6410/6411/6416/6443

Product Instructions
EN Coliform Count Plate
FR Test pour la numération des Coliformes
DE Coliforme Zählplatte
IT Piastra per il conteggio dei coliformi
ES Placa para recuento de coliformes
NL Coliform Telplaat
SV Odlingsplatta för koliformer
DA Coliform Tælleplade
NO For koliforme bakterier
FI Koliformien kasvatusalusta
PT Placa para Contagem de Coliformes
EL Πλακίδιο Καταμέτρησης Κολοβακτηριδίων
PL Płytka do oznaczania liczby bakterii z grupy coli
RU Тест-пластина для подсчета колиформных бактерий
TR Koliform Sayım Plakası
JA 大腸菌群数測定用プレート

ZH 大肠菌群测试片� งเชื้้อ� สำำ�หรัับนัับจำำ�นวนโคลิิฟอร์์ม
TH แผ่่นอาหารเลี้้ย

KO 대장균군 측정용 플레이트CC
Coliform Count

EN(English)Issue Date: 2024-01

Product Instructions

Coliform Count Plate
Product Description and Intended Use

The Neogen® Petrifilm® Coliform Count (CC) Plate is a sample-ready-culture medium system which contains modified
Violet Red Bile (VRB) nutrients, a cold-water-soluble gelling agent, and a tetrazolium indicator that facilitates colony
enumeration. Neogen Petrifilm CC Plates are used for the enumeration of coliforms in the food and beverage and bottled
water industries. Neogen Petrifilm CC Plate components are decontaminated though not sterilized. Neogen Food Safety
is certified to International Organization for Standardization (ISO) 9001 for design and manufacturing. Neogen Petrifilm
CC Plate has not been evaluated with all possible food products, food processes, testing protocols or with all possible
microorganism strains.
The United States Food and Drug Administration (FDA) Bacteriological Analytical Manual (BAM)7 define coliforms as
Gram-negative rods, which produce acid and gas from lactose fermentation. Coliform colonies growing on the Neogen
Petrifilm CC Plate produce acid, which causes the pH indicator to deepen the gel color; gas trapped around red colonies
indicates coliforms.
ISO defines coliforms by their ability to grow in method-specific, selective media. ISO method 48321, enumerating
coliforms by colony-count technique, defines coliforms as acid producers on VRB with lactose (VRBL) agar. On Neogen
Petrifilm CC Plates these acid-producing coliforms are indicated by red colonies with or without gas production. ISO
method 48312, enumerating coliforms by the most probable number (MPN) method, defines coliforms by their ability togrow and produce gas from lactose in a selective broth. On Neogen Petrifilm CC Plates these coliforms are indicated by
red colonies associated with gas.
For bottled water samples, confirmed coliform colonies are indicated by red colonies associated with gas on Neogen
Petrifilm CC Plates. Red colonies without closely associated gas bubbles may be coliforms and should be subcultured andtested with appropriate confirmation methods11,12. See Interpretation section for additional details. Characteristic colonies
can be subcultured and tested as Escherichia coli.
AFNOR Certification has certified Neogen Petrifilm CC Plate in comparison to ISO method 48312 and ISO method 48321
for enumeration of total coliforms. AFNOR Certification has also certified Neogen Petrifilm CC Plate in comparison to
NF V08-0603, for enumeration of thermotolerant coliforms.

SafetyThe user should read, understand, and follow all safety information in the instructions for the Neogen Petrifilm CC Plate.
Retain the safety instructions for future reference.
WARNING: Indicates a hazardous situation, which, if not avoided, could result in death or serious injury and/or
property damage

WARNINGTo reduce the risks associated with exposure to biohazards and environmental contamination:• Follow current industry standards and local regulations for disposal of biohazardous waste.
To reduce the risks associated with release of contaminated product:• Follow all product storage instruction contained in the instructions for use.
• Do not use beyond the expiration date.
To reduce the risks associated with bacterial infection and workplace contamination:• Perform Neogen Petrifilm CC Plate testing in a properly equipped laboratory under the control of a skilled
microbiologist.
• The user must train its personnel in current proper testing techniques: for example, Good Laboratory Practices4,
ISO 72185, or ISO 170256.
To reduce the risks associated with misinterpretation of results:• Neogen has not documented Neogen Petrifilm CC Plates for use in industries other than food and beverage including
bottled water. For example, Neogen has not documented Neogen Petrifilm CC Plates for testing pharmaceuticals, orcosmetics. Neogen has not documented Neogen Petrifilm CC Plates for testing surface and municipal waters, or waters
used in the pharmaceutical or cosmetic industries.
• The use of Neogen Petrifilm CC Plates to test water samples in compliance with local water testing regulations is at thesole discretion and responsibility of the end-user. Neogen Petrifilm CC Plates have not been tested with all possible
bottled water samples, testing protocols or with all possible strains of microorganisms.
1

EN(English)• Do not use the Neogen Petrifilm CC Plates in the diagnosis of conditions in humans or animals.
• Neogen Petrifilm CC Plates do not differentiate any one coliform strain from another.
• Foods with high sugar content may increase the potential for gas production from non-coliform Enterobacteriaceae.
Consult the Safety Data Sheet for additional information.
For information on documentation of product performance, visit our website at www.neogen.com or contact your Neogen
representative or authorized distributor.

User Responsibility

Users are responsible for familiarizing themselves with product instructions and information. Visit our website atwww.neogen.com, or contact your Neogen representative or authorized distributor for more information.
When selecting a test method, it is important to recognize that external factors such as sampling methods, testing
protocols, sample preparation, handling, and laboratory technique may influence results.
It is the user’s responsibility in selecting any test method or product to evaluate a sufficient number of samples with theappropriate matrices and microbial challenges to satisfy the user that the chosen test method meets the user’s criteria.
It is also the user’s responsibility to determine that any test methods and results meet its customers’ and suppliers’
requirements.
As with any test method, results obtained from use of any Neogen Food Safety product do not constitute a guarantee ofthe quality of the matrices or processes tested.

Limitation of Warranties / Limited Remedy

EXCEPT AS EXPRESSLY STATED IN A LIMITED WARRANTY SECTION OF INDIVIDUAL PRODUCT PACKAGING, NEOGENDISCLAIMS ALL EXPRESS AND IMPLIED WARRANTIES, INCLUDING BUT NOT LIMITED TO, ANY WARRANTIES OF
MERCHANTABILITY OR FITNESS FOR A PARTICULAR USE. If any Neogen Food Safety Product is defective, Neogen or
its authorized distributor will, at its option, replace or refund the purchase price of the product. These are your exclusive
remedies. You must promptly notify Neogen within sixty days of discovery of any suspected defects in a product and return it
to Neogen. Please contact your Neogen representative or authorized Neogen distributor for any further questions.

Limitation of Neogen Liability

NEOGEN WILL NOT BE LIABLE FOR ANY LOSS OR DAMAGES, WHETHER DIRECT, INDIRECT, SPECIAL, INCIDENTAL
OR CONSEQUENTIAL DAMAGES, INCLUDING BUT NOT LIMITED TO LOST PROFITS. In no event shall Neogen’s liability
under any legal theory exceed the purchase price of the product alleged to be defective.

Storage

Store unopened Neogen Petrifilm CC Plate pouches refrigerated or frozen at temperatures lower than or equal to 8°C(46°F). Just prior to use, allow unopened Neogen Petrifilm CC Plate pouches to come to room temperature before
opening. Return unused Neogen Petrifilm CC Plates to pouch. Seal by folding the end of the pouch over and applying
adhesive tape. To prevent exposure to moisture, do not refrigerate opened pouches. Store resealed pouches in a cooldry place for no longer than four weeks. It is recommended that resealed pouches of Neogen Petrifilm CC Plates be stored
in a freezer (see below) if the laboratory temperature exceeds 25°C (77°F) and/or the laboratory is located in a region
where the relative humidity exceeds 50% (with the exception of air-conditioned premises).
To store opened pouches in a freezer, place Neogen Petrifilm CC Plates in a sealable container. To remove frozen Neogen
Petrifilm CC Plates for use, open the container, remove the plates that are needed and immediately return remaining plates
to the freezer in the sealed container for the remainder of the shelf life. Neogen Petrifilm CC Plates should not be used
past their expiration date. The freezer that is used for open pouch storage must not have an automatic defrost cycle as thiswould repeatedly expose the Neogen Petrifilm CC Plates to moisture which can damage the plates.
Do not use Neogen Petrifilm CC Plates that show discoloration. Expiration date and lot number are noted on each packageof Neogen Petrifilm CC Plates. The lot number is also noted on individual Neogen Petrifilm CC Plates.

Disposal

After use, Neogen Petrifilm CC Plates may contain microorganisms that may be a potential biohazard.
Follow current industry standards for disposal.

Instructions for Use

Follow all instructions carefully. Failure to do so may lead to inaccurate results.

2

EN (English)
Preparation, Incubation and Interpretation of Samples from Food and Beverage Industries(Bottled Water Excepted) Including Environmental Samples
Sample Preparation
1. Use appropriate sterile diluents:

Butterfield’s phosphate buffered dilution water7, 0.1% peptone water8, peptone salt diluents8,9, Buffered Peptone
Water8,9, saline solution (0.85-0.90%), Neogen® Wide-Spectrum Neutralizer, bisulfite-free letheen broth or distilledwater. See section “Specific Instructions for Validated Methods” for specific requirements.
Do not use diluents containing citrate, bisulfite or thiosulfate with Neogen Petrifilm CC Plates; they can inhibit
growth. If citrate buffer is indicated in the standard procedure, substitute with one of the buffers listed above, warmed
to 40-45°C (104-113°F).
2. Blend or homogenize sample.
3. For optimal growth and recovery of microorganisms, adjust the pH of the sample suspension to 6.6 - 7.2. For acidic
products, adjust the pH with 1N NaOH. For alkaline products, adjust the pH with 1N HCl.
Plating
1. Place the Neogen Petrifilm CC Plate on a flat, level surface.
2. Lift the top film and with the pipette perpendicular to the inoculation area dispense 1 mL of sample suspension onto thecenter of bottom film.
3. Roll the top film down onto the sample to prevent trapping air bubbles.
4. Place the Neogen® Petrifilm® Spreader with the flat side down on the center of the Neogen Petrifilm CC Plate. Press
gently on the center of the Neogen Petrifilm Spreader to distribute the sample evenly. Spread the inoculum over theentire Neogen Petrifilm CC Plate growth area before the gel is formed. Do not slide the Neogen Petrifilm Spreader
across the film.
5. Remove the Neogen Petrifilm Spreader and leave the Neogen Petrifilm CC Plate undisturbed for at least one minute topermit the gel to form.

Incubation

Incubate Neogen Petrifilm CC Plates in a horizontal position with the clear side up in stacks of no more than 20 plates.
Several incubation times and temperatures can be used depending on current local reference methods, some of which arelisted in the “Specific Instructions for Validated Methods” section.

Interpretation

1. Neogen Petrifilm CC Plates can be counted using a standard colony counter or other illuminated magnifier. Gas
produced by coliform may disrupt the colony so that the colony “outlines” the bubble. This should be counted as asingle coliform. Do not count colonies on the foam dam since they are removed from the selective influence of themedium. Do not count artifact bubbles that may be present.
The interpretation of coliform colonies on the Neogen Petrifilm CC Plate varies by reference method. For example:
OR NF Validation certified methods:
AOAC® Official MethodsSM:
Coliform colonies are red and closely associated- As compared to ISO method 48312 (MPN method),(within one colony diameter) with entrapped gas.
coliform colonies are red and closely associated (within
Colonies not associated with gas (a distance greater
one colony diameter) with entrapped gas.
than one colony diameter between colony and gas- As compared to ISO method 48321 (total coliforms)
bubble) are not counted as coliforms.
and NF V08-0603 (fecal coliforms) both based on VRBL
methods, count all red colonies with or without gas.
2. The circular growth area is approximately 20 cm2. Estimates can be made on Neogen Petrifilm CC Plates containing
greater than 150 colonies by counting the number of colonies in one or more representative squares and determining
the average number per square. Multiply the average number by 20 to determine the estimated count per Neogen
Petrifilm CC Plate.
3. When colonies are present in large numbers, Neogen Petrifilm CC Plates may have a deepening of the gel colorand either or both of the following characteristics: many small, indistinct colonies and/or many gas bubbles. Highconcentrations of coliforms will cause the growth area to turn dark red. When this occurs, record results as too
numerous to count (TNTC). When an actual count is required, plate at a higher dilution.
4. Where necessary, colonies may be isolated for further identification. Lift the top film using proper testing technique andpick the colony from the gel. Test using standard procedures.
5. If the Neogen Petrifilm CC Plates cannot be counted within 1 hour of removal from the incubator, they may be stored
for later enumeration by freezing in a sealable container at temperatures lower than or equal to negative 15°C (5°F) for
no longer than one week.

3

EN(English)Preparation, Incubation and Interpretation of Bottled Water Samples
Hydrate Neogen Petrifilm CC Plates
1. Place the Neogen Petrifilm CC Plate on a flat, level surface.

2. Lift the top film and dispense 1 mL of an appropriate sterile hydration diluent onto the center of bottom film.
Appropriate sterile hydration diluents include distilled water, deionized (DI) water and reverse osmosis (RO) water.
3. Roll the top film down onto the sample to prevent trapping air bubbles.
4. Place the Neogen Petrifilm Spreader with the flat side down on the center of the plate. Press gently on the center of the
spreader to distribute the diluent evenly. Spread the diluent over the entire Neogen Petrifilm Plate growth area before
the gel is formed. Do not slide the spreader across the film.
5. Remove the spreader and allow the plates to remain closed for a minimum of 1 hour before use.
6. Store hydrated Neogen Petrifilm CC Plates in a sealed pouch or plastic bag. Protect plates from light and refrigerate at
2-8°C (36-46°F) for up to 7 days.

Water Filtration and Plate Incubation

1. Following standard procedures for water analysis, membrane filter water sample using a 47 mm, 0.45 micron pore size
Mixed Cellulose Ester (MCE) filter.
2. Carefully lift the top film of the Neogen Petrifilm CC Plate. Avoid touching the circular growth area. Place the filter inthe center of the hydrated area. Minimize trapping bubbles under the filter.
3. Slowly roll top film onto the filter. Minimize trapping air bubbles and creating gaps between the filter and the Neogen
Petrifilm CC Plate.
4. Lightly apply pressure by using the Neogen Petrifilm Plate spreader or sliding a finger lightly across the entire disk area(including edges) to ensure uniform contact of the filter with the gel and to eliminate any air bubbles.
5. Incubate Neogen Petrifilm CC Plates at 35°C ± 1°C for 24 hours ± 2 hours11 or 36°C ± 1°C for 24 hours ± 2 hours12 in ahorizontal position with the clear side up in stacks of no more than 20.

Interpretation

1. Neogen Petrifilm CC Plates can be counted using a standard colony counter or other illuminated magnifier. Do notcount colonies on the foam dam since they are removed from the selective influence of the medium. Do not countartifact bubbles that may be present.
2. Red colonies associated with gas bubbles are counted as coliforms. Gas bubbles may form a circular or star-shaped
pattern around the colony. Gas produced by coliforms may disrupt the colony so that the colony “outlines” the bubble.
This should be counted as a single coliform. Red colonies without closely associated gas bubbles may be coliforms andshould be picked and tested with appropriate confirmation methods11,12.
3. When colonies are present in large numbers, Neogen Petrifilm CC Plates will have a deepening of the gel color
associated with many small, indistinct colonies or gas bubbles. When this occurs, record results as too numerous tocount (TNTC).
4. Colonies may be isolated for further identification. Lift the top film and pick the colony from the gel or the filter surface.
When lifting the top film, the filter may adhere to either the top film or the bottom film. If the filter adheres to the top
film, separate the filter from the top film and pick colonies. Test using standard procedures.
Note: Delayed counting of Neogen Petrifilm CC Plates with filters is not recommended.
For further information refer to the appropriate “Neogen® Petrifilm® Coliform Count Plate Interpretation Guide.” If you havequestions about specific applications or procedures, please visit our website at www.neogen.com or contact your local
Neogen representative or distributor.
Specific Instructions for Validated Methods
AOAC® Official MethodsSM (986.33 Bacteria and Coliform Counts in Milk, Dry Rehydratable Film Methods and 989.10
Bacterial and Coliforms Counts in Dairy Products, Dry Rehydratable Film Methods)
Incubate Neogen Petrifilm CC Plates 24 hours ± 2 hours at 32°C ± 1°C.
AOAC® Official MethodsSM (991.14 Coliform and Escherichia coli Counts in Foods, Dry Rehydratable Film Methods)
Incubate Neogen Petrifilm CC Plates 24 hours ± 2 hours at 35°C ± 1°C.
AOAC® Performance Tested MethodSM Certificate #082101
In an AOAC® Research Institute Performance Tested Method (PTM) study, the Neogen Petrifilm CC Plate method wasfound to be equivalent to the average log counts of the FDA/BAM Chapter 4, Section III.D method for the enumeration of
coliform count in bottled water.

4

EN(English)

Scope of the Validation:
Bottled water: purified water, treated spring water, non-carbonated natural spring water, carbonated natural spring water.
Incubation:
Incubate the Neogen Petrifilm CC Plates 24 hours ± 2 hours at 35°C ± 1°C.
NF Validation by AFNOR Certification:
NF Validation certified method in compliance with ISO 16140-210 in comparison to ISO 48321 (3M-01/02-09/89 A)
Scope of the validation: For testing all human food products (except raw shellfish), pet food and environmental samples.
Use the following details when implementing the above Instructions for Use:
Sample preparation:
Use only ISO listed diluents.
Incubation:
Incubate Neogen Petrifilm CC Plates 24 hours ± 2 hours at 30°C ± 1°C or 37°C ± 1°C.
Interpretation:
Calculate the number of microorganisms present in the test sample according to ISO 72185 for one plate per dilution.
Estimates are outside of the scope of the NF Validation certification (cf interpretation part paragraph 2).
NF Validation certified method in compliance with ISO 16140-210 in comparison to ISO 48312 (3M-01/02-09/89 B)
Scope of the validation: For testing all human food products (except raw shellfish).
Use the following details when implementing the above Instructions for Use:
Sample preparation:
Use only ISO listed diluents.
Incubation:
Incubate Neogen Petrifilm CC Plates 24 hours ± 2 hours at 30°C ± 1°C or 37°C ± 1°C.
Interpretation:
Calculate the number of microorganisms present in the test sample according to ISO 72185 for one plate per dilution.
Estimates are outside of the scope of the NF Validation certification (cf interpretation part paragraph 2).
NF Validation certified method in compliance with ISO 16140-210 in comparison to NF V08-0603 (3M-01/02-09/89 C)
Scope of the validation: For testing all human food products
Use the following details when implementing the above Instructions for Use:
Sample preparation:
Use only ISO listed diluents
Incubation:
Incubate Neogen Petrifilm CC Plates 24 hours ± 2 hours at 44°C ± 1°C.
Interpretation:
Calculate the number of microorganisms present in the test sample according to ISO 72185 for one plate per dilution.
Estimates are outside of the scope of the NF Validation certification (cf interpretation part paragraph 2). Refer to EN ISO
7218 standard for inoculation, colony counting and calculation and expression of results.

3M 01/02 – 09/89A, B, and C
ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS
http://nf-validation.afnor.org/en
For more information about end of validity, please refer to NF VALIDATION certificate available on the website mentioned
above.

5

EN(English)

References

1. ISO 4832. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms –Colony count technique.
2. ISO 4831. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumeration of
coliforms – Most probable number technique.
3. AFNOR NF V08-060. General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at
44°C – Routine method.
4. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
6. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
7. FDA. Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998. Reagents Index for BAM found at:
http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.
8. ISO 6887-5. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk products.
9. ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension anddecimal dilutions.
10. ISO 16140-2. Microbiology of the food chain – Method validation – Protocol for the validation of alternative(proprietary) methods against a reference method.
11. U.S. Food and Drug Administration. 2002. Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4. Membranefilter method for coliforms.
12. American Public Health Association. 2017. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th Ed.
Method 9222B2a.
Refer to the current versions of the standard methods listed above.

Explanation of Symbols
info.neogen.com/symbols

AOAC is a registered trademark of AOAC INTERNATIONAL.
Official Methods is a service mark of AOAC INTERNATIONAL.
Performance Tested Method is a service mark of AOAC INTERNATIONAL.

6

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931AFR(Français)Date de parution : 2024-01

Instructions relatives au produit

Test pour la numération des Coliformes
Description et utilisation du produit

Le test Neogen® Petrifilm® pour la numération des Coliformes (CC) est un milieu de culture prêt à l’emploi qui contientdes éléments nutritifs VRB modifiés (cristal violet, rouge neutre et bile), un agent gélifiant soluble dans l’eau froide et
un indicateur au tétrazolium facilitant le dénombrement des colonies. Les tests Neogen Petrifilm CC sont utilisés pourla numération des coliformes dans les secteurs de l’alimentation, des boissons et de l’eau en bouteille. Les composantsdu test Neogen Petrifilm CC sont décontaminés, mais pas stérilisés. Neogen Sécurité Alimentaire respecte la normeInternational Organization for Standardization (ISO) 9001 en matière de conception et de fabrication. Le test Neogen
Petrifilm CC n’a pas été testé avec la totalité des produits alimentaires, des processus de transformation des aliments, desprotocoles d’analyse ou des souches possibles de microorganismes.
Le Bacteriological Analytical Manual (BAM, Manuel analytique bactériologique)7, publié par la Food and Drug
Administration (FDA), définit les coliformes comme des bâtonnets Gram négatif qui produisent des acides et du gaz par
fermentation du lactose. Les colonies de coliformes qui se développent sur le test Neogen Petrifilm CC produisent unacide, ce qui conduit ainsi l’indicateur de pH à assombrir la couleur du gel ; la présence de gaz emprisonné autour descolonies rouges indique la présence de coliformes.
La norme ISO définit les coliformes en fonction de leur capacité à croître dans des milieux sélectifs, selon des méthodes
spécifiques. La méthode ISO 48321, qui énumère les coliformes grâce à la technique de comptage des colonies, définit lescoliformes comme étant des producteurs d’acide sur gélose lactosée biliée au cristal violet et au rouge neutre (VRBL). Sur
les tests Neogen Petrifilm CC, ces coliformes producteurs d’acide forment des colonies rouges avec ou sans production degaz. La méthode ISO 48312, qui énumère les coliformes grâce à la méthode du nombre le plus probable (NPP), définit lescoliformes par leur capacité à se développer et à produire du gaz à partir du lactose dans un bouillon sélectif. Sur les tests
Neogen Petrifilm CC, ces coliformes sont indiqués par des colonies rouges associées à du gaz.
Pour les échantillons d’eau en bouteille, les colonies de coliformes confirmées sont indiquées par des colonies rouges
associées à du gaz sur les tests Neogen Petrifilm CC. Les colonies rouges sans bulles de gaz étroitement associées peuventêtre des coliformes. Elles doivent être passées et testées avec des méthodes de confirmation appropriées11,12. Consultez
la section Interprétation pour obtenir plus de détails. Les colonies caractéristiques peuvent être passées et testées comme
Escherichia coli.
AFNOR Certification a certifié le test Neogen Petrifilm CC par rapport à la méthode ISO 48312 et à la méthode ISO 48321
pour la numération des coliformes totaux. AFNOR Certification a également certifié le test Neogen Petrifilm CC par
rapport à la norme NF V08-0603 pour la numération des coliformes thermotolérants.

Sécurité

L’utilisateur doit lire, comprendre et respecter toutes les consignes de sécurité fournies dans les instructions du test
Neogen Petrifilm CC. Conserver ces consignes de sécurité pour référence ultérieure.
AVERTISSEMENT :indique une situation dangereuse qui, si elle n’est pas évitée, pourrait entraîner un décès,des blessures graves et/ou des dommages matériels

AVERTISSEMENT
Afin de réduire les risques associés à l’exposition aux dangers biologiques et à la pollution de l’environnement :• Se conformer aux normes actuelles du secteur et aux réglementations locales relatives à l’élimination desdéchets contaminés.
Afin de réduire les risques associés à la diffusion de produits contaminés :• Suivre toutes les instructions relatives à la conservation du produit mentionnées dans le mode d’emploi.
• Ne pas utiliser après la date de péremption.
Afin de réduire les risques associés à l’infection bactérienne et à la contamination du lieu de travail :• Effectuer les analyses au moyen du test Neogen Petrifilm CC dans un laboratoire correctement équipé, sous lasurveillance d’un microbiologiste compétent.
• L’utilisateur doit former son personnel aux techniques d’analyse en vigueur appropriées, par exemple les bonnes
pratiques de laboratoire4, la norme ISO 72185 ou la norme ISO 170256.

1

FR(Français)Afin de réduire les risques associés à une mauvaise interprétation des résultats :• Neogen n’a pas étudié l’utilisation des tests Neogen Petrifilm CC dans des secteurs autres que dans celui del’alimentation, des boissons et de l’eau en bouteille. Par exemple, Neogen n’a pas étudié l’utilisation des tests Neogen
Petrifilm CC pour l’analyse de produits pharmaceutiques ou de cosmétiques. Neogen n’a pas documenté les tests
Neogen Petrifilm CC pour l’analyse des eaux de surface et des eaux municipales, ou des eaux utilisées dans lesindustries pharmaceutiques ou cosmétiques.
• L’utilisation des tests Neogen Petrifilm CC pour l’analyse d’échantillons d’eau conformément aux réglementations
locales en matière d’analyse de l’eau est à la seule discrétion et responsabilité de l’utilisateur final. Les tests Neogen
Petrifilm CC n’ont pas été testés avec tous les échantillons d’eau en bouteille possibles, les protocoles d’analyse ou
souches possibles de microorganismes.
• Ne pas utiliser les tests Neogen Petrifilm CC pour réaliser des diagnostics sur l’homme ou l’animal.
• Les tests Neogen Petrifilm CC ne permettent pas de faire de distinction entre les différentes souches de coliformes.
• Les aliments à forte teneur en sucre peuvent augmenter le potentiel de production de gaz des Enterobacteriaceae
non coliformes.
Consulter la fiche de données de sécurité du produit pour obtenir des informations supplémentaires.
Visitez notre site Web à l’adresse www.neogen.com ou contactez votre représentant Neogen ou votre distributeur Neogen
agréé pour plus d’informations.

Responsabilité de l’utilisateur

Il incombe aux utilisateurs de prendre connaissance des instructions et des informations relatives au produit.
Visitez notre site Web à l’adresse www.neogen.com ou contactez votre représentant Neogen ou votre distributeur
Neogen agréé pour plus d’informations.
Lors du choix d’une méthode de test, il est important d’admettre que des facteurs externes comme les méthodesd’échantillonnage, les protocoles d’analyse, la préparation des échantillons, la manipulation et les techniques de laboratoire
peuvent influencer les résultats.
Il incombe à l’utilisateur de sélectionner une méthode ou un produit d’analyse adapté pour évaluer un nombre suffisantd’échantillons avec les matrices et les souches microbiennes appropriées, afin de garantir que la méthode d’analyse est
conforme à ses critères.
Il incombe également à l’utilisateur de déterminer si une méthode d’analyse et ses résultats répondent aux exigences deses clients ou fournisseurs.
Comme pour toute méthode d’analyse, les résultats obtenus avec un produit Neogen Sécurité Alimentaire ne constituent
pas une garantie de la qualité des matrices ou des processus testés.

Limitations de garanties/Limites de recours

SAUF SI EXPRESSÉMENT ÉTABLI DANS LA SECTION DE GARANTIE LIMITÉE D’UN EMBALLAGE DE PRODUITINDIVIDUEL, NEOGEN RENONCE À TOUTE GARANTIE EXPLICITE ET IMPLICITE, Y COMPRIS, MAIS SANS S’Y LIMITER,
TOUTE GARANTIE DE COMMERCIALISATION OU D’ADAPTATION POUR UN USAGE SPÉCIFIQUE. En cas de défaut
de tout produit Neogen Sécurité Alimentaire, Neogen ou son distributeur agréé s’engage, à son entière discrétion, au
remplacement ou au remboursement du prix d’achat du produit. Il s’agit de vos recours exclusifs. Tout défaut supposé duproduit devra être notifié à Neogen dans un délai de soixante jours et le produit renvoyé à Neogen. Merci de contacter
votre représentant Neogen ou votre distributeur Neogen agréé pour toute autre question.

Limitation de responsabilité de Neogen

NEOGEN NE SERA PAS TENUE RESPONSABLE DES PERTES OU DES DOMMAGES ÉVENTUELS, QU’ILS SOIENTDIRECTS, INDIRECTS, SPÉCIFIQUES, ACCIDENTELS OU CONSÉCUTIFS, Y COMPRIS, MAIS SANS S’Y LIMITER, LES
PERTES DE PROFITS. En aucun cas et en aucune manière, la responsabilité de Neogen ne sera engagée au-delà du prixd’achat du produit prétendu défectueux.

Stockage

Conserver les poches non ouvertes de tests Neogen Petrifilm CC au réfrigérateur ou au congélateur à une température
inférieure ou égale à 8 °C (46 °F). Juste avant utilisation, laisser les poches non ouvertes de tests Neogen Petrifilm CC
atteindre la température ambiante avant de les ouvrir. Replacer les tests Neogen Petrifilm CC non utilisés dans leur poche.
Refermer hermétiquement les poches ouvertes avec un ruban adhésif, après avoir plié sur lui-même le côté ouvert. Ne pas
réfrigérer les poches ouvertes pour éviter une exposition à l’humidité. Les poches doivent être conservées refermées dansun endroit frais et sec pendant quatre semaines au maximum. Lorsque la température d’un laboratoire dépasse 25 °C (77 °F),
et/ou que ce laboratoire est situé dans une région où l’humidité relative dépasse 50 % (à l’exception des locaux climatisés), il
est recommandé de conserver les poches de tests Neogen Petrifilm CC refermées au congélateur (voir ci-dessous).
Pour conserver les poches ouvertes dans un congélateur, placer les tests Neogen Petrifilm CC dans un récipient étanche.
Pour retirer les plaques Neogen Petrifilm CC congelées et les utiliser, ouvrez le récipient, retirez les plaques nécessaires
et remettez immédiatement les plaques restantes au congélateur dans le récipient scellé pour le reste de la durée deconservation. Les tests Neogen Petrifilm CC ne doivent pas être utilisés après leur date de péremption. Le congélateurdans lequel sont conservées les poches ouvertes ne doit pas disposer de cycle de dégivrage automatique, car cela
exposerait de façon répétée les tests Neogen Petrifilm CC à l’humidité, ce qui pourrait endommager les tests.
2

FR(Français)Ne pas utiliser les tests Neogen Petrifilm CC qui présentent des signes de décoloration. La date de péremption et lenuméro de lot figurent sur chaque poche de tests Neogen Petrifilm CC. Le numéro de lot est également indiqué sur chaquetest Neogen Petrifilm CC.

Élimination des déchets

Après utilisation, les tests Neogen Petrifilm CC peuvent contenir des microorganismes susceptibles de présenter un risquebiologique potentiel.
Respecter les normes en vigueur concernant l’élimination des déchets.

Instructions d’utilisation

Suivre attentivement toutes les instructions. Dans le cas contraire, les résultats obtenus risquent d’être inexacts.

Préparation, incubation et interprétation d’échantillons provenant des secteurs de l’alimentation
et des boissons (hormis l’eau en bouteille), y compris les échantillons environnementaux
Préparation de l’échantillon
1. Utiliser des diluants stériles appropriés :Eau de dilution tamponnée au phosphate de Butterfield7, eau peptonée à 0,1 %8, diluants peptone sel8,9, eau peptonéetamponnée8,9, solution saline (0,85 à 0,90 %), neutralisant à large spectre Neogen®, bouillon de letheen sans bisulfite ou
eau distillée. Se référer à la section « Instructions spécifiques pour méthodes validées » pour connaître les exigences
spécifiques.
Ne pas utiliser de diluants contenant du citrate, du bisulfite ou du thiosulfate avec les tests Neogen Petrifilm CC,
car ils peuvent inhiber la croissance. Si une solution tampon au citrate est indiquée dans la procédure standard, laremplacer par l’un des tampons cités plus haut, réchauffé à une température comprise entre 40 et 45 °C (104-113°F).
2. Mélanger ou homogénéiser l’échantillon.
3. Pour obtenir des conditions de croissance et de recouvrement optimales des microorganismes, ajuster le pH de lasuspension d’échantillon entre 6,6 et 7,2. Pour les produits acides, ajustez le pH avec 1N NaOH. Pour les produits
alcalins, ajuster le pH avec HCI 1N.
Utilisation des tests
1. Placer le test Neogen Petrifilm CC sur une surface de travail plane et régulière.
2. Soulever le film supérieur et, en tenant la pipette perpendiculairement à la zone d’inoculation, déposer 1 mL del’échantillon en suspension au centre du film inférieur.
3. Rouler le film supérieur sur l’échantillon pour éviter d’emprisonner des bulles d’air.
4. Placer le Neogen® Petrifilm® Diffuseur, face plane, vers le bas au centre du test Neogen Petrifilm CC. Répartirl’échantillon uniformément en exerçant une légère pression au centre du Neogen Petrifilm Diffuseur. Répartir l’inoculum
sur la totalité de la zone de croissance du test Neogen Petrifilm CC avant que le gel ne se forme. Ne pas faire glisser leNeogen Petrifilm Diffuseur sur le film.
5. Retirer le Neogen Petrifilm Diffuseur et laisser le test Neogen Petrifilm CC reposer durant au moins une minute afin delaisser le gel se former.

Incubation

Laisser incuber les tests Neogen Petrifilm CC à l’horizontale, avec le film transparent vers le haut et sans empiler plus de
20 tests. Plusieurs durées et températures d’incubation peuvent être utilisées selon les méthodes de références locales envigueur, dont certaines sont indiquées à la section « Instructions spécifiques pour méthodes validées ».

Interprétation

1. La numération à l’aide des tests Neogen Petrifilm CC peut être effectuée sur un compteur de colonies standard ou
au moyen d’une autre loupe éclairante. Le gaz produit par le coliforme peut perturber la colonie de sorte que celleci « contourne » la bulle. Il doit être compté comme un seul coliforme. Ne pas dénombrer les colonies présentes surle pourtour en mousse, celles-ci n’étant plus exposées à l’influence sélective du milieu. Ne pas dénombrer les bulles
d’artéfacts éventuelles.
L’interprétation des colonies coliformes sur le test Neogen Petrifilm CC varie selon la méthode de référence. Par
exemple :OU Méthodes certifiées NF Validation :AOAC® Official MethodsSM :Les colonies coliformes sont rouges et étroitement- Par rapport à la méthode ISO 48312 (méthode NPP),
liées (dans les limites d’un diamètre correspondant à
les colonies coliformes sont rouges et étroitement liées
une colonie) avec du gaz emprisonné. Les colonies(dans les limites d’un diamètre correspondant à une
non liées au gaz (à une distance supérieure à cellecolonie) avec du gaz emprisonné.
d’un diamètre de colonie entre la colonie et la bulle- Par rapport aux méthodes ISO 48321 (coliformes totaux)de gaz) ne sont pas comptées comme des coliformes.
et NF V08-0603 (coliformes fécaux), toutes deux basées
sur les méthodes de gélose VRBL : compter toutes lescolonies rouges avec ou sans gaz.
3

FR(Français)2. La zone de croissance circulaire est de 20 cm2 environ. Les estimations peuvent être effectuées sur les tests Neogen
Petrifilm CC contenant plus de 150 colonies en comptant le nombre de colonies dans un ou plusieurs carrésreprésentatifs et en déterminant le nombre moyen par carré. Multiplier le nombre moyen par 20 pour déterminer lenombre estimé par test Neogen Petrifilm CC.
3. Lorsque les colonies sont présentes en grand nombre, les tests Neogen Petrifilm CC peuvent présenter unapprofondissement de la couleur du gel et l’une des deux caractéristiques suivantes (ou les deux) : plusieurs petites
colonies indistinctes et/ou de nombreuses bulles de gaz. De fortes concentrations de coliformes impliquent que lazone de croissance devient rouge foncé. Le cas échéant, enregistrer les résultats comme indénombrables. Lorsqu’unenumération réelle est nécessaire, effectuer une analyse après dilution supplémentaire.
4. Si nécessaire, les colonies peuvent être isolées pour être identifiées plus tard. Soulever le film supérieur en utilisant latechnique de test appropriée et prélever la colonie à partir du gel. Procéder au test en suivant les procédures standard.
5. Si les tests Neogen Petrifilm CC sont indénombrables dans l’heure qui suit leur retrait de l’incubateur, ils peuvent êtreconservés pour une numération ultérieure en les congelant dans un récipient étanche à des températures inférieures ouégales à 15 °C (5 °F) pendant une semaine au maximum.

Préparation, incubation et interprétation des échantillons d’eau en bouteille
Hydrater les tests Neogen Petrifilm CC
1. Placer le test Neogen Petrifilm CC sur une surface de travail plane et régulière.

2. Soulever le film supérieur et déposer 1 ml d’un diluant d’hydratation stérile approprié au centre du film inférieur.
Les diluants d’hydratation stériles appropriés comprennent l’eau distillée, l’eau désionisée (DI) et l’eau par osmose
inverse (RO).
3. Rouler le film supérieur sur l’échantillon pour éviter d’emprisonner des bulles d’air.
4. Placer le Neogen Pretrifilm Diffuseur face plate vers le bas au centre du test. Répartir le diluant uniformément enexerçant une légère pression au centre du diffuseur. Répartir le diluant sur la totalité de la zone de croissance dutest Neogen Petrifilm avant que le gel ne se forme. Ne pas faire glisser le diffuseur sur le film.
5. Retirer le diffuseur et laisser les tests fermés pendant au moins 1 heure avant de les utiliser.
6. Conserver les tests Neogen Petrifilm CC hydratés dans une poche fermée ou dans un sachet plastique. Protéger les
tests de la lumière et les réfrigérer à une température située entre 2 et 8 °C (36 et 46 °F) pendant 7 jours maximum.

Filtration de l’eau et incubation des tests

1. Conformément aux procédures standard d’analyse de l’eau, filtrer l’échantillon d’eau sur membrane à l’aide d’un filtred’esters de cellulose mélangées (ECM) de 47 mm, dont les pores mesurent 0,45 micron.
2. Soulever soigneusement le film supérieur du test Neogen Petrifilm CC. Ne pas toucher la zone de croissance circulaire.
Placer le filtre au centre de la zone hydratée. Minimiser l’emprisonnement de bulles d’air sous le filtre.
3. Dérouler lentement le film supérieur sur le filtre. Minimiser l’emprisonnement de bulles d’air et la création d’espaces
entre le filtre et le test Neogen Petrifilm CC.
4. Appliquer une légère pression en utilisant le diffuseur de test Neogen Petrifilm ou en faisant glisser légèrement undoigt sur toute la surface du disque (y compris les bords) pour assurer un contact uniforme du filtre avec le gel et pouréliminer toute bulle d’air.
5. Laisser incuber les tests Neogen Petrifilm CC à 35 °C ±1 °C ou 36 °C ±1 °C pendant 24 heures11 ou à 36 °C ±1 °C
pendant 24 heures ± 2 heures12 à l’horizontale, avec le film transparent vers le haut et sans empiler plus de 20 tests.

Interprétation

1. La numération à l’aide des tests Neogen Petrifilm CC peut être effectuée sur un compteur de colonies standard ou
au moyen d’une autre loupe éclairante. Ne pas dénombrer les colonies présentes sur le pourtour en mousse, celles-cin’étant plus exposées à l’influence sélective du milieu. Ne pas dénombrer les bulles d’artéfacts éventuelles.
2. Les colonies rouges associées aux bulles de gaz sont comptées comme des coliformes. Les bulles de gaz peuvent
former un motif circulaire ou en forme d’étoile autour de la colonie. Le gaz produit par les coliformes peut perturber lacolonie de sorte que celle-ci « contourne » la bulle. Il doit être compté comme un seul coliforme. Les colonies rouges
sans bulles de gaz étroitement associées peuvent être des coliformes. Elles doivent être prélevées et testées avec desméthodes de confirmation appropriées11,12.
3. Lorsque les colonies sont présentes en grand nombre, les tests Neogen Petrifilm CC présenteront un assombrissement
de la couleur du gel associée à plusieurs petites colonies indistinctes ou des bulles de gaz. Le cas échéant, enregistrer
les résultats comme indénombrables.
4. Les colonies peuvent être isolées pour être identifiées plus tard. Soulever le film supérieur et prélever la colonie à partir
du gel ou de la surface du filtre. En soulevant le film supérieur, le filtre risque d’adhérer soit au film supérieur, soit aufilm inférieur. Si le filtre adhère au film supérieur, séparer le filtre du film supérieur et prélever des colonies. Procéder autest en suivant les procédures standard.
4

FR(Français)Remarque : La numération différée des tests Neogen Petrifilm CC avec filtres n’est pas recommandée.
Pour plus d’informations, consultez le « Guide d’interprétation du test Neogen® Petrifilm® pour la numération desColiformes » approprié. Pour toute question concernant des applications ou procédures spécifiques, consulter notre site
Internet à l’adresse www.neogen.com ou contacter votre représentant ou distributeur Neogen local.
Instructions spécifiques pour méthodes validées
AOAC® Official MethodsSM (986.33 Dénombrement des bactéries et des coliformes dans le lait, méthodes sur film
sec réhydratable et 989.10 Dénombrement des bactéries et des coliformes dans les produits laitiers, méthodes sur film
sec réhydratable)
Laisser incuber les tests Neogen Petrifilm CC pendant 24 heures ±2 heures à 32 °C ±1 °C.
AOAC® Official MethodsSM (991.14 Méthodes de numération des coliformes et des Escherichia coli dans tout typed’aliments sur film sec réhydratable)
Laisser incuber les tests Neogen Petrifilm CC pendant 24 heures ±2 heures à 35 °C ±1 °C.
AOAC® Performance Tested MethodSM certificat nº 082101
Une étude AOAC® Research Institute Performance Tested Method (PTM) a démontré que la méthode Test Neogen
Petrifilm CC est équivalente à la méthode de numération totale moyenne issue du BAM de la FDA, chapitre 4, section III.D
en ce qui concerne la numération des coliformes dans l’eau en bouteille.

Portée de la validation :Eau en bouteille : eau purifiée, eau de source traitée, eau de source naturelle non gazeuse, eau de source naturelle
gazeuse.
Incubation :Laisser incuber les tests Neogen Petrifilm CC pendant 24 heures ± 2 heures à 35 °C ± 1 °C.
Méthode certifiée par AFNOR Certification :Méthode certifiée dans le cadre de la marque NF Validation, conformément à la norme ISO 16140-210 par rapport à lanorme ISO 48321 (3M-01/02-09/89 A)
Portée de la validation : pour l’analyse des produits alimentaires destinés à la consommation humaine (à l’exception desfruits de mer crus), des aliments pour animaux de compagnie et des échantillons environnementaux.
Utiliser les détails suivants lors de l’application des instructions d’utilisation ci-dessus :Préparation de l’échantillon :N’utiliser que des diluants répertoriés dans la norme ISO.
Incubation :Laisser incuber les tests Neogen Petrifilm CC pendant 24 heures ±2 heures à 30 °C ±1 °C ou 37 °C ±1 °C.
Interprétation :Calculer le nombre de microorganismes présents dans l’échantillon selon la norme ISO 72185 en utilisant un test par
dilution. Les valeurs estimées sont exclues de la certification par NF Validation (voir la section Interprétation, paragraphe 2).
Méthode certifiée dans le cadre de la marque NF Validation, conformément à la norme ISO 16140-210 par rapport à lanorme ISO 48312 (3M-01/02-09/89 B)
Portée de la validation : pour l’analyse des produits alimentaires destinés à la consommation humaine (à l’exception desfruits de mer crus).
Utiliser les détails suivants lors de l’application des instructions d’utilisation ci-dessus :Préparation de l’échantillon :N’utiliser que des diluants répertoriés dans la norme ISO.
Incubation :Laisser incuber les tests Neogen Petrifilm CC pendant 24 heures ±2 heures à 30 °C ±1 °C ou 37 °C ±1 °C.
Interprétation :Calculer le nombre de microorganismes présents dans l’échantillon selon la norme ISO 72185 en utilisant un test par
dilution. Les valeurs estimées sont exclues de la certification par NF Validation (voir la section Interprétation, paragraphe 2).
Méthode certifiée dans le cadre de la marque NF Validation, conformément à la norme ISO 16140-210 par rapport à lanorme NF V08-0603 (3M-01/02-09/89 C)
Portée de la validation : pour l’analyse des produits alimentaires destinés à la consommation humaine.
5

FR(Français)Utiliser les détails suivants lors de l’application des instructions d’utilisation ci-dessus :Préparation de l’échantillon :N’utiliser que des diluants répertoriés dans la norme ISO.
Incubation :Laisser incuber les tests Neogen Petrifilm CC pendant 24 heures ±2 heures à 44 °C ±1 °C.
Interprétation :Calculer le nombre de microorganismes présents dans l’échantillon selon la norme ISO 72185 en utilisant un test par
dilution. Les valeurs estimées sont exclues de la certification par NF Validation (voir la section Interprétation, paragraphe 2).
Consulter la norme EN ISO 7218 pour l’inoculation, le comptage des colonies et le calcul et l’affichage des résultats.

3M 01/02 – 09/89A, B, and C
MÉTHODES ALTERNATIVES D’ANALYSE POUR L’AGROALIMENTAIRE
http://nf-validation.afnor.org/en
Pour plus d’information sur l’expiration de la validité, se reporter au certificat NF VALIDATION disponible sur le site Internet
cité ci-dessus.

Références

1. ISO 4832. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms –Colony count technique.
2. ISO 4831. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumeration of
coliforms – Most probable number technique.
3. AFNOR NF V08-060. General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at
44°C – Routine method.
4. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
6. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
7. FDA. Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998. Reagents Index for BAM consulté sur :http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.
8. ISO 6887-5. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk products.
9. ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension anddecimal dilutions.
10. ISO 16140-2. Microbiology of the food chain – Method validation – Protocol for the validation of alternative(proprietary) methods against a reference method.
11. U.S. Food and Drug Administration. 2002. Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4. Membranefilter method for coliforms.
12. American Public Health Association. 2017. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th Ed.
Method 9222B2a.
Se reporter aux versions en cours de validité des méthodes normalisées citées plus haut.

Explication des symboles
info.neogen.com/symbols

AOAC est une marque déposée d’AOAC INTERNATIONAL.
Official Methods est un service déposé d’AOAC INTERNATIONAL.
Performance Tested Method est un service déposé d’AOAC INTERNATIONAL.

6

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931A

DE(Deutsch)

Erscheinungsdatum: 2024-01

Gebrauchsanweisungen

Coliforme Zählplatte
Produktbeschreibung und Verwendungszweck

Die Neogen® Petrifilm® Coliforme Zählplatte ist ein probenfertiges Kulturmediensystem, das modifizierte KristallviolettGalle(VRB)-Nährstoffe, einen im kalten Wasser löslichen Gelbildungsstoff und ein Tetrazolium-Indikator, der die Kolonieauszählung erleichtert, enthält. Neogen Petrifilm CC Platten werden zur Zählung von Coliformen in der Lebensmittelund Getränkeindustrie (einschließlich abgefülltem Wasser) eingesetzt. Die Bestandteile der Neogen Petrifilm CC
Platte sind dekontaminiert, aber nicht sterilisiert. Neogen Food Safety hat für die Bereiche Entwicklung und Fertigung
die Zertifizierung der Internationalen Organisation für Normung (ISO) 9001 erhalten. Die Neogen Petrifilm CC Platte
wurde nicht für alle möglichen Lebensmittelprodukte, Lebensmittelverarbeitungsprozesse, Testprotokolle oder mit allen
möglichen Mikroorganismenstämmen getestet.
Im Bacteriological Analytical Manual (BAM)7 der United States Food and Drug Administration (FDA) sind Coliforme alsgramnegative Stäbchen definiert, die durch Laktosefermentierung Säure und Gas bilden. Coliformen-Kolonien, die auf der
Neogen Petrifilm CC Platte wachsen, bilden Säure, die wiederum dazu führt, dass der pH-Indikator die Gelfarbe verstärkt.
Das um die roten Kolonien eingeschlossene Gas weist auf Coliforme hin.
ISO definiert Coliforme nach ihrer Fähigkeit, in methodenspezifischen, selektiven Medien zu wachsen. ISO-Methode48321, Zählung von Coliformen durch Kolonienauszähltechnik, definiert Coliforme als Säurebildner auf VRB-LactoseAgar (VRBL). Auf Neogen Petrifilm CC Platten werden diese säurebildenden Coliforme durch rote Kolonien mit oder ohne
Gasbildung angezeigt. ISO-Methode 48312, Zählung von Coliformen anhand der Methode der wahrscheinlichsten Anzahl(most probable number, MPN) definiert Coliforme anhand ihrer Fähigkeit, in selektivem Bouillon zu wachsen und Gas
aus Laktose zu produzieren. Auf Neogen Petrifilm CC Platten werden diese Coliformen durch mit Gas assoziierte rote
Kolonien angezeigt.
In Proben mit abgefülltem Wasser werden bestätigte Coliformen-Kolonien durch rote, mit Gas assoziierte Kolonien
auf Neogen Petrifilm CC Platten angezeigt. Rote Kolonien die nicht eng mit Gasbläschen assoziiert sind, können auchColiforme sein. In diesem Fall sollte eine Subkultur angelegt werden und mit entsprechenden Bestätigungsmethodengetestet werden11,12. Weitere Details finden Sie im Abschnitt „Interpretation“. Charakteristische Kolonien können als
Subkultur angezogen werden und als Escherichia coli getestet werden.
In der AFNOR Certification wurde die Neogen Petrifilm CC Platte im Vergleich zur ISO-Methode 48312 und ISO-Methode48321 zur Zählung der Gesamtzahl von Coliformen zertifiziert. In der AFNOR Certification wurde die Neogen Petrifilm CC
Platte auch im Vergleich zu NF V08-0603 zur Zählung von temperaturtoleranten Coliformen zertifiziert.

Sicherheit

Der Anwender sollte alle Sicherheitshinweise in den Gebrauchsanweisungen zur Neogen Petrifilm CC Platte lesen, verstehen und befolgen. Bewahren Sie diese Sicherheitshinweise auf, um später auf sie zurückgreifen zu können.
WARNUNG: Bezeichnet eine Gefahrensituation, die – wenn sie nicht vermieden wird – zum Tode oder zu schweren
Verletzungen und/oder Sachschäden führen kann

WARNUNG
So reduzieren Sie die Risiken in Zusammenhang mit einer Exposition gegenüber biologischer Gefährdungund Umweltverschmutzung:• Befolgen Sie die aktuellen Industrienormen und die lokalen Vorschriften für die Entsorgung von biogefährlichem Abfall.
So reduzieren Sie die mit der Freisetzung von kontaminierten Produkten verbundenen Risiken:• Befolgen Sie die in der Gebrauchsanweisung enthaltenen Anweisungen zur Produktlagerung.
• Nicht nach Ablauf des Verfallsdatums verwenden.
So reduzieren Sie die Risiken einer bakteriellen Infektion und einer Kontamination des Arbeitsplatzes:• Führen Sie Untersuchungen mit der Neogen Petrifilm CC Platte in einem ordnungsgemäß ausgestatteten Labor undunter der Aufsicht eines geschulten Mikrobiologen durch.
• Der Anwender muss sein Personal in den geeigneten Testmethoden unterweisen, zum Beispiel laut: Gute Laborpraxis4,
ISO 72185 oder ISO 170256.

1

DE(Deutsch)

So reduzieren Sie die Risiken in Zusammenhang mit einer Fehlinterpretation der Ergebnisse:• Neogen hat die Verwendung von Neogen Petrifilm CC Platten nur für die Lebensmittel- und Getränkeindustrie(einschließlich abgefülltem Wasser) dokumentiert. Neogen hat die Verwendung von Neogen Petrifilm CC Platten
beispielsweise nicht für die Untersuchung von Pharmazeutika oder Kosmetika dokumentiert. Neogen hat die
Verwendung von Neogen Petrifilm CC Platten nicht für die Untersuchung von Oberflächen- und Abwasser oder von in
der pharmazeutischen oder kosmetischen Industrie verwendetem Wasser dokumentiert.
• Die Verwendung von Neogen Petrifilm CC Platten zur Untersuchung von Wasserproben unter Einhaltung der lokalen
Wasseruntersuchungsrichtlinien unterliegt alleine dem Ermessen und der Verantwortlichkeit des Endbenutzers.
Neogen Petrifilm CC Platten wurden nicht mit allen möglichen Proben von abgefülltem Wasser, Testprotokollen oder
mit allen möglichen Mikroorganismenstämmen getestet.
• Neogen Petrifilm CC Platten dürfen nicht zur Diagnose von Erkrankungen bei Menschen oder Tieren verwendet
werden.
• Neogen Petrifilm CC Platten können die einzelnen Coliformen-Stämme nicht differenzieren.
• Lebensmittel mit hohem Zuckergehalt können eine mögliche Gasproduktion durch nicht coliforme Enterobacte-riaceae
erhöhen.
Weitere Informationen sind dem Sicherheitsdatenblatt zu entnehmen.
Informationen zur Dokumentation der Produktleistung finden Sie auf unserer Website unter www.neogen.com oder bei
Ihrem Neogen-Vertreter oder autorisierten Händler.

Verantwortung des Anwenders

Anwender müssen sich auf eigene Verantwortung mit den Gebrauchsanweisungen und Informationen des Produkts
vertraut machen. Besuchen Sie bitte unsere Website unter www.neogen.com oder wenden Sie sich für weitere
Informationen an Ihren Neogen-Vertreter oder autorisierten Händler.
Bei der Auswahl einer Testmethode ist zu beachten, dass externe Faktoren wie Probenentnahmemethoden, Testprotokolle,
Probenaufbereitung, Handhabung und Labortechnik die Ergebnisse beeinflussen können.
Es liegt in der Verantwortung des Anwenders bei der Auswahl einer Testmethode oder eines Produkts, diese mit einer
ausreichenden Anzahl von Proben und Kontrollen zu evaluieren, um sicherzustellen, dass die gewählte Testmethode seinen
Anforderungen entspricht.
Der Anwender trägt ebenfalls die Verantwortung dafür, dass die angewendeten Testmethoden und Ergebnisse den
Anforderungen seiner Kunden und Lieferanten entsprechen.
Wie bei allen Testmethoden, stellen die mit Neogen Lebensmittelsicherheitsprodukten erhaltenen Ergebnisse keine
Garantie für die Qualität der untersuchten Matrizen oder Prozesse dar.

Haftungsbeschränkungen/Beschränkte Rechtsmittel

AUSSER ES WIRD AUSDRÜCKLICH ANDERS IM ABSCHNITT DER HAFTUNGSBESCHRÄNKUNGEN DER VERPACKUNGDES JEWEILIGEN PRODUKTS ANGEGEBEN, LEHNT NEOGEN ALLE AUSDRÜCKLICHEN UND STILLSCHWEIGENDENGARANTIEN, EINSCHLIESSLICH, JEDOCH NICHT BESCHRÄNKT AUF, DIE GEWÄHRLEISTUNG DER MARKTGÄNGIGKEIT ODER DER EIGNUNG FÜR EINEN BESTIMMTEN ZWECK AB. Sollte sich ein Produkt von Neogen Food Safety
als defekt herausstellen, wird es von Neogen oder einem autorisierten Vertragshändler nach eigenem Ermessen ersetzt
oder der Kaufpreis zurückerstattet. Gewährleistungsansprüche bestehen nicht. Sie sind verpflichtet, Neogen umgehend
innerhalb von sechzig Tagen, nachdem die mutmaßlichen Defekte am Produkt festgestellt wurden, darüber zu informieren
und das Produkt an Neogen zurückzusenden. Bei weiteren Fragen wenden Sie sich bitte an Ihren Neogen-Vertreter oder
autorisierten Neogen-Händler.

Haftungsbeschränkungen von Neogen

NEOGEN HAFTET NICHT FÜR VERLUSTE ODER SCHÄDEN, GANZ GLEICH OB MITTELBARE, UNMITTELBARE,
SPEZIELLE, NEBEN- ODER FOLGESCHÄDEN EINSCHLIESSLICH, ABER NICHT BESCHRÄNKT AUF ENTGANGENEN
GEWINN. In keinem Fall übersteigt die Haftung von Neogen den Kaufpreis des angeblich defekten Produkts.

Lagerung

Lagern Sie ungeöffnete Beutel mit Neogen Petrifilm CC Platten gekühlt oder gefroren bei Temperaturen von unter oder
gleich 8 °C (46 °F). Lassen Sie verschlossene Beutel mit Neogen Petrifilm CC Platten unmittelbar vor dem Gebrauch undvor dem Öffnen auf Raumtemperatur erwärmen. Legen Sie unbenutzte Neogen Petrifilm CC Platten wieder zurück in den
Beutel. Falten Sie das geöffnete Ende eines nicht verbrauchten Beutels um und verschließen Sie es mit Klebeband. Damit
die Platten keiner Feuchtigkeit ausgesetzt werden, dürfen die geöffneten Beutel nicht mehr im Kühlschrank gelagert
werden. Lagern Sie wieder verschlossene Beutel maximal vier Wochen lang an einem kühlen trockenen Ort. Sollte die
Labortemperatur 25 °C (77 °F) überschreiten und/oder Ihr Labor in einer Region mit > 50% relativer Luftfeuchtigkeit liegen(mit Ausnahme von Gebäuden mit Klimaanlage), wird empfohlen, die wieder verschlossenen Beutel mit Neogen Petrifilm
CC Platten in einem Tiefkühlgerät zu lagern (siehe unten).

2

DE(Deutsch)

Um die geöffneten Beutel im Tiefkühlgerät zu lagern, legen Sie die Neogen Petrifilm CC Platten in einen verschließbaren
Behälter. Um gefrorene Neogen-Petrifilm-CC-Platten zur Verwendung zu entnehmen, öffnen Sie den Behälter, nehmen
Sie die benötigten Platten heraus und legen Sie die verbleibenden Platten umgehend für die restliche Haltbarkeitsdauer
im versiegelten Behälter zurück in den Gefrierschrank. Verwenden Sie Neogen Petrifilm CC Platten nach Ablauf desVerfallsdatums nicht mehr. Das Tiefkühlgerät für die Lagerung des offenen Beutels darf keinen automatischen Abtauzyklus
durchführen, da dies die Neogen Petrifilm CC Platten Feuchtigkeit aussetzen und damit zu Beschädigungen führen könnte.
Verwenden Sie keine verfärbten Neogen Petrifilm CC Platten. Verfallsdatum und Chargennummer sind auf jeder
Verpackung von Neogen Petrifilm CC Platten angegeben. Die Chargennummer befindet sich zudem auf jeder einzelnen
Neogen Petrifilm CC Platte.

Entsorgung

Nach Gebrauch können Neogen Petrifilm CC Platten mit Mikroorganismen kontaminiert sein und somit ein biologisches
Gefährdungspotenzial darstellen.
Bei der Entsorgung sind die aktuellen Industriestandards zu beachten.

Bedienungsanleitung

Befolgen Sie alle Anweisungen genau. Andernfalls werden möglicherweise ungenaue Ergebnisse erzielt.

Vorbereitung, Inkubation und Interpretation von Proben aus der Lebensmittel- und Getränke-industrie(mit Ausnahme von abgefülltem Wasser), einschließlich Umgebungsproben
Vorbereiten der Probe
1. Verwenden Sie geeignete sterile Verdünnungsmittel:

Butterfields phosphatgepuffertes Verdünnungswasser7, 0,1 % Peptonwasser8, Peptonsalzverdünner8,9, gepuffertes
Peptonwasser8,9, Kochsalzlösung (0,85-0,90 %), Neogen® Breitspektrum-Neutralisator, bisulfatfreies Letheen Broth oderdestilliertes Wasser. Spezifische Anweisungen finden Sie im Abschnitt „Spezielle Anweisungen für validierte Verfahren“.
Neogen Petrifilm CC Platten nicht in Verbindung mit Verdünnungsmitteln benutzen, die Citrat, Bisulfit oder
Thiosulfat enthalten. Sie können das Wachstum der Keime hemmen. Falls im Standardverfahren Citratpuffer
vorgegeben wird, sollte er durch einen der oben genannten, auf 40-45 °C (104-113 °F) angewärmten Puffer ersetzt
werden.
2. Mischen oder homogenisieren Sie die Probe.
3. Für ein optimales Wachstum und eine optimale Rückgewinnung von Mikroorganismen auf muss der pH-Wert derProbensuspension auf 6,6-7,2 angepasst werden. Passen Sie den pH-Wert von säurehaltigen Produkten mit 1 N NaOH
an. Passen Sie den pH-Wert von basehaltigen Produkten mit 1 N HCl an.
Ausplattieren
1. Legen Sie die Neogen Petrifilm CC Platte auf eine flache, ebene Oberfläche.
2. Heben Sie die obere Folie ab und pipettieren Sie mit zum Beimpfungsbereich senkrechter Pipette 1 ml der Probe in die
Mitte des unteren Films.
3. Rollen Sie den oberen Film nach unten auf die Probe, um einen Einschluss von Luftbläschen zu verhindern.
4. Platzieren Sie den Neogen® Petrifilm® Probenverteiler mit der flachen Seite nach unten in der Mitte der Neogen
Petrifilm CC Platte. Verteilen Sie die Probe gleichmäßig, indem Sie leichten Druck auf die Mitte des Neogen Petrifilm
Probenverteilers ausüben. Verteilen Sie das Inokulum über den gesamten Wachstumsbereich der Neogen Petrifilm CC
Platte, bevor sich das Gel ausbildet. Schieben Sie den Neogen Petrifilm Probenverteiler nicht über die Folie.
5. Heben Sie den Neogen Petrifilm Probenverteiler ab und lassen Sie die Neogen Petrifilm CC Platte mindestens eine
Minute lang zum Ausbilden des Gels ungestört stehen.

Inkubation

Inkubieren Sie Neogen Petrifilm CC Platten in horizontaler Lage mit der durchsichtigen Seite nach oben in Stapeln vonmaximal 20 Platten. Abhängig von aktuellen örtlichen Referenzmethoden, von denen einige im Abschnitt „Spezifische
Anweisungen für validierte Verfahren“ aufgeführt sind, können verschiedene Inkubationszeiten und Temperaturen
verwendet werden.

Interpretation

1. Die Neogen Petrifilm CC Platten können mit einem Standardkoloniezähler oder unter einem beleuchteten Vergrößerungsglas gezählt werden. Das von den Coliformen produzierte Gas kann die Kolonie aufbrechen, sodass die Kolonie
die Blase „umrandet“. Dies sollte als einzige Coliformen-Kolonie gezählt werden. Zählen Sie keine Kolonien, die auf
dem Schaumstoffdamm wachsen, da sie dem selektiven Einfluss des Mediums entzogen sind. Zählen Sie keine u. U.
vorhandenen Artefaktbläschen.

3

DE(Deutsch)

Die Interpretation von Coliformen-Kolonien auf der Neogen Petrifilm CC Platte unterscheidet sich je nach Referenzmethode. Beispiel:
AOAC® Official MethodsSM:
Coliformen-Kolonien sind rot und sindeng mit eingeschlossenem Gas assoziiert(Durchmesser von unter einer Kolonie). Nicht
mit Gas assoziierte Kolonien (Abstand zwischen
Kolonie und Gasbläschen ist größer als ein
Kolonien-Durchmesser ist) werden nicht als
Coliforme gezählt.

ODER

NF Validation-zertifizierte Methoden:- Im Vergleich zur ISO-Methode 48312 (MPNMethode) sind Coliformen-Kolonien rot und eng mit
eingeschlossenem Gas assoziiert (Durchmesser vonunter einer Kolonie).
- Im Vergleich zur ISO-Methode 48321 (GesamtColiforme) und NF V08-0603 (fäkale Coliforme),
beide basierend auf VRBL-Methoden, werden alleroten Kolonien mit oder ohne Gas gezählt.

2. Der kreisförmige Wachstumsbereich ist ca. 20 cm2 groß. Bei Platten mit mehr als 150 Kolonien kann auf Neogen
Petrifilm CC Platten eine Schätzung vorgenommen werden, indem die Anzahl Kolonien in zwei oder mehr
repräsentativen Quadraten gezählt werden und der Durchschnittswert pro Quadrat bestimmt wird. Multiplizieren Sie
zur Bestimmung der geschätzten Anzahl mit der Neogen Petrifilm CC Platte die durchschnittliche Anzahl mit 20.
3. Wenn hohe Koloniezahlen vorliegen, können Neogen Petrifilm CC Platten eine stärkere Gelfarbe aufweisen und eineoder beide der folgenden Eigenschaften zeigen: viele kleine, undeutliche Kolonien und/oder viele Gasblasen. Hohe
Konzentrationen von Coliformen führen zu einer Rotfärbung des Wachstumsbereichs. Wenn dies auftritt, müssen
die Ergebnisse „Zur Zählung zu zahlreich“ (TNTC) dokumentiert werden. Wird die tatsächliche Anzahl benötigt,
plattieren Sie mit einer höheren Verdünnung aus.
4. Kolonien können, wo erforderlich, zur weiteren Identifizierung isoliert werden. Heben Sie die obere Folie mithilfe einer
korrekten Testmethode ab und nehmen Sie die Kolonie von dem Gel ab. Testen Sie mithilfe der Standardverfahren.
5. Wenn es nicht möglich ist, die Neogen Petrifilm CC Platten innerhalb von 1 Stunde nach der Herausnahme aus
dem Inkubator zu zählen, können Sie sie in einem verschließbaren Behälter bei Temperaturen von gleich oder unter
15 °C (5 °F) maximal eine Woche lang tiefgekühlt lagern.

Vorbereitung Inkubation und Interpretation von Proben von abgefülltem Wasser
Hydrieren der Neogen Petrifilm CC Platten
1. Legen Sie die Neogen Petrifilm CC Platte auf eine flache, ebene Oberfläche.

