食品衛生法対応カビ毒分析用標準品
Mycotoxin Standards for Food Analysis
カビ毒（マイコトキシン）は、主に穀類・香辛料などの輸入品や試料等に付着したカビが産生する毒素です。人体や動物への急性毒性や発がん性などが報告され、食品や飼肥料検査が実施されています。日本では以下のカビ毒について食品衛生法で規制されております。

■ アフラトキシン
アフラトキシンは一部のAspergillus属のカビが産生するカビ毒で、肝障害などの急性毒性や高い発がん性が報告されております。主要なアフラトキシンとしてはB1、B2、G1、G2の４種が挙げられ、ナッツ類、穀類、香辛料類を中心に様々な食品で汚染が報告されております。また、アフラトキシンB1に汚染された飼料を動物が摂食することによって、代謝により発がん性の高いアフラトキシンM1を生成します。そのため、汚染飼料を摂食した動物の乳中においても、アフラトキシンの汚染が確認されております。

■ デオキシニバレノール
デオキシニバレノールは一部のFusarium属菌が産生するカビ毒で、消化管障害やリンパ管障害などの急性毒性、体重減少などの慢性毒性が報告されております。デオキシニバレノールは類縁体であるニバレノールと共に小麦やトウモロコシなどの穀類で汚染が報告されています。

■ パツリン
パツリンは一部のPenicillium属菌が産生するカビ毒で、動物実験において消化管からの出血や消化器潰瘍などの急性毒性が報告されております。パツリン産生菌の一種であるPenicillium expansumはリンゴ腐敗菌として知られており、主にリンゴやリンゴ果汁の加工品でパツリンの汚染が報告されています。

日本国内における食品を対象としたカビ毒の公定法
総アフラトキシン（B1, B2, G1, G2）デオキシニバレノール

パツリン

アフラトキシンM1

通知

食安発0816第1号
平成23年8月16日

生食発0930第１号
令和3年9月30日

食安発第1126001号
平成15年11月26日

食安発第0723第1号
平成27年7月23日

検体

全食品

小麦

りんごの搾汁及び搾汁された果汁のみを原料とする清涼飲料水

乳規制値

食品1 kgあたり総アフラトキシン（アフラトキシンB1, B2,G1及びG2の総和）として10 µg未満

小麦1 kgあたり1.0 mg未満

りんご果汁およびりんご果汁のみを原料とする
清涼飲料水あたり
0.050 mg未満

乳1 ㎏あたり
0.5 µg未満

蛍光検出器付き高速液体クロマトグラフ（HPLC-FL）

紫外分光光度検出器
付き高速液体クロマトグラフ（HPLC-UV）

紫外分光光度検出器
付き高速液体クロマトグラフ（HPLC-UV）

蛍光検出器付き高速液体クロマトグラフ（HPLC-FL）

液体クロマトグラフ
質量分析計（LC-MS）

液体クロマトグラフ
質量分析計（LC-MS）

液体クロマトグラフ
質量分析計（LC-MS）

液体クロマトグラフ
質量分析計（LC-MS）

液体クロマトグラフ・
タンデム型質量分計（LC-MS/MS）

液体クロマトグラフ・タンデム型質量分計（LC-MS/MS）

ガスクロマトグラフ
質量分析計（GC-MS）

液体クロマトグラフ・タンデム型質量分計（LC-MS/MS）

2頁参照

4頁参照

5頁参照

6頁参照

分析装置

検体調製法

1

総アフラトキシン試験法
日本では昭和46年3月よりアフラトキシンB1を10 μg/kg以上含む食品のみを対象として規制してきました（食品衛生法第6条第2項）。しかし、「アフラトキシンB1およびアフラトキシンG1による複合汚染事例の増加」や「アフラトキシンB1よりアフラトキシンG1が多く検出された汚染事例の発生」により、複数のアフラトキシンへの対応が必要となり、平成23年10月からアフラトキシンB1、B2、G1、G2の合計(総アフラトキシン）として10 μg/kg未満の規制値が設けられました。
総アフラトキシンの試験法は食安発0816第１号で設定されており、HPLC-FLで定量し、LC-MSやLCMS/MSで確認試験を行います。検査する食品によって前処理の方法が異なっており、穀類、豆類及び種実類は簡便かつ短時間で精製できる多機能カラムを用い、香辛料や加工食品等ではイムノアフィニティカラムを用います。

