6536/6537/6538/6539

Product Instructions
EN Salmonella Express System
ES Sistema Salmonella ExpressJA

サルモネラ エクスプレスシステム

ZH 沙门氏菌快速系统

TH ชุุดทดสอบ Salmonella Express

SALX
Salmonella Express

RAPID

EN (English)
Issue Date: 2024-01

Product Instructions

Salmonella Express System
Product Description and Intended Use

The Neogen® Petrifilm® Salmonella Express (SALX) System is used for the rapid qualitative detection and biochemical
confirmation of Salmonella species in enriched food and food process environmental samples. The Neogen Petrifilm
SALX System consists of the Neogen® Salmonella Enrichment Base, the Neogen® Salmonella Enrichment Supplement,
the Neogen® Petrifilm® Salmonella Express (SALX) Plate, and the Neogen® Petrifilm® Salmonella Express (SALX)
Confirmation Disk, which are all packaged separately.
The Neogen Petrifilm SALX Plate is a sample ready-to-use chromogenic culture medium system that contains a coldwater-soluble gelling agent and is selective and differential for Salmonella, providing a presumptive result. The Neogen
Petrifilm SALX Confirmation Disk contains a biochemical substrate that facilitates the biochemical confirmation of
Salmonella organisms.
The Neogen Petrifilm SALX Plate is used with or without the Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disk. The Neogen
Petrifilm SALX Confirmation Disk may be used only in conjunction with the Neogen Petrifilm SALX Plate.
The Neogen Petrifilm SALX System is intended for use in a laboratory environment by professionals trained in laboratory
techniques. Neogen has not documented the use of this product in industries other than food. For example, Neogen has
not documented this product for testing water, pharmaceutical, cosmetic, clinical or veterinary samples. The Neogen
Petrifilm SALX System has not been evaluated with all possible food products, food processes and food processing
environments, testing protocols or with all possible strains of bacteria and may not detect all Salmonella strains. Neogen
has not validated the Neogen Petrifilm SALX System using composite samples.
As with all test methods, the enrichment medium formulation can influence the results. The Neogen Petrifilm SALX
Plate has only been evaluated for use with the Neogen Salmonella Enrichment Base, the Neogen Salmonella Enrichment
Supplement, and Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10) Broth (typical formulation of R-V R10 broth follows below):
Typical Formula
Magnesium chloride (anhydrous) 13.4 grams
Sodium chloride
7.2 grams
Casein peptone
4.54 grams
Monopotassium phosphate
1.45 grams
Malachite green
0.036 grams
Demineralized water
1000.0 mL
pH 5.1 ± 0.2 @ 25°C
Adjust pH as required to meet performance standards.
Neogen Petrifilm SALX Plate and Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disk components are decontaminated though
not sterilized. Neogen Food Safety is certified to International Organization for Standardization (ISO) 9001 for design
and manufacturing. Neogen Petrifilm SALX Plate and Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disk have not been evaluatedwith all possible food products, food processes, testing protocols or with all possible microorganism strains.

SafetyThe user should read, understand, and follow all safety information in the instructions for the Neogen Petrifilm SALX
System. Retain the safety instructions for future reference.
WARNING: Indicates a hazardous situation, which, if not avoided, could result in death or serious injury and/or
property damage.
NOTICE:

Indicates a potentially hazardous situation, which, if not avoided, could result in property damage.

2

EN (English)
WARNING
Do not use the Neogen Petrifilm SALX System in the diagnosis of conditions in humans or animals.
Neogen Petrifilm SALX System will not specifically differentiate some lactose positive Salmonella sp. (primarily S.
arizonae and S. diarizonae) from other lactose positive organisms. Lactose positive Salmonella strains will appear
as non-Salmonella (blue colonies, green colonies, blue to green colonies, and/or black colonies with or without ayellow zone and/or associated gas bubble). It has been stated that these strains account for less than 1% of the total
Salmonella serotypes1.
The user must train its personnel in current proper testing techniques: for example, Good Laboratory Practices2 or
ISO 170253 or ISO 72184.
To reduce the risks associated with a false negative result leading to the release of contaminated product and/or the
possibility of false positive results requiring a retest:• Upon each plate use, verify hydrated Neogen Petrifilm Salmonella Express Plate for any gel discoloration.
• Do not use Neogen Petrifilm Salmonella Express Plate that show discoloration.
• Always use the Neogen Petrifilm SALX System before the expiration date.
• Use the Neogen Petrifilm SALX System with food samples and food process environmental samples that have beenvalidated either by the user or by a third party.
• Use the Neogen Petrifilm SALX System only with surfaces, neutralizing buffers, and protocols that have beenvalidated either by the user or by a third party.
• Store the Neogen Petrifilm SALX System as indicated on the package and in the product instructions.
• Follow the procedures and perform the tests exactly as stated in the product instructions.
• Always use a permanent, ultra fine tip marker to circle the characteristic presumptive Salmonella colonies on the
top film before placing the Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disk onto the gel.
To reduce the risks associated with exposure to chemicals and biohazards:• Perform pathogen testing in a properly equipped laboratory under the control of trained personnel.
• Always follow standard good laboratory safety practices (GLP)2, including proper containment procedures, wearing
appropriate protective apparel and eye protection while handling testing materials and test samples.
• Avoid direct contact with the contents of the enrichment medium and inoculated plates.
• Dispose of enrichment media and inoculated plates according to all applicable government, regulatory regulations
and applicable laboratory procedures.
• Wear appropriate protective apparel while handling the Neogen Petrifilm SALX Plate as some of the components
may be considered allergenic and irritants to some individuals.
To reduce the risks associated with environmental contamination:• Follow current industry standards and local regulations for disposal of contaminated waste.

NOTICE
Neogen Petrifilm SALX System does not differentiate any one Salmonella strain from another.
Consult the Safety Data Sheet for additional information.
For information on documentation of product performance, visit our website at www.neogen.com or contact your
Neogen representative or authorized distributor.

User Responsibility

Users are responsible for familiarizing themselves with product instructions and information. Visit our website atwww.neogen.com, or contact your Neogen representative or authorized distributor for more information.
When selecting a test method, it is important to recognize that external factors such as sampling methods, testing
protocols, sample preparation, handling, and laboratory technique may influence results.
It is the user’s responsibility in selecting any test method or product to evaluate a sufficient number of samples with theappropriate matrices and microbial challenges to satisfy the user that the chosen test method meets the user’s criteria.
It is also the user’s responsibility to determine that any test methods and results meet its customers’ and suppliers’
requirements.
As with any test method, results obtained from use of any Neogen Food Safety product do not constitute a guarantee ofthe quality of the matrices or processes tested.

3EN (English)
Limitation of Warranties / Limited Remedy

EXCEPT AS EXPRESSLY STATED IN A LIMITED WARRANTY SECTION OF INDIVIDUAL PRODUCT PACKAGING,
NEOGEN DISCLAIMS ALL EXPRESS AND IMPLIED WARRANTIES, INCLUDING BUT NOT LIMITED TO, ANY
WARRANTIES OF MERCHANTABILITY OR FITNESS FOR A PARTICULAR USE. If any Neogen Food Safety Product is
defective, Neogen or its authorized distributor will, at its option, replace or refund the purchase price of the product.
These are your exclusive remedies. You must promptly notify Neogen within sixty days of discovery of any suspected
defects in a product and return it to Neogen. Please contact your Neogen representative or authorized Neogen
distributor for any further questions.

Limitation of Neogen Liability

NEOGEN WILL NOT BE LIABLE FOR ANY LOSS OR DAMAGES, WHETHER DIRECT, INDIRECT, SPECIAL, INCIDENTAL
OR CONSEQUENTIAL DAMAGES, INCLUDING BUT NOT LIMITED TO LOST PROFITS. In no event shall Neogen’s
liability under any legal theory exceed the purchase price of the product alleged to be defective.

Storage

Plate storage
Upon receipt, store unopened Neogen Petrifilm SALX Plate pouches at 2 to 8ºC. They are sensitive to both moisture andlight. Just prior to use, allow unopened pouches to come to room temperature (20 - 25°C / <60% RH) before opening.
Return unused Neogen Petrifilm SALX Plates to pouch. To prevent exposure to moisture, store opened Neogen
Petrifilm SALX Plate pouches in a sealed bag, protected from light, at -20 to -10°C for no longer than 4 weeks.
Confirmation Disk storage
Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disks are individually packaged within a foil pouch. They are sensitive to both
moisture and light. Store unopened pouches of Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disks at 2 to 8ºC. Remove only
those individually packaged Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disks that will be used immediately and store theremaining Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disks in the foil pouch by folding the end of the pouch over and applying
adhesive tape. To prevent exposure to moisture, do not refrigerate opened Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disk
pouches. Store resealed pouches in a cool (20-25°C) dry place (less than 60% RH) for no longer than 4 weeks or placed
resealed pouches in a re-sealable storage bag and store at -20 to -10°C for no longer than 5 months.
Do not use Neogen Petrifilm SALX Plates that show discoloration after hydration. Do not use Neogen Petrifilm SALX
Confirmation Disks that show discoloration. Expiration date and lot number are noted on each package of Neogen
Petrifilm SALX Plates and Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disks. The lot number is also noted on individual plates
and on individual confirmation disk packages.

Disposal

After use, Neogen Petrifilm SALX Plates and Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disks may contain microorganismsthat may be a potential biohazard. Follow current industry standards and local regulations for disposal of contaminatedwaste. Consult the Safety Data Sheet for additional information.

Instructions for Use

Follow all instructions carefully. Failure to do so may lead to inaccurate results.
Wear appropriate protective apparel and follow standard good laboratory safety practices (GLP)2.
Sample Enrichment
Foods
Tables 1 and 2 present guidance for test matrix samples. It is the user’s responsibility to validate alternate sampling
protocols (e.g., compositing) or dilution ratios to ensure this test method meets the user’s criteria.
For Low Microbial Load Foods:
Low microbial load foods have a total aerobic colony count of ≤ 104 colony forming units/gram. Examples include:
pasteurized, cooked, or processed foods.
1. Pre-warm Neogen Salmonella Enrichment Base with the added Neogen Salmonella Enrichment Supplement to41.5 ± 1.0°C (see Tables 1 and 2).
2. Aseptically combine the enrichment medium and sample. For all meat and highly particulate samples, the use of
stomacher filter bags is recommended. Homogenize thoroughly for 2 minutes. Incubate at 41.5 ± 1.0°C for
18-24 hours (see Tables 1 and 2).

4

EN (English)
For High Microbial Load Foods:
High microbial load foods have a total aerobic colony count of > 104 colony forming units/gram and require the use of
Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10) Broth. Examples include: raw, unprocessed foods.
1. Pre-warm Neogen Salmonella Enrichment Base with the added Neogen Salmonella Enrichment Supplement to41.5 ± 1.0°C (see Tables 1 and 2).
2. Aseptically combine the enrichment medium and sample. For all meat and highly particulate samples, the use of
stomacher filter bags is recommended. Homogenize thoroughly for 2 minutes. Incubate at 41.5 ± 1.0°C for
18-24 hours (see Tables 1 and 2).
3. After primary enrichment incubation, transfer 0.1 mL of the primary enrichment into 10.0 mL Rappaport-Vassiliadis
R10 (R-V R10) Broth. Incubate at 41.5 ± 1.0°C for 8-24 hours.
Environmental samples
For sample collection, use a biocide-free cellulose sponge hydrated with Dey-Engley (D/E) Neutralizing Broth. Followinguser established procedures, remove any remaining D/E Neutralizing Broth residue from the sampled surface.
The recommended size of the sampling area to verify the presence or absence of the pathogen on the surface is 100 cm2(10 cm x 10 cm or 4 in. x 4 in.)5. When sampling with a sponge, cover the entire area going in two directions (left to rightthen up and down).
1. Pre-warm Neogen Salmonella Enrichment Base with the added Neogen Salmonella Enrichment Supplement to41.5 ± 1.0°C (see Tables 1 and 2).
2. Aseptically combine the enrichment medium and sample. Mix thoroughly. Incubate at 41.5 ± 1.0°C for 18-24 hours.
3. If the environmental sample has a high microbial load (total aerobic colony count of > 104 colony forming
units/sample), then after primary enrichment incubation, transfer 0.1 mL of the primary enrichment into 10.0 mL
Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10) Broth. Incubate at 41.5 ± 1.0°C for 8-24 hours.
4. If the environmental sample has a low microbial load (total aerobic colony count of ≤ 104 colony forming
units/sample), then step 3 can be skipped.
AOAC® Official Method of AnalysisSM (OMA) 2014.01
AOAC® Performance TestedSM (PTM) Certificate #061301

In AOAC Research Institute OMASM and PTMSM studies, the Neogen Petrifilm SALX System was found to be an effective
method for the detection of Salmonella. The matrices tested in these studies are shown in Table 1. The limit of detectionof the Neogen Petrifilm SALX System method is 1-5 colony forming units per validated test portion size (in Table 1).

5

EN (English)
Table 1: Sample Enrichment Protocols according to AOAC OMASM 2014.01 and AOAC PTMSM Certificate #061301

Test Matrix

Raw groundbeef, raw
ground pork,
raw groundchickenPrimary Enrichment
High
Sample Enrichment
Microbial
Temperature Enrichment
Size
VolumeLoad(±1.0°C)
Time (hour)(mL)

Secondary Enrichment
Enrichment
MediumTemperature Enrichment(±1.0°C)
Time (hour)

225

R-V R10Broth:
0.1 mL into
10.0 mL

41.5

8-24

25 g

225

R-V R10Broth:
0.1 mL into
10.0 mL

41.5

8-24

Pasteurized
liquid whole
egg

100 g

900

Dry dog food

375 g

3375

Frozen,uncookedshrimpFresh,
bunchedspinach

✓

✓

✓

25 g

25 g

225

Environmental –stainlesssteel surface(100 cm2 samplesize)

1
Sponge225

Cookedchickennuggets

25 g

225

Not required for low microbial load
foods.
41.5

18-24

Not required for low microbial load
foods.
R-V R10Broth:
0.1 mL into
10.0 mL

41.5

24

Not required for low microbial loadsamples.

6EN (English)
For other matrices:
Table 2: Sample Enrichment Protocols
Primary Enrichment
Secondary Enrichment
High
Sample Enrichment
Test Matrix Microbial
Temperature Enrichment Enrichment Temperature Enrichment
Size
VolumeLoad(±1.0°C)
Time (hour)
Medium(±1.0°C)
Time (hour)(mL)
Foods:
Raw Meat,
Poultry,
Seafood andFish✓

Animal Feed

25 g

225

375 g

3375

Foods:
Produce

✓

25 g

225

Environmental*

1
Sponge225*

Follow appropriate
reference method
for sample size andenrichment volume

Other Foods

R-V R10Broth:
0.1 mL into
10.0 mL

41.5

8-24

Not required for low microbial load
foods.
41.5

18-24

R-V R10Broth:
0.1 mL into
10.0 mL

41.5

8-24

Not required for low microbial loadsamples.

* Some environmental and other food samples may have a high microbial load and require the use of R-V R10 secondary
enrichment.
Plate Hydration
1. Use prescribed sterile diluents to hydrate the Neogen Petrifilm SALX Plates:
Butterfield’s Phosphate Diluent, distilled water, or reverse osmosis water.
2. Place the Neogen Petrifilm SALX Plate on a flat, level surface (figure A).
3. Lift the top film and with the pipette perpendicular dispense 2.0 mL ± 0.1 mL of sterile diluent onto the center ofbottom film (figure B). Do not close the top film before dispensing the entire 2.0 mL volume.
4. Gently roll down the top film onto the diluent to prevent trapping air bubbles (figure C).
5. Place the Neogen® Petrifilm® Flat Spreader (Catalog #6425) on the center of the plate. Press gently on the center ofthe spreader to distribute the diluent evenly. Spread the diluent over the entire Neogen Petrifilm SALX Plate growtharea before the gel is formed. Do not slide the spreader across the film (figure D).
6. Remove the spreader and do not disturb the Neogen Petrifilm SALX Plate for at least 1 minute.
7. Place Neogen Petrifilm SALX Plate on a flat surface for at least 1 hour at room temperature (20-25°C / <60%
RH), protected from light, to allow the gel to form. Hydrated Neogen Petrifilm SALX Plates can be stored at room
temperature (20-25°C / <60% RH) protected from light, for up to 8 hours before use. If hydrated Neogen Petrifilm
SALX Plates will not be used within 8 hours, store them in a sealed plastic bag. Protect Neogen Petrifilm SALX Plates
from light and store at -20 to -10°C for up to 5 days.
8. After Neogen Petrifilm SALX Plates are removed from storage, allow them to warm to room temperature before use.
Plate Inoculation
1. Remove the enrichment medium from the incubator and agitate contents by hand.
2. Use a sterile 10 µL loop (3 mm diameter) to withdraw each sample. Use a smooth loop (one that does not havejagged edges and is not distorted) to prevent the gel surface from breaking.
3. Open the Neogen Petrifilm SALX Plate and streak onto the gel (figure E). Perform a single streak to obtain isolatedcolonies (Figure 1).

7

EN (English)
InicioFinal
Figure 1: Streaking pattern on the Neogen Petrifilm SALX Plate
4. Roll down the top film to close the Neogen Petrifilm SALX Plate.
5. Using a gloved hand (while practicing good laboratory practices to avoid cross contamination and/or direct contact
with the plate), gently apply a sweeping motion with even pressure onto the top film to remove any air bubbles in the
inoculation area (figure F).
Plate Incubation
Incubate plates at 41.5 ± 1.0°C for 24 hours ± 2 hours in a horizontal position with the colored side up in stacks of no
more than 20 plates.

ttern_FS.aiInterpretation
1. Remove the Neogen Petrifilm SALX Plates from the incubator and proceed with visually reading the results.
This artwork has been

2. Using indirect back lighting may enhanceof colonycreatedreading
as requested
by 3M. color, discrete yellow zones, and gas bubbles
3M is responsible for the
associated with a colony.
artwork AS APPROVED and3. For interpretation, visually examine theassumes
isolated
See Table 3. Do not count artifact bubbles that may befullcolonies.
responsibility
for its correctness.
present.
4. Presumptive positive Salmonella species are red to brown colonies with a yellow zone or associated gas bubble, orboth (figure G). An associated gas bubble is defined as being located within one colony diameter distance from thecolony (see Table 3 below).
Table 3: Interpretation for Presumptive Positive Salmonella species
Colony Color
Red

Dark
Red

Colony Metabolism
Brown

✓

Yellowzone

ResultGas bubble

✓

✓
✓

✓
✓

Presumptive +✓Presumptive +✓Presumptive +

✓

✓
✓

✓
✓

✓

Presumptive +✓Presumptive +✓✓✓Presumptive +✓Presumptive +✓Presumptive +✓Presumptive +Non-Salmonella species (figure H):• Blue colonies, green colonies, blue to green colonies, and/or black colonies with or without a yellow zone and/or
associated gas bubble are non-Salmonella organisms.
• Red, dark red, and brown colonies with no yellow zone and no associated gas are non-Salmonella organisms.
• Red, dark red, and brown colonies with a magenta zone are non-Salmonella organisms.

8

EN (English)
If presumptive positive Salmonella colonies are not present, then Salmonella organisms were not detected in the matrix.
Presumptive Salmonella species:
If presumptive positive Salmonella colonies are present, then perform the following steps and continue to the
Biochemical Confirmation step:a. On the Neogen Petrifilm SALX Plate top film, circle a minimum of five isolated presumptive positive
Salmonella colonies (if present) using a permanent, ultra fine tip marker (figure I).
b. Biochemically confirm all Salmonella presumptive positive results using the Neogen Petrifilm SALX Confirmation
Disk. See the Biochemical Confirmation section.
c.

If the Neogen Petrifilm SALX Plates cannot be analyzed within 1 hour of removal from the incubator, first circle thepresumptive Salmonella colonies on the top film by using a permanent, ultra fine tip marker and then place theplates in a sealed plastic bag for later analysis. Protect Neogen Petrifilm SALX Plates from light and store at -20 to-10°C for no longer than 72 hours. Allow plates to warm to room temperature (20-25°C / <60% RH) before adding
the disk to the plate.

WARNING: To reduce the risks associated with a false-negative result leading to the release of contaminatedproduct and the possibility of false positive results requiring a retest, always use a permanent, ultra fine tip marker tocircle the characteristic presumptive Salmonella colonies on the top film of the Neogen Petrifilm SALX Plate before
appropriate storage of the plate and/or before placing the Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disk onto the gel.

Biochemical Confirmation

1. Perform good laboratory practices to avoid cross contamination and/or direct contact with the Neogen Petrifilm
SALX Plate and/or Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disk.
2. Remove an individually packaged Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disk from its pouch and allow it to cometo room temperature (20-25°C / <60% RH). Then remove the Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disk from its
individual package by peeling the package to expose the Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disk’s tab, grasping
the tab, and removing the Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disk.
3. Lift the top film (with the already circled presumptive Salmonella colonies) of the Neogen Petrifilm SALX Plate andinsert the Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disk by rolling it onto the gel to avoid entrapping air bubbles (figure
J). Close the Neogen Petrifilm SALX Plate.
4. Using a gloved hand, gently apply a sweeping motion with even pressure onto the top film to remove any air bubbles
in the inoculation area and assure good contact between the gel and the Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disk
(figure K).
5. Incubate the Neogen Petrifilm SALX System (plate and disk) at 41.5 ± 1.0°C for 4 - 5 hours in a horizontal position,right side up, no higher than 20 plates.
6. Remove the Neogen Petrifilm SALX System from the incubator and proceed with reading the results.
Only read the circled presumptive Salmonella colonies (See Table 4):
Table 4: Interpretation of Neogen Petrifilm SALX System:
Colony Color
Green to Blue

Blue to Dark BlueBlack

Biochemical
Confirmation Result
BiochemicallyConfirmed +✓BiochemicallyConfirmed +✓✓BiochemicallyConfirmed +Biochemically confirmed positive results:• Colonies that are green to blue, blue to dark blue, or black or have a blue precipitate around them are biochemicallyconfirmed positive for Salmonella species.
Biochemically confirmed negative results:• Colonies that remain the same red, dark red or brown color without a blue precipitate are negative for Salmonella
species.

