2021
June Vol. 64 No. 3
J‐STAGE https://www.jstage.jst.go.jp/browse/shikahozon/‐char/ja月刊「歯界展望」別冊

再根管治療を見直す
エンド専門医が伝える考え方・テクニック著

石井 宏・田中浩祐・田中利典・横田 要・大森さゆり“やり直しの根管治療”を成功に導くための考え方とテクニックがここに！
●わが国の根管治療に関する保険請求では，「抜髄処置（初回根管治療）」に比べ「感染根管治療（再根管治療）」が多く，“やり直しの根管治療”が非常に多い実態があります．
●歯内療法の臨床を専門に行う執筆陣による，『再根管治療』に特化した一冊．
●診査・診断，手技（テクニック），現在有効とされる器材等について，豊富な臨床例とともに，ビジュアルにわかりやすく
詳説しています！
■A4判変 / 176頁 / カラー■定価 6,930円（本体 6,300円＋税10％）
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Endodontic
Retreatment

真に患者さんの利益につながる
歯内療法実践のために！

〒113-8612

東京都文京区本駒込1-7-10

TEL.03-5395-7630

FAX.03-5395-7633

https://www.ishiyaku.co.jp/

日本歯科保存学会 2021 年度秋季学術大会（第 155 回）《事前登録のご案内》
日本歯科保存学会 2021 年度秋季学術大会（第 155 回）は，2021 年 10 月 28 日（木）～11 月 10 日（水），オンライン（担当校：新潟大学大学院医歯学総合研究科口腔健康科学講座う蝕学分野，大会長：野杁由一郎教授）において，
下記のとおり開催することとなりました．事前参加登録についてご案内いたしますので，下記の要領により登録手続
きをお願いいたします．多数の会員の皆様方のご参加をお願い申し上げます．
2021 年 6 月
特定非営利活動法人

日本歯科保存学会

理事長

1 ．会

期

2021 年 10 月 28 日（木）～11 月 10 日（水）

2 ．会

場

オンライン開催

3 ．参加登録
大会参加費は以下のとおりです．
事前登録（2021 年 6 月 1 日（火）正午～2021 年 9 月 30 日（木）14：00 までの登録）10,000 円（歯科医師），5,000 円（歯科衛生士）
当日登録12,000 円（歯科医師），6,000 円（歯科衛生士）※本学術大会における事前登録は，すべて大会ホームページ上での手続きとなります．
http://www.kokuhoken.jp/jscd155 にアクセスして，ご登録下さい．
4 ．第 155 回学術大会に関するお問い合わせ先
日本歯科保存学会 2021 年度秋季学術大会（第 155 回）大会事務局〒 170‒0003

東京都豊島区駒込 1‒43‒9（一財）口腔保健協会コンベンション事業部内
TEL：03‒3947‒8761

FAX：03‒3947‒8873

E-mail：jscd155@kokuhoken.jp

詳細につきましては下記アドレスより，大会ホームページにアクセスして下さい．
http:／／www.kokuhoken.jp／jscd155

石井信之

日本歯科保存学会

優秀発表賞

本賞は，本学会とカボデンタルシステムズジャパン株式会社・株式会社松風・株式会社ジーシーの 3 社との協定により設けられました．特定非営利活動法人日本歯科保存学会定款第 5 条第 1 項第 8 号に基づき，日本歯科保存学雑誌に掲載された優秀な論文を年間優秀論文賞，学術大会で発表された優秀な演題を優秀ポスター賞として，本会が表彰いたします．
日本歯科保存学雑誌 63 巻における優秀論文賞および 2020 年度春季学術大会（第 152 回）・秋季学術大会（第 153 回）における優秀ポスター賞の受賞論文・演題は，下記のとおりです．2020 年度の学術大会は，新型コロナウイルス感染症の感染状況を鑑み春季は誌上開催，秋季は Web 開催となりましたが，優秀ポスター賞
対象演題の審査については Zoom システムを利用して行いました．
今回受賞された皆様方には心からお慶び申し上げますとともに，今後ますますの研究成果を期待いたします．
表彰委員会
優秀論文賞

受賞論文

保存修復学分野（カボデンタル優秀論文賞）「A Preliminary Study on Remaining Enamel Thickness Measurement using Time-domain Optical
Coherence Tomography」（63 巻 4 号掲載）
著者：黒川弘康，髙見澤俊樹，飯野正義，新井友依子，高宮 寛，若松賢吾，横山宗典，飯島達也，
宮崎真至
筆頭著者所属：日本大学歯学部保存学教室修復学講座
歯内療法学分野（松風優秀論文賞）「難治性根尖性歯周炎における抗菌ナノパーティクル含有ナノバブル水による根管内除菌効果の検討」（63 巻 1 号掲載）
著者：庵原耕一郎，中島美砂子
筆頭著者所属：国立長寿医療研究センター幹細胞再生医療研究部
歯周病学分野（ジーシー優秀論文賞）「高齢双生児の歯周病病態と遺伝・環境要因の影響度」（63 巻 3 号掲載）
著者：池上久仁子，山下元三，三木康史，久留島悠子，高阪貴之，鈴木美麻，榎木香織，松田謙一，
北村正博，池邉一典，大阪ツインリサーチグループ，村上伸也
筆頭著者所属：大阪大学歯学部附属病院口腔治療・歯周科
優秀ポスター賞

受賞演題

152 回
保存修復学分野（カボデンタル優秀ポスター賞）「歯石に含まれるフッ素性アパタイトの19F-MAS および1H-31P CP/MAS 固体 NMR による解析」（P2）
演者：小川友子，林 文晶，平石典子，田上順次
筆頭演者所属：東京医科歯科大学大学院医歯学総合研究科う蝕制御学分野
歯内療法学分野（松風優秀ポスター賞）「in vitro・in vivo における各種バイオセラミック系シーラーのアパタイト析出能に関する研究」（P3）
演者：イブンベラル ラジサイフラー，枝並直樹，白柏麻里，吉羽邦彦，大倉直人，吉羽永子，遠間愛子，
竹内亮祐，野杁由一郎
筆頭演者所属：新潟大学大学院医歯学総合研究科口腔健康科学講座う蝕学分野

歯周病学分野（ジーシー優秀ポスター賞）「メタトランスクリプトーム解析を用いた歯周疾患ステージにおける細菌種間のネットワーク構造と機能組成の比較」（P7）
演者：根本 昂，芝 多佳彦，渡辺孝康，小柳達郎，駒津匡二，片桐さやか，竹内康雄，岩田隆紀
筆頭演者所属：東京医科歯科大学大学院医歯学総合研究科歯周病学分野
153 回
保存修復学分野（ジーシー優秀ポスター賞）「う蝕深さとコンポジットレジン修復後 2 年間における歯内治療発生率の関係性」（P1）
演者：佐藤隆明，田上順次
筆頭演者所属：東京医科歯科大学大学院医歯学総合研究科う蝕制御学分野
歯内療法学分野（カボデンタル優秀ポスター賞）「ニッケルチタン製ロータリーファイル形成時の根尖方向荷重の違いが根管追従性，根管形成中の応力，形成時間に与える影響」（P6）
演者：牧 圭一郎，海老原 新，春日柚香，大森智史，雲野 颯，中務太郎，木村俊介，興地隆史
筆頭演者所属：東京医科歯科大学（TMDU）大学院医歯学総合研究科口腔機能再構築学講座歯髄生物学分野
歯周病学分野（松風優秀ポスター賞）「歯肉幹細胞由来エクソソームは miR-1260b による RANKL 阻害により歯槽骨吸収を抑制する」（P7）
演者：中尾雄紀，福田隆男，渡邊ゆかり，林 千華子，川上賢太郎，豊田真顕，四本かれん，大和寛明，
新城尊徳，田中 麗，讃井彰一，西村英紀
筆頭演者所属：九州大学大学院歯学研究院口腔機能修復学講座歯周病学分野

日本歯科保存学雑誌
第 64 巻第 3 号

令和 3 年 6 月
目

次

総
説
歯内療法における技術革新と最近のトレンド・トピックス

湯本

誌上シンポジウム「生体の中の保存治療学」
シンポジウム概要
人は口から老い，口で逝く―咬合機能回復の真の意味論―
人生 100 歳時代における硬組織研究の挑戦
歯髄再生治療：実用化に向けた取り組み

浩通 （ 185 ）横瀬 敏志 （ 193 ）落合 邦康 （ 194 ）町谷亜位子，片桐 岳信 （ 201 ）中島美砂子，庵原耕一郎 （ 206 ）原著
太陽電池付光触媒内蔵音波振動歯ブラシのプラーク除去効果について
術者の臨床経験および接着システムの違いが象牙質接着強さと接着信頼性に及ぼす影響について

吉峰

正彌，鴨井

久博，久保田裕子 （ 212 ）高橋 礼奈，榎本愛久美，織田祐太朗
内山 沙紀，盧山晨，金森ゆうな明橋
冴，田上 温子，髙橋 彬文
則武加奈子，佐藤 隆明，田上 順次 （ 220 ）
リン酸系モノマー含有歯面処理剤がレジンセメントの接着性に及ぼす影響石井亮，笠原 悠太，廣兼 榮造
髙見澤俊樹，辻本 暁正，吉中 雄太
宮崎 真至，北原 信也 （ 227 ）カテキンによる SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク質と ACE2 受容体との山田 嘉重，木村 裕一，高橋 昌宏
結合抑制効果に対する基礎的検証
車田 文雄，菊井 徹哉，橋本 昌典
大木 英俊 （ 237 ）（ 248 ）
（ 249 ）
（ 255 ）

臨時評議員会・臨時総会議事録
役員名簿
投稿規程

発

〒 170‒0003

行

特定非営利活動法人 日本歯科保存学会
東京都豊島区駒込 1-43-9 （一財）口腔保健協会内

THE JAPANESE JOURNAL OFCONSERVATIVE DENTISTRY
Vol. 64, No. 3

JUNE 2021

CONTENTS

Review
Technological Innovations and Recent Trends/Topics in Endodontics
Symposium in the Journal
Overview of Symposium
People Age by the Mouth and Die by the Mouth
The Challenges for Research of Hard Tissue with a 100-Year Life
Stem Cell Therapy for Pulp Regeneration：Future Application
for Treatment of Periapical Disease in the AgedYUMOTO Hiromichi （ 185 ）YOKOSE Satoshi （ 193 ）OCHIAI Kuniyasu （ 194 ）MACHIYA Aiko and KATAGIRI Takenobu （ 201 ）NAKASHIMA Misako and IOHARA Koichiro （ 206 ）Original Articles
The Effect of Dental Plaque Removal by a Sonic Toothbrush with Solar Panels
YOSHIMINE Masaya, KAMOI Hisahiro and KUBOTA Hiroko （ 212 ）and Built-in Photocatalyst
Effects of Clinical Experience and Adhesive Systems on Dentin Bonding Strength
TAKAHASHI Rena, ENOMOTO Megumi, ODA Yutaro,
and Dentin Bonding Reliability
UCHIYAMA Saki, ROZAN Shin, KANAMORI Yuna,
AKEHASHI Sae, TAGAMI Atsuko, TAKAHASHI Akifumi,
NORITAKE Kanako, SATO Takaaki and TAGAMI Junji （ 220 ）Influence of a Tooth Conditioner Containing Phosphoric Acid Ester Monomer on
the Bond Performance of a Resin-based Luting Cement
ISHII Ryo, KASAHARA Yuta, HIROKANE Eizo,
TAKAMIZAWA Toshiki, TSUJIMOTO Akimasa, YOSHINAKA Yuta,
MIYAZAKI Masashi and KITAHARA Nobuya （ 227 ）A Basic Analysis on the Inhibitory Effects of Catechins on the Binding of
SARS-CoV-2 Spike Protein to ACE2
YAMADA Yoshishige, KIMURA Yuichi, TAKAHASHI Masahiro,
KURUMADA Fumio, KIKUI Tetsuya, HASHIMOTO Masanori
and OHKI Hidetoshi （ 237 ）Publishedby
THE JAPANESE SOCIETY OF CONSERVATIVE DENTISTRY（JSCD）
c/o Oral Health Association of Japan（Kōkūhoken kyōkai）
1‒43‒9, Komagome, Toshima-ku, Tokyo 170‒0003
Japan2021 年 6 月

185

総

説

日歯保存誌 64（3）：185～192，2021

歯内療法における技術革新と最近のトレンド・トピックス
湯

本

浩

通

徳島大学大学院医歯薬学研究部 歯周歯内治療学分野

Technological Innovations and Recent Trends/Topics in Endodontics
YUMOTO Hiromichi
Department of Periodontology and Endodontology, Tokushima University Graduate School of Biomedical Sciences

キーワード：歯内療法，技術革新，Microscope，Cone‒Beam CT，Ni‒Ti file

はじめに

好な治療成績を示している．
また，根管治療が奏功しない場合の次なる手段として，歯根尖切除術・逆根管充塡法や意図的再植などの外日本歯科保存学会が主領域としている歯内療法学・保科的歯内療法が選択されるが，超高齢社会を迎えた現

存修復学・歯周病学の 3 分野では，これまでに直面した

在，外科的手術を行うことは高齢患者への負担が大き

数々の課題に対してさまざまな歯科材料の開発とそれにい．特に，高血圧や糖尿病などの全身疾患を有する患者

伴う治療技術の革新が行われており，現在もなお，そのにはリスクも大きく，BP（Bisphosphonate）製剤を投与

スピードは加速している．

されている患者には抜歯も含めてその対応が困難とな

歯内療法は抜髄と感染根管治療に大別され，さらに感る．これらの観点からも，多くの患者に適応可能となる

染根管治療は初回治療と再治療に分けられる．一般的

低侵襲な新規の非外科的治療法の開発が望まれている．

に，再治療が初回治療より治癒・成功率が低いことが，現在，医療の分野では iPS 細胞に代表される再生医療が多くの統計学的解析により示されている．その要因とし脚光を浴び，世界中で臨床応用を目指した研究が活発にて，根尖性歯周炎に対する感染根管治療が，病変の原因

行われている．歯科の分野では，歯周病学の領域においである病原細菌や感染歯質の除去を主目的としているにて，GTR（Guided Tissue Regeneration），エナメルマト

もかかわらず，根管の全貌を肉眼で直視することができリックスタンパク質（エムドゲイン）や FGF（Fibroblast

ず，さらに根管系の形態が非常に複雑であることから，

Growth Factor）‒2（リグロス）など数々の手技ならびに原因物質などを完全に除去することが困難であり，とき材料が応用されているが，残念ながら歯内療法の分野でには通常の歯内治療には反応しない難治症例にも遭遇

は，再生療法の開発が遅れていることは否めない．しかし，最終的には抜歯を余儀なくされる症例も少なくない

し，歯内療法分野においては，さまざまな器材の開発とことなどが挙げられる．これらの課題への対応として，その実用化がなされ，さらに再生療法に関する研究もあ近年では，Microscope，Cone‒Beam Computed Tomog-

らゆる角度から遂行されている．

raphy（CBCT）や Nickel Titanium（Ni‒Ti）file などが本総説では，現代の歯内療法における概念を確認した

開発され，広く普及しつつある．さらに充塡材料として

うえで，近年の歯内療法における進歩といまだ残されては，新たに MTA（Mineral Trioxide Aggregate）セメン

いる問題点を整理するとともに，次世代へ向けた歯内療

トや数種の根管充塡用シーラーが開発・市場化され，良法の発展の可能性について考察する．

本稿は日本歯科保存学会 2020 年度秋季学術大会（第 153 回）認定研修会の講演内容をまとめたものである．
DOI：10.11471/shikahozon.64.185

日

186

本

歯

科

保

存

学

雑

誌

第 64 巻第3号

現代の歯内療法における概念
細菌が根管系に侵入することにより感染が成立し，さ根管らに菌体や細菌由来の病原性物質が根尖孔外歯周組織に漏出することにより，根尖歯周組織に炎症が生じる1）．
このことは，根管系に細菌感染が生じなければ根尖性歯周炎が生じないという，無菌ラットを用いた実験結果により示されている2）．この根尖歯周組織の炎症は，身体の他の部分の炎症と基本的には変わらず，生体のもつ防御機構が十分に働ける環境にあるため，原因となっている病原性物質を清掃・除去することにより治癒すると考えられる．すなわち，根尖性歯周炎は細菌感染症による根部象牙細管に侵入した細菌炎症であることから，感染根管治療の主目的は，根管内図 1

根部象牙細管に侵入した細菌に生息している細菌，Biofilm，細菌由来物質，感染象牙質，壊死歯髄組織や腐敗物質などの感染源を除去するこ分野でも以下に記すようなさまざまな歯科材料の開発ととであり，これらの感染源の除去に際しては，file など

それに伴う治療技術の革新が行われている．

による機械的根管拡大と NaOCl や EDTA などによる化学的根管清掃の併用が行われている．しかし，根管系に生息しているさまざまな細菌は，根管象牙質壁の象牙細歯内療法の技術革新

管から歯根表面近くまで深く侵入していることも示され根管治療における課題に対して，近年，歯科用 Micro-ており ，このように深部にまで侵入した細菌すべてを

scope，CBCT や Ni‒Ti file が開発され，根管系を 3 次元

3）

完全に除去することは不可能である（図 1）．そこで，現的に捉え，狭小な領域を観察・確認でき，さらに本来の代の歯内療法の概念として，除去不可能な細管深部に生根管形態を維持できることで，より正確かつ精密な診息している細菌を微小な部位に封じ込めて埋葬し，さら査・診断・治療が行えるようになった．このことは，過に栄養源を枯渇させて化石化させる対応策4）が現実的に度な拡大・形成を避けて残存歯質を可及的に保存する実施されている．

「必要最小限の侵襲処置（MI：Minimal Intervention）」

また感染根管治療の成否は，根管系に細菌などの感染の概念にも合致している．

物質がどの程度残存し，それが生体にどの程度影響を及

特に，前述したように根管治療は目で見えない部分をぼすかによって決まるが，現在の歯内療法では宿主側の処置するので，治療前の診査・診断はきわめて重要であ

治癒能力などを調節できないことから，「根管系を生体るが，これまでの Dental X 線画像は重積像であること

内外に分ける根管狭窄部を決定して感染源を除去し，緊から，立体的に歯や根管とその周囲の構造に加えて，根密に充塡する」ために，根管治療における最重要 Step と尖病変の大きさや位置を把握することが困難な場合も多して「作業長の決定」「機械的拡大・清掃・消毒」と「根く，より正確に診査するには，3 次元的に有意義な情報

管充塡」が挙げられる ．

が得られる CBCT がきわめて有効である．図 2 に示す症

5）しかし歯内療法は，他の歯科治療における条件とは異例は，1 の歯肉腫脹と排膿状態が改善しないために近医なり，根管口から根尖孔までの根管系を直視できない場から紹介を受けた患者で，すでに 100 番まで太く根管が合が多く，この特殊な条件が根管治療を最も困難にさせ拡大されており，Dental X 線画像からは Point 先端に根ている要因の一つである．さらに，根管系の形態が多様管と思われるスペースが確認された．そこで CBCT 撮影

かつきわめて複雑であることから，機械的手法によりを行った結果，根尖部は口蓋側へ湾曲しており，唇側方

完全に細菌を除去することができない．そこで，補助的向に穿孔を起こしていることがわかった．このように，な化学的洗浄や根管貼薬剤が応用されているが，残存細一般的な Dental X 線撮影による平面的な画像では，骨菌の減少や増殖抑制にはある程度の効果が認められるもの吸収状況が唇側・頰側か舌側・口蓋側にあるのか，まのの，歯周組織に対する為害性・副作用・耐性菌出現のた根尖病変の原因が側枝などによるものかは観察・診査

危惧や象牙細管内深部まで侵入した細菌に対する薬剤のできない．CBCT 撮影は，その他にも過剰根管や樋状根，効果・持続時間・浸透性・拡散性など多くの課題が残さ

副根歯の場合の原因根の同定，歯根尖切除・逆根管充塡れている．このような数々の課題に直面し，歯内療法の術の術前診査，file や歯根破折の確認，フェネストレー

6,7）

2021 年 6 月
a

歯内療法における技術革新と最近のトレンド・トピックス
b

c

扁平な根管

d

187
扁平根

偏位根管

穿孔
図 3

扁平根や偏位根管に対する根管拡大・形成時の危険性を招く可能性があることから，そのような症例において
は超弾性の特性を有する Ni‒Ti file が有効になる．しかし，Ni‒Ti rotary file は予兆なく突然に破折を生じる可能性があるため，以降の偶発的事故を防止するために，あらかじめ 15 番以下の手用またはグライドパス用の Ni‒
Ti rotary file で予備拡大を行うことが重要である．また，細長い扁平根管に対して K‒file などの円形器具を用
図 2

CBCT の応用により根尖部の湾曲と穿孔が判明
した症例

いて拡大・形成した場合の問題点として，イスムスやフィンの形態部分の清掃不足が挙げられるので，フィンを有する場合の全周ファイリングには，根断面から根管形態をイメージして，25 番程度のフィンに入り込む細いション（開窓）や外部・内部吸収の確認などに有効であり，その適応は広い．

file を使用して全周に沿って file を操作する必要がある．
根管や根尖孔は正円形とは限らず，多くの場合は楕円形

さらに，歯科用 Microscope と併用することにより，であるとの報告があり，円形の長径と短径を意識した形

正確に根管や根尖の位置を確認して治療を行うことが可成が必要となる．すなわち，扁平根や根管が偏位してい能となる．狭小な領域に対して処置を行う歯内療法では，歯科用 Microscope が有効な適応場面が最も多く，
たとえば，髄室形態の確認には 5～10 倍，根管口から根管内上部における見落とした根管口の発見やイスムス・
フィンの処置などには 10～15 倍で，根管壁の汚染・清掃状態や根管内亀裂・破折線の確認，さらには Endodontic
MicroSurgery 時の歯根尖切除・切断断面の確認には
15～20 倍での使用が目安とされている．しかしながら，
歯科用 Microscope により狭小な領域において精密な処置が可能となるが，微細な部分での器具の操作には少し熟練が必要であることから，今後，卒前の学部学生や若い歯科医師・研修医への歯科用 Microscope の適切かつ有効な使用と器具操作に関する指導や教育が重要となる．
根管拡大・形成についても，根管系を 3 次元的に捉え，本来の根管形態と相似形に形成する概念に基づいて，可能なかぎり病原因子を除去し，適切な Flare 形成とし，過度の拡大・形成を避けて最小の侵襲とすること，さらに，根尖孔の変位を生じないように根管の中心軸を維持し，根尖孔を破壊しないことが重要となる．特に，湾曲根管ではジップやレッジを生じやすく Transportation

る場合には，根管・根尖の形態に合わせて拡大・形成しなければ，穿孔を生じる危険性が高くなる（図 3）．このような症例に対しては，根管の形状に合わせて file の形
状が変化する Self‒Adjusting File（SAF）も開発されている．この file の特長は，薄壁で先の尖った弾性と圧縮性のある独特な格子状かつヤスリ状の Ni‒Ti 製の空洞
file の形状であるため，根管の形状に沿って file が柔軟に
変形・圧縮され，最小侵襲での根管形成（Minimally
Invasive Endodontics）が可能となることである．さらに，根管の形状に合わせて file の形状が変化することに加えて，根管の形成と洗浄を同時に行える機能も有している．その他にも，キャビテーション効果を有する超音波を利用した根管洗浄や，殺菌効果などを目的とした根管へのレーザー照射（半導体・Er：YAG・Nd：YAG・
炭酸ガスレーザーなど）も応用されている．
さらに，緊密な根管充塡，すなわち根尖孔および側枝領域に残存した細菌の封じ込めには，シーラーも大きな役割を果たす．これまで長期にわたり使用されてきたキャナルスなどの単に塞ぐという密着性シーラーや，
スーパーボンド根充シーラー・メタシール soft などの樹

日

188

本

歯

科

保

存

学

a：Microscope 下で超音波チップを利用

雑誌

第 64 巻第3号

b：Microscope 下でマセランキットを利用

c：Microscope 下でバイパス形成

超音波チップで除去を試みるもいまだ残存

ML根管先端部にfile破折

バイパス形成確認
図 4

根管充塡後

File などの器具の根管内破折に対する対応

脂含浸層と長いレジンタグを形成する接着性シーラーにチップなどを利用して除去できる場合もあり，また除去

加えて，近年，この緊密な封鎖と細菌の埋葬・化石化とが困難な場合は，Microscope 下でバイパスの形成を試みいう概念に基づいて，MTA を配合したシーラーも市場ることができる（図 4）．穿孔に対する対処として，穿孔化されている ．近年，Bioactive Glass を配合した「結が歯槽骨縁下に位置する場合は，MTA を用いて封鎖す

合性シーラー」も開発された．これは，根管壁象牙質表ることで良好な結果が得られるという多くの報告もあ面の水分子と接触するとシーラー表面にハイドロキシア

る．しかし，この MTA の使用は日本では適用外使用にパタイトの微小結晶が析出して伸長し，象牙細管内にハあたるため，特定機能病院などでは適用外使用を申請しイドロキシアパタイトのタグ様構造が形成されるという承認を受け，患者の同意を得ることが必要となる．

4）

新しい概念に基づいたものである9）．これらの開発によ

特に根尖部領域で過度な根管拡大や過度な側方加圧をり，根管系を経由した細菌の封鎖（漏出の防止）の観点行った場合には，根尖部の歯根に破折を生じる（図 5）．

から根管治療の予後を高めることが期待される．また，

このことからも，過度の拡大・形成を避けて，残存歯質

主に根管系における抗バイオフィルムの有効性に関しを可及的に保存する MI の概念に基づく処置が重要になて， 抗 生 剤 ま た は 光 増 感 剤 で 機 能 化 さ れ た 抗 菌 性

る．

nanoparticle を洗浄液やシーラーへの添加剤として適用

根尖性歯周炎は通常の根管治療により高い確率で治癒

10）するが，根尖病変の有無やその大きさに関して再感染根

しかし残念ながら，感染根管治療，特に再治療の成功

管治療の成功率を調べた Meta‒Analysis では，5 mm 以率に関しては，以前の不適切な根管拡大・形成の修正が上の大きな病変は有意に成績が悪く，予後不良であると技術的に非常に困難であることや，file 破折・穿孔など報告されている11）．すなわち，根管の著しい湾曲・狭の偶発事故，さらには長期間にわたる根管系や根尖病変

窄・穿孔や除去不可能な器具破折片などにより根管治療

内などに侵入した細菌の除去・殺菌が困難などの理由かが不十分となりやすい難症例とは異なり，通法どおりにら「難治性病変」となった症例も少なくない．File など

適切かつ十分な清掃・拡大・消毒を施したにもかかわらの器具の根管内破折に対しては，Microscope 下で超音波

ず，根尖病変が縮小しないなどの症状が継続する「難治する研究も継続されている ．

2021 年 6 月

歯内療法における技術革新と最近のトレンド・トピックス

図 5

189

根尖部領域で歯根破折を認めた症例

性」の根尖性歯周炎に遭遇する．難治性根尖性歯周炎の低出力超音波の間接的照射も試みられているが，厚い顎原因としては，通法の根管治療で処置できない副根管

骨や歯槽骨に囲まれている歯根や根尖病変に対する治癒（分岐根管），根部象牙質，根尖付近の生理学的根尖孔外促進効果は明らかではない．近年，医療の分野では iPSや根尖部セメント質などに細菌が残存していることが考細胞に代表される再生医療が脚光を浴び，細胞・成長因えられる．また，細菌は根尖孔外にも Biofilm を形成し子・足場を用いた組織工学による研究が主流となり，世て宿主の攻撃を回避するとともに，Quorum Sensing 機界中で臨床応用を目指した研究が活発に行われている．

構などにより薬剤耐性を獲得して，難治化に関与するこ歯内療法の分野においても，歯髄幹細胞を移植する歯とも示唆されている12‒17）．そこで，難治性根尖性歯周炎

髄・象牙質再生治療法の臨床研究，成長因子などを用いの原因と病態を考慮すると，次の対応として歯根尖切除

た歯髄・根尖部歯周組織再生，歯髄血管再生療法（Pulp

療法や逆根管充塡などの外科的歯内療法が選択される．

Revascularization）や上述した歯根尖切除術への骨補塡

近年，CBCT 撮影による診査と Microscope 下での処置

材・Membrane Barrier の併用など，さまざまな研究がにおいて，骨補塡材や Membrane Barrier（GTR）も併

継続的に行われている．その一方で，組織再生を促すた

用されている．以前は，骨削除量も多く，さらに歯めに，熱・圧力・超音波や電磁波などの物理的刺激によ

根切断面を直視できるよう斜めに切断していたが，る理学療法も活発に研究されている．なかでも電流刺激

Modern Technique（Endodontic Microsurgery）と呼ばによる治癒促進や再生効果に関しては，電流の流し方，

れる最近の手法では，幅 4 mm 程度のマイクロミラーが周波数，電流の大きさ，刺激時間や期間などのさまざま

入る骨窩洞を形成し，マイクロミラーと超音波レトロ

な条件が検討され，in vitro において間葉系幹細胞・骨チップを用いた根尖切除面への窩洞形成と MTA による芽細胞・筋細胞や心筋細胞などからの成長因子の産生，

逆根管充塡を行うという，MI の概念に基づいたより精分化の促進，機能変化や細胞増殖について研究され，in度の高い術式となっている．

vivo 動物実験では，骨折の治癒促進や脊髄損傷後の神経18,19）

高周波電流を応用した非外科的歯内療法の再生効果について報告されている．そこで，歯内療法としての非外科的療法を想定した場合，高周波電流を根管や根尖病変部に通電することにより，直接的に根管お超高齢社会を迎えた現在，患者への負担やリスクを考

よび根尖歯周組織に存在する細菌に対する殺菌効果と間慮して，高齢者や全身疾患を有する多くの患者（BP 製

接的な抗炎症効果，根尖病変の治癒促進や骨再生効果が剤使用患者も含む）に適応可能となる，低侵襲な新規非得られる手法を考案した．

外科的治療法の開発が望まれている．これまでに，病原まず初めに，500 kHz の高周波電流通電により，口腔細菌の殺菌や感染歯質などの除去に関しては，レーザー

内病原細菌に対する顕著な殺菌効果や病原性の抑制を認や光を応用した Photodynamic Therapy の応用が試みら

め，根管内や根尖孔外の病変に生息する病原細菌の殺菌れてきたが，狭小または湾曲領域への到達性など，多くに有効である可能性が示された20）．次に，骨芽細胞様細の課題も残されている．また，骨再生促進効果を有する胞に対する影響を調べたところ，500 kHz にて 1 秒間 5

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b

＊

D

25
縮小率
（%）

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C

非通電群

20

AB

15

AB

500μm

50μm

10
5
0

高周波電流
通電群

AB

根管治療
根管治療
＋
のみ
高周波電流通電

AB 500μm

50μm

図 6 ラット根管治療モデルへの高周波電流通電
a：根管治療（根管充塡）終了後 3 週目の根尖病変体積の縮小率（＊：p＜0.05）
b：免疫組織化学染色による TGF‒β1 産生陽性細胞
初診時

唇側穿孔部封鎖
MTA＋グラスアイオノマーセメント

初診時

根管充塡直後図 7

根管充塡1カ月後根管充塡3カ月後根管充塡6カ月後

高周波電流通電を応用した臨床症例

回の高周波電流通電の結果，細胞増殖を促進して活性化本も認められた22）．

し，さまざまな成長因子の発現・産生を誘導することがまた，大阪大学・歯科保存学教室の林教授と新潟大示され，新規の非外科的歯内療法に応用できる可能性が学・う蝕学分野の野杁教授のグループが新規に開発した示唆された21）．

ラット根管治療モデルを用いて，高周波電流を通電し，Sato らの in vivo 動物実験において，ラット頭蓋骨の12 週目までμCT 撮影を行って根尖病変の治癒状態を観左右 1 カ所にトレフィンバーで骨欠損を形成し，片側の察した結果，根管治療に加えて高周波電流を通電した群

骨欠損部に電極を穿刺して高周波電流（520 kHz，1.4 W，では，根管治療のみを行った群と比較して，根管治療（根15～30 mA）を通電した結果，8 週間後のμCT 撮影にて管充塡）終了後 3 週目では根尖病変の縮小率が有意に大ラット頭蓋骨骨欠損部に骨再生が確認され，骨欠損部がきく，病変の治癒スピードが速くなっていることが示さ

ほぼ埋まっているものも認められた．さらに 8 週間後のれた（図 6‒a）．さらに免疫組織化学染色の結果，通電群

組織標本においても，高周波電流刺激により新生骨の形においては根尖病変と歯槽骨との境界に TGF‒β1 産生成が観察され，骨欠損部が完全に新生骨で満たされた標陽性細胞が多く認められた（図 6‒b）23）．

2021 年 6 月

歯内療法における技術革新と最近のトレンド・トピックス

191

そこで，難治性根尖性歯周炎への臨床応用を目指し

ジンコアにより築造された歯の再根管治療を行う際にて，根管および根尖病変内に高周波電流を直接通電するは，接着性セメントで強固に装着されたファイバーある方法を考案し，徳島大学病院医学系研究倫理審査委員会

いはレジンコアを除去する必要がある．除去する際にの承認を得て 2010 年 1 月より臨床試験を行った．術式とは，メタルコアと比べて肉眼では歯質との境界が不明瞭

しては，まず通法どおり根管長の計測，根管拡大・形成であることから，穿孔などの偶発事故の防止や MI の観を行った後，浸潤麻酔下にて 10 番の K‒file を用いて回点からも Microscope の使用が必須となり，場合によっ

転・加圧せずに根尖を穿通し，骨様の抵抗触感を得る根ては，術前の CBCT 撮影が推奨される．歯科保存治療認

尖周囲病変の骨吸収最先端部までの距離を計測し，その定医・専門医として，先入観にとらわれることなく，診後，冷却した生理食塩水で根管内を満たして，根管と根査・診断を行うことの重要性も再認識し，状況に応じた尖病変内に高周波電流を直接通電し，ただちに根管を乾適切な治療方針や術式を検討しなければならない．

燥後，根管充塡を行った．通電する位置は，根尖周囲の骨吸収最先端から 1 mm 離れた部位を通電開始点として2 mm 間隔で，根尖病変および根管内に高周波電流を 500
kHz（20 W），1 回 1 秒間/通電点で直接通電し，通電ごとに能動電極の先端に付着した凝固物などは拭い取り，通電による過蓄熱を防止するために 2～3 秒以上の通電間隔を確保した．能動電極は，先端 3 mm 以外を絶縁体（シリコン）でコーティングした 10 番の K‒file を使用した．
臨床研究のなかから，難治性と判断された病変に高周波電流通電を応用した症例を示す（図 7）．症例は，57 歳の男性で 2 の歯肉腫脹と瘻孔からの排膿を主訴に来院した患者で，10～20 年前に治療して以降，ときどき腫脹と瘻孔からの排膿を認めていた．Dental X 線画像では，根尖から遠心根側にかけて連続した大きな透過像を認
め，根管充塡剤は認めなかった．メタルコアを除去すると，Original な根管の唇側に穿孔を認めたため，MTA とグラスアイオノマーセメントにて封鎖し，本来の根管については通法に従い根管治療を行った後，高周波電流を通電し，即時に根管充塡を行った．根管充塡 6 カ月後のDental X 線画像では，透過像はほぼ消失していた．
以上より，高周波電流通電の効果として，顕著な殺菌効果や病原性の抑制を認め，病変部位に生息する病原細菌の殺菌に有効であることや骨芽細胞に対して細胞増殖を促進して活性化させることが示され，非外科的歯内療法に応用できる可能性が示唆された．今後，より効果的な治療法の確立を目指して，電極やその配置，通電部
位・方法や通電時間・回数などについてさらなる検討が必要であると考えられる．

おわりに近年，歯根破折の防止や金属アレルギーの問題，さらには歯科用金属の価格高騰も重なって，補綴領域分野を中心にメタルフリーの治療が増えてきており，根管処置が終了するとファイバーあるいはレジンコアで築造される症例が増加している．しかし，ファイバーあるいはレ謝

辞稿を終えるにあたり，高周波電流を応用した非外科的歯内療法に関する共同研究に関して，ご協力を賜りました大阪大学大学院歯学研究科口腔分子感染制御学講座 林 美加子教授，新潟大学大学院医歯学総合研究科口腔健康科学講座う蝕
学分野 野杁由一郎教授と北海道大学大学院歯学研究院口腔健康科学分野歯周歯内療法学教室 菅谷の意を表します．

勉教授に深く感謝

本論文の内容に関連し，開示すべき利益相反関係にある企業などはありません．

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第 64 巻

第3号

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ecosystem analysis in root canal infections refractory tolary teeth in the Han nationality in Chinese Guanzhongarea: a new modified root canal staining technique. J17）He Z, Liang J, Zhou W, Xie, Q, Tang Z, Ma R, Huang Z.

