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70 巻 4 号 2024［医学検査のあゆみ］119

医学検査のあゆみ ─ 48

自動血球分析項目の精確さ検証と標準化の現状
なが

永

はじめに

い

井

ゆたか

Yutaka NAGAI豊

Ⅰ. 自動血球分析装置の精確さ検証の標準化

血液検査項目の標準化推進には、外部精度評価（external quality assessment: EQA）における精確

1. 目的と種類さの評価が重要となる。複数の外部精度評価調査ス

臨床検査室が提供する測定値の精密性（precision）

キーム（EQA scheme: EQAS）で実施される評価法と正確性（accuracy）を保証するための精確さ検証は様々であり、認証標準物質（certified reference

は、検査室の遂行能力と方法の評価・教育を目的と

material: CRM）に よ る 正 確 性 評 価 が 可 能 だ が、した EQAS で実施される。EQA には、①外部精度

CRM が利用できない血球分析項目では、新鮮血液を評価プログラム（EQA Program: EQAP）・技能試験

利用しなければ、マトリックス効果が生じない正確（Proficiency Testing: PT）、②参照値が付与された性保証が困難な状況である 。新鮮血液標準試料に評価試料を利用した再チェック・再検査、③同一評

対する値の付与の取り組みは、国際調和プロトコル

価試料を用いた検査室間のクロスチェック、④現場（international harmonisation protocols） に整合しで品質要件を満たしていることを確認する直接評価

た標準作業手順書（Standard Operating Procedures:（On-site evaluation、上述の方法が実施できない場

SOP）の提供、および目標値に対する臨床的な許容合に採用される）などがある 。

1）

2）

範囲設定法の実用検討というプロセスが必要となる。
日本検査血液学会（Japanese Society for Laboratory

3）

2. 許容範囲判定のための評価法

Hematology: JSLH）は、
これらの活動を進めている。

現在、国内では複数の EQAS が存在しており、

本稿では、国内外における自動血球分析項目の精

各 EQAS が設定している許容範囲の基準は様々で確さ検証および国際標準化スキームとの連携などある 4）。その評価には、標準偏差指数（Standard

を、臨床・検査標準協会（Clinical and Laboratory

Deviation Index: SDI）、生理学的変動幅、変動係数

Standards Institute: CLSI）、臨床検査医学における（Coefficient of Variation: CV）、技術水準、目標値

トレーサビリティ合同委員会（Joint Committee On

5）などが利用されている 。評価基準は、調査試料にTraceability in Laboratory Medicine: JCTLM）での付与された値に対して、臨床的に許容できる誤差範

活動を交えて解説する。

囲（clinical allowance interval: CAI）内であることが望ましい。しかし、SDI・CV などの統計量を基準範

1）関西医療大学保健医療学部臨床検査学科 客員教授
〠590 - 0482 大阪府泉南郡熊取町若葉 2 - 11 - 1
2）慶應義塾大学医学部臨床検査医学 研究員〠160 - 8582 東京都新宿区信濃町353）日本検査血液学会 国際標準化担当幹事〠160 - 0016 東京都新宿区信濃町35 信濃町煉瓦館5階

1)Clinical Laboratory Science, Kansai University of Health Sciences(2-11-1, Wakaba, Kumatori-cho, Sennan-gun Osaka 590-0482)
2)Laboratory Medicine, Keio University School of Medicine(35 Shinanomachi, Shinjuku-ku, Tokyo 160-8582)
3)International Standardization Secretary,
Japanese Society for Laboratory Hematology(Shinanomachi Rengakan 5F, 35 Shinanomachi, Shinjuku-ku,
Tokyo 160-0016)（ 19 ）

120

囲として利用する場合は、調査対象機器の分析変動（CV analysis: CVA）などに影響されて、CAI を適切

2. 実試料標準物質に反映できない場合もある 。CAI は、生理学的変

NEQAS 構想における共通精度管理調査実施に関動幅による設定を利用すれば、CVA の影響を受けずする基本コンセプトには、血液学部門研究班から血に個体内生理学的変動（CV I）および個体間生理学