2. Heben Sie die obere Folie ab und dispensieren Sie 1 ml eines geeigneten sterilen Hydrierungsverdünnungsmittels in
die Mitte auf den unteren Film. Als sterile Hydrierungsverdünnungsmittel eignen sich zum Beispiel destilliertes Wasser,
deionisiertes Wasser (DI) und Umkehrosmose-Wasser (RO).
3. Rollen Sie den oberen Film nach unten auf die Probe, um einen Einschluss von Luftbläschen zu verhindern.
4. Platzieren Sie den Neogen Petrifilm Probenverteiler mit der flachen Seite nach unten in der Mitte der Platte. Verteilen
Sie das Verdünnungsmittel gleichmäßig, indem Sie leichten Druck auf die Mitte des Probenverteilers ausüben. Verteilen
Sie das Verdünnungsmittel über die gesamte Neogen Petrifilm Platte, bevor sich das Gel ausbildet. Schieben Sie den
Probenverteiler nicht über die Folie.
5. Entfernen Sie den Probenverteiler und lassen Sie die Platten vor dem Gebrauch mindestens 1 Stunde lang geschlossen.
6. Lagern Sie die hydrierten Neogen Petrifilm CC Platten in einem verschlossenen Beutel oder einem Plastikbeutel. Lagern
Sie Platten bis zu 7 Tage lang lichtgeschützt im Kühlschrank bei 2-8 °C (36-46 °F).

Wasserfiltration und Platteninkubation

1. Führen Sie eine Membranfiltration der Wasserprobe gemäß den Standardverfahren zur Wasseranalyse durch.
Verwenden Sie dabei einen 47-mm-Filter aus gemischtem Celluloseester (MCE) mit einer Porengröße von0,45 Mikrometer.
2. Heben Sie vorsichtig den oberen Film von der Neogen Petrifilm CC Platte ab. Vermeiden Sie es, den runden
Wachs-tumsbereich zu berühren. Platzieren Sie den Filter in der Mitte des hydrierten Bereichs. Achten Sie darauf,
möglichst wenig Bläschen unter dem Filter einzuschließen.
3. Rollen Sie langsam den oberen Film auf den Filter. Minimieren Sie das Einschließen von Luftbläschen und die
Entstehung von Lücken zwischen dem Filter und der Neogen Petrifilm CC Platte.
4. Üben Sie mithilfe des Neogen Petrifilm Platten Probenverteilers leichten Druck aus oder fahren Sie vorsichtig mit dem
Finger über den gesamten Plattenbereich (einschließlich Kanten), um sicherzustellen, dass der Filter gleichmäßigen
Kontakt mit dem Gel hat und um Luftblasen zu entfernen.
5. Inkubieren Sie die Neogen Petrifilm CC Platten 24 Stunden ± 2 Stunden11 lang bei 35°C ± 1 °C oder 24 Stunden± 2 Stunden12 lang bei 36°C ± 1 °C in horizontaler Lage mit der durchsichtigen Seite nach oben in Stapeln von maximal
20 Platten.

4

DE(Deutsch)Interpretation

1. Die Neogen Petrifilm CC Platten können mit einem Standardkoloniezähler oder unter einem beleuchteten
Vergröße-rungsglas gezählt werden. Zählen Sie keine Kolonien, die auf dem Schaumstoffdamm wachsen, da sie dem
selektiven Einfluss des Mediums entzogen sind. Zählen Sie keine u. U. vorhandenen Artefaktbläschen.
2. Rote, mit Gasbläschen assoziierte Kolonien werden als Coliforme gezählt. Gasbläschen können ein rundes odersternförmiges Muster um die Kolonien bilden. Das von den Coliformen produzierte Gas kann die Kolonie aufbrechen,sodass die Kolonie die Blase „umrandet“. Dies sollte als einzige Coliformen-Kolonie gezählt werden. Rote Kolonien die
nicht eng mit Gasbläschen assoziiert sind, können auch Coliforme sein. In diesem Fall sollten Sie herausgenommen und
mit entsprechenden Bestätigungsmethoden getestet werden11,12.
3. Wenn hohe Koloniezahlen vorliegen, weisen Neogen Petrifilm CC Platten eine stärkere Gelfarbe auf. die mit vielen
kleinen, undeutlichen Kolonien und/oder vielen Gasbläschen assoziiert ist. Wenn dies auftritt, müssen die Ergebnisse„Zur Zählung zu zahlreich“ (TNTC) dokumentiert werden.
4. Kolonien können zur weiteren Identifizierung isoliert werden. Heben Sie die obere Folie ab und nehmen Sie die Kolonievon dem Gel oder der Filteroberfläche ab. Beim Anheben des oberen Films kann der Filter am oberen Film oder unteren
Film haften bleiben. Wenn der Filter am oberen Film haftet, trennen Sie ihn vom oberen Film und nehmen Sie Kolonien
auf. Testen Sie mithilfe der Standardverfahren.
Hinweis: Eine verzögerte Auszählung der Neogen Petrifilm CC Platten mit Filtern wird nicht empfohlen.
Weitere Informationen finden Sie im „Interpretationsleitfaden für Neogen® Petrifilm® Coliforme Zählplatten.“ Sollten Sie
Fragen zu bestimmten Anwendungen oder Verfahren haben, besuchen Sie unsere Website unter www.neogen.com oderwenden Sie sich an den lokalen Neogen-Verkaufsvertreter oder Händler.
Spezifische Anweisungen für validierte Verfahren
AOAC® Official MethodsSM (986.33 Bacteria and Coliform Counts in Milk, Dry Rehydratable Film Methods and989.10 Bacterial and Coliforms Counts in Dairy Products, Dry Rehydratable Film Methods)
Inkubieren Sie Neogen Petrifilm CC Platten 24 Stunden ± 2 Stunden lang bei 32 °C ± 1 °C.
AOAC® Official MethodsSM (991.14 Coliform and Escherichia coli Counts in Foods, Dry Rehydratable Film Methods)
Inkubieren Sie Neogen Petrifilm CC Platten 24 Stunden ± 2 Stunden lang bei 35 °C ± 1 °C.
AOAC® Performance Tested MethodSM Zertifikat Nr. 082101
In einer Performance Tested Method (PTM)-Studie des AOAC® Research Institute konnte gezeigt werden, dass das
Neogen Petrifilm CC Platten-Verfahren den durchschnittlichen Logzählungen des Verfahrens United States FDA/BAM
Chapter 4, Section III.D zur Zählung von Coliformen in abgefülltem Wasser gleichwertig ist.

Einsatzgebiet der Validierung:
Abgefülltes Wasser: gereinigtes Wasser, behandeltes Quellwasser, stilles natürliches Quellwasser, kohlensäurehaltiges
natürliches Quellwasser.
Inkubation:
Inkubieren Sie Neogen Petrifilm CC Platten 24 Stunden ± 2 Stunden lang bei 35 °C ± 1 °C.
NF Validation gemäß AFNOR Certification:
NF Validation-zertifizierte Methode in Übereinstimmung mit ISO 16140-210 im Vergleich zu ISO 48321(3M-01/02-09/89 A)
Einsatzgebiet der Validierung: Für die Untersuchung von nur für den Menschen vorgesehenen Nahrungsmittelprodukten(mit Ausnahme von rohen Schalentieren), Tiernahrung und Umgebungsproben.
Bei der Umsetzung der obigen Verfahrensrichtlinien müssen folgende Details beachtet werden:
Probenvorbereitung:
Verwenden Sie nur die nach ISO aufgelisteten Verdünnungsmittel.
Inkubation:
Inkubieren Sie Neogen Petrifilm CC Platten 24 Stunden ± 2 Stunden lang bei 30 °C ± 1 °C oder 37 °C ± 1 °C.
Interpretation:
Die Zahl der Mikroorganismen in der Probenlösung wird gemäß ISO 72185 für eine Platte pro Verdünnungsstufe berechnet.
Schätzungen liegen außerhalb des Umfangs der NF Validation-Zertifizierung (siehe „Interpretationsteil, Paragraph 2“).

5DE

(Deutsch)

NF Validation-zertifizierte Methode in Übereinstimmung mit ISO 16140-210 im Vergleich zu ISO 48312(3M-01/02-09/89 B)
Einsatzgebiet der Validierung: Zur Untersuchung von nur für den menschlichen Verzehr vorgesehenen
Nahrungs-mittelprodukten (mit Ausnahme von rohen Schalentieren).
Bei der Umsetzung der obigen Verfahrensrichtlinien müssen folgende Details beachtet werden:
Probenvorbereitung:
Verwenden Sie nur die nach ISO aufgelisteten Verdünnungsmittel.
Inkubation:
Inkubieren Sie Neogen Petrifilm CC Platten 24 Stunden ± 2 Stunden lang bei 30 °C ± 1 °C oder 37 °C ± 1 °C.
Interpretation:
Die Zahl der Mikroorganismen in der Probenlösung wird gemäß ISO 72185 für eine Platte pro Verdünnungsstufe berechnet.
Schätzungen liegen außerhalb des Umfangs der NF Validation-Zertifizierung (siehe „Interpretationsteil, Paragraph 2“).
NF Validation-zertifizierte Methoden in Übereinstimmung mit ISO 16140-210 im Vergleich zu NF V08-0603(3M-01/02-09/89 C)
Einsatzgebiet der Validierung: Zur Untersuchung von nur für den menschlichen Verzehr vorgesehenen
Nahrungs-mittelprodukten
Bei der Umsetzung der obigen Verfahrensrichtlinien müssen folgende Details beachtet werden:
Probenvorbereitung:
Verwenden Sie nur die nach ISO aufgelisteten Verdünnungsmittel
Inkubation:
Inkubieren Sie Neogen Petrifilm CC Platten 24 Stunden ± 2 Stunden lang bei 44 °C ± 1 °C.
Interpretation:
Die Zahl der Mikroorganismen in der Probenlösung wird gemäß ISO 72185 für eine Platte pro Verdünnungsstufe berechnet.
Schätzungen liegen außerhalb des Umfangs der NF Validation-Zertifizierung (siehe „Interpretationsteil, Paragraph 2“).
Zur Inokulation, Koloniezählung und -berechnung sowie zur Darstellung der Ergebnisse wird auf die Norm EN ISO 7218
verwiesen.

3M 01/02 – 09/89A, B, and C
ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS
http://nf-validation.afnor.org/en
Für weitere Informationen zum Ablauf der Validierung siehe NF VALIDATION-Zertifikat unter der oben genannten Website.

6

DE(Deutsch)

Referenzen

1. ISO 4832. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms –Colony count technique.
2. ISO 4831. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumeration of
coliforms – Most probable number technique.
3. AFNOR NF V08-060. General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at
44°C – Routine method.
4. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
6. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
7. FDA. Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998. Reagents Index for BAM gefunden unter:
http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.
8. ISO 6887-5. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk products.
9. ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension anddecimal dilutions.
10. ISO 16140-2. Microbiology of the food chain – Method validation – Protocol for the validation of alternative(proprietary) methods against a reference method.
11. U.S. Food and Drug Administration. 2002. Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4. Membranefilter method for coliforms.
12. American Public Health Association. 2017. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th Ed.
Method 9222B2a.
Konsultieren Sie bitte die jeweils aktuelle Version der oben aufgelisteten Standardmethoden.

Erklärung der Symbole
info.neogen.com/symbols

AOAC ist eine eingetragene Marke von AOAC INTERNATIONAL.
Official Methods ist eine Dienstleistungsmarke von AOAC INTERNATIONAL.
Performance Tested Method ist eine Dienstleistungsmarke von AOAC INTERNATIONAL.

7

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931A

IT(Italiano)

Data di pubblicazione: 2024-01

Istruzioni sul prodotto

Piastra per il conteggio dei coliformi
Descrizione del prodotto e uso previsto

La piastra Neogen® Petrifilm® per il conteggio dei coliformi (CC) è un sistema con terreno di coltura pronto per l’uso
che contiene sostanze nutritive Violet Red Bile (VRB) modificate, una sostanza gelificante solubile in acqua fredda e
un indicatore al tetrazolio che facilita il conteggio delle colonie. Le piastre Neogen Petrifilm CC sono utilizzate per ilconteggio di coliformi nei settori alimentare, delle bevande e dell’acqua in bottiglia. I componenti della piastra Neogen
Petrifilm CC sono decontaminati, seppure non sterilizzati. Neogen Food Safety è certificata International Organization forStandardization (ISO) 9001 per la progettazione e la produzione. La piastra Neogen Petrifilm CC non è stata valutata con
tutti i prodotti alimentari, i processi alimentari, i protocolli di test o tutti i ceppi di microrganismi possibili.
Il Bacteriological Analytical Manual (BAM)7 della United States Food and Drug Administration (FDA) definisce i coliformi
come bastoncelli Gram negativi, che producono acido e gas dalla fermentazione lattica. Le colonie di coliformi che
crescono sulla piastra Neogen Petrifilm CC producono acido, che induce l’indicatore di pH a far diventare più intenso ilcolore del gel; il gas intrappolato nelle colonie rosse indica i coliformi.
ISO definisce i coliformi a seconda della loro capacità di crescita in terreni di coltura selettivi, specifici per il metodo.
Il metodo ISO 48321, che enumera i coliformi con la tecnica del conteggio delle colonie, definisce i coliformi comeproduttori di acido su VRB agar con lattosio (VRBL). Sulle Piastre Neogen Petrifilm CC, questi coliformi che producono
acido sono indicati da colonie rosse con o senza produzione di gas. Il metodo ISO 48312, che enumera i coliformi con il
metodo del numero più probabile (Most Probable Number - MPN), definisce i coliformi per la loro capacità di crescere e
produrre gas dal lattosio in un brodo selettivo. Sulle Piastre Neogen Petrifilm CC, questi coliformi sono indicati da colonierosse associate a gas.
Per campioni di acqua in bottiglia, colonie di coliformi confermate sono indicate da colonie rosse associate a gas su Piastre
Neogen Petrifilm CC. Le colonie rosse senza bolle di gas strettamente associate possono essere coliformi e devono essere
sottocolturate e testate con metodi di conferma appropriati11,12. Vedere il paragrafo Interpretazione per ulteriori dettagli.
Colonie caratteristiche possono essere sottocolturate e testate come Escherichia coli.
AFNOR Certification ha certificato la Piastra Neogen Petrifilm CC rispetto al metodo ISO 48312 e al metodo ISO 48321 per
l’enumerazione dei coliformi totali. AFNOR Certification ha inoltre certificato la Piastra Neogen Petrifilm CC rispetto a
NF V08-0603, per l’enumerazione dei coliformi termotolleranti.

Sicurezza

L’utente è tenuto a leggere, comprendere e seguire tutte le informazioni di sicurezza contenute nelle istruzioni della Piastra
Neogen Petrifilm CC. Conservare le istruzioni di sicurezza per poterle consultare in futuro.
AVVERTENZA:

indica una situazione pericolosa che, se non evitata, potrebbe provocare la morte o lesioni gravi
e/o danni materiali.

AVVERTENZAPer ridurre i rischi associati all’esposizione a pericoli biologici e alla contaminazione ambientale• Seguire gli standard di settore e le normative locali vigenti per lo smaltimento dei rifiuti a rischio biologico.
Per ridurre i rischi associati al rilascio di un prodotto contaminato• Seguire tutte le istruzioni relative alla conservazione del prodotto contenute nelle istruzioni per l’uso.
• Non utilizzare dopo la data di scadenza.
Per ridurre i rischi associati all’infezione batterica e alla contaminazione del luogo di lavoro• Eseguire il test con la Piastra Neogen Petrifilm CC in un laboratorio adeguatamente equipaggiato, sotto la supervisione
di un microbiologo esperto.
• L’utente deve addestrare il proprio personale all’esecuzione corretta di tecniche di prova attuali: per esempio, Buone
prassi di laboratorio4, ISO 72185 o ISO 170256.
Per ridurre i rischi associati a un’interpretazione errata dei risultati• Neogen non ha documentato l’uso delle Piastre Neogen Petrifilm CC nell’ambito di settori diversi da quello alimentare
e delle bevande, inclusa l’acqua in bottiglia. Per esempio, Neogen non ha documentato l’uso delle Piastre Neogen
Petrifilm CC per analizzare sostanze farmaceutiche o cosmetici. Neogen non ha documentato l’uso delle Piastre
Neogen Petrifilm CC per analizzare acque superficiali e urbane o acque utilizzate nei settori farmaceutico o cosmetico.

1

IT(Italiano)• L’uso di Piastre Neogen Petrifilm CC per testare campioni di acqua in conformità delle normative locali in materia dianalisi dell’acqua è a esclusiva discrezione e responsabilità dell’utente finale. Le Piastre Neogen Petrifilm CC non sonostate testate con tutti i campioni di acqua in bottiglia, i protocolli di test o tutti i ceppi di microrganismi possibili.
• Non utilizzare le Piastre Neogen Petrifilm CC per la diagnosi di condizioni patologiche in esseri umani o animali.
• Le Piastre Neogen Petrifilm CC non sono in grado di differenziare tra loro i diversi ceppi di coliformi.
• Gli alimenti ad alto contenuto di zucchero possono aumentare il potenziale di produzione di gas da parte diEnterobacteriaceae non coliformi.
Per ulteriori informazioni, consultare la scheda di sicurezza.
Per informazioni sulla documentazione relativa alle prestazioni del prodotto, visitare il nostro sito Web all’indirizzo
www.neogen.com oppure contattare il rappresentante Neogen o il distributore autorizzato.

Responsabilità dell’utente

Gli utenti sono tenuti a leggere e apprendere le istruzioni e le informazioni sul prodotto. Per maggiori informazioni, visitare
il nostro sito Web su www.neogen.com oppure contattare il rappresentante o il distributore autorizzato Neogen.
Nella scelta di un metodo di test, è importante considerare che fattori esterni quali i metodi di campionamento, i protocolli
di test, la preparazione del campione, la manipolazione e le tecniche di laboratorio possono influenzare i risultati.
È responsabilità dell’utente, nel selezionare un qualsiasi metodo di analisi o prodotto, valutare un numero sufficiente
di campioni con le matrici appropriate e con particolari caratteristiche microbiche per soddisfare i criteri relativi alla
metodologia di analisi scelta dall’utente.
L’utente ha inoltre la responsabilità di accertarsi che tutti i metodi di analisi utilizzati e i risultati ottenuti soddisfino i requisiti
dei propri clienti e fornitori.
Come per qualsiasi metodo di analisi, i risultati ottenuti grazie al prodotto di Neogen Food Safety non costituiscono una
garanzia della qualità delle matrici o dei processi sottoposti a prova.

Limitazione di garanzia/Rimedio limitato

SALVO NEI CASI ESPRESSAMENTE INDICATI IN UNA SEZIONE DI GARANZIA LIMITATA DELLA CONFEZIONE DEL
SINGOLO PRODOTTO, NEOGEN NON RICONOSCE ALCUNA GARANZIA ESPLICITA O IMPLICITA, INCLUSE, MA NONA ESSE LIMITATE, LE EVENTUALI GARANZIE DI COMMERCIABILITÀ O DI IDONEITÀ A UNO SCOPO PARTICOLARE.
Qualora un prodotto della Neogen Food Safety sia difettoso, Neogen o il suo distributore autorizzato provvederanno, a loro
discrezione, alla sostituzione o al rimborso del prezzo d’acquisto del prodotto. Questi sono gli unici rimedi a disposizionedel cliente. Si dovrà avvisare immediatamente Neogen entro sessanta giorni dal riscontro di eventuali difetti sospetti nel
prodotto, provvedendo a rispedirlo a Neogen. Per ulteriori domande, contattare il rappresentante Neogen o il distributore
autorizzato Neogen.

Limitazione di responsabilità da parte di Neogen

NEOGEN NON SARÀ RESPONSABILE DI PERDITE O DANNI, DIRETTI, INDIRETTI, SPECIALI, INCIDENTALI O
EMERGENTI, INCLUSA, MA NON IN VIA STRETTAMENTE LIMITATIVA, LA PERDITA DI PROFITTO. In nessun caso la
responsabilità legale di Neogen andrà oltre il prezzo d’acquisto del prodotto presunto difettoso.

Conservazione

Conservare le buste contenenti le Piastre Neogen Petrifilm CC chiuse in frigorifero o nel congelatore a temperatureinferiori o pari a 8 °C (46 °F). Prima di aprire le buste contenenti le Piastre Neogen Petrifilm CC, attendere che esse
abbiano raggiunto la temperatura ambiente. Riporre le Piastre Neogen Petrifilm CC inutilizzate nella busta originale.
Sigillare ripiegando l’estremità della busta e applicando del nastro adesivo. Non refrigerare le buste aperte per evitarnel’esposizione all’umidità. Le buste aperte e risigillate vanno conservate in un luogo fresco e asciutto per non oltre 4
settimane. Si raccomanda di conservare le buste di Piastre Neogen Petrifilm CC risigillate in un congelatore (vedere sotto)
se la temperatura del laboratorio supera i 25 °C (77 °F) e/o il laboratorio si trova in un’area dove l’umidità relativa supera il
50% (con l’eccezione di locali dotati di aria condizionata).
Per conservare le buste aperte in un congelatore, inserire le Piastre Neogen Petrifilm CC in un contenitore sigillabile.
Per rimuovere le piastre CC Petrifilm Neogen congelate per l’uso, aprire il contenitore, rimuovere le piastre necessarie
e rimettere immediatamente le piastre rimanenti nel congelatore nel contenitore sigillato per la restante conservazione.
Le Piastre Neogen Petrifilm CC non devono essere utilizzate dopo la data di scadenza. Il congelatore utilizzato per laconservazione delle buste aperte non deve disporre di un ciclo automatico di sbrinamento, in quanto l’esposizione ripetutadelle Piastre Neogen Petrifilm CC all’umidità può danneggiarle.
Non utilizzare le Piastre Neogen Petrifilm CC in presenza di segni di scolorimento. La data di scadenza e il numero di lotto
sono riportati su ogni confezione di Piastre Neogen Petrifilm CC. Il numero di lotto è riportato anche sulle singole Piastre
Neogen Petrifilm CC.

2

IT(Italiano)

Smaltimento

Dopo l’uso, le Piastre Neogen Petrifilm CC potrebbero contenere microorganismi che possono rappresentare unpotenziale rischio biologico.
Seguire le normative vigenti del settore per lo smaltimento.

Istruzioni per l’uso

Seguire attentamente tutte le istruzioni. In caso contrario, si rischia di ottenere risultati non precisi.

Preparazione, incubazione e interpretazione di campioni dei settori alimentare e delle bevande(eccetto l’acqua in bottiglia), compresi i campioni ambientali
Preparazione del campione
1. Usare i diluenti sterili appropriati:

Acqua per diluizione con tampone fosfato di Butterfield7, acqua peptonata allo 0,1%8, diluenti salini peptonati8,9, acqua
peptonata tamponata8,9, soluzione salina (0,85-0,90%), neutralizzante ad ampio spettro Neogen®, brodo Letheen privodi bisolfiti o acqua distillata. Per i requisiti specifici, consultare la sezione “Istruzioni specifiche per metodi validati”.
Non utilizzare diluenti contenenti citrato, bisolfito o tiosolfato con le Piastre Neogen Petrifilm CC: possono inibire
la crescita. Se nella procedura standard viene indicato il tampone citrato, sostituire con uno dei tamponi elencati inprecedenza, riscaldato a 40-45 °C (104-113 °F).
2. Miscelare o omogeneizzare il campione.
3. Per una crescita ottimale e il recupero di microorganismi, regolare il pH della sospensione del campione su un valore di
6,6 - 7,2. Con i prodotti acidi, regolare il pH con 1N NaOH. Con i prodotti alcalini, regolare il pH con 1N HCl.
Piastratura
1. Posizionare la Piastra Neogen Petrifilm CC su una superficie piana e livellata.
2. Sollevare la pellicola superiore e con la pipetta perpendicolare all’area di inoculazione erogare 1 ml di sospensione delcampione al centro della pellicola inferiore.
3. Srotolare la pellicola superiore sul campione per evitare di intrappolare eventuali bolle d’aria.
4. Collocare il Diffusore per piastre Neogen® Petrifilm® con il lato piatto rivolto verso il basso al centro della Piastra
Neogen Petrifilm CC. Distribuire uniformemente il campione esercitando una leggera pressione al centro del Diffusore
per piastre Neogen Petrifilm. Distribuire l’inoculo sull’intera area di crescita della Piastra Neogen Petrifilm CC prima che
si formi il gel. Non far scorrere il Diffusore per piastre Neogen Petrifilm sulla pellicola.
5. Rimuovere il Diffusore per piastre Neogen Petrifilm e lasciare riposare la Piastra Neogen Petrifilm CC per almeno unminuto in modo da consentire la formazione del gel.

Incubazione

Incubare le Piastre Neogen Petrifilm CC in posizione orizzontale, con la faccia trasparente rivolta verso l’alto in pile di nonoltre 20 piastre. È possibile utilizzare tempi e temperature di incubazione diversi a seconda dei metodi di riferimento locali;
alcuni esempi sono riportati nel paragrafo “Istruzioni specifiche per metodi validati”.

Interpretazione

1. Le Piastre Neogen Petrifilm CC possono essere sottoposte a conteggio mediante un contacolonie standard o un’altra
sorgente di luce ingrandita. Il gas prodotto dai coliformi può interrompere la colonia in modo tale che la colonia“delinei il contorno” della bolla. Questa dovrebbe essere considerata come singolo coliforme. Le colonie sulla barriera
schiumosa non vanno prese in considerazione in quanto vengono rimosse dall’influenza selettiva del terreno di coltura.
Non contare le bolle artefatte che potrebbero essere presenti.
L’interpretazione delle colonie di coliformi sulla Piastra Neogen Petrifilm CC varia a seconda del metodo di riferimento.
Per esempio:
OPPURE
AOAC® Official MethodsSM:
Le colonie di coliformi sono rosse e strettamente
associate (entro il diametro della colonia stessa) al
gas intrappolato. Le colonie non associate al gas(la distanza tra la colonia e la bolla di gas in tal caso
deve essere maggiore del diametro della colonia)
non vengono conteggiate come coliformi.

metodi certificati NF Validation:- Rispetto al metodo ISO 48312 (metodo MPN),
le colonie di coliformi sono rosse e strettamente
associate (entro il diametro della colonia stessa) al
gas intrappolato.
- Rispetto al metodo ISO 48321 (coliformi totali) e
NF V08-0603 (coliformi fecali) entrambi basati su
metodi VRBL, devono essere considerate tutte lecolonie rosse con o senza gas.

2. L’area di crescita circolare è pari a 20 cm2 circa. È possibile effettuare delle stime su Piastre Neogen Petrifilm CC che
contengono oltre 150 colonie contando il numero di colonie in uno o più quadratini rappresentativi e determinando ilnumero medio per quadratino. Moltiplicare il numero medio per 20 al fine di determinare la conta stimata per Piastra
Neogen Petrifilm CC.
3

IT(Italiano)

3. Quando le colonie sono presenti in gran numero, le Piastre Neogen Petrifilm CC possono far diventare il colore del gelpiù intenso e avere una o entrambe le seguenti caratteristiche: molte piccole colonie indistinte e/o numerose bolle digas. Elevate concentrazioni di coliformi faranno virare il colore dell’area di crescita al rosso scuro. Quando ciò avviene,
registrare il risultato come Too Numerous To Count (TNTC, troppo numerose per essere contate). Quando è necessario
un conteggio effettivo, prevedere una piastratura con diluizione maggiore.
4. Qualora sia necessario, le colonie possono essere isolate per un’ulteriore identificazione. Sollevare la pellicola
superiore applicando la corretta tecnica di prova e prelevare la colonia dal gel. Analizzare la colonia mediante leprocedure standard.
5. Se non è possibile eseguire il conteggio delle Piastre Neogen Petrifilm CC entro 1 ora dalla rimozione dall’incubatore,
le piastre possono essere congelate e conservate per il conteggio differito in un contenitore sigillabile a temperatura
pari o inferiore a -15 °C (5 °F) per massimo una settimana.

Preparazione, incubazione e interpretazione di campioni di acqua in bottiglia
Idratare le Piastre Neogen Petrifilm CC
1. Posizionare la Piastra Neogen Petrifilm CC su una superficie piana e livellata.

2. Sollevare la pellicola superiore ed erogare 1 ml di un diluente sterile idratante appropriato sul centro della pellicola
inferiore. Tra i diluenti sterili idratanti appropriati figurano acqua distillata, acqua deionizzata (DI) e acqua trattata conl’osmosi inversa (OI).
3. Srotolare la pellicola superiore sul campione per evitare di intrappolare eventuali bolle d’aria.
4. Collocare il Diffusore per piastre Neogen Petrifilm con il lato piatto rivolto verso il basso al centro della piastra. Distribuire
uniformemente il diluente esercitando una leggera pressione al centro del diffusore. Distribuire il diluente sull’intera area
di crescita della Piastra Neogen Petrifilm prima che si formi il gel. Non far scorrere il diffusore sulla pellicola.
5. Rimuovere il diffusore e consentire alle piastre di rimanere chiuse per almeno 1 ora prima dell’uso.
6. Conservare le Piastre Neogen Petrifilm CC idratate in una busta sigillata o sacchetto di plastica. Proteggere le piastre
dalla luce e conservare in frigorifero a 2-8 °C (36-46 °F) per un massimo di 7 giorni.

Filtrazione dell’acqua e incubazione delle piastre

1. Attenendosi alle procedure standard per l’analisi dell’acqua, effettuare la filtrazione a membrana dei campioni d’acqua
utilizzando un filtro da 47 mm in esteri misti di cellulosa (EMC) con porosità di 0,45 micron.
2. Sollevare attentamente la pellicola superiore della Piastra Neogen Petrifilm CC. Evitare di toccare l’area di crescita
circolare. Posizionare il filtro al centro dell’area idratata. Ridurre al minimo l’intrappolamento delle bolle sotto il filtro.
3. Srotolare lentamente la pellicola superiore sul filtro. Ridurre al minimo l’intrappolamento delle bolle d’aria e la creazione
di spazi tra il filtro e la Piastra Neogen Petrifilm CC.
4. Applicare una leggera pressione utilizzando il Diffusore per piastre Neogen Petrifilm o facendo scorrere leggermente
un dito su tutta l’area del disco (compresi i bordi) per assicurare un contatto uniforme del filtro con il gel ed eliminare
eventuali bolle d’aria.
5. Incubare le Piastre Neogen Petrifilm CC a 35 °C ± 1 °C per 24 ore ± 2 ore11 o a 36 °C ± 1 °C per 24 ore ± 2 ore 12 inposizione orizzontale, con la faccia trasparente rivolta verso l’alto in pile di non oltre 20.

Interpretazione

1. Le Piastre Neogen Petrifilm CC possono essere sottoposte a conteggio mediante un contacolonie standard o un’altra
sorgente di luce ingrandita. Le colonie sulla barriera schiumosa non vanno prese in considerazione in quanto vengono
rimosse dall’influenza selettiva del terreno di coltura. Non contare le bolle artefatte che potrebbero essere presenti.
2. Le colonie rosse associate alle bolle di gas vengono conteggiate come coliformi. Le bolle di gas possono formare una
figura circolare o a forma di stella attorno alla colonia. Il gas prodotto dai coliformi può interrompere la colonia in modo
tale che la colonia “delinei il contorno” della bolla. Questa dovrebbe essere considerata come singolo coliforme.
Le colonie rosse senza bolle di gas strettamente associate possono essere coliformi e devono essere prelevate e testate
con metodi di conferma appropriati11,12.
3. Quando le colonie sono presenti in gran numero, le Piastre Neogen Petrifilm CC faranno diventare più intenso il coloredel gel associato a molte piccole colonie indistinte o bolle di gas. Quando ciò avviene, registrare il risultato come Too
Numerous To Count (TNTC, troppo numerose per essere contate).
4. Le colonie possono essere isolate per un’ulteriore identificazione. Sollevare la pellicola superiore e prelevare la colonia
dal gel o dalla superficie del filtro. Quando si solleva la pellicola superiore, il filtro può aderire o alla pellicola superiore oalla pellicola inferiore. Se il filtro aderisce alla pellicola superiore, separare il filtro dalla pellicola superiore e prelevare lecolonie. Analizzare la colonia mediante le procedure standard.
Nota: si sconsiglia il conteggio ritardato di Piastre Neogen Petrifilm CC con filtri.

4

IT(Italiano)

Per ulteriori informazioni, fare riferimento all’opportuna “Guida all’interpretazione della Piastra Neogen® Petrifilm® per ilconteggio rapido dei coliformi ”. Per qualsiasi domanda su applicazioni o procedure specifiche, visitare il nostro sito Web
all’indirizzo www.neogen.com o contattare il distributore o il rappresentante Neogen di zona.
Istruzioni specifiche per metodi validati
AOAC® Official MethodsSM (986.33 Metodi con film secco reidratabile del conteggio dei batteri e dei coliformi nel latte e
989.10 Metodi con film secco reidratabile del conteggio dei batteri e dei coliformi nei latticini)
Incubare le Piastre Neogen Petrifilm CC per 24 ore ± 2 ore a 32 °C ± 1 °C.
AOAC® Official MethodsSM (991.14 Metodi con film secco reidratabile del conteggio di coliformi ed Escherichia coli
negli alimenti)
Incubare le Piastre Neogen Petrifilm CC per 24 ore ± 2 ore a 35 °C ± 1 °C.
AOAC® Performance Tested MethodSM, certificato n. 082101
In uno studio Performance Tested Method (PTM) dell’Istituto di ricerca AOAC® il metodo Piastra Neogen Petrifilm CC è
risultato equivalente ai conteggi log medi del metodo FDA/BAM Capitolo 4, Sezione III.D per il conteggio dei coliformi
dell’acqua in bottiglia.

Ambito della validazione
Acqua in bottiglia: acqua purificata, acqua di sorgente trattata, acqua di sorgente naturale non gassata, acqua di sorgente
naturale gassata.
Incubazione
Incubare le Piastre Neogen Petrifilm CC per 24 ore ± 2 ore a 35 °C ± 1 °C.
NF Validation concessa dalla AFNOR Certification:
Metodo certificato NF Validation in conformità di ISO 16140-210 rispetto a ISO 48321(3M-01/02-09/89 A)
Ambito della validazione: per analizzare tutti i prodotti alimentari umani (eccetto i crostacei crudi), alimenti per animali
domestici e campioni ambientali.
Utilizzare i seguenti dettagli quando si applicano le Istruzioni per l’uso di cui sopra.
Preparazione del campione
Utilizzare esclusivamente diluenti ISO.
Incubazione
Incubare le Piastre Neogen Petrifilm CC per 24 ore ± 2 ore a 30 °C ± 1 °C o 37 °C ± 1 °C.
Interpretazione
Calcolare il numero di microrganismi presenti nel campione del test in base a ISO 72185 per una piastra per diluizione.
Le stime esulano dall’ambito della certificazione della NF Validation (vedere il paragrafo 2 della sezione Interpretazione).
Metodo certificato NF Validation in conformità di ISO 16140-210 rispetto a ISO 48312(3M-01/02-09/89 B)
Ambito della validazione: per analizzare tutti i prodotti alimentari umani (eccetto i crostacei crudi).
Utilizzare i seguenti dettagli quando si applicano le Istruzioni per l’uso di cui sopra.
Preparazione del campione
Utilizzare esclusivamente diluenti ISO.
Incubazione
Incubare le Piastre Neogen Petrifilm CC per 24 ore ± 2 ore a 30 °C ± 1 °C o 37 °C ± 1 °C.
Interpretazione
Calcolare il numero di microrganismi presenti nel campione del test in base a ISO 72185 per una piastra per diluizione.
Le stime esulano dall’ambito della certificazione della NF Validation (vedere il paragrafo 2 della sezione Interpretazione).
Metodo certificato NF Validation in conformità di ISO 16140-210 rispetto a NF V08-0603(3M-01/02-09/89 C)
Ambito della validazione Per analizzare tutti i prodotti alimentari umani.
Utilizzare i seguenti dettagli quando si applicano le Istruzioni per l’uso di cui sopra.
Preparazione del campione
Utilizzare esclusivamente diluenti ISO
Incubazione
Incubare le Piastre Neogen Petrifilm CC per 24 ore ± 2 ore a 44°C ± 1°C.
5

IT

(Italiano)Interpretazione
Calcolare il numero di microrganismi presenti nel campione del test in base a ISO 72185 per una piastra per diluizione.
Le stime esulano dall’ambito della certificazione della NF Validation (vedere il paragrafo 2 della sezione Interpretazione).
Fare riferimento allo standard EN ISO 7218 per inoculazione, conteggio delle colonie e calcolo ed espressione dei risultati.

3M 01/02 – 09/89A, B, and C
ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS
http://nf-validation.afnor.org/en
Per maggiori informazioni sulla scadenza, consultare il certificato NF VALIDATION, disponibile sul sito web menzionato
in precedenza.

Bibliografia

1. ISO 4832. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms –Colony count technique.
2. ISO 4831. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumeration of
coliforms – Most probable number technique.
3. AFNOR NF V08-060. General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at
44°C – Routine method.
4. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
6. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
7. FDA. Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998. Reagents Index for BAM found at:
http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.
8. ISO 6887-5. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk products.
9. ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension anddecimal dilutions.
10. ISO 16140-2. Microbiology of the food chain – Method validation – Protocol for the validation of alternative(proprietary) methods against a reference method.
11. U.S. Food and Drug Administration. 2002. Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4. Membranefilter method for coliforms.
12. American Public Health Association. 2017. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th Ed.
Method 9222B2a.
Fare riferimento alle versioni attuali dei metodi standard elencati in precedenza.

Legenda dei simboli

info.neogen.com/symbols
AOAC è un marchio di fabbrica registrato di AOAC INTERNATIONAL.
Official Methods è un marchio di servizio di AOAC INTERNATIONAL.
Performance Tested Method è un marchio di servizio di AOAC INTERNATIONAL.

6

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931A

ES(Español)Fecha de emisión: 2024-01

Instrucciones del Producto

Placa para recuento de coliformes
Descripción del producto y uso previsto

La placa para recuento de coliformes Neogen® Petrifilm® CC es un sistema de medios de cultivo listo para muestras que
contiene nutrientes de Bilis Rojo Violeta (VRB), un agente gelificante soluble en agua fría y un indicador de tetrazolio
que facilita la enumeración de colonias. Las Placas Neogen Petrifilm CC se usan para la enumeración de coliformes
en las industrias de agua embotellada, alimentos y bebidas. Los componentes de la Placa Neogen Petrifilm CC están
descontaminados, pero no están esterilizados. Neogen Food Safety cuenta con certificación de la Organización
Internacional para la Estandarización (ISO) 9001 de diseño y fabricación. La Placa Neogen Petrifilm CC no ha sido evaluada
con todos los productos alimenticios, procesos alimenticios, protocolos de prueba posibles ni con todas las posibles cepasde microorganismos.
El Manual de análisis bacteriológico7 (BAM) de la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos(FDA) define a los coliformes como bacilos gramnegativos, los cuales producen ácido y gas a partir de la fermentación dela lactosa. Las colonias de coliformes que crecen en la Placa Neogen Petrifilm CC producen ácido, lo que provoca que elindicador de pH intensifique el color del gel; el gas atrapado alrededor de las colonias rojas indica coliformes.
ISO define a los coliformes por su capacidad de crecer en medios selectivos y específicos del método. El método
ISO 48321, que enumera a los coliformes por técnica de recuento de colonias, define a los coliformes como productoresde ácido en VRB con agar de lactosa (VRBL). En las Placas Neogen Petrifilm CC, estos coliformes que producen ácido
están indicados por las colonias rojas con o sin producción de gas. El método ISO 48312, que enumera a los coliformes porel método de número más probable (MPN), define a los coliformes por su capacidad de crecer y producir gas a partir dela lactosa en un caldo selectivo. En las Placas Neogen Petrifilm CC, estos coliformes están indicados por las colonias rojas
asociadas con el gas.
Para las muestras de agua embotellada, las colonias confirmadas de coliformes están indicadas por las colonias rojas
asociadas con el gas en las Placas Neogen Petrifilm CC. Las colonias rojas sin burbujas de gas estrechamente asociadas
pueden ser coliformes y deben subcultivarse y probarse con los métodos de confirmación adecuados11,12. Para obtener
detalles adicionales, consulte la sección Interpretación. Las colonias características pueden subcultivarse y probarse para
Escherichia coli.
AFNOR Certification ha certificado la Placa Neogen Petrifilm CC en comparación con el método ISO 48312 yel método ISO 48321 para la enumeración de coliformes totales. AFNOR Certification también ha certificado la
Placa Neogen Petrifilm CC en comparación con NF V08-0603, para la enumeración de coliformes termotolerantes.

Seguridad

El usuario debe leer, comprender y respetar toda la información de seguridad que se incluye en las instrucciones de laPlaca Neogen Petrifilm CC. Guarde las instrucciones de seguridad para consultas futuras.
ADVERTENCIA:

Indica una situación peligrosa que, si no se evita, podría ocasionar la muerte o lesiones graves odaños en la propiedad.

ADVERTENCIA
Para reducir los riesgos asociados con la exposición a riesgos biológicos y la contaminación ambiental:• Proceda de acuerdo con las normas de la industria y la normativa local actuales para el desecho de residuos deriesgo biológico.
Para reducir los riesgos asociados con la diseminación de productos contaminados:• Siga todas las instrucciones de almacenamiento del producto que se incluyen en las instrucciones de uso.
• No use el producto después de la fecha de vencimiento.
Para reducir los riesgos asociados con la infección bacteriana y la contaminación del lugar de trabajo:• Realice pruebas con la Placa Neogen Petrifilm CC en un laboratorio debidamente equipado, bajo la supervisión de un
microbiólogo capacitado.
• El usuario debe capacitar a su personal en lo que respecta a las técnicas de prueba adecuadas, por ejemplo,
Buenas prácticas de laboratorio4, ISO 72185 o ISO 170256.
Para reducir los riesgos asociados con la interpretación incorrecta de resultados:• Neogen no ha documentado el uso de las Placas Neogen Petrifilm CC en industrias que no sean de alimentos y bebidas,
incluida el agua embotellada. Por ejemplo, Neogen no ha documentado las Placas Neogen Petrifilm CC para probar
productos farmacéuticos o cosméticos. Neogen no ha documentado las Placas Neogen Petrifilm CC para probar aguas
superficiales y municipales o aguas que se utilicen las industrias farmacéuticas o cosméticas.
1

ES(Español)• El uso de Placas Neogen Petrifilm CC para probar muestras de agua en conformidad con las regulaciones locales para
pruebas de agua se hace a absoluta discreción y responsabilidad del usuario final. Las Placas Neogen Petrifilm CC no
han sido probadas con todas las muestras posibles de agua embotellada, protocolos de prueba ni con todas las posibles
cepas de microorganismos.
• No use las Placas Neogen Petrifilm CC para diagnosticar afecciones en humanos o animales.
• Las Placas Neogen Petrifilm CC no distinguen una cepa de coliformes de otra.
• Los alimentos con alto contenido de azúcar pueden aumentar el potencial de producción de gas a partir deEnterobacteriaceae no coliformes.
Consulte la Hoja de Datos de Seguridad para obtener más información.
Para obtener más información sobre la documentación del desempeño del producto, visite nuestro sitio web en
www.neogen.com o póngase en contacto con su representante o distribuidor autorizado de Neogen.

Responsabilidad del usuario

Los usuarios son responsables de familiarizarse con las instrucciones e información del producto. Visite nuestro sitio web
en www.neogen.com o póngase en contacto con su representante o distribuidor autorizado de Neogen para obtener más
información.
Al seleccionar un método de prueba, es importante reconocer que factores externos, tales como los métodos de muestreo,
los protocolos de prueba, la preparación de la muestra, la manipulación y la técnica de laboratorio, pueden afectar
los resultados.
Al seleccionar cualquier método de prueba o producto, es responsabilidad del usuario evaluar un número suficiente demuestras con retos microbianos y matrices apropiadas para satisfacer al usuario en cuanto a que el método de prueba
cumple con los criterios necesarios.
Además, es responsabilidad del usuario determinar que cualquier método de prueba y sus resultados cumplen con losrequisitos de sus clientes y proveedores.
Como sucede con cualquier método de prueba, los resultados obtenidos del uso de cualquier producto de
Neogen Food Safety no constituyen una garantía de calidad de las matrices ni de los procesos analizados.

Limitación de garantía/Recurso limitado

SALVO LO EXPRESAMENTE ESTIPULADO EN UNA SECCIÓN DE GARANTÍA LIMITADA O EN EL EMBALAJE DE UN
PRODUCTO ESPECÍFICO, NEOGEN RENUNCIA A TODAS LAS GARANTÍAS EXPRESAS Y TÁCITAS INCLUIDA, ENTREOTRAS, CUALQUIER GARANTÍA DE COMERCIABILIDAD O IDONEIDAD PARA UN USO EN PARTICULAR. Si un productode Neogen Food Safety es defectuoso, Neogen o su distribuidor autorizado reemplazará el producto o reembolsará
el precio de compra del producto, a su elección. Estos son sus recursos exclusivos. Deberá notificar inmediatamentea Neogen en un lapso de sesenta días a partir del descubrimiento de cualquier sospecha de defecto en un producto ydevolver dicho producto a Neogen. Póngase en contacto con su representante de Neogen o distribuidor autorizado de
Neogen si tuviera cualquier otra pregunta.

Limitación de responsabilidad de Neogen

NEOGEN NO SERÁ RESPONSABLE DE NINGUNA PÉRDIDA O DAÑO, YA SEA DIRECTO, INDIRECTO, ESPECIAL,DAÑOS ACCIDENTALES O CONSECUENCIAS, INCLUIDOS ENTRE OTROS, LA PÉRDIDA DE BENEFICIOS.
En ningún caso la responsabilidad de Neogen conforme a ninguna teoría legal excederá el precio de compra del producto
supuestamente defectuoso.

Almacenamiento

Almacene las bolsas cerradas de la Placa Neogen Petrifilm CC refrigeradas o congeladas a temperaturas inferiores oiguales a 8 °C (46 °F). Antes de usarlas, deje que las bolsas cerradas de la Placa Neogen Petrifilm CC alcancen temperatura
ambiente antes de abrirlas. Vuelva a colocar las Placas Neogen Petrifilm CC que no haya usado en la bolsa. Selle la bolsa
plegando el extremo y colocando cinta adhesiva. Para evitar la exposición a la humedad, no refrigere las bolsas abiertas.
Almacene las bolsas reselladas en un lugar fresco y seco durante no más de cuatro semanas. Se recomienda que las bolsas
reselladas de las Placas Neogen Petrifilm CC se almacenen en un congelador (vea a continuación) si la temperatura dellaboratorio supera los 25 °C (77 °F) o el laboratorio se encuentra en una región con una humedad relativa que supera el
50 % (excepto en instalaciones con aire acondicionado).
Para almacenar las bolsas abiertas en un congelador, coloque las Placas Neogen Petrifilm CC en un recipiente hermético.
Para retirar las placas CC Neogen Petrifilm congeladas para su uso, abra el recipiente, retire las placas necesarias e
inmediatamente devuelva las placas restantes al congelador en el recipiente sellado durante el resto de la vida útil.
Las Placas Neogen Petrifilm CC no deben usarse pasada su fecha de vencimiento. El congelador que se utiliza parael almacenamiento de bolsas abiertas no debe tener un ciclo de descongelación automático, ya que esto expondría
repetidamente las Placas Neogen Petrifilm CC a la humedad, lo que puede dañar las placas.
No use las Placas Neogen Petrifilm CC que presenten decoloración. La fecha de vencimiento y el número de lotefiguran en cada paquete de las Placas Neogen Petrifilm CC. El número de lote también aparece en cada una de lasPlacas Neogen Petrifilm CC.
2

ES(Español)DesechoDespués del uso, las Placas Neogen Petrifilm CC pueden contener microorganismos que pueden representar un potencial
riesgo biológico.
Siga las normas actuales de la industria para su desecho.

Instrucciones de uso

Siga todas las instrucciones atentamente. De lo contrario, los resultados obtenidos podrían llegar a ser incorrectos.

Preparación, incubación e interpretación de las muestras de las industrias de alimentos y bebidas(a excepción del agua embotellada), incluidas las muestras ambientales.
Preparación de la muestra
1. Utilice diluyentes estériles apropiados:

Agua de dilución de fosfatos de Butterfield7, 0,1 % de agua de peptona8, diluyentes de sal de peptona8,9, agua con
peptona tamponada8,9, solución salina (0,85 0,90 %), neutralizador de amplio espectro Neogen®, caldo de Letheen sin
bisulfito o agua destilada. Para conocer los requisitos específicos, consulte la sección “Instrucciones específicas para
métodos validados”.
No utilice diluyentes que contengan citrato, bisulfito o tiosulfato en las Placas Neogen Petrifilm CC, ya que pueden
inhibir el crecimiento. Si se indica una solución de caldo de citrato en el procedimiento estándar, sustitúyala por una
de las soluciones de caldo que figuran más arriba, calentada a 40 °C-45 °C (104 °F-113 °F).
2. Mezcle u homogeneice la muestra.
3. Para un crecimiento y una recuperación óptimos de los microorganismos, ajuste el pH de la suspensión de la muestra a
6,6-7,2. Para productos ácidos, ajuste el pH con 1N de NaOH. Para productos alcalinos, ajuste el pH con 1N de HCl.
Inoculación de las placas
1. Coloque la Placa Neogen Petrifilm CC sobre una superficie nivelada y plana.
2. Levante la película superior y, con la pipeta en posición perpendicular al área de inoculación, distribuya 1 mL desuspensión de la muestra en el centro de la película inferior.
3. Desenrolle la película superior sobre la muestra para evitar atrapar burbujas de aire.
4. Coloque el Neogen® Petrifilm® Difusor con el lado plano hacia abajo en el centro de la Placa Neogen Petrifilm CC.
Presione suavemente el centro del Neogen Petrifilm Difusor para distribuir la muestra de manera uniforme. Esparzael inóculo por toda el área de crecimiento de la Placa Neogen Petrifilm CC antes de que se forme el gel. No deslice el
Neogen Petrifilm Difusor a través de la película.
5. Quite el Neogen Petrifilm Difusor y deje la Placa Neogen Petrifilm CC quieta durante al menos un minuto para permitirque se forme el gel.

Incubación

Incube las Placas Neogen Petrifilm CC en posición horizontal, con el lado claro hacia arriba, en pilas de hasta 20 placas.
Se pueden usar varios tiempos y temperaturas de incubación según los métodos de referencia locales actuales, algunos delos cuales se enumeran en la sección “Instrucciones específicas para métodos validados”.

Interpretación

1. Las Placas Neogen Petrifilm CC pueden contarse con un contador de colonias estándar u otra lupa iluminada. El gas
producido por los coliformes puede impedir el desarrollo normal de la colonia para que esta "delinee" la burbuja.
Esto debe contarse como un coliforme individual. No cuente las colonias en el dique de espuma ya que fueron retiradasde la influencia selectiva del medio. No cuente las burbujas del artefacto que puedan estar presentes.
La interpretación de las colonias de coliformes en la Placa Neogen Petrifilm CC varía según el método de referencia.
Por ejemplo:
AOAC® Official MethodsSM:
Las colonias de coliformes son rojas y se encuentran
estrechamente asociadas (dentro del diámetro deuna colonia) con el gas atrapado. Las colonias noasociadas con el gas (una distancia mayor que eldiámetro de una colonia entre la colonia y la burbuja
de gas) no se cuentan como coliformes.

O Métodos certificados de NF Validation:- En comparación con el método ISO 48312 (método
de MPN), las colonias de coliformes son rojas y seencuentran estrechamente asociadas (dentro deldiámetro de una colonia) con el gas atrapado.
- En comparación con el método ISO 48321 (coliformes
totales) y NF V08-0603 (coliformes fecales), ambos
basados en los métodos de VRBL, se cuentan todas lascolonias rojas con o sin gas.

2. El área de crecimiento circular es de aproximadamente 20 cm2. Se pueden hacer estimaciones en las Placas
Neogen Petrifilm CC que contengan más de 150 colonias contando la cantidad de colonias en uno o más cuadrados
representativos y determinando la cantidad promedio por cuadrado. Multiplique el número promedio por 20 para
determinar el recuento estimado por Placa Neogen Petrifilm CC.
3

ES(Español)3. Cuando las colonias están presentes en grandes cantidades, las Placas Neogen Petrifilm CC pueden sufrir laintensificación del color del gel y cualquiera o ambas de las siguientes características: muchas colonias pequeñas eindistintas o muchas burbujas de gas. Altas concentraciones de coliformes provocarán que el área de crecimiento
se vuelva roja oscura. Cuando esto ocurra, registre los resultados como demasiado numerosos para contar (TNTC).
Cuando se requiera un recuento exacto, siembre con una dilución más alta.
4. Cuando sea necesario, las colonias se podrán aislar para una mejor identificación. Levante la película superior usando
una técnica de prueba adecuada y recoja la colonia del gel. Pruebe usando procedimientos estándar.
5. Si las Placas Neogen Petrifilm CC no se pueden contar pasada 1 hora desde que se las quitó de la incubadora, podrán
almacenarse para su posterior enumeración congelándolas en un recipiente hermético a temperaturas inferiores oiguales a 15 °C (5 °F) negativos durante no más de una semana.

Preparación, incubación e interpretación de muestras de agua embotellada
Hidrate las Placas Neogen Petrifilm CC
1. Coloque la Placa Neogen Petrifilm CC sobre una superficie nivelada y plana.

2. Levante la película superior y vierta 1 mL de un diluyente de hidratación estéril adecuado en el centro de la película
inferior. Los diluyentes de hidratación estéril adecuados incluyen agua destilada, agua desionizada (DI) y agua deósmosis inversa (RO).
3. Desenrolle la película superior sobre la muestra para evitar atrapar burbujas de aire.
4. Coloque el Neogen Petrifilm Difusor con el lado plano hacia abajo en el centro de la placa. Presione ligeramente elcentro del difusor para distribuir el diluyente de manera uniforme. Esparza el diluyente por toda el área de crecimientode la Placa Neogen Petrifilm antes de que se forme el gel. No deslice el difusor a través de la película.
5. Quite el difusor y deje que las placas permanezcan cerradas por un mínimo de 1 hora antes de usarse.
6. Almacene las Placas Neogen Petrifilm CC hidratadas en una bolsa sellada o una bolsa de plástico. Proteja las placas dela luz y refrigérelas a 2 °C-8 °C (36 °F-46 °F) por hasta 7 días.

Filtración de agua e incubación de placas

1. Según los procedimientos estándar para el análisis del agua, filtre la muestra de agua con una membrana de filtro deéster de celulosa mixta (MCE) de 47 mm con un tamaño de poros de 0,45 micrones.
2. Levante con cuidado la película superior de la Placa Neogen Petrifilm CC. Evite tocar el área circular de crecimiento.
Coloque el filtro en el centro del área hidratada. Minimice las burbujas atrapadas debajo del filtro.
3. Enrolle lentamente la película superior en el filtro. Minimice las burbujas de aire atrapadas y la formación de huecos
entre el filtro y la Placa Neogen Petrifilm CC.
4. Aplique presión suavemente usando el difusor de la Placa Neogen Petrifilm o deslizando un dedo suavemente por todael área del disco (incluidos los bordes) para garantizar un contacto uniforme entre el filtro y el gel y para eliminar las
burbujas de aire.
5. Incube las Placas Neogen Petrifilm CC a 35 °C ± 1 °C durante 24 horas ± 2 horas11 o 36 °C ± 1 °C durante
24 horas ± 2 horas12 en posición horizontal con el lado claro hacia arriba en pilas de hasta 20.

Interpretación

1. Las Placas Neogen Petrifilm CC pueden contarse con un contador de colonias estándar u otra lupa iluminada. No
cuente las colonias en el dique de espuma ya que fueron retiradas de la influencia selectiva del medio. No cuente lasburbujas del artefacto que puedan estar presentes.
2. Las colonias rojas asociadas con burbujas de gas se cuentan como coliformes. Las burbujas de gas pueden formar un
patrón circular o con forma de estrella alrededor de la colonia. El gas producido por los coliformes puede impedir eldesarrollo normal de la colonia para que esta "delinee" la burbuja. Esto debe contarse como un coliforme individual.
Las colonias rojas sin burbujas de gas estrechamente asociadas pueden ser coliformes y deben recogerse y probarse
con los métodos de confirmación adecuados11,12.
3. Cuando las colonias estén presentes en grandes cantidades, las Placas Neogen Petrifilm CC sufrirán una intensificacióndel color del gel asociada con muchas colonias pequeñas e indistintas o burbujas de gas. Cuando esto ocurra, registre
los resultados como demasiado numerosos para contar (TNTC).
4. Las colonias se pueden aislar para una mayor identificación. Levante la película superior y recoja la colonia del gel o lasuperficie del filtro. Al levantar la película superior, el filtro puede adherirse a la película superior o a la inferior.
Si el filtro se adhiere a la película superior, separe el filtro de la película superior y recoja las colonias. Pruebe usando
procedimientos estándar.
Nota: No se recomienda el recuento retrasado de las Placas Neogen Petrifilm CC con filtros.
Para obtener más información, consulte la “Guía de Interpretación de la placa para recuento de coliformes Neogen®
Petrifilm®” adecuada. Si tiene preguntas acerca de los procedimientos o las aplicaciones específicas, visite nuestro sitio
web en www.neogen.com o comuníquese con su representante o distribuidor local de Neogen.
4

ES(Español)Instrucciones específicas para métodos validados
AOAC® Official MethodsSM (986.33 Recuentos de coliformes y bacterias en leche, métodos de películas secas rehidratables
y 989.10 Recuentos de coliformes y bacterias en productos lácteos, métodos de películas secas rehidratables).
Incube las Placas Neogen Petrifilm CC 24 horas ± 2 horas a 32 °C ± 1 °C.
AOAC® Official MethodsSM (991.14 Recuentos de Escherichia coli y coliformes en alimentos, métodos de películas
secas rehidratables).
Incube las Placas Neogen Petrifilm CC 24 horas ± 2 horas a 35 °C ± 1 °C.
AOAC® Performance Tested MethodSM N.° de certificado 082101
En un estudio AOAC® Research Institute Performance Tested Method (PTM), se descubrió que el método dePlaca Neogen Petrifilm CC es equivalente a los recuentos logarítmicos promedio del método del Manual Analítico
Bacteriológico (BAM, por sus siglas en inglés) de la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos(FDA, por sus siglas en inglés), Capítulo 4, Sección III.D para la enumeración del recuento de coliformes en agua embotellada.

Alcance de la validación:
Agua embotellada: agua purificada, agua mineral tratada, agua mineral natural no carbonatada, agua mineral naturalcarbonatada.
Incubación:
Incube las Placas Neogen Petrifilm CC 24 horas ± 2 horas a 35 °C ± 1 °C.
NF Validation por AFNOR Certification:
Método certificado de NF Validation en conformidad con ISO 16140-210 en comparación con ISO 48321(3M-01/02-09/89 A).
Alcance de la validación: Para probar todos los productos alimenticios para humanos (excepto mariscos crudos),
alimentos para mascotas y muestras ambientales.
Utilice los siguientes datos al llevar a cabo la implementación de las Instrucciones de uso antes mencionadas:
Preparación de la muestra:
Use exclusivamente diluyentes mencionados en las normas ISO.
Incubación:
Incube las Placas Neogen Petrifilm CC 24 horas ± 2 horas a 30 °C ± 1 °C o 37 °C ± 1 °C.
Interpretación:
Calcule la cantidad de microorganismos presentes en la muestra de la prueba según la norma ISO 72185 para una placa
por dilución. Las estimaciones están fuera del alcance de la certificación de NF Validation (véase el párrafo 2 de la partede interpretación).
Método certificado de NF Validation en conformidad con ISO 16140-210 en comparación con ISO 48312(3M-01/02-09/89 B).
Alcance de la validación: Para probar todos los productos alimenticios para humanos (excepto mariscos crudos).
Utilice los siguientes datos al llevar a cabo la implementación de las Instrucciones de uso antes mencionadas:
Preparación de la muestra:
Use exclusivamente diluyentes mencionados en las normas ISO.
Incubación:
Incube las Placas Neogen Petrifilm CC 24 horas ± 2 horas a 30 °C ± 1 °C o 37 °C ± 1 °C.
Interpretación:
Calcule la cantidad de microorganismos presentes en la muestra de la prueba según la norma ISO 72185 para una placa
por dilución. Las estimaciones están fuera del alcance de la certificación de NF Validation (véase el párrafo 2 de la parte deinterpretación).
Método certificado de NF Validation en conformidad con ISO 16140-210 en comparación con NF V08-0603(3M-01/02-09/89 C).
Alcance de la validación: Para probar todos los productos alimenticios para humanos.
Utilice los siguientes datos al llevar a cabo la implementación de las Instrucciones de uso antes mencionadas:

5

ES(Español)Preparación de la muestra:
Use exclusivamente diluyentes mencionados en las normas ISO.
Incubación:
Incube las Placas Neogen Petrifilm CC 24 horas ± 2 horas a 44 °C ± 1 °C.
Interpretación:
Calcule la cantidad de microorganismos presentes en la muestra de la prueba según la norma ISO 72185 para una placa
por dilución. Las estimaciones están fuera del alcance de la certificación de NF Validation (véase el párrafo 2 de la partede interpretación). Consulte la norma EN ISO 7218 sobre inoculación, recuento y cálculo de colonias, y expresión de losresultados.

3M 01/02 – 09/89A, B, and C
ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS
http://nf-validation.afnor.org/en
Para más información acerca del final de la validez, consulte el certificado de NF VALIDATION disponible en el sitio web
mencionado anteriormente.

Referencias

1. ISO 4832. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms –Colony count technique.
2. ISO 4831. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumeration of
coliforms – Most probable number technique.
3. AFNOR NF V08-060. General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at
44°C – Routine method.
4. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
6. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
7. FDA. Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998. Reagents Index for BAM found at:
http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.
8. ISO 6887-5. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk products.
9. ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension anddecimal dilutions.
10. ISO 16140-2. Microbiology of the food chain – Method validation – Protocol for the validation of alternative(proprietary) methods against a reference method.
11. U.S. Food and Drug Administration. 2002. Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4. Membranefilter method for coliforms.
12. American Public Health Association. 2017. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th Ed.
Method 9222B2a.
Consulte las versiones actuales de los métodos estándar enumerados anteriormente.

Explicación de los símbolos
info.neogen.com/symbols

AOAC es una marca comercial registrada de AOAC INTERNATIONAL.
Official Methods es una marca de servicio de AOAC INTERNATIONAL.
Performance Tested Method es una marca de servicio de AOAC INTERNATIONAL.

6

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931ANL(Nederlands)
Datum van uitgifte: 2024-01

Productinstructies

Coliform Telplaat
Productbeschrijving en beoogd gebruik

De Neogen® Petrifilm® Coliform (CC) Telplaat is een kant-en-klaar kweekmediumsysteem met aangepaste VRBvoedingsstoffen (Violet Red Bile), een in koud water oplosbaar geleermiddel en een tetrazoliumindicator die het tellen
van kolonies vergemakkelijkt. De Neogen Petrifilm CC Telplaten worden gebruikt voor het tellen van coliformen in
voedingsmiddelen, dranken en flessenwater. De componenten van de Neogen Petrifilm CC Telplaat zijn ontsmet,
maar niet gesteriliseerd. Neogen Food Safety is volgens ISO 9001 (Internationale Organisatie voor Standaardisatie)
gecertificeerd voor het ontwerp en de productie. De Neogen Petrifilm CC Telplaat is niet geëvalueerd met alle mogelijke
voedingsmiddelen, voedingsprocessen, testprotocollen en stammen van micro-organismen.
In de Bacteriological Analytical Manual (BAM) van de Amerikaanse Food and Drug Administration (FDA)7 worden
coliformen gedefinieerd als gramnegatieve staven die zuur en gas produceren bij de fermentatie van lactose. Coliforme
kolonies die op de Neogen Petrifilm CC Telplaat groeien produceren zuur, waardoor de pH-indicator de gel een diepere
kleur geeft. Gas rondom rode kolonies duidt op coliformen.
ISO definieert coliformen op basis van hun vermogen om in methode-specifieke, selectieve media te groeien. In
ISO-methode 48321, het tellen van coliformen met de kolonieteltechniek, worden coliformen gedefinieerd als
zuurproducerend op VRB met VRBL-agar (Violet Red Bile Lactose). Op Neogen Petrifilm CC Telplaten komen dezezuurproducerende coliformen voor als rode kolonies met of zonder gasproductie. In ISO-methode 48312, het tellen vancoliformen met de MPN-techniek (Most Probable Number), worden coliformen gedefinieerd op basis van hun vermogen
om in een selectieve bouillon te groeien en gas te produceren bij de fermentatie van lactose. Op Neogen Petrifilm CC
Telplaten komen deze coliformen voor als rode kolonies dicht bij gas.
In flessenwatermonsters komen coliforme kolonies op Neogen Petrifilm CC Telplaten voor als rode kolonies dicht bij gas.
Rode kolonies zonder nabije gasbellen kunnen coliformen zijn. Van deze kolonies moet een subkweek worden gemaakt
en ze moeten worden getest met de juiste bevestigingsmethoden11,12. Raadpleeg het gedeelte 'Interpretatie' voor meer
informatie. Van kenmerkende kolonies kan een subkweek worden gemaakt en deze kunnen worden getest als
Escherichia coli.
AFNOR Certification heeft de Neogen Petrifilm CC Telplaat gecertificeerd in vergelijking met ISO-methode 48312 en
ISO-methode 48321 voor het tellen van het totale aantal coliformen. AFNOR Certification heeft de Neogen Petrifilm CC
Telplaat ook gecertificeerd in vergelijking met NF V08-0603 voor het tellen van thermotolerante coliformen.

Veiligheid

De gebruiker dient alle veiligheidsinformatie in de instructies voor de Neogen Petrifilm CC Telplaat te lezen, te begrijpen ente volgen. Bewaar de veiligheidsinstructies om deze later te kunnen raadplegen.
WAARSCHUWING: Geeft een gevaarlijke situatie aan die, indien deze niet wordt vermeden, kan leiden tot overlijden,
ernstig letsel en/of materiële schade.

WAARSCHUWINGOp de volgende wijze kunt u de risico’s in verband met blootstelling aan biologische gevaren en
milieuverontreiniging beperken:• Houd u aan de actuele branchenormen en lokale voorschriften voor het afvoeren van biologisch gevaarlijk afval.
Op de volgende wijze kunt u de risico’s in verband met vrijgave van verontreinigd product beperken:• Houd u aan alle instructies voor productopslag in deze gebruiksaanwijzing.
• Niet gebruiken nadat de vervaldatum is verstreken.
Op de volgende wijze kunt u de risico’s in verband met bacteriële infecties en verontreiniging van de werkplek beperken:• Voer testen met de Neogen Petrifilm CC Telplaat onder toezicht van een bekwame microbioloog in een goed uitgerustlaboratorium uit.
• De gebruiker moet diens medewerkers trainen in de huidige en juiste testtechnieken, bijvoorbeeld Goede
Laboratoriumpraktijken4, ISO 72185 of ISO 170256.

