Trace Nutrients Research 34 : 94−101（2017）

原著

ラットにおける 5- フルオロウラシル（5-FU）誘発毒性に対する
カキ抽出物の効果
山崎之1），藤 澤西 堀

則紘2），佐々木 麻 衣1），山 口 ゆかり1），樅
頼 史1），松 井 博 之3），松 田 芳 和3）

山

貴

也1），

（1）株式会社新薬リサーチセンター＊，2）株式会社薬物安全性試験センター＊＊，3）日本クリニック株式会社＊＊＊）
（受付 2017 年 8 月 28 日，受理 2017 年 9 月 28 日）

Effects of oyster extract on 5-Fluorouracil (5-FU) induced toxicity in rat
Noriyuki Yamazaki1）, Hiro Fujisawa2）, Mai Sasaki1）, Yukari Yamaguchi1）, Takaya Momiyama1）, Yorifumi Nishihori1）, Hiroyuki Matsui3） and Yoshikazu Matsuda3）
1）
New Drug Research Center, Inc.
2）
Drug Safety Testing Center Co., Ltd
3）
Central Research Institute, Japan Clinic Co, Ltd.

Summary
Oyster (Crassostrea gigas) contains abundant nutritional elements, including glycogen, vitamine, zinc and taurine.
It is reported that oyster extract exhibited several physiological activities．In this study, the symptom relieving effectsof oyster extracts on 5-fluorouracil (5-FU) induced toxicity in rats was examined mainly on gastrointestinal toxicity
and myelotoxicity. Test groups were as follow, control, 5-FU, 5-FU and oyster extract (200 and 500 mg/kg/days).
Oyster extracts were administrated for 21 days in rats. 5-FU was administrated for 5 days after 14 days of oyster
extracts administrated. After termination of administration of oyster extracts, recovery period was established for 3days, and autopsy was performed.
No deaths were observed throughout the study period. Regarding body weight and food intake, significant reduction suppression and dose-dependent reduction tendency was observed. In the hematological examination, influence
was observed on the white blood cell count, red blood cell count, hemoglobin amount and hematocrit value due toadministration of 5-FU.
Evaluation of intestinal mucosa by histopathological examination, mucosal thickness, villous height and crypt thickness were dose - dependent or high trend without dose - dependence. In addition, a suppression tendency was also
observed for mucosal atrophy of the duodenum due to administration of 5-FU. From the above results, it was suggested that oyster extract is effective in alleviating gastrointestinal toxicity by 5-FU.

真牡蠣（学名：Crassostrea gigas）は，グリコーゲン，

して，癌細胞の RNA 機能障害および DNA 合成阻害によ

脂溶性・水溶性ビタミン，亜鉛およびタウリンなどを多くり制癌効果を発揮する。5-FU の副作用としては，消化管含有しており，食経験も長く，世界各地で食されている1）。

毒性，骨髄毒性が顕著であり，その毒性発現に酸化ストレ

2-4）

カキ抽出物に関しては，肝障害抑制作用 ，抗酸化作
3-8）スが関与することが知られている14）。

9）

用 ，血清亜鉛濃度増加作用 ，学習・記憶障害および
10）

11）

パーキンソニズムに対する作用 ，抗不安作用 ，グルタ4, 12-13）

チオン増加作用

今回，5-FU による副作用の発現に対するカキ抽出物の作用について，ラットを用いて，消化管毒性および骨髄毒性を指標として検討を行った。

などが報告されている。

全ての動物実験は，株式会社新薬リサーチセンターの動

5- フルオロウラシル（5-FU）は，長い間，制癌剤として使用されている化合物である。本剤は，葉酸拮抗物質と物倫理委員会の審議・承認を得た後に実施した。



所在地：北海道恵庭市戸磯452-1（〒061-1405）
所在地：埼玉県比企群吉見町黒岩25-1（〒355-0166）＊＊＊所在地：京都府京都市北区大将軍西町1（〒603-8331）＊＊＊― 94 ―

