The Journal of Farm Animal in Infectious Disease
Vol.10 No.4 2021

総IDENTIFICATION OF BRDC PATHOGENS AND DRUG SUSCEPTIBILITY TEST説

呼吸器感染症起因菌の同定法および薬剤感受性試験の定法
田邊太志
北里大学

獣医学部

〒 034-8628

獣医学科

獣医微生物学研究室

青森県十和田市東二十三番町 35-1

Tel 0176-23-4371、Fax 0176-23-8703
e-mail: tanabe@vmas.kitasato-u.ac.jp［要約］

近年薬剤耐性菌の増加が世界規模で問題され、その 1 つの原因として抗菌薬の不適切な使用方法が指摘されている。それは人医療だけの問題ではなく、動物医療においても治療効果の減弱、抗菌性物質または耐性菌の環境汚染、畜産物を介して人への拡散などが懸念されている。その対策として、獣医医療
では、「適正使用」と「慎重使用」の考えのもと適切な抗菌薬の使用が求められている。ウシの呼吸器病症候群（Bovine Respiratory Disease Complex: BRDC）は、細菌・ウイルス・ストレスなどの複数の要因による混合感染であり、畜産業において大きな損失をもたらす疾病の 1 つでもある。その主要な病 原 細 菌 と し て は、Mannheimia haemolytica、Pasteurella multocida、Histophilus somni、Trueperellapyogenes、Mycoplasma bovis などがあり、治療の 1 つとして抗菌薬が汎用される。そこで本稿では、適切な抗菌薬の選択に必要な呼吸器感染症起因菌の同定法について一般的の方法と簡易的な方法を、また分離された菌を使っての薬剤感受性試験法について概説する。
キーワード：ウシ呼吸器病症候群、菌の分離同定、薬剤感受性試験、薬剤耐性菌

機関に依頼することが多いのではないだろう【はじめに】か。また感染症の治療を考えると、緊急を要す

感染症の治療として抗菌薬を使用する場合、る場合は、薬剤感受性試験の結果を待ってから

常に耐性菌の問題を考えなければならない。抗ということは難しく経験的な治療を行わざるを菌薬の使用により薬剤耐性菌を増加させないた

得ない場面も多い。そこで本稿では、ウシの呼めには、「慎重使用」の考えのもと、使用すべ吸 器 病 症 候 群（Bovine Respiratory Disease

きかどうか検討した上で、使用するのであればComplex: BRDC）を例に、日常的な診療でも有効な抗菌薬を選び必要最小限の使用量とする

可能な簡易的な同定法を紹介し、さらに再確認必要がある［7］。そのためには、正しく薬剤感の意味も含め正しい薬剤感受性試験法について

受性試験を行い有効な抗菌薬を選ぶ必要があ解説する。

る。薬剤感受性試験に供する菌は、分離同定さ【ウシの呼吸器病症候群（Bovine Respiratory

れたものを使用する必要があるが、菌の分離同

Disease Complex: BRDC）の原因菌の分離同定法】

定にはある程度の技術が必要なこと、また菌を同定するまでに時間がかかることもあり臨床現

BRDC は、輸送や環境の変化等によるストレ場で実際に行うことが難しいか、もしくは外部

スに加え、ウイルス（ウシヘルペスウイルス-1、ウシパラインフルエンザウイルス 3 型、ウ
シ RS ウイルス、ウシアデノウイルス、ウシウ

受理：2021年10月16日－ 111 －

家畜感染症学会誌
10 巻 4 号 2021

BRDC 起因菌の分離同定・薬剤感受性試験

イ ル ス 性 下 痢 ウ イ ル ス ）、 細 菌（Mannheimia

若干の違いがあるかとは思われるが、ここではhaemolytica、Pasteurella multocida、Histophilus

我々の研究室で普段行っている呼吸器病が疑わsomni、Trueperella pyogenes、Mycoplasma bovis）

れるウシからの分離同定法を紹介する（図 1）。

などによる単独あるいは混合感染により起こ

BRDC の原因菌には上述の M. haemolytica、P.