球分析項目の正確性評価は新鮮血液で行うことが示的変動（CVG）から算出できる 。CVA の測定結果分されているが、ヒト新鮮血液でのサーベイ準備が整

布が正規分布とならずに局在している場合には、配うまでは、加工血球の使用はやむを得ないと記載さ

布試料のマトリックス効果が排除できていれば、各社れている 。現在、各社の自動血球分析装置で共通が採用している国際調和プロトコル/ 校正手順 / 標に使用が可能な標準物質は供給されていないことか

準化状況などの違いに起因することが推測される。

ら、国際調和プロトコル（改訂前は、国際常用基準

6）

7）

8）

測定操作法

3. 検査室認定に必要な外部精度管理調査方法の）で値付けした新鮮血液が、唯一各社

10）共通に使用できる実試料標準物質（新鮮血液キャリ

標準化ブレータ）となる

臨床検査室の認定/認証は、米国 CLIA’88 施行による FDA による認定義務付けから始まり、2000 年。

11）

3. 校正階層と国際標準化適合

前後に米州・豪州・欧州・アジア州で急速に認定制度

標準物質等により分析結果の遡源（トレーサビリ

が定着してきた。その認定/認証を行う際の基礎資

ティ）を明確にすることを臨床検査機器・試薬製造業

料となる EQA は標準化された方法で行うため、共通者に示した体外診断用医療機器指令（IVDD）12） は、

外部精度管理評価事業（National EQAS: NEQAS）

現在、指令から規制（IVDR） への移行期間中で、による統一した EQA が各国で実施されるようにな

2025 年 5 月の完全移行開始を控えている。2020 年、り、日本でも NEQAS が構想された 。標準物質・測定値の正確度保証に関する ISO

基準測定法・基準測定検査室の開発/認定/認証なれ、基準測定操作法および参照物質に関する ISO

どの制度整備、および EQAS による調査方法・評は、正確度保証の ISO 2） の一部として統合された。

価方法などの国内統一が期待された。日本医師会の値が付与される標準物質は、キャリブレータに加え主導により、日本医師会、日本臨床検査医学会、日てヒト試料および真度管理用物質が明記され、精密本臨床衛生検査技師会、日本臨床衛生検査技師会、度検証用のコントロール物質は正確性検証のスコーおよび日本衛生検査所協会の各代表により研究班がプから外れた。製造業者向けに不確かさの計算方法構成され、検討が行われ、2003 年に結果が報告さ2）が全 6 モデルごとに記載された 。血球分析装置のれたが、設立には至らなかった。

主要な項目の測定系の遡源は SI 単位ではなく、国

8）

13）

は大幅に改訂さ7）

14, 15）

際調和プロトコルにトレーサブルであることが求め

Ⅱ. 自動血球分析項目における正確性保証

られ、「校正階層のモデル 5」により遡源性および
不 確 か さ を 含 め た 伝 達 性（ ト ラ ン ス フ ァ ラ ビ リ

血球分析項目の EQA では、CRM を利用できなティ）の提示が求められている。モデル 5 を対象と。フローサイトメ

いため、新鮮血液に値を付与した実試料標準物質をした個別の ISO も発行された利用しないと、特に測定原理が多様な血球分析装置

トリー法を用いた国際調和プロトコルにおいて、伝を網羅した正確性保証が困難となる 。

達性の検証に真度管理用物質が利用できるように

1）

16）

なったため、校正検証の実務作業手順に合った校正

1. マトリックス効果

階層の記載が可能となった。

EQA の配布試料は、多くの場合、保存加工処理をした評価試料（加工血球）が利用されるが、自動

4. 国際調和プロトコルと標準作業手順書

血球分析装置の検出原理は各社ごとに異なるため、SOP は、JCTLM の登録審査では、ISO

14）

に適合

加工血球の測定値が各社で同じ値を示すことを保証

した参照測定手順（reference measurement proce-

できない 。

dures: RMP）であることが検証される。国際調和9）（ 20 ）

121

プロトコルは主に論文での提供が多いため、その記的変動から算出した偏りの比率（%Bias）から以下

載内容を元に、臨床現場の誰もが再現可能な SOPのように算出する。
CAI = Assay ± Bias,

が作成・検証される。さらに、基準測定操作法の内容と提示に関する要求事項等の ISOに適合するための内容を含む。RMP として仕上げるプロセスとなる。改訂された校正階層

