Media Selection Guide

Agilent Seahorse XF
培地選択ガイド
Agilent Seahorse XF培地は、XFアッセイ⽤に特別に調製されたもので、XFアッセイで最良の結果を得るために推奨されます。XF培地は、スタンダードな細胞培養⽤培地の組成 (DMEMまたはRPMI) に基づいて調製されていますが、以下の点が⼀般的な⽣育培地の組成と異なります。
・炭酸⽔素塩を含まず、低い緩衝能︓細胞外酸性化の検出を改善します。
・サプリメントを含まない︓
アッセイ培地のカスタマイズを可能にします。
・フェノールレッドを含まない︓
絶対的なpH値で最も正確かつ精密な計測を可能にします。
Agilent社では、37℃でpH7.4を⽰すよう予め調整された緩衝XF培地を販売しています (型式 103575-100 と 103576-100)。これらの培地には少量のHEPESバッファーを含んでいます。互換性のあるXFサプリメント (XFグルコース溶液、XFピルビン酸塩溶液、XFグルタミン溶液)を推奨濃度で使⽤する場合、培地のpH調整を⾏う必要がありません。したがって、ワークフローを簡略化し、アッセイ準備にかかる時間を削減します。これらのpH調整済培地には⼀貫性のとれた緩衝能があり、実験全体を通してより⼀貫性のあるアッセイデータを得ることができます。

pH調整済 XF DMEM / RPMI 培地 (型式︓ 103575-100 / 103576-100)を使⽤する場合のXFアッセイ培地調製⽅法︓
1. 使⽤する当⽇、XF DMEM / RPMI 培地 (PhenolRed無/pH7.4/HEPES含) の⼗分な使⽤量を新しい無菌ボトルに分注します。
注︓培地のボトル全体を温めず、必ず使⽤量を分注して使⽤するようにしてください。また、pH値を維持するために各使⽤の度にキャップをきつく締めることをお勧めします。
2. XFサプリメント/基質の必要量を添加します。
注︓XFサプリメントは、アッセイ培地を確実に最適な最終pH値にするために、推奨される濃度範囲で使⽤しなければなりません。他の供給元の他ブランドのサプリメントが使⽤される場合、培地の適切なpHは保証されません。推奨されるサ
プリメント濃度は、グルコース 0-10 mM、ピルビン酸塩 0-1 mM、グルタミン
0-2 mM です。サプリメント濃度はアッセイ依存的です。より詳しい情報
は、「Procedures for Preparing XF Assay Media」と 「XF Assay Kit UserGuides」をご参照ください。培地とすべてのサプリメントの無菌性が損なわれない限り、最終的なアッセイ培地のフィルタ滅菌は必要ありません。
3. 培地を37℃まで温めます。アッセイ培地はすぐに使えます(pH調整は必要ありません) 。

pH調整が必要な XF DMEM培地を使⽤する場合のXF アッセイ培地調製⽅法︓
1. 使⽤の当⽇、XF DMEM培地の⼗分な使⽤量を新しいボトルに分注します。
2. サプリメント/基質の必要量を添加します。
注︓Glycolytic Rateアッセイ、リアルタイム ATP Rateアッセイ、Hu T Cell活性化アッセイ、T Cell 代謝
プロファイリングアッセイで使⽤するDMEMアッセイ培地には、HEPESバッファーを5mM添加しなければなりません。他のXFアッセイで使⽤される培地については、HEPESバッファーの添加はオプションです。
3. 培地を37℃まで温めます。
4. pHを7.4 ± 0.1に調整します。
5. pH値を調整した後、培地をフィルタ滅菌します。アッセイ培地はすぐに使えます。

Agilent Seahorse XF 培地・サプリメント
型式

製品名

容量ベースの培地 Phenol Red 注

103575-100 XF⽤DMEM培地(PhenolRed無/pH7.4/HEPES含/500mL)

500 mLDMEM

無全XFアッセイに適合。HEPESを含む。
XF24 / XF24-3にはご使⽤いただけません。

103576-100 XF⽤RPMI培地(PhenolRed無/pH7.4/HEPES含/500mL)

500 mLRPMI

無全XFアッセイに適合。HEPESを含む。
XF24 / XF24-3にはご使⽤いただけません。

103335-100 XF⽤DMEM培地 (PhenolRed無、500mL)

500 mLDMEM

無全XFアッセイに適合。Glycolytic Rateアッセイ、ATP Rateアッセイ、
Hu T Cell活性化アッセイ、T Cell 代謝プロファイリングアッセイにはHEPESの添加 (5mM) が必要。

103577-100 XF 1.0M グルコース溶液 (50mL)

50 mL

n/a

無全XF培地に適合。

103578-100 XF 100mM ピルビン酸塩溶液 (50mL)

50 mLn/a

無全XF培地に適合。

103579-100 XF 200mM グルタミン溶液 (50mL)

50 mLn/a

無全XF培地に適合。

培地パック
103680-100 XF DMEMアッセイ培地パック

XF⽤DMEM培地 (PhenolRed無/pH7.4/HEPES含/500mL) (型式︓103575-100)、XF 1.0M グルコース溶液 (型式︓103577-100)、
XF 100mM ピルビン酸塩溶液 (型式︓103578-100)、XF 200mM グルタミン溶液 (103579-100 ) 各1個ずつのセットです。

103681-100 XF RPMIアッセイ培地パック

XF⽤RPMI培地 (PhenolRed無/pH7.4/HEPES含/500mL) (型式︓103576-100)、XF 1.0M グルコース溶液 (型式︓103577-100)、
XF 100mM ピルビン酸塩溶液 (型式︓103578-100)、XF 200mM グルタミン溶液 (103579-100 ) 各1個ずつのセットです。

注︓全てのXF培地 / サプリメント溶液はエンドトキシン試験済みです。グルタミン溶液以外は4℃保存、グルタミン溶液は-20℃で保存してください。

Agilent Seahorse XF 培地適合チャート
型式

製品名

ミトリアルタイム
ストレスATP Rate
テスト
アッセイ

Mito FuelFlex
テスト

GlycolyticRate
アッセイ

解糖ストレステスト

基質酸化 パルミチン酸 Hu T Cell
ストレス 塩 酸化スト
活性化テストレステスト アッセイ

T Cell 代謝
プロファイリングアッセイ

MitoToxアッセイ103575-100 XF⽤DMEM培地(PhenolRed無/pH7.4/HEPES含/500mL)◎◎◎◎◎◎◎○○◎

103576-100 XF⽤RPMI培地(PhenolRed無/pH7.4/HEPES含/500mL)

○

○

○

○

○

○

○

◎

◎

○103335-100 XF⽤DMEM培地(PhenolRed無、500mL)

○☆

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○

○☆

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○☆

○☆

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◎ 推奨〇 適合☆ HEPESの添加が必須※本パンフレットに記載の製品は、すべて研究・実験用です。
人・動物の診断あるいは治療等の臨床用途に使用することはできません。
●お問合せ先 (Seahorse XFシリーズ 販売店)：

東京都文京区小石川 1-3-25 小石川大国ビル2F
Phone: [東京] 03-3816-0851 [大阪] 06-6310-8077
http://www.primetech.co.jp/ sales@primetech.co.jp●製造元：

DE44259.9303125
rev12 (202403M)