The Journal of Farm Animal in Infectious Disease
Vol.10 No.1 2021

CHANGE IN IMMUNE CELLS AFTER DEHORNING

原著論文

黒毛和種肥育牛における導入後の除角時期の違いが末梢血免疫細胞数に及ぼす影響
髙橋知也 1 ＊） 松田敬一 2） 髙橋史昭 3） 前田洋佑 3） 大塚浩通 4）1）

宮城県農業共済組合

県北家畜診療センター

2）

宮城県農業共済組合

家畜診療研修所3）

北里大学獣医学部

4）

酪農学園大学獣医学部＊

連絡担当者：髙橋知也〒 987-0511

宮城県登米市迫町佐沼字中江 1-3-1
TEL：0220-22-2790
FAX：0220-22-2791
E-mail：tomoya@nosaimiyagi.or.jp［要約］

黒毛和種肥育牛の導入後の除角は有益だが、疼痛ストレスから呼吸器症候群を招く恐れがある。本試
験では導入後の除角時期の違いが末梢血免疫細胞数に及ぼす影響を調査した。管内 3 農家で除角を実施
した黒毛和種肥育牛 21 頭を供試し、導入後約 16 日に除角した 5 頭を Day 16 群（導入後平均 16.4 ±標準偏差 3.3 日）、導入後約 50 日に除角した 8 頭を Day 50 群（導入後 50.5 ± 2.8 日）、導入後約 75 日に除角した 8 頭を Day 75 群（導入後 75.0 ± 1.9 日）とした。除角実施 3 日前、除角実施直後、除角実
施 3 日後および除角実施 7 日後の各群の末梢血免疫細胞数の推移を比較した。ヘルパー T 細胞数および B 細胞数は群間に有意差が認められ、いずれも除角実施 3 日後で Day 75 群は Day 16 群と比較して有意な高値を示した。WBC、Gran、総成熟 T 細胞数、キラー T 細胞数および γ δ T 細胞数は群間に有意差は認められなかったが、Day 50 群および Day 75 群で除角実施直後から除角実施 3 日後にかけて増加する傾向がみられた。NK 細胞数は群間に有意差が認められ、除角実施 7 日後で Day 75 群は Day
16 群および Day 50 群と比較して有意な高値を示した。除角実施直後から除角実施 3 日後の一過性のリンパ球数増加は急性ストレス反応であり、除角実施 7 日後の NK 細胞数の増加は壊死した細胞を除去する免疫応答であることが推測された。また除角時の導入後日数が短い牛ほど移動や群飼等の慢性スト
レスからこれら生理的な免疫応答が十分に反応しないことが推測された。
キーワード：急性ストレス、慢性ストレス、除角、免疫細胞、黒毛和種肥育牛

主が角を気にせず安心して飼養管理が行える利緒論

点のほかに、群飼によって生じる強弱による発近年の肥育農家の多頭化経営に伴い、飼養管育の遅れの防止や角による挫傷の減少等から枝理や枝肉成績の向上を目的として導入後の除角

肉成績の向上が報告されている［9, 16］。しか実施が増加している。除角を実施することで畜しながら除角が要因となって呼吸器症候群の発生リスクが上昇すると考えられている［5］。黒毛和種肥育牛の呼吸器症候群は、その後の肥育