1

NL(Nederlands)

Op de volgende wijze kunt u de risico’s in verband met onjuiste interpretatie van de resultaten beperken:• Neogen heeft de geschiktheid van de Neogen Petrifilm CC Telplaten voor gebruik in andere sectoren dan de voedings- en
drankensector, met inbegrip van flessenwater, niet gedocumenteerd. Neogen heeft bijvoorbeeld de geschiktheid van de
Neogen Petrifilm CC Telplaten voor het testen van farmaceutische producten of cosmetica niet gedocumenteerd. Neogen
heeft de geschiktheid van de Neogen Petrifilm CC Telplaten voor het testen van oppervlakte- en leidingwater of water dat
in de farmaceutische of cosmetische industrie wordt gebruikt niet gedocumenteerd.
• Het gebruik van de Neogen Petrifilm CC Telplaten voor het testen van watermonsters in overeenstemming met deplaatselijke voorschriften voor het testen van water vindt plaats naar het oordeel en onder de verantwoordelijkheid vanuitsluitend de eindgebruiker. De Neogen Petrifilm CC Telplaten zijn niet getest met alle mogelijke flessenwatermonsters,
testprotocollen en stammen van micro-organismen.
• Gebruik de Neogen Petrifilm CC Telplaten niet voor het diagnosticeren van aandoeningen bij mensen of dieren.
• De Neogen Petrifilm CC Telplaten maken geen onderscheid tussen verschillende stammen van coliformen.
• Voedingsmiddelen met een hoog suikergehalte kunnen de kans op gasproductie door niet-coliforme
Enterobacteriaceae verhogen.
Raadpleeg het veiligheidsinformatieblad voor aanvullende informatie.
Bezoek voor informatie over documentatie of productprestaties onze website op www.neogen.com, of neem contact op
met uw Neogen-vertegenwoordiger of erkende Neogen-distributeur.

Verantwoordelijkheid van de gebruiker

Gebruikers worden geacht zich vertrouwd te maken met de productinstructies en -informatie. Bezoek onze website op
www.neogen.com of neem contact op met uw Neogen-vertegenwoordiger of erkende Neogen-distributeur voor meer
informatie.
Bij het kiezen van een testmethode is het belangrijk om te erkennen dat externe factoren zoals bemonsteringsmethoden,
testprotocollen, monstervoorbereiding en -behandeling en laboratoriumtechniek invloed op de resultaten kunnen hebben.
De gebruiker is verantwoordelijk voor de selectie van een testmethode of product waarbij een voldoende aantal monsters
met gepaste matrices en microbiële uitdagingen wordt onderzocht, zodat de gekozen testmethode aan de criteria van degebruiker voldoet.
Het is ook de verantwoordelijkheid van de gebruiker om te bepalen of testmethoden en resultaten aan de vereisten van
klanten en leveranciers voldoen.
Zoals bij elke testmethode vormen de verkregen resultaten van het gebruik van een Neogen Food Safety-product geen
garantie voor de kwaliteit van de geteste matrices of processen.

Beperkte garantie / beperkt verhaal

BEHALVE WAAR UITDRUKKELIJK VERMELD IN EEN SECTIE MET BETREKKING TOT DE BEPERKTE GARANTIE VAN EEN
AFZONDERLIJKE PRODUCTVERPAKKING, WIJST NEOGEN ALLE UITDRUKKELIJKE EN IMPLICIETE GARANTIES AF,
MET INBEGRIP VAN, MAAR NIET BEPERKT TOT, ELKE GARANTIE MET BETREKKING TOT DE VERHANDELBAARHEIDEN DE GESCHIKTHEID VOOR EEN BEPAALD DOEL. Als een Neogen Food Safety-product gebrekkig is, zal Neogen of zijn
gevolmachtigde distributeur naar eigen keuze het product vervangen of de aankoopprijs van het product terugbetalen.
Dit is het enige rechtsmiddel waarover u beschikt. Indien u vermoedt dat een product gebrekkig is, moet u Neogen
daarvan binnen 60 dagen na de vaststelling op de hoogte brengen en het product naar Neogen terugsturen. Neem voor
verdere vragen contact op met uw Neogen-vertegenwoordiger of erkende Neogen-distributeur.

Beperking van Neogen aansprakelijkheid

NEOGEN IS NIET AANSPRAKELIJK VOOR ENIG(E) VERLIES OF SCHADE, ONGEACHT OF HET GAAT OM DIRECTE,
INDIRECTE, SPECIALE, INCIDENTELE OF GEVOLGSCHADE, MET INBEGRIP VAN, MAAR NIET BEPERKT TOT
WINSTDERVING. In geen geval zal de wettelijke aansprakelijkheid van Neogen onder om het even welke juridische theoriede aankoopprijs van het vermeend gebrekkige product overschrijden.

OpslagBewaar ongeopende zakjes met Neogen Petrifilm CC Telplaten gekoeld of bevroren bij een temperatuur lager dan
8 °C (46 °F). Laat de ongeopende zakjes met Neogen Petrifilm CC Telplaten vlak voor het gebruik op kamertemperatuur
komen alvorens deze te openen. Plaats ongebruikte Neogen Petrifilm CC Telplaten terug in het zakje. Sluit geopende
zakjes door het uiteinde om te vouwen en met plakband vast te plakken. Bewaar geopende zakjes niet in de koelkast om
blootstelling aan vocht te vermijden. Bewaar opnieuw gesloten zakjes niet langer dan vier weken op een koele en droge
plaats. Aanbevolen wordt om opnieuw gesloten zakjes met Neogen Petrifilm CC Telplaten in een vriezer te bewaren (ziehieronder) als de temperatuur in het laboratorium hoger is dan 25 °C (77 °F) en/of het laboratorium zich bevindt in een
omgeving met een relatieve vochtigheid hoger dan 50% (uitgezonderd gebouwen met airconditioning).

2

NL(Nederlands)

Geopende zakjes met Neogen Petrifilm CC Telplaten moeten in een afsluitbare container in een vriezer worden bewaard.
Om bevroren Neogen Petrifilm CC-platen te verwijderen voor gebruik, opent u de verpakking, verwijdert u de platen die
u nodig hebt en legt u de resterende platen onmiddellijk terug in de vriezer in de verzegelde container voor de rest van
de houdbaarheid. De Neogen Petrifilm CC Telplaten mogen niet worden gebruikt na de vervaldatum. De vriezer waarin
de geopende zakjes worden bewaard, mag niet over een automatische ontdooicyclus beschikken; hierdoor worden de
Neogen Petrifilm CC Telplaten herhaaldelijk aan vocht blootgesteld, waardoor ze beschadigd kunnen raken.
Neogen Petrifilm CC Telplaten die verkleuring vertonen, mogen niet worden gebruikt. De vervaldatum en het lotnummer
zijn vermeld op iedere verpakking Neogen Petrifilm CC Telplaten. Het lotnummer is ook vermeld op de afzonderlijke
Neogen Petrifilm CC Telplaten.

AfvoerNa gebruik kunnen de Neogen Petrifilm CC Telplaten micro-organismen bevatten die een biologisch gevaar kunnen
vormen.
Volg de in de branche geldende normen voor afvalverwerking.

Gebruiksaanwijzing

Volg alle instructies zorgvuldig op. Wanneer dit niet gebeurt, kan dit onnauwkeurige resultaten tot gevolg hebben.

Voorbereiding, incubatie en interpretatie van monsters van voedingsmiddelen en dranken(met uitzondering van flessenwater), met inbegrip van omgevingsmonsters
Monstervoorbereiding
1. Gebruik geschikte steriele verdunningsmiddelen:

Fosfaatgebufferd verdunningswater van Butterfield7, 0,1% peptonwater8, peptonzoutverdunningsmiddellen8,9,gebufferd peptonwater8,9, zoutoplossing (0,85-0,90%), Neogen® breedspectrumneutralisator, bisulfietvrije
letheenbouillon, of gedestilleerd water. Raadpleeg het gedeelte ‘Specifieke instructies voor gevalideerde methoden’voor informatie over specifieke eisen.
Gebruik geen verdunningsmiddelen die citraat, bisulfiet of thiosulfaat bevatten met Neogen Petrifilm CC Telplaten,
aangezien deze de groei kunnen remmen. Als in de standaardprocedure wordt aangegeven dat er een citraatbuffer
moet worden gebruikt, moet deze worden vervangen door een van de hierboven vermelde buffers, verwarmd tot
40-45 °C (104-113 °F).
2. Meng of homogeniseer het monster.
3. Pas de pH-waarde van de monstersuspensie aan tot 6,6-7,2 voor optimale groei en optimale terugwinning van
micro-organismen. Pas de pH-waarde van zure producten aan met 1N NaOH. Pas de pH-waarde van zure producten
aan met 1N HCl.
Op telplaten aanbrengen of uitplaten
1. Plaats de Neogen Petrifilm CC Telplaat op een vlakke, gelijke ondergrond.
2. Til de bovenste film op en pipetteer 1 ml van de monstersuspensie in het midden van de onderste film terwijl u de pipet
haaks op het inoculatiegebied houdt.
3. Rol de bovenste film naar beneden over het monster zodat er geen luchtbellen ontstaan.
4. Plaats de Neogen® Petrifilm® Spreider in het midden van de Neogen Petrifilm CC Telplaat met de vlakke kant naar
beneden. Druk zachtjes op het midden van de Neogen Petrifilm Spreider om het monster gelijkmatig te verdelen.
Verspreid de entstof over het gehele groeioppervlak van de Neogen Petrifilm CC Telplaat voordat de gel ontstaat. Laatde Neogen Petrifilm Spreider niet over de film glijden.
5. Neem de Neogen Petrifilm Spreider weg en laat de Neogen Petrifilm CC Telplaat minstens één minuut ongestoord
liggen, zodat er een gel kan ontstaan.

Incubatie

Incubeer de Neogen Petrifilm CC Telplaten horizontaal, met de doorzichtige kant naar boven en in stapels van maximaal
20 telplaten. Afhankelijk van de huidige plaatselijke referentiemethoden, waarvan sommige in het gedeelte 'Specifieke
instructies voor gevalideerde methoden' worden vermeld, kunnen verschillende incubatietijden en temperaturen
worden gebruikt.

3

NL(Nederlands)

Interpretatie

1. De Neogen Petrifilm CC Telplaten kunnen met een standaard kolonieteller of een ander verlicht vergrootglas worden
geteld. Door coliformen geproduceerd gas kan de kolonie verstoren, waardoor de kolonie de gasbel omringt. Een
dergelijke kolonie moet als één coliform worden geteld. Tel geen kolonies op de schuimrand aangezien deze van deselectieve invloed van het voedingsmedium zijn verwijderd. Tel geen eventueel aanwezige kunstmatige bellen.
De interpretatie van coliforme kolonies op de Neogen Petrifilm CC Telplaat verschilt per referentiemethode.
Bijvoorbeeld:
OF Met NF Validation gecertificeerde methoden:
AOAC® Official MethodsSM:
Coliforme kolonies zijn rood en bevinden zich dicht- Volgens ISO-methode 48312 (MPN-methode) zijn
bij gasbellen (binnen één koloniediameter). Kolonies
coliforme kolonies rood en bevinden ze zich dicht bij
die zich niet dicht bij gas bevinden (meer dan een
gasbellen (binnen één koloniediameter).
koloniediameter van de gasbel verwijderd), worden- Volgens ISO-methode 48321 (totaal aantal coliformen)
niet als coliformen beschouwd.
en NF V08-0603 (fecale coliformen), beide op basis
van VRBL-methoden, moeten alle rode kolonies met enzonder gas worden geteld.
2. Het cirkelvormige groeioppervlak bedraagt ongeveer 20 cm2. Op basis van Neogen Petrifilm CC Telplaten met meerdan 150 kolonies kunnen schattingen worden gemaakt door het aantal kolonies in één of meer aanwezige vierkantjes
te tellen en het gemiddelde per vierkantje te bepalen. Vermenigvuldig het gemiddelde aantal met 20 om het aantalkolonies op de Neogen Petrifilm CC Telplaat te schatten.
3. Als kolonies in grote aantallen aanwezig zijn, hebben de Neogen Petrifilm CC Telplaten mogelijk een diepere gelkleuren (een van) de volgende kenmerken: veel kleine, moeilijk te onderscheiden kolonies en/of veel gasbellen. Door hoge
concentraties van coliformen wordt het groeioppervlak donkerrood. Als dit gebeurt, moeten de resultaten als TNTC
(Too Numerous To Count) worden beschouwd. Als er een werkelijke telling is vereist, kan er een hogere verdunning
worden gebruikt.
4. Indien nodig kunnen kolonies voor verdere identificatie worden geïsoleerd. Til de bovenste film op met een geschikte
testtechniek en neem de kolonie uit de gel. Voer de test volgens de standaardprocedures uit.
5. Als het niet mogelijk is om de Neogen Petrifilm CC Telplaten binnen 1 uur na verwijdering uit de incubator te tellen,
kunnen deze maximaal één week in een afsluitbare container bij een temperatuur van –15 °C (5 °F) of lager worden
bewaard voor latere telling.

Voorbereiding, incubatie en interpretatie van monsters van flessenwater
Neogen Petrifilm CC Telplaten hydrateren
1. Plaats de Neogen Petrifilm CC Telplaat op een vlakke, gelijke ondergrond.

2. Til de bovenste film op en plaats 1 ml geschikt, steriel hydratatieverdunningsmiddel op het midden van de onderstefilm. Geschikte steriele hydratatieverdunningsmiddelen zijn gedistilleerd water, gedeïoniseerd (DI) water en water dat
met omgekeerde osmose (RO) is gezuiverd.
3. Rol de bovenste film naar beneden over het monster zodat er geen luchtbellen ontstaan.
4. Plaats de Neogen Petrifilm Spreider in het midden van de telplaat met de vlakke kant naar beneden. Druk zachtjes op het
midden van de spreider om het verdunningsmiddel gelijkmatig te verdelen. Verspreid het verdunningsmiddel over het
gehele groeioppervlak van de Neogen Petrifilm Telplaat voordat de gel ontstaat. Laat de spreider niet over de film glijden.
5. Neem de spreider weg en houd de telplaten voorafgaand aan het gebruik minstens 1 uur gesloten.
6. Bewaar gehydrateerde Neogen Petrifilm CC Telplaten in een gesloten zakje of een plastic zak. Bescherm telplatentegen licht en bewaar ze maximaal 7 dagen gekoeld bij 2-8 °C (36-46 °F).

Waterfiltratie en telplaatincubatie

1. Na de standaardprocedures voor wateranalyse moet het watermonster door een membraan worden gefilterd met een
MCE-filter (Mixed Cellulose Ester) van 47 mm met een poriegrootte van 0,45 micron.
2. Til de bovenste film van de Neogen Petrifilm CC Telplaat voorzichtig op. Raak het ronde groeioppervlak niet aan. Plaats
het filter in het midden van het gehydrateerde gebied. Sluit zo weinig mogelijk bellen in onder het filter.
3. Rol de bovenste film langzaam over het filter. Sluit zo weinig mogelijk luchtbellen in om ruimte tussen het filter en de
Neogen Petrifilm CC Telplaat te voorkomen.
4. Pas lichte druk toe met de Neogen Petrifilm Spreider of door zachtjes met een vinger over het volledige oppervlak(met inbegrip van de randen) te glijden om zeker te zijn van gelijkmatig contact van het filter met de gel en om
eventuele luchtbellen te verwijderen.
5. Incubeer de Neogen Petrifilm CC Telplaten horizontaal gedurende 24 uur ± 2 uur bij 35 °C ± 1 °C11 of gedurende 24 uur± 2 uur bij 36 °C ± 1 °C12 met de doorzichtige kant naar boven in stapels van maximaal 20 platen.

4

NL(Nederlands)

Interpretatie

1. De Neogen Petrifilm CC Telplaten kunnen met een standaard kolonieteller of een ander verlicht vergrootglas worden
geteld. Tel geen kolonies op de schuimrand aangezien deze van de selectieve invloed van het voedingsmedium zijn
verwijderd. Tel geen eventueel aanwezige kunstmatige bellen.
2. Rode kolonies dicht bij gas worden beschouwd als coliformen. Gasbellen kunnen een rond of stervormig
patroon rondom de kolonie vormen. Door coliformen geproduceerd gas kan de kolonie verstoren, waardoor dekolonie de gasbel omringt. Een dergelijke kolonie moet als één coliform worden geteld. Rode kolonies zondernabije gasbellen kunnen coliformen zijn. Deze kolonies moeten worden uitgenomen en worden getest met dejuiste bevestigingsmethoden11,12.
3. Als kolonies in grote aantallen aanwezig zijn, hebben de Neogen Petrifilm CC Telplaten een diepere gelkleur en zijn erveel kleine, moeilijk te onderscheiden kolonies of veel gasbellen aanwezig. Als dit gebeurt, moeten de resultaten als
TNTC (Too Numerous To Count) worden beschouwd.
4. Kolonies kunnen voor verdere identificatie worden geïsoleerd. Til de bovenste film op en neem de kolonie uit de gel ofhet filteroppervlak. Bij het optillen van de bovenste film kan het filter aan de bovenste of onderste film blijven plakken.
Als het filter aan de bovenste film blijft plakken, moet het van de bovenste film worden gescheiden voordat de kolonies
kunnen worden uitgenomen. Voer de test volgens de standaardprocedures uit.
Opmerking: Uitgestelde telling van Neogen Petrifilm CC Telplaten met filters wordt niet aanbevolen.
Raadpleeg de '1Interpretatiegids voor de Neogen® Petrifilm® Coliform Telplaat' voor meer informatie. Als u vragen hebt
over specifieke toepassingen of procedures, kunt u onze website www.neogen.com bezoeken of contact opnemen met uw
plaatselijke vertegenwoordiger of distributeur van Neogen.
Specifieke instructies voor gevalideerde methoden
AOAC® Official MethodsSM (986.33 Tellingen van bacteriën en coliformen in melk, methoden met droge rehydrateerbare
film; 989.10 Tellingen van bacteriën en coliformen in zuivelproducten, methoden met droge rehydrateerbare film)
Incubeer de Neogen Petrifilm CC Telplaten gedurende 24 uur ± 2 uur bij 32 °C ± 1 °C.
AOAC® Official MethodsSM (991.14 Tellingen van coliformen en Escherichia coli in voedingsmiddelen, methoden met
droge rehydrateerbare film)
Incubeer de Neogen Petrifilm CC Telplaten gedurende 24 uur ± 2 uur bij 35 °C ± 1 °C.
AOAC® Performance Tested MethodSM certificaat nr. 082101
In een Performance Tested Method (PTM)-onderzoek van het AOAC® Research Institute is vastgesteld dat de methodemet Neogen Petrifilm CC Telplaten vergelijkbaar is met de gemiddelde logtellingen van de FDA/BAM hoofdstuk 4,paragraaf III.D methode voor de telling van coliformen in flessenwater.

Toepassingsgebied van de validatie:
Flessenwater: gezuiverd water, behandeld bronwater, niet-bruisend natuurlijk bronwater, bruisend natuurlijk bronwater.
Incubatie:
Incubeer de Neogen Petrifilm CC Telplaten 24 uur ± 2 uur bij 35 °C ± 1 °C.
NF Validation door AFNOR Certification:
Met NF Validation gecertificeerde methode conform ISO 16140-210 in vergelijking met ISO 48321 (3M-01/02-09/89 A)
Toepassingsgebied van de validatie: Voor het testen van alle voedingsmiddelen voor mensen (met uitzondering van
rauwe schaaldieren), voedsel voor huisdieren en omgevingsmonsters.
Gebruik de volgende gegevens bij het implementeren van de bovenstaande gebruiksaanwijzing:
Monstervoorbereiding:Gebruik uitsluitend verdunningsmiddelen die door ISO worden vermeld.
Incubatie:
Incubeer de Neogen Petrifilm CC Telplaten gedurende 24 uur ± 2 uur bij 30 °C ± 1 °C of 37 °C ± 1 °C.
Interpretatie:
Bereken het aantal in het testmonster aanwezige micro-organismen volgens ISO 72185 voor één telplaat per
verdunning. Schattingen vallen buiten het toepassingsgebied van de NF Validation-certificering (zie paragraaf 2 van het
gedeelte ‘Interpretatie’).

5

NL(Nederlands)

Met NF Validation gecertificeerde methode conform ISO 16140-210 in vergelijking met ISO 48312 (3M-01/02-09/89 B)
Toepassingsgebied van de validatie: Voor het testen van alle voedingsmiddelen voor mensen (met uitzondering van
rauwe schaaldieren).
Gebruik de volgende gegevens bij het implementeren van de bovenstaande gebruiksaanwijzing:
Monstervoorbereiding:Gebruik uitsluitend verdunningsmiddelen die door ISO worden vermeld.
Incubatie:
Incubeer de Neogen Petrifilm CC Telplaten gedurende 24 uur ± 2 uur bij 30 °C ± 1 °C of 37 °C ± 1 °C.
Interpretatie:
Bereken het aantal in het testmonster aanwezige micro-organismen volgens ISO 72185 voor één telplaat per verdunning.
Schattingen vallen buiten het toepassingsgebied van de NF Validation-certificering (zie paragraaf 2 van het
gedeelte 'Interpretatie').
Met NF Validation gecertificeerde methode conform ISO 16140-210 in vergelijking met NF V08-0603(3M-01/02-09/89 C)
Toepassingsgebied van de validatie: Voor het testen van alle voedingsmiddelen voor mensen.
Gebruik de volgende gegevens bij het implementeren van de bovenstaande gebruiksaanwijzing:
Monstervoorbereiding:Gebruik uitsluitend verdunningsmiddelen die door ISO worden vermeld.
Incubatie:
Incubeer de Neogen Petrifilm CC Telplaten gedurende 24 uur ± 2 uur bij 44 °C ± 1 °C.
Interpretatie:
Bereken het aantal in het testmonster aanwezige micro-organismen volgens ISO 72185 voor één telplaat per verdunning.
Schattingen vallen buiten het toepassingsgebied van de NF Validation-certificering (zie paragraaf 2 van het
gedeelte 'Interpretatie'). Raadpleeg de norm EN ISO 7218 voor inoculatie, kolonietelling en de berekening en weergave
van de resultaten.

3M 01/02 – 09/89A, B, and C
ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS
http://nf-validation.afnor.org/en
Voor meer informatie over het einde van de geldigheid kunt u het NF VALIDATION-certificaat op de hierboven vermelde
website raadplegen.

6

NL(Nederlands)

Referenties

1. ISO 4832. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms –Colony count technique.
2. ISO 4831. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumeration of
coliforms – Most probable number technique.
3. AFNOR NF V08-060. General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at
44°C – Routine method.
4. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs - General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
6. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
7. FDA. Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998. Reagents Index for BAM found at:
http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.
8. ISO 6887-5. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk products.
9. ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension anddecimal dilutions.
10. ISO 16140-2. Microbiology of the food chain – Method validation – Protocol for the validation of alternative(proprietary) methods against a reference method.
11. U.S. Food and Drug Administration. 2002. Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4. Membranefilter method for coliforms.
12. American Public Health Association. 2017. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th Ed.
Method 9222B2a.
Raadpleeg de huidige versies van de hierboven vermelde standaardmethoden.

Verklaring van symbolen
info.neogen.com/symbols

AOAC is een gedeponeerd handelsmerk van AOAC INTERNATIONAL.
Official Methods is een dienstmerk van AOAC INTERNATIONAL.
Performance Tested Method is een dienstmerk van AOAC INTERNATIONAL.

7

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931A

SV(Svenska)
Datum för utgåva: 2024-01

Produktinformation

Odlingsplatta för koliformer
Produktbeskrivning och avsedd användning

Neogen® Petrifilm® Odlingsplatta för koliformer (CC) är ett provklart odlingsmediumsystem som innehåller modifierat
VRB-agar, ett kallvattenlösligt gelningsmedel och en tetrazoliumindikator som underlättar koloniräkning. Neogen Petrifilm
CC Odlingsplattor används för räkning av koliformer i livsmedels-, dryckesvaruindustrin och för branschen med vatten
på flaska. Beståndsdelarna i Neogen Petrifilm CC Odlingsplattan är dekontaminerade men inte steriliserade. Neogen
Food Safety är certifierat enligt den internationella standardiseringsorganisationen (ISO) 9001 avseende utformningoch tillverkning. Neogen Petrifilm CC Odlingsplatta har inte bedömts ihop med alla möjliga livsmedelsprodukter,
livsmedelsprocesser, testprotokoll eller med alla möjliga mikroorganismstammar.
The United States Food and Drug Administration (FDA) Bacteriological Analytical Manual (BAM)7 definierar koliformer som
gramnegativa stavar som producerar syra och gas ur laktosfermentering. Koliforma kolonier som växer på Neogen Petrifilm
CC Odlingsplatta producerar syra, vilket får pH-indikatorn att fördjupa gelfärgen; gas som fångats in runt röda kolonier
indikerar koliformer.
ISO definierar koliformer utifrån deras förmåga att växa i metodspecifika, selektiva medier. ISO metod 48321,
för koloniräkningsteknik definierar koliforma bakterier som syraproducenter på VRB med laktosagar (VRBL). De här
syraproducerande koliforma bakterierna indikeras av röda kolonier med eller utan gasproduktion på Neogen Petrifilm CC
Odlingsplattor. ISO metod 48312, räkning av koliformer enligt metoden med det mest sannolika antalet (MPN) definierar
koliforma bakterierna utifrån deras förmåga att växa och producera gas från laktos i en selektiv buljong. De här koliforma
bakterierna indikeras av röda kolonier med gasproduktion på Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor.
För flaskvattenprover indikeras bekräftade koliforma bakteriekolonier av röda kolonier associerade med gas på
Neogen Petrifilm CC Odlingsplattorna. Röda kolonier utan nära tillhörande gasbubblor kan vara koliformer och bör
underkultureras och testas med lämpliga bekräftelsemetoder11, 12. Se avsnittet Tolkning för ytterligare information.
Karakteristiska kolonier kan subkultureras och testas som Escherichia coli.
AFNOR Certification har certifierat Neogen Petrifilm CC Odlingsplatta i jämförelse med ISO metoden 48312 och
ISO metoden 48321 för räkning av totalt antal koliformer. AFNOR Certification har certifierat Neogen Petrifilm CC
Odlingsplatta i jämförelse med NF V08-0603 för räkning av totalt antal värmetoleranta koliformer.

SäkerhetAnvändaren måste läsa, förstå och följa all säkerhetsinformation i instruktionerna för Neogen Petrifilm CC Odlingsplatta.
Behåll säkerhetsanvisningarna för framtida bruk.
VARNING: Indikerar en farlig situation som, om den inte undviks, kan resultera i dödsfall eller allvarliga personskador
och/eller materiella skador

VARNING
För att minska riskerna som förknippas med exponering för biologisk smittofara och miljöförgiftning:• Följ gällande branschstandarder och lokala föreskrifter för kassering av biologiskt riskavfall.
För att minska riskerna som förknippas med utsläpp av kontaminerad produkt:• Följ alla instruktioner gällande produktförvaring i bruksanvisningen.
• Använd inte produkten efter utgångsdatumet.
För att minska riskerna som förknippas med infektioner och kontaminering av arbetsplatsen:• Utför tester med Neogen Petrifilm CC Odlingsplatta i ett korrekt utrustat laboratorium under tillsyn av en
kompetent mikrobiolog.
• Användaren måste utbilda sin personal i korrekta testmetoder, exempelvis Good Laboratory Practices4, ISO 72185,
eller ISO 170256.
För att minska riskerna som förknippas med feltolkning av resultat:• Neogen har inte dokumenterat Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor för användning inom andra branscher än livsmedelsoch dryckesvaruindustrin inklusive vatten i flaska. Till exempel har Neogen inte dokumenterat användning av Neogen
Petrifilm CC Odlingsplattor för testning av läkemedel eller kosmetika. Neogen har inte dokumenterat användning
av Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor för testning av ytvatten och kommunalt vatten eller vatten som används iläkemedels- eller kosmetikabranschen.

1

SV(Svenska)• Användningen av Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor för att testa vattenprover utförs uteslutande enligt den ansvarige
slutanvändarens bedömning, i enlighet med lokala bestämmelser för vattentester. Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor
har inte testats med alla möjliga prover på vatten i flaska, testprotokoll eller med samtliga möjliga bakteriestammar.
• Använd inte Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor för diagnostisering av tillstånd hos människor och djur.
• Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor skiljer inte någon koliform bakteriestam från en annan.
• Livsmedel med högt sockerinnehåll kan öka potentialen för gasbildning från icke-koliform Enterobacteriaceae.
Se säkerhetsdatabladet för mer information.
För information om dokumentation för produktprestanda, besök vår webbplats på www.neogen.com, eller kontakta din
Neogen-representant eller en godkänd distributör.

Användaransvar

Det åligger användarna att bekanta sig med produktinstruktioner och produktinformation. Besök vår webbplats på
www.neogen.com, eller kontakta din Neogen-representant eller en godkänd distributör för mer information.
Vid val av testmetod är det viktigt att inse att externa faktorer som provtagningsmetod, testprotokoll, provpreparering,hantering och laboratorieteknik kan påverka resultat.
Det åligger användaren att vid val av testmetoder utvärdera tillräckligt många prover med lämpliga matriser ochutmaningar, för att övertyga användaren att den valda metoden uppfyller kraven.
Det åligger också användaren att fastställa att en testmetod och dess resultat uppfyller kraven från dennes kunderoch leverantörer.
Liksom med alla testmetoder utgör inte resultat som erhållits från användning av någon produkt från Neogen
Livsmedelshygien en garanti för kvaliteten hos de matriser eller processer som testats.

Garantibegränsningar/begränsad ersättning

MED UNDANTAG AV VAD SOM UTTRYCKLIGEN ANGES I AVSNITT OM GARANTIBEGRÄNSNING FÖR INDIVIDUELLAFÖRPACKNINGAR, FRÅNSÄGER SIG NEOGEN ALLA UTTRYCKLIGA OCH UNDERFÖRSTÅDDA GARANTIER, INKLUSIVE,
MEN INTE BEGRÄNSAT TILL, ALLA GARANTIER BETRÄFFANDE SÄLJBARHET ELLER LÄMPLIGHET FÖR ETT VISST
ÄNDAMÅL. Om någon produkt från Neogen Livsmedelshygien är defekt kommer Neogen eller dess auktoriserade leverantör
att efter eget gottfinnande ersätta produkten eller återbetala produktens inköpspris. Detta är den enda ersättning som ges.
Kunden måste meddela Neogen och returnera produkten till Neogen inom sextio dagar efter upptäckt av misstänkt defekt.
Kontakta din Neogen-representant eller en godkänd Neogen-distributör om du har fler frågor.

Begränsning av Neogen:s ansvar

NEOGEN KOMMER INTE ATT PÅTA SIG NÅGOT ANSVAR FÖR FÖRLUST ELLER SKADOR, VARE SIG DIREKTA,
INDIREKTA, SÄRSKILDA, TILLFÄLLIGA ELLER EFTERFÖLJANDE SKADOR, INKLUSIVE, MEN INTE BEGRÄNSADE TILL,FÖRLORADE VINSTER. Under inga omständigheter ska Neogen:s ansvar i något som helst lagrum överskrida inköpspriset
för den påstått defekta produkten.

FörvaringOöppnade påsar med Neogen Petrifilm CC Odlingsplatta ska förvaras kylda eller i frystemperatur under eller motsvarande
8°C (46°F). Låt oöppnade påsen med Neogen Petrifilm CC Odlingsplatta uppnå rumstemperatur innan den öppnas och
används. Lägg tillbaka oanvända Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor i påsen. Försegla påsen genom att vika den övrekanten och tejpa igen den. För att undvika att plattorna utsätts för fukt ska öppnade påsar inte förvaras i kylskåp.
Förvara återförslutna påsar på sval och torr plats i högst fyra veckor. Det rekommenderas att återförseglade påsar med
Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor förvaras i frys (se nedan) om temperaturen i laboratoriet överstiger 25°C (77°F) och/eller laboratoriet ligger i ett område där den relativa luftfuktigheten överstiger 50 % (med undantag för luftkonditionerade
byggnader).
Placera Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor i en förslutningsbar behållare om öppnade påsar ska förvaras i frys. Ta ut frysta
Neogen Petrifilm CC-plattor för användning genom att öppna behållaren, ta ut de plattor som behövs och omedelbart
lägga tillbaka återstående plattor i frysen i den förslutna behållaren för resten av hållbarhetstiden. Neogen Petrifilm CC
Odlingsplattor får inte användas efter utgångsdatum. Frysen som används för öppning av påse får inte ha en automatisk
avfrostningscykel eftersom detta utsätter Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor för fukt som kan skada plattorna.
Använd inte Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor som visar tecken på missfärgning. Utgångsdatum och partinummer finns
angivna på varje förpackning av Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor. Partinumret finns även angivet på individuella
Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor.

Kassering

Efter användning kan Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor innehålla mikroorganismer som kan utgöra en potentiell
biologisk fara.
Följ gällande branschstandarder för kassering.

2

SV(Svenska)

Bruksanvisning

Följ alla anvisningar noggrant. Underlåtenhet att göra detta kan leda till felaktiga resultat.

Beredning, inkubation och tolkning av vattenprover från livsmedels- och dryckesbranschen(utom vatten på flaska), inklusive miljöprover
Provberedning
1. Använd lämpliga sterila spädningsvätskor:

Butterfields fosfatbuffrade spädningsvatten7, 0,1% peptonvatten8, peptonsaltspädningsmedel8,9, buffrat peptonvatten8,9,saltlösning (0,85–0,90 %), Neogen® Bredspektrumneutraliserare, bisulfitfri letheen-buljong eller destillerat vatten. Se
avsnittet ”Specifika anvisningar för validerade metoder” för särskilda krav:
Använd inte spädningsvätskor som innehåller citrat, vätesulfit eller tiofosfat tillsammans med Neogen Petrifilm CC
Odlingsplattor då dessa ämnen kan hämma tillväxt. Om citratbuffert anges i standardförfarandet, kan du ersätta den
med en av buffrarna som listas ovan, uppvärmd till 40-45°C (104-113°F).
2. Blanda eller homogenisera provet.
3. För optimal tillväxt och återhämtning av mikroorganismer, justera provsuspensionens pH-värde till 6,6 - 7,2. För sura
produkter, justera pH-värdet med 1 N NaOH. För alkaliska produkter, justera pH-värdet med 1N HCl.
Applicering på platta
1. Placera Neogen Petrifilm CC Odlingsplatta på en plan, jämn yta.
2. Lyft den övre filmen och fördela 1 ml av det utspädda provet med lodrät pipett över mitten av den undre filmen.
3. Rulla ned toppfilmen på provet för att förhindra att luftbubblor fångas in.
4. Placera Neogen® Petrifilm® Spridare med den plana sidan nedåt på mitten av Neogen Petrifilm CC Odlingsplattan.
Tryck försiktigt på mitten av Neogen Petrifilm spridaren för att fördela provet jämnt. Sprid inympningsämnet över hela
tillväxtområdet på Neogen Petrifilm CC Odlingsplatta innan gelen bildas. Dra inte Neogen Petrifilm spridaren över filmen.
5, Avlägsna Neogen Petrifilm spridare och lämna Neogen Petrifilm CC Odlingsplatta orörd i minst en minut för att låtagelen bildas.

Inkubation

Inkubera Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor i horisontalläge med den klara sidan uppåt i travar med högst 20 plattor.
Flera inkubationstider och temperaturer kan användas beroende på de aktuella lokala referensmetoderna, av vilka några
anges i avsnittet ”Specifika instruktioner för validerade metoder”.

Tolkning

1. Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor kan räknas med en vanlig koloniräknare eller annat förstoringsglas med ljuskälla.
Gas som produceras av en koliform kan avbryta kolonin så att den markerar bubblans kontur. Den ska räknas som en
enda koliform. Räkna inte kolonier på skumdammen eftersom de tas bort från mediets selektiva påverkan. Räkna inteartefaktbubblor som kan vara förekomma.
Tolkningen av koliformkolonier som inte är E. coli på Neogen Petrifilm CC Odlingsplatta varierar beroende påreferensmetod. Till exempel:
ELLER Metoder som certifierats av NF Validation:
AOAC® Official MethodsSM:
Koliformkolonier är röda och nära förenade med- Jämfört med ISO-metoden 48312 (MPN-metoden),infångad gas (inom en kolonidiameter). Kolonier somär koliformkolonier röda och nära förenade med
inte är associerade med gas (ett avstånd större än eninfångad gas (inom en kolonidiameter).
kolonidiameter mellan koloni och gasbubbla) räknas
- Jämfört med ISO metod 48321 (totala koliformer) och
NF V08-0603 (fekala koliformer) som båda baseras
inte som koliformer.
på VRBL-metoder, räknas alla röda kolonier med ellerutan gas.
2. Den runda tillväxtytan är cirka 20 cm2. Uppskattningar kan göras för Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor som innehåller
mer än 150 kolonier genom att räkna kolonierna i en eller flera representativa rutor och fastställa det genomsnittliga
antalet per ruta. Multiplicera medelantalet med 20 för att bestämma det uppskattade antalet per Neogen Petrifilm CC
Odlingsplatta.
3. När kolonier finns i stort antal kan Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor ha en fördjupning av gelfärgen och endera ellerbåda av följande egenskaper: många små, otydliga kolonier och/eller många gasbubblor. Höga koncentrationer av
koliformer kan få tillväxtområdet att bli mörkrött. När detta inträffar, registrera resultaten som för många för att räkna(TNTC). När ett faktiskt antal räknas, använd en högre utspädning på odlingsplattan.
4. Vid behov kan kolonier isoleras för vidare identifiering. Lyft den övre filmen och plocka bort kolonin från gelen med
lämplig testteknik. Test med standardförfaranden.

3

SV(Svenska)

5. Om Neogen Petrifilm REC Odlingsplattor inte kan räknas inom 1 timme efter uttagning ur inkubatorn, kan de förvaras
för senare uppräkning genom frysning i en förseglingsbar behållare vid temperaturer lägre än eller lika med minus 15 °C(5 °F) i högst en vecka.

Beredning, inkubation och tolkning av vattenprover i flaska
Hydrera Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor
1. Placera Neogen Petrifilm CC Odlingsplatta på en plan, jämn yta.

2. Lyft den övre filmen och fördela 1 ml av lämplig steril hydrerande spädningsvätska över mitten av den undre filmen.
Lämpliga sterila hydreringsutspädningsmedel inkluderar destillerat vatten, avjoniserat (DI) vatten och vatten med
omvänd osmos (RO).
3. Rulla ned toppfilmen på provet för att förhindra att luftbubblor fångas in.
4. Placera Neogen Petrifilm Spridaren med den plana sidan nedåt på mitten av plattan. Tryck försiktigt på mitten av
spridaren för att fördela utspädningsvätskan jämnt. Sprid ut utspädningsvätska över hela tillväxtområdet på Neogen
Petrifilm CC Odlingsplatta innan gelen bildas. Dra inte spridaren över filmen.
5. Ta bort spridaren och låt odlingsplattorna vara stängda i minst 1 timme före användning.
6. Förvara hydrerade Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor i en förseglad påse eller plastpåse. Skydda odlingsplattorna mot
ljus och kyl vid 2-8°C (36-46°F) i upp till 7 dagar.

Vattenfiltrering och inkubation för odlingsplattan

1. Membranfiltrera vattenprover med ett 47 mm filter med en mikron porstorlek på 0,45 bestående av blandadcellulosaester (MCE). Följ standardprocedurerna.
2. Lyft försiktigt den övre filmen av Neogen Petrifilm CC Odlingsplatta. Undvik att vidröra den runda tillväxtytan. Placera
filtret på mitten av det hydrerade området. Minimera infångade bubblor under filtret.
3. Använd en långsam rullande rörelse för att placera den övre filmen på filtret. Minimera infångade luftbubblor och skapa
mellanrum mellan filtret och Neogen Petrifilm CC Odlingsplatta.
4. Använd lätt tryck genom att använda Neogen Petrifilm Odlingsplatta spridare eller skjut ett finger lätt över hela
skivområdet (inklusive kanter) för att säkerställa jämn kontakt med filtret med gelen och eliminera eventuellaluftbubblor.
5. Inkubera Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor vid 35°C ± 1°C i 24 timmar ± 2 timmar11 eller 36°C ± 1°C i 24 timmar± 2 timmar12 i horisontalläge med den klara sidan vänd uppåt, i staplar som inte överstiger 20.

Tolkning

1. Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor kan räknas med en vanlig koloniräknare eller annat förstoringsglas med ljuskälla.
Räkna inte kolonier på skumdammen eftersom de tas bort från mediets selektiva påverkan. Räkna inte artefaktbubblor
som kan vara förekomma.
2. Röda kolonier associerade med gasbubblor räknas som koliformer. Gasbubblor kan bilda ett cirkulärt eller stjärnformat
mönster runt kolonin. Gas som produceras av koliformer kan avbryta kolonin så att den markerar bubblans kontur.
Den ska räknas som en enda koliform. Röda kolonier utan nära tillhörande gasbubblor kan vara koliformer och bör tas ut
och testas med lämpliga bekräftelsemetoder11, 12.
3. När kolonier finns i stort antal kan Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor få en fördjupad gelfärg förenad med många små,otydliga kolonier eller gasbubblor. När detta inträffar, registrera resultaten som för många för att räkna (TNTC).
4. Vid behov kan kolonier isoleras för vidare identifiering. Lyft den övre filmen och plocka bort kolonin från gelen eller
filterytan. När du lyfter upp den övre filmen, kan filtret vidhäfta vid den övre eller undre filmen. Om filtret vidhäftar påden övre filmen, separera filtret från den övre filmen och plocka ut kolonier. Test med standardförfaranden.
Obs: Fördröjd räkning av Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor med filter rekommenderas inte.
För ytterligare information, se motsvarande ”Neogen® Petrifilm® Tolkningsguide för odlingsplattan koliforma bakterier”.
Om du har frågor om specifika tillämpningar eller procedurer kan du besöka vår hemsida på www.neogen.com eller
kontakta din lokala representant eller återförsäljare för Neogen.
Specifika anvisningar för validerade metoder
AOAC® Official MethodsSM (986.33 Bakterie- och koliformräkningar i mjölk, metoder med torr rehydrerbar film och
989.10 Bakterie- och koliformräkning i mejeriprodukter, metoder med torr rehydrerbar film)
Inkubera Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor i 24 timmar ± 2 timmar vid en temperatur på 32°C ± 1°C.
AOAC® Official MethodsSM (991.14 koliformer och Escherichia coli räkning i livsmedel, metoder som använder torr,
rehydrerbar film)
Inkubera Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor i 24 timmar ± 2 timmar vid en temperatur på 35°C ± 1°C.

4

SV

(Svenska)

AOAC® Performance Tested MethodSM Certifikat nr. 082101
I en Performance Tested Method (PTM)-undersökning utförd av AOAC® Research Institute visade sig metoden med
Neogen Petrifilm CC-odlingsplatta vara likvärdig med det genomsnittliga loggantalet för FDA/BAM kapitel 4, avsnitt III.D
för räkning av koliformer i vatten på flaska.

Omfattning av valideringen:
Vatten på flaska: filtrerat vatten, behandlat källvatten, naturligt källvatten utan kolsyra, naturligt källvatten med kolsyra.
Inkubation:
Inkubera Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor i 24 timmar ± 2 timmar vid en temperatur på 35°C ± 1°C.
NF Validation av AFNOR Certification:
Certifierad metod från NF Validation i enlighet med ISO 16140-210 jämfört med NF 48321 (3M-01/02-09/89 A)
Omfattning av valideringen: För testning av alla typer av livsmedelsprodukter avsedda för människor (utom råa skaldjur),
djurmat och miljöprover.
Använd följande uppgifter när du implementerar ovannämnda bruksanvisning:
Provberedning:
Använd endast spädningsvätskor som är ISO-godkända.
Inkubation:
Inkubera Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor i 24 timmar ± 2 timmar vid en temperatur på 30°C ± 1°C eller 37°C ± 1°C.
Tolkning:
Beräkna antalet mikroorganismer i testprovet i enlighet med ISO 72185 för en odlingsplatta per spädningsvätska.
Uppskattningar omfattas inte av NF Validation-certifieringen (jmf. stycke 2 under avsnittet Tolkning).
Certifierad metod från NF Validation i enlighet med ISO 16140-210 jämfört med NF 48312 (3M-01/02-09/89 B)
Omfattning av valideringen: För testning av alla typer av livsmedelsprodukter avsedda för människor (utom råa skaldjur).
Använd följande uppgifter när du implementerar ovannämnda bruksanvisning:
Provberedning:
Använd endast spädningsvätskor som är ISO-godkända.
Inkubation:
Inkubera Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor i 24 timmar ± 2 timmar vid en temperatur på 30°C ± 1°C eller 37°C ± 1°C.
Tolkning:
Räkna antalet mikroorganismer i testprovet i enlighet med ISO 72185 för en platta per spädningsvätska. Uppskattningar
omfattas inte av NF Validation-certifieringen (jmf. stycke 2 under avsnittet Tolkning).
Certifierad metod från NF Validation i enlighet med ISO 16140-210 jämfört med NF V08-0603 (3M-01/02-09/89 C)
Omfattning av valideringen: För testning av alla typer av livsmedelsprodukter avsedda för människor
Använd följande uppgifter när du implementerar ovannämnda bruksanvisning:
Provberedning:
Använd endast spädningsvätskor som är ISO-godkända
Inkubation:
Inkubera Neogen Petrifilm CC Odlingsplattor i 24 timmar ± 2 timmar vid en temperatur på 44°C ± 1°C.

5

SV

(Svenska)Tolkning:
Räkna antalet mikroorganismer som finns i testprovet enligt ISO 72185 för en odlingsplatta per spädningsvätska.
Uppskattningar omfattas inte av certifieringen av NF Validation (jmf. stycke 2 under avsnittet Tolkning). Se EN ISO 7218
standarden för inympning, koloniräkning samt beräkning och uttryck för resultat.

3M 01/02 – 09/89A, B, and C
ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS
http://nf-validation.afnor.org/en
För ytterligare information om valideringsslut, läs NF VALIDATION-certifikatet som finns tillgängligt på ovan
angivna webbsida.

Referenser
1. ISO 4832. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms –Colony count technique.
2. ISO 4831. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumeration of
coliforms – Most probable number technique.
3. AFNOR NF V08-060. General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at
44°C – Routine method.
4. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
6. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
7. FDA. Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998. En förteckning av reagenter för BAM finns
på: http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.
8. ISO 6887-5. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk products.
9. ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension anddecimal dilutions.
10. ISO 16140-2. Microbiology of the food chain – Method Validation – Protocol for the validation of alternative(proprietary) methods against a reference method.
11. U.S. Food and Drug Administration. 2002. Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4. Membranefilter method for coliforms.
12. American Public Health Association. 2017. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th Ed.
Method 9222B2a.
Se de aktuella versionerna av standardmetoderna som anges ovan.

Symbolförklaringar

info.neogen.com/symbols
AOAC är ett registrerat varumärke som tillhör AOAC INTERNATIONAL.
Official Methods är ett servicemärke som tillhör AOAC INTERNATIONAL.
Performance Tested Method är ett servicemärke som tillhör AOAC INTERNATIONAL.

6

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931A

DA (Dansk)
Udstedelsesdato: 2024-01

Produktvejledning

Coliform Tælleplade
Produktbeskrivelse og tilsigtet anvendelse

Neogen® Petrifilm® Coliform (CC) Tælleplade er et færdiglavet dyrkningsmediesystem bestående af Violet Red Bilenæringsstoffer (VRB), et geleringsmiddel, der er opløseligt i koldt vand, og en tetrazoliumindikator, der letter kolonitælling.
Neogen Petrifilm CC Tælleplader bruges til tælling af coliforme bakterier i fødevare-, drikkevare- og flaskevandsindustrien.
Neogen Petrifilm CC Tællepladens komponenter er dekontamineret, men ikke steriliseret. Neogen Food Safety ercertificeret iht. ISO 9001 (International Organisation for Standardisering) med hensyn til design og produktion. Neogen
Petrifilm CC Tælleplade er ikke blevet evalueret med alle mulige fødevarer, fødevareprocesser, testprotokoller eller med
alle mulige mikroorganismestammer.
The United States Food and Drug Administration (FDA) Bacteriological Analytical Manual (BAM)7 definerer coliforme
bakterier som gramnegative stave, der danner syre og gas af under fermentering af laktose. Kolonier af coliforme bakterier,der vokser på Neogen Petrifilm CC Tællepladen, producerer syre, som får pH-indikatoren til at intensivere gelens farve.
Gas indkapslet omkring røde kolonier angiver coliforme bakterier.
ISO definerer coliforme bakterier på deres evne til at vokse i metodespecifikke, selektive medier. ISO-metode 48321,
tælling af coliforme bakterier ved hjælp af en kolonitællingsteknik, definerer coliforme bakterier som syredannende på VRB
med laktose-agar (VRBL). På Neogen Petrifilm CC Tælleplader vises disse syredannende coliforme bakterier i form af røde
kolonier med eller uden gasproduktion. ISO-metode 48312, tælling af coliforme bakterier ved hjælp af metoden med det
mest sandsynlige antal (MPN), definerer coliforme bakterier på deres evne til at vokse og danne gas fra laktose i en selektiv
bouillon. På Neogen Petrifilm CC Tælleplader vises disse coliforme bakterier i form af røde kolonier, der er knyttet til gas.
For prøver af flaskevand vises bekræftede kolonier af coliforme bakterier i form af røde kolonier, der er knyttet til gas, på
Neogen Petrifilm CC Tælleplader. Røde kolonier uden tæt knyttede gasbobler kan være coliforme bakterier, og de skal
dyrkes som subkulturer og testes med egnede bekræftelsesmetoder11,12. Der findes flere oplysninger i afsnittet Aflæsning.
Karakteristiske kolonier kan dyrkes som subkulturer og testes som Escherichia coli.
AFNOR Certification har certificeret Neogen Petrifilm CC Tælleplade sammenlignet med ISO-metode 48312 og ISOmetode 48321 til tælling af det totale antal coliforme bakterier. AFNOR Certification har også certificeret Neogen Petrifilm
CC Tælleplade sammenlignet med NF V08-0603 til tælling af varmetolerante coliforme bakterier.

Sikkerhed

Brugeren skal læse, forstå og følge alle sikkerhedsoplysninger i vejledningen til Neogen Petrifilm CC Tællepladen.
Gem sikkerhedsvejledningen til fremtidig reference.
ADVARSEL: Indikerer en farlig situation, som kan resultere i dødsfald eller alvorlig personskade og/eller skade på
ejendele, hvis den ikke undgåsADVARSEL
For at reducere risiciene forbundet med eksponering for biologiske farer og miljøkontaminering:• Følg de aktuelle branchestandarder og lokale bestemmelser for bortskaffelse af biologisk farligt affald.
For at reducere risiciene forbundet med frigivelse af et kontamineret produkt:• Følg alle anvisninger for produktopbevaring indeholdt i brugsanvisningen.
• Anvend ikke produktet efter udløbsdatoen.
For at reducere risiciene forbundet med bakterieinfektion og kontaminering på arbejdspladsen:• Udfør analysen med Neogen Petrifilm CC Tælleplade i et korrekt udstyret laboratorium under en faglært mikrobiologs
kontrol.
• Brugeren skal uddanne sit personale i de gældende korrekte prøveteknikker: for eksempel god laboratoriepraksis4,
ISO 72185 eller ISO 170256.
For at reducere risiciene forbundet med fejlaflæsning af resultater:• Neogen har ikke dokumenteret Neogen Petrifilm CC Tælleplader til anvendelse i andre industrier end fødevareog drikkevareindustrien, herunder flaskevand. Neogen har for eksempel ikke dokumenteret Neogen Petrifilm CCTælleplader til analyse af lægemidler eller kosmetik. Neogen har ikke dokumenteret Neogen Petrifilm CC Tælleplader til
analyse af overflade- og vandværksvand eller vand, der anvendes i lægemiddel- eller kosmetikindustrien.
• Anvendelse af Neogen Petrifilm CC Tælleplader til analyse af vandprøver i henhold til lokale regler for vandanalyse sker
efter slutbrugerens eget skøn og på dennes eget ansvar. Neogen Petrifilm CC Tælleplader er ikke blevet testet med allemulige prøver af flaskevand eller testprotokoller eller med alle mulige mikroorganismestammer.
1

DA (Dansk)• Undlad at anvende Neogen Petrifilm CC Tællepladerne til at diagnosticere tilstande hos mennesker eller dyr.
• Neogen Petrifilm CC Tælleplader skelner ikke mellem forskellige stammer af coliforme bakterier.
• Fødevarer med højt sukkerindhold kan øge potentialet for gasdannelse fra ikke-coliforme Enterobacteriaceae.
Se sikkerhedsdatabladet for at få yderligere oplysninger.
For oplysninger om dokumentation af produktperformance kan du besøge vores websted på www.neogen.com eller
kontakte din Neogen-repræsentant eller autoriserede Neogen-distributør for at få flere oplysninger.

Brugerens ansvar

Brugeren er ansvarlig for at gøre sig bekendt med produktvejledninger og -oplysninger. Besøg vores websted på
www.neogen.com, eller kontakt din Neogen-repræsentant eller -leverandør for at få flere oplysninger.
Når der vælges en testmetode, er det vigtigt, at man er klar over, at eksterne faktorer såsom prøveudtagningsmetoder,
testprotokoller, klargøring af prøven, håndtering samt laboratorieteknikker, kan påvirke resultaterne.
Det er brugerens eget ansvar at vælge en testmetode, som evaluerer et tilstrækkeligt antal prøver med de passende
matricer og mikrobielle udfordringer for derved at sikre brugeren, at den valgte testmetode lever op til brugerens krav.
Det er også brugerens eget ansvar at kontrollere, at alle testmetoder og resultater lever op til kundernes og leverandørernes
krav.
Som med alle andre testmetoder gælder det, at de resultater, der opnås med dette Neogen Food Safety-produkt, ikke giver
garanti for kvaliteten af de testede matricer og processer.

Begrænsning af garantier/begrænset retsmiddel

BORTSET FRA HVAD DER ER UDTRYKKELIGT ANFØRT I DEN BEGRÆNSEDE GARANTI PÅ DEN INDIVIDUELLEPRODUKTEMBALLAGE, FRASIGER NEOGEN SIG ALLE UDTRYKKELIGE OG UNDERFORSTÅEDE GARANTIER,HERUNDER, MEN IKKE BEGRÆNSET TIL, ENHVER SALGBARHEDSGARANTI ELLER EGNETHED TIL EN BESTEMTANVENDELSE. Hvis et Neogen Food Safety-produkt er behæftet med fejl eller mangler, vil Neogen eller en af dennes
autoriserede distributører efter dennes eget skøn erstatte produktet eller refundere købsprisen. Dette er det eneste tilrådighed værende retsmiddel. Du skal straks, inden for 60 dage efter at have opdaget enhver formodet fejl ved et produkt,
meddele Neogen dette og returnere produktet til Neogen. Kontakt din Neogen-repræsentant eller autoriserede Neogendistributør, hvis du har flere spørgsmål.

Begrænsning af Neogen’s ansvar

NEOGEN KAN IKKE HOLDES ANSVARLIG FOR NOGEN TAB ELLER SKADER, UANSET OM DET DREJER SIG OMDIREKTE, INDIREKTE, SÆRSKILT DOKUMENTEREDE, HÆNDELIGE SKADER ELLER FØLGESKADER, HERUNDER, MEN
IKKE BEGRÆNSET TIL MISTET FORTJENESTE. Under ingen omstændigheder skal Neogen’s erstatningsansvar kunne
overstige købsprisen for det produkt, der efter sigende er behæftet med fejl.

Opbevaring

Opbevar de uåbnede foliepakninger med Neogen Petrifilm CC Tælleplader nedkølet eller nedfrosset ved temperaturer
på 8°C (46°F) eller lavere. Lad de uåbnede foliepakninger med Neogen Petrifilm CC Tælleplader få stuetemperatur
umiddelbart inden brug. Læg ubrugte Neogen Petrifilm CC Tælleplader tilbage i foliepakningen. Forsegl foliepakningen
ved at folde foliepakningens ende og sætte tape henover. Undlad at nedkøle åbnede foliepakninger for at undgå fugt.
Opbevar genforseglede foliepakninger på et køligt, tørt sted i maks. 4 uger. Det anbefales, at genforseglede foliepakninger
med Neogen Petrifilm CC Tælleplader opbevares i fryseren (se nedenfor), hvis temperaturen i laboratoriet overstiger 25°C
(77°F), og/eller laboratoriet befinder sig i et område, hvor den relative luftfugtighed overstiger 50 % (her undtages faciliteter
med aircondition).
Ved opbevaring af åbnede foliepakninger i en fryser skal Neogen Petrifilm CC Tællepladerne lægges i en tætsluttende
beholder. Frosne Neogen Petrifilm CC-plader tages ud til brug ved at åbne beholderen, tage de plader ud, der skal bruges,
og straks lægge de resterende plader tilbage i fryseren i den forseglede beholder for resten af holdbarhedsperioden.
Neogen Petrifilm CC Tælleplader bør ikke anvendes efter udløbsdatoen. Den fryser, der bruges til åbne foliepakninger, måikke have automatisk afrimning, da dette kan udsætte Neogen Petrifilm CC Tællepladerne for fugt gentagne gange, hvilket
kan beskadige pladerne.
Anvend ikke Neogen Petrifilm CC Tælleplader, som er misfarvede. Udløbsdato og lot nr. findes på hver pakke med Neogen
Petrifilm CC Tælleplader. Lot nr. findes også på de individuelle Neogen Petrifilm CC Tælleplader.

Bortskaffelse

Efter brug kan Neogen Petrifilm CC Tælleplader indeholde mikroorganismer, som kan udgøre en potentiel biologisk risiko.
Følg de gældende industristandarder for bortskaffelse.

Brugsanvisning

Følg omhyggeligt alle vejledninger. Hvis dette ikke overholdes, kan det medføre unøjagtige resultater.

2DA (Dansk)
Forberedelse, inkubation og aflæsning af prøver fra fødevare- og drikkevareindustrier(flaskevand undtaget), herunder miljøprøver
Prøveforberedelse
1. Anvend velegnede sterile fortyndingsmidler:

Butterfields fosfatbufferet fortydingsvand7, 0,1 % peptonvand8, peptonsaltfortyndingsmidler8,9, bufferet peptonvand8,9,
saltopløsning (0,85 0,90 %), Neogen® bredspektret neutralisering, bisulfit-fri letheen-bouillon eller destilleret vand. Se
afsnittet “Specifik vejledning i validerede metoder” for specifikke krav.
Brug ikke fortyndingsvæsker, som indeholder citrat, bisulfit eller thiosulfat sammen med Neogen Petrifilm CCTælleplader, da de kan hæmme væksten. Hvis citratbuffer er angivet i den normale procedure, erstattes den med en af
ovennævnte buffere, der opvarmes til 40-45°C (104-113°F).
2. Bland eller homogeniser prøven.
3. For at sikre optimal vækst og retablering af mikroorganismer skal prøveopløsningens pH-værdi justeres til 6,6 - 7,2.
For syreholdige produkter skal pH-værdien justeres med 1N NaOH. For basiske produkter skal pH-værdien justeres
med 1N HCl.
Udpladning
1. Anbring Neogen Petrifilm CC Tællepladen på en flad, plan overflade.
2. Løft den øverste film, og dispenser med pipetten vinkelret på podningsområdet 1 ml prøvesuspension midt
på underfilmen.
3. Rul den øverste film ned på prøven for at forsøge at undgå luftbobler.
4. Anbring Neogen® Petrifilm® Spreder med den flade side nedad midt på Neogen Petrifilm CC Tællepladen. Tryk
forsigtigt på midten af Neogen Petrifilm Sprederen for at fordele prøven jævnt. Spred den afsatte prøve over hele
Neogen Petrifilm CC Tællepladens vækstområde, før gelen dannes. Før ikke Neogen Petrifilm Sprederen hen overfilmen.
5. Fjern Neogen Petrifilm Sprederen, og lad Neogen Petrifilm CC Tællepladen være uforstyrret i mindst ét minut, så gelen
kan dannes.

Inkubation

Inkuber Neogen Petrifilm CC Tælleplader i en vandret stilling med den klare side opad i stakke på højst 20 plader. Der
kan anvendes flere inkubationstider og temperaturer afhængig af de gældende lokale referencemetoder, hvoraf nogle er
angivet i afsnittet “Specifik vejledning i validerede metoder”.

Aflæsning

1. Neogen Petrifilm CC Tælleplader kan tælles ved hjælp af en standardkolonitæller eller en anden lup med lys. Gas
dannet af coliforme bakterier kan forstyrre kolonien, så kolonien danner et “omrids” af boblen. Den bør tælles somén coliform koloni. Tæl ikke kolonier på skumkanten, da de er uden for mediets selektive påvirkning. Eventuellebobleartefakter skal ikke tælles.
Fortolkningen af coliforme kolonier på Neogen Petrifilm CC Tælleplade varierer efter referencemetode. For eksempel:
ELLER NF Validation-certificerede metoder:
AOAC® Official MethodsSM:
Coliforme kolonier er røde og tæt knyttet (inden- Sammenlignet med ISO-metode 48312 (MPN-metode)for én kolonidiameter) til indkapslet gas. Kolonier,er coliforme kolonier røde og tæt knyttet (inden for én
der ikke er knyttet til gas (afstanden er større end
kolonidiameter) til indkapslet gas.
én kolonidiameter mellem kolonien og gasboblen)- Sammenlignet med ISO-metode 48321 (totale coliformetælles ikke som coliforme.
bakterier) og NF V08-0603 (fækale coliforme bakterier),
der begge er baseret på VRBL-metoder, tælles alle røde
kolonier med eller uden gas.

2. Det runde vækstområde er ca. 20 cm2. Der kan foretages skøn på Neogen Petrifilm CC Tælleplader med mere end
150 kolonier ved at tælle antallet af kolonier i én eller flere repræsentative kvadrater og bestemme det gennemsnitlige
antal pr. kvadrat. Gang det gennemsnitlige antal med 20 for at beregne det estimerede antal pr. Neogen Petrifilm
CC Tælleplade.
3. Når kolonier forekommer i større antal, kan Neogen Petrifilm CC Tælleplader have en mere intensiv gelfarve og én eller
begge af følgende kendetegn: mange små, uafgrænsede kolonier og/eller mange gasbobler. Høje koncentrationer
af coliforme kolonier medfører, at vækstområdet bliver mørkerødt. Når det sker, skal resultaterne registreres
som for talrige til at tælle (TNTC). Når der kræves en egentlig tælling, skal udpladning foretages med en højere
fortyndingsfaktor.
4. Kolonier kan isoleres for yderligere identifikation efter behov. Løft den øverste film ved hjælp af korrekt testteknik,og vælg kolonien fra gelen. Foretag test ved hjælp af standardprocedurerne.
3DA (Dansk)
5. Hvis Neogen Petrifilm CC Tællepladerne ikke kan tælles inden for 1 time, efter de er taget ud af inkubatoren, kan degemmes til senere tælling ved at fryse dem ned i en tætsluttende beholder ved temperaturer på eller under -15°C (5°F)
i højst en uge.

Forberedelse, inkubation og aflæsning af prøver af flaskevand
Hydrer Neogen Petrifilm CC Tælleplader
1. Anbring Neogen Petrifilm CC Tællepladen på en flad, plan overflade.

2. Løft den øverste film, og dispenser 1 ml af et egnet sterilt hydreringsfortyndingsmiddel midt på underfilmen. Egnede
sterile hydreringsfortyndingsmidler omfatter destilleret vand, demineraliseret vand (DI) og omvendt osmose-vand (RO).
3. Rul den øverste film ned på prøven for at forsøge at undgå luftbobler.
4. Placer Neogen Petrifilm Spreder med den flade side nedad midt på pladen. Tryk forsigtigt på midten af sprederen for atfordele fortyndingsmidlet jævnt. Spred fortyndingsmidlet over hele Neogen Petrifilm Pladens vækstområde, før gelen
dannes. Før ikke sprederen hen over filmen.
5. Fjern sprederen, og lad pladerne være lukket i mindst 1 time før brug.
6. Opbevar hydrerede Neogen Petrifilm CC Tælleplader i en tætlukkende foliepakning eller plastpose. Beskyt pladerne
mod lys, og nedkøl dem til 2-8°C (36-46°F) i op til 7 dage.

Filtrering af vand og inkubation af plader

1. Følg standardprocedurerne for vandanalyse, og membranfiltrer vandprøven ved hjælp af et 47 mm blandetcelluloseester-filter (MCE) med en porestørrelse på 0,45 mikron.
2. Løft forsigtigt den øverste film af Neogen Petrifilm CC Tælleplade. Undgå at røre ved det runde vækstområde. Anbringfilteret midt på det hydrerede område. Minimer bobler under filteret.
3. Rul langsomt den øverste film ned på filteret. Minimer luftbobler og mellemrum mellem filteret og Neogen Petrifilm
CC Tællepladen.
4. Påfør et let tryk med sprederen til Neogen Petrifilm Plade eller ved at føre en finger let hen over hele pladeområdet
(også kanterne) for at sikre ensartet kontakt mellem filteret og gelen og for at fjerne eventuelle luftbobler.
5. Inkuber Neogen Petrifilm CC Tælleplader ved 35°C ± 1°C i 24 timer ± 2 timer11 eller 36°C ± 1°C i 24 timer ± 2 timer12 i
en vandret stilling med den klare side opad i stakke på højst 20.

