昭和47年10月30日学術刊行物認可289号 令和2年12月31日発行（年6回発行）

2020
December Vol. 63 No. 6
J‐STAGE https://www.jstage.jst.go.jp/browse/shikahozon/‐char/ja承前啓後～未来へつなぐ歯科保存学～

日本歯科保存学会 2021 年度春季学術大会（第 154 回）大会長
鹿児島大学大学院医歯学総合研究科 先進治療科学専攻
顎顔面機能再建学講座 歯科保存学分野
西谷 佳浩

このたび，日本歯科保存学会 2021 年度春季学術大会（第 154 回）を開催させていただくことになりました．2021 年 6 月 10 日，11 日の日程で，会場は川商ホール（旧 鹿児島市民文化ホール）を予定しています．
新型コロナウイルスの影響により開催形式については予断を許さない状況ではありますが，鹿児島大学大学院医歯学総合研究科顎顔面再建学講座歯科保存学分野の教室員および関係者一同，皆様を鹿児島にてお迎えできますことを大変楽しみにしております．

歯を保存することを使命として，修復・歯内・歯周の 3 領域からなる特徴をもつ日本歯科保存学会は，すでに 65 年の歴史を有する学会であり，この間には多数の「歯の保存」スペシャリストが学会を構成すると同時に，次世代の人材育成も行われて継続的に国民の健康増進に貢献しながら発展しています．その伝統ある

日本歯科保存学会の第 154 回目の学術大会を主管開催させていただくにあたり，大会のテーマを「承前啓後～
未来へつなぐ歯科保存学～」といたしました．

本大会では，シンポジウム，教育講演，認定研修会，学会主導型プログラム，口頭およびポスター形式での一般発表を予定しております．

シンポジウムでは，日本歯科保存学会で将来活躍する次世代の人材育成にフォーカスした「歯科保存治療に携わる人材のキャリアプランニング」をテーマとして，岡山大学病院総合歯科 鳥井康弘先生に座長をお願いしました．また，鹿児島県は有人離島人口数が日本一であり，他県にはない規模での離島巡回歯科診療が毎年行われ，そのなかで保存治療も重要な役割を果たしています．この鹿児島県で実施される離島巡回歯科
診療の現状および今後の展望にフォーカスしたシンポジウム「離島歯科巡回診療の現状と将来」について，
鹿児島大学大学院咬合機能補綴学分野 南弘之先生に座長を依頼しています．

さらに本学会では学会主導型プログラムを企画していただき，イタリアの Gianluca Plotino 教授に「TheIdeal Instrument for Root Canal Preparation」のタイトルでご講演いただく予定です．

学会の開催にあたりましては，新型コロナウイルス感染症拡大予防策を徹底して講じます．皆様にもご協力いただきながら，学会の開催方法についても「未来へつなぐ」べく，新たな様式を提案することになりそうです．

大会開催地の鹿児島は，世界有数の活火山である桜島や指宿の砂蒸し風呂，霧島温泉，屋久島や奄美大島

等，豊かな自然に囲まれています．特に桜島は市街地から約 4 キロメートルに位置し，市街地からは 24 時間
運航している桜島フェリーを使うと約 15 分で渡ることができます．さらには幕末・明治時代を中心とした歴史的名所など，見どころが多数あります．また鹿児島は，黒毛和牛・豚・鶏の飼養数，鰻の養殖数，サツマ
イモ収穫量などが全国一位など農業も盛んで，周囲を海に囲まれ新鮮な魚介も豊富です．学会へお越しになられた際には，ぜひ鹿児島のグルメもお楽しみいただければと思います．

現地開催を予定しておりますが，新型コロナウイルス感染拡大の状況によって，開催形式が変更となる場

合もございます．来年 6 月の鹿児島にて皆様とお目にかかれますことを，スタッフとともに楽しみにしております．多数のご参加を心よりお待ちしております．

日本歯科保存学会 2021 年度春季学術大会（第 154 回）《事前登録のご案内》
日本歯科保存学会 2021 年度春季学術大会（第 154 回）は，2021 年 6 月 10 日（木）・11 日（金），鹿児島県・鹿児島市（担当校：鹿児島大学大学院医歯学総合研究科顎顔面再建学講座歯科保存学分野，大会長：西谷佳浩教授）において，下記のとおり開催することとなりました．事前参加登録についてご案内いたしますので，下記の要領により登録手続きをお願いいたします．多数の会員の皆様方のご参加をお願い申し上げます．
※現地開催を予定しておりますが，新型コロナウイルス感染症拡大の状況によって開催形式および登録方法・期間等が変更となる場合もございます．
2020 年 12 月
特定非営利活動法人

日本歯科保存学会

理事長

1 ．会

期

2021 年 6 月 10 日（木）・11 日（金）

2 ．会

場

川商ホール
〒 890‒0062

鹿児島市与次郎 2‒3‒1

TEL：099‒256‒8111（代）
3 ．参加登録
大会参加費は以下のとおりです．
事前登録（2020 年 12 月 14 日（月）正午～2021 年 5 月 7 日（金）15：00 までの登録） 10,000 円
当日登録12,000 円※本学術大会における事前登録は，すべて大会ホームページ上での手続きとなります．
http://www.kokuhoken.jp/jscd154 にアクセスして，ご登録下さい．
4 ．第 154 回学術大会に関するお問い合わせ先
日本歯科保存学会 2021 年度春季学術大会（第 154 回）大会事務局〒 170‒0003

東京都豊島区駒込 1‒43‒9（一財）口腔保健協会コンベンション事業部内
TEL：03‒3947‒8761

FAX：03‒3947‒8873

E-mail：jscd154@kokuhoken.jp

詳細につきましては下記アドレスより，大会ホームページにアクセスして下さい．
http:／／www.kokuhoken.jp／jscd154
5 ．交通・宿泊のご案内
交通・宿泊に関しましては，大会ホームページにおいて詳細を掲載します．

田上順次日本歯科保存学雑誌
第 63 巻第 6 号

令和 2 年 12 月
目次

ミニレビュー
接着性レジンの象牙質接着耐久性改良法の探求と接着破壊ダイナミクスの解明

保坂

啓一 （ 479 ）原著
Study on the Sealing Ability of a New High-penetration Resin Material for Enamel Cracks
and Dentinal Tubules
MIURA Tatsuki, YASUO Kenzo, IWATA Naohiro, YOSHIKAWA Kazushi and YAMAMOTO Kazuyo （ 483 ）ユニバーサルアドヒーシブのアクティブ処理およびエッチングモードがエナメル質接着強さおよび表面自由エネルギーに及ぼす影響
今井亜理紗，髙見澤俊樹，田村 友彦，髙宮
寛，若松 賢吾
辻本 暁正，鈴木 総史，鈴木 美穂，宮崎 真至 （ 494 ）高グルコース条件下における歯肉線維芽細胞のカルプロテクチン誘導性
炎症関連因子の産生におけるスダチチンの抑制効果
西川 泰史，成石 浩司，木戸 淳一，湯本 浩通 （ 503 ）ニッケルチタン製ロータリーファイルのテーパーが回転疲労耐性に与える影響
福森 洋平，中務 太郎，牧 圭一郎，木村 俊介
海老原 新，興地 隆史，杉崎 順平 （ 512 ）新規汚染除去材による処理が唾液汚染された CAD/CAM 冠用ハイブリッドレジンブロックの象牙質接着強さに及ぼす影響
高橋圭，𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷 519 ）生物学的直接覆髄剤開発に向けた生理活性物質 RVX‒208 の歯髄細胞における機能解析
松本 昌大，藤原 千春，島袋 善夫，山本
優，NANTAKEERATIPAT Teerachate
北垣次郎太，八木 寛子，林聡子，岩山 智明，柏木陽一郎
三木 康史，北村 正博，沢田 啓吾，木下 茉優，村上 伸也 （ 527 ）ユニバーサルアドヒーシブへの光線照射の有無が自己接着性レジンセメントの歯質接着性に及ぼす影響石井亮，髙見澤俊樹，野尻 貴絵，辻本 暁正
甘利 佳之，奥脇 岳人，飯島 達也，宮崎 真至 （ 536 ）タタキ振動を付与した音波振動歯ブラシのプラーク除去効果および歯周組織に対する有用性について
鴨井 久博，吉峰 正彌，三浦悠，濵田真理子 （ 545 ）Influence of Light Irradiation Conditions on the Tensile Bond Strength ofResin Composite Bonding Materials to Dentin
OUCHI Satoko, IWATA Naohiro, LIU Haitao, XIE Zhouqiao, WANG Xiangyu
MOROTO Hidetoshi, ISHIDA Shunsuke, KOMASA Reiko, YASUO Kenzo
TANIMOTO Hiroaki, YOSHIKAWA Kazushi and YAMAMOTO Kazuyo （ 554 ）
症例報告
インプラント周囲炎患者に対し Er：YAG レーザーを併用し外科的治療を行った症例
安田 忠司，山本敦彦，辰巳63 巻総目次
会務報告

順一 （ 563 ）（ 570 ）
（ 576 ）

発

〒 170‒0003

行

特定非営利活動法人 日本歯科保存学会
東京都豊島区駒込 1-43-9 （一財）口腔保健協会内

THE JAPANESE JOURNAL OFCONSERVATIVE DENTISTRY
Vol. 63, No. 6

CONTENTS

Mini Review
Improving Resin-dentin Bond Durability and a Novel Ultra-high-speed Videography

DECEMBER 2020

HOSAKA Keiichi （ 479 ）Original Articles
Study on the Sealing Ability of a New High-penetration Resin Material for Enamel Cracks
and Dentinal Tubules
MIURA Tatsuki, YASUO Kenzo, IWATA Naohiro,
YOSHIKAWA Kazushi and YAMAMOTO Kazuyo （ 483 ）Influence of Active Application and Etching Mode on Enamel Bond Strength andSurface Free Energy of a Universal Adhesive
IMAI Arisa, TAKAMIZAWA Toshiki, TAMURA Tomohiko, TAKAMIYA Hiroshi,
WAKAMATSU Kengo, TSUJIMOTO Akimasa, SUZUKI Soshi,
SUZUKI Miho and MIYAZAKI Masashi （ 494 ）Inhibitory Effects of Sudachitin on the Production of Inflammation-related Molecules in
Human Gingival Fibroblasts Cultured under High Glucose Conditions
NISHIKAWA Yasufumi, NARUISHI Koji, KIDO Jun-ichi and YUMOTO Hiromichi （ 503 ）Effect of Taper of Nickel-titanium Rotary Instruments on Cyclic Fatigue Resistance in a Dynamic Model
FUKUMORI Yohei, NAKATSUKASA Taro, MAKI Keiichiro,
KIMURA Shunsuke, EBIHARA Arata, OKIJI Takashi and SUGIZAKI Jumpei （ 512 ）Effect of New Decontamination Material on the Dentin Bond Strength of
Saliva-contaminated Hybrid Resin Block for CAD/CAM Crowns
TAKAHASHI Kei, YOSHIYAMA Tomohiro, YOKOYAMA Akihito,
SHIMADA Yasushi and YOSHIYAMA Masahiro （ 519 ）The Functional Analysis of RVX-208 in Human Dental Pulp Cells: An Initiative for the
Application of a Bioactive Compound, RV-208, on Direct Pulp Capping
MATSUMOTO Masahiro, FUJIHARA Chiharu, SHIMABUKURO Yoshio, YAMAMOTO Yu,
NANTAKEERATIPAT Teerachate, KITAGAKI Jirouta, YAGI Hiroko, HAYASHI Satoko,
IWAYAMA Tomoaki, KASHIWAGI Yoichiro, MIKI Koji, KITAMURA Masahiro,
SAWADA Keigo, KINOSHITA Mayu and MURAKAMI Shinya （ 527 ）Influence of Light Irradiation of Universal Adhesives on the Bonding Effectiveness of
Self-adhesive Resin Cements
ISHII Ryo, TAKAMIZAWA Toshiki, NOJIRI Kie, TSUJIMOTO Akimasa, AMARI Yoshiyuki,
OKUWAKI Taketo, IIJIMA Tatsuya and MIYAZAKI Masashi （ 536 ）The Efficacy of Dental Plaque Removal and Usefulness for Periodontal Tissue of a
Sonic Toothbrush Equipped with Tapping Amplitude
KAMOI Hisahiro, YOSHIMINE Masaya, MIURA Haruka and HAMADA Mariko （ 545 ）Influence of Light Irradiation Conditions on the Tensile Bond Strength ofResin Composite Bonding Materials to Dentin
OUCHI Satoko, IWATA Naohiro, LIU Haitao, XIE Zhouqiao, WANG Xiangyu,
MOROTO Hidetoshi, ISHIDA Shunsuke, KOMASA Reiko, YASUO Kenzo,
TANIMOTO Hiroaki, YOSHIKAWA Kazushi and YAMAMOTO Kazuyo （ 554 ）Case Report
Surgical Treatment of Peri-implantitis by Using Er: YAG Laser: A Case Report
YASUDA Tadashi, YAMAMOTO Atsuhiko and TATSUMI Junichi （ 563 ）Publishedby
THE JAPANESE SOCIETY OF CONSERVATIVE DENTISTRY（JSCD）
c/o Oral Health Association of Japan（Kōkūhoken kyōkai）
1‒43‒9, Komagome, Toshima-ku, Tokyo 170‒0003
Japan2020 年 12 月

479

ミニレビュー

日歯保存誌 63（6）：479～482，2020

接着性レジンの象牙質接着耐久性改良法の探求と接着破壊ダイナミクスの解明
保

坂

啓

一

東京医科歯科大学（TMDU）大学院医歯学総合研究科 医歯学系専攻 口腔機能再構築学講座 う蝕制御学分野

Improving Resin-dentin Bond Durability
and a Novel Ultra-high-speed Videography
HOSAKA Keiichi
Department of Cariology and Operative Dentistry, Division of Oral Health Science,
Graduate School of Medical and Dental Sciences, Tokyo Medical and Dental University（TMDU）

キーワード：象牙質接着耐久性，超高速度イメージング，微小引張接着試験，セルフエッチングシステム，コンポジッ
トレジン

リン酸エッチングを行うことにより良好な接着が得られはじめにるが，より有機質・水分を多く含む象牙質への接着はこれまで難しく，接着耐久性が課題とされてきた．

世界的規模における超高齢化の潮流において，日本で操作ステップを簡略化した接着システムでは，欧米をは 100 歳以上の人口が 11 万人を突破し，8020 達成率も中心に採用されていたウェットボンディングシステムに50％を超えた．そのようななか，現在，根面う蝕・二次

おいて，リン酸エッチング後の水洗による水分のコント

う蝕・トゥースウェアなどへの対応が，歯科保存学・接ロールが難しく，界面剝離と残留脱灰象牙質が生じると着修復学における課題となっている．人生 100 年時代のいう接着劣化につながる問題があった．そこで，著者ら口腔健康を増進させるため，徹底したう蝕予防とう蝕管は水洗後にエタノールを塗布し水分と置換するというス

理，そして治療介入の際には，低侵襲接着技法を用いたテップが，コラーゲン細線維間への疎水性のボンドの浸アプローチがますます重要になっている ．近年の目覚透を促進し，良好な樹脂含浸層を作り接着耐久性に寄与

ましい接着歯学の発展に伴い，直接法コンポジットレジ

することを見いだした4）．現在，世界中で多くの臨床家

ン修復は，厚生労働省の診療別歯科医療統計でも，このに“エタノールウェットボンディングテクニック”とし10 年間で治療件数が約 20％増え，研究者のみならず臨床て応用されている．

1）

家にとっても注目されている2,3）．

接着性レジンの象牙質接着耐久性改良法の探求

一方，マイルドな酸性である機能性モノマーによる脱灰能をもつセルフエッチングシステムは現在，日本のみ
ならず世界のゴールドスタンダードとなっている．しかしながら，切削象牙質上に覆われるスミヤー層が完全に接着修復成功の条件はいうまでもなく，良好な歯質接

除 去 さ れ な い こ と に よ っ て 形 成 さ れ る Hybridized

着性および歯質接着耐久性の獲得である．エナメル質は

smear layer が，接着劣化の一因となる可能性が指摘さ

本ミニレビューは，2020 年度学術賞受賞者へ依頼したものである．
DOI：10.11471/shikahozon.63.479

日

480

本

歯

科

保

存

学

雑

誌

第 63 巻第6号

れている．そこで著者らは，NaOCl 水溶液によるスミ

いて微小引張接着試験中の接着性レジンを用いた象牙

ヤー層の改質（有機成分の溶解除去）がスミヤー層中の質‒レジン接着破壊様相の観察を試みたが，残念ながら

有機成分を溶解除去することが Hybridized smear layer

破壊現象を観察することはできなかった．

形成を防ぎ，接着向上に寄与することを見いだした5）．

そこで新しい試みとして，従来のカメラの撮影速度をさらに，レジンモノマーの浸透性が向上すること，ミネ超えるハイスピードカメラを使用することとした．

ラル密度上昇による化学的接着が向上すること，そしてFocal Encyclopedia of Photography15）によると，高速イ接着阻害因子の水分量が減少するという 3 つの利点が考

メージングは撮影速度によって，4 つのカテゴリ，すな

えられ，直接法でも間接法でも象牙質接着耐久性が向上

わち 1）50～500 fps の「high speed（HS）」，2）500～

する．さらに，脱灰の影響を受け有機質/無機質比率が上

10,000 fps の「very high speed（VHS）」，3）10,000～

昇したう蝕影響象牙質に対してその効果はより高く6），

10,000,000 fps の「Ultra high speed（UHS）」，および 4）

Smear Layer Deproteinizing Pretreatment（SLDP）と1000 万 fps を超える「Super high speed（SHS）」に区別名付けてその臨床応用を行っている．

される．

SLDP は，次亜塩素酸ナトリウム液と有機質との反応

われわれの研究では，最高撮影速度 1,000,000 fps のによる酸化物の発生によってボンドの重合阻害を招くこUHS カメラを使用し，試験中に発生した破壊の瞬間を，とから，スルフィン酸塩などを含む還元剤処理が必要で

撮影速度 299,166 fps，256×112 ピクセルの解像度で分析ある．最新の知見では，還元剤処理自体が光重合型ボン

し，亀裂の起点を特定し，その伝播の観察を試みた．撮ドの重合を促進させる効果も見いだされ，還元剤処理後

影速度に加えて写真の解像度は，イメージングにとってにボンドを塗布するワンステップセルフエッチングシス

非常に重要な要素である．一般的に，ビデオカメラは撮

テム（ユニバーサルタイプを含む）では，これらの処理

影速度を上げると解像度が下がる．したがって，単純にの効果がより高くなる ．現在，次亜塩素酸ナトリウムカメラの最大撮影速度を使用すればよいというわけでは水溶液の代用として，より安全性の高い次亜塩素酸水やない．また，適切な照明条件も本イメージングには重要

植物由来のタンパク質分解酵素の応用の検討を行っていである．工学分野で一般的に使用される連続光であるメ

る

タルハライドランプは，熱を発生し歯の硬組織標本には

7）

．

8,9）

超高速度イメージングを応用した
接着破壊ダイナミクスの解明

熱損傷を起こす危険性があるため，本研究では，シャッターと同期したパルスダイオードレーザーをパルス光源として使用した（図 1）．その結果，超高速度接着破壊現
象である亀裂の発生・亀裂進展を，UHS カメラを用いた接着性能・接着耐久性の実験的評価を行うためには，

UHS ビデオグラフィーにより可視化することに成功しSano らによって開発，1994 年に発表された微小引張接16）た（図 2）．亀裂の進展速度は時速 1,500 km を超えて着試験 が，その汎用性と信頼性の点から今なお多くのいた．使用した接着システムは，クリアフィルメガボン

研究で採用されている．接着試験では，測定した接着強ド（クラレノリタケデンタル）で，業者指示どおりのセ

さのみならず，試料の破壊部位に関する情報も重要であ

ルフエッチング（SE）モード，エタノールウェットボン

り，接着強さが同じだとしても違う破壊形態を示すこと

ディングテクニックを用いた（ER）モードの 2 種類の接もある11）．破壊面の形態分析は，接着試験後，光学顕微

着モードで使用した．微小引張接着試験は，小型卓上試鏡または走査電子顕微鏡（SEM）を使用して破断した試

験機 EZ Test（島津製作所）を用いてクロスヘッドスピー

験片を観察することによって行われる ．セラミックス

ド 1 mm/min で行った．

10）

12）

のような均質な材料であれば，亀裂の起源を示す兆候が同研究では，UHS ビデオグラフィーと SEM によって現れ，破壊の起点と亀裂伝播の方向を決定するための破決定された破断形態分析による違いについての検証も面法が利用可能であるが13），複合材料であるコンポジッ行った．SE モードでは，UHS ビデオグラフィーと SEM

トレジンに適用することは困難である．したがって，界破壊形態分析との間には有意差が認められなかったが，面破壊の性質と複雑さを理解するため，破壊の瞬間のダ

ER モードでは，UHS ビデオグラフィーと SEM 破断面

イナミクスの検討が必要である．

観察結果は一部異なる結果となった．これは，SE モード

これまで，接着試験中の試料の破壊観察を行った先行における酸性モノマーによるマイルドな脱灰効果と比較研究では，標準的なビデオカメラを用いて撮影速度毎秒

し，ER モードにおけるリン酸による深い脱灰によって25 フレーム（fps，frames per second）で，象牙質‒レジ

象牙質表面の凝集力が低下し，破壊が象牙質とボンド層

ン接着界面のせん断応力負荷中の破壊の様子 を観察しとの接着界面・樹脂含浸層直下など複雑な様相で発生している．同様にわれわれも，標準的なビデオカメラを用たため，低解像度の UHS ビデオグラフィーが SEM 破断

14）

2020 年 12 月

接着性レジンの象牙質接着耐久性改良法の探求と接着破壊ダイナミクスの解明

481

コンポジットレジンダイレクトブリッジ構造の支台
歯の片側に荷重を行った瞬間の光弾性の UHS イメー
ジング
ヒト抜去小臼歯（左側）と大臼歯（右側）を石膏に植立後，エナメルリン酸エッチング，クリアフィルメガボンド 2 で接着処理を行いフロアブルコンポジットレジンで連結したダイ
レクトブリッジモデル大臼歯支台側に荷重した瞬間を奥側からの透過光条件で UHS イメージングすると（10,000 fps），接

図 3
微小引張接着試験機と超高速度（UHS）ビデオグラ
フィーのセッティング
超高速度カメラは Phantom V2512（Research Vision Inc.
US）
，照明装置はメタルハライドランプだが，歯の硬組織・高分子材料を使った試料のイメージングでは，熱損傷を避けるため，文献 16 では Diode pulse laser（Cavilux HF, Cavitar
Ltd, Finland）を同期させて使用した．

図 1

着界面ではなく，連結部中央に応力ひずみ（白矢印）が集中していることがわかった．

ることで破壊ダイナミクスの解明に寄与し，新しい接着a

材料開発・接着技法の改良につながることが期待される．実際，SE モードで作製した試料における接着破壊がボンド層での破壊が多いということは視覚的に理解しやすく，重合性の改善，ボンド層とコンポジットレジンとb
クリアフィルメガボンドを使用して作製したコンポ
ジットレジン‒象牙質接着界面における破壊の瞬間のイメージングa ：ボンド層内を亀裂が進展している．
b ：コンポジットレジンとボンド層の界面中央付近での破壊が生じ，亀裂が左右両側へ進展したのがわかる16）．

の界面における共重合性の改善が行われ，より接着耐久性の高い接着システムの開発へとつながった17）．

図 2

超高速度イメージングの応用と今後の展開
直接法コンポジットレジン修復は，臨床的有効性と経済的効率性の観点から適用を広げ，さまざまな症例に多く用いられている．特に少数歯欠損における，ファイバーの補強を行わないシンプルな術式によるダイレクト

面観察ほど正確に破壊位置を特定できなかったこと，おブリッジ修復18）は，最新の臨床研究では 3 年予後成功率

よび観察方向に起因すると考えられる．超高速度イメー

が 80％を超えることが報告され19），低侵襲治療として今ジングの分野は急速に進化しているため，今後，より高後ますます期待されるだろう．

速度・高解像度の撮影技法が開発されると期待される．

そこで，超高速度イメージングと光弾性分析を組み合観察方向については，複数台の UHS カメラの使用が効わせることにより，ダイレクトブリッジ構造内部の応力果的かもしれない．

集中を可視化した（図 3）．欠損隣接歯が歯槽骨で十分にSE モードと ER モードとの間には，微小引張接着強さ支えられている場合，欠損側エナメル質への信頼性の高と同様，UHS ビデオグラフィーと SEM による破壊面形

い接着システムを使用すると，内部応力がエナメル質の態において有意差が認められた．これらの結果は，接着接着界面ではなくポンティックの中央に集中することが材塗布モードが接着性能と破壊様相に明白な影響を与え

わかり，ポンティック構造を検討することが臨床上非常ることを示唆しており，接着モードによる接着性能・接に重要であることが示唆された．この知見は，破壊靱性

着耐久性への影響を一般化するため，さらなる研究が必の高いコンポジットレジンをポンティック内部構造に要である．

使ったダイレクトブリッジへの応用20）につながり，さらUHS ビデオグラフィーは SEM 破壊形態分析と合わせに高い臨床予後につながる可能性を秘めている．超高速

日

482

本

歯

科

度イメージング手法は，歯の破折・セラミックスの破折など，修復学領域のみならず他領域への応用も期待されるイノベーションである．

おわりに今後，得られた研究成果を発展させ，健全歯質を最大限に保存する直接法接着修復の応用可能性を科学的に裏付け，超高齢社会における患者の歯の延命，ひいては口腔健康維持と増進にさらに貢献していきたい．
謝辞

東京医科歯科大学大学院医歯学総合研究科う蝕制御学分野
田上順次教授，中島正俊講師，米国オーガスタ大学名誉教授

Dr. David Pashely の長年にわたる研究ご指導に対しまして，
深く感謝の意を表します．

文献1）Federation FDIWD. FDI policy statement on Minimal
Intervention Dentistry（MID）for managing dental caries: Adopted by the General Assembly: September 2016,
Poznan, Poland. Int Dent J 2017; 67: 6‒7.
2）Chafaie A, Portier R. Anterior fiber-reinforced composite resin bridge: a case report. Pediatr Dent 2004; 26:530‒534.
3）Wirsching E. Contemporary options for restoration ofanterior teeth with composite. Quintessence Int 2015;
46: 457‒463.
4）Hosaka K, Nishitani Y, Tagami J, Yoshiyama M, Brackett WW, Agee KA, Tay FR, Pashley DH. Durability ofresin-dentin bonds to water- vs. ethanol-saturated dentin. J Dent Res 2009; 88: 146‒151.
5）Hosaka K, Thanatvarakorn O, Kunawarote S, Takahashi
M, Foxton RM, Tagami J, Nakajima M. Smear layer-deproteinization: Improving the adhesion of self-etchadhesive systems to caries-affected dentin. Current Oral
Health Reports 2018; 5: 168‒177.
6）中島正俊，谷口 玄，Sitthikorn K，保坂啓一，高橋真広，岩本奈々子，岸川隆蔵，田上順次．う蝕象牙質に対する 2 ステップ・セルフエッチ接着システムの接着性能の改良．日歯保存誌 2008；51：396‒402．
7）Hasegawa M, Tichy A, Hosaka K, Kuno Y, Ikeda M,
Nozaki K, Chiba A, Nakajima M, Tagami J. Degree of
conversion and dentin bond strengths of light curemulti-mode adhesives pretreated or mixed sulfinate
agents. Dent Mater J（in press）.
8）Kusumasari C, Abdou A, Tichy A, Hatayama T, Hosaka
K, Foxton RM, Wada T, Sumi Y, Nakajima M, Tagami J.
Effect of smear layer deproteinization with chemo-me-

保

存

学

雑

誌

第 63 巻

第6号

chanical caries removal agents on sealing performancesof self-etch adhesives. J Dent 2020; 94: 103300.
9）Paing SY, Tichy A, Hosaka K, Nagano D, Nakajima M,
Tagami J. Effect of smear layer deproteinization with
HOCl solution on the dentin bonding of conventionaland resin-modified glass-ionomer cements. Eur J OralSci 2020; 128: 255‒262.
10）Sano H, Ciucchi B, Matthews WG, Pashley DH. Tensile
properties of mineralized and demineralized human andbovine dentin. J Dent Res 1994; 73: 1205‒1211.
11）Armstrong SR, Boyer DB, Keller JC. Microtensile bondstrength testing and failure analysis of two dentin adhesives. Dent Mater 1998; 14: 44‒50.
12）Armstrong S, Geraldeli S, Maia R, Raposo LH, Soares CJ,
Yamagawa J. Adhesion to tooth structure: a criticalreview of“micro”bond strength test methods. Dent
Mater 2010; 26: e50‒62.
13）Quinn GD. NIST Recommended Practice Guide Fractography of Ceramics and Glasses. Report. 2016 May 2016.
Contract No. 960‒16.
14）Griffiths BM, Watson TF, Pagliari DE, Pilecki P, Sherriff
M. Video rate confocal microscopic imaging of dentin/
adhesive interfacial failure under load. Am J Dent 2000;
13: 271‒279.
15）Fuller PWW. High-Speed Cinematography. Peres MR.
Focal encyclopedia of photography. 4th ed. Woburn:
Focal Press; 2007. 539.
16）Hosaka K, Tichy A, Ikeda M, Nakagawa K, Sadr A, Tagami J, Takahashi M, Sato K, Nishitani Y, Klein-Junior
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dental prosthesis by using a bilayering composite resin
injection technique with a digital workflow: A dental
technique. J Prosthet Dent 2020.
（in press）

2020 年 12 月

483

Original Article

日歯保存誌 63（6）：483～493，2020Study on the Sealing Ability of a New High-penetration Resin Material
for Enamel Cracks and Dentinal Tubules
MIURA Tatsuki, YASUO Kenzo, IWATA Naohiro,
YOSHIKAWA Kazushi and YAMAMOTO Kazuyo
Department of Operative Dentistry, Osaka Dental University

Abstract
Purpose: In line with the increasing number of remaining teeth per person, the incidence of noncariogenic
hard tissue diseases other than dental caries and periodontal disease has been increasing. Among noncariogenic diseases, micro cracks of enamel（enamel cracks）may be a cause of hypersensitivity with no substancedefect. Furthermore, exposed dentin is a cause of dentin hypersensitivity to transient cold water and abrasion pain. A new high-penetration resin material for tooth substrates having high flowability, hydrophilicity
and wettability also has high penetrability for enamel cracks and dentinal tubules. Considering the sealing ofenamel cracks and dentinal tubules with resin-based dentin desensitizers, we measured the permeability inhibition rate using a tooth model of hypersensitivity.
Methods: Enamel crack specimens and dentin disc specimens were prepared using healthy human teeth
with no dental caries. Using a device prepared following the method reported by Pashley et al., the specimen
was connected to the device and the inner pressure was set at 25 mmHg. The materials used in the experiment were the new high-penetration resin material for tooth substrates（KE, Kuraray Noritake Dental）andresin-based desensitizers G-Premio BOND（GP; GC）and Scotchbond Universal Adhesive（SU; 3M ESPE）.
After application of each desensitizer, the enamel crack and dentinal tubule permeability inhibition rate wasmeasured. The surface and longitudinal cross-sectional surface in the enamel crack specimens and dentin discspecimens were observed under SEM, and the penetration depth of resin in enamel cracks was measured.
Results: The permeability inhibition rate of the enamel cracks in the KE, GP and SU groups was 96.0, 96.3
and 94.0％, respectively. The permeability inhibition rate of the dentinal tubules in the KE, GP and SU
groups was 90.0, 94.2 and 93.7％, respectively. There was no significant difference in the permeability inhibition rate of the enamel cracks and dentinal tubules between the KE, GP and SU groups, and the permeability
inhibition rates of all groups were high. SEM images showed that the superficial layer of the enamel cracks
and dentin was covered with a resin coating in all the groups, and that the longitudinal cross-sectional surface of the enamel cracks was sealed with resin in all the groups. The penetration depth of resin in theenamel cracks was significantly higher in the KE group than in the GP and SU groups. On the longitudinalcross-sectional surface of the KE group, we observed long resin tags which penetrated into the dentinal
tubules. However, we did not observe any resin tags penetrating the dentinal tubules in the GP group, andobserved resin tags that penetrated slightly into the dentinal tubules in the SU group.
Conclusion: It is considered that the new high-penetration resin material for tooth substrates delivered abetter sealing ability than conventional resin-based desensitizers for enamel cracks and dentinal tubules.
Key words: sealing ability, dentin hypersensitivity model, high-penetration resin material

Corresponding author: Dr. YASUO, Department of Operative Dentistry, Osaka Dental University, 8‒1, Kuzuha-hanazono-cho,
Hirakata, Osaka 573‒1121, Japan
TEL: ＋81‒72‒864‒3077, FAX: ＋81‒72‒864‒3177, E-mail: yasuo-k@cc.osaka-dent.ac.jp
Received for Publication: July 31, 2020/Accepted for Publication: August 26, 2020
DOI: 10.11471/shikahozon.63.483

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第6号

methods and external crown repair are also used as
methods for treating enamel cracks. The application ofIntroduction

medicament is often considered the first choice in theWith the graying of society in Japan, the number oftreatment of dentin hypersensitivity due to its simplic-

remaining teeth per person is increasing thanks to

ity and immediate effectiveness. The action mechanism

activities such as the 8020 movement and advances inof desensitizers involves sealing of the enamel cracks

1）

dental treatment . As a result, however, the incidence

and dentinal tubules on the exposed dentin surface, pre-of noncariogenic hard tissue diseases, which are differ-venting stimulation from reaching the dental pulp andent from dental caries and periodontal diseases, issuppressing the excitation of dental pulp cells. It is also

increasing. Noncariogenic hard tissue diseases include

considered to promote calcium deposition to, andtooth wear, tooth fracture or cracking, hypoplasia, mal-encourage active sealing of, enamel cracks and dentinal

2）

formation, and abnormal number of teeth . Among

tubules10）. There are many types of desensitization,such diseases, two phenomena that can cause hypersen-

including solidification of tissue fluid11）, crystallization ofsitivity are microcracks of enamel（enamel cracks）withmineral salt12,13）, and sealing with resin-based materi-no substance defect, and dentin hypersensitivity, which

als14）, depending on their action mechanism. However, it

presents with exposure of the dentin. In addition, vari-

has been reported that the cure rate for conservativeous factors such as bruxism, clenching, changes in thetreatments is only about 60 to 70％15）, leaving the possi-

environment of the oral cavity due to eating and drink-bility of symptom recurrence. In comparison, there is noing, and decrease in salivary secretion are thought toestablished treatment for enamel cracks. Noninvasive

affect the expansion of enamel cracks and exposure oftreatment is needed as the concept of minimal inter-

dentin with substance defect3）. It has been reported

vention（MI）has become popular. Furusawa, et al.16）

that the incidence of enamel cracks in healthy teeth

reported the effectiveness of sealing enamel cracks

increases with age: 60％ of those in their teens, 68％ ofwith dentin desensitizers（desensitizers）.

those in their twenties, 90％ of those in their thirties4）,

In recent years, coating and sealing of the dentin sur-5）

and more than 95％ of those in their forties and older .

face with resin-based desensitizers have attracted

Enamel cracks are assumed to cause pigment penetra-attention, as indicated by the introduction of insurance

tion via the cracks, cosmetic disturbance of the teeth

coverage for coating treatment using dental sealing/

due to secondary caries, expression of dentin hypersen-

coating materials to seal the dentinal tubules on thesitivity-like pain, and disturbance of procedures such as

surface of vital abutment teeth17）. A prototype new6,7）whitening. Enamel cracks may also reach the dentin,

high-penetration resin material for tooth substrates

allowing stimulation to reach the dental pulp via den-（new high-penetration resin material）, KEC-100, wastinal tubules8）.

newly developed by Kuraray Noritake Dental Inc. for

The hydrodynamic theory, which claims that pain

the purpose of sealing microcracks in dentin. Its charac-

occurs as movement of the inner fluid in dentinalteristics include the incorporation of hydrophilic multi-

tubules stimulates the free nerve endings inside thefunctional amide-type monomer with high hydrophilic-dental pulp under an external stimulation, which is

ity and affinity to dentin, no need for air drying as it

transmitted through the dentinal tubule openings on thecontains no solvents such as water and organic sol-

dentin surface, is considered the most likely mechanism

vents, low viscosity, and high wettability to dentin. Inof pain expression in dentin hypersensitivity9）. Based on

this study, we examined the ability of this new

the hydrodynamic mechanism similar to dentin hyper-

high-penetration resin material to seal enamel cracks

sensitivity, in hypersensitivity which occurs in concur-

and dentinal tubules by preparing a device that canrence with enamel cracks, it is assumed that pain

apply a pressure of 25 mmHg, which is equivalent tooccurs as stimulation reaches the dentin through thethe inner pressure of human dental pulp, in accordance3）

enamel cracks . Methods of treating dentin hypersensi-

with a report by Pashley, et al.18）, and used the device

tivity include conservative treatments such as applica-

and a dentin hypersensitivity model to measure thetion of medicament, iontophoresis, laser treatment, andpermeability inhibition rate.

coverage with adhesive materials. Similar treatment

2020 年 12 月

Sealing Ability of High-penetration Resin for Enamel Cracks and Dentinal Tubules
Table 1

Materials

485

Materials used in this study

Composition

Application protocol

10-MDP, Bis-GMA, hydrophilic amide 1．Apply bond（waiting time 10 s）

Manufacturer
Kuraray

Lot No.
170804

Noritake
Dental（experimental）

10-MDP, 4-META, methacrylate acid 1．Apply adhesive（waiting time 0 s）
G-Premio BOND
ester, MDTP, distilled water, acetone, 2．Dry with max air pressure for 5 s（GP）photo initiators, silica filler
3．Light cure for 10 s

GC

1710033

10-MDP, dimethacrylate resins, a-meth- 1．Apply adhesive（waiting time 20 s）
Scotchbond
acrylate-modified polyalkenoic acid 2．Dry with gentle air flow for 5 s
Universal
copolymer, HEMA, filler, ethanol, 3．Light cure for 10 s
Adhesive（SU）
water, photo initiators, silane

3M ESPE

71207A

KEC-100（KE） monomer, photo initiators

2．No dry
3．Light cure for 10 s

×100, KEYENCE, Osaka, Japan）. We allowed 10％

Materials and Methods

phosphoric acid solution（Kishida Chemical, Osaka,
Japan）to act on the dentin side of the enamel crack

Table 1 shows the materials used in the experiments

specimen for 30 seconds, then rinsed it under runningand how they were applied. As resin-based desensitiz-water for 5 seconds. We obtained the enamel crack

ers, we used G-Premio BOND（GP; GC, Tokyo, Japan）

specimen by removing the smear layer and rinsing

and Scotchbond Universal Adhesive（SU; 3M ESPE,

with distilled water in an ultrasonic cleaning machine

Minnesota, USA）
. As the prototype new high-penetra-

for 5 minutes to open the dentinal tubules.

tion resin material for tooth substrates, we used KEC-

2 ）Dentin disc specimens

100（experimental, KE; Kuraray Noritake Dental, Tokyo,

We shaped the surface from the occlusal surface

Japan）. The groups to which each material was applied

using a model trimmer to prepare a flat dentin surface.

are referred to as GP group, SU group and KE group,

We then cut the root of the tooth near the tooth cervix

respectively.

and removed the dental pulp. We polished it up to #600

1 ．Preparation of enamel crack specimens anddentin disc specimens

with waterproof abrasive paper, and prepared a cylinder-shaped dentin disc with the size of 8 mm diameterAs test subject teeth, we used healthy human molars

and 1 mm thickness for the exposed dentin surface. We（human teeth）without caries which had been frozen atallowed 10％ phosphoric acid solution（Kishida Chemi-－40℃ in physiological saline for storage after beingcal）to act on the occlusal surface of the dentin disc forremoved at the Department of Dental Surgery of our

30 seconds, and rinsed it under running water for 5 sec-

University Hospital due to necessity of removal in theonds. We then allowed 5％ sodium hypochlorite solution

course of treatment, and defrosted the teeth immedi-（Kishida Chemical）to act on the dental pulp side for 10

ately before the experiment.

seconds, and rinsed it under running water for 5 sec-

1 ）Enamel crack specimens

onds. We obtained the dentin disc specimen by remov-

After cutting the root of the tooth, we cut the crowning the smear layer on both sides and rinsing with dis-mesiodistally. We then shaped the surface from thetilled water in an ultrasonic cleaning machine for 5

maximum profile part on the labial and lingual sides

minutes to open the dentinal tubules.

using a model trimmer to prepare a flat enamel surface.
We polished up to #600 with waterproof abrasive paper,and prepared a cylinder-shaped enamel-dentin disc with

2 ．Experiment device
We prepared the dentin hypersensitivity model basedon the method by Zennyu, et al19）（Fig. 1）.

the size of 8 mm diameter and 1 mm thickness. After

We set up the specimen stage by placing a rubber

dropping a 200 g weight twice from a height of 2 cm,

ring with 6 mm inner diameter on the dentin side of thewe identified enamel cracks by phase difference using aenamel crack specimen or the dental pulp side of theconfocal laser scanning microscope（VK-X100 series,

dentin disc specimen, and mounting it with a stainless

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stainless holder（upper）
enamel crack specimen
or dentin disc specimen
rubber ring

specimen stage
glass capillary tube

stainless holder（lower）

DF：physiological saline

three-way cock B

glass injection syringe

three-way cock A

pressure gauge

Fig. 1 Schematic diagram of a dentin hypersensitivity model
A rubber ring with an inner diameter of 6 mm was placed on thedentin side of the enamel crack specimen or the pulp side of the dentin disc specimen, inserted between the upper and lower stainlesssteel holders, and used as a specimen stage. The pressure in the specimen stage was adjusted to 25 mmHg, equal to human dental pulp, toreproduce the pressure in clinical practice.

steel holder to pinch the top and bottom of the speci-

ing three-way cock A, and adjusted the inner pressuremen. We ensured fenestration in a square of 5 mm side

to 25 mmHg. We applied each material according to the（approx. 0.25 cm in area）at the center to expose the

manufacturer’s instructions, and cured it using Pen-surface to which to apply the desensitizer. After fillingCure（J. Morita Mfg, Kyoto, Japan）. We then blew air

physiological saline assumed as the inner fluid of den-for 60 seconds in a similar fashion to that before appli-

tinal tubules（DF）inside the specimen stage while

cation to the specimen, left it standing for 30 seconds,

ensuring that no air was trapped, we connected it toand measured the amount of DF movement again. We

the device for setting the inner pressure, which we pre-measured the permeability inhibition rate for eachpared according to the report by Pashley, et al18）. We

material based on the amount of DF movement before

2

adjusted the inner pressure of the specimen stage to 25

and after material application. We calculated the rate

mmHg, which is equivalent to the inner pressure ofusing Equation（1）below, based on the amount of DF

human dental pulp, to reproduce the inner pressure of

movement before treatment（x）and amount of DF

dental pulp in clinical scenes20‒23）.

movement after treatment（y）:

3 ．Measurement of permeability inhibition rate

Permeability inhibition rate（％）
＝
｛
（x－y）
/x｝×100………（1）First, we cut off the DF from the cylinder direction
with three-way cock B and connected it to the glass

4 ．Laser obser vation of enamel surface

capillary, which was already connected to the specimen

We used a confocal laser scanning microscope（VK-

stage and the experiment device. We then blew air on

X100 series, KEYENCE）to observe the enamel cracks

the exposed enamel surface at the central fenestrationon the surface to which desensitizer was applied before

part of the specimen stage for 60 seconds in this state,

and after treatment by phase difference.

left it standing for 30 seconds, and measured the

5 ．SEM obser vation of sample surface and longi-

amount of DF movement inside the glass capillary24‒26）.

tudinal section, and measurement of enamel

We specified the air pressure as 0.3 MPs. We then cut

crack sealing depth

off the DF flowing inside the glass capillary by adjust-

We conducted gold deposition on the specimens foring three-way cock B so that DF could flow only to thesurface observation according to the normal method.

specimen stage from the cylinder direction. Next, we

We cut each specimen for longitudinal section observa-

injected DF so that it could flow from the cylinder totion with a low-speed diamond wheel saw（Model 650,

the pressure gauge and the specimen stage by adjust-South Bay Technology, California, USA）after embed-

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Sealing Ability of High-penetration Resin for Enamel Cracks and Dentinal Tubules

120
100

（%）
a

a

a

80
60
40
20
0

KE

GP

SU

permeability inhibition ratio

permeability inhibition ratio

（%）

100

487

a

a

a

KE

GP

SU

80
60
40
20
0

Measurement of the permeability inhibition rate of each dentin desensitizer
in enamel cracks
Same letters indicate no significant difference（p＞0.05）.