受理：2020年8月7日－1－

家畜感染症学会誌
10 巻 1 号 2021

黒毛和種肥育牛における導入後の除角時期の違いが末梢血免疫細胞数に及ぼす影響

成績に悪影響を及ぼすほか、治療費用による経調査した。

済的負担や最悪死亡事故を招く恐れもあり、肥材料と方法

育経営上、大きな問題となっている［15］。以

供試牛および調査方法：

上のことから、有益な経済効果をもたらす除角において有効な事故防止策を講じることは重要

調査期間は平成 25 年 6 月から平成 26 年 9 月

であると考えられる。

までとし、宮城県内の 3 肥育農家（A、B およ

黒毛和種肥育牛においてストレスにより分泌

び C 農家）で導入後の除角を実施した臨床的されたコルチゾールは免疫力を抑制することがに健康な黒毛和種肥育牛 21 頭を供試した。供

知られており［17］、また導入時において移動

試牛の詳細は表 1 に示した通りである。導入後ストレスにより末梢血免疫細胞数が低下して免約 16 日経過してから除角した 5 頭を Day 16

疫機能が弱化することが報告されている［11］。

群（導入後平均 16.4 ± 標準偏差 3.3 日）、導入

以上のことから我々は除角時に生じる疼痛スト後約 50 日経過してから除角した 8 頭を Day 50

レスが起因して、末梢血免疫細胞数が低下する群（導入後 50.5 ± 2.8 日）、導入後約 75 日経過仮説を立てた。さらに導入直後の肥育素牛におし て か ら 除 角 し た 8 頭 を Day 75 群（ 導 入 後

いて末梢血免疫細胞数の回復に 21 日以上要す

75.0 ± 1.9 日）とした。各農家の供試牛における報告もあり［12］、導入後の除角時期の違い

る飼料内容の詳細は表 2 に示した通りであっから末梢血免疫細胞数に及ぼす影響が変化する

た。飲水はウォーターカップにて自由飲水とし可能性も考えられる。本試験では導入後の除角た。除角実施 3 日前、除角実施直後、除角実施

時期の違いが末梢血免疫細胞数に及ぼす影響を3 日後、および除角実施 7 日後に採血を実施し、

表1

No 農家 性別
1
2
3
4
5

A
A
C
C
C

去勢
去勢
去勢
去勢
去勢

6
7
8
9
10
11
12
13

A
A
A
A
B
B
B
C

去勢
去勢
去勢
去勢
去勢
去勢
去勢
去勢

14
15
16
17
18
19
20
21

A
A
A
A
B
B
C
C

去勢
去勢
去勢
去勢
去勢
去勢
去勢
去勢

供試牛の概要

除角時の
日齢

除角時の
導入後日数

284
293
296
333
307

20
20
14
14
14

302.6 ± 18.9

16.4 ± 3.3

317
320
324
307
312
361
354
358

49
49
49
49
49
55
55
49

331.6 ± 22.2

50.5 ± 2.8

332
335
344
392
385
329
411
396

74
74
74
74
74
74
78
78

365.5 ± 33.7

－2－

群

Day 16

Day 50Day 7575.0 ± 1.9
平均値 ± 標準偏差

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Vol.10 No.1 2021

表2

CHANGE IN IMMUNE CELLS AFTER DEHORNING

A、BおよびC農家における1日の飼料給餌内容

給与飼料名

A農家
給与量 (kg)

B農家
給与量 (kg)

C農家
給与量 (kg)

配合飼料（TDN : 68％以上、CP ： 14％以上、VA : 3,200 IU/kg）

4

4

4

チモシー乾草

2

2

2

稲わら

2

2

2

ヘイキューブ

1
0.5

0.5

大豆粕
飼料養分含量 （乾物中％）
TDN

63.3

65.3

65.3

CP

12.7

14.7

14.7

NDF

39.2

37.3

37.3

各群の除角前後の末梢血免疫細胞数および血液AS109K、 テ ル モ 株 式 会 社、 東 京 ） お よ び

生化学検査結果の推移を比較した。

EDTA 加真空採血管（ベノジェクトⅡ真空採
血管 VP-DK052K、テルモ株式会社、東京）を除角方法：

用いて採取した。得られた EDTA 血からは、除角方法は、保定してから身体検査にて健康

白血球数（WBC）の測定および末梢血免疫細上問題ないことを確認したのち、キシラジン（セ胞数の測定を実施した。WBC の測定は、自動デラック 2％注射液、ゼノアック、福島）を 0.05