Aflæsning

1. Neogen Petrifilm CC Tælleplader kan tælles ved hjælp af en standardkolonitæller eller en anden lup med lys. Tæl ikke
kolonier på skumkanten, da de er uden for mediets selektive påvirkning. Eventuelle bobleartefakter skal ikke tælles.
2. Røde kolonier knyttet til gasbobler tælles som coloforme bakterier. Gasbobler kan danne et cirkel- eller stjerneformet
mønster omkring kolonien. Gas dannet af coliforme bakterier kan forstyrre kolonien, så kolonien danner et “omrids”
af boblen. Den bør tælles som én coliform koloni. Røde kolonier uden tæt knyttede gasbobler kan være coliforme
bakterier, og de skal vælges og testes med egnede bekræftelsesmetoder11,12.
3. Når kolonier forekommer i større antal, kan Neogen Petrifilm CC Tælleplader have en mere intensiv gelfarve medmange små, uafgrænsede kolonier eller gasbobler. Når det sker, skal resultaterne registreres som for talrige til at tælle(TNTC).
4. Kolonier kan isoleres for yderligere identifikation. Løft den øverste film, og vælg kolonien fra gelen eller filterets
overflade. Når den øverste film løftes, kan filteret hænge fast i enten den øverste eller den nederste film. Hvis filteretsidder fast på den øverste film, skal du separere filteret fra den øverste film og vælge kolonier. Foretag test ved hjælp af
standardprocedurerne.
Bemærk: Det anbefales ikke er udskyde tælling af Neogen Petrifilm CC Tælleplader med filtre.
Der findes flere oplysninger i den relevante “Aflæsningsguide til Neogen® Petrifilm® Coliform Tælleplade.” Hvis du har
spørgsmål til specifikke anvendelser eller procedurer, bedes du besøge vores websted på www.neogen.com eller kontakte
din lokale Neogen-repræsentant eller -distributør.
Specifik vejledning for validerede metoder
AOAC® Official MethodsSM (986.33 Bacteria and Coliform Counts in Milk, Dry Rehydratable Film Methods and989.10 Bacterial and Coliforms Counts in Dairy Products, Dry Rehydratable Film Methods)
Inkuber Neogen Petrifilm CC Tælleplader i 24 timer ± 2 timer ved 32°C ± 1°C.
AOAC® Official MethodsSM (991.14 Coliform and Escherichia coli Counts in Foods, Dry Rehydratable Film Methods)
Inkuber Neogen Petrifilm CC Tælleplader i 24 timer ± 2 timer ved 35°C ± 1°C.
AOAC® Performance Tested MethodSM certifikatnummer 082101
I en Performance Tested Method (PTM)-undersøgelse foretaget af AOAC® Research Institute blev Neogen Petrifilm CCTælleplade-metoden fundet lige så god som eller bedre end de gennemsnitlige logoptællinger i henhold til metoden tiltælling af det totale antal coliforme bakterier i flaskevand i FDA/BAM kapitel 4, afsnit III.D.
4

DA (Dansk)

Valideringsområdet:Flaskevand: renset vand, behandlet kildevand, naturligt kildevand uden kulsyre, naturligt kildevand med kulsyre.
Inkubation:
Inkuber Neogen Petrifilm CC Tælleplader i 24 timer ± 2 timer ved 35°C ± 1°C.
NF Validation med AFNOR Certification:
NF VALIDATION-certificeret metode i overensstemmelse med ISO 16140-210 i sammenligning med ISO 48321(3M-01/02-09/89 A)
Valideringsområdet: Til testning af alle humane fødevareprodukter (undtagen rå skaldyr), dyrefoder og miljøprøver.
Brug følgende oplysninger ved implementering af ovennævnte brugsanvisning:
Prøveforberedelse:
Anvend udelukkende fortyndingsmidler, som findes på ISO-listen.
Inkubation:
Inkuber Neogen Petrifilm CC Tælleplader i 24 timer ± 2 timer ved 30°C ± 1°C eller 37°C ± 1°C.
Aflæsning:
Beregn det antal mikroorganismer, der er til stede i testprøven i henhold til ISO 72185 for én plade pr. fortynding.
De anslåede værdier ligger uden for NF Validation-certificeringens område (se afsnittet om aflæsning, punkt 2).
NF Validation-certificeret metode i overensstemmelse med ISO 16140-210 i sammenligning med ISO 48312(3M-01/02-09/89 B)
Valideringsområdet: Til testning af alle humane fødevareprodukter (undtagen rå skaldyr).
Brug følgende oplysninger ved implementering af ovennævnte brugsanvisning:
Prøveforberedelse:
Anvend udelukkende fortyndingsmidler, som findes på ISO-listen.
Inkubation:
Inkuber Neogen Petrifilm CC Tælleplader i 24 timer ± 2 timer ved 30°C ± 1°C eller 37°C ± 1°C.
Aflæsning:
Beregn det antal mikroorganismer, der er til stede i testprøven i henhold til ISO 72185 for én plade pr. fortynding.
De anslåede værdier ligger uden for NF Validation-certificeringens område (se afsnittet om aflæsning, punkt 2).
NF Validation-certificeret metode i overensstemmelse med ISO 16140-210 i sammenligning med NF V08-0603(3M-01/02-09/89 C)
Valideringsområdet: Til testning af alle humane fødevareprodukter
Brug følgende oplysninger ved implementering af ovennævnte brugsanvisning:
Prøveforberedelse:
Anvend udelukkende fortyndingsmidler, som findes på ISO-listen
Inkubation:
Inkuber Neogen Petrifilm CC Tælleplader i 24 timer ± 2 timer ved 44°C ± 1°C.
Aflæsning:
Beregn det antal mikroorganismer, der er til stede i testprøven i henhold til ISO 72185 for én plade pr. fortynding.
De anslåede værdier ligger uden for NF Validation-certificeringens område (se afsnittet om aflæsning, punkt 2). Se EN ISO
7218-standarden vedrørende inokulation, kolonitælling samt beregning og præsentation af resultater.

3M 01/02 – 09/89A, B, and C
ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS
http://nf-validation.afnor.org/en
For yderligere oplysninger om validering henvises der til NF VALIDATION-certifikatet, der er tilgængeligt på det ovenfornævnte websted.
5DA (Dansk)
Litteraturhenvisninger

1. ISO 4832. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms –Colony count technique.
2. ISO 4831. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumeration of
coliforms – Most probable number technique.
3. AFNOR NF V08-060. General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at
44°C – Routine method.
4. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
6. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
7. FDA. Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998. Reagents Index for BAM found at:
http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.
8. ISO 6887-5. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk products.
9. ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension anddecimal dilutions.
10. ISO 16140-2. Microbiology of the food chain – Method validation – Protocol for the validation of alternative(proprietary) methods against a reference method.
11. U.S. Food and Drug Administration. 2002. Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4. Membranefilter method for coliforms.
12. American Public Health Association. 2017. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th Ed.
Method 9222B2a.
Der henvises til de gældende versioner af de standardmetoder, som er angivet ovenfor.

Symbolforklaring

info.neogen.com/symbols
AOAC er et registreret varemærke tilhørende AOAC INTERNATIONAL.
Official Methods er et servicemærke tilhørende AOAC INTERNATIONAL.
Performance Tested Method er et servicemærke tilhørende AOAC INTERNATIONAL.

6

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931A

NO (Norsk)
Utgivelsesdato: 2024-01

Produktveiledning

For koliforme bakterier
Produktbeskrivelse og tiltenkt bruk

Neogen® Petrifilm® for koliforme bakterier (CC) er et dyrkningsmedium som er klart til bruk, som inneholder modifiserte
Violet Red Bile (VRB) næringsmidler, et kaldtvannsoppløselig geldannende middel og en tetrazoliumindikator som
forenkler telling av kolonier. Neogen Petrifilm CC plater brukes til telling av koliforme bakterier i næringsmiddel- og
flaskevann-industrien. Komponentene i Neogen Petrifilm CC er dekontaminert, men ikke sterilisert. Neogen Food Safety
er International Organization for Standardization (ISO) 9001-sertifisert for utforming og produksjon. Neogen Petrifilm
CC er ikke evaluert med alle mulige matprodukter, matprosesser, testprotokoller eller med alle mulige stammer av
mikroorganismer.
United States Food and Drug Administration (FDA) Bacteriological Analytical Manual (BAM)7 definerer koliforme bakterier
som Gram-negative stenger, som produserer syre og gass av laktosefermentering. Kolonier av koliforme bakterier som
vokser på Neogen Petrifilm CC, produserer syre, og dette får pH-indikatoren til å mørkne gelfargen; gass innfanget rundt
røde kolonier indikerer koliforme bakterier.
ISO definerer koliforme bakterier etter deres evne til å vokse i metodespesifikke, selektive media. ISO-metode 48321,
som teller koliforme bakterier ved kolonitellemetode, definerer koliforme bakterier som syreprodusenter på VRB med
laktose (VRBL)-agar. På Neogen Petrifilm CC plater angis disse syreproduserende koliforme bakteriene ved røde kolonier
med eller uten gassproduksjon. ISO-metode 48312, som teller koliforme bakterier etter metoden med det mest sannsynlige
antallet (MPN), definerer koliforme bakterier etter deres evne til å vokse og produsere gass av laktose i en selektiv buljong.
På Neogen Petrifilm CC plater angis disse koliforme bakterier ved røde kolonier tilknyttet gass.
For flaskevannprøver angis bekreftede kolonier med koliforme bakterier med røde kolonier tilknyttet gass på Neogen
Petrifilm CC plater. Røde kolonier uten nær tilknyttede gassbobler kan være koliforme bakterier og bør subdyrkes og testes
med passende bekreftelsesmetoder11,12. Se tolkningsavsnitt for tilleggsdetaljer. Karakteristiske kolonier kan subdyrkes og
testes som Escherichia coli.
AFNOR Certification har sertifisert Neogen Petrifilm CC sammenlignet med ISO-metode 48312 og ISO-metode 48321 fortelling av totalt antall koliforme bakterier. AFNOR Certification har også sertifisert Neogen Petrifilm CC sammenlignet med
NF V08-0603, for telling av termotolerante koliforme bakterier.

Sikkerhet

Brukeren må lese, forstå og følge all sikkerhetsinformasjonen i produktveiledningen for Neogen Petrifilm CC.
Behold sikkerhetsveiledningen for fremtidig referanse.
ADVARSEL: Indikerer en farlig situasjon som, om den ikke unngås, kan resultere i død eller alvorlig personskade
og/eller materielle skader

ADVARSEL
For å redusere risikoene forbundet med eksponering for biologiske farer og miljøforurensning:• Følg gjeldende industristandarder og lokale forskrifter for kasting av biologisk risikoavfall.
For å redusere risikoene forbundet med utslipp av kontaminert produkt:• Følg alle lagringsinstruksjoner som finnes i bruksanvisningen.
• Må ikke brukes etter utløpsdatoen.
For å redusere risikoene forbundet med bakterieinfeksjon og kontaminering på arbeidsplassen:• Utfør Neogen Petrifilm CC tester i et riktig utstyrt laboratorium, under tilsyn av en dyktig mikrobiolog.
• Brukeren må gi opplæring i korrekte testteknikker til sitt personell: for eksempel Good Laboratory Practices4, ISO 72185
eller ISO 170256.
For å redusere risikoene forbundet med feiltolkning av resultater:• Neogen har ikke dokumentert Neogen Petrifilm CC plater for bruk i andre industrier enn næringsmiddel- og
flaskevannindustrien. Neogen har for eksempel ikke dokumentert Neogen Petrifilm CC plater for testing av legemidler
eller kosmetikk. Neogen har ikke dokumentert Neogen Petrifilm CC plater for testing av overflatevann og kommunalt
vann, eller vann som brukes i legemiddel- eller kosmetikkindustrien.
• Bruk av Neogen Petrifilm CC plater til testing av vannprøver i samsvar med lokale vanntestingsforskrifter foretasene og alene etter sluttbrukerens vurdering og ansvar. Neogen Petrifilm CC plater har ikke blitt testet på alle mulige
flaskevannprøver, testprotokoller eller med alle mulige stammer av mikroorganismer.
1NO (Norsk)• Ikke bruk Neogen Petrifilm CC plater i diagnostisering av tilstander hos mennesker eller dyr.
• Neogen Petrifilm CC plater skiller ikke mellom ulike stammer av koliforme bakterier.
• Mat med høyt sukkerinnhold kan øke muligheten for gassproduksjon fra ikke-koliform Enterobacteriaceae.
Se sikkerhetsdatabladet for ytterligere informasjon.
Besøk nettstedet vårt på www.neogen.com, eller kontakt Neogen-representanten din eller en autorisert distributør for mer
informasjon om dokumentasjon av produktytelsen.

Brukeransvar

Brukere er ansvarlige for å sette seg inn i produktveiledningen og informasjon om produktet. Hvis du vil ha mer informasjon,
gå til nettstedet vårt www.neogen.com eller kontakt din Neogen-representant eller en autorisert Neogen-distributør.
Ved valg av testmetode er det viktig å ta hensyn til at eksterne faktorer som metoder for stikkprøver, testprotokoller,
preparering av prøver, håndtering og laboratorieteknikk kan påvirke resultatene.
Ved valg av testmetode er det brukerens ansvar å vurdere et tilstrekkelig antall prøver med passende matriks og mikrobielle
utfordringer for å tilfredsstille brukeren om at den valgte prøvemetoden oppfyller brukerens kriterier.
Det er også brukerens ansvar å fastslå at alle prøvemetoder og resultater tilfredsstiller kundens og leverandørens krav.
Som med alle testmetoder utgjør ikke resultatene som oppnås ved bruk av noe Neogen Food Safety-produkt, noen garanti
om kvaliteten av matriksene eller prosessene som testes.

Begrensing av garantier / begrensede rettigheter

MED MINDRE DET ER UTTRYKKELIG SKREVET I EN BEGRENSET GARANTI PÅ EN PRODUKTPAKNING, FRASKRIVER
NEOGEN SEG ALLE DIREKTE OG INDIREKTE GARANTIER, INKLUDERT MEN IKKE BEGRENSET TIL, ENHVER GARANTIOM SALGBARHET ELLER ANVENDELSE TIL ET BESTEMT FORMÅL. Hvis noe Neogen Food Safety-produkt er defekt,vil Neogen eller dets autoriserte distributør erstatte eller refundere produktets kjøpesum etter eget skjønn. Dette er dineubetingede rettigheter. Du må straks varsle Neogen innen seksti dager fra oppdagelsen av enhver mulig feil i et produkt og
returnere dette produktet til Neogen. Kontakt Neogen-representanten din eller en autorisert Neogen-distributør hvis du har
flere spørsmål.

Begrensning av Neogens ansvar

NEOGEN VIL IKKE VÆRE ANSVARLIG FOR NOE TAP ELLER SKADE, DIREKTE ELLER INDIREKTE, SPESIELL, TILFELDIG
ELLER FØLGESKADE, INKLUDERT, MEN IKKE BEGRENSET TIL, TAPT FORTJENESTE. Ikke under noen omstendighet skal
Neogens ansvar, under noen juridisk teori, overstige kjøpesummen for et produkt som antas å være defekt.

Oppbevaring

Lagre uåpnede poser med Neogen Petrifilm CC kjølt eller fryst ved temperaturer under eller lik 8°C (46°F). Like før
bruk skal uåpnede poser med Neogen Petrifilm CC varmes opp til romtemperatur før de åpnes. Legg ubrukte Neogen
Petrifilm CC plater tilbake i posen. Posen forsegles ved å brette enden på posen og tette den med tape. For å unngå
fukteksponering, skal åpnede poser ikke legges i kjøleskap. Oppbevar åpnede poser på et kjølig, tørt sted, ikke
lenger enn fire uker. Det anbefales at åpnede poser med Neogen Petrifilm CC plater lagres i en fryser (se under) hvis
laboratorietemperaturen overstiger 25°C (77°F) og/eller laboratoriet ligger i et område hvor den relative fuktigheten
overstiger 50 % (med unntak av lokaler med aircondition).
Ved oppbevaring av åpnede poser i en fryser, legges Neogen Petrifilm CC plater i en tett beholder. For å hente ut frosne
Neogen Petrifilm CC Plates for bruk åpner du beholderen, tar ut platene som trengs, og returnerer deretter umiddelbart degjenværende platene til fryseren i den forseglede beholderen for videre oppbevaring til holdbarhetstidens utløp. Neogen
Petrifilm CC plater må ikke benyttes etter utløpsdatoen. Fryseren som brukes til lagring av åpne poser, må ikke ha etautomatisk avisingsprogram, for dette vil gjentatte ganger eksponere Neogen Petrifilm CC platene for fuktighet som kanødelegge platene.
Ikke bruk Neogen Petrifilm CC plater som har blitt misfarget. Utløpsdato og lotnummer er angitt på alle pakker med
Neogen Petrifilm CC plater. Lotnummeret er også merket på hver enkelt Neogen Petrifilm CC plate.

AvhendingEtter bruk kan Neogen Petrifilm CC plater inneholde mikroorganismer som kan utgjøre en potensiell biologisk fare.
Følg gjeldende industristandarder for kasting.

Bruksanvisning

Følg alle instruksjonene nøye. Dersom dette ikke blir gjort, kan det føre til unøyaktige resultater.

2

NO (Norsk)
Preparering, inkubering og tolkning av prøver fra næringsmiddelindustrien (unntatt flaskevann)inkludert miljøprøver
Prøvepreparering
1. Bruk egnede sterile fortynningsmidler:

Butterfields fosfatbufret fortynningsvann7, 0,1 % peptonvann8, fortynningsmidler med peptonsalt8,9, bufret
peptonvann8,9, saltvannsløsning (0,85–0,90 %), Neogen® bredspektret nøytralisering, bisulfittfri letheen-buljong eller
destillert vann. Se avsnittet “Spesifikke veiledninger for validerte metoder” for spesifikke krav.
Ikke bruk fortynningsmidler som inneholder citrat, bisulfitt eller tiosulfat på Neogen Petrifilm CC plater, da de kanhemme vekst. Hvis en citratbuffer er angitt i standardprosedyren, skal den erstattes med en av bufferne på listen over,
oppvarmet til 40-45 °C (104-113 °F).
2. Bland eller homogeniser prøven.
3. For optimal vekst og gjenoppretting av mikroorganismer, juster pH i prøvesuspensjonen til 6,6 - 7,2. For sure produkter,juster pH med 1N NaOH. For alkaliske produkter, juster pH med 1N HCl.
Inokulering
1. Plasser Neogen Petrifilm CC på en flat, plan overflate.
2. Løft toppfilmen og hold pipetten vinkelrett i forhold til inokuleringsområdet og pipetter 1 mL av prøveoppløsningen på
den midtre eller den nedre filmen.
3. Rull toppfilmen ned på prøven for å unngå at det dannes luftbobler.
4. Plasser Neogen® Petrifilm® spreder med flatsiden ned midt på Neogen Petrifilm CC. Trykk forsiktig på midten av
Neogen Petrifilm spreder for å spre prøven jevnt. Spre inokulatet over hele vekstområdet til Neogen Petrifilm CC før
gelen dannes. Ikke la Neogen Petrifilm spreder gli over filmen.
5. Fjern Neogen Petrifilm spreder og la Neogen Petrifilm CC ligge urørt i minst ett minutt slik at gelen dannes.

Inkubering

Inkuber Neogen Petrifilm CC plater i en horisontal stilling med den klare siden opp i stabler på ikke mer enn 20 filmer.
Flere inkuberingstider og -temperaturer kan brukes, avhengig av gjeldende lokale referansemetoder, noen av disse står i
avsnittet “Spesifikke veiledninger for validerte metoder”.

Tolkning

1. Neogen Petrifilm CC plater kan telles ved hjelp av en standard koloniteller eller annen belyst lupeinnretning.
Gass produsert av koliforme bakterier kan rive opp kolonien slik at kolonien “danner konturene” av boblen. Detteskal telles som en enkelt koliform bakterie. Ikke tell kolonier som vokser på skumbarrieren, da disse er adskilt fra den
selektive påvirkningen av næringsmediet. Ikke tell artefaktbobler som kanskje er til stede.
Tolkningen av kolonier av koliforme bakterier på Neogen Petrifilm CC varierer avhengig av referansemetode. For
eksempel:
AOAC® Official MethodsSM:
Kolonier av koliforme bakterier er røde og nær
tilknyttet (innenfor én kolonidiameter) innestengt
gass. Kolonier som ikke er tilknyttet gass (avstandstørre enn én kolonidiameter mellom koloni og
gassboble), telles ikke som koliforme bakterier.

ELLER

NF Validation sertifiserte metoder:- Sammenlignet med ISO-metode 48312(MPN- metode), er kolonier av koliforme bakterier
røde og nær tilknyttet (innenfor én kolonidiameter)innestengt gass.
- Sammenlignet med ISO-metode 48321 (totalt antall
koliforme bakterier) og NF V08-0603 (fekale koliforme
bakterier) begge basert på VRBL-metoder, telles allerøde kolonier med eller uten gass.

2. Det runde vekstområdet er på omtrent 20 cm2. Estimater kan gjøres på Neogen Petrifilm CC plater som inneholder over
150 kolonier ved å telle antall kolonier i én eller flere representative ruter og bestemme gjennomsnittlig antall per rute.
Multipliser gjennomsnittsantallet med 20 for det estimerte antallet per Neogen Petrifilm CC.
3. Når koloniene er til stede i stort antall, kan Neogen Petrifilm CC plater ha en mørkning av gelfargen og én eller begge
av følgende egenskaper: mange små, utydelige kolonier og/eller mange gassbobler. Høye konsentrasjoner av koliforme
bakterier vil få vekstområdet til å bli mørkerødt. Når dette skjer, må resultatene registreres som for høye til å telle(TNTC). Når en faktisk telling er påkrevd, inokuler med en høyere fortynning.
4. Om nødvendig, kan koloniene isoleres for videre identifisering. Løft toppfilmen ved bruk av riktig testeteknikk og plukk
kolonien fra gelen. Test ved hjelp av standardprosedyrer.
5. Hvis Neogen Petrifilm CC plater ikke kan telles i løpet av 1 time etter fjerning fra inkubatoren, kan de lagres for senere
telling ved å fryse dem ned i en tett beholder ved temperaturer som er lavere eller lik negativ 15 °C (5 °F) i maksimalt enuke.

3NO (Norsk)
Preparering, inkubering og tolkning av flaskevannprøver
Hydrer Neogen Petrifilm CC plater
1. Plasser Neogen Petrifilm CC på en flat, plan overflate.

2. Løft opp toppfilen og pipetter 1 mL av en egnet steril hydreringsfortynner på midten av bunnfilmen. Egnede sterile
hydreringsfortynnere inkluderer destillert vann, avionisert (DI) vann og omvendt osmose (RO)-vann.
3. Rull toppfilmen ned på prøven for å unngå at det dannes luftbobler.
4. Plasser Neogen Petrifilm spreder med flatsiden ned midt på platen. Trykk forsiktig på midten av sprederen for å spre
fortynneren jevnt. Spre fortynneren over hele vekstområdet til Neogen Petrifilm før gelen dannes. Ikke la sprederen gli
over filmen.
5. Fjern sprederen og la platene være lukket i minimum 1 time før bruk.
6. Lagre hydrerte Neogen Petrifilm CC plater i en forseglet pose eller plastpose. Beskytt platene mot lys og kjøl dem
ved 2-8 °C (36-46 °F) i inntil 7 dager.

Vannfiltrering og plateinkubering

1. Følg standard prosedyrer for vannanalyse, membranfiltervannprøve ved bruk av en 47 mm, 0,45 mikron porestørrelse
Mixed Cellulose Ester (MCE)-filter.
2. Løft forsiktig toppfilmen av Neogen Petrifilm CC. Unngå å berøre det runde vekstområdet. Plasser filteret midt på det
hydrerte området. Minimer dannelse av bobler under filteret.
3. Rull toppfilmen langsomt på filteret. Minimer dannelse av luftbobler og åpninger mellom filteret og Neogen Petrifilm
CC.
4. Press lett ved å bruke Neogen Petrifilm spreder eller ved å la en finger gli lett over hele diskområdet (inkludert kantene)for å sikre at filteret får jevn kontakt med gelen og å eliminere eventuelle luftbobler.
5. Inkuber Neogen Petrifilm CC plater ved 35 °C ± 1 °C i 24 timer ± 2 timer11 eller 36 °C ± 1 °C i 24 timer ± 2 timer12 i enhorisontal stilling med den klare siden opp i stabler på ikke mer enn 20.

Tolkning

1. Neogen Petrifilm CC plater kan telles ved hjelp av en standard koloniteller eller annen belyst lupeinnretning. Ikke tellkolonier som vokser på skumbarrieren, da disse er adskilt fra den selektive påvirkningen av næringsmediet. Ikke tellartefaktbobler som kanskje er til stede.
2. Røde kolonier tilknyttet gassbobler telles som koliforme bakterier. Gassbobler kan danne et sirkel- eller stjerneformet
mønster rundt en koloni. Gass produsert av koliforme bakterier kan rive opp kolonien slik at kolonien “danner
konturene” av boblen. Dette skal telles som en enkelt koliform bakterie. Røde kolonier uten nær tilknyttede gassbobler
kan være koliforme bakterier og bør plukkes opp og testes med egnede bekreftelsesmetoder11,12.
3. Når koloniene er til stede i stort antall, vil Neogen Petrifilm CC plater få en mørkning av gelfargen knyttet til mange små,utydelige kolonier eller mange gassbobler. Når dette skjer, må resultatene registreres som for høye til å telle (TNTC).
4. Kolonier kan isoleres for videre identifisering. Løft toppfilmen og plukk kolonien fra gelen eller filteroverflaten. Når duløfter toppfilmen, kan filteret klebe enten til toppfilmen eller den nedre filmen. Hvis filteret kleber til toppfilmen, må duskille filteret fra toppfilmen og plukke koloniene. Test ved hjelp av standardprosedyrer.
Merk: Forsinket telling av Neogen Petrifilm CC plater med filtre anbefales ikke.
For mer informasjon, se “Tolkningsveiledning for Neogen® Petrifilm® for koliforme bakterier”. Hvis du har spørsmål om
spesifikke bruksområder eller prosedyrer, kan du besøke vårt nettsted på www.neogen.com eller ta kontakt med en lokal
Neogen-representant eller -forhandler.
Spesifikke veiledninger for validerte metoder
AOAC® Official MethodsSM (986.33 Bakterier og telling av koliforme bakterier i melk, tørre rehydrerbare filmmetoder og
989.10 Telling av bakterier og koliforme bakterier i melkeprodukter, tørre rehydrerbare filmmetoder)
Inkuber Neogen Petrifilm CC plater 24 timer ± 2 timer ved 32°C ± 1°C.
AOAC® Official MethodsSM (991.14 Telling av koliforme bakterier og Escherichia coli i matvarer, tørre rehydrerbare
filmmetoder)
Inkuber Neogen Petrifilm CC plater 24 timer ± 2 timer ved 35°C ± 1°C.
AOAC® Performance Tested MethodSM sertifikat #082101
I en AOAC® Research Institute Performance Tested Method (PTM)-studie ble metoden Neogen Petrifilm CC funnet å væreekvivalent med gjennomsnittlige log-tellinger i metoden FDA/BAM kapittel 4, avsnitt III.D for telling av koliforme bakterier i
flaskevann.

4

NO (Norsk)
Omfang av godkjenningen:
Flaskevann: renset vann, behandlet kranvann, naturlig kranvann uten kullsyre, naturlig kranvann med kullsyre.
Inkubering:Inkuber Neogen Petrifilm CC plater i 24 timer ± 2 timer ved 35 °C ± 1 °C.
NF Validation av AFNOR Certification:
NF Validation sertifisert metode i samsvar med ISO 16140-210 sammenlignet med ISO 48321 (3M-01/02-09/89 A)
Omfang av godkjenningen: For å teste alle humane matprodukter (unntatt rå skalldyr), kjæledyrfôr og miljøprøver.
Bruk følgende informasjon ved implementering av bruksanvisningen ovenfor:
Prøvepreparering:
Bruk bare ISO-godkjente fortynningsmidler.
Inkubering:Inkuber Neogen Petrifilm CC plater i 24 timer ± 2 timer ved 30 °C ± 1 °C eller 37 °C ± 1 °C.
Tolkning:
Beregn antall mikroorganismer til stede i prøven i henhold til ISO 72185 for én plate per oppløsning. Estimater er utenfor
omfanget av NF Validation-sertifisering (jf. avlesingsdelen under punkt 2).
NF Validation sertifisert metode i samsvar med ISO 16140-210 sammenlignet med ISO 48312 (3M-01/02-09/89 B)
Omfang av godkjenningen: For å teste alle humane matprodukter (unntatt rå skalldyr).
Bruk følgende informasjon ved implementering av bruksanvisningen ovenfor:
Prøvepreparering:
Bruk bare ISO-godkjente fortynningsmidler.
Inkubering:Inkuber Neogen Petrifilm CC plater i 24 timer ± 2 timer ved 30°C ± 1°C eller 37°C ± 1°C.
Tolkning:
Beregn antall mikroorganismer til stede i prøven i henhold til ISO 72185 for én plate per oppløsning. Estimater er utenfor
omfanget av NF Validation-sertifisering (jf. avlesingsdelen under punkt 2).
NF Validation sertifisert metode i samsvar med ISO 16140-210 sammenlignet med NFV08-0603 (3M-01/02-09/89 C)
Omfang av godkjenningen: For å teste alle humane matprodukter
Bruk følgende informasjon ved implementering av bruksanvisningen ovenfor:
Prøvepreparering:
Bruk bare ISO-godkjente fortynningsmidler
Inkubering:Inkuber Neogen Petrifilm CC plater i 24 timer ± 2 timer ved 44 °C ± 1 °C.
Tolkning:
Beregn antall mikroorganismer til stede i prøven i henhold til ISO 72185 for én plate per oppløsning. Estimater er utenfor
omfanget av NF Validation-sertifisering (jf. avlesingsdelen under punkt 2). Se EN ISO 7218-standarden for inokulering,kolonitelling og beregning og fremstilling av resultater.

3M 01/02 – 09/89A, B, and C
ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS
http://nf-validation.afnor.org/en
For mer informasjon om utløp av validitet, henvises det til NF VALIDATION-sertifikat tilgjengelig på nettstedet nevnt over.

5NO (Norsk)
Referanser

1. ISO 4832. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms –Colony count technique.
2. ISO 4831. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumeration of
coliforms – Most probable number technique.
3. AFNOR NF V08-060. General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at
44°C – Routine method.
4. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
6. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
7. FDA. Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998. Reagensindeks for BAM finnes på:
http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.
8. ISO 6887-5. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk products.
9. ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension anddecimal dilutions.
10. ISO 16140-2. Microbiology of the food chain – Method validation – Protocol for the validation of alternative(proprietary) methods against a reference method.
11. U.S. Food and Drug Administration. 2002. Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4. Membranefilter method for coliforms.
12. American Public Health Association. 2017. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th Ed.
Method 9222B2a.
Se gjeldende versjoner av standardmetodene oppført ovenfor.

Symbolforklaring

info.neogen.com/symbols
AOAC er et registrert varemerke for AOAC INTERNATIONAL.
Official Methods er et servicemerke for AOAC INTERNATIONAL.
Performance Tested Method er et servicemerke for AOAC INTERNATIONAL.

6

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931A

FI(Suomenkielinen)
Julkaisuajankohta: 2024-01

Tuoteseloste

Koliformien kasvatusalusta
Tuotteen kuvaus ja käyttötarkoitus

Neogen® Petrifilm® koliformien (CC) kasvatusalusta on näytevalmis pesäkkeiden kasvatusalustajärjestelmä, joka sisältää
muunnettuja violetti-puna-sappi- eli VRB-ravinteita, kylmään veteen liukenevaa geeliainetta ja tetrazolium-indikaattorin,joka helpottaa pesäkkeiden laskemista. Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoja käytetään koliformien laskentaan
elintarvike-, juoma- ja pullovesiteollisuudessa. Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustojen komponentit on dekontaminoitu
mutta ei steriloitu. Neogen Food Safety -osaston suunnittelu- ja valmistusmenetelmät on International Organizationfor Standardization (ISO) 9001 -sertifioitu. Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoja ei ole arvioitu kaikilla mahdollisilla
elintarvikkeilla, prosesseilla, testausmenetelmillä tai kaikilla mahdollisilla mikro-organismikannoilla.
Asiakirjassa United States Food and Drug Administration (FDA) Bacteriological Analytical Manual (BAM)7 määritellään
koliformit gram-negatiivisiksi sauvoiksi, jotka tuottavat happoa ja kaasua laktoosin käymisen aikana. Neogen Petrifilm CC-kasvatusalustalla kasvavat koliformien pesäkkeet tuottavat happoa, jonka vaikutuksesta pH-indikaattori tummentaa geelin
väriä; punaisten pesäkkeiden ympärille keräytynyt kaasu osoittaa koliformit.
ISO-standardissa koliformit määritellään perustuen niiden kykyyn kasvaa menetelmäkohtaisissa selektiivisissä
elatusaineissa. ISO-menetelmässä 48321, jossa koliformit lasketaan pesäkelaskentatekniikalla, määritellään koliformit hapon
tuottajiksi laktoosia ja VRB:tä sisältävässä (VRBL-)agarissa. Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoissa happoa tuottavat
koliformit ilmaistaan kaasua tuottaneina tai tuottamattomina punaisina pesäkkeinä. ISO-menetelmässä 48312 koliformit
lasketaan todennäköisimmän luvun (most probable number, MPN) menetelmällä ja määritellään koliformit niiden kyvyllä
kasvaa ja tuottaa kaasua laktoosista selektiivisessä liemessä. Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoissa nämä koliformit
ilmaistaan punaisina pesäkkeinä, joihin liittyy kaasua.
Pullovesinäytteissä vahvistetut koliformien pesäkkeet ilmaistaan Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustojen punaisina
pesäkkeinä, joihin liittyy kaasua. Punaiset pesäkkeet, joihin ei liity lähellä sijaitsevia kaasukuplia, voivat olla koliformeja, ja ne
on viljeltävä edelleen ja testattava asianmukaisilla vahvistusmenetelmillä11,12. Katso lisätietoja Tulkinta-kohdasta.
Tunnusomaiset pesäkkeet voidaan viljellä edelleen ja testata Escherichia coliksi.
AFNOR Certification on sertifioinut Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustan vertaillen ISO-menetelmään 48312 ja
ISO-menetelmään 48321 yhteenlaskettujen koliformien laskentaa varten. AFNOR Certification on niin ikään sertifioinut
Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustan vertaillen standardiin NF V08-0603 lämmönkestävien koliformien laskentaan.

Turvallisuus

Käyttäjän on luettava ja ymmärrettävä kaikki Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustojen tuoteselosteisiin sisältyvät ohjeet ja
noudatettava niitä. Säilytä turvallisuusohjeet myöhempää käyttöä varten.
VAROITUS: Osoittaa vaarallisen tilanteen, joka saattaa johtaa kuolemaan tai vakavaan loukkaantumiseen ja/tai
omaisuusvahinkoon

VAROITUS
Biologisille vaaratekijöille altistumiseen ja ympäristön saastumiseen liittyvien riskien vähentäminen:• Noudata biologisen jätteen hävittämistä koskevia vallitsevia alan standardeja ja paikallisia määräyksiä.
Kontaminoituneen tuotteen ympäristöön pääsyyn liittyvien riskien vähentäminen:• Noudata kaikkia käyttöohjeissa annettuja tuotteen säilytysohjeita.
• Älä käytä viimeisen käyttöpäivän jälkeen.
Bakteeri-infektioon ja työtilojen kontaminoitumiseen liittyvien riskien vähentäminen:• Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustaa tulee käyttää testaukseen vain asianmukaisesti varustetussa laboratoriossa ja
ammattitaitoisen mikrobiologin valvonnassa.
• Käyttäjän on järjestettävä henkilökunnalleen koulutusta vallitsevista asianmukaisista testausmenetelmistä, joita ovat
esimerkiksi: hyvät laboratoriokäytännöt4, ISO 72185 tai ISO 170256.
Tulosten virheelliseen tulkintaan liittyvien riskien vähentäminen:• Neogen ei ole osoittanut Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoja muuhun kuin elintarvike- ja juomateollisuuden, mukaan
lukien pullovedet, käyttöön. Neogen ei esimerkiksi ole osoittanut Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustojen soveltuvuutta
veden, lääkevalmisteiden tai kosmeettisten aineiden testaamiseen. Neogen ei ole osoittanut Neogen Petrifilm CC-kasvatusalustojen soveltuvuutta pinta- ja vesijohtoveden tai lääke- tai kosmetiikkateollisuudessa käytettävän veden
testaamiseen.
1

FI(Suomenkielinen)• Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustojen käyttö vesinäytteiden testaamiseen paikallisten vedentestausmääräysten
mukaisesti tapahtuu loppukäyttäjän harkinnan mukaisesti ja vastuulla. Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoja ei
ole testattu kaikilla mahdollisilla pullotetuilla vesinäytteillä, testausmenetelmillä tai kaikilla mahdollisilla mikroorganismikannoilla.
• Älä käytä Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoja sairauksien diagnosointiin ihmisillä tai eläimillä.
• Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustat eivät erota koliformikantoja toisistaan.
• Runsaasti sokeria sisältävät elintarvikkeet voivat lisätä ei-koliformisten Enterobacteriaceae-bakteerienkaasunmuodostuspotentiaalia.
Katso lisätietoja käyttöturvallisuustiedotteesta.
Käy verkkosivustollamme osoitteessa www.neogen.com tai ota yhteyttä NEOGEN-edustajaasi tai valtuutettuun
jälleenmyyjään saadaksesi tietoja tuotteiden suorituskyvyn dokumentoinnista.

Käyttäjän vastuu

Käyttäjän vastuulla on tutustua tuoteselosteeseen ja -tietoihin. Käy verkkosivustollamme osoitteessa www.neogen.com
tai ota yhteyttä Neogen-edustajaasi tai valtuutettuun jälleenmyyjään, jos tarvitset lisätietoja.
Testausmenetelmää valitessa on tärkeää ottaa huomioon, että ulkoiset tekijät, kuten näytteenottomenetelmät,
testausprotokollat, näytteiden valmistus, käsittely ja laboratoriotekniikat, voivat vaikuttaa testaustuloksiin.
Käyttäjä on aina testausmenetelmää valitessaan vastuussa siitä, että hän arvioi riittävän määrän näytteitä kyseisistä
elintarvikkeista ja mikrobialtistuksista käyttäjän kriteerien täyttymisen varmistamiseksi.
Käyttäjän vastuulla on myös varmistaa, että testausmenetelmät ja tulokset täyttävät hänen asiakkaidensa tai
toimittajiensa vaatimukset.
Kuten kaikkien testausmenetelmien kohdalla, minkä tahansa Neogen Food Safety -tuotteen käytöstä saavutetut tulokset
eivät ole takuu matriisien tai testattujen prosessien laadusta.

Takuun rajoitus / rajoitettu korvausvelvollisuus

NEOGEN KIISTÄÄ KAIKKI NIMENOMAISET JA EPÄSUORAT TAKUUT, MUKAAN LUKIEN KAIKKI TAKUUT KÄYPYYDESTÄTAI SOPIVUUDESTA TIETTYYN KÄYTTÖTARKOITUKSEEN, PAITSI JOS TUOTEPAKKAUKSEN TAKUUOSIOSSA TOISIN
MAINITAAN. Jos mikä tahansa Neogen Food Safety -tuote on viallinen, Neogen tai sen valtuutettu jälleenmyyjä joko
korvaa tuotteen tai palauttaa sen ostohinnan. Nämä ovat ainoat myönnetyt korvaukset. Käyttäjän on ilmoitettava Neogen:lle
viipymättä kuudenkymmenen päivän sisällä kaikista epäillyistä tuotevirheistä ja palautettava tuote Neogen:lle. Ota yhteyttä
NEOGEN-edustajaasi tai valtuutettuun NEOGEN-jälleenmyyjään, jos sinulla on kysyttävää.

Neogen:N vastuun rajoitukset

NEOGEN EI OLE VASTUUSSA MENETYKSISTÄ TAI VAHINGOISTA, OLIVAT NE SITTEN SUORIA, EPÄSUORIA,
ERITYISLAATUISIA, SATUNNAISIA TAI VÄLILLISIÄ, MUKAAN LUKIEN VOITONMENETYKSET. Missään tapauksessa
Neogen:n vastuu ei minkään laillisen perusteen mukaan ole suurempi kuin vialliseksi väitetyn tuotteen hinta.

Säilytys

Säilytä avaamattomia Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustapusseja jäähdytettyinä tai jäädytettyinä lämpötiloissa, jotka ovat
pienempiä tai yhtä suuria kuin 8 °C (46 °F). Anna avaamattomien Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustapussien lämmetä
huoneenlämpöön ennen niiden avaamista. Laita käyttämättömät Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustat takaisin pussiin.
Sulje pussin suu taittamalla reuna kaksinkerroin ja teippaamalla se kiinni. Älä säilytä avattuja pusseja jääkaapissa,
jotta ne eivät altistu kosteudelle. Uudelleen suljettu pussi säilyy kuivassa ja viileässä enintään neljä viikkoa.
On suositeltavaa säilyttää avatut, uudelleen suljetut Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustapussit pakastimessa (katso alla),
mikäli laboratorion lämpötila ylittää 25 ºC (77 ºF) ja/tai laboratorio sijaitsee alueella, jossa suhteellinen kosteus ylittää 50 %(poikkeuksena ilmastoidut tilat).
Laita Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustat tiiviisti suljettuun rasiaan, kun säilytät avattuja pakkauksia pakastimessa.
Poista käytettävät pakastetut Neogen Petrifilm CC -levyt avaamalla säiliö, poistamalla tarvittavat levyt ja asettamalla
loput levyt välittömästi takaisin pakastimeen suljetussa astiassa jäljellä olevaksi säilyvyysajaksi. Neogen Petrifilm CC-kasvatusalustoja ei saa käyttää niiden viimeisen käyttöpäivämäärän jälkeen. Avattujen pussien säilytykseen käytettävässä
pakastimessa ei saa olla automaattista sulatusta, koska se altistaa Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustat toistuvasti
kosteudelle, joka voi vahingoittaa alustoja.
Älä käytä Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoja, jos niissä näkyy värimuutoksia. Viimeinen käyttöajankohta ja eränumero
on merkitty jokaiseen Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustojen pakkaukseen. Eränumero on myös merkitty yksittäisiin
Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoihin.

2

FI(Suomenkielinen)

Hävittäminen

Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustat voivat sisältää mahdollisesti tartuntavaarallisia mikro-organismeja.
Noudata hävittämisessä voimassa olevia alan standardeja.

Käyttöohjeet

Noudata huolellisesti kaikkia ohjeita. Jos ohjeita ei noudateta, tulokset saattavat olla epätarkkoja.

Elintarvike- ja juomanäytteiden, mukaan lukien ympäristönäytteet, valmistaminen ja Tulkinta(pullovettä lukuun ottamatta)
Näytteen valmistus
1. Käytä sopivaa steriiliä laimenninta:

Butterfieldin fosfaattipuskuroitu laimennusvesi7, 0,1-prosenttinen peptonivesi8, peptonisuolalaimentimet8,9, puskuroitu
peptonivesi8,9, suolaliuos (0,85–0,90-prosenttinen), Neogen® Wide-Spectrum Neutralizer, bisulfiititon Letheen Broth tai
tislattu vesi. Katso erityisvaatimukset kohdasta ”Erikoisohjeet validoituja menetelmiä varten”.
Älä käytä Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustojen kanssa laimentimia, jotka sisältävät sitraattia, bisulfiittia tai
tiosulfaattia, sillä ne voivat estää kasvua. Jos sitraattipuskuri on indikoitu vakiomenettelyssä, korvaa se jollain edellä
luetelluista puskureista lämmitettynä 40–45 °C:n (104–113 °F:n) lämpötilaan.
2. Sekoita tai homogenoi näyte.
3. Säädä näytesuspension pH:ksi 6,6–7,2 mikro-organismien kasvun ja elpymisen optimoimiseksi. Säädä happamissa
tuotteissa pH käyttämällä 1N NaOH-liuosta. Säädä happamissa tuotteissa pH käyttämällä 1N HCl-liuosta.
Kasvatusalustaan asettaminen
1. Aseta Neogen Petrifilm CC -kasvatusalusta tasaiselle pinnalle vaakatasoon.
2. Nosta päällyskalvoa ja annostele pipetillä kohtisuoraan inokulointialueelle 1 ml näytesuspensiota pohjakalvon keskelle.
3. Kierrä päällyskalvo näytteen päälle ilmakuplien muodostumisen ehkäisemiseksi.
4. Aseta Neogen® Petrifilm® -levitin litteä puoli alaspäin keskelle Neogen Petrifilm CC -kasvatusalusta. Levitä näyte
tasaisesti painamalla varovasti Neogen Petrifilm -levittimen keskeltä. Levitä inokulaattia Neogen Petrifilm CC-kasvatusalustan koko kasvualueelle, ennen kuin geeli jähmettyy. Älä vedä Neogen Petrifilm -levitintä kalvoa pitkin.
5. Poista Neogen Petrifilm -levitin ja jätä Neogen Petrifilm CC -kasvatusalusta rauhaan vähintään yhden minuutin ajaksi,
jotta geeliytyminen ehtii tapahtua.

Inkubointi

Inkuboi Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoja vaakasuorassa asennossa kirkas puoli ylöspäin enintään 20 kappaleen
pinoissa. Vallitsevien paikallisten viitemenetelmien mukaan voidaan käyttää useita eri inkubointiaikoja ja -lämpötiloja, joista
osa on lueteltu kohdassa ”Erikoisohjeet validoituja menetelmiä varten”.

Tulkinta

1. Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustat voidaan laskea tavallisella pesäkelaskurilla tai muulla valaistulla suurennuslasilla.
Koliformin tuottama kaasu voi hajottaa pesäkkeen niin, että pesäke ”ympäröi” kuplaa. Tällainen on laskettava yhdeksiainoaksi koliformiksi. Älä laske vaahdon pinnalla olevia pesäkkeitä, sillä elatusaineen selektiivinen vaikutus ei kohdistu
niihin. Älä laske mahdollisia artefaktikuplia.
Koliformisten pesäkkeiden tulkinta Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustalla vaihtelee vertailumenetelmän mukaan.
Esimerkki:
TAI NF Validationin sertifioimat menetelmät:
AOAC® Official MethodsSM:
Koliformien pesäkkeet ovat punaisia ja lähellä- ISO-menetelmään 48312 verraten (MPN-menetelmä),
kaasukeräymää (enintään yhden pesäkkeen läpimitan
koliformien pesäkkeet ovat punaisia ja lähellä
päässä). Pesäkkeitä, joihin ei liity kaasua (pesäkkeen ja
kaasukeräymää (yhden pesäkkeen läpimitan päässä).
kaasukuplan välinen etäisyys on suurempi kuin yhden- ISO-menetelmään 48321 (yhteenlasketut koliformit) ja NF
pesäkkeen läpimitta), ei lasketa koliformeiksi.
V08-0603 (fekaaliset koliformit) verraten, jotka kumpikin
perustuvat VRBL-menetelmiin, lasketaan kaikki kaasua
tuottaneet ja tuottamattomat punaiset pesäkkeet.
2. Pyöreä kasvualue on kooltaan noin 20 cm2. Arvioita voidaan tehdä Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoista, joissa on
yli 150 pesäkettä, laskemalla yhden tai useamman edustavan neliön pesäkkeiden määrä ja määrittämällä pesäkkeiden
keskimääräinen lukumäärä neliötä kohti. Arvioitu luku yhtä Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustaa kohden määritetään
kertomalla keskimääräinen lukumäärä 20:llä.
3. Kun pesäkkeitä on runsaasti, Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustojen geelin väri voi tummentua ja voi esiintyä
jompikumpi tai kumpikin seuraavista piirteistä: paljon pieniä, epäselviä pesäkkeitä ja/tai paljon kaasukuplia.
Suuret koliformipitoisuudet aiheuttavat kasvualueen muuttumisen tummanpunaiseksi. Mikäli näin tapahtuu,
kirjaa tulokset liian suuriksi laskea (TNTC). Jos halutaan todellinen pesäkeluku, tee maljaus käyttämällä
suurempaa laimennosta.
3

FI(Suomenkielinen)

4. Pesäkkeet voi tarvittaessa eristää myöhempää tunnistusta varten. Nosta päällyskalvoa asianmukaisen
testausmenetelmän mukaisesti ja poimi pesäke geelistä. Testaa vakiomenetelmillä.
5. Jos Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoja ei voida laskea 1 tunnin kuluessa inkubaattorista ottamisesta, ne voidaan
säilyttää myöhempää laskentaa varten jäädyttämällä ne suljettavassa rasiassa lämpötilaan, joka on pienempi tai yhtä
suuri kuin -15 °C (5 °F), enintään viikon ajaksi.

Pullovesinäytteiden valmistaminen, inkubointi ja tulkinta

Hydratoi Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustat
1. Aseta Neogen Petrifilm CC -kasvatusalusta tasaiselle pinnalle vaakatasoon.
2. Nosta päällyskalvoa ja annostele 1 ml sopivaa steriiliä laimenninta pohjakalvon keskelle. Sopiviin steriileihin
hydratointilaimentimiin kuuluvat tislattu vesi, deionisoitu vesi (DI) ja käänteisosmoosivesi (RO).
3. Kierrä päällyskalvo näytteen päälle ilmakuplien muodostumisen ehkäisemiseksi.
4. Aseta Neogen Petrifilm -levitin litteä puoli alaspäin keskelle kasvatusalustaa. Levitä laimennin tasaisesti painamalla
varovasti levittimen keskeltä. Levitä laimenninta Neogen Petrifilm -kasvatusalustan koko kasvualueelle, ennen kuin geeli
jähmettyy. Älä vedä levitintä kalvoa pitkin.
5. Poista levitin ja pidä kasvatusalustat suljettuina vähintään 1 tunnin ajan ennen käyttöä.
6. Säilytä hydratoidut Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustat suljetussa pussissa tai muovipussissa. Suojaa kasvualustat
valolta ja jäähdytä 2–8 °C:n (36–46 °F:n) lämpötilaan enintään 7 päiväksi.

Veden suodattaminen ja kasvualustan inkubointi

1. Noudata vesianalyysin vakiomenetelmiä, kalvosuodata vesinäyte käyttäen 47 mm:n, huokoskooltaan 0,45 mikroninsekaselluloosaesterisuodatinta (MCE).
2. Nosta varovasti Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustan päällyskalvoa. Vältä pyöreän kasvualueen koskettamista.
Aseta suodatin keskelle hydratoitua aluetta. Minimoi suodattimen alle muodostuvat ilmakuplat.
3. Kierrä päällyskalvo hitaasti suodattimen päälle. Minimoi muodostuvat ilmakuplat ja raot suodattimen ja Neogen
Petrifilm CC -kasvatusalustan välissä.
4. Paina kevyesti käyttäen Neogen Petrifilm -kasvatusalustan levitintä tai liu’uttaen sormea kevyesti koko kiekon alueen
poikki (reunat mukaan lukien), jotta suodattimen kosketus geeliin on tasainen ja ilmakuplat häviävät.
5. Inkuboi Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoja 35 °C ± 1 °C:n lämpötilassa 24 ± 2 tuntia11 tai 36 °C ± 1 °C:n
lämpötilassa 24 ± 2 tuntia12 vaakasuorassa asennossa kirkas puoli ylöspäin enintään 20 kappaleen pinoissa.

Tulkinta

1. Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustat voidaan laskea tavallisella pesäkelaskurilla tai muulla valaistulla suurennuslasilla.
Älä laske vaahdon pinnalla olevia pesäkkeitä, sillä elatusaineen selektiivinen vaikutus ei kohdistu niihin. Älä laske
mahdollisia artefaktikuplia.
2. Punaiset pesäkkeet, joihin liittyy kaasukuplia, lasketaan koliformeiksi. Kaasukuplat voivat muodostaa pyöreän tai
tähtimäisen kuvion pesäkkeen ympärille. Koliformien tuottama kaasu voi hajottaa pesäkkeen niin, että pesäke ”ympäröi”
kuplaa. Tällainen on laskettava yhdeksi ainoaksi koliformiksi. Punaiset pesäkkeet, joihin ei liity lähellä sijaitsevia
kaasukuplia, voivat olla koliformeja, ja ne on poimittava ja testattava asianmukaisilla vahvistusmenetelmillä11,12.
3. Kun pesäkkeitä on runsaasti, Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustojen geelin väri voi tummentua ja voi esiintyä paljon
pieniä, epäselviä pesäkkeitä tai kaasukuplia. Mikäli näin tapahtuu, kirjaa tulokset liian suuriksi laskea (TNTC).
4. Pesäkkeet voidaan eristää myöhempää tunnistusta varten. Nosta päällyskalvoa ja poimi pesäke geelistä tai suodattimen
pinnalta. Päällyskalvoa nostettaessa suodatin voi tarttua joko päällyskalvoon tai pohjakalvoon. Jos suodatin tarttuu
päällyskalvoon, erota suodatin päällyskalvosta ja poimi pesäkkeet. Testaa vakiomenetelmillä.
Huomio: Suodattimia sisältävien Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustojen laskennan lykkäämistä ei suositella.
Katso lisätietoja ”Neogen® Petrifilm® koliformien kasvatusalustan tulkintaoppaasta”. Jos sinulla on jotain tiettyä sovellusta
tai menetelmää koskevia kysymyksiä, käy verkkosivuillamme osoitteessa www.neogen.com tai ota yhteyttä paikalliseen
Neogen-edustajaan tai -jälleenmyyjään.
Erikoisohjeet validoituja menetelmiä varten
AOAC® Official MethodsSM (986.33 Bacteria and Coliform Counts in Milk, Dry Rehydratable Film Methods and 989.10
Bacterial and Coliforms Counts in Dairy Products, Dry Rehydratable Film Methods)
Inkuboi Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoja 24 ± 2 tuntia 32 °C ± 1 °C:n lämpötilassa.
AOAC® Official MethodsSM (991.14 Coliform and Escherichia coli Counts in Foods, Dry Rehydratable Film Methods)
Inkuboi Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoja 24 ± 2 tuntia 35 °C ± 1 °C:n lämpötilassa.

4

FI(Suomenkielinen)

AOAC® Performance Tested MethodSM -sertifikaatti #082101
Tutkimuslaitos AOAC®:n Performance Tested Method (PTM) -tutkimuksessa Neogen Petrifilm CC -kasvatusalusta-menetelmän todettiin vastaavan keskimääräisiä kirjausmääriä seuraavien asiakirjojen mukaisesti: FDA/BAM luku 4,
kappale III.D, menetelmä koliformien laskentaan pullovedestä.

Validoinnin soveltamisala:Pullotettu vesi: puhdistettu vesi, käsitelty lähdevesi, hiilihapoton luonnonlähdevesi, hiilihapotettu luonnonlähdevesi.
Inkubointi:
Inkuboi Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoja 24 ± 2 tuntia 35 °C ± 1 °C:n lämpötilassa.
AFNOR Certificationin myöntämä NF Validation -sertifikaatti:
NF Validation -sertifioitu ISO 16140-210 -standardin mukainen menetelmä verrattuna ISO 48321 -standardiin(3M-01/02-09/89 A)
Validoinnin soveltamisala: Kaikkien ihmisravinnoksi tarkoitettujen elintarvikkeiden (raakoja simpukoita lukuun ottamatta),
lemmikkieläinten ruoan ja ympäristönäytteiden testaamiseen.
Edellä annettuja käyttöohjeita sovellettaessa on huomioitava seuraavat seikat:
Näytteiden valmistaminen:
Käytä vain ISO-hyväksyttyjä laimentimia.
Inkubointi:
Inkuboi Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoja 24 ± 2 tuntia 30 °C ± 1 °C:n tai 37 °C ± 1 °C:n lämpötilassa.
Tulkinta:
Laske testinäytteessä olevien mikro-organismien määrä standardin ISO 72185 mukaan, yksi alusta laimennusta kohti.
Arviot ovat NF Validation -sertifioinnin soveltamisalan ulkopuolella (katso tulkintaosan kohta 2).
NF Validation -sertifioitu ISO 16140-210 -standardin mukainen menetelmä verrattuna ISO 48312 -standardiin(3M-01/02-09/89 B)
Validoinnin soveltamisala: Kaikkien ihmisravinnoksi tarkoitettujen elintarvikkeiden testaamiseen (raakoja simpukoita
lukuun ottamatta).
Edellä annettuja käyttöohjeita sovellettaessa on huomioitava seuraavat seikat:
Näytteiden valmistaminen:
Käytä vain ISO-hyväksyttyjä laimentimia.
Inkubointi:
Inkuboi Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoja 24 ± 2 tuntia 30 °C ± 1 °C:n tai 37 °C ± 1 °C:n lämpötilassa.
Tulkinta:
Laske testinäytteessä olevien mikro-organismien määrä standardin ISO 72185 mukaan, yksi alusta laimennusta kohti.
Arviot ovat NF Validation -sertifioinnin soveltamisalan ulkopuolella (katso tulkintaosan kohta 2).
NF Validation -sertifioitu ISO 16140-210 -standardin mukainen menetelmä verrattuna NF V08-0603 -standardiin(3M-01/02-09/89 C)
Validoinnin soveltamisala: Kaikkien ihmisravinnoksi tarkoitettujen elintarvikkeiden testaamiseen
Edellä annettuja käyttöohjeita sovellettaessa on huomioitava seuraavat seikat:
Näytteiden valmistaminen:
Käytä vain ISO-hyväksyttyjä laimentimia
Inkubointi:
Inkuboi Neogen Petrifilm CC -kasvatusalustoja 24 ± 2 tuntia 44 °C ± 1 °C:n lämpötilassa.

5

FI(Suomenkielinen)

Tulkinta:
Laske testinäytteessä olevien mikro-organismien määrä standardin ISO 72185 mukaan, yksi alusta laimennusta kohti.
Arviot ovat NF Validation -sertifioinnin soveltamisalan ulkopuolella (katso tulkintaosan kohta 2). Tee inokulointi,
pesäkelaskenta sekä tulosten laskenta ja ilmaisu standardin EN ISO 7218 mukaisesti.

3M 01/02 – 09/89A, B, and C
ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS
http://nf-validation.afnor.org/en
Lisätietoja validointiajan päättymisestä on NF VALIDATION -sertifikaatissa, joka on saatavissa edellä mainitulta
verkkosivustolta.

Viitteet
1. ISO 4832. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms –Colony count technique.
2. ISO 4831. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumeration of
coliforms – Most probable number technique.
3. AFNOR NF V08-060. General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at
44°C – Routine method.
4. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
6. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
7. FDA. Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998. Reagents Index for BAM found at:
http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.
8. ISO 6887-5. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk products.
9. ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension anddecimal dilutions.
10. ISO 16140-2. Microbiology of the food chain – Method validation – Protocol for the validation of alternative(proprietary) methods against a reference method.
11. U.S. Food and Drug Administration. 2002. Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4. Membranefilter method for coliforms.
12. American Public Health Association. 2017. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th Ed.
Method 9222B2a.
Tarkista edellä mainittujen standardien mukaisten menetelmien ajantasaiset versiot.

Merkkien selitykset

info.neogen.com/symbols
AOAC on AOAC INTERNATIONAL -yhtiön rekisteröity tavaramerkki.
Official Method on AOAC INTERNATIONALin palvelumerkki.
Performance Tested Method on AOAC INTERNATIONALin palvelumerkki.

6

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931A

PT(Português)Data de emissão: 2024-01

Instruções do produto

Placa para Contagem de Coliformes
Descrição e uso recomendado do produto

A Placa Neogen® Petrifilm® para Contagem de Coliformes (CC) é um sistema de meio de cultura de amostra pronto,
que contém nutrientes modificados de Violet Red Bile (VRB), um agente gelificante solúvel em água fria e um indicador
tetrazólico que facilita a enumeração das colônias. As Placas Neogen Petrifilm CC são usadas para a enumeração
de coliformes no setor de alimentos, bebidas e águas engarrafadas. Os componentes da Placa Neogen Petrifilm CCsão descontaminados, mas não esterilizados. A Neogen Food Safety é certificada pela Organização Internacional deNormalização (ISO) 9001 para projeto e fabricação. A Placa Neogen Petrifilm CC não foi avaliada com todos os possíveis
produtos ou processos alimentícios, protocolos de testes nem todas as linhagens possíveis de micro-organismos.
O Bacteriological Analytical Manual (BAM) da United States Food and Drug Administration (FDA)7 define coliformes comobastonetes gram-- negativos, os quais produzem ácido e gases a partir da lactose durante a fermentação metabólica.
As colônias de coliformes que crescem na Placa Neogen Petrifilm CC produzem ácidos, que fazem com que o indicador
de pH escureça a cor do gel; o gás preso ao redor de colônias vermelhas indica coliformes.
A ISO define coliformes de acordo com sua capacidade de crescimento em meios seletivos e específicos do método.
Método ISO 48321, enumeração de coliformes por técnica de contagem de colônia, define os coliformes como produtoresde ácidos em VRB com ágar de lactose (VRBL). Nas placas Neogen Petrifilm CC estes coliformes produtores de ácidos
são indicados por colônias vermelhas com ou sem produção de gás. Método ISO 48312, enumeração de coliformes pelo
método de número mais provável (MPN), define os coliformes pela sua capacidade de crescer e produzir gás a partir delactose em um caldo selecionado. Nas placas Neogen Petrifilm CC estes coliformes são indicados por colônias vermelhas
associadas ao gás.
Para amostras de água engarrafada, as colônias de coliformes confirmadas são indicadas por colônias vermelhas
associadas ao gás nas Placas Neogen Petrifilm CC. Colônias vermelhas sem bolhas de gás associadas próximas podem ser
coliformes e devem ser subdividas em outra cultura e testadas com os métodos adequados de confirmação11,12. Consulte aseção Interpretação para mais detalhes. Colônias características podem ser subdivididas em outra cultura e testadas para
Escherichia coli.
A AFNOR Certification certificou a Placa Neogen Petrifilm CC em comparação ao método ISO 48312 e ao método ISO
48321 para enumeração de coliformes totais. A AFNOR Certification também certificou a Placa Neogen Petrifilm CC em
comparação com o NF V08-0603, para enumeração de coliformes termotolerantes.

Segurança

É dever do usuário ler, compreender e seguir todas as informações de segurança contidas nas instruções da Placa
Neogen Petrifilm CC. Guarde as instruções sobre segurança para consulta posterior.
ADVERTÊNCIA:

indica uma situação de perigo que, se não for evitada, pode resultar em morte ou ferimentos
graves e/ou danos

ADVERTÊNCIA
Para reduzir os riscos associados à exposição a agentes nocivos biológicos e contaminação ambiental:• Siga as normas atuais do setor e os regulamentos locais para o descarte de resíduos com risco biológico.
Para reduzir os riscos associados à liberação de produtos contaminados:• Siga todas as instruções de armazenamento do produto descritas nas instruções de uso.
• Não utilize após a data de validade.
Para reduzir os riscos associados a infecções bacterianas e contaminação no local de trabalho:• Realize os testes com as Placas Neogen Petrifilm CC em um laboratório devidamente equipado, sob a supervisão deum microbiologista qualificado.
• O usuário deve treinar sua equipe em técnicas de testes atuais adequadas, por exemplo: Boas Práticas de Laboratório4,
ISO 72185 ou ISO 170256.
Para reduzir os riscos associados à interpretação errônea dos resultados:• A Neogen não registrou as Placas Neogen Petrifilm CC para uso em outros setores além do segmento de alimentos e
bebidas, incluindo água engarrafada. Por exemplo, a Neogen não registrou as Placas Neogen Petrifilm CC para testesde água, produtos farmacêuticos ou cosméticos. A Neogen não registrou as Placas Neogen Petrifilm CC para teste desuperfície e águas municipais ou águas utilizadas nos setores farmacêutico ou cosmético.
1

PT(Português)• O uso de Placas Neogen Petrifilm CC para testar amostras em conformidade com regulamentos locais de teste deágua fica a critério e responsabilidade do usuário final. As Placas Neogen Petrifilm CC não foram testadas com todas
as amostras possíveis de água engarrafada, protocolos de testes e também não em todas as linhagens possíveis demicro-organismos.
• Não use as Placas Neogen Petrifilm CC no diagnóstico de doenças de seres humanos ou animais.
• As Placas Neogen Petrifilm CC não distinguem uma linhagem de coliforme da outra.
• Alimentos com alto teor de açúcar podem aumentar o potencial de produção de gases por Enterobacteriaceae
não coliformes.
Consulte a Folha de dados de segurança para obter mais informações.
Para obter mais informações sobre documentação de desempenho dos produtos, visite o nosso site em www.neogen.com
ou entre em contato com seu representante ou distribuidor autorizado da Neogen.

Responsabilidade do usuário

Os usuários são responsáveis por se familiarizar com as informações e instruções do produto. Acesse o nosso site em
www.neogen.com ou entre em contato com o representante ou distribuidor autorizado da Neogen para obter mais
informações.
Ao selecionar qualquer método de teste, é importante considerar que fatores externos, como métodos de amostragem,
protocolos de teste, preparo de amostras, manipulação e técnica laboratorial utilizada, podem influenciar os resultados.
É de responsabilidade do usuário, ao selecionar qualquer método de teste ou produto, avaliar um número suficiente deamostras com as matrizes e testes microbiológicos que permitam assegurar que o método escolhido atenda aos critérios
por ele estabelecidos.
Também é de responsabilidade do usuário determinar se o método de teste e os resultados atendem às exigências de seusclientes e fornecedores.
Como em qualquer outro método de teste, os resultados obtidos com qualquer produto da Neogen Food Safety não
constituem garantia de qualidade das matrizes ou processos com eles testados.

Limitação de garantias/recurso limitado

SALVO CONFORME DECLARADO EXPRESSAMENTE EM UMA SEÇÃO DE GARANTIA DE EMPACOTAMENTO DE
PRODUTO INDIVIDUAL, A NEOGEN REJEITA TODAS AS GARANTIAS EXPRESSAS E IMPLÍCITAS, INCLUINDO,ENTRE OUTRAS, QUAISQUER GARANTIAS DE COMERCIALIZAÇÃO OU ADEQUAÇÃO PARA UM DETERMINADO
USO. Se ficar provado que qualquer produto da Neogen Food Safety se encontra defeituoso, a Neogen ou seu distribuidor
autorizado procederá à respectiva substituição ou, se assim o decidir, restituirá o dinheiro da compra do produto. Estes são
os seus únicos termos de recurso. A Neogen deverá ser prontamente notificada em até sessenta dias após a descoberta dequalquer defeito suspeito no produto, o qual deverá ser devolvido à Neogen. Entre em contato com seu representante da
Neogen ou distribuidor autorizado da Neogen para qualquer dúvida adicional.

Limitações de responsabilidade da Neogen

A NEOGEN NÃO SE RESPONSABILIZARÁ POR QUAISQUER DANOS, SEJAM DIRETOS, INDIRETOS, ESPECIAIS,ACIDENTAIS OU SUBSEQUENTES, INCLUINDO, ENTRE OUTROS, PERDA DE LUCROS. Em nenhuma circunstância nem
ao abrigo seja de qualquer teoria jurídica, a responsabilidade da Neogen deverá exceder o preço de compra dos produtos
supostamente defeituosos.

