08

SPR & BLI & MALSによって検証されたFc受容体タンパク質

Antigen

D1

Antibody
D2

Fc Receptor

FcRn

IgG
recycling

FcγRI

Activation

FcγRIIA

Activation

FcγRIIB

Inhibition

FcγRIICFcγRIIIA

Activation

Activationwww.acrobiosystems.com

FcγRIIIB

Decoy
activation

目次

P 01
P 02

背景紹介
製品特性

高純度

SPR検証済み親和性
BLI検証済み親和性高いバッチ間の一貫性
P 04

ビオチン標識か他種別のFc受容体タンパク質P 04

高水準な分子間相互作用解析サービス

P 05

製品リスト

背景紹介
研究者たちは、当初にげっ歯類動物の体内でMHCI分子と構造的に類似した受容体を発見しました。それは、β2ミクログロブリンとヘテロ二量体を形成し、生理的効果を発揮します。この受容体は、新生児の腸の上皮細胞を介してIgGを血流に乗せることができるため、新生児Fc受容体（FcRn）と呼ばれています。その後、ヒトや他の哺乳類の体内でも確認されました。

FcRnの主な機能は、内皮細胞でのリソソーム分解作用を抑えることで、IgGや血清アルブミンの半減期を延ばすことです。図1に示すように、IgGと血清アルブミンは、酸性的なpH（6.5未満）でFcRnと結合し、内皮細胞に取込んでから細胞表面に循環輸送され、そして中性的なpH（7.0以上）にて血液中に放出されます。この働きによって、IgGと血清アルブミンがリソソーム分解から守られるわけです。
lgG

FcγR
Ag
VL

VH

VH
CLCH1

CH1

CL

Binding to
FcγR

Ag
VL

Downstream
signallingthrough ITAMsor ITIMs

ITAM/
ITIM

FabCH2 CH2CH3 CH3

Cellmembrane

Blood

Fc

Dissociation at
physiological pH

Recycling
FcRnMaintenance ofserum lgG levels

FcRn
Endothelialcell

Acidicendosome

Fc受容体のメカニズム

ヒトをはじめとする哺乳類には、FcRnのほかに、FcγRI/CD64、FcγRII/CD32和FcγRIII/CD16という3つのサブクラスを持つFcγ受容体（FcγR）も存在します。これらの受容体は、単球、マクロファージ、好中球、好酸球、B細胞、T細胞、樹状細胞、ナチュラルキラー細胞、血小板などに発現しています。FcγRsは、CD32のような低親和性（KD>10-7 M）から、CD64のような高親和性（KD：10-8-10-9 M）、そしてその中間のCD16（KD<10-7 M）など、異なる親和性で免疫グロブリンと結合します。また、IgGサブクラスの違いによっても、これらの受容体に対する親和性が異なることが研究で表明されています。IgGとFcガンマ受容体の結合は生体内で重要な役割を果たしており、その中でも最も重要なのが抗体依存性細胞傷害（ADCC）です。
FcγRsの遺伝的多型がモノクローナル抗体との結合に影響を与え、抗体医薬品の臨床効果に影響を与えることがわかりました。例えば、非ホジキンリンパ腫の治療にリツキシマブ（抗CD20モノクローナル抗体）を使用した試験の結果では、FcγRIIIa（V176）の同型接合体の患者は、F176/V176遺伝子型またはF176/F176遺伝子型の患者よりも高い奏効率を示します。

FcγRsの多型のもう一つの例は、臓器移植の拒絶反応を防ぐ免疫抑制剤の働き、つまりマウスの抗CD3モノクローナル抗体OKT3の副作用に対する研究です。 その結果、FcγRIIa（R167）遺伝子型の患者では、初回投与反応がより重篤であることが判明されました。

Tel: +86 400-682- 252 1 · W e b : w w w . a c rob i os ys t e m s. c o m01 E m a i l : o r d e r @ a c r o b i o sy ste m s. c o m

