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Istruzioni per l'uso
380316-C

Italiano

OC-FCa Reagent

per OC-SENSOR PLEDIAREF V-PH11

per OC-SENSOR Ceres

REF V-PH09

6. Conservare tutti i reagenti a 2-10°C ed evitare il congelamento.
7. La stabilità a bordo può variare a seconda delle condizioni di misurazione, comenumero di test/giorno e ambiente di laboratorio. Quando non è in corso la
misurazione, si consiglia di chiudere il flacone del Reagente al Lattice con un tappo.
8. Evitare di utilizzare i reagenti oltre la loro data di scadenza.
9. Il campione di prova può contenere agenti patogeni. Maneggiare con cura. Dopo
l'uso, tutti i campioni e gli altri materiali devono essere considerati rifiuti sanitari esmaltiti correttamente.
Esempio di trattamento: Immergere per 1 ora o più in una soluzione di ipoclorito disodio (concentrazione di cloro disponibile 1000 ppm o superiore). (Primadell'immersione, neutralizzare tutte le sostanze che contengono acidi.) In
alternativa, trattare in autoclave a 121°C per 20 minuti. (Non trattare in questo modo
gli oggetti a cui ha aderito l'ipoclorito di sodio).
10. Smaltire come rifiuti sanitari i reagenti e i contenitori usati, in conformità con lenormative locali.
11. Se il prodotto viene utilizzato in modo diverso da quello quì indicato, l'affidabilità
dei risultati
della misurazione non può essere garantita. Assicurarsi di seguire la procedura.
12. Una diagnosi clinica basata sui risultati della misurazione deve essere parte di un
giudizio completo espresso dal medico curante, che includa fattori quali sintomi
clinici e altri risultati di test.

USO PREVISTO

OC-FCa Reagent è un reagente diagnostico in vitro destinato alla misurazione
quantitativa della calprotectina, proteina infiammatoria, nelle feci. OC-FCa Reagent,insieme ad altri risultati clinici, aiuta nella diagnosi e nel monitoraggio delle malattie
infiammatorie intestinali (IBD; ad esempio colite ulcerosa e malattia di Crohn). Il testpuò essere utilizzato come supporto diagnostico e nel monitoraggio dei pazienti
sintomatici. Il test non è invasivo e utilizza le feci come campione. Il reagente viene
utilizzato con gli analizzatori automatici dedicati da personale qualificato in laboratori
clinici e ospedali.

DESCRIZIONE PRODOTTO

La calprotectina è una proteina infiammatoria presente in grande quantità nei
neutrofili.1 La quantità di calprotectina nelle feci aumenta nei casi di infiammazionedella mucosa intestinale2. Pertanto, la misurazione della quantità di calprotectina nelle
feci può essere utilizzata per il monitoraggio della malattia dei pazienti con IBD(Malattia Infiammatoria Intestinale) e per distinguere la stessa IBD (ad esempio, colite
ulcerosa, morbo di Crohn) dai disturbi intestinali funzionali (ad esempio, sindromedell'intestino irritabile).3-5
Attualmente, i metodi utilizzati per la rilevazione della calprotectina comprendono:
test immunologico di agglutinazione al lattice, ELISA, FEIA, test immunologico
chemiluminescente e immunocromatografia.6
OC-FCa Reagent è un reagente per test immunologico utilizzato insieme ad unanalizzatore automatico per la misurazione della calprotectina fecale. OC-FCa
Reagent contiene le particelle di lattice rivestite con anticorpi anti-calprotectina
umana per la misurazione ottica della reazione di agglutinazione del lattice.