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誌上シンポジウム

日歯保存誌 64（3）：193～193，2021

生体の中の保存治療学

シンポジウム概要
横

瀬

敏

志

明海大学歯学部機能保存回復学講座保存治療学分野

Overview of Symposium
YOKOSE Satoshi
Division of Endodontics and Operative Dentistry, Department of Restrative Dentistry and Biomaterial Sciences,
Meikai University School of Detistry

キーワード：次世代型保存治療，人生 100 歳時代，口腔と全身疾患，硬組織研究，歯髄再生治療

わが国では平均寿命の延長と医療の革新で，平均寿命

門的立場から，歯周病細菌と全身疾患の関係や口腔機能が 100 歳を超える時代を迎えようとしている．口腔機能を回復させることが全身疾患にいかに大切なことかを，を健康に維持することは健康寿命の延長には必須であ

エビデンスとともに概説していただく．片桐岳信先生

り，そのためには歯をう蝕や歯周病から守ることが「人（共同研究者：町谷亜位子先生）には，保存治療にとって生 100 歳時代」の基本的概念といっても過言ではないだ

重要な組織であるエナメル質の形態形成のメカニズム，

ろう．歯を健康に保存することが使命である歯科保存学

特に BMP シグナルとの関係を説明していただき，MI とでは，まさしく今その重要性に再度目を向け，今後の方の関係を考えたい．そして中島美砂子先生には，これま向性を確認する時がきたといえる．

で長きにわたり先生が追求してきた歯髄組織の再生療法

第 153 回日本歯科保存学会学術大会のテーマは「人生の研究の取り組みとその成果を発表していただき，歯髄100 歳時代を迎え，次世代型の歯科保存治療学を求める」

再生療法の実現に向けた最新情報をお教えいただくようとし，シンポジウムでは「次世代型の保存治療学」を踏お願いしている．

まえ，全身と歯科疾患との関連性から保存治療学を考え

3 名のシンポジストが示す研究内容とその概念はすべるために，「生体の中の保存治療学」というテーマにして，健康寿命を延ばすために保存治療がいかに重要な位た．これまでの保存治療学からさらに全身疾患との関連置を占めるかを適切に示してくれていると確信してい性を考えた次世代型の保存治療学とは何かを，みなさんる．
「人生 100 歳時代を迎え，次世代型の保存治療を求めと考えてみたい．

る」という学術大会のテーマに対して，なんらかのヒン

今回はこのようなテーマの下，3 名のシンポジストをトと新たな道標になることを切に期待したい．

選出した．落合邦康先生には，細菌学やウイルス学の専

本稿は日本歯科保存学会 2020 年度秋季学術大会（第 153 回）シンポジウムの講演内容をまとめたものである．
DOI：10.11471/shikahozon.64.193

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誌上シンポジウム

第 64 巻第3号

日歯保存誌 64（3）：194～200，2021

生体の中の保存治療学

人は口から老い，口で逝く―咬合機能回復の真の意味論―
落

合

邦

康

日本大学

People Age by the Mouth and Die by the Mouth
OCHIAI Kuniyasu
Nihon University

キーワード：口腔常在菌，歯周病，難治性全身疾患

はじめに害による長期療養者においても同様である（厚生労働省
人生の最終段階における医療の決定プロセスに関するガ
イドライン：平成 19 年発表，27 年改訂，http://www.

歯周病が糖尿病，脳・血管障害や早産，肥満そして認

mhlw.go.jp/file/06-Seisakujouhou-10800000-Iseikyoku/知症などさまざまな全身疾患のリスクファクターとなる

0000078981.pdf）．がん細胞による臓器不全およびがん治

ことが明らかとなってきた1‒3）．

療による免疫力の低下は，直接的に感染症に対する抵抗

日本は世界に例をみない速さで高齢化が進み，急増す

力が低下する．感染症研究者は，死亡原因を直接的死因

る高齢者の医療費問題は喫緊の課題となっている．このと間接的死因に分けて考えるが，悪性新生物患者および問題を解決するために重要なことは，いかに高齢者の健その他の死亡原因の上位疾患においても，直接の死亡原康を維持し平均寿命と健康寿命の差を縮め，要介護者を因の大部分は肺炎や敗血症などの感染症である．主な死

減らすかという点に絞られる．医療未発達の国々の主な亡原因を総合すると，本邦においても医療未発達の国々

死亡原因は，肺炎，下痢，マラリア，麻疹，AIDS などと同様，感染症といえる．

感染症で，5 歳未満の乳幼児は約 2 秒に一人命を落とし

現在，世界中を混乱の渦に巻き込んでいる新型コロナていることが報告されている（WHO 統計，2004 年）．医ウイルス感染症（COVID‒19）の死亡率は平均 0.66％

療先進国の本邦における死亡原因の上位は悪性新生物，（2020 年 12 月現在）で季節性インフルエンザの 0.1％前心疾患，老衰，脳血管障害，肺炎となっている（厚生労後の死亡率に比べ高い．先に述べたように，高齢者の死

働省人口動態調査，2018 年）．それ以前の統計調査にお

亡原因における肺炎の大部分は誤嚥性肺炎で，70～80 歳

いては肺炎が第 3 番目であったが，在宅医療の促進政策

での約 70％，90 歳以上の約 95％が誤嚥性肺炎で亡くにより医療機関による継続的な患者ケアと観察が困難となっている．COVID‒19 による高齢者（65～84 歳）の死なった結果，死亡原因の多くが老衰と診断される傾向が亡率は約 15.1％と高いものの，誤嚥性肺炎のそれとは比強まったと考えられる．老衰患者の多くは，反復性の誤較にはならない．外因性感染症と内因性感染症を単純に

嚥性肺炎罹患率が高いことが報告されており，脳血管障

比較することは困難なものの，医療従事者は専門分野の本稿は日本歯科保存学会 2020 年度秋季学術大会（第 153 回）シンポジウムの講演内容をまとめたものである．
DOI：10.11471/shikahozon.64.194

2021 年 6 月

口腔感染症と全身疾患

195

いかんにかかわらず，本邦の最大の死亡原因が口腔や咽細菌種と総細菌数/総面積

頭の常在細菌による誤嚥性肺炎であることを強く認識す1．口腔る必要がある．したがって，「寿命とは常在菌と共存できる期間」といい換えることができる．

口腔内細菌叢と腸内細菌叢4,5）
われわれの粘膜および体表のすべてが常在菌で覆われていることは，広く知られている．しかし，数多くの講演をさせていただいてきた経験からいえることは，常在菌に関する一般的な興味や知識は腸内細菌に関するものが多く，口腔常在菌に関する関心や知識はきわめて乏しい．また，歯科医療従事者においても，口腔細菌に対する認識は十分ではないとの印象をもっている．
デンタルプラーク（以下，プラーク）には，未同定の菌種を含め約 700 種類，総計約 5000 億の細菌が生息している（図 1）．一方腸管には，約 1000 種類，総計 1000 兆個程度の細菌が生息している．口腔の総面積は 200 cm2，
しかし腸管は 8～8.5 m の長さがあり，総面積は 32 m2程度とされる．単位面積当たりの細菌密度は，腸管より口腔が高い事実はほとんど知られていない．
また，腸管粘膜は厚いムチン層に覆われており，糞便

1）総面積：200 cm2

歯垢：１０11～12／ｇ
唾液：１０～9／ｍｌ（ティッシュペーパー
：1/2～3/4 枚）2）総細菌種：約 700 種類
3）総細菌数：約 5000 億

2．腸管1）総面積 32 m2

糞便：１０１2／ｇ（畳：約 20 畳）2）総細菌種：約 1000 種類
3）総細菌数：約 1000 兆

単位面積当たりの細菌密度

口腔≧腸管

デンタルプラークと糞便の染色像（Gram 染色法）

図 1 口腔と腸内環境の相違
腸内細菌と異なり口腔内の細菌種は，付着能および凝集能が強く，典型的な細菌の凝集塊バイオフィルムである歯垢（デンタルプラーク）を形成する．総細菌数は腸内細菌叢が多いものの，単位面積当たりの細菌密度はデンタルプラークが高い．なお，細菌数は測定法により異なる．

は直接腸管粘膜に接触することはない．一方，口腔細菌
は，舌，歯肉や口腔粘膜に直接接触し，常に組織内に侵

要介護につながるフレイルの第一段階は，社会的・心理入している．感染は細菌の組織付着から始まることを考的フレイルといわれ，高齢者の孤食やうつ病など社会とえると，いかに口腔は感染のリスクの高い器官か理解での交流意欲が減少して起こる．それに伴い健康意識や運きる．

動量も低下し，食欲減退による栄養面のフレイルが起こご存じのように，口腔細菌は 1 日のなかでも起床時，る．これが第二段階のフレイルで，この状態が続くと第食後，ブラッシング後に唾液中の総細菌数が変動する．

三段階の身体的フレイルから要介護状態となる．栄養摂また，ブラッシングを停止すると 1 週間程度で好気性菌，

取や運動などにより第二段階から第一段階へ，第一段階

通性嫌気性菌，偏性嫌気性菌の比率が変化し，遷移が誘からプレフレイルへと改善することは可能である．しか導される．レンサ球菌やグラム陽性桿菌が中心となり形

し，第三段階からの復帰は困難とされている．一連のフ成されるプラークの早期定着細菌叢は，健康な口腔環境

レイルの進行を防ぐ最も効果的な手段は，社会的参加意を維持するという重要な役割をしている．しかし，異菌欲を維持し精神的に健康でいること．そして何よりも，種間で起こる共凝集によりプラーク細菌の蓄積量が一気口からものを食べ，栄養をつけることが重要とされる．

に増えると歯周病原細菌などが増加し，プラークは病原この第一・第二段階の時点でフレイルの進行を防止する性の後期定着菌叢へと遷移が起こる．腸内細菌叢においことが，要介護患者数の抑制につながるとされる．そのては，短期間にこのような現象が誘導されることはな

最も効果的な方法は，口腔ケアによるう蝕および歯周病い．つまり，短時間に起こる正常細菌叢から病原性細菌予防と咬合機能回復で，歯科医療の介在が必須と考えら叢への遷移は，近接する細菌間の増殖促進と抑制によっれえている．保存・補綴治療による咬合機能回復の背景て繰り返される生存競争で，凝集と共凝集というプラーには，「咬合機能回復＝要介護の防止」という大きな役割

ク形成細菌特有の性状によるものといえる．

を果たしていることを認識する必要がある．高齢者医療

フレイルと咬合機能回復
近年，サルコペニア（加齢性筋肉減少症）とフレイル（虚弱）という概念が各方面で話題となっている（図 2）．

従事者や関連医療学会関係者から，歯科医療の重要性が報告されていることはきわめて興味深い．要介護防止の視点からも，一層の医科歯科連携が求められる．

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生命維持の根幹である免疫力は低下し感染防御力も著しく低下する．つまり，非経口摂取により，栄養学的にも社会性/心の
フレイル期

・孤食
・うつ病
・社会参加の欠如
・健康意識の欠如

栄養面の
フレイル期

身体的
フレイル期

オーラルフレイル

要介護
死

免疫学的にも生命維持が困難な状態が誘導される．残念ながらこの事実はあまり知られていない．細菌学，免疫学，栄養学，フレイルや高齢者医療などさまざまな知識から得られた「口からものを食べることの真の意味」を
医科・歯科を問わず，すべての医療従事者や介護関係者は理解する必要がある．したがって，「歯科医療は日本を救う」といっても過言ではないといえる．

虚弱度

歯科界には長い間，「臨床技術や歯科材料の開発が歯健康

身体機能障害
前虚弱
虚弱（要介護）（プレフレイル） （フレイル）

図 2 フレイルと歯科医療
健康な高齢者が要介護にいたるまでにはさまざまなフレイル状態が存在する．咬合機能回復と専門的口腔ケアは，すべての段階において，フレイルが進行することを防止することができる．また，さまざまな臨床研究から第一・第二段階においては歯科医療の介在によりその前段階へのフレイル回復が見込めることが報告されている．歯科医療は，高齢者医療においてきわめて重要な位置を占める．

科医療発達そのものである」との考えが根強く，細菌学
や生理学などのいわゆる基礎科学に対する知識はないがしろにされてきた．約半世紀にわたる歯科大学教育と研究に携わり，このことを肌で実感してきた．確かに良い義歯が作れることは良い歯科医師の条件であることは間違いない．しかし，高齢者の著しい増加や歯周病と全身疾患の関係がより鮮明となった現状において「咬合機能回復は消化吸収を促進する」や「脳を活性化する」程度の歯科界からの説明では，医学界が納得し医科歯科連携を積極的に推進するとは考えにくい．また，医療行政関係者から「医科に比べ，歯科からは歯科医療の重要性を納得させる根拠が十分ではない」と説明を受けたことが「口からものを食べる」こととは周術期医療チームや終末期の患者の健康管理に，歯科医師や衛生士が加わる機会が増えた．この背景には，歯科医療の介在により術後の回復が促進され，在院日数が減少し，医療機関および患者の負担軽減につながるとの経験がある．以前に比べ，明らかに医療従事者の口腔に対する認識の変化がある．しかしながら，医科歯科連携が遅々として進まない．背景にはさまざまな問題がある
ことは認識しているが，基礎研究者の視点でいえることある．これらの視点から，われわれは主に「口腔感染症と全身疾患」に焦点を当てた研究活動を行ってきた．口腔領域の研究者は，基礎・臨床を問わず，口腔と全身との関連性を科学的に解明する姿勢が求められる．臨床に携わる歯科医師は，総合内科医的な知識をもち診療を行う姿勢が必要となるだろう．その結果，医科歯科連携が促進され歯科医療従事者の活動範囲は飛躍的に広がると確信している．

口腔感染症と全身疾患の考え方は，両者の食物の経口摂取に対する科学的根拠と根本的

歯周病を中心に，口腔感染症と全身疾患について触れな認識に差があると考えている．食物の経口摂取の重要たいと思う．歯周病がリスク因子となる全身疾患は慢性性を認識するには，非経口的栄養補給法における人体の疾患で，発症までに「長時間を要する」ものが多い．数変化を認識すればさほど困難なことではない．

多くの因子が関与するため，発症機序はきわめて複雑で代表的な非経口的栄養補給法として末梢静脈栄養ある．したがって「歯周病が原因の疾患」と断言するこ（PPT）と中心静脈法（TPN）があり，ある程度の延命とはやや問題がある．通常，生体内では生理的な恒常性は期待できるものの生体内にはさまざまな変化が起こ維持が働くため，容易に全身疾患が発症することはな

る．血管内に直接ブドウ糖やアミノ酸製剤を入れるた

い．特に，免疫システムには多くの細胞や因子がかかわ

め，もはや腸管，特に小腸を維持するための栄養補給はり感染防御にあたる．このシステムは急性炎症や急性疾

重要でなくなる．その結果，小腸粘膜の絨毛は短期間に患にはうまく対応するが，大量の微生物感染や長期に及萎縮し，脆弱化する．さらに，粘膜免疫研究により腸管

ぶ炎症に対しては弱点がある．この場合，この防御シス

粘膜には，全身のリンパ球の約 70～80％が存在すること

テムそのものが組織破壊に働くことがある．COVID‒19が解明されている．非経口摂取による腸管粘膜の菲薄化でみられるサイトカインストームが良い例で，炎症が過により，組織内の免疫担当細胞数は激減する．その結果，剰な場合や慢性炎症のような場合も類似の減少が起こ2021 年 6 月
脳血管障害
（脳梗塞）

＊

EB・ウイルス
インフルエンザ＊
後天性免疫不全
ウイルス
（ＨＩＶ）
＊

口腔感染症と全身疾患
認知症＊
がん細胞の＊
浸潤・転移
メタボリック
シンドローム

誤嚥性肺炎
非アルコール性
脂肪肝炎
妊娠トラブル

197に侵入し食菌作用を回避することができる．歯周病は，高血圧・喫煙・糖尿病や肥満からは独立したリスク因子と考えてよい．歯周病変部からの持続的な炎症物質の供給も，アテローム性動脈硬化の誘因となっている可能性も高いと考えられている．
3 ）非アルコール性肝炎（NASH）11‒13）．

心臓疾患（心筋梗塞・細菌性心内膜炎）（早産・低体重児）

腸内細菌フローラ

皮膚疾患

骨粗しょう症バージャー病

図 3 歯周病がリスクとなる全身疾患
歯周病がリスク因子として発症する全身疾患はきわめて多い．歯周病は，感染による軽度慢性炎症性疾患として生体にさまざまな影響を及ぼし，多くの全身疾患の誘因および原因となる．なお，図中の全身疾患には，現在
基礎研究段階で今後臨床研究や疫学調査が必要とされる全身疾患も含む．＊：落合らが論文報告した全身疾患

歯周病原細菌（P. gingivalis）や腸内細菌の LPS が持続的に血管内に侵入することにより，糖尿病，動脈硬化，慢性腎疾患などの生活習慣病の発症・増悪にかかわっていることがわかっている．NASH もその一つで，飲酒習慣のない人が脂肪肝から慢性肝炎，肝臓がんにいたる可能性が指摘されており，医科領域においても歯周病とNASH の関係が注目されている．
4 ）腸内細菌叢変化の誘導14,15）
唾液中の口腔細菌を大量に飲み込むことにより，腸内細菌叢にさまざまな影響を与えている可能性が指摘されている．P. gingivalis を動物の口腔内に投与することにより腸内細菌叢のバランスが崩れ，腸管粘膜上皮細胞の結合部位が変化し血中内の内毒素の濃度が上昇することが報告されている．その結果，NASH，心臓，腎臓，膵
臓，血管などにさまざまな影響を与えていると考えられる．さらに，歯周病が関与する全身疾患の多くは，背景る．さらに詳細な研究が必要であるが，きわめて興味あに加齢とともに生じる免疫システム上のアンバランスがる結果といえる．
5 ）ウイルス疾患あると考えてよい．
歯周病と全身疾患との関係は大きく 2 つに分類して考歯周病とウイルス疾患との関係は未解明な分野で，疫えることができる（図 3）．1 つは，細菌や内毒素を中心

学調査を含め今後より詳細な研究が必要といえるが，相とした菌体成分，そして代謝産物などが直接の原因とな互関係を強く示唆する報告がある16）．

る疾患．もう 1 つは，感染の結果起こる組織炎症から供（1）インフルエンザ

給される炎症物質や炎症性サイトカインによって発症すインフルエンザウイルスは感染・増殖後，ノイラミニ

る疾患である．しかし，発症までに長期間要する場合な

ダーゼ（NA）酵素により感染細胞から遊離し，近傍のどは両者を明確に区分することが困難な疾患もある．

細胞に感染が拡大する．口腔レンサ球菌の産生する NA

1 ．細菌や代謝産物などが原因となる主な疾患

がウイルスの遊離を促進すること，そして，この作用は1 ）細菌性肺炎（誤嚥性肺炎）

リレンザなどの抗インフルエンザ薬によって抑制されな

すでに死亡原因で述べたが，代表的疾患として誤嚥性いことが判明した．また，P. gingivalis の産生するタン肺炎が挙げられる．健康者の肺炎（市中肺炎）は，肺炎

パク分解酵素（gingipain）がウイルスの HANA タンパ球菌など特定の細菌が原因となるが，誤嚥性肺炎の場合

クを解離しシアル酸との結合を強め，ウイルスの細胞付は病巣部位から歯周病関連菌を含む口腔や咽頭の細菌が着と細胞内への侵入を促進する．その結果，大量のウイ多数検出されるため特定の細菌を原因菌とすることは困

ルスが増殖し感染を重症化するとの報告がある．これら難である．多くの臨床研究によって口腔清掃により発症の結果は，不十分な口腔ケアや歯周病がインフルエンザ率が著しく低下することが報告されており，専門的な口感染を促進するばかりでなく，重症化する可能性を強く腔ケアは肺炎防止にきわめて有効である．

示唆している16,17）．特に，高齢者はインフルエンザが重6,7）2 ）心臓および循環器疾患（アテローム型動脈硬化症）8‒10）歯周病原細菌遺伝子が心臓弁や大動脈瘤から検出され，歯周病が動脈硬化や冠動脈疾患に直接的，または間接的にかかわっていることが指摘されている．Porphyromonas gingivaris などの歯周病原細菌は，血液細胞内症化ししばしば死亡原因ともなるため，口腔ケアは誤嚥性肺炎ばかりでなくインフルエンザ対策としても考える必要がある．
（2）ヒト免疫不全ウイルス（HIV）および Epstein-Barrウイルス（EBV）
感染した HIV は，細胞の染色体に結合したヒストン脱

日

198

本

歯

科

アセチル化酵素（HDAC）の作用によってウイルス遺伝
子の増殖が抑制され長期間の潜伏状態となる．歯周病原細菌の代謝産物・酪酸により HDAC の働きが阻止されるとウイルス粒子の複製が開始される．また，歯周病に
よって血中濃度が上昇した炎症性サイトカイン（TNFα）も HDAC の働きを抑制する．したがって，血液中

保

存

学

雑

誌

１．
認知症の原因第 64 巻第3号

MRI冠状断像・加齢，遺伝，炎症，生活環境
・生活習慣：高血圧，喫煙，
糖尿病，
ストレス等
認知症を発症した死亡者の90％が歯周病に罹患．

２．
老人斑と認知症

TNF-αと歯周局所において歯周病原細菌により産生される酪酸との相乗作用により HIV 再活性化の可能性が考えられる．これらの結果から，HIV 感染者が重症の歯周病に罹患した場合，複製された HIV により CD4 リン
パ球数が減少し，免疫不全に陥り AIDS を発症する可能性が強く示唆される．AIDS による免疫力の低下から重症の歯周病を発症するという従来の考えとは，全く逆の仮説が成り立つことになる．臨床上 HIV 感染者の AIDS
発症機序が解明されていなかったため，われわれの研究
により AIDS 発症に歯周病が深くかかわっている可能性が示唆されたことは，世界中に驚きをもって受け入れられた15）．
成人の大部分が感染し，唾液腺などに潜伏している
EBV も酪酸により再活性化することが報告されている．
重度の歯周病患者のポケット内から EBV が高頻度に検

老人斑

3．
歯周病原菌の遺伝子および菌体が脳から検出される
P. gingivalis，T. denticolaなど

図 4 歯周病とアルツハイマー型認知症
認知症の原因は不明であるが歯周病の発症背景とき
わめて類似している．アルツハイマー型認知症（AD）の患者の脳は全体的に萎縮が進んでいるが，特に海馬の萎縮が顕著である．神経の代謝産物アミロイドβが神経組織に蓄積し老人斑が形成される．その結果神経組織の変性が起こる．アミロイドβの沈着は AD 発症の
20 年以上前から始まっているとの可能性が指摘されている．

出されオッズ比は P. gingivalis より高いことから，EBV
は各種がんやリウマチのみならず，歯周病の発症とも関すでに起こっているとの報告もあり，30 歳代後半からす係する可能性がある．

でに AD 予備軍となっている可能性がある（図 4）．

6 ）がん細胞の浸潤転移．

18‒20）

老人斑の形成機序は解明されていないため，効果的な大規模疫学調査にから口腔レンサ球菌の産生するアセ予防法や治療法はない．関係が深いとされる因子としてトアルデヒドが，口腔や上咽頭がんの誘因となる可能性

加齢，高血圧と動脈硬化，糖尿病，難聴，喫煙などの生が報告されている．また，酪酸が炎症部位やがん細胞の活習慣，その他，降圧剤，抗うつ剤や抗コリン剤などの浸潤部位に多くみられる糖タンパクの遺伝子の発現を促薬物がある．驚くことに，これらはすべて歯周病発症の進することから，がん細胞の転移を誘導する可能性が示背景となる因子ときわめて類似している．

唆されている．

歯周病の関与を裏付ける研究報告は多いが，研究結果

21‒24）
7 ）認知症（アルツハイマー型）の内容は大きく 2 つに分けることができる．1 つは，P.