製品特性

MALS検証を受けた高純度抗体医薬品の開発において、検査やスクリーニングに使用されるタンパク質の高純度化のニーズに応えるため、当社のQCチームは、ほとんどの組換えタンパク質についてSDS-PAGEとSEC-MALS解析を同時に掛けています。
ただし、Fc受容体の単量体はその自然な状態を反映していることから、凝集効果による結合活性の一時的な増大を避けるために、抗体との親和性を確認する際には、可能な限り純度の高い単量体であるFc受容体を使用することが重要です。
そのため、SEC-MALS試験による単量体純度に厳格な内部管理基準を設け、基準を満たしたバッチのみが採用されることにしました。

The purity of Human CD32a (R167), His Tag (Cat. No. CDA-H5221) is more than 95% verified by SDS-PAGE. The
purity of Human CD32a (R167), His Tag (Cat. No. CDA-H5221) is more than 90% verified by SEC-MALS. And themolecular weight of this protein is around 25-35 kDa.

SPR検証済み親和性

分子間相互作用は、さまざまな方法で検出することができます。従来のELISA法は、CD16やCD32のような親和性の低い受容体と抗体との相互作用を検出するのには適していないが、SPRはFc受容体と抗体との親和性を調べるのに最もよく使われている方法です。当社のFc受容体が期待通りの性能を発揮するために、当社のQCチームはほとんどの製品テストにBiacoreプラットフォームを使用しています。公開されているすべてのSPRデータについて、参考のために社内の実施した操作法を無償で提供することができます。

Human CD64, His Tag (Cat. No. FCA-H52H1) captured on CM5chip via anti-His antibody can bind Herceptin® with an affinity
constant of 4.92 nM as determined in a SPR assay (Biacore 8K) .

Immobilized Human CD32a (R167), His Tag (Cat. No. CDA-H5221) on
CM5 Chip via anti-His antibody, can bind Rituximab with an affinity
constant of 3.12 μM as determined in a SPR assay (Biacore T200) .

Immobilized Human CD16a (V176), His Tag (Cat. No. CD8-H52H4) on
CM5 Chip via anti-His antibody, can bind Herceptin with an affinity
constant of 163 nM as determined in SPR assay (Biacore T200) .

Immobilized Human FCGRT&B2M Heterodimer Protein, His Tag&Strep
II Tag (Cat. No. FCM-H5286) on CM5 Chip via Anti-His antibody, canbind Herceptin with an affinity constant of 0.261 μM as determined in aSPR assay (Biacore T200) .

Tel: +86 400- 682- 252 1 · W e b : w w w . a c rob i os ys t e m s. c o m

02 E m a i l : o r d e r @ a c r o bi o sy ste m s. c o m

BLI検証済み親和性

また、お客様の抗体医薬品開発におけるさまざまな応用シーンに対応するため、我々も同じくBLI技術を用いた親和性検証を行っています。公開されているすべてのBLIデータについて、参考のために社内の実施した操作法を無償で提供することができます。

Loaded Human CD64, His Tag (Cat. No. FCA-H52H1) on HIS1K
Biosensor, can bind Herceptin with an affinity constant of 6.98 nM asdetermined in BLI assay (ForteBio Octet Red96e) .

Loaded Herceptin on Protein A Biosensor, can bind Human CD64, HisTag (Cat. No. FCA-H52H1) with an affinity constant of 0.297 nM asdetermined in BLI assay (ForteBio Octet Red96e) .

Loaded Human CD32a (R167), His Tag (Cat. No. CDA-H5221) on HIS1K
Biosensor, can bind Rituximab with an affinity constant of 1.4 μM asdetermined in BLI assay (ForteBio Octet Red96e) .

Loaded Human CD16a (V176), His Tag (Cat. No. CD8-H52H4) on
HIS1K Biosensor, can bind Herceptin with an affinity constant of 0.447
μM as determined in BLI assay (ForteBio Octet Red96e) .

Loaded Human FCGRT&B2M Heterodimer Protein, His Tag&Strep IITag (Cat. No. FCM-H5286) on SA Biosensor via Biotin his antibody, canbind Herceptin with an affinity constant of 0.27 μM as determined inBLI assay (ForteBio Octet Red96e) .

Loaded Herceptin on Protein A Biosensor, can bind Human CD16a(V176), His Tag (Cat. No. CD8-H52H4) with an affinity constant of0.37 μM as determined in BLI assay (ForteBio Octet Red96e) .