血 球 計 算 装 置（PC607、ERMA 社、 ド イ ツ ）mg / kg の容量で頸部筋肉注射にて鎮静処置

を用いて行った。間接蛍光抗体法による白血球

後、両側の角基部と外眼角を結ぶ線上の中央付

表面抗原解析は、採材後に約 4℃で冷蔵保存し近に塩酸プロカイン（動物用塩プロ注「KS」、た材料を用いて 24 時間以内に Wyatt ら［20］共立製薬株式会社、東京）左右各 10 ml の皮下の方法に準じてフローサイトメーター

注射処置し、角神経ブロックを行った。続いて（FACScan, Becton Dickinson, U.S.A.）により両側の角基部にゴムバンドを巻いて駆血した

実 施 し た。 本 解 析 の ウ シ 一 次 抗 体 は CD3後、油圧式除角器（油圧式除角器、オバヤナ ･（MMIA, VMRD, U.S.A.）、CD4（CACT183B,

セメンテックス株式会社、愛知）を用いて角基VMRD, U.S.A.）、CD8（9ACT80C, VMRD,

部から 5 cm の部位で切断した。切断面に生石U.S.A.）、T cell receptor（TCR）1-N12

灰乳を塗布後、除角用焼烙こて（ニューこてじゅ（CACT61A, VMRD, U.S.A.）、MHC class- Ⅱう、富士平工業、東京）を用いて焼烙止血した。

（TH14B, VMRD, U.S.A.）、 お よ び CD335（MCA2365, AbDserotec, U.S.A.） を 用 い た。

採血および血液検査方法：

このうち MHC class- Ⅱには蛍光強度が異なる

供試牛の血液は頸静脈より血清分離剤入真空

2 種類の陽性細胞群が存在したため、過去の報

採 血 管（ ベ ノ ジ ェ ク ト Ⅱ 真 空 採 血 管 VP-

告［19］と同様、蛍光度弱陽性の MHC class-－3－家畜感染症学会誌
10 巻 1 号 2021

黒毛和種肥育牛における導入後の除角時期の違いが末梢血免疫細胞数に及ぼす影響

Ⅱ +low と蛍光度強陽性の MHC class- Ⅱ +high にて除角実施 3 日前と比較して除角実施 3 日後で分類した。サイトグラムの結果から WBC のう有意に増加した。Gran は群間に有意な差は認

ち、単球およびリンパ球で構成される単核球数

められなかったが、Day 50 群において除角実（PBMC）とそれ以外の白血球で構成される顆

施 3 日前と比較して除角実施 3 日後で有意に増粒球数（Gran）に分類した。各表面抗原の陽加した。総成熟 T 細胞数は群間に有意な差は性率と WBC の実測値を用いて各表面抗原陽性

認められなかったが、Day 75 群において除角細胞数を算出した。CD3 陽性細胞数を総成熟

実施 3 日前と比較して除角実施直後および除角

T 細胞数、CD4 陽性細胞数をヘルパー T 細胞数、実施 3 日後で有意に増加した。ヘルパー T 細CD8 陽性細胞数をキラー T 細胞数、TCR1-N12

胞数は群間に有意な差が認められ、除角実施 3

陽性細胞数を γ δ T 細胞数、MHC class- Ⅱ弱陽

日後において、Day 75 群は Day 16 群と比較

性細胞数を単球数、MHC class- Ⅱ強陽性細胞

して有意な高値を示した。さらに Day 75 群に数 を B 細 胞 数、 お よ び CD335 陽 性 細 胞 数 をおいて除角実施 3 日前と比較して除角実施 3 日

