The Journal of Farm Animal in Infectious Disease
Vol.7 No.3 2018

EFFECT OF URSODEOXYCHOLIC ACID ON THE INTRODUCED CATTLE

原著論文

黒毛和種肥育導入牛に対するウルソデオキシコール酸投与が血液性状および疾病発生状況に及ぼす影響
松田敬一 1）、前田洋佑 2）、高橋史昭 2）
所属機関： 1）宮城県農業共済組合〒 981-3602
2）北里大学

連絡先：981-3602
TEL：022-345-2239

宮城県黒川郡大衡村大衡字平林 39-4

獣医学部

〒 034-8628
連絡責任者の氏名：

家畜診療研修所

青森県十和田市東二十三番町 35-1

松田敬一

宮城県黒川郡大衡村大衡字平林 39-4
FAX：022-345-0891

Ｅ -mail：matsuda@nosaimiyagi.or.jp［要約］

肥育牛は家畜市場を経て導入されるが、移動によるストレスによって負のエネルギーバランス（NEB）
を招き、牛の体調を悪化させている。ウルソデオキシコール酸（UDCA）は消化吸収を改善させる作用がある。我々は黒毛和種肥育導入牛に UDCA を投与し、牛の血液性状および疾病発生数に及ぼす影響を調査した。調査には約 9 カ月齢の黒毛和種牛 12 頭を供試した。導入後 3 日間 UDCA 製剤（50 ｇ /日 / 頭）を経口投与した 6 頭を投与群、無投与の 6 頭を対照群とした。肥育農場に到着直後（0 日）、3、7、および 14 日後に採血し、血液化学検査、免疫細胞数、サイトカイン mRNA 発現量を調査した。0日の採血後にビタミン A（VA）100 万 IU を給与した。調査期間中の疾病発生頭数を（調査した。VAは対照群で 0 日に比べ投与後 3 日以降で有意に減少した（P<0.01）。AST は投与群で 0 日に比べ 3 日後以降で有意に減少し（P<0.01）、対照群の 3 日後が投与群に比べ有意に高かった（P<0.05）。遊離脂肪酸は両群で 0 日に比べ 3 日以降で有意に減少し（P<0.01）、投与群は対照群に比べ有意な低値で推移した（P<0.01）。免疫細胞数に有意な変化は認められなかった。サイトカイン IL-8 の mRNA 発現量では、投与群の投与後 3 日が対照群に比べ有意に低くかった（P<0.05）。調査期間中、対照群にのみ呼吸器感染症が 3 頭発生した。UDCA にはビタミン吸収促進作用、消化吸収改善作用、肝細胞保護作用、および炎症性サイトカイン抑制作用があり、これらの作用により輸送後の体調悪化を防ぎ、投与群で疾病が発生しなかったと考えられる。
キーワード：黒毛和種肥育導入牛、負のエネルギーバランス、ウルソデオキシコール酸

現在、畜産業界の広域化により肥育農場が素り免疫力が低下することが報告されており［10,牛を導入する際に長距離を長時間かけて輸送す

22］、長時間にわたる輸送は牛の免疫力を大きることが珍しく無くなっている。牛は輸送によく低下させる［16］。さらに、家畜市場に上場する日は、繁殖農家を出てから肥育農家に到着するまで飼料を与えられず、ほとんどの時間で受付：2018年2月5日
受理：2018年4月4日

佇立したままとなる。よって家畜市場への上場－ 93 －

家畜感染症学会誌
7 巻 3 号 2018

黒毛和種肥育導入牛に対するウルソデオキシコール酸の効果

前後の一連の事象で、牛は負のエネルギーバラ

目的として調査した。

ンス（NEB）になると考えられる。牛は NEB

材料および方法になると血中の遊離脂肪酸（FFA）濃度が増加する［20］。FFA は肝臓で処理されエネルギー

調査期間は平成 28 年 12 月～平成 29 年 1 月

源として活用されるが［4］、その際に肝臓内での 2 ヶ月間とした。家畜市場から管内 1 肥育農

生じた酸化ストレスによって炎症が惹起される場に約 2 時間（移動距離 50km）かけて導入さことが知られている［13］。また、FFA の増加れてきた直後の黒毛和種肥育牛 12 頭（約 9 ヶは免疫細胞の機能を低下させることが報告され

