyl and lactosyl sulfatide species in human serum by MALDITOF mass spectrometry（マトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間型（MALDITOF）質量分析によるヒト血清中ガラクトシルスルファチド分子種とラクトシルスルファチ
ド分子種の特徴付け）堀敦

詞（論文の内容の要旨）【結果】ヒト血清中スルファチドは，２種類の糖鎖，【背景】スルファチドは，さまざまな組織，血清リポ

８種類のスフィンゴイド塩基，ヒドロキシ脂肪酸を含タンパクに分布し，臓器特異的な組成で構成される。

む多種類の脂肪酸側鎖をもつ分子種として同定した。

スルファチドは多種のスフィンゴイド塩基，脂肪酸おそ の 結 果 ，64 種 類 の ガ ラ ク ト シ ル ス ル フ ァ チ ド

よび糖鎖から構成され，簡便かつ迅速なスルファチド（SM4s）と49種類のラクトシルスルファチド分子種をの構造分析は臨床検査で重要である。

同定した。SM3のピーク強度は SM4s の１% 以下で【方法】スルファチドに富む画分を血清脂質から単離あった。健常者血清（n＝８）の SM4s を構成する脂し，そしてスルファチド種をマトリックス支援レー

肪酸は C16：0やヒドロキシル化 C16：0（C16：0h）

ザー脱離イオン化飛行時間型質量分析（MALDI-が優位であり，次いで極長鎖脂肪酸が優位であった一

TOF MS）の負イオンモードにより分析した。

方で，SM3は極長鎖脂肪酸が最も優位であった。

330

信州医誌

68

審査学位論文要旨【結論】本研究は，MALDI-TOF MS を用いたヒト血易分析法と高感度分析法の開発をされた。簡易分析法

清スルファチド分析の簡単な方法を説明した。さらにでは，血清25 μL と内部標準品で，15種のガラクトシ

SM4s と SM3の脂肪酸側鎖の違いを MALDI-TOF MS

ルスルファチド（SM4s）分子種を迅速にかつ定量的によって明らかにした。

に測定された。さらに，血清500 μL の脂質分解酵素

この方法は臨床検査室に適しており，生理学的およ（PLA2 ）による前処理後，Phenyl Sepharose 疎水性び病的状態の両方におけるスルファチド種の役割の理相互作用クロマトグラフィーミニカラムにより部分精解を深める可能性がある。

製 し ，MALDI-TOF/TOF MS（ MS/MS ） に よ り ，（論文審査の結果の要旨）

２種類の糖鎖，８種類のスフィンゴイド塩基，ヒドロ

硫酸化糖脂質の中でも，スフィンゴイド塩基と脂肪

キシ脂肪酸を含む多種類の脂肪酸側鎖をもつ分子種，

酸側鎖からなるセラミドに糖鎖と硫酸基が結合したス

合計64種類の SM4s 分子種と49種類のラクトシルスル

ルファチドは，脳ミエリン鞘の主要構成脂質であり，ファチド（SM3）分子種が同定された。SM4s 分子種

脳・神経系細胞の他に，腎臓の尿細管細胞，消化上皮は定量的に測定され，測定精度，直線性は良好であり，細胞，血液中リポ蛋白質など幅広く分布する脂質であ

SM3のピーク強度は SM4s の１％以下であった。健常る。スルファチドはミエリン機能の他に，細胞表面抗者血清（大学生，女性，n＝８）の SM4s を構成する

原（血液型抗原など），細菌やウィルス毒素の受容体，脂肪酸は C16：0やヒドロキシル化 C16：0（C16：

細胞表面から核への情報伝達過程など，重要な生理機0h） が優位であり， 次いで極長鎖脂肪酸が優位で能を有している。また，卵巣癌，肺癌などの組織へのあった。一方，SM3は極長鎖脂肪酸が最も優位であっ沈着や，ライソゾーム内に蓄積するスフィンゴリピ

たことから，SM4s 分子種と SM3分子種の脂肪酸組成

ドーシスである異染性白質ジストロフィー，アルツハの違いを明らかにした。

イマー病への関与など，様々な疾患との関連が報告されている。

本研究により，MALDI-TOF MS，MALDI-TOF/
TOF MS を用いた臨床検査へ応用できるヒト血清ス

これまで，血液中スルファチドの定量は行われてきルファチド分析法が開発された。本法は，スルファチ

たが，スルファチドは様々な脂肪酸側鎖からなる分子ド代謝機能や代謝異常を解析し，代謝異常症の検索にであるため，その脂肪酸側鎖の違いによる分子種の測有用なツールとなる。また現在，臨床分野との共同研