NK 細胞数とした。

後で有意に増加した。キラー T 細胞数は群間血清分離剤入真空採血管は冷蔵保存後、採血に有意な差は認められなかったが、Day 75 群

から 1 時間以内に遠心分離機（ヘマトクリット

において除角実施 3 日前と比較して除角実施直遠心機センテック 3220、久保田商事株式会社、

後および除角実施 3 日後で有意に増加した。

東京）を用い、1700 × g で 10 分にて血清分

γ δ T 細胞数は群間に有意な差は認められな離を行った。得られた血清から、ビタミン A

かったが、Day 50 群において除角実施 3 日前

（VA）、ビタミン E（VE）、コルチゾール（Corti）、と比較して除角実施直後および除角実施 3 日後

および総コレステロール（T-cho）を測定した。

で有意に増加した。Day 75 群において除角実

VA および VE は逆相高速液体クロマトグラ

施 3 日前と比較して除角実施直後で有意に増加

フィー法を用いて測定した。Corti は全自動化した。B 細胞数は群間に有意な差が認められ、学発光酵素免疫測定装置（Access2、ベックマ

除角実施 3 日後において、Day 75 群は Day 16

ン・コールター株式会社、東京）を用い、化学群と比較して有意な高値を示した。また、Day

発光酵素免疫法で測定した。T-cho は生化学自16 群において除角実施 3 日前と比較して除角

動分析装置（Dimension RL Max、シーメンス実施直後で有意に減少した。Day 75 群におい株式会社、東京）を用い、酵素法で測定した。

て除角実施 3 日前と比較して除角実施 3 日後で有意に増加した。NK 細胞数は群間に有意な差統計方法：が認められ、除角実施 7 日後において、Day

測定値は平均値 ± 標準偏差（SD）で示した。

75 群は Day 16 群および Day 50 群と比較して群間の統計的有意差を評価するために、反復測有意な高値を示した。また、Day 75 群におい定二元配置分散分析を行った。群間に有意差がて除角実施 3 日前と比較して除角実施 7 日後で認められた場合、Turkey’s multiple comparisons

有意に増加した。PBMC および単球数に関し

test による単純主効果検定を行い、各要因におては有意な変化は認められなかった。

ける主効果の検出を行った。また、各群の除角

除角実施前後における各群の血液生化学検査

実施 3 日前とその後の測定値との比較は一元配結果の推移を表 4 に示した。VA は群間に有意置分散分析を行った。有意差が認められた場合、な差は認められなかったが、Day 75 群においDunn’s multiple comparisons test による多重て除角実施 3 日前と比較して除角実施 3 日後で比較を実施した。各統計結果において、危険率有意に減少した。Corti は群間に有意な差は認5％未満を有意差ありとした。

められなかったが、全ての群において除角実施
3 日前と比較して除角実施直後で有意に増加し結果た。T-cho は群間に有意な差は認められなかっ

除角実施前後における各群の末梢血免疫細胞

たが、Day 16 群において除角実施 3 日前と比数の推移を表 3 に示した。WBC は群間に有意較して除角実施 3 日後および除角実施 7 日後でな差は認められなかったが、Day 50 群におい有意に減少した。VE に関しては有意な変化は－4－

The Journal of Farm Animal in Infectious Disease
Vol.10 No.1 2021

CHANGE IN IMMUNE CELLS AFTER DEHORNING

表3
項目
WBC
(/µl)

PBMC
(/µl)

Gran
(/µl)

総成熟T細胞数(/µl)

ヘルパーT細胞数(/µl)

キラーT細胞数(/µl)

γδT細胞数
(/µl)

単球数
(/µl)

B細胞数
(/µl)

NK細胞数
(/µl)

群

除角実施3日前

各群における免疫細胞数の推移
除角実施直後除角実施3日後除角実施7日後

Day 167420.0±2132.46600.0±2346.37120.0±1804.78374.0±1472.7

Day 507250.0±2949.67712.5±1413.610935.0±3439.1 *8825.0±1375.0Day 756836.3±2583.17287.5±1725.08850.0±2211.08718.8±1850.1

