博

士

学

位

論

文

内容の要旨および審査結果の要旨

第

29

集

（平成 25 年度）

金

沢

医

科

大

学

は し が き
本集は、本学において博士（医学）の学位を授与した者の論文内容の要旨および審査の結果の要旨を収録したものである。

－ 第29集 目
学位授与番号
甲 第437号

氏

垣

内

名

無

次 （平成25年度） －
論

文

題

名

頁

一

Relevance of Distinct Monocyte Subsets to ClinicalCourse of Ischemic Stroke Patients・・・・・・

1

・・・・・・

4

甲 第438号

豊

田

一

郎

MRI Reveals Edema in Larynx（But Not in Brain）
During Anaphylactic Hypotension in AnesthetizedRats

甲 第439号

青

木

洋

文

Myocardial sympathetic innervation, function, andoxidative metabolism in non-infarcted myocardiumin patients with prior myocardial infarction

・・・・・・

7

甲 第440号

齊

藤

竜

平

Nutri-pharmacogenomics of warfarin anticoagulation
therapy: VKORC1 genotype-dependent influence of
dietary vitamin K intake

・・・・・・

9

甲 第441号

Nguyen Thi
Nguyet Anh

Maternal risk factors associated with increased
dioxin concentrations in breast milk in a hot spotof dioxin contamination in Vietnam

・・・・・・

11

甲 第442号

野

村

友

映

Influence of HRH2 promoter polymorphism on
aberrant DNA methylation of DAPK and CDH1 in thegastric epithelium

・・・・・・

14

甲 第443号

山

田

英

登

Effects of -1018G>A Polymorphism of HRH2
(rs2607474) on the Severity of Gastric Mucosal
Atrophy・・・・・・

16

甲 第444号

入谷

敦

Association between blood pressure and disabilityfree survival among community-dwelling elderly
patients receiving antihypertensive treatment

・・・・・・

18

甲 第445号

田辺寛

Increased levels of the oxidative stress marker,
nitrotyrosine in patients with provocation testinduced coronary vasospasm

・・・・・・

21

甲 第446号

三

田

哲

大

Change in retinal image contrast with age in eyeswith transparent lenses

・・・・・・

24

甲 第447号

川

邊

真

道

Influences of multiple tooth-loss on signal travelin the insular cortex of rats

・・・・・・

27

甲 第448号

永

井

貴

子

N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline Inhibits
Diabetes-Associated Kidney Fibrosis andEndothelial-Mesenchymal Transition

・・・・・・

28良慢性閉塞性肺疾患におけるReceptor for Advanced
Glycation End Products蛋白の発現・・・・・・

32

貴充

統合失調症患者におけるMRIとNIRSによる脳形態と脳機能の研究・・・・・・

34

野

正

克

原発性肺癌におけるRAGEおよびその関連因子の発現・・・・・・

37

木

原

弘

晶

Near-infrared spectroscopyを用いた双極性障害の家族
集積性の研究・・・・・・

40

水

野

宅

郎

Effects of Vaccination and the New Neuraminidase
Inhibitor, Laninamivir, on Influenza Infection

・・・・・・

43

子

Mortality and causes of deaths of inhabitants withrenal dysfunction induced by cadmium exposure of
the polluted Jinzu River basin,Toyama, Japan; a26-year follow-up

・・・・・・

45

甲 第449号

田中

甲 第450号

嶋田

甲 第451号

上

甲 第452号

甲 第453号

甲 第454号

丸

銭

笑

かい

と

内

む

垣

本

籍

岐

学 位 の 種 類

博士（医 学）

学 位 記 番 号

甲

第４３７号

学位授与の日付

平成２５年９月３０日

学位授与の要件

学位規則第４条第１項該当

学 位 論 文 題 目

Relevance of Distinct Monocyte Subsets to Clinical

阜

無

いち

氏名（生年月日）一（昭和 51 年 12 月 28 日）

県

Course of Ischemic Stroke Patients（虚血性脳卒中患者の臨床経過における単球亜分画の関連）
論 文 審 査 委 員

主

査

中

村

晃

副

査

飯

塚 秀

明

堀

有

行

学位論文内容の要旨
研究目的
脳梗塞の病態には免疫応答の関与した炎症反応が深く関わっていることが明らかにされつつある。梗塞後早期には末梢リンパ系臓器の免疫抑制現象が起こることが報告されている一方で， T 細胞の関与する免疫応答が，脳損傷の進行・増悪のみならず予防にも関与していることが判明している。一方，近年になり，自然免疫を担う単球の機能的亜分画の解明が進み，複数の慢性炎症性疾患において重要な役割を占めていることが明らかにされている。単球は，脳梗塞後にリンパ球よりも速く中枢神経組織に遊走することが判明しており，脳損傷や脳修復に関与する可能性が指摘されている。そこで本研究では，急性期脳梗塞における単球の役割を明らかにすることを目的とし，急性期脳梗塞患者の単球動態を経時的に解析し，脳梗塞の病態や臨床経過，予後との関連性について検討した。さらに脳梗塞の予後因子の一つである梗塞後感染症との関連も検討を行った。
実験方法【対象患者】対象患者は，2010 年 8 月から 2011 年 11 月に金沢医科大学病院に入院した
発症後２日以内の急性期脳梗塞患者３６名を選定した。比較対照群として同時期に入院した脳梗塞の既往のない神経変性疾患患者２４名を選定した。一過性脳虚血発作や，発症から３日以上経過して入院した患者，慢性感染症や炎症性疾患を有する患者，３ヶ月以内に抗生剤やステロイドを含めた免疫抑制剤の使用歴がある患者および悪性腫瘍患者は除外した。
【方法】入院第０〜２病日（超急性期），第３〜７病日（急性期），第１２〜１６病日（早期亜急性期），退院時の計４回にわたり末梢血を採取し， CD14 および CD16 抗体を用い，- 1 -炎症性単球，中間型単球，常在性単球の３つの機能的亜分画をフローサイトメトリーにより解析した。また凍結保存血清での各種サイトカインを測定した。神経症状の評価は入院時，第７，１４病日，退院時に，脳卒中重症度評価スケール（NIHSS）を用いて行った。
また，脳梗塞の病態を TOAST 分類に従い，大血管アテローム硬化症，心原性脳塞栓症，小血管病変，その他および原因不明で評価した。
実験成績
全単球数は超急性期より増加し，神経障害の重症度と正の相関を示し，また心原性脳塞栓症の患者で顕著に増加していた。フローサイトメトリーによる解析では，炎症性単球と中間型単球の割合は急性期に高値を示したが，炎症性単球は感染症併発群で，中間型単球は症状が進行した患者で上昇した。また中間型単球は心原性脳塞栓患者では超急性期のみ
ならず退院時まで一貫して上昇していた。一方，常在性単球は超急性期より有意な低下が認められ，感染症併発群では顕著であった。サイトカイン測定では，IL-6 と IL-17A の増加が認められ，IL-6 は感染症併発群で，IL-17A は症状進行群で相関が認められた。また
IL-17A は早期亜急性期に常在性単球とは正の，炎症性分画とは負の相関が認められた。
総括および結論
本研究の結果から，これまでその役割が不明であった中間型単球が，症状進行群で増加していることが判明した。また心原性脳塞栓症においても持続的に増加していることが明らかになった。中間型単球は，動脈硬化症や関節リウマチなどの慢性炎症疾患で増加する
ことが知られており，症状進行群では中間型単球が組織傷害の悪化に関与している可能性が考えられた。特に心原性脳塞栓症患者における持続増加は，中間型単球が炎症促進と組織傷害に中心的な役割を担っていると考えられた。またこのような心原性脳塞栓患者における単球変動は，虚血耐性がないことが一因と考えられた。一方，常在性単球は炎症局所に速やかに遊走するが，早期亜急性において IL-17A と常在性単球は正の相関を示した。
IL-17A は亜急性期においてT 細胞から分泌されることが指摘されているが，本研究の結果から，常在性単球が，T 細胞の浸潤も含めた組織傷害の病態に関与していると考えられた。
論文審査結果の要旨
脳梗塞後に起こる炎症は，組織傷害のみならず修復にも重要な役割を果たしている。近年，自然免疫応答の関与が明らかになり，自己免疫疾患と同様に炎症性サイトカインを標的とした抗体療法が奏効する可能性が示唆されている。最近になり，自然免疫応答を担う単球の機能的亜分画の解析が進み，脳梗塞後の炎症反応への関与が指摘されていたが，詳細は不明であった。本研究では末梢血単球分画を，４病期にわたり経時的に観察し，中間型単球の割合が症状進行群と心原性脳梗塞群で上昇していることを見いだした。さらに亜急性期において常在性単球と IL-17A との相関性を明らかにした。これまで脳梗塞後の末
梢性単球は機能的に不活化されると考えられてきたが，脳梗塞後の単球分画の変動を詳細に解析することにより，従来まで不明であった末梢単球の役割を明らかにした点で極めて- 2 -重要な研究結果と考えられる。
以上により，本論文は博士(医学)の学位を授与するに値するものと認められる。

（主論文公表誌）
PLoS One

Vol.8, No.8, 2013

- 3 -

とよ

た

田

いち

豊

本

籍

島

学 位 の 種 類

博士（医 学）

学 位 記 番 号

甲

第４３８号

学位授与の日付

平成２５年９月３０日

学位授与の要件

学位規則第４条第１項該当

学 位 論 文 題 目

MRI Reveals Edema in Larynx（But Not in Brain） During

根

一

ろう

氏名（生年月日）郎（昭和 57 年 3 月 26 日）

県Anaphylactic Hypotension in Anesthetized Rats
（麻酔下ラットにおけるアナフィラキシー低血圧時の脳と喉頭の MRI 所見）
論 文 審 査 委 員

主

査

三

輪

高

喜

副

査

石

橋

隆

治

土

田

英

昭

学位論文内容の要旨
研究目的
アナフィラキシーショックでは，しばしば血管透過性の亢進により局所間質の浮腫を伴う。臨床上，重要な所見の一つに喉頭浮腫があり，喉頭浮腫により窒息を引き起こし，致命的な状態を引き起こすこともある。対照的に，脳浮腫の発生は全身性アナ
フィラキシーにおいて問題視されることは少ない。その理由として，脳の血管が脳血液関門（BBB）を有しているため，浮腫の発生が起こりにくくなっている可能性が考えられる。しかしながら，不安，拍動性頭痛，めまい，混乱のような中枢神経系(CNS)の症状は，アナフィラキシーの患者においてしばしば認められる症状である。これらの
CNS の徴候は，低血圧に付随して起こるように考えられるが，脳傷害およびアナフィラ
キシーの直接影響によって引き起こされた浮腫との関連の可能性も考えられる。
脳浮腫はその病態機序として，主として血管性浮腫または細胞毒性浮腫の 2 つに分類される。核磁気共鳴映像法(MRI)は生体内の水素原子に関して，強力で敏感な生体内検査法である。それは，他臓器と同様，脳の含水量の変化を経時的に調べることができるためである。水の見かけの拡散係数(ADC)は細胞毒性浮腫の変化に敏感であり，T2
緩和時間(T2RT)は，血管性浮腫を検知することができる。しかしながら，全身性アナ
フィラキシー中に MRI で脳か喉頭の浮腫を検出できるかを検討した報告はない。そこで本研究では麻酔下のラットで，アナフィラキシーショック時の低血圧中に喉頭および脳に浮腫性変化が認められるかを，血管拡張剤によって引き起こされた低血圧状態と比較して，MRI を利用して検討を行なった。
実験方法
雄の SD ラットを，全身麻酔下にオブアルブミン抗原(n=7)投与によるアナフィラキ- 4 -シー状態の作成，ならびに血管拡張剤であるニトロプルシド・ナトリウム(SNP; n=7)の投与による低血圧状態とした。それぞれの状態の脳組織（両側の視床下部，基底核部，大脳皮質）および喉頭の浮腫状態を，MRI で ADC および T2RT の測定により評価した。測定は薬品投与前に 1 回，薬品投与後 68 分間に 4 回行った。さらに喉頭浮腫の存在は摘出標本による組織学的評価も用いて検討した。脳浮腫の発生の有無は，アナフィラキシー群(n=5)ならびに SNP 群(n=5)のラットおよび血圧正常のコントロール群(n=5)に対してそれぞれ湿乾重量法を使用し，脳含水量を測定することにより評価した。
また，脳内のアナフィラキシー反応の局在をトルイジンブルー染色による肥満細胞数ならびに脱顆粒の有無の観察により，形態学的に検討した。
実験成績
平均動脈圧は，アナフィラキシー群，SNP 投与群ともに 35mmHg まで減少した。抗原投与 13 分後には MRI において喉頭で T2RT の上昇が認められ，これを反映し，T2 強調
画像で喉頭に高信号が認められたが，SNP では信号の変化は認められなかった。組織学的検査でも，アナフィラキシー群のラットでは喉頭蓋の浮腫が認められた。一方，脳においては，T2RT または ADC の有意な変化は，研究されたいずれのラットの脳においても認められなかった。脳水分量の測定では，非低血圧状態のコントロール群と比較して，アナフィラキシーあるいは SNP 群のいずれも有意な差を認めなかった。また，
アナフィラキシー群と SNP 群の間で視床下部中の肥満細胞の数に有意な増加は認められず，視床下部でのアナフィラキシー反応の欠如が示唆された。
総括および結論
本研究の主な発見は，MRI でアナフィラキシー反応時に脳の中ではなく喉頭でのみ信号変化が観察されたこと，ならびに血管拡張剤によって引き起こされた低血圧中では喉頭，脳のいずれにおいても同様の浮腫性変化が生じなかったということである。
脳組織に関しては，湿乾重量法により浮腫の有無を検討したが，アナフィラキシー
群，SNP 投与群ともに有意な変化は認められず，MRI の所見に矛盾しなかった。このことから，アナフィラキシー反応時には喉頭で浮腫性変化が発生するが，脳では浮腫性変化は生じないことが示唆された。これは IgE 抗原の静脈注射により視床下部のアナフィラキシー反応を引き起こした犬での報告とは対照的な結果である。この違いは，研究対象の種差によるものかもしれず，また，異なる免疫反応経路の違いによるもの
かもしれない。
細胞毒性浮腫の発生に関しては，我々は以下のような発生機序を想定した。アナフィラキシー反応で生じた低血圧により，脳の低酸素血症および循環血流量の低下が引き起こされ，結果として脳浮腫や細胞障害に至る。この変化が ADC 値の減少として検出可能と想定した。しかしながら，ADC の変化も脳内において検出されなかった。この結果による細胞毒性浮腫の欠如の示唆は，血圧の低下量が不十分であった，または，
低酸素血症，低血流量状態の持続時間が不十分であった可能性が考えられる。平均動脈圧は薬剤投与後 10 分で 35mmHg まで減少したが，その後，70 分後には 67mmHg まで徐々に回復した。我々は，中大脳動脈の閉塞による重症の脳虚血と比較して，この一時的な低血圧状態が十分な脳損傷を引き起こすのに十分ではなかったと考えた。
- 5 -アナフィラキシーにおいて喉頭浮腫を MRI の高信号イメージとして検知することができるかもしれないことは，今回の実験で初めて報告したものである。この喉頭の変化は，形態学的に喉頭蓋の浮腫として確認された。MRI 上におけるこの喉頭での変化は，抗原注入後 13 分の段階で認められた。これは喉頭浮腫が抗原接触後 1 分で発生したと
いう臨床報告に一致する。さらに，血管透過性の増加はアナフィラキシー反応の初期に認められるという報告とも一致する。
論文審査結果の要旨
本研究は，ラットに対して卵白アルブミンを用いて作成したアナフィラキシーショ
ック時における喉頭の浮腫を，MRI 画像ならびに組織所見を用いて観察するとともに，その病態が血管性浮腫であることを証明したものである。
まず，研究者はアナフィラキシーショックによる血圧低下状態に対する対象として，
ニトロプルシド・ナトリウムを用いた血圧低下ラットを作成した。そして，アナフィ
ラキシーショックラットでは喉頭浮腫が生じるのに対して，ニトロプルシド投与動物
では喉頭浮腫が生じないことを，MRI 画像ならびに摘出喉頭の組織標本を用いて証明した。MRI 画像による評価に際しては，血管性浮腫を示す T2 緩和時間と細胞障害浮腫を示す水のみかけの拡散係数の両者を測定し，T2 緩和時間のみが上昇したことから，喉頭浮腫が細胞障害によるものではなく，血管性浮腫であることを証明した。MRI を用いてアナフィラキシーショックモデル動物の喉頭浮腫とその病態を観察した報告はこれまでなく，放射線学を専攻する研究者ならではの，新たな研究成果であるといえる。
また，同時に研究者は，アナフィラキシーショックモデル動物の脳の変化について
も MRI 画像，脳水分量測定および脳組織における肥満細胞と脱顆粒に関する組織学的観察という，3 通りの手法から検討しており，その結果，脳にはアナフィラキシーショックに伴う変化が生じないことも証明した。
アナフィラキシーショックは緊急の対応を要する重篤な疾患である。喉頭浮腫は気道閉塞から瞬く間に致死的な状況を招き，脳血流の低下はさまざまな症状を誘発するとともに生命にも危機をもたらす。実際の患者において，時々刻々の変化をリアルタイムにかつ客観的，多元的に評価を下すことは困難であり，多くの事実は症状改善後
あるいは不幸な転帰ののちに，類推することによりその病態を把握せざるを得ない。
事後には既にショック時の状態が消滅していることも少なくないためである。本研究では，モデル動物を用い，MRI 撮影を行うことにより，喉頭ならびに脳の変化をリアルタイムに観察することを可能とした。また，その結果を組織学的観察により裏付けている。本論文の結果は，アナフィラキシーショックの病態解明に貢献するとともに，実験手技としても応用が広がる可能性を高く有していることから，今後の研究に寄与するところ大と評価した。
以上により，本論文は博士（医学）の学位を授与するに値するものと認められる。