高いバッチ間の一貫性

私たちは、厳格な品質管理手段を採用することで、製品のバッチ間の一貫性を確保しています。下図に示すように、被検体サンプルのバッチ間ばらつきが極少ないです。

Immobilized Human Fc gamma RIIB / CD32b Protein (Cat. No. CDB-H5228) on CM5 Chip via anti-His antibody, can bind
Rituximab with an affinity constant of 10 μM as determined in a SPR assay (Biacore T200).

類似性採点ソフトを用いた分析においても、CD32bのバッチ間類似性が非常に高く、バッチ間の一貫性が高く維持されたことが分かります。
Tel: +86 400- 682- 252 1 · W e b : w w w . a c rob i os ys t e m s. c o m

03 E m a i l : o r d e r @ a c r o b i o sy ste m s. c o m

Similarity Score(%)

Batch Consistency of Human Fc gamma RllB / CD32b
CD32-lot1

CD32-lot2

CD32-lot3

100%

96.95%

93.58%

Similarity Score(%)

異なるバッチ間のHuman Fc gamma RIIB / CD32b (Cat. No. CDB-H5228)類似性は90％以上を達しています。

ビオチン標識か他種別のFc受容体タンパク質

ACROBiosystems社は、すぐに使えるAviTMターゲット標識付きビオチン化Fc受容体タンパク質を提供しています。当製品は、高活性、且つ安定したバッチ間の一貫性を取れるなどの特徴から、抗体医薬品開発により多い選択肢を与えます。さらに、非ヒト化抗体のスクリーニングや種間交差反応性の確認を行うために、サル、マウス、ラットなど他の種のFc受容体タンパク質も提供しております。

Immobilized Cynomolgus / Rhesus macaque FCGRT&B2M Heterodimer
Protein, His Tag&Strep II Tag (Cat. No. FCM-C5284) on CM5 Chip via
anti-His antibody, can bind Herceptin with an affinity constant of 0.403 μM asdetermined in a SPR assay (Biacore T200).

Biotinylated Human CD16a (V176), Avitag,His Tag (SPR & BLIverified) (Cat. No. CDA-H82E9) captured on Biotin CAP- Series SSensor Chip can bind Rituximab with an affinity constant of 0.261 μM
as determined in a SPR assay (Biacore T200) .

高水準な分子間相互作用解析サービス

ACROは、SPRとBLIを含む分子間相互作用技術サービスを介して、抗体とFc受容体タンパク質との親和性を検定するためのトータルソリューションを提供し、お客様の創薬をサポートします。

サンプルをご提供いただくだけで、2週間以内に抗体およびFc受容体タンパク質の親和性検定ソリューションをご提案いたします。
抗体医薬品の開発に必要なヒトFc受容体タンパク質の全遺伝子型を網羅する親和性検定実験
実験に必要な全Fc受容体タンパク質を無料で提供します。
また、お得なパッケージプランもありますので、お気軽にお問い合わせください。
FcRn

Fc Receptors

Fcγ Receptors

Fcε Receptors

Tel: +86 400-682- 252 1 · W e b : w w w . a c rob i os ys t e m s. c o m

FcγRI(CD64)

FcγRII(CD32)

FcγRIII(CD16)

FcγRIIA(CD32a)
FcγRIIB(CD32b)

FcγRIIIA(CD16a)
FcγRIIIB(CD16b)

R167

H167
F176

V176
NA1
NA2

04 E m a i l : o r d e r @ a c r o b i o sy ste m s. c o m

製品リスト
分子品番

FcRn (FCGRT & B2M)

FCM-H5286

FcRn (FCGRT & B2M)
(Biotin-labeled)

FcRn (FCGRT & B2M)
(Biotin-labeled)

FCM-H82W7
FCN-H52W7

FcRn (FCGRT & B2M)

FCM-H8286

FcRn (FCGRT & B2M)

FCM-H82W4

FcRn (FCGRT & B2M)

FCM-C5284

FcRn (FCGRT & B2M)

FCM-C82W3

FcRn (FCGRT & B2M)
(Biotin-labeled)

FCM-C52W9

FcRn (FCGRT & B2M)

FCM-C82W5

FcRn (FCGRT & B2M)

FCM-M52W8

FcRn (FCGRT & B2M)
(Biotin-labeled)

FcRn (FCGRT & B2M)
(Biotin-labeled)

