23［臨床研究］

自動血球計数装置

UniCel DxH 800 を用いたリンパ球サイズ分布幅（LY-V-SD）の基礎的検討
尾道市立市民病院

奥原要

旨慶彦，竹井絵梨，広実

中央検査室

早苗，巻幡信広，平谷恵子

ベックマン・コールター社の自動血球計数装置 UniCel DxH 800 Cellular Analysis System（UniCel DxH シリーズ コールターセルラーアナリシスシステム UniCel DxH 800：DxH 800）で測定可能なリンパ球サイズの変動幅（Lymphocyte-Volume-SD：LY-V-SD）についての基礎的検討と反応性リンパ球との関連性の検討を行った．結果，LY-V-SD の健常検体から求めた参考基準範囲は 9.8 ～ 16.4，塗抹標
本の目視による反応性リンパ球の割合 2％以上を陽性群と定義したときのカットオフ値は 16.7 であった．LYV-SD と反応性リンパ球には有意な関連性が見られ，LY-V-SD を用いることで反応性リンパ球の発見に役立つと考えられた．
Key words: 自動血球計数装置，LY-V-SD，反応性リンパ球

はじめに反応性リンパ球は通常，血液塗抹標本の目視観察

ベックマン・コールター社の自動血球計数装置でしか発見することは出来ないが，LY-V-SD を測

UniCel DxH 800 Cellular Analysis System

定することにより，リンパ球のサイズの多様性を数（UniCel DxH シリーズ コールターセルラーアナ値で観察することができると考えられる．

リシスシステム UniCel DxH 800）
（以下 DxH

LY-V-SD は現在，RUO（Research Use Only）

800）は血液細胞個々の体積，高周波伝導度およびである．同様の検査項目で単球体積のばらつきを示

5 つのレーザー散乱光により白血球を分類し，それす単球サイズ分布幅（Monocyte distribution

ら細胞解析情報を数値化し Cell population datawidth：MDW）の基礎的検討や敗血症症例におけるとして出力ができる血球計数装置である．DxH

MDW の評価に関する報告はいくつかあるが800 では，リンパ球体積の分布幅を示すリンパ球サ

LY-V-SD に関する基礎的検討などを行った報告はイズの変動幅（Lymphocyte-Volume-SD 以下，ほとんど見当たらない．

LY-V-SD）を測定することができる．

2）3）

，

当院では，目視分類の依頼があった場合に加え，リンパ球は分化度，抗原刺激，活性化，ウイルス目視分類依頼のない検体でも装置に登録している感染などによって姿，形を変える特性を有している．

一定の院内基準値から外れ，DxH 800 からのサス

それらの細胞は反応性リンパ球または異型リンパ球

ペクトメッセージが出た場合は自動で塗抹標本を作と呼ばれる ．

製し，目視による分類を行っている．また，標本に1）

Lymphocyte Volume SD from the automatic hematology analyzer UniCel DxH 800 : Evaluationof the basic performance
Department of Clinical Laboratory, Onomichi Municipal Hospital
Yoshihiko OKUHARA, Eri TAKEI, Sanae HIROZANE, Nobuhiro MAKIHATA,
Keiko HIRATANI

24

尾道市病医誌

Vol.35 No.2（2022）

裸核が認められた場合は 22％ウシアルブミンを全ほとんど見当たらないが，時に正常人でも白血球血に 5％の比率で添加して標本を作製している．し分画の 1％以下で認めるとされている ．そこでかし，測定値が院内基準範囲内に収まっており，今回は目視分類での反応性リンパ球 2％以上を陽

DxH 800 による分類で結果を報告した検体でも反性群と定義した．

応性リンパ球が出現している場合もあった．そこで

5）4）院内基準値範囲内の検体の検討

今回我々は，LY-V-SD を用いることで反応性リン2022 年 7 月～ 10 月に血球数算定検査の採血

パ球の発見に役立つと考え，基礎的検討と塗抹標本があった検体のうち，血算 5 項目と白血球分類がの目視分類による反応性リンパ球の割合との比較

院内基準値範囲内だが LY-V-SD がカットオフ値による検討を行った．

を超える値を示した検体 78 例の塗抹標本を作製し，目視分類により反応性リンパ球の出現の有無を確認した．

対象と方法
2022 年 7 月～ 2022 年 11 月に血球数算定検査
依頼のあった患者検体の EDTA-2K 加静脈血の残なお，LY-V-SD のカットオフ値は 3）で算出した数値を用いた．