Measurement of the permeability inhibition rate of each dentin desensitizer
in dentin
Same letters indicate no significant difference（p＞0.05）.

ding it in epoxy resin. We polished it up to #2000 with

inhibition rates of the KE, GP and SU groups for thewaterproof abrasive paper, and soaked it in 1 mol/lenamel crack specimens and dentin disc specimens, andhydrochloric acid（Kishida Chemical）prepared witheach group indicated a high permeability inhibition rate.

Fig. 2

Fig. 3

distilled water for 1 minute, then 5％ sodium hypochlo-

2 ．Laser obser vation of enamel surface

rite solution（Kishida Chemical）for 5 minute to rinse it

Figure 4 shows the results of laser observation of thewith water. We then conducted gold deposition accord-enamel surface on the enamel crack specimens.

ing to the normal method. We observed each specimen

In all of the KE, GP and SU groups, we observedwith a scanning electron microscope（JSM-5610LV,

images in which the resin film coated the enamel crack

JEOL, Tokyo, Japan）.

surface.

We also measured the sealing depth inside theenamel crack by resin based on the longitudinal section
SEM images of the enamel crack specimens.

3 ．SEM observation of specimen surface and longitudinal section
Figure 5 shows the results of SEM observation of the

6 ．Statistical processing

enamel surface and longitudinal cross-sectional surface

We set the number of specimens to n＝5 in eachof the enamel crack specimens, and Fig. 6 the results ofgroup, and conducted statistical processing on the per-SEM observation of the specimen surface and longitudi-

meability inhibition rate and enamel crack sealing

nal cross-sectional surface of the dentin disc specimens.

depth which we calculated by using one-way analysis ofvariance and Tukey’s test（p＜0.05）.

On the enamel surfaces of the enamel crack specimens in all of the KE, GP and SU groups, we observed

This study was conducted after obtaining approval

images in which the resin film coated and sealed thefrom the ethics committee, Osaka Dental University

enamel crack surface. On the longitudinal cross-sec-（Approval No. 110767, May 13, 2020）.

tional surface of all of the KE, GP and SU groups, weobserved images in which the insides of enamel cracks

Results

were sealed by the penetrating resin.
On the surfaces of the dentin disc specimens in all of

1 ．Permeability inhibition rate

the KE, GP and SU groups, we observed images in

Figure 2 shows the results of measuring the permea-

which the resin film sealed the dentinal tubules andbility inhibition rate after application of each material

coated the dentin surface. On the longitudinal cross-sec-on the enamel crack specimens, and Fig. 3 the results

tional surface of the KE group, we observed long resin

after application of each material on the dentin disctags which penetrated into the dentinal tubules. How-

specimens.

ever, we did not observe any resin tags penetrating the

There was no significant difference in permeability

dentinal tubules in the GP group, and observed resin

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control

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preoperative
10μm

10μm

10μm

10μm

10μm

10μm

10μm

postoperative

Fig. 4 Laser microscopic observation of enamel surface
In the KE, GP and SU groups, the superficial layer of enamel cracks appeared to be covered with a resin coating.

control

KE

GP

SU

surfacelongitudinalcross-sectionalsurfaceFig. 5 SEM observation of enamel surface and longitudinal cross-sectional surface of enamel crack
In the KE, GP and SU groups, the superficial layer of enamel cracks appeared to be covered with a resin coating. The
specimens were embedded in epoxy resin and SEM observation of the longitudinal cross-sectional surface of the enamelcrack specimens was conducted. The inner region of enamel cracks was sealed with resin（white arrows）.

tags that penetrated slightly into the dentinal tubules in
the SU group.

Discussion

4 ．Enamel crack sealing depth
Figure 7 shows the results of enamel crack sealing

KE, which is a prototype new high-penetration resin

depth by resin. The sealing depth of the KE group inmaterial for tooth substrates, is intended to seal microc-

enamel cracks was significantly larger than the values

racks in tooth substrates, and its characteristics includeof the GP or SU group（p＜0.05）.

low viscosity and high wettability to tooth substrates.
Since it does not contain solvents such as water and2020 年 12 月

Sealing Ability of High-penetration Resin for Enamel Cracks and Dentinal Tubules
KE

GP

489

SU

surfacelongitudinalcross-sectionalsurfaceFig. 6 SEM observation of dentin surface and longitudinal cross-sectional surface of dentin
In the KE, GP and SU groups, the superficial layer of dentin appeared to be covered with aresin coating. In the KE group, resin tags penetrated into dentinal tubules（white arrows）. In
the GP and SU groups, there were no or a few resin tags penetrating into dentinal tubules（white arrows）.
（μm）
700
600

tion curing property, and is considered resistant to theeffects of hydrolysis even after polymerization curing.

a

500

The material is also adhesive to tooth substrates27）.
b

400

b

the one-step self-etching system, which uses dentin
adhesive material like the one we used in this experi-

300

ment. Resin-based desensitizers have been reported to200

deliver higher sealing abilities than other desensitizers

100
0There are resin-based desensitizer products that apply

as the resin coating adheres well to the dentin and
KE

GP

SU

Penetration depth of resin in enamel
crack
Different letters indicate significant differences at p＜0.05, as determined by one-way
layout analysis of variance and Tukey’s test.

Fig. 7

finely covers the enamel cracks and dentinal
tubules14,16,28）. Many of the resin-based desensitizers
contain hydrophilic monomers, hydrophobic monomers,
water, and organic solvents29）. Water is necessary forthe etching effect of the acidic monomer, and organic
solvents are necessary for dissolving the monomer
components and water30）. However, these solvents may

organic solvents, it does not require air drying after

cause resin polymerization to fail, and thus the solvents

application, and no polymerization failure is expected toneed to be removed thoroughly by air drying31）. On theoccur thanks to no residual solvents even in deeper

other hand, air drying during treatment can cause pain

parts of microcracks. In addition, it quickly adheres tofor those patients who present hypersensitivity symp-

dentin as the hydrophilic multifunctional amide-type

toms. It is also considered difficult to remove solvents

monomer that is contained has higher hydrophilicity

that permeate into minute enamel cracks by air drying.

than 10-MDP or HEMA, features excellent polymeriza-

Based on the permeability inhibition rate in enamel

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crack specimens, the KE, GP, and SU groups showedthat it brought about the formation of resin tags. On thefavorable enamel crack sealing abilities, and the SEM

other hand, GP and SU, which are one-step self-etching

images of the enamel surface revealed resin films thatsystems, have been reported to have favorable adhesive

coated the surface. Based on the SEM images of theproperties to dentin34,35）. However, we did not observe

longitudinal cross-sectional surface of enamel cracks,

the penetration of resin tags into the dentinal tubules in

the resin permeated more deeply into the cracks in the

the GP group, even though we observed the bonding

KE group than in the GP and SU groups, while all threelayer that coated the dentin surface. In addition, the SU

groups showed resin components that permeated insidegroup showed only a little penetration of resin tags into

the enamel cracks. Since KE benefits from the effects ofthe dentinal tubules even though we observed thelow viscosity and the hydrophilic multifunctional amide-

bonding layer that coated the dentin surface. There is a

27）

type monomer with high affinity to dentin , and since

report which claimed that a coarse resin film withit does not contain fillers, it is assumed that it perme-

voids was observed due to the effects of the inner fluid

ated more deeply into fine enamel cracks. It is alsoof dentinal tubules, which seeps out to the dentin sur-assumed that sealing with resin was observed even inface under the inner pressure of the dental pulp, when

deeper parts of enamel cracks as sufficient polymeriza-a resin-based desensitizer was applied on the dentintion occurred thanks to no solvent content, whichsurface on which such inner pressure was applied26）.

therefore caused no failure of resin polymerization.

The results suggest that resin tags were not observed

However, due to the low mechanical strength which

for GP and SU in this experiment as the bonding com-

results from containing no fillers, the results suggest

ponents could not seep into the dentinal tubules due tothat some resin fell out from inside the enamel cracks

the effects of the inner fluid of the dentinal tubules

during the preparation of specimens for SEM observa-

under the inner pressure of the dental pulp, evention. On the other hand, for GP and SU, which are one-though the adhesiveness between the dentin surface

step self-etching systems, the viscosity of each material

and bonding components was favorable.

as well as the grain shape and size of the filler contained seemed to have affected the penetration depth

Conclusion

into the enamel cracks, even though we observed permeation of resin components into enamel cracks forIn this study, we examined the sealing ability of aboth systems. Furthermore, since GP contains acetone

prototype new high-penetration resin material for toothand water, and SU contains ethanol and water, as sol-

substrates for enamel cracks and dentinal tubules

vents, it is possible that the air drying did not reachunder application of the inner pressure of human dental

32）

sufficiently into the deep parts of enamel cracks .

Polymerization failure, which occurs due to the pres33）

pulp, and obtained the following results.
1．Regarding the permeability inhibition rate onence of unremoved residual solvents , may also haveenamel cracks and dentinal tubules, we observed thatbeen a factor that resulted in the difference in penetra-

the new high-penetration resin material delivered antion depth into enamel cracks.

equally high and favorable rate as conventional res-

Based on the permeability inhibition rate in dentin

in-based desensitizers.

discs, we found that the KE, GP, and SU groups have

2．Compared to conventional resin-based desensitiz-favorable ability to seal dentinal tubules, with SEM

ers, we observed that the new high-penetration resin

images of the dentin surface showing resin films coat-material permeated more deeply and sealed the enamel

ing the surface. In the SEM images of the longitudinalcracks and dentinal tubules.

section of dentin discs, we observed resin tags that pen-

3．The results indicated that the new high-penetra-

etrated into the dentinal tubules in the KE group. Thetion resin material delivered a better sealing abilityhydrophilic multifunctional amide-type monomer con-than conventional resin-based desensitizers.

tained in KE has high hydrophilicity, and KE is low inviscosity as it contains no fillers. Therefore, it isassumed that KE permeated even the dentinal tubules
to which dental pulp inner pressure was applied, andThe authors declare no conflict of interest in this study orreport.

2020 年 12 月

Sealing Ability of High-penetration Resin for Enamel Cracks and Dentinal Tubules

49114）Shimizu H, Hoshika T, Nishitani Y, Yoshiyama M. Effect

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492

日

本

歯

科

ester. Adhes Dent 2017; 35: 40‒46.（in Japanese）

保

存

学

雑

誌

第 63 巻第6号

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2020 年 12 月

Sealing Ability of High-penetration Resin for Enamel Cracks and Dentinal Tubules493

歯質高浸透型新規レジン系材料によるエナメルクラックならびに象牙細管の封鎖性に関する研究

三

浦
吉

樹

保

尾

謙

三

岩

田

川

一

志

山

本

一

世

有

弘

大阪歯科大学歯科保存学講座

抄録
目的：近年，高齢化ならびに国民 1 人当たりの残存歯数の増加がみられるが，それに伴って齲蝕や歯周病以外に，非齲蝕性疾患，特に象牙質知覚過敏症や，実質欠損を伴わないエナメル質の微細亀裂（エナメルクラック）による知覚過敏症状を呈する患者が増えている．新規開発された低粘度の試作歯質高浸透型新規レジン系
材料は，溶剤を含まないためエアー乾燥が必要なく，高い親水性・濡れ性を有するため歯質への馴染みがよく，エナメル質のエナメルクラックや象牙細管への高い浸透性を有している．今回われわれは，知覚過敏症罹患モ
デル歯質を用いて透過抑制率を測定することにより，試作歯質高浸透型新規レジン系材料のエナメルクラック
ならびに象牙細管の封鎖性について検討を行ったので報告する．
材料と方法：試作歯質高浸透型新規レジン系材料 KEC‒100（Kuraray Noritake Dental，KE）と，レジン系
知覚過敏抑制材として G‒Premio BOND（ジーシー，GP），Scotchbond Universal Adhesive（3M ESPE，SU）
を使用した．健全ヒト抜去大臼歯を用いて，エナメルクラック試料と象牙質ディスク試料を作製した．Pashley
らの報告に準じて作製した装置を用いて，試料を装置に接続して内圧が 25 mmHg になるように規定した．各材料の塗布後，エナメルクラックと象牙細管の透過性を測定し，縦断面の SEM 観察よりエナメルクラック内の封鎖深度を測定した．
結果：エナメルクラックの透過抑制率について，KE は 96.0％，GP は 96.3％，SU は 94.0％であり，KE，
GP，SU 間に有意差はなく，高い透過抑制率を示した．また，象牙細管の透過抑制率について，KE は 90.0％，
GP は 94.2％，SU は 93.7％であり，KE，GP，SU 間に有意差はなく，高い透過抑制率を示した．SEM 観察では，エナメル質表面ならびに象牙質表面はレジンによる被覆が認められた．縦断面の SEM 観察より，エナメ
ルクラック内の封鎖深度について，KE は，GP，SU と比べて有意に高い値が認められた．また，KE は象牙細管内に深くまで侵入するレジンタグが認められたが，GP ではレジンタグの侵入は認められず，SU ではレジン
タグの侵入はわずかであった．
結論：試作歯質高浸透型新規レジン系材料は，エナメルクラックならびに象牙細管に対して，従来のレジン
系知覚過敏抑制材より高い封鎖性を有することが示唆された．
キーワード：封鎖性，知覚過敏症罹患モデル歯質，高浸透型レジン

責任著者連絡先：保尾謙三〒 573‒1121 大阪府枚方市楠葉花園町 8‒1 大阪歯科大学歯科保存学講座
TEL：072‒864‒3077，FAX：072‒864‒3177，E-mail：yasuo-k@cc.osaka-dent.ac.jp
受付：2020 年 7 月 31 日/受理：2020 年 8 月 26 日

日

494

本

歯

科

保

原

存

学

雑

誌

第 63 巻著

第6号

日歯保存誌 63（6）：494～502，2020

ユニバーサルアドヒーシブのアクティブ処理およびエッチングモードがエナメル質接着強さおよび表面自由エネルギーに及ぼす影響
今

井

亜理紗1

髙

宮

鈴

木

総

髙見澤

俊

樹1,2

田

村

友

彦1

寛1

若

松

賢

吾1

辻

本

暁

正1,2

史1

鈴

木

美

穂1

宮

崎

真

至1,2

日本大学歯学部保存学教室修復学講座

1

日本大学歯学部総合歯学研究所生体工学研究部門

2

抄録
目的：エッチングモードおよびアクティブ処理の有無がユニバーサルアドヒーシブのエナメル質接着性に及ぼす影響について，接着強さ試験，アドヒーシブ塗布後のエナメル質面における表面自由エネルギー測定および走査型電子顕微鏡（SEM）観察を行うことによって検討した．
材料と方法：供試したユニバーサルアドヒーシブは，Clearfil Universal Bond Quick（Kuraray Noritake
Dental）である．接着試験には，ウシ下顎前歯のエナメル質を，耐水性 SiC ペーパーの #400 まで順次研削して用いた．アドヒーシブの塗布に際して，リン酸エッチングの有無ならびにアドヒーシブのアクティブ処理の有無という 4 条件を設定した．アドヒーシブ塗布面にコンポジットレジンを接着させた試片を 37℃精製水中に24 時間保管後，万能試験機を用いて接着強さを測定した．さらに，アドヒーシブ処理面の表面自由エネルギーを測定するとともに，SEM 観察を行った．
成績：アクティブ処理の有無にかかわらず，リン酸エッチングを行うことで有意に高いエナメル質接着強さが得られたものの，アクティブ処理の有無は接着強さに影響を及ぼさなかった．エナメル質の表面自由エネル
ギーは，リン酸エッチングによって有意に高くなったものの，アドヒーシブ塗布後では，リン酸エッチングの有無にかかわらずアクティブ処理によって低下する傾向を示した．SEM 観察から，リン酸エッチングによってエッチングパターンが明瞭に観察されたが，アクティブ処理を行うことでこれが不明瞭になった．
結論：ユニバーサルアドヒーシブのエナメル質接着性は，リン酸エッチングを行うことで向上し，表面自由エネルギーとしては極性成分が上昇することが明らかとなった．
キーワード：エナメル質接着性，ユニバーサルアドヒーシブ，アクティブ処理，表面自由エネルギー

責任著者連絡先：髙見澤俊樹〒 101‒8310 東京都千代田区神田駿河台 1‒8‒13 日本大学歯学部保存学教室修復学講座
TEL：03‒3219‒8141，FAX：03‒3219‒8347，E-mail：takamizawa.toshiki@nihon-u.ac.jp
受付：2020 年 8 月 3 日/受理：2020 年 10 月 23 日
DOI：10.11471/shikahozon.63.494

2020 年 12 月

異なる塗布法がユニバーサルアドヒーシブのエナメル質接着性に及ぼす影響

緒495た．次いで，直径 4～5 mm のエナメル質平坦面が得られ言るようにモデルトリマーを用いて唇側中央部を研削した
後，この面を耐水性 SiC ペーパーの #400 まで順次研削

ユニバーサルアドヒーシブは，組成とともに術式においても従来のシングルステップセルフエッチアドヒーシブと類似点が多いとされている1,2）．しかし，ユニバーサ

して，被着エナメル質面とした．
2 ）接着強さ測定用試片（接着試片）の製作および保管条件

ルアドヒーシブの特徴として，エッチ＆リンス（ER），

接 着 試 片 の 製 作 お よ び 剪 断 接 着 強 さ 試 験 は，ISO

セルフエッチング（SE）あるいはエナメル質のみをリン

29022：2013 Dentistry―Adhesion―Notched―edge

酸エッチングするセレクティブエッチングという，異なshear bond strength test に準じて行った12）．接着試片のるエッチングモードで使用可能であることが挙げられ製作に際しては，製造者指示条件を基準として，被着面る．したがって，窩洞の大きさ，深さ，位置あるいはに対してユニバーサルアドヒーシブを 1）ER モード＋ア

窩洞におけるエナメル質と象牙質との割合などを考慮しクティブ処理，2）ER モード＋アクティブ処理なし，3）て，このエッチングモードを選択することが可能であSE モード＋アクティブ処理，および 4）SE モード＋ア

り，臨床的な応用範囲は拡大するものと考えられる．

クティブ処理なし，の 4 条件で塗布した後，光照射をアドヒーシブを歯面に塗布する際，ブラシを用いて擦行った（Table 2）．次いで，アドヒーシブ塗布面にウル

3‒6）

4,5）

るように塗布するアクティブ処理は，いくつかのユニ

トラデント治具（Ultradent Products）を設置し，内径バーサルアドヒーシブ製造者が指示している臨床技法で2.4 mm および高さ 2.5 mm のプラスチック型にコンポある．このアクティブ処理は，歯質の脱灰とともにレジジットレジンを塡塞して 30 秒間光照射を行った．これら

ンモノマーの浸透性を促進させる効果を有し，これにの接着試片は，37℃精製水中に 24 時間保管した．なお，

よって接着性が向上するとされている．しかし，こアクティブ処理に関しては，各条件間で差が出ないようのアクティブ処理の効果に関しては接着強さの測定からに同一の術者が実験期間を通して被着面処理を行った．

7‒11）の検討が主なものであり，異なるエッチングモードにおける効果についても不明な点が多い．
そこで，ユニバーサルアドヒーシブの臨床術式の確立

3 ）接着強さの測定
所定の保管期間が終了した接着試片について，万能試験機（Type 5500R，Instron，USA）を用いてクロスヘッ

に関する研究の一環として，エッチングモードおよびア

ドスピード 1.0 mm/min の条件で接着強さを測定した．

クティブ処理の有無がエナメル質接着性に及ぼす影響に得られた値から，各条件における平均値および標準偏差

ついて，接着強さ試験に加えて，エナメル質における表を求めた．なお，各条件における試片の数は 10 個とし，面自由エネルギーを測定することによって検討した．さ

接着試験終了後の試片については，実体顕微鏡を用いてらに，アドヒーシブ処理面の走査型電子顕微鏡（SEM）

レジン側破断面を観察し，破壊形式を分類した．

観察を考察資料とした．

3 ．表面自由エネルギーの測定
表面自由エネルギーの測定は，接着試験と同様の条件

材料および方法

でアドヒーシブを塗布した処理面を，アセトンおよび蒸1 ．供試材料および可視光線照射器

い，これを接触角測定用試片とした．表面自由エネル

供試したユニバーサルアドヒーシブは，Clearfil Uni-

ギーが既知の液体として，1‒ブロムナフタレン，ジヨー

versal Bond Quick（Kuraray Noritake Dental）であり，

ドメタンおよび蒸留水を使用した（Table 3）．接触角のコンポジットレジンとしては Clearfil AP-X（Kuraray

測定は，全自動接触角計（Drop Master DM 500，Kyowa

留水で 15 秒間ずつ交互洗浄することを 3 回繰り返して行

Noritake Dental）
を，リン酸エッチング材としては Ultra-

Interface Science）を用い，セシルドロップ法で各液滴Etch（Ultradent Products，USA）を用いた（Table 1）．

を 1μl 滴下し，装置に付属するソフトウェア（FAMAS，可視光線照射器（Optilux 501，Kerr，USA）は，その光

Kyowa Interface Science）を用いてθ/2 法で測定を行っ強度が 600 mW/cm2以上であることを試片製作前に確認た．なお，各条件における試片数は 10 個とし，未処理面した後に使用した．

およびリン酸エッチング処理面についても同様に測定を

2 ．接着試験1 ）被着歯面の調整接着試験に使用した歯は，ウシ（2～3 歳齢）下顎前歯で，抜歯後ただちに抜髄し，歯根を切断して歯冠部のみを常温重合型レジン（Tray Resin Ⅱ，Shofu）に包埋し行った．
表面自由エネルギーと接触角との関係は，接着仕事量
を WSL，液体の表面自由エネルギーをγL，個体の表面自由エネルギーをγSおよび接触角をθとしたとき，次の拡張 Fowkes の理論式で定義される．

日

496

本

Table 1
Adhesive

Code
CU

歯

科

保

存

学

雑

誌

第 63 巻

Materials used in the study
Main components（Lot No.）
Clearfil Universal Bond Quick（4G0011）

第6号

Manufacturer

bis-GMA, MDP, HEMA, hydrophilic amide Kuraray Noritake Dental
monomer, filler, ethanol, water, NaF, photo
initiators, chemical polymerization, accelerator, silane coupling agent, others
dimethacrylate resins, initiators, water

Etching agent
Ultra-Etch（G017）

35％ phosphoric acid

Ultradent Products

Resin composite
Clearfil AP-X
（N416713）

bis-GMA, TEGDMA, silane barium glass Kuraray Noritake Dental
filler, silane silica filler, silanated colloidal
silica, CQ, pigments, others

bis-GMA：2,2-bis［4-（2-hydroxy-3- methacryloyloxypropoxy）phenyl］propane, MDP：10-methacryloyloxydecyl dihydrogen phosphate, HEMA：2-hydroxyethyl methacrylate, TEGDMA：triethyleneglycol dimethacrylate, CQ：dl-camphorquinone

Application protocol for pre-etching and self-etching adhesives

Table 2Etching-mode

Pre-etching protocol

Etch-&-rinse

Enamel surface was conditioned with phosphoric acid for 15 s.
Conditioned surface was rinsed with water for 15 s（three-way
dental syringe）and air-dried.

Self-etch

Phosphoric acid pre-etching was not conducted.

CodeApplication method

Adhesive application protocol

CU

Active application

Adhesive applied to air-dried enamel surface with rubbing action
for 10 s, followed by application of a mild stream of air for 5 s oruntil the adhesive no longer moved and the solvent had completely evaporated. Light irradiated for 10 s.

Inactive application

Adhesive applied to air-dried enamel surface without rubbing
action for 10 s, followed by application of a mild stream of air for
5 s or until the adhesive no longer moved and the solvent hadcompletely evaporated. Light irradiated for 10 s.

Table 3

Surface free energy and their component values of tested liquids

LiquidLot No.

Manufacturer

γL

γLd

γLp

γLh

1-Bromonaphthalene
Diiodomethane
Distilled water

ALH4513
ALL2310―

Wako Pure Chemical Industries
Wako Pure Chemical Industries
―

44.6
50.8
72.8

44.4
46.8
29.1

0.2
4.0
1.3

0.0
0.0
42.4

Unit：mN・m－1.

γL：surface free energy, γLd：dispersion force, γLp：polarity force, γLh：hydrogen-bonding force

2020 年 12 月

異なる塗布法がユニバーサルアドヒーシブのエナメル質接着性に及ぼす影響

Table 4

Influence of application condition on enamel bond strength and failure mode analysis（MPa）
Etch-&-rinse mode
ActiveSelf-etch mode

Inactive
a

CU

497

Activea41.8（1.6）

43.0（3.5）［80/0/0/20］［86.7/0/0/13.3］

Inactiveb

29.0（4.0）［100/0/0/0］

27.8（2.6）b［100/0/0/0］

N＝10, values in parentheses indicate standard deviation.
Same small letter in horizontal columns indicates no difference at 0.05 significance level.
Failure mode：［adhesive failure/cohesive failure in resin composite/cohesive failure in enamel/mixed
failure］in percentage of each failure mode.

WSL＝γL＋γS－γSL＝γ（1＋cosθ
）
L

MPa，SE モードでは 27.8～29.0 MPa と，塗布法の違い

この拡張 Fowkes の理論式を用いて，各条件におけるにかかわらず ER モードは SE モードに比較して有意に

表面自由エネルギー（γS）を分散（γS ），双極子（γS ）高い接着強さを示した．また，各エッチングモードでア算出した ．

いても有意差は認められなかった．

dp

および水素結合（γSh）の各成分を，次に示す理論式から
13）

1/2
1/2
γSL＝γL＋γS－2（γLd・γSd）－2（γLp・γSp）－2（γL ・γS ）

h 1/2

h

Table 4 に示す．ER モードでは，塗布法の違いにかかわ
れ，SE モードでは塗布法の違いにかかわらずすべて界γS＝γS ＋γS ＋γS
p

接着試験終了後の破断面における破壊形式の成績を，らず，界面破壊が大勢を占めたものの混合破壊が散見さ

γL＝γLd＋γLp＋γLhd

クティブ処理の有無を比較すると，いずれのモードにおh

面破壊であった．

4 ．SEM 観察
各条件におけるアドヒーシブ塗布後のエナメル質処理

2 ．表面自由エネルギー

面の SEM 観察用試片は，表面自由エネルギー測定用試異なるエッチングモードおよびアクティブ処理の有無

片と同様に製作した．製作した SEM 観察用試片は，tert‒

が，ユニバーサルアドヒーシブ塗布前後のエナメル質にブタノール上昇系列に順次浸漬した後，凍結乾燥（Model

おける表面自由エネルギーに及ぼす影響の成績を Table

ID‒3，Elionix）を行った．その後，試片に対してイオン5 に示した．エナメル質研削面およびリン酸エッチング

コーター（Quick Coater Type SC‒201，Sanyu Electric）

処理面の表面自由エネルギー（γS）は，それぞれ 60.0

を 用 い て 金 蒸 着 し， フ ィ ー ル ド エ ミ ッ シ ョ ン SEM

mN・m－1および 78.3 mN・m－1であり，リン酸エッチン（ERA‒8800 FE，Elionix）を用いて加速電圧 10 kV の条グによって表面自由エネルギーは有意に高くなった．ま件で観察した．

た，ユニバーサルアドヒーシブ塗布後のγSは，いずれの5 ．統計解析

エッチングモードおよびアドヒーシブにおいてもアク得られた接着強さおよび表面自由エネルギーについティブ処理群はアクティブ処理なし群に比較して，有意て，等分散性を確認した後，分散分析および Tukey HSD

差は認められないもののγSが低下する傾向示した．一

test を用いて有意水準 5％の条件で多重比較検定を行っ方，分散成分（γSd）はエッチングモードおよび塗布法にかかわらず 41.0～42.5 mN・m－1であり，有意差は認めら

た．

成

績

れなかった．双極子成分（γSp）は，塗布法の違いにかかわらず ER モードで SE モードに比較して高い値を示した．また水素結合成分（γSh）は，いずれのエッチング

1 ．接着強さ

モードにおいてもアクティブ処理を行うことで低くなる

異なるエッチングモードおよびアクティブ処理の有無

傾向が認められた．

が，ユニバーサルアドヒーシブの接着強さに及ぼす影響

3 ．SEM 観察の成績を Table 4 に示す．二元配置分散分析の結果から，アドヒーシブ塗布前の研削被着面およびリン酸エッチ

エッチングモードは接着強さへの有意な影響因子であっング後のエナメル質表面の SEM 像の代表例を，Fig. 1 にたものの（p＜0.001），アドヒーシブの塗布法は接着強さ示す．SiC ペーパー研削面は，削条痕とともにスミヤー

への有意な因子ではなかった（p＝0.67）．また，各因子層の残留が観察された（Fig. 1‒a）
．一方，リン酸エッチ間での相互作用は認められなかった（p＝0.162）．

ング処理面はスミヤー層が完全に除去され，明瞭なエッ

エナメル質接着強さは，ER モードでは 41.8～43.0

チングパターンが観察された（Fig. 1‒b）．異なるエッチ日498
Table 5

歯

科

保

存

学

雑

誌

第 63 巻

第6号

Effect of application condition on surface free-energy（mN・m－1）
γS

Application condition
InitialBaseline本Pre-etch

γSd

γSp

γSh

60.0（1.5）b

41.5（0.5）a

3.0（0.3）d

14.6（2.6）ba

78.3（2.0）a41.7（0.6）

a9.6（1.2）

27.8（2.4）aEtch-&-rinse

ActiveInactive48.0（2.3）c49.5（1.5）c

41.0（1.6）a42.3（1.0）a7.1（2.7）b6.3（0.6）bc

0.2（0.1）c
0.4（0.1）c

Self-etch

ActiveInactive44.8（1.6）d
46.6（1.6）cd

42.5（1.6）a41.7（1.0）a

3.0（0.6）d
4.5（1.0）cd

0.3（0.2）c
0.5（0.3）cCU

N＝10, values in parentheses indicate standard deviation.
γS；total free energy, γSd；dispersion force, γSp；polar force, γSh；hydrogen-bonding force
Same small letter in a column indicates no significant differences at 0.05 significance level.

Fig. 1 Representative SEM images of initial and treated enamel surfaces（a）Ground with #400 SiC paper（baseline sample, ×5,000 magnification）.
（b）Phosphoric acid pre-etching for 15 sec（baseline sample, ×5,000 magnification）.

ングモードでユニバーサルアドヒーシブを用いた際の，よって異なっている．特に，ユニバーサルアドヒーシブ

アクティブ処理群およびこれを行わなかった群の SEMを塗布する際のアクティブ処理は，歯質接着性を向上さ像の代表例を Fig. 2 に示す．ER モードでは，いずれのせることを目的として多くの製造者が指示している．し塗布法においてもエッチングパターンは観察されたもの

かし，異なるエッチングモードにおけるアクティブ処理の，アクティブ処理群ではエッチングパターンは不明瞭がエナメル質接着性に及ぼす影響に関する報告は少なとなった（Fig. 2A，2B）．一方，SE モードでのエナメルい．そこで，異なるエッチングモードおよび塗布法がユ

質処理面は，SiC ペーパー研削面と同様な像を示し，ア

ニバーサルアドヒーシブのエナメル質接着性に及ぼす影

クティブ処理の有無にかかわらずエッチングパターンは響について，接着強さおよびアドヒーシブ塗布後の表面観察されず，部分的にスミアー層が残留した像を示した

自由エネルギーの測定および SEM 観察によって検討し（Fig. 2C，2D）．

た．

考

察

接着強さ試験の結果から，ER モードのエナメル質接着強さは，アクティブ処理の有無にかかわらず，SE モードに比較して高い値を示した．この結果は，リン酸エッ

近年，ユニバーサルアドヒーシブは簡便な操作性ととチングを併用したセルフエッチングシステムのエナメル

もに汎用性が高いところから使用頻度が増加している．

質接着性に関するこれまでの研究結果と一致するものでユニバーサルアドヒーシブは，窩洞の状況に合わせて最あった14,15）．エナメル質へのリン酸エッチングは，ヌレ

適なエッチングモードを選択することでエナメル質およ性を向上させるとともに投錨効果を発揮することで強固

び象牙質への接着耐久性の向上が期待できるとされていな機械的嵌合力を得ている16‒18）．表面自由エネルギー測る4,5）．一方，ユニバーサルアドヒーシブの塗布に関して

定結果からも，リン酸エッチング処理面は SiC ペーパーは，塗布時間，塗布法あるいはエアブロー圧が製品に研削面に比較してγSが約 30％上昇したが，これは双極子2020 年 12 月

異なる塗布法がユニバーサルアドヒーシブのエナメル質接着性に及ぼす影響

499

Fig. 2 Representative SEM images of enamel surfaces treated with CU（A）Etch-&-rinse mode with active application（×5,000 magnification）.（B）
Etch-&-rinse mode with inactive application（×5,000 magnification）.（C）Selfetch mode with active application（×5,000 magnification）.（D）Self-etch modewith inactive application（×5,000 magnification）.

成分（γSp）および水素結合成分（γSh）の有意な上昇によるものであった．

一方，ER モードにおいてアクティブ処理の有無を比性が促進されると考えられた24）．
本研究に用いたユニバーサルアドヒーシブでは，異なるエッチングモードにおけるγShに有意差は認められな較すると，アクティブ処理群で接着強さが低下する傾向

かったものの，いずれのエッチングモードにおいてもアを示した．この理由として，リン酸エッチングによってクティブ処理群は，これを行わない群に比較して低いγS形成されたエッチングパターンが，アクティブ処理によってその一部が崩壊することで投錨効果が減弱したためと考えられた．SEM 観察からも，リン酸エッチング後のアクティブ処理面はエッチングパターンが押しつぶさおよびγShを示した．一方，ER モードのγSおよびγSpは，
アクティブ処理の有無にかかわらず SE モードと比較して高い値を示した．γShは，エナメル質表面の水分と水酸基成分に関係し，γSpは双極子相互作用に加えて電気的れたような像が認められた．一方，ER モードにおけるおよび金属的相互作用を示す成分である18）．一般に，高表面自由エネルギー測定からは，すべてのアドヒーシブ

い極性を有する物質は水溶性を示し，極性が低い物質はでアクティブ処理後のγSは，アクティブ処理を行わな

有機溶媒に可溶性を示す．このように，固体歯面におけかった群に比較して低い値を示した．これは，アクティ

る極性の特徴を知ることによって，表面処理後の界面科ブ処理によって機能性モノマーと歯質との化学的結合が学的性状が親水性あるいは疎水性のどちらを示すかを知促進されたことで疎水性化し，結果としてγS の値がることができる．この観点からは，いずれのエッチング

SE システムのレジンモノマーは，残留したスミヤーを行わない群に比較して低いγSおよびγShを示したとこ

19,20）

h低下したことによるものと考えられた．

モードにおいてもアクティブ処理群は，アクティブ処理

層内に浸透することで「レジン・スミヤー複合体」を形ろから，アクティブ処理を行ったエナメル質表面は疎水成する．歯質の脱灰に関与するアドヒーシブ中の水性を示す傾向にあったことが示された．また，この疎水素イオンは，pH が比較的高いマイルドタイプでは，ス

性の由来は，歯質と反応することによってエナメル質表

ミヤー層によって中和される ．したがって，マイルド

面に強く配向した機能性モノマーによるものと考えられタイプに属すユニバーサルアドヒーシブにおいては，アた．

21,22）

23）

クティブ処理を行うことによって SE モードでは歯質の以上のように本実験の結果から，ユニバーサルアド

脱灰，HAp との化学的反応およびレジンモノマーの浸透

ヒーシブのエナメル質接着性は，エッチングモードおよ

日

500

本

歯

科

びアドヒーシブの塗布法の影響を受けることが明らかと
なった．

保

存

学

雑

誌

第 63 巻

第6号

systems. Dent Mater 2016; 32: e9‒e21.
5）Suzuki T, Takamizawa T, Barkmeier WW, Tsujimoto A,
Endo H, Erickson RL, Latta MA, Miyazaki M. Influence

結論

異なるエッチングモードおよび塗布法が，ユニバーサ
ルアドヒーシブのエナメル質接着性に及ぼす影響について，接着強さ試験および表面自由エネルギー測定およびSEM 観察を行うことによって検討した結果，以下の結論を得た．
1．アドヒーシブ塗布法の違いにかかわらず，ER モー
ドは SE モードに比較して有意に高い接着強さを示した．
2．各エッチングモード間で接着強さを比較すると，
アドヒーシブ塗布法の違いに有意差は認められなかった．
3．エナメル質研削面およびリン酸エッチング処理面の表面自由エネルギーは，それぞれ 60.0 mN・m－1および 78.3 mN・m－1であり，リン酸エッチングによって表面自由エネルギーが有意に高くなった．
4．アドヒーシブ塗布後のγSは，いずれのエッチング

モードにかかわらず，アクティブ処理群はこれを行わなかった群に比較して低下する傾向を示した．
5．SEM 観察から，ER モードではいずれのアドヒー

シブおよび塗布法にかかわらずエッチングパターンが観察されたものの，アクティブ処理群のエッチングパター
ンはこれを行わなかった群に比較して不明瞭であった．
本 研 究 の 一 部 は， 日 本 学 術 振 興 会 科 学 研 究 費 補 助 金（19K10158），日本大学歯学部佐藤研究費，総合歯学研究所研究費および上村安男・治子研究費によって行われた．
本論文で開示すべき利益相反状態はない．

文

献1）Muñoz MA, Luque-Martinez I, Malaquias P, Hass V, Reis
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222.

2020 年 12 月

異なる塗布法がユニバーサルアドヒーシブのエナメル質接着性に及ぼす影響

18）Tsujimoto A, Iwasa M, Shimamura Y, Murayama R,

501

dentin smear layers. Dent Mater 2001; 17: 296‒308.

Takamizawa T, Miyazaki M. Enamel bonding of single-step self-etch adhesives: Influence of surface energy22）Mine A, De Munck J, Cardoso MV, Van Landuyt KL,
Poitevin A, Van Ende A, Matsumoto M, Yoshida Y,

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remains at self-etch adhesive interface. Dent Mater
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23）Mine A, De Munck J, Cardoso MV, Van Landuyt KL,
Poitevin A, Kuboki T, Yoshida Y, Suzuki K, Van Meerbeek B. Enamel-smear compromises bonding by mild
self-etch adhesives. J Dent Res 2010; 89: 1505‒1509.
24）Yoshihara K, Yoshida Y, Hayakawa S, Nagaoka N, Irie
M, Ogawa T, Landuyt KL, Osaka A, Suzuki K, Minagi S,
Van Meerbeek B. Nanolayering of phosphoric acid ester
monomer on enamel and dentin. Acta Biomater 2011; 7:3187‒3195.