り、その結果、病態は複雑化し重篤な呼吸器症

multocida、H. somni お よ び T. pyogenes が 主 な状を引き起こす［2, 4-6, 10, 12, 16-19］。

原因菌と考えられるため、これら菌の分離を想一般的な菌の分離同定法は、採材→（増菌培

定しつつ、他の菌の可能性も考え分離培養を行養）→分離培養→純培養→同定試験（生物学的、う必要がある（マイコプラズマは同定法、薬剤

生化学的性状試験など）の順に行ない菌種を同感受性試験法が若干異なるため今回は省略す

定することになる［8］。手順の進め方、同定のる）。上述の 4 菌種の一般的な性状の違いは表ための様々な試験などはその検査室などにより

1 に示したので参考にしていただきたい［13-

簡易同定法

一般的な同定法

検体

検体

鼻腔スワブまたは BALF
直接塗抹標本のグラム染色

好気・微好気培養

分離培養

分離培養

微好気培養

純培養

グラム染色像、コロニー性状、溶血性
カタラーゼ・オキシダーゼ試験
マッコンキー寒天培地上での発育

グラム染色
コロニー観察純培養
生物学的性状試験
生化学的性状試験

以上の試験結果より判定
薬剤感受性試験

同定試験
簡易同定キットにより同定
薬剤感受性試験

図1
BRDC罹患牛からの菌の分離同定法

グラム染色像BRDC罹患牛からの菌の分離同定法

表1

主なBRDC原因菌の性状比較

コロニー性状
色

大きさ

培養

溶血性

カタラーゼ
産生

オキシターゼ産生

マッコンキー寒天培地上での発育

P. multocida

陰性短桿菌
両端染色

灰白

大

37℃、好気24～48時間

－

+

+

－

M. haemolytica

陰性短桿菌
両端染色

灰白

中～大

37℃、好気24～48時間+++d（11～89%陽性）
赤色コロニーH. somni

陰性短桿菌

黄色

小

37℃、
5～10%CO2
48～72時間

－

－

+

－

T. pyogenes

陽性小桿菌
松葉状

灰白

微小

37℃、
5～10%CO2
48～72時間

+

－

－

－

表1 主なBRDC原因菌の性状比較－ 112 －

The Journal of Farm Animal in Infectious Disease
Vol.10 No.4 2021

IDENTIFICATION OF BRDC PATHOGENS AND DRUG SUSCEPTIBILITY TEST

16］。

とし、T. pyogenes もコロニーが小さいため 48

ウシの呼吸器病の場合、鼻腔スワブもしくは時間の培養が必要なこともある。そのため例え

気管支肺胞洗浄液（BALF）が出発材料となる。

分離培養 24 時間後に菌の発育が認められたと鼻腔スワブはそのまま用い、BALF は、遠心しても、混合感染ということも考え少なくとも後の沈渣を使用する。スワブまたは BALF の

72 時間までは分離培養を続けたほうが良いで沈渣から直接塗抹標本を作製し、グラム染色をあろう。コロニーの発育が確認されたら、グラ

行ない菌の有無などを確認する。グラム染色は

ム染色を行いグラム染色性、菌の形態を確認す

一度覚えてしまえば、それほど手間ではなく、る（図 3）。呼吸器疾患だけでなく一般的な感

そこから得られる情報はとても有益であるの染症においても、分離された菌がグラム陰性菌

で、グラム染色は面倒がらずにぜひ行っていたなのか陽性菌なのか、球菌なのか桿菌なのかがだきたい。分離培養は、1 つの検体を 2 枚のわかるだけでもかなり菌種を絞ることができ、5% ヒツジ血液加寒天培地にそれぞれ接種しその結果この後の培養方法（使用する培地の種