Day 164023.6±

1263.33202.2±1040.52924.4±835.5

3226.6±597.4

Day 503642.3±2255.03838.6±886.64633.9±1246.04372.8±1255.2

Day 752794.0±1158.44119.0±2179.64863.3±2025.83856.0±1125.9Day 163396.4±1052.83397.8±1333.54195.6±1088.15147.4±1010.3

Day 503607.7±

1835.03873.9±1843.26301.1±4120.3 *4452.2±921.7

Day 754042.3±1775.73168.5±2659.83986.7±1639.44862.7±2321.6

Day 161336.2±430.61464.0±535.6

1057.2±602.6

1134.9±350.4

Day 50

991.5

±

422.7

1844.6±595.0

1685.6±650.8

1648.8±674.5

Day 75

841.8

±

421.9

1823.3±980.1 *

1852.5±1078.5 *1150.1±405.5

Day 16

547.7

±

196.0

465.2

±

164.0

305.4

±

160.2

369.7

±

102.5

Day 50

355.8

±

170.0

491.5

±

206.7

448.1

±

164.5

500.3

±

204.5

380.4

±

119.5

a)

b)

Day 75

307.7

±

156.5

490.7

±

198.6

584.0

±

311.6 *

Day 16

404.0

±

135.1

364.7

±

98.6

300.2

±

141.6

283.2

±

63.6

Day 50

254.9

±

112.6

486.2

±

244.1

326.2

±

96.7

373.0

±

151.2

Day 75

289.1

±

154.5

524.8

±

277.7 *

516.8±

305.6 *

373.4

±

163.4

Day 16

549.8

±

275.9

810.9

±

577.7

604.6

±

428.8

673.8

±

202.1

Day 50

336.6

±

136.0

1032.6±533.4 **

836.5±

403.0 *

695.6

±

363.6

Day 75

233.8

±

125.4

774.2

±

450.5 *

673.4

±

360.6

462.1

±

216.1

Day 16

632.7

±

346.2

683.2

±

247.0

819.9

±

433.4

698.1

±

205.2

Day 50

854.4

±

564.8

820.5

±

309.4

1107.2

±

452.7

690.6

±

252.8

Day 75

562.6

±

362.7

643.8

±

360.3

837.9

±

387.1

512.5

±

317.5

Day 161425.4

±

582.8

649.8

±

293.9 *

911.9±

189.8 a)1012.5±219.8

Day 501632.7±1454.41120.9±398.1

1899.6±1185.6

1920.2±794.9

1832.8

±

816.3

b)

Day 751217.8±563.41482.7±1127.72336.8±1074.5 **Day 16

289.6

±

142.6

259.6

±

103.7

226.7

±

96.4

307.9

±

284.4

A)

Day 50

202.9

±

117.2

239.0

±

103.7

210.9

±

72.2

376.6

±

172.8

A)

Day 75

166.8

±

93.2

219.6

±

108.2

264.8

±

133.2

774.1

±

455.0 **

B)

平均値 ± 標準偏差＊＊： p < 0.05 vs 除角実施 3 日前
： p < 0.01 vs 除角実施 3 日前
異符号間は群間で交互作用が認められた場合の有意差を示す（A-B : p < 0.01, a-b : p < 0.05）。
＊

認められなかった。

が除角実施 3 日前と比較して除角実施直後から除角実施 3 日後にかけて増加する傾向がみられ考察た。一方で Day 16 群において、これら末梢血Day 50 群および Day 75 群において WBC、免疫細胞数は増加せず、ヘルパー T 細胞数おGran、総成熟 T 細胞数、ヘルパー T 細胞数、