月齢、去勢）を供試牛とした。

ており［24］、家畜市場への上場前後における導入後に UDCA 製剤（ウルソⓇ -5%、DS ファー

NEB は、肝機能および免疫機能の低下を引き

マアニマルヘルス株式会社）を 50 ｇ / 頭 / 日

起こす可能性がある。特に冬期の輸送は、牛を（UDCA として 2,500mg）を 3 日間投与した 6

トラックの荷台で寒風にさらすことになり、そ頭を投与群、非投与の 6 頭を対照群とした。試の寒冷感作が牛の免疫力をさらに低下させ

験農場では 4 頭を 1 つの牛房で飼育しており、［16］、移動後に呼吸器疾患などの感染症多発の本試験では 1 つの牛房に投与群 2 頭、および対原因となっていると考えられる。

照群 2 頭を入れて、3 牛房を用いた。同じ牛房に両群の牛を飼育したため、両群ともに飼育環

ウルソデオキシコール酸（UDCA）は、牛に境や飼料は同一であった（表 1）。

おいてケトーシスおよび肝機能減退症に対する効能を有す。利胆作用［26］、肝血流増加作用

両群ともに導入直後に頸静脈より血清分離用［25］、および肝細胞保護作用［8］など肝臓に凝固促進剤入真空採血管（ベノジェクトⅡ VP-

対する様々な作用がある。我々は、黒毛和種肥AS109K、テルモ株式会社）、EDTA 加真空採育牛において UDCA の長期低用量投与が肥育

血管（ベノジェクトⅡ VP-DK052K、テルモ株

期間中の肝機能低下および鋸屑肝等の肝臓廃棄式会社）、およびヘパリン加真空採血管（ベノにつながる肝炎の発生を抑制することを報告しジェクトⅡ VP-H100K、テルモ株式会社）を用た［15］。また、胃液分泌促進作用［7］、およいて採血を行った。採血直後にビタミン A（100び膵液分泌促進作用［18］などにより消化吸収

万単位 / 頭）を経口給与した。投与群にはビ促進作用があり、牛の栄養状態を改善する可能

タミン A と同時に UDCA 製剤を投与した。導性がある。

入直後（0 日）に加え、導入 3 日、7 日および

そこで、家畜市場を経て肥育農場に導入され14 日後に頸静脈より採血した。得られた血液

た黒毛和種肥育牛に対し、UDCA の投与によっは、血液生化学検査、末梢血単核球サブポピュて、消化吸収が促進されることで NEB を改善

レ ー シ ョ ン の 解 析、 お よ び サ イ ト カ イ ン

して、FFA の増加を抑制し、肝臓や免疫機能

mRNA 発現量の解析に供した。血清分離用凝に及ぼす影響を軽減させる効果を検証する事を

固促進剤入真空採血管では、採血後 1 時間以内

表1
表1. 試験期間中の給与飼料内容および充足率
試験期間中の給与飼料内容および充足率
給与量

給与飼料名
配合飼料A

1)

4 kg

チモシー乾草

3 kg

稲わら

2 kg

飼料養分含量充足率

乾物量5.06 kg

92%

可消化養分総量

3.48 kg

92%

粗蛋白質1）現物中:

676.0 g102%
DM 88%, TDN 68%, CP 13.5%－ 94 －

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Vol.7 No.3 2018

EFFECT OF URSODEOXYCHOLIC ACID ON THE INTRODUCED CATTLEに遠心分離して血清を得た。

Serotec; NK 細胞）、MHC class Ⅱ（CAT82A、

加えて、農場の疾病記録簿から両群におけるWSU; B 細 胞、 単 球 ）、 お よ び CD14（MY4、調査期間中に発生した疾病の内容および疾病発

Beckman Coulter; 単球）抗体を用いた。反応後、生頭数を調査した。

PBS で洗浄し、二次抗体として 4000 倍希釈した PE 標 識 抗 マ ウ ス IgG1 抗 体（BioLegend）

血液化学検査を 100 μ l または 1500 倍希釈した FITC 標識抗得られた血清からは、ビタミン A（VA）とマ ウ ス IgM 抗 体（Southern Biotechnology