2）%Bias = 0.25 ×（CVG + CV I ）14）の国内への普及は始まっ

2

2

1/2

5. 血球分析項目の国際標準化スキームと連携
JSLH は、国際標準化の動向を反映した精度保証のたば かりで あるが、国 際 調 和プ ロトコル、SOP、向上を図るため、国際血液学標準化協議会（Interna-

RMP を明確に区別した議論が必要である。

tional Council for Standardization in Haematology:

Ⅲ. 自動血球分析装置の精確さ検証条件と基準

ICSH）、CLSI および JCTLM などの国際標準化スキー
ムと連携しながら、血球分析項目の標準化推進を行っている。ICSH からは論文

1. 自動血球分析装置に必要な併行精度

料 SOP 等

20）

が、CLSI からは有19）が提供される。JCTLM は ISO 適合の

血球分析項目の標準化が可能となる自動血球分析

21）
認証機関として機能している 。国際検査血液学会

装置に必要な併行精度（repeatability）は、CV I の（International Society for Laboratory Hematology:

1/4 ～ 1/2 と考えられている。それよりも大きいと、ISLH）では、各国の規格・ガイドライン等をホー

臨床的に個人の生理学的変動を捉えることができな

ムページへ掲載している 。
22）

いからである。また、装置の再現性（reproducibility）

Ⅳ. 標準化の現状と課題

および日内日間の安定性が確保されていないと、校正作業期間は一点では不足となるため、始業時・終業時・週初め・週終わりの期間のデータから校正を実施することが望ましい。この観点では、近年の血1. 赤血球数（red blood cell: RBC）
および白血球数（white blood cell: WBC）

球分析装置では高いレベルの再現性が確保されてい国際調和プロトコルは、ICSH で規定されたインるため、一点での校正が実施されていることが実情

ピーダンス法による単チャンネル測定法である

である。

。

23, 24）

JSLH は ICSH 国際調和プロトコルの RMP を作成し、

2. 国際調和プロトコルによる正確度評価が可能と

国内製造業者の IVDR 対応を目的として公開中であなる条件る 。2023 年、ICSH・JCTLM・JSLH で協議を行い、25）実試料標準物質である新鮮血液に国際調和プロト
コルで付与した値（Assay）の CV A は、自動血球分析装置より収束していれば、該当する血液分析項目の正確度評価が可能となる。

JSLH が公開中の RMP を JCTLM へ登録することで合意した。現在、JCTLM で審査中である。
2. ヘモグロビン（Hemoglobin: Hgb）
国際調和プロトコルは、ICSH と CLSI からシア

3. 臨床的に必要な精密度の評価基準

ンメトヘモグロビン法による吸光度測定が提示され

CVA は、最低限（Minimum）
・望ましい（Desirable）
・ている。正確性保証のために 540nm における

26, 27）

最適（Optimum）の 3 段階に分けた評価が提示され分光光度計の校正および正確な希釈精度の確保が必。

要であり、4 桁の有効数字を保証するために、5 桁ており、目安として利用することが可能である

17, 18）： CVA < 0.75 × CVIの希釈精度が必要となる。厳密に温湿度管理された

望ましい ： CVA < 0.50 × CVI

秤量室で、蒸発や静電気の影響等を配慮する必要が最適ある。比色分析法の ICSH 標準液が提供されており、最低限： CVA < 0.25 × CVI

28）
分光光度計の検証に活用できる 。2023 年、新ロッ4. 臨床的に許容できる誤差限界の算出法 7）

ト供給に向けた ICSH 標準液の値付けが 4 か国で実CAI の中心は Assay とし、偏り（Bias）は生理学

施され、JSLH は ICSH から指名されて参加した。

（ 21 ）

122

自動血球分析装置では、反応速度や環境面の配慮

場合でも、前処理の容積および変形能の変化が機種

から界面活性剤法等が採用され、反応原理と測光波や原理で異なる場合は、実験体での MCV でバイア長が異なる。調査試料に保存血球を利用する場合にスを生じる可能性があり、新鮮血液の Hct が一致しは、機種間差・原理間差を配慮する必要がある。