よび B 細胞数は除角実施 3 日後において Day

キラー T 細胞数、 γ δ T 細胞数および B 細胞数75 群と比較して有意な低値を示した。Day 50－5－家畜感染症学会誌
10 巻 1 号 2021

黒毛和種肥育牛における導入後の除角時期の違いが末梢血免疫細胞数に及ぼす影響

表4

項目
VA
(IU/dl)VE(µg/dl)Corti(µg/dl)T-cho(mg/dl)各群における血液生化学検査結果の推移

群

除角実施3日前

除角実施直後除角実施3日後除角実施7日後

Day 16140.0 ± 43.0

153.0 ± 45.4

149.6 ± 48.7

150.0 ± 30.9

Day 50162.5 ± 39.6

161.3 ± 37.7

146.0 ± 36.3

137.0 ± 37.0

Day 75160.1 ± 54.2

149.3 ± 43.0

126.0 ± 43.0 *142.8 ± 46.9

Day 16218.7 ± 65.7

209.6 ± 43.1

198.7 ± 32.4

210.8 ± 60.9

Day 50204.9 ± 63.6

201.3 ± 74.9

188.0 ± 93.1

193.8 ± 88.3

Day 75225.1 ± 96.4

224.8 ± 97.0

218.0 ± 106.5

239.6 ± 108.3

Day 161.9 ± 0.7

5.3 ± 0.4 *1.7 ± 1.3

2.3 ± 0.9

Day 500.6 ± 0.3

4.7 ± 1.1 **2.1 ± 1.6

0.9 ± 0.7

Day 750.9 ± 0.7

4.4 ± 1.3 **1.1 ± 0.6

1.0 ± 1.1

Day 16107.2 ± 30.8

98.4 ± 25.7

93.6 ± 21.5 *88.0 ± 24.7 *Day 5093.9 ± 25.1

89.3 ± 23.8

91.5 ± 25.5

92.8 ± 30.8

Day 75106.3 ± 28.8

102.8 ± 27.2

104.8 ± 30.5

109.3 ± 33.3＊

： p < 0.05 vs 除角実施 3 日前

平均値 ± 標準偏差： p < 0.01 vs 除角実施 3 日前＊＊

群および Day 75 群の結果は除角後の末梢血免除角実施 7 日後において Day 75 群は Day 16

疫細胞数が減少するという我々の予測に反し群および Day 50 群と比較して有意な高値を示た。ヒト医学領域では急激なストレスが加わるした。NK 細胞は自然免疫の役割を担う細胞障ことで交感神経優位となり好中球を主とした顆

害性リンパ球であり、T 細胞と異なり主要組織

粒球が増加することが報告されている［2］ほか、適合抗原による抗原提示を必要とせず、非特異

急性ストレスにより一過性に免疫機能が亢進し的かつ迅速に直接抗原を標的とする［3］。このキラー T 細胞を中心としたリンパ球数の増加

除角実施 7 日後の NK 細胞数の増加は、除角後が報告されている［10］。実際に乳用子牛の除の焼烙止血に伴う熱ストレスから熱ショックタ

角実施後においても好中球の増加が認められてンパク質（Heat shock protein；HSP）が誘導

いる［4］。一方で慢性ストレスは細胞性免疫おされ、免疫応答が行われた結果と考えた。HSP

よび液性免疫の機能低下を引き起こすと考えら

は熱、化学物質、虚血等のストレスにさらされれている［7］。以上より除角による疼痛ストレた際に細胞内で発現が上昇し、細胞内立体構造

スは急性ストレスであり、リンパ球を中心としを維持するよう細胞自身の防御機構として働く

た末梢血免疫細胞数の増加に至った可能性が示

ほか、細胞内タンパク質の損傷が酷い場合には唆された。また、Day 16 群において除角後にこれを排除するように働く［8］。また HSP とリンパ球数が増加しなかった要因は、導入後間抗原の融合タンパク質は抗原単体と比較して有もなく、移動や群飼といった慢性ストレスによ