37℃、好気および微好気（5 ～ 10%CO2 存在下）

類など）や同定試験も決まってくる。次に目的下で分離培養を行う。血液寒天培地は、普通寒の菌の純培養を行う。純培養とは分離培地から天培地に比べ栄養価も高く、特定の栄養素や因1 つのコロニーを釣菌し、培養することで遺伝子などを要求するような特殊な菌でなければ幅的に同一の菌を得ることである。純培養ができ

広く菌を発育させることができる非選択性の培ていないということは、複数の菌が混じった状地であり、BRDC でよく分離される表 1 に示態であるため、そのまま同定試験を行うと正しした様な菌は問題なく生えるため分離培地としい結果を得ることができない。そのため純培養て使用している。また培養条件は H. somni ま

することは菌を同定する上で必須である。純培

たは T. pyogenes の可能性も想定し、好気的な養菌を得ることができたら、カタラーゼ試験、培養に加え CO2 存在下での分離培養も行う。

オキシダーゼ試験を行う。図 2 に示したような分離培養時間は 24 ～ 72 時間を目安に行う。H.

フローチャートに沿って、グラム染色像とカタ

somni や T. pyogenes 以外の通常の菌であればラーゼ試験、オキシダーゼ試験の結果から、菌24 時間もあればコロニーの発育が認められる。

の属やある程度のグループに絞ることができ

しかし H. somni は 48 ～ 72 時間の培養を必要る。我々の研究室では、これらの結果からおおグラム陰性好気性、通性嫌気性球・桿菌

桿菌

球菌

特殊発育菌
Legionella
Bordetella
Taylorella
Bartonella
Campylobacter
Helicobacter
Spirillum
Lawsonia

図2

OF/O

ブドウ糖分解性

Neisseria
OF/F ad
OX+

VibrioAeromonas
Pasteurella
Mannheimia
Actinobacillus
Haemophilus
Histophilus

OF/－cMoraxella

OF/O b
―e

OX

腸内細菌科

OX+
Pseudomonas
Burkholderia
Brucella
Abortus
Melitensis
Suis
C

―

OX

Acinetobacter
Brucella
Neotomae
Ovis
Francisella tularensis(システイン・鉄要求性)

グラム陰性菌分離同定フローチャート

a:ブドウ糖の発酵的分解、b:ブドウ糖の酸化的分解、c:ブドウ糖非分解、d:オキシダーゼ産生陽性、
図2 グラム陰性菌分離同定フローチャート
a:ブドウ糖の発酵的分解、b:ブドウ糖の酸化的分解、c:ブドウ糖非分解、d:オキシダーゼ産生陽性、e：オキシダーゼ産生陰性
e：オキシダーゼ産生陰性－ 113 －

家畜感染症学会誌
10 巻 4 号 2021

BRDC 起因菌の分離同定・薬剤感受性試験

P. multocida

H. somni

M. haemolytica

T. pyogenes

図3 グラム染色像

図3

グラム染色像

よその属を推定し、使用すべき簡易同定キット

る簡易法は、きちんとした菌種の同定までは行を選び菌種同定を行っている。この方法だと通わないが、原因菌であろう菌を推定し純培養し常、分離培養から同定まで順調に進んで 5 日程

薬剤感受性試験に供している。その手順として度はかかり、H. somni や T. pyogenes では培養は以下のようになる（図 1）。

時間が長いためもっと時間がかかることもあ

1 日目：鼻腔スワブまたは BALF の遠心後のる。

沈渣を 5% ヒツジ血液加寒天培地に接種し微好気（5%CO2 存 在 下 ） で 分 離 培 養 を 行 う。M.