定が，生理機能機序や疾患との関連を明らかにする上究が進められており，SM4s 分子種と SM3分子種プロで重要である。研究的には液体クロマトグラフィー質

ファイルの変化を捉えることが，疾患マーカーになる

量分析（LC MS）や薄層クロマトグラフィーを利用可能性を示しており，スルファチド臨床研究への寄与

した質量分析などが実施されているが，いずれも操作が期待される。

が煩雑であり，スルファチド分析の臨床的応用ができていない。

学位審査において，わかりやすいスライドで発表され，学位論文を補足する解説や結果を提示された。質

本研究では，マトリックス支援レーザー脱離イオン
化飛行時間型質量分析（MALDI-TOF MS）の負イオ

疑応答も的確に答えており，主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

ンモード分析により，血清中スルファチド分子種の簡

Reliability and acceptability of using a social robot to carry out cognitive tests for community-dwelling older adults（地域在住高齢者のためのロボット対話型認知機能検査における信頼性と受容性）髙枝

果奈（論文の内容の要旨）

高齢者の中にはそれらの機器を使用して課題を遂行す

高齢者を対象に日常使用している認知機能検査の多ることに抵抗のある人もいる。対話型ロボットなど対くは専門職による対話形式で行われているが，タッチ

話型インターフェースがコミュニティに存在し，そのスクリーンやキーボード，マウスなどを用いたコン地域に住む高齢者が会話を楽しみながら，気軽に検査

ピュータ化された認知機能検査も増えている。しかし，を受けることができれば，より総合的な診断評価の前

No. 5, 2020331

審査学位論文要旨に簡単に検査を受けられる可能性がある。しかし，対評価とし，分析では，４と３を信頼できる，１と０を話型ロボットを使用して検査を実施した研究はまだ少信頼できないとそれぞれ合わせ３段階にした。２），ないため，高齢者がロボットによる認知機能検査を受３）も同様に５段評価の回答選択肢を３段階に統合しけ入れてくれるかは疑問である。また，対話型ロボッ

た。

トによる認知機能検査の信頼性も検証されていない。

本研究は，信州大学医倫理委員会と国立障害者リハ

そこで今回，高齢者を対象に対話型ロボットによる認

ビリテーションセンター倫理委員会の承認を得て実施

知機能検査を実施し，信頼性とロボットに対する受容した。

性を検証した。

研究１では，72名が参加を申し込み，66名（年齢

対話型ロボットによる認知機能検査には，Telephone

81.2±5.8歳，女性52名）が参加した。TICS-J の平Interview for Cognitive Status in Japanese（以下，均点は， ロボット検査29.9±5.6点， 人による検査

TICS-J）を使用した。この検査は，Mini-Mental State32.7±5.0，研究２では，40名（年齢82.0±5.4歳，女Examination（MMSE）を元に作られた電話による認性33名） が参加し，TICS-J のロボット検査初回は知機能スクリーニング検査 TICS の日本語版であり，30.1±5.7点，再検査では32.0±5.6点であった。信頼性

名前の呼称，時間及び場所の見当識，逆唱，単語の即の検証として，内的整合性は，Cronbachʼs α 0.691，代替時再生，７シリーズ，物の名前の想起，復唱，近時記

検査信頼性は，ICC 0.728（95 ％CI は0.218-0.844），

憶，実技，反対語の11の項目からなる。41点満点であ研 究 ２ の 再 検 査 信 頼 性 は ICC 0.818（ 95 ％ CI はり，高得点ほど機能は良好である。口答指示のみで実0.628-0.899）であった。アンケート結果では，１）ロ

施できるためロボット検査に使用した。対話型ロボッ

ボット検査の結果を，「信頼できる」と回答した人は，

トには，PaPeRo R500（NEC 製）を使用し，発話や動32名で全体の80 ％，ロボット検査を「好ましい」と作シナリオを事前にプログラムした。ロボットの動作

回答した人は24名で全体の60 ％，物忘れを知りたい

タイミングは，対象者の反応をマイクとカメラで観察ときにこのロボットを使いたいと思うかについては，している研究者が，別室で遠隔操作した。検査は，ロ「 使 い た い 」 と 答 え た 人 は 23 名 で 全 体 の 57.5 ％ でボットが対象者へ自己紹介と検査の説明後，TICS-J

あった。ロボット検査と人による検査ではどちらがの質問をし，対象者が回答をするとそれにロボットがよいかについては，ロボット検査15名37.5 ％，人に対応した。

よる検査を選んだ人は14名35 ％であった。ロボット

対象は，65歳以上の者で，口頭でコミュニケーショを好む理由として，「ロボットはかわいい，おもちゃンが可能な者とした。実施方法は，研究１では，ロやゲーム感覚だと緊張しない，わからなくてもロボッ

ボットによる TICS-J と人による TICS-J をそれぞれトだと恥ずかしくない」などが挙げられた，人による実施し検査結果の一致度を代替検査信頼性として級

検査では，「ロボットは緊張する，人は回答者のペー

内相関係数（The interclass correlation coefficient :スに合わせてくれる，質問ができる」などが挙げられICC）を算出し，内的整合性を Cronbachʼs α で検証した。