9EN (English)
7. Colonies may be subcultured for further identification. When subculturing, wear appropriate protective apparel andfollow standard good laboratory safety practices (GLP)2.
a.

Lift the top film and aseptically remove the colony either from the gel or the Neogen Petrifilm SALX
Confirmation Disk. If a Neogen Petrifilm SALX Confirmation Disk is covering the gel, aseptically peel the disk
away and then aseptically remove the colony from the gel.

b. Streak the colony per appropriate reference method6, 7, 8.
8. If the colonies cannot be subcultured within 1 hour of plate removal from the incubator, then store the Neogen
Petrifilm SALX Plates for later analysis by placing in a sealed plastic bag at -20 to -10°C for no longer than 72 hours in
the dark. Allow Neogen Petrifilm SALX Plates to warm to room temperature (20-25°C / <60% RH) before continuing
subculturing for identification.
9. After the test is complete, dispose of the Neogen Petrifilm SALX Plates and Neogen Petrifilm SALX Confirmation
Disks in accordance with current industry standards and/or local regulations.
For further information refer to the Neogen® Petrifilm® Salmonella Express System “Interpretation Guide.” If you havequestions about specific applications or procedures, please visit our website at www.neogen.com or contact your local
Neogen representative or distributor.

References

1. McDonough P.L, et al. (2000). Diagnostic and Public Health Dilemma of Lactose-Fermenting Salmonella enterica
Serotype Typhimurium in Cattle in the Northeastern United States. J. Clin. Microbiol. 38:1221-1226.
2. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
3. ISO/IEC 17025:2017. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
4. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
5. ISO 18593:2004. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal methods for sampling techniquesfrom surfaces using contact plates and swabs.
6. US Food and Drug Administration Bacteriological Analytical Manual. Chapter 5 Salmonella.
7. US Department of Agriculture (USDA) Microbiology Laboratory Guidebook 4.09. Isolation and Identification of
Salmonella from Meat, Poultry, Pasteurized Egg, and Siluriformes (Fish) Products and Carcass and Environmental
Sponges.
8. ISO 6579-1:2017. Microbiology of the food chain – Horizontal method for the detection, enumeration andserotyping of Salmonella – Part 1: Detection of Salmonella spp.
Refer to the current versions of the standard methods listed above.

Explanation of Symbols
info.neogen.com/symbols

AOAC™ is a registered trademark of AOAC International.
Official Methods (OMA)SM is a service mark of AOAC International.
Performance Tested MethodsSM is a service mark of AOAC International.

10EN (English)

Figure A.

Figure B.

Figure C.

Figure D.

Figure E.

Figure F.

Figure G.

Figure H.

Figure I.

Figure J.

Figure K.
11

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Petrifilm are registered trademarks of Neogen Corporation.
FS00828A

ES (Español)
Fecha de emisión: 2024-01

Instrucciones del Producto

Sistema Salmonella Express
Descripción del producto y uso previsto

El Sistema Neogen® Petrifilm® Salmonella Express (SALX) se utiliza para la detección cualitativa rápida y la confirmación
bioquímica de especies de Salmonella en muestras ambientales de alimentos enriquecidos y del proceso dealimentación. El Sistema Neogen Petrifilm SALX consiste en la Base enriquecida de Neogen® Salmonella, el Suplemento
enriquecido de Neogen® Salmonella, la Placa Neogen® Petrifilm® Salmonella Express (SALX) y el Disco de Confirmación
Neogen® Petrifilm® Salmonella Express (SALX), que están todos envasados por separado.
La Placa Neogen Petrifilm SALX es un sistema de medio de cultivo cromogénico de muestra lista para usar que contiene
un agente gelificante soluble en agua fría y es selectivo y diferencial para la Salmonella, lo que proporciona un resultado
presunto. El Disco de Confirmación Neogen Petrifilm SALX contiene un sustrato bioquímico que facilita la confirmación
biológica de organismos de Salmonella.
La Placa Neogen Petrifilm SALX se utiliza con o sin el Disco de Confirmación Neogen Petrifilm SALX. El Disco deConfirmación Neogen Petrifilm SALX se puede utilizar solo en conjunto con la Placa Neogen Petrifilm SALX.
El Sistema Neogen Petrifilm SALX está previsto para el uso en laboratorios por profesionales capacitados en el empleode técnicas de laboratorio. Neogen no documentó el uso de este producto en otras industrias que no sean la alimentaria.
Por ejemplo, Neogen no documentó este producto para el análisis de muestras de agua, farmacéuticas, cosméticas,
clínicas o veterinarias. El Sistema Neogen Petrifilm SALX no ha sido evaluado con todos los posibles productos
alimenticios, procesos alimenticios y entornos de procesamiento de alimentos, protocolos de prueba ni con todas las
cepas de bacterias posibles, y puede que no detecte todas las cepas de Salmonella. Neogen no ha validado el Sistema
Neogen Petrifilm SALX utilizando muestras compuestas.
Como con todos los métodos de prueba, la formulación del medio de enriquecimiento puede influir en los resultados. La
Placa Neogen Petrifilm SALX solo ha sido evaluada para utilizar con la Base de enriquecimiento Neogen Salmonella, elSuplemento de enriquecimiento Neogen Salmonella y con el caldo Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10) (la formulación
típica del caldo R-V R10 que aparece a continuación):
Fórmula típica
Cloruro magnésico (anhidro)
Cloruro de sodio
Peptona caseína
Fosfato monopotasio
Verde de malaquita
Agua desmineralizada
pH 5,1 ± 0,2 @ 25 °C

13,4 gramos
7,2 gramos
4,54 gramos
1,45 gramos
0,036 gramos
1000,0 mL

Ajuste el PH según sea necesario para reunir los estándares de rendimiento.
Los componentes de la Placa Neogen Petrifilm SALX y el Disco de Confirmación Neogen Petrifilm SALX están
descontaminados, aunque no esterilizados. Neogen Food Safety cuenta con certificación de la Organización
Internacional para la Estandarización (ISO) 9001 de diseño y fabricación. La Placa Neogen Petrifilm SALX y el Discode Confirmación Neogen Petrifilm SALX no han sido evaluados con todos los productos alimenticios, procesos
alimenticios, protocolos de prueba posibles, ni con todas las posibles cepas de microorganismos.

Seguridad

El usuario debe leer, comprender y respetar toda la información de seguridad que se incluye en las instrucciones delSistema Neogen Petrifilm SALX. Guarde las instrucciones de seguridad para consultas futuras.
ADVERTENCIA:
ATENCIÓN:Indica una situación peligrosa que, si no se evita, podría ocasionar la muerte o lesiones graves,y/o daños materiales.
Indica una situación potencialmente peligrosa que, si no se evita, podría ocasionar
daños materiales.

1ES (Español)
ADVERTENCIA
No utilice el Sistema Neogen Petrifilm SALX para diagnosticar enfermedades de humanos o animales.
El Sistema Neogen Petrifilm SALX no diferenciará de manera específica algunos casos de Salmonella sp. lactosa
positiva (principalmente S. arizonae y S. diarizonae) de otros organismos de lactosa positiva. Las cepas deSalmonella lactosa positiva aparecerán como no-Salmonella (colonias azules, colonias verdes, colonias azules averdes o colonias negras con o sin zonas amarillas o burbujas de gas asociadas). Se ha establecido que estas cepas
significan menos del 1 % del total de los estereotipos de Salmonella1.
El usuario debe capacitar a su personal en las técnicas de evaluación adecuadas, por ejemplo, las Buenas Prácticas
de Laboratorio2 o ISO 170253 o ISO 72184.
Para reducir los riesgos asociados con un resultado falso negativo que provoque la liberación de productos
contaminados o la posibilidad de resultados falsos positivos que necesiten una nueva prueba:• Luego del uso de cada placa, controle que la Placa Neogen Petrifilm Salmonella Express hidratada en busca dealguna decoloración del gel.
• No utilice la Placa Neogen Petrifilm Salmonella Express con alguna decoloración.
• Utilice siempre el Sistema Neogen Petrifilm SALX antes de la fecha de vencimiento.
• Utilice el Sistema Neogen Petrifilm SALX con muestras de alimentos y muestras ambientales del proceso alimenticio
que hayan sido validadas por el usuario o por un tercero.
• Utilice el Sistema Neogen Petrifilm SALX solo con superficies, soluciones amortiguadoras neutralizantes y
protocolos que hayan sido validados por el usuario o por un tercero.
• Almacene el Sistema Neogen Petrifilm SALX como se indica en el embalaje y en las instrucciones del producto.
• Siga los procedimientos y realice las pruebas exactamente como se indica en las instrucciones del producto.
• Utilice siempre un marcador permanente de punta ultrafina para encerrar las colonias de Salmonella presuntas
características en la superficie de la película colocando antes el Disco de Confirmación Neogen Petrifilm SALX
sobre el gel.
Para reducir los riesgos asociados con la exposición a productos químicos y riesgos biológicos:• Realice las pruebas de patógenos en un laboratorio debidamente equipado, bajo la supervisión depersonal capacitado.
• Siempre proceda de acuerdo con las prácticas estándar de seguridad del laboratorio (GLP)2, lo que incluye usar
procedimientos de contención correctos, ropa de protección adecuada y protección para los ojos al manipular losmateriales de prueba y las muestras de la prueba.
• Evite el contacto directo con los contenidos del medio enriquecido y las placas inoculadas.
• Deseche el medio enriquecido y las placas inoculadas según todas las normativas regulatorias y gubernamentales,y usando los procedimientos de laboratorio correspondientes.
• Utilice ropa de protección adecuada al manipular la Placa Neogen Petrifilm SALX, ya que algunos de loscomponentes pueden ser alergénicos e irritantes para algunas personas.
Para reducir los riesgos relacionados con la contaminación ambiental:• Proceda de acuerdo con las normas de la industria y la normativa local actuales para el desecho deresiduos contaminados.

ATENCIÓN
El Sistema Neogen Petrifilm SALX no diferencia ninguna cepa de Salmonella de otra.
Consulte la Hoja de Datos de Seguridad para obtener más información.
Para obtener más información sobre la documentación del desempeño del producto, visite nuestro sitio web en
www.neogen.com o póngase en contacto con su representante o distribuidor autorizado de Neogen.

Responsabilidad del usuario

Los usuarios son responsables de familiarizarse con las instrucciones y la información del producto. Visite nuestro
sitio web en www.neogen.com o póngase en contacto con su representante o distribuidor autorizado de Neogen paraobtener más información.
Al seleccionar un método de prueba, es importante reconocer que factores externos tales como los métodos demuestreo, los protocolos de prueba, la preparación de la muestra, la manipulación y la técnica de laboratorio pueden
afectar los resultados.

2ES (Español)
Al seleccionar cualquier método de prueba o producto, es responsabilidad del usuario evaluar un número suficiente demuestras con retos microbianos y matrices apropiadas para satisfacer al usuario en cuanto a que el método de prueba
cumple con los criterios necesarios.
Además, es responsabilidad del usuario determinar que cualquier método de prueba y sus resultados cumplen con losrequisitos de sus clientes y proveedores.
Como sucede con cualquier método de prueba, los resultados obtenidos del uso de cualquier producto de
Neogen Food Safety no constituyen una garantía de calidad de las matrices ni de los procesos analizados.

Limitación de garantía/Recurso limitado

SALVO LO EXPRESAMENTE ESTIPULADO EN UNA SECCIÓN DE GARANTÍA LIMITADA O EN EL EMBALAJE DE
UN PRODUCTO ESPECÍFICO, NEOGEN RENUNCIA A TODAS LAS GARANTÍAS EXPRESAS Y TÁCITAS INCLUIDA,ENTRE OTRAS, CUALQUIER GARANTÍA DE COMERCIABILIDAD O IDONEIDAD PARA UN USO EN PARTICULAR.
Si un producto de Neogen Food Safety es defectuoso, Neogen o su distribuidor autorizado reemplazará el productoo reembolsará el precio de compra del producto, a su elección. Estos son sus recursos exclusivos. Deberá notificar
inmediatamente a Neogen en un lapso de sesenta días a partir del descubrimiento de cualquier sospecha de defecto en
un producto y devolver dicho producto a Neogen. Póngase en contacto con su representante de Neogen o distribuidor
autorizado de Neogen si tuviera cualquier otra pregunta.

Limitación de responsabilidad de Neogen

NEOGEN NO SERÁ RESPONSABLE DE NINGUNA PÉRDIDA O DAÑO, YA SEA DIRECTO, INDIRECTO, ESPECIAL,DAÑOS ACCIDENTALES O CONSECUENCIAS, INCLUIDOS ENTRE OTROS, LA PÉRDIDA DE BENEFICIOS. En
ningún caso la responsabilidad de Neogen conforme a ninguna teoría legal excederá el precio de compra del producto
supuestamente defectuoso.

Almacenamiento

Almacenamiento de la placa
Luego de la recepción, almacene las bolsas de Placa Neogen Petrifilm SALX cerradas en un ambiente de 2 a 8 ºC. Son
sensibles a la humedad y la luz. Antes de usarlas, deje que las bolsas cerradas alcancen la temperatura ambiente antes
de abrirlas (20 °C-25 °C / <60 % de humedad relativa). Vuelva a colocar las Placas Neogen Petrifilm SALX que no hayausado en la bolsa. Para evitar la exposición a la humedad, almacene las bolsas de Placa Neogen Petrifilm SALX abiertas
en una bolsa sellada, protegida contra la luz, en un ambiente de -20 °C a -10 °C durante no más de 4 semanas.
Almacenamiento del Disco de confirmación
Los Discos de Confirmación Neogen Petrifilm SALX están embalados por separado dentro de una bolsa de aluminio.
Son sensibles a la humedad y la luz. Almacene las bolsas cerradas de los Discos de Confirmación Neogen Petrifilm SALX
en un ambiente de 2 ºC a 8 ºC. Saque solo los Discos de Confirmación Neogen Petrifilm SALX embalados por separado
que se utilizarán inmediatamente y almacene los Discos de Confirmación Neogen Petrifilm SALX restantes en la bolsa
de aluminio doblando el extremo de la bosa y colocando cinta adhesiva. Para evitar la exposición a la humedad, no
refrigere las bolsas abiertas del Disco de Confirmación Neogen Petrifilm SALX. Almacene las bolsas reselladas en un
lugar frío (20 °C-25 °C) y seco (menos del 60 % de humedad relativa) durante no más de 4 semanas o coloque las bolsas
reselladas en una bolsa de almacenamiento resellable y almacene en un ambiente de -20 °C a -10 °C durante no más de5 meses.
No use las Placas Neogen Petrifilm SALX que presenten decoloración después de la hidratación. No use los Discos deConfirmación Neogen Petrifilm SALX que presenten decoloración. La fecha de vencimiento y el número de lote figuranen cada paquete de Placas Neogen Petrifilm SALX y Discos de Confirmación Neogen Petrifilm SALX. El número de lotetambién se anota en las placas individuales y en los paquetes de discos de confirmación individuales.

DesechoDespués del uso, las Placas Neogen Petrifilm SALX y los Discos de Confirmación Neogen Petrifilm SALX que pueden
representar un posible riesgo biológico. Proceda de acuerdo con las normas de la industria y la normativa local actuales
para el desecho de residuos contaminados. Consulte la Hoja de Datos de Seguridad para obtener más información.

Instrucciones de uso

Siga todas las instrucciones atentamente. De lo contrario, los resultados obtenidos podrían llegar a ser incorrectos.
Use la ropa de protección adecuada y respete las buenas prácticas de seguridad de laboratorio (GLP) estándares2.

3

ES (Español)
Enriquecimiento de la muestra
Alimentos
Las tablas 1 y 2 ofrecen orientación para las muestras matrices de prueba. Es responsabilidad del usuario validar
protocolos de muestreo (p. ej., composición) o proporciones de dilución alternativos para garantizar que este método deprueba satisface los criterios del usuario.
Para los alimentos de baja carga microbiana:
Los alimentos de baja carga microbiana tienen un recuento total de colonias de bacterias aerobias de f ≤ 104 que forma
unidades/gramos. Los ejemplos incluyen alimentos pasteurizados, cocidos o procesados.
1. Base enriquecida Neogen Salmonella precalentada con Suplemento enriquecido Neogen Salmonella de 41,5 ± 1,0 °C(Consulte las Tablas 1 y 2).
2. Combine el medio de enriquecimiento y la muestra de forma aséptica. Para todas las muestras con alto contenidode partículas y carne, se recomienda utilizar bolsas con filtro Stomacher. Homogenice bien durante 2 minutos.
Encube a 41,5 °C ± 1,0 °C durante 18-24 horas (consulte las Tablas 1 y 2).
Para los alimentos de alta carga microbiana:
Los alimentos de alta carga microbiana tienen un recuento total de colonias de bacterias aerobias de > 104 colonias
que forman unidades/gramos y requiere el uso de caldo Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10). Los ejemplos incluyen
alimentos crudos, no procesados.
1. Base enriquecida Neogen Salmonella precalentada con Suplemento enriquecido Neogen Salmonella de 41,5 ± 1,0 °C(Consulte las Tablas 1 y 2).
2. Combine el medio de enriquecimiento y la muestra de forma aséptica. Para todas las muestras con alto contenidode partículas y carne, se recomienda utilizar bolsas con filtro Stomacher. Homogenice bien durante 2 minutos.
Encube a 41,5 °C ± 1,0 °C durante 18-24 horas (consulte las Tablas 1 y 2).
3. Después de la primera incubación enriquecida, transfiera 0,1 mL del enriquecimiento principal a 10,0 mL de caldo
Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10). Incube a una temperatura de 41,5 °C ± 1,0 °C durante 8-24 horas.
Muestras ambientales
Para la recolección de muestras, utilice una esponja de celulosa libre de biocidas hidratada con el caldo neutralizante
Dey-Engley (D/E). Siguiendo los procedimientos establecidos para el usuario, quite cualquier residuo de caldo
neutralizante D/E restante de la superficie muestreada.
El tamaño recomendado del área de muestra para verificar la presencia o ausencia del patógeno en la superficie es de100 cm2 (10 cm x 10 cm o 4 in. x 4 in.)5. Cuando se extraiga la muestra con una esponja, cubra toda el área moviéndose
en dos direcciones (de izquierda a derecha y luego de arriba a abajo).
1. Base enriquecida Neogen Salmonella precalentada con Suplemento enriquecido Neogen Salmonella de 41,5 ± 1,0 °C(Consulte las Tablas 1 y 2).
2. Combine el medio de enriquecimiento y la muestra de forma aséptica. Mezcle bien. Incube a una temperatura de41,5 °C ± 1,0 °C durante 18-24 horas.
3. Si la muestra ambiental contiene una carga microbiana alta (conteo total de colonias de bacterias aerobias de> 104 colonias que forman unidades/muestra), después de la primera incubación enriquecida, transfiera 0,1 mL delenriquecimiento principal a 10,0 mL de caldo Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10). Incube a una temperatura de41,5 °C ± 1,0 °C durante 8-24 horas.
4. Si la muestra ambiental contiene una carga microbiana baja (conteo total de colonias de bacterias aerobias de≤ 104 colonias que forman unidades/muestras), se puede saltear el paso 3.

4

ES (Español)
AOAC® Official Method of AnalysisSM (OMA) 2014.01
AOAC® Performance TestedSM (PTM) Certificado 061301

En los estudios de AOAC Research Institute OMASM y PTMSM, se descubrió que el Sistema Neogen Petrifilm SALX era un
método efectivo para la detección de Salmonella. Las matrices evaluadas en estos estudios se muestran en la Tabla 1. El
límite de detección del método del Sistema Neogen Petrifilm SALX es de 1-5 colonias que forman unidades por tamaño
de parte de prueba validada (en la Tabla 1).
Tabla 1: Protocolos de Enriquecimiento de la muestra según AOAC OMASM 2014.01 y AOAC PTMSM Certificado 061301
Alta
cara
micro‑
biana

Enriquecimiento primario
Tamañode lamuestraMedio deenriqueci‑
mientoTempe‑
ratura(± 1,0 °C)

Tiempo deenriqueci‑
miento(horas)225

Caldo
R-V R10:0,1 mL en
10,0 mL

41,5

8-24

25 g

225

Caldo
R-V R10:0,1 mL en
10,0 mL

41,5

8-24

Huevo entero
líquidopasteurizado

100 g

900

No se requiere para los alimentos debaja carca microbiana.

Comida secapara perros

375 g

3375

Matrizde prueba

Carne de res
molida cruda,carne decerdo molida
cruda, carnede pollo
molida cruda
Camarones
congelados,
sin cocinar

Racimo deespinaca
fresca

✓

✓

✓

25 g

Volumen de
enriqueci‑
miento (mL)

25 g

225

Ambiental:
superficie
de aceroinoxidable(tamaño dela muestra
100 cm2)

1 esponja

225

Pollo
empanizado
cocido25 gTemperatura(± 1,0 °C)

41,5Tiempo deenriqueci‑
miento(horas)

Enriquecimiento secundario

18-24

No se requiere para los alimentos debaja carca microbiana.
Caldo
R-V R10:0,1 mL en
10,0 mL41,524

No se requiere para las muestras debaja carga microbiana.