【ウシ BRDC 原因菌の簡易分離同定法】

haemolytica も P. multocida も通性嫌気性菌であ通常の方法で順調に行ったとしても同定までることから微好気下でも発育は可能であるたに 5 日間はかかってしまい、薬剤感受性試験をめ、培地も 1 つのサンプルに対して 1 枚とし行えばさらに判定までの時間がかかってしま

CO2 存在下でのみの培養とする。サンプルの直う。そこで我々は宮城県農業共済組合家畜診療

接塗抹標本を用いたグラム染色については、で研修所の松田敬一先生とともに、より簡単でできれば行っていただきたい。

きるだけ短い時間で薬剤感受性試験に供するに

2 日目：発育した菌のコロニー性状（色、大きさ、十分な菌を得るための簡易同定法を作成した。

形状、光沢、溶血性、コロニー数）を確認し、この簡易法は、表 1 に示した BRDC の代表的

また菌のグラム染色も行う。その結果分離数もな 4 菌種を性状の違いをもとに最終的な同定試

多く表 1 の性状に当てはまる菌を選び、5% ヒ験を行わずに推定する方法である。薬剤感受性

ツジ血液加寒天培地に接種し純培養を行うとと試験には、原因菌が純培養された状態でなけれもに、同一の菌をマッコンキー寒天培地にも接ば試験に使用することはできない。ここで述べ

種し培養を行う。また H. somni や T. pyogenes－ 114 －

The Journal of Farm Animal in Infectious Disease
Vol.10 No.4 2021

IDENTIFICATION OF BRDC PATHOGENS AND DRUG SUSCEPTIBILITY TESTのように発育が遅い菌もあるため、分離培地はmultocida と推定する。グラム陰性の多型を示

更に培養を続ける。

す桿菌でコロニーが黄色く、カタラーゼ試験陰3 日目：純培養菌の性状確認

性、オキシダーゼ試験陽性、非溶血性の菌であ

純培養菌について、溶血性の有無、マッコン

れば H. somni と推定し、グラム陽性菌の場合は、

キー寒天培地上での発育、カタラーゼ試験、オ

特徴的なグラム染色像（多型 V 字型）、微小コ

キシダーゼ試験を行う。その結果と今まで得たロニー、カタラーゼ試験陰性、オキシダーゼ試

コロニー性状、グラム染色像の試験結果をもと

験陰性であれば T. pyogenes と推定する（表 1、に表 1 に照らし合わせ総合的に推定する。分離

図 3）。

される菌によって様々なパターンが考えられる

この方法であれば早くて 3 日間で菌を推定でが、いくつか例をあげると、例えばマッコンキー

き、さらに薬剤感受性試験を行ったとしても全寒天培地上で発育が観察された菌の中で、白色

体で 4 日間あれば結果を得ることができる。たコロニーを呈したものは乳糖非分解の腸内細菌

だし、H. somni と T. pyogenes に関してはどう科の菌として除外する。赤色コロニーを示ししても培養時間が 48 ～ 72 時間は必要となるたた菌は、オキシダーゼ試験を行いオキシダー

め時間はかかってしまうが、通常の方法に比べ

ゼ陰性の場合は、乳糖分解性腸内細菌科の菌れば数日は短縮可能である。まだまだ検証例がと し て 除 外 し、 オ キ シ ダ ー ゼ 陽 性 で あ れ ば足りないところもあり、改善の余地があるかと

M. haemolytica の 可 能 性 を 考 え る。 ま た M.

思われるが、ぜひこの簡易同定法をもとに独自

haemolytica でもマッコンキー寒天培地での発に改良していただければと思う。

育が弱いまたは発育しないこともあることか【ディスク拡散法による薬剤感受性試験】ら、その場合グラム染色像が陰性桿菌で両端染色性を示し、カタラーゼ試験、オキシダーゼ試

薬 剤 感 受 性 試 験 に は、 最 小 発 育 阻 止 濃 度

験がともに陽性であり、溶血性を示す菌であれ（MIC）を求める希釈法とディスク拡散法があば M. haemolytica、 溶 血 性 が な け れ ば P.

