福岡県保健環境研究所年報第37号，89－94，2010

資料
平成 20 年度感染症流行予測調査（ジフテリア、破傷風、百日咳）
江藤良樹・市原祥子・濱﨑光宏・村上光一・竹中重幸・堀川和美
福岡県におけるジフテリア、破傷風、百日咳に対する抗体保有状況を調査した。163名の血清について破傷風毒素、ジフテリア毒素、百日咳毒素、百日咳繊維状赤血球凝集素に対する抗体価、及び、百日咳菌凝集素価を調査した。破傷風毒素に対する抗体の陰性率は12.3%、ジフテリア毒素に対する抗体の陰性率は23.9%であった。百日咳毒素および百日咳繊維状赤血球凝集素に対する抗体価調査では、百日咳毒素に対する抗体の陰性率は全体で38.0%、百日咳繊維状赤血球凝集素に対する抗体の陰性率は14.7%であった。また、百日咳菌凝集素価で陰性と判定した割合は、東浜株に対して62.6%、山口株に対して64.4%であった。

［キーワード：感染症流行予測調査，ジフテリア毒素抗体価，破傷風毒素抗体価，百日咳毒素抗体価，百日咳繊維状赤血球凝集素抗体価、百日咳菌凝集素価］
１

はじめにる恐れがある。

三種混合ワクチン（DPT）はジフテリア、破傷風及び百日感染症流行予測調査は、「集団免疫の現状把握及び病原体咳の発症・重症化予防を目的としたワクチンで、生後3ヶ月の検索等の調査を行い、各種疫学資料と併せて検討し、予防から12カ月までに3回接種し、その後、最終接種から1年以内接種事業の効果的な運用を図り、さらに長期的視野に立ち総に、追加で1回接種する。予防接種法によると、DPTは定期合的に疾病の流行を予測する」ことを目的としている2）。福

一類疾病接種に分類されており、ワクチン接種の努力をしな

岡県においては、平成20年度にジフテリア、破傷風及び百日ければならないワクチンの1つである。

咳を対象疾病とした感受性調査を行い、社会集団の抗体保有

ジフテリアは、感染症法で2類感染症に指定されている。

状況について解析を行った。平成20年7月14日健発第071400

潜伏期間は2～5日程度で、喉の痛み、倦怠感、発熱、頸部リ1号厚生労働省健康局長通知による「平成20年度感染症流行ンパ節炎などの症状を呈する。合併症として心筋炎を起こす予測調査の実施」に基づき調査を行った。なお、栃木県、東ことがある。また、先進国での致命率は5～10％であり、コ京都、福井県、愛知県、愛媛県の各自治体でも同様な検査をントロールが必要な感染症の一つである。

実施した。

破傷風は、5類感染症に指定されている感染症である。破
傷風菌は芽胞の形で土壌中に常在しており、傷口から体内に２方法侵入することで感染する。発病までの潜伏期間は3日～3週間

２・１

検体

本調査は、平成20年7月から8月に筑紫保健福祉環境事務所、である。破傷風菌が産生する破傷風毒素により強直性痙攣をひき起こし、重篤な患者では呼吸筋の麻痺により窒息死する及び、粕屋保健福祉環境事務所、及び、その管内の医療機関ことがある。近年では、1 年間に約40 人（致命率 約30％）等で採血された7年齢区分163名の血清（0-4歳 59件、5-9歳の患者が報告されている。

31件、10-19歳 22件、20-29歳 11件、30-39歳 20件、40-49

百日咳は、特有のけいれん性の咳発作を特徴とする急性気歳 10件及び、50歳以上10件）を対象とし、ジフテリア、破道感染症である。7～10日程度の潜伏期の後に、風邪様症状

傷風および百日咳に対する抗体価、及び、百日咳菌凝集素価に始まり、次第に咳の回数が増えるとともに程度も激しくなを測定した。

り、やがて、特徴ある発作性けいれん性の咳となる。近年、

２・２

検査項目

検査項目は、平成20年度感染症流行予測調査実施要領に基20歳以上の患者が年々増加し、報告数の半数以上までになっている 。百日咳はワクチン未接種の乳幼児が罹患した場合

づき、ジフテリア毒素に対する抗体価、破傷風毒素に対するには重症化しやすく、20歳以上の患者が小児への感染源とな抗体価、百日咳毒素（PT）に対する抗体価並びに百日咳繊