Armazenamento

Armazene os pacotes fechados da Placa Neogen Petrifilm CC em temperaturas de congelamento ou resfriamento
inferiores ou iguais a 8 °C (46 °F). Momentos antes do uso, deixe os pacotes fechados da Placa Neogen Petrifilm CC
atingirem a temperatura ambiente antes de abri-los. Coloque de volta no pacote as Placas Neogen Petrifilm CC não
utilizadas. Para selar, dobre a extremidade aberta do pacote e cole com fita adesiva. Para evitar exposição à umidade, nãorefrigere os pacotes que tenham sido abertos. Armazene os pacotes que tenham sido lacrados novamente em um local
fresco e seco pelo período máximo de quatro semanas. Recomenda-se que os pacotes de Placas Neogen Petrifilm CC quetenham sido lacrados novamente sejam armazenados em um congelador (veja abaixo) caso a temperatura do laboratório
exceda 25 °C (77 °F) ou o laboratório esteja localizado em uma região onde a umidade relativa do ar ultrapasse 50% (coma exceção de locais refrigerados).
Para guardar os sacos abertos em um congelador, coloque as Placas Neogen Petrifilm CC em um recipiente selável.
Para remover as placas Neogen Petrifilm CC congeladas para uso, abra o recipiente, remova as placas que são necessárias
e devolva imediatamente as placas restantes ao freezer no recipiente selado pelo restante do prazo de validade. As Placas
Neogen Petrifilm CC não devem ser utilizadas após a data de validade. O congelador utilizado para armazenar os pacotes
abertos não pode ter um ciclo de degelo automático, uma vez que isso causaria a exposição repetida das Placas Neogen
Petrifilm CC à umidade, o que pode causar dano a elas.
Não utilize Placas Neogen Petrifilm CC que apresentarem descoloração. A data de validade e o número do lote estão
impressos em cada embalagem das Placas Neogen Petrifilm CC. O número do lote também está impresso em cada Placa
Neogen Petrifilm CC.
2

PT(Português)DescarteApós serem usadas, as Placas Neogen Petrifilm CC podem conter micro-organismos que representem um possível
risco biológico.
Siga as normas industriais vigentes para descarte.

Instruções de uso

Siga todas as instruções com atenção. Caso contrário, pode haver resultados imprecisos.

Preparação, incubação e interpretação de amostras dos setores de alimentos e bebidas(exceto água engarrafada), incluindo amostras ambientais
Preparo da amostra
1. Use diluentes estéreis adequados:Água de diluição tamponada de fosfato de Butterfield7, água peptonada a 0,1%8, diluentes de sal peptonado8,9, águapeptona tamponada8,9, solução salina (0,85 0,90%), neutralizador de amplo espectro Neogen®, caldo de Letheen sem
bissulfito ou água destilada. Consulte a seção “Instruções Específicas para Métodos Comprovados” para obter os
requisitos específicos.
Não utilize diluentes que contenham citrato, bissulfito ou tiossulfato com as Placas Neogen Petrifilm CC, pois
podem inibir o crescimento. Se o tampão de citrato for indicado no procedimento padrão, substitua-o por um dostampões listados acima, aquecido a 40-45 °C(104-113 °F).
2. Misture ou homogeneíze a amostra.
3. Para crescimento e recuperação ideais dos micro-organismos, ajuste o pH da suspensão da amostra para 6,6-7,2.
Para produtos ácidos, ajuste o pH com NaOH a 1N. Para produtos alcalinos, ajuste o pH com 1N HCl.
Plaqueamento
1. Coloque a Placa Neogen Petrifilm CC sobre uma superfície plana e nivelada.
2. Levante o filme superior e, com a pipeta perpendicular à área de inoculação, aplique 1 mL da suspensão da amostra nocentro do filme inferior.
3. Role o filme superior para baixo, na direção da amostra, para impedir a captura de bolhas de ar.
4. Coloque o difusor Neogen® Petrifilm® com o lado plano para baixo no centro da Placa Neogen Petrifilm CC. Pressione
devagar o centro do difusor Neogen Petrifilm para distribuir a amostra uniformemente. Espalhe o inóculo sobre todaa área de crescimento da Placa Neogen Petrifilm CC antes que o gel se forme. Não deslize o difusor Neogen Petrifilm
sobre o filme.
5. Remova o Difusor Neogen Petrifilm e deixe a Placa Neogen Petrifilm CC em descanso por pelo menos um minuto para
permitir a formação do gel.

Incubação

Incube as Placas Neogen Petrifilm CC na posição horizontal com o lado transparente para cima em pilhas de até 20 placas.
Vários tempos de incubação e temperaturas podem ser usados dependendo dos métodos de referência locais atuais,
alguns dos quais estão listados na seção de “Instruções Específicas para Métodos Comprovados”.

Interpretação

1. As Placas Neogen Petrifilm CC podem ser contadas usando um contador de colônias comum ou qualquer outro
amplificador iluminado. O gás produzido pelos coliformes pode romper a colônia de forma que ela “contorne” a bolha.
Isto deve ser contado como um único coliforme. Não conte as colônias presentes na barreira de espuma, pois elas nãoestão sob a influência seletiva do meio. Não conte bolhas artificiais que possam estar presentes.
A interpretação das colônias de coliformes na Placa Neogen Petrifilm CC varia de acordo com o método de referência.
Por exemplo:
OU Métodos certificados de NF Validation:
AOAC® Official MethodsSM:
As colônias de coliformes são vermelhas e- Em comparação com o método ISO 48312
intimamente associadas (com até o diâmetro de(método MPN), as colônias de coliformes são vermelhas
uma colônia) a gases aprisionados. As colônias nãoe intimamente associadas (com até o diâmetro de uma
associadas ao gás (com uma distância superior a um
colônia) aos gases aprisionados.
diâmetro de colônia entre a colônia e a bolha de gás)
- Em comparação com o método ISO 48321
não são contadas como coliformes.
(coliformes totais) e NF V08-0603 (coliformes fecais)
ambos baseados em métodos de VRBL, contando todas
as colônias vermelhas, com ou sem gás.
2. A área de crescimento circular tem aproximadamente 20 cm2. Podem ser feitas estimativas nas Placas Neogen Petrifilm
CC contendo mais de 150 colônias, contando o número de colônias em um ou mais quadrados representativos edeterminando o número médio por quadrado. Multiplique a média por 20 para determinar a contagem estimada paracada Placa Neogen Petrifilm CC.
3

PT(Português)3. Quando houver um grande número de colônias presentes, as Placas Neogen Petrifilm CC podem ter um escurecimento
na cor do gel, e uma ou mais das características: muitas colônias pequenas indistintas e/ou muitas bolhas de gás.
Altas concentrações de coliformes farão com que a área de crescimento se torne vermelha escura. Quando issoacontecer, registre os resultados como muito numerosos para contar (TNTC). Quando for necessária uma contagem
real, faça uma diluição maior da placa.
4. Quando necessário, as colônias podem ser isoladas para identificação posterior. Levante o filme superior usando uma
técnica de teste adequada e colete a colônia do gel. Teste usando procedimentos padrão.
5. Se as Placas Neogen Petrifilm CC não puderem ser contadas em até 1 hora após a remoção da incubadora, elas podem
ser armazenadas para enumeração posterior, congeladas em um recipiente lacrado em temperaturas inferiores ou
iguais a 15 °C (5 °F) negativos pelo período máximo de uma semana.

Preparação, incubação e interpretação de amostras de água engarrafada
Hidrate as Placas Neogen Petrifilm CC
1. Coloque a Placa Neogen Petrifilm CC sobre uma superfície plana e nivelada.

2. Levante o filme superior e aplique 1 mL de um diluente de hidratação estéril apropriado no centro do filme inferior.
Os diluentes de hidratação estéril adequados incluem água destilada, água desionizada (DI) e água de osmose
reversa (RO).
3. Role o filme superior para baixo, na direção da amostra, para impedir a captura de bolhas de ar.
4. Coloque o difusor Neogen Petrifilm com o lado plano para baixo no centro da Placa. Pressione devagar o centro do
difusor para distribuir o diluente uniformemente. Espalhe o diluente sobre toda a área de crescimento da Placa Neogen
Petrifilm antes que o gel se forme. Não deslize o difusor sobre o filme.
5. Remova o difusor e mantenha as placas fechadas por, no mínimo, 1 hora antes do uso.
6. Armazene as Placas Neogen Petrifilm CC hidratadas em um pacote ou saco plástico lacrados. Proteja as placas da luz erefrigere-as a uma temperatura entre 2-8 °C (36-46 °F) por até 7 dias.

Filtragem de água e incubação da placa

1. De acordo com procedimentos padrão para análise de água, filtre com membrana a amostra de água usando um filtrode éster de celulose mista (MCE) de 47 mm com tamanho do poro 0,45 mícron.
2. Levante cuidadosamente o filme superior da Placa Neogen Petrifilm CC. Evite tocar na área de crescimento circular.
Coloque o filtro no centro da área hidratada. Minimize as bolhas presas sob o filtro.
3. Role o filme superior lentamente no filtro. Minimize a criação de bolhas de ar e lacunas entre o filtro e a Placa
Neogen Petrifilm CC.
4. Aplique uma leve pressão usando o difusor da placa Neogen Petrifilm ou deslize um dedo levemente por toda a área do
disco (incluindo as bordas) para garantir um contato uniforme do filtro com o gel e para eliminar quaisquer bolhas de ar.
5. Incube as placas Neogen Petrifilm CC a 35 °C ± 1 °C por 24 horas ± 2 horas11 ou 36 °C ± 1 °C por 24 horas ± 2 horas12
em uma posição horizontal com o lado transparente para cima em pilhas de até 20 placas.

Interpretação

1. As Placas Neogen Petrifilm CC podem ser contadas usando um contador de colônias comum ou qualquer outro
amplificador iluminado. Não conte as colônias presentes na barreira de espuma, pois elas não estão sob a influência
seletiva do meio. Não conte bolhas artificiais que possam estar presentes.
2. Colônias vermelhas associadas a bolhas de gás são contadas como coliformes. Bolhas de gás podem formar um padrão
circular ou em formato de estrela ao redor da colônia. O gás produzido pelos coliformes pode romper a colônia deforma que ela “contorne” a bolha. Isto deve ser contado como um único coliforme. Colônias vermelhas sem bolhasde gás associadas próximas podem ser coliformes e devem coletadas e testadas com os métodos adequadosde confirmação11,12.
3. Quando houver um grande número de colônias presentes, as Placas Neogen Petrifilm CC sofrerão um escurecimento
da cor do gel associado a muitas colônias pequenas indistintas ou bolhas de gás. Quando isso acontecer, registre os
resultados como muito numerosos para contar (TNTC).
4. As colônias podem ser isoladas para identificação posterior. Levante o filme superior e colete a colônia do gel ou dasuperfície do filtro. Ao levantar o filme superior, o filtro pode aderir ao filme superior ou inferior. Se o filtro aderir ao
filme superior, separe o filtro do filme superior e colete as colônias. Teste usando procedimentos padrão.
Nota: A contagem atrasada das Placas Neogen Petrifilm CC não é recomendada.
Para obter mais informações, consulte o “Guia de Interpretação da Placa para Contagem de Coliformes Neogen®
Petrifilm®”. Em caso de dúvidas sobre aplicações ou procedimentos específicos, acesse nosso site www.neogen.com ou
entre em contato com o seu representante ou distribuidor local Neogen.

4

PT(Português)Instruções específicas para métodos comprovados
AOAC® Official MethodsSM (986.33 Contagem de bactérias e coliformes em leite, Método de filme rehidratável a seco e989.10 Contagem de bactérias e coliformes em produtos derivados de leite, métodos de filme rehidratável a seco)
Incube as Placas Neogen Petrifilm CC 24 horas ± 2 horas a 32 °C ± 1 °C.
AOAC® Official MethodsSM (991.14 Contagem de coliformes e Escherichia coli em alimentos, métodos de filmerehidratável a seco)
Incube as Placas Neogen Petrifilm CC 24 horas ± 2 horas a 35 °C ± 1 °C.
AOAC® Performance Tested MethodSM Certificado Nº 082101
Em um estudo Performance Tested Method (PTM) do AOAC® Research Institute, o método da Placa Neogen Petrifilm
CC se mostrou equivalente às contagens logarítmicas médias do método do BAM, Capítulo 4, Seção III.D da FDA para
enumerar a contagem de coliformes em água engarrafada.

Escopo da validação:Água engarrafada: água purificada, água de nascente tratada, água de nascente natural sem gás, água de nascente natural
gaseificada.
Incubação:Incube as Placas Neogen Petrifilm CC por 24 horas ± 2 horas a 35 °C ± 1 °C.
NF Validation da AFNOR Certification:
Método certificado de NF Validation em conformidade com a ISO 16140-210 em comparação com a ISO 48321(3M-01/02-09/89 A)
Escopo da validação: Para testar todos os produtos alimentícios humanos (exceto mariscos crus), alimentos para pets eamostras ambientais.
Leve em consideração os detalhes a seguir ao implementar as instruções de uso acima:
Preparo da amostra:
Utilize apenas diluentes listados na ISO.
Incubação:Incube as Placas Neogen Petrifilm CC por 24 horas ± 2 horas a 30 °C ± 1 °C ou 37 °C ± 1 °C.
Interpretação:Calcule o número de micro-organismos presentes na amostra para análise, de acordo com a ISO 72185, para uma placa
por diluição. As estimativas estão fora do âmbito da certificação NF Validation (veja a seção de interpretação, item 2).
Método certificado de NF Validation em conformidade com a ISO 16140-210 em comparação com a ISO 48312(3M-01/02-09/89 B)
Escopo da validação: Para testar todos os produtos alimentícios humanos (exceto mariscos crus).
Leve em consideração os detalhes a seguir ao implementar as instruções de uso acima:
Preparo da amostra:
Utilize apenas diluentes listados na ISO.
Incubação:Incube as Placas Neogen Petrifilm CC por 24 horas ± 2 horas a 30 °C ± 1 °C ou 37 °C ± 1 °C.
Interpretação:Calcule o número de micro-organismos presentes na amostra para análise, de acordo com a ISO 72185, para uma placa
por diluição. As estimativas estão fora do âmbito da certificação NF Validation (veja a seção de interpretação, item 2).
Método NF Validation certificado em conformidade com a ISO 16140-210 em comparação com a NF V08-0603(3M-01/02-09/89 C)
Escopo da validação: Para testar todos os produtos alimentícios humanos
Leve em consideração os detalhes a seguir ao implementar as instruções de uso acima:
Preparo da amostra:
Utilize apenas diluentes listados na ISO
Incubação:Incube as Placas Neogen Petrifilm CC por 24 horas ± 2 a 44 °C ± 1 °C.
5PT(Português)Interpretação:Calcule o número de micro-organismos presentes na amostra para análise, de acordo com a ISO 72185, para uma placa
por diluição. As estimativas estão fora do âmbito da certificação NF Validation (veja a seção de interpretação, item 2).
Consulte o padrão EN ISO 7218 para inoculação, cálculo e contagem de colônias e expressão dos resultados.

3M 01/02 – 09/89A, B, and C
ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS
http://nf-validation.afnor.org/en
Para obter mais informações sobre o término da validade, consulte o certificado NF VALIDATION disponível nosite supracitado.

Referências
1. ISO 4832. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms –Colony count technique.
2. ISO 4831. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumeration of
coliforms – Most probable number technique.
3. AFNOR NF V08-060. General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at
44°C – Routine method.
4. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
6. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
7. FDA. Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998. Índice de reagentes para BAM encontrado
em: http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.
8. ISO 6887-5. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk products.
9. ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension anddecimal dilutions.
10. ISO 16140-2. Microbiology of the food chain – Method validation – Protocol for the validation of alternative(proprietary) methods against a reference method.
11. U.S. Food and Drug Administration. 2002. Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4. Membranefilter method for coliforms.
12. American Public Health Association. 2017. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th Ed.
Method 9222B2a.
Consulte as versões atuais dos métodos padrão listados acima.

Explicação dos símbolos
info.neogen.com/symbols

AOAC é uma marca comercial registrada da AOAC INTERNATIONAL.
Official Methods é uma marca de serviço da AOAC INTERNATIONAL.
Performance Tested Method é uma marca de serviço da AOAC INTERNATIONAL.

6

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931A

EL(Ελληνικά)Ημερομηνία έκδοσης: 2024-01

Πληροφορίες προϊόντος

Πλακίδιο Καταμέτρησης Κολοβακτηριδίων
Περιγραφή του προϊόντος και σκοπός χρήσης

Το Neogen® Petrifilm® Πλακίδιο Καταμέτρησης Κολοβακτηριδίων (CC) είναι ένα σύστημα έτοιμου για δειγματοληψία
καλλιεργητικού μέσου που περιέχει τροποποιημένα θρεπτικά συστατικά Violet Red Bile (VRB), έναν παράγοντα
σχηματισμού γέλης διαλυτό σε κρύο νερό και έναν δείκτη τετραζολίου που διευκολύνει την καταμέτρηση τηςαποικίας. Τα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC χρησιμοποιούνται για την καταμέτρηση κολοβακτηριδίων στις
βιομηχανίες τροφίμων και ποτών και εμφιαλωμένου νερού. Τα συστατικά των Neogen Petrifilm Πλακιδίων CC έχουν
απολυμανθεί, όχι όμως αποστειρωθεί. Η Neogen Food Safety φέρει πιστοποίηση σύμφωνα με το πρότυπο τουΔιεθνούς Οργανισμού Τυποποίησης (ISO) 9001 για σχεδιασμό και παραγωγή. Το Neogen Petrifilm Πλακίδιο CC δενέχει αξιολογηθεί με όλα τα πιθανά προϊόντα τροφίμων, διεργασίες επεξεργασίας τροφίμων, πρωτόκολλα ελέγχου ήμε όλα τα πιθανά στελέχη μικροοργανισμών.
Στο εγχειρίδιο United States Food and Drug Administration (FDA) Bacteriological Analytical Manual (BAM)7,τα κολοβακτηρίδια ορίζονται ως αρνητικά κατά Gram βακτήρια που παράγουν οξύ και αέριο από τη ζύμωση
λακτόζης. Οι αποικίες κολοβακτηριδίων που αναπτύσσονται στο Neogen Petrifilm Πλακίδιο CC παράγουν οξύ,το οποίο προκαλεί σκουρότερο χρώμα της γέλης από τον δείκτη pH. Το αέριο που παγιδεύεται γύρω από τιςκόκκινες αποικίες υποδεικνύει κολοβακτηρίδια.
Το ISO ορίζει τα κολοβακτηρίδια σύμφωνα με την ικανότητά τους να αναπτύσσονται σε επιλεγμένα μέσασυγκεκριμένης μεθόδου. Η μέθοδος ISO 48321, με απαρίθμηση των κολοβακτηριδίων με την τεχνική καταμέτρησης
αποικιών ορίζει τα κολοβακτηρίδια ως παραγωγούς οξέος στο VRB με άγαρ λακτόζης (VRBL). Στα Neogen
Petrifilm Πλακίδια CC, αυτά τα κολοβακτηρίδια που παράγουν οξύ υποδεικνύονται από κόκκινες αποικίες,με ή χωρίς παραγωγή αερίου. Η μέθοδος ISO 48312, με απαρίθμηση των κολοβακτηριδίων με τη μέθοδο τουπιθανότερου αριθμού (MPN), ορίζει τα κολοβακτηρίδια σύμφωνα με την ικανότητά τους να αναπτύσσονται και ναπαράγουν αέριο από τη λακτόζη σε επιλεκτικό ζωμό. Στα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC, αυτά τα κολοβακτηρίδια
υποδεικνύονται από κόκκινες αποικίες που σχετίζονται με αέριο.
Για τα δείγματα εμφιαλωμένου νερού, οι επιβεβαιωμένες αποικίες κολοβακτηριδίων υποδεικνύονται από κόκκινες
αποικίες που σχετίζονται με αέριο στα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC. Οι κόκκινες αποικίες χωρίς στενό συσχετισμό
φυσαλίδων αερίου μπορεί να αποτελούν κολοβακτηρίδια και θα πρέπει να υποκαλλιεργούνται και να ελέγχονται μετις κατάλληλες μεθόδους επιβεβαίωσης11,12. Ανατρέξτε στην ενότητα «Ερμηνεία» για περισσότερες λεπτομέρειες.
Οι χαρακτηριστικές αποικίες μπορούν να υποκαλλιεργηθούν και να ελεγχθούν ως Escherichia coli.
Η AFNOR Certification πιστοποίησε το Neogen Petrifilm Πλακίδιο CC σε σύγκριση με τη μέθοδο ISO 48312 καιτη μέθοδο ISO 48321 για καταμέτρηση του συνόλου των κολοβακτηριδίων. Η AFNOR Certification πιστοποίησε
επίσης το Neogen Petrifilm Πλακίδιο CC σε σύγκριση με το NF V08-0603, για απαρίθμηση θερμοανεκτικών
κολοβακτηριδίων.

ΑσφάλειαΟ χρήστης πρέπει να διαβάσει, να κατανοήσει και να ακολουθήσει όλες τις πληροφορίες ασφάλειας πουαναφέρονται στις Οδηγίες προϊόντος για το Neogen Petrifilm Πλακίδιο CC. Φυλάξτε τις οδηγίες ασφάλειας γιαμελλοντική αναφορά.
ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ: Υποδεικνύει μια επικίνδυνη κατάσταση, η οποία, εάν δεν αποφευχθεί, ενδέχεται να έχει ωςαποτέλεσμα θάνατο ή σοβαρό τραυματισμό ή/και υλική ζημιά.

ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗΓια τη μείωση των κινδύνων που σχετίζονται με την έκθεση σε βιολογικούς κινδύνους και τη μόλυνσητου περιβάλλοντος:• Ακολουθείτε τα τρέχοντα πρότυπα της βιομηχανίας και τους τοπικούς κανονισμούς για την απόρριψη βιολογικά
επικίνδυνων αποβλήτων.
Για τη μείωση των κινδύνων που σχετίζονται με την αποδέσμευση μολυσμένου προϊόντος:• Ακολουθήστε όλες τις οδηγίες αποθήκευσης προϊόντος που περιέχονται στις οδηγίες χρήσης.
• Μη χρησιμοποιείτε το προϊόν μετά την ημερομηνία λήξης.

1EL(Ελληνικά)Για τη μείωση των κινδύνων που σχετίζονται με βακτηριακή λοίμωξη και επιμόλυνση του χώρου εργασίας:• Πραγματοποιήστε τον έλεγχο με το Neogen Petrifilm Πλακίδιο CC σε κατάλληλα εξοπλισμένο εργαστήριο υπό τηνεπίβλεψη ειδικευμένου μικροβιολόγου.
• Ο χρήστης πρέπει να εκπαιδεύσει το προσωπικό του στις κατάλληλες τεχνικές ελέγχου: Καλές Εργαστηριακές
Πρακτικές4, ISO 72185 ή ISO 170256.
Για τη μείωση των κινδύνων που σχετίζονται με παρερμηνεία των αποτελεσμάτων:• Η Neogen δεν έχει τεκμηριώσει τα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC για χρήση σε βιομηχανίες άλλες εκτός
τροφίμων και ποτών, συμπεριλαμβανομένου του εμφιαλωμένου νερού. Για παράδειγμα, η Neogen δεν έχειτεκμηριώσει τη χρήση των Neogen Petrifilm Πλακιδίων CC για έλεγχο φαρμακευτικών προϊόντων ή καλλυντικών.
Η Neogen δεν έχει τεκμηριώσει τη χρήση των Neogen Petrifilm Πλακιδίων CC για έλεγχο επιφανειακών
και δημοτικών υδάτων ή υδάτων που χρησιμοποιούνται στις βιομηχανίες φαρμακευτικών προϊόντων ή
καλλυντικών.
• Η χρήση των Neogen Petrifilm Πλακιδίων CC για τον έλεγχο δειγμάτων νερού σύμφωνα με τους τοπικούς
κανονισμούς ελέγχου νερού έγκειται στην αποκλειστική ευχέρεια και ευθύνη του τελικού χρήστη. Τα Neogen
Petrifilm Πλακίδια CC δεν έχουν αξιολογηθεί με όλα τα πιθανά δείγματα εμφιαλωμένου νερού, πρωτόκολλα
ελέγχου ή με όλα τα πιθανά στελέχη μικροοργανισμών.
• Μη χρησιμοποιείτε τα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC στη διάγνωση παθήσεων σε ανθρώπους ή ζώα.
• Τα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC δεν διαφοροποιούν ένα στέλεχος κολοβακτηριδίου από ένα άλλο.
• Τροφές με υψηλό περιεχόμενο σε σάκχαρα μπορεί να αυξήσουν τις πιθανότητες παραγωγής αερίων απόEnterobacteriaceae μη κολοβακτηριδίων.
Συμβουλευτείτε το Φύλλο Δεδομένων Ασφαλείας για πρόσθετες πληροφορίες.
Για πληροφορίες σχετικά με την τεκμηρίωση απόδοσης των προϊόντων, επισκεφθείτε την ιστοσελίδα μας στηδιεύθυνση www.neogen.com ή επικοινωνήστε με τον τοπικό σας αντιπρόσωπο ή εξουσιοδοτημένο διανομέα της
Neogen.

Ευθύνη του χρήστηΟι χρήστες είναι υπεύθυνοι να εξοικειωθούν με τις οδηγίες και τις πληροφορίες του προϊόντος. Επισκεφτείτε τονιστότοπό μας στη διεύθυνση www.neogen.com ή επικοινωνήστε με τον αντιπρόσωπο ή τον εξουσιοδοτημένο
διανομέα της Neogen για περισσότερες πληροφορίες.
Κατά την επιλογή μίας μεθόδου ελέγχου, είναι σημαντικό να αναγνωρίζετε ότι εξωτερικοί παράγοντες, όπωςμέθοδοι δειγματοληψίας, πρωτόκολλα ελέγχου, προετοιμασία και χειρισμός δειγμάτων και η εργαστηριακή τεχνική
μπορούν να επηρεάσουν τα αποτελέσματα.
Αποτελεί ευθύνη του χρήστη η επιλογή οποιαδήποτε μεθόδου ή προϊόντος ελέγχου, για να αξιολογήσει ένανεπαρκή αριθμό δειγμάτων με κατάλληλα είδη τροφίμων και μικροβιακές προκλήσεις, ώστε η επιλεγμένη μέθοδος ναικανοποιεί τα κριτήρια του χρήστη.
Αποτελεί επίσης ευθύνη του χρήστη να καθορίσει ότι όλες οι μέθοδοι δοκιμασίας και τα αποτελέσματαανταποκρίνονται στις απαιτήσεις των πελατών και των προμηθευτών του.
Όπως και με κάθε μέθοδο ελέγχου, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται από τη χρήση οποιουδήποτε προϊόντος
Neogen Food Safety δεν συνιστούν εγγύηση της ποιότητας των σχετικών τροφίμων ή των διαδικασιών πουυποβάλλονται σε έλεγχο.

Περιορισμός εγγυήσεων / Περιορισμένη αποκατάστασηΕΚΤΟΣ ΕΑΝ ΔΗΛΩΝΕΤΑΙ ΡΗΤΑ ΣΤΟΝ ΟΡΟ ΤΗΣ ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΕΝΗΣ ΕΓΓΥΗΣΗΣ ΣΤΗΝ ΑΤΟΜΙΚΗ ΣΥΣΚΕΥΑΣΙΑΤΟΥ ΠΡΟΪΟΝΤΟΣ, Η NEOGEN ΠΑΡΑΙΤΕΙΤΑΙ ΑΠΟ ΟΛΕΣ ΤΙΣ ΡΗΤΕΣ ΚΑΙ ΕΝΝΟΟΥΜΕΝΕΣ ΕΓΓΥΗΣΕΙΣ,ΣΥΜΠΕΡΙΛΑΜΒΑΝΟΜΕΝΩΝ ΕΝΔΕΙΚΤΙΚΑ ΑΛΛΑ ΟΧΙ ΠΕΡΙΟΡΙΣΤΙΚΑ, ΟΠΟΙΩΝΔΗΠΟΤΕ ΕΓΓΥΗΣΕΩΝΕΜΠΟΡΕΥΣΙΜΟΤΗΤΑΣ Ή ΚΑΤΑΛΛΗΛΟΤΗΤΑΣ ΓΙΑ ΜΙΑ ΣΥΓΚΕΚΡΙΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ. Εάν οποιοδήποτε προϊόν Neogen
Food Safety είναι ελαττωματικό, η Neogen ή ο εξουσιοδοτημένος διανομέας της, σύμφωνα με την κρίση τους,θα αντικαταστήσουν ή επιστρέψουν την αξία αγοράς του προϊόντος. Αυτοί είναι οι αποκλειστικοί τρόποι
αποκατάστασης. Πρέπει άμεσα και εντός εξήντα ημερών να γνωστοποιήσετε στην Neogen την ανεύρεση τωνπιθανολογούμενων ελαττωμάτων του προϊόντος και να επιστρέψετε το προϊόν στην Neogen. Επικοινωνήστε με τοναντιπρόσωπο της Neogen ή τον εξουσιοδοτημένο διανομέα της Neogen για περαιτέρω ερωτήσεις.

Περιορισμός της ευθύνης της Neogen

Η NEOGEN ΔΕΝ ΕΥΘΥΝΕΤΑΙ ΓΙΑ ΟΠΟΙΑΔΗΠΟΤΕ ΑΠΩΛΕΙΑ Ή ΖΗΜΙΑ, ΕΙΤΕ ΑΜΕΣΗ, ΕΜΜΕΣΗ, ΕΙΔΙΚΗ, ΣΥΜΠΤΩΜΑΤΙΚΗΉ ΑΠΟΘΕΤΙΚΗ ΖΗΜΙΑ, ΣΥΜΠΕΡΙΛΑΜΒΑΝΟΜΕΝΩΝ ΕΝΔΕΙΚΤΙΚΑ, ΑΛΛΑ ΟΧΙ ΠΕΡΙΟΡΙΣΤΙΚΑ, ΔΙΑΦΥΓΟΝΤΩΝ ΚΕΡΔΩΝ.
Η ευθύνη της Neogen δεν υπερβαίνει σε καμία περίπτωση και υπό καμία νομική θεωρία την αξία αγοράς τουπροϊόντος που εικάζεται ότι είναι ελαττωματικό.

2EL(Ελληνικά)Αποθήκευση

Φυλάσσετε τα μη ανοιγμένα σακουλάκια Neogen Petrifilm Πλακιδίων CC σε θερμοκρασία κατάψυξης ή ψυγείου,χαμηλότερες από ή ίσες με 8°C (46°F). Πριν από τη χρήση, αφήστε τα μη ανοιγμένα σακουλάκια Neogen PetrifilmΠλακιδίων CC να έρθουν σε θερμοκρασία δωματίου πριν τα ανοίξετε. Επιστρέψτε τα μη χρησιμοποιημένα Neogen
Petrifilm Πλακίδια CC στο σακουλάκι. Σφραγίστε το σακουλάκι διπλώνοντας το πάνω μέρος του και κολλώντας μεταινία. Για να αποφευχθεί η έκθεση σε υγρασία, μην τοποθετείτε στο ψυγείο τα ανοιγμένα σακουλάκια.
Αποθηκεύστε τα επανασφραγισμένα σακουλάκια σε ψυχρό και ξηρό μέρος για όχι περισσότερο από τέσσερις
εβδομάδες. Συνιστάται να αποθηκεύετε τα ερμητικά κλεισμένα σακουλάκια με Neogen Petrifilm Πλακίδια CCσε καταψύκτη (βλ. παρακάτω) εάν η θερμοκρασία του εργαστηρίου υπερβαίνει τους 25°C (77°F) ή/και εάν τοεργαστήριο βρίσκεται σε περιοχή όπου η σχετική υγρασία υπερβαίνει το 50% (με εξαίρεση τουςκλιματιζόμενους χώρους).
Για να αποθηκεύσετε ανοιγμένα σακουλάκια στην κατάψυξη, τοποθετήστε τα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC σεένα σφραγισμένο δοχείο. Για να αφαιρέσετε τις κατεψυγμένες πλάκες Neogen Petrifilm CC για χρήση, ανοίξτετο δοχείο, αφαιρέστε τις πλάκες που χρειάζονται και επιστρέψτε αμέσως τις υπόλοιπες πλάκες στον καταψύκτηστο σφραγισμένο δοχείο για το υπόλοιπο της διάρκειας ζωής. Τα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC δεν πρέπει ναχρησιμοποιούνται μετά την ημερομηνία λήξης. Ο καταψύκτης που χρησιμοποιείται για την αποθήκευση τωνανοιγμένων σακουλακίων δεν πρέπει να έχει αυτόματο κύκλο απόψυξης, καθώς κάτι τέτοιο θα εξέθετε τα Neogen
Petrifilm Πλακίδια CC στην υγρασία και σε ενδεχόμενη φθορά των πλακιδίων.
Μη χρησιμοποιήσετε Neogen Petrifilm Πλακίδια CC που παρουσιάζουν αποχρωματισμό. Η ημερομηνία λήξης καιο αριθμός παρτίδας σημειώνονται σε κάθε συσκευασία των Neogen Petrifilm Πλακιδίων CC. Ο αριθμός παρτίδας
επισημαίνεται επίσης στα μεμονωμένα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC.

ΑπόρριψηΜετά τη χρήση, τα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC μπορεί να περιέχουν μικρooργανισμoύς πoυ ενδέχεται να
απoτελoύν πιθανό βιoλoγικό κίνδυνο.
Ακολουθείτε τα τρέχοντα πρότυπα της βιομηχανίας για την απόρριψη.

Οδηγίες χρήσης

Τηρείτε προσεκτικά όλες τις οδηγίες. Η μη τήρηση των οδηγιών μπορεί να οδηγήσει σε ανακριβή αποτελέσματα.

Προπαρασκευή, επώαση και ερμηνεία δειγμάτων από τις βιομηχανίες τροφίμων και ποτών
(εκτός εμφιαλωμένου νερού), συμπεριλαμβανομένων περιβαλλοντικών δειγμάτων
Προπαρασκευή δείγματος
1. Χρησιμοποιήστε κατάλληλα αποστειρωμένα αραιωτικά:Νερό αραίωσης με ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών αλάτων7, 0,1% νερό πεπτόνης8, αραιωτικά άλατοςπεπτόνης8,9, Νερό ρυθμιστικού διαλύματος πεπτόνης8,9, αλατούχο διάλυμα (0,85-0,90%), Εξουδετερωτικό ευρέως
φάσματος Neogen®, ζωμός λεθαίνης χωρίς δισουλφίτη ή απεσταγμένο νερό. Βλέπε την ενότητα «Ειδικές
οδηγίες για επικυρωμένες μεθόδους» για τις ειδικές απαιτήσεις.
Μη χρησιμοποιείτε αραιωτικά που περιέχουν κιτρικά ιόντα, θειώδη ή θειοθειικά ιόντα με τα Neogen
Petrifilm Πλακίδια CC, διότι μπορούν να εμποδίσουν την ανάπτυξη. Εάν ενδείκνυται ρυθμιστικό κιτρικού
στην τυπική διαδικασία, αντικαταστήστε το με ένα από τα ρυθμιστικά διαλύματα που αναφέρονται παραπάνω,θερμασμένο στους 40-45°C (104-113°F).
2. Αναμείξτε ή ομογενοποιήστε το δείγμα.
3. Για βέλτιστη ανάπτυξη και ανάκτηση μικροοργανισμών, προσαρμόστε το pH του εναιωρήματος δείγματος σετιμές 6,6-7,2. Για όξινα προϊόντα, προσαρμόστε το pH με 1N NaOH. Για όξινα προϊόντα, προσαρμόστε το pH
με 1N HCl.
Επίστρωση
1. Τοποθετήστε το Neogen Petrifilm Πλακίδιο CC σε επίπεδη επιφάνεια.
2. Ανασηκώστε την επάνω μεμβράνη και με την πιπέτα σε κατακόρυφη θέση ως προς την περιοχή έγχυσης,χορηγήστε 1 mL του εναιωρήματος δείγματος στο κέντρο της κάτω μεμβράνης.
3. Καλύψτε με την επάνω μεμβράνη στο δείγμα, για να μην παγιδευτούν φυσαλίδες αέρα.
4. Τοποθετήστε τον Neogen® Petrifilm® Διασκορπιστή με την επίπεδη πλευρά προς τα κάτω στο κέντρο του
Neogen Petrifilm Πλακιδίου CC. Πιέστε απαλά στο κέντρο του Neogen Petrifilm Διασκορπιστή ώστε ναδιανείμετε το δείγμα ομαλά. Απλώστε το εμβολίασμα επάνω σε ολόκληρη την επιφάνεια ανάπτυξης του Neogen
Petrifilm Πλακιδίου CC πριν να σχηματισθεί γέλη. Μην σύρετε τον Neogen Petrifilm Διασκορπιστή κατά μήκος
της μεμβράνης.
5. Αφαιρέστε τον Neogen Petrifilm Διασκορπιστή και αφήστε το Neogen Petrifilm Πλακίδιο CC ανενόχλητο γιατουλάχιστον ένα λεπτό για να επιτρέψετε το σχηματισμό γέλης.
3EL(Ελληνικά)Επώαση

Επωάστε τα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC σε οριζόντια θέση με τη διάφανη πλευρά προς τα επάνω σε στοιβάδες
μέχρι 20 πλακίδια. Μπορούν να χρησιμοποιηθούν διάφοροι χρόνοι και θερμοκρασίες επώασης ανάλογα με τιςτρέχουσες τοπικές μεθόδους αναφοράς, ορισμένες από τις οποίες αναφέρονται στην ενότητα «Ειδικές οδηγίες γιαεπικυρωμένες μεθόδους».

Ερμηνεία

1. Οι αποικίες στα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC μπορούν να μετρηθούν με χρήση τυπικού απαριθμητή αποικιώνή άλλης φωτεινής συσκευής μεγέθυνσης. Το αέριο που παράγεται από τα κολοβακτηρίδια μπορεί να διαταράξει
την αποικία, με τρόπο όπου η αποικία «περιβάλλει» τη φυσαλίδα. Σε αυτήν την περίπτωση θα πρέπει να γίνεταικαταμέτρηση ως ένα κολοβακτηρίδιο. Μην καταμετράτε αποικίες επάνω σε φράκτη αφρού, καθώς αυτές έχουν
απομακρυνθεί από την επιλεκτική επιρροή του μέσου. Μην καταμετράτε φυσαλίδες ατελειών που μπορεί
να εμφανιστούν.
Η ερμηνεία των αποικιών κολοβακτηριδίων στο Neogen Petrifilm Πλακίδιο CC διαφέρει ανάλογα με τη μέθοδο
αναφοράς. Για παράδειγμα:
AOAC® Official MethodsSM:Οι αποικίες κολοβακτηριδίων είναι κόκκινες καισχετίζονται στενά (με διάμετρο μίας αποικίας)με το παγιδευμένο αέριο. Οι αποικίες που δενσχετίζονται με το αέριο (απόσταση μεγαλύτερηαπό διάμετρο μίας αποικίας μεταξύ της αποικίας
και της φυσαλίδας αερίου) δεν καταμετρώνται ωςκολοβακτηρίδια.

Ή Πιστοποιημένες από την NF Validation μέθοδοι:- Σε σύγκριση με τη μέθοδο ISO 48312 (μέθοδος MPN),οι αποικίες κολοβακτηριδίων είναι κόκκινες καισχετίζονται στενά (με διάμετρο μίας αποικίας) με τοπαγιδευμένο αέριο.
- Σε σύγκριση με τη μέθοδο ISO 48321 (σύνολο
κολοβακτηριδίων) και NF V08-0603 (περιττωματικά
κολοβακτηρίδια), και οι δύο εκ των οποίων
βασίζονται σε μεθόδους VRBL, καταμετρήστε όλες τιςκόκκινες αποικίες με ή χωρίς αέριο.

2. Η κυκλική επιφάνεια ανάπτυξης είναι περίπου 20 cm2. Μπορούν να γίνουν εκτιμήσεις σε Neogen PetrifilmΠλακίδια CC που περιέχουν περισσότερες από 150 αποικίες, καταμετρώντας τον αριθμό των αποικιών σεένα ή περισσότερα αντιπροσωπευτικά τετραγωνίδια και προσδιορίζοντας το μέσο όρο ανά τετραγωνίδιο.
Πολλαπλασιάστε τον μέσο αριθμό με το 20, για να προσδιορίσετε τον εκτιμώμενο αριθμό ανά Neogen PetrifilmΠλακίδιο CC.
3. Όταν υπάρχουν αποικίες σε μεγάλους αριθμούς, τα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC μπορεί να παρουσιάζουν
περισσότερο σκούρο χρώμα γέλης και ένα ή και τα δύο από τα παρακάτω χαρακτηριστικά: πολλές μικρές,απροσδιόριστες αποικίες ή/και πολλές φυσαλίδες αερίου. Οι υψηλές συγκεντρώσεις κολοβακτηριδίων
προκαλούν αλλαγή του χρώματος της επιφάνειας ανάπτυξης σε σκούρο κόκκινο. Αν συμβεί αυτό, καταγράψτε
το αποτέλεσμα ως υπερβολικά μεγάλος αριθμός αποικιών (TNTC). Όταν απαιτείται κανονική καταμέτρηση,τοποθετήστε σε πλακίδιο σε υψηλότερη αραίωση.
4. Όπου είναι απαραίτητο, οι αποικίες μπορούν να απομονωθούν για περαιτέρω ταυτοποίηση. Ανασηκώστε
την επάνω μεμβράνη, εφαρμόζοντας κατάλληλη τεχνική ελέγχου και πάρτε την αποικία από τη γέλη. Κάντε τηδοκιμή σύμφωνα με τις τυπικές διαδικασίες.
5. Αν τα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC δεν μπορούν να καταμετρηθούν εντός 1 ώρας από την αφαίρεση από τονεπωαστήρα, μπορείτε να τα αποθηκεύσετε για μετέπειτα καταμέτρηση, καταψύχοντάς τα σε ένα σφραγισμένο
δοχείο σε θερμοκρασίες μικρότερες ή ίσες με -15°C (5°F), όχι για πάνω από μία εβδομάδα.

Προπαρασκευή, επώαση και ερμηνεία δειγμάτων εμφιαλωμένου νερού
Ενυδατώστε τα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC
1. Τοποθετήστε το Neogen Petrifilm Πλακίδιο CC σε επίπεδη επιφάνεια.

2. Ανασηκώστε την επάνω μεμβράνη και χορηγήστε 1 mL κατάλληλου αποστειρωμένου αραιωτικού ενυδάτωσηςστο κέντρο της κάτω μεμβράνης. Τα κατάλληλα αποστειρωμένα αραιωτικά ενυδάτωσης περιλαμβάνουν
αποσταγμένο νερό, απιονισμένο (DI) νερό και νερό αντίστροφης ώσμωσης (RO).
3. Καλύψτε με την επάνω μεμβράνη στο δείγμα, για να μην παγιδευτούν φυσαλίδες αέρα.
4. Τοποθετήστε τον Neogen Petrifilm Διασκορπιστή με την επίπεδη πλευρά προς τα κάτω στο κέντρο τουπλακιδίου. Πιέστε απαλά στο κέντρο του διασκορπιστή ώστε να διανείμετε το αραιωτικό ομαλά. Απλώστε τοαραιωτικό επάνω σε ολόκληρη την επιφάνεια ανάπτυξης του Neogen Petrifilm Πλακιδίου πριν να σχηματισθεί
γέλη. Μην σύρετε τον διασκορπιστή κατά μήκος της μεμβράνης.
5. Αφαιρέστε τον διασκορπιστή και αφήστε τα πλακίδια κλειστά για τουλάχιστον 1 ώρα πριν από τη χρήση.
6. Φυλάσσετε τα ενυδατωμένα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC σε σφραγισμένο σακουλάκι ή πλαστική σακούλα.
Προστατεύστε τα πλακίδια από το φως και τοποθετήστε τα σε ψυγείο στους 2-8°C (36-46°F) για έως 7 ημέρες.

4EL(Ελληνικά)Διήθηση νερού και επώαση πλακιδίων

1. Ακολουθώντας τις τυπικές διαδικασίες ανάλυσης νερού, διηθήστε με μεμβράνη το δείγμα νερού,χρησιμοποιώντας φίλτρο Ανάμικτων Εστέρων Κυτταρίνης (MCE) 47 mm, με μέγεθος πόρου 0,45 micron.
2. Ανασηκώστε προσεκτικά την επάνω μεμβράνη του Neogen Petrifilm Πλακιδίου CC. Αποφύγετε να αγγίξετε
την κυκλική επιφάνεια ανάπτυξης. Τοποθετήστε το φίλτρο στο κέντρο της ενυδατωμένης επιφάνειας.
Ελαχιστοποιήστε την παγίδευση φυσαλίδων κάτω από το φίλτρο.
3. Καλύψτε αργά με την επάνω μεμβράνη το φίλτρο. Ελαχιστοποιήστε την παγίδευση φυσαλίδων αέρα και τηδημιουργία κενών μεταξύ του φίλτρου και του Neogen Petrifilm Πλακιδίου CC.
4. Ασκήστε ελαφριά πίεση χρησιμοποιώντας τον διασκορπιστή Neogen Petrifilm Πλακιδίων ή περνώντας ελαφράένα δάχτυλο σε όλη την επιφάνεια του δίσκου (συμπεριλαμβανομένων των άκρων) για να εξασφαλίσετε ενιαία
επαφή του φίλτρου με τη γέλη και να εξαλείψετε τυχόν φυσαλίδες αέρα.
5. Επωάστε τα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC στους 35°C ± 1°C για 24 ώρες ± 2 ώρες11 ή στους 36°C ± 1°C για 24ώρες ± 2 ώρες12 σε οριζόντια θέση με τη διάφανη πλευρά προς τα επάνω σε στοιβάδες μέχρι 20 πλακίδια.

Ερμηνεία

1. Οι αποικίες στα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC μπορούν να μετρηθούν με χρήση τυπικού απαριθμητή αποικιώνή άλλης φωτεινής συσκευής μεγέθυνσης. Μην καταμετράτε αποικίες επάνω σε φράκτη αφρού, καθώς αυτές
έχουν απομακρυνθεί από την επιλεκτική επιρροή του μέσου. Μην καταμετράτε φυσαλίδες ατελειών που μπορεί
να εμφανιστούν.
2. Οι κόκκινες αποικίες που συσχετίζονται με φυσαλίδες αερίου καταμετρούνται ως κολοβακτηρίδια. Οι φυσαλίδες
αερίου μπορεί να σχηματίσουν ένα κυκλικό ή αστεροειδές μοτίβο γύρω από την αποικία. Το αέριο πουπαράγεται από τα κολοβακτηρίδια μπορεί να διαταράξει την αποικία, με τρόπο όπου η αποικία «περιβάλλει»τη φυσαλίδα. Σε αυτήν την περίπτωση θα πρέπει να γίνεται καταμέτρηση ως ένα κολοβακτηρίδιο. Οι κόκκινες
αποικίες χωρίς στενό συσχετισμό φυσαλίδων αερίου μπορεί να αποτελούν κολοβακτηρίδια και θα πρέπει ναεπιλέγονται και να ελέγχονται με τις κατάλληλες μεθόδους επιβεβαίωσης11,12.
3. Όταν υπάρχουν αποικίες σε μεγάλους αριθμούς, τα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC παρουσιάζουν περισσότερο
σκούρο χρώμα γέλης σε συσχετισμό με πολλές μικρές, απροσδιόριστες αποικίες ή φυσαλίδες αερίου. Αν συμβεί
αυτό, καταγράψτε το αποτέλεσμα ως υπερβολικά μεγάλος αριθμός αποικιών (TNTC).
4. Οι αποικίες μπορούν να απομονωθούν για περαιτέρω ταυτοποίηση. Ανασηκώστε την επάνω μεμβράνη καιπάρτε την αποικία από τη γέλη ή την επιφάνεια του φίλτρου. Όταν ανασηκώνετε την επάνω μεμβράνη, τοφίλτρο μπορεί να προσκολληθεί είτε στην επάνω είτε στην κάτω μεμβράνη. Εάν το φίλτρο προσκολληθεί στηνεπάνω μεμβράνη, διαχωρίστε το από αυτήν και επιλέξτε αποικίες. Κάντε τη δοκιμή σύμφωνα με τις τυπικές
διαδικασίες.
Σημείωση: Δεν προτείνεται η καθυστερημένη καταμέτρηση των Neogen Petrifilm Πλακιδίων CC με φίλτρα.
Για περαιτέρω πληροφορίες, ανατρέξτε στον κατάλληλο «Οδηγό ερμηνείας Neogen® Petrifilm® Πλακιδίων
Καταμέτρησης Κολοβακτηριδίων». Εάν έχετε ερωτήσεις σχετικά με συγκεκριμένες εφαρμογές ή διαδικασίες,παρακαλούμε επισκεφθείτε την ιστοσελίδα www.neogen.com ή επικοινωνήστε με τον τοπικό σας αντιπρόσωπο ήδιανομέα της Neogen.
Ειδικές οδηγίες για επικυρωμένες μεθόδους
AOAC® Official MethodsSM (986.33 Καταμετρήσεις Βακτηρίων και Κολοβακτηριδίων σε Γάλα, Μέθοδοι Ξηρής
Επανυδατούμενης Μεμβράνης και 989.10 Καταμετρήσεις Βακτηρίων και Κολοβακτηριδίων σε Γαλακτοκομικά
Προϊόντα, Μέθοδοι Ξηρής Επανυδατούμενης Μεμβράνης)Επωάστε Neogen Petrifilm Πλακίδια CC για 24 ώρες ± 2 ώρες στους 32°C ± 1°C.
AOAC® Official MethodsSM (991.14 Καταμετρήσεις Κολοβακτηριδίων και Escherichia coli σε Τρόφιμα, Μέθοδοι Ξηρής
Επανυδατούμενης Μεμβράνης)Επωάστε Neogen Petrifilm Πλακίδια CC για 24 ώρες ± 2 ώρες στους 35°C ± 1°C.
AOAC® Performance Tested MethodSM Πιστοποιητικό #082101
Σε μια μελέτη του Ερευνητικού Ινστιτούτου AOAC® Research Institute για Performance Tested Method (PTM),διαπιστώθηκε ότι η μέθοδος Neogen Petrifilm Πλακιδίου CC ισοδυναμούσε με τους μέσους αριθμούς πουκαταγράφηκαν στο Κεφάλαιο 4 του FDA/BAM, Ενότητα III μέθοδος D για την καταμέτρηση κολοβακτηριδίων σεεμφιαλωμένο νερό.

5EL(Ελληνικά)Πεδίο εγκυρότητας:Εμφιαλωμένο νερό: εξαγνισμένο νερό, επεξεργασμένο νερό πηγής, μη ανθρακούχο φυσικό νερό πηγής, ανθρακούχο
φυσικό νερό πηγής.
Επώαση:Επωάστε τα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC για 24 ώρες ± 2 ώρες στους 35°C ± 1°C.
NF Validation από την AFNOR Certification:Μέθοδος πιστοποίησης NF Validation σύμφωνα με το πρότυπο ISO 16140-210 σε σύγκριση με το ISO 48321(3M-01/02-09/89 A)Πεδίο εγκυρότητας: Για τον έλεγχο όλων των ανθρώπινων προϊόντων τροφίμων (εκτός των νωπών θαλασσινών),τροφής κατοικίδιων και περιβαλλοντικών δειγμάτων.
Χρησιμοποιήστε τις λεπτομέρειες που ακολουθούν όταν εφαρμόζετε τις παραπάνω Οδηγίες Χρήσης:Προετοιμασία δείγματος:Χρησιμοποιείτε μόνο αραιωτικά καταχωρημένα κατά ISO.
Επώαση:Επωάστε τα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC για 24 ώρες ± 2 ώρες στους 30°C ± 1°C ή στους 37°C ± 1°C.
Ερμηνεία:Υπολογίστε τον αριθμό των μικροοργανισμών που είναι παρόντες στο δοκιμαστικό δείγμα σύμφωνα με το ISO 72185για ένα πλακίδιο ανά αραίωση. Οι εκτιμήσεις είναι εκτός του πεδίου της πιστοποίησης NF Validation Certification(βλέπε ενότητα για την ερμηνεία, παράγραφος 2).
Μέθοδος πιστοποίησης NF Validation σύμφωνα με το πρότυπο ISO 16140-210 σε σύγκριση με το ISO 48312(3M-01/02-09/89 B)Πεδίο εγκυρότητας: Για τον έλεγχο όλων των ανθρώπινων προϊόντων τροφίμων (εκτός των νωπών θαλασσινών).
Χρησιμοποιήστε τις λεπτομέρειες που ακολουθούν όταν εφαρμόζετε τις παραπάνω Οδηγίες Χρήσης:Προετοιμασία δείγματος:Χρησιμοποιείτε μόνο αραιωτικά καταχωρημένα κατά ISO.
Επώαση:Επωάστε τα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC για 24 ώρες ± 2 ώρες στους 30°C ± 1°C ή στους 37°C ± 1°C.
Ερμηνεία:Υπολογίστε τον αριθμό των μικροοργανισμών που είναι παρόντες στο δοκιμαστικό δείγμα σύμφωνα με το ISO 72185για ένα πλακίδιο ανά αραίωση. Οι εκτιμήσεις είναι εκτός του πεδίου της πιστοποίησης NF Validation Certification(βλέπε ενότητα για την ερμηνεία, παράγραφος 2).
Μέθοδος πιστοποίησης NF Validation σύμφωνα με το πρότυπο ISO 16140-210 σε σύγκριση με το NF V08-0603(3M-01/02-09/89 C)Πεδίο εγκυρότητας: Για τον έλεγχο όλων των ανθρώπινων προϊόντων τροφίμων
Χρησιμοποιήστε τις λεπτομέρειες που ακολουθούν όταν εφαρμόζετε τις παραπάνω Οδηγίες Χρήσης:Προετοιμασία δείγματος:Χρησιμοποιείτε μόνο αραιωτικά καταχωρημένα κατά ISO.
Επώαση:Επωάστε τα Neogen Petrifilm Πλακίδια CC για 24 ώρες ± 2 ώρες στους 44°C ± 1°C.
Ερμηνεία:Υπολογίστε τον αριθμό των μικροοργανισμών που είναι παρόντες στο δοκιμαστικό δείγμα σύμφωνα με το ISO 72185για ένα πλακίδιο ανά αραίωση. Οι εκτιμήσεις είναι εκτός του πεδίου της πιστοποίησης NF Validation Certification(βλέπε ενότητα για την ερμηνεία, παράγραφος 2). Ανατρέξτε στο πρότυπο EN ISO 7218 για έγχυση, καταμέτρηση καιυπολογισμό αποικιών και εμφάνιση αποτελεσμάτων.

3M 01/02 – 09/89A, B, and C
ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS
http://nf-validation.afnor.org/enΓια περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τη λήξη της επικύρωσης, παρακαλούμε ανατρέξτε στο πιστοποιητικό NF
VALIDATION που διατίθεται στον ιστότοπο που αναφέρεται παραπάνω.
6EL(Ελληνικά)Παραπομπές

1. ISO 4832. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms –Colony count technique.
2. ISO 4831. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumerationof coliforms – Most probable number technique.
3. AFNOR NF V08-060. General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at
44°C – Routine method.
4. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance formicrobiological examinations.
6. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
7. FDA. Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998. Reagents Index for BAM found at:
http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.
8. ISO 6887-5. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension
and decimal dilutions for microbiological examination, Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk
products.
9. ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension
and decimal dilutions for microbiological examination, Part 1: General rules for the preparation of the initialsuspension and decimal dilutions.
10. ISO 16140-2. Microbiology of the food chain – Method validation – Protocol for the validation of alternative(proprietary) methods against a reference method.
11. U.S. Food and Drug Administration. 2002. Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4.
Membrane filter method for coliforms.
12. American Public Health Association. 2017. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20thEd. Method 9222B2a.
Ανατρέξτε στην τελευταία έκδοση των πρότυπων μεθόδων που αναφέρονται παραπάνω.

Επεξήγηση συμβόλων
info.neogen.com/symbols

Το AOAC αποτελεί εγγεγραμμένο εμπορικό σήμα της AOAC INTERNATIONAL.
Το Official Methods αποτελεί σήμα κατατεθέν της AOAC INTERNATIONAL.
Το Performance Tested Method αποτελεί σήμα κατατεθέν της AOAC INTERNATIONAL.

7

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931A

PL(Polski)
Data wydania: 2024-01

Informacje o produkcie

Płytka do oznaczania liczby bakterii z grupy coli
Opis i przeznaczenie produktu

Płytka Neogen® Petrifilm® do oznaczania liczby bakterii z grupy coli (CC) to gotowy do użytku zestaw pożywek
hodowlanych, który zawiera zmodyfikowane składniki odżywcze Violet Red Bile (VRB), substancję żelującą rozpuszczalną
w zimnej wodzie oraz wskaźnik tetrazolowy, który ułatwia zliczanie kolonii. Płytki Neogen Petrifilm CC stosuje się dooznaczania liczby bakterii z grupy coli w produktach spożywczych i napojach oraz wodzie butelkowanej. Składniki płytki
Neogen Petrifilm CC są zdekontaminowane, lecz nie wyjałowione. Firma Neogen Food Safety uzyskała certyfikat ISO(International Organization for Standardization) 9001 dotyczący projektowania i produkcji. Płytki Neogen Petrifilm CC nie
oceniono przy użyciu wszystkich możliwych produktów spożywczych, procesów przetwarzania żywności, protokołów
testowych ani przy użyciu wszystkich dostępnych szczepów drobnoustrojów.
Podręcznik The United States Food and Drug Administration (FDA) Bacteriological Analytical Manual (BAM)7 definiuje
bakterie z grupy coli jako Gram-ujemne pałeczki, które wytwarzają kwas i gaz z laktozy poprzez fermentację.
Kolonie bakterii z grupy coli na płytce Neogen Petrifilm CC wytwarzają kwas, który powoduje, że wskaźnik pH
przyciemnia kolor żelu; gaz uwięziony wokół czerwonych kolonii wskazuje bakterie z grupy coli.
Norma ISO definiuje bakterie z grupy coli na podstawie ich zdolności do wzrostu na swoistych dla metody, selektywnych
podłożach. Metoda ISO 483211, umożliwiająca oznaczanie bakterii z grupy coli techniką liczenia kolonii, definiuje je jako
bakterie produkujące kwas na agarze Violet Red Bile Lactose (VRBL). Na płytkach Neogen Petrifilm CC te produkujące
kwas bakterie z grupy coli są oznaczane poprzez czerwone kolonie wytwarzające gaz i niewytwarzające gazu. Metoda ISO
48312, umożliwiająca oznaczanie bakterii z grupy coli metodą MPN (Most Probable Number), definiuje je na podstawie
ich zdolności do wzrostu i wytwarzania gazu z laktozy w selektywnym bulionie. Na płytkach Neogen Petrifilm CC tebakterie z grupy coli są oznaczane poprzez czerwone kolonie powiązane z gazem.
W przypadku próbek wody butelkowanej CC potwierdzone kolonie bakterii z grupy coli są oznaczane na płytkach
Neogen Petrifilm poprzez czerwone kolonie powiązane z gazem. Czerwone kolonie bez pęcherzyków powietrza ściśle
powiązanych z gazem mogą być bakteriami z grupy coli, w związku z czym należy je wysiać na świeżą pożywkę i zbadać
odpowiednimi metodami potwierdzającymi11,12. Więcej informacji znajduje się w sekcji Interpretacja. Charakterystyczne
kolonie mogą zostać wysiane na świeżą pożywkę i zbadane jako bakterie Escherichia coli.
Płytka Neogen Petrifilm CC otrzymała certyfikat AFNOR Certification przy porównaniu do metod wg normy ISO 48312
i ISO 48321 w zakresie oznaczania łącznej ilości bakterii z grupy coli. Płytka Neogen Petrifilm CC również otrzymała
certyfikat AFNOR Certification przy porównaniu do metody wg normy NF V08-0603 w zakresie oznaczania
termotolerancyjnych bakterii z grupy coli.

Bezpieczeństwo

Użytkownik powinien przeczytać i zrozumieć wszystkie wskazówki bezpieczeństwa zamieszczone w instrukcji dla płytek
Neogen Petrifilm CC, a także ich przestrzegać. Instrukcję bezpieczeństwa należy zachować do przyszłego wykorzystania.
OSTRZEŻENIE:

Oznacza niebezpieczną sytuację, której skutkiem, w razie braku podjęcia środków zapobiegawczych,mogą być poważne obrażenia ciała lub śmierć i/lub uszkodzenie mienia.
OSTRZEŻENIE

Aby ograniczyć ryzyko związane z narażeniem na zagrożenia biologiczne i ze skażeniem środowiska:• Przestrzegać aktualnych norm branżowych i przepisów miejscowych dotyczących utylizacji odpadów stanowiących
zagrożenie biologiczne.
Aby zmniejszyć ryzyko związane z uwolnieniem zanieczyszczonego produktu:• Przestrzegać wszystkich instrukcji dotyczących przechowywania produktu zawartych w instrukcjach użycia.
• Nie używać produktu po upływie terminu ważności.
Aby ograniczyć ryzyko związane z infekcją bakteryjną i skażeniem w miejscu pracy:• Testowanie z użyciem płytek Neogen Petrifilm CC przeprowadzać w odpowiednio wyposażonym laboratorium i pod
nadzorem wykwalifikowanego mikrobiologa.
• Obowiązkiem użytkownika jest przeszkolenie personelu w zakresie aktualnych, odpowiednich technik badań:na przykład w zakresie dobrych praktyk laboratoryjnych4, ISO 72185 lub ISO 170256.

1

PL (Polski)
Aby ograniczyć ryzyko związane z błędną interpretacją wyników:• Firma Neogen nie zatwierdziła stosowania płytek Neogen Petrifilm CC w przemysłach innych niż spożywczy, zuwzględnieniem wody butelkowanej. Firma Neogen nie zatwierdziła płytek Neogen Petrifilm CC na przykład do
testowania farmaceutyków ani kosmetyków. Firma Neogen nie zatwierdziła stosowania płytki Neogen Petrifilm CC do
testowania wód powierzchniowych i miejskich ani wód stosowanych w przemyśle farmaceutycznym i kosmetycznym.
• Używanie płytki Neogen Petrifilm CC do badania próbek wody zgodnie z lokalnymi przepisami dotyczącymi testowania
wody leży w wyłącznej gestii użytkownika końcowego, który ponosi pełną odpowiedzialność za ten proces. Płytek
Neogen Petrifilm CC nie oceniono przy użyciu wszystkich możliwych próbek wody butelkowanej, protokołów
testowych ani przy użyciu wszystkich dostępnych szczepów drobnoustrojów.
• Nie należy używać płytek Neogen Petrifilm CC do testów diagnostycznych u ludzi i zwierząt.
• Płytki Neogen Petrifilm CC nie umożliwiają rozróżniania poszczególnych szczepów bakterii z grupy coli.
• Produkty spożywcze o wysokiej zawartości cukru mogą zwiększać zdolność do wytwarzania gazu w przypadku
Enterobacteriaceae innych niż z grupy coli.
Aby uzyskać dodatkowe informacje, należy zapoznać się z kartą charakterystyki.
W celu uzyskania informacji na temat dokumentacji dotyczącej działania produktu należy odwiedzić naszą witrynę internetową
pod adresem www.neogen.com, skontaktować się z przedstawicielem firmy Neogen albo autoryzowanym dystrybutorem.

Obowiązki użytkownikaUżytkownicy są zobowiązani do zapoznania się z instrukcjami oraz informacjami dotyczącymi produktu. Odwiedź naszą
stronę internetową www.neogen.com lub skontaktuj się z przedstawicielem Neogen lub autoryzowanym dystrybutorem,
aby uzyskać więcej informacji.
Przy wyborze metody testowania należy pamiętać, że takie czynniki zewnętrzne, jak metody próbkowania, protokoły
testowania, przygotowanie próbki, dalsze postępowanie i technika laboratoryjna mogą wpływać na uzyskiwane wyniki.
Obowiązkiem użytkownika przy wyborze jakiejkolwiek metody testowania lub produktu jest poddanie ocenie dostatecznej
liczby próbek z właściwymi macierzami i z uwzględnieniem zagrożeń powodowanych przez mikroorganizmy, tak aby
zastosowana metoda mogła spełnić oczekiwania użytkownika i ustalone przez niego kryteria.
Obowiązkiem użytkownika jest również dopilnowanie, aby zastosowane metody testowania i uzyskane wyniki spełniały
wymagania klienta i dostawcy.
Podobnie jak w przypadku każdej metody testowania wyniki uzyskiwane za pomocą produktu firmy Neogen Food Safety
nie stanowią gwarancji jakości testowanych macierzy ani procesów.

Wyłączenia gwarancji / Ograniczone środki zaradczeJEŚLI NIE ZOSTAŁO TO WYRAŹNIE OKREŚLONE W ROZDZIALE DOT. OGRANICZONEJ GWARANCJI
POJEDYNCZYCH OPAKOWAŃ PRODUKTÓW, FIRMA NEOGEN WYŁĄCZA WSZELKIE GWARANCJE WYRAŹNE I
DOROZUMIANE, W TYM MIĘDZY INNYMI WSZELKIE GWARANCJE ZGODNOŚCI Z PRZEZNACZENIEM
I PRZYDATNOŚCI DO OKREŚLONEGO CELU. W razie wad jakiegokolwiek produktu firmy Neogen Food Safety firma
Neogen lub jej autoryzowany dystrybutor wymieni taki produkt lub, wedle własnego uznania, zwróci koszty zakupu tego
produktu. Są to jedyne przysługujące środki zaradcze. W ciągu 60 dni od wykrycia jakiejkolwiek podejrzewanej wadyproduktu należy niezwłocznie powiadomić firmę Neogen oraz zwrócić produkt. W przypadku dalszych pytań prosimy okontakt z przedstawicielem firmy Neogen lub autoryzowanym dystrybutorem firmy Neogen.

Ograniczenie odpowiedzialności firmy Neogen

FIRMA NEOGEN NIE BĘDZIE ODPOWIEDZIALNA ZA JAKIEKOLWIEK SZKODY ANI STRATY, ZARÓWNOBEZPOŚREDNIE, POŚREDNIE, SZCZEGÓLNE, UBOCZNE LUB NASTĘPCZE, W TYM MIĘDZY INNYMI ZA UTRACONEZYSKI. W żadnym wypadku odpowiedzialność firmy Neogen z mocy prawa nie może przekroczyć ceny zakupu rzekomo
wadliwego produktu.