ても MCV が一致しない事象が生じることとなる。

3. ヘマトクリット（Hematocrit: Hct）

5. 平 均赤血球ヘモグロビン濃度（mean corpuscularhemoglobin concentration: MCHC）

国際調和プロトコルは、ICSH/ WHO と CLSI で規定されたミクロヘマトクリット法（Packed cell
Volume: PCV）である。PCV 測定は、健常検

29 ～ 31）

国際調和プロトコルは、CLSI が計算法（MCHC ＝
Hgb/PCV）を提示している。Hct および MCV と31）

体の新鮮血液で行うことが規定されているため、低同様に、低値領域および高値領域では、国際調和プ

値領域および高値領域では、国際調和プロトコルに

ロ ト コ ル に よ る 値 が 付 与 で き な い 状 況 で あ る。

よる値が付与できない状況である。PCV は遠心後MCHC 標準化に関わる課題は「MCHC 上限値の推のマイクロキャピラリーチューブ内の赤血球層に含定および計測誤差」に詳細が報告されている 。

まれる血漿成分（Trapped Plasma: TP）の影響を受ける。TP は健常検体で 1 ～ 3％、患者検体で 1 ～ 5％と報告されている35）

6. Hctおよび赤血球恒数の国際調和プロトコルによる値付与の限定条件。TP の影響を受けない全血32）

PCV 測定は、TP の影響を避けるため健常検体にHgb と充填 Hgb の比から PCV を推定する方法が開限定する必要がある。ICSH は、MCV（86 ～ 96fL）。

示されたが、主流にならなかった

33）

自動血球分析装置の容積測定は TP による影響を受けないことから、この差の補正法の違いによりHct 値に校正差が生じる可能性がある。自動血球分析装置の Hct 値に対する TP 補正の有無は開示されかつ MCHC（33.0 ～ 34.5g/dL）の範囲内を指定し
ている

。

23）

7. 用手法からフローサイトメトリー法へ移行した項目
血球分析の基準分析法は、精密度が十分でない用ておらず、メーカーや機種によって標準化が不明確手法（鏡検法など）から精密度・特異性・均一性がである。

高いフローサイトメトリー法へ移行している 36）。フ

4. 平均赤血球容積（mean corpuscular volume:

ローサイトメトリー法で調査試料を値付けする場合、MCV）

正確性を保証するための SOP は提供されておらず、

国際調和プロトコルは、CLSI が計算法（MCV ＝ICSH または CLSI が引用している文献から、SOP

PCV/RBC）を提示している。Hct と同様に、低値を作成・検証する必要がある。下記 3 項目において領域および高値領域では、国際調和プロトコルによは、JSLH が主催する国際調和プロトコル EQA（以る値が付与できない状況である。

降、同 EQA）において、SOP が提供されており、

31）

自動血球分析装置の Hct は、個々の赤血球容積を積算して算出される。容積の検出原理は、直接容

37）良好な検証結果が得られている 。

1）白血球分類（WBC differential: Diff）

積を計測するインピーダンス法と、粒子断面積に比国際調和プロトコルは精密度・特異度・均一性の例する散乱光強度を計測して容積情報に変換する測高いフローサイトメトリー法が推奨されており、用定法（光学法）がある。光学法では赤血球を球状化手法で検証することが要求されている。用手法はする前処理が必要であるため、両者の計測結果が各ウェッジ法で作成した血液塗抹標本を、ロマノフス社で一致しない原因となっている 。赤血球は、希キー染色して目視分類する鏡検法である。しかし、釈用試薬の浸透圧や作用（球状化など）の違いによ

精密度の不足、標本上の血球配置の不均一性が解決

り、赤血球容積や変形能などが変化するため、各社できないため、正確性評価は困難である。ICSH ははそれを考慮した大きさ補正を行い、PCV および

フローサイトメトリー候補法を提示したが、CLSIRBC の国際調和プロトコルと一致するように整合をH20- A2とっている。PCV と RBC が一致するように構成した球分類を目的としたものではなかった

34）（ 22 ）

38）のスコープである健常検体の精確な白血。JSLH は39）

123

健常検体の血液キャリブレータへの値付けや、自動フローサイトメトリー法は ICSH および CLSI が血球分析装置の校正検証に特化した方法を開発し 、引用している文献

