どうやって培養するの？
推奨培地の準備12

凍結バイアル溶解/播種

3培地交換：翌日

4

HUVEC編継代？
D-PBS ReagentPack™
Subculture Reagents(Lonza Catalog No.
CC-5034) を使用してください

凍結バイアルトリプシン /EDTA

基本培地

16 〜 24hr 以内に完全培地
添加因子セット(Single Quote)

1-2 分以内
37℃ウォーターバス

完全培地

培地交換を実施

トリプシン中和液

凍結バイアルを融解し、すぐに培養を開始する

遠心回収し播種継代

Bullet Kit 構成 品を 混 和して完 全 培地を調整。
使用期限：冷蔵保存 /1 ヶ月以内

応用例

ウォーターバスで 1 分程度溶解したら、プレインキュベーションしておいた完全培地へ播種して培養開始（遠心はしない）。

播種翌日 (16-24hr 以内）に培地交換を実施（凍結保存培地に含まれていた DMSO 除去のため）。
そ の 後は、2 日に 1 回の 頻 度 で 培地 交 換 を実施する。

？

70-85% コ ン フ ル
エンシー の状 態になったら、培地を除き HEPES-BSS で 培地 成 分を 洗 浄する。
トリプシン 処 理 後、中 和液で反 応を停止させたら、細胞を遠 心 回 収 (200 x g5 分 ) して 複 数 枚のディッシュに播 種して継代培養する。

播種密度：2,500 viable cells/cm2

血管新生（Angiogenesis）■ お受け取り後の保管
細胞：液体窒素 (-196 ℃ )基礎培地 (4℃〜 8 ℃ )：冷蔵
添加因子：冷凍 (-20 ℃ )■ メンテナンス
48-96 well プレートをプレコーティング *2X 血管新生の促進因子 / 抑制因子★
EGM-2 増殖培地（★を含む）で30 分〜インキュベーションする。
血管新生抑制用のコントロール試薬：
8 well-plate の調整培地：125 ml
96 well-plate の調整培地：75 ml
Suramin(Sigma-S2671)
終濃度 15 µM および30 µM も使用可能＊Matrigel® Corning 社製

継代回収後、EGM-2 増殖培地でHUVEC を懸濁する。

HUVEC 播種密度：
65,000-80,000 cell/cm2※プレスクリーン済み HUVEC 使用

HUVEC Tube formation
プレコー ティングした 48-well plateを用いて、Lonza EGM™ -2 培地で 16時間培養した後、倍率：5X で観察

解凍翌日に培地交換した後は、一日おきに培地※ 交換を行います。その際の培地量は下記の通りです。
細胞密度 25-45%：1.5 mL/5 cm2
細胞密度 >45% 2 mL/5 cm2※培地は必要量を分注して、プレインキュベーションしてから使用してください。

■ 継代
継代は必ず専用継代試薬キット (CC-5034) を使用してください。継代は、細胞密度が 70-85% の状態で行い、必要量の継代試薬を室温に戻して使用します。

HUVEC 製品一覧

HUVEC と推奨培地の選択ガイド

臍帯静脈カタログ番号

製品名

製品情報

C2517AHUVEC – 臍帯静脈内皮細胞
HUVEC – Human Umbilical Vein Endothelial Cells

正常新生児
(単一)

サイズ

≥5.0 x 10

5

定価50,000円

C2517ASHUVEC – 臍帯静脈内皮細胞【 スクリーニング済 】
HUVEC – Human Umbilical Vein Endothelial Cells

正常新生児
(単一)

≥5.0 x 105

98,000円

C2519AHUVEC – 臍帯静脈内皮細胞
HUVEC – Human Umbilical Vein Endothelial Cells

正常新生児(プール)≥5.0 x 105

38,000円

C2519ASHUVEC – 臍帯静脈内皮細胞【 スクリーニング済 】HUVEC – Human Umbilical Vein Endothelial Cells

正常新生児(プール)≥5.0 x 105

75,000円

00191027

HUVEC-XL – 臍帯静脈内皮細胞【 大容量 】
HUVEC-XL – Human Umbilical Vein Endothelial Cells

正常新生児
(プール)

7CC-3162

EGM™-2 BulletKit™
EGM™-2 Endothelial Cell Growth Medium-2 BulletKit™

CC-3156

EBM™-2基本培地
EBM™-2 Endothelial Cell Basal Medium-2500 ml

CC-4176

EGM™-2 SingleQuots™ 添加因子セット
EGM™-2 Endothelial Cell Growth Medium-2 SingleQuots™
Supplements and Growth Factors