Przechowywanie

Woreczki z płytkami Neogen Petrifilm CC należy przechowywać schłodzone lub zamrożone w temperaturze poniżej lub
równej 8°C (46°F). Bezpośrednio przed użyciem nieotwarte woreczki z płytkami Neogen Petrifilm CC należy pozostawić doosiągnięcia temperatury pokojowej. Niewykorzystane płytki Neogen Petrifilm CC włożyć z powrotem do woreczka. Zamknąć
szczelnie, zaginając brzeg woreczka i zaklejając taśmą klejącą. Aby zapobiec narażeniu na działanie wilgoci, nie schładzaćotwartych woreczków. Ponownie zamknięte woreczki należy przechowywać w chłodnym, suchym miejscu nie dłużej niż
przez cztery tygodnie. Zaleca się, aby ponownie zamknięte woreczki z płytkami Neogen Petrifilm CC przechowywać wzamrażarce (patrz poniżej), jeśli temperatura w laboratorium przekracza 25°C (77°F) i/lub jeśli laboratorium jest położone w
regionie, w którym wilgotność względna przekracza 50% (z wyjątkiem pomieszczeń klimatyzowanych).
W celu przechowywania otwartych woreczków w zamrażarce umieścić płytki Neogen Petrifilm CC w pojemnikach,które można szczelnie zamknąć. Aby wyjąć zamrożone płytki Neogen Petrifilm CC w celu użycia, należy otworzyć
pojemnik, wyjąć potrzebne płytki i natychmiast umieścić pozostałe płytki w zamrażarce w szczelnie zamkniętym
pojemniku na pozostałą część okresu przydatności do użycia. Nie należy stosować płytek Neogen Petrifilm CC po
upłynięciu ich daty ważności. Zamrażarka używana do przechowywania otwartych woreczków nie może korzystać
z automatycznego cyklu odszraniania, ponieważ w takim przypadku płytki Neogen Petrifilm CC byłyby wielokrotnie
wystawiane na działanie wilgoci, co może uszkodzić płytki.
2

PL(Polski)Nie używać płytek Neogen Petrifilm CC, które noszą ślady odbarwień. Data ważności oraz numer serii znajdują się nakażdym opakowaniu płytek Neogen Petrifilm CC. Numer serii jest również podany na poszczególnych płytkach Neogen
Petrifilm CC.

Utylizacja

Wykorzystane płytki Neogen Petrifilm CC mogą zawierać mikroorganizmy, które mogą stanowić potencjalne
zagrożenie biologiczne.
Należy postępować zgodnie z bieżącymi normami branżowymi dotyczącymi utylizacji.

Instrukcja użycia

Należy dokładnie przestrzegać wszystkich instrukcji. W przeciwnym razie wyniki mogą być niedokładne.

Przygotowanie, inkubacja i interpretacja próbek z przemysłu spożywczego (z wyjątkiem wodybutelkowanej), w tym próbek środowiskowych
Przygotowanie próbki
1. Stosować odpowiednie jałowe rozcieńczalniki:

Bufor fosforanowy Butterfield’a7, 0,1% woda peptonowa8, rozcieńczalniki soli peptonu8,9, buforowana woda
peptonowa8,9, roztwór soli fizjologicznej (0,85-0,90%), roztwór neutralizujący Neogen® Wide-Spectrum Neutralizer,
bulion Letheen niezawierający wodorosiarczynów lub woda destylowana. Szczegółowe wymagania opisano w części
„Specjalne instrukcje dotyczące zatwierdzonych metod”:
Nie stosować z płytkami Neogen Petrifilm CC rozcieńczalników zawierających cytrynian, wodorosiarczyn lub
tiosiarczan, ponieważ mogą one hamować wzrost. Jeśli w standardowej procedurze wskazane jest zastosowanie
buforu na bazie cytrynianu, należy zastąpić go jednym z buforów podanych powyżej, podgrzanym do temperatury
40–45°C (104–113°F).
2. Zmieszać próbkę lub poddać ją homogenizacji.
3. W celu uzyskania optymalnego wzrostu i odzysku mikroorganizmów zmodyfikować pH zawiesiny próbki do wartości
6,6–7,2. W przypadku produktów kwasowych zmodyfikować pH za pomocą 1N NaOH. W przypadku produktów
kwasowych zmodyfikować pH za pomocą 1N HCl.
Stosowanie płytek
1. Umieścić płytkę Neogen Petrifilm CC na płaskiej, równej powierzchni.
2. Podnieść wierzchnią folię i za pomocą pipety dozować, prostopadle do powierzchni posiewu, 1 ml zawiesiny próbki naśrodek dolnej folii.
3. Rozwinąć górną folię na próbce, aby zapobiec uwięzieniu pęcherzyków powietrza.
4. Umieścić głaszczkę Neogen® Petrifilm® na środku płytki Neogen Petrifilm CC, płaską stroną do dołu. Delikatnie
nacisnąć na środek głaszczki Neogen Petrifilm, aby równomiernie rozprowadzić próbkę. Rozprowadzić materiałposiewowy po całej powierzchni wzrostu płytki Neogen Petrifilm CC, zanim nastąpi żelowanie. Nie przesuwać
głaszczki Neogen Petrifilm po folii.
5. Usunąć głaszczkę Neogen Petrifilm i pozostawić płytkę Neogen Petrifilm CC na co najmniej jedną minutę, abyumożliwić wytworzenie się żelu.

Inkubacja

Inkubować płytki Neogen Petrifilm CC w położeniu poziomym, ułożone przezroczystą stroną do góry, w stosach
składających się z maksymalnie 20 płytek. W zależności od aktualnych lokalnych metod referencyjnych można
zastosować kilka czasów inkubacji i temperatur, z których niektóre wskazano w części „Specjalne instrukcje dotyczące
zatwierdzonych metod”.

3

PL(Polski)Interpretacja wyników

1. Płytki Neogen Petrifilm CC można zliczać za pomocą standardowego licznika kolonii lub innego podświetlanegourządzenia powiększającego. Gaz wytwarzany przez bakterie z grupy coli może spowodować zaburzenie kolonii,
co spowoduje, że na kolonii „pojawi się” pęcherzyk. Taki przypadek należy zliczyć jako pojedynczą bakterię z grupy
coli. Nie liczyć kolonii wyrosłych na piance, ponieważ zostały one oddzielone od selektywnego podłoża. Nie liczyć
artefaktowych pęcherzyków, które mogą być obecne.
Interpretacja kolonii bakterii z grupy coli na płytce Neogen Petrifilm CC różni się w zależności od metody referencyjnej.
Na przykład:
LUB Certyfikowane metody NF Validation:
Metody AOAC® Official MethodsSM:
Kolonie bakterii z grupy coli są czerwone i ściśle
- W porównaniu do metody ISO 48312 (metoda MPN)
powiązane (w obrębie jednej średnicy kolonii)
kolonie bakterii z grupy coli są czerwone i ściśle
z uwięzionym gazem. Kolonie niepowiązane
powiązane (w obrębie jednej średnicy kolonii)z gazem (odległość większa niż jedna średnica
z uwięzionym gazem.
kolonii między kolonią a pęcherzykiem gazu) nie są- W porównaniu do metod ISO 48321 (łączna ilość bakterii
liczone jako bakterie z grupy coli.
z grupy coli) i NF V08-0603 (bakterie z grupy coliz odchodami), które opierają się na metodach VRBL,należy zliczyć wszystkie czerwone kolonie wytwarzające
lub niewytwarzające gazu.
2. Okrągły obszar wzrostu ma powierzchnię około 20 cm2. Oszacowania można dokonać na płytkach Neogen Petrifilm
CC zawierających ponad 150 kolonii, zliczając liczbę kolonii w co najmniej jednym reprezentatywnym kwadracie
i określając średnią liczbę na kwadrat. Pomnożyć średnią liczbę przez 20, aby określić szacunkową liczbę na płytce
Neogen Petrifilm CC.
3. Jeśli kolonie występują w dużych ilościach, płytki Neogen Petrifilm CC mogą mieć ciemny kolor żelu i jedną albo obie
z poniższych cech: wiele małych, niewyraźnych kolonii i/lub wiele pęcherzyków gazu. Wysokie stężenie bakterii
z grupy coli spowoduje, że obszar wzrostu przybierze ciemny czerwony kolor. W takim przypadku zapisać liczbę jako
zbyt dużą do zliczenia (TNTC). Jeśli wymagana jest wyższa liczba, zastosować wyższe rozcieńczenie na płytce.
4. Jeśli to konieczne, kolonie mogą zostać odizolowane w celu dalszej identyfikacji. Podnieść wierzchnią folię za pomocą
odpowiedniej techniki badań i pobrać kolonię z żelu. Przetestować, stosując standardowe procedury.
5. Jeśli bakterii na płytkach Neogen Petrifilm CC nie można policzyć w ciągu 1 godziny po wyciągnięciu z inkubatora,
płytki można przechowywać na potrzeby późniejszego zliczenia poprzez zamrożenie w zamykanym pojemniku
w temperaturze niższej lub równej -15°C (5°F) nie dłużej niż tydzień.

Przygotowanie, inkubacja i interpretacja próbek wody butelkowanej
Nawodnianie płytek Neogen Petrifilm CC
1. Umieścić płytkę Neogen Petrifilm CC na płaskiej, równej powierzchni.

2. Podnieść górną folię i dozować 1 ml odpowiedniego jałowego rozcieńczalnika do uwadniania na środek dolnej folii.
Odpowiednie jałowe rozcieńczalniki do uwodniania zawierają wodę destylowaną, wodę dejonizowaną (DI) i wodęo odwróconej osmozie (RO).
3. Rozwinąć górną folię na próbce, aby zapobiec uwięzieniu pęcherzyków powietrza.
4. Umieścić głaszczkę Neogen Petrifilm na środku płytki, płaską stroną do dołu. Delikatnie nacisnąć na środek głaszczki,
aby równomiernie rozprowadzić rozcieńczalnik. Rozprowadzić rozcieńczalnik po całej powierzchni wzrostu płytki
Neogen Petrifilm, zanim nastąpi żelowanie. Nie przesuwać głaszczki po folii.
5. Usunąć głaszczkę i pozostawić płytki w zamknięciu na co najmniej 1 godzinę przed rozpoczęciem użytkowania.
6. Przechowywać nawodnione płytki Neogen Petrifilm CC w zamkniętym woreczku lub woreczku z tworzywa
sztucznego. Zabezpieczyć płytki przed światłem i przechowywać w temperaturze chłodzenia 2–8°C (36–46°F)
maksymalnie przez 7 dni.

Filtrowanie wody i inkubacja płytek

1. Po wykonaniu standardowych procedur z zakresu analizy wody przefiltrować próbkę wody przez filtr membranowy,używając filtra MCE (Mixed Cellulose Ester) 47 mm o rozmiarze porów 0,45 mikrona.
2. Ostrożnie podnieść górną folię płytkiNeogen Petrifilm CC. Unikać dotykania okrągłego obszaru wzrostu. Umieścić filtr
na środku nawadnianego obszaru. Ograniczyć gromadzenie się pęcherzyków powietrza pod filtrem.
3. Powoli rozwinąć górną folię na filtrze. Ograniczyć gromadzenie się pęcherzyków powietrza i powstawanie szczelinmiędzy filtrem i płytką Neogen Petrifilm CC.
4. Delikatnie docisnąć za pomocą głaszczki do płytki Neogen Petrifilm lub poprzez lekkie przesunięcie palcem po całym
obszarze dysku (wraz z krawędziami), aby upewnić się, że filtr równomiernie przylega do żelu i usunąć
pęcherzyki powietrza.

4

PL(Polski)

5. Inkubować płytki Neogen Petrifilm CC w temperaturze 35°C ±1°C przez 24 ±2 godziny11 lub 36°C ±1°C przez
24 ±2 godziny12 w położeniu poziomym, ułożone przezroczystą stroną do góry, w stosach składających sięz maksymalnie 20 płytek.

Interpretacja wyników

1. Płytki Neogen Petrifilm CC można zliczać za pomocą standardowego licznika kolonii lub innego podświetlanegourządzenia powiększającego. Nie liczyć kolonii wyrosłych na piance, ponieważ zostały one oddzielone od
selektywnego podłoża. Nie liczyć artefaktowych pęcherzyków, które mogą być obecne.
2. Czerwone kolonie powiązane z pęcherzykami gazu są zliczane jako bakterie z grupy coli. Pęcherzyki gazu mogą miećokrągły lub gwiazdkowaty kształt wokół kolonii. Gaz wytwarzany przez bakterie z grupy coli może spowodować
zaburzenie kolonii, co spowoduje, że na kolonii „pojawi się” pęcherzyk. Taki przypadek należy zliczyć jako pojedynczą
bakterię z grupy coli. Czerwone kolonie bez pęcherzyków powietrza ściśle powiązanych z gazem mogą być bakteriami
z grupy coli, w związku z czym należy je zebrać i zbadać odpowiednimi metodami potwierdzającymi11,12.
3. Jeśli kolonie występują w dużych ilościach, płytki Neogen Petrifilm CC będą miały ciemny kolor żelu, który jestpowiązany z wieloma małymi, niewyraźnymi kolonami i/lub wieloma pęcherzykami gazu. W takim przypadku zapisać
liczbę jako zbyt dużą do zliczenia (TNTC).
4. Kolonie mogą zostać odizolowane w celu dalszej identyfikacji. Podnieść górną folię i pobrać kolonię z żelu lub
powierzchni filtra. Podczas podnoszenia górnej folii filtr może przylegać do górnej lub dolnej folii. Jeśli filtr przylega do
górnej folii, należy go oddzielić, aby zebrać kolonie. Przetestować, stosując standardowe procedury.
Uwaga: nie zaleca się opóźnionego zliczania płytek Neogen Petrifilm CC z filtrami.
W celu uzyskania dodatkowych informacji należy zapoznać się z odpowiednim dokumentem „Przewodnik interpretacji
do płytek Neogen® Petrifilm® do oznaczania liczby bakterii z grupy coli”. W przypadku pytań dotyczących konkretnych
zastosowań lub procedur należy odwiedzić stronę www.neogen.com lub skontaktować się z lokalnym przedstawicielem
lub dystrybutorem firmy Neogen.
Specjalne instrukcje dotyczące zatwierdzonych metod
AOAC® Official MethodsSM (986.33 Bacteria and Coliform Counts in Milk, Dry Rehydratable Film Methods and989.10 Bacterial and Coliforms Counts in Dairy Products, Dry Rehydratable Film Methods)
Inkubować płytki Neogen Petrifilm CC przez 24 ±2 godziny w temperaturze 32°C ±1°C.
AOAC® Official MethodsSM (991.14 Coliform and Escherichia coli Counts in Foods, Dry Rehydratable Film Methods)
Inkubować płytki Neogen Petrifilm CC przez 24 ±2 godziny w temperaturze 35°C ±1°C.
AOAC® Performance Tested MethodSM, certyfikat nr 082101
W badaniu AOAC® Research Institute Performance Tested Method (PTM) stwierdzono, że metoda z użyciem płytki
Neogen Petrifilm CC jest równoważna średniej liczbie metodami referencyjnymi według publikacji FDA/BAM Rozdział 4,
Sekcja III.D do obliczania liczby bakterii z grupy coli w wodzie butelkowanej.

Zakres walidacji:
Woda butelkowana: woda oczyszczona, uzdatniona woda źródlana, naturalna woda źródlana niegazowana, naturalna wodaźródlana gazowana.
Inkubacja:
Inkubować płytki Neogen Petrifilm CC przez 24 h ±2 h w temperaturze 35°C ±1°C.
Certyfikacja NF Validation instytutu AFNOR Certification:
Metoda certyfikowana według NF VALIDATION zgodnie z normą ISO 16140-210 w porównaniu do normy ISO 48321(3M-01/02-09/89 A)
Zakres walidacji: testowanie wszystkich produktów żywnościowych przeznaczonych dla ludzi (z wyjątkiem surowych
owoców morza), karmy dla zwierząt i próbek środowiskowych.
Podczas wdrażania powyższych instrukcji użycia należy skorzystać z poniższych informacji szczegółowych:
Przygotowanie próbki:Stosować wyłącznie rozcieńczalniki z listy ISO.
Inkubacja:
Inkubować płytki Neogen Petrifilm CC przez 24 ±2 godziny w temperaturze 30°C ±1°C lub 37°C ±1°C.
Interpretacja wyników:
Zliczyć liczbę mikroorganizmów znajdujących się w testowanej próbce na jednej płytce na rozcieńczenie, zgodnie z normą
ISO 72185. Oszacowania wykraczają poza zakres certyfikacji NF Validation (patrz ustęp 2 części Interpretacja wyników).
5

PL(Polski)

Metoda certyfikowana według NF VALIDATION zgodnie z normą ISO 16140-210 w porównaniu do normy ISO 48312(3M-01/02-09/89 B)
Zakres walidacji: testowanie wszystkich produktów żywnościowych przeznaczonych dla ludzi (z wyjątkiem surowych
owoców morza).
Podczas wdrażania powyższych instrukcji użycia należy skorzystać z poniższych informacji szczegółowych:
Przygotowanie próbki:Stosować wyłącznie rozcieńczalniki z listy ISO.
Inkubacja:
Inkubować płytki Neogen Petrifilm CC przez 24 ±2 godziny w temperaturze 30°C ±1°C lub 37°C ±1°C.
Interpretacja wyników:
Zliczyć liczbę mikroorganizmów znajdujących się w testowanej próbce na jednej płytce na rozcieńczenie, zgodnie z normą
ISO 72185. Oszacowania wykraczają poza zakres certyfikacji NF Validation (patrz ustęp 2 części Interpretacja wyników).
Metoda certyfikowana według NF VALIDATION zgodnie z normą ISO 16140-210 w porównaniu do normy NF V08-0603(3M-01/02-09/89 C)
Zakres walidacji: testowanie wszystkich produktów żywnościowych przeznaczonych dla ludzi.
Podczas wdrażania powyższych instrukcji użycia należy skorzystać z poniższych informacji szczegółowych:
Przygotowanie próbki:Stosować wyłącznie rozcieńczalniki z listy ISO.
Inkubacja:
Inkubować płytki Neogen Petrifilm CC przez 24 ±2 godz. w temperaturze 44°C ±1°C.
Interpretacja wyników:
Zliczyć liczbę mikroorganizmów znajdujących się w testowanej próbce na jednej płytce na rozcieńczenie, zgodnie z normą
ISO 72185. Oszacowania wykraczają poza zakres certyfikacji NF Validation (patrz ustęp 2 części Interpretacja wyników).
Informacje dotyczące inokulacji, zliczania kolonii i obliczania oraz przedstawienia wyników można znaleźć w normie
EN ISO 7218.

3M 01/02 – 09/89A, B, and C
ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS
http://nf-validation.afnor.org/en
Dodatkowe informacje na temat końca ważności można znaleźć w certyfikacie NF VALIDATION dostępnym na wskazanejpowyżej stronie internetowej.

6

PL(Polski)Źródła

1. ISO 4832. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms –Colony count technique.
2. ISO 4831. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumeration of
coliforms – Most probable number technique.
3. AFNOR NF V08-060. General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at
44°C – Routine method.
4. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
6. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
7. FDA. Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998. Reagents Index for BAM found at:
http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.
8. ISO 6887-5. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk products.
9. ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension anddecimal dilutions.
10. ISO 16140-2. Microbiology of the food chain – Method validation – Protocol for the validation of alternative(proprietary) methods against a reference method.
11. U.S. Food and Drug Administration. 2002. Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4. Membranefilter method for coliforms.
12. American Public Health Association. 2017. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th Ed.
Method 9222B2a.
Należy skorzystać z bieżących wersji wymienionych powyżej standardowych metod.

Objaśnienie symboli

info.neogen.com/symbols
AOAC jest zastrzeżonym znakiem towarowym firmy AOAC INTERNATIONAL.
Official Methods jest znakiem usługowym firmy AOAC INTERNATIONAL.
Performance Tested Method jest znakiem usługowym firmy AOAC INTERNATIONAL.

7

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931A

RU(Русский)Дата выпуска: 2024-01

Инструкции к продукту

Тест-пластина для подсчета колиформных бактерий
Описание продукта и его назначение

Тест-пластина Neogen® Petrifilm® для подсчета колиформных бактерий (CC) — это готовая культуральная
среда, содержащая питательные компоненты на основе модифицированного фиолетового красного с желчью
(VRB), растворимый в холодной воде гелеобразующий агент и тетразолиевый индикатор, облегчающий
подсчет колоний. Тест-пластины Neogen Petrifilm CC предназначены для подсчета колиформных бактерийпри производстве пищевых продуктов, напитков и бутилированной воды. Компоненты тест-пластин
Neogen Petrifilm CC дезинфицированы, однако не стерилизованы. Процессы разработки и производства
компании Neogen Food Safety сертифицированы по стандарту Международной организации постандартизации (ISO) 9001. Тест- пластина Neogen Petrifilm CC не испытывалась применительно ко всемвозможным пищевым продуктам, технологиям производства пищевых продуктов, протоколам анализа, атакже всем возможным штаммам микроорганизмов.
В руководстве по методам бактериологического анализа (BAM) Управления по контролю качества
пищевых продуктов и лекарственных средств США (FDA) 7 колиформные бактерии определяются какграмотрицательные палочки, ферментирующие лактозу до кислоты и газа. Колонии колиформных бактерий,растущие на тест-пластине Neogen Petrifilm CC, вырабатывают кислоту, под действием которой индикатор
уровня pH делает более интенсивным цвет геля; скопление газа вокруг колоний красного цвета указывает наприсутствие колиформных бактерий.
В стандарте ISO колиформные бактерии определяются по критерию способности расти в специфическихдля метода селективных средах. В описании метода 4832 по ISO 1, предполагающего подсчет колиформных
бактерий путем подсчета колоний, эти бактерии определяются как производящие кислоту на VRB-агарес лактозой (VRBL). На тест-пластинах Neogen Petrifilm CC на присутствие таких вырабатывающих кислоту
колиформных бактерий указывает красный цвет колоний при наличии либо отсутствии газа. В описании
метода 4831 по ISO 2, предполагающего подсчет колиформных бактерий путем расчета наиболее вероятной
численности (MPN), колиформные бактерии определяются по критерию способности расти и производить газиз лактозы в селективном бульоне. На тест-пластинах Neogen Petrifilm CC на присутствие этих колиформных
бактерий указывает красный цвет колоний, который соотносится с наличием газа.
В образцах бутилированной воды на присутствие колоний колиформных бактерий достоверно указывает
соотносящийся с наличием газа красный цвет колоний на тест-пластинах Neogen Petrifilm CC. Колонии,красный цвет которых не соотносится непосредственно с наличием пузырьков газа, могут являться
колониями колиформных бактерий. Их следует субкультивировать и подвергать дальнейшему анализу,используя надлежащие методы подтверждения 11,12. См. дополнительную информацию в разделе обинтерпретации результатов. Характеристические колонии можно субкультивировать и подвергать анализу
как Escherichia coli.
Организацией AFNOR Certification тест-пластина Neogen Petrifilm CC сертифицирована по результатам
сопоставления с методом 4831 по ISO 2 и методом 4832 по ISO 1 применительно к подсчету общей
численности колиформных бактерий. Организацией AFNOR Certification тест-пластина Neogen Petrifilm CCсертифицирована также по результатам сопоставления с NF V08-060 3 применительно к подсчету численности
термотолерантных колиформных бактерий.

Техника безопасности

Пользователь должен прочесть, понять и соблюдать все указания по технике безопасности в инструкцияхк тест-пластине Neogen Petrifilm CC. Сохраните инструкции по технике безопасности для использованияв дальнейшем.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ.

Указывает на опасную ситуацию, которая, если ее не избежать, может привестик смерти, тяжелой травме и (или) повреждению имущества

1

RU(Русский)ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕДля снижения рисков, связанных с воздействием биологически опасных веществ и загрязнением
окружающей среды, необходимо соблюдать следующие правила.
• Утилизируйте биологически опасные отходы в соответствии с действующими отраслевыми стандартами иместными нормативами.
Для снижения рисков, связанных с выпуском зараженного продукта, придерживайтесь приведенных
далее рекомендаций.
• Соблюдайте все инструкции по хранению изделия, содержащиеся в этих инструкциях по применению.
• Не используйте продукт по истечении его срока годности.
Для снижения рисков, связанных с бактериальным инфицированием и загрязнением рабочего места,необходимо соблюдать следующие правила.
• Выполняйте процедуры анализа с использованием тест-пластины Neogen Petrifilm CC в надлежащим
образом оборудованной лаборатории под контролем квалифицированного микробиолога.
• Пользователь обязан обучить персонал надлежащим методикам проведения анализа, например излагаемымв документе Good Laboratory Practices 4, ISO 7218 5 или ISO 17025 6.
Для снижения рисков, связанных с неправильной интерпретацией результатов, необходимо
учитывать следующую информацию.
• Тест-пластины Neogen Petrifilm CC не зарегистрированы компанией Neogen применительно киспользованию в каких-либо отраслях, кроме производства пищевых продуктов и напитков, в томчисле бутилированной воды. В частности, тест-пластины Neogen Petrifilm CC не зарегистрированы
Neogen применительно к исследованию фармацевтических препаратов и косметики. Тест-пластины
Neogen Petrifilm CC не зарегистрированы Neogen применительно к исследованию поверхностныхвод и водопроводной воды, а также воды, используемой в фармацевтической и косметической
промышленности.
• Использование тест-пластин Neogen Petrifilm CC для анализа образцов воды в соответствии с местными
нормативами для исследования воды осуществляется исключительно по усмотрению конечного
пользователя, который несет исключительную ответственность за такое использование. Тест-пластины
Neogen Petrifilm CC не испытывались применительно к всем возможным образцам бутилированной воды,протоколам анализа, а также всем возможным штаммам микроорганизмов.
• Не используйте тест-пластины Neogen Petrifilm CC при диагностировании заболеваний у человека иживотных.
• Тест-пластины Neogen Petrifilm CC не позволяют дифференцировать никакие штаммы колиформных
бактерий.
• Пищевые продукты с высоким содержанием сахара могут увеличивать способность к газообразованию уEnterobacteriaceae неколиформного типа.
Дополнительную информацию см. в паспорте безопасности продукта.
Чтобы узнать о документации, касающейся рабочих характеристиках продукта, посетите наш веб-сайт
www.neogen.com либо обратитесь к местному представителю или официальному дилеру Neogen.

Ответственность пользователей

Пользователи обязаны ознакомиться с информацией и инструкциями к изделию. Для получения
дополнительной информации посетите наш веб-сайт www.neogen.com либо обратитесь к местному
представителю или официальному дистрибьютору Neogen.
При выборе метода исследования важно понимать, что на результаты исследования могут влиять внешние
факторы, например метод забора проб, протокол исследования, подготовка проб к исследованию,способы обработки проб во время исследования, а также используемое оборудование.
За выбор метода исследования и исследуемого продукта отвечает пользователь, который должен наосновании исследования достаточного количества образцов с помощью надлежащих матриц имикробных провокационных проб определить, отвечает ли выбранный метод исследования необходимымему критериям.
Пользователь также обязан установить, что выбранный им метод анализа, а также полученные результаты
отвечают требованиям его клиентов или поставщиков.
Результаты, полученные с помощью продукта Neogen Food Safety (как и при использовании любого другого
метода исследований), не гарантируют качество матриц или технологических процессов, подвергавшихся
исследованиям.

2

RU(Русский)Ограничение гарантий и средств судебной защиты

ЕСЛИ ИНОЕ ЯВНО НЕ УКАЗАНО В РАЗДЕЛЕ ОБ ОГРАНИЧЕННОЙ ГАРАНТИИ НА ИНДИВИДУАЛЬНОЙ УПАКОВКЕ
ПРОДУКТА, NEOGEN НЕ ПРИЗНАЕТ ПРЯМЫЕ ИЛИ КОСВЕННЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА, ВКЛЮЧАЯ, ПОМИМО ПРОЧЕГО,ГАРАНТИЮ ТОВАРНЫХ ХАРАКТЕРИСТИК ИЛИ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В СООТВЕТСТВИИ С УКАЗАННОЙ ОБЛАСТЬЮ
ПРИМЕНЕНИЯ. Если в изделии компании Neogen Food Safety обнаруживаются дефекты, компания Neogenили уполномоченный этой компанией дистрибьютор обязуется по своему усмотрению заменить этоизделие или возместить стоимость его покупки. Это единственный способ правовой защиты. О возможном
дефекте необходимо немедленно уведомить компанию Neogen в течение шестидесяти дней с момента егообнаружения и вернуть дефектное изделие в компанию Neogen. По любым дополнительным вопросам
обращайтесь к представителю или официальному дилеру Neogen.

Ограничение ответственности компании NeogenКОМПАНИЯ NEOGEN НЕ НЕСЕТ ОТВЕТСТВЕННОСТИ ЗА УЩЕРБ ИЛИ ПОВРЕЖДЕНИЯ, ЯВЛЯЮЩИЕСЯ ПРЯМЫМИ,НЕПРЯМЫМИ, УМЫШЛЕННЫМИ, СЛУЧАЙНЫМИ ИЛИ КОСВЕННЫМИ, ВКЛЮЧАЯ, ПОМИМО ПРОЧЕГО,УТРАЧЕННУЮ ПРИБЫЛЬ. Ответственность компании Neogen ни при каких обстоятельствах и несмотря ни накакие требования не может превышать стоимость изделия.

Хранение

Невскрытые упаковки с тест-пластинами Neogen Petrifilm CC подлежат хранению в холодильной илиморозильной камере при температурах не выше 8 °C (46 °F). Перед вскрытием упаковки с тест-пластинами
Neogen Petrifilm CC доведите ее до комнатной температуры. Неиспользованные тест-пластины Neogen
Petrifilm CC помещайте обратно в упаковку. Запечатайте открытый край пакета, завернув его и заклеив
клейкой лентой. Во избежание воздействия влаги не охлаждайте вскрытые пакеты. Храните
повторно запечатанные пакеты с тест-пластинами в сухом прохладном месте не более четырех недель.
Если температура в лаборатории превышает 25 °C (77 °F) и (или) лаборатория расположена в регионес относительной влажностью выше 50 % (за исключением кондиционируемых помещений), повторно
запечатанные пакеты с тест-пластинами Neogen Petrifilm CC рекомендуется хранить в морозильной камере
(см. ниже).
Хранить вскрытые пакеты с тест-пластинами Neogen Petrifilm CC в морозильной камере следуетв герметизируемом контейнере. Чтобы извлечь замороженные пластины Neogen Petrifilm CC дляиспользования, откройте контейнер, извлеките нужное количество пластин, а оставшиеся пластины вгерметизированном контейнере немедленно поместите обратно в морозильную камеру, где они должны
находиться в течение всего периода хранения. Не используйте тест-пластины Neogen Petrifilm CC после
истечения срока годности. Морозильная камера, используемая для хранения вскрытых пакетов, не должна
иметь автоматический цикл размораживания, поскольку в этом случае тест-пластины Neogen Petrifilm CCбудут неоднократно подвергаться воздействию влаги, которая может их повредить.
Не используйте тест-пластины Neogen Petrifilm CC, цвет которых изменился. Дата истечения срока годностии номер партии указаны на каждой упаковке тест-пластин Neogen Petrifilm CC. Номер партии также указан накаждой тест-пластине Neogen Petrifilm CC.

Утилизация

После использования тест-пластины Neogen Petrifilm CC могут содержать микроорганизмы, которые могут
представлять биологическую опасность.
Утилизируйте продукт в соответствии с действующими отраслевыми стандартами.

Инструкции по применению

Строго соблюдайте все инструкции. В противном случае результаты могут быть неточными.

Приготовление и инкубация образцов пищевых продуктов и напитков(за исключением бутилированной воды), в том числе образцов окружающей среды,и интерпретация результатов анализа.
Приготовление образца
1. Используйте подходящие стерильные разбавители:Фосфатный буферный водяной раствор по Баттерфилду7, пептонная вода 0,1 %8, пептонные солевые
растворители8,9, буферная пептонная вода8,9, соляной раствор (0,85–0,90 %), нейтрализатор широкого
спектра Neogen®, безбисульфитный летиновый бульон или дистиллированная вода. Особые требования
см. в разделе «Особые инструкции для утвержденных методов».
Не используйте с тест-пластинами Neogen Petrifilm CC разбавители, содержащие цитраты,бисульфиты или тиосульфаты, поскольку эти вещества могут замедлить рост бактерий. Еслистандартная методика предполагает использование цитратного буфера, его необходимо заменить
буфером из списка выше, нагретым до температуры 40–45 °C (104–113 °F).
3

RU(Русский)2. Перемешайте или гомогенизируйте образец.
3. Для обеспечения оптимального роста и выхода микроорганизмов доведите pH суспензии образца доуровня 6.6–7.2. Для кислых продуктов отрегулируйте уровень pH с помощью 1N NaOH. Для щелочных
продуктов отрегулируйте уровень pH с помощью 1N HCl.
Посев
1. Поместите тест-пластину Neogen Petrifilm CC на плоскую горизонтальную поверхность.
2. Поднимите покрывающую пленку и пипеткой, расположенной перпендикулярно к зоне посева,нанесите на центральную часть подложной пленки 1 мл суспензии образца.
3. Осторожно опустите верхнюю пленку на образец, не допуская образования пузырьков воздуха.
4. Поместите распределитель Neogen® Petrifilm® плоской стороной вниз в центре тест-пластины Neogen
Petrifilm CC. Осторожно надавите на центральную часть распределителя Neogen Petrifilm, чтобы
равномерно распределить образец. Распределите посевной материал по всей области роста на тестпластине Neogen Petrifilm CC до образования геля. Не разглаживайте пленку распределителем Neogen
Petrifilm.
5. Для образования геля уберите распределитель Neogen Petrifilm и не прикасайтесь к тест-пластине Neogen
Petrifilm CC не менее одной минуты.

Инкубация

Инкубируйте тест-пластины Neogen Petrifilm CC в горизонтальном положении прозрачной стороной вверх встопках не более чем по 20 тест-пластин. Можно использовать разные периоды инкубации и температурыв зависимости от используемых в текущий момент в регионе эталонных методов, некоторые из которых
перечисляются в разделе «Особые инструкции для утвержденных методов».

Интерпретация результатов

1. Подсчет микроорганизмов на тест-пластинах Neogen Petrifilm CC можно выполнять с помощью
стандартного счетчика колоний или другого подсвечиваемого увеличителя. Газ, вырабатываемый
колиформными бактериями, может разрушить колонию, в результате чего она будет «окаймлять» пузырек.
Такую колонию следует считать одной колонией колиформных бактерий. При подсчете не учитывайте
колонии на пенной перемычке, поскольку они не подвергались селективному воздействию питательной
среды. При подсчете не учитывайте артефактные пузырьки.
Интерпретация результатов подсчета колоний колиформных бактерий на тест-пластине Neogen Petrifilm
CC различна в зависимости от используемого эталонного метода подсчета. Примерами могут служить
следующие источники.
ИЛИ Методы, сертифицированные NF Validation.
AOAC® Official MethodsSM.
Колонии колиформных бактерий имеют- В отличие от метода 4831 по ISO 2 (метод MPN)
красный цвет и непосредственно связаны
предполагается, что колиформные бактерии имеют(в пределах одного диаметра колонии) скрасный цвет и непосредственно связаны (в пределах
пузырьками газа. Колонии, не связанные
одного диаметра колонии) с пузырьками газа.
с газом (расстояние между колонией и- В отличие от метода 4832 по ISO 1 (общее количество
пузырьком газа больше одного диаметра
колиформных бактерий) и NF V08-060 3 (колиформные
колонии), не учитываются при подсчете какбактерии в фекалиях), которые основаны наколонии колиформных бактерий.
использовании VRBL, считаются все красные колониис пузырьками газа и без них.
2. Площадь круглой области роста составляет приблизительно 20 см2. Проводить оценку на тест-пластинах
Neogen Petrifilm CC, содержащих более 150 колоний, можно путем подсчета количества колоний наодном или более репрезентативных квадратах и определения среднего количества на квадрат. Умножьте
среднее число на 20, чтобы определить расчетное количество на тест-платину Neogen Petrifilm CC.
3. Если колонии присутствуют в больших количествах, то на тест-пластинах Neogen Petrifilm CC возможно
увеличение интенсивности цвета геля, а также наличие одного из или обоих следующих признаков:множество небольших, нечетких колоний и (или) множество пузырьков газа. При высоких концентрациях
колиформных бактерий область роста приобретает темно-красный цвет. В таких случаях результат следует
записывать как слишком большое для подсчета количество (TNTC). Если требуется подсчет фактического
количества бактерий, сделайте посев при большем разведении.
4. При необходимости колонии можно изолировать для дальнейшего исследования. Поднимите
покрывающую пленку, используя надлежащую методику проведения анализа, и извлеките колонию из
геля. Проводите анализ по стандартным правилам.
5. При невозможности подсчета бактерий на тест-пластинах Neogen Petrifilm CC в течение 1 часа после
извлечения из инкубатора их можно хранить для последующего подсчета в морозильной камере вгерметичном контейнере при температуре не выше минус 15 °C (5 °F) не более одной недели.
4

RU(Русский)Приготовление и инкубация образцов бутилированной воды, интерпретация
результатов анализа
Смочите тест-пластины Neogen Petrifilm CC
1. Поместите тест-пластину Neogen Petrifilm CC на плоскую горизонтальную поверхность.

2. Поднимите покрывающую пленку и внесите 1 мл надлежащего стерильного разбавителя для смачиванияпо центру подложной пленки. К надлежащим стерильным разбавителям для смачивания относятся:дистиллированная вода, деионизированная (DI) вода и обратноосмотическая (RO) вода.
3. Осторожно опустите верхнюю пленку на образец, не допуская образования пузырьков воздуха.
4. Поместите распределитель Neogen Petrifilm плоской стороной вниз в центре тест-пластины.
Осторожно надавите на центральную часть распределителя, чтобы равномерно распределить
разбавитель. Распределите разбавитель по всей области роста на тест-пластине Neogen Petrifilm дообразования геля. Не разглаживайте пленку распределителем.
5. Снимите распределитель и оставьте тест-пластины закрытыми не менее чем на 1 час, прежде чемпродолжить работу с ними.
6. Храните смоченные тест-пластины Neogen Petrifilm CC в запечатанной упаковке или полиэтиленовом
пакете. Защищайте тест-пластины от солнечного света и храните их в холодильной камере притемпературе 2–8 °C (36–46 °F) не более 7 дней.

Фильтрация воды и инкубация тест-пластин

1. Следуя стандартным правилам исследования воды, отфильтруйте образец воды через мембранный
фильтр. Используйте фильтр из смеси сложных эфиров целлюлозы (MCE) 47 мм с порами размером
0,45 микрона.
2. Осторожно поднимите покрывающую пленку тест-пластины Neogen Petrifilm CC. Не прикасайтесь ккруглой области роста. Поместите фильтр в центр смоченной области. Сведите к минимуму образование
пузырьков под фильтром.
3. Медленно опустите покрывающую пленку на фильтр. Сведите к минимуму образование пузырьков
воздуха и зазоров между фильтром и тест-пластиной Neogen Petrifilm CC.
4. Слегка надавите сверху распределителем тест-пластины Neogen Petrifilm или осторожно проведя пальцемпо всей площади диска (включая края), чтобы обеспечить равномерный контакт фильтра с гелем иудалить пузырьки воздуха.
5. Инкубируйте тест-пластины Neogen Petrifilm CC при температуре 35 °C ± 1 °C в течение 24 ± 2 часов 11 или
36 °C ± 1 °C в течение 24 ± 2 часов 12 в горизонтальном положении прозрачной стороной вверх в стопкахне более чем по 20 тест-пластин.

Интерпретация результатов

1. Подсчет микроорганизмов на тест-пластинах Neogen Petrifilm CC можно выполнять с помощью
стандартного счетчика колоний или другого подсвечиваемого увеличителя. При подсчете не учитывайте
колонии на пенной перемычке, поскольку они не подвергались селективному воздействию питательной
среды. При подсчете не учитывайте артефактные пузырьки.
2. Колонии красного цвета, связанные с пузырьками газа, считаются колониями колиформных
бактерий. Пузырьки газа могут располагаться вокруг колонии в виде кольца или звездообразно.
Газ, вырабатываемый колиформными бактериями, может разрушить колонию, в результате чего она будет
«окаймлять» пузырек. Такую колонию следует считать одной колонией колиформных бактерий. Колонии,красный цвет которых не соотносится непосредственно с наличием пузырьков газа, могут являться
колониями колиформных бактерий. Их следует отделять и подвергать дальнейшему анализу, используя
надлежащие методы подтверждения 11,12.
3. Если колонии присутствуют в больших количествах, то на тест-пластинах Neogen Petrifilm CC возможно
увеличение интенсивности цвета геля, а также наличие множества небольших, нечетких колоний иили пузырьков газа. В таких случаях результат следует записывать как слишком большое для подсчета
количество (TNTC).
4. Колонии можно изолировать для дальнейшего исследования. Поднимите покрывающую пленку иизвлеките из геля или снимите с поверхности фильтра колонию. При поднятии покрывающей пленки
фильтр может прилипнуть к покрывающей или подложной пленке. Если фильтр прилип к покрывающей
пленке, отделите фильтр от покрывающей пленки и снимите колонии. Проводите анализ постандартным правилам.
Примечание. Откладывание подсчета бактерий на тест-пластинах Neogen Petrifilm CC с фильтрамине рекомендуется.

5

RU(Русский)Подробнее см. в соответствующем руководстве по интерпретации результатов, полученных с помощью
тест-пластин Neogen® Petrifilm® для подсчета колиформных бактерий. Если у вас возникли вопросы покаким-либо областям или методикам применения продукта, посетите наш веб-сайт по адресу
www.neogen.com или обратитесь к местному представителю или дистрибьютору компании Neogen.
Особые инструкции к утвержденным методам
AOAC® Official MethodsSM (986.33 Подсчет колиформных и других бактерий в молоке, методы сиспользованием сухих регидратируемых пленок, и 989.10 Подсчет колиформных и других бактерий вмолочных продуктах, методы с использованием сухих регидратируемых пленок)Инкубируйте тест-пластины Neogen Petrifilm CC в течение 24 ± 2 часов при температуре 32 °C ± 1 °C.
AOAC® Official MethodsSM (991.14 Подсчет колиформных бактерий и Escherichia coli в пищевых продуктах,методы с использованием сухих регидратируемых пленок)Инкубируйте тест-пластины Neogen Petrifilm CC в течение 24 ± 2 часов при температуре 35 °C ± 1 °C.
Сертификат AOAC® Performance Tested MethodSM № 082101
В исследовании AOAC® Research Institute Performance Tested Method (PTM) было установлено, что метод сиспользованием тест-пластины Neogen Petrifilm CC эквивалентен методу определения среднего значения спомощью логарифма FDA/BAM, глава 4, раздел III.D для подсчета колиформных бактерий в бутилированной
воде.

Объект валидации
Бутилированная вода: очищенная вода, очищенная родниковая вода, негазированная природная
родниковая вода, газированная природная родниковая вода.
Инкубация
Инкубировать тест-пластины Neogen Petrifilm CC в течение 24 ± 2 часов при температуре 35 °C ± 1 °C.
NF Validation от AFNOR CertificationСертифицированный NF Validation метод по стандарту ISO 16140-2 10 в отличие от ISO 4832 1(3M-01/02-09/89 A)Объект валидацииДля исследования образцов всех пищевых продуктов, предназначенных для человека(за исключением сырых моллюсков и ракообразных), кормов для домашних животных и образцов
окружающей среды.
При работе по вышеизложенным инструкциям придерживайтесь следующих рекомендаций.
Приготовление образца:Пользуйтесь только предусмотренными ISO разбавителями.
Инкубация:Инкубируйте тест-пластины Neogen Petrifilm CC в течение 24 ± 2 часов при температуре 30 °C ± 1 °C или 37 °C ± 1 °C.
Интерпретация результатов
Подсчитайте количество микроорганизмов в исследуемом образце методом ISO 7218 5 для одной тестпластины на каждое разведение. Приблизительные подсчеты не являются объектом сертификации NF
Validation (ср. пункт 2 раздела об интерпретации результатов).
Сертифицированный NF Validation метод по стандарту ISO 16140-2 10 в отличие от ISO 4831 2(3M-01/02-09/89 B)Объект валидацииДля исследования образцов всех пищевых продуктов, предназначенных для человека (за исключением
сырых моллюсков и ракообразных).
При работе по вышеизложенным инструкциям придерживайтесь следующих рекомендаций.
Приготовление образца
Пользуйтесь только предусмотренными ISO разбавителями.
Инкубация
Инкубируйте тест-пластины Neogen Petrifilm CC в течение 24 ± 2 часов при температуре 30 °C ± 1 °C или 37 °C ± 1 °C.
6

RU(Русский)Интерпретация результатов
Подсчитайте количество микроорганизмов в исследуемом образце методом ISO 7218 5 для одной тест-пластинына каждое разведение. Приблизительные подсчеты не являются объектом сертификации NF Validation(ср. пункт 2 раздела об интерпретации результатов).
Сертифицированный NF Validation метод по стандарту ISO 16140-2 10 в отличие от NF V08-060 3(3M-01/02-09/89 C)Объект валидацииДля исследования образцов всех пищевых продуктов, предназначенных для человекаПри работе по вышеизложенным инструкциям придерживайтесь следующих рекомендаций.
Приготовление образца
Пользуйтесь только предусмотренными ISO разбавителями.
Инкубация
Инкубируйте тест-пластины Neogen Petrifilm CC в течение 24 ± 2 часов при температуре 44 °C ± 1 °C.
Интерпретация результатов
Подсчитайте количество микроорганизмов в исследуемом образце методом ISO 7218 5 для одной тест-пластинына каждое разведение. Приблизительные подсчеты не являются объектом сертификации NF Validation(ср. пункт 2 раздела об интерпретации результатов). Информацию о посеве, определении количества колоний,вычислениях и интерпретации результатов см. в стандарте EN ISO 7218.

3M 01/02 – 09/89A, B, and CАЛЬТЕРНАТИВНЫЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА ДЛЯ АГРОПРОМЫШЛЕННОСТИ
http://nf-validation.afnor.org/enПодробнее о сроке действия см. в сертификате NF VALIDATION на указанном выше веб-сайте.

7

RU(Русский)Ссылки

1. ISO 4832. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms –Colony count technique.
2. ISO 4831. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumerationof coliforms – Most probable number technique.
3. AFNOR NF V08-060. General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at
44°C – Routine method.
4. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance formicrobiological examinations.
6. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
7. FDA. Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998. Reagents Index for BAM found at:
http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.
8. ISO 6887-5. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension
and decimal dilutions for microbiological examination, Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk
products.
9. ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension
and decimal dilutions for microbiological examination, Part 1: General rules for the preparation of the initialsuspension and decimal dilutions.
10. ISO 16140-2. Microbiology of the food chain – Method validation – Protocol for the validation of alternative(proprietary) methods against a reference method.
11. U.S. Food and Drug Administration. 2002. Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4.
Membrane filter method for coliforms.
12. American Public Health Association. 2017. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20thEd. Method 9222B2a.
См. действующие версии указанных выше стандартных методов.

Пояснения к символам
info.neogen.com/symbols

AOAC – зарегистрированный товарный знак AOAC INTERNATIONAL.
Official Methods — марка обслуживания AOAC INTERNATIONAL.
Performance Tested Method является знаком обслуживания AOAC INTERNATIONAL.

8

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931A

TR(Türkçe)Yayınlanma Tarihi: 2024-01

Ürün Talimatları

Koliform Sayım Plakası
Ürün Tanımı ve Kullanım Amacı

Neogen® Petrifilm® Koliform Sayım (CC) Plakası; soğuk suda çözünen jelleştirici bir madde olan modifiye edilmiş Violet
Red Bile (VRB) besin maddeleri ve koloni sayımını kolaylaştıran bir tetrazolyum göstergesini içeren numune almaya hazır
kültür besiyeri sistemidir. Neogen Petrifilm CC Plakaları, gıda, içecek ve şişelenmiş su endüstrilerinde koliform sayımı içinkullanılır. Neogen Petrifilm CC Plakası bileşenleri dekontamine edilmiştir ama sterilize değildir. Neogen Gıda Güvenliği,Uluslararası Standardizasyon Teşkilatı (ISO) 9001 tasarım ve üretim sertifikasına sahiptir. Neogen Petrifilm CC Plakası,
tüm olası gıda ürünleri, gıda prosesleri, test protokolleri veya tüm olası mikroorganizma suşlarıyla değerlendirmeye tabitutulmamıştır.
Amerika Birleşik Devletleri Gıda ve İlaç Dairesi (FDA) Bakteriyolojik Analiz Kılavuzu (BAM)7 koliformları, laktoz
fermentasyonundan asit ve gaz üreten gram-negatif çomaklar olarak tanımlar. Neogen Petrifilm CC Plakasının üzerindeüreyen koliform kolonileri asit üretir bu da pH göstergesinin jel rengini derinleştirmesine yol açar. Kırmızı kolonilerin etrafınasıkışan gaz koliform varlığını gösterir.
ISO, koliformları yönteme özgü, seçici besiyerindeki üreme özelliklerine göre tanımlar. Koliformları koloni sayım tekniğine
göre sayan ISO yöntemi 48321, koliformları laktozlu VRB (VRBL) agarı üzerinde asit üreticileri olarak tanımlar. Neogen
Petrifilm CC Plakalarının üzerinde bu asit üreten koliformlar gaz üretimi olan ve olmayan kırmızı kolonilerle gösterilir.
Koliformları en yüksek olasılıklı sayı (MPN) yöntemine göre sayan ISO yöntemi 48312, koliformları seçici sıvı besiyerindeüreme ve laktozdan gaz üretme yeteneğine göre tanımlar. Neogen Petrifilm CC Plakalarının üzerinde bu koliformlar gazlailişkili kırmızı kolonilerle gösterilir.
Şişelenmiş su örnekleri için, doğrulanmış koliform kolonileri Neogen Petrifilm CC Plakalarının üzerinde gazla ilişkili
kırmızı kolonilerle gösterilir. Yakından ilişkilendirilmiş gaz kabarcıkları olmayan kırmızı koloniler koliform olabilir ve uygundoğrulama yöntemleri ile alt kültürleme yapılmalı ve test edilmelidir11,12. Ek ayrıntılar için Yorumlama bölümüne bakın.
Karakteristik koloniler Escherichia coli olarak alt kültürlenebilir ve test edilebilir.
AFNOR Certification, toplam koliformların sayımı için Neogen Petrifilm CC Plakasını ISO yöntemi 48312 ve ISO yöntemi
48321’ye kıyasla onaylamıştır. AFNOR Certification aynı zamanda sıcaklığa dayanıklı olan koliformların sayımı için
Neogen Petrifilm CC Plakasını NF V08-0603’a kıyasla onaylamıştır.

Güvenlik

Kullanıcı, Neogen Petrifilm CC Plakası talimatlarındaki tüm güvenlik bilgilerini okumalı, anlamalı ve bunlara uymalıdır.
Güvenlik talimatlarını ileride başvurmak üzere saklayın.
UYARI: Önlenmemesi halinde ölüm ya da ciddi yaralanma ve/veya mal zararı ile sonuçlanabilecek tehlikeli bir
durumu gösterir

UYARI
Biyolojik tehlikelere ve çevresel kontaminasyona maruz kalmayla ilişkili riskleri azaltmak için:• Biyolojik tehlike teşkil eden atıkların atılmasında geçerli endüstri standartlarına ve yerel düzenlemelere uyun.
Kontamine ürünün piyasaya sürülmesiyle ilişkili riskleri azaltmak için:• Kullanım talimatlarında yer alan tüm ürün saklama talimatlarına uyun.
• Son kullanma tarihi geçtikten sonra kullanmayın.
Bakteriyel enfeksiyon ve iş yeri kontaminasyonuyla ilişkili riskleri azaltmak için:• Neogen Petrifilm CC Plakası testini, uzman bir mikrobiyoloğun kontrolü altında uygun şekilde donatılmış birlaboratuvarda gerçekleştirin.
• Kullanıcı, personelini mevcut doğru test teknikleri konusunda eğitmelidir; örneğin, İyi Laboratuvar Uygulamaları4,
ISO 72185 veya ISO 170256.
Sonuçların yanlış yorumlanmasına ilişkin riskleri azaltmak için:• Neogen, Neogen Petrifilm CC Plakalarının şişelenmiş sular dahil olmak üzere yiyecek ve içecek dışındaki sektörlerde
kullanımını belgelendirmemiştir. Örneğin Neogen, Neogen Petrifilm CC Plakalarını, farmasötik veya kozmetik ürünlerin
test edilmesi için belgelendirmemiştir. Neogen, Neogen Petrifilm CC Plakalarını yüzey suları ve şebeke sularının veya
farmasötik veya kozmetik endüstrilerinde kullanılan suların test edilmesi için belgelendirmemiştir.
• Yerel su kaynaklarının test edilmesiyle ilgili düzenlemelere uygun olarak su numunelerini test etmek için Neogen
Petrifilm CC Plakalarının kullanılması tamamıyla son kullanıcının takdirine bağlıdır ve onun sorumluluğundadır. Neogen
Petrifilm CC Plakaları, olabilecek tüm şişelenmiş su numuneleriyle, test protokolleriyle veya tüm olası mikroorganizmasuşlarıyla test edilmemiştir.
1

TR(Türkçe)• Neogen Petrifilm CC Plakalarını insan ya da hayvan sağlık sorunlarının tanısında kullanmayın.
• Neogen Petrifilm CC Plakaları bir koliform suşunu başka bir koliform suşundan ayırt etmez.
• Yüksek şeker içeriğine sahip gıdalar, koliform olmayan Enterobacteriaceae’den gaz üretimi potansiyelini artırabilir.
Detaylı bilgi için Güvenlik Veri Formuna başvurun.
Ürün performansı belgeleri hakkında bilgi için www.neogen.com adresindeki web sitemizi ziyaret edin ya da Neogen
temsilciniz veya yetkili distribütörünüz ile iletişim kurun.

Kullanıcının Sorumluluğu

Kullanıcılar ürün talimatları ve bilgileri hakkında bilgi edinmekle yükümlüdür. Daha fazla bilgi için www.neogen.com
adresindeki web sitemizi ziyaret edin ya da Neogen temsilciniz veya yetkili distribütörünüz ile iletişim kurun.
Bir test yöntemi seçilirken, numune alma yöntemleri, test protokolleri, numunenin hazırlanması, işlem yapılması velaboratuvar tekniği gibi dış faktörlerin sonuçları etkileyebileceği bilinmelidir.
Seçilen test yönteminin kullanıcının kriterlerini karşıladığı konusunda kullanıcıyı tatmin edecek uygun matrisler ve mikrobiyal
zorluklarla yeterli sayıda numuneyi değerlendirmek üzere herhangi bir test yönteminin seçilmesi
kullanıcının sorumluluğundadır.
Tüm test yöntemlerinin ve sonuçlarının müşteri ve tedarikçi gereksinimlerini karşılamasını sağlamak yine
kullanıcının sorumluluğundadır.
Tüm test yöntemlerinde olduğu gibi, herhangi bir Neogen Gıda Güvenliği ürününün kullanılmasından elde edilen sonuçlar
test edilen matrislerin veya süreçlerin kalitesi konusunda bir garanti oluşturmaz.

Garantilerin Sınırlandırılması/Sınırlı Çözüm

NEOGEN, HER BİR ÜRÜN AMBALAJININ ÜZERİNDEKİ SINIRLI GARANTİ KISMINDA AÇIKÇA BELİRTİLENLERHARİCİNDE, PAZARLANABİLİRLİK VEYA BELİRLİ BİR KULLANIMA UYGUNLUK GARANTİLERİ DAHİL ANCAKBUNLARLA SINIRLI OLMAMAK ÜZERE HERHANGİ BİR AÇIK VEYA ZIMNİ GARANTİYİ KABUL ETMEMEKTEDİR.
Herhangi bir Neogen Gıda Güvenlik Ürünü’nün kusurlu olması durumunda, Neogen veya yetkili dağıtımcısı, tercihinegöre ürünü değiştirecek veya ürün satış tutarını iade edecektir. Tarafınıza münhasır çözümler bunlardır. Üründe mevcutolduğundan kuşku duyulan herhangi bir kusurun fark edilmesinden sonraki altmış gün içinde durumu Neogen’e bildirin veya
ürünü Neogen’e iade edin. Diğer her türlü sorunuz için lütfen Neogen temsilciniz veya yetkili Neogen distribütörünüz ile
iletişim kurun.

Neogen’in Sınırlı Sorumluluğu

NEOGEN DOĞRUDAN, DOLAYLI, ÖZEL, ARIZİ VEYA NETİCE KABİLİNDEN DOĞMUŞ, KAYBEDİLMİŞ KAZANÇLAR
DAHİL ANCAK BUNUNLA SINIRLI OLMAMAK ÜZERE HERHANGİ BİR KAYIP VEYA ZARARDAN SORUMLU
OLMAYACAKTIR. Hiçbir durumda Neogen’in herhangi bir hukuk kuramı altındaki sorumluluğu, kusurlu olduğu iddia edilenürünün satış fiyatını aşamaz.

SaklamaAçılmamış Neogen Petrifilm CC Plakası poşetlerini 8°C’ye (46°F) eşit veya bundan daha düşük sıcaklıklarda soğutulmuş
veya dondurulmuş olarak muhafaza edin. Kullanım öncesinde, açılmamış Neogen Petrifilm CC Plakası poşetlerini açmadanönce poşetlerin oda sıcaklığına gelmesini bekleyin. Kullanılmamış Neogen Petrifilm CC Plakalarını poşete geri koyun.
Poşetin ucunu katlayıp yapıştırıcı bant uygulayarak ağzını kapatın. Ürünün neme maruz kalmasını önlemek için açılmış
poşetleri soğutucuya koymayın. Yeniden kapatılmış poşetleri dört haftadan uzun olmamak kaydıyla serin ve kuru bir yerde
saklayın. Laboratuvar sıcaklığı 25°C’yi (77°F) aşıyorsa ve/veya laboratuvar, bağıl nemin %50’yi aştığı bir bölgedeyse (klimalı
tesisler hariç), ağzı yeniden kapatılmış Neogen Petrifilm CC Plakası poşetlerinin bir dondurucuda (aşağıya bakın) saklanmasıönerilir.
Ağzı açılmış poşetleri bir dondurucuda saklamak için Neogen Petrifilm CC Plakalarını hava sızdırmayan bir kutuya koyun.
Kullanmak üzere dondurulmuş Neogen Petrifilm CC Plakalarını çıkarmak için kabı açın, gerekli olan plakaları çıkarın ve
kalan raf ömrü için kalan plakaları derhal yalıtımlı kap içinde dondurucuya geri koyun. Neogen Petrifilm CC Plakaları
son kullanma tarihinden sonra kullanılmamalıdır. Açık poşetin saklanması için kullanılan dondurucu otomatik bir buzçözme döngüsüne sahip olmamalıdır; aksi halde bu durum Neogen Petrifilm CC Plakalarını tekrarlı olarak plakalara zarar
verebilecek neme maruz bırakacaktır.
Rengi değişmiş olan Neogen Petrifilm CC Plakalarını kullanmayın. Son kullanma tarihi ve lot numarası, her bir Neogen
Petrifilm CC Plakası paketi üzerinde belirtilmiştir. Lot numarası ayrıca Neogen Petrifilm CC Plakalarının her birinde bulunur.

Atma

Kullanım sonrasında, Neogen Petrifilm CC Plakaları biyolojik tehlike oluşturma potansiyeline sahip mikroorganizmalariçerebilir.
Ürünün atılması ile ilgili geçerli endüstri standartlarına uyun.

Kullanım Talimatları

Tüm talimatlara dikkatle uyun. Bu uyarının dikkate alınmaması hatalı sonuçlara neden olabilir.
2TR (Türkçe)Çevreden Alınan Numuneler Dahil (Şişelenmiş Sular Hariç) Yiyecek ve İçecek Endüstrilerinden
Alınan Numunelerin Hazırlanması, İnkübasyonu ve Yorumlanması
Numune Hazırlama
1. Uygun steril seyrelticiler kullanın:

Butterfield fosfat tamponlanmış seyreltme suyu7, %0,1 peptonlu su8, peptonlu tuz seyrelticileri8,9, Tamponlanmış
Peptonlu Su8,9, salin çözeltisi (%0,85 %0,90), Neogen® Geniş Spektrumlu Nötrleştirici, bisülfit içermeyen letheen suyu
veya damıtılmış su. Özel gereksinimler için “Valide Edilmiş Yöntemler için Özel Talimatlar” bölümüne bakın.
Üremeyi engelleyebileceğinden, sitrat, bisülfit veya tiyosülfat içeren seyrelticileri Neogen Petrifilm CC Plakalarıyla
kullanmayın. Standart prosedürde sitratlı tampon belirtilmişse bunun yerine 40-45°C’ye (104-113°F) ısıtılmış yukarıda
belirtilen tamponlardan birisini kullanın.
2. Numuneyi karıştırın veya homojenize edin.
3. Mikroorganizmaların optimum üremesi ve geri kazanımı için numune süspansiyonunun pH’ını 6,6-7,2 aralığına ayarlayın.
Asidik ürünler için pH’ı 1N NaOH ile ayarlayın. Alkalin ürünler için pH’ı 1N HCl ile ayarlayın.
Kaplama
1. Neogen Petrifilm CC Plakasını düz, eğimsiz bir yüzeye yerleştirin.
2. Üstteki film tabakasını kaldırın ve pipeti inokülasyon alanına dik tutarak numune süspansiyonundan 1 mL alıp alttaki film
tabakasının ortasına dağıtın.
3. Hava kabarcıklarının yakalanmasını önlemek için üst film tabakasını numunenin üstüne yuvarlayarak yerleştirin.
4. Neogen® Petrifilm® Dağıtıcıyı, düz tarafı aşağı bakacak şekilde Neogen Petrifilm CC Plakasının ortasına yerleştirin.
Numuneyi eşit şekilde dağıtmak için Neogen Petrifilm Dağıtıcının ortasına hafifçe bastırın. Jel oluşmadan önceinokülümü Neogen Petrifilm CC Plakasının tüm üreme alanına yayın. Neogen Petrifilm Dağıtıcıyı film tabakasınınüzerinde kaydırmayın.
5. Neogen Petrifilm Dağıtıcıyı kaldırın ve Neogen Petrifilm CC Plakasını hiç kıpırdatmadan en az bir dakika kadar jelinoluşmasını bekleyin.

İnkübasyon

Neogen Petrifilm CC Plakalarını yatay bir konumda, temiz kısmı yukarı bakacak ve üst üste 20 plakadan fazla olmayacakşekilde inkübe edin. Mevcut yerel referans yöntemlere göre farklı inkübasyon süreleri ve sıcaklıkları kullanılabilir; bunların
bir kısmı “Valide Edilmiş Yöntemler için Özel Talimatlar” bölümünde listelenmiştir.

Yorumlama

1. Neogen Petrifilm CC Plakaları, standart bir koloni sayacı veya başka bir aydınlatmalı büyüteç kullanarak sayılabilir.
Koliform tarafından üretilen gaz koloniyi bozabilir bu da koloninin kabarcığın “etrafında çizgi oluşturmasına” yol açar.
Bu tek bir koliform olarak sayılmalıdır. Köpük seti üzerindeki koloniler, besiyerinin seçici etkisinden çıktığı için bu
kolonileri saymayın. Mevcut olabilecek yapay kabarcıkları saymayın.
Neogen Petrifilm CC Plakası üzerindeki koliform kolonilerinin yorumlanması, referans yönteme göre farklılık gösterir.
Örneğin:
YA DA NF Validation onaylı yöntemler:
AOAC® Official MethodsSM:
Koliform kolonileri kırmızıdır ve sıkışmış gazla- ISO yöntemi 48312'e (MPN yöntemi) göre koliform
yakından ilişkilidir (bir koloni çapı içinde). Gazla ilişkili
kolonileri kırmızı renklidir ve sıkışmış gazla yakından
olmayan koloniler (koloni ile gaz kabarcığı arasındailişkilidir (bir koloni çapı içinde).
bir koloni çapından daha büyük bir mesafe) koliform- Her ikisi de VRBL yöntemlerine dayalı olan ISO
olarak sayılmaz.
yöntemi 48321 (toplam koliform) ve NF V08-0603(fekal koliformlar) yöntemlerine kıyasla, gazlı veya
gazsız olarak tüm kırmızı koloniler sayılır.
2. Dairesel üreme alanı yaklaşık 20 cm2’dir. Tahminler, bir veya daha fazla temsili karedeki koloni sayısı sayılarak ve her kareiçin ortalama sayı belirlenerek 150’den fazla koloni içeren Neogen Petrifilm CC Plakaları üzerinde yapılabilir. Neogen
Petrifilm CC Plakası başına tahmini sayımı belirlemek için ortalama sayıyı 20 ile çarpın.
3. Çok sayıda koloni varsa, Neogen Petrifilm CC Plakalarında jel rengi derinleşebilir ve aşağıdaki özelliklerden birine
veya her ikisine birden sahip olabilir: çok sayıda küçük, belli belirsiz koloniler ve/veya çok fazla gaz kabarcığı. Yüksek
konsantrasyonlara sahip koliformlar üreme alanının koyu kırmızıya dönmesine neden olacaktır. Bu durum gerçekleşirse,
sonuçları sayılamayacak kadar çok (TNTC) olarak kaydedin. Gerçek bir sayım gerekliyse test işlemini daha yüksek
seyreltmelerde gerçekleştirin.
4. Gerektiğinde daha net tanımlama için koloniler izole edilebilir. Doğru test tekniğini kullanarak üstteki tabakayı kaldırın vekoloniyi jelden alın. Standart prosedürleri kullanarak test edin.
5. Neogen Petrifilm CC Plakaları inkübatörden çıkarıldıktan sonra 1 saat içinde sayılamazsa, daha sonra sayım için bir
haftadan daha uzun olmamak kaydıyla eksi 15°C’ye (5°F) eşit veya bu değerden daha düşük sıcaklıklarda kapatılabilir
bir kutuda dondurularak saklanabilir.
3

TR(Türkçe)Şişelenmiş Su Örneklerinin Hazırlanması, İnkübasyonu ve Yorumlanması
Neogen Petrifilm CC Plakalarının Hidratlanması
1. Neogen Petrifilm CC Plakasını düz, eğimsiz bir yüzeye yerleştirin.

2. Üstteki film tabakasını kaldırın ve uygun steril hidrasyon seyrelticisinden 1 mL alıp alttaki film tabakasının ortasınauygulayın. Uygun steril hidrasyon seyrelticileri distile su, deiyonize edilmiş (DI) su ve ters ozmos (RO) suyu içerir.
3. Hava kabarcıklarının yakalanmasını önlemek için üst film tabakasını numunenin üstüne yuvarlayarak yerleştirin.
4. Neogen Petrifilm Dağıtıcıyı, düz tarafı aşağı bakacak şekilde plakanın ortasına yerleştirin. Seyrelticiyi eşit şekildedağıtmak için dağıtıcının ortasına hafifçe bastırın. Jel oluşmadan önce seyrelticiyi Neogen Petrifilm Plakasının tümüreme alanına sürün. Dağıtıcıyı film tabakasının üzerinde kaydırmayın.
5. Dağıtıcıyı kaldırın ve plakaları kullanmadan önce en az 1 saat süreyle kapalı şekilde bırakın.
6. Hidratlanmış Neogen Petrifilm CC Plakalarını kapatılmış bir poşet veya plastik kese içinde saklayın. Plakaları ışıktan
koruyun ve 2-8°C (36-46°F) arasında 7 güne kadar soğutulmuş olarak saklayın.