意に効率よく免疫活性がなされることが報告さ

り免疫機能が低下し、十分に免疫応答が行われれている［18］。Shevtsov らは、グリア芽腫をなかったものと推察した。

罹患したラットの腫瘍内に活性化した HSP70

NK 細胞数は群間に有意な違いが認められ、を注入したところ 1 週間内に NK 細胞が増加し－6－

The Journal of Farm Animal in Infectious Disease
Vol.10 No.1 2021

CHANGE IN IMMUNE CELLS AFTER DEHORNING

たことを報告している［13］。これは本試験のした生理的な結果であることが推察された。除除角実施 7 日後に NK 細胞数が増加したことと角時に導入後日数が短いものほど、移動や群飼一致している。以上より、焼烙で生じた熱スト

といった慢性ストレスにより免疫機能が低下

レスから HSP が発現し、焼烙により壊死した

し、これら生理的な免疫応答が十分に行われな細胞と融合タンパク質を形成することで NK 細い可能性が示唆された。今後、除角後の免疫応胞に応答したものを捉えた結果と推察した。ま答の大小が牛に与える影響について調査していた NK 細胞数が Day 75 群において Day 16 群

きたい。

および Day 50 群と比較して有意な高値を示し引用文献

た理由は、仮説のとおり Day 16 群および Day［1］ Adachi, K., Fukumoto, K., Nomura, Y., Katsura, N.,
Arikawa, A., Tsuji, A., Onimaru, T. 1998. Significant
decrease of serum vitamin A level in Japanese Black
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leukocytosis: early observations, current research,and future directions. Brain Behav Immun. 10: 7791.
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recognition by stimulatory immunoreceptors. Curr
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［4］ Doherty, T. J., Kattesh, H. G., Adcock, R. J.,
Welborn, M. G., Saxton, A. M., Morrow, J. L.,
Dailey, J. W. 2007. Effects of a concentrated
lidocaine solution on the acute phase stress response
to dehorning in dairy calves. J. Dairy. Sci. 90: 42324239.

50 群は Day 75 群と比較して移動や群構成スト
レスからの免疫機能回復が不十分であった可能性が考えられた。HSP により腫瘍内で NK 細胞を活性化させて癌細胞を破壊するという抗癌治療が注目されており、本試験における除角実
施 7 日後の NK 細胞数の増加は免疫応答の強弱を反映している可能性が示唆された。さらに
Shevtsov らは、HSP70 を注入して 2 週間後に腫瘍細胞内に T 細胞数の増加も報告しており［13］、今後、除角後の焼烙でも同様の反応が得られるか更なる調査が必要と考える。
VA に関して、Day 75 群は除角実施 3 日前と比較して除角実施 3 日後に有意な減少を示した。また Day 50 群において除角実施 3 日前と比較して除角実施 7 日後で減少する傾向がみられた（p < 0.10）。黒毛和種肥育牛において移動や寒冷ストレスにより血中 VA が消費され［5］ 犬塚一歩 . 2010. 牛の呼吸器感染症の発生に関するリスクファクター . 日本家畜臨床感染症研究会誌 . 5: 41-46.
［6］ 石崎 宏 . 2010. 育成期の子牛の免疫抵抗性を低下させる要因 . 日本家畜臨床感染症研究会誌 .
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［7］ Kubitz, K. A., Peavey, B. S., Moore, B. S. 1986. The
effect of daily hassles of humoral immunity. An
Interaction Moderated by Locus of Control.
Biofeedback Self Regul. 11: 115-123.
［8］ Li, Z., Srivastava, P. 2004. Heat-shock proteins. Curr
Protoc Immunol. Appendix 1: Appendix 1T.

る［11］ほか、導入後の群構成ストレスによっても VA は消費されることが知られている［1］。
一方で、牛へのストレス負荷はコルチゾールの分泌量を増加させることが報告されている［14］。本試験においていずれの群も除角実施直後の Corti が有意に増加しているが、導入後日
数が長いものほど除角後の VA 減少が大きくなる傾向があった。飼養管理上 VA は充足されており、原因は不明だが、導入後日数が長い
ものほど血液上に現われない強いストレスや炎［9］ 前原俊浩 , 堤 知子 . 1990. 肉用牛の除角と群管理 . 日草九支報 . 20. 17-22.
［10］Maes, M., Van Bockstaele, D. R., Gastel, A., Song,C., Schotte, C., Neels, H., DeMeester, I., Scharpe, S.,
Janca, A. 1999. The effects of psychological stresson leukocyte subset distribution in humans. Evidenceof Immune Activation. Neuropsychobiology. 39:
1-9.