るが、臨床現場を考えると迅速性、経済性や簡菌の培養

平板培地の菌を接種し培養

菌液調整

McFarland 標準濁度 0.5 になるように菌液を調整

菌接種

滅菌綿棒を使用し試験用培地に菌を接種
平板を 60°ずつ回転させ、合計 3 回塗抹する

ディスクの配置

図4

培養35～37°C、16～18 時間培養判定

阻止円の直径を測定

薬剤感受性試験ディスク拡散法フローチャート－ 115 －

図4 薬剤感受性試験ディスク拡散法フローチャート

家畜感染症学会誌
10 巻 4 号 2021

BRDC 起因菌の分離同定・薬剤感受性試験

便性に優れるディスク拡散法が利用されること

somni の場合は 5 ～ 10%CO2 下で培養する。

が多いと思う。ここではその手順について述べ⑤判定：阻止円の直径を測定しディスク添付文

る。

書の判定基準、CLSI または EUCAST の判定

ディスク拡散法は、CLSI に準拠した Kirby-

基準に照らし合わせ、感性（S）、中間（I）、耐

Bauer 法が一般的であるが、抗菌薬を含んでい性（R）として表す［3, 9］。

る一定の大きさのろ紙を菌を塗抹した培地上にディスク拡散法での注意点として、使用する置き培養後に、そのろ紙の周囲に菌が発育して培地は、一般的にミューラーヒントン寒天培地

いない領域、すなわち阻止円の直径を測る。個々

またはミューラーヒントン寒天培地に血液を添の抗菌薬の阻止円の直径に基づき抗菌薬への感加した培地を用いる。これは培地成分によって受性を定性的に判定するものである［3, 11］。

は抗菌薬の作用に影響し正確な試験結果が得ら

繰り返しになるが薬剤感受性試験に供する菌れないことがあり、ミューラーヒントン寒天培

は、純培養菌を用いることが原則である。さま地はそれらを考慮して作られている。そのためざまな菌が混在しているサンプルを使用した場

薬剤感受性試験に使用する培地は、CLSI 等に合、抗菌薬に影響を一番受けない菌の阻止円を準拠した薬剤感受性試験用の培地を使用しなけ測定することになる。それが本来の原因菌であればならない。得られた結果から、ついつい阻るかどうかがわからないため正確な結果を求め止円の直径が大きいと効果が高いと勘違いしがることができない。そのためにも上述した方法

ちだが、あくまでもディスク拡散法は定性法でで得た純培養菌を使用すべきである。薬剤感受あるため、同じ抗菌薬でも菌種によって判定基性試験のディスク拡散法の手順は以下の通りと準が異なる場合があること、異なった抗菌薬同なる（図 4）。

士での阻止円の比較は意味がない点に注意が必①菌液調整：目的の菌を寒天培地上で発育させ要である。またこのディスク拡散法は、嫌気性る。4ml 程度の滅菌生理食塩水に McFarland

菌やマイコプラズマなどには適用外であり、こ

標準濁度液 0.5 と同じ濃度になるように菌浮遊

れら菌の感受性は希釈法で行うことが推奨され液を調整する。菌液は濃くても薄くても結果にる。

影響するため、簡易的ではあるが McFarland【おわりに】

標準濁度液に合わせる必要がある。McFarland
標準濁度液は、購入することもでき、また自分

薬剤耐性菌の問題は、動物や人だけでなく環で調整することも可能なので、検査室に 1 つは境とも密接に影響しあっており、この 3 分野の用意しておくと良いだろう。

垣根を超えた対策が必要とされる。その対策と②菌接種：調整された菌液に滅菌綿棒を浸し、して、「適正使用・慎重使用」が求められている。

試験管内壁で軽く押し付け過剰な菌液を取り除

そのためには、経験的または推測での抗菌薬のく。菌の接種は寒天培地に隙間なく全面に塗抹投与に頼るのではなく、病原菌を突き詰め、薬する。その後シャーレを 60 ゜回転させ、菌液に剤感受性試験を行い、その結果に基づいて抗菌再度浸すことなく同じ綿棒で最初と同様に菌を薬を選択することが重要である。しかし、感染全面に塗抹する。もう一度シャーレを 60 ゜回転症が疑われる動物から原因菌を分離、同定し、させ同様に菌を接種する。なお菌接種は、菌液