FCM-M82W6
FCM-M52W2

FcRn (FCGRT & B2M)

FCM-M82W5

FcRn (FCGRT & B2M)

FCM-R52W5

種別Human

HumanHuman

Human

Human

Cynomolgus /Rhesus macaque

Cynomolgus /Rhesus macaque

Cynomolgus /Rhesus macaque

Cynomolgus /Rhesus macaque

Mouse

Mouse

Mouse

Mouse

RabbitTel: +86 400- 682- 252 1 · W e b : w w w . a c rob i os ys t e m s. c o m

構造
FcGRT(24-297)

His

FcGRT(24-297)

His

FcGRT(24-297)

His

FcGRT(24-297)

His

FcGRT(24-297)

His

Avi

FcGRT(24-297)

His

Avi

FcGRT(24-297)

His

FcGRT(24-297)

His

B2M(21-119)
B2M(21-119)
B2M(21-119)
B2M(21-119)
B2M(21-119)
B2M(21-119)
B2M(21-119)

Strep II
Strep II
Avi

Strep II

Strep II
Avi

B2M(21-119)

Strep IIFcGRT(24-297)

His

FcGRT(22-297)

His

FcGRT(22-297)

B2M(21-119)

Avi

His

Strep IIFcGRT(22-297)

His

Avi

FcGRT(22-297)

His

B2M(21-119)

B2M(21-119)

B2M(21-119)
B2M(21-119)

FcGRT(23-298)
B2M(21-119)

Twin-Strep

His

Strep II仕様

特性50ug,1mg

SPR & BLI
& MALS veriﬁed

25ug,200ug

SPR & BLI
& MALS veriﬁed

25ug,200ug

SPR & BLI
& MALS veriﬁed

50ug,1mg

SPR & BLI
veriﬁed25ug,200ug

SPR & BLI
veriﬁed25ug,200ug

SPR & BLI& MALS veriﬁed50ug,1mg

SPR & BLI& MALS veriﬁed

25ug,200ug

SPR & BLI
veriﬁed50ug,1mg

SPR & BLI
veriﬁed50ug,1mg

BLI & MALS
veriﬁed25ug,200ug

BLI & MALS
veriﬁed25ug,200ug

BLI veriﬁed

50ug,1mg

BLI veriﬁed

50ug,1mg

SPR & MALS
veriﬁed05 E m a i l : o r d e r @ a c r o bi o sy ste m s. c o m

分子FcRn (FCGRT & B2M)
(Biotin-labeled)

FcRn (FCGRT & B2M)
(Biotin-labeled)

FcRn (FCGRT & B2M)
(Biotin-labeled)

品番
FCM-R5287
FCM-R82W7
FCN-B82W3

FcRn (FCGRT & B2M)

FCN-F82W3

FcRn (FCGRT & B2M)

FCM-P5280

Fc gamma RI / CD64

FCA-H52H1

Fc gamma RI / CD64
(Biotin-labeled)Fc gamma RI / CD64
Fc gamma RI / CD64
(Biotin-labeled)Fc gamma RI / CD64
(Biotin-labeled)

Strep IIFcGRT(24-298)

His

Avi

Rat

FcGRT(24-297)

His

Avi

BovineFcGRT(16-289)

HisFeline

FcGRT(24-297)

His

PorcineHuman

B2M(21-118)
B2M(21-118)
B2M(21-118)

Strep II

B2M(22-120)

CDA-H82E6
CDA-H82E7

Fc gamma RIIA / CD32a

CDA-R52H5

Fc gamma RIIA / CD32a

CDA-C52H7

H167

Human

CD32a (36-218)
R167

Human

CD32a (36-218)

Human

CD32a (36-218)

H167
R167

Human

Rat

Cynomolgus

Tel: +86 400- 682- 252 1 · W e b : w w w . a c rob i os ys t e m s. c o m

CD32a (36-218)

SPR veriﬁed

25ug,200ug

SPR veriﬁed

50ug,1mg

SPR & MALS
veriﬁed50ug,1mg

SPR & MALS
veriﬁed100ug,1mg

SPR & BLI
& MALS veriﬁed

Avi 25ug,200ug

SPR & MALS
veriﬁed25ug,200ug

BLI veriﬁed

His

100ug,1mg

SPR & BLI& MALS veriﬁed

His

100ug,1mg

SPR & BLI
& MALS veriﬁed

His

CD64 (11-288)