19）Yoshida Y, Nagakane K, Fukuda R, Nakayama Y, Okazaki M, Shintani H, Inoue S, Tagawa Y, Suzuki K, De
Munck J, Van Meerbeek B. Comparative study on adhesive performance of functional monomers. J Dent Res
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20）Yoshihara K, Hayakawa S, Nagaoka N, Okihara T,
Yoshida Y, Van Meerbeek B. Etching efficacy ofself-etching functional monomers. J Dent Res 2018; 97:1010‒1016.
21）Tay FR, Pashley DH. Aggressiveness of contemporary
self-etching systems. I: Depth of penetration beyond

日

502

本

歯

科

保

存

学

雑

誌

第 63 巻

第6号

Influence of Active Application and Etching Mode on Enamel Bond
Strength and Surface Free Energy of a Universal Adhesive
IMAI Arisa1, TAKAMIZAWA Toshiki1,2, TAMURA Tomohiko1,
TAKAMIYA Hiroshi1, WAKAMATSU Kengo1, TSUJIMOTO Akimasa1,2,
SUZUKI Soshi1, SUZUKI Miho1 and MIYAZAKI Masashi1,21Department of Operative Dentistry, Nihon University School of Dentistry2

Division of Biomaterials Science, Dental Research Center, Nihon University School of Dentistry

Abstract
Purpose: The purpose of this study was to investigate the influence of active application and etching modeon the enamel bond performance of a universal adhesive based on shear bond strength（SBS）tests and surface free-energy（SFE）measurements.
Materials and Methods: A universal adhesive, Clearfil Universal Bond Quick（CU, Kuraray Noritake Dental）, was used. Bovine enamel surfaces were ground with silicon carbide papers, ending at #400-grit. The
prepared enamel specimens were divided into four groups following surface treatment:（1）etch-&-rinse modewith active application;（2）etch-&-rinse mode with inactive application;（3）self-etch mode with active application;（4）self-etch mode with inactive application. Ten bonded specimens per group were stored in 37℃ waterfor 24 h, and then SBS tests were performed. The SEF of the enamel surfaces with different application
modes was measured after rinsing with acetone and water. Representative treated enamel surfaces wereobserved with a scanning electron microscope（SEM）. One-way ANOVA followed by Tukey’s honestly significant difference test（α＝0.05）was performed for analysis of the SBS and SFE data.
Results: The SBS values in etch-&-rinse mode were significantly higher than those in self-etch mode
regardless of with or without active application. On the other hand, there were no significant differences in
SBS between the active and inactive application groups. For baseline, the enamel surface after phosphoricacid etching showed a significantly higher total SFE value than the initial（just ground）enamel surface. A
reduction in total SFE was observed for the active application groups compared with the inactive applicationgroups. From the SEM observations, although typical etching patterns were observed in etch-&-rinse mode,the spicular etching pattern appeared to be collapsed in active application.
Conclusion: The results of this study indicated that the SBS values of the universal adhesive tested weresignificantly higher in etch-&-rinse mode than in self-etch mode, regardless of the adhesive application mode.
Regarding the SFE, the universal adhesive showed higher polar force in etch-&-rinse mode than in self-etchmode.
Key words: enamel bonding, universal adhesive, active application, surface free energy

Corresponding author: Dr. TAKAMIZAWA, Department of Operative Dentistry, Nihon University School of Dentistry, 1‒8‒13,
Kanda-Surugadai, Chiyoda-ku, Tokyo 101‒8310, Japan
TEL: ＋81‒3‒3219‒8141, FAX: ＋81‒3‒3219‒8347, E-mail: takamizawa.toshiki@nihon-u.ac.jp
Received for Publication: August 3, 2020/Accepted for Publication: October 23, 2020

2020 年 12 月

503

原

著

日歯保存誌 63（6）：503～511，2020

高グルコース条件下における歯肉線維芽細胞のカルプロテクチン誘導性
炎症関連因子の産生におけるスダチチンの抑制効果
西

川

泰

史

成

石

浩

司1

木

戸

淳

一2

湯

本

浩

通2

徳島大学病院口腔インプラントセンター
徳島大学病院歯科・歯周病科

1

徳島大学大学院医歯薬学研究部 歯周歯内治療学分野

2

抄録
目的：糖尿病患者の歯周病は重症化する．本研究では，糖尿病患者において重症化した歯周病におけるスダ
チ果皮抽出物スダチチンの治療効果を検討することを目的とし，その第一段階として高グルコース条件下で培養した歯肉線維芽細胞において，カルプロテクチンによって誘導される炎症関連因子の産生におけるスダチチ
ンの抑制効果を調べた．
方法：細胞はヒト歯肉線維芽細胞 CRL‒2014（ATCC）を用い，培養は通常のグルコース濃度（5.5 mmol/l）
を Normal Glucose（NG），高グルコース濃度（25 mmol/l）を High Glucose（HG）とした．なお，浸透圧対照として NG に 19.5 mmol/l のマンニトール（MN）を添加して調製した群を実験系に加えた．カルプロテクチンで刺激した後のヒト歯肉線維芽細胞の IL‒6，MCP‒1，MMP‒1 および TIMP‒1 の産生性は ELISA キットを用いて測定・評価し，IκBαおよび p65 のリン酸化誘導の有無はウエスタンブロット法によって検討した．なお，
カルプロテクチン刺激の 60 分前にスダチチンを添加して，カルプロテクチンによる炎症関連因子の産生誘導におけるスダチチンの抑制効果を調べた．
結果：HG 群の歯肉線維芽細胞において，カルプロテクチン誘導性の MMP‒1 および MCP‒1 産生は対照群に比較して有意に亢進したが，HG による IL‒6 の産生亢進はみられなかった．一方，TIMP‒1 の産生はカルプロ
テクチン刺激によって変化しなかった．また，HG 群の歯肉線維芽細胞をカルプロテクチンで刺激すると，対照群に比較して IκBαおよび p65 のリン酸化が著明に亢進した．なお，スダチチンはカルプロテクチンによる
MCP‒1，MMP‒1 の誘導および IκBαおよび p65 のリン酸化を劇的に抑制した．
結論：スダチチンは，NG 群および HG 群の歯肉線維芽細胞においてカルプロテクチン誘導性 MCP‒1 および
MMP‒1 産生を抑制する．このことは，スダチチンが慢性歯周炎および糖尿病患者にみられる歯周病の重症化を抑制する可能性を示唆する．
キーワード：糖尿病，歯周病，スダチチン，カルプロテクチン，歯肉線維芽細胞

責任著者連絡先：成石浩司〒 770‒8504 徳島市蔵本町 3‒18‒15 徳島大学病院歯科・歯周病科
TEL：088‒633‒7344，FAX：088‒633‒7345，E-mail：naruishi@tokushima-u.ac.jp
受付：2020 年 8 月 26 日/受理：2020 年 10 月 30 日
DOI：10.11471/shikahozon.63.503

日

504

緒

本

歯

科

保

存

学

雑

誌

言

現在，わが国の糖尿病予備軍を含めた糖尿病患者数は

第 63 巻第6号

材料および方法
1 ．細胞

約 2000 万人と推計され，糖尿病は「国民を悩ます」疾患

ヒト歯肉線維芽細胞は，CRL‒2014（ATCC，USA）をとして広く認知されている1）．一方，歯周病は糖尿病の用 い た． 培 養 は，10％ の 割 合 に ウ シ 胎 児 血 清 を 含 む

合併症の一つであり，古くから糖尿病患者の歯周病は重DMEM を用い，3～5 代まで継代した細胞を実験に供し症化することが知られるが，その病態は不明である．

た．また，通常のグルコース濃度（5.5 mmol/l）
を Normal

歯肉線維芽細胞は歯周組織の恒常性を維持する役割を

glucose（NG），高グルコース濃度（25 mmol/l）を High

有するが，同時に歯周病の炎症反応を制御することも明

glucose（HG）とした．なお浸透圧対照として，NG にらかになっている．われわれはこれまでに，好中球など

19.5 mmol/l のマンニトール（MN）を添加して調製したが産生するカルプロテクチンが歯肉線維芽細胞のイン系を MN 群として実験系に加えた．

ターロイキン（IL）‒6 産生を劇的に誘導することを報告

2 ．試

薬

した ．このことは，カルプロテクチンは歯周病の重症

S100A8 と S100A9 は ATGen（Sampyeongdong，

化機序の一翼を担うことを意味する．一方，われわれは

Korea）から購入し，カルプロテクチンは Kwon らの方

歯肉線維芽細胞を高グルコース条件下で培養すると，

法7）に従って調製した．スダチチンは和光純薬から購入

IL‒1βや IL‒6 による血管内皮増殖因子（VEGF）あるい

した．また，IκBα，p65 の抗体およびおのおののリン酸はマトリックスプロテアーゼ（MMP）などの炎症関連因化抗体は Cell Signaling Technology（USA）から購入し，子の産生がさらに亢進されるという研究成果を基に，糖ウエスタンブロット法で用いた．

2）

尿病患者の歯周病が重症化する病態機序を報告してきた3）．しかしながら，カルプロテクチンが糖尿病患者の歯周病重症化に関与するかどうかは不明である．

3 ．歯肉線維芽細胞の増殖活性に及ぼすスダチチンの影響の検討
細 胞 の 増 殖 活 性 は 通 法 に 従 い，M T T［3‒（4 , 5‒スダチ（酢橘，Citrus sudachi）は，徳島県が主な産地

dimethyl‒thiazole‒2‒yl）‒2,5‒diphenyl tetrozolium bro-として全国収穫量の約 98％を占める日本固有の柑橘類

mide］（Sigma‒Aldrich，USA）法を用いて測定した2）．

で あ る4）． ス ダ チ は 搾 汁 さ れ た 後， 果 汁 は ポ ン 酢 やすなわち，細胞を 96 穴プレートに 1.0×104個/96 well のジュース類の原料として利用されるが，果皮などの搾汁密度になるように播種し，その 24 時間後にスダチチン

残渣については，その多くは堆肥化されるものの，その（0～15μmol/l）を添加した．その後，24～48 時間培養

他の有効活用が検討されている．すなわち柑橘類の果皮

し，MTT を最終濃度 0.5 mg/ml になるように添加した．

には多くのポリフェノールが含まれ，これまでに抗がん細胞の増殖活性は，MTT を吸収して青褐色のホルマザ作用や抗血糖作用などが報告されており5），スダチ果皮ンを形成した細胞を DMSO で溶解した後，吸光度計においても同様の健康増進効果が期待されている．最（Bio‒Rad，測定波長：595 nm）を用いて溶解液の発色程

近，高脂肪食を与えた肥満マウスにスダチ果皮から抽度を測定して調べた．

出・同定されたポリフェノールのスダチチンを長期投与

4 ．炎症関連因子の産生性の検討することで，その血糖値が有意に改善したと報告され

ヒト歯肉線維芽細胞を上記 3 条件（NG，HG，MN）でた6）．すなわちスダチチンには，糖尿病患者の血糖値を培養した後，カルプロテクチン（50 nmol/l）で 24 時間

改善する作用があるのかもしれない．一方，糖尿病患者

刺激した後の培養上清を回収し，市販の ELISA キットにみられる重症化した歯周病において，スダチチンが抑（R & D，USA）を用いて IL‒6，Monocyte chemotactic

制的な抗炎症効果を発揮するかどうかは不明である．

protein（MCP）‒1，MMP‒1 および Tissue inhibitor of

本研究では，糖尿病患者において重症化した歯周病にMMP（TIMP）‒1 の産生動態を調べた．また，カルプロ

対してスダチチンが抗炎症効果を示すかどうかを探るこ

テクチンによる上記 4 種の炎症関連因子の産生誘導におとを目的に，その第一段階として歯肉線維芽細胞を高グけるスダチチンの抑制効果を調べるために，10μmol/l

ルコース条件下で培養した後にカルプロテクチンで刺激のスダチチンをカルプロテクチン刺激の 1 時間前に添加し，細胞の炎症関連因子の産生性に及ぼすスダチチンのした実験系も併せて検討した．

抑制効果を検討した．

5 ．細胞内シグナル伝達系の検討
ヒト歯肉線維芽細胞を上記 3 条件（NG，HG，MN）で培養し，カルプロテクチン（50 nmol/l）で 30 分間刺激
した後，全細胞タンパクを回収し，通法に従ってウエス2020 年 12 月

歯肉線維芽細胞の炎症因子産生におけるスダチチンの抑制効果

タンブロット法によって IκBαおよび p65 のリン酸化動態を調べた．なお，リン酸化分子は，ルミノイメージア

（B）

（A）

パン）を使用して検出した．また，カルプロテクチンに系も併せて検討した．なお，リン酸化した IκBαおよびp65 の強度は，ImageJ ソフトウェア（ver. 1.53a，NIH，
USA）を用いて各バンドの黒化度を測定した後，対照のIκBαおよび p65 の黒化度の値で除した数値によって評
価した．

（C）

1.0

MTT OD595

をカルプロテクチンで処理する 1 時間前に添加した実験

各群における有意差の有無は，統計解析ソフト JMP
8.0.2（SAS Institute，USA）を用いて ANOVA Tukey‒
HSD test および Student’s t‒test によって解析し，p 値が 0.05 未満を有意差ありと判定した．

結果

1 ．スダチチンによる細胞障害作用の検討
スダチチンは，0，1，5，10，15μmol/l で歯肉線維芽

OCH3

O

OH
NS

NS

0.5

0
Suda（μmol/l）: 0

6 ．統計解析O

H3CO

よる IκBαおよび p65 のリン酸化誘導におけるスダチチ

OH

OCH3

HO

ナライザー（ImageQuant LAS500，GE ヘルスケアジャ

ンの抑制効果を調べるために，10μmol/l のスダチチン

505

1time（h）
:

5

10 15

24

0

1

5

10 15

48

Fig. 1（A）Image of Citrus sudachi.（B）Chemical structure of Sudachitin.（C）Effects of Sudachitin on cellproliferation. After HGFs were treated with Sudachitin（0‒15μmol/l）for 24‒48 h, cell proliferative activity
was determined using MTT assay. Data represents as
the mean±SD from 3 independent experiments.
Suda, Sudachitin. NS, not significant differences,
ANOVA Tukey-HSD.

細胞を刺激して 24 時間および 48 時間培養した後の細胞増殖活性に影響を及ぼさなかった（ANOVA‒Tukey
HSD 検定，Fig. 1C）．
2 ．カルプロテクチン誘導性炎症関連因子の産生におけるスダチチンの影響

1：p＜0.0001，vs. NG，p＝0.0002，vs. MN；TIMP‒1：
p＝0.67，vs. NG，p＝0.44，vs. MN，Student’s t‒test）．
また，カルプロテクチンによって誘導された MMP‒1 産
生はスダチチンの前処理によって有意に抑制されたが，Fig. 2 に示すように，カルプロテクチンは歯肉線維芽

TIMP‒1 の産生には変化はみられなかった（MMP‒1：細胞の MCP‒1 および IL‒6 の産生を劇的に誘導した（p＜NG，p＜0.0001，HG，p＜0.0001，MN，p＝0.0002；

0.0001，Student’s t‒test）．また，HG 条件下で培養した

TIMP‒1：NG，p＝0.92，HG，p＝0.59，MN，p＝0.82，

歯肉線維芽細胞においては，対照群と比較してカルプロ

Student’s t‒test）．

テクチン誘導性の MCP‒1 産生は有意に亢進したが IL‒6の産生に群間の有意差は認めなかった（MCP‒1：p＝3 ．カルプロテクチン誘導性細胞内シグナル伝達系におけるスダチチンの影響

0.016，vs. NG，p＝0.023，vs. MN；IL‒6：p＝0.064，vs.

カルプロテクチンは，歯肉線維芽細胞の p65 およびNG，p＝0.65，vs. MN，Student’s t‒test）．また，カルプIκBαのリン酸化を著明に誘導した（Fig. 4A）．また HG

ロテクチンによって誘導された MCP‒1 産生は，スダチ

条件下で培養した歯肉線維芽細胞をカルプロテクチンでチンの前処理によって有意に抑制されたが IL‒6 の産生刺激すると，対照群と比較して p65 および IκBαのリンは抑制されなかった（MCP‒1：NG，p＜0.0001，HG，酸化がさらに亢進した．一方，NG および HG 条件下でp＜0.0001，MN，p＝0.0002；IL‒6：NG，p＝0.81，HG，培養した歯肉線維芽細胞のカルプロテクチン誘導性の

p＝0.57，MN，p＝0.16，Student’s t‒test）．
次に，Fig. 3 に示すように，カルプロテクチンは歯肉
線維芽細胞の MMP‒1 産生を劇的に誘導したが TIMP‒1の産生には影響を及ぼさなかった（MMP‒1：p＜0.0001；
TIMP‒1：p＝0.52，Student’s t‒test）．また，HG 条件下

p65 および IκBαのリン酸化は，スダチチンの前処理によってともに著明に抑制された（Fig. 4B）．

考察で培養した歯肉線維芽細胞においては，対照群と比較し歯周病は糖尿病の慢性合併症の一つである．また歯科てカルプロテクチン誘導性の MMP‒1 産生は有意に亢進

臨床の現場において糖尿病患者の歯周病は重症化するこしたが TIMP‒1 の産生に有意差は認めなかった（MMP‒とが知られているが，その病態は不明である．これまで

1,000
500

1,000

0
CPT: － ＋学

雑1,500 HG
1,500 MN
＊＊
＊＊

500

500

0
CPT: ＋ ＋
Suda: － ＋0
CPT: ＋ ＋
Suda: － ＋0
CPT: ＋＋
Suda: －＋

IL－6（pg/ml）

1,000

存

500

（E）
3,000 NG

＊＊

保

1,000

（D）
3,000 NG
2,000

科

1,000

IL－6（pg/ml）

0
CPT: － ＋

＊＊

歯

2,000

NS

3,000 HG

3,000 MN

2,000

2,000

NS

NS

1,000

1,000

1,000

0
CPT: ＋ ＋
Suda: － ＋0
CPT: ＋ ＋
Suda: － ＋0
CPT: ＋ ＋
Suda: － ＋誌

第 63 巻

第6号

（C）
1,500
MCP－1（pg/ml）＊＊（B）
1,500 NG
MCP－1（pg/ml）

MCP－1（pg/ml）（A）
1,500 NG

本

＊

1,500

1,000

1,000

500

500

0

NG HG

0

CPT
（F）
IL－6（pg/ml）

日

506

3,000
2,000

HG MN
CPT

3,000

NS

1,000
0

＊

2,000

NS

1,000

NG HG
CPT

0

HG MN
CPT

Fig. 2 Effects of Sudachitin on calprotectin-induced MCP-1 and IL-6 production
HGFs were cultured with 25 mmol/l glucose（HG）or 5.5 mmol/l glucose（NG）conditionand stimulated with calprotectin（CPT, 50 nmol/l）. As an osmotic control for HG, cells werealso cultured in NG medium supplemented with 19.5 mmol/l mannitol（MN）. Also, HGFs

were pretreated with Sudachitin（Suda, 10μmol/l）for 60 mins. Supernatants were collected
after 24 h later, and the protein levels of target molecules（MCP-1, IL-6）were measured
using ELISA Kits. Production of MCP-1（A, B, C）and IL-6（D, E, F）. Data represents as themean±SD from 4 independent experiments. ＊：p＜0.05, ＊＊：p＜0.01, as compared with
control, Student’s t-test.

にわれわれは，HG 条件下で培養した歯肉線維芽細胞を要な役割を果たす分子であると考えられる．そこで本研

可溶性 IL‒6 レセプター（sIL‒6R）と IL‒6 で共刺激する

究では，まずカルプロテクチンが糖尿病患者の歯周病重と， 細 胞 内 の extracellular signal‒regulated kinase

症化を誘発する可能性があるかどうかに着目した．すな（ERK）‒CCAAT/enhancer binding protein（C/EBP）シ

わち，糖尿病患者の歯周組織を培養系に再現するべくグナルが増強して，結果的に VEGF 産生が促進されるこ

HG 条件下で培養した歯肉線維芽細胞（HG 群）をカルプとを報告した ．このことは，糖尿病患者では歯周組織

ロテクチンで刺激した後，IL‒6，MCP‒1 およびコラーゲへの毛細血管の浸潤が促進され，著明な歯肉の発赤およン線維を溶解する MMP‒1 の産生性に及ぼす影響を調べ

び腫脹が生じる機序の細胞学的エビデンスとなっている．

た．重要なことに，HG 群では通常のグルコース濃度群8）

カルプロテクチンは S100 ファミリーに属する S100A8（NG 群）と比較してカルプロテクチンは MCP‒1 およびと S100A9 のヘテロダイマーであり，主に好中球によっMMP‒1 の産生性を有意に亢進した．一方，MMP‒1 に阻て産生される分子である ．これまでにわれわれは，カ

害作用を示す TIMP‒1 の産生性は変化しなかった．すな

ルプロテクチンは歯周病患者の歯肉溝滲出液中において

わち TIMP‒1 産生は，カルプロテクチン誘導性 TLR4 シ

高濃度に検出されることから，その歯周病の診断マー

グナル経路によって制御されないと考えられる．また，カーとしての有用性を提唱してきた10）．さらにカルプロ

TIMP‒1 の作用が変化しない状況にあるため，結果的にテクチンは，Toll 様受容体 4（TLR4）および NF‒κB 経

MMP‒1 によるコラーゲン線維の破壊がさらに増強され路を介して歯肉線維芽細胞の IL‒6 および MCP‒1 の産生る環境にあることも示唆された．このことは，カルプロを誘導することも報告しており ，これら一連の研究成

テクチンによって誘導される糖尿病患者の歯周病重症化

果を鑑みて，カルプロテクチンは歯周病の病態形成に重機序の一翼を示すものである．一方，歯周病の病態形成

9）2）歯肉線維芽細胞の炎症因子産生におけるスダチチンの抑制効果

5

＊＊

（B）

0
CPT: － ＋

30 NG
20

NS

10
0
CPT: － ＋（E）
TIMP－1（ng/ml）

TIMP－1（ng/ml）

（D）

10 NG

10 HG

10

MN

＊＊

5

＊＊

5

5

＊＊

0
CPT: ＋ ＋
Suda: － ＋0
CPT: ＋ ＋
Suda: － ＋0
CPT: ＋ ＋
Suda: － ＋

30 NG

30 HG

30 MN

20

NS

20

NS

20

NS

10

10

10

0
CPT: ＋ ＋
Suda: － ＋0
CPT: ＋ ＋
Suda: － ＋0
CPT: ＋ ＋
Suda: － ＋

507

（C）
10
MMP－1（ng/ml）

10 NG

（F）

10
＊＊

5

0

TIMP－1（ng/ml）

MMP－1（ng/ml）（A）

MMP－1（ng/ml）

2020 年 12 月

5

NG HG
CPT

30
20

0

HG MN
CPT

30
NS

10
0

＊＊

20

NS

10

NG HG
CPT

HG MN
CPT

Fig. 3 Effects of Sudachitin on calprotectin-induced MMP-1 and TIMP-1 production
HGFs were cultured with 25 mmol/l glucose（HG）or 5.5 mmol/l glucose（NG）conditionand stimulated with calprotectin（CPT, 50 nmol/l）. As an osmotic control for HG, cells werealso cultured in NG medium supplemented with 19.5 mmol/l mannitol（MN）. Also, HGFs

were pretreated with Sudachitin（Suda, 10μmol/l）for 60 mins. Supernatants were collected
after 24 h later, and the protein levels of target molecules（MMP-1, TIMP-1）were measured
using ELISA Kits. Production of MMP-1（A, B, C）and TIMP-1（D, E, F）. Data represents
as the mean±SD from 4 independent experiments. ＊＊：p＜0.01, as compared with control；NS, not significant differences, Student’s t-test.

に重要な役割を果たす IL‒6 については，われわれの以前

躇せざるをえない状況にしばしば遭遇する．そこで血糖の報告 に相応してカルプロテクチンによる劇的な産生

コントロール不良の歯周病患者に対して各種薬剤の抗誘導はみられたが，HG 群における有意な亢進はみられ

菌・抗炎症効果に期待する薬物療法が併用，選択されるなかった．IL‒6 は歯周病重症化機序において，糖尿病患ことが多い．塩酸ミノサイクリンを用いた歯周局所の抗者に特化した作用はもたないのかもしれない．次に，カ菌療法（LDDS）はその代表例であろう．

2）

ルプロテクチンによって誘導されるシグナル伝達経路に徳島県が主な産地である柑橘類のスダチは，酸味や風及ぼす HG の影響を調べるために，HG 群におけるカル味が強いため減塩効果のある薬味として利用されること

プロテクチン誘導性の NF‒κB 経路の動態を調べたとこが多い（Fig. 1A）．スダチ果汁には疲労回復・抗酸化・ろ，NG 群と比較して IκBαおよび p65 のリン酸化が劇

美肌効果などがあるといわれ，世界的な健康志向の高ま的に亢進された．われわれは HG 群における IL‒6 シグナ

りとともにわが国の消費者にも注目されるようになって

ル伝達分子 gp130 の発現の増強を報告したが ，カルプいる4）．一方，本研究で用いたスダチチンは，スダチ果

ロテクチンの標的受容体である歯肉線維芽細胞の TLR4

皮（搾汁残渣）から抽出されるポリフェノールである

発現が HG によって増強されるかどうかは今後の研究課（Fig. 1B）．最近，スダチチンがマクロファージを標的と題である．

した in vitro 研究によって，誘導型一酸化窒素合成酵素

8）

糖尿病患者に対する歯周病治療は歯周組織の感染源を（iNOS，inducible nitric oxide synthase）の産生抑制を介機械的に除去するという大原則はあるものの，HbA1c 値

して抗炎症効果を有すること12），また肥満マウスを標的が 7.0％を超える場合は観血的な治療を避ける必要性もとした in vivo 研究によって血糖値改善効果を有するこ

提唱されており ，臨床的には根治的な歯周病治療を躊と6）が報告された．これらの研究成果は，歯周病および

11）

日

508
（A）

－

CPT:
NG

本

歯

科

存

学

雑

HG

MN

NG

誌

HG

MN

1

35

3

120

184

123

p－p65

NF－κB
MMP－1 MCP－1

p65
100

145

128

（B）

199

268

235

CPT
NG

Suda（μmol/l）: 0

HG
10

0

10

5

57

7

p－IκBα
IκBα
fold:

31

第6号

CPT
HG

NG

IκBα

fold:

第 63 巻Periodontitis＋

p－IκBαfold:

保Sudachitin

NF－κB

Sudachitin

MCP－1 MMP－1

Schematic representation of inhibitory
effects of Sudachitin on calprotectin-induced
progression of severe periodontitis in diabetic patients
HG enhances calprotectin（CPT）-induced production of inflammation-related molecules in HGFs,
resulting in progression of severe periodontitis indiabetic patients. In addition to the usual periodontitis treatment clinically, Sudachitin intake may contribute to prevent the progression of theseunwanted cascades.
Fig. 5p－p65

けるカルプロテクチン誘導性の炎症関連因子の産生系に

p65
fold:

68

54

80

64

Effects of Sudachitin on calprotectin-induced
phosphorylation of p65 and IκBα（A）HGFs were cultured with 25 mmol/l glucose

Fig. 4

おけるスダチチンの影響を調べることにした．まず，われわれは実験系に用いる適正なスダチチンの刺激濃度を検討した．すなわち，歯肉線維芽細胞におけるスダチチ
ンによる細胞増殖能に及ぼす影響を MTT 法によって確（HG）or 5.5 mmol/l glucose（NG）condition and stim-

認したところ，スダチチンは 15μmol/l 以下の濃度におAs an osmotic control for HG, cells were also cultured
in NG medium supplemented with 19.5 mmol/l manni-

果から，本研究では 10μmol/l のスダチチンを細胞実験

ulated with calprotectin（CPT, 50 nmol/l）for 30 mins.

tol（MN）.（B）To examine the effects of Sudachitin（Suda）on CPT-induced phosphorylation of p65 andIκBα, Sudachitin（10μmol/l）was added 60 min priorand during stimulations. Cell lysates were resolved by
SDS-PAGE and analyzed using western-blotting
probed with antibodies against phospho-p65 and phospho-IκBα. Equal loading of total lysates（10μg）was
confirmed by re-probing with antibodies against eachmolecule p65 and IκBα. This figure shows a result ofrepresentative 2 independent experiments. Quantitation of the phosphorylated protein levels was performed by densitometric scanning of each band using
Image J software, and fold changes of each band wereexpressed as a ratio of control.

いて細胞増殖活性になんら影響を示さなかった．この結に用いることにした．なお，Yuasa らの研究12）ではマク
ロファージ様 RAW264 細胞に対するスダチチンの刺激
濃度は 30μmol/l に設定されていたので，われわれの実
験系におけるスダチチンの適用濃度はそれと比較して低濃度であったと評価される．一方，Ohyama らの研究13）によると，10μmol/l のスダチチンによって破骨細胞の分化が抑制されており，スダチチンの至適濃度は標的細胞によって異なる可能性が考えられた．次に，歯肉線維芽細胞においてカルプロテクチンによる炎症関連因子の産生誘導がスダチチンによって抑制されるかどうかを調べたところ，スダチチンは MCP‒1 および MMP‒1 の産生を有意に抑制した．代表的なケモカインである MCP‒
1 の産生抑制は炎症性細胞の走化性・遊走性を弱めることに繋がるので，スダチチンには歯周組織への炎症性細胞 浸 潤 を 抑 制 す る 効 果 が あ る と 考 え ら れ た． また，糖尿病の双方の疾患にスダチチン摂取が好影響を与える

MMP‒1 の産生抑制は結果的にコラーゲン線維の分解抑可能性を示唆するものである．そこで本研究では，スダ制に繋がるので，本研究結果から，スダチチンは歯周病

チチンが糖尿病患者における歯周病重症化に対して抑制進行による歯周組織破壊の抑制作用を有する可能性も示的な作用を示すかどうかを検討するために，HG 群にお唆された．なお，本研究で得られた知見の正当性および2020 年 12 月

歯肉線維芽細胞の炎症因子産生におけるスダチチンの抑制効果

509

将来の臨床応用の是非は，適切な in vivo 研究あるいはした歯周病も抑制制御しうる新たな治療コンセプトの確臨床研究の実施によって検証される必要がある．また，

立および創薬技術の発展に結び付くことが期待される．

一般的に TLR シグナルにおいて NF‒κB 経路は中心的な結役割を果たすことが知られているので，今回，カルプロ
テクチン誘導性の NF‒κB 経路の増強がスダチチンに論

よって抑制されるかどうかを調べたところ，スダチチン

スダチチンは，NG 群および HG 群の歯肉線維芽細胞

はその IκBαおよび p65 のリン酸化を著しく抑制した．

においてカルプロテクチン誘導性 MCP‒1 および MMP‒

われわれは，歯肉線維芽細胞における MCP‒1 および1 産生を抑制する．すなわち，スダチチンは慢性歯周炎

MMP‒1 の産生が NF‒κB 経路によって制御されることおよび糖尿病患者における歯周病重症化を抑制する可能を報告している2,3）．すなわち，歯肉線維芽細胞における性が示唆される．

スダチチンによるカルプロテクチン誘導性の MMP‒1 お
よび MCP‒1 の産生抑制は，NF‒κB 経路の抑制によって生じるものと推察される．スダチチンは歯根膜細胞における TNF 誘導性の NF‒κB 経路を抑制することが報告されており14），本研究結果もそれに相応するものであった．また，歯肉線維芽細胞において Yuasa ら12）の研究で示された iNOS を介した制御が存在するかどうかについては今後の課題である．以上のことから，スダチチンには歯周組織を構成するさまざまな細胞に対して抗炎症作用を示す可能性があり，将来，有効な薬理効果を発揮す
るポリフェノールとしての臨床応用が期待される．しかしながら，カルプロテクチン誘導性の IL‒6 産生系においてスダチチンの抑制効果はみられなかったことから，標的分子を含めてスダチチンによる細胞作用の機序には不可解な点もある．すなわち，1．NF‒κB 経路以外にも抑制作用を示す他のシグナル分子の存在は否定できない，
2．MCP‒1 や MMP‒1 の産生がカルプロテクチンによる直接的なシグナルに依存するものではなく，実はカルプ
ロテクチン誘導性の未知のサイトカインによるオートク
リン的なシグナル系が併存し，スダチチンによって，その未解明のシグナルが抑制されている可能性もある．今後，スダチチンによる炎症反応の抑制機序の詳細がさらに解明・追求されることが望まれる．
一般的に，ポリフェノールは未病の段階で継続服用することで未然に疾患発症を防ぐという効能に期待する栄養素である15）．近年，ポリフェノールの成分が生化学的に分析され，その薬理機序が分子レベルで解明されるよ
うになってきた．すなわち現代は，古くから知られてき
た健康増進をもたらす栄養成分の解析が進み，それらの標的分子を絞り込むことで，これまで想定しえなかった
新たな疾患に対する薬理効果が期待される時代なのかもしれない．本研究では，スダチチンは HG 条件下で培養した歯肉線維芽細胞において複数の炎症関連分子の産生を抑制することを示した（Fig. 5）．昨今，スダチチン摂取による血糖コントロールの改善効果が期待されており，さらに将来，スダチチンによる炎症制御の機序が細胞レベルで明らかになることで，糖尿病と同時に重症化謝辞本研究の一部は，日本学術振興会科学研究費補助金研究活
動スタート支援（19K21411）および基盤研究 C（19K10131）の助成によって行われた．
本研究の遂行および本論文の作成にあたり，開示すべき一切の利益相反はない．

文献1）斎 藤 重 幸． わ が 国 の 糖 尿 病 の ト レ ン ド． 日 循 予 防 誌
2018；53：211‒219．
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3）Lew JH, Naruishi K, Kajiura Y, Nishikawa Y, Ikuta T,
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polymethoxylated flavone, improves glucose and lipid
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8）Omori K, Naruishi K, Nishimura F, Yamada-Naruishi H,

510

日

本

歯

科

保

存

学

雑

誌

第 63 巻

第6号

Takashiba S. High glucose enhances interleukin-6-in-Tsuji A. Sudachitin, a polymethoxyflavone from Citrus

duced vascular endothelial growth factor 165 expression via activation of gp130-mediated p44/42 MAPK-

sudachi, suppresses lipopolysaccharide-induced inflammatory responses in mouse macrophage-like RAW264

CCAAT/enhancer binding protein signaling in gingival
fibroblasts. J Biol Chem 2004; 279: 6643‒6649.
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polymethoxy flavonoid sudachitin suppresses inflammatory bone destruction by directly inhibiting osteoclastogenesis due to reduced ROS production and MAPK
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cells. Biosci Biotechnol Biochem 2012; 76: 598‒600.

2020 年 12 月

歯肉線維芽細胞の炎症因子産生におけるスダチチンの抑制効果

511

Inhibitory Effects of Sudachitin on the Productionof Inflammation-related Molecules in Human Gingival Fibroblasts
Cultured under High Glucose Conditions
NISHIKAWA Yasufumi, NARUISHI Koji1,
KIDO Jun-ichi2 and YUMOTO Hiromichi2
Department of Oral Implant Center, Tokushima University Hospital
1

Department of Periodontics, Tokushima University Hospital2

Department of Periodontology and Endodontology, Tokushima University Graduate School of Biomedical Sciences

Abstract
Purpose: Diabetic patients are susceptible to severe periodontitis. Sudachitin, which is a polymethoxyflavone derived from the peel of Citrus sudachi, possesses antioxidant properties. The purpose of this study
was to explore the biological activities of Sudachitin on severe periodontitis in diabetic patients by targeting
human gingival fibroblasts（HGFs）cultured under high glucose（HG）conditions.
Methods: HGF cell line CRL-2014（ATCC）was maintained in DMEM containing 5.5 mmol/l glucose（normal
glucose condition, NG）
or 25 mmol/l glucose（HG）, and cells were stimulated with calprotectin. To investigate
the productivity of MCP-1, IL-6, MMP-1 and TIMP-1 after calprotectin stimulation, cell supernatants werecollected for enzyme-linked immunosorbent assay. Next, total cell lysates were collected for western-blotting
in order to investigate the NF-κB signaling after calprotectin stimulation. To examine the effects of Sudachitin on the production of inflammation-related molecules or NF-κB signaling, Sudachitin was added 60 min
prior to the calprotectin stimulation.
Results: Calprotectin increased MCP-1, IL-6 and MMP-1 production significantly in HGFs. HG enhanced
significantly calprotectin-induced production of MCP-1 and MMP-1, but not IL-6. Sudachitin suppressed calprotectin-induced MCP-1 and MMP-1 production in HGFs cultured with both NG and HG significantly. Sudachitin also inhibited dramatically the calprotectin-induced IκBα and p65 phosphorylation.
Conclusion: HG enhances calprotectin-induced production of MCP-1 and MMP-1 in HGFs. Sudachitin suppresses MCP-1 and MMP-1 production in HGFs via the NF-κB pathway. Sudachitin might be a useful polyphenol for severe periodontitis in diabetic patients.
Key words: diabetes mellitus, periodontitis, Sudachitin, calprotectin, gingival fibroblasts

Corresponding author: Dr. NARUISHI, Department of Periodontics, Tokushima University Hospital, 3‒18‒15 Kuramoto-cho,
Tokushima 770‒8504, Japan
TEL: ＋81‒88‒633‒7344, FAX: ＋81‒88‒633‒7345, E-mail: naruishi@tokushima-u.ac.jp
Received for Publication: August 26, 2020/Accepted for Publication: October 30, 2020

日

512

本

歯

科

保

存

原

学

雑

誌

第 63 巻著

第6号

日歯保存誌 63（6）：512～518，2020

ニッケルチタン製ロータリーファイルのテーパーが回転疲労耐性に与える影響
福

森

洋

平

中

木

村

俊

介＊

海 老 原
杉

務
崎

太
順

郎＊

牧

新＊

興

圭 一 郎＊地隆

史＊平

虎の門病院歯科＊東京医科歯科大学（TMDU）大学院医歯学総合研究科 医歯学系専攻 口腔機能再構築学講座 歯髄生物学分野

抄録
目的：動的回転疲労試験により，ニッケルチタン製ロータリーファイルの回転疲労破折抵抗性に対するテーパーの影響を解析することを目的とした．
材料と方法：被験ファイルはすべて先端径 0.25 mm，長さ 25 mm とし，先端のテーパーで実験群を 3 群に分けた（各群 n＝10）．すなわち，0.04 テーパーと 0.06 テーパーの器具として Vortex Blue（Dentsply Sirona）を採用し，それぞれ VB 0.04 群，VB 0.06 群とした．また，0.08 テーパーの器具には ProTaper Gold F2（Dentsply
Sirona）を採用し，PTG 0.08 群とした．試験用の人工根管模型には曲率半径 3 mm，曲げ角度 60° のステンレ
ス鋼製の模型を使用した．自作の動的回転疲労試験機を使用し，上下動速度 50 mm/min，振幅 1 mm，ファイ
ルの回転速度はメーカー推奨値の条件にて根管内でファイルを回転させた．ファイルが根管模型内を摩擦抵抗なく回転するようシリコーンオイルを使用した．破断までの時間をストップウォッチにて計測し，これに回転速度を乗じた値を破断までの回転数（NCF）とした．また，破断片の長さを電子ノギスで計測した．各群のNCF と破断片の長さを Kruskal‒Wallis 検定で解析後，Steel‒Dwass 検定にて多重比較を行った（有意水準 5％）．
成績：VB 0.04 群の NCF は VB 0.06 群，PTG 0.08 群の NCF と比較し有意に大きくなった（p＜0.05）．VB
0.06 群の NCF は PTG 0.08 群の NCF と比較し有意差を認めなかった（p＞0.05）．VB 0.04 群の破断片の長さはVB 0.06 群と比較し有意に短い値となったが（p＜0.05），他の群間比較ではいずれも有意差を認めなかった．
結論：本研究の条件下では，Vortex Blue 間の比較では 0.06 テーパーに比べ 0.04 テーパーが有意に高い動的回転疲労抵抗性を示したが，ProTaper Gold F2 の動的回転疲労抵抗性は 0.06 テーパーの Vortex Blue と同等であった．
キーワード：動的回転疲労耐性，ニッケルチタン製ロータリーファイル，テーパー

責任著者連絡先：福森洋平〒 105‒0001 東京都港区虎ノ門 2‒2‒2 虎の門病院歯科
TEL：03‒3588‒1111, FAX：03‒3582‒7068, E-mail：yohei-f@toranomon.gr.jp
受付：2020 年 9 月 14 日/受理：2020 年 10 月 30 日
DOI：10.11471/shikahozon.63.512

2020 年 12 月

ニッケルチタンファイルのテーパーの疲労強度への影響

緒言ニッケルチタン製ロータリーファイル（以下，NiTi513

3 種の NiTi ファイルを使用し，それぞれ VB 0.04 群，VB
0.06 群および PTG 0.08 群とした．Vortex Blue は断面形
態は三角形で，先端から一定のテーパーが付与されている．ProTaper Gold F2 については，断面形態は各辺が凸ファイル）は手用ステンレスファイルに比べ，高い柔軟面の三角形であり，テーパーは先端から 3 mm が 8％で，性や切削効率などの多くの利点があり広く普及してい同部からは基部に向かうに従い徐々に小さくなる可変る1‒3）．しかしながら，湾曲した根管での形成時はファイテーパーの設計が採用されている．各群とも使用した

ルが破折するリスクを有しており，根管治療の予後を損ファイルの長さは 25 mm とし，目視でファイルの変形

なうことも示唆されている ．

がないことを確認した．

4）

NiTi ファイルは熱処理を加えることで曲げ剛性が低動的回転疲労試験を行うにあたり，自作の試験機15）をくなり，回転疲労抵抗性が高くなることが報告されてい使用した（Fig. 1）．モーターには X‒Smart Plus（Dentsply

る．また，曲げ剛性が低くなると根管形成能も向上す

Sirona）を使用し，試験機に固定したハンドピースが 50

ることもすでに報告されている8,9）．そのため，熱処理をmm/min の速度で振幅 1 mm の往復上下運動を行うよう5‒7）加えたワイヤーを用いたさまざまな種類の NiTi ファイ

設定した．試験用の人工根管模型として根管幅径 1.5ルが開発されている10）．Vortex Blue
（Dentsply Sirona，mm，根管長 15 mm，曲率半径 3 mm，曲げ角度 60° のSwitzerland），ProTaper Gold（Dentsply Sirona）は，ステンレス鋼製の模型を使用し，ファイルの位置は根管加工された NiTi ファイルに複雑な過程の熱処理を加え，模型の先端を開始の位置とした（Fig. 2）．ファイルの回

その表層にそれぞれ青色もしくは金色の酸化チタン層を転速度は各ファイルのメーカー推奨の速度（VB 0.04 群，形成させて製作されており，その機械的特性が従来のVB 0.06 群では 500 rpm，PTG 0.08 群では 300 rpm）とファイルと比較し向上していることが報告されていした．破断までの時間を目視および破断音の発生を指標

る11,12）．

としてストップウォッチ（Alba Picco Multi Timer，セ

前述したように新製品が開発，または改良されるごと

イコーウォッチ）で計測し，この値に各群の回転速度をに，それぞれ従来の NiTi ファイルと機械的特性の比較乗じた値を破断までの回転数（number of cycles to fail-が行われてきた．この際，回転疲労抵抗性の解析は多く

ure，以下，NCF）とした．ファイルが根管模型内を摩の場合静的回転疲労試験で行われており，動的回転疲労

擦抵抗なく回転するようシリコーンオイル（KF‒96‒

試験の報告は少ない13）．動的回転疲労試験は，臨床上の100CS，信越化学）を使用した．またファイルの先端とNiTi ファイルの動作を模し，ファイルを上下方向に動か

破断面までの破断片の長さを電子ノギス（Digital Ver-しながら回転疲労試験を行う方法であり，静的回転疲労

nier Caliper，シンワ測定）で計測した．

試験と比較して，根管内をファイルが常時根管の長軸方

各群の NCF および破断片の長さの中央値を Kruskal‒

向に往復運動するため，圧縮応力と引っ張り応力の集中

Wallis 検定によって分析し，Steel‒Dwass 検定により多が避けられ，破折抵抗が増加するとされている14）．すで重比較を行い，有意水準 5％で解析した．

に著者らは，テーパーの差異が NiTi ファイルの機械的結特性に与える影響について静的回転疲労試験を行い，テーパーの増加により回転疲労抵抗性が低下することを

果

報告した9）．一方で著者らの知るかぎり，テーパーの差

各群の NCF および破断片の長さを，Fig. 3，4 に示す．

異に注目し動的回転疲労試験を行った報告はない．そこ

Steel‒Dwass 検定による各群間の比較で VB 0.04 群ので，本研究ではさまざまなテーパーを有したファイルを

NCF は VB 0.06 群，PTG 0.08 群の NCF と比較し有意に用いて，自作の動的回転疲労試験機を使用し，動的回転大きくなった．VB 0.06 群の NCF は，PTG 0.08 群の NCF

疲労抵抗性の差異を解析することを目的とした．帰無仮と比較し有意な差を認めなかった．

説は「被験ファイル間で回転疲労抵抗に差異はない」とした．

破断片の長さの比較では，VB 0.04 群の破断片の長さは VB 0.06 群の破断片の長さと比較し有意に短い値と材料および方法
本実験には，Vortex Blue（先端径 0.25 mm，0.04 テー
パー，および先端径 0.25 mm，0.06 テーパー），および
ProTaper Gold F2（先端径 0.25 mm，0.08 テーパー）のなった．他群間の比較では，いずれの群間でも有意差を認めなかった．

考察

本実験はファイルの種類およびテーパーを変え，動的

日

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科

保

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誌

第 63 巻

第6号

NCF
VB 0.04
1,200

VB 0.06

PTG 0.08

＊

1,000
800
600
400
200

＊

0

The number of cycles to failure（NCF）of thetested instruments during dynamic cyclic
fatigue testing＊indicates a significant difference in NCF（p＜0.05）.