PRELIEVO DEI CAMPIONI• Per la raccolta dei campioni, utilizzare il seguente contenitore di campionamento.
OC-Auto Sampling Bottle 3 (REF V-PZ25, V-PZ26) (venduto separatamente)• Prelevare campioni fecali raschiando la superficie delle feci in diverse aree.
Raccogliere la quantità necessaria per coprire la scanalatura della sonda.
• Verificare che il campione sia totalmente in sospensione nella soluzione tampone
all'interno del OC-Auto Sampling Bottle 3.
• Utilizzare il campione per la misurazione almeno 1 ora dopo il prelievo nel OC-AutoSampling Bottle 3.
• La calprotectina nel OC-Auto Sampling Bottle 3 è stabile a temperatura ambiente per
3 giorni, a 2-10°C per 14 giorni.7• I campioni raccolti nel contenitore dedicato devono essere conservati a 2-8°C e
trasferiti entro 3 giorni nel contenitore OC-Auto Sampling Bottle 3.8

PREPARAZIONE DEI REAGENTIPRINCIPIO METODOLOGICO

OC-FCa Latex Reagent per OC-SENSOR PLEDIA
Pronto all'uso.
Prima dell'uso, portare il reagente a temperatura ambiente (20-25 °C) e
capovolgere delicatamente il flacone diverse volte per assicurare una
sospensione uniforme.
Non mescolare il reagente con un altro flacone.

Il metodo di prova si basa su una reazione di agglutinazione al lattice. Un reagente
al lattice viene preparato rivestendo le particelle di lattice di polistirene con
anticorpi anti calprotectina umana. Quando questo reagente viene miscelato con il
campione, gli anticorpi anticalprotectina umana, che erano attaccati al lattice,reagiscono con la calprotectina nel campione e nella reazione di agglutinazione allattice si forma l'aggregato di lattice. La variazione di assorbanza per unità di tempo
risultante dalla reazione di agglutinazione al lattice è proporzionale alla concentrazione
di calprotectina nel campione. Viene generata una curva di risposta alla dose dell'unità
di assorbanza (OD) rispetto alla concentrazione usando i risultati ottenuti dai
calibratori. La concentrazione di calprotectina nel campione del paziente è determinata
da questa curva.

MATERIALI FORNITI
Codiceprodotto

Nome prodotto

V-PH11 OC-FCa Reagent
V-PH09 OC-FCa Reagent

Contenuto Conservazione

2 x 8 mL2 x 15 mL
2 x 8 mL2 x 15 mL

Codiceprodotto

Nome prodotto

V-PH12 OC-FCa Calibrator
V-PH13 OC-FCa Control LV1
V-PH14 OC-FCa Control LV2
V-PH15 OC-FCa Control LV3
V-PH19
OC-SENSOR Sample Diluent
V-PH08

PLEDIA

2-10 °C

Ceres

V-PZ25 OC-Auto Sampling Bottle 3
OC-Auto Sampling Bottle 3
V-PZ26
without barcode

Contenuto Conservazione

OC-FCa Latex Reagent per OC-SENSOR Ceres
Pronto all'uso.
Prima dell'uso, capovolgere delicatamente il flacone più volte per assicurare una
sospensione uniforme.
Non mescolare il reagente con un altro flacone.

Analizzatore
compatibile

2-10 °C

MATERIALI NECESSARI MA NON FORNITIOC-FCa Buffer per OC-SENSOR PLEDIA
Pronto all'uso.
Prima dell'uso, portare il tampone a temperatura ambiente (20-25°C).
Non mescolare con un tampone di un altro flacone.
Non utilizzare il tampone in presenza di precipitato, in quanto il precipitato può
causare problemi agli analizzatori.

OC-FCa Buffer per OC-SENSOR Ceres
Pronto all'uso.
Non mescolare con un tampone di un altro flacone.
Non utilizzare il tampone in presenza di precipitato, in quanto il precipitato può
causare problemi agli analizzatori.
Nota: OC-SENSOR Ceres è dotato di slot refrigerati per i reagenti in modo che
i reagenti non debbano essere portati a temperatura ambiente.