225

5

ES (Español)
Para otras matrices:
Tabla 2: Protocolos Enriquecimiento de la muestra

Matrizde prueba

Alimentos:
Carnecruda,
carne
de ave,mariscosy pescado

Alta
cara
micro‑
biana✓

Alimento
para
animalesEnriquecimiento primario
Tamañode lamuestraTiempo deVolumen deMedio deTemperatura enriqueci‑
Temperatura
enriqueci‑
enriqueci‑(± 1,0 °C)
miento(± 1,0 °C)
miento (mL)miento(horas)Tiempo deenriqueci‑
miento(horas)

25 g

225

Caldo
R-V R10:0,1 mL en
10,0 mL

375 g

3375

No se requiere para los alimentos de baja
carca microbiana.
41,5

Alimentos:
Producto

✓

25 g

225

Ambiental*

1 esponja

225*

Siga el método dereferencia adecuado
para el tamaño de lamuestra y el volumen
de enriquecimiento

Otros
alimentos

Enriquecimiento secundario

18-24

Caldo
R-V R10:0,1 mL en
10,0 mL

41,5

41,5

8-24

8-24

No se requiere para las muestras de baja
carga microbiana.

* Algunas muestras ambientales y de otros alimentos pueden tener una carga microbiana alta y requieren del uso deenriquecimiento secundario R-V R10.
Hidratación de placas
1. Use los diluyentes estériles prescritos para hidratar las Placas Neogen Petrifilm SALX:
Diluyente fosfato de Butterfield, agua destillada o agua por ósmosis inversa.
2. Coloque la Placa Neogen Petrifilm SALX sobre una superficie nivelada y plana (figura A).
3. Levante la película superior y, con la pipeta en posición perpendicular, distribuya 2,0 mL ± 0,1 mL de diluyente
estéril en el centro de la película inferior (figura B). No cierre la película superior antes de dispensar el volumen total
de 2,0 mL.
4. Desenrolle suavemente la película superior sobre el diluyente para evitar que se formen burbujas de aire (figura C).
5. Coloque el Neogen® Petrifilm® Difusor Plano (N.º de catálogo 6425) en el centro de la Placa. Presione ligeramente
el centro del difusor para distribuir el diluyente de manera uniforme. Esparza el diluyente por toda el área decrecimiento de la Placa Neogen Petrifilm SALX antes de que se forme el gel. No deslice el difusor a través de lapelícula (figura D).
6. Quite el difusor y no interrumpa la Placa Neogen Petrifilm SALX durante, al menos, 1 minuto.
7. Coloque la Placa Neogen Petrifilm SALX en una superficie plana durante, al menos, 1 hora a temperatura ambiente(20 °C-25 °C / <60 % de humedad relativa), protegida contra la luz, para dejar que se forme el gel. Las Placas
Neogen Petrifilm SALX hidratadas se pueden almacenar a temperatura ambiente (20 °C-25 °C / <60 % dehumedad relativa) protegidas contra la luz durante hasta 8 horas antes del uso. Si las Placas Neogen Petrifilm SALX
hidratadas no se usarán dentro de las 8 horas, almacénelas en una bolsa plástica sellada. Proteja las Placas
Neogen Petrifilm SALX contra la luz y almacénelas en un ambiente de -20 °C a -10 °C durante hasta 5 días.
8. Después de que se quiten las Placas Neogen Petrifilm SALX del almacenamiento, deje que alcancen la temperatura
ambiente antes del uso.

6

ES (Español)
Inoculación de placas
1. Quite el medio de enriquecimiento de la incubadora y agite los contenidos a mano.
2. Use un asa esterilizada de 10 µL (3 mm de diámetro) para retirar cada muestra. Use un asa lisa (una que no tenga
bordes irregulares o torcidos) para evitar que se quiebre la superficie del gel.
3. Abra la Placa Neogen Petrifilm SALX y páselo por el gel (figura E). Realice una pasada única para obtener colonias
aisladas (figura 1).

InicioFinal
Figura 1: Patrón de rayado en la Placa Neogen Petrifilm SALX
4. Desenrolle la película superior para cerrar la Placa Neogen Petrifilm SALX.
5. Usando la mano con guante (mientras ejercita buenas prácticas de laboratorio para evitar la contaminación cruzada
o el contacto directo con la placa), aplique suavemente un movimiento amplio con presión uniforme sobre lapelícula superior para eliminar cualquier burbuja de aire de la zona de inoculación (figura F).
Incubación de placas
Incube las Placas a 41,5 ± 1,0 °C durante 24 horas ± 2 horas en posición horizontal, con la parte coloreada hacia arriba,
en pilas de hasta 20 placas.

ttern_FS.aiInterpretación
1. Saque las Placas Neogen Petrifilm SALX de la incubadora y proceda con la lectura visual de los resultados.
This artwork has been

2. Usar luz interior indirecta puede mejorar
la lecturadelbycolor
createdas requested
3M. de la colonia, las zonas amarillas discretas y las
is responsible for the
burbujas de gas relacionadas con una3M
colonia.
artwork AS APPROVED and3. Para la interpretación, examine visualmente
aisladas. Consulte la Tabla 3. No cuente las burbujas delassumeslas
fullcolonias
responsibility
artefacto que puedan estar presentes.for its correctness.
4. Las especies de Salmonella presuntamente positivas son colonias de rojo a marrón con una zona amarilla oburbujas de gas asociadas, o con ambas características (figura G). Una burbuja de gas asociada se define así por
estar ubicada dentro de la distancia del diámetro de una colonia desde la colonia (consulte la Tabla 3 que aparece
a continuación).

7ES (Español)
Tabla 3: Interpretación de especies de Salmonella presuntamente positivas
Metabolismo dela colonia

Color de la colonia
Rojo

Rojo
oscuroMarrón✓Zonaamarilla

Resultado

Burbujade gas

✓

✓
✓

✓
✓

Presuntamente +✓Presuntamente +✓Presuntamente +

✓

✓
✓

✓
✓

✓

Presuntamente +✓Presuntamente +✓✓✓Presuntamente +✓Presuntamente +✓Presuntamente +✓Presuntamente +Especies de no-Salmonella (figura H):• Las colonias azules, verdes, azules a verdes o negras con o sin una zona amarilla o con burbujas de gas asociadas seconsideran organismos de no-Salmonella.
• Las colonias rojas, rojo oscuro y marrones sin zona amarilla y sin gas asociado se consideran organismos
de no-Salmonella.
• Las colonias rojas, rojo oscuro y marrones con una zona magenta se consideran organismos de no-Salmonella.
Si no hay presentes colonias de Salmonella presuntamente positiva, los organismos de Salmonella no se detectaron enla matriz.
Especies de Salmonella presunta:
Si hay presentes colonias de Salmonella presuntamente positiva, realice los siguientes pasos y continúe hasta el paso deConfirmación bioquímica:a. En la película superior de la Placa Neogen Petrifilm SALX, encierre un mínimo de cinco colonias de Salmonellapresuntamente positiva (si están presentes) usando un marcador permanente de punta ultrafina (figura I).
b. Confirme bioquímicamente todos los resultados de Salmonella presuntamente positiva usando el Disco deConfirmación Neogen Petrifilm SALX. Consulte la sección de Confirmación bioquímica.
c.

Si las Placas Neogen Petrifilm SALX no se pueden analizar dentro de 1 hora de la extracción de la incubadora,
encierre primero las colonias de almonella presuntas sobre la película superior usando un marcador
permanente de punta ultrafina y luego coloque las placas en una bolsa plástica sellada para un análisis
posterior. Proteja las Placas Neogen Petrifilm SALX contra la luz y almacénelas en un ambiente de -20 °C a
-10 °C durante no más de 72 horas. Deje que las placas alcancen la temperatura ambiente (20 °C-25 °C / <60 %de humedad relativa).

ADVERTENCIA: Para reducir los riesgos asociados con un resultado falso negativo que provoque la liberaciónde productos contaminados y la posibilidad de resultados falsos positivos que requieran una nueva prueba, siempre
use un marcador permanente de punta ultrafina para encerrar las colonias de Salmonella presunta características enla película superior de la Placa Neogen Petrifilm SALX antes del almacenamiento adecuado de la placa o antes decolocar el Disco de Confirmación Neogen Petrifilm SALX sobre el gel.

Confirmación bioquímica

1. Ejercite buenas prácticas de laboratorio para evitar la contaminación cruzada o el contacto directo con la
Placa Neogen Petrifilm SALX o el Disco de Confirmación Neogen Petrifilm SALX.
2. Saque de la bolsa un Disco de Confirmación Neogen Petrifilm SALX embalado por separado y deje que alcance latemperatura ambiente (20 °C-25 °C / <60 % de humedad relativa). Para sacar el Disco de Confirmación
Neogen Petrifilm SALX de su envoltorio individual, desprenda el envoltorio para exponer la solapa del Disco deConfirmación Neogen Petrifilm SALX, sujete la solapa y quite el Disco de Confirmación Neogen Petrifilm SALX.

8

ES (Español)
3. Levante la película superior (con las colonias de Salmonella presunta ya encerradas) de la Placa Neogen Petrifilm
SALX e inserte el Disco de Confirmación Neogen Petrifilm SALX estirándolo sobre el gel para evitar atrapar burbujas
de aire (figura J). Cierre la Placa Neogen Petrifilm SALX.
4. Usando la mano con guante, aplique suavemente un movimiento amplio con presión uniforme sobre la película
superior para eliminar cualquier burbuja de aire del área de inoculación y asegure un buen contacto entre el gel y el
Disco de Confirmación Neogen Petrifilm SALX (figura K).
5. Incube el Sistema Neogen Petrifilm SALX a 41,5 °C ± 1.0 °C durante 4 a 5 horas en posición horizontal, hacia arriba,
en pilas de no más de 20 placas.
6. Quite el Sistema Neogen Petrifilm SALX de la incubadora y proceda con la lectura de los resultados.
Solo lea las colonias de Salmonella presuntas que se encerraron (consulte la Tabla 4):
Tabla 4: Interpretación del Sistema Neogen Petrifilm SALX:
Color de la colonia
Verde a azul

Azul a azul oscuro

Negro

Resultado deconfirmación
bioquímica
Confirmado
bioquímicamente +✓Confirmado
bioquímicamente +✓✓Confirmado
bioquímicamente +Resultados positivos confirmados bioquímicamente:• Las colonias de color verde a azul, azul a azul oscuro o negras, o que tienen un azul precipitado a su alrededor son
confirmadas bioquímicamente confirmadas como positivas para las especies de Salmonella.
Resultados negativos confirmados bioquímicamente:• Las colonias que mantienen el mismo color rojo, rojo oscuro o marrón sin un azul precipitado son negativas para las
especies de Salmonella.
7. Puede que las colonias se deban subcultivar para una mayor identificación. Cuando realice subcultivos, use la ropa
de protección adecuada y respete las buenas prácticas de seguridad de laboratorio (GLP) estándares2.
a.

Levante la película superior y quite de manera aséptica la colonia del gel o del Disco de Confirmación
Neogen Petrifilm SALX. Si un Disco de Confirmación Neogen Petrifilm SALX está cubriendo el gel, desprenda eldisco de manera aséptica y quite la colonia del gel de manera también aséptica.

b. Raye la colonia según el método de referencia adecuado6, 7, 8.
8. Si las colonias no se pueden subcultivar dentro de 1 hora de haber quitado la placa de la incubadora, almacene lasPlacas Neogen Petrifilm SALX para un análisis posterior colocándolas en una bolsa plástica sellada en un ambientede -20 °C a -10 °C durante no más de 72 horas en la oscuridad. Deje que las Placas Neogen Petrifilm SALX
alcancen la temperatura ambiente (20 °C-25 °C / <60 % de humedad relativa) antes de seguir con el subcultivo parala identificación.
9. Después de que se haya completado la prueba, deseche las Placas Neogen Petrifilm SALX y los Discos deConfirmación Neogen Petrifilm SALX de acuerdo con los estándares de la industria o la normativa local.
Para obtener mayor información, consulte la "Guía de interpretación" del Sistema Neogen® Petrifilm® Salmonella
Express. Si tiene preguntas acerca de los procedimientos o las aplicaciones específicas, visite nuestro sitio web en
www.neogen.com o comuníquese con su representante o distribuidor local de Neogen.

9ES (Español)
Referencias

1. McDonough P.L, et al. (2000). Diagnostic and Public Health Dilemma of Lactose-Fermenting Salmonella enterica
Serotype Typhimurium in Cattle in the Northeastern United States. J. Clin. Microbiol. 38:1221-1226.
2. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practicefor Nonclinical Laboratory Studies.
3. ISO/IEC 17025:2017. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
4. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance formicrobiological examinations.
5. ISO 18593:2004. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal methods for sampling techniquesfrom surfaces using contact plates and swabs.
6. US Food and Drug Administration Bacteriological Analytical Manual. Chapter 5 Salmonella.
7. US Department of Agriculture (USDA) Microbiology Laboratory Guidebook 4.09. Isolation and Identificationof Salmonella from Meat, Poultry, Pasteurized Egg, and Siluriformes (Fish) Products and Carcass andEnvironmental Sponges.
8. ISO 6579-1:2017. Microbiology of the food chain – Horizontal method for the detection, enumeration andserotyping of Salmonella – Part 1: Detection of Salmonella spp.
Consulte las versiones actuales de los métodos estándar enumerados anteriormente.

Explicación de los símbolos
info.neogen.com/symbols

AOAC™ es una marca registrada de AOAC International.
Official Methods (OMA)SM es una marca de servicio de AOAC International.
Performance Tested MethodsSM es una marca de servicio de AOAC International.

10ES (Español)

Figura A.

Figura B.

Figura C.

Figura D.

Figura E.

Figura F.

Figura G.

Figura H.

Figura I.

Figura J.

Figura K.
11

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Petrifilm are registered trademarks of Neogen Corporation.
FS00828A

JA （日本語）

発行日：2024-01

製品情報

サルモネラエクスプレスシステム
製品の概要および用途

Neogen® ペトリフィルム® サルモネラエクスプレスシステム (SALX) は、食品増菌検体および食品加工環境検体におけるサルモ
ネラ属菌の、迅速な定性的検出および生化学的確認に使用されます。Neogen ペトリフィルムSALXシステムは、Neogen® サルモ
ネラエンリッチメントベース、Neogen® サルモネラエンリッチメントサプリメント、Neogen® ペトリフィルム® サルモネラエクスプレ
スプレート (SALX)、およびNeogen® ペトリフィルム® サルモネラエクスプレス確認ディスク (SALX) で構成されて、すべて個別に包装されています。
NeogenペトリフィルムSALXプレートは、冷水可溶性ゲル化剤を含有する発色性のできあがり培地システムで、サルモネラを選択、識別し、推定結果を提供します。
Neogen ペトリフィルムSALXディスクは、
サルモネラ菌の生化学的確認を行いやすくする生化学的基質を含有しています。

NeogenペトリフィルムSALXプレートは、
プレート単体またはNeogen ペトリフィルムSALXディスクと併用します。
Neogen ペトリ
フィルムSALXディスクは、NeogenペトリフィルムSALXプレートとの併用でのみ使用できます。
Neogen ペトリフィルムSALXシステムは、検査技術の訓練を受けた専門家による検査室環境での使用を目的としています。
Neogenは、食品以外の産業における本製品の使用に関しては検証しておりません。
たとえば、Neogenは、本製品を水、医薬品、化粧品、臨床または動物検体の検査に使用することについては検証しておりません。
Neogen ペトリフィルムSALXシステム
は、すべての食品、食品製造行程、食品可能環境、検査プロトコル、またはすべての菌株による評価は実施しておらず、一部のサル
モネラ菌株は検出されない場合があります。Neogenは、Neogen ペトリフィルムSALXシステムにおける混合検体の使用については検証しておりません。

すべての検査法と同様に、増菌培地の配合が結果に影響を与える可能性があります。
NeogenペトリフィルムSALXプレート
は、Neogenサルモネラエンリッチメントベース、Neogenサルモネラエンリッチメントサプリメント、
ラパポートバシリアディスR10(R-V R10) ブロスとの併用についてのみ、評価されています（R-V R10培地の一般的な配合を以下に示します）。

一般的な配合塩化マグネシウム（無水） 13.4 g
塩化ナトリウム
7.2 g
カゼインペプトン
4.54 g
リン酸一カリウム
1.45 g
マラカイトグリーン
0.036 g
脱イオン水1000.0 mL
25°CでpH 5.1±0.2

必要に応じて、性能基準を満たすようpHを調整してください。

NeogenペトリフィルムSALXプレートおよびNeogen ペトリフィルムSALXディスクは、汚染除去済みですが未滅菌です。
Neogen
食品衛生部門は、設計と製造についてISO（国際標準化機構）9001認証を取得しています。
NeogenペトリフィルムSALXプレート
およびNeogen ペトリフィルムSALXディスクは、すべての食品、食品製造工程、検査プロトコルや、混入の可能性があるすべての微生物菌株について評価されているわけではありません。

安全性

Neogen ペトリフィルムSALXシステムの使用説明書にあるすべての安全情報をお読みになり、よく理解し遵守してください。
また、
この安全指示書を今後の参照のために保管してください。

警告： 警告は、それを避けなければ死亡または重篤な傷害ないし物的損害が発生しうる危険な状況を示します。
注記： 適切な危険予防措置が行われていない場合、危険な状況により物的損害が発生する場合があります。

1

警告

JA （日本語）

Neogen ペトリフィルムSALXシステムをヒトや動物の疾患診断に使用しないでください。

Neogen ペトリフィルムSALXシステムを使用しても、一部の乳糖陽性サルモネラ属菌（主にS. arizonaeおよびS.diarizonae）については、他の乳糖陽性菌との違いを識別することはできません。
乳糖陽性のサルモネラ菌株は、非サルモネラ属菌として判定されます（黄色域および/またはガスの有無にかかわらず、青色コロニー、緑色コロニー、青緑色コロニーおよび/または黒色コロニー）。
これらの菌株はサルモネラの血清型全体の約1%未満であると言われています1。
検査実施担当者に適切な検査技術を身につけるように指導してください（例：GLP2、ISO 170253、ISO 72184）。

偽陰性結果に伴い汚染製品が流出するリスク、および/または再検査が必要となる偽陽性判定の可能性を低下させるために：• プレートの使用時に必ず、水和したNeogenペトリフィルムサルモネラエクスプレスプレートのゲルの変色を確認してください。
• Neogenペトリフィルムサルモネラエクスプレスプレートが変色している場合は、使用しないでください。
• Neogen ペトリフィルムSALXシステムは、必ず使用期限を守って使用してください。
• Neogen ペトリフィルムSALXシステムは、お客様または第三者による検証済みの食品検体および食品加工環境検体に使用してください。
• Neogen ペトリフィルムSALXシステムは、お客様または第三者による検証済みの検査表面、中和緩衝液および試験プロトコ
ルでのみ使用してください。
• Neogen ペトリフィルムSALXシステムは、外箱表示および製品指示書に記載のとおりに保管してください。
• 手順に従い、製品指示書に記載のとおりに検査を実施してください。
• Neogen ペトリフィルムSALXディスクをゲルに配置する前に、必ず超極細の油性マーカーを使用して上部フィルムに特徴的な推定サルモネラコロニーをマーキングしてください。

化学物質およびバイオハザードへの暴露に伴う危険を回避するために：• 食中毒菌検査は技能訓練を受けた検査実施担当者の管理下で、適切な設備のある検査室にて行ってください。
• 試験材料および検体の取り扱いには、正しい封じ込め手順、適切な防護服および保護めがねの着用など、必ず標準的なGLP(Good Laboratory Practice)2 を遵守してください。
• 増菌培地および培養プレートの内容物に直接触れないでください。
• 増菌培地および培養プレートは、政府、規制当局の適用規則および検査施設の該当手順に従って廃棄してください。
• NeogenペトリフィルムSALXプレートを取り扱う際は、人によりアレルギー反応や炎症を起こす成分が含まれている可能性があるため、適切な防護服を着用してください。
環境汚染に伴う危険を回避するために：• 汚染廃棄物に関する現行の産業基準および地域の規制に従って廃棄してください。

注記

Neogen ペトリフィルムSALXシステムは、
サルモネラの血清を特定することはできません。
その他の情報については製品安全データシートを参照してください。

製品性能に関するドキュメントについては、当社ウェブサイト(www.neogen.com)をご覧いただくか、Neogenの担当者または正規代理店にお問い合わせください。

お客様の使用責任

お客様には、製品説明書および製品情報を熟知していただく責任があります。
詳しくは当社ウェブサイト(www.neogen.com)をご覧いただくか、Neogenの担当者または正規代理店にお問い合わせください。
検査方法を選択する際には、検体採取方法、検査プロトコル、検体調製、取り扱い、および検査手技などの外的要因が結果に影響する可能性があることを認識することが重要です。

検査方法または製品を選択する際に、適切なマトリックスおよび微生物負荷を用いて十分な数の検体を評価し、選択した試験方法がお客様の基準を満たすことをお客様の責任でご確認ください。