SOP は ICSH 候補法および鏡検法の両方法との検証

より、次の課題が明らかになった。血小板は TO 染

、同 EQA で運用されている

色で陽性となるため、成熟赤血球との同時通過およ

40）

を行い

41, 42）。

43, 44）2）血小板数（Platelet: Plt）

54, 55）に示されている。同 EQA にび吸着は、網赤血球イベントとして計数される。赤国際調和プロトコルは、ICSH および CLSI から免血球を CD235a で標識すると血球同士の非特異吸着

疫学的フローサイトメトリー法が、赤血球数との比率などの影響が発生する。JSLH は赤血球識別に CD45/。

CD61/CD41a を用いたネガティブセレクション法

同 EQA により、次の課題が明らかになった。フローを採用することでこれらの課題を解決した。現在、サイトメータの検出感度向上に伴い、サイズ下限の設

SOP 検証を行い、同 EQA で運用されている定が必要となり、国際血栓止血学会が定義した血小4）識別量が連続分布を持っている項目の課題で計測する間接法として提示・引用されている

45 ～ 47）。

56）

板由来マイクロパーティクル（Platelet derived micro

Retic は RNA 量の連続分布を持っているが、フローparticle: PDMP）のサイズ上限を採用した。フロー

サイトメトリー法における網赤血球と成熟赤血球のサイトメータの前方散乱光の集光角度は、国際調和

閾値は、厳密な環境および時間管理により測定されプロトコルの条件と一致させた。本法は間接法であた NMB 法の網赤血球比率と一致するポイントに設るため、測定サンプルは、比重の異なる赤血球と血定する必要がある。この評価は臨床現場では困難で小板が均一に浮遊している必要があった。そのため、あるため、同 EQA では NMB 法で検証済みの SOP。Plt 標準を参加者へ提供している。また、Plt は PDMP とサ化に関わる課題は「血小板自動測定の限界と将来展

イズが重複する連続分布となる。自動血球分析装置

望 −容積と計数の定量限界−」に詳細が報告されでは、容積 2fL を血小板サイズの下限閾値に設定し。これらを反映した SOP が検証され、同ているため、発現機序から定義された血小板の全て

攪拌および測定時間の条件を追加した

ている

48）

49）

EQA で運用されている。

を計数している訳ではなく、大きさの下限以下のも

50）

3）網赤血球数（Reticulocyte: Retic）のは、血小板数計数値から除外されていることにな

国際調和プロトコルは、チアゾールオレンジ（TO）る。血小板のサイズ下限はインピーダンス法で計測

で赤血球内の核酸染色を行い、赤血球を免疫学的にした 2fL の容積と一致するポイントに設定する必要識別するフローサイトメトリー法が、赤血球数との

がある

。

34）

網赤血球数の比率で計測する間接法である。フロー

このように、国際調和プロトコルで得られたヒス

サイトメトリー法により ICSH および CLSI から提トグラムや 2 次元プロットで表示された連続分布に。用手法で検証することが要求され対して閾値を設定する際は、ゲート設定する際に違示された

51 ～ 53）ている 。

和感が大きいことが懸念される。連続量に対する血53）

用手法は、ニューメチレンブルー超生体染色した球識別は、定義された閾値によって決定されるた試料を計算盤とミラーディスクを用いて算定する鏡

め、閾値設定の根拠の明確化および標準化が重要で検法（NMB 法）である。網赤血球の形態観察によるある。

識別は、超生体染色の際に現れるアーチファクトでおわりにある網状構造の顆粒が 2 つ以上存在する赤血球を、
53）
網赤血球として識別することが定義されている 。

NMB 法による網状構造形成は、染色温度および染自動血球分析項目の精確さ検証および標準化の現

色時間に影響を受ける。特に、健常検体領域では影状を解説した。全血算項目（CBC）において、MCV響が大きく NMB 法が高値となるため、染色条件はと平均血小板容積（MPV）の標準化は課題が残った

ICSH および CLSI の規定範囲に従って、室温 20℃

ままである。MCV は貧血診断に重要であるが、容。

積検出原理の違いおよび PCV の国際調和プロトコル

NMB 法の検証は、通常の臨床検査現場において、が健常領域に限定されることから、全機種・全原理

温度管理の面から困難である。

で一致させることは難しい。MPV は血小板クリットの環境・染色時間 10 分に制御する必要があった

53）（ 23 ）

124（Pct）の国際調和プロトコルが無いことから、別の標準化指標が必要となる。CLSI は、容積軸のようなサイズ指標は米国商務省標準化技術研究所（NIST）
を利用するように記載があるため、これを元に校正
53）
階層を構築することが望ましいと考える 。