余検体を用いて，以下の項目について検討を行った．
1）健常検体による参考基準範囲の算出
2022 年 8 月～ 10 月に血球数算定検査の採血があった健常検体 203 例の LY-V-SD を抽出し，その数値の上下 3SD の区間を参考基準範囲とし結果

1）健常検体による参考基準範囲の算出
203 例の健常検体を対象に参考基準範囲の算出を行った．
LY-V-SDの中央値は13.0，参考基準範囲は 9.8て算出した．
203 例の検体に関しては，血算 5 項目と白血球～ 16.4 であった（図 1）．

分類のすべての数値が日本臨床検査標準協議会

2）LY-V-SD と塗抹標本の目視による反応性リンパ（Japanese Committee For Clinical

球の割合の比較

4）

Laboratory Standards：JCCLS） の提唱する

LY-V-SD の数値を 12-14 群，14-16 群，16-18

共用基準範囲内にあるものを健常検体とした．

群，18-20 群，20-22 群，22 以上の群に分け，塗2）LY-V-SD と塗抹標本の目視による反応性リンパ抹標本の目視による反応性リンパ球の割合との球の割合の比較比較を行った．

2022 年 7 月～ 11 月に血球数算定検査の採血

各群の症例数は 12-14 群 141 例，14-16 群 126があった検体 430 例の残余検体を用いて，塗抹標例，16-18 群 108 例，18-20 群 33 例，20-22 群

本を作製し LY-V-SD と目視による反応性リンパ13 例，22 以上の群 9 例であった．各群の目視に球の割合の比較を行った．

よる反応性リンパ球の割合の平均値は，それぞれ

LY-V-SD の数値を 12-14 群，14-16 群，16-18群，18-20 群，20-22 群，22 以上の群に分け，塗抹標本の目視による反応性リンパ球の割合との比較を行った．
3）院内における LY-V-SD カットオフ値の算定
2022 年 7 月～ 10 月に血球数算定検査の採血があった検体 428 例を対象とし，塗抹標本におい0.09%，0.19%，0.46%，0.59%，2.01%，1.44%であった（図 2）．
3）院内における LY-V-SD カットオフ値の算定
塗抹標本の目視による反応性リンパ球の割合が 2％以上のものを「陽性群」，2％未満のものを「陰性群」と定義し，LY-V-SD のカットオフ値の算定を行った．て反応性リンパ球の出現が 2％を超えるものを陽それぞれの症例数は陽性群 6 例，陰性群 422性と定義し LY-V-SD のカットオフ値を算出した．

例で 2 つの群の LY-V-SD には有意差を認めた（P

反応性リンパ球に関して明確な数値の基準値は＜ 0.05）．

自動血球計数装置

UniCel DxH 800 を用いたリンパ球サイズ分布幅（LY-V-SD）の基礎的検討

図1

図2

異常検体の LY-V-SD ヒストグラム

LY-V-SD と目視分類による反応性リンパ球の比較

図325

26

尾道市病医誌

Vol.35 No.2（2022）

また，ROC 解析を行った結果，反応性リンパ球「陽性群」を検出する際の LY-V-SD のカットオフ値は 16.7（感度 0.74，特異度 1.00，

なり，健常検体を用いた LY-V-SD の参考基準範囲の上限 16.4 と近似する値となった．
反応性リンパ球は細胞傷害性 T 細胞や NK 細胞

AUC0.918）であった（図 3）．

が反応した細胞であり，伝染性単核球症，風疹，水4）院内基準値範囲内の検体の検討

痘，流行性耳下腺炎，ウイルス性肝炎などのウイル

院内基準値範囲内で塗抹標本が作製されなス感染症や免疫反応（アレルギー・薬物）で出現をかった検体のうち，3）で求めた LY-V-SD のカッ

認める ．しかし，反応性リンパ球は自動血球計測

トオフ値：16.7 を超えた検体の塗抹標本を作製装置での診断は困難とされており，塗抹標本の鏡検し，目視による反応性リンパ球の割合について検が不可欠である．特に EB ウイルスによる伝染性単討を行った．