また、検査方法および結果が顧客または供給業者の要件を満たしているかについても、事前にお客様の責任でご確認ください。
どの検査方法を使用した場合でも、Neogen食品衛生製品を用いて得られた結果は、検査を実施した食品マトリックスまたは工程の品質を保証するものではありません。

2

JA （日本語）

保証の範囲/賠償の制限

個々の製品パッケージの限定保証条項に明示されている場合を除き、NEOGENは明示または黙示を問わず、商品性または特定の目的への適合性に関する保証を含むがこれに限定されない、
いかなる種類の保証も負いかねます。
Neogen食品衛生製品
部門の製品に欠陥があった場合、Neogenまたは指定販売店で交換あるいは製品購入価格の払い戻しをいたします。
対応は上記のみとさせていただきます。
製品の欠陥が疑われる場合は、判明した時点から60日以内に速やかにNeogenに通知し、製品をNeogenに返品する必要があります。
ご不明な点がございましたら、Neogenの担当者またはNeogenの正規代理店にお問い合わ
せください。

Neogenの保証責任範囲

NEOGENは、直接的、間接的、特殊なもの、偶発的または必然的であるかを問わず、利益損失を含むがこれに限定されないあらゆる損失または損害に対しての責任を負わないものとします。
いかなる場合も、
いかなる法的理論の下でも、Neogenの保証責任
範囲は、欠陥と申し立てられた製品の購入金額を超えないものとします。

保管

プレートの保管
NeogenペトリフィルムSALXプレートパウチは、受け取り次第未開封のまま2~8ºCで保管してください。
本製品は湿気と光に感応します。
使用直前に、未開封のパウチを室温 (20~25°C、<60% RH) に戻してください。
未使用のNeogenペトリフィルムSALXプレ
ートはパウチに戻してください。
湿気を避けるため、一度開封したNeogenペトリフィルムSALXプレートパウチは袋に密封し、光を避け、-20~-10°Cで最大4週間保管できます。
ディスクの保管
Neogen ペトリフィルムSALXディスクは、
ホイルパウチに個包装されています。
本製品は湿気と光に感応します。
未開封のNeogen ペトリフィルムSALXディスクパウチは、2~8ºCで保管してください。
すぐに使用する個包装のNeogen ペトリフィルム
SALXディスクのみを取り出し、残りのNeogen ペトリフィルムSALXディスクはホイルパウチ内で保管し、パウチの口を折り曲げ、
粘着テープで留めます。
湿気への曝露を避けるため、開封したNeogen ペトリフィルムSALXディスクパウチを再冷蔵しないでください。
封をしたパウチの保管は、乾燥した（RH 60%未満）冷所 (20~25°C) で最長4週間、または再封可能な保管用袋に入れ、20~-10°Cで最長5ヵ月間、保管できます。

NeogenペトリフィルムSALXプレートが水和後に変色した場合は、使用しないでください。
NeogenペトリフィルムSALXディスクが変色している場合は、使用しないでください。
使用期限と製品ロット番号は、NeogenペトリフィルムSALXプレートおよびNeogenペトリフィルムSALXディスクの包装に記載されています。
なお、
ロット番号は、個々のプレートおよびディスクのパッケージにも記載されています。

廃棄

使用済みのNeogenペトリフィルムSALXプレートおよびNeogen ペトリフィルムSALXディスクには、バイオハザードをもたらす可能性のある微生物が混在している場合があります。
汚染廃棄物に関する現行の産業基準および地域の規制に従って廃棄してくだ
さい。
その他の情報については製品安全データシートを参照してください。

使用方法

すべての指示に、注意深く従ってください。
従わない場合、正確な結果が得られないことがあります。
適切な防護服を着用し、GLP2を遵守してください。

検体の増菌
食品
表1および表2は、検査用食品検体のガイドラインです。
別の検体採取手順（混合検体など）または希釈率については、お客様の責任で検証を行い、この検査法がお客様の基準を満たしていることを確認してください。
低夾雑の食品：低夾雑の食品とは、好気性菌の総数が ≤ 104 CFU/gであるものを指します。
例：低温殺菌、調理済み、加工済み食品など。

1. NeogenサルモネラエンリッチメントベースにNeogenサルモネラエンリッチメントサプリメントを加え、41.5±1.0°Cに加温します（表1および表2参照）。
2. 増菌培地と検体を無菌的に混合します。
すべての肉検体および微粒子を多く含む検体に関しては、
ストマッカーフィルターバ
ッグの使用を推奨します。
2分間よくホモジナイズします。
41.5±1.0°Cで、18~24時間培養します（表1および表2参照）。

3

JA （日本語）

高夾雑の食品：高夾雑の食品は、好気性菌の総数が > 104 CFU/gであるものを指し、ラパポートバシリアディスR10 (R-V R10) ブロスの使用を必要とします。
例：生の未加工食品など。

1. NeogenサルモネラエンリッチメントベースにNeogenサルモネラエンリッチメントサプリメントを加え、41.5±1.0°Cに加温します（表1および表2参照）。
2. 増菌培地と検体を無菌的に混合します。
すべての肉検体および微粒子を多く含む検体に関しては、
ストマッカーフィルターバ
ッグの使用を推奨します。
2分間よくホモジナイズします。
41.5±1.0°Cで、18~24時間培養します（表1および表2参照）。

3. 一次増菌培養後、0.1 mLをラパポート バシリアディスR10 (R-V R10) ブロス10.0 mLに滴下します。
41.5±1.0°Cで8~24時間
培養します。

環境検体
検体採取には、Dey-Engley (D/E) 中和液を染み込ませたバイオサイドフリーのセルローススポンジを使用してください。
お客様が確立した手順の後、検体の表面に残った余分なD/E中和ブロスを取り除きます。

2
表面の病原菌の有無を確認するための検体採取部分の推奨サイズは、100 cm（10cm x 10 cmまたは4 in x 4 in）5です。
スポンジでの採取の際、全体を2方向に網羅してください（左右の次に上下）。

1. NeogenサルモネラエンリッチメントベースにNeogenサルモネラエンリッチメントサプリメントを加え、41.5±1.0°Cに加温します（表1および表2参照）。
2. 増菌培地と検体を無菌的に混合します。
よく混合します。
41.5±1.0°Cで18~24時間培養します。

3. 高夾雑の環境検体の場合（好気性菌総数 > 104 CFU/g）、一次増菌培養後、0.1 mLを10.0 mLのラパポートバシリアディス
R10 (R-V R10) ブロスに滴下します。
41.5±1.0°Cで8~24時間培養します。

4. 低夾雑の環境検体の場合（好気性菌総数 ≤ 104 CFU/g）、手順3は省略します。

AOAC® Official Method of AnalysisSM (OMA) 2014.01
AOAC® Performance TestedSM (PTM) 認証 #061301

AOAC Research Institute OMASMおよびPTMSM認証を受けた試験法において、Neogen ペトリフィルムSALXシステムは、
サル
モネラの検出に有効な方法であることが確認されています。上記試験において検査の対象となったマトリックスは、表1に記載されています。
Neogen ペトリフィルムSALXシステムを用いた検査法の検出限界は、1~5 CFU/有効測定分量サイズです
（表1を参
照）。

4

表1：AOAC OMASM 2014.01およびAOAC PTMSM認証#061301に基づく検体増菌プロトコル
一次増菌

JA （日本語）
二次増菌

検体

高夾雑

検体量

生の牛挽
肉、生の豚
挽肉、生の
鶏挽肉

✓

25 g

225

R-V R10ブロス：
0.1 mLを
10.0 mLへ

✓

25 g

225

R-V R10ブロス：
0.1 mLを
10.0 mLへ

100 g

900

低夾雑の食品には不要です。

375 g

3375

低夾雑の食品には不要です。

冷凍生エビ
低温殺菌
液状全卵

ドライドッ
グフード

生ホウレン
ソウ束

増菌量 (mL)

温度(±1.0°C)

41.5
✓

環境検
体 – ステ
ンレスス
チール表面
（検体範囲
100 cm2）
加熱調理
済みチキン
ナゲット

25 g

225

スポン
ジ1個

225

25 g

225

増菌時間
（時間）

18~24

増菌培地

R-V R10ブロス：
0.1 mLを
10.0 mLへ

温度(±1.0°C)

増菌時間
（時間）

41.5

8~24

41.5

8~24

24

41.5

低夾雑の検体には不要です。

その他の食品検体：

表2：検体増菌プロトコル
検体

高夾雑

食品：
生肉、鶏
肉、魚介類

✓

食品：
農産物

その他の
食品

増菌量 (mL)

25 g

225

375 g

3375

✓

25 g

225

*

スポン
ジ1個

225

動物飼料

環境検体

検体量

*

一次増菌

温度
(±1.0°C)

増菌時間
（時間）

増菌培地

二次増菌

R-V R10ブロス：
0.1 mLを
10.0 mLへ

温度(±1.0°C)

増菌時間
（時間）

41.5

8~24

低夾雑の食品には不要です。

41.5

18~24

R-V R10ブロス：
0.1 mLを
10.0 mLへ

41.5

8~24

低夾雑の検体には不要です。

検体量と増菌量に応じて、適切な参照方法に従ってください。

* 高夾雑の環境検体およびその他の食品検体の場合、R-V R10を用いた二次増菌培養が必要です。

5

プレートの水和1. 処方された滅菌希釈液を用いて、NeogenペトリフィルムSALXプレートを水和します

JA （日本語）（バターフィールドリン酸希釈水、蒸留水、逆浸透水）。

2. NeogenペトリフィルムSALXプレートを平らで水平な面に置きます（図A）。

3. 上部のフィルムを持ち上げ、ピペットで垂直に、2.0 mL±0.1 mLの滅菌希釈液を下部フィルムの中央に滴下します（図B）。
2.0 mL全量を滴下するまで、上部フィルムを閉じないでください。

4. 気泡が入らないように上部フィルムを希釈液の上に静かにおろします（図C）。

5. Neogen® ペトリフィルム® フラットスプレッダー（カタログ#6425）をプレートの中心に置きます。
スプレッダーの中心部を軽く押し、希釈液を均等に広げます。
ゲルが形成される前に、希釈液をNeogenペトリフィルムSALXプレート増殖エリア全体に広げます。
フィルム上でスプレッダーをすべらせないでください（図D）。

6. スプレッダーを取り外し、NeogenペトリフィルムSALXプレートを静かに1分以上放置します。

7. NeogenペトリフィルムSALXプレートを、水平面に、光を避けて室温 (20~25°C、<60% RH) で1時間以上置き、ゲル化されるまで待ちます。
水和したNeogenペトリフィルムSALXプレートは、使用時まで光を避け、室温 (20~25°C、<60% RH) で最大8時間保管できます。
水和したNeogenペトリフィルムSALXプレートを8時間以内に使用しない場合は、
プラスチック製の袋に密封して保管してください。
NeogenペトリフィルムSALXプレートは光に当たらないよう保護し、最大5日間、-20~-10°Cで保管します。

8. NeogenペトリフィルムSALXプレートを保管場所から取り出した後、室温に戻してから使用します。

プレートへの接種
1. 培養器から増菌培地を取り出し、内容物を手動で撹拌します。

2. 滅菌済みの10 µLループ（直径3 mm）を使用し、各検体を採取します。
ゲル表面を破損しないように、滑らかな（縁に傷がなく、歪みのない）
ループを使用します。
3. NeogenペトリフィルムSALXプレートを開き、ゲルの表面に塗抹します（図E）。
コロニーが分離するよう、1回で塗抹します（図1）。

InicioFinal
図1：NeogenペトリフィルムSALXプレートへの塗抹パターン

4. 上部フィルムを戻し、NeogenペトリフィルムSALXプレートを閉じます。

5. 手袋をした手で（GLPを実践し交差汚染および/またはプレートへの直接接触を避けながら）、上部フィルムの上を均等な圧力で静かにこすり、培養エリアから気泡を取り除きます（図F）。

プレートの培養プレートの色の付いた面を上に向けて水平面に置き、41.5±1.0°Cで24±2時間培養します。
プレートは20枚まで重ねられます。
判定
1. NeogenペトリフィルムSALXプレートを培養器から取り出し、目視で結果を判定します。

ttern_FS.ai2. バックライトを使用すると、コロニーの色、個別の黄色域、コロニーに伴う気泡が判読しやすくなります。

3. 分離したコロニーを目視で確認し、判定を行います。
表3を参照してください。
作業中に混入した気泡は数えないでください。
This artwork has
been

黄色域または気泡のいずれか、
または両方を伴
4. 陽性と推定されるサルモネラ属菌は、赤色から茶色のコロニーで、
3M is responsible for the
artwork
AS APPROVED and
います
（図G）。
コロニーが産生した気泡は、
当該コロニーの直径未満の距離に位置するものであると定義されます
assumes full responsibility（下の表3参照）。
for its correctness.
created as requested by 3M.

6JA （日本語）

表3：陽性と推定されるサルモネラ属菌の判定
赤色

コロニーの色
暗赤色

茶色✓

コロニーの代謝

黄色域

結果

気泡

推定 +

✓

✓

推定 +

✓

✓

✓
✓

推定 +

✓

推定 +

✓

✓

推定 +

✓

✓

✓
✓

推定 +

✓

✓
✓

推定 +

✓

推定 +

✓
✓

推定 +

✓

非サルモネラ属菌（図H）：• 黄色域および/またはガスの気泡の有無にかかわらず、青色コロニー、緑色コロニー、青緑色コロニーおよび/または黒色コ
ロニーは非サルモネラ属菌です。
• 赤色、暗赤色、茶色のコロニーで、黄色域やガスの気泡を伴わないものは、非サルモネラ菌です。
• 赤色、暗赤色、茶色のコロニーで、マゼンタ色の帯域を伴うものは、非サルモネラ菌です。
陽性と推定されるサルモネラコロニーが存在しない場合、サルモネラ菌は検体上に検出されなかったと判定します。

推定サルモネラ属菌：

陽性と推定されるサルモネラコロニーが存在する場合、次の手順を実施し、続いて生化学的確認手順に進んでください。
a. NeogenペトリフィルムSALXプレートの上部フィルムに超極細の油性マーカーを使用し、分離された陽性と推定される
サルモネラコロニー（存在する場合）を5つ以上、丸で囲みます（図I）。

b. Neogen ペトリフィルムSALXディスクを使用して、すべての陽性と推定されるサルモネラを、生化学的に確認します。
「生
化学的確認」セクションを参照してください。

c. NeogenペトリフィルムSALXプレートを培養器から取り出して1時間以内に分析できない場合、
まず超極細の油性マーカーを使用し、陽性と推定されるサルモネラコロニーを上部フィルムの上から丸で囲み、プレートを袋に密封して、分析を行うまで保管します。
NeogenペトリフィルムSALXプレートは光に当たらないよう保護し、最大72時間、-20~-10°Cで保管します。
プレートを室温 (20~25°C、<60% RH) に戻してからディスクを挟みます。

警告：偽陰性結果に伴い汚染製品が流出するリスク、および再検査が必要となる偽陽性判定の可能性を低下させるために、プレートを適切に保管する前および/またはNeogen ペトリフィルムSALXディスクをゲル上に置く前に、必ず超極細の油性マーカーを使用して、NeogenペトリフィルムSALXプレートの上部フィルムの上に特徴的な推定サルモネラコロニーを丸で囲んでください。

生化学的確認1. GLP (Good Laboratory Practice) を実践して、交差汚染および/またはNeogenペトリフィルムSALXプレートおよび/またはNeogen ペトリフィルムSALXディスクへの直接接触を避けてください。

2. 個包装されたNeogen ペトリフィルムSALXディスクをパウチから取り出し、室温 (20~25°C、<60% RH) に戻します。
次に、Neogen ペトリフィルムSALXディスクの個包装を剥がして開封し、Neogen ペトリフィルムSALXディスクのタブを露出させ、タブをつまみ、Neogen ペトリフィルムSALXディスクを取り出します。

3. NeogenペトリフィルムSALXプレートの上部フィルム（陽性と推定されるサルモネラコロニーに既に○印が付いている）を持
ち上げ、気泡が入り込まないようNeogen ペトリフィルムSALXディスクをゲルの上にすべらせながら置きます（図J）。
NeogenペトリフィルムSALXプレートを閉じます。
4. 手袋をした手で静かに表面を拭うように手を動かして上部フィルムに均一な圧力をかけ、培養エリアの気泡を取り除き、Neogen ペトリフィルムSALXディスクをしっかりとゲルに密着させます
（図K）。

7

JA （日本語）

5. Neogen ペトリフィルムSALXシステム（プレートおよびディスク）を、正しい上下の向きで水平に保ち、41.5±1.0°Cで4~5時間
培養します（プレートは20枚まで重ねられます）。
6. Neogen ペトリフィルムSALXシステムを培養器から取り出し、結果を判定します。
丸で囲んだ推定サルモネラコロニーのみを調べます（表4）：
表4：Neogen ペトリフィルムSALXシステムの判定
緑色~青色✓

コロニーの色青色~暗青色黒色✓✓

生化学的確認の結果
生化学的確認結果 +生化学的確認結果 +生化学的確認結果 +生化学的確認結果陽性：• 緑色から青色、青色から暗青色、または黒色のコロニー、もしくは周囲に青色の沈殿物を伴うコロニーは、生化学的にサルモネラ属菌陽性であると確認されます。
生化学的確認結果陰性：• 色が赤色、暗赤色または茶色のまま変化せず、青色の沈殿物を伴わないコロニーは、
サルモネラ属菌陰性です。

7. コロニーを二次培養してさらに同定を行うこともできます。
二次培養時は、適切な防護服を着用し、GLP2を遵守してください。

a. 上部フィルムを持ち上げ、ゲルまたはNeogen ペトリフィルムSALXディスクから無菌的にコロニーを釣菌します。
NeogenペトリフィルムSALXディスクがゲルを覆っている場合は、無菌的にディスクを取り除いてから、無菌的にゲルからコロニーを釣菌します。
b. 適切な参照方法6, 7, 8に従って、培地にコロニーを塗抹します。

8. プレートを培養器から取り出して1時間以内に二次培養を行わない場合、NeogenペトリフィルムSALXプレートをプラスチ
ック袋に密封し、分析を行うまでの間、-20~-10°Cで、72時間まで暗所で保管できます。
二次培養の確認を行う際は、事前にNeogenペトリフィルムSALXプレートを室温 (20~25°C、<60% RH) まで加温します。

9. 検査終了後、NeogenペトリフィルムSALXプレートおよびNeogen ペトリフィルムSALXディスクは、現行の産業基準および/
または地域の規制に従って廃棄します。

詳細については、Neogen® ペトリフィルム® サルモネラエクスプレスシステムの「解説書」を参照してください。
具体的な用途や手順についてご質問がありましたら、当社のウェブサイト (www.neogen.com) をご覧いただくか、Neogen営業担当者または取り扱い販売店までお問い合わせください。

8

JA （日本語）

参考文献

1. McDonough P.L, et al. (2000). Diagnostic and Public Health Dilemma of Lactose-Fermenting Salmonella enterica
Serotype Typhimurium in Cattle in the Northeastern United States. J. Clin. Microbiol. 38:1221-1226.
2. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
3. ISO/IEC 17025:2017. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
4. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
5. ISO 18593:2004. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal methods for sampling techniquesfrom surfaces using contact plates and swabs.
6. US Food and Drug Administration Bacteriological Analytical Manual. Chapter 5 Salmonella.

7. US Department of Agriculture (USDA) Microbiology Laboratory Guidebook 4.09. Isolation and Identification of
Salmonella from Meat, Poultry, Pasteurized Egg, and Siluriformes (Fish) Products and Carcass and Environmental
Sponges.
8. ISO 6579-1:2017. Microbiology of the food chain – Horizontal method for the detection, enumeration andserotyping of Salmonella – Part 1: Detection of Salmonella spp.

上述の標準試験法については、現行の最新版を参照してください。

記号の説明

info.neogen.com/symbols

AOAC™ は、AOAC International の登録商標です。
Official Methods (OMA)SM は、AOAC International のサービス マークです。
Performance Tested MethodsSM は、AOAC International のサービス マークです。

9

JA （日本語）

図A.

図B.

図C.

図D.

図E.

図F.

図G.

図H.

図I.

図J.