本邦の認知症患者はおおよそ 462 万人おり，5 年以内

gingivalis や口腔スピロヘータ歯周病原細菌の遺伝子がに半数が認知症となる確率の高い経度認知障害者は 400

脳内から検出されるなどの報告から，菌が直接脳に影響万人とされ，2025 年には患者数が 700 万人を超えると予を及ぼしているという考え方．また，AD 患者の脳内か想されている（日本における認知症の高齢者人口の将来

ら遺伝子だけではなく P. gingivalis 菌体も高頻度で検出推計に関する研究，内閣府「平成 29 年度版高齢社会白されている．動物実験からも P. gingivalis は脳内に移行

書」）．認知症は大きく 4 つに分類されるが，アルツハイ

するなんらかの手段をもっている可能性が示唆される．

マー型認知症（AD）の患者数が最も多く全体の約 70％

特に，内毒素やジンジパイン酵素が強く影響しているとを占める．AD 患者が加齢性の記憶力低下と最も異なるの研究報告がある．われわれの研究でも，歯肉内の酪酸

点は，自覚がないことと，症状が進行し日常生活においがアミロイドβの前駆体の産生を促進しているという結て大きな障害やトラブルが起こることである．

果も得られている．

認知症の患者の脳は全体に委縮しているが，近い過去

ほかの 1 つは，歯周病の炎症物質が脳に作用している，の記憶を司る海馬の顕著な萎縮がみられる．海馬の神経あるいは，歯周病変部位で活性化されたマクロファージ

線維に神経細胞の代謝産物のアミロイドβが凝集し老人が影響しているというもの．認知症における腸内細菌の斑が形成され，神経細胞が変性してしまう．アミロイド

影響も指摘されているが，消化器官よりもはるかに脳にβの沈着や老人斑の形成が AD 発症の 20～30 年前から近い歯周組織の炎症が脳に多く影響を及ぼしている可能2021 年 6 月

口腔感染症と全身疾患

199

資質を備えなければならない．口腔だけを視野に入れた性は無視できない．
現在までの研究結果から歯周病は，AD の発症を早め歯科治療に特化していては，みずから活躍の場を狭めて重症化する可能性がきわめて高いといえる．歯周病としまう．今はまさに，新たな視点で歯科医療を広い視野AD との関係は日本をはじめ，世界各国で精力的に研究でとらえ，新たな方向性を考える時期が来たものと考えされており，近い将来より明確になるものと思われる．

る．
口腔は腸管とは大きく異なり，口腔清掃を怠ると常在2 ．炎症が誘因となる主な疾患
25‒27）

1 ）糖尿病と肥満（メタボリックシンドローム）

細菌叢に遷移が起こり，歯周病などの口腔疾患の原因と歯周病は糖尿病の合併症であるばかりでなく，糖尿病なる．早急に命にかかわる感染症ではないと放置される発症のリスク因子であるといえる．歯周病変部位から持ため，しばしば重症化し難治性疾患の原因となる．歯科続的に供給される炎症性サイトカイン（TNF-αなど）が医療従事者は，咬合機能回復の真の重要性を理解するとインスリン抵抗性に影響を与え，糖尿病発症に関与する

ともに，歯科医療は高齢化社会において今まで以上に重と考えられている．糖尿病対策において口腔ケアの重要

要な役割を果たしていることを認識する必要がある．

性が認められ，医師会と歯科医師会が連携を深め糖尿病対策を行っている地域が広がっている．

日本細菌学会の祖・北里柴三郎博士は「医療の究極の目的は予防にあり」という言葉を残された．歯科医療従

内臓脂肪には TNF-αなどの炎症性サイトカインが多事者は，国民の健康管理に深くかかわることで感染症予数発現しており，炎症反応を促進することから歯周病や防や医療の最前線に立っており，「歯科医療が日本を救

糖尿病を悪化させることが報告されている．また，過度う」という自負と自覚が必要なのではないだろうか．

の肥満により炎症を抑制するアデポネクチンの産生が低下し，炎症や炎症性サイトカインの産生がより促進され，歯周組織の再生能力も低下することが知られている．歯周病によって肥満が促進されるか否かはより詳細な研究が必要と思われるが，歯周病，肥満，そして糖尿病は相互に深く関係しているものと思われる．
2 ）早産・低体重児出産28,29）
子宮収縮を促すプロスタグランジンや炎症性サイトカ
インが歯周病の進行とともに妊婦の血中に増加し，胎児の成長に悪影響を与える．そのほかの数多くの疫学や臨床研究から，歯周病が早産や低体重児出産のリスクとなることが報告されている．

おわりに歯周病と全身疾患が各方面で話題となるにつれ，歯科医療に対する注目度は高まっている．そのような背景からかさまざまな方面で講演をする機会があり，幅広い年
齢層の歯科医師と接してきた．一部の歯科医の方から，「義歯もうまく作れないのに，何が全身疾患だ……」という意見をいただいたこともある．もちろん，良い歯科治療ができ良い義歯を作ることが良い歯科医師であることは間違いない．う蝕全盛の時代と異なり，現在においてそれは“歯科医の最低条件”ではないだろうか．口腔感染症，特に歯周病が全身疾患に深くかかわっていることが判明しても，歯科医師には全身疾患を診断・治療はできない．したがって，国民の健康と長寿を考えると必然的に医科との協力が必須となる．そのために歯科医療従
事者は関連分野の医科との共通言語を理解し，さらに，
歯科サイドから医療従事者へ提案やアドバイスを行える

謝辞

今回の発表に関し，多大なるご尽力を頂いた明海大学機能保存回復学講座の横瀬敏志教授に心から感謝申し上げます．
本論文に関し，開示すべき利益相反はない．

文献1）日本歯周病学会．歯周病と全身の健康．1 版．医歯薬出版：東京；2016．
2）落合邦康．人は口から老い口で逝く．1 版．日本プラン
ニングセンター：千葉；2021．
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213．
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2020，10‒15．
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2020，3‒8．
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7）山下喜久，竹下 徹．高齢者の肺炎と口腔細菌．落合邦康．腸内細菌・口腔細菌と全身疾患．1 版．シーエムシー
出版：東京；2015，109‒116．
8）Kudo C, Shin WS, Minabe M, Harai K, Kato K, Seino H,

200

日

本

歯

科

Goke E, Sasaki N, Fujino T, Kuribayashi N, Pearce YO,
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13）和田孝一朗，結束貴臣，小川祐二，今城健人，米田正人，
中島 淳．落合邦康．歯周病と非アルコール性脂肪肝炎，
ヒト常在菌叢と生理機能・全身疾患．1 版．シーエムシー
出版：東京；2020，236‒243．
14）山崎和久，山崎恭子．口腔細菌の腸内細菌叢への影響．
落合邦康．ヒト常在菌叢と生理機能・全身疾患．1 版．
シーエムシー出版：東京；2020，30‒39．
15）今井健一，落合邦康．歯周病原菌とウイルス感染症―ウ
イルス微生物間相互作用による潜伏感染ウイルスの再活性化機構．落合邦康．腸内細菌・口腔細菌と全身疾患．
1 版．シーエムシー出版：東京；2015，144‒152．
16）Kamio N, Imai K, Shimizu K, Cueno ME, Tamura M,
Saito Y, Ochiai K. Neuramidase-produching oral mitis
group streptococci potentially contribute to influenza
viral infection and reduction in antiviral efficacy of zanamivir. Cell Mol Life Sci 2014; DOI 10.1007/s00018-0141669-1.
17）神尾宜昌，落合邦康．インフルエンザ．落合邦康．腸内細菌・口腔細菌と全身疾患．1 版．シーエムシー出版：
東京；2015，127‒133．
18）宮崎裕司，菊地建太郎，草間 薫．口腔微生物とがん．

保

存

学

雑

誌

第 64 巻第3号

落合邦康．腸内細菌・口腔細菌と全身疾患．1 版．シー
エムシー出版：東京；2015，135‒141．

19）草間薫．口腔微生物と口腔がん．落合邦康．ヒト常在菌叢と生理機能・全身疾患．1 版．シーエムシー出版：
東京；2020，211‒218．
20）日暮琢磨，吉原 努，松浦哲也，中島 淳．口腔内細菌と大腸癌．落合邦康．ヒト常在菌叢と生理機能・全身疾患．1 版．シーエムシー出版：東京；2020，221‒227．
21）Poole S, Singhrao SK, Kesavalu I, Curtis MA, Crean S.
Determining the presence of periodontopathic virulence
factors in short-term postmortem Alzheimer’s disease
brain tissue. J Alzheimers Dis 2013; 36: 665‒677.
22）Poole S, Singhrao SK, Chukkapalli S, Rivera M, Velsko I,
Kesavalu L, Crean S. Active invasion of Porphyromonas
gingivalis and infection-induced complement activationin ApoE-/- mice brain. J Alzheimers Dis 2015; 43: 67‒80.
23）松下健二．認知症．落合邦康．腸内細菌・口腔細菌と全身疾患．1 版．シーエムシー出版：東京；2015，176‒181.
24）武
洲．認知症．落合邦康．ヒト常在菌叢と生理機能・全身疾患．1 版．シーエムシー出版：東京；2020，257‒264．
25）Demmer RT, Squillaro AS, Papapanou NP, Rosenbaum
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resistance: results from the continuous National Healthand Nutrition Examination Survey（NHANES）1999‒
2004. Diabetes Care 2012; 35: 2235‒2242.
26）西村英紀．歯周炎症が糖尿病の病態に及ぼす影響の想定
メカニズム．日本歯周病学会．歯周病と全身の健康．1
版．医歯薬出版：東京；2016，89‒91．
27）新城尊徳，西村英紀．糖尿病．落合邦康．ヒト常在菌叢と生理機能・全身疾患．1 版．シーエムシー出版：東京；
2020，199‒209．
28）Blencowe H, Cousens S, Oestergaard MZ, Chou D,
Moller AB, Narwal R, Adler A, Vera Garcia C, Rohde S,
Say l, Lawn JE. National, regional, and worldwide estimates of preterm birth rates in the year 2010 with timetrends since 1990 for selected countries: a systematic
analysis and implications. Lancet 2012; 379: 2162‒2172.
29）相沢（小峰）志保子，廣畑直子，早川 智．口腔細菌と妊娠合併症．落合邦康．腸内細菌・口腔細菌と全身疾患．
1 版．シーエムシー出版：東京；2015，191‒193．

2021 年 6 月

201

誌上シンポジウム

日歯保存誌 64（3）：201～205，2021

生体の中の保存治療学

人生 100 歳時代における硬組織研究の挑戦
町谷

亜位子1,2,3 片

桐

岳

信1

埼玉医科大学医学研究センター埼玉医科大学医学部ゲノム基礎医学1

明海大学歯学部形態機能成育学講座歯科矯正学分野

2

明海大学歯学部機能保存回復学講座オーラル・リハビリテーション学分野

3

The Challenges for Research of Hard Tissue with a 100-Year Life
MACHIYA Aiko1,2,3 and KATAGIRI Takenobu1
1
2

Division of Biomedical Sciences, Research Center for Genomic Medicine, Saitama Medical University

Division of Orthodontics, Department of Human Development and Fostering, Meikai University School of Dentistry
3

Division of Oral Rehabilitation of Sciences, Department of Restorative and Biomaterials Sciences,
Meikai University School of Dentistry

キーワード：TGF‒βファミリー，Smad4，歯の発生，上皮系細胞，齧歯類切歯

はじめに全世界的な高齢化が進むなか，わが国は「人生 100 歳

齧歯類の切歯を用いたエナメル質の形成機構の解析時代」を迎えつつある．2019 年の日本人の平均寿命は男

1 本の歯は，性状が異なるエナメル質と象牙質から構性 81.41 歳，女性 87.45 歳であり，世界でもトップレベル成される．エナメル質は上皮系細胞のエナメル芽細胞なの長寿国である1）．高齢化の進展に伴い，一生のなかでどにより形成され，象牙質は間葉系細胞の象牙芽細胞な健康で自立した生活を営める期間を指す「健康寿命」をどによって形成される．一連の歯の形成過程において，

いかに伸ばすかが，重要な課題となっている．健康寿命

上皮系細胞と間葉系細胞は，さまざまな液性因子や細胞を妨げる要因には，認知症，脳血管障害，高齢による衰接着因子などを介して相互に影響し合いながら歯を形成

弱，関節疾患，転倒・骨折などが挙げられる．これらは，する2）．

いずれも口腔や運動器の機能に強く関与しており，歯やヒトの歯は，胎生期から小児期にかけて一過性に形成

骨などの硬組織の健康が，健康寿命の延長に重要な役割される．一方，マウスなどの齧歯類の切歯は，出生後もを果たすことがわかる．本稿では，われわれの最近の研

持続的に形成される．これは，齧歯類の切歯に出生後も究成果を基に，歯の上皮細胞の分化制御機構を考察する．

歯の幹細胞が存在し，持続的な細胞増殖と細胞分化が維持されていることによる．したがって，齧歯類の切歯は，出生後の成体において歯の形成過程やその調節機構を解析できる優れた実験モデルである．
齧歯類切歯の最も根元に位置するサービカルループ

本稿は日本歯科保存学会 2020 年度秋季学術大会（第 153 回）シンポジウムの講演内容をまとめたものである．
DOI：10.11471/shikahozon.64.201

日

202

本

歯

科

保

存

学

雑

誌

第 64 巻第3号

Fig. 1 Dental epithelial cells in mouse incisor
Ep：epithelial cells, Me：mesenchymal cells, Am：ameloblasts, SI：
stratum intermedium, SR：stellate reticulum, PL：papillary layer（Cervical loop）領域は，歯の上皮系および間葉系の成体

よるエナメル質の形成過程は，さまざまな情報伝達機構

幹細胞を維持するニッチ（niche）となっている （Fig.

により複雑に制御されている．

2）1）．歯の上皮系幹細胞は，エナメル芽細胞（Ameloblast）
やその外層である中間層（stratum intermedium：SI）細胞，星状網（stellate reticulum：SR）細胞へ分化し，サー
ビカルループ領域から切端側へ移行しながら，高度に石Transforming growth factor—β（TGF—β）
ファミリーの細胞内シグナル伝達

灰化したエナメル質を形成する．エナメル質に沿って存Transforming growth factor‒β（TGF‒β）ファミリー

在するエナメル芽細胞は，一連のエナメル質の形成過程

は，運動器や硬組織の形成細胞の増殖，分化，死の制御

で形態を変化させる．まず，幹細胞から分化したエナメに重要な成長因子群である5‒7）．主に胎生期の歯胚形成

ル芽細胞は，単層に配列してアメロジェニン，アメロブの解析から，TGF‒βファミリーの成長因子は，歯の形

ラスチン，エナメリンなどのエナメル質に特有の細胞外成にも重要な因子であることが明らかとなりつつある．

基質タンパク質を盛んに分泌する．この分泌期（Secre-

TGF‒βファミリーのリガンドとして，Bone morphoge-

tory stage）のエナメル芽細胞は，背の高い円柱状で極

netic protein（BMP），Growth and differentiation factor性を示し，核は細胞外基質成分の分泌方向と反対側に整（GDF），TGF‒βや Activin など，30 種類以上のメンバー

列 す る． そ の 後， エ ナ メ ル 芽 細 胞 の 高 さ は 減 少 し，が分類されている．

MMP‒20 や KLK4 などのプロテアーゼや，石灰化に重要

これら TGF‒βファミリーの成長因子の活性は，標的な組織非特異型アルカリホスファターゼ（ALP）などの細胞が細胞膜上に発現するⅠ型およびⅡ型の膜貫通型セ酵素を発現する．分泌された酵素群により，エナメル基

リン・スレオニンキナーゼ受容体によって細胞内へ伝達質タンパク質の分解と石灰化が進行し，エナメル質に特される（Fig. 2）．リガンドが細胞膜上で受容体と結合す有の二次石灰化が起きてエナメル質の成熟が進む（Mat-ると，受容体が細胞内領域にもつキナーゼが細胞質でuration stage） ．成熟期に認められる乳頭層は，分泌期

Smad と呼ばれる転写因子（R‒Smad）をリン酸化する．

の中間層細胞，星状網細胞から形成され，毛細血管網をリン酸化された R‒Smad は，細胞質で転写共役因子とし有する乳頭状構造を呈し，エナメル芽細胞と協調してエて機能する Smad4 と会合し，核内へ移行して標的遺伝子

ナメル質の石灰化を制御する．成熟期後期（Post‒matu-の発現を制御する．

3,4）

ration stage）には，エナメル芽細胞は立方形となり，分TGF‒β フ ァ ミ リ ー は， 骨 誘 導 活 性 を も つ BMP や泌機能を失う （Fig. 1）．このようなエナメル芽細胞にGDF と，骨誘導活性をもたない TGF‒βや Activin の 2

3,4）2021 年 6 月

人生 100 歳時代における硬組織研究の挑戦

203

全を呈する9‒11）．上皮系細胞特異的に Smad4 を欠失させると，エナメル質形成が阻害される12,13）．しかし，上皮特異的な Smad4 のノックアウトマウスでも出産直後に致死となる12,13）ため，成体の歯における Smad4 依存的な
TGF‒βファミリーの役割は依然として不明な点が多い．
われわれは，タモキシフェン投与誘導性に全身のSmad4 を欠失できる新しい Smad4 コンディショナル
ノックアウトマウス（cKO）を樹立した14）．われわれの作出した Smad4 cKO マウスを用いると，タモキシフェンを投与して Smad4 を欠失させることが可能となり，成長過程の任意の時期に Smad4 の役割を解析できる．さらに，伸長し続ける切歯を解析することで，Smad4 を欠失
Smad4, a central co‒activator of the TGF-βfamilyModified from Katagiri T et al, Int J Mol Sci
2018；19：E3586.7）
Fig. 2つの群に大別される．両群の差は，受容体により細胞

5‒7）

内でリン酸化される R‒Smad の違いによる．骨誘導活性してすべての TGF‒βファミリーのシグナルが遮断された状態での歯の形成過程の変化を，連続的に観察することも可能となった．

成体マウスの切歯形成における転写共役因子 Smad4 の役割を有するリガンドは，Ⅰ型受容体として ALK1，ALK2，

われわれが新たに樹立したマウスを 10 週齢まで飼育

BMPR‒IA（ALK3），BMPR‒IB（ALK6）に結合してした後に，タモキシフェンを腹腔内投与して Smad4 の欠

Smad1/5/9 のリン酸化を誘導する．一方，骨誘導活性を失を誘導した．タモキシフェンの初回投与から約 3 週間

もたないリガンドは，Ⅰ型受容体の ALK4，ALK5（T

飼育を継続した後，下顎骨を摘出して切歯の形成におけβR‒I），ALK7 に結合して Smad2/3 のリン酸化を惹起す

る影響を詳細に解析した．Smad4 cKO マウスの切歯をる

組織学的に解析すると，特に成熟期以降のエナメル芽細

．

5‒7）

胞を含む上皮細胞層の扁平や低形成が認められた（Fig.

転写共役因子 Smad4 とノックアウトマウス

3）．そこで，免疫組織学的に Smad4 および Smad4 と複合体を形成するリン酸化 Smad1/5/9，リン酸化 Smad2/Ⅰ型受容体によってリン酸化される R‒Smad とは異な

3 の局在を検討した．コントロールマウスの切歯では，り，Smad4 はリガンド依存的な翻訳後修飾を受けない

サービカルループ領域から成熟期後期の上皮系細胞と間Smad と考えられている．Smad4 の重要な機能は，リン葉系細胞に，Smad4，リン酸化 Smad1/5/9，リン酸化

酸化された R‒Smad と会合することで，TGF‒βファミ

Smad2/3 が広く認められた．この結果は，TGF‒βファ

リーの転写共役因子として働くことである（Fig. 2）．

ミリーのシグナルが切歯の生理的な形成過程に広く関与

Smad4 の機能を失った細胞では，BMP や TGF‒βの刺していることを示唆する．

激により R‒Smad のリン酸化と核内移行が起こるにもか

Smad4 cKO マウスでは，予想どおり抗 Smad4 抗体に

か わ ら ず， 初 期 応 答遺伝子の誘導が認められ な い．

よる染色性が低下しており，Smad4 タンパク質の欠失がSmad4 は，R‒Smad と複合体を形成することにより，初確認された．さらに，Smad4 cKO マウスでもリン酸化期応答遺伝子の転写制御領域への結合能を高めると考え

Smad1/5/9 とリン酸化 Smad2/3 の量や局在に顕著な変られている5‒7）．

化は認められなかった．これらの結果から，Smad4 cKO

Smad4 を全身の細胞で欠失させたノックアウトマウ

マウスの切歯における低形成や上皮系細胞の形態変化

スは，歯の形成以前の胎生期初期（E6～E7）の段階で致は，TGF‒βファミリーの細胞内シグナル伝達における死となる ．そのため，歯の形成における TGF‒βファミ

Smad4 を介した標的遺伝子の転写制御の変化に起因す

リーの役割を解析するために，歯の細胞特異的な Smad4

ると考えられた14）．この仮説は，野生型マウスを用いてノックアウトマウスを樹立し，臼歯歯胚を用いて研究がTGF‒βファミリーリガンドの発現量と受容体の低分子進められている．

キナーゼ阻害剤の影響を調べたわれわれの実験からも支8）

間葉系細胞特異的に Smad4 を欠失させると，象牙芽細胞の形態や機能に異常が起こり，象牙質や歯根の形成不持された15）．

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誌

第 64 巻

第3号

Smad4‒dependent regulation of differentiation and function in dental epithelialcells
A schema of our report14）（a. and d）In the immunohistochemical analysis revealed that

Fig. 3the ALP protein level was almost undetectable in dental epithelial cells in Smad4 cKO
mice（Brown color area）（b. and e）In Berlin blue staining, iron pigmentation in dental
epithelial cells was almost undetectable in Smad4 cKO mice（Blue color area）（c. and f）
Histological analysis showed that cKO of the Smad4 gene led to hypoplasia of dental epithelial cells. Am：ameloblasts, SI：stratum intermedium, SR：stellate reticulum, PL：papillary layer

切歯の石灰化におけるSmad4 依存的細胞内シグナルの役割
ALP は，歯や骨の石灰化に必須な酵素の一つである．

染色した．コントロールマウスの切歯における鉄の沈着
は，成熟期，成熟期後期のエナメル芽細胞や，乳頭層における毛細血管構造に検出された．一方，Smad4 cKO マ
ウスでは鉄の沈着が大幅に減少しており，上皮系細胞における鉄輸送能が低下したと考えられた14）（Fig. 3）．

組織非特異的 ALP をコードする ALPL 遺伝子変異を認

以上のように，ALP の発現低下や鉄輸送能の低下かめる骨系統疾患の低ホスファターゼ症（HPP）では，骨ら，Smad4 cKO マウスの切歯では，エナメル質の石灰の低石灰化とともに歯の石灰化不全が認められる4）．抗化が低下していると予想された．しかし，マイクロ CT

ALP 抗体を用いて切歯における局在を解析したところ，

で切歯の石灰化度を解析しても，コントロールマウスの中間層，成熟期エナメル芽細胞，乳頭層のような上皮系

切歯と石灰化に差は認められなかった14）．この理由とし細胞に発現していた．しかし，Smad4 を欠失させたマウて，われわれの Smad4 cKO マウスが貧血を呈して 1 カスの切歯では，これらの上皮系細胞に ALP は検出され月程度で死亡するために，十分な差が認められない可能なかった14）（Fig. 3）
．これは，Smad4 依存的な TGF‒β性が考えられる．より長期間飼育できる条件下で，詳細ファミリーの細胞内シグナルが，切歯の上皮系細胞の分に切歯を解析する必要がある．

化を介して石灰化を制御する可能性を示す．
齧歯類の切歯では，エナメル芽細胞が鉄結合性タンパ
ク質であるフェリチンを産生する．このため，齧歯類でおわりにはエナメル質石灰化の過程で鉄が沈着することで，肉眼われわれが樹立した新しい Smad4 cKO マウスを解析的にオレンジ色を呈する16）．切歯に鉄が沈着することした結果から，TGF‒βファミリーが切歯の上皮系細胞で，物理的な耐性が向上すると考えられている17）．

の分化と機能を制御する重要なシグナルであることが示

マウスの切歯切片を，鉄を検出するベルリンブルーで唆された14）．単一の細胞で形成される皮膚や，骨，心筋，2021 年 6 月

人生 100 歳時代における硬組織研究の挑戦

角膜などは，組織再生の研究が進展しつつある．一方，歯や毛，乳腺，肺，腎臓など上皮間葉相互作用など複数の細胞の相互作用を要する臓器や器官の再生研究は難し
い．TGF‒βファミリーよる上皮間葉相互作用の制御機構の解明は，臓器や器官形成と再生の鍵になる可能性がある．また，誌面の都合上割愛した Smad4 cKO マウスの骨や軟骨などの解析結果も，生理的な硬組織の形成制
御機構の解明に糸口を与えるものと期待される．こうした歯や骨などの硬組織研究が進歩することにより，人生
100 歳時代において，人々が健康で充実した人生を過ごすことができることを願う．
謝辞

今回の発表に関する研究を遂行するにあたり，多大なる尽力を頂いた埼玉医科大学医学部ゲノム基礎医学の塚本 翔博士，倉谷麻衣博士，研究室メンバー各位，北里大学薬学部の大手 聡博士，明海大学歯学部形態機能成育学講座歯科矯正学分野の須田直人教授，九州大学大学院歯学研究院歯学部門の自見英治郎教授に深謝する．Smad4 floxed マウスは，XiDeng 博士より提供された．
本 研 究 は， 科 研 費（ 課 題 番 号 17H04317，17K11026，
19K22725，20H03808，20K18009），明海大学宮田研究奨励金の助成を受けて行われた．片桐は，第一三共株式会社より研究費の助成を受けている．他の著者は，開示すべき利益相反状態はない．

文献1）内閣府．令和 2 年版高齢社会白書．https://www8.cao.
go.jp/kourei/whitepaper/index-w.html（2021 年 1 月 20
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日

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学

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誌上シンポジウム

第 64 巻第3号

日歯保存誌 64（3）：206～211，2021

生体の中の保存治療学

歯髄再生治療：実用化に向けた取り組み中島

美砂子1,2庵原耕一郎2RD 歯科クリニック

1

国立長寿医療研究センター 再生歯科医療研究室

2

Stem Cell Therapy for Pulp Regeneration：Future Application
for Treatment of Periapical Disease in the Aged
NAKASHIMA Misako1,2 and IOHARA Koichiro2
1

RD Dental Clinic

2

Laboratory of Dental Regenerative Medicine, National Center for Geriatrics and Gerontology

キーワード：歯髄幹細胞，歯髄再生治療，抜髄，感染根管，ナノバブル水

はじめに
歯髄再生治療は，歯髄炎および根尖性歯周炎に罹患した歯において歯髄・象牙質複合体を再生させることにより歯髄の本来の生体防御機能を維持し，歯の喪失およびそれに伴う骨吸収の時期をできるだけ遅らせ，人生 100
年時代においていつまでも自分の歯で嚙めることによる健康長寿に貢献することを目的としている．私たちはす場合の同種移植の技術開発，および乳歯由来歯髄幹細胞を含めた歯髄幹細胞バンクの細胞源の開発も進めてきた．本稿では，歯髄・象牙質再生治療の実用化とさらなる普及を目指して行っているこれらの研究について紹介する．

感染根管におけるナノバブル水による根管内除菌後の歯髄再生でに「不可逆性歯髄炎における自己歯髄幹細胞移植によ従来の感染根管治療法ではなかなか治りにくい場合がる歯髄再生治療法」の臨床研究を行い安全性および有効あるのは，根管形態が複雑で，細管や側枝等に深く侵入性が確認された1）ことから，さらに特定認定再生医療等した細菌に対して，機械的拡大が困難で薬剤もなかなか委員会での再生医療等提供計画の審査および厚生労働省

浸透せず完全には除去できないことが主原因と考えられへの届出を経て，昨年より同歯髄再生治療を実施している．また，一般に使われている水酸化カルシウムが効かる．一方，抜髄歯ばかりでなく感染根管歯にも歯髄再生ない Enterococcus faecalis などの細菌が残って，バイオ治療を適応拡大できるよう，ナノバブル水と抗菌剤を併

フィルムを形成してしまうためともいわれている2）．

用した根管内除菌法の開発を進めてきた．さらに，加齢それで私たちは，ナノバブル薬剤導入法による根管内に伴い減退する生体の治癒・再生能力を回復させ，中高除菌法を開発してきた．ナノバブル水は濃度 2.0×107個/

齢者にも歯髄再生治療を可能にするため，歯髄再生促進

ml 以上，粒径百数十 nm の泡で，根管壁のスミヤー層を法の研究開発を行ってきた．また，自家の不用歯がない除去できる（Fig. 1A）と同時に，バイオフィルム除去に

本稿は日本歯科保存学会 2020 年度秋季学術大会（第 153 回）シンポジウムの講演内容をまとめたものである．
DOI：10.11471/shikahozon.64.206

2021 年 6 月

歯髄再生治療の実用化

207も効果がある（Fig. 1B）3,4）．さらにナノバブルを抗菌薬

移植細胞からさまざまな血管新生・神経栄養因子（tro-等と併用することにより，象牙細管や側枝・副根管など

phic 因子）が放出され，G‒CSF との相加効果により，歯の深部 1 mm 以上に薬剤を浸透させることが可能となりの周辺組織（歯根膜，骨髄等）から在来幹細胞が根管内（Fig. 1C）
，複雑な歯構造体の奥深くに潜む細菌を除去すに遊走し増殖して，血管新生および神経再疎通が生じる

ることができると同時に歯髄が再生されると考えている6）．

．これにより，従来法のように細菌を4,5）除去するために過剰に根管壁を削って歯折するのを防ぐことができると考えられる．

一般に，年齢とともに生体組織の再生能力は徐々に低下することはよく知られているが，歯においても，歯髄

まず，臨床に適応しやすい抗菌薬として，米国で FDA

幹細胞を自家移植すると高齢は若齢と比べて歯髄再生はに認可された 3Mix/TAP（Triple antibiotic paste）ある遅れる7）．一方，分取した中高齢者由来の歯髄幹細胞は

いはレボフロキサシン（クラビット）を選択した．まず，若齢者由来のものと比較して，増殖能はやや劣るもの

初期感染根管から検出される Fusobacterium，難治性感の，遊走能や抗アポトーシス能・血管新生能などの特性

染根管から検出される E. faecalis およびイヌ難治性の根は変わらないことが示されている8）．実際，歯髄幹細胞

管より釣菌した混合細菌に対する細菌感受性試験を行を他組織再生に適応した治験において，69 歳の高齢者でい，3Mix/TAP およびレボフロキサシンの最適有効濃度

も歯周組織が有効に再生された報告がある9）．しかしなを決定した．次にそれらの薬剤を混合してもナノバブル

がら，高齢歯由来の歯根膜幹細胞の遊走能・増殖能およは消泡せず，象牙細管内に薬剤を浸透できることを確認

び抗アポトーシス能を in vitro において調べると，若齢した（Fig. 1C～G）．次に実際にイヌの感染根管モデルをに比べて低いことが示されている7）．よって高齢が若齢作製し（Fig. 1H，I），プラス帯電性ナノバブル水（Nanoと比べて歯髄再生が遅い理由としては，移植する幹細胞

Bubble Water，アエラスバイオ）とレボフロキサシンを自身の問題ではなく，遊走してくる歯根膜などの周辺組

併用して根管の洗浄・貼薬を 1 週間ごとに繰り返し，嫌織の幹細胞の問題あるいは周囲の微小環境の変化である

気性培養による根管内細菌検査を行った．その結果，そと考えられた．また高齢歯では，セメント質が厚く，歯れぞれ単独に比べて有意に数回で根管内部の細菌は検出

根膜は狭窄・線維化している．さらに根尖歯周組織に慢限界以下になった．なお，ナノバブル水と併用すること

性炎症が生じているため，在来細胞が老化している可能により根管の除菌が促進できることは，3Mix/TAP にお性がある10）．よって，歯根膜などからの在来幹細胞の遊いても確認できた．根管内無菌化を確認後，通法どおり走が妨げられ，歯髄再生が遅延する可能性が示唆された．

細胞移植を行い，CBCT において根尖病変の大きさの変したがって，高齢歯の歯髄再生を促進する物質として化を解析すると，根管治療 1 カ月目（細胞移植時，Fig.

高齢歯の線維化した歯根膜を溶解し，幹細胞が根管内に1J）と 2 カ月後（Fig. 1K）を比較して有意な減少がみら

遊走しやすくすることを目的として，細胞移植前にトリれた（Fig. 1L）．細胞移植 2 カ月後の組織標本では，血プシンを根管内に作用（トリプシン前処置）させてみた．

管と神経に富む歯髄組織が再生され，根管壁には象牙質

トリプシンは 40 年以上にわたって臨床で安全に使用さ様硬組織の添加がみられた．また，根尖歯周組織には炎れてきたタンパク質分解酵素で，炎症症状を迅速に緩解

症所見はなく，骨添加がみられた（Fig. 1M）．根管内のし，急性組織損傷の治癒を促進することにより慢性炎症

歯髄再生量は約 70％に達し，グラム染色にて根管壁・象を防止することが知られていた11）．イヌ高齢歯ではトリ

牙細管内・歯根表面セメント質および根尖歯周組織（Fig.

プシン前処置により，前処置なしのコントロールと比べ

1N～Q）にバイオフィルムは確認されなかった．

て移植後 14 日での歯髄再生量が約 4 倍有意に増加した

したがって，感染根管歯においても，根管内の除菌が（Fig. 2）．また，根尖歯周組織での血管新生も約 20 倍有できれば，抜髄歯と同様に歯髄が再生されることが示さ

意に増加がみられた12）．しかしながら，若齢歯ではトリれ，歯髄再生治療が感染根管にも適応拡大できる可能性

プシン前処置しても歯髄再生の促進効果はみられなかっが示唆された．

た．トリプシン前処置した高齢歯では，移植 36 週後，根中高齢者の歯髄再生促進

管側壁に大量の象牙質様硬組織が形成され根管内が閉塞し，正常な高齢歯と組織学的類似がみられた．歯科用 X
線解析では，根尖部透過像はみられず，病理標本でも歯次に，中高齢者に対して歯髄再生を促進する根管内前根膜・根尖歯周組織に異常はみられなかった．また，血処置法を開発した．これまで歯髄再生メカニズムとし液生化学検査・尿検査によっても，トリプシン前処理のて，根管内に歯髄幹細胞を G‒CSF とともに移植すると，安全性が確認された12）．したがって，中高齢者において移植細胞は G‒CSF の作用により生着でき，根管外へ溢

トリプシン前処置により歯髄再生治療を促進させること出せずに根管内にとどまることが知られている．そしてが可能であることが示唆された．

日

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A

B

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D.W.

Non

20μm

20μm

20μm

Nanobubbles

D.W.

Non

10μm

10μm

D.W.

D

500μm

500μm

I
Pulpectomy Opening

H

誌

Nanobubbles

Nanobubbles

C

雑ClosureDog
Premolar

E

500μm

J

Hydrauliccement

Resin

TAP

F

第3号

10μm

Nanobubbles＋TAP

G Nanobubbles＋Levofloxacin

500μm

500μm

M

N

20μm

O
I

R

J

K

20μm
Pretreatment

P

Extraction*

1.5

根尖病変の体積比

LTransplantation

20μm

1

Q

0.5
0

0

1

Pretreatment Transplantation

2

3（Months）

Extraction

4

1mm

20μm

Fig. 1 Complete disinfection with nanobubbles and antibacterial agents and pulp regeneration
A：The ability of the smear layer removal of nanobubbles in a porcine root canal model by scanning electron microscopic（SEM）analysis. B：The removal of Streptococcus mutans biofilms formed on hydroxyapatite discs by nanobubbles by SEM
analysis. C‒G. Enhanced delivery of tetracycline（5 mg/ml）into dentinal tubules with/without nanobubbles. C：nanobubbles.
D：Distilled water. E：TAP（Triple antibiotic paste）. F：Nanobubbles with TAP. G：Nanobubbles with Levofloxacin. H：A
schematic diagram demonstrating intractable periapical disease model in canine premolar. I‒Q. Complete disinfection by
nanobubbles with Levofloxacin and the transplantation of dental pulp stem cells（DPSCs）in the intractable periapical diseasemodel. I‒K：A cone beam computed tomography（CBCT）study at the time of pretreatment（I）, at 1 month after the root
canal treatment（transplantation）（J）and another 2 months after cell transplantation（extraction）（K）using OsiriX program.
L：The relative volume of periapical lesions compared with pretreatment. There is a significant difference in the relative volume between 1 month（transplantation）and another 2 months（extraction）. Data are expressed as mean±SD（n＝4）（＊；p＜0.01）. M：Pulp regeneration at 2 months after cell transplantation. Dentin‒like mineralized tissue formed along the dentinalwall（arrows）. Hematoxylin‒eosin staining. N‒Q：Gram staining showing complete removal of microbial biofilm in the dentinalwall（N）, dentinal tubules（O）, lacunae in the cementum（P）, and periapical tissue（Q）.