してレチノール濃度、ビタミン E（VE）としAssociates）を 100 μ l 加え、4℃で 30 分間反応て α - ト コ フ ェ ノ ー ル 濃 度、 コ ル チ ゾ ー ル

さ（Corti）濃度、総タンパク質（TP）濃度、アで 測 定 し た。 測 定 デ ー タ は Kaluza v1.5a

ルブミン（Alb）濃度、アスパラギン酸アミノ（Beckman Coulter）を用いて解析した。サイトランスフェラーゼ（AST）活性値、γ グルタ

トグラムの側方散乱光により、顆粒球および単ミルトランスフェラーゼ（GGT）活性値、総核球（単球、リンパ球）に分類した。各表面抗コレステロール（TC）濃度、尿素窒素（UN）

原の陽性率と白血球の実数値を用いて各表面抗濃 度、 ト リ グ リ セ リ ド（TG） 濃 度、 お よ び

原陽性細胞数を算出した。CD3 陽性細胞数を

FFA 濃度を測定した。血清中 VA および VE

総成熟 T 細胞数、CD4 陽性細胞数をヘルパー

濃度は、逆相高速液体クロマトグラフィー法を

T 細胞数、CD8 陽性細胞数を細胞障害性 T 細

用 い て 測 定 し た。 生 化 学 自 動 分 析 装 置

胞数、MHCclass Ⅱ陽性 CD14 陰性細胞数を B（Dimension RL Max、 シ ー メ ン ス 株 式 会 社 ）細胞数、TCR1‐N12 陽性細胞数を γ δ T 細胞数、を 用 い て、 血 清 中 Alb、AST、GGT、TC、

CD335 陽性細胞数を NK 細胞数、および CD14

BUN、TG および FFA 濃度は酵素法、血清中

陽性細胞数を単球数とした。

TP 濃度は Biuret 法でそれぞれ測定した。血清

せ、Cytomics FC500（Beckman Coulter）

末梢血単核球サイトカイン mRNA の解析

中 Corti 濃度は、全自動化学発光酵素免疫測定
装置（Access2、ベックマン・コールター株式

末梢血単核球サイトカイン mRNA の解析は会社）を用いて、化学発光酵素免疫法で測定し

real-time PCR 法により、過去の報告［14］にた。

準じて実施した。ヘパリン血から Lymphocyte
Separation Medium 1077（PromoCell GmbH）

末梢血単核球サブポピュレーションの解析を 用 い て 単 核 球 を 分 離 し た。 単 核 球 か ら

総白血球数は EDTA 加血を用いて、自動血

TRIzol Reagent（invitrogen） を 用 い て 総球計算装置（MEK-6450、セルタック α 、日本

mRNA を 抽 出 し た。GoScriptTM Reverse光電社）で測定した。末梢血単核球サブポピュ

Transcriptase（Promega）を用いて逆転写反レーションの解析は、フローサイトメトリー法

応を行い、cDNA を合成した。その後、SYBR

により、過去の報告［9］に準じて実施した。

Green PCR Master Mix （Applied

EDTA 血 2ml に 0.83% 塩化アンモニウム溶液

Biosystems） を 用 い て、Step One Plus Realを 4ml 加えて溶血した。300g で 3 分間遠心後、Time PCR System（Applied Biosystems）で沈査を 1/15M リン酸緩衝液（PBS）で洗浄し、測定した。表 2 に示したプライマーにより、白血球浮遊液を作製した。約 1 × 106 個 /ml

IL-4、INF- γ 、TNF- α 、および IL-8 を測定し、の白血球浮遊液 100 μ l に各一次抗体 100 倍希釈

内 部 標 準 遺 伝 子 と し て β -actin（forward 5’