Fig. 3Fig. 1

Custom-made dynamic cyclic
fatigue testing device used in
the present study

mm
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0

Length of the fractured fragment（mm）
VB 0.04
VB 0.06
PTG 0.08＊

Length of the fractured fragment（mm）of thetested instruments＊indicates a significant difference in the length of
the fractured fragment（p＜0.05）.
Fig. 4

告されている18）．
Fig. 2

Artificial canal used in
the present study

動的回転疲労試験の利点として，ファイルを上下動させることでペッキングモーションを再現できるため，臨床の状況に近似した条件で回転疲労抵抗性の評価が可能であることが挙げられる19）．本研究では，この利点を重回転疲労抵抗性を比較した．得られた結果より，本研究視して動的回転疲労試験を採用した．本試験では，根管の帰無仮説は棄却された．

内で繰り返される長軸方向の往復運動により，特定の部

NiTi ファイルの回転疲労耐性に関して，その試験法は位への応力の集中が避けられることから，静的回転疲労

確立されていない．とりわけ模擬根管については，その試験と比較して破断までの時間や NCF が増加すること

種類・曲率半径・曲げ角度などのさまざまな因子の影響が報告されており15），これがファイル破折を避けるうえを考慮する必要がある

で，ペッキングモーションが有用であることの根拠の一．特に湾曲角度については，

13,16）

本研究では 60° の人工根管を採用したが，この角度はつとなっている．

NiTi ファイルの回転疲労抵抗性の評価に適切なものと

一方，動的回転疲労試験においては，ファイルの振幅

して多くの先行研究で採用されている ．60° の湾曲は，や上下動速度など，静的回転疲労試験と比較して実験条臨床で遭遇する根管の湾曲角度としては比較的大きい

件の規格化のため多くの因子の影響を考慮する必要があが ，湾曲角度 30° では根管内で被験ファイルに十分なる13）．また，動的回転疲労試験では湾曲根管内でファイ負荷がかからず，また 90° では負荷が強すぎることが報

ルの軌道が変動する可能性が示されており20），条件の厳

16）

17）

2020 年 12 月

ニッケルチタンファイルのテーパーの疲労強度への影響

515

密な規格化を図るうえで考慮すべきである21）．動的回転り19），本研究の結果はこれを支持するものである．製造

疲労試験において，被験ファイルが異なる曲げモーメン

者によると，Vortex Blue は K ファイルで穿通を確認後，トを受けると軌道が変化すること ，あるいは合金の種

根管の太さに応じて先端径 0.3 mm もしくは 0.4 mm のい類，テーパーが変わると曲げ剛性が変化することも示さ

ずれも 0.04 テーパーのファイルを最初に用い，以後クラれている23）．本研究では，VB 0.04 群の破断片の長さはウンダウン法で形成する方法が指定されており，0.06

VB 0.06 群の破断片の長さと比較し有意に短い値となっテーパーのファイルは根管上部で根管の湾曲を軽減させたが，ほかの群間比較ではいずれも破断したファイルのるために使用するよう推奨されている29）．本研究の結果

長さの中央値に有意な差を認めなかった．したがって，を鑑み，この方法は根尖部の湾曲による回転疲労破折のVB 0.04 群と VB 0.06 群間を除き，被験ファイルはいず回避の意味で，合理的と考えることができる．また，根れも最大の曲げ応力を負荷された位置がほぼ同じで，湾管形成器具のテーパーを小さくすることで歯の破折抵抗曲根管内での軌道の差異は生じていないことが示唆されが大きくなることも報告されており30），この意味でもた．このことは，すでに報告されている同様の研究の結0.04 テーパーの器具の使用は有利と思われる．

22）

果と一致している24‒26）．いずれにしても，本研究の結果

VB 0.06 群と PTG 0.08 群との NCF に有意差を認めなについては，これらの本試験法の特徴を考慮したうえでかったが，この結果はすでに報告されている結果と同様解釈すべきと思われる．

であった30）．また，VB 0.04 群の NCF は PTG 0.08 群に

本実験ではファイルの振幅を 1 mm とした．ペッキン

比べ有意に大きな値となった．ProTaper Gold は可変

グモーションの振幅について明確な指標は，これまでのテーパーを採用しており，破断した先端から 8 mm 付近

ところ存在しない．動的回転疲労試験において振幅が小の F2 のテーパーは約 5％，直径は 0.78 mm 程度であさくなると，ファイルへの負荷は大きくなることがすでる31）．Vortex Blue は先端径 0.25 mm で先端から一定のに報告されている20）．そのため，本実験の振幅の条件はテーパーのため，VB 0.04 群の先端から 8 mm の直径は比較的厳しいと考えられる．また上下動速度について

0.57 mm，VB 0.06 群は 0.73 mm とそれぞれ計算できる．

は，その増加によりファイルに加わるトルクや荷重が増

回転疲労抵抗に影響を与える因子として，テーパー以外

加傾向を示すことを著者らは確認している ．今回は，にファイルの直径，断面形態，回転様式，合金の種類な

動的回転疲労試験を用いた先行研究15）とほぼ同等の条件

どが挙げられる32‒34）．VB 0.04 群で PTG 0.08 群と比べてとして，著者らの先行研究における中等度の条件を採用

NCF が有意に大きかったことについては，主として VBした．一方で，実際に臨床で使用する際はファイルの上

0.04 群の直径，テーパーが小さいことが関与していると下方向の動作は手動で制御され，その振幅・速度ともに思われるが，両群間での合金の相違も関与していると思変化しやすいと思われる．本研究では，単一かつ可及的

われる．

27）

に規格化された条件で回転疲労試験を実施することで，NiTi ファイルの破折の主因の一つとして，ファイルへ

器具間で客観的な比較を行うことを目的としたが，単一の過剰なトルク負荷を原因とするねじり疲労破折を挙げの条件で臨床的状況がどの程度説明されるかについてることができるが35），この種の破折様式では回転疲労破は，検討の余地が残されている．

折と異なり，テーパーが小さい器具において破折抵抗性

本実験では，Vortex Blue のファイル 2 群と ProTaper

が小さくなる36）．テーパーが小さい器具が高い回転疲労Gold のファイル 1 群で実験群を構成した．前述したよう

破折抵抗性を有することは本研究結果が示すとおりであに，ProTaper Gold は可変テーパーを採用している．一るが，これらの器具の臨床応用に際しては，適切なトル方で可変テーパーのファイルを用い回転疲労試験を行

クコントロール下で用いるなどの対応により，ねじり疲い，テーパーの影響を解析するのは好ましくないことが

労破折のリスクを低減させる配慮が必要である．

示唆されている ．われわれの知るかぎりで可変テー28）

パーのファイルを使用し，テーパーの影響を論じた報告は少ない．そのため，本実験ではテーパーだけの異なる
同種のファイルの比較をしたうえで，可変テーパーのファイルとも比較し検証した．
本実験の結果より，同種のファイルを使用した VB 群
で比較すると，VB 0.04 群の NCF は VB 0.06 群の NCF

結論

本研究の条件下では，Vortex Blue では 0.06 テーパーに比べ 0.04 テーパーが有意に高い動的回転疲労抵抗性を示したが，ProTaper Gold F2 の動的回転疲労抵抗性は0.06 テーパーの Vortex Blue と同等であった．

と比べて有意に大きな値となった．従来型 NiTi 合金製
ファイルに対する動的回転疲労試験において，テーパーが増加すると破折抵抗が減少することが報告されてお本研究の一部は，2018 年度虎の門病院院内研究費助成（受付番号 9）の補助を受けた．

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科

本研究に関連し，申告すべき利益相反関係にある団体等はありません．

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雑

誌

第 63 巻第6号

13）Hülsmann M, Donnermeyer D, Schäfer E. A criticalappraisal of studies on cyclic fatigue resistance ofengine-driven endodontic instruments. Int Endod J 2019;

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2020 年 12 月

ニッケルチタンファイルのテーパーの疲労強度への影響

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517

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日

518

本

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科

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学

雑

誌

第 63 巻

第6号

Effect of Taper of Nickel-titanium Rotary Instruments
on Cyclic Fatigue Resistance in a Dynamic Model
FUKUMORI Yohei, NAKATSUKASA Taro＊, MAKI Keiichiro＊,
KIMURA Shunsuke＊, EBIHARA Arata＊, OKIJI Takashi＊and SUGIZAKI Jumpei
Department of Dentistry, Toranomon Hospital＊

Department of Pulp Biology and Endodontics, Division of Oral Health Sciences, Medical and Dental Sciences Track,
Graduate School of Medical and Dental Sciences, Tokyo Medical and Dental University（TMDU）

Abstract
Purpose: This study examined the effect of taper on the dynamic cyclic fatigue resistance of nickel-titanium（NiTi）rotary instruments.
Methods: This study examined three NiTi instruments with a tip size of 0.25 mm and 25 mm in length; i. e.,
Vortex Blue（Dentsply Sirona; size #25/0.04 taper and #25/0.06 taper; Group VB 0.04 and Group VB 0.06,
respectively）, and ProTaper Gold F2（Dentsply Sirona; size #25/0.08 taper; Group PTG 0.08）（n＝10 in eachgroup）. An artificial stainless steel canal with a 60° angle and 3 mm radius of curvature was used. The
instruments were rotated in the artificial canal using a custom-made dynamic cyclic fatigue test device operated at an up-and-down speed of 50 mm/min and an axial amplitude of 1 mm. Rotational speeds were set
according to the manufacturer’s recommendation. The canal was filled with a silicone oil to reduce the generation of frictional heat during the rotation of instruments. The time to fracture was measured using a digital stopwatch, and the number of cycles to fracture（NCF）was determined by multiplying the time by the
number of rotations per minute. The length of the fractured tip was measured with an electronic digital caliper. NCF and the length of the fractured fragment in the three groups were statistically analyzed using the
Kruskal-Wallis test followed by multiple comparisons with the Steel-Dwass test, with 5％ set as the level ofsignificance.
Results: NCF of Group VB 0.04 showed significantly higher values compared with that of Groups VB 0.06
and PTG 0.08（p＜0.05）. There was no statistically significant difference between NCF of Groups VB 0.06 andPTG 0.08（p＞0.05）. The length of the fractured fragment of Group VB 0.04 was significantly shorter compared with that of Group VB 0.06（p＜0.05）. None of the other intergroup comparisons were statisticallysignificant（p＞0.05）.
Conclusion: Under the present experimental conditions, the 0.04 taper Vortex Blue instrument showed asignificantly higher dynamic cyclic fatigue resistance compared with the 0.06 taper Vortex Blue instrument.
The dynamic cyclic fatigue resistance of the ProTaper Gold F2 instrument was similar to that of the 0.06
taper Vortex Blue instrument.
Key words: dynamic cyclic fatigue resistance, nickel-titanium rotary instrument, taper

Corresponding author: Dr. FUKUMORI, Department of Dentistry, Toranomon Hospital, 2‒2, Toranomon 2-chome, Minato-ku,
Tokyo 105‒0001, Japan
TEL: ＋81‒3‒3588‒1111, FAX: ＋81‒3‒3582‒7068, E-mail: yohei-f@toranomon.gr.jp
Received for Publication: September 14, 2020/Accepted for Publication: October 30, 2020

2020 年 12 月

519

原

著

日歯保存誌 63（6）：519〜526，2020

新規汚染除去材による処理が唾液汚染された CAD/CAM 冠用
ハイブリッドレジンブロックの象牙質接着強さに及ぼす影響
高

橋
島

圭

𠮷

山

知

宏

横

山

田

康

史

𠮷

山

昌

宏

章

人

岡山大学大学院医歯薬学総合研究科 機能再生・再建科学専攻 生体機能再生・再建学講座 歯科保存修復学分野

抄録
目的：臨床現場において，CAD/CAM 用ハイブリッドレジンレジン冠（以下，CAD/CAM レジン冠）の脱離にはさまざまな要因が考えられる．本研究では接着阻害因子による脱離に着目し，試適時の唾液汚染に対する新規汚染除去材（DC 200C）の効果について比較検討を行った．
材料と方法：ヒト抜去歯の象牙質面に CAD/CAM 用レジン材料カタナアベンシアブロック（クラレノリタ
ケデンタル）をパナビア V5（クラレノリタケデンタル）を用いて接着し，マイクロテンサイル法による引張接着試験を行った．唾液汚染には人工唾液を使用し，除去材にはイボクリーン（Ivoclar Vivadent），マルチエッ
チャント（YAMAKIN），DC 200C（クラレノリタケデンタル）を使用した．試料体 1）レジンブロックも象
牙質も唾液汚染なし（コントロール群），2）レジンブロックを唾液汚染，3）レジンブロックを唾液汚染後イボクリーンで処理，4）レジンブロックを唾液汚染後マルチエッチャントで処理，5）レジンブロックを唾液汚染
後 DC 200C で処理，6）象牙質を唾液汚染，7）象牙質を唾液汚染後マルチエッチャントで処理，8）象牙質を
唾液汚染後 DC 200C で処理の計 8 群とし，24 時間 37℃で水中浸漬後切断し，卓上万能試験機を用いてクロス
ヘッドスピード 1.0 mm/min の条件下で引張接着試験を行った．試料数を各 8 個とし，得られた結果は one
way ANOVA と Tukeyʼs test を用いて有意水準 5％にて統計処理を行った．また引張試験後の破断面について，デジタルマイクロスコープ（KEYENCE）により形態観察を行った．そして唾液タンパク質の除去効果を調べるために，色素結合法による唾液タンパク質の染色試験も行った．
結果および考察：引張接着試験の結果を以下に示す．1）35.74±4.81（MPa），2）16.75±4.79（MPa），3）
26.49±4.21（MPa），4）23.94±2.64（MPa），5）33.50±6.38（MPa），6）21.58±5.73（MPa），7）30.65±2.92（MPa），8）34.43±5.33（MPa）．CAD/CAM レジン冠，象牙質ともに唾液汚染により接着強さは有意に低下した．CAD/CAM レジン冠は唾液汚染後，各唾液除去法で接着強さは回復したが，DC 200C で処理した群のみがコントロール群と同等の接着強さまで回復した．象牙質は唾液汚染後，各唾液除去法で接着強さは回復したが，DC 200C で処理した群のみがコントロール群と同等の接着強さまで回復した．また，色素結合法による唾
液タンパク質染色試験の結果からも，DC 200C は CAD/CAM レジン冠の被着面の唾液汚染に対して，MDP 塩の界面活性効果によりほかの材料よりも高い唾液タンパク除去効果が認められたものと考えられる．
結論：CAD/CAM 冠用ハイブリッドレジンブロックの唾液汚染に対して新規汚染除去材（DC 200C）を用いることによって，接着強さは汚染前と同等まで回復した．また DC 200C はほかの汚染除去材よりも高い唾
液タンパク質除去効果があることが示唆された．
キーワード：唾液汚染，微小引張接着強さ，CAD/CAM レジン冠
責任著者連絡先：高橋 圭〒 700 8525 岡山市北区鹿田町 2 5 1 岡山大学大学院医歯薬学総合研究科機能再生・再建科学専攻生体機能再生・再建学講
座歯科保存修復学分野
TEL：086 235 6672，FAX：086 235 6674，E-mail：takaha-k@cc.okayama-u.ac.jp
受付：2020 年 8 月 24 日/受理：2020 年 11 月 2 日
DOI：10.11471/shikahozon.63.519

日

520

緒

本

歯

科

言

保

存

学

雑

誌

第 63 巻第6号デンタル）と汚染物質として使用した人工唾液の組成18）を示す．
2 ．唾液汚染試料の作製

近年，歯科用 CAD/CAM 技術の進歩により，高品質

本研究では，形成後の象牙質面に CAD/CAM レジン

な審美修復冠を短時間かつ低コストで製作することが可冠による歯冠修復治療を行うことを想定して実験を行っ能になった．さらに歯科用金属価格の高騰および患者のた．そのため，CAD/CAM 冠用ハイブリッドレジンブ

審美的な要求の高まりを受けて，2014 年 4 月に小臼歯部ロックならびに象牙質面それぞれに対して人工唾液を用に対して CAD/CAM 用ハイブリッドレジンブロックをいて汚染し，微小引張接着強さを測定して比較検討を用いた歯冠修復（以下，CAD/CAM レジン冠）が保険適行った．

応となり，また 2017 年 12 月からは第一大臼歯にも適用

歯冠中央部を耐水研磨紙 #600 まで研磨した象牙質面

範囲が拡大されたことにより，CAD/CAM レジン冠にに，CAD/CAM 用レジン材料カタナアベンシアブロッよる歯冠修復治療が一気に普及するようになった．しかクユニバーサル用（クラレノリタケデンタル）をパナビしながら CAD/CAM レジン冠の脱離も臨床現場でみらア V5 を用いて接着した．カタナアベンシアブロックをれ，その対策が望まれている．CAD/CAM レジン冠の脱厚さ 6 mm となるように切断し，平面を耐水研磨紙 #400

離にはさまざまな要因があり，臨床における接着阻害因

で研磨し被着面とした．また唾液汚染には人工唾液に 1

子として唾液，血液，滲出液，呼気，仮着材，仮封材な

分間浸漬後，30 秒間水洗 10 秒間乾燥後，各汚染除去材

どによる接着面の汚染が考えられ，従来の接着システム

をメーカー指示どおりに用いて処理した後，レジンブ

では，唾液や血液汚染によって，エナメル質および象牙

ロックにはクリアフィルセラミックプライマープラス質に対する接着強さが著しく低下することが報告されて（クラレノリタケデンタル）を用いてシランカップリング

いる1 12）．また最近の接着システムにおいても，象牙質処理を行い，象牙質面にはパナビア V5 トゥースプライ

被着面や修復物，歯冠補綴物内面の唾液や血液汚染にマー（クラレノリタケデンタル）を用いて，歯面処理をよって，接着強さが有意に低下することが報告されてい行った．合着用セメントには接着性レジンセメントであ13 17）

る

るパナビア V5 を用いて，LED 光重合器（PENCURE，

CAD/CAM レジン冠の唾液による汚染は支台歯や窩J. Morita，USA）で 4 方向から各 10 秒間光照射し接着洞への試適時にも生じることから，唾液汚染除去剤が開した．唾液汚染除去剤として，イボクリーン，マルチ

発され臨床で用いられている．しかしながら口腔内でのエッチャント，DC 200C を用いた．また実験群は，以下使用が禁忌の汚染除去剤や，また口腔内にて使用可能での計 8 群とし，比較検討を行った．

．

も，唾液の汚染除去効果が低い製品もあり，良好な臨床成績を得るうえで課題が残されている．新規汚染除去材（DC 200C）は口腔内でも使用可能であり，かつ MDP 塩による汚染除去効果が期待されている．そこで本研究では，CAD/CAM レジン冠内面ならびに被着面である象牙質双方に着目し，唾液汚染後の各種汚染除去材による接着強さの変化を比較し，DC 200C の唾液汚染の除去効

1 ．レジンブロック，象牙質ともに唾液汚染なし（コントロール群）．
2 ．レジンブロックのみを唾液汚染した群
3 ．レジンブロックのみを唾液汚染後イボクリーンで処理した群
4 ．レジンブロックのみを唾液汚染後マルチエッチャ
ントで処理した群
5 ．レジンブロックのみを唾液汚染後 DC 200C で処果を評価した．

材料および方法「ヘルシンキ宣言（ヒトを対象とする生物学的研究に携理した群6 ．象牙質のみを唾液汚染した群
7 ．象牙質のみを唾液汚染後マルチエッチャントで処理した群

わる医師のための勧告）」に基づく倫理的原則を遵守する

8 ．象牙質のみを唾液汚染後 DC 200C で処理した群とともに，岡山大学倫理委員会の許可（承認番号 189 号）

3 ．微小引張接着強さの測定を得て本実験は実施された．
抜去後に 4℃冷蔵保存した健全ヒト大臼歯 40 本を使用した．

37℃水中で 24 時間保管した試料は，硬組織精密低速切断機（Isomet low speed saw，Buehler，USA）を用いて接着界面に垂直に厚さ約 1.0 mm の連続切片に切り出

1 ．実験に使用した材料

し，各切片は，接着面積が 1.0 mm2になるように微粒子

Table 1 に，今回実験に使用した各種汚染除去材と接ダイヤモンドポイント（K2ff，ジーシー）を装着したエ

着性レジンセメントであるパナビア V5（クラレノリタケ

アータービンを用いて注水下にてダンベル型にトリミン

2020 年 12 月

CAD/CAM 冠用ハイブリッドレジンブロックの唾液汚染に対する新規汚染除去材の効果
Table 1

Product
DC-200C（Lot：T181116）
Ivoclean（Lot：X28703）
Multi Etchant（Lot：01091825）
PANAVIA V5
Paste（Lot：AB0089）

521

Materials used in this study with their application procedure
Manufacturer

Composition

Kuraray Noritake
Dental
Ivoclar Vivadent

Water, 10-Methacryloyloxydecyl dihydrogen phosphate（MDP）, Triethanolamine, Polyethylene glycol, Stabilizer, Dyes
Zirconium oxide, Water, Polyethylene glycol, Sodium hydroxide, Pigments, Additives
Purified water, Phosphoric acid monomer, Thickening agents, Dye

YAMAKIN

Tooth Primer（Lot：AG0057）
Clearfil Ceramic Primer Plus
（Lot：AA0039）

Paste A：Bis-GMA, TEGDMA, Hydrophobic aromaticdimethacrylate,Hydrophilic aliphatic dimethacrylate, Initiators, Accelerators, Silanatedbarium glass filler, Silanated, Fluoroalminosilicate glass filler, Colloidal
silicaPaste B：Bis-GMA, Hydrophobic aromatic dimethacrylate, Hydrophilicaliphatic dimethacrylate, Silanated barium glass filler, Silanated alminium oxide filler, Accelerators, Dl-Camphorquinone, Pigments
MDP, HEMA, Hydrophilic aliphatic dimethacrylate, Accelerators,
Water
3-trimethoxysilyporopyl methacrylate, MDP, Ethanol〔Artificial saliva〕

CaCl2, KH2PO4, NaOAc, NaN3, Casein, H2O

KATANA AVENCIA
Block Universal（Lot：000752）

Kuraray Noritake
DentalKuraray Noritake
DentalMixed filler with colloidal silica（Ø40 nm）and aluminum（Ø20 nm）oxide,
Cured resins consisting of methacrylate monomer（Copolymer of urethane dimethacrylate and other methacrylate monomers）, Pigments

グを行った19,20）．得られた切片は，Bencor Multi T test-

色，SE6000）を用いてφ10 mm の範囲で色調測定を行っing device（Danville Engineering，USA）にシアノアク

た．そして得られた測色データから算出したコントロー

リレート接着剤（Zapit，DVA，USA）を用いて固定し，ルとの色差値で，各汚染除去材の唾液タンパク質除去能

小型卓上試験機（EZ Test，Shimadzu）を用いて，クロを評価した．

スヘッドスピード 1 mm/min の条件下で微小引張接着強結さを測定した．なお試料数は各 8 個とし，得られた結果
は，レジンブロックを対象とした実験群と象牙質を対象果とした実験群に分け，各グループにおける実験群間の統

CAD/CAM 用ハイブリッドレジンブロックを唾液汚計学的有意差を one way ANOVA と Tukeyʼs test を用染した実験群における微小引張接着試験における結果をいて有意水準 5％にて検定した．

Fig. 1 に，また象牙質を唾液汚染した実験群の微小引張

4 ．接着破壊様式の分析

接着強さを Fig. 2 に示す．CAD/CAM レジン冠，象牙質

デジタルマイクロスコープ（KEYENCE）を用いて，ともに唾液汚染により接着強さは有意に低下した（p＜微小引張接着試験後の試料の汚染側破断面を観察し，接0.05）．CAD/CAM レジン冠は唾液汚染後，各唾液除去

着破壊様式を判定した（倍率×200）．なお判定基準は，法（イボクリーン，マルチエッチャント，DC 200C）で破断面の接着性レジンセメントの残存割合によって界面接着強さは回復したが，DC 200C で処理した群のみがコ

破壊，凝集破壊および混合破壊に分類した．

ントロール群と同等の接着強さまで回復した（p＞0.05）．

5 ．各汚染除去材の唾液タンパク質除去能の評価

象牙質は唾液汚染後，各唾液除去法（マルチエッチャン

CBB（Coomassie Brilliant Blue）染色に 45％メタノー

ト，DC 200C）で接着強さは回復したが，DC 200C で処

ル/10％酢酸を加え 0.25％CBB 溶液を準備した．次に理した群のみがコントロール群と同等の接着強さまで回#1000 研磨紙によって研磨した CAD/CAM レジンブ復した（p＞0.05）．

ロックのサンプルを各 3 個準備し，人工唾液に 1 分間の微小引張接着試験後の接着破壊様式を分析した結果に

浸漬後，各汚染除去材をメーカー指示どおりに用いて洗ついて，CAD/CAM 用ハイブリッドレジンブロックを浄処理を実施した．0.25％CBB 溶液にサンプルを 12 時間

唾液汚染した実験群を Fig. 3 に，また象牙質を唾液汚染

浸漬し，その後水洗・乾燥を行い，分光色差計（日本電した実験群を Fig. 4 に示す．CAD/CAM 用ハイブリッド

日

522

本

歯

科

μTBS

（MPa）
a
a
45
40
c
c
35
30
b
25
20
15
10
5
0
Control Contaminated Ivoclean Multi Etchant DC－200C
CAD/CAM
Resin
Control

ContaminatedIvocleanMulti EtchantDC-200C

35.74±4.81

16.75±4.79

26.49±4.2123.94±2.6433.50±6.38

保

存

学

雑

c

：mixedContaminated
CAD/CAM resin
IvocleanMulti EtchantDC－200C
0
Fig. 3

2

4

6

8 N

Failure mode analysis of the experimentalgroups for contaminated CAD/CAM resinblock：cohesive：adhesive：mixedControla,cContaminatedDentinμTBSb：adhesive

第6号

ControlμTBS results of contaminated CAD/CAM
resin block
Values with the same alphabets indicate no significant difference（p＞0.05）

a

第 63 巻：cohesive

Fig. 1

Multi EtchantDC－200C
0
Control

ContaminatedDentinMulti
Etchant

DC－200C

Control

ContaminatedMulti EtchantDC-200C

35.74±4.81

21.58±5.73

30.65±2.9234.43±5.33

Fig. 2 μTBS results of contaminated dentin
Values with the same alphabets indicate no
significant difference（p＞0.05）

Fig. 4235料については，コントロールと比較して界面破壊の割合が多く観察された．また，各唾液除去法（イボクリーン，
マルチエッチャント，DC 200C）で処理することによって界面破壊の割合が減少し，凝集破壊の割合が増加し

c

10
5
0

a
BeforeAfter
DC－200C Multi Etchant Ivoclean
contamination contamination

BeforeAftercontamination

様に，ほかの汚染除去法と比較して界面破壊の割合が最027.39±2.64

Fig. 5 に，代表的な染色写真を Fig. 6 に示す．唾液汚染
前の状態をコントロールとしてほかの群と比較した結果，イボクリーンあるいはマルチエッチャントで処理しb

20

contamination

各汚染除去材の唾液タンパク質除去能の評価結果を

8 N

25

た．また，DC 200C で処理した群はコントロール群と同も少なかった．

6

b

b

30

15

レジンブロックならびに象牙質ともに唾液汚染された試4

Failure mode analysis of the experimentalgroups for contaminated dentin

ΔE＊

（MPa）
45
40
35
30
25
20
15
10
5
0

誌

DC-200C

Multi EtchantIvoclean9.04±1.50

28.63±2.2322.03±4.07

Evaluation of removal ability of saliva protein on the decontamination materials
Values with the same alphabets indicate no significant difference（p＞0.05）
Fig. 5

2020 年 12 月

CAD/CAM 冠用ハイブリッドレジンブロックの唾液汚染に対する新規汚染除去材の効果

Beforecontamination
Fig. 6

Aftercontamination

DC－200C

Multi Etchant523

Ivoclean

Photographs of representative specimens after protein staining test

た群はコントロールとの有意差は認めなかった（p＞

科用金属（貴金属合金・非貴金属合金）などに使用可能

0.05）のに対し，DC 200C を用いて処理した群は有意にである．
微小引張接着試験ならびに色素結合法によるタンパク

低い値を示した（p＜0.05）．

考察

質染色試験の結果から，CAD/CAM 用ハイブリッドレ
ジンブロックに対しては，新規汚染除去材 DC 200C はイボクリーン，マルチエッチャントで処理した群と比較間接法による接着修復では，完成した修復物を口腔内して有意にタンパク質除去効果が認められたことから，で試適する際，唾液・歯肉溝滲出液あるいは血液などの唾液汚染された被着面の唾液タンパク成分の大部分が除接着阻害因子によって汚染が生じ，レジンセメントとの去されたことにより，コントロールと有意差ない接着強

接着性が低下することが報告されている13 17）．修復物内さまで回復したものと考えられる．

面が唾液に汚染されると，表面に唾液タンパク質の非共

一般的に洗浄剤の主成分である界面活性剤は，一つの有結合による吸着が起こり，水洗では完全には除去でき分子の中に水になじみやすい部分（親水基）と油になじない有機コーティングが形成される21）．また唾液タンパ

みやすい部分（疎水基）の両方を併せもつ化学構造上のク質による汚染は，35〜45％リン酸エッチングによる洗特徴を有している．水中では分子の疎水基同士が凝集

浄でも汚染された唾液成分を完全に除去することはでき

し，親水基が外側に向いた集合体（ミセル）を形成する．

22,23）

ないことが報告されている

このミセルは，内側の疎水基に汚れ成分を取り込む性質

イボクリーンはガラスセラミックス，間接修復用コンを有することが知られ，DC 200C においても，配合されポジットレジン，酸化ジルコニウム，酸化アルミニウム，ている MDP 塩が同様に水中でミセルを形成することに貴金属，卑金属など多くの材料に使用可能であり，特により洗浄作用を発現していると推測される．そのため酸化ジルコニウムや卑金属で高い効果を発揮することがDC 200C では，MDP に対して塩基性成分を添加し MDP

報告されている24 26）．しかし強アルカリ性（pH13.5）の塩とすることにより，本来は水に難溶の MDP を水に溶．

ため口腔内での使用は禁忌であり，窩洞形成後の象牙質面や直接法コンポジットレジン修復には適用できない．
マルチエッチャントは pH1.6 でエッチング材として通常使用する 35〜45％リン酸水溶液よりマイルドな酸性のため，口腔内での使用はもちろん象牙質に対しても過脱灰が抑制されるため使用可能である．また，リン酸ではなく接着性リン酸モノマー（11 メタクリロイルオキシ
テトラエチレングリコールジハイドロゲンホスフェート）を含有しているためジルコニア，チタン，銀合金，
レジンブロックなど多くの材料に使用可能であり，特にジルコニアに対してはプライミング効果も有する．
新規汚染除去材 DC 200C は pH4.5 で弱酸性であり，口腔内での使用が可能である．また，使用用途は多岐にわたり，天然歯（エナメル質・象牙質），歯科用セラミッ
クス（ジルコニア・歯科用陶材・二ケイ酸リチウム），レ

解させ，水を溶媒として高い界面活性効果を発揮することにより，ほかの材料よりも高い唾液タンパク除去効果が認められたものと考えられる．したがって，CAD/
CAM 冠用レジンブロックの唾液汚染に対して DC 200Cに配合されている MDP 塩による界面活性効果は，イボ
クリーンに含まれる水酸化ナトリウムによる清掃効果やマルチエッチャントに配合されている接着性リン酸モノ
マーによる清掃効果に比べて唾液汚染除去効果が高いことが示唆された．
しかしながら，現在多くの CAD/CAM 冠用レジンブ
ロックがこれまでに開発されており，各ブロックの性質はさまざまである．亀山らは現在市販されている 8 種類の CAD/CAM 冠用レジンブロックの物性について比較・検討した結果，すべてのレジンブロック間で無機
フィラー含有量に有意差が認められたと報告していジン系材料（CAD/CAM 冠・コンポジットレジン），歯る27）．したがって，ほかの CAD/CAM 冠用レジンブロッ

科用ポスト（グラスファイバーポスト・金属ポスト），歯クについても今回と同様な結果が得られるか検討する必

日

524

本

歯

科

要があると思われる．また本研究では 24 時間後の接着強さを測定しており，長期的予後を評価するためにはさらなる研究が必要と思われる．

結論

CAD/CAM 冠用ハイブリッドレジンブロックの唾液汚染に対して，新規汚染除去材（DC 200C）を用いることによって接着強さは汚染前と同等まで回復した．またDC 200C は，ほかの汚染除去材よりも高い唾液タンパク
質除去効果があることが示唆された．
本研究の遂行および本論文の作成にあたり，開示すべき一切の利益相反はない．

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存

学

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2020 年 12 月

CAD/CAM 冠用ハイブリッドレジンブロックの唾液汚染に対する新規汚染除去材の効果

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525

Ludwig K, Adelung R, Kern M. Influence of saliva contamination on zirconia ceramic bonding. Dent Mater
2008; 24: 508 513.
26）Klosa K, Wolfart S, Lehmann F, Wenz HJ, Kern M. The
effect of storage conditions, contamination modes andcleaning procedures on the resin bond strength to lithium disilicate ceramic. J Adhes Dent 2009; 11: 127 135.
27）亀山祐佳，大橋 桂，山口紘章，三宅 香，和田悠希，
緑野智康，谷本安浩，寺中文子，岩井啓寿，平山聡司，
二瓶智太郎．CAD/CAM 冠用ハイブリッドレジンブロッ
クの物性に関する研究．日歯理工誌 2017；36：453 459．

日

526

本

歯

科

保

存

学

雑

誌

第 63 巻

第6号

Effect of New Decontamination Material on the Dentin Bond Strength of
Saliva-contaminated Hybrid Resin Block for CAD/CAM Crowns
TAKAHASHI Kei, YOSHIYAMA Tomohiro, YOKOYAMA Akihito,
SHIMADA Yasushi and YOSHIYAMA Masahiro
Department of Operative Dentistry, Field of Study of Biofunctional Recovery and Reconstruction,
Okayama University Graduate School of Medicine, Dentistry and Pharmaceutical Sciences

Abstract
Objectives: The clinical failure of hybrid resin crowns fabricated using computer-aided design and computer-aided manufacturing（CAD/CAM）involves various factors. The aim of this study was to evaluate theeffect of decontamination agents for saliva contamination on the bonding of CAD/CAM crowns.
Methods: CAD/CAM resin blocks（KATANA AVENCIA Block Universal, Kuraray Noritake Dental）werebonded to the dentin surface with and without artificial saliva contamination. A newly developed decontamination agent containing MDP（DC-200C, Kuraray Noritake Dental）and two commercially available decontamination agents（Ivoclean, Ivoclar Vivadent; Multi Etchant, YAMAKIN）were used in this study. Flat dentin
surfaces were prepared and divided into eight groups. CAD/CAM resin blocks were bonded to the dentin
surface using PANAVIA V5（Kuraray Noritake Dental）as follows: 1）control group without saliva contamination on either resin block or dentin, 2）resin block with saliva contamination, 3）resin block with saliva
contamination and Ivoclean decontamination, 4）resin block with saliva contamination and Multi Etchantdecontamination, 5）resin block with saliva contamination and DC-200C decontamination, 6）dentin with saliva
contamination, 7）dentin with saliva contamination and Multi Etchant decontamination, and 8）dentin withsaliva contamination and DC-200C decontamination. After 24 hours, the samples were subjected to microtensile bond strength testing at the crosshead speed of 1.0 mm/min. A saliva protein staining test was performed by the pigment binding method to investigate the effect of removing saliva protein. The results were
statistically analyzed at the significance level of p＝0.05.
Results: The obtained bond strength values in MPa were as follows: 1）35.74±4.81, 2）16.75±4.79, 3）26.49±4.21, 4）23.94±2.64, 5）33.50±6.38, 6）21.58±5.73, 7）30.65±2.92, and 8）34.43±5.33. The saliva contamination on both the CAD/CAM resin block and dentin surface showed significantly lower values than the control group（p＜0.05）. All the decontamination agents could significantly restore the bond strength from thesaliva contamination（p＜0.05）, and DC-200C showed no significant difference from the control（p＞0.05）.
From the results of the saliva protein staining test, DC-200C showed higher removal effect of saliva protein
for the CAD/CAM resin surface than the other materials due to the surface active effect of MDP salt.
Conclusion: The bond strength of the saliva-contaminated CAD/CAM hybrid resin block was restored tothe same level as before the contamination by using a new decontamination material（DC-200C）. It is suggested that DC-200C has a higher salivary protein removal effect than the other decontamination materials.
Key words: saliva contamination, microtensile bond strength, CAD/CAM resin crownCorresponding author: Dr. TAKAHASHI, Department of Operative Dentistry, Field of Study of Biofunctional Recovery andReconstruction, Okayama University Graduate School of Medicine, Dentistry and Pharmaceutical Sciences, 2 5 1, Shikata-cho,
Kita-ku, Okayama 700 8525, Japan
TEL: ＋81 86 235 6672, FAX: ＋81 86 235 6674, E-mail: takaha-k@cc.okayama-u.ac.jp
Received for Publication: August 24, 2020/Accepted for Publication: November 2, 2020