Analizzatore
compatibile

6 x 1 mL
2 x 5 mL
2 x 5 mL
2 x 5 mL3 x 45 mL
2 x 20 mL
100 flaconi

2-8 °C
2-8 °C
2-8 °C
2-8 °C
2-8 °C
2-8 °C
1-30 °C

PLEDIA, Ceres
PLEDIA, Ceres
PLEDIA, Ceres
PLEDIA, Ceres
PLEDIA
Ceres
PLEDIA, Ceres

100 flaconi

1-30 °C

PLEDIA, Ceres

PROCEDURA DEL TEST

Eseguire le misurazioni come indicato nel manuale di istruzioni dell'analizzatore.
1) Posizionare OC-FCa R-2 Latex Reagent e OC-FCa R-1 Buffer nei punti designatidell'analizzatore.
2) Immettere i parametri nell'analizzatore.
3) Controllare l'acqua, la soluzione di lavaggio e i volumi del serbatoio di scarico.
4) Creare la curva di calibrazione (quando necessario).
5) Impostare i materiali di controllo, OC-FCa Controls come controllo interno e avviare
la misurazione. Assicurarsi che i valori dei controlli siano all'interno dell'intervallo
accettabile stabilito.
6) Impostare i campioni raccolti con OC-Auto Sampling Bottle 3 e iniziare la
misurazione.

MATERIALI NECESSARI NON FORNITI DAL PRODUTTORE
Preparare i seguenti materiali prima della misurazione• Soluzione di lavaggio: ipoclorito di sodio 0,15% (0,10%-0,30% è accettabile)• Acqua purificata per il lavaggio: acqua distillata o deionizzata (1,0-10,0 MΩcm è
accettabile)• Coppette portacampione• Carta per stampante: carta per stampante termica adatta all'analizzatore

RISULTATI

La reazione di ogni campione viene confrontata con la curva di calibrazione creata inprecedenza. La concentrazione di calprotectina (μg/g feci) è riportata come risultato.

LIMITAZIONI• L'assunzione regolare di FANS (farmaco antinfiammatorio non steroideo) può
aumentare i livelli di calprotectina fecale.9• I campioni con una concentrazione di calprotectina superiore a 50.000 μg/g possono
avere risultati entro l'intervallo di misurazione a causa dell'effetto prozona.
• I pazienti con IBD oscillano tra le fasi attive (infiammatorie) e inattive (remissione)della malattia. Queste fasi devono essere considerate quando si interpreta ilrisultato della calprotectina fecale.10• Altre malattie intestinali come il cancro colorettale e le infezioni gastrointestinali
possono provocare un aumento del livello di calprotectina. Una diagnosi clinica
basata sui risultati della misurazione deve essere un giudizio complessivo fatto dal
medico curante, tenendo in considerazione fattori come i sintomi clinici e i risultati
di altri test.10-12

REAGENTI

I reagenti sono stabili fino alla data stampata sull'etichetta, a condizione che ilcontenitore non venga aperto e rimanga a una temperatura di conservazione di 210°C.
R-2 Latex Reagent (sospensione di particelle di lattice rivestite con anticorpi di topo
anti-calprotectina umana)
per OC-SENSOR PLEDIA ･････8 mL x 2 flaconi; circa 50 test/flacone
per OC-SENSOR Ceres ･････8 mL x 2 flaconi; circa 115 test/flacone
Stabile per 4 settimane se riposto in frigorifero dopo l'uso con il tappo chiuso.
Stabile per 4 settimane a bordo con tappo chiuso dopo utilizzo su PLEDIA e Ceres.
R-1 Buffer (50 mM acido N-2-idrossietilpiperazina-N'-2-etanesulfonico (HEPES))
per OC-SENSOR PLEDIA ･････15 mL x 2 flaconi; circa 50 test/flacone
per OC-SENSOR Ceres ･････15 mL x 2 flaconi; circa 115 test/flacone
Stabile per 4 settimane se riposto in frigorifero dopo l'uso con il tappo chiuso.
Stabile per 4 settimane a bordo con tappo chiuso dopo utilizzo su PLEDIA e Ceres.

CONTROLLO QUALITÀ INTERNO

Ciascun laboratorio dovrebbe stabilire un programma di controllo di qualità permonitorare le prestazioni del R-2 Latex Reagent. Per il controllo di qualità in laboratorio,
si consiglia di utilizzare i seguenti materiali.
OC-FCa Controls: Liquido, controlli pronti all'uso venduti separatamente
LV1 (REF V-PH13)
LV2 (REF V-PH14)
LV3 (REF V-PH15)

AVVERTENZE E PRECAUZIONI
1.
2.
3.
4.

