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7，57‑
58(2002)
2002ArthropodanEmbryologicalSocietyo
fJapanIS
SN1341‑1527

カブラハバチの遺伝子連鎖地図の作製
松本耕平・畠山正統・大石陸生

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isionofBiology，GraduateSchoolofS
cienceandTechnolog，yKobeUniv
ersity，Nada，Kobe，め ogo657‑8501，JapanDevelopmentalMechanismsLaboratory，Dev
elopmentalBiologyDepartment，Instituteo
fInsectandAnimalScienc偽NationalInstituteofAg
robiologicalSciences，目。Jashi，Tsukuba，Ibaraki305‑8634，JapanのDepartmentofBiology，Facultyo
fScience，KobeUniv
ersity，Nada，Kobe，Hyogo657‑8501，
JapanE‑mail:oishi@biol.
sci.
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2)

わたしたちは膜麹目昆虫のカブラハパチ A
thaliarosaenザi'cornisをモデル実験生物として研究をすすめている。
カブラハバチは、成熟未受精卵を蒸留水中に浸すだけで単為発生を開始させることができる、昆虫で唯一卵内に精子を顕微注入することで体外人工授精ができるなどの、ユニークな特長を備えており、発生初期のメカニズムを解明する上で有利なモデル生物となりえると考えている (Oishietal.，1993，1995，1998)。しかし、遺伝学的バックグラウンドに乏しい面があり、それを埋めることは研究課題の一つである。
代表的なモデル生物であるキイロショウジヨウパエ DrosoPhilamelanogas
伽は、唾腺染色体という巨大な多糸染色体をもつために FISH (Fluorescenceinsituhybridization) 法を用いて遺伝子の染色体上における位置を簡単に知ることができ、詳細な細胞学的地図が作製されている しかし、カブラハパチをはじめ、他の多くの昆虫は多糸染色体を持たないために、ショウジョウバエのような遺伝学的パックグラウンドを得ることは容易ではな
Oしミ。

カフゃラハノ τ
チでは近年 RAPD (Random空mplifiedpolymorphic~NA) 法を用いた連鎖解析で 16 本の連鎖群からなる遺伝子連鎖地図が得られ (Nishimorietal.，2000)、FISH法により単一コピー遺伝子を体細胞分裂中期染色体上に位置づけることにも成功している(松本ら， 2001;Matsumotoetal.，2002)。そこで、 AFLP法 (Amplified101ymorphism) を用いて DNA多型を検出し、連鎖解析を行うことにより、さらに詳細な遺伝子連
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鎖地図の作製を試みた。多型の検出には、カブラハノ Tチの可視突然変異で、ある ycolor(cec)，shor
twing(sω) の三つについてヘテロの遺伝子型を持つ雌 1個体と、その雌から単為発生的に得た半数体雄 47個体を用いた。これらの個体からそれぞれゲノム DNAを抽出し、 2種類の制限酵素 (EcoRI，MseI)で消化した。得られた DNA断片にアダプターを結合させたものを鋳型とし、アダプタ一部位、制限部位に特異的なプライマーに任意の 3塩基を加えたプライマーを用いて PCRを行い (Vosetal.，1995)、任意に設定した 3塩基の部分の塩基置換により生じる DNA多型を AFLPマーカーとして検出した。
得られた 67個の AFLPマーカーを、連鎖解析ソフト MAPMAKERver.2.
0(Landeretal.，1987) で解析したと
ころ、 31固の可視突然変異マーカーと 59個の AFLPマーカーが 14本の連鎖群を構成した (Fig.
1)。
今後はより多くの AFLPマーカーを得ることで、カブ、ラハパチ半数体の染色体数の 8本に収束した遺伝子連鎖地図を作製したい。また、クローニングし STS化 (Sequencetaggedsites) した AFLPマーカーを、体細胞分裂中期の染色体上に FISHすることにより、連鎖群と染色体を 1対 1で対応させることを目指している。

•Abstractofpaperreadatt
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7thAnnualMeetingo
fArthropodanEmbryologicalSocietyo
fJapan，June1‑2，2001(Nihonmatsu，Fukushima).

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