The Journal of Farm Animal in Infectious Disease
Vol.7 No.1 2018

EFFECT OF INTRANASAL MIST OF THE COCCOMYXA GLOEOBOTRYDIFORMIS

原著論文

微細藻類 Coccomyxa 抽出物多糖体鼻腔内噴霧が子豚の発育、血液成分および免疫関連遺伝子発現量に及ぼす影響
山田未知 1,2）・胡口桃子 2）・菅野美樹夫 3*）・尾崎邦嗣 3）・
大塚浩通 4*）・高橋俊彦 1,2）・末野修 5）・中辻浩喜 1,2）

1）

北海道江別市

069-85012）

北海道江別市

069-85013）北海道江別市

069-85014）

青森県十和田市 034-8628

5）岐阜県羽島市501-6255

北海道江別市

069-8501

酪農学園大学農食環境学群
酪農学園大学酪農学部
酪農学園フィールド教育研究センター

北里大学獣医学部
株式会社日健総本社*現酪農学園大学獣医学群連絡担当者：山田未知
TEL ＆ Fax：011-388-4865
E-mail：m-yamada@rakuno.ac.jp［要約］

微細藻類 Coccomyxa 抽出物多糖体溶液（Coccomyxa 溶液）の鼻腔内噴霧が子豚の発育と血液成分および免疫関連遺伝子発現量に及ぼす影響について検討した。48 ～ 50 日齢の三元交雑種去勢雄および雌
子豚を、蒸留水を用いた対照区、1% Coccomyxa 溶液を用いた試験区に分け、供試豚に対して 4 週間、各区溶液を毎日 1 回鼻腔内噴霧するとともに、直腸温を測定した。また、噴霧開始時から 1 週間ごとの採血により、血液成分調査を行うとともに、噴霧前、2 週目および 4 週目の血液を用いて免疫関連遺伝
子発現量も調査した。各週における両区子豚の体重と一日平均増体量、平均直腸温に差はなかった。血
液成分では、噴霧開始 3 週目（69 ～ 71 日齢）のヘモグロビン濃度とヘマトクリット値が試験区に比べ対照区で有意に低値を示し（P<0.05）、白血球数も低い傾向を示した（P<0.1）。また、3 週目の CRP 濃
度は試験区に比べ対照区で有意に高値を示した（P<0.05）。血中免疫関連因子 mRNA 発現量では 4 週目（76 ～ 78 日齢）の Perforin が試験区に比べ対照区で有意に低値を示し（P<0.05）、Mx1 は試験区に比べ対照区で高い傾向を示した（P<0.1）。このことから、Coccomyxa 抽出物多糖体溶液の鼻腔内噴霧の有無により子豚における炎症性の生理学的反応に差が見られる可能性が示唆された。
キーワード：Coccomyxa、子豚、血球成分、血清蛋白質、免疫関連遺伝子［緒

豚業［23］では、疾病対策として衛生環境の整

言］

備、清掃消毒の徹底、ワクチンや抗菌剤投与等

呼吸器病や消化器病を主体とする日和見感染により、事故率低減に努めている［17, 33］。しや慢性疾病が大きな問題となっている日本の養かし、多頭化が進む日本の養豚［24］ではワクチンや抗菌剤投与の経費や、労力負担の増加が受付：2017年 9 月13日
受理：2017年12月18日考えられるほか、抗菌剤投与による耐性菌の出－9－家畜感染症学会誌
7 巻 1 号 2018

Coccomyxa 抽出物多糖体鼻腔内噴霧の影響

現［2, 3, 5, 15］、さらには抗菌剤等の残留［27］において、2013 年 11 月 27 日から同年 12 月 25など多くの課題を残している。今後も更なる多日にかけて実施した。

頭化が予想される日本の養豚業においては、ワ

供試豚として繁殖雌豚 2 腹から生産された三クチンや抗菌剤等の医薬品に依存せず、安全で

元 交 雑 豚（WLD） 去 勢 雄 6 頭 お よ び 雌 4 頭、かつ労力や経費負担を軽減できる疾病対策が必計 10 頭 を 用 い た。 本 研 究 で は、 微 細 藻 類要とされる。

