Clonetics™ 皮膚細胞
Epidermal Keratinocytes
Dermal Fibroblasts
Epidermal Melanocytes
Dermal Microvascular Endothelial Cells

ロンザはヒト初代細胞パイオニアとして、皮膚細胞製品をご提供します。ケラチノサイト、皮膚線維芽細胞、メラノサイト
および皮膚微小血管内皮細胞の製品ラインナップを有し、皮膚疾患研究、美容分野研究、再生医療研究ツールとして幅広くご利用いただけます。
【製品仕様】 ■ ケラチノサイト 形態観察により細胞特性を確認、成人：18回分裂■ 皮膚線維芽細胞

新生児：20回分裂保証

形態観察により細胞特性を確認、15回分裂保証

Mel-5免疫蛍光標識による純度確認（>85%）、L-DopaからのMelanin生成を確認■ 皮膚微小血管内皮細胞 LDL取り込み陽性、第VⅢ因子陽性、15回分裂保証■ メラノサイト》 ケラチノサイトおよび皮膚線維芽 細 胞 は 継 代 数 P1 細 胞 製 品をご 提 供》 ケラチノサイト培地（ KGM™ Gold ）の優れた培養パフォーマンス（裏面参照）》 ロット数、ロット毎の在庫本数。国 内 在 庫も潤 沢で す》 専 用培地キット BulletKit™ による豊 富 な 培 養 実 績
オーダー情報カタログ番号 製品名

ドナーサイズ価格（円）00192907

NHEK-Neo- 皮膚ケラチノサイト

正常新生児（単一）95,00000192906

NHEK-Neo- 皮膚ケラチノサイト

正常新生児
（プール）

95,00000192627

NHEK-Ad- 皮膚ケラチノサイト

正常成人（単一）

95,000CC-2509

NHDF-Neo- 皮膚線維芽細胞

正常新生児（単一）90,000CC-2511

NHDF-Ad- 皮膚線維芽細胞

CC-2504

NHEM-Neo- 皮膚メラノサイト≥ 5.0 × 105 60,000
正常新生児（単一） cells/vial
120,000

CC-2586

NHEM-Ad- 皮膚メラノサイト

正常成人（単一）

90,000CC-2505

HMVEC-dNeo- 皮膚微小血管内皮細胞

正常新生児（単一）120,000

CC-2516

HMVEC-dNeo- 皮膚微小血管内皮細胞 正常新生児（プール）

100,000

CC-2543

HMVEC-dAd- 皮膚微小血管内皮細胞

120,000

正常成人（単一）正常成人（単一）

専用培地
カタログ番号

製品名00192060

KGM ™ Gobl BulletKit™

CC-3132

FGM ™ -2 BulletKit™

サイズ

価格（円）

20,00027,500500 ml

CC-3249

MGM ™ -4 BulletKit™

27,500CC-3202

EGM ™ -2MV BulletKit™

27,500*NHEM-Adの培養には別途ET-3増殖因子（CC-4510）13,000円が必要ですCumulative Population Doublings

ケラチノサイト培地, KGM™ Gold BulletKit™
優れた培養パフォーマンス

A

KGM™ Gold Medium
KGM™ Medium

ロンザNHEK-NeoにおけるKGM™ Gold BulletKit™ と旧製品KGM™ BulletKit™ の培養比較。

KGM™ Gold培養のNHEKは、継代数5回の時点で倍加回数が21回に達し、かつ正常な形態を維持していた。一方、旧培地では倍加回数14の時点で細胞老化が示された。
グラフはKGM™
GoldによりNHEKのライフスパンが旧培地に比べて34%増加したことを示す。
Days in Culture

Figure 2A. Lifespan of NHEK in KGM™ Gold Medium vs. KGM™ Medium. The same lot of NHEKNeo Neonatal Human Epidermal Keratinocytes was cultured through passage 5 in either KGM™ Medium or KGM™ Gold Medium. At the end of passage 5, cells proliferating inKGM™ Gold Medium were able to achieve 21 total Population Doublings, retaining a healthymorphology (see Figure 2B). NHEK maintained in KGM™ Medium reached senescence after
only 14 total Population Doublings. This experiment shows that KGM™ Gold Medium is able toGrowth Performance of Adult Keratinocytes
support
2 5 a 34% increase in NHEK lifespan compared to KGM™ Keratinocyte Growth Medium.