た。研究２では，研究１の対象者数名に約６週後，ロ本研究より，対話型ロボットよる認知機能検査は信ボットによる TICS-J を再実施し，再検査信頼性を頼性があり，地域在住高齢者に受容できる可能性を示

ICC で算出した。また，ロボット検査終了後，ロボッ唆した。これは，ロボットが検査をすることで，緊張ト検査に関するアンケートを実施し，受容性を評価し感や恥ずかしさなどの心理的障壁を減らすことが考えた。アンケートは，１）このロボット検査の結果を信られる。一方，ロボットに緊張する人もいることから，頼できると思うか，２）このロボット検査を好ましい

本人がロボット検査を受けるかを選択できることが重と思うか，３）自分の物忘れを知りたい時にこのよう要であると思われる。

なロボットを使いたいと思うか，４）ロボットが検査

今後，このような対話型ロボットによる認知機能検をするのと人が検査をするのでは，どちらがよいか，査が，本研究で研究者が代行していたタスクを対象者

またその理由は何か，の４つの質問からなる。１）かに合わせて実施する機能を搭載することができれば，

ら３）の回答の選択肢は，１）では，４：とても信頼

対話型ロボットが検査を実施できる可能性が示唆されできる，３：信頼できる，２：どちらともいえない，た。

１：信頼できない，０：とても信頼できないの５段階
332

信州医誌

68

審査学位論文要旨（論文審査の結果の要旨）

40名（平均年齢82.0±5.4歳，女性33名）を対象にロ

高齢社会の進展を背景に認知障害の早期発見が課題

ボット認知機能検査の再検査信頼性と受容性が調査となっており，汎用可能なコンピュータ認知機能検査された。 その結果，ICC＝0.818，95 ％ CI：0.628-（CCT）の開発が検討されている。高枝は，国立障害0.899（high） が得られた。 受容性を調査したアン者リハビリテーションセンターと連携し，本研究におケートでは，80.0 ％がとても信頼できるか信頼できいて地域在住高齢者を対象にコミュニケーションロ

る，60.0 ％がとても好ましいか好ましい，57.5 ％がボットをインターフェースとする認知機能検査の信頼とても使いたいか使いたいという回答が得られた。

性と受容性を検討した。

本研究によって，専門職が遠隔で実施する認知機能

認知機能検査は信頼性と妥当性が検証されている検査には及ばないものの，ロボット認知機能検査の実

Telephone Interview for Cognitive Status in Japa­

現可能性が示された。高齢者のロボット認知機能検査

nese（TICS-J）を使用し，質問項目を対話型ロボッに対する受容性は高く，認知機能検査に対する心理的ト PapeRo R500（NEC 製）に実装した。ロボットが負担感を軽減する効果が示唆された。本研究は，認知

自己紹介，検査説明，質問，あいさつなどを行う，対機能検査を対話型ロボットで実施し，高齢者の受容性

話形式の検査を実施した。シナリオは事前にプログラを報告した初めての研究である。被検者の反応に応じムされ，実験では別室にいる研究者が被検者の反応をたロボットの発話・動作のタイミング調整や，研究者

観察し，質問のタイミングなどを操作した。被検者はが代行したフィードバック機能を追加できれば，今後，コミュニケーション可能な65歳以上の高齢者で，有料

高齢者の認知機能を簡便に評価できるコミュニケー

老人ホームなどでリクルートされた。

ションロボットとしての実装が可能と思われる。

研究１では，66名（平均年齢81.2±5.8歳，女性52

本研究は，高齢社会のニーズに対応する意欲的な研名）を対象にロボット認知機能検査の代替検査信頼性究であり，認知機能を測定する対話型ロボットの実用と内的整合性が検討された。その結果，信頼性を示す化に向けて，今後の課題を明らかにした意義のある研

級内相関係数（ICC）＝0.728，95 ％信頼区間（CI）＝究と言える。
したがって，主査，副査は一致して本論文を学位論

0.218-0.844（adequate）が得られ，内的整合性を示す Cronbach α は0.691であった。また，研究２では，文として価値があるものと認めた。

Relationship between Sympathetic Nerve Activity Evaluated by Pulse Rate Variability andBlood Pressure Early in the Morning in Sleep Disordered Breathing（脈拍変動によって評価した交感神経活動と睡眠呼吸障害における早朝血圧との関係）
植

松

明

和

（論文の内容の要旨）

重度 SDB 群（n＝26）に分類した。平均 LF/HF 比は，【目的と背景】本研究は，睡眠呼吸障害（SDB）が睡全群において REM 睡眠＞軽睡眠＞深睡眠の順に高値

眠中の交感神経（SN）活動の亢進および高血圧症にであった。中～重度 SDB 群において，各睡眠段階の寄与しているかどうかを明らかにするため実施された。

LF/HF 比および就寝前と早朝の血圧は正常群および【対象と方法】153名の男性を被験者として，睡眠ポリ

軽度 SDB 群と比較して有意に高値であり，覚醒反応

グラフ（PSG）検査と同時に光電式容積脈波系を用い（arousal index）と有意な正の相関がみられた。重回て心拍変動を記録した。心拍変動解析には complex