薬剤感受性試験を行う一連の手順は煩雑かつ時調整後 15 分以内に行わなければならない。

間がかかり、理想と現実のジレンマとなる。本

③ディスクの配置：ディスクは滅菌ピンセット

稿では、そのジレンマを少しでも解消するため、またはディスペンサー等を使い、菌を塗抹した

一般的な同定法に加え簡易法も紹介した。簡易培地上にディスクを配置する。ピンセット等を的な同定法では菌の属種はあくまでも推定と使う場合、ディスク間は、ディスクの中心からなってしまうが、原因菌と思われる菌を単離す

24mm 以上隣のディスクから離れるように置ることができれば、その純培養菌を使って薬剤く。

感受性試験を行うことができ臨床的にも活用で④培養：特殊な細菌でなければ 35 ～ 37℃で 16きる結果を得ることができると考える。またと～ 18 時 間 好 気 的 に 培 養 を 行 う。 た だ し H.

りあえず先行して薬剤感受性試験を行いなが－ 116 －

The Journal of Farm Animal in Infectious Disease
Vol.10 No.4 2021

IDENTIFICATION OF BRDC PATHOGENS AND DRUG SUSCEPTIBILITY TEST

ら、純培養菌の同定を行っても良いかもしれな［10］Gershwin, L. J. 2007. Bovine respiratory syncytial
virus infection: immunopathogenic mechanisms.
Anim. Heal. Res. Rev. 8:207‐213.