実験方法

6．検査項目
1）一般状態観察

1．被験物質，試薬および媒体

一般状態観察は，毎日行った。

カキ抽出物は，薄茶色～茶色の粉末であった。試薬とし
2）体重測定て，5- フルオロウラシル（5-FU，和光純薬工業㈱）およ

体重は，投与 1 週は週 3 回，投与 2 週は週 2 回，投与 3

び媒体として，注射用水（大塚蒸留水，㈱大塚製薬工場）を使用した。

週は週 7 回および剖検日に測定した。

2．使用動物

3）摂餌および摂水量測定
摂餌および摂水量は，投与 1 週は週 3 回，投与 2 週は週

5 週齢の Crl:CD（SD）（SPF）雄性ラットを日本チャー

2 回，投与 3 週は週 7 回および剖検日に測定した。

ルス・リバー㈱より入荷した。動物は入荷からカキ抽出物
投与開始日まで馴化した。ただし，入荷 7 日までの期間は

4）血液学的検査

検疫を行った。

投与 19 日（回復 1 日）および病理解剖学的検査時に採3．飼育条件血を行った。採取した血液で以下の項目を検査した。

動物は温度 22±3℃，湿度 50±20％，換気回数 13～17

白血球数，赤血球数，血色素量，ヘマトクリット値，平回／時間，照明時間 8：00～20：00（明 12 時間，暗 12 時

均赤血球容量，平均赤血球色素量，平均赤血球血色素濃度，間 ） の 環 境 下 で， ス テ ン レ ス 製 可 動 ラ ッ ク（1790W×

血小板数，好中球比率，リンパ球比率，単球比率，好酸球

470D×1650H mm） に 装 着 し た ス テ ン レ ス 製 金 網 2 連

比率，好塩基球比率，網状赤血球比率

ケ ー ジ の 1 区 画（255W×185D×200H mm） に 個 別 に 収5）病理解剖学的検査および器官組織の摘出容した。

採血後，腹大動脈からの放血により安楽死させ直ちに剖

飼料は固型飼料 CRF-1（オリエンタル酵母工業㈱）を，
飲料水は水道水を試験期間を通じ自由に与えた。排泄物の検を行った。頭部および胸腹部の器官・組織を肉眼的に観処理は，ケージ下に敷いた汚物受け皿に受け，汚物受け皿察した。摘出する器官・組織を下記に示した。
胃，十二指腸，空腸，回腸，盲腸，結腸，直腸，大腿を交換することにより処理した。

骨・脛骨（骨髄），脾臓，胸腺，精巣4．動物の選択および群分け6）器官重量の測定

検疫・馴化期間の一般状態観察において全例において異常が認められなかったことより，体重推移を基準に動物の摘出後，下記の器官の重量を測定した。

選択を行った。選択した動物は馴化期間終了時の体重によ脾臓，胸腺，精巣る層別連続無作為化法により各群に割り付けた。
7）骨髄総グルタチオン量測定

群構成表を Table 1 に示す。

左 大 腿 骨 お よ び 脛 骨 か ら 骨 髄 を 採 取 し，Total
5．カキ抽出物および 5-FU の投与

Glutathione Quantification Kit（㈱同仁化学研究所）を用い，総グルタチオン量を測定した。

カキ抽出物および 5-FU は，用時に注射用水に溶解または懸濁させて投与液とした。投与回数はカキ抽出物および5-FU 共に 1 日 1 回とし，投与期間はカキ抽出物は 21 日間，

8）骨髄塗抹検査

5-FU は 5 日間（カキ抽出物投与 14 日より 18 日まで）と

右大腿骨から骨髄を採取した。スライドグラス上に骨髄した。回復期間は 3 日間（投与 19 日（回復 1 日）から剖を均一に塗抹し，メイ・グリュンワルド−ギムザ染色を施検日（回復 3 日）まで）とした。

した。骨髄細胞の形態，骨髄細胞を計数し，骨髄細胞千分

Table 1  Test group of experiments
Group
Control
5-FU
5-FU+oyster extract low dose
5-FU+oyster extract high dose

Dose (mg/kg/day)
Oyster extract

5-FU

0a）
0a）
200
500

0a）
30
30
30

a): Distilled water was administrated.
― 95 ―

No. of animals
6666率（顆粒球系細胞，赤芽球系細胞およびその他細胞）およ

例に認められた。5-FU+ カキ抽出物投与群では，糞量減

び M/E 比を算出した。

少の抑制が認められた。また，全身被毛の光沢の消失および肛門部被毛の汚れが 5-FU および 5-FU+ カキ抽出物投9）病理組織学的検査

与群に散見された。

全例の十二指腸，空腸および回腸について，ヘマトキシ
2．体重

リン ･ エオジン染色を行い，腸管粘膜の厚さおよびその他

結果を Fig. 1 に示した。

所見について観察した。

対照群と 5-FU 投与群間では，5-FU 投与群で，投与 17
7．統計処理～20 日および剖検日に有意な低値が認められた。

統計処理は統計ソフト SPSS 14.0J（SPSS Inc.）を用い

5-FU 群とカキ抽出物投与各群間については，5-FU+ カて行った。有意差検定は，対照群と各投与群，5-FU 投与

キ抽出物高用量群において投与 18～20 日および剖検日に群と 5-FU+ カキ抽出物投与群間で行った。

有意な高値が認められた。

体重，摂餌量，摂水量，白血球型別百分率を除く血液学
3．摂餌・摂水量的検査，器官・組織の重量と相対重量，骨髄総グルタチオ

摂餌量については，対照群と 5-FU 投与群間については，ン量，骨髄塗抹検査の M/E 比および病理組織学的検査の5-FU 投与群で，5-FU 投与期間中および剖検日に有意な低腸管粘膜の厚さについては，Bartlett 法により等分散性の検定を行い，等分散の場合は更に一元配置分散分析を行い， 値が認められた。5-FU 群とカキ抽出物投与各群間については，5-FU 投与期間中に有意な高値が認められた。

有意な場合は Dunnett 法により平均値の比較を行った。
不等分散の場合は Kruskal-Wallis の H 検定を行い，有意摂水量については，対照群と 5-FU 投与群間において投な場合は Dunnett 法により平均順位の比較を行った。血