1）

維状赤血球凝集素（FHA）に対する抗体価、及び、百日咳菌
福岡県保健環境研究所 （〒818-0135 太宰府市大字向佐野 39）

凝集素価の5項目であった。

―89―

２・３

検査方法

平均抗体価（幾何平均）100

検査方法は、感染症流行予測調査検査術式に従い実施した。

1.080
抗体陰性率（％）

用した。ジフテリア毒素に対する抗体価測定は、96穴マイク
ロプレートを用いた培養細胞法で行った。血清を2倍段階希1.2700.860500.6400.430釈し、16 CD50 / 25μl に希釈したジフテリア毒素を添加後、2037℃で30分間中和した。培養液、及び、3×10 cells / ml の0平均抗体価（ IU / ml ）血清は56℃で30分間加熱し、非働化を行い、以下の試験に使

抗体陰性率

900.2

1050.00-45-910-19

VERO細胞を加え、37℃で4～5日間培養し細胞変性効果を観図1察した。細胞変性効果が観察された最初の希釈倍率から抗体20-2930-39
年齢（歳）

40-49

50-

ジフテリア毒素に対する年齢別抗体陰性率価を算出した。破傷風毒素に対する抗体価測定は、破傷風抗体測定キット"化血研"（（財）化学血清療法研究所）を用い３．２ 破傷風感受性調査て実施した。96穴U型マイクロプレート上で、血清を2倍段破傷風毒素に対する抗体価の調査結果を図2、表2に示す。

階希釈した後に感作ラテックスを加え、室温で2時間反応し、抗体陰性率が最も高かったのは40-49歳と50歳以上の年齢凝集像の判定を行った。凝集が観察された最大希釈倍率から群で90%、次に30-39歳の10%の順であった。全体では12.3%抗体価を算出した。PTおよびFHAに対する抗体価測定は、が抗体陰性であった。

百日咳抗体価測定キット（和光純薬工業（株））を用いて行った。24穴マイクロプレートに血清、希釈液、百日咳毒素抗洗浄液で3回洗浄し、標識抗体を加え室温で30分間反応した。

0.60.580抗体陰性率（％）

相を加え、37℃で1時間ゆっくり振り混ぜながら反応した。

抗体陰性率

90700.4600.350400.230

洗浄液で3回洗浄後、発色液を加え、492nmの吸光度を測定

20平均抗体価（ IU / ml ）原結合固相および百日咳菌繊維状赤血球凝集素抗原結合固平均抗体価（幾何平均）

1000.110した。キットに付属の陽性コントロールを用いて検量線を作0.00成し、それぞれの検体の抗体価を算出した。凝集反応法に0-4よる百日咳菌凝集素価測定には、抗原として百日せき凝集

図25-910-1920-2930-39
年齢（歳）40-4950-

破傷風毒素に対する年齢別抗体陰性率

反応用抗原「生研」Ⅰ相菌 東浜株、及び、山口株（デンカ生研）を使用した96穴U型マイクロプレートで。非働化し３．３ 百日咳感受性調査

た血清の希釈系列を作製した後に抗原を添加し、撹拌後に3PTに対する抗体価調査の結果を図3、表3に示す。年齢区7℃で2時間反応させ、一晩、室温で静置した。強い凝集像が分で陰性率が最も高かったのは、30-39歳、40-49歳、50歳以観察された最高希釈倍数に2を乗じた値を凝集価とした。

上で70%、ついで5-9歳で 45%の順であった。また、最も抗また、ジフテリアは抗毒素価0.1 IU / ml 未満、破傷風

体陰性率が低かったのは0-4歳で18.6%、ついで10-19歳で22.

は抗毒素価0.01 IU / ml未満、百日咳は百日咳抗PT抗体価7%の順であった。抗体陰性率は全体で38.0%であった。FHと百日咳抗FTA抗体価が10 EU / ml未満であるときに抗Aに対する抗体価調査の結果を図4に示す。抗体陰性率は全体陰性と判定した。百日咳菌凝集素価は、凝集素価が40倍体で14.7%、年齢区分で陰性率が最も高かったのは40-49歳で未満で陰性と判定した。

50%、次に50歳以上で30%、30-39歳で25.0%の順であった。

３ 検査結果-9歳で9.7%の順であった。発症防御には抗PT抗体価と抗FH

３．１ ジフテリア感受性調査

A抗体価の両方が10 EU / ml 以上が必要であると考えられまた、最も抗体陰性率が低かったのは0-4歳で5.1%、ついで5ジフテリア毒素に対する抗体価の調査結果を図1、表1に示ているが、この基準を満たさない抗体陰性者の割合は、0-4す。抗体陰性率が最も高かったのは、50歳以上（90％）で、歳で20.3%、5-9歳で45.2%、10-19歳で27.3%、20-29歳で36.4%、次いで30-39歳（60％）、40-49歳（50％）の順であった。