25ug,200ug

SPR & BLI
& MALS veriﬁed

His

Avi

Mouse

Cynomolgus

SPR & MALS
veriﬁed25ug,200ug

CD64 (16-288)

CD64 (Glu 25-Pro 297)
Poly-hisP26151-1

FCA-C82E825ug,200ug

SPR & BLI& MALS veriﬁed

His

CD64 (25-297)

CD4-M82E7特性50ug,100ug,1mg

CD64 (16-281)

Mouse

CDA-H5221(Biotin-labeled)His

CD4-M5227

Fc gamma RIIA / CD32a

Fc gamma RIIA / CD32a

B2M(21-119)

Avi

FcGRT(23-298)
Rat

仕様

Human

CD1-H5223(Biotin-labeled)

構造

FCA-H82E8

Fc gamma RIIA / CD32a

Fc gamma RIIA / CD32a

種別

His

Avi

Avi

His

25ug,200ug

SPR & BLI
veriﬁedAvi

His

25ug,200ug

SPR & BLI
veriﬁed

CD32a (Glu 34-Leu 216)
Poly-his
MOR4F7-1

100ug,1mg

CD32a (28-208)

50ug,100ug,1mg

His

06 E m a i l : o r d e r @ a c r o b i o sy ste m s. c o m

SPR & BLI& MALS veriﬁed

分子Fc gamma RIIA / CD32a(Biotin-labeled)

品番
CDA-C82E5

種別

Cynomolgus

構造Avi

仕様

特性25ug,200ug

SPR & BLI
& MALS veriﬁed

CD32a (28-208)

His

CD32a (34-217)

His

50ug,1mg

SPR & BLI& MALS veriﬁed

His

100ug,1mg

SPR & BLI
& MALS veriﬁed

Fc gamma RIIA / CD32a

CDA-R52H4

Fc gamma RIIB / CD32b

CDB-M52H7

Mouse

CD32b (40-217)

CDB-M82E8

Mouse

CD32b (40-217)

AviHis25ug,200ug

SPR & BLIveriﬁed

CD32b (46-224)

HisAvi25ug,200ug

SPR & BLI& MALS veriﬁed

Fc gamma RIIB / CD32b(Biotin-labeled)Fc gamma RIIB / CD32b(Biotin-labeled)Fc gamma RIIB / CD32b(Biotin-labeled)

CDB-C82E4
CDB-C5224

Fc gamma RIIB / CD32b

CDB-H5228

Fc gamma RIIB / CD32b

CDB-H5298

Fc gamma RIIB / CD32b

CDB-H52S9

Fc gamma RIIB / CD32b(Biotin-labeled)

CDB-H82E0

Fc gamma RIII / CD16

CDA-M52H8

Fc gamma RIII / CD16

FC6-M82E0

Fc gamma RIII / CD16

FC6-C52H9

Fc gamma RIII / CD16(Biotin-labeled)

FC6-C82E0

Fc gamma RIII / CD16

FC6-R52H6

Fc gamma RIIIA / CD16a

CDA-H5290

Rhesus macaque

Cynomolgus

Cynomolgus

Human

CD32b (Ala 46-Pro 224)
Poly-his
Q8SPW3-150ug，100ug，1mg

CD32b (46-217)

100ug,1mg

His

SPR & MALS
veriﬁedSPR & BLI& MALS veriﬁed

Human

SUMO CD32b/c(Ala 46-Pro 217) Poly-his 50ug，100ug，
P31994-1
1mg

BLI & MALS
veriﬁed

Human

CD32b/c (Ala 46-Pro 217)
HSA Poly-his
P31994-1

BLI & MALS
veriﬁed

CD32b (46-217)

Avi

Mouse

CD16 (32-215)

His

Mouse

CD16 (Leu 32-Thr 215)
Poly-his
Q5D518-1

Human

Cynomolgus

Cynomolgus

Rhesus macaque

Human

Tel: +86 400-682- 252 1 · W e b : w w w . a crob i os ys t e m s. c o m

CD16 (17-208)

His

CD16 (17-208)