2020 年 12 月

527

原

著

日歯保存誌 63（6）：527～535，2020

生物学的直接覆髄剤開発に向けた生理活性物質 RVX‒208 の歯髄細胞における機能解析

松
山

本

本

昌

優

大

藤

原

千

春

島

袋

NANTAKEERATIPAT Teerachate

八

木

寛

子

林

柏

木

陽一郎

三

沢

田

啓

木

吾

善

夫

北

垣

聡

子

岩

山

智

明

木

康

史

北

村

正

博

下

茉

優

村

上

伸

也

次郎太

大阪大学大学院歯学研究科 口腔分子免疫制御学講座（口腔治療学教室）

抄録
目的：水酸化カルシウム製剤や Mineral Trioxide Aggregate（MTA）を用いた直接覆髄法が一般的に用いられているが，これらは，歯髄組織に広範な壊死を引き起こすという欠点を有する．このため，歯髄細胞への傷
害性の少ない新たな直接覆髄材（剤）の開発が期待されている．生理活性物質の一つである RVX‒208 は，エピジェネティクスに遺伝子発現を変化させることで，炎症や骨代謝の制御に重要な役割を担うことが報告されているが，歯髄細胞における機能は不明である．そこで本研究は，RVX‒208 の歯髄細胞に対する毒性評価および同細胞における RVX‒208 の機能を検討することで，生物学的直接覆髄剤として必要な機能の一端を RVX‒
208 が有するのか否かを検討することを目的とした．
材料と方法：大阪大学歯学部附属病院にて矯正治療のために便宜抜歯された第一小臼歯を抜髄し，outgrowth 法を用いて単離したヒト歯髄細胞（hDPC）を実験に供した．RVX‒208 が hDPC に及ぼす細胞毒性については，ヨウ化プロビジウム（PI）染色にて検討した．そして，RVX‒208 が hDPC の増殖に及ぼす影響については，ブロモデオキシウリジン（BrdU）アッセイを用いて検討した．さらに，hDPC を RVX‒208 存在下で石灰化誘導し，培養 18 日目における石灰化物の形成を，アリザリンレッド染色法を用いて検討した．加えて，石灰化誘導過程における hDPC の象牙芽細胞分化関連遺伝子の発現をリアルタイム PCR 法を用いて検討した．
結果：RVX‒208（0～100 nmol/l）は，hDPC の死細胞率を増加させることはなかった．BrdU アッセイの結果，RVX‒208（0～100 nmol/l）は hDPC の増殖を損なうことはなかった．一方，アリザリン染色の結果より，
hDPC の硬組織形成細胞への分化誘導 18 日目において，RVX‒208（0～100 nmol/l）は濃度依存的に hDPC の石灰化物形成を促進することが明らかとなった．さらに，リアルタイム PCR 解析の結果より，hDPC の硬組織形成細胞への分化過程において，RVX‒208（0～100 nmol/l）は，hDPC におけるアルカリホスファターゼ（ALPL）およびⅠ型コラーゲン（COL1A1）遺伝子の発現を低下させた．一方，RVX‒208（0～100 nmol/l）
は，hDPC における象牙質シアロタンパク（DSPP）およびデンチンマトリックスプロテイン 1（DMP1）の遺伝子発現を上昇させた．加えて，石灰化誘導 6 日目において，RVX‒208（0～100 nmol/l）は hDPC の Runt‒
Related Transcription Factor‒2（RUNX2）の遺伝子発現に影響を及ぼさなかったが，石灰化誘導 18 日目において，100 nmol/l RVX‒208 は hPDC の RUNX2 遺伝子発現を有意に抑制した．
結論：生理活性物質 RVX‒208 は，歯髄細胞に対して毒性を示さず，その増殖を損なうことなしに，歯髄細胞の硬組織形成細胞への分化および石灰化を促進することが明らかとなった．すなわち，RVX‒208 は安全で有効な直接覆髄剤の一候補となる可能性が示唆された．
キーワード：RVX‒208，ヒト歯髄細胞，直接覆髄剤
責任著者連絡先：藤原千春〒 565‒0871 大阪府吹田市山田丘 1‒8 大阪大学大学院歯学研究科口腔分子免疫制御学講座（口腔治療学教室）
TEL：06‒6879‒2932，FAX：06‒6879‒2934，E-mail：fchiharu@dent.osaka-u.ac.jp
受付：2020 年 8 月 20 日/受理：2020 年 11 月 5 日
DOI：10.11471/shikahozon.63.527

日

528

緒

本

歯

科

言

保

存

学

雑

誌

第 63 巻第6号

terminal（BET）のアンタゴニストである JQ1 は，BET
タンパクの一つ Bromodomain‒containing protein 4（BRD4）を阻害することで RUNX2 の遺伝子発現を抑制

深在性のう蝕治療に際し，偶発的に露髄を認めた場

し，骨肉腫細胞の骨芽細胞様細胞への分化を負に制御す

合，外部からの物理的・化学的刺激から歯髄を保護するることが明らかとなっている9）．これらの研究から，ために，露髄面を覆髄材で覆う直接覆髄法が用いられ

RVX‒208 は，さまざまな細胞の遺伝子の発現を変化さる．現在，直接覆髄材として水酸化カルシウム製剤，せることで，炎症や骨代謝の制御に重要な役割を担う可Mineral Trioxide Aggregate（MTA）セメントやタンニ

能性が考えられる．しかしながら，間葉系細胞の一つでン・フッ化物配合カルボキシレートセメントなどが一般

ある歯髄細胞の表現系にどのような影響を及ぼすのかに的に使用されている．これらの直接覆髄材は，歯髄細胞

関してはいまだ明らかではない．

に作用することで，歯髄の硬組織添加を促進することがそこで本研究は，RVX‒208 がヒト歯髄細胞の増殖お報告されている ．その一方で，露髄面を pH 12 前後とよび同細胞の硬組織形成細胞への分化・石灰化能にどのいう強アルカリ環境下に曝すため，歯髄に為害的に作用ような影響を及ぼすのかを検討し，RVX‒208 が直接覆するという欠点をもつ．このため，新たな直接覆髄材

髄剤として必要なこれらの機能を有するのか否かについ（剤）の開発が期待されている．

て検討を行った．

1）

歯髄は，象牙芽細胞・線維芽細胞・免疫担当細胞など

材料および方法の細胞成分を有し，血管や神経の豊富な結合組織で，歯の形成に関与し，外部刺激や細菌に対する防御機能をもつ．歯髄には，これらの細胞以外に歯髄幹細胞と呼ばれ1 ．細胞培養る未分化間葉系細胞が存在しており，歯の損傷時には歯本研究は，大阪大学大学院歯学研究科研究倫理委員会

髄幹細胞が増殖し，象牙芽細胞様細胞に分化して修復象の承認を得て行われた．本実験の内容を理解したうえ

牙質を形成することで，機械的・温熱的・化学的・細菌

で，インフォームドコンセントが得られた矯正治療中のなどの刺激を遮断して歯髄を保護することが明らかと患者から第一小臼歯の便宜抜歯を行い，髄腔を開拡したなっている2）．

後，歯髄組織を摘出し，35 mm Culture Dish（Corning，

従来，植物に含まれるさまざまな生理活性物質の薬理USA）内に入れて得られた細胞を培養した．同組織片よ効果に着目し，これらの植物由来成分を医療応用する試

り遊走，増殖してきた細胞を 5～12 代継代し，ヒト歯髄みがなされている ．一例として，茶の成分の一つであ細胞（hDPC）として本実験に供した．継代の際には，るカテキンは，抗炎症作用・抗菌作用・抗酸化作用を有0.2％トリプシン‒0.02％エチレンジアミン四酢酸四ナト

しており，これらの作用が歯周病をはじめ心血管疾患やリウム（Gibco Laboratories，USA）を用いた．hDPC の

メタボリックシンドロームなどさまざまな疾患に対して継代培養には，10％ Fetal Bovine Serum（FBS，Thermo

有効であることが示されている ．また，ニチニチソウ

Fisher Scientific，USA）と 60μg/ml カナマイシン（和より抽出されるビンカアルカロイドは微小管の安定化を

光純薬工業）を加えたα変法イーグル最小必須培地

阻害し，細胞分裂を停止させることで細胞のアポトーシ（MEMα，和光純薬工業）を用いて，37℃，5％ CO2気相

3）4）スを誘導し抗腫瘍効果を示す5）．生理活性物質の一つで下で行った．hDPC の石灰化能をもつ細胞への分化誘導

ある RVX‒208 は，植物性ポリフェノールレスベラトには，RVX‒208（Cayman Chemical，USA）添加またはロールの誘導体を組成とし，近年，心血管疾患の医薬品

ジメチルスルホキシド（DMSO，和光純薬工業）を添加

候 補 と し て 同 定 さ れ た 低 分 子 化 合 物 で あ る6）．Jaha-

した石灰化誘導培地［10％ FBS，5 mmol/l βグリセロ

girdar ら は，RVX‒208 が，肝細胞においてアポリポタ

リン酸（和光純薬工業），50μg/ml アスコルビン酸（和ンパク A‒1 遺伝子の発現を上昇させることにより，肝細光純薬工業）含有］を用いて，2，3 日ごとに培地を交換

胞からの High Density Lipoprotein の産生増加を誘導し

した．

7）

て，肝臓において炎症抑制に作用することを示してい2 ．細胞毒性の検討

る．歯科の分野においても RVX‒208 の薬理作用に関す

12‒well Clear TC‒treated Multiple Well Plates（Corn-

る報告があり，その一例として，RVX‒208 を歯周病誘導ing）に hDPC（1.0×105 cells/well）を播種し，無血清培

マウスに投与すると，破骨細胞の分化や成熟に関連する

地で starvation を行った．24 時間後，濃度の異なる遺伝子の発現が低下し，破骨細胞前駆細胞の分化を抑制

RVX‒208（0～100 nmol/l）存在下で hDPC を培養し，することで，歯槽骨の吸収量が減少することが報告され

24 時間後の死細胞数の割合をヨウ化プロビジウム（PI，ている ．RVX‒208 と同じ Bromodomain and extra‒

和光純薬工業）で染色して測定した．すなわち，細胞を8）

2020 年 12 月

RVX‒208 の歯髄細胞における機能

529

Hank’s バッファー［1％ウシ血清アルブミン（BSA，

systems）にて行った．また，各遺伝子の発現量は，ハ

Sigma Aldrich，USA）含有 Hank’s 平衡塩溶液（HBSS，

ウスキーピング遺伝子 Hypoxanthine Phosphoribosyl-

Thermo Fisher Scientific）］で洗浄し，PI（1μg/tube）

transferase（HPRT）を内在性コントロール遺伝子としを添加後，フローサイトメーター（BD FACS Calibur，て，同遺伝子の発現量に対する相対量として算出した．

BD Bioscience，USA）を用いて解析した．解析は，象牙芽細胞分化関連遺伝子に特異的なプライマー（タカFlowJo（BD Bioscience）を用いて，PI 陽性細胞の割合

ラバイオまたは Thermo Fisher Scientific）の配列は次のを測定した．

とおりである．

3 ．細胞増殖能の検討

HPRT：F：5’‒GGCAGTATAATCCAAAGATGGT-

96‒well Multiple Well Cell Culture Plates（Corning）

C A A‒’ 3 , R：5 ’‒G T C A A G G G C A T A T C C T A C A A -に hDPC（1.0×104 cells/well）を播種し，無血清培地で

C A A A C‒’ 3 , A L P L：F：5 ’‒G G A C C A T T C C C A C -24 時間 starvation を行った．その後，濃度の異なる

GTCTTCAC‒’3, R：5’‒CCTTGTAGCCAGGCCCATTG‒

RVX‒208（0～100 nmol/l）存在下で hDPC を培養した’3, COL1A1：F：5’‒CCCGGGTTTCAGAGACAACTTC‒

際 の 細 胞 増 殖 能 を，Cell Proliferation ELISA BrdU

’3, R：5’‒TCCACATGCTTTATTCCAGCAATC‒’3,

assay kit（Roche，Switzerland）を用いて測定した．すDSPP：F：5’‒GGCAGTGCATCAAAAGGAGC‒3’, R：5’‒

なわち，1.0×104 cells/well の hDPC を 10μmol/l ブロモ

TGCTGTCACTGTCACTGCTG‒3’, D M P 1：F：5‒

デオキシウリジン（BrdU）でラベルし，10％ FBS 含有

TGGAGTTGCTGTTTTCTGTAGAG‒3, R：5’‒ATTGC-

MEMα培地で 24 時間培養した．その後，細胞を洗浄・

CGACAGGATGCAGA‒3’, RUNX2：F：5’‒CACTGGC-

固定し，抗 BrdU 抗体で標識し，BrdU 取り込み細胞を

GCTGCAACAAGA‒’3, R：5’‒CATTCCGGAGCTCAG-

ルミノメーター（GLOMAX：96 MICROPLATE LUMI-CAGAATAA‒3’

NOMETER，Promega，USA）を用いて測定した．
4 ．石灰化物形成能の検討
hDPC を硬組織形成細胞へと分化誘導した．すなわち，
12‒well Multiple Well Cell Culture Plates（Corning）に6 ．統計学的解析
データは，それぞれの平均値±標準偏差で示し，3 群以上の比較では One‒way ANOVA と Dunnett 法を用いて有意水準 5％にて統計処理を行った．

hDPC（1.0×105 cells/well）を播種し，石灰化誘導培地

結を用いて 18 日間培養した．歯髄細胞の石灰化物形成能についての検討は，アリザリン染色を用いて行った10）．す果

なわち，細胞をダルベッコーリン酸緩衝生理食塩水

1 ．hDPC に対する RVX⊖208 の細胞毒性評価（PBS，和光純薬工業）にて洗浄した後，エタノール（和hDPC に対する RVX‒208 の細胞毒性を評価するため

光純薬工業）にて固定した．洗浄後，1％アリザリンレッに，hDPC に RVX‒208 を添加した際の死細胞の割合をド染色液（pH 6.4，和光純薬工業）にて石灰化物を染色検討した．すなわち，hDPC に RVX‒208（0～100 nmol/l）

した．画像解析ソフトウェア（WinRoof，三谷商事）をを添加し，24 時間培養後，PI 陽性死細胞の割合をフロー用いてアリザリンレッド陽性の密度をデンシメトリック

サイトメーターで測定した．その結果，1～100 nmol/l の解析した．

RVX‒208 を添加した群と 0 nmol/l RVX‒208（DMSO 単

5 ．象牙芽細胞分化関連遺伝子の発現検討

独添加）群との間で，PI 陽性 hDPC の割合に有意差を認

hDPC の石灰化誘導過程における象牙芽細胞分化関連めなかった（Fig. 1）．

遺伝子の発現を検討した．すなわち，12‒well Multiple

2 ．RVX⊖208 が hDPC の細胞増殖能に及ぼす影響

Well Cell Culture Plates（Corning）に hDPC（1.0×105

次に，RVX‒208 が hDPC の細胞増殖能にどのようなcells/well）を播種し，石灰化誘導培地を用いて培養し影響を及ぼすのかを検討するために，BrdU アッセイをた．培養 6 日と 18 日目に，RNA‒Bee（TEK‒TEST，

用いて RVX‒208 の刺激による hDPC の細胞増殖能を検USA）を用いて細胞から全 RNA を抽出・精製した．得討した．すなわち，hDPC に RVX‒208（0～100 nmol/l）

られた全 RNA を鋳型として，High Capacity RNA‒to‒を添加し 24 時間培養後，hDPC に取り込まれた BrdU

cDNA kit（Applied Biosystems，USA）を用いて逆転写を，ルミノメーターを用いて測定した．BrdU アッセイ

反応を行い，cDNA を作製した．得られた cDNA を鋳型の結果，1～100 nmol/l の RVX‒208 を添加した群と 0として，リアルタイム PCR 法により象牙芽細胞分化関連

nmol/l RVX‒208（DMSO 単独添加）群との間で，BrdU

遺 伝 子 の 発 現 を 検 討した．PCR 反応は，Fast SYBRの取り込み量に有意差を認めなかった（Fig. 2）．

Green PCR Master Mix（Applied Byosystems）を用いて，StepOnePlus Real‒time PCR System（Applied Bio-

日

530

本

歯

科

存

学

雑

誌

第 63 巻a

5

第6号

RVX-208（nmol/l）

4

0

1

10

100

10

100

3
2
1
0

b
0

1

10

100

RVX－208（nmol/l）
Effect of RVX-208 on cytotoxicity
of hDPC
hDPC was treated with RVX-208（0‒100 nmol/l）and the frequency of PI＋
Fig. 1dead hDPC was analyzed by flow cytometry. Values represent the mean±standard deviation（SD）of triplicate assays.

＊＊

Relative densities
to 0 nmol/l of RVX-208

PI（＋）cell（％）

保

4
3
2
1
0

0

1

RVX-208（nmol/l）
Effect of RVX-208 on calcified nodule formationof hDPC
hDPC was cultured in calcification medium in thepresence of RVX-208（0‒100 nmol/l）and the alizarin
Fig. 3rlu/s（×106）

3
2

staining was performed on day 18.

1
0

0

1

10

100

RVX-208（nmol/l）a ）Images of the alizarin stained hDPC. Data are representative of three independent experiments.
b ）The densities of the alizarin staining. Values represent the mean±SD of triplicate assays. ＊＊：p＜0.01, compared with 0 nmol/l RVX-208.

Effect of RVX-208 on proliferationof hDPC
hDPC was treated with RVX-208（0‒100

4 ．RVX⊖208 が hDPC の象牙芽細胞分化関連遺伝子

nmol/l）and the incorporation of BrdU in
hDPC was analyzed. Values represent themean±SD of triplicate assays.

伝子の発現に及ぼす影響を検討するために，hDPC を

Fig. 2発現に及ぼす影響
さらに，RVX‒208 が hDPC の象牙芽細胞分化関連遺RVX‒208（0～100 nmol/l）存在下で石灰化誘導培地にて

3 ．RVX⊖208 が hDPC の石灰化物形成能に及ぼす影響

培養し，hDPC における象牙芽細胞分化関連遺伝子の発現をリアルタイム PCR 法にて検討した．リアルタイム

加えて，RVX‒208 が hDPC の石灰化物形成能に及ぼPCR 解析の結果，培養 6 日目において，RVX‒208 は濃す影響を検討するために，hDPC を硬組織形成細胞へと度依存的に，hDPC における ALPL および COL1A1（象分化誘導した際の石灰化物の形成能をアリザリン染色法

牙芽細胞の初期分化マーカー）の遺伝子発現を低下させにて検討した．すなわち，hDPC を RVX‒208（0～100

た（Fig. 4‒a，b）．一方，RVX‒208 は，hDPC における

nmol/l）存在下で石灰化誘導培地にて培養し，18 日後のDSPP および DMP1（成熟象牙芽細胞のマーカー）の遺石灰化物をアリザリンレッドで染色した．アリザリン染伝子発現を上昇させた（Fig. 4‒c，d）．さらに，石灰化誘

色陽性の石灰化物をデンシメトリック解析にて計測した

導初期（培養 6 日目）においては，RVX‒208 の有無によ

結果，RVX‒208 は濃度依存的に hDPC の石灰化物形成

り hDPC の RUNX2 遺伝子発現に有意な差を認めなかっを促進させることが明らかとなった．さらに，100 nmol/l

たが（Fig. 5 left），石灰化誘導の後期（培養 18 日目）に

RVX‒208 は 0 nmol/l RVX‒208（DMSO 単独添加）群とお い て，100 nmol/l RVX‒208 は，hDPC に お け る

比較して，有意に石灰化物の形成を促進させることが明

RUNX2 遺伝子発現を有意に抑制した（Fig. 5 right）．

らかとなった（Fig. 3）．

2020 年 12 月

RVX‒208 の歯髄細胞における機能
a

b

10

＊

＊＊＊
＊＊

8
6
4
2
0

0

10
100
1
RVX-208（nmol/l）c

COL1A1
Ratio to HPRT（×102）

Ratio to HPRT（×10-2）

ALPL

＊＊
＊＊

3
2
1
0

0

1
10
100
RVX-208（nmol/l）

d

3

＊＊＊

＊

2
1
0

0

1
10
100
RVX-208（nmol/l）

DMP1
Ratio to HPRT（×10-3）

DSPP
Ratio to HPRT（×10-2）

531

＊

5
4
3
2
1
0

0

1
10
100
RVX-208（nmol/l）

Effect of RVX-208 on mRNA expression of odontoblast-related genes during
cytodifferentiation of hDPC
hDPC was cultured in calcification medium in the presence of RVX-208（0‒100

Fig. 4nmol/l）for 6 days and mRNA expression of（a）ALPL,（b）COL1A1,（c）DSPP
and（d）DMP1 in hDPC was analyzed by real-time PCR. Values represent the mean
±SD of triplicate assays. ＊：p＜0.05, ＊＊：p＜0.01, ＊＊＊：p＜0.001, comparedwith 0 nmol/l of RVX-208

8
6
4
2
0

0

10
100
1
RVX-208（nmol/l）

Day 18
Ratio to HPRT（×10-1）

Ratio to HPRT（×10-1）

Day 6

＊＊

12
10
8
6
4
2
0

0

1
10
100
RVX-208（nmol/l）

Effect of RVX-208 on RUNX2 mRNA expression during cytodifferentiationof hDPC
hDPC was cultured in calcification medium in the presence of RVX-208（0‒100

Fig. 5nmol/l）and RUNX2 mRNA expression was analyzed by real-time PCR on day 6（left）and 18（right）of cytodifferentiation of hDPC. Values represent the mean±SDof triplicate assays. ＊＊：p＜0.01, compared with 0 nmol/l of RVX-208.

日

532

考

本

歯

科

保

存

学

雑

誌

第 63 巻第6号

めて明らかとなった．

察BET ファミリータンパクは，Bromodomain‒containing protein 2‒4（BRD2‒4）と Bromodomain testis‒spe-

現在，直接覆髄法に使用されている水酸化カルシウム

cific protein（BRDT）の 4 つのタンパク質で構成されて製剤や MTA は，抗菌性・殺菌作用を示す一方で，高アいる．なかでも代表的な BET タンパクである BRD4 は，

ルカリ性の pH によって歯髄組織を壊死させることが知

骨関連遺伝子のプロモーターの RUNX2 結合領域に結合られている．水酸化カルシウム製剤は，塗布後 24 時間ですることで，骨芽細胞の分化制御や骨の恒常性維持に重pH 11 前後を示し11），MTA は硬化直後（塗布後 3 時間）

要な役割を担う9,17）．BET 阻害剤の一つである JQ1 は，の pH が最も高く pH 12.5 となることが報告されていBRD4 のドメインである Bromodomain 1 と 2（BD1 とる12）．また，これらの材料が歯髄細胞の増殖能に及ぼすBD2）の両方を標的とする．そのため，継続して JQ1 存

影響について検討した in vitro の研究より，水酸化カル

在 下 で 未 分 化 な 骨 芽 細 胞 を 培 養 す る と，RUNX2 やシウム製剤添加群は，0～24 時間で歯髄細胞数が減少し，

ALPL などの骨関連遺伝子の発現を顕著に抑制する．しMTA 添加群では 24～72 時間において歯髄細胞の増殖能

かし，JQ1 非存在下で同細胞を培養すると，その抑制効が減少することが明らかとなっている．一方，本研果は可逆的に解除される9,17）．一方，BD2 選択的阻害因究において，RVX‒208 は hDPC に対して細胞毒性を示子である RVX‒208 の調節機能は，汎 BET 抑制因子であさないことが明らかとなった．さらに，RVX‒208 はる JQ1 と比較すると限定的である18）．われわれの研究結

hDPC の増殖を抑制することもなかった．現在用いられ果においても，RVX‒208 はヒト歯髄細胞の石灰化誘導ている MTA や水酸化カルシウム製剤が，歯髄組織の壊の初期段階においては RUNX2 の遺伝子発現に影響を及

死を引き起こすことを考えると，RVX‒208 は組織親和

ぼさなかったが，持続的に 100 nmol/l の RVX‒208 をヒ

性の高い，安全な直接覆髄剤の要件を満たしていると考ト歯髄細胞に添加すると，石灰化誘導の後期においてヒえられた．さらに，RVX‒208 は同細胞の石灰化を促進さ

ト歯髄細胞における RUNX2 遺伝子の発現が抑制される

せることが明らかとなった．すなわち，RVX‒208 は歯髄ことが明らかとなった．一般的に，石灰化誘導過程にお細胞の硬組織形成細胞への分化を促進することで，歯髄ける RUNX2 遺伝子の発現パターンは，細胞分化の初期の石灰化を誘導する機能を有することが示された．

段階では RUNX2 遺伝子の発現上昇を認め，細胞分化の11,13）

RVX‒208 は，ヒストンと BET タンパクの相互作用を

後期では RUNX2 遺伝子発現が抑制される19）．この報告

競合的に阻害することで，転写および転写後に起こる遺とわれわれの研究成果より，RVX‒208 は象牙芽細胞へ

伝子発現をエピジェネティクスに変化させる機能をもの分化の後期・石灰化における RUNX2 遺伝子の発現をつ14）．これまでに，歯髄幹細胞の分化誘導にヒストンタ抑制することで，歯髄における硬組織形成をより促進さ

ンパクのエピジェネティクスな修飾が重要な役割をもつせることが示唆される．一方 JQ1 は，石灰化誘導の初期ことが報告されている．一例として，Cho ら15）は in vitro

段階から持続的に RUNX‒2 の遺伝子発現を顕著に抑制において，ヒト歯髄幹細胞にヒストン脱アセチル化酵素するため，硬組織形成細胞への分化，さらにその後に続阻害剤であるバルプロ酸を添加すると，Osterix，Osteo-

く石灰化物の形成を抑制する9,17）．

pontin および RUNX2 といった骨関連遺伝子の転写が促

現在，エピジェネティクスを標的とした分子標的薬の進され，同細胞の分化および石灰化が促進されることを開発が先天性疾患やガン研究の分野などで進んでおり，報告している．われわれの研究成果においても，ヒト歯すでにいくつかの薬剤は治療薬として利用されている．

髄細胞を RVX‒208 存在下で硬組織形成細胞へと分化誘

たとえば，骨髄異形成症候群治療薬として臨床で用いら導すると，分化の初期において，hDPC は成熟象牙芽細れている DNA メチル化酵素阻害剤であるアザシチジン

胞のフェノタイプ（ALPL および COL1A1 遺伝子の発や20），皮膚 T 細胞リンパ腫の治療薬として使用されてい現低下ならびに DSPP および DMP1 遺伝子の発現上るヒストン脱アセチル化酵素であるロミデプシンが挙げ昇 ）を示したことから，RVX‒208 は hDPC の象牙芽られる21）．これらの事実は，エピジェネティクスを標的

細胞様細胞への分化を促進させることが明らかとなっとした既存薬の新規機能を探索することにより，その既た．すなわち，歯髄細胞に含まれる未分化間葉系細胞の存薬を別の疾患の治療に応用することが可能であること

分化制御には，エピジェネティクスな転写が鍵となるこを示唆している．本研究で使用した RVX‒208 は，心血とが裏付けられた．さらに，歯髄細胞の分化制御には，管疾患に対する経口治療薬として現在開発が進められてバルプロ酸のようなクロマチンの翻訳後修飾によるエピ

おり，同剤投与により心疾患マーカー分子の発現が調節

ジェネティクスな転写制御のみならず，BET タンパクをされることで，有害な心血管系イベントの発生率が低下

介した転写制御も関与することが本研究成果によって初することが報告されている22）．RVX‒208 は自然由来の

16）

2020 年 12 月

RVX‒208 の歯髄細胞における機能

低分子化合物で，低い全身クリアランス率（5 ml/min/kg）を示し，比較的短い半減期（1.5 時間）で，44％の経口バイオアバイラビリティを示すことが報告されている ．このように，RVX‒208 は人体に対する安全性を有23）

し，薬物動態の情報も明確であることから，エピジェネ
ティクス機構を発揮するほかの分子標的薬と比較してドラッグ・リポジショニングが容易な薬剤であると考えられる．これらの報告と本研究の結果から，RVX‒208 は歯髄幹細胞の象牙芽細胞様細胞への分化を誘導し，損傷部の硬組織（修復象牙質）形成を促すことが可能な副作用の少ない新規直接覆髄剤となりうることが期待できる．
今後，in vitro における RVX‒208 の歯髄幹細胞の分化誘導機構についてのさらなる解明，封鎖性を発揮する
RVX‒208 と混和する足場材の探索，さらに，同定された足場材と RVX‒208 の混和物の効果を in vivo 実験により明らかにすることで，有効な直接覆髄法の一つとして
RVX‒208 の応用が実現されるものと期待される．

結論

RVX‒208 は，歯髄細胞を傷害することなく，歯髄細胞の硬組織形成細胞への分化および石灰化を促進することが示された．すなわち，RVX‒208 は，直接覆髄剤に必要な歯髄親和性および石灰化促進作用をもつことが明らかとなった．
本研究は，大阪大学 女性研究者に対する研究費支援および JSPS 科研費 T19K227140 の助成を受けたものである．
本論文に関して，開示すべき利益相反状態はない．

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Carstens MF, Thaler R, Stein GS, van Wijnen AJ, Duda-

534

日

本

歯

科

保

存

学

雑

誌

第 63 巻第6号

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シン（イストダックス® 点滴静注用 10 mg）の薬理学的/2020 年 12 月

RVX‒208 の歯髄細胞における機能

535

The Functional Analysis of RVX-208 in Human Dental Pulp Cells:
An Initiative for the Application of a Bioactive Compound, RV-208,
on Direct Pulp Capping
MATSUMOTO Masahiro, FUJIHARA Chiharu, SHIMABUKURO Yoshio,
YAMAMOTO Yu, NANTAKEERATIPAT Teerachate, KITAGAKI Jirouta,
YAGI Hiroko, HAYASHI Satoko, IWAYAMA Tomoaki,
KASHIWAGI Yoichiro, MIKI Koji, KITAMURA Masahiro,
SAWADA Keigo, KINOSHITA Mayu and MURAKAMI Shinya
Department of Periodontology, Division of Oral Biology and Disease Control, Osaka University Graduate School of Dentistry

Abstract
Purpose: Calcium hydroxide and mineral trioxide aggregate（MTA）are the most widely used for direct
pulp capping. However, these agents induce the large pulp necrosis beneath the materials. Therefore, there
is a need to develop non-toxic agents for pulp capping. RVX-208, a bioactive compound, plays important roles
in inflammation and bone metabolism by epigenetic regulation of the expression of various genes. However,the functions of RVX-208 in dental pulp cells are still unknown. Thus, in this study, we investigated the toxicity and functions of RVX-208 on dental pulp cells to evaluate whether it offers the necessary features as agood next generation candidate for direct pulp capping materials.
Methods: The first premolars were extracted from patients undergoing orthodontic treatment at the
Osaka University Dental Hospital. Then, dental pulp was extracted from the premolars and human dental
pulp cells（hDPC）were isolated by primary outgrowth cultures. The cytotoxicity of RVX-208 on hDPC was
examined by probidium iodide（PI）staining. The effect of RVX-208 on proliferation of hDPC was analyzed
using Bromodeoxyuridine（BrdU）assay. In addition, the effect of RVX-208 on calcification nodules producedby cytodifferentiation of hDPC was evaluated by alizarin staining. Furthermore, the effect of RVX-208 on
mRNA expression of odontoblast-related genes during cytodifferentiation of hDPC was examined by realtime PCR.
Results: The frequency of occurrence of PI＋ cells was not significantly different between hDPC in thepresence of 1, 10, 100 and 0 nmol/l of RVX-208. BrdU assay revealed that RVX-208（0‒100 nmol/l）did notaffect the proliferation of hDPC. In contrast, on day 18 of cytodifferentiation of hDPC, alizarin staining
showed that RVX-208 increased the calcification nodules of hDPC in a concentration-dependent manner. In
addition, real-time PCR analysis revealed that DSPP and DMP1 mRNA expression was up-regulated in
hDPC treated with RVX-208 during cytodifferentiation, whereas ALPL and COL1A1 mRNA expression was
down-regulated in these cells. On day 6 of cytodifferentiation of hDPC, there was no significant difference in
RUNX2 mRNA expression between hDPC treated with or without RVX-208. In contrast, on day 18, RUNX2mRNA expression was significantly down-regulated in hDPC treated with 100 nmol/l of RVX-208, comparedto that treated without RVX-208.
Conclusion: A bioactive compound, RVX-208, enhanced cytodifferentiation and calcification of dental pulp
cells. RVX-208 might be a good candidate for a safe and effective biological direct pulp capping agent.
Key words: RVX-208, human dental pulp cells, direct pulp capping agent
Corresponding author: Dr. FUJIHARA, Department of Periodontology, Division of Oral Biology and Disease Control, Osaka
University Graduate School of Dentistry, 1‒8, Yamadaoka, Suita, Osaka 565‒0871, Japan
TEL: ＋81‒6‒6879‒2932, FAX: ＋81‒6‒6879‒2934, E-mail: fchiharu@dent.osaka-u.ac.jp
Received for Publication: August 20, 2020/Accepted for Publication: November 5, 2020

日

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歯

科

保

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原

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雑

誌

第 63 巻著

第6号

日歯保存誌 63（6）：536～544，2020

ユニバーサルアドヒーシブへの光線照射の有無が自己接着性レジンセメントの歯質接着性に及ぼす影響
石

井

辻

本

亮1,2

髙見澤

俊

樹1,2

野

尻

貴

絵1

暁

正1,2

甘

利

佳

之1

奥

脇

岳

人1

飯

島

也1

宮

崎

達

真

至1,2

日本大学歯学部保存学教室修復学講座

1

日本大学歯学部総合歯学研究所生体工学研究部門

2

抄録
目的：汎用性に優れたユニバーサルアドヒーシブは，自己接着性レジンセメント（自己接着セメント）の前処理材として使用可能であるが，その詳細については不明な点が多い．そこで，ユニバーサルアドヒーシブへの光線照射の有無が自己接着セメントの歯質接着性に及ぼす影響について，剪断接着強さ試験および接着界面の走査電子顕微鏡（SEM）観察を行うことによって検討した．
材料と方法：供試したユニバーサルアドヒーシブと自己接着セメントとの組合せは，OptiBond Universal/
Maxcem Elite Chroma，G‒Premio Bond/G‒CEM LinkAce および Scotchbond Universal/RelyX Unicem 2
Automix である．接着試片の製作に際して，ウシ下顎前歯歯冠部を用い，エナメル質あるいは象牙質平坦面を
耐水性 SiC ペーパー #320 を用いて研削し，これらを被着歯面とした．歯面処理として，ユニバーサルアドヒー
シブをセルフエッチモードとして製造者指示条件に従って塗布した後，照射を行うもの（照射群）とこれを行
わないもの（非照射群）の 2 条件とした．次いで，内径 2.4 mm，高さ 2 mm のリング状ステンレス型にセメン
ト泥を塡塞してこれに光照射を行い，37℃精製水中に 24 時間保管した．保管後の試片について，万能試験機を用いてクロスヘッドスピード 1.0 mm/min の条件で剪断接着強さを測定し，得られた値から各条件の接着強さ（MPa）を求めた（n＝10）．得られたデータに関しては，一元配置分散分析および Tukey HSD test によって有意水準 5％の条件で統計学的検討を行った．さらに，エナメル質および象牙質との接着界面について，通法に従って SEM 観察を行った．
結果：接着強さ試験の結果から，エナメル質および象牙質いずれの被着歯面においても自己接着セメントの違いによって接着強さは異なるものの，ユニバーサルアドヒーシブの塗布およびその光照射は，接着強さの向上に寄与する傾向が認められた．また，SEM 観察の結果からアドヒーシブへの照射を行った試片で，これを行わなかった試片と比較して厚いアドヒーシブ層が観察され，これが接着強さの向上に寄与した可能性が考えられた．
結論：自己接着セメントの前処理材としてユニバーサルアドヒーシブを用いる際には，製品によってその傾向は異なるものの，アドヒーシブへの適切な光照射を行うことで歯質接着性の向上が期待できることが示唆された．
キーワード：自己接着性レジンセメント，ユニバーサルアドヒーシブ，光照射，接着強さ，SEM 観察

責任著者連絡先：石井 亮〒 101‒8310 東京都千代田区神田駿河台 1‒8‒13 日本大学歯学部保存学教室修復学講座
TEL：03‒3219‒8141，FAX：03‒3219‒8347，E-mail：ishii.ryou@nihon-u.ac.jp
受付：2020 年 9 月 15 日/受理：2020 年 11 月 6 日
DOI：10.11471/shikahozon.63.536

2020 年 12 月

アドヒーシブへの光照射とレジンセメントの歯質接着性緒537

Universal（OU，Kerr，USA），G‒Premio Bond（GP，言ジーシー）および Scotchbond Universal（SU，3M Oral
Care，USA）の 3 製品を用いた．自己接着セメントとし患者および術者相方からの審美性に対する要求の高まては，Maxcem Elite Chroma（ME，Kerr），G‒CEMりから，歯冠色を有する間接修復物が選択される症例がLinkAce（GL，ジーシー）および RelyX Unicem 2 Auto-増加するのに伴って，装着材としてレジンセメントを用

mix（RU，3M Oral Care）の 3 製品を同一製造者のアド1）

いる頻度が高くなっている ．これまで，レジンセメン

ヒーシブと併用した．また可視光線照射器（Optilux 501，

トを用いた修復物の装着に際しては，歯冠修復物内面とKerr）は，その光強度が 600 mW/cm2以上であることをともに支台歯に適した前処理を行うことが必要であると確認して実験に使用した．

されて，プライマー塗布などが行われてきた2）．一方，

2 ．接着強さの測定

これらプライマーの使用は臨床ステップを複雑にすると接着試験測定用試片の製作に際しては，ウシ（2～3 歳

ともに，テクニックセンシティブ因子を増加させること齢）の下顎前歯の歯冠部のみを常温重合レジン（トレーにつながる可能性がある．このような臨床背景の下に，

レジンⅡ，松風）に包埋し，直径 6～8 mm 程度のエナメ

レジンセメントを用いた歯冠修復物の装着をより簡便で

ル質あるいは象牙質平坦面が得られるように唇側中央部あるとともに確実にしたいという臨床要求が高まり，被を研削した．次いで，この面を耐水性シリコンカーバイ

着面に対する前処理不要の自己接着性レジンセメント

ドペーパーの #320 で研削し，被着歯面とした．

（以後，自己接着セメント）が開発された3）．

これらの被着歯面に対しては，アドヒーシブをセルフ

自己接着セメントは，その組成中に機能性モノマーをエッチングモードとして製造者指示に従って塗布，エア含有することで，歯質および修復物への前処理を不要とブローを行った．次いで，アドヒーシブへ光照射を行うしたものであり，臨床操作性を飛躍的に向上するものと（照射群），あるいは照射を行わない（非照射群）というされている4）．さらに，各被着面に適したプライマーを

2 条件を設定するとともに，アドヒーシブを塗布せず自塗布するレジンセメントと比較して，修復物装着時の操己接着セメントのみを用いた試片をコントロールとし作ステップの簡略化によってチェアタイムを短縮するとた．次いで，内径 2.4 mm，高さ 2 mm のリング状ステン

ともに，装着時に生じるテクニックセンシティブ因子をレス（SUS 304）型に練和したセメント泥を塡塞し，塡低減化しているとの報告もある ．一方，歯質に対して塞面を透明ストリップスで圧接した面に 30 秒間光照射

可及的に高い接着性が求められる大型のアンレー窩洞形を行った．なお，アドヒーシブと自己接着セメントの組態あるいはセラミックスなどの審美脆性材料を用いた歯合せは，同一製造者の製品とした．

5）

冠修復物においては，自己接着セメントになんらかの補試片を，照射直後から 37℃精製水中に 24 時間保管し助的手法を付加することが求められる症例もある．そこた後，万能試験機（Type 5500R，Instron，USA）を用

で，自己接着セメントを使用する際に接着性を向上させ

い，クロスヘッドスピード 1.0 mm/min の条件で剪断接ることを目的として，汎用性に優れるとともに術式が簡

着強さを測定し平均値および標準偏差を求めた．各条件

便なユニバーサルアドヒーシブ（以後，アドヒーシブ）における試片の数は 10 個とし，接着試験終了後の試片にを前処理として用いることも提唱されている．しかついては，実態顕微鏡（SZH‒131，オリンパス）を用いし，アドヒーシブ塗布の効果とともに，アドヒーシブへてレジン側，歯質側および自己接着セメント側破断面をの光照射の有無に関しては不明な点が多い．

観察し，界面破壊，歯質あるいはレジンセメントの凝集

6,7）

そこで本研究では，自己接着セメントの臨床術式を確立する研究の一環として，被着歯面の前処理として塗布破壊および混合破壊として分類した．
3 ．SEM 観察されたアドヒーシブへの光照射が自己接着セメントの接

自己接着セメントと歯質との接合界面の観察に際して着性に及ぼす影響について，剪断接着強さ試験および接は，接着試験用試片と同様に製作した試片を 37℃精製水

着界面の走査電子顕微鏡（SEM）観察を行うことによっ

中に 24 時間水中保管した後，エポキシ樹脂（Epon520，て検討した．

日新 EM）に包埋した．樹脂が硬化した後，低速精密切材料および方法

断機（IsoMet 4000，Buehler，USA）を用いて注水下で縦断し，この面をダイヤモンドペーストの粒径 0.25μmまで順次研磨して SEM 観察用試片とした．これらの試

1 ．供試材料および可視光線照射器

片は，tert‒ブタノール濃度上昇系列に順次浸漬した後，供試したアドヒーシブおよび自己接着セメントを，

凍結乾燥機（Model ID‒3，エリオニクス）を用いてフTable 1，2 に示した．アドヒーシブとしては，OptiBond

リーズドライし，加速電圧 1.0 kV，イオン流密度 1.2

日

538

Table 1

本

保

存

学

雑

誌

Main component（Code）G‒Premio Bond（GP）科

第 63 巻

第6号

Manufacturer

Lot No.