症があった可能性が示唆された。
除角実施による疼痛ストレスにより末梢血免
疫細胞数は低下する仮説を立てたが、予測に反して Day 50 群および Day 75 群で除角実施後に増加した。これは除角という急性ストレスが加わったことに対する生理的な免疫応答であることが推察された。また除角実施 7 日後におけ［11］松田敬一 , 大塚浩通 . 2011. 黒毛和種牛の冬季ト
ラック輸送に対する保温ジャケットの効果 . 日
本家畜臨床感染症研究会誌 . 6：1-8.

る Day 75 群の NK 細胞数の増加は HSP と壊死した細胞が形成した融合タンパクに免疫応答－7－家畜感染症学会誌
10 巻 1 号 2021

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家畜診療 . 55: 177-181.
［18］Vabulas, R. M., Braedel, S., Hilf, N., Singh-Jasuja,
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heat shock protein Gp96 activates dendritic cells via
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［12］松田敬一 . 2015. 黒毛和種肥育牛における飼養管理と炎症性疾患の関係 . 家畜感染症学会誌 . 4.
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［13］Shevtsov, M. A., Pozdnyakov, A. V., Mikhrina, A. L.,
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The Journal of Farm Animal in Infectious Disease
Vol.10 No.1 2021

CHANGE IN IMMUNE CELLS AFTER DEHORNING

Change in peripheral blood immune cell counts associated with the timing of
dehorning after the introduction in Japanese Black Steers
Tomoya Takahashi1), Keiichi Matsuda2), Fumiaki Takahashi3), Yousuke Maeda3), Hiromichi Ohtsuka4)1) Kenhoku Veterinary Clinical Center, Miyagi Prefectural Agricultural Mutual Aid Association,
1-3-1 sanuma, hasamacho, tome, Miyagi 987-0511, Japan2)
Livestock Medical Training Center, Miyagi Prefectural Agricultural Mutual Aid Association
3)
School of Veterinary Medicine, Kitasato University
4)
School of Veterinary Medicine, Rakuno Gakuen University【Abstract】
The dehorning after introduction in Japanese Black Steers achieves amenities of the fattener management.
However, Dehorning is possible to cause Bovine Respiratory Disease Complex by the pain stress. In the study, it
was researched whether the timing of the dehorning after introduction in Japanese Black Steers exerted an
influence upon immune cells in peripheral blood. Of 21 Japanese Black Steers in 3 farms to act dehorning, 5 steers
were at about 16 days after introduction (Day 16) , 8 steers were at about 50 days after introduction (Day 50), and8 steers were at about 75 days after introduction (Day 75), at dehorning. To assess shift of immune cells inperipheral blood, 4 measurement points were set such as 3 days before dehorning (-D3), soon after dehorning(post), 3 days after dehorning (D3), and 7 days after dehorning (D7). In helper T cell counts and B cell counts, Day
75 was significantly higher on D3 than Day 16, respectively. In WBC, Gran, total mature T cell counts, killer T
cell counts, and γδT cell counts, Day 50 and Day 75 tended to increase from post to D3, though they did not show
any significant differences variation between the groups. In NK cell counts, Day 75 was significantly higher on D7
than Day 16 and Day 50. It was presumed that the transient lymphocyte elevation from post to D3 was the acutestress reaction and NK cell counts increase at D7 were physiological response to remove necrotic cells. It wassuggested that their immune response was not performed sufficiently by the chronic stress such as transport andgroup housing so that the number of days was short after introduction.
Keywords: acute stress, chronic stress, dehorning, immune cell, Japanese Black Steer－9－