与 18 日に有意な減少が認められた。5-FU 群とカキ抽出物

液学的検査の白血球型別百分率および骨髄塗抹検査の骨髄投与各群間には影響は認められなかった。

細胞千分率については，Kruskal-Wallis の H 検定を行い，4．血液学的検査

有意な場合は Dunnett 法により平均順位の比較を行った。

結果を Table 2 および 3 に示した。

有意水準は Bartlett 法，一元配置分散分析，Kruskal-

対照群と 5-FU 投与群間では，回復 1 日および剖検日で，Wallis の H 検定では危険率 5% とした。Dunnett 法では網状赤血球数および白血球数の有意な低値，平均赤血球血危険率 5％および 1％とした。

色素濃度の有意な高値が認められた。上記に加え，回復 1

結果日目では，赤血球数，血色素量，ヘマトクリット値，好酸球比率の有意な高値が，剖検日では，リンパ球比率の有意

1．一般状態観察

な高値，単球比率および血小板数の有意な低値が認められた。

試験期間を通じ，対照，5-FU，5-FU+ カキ抽出物投与

5-FU 投与群とカキ抽出物投与群間では，回復 1 日目で群に死亡は認められなかった。

低用量群において白血球数の有意な高値が認められ赤血球

一般状態観察では，糞量減少が 5-FU 投与群において全500

Body Weight (g)

400
*
**

300

*, #

200

**
**

**, #

##

**
**

*
**

Control
5-FU

100
0

**, #

**
**

5-FU+low dose
5-FU+high dose

0

1

3

7

10

14

15

16

17

Treated with 5-FU

18

19

20

21

Autopsy

Recovery period

Fig. 1  Body weight changes of rats treated concomitantly with Oyster extract powder and 5-Fluorouracil
Each value represents mean ± SE from 6 rats.
*, **: Significantly different from control group at p < 0.05 and 0.01, respectively.
#, ##: Significantly different from 5-FU group at p < 0.05 and 0.01, respectively.
― 96 ―

数，血色素量およびヘマトクリット値の用量依存的な低値

6．器官重量対照群と 5-FU 投与群間では，胸腺および脾臓について，傾向が認められた。

絶対重量および相対重量とも有意な低値が認められた。
5．病理解剖学的検査

5-FU 投与群とカキ抽出物投与群間については，有意な変主な所見として，全身被毛の光沢の消失が 5-FU 群にお動は認められなかった。

い て 4 例，5-FU+ カ キ 抽 出 物 低 用 量 群 に お い て 3 例，
5-FU+ カキ抽出物高用量群において 2 例，胸腺小型化が7．骨髄総グルタチオン量

5-FU，5-FU+ カキ抽出物低用量および 5-FU+ カキ抽出物

結果を Table 4 に示した。

高用量群において各 6 例認められた。

対照群と 5-FU 投与群間では，5-FU 投与群で，骨髄総Recovery period (Day 1)
5-FU + test substance

5-FU + test substance

Group
5-FU
Table 2  Hematologyof rats treated concomitantlyControl
with Oyster extract
powder and 5-Fluorouracil(Recovery
period day 1)
low dosehigh dose
No. of animals
4

Erythrocytes

Group

Reticulocytes
Hemoglobin(×10 /L)
(%)

6

6

13**
5-FU907+ test± substance
0.28
0.02**
low±dose

9*5-FU892+ test± substance
0.31
0.02*
high±dose

16.7 ±6 0.2
48.6
832 ±
± 0.7
21
58.5
±
5.09 ± 1.1
0.34

18.9 ±6 0.5**
52.9
929 ±
± 1.1**
18**
57.0±
0.26 ± 0.6
0.05**

(×10
/L)
(fL)

2

156.5
58.5 ±± 16.81.1

50.3
57.0 ±± 1.6**
0.6

##
70.8
57.1 ±
± 4.3
0.7

35.9
50.0 ±± 0.2**
0.7
58.1
56.1 ±± 3.5**
0.6(pg)

20.1 ± 0.4
1.0 ±
34.4
± 0.2
0.3
16.4
±
156.5 ± 1.6
16.8

20.3 ± 0.2
2.1 ±
35.6
± 0.3*
0.2**
26.1±
50.3 ± 5.4
1.6**

20.3 ± 0.3
1.7 ±
35.6
± 0.3
0.1**
30.9
±
70.8 ± 3.2*
4.3 ##

20.2 ± 0.2
2.6 ±
35.9
± 0.6*
0.2**
28.3±
58.1 ± 2.9
3.5**

4.9
1.0 ±
± 0.7
0.2
77.7
16.4 ±
± 2.2
1.6
101.5
0.0 ±
± 3.8
0.0

2.6
2.1 ±
± 0.4
0.3*
69.2
26.1 ±
± 5.3
5.4
77.7
0.0 ±
± 7.9
0.0

2.7
1.7 ±
± 0.3
0.3
64.7
30.9 ±
± 3.2
3.2*
98.4
0.0 ±
± 7.3
0.0

3.6
2.6
65.5
28.3
78.7
0.0

4.9 ± 0.7

2.6 ± 0.4

2.7 ± 0.3

3.6 ± 0.7

Lymphocytesdifferent from control group at p<0.05 and 0.01,
77.7respectively.
± 2.2* , ** : Significantly

69.2 ± 5.3

64.7 ± 3.2

65.5 ± 3.2

4Platelets## : Significantly
different from 5-FU group at(×10p<0.01.
/L)