核球症では反応性リンパ球の出現が 10％を超え，
ま6）

対象は 78 例で，
LY-V-SD の内訳は 16.7-18 群た症状の回復とともに反応性リンパ球の割合が減

45 例，18-20 群 27 例，20-22 群 3 例，22 以上少するため経時的に検査をすることで病態の把握の群 3 例であった．に役立つとされている

7）8）

．

塗抹標本の目視によって認めた反応性リンパここで 1 つ例を提示する．図は当院に来院された球の割合の平均値は全体で 0.49％，LY-V-SD で水痘・帯状疱疹ウイルスに罹患した患者の LY-V-の群別ではそれぞれ，0.40％，0.49％，1.25％，SD 値と反応性リンパ球の割合の経過である（図 4）．

1.16％であった．

発症日には LY-V-SD と反応リンパ球の割合がそれぞれ 26.2，7.5% だったが，2 日目が 25.9，5.0%，
察

3 日目が 22.8，4.25%，5 日目が 17.1，1.5%，12

健常検体を用いた LY-V-SD の参考基準範囲は

日目には 13.6，0% と反応性リンパ球の割合が減少

9.8 ～ 16.4，中央値 13.0 であり，目視による反応性するにつれて LY-V-SD も低下がみられ，LY-V-SDリンパ球の割合との比較でも LY-V-SD が高値になと反応性リンパ球の関連が示唆された．

考るほど反応性リンパ球の割合が多くなることが分

院内基準値内であるが，カットオフ値：16.7 を超えたため塗抹標本を作製した検体では，平均でかった．
ROC 解 析による LY-V-SD のカットオフ値は0.49％の反応性リンパ球が確認された．平均値を見16.7，感度 74％，特異度 100％，AUC は 0.918 とると少なく感じるが，検討した 78 例のうち 3 例は

図4

水痘・帯状疱疹ウイルス罹患患者の経過自動血球計数装置

UniCel DxH 800 を用いたリンパ球サイズ分布幅（LY-V-SD）の基礎的検討反 応 性リンパ球が 2％を超えていた．今まではDxH800 による分類で報告が終わっていた検体に対し，LY-V-SD を用いることで反応性リンパ球の発見に役立つと考えられた．
今回の検討をもとに，LY-V-SD の数値を用いて反応性リンパ球をより鋭敏に捉えることで，ウイル

6） 鶴田一人，他：異型リンパ球の鑑別法．検査と技術 vol.36 no.5 397-403，2008
7） Chong VCL，他：Reactive lymphocytes inpatients with Covid-19.Br J Haematol.
2020 Jun;189（5）:844.
8） Samuel E Weinberg ら Atypical

ス感染の示唆や免疫反応の動態の指標の一助にな

lymphocytes in peripheral blood ofれば良いと考える．

patients with COVID-19 Br J Haematol.

DxH800 では，通常の白血球分類測定で同時にLY-V-SD を求めることができる．患者に再採血を行うことなくデータを得ることができ，検査技師側への業務負担もほとんどないので，反応性リンパ球の発見に簡便に組み込める項目である．当院でも今後，今回求めた LY-V-SD のカットオフ値を用いて塗抹標本を作製し，さらなる検討を行っていく必要がある．
まとめ
LY-V-SD の参考基準範囲やカットオフ値の基礎的検討，および反応性リンパ球の出現との関連性を検討した．反応性リンパ球の割合 2％以上を陽性群と定義したとき，LY-V-SD は有意な関連性を示した．反応性リンパ球は装置による分類だけでは発見が困難とされており，また塗抹標本の観察の際も正常なリンパ球との鑑別に苦労することが多いため，
LY-V-SD を用いることで反応性リンパ球の発見に役立つことが期待される．
文献1） 柴田進：図解血液病学，
改訂 3 版．金芳堂 594595，1996
2） 小森彩，他：自動血球計測装置 UniCel DxH
900 を用いた単球サイズ分布幅（MDW）の基礎的検討とプロカルシトニンとの比較
3） 佐々木麻美，他：敗血症スクリーニングにおける Monocyte distribution width（MDW）
測定の評価
4） 日本臨床検査標準協議会：https://www.
jccls.org/
5） ビジュアル臨床血液形態学 南江堂

2020 Jul;190（1）:36-39.

27

28

尾道市病医誌

Vol.35 No.2（2022）