図K.
10

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Petrifilm are registered trademarks of Neogen Corporation.
FS00828A

ZH （简体中文）

发布日期：2024-01

产品信息沙门氏菌快速系统
产品说明及预期用途

Neogen® Petrifilm® 沙门氏菌快速系统 (SALX) 用于对增菌后的食品和食品加工环境样品中的沙门氏菌属进行快速定性检测
和生化确认。
Neogen Petrifilm SALX 系统包含 Neogen® 沙门氏菌基础增菌培养基、Neogen® 沙门氏菌增菌补充物、Neogen®
®
Petrifilm 沙门氏菌快速 (SALX) 测试片和 Neogen® Petrifilm® 沙门氏菌快速确认反应片 (SALX)，以上物品均采用独立包装。
Neogen Petrifilm SALX 测试片是一个样品即用型显色培养基系统，其中包含冷水可溶性凝胶，对沙门氏菌具有选择性和差异性，可提供假定结果。
Neogen Petrifilm SALX 确认反应片包含生化基质，可帮助对沙门氏菌有机体进行生化确认。
Neogen Petrifilm SALX 测试片可搭配或不搭配 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片使用。
Neogen Petrifilm SALX 确认反应
片只能搭配 Neogen Petrifilm SALX 测试片使用。
Neogen Petrifilm SALX 系统专供受过实验室技术培训的专业人员在实验室环境下使用。
对于在食品以外的行业中使用此
产品，Neogen 尚未有资料可证。
例如，对于将此产品用于检测水、药品、化妆品、临床或家畜样品，Neogen 尚未有资料可证。
Neogen Petrifilm SALX 系统尚未针对所有可能的食品产品、食品工艺和食品加工环境、检测方案或所有可能的菌株进行
评估，可能无法检测到所有沙门氏菌菌株。
Neogen 尚未使用复合样品验证 Neogen Petrifilm SALX 系统。

正如所有检测方法一样，增菌培养基配方可能会影响结果。
仅针对 Neogen Petrifilm SALX 测试片与 Neogen 沙门氏菌基础增菌培养基、Neogen 沙门氏菌增菌补充物和 Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10) 肉汤（R-V R10 肉汤典型配方如下）的搭配使用进行了评估：典型配方氯化镁（无水）13.4 克
氯化钠
7.2 克
酪蛋白胨
4.54 克磷酸二氢钾1.45 克孔雀绿
0.036 克软化水
1000.0 mL
pH 5.1 ± 0.2 @ 25°C

根据需要调整 pH 以满足性能标准。

Neogen Petrifilm SALX 测试片和 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片组件虽未经灭菌，但已经进行了净化处理。
Neogen 食品安全部的产品设计和生产已经获得国际标准化组织 (ISO) 9001 认证。
尚未针对所有可能的食品产品、食品加工、检测方案或所有可能的微生物菌株对 Neogen Petrifilm SALX 测试片和 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片进行评估。

安全用户应该阅读、理解并遵守 Neogen Petrifilm SALX 系统说明中的所有安全信息。
妥善保存安全说明书，以备日后查阅。
警告： 表示危险情况，如果不注意避免，可能造成死亡或严重的人身伤害和/或财产损失。
注意： 表示潜在的危险情况，如果不注意避免，可能导致财产损失。

警告请勿在人类或动物的各种疾病诊断中使用 Neogen Petrifilm SALX 系统。

Neogen Petrifilm SALX 系统无法明确区分部分乳糖阳性沙门氏菌属（主要是沙门氏菌亚利桑那亚种和沙门氏菌双相亚利桑那亚种）和其他乳糖阳性有机体。乳糖阳性沙门氏菌菌株将显示为非沙门氏菌（蓝色菌落、绿色菌落、蓝绿色菌落，和/或带有或不带黄色区域和/或相关气泡的黑色菌落）。
这些菌株在沙门氏菌血清型总数中所占比例不到 1%1。

用户必须就当前适用的检测技术对其人员进行培训，例如：良好实验室规范2、ISO 170253 或 ISO 72184。
为了降低因假阴性结果而放行受污染产品的风险和/或产生需要重新进行检测的假阳性结果的可能性：• 每次使用测试片时，确认水化 Neogen Petrifilm 沙门氏菌快速测试片是否存在凝胶变色现象。
• 切勿使用已变色的 Neogen Petrifilm 沙门氏菌快速测试片。
• 始终在有效期前使用 Neogen Petrifilm SALX 系统。
• 将 Neogen Petrifilm SALX 系统用于经用户或第三方验证的食品样品和食品加工环境样品。

1

•
•
•
•

ZH （简体中文）仅将 Neogen Petrifilm SALX 系统用于经用户或第三方验证的表面、中和缓冲液和方案。
按照包装和产品信息中的指示储存 Neogen Petrifilm SALX 系统。
遵守操作流程并严格按照产品信息中提供的方法执行检测。
始终使用超细笔尖永久性记号笔在上层薄膜上圈出典型的假定沙门氏菌菌落，然后再将 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片放到凝胶上。

为了降低与化学品和生物危害接触相关的风险，请注意以下事项：• 在训练有素的工作人员的控制下，于妥善配备的实验室中执行致病菌检测。
• 始终遵守标准优良实验室安全规范 (GLP)2，包括在处理检测材料和检测样品时遵循正确的控制程序、穿戴适当的防护服和护眼装置。
• 避免直接接触增菌培养基和接种测试片中的内容物。
• 对增菌培养基和接种测试片进行废弃处理时，遵守所有适用的政府和监管法规以及适用的实验室操作规程。
• 处理 Neogen Petrifilm SALX 测试片时，应穿着适当的防护服，因为部分人群可能会因某些组件而引发过敏和刺激反应。

为了降低与环境污染相关的风险，请注意以下事项：• 对于受污染废弃物的废弃处理，请遵循当前的行业标准和当地的法规要求。

注意

Neogen Petrifilm SALX 系统不能用于区分两种不同的沙门氏菌菌株。
请参阅“安全数据表”以了解其他信息。

有关产品性能文件的信息，请访问我们的网站 www.neogen.com 或联系您的 Neogen 代表或授权经销商。

用户责任

用户负责熟悉产品说明和信息。
请访问我们的网站 www.neogen.com, 或联系您的 Neogen 代表或授权经销商获取更多信息。
选择检测方法时，务必认识到各种外部因素（如取样方法、检测方案、样品制备、处理和实验室技术）都可能会影响结果。

用户在选择检测方法或产品时，应自行负责选用合适的基质和微生物激发试验对足够多的样品进行评估，以确保所选择的检测方法达到用户的标准。
检测方法及结果能否满足客户及供应商的要求也由用户负责。

同所有检测方法一样，使用任何 Neogen Food Safety 产品所得到的结果并不能保证受检基质或程序的质量。

有限保证/有限补救措施

除非各个产品包装的有限保证部分明确声明，否则，Neogen 将不提供任何明示或默示保证，包括但不限于适销性或特定用途
适用性保证。
如果证明任何 Neogen 食品安全部产品存在缺陷，Neogen 或其授权经销商可以自行决定换货或是退款。
这是向您提供的唯一补救方案。
您必须在发现产品存在任何可疑缺陷的 60 天内立即通知 Neogen，并将该产品退还给 Neogen。
如有任何其他问题，请联系您的 Neogen 代表或授权的 Neogen 分销商。

Neogen 责任限制

对于任何损失或损害，无论是直接、间接、特殊、偶然或非直接原因造成的损害，Neogen 概不承担任何责任，包括但不限于利润损失。
根据法律理论，Neogen 对所谓存在缺陷的产品的赔付不会超过产品的购买价格。

储存

测试片储存
收货后，请将未开封的 Neogen Petrifilm SALX 测试片包装袋储存在 2-8ºC 环境中。
产品对湿度和光照非常敏感。
使用之前，
要先使未开封的包装袋达到室温（20-25ºC/相对湿度 <60%）再开封。
将未使用的 Neogen Petrifilm SALX 测试片装回包装袋中。
为防止受潮，请将已开封的 Neogen Petrifilm SALX 测试片包装袋放入密封袋子中，然后避光存放在 -20ºC 至 -10ºC 环境
下不超过 4 周。
确认反应片储存
Neogen Petrifilm SALX 确认反应片单独包装在铝箔袋中。
产品对湿度和光照非常敏感。
请将未开封的 Neogen Petrifilm
SALX 确认反应片包装袋储存在 2-8ºC 环境中。
仅在立即需要使用这些独立包装的 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片时，再将其取出，然后通过折叠包装袋的末端并粘贴胶带，将剩余的 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片储存在铝箔袋中。
为防止受潮，请勿冷藏已开封的 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片包装袋。
将重新密封的包装袋储存在阴凉 (20-25ºC) 干燥地点（相对湿度低于 60%）不超过 4 周，或将重新密封的包装袋放入可重新密封的袋子中，并储存在 -20ºC 至 -10ºC 环境下不超过 5个月。
切勿使用在水化后变色的 Neogen Petrifilm SALX 测试片。
切勿使用已变色的 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片。
NeogenPetrifilm SALX 测试片和 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片的每个包装上均标有产品的有效期和批号。
测试片和确认反应
片的独立包装上也标有批号。

2

ZH （简体中文）

废弃处理

使用后，Neogen Petrifilm SALX 测试片和 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片可能因含有微生物而具有潜在生物危害性。
对于受污染废弃物的废弃处理，请遵循当前的行业标准和当地的法规要求。
请参阅“安全数据表”以了解其他信息。

使用说明

请仔细遵循所有说明。
否则，可能会导致结果不准确。

应穿着适当的防护服并遵守标准优良实验室安全规范 (GLP)2。

样品增菌
食品
表 1 和表 2 陈述了检测基质样品指南。
用户有责任验证备用取样方案（例如复合）或者稀释率，以确保本检测方法符合用户
的标准。
对于微生物负载量低的食品：

微生物负载量低的食品需氧菌菌落总数为每克 ≤ 104 个菌落形成单位。
示例包括：经过巴氏杀菌、烹调或加工的食品。

1. 将添加了 Neogen 沙门氏菌增菌补充物的 Neogen 沙门氏菌基础增菌培养基预热至 41.5 ± 1.0ºC（参见表 1 和表 2）。
2. 在无菌环境下将增菌培养基和样品进行混合。
对于所有肉类和微粒样品，建议使用均质过滤袋。
充分混匀 2 分钟。
在 41.5 ± 1.0ºC 环境下培养 18-24 小时（参见表 1 和表 2）。

对于微生物负载量高的食品：

微生物负载量高的食品需氧菌菌落总数为每克 > 104 个菌落形成单位，并且需要使用 Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10)
肉汤。
示例包括：生的、未经加工的食品。

1. 将添加了 Neogen 沙门氏菌增菌补充物的 Neogen 沙门氏菌基础增菌培养基预热至 41.5 ± 1.0ºC（参见表 1 和表 2）。
2. 在无菌环境下将增菌培养基和样品进行混合。
对于所有肉类和微粒样品，建议使用均质过滤袋。
充分混匀 2 分钟。
在 41.5 ± 1.0ºC 环境下培养 18-24 小时（参见表 1 和表 2）。

3. 初步增菌培养后，将 0.1 mL 初步增菌物转移至 10.0 mL Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10) 肉汤中。
在 41.5 ± 1.0ºC环境下培养 8-24 小时。

环境样品
采集样品时，可使用通过 Dey-Engley (D/E) 中和肉汤水化的不含生物杀菌剂的纤维素海绵。
按照用户的既定程序，清除取样表
面上剩余的 D/E 中和肉汤残留物。

2
用于验证表面是否存在病原体的取样区域的建议尺寸为 100 cm（10cm x 10 cm 或 4”x 4”）5。
使用海绵取样时，从两个方向（从左到右，然后从上到下）覆盖整个区域。

1. 将添加了 Neogen 沙门氏菌增菌补充物的 Neogen 沙门氏菌基础增菌培养基预热至 41.5 ± 1.0ºC（参见表 1 和表 2）。
2. 在无菌环境下将增菌培养基和样品进行混合。
充分混合。
在 41.5 ± 1.0ºC 环境下培养 18-24 小时。

3. 如果环境样品的微生物负载量高（需氧菌菌落总数为每个样品 > 104 个菌落形成单位），则在初步增菌培养后，将 0.1 mL
初步增菌物转移至 10.0 mL Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10) 肉汤中。
在 41.5 ± 1.0ºC 环境下培养 8-24 小时。

4. 如果环境样品的微生物负载量低（需氧菌菌落总数为每个样品 ≤ 104 个菌落形成单位），则可以跳过第 3 步。

AOAC® Official Method of AnalysisSM (OMA) 2014.01
AOAC® Performance TestedSM (PTM) 证书 #061301

AOAC 研究所 OMASM 和 PTMSM 研究显示，Neogen Petrifilm SALX 系统是一种有效的沙门氏菌检测方法。
这些研究中检测
的基质显示在表 1 中。
根据已验证的检测部分大小，Neogen Petrifilm SALX 系统方法的检测限为 1-5 个菌落形成单位（参见
表 1）。

3

表 1：遵照 AOAC OMASM 2014.01 和 AOAC PTMSM 证书 #061301 实施的样品增菌方案
初步增菌

ZH （简体中文）

微生物负
载量高

样品
大小

增菌量 (mL)

✓

25 g

225

R-V R10 肉汤：
0.1 mL 加入
10.0 mL

✓

25 g

225

R-V R10 肉汤：
0.1 mL 加入
10.0 mL

100 g

900

375 g

3375

25 g

225

环境 — 不锈钢表面（样品大小100 cm2）

1 块海
绵

225

熟鸡块

25 g

225

检测基质
生的碎牛
肉、生的碎
猪肉、生的
碎鸡肉
冷冻生虾

巴氏杀菌
全蛋液
干狗粮

新鲜的成
捆菠菜

✓

温度
(±1.0°C)

增菌时间
（小时）

增菌培养基

二次增菌

温度
(±1.0°C)

增菌时间
（小时）

41.5

8-24

41.5

8-24

微生物负载量低的食品不需要。

41.5

18-24

微生物负载量低的食品不需要。

R-V R10 肉汤：
0.1 mL 加入
10.0 mL41.5

24

微生物负载量低的样品不需要。

对于其他基质：

表 2：样品增菌方案
检测基质
食品：
生的肉类、
家禽、海鲜
和鱼类

微生物负
载量高

样品
大小

增菌量 (mL)

✓

25 g

225

375 g

3375

✓

25 g

225

*

1 块海
绵

225

动物饲料
食品：
农产品
环境

其他食品

*

初步增菌

温度
(±1.0°C)

增菌时间
（小时）

增菌培养基

R-V R10 肉汤：
0.1 mL 加入
10.0 mL

二次增菌

温度(±1.0°C)

增菌时间
（小时）

41.5

8-24

微生物负载量低的食品不需要。

41.5

18-24

R-V R10 肉汤：
0.1 mL 加入
10.0 mL

41.5

8-24

微生物负载量低的样品不需要。

遵循适用于样品大小和
增菌量的参考方法* 一些环境样品和其他食品样品的微生物负载量可能较高，需要使用 R-V R10 二次增菌方法。

4测试片水化
1. 使用规定的无菌稀释剂对 Neogen Petrifilm SALX 测试片进行水化：

ZH （简体中文）

Butterfield 磷酸稀释剂、蒸馏水或反渗透水。

2. 将 Neogen Petrifilm SALX 测试片放置在平坦且水平的表面上（图 A）。

3. 掀起上层薄膜，使用移液管将 2.0 mL ± 0.1 mL 无菌稀释剂垂直滴于底层薄膜的中央位置（图 B）。
滴完全部 2.0 mL 前，
请勿盖上上层薄膜。

4. 将上层薄膜轻轻盖压在稀释剂上，避免产生气泡（图 C）。

5. 将 Neogen® Petrifilm® 压板（目录号 6425）放在测试片中心位置。
轻轻地压按压板的中心以使稀释剂均匀覆盖。
在凝胶固化之前，应使稀释剂均匀覆盖于整个 Neogen Petrifilm SALX 测试片的培养区域内。
请勿在薄膜上滑动压板（图 D）。
6. 将压板拿开，让 Neogen Petrifilm SALX 测试片至少静置 1 分钟。

7. 在室温（20-25ºC/相对湿度 <60%）下，将 Neogen Petrifilm SALX 测试片放置于水平表面上至少 1 小时，避免光照，以便形成凝胶。
在避光的情况下，水化 Neogen Petrifilm SALX 测试片可以在使用前于室温（20-25ºC/相对湿度 <60%）下最长储存 8 小时。
如果不在 8 小时内使用水化的 Neogen Petrifilm SALX 测试片，请将其储存在密封塑料袋中。
将 Neogen
Petrifilm SALX 测试片避光储存在 -20ºC 至 -10ºC 温度下最多 5 天。

8. 将 Neogen Petrifilm SALX 测试片从储存区取出后，待其恢复到室温后再使用。
测试片接种
1. 从培养器中取出增菌培养基后，手动摇动培养基内容物。

2. 使用无菌的 10 µL 圆环（直径 3 mm）抽取每份样品。
使用光滑的圆环（没有锯齿边缘且不会变形）可以防止凝胶表面破裂。
3. 打开 Neogen Petrifilm SALX 测试片，并在凝胶上划线（图 E）。
单次划线可获取隔离菌落（图 1）。

InicioFinal
图 1：
Neogen Petrifilm SALX 测试片上的划线图形

4. 放下上层薄膜，盖住 Neogen Petrifilm SALX 测试片。

5. 用戴手套的手（确保执行优良实验室规范，避免交叉污染和/或直接接触测试片）在上层薄膜上均匀滑动按压，清除接种区
中的气泡（图 F）。
测试片培养
在 41.5 ± 1.0ºC 下将测试片培养 24 ± 2 小时，将测试片的彩色面朝上水平放置，最多可堆叠至 20 片。
判读
1. 从培养器中取出 Neogen Petrifilm SALX 测试片后，通过目视观察读取结果。

ttern_FS.ai2. 使用间接逆光照明可以帮助读取菌落颜色、离散的黄色区域以及与菌落相关的气泡。
3. 目视检查隔离菌落以进行判读。
参见表 3。
请勿计数可能因人为操作而产生的气泡。
This
artwork has been（图 G）。
相关气泡的定义是位于菌落周围一个菌落
4. 假定阳性沙门氏菌属表现为拥有黄色区域和/或相关气泡的红棕色菌落
3M is responsible for the
artwork AS APPROVED and
直径内（参见下文表 3）。
created as requested by 3M.
assumes full responsibility
for its correctness.

5

ZH （简体中文）

表 3：假定阳性沙门氏菌属的判读
红色

菌落颜色
深红色

棕色

✓

菌落代谢

黄色区域

结果

气泡

假定 +

✓

✓

假定 +

✓

✓

✓
✓

假定 +

✓

假定 +

✓

✓

假定 +

✓

✓

✓
✓

假定 +

✓

✓
✓

假定 +

✓

假定 +

✓
✓

假定 +

✓

非沙门氏菌属（图 H）：• 蓝色菌落、绿色菌落、蓝绿色菌落，和/或带有或不带黄色区域和/或相关气泡的黑色菌落是非沙门氏菌有机体。
• 没有黄色区域且没有相关气泡的红色、深红色和棕色菌落是非沙门氏菌有机体。
• 带有品红色区域的红色、深红色和棕色菌落是非沙门氏菌有机体。
如果假定阳性沙门氏菌菌落不存在，则不会在基质中检测到沙门氏菌有机体。
假定沙门氏菌属：

如果存在假定阳性沙门氏菌菌落，则执行以下步骤，然后继续执行生化确认步骤：a. 在 Neogen Petrifilm SALX 测试片上层薄膜上，使用超细笔尖永久性记号笔圈出至少五个假定阳性沙门氏菌隔离菌落（如果存在）（图 I）。
b. 使用 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片以生化方式确认所有沙门氏菌假定阳性结果。
请参见生化确认部分。

c. 如果从培养器中取出 Neogen Petrifilm SALX 测试片后，无法在 1 小时内对其进行分析，则首先使用超细笔尖永久性记号笔在上层薄膜上圈出假定沙门氏菌菌落，然后将测试片放入密封塑料袋中，以便之后进行分析。
将 Neogen
Petrifilm SALX 测试片避光储存在 -20ºC 至 -10ºC 温度下不超过 72 小时。
将确认反应片添加到测试片之前，先让测试片恢复到室温（20-25ºC/相对湿度 <60%）。

警告：为了降低因假阴性结果而放行受污染产品的风险和/或产生需要重新进行检测的假阳性结果的可能性，始终使用超细笔尖永久性记号笔在 Neogen Petrifilm SALX 测试片的上层薄膜上圈出典型的假定沙门氏菌菌落，然后妥善储存测试片和/或将 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片放在凝胶上。

生化确认

1. 执行优良实验室规范，以免发生交叉污染和/或直接接触 Neogen Petrifilm SALX 测试片和/或 Neogen Petrifilm SALX 确
认反应片。

2. 从包装袋中取出单独包装的 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片并让其恢复到室温（20-25ºC/相对湿度 <60%）。
然后，撕开包装，将 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片从其独立包装中取出，露出 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片的翼片，抓
住翼片并取出 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片。
3. 掀开 Neogen Petrifilm SALX 测试片的上层薄膜（已经圈出假定沙门氏菌菌落），通过将 Neogen Petrifilm SALX 确认反应
片压盖到凝胶上的方式将其插入，从而避免产生气泡（图 J）。
盖上 Neogen Petrifilm SALX 测试片。

4. 用戴手套的手在上层薄膜上均匀滑动按压，以清除接种区中的气泡，同时确保凝胶与 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片
充分接触（图 K）。

5. 在 41.5 ± 1.0ºC 温度下，以水平位置（正面朝上）将 Neogen Petrifilm SALX 系统（测试片和确认反应片）培养 4-5 小时，最多培养 20 片。

6

6. 将 Neogen Petrifilm SALX 系统从培养器中取出，并读取结果。
只读取圈出的假定沙门氏菌菌落（请参见表 4）：
表 4：Neogen Petrifilm SALX 系统的判读：
绿色到蓝色
✓

菌落颜色

蓝色到深蓝色黑色✓✓ZH （简体中文）

生化确认结果经生化确认 +
经生化确认 +
经生化确认 +

经生化确认的阳性结果：• 绿色到蓝色、蓝色到深蓝色、黑色，或周围存在蓝色沉淀的菌落表示经生化确认沙门氏菌属阳性。
经生化确认的阴性结果：• 仍然为红色、深红色或棕色且没有蓝色沉淀的菌落为沙门氏菌菌阴性。

7. 可能需要对菌落再次进行培养以进一步鉴定。
再次培养时，应穿着适当的防护服并遵守标准优良实验室安全规范 (GLP)2。
a. 掀起上层薄膜，以无菌方式清除凝胶或 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片上的菌落。
如果 Neogen Petrifilm SALX
确认反应片盖住了凝胶，请以无菌方式剥开确认反应片，然后以无菌方式清除凝胶上的菌落。
b. 按照适用的参考方法在菌落上划线6, 7, 8。

8. 如果将测试片从培养器中取出后，无法在 1 小时内再次对菌落进行培养，请将 Neogen Petrifilm SALX 测试片放入密封塑
料袋中，然后存放在 -20ºC 至 -10ºC 的黑暗环境中不超过 72 小时，以备之后进行分析。
再次培养并鉴定前，应让 Neogen
Petrifilm SALX 测试片恢复到室温（20-25ºC/相对湿度 <60%）。
9. 检测完成后，根据当前的行业标准和/或当地法规对 Neogen Petrifilm SALX 测试片和 Neogen Petrifilm SALX 确认反应片进行废弃处理。

更多信息，请参阅 Neogen® Petrifilm® 沙门氏菌快速系统“判读指南”。
如果您对于特定的应用或程序存有疑问，请访问我们的网站 www.neogen.com，也可与您当地的 Neogen 代表或经销商联系以获得帮助。

参考资料

1. McDonough P.L 等人。
(2000)。
美国东北部牛群发酵乳糖的肠道血清型鼠伤寒沙门氏菌的诊断和公共卫生难题。
临床微生
物学杂志。
38:1221-1226。

2. 美国食品药品监督管理局。
美国联邦法规第 21 篇第 58 部分。
非临床实验室研究的优良实验室规范。
3. ISO/IEC 17025:2017。
检测和校准实验室能力的通用要求。

4. ISO 7218。
食品和动物饲料微生物学 — 微生物检验的一般要求和指南。

5. ISO 18593:2004。
食品和动物饲料微生物学 — 利用接触板和棉签进行表面取样的水平方法。

6. 美国食品药品监督管理局微生物学分析手册。
第 5 章沙门氏菌。

7. 美国农业部 (USDA) 微生物实验室指南 4.09。
肉、家禽、巴氏杀菌蛋、鲶形目（鱼类）产品以及胴体和环境海绵中沙门氏菌的分离和鉴定。

8. ISO 6579-1:2017。
食物链微生物学 — 沙门氏菌检测、计数和血清学分型的水平方法 — 第 1 部分：
沙门氏菌属的检测。

请参考以上所列标准方法的现行版本。

符号说明info.neogen.com/symbols

AOAC™是 AOAC International 的注册商标。
官方方法 (OMA)SM是 AOAC International 的服务标志。
性能测试方法SM是 AOAC International 的服务标志。

7

ZH （简体中文）

图 A.