77.7 ± 7.9

98.4 ± 7.3

78.7 ± 7.7

No. of animals

Hematocrit
Erythrocytes
MCV
Reticulocytes
MCH
Hemoglobin
MCHC
Hematocrit

Leukocytes
MCV
Differential count of leukocytes (%)
MCH
Eosinophils
MCHC
Neutrophils
Leukocytes(g/dL)

6
6
Recovery
period (Day 1)
832 ± 21929 ± 18**
Control
5.09± 0.340.265-FU± 0.05**

4(%)(×10 /L)
(fL)
(%)

(pg)
(g/dL)
(%)
(%)

(%)
2

Basophilscount of leukocytes (%)
Differential
Monocytes
Eosinophils

Lymphocytes
Neutrophils
Platelets
Basophils(×10 /L)

4(×10 /L)

Monocytes
Each value
represents mean ± SE.

20.1
16.7 ±
± 0.4
0.2
34.4
48.6 ±± 0.3
0.7

0.0 ± 0.0

101.5 ± 3.8

20.3
18.9 ±
± 0.2
0.5**
35.6
52.9 ±± 0.2**
1.1**

0.0 ± 0.0

18.4 ±6 0.2**
51.8
907 ±
± 0.7*
13**
57.1±
0.28 ± 0.7
0.02**
20.3
18.4 ±
± 0.3
0.2**
35.6
51.8 ±± 0.1**
0.7*

0.0 ± 0.0

18.0 ±6 0.3*
50.0
892 ±
± 0.7
9*

56.1
0.31 ±
± 0.6
0.02*
20.2
±
18.0 ± 0.2
0.3*

0.0 ± 0.0

±
± 0.7
0.6*
±
± 3.2
2.9
±
± 7.7
0.0

Each value represents mean ± SE.
* , ** : Significantly different from control group at p<0.05 and 0.01, respectively.

## : Significantly
different from 5-FU ofgroupat p<0.01.
Table
2 Hematology
ratstreated concomitantly with Oyster extract powder and 5-Fluorouracil(Recovery period day 1)
Table 3  Table
2 Hematology
Hematology
rats treatedconcomitantly
Oysterpowder and5-Fluorouracilof ratsoftreatedconcomitantlywith Oyster withextract
powderextract
and 5-Fluorouracil(Autopsyday)(Recovery period day 1)
Group

Control

No. of animals
4

Erythrocytes
Reticulocytes

Group

Hemoglobin

No. of animals

Hematocrit
Erythrocytes
MCV
Reticulocytes
MCH
Hemoglobin
MCHC
Hematocrit

Leukocytes
MCV
Differential count of leukocytes (%)
MCH
Eosinophils
MCHC
Neutrophils
Leukocytes

Basophilscount of leukocytes (%)
Differential
Monocytes
Eosinophils

Lymphocytes
Neutrophils
Platelets
Basophils

Recovery period (Autopsy day)(×10 /L)(%)(g/dL)

6 period (Autopsy day) 6
Recovery772 ± 19824 ± 17
Control
4.31± 0.240.325-FU± 0.03**14.6 ±6 0.1
44.1
772 ±
± 0.3
19
57.3
±
4.31 ± 1.4
0.24

15.9 ±6 0.3
45.6
824 ±
± 0.7
17
55.4
±
0.32 ± 0.7
0.03**

(×10
/L)
(fL)

91.5
57.3 ±± 12.91.4

28.5
55.4 ±± 10.5**0.7(pg)

19.0 ± 0.4
0.7 ±
33.2
± 0.1
0.2
12.8
±
91.5 ± 1.8
12.9
2.3
0.7
84.2
12.8

(%)
4
(×10 /L)
(fL)
(%)
(pg)
(g/dL)
(%)
(%)
2

(%)
2

(×10 /L)

4(×10 /L)

Monocytes
Each value
represents mean ± SE.

19.0
14.6 ±
± 0.4
0.1
33.2
±
44.1 ± 0.2
0.3

4(×10 /L)

19.3
15.9 ±
± 0.2
0.3
34.9
±
45.6 ± 0.1**
0.7

5-FU + test substance

5-FU + test substancelow dosehigh dose

66

13
5-FU837+ test± substance
0.52
0.19*
low±dose

15
5-FU815+ test± substance
0.38
0.08**
high±dose

16.0 ±6 0.1**
46.3
837 ±
± 0.2
13
55.4
±
0.52 ± 0.9
0.19*
19.2
16.0 ±
± 0.3
0.1**
34.6
±
46.3 ± 0.2**
0.2