2021 年 6 月

歯髄再生治療の実用化

A

209

種の歯髄幹細胞を用いることにより，品質の安定した細B胞が治療必要時に必要数すぐに供給可能となる利点がある．現在，間葉系幹細胞を用いた同種移植の実現可能性
proof‒of‒concept や安全性は示されており，国内外で骨髄，脂肪，滑膜，臍帯等由来の間葉系幹細胞を用いた急性期脳梗塞，虚血性心疾患，肝硬変，軟骨損傷，脊髄損
傷等の種々の疾患に対する治験が行われている．日本では，急性移植片対宿主病（急性 GVHD）に対するテムセ
ル HS 注（JCR ファーマ）がすでに再生医療等製品として承認されている．また同種歯髄幹細胞を用いて，オス

500μm

Fig. 2500μm

Enhanced pulp regeneration by trypsin
pretreatment in the pulpectomized teeth
before transplantation of dental pulp stem
cells（DPSCs）in the aged dogs on day 14

Pretreatment with trypsin（A）and with saline
as a control（B）. Hematoxylin‒eosin staining17）.

テオインテグレーションや急性期脳梗塞，慢性歯周疾患などに対する治験や臨床研究が行われている13）．さらに
近年，チリにおいて同種臍帯由来間葉系幹細胞を用いて感染根管歯の歯髄再生治療の治験を行い，安全性と有効性が示されている14）．間葉系幹細胞が免疫抑制剤を使用せず同種移植が可能である理由は，間葉系幹細胞の免疫原性が低く，免疫抑制作用が高いためと考えられている．すなわち，MHC class Ⅱはほとんど発現しておらず，T cell への共刺激機能をもつ CD40，CD80，CD86 も次に，トリプシンによる高齢歯の歯髄再生促進作用のほとんど発現がみられない．また，免疫抑制作用をもつメカニズムを検討した．根管内に遊走してくる在来細胞

パラクリン因子やエクソゾームを分泌し，ヘルパー T 細として歯根膜幹細胞を高齢歯より分離し若齢歯由来のも胞や細胞傷害性 T 細胞の増殖を抑制し，炎症誘発因子のと比べてみると，トリプシンにより活性化されるとい（IFN‒γ，TNF‒α，IL2）の産生を抑制する．さらにナわれている Protease‒activated receptor 2（PAR2）が高チュラルキラー（NK）細胞の活性や B 細胞の成熟を抑発現していた．高齢の歯根膜細胞にトリプシンを添加し制し，樹状細胞の成熟を阻止し，結果として T 細胞の活た in vitro 実験結果より，在来幹細胞へトリプシンが直性化に必要な抗原や共刺激分子の発現を低下させ，免疫接働いて老化やアポトーシスが抑制され，再生に関与すが抑制されると考えられている15）．

る種々の組織修復関連因子や抗炎症因子の分泌が促進さ

私たちは，同種移植による歯髄再生治療のイヌ非臨床

れることにより，慢性炎症状態の根尖歯周組織に対して研究において，ヒト HLA に類似したイヌの DLA 遺伝子

再生への機転が働くことが示唆された12）．また間接作用型の解析を行い，不一致で歯髄幹細胞を 2 回続けて根管として，トリプシンによりセメント質や象牙質から放出内に移植した．その結果，1，2 回目とも異常はみられなされる Fibronectin 等が在来幹細胞の遊走促進，抗炎かった．また，12 週での歯髄再生量は，DLA 遺伝子型症・免疫調整，血管新生・神経再疎通促進に働き，またが一致・不一致とも 1，2 回目で変わらず，血管新生量や象牙質から放出される物質により歯髄誘導および象牙芽

神経突起伸長量に関しても変化はみられなかった16）．

細胞分化促進が生じることが明らかとなった ．

よって，同種移植の歯髄再生治療の安全性・有効性が示

12）現在，トリプシンを中高齢者の歯髄再生促進治療の臨床に適応できるよう，さらなる研究開発を進めている．

同種移植による歯髄再生唆されている．

歯髄幹細胞バンク
歯髄幹細胞は細胞源として有利な特性を有している．

中高齢者の場合，自家移植の問題点は，まず，自分自

すなわち，抜け落ちる乳歯や抜去する智歯・矯正便宜抜

身の不用歯がない場合が多いということが挙げられる．

去歯などの不用歯から，体への負担やリスクが少なく手また中高齢者の歯では根管内の線維化や石灰化，根管壁軽に採取することができる．また，遺伝子が傷つきにくへの象牙質添加などにより歯髄組織量が少なくなり，歯く，形質の一定した幹細胞が得られやすいこと，細胞の髄幹細胞数が減少し，その増幅に時間がかかること，お増殖能，免疫調整能，抗炎症作用，遊走能に優れ，血管よび糖尿病や関節リウマチなどの慢性疾患により幹細胞

新生や神経誘導能が高いことなどが挙げられる．なお，

形質が変化していることなどが問題となる．よって，同乳歯由来歯髄幹細胞は永久歯由来歯髄幹細胞と比較し

日

210

本

歯

科

て，遊走能や遊走促進作用および抗炎症・免疫調整作用が高く，同等以上の有利な品質特性を有する．しかしながら，イヌ同一個体において，自家の乳歯由来および永久歯由来の歯髄幹細胞を根管内に移植すると，歯髄再生
量・血管新生量および神経突起伸長量に有意差はみられなかった（中島未発表データ）．したがって，歯髄再生治
療の細胞源として，永久歯の不用歯ばかりでなく乳歯から採取した歯髄幹細胞をバンクに保管しておくことの有用性が示唆される．アエラスバイオ株式会社ではすでに
歯髄幹細胞バンクを開始しており，バンクに保管した歯髄幹細胞は本人の治療に対してばかりでなく，必要時に本人の同意を得ることにより二親等以内に供給できるようなシステムを構築している．また，すでに国内外の治験で報告されているように，将来的には歯髄再生ばかり
でなく，顎骨，歯周組織，脳梗塞等の再生治療に用いることができるような時代が来ると考えられ，品質の良い
自家の歯髄幹細胞を若いうちに備えておくことも有用かもしれない．

おわりに
本稿において，歯髄再生治療は，根管内を除菌できれば感染根管治療にも適応できる可能性があることを示した．また年齢とともに歯髄再生は遅れるが，移植前に根管内をトリプシンで前処置することにより再生を促進できる可能性を示した．さらに不用歯がない場合でも，同種移植が適応できる可能性を示した．このような結果を得て，近く，歯髄再生治療の年齢を 7 歳から 69 歳までに適応拡大し，症例を感染根管にまで拡大する予定である．また，同種移植の歯髄再生治療の臨床研究も準備を進めている．しかしながら，今後さらに，治療を繰り返してきたあるいは長年経過した感染根管歯においても歯髄再生が確実に成功できるよう，根管壁の処置法，移植細胞の前処理法，最適な移植細胞数や添加因子およびscaffold などの技術改良を重ねていく必要がある．また現在，再生された歯髄組織面上に大量に早期に被蓋象牙質が形成され，残存象牙質と隙間なく癒合することにより微小漏洩や再感染を防止でき，十分な機械的強度も得られる象牙質再生法の開発を進めている．
開示すべき利益相反として，筆頭著者中島美砂子は，国立
長寿医療研究センターとエア・ウォーター株式会社との共同研究開発として，エア・ウォーター株式会社から一部の研究費を得て，本研究は行われた．
（https://www.awi.co.jp/business/medical/med_guideline/
med_guideline_info.html，https://www.ncgg.go.jp/research/annualreport/documents/2019nenpo1.pdf.）

保

存

学

雑

誌

第 64 巻文第3号

献1）Nakashima M, Iohara K, Murakami M, Nakamura H,
Sato Y, Ariji Y, Matsushita K. Pulp regeneration bytransplantation of dental pulp stem cells in pulpitis: apilot clinical study. Stem Cell Res Ther 2017; 8: 61.
2）興地隆史．歯内療法の争点―難治性根尖性歯周炎の病因と臨床．新潟歯学会誌 2006；36：1‒15．
3）庵原耕一郎，中島美砂子．ナノバブル水を用いた新規根管洗浄液のスミヤー層除去効果の検討．日歯保存誌

2019；62：159‒164．
4）藤田将典，庵原耕一郎，堀場直樹，立花克郎，中村 洋，
中島美砂子．感染根管歯におけるナノバブルと超音波を用いた根管内無菌化と歯髄再生．日歯保存誌 2014；57：
170‒179．
5）庵原耕一郎，中島美砂子．難治性根尖性歯周炎における抗菌ナノパーティクル含有ナノバブル水による根管内除菌効果の検討．日歯保存誌 2020；63：73‒82．
6）Iohara K, Murakami M, Takeuchi N, Osako Y, Ito M,
Ishizaka R, Utunomiya S, Nakamura H, Matsushita K,
Nakashima M. A novel combinatorial therapy with pulp
stem cells and granulocyte colony-stimulating factor for
total pulp regeneration. Stem Cells Transl Med 2013; 2:
521‒533.
7）Iohara K, Murakami M, Nakata K, Nakashima M.
Age-dependent decline in dental pulp regeneration after
pulpectomy in dogs. Exp Gerontol 2014; 52: 39‒45.
8）Horibe H, Murakami M, Iohara K, Hayashi Y, Takeuchi
N, Takei Y, Kurita K, Nakashima M. Isolation of a stable subpopulation of mobilized dental pulp stem cells（MDPSCs）
with high proliferation, migration, and regeneration potential is independent of age. PloS One 2014; 9:e98553‒e98553. Correction PloS One 2016; 11: e0151741.
9）Ferrarotti F, Romano F, Gamba MN, Quirico A, Giraudi
M, Audagna M, Aimetti M. Human intrabony defectregeneration with micrografts containing dental pulp
stem cells: A randomized controlled clinical trial. J Clin
Periodontol 2018; 45: 841‒850.
10）Huttner EA, Machado DC, de Oliveira RB, Antunes AG,
Hebling E. Effects of human aging on periodontal tissues. Spec Care Dentist 2009; 29: 149‒155.
11）Shah D, Mital K. The role of trypsin: chymotrypsin intissue repair. Adv Ther 2018; 35: 31‒42.
12）Iohara K, Zayed M, Takei Y, Watanabe H, Nakashima M.
Treatment of pulpectomized teeth with trypsin prior totransplantation of mobilized dental pulp stem cells
enhances pulp regeneration in aged dogs. Front Bioeng
Biotechnol 2020; 8: 983.
13）Yamada Y, Nakamura-Yamada S, Kusano K, Baba S.
Clinical potential and current progress of dental pulp

2021 年 6 月

歯髄再生治療の実用化

211

stem cells for various systemic diseases in regenerative16）Iohara K, Utsunomiya S, Kohara S, Nakashima M. Allo-

medicine: a concise review. Int J Mol Sci 2019; 20: 1132.
14）Brizuela C, Meza G, Urrejola D, Quezada MA, Concha G,

geneic transplantation of mobilized dental pulp stem
cells with the mismatched dog leukocyte antigen type isRamírez V, Angelopoulos I, Cadiz MI, Tapia-Limonchi
R, Khoury M. Cell-based regenerative endodontics fortreatment of periapical lesions: a randomized, controlled
phase Ⅰ/Ⅱ clinical trial. J Dent Res 2020; 99: 523‒529.
15）Karantalis V, Schulman IH, Balkan W, Hare JM. Allogeneic cell therapy: a new paradigm in therapeutics. Circ
Res 2015; 116: 12‒15.

safe and efficacious for total pulp regeneration. Stem
Cell Res Ther 2018; 9: 116.
17）Nakashima M, Iohara K, Zayed M. Pulp regeneration:
current approaches, challenges, and novel rejuvenating
strategies for an aging population. J Endod 2020; 46:
S135‒142.

日

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誌

著

第 64 巻第3号

日歯保存誌 64（3）：212～219，2021

太陽電池付光触媒内蔵音波振動歯ブラシのプラーク除去効果について
吉

峰

正

彌

鴨

井

久

博

久保田

裕

子＊

日本医科大学千葉北総病院歯科
久保田歯科医院＊抄録
目的：歯周病予防・治療においてプラークコントロールは非常に重要な役割を果たしており，近年では手用歯ブラシのみならず音波振動歯ブラシも数多く開発されている．本研究では酸化チタン（以下，TiO2）の光触媒作用をさらに増強するために，太陽電池（以下，ソーラーパネル）を増加させた音波振動歯ブラシのプラー
ク除去効果と安全性について検討を行った．
材料と方法：被験者は日本医科大学千葉北総病院歯科の医局員で，口腔清掃方法の知識・能力・健康な歯肉を有する男女年齢不問の 8 名とした．被験歯は Ramfjörd の代表歯 6 歯とし，プラーク付着に影響を及ぼす修復物がない歯とした．使用した歯ブラシは，ソーラーパネル 3 枚を内蔵した音波振動歯ブラシ SOLADEYRHYSHM 2（シケン）とした．TiO2 を有しない同一形状の音波振動歯ブラシ（CONTROL 群），および大型太陽電池付酸化チタン電極内蔵の手用歯ブラシ SOLADEY N4（シケン，MANUAL 群）を対照群とした．付着

プラークの評価には，Rustogi Modification Navy Plaque Index（RMNPI）を用いてプラーク除去率を算出した．一元配置分散分析を用い，歯ブラシ前後と 3 群間のプラーク除去率の比較を行った．
結果と考察：SOLADEY RHYSHM 2 を使用したプラーク除去効果は，歯面部位・歯種にかかわらずおおむ
ねプラーク除去率が高い傾向が認められた．また，毛先の届きづらい歯頸部においてもプラーク除去率が高い
ことが示され，ソーラーパネルを 3 枚にし内蔵した結果，音波振動機能に加えて TiO2 の光触媒作用が増強された可能性が考えられた．

結論：TiO2 とソーラーパネルを内蔵した音波振動歯ブラシは，プラーク除去効果が高く，プラークコント

ロールに有用である可能性が示唆された．

キーワード：酸化チタン，太陽電池，音波振動歯ブラシ

責任著者連絡先：吉峰正彌〒 270‒1694 千葉県印西市鎌苅 1715 日本医科大学千葉北総病院歯科
TEL：0476‒99‒1111，FAX：0476‒99‒1919，E-mail：yoshimine9110@nms.ac.jp
受付：2021 年 1 月 14 日/受理：2021 年 4 月 14 日
DOI：10.11471/shikahozon.64.212

2021 年 6 月

太陽電池付光触媒内蔵音波振動歯ブラシのプラーク除去効果

緒

言

213

であり，ソーラーパネルを 3 枚内蔵し，TiO2電極を有する（TEST 群，Fig. 1）．電子発生が LED ランプの点滅に
より可視化されるのが特長となっている．また音波振動

酸化チタン（以下，TiO2）は，その光触媒作用によりは 9,000 回転/分，1,1000 回転/分の 2 段階となっており，

Streptococcus mutans や Porphyromonas gingivalis など

今回は標準モードの 9,000 回転/分を使用した．歯ブラシの口腔内細菌に対して抗菌作用を有していることが知らの毛先はポイント毛形状となっており，ハニカム形状でれている．また TiO2の光触媒作用は，太陽電池（以1‒4）あった．毛の硬さは JIS 規格でふつう，毛の直径は 0.16

下，ソーラーパネル）を付与することにより増強するこ

mm であった．先端ポイント毛形状を有しており，先端とが報告されており，S. mutans の酸産生および付着のポイント部の毛の長さが 10.5 mm，フラットな部分の毛抑制が働いたとの報告がある5,6）．このような背景から，の長さは 9.5 mm であった．毛束配列部は横 6.7 mm，縦TiO2とソーラーパネルを内蔵した手用歯ブラシおよび17.8 mm であり，植毛穴は，先端が 2 個，その他は 3 個

ロールに対する有用性について種々の報告がされてい今回は，酸化チタンを有しない同一形状の音波振動歯

音波振動歯ブラシが市販され，それらのプラークコント
るの部分が 6 列であった．

．特に音波振動歯ブラシは，周術期患者の口腔内ブラシ（CONTROL 群），および大型太陽電池付酸化チ

清掃状態を改善して，術後合併症の防止に寄与する可能

タン電極内蔵の手用歯ブラシ SOLADEY N4（シケン，7‒10）

性があるとの報告もある ．またソーラーパネルに関し

MANUAL 群，Fig. 2）を対照群とした．歯ブラシの毛先ては，手用歯ブラシにおいてその内蔵枚数と面積を増加

はポイント毛形状となっており，先端ポイント毛形状でさせることで，より多くの電子を発生させ，結果としてあった．毛の硬さは JIS 規格でふつう，毛の直径は 0.177

より大きなプラーク除去率につながったとの報告もあ

mm であった．先端ポイント毛形状を有しており，先端る

8）．しかしながら，音波振動歯ブラシにおいてソーポイント部の毛の長さが 10.5 mm，フラットな部分の毛

ラーパネルを増加させて応用した報告はいまだ認められの長さは 9.5 mm であった．毛束配列部は横 6.7 mm，縦ない．本研究では，TiO2の光触媒作用をさらに増強する

17.8 mm であり，植毛穴は，先端が 2 個，その他は 3 個

ために，ソーラーパネルを 3 枚にし内蔵した音波振動歯の部分が 6 列であり，TEST 群と同じサイズおよび配置

ブラシのプラーク除去効果と安全性について検討を行っとなっていた．CONTROL 群は，TiO2 を有しないため，

9,10）

た．

TEST 群と同一形状であるのみで，ソーラーパネルの効材料および方法

力も全く発揮されないものとした．
被験者には，研究開始前 24 時間は歯ブラシによるブラッシングを中止させ，その後，歯磨剤を使用せずに 5

被験者は歯周病に対して知識を有する日本医科大学千分間毛先磨きによるブラッシングを実施してもらった．

葉北総病院歯科の医局員で，口腔清掃方法の知識・能なお 3 種の歯ブラシすべてにおいて，ブラッシング時に力・健康な歯肉を有する男女年齢不問の 8 名とした．

ソーラーパネルを手で隠さないようにすること，ブラシ被験歯は Ramfjörd の代表歯，すなわち右上第一大臼を十分に水で濡らしてからブラッシングを開始すること

歯，左上第一中切歯，左上第一小臼歯，左下第一大臼歯，に留意させた．この過程を，日を改めて 3 回繰り返し実

右下第一中切歯，右下第一小臼歯とし（以下，16 歯，21

施した．歯ブラシ前後におけるプラーク付着状態と，歯歯，24 歯，36 歯，41 歯，44 歯）すべて天然歯とした．

ブラシの使用による歯肉創傷の有無の記録は口腔内撮影

また被験歯が処置歯の場合は，測定部位が補綴処置ある用ビデオカメラを用いて行った．

いは充槇処置されていなければ，対象歯とした．被験歯

デンタルプラークの染め出しには，デントプラークテが補綴物により被覆されている場合または欠損の場合

スター AR（ライオン歯科材）を用いた．付着プラーク

は，その隣在歯を被験歯とした．さらに，隣在歯で対応の評価には，Rustogi Modification Navy Plaque Index

できない場合は対象歯の同顎かつ反対側に位置する歯（RMNPI）を用いた．歯面を平滑面・隣接面・歯頸部にを，代替被験歯とした．

9 分割して a，b，c，e を平滑面，d，f を隣接面，g，h，

歯ブラシのプラーク除去効果については，歯ブラシのi を歯頸部とした（Fig. 3）．頰側・舌側ともに評価を行

毛先およびヘッド部の大きさ，毛束の数や状態，把持部

い，歯ブラシの使用によるプラーク除去率を算出した．

の大きさ，長さおよび太さが影響することは知られてい

なお，表示するプラーク除去率は平均値である．

るが，本研究においては，ソーラーパネルおよび TiO2 に着目した．

使用した歯ブラシは SOLADEY RHYSHM 2（シケン）

なお，本研究はヘルシンキ宣言，医学系研究に関する倫理指針に準拠しており，当院の倫理審査委員会の承認を得て行われた（承認番号 571，638）
．

日

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TiO2
Solar panel
Fig. 1 SOLADEY RHYSHM 2（Shiken）
Solar panels reinforce the effect of titanium dioxide
electrode.

Rustogi Modification Navy
Plaque Index（RMNPI）
Dental plaque adhesion at interproximal surface and cervical surface can beinvestigated in detail.
a, b, c, e：smooth surface, d, f：interproximal surface, g, h, i：cervical surface
Fig. 3Plaque removal rate（％）

Fig. 2 SOLADEY N4（Shiken）
Solar panels reinforce the effect of titanium dioxide
electrode as is the case with SOLADEY RHYSHM 2.
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0

TEST

CONTROLMANUAL

Fig. 4 Plaque removal rate（Whole mouth）
Plaque removal rate was highest in the test group.

統計学的解析には，一元配置分散分析にて歯ブラシ前61.5％・MANUAL 群 77.3％），舌側平滑面（TEST 群

後と 3 群間のプラーク除去率の比較を行った．統計学的66.2％・CONTROL 群 48.3％・MANUAL 群 80.5％）（Fig.

有意水準はすべて 5％とした．

5），隣接面（TEST 群 67.2％・CONTROL 群 62.4％・

結果TEST 群・CONTROL 群ともに歯ブラシ使用後に，歯肉における創傷は認められなかった．
プラーク除去率は，すべての項目において有意差は認
め ら れ な か っ た．口腔内全体のプラーク除去 率 は，

MANUAL 群 68.0％），頰側歯頸部（TEST 群 75.2％・
CONTROL 群 68.3％・MANUAL 群 66.9％），舌側歯頸部（TEST 群 69.6％・CONTROL 群 63.4％・MANUAL
群 57.0％）（Fig. 6）であり，おおむね TEST 群は高いプ
ラーク除去率を示した．ただし，隣接面，舌側平滑面においては MANUAL 群が TEST 群よりも高いプラーク除去率を示した．

TEST 群 77.1％，CONTROL 群 70.2％，MANUAL 群

また，歯種別のプラーク除去率も 16（TEST 群 75.1％・63.8％であった（Fig. 4）．TEST 群は，CONTROL 群お

CONTROL 群 61.7％・MANUAL 群 54.1％），21（TEST

よび MANUAL 群よりも高いプラーク除去率を示した．

群 89.2％・CONTROL 群 82.9％・MANUAL 群 66.8％），

次に，部位別のプラーク除去率は，頰側（TEST 群

24（TEST 群 57.6％・CONTROL 群 56.6％・MANUAL

76.0％・CONTROL 群 66.8％・MANUAL 群 68.4％），舌群 61.2％），36（TEST 群 68.0％・CONTROL 群 60.6％・側（TEST 群 68.8％・CONTROL 群 70.9％・MANUALMANUAL 群 65.8％），41（TEST 群 86.1％・CONTROL

群 61.3％），頰側平滑面（TEST 群 78.5％・CONTROL 群

群 82.5％・MANUAL 群 73.0％），44（TEST 群 76.1％・

2021 年 6 月

太陽電池付光触媒内蔵音波振動歯ブラシのプラーク除去効果

215

120
Plaque removal rate（％）

100
80
60
40

BuccalLingualB. smooth

MANUALCONTROLTESTMANUALCONTROLTESTMANUALCONTROLTESTMANUALCONTROL

0

TEST

20

L. smooth

Plaque removal rate（buccal, lingual, buccal smooth, and lingual
smooth surface）
Plaque removal rate of the test group tended to be highest at all four surfaces.
Fig. 5

被験者として選択した場合，患者のブラッシング技能における個人差が大きいとの報告がなされている11）．ま100

た，患者の代わりに歯学部学生を被験者として選択して行った音波振動歯ブラシの研究でも，手用歯ブラシと比80

較して有意なプラーク除去率・PCR 減少率が示されたと60の報告がある12）．これらの報告から，本研究では被験者

40

葉北総病院歯科の医局員としており，被験者の選択は妥

は歯周疾患に対して十分な知識を有する日本医科大学千当であり，ブラッシング時のプラーク除去効果に影響は

20
MANUALTESTMANUALTEST

Buccal cervical

CONTROLInterproximal

CONTROLMANUAL

対する習熟度も，プラーク除去効果に影響を及ぼすと考TEST

0

与えなかったと考えられる．一方で被験者の歯ブラシにCONTROL

Plaque removal rate
（％）

120

Lingual cervical

Plaque removal rate（interproximal surface
and cervical surface）
Plaque removal rate at the interproximal surface
was highest in the manual group.
Fig. 6

えられる．実験期間については音波振動歯ブラシにおいて 5 カ月に設定している報告などもあるが，本研究においては被験者が音波振動歯ブラシに関する知識を有し，またその使用方法の習熟になんら支障がなく研究が遂行されたものと推察される．次に，本研究においてブラッ
シング時間は 5 分としている．これは反転式電動歯ブラシを使用した研究においてブラッシング時間を 4 分間として，手用歯ブラシと同等以上の臨床的な改善が報告されていることなどから13），本研究のブラッシング時間はCONTROL 群 61.9％・MANUAL 群 62.0％）（Fig. 7）であり，24 以外のすべての歯において，TEST 群が高いプ

また，TEST 群および CONTROL 群使用後に，歯肉に創傷は認められなかったためこの歯ブラシを使用するこラーク除去率を示した．

考妥当であったと考えられた．

察とに関して安全性に問題はなかったものと考えられる．
統計学的解析より部位別のプラーク除去率は，舌側では 2 群間で有意差は認められなかったものの，舌側以外歯ブラシのプラーク除去効果の検討に際して，被験者のすべての部位で TEST 群は CONTROL 群と比較しての選択はそれに影響を与える因子と考えられる．患者を大きなプラーク除去率を有した．これら 2 群の比較結果

日

216

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100
Plaque removal rate（％）

90
80
70
60
50
40
30
20

TEST
CONTROLMANUAL24
36
Tooth number

TEST
CONTROLMANUAL

21

TEST
CONTROLMANUAL

16

TEST
CONTROLMANUALTESTCONTROLMANUAL

0

TEST
CONTROLMANUAL

10

41

44

Fig. 7 Plaque removal rate of each tooth
Plaque removal rate of the test group was highest in all teeth except for 24.

から，これまでの報告と同じく，TiO2とソーラーパネル効果に加えて，直接毛先が接触していない部分においてを内蔵することは，高いプラーク除去率になる傾向があも，音波振動が唾液中を移動することでキャビテーショ

ると考えられる．これらの効果は，特にプラーク除去しンバブルを発生させて液体流動力によってプラーク除去

づらい歯頸部においてより効力が発揮された可能性があが可能である15）．本研究においても，音波振動のこれらる ．すなわち，TiO2に太陽光および蛍光灯などの光源の効果がプラーク除去に寄与した可能性があるが，詳細

ラーパネルから発生した電子が唾液の成分を介して口腔が必要であると考えられる．特にプラーク除去しづらい

9）に含まれる紫外光が当たることにより，TiO2およびソー内に移動したと推察される．次に，この過程で発生したなプラーク除去のメカニズムについてはより細かな検討
歯頸部においては，TiO2の光触媒作用とソーラーパネル

ヒドロキシラジカル（・OH）あるいはスーパーオキシドの効果がブラッシングによるプラーク除去への助力とアニオン（・O2－）がプラーク内の水素イオン（H＋）をなった可能性が考えられる．

除去し粘着力が不安定な状態になり，結果としてよりプ

一方で，隣接面（Fig. 6）はプラーク除去しづらい部位

ラークが除去されやすい状態に変化したと考えられとして挙げられるが，3 群のうち MANUAL 群においてる7）．またこの結果に加えて，本研究においては電子の最も高い除去率（68.0％）を示した．また，舌側平滑面発生が LED ランプの点滅により可視化されたことは，（Fig. 5）においても同様に，MANUAL 群において最もソーラーパネルが手で被覆されてしまうことにより電子高い除去率（80.5％）を示した．MANUAL 群で使用しが適切に発生しない事象，あるいは TiO2が水で十分に濡た SOLADEY N4 は，TiO2およびソーラーパネルを内蔵れ，TiO2およびソーラーパネルの効力をより十分に発揮て高いプラーク除去率を示す報告9,10）と一致した結果をTEST 群と MANUAL 群を比較すると，舌側平滑面は同一ではないため単純に比較することはできない．し（Fig. 5）と隣接面（Fig. 6）以外の部位で TEST 群におかしながら，音波振動機能を有する TEST 群よりもいて高いプラーク除去率を示した．これらの部位におい

MANUAL 群は隣接面（Fig. 6），舌側平滑面（Fig. 5）にては音波振動効果によるプラーク除去が適当に発揮されおいて高いプラーク除去率を示したことから，TiO2の光れていないことによる不具合などを回避できたと考えらできた可能性が示唆された．

た可能性があり，種々の音波振動歯ブラシを用いいずれ

し，特にプラークの除去しづらい歯頸部・隣接面におい示した．ただし，2 群において歯ブラシのハンドル形状

触媒作用とソーラーパネルの効果を有することは，音波の音波振動歯ブラシにおいても縁上プラークの減少が認

振動機能を有さない手用歯ブラシにおいてもその機能をめられたとの報告14）と同様の結果となった．

補完できる可能性があると考えられる．この傾向は，頰

音波振動歯ブラシの効果に関してはさまざまな報告が側（Fig. 5），隣接面（Fig. 6），頰側平滑面（Fig. 5），舌あるが，ブラシ先端に接触したプラークを直接除去する

側平滑面（Fig. 5）の 4 カ所においては，MANUAL 群に2021 年 6 月

太陽電池付光触媒内蔵音波振動歯ブラシのプラーク除去効果

217

おいて CONTROL 群と比較して高いプラーク除去率を歯ブラシがう蝕や歯周病に対するプラークコントロール

示 し た． こ の 結 果 からも，音波振動機能をも た な いに有用である可能性が示唆された．

MANUAL 群は TiO2の光触媒作用とソーラーパネルの効果がよりプラーク除去に寄与した可能性がある．また，音波振動歯ブラシと手用歯ブラシを比較した際に，株式会社シケンより研究に使用した歯ブラシの提供を受けたが，本研究に関連して特に開示すべき利益相反はない．

プラーク除去効果には差がないとの報告もある16,17）．し文

たがって，TiO2およびソーラーパネルを内蔵した歯ブラシに関しては，使用者の歯ブラシの種類に対する好みなどを状況に応じて手用歯ブラシと音波振動歯ブラシそれぞれを使い分けることができる可能性があり，使用者が口腔内の状況に応じて歯ブラシを選択できるようになると示唆される．ただし，TEST 群および MANUAL 群において，歯ブラシの毛先の形状が前者はハニカム形状であり後者は円形となっていた点，さらに毛の直径がそれ
ぞれ 0.16，0.177 mm と異なっており，これらの差がプラークコンロトールに影響を及ぼした可能性も否定できない．一方でこれら 2 群間においてそれら以外の因子である，毛の硬さはともにふつうで同等，歯ブラシ先端部のポイント形状・毛の長さ・毛束配列も同じであることから，全く異なった形状のものを比較しているわけではないため，ソーラーパネル・TiO2 に主に着目した本研究においてはこれら 2 群を比較検討することに問題はないと考えた．
歯種別のプラーク除去率に関しては，24（Fig. 7）以外
では TEST 群が最も高いプラーク除去率を示し，TEST群においては，口腔内における歯の位置にかかわらずおおむね良好にプラーク除去ができることが示された．前歯部から臼歯部にいくに従い，プラーク除去が困難になることが報告されているが18），音波振動機能に加えて，TiO2の光触媒作用とソーラーパネルからの電子発生効

果により口腔内においてプラーク除去効果が向上し，歯種にかかわらずほぼ一様にプラーク除去が可能になったものと推察される．一方で，24（Fig. 7）においては
MANUAL 群が最も高いプラーク除去率を示し，かつ36・44（Fig. 7）では MANUAL 群において CONTROL
群と比較すると高いプラーク除去率を示した．これらの結果は上述したように，TiO2およびソーラーパネルを内蔵した手用歯ブラシが，一般的な音波振動歯ブラシを代替できる可能性を示唆するものである．

結論

TiO2とソーラーパネルを内蔵した音波振動歯ブラシ

は音波振動機能に加えて，TiO2の光触媒作用とソーラパ
ネル（3 枚）の電子が働くことにより，歯面部位や歯種にかかわらずプラーク除去効果がおおむね高いことが確認された．これにより，太陽電池付光触媒内蔵音波振動

献1）斉藤俊行，堀江純司，奈良美夫，小野田金児，森岡俊夫．
半導体 TiO2 微粒子の光触媒による Streptococcus mutans

に対する殺菌効果．口腔衛生会誌 1987；37：520‒521．
2）三浦宏子，磯貝恵美子，磯貝 浩，脇坂仁美，上田五男，
井藤信義．半導体 TiO2 微粒子配合歯磨剤の臨床応用―齲蝕原性細菌との関連性―．口腔衛生会誌 1989；39：711‒715．
3）磯貝恵美子，三浦宏子，磯貝 浩，脇坂仁美，上田五男，
井藤信義．半導体 TiO2 微粒子の光触媒反応による黒色
集落性 Bacteroides に対する反応．口腔衛生会誌 1988；

38：588．
4）八島章博，五味一博，佐藤淳一，前田伸子，新井 髙．
酸化チタン光触媒が口腔内細菌に及ぼす影響．日歯周誌
2006；48：297‒306．
5）石井敏美，松村誠士，西村美智子，Omar Rodis，平川貴之，保富貞宏，下野 勉，和田精久．太陽電池を付与した棒状半導体 TiO2 の S. mutans に対する光触媒効果―第 1 報：酸産生抑制および抗菌効果について―．小児歯誌 2006；44：567‒572．