（主論文公表誌）
Allergy, Asthma & Immunology Research- 6 -Vol.5, No.6, 2013

あお

き

木

ひろ

青

本

籍

富

学 位 の 種 類

博士（医 学）

学 位 記 番 号

甲

第４３９号

学位授与の日付

平成２５年９月３０日

学位授与の要件

学位規則第４条第１項該当

学 位 論 文 題 目

Myocardial sympathetic innervation, function, and

山

洋

ふみ

氏名（生年月日）文（昭和 53 年 1 月 28 日）

県oxidative metabolism in non-infarcted myocardium inpatients with prior myocardial infarction（心筋梗塞患者における非梗塞心筋部位での交感神経機能，心機能，酸素代謝の関連について）
論 文 審 査 委 員

主

査

秋

田 利

明

副

査

芝

本 利

重

神

田 享

勉

学位論文内容の要旨
研究目的
心筋梗塞後の進行性の心拡大は心臓リモデリング現象としられ，心不全悪化の最大の要因であり，生命予後を悪化させる最大の要因でもある。心臓リモデリングは心筋梗塞部位のみならず，正常心筋すなわち非梗塞心筋にも起こることが知られている。細胞レベルでは心筋のサイズ・形状・機能が変化する。心筋梗塞後の心臓リモデリングを抑制する事は心不全症状や生命予後の改善に繋がる為，リモデリングが生じる非梗塞心筋の特徴を把握することは非常に重要であると言える。心筋梗塞部位の交感神経機能や収縮能，酸素代謝との関連を調べた報告は散見されるが，これまでの MIBG SPECT を用いた交感神経機能評価
では画質が荒い上に，核種が肝臓に集積するため近接する心臓下壁の評価が困難で非梗塞部位における研究はほとんど報告されてない。本研究の目的は，新しく開発された核種
C-11 hydroxyephedrine (以下 HED と略す) PET と C-11 acetate PET を用いて，心筋梗塞後の患者における非梗塞心筋の交感神経機能，収縮能，酸素代謝を評価し，これら指標と心臓リモデリングとの関連を評価する事である。
実験方法
心筋梗塞発症後の 10 日目以降の慢性期の患者で左室駆出率 50％未満の患者 19 名を対象とした。すべての症例で冠動脈カテーテル治療もしくはバイパス術による血行再建が行われた。心臓を AHA のガイドラインに沿って 17 分割に分け，梗塞部位の判定は SPECT による
心筋灌流ピーク値の 70％未満の領域とし評価の対象から外した。対象とした非梗塞部位は
平均 8.3±2.4 領域（2～12 領域）だった。交感神経機能の評価として HED retention を，
酸素代謝は 11-C acetate の活性低下を指数関数で近似した Kmono で評価した，収縮能には- 7 -

心 エ コ ー で の ス ペ ッ ク ル ト ラ ッ キ ン グ 法 を 用 い 長 軸 方 向 心 筋 ひ ず み (Longitudinalstrain: LS)を評価した。これら 3 つの検査は同一日に施行した。統計解析には SAS 社製
JMP8 または GraphPad Software 社製 GraphPad Prism5 を使用し，各指標の関係は 1 次直線回帰で解析した。2 標本間の平均値の差は，t 検定を使用，差の検定には Fisher の正確検定を使用し，危険率 0.05 未満を有意とした。
実験成績
非梗塞部位の心筋 HED retention は，
左室駆出率（LVEF）とは正の相関(傾き 0.57, p<0.05)を，LS と負の相関(傾き-0.56, p<0.05)と良好な相関関係を示した。酸素消費の指標である心筋 Kmono は Rate pressure product(RPP)と相関を認めたものの，HED retention(r =0.188, p=0.442)，LVEF(r =0.106, p=0.666)，LS(r =-0.256, p= 0.291)といずれも相関を認めなかった。左室収縮末期容積の中央値 41ml で２群に分けた場合，年齢，性別，RPPなどには有意差が無いが，41ml 以上の群では有意に HED retention，LS が低く，一方で Kmonoは２群間で有意差を認めなかった。
総括および結論
心筋梗塞後の非梗塞部位心筋では，交感神経機能は左室全体の心機能だけでなく，局所壁運動とも有意の相関を認めた。リモデリングを来した左室は交感神経機能や左室機能がリモデリングをきたしていない症例より有意に低下していた。局所酸素代謝においては交感神経機能より左室全体の心仕事量と関連があった。非梗塞部部位の交感神経機能の低下
は心臓リモデリング現象，局所壁運動と密接に関連していることが示唆された。
論文審査結果の要旨
本研究は，心筋梗塞患者の非梗塞部領域における交感神経機能と，左室全体の心機能，
局所心機能，局所酸素消費との関連性を見たものである。C11 HED retention で測定される心筋の局所交感神経機能は，心臓全体の心機能だけでなく非梗塞部位の心機能とも良好な相関関係を有した，左室リモデリングを来した症例では，非梗塞心筋領域の交感神経機能と局所心機能がリモデリングを来していない症例より有意に低下していた。酸素消費においては心臓全体の心筋仕事量と関連があったが交感神経機能とは相関がなかった。
従来のMIBG SPECTを用いた心臓の交感神経機能と心臓リモデリングの関係を評価した研究では，空間分解能が悪いため梗塞部位と非梗塞部位を区別して評価することが困難だった。本研究ではC-11 HED PETという新しい核種を用いて，心臓リモデリング症例において非梗塞部位においても交感神経機能と局所心機能が低下していることを初めて証明した画期的論文である。
以上により，本論文は博士(医学)の学位を授与するに値するものと認められる。

（主論文公表誌）
Annals of Nuclear Medicine

Vol.27, No.6, 2013

- 8 -

さい

とう

藤

りゅう

へい

氏名（生年月日）

齊

本

籍

埼

学 位 の 種 類

博士（医 学）

学 位 記 番 号

甲

第４４０号

学位授与の日付

平成２５年９月３０日

学位授与の要件

学位規則第４条第１項該当

学 位 論 文 題 目

Nutri-pharmacogenomics of warfarin anticoagulation

玉

竜

平

（昭和 52 年 2 月 20 日）

県

therapy: VKORC1 genotype-dependent influence of
dietary vitamin K intake（ワルファリン抗凝固療法の栄養薬理遺伝学：VKORC1 遺伝子型に基づいた経口ビタミンＫ摂取の影響について）
論 文 審 査 委 員

主

査

西

尾 眞

友

副

査

竹

上

勉

岡

崎 俊

朗

学位論文内容の要旨
研究目的
ワルファリンは現在最も広く用いられている抗凝固薬であるが，良好な治療効果を得るために必要な投与量には大きな個体差がある。ワルファリンの投与量に影響を与えるいく
つかの臨床的・遺伝的差異が同定されているが，経口ビタミン K 摂取に関連した遺伝子型と栄養の相互作用については明らかにされていない。より個人に適した実臨床を行なうた
め，本研究では安定した抗凝固療法中の日本人患者において，ワルファリンの代謝に関与する 2 つの酵素(VKORC1，CYP2C9)とビタミン K 摂取量の関連性，および両者の治療反応性に対する影響について把握することを目的に，すでに実際にワルファリン内服にて治療が行なわれている患者について，遺伝子型と治療反応性の関係にビタミン K 摂取量の影響を加味して検討した。
実験方法
ワルファリン抗凝固療法における遺伝子型と栄養の相互作用を調べるために，ワルファリンによる抗凝固療法が安定している 202 人(男/女＝142/60 人，平均年齢 69 歳)の外来
患者を逐次登録して対象とした。酵素遺伝子 VKORC1(rs9923231)と CYP2C9(rs1057910)の
高頻度一塩基多型(SNP)について PCR‐制限酵素を用いた遺伝子解析を行うとともに，栄養学的な裏付けを元に作成したアンケートにより，採血 1 週間前からの経口ビタミン K 摂取量を定量的に推定し，ビタミン K 低摂取量群，中摂取量群，高摂取量群に患者を群分けしてワルファリン投与量を集計し解析した。

- 9 -

実験成績

VKORC1 -1639 A/A 型の患者では，-1639 A/G 型の患者より有意に平均ワルファリン投与
量が少なかった(2.74 vs. 3.91 mg/ 日，p<0.0001)。他方 CYP2C9 *1/*3 型と CYP2C9*1/*1 型の患者ではワルファリン必要量に差はなかった。また，VKORC1 -1639 A/G 型の患者においては，ビタミン K 低摂取量群は，中ならびに高摂取量群に比べ有意にワルファリ
ン投与量が少なかった(3.4 vs. 5.0 vs. 4.0 mg/日，p=0.028)。VKORC1 -1639 A/A 型の患者ではこのようなビタミン K 摂取量による差違は見られなかった。
総括および結論
以上の結果から，安定した抗凝固療法中の患者において，経口ビタミン K 摂取が少なくともその一部，VKORC1 遺伝子型に依存してワルファリン必要量を規定することが示唆された。
論文審査結果の要旨
ワルファリン投与について，本邦でも遺伝子と治療反応性の関係について検討が行われた研究は散見される。本研究は，アンケートを行なうことによりこれまで明らかにされてこなかった環境因子(食生活)の影響を加味して検討を行なった画期的なものである。実臨
床において効果発現に個人差が大きく，薬効を推測するのに難渋するワルファリン投与において，薬効を規定する因子として遺伝子および食生活が重要であることを本研究は示唆し、この分野に新しい視点を提供するものである。対象患者の選定や栄養素摂取量を推定するためのアンケート方法に検討の余地はあるが，今後は，本研究で得られた結論を基に実臨床への介入を行ない，より安定した抗凝固療法を行なうための指標として確立することが望まれる。より個別化された実臨床を行なうためには遺伝子と環境因子についてのさらなる検討が必要であることを示唆した重要な研究である。
以上により，本論文は博士(医学)の学位を授与するに値するものと認められる。

（主論文公表誌）
Journal of Thrombosis and Thrombolysis- 10 -

Vol.38, No.1, 2014

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ン

テ ィ

グ エ ッ トアイン

氏名（生年月日）

Nguyen Thi Nguyet Anh

本

ベトナム社会主義共和国

籍（1984 年 11 月 17 日）

学 位 の 種 類

博士（医 学）

学 位 記 番 号

甲

第４４１号

学位授与の日付

平成２６年３月２７日

学位授与の要件

学位規則第４条第１項該当

学 位 論 文 題 目

Maternal risk factors associated with increased
dioxin concentrations in breast milk in a hot spotof dioxin contamination in Vietnam（ベトナムの高度ダイオキシン汚染地域における母乳中ダ
イオキシン濃度上昇に関連する母親のリスク要因について）論 文 審 査 委 員

主

査

山

田 裕

副

査

佐々木

洋

笹

之

川 寿

一

学位論文内容の要旨
研究目的
ベトナム戦争時，米軍により 4 千万リットル以上に及ぶ枯葉剤が旧南ベトナム一帯で散布され，未曾有のダイオキシン環境汚染が発生した。以来 40 年を経過する現在でも，旧米軍基地跡周辺などの高濃度汚染地域では，地中ダイオキシン濃度が非汚染地区の 2 倍，
周辺住民の母乳中ダイオキシン濃度が 4 倍であり，乳幼児の心身の発達に影響が及んでいることが明らかにされている。一方，ダイオキシンの体内吸収は 90%以上が食品に由来する。本研究では，ダイオキシン汚染地域住民での母乳ダイオキシン汚染の要因を明らかにすることを目的に，井戸水の摂取および特定の食品摂取との関係を解析した。
実験方法
ベトナムの高濃度ダイオキシン汚染地区の１つである旧米軍基地周辺地区に居住し，タンケ病院で出産した 159 人の母親を対象とした。出産 1 カ月後の母乳を 20 mL 採取し，特に毒性の強い 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD)をはじめとする７種の PCDD
（polychlorinated dibenzodioxin）類と 10 種の PCDF（polychlorinated dibenzofuran）
類化合物を HR-GC/MS（high-resolution mass spectrometer）で測定し，脂肪量当たり濃度と，WHO の毒性当量（Toxic Equvalent）で表した。
出産 4 カ月後と 12 カ月後に，対象者の年齢，居住歴，妊娠出産歴などの基本情報と，井戸水の摂取，ダイオキシン含有量の多い魚肉，畜肉などの摂取頻度をインタヴュー調査した。すべての調査が行い得た 140 人を解析対象とした。