Coccomyxa 抽出物多糖体投与による疾病感染等

これまで抗菌剤に依存しない養豚業推進におに対する生理学的な反応を調査するため、主なける生産性向上のため、いくつかの研究が行わ

疾病における母豚からの移行抗体の消失時期れてきた［32, 34, 35, 38］。設楽と忽那は抗菌[1, 10, 29] を考慮して、生後 48 ～ 50 日齢から性飼料添加物を含まない飼料に乳酸菌製剤を添調査を開始した。これらの豚は蒸留水を用いた加した結果、抗菌性添加物と同等の飼料要求率

対照区、1%Coccomyxa 抽出物多糖体を蒸留水

改善効果を有することを報告している［32］。

に溶解した溶液（Coccomyxa 溶液）を用いた試

また、Song らは、病原性大腸菌を実験的に感験区に各区去勢雄 3 頭および雌 2 頭の計 5 頭を染させた離乳豚に食餌性粘土を給与した結果、各腹から均等となるように配置し、供試豚は隣下痢が軽減したと報告している［34］。さらに、接する各豚房で区ごとに群飼した。供試豚には鈴木らは、海藻および β －グルカンを飼料中にトリガータイプスプレー（ダイヤスプレーエク

添加することにより、給与した豚の免疫能が影

セレント、株式会社フルプラ）を用い、4 週間

響を受けることを報告している［35］。また、

毎日各溶液を左右鼻腔内に 1 回噴霧するととも

Yan らは、妊娠後期および泌乳期雌豚に漢方に、直腸式デジタルサーモメーター（株式会社

薬パウダー添加飼料を給与した結果、その子豚

アステック製）により直腸温を測定した。なお、の血清代謝反応や細胞性および液性免疫反応に各区供試豚への 1 回当たりの各溶液噴霧量は、有益な影響を及ぼすことを報告している［38］。

豚萎縮性鼻炎対策で用いられている硫酸カナマ

近年、藻類の一種である微細藻類 Coccomyxa

イシンの子豚への鼻腔内噴霧量［18, 22］を参は粘性多糖体の産生が著しく［12］、その多糖考 に、1 回 当 た り 左 右 鼻 腔 内 に 各 1ml、 計 約

体は単純ヘルペスウイルスⅠ型や A 型インフ

2ml と し た。 ま た、 噴 霧 前（48 ～ 50 日 齢 ）、

ルエンザウイルス等に対して抗ウイルス活性が噴霧 1 週目（55 ～ 57 日齢）、2 週目（62 ～ 64

高いことが示されている［12, 16］。また、鶏に日齢）、3 週目（69 ～ 71 日齢）、4 週目（76 ～おいてはこの抽出物多糖体が免疫活性を高め、78 日齢）に体重測定を行うとともに各豚の外伝染性ファブリキウス嚢病ウイルスの増殖を抑頸静脈よりヘパリン添加採血管およびプレイン

制することも報告されていることから［7］、こ採血管にて採血を行い、各週の血液により血球れまで豚に対して投与報告が見られない同抽出

成分、血清蛋白質成分および、噴霧前、2 週目、

物多糖体は、養豚業における慢性疾病対策への

4 週目の血液を用いて免疫関連因子 mRNA 発

活用に期待が持てる可能性が考えられる。

現量分析の測定に用いた。

そこで本研究では、微細藻類 Coccomyxa 抽

なお、本研究に用いた子豚には一切ワクチン

出物多糖体が豚慢性疾病対策へ応用可能かどう

接種は行っておらず、子豚を娩出した母豚につかについて検討するにあたり、本抽出物多糖体

いても直近でのワクチン接種は行っていない。

溶液の鼻腔内噴霧による子豚の疾病感染等に対2．血球成分及び血清蛋白質分析

する生理学的反応を検討する上で、同抽出物鼻腔内噴霧の有無による子豚の体温と発育および血 球 成 分 に つ い て は、 自 動 血 球 計 装 置

血液成分、免疫関連遺伝子発現量への影響につ（MEK-5208、セルタック α、日本光電工業株式

いて調査した。

会社製）にて各項目の測定を行った。また、血清総蛋白質量および C-reactive protein（CRP）［材料と方法］

量については、自動分析装置（BM8060

1．調査方法

日本

電子株式会社製）、その分画割合については電本研究は、酪農学園豚コンベンショナル農場

気泳動装置（CTE8000－ 10 －

常光株式会社製）で

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Vol.7 No.1 2018

EFFECT OF INTRANASAL MIST OF THE COCCOMYXA GLOEOBOTRYDIFORMIS

測定し、血清総蛋白質量に各分画割合を乗じてから各区のデータについては去勢雄および雌を各分画蛋白質量を求めた。なお、CRP についまとめて処理し、各週における処理区間データては噴霧開始 2 週目より測定した。