15.5 ±6 0.4
44.9
815 ±
± 1.0
15

55.0
0.38 ±± 0.7
0.08**
19.0±
15.5 ± 0.2
0.4

34.5
55.4 ±± 6.0**
0.9

34.5
44.9 ±± 0.3**
1.0
28.1±
55.0 ± 5.8**
0.7

19.3 ± 0.2
0.7 ±
34.9
± 0.3
0.1**
5.6
±
28.5 ± 2.8
10.5**

19.2 ± 0.3
0.6 ±
34.6
± 0.2
0.2**
3.3
±
34.5 ± 1.1
6.0**

19.0 ± 0.2
0.5 ±
34.5
± 0.2
0.3**
1.5
±
28.1 ± 0.4**
5.8**

±
± 0.4
0.1
±
± 2.3
1.8

0.5
0.7 ±
± 0.2**
0.3
93.2±
5.6 ± 2.9*
2.8

0.9
0.6 ±
± 0.2
0.2
95.2
±
3.3 ± 1.2
1.1

66.9
0.0 ±
± 6.3**
0.0

0.7
0.5
97.3
1.5
56.5
0.1

2.3 ± 0.4

0.5 ± 0.2**

0.9 ± 0.2

0.7 ± 0.2*

93.2 ± 2.9*

95.2 ± 1.2

97.3 ± 0.4**

46.4 ± 11.1**

66.9 ± 6.3**

56.5 ± 9.3**

0.0 ± 0.0

110.2
0.0 ±
± 3.2
0.0

Lymphocytesdifferent from control group at p<0.05 and 0.01,
84.2respectively.
± 2.3* , ** : Significantly
Platelets

5-FU

110.2 ± 3.2

0.0 ± 0.0

46.4
0.0 ±
± 11.1**0.0

0.0 ± 0.0

0.1 ± 0.1±
± 0.2*
0.2±± 0.4**
0.4**±± 9.3**
0.1

Each value represents mean ± SE.
* , ** : Significantly different from control group at p<0.05 and 0.01, respectively.
― 97 ―

Table 3 Hematology of rats treated concomitantly with Oyster extract powder and 5-Fluorouracil(Autopsy day)

グルタチオン量について，有意な低値が認められた。

陰窩の厚さに有意な高値が認められた。空腸については，

5-FU 投与群とカキ抽出物投与群間では有意な変動は認め

粘膜の厚さおよび絨毛高に有意な低値が認められた。回腸られなかった。

については有意な変動は認められなかった。

8．骨髄塗抹検査

腸および空腸ともに，粘膜の厚さ，絨毛高および陰窩の厚5-FU 投与群とカキ抽出物投与群間については，十二指さに用量依存的な高値傾向又は用量依存を伴わない高値傾対照群と 5-FU 投与群間で，有意な変動は認められな向が認められた。

かった。5-FU 投与群とカキ抽出物投与群間についても同様であった。

2）病理所見
9．病理組織学的検査

対照群と 5-FU 投与群間では，十二指腸および空腸とも，
粘膜萎縮，粘膜上皮の変性・剥離，粘膜固有層の浮腫が認結果を Table 5，Photo 1～4 に示した。

められた。
1）腸管粘膜の厚さ Group

5-FU + test substance

5-FU + test substance

5-FU 投与群とカキ抽出物投与群間については，十二指5-FU
low dosehigh dose

Control

腸の粘膜萎縮に抑制傾向が認められた。
6
6

対照群と 5-FU No.
投与群間では，5-FU投与群で，十二指6of animals
Bone marrow total GSH(nmol/mg tissue)
2.80 ± 0.19
腸については，粘膜の厚さおよび絨毛高に有意な低値が，1.37 ± 0.17**

1.61 ± 0.19**

6

1.26 ± 0.23**

Each value represents mean ± SE.
** : Significantly different from control group at p<0.01.

Table 4  Bone marrow total glutathione of rats treated concomitantly with Oyster extract powder and 5-Fluorouracil
5-FU + test substance

5-FU + test substancelow dosehigh doseGroup

Control

5-FU

No. of animals

6

6

6

6

2.80 ± 0.19

1.37 ± 0.17**

1.61 ± 0.19**

1.26 ± 0.23**

Bone marrow total GSH(nmol/mg tissue)

Table 4 Bone marrow total glutathione of rats treated concomitantly with Oyster extract powder
Each value represents mean ± SE.

** : Significantly
different
from control group at p<0.01.
and
5-Fluorouracil

Table 5  Histopathology of rats treated concomitantly with Oyster extract powder and 5-Fluorouracil

Table 4 Bone marrow total glutathione of rats treated concomitantly with
Oyster5-FU +test
substanceextract
5-FU powder+test substanc
TissueFindingand 5-Fluorouracil

Group

Grade
Duodenum

Tissue

6

－

±

＋

++

+++

－

±

6

Degeneration and desquamation of the mucosal epithelium

6

1

2

Dilatation of the glandular spaces

6

5

1

Edema in the lamina propria

6

3

2

Crypt hyperplasia

6

6

＋

++

3
2

+++

±

＋

++

3

1

2

2

1

1

2

2

2

1

1

4
2

7.83 Control± 0.21

6.58 5-FU± 0.24 *

5.46

3.38

-1

Mean±S.E.
No. of animals
Grade Mean±S.E.

－ 3.21
±

2

2

1

1

6
4

4
2
5-FU +test substance
7.50 ± 0.34
low dose235-FU +test substanc
7.67 ± 0.40
high dose

1

2

22

31

2

1

2

51

31

2

22

12

3

2

2

32

3

11

11

2

34

66

65

1

66

13

22

31

Crypt
Crypt hyperplasia
hyperplasia

66

2

44

2

4.08

1

66
44
2

4.13

± 0.406±＋ 0.20
++

66
34
12

31

1

2

42

3

Mean±S.E.
Mean±S.E.