液を 10 μ l 加え、4℃で 1 時間反応させた。一次-CCCAGATCATGTTCGAGACC-3’; reverse

抗 体 と し て、 抗 CD3（MM1A、Washington

5’-GAGGCATACAGGGACAGCAC-3’）を用いState University Monoclonal Antibody Center

た。測定値は⊿⊿ CT 法を用いて解析項目ごと（WSU）;に最小値に対する相対発現量で表し、Log 変換

総 T 細 胞 ）、CD4（CACT138A、

WSU; ヘ ル パ ー T 細 胞 ）、CD8（BAQ111A、
WSU; 細 胞 傷 害 性 T 細 胞 ）、 抗 TCR1-N12（CACT61A、WSU; γ δ T 細胞）、CD335（AKS1、－ 95 －

による補正を行った。

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7 巻 3 号 2018

表2.

黒毛和種肥育導入牛に対するウルソデオキシコール酸の効果

表2 サイトカインmRNA遺伝子のプライマー配列
サイトカインmRNA遺伝子のプライマー配列

遺伝子

Forward Primer

Reverse Primer(5’-3’)(5’-3’)IL-4

GCCCCAAAGAACACAACTGAGAGATTCCTGTCAAGTCCGC

INF-γ

TCAAATTCCGGTGGATGATCTCTTCTCTTCCGCTTTCTGAGG

TNF-α

CTCTGGTTCAAACACTCAGGTCGGGCATTGGCATACGAGTCIL-8GTGAAGAGAGCTGAGAAGCAAGCACCAGACCCACACAGAACA

末梢血単核球サブポピュレーションの解析

統計解析方法末梢血単核球サブポピュレーションの解析結結果は平均値±標準偏差（SD）で示した。

果は表 4 に示した。測定したすべての免疫細胞

各検査項目における群間の比較は反復測定二元数で、有意な変化は認められなかった。

配置分散分析を用い、群間効果を求めた。また、末梢血サイトカイン mRNA 発現量の解析

要因間において交互作用が認められた項目については Bonferroni の方法による単純主効果検

末梢血サイトカイン mRNA 発現量の解析結定を行い各要因における主効果の検出を行っ果は表 5 に示した。TNF- α は両群間で有意なた。各項目の 0 日とその後の採血日との比較は、差は認められなかった。投与群では、0 日に比反復測定一元配置分散分析を行い Tukey の方

べ投与後 14 日で有意に低下した。IL-8 は両群法による多重比較を実施した。疾病発生頭数のに有意な交互作用を認め、単純主効果検定の結比 較 は、Fisher の 直 接 確 率 計 算 法 を 用 い た。

果、投与後 3 日の対照群に比べ、投与後 3 日の各統計結果において、危険率 5％未満となった

投与群で有意に低い値を示した。IL-4、およびものを有意差ありとした。

INF- γ には有意な変化は認められなかった。

結果

疾病発生頭数

血液生化学検査

調査期間中の疾病発生頭数は投与群 0 頭

血清中 VA 濃度は両群間で有意な差は認め（0/6）、対照群 3 頭（3/6）であり、両群間に有られなかった（表 3）。しかし、対照群では、0

意な差は認められなかった。対照群で発生した日に比べ投与後 3、7、および 14 日で有意に低疾病はすべて呼吸器感染症であった。

下した。血清中 AST 活性値は両群間に有意な交互作用が認められ、単純主効果検定の結果、

考察

投与後 3 日の対照群は、投与後 3、7、14 日の本研究では、家畜市場から導入直後の黒毛和投与群および投与後 14 日の対照群に比較して種肥育牛に UDCA を投与すると、導入後 14 日

有意に高かった。また、投与群では、0 日に比間の血清中 VA 濃度および AST 活性値の変動

べ投与後 3、7、および 14 日で有意に低下した。

が 少 な く、 導 入 直 後 に 上 昇 し て い た 血 清 中血清中 FFA 濃度は、両群間の比較で、投与群

FFA 濃度が早期に低下し、炎症性サイトカイ

は対照群に比べ有意に低い値で推移した。両群ンである TNF- α および IL-8 が低下した。また、

ともに 0 日に比べ投与後 3、7、および 14 日で統計的に有意な差は認められなかったものの、有 意 に 低 下 し た。 血 清 中 VE、Corti、TC、投与群では疾病発生がみられなかった。