の差の検定については、Student または Welchの t 検定により実施した。

3．免疫関連遺伝子 mRNA 発現量分析
5．動物実験の承認

免疫関連因子として、噴霧開始前、2 週目およ び 4 週 目 の IFN（ イ ン タ ー フ ェ ロ ン ）-γ、

本研究は酪農学園大学動物実験委員会の承認

Perforin、Granzyme B、Mx1 お よ び Mx2 蛋を得るとともに（承認番号 DH25B1）、酪農学

白質の遺伝子発現量を以下の方法により測定し

園大学動物実験指針に基づき実施した。

た。まず、採血により得られたヘパリン添加採［結血管血液からリンホセパールⅠ（比重 1.077 ±果］

0.001）（免疫生物研究所（株）、群馬、日本）

1．発育血液成分調査

を 用 い て 末 梢 血 単 核 球（peripheral blood（1）直腸温および体重の推移

mononuclear cells；PBMCs）を分離し、これ各週における両区の平均直腸温および体重のま で 報 告 さ れ て い る 方 法［20］ に 準 じ て推移を表 2 に示した。

mRNA を 抽 出、cDNA を 合 成 し て real-time

各週の平均直腸温は調査期間において両区とPCR 法によって免疫関連物質の mRNA 発現量

もに週齢を経るごとに若干低下する傾向を示しを解析した。免疫関連物質に関する mRNA 発

たものの、39℃台で推移し、各週における平均現量の結果は β-actin に対する相対比として以直腸温は両区間に有意な差は見られなかった。

下の式で求めた。

また、各週の体重は週齢を経るに伴って順調^に増加し、両区間に有意な差は見られず、一日

値 － β-actin の CT 値））

平均増体量についても各週において両区間に有mRNA 発現量＝ 2 （ －（ 対 象 遺 伝 子 の CT
なお、使用したプライマ－を表 1 に示した。

意な差は見られなかった。
なお、両区供試豚においては、咳や元気消失

4．統計処理等の臨床症状を示した個体は確認できなかっ本研究では、各区とも去勢雄及び雌の頭数はた。
（2）血球成分の推移同数とした。また、斎藤によると、生後 1 カ月
齢から 8 カ月齢までの子豚の白血球数、赤血球各週における両区の血球成分値を表 3 に示し数、ヘマトクリット値、ヘモグロビン量、3 日た。

齢から 14 ～ 18 カ月齢までの子豚の血清蛋白濃

ヘモグロビン濃度では、3 週目において対照度および血清蛋白分画には性による差は見られ

区 が 12.2 ± 0.7g/dL、 試 験 区 が 13.5 ± 0.9 g/

なかったとの報告がある［30］。これらのこと

dL と試験区に比べ対照区が有意に低い値を示

表1

表１． リアルタイムＰＣＲ分析用特定プライマー
Species

Gene

Accession Number

Swine

β-actin

DQ845171.1

リアルタイムPCR分析用特定プライマー
Product
Length118

Primer Designation
ForwardSequence
GCCAACCGTGAGAAGATGACT

ReverseTGACAATGCCAGTGGTGCG

IFN-γ

NM_213948.1

140

ForwardGAGCCAAATTGTCTCCTTCTAC

Perforin

AY373815.1

83

ReverseForward
ReverseCGAAGTCATTCAGTTTCCCAG
AGGAGGTGGCTAAGGAGGCA
ATTGGTGCTGGGCTTGGGAG

Granzyme B

NM_001143710.1

145

ForwardTACTGCAGCTGGAGAGAAAGGC

ReverseForward
ReverseForward
ReverseAGTGTGTCTGTGTAAATGCCCC
GCCTTCTTTGAAAACCACGCATCTAACAGGGGCAGAGTTTTACAGCGAGAAACAGAGCGTGCCAAGGGAAGAAGCCTGCCTATGAC