帰分析では，早朝収縮期血圧の独立した関連因子としdemodulation 法を用いた。副交感神経（PN）活動はて年齢，BMI， 睡眠中の低酸素状態の指標である

高周波成分（HF）の振幅で，交感神経活動は低周波

SpO2＜90 ％（CT90），睡眠効率の低下であることが成分（LF）と HF 成分の振幅の比率（LF/HF 比）で示された。

評価した。また，全被験者に対し就寝前と早朝に血圧【結論】本研究結果からは，中～高度 SDB におけるを測定した。

頻回の覚醒反応が SN 活動の亢進に寄与し，年齢およ【結果】被験者（n＝153）は，無呼吸低呼吸指数（AHI）

び肥満に加えて，睡眠中の低酸素血症および睡眠障害により，正常群（n＝99），軽度 SDB 群（n＝28），中～が，早朝収縮期血圧の上昇について関連していると考No. 5, 2020333

審査学位論文要旨

解能の高い CD 法により短時間内の脈拍変動の周波数えられた。
（論文審査の結果の要旨）解析を実施し，睡眠段階別の自律神経機能を評価した

植松の研究は，睡眠呼吸障害（SDB）が睡眠中のこと，その結果，２）交感神経活動の亢進は，覚醒反自律神経バランスの異常および高血圧症（早朝血圧）

応指数と正の相関を認め，REM 睡眠中の亢進が顕著に寄与しているかどうかを明らかにすることを目的とであったこと，さらに，３）睡眠中の低酸素血症と早して実施された。

朝収縮期血圧には年齢および BMI と独立した関連が１．論文の概要

あること，以上が挙げられた。

男性153名を対象とし，睡眠ポリグラフ検査（poly­

最終試験では，まず最初に心拍変動の周波数解析のsomnography : PSG）と同時に光電式容積脈波計を用原理と，指標（LF/HF，HF）の測定意義に関する質

いて安静臥床時の脈拍変動を記録した。脈拍変動は問があった。心拍数の変動を心電図のＲ - Ｒ間隔の変

complex demodulation（CD）法を用いて解析し，高動から解析する研究が多く報告されており，本研究で周波成分（high-frequency : HF）の振幅が副交感神

はこれを脈波の変動から解析したこと，そして変動を経活動を，低周波成分（low-frequency : LF）と HF

スペクトル解析により周波数成分に分類すると，自律成分の振幅の比率（LF/HF 比）が交感神経活動を反神経機能を反映する指標が得られ，LF/HF が交感神映することに基づき，各睡眠段階（睡眠ステージ１～

経活動，HF が副交感神経活動を示すことについて説

４，および REM 睡眠）における自律神経活動を評価明された。

した。CD 法は短時間（30秒）の計測で脈拍変動の周続いて，CD 法による30秒間の測定について，測定波数解析が可能であり，古典的な心拍変動と良好な相中に数回含まれる呼吸が常に一定の影響を持つといえ関が報告されている。血圧は就寝前と早朝に測定した。

るか，測定の再現性と信頼性について質問があった。

被験者（153例）の SDB は，無呼吸低呼吸指数（ap­

これに対し，CD 法を活用した先行研究によって再現

nea hypopnea index : AHI）により，正常群（99例，性と信頼性が検証されていることが的確に説明された。

AHI＜ ５ ）， 軽 度 SDB 群（ 28 例 ， ５≦AHI＜15 ），

ただし，測定の限界や誤差の生じる要因（不整脈や呼中～重度 SDB 群（26例，AHI≧15）に分類した。平

吸状態，身体活動等）について説明があり，本研究に

均 LF/HF 比は，全群において REM 睡眠＞軽睡眠＞

おいては総脈拍数の10 ％を超える不整脈を認めた例

深睡眠の順に高値であり，REM 睡眠中の交感神経活は除外されたこと，安静仰臥位の記録としたことが説動の亢進が示された。中～重度 SDB 群において，各明された。

睡眠段階の LF/HF 比および就寝前と早朝の血圧は，

早朝収縮期血圧と関連する因子を検討した重回帰分

正常群および軽度 SDB 群と比較して有意に高値であ析の結果について議論となった。実際に本研究では，年り，覚醒反応指数と有意な正の相関がみられた。早朝

齢と BMI は早朝収縮期血圧の有意な規定因子であっ

収縮期血圧は相関分析の結果，年齢，AHI，覚醒反応

たが，SDB や自律神経機能に関連する指標は CT90の指数，LF/HF 比，睡眠中の末梢血酸素飽和度（SpO2）みが示されており，その他には有意な因子が抽出され＜90 ％を呈する時間の割合（CT90）と関連することなかった。睡眠，自律神経機能と血圧はそれぞれが互が示された。さらに，年齢と BMI で調整した重回帰