近年、レポータブルとなった血球分析項目には、
不確かさ付与の観点からは用手法ではなく、フロー
サイトメトリー法による校正階層の構築が望まれている。有核赤血球、網血小板および幼若顆粒球などの国際調和プロトコルの開発、SOP の構築/検証を加速する必要があると感じる。
血球分析項目の伝達性検証は、新鮮血液キャリブ
レータが必要となることから難しい現状であるが、診断に利用される項目を優先して取り組むことが重要と考える。

文献1 ）永井 豊, 巽 典之. 血液検査と化学検査の精確さ検証の違い. 生物試料分析. 2008; 31（5）: 307-324．
2 ）ISO 17511:2020, In vitro diagnostic medical devices —Requirements for establishing metrological traceability ofvalues assigned to calibrators, trueness control materials
and human samples.
3 ）International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine“The International Federation of Clinical
Chemistry and Laboratory Medicine. External Quality Assessment（EQA）or Proficiency Testing in Molecular Diagnostics.”.
https://ifcc.org/ifcc-scientific-division/sd-committees/cmd/externalqualityassessment-proficiencytestinginmo
leculardiagnostics/（引用 2023 年 12 月 31 日）
4 ）鈴木隆史 . 臨床検査における精度管理 . 臨床検査と総合
健診 . 2019; 46（2）: 226 -235．
5 ）前川真人 . わが国の外部精度管理調査のあゆみ . モダンメディア . 2023; 69（11）: 289 -296．
6 ）鈴木隆史. 臨床検査精度管理調査の定量検査評価法と試料に関する日臨技指針 . 医学検査 . 2008; 57: 109 -117．
7 ）European Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine,“Biological Variation Database”,
https://biologicalvariation.eu/（引用 2023 年 1 月 13 日）
8 ）河野均也.「臨床検査室の外部精度評価の統一化事業の推進と臨床検査室の認証 / 認定システム構築に関する研究 . 日医総研ワーキングペーパー 2003 : 90」
https://www.jmari.med.or.jp/wp-content/uploads/2021/
10/WP090.pdf（引用 2023 年 12 月 31 日）
9 ）永井 豊 , 近藤 弘 , 巽 典之 . 計測技術ティーチング : 血球分析基本技術. 東京 : 宇宙堂八木書店 ; 2006: 56 -113．
10）ISO 17511: 2003, In vitro diagnostic medical devices Measurement of quantities in biological samples - Metro-logical traceability of values assigned to calibrators andcontrol materials.
11）永井 豊 , 近藤 弘 , 川合陽子 . 実試料標準物質の概要 −血液検査系−. 臨床化学 . 2009; 38（4）: 408 - 415.
12）European Directive 98/79/EC of the European Parliament and of the Council of 27 October 1998 on in vitro diagnostic medical devices.
13）Regulation（EU）2017/746 of the European Parliamentand of the Council of 5 April 2017 on in vitro diagnostic
medical devices and repealing Directive 98/79/EC andCommission Decision 2010/227/EU（Text with EEA relevance）
14）ISO 15193: 2009, In vitro diagnostic medical devices —Measurement of quantities in samples of biological origin— Requirements for content and presentation of reference measurement procedures.
15）ISO 15194: 2009, In vitro diagnostic medical devices —Measurement of quantities in samples of biological origin— Requirements for certified reference materials and thecontent of supporting documentation.
16）ISO 21151: 2020, In vitro diagnostic medical devices —Requirements for international harmonisation protocols
establishing metrological traceability of values assigned
to calibrators and human samples.
17）Fraser CG, Petersen PH, Libeer CJ, et al. Proposals for
Setting Generally Applicable Quality Goals Solely Basedon Biology. Annals of Clinical Biochemistry. 1997; 34:
8 -12.
18）Oosterhuis W, Bayat H, Armbruster D, et al. The use oferror and uncertainty methods in the medical laboratory.
Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. 2018; 56:
209 -219.
19）International Council for Standardization Haematology,“Publications: Guidelines, Recommendations, Editorials& Articles”,
https://www.icsh.org/publications（引用 2024年1月9日）
20）Clinical and Laboratory Standards Institute. CLSI Standards: Guidelines for Health Care Excellence.
https://clsi.org/standards/（引用 2024 年 1 月 9 日）21）Joint Committee for Traceability in Laboratory Medicine.
Analyte Group 2: Blood Cell Counting and Typing Review
Team.
https://www.bipm.org/en/committees/jc/jctlm/wg/
jctlm-rt-blood-cells/members（引用 2024 年 1月 9 日）22）International Society of Laboratory Hematology.
https://www.islh.org/ISLH-Education/guidelines.php（引用 2024 年 1 月 9 日）
23）International Council for Standardization Haematology.
The assignment of values to fresh blood used for calibrating automated blood cell counters. Clin Lab Haematol.
1988; 10: 203 -212.
24）International Council for Standardization Haematology.
Reference method for the enumeration of erythrocytes
and leucocytes, Clin Lab Haematol. 1994; 16: 131 -138.
25）日本検査血液学会標準化委員会 .「赤血球数および白血（ 24 ）

