ペトリフィルム™
乳酸菌数測定用プレート（LABプレート） 

解説書

ペトリフィルム™ 乳酸菌数測定用プレート（以下「本プレート」という）は、調製不要のできあがり培地で、栄養成分、選択成分、冷水可溶性ゲル化剤、および測定を容易にするTTC 指示薬が含まれています。

本プレートには脱酸素剤が含まれており、嫌気状態を作り出し、食品・飲料に存在するホモ型乳酸菌およびヘテロ型乳酸菌を検出することができます。

適正測定範囲：～300コロニー（気泡を伴うコロニーがない場合）～150コロニー（気泡を伴うコロニーがある場合）

図1

図2

乳酸菌数 = 0

乳酸菌数 = 236

コロニーが存在しない本プレート。

本プレート上のコロニーは気泡を伴っていないため、ホモ型乳酸菌と考えられます。適正測定範囲は、気泡を伴わない場合 300コロニー以下です。人為的な気泡は、本プレートへの不適切な接種（○1）、または検液に含まれていた空気に起因して発生する可能性があります。人為的な気泡は形状が不規則で、赤色のコロニーを伴いません。フォームダム上のコロニーは測定しないでください。

図3

図4

乳酸菌数 = 24

乳酸菌数 = 38

本プレート上のコロニーは気泡を伴うため、ヘテロ型乳酸菌と考えられます。気泡を伴う場合の適正測定範囲は 150コロニー以下です。気泡のサイズや形状は様々です。気泡がコロニーを分断して、コロニーが気泡の周りを「囲む」こともあります。

サイズや濃淡を問わず、全てのコロニーを測定します。

TNTC（Too Numerous to Count：測定不能多数）
より正確に測定するには、検体をさらに希釈します。

図5

図6

乳酸菌数 = TNTC

コロニーが測定不能多数（TNTC）となった本プレートでは、多数の小さなコロニー、多数の気泡、青からピンクがかった紫に変色したゲルといった特徴が 1 つ以上みられます。本プレート上のコロニーの数が多いと、生育領域全体が濃紺～紫色に変色し、本プレート周縁部がピンク色になります。この場合、検液をさらに希釈する必要があります。

図 7a
乳酸菌数 = TNTC

図 7b

乳酸菌数 = 0

本プレート上のコロニーの数が多いと、生育領域全体が濃紺～紫色に変色し、本プレート周縁部がピンク色になります。この場合、検液をさらに希釈する必要があります。

乳酸菌数 = TNTC

本プレート上において、気泡産生を伴う（ヘテロ型）コロニーの数が多いと、多数の気泡が不規則に出現します。この場合、検液をさらに希釈する必要があります。

図8
推定乳酸菌数 = 1500

気泡を伴わないコロニーの数が 300 を超える場合は、推定乳酸菌数を算出します。2 つ以上の代表的な区画内におけるコロニーの平均数を求め、30 を乗じて本プレートあたりの推定総数を計算します。本プレー
トの接種面積は約 30cm2 です。

図9

図 10

推定乳酸菌数 = 250

気泡を伴うコロニーの数が 150 を超える場合は、推定乳酸菌数を算出します。2 つ以上の代表的な区画内におけるコロニーの平均数を求め、30 を乗じて本プレートあたりの推定総数を計算します。本プレー
トの接種面積は約 30cm2 です。

推定乳酸菌数 = 165

気泡を伴うコロニーと伴わないコロニーの合計数が 150 を超える場合は、推定乳酸菌数を算出します。2つ以上の代表的な区画内におけるコロニーの平均数を求め、30 を乗じて本プレートあたりの推定総数を計算します。本プレートの接種面積は約 30cm2 です。

211

図 11
乳酸菌数 = 41

図 12
ホモ型乳酸菌数 = 13

ヘテロ型乳酸菌数 = 28

本プレートでは、ホモ型乳酸菌（○1）とヘテロ型乳酸菌（○2）を区別することができます。ヘテロ型乳酸菌は、気泡を近くに伴う（1コロニー径以内）赤色のコロニーと定義されます。ホモ型乳酸菌は、気泡を伴わない赤色のコロニーと定義されます。

乳酸菌数 = 4

ホモ型乳酸菌数 = 1

ヘテロ型乳酸菌数 = 3

食品の残渣（○1）は、不規則な形状または繊維状として認められます。
これらは測定しないでください。人為的な気泡は、本プレートへの不適切な接種または検液に含まれていた空気に起因して発生する可能性があります。人為的な気泡は形状が不規則で、赤色のコロニーを伴いません。これらは測定しないでください。

使用上の注意事項
保管-20 ～ 8°C

1

未開封の本プレートのパウチは、-20℃～ 8℃で冷凍保管または冷蔵保管してください。パ
ウチに記載の有効期限が切れる前にご使用ください。開封前にパウチを室温に戻すことをお勧めします。

2

接種

3

本プレートを平らな台に置きます。上部フィル
ムを持ち上げ、ピペットを接種面に垂直に保ち、検液 1mL を下部フィルムの中央部に接種します。

培養

5

4

開封後のパウチを保管する場合は、パウチの開封部を折り畳み、粘着テープを貼って封をします。湿気を避けるため、開封済みのパウチは冷蔵しないでください。密封したパウチは、4 週 間 を限 度 として、涼しい 乾 燥した 場 所（25℃以下 / 相 対湿 度 50%以下）
また は -15℃以下の冷凍庫で保管してください。

気泡が入らないようにしながら、上部フィルムを下ろします。ペトリフィルム TM フラットスプレッダー（以下「本スプレッダー」という）を本プレートの中央に置きます。検液が均一に広がるように、本スプレッダーの中央部を軽く押します。本スプレッダーを取り除き、本プレートを1 分間以上放置してゲル化させます。

判定

本プレートは透明なフィルムを上にして培養します。最高 20 枚まで重ねて培養できます。
本プレートは、28 ～ 37℃で48±3 時間培養します。

6

本プレートは、標準的なコロニーカウンターまたは拡大鏡でも測定できます。サイズや濃淡にかかわらず、赤色のコロニーは全て測定します。
フォームダム上のコロニーは、培地の選択成分の影響を受けていないため、測定しないでください。

7

ヘテロ型乳酸菌は、気泡を近くに伴う（1コロニー径以内）赤色のコロニーと定義されます。ホモ型乳酸菌は、気泡を伴わない赤色のコロニーと定義されます。

使用者の責任：ペトリフィルム™ 培地の性能は、全ての微生物、培養条件、食品マトリクスについて評価されたわけではありません。
試験方法とその結果がお客様の必要条件を満たすかどうかの判断は、お客様ご自身の責任となります。本判定ガイドの複製が必要な場合、お客様の印刷設定が画像や色の質に影響する場合があります。

気泡

下記のイラストは、気泡を伴うコロニーと関連する様々な気泡パターンの例を示しています。
本プレートには複数の気泡パターンが現れる可能性があります。
以下のような気泡は、1つのコロニーとして測定します。

以下のような気泡は、2 つのコロニーとして測定します。

培養の時間や温度は方法によって異なります。
最も一般的な方法を以下に示します。
AOAC Performance Tested Method (PTM)
041701

選択された複数の食品および環境検体：28 ～ 37℃、48±3 時間

AFNOR Validated Method
3M 01/19-11/17

全食品（ヨーグルトを除く）および環境検体：30℃、48±3時間

NEOGEN、ペトリフィルム、Petriﬁlm は、Neogen 社の商標です。

ネオジェンジャパン株式会社
https://www.neogen.jp/      