TP、Alb、BUN、および TG 濃度と GGT 活性

本試験を行った冬期の輸送は、寒冷ストレス値には有意な変化は認められなかった。

と輸送ストレスが重なり血清中 VA 濃度が低下したことが報告されている［16］。また、牛における群編成は、順位付け行動や闘争を引き－ 96 －

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EFFECT OF URSODEOXYCHOLIC ACID ON THE INTRODUCED CATTLE

表3. 両群における血液生化学検査結果の推移

表3

両群における血液生化学検査結果の推移

導入直後（0日）

3日後

7日後

14日後

ビタミンA
(IU/dℓ）投与群
対照群

70.3 ± 6.5
79.3 ± 6.4

60.5 ± 5.3
55.1 ± 11.79 **58.2 ± 7.1
57.1 ± 15.26 **64.3 ± 9.8
62.9 ± 13.46 *ビタミンE(IU/dℓ）投与群
対照群

171.5 ± 12.4
195.5 ± 20.7

161.9 ± 15.9
174.4 ± 31.3

157.2 ± 11.4
163.7 ± 19.4

145.9 ± 4.6
156.0 ± 20.7

コルチゾール(μg/dℓ）投与群
対照群

1.83 ± 0.72
2.69 ± 3.72

3.01 ± 1.23
3.72 ± 1.31

1.59 ± 0.72
1.30 ± 0.89

2.57 ± 0.84
1.92 ± 0.69

総タンパク質(mg/dℓ）投与群
対照群

6.63 ± 0.23
6.93 ± 0.34

6.62 ± 0.28
6.70 ± 0.26

6.80 ± 0.35
6.87 ± 0.22

6.95 ± 0.66
6.82 ± 0.42

アルブミン(mg/dℓ）投与群
対照群

3.92 ± 0.18
3.93 ± 0.39

3.73 ± 0.20
3.77 ± 0.10

3.75 ± 0.27
3.72 ± 0.18

3.62 ± 0.04
3.57 ± 0.16

投与群
対照群

87.3 ± 9.6
88.3 ± 11.4

60.3 ± 7.2 a**123.7 ± 74.1 b

64.0 ± 7.8 a*
72.5 ± 23.9

69.5 ± 16.1 a*
68.3 ± 15.5 a

GGT(IU/ℓ）投与群
対照群

23.3 ± 3.4
25.8 ± 10.7

21.0 ± 2.6
31.8 ± 12.3

21.0 ± 2.5
24.2 ± 8.2

20.2 ± 2.9
23.5 ± 10.6

総コレステロール(mg/dℓ）投与群
対照群

138.3 ± 23.5
200.5 ± 90.7

131.7 ± 24.3
165.8 ± 92.7

118.7 ± 10.7
162.0 ± 80.6

115.2 ± 7.3
138.0 ± 61.0

尿素窒素(mg/dℓ）投与群
対照群

11.82 ± 3.32
14.95 ± 4.66

12.02 ± 2.09
10.35 ± 1.11

12.93 ± 5.29
12.12 ± 5.57

13.28 ± 5.56
12.65 ± 4.76

トリグリセリド(mg/dℓ）投与群
対照群

7.55 ± 6.04
13.03 ± 8.64

14.00 ± 7.58
14.30 ± 9.64

15.55 ± 7.83
13.52 ± 4.21

12.40 ± 4.97
14.05 ± 5.62

遊離脂肪酸(μEｑ/ℓ)※※ 投与群
対照群

521.3 ± 241.7
599.2 ± 98.9

122.2 ± 48.5 **309.3 ± 48.1 **155.5 ± 43.1 **168.2 ± 40.8 **129.8 ± 33.7 **124.7 ± 16.3 **AST(IU/ℓ）

ЖЖ

平均値±SD* ; P< 0.05 vs. 0日., ** ; P < 0.01 vs. 0日.
※※; P < 0.01 vs. 対照群.
ЖЖ；P<0.01 交互作用. 異符号間に有意差あり