Esclusivamente per uso diagnostico in vitro.
Prima di eseguire la misurazione, leggere il manuale di istruzioni dell'analizzatore.
Preparare e regolare adeguatamente l'analizzatore prima della misurazione.
Utilizzare OC-FCa Calibrator (REF V-PH12) per creare la curva di calibrazione.
Seguire le sue istruzioni per l'uso quando si crea una nuova curva di calibrazione.
5. Se i risultati della misurazione superano l'intervallo di misurazione, utilizzare il OCSENSOR Sample Diluent (REF V-PH19, V-PH08) per diluire il campione ed eseguirenuovamente la misurazione.

1/2

Istruzioni per l'uso
380316-C
CARATTERISTICHE DELLE PRESTAZIONI

1. Accuratezza
Quando sono stati misurati campioni di controllo di concentrazione nota (170, 250, 500,
1360 µg/g), il valore ottenuto è risultato entro il ±15% del valore indicato. L'esempio di
misurazione ha prodotto 95-103%, 98-100%, 97-100% e 96-100% rispettivamente per i
campioni 170, 250, 500 e 1360 µg/g.

Differenziazione di IBD e IBS a diversi limiti (cut-off)6

2. Riproducibilità e Precisione
Quando gli stessi campioni sono stati misurati in due replicati, 2 volte al giorno, per
20 giorni (2x2x20), il coefficiente di variazione (CV) per i valori ottenuti mediante analisi
ANOVA era del 10% o meno. Di seguito sono riportati esempi di misurazione di controllie campioni fecali (N=80 ciascuno) utilizzando OC-SENSOR PLEDIA e Ceres.

Gli studi hanno dimostrato che gli intervalli di riferimento sono 10-33 μg/g (N=128)13 e
3-35 μg/g (N=82)14 nella popolazione normale, 59-276 μg/g (N=82) nei pazienti con colite
ulcerosa e 110-353 μg/g (N=49) nei pazienti con malattia di Crohn,14 rispettivamente
come intervalli di confidenza del 95%.

OC-SENSOR PLEDIA

BIBLIOGRAFIACampioni
LV1
LV2
S1
S2

Media
(μg/g)
252,7
496,0
53,0
284,3

LV1
LV2
S1
S2

Inter-serie
SD
CV
2,2
0,9%
2,3
0,5%
1,5
2,8%
1,3
0,4%

Inter-giorno
SD
CV
2,9
1,2%
4,4
0,9%
0,7
1,4%
2,7
0,9%

Precisione
SD
CV
4,6
1,8%
6,5
1,3%
3,4
6,4%
3,9
1,4%

Media
(μg/g)
252,7
508,5
49,7
307,3

Ripetibilità
SD
CV
2,4
1,0%
4,9
1,0%
1,7
3,4%
3,3
1,1%

Inter-serie
SD
CV
1,1
0,4%
0,3
0,0%
0,8
1,5%
0,9
0,3%

Inter-giorno
SD
CV
3,1
1,2%
6,1
1,2%
1,2
2,5%
3,6
1,2%

Precisione
SD
CV
4,1
1,6%
7,8
1,5%
2,2
4,5%
4,8
1,6%

0,92

Specificità

0,77

0,86

1.
2.

4.
5.
6.

3. Intervallo di misurazione
Fino a 2720 µg/g (feci)
Esempi di misurazione utilizzando il risultato di OC-SENSOR PLEDIA hanno
mostrato un LOD di 9 µg/g, LOQ di 23 µg/g; OC-SENSOR Ceres ha mostrato un LOD
di 5 µg/g, e LOQ di 22 µg/g. I valori possono variare in base ai campioni fecali ese/come la calprotectina viene addizionata.

100 μg/g

0,96

3.

OC-SENSOR Ceres
Campioni

Ripetibilità
SD
CV
2,8
1,1%
4,1
0,8%
3,0
5,6%
2,6
0,9%

50 μg/g
Sensibilità

7.
8.