Mx1

NM_214061.1

128

Mx2

NM_001097416.1

134－ 11 －

家畜感染症学会誌
7 巻 1 号 2018

Coccomyxa 抽出物多糖体鼻腔内噴霧の影響

表2

Coccomyxa抽出物溶液の鼻内噴霧が子豚の直腸温および体重に及ぼす影響

表２． Coccomyx a抽出物溶液の鼻内噴霧が子豚の直腸温および体重に及ぼす影響
0 week

1 week2 week3 week

4 week

48～50 days age

55～57days age

62～64 days age

69～71 days age

76～78 days age

Body temperature (℃)*
Control(n=5)

39.89±0.2139.78±0.15

39.60±0.08

39.63±0.15

39.56±0.17

Experimental(n=5)

39.95±0.1139.81±0.1439.64±0.16

39.61±0.09

39.59±0.12

Control
Experimental

(n=5)
(n=5)

18.2±4.0
18.1±2.3

24.0±3.823.1±2.2

28.6±5.3
27.8±3.1

34.4±5.634.2±3.3

41.8±5.841.4±3.9

Body weight (kg)Daily weight gain (g)0-1 week

1-2 week

2-3 week

3-4 week

Control(n=5)
Experimental(n=5)
Values are shown as means ± standard deviation.
*Average of 7 days Body temperature in each piglet.

818.9±152.1
713.7±118.0

663.4±265.8
666.0±181.1

828.6±199.5
914.3±117.4

1,057.1± 93.1
1,028.6±156.5

表3

Coccomyxa 抽出物溶液の鼻内噴霧が子豚の血球成分に及ぼす影響
Erythrocyte(×10⁴/μL)

Hemoglobin(g/dL)

Hematocrit Value(%)

Control

Experimental

Control

Experimental

Control

(n=5)

(n=5)

(n=5)

(n=5)

(n=5)

(n=5)

0 week

544.0±145.2

522.0±119.4

10.1±2.7

9.8±2.1

30.1±7.929.9±7.0

1 week2 week3 week

647.8± 30.3
664.6± 20.3
659.0± 39.4

629.2± 35.0
657.6± 10.5
700.8± 46.7

12.0±0.512.3±0.4
12.2±0.7b

11.9±0.6
12.6±0.4
13.5±0.9a

36.4±1.336.9±1.236.8±2.2b

36.6±1.7
38.1±1.1
40.3±2.4a

4 week

757.8± 82.1

722.2± 40.7

13.4±1.2

13.0±0.542.3±3.0

41.4±1.7

Leukocyte(×10²/μL)
Control
Experimental
(n=5)
(n=5)
175.8± 75.5
182.6± 93.6
193.4± 50.2
212.6± 19.5
197.4± 30.7
217.0± 31.50 week
1 week2 weekc
3 week
355.6±160.1a
206.0± 42.0
4 week
229.0± 65.3
220.0± 33.1
Values are shown as means ± standard deviation.
a-b:：P<0.05, a-c：P<0.1 (in a line)

Experimental

Platelet(×10⁴/μL)
Control
Experimental
(n=5)
(n=5)
26.1±14.6
20.1±11.7
17.9± 8.7
15.5± 4.828.7± 5.825.8± 5.3
28.5± 5.1
28.7± 6.6
21.2± 5.917.7± 9.6

した（P<0.05）。また、ヘマトクリット値も 3が有意に高い値を示したほか（P<0.05）、有意週目で対照区が 36.8 ± 2.2%、試験区が 40.3 ±な差は見られなかったものの 4 週目においても2.4% と試験区に比べ対照区で有意に低い値を試験区に比べその平均値は対照区で高い値を示示した（P<0.05）。さらに有意な差は見られなしていた。

かったものの、3 週目の白血球数は対照区が（4）血中免疫関連遺伝子発現量206.0 ± 42.0 × 10²/μ L、試験区が 355.6 ± 160.1

両区における噴霧開始前、開始 2 週目、4 週

× 10²/μ L と試験区に比べ対照区で低い傾向が目 の IFN-γ、Perforin、Granzyme B、Mx1 お見られた（P<0.1）。しかし、赤血球数および血