表4. 両群における末梢血単核球サブポピュレーション解析結果の推移
表4 両群における末梢血単核球サブポピュレーション解析結果の推移
導入直後（0日）

3日後

7日後

14日後

白血球数
(cells/μℓ）

投与群
対照群

12883.3 ± 3168.9
10083.3 ± 1667.8

9500.0 ± 2651.8
8450.0 ± 2268.7

8400.0 ± 1408.6
7600.0 ± 1590.0

9483.3 ± 1579.1
8966.7 ± 902.6

総成熟T細胞数(cells/μℓ）

投与群
対照群

1960.6 ± 488.1
1553.3 ± 665.9

2170.1 ± 492.5
1902.0 ± 619.4

2346.1 ± 591.8
2023.5 ± 727.7

2336.4 ± 568.7
2312.7 ± 493.5

ヘルパーT細胞数(cells/μℓ）

投与群
対照群

446.5 ± 164.7
464.1 ± 190.4

627.9 ± 139.7
536.0 ± 170.9

626.5 ± 306.2
517.1 ± 204.3

667.4 ± 167.3
724.5 ± 215.6

キラーT細胞数(cells/μℓ）

投与群
対照群

404.2 ± 108.0
303.1 ± 112.1

333.9 ± 141.6
324.4 ± 187.5

360.3 ± 186.4
271.7 ± 125.5

377.4 ± 142.7
347.3 ± 203.3

B細胞数(cells/μℓ）

投与群
対照群

1973.2 ± 576.3
1837.3 ± 694.8

1392.3 ± 407.0
1368.8 ± 628.9

1708.1 ± 898.8
1496.5 ± 399.0

1924.3 ± 762.2
1778.9 ± 313.0

γδT細胞数(cells/μℓ）

投与群
対照群

971.4 ± 348.1
829.5 ± 462.1

1079.6 ± 385.4
1001.5 ± 346.4

1110.3 ± 220.1
979.4 ± 409.2

1061.5 ± 253.1
972.1 ± 266.0

NK細胞数(cells/μℓ）

投与群
対照群

331.9 ± 250.2
225.3 ± 106.5

309.9 ± 275.1
162.7 ± 81.5

307.9 ± 192.4
149.8 ± 62.2

289.7 ± 213.3
163.1 ± 52.1

単球数
(cells/μℓ）

投与群
対照群

606.5 ± 381.8
422.2 ± 354.3

727.8 ± 243.8
905.1 ± 452.0

732.8 ± 292.3
805.1 ± 257.0

569.0 ± 193.9
583.3 ± 362.2

平均値±SD－ 97 －

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7 巻 3 号 2018

表5.

黒毛和種肥育導入牛に対するウルソデオキシコール酸の効果

両群における末梢血サイトカインmRNA発現症量 (⊿⊿Ct値) 解析結果の推移

表5

両群における末梢血サイトカインmRNA発現症量（⊿⊿Ct値）解析結果の推移
導入直後（0日）

3日後

7日後

14日後

IL-4 mRNA

投与群
対照群

8.20 ± 3.25
5.23 ± 4.61

3.65 ± 2.83
3.79 ± 3.01

4.59 ± 5.06
4.52 ± 2.66

4.25 ± 2.26
2.29 ± 2.83

IFN-γ mRNA

投与群
対照群

8.18 ± 5.51
4.82 ± 4.95

2.36 ± 3.12
4.67 ± 3.72

6.21 ± 5.24
4.47 ± 3.69

3.28 ± 2.39
3.65 ± 2.82

TNF-α mRNA

投与群
対照群

8.78 ± 5.11
4.41 ± 5.55

2.41 ± 3.75
6.02 ± 3.83

5.01 ± 5.54
2.95 ± 4.66

1.18 ± 2.89 *2.91 ± 4.50

投与群
対照群

10.15 ± 3.77
7.90 ± 6.68

3.64 ± 2.11 a
11.64 ± 1.09 b

8.10 ± 6.41
10.39 ± 2.43

7.86 ± 2.62
6.12 ± 4.48

IL-8 mRNAЖЖ

平均値±SD* ; P< 0.05 vs. 0日.
ЖЖ；P<0.01 交互作用. 異符号間に有意差あり

起こし、牛に大きなストレスが加わることが知理を行っていたにも関わらず、投与群の血中られている［1］。一般的に、肥育素牛を肥育農

VA 濃度が有意な変化を示さず推移したのは、場に移動させた後は、移動してきた牛同士で新UDCA の脂溶性ビタミン吸収促進作用により、しい群を構成させて、飼育管理を行うことが多同じ VA 給与量でも、投与群ではより多くのい。このような管理では、移動後における免疫