いに影響するため，因子間に多重共線性が存在するこ分析において，早朝収縮期血圧は CT90と関連すること，および解析例数が少ないために回帰分析に限界がとが示されたが，その他の睡眠指標や自律神経指標とあることが考察された。

の関連は有意ではなかった。

最後に，本研究成果の意義および今後の展望につい以上に基づき，SDB が中等度～高度である場合，て活発な討論があり，短時間の脈拍変動解析の有用性

頻回の覚醒反応が交感神経活動を活性化し，年齢およを活かし，各睡眠段階それぞれにおける SDB の病態

び BMI と 独 立 し て 睡 眠 障 害 に 伴 う 低 酸 素 血 症（無呼吸低呼吸指数等）と自律神経機能の解析，治療（CT90）が早朝収縮期血圧の上昇に関連していると考前後の比較検討等，研究の展開が期待された。副査よ察された。

り，REM 睡眠期に SDB が顕著になる例において，２．審査結果心血管イベント（狭心症や突然死）や高血圧，糖尿病

審査に先立ち，植松氏より本研究の概要について説

等の病態が関連したとの報告が睡眠学会で注目されて明があった。本研究成果の新規性として，１）時間分

いる，とのコメントがあった。簡便な脈拍変動の解析

334

信州医誌

68

審査学位論文要旨

による自律神経機能解析が，SDB の病態の解明や予連することを示し，脳心血管病の予防のための新たな防および治療介入への示唆を提供する方向に今後の研視点と示唆を提供するものであり，博士論文として研究が展開するであろうと期待された。

究の内容と成果は高く評価された。主査および副査は以上から，本論文は睡眠呼吸障害と自律神経バラン

全員一致で本論文が信州大学大学院医学系研究科保健ス異常（交感神経活動の亢進）が早朝収縮期血圧と関学専攻の博士論文にふさわしいものであると判断した。

Assessment of Depressive Tendency, Coping Strategies and Type D Personality in Japanese Patients with Coronary Artery Disease（日本人の冠状動脈疾患患者における抑うつ傾向，コーピング方略，およびタイプＤパーソナリティに関する検討）
山

口

大

輔

（論文の内容の要旨）

尺度の「放棄または諦め」（OR＝1.33，95 ％ CI［1.07，【背景・目的】社会的抑制と否定的な感情を特徴とす

1.65］，P＝0.010）と有意な関連を認めた。タイプＤる性格傾向であるタイプＤパーソナリティ（以下，タ例は非タイプＤ例に比し，コーピング方略の「放棄まイプＤ）は，冠動脈疾患（CAD）の心理的危険因子

たは諦め」が有意に高値（P＝0.002）であり，「肯定として注目されている。タイプＤの CAD 例では，約的解釈」が有意に低値（P＝0.004）であった。

76 ％が著しい不安と抑うつ症状を経験し，抑うつ症【考察】「放棄または諦め」のコーピング方略は，心理状がある CAD 例の２年後の死亡率は，抑うつ症状の的ストレス要因からの一時的な逃避を行うことは可能ない CAD 例の２倍以上との報告もある。CAD 例のであるが，現実を変化させ，心理的ストレス要因を解

さらなる心血管イベントを防ぐには，抑うつに対する消することは困難である点でネガティブなコーピング

介入が必要である。本研究の目的は，日本の CAD 例

方略である。CAD 例は，複数の薬物治療，食事制限，における抑うつ傾向の自己評価と，コーピング方略，

特に二次的な心血管イベントのリスクに対する懸念がタイプＤ，および社会人口学的または臨床的要因との増しているため，退院後にさらにストレスを受ける可関連を明らかにすることである。

能性がある。これらのストレスは，生活の質を低下さ【方法】経皮的冠動脈インターベンションを受けた入せ，抑うつ傾向のリスクを高めると考えられ，タイプ

院中の CAD 例を対象に，無記名自記式質問紙調査をＤの CAD 例で不足しているポジティブなコーピング実施した。使用尺度は，Zung Self-Rating Depression

方略の実施が必要と考える。

Scale，Type D Personality Scale，および Tri-Axial

また，常勤勤務者へのストレスチェック等の対応が，Coping Scale 24であり，それぞれ抑うつ傾向，タイ

少なからず抑うつへの傾向を予防していると考えられ

プＤ，およびコーピング方略を調査した。分析は，多る。退院後のメンタルヘルスケアは，パートタイム労重ロジスティック回帰分析を用いて，抑うつ傾向に働者や失業者に特に焦点を当てるべきであることが示