5.00
7.83 ±± 0.13
0.21

**
2.50
6.58 ±± 0.180.24 ***
3.08
7.50 ±± 0.270.34

3.08
7.67 ±± 0.150.40

Mean±S.E.
Mean±S.E.

3.71
5.46 ±± 0.10
0.16

**
1.29
3.38 ±± 0.180.15 ****
1.75
4.08 ±± 0.250.37 *

1.54
4.13 ±± 0.140.40

Mean±S.E.
Mean±S.E.

1.29
2.38 ±
0.09± 0.04

1.21
3.21 ±
0.10 **± 0.081.33
3.42 ±
0.12 **± 0.05

MucosalMucosal atrophy
atrophy66

6Degeneration
Degeneration andand desquamation
desquamation ofof thethe mucosal
mucosal epithelium
epithelium

66

5Dilatation
Dilatation ofof thethe glandular
glandular spaces
spaces

66

66

11

1

3

2

3

2

5

1

2

3

5

12

1

3

1

66

1.54
3.54 ±
0.20± 0.10
6

5

6

3

3

66

Edema
Edema inin thethe lamina
lamina propria
propria

66

41

12

13

34

21

11

Crypt
Crypt hyperplasia
hyperplasia

66

1

42

14

1

32

23

-1

1

2

33

Edema
Edema inin thethe lamina
lamina propria
propria-1
HeightHeight ofof villus
villus (×10
(×10 mm)mm)-1-1
Thicknessmm)
Thickness ofof crypt
crypt (×10
(×10 mm)2

22

Dilatation
Dilatation ofof thethe glandular
glandular spaces
spaces

-1

1

13
1

-1
Thicknessmm)
Thickness ofof mucosa
mucosa (×10
(×10 mm)++

2－ 3.54
±

66

-1

＋

± 0.37 *6**±＋ 0.12++ +++

66-1
HeightHeight ofof villus
villus (×10
(×10 mm)mm)-1-1
Thickness
of
crypt
(×10
Thickness of crypt (×10 mm)
mm)±－ 3.42±

Degeneration
Degeneration andand desquamation
desquamation ofof thethe mucosal
mucosal epithelium
epithelium-1－± 0.15 **6**±＋ 0.10++ +++

MucosalMucosal atrophy
atrophy

12

+++

6

Group Mean±S.E.

－ 2.38
±

6

－

1
4

± 0.16
6±＋ 0.09++ +++

high dose

low dose-1

Thickness of mucosa (×10 mm)-1
Height of villusFinding(×10 mm)-1
Thickness
Thickness ofof mucosa
mucosa (×10
(×10 mm)mm)

Ileum
Jejunum

5-FU

6Mucosal atrophy

Thickness of crypt (×10 mm)
Jejunum
DuodenumControl

No. of animals

1

43

23

1

52

4

Mean±S.E.
Mean±S.E.

3.50
5.00 ±± 0.130.13

3.25
2.50 ±± 0.250.18 **

2.92
3.08 ±± 0.200.27 **

3.08
3.08 ±± 0.150.15

Mean±S.E.
Mean±S.E.

2.08
3.71 ±
0.10± 0.11

2.00
1.29 ±
0.18 **± 0.13*1.67
1.75 ±
0.25 **± 0.081.75
1.54 ±
0.14± 0.06

Mean±S.E.
Mean±S.E.

1.42
1.29 ±± 0.050.04

1.25
1.21 ±± 0.140.08

1.25
1.33 ±± 0.130.05

Mucosalatrophy*Ileum, ** : Significantly
different
from control group at p<0.05 and 0.01, respectively. 6

6# : Significantly different
from 5-FU
group at p<0.05.
Degenerationand desquamationof the mucosal epithelium

5

6

1

－:spaces
Grade of histopathologicalno remarkable changes, ±: minimal, 6 ＋: slight, ++: moderate, 6+++: severe
Dilatationfindingsof the glandular

5

1

5

1

1.33
1.54 ±± 0.11
0.10
6
6

6

6

Edema in the lamina propria

6

4

1

1

3

2

1

4

2

Crypt hyperplasia

6

1

4

1

1

3

2

1

5

3.25

±

0.25

2.92

±

0.20

3.08

±

0.15

1.25

±

0.14

1.25

±

0.13

1.33

±

0.11

-1

Mean±S.E.

―
3.50― ±980.13-1

Mean±S.E.

1.42

Thickness of mucosa (×10 mm)

Table 5 HeightHistopathologyof rats
treated2.08 concomitantly
1.75 ± and
0.06
Mean±S.E.
± 0.112.00 with± 0.13 Oyster
1.67 extract± 0.08 * powderof villus (×10 mm)-1

Thickness of crypt (×10 mm)

5-Fluorouracil* , ** : Significantly different from control group at p<0.05 and 0.01, respectively.

±

0.05

Photo 1Control
Noremarkablechanges.
Thickness of mucosa (8.00×10−1mm), height of villus (5.50×10−1mm) and
thicknessofcrypt(2.50×10−1mm)

Photo 25-FU
Mucosal atrophy (moderate), degeneration and desquamation of the mucosal
epithelium(slight),edemainthelaminapropria(minimal)andcrypthyperplasia(slight).
Thickness of mucosa (6.00×10−1mm), height of villus (3.00×10−1mm) and
thicknessofcrypt(3.00×10−1mm).