Cumulative Population Doublings

KGM™
2 0 Gold Medium

KGM™ Gold Medium
KGM™ Medium

KGM™ Medium

1510Company I

KGM™ Gold

50P405Day 13, 16 TPD

10P41520253035

Days inDay
Culture13, 14 TPD

B

Lonza’s NHEK-Ad in KGM™ Gold Medium

Company I’s Adult Keratinocytes in Company I’s Medium

Figure 3. Morphology of Company I’s keratinocytes at low density in KGM™ Gold Medium (A)vs. Competitor I’s medium (B). Passage 2 neonatal foreskin keratinocytes from Company I
were grown in either KGM™ Gold Medium (A) or in Competitor I’s medium (B). Cultures werefed with fresh medium every other day and photographed 5 days after seeding. Cells plated inCompetitor I’s medium
colony formation (B).
P2 show slow growth, low mitotic index and diffuseP2The same lot ofDaycells
shows healthy, rapid growth in KGM™ Gold Medium,Day 6, with
6 TPD characteristic
4, 4 TPD
epithelioid colony morphology (A).

We further show that even keratinocytes from Company I grow andlook significantly better in Lonza’s KGM™ Gold Keratinocyte Growth
Medium than in Company I’s medium (Figure 3).

P3
P3
In addition,DayLonza’s
NHEK-Ad Adult Normal Human Epidermal
Keratino8, 9 TPD
Day 14, 13 TPD
cytes grown in KGM™ Gold Keratinocyte Growth Medium-Gold outperformed Company I’s adult keratinocytes grown in their own mediumin growth rate and morphology (Figure 4) up to and even beyond
15 Population Doublings. This data shows that, although Company I
claims extended lifespan of their keratinocytes in their own medium,the health and morphology of these adult keratinocytes is poor beyond 13 – 15
unusable
P4
P4Population Doublings, rendering the cultures
Day 25, 17 TPD
Day 13, 15 TPD
for further experimentation.

Summary
KGM™ Gold Keratinocyte Growth Medium-Gold was created in response
to deficiencies in the performance of keratinocyte media currently
on the market.
high denP5P5 It is a rich medium, capable of maintaining
Day 20, 19 TPD
32, 19 TPDsity keratinocyte
cultures, while at the same time Day
supportingclonalMorphology of Lonza’s NHEK-Ad
grown in KGM™
Gold Medium compared
Company I’s adult keratinocytes in their own medium. The
growth andFigure
the4.maintenanceof healthy
keratinocyte
celltomorphology.
growth performance and longevity of Company I’s adult keratinocytes grown in their own medium were compared with Lonza’s NHEK-Ad grown in

P5

Days in Culture

Day 20, 21 TPD

P5

ロンザ（左）と他社成人ケラチノサイト（右）NHEK-Ad
obtained
19 PD. Note the presenceof several
enlarged cells in Passage 2 in Company I’s medium (Circle).
At the endとの培養比較。
of passage 4 (15 PD) Lonza’s

Day 22, 14 TPD

ロンザはP4まではほとんどの細胞が正常な形態であることを示す。

KGM™ Gold Medium. Although Company I claims ≥25 total Population Doublings for their adult keratinocytes, actual results show that this lot barely

NHEK-Ad consist of mostly small proliferative cells.

Figure 2B. Morphology of NHEK-Neo in KGM™ Gold Medium vs. KGM™ Medium. The same
lot of NHEK-Neo isolated in KGM™ Medium were plated in either KGM™ Gold Medium or KGM™
Medium. Population Doublings were determined for passages 2 – 5 (up to 22 days). Photographs (Figure 2B) show NHEK morphology at the corresponding data points on the graph(Figure 2A). Long-term growth and morphology of keratinocytes isolated in KGM™ Medium
are superior in KGM™ Gold Medium compared to KGM™ Medium; NHEK cultured in KGM™ Gold
Medium continue to proliferate while those in KGM™ Medium have senesced.

Article written for Lonza’s Fall Resource Notes™ Newsletter ©2009

ロンザのNHEK（解凍時継代数P1）とKGM™ Gold BulletKit™ の4D-Nucleofector™ による使用により、長期間のケラチノサイト培養が可能です

ケラチノサイト遺伝子導入効率

Growth Performance of Adult Keratinocytes

25203Bioscience Solutions – KGM™ Gold Keratinocyte Growth Medium

NHEK-Neo 68%

15210

Bioscience Solutions – KGM™ Gold Keratinocyte Growth Medium

NHEK-Ad

60%Company I

KGM™ Gold5メラノサイト, NHEM-Ad
005101520253035

適切な細胞キャラクタリゼーション
Days in Culture

ロンザNHEM-Adを使用して、細胞融解後、倍加回数3, 5, 7, 11回において、Mel-5免疫蛍光標識による細胞純度の確認を実施した。
またメラノサイトの細胞機能確認として、
L-DopaからDopa-melaninへのコンバージョンを確認した。長期にわたり、メラノサイトの純度および機能が維持されていることを示す。

ロンザのNHEMは、メラノサイトとしての純度、細胞機能が長く維持されている細胞製品です

RES-LF2006-03