125

球数のメーカ基準分析法（ISO15193 に対応）」，
https://jslh-cs.com/.assets/RMP-for-RBC-and-WBC-enumeration-2022-05-19-rev01-03.pdf（引用 2024 年 1 月 6 日）
26）International Council for Standardization Haematolgoy.
Recommendations for reference method for haemoglobinometry in human blood. J Clin Pathol. 1996; 49: 271- 274.
27）CLSI. Reference and Selected Procedures for the Quantitative Determination of Hemoglobin in Blood. 3rd ed. CLSI standard H15. Clinical and Laboratory Standards Institute; 2000.
28）International Council for Standardization Haematology.
New reference method for haemiglobincyanide for use instandardization of blood haemoglobin measurements. Intl
J Lab Hem. 2010; 32: 139 -141.
29）International Council for Standardization Haematolgy. Selected methods for the determination of packed call volume. In: Advances in Hematologic Methods: The BloodCount. van Assendelf OW and England JM, eds. Boca Raton, FL: CRC Press; 198230）World Health Organization. ICSH Recommended method
for the determination of packed cell volume by centrifugation. WHO/LAB/89.1, 1989.
31）CLSI. Procedure for Determining Packed Cell Volume by
the Microhematocrit Method3rd ed. CLSI standard H07.
Clinical and Laboratory Standards Institute; 2000.
32）Kazuo Niitani. Use of Indocyanine Green for the Determination of Trapped Plasma. Proceedings of the 5th ISQCTOKYO. 1983; 54- 61.
33）International Council for Standardization Haematolgy.
ICSH Recommendations for“surrogate reference”method for the packed cell volume. Lab Hematol 2003; 9: 1 - 9.
34）永井 豊, 近藤 弘 . 血液学検査の国際標準化の動向 ; 血液学検査を使いこなす . 東京 : 宇宙堂八木書店 ; 2019; 161:
40 -54．
35）永井 豊 , 竹田知広 , 近藤 弘 . 平均赤血球ヘモグロビン濃度（MCHC）上限値の推定および計測誤差 . 日本検査血液学会雑誌. 2022; 23（1）: 28 -37．
36）永井 豊 , フローサイトメトリーによる血球分類の動向 ,Cytometry Research. 2011; 21（2）: 13 -22．
37）鶴田一人 , 竹田知広 , 近藤 弘 , 他 . 新鮮血液を用いた 6
メーカー基準自動血球分析装置による外部精度管理調査の経年的評価報告 . 日本検査血液学会雑誌 , 2021; 22:
114 -125.
38）CLSI. Reference Leukocyte（WBC）Differential Count（Proportional）and Evaluation of Instrumental Methods.
2nd ed. CLSI standard H20. Clinical and Laboratory
Standards Institute; 2007.
39）Roussel M, Davis BH, Fest T, et al. on behalf of theInternational Council for Standardization in Hematology. Toward a reference method for leukocyte differential countsin blood: Comparison of three flow cytometric candidate
methods. Cytometry. 2012; 81A: 973 - 982.
40）Kawai Y, Nagai Y, Kondo et al. Japanese Society for Laboratory Hematology flow cytometric reference method ofdetermining the differential leukocyte count: external