6）石井敏美，松村誠士，西村美智子，Omar Rodis，平川貴之，保富貞宏，下野 勉，和田精久．太陽電池を付与した棒状半導体 TiO2 の S. mutans に対する光触媒効果―第 2 報：付着抑制効果について―．小児歯誌 2006；

44：709‒712．
7）吉峰正彌，小倉喜一郎，大木亜悠子，村田侑加，藤川瑞穂，鴨井久博，和崎佳子．光触媒を内蔵した太陽電池付
音波振動歯ブラシの臨床効果．ライフケアジャーナル
2013；4：7‒15．
8）吉峰正彌，大木亜悠子，藤川瑞穂，村田侑加，鴨井久博，
久 保 田 裕 子． 周 術 期 患 者 に 対 す る S O L A D E Y
RHYTHM® の効果．日本口腔ケア学会誌 2017；12：25‒
31．
9）田辺瑞穂，本間友千佳，河野亮子，山﨑廉平，後藤祐香，
岡崎加奈，小木曽令実，村田侑加，吉峰正彌，鴨井久博，
松村彰子．大型太陽電池付チタン電極内蔵歯ブラシのプ
ラーク除去効果．ライフケアジャーナル 2018；9：1‒6．

10）吉峰正彌，山﨑廉平，岡崎加奈，小木曽令実，鴨井久博，
浅木英理．太陽電池付酸化チタン内蔵歯ブラシの口腔清掃効果．日歯周誌 2020；62：58‒73．

11）泉澤勝憲，立花智子，宮川みほ，小林 誠，福田光男，
野口俊英，木下四郎．ブラッシング時の個人差が歯垢除去効果に及ぼす影響について．日歯周誌 1993；35：674‒
680．

日

218
12）鈴木崇夫，望月悟，山本祥子，宮下本

歯科

元，山本松男．

音波ブラシのプラーク除去効果．日歯周誌 2007；49：120‒129．

13）渡辺孝章，鈴木丈一郎，荒瀬 誠，岩林明子，新井 髙，
中村治郎．反転式電動歯ブラシと手用歯ブラシの臨床的評価．日歯周誌 1995；37：353‒361．
14）八島章博，鈴木丈一郎，田村紗恵子，松島友二，五味一
博，新井 髙．音波歯ブラシの臨床的および細菌学的パ
イロット研究．日歯周誌 2015；57：159‒167．

15）MacNeill S, Walters DM, Dey A, Glaros AG, Cobb CM.
Sonic and mechanical toothbrushes. An in vitro study
showing altered microbial surface structures but lack ofeffect on viability. J Clin Periodontol 1998; 25: 988-993.
16）白川 哲，氏家優子，横山拓哉，中山佑平，早田優樹，

保

存

学

雑

誌

第 64 巻第3号

丹羽尭彦，船津太一朗，荒井千明，長野孝俊，五味一博．
音波歯ブラシ（Sonicare® FlexCare Platinum）のプラー

ク除去，臨床パラメーターならびに歯周ポケット内細菌に与える効果．日歯周誌 2016；58：107‒116．

17）松島友二，鈴木琢磨，八島章博，白川 哲，鈴木丈一郎，五味一博．極細毛音波歯ブラシの歯肉傷害と臨床効果な
らびにポケット内細菌への影響．日歯保存誌 2015；58：306‒313．
18）苗代 明，鴨井久博，斉藤洋一，大崎忠夫，島田栄一，
田中正直，松村彰子，中島 茂，西澤和利，佐藤 聡，
鴨井久一．規格モデルによるプラークコントロール―各
種歯ブラシの形態によるプラーク除去の効果について―．日歯周誌 1994；36：693‒706．

2021 年 6 月

太陽電池付光触媒内蔵音波振動歯ブラシのプラーク除去効果

219

The Effect of Dental Plaque Removal by a Sonic Toothbrushwith Solar Panels and Built-in Photocatalyst
YOSHIMINE Masaya, KAMOI Hisahiro and KUBOTA Hiroko＊
Dental Clinic, Nippon Medical School Chiba Hokusoh Hospital＊

Kubota Dental Clinic

Abstract
Objective: Effective control of dental plaque by daily brushing is critical for the prevention and treatmentof periodontal disease. Recently, not only manual toothbrushes but also many types of sonic powered toothbrush have been developed.
Materials and Method: The aim of this study was to investigate the dental plaque removal effect andsafety of SOLADEY RHYTHM 2（Shiken Co., Ltd.）, which has more solar panels than the conventional types
already developed by Shiken Co., Ltd., to reinforce the effect of the titanium dioxide electrode.
Results: SOLADEY RHYTHM 2 has a high oral hygiene effect regardless of the kind of tooth and surface,and a high rate of dental plaque removal at interproximal or cervical surfaces in particular was observed.
Conclusion: It is suggested that the sonic powered toothbrush with titanium dioxide electrode and solar
panels has high dental plaque removal efficacy, and is effective for plaque control for preventing dental caries and periodontal disease.
Key words: titanium dioxide electrode, solar panel, sonic powered toothbrush

Corresponding author: Dr. YOSHIMINE, Dental Clinic, Nippon Medical School Chiba Hokusoh Hospital, 1715, Kamagari, Inzai,
Chiba 270‒1694, Japan
TEL: ＋81‒476‒99‒1111, FAX: ＋81‒476‒99‒1919, E-mail: yoshimine9110@nms.ac.jp
Received for Publication: January 14, 2021/Accepted for Publication: April 14, 2021

日

220

本

歯

科

保

存

原

学

雑

誌

第 64 巻著

第3号

日歯保存誌 64（3）：220～226，2021

術者の臨床経験および接着システムの違いが象牙質接着強さと接着信頼性に及ぼす影響について

高

橋

礼

奈

榎

本

愛久美1

織

田

祐太朗

内

山

沙

紀

盧

山

晨

金

森

ゆうな2

明

橋

冴3

田

上

温

子

髙

橋

彬

文4

則

武

加奈子2

佐

藤

隆

明

田

上

順

次

東京医科歯科大学（TMDU）大学院医歯学総合研究科 医歯学系専攻 口腔機能再構築学講座 う蝕制御学分野
東京医科歯科大学（TMDU）歯学部

1
2

東京医科歯科大学（TMDU）歯学部附属病院歯科総合診療部
東京歯科大学保存修復学講座

34

日本歯科大学附属病院総合診療科 1

抄録
目的：近年，コンポジットレジン修復において，さまざまな被接着体に対して同一のボンディング材が使用できるユニバーサルタイプの接着システムが開発され，臨床でも多用されるようになってきている．本研究では，術者の臨床経験と接着システムが象牙質接着性能に及ぼす影響について評価した．
材料と方法：2 ステップボンディングシステムであるクリアフィルメガボンド 2（MB2）および 1 ボトルユ
ニバーサルタイプのボンディングシステムであるクリアフィルユニバーサルボンドクイック（UBQ）の，2 種類の接着システムを使用した．ウシ抜去下顎永久切歯の唇面象牙質平坦面を流水下にて露出させ，#600 の耐水研磨紙で研削した．基礎実習中の歯学部学生（undergraduates）5 名と臨床経験 5 年以上（平均 7.4 年）の歯科医師（professionals）5 名が，MB2 または UBQ を業者指示どおりに象牙質表面に接着操作を行った後，コン
ポジットレジンを 2 mm 築盛し，光照射を 20 秒行った．試料を 24 時間 37℃の水中に保管した後，クロスヘッ
ドスピード 1 mm/分にて微小引張試験を行った．得られた値は，二元配置分散分析と t 検定により統計処理を行った（p＝0.05）．さらに，Weibull 分析により解析した．
結果：MB2‒undergraduates，MB2‒professionals，UBQ‒undergraduates，UBQ‒professionals の平均値±標
準偏差（MPa）は，33.7±10.1，36.7±10.1，26.0±10.7，28.1±11.1，Weibull 係数は 3.6，4.2，2.0，2.6 であった．二元配置分散分析により，“臨床経験”は微小引張接着強さに影響せず（p＞0.05），“接着システム”は微小引張接着強さに影響した（p＜0.05）．Weibull 係数は，大きい値から MB2‒professionals，MB2‒undergraduates，UBQ‒professionals，UBQ‒undergraduates の順であった．傾きの差の検定では，すべての群の m の間に有意差を認めた（p＜0.05）．
結論：MB2 は UBQ より高い象牙質接着強さを示し，信頼性も高い接着システムであった．臨床経験の違い
は象牙質接着強さに影響を及ぼさなかったが，信頼性に関しては MB2，UBQ ともに臨床経験 5 年以上の歯科医師のほうが歯学部学生に比べて高かった．
キーワード：術者の臨床経験，象牙質接着性能，Weibull 分析
責任著者連絡先：高橋礼奈〒 113‒8549 東京都文京区湯島 1‒5‒45 東京医科歯科大学（TMDU）大学院医歯学総合研究科医歯学系専攻口腔機能再構築学講座う蝕制御学分野
TEL：03‒5803‒5483，FAX：03‒5803‒0195，E-mail：rtakahashi.ope@tmd.ac.jp
受付：2021 年 3 月 15 日/受理：2021 年 4 月 20 日
DOI：10.11471/shikahozon.64.220

2021 年 6 月

術者の経験と接着システムが象牙質接着強さと接着信頼性に及ぼす影響

緒

言

221

AP-X，クラレノリタケデンタル）2 mm の築盛を行った．光照射器は，LED 光照射器である VALO キュアリ
ングライト（VALO，ウルトラデント，USA）のスタン

これまで，コンポジットレジン修復において，セルフ

ダードモード（1,000 mW/cm2）を用いた．試料を 24 時

エッチングプライマーとボンドを 1 ボトルにした，1 ス

間 37℃水中に保管後，接着界面が約 1 mm2となるよう

テップボンディングシステムが多数開発されてきた．1に，精密切断加工機（アイソメット，ビューラー，USA）

ステップボンディングシステムでは，酸性モノマーがプを用いて接着界面に垂直に薄切し，ビーム状試片を作製

ロトンを電離しボンディング材にエッチング機能をもたした．小型卓上試験機（EZ-SX，島津）を用いてクロスせるために水を含有している ．さらに，触媒などを溶

ヘッドスピード 1 mm/分にて微小引張試験を行った（n解し，ボンドが歯質に浸透するのに適当な粘性を与える＝30）．得られた値は，Shapiro‒Wilk test にて正規性と有機溶媒（アセトンやアルコール）
やさまざまなモノマー

Levene test にて等分散性を確認した後，二元配置分散

1）

成分を含有している ．2 ステップボンディングシステ

分析と t 検定を用いて統計処理を行った．さらに，得らムに比べて，1 ステップボンディングシステムでは歯面れた微小引張接着強さの値に対して以下に示す式を用い処理時間の短縮，操作手順のエラーの減少など有利な点て Weibull 分析に必要な数値を算出した．

2）も挙げられる．その反面，ボンディング材の水や有機溶
媒は，ボンディング材の重合を阻害する因子でもあり，
さらに硬化後のボンディング層の機械的性質の低下の原因となるため，接着修復の劣化をまねく危険性もある．

Pf＝1－exp［（－σ/σ0）m］

Pf：破断確率，σ：応力（MPa），m：Weibull 係数，

σ0：尺度パラメーターである．

各条件間の Weibull 係数の差については，回帰直線のさらに近年，さまざまな被接着体に対して同一のボン

傾きの差の検定を行った．統計処理は，IBM SPSS Sta-

ディング材が使用できるユニバーサルタイプの接着シス

tistics 23（IBM，USA）を用いて有意水準 5％にて行っ

テムや，塗布後に待ち時間が必要ない接着システムが開た．

発され，臨床でも多用されるようになってきている．各さらに微小引張試験後の試料は金蒸着を施して走査電接着システムの操作方法は製品により異なり，術者の経子顕微鏡（SEM，JSM-5310LV，Jeol）にて破断面観察

験により接着強さに影響を及ぼすことが報告されていを行い，界面破壊または凝集破壊に分類した．

る．しかしながら，術者の臨床経験が異なる接着シス

3‒5）

テムに及ぼす影響やその接着信頼性について検討した報告は少ない．そこで本研究では，術者の臨床経験および
接着システムの違いが象牙質接着強さと接着信頼性に及ぼす影響について検討を行った．

材料および方法

結果

微小引張試験の結果を Table 2 に，Weibull プロットを Fig. 1 に示す．MB2-undergraduates，MB2-professionals，UBQ-undergraduates，UBQ-professionals の接着強さの平均値±標準偏差（MPa）は，33.7±10.1，36.7±10.1，26.0±10.7，28.1±11.1，Weibull 係数は 3.6，4.2，

本実験に用いた材料を Table 1 に示す．接着システム

2.0，2.6 であった．二元配置分散分析により，“臨床経験”

として，2 ステップボンディングシステムのクリアフィ

は微小引張接着強さに影響せず（p＞0.05），“接着システルメガボンド 2（MB2，クラレノリタケデンタル）と 1

ム”は微小引張接着強さに影響した（p＜0.05）．また，2ボトルユニバーサルタイプボンディングシステムのクリ

要因の交互作用は認められなかった（p＞0.05）．m は，

アフィルユニバーサルボンドクイック（UBQ，クラレノ

大きい値から MB2-professionals，MB2-undergradu-

リタケデンタル）を使用した．

ates，UBQ-professionals，UBQ-undergraduates の順で

被着体材料として，冷凍保存されたウシ抜去下顎永久切歯 40 歯を用いた．歯を解凍し，流水下にて唇面象牙質あった．傾きの差の検定では，すべての群の m の間に有意差を認めた（p＜0.05）．

平坦面をモデルトリマー（Y‒230，ヨシダ）にて露出さまた，微小引張試験後の破断面形態観察では，すべて

せ，#600 の耐水研磨紙で研削した．術者は，東京医科歯の群において，90％以上の凝集破壊が認められた（Fig. 2）．

科大学歯学部歯学科 4 年生で基礎実習中の学生（undergraduates）5 名と，臨床経験 5 年以上（平均 7.4 年）の歯科医師（professionals）5 名とした．各術者が，業者指考察示に従い MB2 または UBQ を用いて牛歯象牙質に接着操

本研究で用いた微小引張試験は，レジン系材料と象牙作を行い，光重合型コンポジットレジン（クリアフィル

質の接着試験に広く用いられている試験方法である．ま

日

222

本

Table 1
Material

Code

Clearfil Mega Bond 2

MB2

歯

科

保

存

学

雑

誌

第 64 巻第3号

Materials used in this study

Compositions

Procedure

Batch No.

Primer: 10-MDP, HEMA, hydrophilic dimeth- Apply and leave primer for 20 s, 3F0032
and then gently air-dry.
acrylate, water, photo initiator（pH＜2.5）
Bond: 10-MDP, HEMA, Bis-GMA, hydropho- Apply bond, gently air-dry, and 3M0047
bic dimethacrylate, silanated colloidal silica, then light cure for 10 s.
CQ, new initiators, accelerators

Clearfil Universal Bond
Quick

UBQ

Clearfil AP-X
Shade: A2

10-MDP, Bis-GMA, HEMA, hydrophilic amide Apply and air-dry immediately
monomer, filler, NaF, ethanol, water, photo for 5 s. Light cure for 10 s.
initiators, chemical polymerization, accelerator, others（pH 2.3）

5Q0035

Bis-GMA, TEGDMA, silane barium glass Light cure for 20 s.
filler, silane silica filler, silanated colloidal silica, CQ, pigments, others

B90078Manufacturer: Kuraray Noritake Dental, Tokyo, Japan; Abbreviations: 10-MDP: 10-methacryloyloxydecyl dihydrogen phosphate; HEMA: 2-hydroxyethylmethacrylate; Bis-GMA: bisphenol-A-diglycidylmethacrylate; TEGDMA: triethylene glycol
dimethacrylate; CQ: dl-camphorquinone
Table 2
Adhesive system
MB2
UBQ

Results of microtensile bond strength test and failure mode analysis
Operator

Mean±SD

m

σ0

P10

Failure mode ％（Ad/Co）

undergraduates

33.7±10.1a

3.6A

37.4

20.1

5/95

a

4.2B

40.4

23.5

6/94

b

C

2.0

30.3

9.7

7/93

2.6D

31.7

13.5

5/95

professionals

36.7±10.1

undergraduates

26.0±10.7

professionals

28.1±11.1b

Weibull modulus（m）, characteristic strength（σ0）in MPa, and 10％ probability of failure（P10）in MPa.
The values with the same superscript letters are not statistically different（p＞0.05）.
Ad: adhesive failure, Co: cohesive failure within substrates

た，Weibull 分析は信頼性の評価に用いる分析方法であされている製品が多い9）．HEMA-rich の接着システムでり，Burrow らは，Weibull 分析はレジン系材料と象牙質

は象牙質と接触したときの親水性の増加が認めら

接着強さにおける分析において有用であると報告していれ10,11），HEMA-free の接着システムでは，相分離によりる6）．Weibull プロットの回帰直線の傾きとして得られる

接着強さが低下することが報告されている9）．本研究でWeibull 係数（m）は，値が大きいほど接着強さのばらつ使用した UBQ は，HEMA の一部を HEMA より高い親

きが少なくなり，信頼性が高いといえる．

水性をもつ多官能アミド系モノマーに置換してある．

本研究で用いた MB2 と UBQ は，どちらも代表的なリ

Kuno らは，上記の置換を行うことにより象牙質への浸ン 酸 エ ス テ ル 系 モ ノ マ ー で あ る 10-methacryloy-

透性が向上し，かつ重合後のボンドの機械的強度が向上

loxydecyl dihydrogen phosphate（10-MDP）が含まれてし，接着性能が向上したと報告している12）．本研究においる．MB2 は，2 ステップセルフエッチボンディングシ

いて，UBQ が業者指示である塗布後待ち時間なしにもステムのゴールドスタンダードと考えられてきたクリアかかわらず 25 MPa 以上の平均微小引張接着強さを示

フィルメガボンド（クラレノリタケデンタル） よりも，し，凝集破壊が多くみられた．しかしながら，MB2 はボンドに新規重合触媒を含有することにより重合性が高

UBQ よりも有意に高い接着強さを示した．

7）

まり，初期接着強さおよび長期接着耐久性が向上したとの報告がある8）．

UBQ は有機溶媒としてエタノールを含有しているが，アセトンと比較した場合，エタノールの蒸気圧は低く，

1 液性の接着システムでは，親水性モノマーとして，共沸効果としての水の除去効果は高くないと考えられ水を取り込みハイドロジェルを形成する HEMA が含有

る1,10）．これら溶媒がボンド層や樹脂含浸層に残存する

2021 年 6 月

術者の経験と接着システムが象牙質接着強さと接着信頼性に及ぼす影響

223

In（In（1/（Survival probability）））

2
MB2－undergraduates

1

MB2－professionals

0

UBQ－undergraduates－1

UBQ－professionals

－2
－3
－4

1.5

2.0

2.5
3.0
3.5
In（Microtensile bond strength）
Fig. 1

4.0

4.5

Weibull plots of microtensile bond strengtha：dentin sideb：composite resin side

Fig. 2 Representative SEM images of the fractured specimens
Cohesive failures within bonding agent and dentin were observed.

ことにより，ボンドの重合不全を起こし接着強さを低下たと報告している．これは，UBQ はマイルドなセルフさせる ．エタノールと水は光照射前に徹底的に除去すエッチングシステムにもかかわらず，塗布後の待ち時間ることが必要であるが，溶媒が揮発するにつれてボンドがないことにより，スミヤー層の除去がほとんどできなの粘性が上昇するため，溶媒の完全除去は困難であかったためと結論づけている．

13）．さらに，UBQ には親水性モノマーとして，アミ

これまでの 2 ステップボンディングシステムと 1 ス

ド系モノマーに加えて HEMA が含まれており，溶媒除テップボンディングシステムを使用した研究では，2 ス

去 効 果 に 影 響 を 与えている可能性がある16）． 以 上 のテップボンディングシステムのほうが高い接着強さが得

UBQ の性質から，Weibull 係数が MB2 よりも小さくなっ

られ，値のばらつきが小さく信頼性が高い材料であった

たと考えられる．

との報告がある18）．このことは，本研究結果と一致する．

る

14,15）

Seitoku ら は，MB2 と UBQ を用いて象牙質に対す

本研究では，同一システムを用いた場合，術者の臨床

る微小引張試験と走査電子顕微鏡による接着界面観察を経験の差による微小引張強さに有意差が認められなかっ行っている．MB2 は，UBQ より有意に高い接着強さをたが，Weibull 係数では有意差が認められた．2 ステップ

示し，MB2 では多数のレジンタグが象牙細管内に観察さボンディングシステムは，プライマー成分中の水分の揮れたが，UBQ ではほとんどレジンタグがみられなかっ

発やボンドの厚みにより接着強さが変わるとの報告があ

17）

日

224

本

歯

科

る．1 ステップボンディングシステムでは，塗布方法・
塗布回数・塗布後のエアブローの強さにより，接着性能が左右されるとの報告がある ．Sano らは，術者の臨床
10）

経験は接着試験の結果に影響を及ぼすが，臨床経験よりも使用する接着システムのほうが接着試験の接着強さお
よび値のばらつきに影響を及ぼすと報告している3）．そして，2 ステップボンディングシステムを用いた際に，歯学部学生と歯科医師で接着強さに有意差がなかった
が，歯科医師のほうが値のばらつきが少なかったと報告しており，本研究結果と一致する3）．また，同一の術者が経験を重ねると接着強さが向上し，ばらつきが小さくなったとの報告がある19）．本研究においても，臨床経験
5 年以上の歯科医師は製品の使用に慣れており，塗布方法・ エ ア ブ ロ ー の強さなどの手技が安定して お り，Weibull 係数が大きくなったと考えられる．
本研究では，初期接着性能について検討したが，長期接着性能についてもさらなる検討が必要である．

結論

本研究の結果から，MB2 は UBQ より高い象牙質接着
強さを示し，信頼性も高い接着システムであることが明らかになった．臨床経験の違いは象牙質接着強さに影響を及ぼさなかったが，信頼性に関しては MB2，UBQ ともに臨床経験 5 年以上の歯科医師のほうが歯学部学生に比べて高かった．
本論文に関して，開示すべき利益相反状態はない．

文

献1）Van Landuyt KL, Snauwaert J, De Munck J, Peumans M,
Yoshida Y, Poitevin A, Coutinho E, Suzuki K, Lambrechts P, Van Meerbeek B. Systematic review of thechemical composition of contemporary dental adhesives.
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保

存

学

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誌

第 64 巻第3号

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壁象牙質接着性能に及ぼす効果．日歯保存誌 2019；62：39‒46．

2021 年 6 月

術者の経験と接着システムが象牙質接着強さと接着信頼性に及ぼす影響

17）Seitoku E, Hoshika S, Ikeda T, Abe S, Tanaka T, Sano H.
Bonding performance of a hydrophilic amide monomer
containing adhesive to occlusal and cervical dentin.
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225

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日

226

本

歯

科

保

存

学

雑

誌

第 64 巻

第3号

Effects of Clinical Experience and Adhesive Systems
on Dentin Bonding Strength and Dentin Bonding Reliability
TAKAHASHI Rena, ENOMOTO Megumi1, ODA Yutaro,
UCHIYAMA Saki, ROZAN Shin, KANAMORI Yuna2,
AKEHASHI Sae3, TAGAMI Atsuko, TAKAHASHI Akifumi4,
NORITAKE Kanako2, SATO Takaaki and TAGAMI Junji
Department of Cariology and Operative Dentistry, Division of Oral Health Sciences, Medical and Dental Sciences,
Graduate School of Medical and Dental Sciences, Tokyo Medical and Dental University（TMDU）
1

Faculty of Dentistry, Tokyo Medical and Dental University（TMDU）

2

Oral Diagnosis and General Dentistry, Dental Hospital, Tokyo Medical and Dental University（TMDU）
3

Department of Operative Dentistry, Cariology and Pulp Biology, Tokyo Dental College
4

The Nippon Dental University Hospital, General Dentistry 1

Abstract
Purpose: In composite resin restoration, universal adhesives have become popular due to their broad applicability in various clinical situations. The clinical success of adhesive systems depends not only on material-related but also on operator-related factors. The purpose of this study was to evaluate the dentin bondstrength of two adhesive systems performed by operators with or without clinical experience.
Methods: Two types of adhesive system, a two-step self-etch adhesive, Clearfil Mega Bond 2（MB2）, and a1-bottle universal adhesive, Clearfil Universal Bond Quick（UBQ）, were used in this study. The operators
were five undergraduate dental students with no clinical experience at all（undergraduates）and five dentists
with extensive experience in adhesive dentistry（mean experience of 7.4 years）（professionals）. Forty bovine
dentin surfaces were prepared with #600-grit SiC paper under running water. MB2 or UBQ was applied tothe dentin surfaces and light-cured according to the manufacturer’s instructions, followed by 2-mm composite buildups by each operator. The specimens were sectioned and subjected to a microtensile bond strength（μTBS）test after being stored in water for 24 h. The data were statistically analyzed by two-way ANOVA
and t-test（p＝0.05）. Weibull analysis was also performed on the μTBS data.
Results: The mean μTBSs in MPa/Weibull modulus value were MB2-undergraduate: 33.7/3.6, MB2-professionals: 36.7/4.2, UBQ-undergraduate: 26.0/2.0, and UBQ-professionals: 28.1/2.6. Two-way ANOVA revealed
that“adhesive system”influenced μTBS（p＜0.05）, while“operator”did not（p＞0.05）. The Weibull modulus of each group was significantly different（p＜0.05）.
Conclusion: MB2 is superior to UBQ in terms of dentin bond strength and bonding reliability. The practitioner’s clinical experience does not affect the dentin bond strengths of both MB2 and UBQ. Professionals
attained superior bonding reliability of both MB2 and UBQ compared with undergraduates.
Key words: clinical experience, dentin bond strength, Weibull analysis
Corresponding author: Dr. TAKAHASHI Rena, Department of Cariology and Operative Dentistry, Division of Oral Health Sciences, Medical and Dental Sciences, Graduate School of Medical and Dental Sciences, Tokyo Medical and Dental University（TMDU）, 5‒45, Yushima 1-chome, Bunkyo-ku, Tokyo 113‒8549, Japan,
TEL: ＋81‒3‒5803‒5483, FAX: ＋81‒3‒5803‒0195, E-mail: rtakahashi.ope@tmd.ac.jp
Received for Publication: March 15, 2021/Accepted for Publication: April 20, 2021

2021 年 6 月

227

原

著

日歯保存誌 64（3）：227～236，2021

リン酸系モノマー含有歯面処理剤がレジンセメントの接着性に及ぼす影響
石

井

髙見澤

亮1,2

笠

原

悠

太1

廣

兼

榮

造1

俊

樹1,2

辻

本

暁

正1,2

吉

中

雄

太1

宮

崎

至1,2

北

原

真

信

也1,3

日本大学歯学部保存学教室修復学講座

1

日本大学歯学部総合歯学研究所生体工学研究部門

2

TEAM 東京

3

ノブレストラティブデンタルオフィス

抄録
目的：唾液汚染が生じた歯質表面に対し，各種汚染除去法がレジンセメントの接着性に及ぼす影響について，
剪断接着強さおよび歯質表面の表面自由エネルギーを求めるとともに SEM 観察を行うことによって検討した．
材料と方法：レジンセメントとしてパナビア V5（クラレノリタケデンタル）を，唾液汚染面の表面処理剤としてカタナクリーナー（KC，クラレノリタケデンタル），Multi Etchant（ME，ヤマキン）および Ultra‒Etch（UE，Ultradent Products）を使用した．接着試験用試片の製作に際して，ウシ下顎前歯歯冠部を常温重合レ
ジンに包埋し，エナメル質あるいは象牙質平坦面を耐水性 SiC ペーパー #320 を用いて研削して被着歯面とした．これらの被着歯面に対し，ヒト唾液を 10μl 滴下してこれを汚染面とした．汚染面に表面処理を施すことなく測定を行ったものを SC 群，汚染のない被着面を Control 群とした．汚染面の表面処理法は，KC 群，ME群および UE 群の合計 3 条件とした．これらの被着面に対して内径 2.4 mm，高さ 2 mm の円柱状ステンレス型
を静置し，これにセメントペーストを塡塞して接着試験用試片とした．これらの試片を 37℃精製水中に 24 時
間保管後，あるいは 24 時間保管後に 5～55℃を 1 サイクルとしたサーマルサイクル（TC）を 10,000 回負荷後，万能試験機（Type 5500R，Instron）を用いてクロスヘッドスピード 1.0 mm/min の条件で剪断接着強さを測定した．表面自由エネルギーの算出に際しては，剪断接着強さ測定用試片と同様に調製した試片に対して，表面
自由エネルギーが既知である 3 種類の液体を用いて接触角を測定することによって求めた．また，各被着歯面における，各処理後の SEM 観察を行った．
成績：歯質に対するレジンセメントの 24 時間後の接着強さは，Control 群に比較して SC 群で有意に低下したが，表面処理を行うことによって回復した．TC 後におけるレジンセメントの接着強さは，エナメル質ではUE 群が有意に高い値を示し，象牙質においては KC 群が有意に高い値を示した．歯質表面における表面自由エネルギーは SC 群で低下したが，各表面処理の影響は歯質とともに各処理剤によって異なるものであった．
結論：本実験の結果から，唾液汚染されたエナメル質および象牙質に対する表面処理は，汚染面を改質することで接着強さを向上させた．また，処理面の表面自由エネルギーは各処理剤によって異なる傾向を示した．
キーワード：唾液汚染，レジンセメント，表面自由エネルギー，接着強さ

責任著者連絡先：石井 亮〒 101‒8310 東京都千代田区神田駿河台 1‒8‒13 日本大学歯学部保存学教室修復学講座
TEL：03‒3219‒8141，FAX：03‒3219‒8347，E-mail：ishii.ryou@nihon-u.ac.jp
受付：2021 年 2 月 22 日/受理：2021 年 4 月 23 日
DOI：10.11471/shikahozon.64.227

日

228

緒

本

歯

科

保

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雑

誌

第 64 巻第3号

唇側中央部をモデルトリマーを用いて研削した．次い言で，この面を耐水性 SiC ペーパーの #320 で研削し，被着歯面とした（Control 群）．

近年，CAD/CAM システムが普及したことによって，これらの被着歯面に対し，ヒト唾液を 10μl 滴下し 60

セラミックスやコンポジットレジンブロックを用いた間秒後に水洗し 10 秒間乾燥させたものを唾液汚染面（SC接法による修復治療を選択する機会が増加している1）．

群）とした．汚染面の表面処理法は，KC 処理（KC 群），

これら修復材料は，優れた審美性を有するとともに，機ME 処理（ME 群）および UE 処理（UE 群）の 3 条件と械的強度も高く耐摩耗性にも優れている2,3）．一方，製作した．各被着歯面に対し歯面処理を行った後，内径 2.4された歯冠修復物は，口腔内で長期間機能させるために

mm，高さ 2 mm のステンレス（SUS 304）製リング状

は装着材として接着性レジンセントを使用することが推

モールドにセメント泥を塡塞し，塡塞面を透明ストリッ

奨されている4）．

プスで圧接して 30 秒間光照射を行ったものを接着試験

間接修復法においては，製作された歯冠修復物を口腔用試片とした．

内で試適し，調整する必要がある．その際，歯冠修復物

これらの試片を，37℃精製水中に 24 時間保管，あるい

内面あるいは被着歯面に唾液汚染が生じることとなる．

は 24 時間保管後にサーマルサイクル試験機（サーマル

この唾液汚染はレジンセメントの接着阻害因子となり，ショックテスター TTS‒1，トーマス科学）を用いて 5～

接着性を低下させることが指摘されている．このう

55℃を 1 サイクルとし，各温度における係留時間を 30 秒

ち，化学的除去法としてリン酸系モノマーを用いて，界間に設定したサーマルサイクル（TC）を 10,000 回負荷

面活性作用を効果的に発揮するという製品が開発されした．その後，万能試験機（Type 5500R，Instron，USA）

た7‒9）．しかし，これらの製品における汚染除去効果ととを用いてクロスヘッドスピード 1.0 mm/min の条件で剪

もに歯質接着性に及ぼす影響については，開発から間も断接着強さを測定した．各条件における試片の数は 15 個ないこともあり，不明な点が多いのが現状である．

とし，接着試験終了後の試片については，実体顕微鏡

5,6）

そこで著者らは，レジンセメントの接着性に関する研（SZH‒131，オリンパス）を用いて被着歯面およびレジン究の一環として，被着歯面の唾液汚染に対する表面処理

セメント破断面を観察し，界面破壊，歯質あるいはレジ材の応用効果について検討した．すなわち，唾液汚染がンセメントの凝集破壊および混合破壊として分類した．

生じた被着歯面および汚染を除去した後の接着強さを測

なおヒト唾液は，本研究の趣旨を理解し協力を得られ定するとともに，処理面の表面自由エネルギーの変化かた，全身健康状態および口腔内環境が良好な 30 代男性 1

ら，レジンセメンントの歯質に対する接着性について検名から採取した唾液を試料とした．唾液採取に際して討するとともに，被着歯面の走査電子顕微鏡（SEM）観

は，研究協力者に唾液採取前 2 時間以内の飲食およびブ察を行った．

ラッシングを控えるようにあらかじめ指示した．その材料および方法
1 ．供試材料および可視光線照射器
供試したレジンセメントおよび唾液汚染に対する表面処理材を，Table 1，2 に示した．すなわち，レジンセメ

後，パラフィンぺレットを 5 分間嚙むことによって刺激唾液を採取，これを試料とした．なお，唾液採取に関しては実験ごとに行った．
また，本研究の実施にあたっては日本大学歯学部倫理審査委員会の承認を得ている（倫許 2019‒12）．
3 ．表面自由エネルギーントとしてパナビア V5（クラレノリタケデンタル）を，

表面自由エネルギーの算出に際して，接着試験用試片

表面処理剤としてカタナクリーナー（KC，クラレノリタと同様に処理したウシ下顎前歯の歯冠部に対して各表面

ケデンタル），Multi Etchant（ME，ヤマキン）および処理を行った．表面自由エネルギーが既知の液体としUltra‒Etch（UE，Ultradent Products，USA）を用いて，1‒ブロモナフタレン，ジヨードメタンおよび蒸留水

た．また，可視光線照射器（Optilux 501，Kerr，USA）

を使用した（Table 3）．接触角の測定は，全自動接触角は，その光強度が 600 mW/cm2以上であることを確認し計（Drop Master DM 500，協和界面科学）を用い，セて実験に使用した．

シルドロップ法でそれぞれの液滴を 1μl 滴下し，装置に2 ．接着強さ

付属するソフトウェア（FAMAS，協和界面科学）を用

接着試験測定用試片の製作に際して，ウシ（2～3 歳齢）いてθ/2 法で測定を行った（Fig. 1）．なお，接触角の測

下顎前歯歯冠部（大阪食肉臓器）のみを常温重合レジン

定は液滴滴下直後とし，各条件における試片数は 10 個と（トレーレジンⅡ，松風）に包埋し，直径 6～8 mm 程度

した．

のエナメル質あるいは象牙質平坦面が得られるように，

表面自由エネルギーと接触角の関係は，接着仕事量を

2021 年 6 月

唾液汚染除去法がレジンセメントの歯質接着性に及ぼす影響
Table 1Resin cement

Resin cement used in this study

Main component

Panavia V5

229

Manufacturer

Lot No.