Kerr
（USA）

6689301

GC

1611011

3M Oral Care
（USA）

80822C

Universal adhesive used in this study

Universal adhesive
OptiBond Universal（OU）

歯UDMA, TEGDMA, silica‒zirconia filler
MDP, 4‒MET, MEPS, methacrylate monomer, acetone, water, silica, initiator

Scotchbond Universal Bis‒GMA, HEMA, decamethylene dimethacrylate, ethyl methacryalate,（SU）
propenoic acid, methyl‒reaction products with decanediol and phosphorous oxide, copolymer of acrylic and itaconic acid, dimethylaminobenzoate, methyl ethyl ketone, ethanol, water, silane treated silica, initiator

UDMA：urethane dimethacrylate, TEGDMA：triethyleneglycol dimethacrylate, MDP：10‒methacryloyloxydecyl dihydrogen phosphate, 4‒MET：4‒methacryloyloxyethyl trimellitate, MEPS：methacryloyloxyalkyl thiophosphate methylmethacrylate, Bis‒GMA：2,2‒bis［4‒（2‒hydroxy‒ 3‒methacryloyloxypropoxy）phenyl］propane, HEMA：2‒hydroxyethyl methacrylate.

Table 2

Self‒adhesive resin cement used in this study

Self‒adhesive resin cement（Code）

Main component

Manufacturer

Lot No.

Maxcem Elite Chroma（ME）

HEMA, GDM, UDMA, 1,1,3,3‒tetramethylbutyl hydroperoxide
TEGDMA, fluoroaluminosilicate glass, GPDM, barium glass filler,
fumed silica

Kerr
（USA）

7198588

G‒CEM LinkAce（GL）

UDMA, dimethacrylate, phosphonate monomer, γ‒methacryloxypropyltrimethoxysilane, α,α‒dimethyl‒benzyl hydroperoxide, fluoro‒aluminosilicate glass, silicon dioxide, initiator, inhibitor, pigment

GC

1906171

RelyX Unicem 2
Automix（RU）

propanediyl dimethacrylate and phosphorus oxide, substitute dimeth- 3M Oral Care 6054585
a c r y l a t e , T E G D M A , 2‒p r o p e n o i c a c i d , 2‒m e t h y l‒, 1 , 1 ’‒
［1‒
（USA）
（hydroxymethyl）‒1,2‒eth‒anediyl］ester, silane treated glass powder,silane treated silica, sodium persulfate, glass powder, tert‒ butyl peroxy‒3,5,5‒trimethylhexanoate, copper（II）acetate monohydrate, 1,12‒
dodecane dimethycrylate, 1‒benzyl‒5‒phenyl‒barbic‒acid, calcium
salt, sodium p‒toluenesulfinate, calcium hydroxide, methacrylated aliphatic amine, titanium dioxide

HEMA：2‒hydroxyethyl methacrylate, GDM：glycerol 1,3‒dimethacrylate, UDMA：urethane dimethacrylate, TEGDMA：
triethyleneglycol dimethacrylate, GPDM：glyceroldimethacrylate dihydrogen phosphate.

mA/cm2 の条件でアルゴンイオンエッチング（EIS‒200

結ER，エリオニクス）を 30 秒間行った．次いで，イオンコーター（Quick Coater Type SC‒201，サンユー電子）

果を用いて金蒸着を行い，フィールドエミッション型

1 ．接着強さ

SEM（ERA‒8800 FE，エリオニクス）を用いて，加速

アドヒーシブへの照射の有無が自己接着セメントの歯

電圧 10 kV の条件で観察した．
4 ．統計処理

質接着性に及ぼす影響を，Table 3 に示した．
エナメル質接着強さは，コントロールと比較するとア得られた測定値については，統計用ソフトウェア

ドヒーシブを併用することによって有意に高い値を示し（Sigma Plot version 13.0，Systat Software，USA）を用た．また，アドヒーシブへの光線照射の有無で比較する

いて，一元配置分散分析および Tukey HSD test によっと，ME および GL において有意に高い値を示し，RU でて有意水準 5％の条件で統計学的検討を行った．

は有意差は認められなかった．象牙質接着強さは，エナ2020 年 12 月

アドヒーシブへの光照射とレジンセメントの歯質接着性
Table 3539

Influence of light irradiation to universal adhesives on bondstrength of self‒adhesive resin cements

Resin cement

Adhesive

Light irradiation

4.8（0.8）

OU
OU

21.7（1.4） 22.2（4.0）ab
18.6（3.0）
17.0（2.3）b

withwithoutd5.6（0.9）

RU

GP

with

GP

without

4.6（1.9）eaControlGL

DentineControlME

Enamel4.7（1.4）eb

15.2（2.3） 12.4（2.2）c
13.1（1.8）c

9.3（1.2）dControlSUwithe4.4（1.0）
5.3（1.5）e17.2（2.0）b 17.9（3.2）bSU

without

16.3（1.4）b 14.6（1.8）cn＝10, unit：MPa
Same small case letter in vertical columns indicates no difference at
5％ significance level.

Table 4

Failure mode analysis of de‒donded specimens

Resin cement

Adhesive

Light irradiation

EnamelDentinME

Control
OU
OU

withwithout［100/0/0/0］［100/0/0/0］［100/0/0/0］［87/0/0/13］［100/0/0/0］［100/0/0/0］

GLControlGPGP

withwithout［100/0/0/0］［100/0/0/0］［100/0/0/0］［100/0/0/0］［100/0/0/0］［100/0/0/0］

RU

ControlSUSU

withwithout［100/0/0/0］［100/0/0/0］［100/0/0/0］ ［93/0/0/7］［100/0/0/0］［100/0/0/0］

n＝10
Failure mode：［adhesive failure/cohesive failure in resin cement/cohesive failure in tooth/mixed failure］percentage of each failure mode.

メル質と同様にアドヒーシブを併用することで有意に高への照射条件で比較すると，照射群で非照射群と比較しい値を示し，照射群は非照射群と比較して有意に高い接てアドヒーシブ層が厚くなる傾向を示した．

着強さを示した．

自己接着セメントの，象牙質における接合界面の2 ．破壊形式

SEM 像を Fig. 2 に示した．象牙質に対するレジンセメン

接着試験終了後の破断面における破壊形式を，Table

トの接合状態は，アドヒーシブの有無あるいは光照射条4 に示した．すなわち，試験終了後の破断面における破件にかかわらず良好であり，象牙細管内に浸透したレジ

壊形式は，コントロールを含めていずれの被着体およびンタグが観察された．またアドヒーシブ層は，エナメル

照射条件にかかわらず界面破壊が大勢を占める傾向を示質と同様に照射群で厚くなる傾向を示した．

した．
3 ．SEM 観察
自己接着セメントの，エナメル質接合界面の SEM 像考察を Fig. 1 に示した．いずれの自己接着セメントにおいて歯質と同様の色調を有するセラミックスあるいはも，エナメル質との接合状態はアドヒーシブへの光照射

CAD/CAM レジン冠の装着には，機械的強度が高く辺条件にかかわらず良好であった．また，各アドヒーシブ

縁封鎖性に優れたレジンセメントが使用されている8,9）．

日

540

本

歯

科

保

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学

雑

with light irradiation

第 63 巻

R

A

A

E

E
R

GP/GL

R

A

A

E

E

R

R

SU/RU

第6号

without light irradiation
R

OU/ME

誌

A

A

E

E

Fig. 1 SEM observation of resin cements-enamel interfaces
R：resin cement, A：adhesive, E：enamel（original magnification：×10,000）

これまで，レジンセメントを用いた装着に際しては，修レジンセメントの機械的性質の違いが接着強さに及ぼす復物とともに支台歯それぞれに適した前処理が必要であ影響を低減化するとされている．また，接着界面を歯質

り，装着時の操作が煩雑となるためにこれがテクニックとレジンセメント間に限定することから，本法を用いる

センシティブ因子となることが指摘されていた10）．そこことによって，得られたデータのバラつきが少なくなるで，歯冠修復物の装着に際して操作ステップを簡略化しとともに安定したデータを得ることができたものと考えた自己接着セメントが開発，臨床応用されるようになっられた．

た ．一方，症例によっては自己接着セメントの接着耐

Mold‒enclosed method を用いた接着試験の結果から，

久性を向上させることが求められ，多種多様な被着体にいずれの自己接着セメントにおいても，アドヒーシブを接着可能であるアドヒーシブを前処理材として用いる臨

併用すると光照射の有無にかかわらずコントロールと比床術式が提唱された

11）．しかし，塗布されたアドヒー

較して有意に高い接着強さが得られた．自己接着セメン

シブに対する光照射の有無など，その臨床術式について

トは，含有される機能性モノマーが酸として作用するこは不明な点が多い．そこで，前処理材として使用するアとで歯質表面が脱灰し，遊離したカルシウムイオンと化

ドヒーシブへの光照射が自己接着セメントの歯質接着性

学的に結合するとともに，モノマー成分が歯質表面に浸に及ぼす影響について検討した．

透・拡散した後に硬化することで微小機械的嵌合力を獲

12,13）

本研究には，剪断接着強さ試験用試片の制作に際し得している15）．一方，自己接着セメントはその機械的強て，内径 2.4 mm，高さ 2 mm のリング状ステンレス型を度を向上させるためにフィラーが一定量含有されてお使用する mold‒enclosed method を採用した14）．この試

り，相対的にレジンモノマー量が少なくなる．したがっ験法はステンレス型を用いることによって剪断接着試験てレジンペーストの流動性や歯質へのぬれ性などは，ア時の応力分散を均等化することが可能となるとともに，ドヒーシブと比較すると劣ることとなる．したがって，2020 年 12 月

アドヒーシブへの光照射とレジンセメントの歯質接着性
with light irradiation

OU/ME

without light irradiation
R

R

A

A

D

D

R

GP/GL

R

A

A

D

D

R

R

SU/RU

541

A

A

D

D
Fig. 2 SEM observation of resin cements-dentin interfaces
R：resin cement, A：adhesive, D：dentin（original magnification：×10,000）

アドヒーシブを自己接着セメントの前処理材として併用高くなった理由として，セメント泥を硬化させるためにすることによって練和レジンセメントペーストで不足す行った光照射以外にアドヒーシブ自体への光照射によっる可能性がある歯質へのぬれ性とともに浸透性を補うこてアドヒーシブ層の機械的強度が向上し，接着界面付近とが可能となり，接着強さが有意に向上したものと考えに生じる応力への抵抗性が高くなったためと考えられられた ．

た．また，光照射されていないアドヒーシブ中には酸性

16）

次いで，ユニバーサルアドヒーシブへの光照射の有無を示す機能性モノマーが多く残留しており，この上にセで接着強さを比較すると，RU のエナメル質に対する接メントペーストが充塡されるが低い pH 環境のために重着では差は認められなかったものの，これ以外の条件で合性が低下したために，機械的強度も低下した可能性もは非照射群と比較して有意に高い値を示した．一方，接考えられた20）．

着界面の SEM 観察からは，いずれの条件においても照さらに，光照射の有無によって生じたアドヒーシブ層

射群は非照射群と比較してアドヒーシブ層が厚くなる傾の厚みの違いも接着強さに影響を与える因子となった可向を示し，その厚さは 1～5μm であった．アドヒーシブ能性もある21）．すなわち，静的荷重負荷によって生じたは，照射によって励起したカンファーキノンが還元剤で亀裂の先端にはアドヒーシブ層の塑性変形を伴った塑性あるアミンと励起錯体を形成してラジカルを生じること

変形領域が形成され，その大きさは亀裂の進展に関連すで，レジンモノマーの重合が生じ，接着界面に強固なアるとされ，アドヒーシブ層の厚さが亀裂先端に形成されドヒーシブ層を形成する ．アドヒーシブへの光照射がた塑性変形領域に対して十分に厚い条件では応力を分散

歯質接着性に及ぼす影響を検討した報告からは，接着強させることが可能となる22）．したがって，照射によってさは光強度が高くなるとともに向上したとされていアドヒーシブの厚さが十分に得られた結果，アドヒーシる

ブ層の変形が波及しない堅性変形領域の存在によって亀17）．したがって，光照射を行った条件で接着強さが18,19）

日

542

本

歯

科

裂進展に対する抵抗性が高くなったため，接着性も高くなったものと考えられた．一方 SU には，光重合型ではあるが自己接着セメントの RU と接触することによって
化学重合開始剤を取り込むことでデュアルキュアとなる
硬化反応様式が採用されているところから23,24），特に水分量が少なくレジン成分の重合性が象牙質に比較して有利となるエナメル質において，光照射の有無が接着強さに影響しなかったものと考えられた．
以上のように本研究の結果から，自己接着セメントを使用する際にアドヒーシブを併用することで，エナメル質および象牙質接着性を向上させることが可能であることが明らかとなった．また，アドヒーシブ塗布後に光照射を行うことよって良好な接着性が得られることが示さ
れた．

結

論

ユニバーサルアドヒーシブへの照射の有無が自己接着性レジンセメントの歯質接着性に及ぼす影響について検討した結果，以下の結論が得られた．
1．自己接着性レジンセメントは，ユニバーサルアド
ヒーシブへの光照射の有無にかかわらずユニバーサルア
ドヒーシブを併用することで接着性が向上した．
2．ユニバーサルアドヒーシブ塗布後，光照射を行う
ことで適切なアドヒーシブ層が形成された結果，自己接着性レジンセメントの接着強さは向上する傾向を示した．
3．接着界面の SEM 観察から，ユニバーサルアドヒー
シブに光照射を行うことで 1～5μm のアドヒーシブ層の形成が確認された．
本論文に関して，開示すべき利益相反状態はない．

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保

存

学

雑

誌

第 63 巻

第6号

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2020 年 12 月

アドヒーシブへの光照射とレジンセメントの歯質接着性17）Van Landuyt KL, Cardoso MV, De Munck J, Peumans543

20: 157‒160.

M, Mine A, Lambrechts P, Van Meerbeek B. Optimization of the concentration of photo-initiator in a one-step21）Lodovici E, Reis A, Geraldeli S, Ferracane JL, Ballester
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日

544

本

歯

科

保

存

学

雑

誌

第 63 巻

第6号

Influence of Light Irradiation of Universal Adhesiveson the Bonding Effectiveness of Self-adhesive Resin Cements
ISHII Ryo1,2, TAKAMIZAWA Toshiki1,2, NOJIRI Kie1,
TSUJIMOTO Akimasa1,2, AMARI Yoshiyuki1, OKUWAKI Taketo1,
IIJIMA Tatsuya1 and MIYAZAKI Masashi1,21Department of Operative Dentistry, Nihon University School of Dentistry2

Division of Biomaterials Science, Dental Research Center, Nihon University School of Dentistry

Abstract
Purpose: The purpose of this study was to investigate the influence of light irradiation of universal adhesives on the bonding performance of self-adhesive resin cements based on shear bond strength（SBS）tests
and SEM observations of resin/dentin interfaces.
Materials and Methods: Three combinations of universal adhesive and self-adhesive resin cement wereused: OptiBond Universal/Maxcem Elite Chroma, G-Premio Bond/G-CEM LinkAce, and Scotchbond Universal/RelyX Unicem 2 Automix. Bovine enamel and dentin surfaces were ground with SiC papers, ending at#320 grit. Each universal adhesive was applied to the ground surface in self-etch mode according to the manufacturers’ indications. The treated specimens were divided into two groups, with or without light irradiation of the adhesive applied surface. A stainless-steel metal ring was placed over the bonding area, and theself-adhesive cement was condensed into the ring and light irradiated. Ten specimens per each group werestored in 37℃ water for 24 h, and then SBS tests were conducted. Two-way ANOVA followed by Tukey’s
honestly significant difference test（α＝0.05）was used for analysis of the SBS data.
Results: Although SBS value was material dependent for both enamel and dentin, the light irradiationgroups tended to show higher SBS values than the non-irradiated groups. In the SEM observations, the adhesive layers with light irradiation were thicker than those without.
Conclusion: The results of this study indicated that appropriate light irradiation of universal adhesives may
increase the bond performance of self-adhesive resin cements.
Keywords: self-adhesive resin cement, universal adhesive, light irradiation, bond strength, SEM observation

Corresponding author: Dr. ISHII, Department of Operative Dentistry, Nihon University School of Dentistry, 1‒8‒13, Kanda-Surugadai, Chiyoda-ku, Tokyo 101‒8310, Japan
TEL: ＋81‒3‒3219‒8141, FAX: ＋81‒3‒3219‒8347, E-mail: ishii.ryou@nihon-u.ac.jp
Received for Publication: September 15, 2020/Accepted for Publication: November 6, 2020

2020 年 12 月

545

原

著

日歯保存誌 63（6）：545～553，2020

タタキ振動を付与した音波振動歯ブラシのプラーク除去効果および歯周組織に対する有用性について
鴨
三

井
浦

久

博
悠

＊

吉

峰

正

彌

濵

田

真理子＊

日本医科大学千葉北総病院歯科＊

エイチ・エムズコレクション

抄録
目的：口腔内疾患の発症や予防のために，日々のブラッシングによるプラーク・コントロールはとても重要である．効果的なプラーク・コントロールにおいて，音波振動歯ブラシは有効であることが示されている．そこで今回，新たに音波振動歯ブラシを用いて，プラーク除去効果について多角的に有用性を評価する．
対象および方法：被験者は，口腔清掃に関しての十分な知識をもち，かつ技能に関しても十分習熟していると考えられる男女年齢不問の 12 名とした．被験歯は，Ramfjord 6 歯（16，21，24，36，41，44 または代替歯）でプラーク蓄積に著しく影響を及ぼす修復物がないものとした．使用器具は，新駆動方式の音波振動ハブラシ
Doltz（EW‒DP51/Panasonic，以下，新ドルツ），従来駆動方式の音波振動ハブラシ Doltz（EW‒DE25/Panasonic，以下，従来ドルツ）を使用した．研究方法は，初めに口腔内のプラーク除去を評価するために，プラークの点数化は Rustogi Modification Navy Plaque Index を用いて，使用前後の測定を行った．統計処理としては Wilcoxon 検定を用いた．次に歯周組織の状態を評価するために，評価項目は Probing Depth（PD），Bleeding on Probing（BOP），Gingival Index（GI）を用いて，使用前後の測定を行った．統計処理としては Wilcoxon
検定を用いた．
結果・考察：プラーク除去率は，全部位において従来ドルツ群が新ドルツ群と比較して各部位で高い除去率を示したが，両群には統計学的有意差は認めなかった．歯周組織の状態の評価は，PD，BOP，GI の全パラメー
ターにおいて，従来ドルツ群よりも新ドルツ群のほうが高い改善率を示した．また，群内比較においても新ドルツ群は全パラメーターで使用前後の有意差を認めた（p＜0.05）．
以上の所見から，新ドルツは従来ドルツに比較して，歯周組織改善効果が高いことが示された．新ドルツ本体に新たに付加されたタタキ振幅により歯肉に適度な刺激が伝わることと，口腔清掃に最適なマルチフィット
ブラシとの相乗効果が歯肉の改善に寄与したためと考えられる．今後，音波振動歯ブラシの使用により，う蝕・歯周病予防のプラーク・コントロールを行うことが期待できる．
キーワード：Rustogi Modification Navy Plaque Index，タタキ振幅，歯肉の改善

責任著者連絡先：鴨井久博〒 270‒1694 千葉県印西市鎌苅 1715 日本医科大学千葉北総病院歯科
TEL：0476‒99‒1111，FAX：0476‒99‒1919，E-mail：hisakamo@nms.ac.jp
受付：2020 年 9 月 9 日/受理：2020 年 11 月 9 日
DOI：10.11471/shikahozon.63.545

日

546

緒

本

歯

科

保

存

学

雑

誌

第 63 巻第6号ものとした．対象歯に Probing depth（PD）が 2～6 mm

言程度で Bleeding on Probing（BOP）を伴う箇所を有していること，3 カ月以上歯科医院に通院していない者，被日々のプラーク・コントロールは，歯周病の予防や治

験歯が天然歯であることを対象条件とした．被験歯が処療を行ううえで最も重要である ．プラーク・コント

置歯の場合は，歯冠を覆っていないインレー・複合レジ

ロールには，化学的な方法と機械的な方法があるが，日ンなどであれば対象歯とした．さらに，インレー・複合

常におけるプラーク・コントロールは主に歯ブラシを用

レジン以外の修復物または欠損歯の場合は隣接代替歯でいた機械的プラーク・コントロールである．特に，セル

対応し，隣接代替歯で対応不可の場合は対象歯を左右反フケアとして行う日常のブラッシングは非常に重要であ転させ対応した．

1）

本研究は倫理的観点からインフォームドコンセントをる2）．
ブラッシングには，手用歯ブラシが用いられることが実施した．すなわち研究計画を口頭および文書で被験者多く，歯肉縁上プラークの除去は可能であるものの，歯に説明し，参加被験者全員より研究参加の同意を書面で肉縁下のプラーク・コントロールは歯肉縁下 1～2 mm ま得た．なお本研究は，パナソニック株式会社アプライア

でが限界である．そこでプラーク・コントロールをさら

ンス社研究倫理審査委員会の承認を得ている（承認番に向上させるため，近年では電動歯ブラシ，特に音波振号：20161221‒A01）．

動歯ブラシが普及してきている．音波振動歯ブラシは2 ．使用歯ブラシと歯磨剤

1990 年代に開発され，2000 年頃から急速に普及してきた

使用した音波振動歯ブラシは，振動数 31,000 ブラシス

経緯がある．また，歯周病の全身への影響などが報告さ

ト ロ ー ク/分 を 有 し， 横 磨 き 振 幅 1.1 mm で 動 作 す るれ3），口腔清掃への意識の高まりによりさまざまな音波

Doltz（EW‒DE25/Panasonic，以下，従来ドルツ，Fig.

振動歯ブラシが開発されてきている．

1）と，新たに開発された振動数 12,000 ブラシストロー

この音波振動歯ブラシの普及に伴い，現在まで音波振ク/分と振幅 0.5 mm のタタキの動作を従来ドルツに追加

動歯ブラシと手用歯ブラシとの比較検討が行われてきてした新 Doltz（EW‒DP51/Panasonic，以下，新ドルツ，

いるが，音波振動歯ブラシは手用歯ブラシと比較して，Fig. 2）とした．ブラシヘッドはマルチフィットブラシ

プラークが効率よく除去できるという報告が種々されて（EW0915/Panasonic，Fig. 3）とした．また歯ブラシ使おり4‒7），その有用性が示唆されている．これまでわれわ

用時に用いる歯磨剤は，パックスジェルはみがき（太陽れは，音波振動ハブラシ Doltz にマルチフィットブラシ

油脂）とした．研磨剤・発泡剤・薬用成分の配合はなく，を装着した際のブラッシングの有用性および安全性を立

電動歯ブラシとの併用が可能となっている．

証してきたが，今回，歯の清掃により有効なブラッシン

3 ．研究方法

グを実現するために，従来の横磨き駆動に加えてタタキ

1 ）マルチフィットブラシによるプラーク除去率およ

方向の駆動を備えた新しい Doltz が開発された．そこで

び安全性の検証

本研究では，マルチフィットブラシを用いて新たに開発予備診査として，モニター募集した者に歯式診査，被された Doltz と従来型の Doltz のプラーク除去効果およ験歯の染め出し後，歯科衛生士によるスクリーニングを

び安全性を比較評価した．さらに，臨床パラメーターの行った．このスクリーニングにより，被験者 12 名を選出

改善についても比較検討を加えた．

した．被験者 12 名を 6 名ずつ 2 グループに分け，新ドル

対象および方法
1 ．被験者および被験歯ツ本体にマルチフィットブラシを装着し使用する群，従来ドルツ本体にマルチフィットブラシを装着し使用する
群の 2 群をクロスオーバー試験により評価した．
被験者の研究開始前の状態記録のため，試験開始前の被験者は，口腔清掃に関しての十分な知識をもち，か創傷の有無確認，正面観の口腔内の写真撮影を行った．

つ技能に関しても十分習熟していると考えられる男女年

これらの診査終了後，被験器具を渡し使用法および禁止

齢不問の 12 名とし，2 群に振り分けた．喫煙習慣がある

事項の説明，また歯ブラシの使用記録表への記入の指導者，全身疾患を有する者，抗生物質を服用している者，を行った．試験期間は約 2 週間とし，被験者は割り当て

矯正治療中の者，妊娠中および産後 1 カ月以内の者，歯られた被験器具を毎日使用した．なお被験者にはプラー科医療従事者，現在歯科医院に通院している者は，対象

ク除去率測定のため，診査の前夜からブラッシングを中から除外した．

止させ，プラークが付着した状態で来院させた．2 週間

対象歯は，Ramfjord 6 歯（16，21，24，36，41，44）とし，プラーク蓄積に著しく影響を及ぼす修復物がない

後，創傷有無の確認，プラーク除去率測定を行った．創傷有無の確認は目視による歯肉創傷有無とした．

2020 年 12 月

音波振動歯ブラシのプラーク除去効果と歯周組織への有用性

Fig. 3Fig. 1 Doltz（Conventional type）

547

Multifit brush

Fig. 2 Doltz（New type）

プラーク除去率の測定に関しては，被験歯を染め出して被験器具の使用前のプラーク付着状態を記録した．その後，新品のマルチフィットブラシとドルツ本体を用い，各規定の磨き方で被験者自身にブラッシングさせFig. 4 Rustogi Modification Navy Plaque Index（RMNPI）
a, b, c, e：smooth surface area, d, f：interproximal area, g,h, i：cervical area

た．再び染め出しを行い，測定・口腔内撮影を再度行った．その後，歯肉創傷の診査を明確に行うため，1 週間まで磨けたか，歯磨き後の口の中の爽快感，継続して使の研究で用いる歯ブラシを使用しない期間を設けた．な

用したいか，の 4 項目についての官能評価を行った．5

お被験者はその期間，普段どおりのケアを行うよう指示

点：満足/思う，4 点：やや満足/やや思う，3 点：どちらした．3 週間以降は，研究開始から 2 週間後までと同様ともいえない，2 点：やや不満足/あまり思わない，1 点：の内容を繰り返して行い，5 週間後に同様の診査を行っ

不満足/思わない，の 5 段階で点数化後評価した．

た．
歯ブラシの使用条件は，朝・夕 2 回のブラッシング 22 ）マルチフィットブラシによる歯肉改善および安全性検証分間とした．歯磨剤使用は約パール 1 粒大とし，歯ブラ予備診査として，モニター募集した者に歯式診査，被シ使用時のみの使用を指示した．試験期間中は，試験器

験歯の PD・BOP・GI の測定を行った．測定を阻害する

具以外の歯ブラシと歯磨剤の使用，補助用具の使用，洗歯肉縁上歯石を認めた場合は，その歯のみ歯石除去を口剤・デンタルリンスの使用，ガム・タブレットの摂取，行った．スクリーニングにより，被験者 12 名を選出し抗生物質の服用などを禁止とした．

た．被験者に対して，歯ブラシ使用前の歯周組織検査，

付着プラークの評価方法は Navy 法とし8），プラーク

創傷有無の確認，被験器具の使用法の提示を行った．

の点数化は Rustogi Modification Navy Plaque Index

被験者の試験開始前の状態記録のために，試験開始前（RMNPI）を用いた（Fig. 4）．各 1 歯面の 9 分画についの創傷の有無確認，正面観の写真撮影，ならびに PD・てプラークの付着の有無を判定し，1 および 0 として点BOP・GI の測定を行った．診査後，被験器具を渡し使用数化した．なお，1 歯面につき頰側・舌側を計測した．

法および禁止事項の説明，使用記録表への記入の指導を

記録は，口腔内用ビデオカメラ，デンタルアイ（パナソ行った．なお，試験期間は 1 週間とし，被験者は割り当

ニックデンタル）を用いて撮影した．

てられた被験器具を毎日使用するよう指示した．使用 1

歯肉創傷は目視診察により確認した．歯ブラシ使用前

週間後に来院させて，歯周組織検査，創傷有無の確認を後の歯肉創傷の有無はカルテへ記録し，歯肉創傷を認め行うとともに，目視による歯肉創傷有無の確認と PD・た場合は，静止画で撮影してカルテへ部位を記録した．

BOP・GI を測定した．その後，歯肉創傷の診査を明確に

また新ドルツ群・従来ドルツ群ともに，満足度，隅々行うため，1 週間のウォッシュアウト期間を設け，その日

548
Table 1本

歯科

New type
Conventional type

学

Cervical誌

Interproximal

第 63 巻第6号

Smooth surface

19.0±10.5

22.7±12.9

11.2±8.6

20.4±13.926.7±13.4

16.9±11.2

25.4±13.3

Results of sensory evaluation

Satisfaction

Ability for brushingin every corner

Refreshing feeling

Hope for continuous use

3.7±1.2
3.6±1.2

3.5±1.1
3.3±1.1

4.0±1.2
3.8±1.2

3.8±1.2
3.8±1.0

60

6.0

50

5.0
4.0

40

3.0

30

2.0

20

1.0

10
0

雑

23.9±11.7

Table 2

Removal rate（％）

存

Plaque removal rate by Multifit brush in two groups（％）
Whole mouth

New type
Conventional type

保

0.0
Whole
Cervical Interproximal Smoothmouth
surface
New type
Conventional typeFig. 5

Satisfaction Ability for Refreshing Hope forfeeling continuous use
brushing
in every corner
New type
Conventional typeFig. 6Plaque removal rate by Multifit brush

間被験者は普段どおりのケアを行うよう指示した．2 週

Results of sensory evaluation

られた傷はなかった．

間以降は，研究開始から 1 週間後までと同様の内容を繰

2 ）プラーク除去率の変化についてり返して行い，3 週間後に同様の診査を行った．歯ブラ

プラーク除去率の計測値を Table 1 および Fig. 5 に示シの使用条件は，プラーク除去率および安全性の検証時した．（術前のプラークスコア－術後のプラークスコと同条件とした．

ア）/（術前のプラークスコア）×100（％）で除去率を算

なお本研究の臨床試験の実施期間は，2017 年 5 月 13日～7 月 2 日とした．

出した．
全部位において，従来ドルツ群が新ドルツ群と比較し4 ．統計解析て高い除去率を示したが，両群には統計学的有意差は認各群の比較はクロスオーバーデザインのため，統計処

められなかった．

理としては Wilcoxon 検定を用いた．危険率 5％で有意差あり，10％で差が有意である傾向を示すと判断した．

結果

1 ．マルチフィットブラシによるプラーク除去率および安全性検証3 ）官能評価について
新ドルツ群・従来ドルツ群ともに，下記項目について
官能評価を行った．官能評価の結果を，Table 2 およびFig. 6 に示した．各項目で両群とも同等に高い評価となった．
2 ．マルチフィットブラシによる歯肉改善および安全性検証

1 ）歯ブラシ使用後の創傷について

1 ）歯ブラシ使用後の創傷について視診による検査の結果，被験器具使用後に新たに認め視診による検査の結果，安全上問題となる傷は認めな

2020 年 12 月

音波振動歯ブラシのプラーク除去効果と歯周組織への有用性
Table 3

Measured values of three clinical parameters

PD（mm）
BeforeAfter

New type2.82±0.72

Conventional type2.82±0.53549＊

2.56 ±0.55＊

2.59 ±0.54

BOP（％）
BeforeAfter＊

GI
BeforeAfter48.1±25.1

36.8 ±23.4

1.41±0.35

1.22＊±0.45

53.7±21.0

42.8±23.4

1.47±0.30

1.33±0.32＊：p＜0.05
＊

5.0

2.0

4.0
3.0
2.0
1.0
0.0

＊

2.5

Mean value

Mean value（mm）

6.0

BeforeChange of mean value（PD）by New
type Doltz＊：p＜0.05

1.0
0.5
0.0

After

Fig. 7

1.5

BeforeChange of mean value（GI）by New
type Doltz＊：p＜0.05

Fig. 9＊6.0
Mean value（mm）

Positive rate（％）

＊
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0

After

5.0
4.0
3.0
2.0
1.0
0.0

BeforeAfter

Fig. 8 Change of BOP by New type Doltz＊：p＜0.05

BeforeAfter

Change of mean value（PD）by Conventional type Doltz＊：p＜0.05

Fig. 10

かった．被験器具使用後に新たには擦過傷が新ドルツ群

群間比較について，新ドルツ群と従来ドルツ群の臨床において 1 症例，従来ドルツ群において 2 症例認められパラメーターの改善率を Table 4 および Fig. 13 に示したが被験者に自覚症状はなく，ごく微細なものであった．

た．両群の比較では PD・BOP・GI において統計的有意2 ）PD・BOP・GI の計測値の変化差は認められなかったものの，新ドルツ群で高い改善率

群内比較について新ドルツ群と従来ドルツ群それぞれを示した．

の臨床パラメーターの計測値を Table 3 および Fig. 7～
12 に示した．新ドルツ群内比較において PD（p＝0.041），
BOP（p＝0.022），GI（p＝0.018）で有意差を認めた．また，従来ドルツ群内比較では PD（p＝0.025）において有意差を認めた（p＜0.05）．

考察

従来ドルツ群，新ドルツ群ともにマルチフィットブラ
シを装着して使用後，視診により問題となるような歯肉

日

550

歯

科

存

学

Table 4

雑誌

第6号

Improvement rate of three clinical parameters（％）
BOP

GI
16.0±25.0
8.5±20.3

New type8.2±12.3

22.3±34.4

Conventional type7.8±11.3

19.2±37.9

60

Before

After

2.5
2.0

50
40
30
20
10
0

1.5
Fig. 13

1.0
0.5
0.0

第 63 巻

PD

Fig. 11 Change of BOP by Conventional type
Doltz

Mean value

保Improvement rate（％）

Positive rate（％）

100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0

本

BeforeAfter

Fig. 12 Change of mean value（GI）by Conventional type Doltz

PD
New type

BOP
GI
Conventional type

Improvement rate of three clinical parameters in two groups

ラッシング時間は 2 分間であった．音波振動歯ブラシの，手用歯ブラシよりも高いプラーク除去効果を考慮してもブラッシング時間は 2 分間よりも長くする必要があるとの報告5）もあることから，ブラッシング時間を長く設定への大きな創傷は認められなかった．このことから，両することで新ドルツ使用時における高いプラーク除去率

群へのマルチフィットブラシの装着，使用における安全につながる可能性がある．また本研究では，付着プラー性に問題はなかったと考えられた．

クの評価方法は Navy 法とし RMNPI を用いた．RMNPI

プラーク除去率は，全部位において従来ドルツ群が新は，隣接面および歯頸部のプラーク付着状態をより詳細

ドルツ群と比較して高い除去率を示したものの，統計学に 把 握 す る た め に 開 発 さ れ た 指 標 で あ る8）． 実 際 に的有意差は認めなかった．このことから，プラーク除去

RMNPI をプラーク付着の指標として用いることによに関しては，横磨き振幅のみの従来ドルツにおいて十分り，口腔内全体のみならず，う蝕・歯周疾患に最も関連に行われていた可能性もあるものの，本研究におけるプ性があると考えられる歯頸部・隣接面のプラーク除去効

ラーク除去率は 2 群ともに 20％台であり低い値を示し率が示され，使用した歯ブラシのプラーク除去効果が，た．本来，音波振動歯ブラシの習熟期間を考慮して，研

歯頸部・隣接面の部位別に詳細に観察できる利点があ

究期間を 5 カ月に設定している報告 もあることや，まる．本研究においても，プラーク除去率は，口腔内全た音波振動歯ブラシ・電動歯ブラシの使用に関する慣れ

体・歯頸部・隣接面・平滑面の 4 部位にて算出しており，の期間はプラーク除去率に影響を及ぼす といわれていそれらを比較すると，特に従来ドルツ群・新ドルツ群とることから，本研究における 2 週間の研究期間では音波

もに歯頸部において高い値を示す傾向が認められた．こ振動歯ブラシの使用に十分に慣れることが困難であった

れは，両群において音波振動効果が働くことにより，プことが予想され，このことがプラーク除去率の低さにつラーク除去効果が高いとされるスクラビング法10）と同様

ながったものと思われる．研究期間をより長く設定するの動きが歯面に対して行われ，結果として歯頸部に対しことにより，新ドルツ群への慣れが生じた結果として，てのプラーク除去効果を発揮したものと推察される．

7）

9）

新たに搭載された 12,000 ブラシストローク/分のタタキ

マルチフィットブラシの官能評価において，両群とも磨きの効果が高いプラーク除去率につながるかもしれなに高い値を示し，特に新ドルツ群では，従来ドルツ群よい．また過去の電動歯ブラシの研究報告の多くが刷掃時りも高い評価を示した．すなわち，満足度，隅々まで磨間を 3 分間に設定しているなかで，本研究におけるブけた感じがある，ブラッシング後の爽快感，また継続し2020 年 12 月

音波振動歯ブラシのプラーク除去効果と歯周組織への有用性

551て使用したいとの評価であった．これらの使用感は，実る18）．これらのことから，音波歯ブラシのキャビテー

際のプラーク除去率と必ずしも一致するとは限らない

ション効果によりバイオフィルムの歯面への付着力の減が，特に，歯ブラシを継続して使用するためのモチベー

弱，および歯周ポケット内細菌の構造破壊などが惹起さションの向上などにつながる可能性がある11）．

れて，結果として歯周ポケット内の歯周病原性細菌の減音波振動歯ブラシを使用したことにより，音波振動による歯肉へのマッサージ効果が得られ，結果として
PD・Gingival Bleeding Index・GI の臨床パラメーターが改善したとの報告12）や PD・BOP・GI が改善したとの報
告13）がなされているが，本研究においてもこれらの報告

少により歯肉における炎症の消退につながった可能性も考えられる．

結論と同様の傾向を示した．臨床パラメーターにおいては，

新ドルツは，従来ドルツに比較して，歯周組織改善効

PD・BOP・GI の全パラメーターで，従来ドルツ群より果が高いことが示され，今後，う蝕・歯周病予防のプも新ドルツ群のほうが高い改善率を示した．さらに，2

ラーク・コントロールに対しての効果が期待できる．

群間のプラーク除去率に関して有意差が認められていな
いにもかかわらず，新ドルツ群のみで全パラメーターで使用前後の有意差を認めていた．このことから，新ドルツ群におけるタタキ方向の微小振動に伴う歯肉への物理的なマッサージが効果的に作用して歯肉における炎症状態を改善させた結果，臨床パラメーターの改善が起こった可能性がある．
新ドルツでは，31,000 ブラシストローク/分の横磨き
振動に加えて，歯間部にアプローチする 12,000 ブラシス
トローク/分のタタキ振動が加えられており，従来ドルツ群と比較してより多方向に振動が起こることにより，歯肉への効果的なマッサージが行われたものと推察される．歯間部の形態は複雑であり，清掃あるいは歯間部歯肉へのマッサージには，手用の歯間ブラシなどを一方向に往復させるなどの単純な動きでは不十分であり，歯間部の形態に合わせて多方向に動かす必要がある14）．その点において，新ドルツ群に付与されたタタキ振動は，縦方向の振動を有し歯間部の形態に立体的にフィットする
ことによりアプローチが可能になったものと推察される．その結果，歯間部歯肉のマッサージが効果的に行われたことで歯肉の状態が改善され，歯肉の状態に関する
3 種類の臨床パラメーター，すなわち PD・BOP・GI が，新ドルツ使用前後で有意に改善されたと考えられる．歯肉マッサージは歯周組織の炎症改善に影響するという報告があることから15），歯肉への適度な刺激により血液循環の改善などが起こった可能性があり，その結果として
臨床パラメーターが改善したものと考えられる．すなわ
ち，まずマッサージ効果により表在性の炎症が消退することで GI の改善が起こり，ポケット内部の炎症所見である BOP が続いて改善し最終的に PD の改善につながったと推察される．さらに，音波振動歯ブラシでは，音波振動が液体中を伝達して空気の泡を発生させる液体流動
力により毛先が直接触れていない部分のプラークを除去することが可能であるといわれている16,17）．また，音波振動により細菌の構造破壊を起こすことも報告されてい本論文に関して，開示すべき利益相反状態はない．

文献1）鈴木史彦，山口貴司，小野瀬 規，依田圭吾，河本和繁，
関野 愉，岡本 浩．歯周基本治療においてプラークコ
ントロール期間が歯周組織の改善に及ぼす影響．日歯周誌 1999；41：330‒337．
2）松 澤 澄 江． モ チ ベ ー シ ョ ン を す る た め に． 日 歯 周 誌

2010；52：434‒437．
3）村山洋二，西村英紀，岩本義博，高柴正悟．歯周病と全身疾患．日歯周誌 2003；45：325‒348.