4. Valore limite (cut-off)
I risultati ottenuti con OC-FCa Reagent superiori a 50 μg/g (feci) dovrebbero essere
considerati positivi. Si consiglia a ciascun laboratorio di stabilire un valore limite
adatto agli specifici scopi in programmi di screening o per uso diagnostico.69.

5. Intervallo di accettabilità fra lotti di reagente
R-2 Latex Reagent
Quando sono stati misurati campioni di controllo di concentrazione nota (250 e 500μg/g), il valore ottenuto era entro il 100±15% del valore indicato.

11.

6. Interferenza
Le seguenti sostanze sono state aggiunte al campione ei risultati del test non hanno
mostrato alcuna interferenza o reattività crociata.
- Detergenti per WC
0,01% Poli(ossietilene)alchiletere- Sostanze coesistenti
20 mg/dL di Bilirubina (libera e coniugata)
3,5 g/dL di Proteina
1500 FTU Chilo (torbidità della formazina)
4,0 g/dL Glucosio
125 mg/dL Emoglobina
100 mg/dL Solfato di bario

13.

10.

12.

14.

Dale I, Fagerhol MK, Naesgaard I. Purification and partial characterization of a highly
immunogenic human leukocyte protein, the L1 antigen. Eur J Biochem. 1983;134(1):16.
Røseth AG, Fagerhol MK, Aadland E, Schjønsby H. Assessment of the neutrophil
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Reenaers C, Bossuyt P, Hindryckx P, Vanpoucke H, Cremer A, Baert F. Expert opinion
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Tibble J, Sigthorsson G, Foster R, Sherwood R, Fagerhol M, Bjarnason I. Faecal
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Costa F, Mumolo MG, Bellini M, et al. Role of faecal calprotectin as non-invasive marker
of intestinal inflammation. Dig Liver Dis. 2003;35(9):642-647.

AVVISO

Ogni incidente grave verificatosi in relazione al dispositivo deve essere segnalato al
rappresentante autorizzato, al produttore e all'autorità competente dello Stato
membro in cui l'utente e/o il paziente si trovano.

7. Stabilità del campione
Il test delle prestazioni con il dispositivo di prelievo dei campioni ha dimostrato che i
campioni conservati a 2°C per 31 giorni hanno l'88±23,4%, a 25°C per 3 giorni
l'80±33,4%, e a 30°C per 3 giorni il 66±42,4% di recupero della calprotectina (dati interni,
tasso di recupero mostrato come media±2SD).

SPIEGAZIONE DEI SIMBOLI

8. Confronto tra analizzatori
Confrontando gli analizzatori OC-SENSOR, Ceres e PLEDIA, non sono state rilevate
differenze significative nella misurazione. Esempio di misurazione di 168 campioni èrisultato con la pendenza di 1,03 e r (coefficiente di correlazione) di 0,9996 nell'analisi
di regressione.
9. Tracciabilità e Materiale Standard
Non sono disponibili materiali di riferimento internazionali o procedure di misurazione
di riferimento per la calprotectina. I calibratori e i controlli sono tracciabili al materiale
di riferimento interno.
10. Prestazioni cliniche
I dati della meta-analisi sono riassunti da articoli che utilizzano vari test
immunochimici della calprotectina fecale come informazione generale. I dati di questo
prodotto non sono inclusi.
Sensibilità e specificità diagnostica per IBD con diversi limiti12
50 μg/g

100 μg/g

250 μg/g

Sensibilità

0,92

0,84

0,80

Specificità

0,60

0,66

0,82

PLR

2,33

2,95

4,17

NLR

0,13

0,23

0,22

N (pazienti)

693

559

763

PLR: rapporto di verosimiglianza
positivo
NLR: rapporto di verosimiglianza
negativo

Sensibilità e specificità diagnostica per diversi disturbi12
IBD

UC

CD

Sensibilità

0,85

0,88

0,81

Specificità

0,81

0,82

0,81

N (pazienti)

1471

744

727

(ai limiti cut-off con la massima accuratezza diagnostica)

Data di emissione: 2022-05-26

2/2