quality assurance using fresh blood samples. Int Jnl Lab
Hem. 2017; 39: 202 - 222.
41）近藤 弘 , 永井 豊 , 小川恵津子, 他 . フローサイトメト
リーによる白血球分類のための日本検査血液学会参照
法の検討 . 日本検査血液学会雑誌 . 2016; 17: 169 -181．
42）竹田知広 , 永井豊 , 他 . 血液検査領域における外部精度管理調査の現状と課題. 日本検査血液学会雑誌. 2021; 22:407- 413．
43）日本検査血液学会標準化委員会血球計数標準化小委員
会 ,「フローサイトメトリー法による白血球 5 分類算定法
手順書」,
https://jslh-cs.com/.assets/JSLH-Diff-SOP-rev1.42e.pdf（引用 2024 年 1 月 9 日）44）Mori S Sayaka, Tsuruda K, Yanagihara K, et al. behalf of
JSLH Standardization sub-committee for blood cell counting. Evaluation for convergence of the target assay range
for fresh blood calibrators measured by laboratories inexternal quality assurance survey for leukocyte differentials. Int J Lab Hematol. 2023; 45: 82- 83.
45）International Council for Standardization Haematolgy Expert Panel on Cytometry and the International Society ofLaboratory Hematology Task Force on Platelet Counting.
Platelet counting by RBC/platelet ratio method. A reference method. Am J Clin Pathol. 2001; 115: 460-464.
46）International Society of Laboratory Hematology Task
Force. Reference Platelet Count. Am J Clin Pathol. 2001;
115: 448 - 459.
47）CLSI. Validation and Quality Assurance of Automated Hematology Analyzers. 2nd ed. CLSI standards H26. Clinicaland Laboratory Standards Institute; 2010.
48）近藤 弘 , 永井 豊 , 池田尚隆 , 他 . 新鮮血サーベイ試料の攪拌および分注方法の検討. 臨床検査. 2017; 61: 14971501．
49）永井 豊 , 竹田知広 , 近藤 弘 . 血小板自動測定の限界と将来展望 −容積と計数の定量限界−. 日本検査血液学会雑誌 . 2019: 20193 -206．
50）日本検査血液学会標準化委員会血球計数標準化小委員
会 ,「フローサイトメトリー法による血小板絶対数算定
法
（間接法）
手順書書」
，
http://jslh.kenkyuukai.jp/images/sys/information/2019
0926111409-32FF8C754AD98B70E4D0049CDE7CD4
DCDF9F15EA8CD6DDD4E73F12A34403093B.pdf（引用2024年 1 月 9 日）51）Schimenti KJ, Lacrna K, Maston L, et al. Reticulocyte
analysis: comparison of flow cytometry, image analysis
and manual counting. Cytometry. 1992; 13: 853-62.
52）ICSH Expert Panel on Cytometry. Proposed reference
method for reticulocyte counting based on the determination of the reticulocyte to red cell ratio. Clin Lab Haematol. 1998; 20: 77- 9.
53）CLSI. Methods for Reticulocyte Counting（AutomatedBlood Cell Counters, Flow Cytometry, and SupravitalDyes）. 2 nd ed. CLSI guideline H44. Clinical and Laboratory Standards Institute; 2004.
54）Lee LG, Chen CH, Chiu LA. Tiazole orange: new dye for（ 25 ）

126

reticulocyte analysis. Cytometry. 1986; 7: 508 -17.
55）Serke S, Huhn D. Improved specificity of determinationof immature erythrocytes（reticulocytes）by multiparameter flow cytometry thiazole orange using combined staining with monoclonal antibody（antiglycophorin-A）. Clin
Lab Haematol. 1993; 15: 33 - 44.

56）Takeda T, Mori1 S, Tsuruda K, et al. behalf of JSLH
Standardization sub-committee for blood cell counting.
Evaluation for convergence of the target assay range forfresh blood calibrators measured by laboratories in external quality assurance survey for reticulocyte percentage.
Int J Lab Hematol. 2023; 45: 110 -111.

（ 26 ）