30-39歳で70.0%、40-49歳で80.0%、50歳以上で70.0%であっ全体の抗体陰性率は23.9%であった。また、抗体陽性者のた。

平均抗体価（幾何平均）は、0.389 IU / mlであった。年齢

凝集素価法による結果を、図5、6、及び、表5、表6に示とともに抗体陰性率が上昇する傾向にあり、特に30歳以上す。東浜株への凝集素価を陰性と判定した率が最も低かっでは抗体陰性率が50%以上であった。

たのは40-49歳の年齢群で20.0%、次に20-29歳の27.3%、3039歳の40.0%の順であった。山口株への凝集素価を陰性と判定した率が最も低かったのは40-49歳の年齢群で30.0%、―90―次に30-39歳の35.0%、20-29歳の45.5%の順であった。いず４ 考察
破傷風およびジフテリア毒素に対する抗体価は、若年齢層

れの株の凝集素価は年齢とともに下がり、50歳以上では高で抗体陰性率が低く、年齢を経るに従って抗体陰性率が高くくなっていた。

なる傾向が見られた。これらの結果から、予防接種により効平均抗体価

果的に破傷風およびジフテリア毒素に対する抗体価が得ら

907080607060505040403030202010100れていると考えられる。また、今回の調査では40歳以上で9平均抗体価（ EU / ml ）抗体陰性率（％）

80

抗体陰性率0%が破傷風の抗体が陰性であったが、破傷風発症者の95%以上が30才以上の成人であることを併せて考えると、これらの年齢層に予防接種を推奨する必要があると考えられた。
百日咳においては、ワクチン接種を受けて間もない0-4歳

00-45-910-1920-2930-39
年齢（歳）40-4950-

では、PTとFHAに対する抗体陰性率が低く、また、平均抗図3 百日咳毒素（PT）に対する年齢別抗体陰性率体価が全ての年齢群で最も高いことから、ワクチン接種により効率よく免疫が得られていると考えられた。また、PTに関しては5-9歳で抗体陰性率が45.2%と前後の年齢群と比較50100して高くなっている一方で、FHAについては年齢とともに抗4080306020401020り、50歳以上では再び上昇している。百日咳凝集素価は、感0

染歴の有無を示すと考えられるが、今回の結果からは、20-

図4 百日咳繊維状赤血球凝集素（FHA）に対するで東浜株に対する抗体陰性率が高くなっている一方で、抗体年齢別抗体陰性率

陽性者の幾何平均が他の年齢群と比べ明らかに高くなって抗体陰性率（％）

60

抗体陰性率

00-4

5-910-1920-2930-39
年齢（歳）

40-49

平均抗体価（ EU / ml ）

120

平均抗体価

50-体陰性率が上昇している。しかし、これらの原因については不明である。
百日咳菌凝集素は年齢群が上昇するに抗体陰性率が下が49歳では半数以上で過去の感染が疑われた。また、30-39歳いることから、この年齢群が、最近、百日咳菌に感染してい平均凝集素価

90%

抗体陰性率

500

60%

400

50%

300

40%
30%

200

20%
10%
0%
0-4

5-910-1920-2930-39
年齢（歳）

40-49

平均凝集素価陰性率（％）

70%

図5ることが疑われた。

600

80%

５ まとめ
今回の調査で、福岡県民のジフテリア毒素、破傷風毒素、百日咳毒素、百日咳繊維状赤血球凝集素及び百日咳菌凝集素

100に対する抗体保有状況を把握することができた。これらのデ0ータは、今後、疾病の流行予測、感染予防、効果的な予防接50-種のために利用でき、公衆衛生行政に役立つものと考えられ

百日咳菌凝集素（東浜株）に対する凝集素価でる。

陰性と判定された年齢別の割合
６
平均凝集素価90%

抗体陰性率

検体採取にご協力頂いた筑紫保健福祉環境事務所、粕屋

250

保健福祉環境事務所、及び、医療機関の関係各位に深謝しま

80%
200

60%
150

50%
40%

100

30%
20%

50

す。
平均凝集素価陰性率（％）

70%

文献
1) 国立感染症情報センター：感染症週報 IDWR，2010年

10%0%第24週号.

00-4

図6

謝辞

5-9

10-19

20-29
30-39年齢（歳）40-4950-2) 平成19 年度（2007 年度）感染症流行予測調査報告書.