- 11 -

実験成績
対象者の食品摂取頻度データの因子分析によって 3 種類の食生活パターンを導いた。母
体情報，食品摂取頻度，そして食生活パターンと母乳中ダイオキシン濃度との関係を一般
化線形モデルを用いて解析し，以下の成績を得た。
１．対象者および食生活習慣の概要
対象者平均年齢 28.4 歳，汚染地居住年数は平均 17.8 年で，34.1％が主婦。27.5％が初産婦で，喫煙者はなく，15.2%が飲酒する。豚肉と牛肉の摂取頻度はそれぞれ週平均
3.3 回と 3.1 回，鶏肉は 0.5 回である。淡水魚の摂取は週 0.6 回だが，海水魚は 8.3 回とほぼ毎日摂取する。乳製品の摂取頻度は低く，ミルクが週平均 2.3 杯，チーズやバター摂取は 0.4 回。他に，卵摂取は鶏が週 2 回，アヒル 1.4 回，ウズラ 2.5 回であった。
２．母体要因と母乳中ダイオキシン濃度の関係
対象者の年齢は TetraCDD を含む 7 種の CDD すべてと 2 種の CDF に相関し，特にPentaCDD，HexaCDD と OctaCDD 濃度での寄与率が 10%を超えて大きかった。居住年数も7 種の CDD すべてに加え，8 種の CDF と相関し，特に Tetra 及び PentaCDD，HexaCDD，
TetraCDF，PentaCDF，HexaCDF 濃度への寄与率が大きかった。出産歴は TetraCDD を含む 4 種の CDD と 1 種の CDF と相関し，PentaCDD と PentaCDF 濃度への寄与率が大きかった。
３．食品摂取頻度と母乳中ダイオキシン濃度の関係
井戸水を摂取する者で，TetraCDD 以外のいくつかのダイオキシン類化合物が，摂取しない者に比べて有意の高濃度を示した。しかし，その寄与率は大きくはなかった。
特定食品の摂取頻度と母乳中ダイオキシンの関係を，年齢，居住歴，出産歴を補正して検討した。畜肉の摂取頻度は TetraCDD 以外の多くのダイオキシン類の母乳中濃度と相関し，特に週 6 回以上摂取する者では，まったく摂取しない者よりも 2～3 倍高い濃度を示した。淡水魚を摂取する者で TetraCDD 以外のダイオキシン類の母乳中濃度が，摂取しない者よりも有意に低い一方，海水性のエビやカニを摂取する者では，しない者に比べ，有意に高かったが，それらの寄与率も大きいものではなかった。
４．食生活パターンと母乳中ダイオキシン濃度の関係
因子分析の結果，食生活は 3 つのパターンに区分された。畜肉・魚肉パターンでは，
高魚肉/低畜肉群の母乳中 PentaCDD 濃度が，高畜肉，低畜肉，および高魚・蓄肉の 3 群よりも低かったが，その寄与率は大きいものではない。淡水魚・海水魚パターンでは，
高淡水魚摂取群の TetraCDD 以外のいくつかのダイオキシン類の母乳中濃度が，低淡水魚摂取群や高海水魚摂取群よりも有意に低かったが，その寄与率はやはり大きくなかった。異なる種類の卵摂取のパターンでは，TetraCDD 以外の数種の母乳中ダイオキシン
類濃度が，ウズラ卵優位摂取群で鶏卵優位摂取群や低卵摂取群に比して高値を示したが，その寄与率も大きいものではなかった。
総括および結論
ダイオキシン高濃度汚染地区住民の母乳中の，毒性がもっとも高い TetraCDD を含むダ
イオキシン類濃度は，汚染地での居住年数にもっとも強く関連した。井戸水の摂取，海水性エビ，カニやウズラ卵など特定の食品の摂取が，TetraCDD を除くいくつかのダイオキ- 12 -

シン類化合物の母乳中濃度上昇に影響をあたえる可能性も示唆されたが，その寄与率は大きいものではない。以上の結果から，次世代のダイオキシン暴露の低減のためには，個々の食品の除去よりも，汚染地全体からのダイオキシン除去がより重要であると考えられた。
論文審査結果の要旨
1962～1970 年の米軍の枯葉剤散布によって引き起こされた環境ダイオキシン汚染により，ベトナムでは，現在でも深刻な人体・健康影響が存在することが先行研究で明らかにされている。本研究は，環境ダイオキシン汚染の影響を一層詳らかにする研究の一環として，母乳中ダイオキシン汚染の原因としての食品摂取内容，頻度の意義を明らかにすることを目的に，ダイオキシン高濃度汚染地区の母親 140 人での母乳中ダイオキシン濃度と，井戸水を含むダイオキシン含有の可能性が高い食品摂取との関係を解析したものである。
その結果，毒性が強い TetraCDD を含むダイオキシン類の母乳中濃度は，汚染地居住年数にもっとも強く関連し，一方，井戸水摂取や，海水性エビやカニ，ウズラ卵など特定の食品の摂取が，TetraCDD を除くいくつかのダイオキシン類化合物の濃度上昇に影響を与えている可能性が示唆されたが，その寄与率はあまり大きいものではなかった。したがって，次世代のダイオキシン暴露の低減のためには，特定の食品の除去よりも，汚染地全体からのダイオキシン除去がより重要であると考えられた。
以上，本研究の目的は明瞭で，意義も大きく，結果も興味深く，信憑性があり，考察も論理的である。枯葉剤散布後 40 年以上経過した現在においても，ベトナムの環境ダイオキシン汚染の人体・健康影響は重要であり，さらなる暴露リスク因子についての検討が必要であることを示した本研究は，環境科学，環境医学・毒性学の発展に資するところきわめて大と評価される。
以上により，本論文は博士(医学)の学位を授与するに値するものと認められる。

（主論文公表誌）
Journal of Exposure Science and Environmental Epidemiology- 13 -

Vol.24, No.5, 2014

の

むら

村

とも

友

え

氏名（生年月日）

野

本

籍

岐

学 位 の 種 類

博士（医 学）

学 位 記 番 号

甲

第４４２号

学位授与の日付

平成２６年３月２７日

学位授与の要件

学位規則第４条第１項該当

学 位 論 文 題 目

Influence of HRH2 promoter polymorphism on aberrant阜映（昭和 57 年 12 月 9 日）

県

DNA methylation of DAPK and CDH1 in the gastricepithelium（HRH2 プロモーターの多型が胃粘膜の DAPK と CDH1 の異常メチル化に及ぼす影響）論 文 審 査 委 員

主

査

梶

波 康

二

副

査

竹

上

勉

小

坂 健

夫

学位論文内容の要旨
研究目的
ヒスタミン受容体 H2 は胃酸分泌の機序に中心的な役割を持っているが，これをコードする HRH2 のプロモーター領域に存在する遺伝子多型と消化器疾患との関係については検討がなされていない。また遺伝子のメチル化が種々の病態に関わるとの指摘がなされているが，胃粘膜では，Death-associated protein kinase (DAPK) や E-cadherin (CDH1)などの遺伝子において，加齢，H.pylori による炎症，胃炎の程度，胃癌に関連してメチル化が認められると報告されている。今回は HRH２のプロモーター多型が DAPK，CDH1 のメチル化に及ぼす影響につき臨床的に検討した。
実験方法
上部消化管内視鏡を行い，文書で同意が得られた胃癌患者 115 例と非胃癌者 412 例を対象とした。胃潰瘍･十二指腸潰瘍例は除外した。すべての被験者の非癌部より胃粘膜のサンプルを生検により採取した。また胃癌患者では癌部からもサンプルを得た。メチル化はMSP 法で，HRH2 プロモーター多型（rs2607474）は PCR-SSCP で評価した。
非胃癌者のうち 296 例について，病理医が改訂版シドニーシステムに基づき胃粘膜萎縮と腸上皮化生のスコアを付けた。H.pylori 感染については血清学的，病理学的，尿素呼気試験のいずれかが陽性であれば感染ありとした。
実験成績

DAPK と CDH1 のメチル化は 527 例中それぞれ 296 例，246 例で認められた。非胃癌者- 14 -

412 例中，DAPK は 201 例で，CDH1 は 150 例でメチル化が検出されたのに対し，胃癌患者115 例では DAPK は 95 例，CDH1 は 96 例でメチル化が検出され，胃癌患者は非胃癌者に比べてメチル化の頻度が有意に高かった（ともに p＜0.0001）。しかし胃癌患者の非癌部胃粘膜と癌部でのメチル化頻度を比較すると，DAPK では有意差がなく，CDH1 では非癌部の方が癌部よりも多くメチル化を認めた。
rs2607474 遺伝子型は，527 例中 GG401 例，GA119 例，AA7 例であった。rs2607474 遺伝
子型 GG ホモ接合は，DAPK･CDH1 両者のメチル化の有意なリスクであった（p＜0.0001 ,p＝0.0009）。非胃癌者と 60 歳以上の高齢者では，GG ホモ接合は DAPK･CDH1 のメチル化とより密接に関係していた。しかし胃癌患者では，GG ホモ接合が DAPK･CDH1 のメチル化のリスクとは言えなかった。H.pylori 感染の有無別では，感染を認めない例では，GG ホモ
接合は DAPK･CDH1 両者のメチル化のリスクであった (p＝0.0074 ,

p＝0.0016)が，感染を認める例では，DAPK のみのメチル化リスクであった(p＝0.0018)。
さらに 60 歳以上の高齢者では，GG ホモ接合は粘膜萎縮および化生のスコアが有意に高かった(p＝0.011 , p＝0.039)。
総括および結論

HRH2 プロモーター（rs2607474）遺伝子型 GG は，年齢に相関した胃粘膜委縮の進行に関係し，また DAPK と CDH1 のメチル化の頻度を有意に上昇させ，60 歳以上の高齢者ではその傾向はさらに顕著となった。胃癌患者では非胃癌者に比べメチル化の頻度が有意に高かったが，癌部と非癌部でのメチル化頻度は，DAPK では差がなく CDH1 では非癌部が高い結果であり，更なる検討が必要と考えられた。
論文審査結果の要旨
本研究は，代表的な胃粘膜病変である胃癌と，胃発癌の背景である胃粘膜萎縮を対象に，その病態に強く関与が想定されるヒスタミン受容体 H2 の役割について，その遺伝子 HRH2
プロモーター領域に存在する高頻度多型を検討し，年齢，ヘリコバクターピロリ感染の有無，といった患者背景との相互関係の解明を目指した genetic association study である。
本研究では胃酸分泌に関与する HRH2 遺伝子プロモーター多型が，胃癌に関わる遺伝子

DAPK と CDH1 のメチル化に影響を及ぼし，さらに胃粘膜萎縮の進行に関係することを明らかにし，胃癌予防や新規治療法開発の可能性を示唆した。
日常診療で高頻度に遭遇する疾患の多数例を対象とし，確立された遺伝子解析技術を用いることで，従来は推測の域にとどまっていた遺伝子メチル化の観点から病態にアプロー
チし新知見を得た点で画期的研究であると評価される。
以上により，本論文は博士(医学)の学位を授与するに値するものと認められる。

（主論文公表誌）
BMC Gastroenterology Vol.13, No.1, 2013- 15 -

やま

だ

田

ひで

山

本

籍

愛

学 位 の 種 類

博士（医 学）

学 位 記 番 号

甲

第４４３号

学位授与の日付

平成２６年３月２７日

学位授与の要件

学位規則第４条第１項該当

学 位 論 文 題 目

Effects of -1018G>A Polymorphism of HRH2 (rs2607474)

知

英

と

氏名（生年月日）登（昭和 47 年 10 月 29 日）

県

on the Severity of Gastric Mucosal Atrophy（胃粘膜萎縮の程度に対する HRH2 -1018G>A (rs2607474)
遺伝子多型の影響）
論 文 審 査 委 員

主

査

古

家 大

祐

副

査

岩

淵 邦

芳

梶

波 康

二

学位論文内容の要旨
研究目的
ヒ ス タ ミ ン は H2 受 容 体 に 作 用 し 胃 酸 分 泌 を 亢 進 さ せ る 一 方 で ， Helicobacter

pylori(HP)感染による胃粘膜の炎症や組織損傷を増悪させる。したがって，HRH2 プロモーターのエンハンサー領域に位置する rs2067474 遺伝子多型は，H2 受容体の発現調節を介して胃粘膜萎縮の程度に影響する可能性がある。そこで，本研究では，rs2067474 遺伝
子多型と組織学的な胃粘膜萎縮とその指標であるペプシノーゲン(PG)Ⅰ/Ⅱ比との関連を
検討した。
実験方法
腫瘍性病変や消化性潰瘍を有さない 398 人を対象に上部消化管内視鏡検査を施行し，うち 366 例では前庭部粘膜より生検組織を得た。生検標本の一部は 10％の緩衝ホルマリンで固定，パラフィンに包埋し，他は-80℃で凍結保存した。HP 感染は，血清学的検査，組織学的検査，尿素呼気試験のうち，1 項目が陽性であれば，陽性とした。生検標本または血液から分離した DNA を用い，PCR-SSCP 法で遺伝子型を決定した。組織学的評価は，改訂シドニーシステムに基づき，非萎縮群（非 SA：萎縮スコア≤ 1 かつ化生スコアは=0）と萎縮群（SA：萎縮スコア≥ 2 または化生スコア≥ 1）に分類した。胃粘膜萎縮の程度に応じて減少するペプシノーゲン(PG)Ⅰ/Ⅱ比を血清学的マーカーとして使用した。アレル数
はフィッシャーの正確確立検定により比較した。遺伝子型と胃粘膜萎縮との関連性は，ロジステック回帰分析によりオッズ比と 95%信頼区間を算出し評価した。非萎縮群と萎縮群の PGⅠ/Ⅱ比はマンホイットニーU 検定で比較した。年齢と PGⅠ/Ⅱ比との関係は ANOVA
により評価した。有意水準 p <0.05 を有意とした。

- 16 -

実験成績
被験者398人のうち，rs2067474遺伝子型はGGが306人，GAが88人，AAが4人であり，ハーディ·ワインベルグ平衡を満たしていた（P =0.77）。SA群の男性比，HP陽性率は，非SA群よりも有意に高値であった。rs2067474遺伝子型の分布は，非SA群ではGGが194人，GAが63
人 ， AA が 3 人 だ っ た の に 対 し ， SA 群 で は GG が 89 人 ， GA が 17 人 ， AA が 0 人 で あ っ た 。
rs2067474のマイナーアレル頻度は，SA群で8.02％，非SA群で13.3％であり（P=0.057），
GG型の頻度は，SA群で高値の傾向を認めた（p=0.055）。
年齢，性別，HP感染の有無を調整したロジスティック回帰分析では，GGでは胃粘膜萎縮のリスクが有意に増加していた(OR,2.03;95%CI,1.03-4.01)。 HP陰性者では遺伝子型分布の有意な偏差が認められなかったのに対し，HP陽性者ではGGでは胃粘膜萎縮のリスクが増加していた(OR,2.32;95%CI,1.12-4.81)。また，GGでは60才以上でも胃粘膜萎縮のリスクが増加していた(OR,2.63;95%CI,1.15-6.00)。PG Ⅰ/Ⅱ比は，Aアレル保有者のHP陰性者とHP陽性者では有意差は認めなかったが，GGではHP陽性者はHP陰性者よりも有意に低値であった。また，Aアレル保有者では年齢とPGⅠ/Ⅱ比に有意な相関がなかったのに対し，GGでは血清PG Ⅰ/Ⅱ比は加齢に伴い有意な減少を認めた。
総括および結論
rs2067474GGホモ接合体ではヒスタミンH2作用がより強く発現する結果，胃粘膜萎縮が高度に進展する可能性が示唆された。
論文審査結果の要旨
本研究は，胃粘膜萎縮を対象に，ヒスタミン受容体 H2 の遺伝子 HRH2 プロモーター領域に存在する rs2067474 遺伝子多型のジェノタイピング後，胃粘膜萎縮とその指標であるペプシノーゲン(PG)Ⅰ/Ⅱ比と rs2067474 遺伝子多型との関連を検討した。さらに，年齢，
ヘリコバクターピロリ感染の有無との関係の解明を目指した研究である。
本研究では胃酸分泌に関与する HRH2 遺伝子プロモーターrs2067474GG ホモ接合体が，ヘリコバクターピロリに感染した患者と高齢者において，胃粘膜萎縮の重症度に関係することを明らかにした世界でも初めての報告である。
超高齢化社会に突入しかけている我が国において，今後，増加の一途を辿る胃粘膜萎縮とその重症度を，遺伝子変異解析によって診断できることを明らかにした点でオーダーメード医療に繋がる研究であると評価される。
以上により，本論文は博士（医学）の学位を授与するに値すると認められた。