图 B.

图 C.

图 D.

图 E.

图 F.

图 G.

图 H.

图 I.

图 J.

图 K.
8

Neogen Food Safety
Neogen Corporation
620 Lesher Place
Lansing, MI 48912 USA
Neogen.com
Neogen Europe Ltd.
The Dairy School
Auchincruive
Ayr, KA6 5HU
Scotland, UK
Neogen Ireland, Ltd.
Bray Business Park, Bray
Co. Wicklow
A98YV29, Ireland

Neogen Corporation
620 Lesher Place Lansing, MI 48912 USA
www.neogen.com© Neogen Corporation 2024. All rights reserved.
Neogen and Petrifilm are registered trademarks of Neogen Corporation.
FS00828A

TH (ภาษาไทย)วัันที่่�ออก: 2024-01

คำำ�แนะนำำ�การใช้้งานผลิิตภััณฑ์์

ชุุดทดสอบ Salmonella Expressรายละเอีียดผลิิตภััณฑ์์และวััตถุุประสงค์์การใช้้งาน

ชุุดทดสอบ Neogen® Petrifilm® Salmonella Express (SALX) ใช้้สำำ�หรัับการตรวจสอบเชิิงคุุณภาพอย่่างรวดเร็็วและการยืืนยัันทาง
ชีีวเคมีีของเชื้้�อในสปีีชีีส์์ Salmonella ในตััวอย่่างอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อและตััวอย่่างจากสิ่่�งแวดล้้อมกระบวนการแปรรููปอาหาร ชุุดทดสอบ
Neogen Petrifilm SALX ประกอบด้้วย Neogen® อาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�หรัับเชื้้�อซาโมเนลล่่า Neogen® ซััพพลีีเม้้นท์์สำำ�หรัับอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อ
ซาลโมเนลล่่า แผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen® Petrifilm® Salmonella Express (SALX) และแผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล
Neogen Petrifilm® Salmonella Express (SALX) ซึ่่�งบรรจุุแยกทั้้�งหมด
แผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX เป็็นตััวอย่่างระบบการเพาะเลี้้�ยง chromogenic แบบพร้้อมใช้้ที่่�มีีสารก่่อเจล
ละลายในน้ำำ��เย็็น และมีีการคััดเลืือกและแยกชนิิดกััน Salmonella ที่่�ให้้ผลการเบื้้�องต้้น แผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm
SALX มีีสารตั้้�งต้้นทางชีีวเคมีีที่่�ช่่วยในการยืืนยัันทางชีีวเคมีีของจุุลชีีพ Salmonellaสามารถใช้้แผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX โดยมีีหรืือไม่่มีีแผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALXก็็ได้้ แผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX อาจใช้้ร่่วมกัับแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX เท่่านั้้�น
ชุุดทดสอบ Neogen Petrifilm SALX ออกแบบมาให้้ใช้้ในสภาพแวดล้้อมห้้องปฏิิบััติิการ โดยเจ้้าหน้้าที่่�ห้้องปฏิิบััติิการที่่�ผ่่านการอบรม
เทคนิิคการปฏิิบััติิงานในห้้องปฏิิบััติิการ Neogen ยัังไม่่ได้้จััดทำำ�เอกสารเกี่่�ยวกัับการใช้้ผลิิตภััณฑ์์นี้้�ในอุุตสาหกรรมอื่่�นๆ นอกจาก
อุุตสาหกรรมอาหาร ตััวอย่่างเช่่น Neogen ยัังไม่่ได้้ออกเอกสารเกี่่�ยวกัับผลิิตภััณฑ์์นี้้�สำำ�หรัับการทดสอบตััวอย่่างน้ำำ�� ตััวอย่่างยา ตััวอย่่าง
เครื่่�องสำำ�อาง ตััวอย่่างทางคลิินิิก หรืือตััวอย่่างด้้านสััตวแพทย์์ศาสตร์์ ชุุดทดสอบ Neogen Petrifilm SALX ยัังไม่่ได้้รัับการประเมิินกัับ
ผลิิตภััณฑ์์อาหาร กระบวนการแปรรููปอาหารและการแปรรููปอาหาร ระเบีียบการทดสอบที่่�เป็็นไปได้้ทั้้�งหมด หรืือกัับสายพัันธุ์์�แบคทีีเรีียที่่�
เป็็นไปได้้ทั้้�งหมดและอาจตรวจไม่่พบ Salmonella ทุุกสายพัันธุ์์� Neogen ไม่่ได้้ตรวจสอบชุุดทดสอบ Neogen Petrifilm SALX โดยใช้้
ตััวอย่่างคอมโพสิิต
เช่่นเดีียวกัับวิิธีีทดสอบทั่่�ว ๆ ไป สููตรอาหารสำำ�หรัับเพิ่่�มจำำ�นวนเชื้้�อสามารถส่่งผลกระทบต่่อผลของการทดสอบที่่�ได้้ แผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อ
สำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX ได้้รัับการประเมิินเพื่่�อใช้้งานกัับ Neogen อาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�หรัับเชื้้�อ ซาโมเนลล่่า Neogen ซััพพลีี
เม้้นท์์สำำ�หรัับอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อ ซาลโมเนลล่่า และอาหารเหลวเลี้้�ยงเชื้้�อ Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10) เท่่านั้้�น (สููตรทั่่�วไปของ
อาหารเหลวเลี้้�ยงเชื้้�อ R-V R10 เป็็นดัังด้้านล่่างนี้้�):สููตรทั่่�วไป
แมกนีีเซีียมคลอไรด์์ (ปราศจากน้ำำ��) 13.4 กรััม
โซเดีียมคลอไรด์์
7.2 กรััม
เคซีีนเปปโตน
4.54 กรััม
โมโนโพแทสเซีียมฟอสเฟต
1.45 กรััม
มาลาไคท์์กรีีน
0.036 กรััม
น้ำำ��ปราศจากแร่่ธาตุุ
1000.0 มล.
pH 5.1 ± 0.2 @ 25°C
ปรัับค่่า pH ตามที่่�ต้้องการเพื่่�อให้้เป็็นไปตามมาตรฐานการปฏิิบััติิงาน
ส่่วนประกอบของแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX และแผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX นี้้�ได้้
ผ่่านกระบวนการลดการปนเปื้้�อนแต่่ไม่่ผ่่านกระบวนการทำำ�ให้้ปลอดเชื้้�อ Neogen Food Safety ได้้รัับการรัับรองตามมาตรฐานองค์์การ
มาตรฐานสากล (ISO) 9001 ด้้านการออกแบบและการผลิิต ส่่วนประกอบของแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALXและแผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX ยัังไม่่ผ่่านการประเมิินกัับผลิิตภััณฑ์์อาหาร กระบวนการแปรรููปอาหาร ระเบีียบ
การทดสอบ หรืือกัับสายพัันธุ์์�จุุลิินทรีีย์์ทั้้�งหมดที่่�อาจเป็็นไปได้้

ความปลอดภััย

ผู้้�ใช้้ควรอ่่าน ทำำ�ความเข้้าใจ และปฏิิบััติิตามข้้อมููลด้้านความปลอดภััยทั้้�งหมดในคำำ�แนะนำำ�การใช้้งานชุุดทดสอบ Neogen Petrifilm
SALX เก็็บคำำ�แนะนำำ�ด้้านความปลอดภััยนี้้�ไว้้สำำ�หรัับใช้้อ้้างอิิงในอนาคต
คำำ�เตืือน
น:บ่่งชี้้�ว่่าเป็็นสถานการณ์์ที่่�เป็็นอัันตราย ซึ่่�งหากไม่่มีีการหลีีกเลี่่�ยง อาจก่่อให้้เกิิดการเสีียชีีวิิตหรืือการบาดเจ็็บรุุนแรง
และ/หรืือความเสีียหายต่่อทรััพย์์สิินได้้

ข้้อสัังเกต
เกต:ระบุุสถานการณ์์ที่่�อาจจะเป็็นอัันตราย ที่่�หากไม่่หลีีกเลี่่�ยง อาจก่่อให้้เกิิดความเสีียหายต่่อทรััพย์์สิิน

1

TH (ภาษาไทย)คำำ�เตืือน
ห้้ามใช้้ชุุดทดสอบ Neogen Petrifilm SALX ในการวิินิิจฉััยสภาวะต่่างๆ ในมนุุษย์์หรืือสััตว์์
ชุุดทดสอบ Neogen Petrifilm SALX จะไม่่แยกชนิิดอย่่างจำำ�เพาะเจาะจงระหว่่างเชื้้�อ Salmonella sp. (ส่่ส่่วนมากเป็็น S. arizonae
และ S. diarizonae) ที่่�ให้้ผลลบต่่อแลคโตสออกจากจุุลชีีพที่่�ให้้ผลบวกต่่อแลคโตส Salmonella ที่่�ให้้ผลบวกต่่อแลคโตส จะปรากฏเป็็น
non-Salmonella (โคโลนีีสีีฟ้้า โคโลนีีสีีเขีียว โคโลนีีสีีฟ้้าเป็็นสีีเขีียว และ/หรืือโคโลนีีสีีดำำ�ที่่�มีีหรืือไม่่มีีเขตสีีเหลืือง และ/หรืือฟองก๊๊าซที่่�
เกี่่�ยวข้้อง) มีีการระบุุว่่าสายพัันธุ์์�เหล่่านี้้�มีีสััดส่่วนน้้อยกว่่า 1% ของซีีโรไทป์์ Salmonella ทั้้�งหมด1ผู้้�ใช้้งานต้้องฝึึกอบรมบุุคลากรเกี่่�ยวกัับเทคนิิคการทดสอบที่่�ถููกต้้องเหมาะสมในปััจจุุบััน: ตััวอย่่างเช่่น หลัักปฏิิบััติิทางห้้องปฏิิบััติิการที่่�
เหมาะสม2 หรืือ ISO 170253 หรืือ ISO 72184
เพื่่�อลดความเสี่่�ยงที่่�เกี่่�ยวข้้องกัับผลลบปลอมซึ่่�งนำำ�ไปสู่่�การปล่่อยผลิิตภััณฑ์์ที่่�มีีการปนเปื้้�อนไปขาย และ/หรืือความเป็็นไปได้้ของผลลััพธ์์ที่่�
เป็็นผลบวกปลอมซึ่่�งต้้องทำำ�การทดสอบซ้ำำ�� ให้้ปฏิิบััติิดัังนี้้�:
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•

เมื่่�อใช้้งานแต่่ละแผ่่น ให้้ตรวจสอบว่่าแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm Salmonella Express ที่่�ได้้รัับการเติิมน้ำำ��ว่่ามีี
การเปลี่่�ยนสีีของเจลหรืือไม่่
ห้้ามใช้้แผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm Salmonella Express ที่่�มีีสีีผิิดเพี้้�ยนจากปกติิ
ใช้้ชุุดทดสอบ Neogen Petrifilm SALX ก่่อนวัันหมดอายุุเสมอ
ใช้้ชุุดทดสอบ Neogen Petrifilm SALX กัับตััวอย่่างอาหารและตััวอย่่างจากสิ่่�งแวดล้้อมในกระบวนการผลิิตอาหาร ซึ่่�งได้้รัับการ
พิิสููจน์์ยืืนยัันจากผู้้�ใช้้หรืือโดยหน่่วยงานภายนอกแล้้ว
ใช้้ชุุดทดสอบ Neogen Petrifilm SALX กัับพื้้�นผิิว กำำ�จััดสารบััฟเฟอร์์ และระเบีียบวิิธีีทดสอบ ซึ่่�งได้้รัับการพิิสููจน์์ยืืนยัันจากผู้้�ใช้้หรืือ
โดยหน่่วยงานภายนอกแล้้ว
เก็็บชุุดทดสอบ Neogen Petrifilm SALX ตามที่่�ระบุุไว้้บนบรรจุุภััณฑ์์และในคำำ�แนะนำำ�การใช้้งานผลิิตภััณฑ์์
ปฏิิบััติิตามระเบีียบการและขั้้�นตอนดัังที่่�ระบุุไว้้อย่่างชััดเจนในคำำ�แนะนำำ�การใช้้งานผลิิตภััณฑ์์
ควรใช้้ปากกามาร์์คเกอร์์ปลายแหลมแบบถาวรเสมอ เพื่่�อวงกลมจุุดสัันนิิษฐานลัักษณะโคโลนีี Salmonella บนฟิิล์์มด้้านบนก่่อนที่่�จะ
วางแผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX ลงบนเจล

เพื่่�อลดความเสี่่�ยงที่่�เกี่่�ยวข้้องกัับการสััมผััสสารเคมีีหรืือสารอัันตรายทางชีีวภาพ ให้้ปฏิิบััติิดัังนี้้�:
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ให้้ทำำ�การทดสอบเชื้้�อก่่อโรคในห้้องปฏิิบััติิการที่่�มีีอุุปกรณ์์อย่่างเหมาะสมภายใต้้การควบคุุมของบุุคลากรที่่�ได้้รัับการอบรม
ปฏิิบััติิตามแนวปฏิิบััติิที่่�เหมาะสมเพื่่�อความปลอดภััยทางห้้องปฏิิบััติิการมาตรฐานทุุกครั้้�ง (GLP)2 โดยรวมถึึงขั้้�นตอนการควบคุุมโรค
ที่่�เหมาะสม การสวมเครื่่�องแต่่งกายเพื่่�อป้้องกัันและอุุปกรณ์์ปกป้้องดวงตาในขณะที่่�จััดการกัับอุุปกรณ์์การทดสอบและตััวอย่่างการ
ทดสอบหลีีกเลี่่�ยงการสััมผััสโดยตรงกัับอาหารเพิ่่�มจำำ�นวนเชื้้�อและแผ่่นเชื้้�อ
กำำ�จััดอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อและแผ่่นเชื้้�อตาม ระเบีียบข้้อบัังคัับของรััฐบาลและระเบีียบที่่�ใช้้บัังคัับและระเบีียบวิิธีีทางห้้องปฏิิบััติิการที่่�
เกี่่�ยวข้้อง
สวมชุุดป้้องกัันที่่�เหมาะสมในขณะที่่�ใช้้งานแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX เนื่่�องจากส่่วนประกอบบางอย่่าง
อาจก่่อให้้เกิิดภููมิิแพ้้และระคายเคืืองในบางคน

ควรปฏิิบััติิดัังนี้้�เพื่่�อลดการปนเปื้้�อนในสิ่่�งแวดล้้อม:ม• ปฏิิบััติิตามมาตรฐานอุุตสาหกรรมล่่าสุุดและระเบีียบข้้อบัังคัับของท้้องถิ่่�นในการทิ้้�งของเสีียที่่�มีีการปนเปื้้�อนของสิ่่�งเจืือปน

ข้้อสัังเกต
ชุุดทดสอบ Neogen Petrifilm SALX ไม่่สามารถแยกความแตกต่่างสายพัันธุ์์� Salmonella หนึ่่�งออกจากสายพัันธุ์์�อื่่�นได้้
ศึึกษาเอกสารข้้อมููลความปลอดภััยของวััสดุุหากต้้องการทราบข้้อมููลเพิ่่�มเติิม
สำ�หรับข้อมูลเกี่ยวกับเอกสารประสิทธิภาพของผลิตภัณฑ์ โปรดไปที่เว็บไซต์ของเราที่ www.neogen.com หรือติดต่อตัวแทน Neogenของคุณหรือผู้จัดจำ�หน่ายที่ได้รับอนุญาต

ความรัับผิิดชอบของผู้้�ใช้้

ผู้ใช้มีหน้าที่รับผิดชอบในการทําความคุ้นเคยกับคําแนะนําและข้อมูลผลิตภัณฑ์ โปรดไปที่เว็บไซต์ของเราที่ www.neogen.com หรือติดต่อตัวแทน Neogen ของคุณหรือผู้จัดจำ�หน่ายที่ได้รับอนุญาตหากต้องการข้อมูลเพิ่มเติม
การเลือกวิธีทดสอบ จะต้องศึกษาปัจจัยภายนอกต่างๆ ที่อาจส่งผลต่อผลการทดสอบ เช่น วิธีการสุ่มตัวอย่าง ระเบียบวิธีการทดสอบ วิธีการเตรียมตัวอย่าง การจัดการควบคุม และเทคนิคของห้องปฏิบัติการที่อาจกระทบต่อผลการทดสอบได้
ผู้้�ใช้้งานระเบีียบวิิธีีเป็็นผู้้�รัับผิิดชอบในการประเมิินความเหมาะสมสำำ�หรัับการเลืือกวิิธีีการทดสอบหรืือวิิธีีการเลืือกตััวอย่่าง เพื่่�อประเมิิน
จำำ�นวนตััวอย่่างที่่�เพีียงพอกัับเมทริิกซ์์ที่่�เหมาะสมและความสามารถในการเหลืือรอดของจุุลิินทรีีย์์ เพื่่�อให้้ผู้้�ใช้้แน่่ใจว่่าวิิธีีการทดสอบที่่�
เลืือกนั้้�นเป็็นไปตามเกณฑ์์ของผู้้�ใช้้เอง
นอกจากนี้้� ผู้้�ใช้้จะต้้องรัับผิิดชอบในการเลืือกวิิธีีการทดสอบและผลลััพธ์์ที่่�ได้้ให้้เป็็นไปตามข้้อกำำ�หนดของลููกค้้าและของซััพพลายเออร์์
เช่่นเดีียวกัับวิิธีีการทดสอบอื่่�นๆ ผลการทดสอบที่่�ได้้จากการใช้้ผลิิตภััณฑ์์ Neogen Food Safety ใดก็็ตาม ไม่่ได้้รัับประกัันถึึงคุุณภาพ
ของเมทริิกซ์์หรืือขั้้�นตอนที่่�ใช้้ทดสอบ

2

TH (ภาษาไทย)เงื่่�อนไขการรัับประกััน/การชดเชยแบบจำำ�กััด

NEOGEN ปฏิิเสธการรัับประกัันทั้้�งหมดทั้้�งอย่่างชััดแจ้้งและโดยนััย รวมถึึงแต่่ไม่่จำำ�กััดเพีียงการรัับประกัันใด ๆ ถึึงความสามารถในการ
จำำ�หน่่าย หรืือความเหมาะสมสำำ�หรัับการใช้้งานโดยเฉพาะ เว้้นแต่่จะได้้อธิิบายไว้้อย่่างชััดแจ้้งในส่่วนการรัับประกัันแบบจำำ�กััดว่่าด้้วยบรรจุุ
ภััณฑ์์ของผลิิตภััณฑ์์แต่่ละชิ้้�น หากผลิิตภััณฑ์์ Neogen Food Safety ใดๆ มีีตำำ�หนิิบกพร่่อง บริิษััท Neogen หรืือผู้้�จััดจำำ�หน่่ายที่่�ได้้รัับ
อนุุญาตของบริิษััทจะใช้้ดุุลยพิินิิจของตนในการพิิจารณาเปลี่่�ยนแทนผลิิตภััณฑ์์หรืือคืืนเงิินค่่าผลิิตภััณฑ์์ดัังกล่่าว อัันนี้้�คืือการชดเชยพิิเศษ
หากสงสััยว่่ามีีข้้อบกพร่่องหรืือความเสีียหายกัับสิินค้้า ท่่านต้้องแจ้้ง Neogen ภายใน 60 วัันหลัังจากที่่�พบ และทำำ�การคืืนสิินค้้าที่่�เสีียหาย
ให้้ทาง Neogen โปรดโทรติิดต่่อแผนกบริิการลููกค้้า (1-800-328-1671 ในสหรััฐอเมริิกา) หรืือตััวแทน Neogen Food Safety เพื่่�อขอ
สิิทธิ์์�ส่่งคืืนผลิิตภััณฑ์์ โปรดติิดต่่อตััวแทน Neogen ของคุุณหรืือผู้้�จััดจำำ�หน่่าย Neogen ที่่�ได้้รัับอนุุญาตหากมีีคำำ�ถามเพิ่่�มเติิม.