Photo 35-FU+oysterextractlowdose
Mucosalatrophy(minimal),degenerationanddesquamationofthemucosalepithelium(minimal)andcrypthyperplasia(slight).
Thickness of mucosa (7.50×10−1mm), height of villus (4.25×10−1mm) and
thicknessofcrypt(3.25×10−1mm).

Photo 45-FU+oysterextracthighdose
Mucosalatrophy(slight)andcrypthyperplasia(moderate).
Thickness of mucosa (8.00×10−1mm), height of villus (4.25×10−1mm) and
thicknessofcrypt(3.75×10−1mm).

PhotoDuodenummacroscopyofratstreatedconcomitantlywithOysterextractpowderand5-Fluorouracil

考察

報告している。一方，5- フルオロウラシル（5-FU）は制癌剤として長年にわたって使用されているが，種々の重篤真牡蠣（学名：Crassostrea gigas）は，グリコーゲン，

な副作用が問題となっている。5-FU の毒性発現について

脂溶性・水溶性ビタミン，亜鉛およびタウリンなどを多く

は，酸化ストレスも関与しており，毒性の軽減にグルタチ含有している1）。その真牡蠣を原材料としたカキ抽出物は， オンが有効であることも知られている14）。
これまでに，様々な機能性を有することが報告されており，以上のことから，今回，5-FU による副作用の発現に対

その作用機序のひとつとして，グルタチオン増加作用が考するカキ抽出物の作用について，ラットを用いて，消化管えられている。春松ら4）は，ラットのアセトアミノフェン

毒性および骨髄毒性を指標として検討を行った。

誘発肝障害モデルにおいて，カキ抽出物の投与が肝障害の群 構 成 に つ い て は， 対 照，5-FU，5-FU+ カ キ 抽 出 物

抑制作用を示し，肝臓中のグルタチオンが有意に増加する（200 および 500mg/kg/day）の計 4 群を設定した。カキことを報告している。更に，ラット海馬においても，カキ抽出物は，6 週齢より剖検日前日までの 21 日間経口投与

抽出物の投与で，グルタチオン含量が増加することも報告を行った。5-FU の投与量は，30mg/kg/day に設定し，されている12-13）。鈴木ら10）は，カキ抽出物が，学習・記憶

カキ抽出物投与開始 14 日目より 5 日間経口投与を行った。

能力の改善およびパーキンソニズム症状の緩和作用を示し， 5-FU 投与期間終了後，回復期間を 3 日間設けた。なお，
その機序として，酸化ストレスの軽減が考えられることを

剖検日は回復期間 3 日目とした。

― 99 ―

試験期間を通じ，死亡は認められなかった。一般状態観誘発された酸化ストレスのグルタチオンにおける消去であ察では糞量減少が 5-FU 投与群と比較し，カキ抽出物投与

り，今回の結果が制癌作用に対して影響を及ぼす可能性は群で用量依存的な抑制傾向が認められた。体重および摂餌少ないことが推察された。

量では，5-FU 群と比較し，カキ抽出物投与群で用量依存以上の結果より，カキ抽出物と 5-FU を併用投与するこ的な減少抑制が認められた。摂餌量の変化は，5-FU によとにより，5-FU の消化管毒性が軽減されることが示唆さる消化管毒性の軽減の可能性が，糞量減少の抑制傾向およれた。

び体重の変化は，摂餌量の変化に伴う 2 次的変化の可能性

参考文献が考えられた。摂水量では，明確な差は認められなかった。
血液学的検査では，5-FU 投与群で，網状赤血球数，白
血球数，血小板数および単球比率の低値，平均赤血球血色

1）杉田浩一，平宏和，田島眞，安井明美，日本食品大事

素濃度，赤血球数，血色素量，ヘマトクリット値，好酸球

典，医歯薬出版株式会社，東京：pp. 415-416（2008）．

比率およびリンパ球比率の高値が認められた。これに対し

2）久保道徳，松田秀秋，田村崇子，高津正雄（1980），て，カキ抽出物投与群では，低用量群において白血球数のバ ラ ン ス タ ー［ カ キ Crassosfrea gigas（THUN-