（主論文公表誌）
Journal of Gastrointestinal and Liver Diseases Vol. 21, No.2, 2012- 17 -

いり

たに

谷

おさむ

氏名（生年月日）

入

本

籍

北

学 位 の 種 類

博士（医 学）

学 位 記 番 号

甲

第４４４号

学位授与の日付

平成２６年３月２７日

学位授与の要件

学位規則第４条第１項該当

学 位 論 文 題 目

Association between blood pressure and disability-free

海敦（昭和 53 年 2 月 21 日）

道survival among community-dwelling elderly patients
receiving antihypertensive treatment（降圧薬治療中の地域在住高齢者における高血圧到達値と自立生活維持との関連）
論 文 審 査 委 員

主

査

小

林 淳

ニ

副

査

西

尾 眞

友

森

河 裕

子

学位論文内容の要旨
研究目的
60 歳以上の高齢者高血圧例における 8 件の大規模介入試験のメタ解析，60 歳以上の高齢者に限定した近年の多くの臨床試験，および 80 歳以上の高齢者高血圧例を対象とした
HYVET 試験で，高齢者といえども降圧薬治療により脳心血管疾患の発症率・死亡率を有意に減少させうることが明らかとなった。一方，脳心血管病変を有する高齢者高血圧例における脳心血管疾患の発症率・死亡率に対し到達収縮期血圧（SBP），拡張期血圧（DBP）および，その双方において，J 型現象が認められることが報告されている。また，高血圧は高齢者の生活機能の低下にも関係していることも知られている。我が国においては，生活機能の低下した障害高齢者に対しては要支援・要介護認定が行われ，介護サービスが提供される。しかし，地域在住の高齢者高血圧例における自立生活維持と到達血圧との関連性を検証した研究はない。そこで，降圧薬治療下血圧値と要支援・要介護認定，死亡リスクとの関連性につき検討した。
実験方法
U 町を対象地域とした。2008 年 4 月，地域在住の 65 歳以上の要支援・要介護認定を受けていない 4,050 例の高齢者のうち，1,091 例が健康診査を受診し，このうち 62.6％（n= 683）の高齢者は，血圧 140/90 mmHg 以上または降圧薬治療中の高血圧例であった。これらのうち，84.8%（n = 579）は降圧薬治療を受けていた。本研究の 4 年間のエンドポイ
ントは，初回要支援・要介護認定および死亡とした。また認定時の主治医意見書の主病名から認定原因疾患を脳障害，転倒・骨折，認知症・うつ，その他の疾患の 4 群に分類した。

- 18 -

SBP および DBP は，それぞれ 4 群に分類した（SBP: <120，120～139，140～159， ≥160
mmHg； DBP: <70，70～79，80～89，≥90 mmHg）。初回要支援・要介護認定または死亡への未調整ハザード比（HR）および 95％信頼区間（CI）を推定するために，Cox 比例ハザー
ド回帰分析を用いた。年齢，性，および同検定にて P<0.20 を与える全ての因子を交絡因子とした。SBP: 140～159 mmHg 群および DBP: 70～79 mmHg 群を対照群とし，他血圧群におけるエンドポイント発生の HR および 95% CI を算出した。
実験成績
降圧薬治療を受けた 579 例のうち，転出した 9 例を除外した 570 例（男性 225 例，女性
345 例）を対象とした。年齢は 74.2±6.1 歳（65～94 歳）であった。4 年間の全イベント（初回要支援・要介護認定または死亡）の発生率は SBP: 140～159mmHg の群で底値を示し，
この群と比較して，SBP: 120 mmHg 未満の群(HR=2.81，95% CI=1.15-6.82，P=0.023)，および 160 mmHg 以上の群 (HR=4.32，95% CI=1.90-9.83，P<0.001)で 2 峰性に有意に高かった。また，4 年間の初回要支援・要介護認定の発生率も SBP が 120 mmHg 未満の群
(HR=3.37，95% CI=1.18-9.60，P=0.023)，および，160 mmHg 以上の群 (HR=4.09，95%
CI=1.03-8.16，P=0.043)において 2 峰性に，有意に高率であった。これら全イベントおよび初回要支援・要介護認定における J 型現象は，75 歳以上例で認められたが，75 歳未満
例では認められなかった。死亡に関しては，SBP が 160 mmHg 以上の群 (HR=6.10，95%
CI=1.33-19.5，P=0.017)で有意に高率であった。認定原因疾患としては，脳障害の発生が
SBP 120 mmHg 未満群(HR=27.3，95% CI=1.09-684，P=0.044)で有意に高率で，転倒・骨折の発生は SBP 160 mmHg 以上の群(HR=25.0，95% CI=1.61-388，P=0.021)で有意に高率であった。
総括および結論
本研究では，地域在住高齢者高血圧例において，脳心血管疾患の発症・死亡のみならず，地域における自立生活の終焉となる要支援・要介護認定および死亡の発生に，降圧薬治療
下収縮期血圧に依存した J 型現象が認められることを初めて明らかにし，高齢者，特に後期高齢者における過降圧および降圧不良は，ともに生活機能の低下に繋がる可能性を示唆した。本研究の限界としては，観察研究で介入試験ではないこと，単一地域モデルである
こと，降圧薬の種別が調査されていないことなどが挙げられ，今後さらに検討が必要と考えられる。
論文審査結果の要旨
本研究は U 町地区の高齢者高血圧患者を対象とし，要支援・要介護認定および死亡をエンドポイントとして降圧薬による血圧をどの程度に保つのがもっとも適切かを明らかにした前向き研究である。その結果，７５歳以上の高齢者において収縮期血圧を 140ｍｍHg 以
上 160ｍｍHg 未満に保つと上記イベントが最も少なく，一方で 160mmHg 以上の群，
120mmHg 未満の群いづれにおいても上記エンドポイントが有意に高いことを，年齢，性，慢性腎臓病，糖尿病，低アルブミン血症，高尿酸血症，脳卒中既往歴，心疾患既往歴で補- 19 -

正した Cox 比例ハザードモデルで解析し明らかにした。過去に高齢者高血圧例を対象として脳心血管疾患発症率と血圧との間に J カーブ現象を認めるとの報告はいくつかあるが，高齢者の日常生活動作（ADL）に直接関連する要支援・要介護認定をエンドポイントとした研究はなく独創性のある研究と評価できる。研究対象症例 570 名と多く 4 年間の追跡率も 98.4％と非常に高く質の高い研究である。高齢者高血圧を治療するにあたっての適切な降圧レベルの指標を明らかにした点で日常診療に極めて有益なメッセージを与える研究である。
以上により，本論文は博士(医学)の学位を授与するに値するものと認められる。

（主論文公表誌）
Hypertension Research

Vol.37, No.8, 2014

- 20 -たなべ

かん

氏名（生年月日）

田

辺

寛

本

籍

神

奈

学 位 の 種 類

博士（医 学）

学 位 記 番 号

甲

第４４５号

学位授与の日付

平成２６年３月２７日

学位授与の要件

学位規則第４条第１項該当

学 位 論 文 題 目

Increased levels of the oxidative stress marker,

川（昭和 52 年 4 月 2 日）

県

nitrotyrosine in patients with provocation test-induced
coronary vasospasm（アセチルコリン負荷試験により冠攣縮が誘発した患者において，酸化ストレスマーカーであるニトロチロシンが上昇する）
論 文 審 査 委 員

主

査

土

田 英

昭

副

査

森

本 茂

人

倉

田 康

孝

学位論文内容の要旨
研究目的
冠攣縮性狭心症は，冠動脈の攣縮すなわち冠攣縮によって一時的に冠血流が途絶状態に陥り，一過性心筋虚血を生じる症候群で，しばしば心筋梗塞や突然死の原因となる。この冠攣縮の病因は様々であるが，酸化ストレスの過剰産生による血管内皮機能障害がその一因であると考えられている。しかし，血液中の酸化ストレスのバイオマーカーが，冠攣縮後に変化するかどうかはこれまで明らかにされていない。申請者らは，冠攣縮によって生じる一過性心筋虚血を鋭敏に検出できる酸化ストレスのバイオマーカーとして 4‐ヒドロ
キシノネナール（HNE）とニトロチロシン（NT）に注目し，アセチルコリン負荷試験によって誘発された冠攣縮後の HNE と NT 濃度の変化を経時的に検討した。
実験方法
安静時胸痛を主訴とし，冠攣縮性狭心症が疑われた患者に対して，少なくとも検査 24
時間前に血管拡張薬を中止したうえで，冠動脈造影を施行した。冠動脈造影で冠動脈に器
質的有意狭窄を認めなかった 30 人を研究対象とした。冠動脈内にアセチルコリンを注入し，冠攣縮誘発の有無を冠動脈造影で評価した。誘発試験後，ニトログリセリンで寛快する一過性の冠動脈閉塞もしくは 90％を越える冠動脈狭窄を認めた患者を冠攣縮陽性と定義した。誘発試験の結果，対象患者を冠攣縮陽性群（n=14），冠攣縮陰性群（n=16）に分けた。誘発試験前，誘発試験 15 分後，3 時間後，12 時間後に採血を行い，血清分離後，測定まで－80℃で保存した。各サンプルの HNE と NH 濃度は，時間分解蛍光イムノアッセ- 21 -

イ法によって測定した。
実験成績
患者背景において，年齢，性別，冠危険因子（高血圧，高脂血症，糖尿病，喫煙）保有率に両群間で差を認めなかった。入院前に硝酸薬もしくはカルシウム拮抗薬を内服していた患者数は，冠攣縮陽性群で有意に多かった（P=0.007）。誘発試験前後の血圧，心拍数にも両群間で差はなかった。
誘発試験前の血清 HNE 濃度に両群間で差を認めなかったが，血清 NT 濃度は冠攣縮陰性群が陽性群よりも高値であった（P=0.008）。誘発試験後，血清 HNE 濃度は両群とも有意な変化を示さなかったが，血清 NT 濃度は冠攣縮陽性群において，誘発試験前（8.1±3.2μg/mL）と比較し 3 時間後（11.3±3.3μg/mL，P=0.015），12 時間後（12.1±5.7μg/mL，

P=0.03）に増加した。一方，冠攣縮陰性群において血清 NT 濃度は，誘発試験前と比較して誘発試験後に減少した。
誘発試験前の血清 NT 濃度に及ぼす入院前の薬剤の影響を検討したところ，硝酸薬もし
くはカルシウム拮抗薬を内服していた患者における誘発試験前の血清 NT 濃度（8.1±3.2
μg/mL）は，内服していない患者（11.3±3.3μg/mL）と比べて低値であった（P=0.02）。
総括および結論
アセチルコリン負荷試験によって誘発された冠攣縮後，血清 NT 濃度は有意に増加した。
このことから，血清 NT 濃度は一過性心筋虚血のバイオマーカーとなり得る可能性がある。
また，血清 NT 濃度は硝酸薬もしくはカルシウム拮抗薬服用患者で減少していることが明らかとなった。NT を発生させる peroxynitrite は冠攣縮を引き起こす一因であり，冠攣
縮後も血清 NT 濃度の増加が持続することから，冠攣縮性狭心症の増悪に関与する可能性もある。
論文審査結果の要旨
現在，心筋梗塞の診断には心電図や心エコー図，血清 CK-MB 濃度や血中トロポニン T 濃度などが使われている。しかし，短時間の心筋虚血を心電図や心エコー図で捉えるのは難
しく，心筋に傷害が起こらない限り，CK-MB 濃度やトロポニン T 濃度も上昇しない。胸痛が起きたときに，それが心筋虚血によるものかどうかを後から血清学的に判断できるツールがあれば，診断学上，極めて価値が高いことは疑う余地がない。このような背景のもとに，本研究は施行されている。
申請者らは，4‐ヒドロキシノネナール（HNE）とニトロチロシン（NT）という酸化スト
レスのバイオマーカーに注目し，これらの血清濃度が一過性心筋虚血の代表である冠攣縮
の前後でどのような変化を示すかを検討した。対象患者は冠攣縮性狭心症が疑われて冠動
脈造影が施行され，冠動脈に器質的な病変の無かった 30 名である。冠拡張薬であるカル
シウム拮抗薬や硝酸薬は，検査 24 時間以上前に止められている。アセチルコリンの冠動
脈内注入により冠攣縮を誘発したところ，14 名では冠動脈の攣縮（90％超の狭窄）が起こり（冠攣縮陽性群），16 名では冠動脈攣縮が起こらなかった（冠攣縮陰性群）。冠攣縮- 22 -

陽性群では，攣縮出現 1 分以内に冠動脈内へニトログリセリンを注入し，攣縮を解除した。
血液サンプルは冠攣縮誘発前，誘発 15 分後，3 時間後，12 時間後に採取され，血清分離後，時間分解蛍光イムノアッセイ法によって HNE と NT 濃度が測定された。その結果，血清 HNE 濃度は全経過を通じて有意な変化を示さなかった。一方，血清 NT 濃度には両群間で有意差が認められた。冠攣縮誘発前の血清 NT 濃度は，冠攣縮陽性群と比較し，陰性群で有意に高値であった。その理由を申請者は，活性酸素を減少させる効果がある冠拡張薬の作用ではないかと推察した。なぜなら，冠攣縮陽性群のほうが検査前に冠拡張薬を服用していた患者が多く，検査前に冠拡張薬を服用していた患者と服用していなかった患者とで比較したところ，冠拡張薬服用患者で血清 NT 濃度が有意に低かったからである。また，
冠攣縮陽性群では誘発 3 時間後から血清 NT 濃度が上昇したのに対し，陰性群では誘発 15
分後から逆に低下した。この原因として申請者は，冠攣縮陽性群では虚血によって産生された peroxynitrite が血清 NT 濃度を上昇させたのに対し，冠攣縮陰性群ではアセチルコ
リンによって冠動脈が拡張したためではないか，と推察した。
審査委員からは，短時間の虚血により血清 NT 濃度が上昇する理由に対する質問が出され，上昇した peroxynitrite によって eNOS の uncoupling が起きた可能性，冠攣縮陽性群
では遺伝子多型により eNOS の uncoupling が起こりやすい状態にあった可能性等も考えられると回答した。その他，虚血誘発前の血清 NT 濃度の差異，攣縮解除のために投与したニトログリセリンの影響，採血部位の影響等に対する質問が出されたが，いずれも適切に回答した。
本研究は，心筋には傷害の起こらない短時間の心筋虚血を，虚血後数時間を経て血清学的に診断できる可能性を示した重要な知見であると審査委員会では評価した。
以上により，本論文は博士(医学)の学位を授与するに値するものと認められる。