百日咳菌凝集素（山口株）に対する凝集素価で陰性と判定された年齢別の割合

―91―

表1

平成20年度筑紫・粕屋地区におけるジフテリア毒素に対する年齢別抗体保有状況（平成20年 7−8月採血）

年齢区分 検体数（歳）

抗体陰性率*1
(％)

／
0.009

0- 4

59

8.5

5- 9

31

9.7

10-19

22

18.2

20-29

11

9.1

30-39

20

60.0

40-49

10

50.0

50-10

90.0

5

合 計

163

23.9

110.010／0.019

0.020／
0.039

0.040／
0.099

141

5

13152

1

71162

12231314123111314112111214618815

抗毒素価（IU/ml)
0.100 0.160 0.320 0.640／／／0.159 0.319 0.639 1.279

121.280／
2.559

2.560／

幾何平均

6150.997

30.37140.526

10.278620.151
0.135
0.001

1733

230.389*1 0.1 IU/ml未満を抗体陰性とした

表2

年齢区分 検体数（歳）平成20年度筑紫・粕屋地区における破傷風毒素に対する年齢別抗体保有状況

抗体陰性率*1 <0.010 0.010
(％)
／
0.031

0.032／
0.099（平成20年 7−8月採血）
抗毒素価（IU/ml）
0.100 0.320 1.000 3.200 10.000
幾何平均／／／／／
0.319 0.999 3.199 9.999

0- 4590.00141222145- 9

310.0025910510-19

220.00439520-29

110.001820.497

30-39

2010.02480.403

40-49

1090.0950-1090.091合計 16312.3

205123420.537
0.229

10.38710.3200.020

1627*1 抗毒素価 0.01 IU/ml未満を抗体陰性とした

―92―

5434

520.396表3

平成20年度筑紫・筑紫地区における百日咳毒素（PT）に対する年齢別抗体保有状況（平成20年 7−8月採血）
抗PT ELISA抗体価（EU/ml）
10550100
平均抗体価／／／／94999

年齢区分（歳）検体数抗体陰性率*1(％)

＜11／
40- 4

5918.604726101276.6

5- 93145.20131103444.4

10-192222.7023132231.4

20-29

1136.40

134330.330-392070.01945111.4

40-49

1070.0223350-1070.0

2322

1163

38.0

534236320合計

13.3
24.0
1847.0*1 抗PT ELISA抗体価 10 EU/ml未満を抗体陰性とした

表4

平成20年度筑紫・粕屋地区における百日咳繊維状赤血球凝集素（FHA）に対する年齢別抗体保有状況（平成20年 7−8月採血）
抗FHA ELISA抗体価（EU/ml）
10501005平均抗体価／／／／49999

年齢区分（歳）検体数

抗体陰性率*1(％)＜11／
40- 4595.10

12141527110.8

5- 9319.70

121071190.6

10-19

2213.602

179360.5

20-29

1118.20

27235.230-392025.0

0

32122

130.8

40-49

1050.01224116.0

50-1030.002

14331.0163

14.7111125837合計*1 抗FHA ELISA抗体価 10 EU/ml未満を抗体陰性とした―93―4474.9表5

平成20年度筑紫・粕屋地区における百日咳菌凝集素（東浜株）に対する年齢別凝集素価（平成20年 7−8月採血）
凝集素価

年齢区分 検体数（歳）陰性率*1(％)＜20204080160320640

32140.5

167.3
113.1

1280

0- 4

5974.6%4311545- 93180.6%23222

110-192259.1%1211412120-29

1127.3%3

1211230-39

2040.0%8151440-49

1020.0%11250-1070.0%

762.6%

97

合計 1631528

121111510122560

≧2560

幾何平均

1246.81538.2160.0
160.0

862174.0*1 凝集素価40倍未満を陰性とした。

表6

平成20年度筑紫・粕屋地区における百日咳菌凝集素（山口株）に対する年齢別凝集素価（平成20年 7−8月採血）
凝集素価

年齢区分 検体数
（歳）

陰性率
(％)

*1

<20204080160

320

682

1143.22

188.3

1201.60- 45979.7%415- 93177.4%24

10-192259.1%

13

20-29

11

45.5%

4

1

3

30-39

20

35.0%

6

15

12

40-49

1030.0%

3

2

3

1

50-1060.0%

6

1

111

計 163

64.4%

97

23

8

134

合4
1852

1

*1 凝集素価40倍未満を陰性とした。

―94―

640

1112802560

12≧2560

幾何平均

107.7
2

1152.3
97.5
113.1

7

1295.6