4）深谷千絵，穂坂康朗，中川種昭．音波歯ブラシと超音波
歯ブラシのプラーク除去効果．日歯保存誌 2005；48：481‒487．
5）穂坂康朗，深谷千絵，永井美和，両角祐子，佐藤 聡，
中川種昭．音波歯ブラシ（sonicare® elite）のプラーク除去効果―ヘッドの大きさの違いによる比較―．日歯保存誌 2007；50：440‒446．

6）Johnson BD, Mclnnes C. Clinical evaluation of the efficacy and safety of a new sonic toothbrush. J Periodontol 1994; 65: 692‒697.
7）鈴木崇夫，望月 悟，山本祥子，宮下 元，山本松男．
音波歯ブラシのプラーク除去効果について．日歯周誌
2007；49：120‒129．
8）Rustogi KN, Curtis JP, Volpe AR, Kemp JH, McCool JJ,
Korn LR. Refinement of the Modified Navy PlaqueIndex to increase plaque scoring efficiency at the gum
line and interproximal tooth areas. J Clin Dent 1992; 3:
C9‒12.
9）渡辺一郎，野村典生，橘 文昭，鈴木丈一郎，五味一博，
新井 髙．音波歯ブラシのプラーク除去効果．日歯保存誌 2005；48：40‒47．

10）新井 髙．歯ブラシとブラッシング方法の相違による歯垢除去についての比較．日歯周誌 1976；18：13‒31．
11）中山亮平，太田淳也，両角祐子，深谷千絵，笠井俊輔，
植野琢也，高塩智子，佐藤 聡，中川種昭．音波振動式

552

日

本

歯

科

電動歯ブラシのプラーク除去効果．日歯周誌 2013；55：
140‒147．

12）八島章博，鈴木丈一郎，田村紗恵子，松島友二，五味一

博，新井 髙．音波歯ブラシの臨床的および細菌学的パ
イロット研究．日歯周誌 2015；57：159‒167．

13）白川 哲，氏家優子，横山拓哉，中山佑平，早田優樹，
丹羽尭彦，船津太一朗，荒井千明，長野孝俊，五味一博．
音波歯ブラシ（Sonicare® FlexCare Platinum）のプラー

ク除去，臨床パラメーターならびに歯周ポケット内細菌に与える効果．日歯周誌 2016；58：107‒116．

14）高世尚子，田淵由美子，鶴川直希，武村あかね．歯間清
掃器具によるプラーク除去効果の臨床的検討．日歯保存誌 2005；48：272‒277．

保

存

学

雑

誌

第 63 巻第6号

15）渡辺一郎．サル実験的歯肉炎に対するブラッシング，歯肉マッサージ，プラーク除去効果の比較．日歯保存誌
2001；44：492‒505．

16）八島章博，鈴木 磨，松島友二，五味一博．水流洗浄器と音波歯ブラシ併用が歯周ポケット内細菌へ与える影響．
日歯周誌 2015；58：314‒320．
17）Stanford CM, Srikantha R, Wu CD. Efficacy of the Sonicare toothbrush fluid dynamic action on removal of
human supragingival plaque. J Clin Dent 1997; 8: 10‒14.
18）MacNeill S, Walters DM, Dey A, Glaros AG, Cobb CM.
Sonic and mechanical toothbrush. An in vitro study
showing altered microbial surface structures but lack ofeffect on viability. J Clin Periodontol 1998; 25: 988‒993.

2020 年 12 月

音波振動歯ブラシのプラーク除去効果と歯周組織への有用性

553

The Efficacy of Dental Plaque Removal and Usefulness
for Periodontal Tissue of a Sonic Toothbrush
Equipped with Tapping Amplitude
KAMOI Hisahiro, YOSHIMINE Masaya,
MIURA Haruka＊ and HAMADA Mariko＊Dental Clinic, Nippon Medical School Chiba Hokusoh Hospital＊

H・M’s collection

Abstract
Objective: Plaque control by daily brushing is important to prevent oral diseases. The usefulness of electric toothbrushes for effective plaque control has been demonstrated. In this study, the usefulness of a newelectric toothbrush for removing plaque was evaluated from multiple aspects.
Subjects and Method: The subjects were males and females, regardless of age, who had knowledge of andwere able to perform the oral cleaning method, and met the study conditions. For the test teeth, 6 Ramfjord
teeth（16, 21, 24, 36, 41, and 44 or alternative teeth）without restoration with marked plaque accumulation
were used. For the tool, two types of sonic toothbrush, the new Doltz and the conventional Doltz（Panasonic）, were used. First, to evaluate oral plaque removal, plaque was scored using the Rustogi Modification
Navy Plaque Index before and after use of the sonic toothbrush. For statistical analysis, the Wilcoxon test
was used. Then, to evaluate oral cleaning, the following evaluation items were measured before and after useof the toothbrush: probing depth（PD）, bleeding on probing（BOP）, and gingival index（GI）. For statisticalanalysis, the Wilcoxon test was used.
Results and Discussion: The plaque removal rate was higher in the conventional Doltz group than in the
new Doltz group in all regions, but the differences between the two groups were not significant. On evaluation of periodontal pocket cleaning, the improvement rates of all parameters（PD, BOP, and GI）were higher
in the new Doltz group than in the conventional Doltz group. In addition, significant differences were noted
after use in all parameters on intra-group comparison（p＜0.05）.
This study clarified that the new Doltz has greater improvement effects on periodontal tissue than theconventional Doltz; this may be due to the tapping amplitude newly added to the main unit of the new Doltz,
which appropriately stimulates the gingiva, as well as the dense extra-fine toothbrush, which is optimal for
periodontal pocket cleaning, exhibiting synergistic effects to improve the gingiva. Sonic toothbrushes are
expected to be effective for plaque control to prevent caries and periodontal disease.
Key words: Rustogi Modification Navy Plaque Index, tapping amplitude, effects to improve the gingiva

Corresponding author: Dr. KAMOI, Dental Clinic, Nippon Medical School Chiba Hokusoh Hospital, 1715, Kamagari, Inzai,
Chiba 270‒1694, Japan
TEL: ＋81‒476‒99‒1111, FAX: ＋81‒476‒99‒1919, E-mail: hisakamo@nms.ac.jp
Received for Publication: September 9, 2020/Accepted for Publication: November 9, 2020

日

554

本

歯

科

保

存

学

雑

誌

Original Article

第 63 巻第6号

日歯保存誌 63（6）：554～562，2020

Influence of Light Irradiation Conditions on the Tensile Bond Strengthof Resin Composite Bonding Materials to Dentin
OUCHI Satoko, IWATA Naohiro, LIU Haitao,
XIE Zhouqiao, WANG Xiangyu, MOROTO Hidetoshi,
ISHIDA Shunsuke, KOMASA Reiko, YASUO Kenzo,
TANIMOTO Hiroaki, YOSHIKAWA Kazushi and YAMAMOTO Kazuyo
Department of Operative Dentistry, Osaka Dental University

Abstract
Purpose: The influence of irradiation conditions on tensile bond strength（TBS）was evaluated using Clearfil Mega Bond（MB, Kuraray Noritake Dental）and Clearfil Mega Bond 2（MB2, Kuraray Noritake Dental）
which contain a highly active photopolymerization catalyst.
Methods: The surface of human teeth was ground with wet SiC paper up to 600 grit to prepare the dentin
surface. The prepared surface was then conditioned by applying primer of MB, followed by bonding agent of
MB. The applied bonding agent was light-irradiated from approximately 2.0 mm, 7.0 mm and 12.0 mm above
the adherend surface under the following conditions: 1. Using a halogen irradiation device（XL3000, 3M ESPE,
USA）for 10 seconds, 2. Using a conventional LED light irradiation device（PenCure, Morita）for 10 seconds,
and 3. Using a high-output LED light irradiation device（PenCure 2000, Morita）in high-power mode for 3
seconds. The resin composite was filled and cured by the XL3000. TBS was determined after 24-hour storage in water at 37℃（n＝5）.
Results: In the case of the irradiation distance of 2.0 mm, MB2 attained enough TBS under the conditionsof high-output LED light irradiation by the PenCure 2000 in high-power mode for 3 seconds. However, when
the irradiation distance was long, MB2 could not attain enough TBS with 3 seconds of irradiation and enoughTBS was attained only when irradiating with the PenCure for 10 seconds.
Conclusion: Even if the irradiation distance of PenCure was long, MB2 attained enough TBS. In addition, it
was possible to obtain sufficient TBS by conducting light irradiation for 10 seconds, even when the irradiation distance was longer.
Key words: bonding system, TBS, LED light-curing unit

Corresponding author: Dr. OUCHI, Department of Operative Dentistry, Osaka Dental University, 1‒5‒17, Otemae Chuo-ku,
Osaka 540‒0008, Japan
TEL: +81‒6‒6910‒1087, Fax: +81‒6‒6910‒1052，E-mail: satoko-o@cc.osaka-dent.ac.jp
Received for Publication: September 15, 2020/Accepted for Publication: November 17, 2020
DOI: 10.11471/shikahozon.63.554

2020 年 12 月

Influence of Light Conditions on the Bond Strength of Resin Composite to Dentin

555

ate a larger number of highly active radicals than theconventional photopolymerization catalysts.

Introduction

In this study, the effects of different light sources andIn recent years, the bonding systems of composite

irradiation distances on the tensile bond strength（TBS）

resins（CRs）have dramatically advanced, including

to dentin were compared and examined by using MB2

improved bond strength and reduced technical sensitiv-

and Clearfil Mega Bond（MB）, which is a conventional

ity with simplified steps. In addition, thanks to the con-bonding system.

current improvements in mechanical properties andesthetics of CRs, they have been used for treating vari-

Materials and Methods

ous cavities1‒5）. Moreover, the widespread popularization of the concept of minimal intervention6‒8）among

This study was conducted with the approval of thedentists has resulted in broader use of CRs to perform

ethics committee, Osaka Dental University（approvallarge repairs of molar parts and devitalized teeth afterNo.: Osaka Dental University Medical Ethics No.

root canal treatment. As opportunities for CR repair

110883）. Table 1 lists the materials that were used inincrease, the light irradiation devices and bonding sys-

this study, and Table 2 the irradiation devices and irra-

tems used in such repairs have rapidly advanced, with

diation conditions that were used.

new products being released one after another. As light

1 ．Measurement of tensile bond strength（TBS）

irradiation devices, devices that use blue light-emitting

Flat dentin surfaces were prepared by defrosting

diodes（LEDs）as light sources have replaced the con-human premolars which had been stored in a freezer

ventional halogen lamp types and have become theafter removal immediately before use, removing themainstream. Unlike halogen light, the light irradiatedenamel on the labial side of the crown part by using afrom these LED devices is in specific wavelength

model trimmer while preserving the dental pulp, and9）regions , and the devices also consume less electricity

then polishing the area up to #600 with waterproof

and their light source has a longer lifespan compared toabrasive paper. The bonding surface area was defined10）. They also offer advan-by fixing double-sided tape in which a hole with 3.0 mm

tages such as low heat generation and no need for fil-inner diameter was formed, and a brass jig with 4.0 mm

halogen irradiation devices

ters to eliminate unnecessary wavelengths

11‒13）. The

inner diameter at the top, 3.5 mm inner diameter at the

insufficient light intensity of the early models has there-

bottom and 2.0 mm height was placed on top of it. MB

fore been improved, and recent high-output LED lightor MB2 was applied on the dentin surface to be bonded,irradiation devices can polymerize bonding materials in

followed by primer treatment for 20 seconds, thorougha shorter irradiation time

14,15）. However, it has been

drying by blowing air, thin application of bonding agent,reported that the bond strength deteriorated depending

and light irradiation under different conditions withon the type of bonding material when the irradiation

irradiation distances of 2.0 mm, 7.0 mm, or 12.0 mm.

period was short, as polymerization was insufficient9）.

The three irradiation conditions listed in Table 2 wereClearfil Mega Bond 2（MB2）, which is currently avail-used. After filling CR into the brass jig in bulk andable commercially, is a two-step self-etching bonding

pressure-welding it with a glass plate under pressure

system which consists of two materials, namely theapplied by the fingers via a polyester film, a halogen

primer and the bonding agent, and it incorporates airradiation device（XL3000, 3M ESPE, USA）was usedphosphate ester-based monomer called MDP, which

to irradiate light for 20 seconds to cure the material.

16）

delivers a high bond durability . It is also considered

The cured material was stored in water at 37℃ for 24

possible with this system to reduce the light irradiation

hours before it was subjected to TBS measurement

period by using a high-output LED light irradiation

with a universal testing machine（IM-20, INTESCO）at

device（1,500 mW/cm2 or higher）, as the photocuringa crosshead speed of 0.3 mm/min（n＝5）. As statisticalproperties are improved with the incorporation of aprocessing, the significant difference authorization ofhigh-activity photopolymerization catalyst, which offers

groups（MB-XL3000, MB2-XL3000, MB-PenCure,high absorption of light and an absorption wavelength

MB2-PenCure, MB-PenCure 2000 and MB2-PenCure

region that includes the LED region, and so can gener-

2000）was held for every irradiation distance using one-

日

556

本

歯

科

Table 1
Materials

保

存

学

雑

誌

第 63 巻第6号

Materials used

Code

Composition

Lot

Manufacturer

Bond
ClearfilMega Bond

MB

BondingsystemClearfilMega Bond 2

Composite
resin

Primer10-MDP, HEMA,
Hydrophilic aliphatic
dimethacrylates,
dl-Camphorquinone,
Water

MB2

ClearfilCR
AP-X（shade A3）

10-MDP, HEMA, Bis-GMA,
Hydrophobic aliphatic
methacrylates, Colloidal
silica, dl-Camphorquinone,
Intitators,
Accelerators, Water
10-MDP, HEMA, Bis-GMA,
Hydrophobic aliphatic
dimethacrylates, Colloidal
silica, dl-Camphorquinone,
New initiators, Accelerators

000031
Kuraray
Noritake
Dental000035

Bis-GMA, TEGDMA, Photopolymerization catalyst,
920064
Filler, Colorant, Accelerators

Table 2

Light-curing devices and conditions

Curing light device

Irradiation time

PenCurePenCure 2000
XL3000

10 seconds
High power 3 seconds
10 seconds

Manufacturer
Morita3M ESPE（USA）

way analysis of variance and Tukey’s post hoc test（p＜0.05）.

Results

All samples were sputter-coated with gold after TBS
measurement according to the normal method, and the

1 ．Tensile bond strength（TBS）

tensile fracture surface of dentin was observed using a

Figure 1 shows the results of TBS measurements. As

scanning electron microscope（JSM-5610LU, JEOL）. The

a result of one-way layout analysis of variance, the com-

failure type was determined by classifying those withbination of bonding resin and irradiation device gave a

70％ or more interface exposure as adhesive failure,significant difference in TBS（2.0 mm: F＝5.24, p＜0.01;

those with 70％ or more adhesion of dentin or the

7.0 mm: F＝3.64, p＜0.05; 12.0 mm: F＝11.50, p＜0.01）.

cured material as cohesive failure, and others as mixed

TBS did not show any significant difference between

failure.

the PenCure samples and the XL3000 samples for MB2

2 ．Measurement of light intensity（p＞0.05）when PenCure 2000 in high-power mode was

WSpec（B & W TEK, USA）was used to measure theused to irradiate light for 3 seconds at the irradiation

quantity of light. Light intensity levels of PenCure, Pen-distance 2.0 mm, even though TBS decreased signifi-

Cure 2000 in high-power mode, and XL3000 were mea-

cantly for MB（p＜0.05）. It was found that a high TBS

sured at distances from the measurement fiber of 2.0

value could be obtained by irradiating light for 10 sec-

mm, 7.0 mm, and 12.0 mm（n＝5）. As statistical process-onds using PenCure when the irradiation distance wasing, the significant difference authorization between thelonger, although TBS decreased for both MB and MB2

irradiation distances was held for each container which

when XL3000 was used（p＜0.05）. Furthermore, thewas irradiated with light using one-way analysis of

TBS value decreased significantly when the irradiation

variance and Tukey’s post hoc test（p＜0.05）.

distance was 12.0 mm even for PenCure 2000 in highpower mode when the light irradiation period was 3
seconds（p＜0.05）.

2020 年 12 月

Influence of Light Conditions on the Bond Strength of Resin Composite to Dentin

MPa
35

MPa
35

＊

30

30

25

25

20

20

15

15

10

10

5

5

0

MB

MB2

MB

MB2

557

MB

MB2

0

MB

MB2

2.0 mm

MB

MB2

MB

MB2

7.0 mm
XL3000PenCureMPa
35

PenCure 2000

30
25
20
15
10
5
0

MB

MB2

MB

MB2

MB

MB2

12.0 mmFig. 1 Influence of irradiation on dentin tensile bond strength＊：p＜0.05

Tables 3 to 5 and figure 2 show the results of tensile
fracture surface observation. Adhesive failure images

Discussion

were not observed for MB2 even with longer irradiation distances, although it was observed for MB even at

LED irradiation devices offer advantages such as

the irradiation distance of 2.0 mm when light was irra-

excellent operability even in the confined space of thediated for 3 seconds with PenCure 2000 in high-power

oral cavity thanks to their cordless feature, lightmode.

weight, small head part, stable light irradiation with no2 ．Light intensity

deterioration in light intensity during continuous irradi-

Figure 3 shows the measurement results. As a result

ation, and less frequent need for charging thanks to low

of one-way layout analysis of variance, the significant

electricity consumption10）. The devices are thus used indifference was accepted for light intensity by difference

various clinical settings as a replacement for conven-in irradiation distance（PenCure: F＝4853.04, p＜0.01;

tional halogen light irradiation devices. In addition, they

PenCure 2000: F＝519.70, p＜0.01; XL3000: F＝168.74, p

can produce parallel and uniform light irradiation when

＜0.01）. The light intensity decreased significantly withcombined with an optical mirror and an aspherical lenslonger irradiation distance for all irradiation devices（pinside the head, and are estimated to deliver a sufficient＜0.05）. Especially, when the irradiation distance wasamount of light even at some distance from the irradi-increased to 12.0 mm, the light intensity levels of bothated part10）. However, deterioration in optical energy

PenCure 2000 and XL3000 decreased to approximately

during light irradiation and unstable focus are highly

half compared to the levels at the distance of 2.0 mm.

likely to occur when irradiation is done in a deep cavity, such as a repair that includes the gingival wall of aclass 2 cavity or a pulp cavity after root canal treat-日558
Table 3

本

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科

保

存

XL3000Adhesive failure
Mixed failure
Cohesion failure of bonding resin
Cohesion failure of dentin

誌

第 63 巻PenCure

MB2

MB

第6号

4
1

2
2
1

MB2

PenCure 2000
MB

MB2

1
2
3

3
2

4

5

Failure mode analysis of irradiation distance 7.0 mm
XL3000MB
MB2

Adhesive failure
Mixed failure
Cohesion failure of bonding resin
Cohesion failure of dentin

Table 5雑Failure mode analysis of irradiation distance 2.0 mm
MB

Table 4

学

PenCureMB
MB2

PenCure 2000
MB
MB2

1
4

4
1

2
3

5

1
4

4
1

Failure mode analysis of irradiation distance 12.0 mm

Mixed failure
Cohesion failure of bonding resin
Cohesion failure of CR

XL3000MB
MB2

PenCure
MB
MB2

3
2

2
3

4
1

2
3

5

b

a

c

1
3
1

PenCure 2000
MB
MB2

d

e

Typical example of failure mode
a：Adhesive failure, b：Mixed failure, c：Cohesion failure of bonding resin, d：Cohesion failure of dentin,
e：Cohesion failure of CR
Fig. 2

2020 年 12 月

Influence of Light Conditions on the Bond Strength of Resin Composite to Dentin

mW/cm2
1,800
1,600
1,400
1,200
1,000
800
600
400
200
0

2mm

7mm

12mm

2mm

7mm

2mm

7mm

12mm

PenCure 2000 in High-power mode

PenCuremW/cm2
1,800
1,600
1,400
1,200
1,000
800
600
400
200
0

mW/cm2
1,800
1,600
1,400
1,200
1,000
800
600
400
200
0

559

12mm

XL3000Fig. 3 Results of light intensity＊：p＜0.05

ment, which is expected to also affect the bondMB2 even with irradiation for 3 seconds, as it largely

strength. Therefore, in this study, the dentin bonding

absorbed LED light and generated many highly active

performance when light was irradiated on the bonding

radical reactions, which increased the curing rate, as it

material with a halogen type irradiation device, a nor-contained a high-activity photopolymerization cata-

mal LED light irradiation device, and a high-output irra-

lyst17）. When the irradiation distance was longer at 12.0

diation device at different irradiation distances was

mm, TBS decreased significantly for both MB and MB2

examined while using the conventional MB as well as

when light irradiation was conducted with XL3000.

MB2.

However, when PenCure was used to irradiate light for

When the irradiation distance was small, MB, which

10 seconds, TBS values equivalent to those from an

is a conventional bonding system, did not show a signif-

irradiation distance of 2.0 mm were obtained for both

icant difference in TBS whether PenCure, an LED light

MB and MB2. It is surmised that this was because 800

irradiation device, or XL3000, a halogen irradiation

mW/cm2 was maintained and because the irradiation

device, was used. However, no significant differencetime was somewhat long at 10 seconds, even though

was observed for MB2 when irradiation was conducted

the light intensity of PenCure decreased significantly atunder the high-power mode of PenCure 2000 for 3 sec-

the irradiation distance of 12.0 mm compared to that atonds and when irradiation was conducted with PenCure

2.0 mm. Furthermore, MB2 did not result in a high TBS

for 10 seconds, even though TBS decreased signifi-

value even with the high-power mode when the dis-cantly for MB when irradiation was conducted undertance was longer, although TBS values equivalent to

the high-power mode of PenCure 2000 for 3 seconds. It

those of other irradiation devices could be attained in 3

is assumed that this result was obtained as sufficientseconds when the high-power mode of PenCure 2000

polymerization occurred in the bonding material of

was used with the irradiation distance of 2.0 mm. Pen-

日

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科

Cure 2000 also decreased in light intensity to approxi2

mately 600 mW/cm when the distance increased to

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第 63 巻

第6号

There are no conflicts of interest to be disclosed regarding this study.

12.0 mm, even though it had the light intensity of
approximately 1,600 mW/cm2 at 2.0 mm. Meanwhile,the light intensity of PenCure was approximately 1,000
mW/cm2 at 2.0 mm, and it did not decrease dramatically even at the irradiation distance of 12.0 mm withthe light intensity remaining at approximately 800
mW/cm2. It seems that the high-power mode of PenCure 2000 used different light condensing and guiding
methods in order to increase the light intensity, which
thus significantly deteriorated the light intensity of PenCure 2000 at longer irradiation distances, unlike PenCure, even though they are both LED irradiation
devices. These findings suggest that it may not becapable of polymerizing the bonding material sufficiently when the distance is longer even in high-powermode, as the optical energy becomes weaker18）. As tothe differences between the irradiation devices, highTBS values were attained for both MB and MB2 when
PenCure was used to irradiate light even with a longer
irradiation distance, whereas the TBS value decreased
for both MB and MB2 when XL3000 was used to irradiate light with a longer irradiation distance. Whenobserving the tensile fracture surface, adhesive failure
was observed on MB fracture surfaces irradiated with
PenCure 2000 in high-power mode for 3 seconds evenwhen the irradiation distance was short. It is assumed
that this occurred as the bonding between dentin andbonding material was insufficient with incomplete
polymerization of the MB bonding material under lightirradiation of 3 seconds.

Conclusion
Both MB and MB2 did not show deterioration in TBS
even with a longer irradiation distance when the conventional LED light irradiation device was used to irradiate light for 10 seconds. In addition, MB2 yielded ahigh TBS value even when the irradiation period of thehigh-output irradiation device was 3 seconds, as long as
the irradiation distance was 2.0 mm. However, the TBS
value decreased significantly for both MB and MB2
when the irradiation distance became longer under irradiation conditions with the high-power LED light or the
halogen light.

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日

562

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科

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存

学

雑

誌

第 63 巻第6号

ボンディング材に対する光照射条件がコンポジットレジンの象牙質接着強さに与える影響
黄

地

謝

智

子

岩

洲

橋

王

田

有

弘

劉

翔

宇

諸

海

濤

頭

秀

俊

石

田

俊

輔

小

正

玲

子

保

尾

謙

三

谷

本

啓

彰

吉

川

一

志

山

本

一

世

大阪歯科大学歯科保存学講座

抄録
目的：今回，高活性光重合触媒を配合したメガボンド 2（以下，MB2，クラレノリタケデンタル）と従来のメガボンド（以下，MB，クラレノリタケデンタル）を用いて照射条件が引張接着強さ（以下，TBS）に与える影響の比較，検討を行った．
材料と方法：ヒト抜去歯に象牙質被着面を作製し，被着面積を直径 3.0 mm に規定した．その後 MB およびMB2 で製造者指示に従い歯面処理を行った後，光照射を 2.0，7.0，12.0 mm と照射距離を変えて以下の照射条件で行った．1．ハロゲン照射器 XL3000（3M ESPE，USA）10 秒，2．従来型 LED 照射器ペンキュア（モリタ）10 秒，3．高出力 LED 照射器ペンキュア 2000（モリタ）のハイパワーモード 3 秒．その後コンポジット
レジンを充塡した．すべての試料を 24 時間 37℃水中保管した後，引張接着強さを測定した（n＝5）．
結果：照射距離が 2 mm の場合，MB2 はハイパワーモード 3 秒照射でも十分な TBS を得ることができた．
しかし照射距離が長くなると，MB2 であっても 3 秒の光照射では十分な TBS を得ることができず，ペンキュ
ア 10 秒照射でのみ十分な TBS を得ることができた．
結論：LED を用いた場合，MB2 は照射距離が長くても十分な TBS を得ることができたが，ほかの照射条件では十分な TBS を得るためには照射距離を短くする必要があることが示唆された．
キーワード：ボンディングシステム，引張接着強さ，LED 光照射器

責任著者連絡先：黄地智子〒 540‒0008 大阪市中央区大手前 1‒5‒17 大阪歯科大学歯科保存学講座
TEL：06‒6910‒1087，FAX：06‒6910‒1052，E-mail：satoko-o@cc.osaka-dent.ac.jp
受付：2020 年 9 月 15 日/受理：2020 年 11 月 17 日

2020 年 12 月

563

症例報告

日歯保存誌 63（6）：563～569，2020

インプラント周囲炎患者に対し Er：YAG レーザーを併用し外科的治療を行った症例

安

田

忠

司1

山

本

敦

彦1,2

辰

巳

順

一1

朝日大学歯学部口腔感染医療学講座歯周病学分野

1

医療法人成仁会藤沢台山本歯科2

抄録
緒言：Er：YAG レーザーは，インプラント周囲炎治療の際にインプラント表面のデコンタミネーションに用いられている．本稿では，Er：YAG レーザーを用いたデコンタミネーション前後のインプラント表面の汚染度として，Lipopolysaccharide（LPS）を定量した．また臨床評価，細菌検査，cone‒beam computed tomography（CBCT）による検査の結果より，インプラント周囲組織の改善を認めた症例を報告する．
症例：患者は 68 歳，女性．21 部インプラント周囲溝からの排膿を主訴として来院した．上部構造装着期間
は 8 年で全身疾患・喫煙歴はなく歯周疾患の既往があった．エックス線所見からインプラント周囲の支持歯槽骨の高度な吸収を認め，CBCT 像よりインプラント長約 1/2 に及ぶ骨吸収像を示した．また，インプラント周囲ポケットにおける細菌検査から Tannerella forsythensis，Treponema denticola，Fusobacterium nucleatumを検出し，本症例の病態に関与していることが考えられた．歯周組織ならびにインプラント周囲組織検査の結果から，インプラントは動揺を認めなかったものの唇側中央に 14 mm，唇側および口蓋側遠心に 10 mm のProbing Pocket Depth（PPD）を認めたことよりインプラント周囲炎（重度）と診断した．消炎処置後の再評
価で，インプラント部の唇側中央に 13 mm，唇側および口蓋側遠心に 10 mm の PPD が残存したため，インプラント周囲炎に対する外科的対応を行った．浸潤麻酔後，全層弁にて剝離したところ近心に根尖側 3 壁性，歯冠側に 1 壁性の垂直性骨欠損を認めた．Er：YAG レーザーを用いて，骨欠損周囲の炎症性肉芽組織およびイ
ンプラント表面のデコンタミネーションを注水下にて行った．デコンタミネーション前後でインプラント表面の LPS サンプルを各 2 回採取し，Limulus amebocyte lysate 法にて定量し平均値を LPS 量とした結果，10.3755
EU/ml から 0.0015 EU/ml に減少した．骨欠損部に対し骨補塡材を塡入後，コラーゲンメンブレンを設置し単純縫合にて閉創した．
成績：術後 10 カ月の再評価でインプラント部の PPD は 2～3 mm に安定したため，Supportive Periodontal
Therapy に移行した．術前と術後 12 カ月の歯周病関連細菌検査を比較すると総菌数の減少を認め，また T.
forsythensis，T. denticola，F. nucleatum の菌数の減少を認めた．CBCT の評価から，術前はインプラント体
1/2 に及ぶ骨吸収を認めたものの，術後 5 年ではインプラント周囲不透過像の亢進を認めた．
結論：本症例では，インプラント周囲炎の治療において Er：YAG レーザーによるデコンタミネーションを行った結果，インプラント表面の LPS を減少させ，その結果として良好な組織再生が得られ，長期的に安定した状態を維持することができた．
キーワード：インプラント周囲炎，Er：YAG レーザー，リポポリサッカライド

責任著者連絡先：安田忠司〒 501‒0296 岐阜県瑞穂市穂積 1851 朝日大学歯学部口腔感染医療学講座歯周病学分野
TEL & FAX：058‒329‒1452，E-mail：tadashi@dent.asahi-u.ac.jp
受付：2020 年 9 月 7 日/受理：2020 年 11 月 2 日
DOI：10.11471/shikahozon.63.563

日

564

緒

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第 63 巻第6号

認めた．エックス線写真検査を行い，同部位にインプラ言

ントプラットフォームから 1/2 程度の骨吸収を確認した．Froum らの分類19）で重度に相当し，周囲粘膜の炎

歯科用インプラント治療は，予知性の高い欠損補綴方症，全周にわたる骨欠損を伴い，中程度から高度な垂直．しかしな性骨吸収ならびに違和感などの臨床症状を認めた．以上

がらメインテナンス期における頻度の高い合併症としての検査結果からインプラント周囲炎と診断し，消炎処置

インプラント周囲炎があり，患者単位で約 19～56％，イ

後に再評価を行い，インプラント周囲炎に対する外科的ンプラント単位で 10～43％発症することが報告されて処置を行う計画を立案した．治療に付随し，口腔清掃指いることから，インプラント治療の予知性を低下させる

導後，全顎的なスケーリング・ルートプレーニングを重大な疾患として認知されている3,4）．現在，インプラン

行った．再評価時に 21 インプラント部に高度なポケット

ト周囲炎の治療はチタンブラシや超音波スケーラーによが残存し，BOP が陽性のため，インプラント周囲炎に対るインプラント表面の汚染物質の除去があるものの，イする外科的処置を行うこととした．患歯の歯周病関連細ンプラントの表面性状を維持し汚染物質を除去すること

菌は株式会社ビー・エム・エルに委託し，Invader 法に法として良好な治療成績が報告されている

1,2）．近年，Er：YAG レーザーがインプラて行った．結果を Table 1 に示す．総菌数は 46,000 コ

ント周囲炎の治療へ臨床応用されている8,9）．その作用機

ピー，Prevotella intermedia，Porphyromonas gingivalis

序としては 2.94μm のパルス波で振動され，生体組織のは 10 コピー未満，Tannerella forsythensis は 5,400 コ

表面で吸収され水分の気化に伴い微小爆発を生じ，組織

ピー，Treponema denticola は 97 コピー，Fusobacterium

破壊を起こすことが知られている

nucleatum は 5,400 コピーであった．

は困難である5‒7）．山本らは Er：

2,10,11）

YAG レーザーをインプラント周囲炎局所に用いること

インプラントの動揺は認められなかった．外科的処置

により温度上昇を最小限にとどめて，かつインプラント

に対するインフォームドコンセントを患者に行い，同意

表面構造を数μm 蒸散剝離することを報告している11,12）．

を得たうえでインプラント周囲炎に対し Er：YAG レー

一般に，歯周病やインプラント周囲炎は歯周ポケット

ザーを用いた再生療法を行った．

内のグラム陰性嫌気性桿菌の感染による病変であること

治療経過から，それら細菌と細菌由来の菌体内毒素である Lipo．インプ

13‒16）

polysaccharide（LPS）の除去が重要である

ラント周囲炎は歯周病と同様に細菌感染により誘発さ術前の口腔内写真を Fig. 1A，B に示す．唇側中央部にれ，インプラント周囲の炎症反応から骨吸収を生じ13 mm，口蓋側遠心に 10 mm の高度な Probing Pocketる17）．この骨吸収に LPS が深くかかわっていることか

Depth（PPD），唇側に 3 mm の歯肉退縮を認めた．術前ら，Kubota らはインプラント汚染部位にダクロン樹脂のデンタルエックス線写真を Fig. 1C に示す．近心に垂製スワブを擦過させインプラント表面の LPS を定量し直性骨吸収，遠心にインプラント 1/2 に達する骨吸収をた結果，Er：YAG レーザー照射によるデコンタミネー

認めた．2％キシロカイン（1/8 万アドレナリン添加）局

ションは有意に LPS の除去効果を認め，インプラント周所麻酔下で，12 歯から 23 歯に切開および全層弁剝離を囲炎に有効であると報告している ．

行った．インプラント体に動揺はないものの，その周囲

18）

そこで，インプラント周囲炎に対し Er：YAG レー

は広範囲に骨吸収を認め，不良肉芽に覆われており，さザーを用いてデコンタミネーション前後に Kubota らのらにインプラント体表面にプラークと歯石の沈着を認め方法を用いて LPS を定量し，再生治療を行った症例を報た（Fig. 2A）．Er：YAG レーザー（アーウイン，モリ

告する．

タ）を用いて，骨欠損周囲・底部の炎症性肉芽組織およ症

例

Table 1

Microbiological analysis

患者は 68 歳女性，近医にてインプラントおよび歯周組
織のメインテナンスを行っていたものの，上顎左側中切歯部のインプラント部からの排膿が改善しないことを主訴に朝日大学医科歯科医療センター歯周病科に来院した．全身疾患の既往や喫煙歴はない．プラークコント
ロールは良好であったが，21 インプラント部において9～13 mm のポケットとプロービング時の出血，排膿をTotal number of bacteria
P. intermedia
P. gingivalis
T. forsythensis
T. denticola
F. nucleatum

PreOpePostOpe

46,000
＜10
＜10
5,400
97
5,400

＜1,000
＜10
＜10
＜10
＜10
＜27

2020 年 12 月

インプラント周囲炎患者に対し Er：YAG レーザーを併用し外科的治療を行った症例

Fig. 1

565

Intraoral photographs and dental radiograph before surgery

Fig. 3

Dental radiographs just（A）, 1 year（B）and 5
years（C）after surgery

は 0.001 EU/ml である．LPS の定量は株式会社ビー・エ
Fig. 2（A）Clinical view at the time of periodontal
surgery showing circumferential bone defect.
（B）Debridement and decortication using
Er：YAG laser were performed.（C）Graft（Bio‒Oss）insertion was performed.（D）Collagen membrane（Bio‒Gide）was applied.

ム・エルに委託した．LPS の採取，定量方法は Kubota
ら の 方 法 に 準 拠 し た18）． デ コ ン タ ミ ネ ー シ ョ ン 後，
PS600TS を用いて骨欠損周囲骨面のレーザーデコルチ
ケーション（皮質骨穿孔）を行った（Fig. 2B）．その後，唇側のインプラントが露出した高度な骨吸収，舌側の 3壁性骨欠損に対し骨再生におけるスキャホールドの役割として骨伝導能がある骨補塡材（Bio‒Oss，Geistlich
Pharma Japan K. K）を塡入した（Fig. 2C）．移植骨の安びインプラント表面の不良肉芽除去とデコンタミネー

定性を向上させる目的でコラーゲンメンブレン（Bio‒

ションを滅菌注射用水の注水下で行った（Fig. 2B）．不Gide，Geistlich Pharma Japan K. K）を設置し，単純縫良肉芽の除去後，近遠心に 3 壁性の垂直性骨欠損を認め

合にて閉創した（Fig. 2D）．術直後のデンタルエックス

た．インプラント体周囲の不良肉芽は PS600TS のチップ

線写真を Fig. 3A に示す．術後に抗菌薬を投与し，抜糸を用い，毎分 7 ml の注水下で，30～70 mJ，20pps のパ

は 2 週間後に行った．術後 1 週間で軟組織の炎症は縮小

ネル値にて蒸散除去を行った．インプラント表面はし，2 週間後に創の一時閉鎖が得られたため抜糸を行っ

PS600TS，CS600F，C800F を使用し，30～100 mJ，20

た．抜糸後インプラント部の清掃を軟毛ブラシにて行う

pps のパネル値にて蒸散除染した．インプラント表面のように指導した．術後 12 カ月のデンタルエックス線写真

LPS 採 取 は ダ ク ロ ン 樹 脂 製 ス ワ ブ（FLOQSwabs

を Fig. 3B に示す．術前と比較し術後 12 カ月ではインプ

56780CS01，COPAN）を用いた．LPS 採取方法は歯肉弁

ラント周囲の不透過性が亢進し，インプラント支持骨の剝離直後と Er：YAG レーザーによるデコンタミネー

平坦化を認めた．PPD は術前に唇側に 13 mm，口蓋側にション後にインプラントの表面をエアーにて乾燥させ，10 mm であったが，術後 12 カ月の再評価時では唇側 45 秒間擦過し，周囲の歯肉弁や唾液に触れないように採mm，口蓋側 3 mm となり，Bleeding on Probing（BOP）

取し，LPS フリー蒸留水 1 ml（大塚蒸留水，大塚製薬）

も陰性になった．術後 5 年経過しているもののプラークにて溶解させ，試料に含まれる LPS を Limulus amebo-

コントロールは良好で，安定した状態を維持している

cyte lysate 法にて定量した．試料の採取面は各回同部位（Fig. 3C）が唇側の歯肉退縮によりアバットメントが露を 2 回採取し，平均値を LPS 量とした．本法の検出下限

出し審美不良となった（Fig. 4A）．インプラント部の口

日

566

Fig. 4

本

歯

科

保

存

学

雑

誌

第6号

Intraoral photographs 5 years after surgery
Fig. 5

Table 2

第 63 巻

LPS endotoxin unit pre‒ and post‒ Er：YAG laser
decontamination on the implant surfaces
Pre decontamination

Post decontamination

First
Second8.444
12.307

0.001
0.002

Average

10.3755

0.0015（EU/ml）

A significant decrease in LPS endotoxin unit wasobserved after Er：YAG laser decontamination.

Cone beam computed
tomography sagittal sectional image at pretreatment（A）and 5 years after
treatment（B）の検討により Er：YAG レーザー照射によってインプラント体表面の LPS 量が顕著に減少したことが明らかとなった．
インプラント周囲炎を治療する際，インプラント体周
囲のプラーク，歯石と不良肉芽組織の除去が不可欠であるものの，スケーラーやチタンブラシなど従来の方法で蓋側遠心に歯肉退縮を認めた（Fig. 4B）．術後 12 カ月では完全に除去することは不可能である22）．山本らは Er：

歯周病関連細菌を定量し術前と比較した結果，総菌数はYAG レーザーが水に吸収される際に起こる微小爆発を

46,000 から 1,000 未満に減少した．P. intermedia，P.

利用して，インプラント体の温度上昇を最小限にとどgingivalis に著変は認められなかったものの，T. for-め，かつインプラント表面を数μm 蒸散剝離し，インプ

sythensis と T. denticola は 10 コピー未満に減少し，F.