（主論文公表誌）
Journal of Cardiology Vol.64, No.2, 2014

- 23 -

み

た

田

のり

三

本

籍

石

学 位 の 種 類

博士（医 学）

学 位 記 番 号

甲

第４４６号

学位授与の日付

平成２６年３月２７日

学位授与の要件

学位規則第４条第１項該当

学 位 論 文 題 目

Change in retinal image contrast with age in eyes

川

哲

ひろ

氏名（生年月日）大（昭和 54 年 5 月 22 日）

県with transparent lenses（透明水晶体眼における網膜像コントラストの加齢変化）論 文 審 査 委 員

主

査

森

本 茂

人

副

査

米

倉 秀

人

本

多 隆

文

学位論文内容の要旨
研究目的
見え方の程度を知る最も代表的な方法は視力検査であるが, これは被検者自身が応答す
る自覚的な検査である。この手法では被検者の応答によって結果が異なるのみならず, 視標であるランドルト環の切れ目の方向さえ分かれば正答してしまうため, 同じ視力値であっても実際の見え方には大きさ差がある。見え方を正確に把握するためには被検者の応答の影響を受けない客観的な評価が必要であるが, これまでは眼科臨床において, そのような検査法はなかった。網膜像コントラストとは点光源を網膜に反射させることによって得られた情報から網膜上に映る像を客観的に把握するものである。網膜像コントラストには高次収差と前方散乱(網膜に向かう散乱)・後方散乱(水晶体から角膜側への散乱)が影響する可能性があるが, 臨床例でその関係を明らかにした研究はない。高次収差とは水晶体の形状や屈折率の変化によって生じた, 眼鏡レンズでは矯正出来ない「歪み」であり, 高次
収差が大きいほど網膜に投影される像は不鮮明になる。白内障のない透明水晶体眼における網膜像コントラストの加齢変化を検討することにより, 視機能の加齢変化を客観的に捉えることが可能になるとともに, 白内障眼の手術適応の判定や眼内レンズ挿入眼の視機能を評価上で重要な基礎データになると考えられる。また, 高次収差および後方散乱と網膜
像コントラストの関係についても, 併せて検討した。
実験方法
対象は遠見矯正視力(logMAR)が 0 以上（小数視力で 1.0 以上）の透明水晶体眼 269 例
269 眼(平均年齢 39.7±7.7 歳, 全て右眼)とし, 屈折異常以外の眼疾患を有する症例は除外した。網膜像コントラストは PSF アナライザー（PSF— 1000, トプコン)を使用し入射瞳
3 mm にて低周波数, 中間周波数, 高周波数領域について測定した。高次収差は Wave

- 24 -

Front Analzer (9000PW, トプコン)で測定し, 入射瞳 4 mm における全高次収差を測定した。水晶体透明度指数 (Lens Transparency Property：LTP) は水晶体全体の透明度を定量化した指数であり, 前眼部解析装置 (EAS-1000, ニデック) で撮影したスリット画像から前嚢 (A), 前成人核 (B), 中心間層 (C)の後方散乱光強度および前嚢から前成人核(LAB), 前嚢から中心間層(LAC)までの光学距離を計測し, 既報式：LTP = A + B×LAB + C +LAC にて算出した。これらの測定はミドリン P 点眼により 6.5mm 以上散瞳した状態で, 暗室にて測定した。
実験成績
対象者は 20 歳代：23 眼, 30 歳代：118 眼, 40 歳代：95 眼, 50 歳代：33 眼であった。
網膜像コントラストは加齢にともない低下し, 小数視力が 1.0 以上である正常眼であっても, 網膜に投影される像の質は加齢により劣化していると考えられた。空間周波数別では,
中間周波数領域である 0.423logMAR 視標（少数視力で 0.4 付近）が, 加齢による低下が最も大きかった(p<0.05)。網膜像コントラストと全高次収差（p<0.01）および水晶体透明度指数（p<0.05）には有意な負の相関があり, 重回帰分析により全高次収差および水晶体透明度指数の網膜像コントラストへの影響を検討したところ, 標準化編回帰係数は高次収差が-0.317，水晶体透明度指数が-0.413 であり両者の影響はほぼ同等であった。透明水晶体眼における網膜像の質の低下には, 水晶体の加齢にともなう形状および屈折率分布の変化により増加する高次収差と水晶体透明度低下による後方散乱の増加が関与していると考えられた。
総括および結論
本研究により, 透明水晶体眼において網膜に投影される像の質は加齢にともない有意に低下し, 小数視力 1.0 以上の正常眼であっても視機能の質は加齢とともに低下することが明らかになった。また, 網膜像コントラストに影響する因子として, 全高次収差と後方散乱光強度により算出される水晶体透明度指数がほぼ同程度影響していることも明らかになった。本研究結果は網膜像コントラストの年代別の基準値として極めて有用であり, 網膜
像コントラストによる白内障眼の手術適応判定, 眼内レンズ挿入眼の視機能判定に応用できる。
論文審査結果の要旨
白内障手術は 30 年前までは小数視力 0.1 以下の例を対象に行われていたが, 手術手法の安全性の向上により手術件数は年々増加し, 現在では年間 120 万件行われるに至っており, 小数視力 1.0 以上でも自覚的な見え方に不満があれば手術が行われる例が出てきている。しかし, 白内障手術適応の判定には, この自覚的な見え方の不満を表す視機能低下を客観的に評価する必要がある。眼球光学系に点光源を投影したときに網膜上に形成される像のぼやけて映る度合いが測定できれば, 視機能低下の客観的指標になりうるが, 網膜上の像はカメラで捉えられないので, 網膜像コントラストではこれに代わり網膜からの反射
光を CCD カメラにて捉え, そこから眼球光学系を一度だけ通過したときの網膜像を求め,- 25 -

この像のぼやけて映る度合いから小数視力 0.1～2.0 に対応するランドルト環の切れ目の部分のコントラストを計算し, その値をグラフに描くことにより測定眼の網膜像コントラ
スト曲線を得ている。本研究では, 20 歳代から 50 歳代の小数視力 1.0 以上の透明水晶体
眼例において網膜像コントラストの年代別基準値の作成を試みた。対象例選定時の白内障の除外には, 他の施設でも評価している皮質混濁, 核混濁, 後嚢下混濁の３病型のみならず, 本学眼科学講座がこれらに加えて評価している Retrodots 混濁, および WaterClefts
混濁を加え 5 病型に分類し, これらをすべて除外し, 厳格な定義の下で透明水晶体眼例を選定した。これら 20 歳代から 50 歳代の小数視力 1.0 以上の透明水晶体眼 269 眼において計測した網膜像コントラストは, 20 歳代から 50 歳代まで加齢とともに低下し, 網膜に投影される像の質は 50 歳代では 20 歳代に比べ著しく低下していた。また, 加齢の影響を最も大きく受ける小数視力は 0.4 付近の中間周波数帯であり, この領域の網膜像コントラス
ト低下は, 視力が良好であるにも関わらず「なんとなく見えにくい」という自覚症状の要因になっている可能性がある。本研究ではさらに, 透明水晶体眼を有する日本人において,全高次収差の増加, 後方散乱の増加がほぼ同程度, 網膜像コントラスト低下に影響していることも明らかにしている。本研究の継続研究において，60 歳代以上では網膜像コント
ラストはさらに低下すること, 白内障手術による眼内レンズ挿入眼の網膜像コントラスト
は 50 歳代から 60 歳代の透明水晶体眼とほぼ同等であることも確認している。
白内障手術が進歩し, 視力低下が軽度な症例においても手術が行われるようになった昨今, 細隙灯顕微鏡検査による白内障の混濁評価と視機能が一致しない場合も多く, 視力以外の客観的な手法での視機能評価の重要性は今後益々増えることが予想され, 白内障手術により術後の視機能が改善するかを客観的に評価できる網膜像コントラスト手法は, 手術
適応の判定に極めて有用と考えられる。本研究結果は透明水晶体眼 269 眼と多数例における検討から得られており, 網膜像コントラストの年代別の基準値として極めて有用であり,白内障眼の網膜像コントラストと本研究の正常値を比較することで, 高い精度での手術適応判定が可能になると考えられる。
以上により，本論文は博士(医学)の学位を授与するに値するものと認められる。

（主論文公表誌）
Journal of Cataract Refractive Surgery- 26 -

Vol.38, No.10, 2012

かわ

べ

邊

ま

みち

氏名（生年月日）

川

真

道

本

籍

石

学 位 の 種 類

博士（医 学）

学 位 記 番 号

甲

第４４７号

学位授与の日付

平成２６年３月２７日

学位授与の要件

学位規則第４条第１項該当

学 位 論 文 題 目

Influences of multiple tooth-loss on signal travel in

川（昭和 58 年 2 月 26 日）

県

the insular cortex of rats
（多数歯牙喪失がラット島皮質におけるシグナル伝播に及ぼす影響）論 文 審 査 委 員

主

査

川

﨑 康

弘

副

査

松

井

真

三

輪 高

喜

学位論文内容の要旨
研究目的
咀嚼機能に代表される口腔機能が障害されると脳は不快な入力を受け，ストレス感覚が引き起こされる。島皮質は感覚情報処理のみならず自律神経系や情動に関与しており，扁桃体，海馬，視床下部，傍梨状核，体性感覚野などと神経連絡を有しているが，口腔機能の障害が島皮質に及ぼす影響はよくわかっていない。咀嚼機能不全による身体的ストレス
暴露や感覚情報低下自体が神経活動を低下させることが考えられることから，本研究では，ラット上顎の臼歯を抜歯することで口腔機能が障害された状態を作り，この口腔機能障害が島皮質の神経活動を上昇または低下のどちらに導くかについて，光学的手法および神経
生理学的手法と形態学的手法を用いて調べた。
実験方法
ラットを用い生後 19-20 日で上顎臼歯を抜歯して飼育した多数抜歯群と抜歯を行わず飼育したコントロール群に分けた。生後 35-42 日で島皮質を含む脳スライスを作製し，膜電位感受性色素を用いた計測を行った。さらに，無顆粒性島皮質に電気刺激を与え，顆粒性島皮質から細胞外電位記録法にて刺激応答の潜時を調べ，シグナル伝播の様子を観察した。
島皮質の形態学的評価は，上記 2 群に生後 38-42 日で脳標本スライスを作製し，クレシル
バイオレット染色を行った。解析ソフトウェアを用い，無顆粒性島皮質および顆粒性島皮質それぞれについて，面積 100μm×100μm あたりの細胞体数をカウントした。
実験成績
膜電位感受性色素を用いた光学的計測を行ったところ，コントロール群では，無顆粒性- 27 -

島皮質への電気刺激により興奮性シグナルが 2-3 層に沿って体性感覚野へと伝播した。多数抜歯群においても同様であったが，コントロール群と比較して伝播速度の低下が確認された。そこで，無顆粒性島皮質への電気刺激に対する応答を顆粒性島皮質から細胞外記録法を用いて計測したところ，コントロール群と比較して多数抜歯群において応答潜時の延長が見られ，電気生理学的にも多数抜歯群において伝播速度が低下していることが示された。次に，顆粒性島皮質および無顆粒性島皮質の各層における細胞体数を，コントロール
群と多数抜歯群で比較したところ，いずれの皮質でも群間差が見られ，多数抜歯群において細胞体数が有意に低下していた。大脳皮質視覚野においても同様の解析を行ったが有意所見は見られず，脳全体に及ぶ変化ではないことが示唆された。
総括および結論
ラット上顎の臼歯を抜歯することで口腔機能障害を作り出したところ，光学的手法および電気生理学的手法を用いた評価では多数抜歯群においてシグナル伝播速度が低下し，細胞密度評価では多数抜歯群において細胞体数の有意な減少が確認された。多数歯喪失により島皮質の細胞体数が減少したのは，口腔ストレスが，視床下部-下垂体-副腎系や自律神経系を介して島皮質の細胞密度減少を引き起こしたと考えられる。興奮性シナプス後電位を反映したシグナルが神経回路内を連続的に伝播するには，神経細胞の活動電位発生が必要となるが，シグナル伝播に関わる神経細胞が受けるシナプス入力の時間的空間的加重の減少が引き起こされ，その結果発火のタイミングが遅れ，シグナル伝播速度が低下するに至ったと予想される。
論文審査結果の要旨
本研究は，感覚情報処理のみならず自律神経系や情動に関与する島皮質の機能や形態的な変化が口腔機能の障害により誘発されるか，歯牙形成後の成熟過程にあるラットを用いた動物実験にて検討したものである。もちいられた計測技術は膜電位感受性色素を用いた
光学的計測，電気生理学的な細胞外記録法，解析ソフトウェアを用いた組織学的解析であり，申請者も参加した先行研究により，安定した測定結果が得られることが示されている。
信頼性の高い測定技術をもちいた実験により，臼歯を抜歯することで作り出された口腔機能障害ラットでは，コントロールラットと比較したところ，島皮質の細胞体数の有意な減少とシグナル伝播速度の低下が確認された。本研究は中枢神経系の成熟過程において健常な口腔機能を有さないために生じるストレスが島皮質の神経細胞の形態と機能に変化を引き起こすことを明らかにした。このことは発育期に健常な歯牙形成を促し，歯牙喪失などにより生じる口腔ストレスを避ける事が，感覚情報処理，自律神経系や情動に関与する島皮質の形成にも必要であることを示唆しており，口腔外科学や神経科学領域の発展に寄与する有益な研究である。
以上により，本論文は博士(医学)の学位を授与するに値するものと認められる。

（主論文公表誌）
European Journal of Oral Sciences- 28 -

Vol.122, No.3, 2014

なが

い

井

たか

永

本

籍

愛

学 位 の 種 類

博士（医 学）

学 位 記 番 号

甲

第４４８号

学位授与の日付

平成２６年３月２７日

学位授与の要件

学位規則第４条第１項該当

学 位 論 文 題 目

N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline Inhibits

知

貴

こ

氏名（生年月日）子（昭和 56 年 6 月 6 日）

県Diabetes-Associated Kidney Fibrosis and EndothelialMesenchymal Transition（N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline は糖尿病に関連した腎線維化と内皮－間葉系分化を抑制する）
論 文 審 査 委 員

主

査

竹

上

勉

副

査

野

島 孝

之

横

山

仁

学位論文内容の要旨
研究目的
糖尿病性腎症は最終的に腎線維化を生じ末期腎不全へと進行する。腎線維化において重要とされる線維芽細胞の活性化やその供給源として EndMT(内皮細胞-間葉系細胞分化)の意義が注目されている。N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline(AcSDKP)はアンギオテ
ンシン変換酵素(ACE)によって分解される内因性ペプチドであるが，様々な実験モデルにおいて抗線維化効果を示すことが報告されている。本申請者らは AcSDKP の抗線維化効果
において, Transforming growth factor(TGF)-βおよびその特異的細胞内転写因子 Smad
経路への影響を報告しているが, 近年 micro RNA let-7 の腎保護効果，及び，その発現がfibroblast growth factor 受容体(FGFR)発現に関連するとする報告がある。本研究では,
この抗線維化ペプチド AcSDKP の，線維芽細胞活性化，EndMT，腎線維化に対する抑制効果を確認するとともに，その分子機構を明らかにし，臨床応用を見据え，既存の糖尿病性腎症治療薬との併用で相加的効果の有無について明らかにすることを目的とする。
実験方法
実験①

