2018 年 3 月 20 日
国立大学法人 岐阜大学

プレスリリース

岐阜大学大学院医学系研究科 手塚建一准教授らの研究グループ

従来よりガン誘発リスクを低減できる
iPS 細胞誘導方法の特許を米国で取得
初期化 4 因子のガン誘発リスクがある c-MYC の代替として DLX4 を採用
iPS 細胞を作製する際に用いられる 4 因子（山中因子；OCT3/4、SOX2、KLF4、c-MYC）のうち、c-MYC にはがん誘発リスクがあることが知られています。2011 年に岐阜大学大学院医学系研
究科 組織・器官形成分野の手塚建一准教授らの多施設共同研究グループは、歯髄細胞からiPS 細胞を樹立する研究の過程で、c-MYC の代わりに DLX4 を用いることで、がん誘発リスクを低減し、c-MYC と同等の効率で iPS 細胞に誘導できることを発見しました（図１～図４）。
この研究成果は 2014 年に"SCIENTIFIC REPORTS”に掲載 ※1され、DLX4 等を用いた iPS 細胞作
製方法は国内 ※2および国際出願 ※3をしていました。このたび、この特許が米国 ※4で成立しました。欧州でも近く特許が成立する見込みです。今後、手塚准教授は DLX4 を含む遺伝子ベクターセットを製造販売する協力企業を募り、国内外の研究機関や医療施設に提供する考えです。
なお、手塚准教授は 3 月 22 日にパシフィコ横浜で開催される第 17 回再生医療学会総会のテクノオークションにおいて、「捨てられる歯から iPS 細胞～安全な再生医療を世界に届けるために～」と題した本特許に関する発表を行います。
図１：c-MYC の代わりに DLX4 を用いる iPS 細胞誘導方法

岐阜大学総合企画部総務課広報係
Tel 058-293-3377/2009https://www.gifu-u.ac.jp/ 〒501-1193 岐阜県岐阜市柳戸 1-1
Fax 058-293-2021

1

E-mail：kohositu@gifu-u.ac.jp

2018 年 3 月 20 日
国立大学法人 岐阜大学

プレスリリース

図２：歯髄細胞の初期化において、OSKM（c-MYC を含む山中 4 因子）を用いた場合と、OSKD（c-MYC を DLX4 に代替）を用いた場合は、ES細胞様コロニーがほぼ同じ数出現した。

図３：ヒト繊維芽細胞の初期化においても、歯髄細胞のときと同様に、OSKM（c-MYC）を用いた場合とOSKD（DLX4）を用いた場合に、ES 細胞様コロニーがほぼ同じ数出現した。

図４（左）：歯髄細胞の初期化において、OSKM（c-MYC）と比べて OSKD（DLX4）を用いた場合は、同じ程度の量の iPS 細胞を誘導したうえで、正常でないコロニーの発生を防ぐことが示された。

●発見の経緯：歯髄細胞の研究
岐阜大学医学系研究科の組織・器官形成分野と口腔病態学分野では、これまで 10 年以上にわたり、ヒト歯髄細胞を集め、日本人向けの再生医療に活用するための歯髄細胞コレクションの設立に取り組んできました ※5,6。その過程で、手塚准教授は 2008 年には京都大学の山中伸弥教授との共同研究で、歯髄細胞は皮膚繊維芽細胞に比べて、iPS 細胞誘導効率が高いことを発見 ※7し、「効率的な人工多能性幹細胞の樹立方法」として特許 ※8を取得しました。そして、歯髄細胞から iPS 細胞を樹立しやすい原因となる遺伝子を探索してきました。
手塚准教授らはこれらの研究の中で、10 代の人から採取した歯髄細胞は、20 代以上の人から採取した歯髄細胞よりも iPS 細胞を樹立しやすく、また 10 代の人の歯髄細胞では DLX4 遺伝子が顕著に発現していることに着目しました。そして DLX4 が iPS 細胞の誘導効率を高めていることを突き止めました。この研究成果の論文が“SCIENTIFIC REPORTS”に掲載され *1、今回の特許取得に繋がりました。
なお、岐阜大学では「HLA ハプロタイプホモ歯髄細胞ストック」を推進するために、2016
年 2 月に「岐阜大学しずい細胞プロジェクト」を発足しました。

岐阜大学総合企画部総務課広報係
Tel 058-293-3377/2009https://www.gifu-u.ac.jp/ 〒501-1193 岐阜県岐阜市柳戸 1-1
Fax 058-293-2021