抽出

精製

穀類、豆類、種実類

その他食品(香辛料など）

試料50.0 g

試料50.0 g

アセトニトリル/水（9:1）
による抽出、ろ過

アセトニトリル/水（4:1）
による抽出、ろ過

ろ液

ろ液

多機能カラムによる精製

イムノアフィニティカラム
による精製

精製液
トリフルオロ酢酸誘導体化

アセトニトリル/水（1：9）
試験溶液

定量

2

HPLC-FL

LC-MSまたはLC-MS/MS～移動層例～
アセトニトリル、水及びメタノール（1:6:3）混液～移動層例～
10 mmol/L 酢酸アンモニウム及びメタノール（3:2）混液標準品・標準液
組成・濃度(µg/mL)

溶媒

包装

製品番号

アフラトキシン B1 標準品 (AFB1)

--

5 mg

49160-26

アフラトキシン B2 標準品 (AFB2)--5 mg49160-27

アフラトキシン G1 標準品 (AFG1)--5 mg49160-28

アフラトキシン G2 標準品 (AFG2)--5 mg49160-32

アフラトキシン B1 標準液

2AL

1 mL

49161-37

5 mL

49161-36

0.5

AL

1 mL

49161-39

5 mL

49161-38

2AL

1 mL

49161-41

5 mL

49161-40

0.5

AL

1 mL

49161-43

5 mL

49161-42

1 mL

49150-39

5 mL

49150-23

1 mL

49150-58

6 mL

49150-59

AL

5 mL

49160-85

組成・濃度(µg/mL)

溶媒包装

製品番号

0.5

AL

1.2 mL49160-24

5 mL

49161-64

0.5

AL

1.2 mL49160-43

5 mL

49161-65

0.5

AL

1.2 mL49160-44

5 mL

49161-66

0.5AL

1.2 mL49160-45

5 mL

49161-67

製品名Aflatoxin B1 standard

Aflatoxin B2 standard

Aflatoxin G1 standard

Aflatoxin G2 standard

Aflatoxin B1 standard solution

アフラトキシン B2 標準液

Aflatoxin B2 standard solution

アフラトキシン G1 標準液

Aflatoxin G1 standard solution

アフラトキシン G2 標準液

Aflatoxin G2 standard solution

マイコトキシン混合液１（アフラトキシン）
Mycotoxin mixture solution 1（Aflatoxin）

マイコトキシン混合液５（アフラトキシン）
Mycotoxin mixture solution 5（Aflatoxins）

マイコトキシン混合液９（アフラトキシン）
Mycotoxin mixture solution 9（Aflatoxins）

AFB1 0.5
AFB2 2
AFG1 0.5
AFG2 2
AFB1 0.25
AFB2 0.25
AFG1 0.25
AFG2 0.25
AFB1 1
AFB2 1
AFG1 1
AFG2 1ALAL

安定同位体(13C）標準液
製品名1313

C17-アフラトキシン B1 標準液

C17-Aflatoxin B1 standard solution

1313

C17-アフラトキシン B2 標準液

C17-Aflatoxin B2 standard solution

1313

C17-アフラトキシン G1 標準液

C17-Aflatoxin G1 standard solution

1313

C17-アフラトキシン G2 標準液

C17-Aflatoxin G2 standard solution

AL：アセトニトリル

3デオキシニバレノール試験法
平成14年5月に日本国内で流通している小麦が高濃度のデオキシニバレノール(最大2.2 mg/kg)に汚染されていることが判明しました。当時は国際基準値が無かったことから暫定的に1.1 mg/kgが規制値に設定されましたが、その後の国内外での汚染実態調査によって、令和3年10月に現在の規制値（小麦に対して1.0mg/kg未満）が設定されました。
デオキシニバレノールの試験法は生食発0930第１号で設定されており、HPLC-UVで定量し、LC-MSやLCMS/MSで確認試験を行います。