糖尿病性腎症治療薬 ACE 阻害薬投与下の AcSDKP による相加的抗線維化効果を調べるために，生後 6 週 CD1 マウスに streptozotocin(STZ)(200mg/kg)を腹腔内へ単回投与し, STZ 誘導 1 型糖尿病腎症モデルマウスを作成, その時点から 4 カ月後にACE 阻害剤（ACE-I）のイミダプリル単独あるいは ACE-I＋AcSDKP の追加投与，または アンギオテンシン受容体拮抗薬の TA-606 単独を各々マウスに投与した。各
マウス群の薄切腎組織を用い，PAS 染色にて糸球体硬化を調べ，MTS 染色にて尿細- 29 -

管間質線維化を評価した。他方でマウス血漿および尿中の AcSDKP 濃度を測定した。
EndMT 過程を調べるために薄切腎組織に対して内皮マーカーCD31 及び間葉系マー
カーαSMA および FSP1 染色を行い，二重染色陽性細胞を EndMT 過程の細胞と認識して蛍光顕微鏡で解析した。
実験②

AcSDKP による抗 EndMT 効果の in vitro 解析を行うために，ヒト培養内皮細胞(HMVEC) を 用 い ， サ イ ト カ イ ン (TGF- β 2 ， TNF- α ， IL-1 β ) で 刺 激 ， 2 時 間 の
AcSDKP 前孵置（100nM）を行い, 計 72 時間の培養後，AcSDKP の有無によって比較検討し，さらに蛍光抗体法により CD31 及び SM22αの発現を調べ, Western

blot

法によって CD31,VE カドヘリンと FSP1 さらに Smad3 の蛋白発現を検討した。
実験③

AcSDKP による抗 EndMT 効果における microRNA let-7 family 制御機構及び let7 の標的 TGFβR1 についての検討を行った。糖尿病モデルマウス凍結腎臓サンプルを用いて microRNA を含む total RNA を抽出後，microRNA array 解析, 定量的 PCRを施行し, let-7

family を解析した。Western

blot 法により FGFR リン酸化，

FGFR 蛋白量を解析し，また薄切腎組織を用い，let-7 の標的である TGFβR1 と
CD31 を二重染色し，蛍光顕微鏡で解析した。
実験成績
実験①

マウスの組織学的解析において, 糸球体肥大および PAS 陽性のマトリックス蓄

積，MTS 染色で強く尿細管間質線維化が認められた糖尿病マウスと比較し，イミダ
プリル治療群では糸球体硬化と尿細管間質の線維化が部分的に，イミダプリル＋
AcSDKP 治療群では腎線維化がほぼ完全に抑制された。TA-606 に抗線維化効果はなかった。糖尿病マウスの血中 AcSDKP 濃度はコントロールに比べ低下傾向にあったが，イミダプリル投与で上昇を認め，イミダプリル＋AcSDKP 追加投与ではその約5.5 倍へと増加した。メサンギウム領域拡大，尿細管間質の線維化は AcSDKP 血漿
濃度と逆相関していた。糖尿病マウスでは EndMT を呈している細胞数が増加していたが，イミダプリル治療群では部分的に抑制，イミダプリル＋AcSDKP 治療群では完全に抑制された。TA606 治療群には EndMT の抑制は認められなかった。
実験②

HMVEC 細胞を用いた実験では, 敷石状外観を呈する内皮細胞はサイトカイン刺激
にて紡錘形へ形態変化したが，AcSDKP の共孵置で形態変化は抑制された。内皮細胞の形態変化とともに確認された EndMT（内皮マーカー（CD31）の消失と間葉系マーカー(SM22α)の発現増加）は，AcSDKP の共孵置で抑制された。サイトカイン刺激で CD31 および VE カドヘリン蛋白発現量減少かつ FSP1 増加が見られたが，
AcSDKP 追加投与にて各々の変化は抑制され，また同様に，Smad3 のリン酸化も抑
制された。

実験③

microRNA array 解析の結果，let-7 family は糖尿病腎で抑制されていたが, イ

ミダプリル＋AcSDKP 処理にてほぼすべての let-7 量が正常化傾向を示していた。定量的 PCR 解析でも, イミダプリル＋AcSDKP の処理によって let-7 量の回復を確認した。また Western

blot 解析では, 糖尿病で低下していた FGFR リン酸化および FGFR

蛋白量および遺伝子発現量が，イミダプリルにより部分的に，イミダプリル＋
AcSDKP で完全に回復した。培養細胞 HMVEC においても，サイトカイン刺激で抑制さ- 30 -

れていた FGFR 発現と FGFR リン酸化は共に AcSDKP 共孵置で正常化した。糖尿病マウ
ス内皮細胞で TGFβR1 は発現増加していたが，イミダプリル投与で部分的に，
AcSDKP 追加で完全に抑制されていた。
総括および結論
本申請者らの検討では，内因性抗線維化ペプチド AcSDKP が,糖尿病では低下しており，

AcSDKP により惹起される FGF 受容体を介した microRNA let-7 の発現量も低下していた。
本研究結果から, ACE-I と AcSDKP 併用療法によって内因性抗線維化プログラムを改善する事が可能であることが示された。また本研究から，AcSDKP-FGF 受容体-let7 という抗EndMT-抗線維化プログラムが糖尿病腎で低下している事象のメカニズムが治療標的である事, さらには糖尿病性腎症の治療戦略において ACE 阻害の生物学的意義に注目する必要がある事が示唆された。
論文審査結果の要旨
本研究は内因性ペプチドである AcSDKP に着目し, 糖尿病性腎症における腎線維化の阻止, さらには臨床応用を目指したものである。腎線維化においては内皮細胞-間葉系細胞
分化（いわゆる EndMT)が注目されている。本研究では糖尿病性腎症モデルマウスである
STZ 誘導 1 型糖尿病マウスを作成し, そこに AcSDKP 分解に関与する酵素 ACE の阻害剤イ
ミダプリルの単独投与の結果，腎線維化の部分的抑制がみられ, さらにイミダプリルとAcSDKP との併用下においては腎線維化の完全抑制が認められた。また糖尿病モデルマウ
スでは増加していた EndMT を呈する細胞数も正常値にもどり, 同様な結果となった。また
HMVEC 細胞を用いた in vitro の実験ではサイトカイン処理で生じた CD31, VE カドヘリンの減少, FSP1 増加という EndMT の様相も AcSDKP の処理で抑制されていた。糖尿病腎で抑制されていた microRNA let-7 の発現量さらには FGFR の発現量とリン酸化についてもイミ
ダプリルと AcSDKP の共孵置で正常化したとし, AcSDKP-FGF 受容体-let7 という抗 EndMT抗線維化プログラムの関わりを明確化した。本研究は糖尿病性腎症の治療戦略においてAcSDKP の役割及びそれに関わる ACE 阻害の生物学的意義を示唆する等の極めて重要な知見を示している。
以上により，本論文は博士(医学)の学位を授与するに値するものと認められる。

（主論文公表誌）
BioMed Research International- 31 -

Vol.2014, 2014

た

なか

中

まこと

氏名（生年月日）

田

本

籍

石

学 位 の 種 類

博士（医 学）

学 位 記 番 号

甲

第４４９号

学位授与の日付

平成２６年３月２７日

学位授与の要件

学位規則第４条第１項該当

学 位 論 文 題 目

慢性閉塞性肺疾患における Receptor for Advanced

川良（昭和 46 年 10 月 22 日）

県

Glycation End Products 蛋白の発現論 文 審 査 委 員

主

査

栂

博

久

副

査

米

倉 秀

人

竹

内 正

義

学位論文内容の要旨
研究目的
慢性閉塞性肺疾患 (chronic obstructive pulmonary disease, COPD) はタバコ煙等の有害物質を長期間吸入暴露することで生じる肺の慢性炎症性疾患で，進行性の不可逆的閉
塞性換気障害で定義される。Receptor for advanced glycation end products (RAGE) は，
糖尿病性血管傷害における最終糖化産物の細胞膜受容体として発見され，炎症を惹起・増幅する。肺では恒常的に RAGE が高発現しているが，その機能は未だ不明で，肺疾患における意義も知られてない。今回，ヒト肺組織における RAGE 蛋白の発現解析により，そのCOPD の発症と進展における関与の解明を目指した。
実験方法
COPD 群 38 症例と対照群 37 症例の外科的切除肺組織を対象とした。抗 RAGE 抗体による免疫染色を施し，I 型肺胞上皮細胞，細気管支粘膜上皮細胞，肺胞マクロファージにおける発現を半定量解析し，年齢・性，１秒率，％肺活量，喫煙指数との関係を検討した。
実験成績
I 型肺胞上皮細胞と肺胞マクロファージにおける RAGE の発現は，対照群と比較し COPD
群で有意に高く，１秒率と負の相関を認めた。細気管支粘膜上皮細胞では両群間に有意な差異は認めず，さらに RAGE 発現と喫煙指数，％肺活量との関連はいずれの細胞群でもみられなかった。
総括および結論
以上の研究成績から，肺胞上皮細胞と肺胞マクロファージで発現される RAGE が COPD の発症と進行に関わる可能性が示された。さらにこれら RAGE の発現亢進は喫煙による直接- 32 -

作用ではなく別経路の可能性も示唆され，RAGE は COPD 進行の制御に向けた新たな標的分子となる可能性が示唆された。
論文審査結果の要旨
申請者は，65 例という比較的多数の患者で，肺組織における RAGE の発現を検討している。その結果，I 型肺胞上皮細胞，肺胞マクロファージ，細気管支粘膜上皮細胞に RAGEが発現していることを示し，I 型肺胞上皮細胞と肺胞マクロファージにおける発現は COPD
患者で有意に強いことを初めて示している。さらに，RAGE の発現と閉塞生換気障害の指標である１秒率の間には有意な負の相関があるが，喫煙指数および％肺活量の間には相関がないことを示している。COPD の発症には喫煙が必須の条件であるが，重喫煙者のうちCOPD を発症するのは 20％程度とされており，喫煙以外の因子が必要であることが知られている。申請者らの結果は，RAGE がこの喫煙以外の標的分子の一つの候補であることを示唆した初めての研究である。このことはまた，RAGE および関連する因子の制御によって COPD 発症を予防する可能性を示しており，臨床的に COPD の治療につながる期待を持たせるものであり，呼吸器病学の進歩に寄与しうるものと思われる。
以上により，本論文は博士(医学)の学位を授与するに値するものと認められる。

（主論文公表誌）
金沢医科大学雑誌

第 39 巻

第1号- 33 -

平成 26 年

しま

だ

田

たか

嶋

本

籍

茨

学 位 の 種 類

博士（医 学）

学 位 記 番 号

甲

第４５０号

学位授与の日付

平成２６年３月２７日

学位授与の要件

学位規則第４条第１項該当

学 位 論 文 題 目

統合失調症患者における MRI と NIRS による脳形態と脳機

城

貴

みつ

氏名（生年月日）充（昭和 55 年 6 月 18 日）

県能の研究
論 文 審 査 委 員

主

査

加

藤 伸

郎

副

査

田

中 惠

子

渡

邉 直

人

学位論文内容の要旨
研究目的
統合失調症は青年期に好発し, 生涯発病率は約 1%の主要な精神疾患である。統合失調症患者では高次の知的機能や感情機能が不良であることから, 前頭葉に障害が存在することが推定されている。このことを検証するために, 統合失調症患者の前頭葉の脳形態および脳機能に着目した研究が行われているが, 確定的な知見は得られていない。
近年の統合失調症患者の脳形態画像研究では , MRI をもちい, 画像解析法として
statistical parametric mapping (SPM) などの統計画像解析プログラムを使用し, 全脳にわたって探索的に統計学的に有意な形態変化を示す脳部位を見出す voxel-based
morphometry (VBM) による研究が広く行われている。一方, 脳機能画像研究では, 神経細胞活動を反映すると考えられている酸素化ヘモグロビン (oxy-Hb) を計測する近赤外線ス
ペ ク ト ロ ス コ ピ ィ (near-infrared spectroscopy; NIRS) に よ り , 言 語 流 暢 性 課 題(verbal fluency test; VFT) などの前頭葉賦活課題をもちいて脳機能を検討する研究が広く行われている。
しかし, 脳形態画像としての MRI による静的な体積変化と, 脳機能画像としての NIRS
による動的な血流変化とを同一対象で検討した報告は未だ行われていない。
本研究では, 統合失調症患者と健常者を対象に, MRI から VBM をもちいて全脳灰白質体積を評価し, また VFT 遂行中に NIRS をもちいて脳血流変化を測定することにより, 統合失調症の病態発現にかかわる脳形態と脳機能の変化を探ることを目的とした。
実験方法
本研究は金沢医科大学倫理審査委員会の承認を経た後, 文書による説明と同意が得られた統合失調症患者 28 名 (男：11 名, 女：17 名, 平均年齢 36.6 歳) および年齢・性別を適合させた健常者 28 名を対象とし, 同意取得後 1 ヶ月以内に頭部 MRI と NIRS を施行した。

- 34 -

全ての患者は DSM-Ⅳに基づく統合失調症の診断基準を満たし, 陽性・陰性症状評価尺度 (positive and negative symptom scale; PANSS) をもちいて臨床症状を評価した。
頭部 MRI では 3T MRI 装置 (Magnetomy Trio, Siemens, Germany) を使用して 3 次元 T1
強調画像を撮像し, また VBM8 の多変量線形解析プログラムをもちい, 2 群間の灰白質体
積 比 較 を 行 っ た 。 次 に VBM に て 有 意 差 が 認 め ら れ た 領 域 を 関 心 領 域 (region ofinterest; ROI) として設定し, 灰白質体積を算出した。
NIRS では全 52 チャンネルの NIRS 装置 (ETG-4000, 日立メディコ社, 日本) を使用し,
前頭前野を中心に左右対称に装着し, 福田による標準脳との対応表をもちい, 各チャンネ
ルの解剖学的部位を同定した。賦活課題として VFT をもちいた。その後, 神経細胞活動の指標として, 各チャンネルにおける課題遂行区間中の酸素化ヘモグロビン濃度 ([oxyHb]) の積分値を算出し，標準得点化を行い Z-score を得た。2 群間の比較には診断とチャンネルの 2 要因分散分析を行った。
次に ROI における灰白質体積と解剖学的に対応する NIRS チャンネルの Z-score との間のピアソン相関係数を算出した。それにより有意差が認められた ROI の灰白質体積ないしNIRS チャンネルの[oxy-Hb]の積分値をもちいて, PANSS による臨床症状評価スコアとの間のピアソン相関係数を算出した。
実験成績
VBM による灰白質体積の 2 群比較では, 統合失調症患者でおもに左前頭葉領域にて有意な体積の減少が認められた (p<0.001) 。
VFT 施行中の NIRS における 2 群比較では,全チャンネルにおいて統合失調症患者で[oxy-Hb]の積分値が低いという診断の主効果がみられ (p<0.05), 多重比較では全 52 チャ
ンネル中 42 チャンネルにて有意差が認められた (p<0.05) 。
VBM での 2 群間比較にて有意差が認められた脳領域のうち, voxel 数が 30 以上と比較的広い範囲で違いを認めた領域を ROI として設定した後, 各 ROI の灰白質体積と対応する
NIRS チャンネルの[oxy-Hb]の積分値との間の相関分析を行った。その結果，左下前頭回
三角部と Ch40 (Broca 野) との間で有意な負の相関が認められた (r=-0.386, p<0.05) 。
左下前頭回三角部の灰白質体積ないし Ch40 (Broca 野) の[oxy-Hb]の積分値と，PANSS
による臨床症状評価スコアとの間の相関分析では, 下位項目のうち, 陰性尺度 (N1: 情動の平板化) と灰白質体積との間に有意な負の相関が認められた (r= -0.429, p<0.05)。また陽性尺度 (P2: 概念の統合障害) と[oxy-Hb]の積分値との間に有意な負の相関が認められた(r= -0.472, p<0.05) 。
総括および結論
脳形態画像として MRI, 脳機能画像として NIRS をもちい, 統合失調症患者の脳形態と脳機能の変化を検討した。統合失調症患者では健常者と比較し, 前頭葉灰白質体積の減少や広範な脳賦活反応の低下が認められた。臨床症状との間では, 統合失調症患者では前頭葉の形態変化は陰性症状と, 機能変化は陽性症状との関連が認められた。また, MRI とNIRS で異常を認めた領域はともに Broca 野に位置していたことから, Broca 野における脳形態と脳機能の変化の間には関連があることが示唆された。この関連は灰白質体積と脳賦活反応との間で逆相関を示しており何らかの機能的代償が示唆された。
- 35 -