2

E-mail：kohositu@gifu-u.ac.jp

2018 年 3 月 20 日
国立大学法人 岐阜大学

プレスリリース（参考）岐阜大学しずい細胞プロジェクト
岐阜大学は、これまで医学系研究科の組織・器官形成分野と口腔病態学分野が協力して取り組んできた「歯髄細胞バンク」を推進し、日本人全体をカバーしうる iPS 細胞ストックに貢献するために、2016 年 2 月 4 日に岐阜大学学長の森脇久隆が会長となり本プロジェクトを発足しました。本プロジェクトでは、産学協同のベンチャー企業を設立し、歯髄細胞を研究機関や医療施設などに提供する事業収益を得ることで、他家 iPS 細胞移植医療に必要な「HLA ハプロタイプホモドナー※9」の歯髄細胞の収集・活用を進める計画です。
＜岐阜大学しずい細胞プロジェクトの目的＞
・日本人歯髄細胞の収集：日本人の約 100 人に１人出現する、ヒト白血球抗原（HLA）をホモに持つ特殊なドナー（HLA ハプロタイプホモドナー）の探索。他家移植医療に必要な歯髄細胞コレクションを構築し、公的バンクや営利企業を通じて研究用・臨床用に広く提供する。
・世界規模の歯髄細胞収集；日本人とは HLA が異なり、民族的な多様性が高いハンガリーと協力し、世界規模の歯髄細胞コレクションを構築する。
・iPS 細胞の誘導：京都大学の iPS 細胞研究所と連携して、日本人 iPS 細胞ストック *7の充実に貢献する。
・再生医療に携わる人材の育成：再生医療分野で活躍する認定医や臨床培養士の教育を通じて、未来の医療に貢献する。
※1．"The homeobox gene DLX4 promotes generation of human induced pluripotent stem cells"
論文著者：玉置 也剛 1, 高橋 和利 2, 青木 仁美 3, 飯田 一規 1, 川口 知子 1, 畠山大二郎 1, 位田 雅俊 4, 帖佐 直幸 5, 石崎 明 5, 國貞 隆弘 3, 柴田 敏之 1, 五島 直樹 6, 山中 伸弥 2、手塚 建一3
1 岐阜大学大学院医学系研究科 口腔病態学

2 京都大学 iPS 細胞研究所

3 岐阜大学大学院医学系研究科 組織・器官形成分野
4 岐阜薬科大学薬学部 薬物治療学研究室

5 岩手医科大学歯学部 口腔生化学講座

6 国立研究開発法人産業技術総合研究所 創薬分子プロファイリング研究センター
掲載雑誌：SCIENTIFIC REPORTS, 4; 7283, 2014 (DOI: 10.1038/srep07283)
論文公開 URL：https://www.nature.com/articles/srep07283※2．「人工多能性幹細胞の作製方法」、特願 2015-534283, PCT/JP2014/072564（優先権：特願 2013-176647）※3．国際公開番号 WO2015030111※4．米国特許：US 9890360 B2※5．Takeda T et al. : Characterization of Dental Pulp Stem Cells of Human Tooth Germs. J.Dental
Res. 87; 676-681, 2008
※6．Tamaoki N et al.: Dental Pulp Cells for Induced Pluripotent Stem Cell Banking J.Dental
Res. 89; 773-778, 2010
※7．Okita K et al.: A more Efficient Method to Generate Integration-Free Human iPS Cells. NatureMethods. 8; 409-412, 2011※8．効率的な人工多能性幹細胞の樹立方法、特許第 5553178 号, PCT/JP2008/068320※9．HLA は白血球の型で、人は両親から異なる 3 種類の HLA のセット（ハプロタイプ）を受け継ぎ、通常の人は 6 種類の HLA を持つ。両親から同じ 3 種類の HLA ハプロタイプを受け継いだ子の HLA
岐阜大学総合企画部総務課広報係
Tel 058-293-3377/2009https://www.gifu-u.ac.jp/ 〒501-1193 岐阜県岐阜市柳戸 1-1
Fax 058-293-2021

3E-mail：kohositu@gifu-u.ac.jp

2018 年 3 月 20 日
国立大学法人 岐阜大学

プレスリリース

は見かけ上 3 種類になる。HLA が 3 種類だけの人は、「HLA ハプロタイプホモドナー」と呼ばれ、もう一方の HLA ハプロタイプに関わらず、その 3 種を含む HLA ハプロタイプを持つ人に移植しても拒絶反応が起きにくいため、このような細胞は他家細胞移植医療に適する。日本人に多い
HLA ハプロタイプホモ iPS 細胞が 14 種類揃うと、日本人の約 50%に対して他家 iPS 細胞移植医療が可能になると考えられ、京都大学を中心に提供準備が進められている。

【研究者プロフィール】
手塚 建一（Tezuka, Ken-ichi）プロフィール
岐阜大学大学院医学系研究科 組織・器官形成分野 准教授、歯学博士＜略歴＞
1983 年～1987 年

京都大学 理学部 生物物理学教室卒業

1991 年〜1994 年

明海大学 歯学部 助手

1994 年〜1997 年

Merck 研究所 ポスドク研究員

1997 年～2001 年

東京理科大学生命科学研究所 講師

2002 年 4 月～2007 年 3 月

岐阜大学大学院医学系研究科 助教授

2004 年 10 月〜2008 年 3 月

科学技術振興機構さきがけ研究員（兼任）2007 年～現在

岐阜大学大学院医学系研究科 准教授※本リリースは文部科学記者会、厚生労働記者会、厚生日比谷クラブ、本町記者会、科学記者会
および各社科学担当に送信しております。
【本件に関する問い合わせ先】
岐阜大学総合企画部総務課広報係

担当：佐藤、伊藤

Tel：058-293-3377／2009 Fax：058-293-2021 E-mail：kohositu@gifu-u.ac.jp

岐阜大学総合企画部総務課広報係
Tel 058-293-3377/2009https://www.gifu-u.ac.jp/ 〒501-1193 岐阜県岐阜市柳戸 1-1
Fax 058-293-2021

4E-mail：kohositu@gifu-u.ac.jp