関連する特性を特定した。また，タイプＤ例と非タイ

唆された。

プＤ例のコーピング方略の下位尺度得点を Mann-【結論】CAD 例に高頻度で認めた抑うつ傾向は，タWhitney のＵ検定で比較した。

イプＤと「放棄または諦め」のコーピング方略と関連

本研究は，信州大学医学部医倫理委員会の承認を受し，常勤勤務者と負の関連を認めた。CAD 例では，

けて実施した。

性格傾向を評価し，ポジティブなコーピング方略を実【結果】調査用紙の回答者は108例であった。調査項目

施できるように介入することが，抑うつ傾向の予防にに欠損があったものを除外し，100部（有効回答率：有益である可能性が示唆された。

92.6 ％）を分析対象とした。59例が抑うつ傾向であ（論文審査の結果の要旨）

り，44例がタイプＤであった。多変量解析の結果，抑冠動脈疾患患者では社会的抑制と否定的な感情を特うつ傾向は，タイプＤ（オッズ比［OR］＝2.78，95 ％徴とするタイプＤパーソナリティが心理的危険因子と信頼区間［CI］［1.06，7.24］，P＝0.037），常勤勤務

して関連があることが知られている。またタイプＤ者（OR＝0.23，95 ％ CI［0.08，0.64］，P＝0.005）

パーソナリティの冠動脈疾患患者では不安と抑うつ症と有意に関連していた。また，コーピング方略の下位状が多く見られている。山口はこれらのことに注目し，

No. 5, 2020335

審査学位論文要旨

日本人の冠動脈疾患患者におけるタイプＤパーソナリ

7.24），常勤の勤務者が少なかった（オッズ比：0.23，

ティ，抑うつ症状，ストレスに対するコーピング方略

95 ％信頼区間：0.08-0.64）。コーピング方略に関しについて，アンケートを用いて調査した。

ては，抑うつ傾向では「放棄・諦め」，「責任転嫁」が対象は信州大学医学部附属病院に入院して経皮的冠多く，「計画立案」が少なかった。またタイプＤパー

動脈インターベンションを受けた108名の患者であり，ソナリティでも「放棄・諦め」，「責任転嫁」が多く，Zung Self-Rating Depression Scale，Type D Person­「肯定的解釈」が少なかった。これらの結果から，日ality Scale，Tri-Axial Coping Scale 24を用いて無記

本人の冠動脈疾患患者において，抑うつ傾向になりや

名自記式質問紙調査を行った。そのうち100名のデー

すいパーソナリティや勤務形態が明らかになり，抑う

タを用いて解析を行った。

つ傾向やタイプＤパーソナリティを示す冠動脈疾患患

冠動脈疾患患者の年齢は30～70歳代で，中央値は66歳であり，疾患は急性心筋梗塞と狭心症であった。こ者の取りやすいコーピング方略を明らかにすることができた。

のうち常勤の勤務者は55 ％，非常勤の勤務者は９％，以上より山口は日本人の冠動脈疾患患者の抑うつ傾

非勤務者は36 ％であった。タイプＤパーソナリティ

向，タイプＤパーソナリティ，コーピング方略の関連と判定されたのは44 ％，抑うつ傾向と判定されたのを科学的に明らかにした。よって主査，副査は一致しは59 ％であり，抑うつ傾向ではタイプＤパーソナリて本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

ティが多く（オッズ比：2.78，95 ％信頼区間：1.06-

Correlation between radiographic sagittal alignment, range of motion, muscle strength, andquality of life in adults with spinal deformities（成人脊柱変形患者の単純レントゲンにおける矢状面アライメント，関節可動域，筋力，生活の質の相関関係）
齋

門

良

紀

（論文の内容の要旨）

対象は，腰痛を有する成人脊柱変形患者とした。脊【はじめに】成人脊柱変形患者において，生活の質

柱・下肢の関節可動域・筋力，矢状面アライメントの（Quality of life：以下，QOL）低下に影響する因子は測定および QOL の評価を実施した。脊柱・下肢の関冠状面のアライメントではなく，矢状面のアライメン

節可動域・筋力と矢状面アライメント，QOL の相関トであると報告されている。特に脊柱の後弯変形や骨分析を行った。

盤の後傾，その双方を含めた体幹全体における前方へ【結果】取り込み基準に該当した対象は，26名（男性のバランス偏位が QOL 低下を招くことが明らかと10名，女性16名，平均年齢78.6±7.5歳）であった。

なっている。成人脊柱変形の病態は複雑であるが，こ矢状面アライメントに関しては，股関節伸展可動域

れらの矢状面アライメント不良といくつかの脊柱・下と sagittal vertebral axis に有意な負の相関関係（n＝肢の関節可動域・筋力との関連が報告されている。し９，r＝－0.73），occiput-to-wall distance と胸腰椎後かし，矢状面アライメント評価のゴールドスタンダー

