PCB 水酸化代謝物の分析
横浜国立大学環境情報学府、*横浜市立大学医学部○青柳光洋、*鹿島勇治、益永茂樹

Analysis of Hydroxylated PCBs Metabolites, by Mitsuhiro AOYAGI, *Yuji KASHIMA, Shigeki MASUNAGA(Graduate School of Environmental Infomation＆Science /Yokohama National University, *Department ofHygiene /Yokohama City University School of Medicine)

1. はじめに
PCB は生体内において、チトクロム P450 による酸化を受け、水酸化体 PCB へと変換された後、速やかに体外へ排出されるが、一部の水酸化体は、甲状腺ホルモンと類似した構造を持つために、甲状腺ホルモン輸送タンパクであるトランスサイレチン（TTR）と結合し、血液中に特異的に残留する事が明らかとなっている 1)。
また、ペンタクロロフェノール（PCP）などのハロゲン化フェノールもまた TTR と結合して甲状腺ホルモン機能を攪乱することが懸念されている。我が国において、これらの物質の測定データは未だ不足しているため、本研究では、ボランティア血清中の水酸化体 PCB及び PCP を分析し、近年の我が国のヒトの血液中濃度及び存在パターンの概要について解析した。
2. 実験方法
ヒト血清試料（すべて男性）17 検体を分析に供した。
対象化合物は、4〜7 塩素の水酸化体 PCB 14 異性体および PCP の計 15 物質である（表１）。血清試料 5g に内標準物質を添加後、硫酸で血清中タンパクを変性させ、ヘキサン / MTBE(1:1,v/v)を用いて振とう抽出した。
抽出物をヘキサンに転溶後、アルカリ溶液（KOH）によりフェノール性化合物を分配抽出し、PCBs 等の中性物質と分離した。アルカリ溶液に塩酸を加え酸性化し、ヘキサン/ MTBE(1:9,v/v)によりフェノール性化合物を有機相に抽出した。有機相を濃縮後、フェノール性化合物を硫酸ジメチルにより対応するメトキシ誘導体化した。得られた試料を 33%硫酸シリカゲルカラムに付し、ジクロロメタンで溶出し、濃縮後シリンジスパイクを添加したものを試料溶液とした。機器分析は、DB-5（J&W 社）を装填した HRGC/HRMS（Micromass 社、Autospec-Ultima）を用い、分解能 10000 以上で EI-SIM法にて測定を行った。
3. 実験結果
ヒト血清中から検出された分析対象の水酸化体 PCB の合計濃度は 10〜640 pg/g fresh weight (pg/g fw) の範囲で、その平均濃度は 204 pg/g fw であった。また、全ての試料から PCP が検出され、その濃度範囲は 717〜7907 ng/g fw、平均濃度は 2738 pg/g fw であった。
4. 考察
本研究においてヒト血清中から検出された水酸化体
PCB は、すべて 5 塩素化以上の異性体であり、4 塩素化の異性体はほとんど検出されなかった。これらの濃度レベルは、欧米人の PCB 高暴露群の濃度よりも 1 桁低く、また対照群と同レベルであった 2)3)。また、全ての試料から検出された上位 3 異性体の平均濃度の順位

は 、 4-HO-233'4'5-pentaCB (4-HO-CB107) ＞
4-HO-22'34'55'6-heptaCB(4-HO-CB187)＞
4-HO-22'34'55'-hexaCB (4-HO-CB146)であり、これら3 異性体だけで水酸化体 PCB の合計濃度の約 7 割の濃度を占めた。スウェーデン人血清及び血漿の分析では、
4-HO-CB187、4-HO-CB146、4-HO-CB107 の順で高濃度に検出されているが、日本人及びラトビア人 4)の血
漿では 4-HO-CB107 が最も高濃度であり、主要な異性体の濃度順位には差が認められる。これらの差には食習慣などによる PCB の暴露量の違いや、人種による代謝能力の違い等が影響していると考えられる。一方、PCP の濃度は、水酸化体 PCB の合計濃度の約 20 倍であり、これまでの報告と同様に、今回分析したフェノール系化合物の内、最も高濃度の成分であった。また、
PCP の濃度レベルは、欧米人の PCB 高暴露群及び対照群と同レベルであったことから、水酸化体 PCB とは暴露経路が異なる事が推察される。ヒト血液中におけるPCP の汚染源や暴露経路は不明であるが、PCP の直接摂取の他に Hexachlorobenzene の体内代謝物が寄与していると考えられる。PCP は TTR との結合親和性がT4 の約 2 倍 5)であり、水酸化 PCB よりも高濃度である事から、今後水酸化体 PCB と同様に、PCP による甲状腺ホルモンの攪乱作用の調査の必要性が示唆された。
表１ ヒト血清中の HO-PCBs 及び PCP 濃度（pg/g fresh weight, n=17）
HO-PCB
congeners
4'-HO-CB72
4-HO-2',3',4',5'-Tetrachlorobiphenyl
4'-HO-CB61
4-HO-2',3,5,5'-Tetrachlorobiphenyl/4-HO-CB79 /4-HO-3,3',4',5-Tetrachlorobiphenyl
4-HO-CB107 4-HO-2,3,3',4',5-Pentachlorobiphenyl
3-HO-CB118 3-HO-2,3',4,4',5-Pentachlorobiphenyl
4'-HO-CB120 4-HO-2',3,4',5,5'-Pentachlorobiphenyl
4'-HO-CB121 4-HO-2',3,4',5,6'-Pentachlorobiphenyl
4'-HO-CB127 4-HO-3,3',4',5,5'-Pentachlorobiphenyl
3-HO-CB138 3-HO-2,2',3',4,4',5-Hexachlorobiphenyl
4-HO-CB146 4-HO-2,2',3,4'5,5'-Hexachlorobiphenyl
4'-HO-CB159 4-HO-2',3,3',4',5,5'-Hexachlorobiphenyl
4'-HO-CB165** 4-HO-2',3,3',5,5',6'-Hexachlorobiphenyl
4-HO-CB172 4-HO-2,2',3,3',4',5,5'-Heptachlorobiphe
4-HO-CB187 4-HO-2,2',3,4',5,5',6-Heptachlorobiphen
SumPCP
Pentachlorophenol

Mean

Range

0.2

＜0.1-2

22-6

63
512
828
39
2
1212
42
204
2738

3-169
＜0.1-16＜0.1-6＜0.1-11＜0.1-6
1-92
2-137
0.6-4
4-24
0.6-402-183
10-640717-7907** 3-HO-CB153 が co-elution している可能性あり【参考文献】
1) L. Hovander et al.: Arch Environ Contam Toxicol. (2002)42,105-17. 、 2) Andreas Sjodin et al.: Environ.Health Perspect.
(2000)108, 1035-1041.、3) Courtney D Sandau et al.: Environ

Health Perspect. (2000)108, 611-616.、4) Daiva MG et al.: Environ
Health Perspect. (2003)111, 1235-1241.、5) van den Berg KJ.:
Chem Biol Interact. (1990)76, 63-75.