小麦
試料50.0 g

抽出

アセトニトリル/水（17:3）による抽出、ろ過
ろ液
多機能カラムによる精製
溶媒除去後、アセトニトリル/水/メタノール(1:18:1）に再溶解

精製

試験溶液

定量

HPLC-UV

LC-MSまたはLC-MS/MS~移動層例~
アセトニトリル、水及びメタノール（1:18:1）混液~移動層例~
Ａ溶媒：2 mmol／Ｌ酢酸アンモニウム
Ｂ溶媒： メタノール又はアセトニトリル

標準品・標準液
製品名

デオキシニバレノール 標準品
Deoxynivalenol standard

デオキシニバレノール 標準液
Deoxynivalenol standard solution

組成・濃度(µg/mL)

溶媒--100AL

組成・濃度(µg/mL)

溶媒25AL包装

製品番号5 mg

49150-70

10 mg

49150-71

1 mL

49161-51

5 mL

49161-50

包装

製品番号

1.2 mL49150-28

5 mL

49161-69

安定同位体(13C）標準液
製品名
1313

C15-デオキシニバレノール 標準液

C15-Deoxynivalenol standard solution

AL：アセトニトリル
4パツリン試験法
パツリンはヨーロッパなどで平成12年以前からリンゴ等に対する基準値が設定されていました。日本では、国内製品でパツリンが検出されたこと、平成15年にCodex委員会で基準値が採択されたことから、同年11月にりんご搾汁および搾汁された果汁のみを原料とする清涼飲料水に対して0.05 mg/kg 未満の規制値が設定されました。
パツリンの試験法は食安発第1126001号で設定されており、HPLC-FLで定量し、LC-MSやGC-MSで確認試験を行います。本試験法では、試料5.0 gを酢酸エチルにて抽出した後に液-液分配または固相抽出によって精製を行います。

りんご搾汁およびりんご搾汁された果汁のみを原料とする清涼飲料水
試料5.0 g

抽出

酢酸エチルによる抽出抽出液
1.5%炭酸ナトリウム水溶液/酢酸エチルによる抽出
溶媒除去後、酢酸水溶液（pH 3.6～4.0）に再溶解

精製
トリメチルシリル化剤0.5 mlを加えて混和後、室温で60分間放置

定量

試験溶液

試験溶液

HPLC-UV

GC-MSまたはLC-MS~移動層例~
アセトニトリル及び水（4:96）混液~移動層例~
A溶媒：アセトニトリル及び水（4:96）混液
B溶媒：アセトニトリル及び水（7:3）混液

標準品・標準液
製品名

パツリン 標準品
Patulin standard

パツリン 標準液
Patulin standard solution

組成・濃度(µg/mL)

溶媒包装

製品番号--

5 mg

49160-30

100

AL

1 mL

49161-61

5 mL

49161-60

組成・濃度(µg/mL)

溶媒包装

製品番号25AL

1.2 mL49160-48

5 mL

49161-75

安定同位体(13C）標準液
製品名1313

C7-パツリン 標準液

C7-Patulin standard solution

AL：アセトニトリル
5アフラトキシンM1試験法
平成13年7月にCodexが乳中のアフラトキシンM1に対して基準値0.5 μg/kgを設定しましたが、当時の日本では牛乳中のアフラトキシンM1汚染状況が基準値を大きく下回っていたことから、規制値の設定は見送られておりました。しかし、平成20年7月に「食品中の汚染物質に係る規格基準設定の基本的考え方」が整備され、アフラトキシンM1は規格基準設定の検討対象化合物となりました。その後評価検討が実施された結果、平成27年7月に現在の規制値である0.5 μg/kg未満に設定されました。
アフラトキシンM1の試験法は食安発第0723第1号で設定されており、HPLC-FLで定量し、LC-MSやLCMS/MSで確認試験を行います。均質化処理されていない乳を検体として用いる場合はろ過の前に乳中脂肪分を除去する必要があります。