VA を吸収したことが原因と考えられる。

応答の回復期に新たなストレスが加わること

VA は、免疫機構に関与していると考えられ

で、VA が消費される［17］。Adachi らは、肥ており、黒毛和種肥育牛において血清中 VA

育農場に導入された黒毛和種去勢牛は導入直後濃度の低下により免疫細胞数が減少することがに比べ導入 7 日後に血清中 VA 濃度が著しく報告されている［27］。また、VA は腸の粘膜減少し、これはストレスの増加による VA の免疫機能に関与しており、マウスにおいて飼料消費によるものであったと報告している［2］。

中の VA を欠乏させるとデキストラン硫酸ナ

また、Ribeiro らは、ヒトにおいて入院患者にトリウム誘発大腸炎が重篤化するとの報告があ

対する酸化ストレスの増大や感染の存在は、

り［3］、粘膜免疫の安定化には VA の代謝産

VA の有機的利用を増加させ血清中レチノール物であるレチノイン酸が重要であると考えられ

濃 度 が 減 少 す る と 報 告 し て い る［21］。

ている。本試験では免疫細胞数に変化は認めら

Stephensen らは、ヒトにおいて肺炎や敗血症れなかったが、VA が減少した対照群においてを呈した ICU 患者では、健康な人と比較して粘膜免疫が低下していた可能性がある。

レチノールの尿中排泄が増加すると報告してい家畜市場を経た牛の輸送は、牛を NEB に陥る［23］。これらの報告から、本試験でみられら せ、 血 清 中 FFA 濃 度 を 増 加 さ せ る［16］。

た対照群における血清中 VA 濃度の減少は、増加した FFA は肝臓に酸化ストレスを加えて導入後のストレスにより、レチノールの有機的肝臓の炎症を引き起こすことが知られている

利用や尿中排泄の増加を招き、結果的に VA［13］。対照群で認められた投与後 3 日の血中の消費量が給与した VA 量を上回ったことがAST 活性値の高値は、NEB による血中 FFA原因と考えられた。UDCA は、胆汁の分泌を濃度の増加が原因と考えられる。UDCA は、増加させて［5］、脂溶性ビタミンの吸収を促進

ケノデオキシコール酸等の疎水性胆汁酸によるすることが知られている。以前我々は、VA 給肝細胞への細胞障害性を軽減する肝細胞保護作

与量を抑制されて飼育されている黒毛和種肥育用を示すこと［8, 11］が知られている。また、牛において、肥育期間中継続的に UDCA を投肝障害による TNF- α や IL-6 等のサイトカイン

与すると、無給与の対象牛に比べて血清中 VAの上昇を抑制するとともに、肝臓での好中球の濃度の減少が抑制され、この作用は UDCA が浸潤を抑制して肝障害抑制作用を示すこと［6］、ビタミン A の吸収を促進したものと報告した