よび Mx2 の mRNA 発現量を表 5 に示した。

小板数には両区間に差は見られなかった。

噴霧開始前および 2 週目の各血中免疫関連因（3）血清蛋白質の推移

子 mRNA 発現量には両区間に差は見られな

各週における両区の血清蛋白質の推移を表 4かったが、4 週目の Perforin では対照区に比べに示した。

試験区が有意に高い値を示し（P<0.05）、有意両区における各週の血清総蛋白質濃度、A/G

な差は見られなかったものの、Mx1 では対照

比、アルブミン濃度、α、β、および γ －グロブ区に比べ試験区で低い傾向が見られた（P<0.1）。

リン濃度には有意な差は見られなかった。しかしかし、その他の因子においては両区間に差はし、CRP 濃度は 3 週目で試験区に比べ対照区見られなかった。

－ 12 －

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EFFECT OF INTRANASAL MIST OF THE COCCOMYXA GLOEOBOTRYDIFORMIS

表4抽出物溶液の鼻内噴霧が子豚の血清蛋白質に及ぼす影響
表４ Coccomyxa抽出物溶液の鼻内噴霧が子豚の血清蛋白質に及ぼす影響
Coccomyxa

Total Protein(g/dL)

CRP(mg/dL)A/G rate

Control

Experimental

Control

Experimental

Control

Experimental

(n=5)

(n=5)

(n=5)

(n=5)

(n=5)

(n=5)

0 week

5.1±0.5

5.1±0.3

1.23±0.20

1.29±0.21－－

1 week2 week3 week

5.9±0.8
5.8±0.3
5.6±0.3

5.2±0.4
5.5±0.4
5.8±0.4

1.09±0.22
1.19±0.05
1.38±0.10

1.19±0.90
1.18±0.08
1.39±0.19－
0.06±0.01a
0.16±0.07－
0.08±0.06
0.07±0.03b

4 week

6.0±0.2

6.0±0.1

1.24±0.21

1.23±0.29

0.19±0.14

0.07±0.03

AlbuminControl
Experimental
(n=5)
(n=5)
0 week
2.79±0.43
2.85±0.27
1 week
3.02±0.25
2.82±0.29
2 week
3.14±0.17
2.95±0.31
3 week
3.26±0.24
3.38±0.29
4 week
3.32±0.21
3.25±0.42
Values are shown as means ± standard deviation.
a-b: P<0.05 (in a line)

Serum Protein Fraction(g/dL)
α-globulin
β-globulin
Control
Experimental
Control
Experimental
(n=5)
(n=5)
(n=5)
(n=5)
1.05±0.07
0.99±0.08
0.22±0.06
0.28±0.15
1.01±0.04
0.99±0.06
0.73±0.57
0.39±0.24
1.09±0.10
1.07±0.06
0.39±0.20
0.45±0.24
0.94±0.03
0.97±0.15
0.30±0.04
0.28±0.07
1.16±0.40
1.25±0.52
0.38±0.17
0.33±0.13

γ-globulin
Control
Experimental
(n=5)
(n=5)
1.02±0.10
0.96±0.07
1.11±0.13
1.04±0.13
1.17±0.06
0.99±0.27
1.12±0.04
1.20±0.12
1.18±0.28
1.13±0.30

表5抽出物溶液の鼻内噴霧が子豚の血中免疫関連因子mRNA発現量に及ぼす影響
表５ Coccomyxa抽出物溶液の鼻内噴霧が子豚の血中免疫関連因子mRNA発現量に及ぼす影響
Coccomyxa
IFN-γ

GranzymeB

Perforin

Mx2

Mx1

Control

Experimental

Control

Experimental

Control

Experimental

Control

Experimental

Control

(n=5)

(n=5)

(n=5)

(n=5)

(n=5)

(n=5)

(n=5)

(n=5)

(n=5)

(n=5)

0 week

14.1±9.915.5±11.8

6.3±3.3

4.4±2.5

10.2± 7.0

12.0±9.6

3.1±1.6

3.9±1.2

7.0±3.8

11.7±6.7

2 week

17.2±3.6

17.0±7.5

6.7±2.1

7.0±2.9

14.0± 5.5

12.4±4.8

3.1±1.6

3.4±3.6

7.6±1.3

7.6±5.4

4 week
20.6±13.3
13.0±3.5
1.9±0.1b
Values are shown as means ± standard deviation.
a-b:：P<0.05, a-c：P<0.1 (in a line)