弯 角 に 有 意 な 負 の 相 関 関 係（ n＝24 ，r＝－0.51 ），ドである単純レントゲンを用いて，脊柱・下肢の関節

脊柱伸展筋持久力と骨盤傾斜に有意な負の相関関係

可動域・筋力との関連を詳細に検討した研究はない。

（n＝25，r＝－0.48），脊柱伸展筋持久力と pelvic inci-

また，脊柱変形患者において，脊柱・下肢の関節可動

dence-腰椎前弯角（骨盤の形態と腰椎前弯とのミス

域・筋力と QOL との関連を検討した報告はない。

マッチ）に有意な負の相関関係（n＝25，r＝－0.40）【目的】本研究の目的は，成人脊柱変形患者を対象に，をみとめた。QOL に関しては，腰椎疼痛関連障害の脊柱・下肢の関節可動域・筋力と１）単純レントゲン

スコアと腰椎の可動域に有意な負の相関関係（n＝６，にて評価された矢状面アライメント，２）QOL との

r＝－0.83），歩行機能障害のスコアと膝関節伸展可動関連を検討し，成人脊柱変形患者に対する適切な要因

域に有意な正の相関関係（n＝９，r＝0.83），歩行機を標的とした効果的な理学療法を検討する際の一助と能障害のスコアと股関節伸展可動域に有意な正の相関することとする。

関係（n＝９，r＝0.77）をみとめた。

【対象および方法】本研究は，横断的観察研究である。

【結論】矢状面アライメント不良には，股関節伸展可

336

信州医誌

68

審査学位論文要旨

動域低下，脊柱伸展可動域低下，脊柱伸展筋持久力低腰椎・膝伸展の関節可動域および腸腰筋の柔軟性との下が関連することが明らかとなった。また，QOL に関連性がみられたことが示された。

おいては，腰椎の疼痛増悪に腰椎の可動域増加，歩行

また，研究の限界として，２日間に分けて測定を実機能低下に股関節および膝関節の伸展可動域低下が関施したことから，被検者数が減少したため，今後，さ連することが明らかとなった。これらの結果は，成人

らに症例数を増やして，脊柱・骨盤の矢状面上のアラ

脊柱変形患者に対する評価および治療において標的とイメントや QOL と，上肢・体幹・下肢の関節可動域

すべき要因を示唆するものである。

や，体幹・下肢筋力との関連性を解析していくことの（論文審査の結果の要旨）

必要性を掲げている。

本研究は，脊柱の変形と腰痛を有する整形外科外来

本研究の結果は，横断的観察研究の結果であること

受診患者を対象として，レントゲン写真に基づく脊柱から，脊柱の後弯変形と，上肢・体幹・下肢の関節可および骨盤の矢状面上のアライメントと，脊柱・股関動域の低下や，体幹・下肢筋力の低下との時系列的因節・膝関節の関節可動域，上肢・体幹・下肢の筋力，

果関係については不明であるが，今回の解析結果から，

そして，Quality of Life（QOL）との関連性を解析す

脊柱の後弯変形を有する症例に対するより効果的な理ることによって，脊柱変形を呈する症例に対するより学療法を考究するための指標を浮き彫りにすることが効果的な理学療法プログラムの在り方を考究することできたものと考えられる。
また，審査会においては，主査および副査からの質を目的として実施したものである。
結果として，脊柱の後弯変形と，立位で踵部と背部問に対して，的確かつ論理的な回答が示された。

を壁につけた際の壁と後頭骨との距離，股関節伸展の以上の点から，本論文は，博士（保健学）の学位論

関節可動域， 上肢の筋力との間に関連性がみられ，文として価値あるものであることを主査，副査が一致

QOL の指標である Japanese Orthopedic Association

して認めた。

Back Pain Evaluation Questionnaire（JOABPEQ）と，

Comparison of impedance measured by the forced oscillation technique and pulmonary
functions, including static lung compliance, in obstructive and interstitial lung disease（閉塞性肺疾患及び間質性肺疾患における肺コンプライアンスと多周波強制オッシレーション法を用いた呼吸インピーダンスとの関係）
武

市

尚

也

（論文の内容の要旨）

および間質性肺疾患（interstitial lung disease, ILD）

【背景】多周波オッシレーション法（multi-frequency

における静肺プライアンスと MF-FOT の結果を比較

forced oscillation technique, MF-FOT）による呼吸検討した。

インピーダンスの評価は，呼吸器の呼吸抵抗（Rrs :【方法】MostGraph-01を用いて呼吸インピーダンス

respiratory resistance）と呼吸リアクタンス（Xrs :測定と食道バルーン法による肺コンプライアンス測定，

respiratory reactance）に分けて評価ができる方法で

スパイロメトリー，体プレティスモグラフによる肺気ある。Rrs は気道抵抗と肺および胸郭の組織抵抗の和

量分画と気道抵抗，１回呼吸法による CO 肺拡散能力，であり，Xrs は弾性抵抗と慣性抵抗の和である。閉塞

単一呼吸法による換気不均等分布の測定検査を全て同性肺疾患（obstructive lung disease, OLD）では，そ日に行った対象の検査データを対象とした。解析対象の重症度に応じて Rrs は低周波数領域で高値を，Xrsとなった症例は，健常者（healthy subjects, HS）24