肝臓において CD4 陽性 T 細胞が関与する標的［15］。本試験の結果より、対照群と同じ飼育管細胞のアポトーシス誘導を抑制すること［28］－ 98 －

The Journal of Farm Animal in Infectious Disease
Vol.7 No.3 2018

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が原因となる肝疾患の予防に有用であると考えられている。本試験の投与群で AST が安定推移したのは、UDCA が有す肝細胞保護作用により、増加した FFA による肝臓への炎症反応が抑制されたこと、対照群に比べ早期に FFAが減少したことが原因と考えられる。
UDCA は、利胆作用［26］、胃液分泌促進作用［7］、および膵液分泌促進作用［18］などにより消化吸収促進作用がある。本試験における投与群の血清中 FFA 濃度が早期に減少した現
象は、UDCA の消化吸収促進作用により、摂取した給与飼料をより効率的に吸収した結果、NEB が早期に改善されたためと考えられる。
UDCA には抗炎症作用があり、リポポリサッ
カライド刺激により誘導される TNF- α 等の前炎症性サイトカインを減少させるとの報告がある［12］。また、UDCA には炎症性サイトカイン産生抑制作用があり TNF- α の刺激に伴い単球より放出される IL-8 を特異的に抑制するとの報告がある［19］。本試験で認められた投与群における投与後 3 日での IL-8 の mRNA の低値は、UDCA の炎症性サイトカイン抑制作用によるものと考えられる。しかし、投与群におけ る TNF- α の 減 少 は 投 与 後 14 日 で あ り、UDCA の投与期間から日数が経過しているた
め、UDCA の直接的な影響というよりは疾病の発生が無かったことによるものと示唆された。
本試験の結果より、黒毛和種肥育導入牛に対する UDCA 投与は、消化吸収促進作用による
NEB の改善、脂溶性ビタミン吸収促進作用、および炎症性サイトカイン産生抑制作用等のUDCA が有す多くの生理活性作用が相乗効果を示し、牛の体調維持、および免疫機能の安定化に貢献して呼吸器感染症等の疾病発生を予防したものと考えらえた。
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The Journal of Farm Animal in Infectious Disease
Vol.7 No.3 2018

EFFECT OF URSODEOXYCHOLIC ACID ON THE INTRODUCED CATTLE

Influence of ursodeoxycholic acid on blood properties anddisease outbreaks on the introduced Japanese Black fattening cattle

Keiichi Matsuda1), Yousuke Maeda2), Fumiaki Takahashi2)
1) Miyagi Prefecture Agricultural Mutual Aid Associations Livestock Medicine Training Center
39-4 Hirabayashi, Oohira, Kurokawagun, Miyagi, 981-3602,Japan
2) School of Veterinary Medicine, Kitasato University35-1 higashi23, Towada, Aomori, 034-8628, Japan【Abstract】
While fattening cattle are introduced through a cattle market, the transfer process may generate negative
energy balance (NEB) resulted in deterioration of physical condition of cattle. Ursodeoxycholic acid (UDCA) has
an effect to improve digestion and absorption. In introduced Japanese Black fattening cattles, we have examined
the impacts of UDCA on their blood chemical parametors, immune system and disease incidence. The examination
was performed for 12 Japanese Black cattle at around 9 months old. UDCA preparation (50g/day) was orally
administered for 3 days in the administration group (n=6) and not administered in the control group (n=6). All
cattle took blood samples just after arrived at a fattening farm (day 0), day 3, 7 and 14 after administered UDCA.
By used blood samples, the number of immune cells, cytokine mRNA expression levels and blood chemicalparameters were examined. Vitamin A (VA) was fed by 1 million IU on day 0. In addition, number of cattle whichdeveloped any disease during the examination was investigated. In control group, blood VA concentration
significantly decreased on day 3 or later compared with day 0 (P<0.01). Blood AST concentration in administrationgroup significantly decreased on day 3 or later compared with day 0 (P<0.01). Whereas it at day 3 in control group
showed higher compared with at days 3, 7 and 14 in administration group (P<0.05). Free fatty acid significantly
decreased on day 3 or later in both groups compared with that on day 0 (P<0.01) and the administered groupremained at a significantly lower value than the control group (P<0.01). No significant change was observed in
number of immune cells. The mRNA of IL-8 in administration group was significantly lower compared with thatin control group. During the examination, respiratory disease were showed in 3 cattle in the only control group. It
was concluded that UDCA avoided deterioration of physical condition after transportation by its vitamin
absorption promoting effect, digestion absorption improving effect, liver cell protective effect and inflammatory
cytokine inhibitory effect. Therefore UDCA may prevent respiratory disease induced dy transportation.
Keywords:Japanese Black fattening cattle, Negative energy balance, Ursodeoxycholic acid－ 101 －