2.7±0.6a

14.9±11.9

9.4±4.1

8.2±4.4a

2.8±0.6c

6.8±5.6

6.8±4.0［考Experimental

や飲水量には影響はなかったものと考える。

察］

1．直腸温および発育

2．血球成分および血清蛋白成分

豚の体温は、暑熱ストレスの指標［11, 21］

Odink らは、生後約 6 カ月齢豚において健康であるとともに各種疾病感染の指標ともなるな豚と炎症反応を示した豚の血球成分を比較し［26, 37］。本研究における各週の平均直腸温はたところ、炎症反応を示した豚は健康な豚に比両区ともに生後日齢経過に伴って若干低下する

べ赤血球沈降割合が高く、ヘモグロビン濃度や傾向を示したものの、39℃台で推移し、両区間ヘマトクリット値が低下すると報告しているに有意な差は見られなかった。また、各週にお［25］。

ける体重および各週間の一日平均増体量にも両また、北川と久保は、70 ～ 95 日齢の育成豚

区間に差は見られなかった。さらに、各供試豚で臨床上異常が認められた豚と健康と認められにおいては両区とも、咳や元気消失等の目立った豚の血清蛋白質の変化について比較検討をた臨床症状を示す個体は確認できなかった。こ

行った結果、正常豚に比べ異常豚は血漿総蛋白のことより、本研究においては、両区において質濃度、フィブリノーゲン濃度、α および γ －平均直腸温や発育に影響を及ぼすほどの生理学

グロブリン濃度が高く、A/G 比、アルブミン

的反応の差は生じていなかったものと考える。

濃度が低いと報告している［14］。

また、本研究においては、各区の飼料摂取量や一方、血清蛋白質の一種である CRP は、体

飲水量については調査していないが、発育にお内で急性炎症または組織壊死がある病態で増加

い て 両 区 間 に 差 が な か っ た こ と か ら、が見られるタンパク質で［6, 8, 13, 36］、炎症

Coccomyxa 溶液の鼻腔内噴霧による飼料摂取量

マーカーの一つとしてヒト［6, 13］および家畜－ 13 －

家畜感染症学会誌
7 巻 1 号 2018

Coccomyxa 抽出物多糖体鼻腔内噴霧の影響［8, 36］の疾病診断に活用されている。また、胞にこれら細胞障害顆粒を放出することにより豚においては豚コレラまたはアフリカ豚コレラ

標的細胞の細胞死を誘導する物質である［19］。

ウイルスを接種すると顕著に血清アミロイド

また、Mx タンパク質は INF により誘導されA が増加するとともに CRP 濃度も約 3 倍に増るタンパク質であり、遺伝子転写やタンパク質加したとの報告がある［31］。

の合成を阻害し、抗ウイルス作用を示すことか

本研究の供試豚の血液成分については、血清

らウイルス感染の指標として有用とされており

総蛋白質濃度や A/G 比、アルブミン濃度、α、β、［9］、ブタ Mx1 タンパク質は水疱性口炎ウイル

γ －グロブリン濃度は各週において両区間に有スに対する抵抗性作用を有することも報告され意な差は見られなかったものの、CRP 濃度は、ている［4］。

3 週目で試験区に比べ対照区は約 2 倍の値を示

本研究において Perforin が対照区に比べ試し、両区間に有意な差が見られた（P<0.05）。

験区で有意に高い値を示したことについては、

また、ヘモグロビン濃度とヘマトクリット値でCoccomyxa 溶液鼻腔内噴霧により対照区に比べは 3 週目においては、試験区に比べ対照区で有試験区で感染抑制が強く作用した可能性が考え意に低い値を示した（P<0.05）。

る。また Mx1 が試験区に比べ対照区で高い傾本研究において噴霧開始 3 週目の対照区の向が見られたのは試験区に比べ対照区でウイル

CRP が試験区に比べ高い値を示したことは、ス感染等が強かった可能性が伺えるが、本研究対照区において、この時期に何らかの炎症性ののデータからは詳細な考察は困難であると考

生理学的反応が起きていたことが考えられ、そえ、この機序については今後の研究課題としたれに伴い同時期における対照区のヘモグロビン

い。

濃度やヘマトクリット値が試験区に比べ低値を以上の結果より、本研究では発育や各週の平示した可能性が考えられた。

均直腸温について両区間で差が見られるような一方、離乳直後の子豚に β －グルカンおよび反応はなかったものの、血液成分や血中免疫関

海藻添加飼料を給与した小野寺らの研究におい

連遺伝子発現量において、対照区では炎症性反ては、総白血球数が対照区に比べ多いことを示応が疑われる項目に差が見られたことから、子し、両添加物の経口摂取が白血球数増殖に関与