はより陰性を示すことが報告されている。一方，Rrs

例，OLD 18例（COPD 16例，asthma-COPD overlap

および Xrs は，肺の病態変化（気腫性変化による肺２例），ILD は11例であった。HS と OLD，ILD の３弾性収縮圧の低下および肺線維症による肺の硬化な群で比較を行った。

ど）をどの程度反映しているかは明らかでない。本研【結果】Rrs の指標である R5-R20は，一秒量（FEV1），

究は，肺弾性収縮圧の影響が Rrs および Xrs にどの

肺拡散能（DLco）と負の，ΔN2，気道抵抗（Raw），

程度反映されているのかを明らかにするため，OLD

肺抵抗（RL）とは正の相関を示した。Xrs の指標でNo. 5, 2020337

審査学位論文要旨

ある X5は，肺活量（VC），FEV1および DLco と正の，変化（気腫性変化による肺弾性収縮圧の低下および肺ΔN2，Raw，RL，ΔRL と負の良好な相関を示した。

線維症による肺の硬化など）をどの程度反映している

fres は X5の場合と同様の項目と逆の相関がみられた。

かは明らかでない。本研究では，肺弾性収縮圧の影響

RL は呼吸インピーダンスの多くの指標と良好な相関が Rrs および Xrs にどの程度反映されているのかをが得られたが，静肺コンプライアンス（Cst）とは良明らかにするため，OLD および間質性肺疾患（ILD）

好な相関は得られなかった。さらに OLD 群のみで相における静肺プライアンスと MF-FOT の結果を比関をみると，R5-R20，X5，fres は，FEV1，ΔN2，

較検討している。結果としては，Rrs の指標は，一秒

Raw，RL，ΔRL と良好な相関関係を示した。ILD 群

量（FEV1），肺拡散能（DLco）と負の，ΔN2，気道の み で 相 関 を み る と ，R5-R20 は ，FEV1 ，ΔN2 ，抵抗（Raw），肺抵抗（RL）とは正の相関を示した。

Raw と有意な相関をしめし，X5，fres は加えて VC，Xrs の指標は，肺活量（VC），FEV1および DLco とRL，⊿RL とも有意な相関関係を示した。Xrs と Cst

正の，ΔN2，Raw，RL，ΔRL と負の相関を示した。

の間に相関関係は認められなかった。

RL は呼吸インピーダンスの多くの指標と良好な相関【結論】ILD における呼吸インピーダンスの各指標，が得られたが，静肺コンプライアンス（Cst）とは相

特に Xrs の指標（X5および fres）は，肺の弾性収縮

関は得られなかった。さらに OLD 群のみで相関をみ力を表す Cst および肺気量分画の減少とは相関を示さ

ると，Rrs および Xrs の指標は，FEV1，ΔN2，Raw，ず，気道抵抗，肺抵抗および換気不均等と良好な相関

RL，ΔRL と良好な相関関係を示した。ILD 群のみでを示した。OLD に対しても呼吸インピーダンス各指相関をみると，Rrs の指標は，FEV1，ΔN2，Raw と標は，Cst や肺気量分画の増加とは相関を示さず，気有意な相関をしめし，Xrs の指標は加えて VC，RL，道病変に影響を受ける指標と良好な相関関係が得られ⊿RL とも有意な相関関係を示した。Xrs と Cst の間た。以上から MF-FOT による呼吸インピーダンスのに相関関係は認められなかった。本研究の結論として各指標は，肺の弾性収縮圧の変化をあまり反映しにく

は，ILD における呼吸インピーダンスの各指標，特く，気道病変を反映しやすいことが示唆された。

に Xrs は，肺の弾性収縮力を表す Cst および肺気量（論文審査の結果の要旨）

分画の減少とは相関を示さず，気道抵抗，肺抵抗およ

本研究は，多周波オッシレーション法（multi-

び換気不均等と良好な相関を示した。OLD に対して

frequency forced oscillation technique, MF-FOT）にも呼吸インピーダンス各指標は，Cst や肺気量分画のおける呼吸インピーダンス（呼吸抵抗と呼吸リアクタ増加とは相関を示さず，気道病変に影響を受ける指標ンス）が肺の病態変化をどの程度反映しているかを検と良好な相関関係が得られた。以上から MF-FOT に討している。MF-FOT は，呼吸抵抗（Rrs）と呼吸よる呼吸インピーダンスの各指標は，肺の弾性収縮圧

リアクタンス（Xrs）に分けて評価ができる方法であの変化をあまり反映しにくく，より気道病変を反映しる。閉塞性肺疾患（OLD）では，その重症度に応じやすいことが示唆された。

て Rrs は低周波数領域で高値を，Xrs はより陰性を示すことが報告されていが，Rrs および Xrs は肺の病態

338

主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

信州医誌68