有意な高値が認められ，赤血球数，血色素量およびヘマト

BERG）の肉エキス］の実験的肝障害に対する予防おクリット値の用量依存的な低値傾向が認められた。これら

よび肝機能改善作用，基礎と臨床，14，1437-1442．

の変化は，脱水による血液の濃縮に起因する 5-FU 投与群

3）藤澤紘，竹原功，西堀頼史，矢野夕幾，山崎則之，松の相対的増加の可能性が示唆された15）。しかし摂水量に明

井博之，松田芳和，福原育夫（2012），カキ肉エキス

確な差は認められなかったことから，消化管毒性の軽減に

12 週間摂取の軽度アルコール性肝障害をもつヒトボ

伴い消化管機能が維持されていたことにより用量依存的な

ランティアの肝機能への影響，微量栄養素研究，29，
13-17．

低値傾向を示したものと考えられた。
病理組織学的検査および器官重量，骨髄総グルタチオン

4）春松慎，福田卓，松井博之，松田芳和（2013）カキ肉

量および骨髄塗抹検査では，意義のある差および傾向は認エキスのアセトアミノフェンによる肝障害抑制作用の検討，30，41-43．

められなかった。
病理組織学的検査の腸管粘膜の厚さでは，5-FU 投与群

5）T Yoshikawa, Y Naito, K Masui, T Fujii, Y Boku,

で，十二指腸および空腸について，粘膜の厚さおよび絨毛S Nakagawa, N Yoshida, M Kondo（1997），Free

高に有意な低値が認められ，十二指腸ではさらに，陰窩のradical-scavenging activity of Crassosfrea gigas ex-

厚さに有意な高値が認められた。以上の変化に対して，カtract (JCOE)，Biomed Pharmacother, 51, 328-332.

キ抽出物投与群については，粘膜の厚さ，絨毛高および陰6）Gate L, Schultz M, Walsh E, Dhalluin S, Nguyen

窩の厚さに用量依存的な高値傾向又は用量依存を伴わない

Ba G, Tapiero H, Tew KD（1998），Impact of di-

高値傾向が認められた。病理所見については，5-FU 投与

etary supplement of Crassosfrea gigas extract

群で，十二指腸および空腸とも，粘膜萎縮，粘膜上皮の変(JCOE) on glutathione levels and glutathione

性・剥離，粘膜固有層の浮腫が認められた。この変化に対

S-transferase activity in rat tissue., In vivo 12,299-303.

して，カキ抽出物投与群については，十二指腸の粘膜萎縮に抑制傾向が認められた。上記の病理組織学的検査におけ

7）Tapiero H, Gate l, Dhalluin S, Nguyen Ba G,

る腸管粘膜の厚さおよび十二指腸の粘膜萎縮の傾向から，

Soupramanien V, kouyate J, Tew KD (1998)，The

消化管粘膜の障害が用量依存的に軽減されていることが示

antioxidant effects of Crassosfrea gigas extract

された。

(JCOE) on human volunteers., In vivo 12, 305-309.

糞量減少，体重，摂餌量，血液学的検査における赤血球

8）Tapiero H, Tew KD (1996), Increased glutathione

数，血色素量およびヘマトクリット値，病理組織学的検査

exin cells induced by Crassosfrea gigas extractの変化を包括すると，消化管毒性の軽減はカキ抽出物投与(JCOE). Biomed Pharmacother, 50, 149-153.

に起因する変化という結論に至った。その消化管毒性軽減

9）安部麻美子，松田芳和，小邨奈美，吉田宗弘（2010），の機序については，Gate ら16）の報告によるとかき抽出物

カキ肉エキスを投与したラットの血清亜鉛濃度の変化，投与により小腸におけるグルタチオン値に有意な高値が認

微量栄養素研究，27，56-59．

14）

め ら れ て い る。 ま た，Numazawa ら の 報 告 に よ る と

10）鈴木孝太郎，野々村徹，山崎則之，高橋尚彰，松井博

5-FU により酸化ストレスが誘導されることが示されてい之，松田芳和，マウスを用いたカキ肉エキス抽出物のる。以上のことを踏まえると，5-FU により誘発された酸

学習・記憶能力およびパーキンソニズムに対する作用

化ストレスがグルタチオンの抗酸化力により消去され，その評価，微量栄養素研究，30，48-51．

の結果として消化管毒性が軽減された可能性が考えられた。 11）増澤徹，松井博之，松田芳和，朝戸めぐみ，池田弘子，
なお。5-FU の制癌作用メカニズムは葉酸拮抗作用であり，亀井淳三（2012），マウスを用いたカキ肉エキス含有

本検討で示唆された消化管毒性軽減の機序は 5-FU による食品の抗不安作用に関する評価，微量栄養素学会誌，― 100 ―

suppression in Mice. Basic Clin pharmacol Toxicol.

29，7-12．

2011; 108: 40-5.

12）西堀頼史，鈴木陽子，岸浪昌礼，藤澤紘，永岡茂樹，
山崎則之，松井博之，松田芳和（2011），カキ抽出エ

15）西崎統，村上純子編．2．血液検査．In：検査値の読

キスパウダーの安全性および機能性に関する報告，微み方・考え方 専門医からのアドバイス．東京：総合量栄養素学会誌，28，40-44．

医学社；2008．p. 32-56．

13）福田卓，春松慎，松井博之，松田芳和（2012），カキ

16）Gate L, Schultz M, Walsh E, Dhalluin S, Nguyen

肉エキスによるラット海馬中総グルタチオン増強効果，

Ba G, Tapiero H, et al. Impact of dietary supple-

微量栄養素学会誌，29，106-109．

ment of Crassostrea gigas extract (JCOE) on gluta-

14）Numazawa S, Sugihara K, Miyake S, Tomiyama H,
Hida A, Hatsuno M, et al. Possible Involvement of
Oxidative Stress in 5-Fluorouracil-Mediated Myelo-― 101 ―

thione levels and glutathione S-transferase activity
in rat tissues. In Vivo. 1998; 12: 299-303.