論文審査結果の要旨
統合失調症の発症にかかわる器質的病態については, 統合失調症患者の前頭葉の脳形態および脳機能に着目した研究が行われてきた。形態的研究においては, MRI 画像に SPM な
どの統計画像解析プログラムを適用することにより実現される voxel-based morphometry(VBM)が多用されている。一方, 機能的研究としては, 近赤外線スペクトロスコピィ(near-infrared spectroscopy; NIRS)を用いた脳血流評価により, 言語流暢性課題などの前頭葉賦活課題に依存する脳機能の検討が広く行われている。しかし, これらの形態と機能の両側面を同一対象で検討した報告はない。そこで, 本研究においては 統合失調症患者と健常者に MRI 画像 VBM を適用し, また言語流暢性課題遂行中の NIRS による脳機能評価も併用し, 統合失調症の病態発現にかかわる脳形態と脳機能の連関性を探ることが志向された。
DSM-Ⅳに基づく統合失調症患者 28 名 (男：11 名, 女：17 名, 平均年齢 36.6 歳) およ
び年齢・性別を適合させた健常者 28 名を対象とし, 頭部 MRI と NIRS を施行した。臨床症状評価は陽性・陰性症状評価尺度 (positive and negative symptom scale; PANSS) によった。頭部 MRI では 3T MRI 装置を使用し, VBM8 の多変量線形解析プログラムで灰白質体積比較を行った。次に VBM にて有意差が認められた領域の灰白質体積を算出した。
NIRS では全 52 チャンネルの NIRS 装置 (ETG-4000, 日立メディコ社, 日本) を使用し,
前頭前野を中心に左右対称に装着し, 福田による標準脳との対応表をもちい, 各チャンネ
ルの解剖学的部位を同定した。賦活課題として VFT が用いられた。
VBM による灰白質体積の 2 群比較では, 統合失調症患者でおもに左前頭葉領域にて有意な体積の減少が認められた。VFT 施行中の NIRS における 2 群比較では, 全チャンネルにおいて統合失調症患者で[oxy-Hb]の積分値が低く, 多重比較では全 52 チャンネル中 42 チ
ャンネルにて有意差が認められた。灰白質体積と NIRS [oxy-Hb]の積分値との間の相関分析を行ったところ, 左下前頭回三角部と Ch40 (Broca 野) との間で有意な負の相関が認められた。また陰性尺度 (N1: 情動の平板化) と灰白質体積の間に負の相関が陽性尺度(P2: 概念の統合障害) と NIRS[oxy-Hb]積分値に負の相関が見いだされた。
MRI による脳形態画像解析と NIRS による 脳機能評価を統合失調症患者に適用した。健常者と比較し, 前頭葉灰白質体積の減少や広範な脳賦活反応の低下が認められた。統合失調症患者では前頭葉の形態変化は陰性症状と, 機能変化は陽性症状との関連が認められた。
同一被験者において, 両症状の脳内責任部位を分離して同定できたことは新知見であり,統合失調症の器質的理解を進展させることとになった。また, MRI と NIRS でともに異常を認めた領域である Broca 野では, 灰白質体積と脳賦活反応との間に逆相関が見られた。
これより, 灰白質体積の減少による運動性言語野の機能低下が代償され, それが脳血流量の増大に反映されている可能性が示唆され, 統合失調症脳における神経可塑性の重要性を新しい視点から指摘することができた。
以上により，本論文は博士(医学)の学位を授与するに値するものと認められる。

（主論文公表誌）
金沢医科大学雑誌

第 39 巻第1号- 36 -

平成 26 年

うえ

の

まさ

かつ

氏名（生年月日）

上

野

正

克

本

籍

鹿

児

島

県

学 位 の 種 類

博士（医 学）

学 位 記 番 号

甲

第４５１号

学位授与の日付

平成２６年３月２７日

学位授与の要件

学位規則第４条第１項該当

学 位 論 文 題 目

原発性肺癌における RAGE およびその関連因子の発現論 文 審 査 委 員

主

査

清

川 悦

子

副

査

竹

内 正

義

長

内 和

弘

（昭和 49 年 8 月 30 日）

学位論文内容の要旨
研究目的
Receptor for advanced glycation end-products (RAGE ） は , advanced glycation
end-products (AGEs)の細胞膜受容体の１つであり, 糖尿病をはじめとする生活習慣病の進展に重要な役割を演じていることが明らかにされてきた。最近, RAGE が AGEs, HMGB-1,
S100A4 などの癌細胞の生物学的特性に関わる複数の分子をリガンドとして認識し, MAPK,
NFκB などの活性化を介し, 癌細胞の増殖・浸潤・転移に関わることが明らかにされた。
ヒト腫瘍組織における解析により, RAGE 発現と癌の進展・予後との関与が報告されてきつつあるが, 依然解明されなければならない問題は多い。肺は他の臓器と比較し RAGE が恒常的に高発現しているが, その生理学的役割はほとんど知られておらず, 原発性肺癌における変動の報告も少ない。
本研究では, 原発性肺癌 127 例の組織アレイを用い免疫組織学的に RAGE の発現を検討し, 組織亜型, 病期ならびに生命予後との関連を統計学的に解析することで, 原発性肺癌における RAGE 発現の意義を明らかにすることを第一の目的とした。さらに, 肺癌組織における RAGE のリガンドを明らかにすることを目的に, RAGE の発現と AGEs, HMGB-1 ならびに S100A4 の発現との関連性を検討した。
実験方法
金沢医科大学呼吸器外科にて 2001～2010 年に外科的切除を行った原発性肺癌症例中,代表的な 127 例の肺癌腫瘍組織の 10%緩衝ホルマリン固定・パラフィン包埋標本から組織
スパイラルアレイを作製し, RAGE, AGEs, HMGB-1, S100A4 の免疫染色による発現解析とそれらの相互関係および臨床病理学的因子（組織型・組織亜型・病期・分化度・予後）との関連を検討した。免疫染色はストレプトアビジン・ビオチン法を用い, 1 次抗体はヤギ
抗 RAGE ポリクローナル抗体 (RAGE001-050, Biologo 社), ウサギ抗 AGEs ポリクローナル
抗体(ab23722, Abcam 社), ウサギ抗 HMGB-1 ポリクローナル抗体(ab18256, Abcam 社）,- 37 -

ウサギ抗 S100A4 モノクローナル抗体(ab124805, Abcam 社)をそれぞれ使用し, マイクロウェーブによる抗原賦活を行った。
実験成績
RAGE の発現を肺癌 127 例中 30 例（23.6%）に認めた。組織型別解析では, 扁平上皮癌(2/21, 9.5 %) と比較し腺癌 (25/103, 24.3%)および小細胞癌 (3/3, 100%)で高い陽性発
現率を認めた (p<0.05)。腺癌症例では, 中・低分化のものが高分化のものよりも有意に高い陽性発現を認めた (14/39, 35.9% vs. 11/64, 17.2%, p<0.05)。スコアリングによる解析では, 粘液非産生型腺癌は粘液産生型腺癌と比べ高い発現スコアを認めた（2.77 vs.
1.63, p<0.05）。また, 腺癌の IB 期以上の症例は IA 期と比較し発現スコアが高い傾向があった（2.88 vs. 2.24, p=0.09）。
AGEs の発現を 127 例中 47 例(37.0%)に認めた。組織型別では腺癌での発現率(44/103,
42.7%)が, 扁平上皮癌（3/21, 14.3%）および小細胞癌(0/3, 0%)での発現率と比べ有意に高かった（p<0.05）。腺癌の分化度や病期との間には有意差は認めなかった。
HMGB-1 は 94 例(74.8%)に陽性所見を認めた。組織型別では扁平上皮癌(20/21,95.2%)および小細胞癌(3/3, 100%)は腺癌における陽性発現頻度（71/103,68.9%）と比べ有意に高かった (p<0.05)。腺癌の分化度や病期との間には有意差は認めなかった。
S100A4 は 46 例（36.2%）で陽性所見を認めた。組織型, 腺癌の分化度や病期との有意な関連性は認めなかった。
RAGE の発現と３種のリガンドの発現との相関を検討したところ, RAGE と AGEs の発現には逆相関の関係を認めたが(p<0.05), RAGE と HMGB-1 間および RAGE と S100A4 間では有意な相関を認めなかった。
RAGE と３種類のリガンドの単独発現ならびに共発現と生命予後との関連を, 全症例での解析に加え, 組織型別ならびに進行度別の解析を加えたところ, Ⅰ期腺癌においてAGEs 陽性例が有意ではないが予後良好な傾向を示したほかには, 全症例, Ｉ期腺癌ならびにそれ以外のサブグループでの検討において予後との有意な関連は得られなかった。
総括および結論
今回の検討により, 原発性肺癌組織での RAGE 発現は, 組織型により異なり, 特に腺癌においては粘液産生性に影響を受け, 分化度が低いほど, 病期が進行するほど発現率が上昇した。これらの結果は粘液非産生性腺癌の進展への RAGE の関与が示唆され, リガンド
として AGEs の発現が関与している可能性が推測された。
論文審査結果の要旨
本研究では原発性肺癌における RAGE，およびそのリガンドである AGEs，HMGB-1，
S100A4 の免疫染色による発現を調べ，RAGE の肺癌の悪性化における役割と予後に及ぼす影響を明らかにしようと試みた。その結果，RAGE は腺癌では扁平上皮癌に比べて陽性率が有意に高く，粘液非産生細胞型にて有意に陽性率が高かった。有意ではないが，腺癌においては低～中分化で陽性頻度が高く，発現陽性症例は予後が悪い傾向が見られた。３つ- 38 -

のリガンドのなかで腺癌の分化度や病期との間には有意差は認めなかったが，RAGE とAGEs の発現は逆相関しており，肺癌においては AGEs は RAGE の受容体として機能していないことが示唆された。RAGE は，AGEs の受容体として発見され，正常では肺でのみ高発現していることが知られていたが，その役割は不明であった。メラノーマなどの悪性腫瘍
では，発現が上昇することで浸潤・増殖に関連するとの報告があるが肺癌では発現が下がるという報告があり，関与は否定的であったが，本研究により肺癌の分化・進展に関与する可能性が初めて示唆された。また，127 例と単一機関にとっては多数の症例について，
正確な病理診断と臨床情報を元に統計処理を行って得られた信頼できる結果である。
以上により，本論文は博士(医学)の学位を授与するに値するものと認められる。

（主論文公表誌）
金沢医科大学雑誌

第 39 巻第1号- 39 -

平成 26 年

き

はら

ひろ

原

あき

氏名（生年月日）

木

弘

晶

本

籍

和

歌

学 位 の 種 類

博士（医 学）

学 位 記 番 号

甲

第４５２号

学位授与の日付

平成２６年３月２７日

学位授与の要件

学位規則第４条第１項該当

学 位 論 文 題 目

Near-infrared spectroscopy を用いた双極性障害の家族

山（昭和 57 年 6 月 27 日）

県

集積性の研究論 文 審 査 委 員

主

査

松

井

真

副

査

加

藤 伸

郎

赤

井 卓

也

学位論文内容の要旨
研究目的
大うつ病性障害と双極性症障害は鑑別が難しく, 横断面の症状評価だけでなく, 縦断面の経過観察が重要とされている。平成 21 年 4 月にうつ症状の鑑別補助検査として, 近赤外光で脳表の酸素化ヘモグロビン濃度([oxy-Hb])を測定する技術である近赤外線スペクト
ロスコピー(NIRS)を用いた光トポグラフィー検査が先進医療として認可された。光トポグ
ラフィー検査では, 言語流暢性課題(VFT)中の大脳皮質の[oxy-Hb]変化量を測定し, 前頭部平均波形から「神経活動の賦活反応量」を示すとされる積分値と, 「神経活動の賦活反応性」を示すとされる重心値を算出し, 福田らの鑑別アルゴリズムにもとづき, うつ症状の鑑別診断補助(以下, NIRS 診断)ができるとされている。つまり, 双極性障害を躁状態の出現に先立って確定診断できる可能性が出てきたと言える。しかし, 臨床診断と NIRS
診断を一致させて気分障害の所見を検討した報告はない。一方, 双極性障害は遺伝性的要因の関与が指摘されており, 家系的に気分障害が出現する家族集積性が高いとされている。
また, 家族集積性のある双極性障害患者は, 家族集積性のない双極性障害患者に比較して症状が重篤な傾向が指摘されており, 家族集積性の有無で生物学的基盤が異なる可能性がある。さらに, 双極性障害は認知機能障害がみられ,エピソードを繰り返すにつれて悪化するとの報告もあるが, 必ずしも一定しておらず, 家族集積性などの遺伝的要因の影響が考えられている。今回, 光トポグラフィー検査を用い, 臨床診断と NIRS 診断が一致した双極性障害患者を対象に, 家族集積性と側頭部を中心とした NIRS 所見との関連を調べた。
実験方法
被験者は DSM-Ⅳで双極性障害の臨床診断を得た 32 名(男: 14 名, 女: 18 名, 平均年
齢: 39.7 歳)とした。全例 20 歳～59 歳の範囲で, 右利きの黄色人種かつ日本語を母国語- 40 -