ขอบเขตความรัับผิิดชอบของ Neogen

NEOGEN จะไม่่รัับผิิดชอบต่่อการสููญเสีียหรืือความเสีียหายใดๆ ทั้้�งโดยตรง โดยอ้้อม ความเสีียหายจำำ�เพาะ ที่่�เกิิดขึ้้�นเนื่่�องจากการผิิด
สััญญา หรืือที่่�เป็็นผลสืืบเนื่่�อง รวมถึึงแต่่ไม่่จำำ�กััดเพีียงการสููญเสีียผลกำำ�ไร ความรัับผิิดชอบของทาง Neogen ในทางกฎหมายจะต้้องไม่่
เกิินราคาของผลิิตภััณฑ์์ที่่�เสีียหายหรืือบกพร่่องไม่่ว่่ากรณีีใดๆ ก็็ตาม

การเก็็บรัักษา

การเก็็บรัักษาแผ่่นเชื้้�อ
เมื่่�อได้้รัับแล้้ว ให้้เก็็บแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX ที่่�ยัังไม่่ได้้เปิิดถุุงใช้้งาน ที่่� 2 ถึึง 8ºC อุุปกรณ์์มีีความไวต่่อ
ความชื้้�นและแสง ก่่อนใช้้งาน วางถุุงบรรจุุที่่�ยัังไม่่เปิิดใช้้ทิ้้�งไว้้ที่่�อุุณหภููมิิห้้อง (20 - 25°C / <60% RH) ก่่อนเปิิดใช้้งาน นำำ�แผ่่นอาหาร
เลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX ที่่�ยัังไม่่เปิิดใช้้กลัับเข้้าไว้้ในถุุงบรรจุุตามเดิิม เพื่่�อป้้องกัันความชื้้�น ให้้เก็็บ ถุุงแผ่่นอาหาร
เลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX ที่่�เปิิดแล้้วในถุุงปิิดผนึึก เพื่่�อป้้องกัันแสง ที่่�อุุณหภููมิิ -20 ถึึง -10°C ไม่่เกิิน 4 สััปดาห์์
การเก็็บรัักษาแผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล
แผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX บรรจุุแยกแผ่่นในถุุงฟอยล์์ อุุปกรณ์์มีีความไวต่่อความชื้้�นและแสง เก็็บถุุงแผ่่นดิิสก์์
สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX ที่่�ยัังไม่่ได้้เปิิดใช้้งานที่่�อุุณหภููมิิ 2 ถึึง 8ºC นำำ�แผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm
SALX ออกมาทีีละถุุงที่่�จะนำำ�มาใช้้งานทัันทีีและเก็็บแผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX ที่่�เหลืืออยู่่�ในซองฟอยล์์โดยพัับ
ปลายของซองฟอยล์์ให้้แน่่นแล้้วใช้้เทปกาวปิิด อย่่าแช่่เย็็นถุุงบรรจุุที่่�เปิิดใช้้แล้้วเพื่่�อป้้องกัันไม่่ให้้ความชื้้�นเข้้าไปภายในถุุง แผ่่นดิิสก์์
สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX ที่่�เปิิดแล้้ว เก็็บถุุงที่่�ปิิดผนึึกในที่่�เย็็น (20-25°C) ที่่�แห้้ง (น้้อยกว่่า 60% RH) ไม่่เกิิน 4 สััปดาห์์
หรืือใส่่ถุุงปิิดผนึึกในถุุงปิิดผนึึกซ้ำำ��และเก็็บไว้้ที่่�อุุณหภููมิิ -20 ถึึง -10°C ไม่่เกิิน 5 เดืือน
ห้้ามใช้้แผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX ที่่�มีีสีีผิิดเพี้้�ยนจากปกติิหลัังการการเติิมน้ำำ�� ห้้ามใช้้แผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยััน
ผล Neogen Petrifilm SALX ที่่�มีีสีีผิิดเพี้้�ยนจากปกติิ วัันหมดอายุุและหมายเลขล็็อตจะแสดงไว้้บนบรรจุุภััณฑ์์ของแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อ
สำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX และแผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX แต่่ละกล่่อง ยัังมีีการระบุุหมายเลขล็็อตไว้้
บนแผ่่นเพาะเลี้้�ยงเชื้้�อแต่่ละแผ่่นและบรรจุุภััณฑ์์ของแผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผลแต่่ละแผ่่นอีีกด้้วย

การทิ้้�ง

ภายหลัังจากการใช้้งานแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX และแผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm
SALX อาจจะมีีเชื้้�อจุุลิินทรีีย์์ซึ่่�งอาจก่่อให้้เกิิดอัันตรายทางชีีวภาพได้้ ปฏิิบััติิตามมาตรฐานอุุตสาหกรรมล่่าสุุดและระเบีียบข้้อบัังคัับของท้้อง
ถิ่่�นในการทิ้้�งของเสีียที่่�มีีการปนเปื้้�อนของสิ่่�งเจืือปน ศึึกษาเอกสารข้้อมููลความปลอดภััยของวััสดุุหากต้้องการทราบข้้อมููลเพิ่่�มเติิม

คำำ�แนะนำำ�การใช้้งาน

ปฏิิบััติิตามคำำ�แนะนำำ�ทั้้�งหมดอย่่างละเอีียดรอบคอบ หากไม่่ปฏิิบััติิเช่่นนั้้�น อาจให้้ผลที่่�ไม่่ถููกต้้องแม่่นยำำ�ได้้
สวมใส่่ชุุดป้้องกัันที่่�เหมาะสมและปฏิิบััติิตามแนวทางปฏิิบััติิมาตรฐานที่่�เหมาะสมเพื่่�อความปลอดภััยในห้้องปฏิิบััติิการ (GLP)2
การเพิ่่�มจำำ�นวนเชื้้�อในตััวอย่่าง
อาหารตารางที่่� 1 และ 2 คํําแนะนํําในปััจจุุบัันสํําหรัับตััวอย่่างการทดสอบเมทริิกซ์์ ผู้้�ใช้้มีีหน้้าที่่�รัับผิิดชอบในการพิิสููจน์์ยืืนยัันระเบีียบการสุ่่�ม
ตััวอย่่าง (เช่่น การประกอบองค์์รวม) หรืืออััตราส่่วนการเจืือจางแบบอื่่�นเพื่่�อให้้มั่่�นใจว่่าวิิธีีการทดสอบนี้้�สอดคล้้องกัับเกณฑ์์ของผู้้�ใช้้งาน
เองสำำ�หรัับอาหารที่่�มีีปริิมาณจุุลิินทรีีย์์ต่ำำ��:อาหารที่่�บรรจุุเชื้้�อจุุลิินทรีีย์์ต่ำำ��มีีจำำ�นวนโคโลนีีของแอโรบิิกรวม ≤ 104 cfu/g (Colony Forming Units/Gram) ตััวอย่่างรวมถึึง: อาหารที่่�
ผ่่านการพาสเจอร์์ไรส์์ ปรุุงสุุก หรืือแปรรููป
1. อุ่่�น Neogen อาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�หรัับเชื้้�อซาโมเนลล่่าล่่วงหน้้าพร้้อมเติิม Neogen ซััพพลีีเม้้นท์์สำำ�หรัับอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อซาลโมเนลล่่า
เป็็น 41.5 ± 1.0°C (ดููตาราง 1 และ 2)
2. ผสมอาหารเพิ่่�มจำำ�นวนเชื้้�อกัับตััวอย่่างเข้้าด้้วยกัันโดยใช้้วิิธีีการแบบปลอดเชื้้�อ สำำ�หรัับตััวอย่่างประเภทเนื้้�อสััตว์์และตััวอย่่างที่่�มีี
ลัักษณะเป็็นละอองอนุุภาคขนาดเล็็กทั้้�งหมด แนะนำำ�ให้้ใช้้ถุุงกรองเก็็บตััวอย่่างแบบปลอดเชื้้�อ ทํําให้้เป็็นเนื้้�อเดีียวกัันอย่่างละเอีียดเป็็น
เวลา 2 นาทีี บ่่มที่่� 41.5 ± 1.0°C เป็็นเวลา 18-24 ชั่่�วโมง (ดููตาราง 1 และ 2)

3

TH (ภาษาไทย)สำำ�หรัับอาหารที่่�มีีปริิมาณจุุลิินทรีีย์์สููง:อาหารที่่�มีีปริิมาณจุุลิินทรีีย์์สููงมีีจำำ�นวนโคโลนีีของเชื้้�อแอโรบิิกรวม > 104 cfu/g และจำำ�เป็็นต้้องใช้้อาหารเหลวเลี้้�ยงเชื้้�อ RappaportVassiliadis R10 (R-V R10) ตััวอย่่างรวมถึึง: อาหารที่่�ยัังไม่่ผ่่านการแปรรููป
1. อุ่่�น Neogen อาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�หรัับเชื้้�อซาโมเนลล่่าล่่วงหน้้าพร้้อมเติิม Neogen ซััพพลีีเม้้นท์์สำำ�หรัับอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อซาลโมเนลล่่า
เป็็น 41.5 ± 1.0°C (ดููตาราง 1 และ 2)
2. ผสมอาหารเพิ่่�มจำำ�นวนเชื้้�อกัับตััวอย่่างเข้้าด้้วยกัันโดยใช้้วิิธีีการแบบปลอดเชื้้�อ สำำ�หรัับตััวอย่่างประเภทเนื้้�อสััตว์์และตััวอย่่างที่่�มีี
ลัักษณะเป็็นละอองอนุุภาคขนาดเล็็กทั้้�งหมด แนะนำำ�ให้้ใช้้ถุุงกรองเก็็บตััวอย่่างแบบปลอดเชื้้�อ ทํําให้้เป็็นเนื้้�อเดีียวกัันอย่่างละเอีียดเป็็น
เวลา 2 นาทีี บ่่มที่่� 41.5 ± 1.0°C เป็็นเวลา 18-24 ชั่่�วโมง (ดููตาราง 1 และ 2)
3. หลัังจากการบ่่มเชื้้�อปฐมภููมิิ ย้้ายเชื้้�อปฐมภููมิิ 0.1 มล. ไปยัังอาหารเหลวเลี้้�ยงเชื้้�อ Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10) 10.0 มล.
บ่่มที่่�อุุณหภููมิิ 41.5 ถึึง 1.0°C เป็็นเวลา 8-24 ชั่่�วโมง
ตััวอย่่างจากสิ่่�งแวดล้้อม
สำำ�หรัับการเก็็บตััวอย่่าง ใช้้ฟองน้ำำ��เซลลููโลสที่่�ปราศจากสารละลายไบโอไซด์์ที่่�เติิมน้ำำ��ด้้วย อาหารเหลวเลี้้�ยงเชื้้�อ Dey-Engley (D/E)
Neutralizing Broth ปฏิิบััติิตามขั้้�นตอนผู้้�ใช้้ที่่�กำำ�หนด นำำ�สารละลายอาหารเหลวเลี้้�ยงเชื้้�อ D/E Neutralizing Broth ใด ๆ ที่่�ตกค้้างจาก
พื้้�นผิิวตััวอย่่างออก
ขนาดพื้้�นที่่�เก็็บตััวอย่่างที่่�แนะนำำ�เพื่่�อตรวจสอบยืืนยัันการมีีอยู่่�หรืือการไม่่มีีอยู่่�ของเชื้้�อก่่อโรคบนพื้้�นผิิวคืือขนาดอย่่าง 100 ซม.2
(10 ซม. x 10 ซม. หรืือ 4 นิ้้�ว x 4 นิ้้�ว)5 เมื่่�อเก็็บตััวอย่่างด้้วยฟองน้ำำ�� ครอบคลุุมพื้้�นที่่�ทั้้�งหมดในสองทิิศทาง (จากซ้้ายไปขวาจากนั้้�นขึ้้�น
และลง)
1. อุ่่�น Neogen อาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�หรัับเชื้้�อซาโมเนลล่่าล่่วงหน้้าพร้้อมเติิม Neogen ซััพพลีีเม้้นท์์สำำ�หรัับอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อซาลโมเนลล่่า
เป็็น 41.5 ± 1.0°C (ดููตาราง 1 และ 2)
2. ผสมอาหารเพิ่่�มจำำ�นวนเชื้้�อกัับตััวอย่่างเข้้าด้้วยกัันโดยใช้้วิิธีีการแบบปลอดเชื้้�อ ผสมให้้เข้้ากััน บ่่มที่่�อุุณหภููมิิ 41.5 ถึึง 1.0°C เป็็นเวลา
18-24 ชั่่�วโมง
3. หากตััวอย่่างจากสิ่่�งแวดล้้อมมีีปริิมาณจุุลิินทรีีย์์สููง (จำำ�นวนโคโลนีีของแอโรบิิกรวม > 104 cfu/g) จากนั้้�นหลัังการบ่่มเชื้้�อปฐมภููมิิ ย้้าย
เชื้้�อปฐมภููมิิ 0.1 มล. ไปยัังอาหารเหลวเลี้้�ยงเชื้้�อ Rappaport-Vassiliadis R10 (R-V R10) 10.0 มล. บ่่มที่่�อุุณหภููมิิ 41.5 ถึึง 1.0°Cเป็็นเวลา 8-24 ชั่่�วโมง
4. หากตััวอย่่างจากสิ่่�งแวดล้้อมมีีปริิมาณจุุลิินทรีีย์์ต่ำำ�� (จำำ�นวนโคโลนีีของเชื้้�อแอโรบิิกรวม ≤ 104 cfu/u) จากนั้้�นข้้ามขั้้�นตอนที่่� 3 ได้้ใบรัับรอง AOAC® Official Method of AnalysisSM (OMA) 2014.01
AOAC® Performance TestedSM (PTM) หมายเลข 061301

จากการศึึกษา OMASM และ PTMSM ของสถาบัันวิิจัยั AOAC Research Institute พบว่่าชุุดทดสอบ Neogen Petrifilm SALX เป็็นวิิธีีการที่่�
มีปี ระสิิทธิิภาพในการตรวจหา เชื้้�อซาลโมเนลล่่า เมทริิกซ์์ที่ไ�่ ด้้รับั การทดสอบในการศึึกษาดัังกล่่าวแสดงไว้้ในตาราง 1 ขีีดจำำ�กััดในการตรวจ
หาเชื้้�อของวิิธีีทดสอบของชุุดทดสอบ Neogen Petrifilm SALX คืือ 1-5 cfu/g ต่่อขนาดการทดสอบที่่ต� รวจสอบแล้้ว (ในตาราง 1)

4

TH (ภาษาไทย)ตาราง 1: ตััวอย่่างขั้้�นตอนปฏิิบััติิในการเพิ่่�มจำำ�นวนเชื้้�อตามมาตรฐาน AOAC OMASM 2014.01 และตามใบรัับรอง AOAC PTMSM
หมายเลข 061301
เมทริิกซ์์การ
ทดสอบปริิมาณ
จุุลิินทรีีย์์สููง

ขนาดตััวอย่่าง

การเพิ่่�มจำำ�นวนเชื้้�อปฐมภููมิิ

อาหารสำำ�หรัับ
เพิ่่�มจำำ�นวนเชื้้�อ

อุุณหภููมิิ
(±1.0°C)เวลาการเพิ่่�ม
จำำ�นวนเชื้้�อ
(ชั่่�วโมง)225

อาหารเหลวเลี้้�ยง
เชื้้�อ R-V R10:
0.1 มล. ไปยััง
10.0 มล.

41.5

8-24

25 กรััม

225

อาหารเหลวเลี้้�ยง
เชื้้�อ R-V R10:
0.1 มล. ไปยััง
10.0 มล.

41.5

8-24

ไข่่ดิิบทั้้�งฟอง
ที่่�ผ่่านการ
พาสเจอร์์ไรซ์์
แล้้ว

100 กรััม

900อาหารสุุนััข
ชนิิดแห้้ง

375 กรััม

3375

เนื้้�อวััวดิิบบด
เนื้้�อหมููดิิบบด
เนื้้�อไก่่ดิิบบด
กุ้้�งแช่่แข็็ง
ที่่�ไม่่ผ่่านการ
ปรุุงสุุก

ผัักโขมมััดสด

✓✓25 กรััม

ปริิมาตรการ
เพิ่่�มเชื้้�อ (มล.)

25 กรััม

225

สภาพแวดล้้อม –พื้้�นผิิว เหล็็ก
สแตนเลส
(ขนาดตััวอย่่าง
100 ซม.2)

ฟองน้ำำ��
1 ชิ้้�น

225

นัักเก็็ตไก่่
ปรุุงสุุก

25 กรััม

225✓

อุุณหภููมิิ
(±1.0°C)เวลาการเพิ่่�ม
จำำ�นวนเชื้้�อ
(ชั่่�วโมง)การเพิ่่�มจำำ�นวนเชื้้�อทุุติิยภููมิิ

อาหารที่่�มีีจุุลิินทรีีย์์ต่ำำ��ไม่่จํําเป็็นต้้องใช้้

41.5

18-24

อาหารที่่�มีีจุุลิินทรีีย์์ต่ำำ��ไม่่จํําเป็็นต้้องใช้้
อาหารเหลว
เลี้้�ยงเชื้้�อ R-V
R10: 0.1 มล.
ไปยััง 10.0 มล.

41.5

24

ตััวอย่่างที่่�มีีจุุลิินทรีีย์์ต่ำำ��ไม่่จํําเป็็นต้้องใช้้

5

TH (ภาษาไทย)สำำ�หรัับเมทริิกซ์์อื่่�น ๆ:ๆตาราง 2: ตััวอย่่างระเบีียบวิิธีีการเพิ่่�มจำำ�นวนเชื้้�อ
การเพิ่่�มจำำ�นวนเชื้้�อปฐมภููมิิ
เมทริิกซ์์
ปริิมาณ
การทดสอบ จุุลิินทรีีย์์สููง
อาหาร:
เนื้้�อสััตว์์
ดิิบ สััตว์์
ปีีก อาหาร
ทะเลและ
เนื้้�อปลา

✓อาหารสััตว์์

ขนาดตััวอย่่าง

ปริิมาตรการ
เพิ่่�มเชื้้�อ (มล.)

25 กรััม

225

375 กรััม

3375

อุุณหภููมิิ
(±1.0°C)✓

25 กรััม

225

จากสิ่่�ง
แวดล้้อม

*ฟองน้ำำ��
1 ชิ้้�น

225

อาหารอื่่�น ๆ*ปฏิิบััติิตามวิิธีีการอ้้างอิิง
ที่่�เหมาะสมสำำ�หรัับขนาด
ตััวอย่่างและปริิมาณเชื้้�อ

เวลาการเพิ่่�ม
จำำ�นวนเชื้้�อ
(ชั่่�วโมง)อาหารสำำ�หรัับ
เพิ่่�มจำำ�นวนเชื้้�อ

อุุณหภููมิิ
(±1.0°C)เวลาการเพิ่่�ม
จำำ�นวนเชื้้�อ
(ชั่่�วโมง)อาหารเหลวเลี้้�ยง
เชื้้�อ R-V R10:
0.1 มล. ไปยััง
10.0 มล.

41.5

8-24

อาหารที่่�มีีจุุลิินทรีีย์์ต่ำำ��ไม่่จํําเป็็นต้้องใช้้
41.5

อาหาร:
ผลผลิิต

การเพิ่่�มจำำ�นวนเชื้้�อทุุติิยภููมิิ

18-24อาหารเหลวเลี้้�ยง
เชื้้�อ R-V R10:
0.1 มล. ไปยััง
10.0 มล.