ラント体表面を 1 層除去することを報告した12）．

nucleatam は 27 コピー未満に減少した（Table 1）．レー

本症例は，インプラント埋入時に骨増大を併用していザーによるデコンタミネーション前後を比較した結果，る．このような症例では術後の骨吸収を認めることが報

LPS 量は平均 10.3755 EU/ml から 0.0015 EU/ml に減少

告されている23）．歯肉弁を剝離翻転するとインプラント

した（Table 2）．

体周囲の骨吸収が大きく，インプラントに多量の歯石が術前の cone‒beam computed tomography ではインプ付着していた．Er：YAG レーザーを用いることにより，ラント体 1/2 に及ぶ骨吸収を認めたものの，術後 5 年で鋭匙などの従来の手用器具が挿入不可能な深い骨縁下ポはインプラント周囲の骨様不透過像の亢進を認めた

ケットまで容易にインプラント表面を蒸散することがで（Fig. 5）
．なお使用した薬剤・材料・医療機器は厚生労働

きた．
本論文では Er：YAG レーザーによる，インプラント

省の認可ずみである．

考察

表面の LPS の除去効果について臨床的に初めて報告した．その結果，これまでに in vitro や動物実験の研究で示唆されていたように24,25），Er：YAG レーザーがインプ

本症例では，インプラント周囲炎に対し，Er：YAG

ラント表面の LPS を効果的に除去することを明らかに

レーザーを汚染インプラント体の除染に用いた後に骨補した．Er：YAG レーザーは照射に伴うインプラント体

塡材を塡入して再生治療を行った．また Er：YAG レー

や周囲組織の温度を上昇させず26,27），殺菌効果28）がある

ザー照射下によるデコンタミネーションによる有効性

ことから，生体に対する為害性が少ないとする論文があを，インプラント体表面の LPS の変化で検討したものでる29）．レーザー照射後の LPS 除去効果は，Er：YAG レー

ある．治療の結果，術後 12 カ月において術前に比べ有意ザー照射による水と反応した微小爆発による不良肉芽やに PPD，BOP が改善し，デンタルエックス線上で不透歯石の除去，キャビテーションによる洗浄効果によって過性の亢進を示した．また，術後 5 年経過しているもの得られたと推測する．過去の報告から，Er：YAG レーのプラークコントロールは良好で，安定した状態を維持

ザーは水中で照射するとチップ表面の水は沸点に達し，している．インプラント周囲炎に Er：YAG レーザーを気泡を発生させさらに水流を生じさせる30）ことからイン用いた有効性はこれまでの報告と一致する20,21）が，今回

プラント表面においても LPS と細菌の除去に関与する

2020 年 12 月

インプラント周囲炎患者に対し Er：YAG レーザーを併用し外科的治療を行った症例と考えられる．歯周炎における歯根表面の LPS31）と比較
し，インプラント表面はより LPS が多く検出されたが，これはインプラント体表面の複雑な構造が影響していると考えられる．
歯周ポケット内の歯周病原性細菌叢を分析すること
は，歯周炎の病因を解明するために重要であることが報告されている32）．インプラント周囲炎のポケット内細菌叢の分析も，歯周炎と同様に重要であると考える．過去の報告では，インプラント周囲炎部位へ非外科的に Er：
YAG レーザーを照射した結果，照射前と照射後 3 カ月の比較では有意な差は認められなかった33）．本症例では，術後 12 カ月で総菌数の減少と T. forsythensis，T. denticola，F. nucleatum の減少を認めた．これは，フラップを剝離翻転しさまざまな角度からデコンタミネーション
でき，有意に周囲 LPS 量を低下させたことによると考えられる．
インプラント周囲炎に対し，Er：YAG レーザーを用
い肉芽組織および付着構造物の除去，またスレッドを破壊せずに LPS を除去することができることが明らかとなり，インプラント周囲炎の治療法の一助となることが示唆された．しかしながら，インプラント周囲炎の病態は多様であり，またインプラント体の種類も数多いことから，種々のインプラント表面に対する Er：YAG レー
ザー照射による構造変化などを今後詳細に検索していく予定である．

結論

本症例で，インプラント周囲炎の治療において Er：
YAG レーザーによるデコンタミネーションを行った結果，インプラント表面の LPS を有意に減少させ，その結果として良好な組織再生が得られ，長期的に安定した状態を維持することができた．
本論文で開示すべき利益相反状態はない．

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日

本

歯

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保

存

学

雑

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第 63 巻第6号

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2020 年 12 月

インプラント周囲炎患者に対し Er：YAG レーザーを併用し外科的治療を行った症例

569

Surgical Treatment of Peri-implantitis by Using Er: YAG Laser:
A Case Report
YASUDA Tadashi1, YAMAMOTO Atsuhiko1,2 and TATSUMI Junichi1
1

Department of Periodontology, Division of Oral Infections and Health Sciences, Asahi University School of Dentistry2

Perio-Implant Hospital AUTIS

Abstract
Purpose: The erbium: YAG（Er: YAG）laser is used for decontaminating implant surfaces in the treatmentof peri-implantitis. In this study, we quantified lipopolysaccharides（LPS）before and after decontaminating
the contaminated layer on the implant surface, using an Er: YAG laser. In addition, we report that theperi-implantitis of the patient improved, based on the results of clinical evaluation, bacteriological examination, and cone-beam computed tomography（CBCT）.
Patient: A 68-year-old woman visited our hospital with the chief complaint of drainage from an implant.
Her implant superstructures had been installed eight years ago, and she had no systemic disease except periodontal disease. X-ray examination revealed high resorption of the alveolar bone around the implant, andCBCT images revealed bone resorption; the resorbed bones were half the length of the implant. In addition,
bacterial examination of the peri-implant pocket revealed Tannerella forsythensis, Treponema denticola, andFusobacterium nucleatum. Although the implant showed no mobility, the probing periodontal pocket depth（PPD）of the labial center was 14 mm, and the distopalatal PPD was 10 mm. After the initial periodontal
therapy, the PPD was 10‒13 mm, and it bled on probing. Therefore, a surgical procedure was performed totreat the peri-implantitis. After administration of anesthesia, a full-thickness flap was raised, and a verticalbone defect with three walls on the apical side and one wall on the crown side was observed. The inflammatory tissue around the bone defect and the implant surface were decontaminated using an Er: YAG laser
with water spray. LPS on the implant surface were sampled twice before and after decontamination andquantified using the Limulus amebocyte lysate method. The average of all the values was used as the LPS
value, which decreased from 10.3755 to 0.0015 EU/ml. Bio-Gide was applied after insertion of Bio-Oss, and theflap was repositioned and sutured.
Results: The PPD of the implant site stabilized at 2‒3 mm 10 months after the procedure. A comparison of
periodontal disease-related bacterial tests before and 12 months after surgery revealed that the numbers of
T. forsythensis, T. denticola, and F. nucleatum decreased after surgery. Newly formed bone was observed in
the intrabony defect from the CBCT images.
Conclusion: In this case, the contaminated layer on the implant surface was decontaminated by an Er:
YAG laser used for the treatment of peri-implantitis, along with reduction of LPS on the implant surface,
facilitating long-term bone regeneration.
Key words: peri-implantitis, Er: YAG laser, lipopolysaccharide

Corresponding author: Dr. YASUDA, Department of Periodontology, Division of Oral Infections and Health Sciences, Asahi
University School of Dentistry, 1851, Hozumi, Mizuho, Gifu 501‒0296, Japan
TEL & FAX: ＋81‒58‒329‒1452, E-mail: tadashi@dent.asahi-u.ac.jp
Received for Publication: September 7, 2020/Accepted for Publication: November 2, 2020

日本歯科保存学雑誌

第 63 巻総目次（2020 年）THE JAPANESE JOURNAL
OF CONSERVATIVE DENTISTRYVOLUME 63, 2020

2020 年 12 月

571

第 1 号（令和 2 年 2 月 29 日発行）
原著
Study on Rehardening of Demineralized Dentin with the New Pulp-capping Agents
SAWAI Kenshiro, YASUO Kenzo, KOMASA Reiko,Containing Bioactive GlassYOSHIKAWA Kazushi and YAMAMOTO Kazuyo （ 1 ）バルクフィルコンポジットレジンの硬化初期における重合収縮応力の神谷 直孝，神谷 昌宏，藤田（中島）光発生挙動と窩洞切断面の観察
岩崎 太郎，谷本 安浩，平山 聡司 （ 14 ）講義および実習試験の評価による歯周病学教育のあり方の考察
成石 浩司，坂本英次郎，生田 貴久
木戸 理恵，木戸 淳一，湯本 浩通 （ 22 ）Visual Analog Scale（VAS）を用いたコンポジットレジンの色調適合評価
小野瀬里奈，大原 直子，松崎久美子
澁谷 和彦，横山 章人，高橋圭
神農 泰生，山路 公造，島田 康史
𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷 30 ）石井 信之，水野 潤造，武藤 徳子
歯科診療アシストスーツの開発と機能評価
鈴木 二郎，室町幸一郎，下島かおり
藤巻 龍治，宇都宮舞衣，山田 寛子
木庭 大槻，許多，佐藤イテヒョン
清水 千晶，田中俊，林田優太郎菅原 美咲 （ 38 ）杉井 英樹，吉田晋一郎，友清
淳
未重合レジンセメントと未重合フロアブルレジンの結合力
濱野さゆり，長谷川大学，前田 英史 （ 44 ）トリブチルボランを重合開始剤とする新規レジン複合型 mineral trioxide
井波 智鶴，岩﨑小百合，西谷 佳浩
aggregate（MTA）系材料の辺縁封鎖性に関する検討伊津野真一 （ 52 ）
機能性糖脂質ビザンチンの Streptococcus mutans に対する抗バイオフィルム効果―スクロース濃度の影響とバイオフィルム形成関連遺伝子の発現解析―
竹中 彰治，長谷川泰輔，小田 真隆
高橋 直紀，磯野 俊仁，大倉 直人
山本 博文，多部田康一，野杁由一郎 （ 61 ）難治性根尖性歯周炎における抗菌ナノパーティクル含有ナノバブル水による
庵原耕一郎，中島美砂子 （ 73 ）根管内除菌効果の検討
鴨井 久博，吉峰 正彌，三浦悠
キャビテーション気泡を含む水流による口腔洗浄器の効果
濵田真理子 （ 83 ）症例報告
One-year Follow-up of Maxillary Right First and Second Molars
Sealed with Bioactive Glass-based Root Canal Sealer Using the Single-cone Obturation Technique
WASHIO Ayako, ODA Masafumi, MORIMOTO Yasuhiro
and KITAMURA Chiaki （ 90 ）
低侵襲の歯周外科治療に Er：YAG レーザーを応用した症例の長期経過
水谷 幸嗣，三上理沙子，松浦 孝典
和泉 雄一，岩田 隆紀，青木章 （ 96 ）第 2 号（令和 2 年 4 月 30 日発行）
誌上シンポジウム
保存治療のイノベーション
口腔細菌パターンを“健康型”へと変える試み

野杁由一郎，西村 英紀 （ 125 ）南部 隆之 （ 127 ）第 63 巻572

光干渉断層計（OCT）を用いた齲蝕の診断
インドシアニングリーン封入ナノ粒子と半導体レーザーによる抗菌光線力学療法の歯内治療への応用
歯肉幹細胞由来エクソソームによる炎症制御

島田

第6号

康史 （ 131 ）樋口 直也 （ 135 ）福田 隆男 （ 140 ）原著
Porphyromonas gingivalis がヒト口腔粘膜上皮細胞に与える影響の3 次元構築モデルによる解析

笠孝成，内田 邦敏，岡村 和彦
八田 光世，山﨑純，坂上 竜資 （ 144 ）Remineralization Potential of a Calcium-fluoroaluminosilicate Glass-based
Desensitizer on Artificial Human Enamel Subsurface Lesions
HAMBA Hidenori, NAKAMURA Keiki, NIKAIDO Toru,
FURUSAWA Masahiro, TAGAMI Junji and MURAMATSU Takashi （ 156 ）1 ステップ PMTC 用ペーストによる機械的清掃―荷重と時間が CAD/CAM 用歯冠色修復材料の表面性状に与える影響―
内川竜太朗，大木茜，春山亜貴子，杉山 利子
小町谷美帆，小松 佐保，甲田 訓子，奥瀬 稔之
森啓，吉成 伸夫，亀山 敦史 （ 165 ）
機能性糖脂質ビザンチンによる Streptococcus mutans の付着抑制効果―表面性状の変化と付着関連遺伝子の発現解析―
竹中 彰治，長谷川泰輔，小田 真隆，山本 博文，NAKSAGOON Traithawit
永田 量子，鈴木 裕希，大墨 竜也，野杁由一郎 （ 173 ）Comparison of Obturation Ratios between the Thermafil Obturator and NT Condenser
with Obturation Gutta NT Using Micro-CT Analysis
SHIMIZU Kohei, YASUKAWA Takuya, HATORI Keisuke, SUZUKI Yusuke,
TAKEICHI Osamu, HAYASHI Makoto, SUGURO Hisashi, NAKAMURA Takeshi,
TAMURA Takahito, KOBAYASHI Hiroshi, HIRANO Yoriyuki and OGISO Bunnai （ 181 ）髙見澤哲矢，半田 慶介，鈴木 重人
歯根尖切除術の教育用顎模型システムの開発とその評価
長谷川達也，中野 将人，八幡 祥生，齋藤 正寛 （ 188 ）澁谷 和彦，大原 直子，入江 正郎
乾燥が成形修復材料の質量および曲げ強度に及ぼす影響
小野瀬里奈，松崎久美子，松本 卓也，𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷 199 ）Ni‒Ti ロータリーファイルを用いた根管形成の術者間比較―ソフトレシプロックによる根管形成能の評価―
赤堀 裕樹，木方 一貴，長谷川智哉，田中 雅士，堺 ちなみ，小畠 莉里
和仁護，加藤 友也，伊藤 智美，瀧谷 佳晃，吉田 隆一，河野哲 （ 207 ）第 3 号（令和 2 年 6 月 30 日発行）
原著
塩基性線維芽細胞増殖因子（FGF‒2）製剤を用いた歯周組織再生療法の治療成績
沢田 啓吾，北村 正博，長谷川詩織，森本 千晶，平井 麻絵，今井昂
川嵜 公輔，橋本 康樹，麻生 桃子，辻井 翔一，野田亜利紗，花田 滉輔
政近 健司，藤田 翔子，鈴木 美麻，八木 寛子，池上久仁子，山本 智美
森健太，中村 友美，小笹 匡雄，北垣次郎太，岩山 智明，柏木陽一郎
藤原 千春，三木 康史，竹立 匡秀，山下 元三，野崎 剛徳，村上 伸也 （ 219 ）Shaping Ability of the WaveOne Gold Instrument in Torque Generation with and
SHIMOJIMA Kaori, MUTOH Noriko, UTSUNOMIYA Mai,
without Establishing Different Glide Paths
YAMADA Hiroko and TANI-ISHII Nobuyuki （ 228 ）池上久仁子，山下 元三，三木 康史，久留島悠子
高齢双生児の歯周病病態と遺伝・環境要因の影響度
高阪 貴之，鈴木 美麻，榎木 香織，松田 謙一
北村 正博，池邉 一典，大阪ツインリサーチグループ，村上 伸也 （ 236 ）2020 年 12 月

573

人間ドック受診者に対する歯周病スクリーニング方法の検討
水谷 幸嗣，三上理沙子，佐々木好幸，髙谷
―単一施設横断研究―
太田秀二郎，松浦 孝典，城戸 大輔，武田向山 雄人，須田 智也，和泉 雄一，岩田典秀
浩平
隆紀 （ 245 ）症例報告
Root Canal Treatment of a Mandibular Premolar with Two Root Canals
in a Japanese Patient Using Cone-beam Computed Tomography and Surgical Microscopes
YAMADA Masashi, SAKO Ryo, TAMIYA Yoshiki, ASAI Tomohiro, SANO Yosuke,
SEKIYA Sayo, KASAHARA Masaaki, KASAHARA Norio and FURUSAWA Masahiro （ 254 ）第 4 号（令和 2 年 8 月 31 日発行）
総説
OCT による研究がもたらした歯の内部構造に関する新知見
田上 順次，島田 康史，SADR Alireza，𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷 267 ）新型コロナウイルス（SARS‒CoV‒2）感染拡大に伴う歯科保存治療における予防対策
飯野 由子，砂川 光宏，鶴岡 広美，沖畠 里恵，高橋 祐太，荒木 孝二 （ 272 ）原著
マウスガードによる季節性アレルギー性鼻炎症状改善に関する研究―スギ花粉症患者の唾液性状解析―
原賀裕，室町幸一郎，武藤 徳子，鈴木 二郎
下島かおり，藤巻 龍治，宇都宮舞衣，木庭 大槻許多，石井 信之 （ 280 ）Porphyromonas gingivalis 由来 LPS 局所投与が加齢マウスの歯周組織に及ぼす影響
森永 啓嗣，金山 圭一，北後 光信，安田 忠司
長谷川 徹，佐藤匠，清水 雄太，辰巳 順一 （ 287 ）A Preliminary Study on Remaining Enamel Thickness Measurement
using Time-domain Optical Coherence Tomography
KUROKAWA Hiroyasu, TAKAMIZAWA Toshiki, IINO Masayoshi,
ARAI Yuiko, TAKAMIYA Hiroshi, WAKAMATSU Kengo,
YOKOYAMA Munenori, IIJIMA Tatsuya and MIYAZAKI Masashi （ 296 ）ニッケルチタン製ロータリーファイルと手用 K ファイルの湾曲根管形成能：
未経験者による根管形成の評価
牧 圭一郎，海老原 新，中務 太郎，木村 俊介，興地 隆史 （ 305 ）
症例報告
セメント質剝離の 2 症例に対する三次元画像診断に基づいた臨床的考察
柴田 直樹，稲本 京子，山本

弦太，三谷

章雄，中田

和彦 （ 312 ）〔優秀症例発表賞受賞演題〕
治療に無関心であった広汎型重度慢性歯周炎患者に対し行動変容を促し自家骨移植およびエナメルマトリックスタンパク質を用いた歯周組織再生療法を行った一症例
五十嵐（武内）寛子，沼部 幸博 （ 320 ）Tooth Wear による機能的・審美的障害に対して直接法コンポジットレジン修復を行った 1 症例
田代 浩史，保坂 啓一，田上 順次 （ 327 ）Periapical osteoperiostitis を伴う上顎大臼歯歯根囊胞に外科的歯内治療を行った 1 症例
飯野 由子，井澤 常泰，八尾香奈子，興地 隆史 （ 332 ）第 63 巻574

第6号

第 5 号（令和 2 年 10 月 31 日発行）
総説
マイクロテンサイル法（微小引張接着試験）について

西谷

佳浩，星加

知宏 （ 351 ）原著
Study on Rehardening of Demineralized Dentin with Resin-modified Pulp-capping
TSUTANI Kayo, YASUO Kenzo, TANIMOTO Hiroaki,
Agents Containing MTAYOSHIKAWA Kazushi and YAMAMOTO Kazuyo （ 356 ）ジルコン粉末を用いた噴射研削による小窩裂溝齲蝕除去について
堀田 正人，瀧谷 佳晃，河野哲 （ 368 ）高度テーパー加工フィラメント植毛歯ブラシヘッドの大きさの違いが人工プラーク除去に及ぼす影響堀田 正人，佐野晃，清水翔二郎石榑 大嗣，日下部修介，二階堂 徹 （ 377 ）第 3 次産業勤労者の口腔保健行動と意識
志倉 興紀，志倉 敬章，内川竜太朗―大阪府堺市西区における 2016 年度アンケート調査―山本 昭夫，富田美穂子 （ 385 ）トモシンセシス法を用いたパノラマ X 線画像における歯周組織所見の主観的および物理学的画質評価
杉原俊太郎，両⻆ 俊哉，香西 雄介，印南永泉
雅浩，田村 利之，櫻井孝，三邉 正人 （ 396 ）Evaluation of Root Canal Wall Displacement and Working Time in Simulated Curved Root Canals
SEKIYA Miki, MAEDA Munehiro, NISHIDA Taro
Using Various Reciproc Filesand IGARASHI Masaru （ 405 ）ポリエチレングリコール鎖を有する機能性モノマー配合接着材の象牙質接着性と弾性率
英將生，木村紗央里，大川 一佳
山本 雄嗣 （ 414 ）藤巻 龍治，鈴木 二郎，石井 信之 （ 425 ）pH 調整による EDTA 溶液の根管象牙質に及ぼす影響
症例報告〔優秀症例発表賞受賞演題〕
露髄を伴う前歯部破折症例への加圧直接覆髄処置と即日接着修復の応用
片平 信弘，稲井 紀通，田上 順次 （ 432 ）冨永 尚宏，木庭 大槻，石井 信之 （ 438 ）
歯内‒歯周治療を基本とした包括的治療症例
大墨 竜也，竹中 彰治，野杁由一郎 （ 445 ）非穿孔型の広範な歯根内部吸収を認めた上顎右側中切歯の 1 症例
歯周組織の炎症と不妊の関連性を示唆する，ある侵襲性歯周炎患者の病態生理大森 一弘，河野 隆幸，小林 寛也
新井 英雄，山本 直史，高柴 正悟 （ 451 ）慢性根尖性歯周炎に罹患した下顎第二大臼歯樋状根に非外科処置にて対応した 1 症例
川西 雄三，前薗 葉月，林 美加子 （ 461 ）広汎型重度慢性歯周炎患者に対しリグロスを用いた歯周組織再生療法を行い，
須藤 瑞樹 （ 467 ）包括的歯科治療を行った 1 症例
第 6 号（令和 2 年 12 月 31 日発行）
ミニレビュー
接着性レジンの象牙質接着耐久性改良法の探求と接着破壊ダイナミクスの解明

保坂

啓一 （ 479 ）原著
Study on the Sealing Ability of a New High-penetration Resin Material for Enamel Cracks
and Dentinal Tubules
MIURA Tatsuki, YASUO Kenzo, IWATA Naohiro, YOSHIKAWA Kazushi and YAMAMOTO Kazuyo （ 483 ）2020 年 12 月

575

ユニバーサルアドヒーシブのアクティブ処理およびエッチングモードがエナメル質接着強さおよび表面自由エネルギーに及ぼす影響
今井亜理紗，髙見澤俊樹，田村 友彦，髙宮
寛，若松 賢吾
辻本 暁正，鈴木 総史，鈴木 美穂，宮崎 真至 （ 494 ）高グルコース条件下における歯肉線維芽細胞のカルプロテクチン誘導性
炎症関連因子の産生におけるスダチチンの抑制効果
西川 泰史，成石 浩司，木戸 淳一，湯本 浩通 （ 503 ）ニッケルチタン製ロータリーファイルのテーパーが回転疲労耐性に与える影響
福森 洋平，中務 太郎，牧 圭一郎，木村 俊介
海老原 新，興地 隆史，杉崎 順平 （ 512 ）新規汚染除去材による処理が唾液汚染された CAD/CAM 冠用ハイブリッドレジンブロックの象牙質接着強さに及ぼす影響
高橋圭，𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷 519 ）生物学的直接覆髄剤開発に向けた生理活性物質 RVX‒208 の歯髄細胞における機能解析
松本 昌大，藤原 千春，島袋 善夫，山本
優，NANTAKEERATIPAT Teerachate
北垣次郎太，八木 寛子，林聡子，岩山 智明，柏木陽一郎
三木 康史，北村 正博，沢田 啓吾，木下 茉優，村上 伸也 （ 527 ）ユニバーサルアドヒーシブへの光線照射の有無が自己接着性レジンセメントの歯質接着性に及ぼす影響石井亮，髙見澤俊樹，野尻 貴絵，辻本 暁正
甘利 佳之，奥脇 岳人，飯島 達也，宮崎 真至 （ 536 ）タタキ振動を付与した音波振動歯ブラシのプラーク除去効果および歯周組織に対する有用性について
鴨井 久博，吉峰 正彌，三浦悠，濵田真理子 （ 545 ）Influence of Light Irradiation Conditions on the Tensile Bond Strength ofResin Composite Bonding Materials to Dentin
OUCHI Satoko, IWATA Naohiro, LIU Haitao, XIE Zhouqiao, WANG Xiangyu,
MOROTO Hidetoshi, ISHIDA Shunsuke, KOMASA Reiko, YASUO Kenzo,
TANIMOTO Hiroaki, YOSHIKAWA Kazushi and YAMAMOTO Kazuyo （ 554 ）
症例報告
インプラント周囲炎患者に対し Er：YAG レーザーを併用し外科的治療を行った症例
安田 忠司，山本敦彦，辰巳順一 （ 563 ）第 63 巻576

第6号

会 務 報 告特定非営利活動法人日本歯科保存学会 2020 年度総会議事録
1 ．開催日時2020 年 7 月 30 日

1 ．開催場所

一般財団法人口腔保健協会 3 階会議室（東京都豊島区駒込 1‒43‒9

1 ．正会員（社員）数

4,412 名

1 ．出席正会員数

1,150 名内訳

本人出席

16：30～17：00

4 名，表決委任者

駒込 TS ビル）

1,146 名1 ．議事の経過の要領及び議決の結果
上記のとおりの出席があったので，定款の規定により議長の選出を行ったところ，田上順次が選ばれて議長となった．
議長が，議事録署名人を選任したい旨及び次の者を指名したい旨を述べたところ，満場一致をもって承認可決されたので，議長は次の者を議事録署名人に指名した．
議事録署名人
第 1 号議案

林

美加子・横瀬敏志

次期理事長承認の件

議長は，上記議案を上程し，概要を説明して議決を求めたところ，全員異議なく原案通り承認可決した．
第 2 号議案

理事承認の件

議長は，上記議案を上程し，概要を説明して議決を求めたところ，全員異議なく原案通り承認可決した．
第 3 号議案

名誉会員承認の件

議長は，上記議案を上程し，概要を説明して議決を求めたところ，全員異議なく原案通り承認可決した．
第 4 号議案

2019 年度事業報告の件

議長は，上記議案を上程し，概要を説明して議決を求めたところ，全員異議なく原案通り承認可決した．
第 5 号議案

2019 年度決算報告の件

議長は，上記議案を上程し，財産目録，貸借対照表および収支決算書の内容につき概要を説明して議決を求めたところ，全員異議なく原案通り承認可決した．
第 6 号議案

2020 年度事業計画の件

議長は，上記議案を上程し，概要を説明して議決を求めたところ，全員異議なく原案通り承認可決した．
第 7 号議案

2020 年度予算案の件

議長は，上記議案を上程し，概要を説明して議決を求めたところ，全員異議なく原案通り承認可決した．
議長は，以上をもって本日の議案の審議をすべて終了した旨を述べ，17 時 00 分閉会を宣した．
上記議事の経過の要領及び議決の結果を明確にするためこの議事録を作成し議長及び議事録署名人がこれに記名押印する．

2020 年 12 月577

日 本 歯 科 保 存 学 雑 誌 投 稿 規 程
1．この学術雑誌は，研究成果の論文発表による発信を通して，歯科保存学（保存修復学，歯内療法学，歯周病学）の発展に寄与することを目的としている．そのため，歯科保存学の基礎，臨床，教育ならびに歯科保存学を基盤とした歯科医学全般に関する論文を掲載する．
2．論文の種類は，原著論文（独創性がある研究の成果に関するもの），総説（歯科保存学に関する争点を整理して今後の方向性を示唆しようとするもの，あるいは既発表論文の内容をまとめて新たな概念を提唱しようとするもの），ミニレビュー（歯科保存学に関する最近のトピックを総説形式で簡潔にまとめたもので，各賞の受賞論文を含む），症例・臨床報告（歯科保存学領域から広く歯科医療の実践と発展に有用となる臨床の記録）などの 4 種に分類する．なお，総説とミニレビューは，編集委員会からの依頼によるものと投稿によるものとに分ける．
3．原著論文および症例・臨床報告の内容は，過去に他誌に掲載されたり，現在投稿中あるいは掲載予定でないものに限る．
4．論文の採否は，査読を経て決定する（編集委員会からの依頼によるものを除く）．
5．投稿原稿は，日本語または英語で簡潔に記述されたものとする．
6．原著論文の形式は，原則として和文（英文）抄録，緒言，材料および方法，結果あるいは成績，考察，結論，文献，英文（和文）抄録の順に記載する．原著論文以外の論文も，原則としてこれに準ずる．
7．本誌の発行は，原則として 2 月，4 月，6 月，8 月，10 月および 12 月に行う．また，必要があれば増刊する．
8．筆頭著者が会員の場合のみ，一定額の掲載料補助を行う．また，筆頭著者が会員であるが共著者に非会員が含まれる場合については，掲載料補助は行われるが非会員の人数に応じて別途負担金を求める．なお，図表・写真な
どの実費，発送および別刷にかかわる費用，J‒STAGE 登載用データ作成代は，著者負担とする．ただし，編集委員会からの依頼によるものは除くものとする．
9．論文投稿票は，最新のものを用い，投稿原稿に必ず添付する．
10．受付日は，投稿原稿が学会事務局へ到着した日付とする．また，受理日は，査読担当者から採択可と判定された日付とする．
11．掲載順序は，受理順とする．なお，採択論文の掲載証明は希望がある場合に発行する．
12．論文投稿は E-mail 投稿または学会ホームページ等からの Web 投稿とする．投稿原稿の送付先は，学会事務局とする．
13．著者による校正は，原則として 2 校までとする．その際には，字句の著しい変更，追加，削除などは認めない．
校正刷は所定の日までに必ず返却する．校正不要の場合には，その旨表紙左側に明記する．
14．本誌掲載の著作物の著作権は，本学会に帰属するものとする．
15．この規程にない事項は，別に編集委員会で決定する．
附則
1．本規程は平成 6 年 11 月 10 日から施行する（第 38 巻第 1 号より適用）．
2．本規程は平成 7 年 10 月 26 日から一部改正し施行する．
3．本規程は平成 9 年 6 月 5 日から一部改正し施行する．
4．本規程は平成 11 年 11 月 17 日から一部改正し施行する．
5．本規程は平成 16 年 6 月 9 日から一部改正し施行する．
6．本規程は平成 18 年 11 月 9 日から一部改正し施行する．
7．本規程は平成 20 年 6 月 5 日から一部改正し施行する．
8．本規程は平成 21 年 10 月 28 日から一部改正し施行する．
9．本規程は平成 22 年 6 月 3 日から一部改正し施行する．
10．本規程は平成 24 年 6 月 28 日から一部改正し施行する．
11．本規程は平成 25 年 6 月 27 日から一部改正し施行する．
12．本規程は令和 2 年 6 月 25 日から一部改正し施行する．
投稿にあたっては「投稿規程」のほか，必ず各巻の 1 号に掲載されている「投稿の手引き」に準拠すること．

第 63 巻578

第6号

複写をご希望の方へ
本学会は，本誌掲載著作物の複写複製に関する権利を学術著作権協会に委託しております．
本誌に掲載された著作物の複写複製をご希望の方は，学術著作権協会（https://www.jaacc.org/）が提供している複製利用許諾システムを通じて申請ください．
複写以外の許諾（著作物の引用，転載，翻訳等）に関しては，直接本学会へお問い合わせください．
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Clearance（JAC）to license our reproduction rights of copyrighted works. If you wish to obtain permissionsof these rights in the countries or regions outside Japan, please refer to the homepage of JAC（http://www.
jaacc.org/en/）and confirm appropriate organizations to request permission.

2020 年 12 月

579

握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握

渥握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握渥編 集 後 記渥握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握 ・新型コロナ感染症禍が続いているために，編集委員会の協議はメールを通して行われています．個人的には，
 重要な協議事項がある場合は，委員の皆様はお忙しいと思いますがメールでなく集まって協議するのがいいと
 考えています．新型コロナ感染症がいち早く終息することを祈ります．
 ・さて，私の編集委員会時の東京への移動手段は，東海道・山陽新幹線です．前回編集後記を担当した時は，
 車窓から見える一級河川について，歴史上有名な合戦を交えながら述べました．今回は，城について書きたい ところですが，他学会の編集後記ですでに記載しています．それで，山について簡単に述べます．私の知るか ぎり車窓から見える名山は，丹沢山，富士山，天城山，恵那山，岐阜城のある金華山，白山，御嶽山，乗鞍岳，，比叡山，生駒山および六甲山です．当然，他にもたくさんの名山があ 御在所山，伊吹山，近江富士（三上山） ります．
 ・富士山は，広島から東京へ移動時，浜名湖付近，天竜川付近，富士川付近，新富士駅付近，三島駅付近，小 田原駅付近，平塚市北部あたり，新横浜駅付近および都内通過時，進行方向の左側に見えます．テレビ番組の クイズに出るくらい有名なことですが，車窓の右側に見える場所があります．その場所は，静岡駅手前の安倍 川付近です．日本地図を頭に浮かべ，新幹線の進路が掛川市辺りから，東北東，北東に変化することに気付け ば，このクイズは簡単です．お時間があれば，焼津（日本坂トンネル）あたりから，外の風景を見ることに集 中し，富士山を見てください．最近は，車窓から見える有名企業の工場がある場所を確認しております．
 ・菅 義偉内閣総理大臣が「〝自助，共助，公助〟，そして〝絆〟」という社会像を目指すと述べられました．こ の理念に対しては賛否両論がありますが，平和社会を実現するには共生社会が必要です．この理念によって，
 日本・世界の人々が安心・安全に生活できる，平和な社会をぜひ実現していただきたいと願っています．歯で 食べ物を嚙み砕くことおよび歯ごたえは，美味しく・楽しく食べることにつながります．会員の皆様の強固な 絆によって生みだされる研究成果が，日本・世界の人々の食育推進と健寿寿命の延伸に寄与することを祈りま す．
（柴 秀樹 記）握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握渥

日本歯科保存学雑誌編集委員会
委 員 長

中

田

和

彦（愛知学院大学歯学部）

副委員長

前

田

英

史（九州大学大学院歯学研究院）

北

村

和

夫（日本歯科大学）齋藤正寛（東北大学大学院歯学研究科）

秀樹（広島大学大学院医系科学研究科）

柴

幹

事

編集・発行予定新海航一（日本歯科大学新潟生命歯学部）

平

山

聡

司（日本大学松戸歯学部）

村松敬（東京歯科大学）

八 重 柏隆（岩手医科大学歯学部）

山

本

一

世（大阪歯科大学）山本松男（昭和大学歯学部）

湯

本

浩

通（徳島大学大学院医歯薬学研究部）

稲

本

京

子（愛知学院大学歯学部）

号

投稿締切日

発 行 日

1

前年 11 月 15 日

2 月末日

2

1 月 15 日

4 月末日

3

3 月 15 日

6 月末日

4

5 月 15 日

8 月末日

5

7 月 15 日

10 月末日6

9 月 15 日

12 月末日（50 音順）令和 2 年 12 月 25 日

印

刷

令和 2 年 12 月 31 日

発

行

編集兼発行者

特定非営利活動法人 日本歯科保存学会理事長
田上

一般財団法人

順

次

制

作

者

口腔保健協会印

刷所

三 報 社 印 刷 株 式 会 社

発

行

所

特定非営利活動法人 日本歯科保存学会
日 本 歯 科 保 存 学 雑 誌 編 集 委 員 会

http：//www.kokuhoken.or.jp/〒 170‒0003 東京都豊島区駒込 1‒43‒9（一財）口 腔 保 健 協 会 内
電話

03（3947）8891

ＦＡＸ

03（3947）8341

第 63 巻580

第6号

特定非営利活動法人 日本歯科保存学会賛助会員名簿
賛

助

会

員

名

郵便番号

所

在

地

電話番号

ア グ サ ジ ャ パン 株 式 会 社

540‒0004

大阪市中央区玉造 1―2―34（06）
6762―8022

医 歯 薬 出 版 株 式 会 社

113‒8612

東京都文京区本駒込 1―7―10（03）5395―7638

イボクラールビバデント株式会社

113‒0033

東京都文京区本郷 1―28―24

4F

（03）
6801―1303

長 田 電 機 工 業 株 式 会 社 141‒8517

東京都品川区西五反田 5―17―5（03）3492―7651

カボデンタルシステムズ株式会社

140‒0001

東京都品川区北品川 4―7―35

御殿山トラストタワー 15F （03）6866―7480

クラレノリタケデンタル株式会社

100‒0004

東京都千代田区大手町 1―1―3

大手センタービル

ク ル ツ ァ ー ジ ャ パ ン 株 式 会 社 113‒0033

東京都文京区本郷 4―8―13

小567‒0057

大阪府茨木市豊川 1―30―3

コ ル テ ン ジ ャ パ ン 合 同 会 社 190‒0012

東京都立川市曙町 2―25―1

サ ン メ デ ィ カル 株 式 会 社

524‒0044

滋賀県守山市古高町 571―2（077）
582―9981

株ー

113‒0033

東京都文京区本郷 3―2―14（03）3815―1511

風605‒0983

京都市東山区福稲上高松町 11（075）
561―1112

昭 和 薬 品 化 工 株 式 会 社 104‒0031

東京都中央区京橋 2―17―11（03）3567―9573

ス リ ー エ ム ジ ャ パ ン 株 式 会 社 141‒8684

東京都品川区北品川 6―7―29（03）6409―3800

タ カ ラ ベ ル モ ン ト 株 式 会 社 542‒0083

大阪市中央区東心斎橋 2―1―1（06）
6212―3619

デ ン ツ プ ラ イ シ ロ ナ 株 式 会 社 106‒0041

東京都港区麻布台 1―8―10（03）5114―1005

株 式 会 社 東 洋化 学 研 究 所

173‒0004

東京都板橋区板橋 4―25―12（03）3962―8811

株 式 会 社 ト ク ヤ マ デ ン タ ル 110‒0016

東京都台東区台東 1―38―9

イトーピア清洲橋通ビル 7F （03）3835―2261

株

式

会

社

ナ

カ

ニ

シ

322‒8666

栃木県鹿沼市下日向 700（0289）
64―3380

株

式

会

社

ニ

ッ

シ

ン

601‒8469

京都市南区唐橋平垣町 8（075）681―5346

日 本 歯 科 薬 品 株 式 会 社 750‒0015

山口県下関市西入江町 2 番 5 号（0832）
22―2221

ネ オ 製 薬 工 業 株 式 会 社 150‒0012
白

水

貿

ピ

ヤ

ス

マ

ニ

ー

株

林

式

製

薬

会

式

株

式

社

ジ

会

社

ー

会

シ
松

社

TSK ビル 2F（03）6701―1730（03）
5803―2151（072）
640―0117

2F（042）
595―6945

東京都渋谷区広尾 3―1―3（03）3400―3768

式

会社

532‒0033

大阪市淀川区新高 1―1―15（06）
6396―4455

株

式

会

社

132‒0035

東京都江戸川区平井 6―73―9（03）3619―1441

株

式

会

易

株

社

321‒3231

宇都宮市清原工業団地 8―3（028）
667―1811

株 式 会 社 茂 久 田 商 会

650‒0047

神戸市中央区港島南町 4―7―5（078）
303―8246

株

式

会

株

式

会

モ

リ

タ

564‒8650

大阪府吹田市垂水町 3―33―18（06）
6388―8103

リムラ

110‒0005

東京都台東区上野 3―17―10（03）3836―1871

Y A M A K I N 株 式 会 社 543‒0015

大阪市天王寺区真田山町 3―7（06）6761―4739

株東京都台東区上野 7―6―9（03）3845―2931

式

会

社
社
社

モ

ヨ

シ

ダ

110‒0005（五十音順）

日本歯科保存学雑誌論文投稿票（第1． 論文の分類（チェックして下さい）
2． 論文種別（チェックして下さい）

□修復
□原著

□歯内

□歯周

□総説

□ミニレビュー

巻

号掲載希望）□その他□症例・臨床報告

3． 論文タイトル
4． ランニングタイトル（サブタイトルでなく，論文内容を的確に示す略表題．
40 字以内とし，英文は 2 文字が和文 1 文字に相当する）

5． 著者名（全員）
6． 筆頭著者の所属機関名
7． 原稿の構成
・本文（和文・英文表紙，和文・英文抄録，本文，文献，付図説明を含む）

枚

・図

枚

枚（うちカラー掲載希望の図番号

8． 別刷希望部数部（□カラー印刷），表□モノクロ印刷）

9． 連絡先（投稿・校正責任者）
・氏名
・住所

〒

・電話

内線

Fax

・E‒mail
10．備考，連絡事項

日本歯科保存学会

殿

日本歯科保存学雑誌著作権帰属承諾書
年月日

下記に署名・捺印した著者は，下記の表題の投稿原稿が「日本歯科保存学雑誌」に掲載された際には，同誌の投稿規程により，著作権を貴学会に帰属することを承諾いたします。
・論文タイトル
・著者（全員）

印

印

印

印

印

印

印

印

印

印

印

印

印

印

印

著者全員の署名・捺印が投稿締切までに揃わない場合は，事務局までご相談ください．

（裏面にチェックリストがあります）

63 巻 6 号

貴稿が日本歯科保存学雑誌の投稿規程に沿ったものであるかを確認し，1～12 の項目については，必ず著者チェック欄にチェック（✓印）して下さい．さらに，その項目について，所属機関の編集連絡委
員のチェックを受けてから投稿して下さい．（編集連絡委員名簿は各巻 3・6 号に掲載しています）
なお，13～18 の項目については該当する場合にチェックして下さい．

チェック
著者

チェック

編集連絡委員

編集委員会□□

1．保存学会 HP 掲載の最新の投稿票を用いていますか．

□□□□

2．原稿（図，表を含む）は A4 サイズで作成していますか．

□□□□

3．原稿は和文（英文）表紙，和文（英文）抄録，本文，文献，英文（和文）表紙，
英文（和文）抄録の順になっていますか．

□□□□

4．和文抄録，英文抄録には，見出しが付いていますか．

□□□□

5．和文・英文各表紙の末尾に責任著者連絡先が記入してありますか．

□□□□

6．和文・英文各キーワード（索引用語）を 3 語程度，和文抄録・英文抄録の末尾に記入してありますか．

□□□□

7．表紙には，ランニングタイトルが記入してありますか．

□□□□

8．原稿には通しページ番号（表紙から文献まで）が記載されていますか．

□□□□

9．文献は所定の書き方で，引用順になっていますか．

□□□□

10．図表にはそれぞれ番号が記入してありますか．

□□□□

11．図表とその説明は英語で表記していますか．

□□□□

12．投稿論文に関わる利益相反（COI）自己申告書を添付していますか．

□□□□

13．トレースの必要な図は，余白にその旨記載してありますか．

□□□□

14．カラー掲載希望の場合にはカラーデータを，モノクロ掲載希望の場合にはモノ
クロデータを添付していますか．

□□□□

15．英文論文の場合は，ネイティブスピーカー等による英文校閲証明書を添付して
いますか．

□□

□□

16．ヒトを対象とする研究について，所属機関の長もしくはその長が委託する倫理委員会等の承認を得ていますか．

□□□□

17．ヒトを対象とする研究について，匿名化を行うなど研究対象者個人が特定されることがないよう配慮されていますか．

□□□□

18．ヒトを対象とする研究について，得られた資料を使用するにあたり研究対象者の承諾を得ていますか．

□□

編集連絡委員名㊞

編集委員会からのお願い：所属機関に編集連絡委員がおられない場合には，その旨明記の上，締切日に余裕をもって事務局までお送り下さい．

保険

算定

項目

が拡

大！