乳均質化処理されていない乳（生乳等）

検体を37 ℃に加温し、ろ過遠心分離し、上層の脂肪層を除去

試料調製

下層の液体分をろ過
試料液（ろ液）20.0 g

試料液（ろ液）20.0 g

イムノアフィニティカラムによる精製
精製液

精製

溶媒除去後、アセトニトリル/水（1:4）に再溶解
試験溶液

HPLC-FL

LC-MSまたはLC-MS/MS~移動層例~
アセトニトリル及び水（1:3）混液~移動層例~
A溶媒：10 mmol／L酢酸アンモニウム
B溶媒：アセトニトリル

定量

標準品・標準液
製品名

アフラトキシン M1 標準液
Aflatoxin M1 standard solution

組成・濃度(µg/mL)

溶媒

0.5

AL

組成・濃度(µg/mL)

溶媒

0.5

AL

包装

製品番号

1 mL49150-38

5 mL

49150-22

包装

製品番号

1.2 mL49160-65

5 mL

49161-68

安定同位体(13C）標準液
製品名
1313C17-アフラトキシン M1 標準液

C17-Aflatoxin M1 standard solution

AL：アセトニトリル
6その他関連試薬
製品名

アセトニトリル

規格

包装

製品番号

LC/MS用

200 mL

01033-23

3L

01031-2B

1L

01031-1B

3L

01033-76

1L

01033-79

200 mL

11307-23

3L

11307-2B

1L

11307-1B

3L

11307-76

1L

11307-79

200 mL

25185-23

3L

25183-2B

1L

25183-1B

3L

25185-76

1L

25185-79

3L

14029-2B

1L

14029-1B

25 mL

40578-2B

1 mL×540578-1B

アセトニトリル -Plus-高速液体クロマトグラフィー用

アセトニトリル -Plus-

LC/MS用蒸留水

LC/MS用蒸留水 -Plus-

高速液体クロマトグラフィー用

蒸留水 -Plus-

LC/MS用

メタノール

LC/MS用

メタノール -Plus-

高速液体クロマトグラフィー用

メタノール -Plus-

LC/MS用

酢酸エチル

高速液体クロマトグラフィー用

トリフルオロ酢酸

高速液体クロマトグラフィー用

7アプリケーションデータ●Mightysilでのアフラトキシン分析
ColumnMightysil RP-18 250 - 4.6 mmØ 5 mm

EluentMethanol / Water = 1 / 14O

O1OO

Flow Rate

0.75 mL/min.

Detection

Fluorescence 450 nm (Excitation 365 nm)

2 3OOO

2Temperature

Room Temperature

Sample Vol.

20 mL

Samples

Mixture of samples were pre-treated withtrifluoroacetic acid in order to convert G1
and B1 to their derivatives

OOO

1

1. Aflatoxin G1 derivative

20 ng/mL

2. Aflatoxin B1 derivative

20 ng/mL

3. Aflatoxin G220 ng/mL

4. Aflatoxin B220 ng/mL

O

O

O

O

O

3

O

O

O

O

O

O

O

4O

5Time

10O

O

O

★関連製品として、HPLC用溶媒やLC-MS用溶媒、各種カラムを取り扱っております。弊社支店・営業所またはお近くの販売店まで お問合せください。また、製品をお探しの際に、ぜひ下記のウェブサイトをご活用ください。
☞試薬検索サイト Cica-Web
https://cica-web.kanto.co.jp/CicaWeb/servlet/wsj.front.LogonSvlt☞標準品電子カタログ
https://cica-catalog.kanto.co.jp/standards/searchREA-19（202406）