Su Filtrasyonu ve Plaka İnkübasyonu

1. Su analizi için standart prosedürleri izleyerek, 47 mm, 0,45 mikron gözenekli Karışık Selüloz Esteri (MCE) filtresi
kullanarak su numunesini membran filtreyle filtreleyin.
2. Neogen Petrifilm CC Plakasının üst film tabakasını dikkatli bir şekilde kaldırın. Dairesel üreme alanına dokunmayın.
Filtreyi hidratlanmış alanın ortasına yerleştirin. Filtrenin altında kabarcık oluşumunu miminize edin.
3. Üstteki film tabakayı yavaşça filtrenin üzerine yuvarlayın. Hava kabarcığı oluşumunu ve filtre ve Neogen Petrifilm CC
Plakası arasında boşluk oluşumunu minimize edin.
4. Filtrenin jel ile eşit bir şekilde temas etmesini ve hava kabarcığı oluşmamasını sağlamak için Neogen Petrifilm Plakasınındağıtıcısını kullanarak veya bir parmağınızı tüm disk alanı boyunca yavaşça kaydırarak hafifçe baskı uygulayın (kenarlar
dahil olmak üzere).
5. Neogen Petrifilm CC Plakalarını 24 ± 2 saat11 boyunca 35°C ± 1°C veya 24 ± 2 saat12 boyunca 36°C ± 1°C sıcaklıkta
yatay bir konumda, temiz kısmı yukarı bakacak ve üst üste 20 taneden fazla olmayacak şekilde inkübe edin.

Yorumlama

1. Neogen Petrifilm CC Plakaları, standart bir koloni sayacı veya başka bir aydınlatmalı büyüteç kullanarak sayılabilir.
Köpük seti üzerindeki koloniler, besiyerinin seçici etkisinden çıktığı için bu kolonileri saymayın. Mevcut olabilecek yapay
kabarcıkları saymayın.
2. Gaz kabarcıklarıyla ilişkilendirilen kırmızı koloniler koliform olarak sayılır. Gaz kabarcıkları koloninin etrafında daireselveya yıldız şeklinde bir desen oluşturabilir. Koliformlar tarafından üretilen gaz koloniyi bozabilir bu da kolonininkabarcığın “etrafında çizgi oluşturmasına” yol açar. Bu tek bir koliform olarak sayılmalıdır. Yakından ilişkilendirilmiş gazbaloncukları olmayan kırmızı koloniler koliform olabilir ve alınmalı ve uygun doğrulama yöntemleri ile test edilmelidir11,12.
3. Çok sayıda koloni varsa, Neogen Petrifilm CC Plakalarında jel rengi derinleşir; bu durum çok sayıda küçük, belli belirsiz
koloniler veya gaz kabarcıklarıyla ilişkilendirilmektedir. Bu durum gerçekleşirse, sonuçları sayılamayacak kadar çok(TNTC) olarak kaydedin.
4. Daha net tanımlama için koloniler izole edilebilir. Üstteki tabakayı kaldırın ve koloniyi jelden veya filtre yüzeyinden alın.
Üstteki tabakayı kaldırırken, filtre üstteki veya alttaki film tabakaya yapışabilir. Filtre üstteki tabakaya yapışırsa,filtreyi üstteki film tabakadan ayırın ve kolonileri alın. Standart prosedürleri kullanarak test edin.
Not: Filtrelerin bulunduğu Neogen Petrifilm CC Plakalarının sayılmasının geciktirilmesi önerilmez.
Daha fazla bilgi için “Neogen® Petrifilm® Koliform Sayım Plakası Yorumlama Kılavuzu”na bakın. Belirli uygulamalar veya
prosedürler hakkında sorularınız varsa www.neogen.com adresindeki web sitemizi ziyaret edin veya yerel
Neogen temsilcisi ya da distribütörü ile iletişim kurun.
Valide Edilmiş Yöntemler için Özel Talimatlar
AOAC® Official MethodsSM (986.33 Bacteria and Coliform Counts in Milk, Dry Rehydratable Film Methods and989.10 Bacterial and Coliforms Counts in Dairy Products, Dry Rehydratable Film Methods)
Neogen Petrifilm CC Plakalarını 24 ± 2 saat boyunca 32°C ± 1°C’de inkübe edin.
AOAC® Official MethodsSM (991.14 Coliform and Escherichia coli Counts in Foods, Dry Rehydratable Film Methods)
Neogen Petrifilm CC Plakalarını 24 ± 2 saat boyunca 35°C ± 1°C’de inkübe edin.
AOAC® Performance Tested MethodSM Certificate #082101
AOAC® Research Institute Performance Tested Method (PTM) çalışmasında, şişelenmiş suda koliform sayımınınhesaplanması için Neogen Petrifilm CC Plakası yönteminin FDA/BAM Bölüm 4, Kısım III.D yöntemindeki ortalama log
sayımlarına eşdeğer olduğu bulunmuştur.

4

TR(Türkçe)Validasyonun Kapsamı:Şişelenmiş su: saf su, işlenmiş kaynak suyu, gazsız doğal kaynak suyu, gazlı doğal kaynak suyu.
İnkübasyon:
Neogen Petrifilm CC Plakalarını 35°C ± 1°C’de 24 ± 2 saat inkübe edin.
AFNOR Certification ile NF Validation:
ISO 48321 (3M-01/02-09/89 A)’ya kıyasla ISO 16140-210’ye uygun NF Validation onaylı yöntem
Validasyonun kapsamı: Tüm insan yiyeceği ürünlerinin (pişirilmemiş kabuklu deniz ürünleri hariç), evcil hayvan
yiyeceklerinin ve çevreden alınan numunelerin test edilmesi için.
Yukarıdaki Kullanım Talimatlarını yerine getirirken aşağıdaki ayrıntılardan faydalanın:
Numune hazırlama:
Sadece ISO listesinde bulunan seyrelticileri kullanın.
İnkübasyon:
Neogen Petrifilm CC Plakalarını 30°C ± 1°C veya 37°C ± 1°C’de 24 ± 2 saat inkübe edin.
Yorumlama:
ISO 72185 uyarınca seyrelti başına bir plaka için test numunesinde bulunan mikroorganizma sayısını hesaplayın.
Tahminler, NF Validation onayı dışındadır (yorumlama bölümü 2. paragraf ile kıyaslayın).
ISO 48312 (3M-01/02-09/89 B)’ye kıyasla ISO 16140-210’ye uygun NF Validation onaylı yöntem
Validasyonun kapsamı: Tüm insan yiyeceği ürünlerinin (pişirilmemiş kabuklu deniz ürünleri hariç) test edilmesi için.
Yukarıdaki Kullanım Talimatlarını yerine getirirken aşağıdaki ayrıntılardan faydalanın:
Numune hazırlama:
Sadece ISO listesinde bulunan seyrelticileri kullanın.
İnkübasyon:
Neogen Petrifilm CC Plakalarını 30°C ± 1°C veya 37°C ± 1°C’de 24 ± 2 saat inkübe edin.
Yorumlama:
ISO 72185 uyarınca seyrelti başına bir plaka için test numunesinde bulunan mikroorganizma sayısını hesaplayın.
Tahminler, NF Validation onayı dışındadır (yorumlama bölümü 2. paragraf ile kıyaslayın).
ISO V08-060 3 (3M-01/02-09/89 C)’ye kıyasla ISO 16140-210’ye uygun NF Validation onaylı yöntem
Validasyonun kapsamı: Tüm insan yiyeceği ürünlerinin test edilmesi için
Yukarıdaki Kullanım Talimatlarını yerine getirirken aşağıdaki ayrıntılardan faydalanın:
Numune hazırlama:
Sadece ISO listesinde bulunan seyrelticileri kullanınİnkübasyon:
Neogen Petrifilm CC Plakalarını 44°C ± 1°C’de 24 ± 2 saat inkübe edin.
Yorumlama:
ISO 72185 uyarınca seyrelti başına bir plaka için test numunesinde bulunan mikroorganizma sayısını hesaplayın. Tahminler,
NF Validation onayı dışındadır (yorumlama bölümü 2. paragraf ile kıyaslayın). İnokülasyon, koloni sayımı ve sonuçlarınhesaplanması ve sunumu hakkında bilgi için EN ISO 7218 standardına başvurun.

3M 01/02 – 09/89A, B, and C
ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS
http://nf-validation.afnor.org/en
Validasyonun bitiş tarihi ve geçerliliği ile ilgili daha fazla bilgi için lütfen yukarıda bahsi geçen web sitesindeki
NF VALIDATION sertifikasına bakın.
5

TR(Türkçe)Referanslar

1. ISO 4832. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms –Colony count technique.
2. ISO 4831. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumeration of
coliforms – Most probable number technique.
3. AFNOR NF V08-060. General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at
44°C – Routine method.
4. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
6. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
7. FDA. Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998. Reagents Index for BAM found at:
http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.
8. ISO 6887-5. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk products.
9. ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension anddecimal dilutions.
10. ISO 16140-2. Microbiology of the food chain – Method validation – Protocol for the validation of alternative(proprietary) methods against a reference method.
11. U.S. Food and Drug Administration. 2002. Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4. Membranefilter method for coliforms.
12. American Public Health Association. 2017. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th Ed.
Method 9222B2a.
Yukarıda listelenen standart yöntemlerin güncel versiyonlarına başvurun.

Sembollerin Açıklaması
info.neogen.com/symbols

AOAC, AOAC INTERNATIONAL şirketinin tescilli ticari markasıdır.
Official Methods, AOAC INTERNATIONAL şirketinin hizmet markasıdır.
Performance Tested Method, AOAC INTERNATIONAL şirketinin hizmet markasıdır.

6

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931A

JA

(日本語)

発行日：2024-01

製品情報

大腸菌群数測定用プレート製品の説明および用途

Neogen® ペトリフィルム® 大腸菌群数測定用プレート (Ccプレート) は、改良型バイオレットレッド胆汁 (VRB) 培地の栄養成分、
冷
水可溶性ゲル化剤、およびコロニー数を数えやすくするテトラゾリウム指示薬を含む培養システムで、検体をそのまま検査できます。
NeogenペトリフィルムCCプレートは、
食品・飲料および容器入り飲用水業界において大腸菌数を測定するために使用されています。
NeogenペトリフィルムCCプレートの成分は、滅菌されていませんが除染済みです。
Neogen食品衛生部門は、設計と製造についてISO (国際標準化機構) 9001認証を取得しています。
NeogenペトリフィルムCCプレートは、すべての食料品、食品製造工程、
検査プロトコルや、すべての混入しうる微生物菌株について評価されているわけではありません。
米国食品医薬品局 (FDA) 細菌学的分析マニュアル (BAM)7では、大腸菌は乳糖醗酵により酸およびガスを産生するグラム陰性桿菌と定義されています。
NeogenペトリフィルムCCプレート上で生育する大腸菌群コロニーは酸を産生するためpH指示薬によりゲルの色が濃くなり、
赤色のコロニー周囲に捕捉されたガスにより大腸菌群であることが示されます。

ISOでは、
方法特異的な選択培地での生育可能性に基づいて大腸菌群を定義しています。
コロニー計数法により大腸菌群数を測定するISOメソッド48321では、大腸菌群は乳糖添加VRB寒天培地 (VRBL) 上で酸を産生する細菌と定義されています。
NeogenペトリフィルムCCプレートでは、ガス産生が見られる、または見られない赤色のコロニーがこのような酸産生大腸菌群であることを示します。
最確数 (MPN) メソッドにより大腸菌群数を測定するISOメソッド48312では、
選択ブロス中で生育できブロス中の乳酸から酸を生成する能力があるものが大腸菌群として定義されています。
NeogenペトリフィルムCCプレートでは、ガス産生が見られる
赤色のコロニーを大腸菌群とします。
容器入り飲用水の検体については、
NeogenペトリフィルムCCプレート上で気泡を伴う赤色のコロニーで大腸菌群を確認します。
気泡を周囲に伴わない赤色のコロニーも大腸菌群である可能性があり、このようなコロニーは継代培養して適切な認定メソッ
ド11,12で検査する必要があります。
詳細については「判定」のセクションを参照してください。
特徴的なコロニーを継代培養してEscherichia coliであるか検査することができます。

AFNOR Certificationは、ISO方法48312およびISO方法48321と比較した上で、総大腸菌群数を測定する方法としてNeogenペトリ
フィルムCCプレートを認証しました。
また、
AFNOR Certificationは、
NF V08-0603と比較した上で、耐熱性大腸菌群数を測定する方法としてNeogenペトリフィルムCCプレートを認証しました。

安全性

NeogenペトリフィルムCCプレートの使用説明書にあるすべての安全情報をお読みになり、よく理解し遵守してください。
また、
この安全性指示を保管し、後に参照できるようにしてください。
警告：警告は、それを避けなければ死亡または重篤な傷害ないし物的損害が発生しうる危険な状況を示します

警告

バイオハザードや環境汚染への曝露に関連する危険を回避するには：• バイオハザード廃棄物に関する現行の産業基準や地域の規制に従って廃棄してください。
汚染された製品の流出に伴う危険を回避するには：• 使用説明書に記載されているすべての製品保管方法に従ってください。
• 使用期限を過ぎた製品は使用しないでください。

細菌感染や作業場の汚染に伴う危険を回避するには：• NeogenペトリフィルムCCプレートによる検査は、熟練した微生物管理者の管理下で適切な設備のある検査室にて実施してくださ い。
• 検査実施担当者に適切な検査技術を身につけるように指導してください (例：GLP4、
ISO 72185、
ISO 170256)。

結果の誤判定に関連する危険を回避するには：• Neogenは、食品および飲料水以外の分野におけるNeogenペトリフィルムCCプレートの使用について検証しておりません。
たとえば、
Neogenは、NeogenペトリフィルムCCプレートを医薬品または粧品の検査に使用することについて検証を行っておりません。
Neogen は、NeogenペトリフィルムCCプレートを地表水および水道水、または製薬業界や化粧品業界で使用される水の検査に使用することについて検証を行っておりません。
• 現地の水検査規制に従って水サンプルの検査にNeogenペトリフィルムCCプレートを使用するかは、
エンドユーザーがその自由裁量およびその責任で決定してください。
NeogenペトリフィルムCCプレートは、すべての容器入り飲用水検体、検査プロトコルや、す べての混入しうる微生物菌株について評価されているわけではありません。
• NeogenペトリフィルムCCプレートをヒトや動物の疾患診断に使用しないでください。
• NeogenペトリフィルムCCプレートは、大腸菌群の菌株を他の菌株と鑑別するものではありません。
1

JA

(日本語)

• 高糖度の食品は、大腸菌群ではない腸内細菌科菌群によるガス産生の可能性を高める場合があります。

その他の情報については製品安全データシートを参照してください。

製品性能に関するドキュメントについては、
当社ウェブサイト (www.neogen.com) をご覧いただくか、Neogen の担当者または正規代理店にお問い合わせください。

お客様の使用責任

お客様には、使用前に製品説明書および製品情報を熟知していただく責任があります。
詳しくは当社ウェブサイト
(www.neogen.com) をご覧いただくか、Neogen の担当者または正規代理店にお問い合わせください。

検査方法を選択する際には、検体採取方法、
検査プロトコル、
検体調製、
取り扱い、
および検査手技などの外的要因が結果に影響しうることを認識することが重要です。

検査方法または製品を選択する際に、適切なマトリックスおよび微生物負荷を用いて十分数の検体を評価して、選択した試験方法
がお客様の基準を満たすことをお客様の責任でご確認ください。

また、検査方法および結果が顧客または供給業者の要件を満たしているかについても、
事前にお客様の責任でご確認ください。

どの検査方法を使用した場合でも、Neogen食品衛生製品を用いて得られた結果は、検査を実施した食品マトリックスまたは工程の品質を保証するものではありません。

保証の範囲／賠償の制限

個々の製品パッケージの限定保証条項に明示されている場合を除き、NEOGENは明示または黙示を問わず、商品性または特定の目的への適合性に関する保証を含むがこれに限定されない、
いかなる種類の保証も負いかねます。
Neogen食品衛生製品部門の製品に欠陥があった場合、Neogenまたは指定販売店で交換あるいは製品購入価格の払い戻しをいたします。
対応は上記のみとさせていただきます。
製品の欠陥が疑われる場合は、判明した時点から60日以内に速やかにNeogenに通知し、製品をNeogenに返品してください。
ご不明な点がございましたら、Neogen の担当者または Neogen の正規代理店にお問い合わせください。

Neogenの保証責任範囲

NEOGENは、
直接的、間接的、特殊なもの、
偶発的または必然的であるかを問わず、利益損失を含むがこれに限定されないあらゆ
る損失または損害に対しての責任を負わないものとします。
いかなる場合も、法的理論に基づきNeogenの責任範囲は、欠陥と申し立てられた製品の購入金額を超えないものとします。

保管

未開封NeogenペトリフィルムCCプレート パウチは8°C (46°F) 以下の温度で冷蔵または冷凍します。
使用前に、未開封のNeogen
ペトリフィルムCCプレートの包装パウチを室温に戻してください。
未使用のNeogenペトリフィルムCCプレートはパウチに戻してください。
パウチの開口部を折り、粘着テープで封をしてください。
水分への曝露を避けるために、開封したパウチを再冷蔵しないでください。
再封したパウチは乾燥した冷所で4週間まで保管できます。
再封したNeogenペトリフィルムCCプレートのパウチは、検査室の室温が25°C (77°F) を超えるか、検査室が相対湿度50%を超える地域にある場合には、冷凍庫で保管することをお勧めします(下記参照)(空 調管理された施設を除く)。

一度開封したプレートを冷凍保存する場合には、密封可能な容器にNeogenペトリフィルムCCプレートを入れてください。
凍結した
Neogen Petrifilm CC プレートを使用するために取り出すには、容器を開け、
必要なプレートを取り出し、残りのプレートを直ちに密閉容器に入れて冷凍庫に戻し、残りの保存期間を保ちます。
使用期限が過ぎたNeogenペトリフィルムCCプレートは使用しないでください。
一度開封した包装パウチを冷凍保存する場合には、自動除霜機能のある冷凍庫には保管しないでください。
除霜サイ
クルにより繰り返し湿気にさらされると、NeogenペトリフィルムCCプレートの性能に影響を及ぼす可能性があります。

NeogenペトリフィルムCCプレートが変色している場合は、使用しないでください。
使用期限と製品ロット番号は、Neogenペトリフィ
ルムCCプレートの包装に記載されています。
なお、
ロット番号は、個々のNeogenペトリフィルムCCプレートにも記載されています。

廃棄

使用済みのNeogenペトリフィルムCCプレートには、
バイオハザードをもたらしうる微生物が混在している場合があります。
現行の業界基準に従って廃棄してください。

使用方法

すべての指示に、注意深く従ってください。
従わない場合、
正確な結果が得られないことがあります。

食品・飲料水 (容器入り飲用水を除く) 業界から得た検体 (環境検体を含む) の調製、培養および判定
検体調製
1. 適切な滅菌希釈液をご使用ください：

Butterfield リン酸緩衝希釈液7、0.1% ぺプトン水8、ペプトン塩希釈液8,9、緩衝化ペプトン水8,9、
生理食塩水 (0.85～0.90%)、®
Neogen 広範囲中和剤、重硫酸塩を含まない letheen 培養液または蒸留水。具体的な要件については、「バリデート済みメソッドに関する具体的な指示」の項を参照してください。
クエン酸塩、
重亜硫酸塩またはチオ硫酸塩を含有する希釈液は、菌の成育を阻害する可能性があるためNeogenペトリフィル
ムCCプレートに使用しないでください。
標準手順にクエン酸緩衝液が指定されている場合は、
上記の緩衝液のいずれかに変
更し、40～45°C (104-113°F) に加温して使用してください。
2JA

2. 検体を撹拌またはホモジナイズしてください。

(日本語)

3. 微生物の生育と回収を最適にするために、検体試料液のpHを6.6～7.2に調節してください。
酸性の検体は、
1N NaOHを用いてpHを調節して下さい。
アルカリ性の検体は、
1N N Hclを用いてpHを調節して下さい。

プレートへの接種
1. NeogenペトリフィルムCCプレートを平らで水平な面に置きます。

2. 上部フィルムを持ち上げ、ピペットを接種エリアに対して垂直に保ち、検体試料液1 mLを下部フィルムの中央部に接種します。

3. 気泡が入らないように、上部フィルムを検体の上にゆっくりと戻します。

4. Neogen® ペトリフィルム® スプレッダーの平らな面を下にして、NeogenペトリフィルムCCプレートの中央に置きます。
Neogenペトリフィルムスプレッダーの中心部を軽く押し、検体試料液を均等に広げます。
ゲルが形成される前に、接種物をNeogenペトリフ
ィルムCCプレート増殖エリア全体に広げます。
フィルム上でNeogenペトリフィルムスプレッダーをスライドしてはいけません。

5. Neogenペトリフィルムスプレッダーを取り出し、
NeogenペトリフィルムCCプレートをそのまま1分以上放置してゲル化させます。

培養

NeogenペトリフィルムCCプレートの透明フィルム側を上に、水平にして培養します。
20枚まで重ねて培養することができます。
各施
設の現行の参照方法に応じて、適した培養時間と温度を選択できます、
培養条件例については、「バリデート済みメソッドの具体的な指示」の項を参照してください。

判定

1. NeogenペトリフィルムCCプレートは、標準的なコロニーカウンターか拡大鏡（照明付き）を用いて計数できます。
大腸菌群の産生するガスによってコロニーが崩壊し、コロニーが気泡の周りに「輪郭を形成」
しているように見えることがあります。
こうしたコロニーは全体で1つの大腸菌として計測します。
周囲の気泡ダムの上のコロニーは数えないでください。
これらのコロニー
は培地の選択的影響を受けません。
作業中に混入した気泡も数えないでください。
NeogenペトリフィルムCCプレート上で生育した大腸菌群コロニーの判定は、試験方法によって異なります。
例：

AOAC® Official MethodsSM：
または NF Validation認可済みメソッド：
大腸菌群のコロニーは赤色で、周囲 (コロニー直径と- ISOメソッド 48312 (MPNメソッド) とは異なり、赤色で周囲 (
同等の距離内) にガスが封入された気泡あります。
コロニー直径と同等の距離内) にガスが封入された気泡が気泡を伴わないコロニー (コロニーと気泡との距離があるコロニーを大腸菌群コロニーとする方法。
コロニー直径分を超える場合) は、大腸菌群として測定- ISOメソッド 48321 (総大腸菌群数) およびNF V08-0603
しません。
(糞便性大腸菌群) (両者ともVRBLメソッドに基づく) と異なり、
気泡の有無にかかわらずすべての赤色のコロニーを計数する方法。

2. 接種領域は約20 cm2です。
150を超えるコロニーを含むNeogenペトリフィルムCCプレートについては、
1つか複数の代表的な1 cm2区画中のコロニーを計数し、区画当たりの平均数を求めて推定することができます。
1 cm2当たりの平均値を20倍して、NeogenペトリフィルムCCプレート全体のコロニー数を推定します。

3. コロニーが多数存在する場合には、NeogenペトリフィルムCCプレートのゲルの色が濃くなり、次の特性の一方か両方が認められます：多数の小さい不明瞭なコロニー、
および/または多数の気泡が存在。
大腸菌群の密度が高いと、増殖領域が濃い赤色になります。
このような場合は「数えきれない (TNTC)」
として結果を記録してください。
実際の計数値が必要な場合には、
希
釈率を高めて培養します。

4. 必要に応じ、コロニーを単離してさらに同定を行います。
適切な検査法を用いて上部フィルムを持ち上げ、ゲルからコロニーを釣菌します。
規定の手順に従い検査してください。

5. NeogenペトリフィルムCCプレートの計数を培養後1時間以内に行えない場合には、プレートを密封容器に入れて冷凍保存し、後に測定することができます。
保存は-15°C (5°F) 以下で、1週間以内としてください。

容器入り飲用水検体の調製、培養および判定

NeogenペトリフィルムCCプレートの水和
1. NeogenペトリフィルムCCプレートを平らで水平な面に置きます。

2. 上部フィルムを持ち上げ、適切な滅菌水和用希釈液1 mLを下部フィルムの中心に注入します。
適切な滅菌水和用希釈液としては、蒸留水、脱イオン (DI) 水、
逆浸透 (RO) 水があります。

3. 気泡が入らないように、上部フィルムを検体の上にゆっくりと戻します。

4. Neogenペトリフィルムスプレッダーの平らな面を下にして、プレートの中央に置きます。
スプレッダーの中心部を軽く押し、希釈
液を均等に広げます。
ゲルが形成される前に、希釈液をNeogen ペトリフィルムプレート増殖エリア全体に広げます。
フィルム上でスプレッダーをすべらせないでください。
5. スプレッダーを取り出し、使用前にプレートを1分以上閉じたままにします。

6. 水和したNeogenペトリフィルムCCプレートを密封パウチまたはプラスチックバッグ中で保存します。
プレートは、光から保護し、
2～8°C (36～46°F) で最大7日間冷蔵できます。

3

JA

水ろ過およびプレート培養(日本語)

1. 水分析の標準手順に従って、
径47 mm、
孔サイズ0.45 µmのセルロース混合エステル (MCE) メンブレンフィルタを用いて水検体をろ過します。

2. NeogenペトリフィルムCCプレートの上部フィルムを慎重に持ち上げます。
円形の増殖エリアに触れないようにします。
フィルタ
ーを水和エリアの中心に置きます。
できる限りフィルターの下に気泡を取り込まないようにします。
3. 上部フィルムをゆっくりとフィルター上に広げます。
できる限り気泡を取り込まないようにし、フィルターとNeogenペトリフィル
ムCCプレートの間にできる限り隙間ができないようにします。

4. Neogen ペトリフィルムプレートスプレッダーを使用するか指を軽くすべらせてディスクエリア全体 (縁部を含む) に対して軽く圧を加え、フィルターをゲルに均一に接触させ、気泡を排出します。

5. NeogenペトリフィルムCCプレートの上部フィルム（透明フィルム側）を上にして水平にし、35°C ± 1℃で24時間 ± 2時間11、ま12
たは36°C±1℃で24 ± 2時間 培養します。
20枚まで重ねて培養できます。

判定

1. NeogenペトリフィルムCCプレートは、標準的なコロニーカウンターか拡大鏡（照明付き）を用いて計数できます。
周囲の気泡
ダムの上のコロニーは数えないでください。
これらのコロニーは培地の選択的影響を受けません。
作業中に混入した気泡も数えないでください。

2. 気泡を伴う赤色のコロニーを大腸菌群として計数します。
コロニー周囲の環状または星状のパターンで気泡が形成されることがあります。
大腸菌群の産生するガスによってコロニーが崩壊し、コロニーが気泡の周りで「輪郭を形成」
しているように見えることがあります。
こうしたコロニーは全体で1つの大腸菌として計測します。
気泡を周囲に伴わない赤色のコロニーも大腸菌群である可能性があり、このようなコロニーは継代培養して適切な確認方法11,12で検査する必要があります。
3. コロニーが多数存在する場合には、NeogenペトリフィルムCCプレートのゲルの色が濃くなり、多数の小さい不明瞭なコロニー
または多数の気泡を伴います。
このような場合は「数えきれない (TNTC)」
として結果を記録してください。
4. コロニーを単離してさらに同定を行うこともできます。
上部フィルムを持ち上げ、ゲルまたはフィルター表面からコロニーを釣菌します。
上部フィルムを持ち上げるときに、
フィルターが上部フィルムまたは下部フィルムに付着していることがあります。
フィ
ルターが上部フィルムに付着しているときは、
フィルターを上部フィルムから分離してコロニーを釣菌します。
規定の手順に従い検査してください。
注：フィルターを乗せたNeogenペトリフィルムCCプレートの計数を遅らせることは推奨されません。

詳細については「Neogen® ペトリフィルム® 大腸菌群数測定用プレート判定ガイド」
を参照してください。
具体的な用途や手順についてご質問がありましたら、当社のウェブサイト (www.neogen.com) をご覧いただくか、Neogen販売員または取り扱い販売店までお問い合わせください。
バリデート済みメソッドに関する具体的な指示
再水和可能乾燥フィルムメソッド」
および989.10「乳製AOAC® Official MethodsSM (986.33「牛乳中の細菌数および大腸菌群数、品中の細菌数および大腸菌群数、再水和可能乾燥フィルムメソッド」)
NeogenペトリフィルムCCプレートを32°C ± 1°Cで24 ± 2時間培養します。

AOAC® Official MethodsSM (991.14「食品中の大腸菌群数および大腸菌数、再水和可能乾燥フィルムメソッド」)
NeogenペトリフィルムCCプレートを35°C ± 1°Cで24 ± 2時間培養します。

AOAC® Performance Tested MethodSM認証 #082101
AOAC® Research Institute Performance Tested Method (PTM) 試験において、
NeogenペトリフィルムCCプレートは、
FDA/BAM
第4章、第III.D節（ボトル入り飲料水の大腸菌群数の測定）の平均対数計数と同等の有効性があることが判明しています。

適応範囲：
ボトル入り飲料水：精製水、処理済み天然水、
非炭酸天然水、
炭酸天然水。

培養：
NeogenペトリフィルムCCプレートを35°C±1℃で24時間±2時間培養します。

AFNOR CertificationによるNF Validation：
ISO 48321 (3M-01/02-09/89 A) よりもISO 16140-210に準拠するNF Validation認証済みメソッド

バリデーションの適応範囲：すべてのヒト用食品検体 (生の甲殻類を除く)、ペット飼料検体および環境検体の検査。
上記の試験を実施するときには、以下の詳細に従ってください：
検体の調製：
ISO指定の希釈液のみを使用してください。

培養：
NeogenペトリフィルムCCプレートを30°C ± 1°Cまたは37°C ± 1℃で24 ± 2時間培養します。
4

JA

(日本語)

判定：
検体に存在する微生物の数を計算します。
推定結果はNF Validation
希釈段階あたり1枚のプレートについて、
ISO 72185に従い、認証の適用範囲外です「判定」(
パートの第2項を参照)。

ISO 48312 (3M-01/02-09/89 B) よりもISO 16140-210に準拠するNF Validation認証済みメソッド
バリデーションの適応範囲：すべてのヒト用食品 (生の甲殻類を除く) の検査。
上記の試験を実施するときには、以下の詳細に従ってください：
検体の調製：
ISO指定の希釈液のみを使用してください。

培養：
NeogenペトリフィルムCCプレートを30°C ± 1°Cまたは37°C ± 1°C.で24 ± 2時間培養します。

判定：
希釈段階あたり1枚のプレートについて、
ISO 72185に従い、検体に存在する微生物の数を計算します。
推定結果はNF Validation
認証の適用範囲外です「判定」(
パートの第2項を参照)。

ISO V08-0603 (3M-01/02-09/89 C) よりもISO 16140-210に準拠するNF Validation認証済みメソッド
バリデーションの適応範囲：すべてのヒト用食品の検査
上記の試験を実施するときには、以下の詳細に従ってください：
検体の調製：
ISO指定の希釈液のみを使用してください

培養：
NeogenペトリフィルムCCプレートを44°C±1℃で24 ± 2時間培養します。

判定：
希釈段階あたり1枚のプレートについて、
ISO 72185に従い、検体に存在する微生物の数を計算します。
推定結果はNF Validation
認証の適用範囲外です「判定」(
パートの第2項を参照)。培養、コロニーのカウントと計算、
結果の表示については、
EN ISO 7218基
準をご参照ください。

3M 01/02 – 09/89A, B, and C「ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS」
http://nf-validation.afnor.org/en

有効性の終了についての詳細は、上記のウェブサイト上で入手できるNF Validation認証を参照してください。

5

JA

参考文献

(日本語)

1. ISO 4832.Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms –Colony count technique.

2. ISO 4831.Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumeration of
coliforms – Most probable number technique.
3. NF V08-060.General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at 44°C –Routine method.

4. U.S. Food and Drug Administration.Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58.Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.

5. ISO 7218.Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
6. ISO/IEC 17025.General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.

7. FDA.Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998.BAMの試薬インデックスは次のサイトにあります：http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.

8. ISO 6887-5.Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological 、Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk products.

9. ISO 6887-1.Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological 、Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension and decimal
dilutions.
10. ISO 16140-2.Microbiology of the food chain - Method Validation - Protocol for the validation of alternative(proprietary) methods against a reference method.

11. U.S. Food and Drug Administration.2002.Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4.Membranefilter method for coliforms.
12. American Public Health Association.2017.Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th
Ed.Method 9222B2a.
上述の標準試験法については、
現行の最新版を参照してください。

記号の説明

info.neogen.com/symbols
AOACはAOAC INTERNATIONALの登録商標です。

Official Methodは、
AOAC INTERNATIONALのサービスマークです。

Performance Tested Methodは、
AOAC INTERNATIONALのサービスマークです。

6

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931A

ZH (简体中文)

发布日期：2024-01产品信息大肠菌群测试片
产品说明及预期用途

Neogen® Petrifilm® 大肠菌群测试片是一种样品预制培养基系统，其中含有改良的紫红胆汁 (VRB) 培养基、
冷水可溶性凝胶，
以及帮助菌落计数的四唑指示剂。
Neogen Petrifilm 大肠菌群 (CC) 测试片旨在用于食品、
饮料和瓶装水行业的大肠菌群计数。
Neogen Petrifilm CC 测试片组件虽未经灭菌，但是已经进行了净化处理。
Neogen 食品安全部的产品设计和生产已经获得国际标准化组织 (ISO) 9001 认证。
尚未针对所有可能的食品产品、
食品加工、
检测方案或所有可能的微生物菌株对 Neogen
Petrifilm CC 测试片进行评估。

美国食品药品监督管理局 (FDA) 细菌学分析手册 (BAM)7 将大肠菌群定义为革兰氏阴性杆菌，在乳糖发酵过程中，能发酵乳糖产
酸和产气。
在 Neogen Petrifilm CC 测试片上生长的大肠菌落会产生酸，导致 pH 指示剂让凝胶颜色变深；红色菌落周围滞留气体表明存在大肠菌群。

ISO 根据大肠菌群在方法特异性、选择性培养基中的生长能力对其进行定义。
ISO 方法 48321 采用菌落计数法来计数大肠菌群，通过大肠菌群在带有乳糖的 VRB (VRBL) 琼脂培养基上的产酸能力来定义。
在 Neogen Petrifilm CC 测试片上，这些产酸的大肠菌
群显示为产气或不产气的红色菌落。
ISO 方法 48312 采用最大可能数 (MPN) 法来计数大肠菌群，通过大肠菌群在含有乳糖的选择性肉汤培养基上生长并产气的特性来定义。
在 Neogen Petrifilm CC 测试片上，这些大肠菌群由与气体相关的红色菌落指明。
对于瓶装水样品，在 Neogen Petrifilm CC 测试片上出现的与气体相关的红色菌落可确定为大肠菌群。
与气泡并不密切相关的红色菌落可能是大肠菌群，应该使用适当的确认方法进行二次培养和测试11,12。
有关其他详细信息，请参阅“判读”部分。
具有明显
特征的菌落可经过二次培养和测试以确定是否存在大肠杆菌。
Neogen Petrifilm CC 测试片已获得 AFNOR Certification 认证，后者已针对总大肠菌群计数将其与 ISO 方法 48312 和 ISO 方
法 48321 进行了比较。
Neogen Petrifilm CC 测试片还获得了 AFNOR Certification 在耐热大肠菌群计数方面的认证（与 NF
V08-0603 对比）。

安全用户应该阅读、理解并遵守 Neogen Petrifilm CC 测试片说明中的所有安全信息。
妥善保存安全说明书，以备日后查阅。
警告：表示危险情况，如果不注意避免，可能造成死亡或严重的人身伤害和/或财产损失警告为了降低与生物危害暴露和环境污染相关的风险，请注意以下事项：• 对于危害性生物废弃物的废弃处理，请遵循当前的行业标准和当地的法规要求。
为了降低与释放受污染产品相关的风险，请注意以下事项：• 遵守使用说明中包含的所有产品储存说明。
• 切勿使用过期产品。

为了降低与细菌感染和工作环境污染相关的风险，请注意以下事项：• 在训练有素的微生物分析师的控制下，于妥善配备的实验室中执行 Neogen Petrifilm CC 测试片检测。
• 用户必须就当前适用的检测技术对其人员进行培训，例如：优良实验室规范4、
ISO 72185 或 ISO 170256。

为了降低与错误判读结果相关的风险，请注意以下事项：• 除了食品和饮料行业，对于其他行业内 Neogen Petrifilm CC 测试片的使用，Neogen 尚未有资料可证，包括瓶装水。
例如，
对于将 Neogen Petrifilm CC 测试片用于检测药品或化妆品，Neogen 尚未有资料可证。
对于将 Neogen Petrifilm CC 测试片
用于检测地表水或城市用水，或制药或化妆品行业中使用的水，Neogen 尚未有资料可证。
• 根据当地的水检测法规使用 Neogen Petrifilm CC 测试片对水样进行检测由最终用户自行决定并承担责任。
尚未针对所有可能瓶装水样品、
检测方案或所有可能的微生物菌株对 Neogen Petrifilm CC 测试片进行检测。
• 请勿在人类或动物的各种疾病诊断中使用 Neogen Petrifilm CC 测试片。
• Neogen Petrifilm CC 测试片不能用于区分两种不同的大肠菌群菌株。
• 含糖量较高的食品可能会增加非大肠菌群肠杆菌产生气体的可能性。

请参阅“安全数据表”以了解其他信息。

关于产品性能文件的更多信息，请访问我们的网站（网址：www.neogen.com）或联系您的 Neogen 代表或授权经销商。

1

ZH (简体中文)用户责任

用户有责任熟悉产品信息和说明。
请访问我们的网站（网址：www.neogen.com）或联系您的 Neogen 代表或授权经销商了解
更多信息。
选择检测方法时，务必认识到各种外部因素（如取样方法、
检测方案、
样品制备、
处理和实验室技术）都可能会影响结果。

用户在选择检测方法或产品时，应自行负责选用合适的基质和微生物激发试验对足够多的样品进行评估，以确保所选择的检测方法达到用户的标准。
检测方法及结果能否满足客户及供应商的要求也由用户负责。

同所有检测方法一样，使用任何 Neogen 食品安全部产品所得到的结果并不能保证受检基质或程序的质量。

有限保证/有限补救措施

除非各个产品包装的有限保证部分明确声明，否则，NEOGEN 将不提供任何明示或默示保证，包括但不限于适销性或特定用途
适用性保证。
如果证明任何 Neogen 食品安全部产品存在缺陷，Neogen 或其授权经销商可以自行决定是提供换货，还是对产品进行退款。
这是向您提供的唯一补救方案。
您必须在发现产品存在任何可疑缺陷的 60 天内立即通知 Neogen，并将该产品退还给 Neogen。
如有任何疑问，请联系 Neogen 代表或 Neogen 授权经销商。

Neogen 责任限制

对于任何损失或损害，无论是直接、
间接、
特殊、
偶然或非直接原因造成的损害，NEOGEN 概不承担任何责任，包括但不限于利润损失。
根据法律理论，Neogen 对所谓存在缺陷的产品的赔付不会超过产品的购买价格。

储存将未开封的 Neogen Petrifilm CC 测试片包装袋在不高于 8°C (46°F) 的温度下冷藏或冷冻储存。
使用之前，要先使未开封的
Neogen Petrifilm CC 测试片包装袋达到室温再开封。
将未使用的 Neogen Petrifilm CC 测试片装回包装袋中。
将包装袋的一端折叠，然后使用胶带进行封存。
为防止受潮，请勿冷藏已开封的包装袋。
将重新密封的测试片包装袋存放在低温干燥的地方，时间
不超过四周。
如果实验室温度超过 25°C (77°F) 和/或实验室环境的相对湿度超过 50%（进行空气调节时除外），建议将重新封存
的 Neogen Petrifilm CC 测试片包装袋储存在冰箱中（如下所述）。
要将已开封的包装袋储存在冰箱中，应先将 Neogen Petrifilm CC 测试片放置在密封容器中。要取出冷冻的 Neogen Petrifilm
CC 测试片以供使用，请打开容器，取出所需的测试片，并立即将剩余的测试片放回密封容器中的冷冻柜，以延长剩余的保质期。
请勿使用已经失效的 Neogen Petrifilm CC 测试片。
切勿将已开封的包装袋储存在自动周期除霜的冰箱中，这会导致 Neogen
Petrifilm CC 测试片反复暴露于潮湿环境中，进而导致测试片损坏。
请勿使用已变色的 Neogen Petrifilm CC 测试片。
在 Neogen Petrifilm CC 测试片的每个包装上均标明了产品的有效日期和批号。
在各 Neogen Petrifilm CC 测试片上也会标明产品的批号。

弃置

Neogen Petrifilm CC 测试片在使用之后可能包含微生物，这有可能导致生物危害。
请根据当前的行业标准进行废弃处理。

使用说明请仔细遵循所有说明。
否则，可能会导致结果不准确。

食品和饮料行业（瓶装水除外）样品的制备、培养和判读，包括环境样品样品制备
1. 使用适宜的无菌稀释剂：

Butterfield 磷酸盐缓冲稀释水7、0.1% 蛋白胨水8、蛋白胨盐稀释剂8,9、
缓冲蛋白胨水8,9、
盐溶液 (0.85-0.90%）、
Neogen®
广谱中和剂、
不含亚硫酸氢盐的 letheen 肉汤或蒸馏水。请参见“验证方法具体说明”部分，了解特定要求。

请勿将包含柠檬酸盐、亚硫酸氢盐或硫代硫酸钠的稀释剂与 Neogen Petrifilm CC 测试片配合使用，它们会抑制生长。
如果
标准程序要求使用柠檬酸盐缓冲液，请替换为上述缓冲液之一，加热至 40-45°C (104-113°F)。

2. 混合或混匀样品。

3. 为了使微生物生长和恢复达到最佳，请将样品混悬液 pH 值调整为 6.6 - 7.2。
对于酸性产物，请使用 1N NaOH 调整 pH 值。
对于碱性产物，请使用 1N HCl 调整 pH 值。
平板培养
1. 将 Neogen Petrifilm CC 测试片放置在平坦且水平的表面上。

2. 掀起上层薄膜，使用移液管在培养区正上方将 1 mL 样品混悬液垂直滴于底层薄膜的中央位置。
3. 将上层薄膜盖于样品上，避免产生气泡。

4. 将 Neogen® Petrifilm® 压板平面一侧压在 Neogen Petrifilm CC 测试片的中心。
轻轻地压按 Neogen Petrifilm 压板的中心
以使样液均匀覆盖。
在凝胶固化之前，应使接种物均匀覆盖于整个 Neogen Petrifilm CC 测试片的培养区域内。
请勿在薄膜
上滑动 Neogen Petrifilm 压板。

5. 取走 Neogen Petrifilm 压板，让 Neogen Petrifilm CC 测试片至少静置 1 分钟，使凝胶凝固。
2

ZH (简体中文)恒温培养

对 Neogen Petrifilm CC 测试片进行培养，将测试片的透明面朝上水平放置，最多可堆叠至 20 片。
根据当地现行参考方法（其中一些列在“验证方法具体说明”部分中），可以使用多个培养时间和温度。

判读

1. 可以使用标准菌落计数仪或其他受照放大镜来计数 Neogen Petrifilm CC 测试片。
大肠菌群产生的气体可能会破坏菌落，使菌落“产生”气泡。
这应该计作一个菌群。
请勿计数泡棉上的菌落，因为已将其从培养基的选择性影响中排除。
请勿计数可能因人为操作而产生的气泡。
对 Neogen Petrifilm CC 测试片上大肠菌群菌落的判读因参考方法而异。
例如：

AOAC® Official MethodsSM：
大肠菌群菌落是红色的，且与滞留气体密切相关（在一个菌落直径范围内）。
与气体不相关的菌落（菌落与气泡之间的距离大于一个菌落直径）将不计作大肠菌群。

或 NF Validation 认证方法：2- 相较于 ISO 方法 4831（MPN
方法），大肠菌群菌落是红色的，且与滞留气体密切相关（在一个菌落直径范围内）。
1
3- 相较于 ISO 方法 4832（总大肠菌群）和 NF V08-060（粪便大肠菌群）（均基于 VRBL 方法），请对产气或不产气的所有红色菌落计数。

2. 圆形培养区域大约为 20 cm2。
进行估算时，可以通过在包含超过 150 个菌落的 Neogen Petrifilm CC 测试片上计量一个或
多个代表性平方区域中的菌落数量，然后确定每平方的平均数量。
将平均数量乘以 20 即可确定每个 Neogen Petrifilm CC测试片的预估计数。

3. 当存在大量菌落时，Neogen Petrifilm CC 测试片的凝胶颜色可能会变深，并拥有以下一个或两个特征：
许多很小、
不明显的
菌落和/或许多气泡。
高浓度大肠菌群将导致生长区域变成深红色。
出现这种情况时，将结果记作多不可计 (TNTC)。
需要实际
的计数时，可以用更高的稀释度进行测试。
4. 如有必要，可以分离菌落以进一步进行鉴定。
使用正确的测试技术掀起上层薄膜，将菌落自凝胶中提取出。
使用标准程序进
行检测。

5. 如果 Neogen Petrifilm CC 测试片在从培养器中取出 1 小时内无法计数，可以将其存放在可密封的容器中，然后在低于或等于 -15℃ (5℉) 的温度下冷冻存放不超过一周，以便在之后进行计数。

瓶装水样品制备、培养和判读

水化 Neogen Petrifilm CC 测试片
1. 将 Neogen Petrifilm CC 测试片放置在平坦且水平的表面上。

2. 掀起上层薄膜，将 1 mL 合适的无菌水化稀释剂滴于底层薄膜的中央位置。
合适的无菌水化稀释剂包括蒸馏水、去离子 (DI)水和反渗透 (RO) 水。
3. 将上层薄膜盖于样品上，避免产生气泡。

4. 将 Neogen Petrifilm 压板平面一侧压在测试片的中心。
轻轻地压按压板的中心以使稀释剂均匀覆盖。
在凝胶固化之前，应使稀释剂均匀覆盖于整个 Neogen Petrifilm 测试片的培养区域内。
请勿在薄膜上滑动压板。
5. 使用前，请取下压板并让测试片保持闭合状态至少 1 小时。

6. 将水化 Neogen Petrifilm CC 测试片放在密封的包装袋或塑料袋中。
避免光线照射测试片，并在 2-8°C (36-46°F) 温度下冷藏
最多 7 天。

水过滤和测试片培养

1. 按照水分析的标准程序，使用 47 mm、0.45 微米孔大小的混合性纤维素酯 (MCE) 滤膜对水样进行薄膜过滤。

2. 小心掀起 Neogen Petrifilm CC 测试片的上层薄膜。
避免触碰圆形生长区。
将滤膜放在水化区域的中央位置。
尽可能减少滤
膜下存留的气泡。

3. 将上层薄膜慢慢滚动到滤膜上。
尽可能减少存留的气泡，避免在滤膜和 Neogen Petrifilm CC 测试片之间产生间隙。

4. 使用 Neogen Petrifilm 测试片压板或手指对整个圆盘区域（包括边缘）略微施加压力，确保滤膜与凝胶均匀接触，并消除气泡。

5. 在 35°C ± 1℃ 的环境下将 Neogen Petrifilm CC 测试片培养 24 ± 2 小时11，或在 36°C ± 1℃ 的环境下培养 24 ± 2 小时12，
将测试片的透明面朝上水平放置，最多可堆叠至 20 片。

判读

1. 可以使用标准菌落计数仪或其他受照放大镜来计数 Neogen Petrifilm CC 测试片。
请勿计数泡棉上的菌落，因为已将其从培养基的选择性影响中排除。
请勿计数可能因人为操作而产生的气泡。
2. 与气泡相关的红色菌落将计作大肠菌群。
气泡可能会在菌落周围形成圆形或星形。
大肠菌群产生的气体可能会破坏菌落，使菌落“产生”气泡。
这应该计作一个菌群。
与气泡并不密切相关的红色菌落可能是大肠菌群，应该使用适当的确认方法进行提取和测试11,12。
3. 当存在大量菌落时，Neogen Petrifilm CC 测试片的凝胶颜色将会变深，这与许多很小、不明显的菌落或气泡有关。
出现这种情况时，将结果记作多不可计 (TNTC)。
4. 可以分离菌落以进一步进行鉴定。
掀起上层薄膜，将菌落自凝胶或滤膜表面中提取出。
掀起上层薄膜时，滤膜可能会附着在上层薄膜或底层薄膜上。
如果滤膜附着在上层薄膜，请将滤膜与上层薄膜分离并提取菌落。
使用标准程序进行检测。
3

注释：不建议对使用滤膜的 Neogen Petrifilm CC 测试片进行延迟计数。

ZH (简体中文)

有关更多信息，请参阅相应的“Neogen® Petrifilm® 大肠菌群测试片判读指南”。
如果您对于特定的应用或程序存有疑问，请访问我们的网站 www.neogen.com，也可与您当地的 Neogen 代表或经销商联系以获得帮助。

验证方法具体说明以及 989.10 奶制品中的细菌和大肠菌群
AOAC® Official MethodsSM（986.33 牛奶中的细菌和大肠菌群计数，再水化干膜法；
计数，再水化干膜法）
在 32°C ± 1°C 环境下，将 Neogen Petrifilm CC 测试片培养 24 ± 2 小时。

AOAC® Official MethodsSM（991.14 食品中的大肠菌群和大肠杆菌计数，干燥可复水薄膜法）
在 35°C ± 1°C 环境下，将 Neogen Petrifilm CC 测试片培养 24 ± 2 小时。

AOAC® Performance Tested MethodSM 证书 #082101
AOAC® 研究所 Performance Tested Method (PTM) 研究表明，Neogen Petrifilm CC 测试片方法的效果等同于 FDA/BAM 第 4
章第 III.D 部分瓶装水中大肠菌群计数方法的平均计数。
.

验证范围：
瓶装水：
纯净水、
经过处理的矿泉水、无碳酸天然矿泉水、碳酸天然矿泉水。

培养：
在 35°C ± 1℃ 温度下，将 Neogen Petrifilm CC 测试片培养 24 ± 2 小时。

AFNOR Certification 认证的 NF Validation：
NF Validation 认证方法遵循 ISO 16140-210（与 ISO 48321 相比）(3M-01/02-09/89 A)验证范围：用于检测所有人类食品（生贝类除外）、宠物食品和环境样品。
当执行上述“使用说明”时，请遵循以下详细信息：样品制备：仅使用 ISO 核准稀释剂。

培养：在 30°C ± 1°C 或 37°C ± 1℃ 温度下，将 Neogen Petrifilm CC 测试片培养 24 ± 2 小时。

判读：针对每个稀释剂中的单个测试片，遵照 ISO 72185 计算检测样品中存在的微生物数量。
估算并不在 NF Validation 认证范围内（参阅判读部分段落 2）。
NF Validation 认证方法遵循 ISO 16140-210（与 ISO 48312 相比）(3M-01/02-09/89 B)
验证范围：
用于检测所有人类食品（生贝类除外）。
当执行上述“使用说明”时，请遵循以下详细信息：样品制备：仅使用 ISO 核准稀释剂。

培养：在 30°C ± 1°C 或 37°C ± 1°C 环境下，将 Neogen Petrifilm CC 测试片培养 24 ± 2 小时。

判读：针对每个稀释剂中的单个测试片，遵照 ISO 72185 计算检测样品中存在的微生物数量。
估算并不在 NF Validation 认证范围内（参阅判读部分段落 2）。
NF Validation 认证方法遵循 ISO 16140-210（与 NF V08-0603 相比）(3M-01/02-09/89 C)
验证范围：
用于检测所有人类食品
当执行上述“使用说明”时，请遵循以下详细信息：样品制备：仅使用 ISO 核准稀释剂培养：
在 44°C ± 1℃ 温度下，将 Neogen Petrifilm CC 测试片培养 24 ± 2 小时。

4

ZH (简体中文)判读：估算并不在 NF Validation 认证范围内针对每个稀释剂中的单个测试片，遵照 ISO 72185 计算检测样品中存在的微生物数量。
（参阅判读部分段落 2）。
关于接种、菌落计数以及结果的计算和表达，请参阅 EN ISO 7218 标准。

3M 01/02 – 09/89A, B, and C
ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS
http://nf-validation.afnor.org/en

有关有效性截止日期的详细信息，请参阅上述网站中提供的 NF VALIDATION 证书。

参考资料

1. ISO 4832. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms –Colony count technique.
2. ISO 4831. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumeration of
coliforms – Most probable number technique.
3. AFNOR NF V08-060. General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at
44°C – Routine method.
4. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
6. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
7. FDA. Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998. Reagents Index for BAM found at:
http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.
8. ISO 6887-5. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk products.
9. ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension anddecimal dilutions.
10. ISO 16140-2. Microbiology of the food chain – Method validation – Protocol for the validation of alternative(proprietary) methods against a reference method.
11. U.S. Food and Drug Administration. 2002. Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4. Membranefilter method for coliforms.
12. American Public Health Association. 2017. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th Ed.
Method 9222B2a.
请参考以上所列标准方法的现行版本。

符号说明info.neogen.com/symbols
AOAC 是 AOAC INTERNATIONAL 的注册商标。

Official Method 是 AOAC INTERNATIONAL 的服务标志。

Performance Tested Method 是 AOAC INTERNATIONAL 的服务标志。

5

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931A

TH(ภาษาไทย)วัันที่อ�่ อก: 2024-01

คำำ�แนะนำำ�การใช้้งานผลิิตภััณฑ์์

แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ� สำำ�หรัับนัับจำำ�นวนโคลิิฟอร์์ม
รายละเอีียดผลิิตภััณฑ์์และวััตถุุประสงค์์การใช้้งาน

แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ� สำำ�หรัับนัับจำำ�นวนโคลิิฟอร์์ม (CC) Neogen® Petrifilm® เป็็นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ� แบบสำำ�เร็็จรูปู สำำ�หรัับตััวอย่่างเชื้้อ� โดยใน
สารอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Violet Red Bile (VRB) สารที่่ทำ� �ำ ให้้เกิิดเจลที่ล�่ ะลายได้้ในน้ำำ�� เย็็นและระบบตััวบ่่งชี้้ที่
� ช่
�่ ว
่ ยในการนัับจำำ�นวนโคโลนีี
แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC สำำ�หรัับการนัับจำำ�นวนของโคลิิฟอร์์มในอุุตสาหกรรมอาหาร เครื่่�องดื่่�มและน้ำำ�� บรรจุุขวด ส่่วน
ประกอบของแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ได้้ผ่า่ นกระบวนการลดการปนเปื้้อ� นที่ไ�่ ม่่ใช่่ผ่า่ นกระบวนการทำำ�ให้้ปลอดเชื้้อ
�
Neogen Food Safety ได้้รับั การรัับรองตามมาตรฐานองค์์การมาตรฐานสากล (ISO) 9001 ด้้านการออกแบบและการผลิิต แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ยัังไม่่ผ่า่ นการประเมิินกัับผลิิตภััณฑ์์อาหาร กระบวนการแปรรููปอาหาร เกณฑ์์วิธีิ กี ารทดสอบ หรืือกัับสายพัันธุ์์�
จุุลินิ ทรีีย์์ทั้้ง� หมดที่่อ� าจเป็็นไปได้้The United States Food and Drug Administration (FDA) Bacteriological Analytical Manual (BAM)7 กำำ�หนดโคลิิฟอร์์มเป็็น
แบคทีีเรีียแกรมลบรููปร่า่ งเป็็นแท่่งซึ่่ง� ผลิิตกรดและก๊๊าซจากการหมัักแลคโตส โคโลนีีโคลิิฟอร์์มที่เ�่ ติิบโตบนแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
�
Neogen Petrifilm CC ผลิิตกรดซึ่่ง� ทำำ�ให้้ตัวั บ่่งชี้้ค่� า่ pH เพื่่�อทำำ�ให้้สีีของเจลเข้้มขึ้้�น; ก๊๊าซที่ติ�่ ดิ อยู่่�ด้้านในโคโลนีีสีีแดงหมายถึงึ โคลิิฟอร์์มISO ให้้คำ�นิำ ยิ ามโคลิิฟอร์์มตามความสามารถการเจริิญเติิบโตของโคลิิฟอร์์มในอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ� ประเภทที่คั�่ ดั เลืือก ISO method 48321
การแจกแจงโคลิิฟอร์์มโดยใช้้เทคนิิคการนัับโคโลนีี กำำ�หนดให้้โคลิิฟอร์์มเป็็นตััวผลิิตกรดใน VRB กัับเจลแลคโตส (VRBL) บนแผ่่นอาหาร
เลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC โคลิิฟอร์์มที่่ผลิ� ติ กรดจะถููกระบุุโดยโคโลนีีสีีแดงที่มีี�่ หรืือไม่่มีีการผลิิตก๊๊าซ ISO method 48312การแจกแจง
โคลิิฟอร์์มโดยใช้้ตัวั เลขที่่น่� า่ จะเป็็นมากที่่สุ� ด
ุ (MPN) กำำ�หนดโคลิิฟอร์์มโดยความสามารถในการเติิบโตและผลิิตก๊๊าซจากแลคโตสใน
ของเหลวที่่เ� ลืือก บนแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC โคลิิฟอร์์มเหล่่านี้้จ� ะถููกระบุุโดยโคโลนีีสีีแดงที่มีีก๊�่ า๊ ซสำำ�หรัับตััวอย่่างน้ำำ�ดื่่� ม� บรรจุุขวด โคโลนีีโคลิิฟอร์์มที่่ยืื� นยัันแล้้วจะถููกระบุุด้ว้ ยโคโลนีีสีีแดงที่มีีก๊�่ า๊ ซบนแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm
CC โคโลนีีสีีแดงที่่ไ� ม่่มีีฟองก๊๊าซอาจเป็็นโคลิิฟอร์์ม และควรทำำ�การเพาะเชื้้อ� และทดสอบด้้วยวิิธีกี ารยืืนยัันที่เ�่ หมาะสม11,12 โปรดดููในหััวข้้อการ
แปลผลการตรวจวิิเคราะห์์เพื่่�อข้้อมููลเพิ่่�มเติิม โคโลนีีที่่มีีคุ� ณุ ลัักษณะจำำ�เพาะสามารถทำำ�การเพาะและทดสอบในฐานะ Escherichia coli
AFNOR Certification ได้้รับั รองว่่าแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC เมื่่�อเปรีียบเทีียบกัับ ISO method 48312 และ ISO method
14832 สำำ�หรัับการนัับโคลิิฟอร์์มทั้้�งหมด AFNOR Certification ยัังได้้รับั รองว่่าแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC เมื่่�อเปรีียบเทีียบ
กัับNF V08-0603, สำำ�หรัับการนัับโคลิิฟอร์์มทนความร้้อน

ความปลอดภััย

ผู้้�ใช้้ควรอ่่าน ทำำ�ความเข้้าใจ และปฏิิบัติั ติ ามข้้อมููลด้า้ นความปลอดภััยทั้้�งหมดในคำำ�แนะนำำ�การใช้้งานแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm
CC เก็็บคำำ�แนะนำำ�ด้า้ นความปลอดภััยนี้้ไ� ว้้สำ�ำ หรัับใช้้อ้า้ งอิิงในอนาคต
คำำ�เตืือน:	บ่่งชี้้ว่� า่ เป็็นสถานการณ์์ที่เ�่ ป็็นอัันตราย ซึ่่ง� หากไม่่มีีการหลีีกเลี่่�ยง อาจก่่อให้้เกิิดการเสีียชีีวิิตหรืือการบาดเจ็็บรุุนแรง
และ/หรืือความเสีียหายต่่อทรััพย์สิ์ นิ ได้้

คำ�เตอื นเพื่อ�่ ลดความเสี่่�ยงที่่เ� กี่่�ยวข้้องกัับการสัั มผััสสารที่่เ� ป็็นอัันตรายทางชีีวภาพและการปนเปื้้อ� นทางสิ่่�งแวดล้้อม:• ปฏิิบัติั ติ ามมาตรฐานอุุตสาหกรรมล่่าสุุดและระเบีียบข้้อบัังคัับของท้้องถิ่่�นในการทิ้้�งของเสีียที่มีี�่ การปนเปื้้อ� นทางชีีวภาพ
เพื่อ�่ ลดความเสี่่�ยงที่่เ� กี่่�ยวข้้องกัับการปล่่อยผลิิตภััณฑ์์ที่ป�่ นเปื้้อ� น:ั ติ ามคำำ�แนะนำำ�การเก็็บรัักษาผลิิตภััณฑ์์ที่อ�่ ยู่่�ในคำำ�แนะนำำ�การใช้้งาน
• ปฏิิบัติ
• ห้้ามใช้้หลัังจากวัันหมดอายุุ
เพื่อ�่ ลดความเสี่่�ยงที่่เ� กี่่�ยวข้้องกัับการติิดเชื้้อ� แบคทีีเรีียและการปนเปื้้อ� นในสถานที่ทำ�่ �ำ งาน:• ให้้ทำ�ำ การทดสอบแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ในห้้องปฏิิบัติั กิ ารที่มีีอุ�่ ปุ กรณ์์ที่เ�่ หมาะสมภายใต้้การควบคุุมดููแลของ
นัักจุุลชีีววิิทยาที่่เ� ชี่่�ยวชาญ
• ผู้้�ใช้้งานต้้องทำำ�การฝึึกอบรมบุุคลากรเกี่่�ยวกัับเทคนิิคการทดสอบที่เ�่ หมาะสมในปััจจุบัุ นั ตััวอย่่างเช่่น หลัักปฏิิบัติั ทิ างห้้องปฏิิบัติั กิ ารที่ดีี
�่ 4ISO 72185หรืือ ISO 170256
เพื่อ�่ ลดความเสี่่�ยงที่่เ� กี่่�ยวข้้องจากการแปลผลผิิดพลาด:• Neogen ยัังไม่่ได้้จัดั ทำำ�เอกสารการใช้้งานแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC สำำ�หรัับการใช้้งานในอุุตสาหกรรมอื่่�นใดนอก
เหนืือจากอุุตสาหกรรมอาหารและเครื่่�องดื่่�ม รวมถึึงน้ำำ�ดื่่� ม� บรรจุุขวด ตััวอย่่างเช่่น Neogen ยัังไม่่มีีเอกสารเกี่่�ยวกัับแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
�
Neogen Petrifilm CC สำำ�หรัับการทดสอบยา หรืือเครื่่�องสำำ�อาง Neogen ยัังไม่่ได้้จัดั ทำำ�เอกสารการใช้้งานแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen
Petrifilm CC สำำ�หรัับการทดสอบพื้้น� ผิิวและน้ำำ�� ในเขตเทศบาล หรืือน้ำำ�� ที่ใ�่ ช้้ในอุุตสาหกรรมยาหรืือเครื่่�องสำำ�อาง
• การใช้้แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC เพื่่�อทดสอบตััวอย่่างน้ำำ�ส� อดคล้้องกัับข้้อบัังคัับการทดสอบน้ำำ�� ในพื้้น� ที่�่ ขึ้้�นอยู่่�กัับ
ดุุลยพิินิจิ และความรัับผิิดชอบของผู้้�ใช้้ปลายทาง แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ยัังไม่่ผ่า่ นการทดสอบกัับตััวอย่่างน้ำำ�� บรรจุุ
ขวดที่่เ� ป็็นไปได้้ทั้้ง� หมด เกณฑ์์วิธีิ กี ารทดสอบ หรืือกัับสายพัันธุ์์�จุุลินิ ทรีีย์์ทั้้ง� หมดที่อ�่ าจเป็็นไปได้้
• ห้้ามใช้้แแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ในการวิินิจิ ฉััยสภาวะต่่างๆ ในมนุุษย์์หรืือสััตว์์
• แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ไม่่สามารถแยกความแตกต่่างสายพัันธุ์์�โคลิิฟอร์์มออกจากสายพัันธุ์์�อื่่�นได้้
• อาหารที่่มีีปริ�มิ าณน้ำำ�� ตาลสููงอาจมีีโอกาสทำำ�ให้้เกิิดก๊๊าซเพิ่่�มขึ้้�นได้้โดยเกิิดจากแบคทีีเรีีย เอนเทอโรแบคเตอร์์ (Enterobacteriaceae)1TH(ภาษาไทย)ศึึกษาเอกสารข้้อมููลความปลอดภััยของวััสดุหุ ากต้้องการทราบข้้อมููลเพิ่่�มเติิม
สำำ�หรัับข้้อมููลเกี่่�ยวกัับเอกสารประสิิทธิภิ าพของผลิิตภััณฑ์์ โปรดไปที่เ�่ ว็็บไซต์์ของเราที่�่ www.neogen.com หรืือติิดต่่อตััวแทน Neogen ของคุุณหรืือผู้้�จััดจำำ�หน่่ายที่่ไ� ด้้รับั อนุุญาต

ความรัับผิิดชอบของผู้้�ใช้้

ผู้้�ใช้้มีีหน้้าที่่รั� บั ผิิดชอบในการทํําความคุ้้�นเคยกัับคํําแนะนํําและข้้อมููลผลิติ ภััณฑ์์ โปรดไปที่เ�่ ว็็บไซต์์ของเราที่�่ www.neogen.com หรืือ
ติิดต่่อตััวแทน Neogen ของคุุณหรืือผู้้�จััดจำำ�หน่่ายที่่ไ� ด้้รับั อนุุญาต หากต้้องการข้้อมููลเพิ่่�มเติิม
เวลาเลืือกวิิธีีทดสอบ การศึึกษาปััจจัยั ต่่างๆ ที่่อ� าจส่่งผลต่่อผลการทดสอบเป็็นเรื่่�องสำำ�คัญั เช่่น วิิธีกี ารสุ่่�มตััวอย่่าง ระเบีียบการทดสอบ
วิิธีกี ารเตรีียมตััวอย่่าง การจััดการควบคุุม และเทคนิิคของห้้องปฏิิบัติั กิ ารที่อ�่ าจกระทบต่่อผลการทดสอบได้้
ผู้้�ใช้้งานเป็็นผู้้�รัับผิิดชอบในการประเมิินความเหมาะสมสำำ�หรัับการเลืือกวิิธีกี ารทดสอบหรืือชนิิดผลิิตภััณฑ์์ เพื่่�อประเมิินจำำ�นวนเมทริิกซ์์ที่�่
เหมาะสมและความสามารถในการเหลืือรอดของจุุลินิ ทรีีย์์ เพื่่�อให้้ผู้้�ใช้้แน่่ใจว่่าวิิธีกี ารทดสอบที่เ�่ ลืือกนั้้�นเป็็นไปตามเกณฑ์์ของผู้้�ใช้้เอง
นอกจากนี้้� ผู้้�ใช้้จะต้้องรัับผิิดชอบในการเลืือกวิิธีกี ารทดสอบและผลลััพธ์ที่์ ไ�่ ด้้ให้้เป็็นไปตามข้้อกำำ�หนดของลููกค้้าและของซััพพลายเออร์์
เช่่นเดีียวกัับวิิธีกี ารทดสอบอื่่�นๆ ผลการทดสอบที่่ไ� ด้้จากการใช้้ผลิติ ภััณฑ์์ Neogen Food Safety ใดก็็ตาม ไม่่ได้้รับั ประกัันถึงึ คุุณภาพของ
เมทริิกซ์์หรืือขั้้�นตอนที่่ใ� ช้้ทดสอบ