としていた。光トポグラフィー検査の前頭部波形が, 福田らの多施設共同研究で提唱されている双極性障害の基準を満たし, 視察法で典型的な双極性障害パターンを示す被験者を対象とした。SCID-I を用いて家族歴を聴取し, AxisⅠの精神疾患の既往歴や家族歴を得た。第 1 度親族あるいは第 2 度親族に, 大うつ病性障害，双極性障害の診断を得た親族がいる場合を家族集積性ありとし, 家族集積性がある群（以下, 集積群）と家族集積性がな
い群（以下, 非集積群）に分けた。SIGH-D, GAF, JART で臨床症状評価を行い, 脳器質性疾患, 神経疾患, 心的外傷, 電気治療の既往, アルコールや薬物の乱用歴, 精神遅滞, 体
温 37.0 度以上を除外した。被験者は全例金沢医科大学病院通院中で, 内服加療をうけていた。罹病期間は初発の気分エピソードから光トポグラフィー検査までの期間とした。
光トポグラフィー検査の賦活課題は VFT を用い, 52 チャンネルの NIRS 装置で計測を行った。得られたデータのうち上 2 段を除いた全 31 チャンネルの積分値・重心値を解析に用いた。臨床診断と NIRS 診断の一致率を調べ, 次に集積群と非集積群に分け, 各チャンネ
ルの積分値・重心値を対応のない t 検定を用いて比較し, 家族集積性に関連する部位を調べた。さらに, 集積群と非集積群の各チャンネルの積分値・重心値と罹病期間の相関を
Pearson 相関係数で調べ, 罹病期間の影響を調べた。
実験成績
臨床診断と NIRS 診断の一致率は 62.5%で, 集積群 10 名（男: 3 名, 女：7 名, 平均年
齢; 35.3 歳）, 非集積群 10 名（男: 4 名, 女: 6 名, 平均年齢 40.7 歳）であった。集積群と非集積群で比較したところ, 集積群は非集積群に比較して右側頭極に対応するチャンネル 44 と右下前頭回眼窩部に対応するチャンネル 45 で積分値が小さく, 有意な群間差が認められた。さらに, 集積群と非集積群の各チャンネルで積分値・重心値と罹病期間の相関を調べたところ, 集積群はいずれのチャンネルでも積分値・重心値と罹病期間に有意な相関は認められなかった。一方, 非集積群では, 右側頭極に対応するチャンネル 44 でのみ積分値と罹病期間に負の相関が認められた。
総括および結論
光トポグラフィー検査を用いて双極性障害の家族集積性について調べた。集積群は, 罹
病期間に関わりなく右下前頭回眼窩部・右側頭極の積分値が小さい傾向が認められた。非集積群では, 右側頭極の積分値と罹病期間で有意な負の相関が認められた。双極性障害は右半球との関連が指摘されており, 本研究の結果とは矛盾しなかった。双極性障害は認知機能障害が指摘されており, 失語症の研究から言語機能は右半球での代償過程が示されているが, 集積群の患者ではその代償過程が非集積群よりも不十分であると考えられた。
本研究の結果から, 双極性障害は家族集積性の有無で生物学的基盤が異なる可能性が示された。
論文審査結果の要旨
本研究は，近赤外線スペクトロスコピー(NIRS)を用いた光トポグラフィー検査を用いて双極性障害を有する患者の家族集積性の有無で，疾患に質的な差が存在するのか否かを明- 41 -

らかにすることを試みたものである。双極性障害は躁症状が出現するまで 10 年以上も診断がつかない例があり，本研究では，脳の活動性を定量的に測定できる可能性のあるデバイスとして近年注目されている NIRS の波形変化の相違を，同疾患の診断や質的評価に用いられないかという仮説に基づいて，研究デザインが構築された。先ず，臨床的診断で双極性障害を有する患者を抽出し，それらの患者のうつ症状期において光トポグラフィー検査を行ない，その中から，従来の研究で明らかにされている双極性障害患者の特徴とされる NIRS 波形パターンを有する患者のみを研究の対象とした。すなわち，光トポグラフィ
ー検査の信頼性が高いと推定される患者のみを対象とした点が画期的である。そこで，患者群を家族集積性のある群とない群に分けて解析をした結果，従来研究報告の多い前頭葉ではなく，劣位側の側頭極の重要性が明らかにされた。それは，家族集積のある患者では劣位側の側頭極が病初期から賦活課題に対する反応性が低いのに対して，弧発例の患者では罹病期間とともに反応性が進行性に低下するという事実である。本研究は，家族集積性のある双極性障害が家族集積性のない同疾患とは生物学的に異なることを明らかにし得ただけではなく，劣位側側頭極の重要性を明らかにした点で独創性の高いものである。さらに，NIRS による光トポグラフィー検査が他の精神疾患の脳機能解析にも有用である可能性を示した点で意義ある成果を上げたと評価することができる。
以上により，本論文は博士(医学)の学位を授与するに値するものと認められる。

（主論文公表誌）
金沢医科大学雑誌

第 39 巻第1号- 42 -

平成 26 年

みず

の

野

たく

宅

ろう

氏名（生年月日）

水

本

籍

大

学 位 の 種 類

博士（医 学）

学 位 記 番 号

甲

第４５３号

学位授与の日付

平成２６年３月２７日

学位授与の要件

学位規則第４条第１項該当

学 位 論 文 題 目

Effects of Vaccination and the New Neuraminidase Inhibitor,

阪郎（昭和 53 年 2 月 21 日）

府

Laninamivir, on Influenza Infection（インフルエンザ感染症におけるワクチンと新しいノイラ
ミニダーゼ阻害剤；ラニナミビルの有効性の検討）
論 文 審 査 委 員

主

査

飯

沼 由

嗣

副

査

元

雄 良

治

西

条 旨

子

学位論文内容の要旨
研究目的
小児や高齢者はインフルエンザ感染症の高リスク・グループであるが，インフルエンザ
ワクチンの効果のエビデンスは限定的である。また，治療薬として 1 回吸入完結型の新たな吸入型ノイラミニダーゼ阻害薬であるラニナミビルが開発され，その臨床的有用性が期待されている。本研究は，インフルエンザワクチンの予防効果とラニナミビルの臨床的有効性を明らかにすることを目的とした。
実験方法
水野診療所（大阪府）にて 2007/08 から 2011/12 の 5 シーズンにわたりインフルエンザ
ワクチン接種者を対象に，前シーズンのワクチン接種歴とインフルエンザ発症の有無について質問紙による調査を行い，ワクチンの予防効果を検討した。次に同 5 シーズンに，同診療所にて迅速抗原検査にてインフルエンザと診断された症例を対象とし，患者背景，臨床症状，抗インフルエンザ薬の有効率，再発率を比較検討した。統計解析は SAS version
9.1 for windows を使用した。
実験成績
解析可能な質問紙は 5 シーズンで計 3,769 人から回収された。全年齢群の比較では2008/09 シーズンと 2010/11 シーズンにおいて，ワクチン接種はインフルエンザの発症率を有意に低下させた（P＜0.01）。ワクチン株とシーズン流行株の一致がその要因の一つと考えられた。年齢群別の比較では 2010/11 シーズンの 14〜64 歳においてワクチン接種は有意に感染率を下げたが，13 歳以下の小児と，65 歳以上の高齢者では，すべてのシーズ- 43 -

ンにおいて有意な感染率の低下は見られなかった。
迅速抗原検査でインフルエンザと診断された症例は 5 シーズン合計 4,443 例であった。
性別では，男性 45.8%，女性 54.2%で差はみられなかった。ウイルス型別では A 型 2,666
例，B 型 1,644 例，その他 133 例であった。年齢別では，14〜64 歳が 68.3％を占め，13
歳以下は 20.9％，65 歳以上は 10.8％であった。受診時の体温は，38℃以上は 35.6%であったが，37℃以下を示した者が 40％にみられた。一方咽頭濾胞は 78.4％にみられ，診断の補助となる可能性が示された。
治療に用いられた抗インフルエンザ薬は，ノイラミニダーゼ阻害薬ではラニナミビルが1,381 名に，オセルタミビルが 2,432 名に，ザナミビルが 1,044 名にそれぞれ用いられ，
アマンタジンは 100 名に用いられた。異常行動などの副作用に薬剤毎の有意な差は認めなかった。一方，同一シーズン内の再発率の比較では，ラニナミビル使用群（0.8％）はオ
セルタミビル（6.1％）およびザナミビル（2.2％）使用群と比較して有意に再発率が低かった（P＜0.01）。2011/12 シーズンにおけるラニナミビルの臨床的有効率は 95.7％であり，さらに発症後から薬剤使用までの時間，来院時の体温，インフルエンザのタイプ別の全ての群において高い有効率を示した。
総括および結論インフルエンザワクチンは，ワクチンと流行株が一致し，さらに年齢層が 13〜64 歳の場合に感染率の低下が期待できる。1 回吸入完結型の新しい抗インフルエンザ薬であるラニナミビルは臨床的有効性が高く，再発率も低く抑えられる可能性があり，インフルエン
ザの高リスクグループの治療薬として，他のノイラミニダーゼと比較してより臨床的有用性の高い薬剤である可能性が示された。
論文審査結果の要旨
本研究は 5 シーズンにわたり一市中医療機関にて実施された，インフルエンザの臨床研究であり，ワクチン予防及びインフルエンザ発病後の解析についてそれぞれ 3,000 症例を超えるデータが集積されている。本研究により，流行株とワクチン株の一致がワクチンの感染防御に関連する可能性が示され，年齢別では 14〜64 歳までの群で発症予防効果が期
待されることが示された。治療においては，新しい抗インフルエンザ薬であるラニナミビ
ルの高い臨床効果及び他のノイラミニダーゼ阻害薬と比較して再発率を下げる効果が示された。以上の結果により，インフルエンザワクチンに期待される予防効果と限界，および
小児や高齢者などの高リスクグループに対する治療薬の選択において臨床的に有用な情報を示した貴重な研究論文であると考える。
以上により，本論文は博士(医学)の学位を授与するに値するものと認められる。

（主論文公表誌）
PLoS One

Vol.9, No.4, 2014

- 44 -

まる

ぜに

銭

しょう

こ

氏名（生年月日）

丸

本

籍

石

学 位 の 種 類

博士（医 学）

学 位 記 番 号

甲

第４５４号

学位授与の日付

平成２６年３月２７日

学位授与の要件

学位規則第４条第１項該当

学 位 論 文 題 目

Mortality and causes of deaths of inhabitants with

川

笑

子

（昭和 52 年 11 月 10 日）

県

renal dysfunction induced by cadmium exposure of thepolluted Jinzu River basin,Toyama, Japan; a 26-year
follow-up（神通川流域のカドミウム汚染地域における腎尿細管障害を伴う住民の死亡率と死亡原因に関する調査）
論 文 審 査 委 員

主

査

岩

淵 邦

芳

副

査

北

村

修

宮

澤 克

人

学位論文内容の要旨
研究目的
カドミウム(Cd)とその化合物は がん研究国際機関(IARC)によって人体への発がん性物
質であると分類されている。海外の長期的な追跡調査では，労働環境により高度な Cd 暴露を受けた労働者による肺がんや腎疾患死亡，循環器疾患死亡との関連性が報告されているが，一方でそれらの関連性は認められないという報告もあり，結果は必ずしも一致していない。国内では，イタイイタイ病の発生地域であり国内最大規模の Cd 汚染地域である
神通川流域における長期的健康影響の調査によって，汚染地域の女性において大腸がん，
虚血性心疾患，腎疾患の死亡リスクが上昇することが報告されたが，腎尿細管障害と死亡率の関連性については検討されていなかった。そこで本研究では高度の環境汚染によるCd 暴露によって引き起こされた腎尿細管障害を伴う住民の，死亡率と死亡原因を明らかにすることを目的とした。
実験方法
1979-1984 年にかけて 50 歳以上を対象に実施された健康調査参加者のうち，神通川流域の Cd 環境汚染地域に住む 7348 名(男性 3363 名，女性 3985 名)および，非汚染地域に住む 2149 名(男性 926 名，女性 1172 名)を本研究の対象とし，調査時の尿所見別に汚染地域
を 4 つのグループに分類し，非汚染地域と比較した。死亡率に関する調査では，戸籍照会により平成 17 年 11 月までの生死に関する情報を得た。さらにその死亡者について，平成
21 年に厚生労働省より人口動態統計目的外使用の許可を得て死亡者の 98%の死因が同定さ- 45 -

れた。これらを用いて Cox 比例ハザードモデルにより，ベースライン時の年齢，喫煙歴，高血圧の既往で調整した後に，汚染地域の尿所見なし，尿糖陽性，尿蛋白陽性，尿糖尿蛋
白同時陽性の 4 つのグループと，非汚染地域の尿所見ありを除いたグループとで，全死亡および死亡原因別の死亡率を比較した。
標準化死亡比(SMR)の算出は，観察期間が長期に渡るため 1979-1985，1986-1990，
1991-1995，1996-2000，2001-2005 年の 5 期間に分け，それぞれの期間ごとに年齢階級別
観察人年を求め，同期間の日本全体の死亡率を基準として期待死亡数を算出した。本研究では各 5 期間の期待死亡数を合算し，観察総年数 26 年間の総期待死亡数とし，観察死亡数をこの総期待死亡数で除して SMR を算出した。
実験成績
全死亡の死亡率は，非汚染地域の尿所見なしのグループと比較して，男性の蛋白陽性，
糖蛋白同時陽性のグループ，そして女性の糖陽性，蛋白陽性，糖蛋白同時陽性のグループ
で汚染地域が有意に高かった。死亡原因別では，男性の呼吸器，腎，心血管疾患，糖尿病で，そして女性の脳血管疾患を除くすべての疾患で糖蛋白同時陽性グループは死亡率が上昇していた。また女性では，蛋白陽性と糖蛋白同時陽性のグループで大腸，子宮，腎尿路系のがんの死亡率が有意に高かった。さらに汚染地域の女性では，尿所見なしと糖蛋白同時陽性のグループで，虚血性心疾患と大腸がんの死亡率の上昇が明らかにされた。非汚染地域の尿所見ありグループもまた糖尿病と腎疾患で死亡率の高さを示したが，腎疾患死亡率リスク比の上昇は汚染地域の尿所見ありのグループでより高かった。
標準化死亡比(SMR)は，男性では糖蛋白同時陽性グループで 1.40 と有意に高値であった。
女性では尿所見ありのグループの SMR は有意に高くなっており，中でも糖蛋白同時陽性グ
ループでは 2.02 と高率であった。
総括および結論
今回新たな知見として，汚染地域における女性の尿所見なしグループと糖蛋白同時陽性
グループで，虚血性心疾患と大腸がん死亡リスクの上昇が明らかになった。これは腎機能障害を伴わない汚染地域の住民でも Cd 暴露によって虚血性心疾患や大腸がんの死亡リス
クが上昇することを示唆している。また汚染地域のすべての女性で，虚血性心疾患のリスク上昇が示された。さらに糖尿病，心血管疾患とくに虚血性心疾患，呼吸器系疾患，腎疾
患は両方の性の死亡率上昇に寄与していた。これらの結果は，Cd 暴露による腎への影響が男女共に長期的な生命予後の低下につながることを示唆している。
論文審査結果の要旨
本研究では，神通川流域の Cd 汚染地域住民における，死亡率・死亡原因と腎尿細管障
害との関連性を明らかにするために，汚染地域住民 7348 名を尿所見なし，尿糖陽性，尿蛋白陽性，尿糖尿蛋白同時陽性の 4 つのグループに分けて，その死亡率と死亡原因を 26
年間のデータを基に調査した。その結果，Cd 暴露による腎への影響が男女共に長期的な生命予後の低下につながることを示された。特筆すべき点は，Cd による尿細管障害とは- 46 -

関係なく，特に女性において大腸癌や虚血性心疾患が有意に増加し，これが生命予後を悪くする一因となっているという新たな知見が見出されたことである。本研究結果は，膨大な症例と，長期間に蓄積されたデータに基づくものである。結論は適切な統計処理を行って得られた信頼すべきものであり，またこれまでの報告にない新たな知見が含まれる。
以上より, 本論文は博士（医学）の学位を授与するに値するものと認められる。

（主論文公表誌）
Environmental HealthVol.13, No.1, 2014

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