Past A: Bis-GMA, TEGDMA, hydrophobic aromatic dimethacry- Kuraray Noritake Dentallate, hydrophilic aliphatic dimethacrylate, silanated barium
glass filler, fluoroaluminosilicate glass filler, colloidal silica,
accelerator, initiator

5M0104

Past B: Bis-GMA, hydrophobic aromatic dimethacrylate, hydrophilic aliphatic dimethacrylate, silanated barium glassfiller, silanated aluminum oxide filler, accelerator, dl- camphorquinone, pigments
Panavia V5Tooth primer

10-MDP, hydrophilic aliphatic dimetacrylate accelerators, HEMA,
water, stabilizer

Kuraray Noritake Dental

AB0071

Bis-GMA: 2,2-bis［4-（2-hydroxy- 3-methacryloyloxypropoxy）phenyl］propane, TEGDMA: triethyleneglycol dimethacrylate,
10-MDP: 10-methacryloyloxydecyl dihydrogen phosphate, HEMA: 2-hydroxyethyl methacrylate.

Table 2Pretreatment materials used in this study

Pretreatment（Code）

Main component

pH

Manufacturer

Lot No.

Katana Cleaner（KC）

10-MDP, water, triethanolamine, polyethyleneglycol, stabilizer, accelerator, dyes

4.51

Kuraray Noritake Dental

AH001

Multi Etchant（ME）

M-TEG-P, water, thicluig agenrt, dyes

0.6

Yamakin

02022026

Ultra-Etch（UE）

35％phosphoric acid, water, silicon dioxide, dyes

＜1

Ultradent Products（USA）

01071704

10-MDP：10-methacryloyloxydecyl dihydrogen phosphate, M-TEG-P：methacryloyloxy tetraethylene glycol dihydrogen
phosphate.

Table 3

Surface-free energy and their components values of three test liquids（mN・m－1）

Liquids

Lot No.

Manufacturer

γLd

γLp

γLh

γL

1-Bromonaphthalene
Diiodomethane
Distilled water

ALH4513
ALL2310

Wako Pure Chemical Industries
Wako Pure Chemical Industries

44.4
46.8

0.2
4.0

0.0
0.0

44.6
50.8

29.1

1.3

42.4

72.8

―

―

γL : dispersion force, γL : polar force, γL : hydrogen-bonding force, γL: total free-energy of liquid.
dph

WSL，液体の表面自由エネルギーをγL，固体の表面自由γL＝γLd＋γLp＋γLh

エネルギーをγS および接触角をθとしたとき，以下にγS＝γSd＋γSp＋γSh

示す拡張 Fowkes の理論式で定義される10）．

4 ．SEM 観察
唾液汚染後とともに各表面処理後の歯質表面を観察す

WSL＝γL＋γS－γSL＝γL（1＋cosθ）
この拡張 Fowkes の理論式を用いて，各条件におけるるために，各試片を接着試験および表面自由エネルギー

表面自由エネルギー（γS）を分散（γSd），双極子（γSp）

測定用試片と同様に処理した．次いで，試片を tert‒ブタおよび水素結合（γS ）の各成分を，次に示す理論式から

ノール濃度上昇系列を用いて脱水するとともに，フリー算出した．

ズドライヤー（Model ID‒3，エリオニクス）を用いて乾hγSL＝γS＋γL－2（γS ・γL ） －2（γS ・γL ）d－2（γS ・γL ）
h

h 1/2

d 1/ 2p

p 1/ 2

燥処理を行った．この面にイオンスパッタ装置（Quick
Coater Type SC‒201，サンユー電子）を用いて金蒸着

日

230

本

歯

科

Dispenser

保

存

学

雑

Table 4誌

第 64 巻

第3号

Influence of surface treatment of saliva contaminated enamel on bond strength of resin cement
Treatment

Adapter

ControlSC

CCD camera
Sample stage（a）

Enamel

KC
ME
UE

L

R

（b）
Fig. 1 Contact angle meter used in this study（DropMaster DM500; Kyowa Interface Science）（a）Using this device, automatic measurements of thecontact angles can be done（b）.

Table 5ControlSCた．
Dentin

置分散分析，表面自由エネルギーについては一元配置分
散分析を行い，その後 Tukey Honestly Significant Difference test を用いて有意水準 5％の条件で統計処理を
行った．

成

績

1 ．接着強さ
唾液汚染歯面の表面処理剤の違いがレジンセメントの接着性に及ぼす影響および試験後の破壊形式を Table
4，5 に示した．二元配置分散分析の結果から，歯面処理23.3（1.8）

16.8（1.6）c［9/1/0/0］

5.2（1.0）c

3.7（0.7）d［10/0/0/0］

22.1（2.6）b

23.4（2.0）b［8/2/0/0］b19.5（1.9）

20.2（1.1）b［8/2/0/0］

26.9（2.5）aa
27.3（1.6）［8/2/0/0］［6/3/0/1］［10/0/0/0］［7/3/0/0］［8/2/0/0］［6/4/0/0］

Influence of surface treatment of saliva contaminated dentin on bond strength of resin cement
Treatment

エリオニクス）を用いて加速電圧 10 kV の条件で観察し接着強さについては，等分散性を確認した後，二元配TCbn＝15, unit: MPa, values in parenthesis indicate standard deviations. Fracture mode［adhesive failure/cohesive failure in resin cement/cohesive failure in enamel/
mixed failure］. Same small case letter columns indicates no difference at 5％ significance level.
TC: thermal cycles

し，フィールドエミッション型 SEM（ERA‒8800 FE，5 ．統計処理

24 h

KC
ME
UE

24 h

TC
a

19.8（2.1）

16.2（1.2）b［9/1/0/0］

4.8（0.7）de
2.6（0.9）［10/0/0/0］

19.1（1.8）aa
20.8（1.2）［9/1/0/0］a18.1（1.1）

15.1（1.1）b［10/0/0/0］

20.4（1.4）a12.7（1.9）c［10/0/0/0］［7/2/0/1］［10/0/0/0］［9/1/0/0］［9/1/0/0］［9/1/0/0］

n＝15, unit: MPa, values in parenthesis indicate standard deviations. Fracture mode［adhesive failure/cohesive failure in resin cement/cohesive failure in dentin/
mixed failure］. Same small case letter columns indicates no difference at 5％ significance level.
TC: thermal cycles

はいずれの条件においても SC 群と比較して有意に高い法および TC 条件の組合せは，接着強さへの有意な影響値を示し，Control 群と比較して KC 群（22.1 MPa）およ因子であり（p＜0.001），それぞれの因子の交互作用につび ME 群（19.5 MPa）は有意差が認められなかったもの

いても有意差が認められた（p＜0.001）．

の，UE 群（26.9 MPa）は有意に高い値を示した．TC 負エナメル質の 24 h における接着強さは，SC 群（5.2

荷後のエナメル質接着強さは，24 h の接着強さと比較しMPa）は Control 群（23.3 MPa）と比較して有意に低いて Control 群（16.8 MPa）および SC 群（3.7 MPa）にお値を示した．唾液汚染面に表面処理を行うと，接着強さ

いて有意に低下した．一方，KC 群（23.4 MPa）
，ME 群

2021 年 6 月

唾液汚染除去法がレジンセメントの歯質接着性に及ぼす影響
Table 6

231

Influence of surface treatment of saliva contaminated tooth on surface freeenergyTreatment

γSd

γSp

γSh

γS

EnamelControl
SC
KC
ME
UE

43.9（1.3）
42.9（1.2）
43.2（1.2）
43.4（1.5）
42.2（1.2）

3.4（1.4）
0.0（0.0）
2.4（1.4）
1.3（1.2）
8.6（1.2）

14.6（2.7）
6.8（0.4）
13.4（0.9）25.1（1.1）
27.4（1.2）

61.9（1.7）
49.7（1.4）
59.0（1.9）
69.8（1.7）
78.2（1.2）

DentinControl
SC
KC
ME
UE

42.3（1.3）
38.4（1.2）
35.8（1.2）
40.6（1.5）
36.8（1.4）

2.8（1.3）
0.0（0.0）
1.6（1.4）
0.9（0.2）
1.4（1.5）

25.4（1.6）
8.2（1.5）
18.3（2.0）
10.2（2.0）
2.8（1.5）

70.5（1.3）
46.6（1.8）
55.7（1.6）
51.7（1.1）
41.0（1.1）

N＝10, unit: mN・m－1, values in parenthesis indicate standard deviations.
Values connected by vertical lines indicate no significant difference（p＞0.05）.
γSd: dispersion force, γSp: polar force, γSh: hydrogen-bonding force, γS: surface
free energy.

（20.2 MPa）および UE 群（27.3 MPa）においては，TC（1.3～8.6 mN・m－1）を示し，UE 群（8.6 mN・m－1）で後における接着強さに差は認められなかった．接着試験

KC 群（2.4 mN・m－1）および ME 群（1.3 mN・m－1）と後の破壊形式は，いずれの保管条件においても SC 群で比較して有意に高い値を示した．また，水素結合成分

界面破壊が大勢を占めたのに対し，唾液汚染後の表面処（γSh）は，SC 群で有意に低い値（6.8 mN・m－1）を示

理によってレジンセメント内の凝集破壊が増加する傾向

し，各表面処理によって上昇した（13.4～27.4 mN・m－1）
．

を示した．

唾液汚染された象牙質におけるγS では，Control 群

象牙質の 24 h における接着強さは，エナメル質接着強（70.5 mN・m－1）と比較していずれの群においても有意さと同様に，Control 群（19.8 MPa）と比較して SC 群に低い値（41.0～55.7 mN・m－1）を示した．また，SC 群（4.8 MPa）において有意に低い値を示し，唾液汚染後の（46.6 mN・m－1）に対し KC 群（55.7 mN・m－1）および各種表面処理により接着強さは向上した．TC 負荷後のME 群（51.7 mN・m－1）は有意に高い値を示し，逆に象牙質接着強さは，24 h と比較して KC 群を除いて有意UE 群（41.0 mN・m－1）は有意に低い値を示した．表面に低下した．また，TC 負荷条件内で比較すると，KC 群

自由エネルギーの各構成成分で比較すると，γSdはいず（20.8 MPa）および ME 群（15.1 MPa）では Control 群

れの条件においても支配的であり，γSpはエナメル質同（16.2 MPa）と同等あるいは有意に高い値を示したのに対様，SC 群では 0 であったものが，唾液汚染面に対する表

して，UE 群（12.7 MPa）は有意に低い値を示した．接面処理によって有意に高い値（0.9～1.6 mN・m－1）を示

着試験後の破壊形式では，いずれの条件においても界面した．またγShは，SC 群（8.2 mN・m－1）と比較して KC

破壊がその大勢を占めた．

群（18.3 mN・m－1）で有意に高い値を示したものの，UE 群（2.8 mN・m－1）では有意に低下した．

2 ．表面自由エネルギー
唾液汚染および各表面処理後の歯質表面における表面

3 ．SEM 観察

自由エネルギー（γS）およびその各成分を Table 6 に示

唾液汚染および各表面処理後の歯面における代表的なした．唾液汚染されたエナメル質のγS は，Control 群

SEM 像を Fig. 2 に示した．また，参考として唾液汚染さ（61.9 mN・m－1）と比較して有意に低い値（49.7 mN・れていない歯面に対する各表面処理後の代表的な SEMm－1）を示したものの，SC 群に対する表面処理後のγS像を Fig. 3 に示した．Control 群では，エナメル質および－1

は，SC 群と比較して有意に高い値（59.0～78.2 mN・m ）象牙質のいずれにおいても SiC ペーパーによる削状痕をを示した．表面自由エネルギーの各構成成分で比較する

認めるとともに，その表面は厚いスミヤー層に覆われてと，分散成分（γS ）はいずれの条件においても支配的でいた．SC 群においては，その表面に唾液成分と考えられあるとともに有意差は認められなかった（42.2～43.9

る残留物が認められたものの，UE 群では汚染物質とと

d－1

mN・m ）．一方，双極子成分（γS ）は，SC 群では 0

もにスミヤー層もすべて除去され，エナメル質ではエッであったものが，各表面処理によって有意に高い値

チングパターンが，象牙質では象牙細管が明瞭に観察さ

p

日

232

本

Enamel

歯

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保

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誌

第 64 巻
DentinControl

SC

KC

ME

UE

Fig. 2 SEM observation of saliva contaminated and surface treated tooth
Arrows indicate the saliva contamination.

第3号

2021 年 6 月

唾液汚染除去法がレジンセメントの歯質接着性に及ぼす影響
Enamel233

DentinKC

ME

UE

Fig. 3

SEM observation for surface treated tooth without saliva contamination

れた．KC 群および ME 群においては，SC 群で観察されついては議題が残っている15）．そこで，口腔内に使用可

た残留物は認められず，スミヤー層は除去されているも能な唾液汚染の効果的除去法としてリン酸系モノマーをのの，一部に微細な粒子の残留が認められた．

用い，その界面活性剤としての効果によって被着面のヌ

考察

セラミックスやハイブリッドレジンを用いた間接修復
法は，デジタルデンティストリーの普及に伴って一般臨

レ性を向上させることが提案され，臨床使用がされている7‒9）．しかし，これらの処理剤は開発されて間もないところから，その詳細については不明な点が多い．そこで，
これら歯面処理剤がレジンセメントの接着性に及ぼす影響について，リン酸エッチング材と比較検討した．

．一方，これら歯冠修復物

その結果，レジンセメントのエナメル質接着強さは，の装着には，その良好な予後を獲得するためにレジンセ

唾液汚染によって 24 h および TC 後のいずれも有意に低メントを用いることが推奨されている13）．レジンセメン

下した．歯質表面における唾液汚染は，唾液タンパク質

トは，高い接着性を示すものの歯冠修復物の試適時に生成分が歯質表面に吸着するため，水洗のみによる除去はじる唾液汚染が接着性を低下させることが指摘されてい不可能とされている9,14）．歯質に残留した唾液成分が，レる．そこで，歯冠修復物内面に対する汚染物質の除去

ジンセメントに付属しているトゥースプライマーと被着法として，機械的および化学的方法が検討されている．

歯面との化学的相互作用を阻害することによって，接着

一方，被着体である歯質表面に対する汚染物質除去法に強さが低下したものと考えられた．これに対して，唾液

ついては化学的清掃法としては，リン酸エッチング処理

汚染面に各表面処理を行うことで汚染物質が除去され，が用いられてきたものの，象牙質に対するリン酸処理に接着強さが有意に向上したものと考えられた．特にエナ床に急速に広がっている

11,12）

9,14）

日

234

本

歯

科

保

存

学

雑

誌

第 64 巻第3号

メル質接着強さに関しては，UE で 24 h および TC 条件

るためコラーゲン線維の露出量が増加する．その結果，

でほかの群に比較して有意に高い値を示したが，これはプライマー成分が十分に浸透せず，樹脂含浸層の形成がエッチングパターンの形成による粗糙面形成ならびに被不十分な層が生じるために象牙質への接着性が低下す

着面積の増加によるものと考えられた15）．

る25）．エナメル質に対してのリン酸エッチングは，レジ

エナメル質表面における表面自由エネルギー（γS）
は，

ンセメントの接着強さ向上には大きな効果を発揮するも表面処理を行うことによって SC 群に比較して有意に向のの，象牙質に対する接着耐久性向上効果は期待できな上した．固体表面における表面自由エネルギーは，そのい可能性が示唆された．これに対してリン酸系モノマー

界面における清浄度とともに界面における活性の指標とを用いて象牙質表面の唾液汚染を除去する方法は，残留されている．このことから，エナメル質においてはする機能性モノマーの違いによって異なる傾向を示すも

唾液汚染後の各表面処理によって唾液汚染物質が除去さのの，接着耐久性の維持という観点からも優れた前処理れたことで，表面自由エネルギーが上昇したものと考え法であると考えられた．臨床においては，全部冠の場合，られた

16,17）．一方，γS およびγS は各表面処理によって接着対象が象牙質となることから，リン酸系処理剤の使高い値を示した．歯質表面に唾液汚染が生じた際，歯質用は接着耐久性の維持という観点からも望ましいと考え表面の極性側鎖に対し，唾液タンパクをはじめとする汚られる．一方，インレーまたはアンレー窩洞のようにエ

染物質の極性側鎖が吸着することで歯質表面に非極性側ナメル質が混在する場合，エナメル質にセレクティブ

鎖が配向するため，γS は有意に低下したものと考えられエッチングを行い，象牙質に対してはリン酸系処理剤をた．一方，各表面処理によって汚染物質が除去されて歯併用することが望ましいと考えられる．

18,19）ph

質表面が改質されたことで，γS およびγS が上昇したも

以上のように，本実験の結果からリン酸系モノマーをのと考えられ20），エナメル質に対する TC 後の高い接着用いた表面処理剤である KC および ME は，唾液汚染さ強さにつながった可能性が示された．

れたエナメル質および象牙質に対するレジンセメントのph

象牙質においても，エナメル質と同様に唾液汚染物質

接着性を向上させることが明らかとなった．

を除去することで 24 h の接着強さは有意に向上した．こ結れは，SEM 観察の結果からも各表面処理によって汚染物質が除去されていたことからも明らかと考えられる．

論

一方，表面自由エネルギーにおけるγSpおよびγShは，唾

リン酸系モノマー含有歯面処理剤がレジンセメントの液汚染面と比較して KC 処理および ME 処理によって向接着性に及ぼす影響について検討した結果，以下の結論

上したものの，UE 処理で有意に低下した．

を得た．

KC に含有されている MDP は，親水基と疎水基をもつ

1．リン酸系モノマー含有歯面処理剤である KC およ

両親媒性の機能性モノマーである ．MDP は歯質表面

び ME は，機能性モノマーによる界面活性効果により清に吸着した汚染物質を取り囲むように疎水基が結合し，掃効果を発揮し，レジンセメントの歯質接着性を向上さ

親水基を外側に配向したミセルを形成する ．その結果，

せた．

21）

7）

汚染物質に対する界面活性作用による洗浄効果が発揮さ

2．唾液汚染されたエナメル質の表面自由エネルギー

れ，象牙質の構造を変化させることなく汚染物質の除去

は，唾液汚染によって低下するものの，UE 処理で有意が可能と考えられている．また，ME においては，KC 同に向上した．

様に機能性モノマーによる界面活性効果による清掃性を

3．唾液汚染された象牙質の表面自由エネルギーは，獲得している．しかし，使用されている機能性モノマー

唾液汚染によって低下した．また，KC 処理および MEの性質は異なるもので，ME に含有されている M‒TEG‒

処理で向上するものの，UE 処理で有意に低下した．

P は界面活性剤に用いられるポリエチレングリコールと4．SEM 観察の結果から，唾液汚染後の各表面処理に類似した構造を連結基にもつリン酸系モノマーであより汚染物質は除去され，清掃効果を得た．しかし，KCる22‒24）．ME は，M‒TEG‒P の作用によって歯質表面へ群および ME 群においては残留モノマーと思われる粒子のマイルドなエッチング効果とともに，汚染物質に対すが観察された．

る界面活性効果を発揮することで清掃効果を発揮するとされている．このことから，KC 群および ME 群においては汚染物質の除去により，歯質表面の改質がされたものの，残留する機能性モノマーの違いによってγSpおよびγShが異なる傾向を示したものと考えられた．
象牙質表面に対するリン酸エッチングは，過脱灰とな

本論文に関して，開示すべき利益相反状態はない．

文

献1）Spitznagel FA, Boldt J, Gierthmuehlen PC. CAD/CAM

2021 年 6 月

唾液汚染除去法がレジンセメントの歯質接着性に及ぼす影響

ceramic restorative materials for natural teeth. J Dent

235

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Johnson WW, Takamizawa T, Latta MA, Miyazaki M.

日

236

本

歯

科

保

存

学

雑

誌

第 64 巻

第3号

Influence of a Tooth Conditioner Containing Phosphoric Acid Ester
Monomer on the Bond Performance of a Resin-based Luting Cement
ISHII Ryo1,2, KASAHARA Yuta1, HIROKANE Eizo1,
TAKAMIZAWA Toshiki1,2, TSUJIMOTO Akimasa1,2, YOSHINAKA Yuta1,
MIYAZAKI Masashi1,2 and KITAHARA Nobuya1,31Department of Operative Dentistry, Nihon University School of Dentistry2

Division of Biomaterials Science, Dental Research Center, Nihon University School of Dentistry3

Nobu Restorative Dental Office, Team Tokyo

Abstract
Purpose: The purpose of this study was to determine the influence of a tooth conditioner containing phosphoric acid ester monomer on the bond performance of a resin-based luting cement to saliva contaminatedsurfaces based on shear bond strength（SBS）tests and surface free energy（SFE）measurements.
Materials and Methods: Three conditioners for saliva contaminated tooth surfaces were used: Katana
Cleaner（KC, Kuraray Noritake Dental）, Ultra-Etch（UE, Ultradent Products）, and Multi Etchant（ME, Yamakin）. Panavia V5（Kuraray Noritake Dental）was used as a resin-based luting agent. Bovine enamel anddentin surfaces were ground with SiC papers, ending at #320 grit. For saliva contaminated tooth surfaces,
10μl of human saliva was applied to the ground surface. Uncontaminated tooth surfaces were set as a control group. The saliva contaminated specimens were divided into four groups, treated with the different conditioners described above（KC, UE, and ME group）or without any treatment（SC group）. A stainless-steel
metal ring was placed over the bonding area, and the luting agent was condensed into the ring and lightirradiated. The assembled specimens were stored in 37℃ water for 24 h. Half of the specimens in each groupwere subjected to thermal cycling（TC）
10,000 times between 5 and 55℃, with a dwell time of 30 s. The otherhalf of the specimens in each group formed a baseline group. SBS tests were conducted after each storage
condition. For SFE determinations, specimens were prepared as for the SBS tests. The contact angles ofthree test liquids that have known SFE parameters were measured using a contact angle meter. In addition,
SEM observations were performed of surfaces treated with the three different conditioners after saliva contamination.
Results: In the baseline groups, although the SC groups showed a significantly lower SBS value than thecontrol groups in both enamel and dentin, the conditioner treated groups showed higher SBS values than the
SC groups. In the TC groups, UE showed a significantly higher enamel SBS than the other groups, but KC
showed a significantly higher dentin SBS than the other groups. Although the SC groups showed significantly lower SFEs than the control groups in both enamel and dentin, the SFEs after conditioner treatment
were material dependent.
Conclusion: After salival contamination of tooth surfaces, the conditioners tested might be useful inenhancing the bond performance of the resin-based luting cement due to modification of the contaminatedtooth surfaces. The SFEs of treated surfaces differed with different conditioners depending on their conditioning mechanisms.
Key words: saliva contamination, resin-based luting agent, surface free energy, bond strength
Corresponding author: Dr. ISHII, Department of Operative Dentistry, Nihon University School of Dentistry, 1‒8‒13, Kanda-Surugadai, Chiyoda-ku, Tokyo 101‒8310, Japan
TEL: ＋81‒3‒3219‒8141, FAX: ＋81‒3‒3219‒8347, E-mail: ishii.ryou@nihon-u.ac.jp
Received for Publication: February 22, 2021/Accepted for Publication: April 23, 2021

2021 年 6 月

237

原

著

日歯保存誌 64（3）：237～247，2021

カテキンによる SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク質と ACE2 受容体との結合抑制効果に対する基礎的検証

山

田

嘉

重

木

村

裕

一1

高

橋

昌

宏2

車

田

文

雄3

菊

井

徹

哉

橋

本

昌

典

大

木

英

俊

奥羽大学歯学部歯科保存学講座保存修復学分野
奥羽大学歯学部歯科保存学講座歯内療法学分野

1

奥羽大学歯学部歯科補綴学講座口腔インプラント学分野

2

奥羽大学歯学部口腔衛生学講座

3

抄録
目的：SARS‒CoV‒2 感染予防は，COVID‒19 流行を阻止するために非常に重要である．そのため，手指の消毒と個人防護器具（PPE）の装着に加えて新たな予防対策を講じる必要性がある．その予防策の候補の一つとして，エピガロカテキンガレート（EGCG）を代表とするカテキンの使用が挙げられる．分子ドッキング法により，選択的に SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク質と EGCG が結合することで，スパイクタンパク質と ACE2受容体との結合を抑制する可能性が報告されている．本研究では，SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク質に対してEGCG 単独，4 種混合カテキンおよび緑茶が実際にスパイクタンパク質と ACE2 との結合抑制に効果を有するのかを調べることを目的とした．
材料と方法：本研究では，異なる状態のカテキン（EGCG，4 種混合カテキン，粉末緑茶）を使用した．溶液の濃度は EGCG 溶液（EGCG）と 4 種混合カテキン溶液（4 KC）で 1，10，100 mg/ml，2 種類の緑茶溶液Ⅰ（PWA）と緑茶溶液Ⅱ（PWB）では 1，10 mg/ml とした．SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク質抑制スクリーニ
ングキットを使用し，TMB 基質で発色後の撮影と ELISA による検討を行った．
結果および考察：各種抑制溶液において 100 mg/ml の濃度が最も SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク質と ACE2との結合抑制効果が強く，濃度の減少に比例して抑制効果が減少するのが観察された．それぞれの結合抑制率の割合は，EGCG では 12～89％，4 KC は 11～88％，PWA では 10～47％，PWB では 11～47％であった．本
研究結果において，EGCG だけでなく 4 KC や PWA，PWB でもスパイクタンパク質と ACE2 との結合抑制効
果を有することおよび，その結合はカテキンの濃度に依存することが判明した．
結論：本研究により EGCG 単独だけではなく，4 種カテキン混合状態および粉末緑茶溶液においても SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク質と ACE2 との結合に対して濃度依存的に抑制効果を有することが確認された．カテキン配合溶液は，SARS‒CoV‒2 感染に対する新たな予防法の一つとなることが期待される．
キーワード：SARS‒CoV‒2，スパイクタンパク質，EGCG，4 種混合カテキン，粉末緑茶

責任著者連絡先：山田嘉重〒 963‒8611 福島県郡山市富田町字三角堂 31‒1 奥羽大学歯学部歯科保存学講座保存修復学分野
TEL：024‒932‒8931（内線 2538），FAX：024‒938‒9192（代表），E-mail：y-yamada@den.ohu-u.ac.jp
受付：2021 年 3 月 15 日/受理：2021 年 5 月 12 日
DOI：10.11471/shikahozon.64.237

日

238

緒

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誌

第 64 巻

第3号

性が高いものと考えられる．

言

SARS‒CoV‒2 を体内の細胞内に取り込む際には ACE2
（アンジオテンシン変換酵素 2）という受容体が関与して2019 年 12 月に中国湖北省で発生した新型コロナウイ

いることが報告されている6）．ACE2 は血管拡張によるルス（重症急性呼吸器症候群コロナウイルス 2：SARS‒

血圧上昇の調節7‒9），心臓の保護10），腎臓の保護11）などにCoV‒2）は，SARS‒CoV（重症急性呼吸器症候群コロナ

関与する受容体であり，HIV ウイルス，インフルエンザウイルス）と遺伝子では 79.5％ ，タンパク質では 76％

2）ウイルスなどには結合せず，SARS‒CoV など特定のウイの同一性があることが報告されている．SARS‒CoV‒2 はルスにのみ結合する12）．ACE2 は上気道（鼻腔，咽頭，

現在も日本を含む世界中に深刻な影響を与えており，現喉頭），下気道（気管支，肺胞），脳，心臓，腎臓，十二在各国で SARS‒CoV‒2 感染予防のためのワクチンや指腸，小腸，精巣などの数多くの組織の細胞表面に存在

COVID‒19 発症時の特効薬の開発が継続して進められてしており，気管支や肺胞の細胞表面は ACE2 が発現しやいる．ウイルス感染の予防としてのワクチンの種類にすい部位とされている13,14）．ウイルスのヒト体内への侵は，これまでは生ワクチン・不活化ワクチンが主であっ入経路としては，鼻や口腔から上気道に沈着して鼻杯分たが，今回 SARS‒CoV‒2 感染に対するワクチンとして

泌細胞の感染を引き起こした後，肺の中央部および内側は従来型のワクチンだけでなく，mRNA ワクチン，に広がっていくことが生理学的研究で判明している15,16）．

1）

DNA ワクチン，アデノウイルスベクターワクチン，組

重度の喘息などの呼吸器疾患のある人の肺には ACE2

換えタンパクワクチンなどの新しい手法のワクチン開発が 多 く 存 在 し， そ の 結 果 SARS‒CoV‒2 感 染 お よ びがいくつか進められており，実際に海外では開発された

COVID‒19 発症のリスクが増加してしまうことも報告さ

数種類のワクチンの投与が開始されている．日本においれている17）．したがってウイルスの口腔内への侵入を阻ても mRNA ワクチンの投与が開始されており，今後は止 す る こ と が で き れ ば，SARS‒CoV‒2 感 染 お よ び

国内産を含め感染予防効果の高いワクチンがいくつも開COVID‒19 発症抑制に大いに貢献するものと考えられ発されるものと考えられる．

る．ゆえに，マスクを着用することは，ACE2 が存在す

一方，実際に COVID‒19 が発症した際の効果的な治療

る気道内にウイルスを侵入させないための重要な感染予薬はいまだ開発されておらず，現在はエボラ出血熱の治

防対策の一つとなる．これまでにマスクの着用による鼻療薬レムデシビル（商品名：ベクルリー），抗インフルエと口腔を被覆することで，SARS‒CoV‒2 ウイルス感染にンザ薬のアファビピラビル（商品名：アビガン），ステロ

対してかなりの予防効果が期待できることが報告されてイド薬であるデキサメダゾン（商品名：デカドロン）ないる18）．

ど本来別の疾患に使用している治療薬を代用していると

SARS‒CoV‒2 は，ウイルス膜に連なる王冠状を呈するいう状況にある．ウイルスは細菌などと異なり自己増殖

大きな糖タンパク質を有する．この糖タンパク質はスパができないため，宿主細胞内に侵入し増殖を行う必要がイクタンパク質と呼ばれ，標的細胞に存在する受容体へある．そのため治療薬として（1）細胞内へのウイルスの結合するドメイン（RBD）を含む S1 タンパク質と，標侵入を阻害するもの，（2）細胞内に侵入したウイルスの的細胞膜に貫通し膜融合を誘起する S2 タンパク質から遺伝子が増殖を行うのを阻害するものに大きく区分され構成されている．このスパイクタンパク質が細胞膜上にている．現在のところ著しく効果の高い薬剤については存在する受容体である ACE2 に結合することで，ウイル

開発途上の状態にあると考えられるが，しばらくするとスが標的細胞内に侵入しウイルス感染を引き起こす主要

COVID‒19 感染症に対する効果的な薬剤が開発され，現因となっていることが解明されている19）．SARS‒CoV‒2

在 の 状 況 は 改 善 されることが期待される．し か し，の構造として，mRNA を覆うカプシドと呼ばれる殻の周

SARS‒CoV‒2 感染に対しては現在のところ集団免疫を

囲をエンベロープと呼ばれるタンパク質の膜で被覆され獲得することは困難であり，天然痘ウイルスのように完ている．エタノールや逆性石鹼はこのエンベロープ膜を全に根絶すること，または 2003 年に流感した SARS‒

溶解する効果を有しており，これらの薬剤の使用によりCoV のように感染を抑え込むことは困難であると推察

ウイルスを失活させることに優れていることから，手指される．また，SARS‒CoV‒2 に対するワクチンは現在ののアルコールや石鹼による消毒が推奨される理由となっところ，はしかのように一度免疫を獲得すると一生涯そている20‒24）．

の効果が持続することは難しく，免疫による感染防護の効果は長期的に持続せず再感染を引き起こす可能性があることも報告されており3‒5），将来的には季節性インフ
ルエンザのような対応をせざるをえない状況になる可能

SARS‒CoV‒2 感染に対するワクチンもいくつか臨床使用されはじめているが，効果的に感染を阻止できるワ
クチンや特効薬が開発され広く使用されるまでには，かなり時間を要するものと推察される．そのため，マスク

2021 年 6 月

カテキンによる SARS‒CoV‒2 と ACE2 との結合抑制効果
Table 1Natural Catechins239

果に差異が生じるかを検討した．

Types of catechinsHeat‒denatured catechins

Epicatechin（EC）
Catechin（C）
Epigallocatechin（EGC）
Gallocatechin（GC）
Epicatechin gallate（ECG） Catechin gallate（CG）
Epigallocatechin gallate Gallocatechin gallate（GCG）（EGCG）
Catechins are classified into four types of natural catechins and four types of heat‒denatured catechins.