เงื่่�อนไขการรัับประกััน/การชดเชยแบบจำำ�กััด

Neogen ปฏิิเสธการรัับประกัันทั้้�งหมดทั้้�งอย่่างชััดแจ้้งและโดยนััย รวมถึงึ แต่่ไม่่จำ�กัำ ดั เพีียงการรัับประกัันใด ๆ ถึงึ ความสามารถในการ
จำำ�หน่่าย หรืือความเหมาะสมสำำ�หรัับการใช้้งานโดยเฉพาะ เว้้นแต่่จะได้้อธิิบายไว้้อย่่างชััดแจ้้งในส่่วนการรัับประกัันแบบจำำ�กัดั ว่่าด้้วยบรรจุุ
ภััณฑ์์ของผลิิตภััณฑ์์แต่่ละชิ้้�น หากผลิิตภััณฑ์์ Neogen Food Safety ใดๆ มีีตำำ�หนิิบกพร่่อง บริิษัท
ั Neogen หรืือผู้้�จััดจำำ�หน่่ายที่ไ�่ ด้้รับ
ัอนุุญาตของบริิษัทจั ะใช้้ดุลุ ยพิินิจิ ของตนในการพิิจารณาเปลี่่�ยนแทนผลิิตภััณฑ์์หรืือคืืนเงิินค่่าผลิิตภััณฑ์์ดังั กล่่าว เหล่่านี้้คืื� อการชดเชยพิิเศษ
หากสงสััยว่่ามีีข้้อบกพร่่องหรืือความเสีียหายกัับสิินค้้า ท่่านต้้องแจ้้ง Neogen ภายในหกสิิบวัันหลัังจากที่พ�่ บ และทำำ�การคืืนสิินค้้าที่เ�่ สีียหายให้้
ทาง Neogen โปรดโทรติิดต่่อแผนกบริิการลููกค้้า (1-800-328-1671 ในสหรััฐอเมริิกา) หรืือตััวแทน Neogen Food Safety เพื่่�อขอสิิทธิ์์ส่� ง่คืืนผลิิตภััณฑ์์ โปรดติิดต่่อตััวแทน Neogen ของคุุณหรืือผู้้�จััดจำำ�หน่่าย Neogen ที่ไ�่ ด้้รับั อนุุญาตหากมีีคำำ�ถามเพิ่่�มเติิม

ขอบเขตความรัับผิิดชอบของ Neogen

Neogen จะไม่่รับั ผิิดชอบต่่อการสููญเสีียหรืือความเสีียหายใดๆ ทั้้�งโดยตรง โดยอ้้อม ความเสีียหายจำำ�เพาะ ที่เ�่ กิิดขึ้้�นเนื่่�องจากการผิิดสััญญา
หรืือที่เ�่ ป็็นผลสืืบเนื่่�อง รวมถึึงแต่่ไม่่จำ�กัำ ดั เพีียงการสููญเสีียผลกำำ�ไร ความรัับผิิดชอบของทาง Neogen ในทางกฎหมายจะต้้องไม่่เกิินราคาของ
ผลิิตภััณฑ์์ที่เ�่ สีียหายหรืือบกพร่่องไม่่ว่า่ กรณีีใดๆ ก็็ตาม

การเก็็บรัักษา

เก็็บถุุงบรรจุุแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ที่ยั�่ งั ไม่่เปิิดไว้้ในตู้้�เย็็นหรืือแช่่แข็็งที่อุ�่ ณุ หภููมิต่ำิ ��ำ กว่่าหรืือเท่่ากัับ 8°C (46°F) ก่่อนใช้้งาน วางถุุงบรรจุุแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ที่ยั�่ งั ไม่่เปิิดใช้้ทิ้้ง� ไว้้ที่อุ�่ ณุ หภููมิห้ิ อ้ งก่่อนเปิิดใช้้งาน นำำ� Neogen Petrifilm CC
Plate ที่่ยั� งั ไม่่เปิิดใช้้กลัับเข้้าไว้้ในถุุงบรรจุุตามเดิิม ปิิดผนึึกโดยพัับที่ปล�่ ายถุุงบรรจุุและใช้้เทปกาวปิิดทัับ อย่่าแช่่เย็็นถุุงบรรจุุที่เ�่ ปิิดใช้้แล้้ว
เพื่อ�่ ป้้องกัันไม่่ให้้ความชื้้น� เข้้าไปภายในถุุง จััดเก็็บถุุงบรรจุุที่ผ่�่ า่ นการเปิิดเพื่่�อใช้้งานแล้้วในที่แ�่ ห้้งเย็็นเป็็นเวลาไม่่เกิินสี่่�สัปั ดาห์์ แนะนำำ�ให้้
เก็็บรัักษาถุุงบรรจุุแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ที่ผ่�่ า่ นการเปิิดเพื่่�อใช้้งานแล้้วในตู้้�แช่่แข็็ง (ดููข้า้ งล่่าง) หากอุุณหภููมิใิ นห้้อง
ปฏิิบัติั กิ ารสููงกว่่า 25°C (77°F) และ/หรืือหากห้้องปฏิิบัติั กิ ารนั้้�นตั้้�งอยู่่�ในบริิเวณที่มีี�่ ความชื้้น� สััมพััทธ์ม์ ากกว่่า 50% (ยกเว้้นแต่่ว่า่ สถานที่นั้้�่ น�ใช้้เครื่่�องปรัับอากาศ)ในการเก็็บถุุงที่่เ� ปิิดแล้้วในตู้้�แช่่แข็็ง ให้้ใส่่แผ่่นเพลทอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ในภาชนะที่ปิ�่ ดิ ผนึึกได้้ ในการนำำ�แผ่่นเพลท
อาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ที่่แ� ช่่แข็็งมาใช้้งาน ให้้เปิิดภาชนะ นำำ�แผ่่นเพลทออกมาตามจำำ�นวนที่ต้�่ อ้ งการและเก็็บแผ่่นเพลท
ที่เ�่ หลืือในภาชนะที่่ปิ� ดิ สนิิทใส่่ในตู้้�แช่่แข็็งทัันทีีเพื่่�อเก็็บรัักษาตามอายุุการใช้้งานที่เ�่ หลืือ ไม่่ควรใช้้แผ่่นเพลทอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen
Petrifilm CC เมื่่�อเลยวัันหมดอายุุไปแล้้ว ตู้้�แช่่แข็็งที่่ใ� ช้้สำ�ำ หรัับเก็็บถุุงที่เ�่ ปิิดแล้้วต้้องไม่่มีีรอบการละลายน้ำำ�� แข็็งอััตโนมััติเิ นื่่�องจากจะทํําให้้แผ่่น
เพลทอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC สััมผััสกับั ความชื้้น� ซ้ำำ�� ๆ ซึ่่ง� อาจทํําให้้แผ่่นเพลทเสีียหายได้้
ห้้ามใช้้แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ที่่มีีสีีผิ�ดิ เพี้้ย� นจากปกติิ วัันหมดอายุุและหมายเลขล็็อตจะแสดงไว้้บนบรรจุุภัณั ฑ์์ของ
แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC แต่่ละกล่่อง ยัังมีีการระบุุหมายเลขล็็อตไว้้บนแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC แต่่ละ
แผ่่นอีีกด้้วย

การทิ้้�ง

ภายหลัังจากการใช้้งานแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC อาจจะมีีเชื้้อ� จุุลินิ ทรีีย์์ซึ่ง�่ อาจก่่อให้้เกิิดอัันตรายทางชีีวภาพได้้
ปฏิิบัติั ติ ามมาตรฐานการกำำ�จัดั ทิ้้�งอย่่างถููกวิิธีตี ามข้้อกำำ�หนดอุุตสาหกรรมในปััจจุบัุ นัคำำ�แนะนำำ�การใช้้งาน

ปฏิิบัติั ติ ามคำำ�แนะนำำ�ทั้้ง� หมดอย่่างละเอีียดรอบคอบ หากไม่่ปฏิิบัติั เิ ช่่นนั้้�น อาจให้้ผลที่ไ�่ ม่่ถูกู ต้้องแม่่นยำำ�ได้้

2

TH (ภาษาไทย)การเตรีียม การบ่่มเชื้้�อและการตีีความตััวอย่่างจากอุุตสาหกรรมอาหารและเครื่่�องดื่่�ม
(ยกเว้้นน้ำำ��ดื่่�มบรรจุุขวด) รวมถึึงตััวอย่่างด้้านสิ่่�งแวดล้้อม
การเตรีียมตััวอย่่าง
1. ใช้้สารทำำ�ละลายปลอดเชื้้อ� ที่่เ� หมาะสม:	น้ำำ�� เจืือจางที่่มีี� ฟอสเฟตบััฟเฟอร์์ของ Butterfield (Butterfield’s phosphate buffered dilution water)7, น้ำำ�� เพปโทน (peptone water)8
0.1%, สารเจืือจางเกลืือเพปโทน (peptone salt diluent)8,9, น้ำำ�� เพปโทนที่มีีบั�่ ฟั เฟอร์์ (Buffered Peptone Water)8,9, สารละลายน้ำำ�� เกลืือ
(saline solution) (0.85-0.90%), สารทํําให้้เป็็นกลางสเปกตรััมกว้้างของ Neogen (Neogen® Wide-Spectrum Neutralizer), อาหาร
เลี้้ย� งเชื้้อ
� letheen broth ที่่ไ� ม่่มีีไบซััลไฟต์์ (bisulfite-free letheen broth) หรืือน้ำำ�� กลั่่�น ดููหัวั ข้้อ “คำำ�แนะนำำ�เฉพาะสำำ�หรัับวิิธีที่
ี ผ่
�่ า
่ นการ
ตรวจสอบความถููกต้้อง” หากต้้องการทราบข้้อกำำ�หนดที่เ�่ ฉพาะเจาะจง
ห้้ามใช้้สารทำำ�เจืือจางที่่ป� ระกอบด้้วยซิิเตรต ไบซััลไฟต์์ หรืือไธโอซััลเฟตกัับแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CCโดยเด็็ดขาด เนื่่�องจากสามารถยัับยั้้�งการเจริิญเติิบโตของเชื้้อ� ได้้ หากในวิิธีมี าตรฐานระบุุให้้ใช้้วิธีิ มี าตรฐาน ให้้ใช้้หนึ่่ง� ในบััฟเฟอร์์
ที่แ�่ สดงในรายการข้้างต้้นแทน โดยอุ่่�นที่่อุ� ณุ หภููมิิ 40-45°C (104-113°F)
2. ผสมหรืือทำำ�ให้้ตัวั อย่่างเป็็นเนื้้อ� เดีียวกััน
3. เพื่่�อให้้ได้้การเจริิญเติิบโตที่่เ� หมาะสมและการเพาะเลี้้ย� งเชื้้อ� จุุลินิ ทรีีย์์ที่เ�่ หมาะสม ให้้ปรับั ระดัับค่่า pH ของสารแขวนลอยของตััวอย่่างอยู่่�ที่�่
6.6 - 7.2 สำำ�หรัับผลิิตภััณฑ์์ที่มีีสภ
�่าพเป็็นกรด ให้้ปรับั ค่่า pH ด้้วยสารละลาย 1N NaOH สำำ�หรัับผลิิตภััณฑ์์ที่มีีสภ
�่าพเป็็นกรด ให้้ปรับั ค่่า
pH ด้้วยสารละลาย 1N HClการวางเชื้้อ
�
1. วางแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC บนพื้้น� ผิิวเรีียบและอยู่่�ในแนวราบ
2. เปิิดแผ่่นฟิิล์ม์ ที่่อ� ยู่่�ด้้านบนขึ้้�นและหยดสารละลายตััวอย่่างในแนวตั้้�งฉากกัับบริิเวณเลี้้ย� งเชื้้อ� ด้้วยการใช้้ปิเิ ปตต์์โดยหยดในปริิมาณ 1 มล.
ของสารแขวนลอยของตััวอย่่างลงตรงกลางแผ่่นฟิิล์ม์ ส่่วนล่่างสุุด
3. ม้้วนแผ่่นฟิิล์ม์ แผ่่นบนสุุดวางทัับไปบนตััวอย่่างเพื่่�อป้้องกัันไม่่ให้้มีีฟองอากาศที่อ�่ าจติิดค้้างอยู่่�� งเชื้้อ
� Neogen
4. วางตััวกดแบบเรีียบ Neogen® Petrifilm® ลงไปโดยให้้ด้า้ นเรีียบของตััวกดวางทัับไปบนตรงกลางของแผ่่นอาหารเลี้้ย
Petrifilm CC กดเบาๆ บริิเวณส่่วนกลางของตััวกดแบบเรีียบ Neogen Petrifilm เพื่่�อให้้ตัวั อย่่างกระจายอย่่างสม่ำำ�� เสมอ เกลี่่�ยหััวเชื้้อ� ให้้
ทั่่�วทั้้�งบริิเวณที่่เ� ชื้้อ� เจริิญเติิบโตบนแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ก่่อนที่เ�่ จลจะก่่อตััวขึ้้�น ห้้ามเลื่่�อนตััวกดแบบเรีียบ Neogen
Petrifilm ไปมาบนแผ่่นฟิิล์ม
์
5. เอาตััวกดแบบเรีียบ Neogen Petrifilm ออกและปล่่อยแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ทิ้้�งไว้้เป็็นเวลาอย่่างน้้อยหนึ่่ง� นาทีีเพื่่�อ
ให้้เจลก่่อตััว

การบ่่มเชื้้�อ

นำำ�แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ไปบ่่มโดยจััดเรีียงไว้้ในแนวนอนหัันด้้านใสขึ้้�นบน วางซ้้อนกัันไม่่เกิิน 20 แผ่่น ระดัับของ
อุุณหภููมิแิ ละระยะเวลาที่่บ่� ม่ สามารถใช้้ได้้หลายระดัับขึ้้�นอยู่่�กัับวิิธีกี ารอ้้างอิิงต่่าง ๆ ที่ใ�่ ช้้อยู่่�ในปััจจุบัุ นั ของประเทศนั้้�น ๆ โดยบางวิิธีกี ารได้้นำ�ำ
มาแสดงไว้้ในส่่วนหััวข้้อ “คำำ�แนะนำำ�เฉพาะสำำ�หรัับวิิธีที่
ี ผ่
�่ า
่ นการตรวจสอบแล้้ว”การแปลผลการตรวจวิิเคราะห์์

1. สามารถนัับจำำ�นวนเชื้้อ� บนแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ได้้โดยใช้้เครื่่�องนัับโคโลนีีมาตรฐาน หรืือกล้้องส่่องตรวจนัับ
จำำ�นวนประเภทอื่่�นๆ ที่่มีี� ไฟส่่องสว่่าง ก๊๊าซที่่เ� กิิดจากโคลิิฟอร์์มอาจไปรบกวนโคโลนีี โคโลนีีนั้้�นๆ จึึง “แสดง” ฟอง จึึงควรนัับเป็็นโคลิิฟอร์์ม
เดี่่�ยว ไม่่ต้อ้ งนัับโคโลนีีบนขอบโฟมเนื่่�องจากเป็็นบริิเวณที่ไ�่ ม่่ได้้รับั อิิทธิพลจ
ิากอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ� ไม่่ต้อ้ งนัับจำำ�นวนฟองอากาศที่เ�่ กิิดขึ้้�นที่�่
อาจมีีอยู่่�
การแปลผลการตรวจวิิเคราะห์์โคโลนีีของโคลิิฟอร์์มบนแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC อาจแตกต่่างกัันไปตามวิิธีกี ารอ้้างอิิง
ที่ใ�่ ช้้ ยกตััวอย่่าง:หรือ วิธีการที่ไดร้ บั การรับรองมาตรฐานของ NF Validationวิธีการ AOAC® Official MethodsSM:
โคโลนีของโคลิฟอร์มจะเป็นสีแดงและเป็นผลมาจากก๊าซที่ขัง- เมอื่ เทียบกับ ISO method 48312 (MPN method) โคโลนข
ี อง
อยูห
่ รือติดอยูด่ า้ นใน (ภายในหนงึ่ เส้นผ่านศูนย์กลางโคโลน)ี
โคลิฟอรม์ จะเป็นสีแดงและเป็นผลมาจากก๊าซที่ขังอยูห่ รอื ติดอยู่
โคโลนีที่ไม่ได้เป็นผลมาจากก๊าซ (ระยะห่างมากกว่าหนงึ่ เส้นดา้ นใน (ภายในหนงึ่ เส้นผ่านศูนยก์ ลางโคโลน)ี
ผ่านศูนย์กลางโคโลนีระหว่างโคโลนีกบั ฟองก๊าซ) จะไมน
่ บ
ั
- เมอ
ื่ เทียบกับ ISO method 48321 (โคลิฟอรม์ ทัง้ หมด) และเป็นโคลิฟอร์ม
NF V08-0603 (fecal coliforms) ทัง้ สองขนึ้ อยูก่ บั วิธีการวิธี
VRBL นับโคโลนีทัง้ หมดทัง้ มแี ละไมม่ กี า๊ ซ
2. พื้้น� ที่่ก� ารเจริิญเติิบโตเป็็นวงกลมขนาดประมาณ 20 ซม.2 สามารถทำำ�การประมาณค่่าบนแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ที่�่
มีีมากกว่่า 150 โคโลนีีได้้โดยการนัับจำำ�นวนโคโลนีีในช่่องสี่่�เหลี่่�ยมหนึ่่ง� ช่่องหรืือมากกว่่าและหาค่่าเฉลี่่�ยจำำ�นวนโคโลนีีต่่อช่่อง คููณค่่า
เฉลี่่�ยด้้วย 20 เพื่่�อหาจำำ�นวนโดยประมาณต่่อแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC แต่่ละแผ่่น
3. เมื่่�อมีีโคโลนีีปรากฏเป็็นจำำ�นวนมาก แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC สีีของเจลอาจเข้้มขึ้้�น อาจมีีลัักษณะเฉพาะอย่่างใดอย่่าง
หนึ่่ง� หรืืออาจทั้้�งคู่่�ดัังต่่อไปนี้้:� โคโลนีีขนาดเล็็กจำำ�นวนมาก ไม่่เด่่นชััด และ/หรืือมีีฟองก๊๊าซจำำ�นวนมาก โคลิิฟอร์์มที่มีี�่ ความเข้้มข้้นสููงจะ
ทำำ�ให้้บริิเวณการเจริิญเติิบโตเปลี่่�ยนเป็็นสีีแดงเข้้ม เมื่่�อมีีเหตุุการณ์์นี้เ�้ กิิดขึ้้�น ให้้บันั ทึึกผลการตรวจวิิเคราะห์์ว่า่ เป็็นจำำ�นวนมากเกิินกว่่าจะ
นัับ (TNTC) เมื่่�อต้้องการจำำ�นวนจริิง นัับแผ่่นที่่เ� จืือจางสููงกว่่า
4. หากจำำ�เป็็น อาจจะนำำ�โคโลนีีไปแยกเชื้้อ� เพื่่�อจำำ�แนกประเภทเพิ่่�มเติิมได้้ ยกแผ่่นฟิิล์ม์ ที่อ�่ ยู่่�ด้้านบนขึ้้�นด้้วยเทคนิิคการทดสอบที่เ�่ หมาะสม
และเลืือกโคโลนีีจากเจล การทดสอบด้้วยการใช้้ขั้้น� ตอนวิิธีกี ารที่ม�่ าตรฐาน� บนแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ได้้ภายใน 1 ชั่่�วโมงหลัังนำำ�ออกจากตู้้�บ่่มเชื้้อ� สามารถจััด
5. หากไม่่สามารถนัับจำำ�นวนเชื้้อ
เก็็บแผ่่นเพาะเชื้้อ� ไว้้เพื่่�อการนัับจำำ�นวนในภายหลัังได้้โดยการแช่่แข็็งไว้้ในภาชนะที่ส�่ ามารถปิิดผนึึกได้้ ณ อุุณหภููมิที่ิ ต่ำ�่ ��ำ กว่่าหรืือเท่่ากัับ
ลบ 15°C (5°F) เป็็นระยะเวลาไม่่เกิินหนึ่่ง� สััปดาห์์
3

TH(ภาษาไทย)การเตรีียม การบ่่มเชื้้�อและการตีีความตััวอย่่างน้ำำ��บรรจุุขวด

เติิมสารละลายลงบนแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC
1. วางแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC บนพื้้น� ผิิวเรีียบและอยู่่�ในแนวราบ
2. ยกแผ่่นฟิิล์ม์ ที่่อ� ยู่่�ด้้านบนขึ้้�นและหยดตััวทำำ�ละลายไฮเดรชั่่�นที่เ�่ หมาะสมผ่่านการฆ่่าเชื้้อ
� 1มล. ลงตรงกลางของแผ่่นเพาะเลี้้ย� งเชื้้อ
�ตััวทำำ�ละลายไฮเดรชั่่�นที่่เ� หมาะสมผ่่านการฆ่่าเชื้้อ� ได้้แก่่น้ำ��ำ กลั่่�น นํ้้�าปราศจากไอออน (DI) และน้ำำ�รีี� เวอร์์สออสโมซิิส (RO)
3. ม้้วนแผ่่นฟิิล์ม์ แผ่่นบนสุุดวางทัับไปบนตััวอย่่างเพื่่�อป้้องกัันไม่่ให้้มีีฟองอากาศที่อ�่ าจติิดค้้างอยู่่�
4. วางตััวกดแบบเรีียบ Neogen Petrifilm ลงไปโดยให้้ด้า้ นเรีียบของตััวกดวางทัับไปบนตรงกลางของแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ� กดเบาๆ บริิเวณ
ส่่วนกลางของตััวกดแบบเรีียบเพื่่�อให้้ตัวั ทำำ�ละลายกระจายอย่่างสม่ำำ�� เสมอ เกลี่่�ยตััวทำำ�ละลายให้้ทั่่ว� ทั้้�งบริิเวณที่เ�่ ชื้้อ� เจริิญเติิบโตบนแผ่่น
อาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ก่่อนที่่เ� จลจะก่่อตััวขึ้้�น ห้้ามเลื่่�อนตััวกดแบบเรีียบไปมาบนแผ่่นฟิิล์ม
์
5. เอาตััวกดแบบเรีียบออก แล้้วปิิดแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ� อย่่างน้้อย 1 ชั่่�วโมงก่่อนใช้้งาน
6. เก็็บแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ที่่เ� ติิมสารทำำ�ละลายไว้้ในถุุงปิิดผนึึกหรืือถุุงพลาสติิก ปกป้้องแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ� จากแสง และแช่่เย็็นที่่อุ� ณุ หภููมิิ 2-8°C (36-46°F) ได้้นานถึงึ 7 วัันการกรองน้ำำ��และการบ่่มแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อ

1. ทำำ�ตามขั้้�นตอนมาตรฐานสำำ�หรัับการวิิเคราะห์์น้ำ��ำ ตััวอย่่างน้ำำ�� กรองเมมเบรนใช้้ขนาด 47 มม. ขนาดรููพรุน
ุ 0.45 ไมครอน ตััวกรอง
Mixed Cellulose Ester (MCE)
2. วางแผ่่นฟิิล์ม์ ด้้านบนของแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC อย่่างระมััดระวััง หลีีกเลี่่�ยงการสััมผััสพื้น�้ ที่ก�่ ารเจริิญเติิบโตแบบ
วงกลม วางตััวกรองลงตรงกลางพื้้น� ที่่ที่� ห�่ ยดสารทำำ�ละลาย ลดฟองอากาศที่อ�่ าจติิดค้้างอยู่่�ใต้้ตัวั กรองให้้น้อ้ ยที่สุ�่ ด
ุ
3. ค่่อยๆ ม้้วนฟิิล์ม์ ด้้านบนลงบนตััวกรอง ลดฟองอากาศที่อ�่ าจติิดค้้างอยู่่�ให้้น้อ้ ยที่สุ�่ ดุ และสร้้างช่่องว่่างระหว่่างตััวกรอง� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CCและแผ่่นอาหารเลี้้ย
4. ใช้้แรงกดเบาๆ โดยใช้้ตัวั กดแบบเรีียบของแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm หรืือใช้้นิ้้ว� เลื่่�อนเบาๆ ทั่่�วทั้้�งแผ่่น (รวมถึงึ ตรงขอบ
ด้้วย) เพื่่�อให้้แน่่ใจว่่าเจลสััมผััสตัวั กรองอย่่างสม่ำำ�� เสมอและเพื่่�อกำำ�จัดั ฟองอากาศใดๆ ด้้วย
5. นำำ�แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ไปบ่่มที่อุ�่ ณุ หภููมิิ 35°C ± 1°C นาน 24 ชั่่�วโมง ± 2 ชั่่�วโมง11 หรืือ 36°C ± 1°C
นาน 24 ชั่่�วโมง ± 2 ชั่่�วโมง12 ในแนวนอนหัันด้้านใสขึ้้�นบน วางซ้้อนกัันไม่่เกิิน 20 ชั้้�น

การแปลผลการตรวจวิิเคราะห์์

1. สามารถนัับจำำ�นวนเชื้้อ� บนแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ได้้โดยใช้้เครื่่�องนัับโคโลนีีมาตรฐาน หรืือกล้้องส่่องตรวจนัับ
จำำ�นวนประเภทอื่่�นๆ ที่่มีี� ไฟส่่องสว่่าง ไม่่ต้อ้ งนัับโคโลนีีบนขอบโฟมเนื่่�องจากเป็็นบริิเวณที่ไ�่ ม่่ได้้รับั อิิทธิพลจ
ิากอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ� ไม่่ต้อ้ งนัับ
จำำ�นวนฟองอากาศที่่เ� กิิดขึ้้�นที่่อ� าจมีีอยู่่�
2. โคโลนีีสีีแดงที่่มีี� ฟองก๊๊าซจะถููกนัับเป็็นโคลิิฟอร์์มด้้วย ฟองก๊๊าซอาจก่่อตััวเป็็นรููปวงกลมหรืือดาวรอบๆ โคโลนีี ก๊๊าซที่เ�่ กิิดจากโคลิิฟอร์์มอาจ
ไปรบกวนโคโลนีี โคโลนีีนั้้�นๆ จึึง “แสดง” ฟอง จึึงควรนัับเป็็นโคลิิฟอร์์มเดี่่�ยว โคโลนีีสีีแดงที่ไ�่ ม่่มีีฟองก๊๊าซอาจเป็็นโคลิิฟอร์์ม และควร
ถููกเลืือกและทดสอบด้้วยวิิธีกี ารยืืนยัันที่่เ� หมาะสม11,12
3. เมื่่�อมีีโคโลนีีปรากฏเป็็นจำำ�นวนมาก แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC สีีของเจลอาจเข้้มขึ้้�นร่่วมกัับโคโลนีีขนาดเล็็กจำำ�นวนมาก ไม่่เด่่นชััดหรืือมีีฟองก๊๊าซจำำ�นวนมาก เมื่่�อมีีเหตุุการณ์์นี้เ�้ กิิดขึ้้�น ให้้บันั ทึึกผลการตรวจวิิเคราะห์์ว่า่ เป็็นจำำ�นวนมากเกิินกว่่าจะนัับ(TNTC)
4. อาจนำำ�โคโลนีีไปแยกเชื้้อ� เพื่่�อจำำ�แนกประเภทเพิ่่�มเติิมได้้ ยกแผ่่นฟิิล์ม์ ที่อ�่ ยู่่�ด้้านบนขึ้้�นและเลืือกโคโลนีีจากเจลหรืือพื้้น� ผิิวตััวกรอง เมื่่�อยก
แผ่่นฟิิล์ม์ ที่่อ� ยู่่�ด้้านขึ้้�น ตััวกรองอาจติิดไปกัับแผ่่นฟิิล์ม์ ด้้านบนหรืือแผ่่นฟิิล์ม์ ด้้านล่่าง หากตััวกรองติิดกัับฟิิล์ม์ ด้้านบน แยกตััวกรองออก
จากฟิิล์ม์ ด้้านบนและเลืือกโคโลนีี การทดสอบด้้วยการใช้้ขั้้น� ตอนวิิธีกี ารที่ม�่ าตรฐาน
หมายเหตุุ: ไม่่แนะนำำ�ให้้นับั แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ที่มีีตั�่ วั กรองล่่าช้้า
สำำ�หรัับข้้อมููลเพิ่่�มเติิม โปรดดููในหััวข้้อ “Neogen® Petrifilm® คู่่�มืือแปลผลแผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ� สำำ�หรัับนัับจำำ�นวนโคลิิฟอร์์ม” หากท่่านมีีข้้อ
สงสััยเกี่่�ยวกัับการใช้้งานหรืือกรรมวิิธีที่ี เ�่ ฉพาะเจาะจงใดๆ โปรดเยี่่�ยมชมเว็็บไซต์์ของเราที่�่ www.neogen.com หรืือติิดต่่อตััวแทนจำำ�หน่่าย
หรืือผู้้�จััดจำำ�หน่่ายของบริิษัท
ั Neogen ในท้้องถิ่่�นของท่่าน
คำำ�แนะนำำ�เฉพาะสำำ�หรัับวิิธีที่
ี ผ่
�่ า
่ นการตรวจสอบแล้้ว
AOAC® Official MethodsSM (986.33 การนัับแบคทีีเรีียและโคลิิฟอร์์มในนม Dry Rehydratable Film Methods และ 989.10 การนัับ
แบคทีีเรีียและโคลิิฟอร์์มในผลิิตภััณฑ์์ที่ทำ�่ �จำ ากนม Dry Rehydratable Film Methods)นำำ�แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ไปบ่่ม 24 ชั่่�วโมง ± 2 ชั่่�วโมงที่�่ 32°C ± 1°C
AOAC® Official MethodsSM (991.14 การนัับแบคทีีเรีียและ Escherichia coli ในอาหาร Dry Rehydratable Film Methods)นำำ�แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ไปบ่่ม 24 ชั่่�วโมง ± 2 ชั่่�วโมงที่�่ 35°C ± 1°C
AOAC® Performance Tested MethodSM Certificate #082101
จากการศึึกษา Performance Tested Method (PTM) ของสถาบัันวิิจัยั AOAC® พบว่่าการใช้้แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CCนั้้�นเทีียบเท่่ากัับจำำ�นวนค่่า log เฉลี่่�ยของ FDA/BAM Chapter 4, Section III.D วิิธีกี ารสำำ�หรัับนัับจำำ�นวนของโคลิิฟอร์์มในน้ำำ�� บรรจุุขวด

4

TH(ภาษาไทย)ขอบเขตของการตรวจสอบความใช้้ได้้ของวิิธีกี าร มีีดัังต่่อไปนี้้:�น้ำำ�� บรรจุุขวด: น้ำำ�� บริิสุทธิ์์ุ � น้ำำ�� แร่่ที่ผ่�่ า่ นกระบวนการ น้ำำ�� แร่่ธรรมชาติิประเภทไม่่มีีคาร์์บอเนต น้ำำ�� แร่่ธรรมชาติิประเภทเติิมคาร์์บอเนต
การบ่่มเชื้้อ� :นำำ�แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ไปบ่่ม 24 ชั่่�วโมง ± 2 ชั่่�วโมงที่อุ�่ ณุ หภููมิิ 35°C ± 1°C
NF Validation โดย AFNOR Certificationวิิธีกี ารที่ไ�่ ด้้รับั การรัับรองมาตรฐานของ NF VALIDATION ตามมาตรฐาน ISO 16140-210 เมื่่�อเปรีียบเทีียบกัับ ISO 48321(3M-01/02-09/89 A)ขอบเขตของการตรวจสอบความใช้้ได้้ของวิิธีีการ มีีดัังต่่อไปนี้้�: สำำ�หรัับการทดสอบ ผลิิตภััณฑ์์อาหารมนุุษย์์ทุุกชนิิด (ยกเว้้นสััตว์์น้ำำ��
ประเภทที่่�มีีเปลืือกดิิบๆ) ตััวอย่่างอาหารสััตว์์เลี้้�ยงและสิ่่�งแวดล้้อม
ใช้้รายละเอีียดต่่อไปนี้้เ� มื่่�อนำำ�คำ�ำ แนะนำำ�การใช้้ด้า้ นบนมาใช้้:การเตรีียมตััวอย่่าง:ให้้ใช้้สารทำำ�ละลายตามที่่ร� ะบุุโดยมาตรฐาน ISO เท่่านั้้�น
การบ่่มเชื้้อ� :นำำ�แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ไปบ่่ม 24 ชั่่�วโมง ± 2 ชั่่�วโมงที่อุ�่ ณุ หภููมิิ 30°C ± 1°C หรืือ 37°C ± 1°C
การแปลผลการตรวจวิิเคราะห์์:คำำ�นวณจำำ�นวนเชื้้อ� จุุลินิ ทรีีย์์ที่ขึ้้�่ น� ในอาหารที่่นำ� �ำ มาทดสอบตาม ISO 72185 โดยใช้้แผ่่นอาหารหนึ่่ง� แผ่่นต่่อตััวอย่่างเจืือจางหนึ่่ง� ตััวอย่่าง
การประมาณจำำ�นวนโคโลนีีที่่อ� ยู่่�นอกเหนืือขอบเขตของการรัับรองของ NF Validation (ดููส่ว่ นการแปลผล ในย่่อหน้้าที่�่ 2)วิิธีกี ารที่ไ�่ ด้้รับั การรัับรองมาตรฐานของ NF VALIDATION ตามมาตรฐาน ISO 16140-210 เมื่่�อเปรีียบเทีียบกัับ ISO 48312(3M-01/02-09/89 B)ขอบเขตของการตรวจสอบความใช้้ได้้ของวิิธีกี าร มีีดัังต่่อไปนี้้:� สำำ�หรัับการทดสอบ ผลิิตภััณฑ์์อาหารมนุุษย์์ทุกุ ชนิิด
(ยกเว้้นสััตว์์น้ำ�ป�ำ ระเภทที่่มีี� เปลืือกดิิบๆ)ใช้้รายละเอีียดต่่อไปนี้้เ� มื่่�อนำำ�คำ�ำ แนะนำำ�การใช้้ข้า้ งบนมาใช้้:การเตรีียมตััวอย่่าง:ให้้ใช้้สารทำำ�ละลายตามที่่ร� ะบุุโดยมาตรฐาน ISO เท่่านั้้�น
การบ่่มเชื้้อ� :นำำ�แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ไปบ่่ม 24 ชั่่�วโมง ± 2 ชั่่�วโมงที่อุ�่ ณุ หภููมิิ 30°C ± 1°C หรืือ 37°C ± 1°C
การแปลผลการตรวจวิิเคราะห์์:คำำ�นวณจำำ�นวนเชื้้อ� จุุลินิ ทรีีย์์ที่ขึ้้�่ น� ในอาหารที่่นำ� �ำ มาทดสอบตาม ISO 72185 โดยใช้้แผ่่นอาหารหนึ่่ง� แผ่่นต่่อตััวอย่่างเจืือจางหนึ่่ง� ตััวอย่่าง
การประมาณจำำ�นวนโคโลนีีที่่อ� ยู่่�นอกเหนืือขอบเขตของการรัับรองของ NF Validation (ดููส่ว่ นการแปลผล ในย่่อหน้้าที่�่ 2)วิิธีกี ารที่่ไ� ด้้รับั การรัับรองมาตรฐานของ NF VALIDATION ตามมาตรฐาน ISO 16140-210 เมื่่�อเปรีียบเทีียบกัับ NF V08-0603(3M-01/02-09/89 C)ขอบเขตของการตรวจสอบความใช้้ได้้ของวิิธีกี าร มีีดัังต่่อไปนี้้:� สำำ�หรัับการทดสอบ ผลิิตภััณฑ์์อาหารมนุุษย์์ทุกุ ชนิิด
ใช้้รายละเอีียดต่่อไปนี้้เ� มื่่�อนำำ�คำ�ำ แนะนำำ�การใช้้ข้า้ งบนมาใช้้:การเตรีียมตััวอย่่าง:ให้้ใช้้สารทำำ�ละลายตามที่่ร� ะบุุโดยมาตรฐาน ISO เท่่านั้้�น
การบ่่มเชื้้อ� :นำำ�แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ
� Neogen Petrifilm CC ไปบ่่ม 24 ชั่่�วโมง ± 2 ชั่่�วโมงที่อุ�่ ณุ หภููมิิ 44°C ± 1°C
การแปลผลการตรวจวิิเคราะห์์:คำำ�นวณจำำ�นวนเชื้้อ� จุุลินิ ทรีีย์์ที่ขึ้้�่ น� ในอาหารที่่นำ� �ำ มาทดสอบตาม ISO 72185 โดยใช้้แผ่่นอาหารเลี้้ย� งเชื้้อ� หนึ่่ง� แผ่่นต่่อตััวสารทำำ�ละลายหนึ่่ง� ตััวการประมาณจำำ�นวนโคโลนีีที่่อ� ยู่่�นอกเหนืือขอบเขตของการรัับรองของ NF Validation (ดููส่ว่ นการแปลผล ในย่่อหน้้าที่�่ 2) อิิงตามมาตรฐาน
EN ISO 7218 ในการเพาะเชื้้อ� การนัับโคโลนีี และการคำำ�นวณและการแสดงผลลััพธ์์

3M 01/02 – 09/89A, B, and C
ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS
http://nf-validation.afnor.org/enหากต้้องการข้้อมููลเพิ่่�มเติิมเกี่่�ยวกัับการสิ้้�นสุุดการบัังคัับใช้้ของผลจากการตรวจสอบความใช้้ได้้ของวิิธีกี าร โปรดอ่่านเอกสารรัับรองของNF VALIDATION ที่่พร้� อ้ มให้้ใช้้งานได้้ตามเว็็บไซต์์ที่ร�่ ะบุุไว้้ข้า้ งต้้น

5

TH(ภาษาไทย)ข้้อมููลอ้้างอิิง

1. ISO 4832. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms – Colony
count technique.
2. ISO 4831. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumeration of
coliforms – Most probable number technique.
3. AFNOR NF V08-060. General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at 44°C
– Routine method.
4. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
6. ISO/IEC 17025 General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
7. FDA. Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998. Reagents Index for BAM found at:
http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.
8. ISO 6887-5. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension and decimal
dilutions for microbiological examination, Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk products.
9. ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension and decimal
dilutions for microbiological examination, Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension and decimal
dilutions.
10. ISO 16140-2. Microbiology of the food chain – Method validation – Protocol for the validation of alternative (proprietary)
methods against a reference method.
11. U.S. Food and Drug Administration. 2002. Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4. Membrane filter
method for coliforms.
12. American Public Health Association. 2017. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th Ed.
Method 9222B2a.
โปรดอ้้างอิิงวิิธีกี ารมาตรฐานฉบัับปััจจุบัุ นั ที่่แ� สดงรายการไว้้ข้า้ งต้้น

คำำ�อธิิบายสััญลัักษณ์์

info.neogen.com/symbols
AOAC เป็็นเครื่่�องหมายการค้้าจดทะเบีียนของ AOAC INTERNATIONAL
Official Method เป็็นเครื่่�องหมายบริิการของ AOAC INTERNATIONAL
Performance Tested Method เป็็นเครื่่�องหมายบริิการของ AOAC INTERNATIONAL

6

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931A

KO (한국어)발행일: 2024-01

제품 설명서

대장균군 측정용 플레이트제품 설명 및 용도

Neogen® Petrifilm® 대장균군용 (CC) 플레이트는 시료가 준비된 배양 시스템으로써 Violet Red Bile(VRB) 영양분, 냉수 용해성겔화제와 집락 계수를 용이하게 하는 테트라졸륨 지시제가 포함되어 있습니다. Neogen Petrifilm CC 플레이트는 식음료 및 병 생수업계에서 대장균균을 계수하는 데 사용합니다. Neogen Petrifilm CC 플레이트 구성품은 멸균 처리되지는 않았으나 오염은 모두제거되었습니다. Neogen Food Safety는 설계 및 제조에 관한 국제 표준화 기구(ISO) 9001 인증을 받았습니다. Neogen Petrifilm
CC 플레이트는 모든 가능한 식료품, 식품 가공, 시험 프로토콜 또는 모든 가능한 미생물 종에 대해서 평가되지 않았습니다.

미국 식품의약국(FDA) 박테리아 분석 매뉴얼(Bacteriological Analytical Manual, BAM)7에서는 대장균군을 유당 발효로부터 산과가스를 발생시키는 그램 음성 간균을 정의합니다. Neogen Petrifilm CC 플레이트에서 생장하는 대장균군은 pH 지표 젤 색상이짙어지는 산을 발생시키며 적색 집락에 갇힌 가스는 대장균군을 나타냅니다.

ISO는 특정한 방법, 선택적 배지에서 성장 능력을 기준으로 대장균군을 정의합니다. ISO 방법 48321는 집락 계수 방법을 통해대장균군을 계수하며, 대장균군을 유당(VRBL) 한천으로 VRB에서 산을 발생시키는 균으로 정의합니다. Neogen Petrifilm CC플레이트에서 이러한 산 생성 대장균군은 가스 생성 또는 비생성 적색 집락으로 나타납니다. ISO 방법 48312은 대장균군을 최석확수(MPN)법으로 계수하여 증식 및 선별 배지의 유당으로부터 가스를 생성하는 능력으로 대장균군을 정의합니다. Neogen Petrifilm CC플레이트에서 이러한 대장균군은 가스와 연관된 적색 집락으로 나타납니다.
병 생수 시료의 경우 확인된 대장균군 집락은 Neogen Petrifilm CC 플레이트에서 가스와 연관된 적색 집락으로 나타납니다.
가스 기포와 밀접한 연관이 없는 적색 집락은 대장균군일 수 있으며 적절한 확인 방법11,12으로 계대배양 및 시험해야 합니다. 추가세부사항은 결과 해석 섹션을 참조하십시오. 특징적 집락은 대장균으로 계대배양 및 시험할 수 있습니다.

AFNOR Certification에서는 총 대장균군 계수화에 대해 ISO 방법 48312 및 ISO 방식 48321 대비 Neogen Petrifilm CC 플레이트를
인증했습니다. AFNOR Certification에서는 또한 내열성 대장균군 계수에 대해 NF V08-0603 대비 Neogen Petrifilm CC 플레이트를
인증했습니다.

안전사용자는 Neogen Petrifilm CC 플레이트의 제품 설명서에 있는 모든 안전 관련 사항을 읽고, 숙지하고, 이에 따라야 합니다. 나중에참조할 수 있도록 안전 지침을 보관하십시오.
경고: 피하지 못할 경우 사망이나 심각한 부상 및/또는 재산상의 손해를 초래할 수 있는 위험 상황을 의미합니다

경고생물학적 위험 및 환경 오염과 관련된 위험을 줄이려면:• 생물학적 위험 폐기물의 처분에 관한 최신 산업 표준과 현지 규정을 따르십시오.
오염된 제품의 누출과 관련된 위험을 줄이려면:• 설명서에 포함된 제품 보관 지침을 모두 따르십시오.
• 유효기간이 지난 제품을 사용해서는 안 됩니다.

세균 감염 및 작업 현장 오염과 관련된 위험을 줄이려면:• 적절한 장비를 갖춘 실험실에서 숙련된 미생물 전문가의 관리하에 Neogen Petrifilm CC 플레이트 시험을 실시합니다.
• 사용자는 최신의 올바른 시험 기법으로 담당 직원을 반드시 교육해야 합니다. 예: 우수 실험실 기준4, ISO 72185, 또는 ISO 170256.

결과에 대한 해석 오류와 관련된 위험을 줄이려면:• Neogen에서는 병 생수를 포함한 식음료 업계 이외의 다른 산업에서 Neogen Petrifilm CC 플레이트를 사용하는 것과 관련된정보를 문서화하지 않았습니다. 예를 들어 Neogen에서는 Neogen Petrifilm CC 플레이트를 의약품 또는 화장품의 시험에 대해문서화하지 않았습니다. Neogen에서는 Neogen Petrifilm CC 플레이트를 표면 및 도시용수나 의약품 또는 화장품 업계 용수시험에 대해 문서화하지 않았습니다.
• 지역 용수 시험 규정을 준수한 용수 시료 시험을 위한 Neogen Petrifilm CC 플레이트의 사용은 전적으로 최종 사용자의책임입니다. Neogen Petrifilm CC 플레이트는 모든 가능한 병 생수 시료, 시험 프로토콜 또는 모든 가능한 미생물 종에 대해서시험되지 않았습니다.
• Neogen Petrifilm CC 플레이트를 사람이나 동물의 상태 진단에 사용하면 안 됩니다.
• Neogen Petrifilm CC 플레이트는 대장균군 균주를 구별하지 않습니다.
• 당도가 높은 식품의 경우에는 비대장균군 장내세균속균종에 의해 가스 발생 가능성이 높아질 수 있습니다.

자세한 정보는 물질안전보건자료를 참고하십시오.

제품 성능 문서에 대한 자세한 내용은 www.neogen.com 웹사이트를 참조하거나 Neogen 담당자 또는 Neogen 공인 대리점에문의하십시오.
1

KO (한국어)사용자의 책임

사용자는 제품 설명서와 정보를 숙지할 책임이 있습니다. 자세한 내용은 당사 웹사이트(www.neogen.com)를 방문하거나 현지
Neogen 또는 판매업체로 문의하십시오.

시험 방법을 선택할 때, 시료 추출 방법, 시험 프로토콜, 시료 준비, 취급, 실험 기법과 같은 외적 요인이 결과에 영향을 미칠 수 있음을인식하는 것이 중요합니다.
시험 방법이나 제품을 선택할 때 선택된 시험 방법이 사용자의 기준을 충족할 수 있도록 적합한 매트릭스와 미생물 유발 시험을사용하여 충분한 수의 시료를 평가하는 것은 사용자의 책임입니다.
또한 사용자는 모든 시험 방법 및 결과가 고객 및 공급자의 요구사항을 충족하는지 판단할 책임이 있습니다.

다른 시험 방법과 마찬가지로 Neogen Food Safety 제품을 사용하여 얻은 결과가 시험된 매트릭스나 프로세스의 품질을 보장하는것은 아닙니다.

보증의 한계/제한적 구제개별 제품 포장의 제한적 보증 부분에 명시된 경우를 제외하고, NEOGEN은 상품성 또는 특정 용도 적합성에 대한 보증을 포함한 어떤명시적이거나 암묵적인 보증도 거부합니다. Neogen Food Safety 제품에 결함이 있을 경우, Neogen이나 그의 공식 판매업체는 자체판단에 따라 제품을 교체하거나 구매 금액을 환불해 드립니다. 다음은 귀하의 유일한 구제 방법입니다. 제품에서 의심되는 결함이발견되면 발견일로부터 60일 이내에 Neogen으로 즉시 통지하고, 제품을 Neogen으로 반품해야 합니다. 추가 질문이 있으면 Neogen담당자 또는 Neogen 공인 대리점에 문의하십시오.

Neogen 책임의 제한

NEOGEN은 수익의 상실을 포함하여 어떤 직접적인, 간접적인, 특별한, 부수적인, 결과적인 손해나 손실에 대해서도 책임지지않습니다. 법 이론에 따른 Neogen의 책임은 어떤 경우에도 결함이 있다고 주장된 제품의 구매 대금을 초과하지 않습니다.

보관열지 않은 Neogen Petrifilm CC 플레이트 파우치를 8°C(46°F) 이하의 온도에서 냉장 또는 냉동 보관하십시오. 개봉하지 않은
Neogen Petrifilm CC 플레이트 파우치는 사용 직전에 실온으로 옮겼다가 개봉하십시오. 사용하지 않은 Neogen Petrifilm CC플레이트는 다시 파우치에 넣어두십시오. 파우치의 말단을 접고, 접착테이프를 붙여서 밀봉하십시오. 습기에 노출되지 않게 하려면개봉한 파우치를 냉장 보관하지 마십시오. 다시 밀봉한 파우치는 서늘하고 건조한 곳에 4주 이상 보관하면 안 됩니다. 실험실 온도가
25°C(77°F)를 초과하거나 실험실이 상대 습도가 50%를 초과하는 지역에 있는 경우(공기 조절 설비가 있는 곳은 제외), 재밀봉한Neogen Petrifilm CC 플레이트의 파우치를 냉동고(아래 참고)에 보관하는 것이 좋습니다.
개봉된 파우치를 냉동고에 보관하려면 Neogen Petrifilm CC 플레이트를 밀폐 가능한 용기에 넣으십시오. 냉동된 Neogen
Petrifilm CC 플레이트를 사용하기 위해 꺼내려면 용기를 열고 필요한 플레이트를 꺼낸 다음, 남은 플레이트를 즉시 밀봉된 용기에도로 넣어 남은 유통기한 동안 냉동실에 보관하십시오. 유효기간이 지난 Neogen Petrifilm CC 플레이트는 사용해서는 안 됩니다.
개봉한 파우치를 보관하는 냉동고에는 자동 성에 제거 장치가 있으면 절대로 안 됩니다. 이 장치가 있는 경우 Neogen Petrifilm CC플레이트는 손상을 입을 수 있는 습기에 반복적으로 노출됩니다.
변색된 Neogen Petrifilm CC 플레이트는 사용할 수 없습니다. 유효기간 및 제조번호는 Neogen Petrifilm CC 플레이트의 각 포장위에 표기되어 있습니다. 제조번호는 개별 Neogen Petrifilm CC 플레이트에도 표시되어 있습니다.

폐기

사용한 Neogen Petrifilm CC 플레이트에는 잠재적인 생물학적 위험물인 미생물이 들어있을 수 있습니다.
현행 산업 표준에 따라 폐기하십시오.

사용 지침모든 지침을 주의 깊게 준수하십시오. 그렇지 않으면 부정확한 결과가 나올 수 있습니다.

환경 시료를 비롯한 식음료 업계 시료 준비, 배양 및 결과 해석 (병 생수 제외)시료 준비
1. 다음과 같이 적절한 살균된 희석액을 사용하십시오.

버터필드의 인산염 완충 희석수7, 0.1% 펩톤수8, 펩톤 염 희석제8,9, 완충 펩톤수8,9, 식염수(0.85 ~ 0.90%), Neogen® 와이드스펙트럼 중화장치, 중황산염이 없는 레틴 액체배지 또는 증류수. 특정 요건에 관해서는 “유효성 검증 방법 관련 상세 설명” 섹션을참조하십시오.

시트르산염, 중아황산염 또는 티오황산염을 포함하는 희석액을 Neogen Petrifilm CC 플레이트에 사용하지 마십시오. 이들은증식을 억제할 수 있습니다. Citrate 버퍼액이 표준 절차에 표시되어 있는 경우, 40~45°C(104-113°F)로 가열된 상기 완충액 중하나와 교체하십시오.

2. 샘플 혼합 또는 균질화.

3. 미생물의 최적 성장 및 회복을 위해, 시료 현탁액의 pH 값을 조절하여 6.6~7.2로 맞춥니다. 산성 제품의 경우, 1N NaOH를
사용하여 pH를 조절합니다. 알칼리 제품의 경우, 1N HCl를 사용하여 pH를 조절합니다.

2접종
1. Neogen Petrifilm CC 플레이트를 평평하고 수평한 표면에 놓습니다.

KO (한국어)2. 피펫을 사용하여 배양 구역에 수직하게 상단 필름을 들고 하단 필름의 중앙에 시료 현탁액 1mL를 떨어뜨립니다.
3. 시료 위에서 상단 필름을 아래로 눌러서 기포가 포획되지 않도록 합니다.

4. Neogen® Petrifilm® 누름판의 평평한 면을 아래로 하여 Neogen Petrifilm CC 플레이트의 중앙에 놓습니다. Neogen Petrifilm누름판의 중앙부를 부드럽게 눌러서 시료를 고르게 펴십시오. 겔이 형성되기 전에 접종물을 Neogen Petrifilm CC 플레이트의전체 증식 구역에 펼치십시오. Neogen Petrifilm 누름판을 필름 위에 올려놓고 옆으로 밀지 마십시오.

5. Neogen Petrifilm 누름판을 제거하고 Neogen Petrifilm CC 플레이트를 최소 1분 이상 그대로 두어 겔이 형성되도록 하십시오.

배양수평 위치에서 투명한 쪽이 위로 향하게 20개 미만의 플레이트를 쌓아서 Neogen Petrifilm CC 플레이트를 배양합니다. 최신 현지참조 방법에 따라서 몇 가지의 배양 시간 및 온도를 사용할 수 있으며, 그 중 일부를 “검증 방법 관련 상세 설명” 섹션에서 제시합니다.

결과 해석

1. Neogen Petrifilm CC 플레이트는 표준 집락 계수기나 다른 조명 확대경을 사용하여 계수할 수 있습니다. 대장균군이 생성한가스는 집락을 방해할 수 있어 집락이 기포의 “윤곽을 표시”할 수 있습니다. 이는 단일 대장균군으로 계수해야 합니다. 겔 바깥부분의 집락은 배지의 선택적 영향에서 벗어났으므로 계수하면 안 됩니다. 허상 기포가 나타나는 경우 계수하면 안 됩니다.
Neogen Petrifilm CC 플레이트에서 대장균군 집락의 해석은 참조 방법에 따라 차이가 있습니다. 사례:또는 NF Validation 인증 방법:
AOAC® Official MethodsSM:
대장균군 집락은 적색이며 (단위 집락 직경 내부의) 포획된- ISO 방법 48312(MPN 방법)과 비교하여 대장균군 집락은적색이며 갇힌 가스(하나의 집락 직경 내에) 긴밀히 연관되어가스와 밀접한 관계를 갖습니다. 가스와 관련성이 없는있습니다.
집락(집락과 가스 기포 사이의 거리가 단위 집락의 직경을- ISO 방법 48321(총 대장균군) 및 NF V08-0603(대변 대장균군)초과)은 대장균군으로 계수하지 않습니다.
과 비교했을 때 두 가지 모두 VRBL 방법에 기반을 두고 가스포함 또는 미포함 적색 집락 모두를 계수합니다.

2. 원형으로 된 증식 구역은 약 20 cm2입니다. 150개 이상의 집락을 포함한 Neogen Petrifilm CC 플레이트에 대한 추정치는 1개
이상의 대표 사각형 내 집락의 수를 세고 사각형당 평균치를 결정함으로써 계산할 수 있습니다. 평균값에 20을 곱하여 Neogen
Petrifilm CC 플레이트당 추정 계수값을 결정합니다.

3. 높은 수의 집락이 존재할 때 Neogen Petrifilm CC 플레이트의 겔 컬러가 짙어질 수 있으며 다음 특징 중 하나 또는 모두가나타날 수 있습니다: 작고 많은 희미한 집락 및/또는 많은 가스 기포. 대장균군의 높은 농도는 증식 구역을 짙은 적색으로 만들 수
있습니다. 이처럼 되는 경우, 결과는 너무 많아서 계수 불가능(TNTC)으로 기록합니다. 실제 계수가 필요한 경우 높은 희석액을플레이팅하십시오.
4. 필요한 경우 집락을 분리해서 자세하게 확인할 수 있습니다. 올바른 시험 기법을 사용해 상단 필름을 들어 올리고 겔에서 집락을선택합니다. 표준 절차를 사용하여 시험합니다.

5. 배양기에서 꺼낸지 1시간 내에 Neogen Petrifilm CC 플레이트를 계수하지 못하는 경우에는 다음에 계수하기 위해 밀폐 가능한용기에 넣고 영하 15°C(5°F) 이하의 온도에서 동결하여 1주 이내의 시간 동안 보관할 수 있습니다.

병 생수 시료 준비, 배양 및 결과 해석

Neogen Petrifilm CC 플레이트 수화
1. Neogen Petrifilm CC 플레이트를 평평하고 수평한 표면에 놓습니다.

2. 상단 필름을 들고 적절한 멸균 수화 희석액 1mL를 바닥 필름의 중앙에 떨어뜨립니다. 적절한 멸균 수화 희석액에는 증류수,탈이온(DI)수 및 역삼투(RO)수가 포함됩니다.
3. 시료 위에서 상단 필름을 아래로 눌러서 기포가 포획되지 않도록 합니다.

4. Neogen Petrifilm 누름판의 평평한 면을 아래로 하여 플레이트의 중앙에 놓습니다. 누름판의 중앙부를 부드럽게 눌러서 희석액을고르게 펴십시오. 겔이 형성되기 전에 희석액을 Neogen Petrifilm 플레이트의 전체 증식 구역에 펼치십시오. 누름판을 필름 위에올려놓고 옆으로 밀지 마십시오.
5. 누름판을 떼고 사용 전에 플레이트가 최소 1시간 동안 닫혀 있도록 하십시오.

6. 수화된 Neogen Petrifilm CC 플레이트를 밀봉된 파우치나 비닐 봉지에 보관하십시오. 플레이트를 직사광선으로부터 보호하고최대 7일간 2~8°C(36~46°F)에서 냉장하십시오.

물 여과 및 플레이트 배양

1. 용수 분석을 위한 표준 절차에 따라 47 mm, 0.45 미크론 기공 크기의 에스테르 혼합 셀룰로오스(MCE) 필터를 사용해 용수 시료를막여과로 걸러냅니다.
2. Neogen Petrifilm CC 플레이트의 상단 필름을 조심스럽게 걷어냅니다. 원형 생장 영역에 접촉하지 않도록 하십시오. 필터를 수화영역 중앙에 놓습니다. 필터 아래에 기포가 생기는 것을 최소화하십시오.

3. 상단 필름을 필터 위에 조심스럽게 펴십시오. 필터와 Neogen Petrifilm CC 플레이트 사이에 기포와 공간이 생기는 것을최소화합니다.
3

KO (한국어)4. Neogen Petrifilm 플레이트 누름판을 사용하거나 손가락을 전체 디스크 구역(가장자리 포함) 전반으로 밀어 약간의 압력을가하여 필터가 겔과 일정한 접촉을 하고 기포를 제거할 수 있도록 합니다.

5. Neogen Petrifilm CC 플레이트를 수평 상태로 투명한 쪽이 위로 가게 하여 20개 미만으로 쌓은 다음 35°C ± 1°C에서 24시간 ±2시간11 또는 36°C ± 1°C에서 24시간 ± 2시간12 동안 배양하십시오.

결과 해석

1. Neogen Petrifilm CC 플레이트는 표준 집락 계수기나 다른 조명 확대경을 사용하여 계수할 수 있습니다. 겔 바깥 부분의 집락은배지의 선택적 영향에서 벗어났으므로 계수하면 안 됩니다. 허상 기포가 나타나는 경우 계수하면 안 됩니다.

2. 가스 기포와 연관된 적색 집락은 대장균군으로 계수합니다. 가스 기포는 집락 근처에 원형이나 별 모양 패턴을 형성할 수 있습니다.
대장균군이 생성한 가스는 집락을 방해할 수 있어 집락이 기포의 “윤곽을 표시”할 수 있습니다. 이는 단일 대장균군으로 계수해야합니다. 가스 기포와 밀접한 연관이 없는 적색 집락은 대장균군일 수 있으며 적절한 확인 방법11,12으로 선별 및 시험해야 합니다.
3. 높은 수의 집락이 존재할 때 Neogen Petrifilm CC 플레이트의 작고 많은 희미한 집락 또는 가스 기포와 관련된 겔 컬러가 짙어질수 있습니다. 이처럼 되는 경우, 결과는 너무 많아서 계수 불가능(TNTC)으로 기록합니다.

4. 집락을 분리해서 자세하게 확인할 수 있습니다. 상단 필름을 들어 올리고 겔 또는 필터 표면에서 집락을 선택합니다. 상단 필름을들어 올릴 때 필터가 상단 필름이나 하단 필름에 붙을 수 있습니다. 필터가 상단 필름에 붙는 경우 필터를 상단 필름에서 떼어내고집락을 집어냅니다. 표준 절차를 사용하여 시험합니다.

참고: 필터가 있는 Neogen Petrifilm CC 플레이트의 지연 계수는 권장하지 않습니다.

보다 상세한 내용은 적절한 “Neogen® Petrifilm® 대장균군 측정용 플레이트 해석 가이드”를 참조합니다. 구체적인 용도나 절차에대하여 궁금한 점이 있으면 당사 웹사이트(www.neogen.com)를 방문하거나 현지 Neogen 또는 판매업체로 문의하십시오.

검증 방법 관련 상세 설명
AOAC® Official MethodsSM (986.33 우유에서의 박테리아 대장균군 계수, 건조 재수화 가능 필름 방법 및 989.10 유제품에서의
박테리아 및 대장균 계수, 건조 재수화 가능 필름 방법)
Neogen Petrifilm CC 플레이트를 32°C ± 1°C에서 24시간 ± 2시간 동안 배양합니다.

AOAC® Official MethodsSM (991.14 식품에서의 대장군균 및 대장균 계수, 건조 재수화 가능 필름 방법)

Neogen Petrifilm CC 플레이트를 35°C ± 1°C에서 24시간 ± 2시간 동안 배양합니다.

AOAC® Performance Tested MethodSM 인증서 #082101
AOAC® Research Institute Performance Tested Method(PTM) 연구에서 Neogen Petrifilm CC 플레이트 방식은 생수 내대장균군 측정용 FDA/BAM 4장 섹션 III.D 방법의 평균 로그 수와 동일한 것으로 밝혀졌습니다.

검증의 범위:생수: 정제수, 처리한 샘물, 무탄산 천연 샘물, 탄산 천연 샘물.

배양:
Neogen Petrifilm CC 플레이트를 35°C±1°C에서 24시간±2시간 동안 배양합니다.

AFNOR Certification에 의한 NF Validation:
ISO 48321 (3M-01/02-09/89 A) 대비 ISO 16140-210에 준한 NF Validation 인증 방법검증의 범위: 모든 인간의 식료품(생 조개류 제외), 애완동물 사료와 환경 시료.
상기 사용 지침을 사용할 시에는 다음 세부 사항을 참고하시기 바랍니다.
시료 준비:ISO에 명시된 희석액만 사용하십시오.

배양:
Neogen Petrifilm CC 플레이트를 30°C ± 1°C 또는 37°C ± 1°C에서 24시간 ± 2시간 동안 배양합니다.

해석:ISO 72185에 따라 희석액당 하나의 플레이트에 대해 시험 시료에 나타난 미생물의 개수를 계산합니다. 추정치는 NF Validation인증의 범위를 벗어납니다(해석 파트 2항 참조).
ISO 48312 (3M-01/02-09/89 B) 대비 ISO 16140-210에 준한 NF Validation 인증 방법검증의 범위: 모든 인간의 식료품(생 조개류 제외) 검사용상기 사용 지침을 사용할 시에는 다음 세부 사항을 참고하시기 바랍니다.
시료 준비:ISO에 명시된 희석액만 사용하십시오.

4

KO (한국어)배양:
Neogen Petrifilm CC 플레이트를 30°C ± 1°C 또는 37°C ± 1°C에서 24시간 ± 2시간 동안 배양합니다.

해석:ISO 72185에 따라 희석액당 하나의 플레이트에 대해 시험 시료에 나타난 미생물의 개수를 계산합니다. 추정치는 NF Validation인증의 범위를 벗어납니다(해석 파트 2항 참조).
NF V08-0603(3M-01/02-09/89 C) 대비 ISO 16140-210에 준한 NF Validation 인증 방법검증의 범위: 모든 인간의 식료품 검사용상기 사용 지침을 사용할 시에는 다음 세부 사항을 참고하시기 바랍니다.
시료 준비:ISO에 명시된 희석액만 사용하십시오

배양:
Neogen Petrifilm CC 플레이트를 44°C ± 1°C에서 24시간 ± 2시간 동안 배양합니다.

해석:ISO 72185에 따라 희석액당 하나의 플레이트에 대해 시험 시료에 나타난 미생물의 개수를 계산합니다. 추정치는 NF Validation인증의 범위를 벗어납니다(해석 파트 2항 참조). 배양, 집락 계수, 계산 및 결과 표현에 대해서는 EN ISO 7218 표준을 참조하십시오.

3M 01/02 – 09/89A, B, and C
ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS
http://nf-validation.afnor.org/en유효 기간과 관련한 상세 정보는 상기에 명시한 웹 사이트에 있는 NF Validation 인증서를 참고하십시오.

5

KO (한국어)참고 자료

1. ISO 4832. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coliforms –Colony count technique.
2. ISO 4831. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection and enumeration of
coliforms – Most probable number technique.
3. AFNOR NF V08-060. General guidance for the enumeration of fecal coliforms – Colony count technique (VRBL) at
44°C – Routine method.
4. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
6. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
7. FDA. Bacteriological Analytical Manual (BAM), 8th Edition, Revision A, 1998. Reagents Index for BAM found at:
http://www.fda.gov/Food/FoodScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm055791.htm.
8. ISO 6887-5. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 5: Specific rules for the preparation of milk and milk products.
9. ISO 6887-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Preparation of test samples, initial suspension anddecimal dilutions for microbiological examination, Part 1: General rules for the preparation of the initial suspension anddecimal dilutions.
10. ISO 16140-2. Microbiology of the food chain – Method validation – Protocol for the validation of alternative(proprietary) methods against a reference method.
11. U.S. Food and Drug Administration. 2002. Bacteriological Analytical Manual, Ch. 4, Section lll, Method 4. Membranefilter method for coliforms.
12. American Public Health Association. 2017. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th Ed.
Method 9222B2a.
위에 열거된 표준 방법의 최신 버전을 참고하십시오.

기호 설명

info.neogen.com/symbols
AOAC는 AOAC INTERNATIONAL의 등록 상표입니다.

Official Methods는 AOAC INTERNATIONAL의 서비스 마크입니다.

Performance Tested Method는 AOAC INTERNATIONAL의 서비스마크입니다.

6

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Clean-Trace are trademarks of Neogen Corporation.
FS00931A