His

CD16 (21-206)

His

SUMO

His

25ug,200ug
100ug

Avi

Avi

25ug，200ug

SPR & BLI
veriﬁedSPR & BLI
& MALS veriﬁed
SPR & MALS
veriﬁed100ug,1mg

SPR & BLI& MALS veriﬁed

25ug,200ug

SPR & BLI& MALS veriﬁed

50ug,1mg

SPR & BLI& MALS veriﬁed

CD16a(Gly 17-Gln 208) Poly-his 50ug，100ug，1mg
P08637-1(F176V)

07 E m a i l : o r d e r @ a c r o b i o sy ste m s. c o m

BLI & MALS
veriﬁed分子

品番Fc gamma RIIIA / CD16a

CDA-H52S1

Fc gamma RIIIA / CD16a

CD8-H52H4

Fc gamma RIIIA / CD16a

CDA-H5220

Fc gamma RIIIA / CD16a(Biotin-labeled)Fc gamma RIIIA / CD16a(Biotin-labeled)Fc gamma

RIIIB / CD16b (NA1)
Fc gamma

RIIIB / CD16b (NA1)
Fc gamma

RIIIB / CD16b (NA1)(Biotin-labeled)Fc gamma

RIIIB / CD16b (NA2)
Fc gamma

RIIIB / CD16b (NA2)(Biotin-labeled)Fc gamma

CDA-H82E8
CDA-H82E9
CDB-H5227
CDB-H5296
CDB-H82E4
CDB-H5222
CDB-H82Ea

種別

Human

構造
V176
CD16a(Gly 17-Gln 208)
HSA Poly-his
P08637-1
V176

Human

CD16a (17-208)
F176

Human

CD16a (17-208)

Human

CD16a (17-208)

Human

Human

Human

Human

Human

Human

仕様

F176

50ug，100ug，1mg

BLI & MALS
veriﬁedHis

100ug,1mg

MALS veriﬁed

His

100ug,1mg

MALS veriﬁed

Avi

His

25ug,200ug

CD16a (17-208)

Avi

His

25ug,200ug

CD16b (NA1) (17-200)

His

V176

特性100ug,1mg

SPR & BLI
& MALS veriﬁed

50ug，100ug，
SUMO CD16b(NA1)(Gly17-Ser200) Poly-his
1mg
AAA35881.1
CD16b (NA1) (17-200)

His

CD16b (NA2) (17-200)

His

CD16b (NA2) (17-200)

His

Avi

Avi

BLI & MALS
veriﬁed25ug,200ug

SPR & BLI
veriﬁed100ug,1mg

SPR & BLI& MALS veriﬁed

25ug,200ug

SPR & BLI& MALS veriﬁed
BLI & MALS
veriﬁedCDB-H5294

Human

SUMO CD16b(NA2)(Gly17-Ser200) Poly-his 50ug，100ug，075015-1
1mg

FC4-M52H3

Mouse

CD16-2 (21-203)

FC4-M82E8

Mouse

CD16-2 (21-203) His

CD23

CD3-H5249

Human

His

CD23 (48-321)

100ug,1mg

CD23 (Biotin-labeled)CD3-H82Q5

His

Avi

25ug,200ug

MALS veriﬁed

Fc epsilon RI alpha

FCA-H5259

Human

FCER1A(Val 26-Leu 204)
P12319-1

Fc(Pro 100-Lys 300) 100ug,1mg
P01857

BLI & MALS
veriﬁedFc epsilon RI alpha

FCA-H5228

Human

FCER1A(Val 26-Gln 205)
P12319-1

Poly-his

BLI veriﬁed

RIIIB / CD16b (NA2)
Fc gamma RIV / CD16-2
Fc gamma RIV / CD16-2(Biotin-labeled)

Human

Tel: +86 400- 682- 252 1 · W e b : w w w . a c rob i os ys t e m s. c o m

His
Avi

CD23 (48-321)

100ug,1mg

SPR & BLI& MALS veriﬁed

25ug,200ug

BLI veriﬁed

100ug,1mg

08 E m a i l : o r d e r @ a c r o b i o sy ste m s. c o m

+86 400-682-2521 (Asia & Pacific)+1 800-810-0816 (US/Canada)order@acrobiosystems.com
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