材料および方法
1 ．各結合抑制溶液の準備
本 研 究 で は，SARS‒CoV‒2 ス パ イ ク タ ン パ ク 質 と
ACE2 との結合抑制溶液として 4 種類の抑制溶液を作製し，検討した．
抑 制 溶 液 1（EGCG）： エ ピ ガ ロ カ テ キ ン ガ レ ー ト（Toronto Research，Canada），抑制溶液 2（4 KC）：4 種
類のカテキン混合（緑茶由来カテキン混合物，富士フイの着用や手指の消毒の励行以外の予防手段についても検

ルム和光純薬），抑制溶液 3（PWA）と抑制溶液 4（PWB）

討していく必要があると考えられる．その場合，日常的は，市販の粉末緑茶を精製水で溶液した．PWA は粉末に継続して予防手段を励行するためには，経済的に高価緑茶（カテキンまるごと粉末緑茶，お茶の丸幸），PWB

なものや使用手段が困難なものは予防法としては適さ

は粉末緑茶（おーいお茶濃い茶，伊藤園）を選択して本ず，現在われわれが日常使用している方法を応用するこ研究に使用した．EGCG と 4 KC は 37℃の精製水で溶解とが最も簡便で継続が容易な方法になるものと考えられした．一方，粉末緑茶は常温では溶解が困難なため，る．その予防法の一つとして，緑茶由来のカテキンの応PWA と PWB は 70℃に加温した精製水で粉末緑茶が溶用が期待されている．一般的に呼ばれているカテキンは解したのを確認して 37℃に冷却後再攪拌を行い，本研究総称であり，実際は天然カテキンとしてエピガロカテキに使用した．EGCG と 4 KC を含有する結合抑制溶液のン（EGC），エピカテキン（EC），エピガロカテキンガ

濃度はそれぞれ①100 mg/ml，②10 mg/ml，③1 mg/ml

レート（EGCG），エピカテキンガレート（ECG）の 4 種の 3 種類とした．PWA，PWB 溶液における濃度は，①類に分類される．また，市販のペットボトルなど加熱殺10 mg/ml，②1 mg/ml の 2 種類とした．

菌したものはカテキンの構造が一部熱変性を引き起こ

Positive Control（Po‒Cont）として，5％ DMSO 溶液

し，ガロカテキン（GC），カテキン（C），ガロカテキン（三協化学）を使用した．また，Negative Control（Ne‒ガレート（GCG），カテキンガレート（CG）に変化するCont）として，SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク質の代わ（Table 1）．EGCG は緑茶中のカテキンのなかで最も量りに使用したキット付属の試薬である Immuno Bufferが多く約 60％を占め，天然カテキンのなかで特に多様なを添加した．

作用を有することが知られている．EGCG の SARS‒

2 ．実験手順

CoV‒2 に対する効果としては，ウイルスのスパイクタン

本研究では Spike S1‒Biotin（SARS‒CoV‒2）Inhibitor

パク質の RBD を含むさまざまな領域と高い結合能力をScreening Assay Kit（BPS Bioscience，USA）を使用し有することが，分子ドッキング法により報告されていた．研究手順は本キットの説明書の手順に従い，また，る ．その結果，SARS‒CoV‒2 のスパイクタンパク質はHoffmann らの方法を参考に施行した19）．まずはプレー

ACE2 との結合が阻害され，ウイルス感染が抑制される

トの各ウェルに ACE2（1μg/ml）をコーティングし室温ことになる．また，EGCG はウイルスの複製と成熟に重で 1 時間インキュベートした．その後 3 回洗浄を行い，要な役割を果たすと考えられているメインプロテアーゼ

付属の Blocking Buffer にて室温で 10 分間ブロッキング（Mpro）とも特異的に結合し，プロテアーゼ活性を抑制

を行った．

25）

する可能性も分子ドッキング法にて確認されている ．

各種結合抑制溶液と SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク

これらの報告では EGCG が SARS‒CoV‒2 感染予防に対質（1 ng/μl）をそれぞれのウェルに添加し，1 時間室温

して有効な薬剤になりうるとしているが，多くのカテキ

でインキュベートを行った．Po‒Cont には各種結合抑制

ンが混合された状態や緑茶飲料の場合において，EGCG

溶液使用グループと同様に SARS‒CoV‒2 スパイクタン

単独の場合と比較して効果に差異が生じるのか，生じる

パク質を加えたが，結合抑制溶液の代わりに同量の 5％

場合にはどの程度抑制効果に影響を与えるのかなどにつDMSO 溶液をウェルに添加した．Ne‒Cont には SARS‒

いての評価はこれまでなされていない．

CoV‒2 スパイクタンパク質を入れずに，ほかのグループ

26）

そのため本研究では，EGCG 単独，4 種天然カテキン

で使用したスパイクタンパク質と同量の Immuno Buffer

混合，粉末緑茶とそれぞれ異なった状態のカテキンにおと Po‒Cont と同量の 5％ DMSO 溶液を混合してウェルいて，どの程度 SARS‒CoV‒2 と ACE2 との結合抑制効に添加した．

240

日

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保

存

学

雑

誌

第 64 巻EGCG 10 mg/ml

Po－Cont

EGCG 100 mg/ml

EGCG 1 mg/ml

Ne－Cont

EGCG 1 mg/ml

第3号

4 KC 10 mg/ml

4 KC 1 mg/ml

4 KC 100 mg/ml

PWA 10 mg/ml

4 KC 1 mg/ml

Fig. 2

PWA 1 mg/ml

Comparison of 100 mg/ml and 1

mg/ml concentrations for EGCG
and 4 KC, respectively
Reaction to EGCG solution（100 mg/ml
and 1 mg/ml）or four catechins mixed solution（100 mg/ml and 1 mg/ml）. 100 mg/mlof each solution showed no specific color
reaction, while 1 mg/ml of each solution

PWB 10 mg/ml

showed a distinct color reaction.
PWB 1 mg/ml

TMB 停止溶液（Sera Care，USA）にて反応を停止させた．450 nm における吸光度を，ELISA 法マイクロプレー

Fig. 1 Results of various inhibitor reactions
The coloration of 1 mg/ml of all inhibitory solutions was similar to that of the positive control. On
the other hand, the coloration was reduced at 10 mg/
ml concentration.

トリーダー（マルチスキャン JX，Thermo Fissure Scientific，USA）にて測定した．本研究では各抑制溶液，
Po‒Cont，Ne‒Cont それぞれにおいて 3 試料ずつ行った．
3 ．統計解析
本研究にて得られた結果は，Mann‒Whitney U‒test お
よび Kruskal Wallis H‒test を用いて有意水準 5％で解析

インキュベート終了後に 3 回洗浄した後，Blocking
Buffer にてブロッキングを行った．次いで，本キットで使用した SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク質に融合しているマウス Fc に対する HRP 標識抗マウス Fc 抗体を添

した．

結

果

加した後，1 時間室温でインキュベートを施行した．反EGCG 溶液，4 KC 溶液，各種粉末緑茶溶液それぞれに応は TMB 基質（TMB One Component HRP Microwellおける結合抑制効果を Fig. 1 と Fig. 2 に示す．EGCG 単

Substrate，Surmodics IVD，USA）にて可視化し，プ

独，4 種混合カテキン，粉末緑茶のそれぞれを結合抑制

レート上に発色が生じた後，発色状態をデジタルカメラ

溶液として使用したどの場合においても，濃度依存的に（PSG7X Mark Ⅲ，キヤノン）にて撮影した．その後，結合抑制効果が確認された．結合抑制溶液の濃度によるInhibitory Rate（%）

2021 年 6 月
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0

カテキンによる SARS‒CoV‒2 と ACE2 との結合抑制効果
＊
＊

＊
＊

100mg/ml
100mg/ml
10mg/ml
1mg/ml10mg/ml

1mg/ml

＊

＊

＊

＊

241

防・口臭予防作用32），体重減少33）など多種多様の効果が報告されている．これらの効果を発揮するカテキン群のなかで最も強い作用を示すのは，EGCG である．EGCG
は緑茶に特異的に認められるカテキンであり，緑茶由来のカテキン中の約 60％と最も多くの割合を占めている．
EGCG は SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク質の S1 領域に特異的に結合することで ACE2 との結合を阻害することが，分子ドッキング法にて報告されている25）．分子ドッキング法とは，ターゲットとするタンパク質とリガンド

EGCG

4KC
PWA
Each Inhibitory Solution

PWB

Fig. 3 Inhibition rate of SARS‒CoV‒2 spike
protein‒ACE2 receptor binding
In each of the inhibitory solutions, the inhibition rate decreased as the concentration ofeach inhibitory solution decreased, and significant differences were observed between theconcentrations.（＊：p＜0.05）

が鍵と鍵穴のように相補的に結合する際の表面の結合状
態がどの程度良好に行われているかをコンピューターによるシミュレーションにて予測する方法であり，創薬の設計などに対しても応用されている技術である34）．しかし，この方法はタンパク質の構造を検討し計算式で結合状態をシミュレーションする方法であり，実際のタンパ
ク質と受容体との結合状態を検討しているわけではない
ことから，どの程度の濃度において効果を有するのかについて明確にする必要がある．そのため本研究では，
SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク質専用のキットを使用

検討では，各種抑制溶液において 100 mg/ml の濃度が最して検討した．また，これまで報告されている研究ではも SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク質と ACE2 との結合

EGCG の検討が主であり，4 種類の天然カテキンのすべ抑制効果が高く，10，1 mg/ml と濃度の減少に比例しててが含まれた状態や実際の緑茶飲料においての検討はほ結合抑制効果が減少したことが観察された．SARS‒

とんどみられないことから，本研究では EGCG だけでは

CoV‒2 スパイクタンパク質と ACE2 との結合抑制率の割なく，4 種類の天然カテキンの混合状態や緑茶飲料とし合は，5％ DSMO 溶液を使用した Po‒Cont の結合の割合

た場合ではそれぞれどの程度スパイクタンパク質との結を基準として，どの程度結合が低下するかを評価して算合効果に促進・減弱などの差異が生じるかなどについて定した．その結果，各抑制溶液使用時における結合抑制も検討するため，さまざまなカテキン溶液を結合抑制溶率は EGCG では 100，10，1 mg/ml のそれぞれで 89，

液として使用した．

53，12％であり，4 種混合カテキンを使用した 4 KC は結合抑制溶液の一つとして本研究では粉末緑茶を溶解

88，51，11％であった．一方，粉末緑茶を使用した PWA

した溶液を使用したが，その理由として，煎じて溶出さ

では 10，1 mg/ml それぞれで 47％と 10％，PWB では

せた場合では茶葉から溶出するカテキンは 30％前後程

47％と 11％であった．EGCG 抑制溶液と 4 KC 抑制溶液

度にとどまり，カテキンの多くは茶葉の中に残留するこそれぞれにおいて，100 mg/ml と 1 mg/ml 間において統とがわかっている．そのため一般的に行われている急須

計学的に有意差を認めた．また，EGCG 抑制溶液と 4 KCを使用した方法では期待しうる量のカテキンは溶液中に抑制溶液だけではなく，PWA 溶液と PWB 溶液を含むすは含まれていない可能性が高いことから，最も確実に多べての抑制溶液においても 10 mg/ml と 1 mg/ml 間に統くの茶葉内のカテキンを摂取する方法として，茶葉全体

計学的な有意差が認められた．得られた結果を Fig. 3 にを粉末状にした粉末緑茶の使用を選択した．また，製品示す．

の生成法の違いにより結果が異なる可能性を考慮して，

考2 種類の異なる製品の粉末緑茶を使用した．そして粉末

察

緑茶溶解のための精製水の温度を，本研究では 70℃に設定した．その理由として，EGCG は 82℃以上の温度で熱

カテキンは茶葉に含まれている成分として知られてい変性を生じる可能性が指摘されていることがある．特にるが，リンゴ，ブラックベリー，ソラマメ，サクランボ，

100℃を超えると EGCG 量は減少していくことが報告さ

ブドウ，ナシ，キイチゴ，チョコレートなどにも含まれれており，通常急須から入れる飲料緑茶の場合は 60℃かているポリフェノールの一種である．これまでにカテキ

ら 80℃の温水にて溶解することが奨励されている．そのンには抗酸化作用 ，殺菌作用 ，抗ガン作用 ，コレ

ため本研究では，粉末緑茶を使用した PWA と PWB は，

ステロール減少作用 ，血糖上昇抑制作用 ，齲蝕予粉末の溶解性が高く，かつ EGCG の減少に影響が少ない

27）

28）

30）

29）

31）

242

日

本

歯

科

と思われる 70℃に加温した精製水を選択した．

保

存

学

雑

誌

第 64 巻第3号

も数多く普及している．ペットボトル飲料の場合は加熱

本研究結果において，EGCG 単独溶液だけでなく 4 種

殺 菌 処 理 に よ り，EGC は GC に，EC は C，EGCG は類カテキン混合溶液や緑茶溶液においてもスパイクタン

GCG，ECG は CG へとそれぞれ変性する．分子ドッキン

パク質との結合効果を有することや，その結合はカテキ

グ法による検証では，GCG は EGCG に近似する抑制効果

ンの濃度に依存することが判明した．今回検討した 1が報告されている26）．そのため今後は，ペットボトル緑

ng/μl 量の SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク質に対して茶飲料においても実際に抑制効果を発揮するのか，または，1 mg/ml 濃度以下のカテキンではどの結合抑制溶液

天然カテキンとどの程度抑制効果に差が生じるのかにつにおいても SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク質と ACE2

いての検討も必要である．

との結合抑制がかなり低いことが確かめられた．一方，

SARS‒CoV‒2 はほかのウイルスと同様に，前記したよ

EGCG 溶液または 4 種類カテキン混合溶液においては 10

うに自分自身では複製・増殖することができず，①標的

mg/ml 濃度では 50％以上，100 mg/ml 濃度では 80％以細胞の細胞膜上の受容体と結合，②細胞内に侵入，③脱上の抑制効果が認められたことから，現段階では可能な殻（みずからの RNA の放出），④細胞内でウイルス RNA

かぎりカテキンの濃度を高くすることが，SARS‒CoV‒2の合成，⑤カプシド，スパイクタンパク，エンベロープ

スパイクタンパク質と ACE2 との結合抑制に大きく寄与

タンパクなどの合成，⑥ウイルスの構築，⑦細胞外へのするものと考えられる．粉末緑茶を使用した緑茶溶液の放出・出芽という過程を経て拡散・増殖していく35,36）．

場合においてもほぼ同様に，10 mg/ml 濃度では 50％前

SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク質が ACE2 に結合した後の抑制効果を示した．本研究では 100 mg/ml 濃度の緑後の細胞侵入には 2 種類の経路が判明しており，一つは茶飲料を確かめてはいないが，100 mg/ml などに濃度を

ACE2 に結合後，エンドサイトーシスによりエンドソー増加させることで，EGCG 単独溶液や 4 種混合カテキン

ムを形成して細胞内に侵入37）し，その後細胞内でカテプ溶液と同様な抑制効果を有するものと推測される．統計

シン B，L により分解される機序がある．もう一つの細学的な評価では，各抑制溶液においてそれぞれの濃度の胞内への侵入経路は，SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク質間で有意差が確認された．しかし，今回は基礎的研究のが ACE2 に結合した後にセリンプロテアーゼである

ため評価した各試料数は多くなく，今後は同様の試験を

TMPRSS2 により S1 と S2 領域に分断され，その後ウイ

繰り返すことでより統計学的に詳細な評価を行う予定でルス側の S2 スパイクタンパク質断端が活性化して標的ある．

細胞の細胞膜に結合することで膜融合が生じ，その結果

また 4 種混合カテキン溶液や緑茶溶液においても

SARS‒CoV‒2 の mRNA 遺伝子が細胞内に放出されるとEGCG 溶液とほぼ同様の結果を示したことから，EGCG

いう機序である38,39）．そのため SARS‒CoV‒2 のスパイク

以外のカテキンや茶葉の中のほかの成分は SARS‒CoV‒タンパク質を切断する酵素，特に TMPRSS2 は細胞内の2 スパイクタンパク質との結合に顕著に関与していない

ウイルス感染に重要な役割を果たしていることがいくつ可能性が推察される．しかし，この結果は本来の SARS‒も報告されている6,19）．

CoV‒2 ウイルスにて検討したのではなく，ウイルスのス

TMPRSS2 に関しては，SARS‒CoV においても問題でパイクタンパク質を使用した特定の研究キットを使用しあることが指摘され報告されている40,41）．したがって，検証していることから，今後はさまざまな条件の異なる

TMPRSS2 の酵素活性を抑制することが SARS‒CoV‒2

研究キットにより追加検証を続け，最終的には本来のウ感染阻害に大いに寄与するものと考えられており，

イルスそのものを使用して検証する必要がある．また本TMPRSS2 発現抑制をターゲットとした薬剤の開発も行研究で使用した 4 種混合カテキンに含まれる各種カテキ

われている．Kesic らは，ヒト鼻上皮細胞へのインフルン量は同一ではなく，通常茶葉に含まれている各種カテ

エンザウイルス感染に対する実験系を用いて検討したとキンの配合割合に準じている．緑茶抽出溶液における各

ころ EGCG が TMPRSS2 分泌を減少させることを報告し

種カテキンの割合は分析法の違いにより割合が多少異なており42），カテキンを作用させることにより，SARS‒

るが，総カテキン量に対して EC が 6～8％，EGC が 19～

CoV‒2 が生体細胞への結合と細胞内への侵入を阻止す

24％，ECG が 13～16％，EGCG が 50～60％前後とされる効果が期待される．

ている．そのため今後は，同一濃度におけるそれぞれの

また，奈良県立医科大学の矢野寿一教授らは緑茶飲料

カテキンが SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク質と ACE2に SARS‒CoV‒2 を 30 分間反応させるとウイルス自身をとの結合に対してどのような働きをするのかも検討しな

99％以上不活化させることができると報告している（プければならない．

43）
レス発表のみ）．彼らの研究報告内容は，本研究で検討

さらに緑茶飲料としては，急須を使用する場合や粉末しているカテキンによる SARS‒CoV‒2 感染抑制とは目緑茶を溶解する場合以外に市販のペットボトル緑茶飲料

的の趣旨が異なるが，カテキンによる SARS‒CoV‒2 の2021 年 6 月

カテキンによる SARS‒CoV‒2 と ACE2 との結合抑制効果

243

効果としては大変興味深い．ウイルス不活性化に対するウイルス量とは比例していないことから，効果的な緑茶

詳細な報告が出ていないので現時点では不明な点が多いの飲用量や飲用による感染予防効果の程度などはいまだが，これまで報告されているカテキンによる抗ウイルス

明確ではないため，今後は効果的な緑茶飲用量について効果に準じる可能性が考えられる．特に天然カテキンの継続して検討する必要がある．

なかで EGCG が最も強力なウイルス阻害効果を有するこ

本研究を含むこれまでの研究報告により，EGCG を含とが報告されている44,45）．EGCG は単純ヘルペスウイル

むカテキンは SARS‒CoV‒2 感染予防に対して有望な選ス（HSV），B，C 型肝炎ウイルス，インフルエンザウイ

択肢になりうるだけでなく，今後新たに出現する可能性

ルス，ヒト免疫不全ウイルス（HIV）など多くのウイルがあるウイルスに対しても対抗できる自然由来のウイル

スの感染を抑制する．本研究で示唆している標的細ス対抗因子としての優秀な候補であることには間違いな胞受容体への結合阻害による抗ウイルス作用とは別に，

い．今後起こりうる可能性のある新たなウイルス感染のEGCG はウイルス自身にダメージを与えることが知られ脅威も含め，効果的なカテキン含有飲料やカテキンドている．B 型肝炎ウイルスに対する DNA 合成防止ロップなどの摂取形態の構築も必要になるものと考えら

45,46）

や

47,48）

細胞内の複製中間体の RNA 合成阻害49），HIV の逆転写れる．

ステップの阻害 などが報告されている．インフルエン

今回の結果およびこれまでの報告から，緑茶飲料は絶ザウイルスに対してはゲノム RNA 合成阻害やノイラミ

対的な SARS‒CoV‒2 感染防止とはならないとしても，

50）

ニダーゼ活性阻害を誘発し，その効果は EGCG には及ば非常に簡便で安価な SARS‒CoV‒2 感染防止対策の一つ

ないが ECG や EGC も有することが知られている51）．そになりうる可能性が強く示唆される．本研究ではある一のため EGCG を含むカテキンは，SARS‒CoV‒2 に対し定条件におけるカテキンの効果の傾向を示したにすぎても RNA 合成系の阻害などの活性抑制効果を有する可ず，今後はさらに各種カテキン成分や緑茶についての詳能性が推察されるが，詳しい作用機序の解明については細な検討を計画している．

今後の研究が必要である．以上のことから，EGCG を代表とするカテキンには SARS‒CoV‒2 に対して標的細胞への結合と細胞侵入によるウイルス感染の抑制効果のみ

結論

ではなく，ウイルス自身への殺菌作用などの多面的な抗EGCG 単独だけではなく，4 種類カテキンが混合した

ウイルス効果を有する天然由来のポリフェノールとして状態および粉末緑茶から得られた溶液の状態においての効果が大変期待される．

も，SARS‒CoV‒2 スパイクタンパク質と ACE2 との結合

また，緑茶にカテキンが含まれているように紅茶にもに対して同程度の抑制効果を有することが確認された．

テアフラビンというポリフェノールが存在する．紅茶はこの抑制効果は濃度依存性があり，EGCG 単独および 4緑茶と同じ茶樹から精製されるが酸化酵素を含んで精製

種混合カテキンでは 10 mg/ml の濃度では結合抑制は約されるため，含有ポリフェノールも緑茶とは異なる．テ

50％程度であるが，100 mg/ml の濃度になると 90％近く

アフラビンは 2 つの緑茶カテキンが結合された構造を呈抑制できるものと考えられる．粉末緑茶においても，しているため，カテキンよりさまざまな作用が強いこと

EGCG 単独，4 種混合カテキンと同程度の抑制効果が確が推測されている．これまでに，カテキン同様分子ドッ認された．本研究はあくまでも基礎的解析であり，今後キング法を用いた研究によりテアフラビンと SARS‒

も条件設定や結合抑制溶液の検証をさらに継続していく

CoV‒2 スパイクタンパク質との結合力はカテキンより必要があるが，カテキン配合溶液の使用が SARS‒CoV‒

高い可能性が示唆されている

2 をはじめさまざまなウイルスの感染に対する新たな予．そのため，カテキン

52‒54）とテアフラビンにおいてどの程度結合抑制効果が異なる防法の一つとなることが期待される．

かなどについての比較検討も予定している．
本研究結果より，緑茶由来のカテキンが SARS‒CoV‒
2 スパイクタンパク質と ACE2 との結合を抑制する可能性が示唆された．Marta らは，EGCG による効果を検証した結果，COVID‒19 の症状が悪化し炎症マーカーが上昇した時点で，EGCG を 600～900 mg/日の用量で経口投与することで症状のさらなる悪化を防ぐ可能性があると報告しているが ，感染予防に効果的な投与量に関して
55）の報告はない．本研究で使用した SARS‒CoV‒2 スパイ
クタンパク質の濃度は SARS‒CoV‒2 感染者の口腔内の本論文に関連し，開示すべき利益相反関係にある企業等は
ない．

文

献

1）Zhou P, Yang XL, Wang XG, Hu B, Zhang L, Zhang W,
Si HR, Zhu Y, Li B, Huang CL, Chen HD, Chen J, Luo Y,
Guo H, Jiang RD, Liu MQ, Chen Y, Shen XR, Wang X,
Zheng XS, Zhao K, Chen QJ, Deng F, Liu LL, Yan B,

244

日

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歯

科

保

存

学

雑

誌

第 64 巻第3号

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246

日

本

歯

科

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保

存

学

雑

誌

第 64 巻

第3号

polymerase（RdRp）inhibition: an in-silico analysis. J
Biomol Struct Dyn 2020; 1‒16.
55）Marta M, Rachele C, Mariarita B, Rosalia, Rosanna DP,
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ijms21145171.

2021 年 6 月

カテキンによる SARS‒CoV‒2 と ACE2 との結合抑制効果

247

A Basic Analysis on the Inhibitory Effects of Catechins on the Bindingof SARS-CoV-2 Spike Protein to ACE2
YAMADA Yoshishige, KIMURA Yuichi1, TAKAHASHI Masahiro2,
KURUMADA Fumio3, KIKUI Tetsuya, HASHIMOTO Masanori
and OHKI Hidetoshi
Division of Operative Dentistry, Department of Conservative Dentistry, Ohu University School of Dentistry1

Division of Endodontics, Department of Conservative Dentistry, Ohu University School of Dentistry2

Division of Oral Implantology, Department of Prosthetic Dentistry, Ohu University School of Dentistry3

Department of Preventive Dentistry, Ohu University School of Dentistry

Abstract
Purpose: Prevention of SARS-CoV-2 infection is crucial for overcoming the COVID-19 epidemic. Therefore,
it is necessary to take new precautionary measures in addition to disinfecting hands and wearing personal
protective equipment（PPE）. One of the candidates for prevention is the use of catechins, particularly epigallocatechin-3-Ο-gallate（EGCG）. It has been reported that EGCG selectively binds to the spike protein of
SARS-CoV-2 by the molecular docking method, which may inhibit the binding of the spike protein to angiotensin converting enzyme-2（ACE2）. The purpose of this study was to investigate whether each of EGCG
alone, a mixture of four kinds of catechins, or green tea effectively inhibited the binding of the SARS-CoV-2
spike protein to ACE2.
Materials and Methods: Catechins in different states（EGCG, four types of mixed catechins, powderedgreen tea）were used in this study. The effects of EGCG solution（EGCG）and four kinds of mixed catechins
solution（4 KC）were examined at three different concentrations（1, 10 and 100 mg/ml）, and two types ofgreen tea solution, Ⅰ（PWA）and Ⅱ（PWB）, at two different concentrations（1 and 10 mg/ml）were adopted.
A screening kit for SARS-CoV-2 spike protein inhibition was used and the reaction was developed with atetramethylbenzidine（TMB）substrate. Thereafter, the coloring reaction was photographed and inhibitorylevel was measured by ELISA.
Results and Discussion: The inhibitory effect of ACE2 binding to SARS-CoV-2 spike protein was the strongest at high concentration in each solution, and the inhibitory effect decreased in proportion to the decreaseof concentration. The percentages of inhibitory effect ranged from 12 to 89％ for EGCG, from 11 to 88％ for
4 KC, from 10 to 47％ for PWA, and from 11 to 47％ for PWB. In the present study, it was found that fourkinds of catechins mixed solution and green tea solution inhibited binding of the spike protein to ACE2 thesame as the EGCG solution, and that the inhibitory effect of each solution depended on the concentration.
Conclusion: This study showed that not only EGCG, but also the mixture of four kinds of catechins and thepowdered green tea effectively inhibited the binding of SARS-CoV-2 spike protein depending on the concentration. Catechins are expected to serve as a new way to prevent SARS-CoV-2 infection.
Key words: SARS-CoV-2, spike protein, EGCG, mixture of four kinds of catechins, powdered green tea
Corresponding author: Dr. YAMADA, Division of Operative Dentistry, Department of Conservative Dentistry, Ohu University
School of Dentistry, 31‒1, Misumido, Tomitamachi, Koriyama, Fukushima 963‒8611, Japan
TEL: ＋81‒24‒932‒8931（ext 2538）, FAX: ＋81‒24‒938‒9192, E-mail: y-yamada@den.ohu-u.ac.jp
Received for Publication: March 15, 2021/Accepted for Publication: May 12, 2021

第 64 巻248

第3号

会 務 報 告特定非営利活動法人日本歯科保存学会 2020 年度臨時評議員会・臨時総会議事録
1 ．開催日時2020 年 11 月 24 日（火） 16：00～16：30

1 ．開催場所

一般財団法人口腔保健協会 3 階会議室（東京都豊島区駒込 1‒43‒9

1 ．正会員（社員）数

4,370 名

1 ．出席正会員数

1,451 名

内訳

本人出席

6 名，表決委任者

駒込 TS ビル）

1,618 名1 ．議事の経過の要領及び議決の結果
上記のとおりの出席があったので，定款の規定により議長の選出を行ったところ，田上順次が選ばれて議長となった．
議長が，議事録署名人を選任したい旨及び次の者を指名したい旨を述べたところ，満場一致をもって承認可決されたので，議長は次の者を議事録署名人に指名した．
議事録署名人
第 1 号議案

五十嵐勝・前田英史1 号理事承認の件

議長は，上記議案を上程し，概要を説明して議決を求めたところ，原案通り承認可決した．
（書面表決にて 1 名反対）第 2 号議案

2 号理事承認の件

議長は，上記議案を上程し，概要を説明して議決を求めたところ，原案通り承認可決した．
（書面表決にて 2 名反対）第 3 号議案

次期執行部役員の件

議長は，上記議案を上程し，概要を説明して議決を求めたところ，原案通り承認可決した．
（書面表決にて 1 名反対）第 4 号議案

入会金及び会費に関する規程の制定の件

議長は，上記議案を上程し，概要を説明して議決を求めたところ，原案通り承認可決した．
（書面表決にて 4 名反対）
議長は，以上をもって本日の議案の審議をすべて終了した旨を述べ，16 時 30 分閉会を宣した．
上記議事の経過の要領及び議決の結果を明確にするためこの議事録を作成し議長及び議事録署名人がこれに記名押印する．

