GeneAce SYBR™ qPCR Mix II
製品説明

I.

GeneAce SYBR™ qPCR Mix II は、2×プレミックスタイプのインターカレーター法用のリアルタイム PCR 用試薬です。
本製品は、ホットスタート PCR 用酵素 Hot-Start Gene Taq
NT と最適化されたバッファーにより、非特異的増幅を抑制し、高い特異性と再現性を実現しています。また、別途 UracilN-Glycosylase (UNG) を添加することで、キャリーオーバー＜反応液（例）＞[ 20 μl 系 ]2x GeneAce SYBR™ qPCR Mix II *2)

10.0 μl

25 μM each Primers

0.4 μl
2.0 μlTemplate
d.d.H2O＊2)防止処理を行うことがきます。（本品に UNG は含まれておりません。）
本製品は、パッシブリファレンス色素が予め添加されているため、各種リアルタイム PCR 装置で使用することが可能です。

up to

20.0 μl

本品に UNG は含まれておりません。UNG 処理を行う場合、別売の Uracil-DNA Glycosylase (UNG) (Code No. 31709041) をご利用いただけます。反応液に別途 UNG を添加し、酵素活性化ステップの前に UNG 処理ステップを設定してください。

＜推奨 PCR サイクル条件＞＊3), *4)

II. 保存－20℃ (遮光)

酵素活性化ステップ

95℃

10 min95℃

5 sec (or 15 sec) *5)

60℃

1 min

45 cycles

4℃保存(遮光)も可能ですが、その場合は１ヶ月以内にご使融解曲線解析用下さい。

III.

製品内容
試 薬

125 反応用

500 反応用

2 x GeneAce SYBR™
qPCR Mix II *1)

1.25 ml x 1 本

1.25 ml x 4 本＊1)

Hot-Start Gene Taq NT, dATP, dCTP, dGTP, dUTP,
Mg2+, SYBR™ Green I, Passive Reference Dye,Stabilizers を含んでいます。

IV.

注意

・ 化学修飾を施したホットスタート PCR 用酵素を用いている
ため、酵素活性化ステップ（95℃ 10min.）を必ず実施して下さい。
・ PCR サイクルは 2 ステップを推奨します。（V.使用例 参照）＊3)

プライマーの設計や鋳型 DNA 等により反応の至適条件が変わることがあります。

＊4)

推奨 Ramp rate 範囲は、2.63-4.4℃/sec（温度上昇速度）と 2.2-3.5℃/sec（温度下降速度）です。Thermo Fisher
Scientific 社製のリアルタイム PCR 装置を使用する際は、Standard mode ramp speed ではなく、「Fast mode」を選択してください。その際、初期設定から「推奨 PCR サイクル条件」に設定を変更してください。必ず酵素の活性化ステップ（95℃10 分間）が含まれていることを確認し、60℃の伸長時間を 1 分間にしてください。

＊5)

増幅鎖長が 200 bp 以上の場合は、サイクル内の変性時間を 5 sec から 15 sec に変更することを推奨します。なお、プライマー設計の際は、増幅鎖長が 500 bp を超えないようにしてください。増幅鎖長を 80-180 bp 程度にすることが最も望ましいです。

・ 使用時は、泡立てないように穏やかに転倒混和し、試薬を十分均一にしてからご使用下さい。
注）SYBR 商標は米国 Life Technologies Corporation のライセンスに基づき使用されています。

V.

使用例

ご使用の装置に対応した反応液量でご使用下さい。

本製品は、試薬（試験研究用）として販売しているものです。
医薬品の用途には使用しないでください。

株式会社ニッポンジーン

TEL 076-451-6548

FAX 076-451-6547

www.nippongene.com
CN2309

GeneAce SYBR™ qPCR Mix IIComponent

Volume [20 μl rxn]

GeneAce SYBR™ qPCR II is a convenient 2X premix for

2x GeneAce SYBR™ qPCR Mix II *2)

10.0 μlreal-time qPCR using SYBR™ Green I dye.

25 μM each Primers

0.4 μlThis product provides high specificity and reproducibility

Template

and allows for reducing non-specific amplification by using

d.d.H2OI.

Description

2.0 μlup to20.0 μl

optimized buffer components and Hot-Start Gene Taq NT,*2) UNG is not included in the GeneAce SYBR™ qPCR Mix II.

a chemically modified Taq DNA Polymerase.
This product contains dUTP and therefore carryover
contamination is prevented by adding UNG (This productdoes not contain UNG).
This product contains a unique passive reference dye thatis compatible across a variety of instrument platforms.

UNG can be purchased separately from Nippon Gene (Code No.
317-09041). If optional treatment with UNG is required, add UNG
to the reaction mixture (see the UNG manual).

Recommended thermal cycling conditions. *3), *4)
95°C

10 min95°C

5 sec (or 15 sec) *5)

II. Storage–20°C, protected from light.

60°C

1 min

This product should be protected from light. After thawing,

Melting curve analysis

the master mix may be stored at 4°C for up to one monthor returned to -20°C for long term storage.

III.

45 cycles*3) Optimal PCR condition depends on primer sequence andtemplate DNA and so on.

Components

2 x GeneAce SYBR™
qPCR Mix II *1)

Enzyme activation*4) Recommended ramp rates are 2.63-4.4°C/sec (up ramp) and
125 rxns

500 rxns

1.25 ml x 1

1.25 ml x 4

2.2-3.5°C/sec (down ramp). When using Thermo Fisher Scientificthermal cycler, we recommend selecting the “Fast mode” ramp

*1) It contains Hot-Start Gene Taq NT, dATP, dCTP, dGTP, dUTP,Mg2+, SYBR™ Green I, Passive Reference Dye, Stabilizers.

speed instead of Standard mode. Ensure that the cycling
program includes the initial 10 min 95ºC step required to activate
the DNA polymerase. Also, the extension time should be 1 min at60ºC.

IV.

Notes

・ The PCR must start with an initial 10 minutes*5) For PCR fragments <200 bp, this denature time is 5 sec.
For PCR fragments 200-500 bp, the denature time is 15 sec.

incubation at 95°C to activate the chemically

For optimal results, PCR products should be between 80-180 bp

modified hot-start Taq DNA polymerase.

and should not exceed 500 bp.

・ We recommend two-step cycling protocols. (See V.
Typical PCR protocol)
・ Always ensure that the product has been fully thawed
and mixed before use. Gently mix the mixtures without
creating bubbles.

V.

Typical PCR Protocol

Choose an appropriate total reaction volume, dependingon the instrument used.

NIPPON GENE CO., LTD.
www.nippongene.com

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