い。今後はさらに抗菌薬の「適正使用・慎重使用」を求められるだろう。そのため、少しでも臨床獣医師の先生方の労力を増やすことなく、正しい抗菌薬を選ぶための 1 つのアイディアとなれば幸いである。
【引用文献】［1］ Angen, Ø. 2015. Histophilus Angen et. al 2003 .
Christense, H.(ed) Bergey’s Manual of Systematics
of Archaea and Bacteria, Bergey’s Manual Trust.
［2］ C a s we l l , J . L . a n d A rch amb au lt, M . 2007.
Mycoplasma bovis pneumonia in cattle. Anim. Heal.
Res. Rev. 8:161‐186.
［3］ Clinical and Laboratory Standards Institute.
Performance standards for antimicrobial
susceptibility testing; 30th ed. CLSI supplement
M100. Wayne, PA: Clinical and Laboratory
Standards Institute. 2020.
［4］ C o n f e r, A . W. 2 0 0 9 . U p d a t e o n b a c t e r i a lpathogenesis in BRD. Anim. Health. Res. Rev.
10:145–148.
［5］ Corbeil, L. B., Widders. PR, Gogolewski, R., Arthur,J., Inzana, T. J, Ward ACS. 1986. Haemophilus
somnus: bovine reproductive and respiratory disease.
Can. Vet. J. 27:90‐93.
［6］ Dabo, S. M., Taylor, J. D. and Confer, A. W. 2007.
Pasteurella multocida and bovine respiratory disease.
Anim. Heal. Res. Rev. 8:129‐150.
VP［7］ 動物医薬品検査所：動物様抗菌性物質製剤の慎重使用の考えwww.maff.go.jp/nval/yakuzai/yakuzai_p5.html［8］ 動物衛生研究部門：病性鑑定マニュアル 第 4
版 www.naro.affrc.go.jp/org/niah/disease_byoseikantei2016/index.html［9］ EUCAST Disk Diffusion Test Methodology. https://e u c a s t . o rg / a s t _ o f _ b a c t e r i a / d i s k _ d i ff u s i o n _methodology/［11］実験法―抗菌剤の試験法を理解するために .
2004. 動物用抗菌剤マニュアル .（動物様抗菌剤研究会編）．InterZoo, 東京 . pp 155-173.
［12］Jones, C. and Chowdhury, S. 2007. A review of thebiology of bovine herpesvirus type 1 (BHV‐1), itsrole as a cofactor in the bovine respiratory disease
complex and development of improved vaccines.
Anim. Heal. Res. Rev. 8:187‐205.
［13］Lammler, C., Sammra, O, Glaeser, S. and Kampfer,
P. 2015. Trueperella Yassin et al. 2011vp. Trujillo, M.
E. (ed.) Bergey’s Manual of Systematics of Archaea
and Bacteria, Bergey’s Manual Trust.
［14］Mutters, R., Angen, Ø. and Bisgaard, M. 2015.
Mannheimia Mutters, A., Olesen, C. and Bisgaard
199a, 82 VP. Bergey’s Manual of Systematics ofArchaea and Bacteria, Bergey’s Manual Trust.
［15］Mutters, R., Christensen, H. And Bisgaard, M. 2015.
Pasteurella Trevisan 1887, 94AL Nom. Cons. Opin.
13, Jud. Comm. 1954b, 153. Bergey’s Manual of
Systematics of Archaea and Bacteria, Bergey’s
Manual Trust.
［16］Muylkens, B., Thiry, J., Kirten, P., Schynts, F. andThiry, E. 2007. Bovine herpesvirus 1 infection andinfectious bovine rhinotracheitis. Vet. Res.
38:181‐209.
［17］Panciera, R.J. and Confer, A.W. 2010. Pathogenesis
and pathology of bovine pneumonia. Vet. Clin.
North Am. Food Anim. Pract. 26:191-214.
［18］Singh, K., Ritchey, J.W. and Confer, A. W. 2011.
Mannheimia haemolytica: bacterial–host interactions
in bovine pneumonia. Vet. Pathol. 48:338‐348.
［19］Valarcher, J‐F. and Taylor, G. 2007. Bovine
respiratory syncytial virus infection. Vet Res.
38:153‐180.

－ 117 －

家畜感染症学会誌
10 巻 4 号 2021

BRDC 起因菌の分離同定・薬剤感受性試験

Bacterial identification method for respiratory infections
and standard method of drug susceptibility test
Taishi Tanabe
Laboratory of Veterinary Microbiology, School of Veterinary Medicine, Kitasato University
35-1, Higashi 23, Towada, Aomori, 034-8628, Japan
Tel: +81 0176 23 4371, Fax: +81 0176 23 8703
e-mail: tanabe@vmas.kitasato-u.ac.jp【Abstract】
The recent increase in drug-resistant bacteria due to improper use of antimicrobial agents has become a global
issue. In both human and veterinary medicine, they pose problems, such as reduced therapeutic effects,
environmental pollution of antimicrobial substances or drug-resistant bacteria, and their passage to humans
through livestock products. In veterinary medicine, the appropriate use of antimicrobial agents is required under
the concept of “proper” and “careful” usage to prevent the spread of drug-resistant bacteria. Bovine Respiratory
Disease Complex (BRDC), a combined infection due to multiple factors, such as bacteria, viruses, and stress, is adisease that causes significant losses in the livestock industry. Its major causative bacteria include Mannheimia
haemolytica, Pasteurella multocida, Histophilus somni, Trueperella pyogenes, and Mycoplasma bovis, for which
antimicrobial agents are routinely administered. This paper reviews the general and simple methods for identifying
the causative bacteria of respiratory infection required to select an appropriate antimicrobial agents and drug
susceptibility tests with isolated bacteria.
Keywords: Antimicrobial resistant bacteria, Bacterial identification, Bovine respiratory disease complex, Drugsusceptibility test

－ 118 －