2021 年 6 月

249

特定非営利活動法人

日本歯科保存学会名誉会員・役員（2021 年度）

名誉会員
細

田

裕

康

向

山

下河辺

宏

功

末

田

中

村

治

郎

加

藤

村

山

洋

二

岩

久

正

石

川

烈

戸

田

滝

内

雄

平

井

新

井

髙

加

藤

小

松

正

志

久

光

前

田

勝

正

須

田

英

宏

行

赤

峰

直

勝

海

林

春

嘉

幸

松

尾

武

村

井

繁

土

谷

大

堀

内

彦

岡

本

莫

川

越

博

斎

藤

毅

井

上

熈

岡

田

明

小野瀬

英

宏

淺

井

雄

高

津

康

宏

上

野

和

之

河

野

寿

夫

新

谷

英

章

鴨

井

忠

夫

太

田

義

人

松

本

紀

雄

川

光

吉

山

崎

孝

一

天

野

義

和

岡

本

浩

本

宏

治

清

水

明

彦

久 保 田

稔

喜

郎

山

田

了

角

田

正

健

横

田

誠

上

田

雅

俊

久

黒

﨑

明

出

口

紀
眞

正

伊

藤

公

一

寺

中

夫

寺

下

正

道

二

笠

原

悦

男

中

村

洋

野

口

俊

英

昭

文

鳥

一

郎

吉

居
田

光

男

恵比須

繁

之

川

浪

雅

光

笹

野

高

嗣

隆

一

竹

重

文

雄

林

善

彦

和

泉

雄

一

彰

福

島

正

義

二

田

上

順

次

正

裕

片

山

永

田

俊

彦

原

宜

興

桃

井

保

子

吉

江

弘

正

千

田

堀

田

正

人

小木曽

文

内

栗

原

英

見

松

尾

敬

志

荒

木

廣

藤

卓

雄

理

事

長

石

井

信

之（神奈川歯科大学大学院歯学研究科）

副理事長

北

村

知

昭（九州歯科大学）

副理事長

林

前理事長

田

美 加 子（大阪大学大学院歯学研究科）
上順次（東京医科歯科大学大学院医歯学総合研究科）（総務担当）山

本一世（大阪歯科大学）（財務担当）向井義晴（神奈川歯科大学大学院歯学研究科）（編集担当）柴秀樹（広島大学大学院医系科学研究科）（修復担当）北知昭（九州歯科大学）（歯内担当）

林常任理事

村美 加 子（大阪大学大学院歯学研究科）（歯周担当）

小（医療合理化委員長）

二 階 堂

方

（教育問題委員長）

奈（学術委員長）良賴昌（日本大学松戸歯学部）
徹（朝日大学歯学部）

陽一郎（日本歯科大学生命歯学部）

斎

藤

隆

史（北海道医療大学歯学部）（学会のあり方委員長） 前田英史（九州大学大学院歯学研究院）（学術用語委員長）

古澤成博（東京歯科大学）（渉外委員長）坂上竜資（福岡歯科大学）（国際交流委員長）

宮崎

真至（日本大学歯学部）（認定委員長）五 十 嵐勝（日本歯科大学生命歯学部）（認定歯科衛生士審査委員長） 野杁由一郎（新潟大学大学院医歯学総合研究科）

北

村

知
一

（定款委員長）（広報委員長）山

本（選挙管理委員長）

佐藤（表彰委員長）北村（倫理/COI 委員長）

林昭（九州歯科大学）世（大阪歯科大学）
聡（日本歯科大学新潟生命歯学部）

知昭（九州歯科大学）

美 加 子（大阪大学大学院歯学研究科）

敏

孝

昌

宜
清
篤

久

一

第 64 巻

250

監

事

幹

槇

石

武

美（東京歯科大学名誉教授）

中

村

勝

文（埼玉県開業）

事
武

藤

徳

子（神奈川歯科大学大学院歯学研究科）（総務担当幹事） 吉川一志（大阪歯科大学）（財務担当幹事） 富山（編集担当幹事） 武田克浩（広島大学大学院医系科学研究科）

前

田

宗

宏（日本歯科大学生命歯学部）（理事長幹事）（認定幹事）

理

潔（神奈川歯科大学大学院歯学研究科）

事

北海道医療大学歯学部
古

市

保

志

〒 061‒0293
斎

藤

北海道大学大学院歯学研究院
佐

野

英

彦

岩手医科大学歯学部
野

田

上

藤

正

奥羽大学歯学部
高

橋

慶

杁

新

木

由一郎

海

航

吉

一

吉

成

伸

夫

申

基
方

賴

齋

音

田
村

良

宮

崎

陽一郎
真

裕

一

地

隆

昭和大学歯学部
山

本

松

邦

彦

〒 951‒8580

松
古

井

信

鶴見大学歯学部
細

矢

哲

谷

章

嘉

藤

多部田

康

琴

淳

一

亀

敏

山

敦

史

聡

司

島

潔

平

山

澤

成

博

村

松

博

部

幸

五 十 嵐

勝

千代田区神田駿河台 1‒8‒13
秀

一

田

隆

武

大田区北千束 2‒1‒1
鍋
辺

厚

市

〒 113‒8549

男

史

長谷川

和

夫

規

元

司

横須賀市稲岡町 82
井

横浜市鶴見区鶴見 2‒1‒3

冨士谷

篤

向

人

味

〒 464‒8651

文京区湯島 1‒5‒45

正

康
雄

村

収

〒 238‒8580〒 230‒8501
五

北紀〒 145‒8515

三

子

敬

沼

真

宜

千代田区神田三崎町 2‒9‒18
千代田区富士見 1‒9‒20

岩

田

志

〒 102‒8159

佐増

松戸市栄町西 2‒870‒1

藤

之

一

聡

至
史

重

新潟市中央区浜浦町 1‒8〒 101‒8310

愛知学院大学歯学部
三田

塩尻市広丘郷原 1780

神奈川歯科大学大学院歯学研究科
石勉〒 951‒8514 新潟市中央区学校町通二番町 5274

東京医科歯科大学大学院医歯学総合研究科
興

山

瀬

横

淳

日本大学歯学部

羽〒 271‒8587

日本歯科大学生命歯学部
奈谷

仙台市青葉区星陵町 4‒1

喆〒 101‒0061

藤

史

聡

坂戸市けやき台 1‒1

昌

東京歯科大学菅〒 350‒0283

日本大学松戸歯学部
小佐〒 399‒0781

明海大学歯学部

智〒 963‒8611 郡山市富田町字三角堂 31‒1
壮日本歯科大学新潟生命歯学部
松本歯科大学上隆〒 980‒8575
山

新潟大学大学院医歯学総合研究科
野川

盛岡市中央通 1‒3‒27

八 重 柏

寛

史
哲

〒 020‒8505

守

北海道石狩郡当別町字金沢 1757

〒 060‒8586 札幌市北区北 13 条西 7 丁目

井東北大学大学院歯学研究科
齋

隆

一

博

山

本

義

晴

雄

嗣

名古屋市千種区末盛通 2‒11
盛

興

鈴

木

第3号

2021 年 6 月

251

朝日大学歯学部
河〒 501‒0296

野

哲

大阪大学大学院歯学研究科
村上伸

大阪歯科大学

也

山

一

世

秀

巳

順

一

吹田市山田丘 1‒8

枚方市楠葉花園町 8‒1

梅

樹

辰

美 加 子
田

誠

広島大学大学院医系科学研究科
柴徹〒 565‒0871
林〒 573‒1121

本

岐阜県瑞穂市穂積 1851

二 階 堂

前

〒 734‒8553

水野

岡山大学学術研究院医歯薬学域

智

田

博

史

広島市南区霞 1‒2‒3

仁〒 700‒8525

岡山市北区鹿田町 2‒5‒1𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷
徳島大学大学院医歯薬学研究部
湯

本

浩

通

九州歯科大学北保坂〒 803‒8580

村

知

昭

西

村

英

紀

坂

上

中

資

一

島

啓

介

〒 812‒8582
前〒 814‒0193
竜

啓

阿

田

英

史

村

篤

南

壽

尚

久

米

田

雅

裕

〒 890‒8544

鹿児島市桜ケ丘 8‒35‒1

利

口

和

行

立

澤

敦

子（日本歯科衛生士会）

西

報
高橋

田

長崎市坂本 1‒7‒1

野

名誉会員

和

〒 852‒8588

鹿児島大学大学院医歯学総合研究科

訃

福岡市東区馬出 3‒1‒1

福岡市早良区田村 2‒15‒1

長崎大学大学院医歯薬学総合研究科
吉

徳島市蔵本町 3‒18‒15北九州市小倉北区真鶴 2‒6‒1

九州大学大学院歯学研究院
福岡歯科大学〒 770‒8504

一祐先生

谷

佳

浩

第 64 巻252

第3号

日本歯科保存学会各種委員会委員リスト（2021 年 4 月 1 日～2023 年 3 月 31 日）
編集委員会
＊柴
秀樹
山本 一世

☆前田
山本

英史
松男

亀山
湯本

敦史
浩通

北村
吉羽

和夫
邦彦

平山
吉村

聡司
篤利

村松
米田

敬
雅裕

医療合理化委員会＊二階堂 徹
☆細矢
半場 秀典
柵木

哲康
寿男

岩田
吉川

隆紀
一志

小方
（髙垣

賴昌
智博）

菅谷

勉

鈴木

規元

林

代田あづさ

瀧川

智義

松見

秀之

山田

嘉重

吉川

一志

勇一
正義

久保
掘江

至誠
卓

清水
前薗

明彦
葉月

菅井 健一
松﨑英津子

高橋
武藤

礼奈
徳子

康弘

〔社会保険対策小委員会〕＊細矢 哲康岩田 有弘
陸田 明智〔う蝕治療ガイドライン作成小委員会〕＊林 美加子
小幡 純子
北迫
中嶋 省志
二階堂 徹
福島
桃井 保子

八重柏 隆
（武田 克浩）
美加子

教育問題委員会＊奈良陽一郎
長谷川篤司

☆小方
三谷

賴昌
章雄

亀山
山本

敦史
雄嗣

川上
吉羽

智史
邦彦

佐藤
吉村

聡
篤利

柴
（柵木

秀樹
寿男）

鳥井

学術委員会
＊斎藤 隆史
西谷 佳浩

☆高柴
沼部

正悟
幸博

興地
増田

隆史
宜子

亀山
横瀬

敦史
敏志

坂上
（松田

竜資
康裕）

申

基喆

二階堂

徹

学会のあり方委員会＊前田 英史
☆斎藤
向井 義晴
湯本

隆史
浩通

五味
（杉井

一博
英樹）

新海

航一

高橋

慶壮

辰巳

順一

松島

潔

学術用語委員会＊古澤 成博
柵木 寿男

☆石原
鷲尾

裕一
絢子

収
隆）

鳥井

康弘

根本

英二

半場

秀典

渉外委員会
＊坂上 竜資菅谷勉☆奈良陽一郎
立澤 敦子

勝

大槻

昌幸

小方

賴昌

木村

裕一

国際交流委員会＊宮崎 真至山本 雄嗣☆𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷𠮷
山本 松男
吉成 伸夫
（髙見澤俊樹）認定委員会＊五十嵐 勝
西谷 佳浩
湯本 浩通☆野杁由一郎
平山 聡司（前田 宗宏）

認定歯科衛生士審査委員会＊野杁由一郎☆前田 英史
立澤 敦子
野田
守
倫理委員会
＊林 美加子○井上 順之

☆山本
○永嶋

一世
哲也

田口洋一郎
和田 尚久
阿南
村上

壽
伸也

武市
（吉田
五十嵐

木村 裕一
冨士谷盛興

黒川
細矢

弘康
哲康

佐藤
真鍋

秀一
厚史

武市
三谷

収
章雄

中島
両角

啓介
祐子

梅田
真鍋

尾崎 和美
山口由美子

北村

和夫

坂上

竜資

佐藤

治美

北村

柴

秀樹

前田

英史

山本

松男

誠
厚史

五十嵐 勝
（高橋 雄介）知昭

2021 年 6 月

253

COI 委員会＊林 美加子○永嶋 哲也

☆吉村
（高橋

篤利
雄介）

阿南

壽

古市

保志

山田

聡

山田

嘉重

○井上

順之

定款委員会
＊北村 知昭
山本 雄嗣

☆木村
和田

裕一
尚久

河野
（鷲尾

哲
絢子）

佐野

英彦

沼部

幸博

野口

和行

三辺

正人

広報委員会
＊山本 一世
多部田康一

☆細矢
前田

哲康
宗宏

石幡
吉成

浩志
伸夫

稲本
（吉川

京子
一志）

井上

哲

音琴

淳一

斎藤

隆史

選挙管理委員会
＊佐藤
聡

☆前田

博史

海老原

新

鈴木

茂樹

平山

聡司

表彰委員会
＊北村 知昭
向井 義晴

☆古澤
横瀬

成博
敏志

隆紀
絢子）

齋藤

正寛

菅谷

勉

西村

英紀

増田

宜子

岩田
（鷲尾

積立金管理運用委員会 【役職指定】
＊
【理事長】
石井 信之
【前理事長】
田上 順次 ※任期終了後 1 年間
【総務担当常任理事】 山本 一世＊委員長，☆副委員長，○外部委員，（）内幹事役，五十音順【副理事長】
北村 知昭【次期理事長】※総会承認後【財務担当常任理事】 向井 義晴

林美加子

第 64 巻254

第3号

日本歯科保存学会編集連絡委員
大
北

学
医

連絡委員

大

大

東
幸

紀

修復

春

山

亜貴子

感染制御（保存）

伊

藤

祥

作

田

康

裕

歯内

佐

古

亮

免疫制御（治療）

島

袋

善

夫

歯周

勢

島

典

総診

杉

山

利

子

保存

谷

本

啓

彰

口腔治療

至

田

宗

泰

保存

前

田

宗

宏

歯周病

田

口

洋一郎

歯髄生物

土

屋

志

歯周病態

藤

田

保存修復

島

田

康

史

歯周病態

畑

中

加

珠

保存

中

西

歯周歯内

木

戸

淳

一

保存

鷲

尾

絢

子

歯周病

臼

井

通

彦

讃

井

彰

一

口腔機能（歯科保存）

友

清

大
平

歯周・歯内

下

地

伸

司

医

工

藤

義

之

歯周療法

佐々木

大

輔

北

大

歯内歯周

鈴

木

茂

樹

保存

半

田

慶

介

羽

潟

修復

菊

井

徹

哉

歯周

高

橋

慶

壮

歯内

佐々木

重

夫

う蝕

吉

羽

永

子

歯周

久保田

健

彦

北

島

佳代子

保存Ⅱ

鈴

木

雅

也

歯周病

両

角

祐

子

横須賀

孝

史

保存（修復）安西正明

保存（歯周）

吉

成

伸

夫

健康増進

音

琴

淳

一

総合診療
大

大

保存治療

門

歯周病

林

倉

弘

志

木

寿

男

沼

部

幸

博

総合診療

石

川

明

子

保存修復

黒

川

弘

康

歯内療法

勝

呂

歯周病

菅

野

直

之

う蝕制御

大

槻

昌

幸

歯周病

竹

内

康

雄

歯髄生物

渡

辺

聡

総合診療

新

田

浩

保存・美容歯科

小

林

幹

宏

歯周病

小

出

容

子

口腔機能（歯周）

保存修復

富

山

潔

福

歯周

両

⻆

俊

哉

歯内

鈴

木

二

郎

保存修復

岡

田

彩

子

歯内療法

中

野

雅

子

歯周病

長

野

孝

俊

日

内

山

敏

一

小

方

賴

昌

歯内

川

島

正

大

昭

神

大

歯

鶴

愛

朝

大

大

院

大

保存修復

友

田

篤

臣

歯内治療

樋

口

直

也

歯周病

福

田

光

男

修復

日下部

修

介

歯内

瀧

佳

晃

日

大

歯周病

谷

広

大

岡

津
剛

大

尚

医科歯科大

日 大 松 戸
保存修復

大

柵

丈 一 朗

歯周治療学

大

歯

接着

大

保存Ⅰ

海

歯

大

歯周病

大

日歯大新潟

歯

日

大

う蝕治療

総診

明

大

藤

修

松

阪

連絡委員

松

加

新

大

学

加

星

奥

大

う蝕制御
修復・歯内

東

歯

連絡委員

歯周歯内
北

岩

学

徳

九

大

歯

九

正

大

大

歯

淳

大
泉

利

雄

歯周

吉

永

泰

周

総合歯科

米

田

雅

裕

栁

口

嘉治郎

修復歯内

星

加

知

宏

歯周病

野

口

和

行

長

修復・歯内

大
歯周歯内

鹿

大

2021 年 6 月

255

日 本 歯 科 保 存 学 雑 誌 投 稿 規 程
1．この学術雑誌は，研究成果の論文発表による発信を通して，歯科保存学（保存修復学，歯内療法学，歯周病学）の発展に寄与することを目的としている．そのため，歯科保存学の基礎，臨床，教育ならびに歯科保存学を基盤とした歯科医学全般に関する論文を掲載する．
2．論文の種類は，原著論文（独創性がある研究の成果に関するもの），総説（歯科保存学に関する争点を整理して今後の方向性を示唆しようとするもの，あるいは既発表論文の内容をまとめて新たな概念を提唱しようとするもの），ミニレビュー（歯科保存学に関する最近のトピックを総説形式で簡潔にまとめたもので，各賞の受賞論文を含む），症例・臨床報告（歯科保存学領域から広く歯科医療の実践と発展に有用となる臨床の記録）などの 4 種に分類する．なお，総説とミニレビューは，編集委員会からの依頼によるものと投稿によるものとに分ける．
3．原著論文および症例・臨床報告の内容は，過去に他誌に掲載されたり，現在投稿中あるいは掲載予定でないものに限る．
4．論文の採否は，査読を経て決定する（編集委員会からの依頼によるものを除く）．
5．投稿原稿は，日本語または英語で簡潔に記述されたものとする．
6．原著論文の形式は，原則として和文（英文）抄録，緒言，材料および方法，結果あるいは成績，考察，結論，文献，英文（和文）抄録の順に記載する．原著論文以外の論文も，原則としてこれに準ずる．
7．本誌の発行は，原則として 2 月，4 月，6 月，8 月，10 月および 12 月に行う．12 月には英文誌“Operative Dentistry, Endodontology and Periodontology”として発行する．また，必要があれば増刊する．
8．筆頭著者が会員の場合のみ，一定額の掲載料補助を行う．また，筆頭著者が会員であるが共著者に非会員が含まれる場合については，掲載料補助は行われるが非会員の人数に応じて別途負担金を求める．なお，図表・写真な
どの実費，発送および別刷にかかわる費用，J‒STAGE 登載用データ作成代は，著者負担とする．ただし，編集委員会からの依頼によるものは除くものとする．
9．論文投稿票は，最新のものを用い，投稿原稿に必ず添付する．
10．受付日は，投稿原稿が学会事務局へ到着した日付とする．また，受理日は，査読担当者から採択可と判定された日付とする．
11．掲載順序は，受理順とする．なお，採択論文の掲載証明は希望がある場合に発行する．
12．論文投稿は E-mail 投稿または学会ホームページ等からの Web 投稿とする．投稿原稿の送付先は，学会事務局とする．
13．著者による校正は，原則として 2 校までとする．その際には，字句の著しい変更，追加，削除などは認めない．
校正刷は所定の日までに必ず返却する．校正不要の場合には，その旨表紙左側に明記する．
14．本誌掲載の著作物の著作権は，本学会に帰属するものとする．
15．この規程にない事項は，別に編集委員会で決定する．
附則
1．本規程は平成 6 年 11 月 10 日から施行する（第 38 巻第 1 号より適用）．
2．本規程は平成 7 年 10 月 26 日から一部改正し施行する．
3．本規程は平成 9 年 6 月 5 日から一部改正し施行する．
4．本規程は平成 11 年 11 月 17 日から一部改正し施行する．
5．本規程は平成 16 年 6 月 9 日から一部改正し施行する．
6．本規程は平成 18 年 11 月 9 日から一部改正し施行する．
7．本規程は平成 20 年 6 月 5 日から一部改正し施行する．
8．本規程は平成 21 年 10 月 28 日から一部改正し施行する．
9．本規程は平成 22 年 6 月 3 日から一部改正し施行する．
10．本規程は平成 24 年 6 月 28 日から一部改正し施行する．
11．本規程は平成 25 年 6 月 27 日から一部改正し施行する．
12．本規程は令和 2 年 6 月 25 日から一部改正し施行する．
13．本規程は令和 3 年 6 月 9 日から一部改正し施行する．
投稿にあたっては「投稿規程」のほか，必ず各巻の 1 号に掲載されている「投稿の手引き」に準拠すること．

第 64 巻256

第3号

複写をご希望の方へ
本学会は，本誌掲載著作物の複写複製に関する権利を学術著作権協会に委託しております．
本誌に掲載された著作物の複写複製をご希望の方は，学術著作権協会（https://www.jaacc.org/）が提供している複製利用許諾システムを通じて申請ください．
複写以外の許諾（著作物の引用，転載，翻訳等）に関しては，直接本学会へお問い合わせください．
Reprographic Reproduction outside JapanThe Japanese Society of Conservative Dentistry authorized Japan Academic Association For Copyright
Clearance（JAC）to license our reproduction rights of copyrighted works. If you wish to obtain permissionsof these rights in the countries or regions outside Japan, please refer to the homepage of JAC（http://www.
jaacc.org/en/）and confirm appropriate organizations to request permission.

2021 年 6 月

257

握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握

渥握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握渥編 集 後 記渥握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握 ・本年 4 月から，日本歯科保存学雑誌の編集委員の任を仰せつかりました，松本歯科大学歯科保存学講座（修 復）の亀山と申します．どうぞよろしくお願いいたします．
 ・現在，私は本学会以外にも 3 つの学会で編集委員を務めておりますが，学会誌の発行は学術大会の開催とな らび，いずれの学会においても主要な事業として位置づけられているうちの 1 つです．本学会でも，総会や理 事会の資料を見ると 10 項目以上ある事業計画案や事業報告書の 1 番目に本誌の発行が明記されていることか ら，最も主要な事業と考えられていることがわかります．そして以前から事業計画案の 2 番目に記載されてき た英文誌発行が，いよいよ今年から始まります．
 ・さて，この原稿を書いているのは 6 月初旬で，いよいよこれから歯と口の健康週間が始まろうという時期で
 す．この事業は日本歯科医師会が昭和 3 年，
「虫歯予防デー」という名前で実施し，その後何度か名前を変えな がら現在に至っており，日本歯科医師会をはじめ，都道府県歯科医師会や郡市区歯科医師会で啓発のための各
 種イベントなどを行っています．
 ・この間，昭和・平成・令和の 90 年以上にわたって歯と口の健康，そして歯科疾患の予防に関する啓発・普及
 がなされたこともあり，国民にブラッシングの習慣が根付く大きなきっかけとなりました．この効果は非常に 大きいものであり，今後も長く続けていくべき事業であると考えられます．一方で，今日の歯の健康寿命が延 伸したことは，単にブラッシング習慣のみではなしえず，むしろ保存治療技術の向上や発展が大きく関わって きたものと思います．そしてこの技術の発展・向上は，これまで本誌に掲載された論文で紹介された数々の知 見や研究成果によるものも多数ございます．
 ・この原稿を執筆している 6 月 4 日，私はわが国における現在の歯の健康寿命の延伸を支えてきた日本歯科保 存学会と，学会の根幹をなす日本歯科保存学雑誌に対して長年の歴史を感じるとともに，新たに編集委員会の メンバーに加わったことの責任の重さをより一層感じている次第です．あわせて，学会と本誌をこれまで支え てきてくださった全ての会員の先生方に改めて敬意を表したいと思います．
（亀山敦史 記）握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握握渥

日本歯科保存学雑誌編集委員会
委 員 長
副委員長

幹

事

柴
秀
前 田 英
亀 山 敦
北 村 和
平 山 聡
村 松
八 重 柏
山 本 一
山 本 松
湯 本 浩
吉 羽 邦
吉 村 篤
米 田 雅
武 田 克

樹（広島大学大学院医系科学研究科）
史（九州大学大学院歯学研究院）
史（松本歯科大学）夫（日本歯科大学）司（日本大学松戸歯学部）
敬（東京歯科大学）隆（岩手医科大学歯学部）
世（大阪歯科大学）男（昭和大学歯学部）
通（徳島大学大学院医歯薬学研究部）
彦（新潟大学大学院医歯学総合研究科）
利（長崎大学大学院医歯薬学総合研究科）
裕（福岡歯科大学）
浩（広島大学大学院医系科学研究科）

編集・発行予定
号

投稿締切日

発 行 日

1

前年 11 月 15 日

2 月末日

2

1 月 15 日

4 月末日

3

3 月 15 日

6 月末日

4

5 月 15 日

8 月末日

5

7 月 15 日

10 月末日6

9 月 15 日

12 月末日（50 音順）令和 3 年 6 月 25 日

印

刷

令和 3 年 6 月 30 日

発

行

編集兼発行者

特定非営利活動法人 日本歯科保存学会理事長
石井

一般財団法人

信

之

制

作

者

口腔保健協会印

刷所

三 報 社 印 刷 株 式 会 社

発

行

所

特定非営利活動法人 日本歯科保存学会
日 本 歯 科 保 存 学 雑 誌 編 集 委 員 会

http：//www.kokuhoken.or.jp/〒 170‒0003 東京都豊島区駒込 1‒43‒9（一財）口 腔 保 健 協 会 内
電話

03（3947）8891

ＦＡＸ

03（3947）8341

第 64 巻258

第3号

特定非営利活動法人 日本歯科保存学会賛助会員名簿
賛

助

会

員

名

郵便番号

所

在

地

電話番号

ア グ サ ジ ャ パン 株 式 会 社

540‒0004

大阪市中央区玉造 1―2―34（06）
6762―8022

医 歯 薬 出 版 株 式 会 社

113‒8612

東京都文京区本駒込 1―7―10（03）5395―7638

イボクラールビバデント株式会社

113‒0033

東京都文京区本郷 1―28―24

4F

（03）
6801―1303

長 田 電 機 工 業 株 式 会 社 141‒8517

東京都品川区西五反田 5―17―5（03）3492―7651

カボデンタルシステムズ株式会社

140‒0001

東京都品川区北品川 4―7―35

御殿山トラストタワー 15F （03）6866―7480

クラレノリタケデンタル株式会社

100‒0004

東京都千代田区大手町 1―1―3

大手センタービル

ク ル ツ ァ ー ジ ャ パ ン 株 式 会 社 113‒0033

東京都文京区本郷 4―8―13

小567‒0057

大阪府茨木市豊川 1―30―3

コ ル テ ン ジ ャ パ ン 合 同 会 社 190‒0012

東京都立川市曙町 2―25―1

サ ン メ デ ィ カル 株 式 会 社

524‒0044

滋賀県守山市古高町 571―2（077）
582―9981

株ー

113‒0033

東京都文京区本郷 3―2―14（03）3815―1511

風605‒0983

京都市東山区福稲上高松町 11（075）
561―1112

昭 和 薬 品 化 工 株 式 会 社 104‒0031

東京都中央区京橋 2―17―11（03）3567―9573

ス リ ー エ ム ジ ャ パ ン 株 式 会 社 141‒8684

東京都品川区北品川 6―7―29（03）6409―3800

タ カ ラ ベ ル モ ン ト 株 式 会 社 542‒0083

大阪市中央区東心斎橋 2―1―1（06）
6212―3619

デ ン ツ プ ラ イ シ ロ ナ 株 式 会 社 106‒0041

東京都港区麻布台 1―8―10（03）5114―1005

株 式 会 社 東 洋化 学 研 究 所

173‒0004

東京都板橋区板橋 4―25―12（03）3962―8811

株 式 会 社 ト ク ヤ マ デ ン タ ル 110‒0016

東京都台東区台東 1―38―9

イトーピア清洲橋通ビル 7F （03）3835―2261

株

式

会

社

ナ

カ

ニ

シ

322‒8666

栃木県鹿沼市下日向 700（0289）
64―3380

株

式

会

社

ニ

ッ

シ

ン

601‒8469

京都市南区唐橋平垣町 8（075）681―5346

日 本 歯 科 薬 品 株 式 会 社 750‒0015

山口県下関市西入江町 2 番 5 号（0832）
22―2221

ネ オ 製 薬 工 業 株 式 会 社 150‒0012
白

水

貿

ピ

ヤ

ス

マ

ニ

ー

株

林

式

製

薬

会

式

株

式

社

ジ

会

社

ー

会

シ
松

社

TSK ビル 2F（03）6701―1730（03）
5803―2151（072）
640―0117

2F（042）
595―6945

東京都渋谷区広尾 3―1―3（03）3400―3768

式

会社

532‒0033

大阪市淀川区新高 1―1―15（06）
6396―4455

株

式

会

社

132‒0035

東京都江戸川区平井 6―73―9（03）3619―1441

株

式

会

易

株

社

321‒3231

宇都宮市清原工業団地 8―3（028）
667―1811

株 式 会 社 茂 久 田 商 会

650‒0047

神戸市中央区港島南町 4―7―5（078）
303―8246

株

式

会

株

式

会

モ

リ

タ

564‒8650

大阪府吹田市垂水町 3―33―18（06）
6388―8103

リムラ

110‒0005

東京都台東区上野 3―17―10（03）3836―1871

Y A M A K I N 株 式 会 社 543‒0015

大阪市天王寺区真田山町 3―7（06）6761―4739

株東京都台東区上野 7―6―9（03）3845―2931

式

会

社
社
社

モ

ヨ

シ

ダ

110‒0005（五十音順）

日本歯科保存学雑誌論文投稿票（第1． 論文の分類（チェックして下さい）
2． 論文種別（チェックして下さい）

□修復
□原著

□歯内

□歯周

□総説

□ミニレビュー

巻

号掲載希望）□その他□症例・臨床報告

3． 論文タイトル
4． ランニングタイトル（サブタイトルでなく，論文内容を的確に示す略表題．
40 字以内とし，英文は 2 文字が和文 1 文字に相当する）

5． 著者名（全員）
6． 筆頭著者の所属機関名
7． 原稿の構成
・本文（和文・英文表紙，和文・英文抄録，本文，文献，付図説明を含む）

枚

・図

枚

枚（うちカラー掲載希望の図番号

8． 別刷希望部数部（□カラー印刷），表□モノクロ印刷）

9． 連絡先（投稿・校正責任者）
・氏名
・住所

〒

・電話

内線

Fax

・E‒mail
10．備考，連絡事項

日本歯科保存学会

殿

日本歯科保存学雑誌著作権帰属承諾書
年月日

下記に署名・捺印した著者は，下記の表題の投稿原稿が「日本歯科保存学雑誌」に掲載された際には，同誌の投稿規程により，著作権を貴学会に帰属することを承諾いたします。
・論文タイトル
・著者（全員）

印

印

印

印

印

印

印

印

印

印

印

印

印

印

印

著者全員の署名・捺印が投稿締切までに揃わない場合は，事務局までご相談ください．

（裏面にチェックリストがあります）

64 巻 3 号

貴稿が日本歯科保存学雑誌の投稿規程に沿ったものであるかを確認し，1～12 の項目については，必ず著者チェック欄にチェック（✓印）して下さい．さらに，その項目について，所属機関の編集連絡委
員のチェックを受けてから投稿して下さい．（編集連絡委員名簿は各巻 3・6 号に掲載しています）
なお，13～18 の項目については該当する場合にチェックして下さい．

チェック
著者

チェック

編集連絡委員

編集委員会□□

1．保存学会 HP 掲載の最新の投稿票を用いていますか．

□□□□

2．原稿（図，表を含む）は A4 サイズで作成していますか．

□□□□

3．原稿は和文（英文）表紙，和文（英文）抄録，本文，文献，英文（和文）表紙，
英文（和文）抄録の順になっていますか．

□□□□

4．和文抄録，英文抄録には，見出しが付いていますか．

□□□□

5．和文・英文各表紙の末尾に責任著者連絡先が記入してありますか．

□□□□

6．和文・英文各キーワード（索引用語）を 3 語程度，和文抄録・英文抄録の末尾に記入してありますか．

□□□□

7．表紙には，ランニングタイトルが記入してありますか．

□□□□

8．原稿には通しページ番号（表紙から文献まで）が記載されていますか．

□□□□

9．文献は所定の書き方で，引用順になっていますか．

□□□□

10．図表にはそれぞれ番号が記入してありますか．

□□□□

11．図表とその説明は英語で表記していますか．

□□□□

12．投稿論文に関わる利益相反（COI）自己申告書を添付していますか．

□□□□

13．トレースの必要な図は，余白にその旨記載してありますか．

□□□□

14．カラー掲載希望の場合にはカラーデータを，モノクロ掲載希望の場合にはモノ
クロデータを添付していますか．

□□□□

15．英文論文の場合は，ネイティブスピーカー等による英文校閲証明書を添付して
いますか．

□□

□□

16．ヒトを対象とする研究について，所属機関の長もしくはその長が委託する倫理委員会等の承認を得ていますか．

□□□□

17．ヒトを対象とする研究について，匿名化を行うなど研究対象者個人が特定されることがないよう配慮されていますか．

□□□□

18．ヒトを対象とする研究について，得られた資料を使用するにあたり研究対象者の承諾を得ていますか．

□□

編集連絡委員名㊞

編集委員会からのお願い：所属機関に編集連絡委員がおられない場合には，その旨明記の上，締切日に余裕をもって事務局までお送り下さい．