豚への Coccomyxa 溶液の鼻腔内噴霧は炎症性している可能性を示唆している［28］。本研究

反応を抑制する何らかの効果がある可能性が示においては、有意な差は見られなかったものの、唆された。

噴霧開始 3 週目の白血球数は対照区に比べ試験

今後は、Coccomyxa 溶液投与による炎症抑制

区で高い傾向が見られた。このことについては、効果について、その要因を詳細に検討していく

詳細な検討をしていないため推測の域は出ない必要があるものと考える。

が、前述のとおり噴霧開始 3 週目の対照区にお［謝

いては試験区に比べ炎症性反応で見られる項目で有意な差があったことから、試験区において

辞］

本研究にご協力いただきました本学家畜栄養

は Coccomyxa 溶液鼻腔内噴霧により、β －グル

学研究室

カンや海藻添加飼料の経口摂取と同様に白血球

室学生諸君に感謝いたします。

増殖が促され、免疫能の強化によって炎症性反応で見られる項目において対照区との間で差があった可能性が考えられた。
3．血中免疫関連遺伝子発現量
本研究では噴霧開始 4 週目の Perforin が対照区に比べ試験区で有意に高い値を示し、Mx1が対照区に比べ試験区で低い傾向を示した。
Perforin は細胞障害性 T 細胞やナチュラルキラー細胞などのキラー細胞に存在し、標的細池原麻友美氏、中小家畜飼養学研究［引用文献］［1］ Allan, G.M., McNeilly, F., McNair, I., Meehan, B.,
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Vol.7 No.1 2018

EFFECT OF INTRANASAL MIST OF THE COCCOMYXA GLOEOBOTRYDIFORMIS

Effects of intranasal mist of polysaccharide solution from Coccomyxa gloeobotrydiformis,
a green alga, on the growth, blood components and immune-related gene expression levels of piglets

Michi Yamada1,2), Momoko Koguchi2), Mikio Sugano3*), Kunitsugu Ozaki3),
Hiromichi Ohtsuka4*), Toshihiko Takahashi1, 2), Osamu Sueno5) and Hiroki Nakatsuji1, 2)
1)

College of Agriculture, Food and Environment Sciences Rakuno Gakuen University, Ebetsu-shi 069-8501, Japan
Faculty of Daily Science Rakuno Gakuen University, Ebetsu-shi 069-8501, Japan
3)
Rakuno Gakuen Field Education and Research Center, Ebetsu-shi 069-8501, Japan
4)
School of Veterinary Medicine Kitasato University, Towada-shi 034-8628, Japan
5)
Nikken Sohonsha Corporation, Hashima-shi 501-6255, Japan*Present address: School of Veterinary Medicine, Rakuno Gakuen University. Ebetsu-shi, 069-8501，Japan
2)【Abstract】
The effects of an intranasal mist of a polysaccharide solution from Coccomyxa gloeobotrydiformis, a green
alga, on the growth, blood components, and immune-related gene expression levels of piglets were examined. To
measure growth and blood components, 15 three-way crossbred (Landrace × Large White × Duroc) piglets, withan average body weight of 18 kg (about 50 days old), were divided into two groups and sprayed distilled water
only (control group) or distilled water solution containing 1% polysaccharide from Coccomyxa gloeobotrydiformis(experimental group). The appropriate solution was sprayed into the nose of each piglet every day. Rectal
temperature was measured every day and bodyweight was measured weekly. There were no significant differencesin the average rectal temperature, bodyweight, or daily weight gain between the control and experimental groups
in any week. In week 3 (69–71 days old), the mean blood corpuscle ingredients, hemoglobin concentration, andhematocrit value of the control group were significantly lower than those of the experimental group (P < 0.05), andthe number of leukocytes tended to be higher in the experimental group than in the control group (P < 0.1). Amongthe serum proteins, the C-reactive protein content in week 3 (69–71 days old) was significantly higher in thecontrol group than in the experimental group. The expression of the immunity-related gene, perforin, wassignificantly lower in the control group than in the experimental group (P < 0.05), and MX1 expression tended tobe higher in the control group than in the experimental group (P < 0.1) in week 4 (76–78 days old).
Keywords:Coccomyxa, piglet, blood corpuscle ingredient, serum protein, immunity-related gene,－ 17 －