41.5

8-24

ตััวอย่่างที่่�มีีจุุลิินทรีีย์์ต่ำำ��ไม่่จํําเป็็นต้้องใช้้

* ตััวอย่่างจากสิ่่�งแวดล้้อมและอาหารอื่่�น ๆ อาจมีีปริิมาณจุุลิินทรีีย์์สููงและจำำ�เป็็นต้้องใช้้การเพิ่่�มจำำ�นวนเชื้้�อแบบทุุติิยภููมิิด้้วย R-V R10การเติิมน้ำำ��แผ่่นละลาย
1. ใช้้สารละลายสำำ�หรัับเจืือจางปลอดเชื้้�อที่่�กำำ�หนดเพื่่�อเติิมน้ำำ��ให้้แผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX:สารละลายสำำ�หรัับเจืืองจาง Butterfield's phosphate, น้ำำ��กลั่่�น หรืือน้ำำ�� Reverse Osmosis
2. วางแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX บนพื้้�นผิิวเรีียบและอยู่่�ในแนวราบ (รููป ก)
3. เปิิดแผ่่นฟิิล์์มที่่�อยู่่�ด้้านบนขึ้้�นและหยดสารละลายตััวอย่่างในแนวตั้้�งฉากด้้วยปิิเปตต์์ 2.0 มล. ± 0.1 มล. ของสายละลายสำำ�หรัับเจืือจาง
ปลอดเชื้้�อลงตรงกลางของก้้นฟิิล์์ม (รููป ข) อย่่าปิิดฟิิล์์มด้้านบนก่่อนถึึงปริิมาตร 2.0 มล.
4. ค่่อย ๆ ม้้วนฟิิล์์มด้้านบนลงบนสารละลายสำำ�หรัับเจืือจางเพื่่�อป้้องกัันไม่่ให้้เกิิดฟองอากาศ (รููป ค)
5. วางตััวกดแบบเรีียบ Neogen® Petrifilm® (แค็็ตตาล็็อก #6425) กดบนตรงกลางของแผ่่นเพาะเลี้้�ยงเชื้้�อ กดเบาๆ บริิเวณส่่วนกลาง
ของตััวกดแบบเรีียบเพื่่�อให้้ตััวทำำ�ละลายกระจายอย่่างสม่ำำ��เสมอ เกลี่่�ยสารละลายสำำ�หรัับเจืือจางให้้ทั่่�วทั้้�งบริิเวณที่่�เชื้้�อเจริิญเติิบโตบน
แผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX ก่่อนที่่�เจลจะก่่อตััวขึ้้�น ห้้ามเลื่่�อนตััวกดแบบเรีียบไปมาบนแผ่่นฟิิล์์ม (รููป ง)
6. นำำ�ตััวกดแบบเรีียบออก และห้้ามทำำ�สิ่่�งใดกัับแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX อย่่างน้้อย 1 นาทีี
7. วางแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX บนพื้้�นเรีียบอย่่างน้้อย 1 ชั่่�วโมงที่่�อุุณหภููมิิห้้อง (20-25°C / <60% RH)เพื่่�อป้้องกัันแสง ให้้เจลก่่อตััว แผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX ที่่�เติิมน้ำำ��แล้้วสามารถเก็็บไว้้ที่่�อุุณหภููมิิห้้อง
(20-25°C / <60% RH) เพื่่�อป้้องกัันแสง นานถึึง 8 ชั่่�วโมงก่่อนการใช้้งาน หากแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm
SALX ที่่�เติิมน้ำำ��แล้้วจะใช้้งานไม่่ได้้ภายใน 8 ชั่่�วโมงให้้เก็็บไว้้ในถุุงพลาสติิกที่่�ปิิดผนึึก ป้้องกัันแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen
Petrifilm SALX จากแสง และแช่่เย็็นที่่�อุุณหภููมิิ -20 ถึึง -10°C ได้้นานถึึง 5 วััน8. หลัังจากแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX ถููกนำำ�ออกจากที่่�จััดเก็็บ ให้้ปล่่อยทิ้้�งไว้้ให้้อุ่่�นขึ้้�นที่่�อุุณหภููมิิห้้องก่่อน
การใช้้งาน
การนํําแบคทีีเรีียไปเพาะเชื้้�อบนแผ่่นเพาะเชื้้�อ (Inoculation)
1. นำำ�อาหารสำำ�หรัับเพิ่่�มจำำ�นวนเชื้้�อออกจากตู้้�อบและเขย่่าเครื่่�องด้้วยมืือ
2. ใช้้ลููปปราศจากเชื้้�อ 10 µL (เส้้นผ่่านศููนย์์กลาง 3 มม.) เพื่่�อเก็็บแต่่ละตััวอย่่าง ใช้้ลููปที่่�เรีียบ (ไม่่มีีขอบหยัักและไม่่บิิดเบี้้�ยว) เพื่่�อป้้องกััน
ไม่่ให้้ผิิวเจลแตก
3. เปิิดแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX และขีีดเชื้้�อลงบนเจล (รููป จ) ขีีดเชื้้�อเส้้นเดีียวเพื่่�อให้้โคโลนีีที่่�แยกกลุ่่�ม
กััน (รููปที่่� 1)

6

TH (ภาษาไทย)InicioFinalรููปที่่� 1 ขีีดเชื้้�อบนแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX
4. ม้้วนฟิิล์์มด้้านบนของแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX เพื่่�อปิิด
5. สวมถุุงมืือ (ในขณะที่่�ปฏิิบััติิตามหลัักปฏิิบััตของห้้องปฏิิบััติิการที่่�ทีีดีีเพื่่�อหลีีกเลี่่�ยงการปนเปื้้�อนข้้ามและ/หรืือการสััมผััสโดยตรงกัับแผ่่น
เพาะเชื้้�อ) ลููบอย่่างเบามืือและกดบนฟิิล์์มด้้วยแรงที่่�สม่ำำ��สม่ำำ��กััน เพื่่�อกำำ�จััดฟองอากาศในบริิเวณที่่�มีีนำำ�เชื้้�อไปเพาะ (รููป ฉ)การบ่่มแผ่่นเพาะเชื้้�อ
นำำ�แผ่่นเพาะเชื้้�อไปบ่่มที่่�อุุณหภููมิิ 41.5 ± 1.0°C เป็็นเวลา 24 ± 2 ชั่่�วโมง ในแนวนอนหัันด้้านที่่�มีีสีีขึ้้�นบน วางซ้้อนกัันไม่่เกิิน 20 ชั้้�น
การแปลผลการตรวจวิิเคราะห์์
1. นำำ�แผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX ออกจากเครื่่�องบ่่มเพาะและดำำ�เนิินการอ่่านผลลััพธ์์ที่่�มองเห็็น

ttern_FS.ai2. การใช้้แสงด้้านหลัังโดยอ้้อมอาจช่่วยเพิ่่�มการอ่่านสีีโคโลนีี เขตสีีเหลืืองที่่�แยกกัันและฟองก๊๊าซที่่�เกี่่�ยวข้้องกัับโคโลนีีเชื้้�อ
3. สำำ�หรัับการแปลผลการตรวจวิิเคราะห์์ ตรวจสอบโคโลนีีที่่
�แยกด้้
This artwork has
beenวยสายตา โปรดดููตาราง 3 ไม่่ต้้องนัับจำำ�นวนฟองอากาศที่่�เกิิดขึ้้�นที่่�
created as requested by 3M.
อาจมีีอยู่่�
3M is responsible for the

AS APPROVED
4. สปีีชีีส์์ Salmonella ที่่�ให้้ผลบวกเบื้้�องต้้นเป็็นartworkสีีแดงถึึงสีีน้ำำ
��ตาลที่่�มีีเandขตสีีเหลืืองหรืือฟองก๊๊าซที่่�เกี่่�ยวข้้องหรืือทั้้�งสองอย่่าง (รููป ช) ฟอง
full
responsibilityก๊๊าซที่่�เกี่่�ยวข้้องดููจากกลุ่่�มที่่�อยู่่�ภายในรััศมีีเส้้assumes
น
ผ่่
า
นศูู
น
ย์์
ก
ลางหนึ่่
ง�โคโลนีีจากโคโลนีีนั้้�น (โปรดดููตาราง 3 ด้้านล่่าง)for its correctness.

ตาราง 3: การแปลผลการตรวจวิิเคราะห์์สำำ�หรัับสปีีชีีส์์ Salmonella ที่่�ให้้ผลบวกเบื้้�องต้้น
สีีของโคโลนีี
สีีแดง

สีีแดงเข้้ม

เมตาบอลิิสมของโคโลนีี
สีีน้ำำ��ตาล

✓เขตสีีเหลืือง

ผลการตรวจ

ฟองก๊๊าซ

ผลเบื้้�องต้้นเป็็น +

✓

✓
✓

✓
✓

✓

ผลเบื้้�องต้้นเป็็น +✓ผลเบื้้�องต้้นเป็็น +ผลเบื้้�องต้้นเป็็น +

✓

✓
✓

✓
✓

ผลเบื้้�องต้้นเป็็น +✓ผลเบื้้�องต้้นเป็็น +ผลเบื้้�องต้้นเป็็น +

✓

✓
✓

✓

✓

✓

ผลเบื้้�องต้้นเป็็น +✓ผลเบื้้�องต้้นเป็็น +สปีีชีีส์์ Non-Salmonella (รููป ซ):• โคโลนีีสีีฟ้้า โคโลนีีสีีเขีียว โคโลนีีฟ้้าไปเขีียว และ/หรืือโคโลนีีสีีดำำ�ที่่�มีีหรืือไม่่มีีเขตสีีเหลืืองและ/หรืือมีีฟองก๊๊าซเกี่่�ยวข้้องเป็็นจุุลชีีพ
non-Salmonella• โคโลนีีสีีแดง สีีแดงเข้้ม และสีีน้ำำ��ตาลที่่�ไม่่มีีเขตสีีเหลืืองที่่�ไม่่มีีก๊๊าซเกี่่�ยวข้้องเป็็นจุุลชีีพ non-Salmonella• โคโลนีีสีีแดง สีีแดงเข้้ม และสีีน้ำำ��ตาลที่่�มีีเขตสีีม่่วงแดงเป็็นจุุลชีีพ non-Salmonella7TH (ภาษาไทย)หากผลเบื้้�องต้้นไม่่พบโคโลนีีของ Salmonella เป็็นบวก แสดงว่่าไม่่มีีการตรวจพบเชื้้�อ Salmonella ในเมทริิกซ์์
ผลเบื้้�องต้้นของสปีีชีีส์์ Salmonella:หากผลเบื้้�องต้้นพบโคโลนีีของ Salmonella เป็็นบวก ให้้ทํําตามขั้้�นตอนต่่อไปนี้้�และดํําเนิินต่่อไปยัังขั้้�นตอนการยืืนยัันทางชีีวเคมีี:ก. ด้้านบนของฟิิล์์มแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX วงกลมอย่่างน้้อยห้้าโคโลนีีที่่�ให้้ผลเบื้้�องต้้นเป็็นบวก
สำำ�หรัับ Salmonella (หากมีี) โดยใช้้ปากกามาร์์คเกอร์์ปลายแหลมแบบถาวร (รููป ฌ)
ข. ยืืนยัันทางชีีวเคมีีผล Salmonella ที่่�ผลเบื้้�องต้้นเป็็นบวกโดยใช้้แผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX ดููหมวดการ
ยืืนยัันทางชีีวเคมีี
ค. หากแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX ไม่่สามารถวิิเคราะห์์ได้้ภายใน 1 ชั่่�วโมงหลัังจากนำำ�ออกจาก
เครื่่�องบ่่มเพาะ ขั้้�นแรก วงกลมโคโลนีี Salmonella ที่่�ให้้ผลเบื้้�องต้้นเป็็นบวกด้้านบนแผ่่นฟิิล์์ม โดยใช้้ปากกามาร์์คเกอร์์ปลาย
แหลมแบบถาวร แล้้วนำำ�แผ่่นเพาะเชื้้�อมาใส่่ในถุุงพลาสติิกที่่�ปิิดสนิิทเพื่่�อทำำ�การวิิเคราะห์์ในภายหลััง ป้้องกัันแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อ
สำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX จากแสงและเก็็บที่่�อุุณหภููมิิ -20 ถึึง -10°C ไม่่เกิิน 72 ชั่่�วโมง ให้้แผ่่นเพาะเชื้้�ออุ่่�นขึ้้�นโดยใช้้
ความร้้อนที่่�อุุณหภููมิิห้้อง (20-25°C / <60% RH) ก่่อนจะเพิ่่�มดิิสก์์ลงในแผ่่นเพาะเชื้้�อ
คำำ�เตืือน:น เพื่่�อลดความเสี่่�ยงที่่�เกี่่�ยวข้้องกัับผลลบปลอมซึ่่�งนำำ�ไปสู่่�การปล่่อยผลิิตภััณฑ์์ที่่�มีีการปนเปื้้�อนไปขายและความเป็็นไปได้้ของ
ผลบวกปลอม ต้้องทำำ�การทดสอบซ้ำำ��โดยใช้้ปากกามาร์์คเกอร์์ปลายแหลมแบบถาวรเสมอ เพื่่�อวงลัักษณะของโคโลนีี Salmonella จากผล
เบื้้�องต้้นที่่�ด้้านบนของฟิิล์์มแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX ก่่อนการเก็็บรัักษาแผ่่นเพาะเชื้้�อที่่�เหมาะสมและ/หรืือ
ก่่อนจะวางแผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX ลงบนเจล

การยืืนยัันทางชีีวเคมีี

1. ดำำ�เนิินการตามหลัักห้้องปฏิิบััติิการที่่�ดีีเพื่่�อหลีีกเลี่่�ยงการปนเปื้้�อนข้้ามและ/หรืือสััมผััสโดยตรงกัับแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป
Neogen Petrifilm SALX และ/หรืือแผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX
2. นำำ�แผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX ที่่�บรรจุุแยกแผ่่นออกจากถุุงและให้้อยู่่�ในอุุณหภููมิิห้้อง (20-25°C / <60%
RH) หลัังจากนั้้�นนำำ�แผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX ออกจากการบรรจุุแยกแผ่่นโดยแกะบรรจุุภััณฑ์์เพื่่�อแสดง
แท็็บของแผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX จัับแท็็บและนำำ�แผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALXออก
3. ยกแผ่่นฟิิล์์มด้้านบน (โดยที่่�วงกลมโคโลนีีที่่�ให้้ผลเบื้้�องต้้นว่่าเป็็น Salmonella แล้้ว) ของแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen
Petrifilm SALX ขึ้้�นและใส่่แผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX โดยม้้วนไปบนเจลเพื่่�อหลีีกเลี่่�ยงการทำำ�ให้้เกิิดฟอง
อากาศ (รููป ญ) ปิิดแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX
4. สวมถุุงมืือ ลููบเบา ๆ และกดบนแผ่่นฟิิล์์มด้้วยแรงที่่�สม่ำำ��เสมอเพื่่�อกำำ�จััดฟองอากาศในบริิเวณที่่�เพาะเชื้้�อลงไป และต้้องแน่่ใจว่่าเจลและ
แผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX มีีการสััมผััสกัันดีี (รููป ฎ)
5. บ่่มชุุดทดสอบ Neogen Petrifilm SALX (แผ่่นเพาะเชื้้�อและแผ่่นดิิสก์์) ที่่�อุุณหภููมิิ 41.5 ± 1.0°C เป็็นเวลา 4 - 5 ชั่่�วโมง ในแนวนอน
หัันด้้านขวาขึ้้�นบน วางซ้้อนกัันไม่่เกิิน 20 ชั้้�น
6. นำำ�ชุุดทดสอบ Neogen Petrifilm SALX ออกจากเครื่่�องบ่่มเพาะและดำำ�เนิินการอ่่านผลลััพธ์์
อ่่านเฉพาะจุุดที่่�วงกลมโคโลนีีที่่�ให้้ผลเบื้้�องต้้นว่่าเป็็น Salmonella (โปรดดูู
โปรดดููตาราง 4):ตาราง 4: การแปลผลการตรวจวิิเคราะห์์ของชุุดทดสอบ Neogen Petrifilm SALXสีีของโคโลนีี
สีีเขีียวไปสีีฟ้้า

สีีฟ้้าไปสีีน้ำำ��เงิิน

สีีดำำ�

ผลการยืืนยัันทางชีีวเคมีี
ได้้รัับการยืืนยัันทางชีีวเคมีี +✓ได้้รัับการยืืนยัันทางชีีวเคมีี +✓✓ได้้รัับการยืืนยัันทางชีีวเคมีี +ได้้รัับผลการยืืนยัันทางชีีวเคมีีว่่าเป็็นบวก:• โคโลนีีที่่�มีีสีีเขีียวไปสีีฟ้้า สีีฟ้้าไปสีีน้ำำ��เงิิน หรืือสีีดำำ� หรืือมีีการตกตะกอนสีีฟ้้ารอบ ๆ โคโลนีีได้้รัับการยืืนยัันทางชีีวเคมีีว่่าเป็็นบวก
สำำ�หรัับสปีีชีีส์์ Salmonellaได้้รัับผลการยืืนยัันทางชีีวเคมีีเป็็นลบ:• โคโลนีีที่่�ยัังคงเป็็นสีีแดง สีีแดงเข้้ม หรืือสีีน้ำำ��ตาลโดยไม่่มีีตะกอนสีีฟ้้าเป็็นผลลบสำำ�หรัับสปีีชีีส์์ Salmonella
7. อาจนำำ�โคโลนีีไปเพาะเชื้้�อต่่อเพื่่�อจำำ�แนกชนิิดเพิ่่�มเติิมได้้ เมื่่�อนำำ�ไปเพาะเชื้้�อต่่อ สวมใส่่ชุุดป้้องกัันที่่�เหมาะสมและปฏิิบััติิตามแนวทาง
ปฏิิบััติิมาตรฐานที่่�เหมาะสมเพื่่�อความปลอดภััยในห้้องปฏิิบััติิการ (GLP)2
ก. ยกฟิิล์์มด้้านบนขึ้้�นและนำำ�โคโลนีีออกจากเจลหรืือแผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX อย่่างปลอดเชื้้�อ หากแผ่่น
ดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล Neogen Petrifilm SALX ห่่อเจลอยู่่� แกะแผ่่นดิิสก์์ออกอย่่างปลอดเชื้้�อแล้้วจึึงนำำ�โคโลนีีออกจากเจล
ข. ให้้ขีีดเชื้้�อจากโคโลนีีเป็็นไปตามวิิธีีการอ้้างอิิงที่่�เหมาะสม6, 7, 8

8

TH (ภาษาไทย)8. หากโคโลนีีไม่่สามารถเพาะเชื้้�อต่่อได้้ภายใน 1 ชั่่�วโมงของการนำำ�แผ่่นจากเครื่่�องบ่่มเพาะ ให้้เก็็บแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป
Neogen Petrifilm SALX เพื่่�อวิิเคราะห์์ในภายหลัังโดยใส่่ไว้้ในถุุงพลาสติิกปิิดผนึึกที่่�อุุณหภููมิิ -20 ถึึง -10°C ไม่่เกิิน 72 ชั่่�วโมงใน
ที่่�มืืด ให้้แผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX อุ่่�นขึ้้�นที่่�อุุณหภููมิิห้้อง (20-25°C / <60% RH) ก่่อนจะดํําเนิินการ
เพาะเชื้้�อต่่อเพื่่�อระบุุเชื้้�อ
9. หลัังจากการทดสอบเสร็็จสิ้้�นให้้กำำ�จััดแผ่่นอาหารเลี้้�ยงเชื้้�อสำำ�เร็็จรููป Neogen Petrifilm SALX และแผ่่นดิิสก์์สำำ�หรัับยืืนยัันผล
Neogen Petrifilm SALX ตามมาตรฐานอุุตสาหกรรมในปััจจุุบัันและ/หรืือข้้อบัังคัับท้้องถิ่่�น
สำำ�หรัับข้้อมููลเพิ่่�มเติิม โปรดดููในหััวข้้อ "คู่่�มืือการแปลผล" ชุุดทดสอบ Neogen® Petrifilm® Salmonella Express หากท่่านมีีข้้อสงสััย
เกี่่�ยวกัับการใช้้งานหรืือกรรมวิิธีีที่่�เฉพาะเจาะจงใดๆ โปรดเยี่่�ยมชมเว็็บไซต์์ของเราที่่� www.neogen.com หรืือติิดต่่อตััวแทนจำำ�หน่่ายหรืือ
ผู้้�จััดจำำ�หน่่ายของบริิษััท Neogen ในท้้องถิ่่�นของท่่าน

ข้้อมููลอ้้างอิิง

1. McDonough P.L, et al. (2000). Diagnostic and Public Health Dilemma of Lactose-Fermenting Salmonella enterica
Serotype Typhimurium in Cattle in the Northeastern United States. J. Clin. Microbiol. 38:1221-1226.
2. U.S. Food and Drug Administration. Code of Federal Regulations, Title 21, Part 58. Good Laboratory Practice forNonclinical Laboratory Studies.
3. ISO/IEC 17025:2017. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
4. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiologicalexaminations.
5. ISO 18593:2004. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal methods for sampling techniquesfrom surfaces using contact plates and swabs.
6. US Food and Drug Administration Bacteriological Analytical Manual. Chapter 5 Salmonella
7. US Department of Agriculture (USDA) Microbiology Laboratory Guidebook 4.09. Isolation and Identification of
Salmonella from Meat, Poultry, Pasteurized Egg, and Siluriformes (Fish) Products and Carcass and Environmental
Sponges.
8. ISO 6579-1:2017. Microbiology of the food chain – Horizontal method for the detection, enumeration andserotyping of Salmonella – Part 1: Detection of Salmonella spp.
โปรดอ้้างอิิงวิิธีีการมาตรฐานฉบัับปััจจุุบัันที่่�แสดงรายการไว้้ข้้างต้้น

คำำ�อธิิบายสััญลัักษณ์์

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Performance Tested MethodsSM เป็นเครื่องหมายบริการของ AOAC International9TH (ภาษาไทย)รููป ก

รููป ข

รููป ค

รููป ง

รููป จ

รููป ฉ

รููป ช

รููป ซ

รููป ฌ

รููป ญ

รููป ฎ
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