1セット≥1.0 x 10

基本培地および添加因子21,000円
18,000円

臍帯静脈≥5.0 x 105

50,000円CC-2519

HUVEC – 臍帯静脈内皮細胞
HUVEC – Human Umbilical Vein Endothelial Cells

正常新生児(プール)≥5.0 x 105

38,000円

CC-3124

EGM™ BulletKit™
EGM™ Endothelial Cell Growth Medium BulletKit™

基本培地および添加因子

26,000円

CC-3121

EBM™ 内皮細胞基本培地
EBM™ Endothelial Cell Basal Medium

500 ml

18,000円静脈臍帯

EGM™ 完全培地【 添加因子混合済み 】
EGM™Complete Endothelial Cell Growth Medium

CC-2935

HUVEC – 臍帯静脈内皮細胞
HUVEC – Human Umbilical Vein Endothelial Cells

CC-5035

EGM™-Plus BulletKit™
EGM™-Plus Endothelial Cell Growth Medium BulletKit™

CC-5036
CC-4542BBEVEGFhEGF

C2517A (単一)C2519A (複数)00191027 (複数 , 大量)

EGM™-2

EGM™-2CC-3162

̶

含有

含有

C2517AS (単一)C2519AS (複数)

EGM™-2

EGM™-2CC-3162

̶

含有

含有

CC-2517 (単一)CC-2519 (複数)

EGM™

EGM™

CC-3124含有̶

含有

EGM™-Plus

EGM™-PlusNew!

CC-5035含有

̶含有

Bullet Kit™

備考

血管新生マーカー(eNOS, Axl, Tie-2 , VEGFr2)の発現が陽性である事を確認済

増殖が早い

培地含有成分
カタログ番号

製品名

内容CC-3162

EGM™-2 BulletKit™

内皮細胞増殖培地 -2 BulletKit™ 2% FBS 含む

CC-3156

EBM™-2 基本培地

内皮細胞基本培地 -2, 無血清

CC-4176

EGM™-2 SingleQuots™ キット

hEGF, 0.5 ml; ヒドロコルチゾン, 0.2 ml; FBS, 10 ml; VEGF, 0.5 ml;
hFGF-B, 2 ml; R3-IGF-1, 0.5 ml;アスコルビン酸 , 0.5 ml; GA-1000,0.5 ml, ヘパリン, 0.5 ml (BBE なし)

CC-3124

EGM™ BulletKit™

内皮細胞増殖培地 BulletKit™ 2% FBS 含む

CC-3121

EBM™ 基本培地

添加により EBM™-2を EGM™-2として使用可能

18,000円

正常新生児(単一)CC-3024

カタログ番号150,000円

HUVEC – 臍帯静脈内皮細胞
HUVEC – Human Umbilical Vein Endothelial Cells

EGM™ SingleQuots™ 添加因子セット
EGM™ Endothelial Cell Growth Medium SingleQuots™
Supplements and Growth Factors推奨培地

CC-2935 (単一) New!

CC-2517

CC-4133

単離に用いた培地

細胞
カタログ番号

1セット

18,000円

完全培地

500 ml

23,300円

正常新生児(単一)≥5.0 x 105

50,000円

基本培地および添加因子

27,000円

EBM™-Plus 内皮細胞基本培地
EBM™-Plus Endothelial Cell Basal Medium

500 ml

19,000円

EGM™-Plus SingleQuots™ 添加因子セット
EGM™-Plus Endothelial Cell Growth Medium SingleQuots™
Supplements and Growth Factors

1セット

19,000円

内皮細胞基本培地 , 無血清
添加により EBM™ を EGM™ として使用可能

CC-4133

EGM™ SingleQuots™ キット

CC-3024

EGM™ 完全培地

CC-5035

EGM™-Plus BulletKit™

内皮細胞増殖培地 ™ BulletKit 2% FBS 含有CC-5036

EGM™-Plus 基本培地

内皮細胞基本培地 , 無血清

CC-4542

EGM™-Plus SingleQuots™ キット

BBE 1ml; L-グルタミン25 ml: hEGF 0.5 ml: ヒドロコルチゾン 0.5ml : FBS 10 ml: GA-1000 0.5ml; アスコルビン酸 0.5 ml: ヘパリン
0.5 mlBBE, 2 ml; hEGF, 0.5 ml; ヒドロコルチゾン, 0.5 ml; FBS, 10 ml;
GA-1000, 0.5 ml
内皮細胞増殖培地 2% FBS 含む

RES-LF1524C