私〔私が出会った微生物検査症例 − ３〕 145が出会った微生物検査症例─３

Abiotrophia sp. の分離経験

静岡県立静岡がんセンター 感染症科

佐藤智明

Ⅰ．はじめに血液寒天培地は日常検査で分離培養に使用される基本的な培地であり，ほとんどの菌種が発育を認める。しかし，Abiotrophia 属は，一般的に血液寒天培地には発育せず，ビタミン B6 あるいは L - システ
インの添加によって発育する特徴を有するため，グラム染色で菌が確認されても，検出･同定不能とされる場合もあり，稀な検出菌とされている。今回は，血液培養からの Abiotrophia 属の分離経験について述べる。

写真１ 血液培養ボトル培養液のグラム染色像（× 1,000）

Ⅱ．検出・同定の流れ
１．グラム染色，分離培養
自動血液培養装置により陽性と判定されたボトルから，注射器により培養液を採取し，グラム染色とサブカルチャーを行った。サブカルチャーの使用培地は，GAM 半流動培地，GAM 寒天培地，チョコレ ー ト 寒 天 培 地， ヒ ツ ジ 血 液 寒 天 培 地 を 用 い，GAM 半流動培地は好気培養，GAM 寒天培地は嫌気培養，チョコレート寒天培地，血液寒天培地は炭酸ガス培養を行った。
写真１に培養液のグラム染色像を示した。長いグラム陽性連鎖球菌が観察されるが，グラム陽性の短連鎖や球桿菌状の染色像が見られる場合が多い。
写真 2 に 48 時間培養後の GAM 寒天培地を示した。直径約１mm の半透明コロニーが認められた。
チョコレート寒天培地，血液寒天培地は 48 時間培養ではコロニーは認めず，72 時間培養でチョコレート寒天培地に微小なコロニーを認めた。GAM 半流動培地は中間層にのみ菌発育を認めた。
写真 3 にコロニーからのグラム染色像を示した。
短連鎖状の球桿菌であった。

写真２

GAM 寒天培地上の Abiotrophia sp. のコロニー（48 時間嫌気培養後のコロニー）

写真３ コロニーからのグラム染色像（× 1,000）

静岡県立静岡がんセンター 感染症科 〠 411-8777 静岡県駿東郡長泉町下長窪 1007

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Abiotrophia sp. の分離経験

２．衛生現象の確認
検出菌はカタラーゼ陰性で，サブカルチャーの各培地の発育性状から嫌気性菌を疑ったが，嫌気性菌様臭はなかった。自家調整した metronidazole ディスクによる薬剤感受性試験では阻止円を認めず耐性であり，嫌気性菌は否定された。この時点で初めてAbiotrophia 属を疑い，S. epidermidis を用いて衛生現象の観察を行った（写真４，５）。2 度目以降の分離例では metronidazole ディスクによる嫌気性菌の確認を行わずに，培地発育状態から Abiotrophia 属を疑い衛生現象の確認を行っている。また，眼脂からの分離経験では，S. aureus と同時に分離された
ため，血液寒天培地で S. aureus の周囲に発育しており，グラム陽性球菌であったため，容易に Abiotrophia 属を疑うことができた。

内の常在細菌の一種であり，血液，腫瘍，口腔内潰瘍，尿路などの臨床材料より検出されるが，特に感染性心内膜炎の原因菌として重要であるとされている。欧米では，感染性心内膜炎から分離されたビリダンス型レンサ球菌の５〜 10％が本菌によるものであったと報告されている 1，2）。
Abiotrophia 属は一度経験し，ポイントを知れば容易に検出･同定が可能な菌であり，感染性心内膜炎以外に脳膿瘍 3） や髄膜炎 4） などの重篤な感染症からの分離報告もある。原因菌の確定や薬剤感受性検査を行うためにも臨床材料からの迅速な菌分離を確実に行うことが検査室の役割である。

３．同定検査アピストレップ 20（日本ビオメリュー）によるAbiotrophia 属 2 菌 種 の 同 定 結 果 を 示 し た（ 写 真６，７）。しかし，実際には同定キットでは同定確立が低い場合や，同定不能となる場合がある。このような場合は，表１に示した主な生化学性状により菌種を推定同定し報告している。

写真４ Stelitism test（Abiotrophia sp. を羊血液寒天培地に塗抹し，S. epidermidis を培地中央に画線塗抹した。S. epidermidis の周囲に Abiotrophia
sp. の発育が観察される。）

Ⅲ．おわりにAbiotrophia 属 は，1961 年 Frenkel ら に よ っ て 感
染性心内膜炎患者の血液培養から特殊な栄養要求を示し，他の菌の周囲に衛生現象として発育する Nutritionally variant streptococci（NVS）として最初に報告された。その後 NVS は，1989 年に Bouvet らによって Streptococus adjacens と Streptococcus difectivus の 2 菌種とすることが提唱され，1995 年にはKawamura らによって Abiotrophia adiacens と Abiotrophia defective に変更された。1998 年には Roggenkamp ら に よ っ て Abiotrophia elegans が 追 加 さ れ
Abiotrophia 属は 3 菌種となった（現在は，A. adiacens と A. elegans は Granulicatella 属に変更されている）。
Abiotrophia 属は，口腔内，尿路，あるいは腸管

写真５ Stelitism test（写真 4 の血液寒天培地の代わり（ 18 ）10にミュラー・ヒントン寒天培地を使用。）

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私が出会った 微生物 検査症例−３

写真６A. adiacens のアピストレップ 20 の判定結果（プロファイル：054000，％ ID：99.8%，Tindex：0.92）

写真７ A. defectiva のアピストレップ 20 の判定結果（プロファイル：0350451，％ ID：96.3%，Tindex：1.0）
表１ A. adiacens，A. defectiva の鑑別生化学性状テスト項目
PYR test
Leucine aminopeptidase
Alkaline phosphatasea-Galactosidaseb-Galactosidaseb-Glucuronidaseb-Glucosidase
Hippurate hydrolysis
Arginine dihydrolase
Acid production from：Trehalose
InulinLactoseRaffinose
StarchA. adiacens＋＋−−−vv−−

A. defectiva＋＋−＋＋−
−−
−−＋v
−−v
−v
v
−
Diagnostic Microbiology 5th’ より引用

（ 19 ）11

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Abiotrophia sp. の分離経験

文

私が出会った 微生物 検査症例−３献1）Peterson, D. E., J. L. Cook, and J. P. Burke.: Me-dari, J. L. Hughes, R. R. Peairs, and D. J. Savage.:

dia-dependent subculture of nutritionally variant

Abiotrophia species as a cause of endophthalmi-streptococci. Am. J. Clin. Pathol., 4: 634-636,

tis following cataract extraction. J. Clin. Microbi-1981.

ol., 37: 1564-1566, 1999.

2）Wilson, W. R., and J. E. Geraci.: Treatment of4）Schlegel, i., C. Merlet, J. M. Laroche, A. Frem-streptococcal infective endocarditis. Am. J. Med.,aux, and P. Geslin.: Latrogenic meningitis due to78: 128-137, 1985.

Abiotrophia defective after myelography. Clin.

3）Namdari, H., K. Kintner, B. A. Jackson, S. Nam-（ 20 ）12

Infec. Dis., 28: 155-156, 1999.