原 著

機能水研究

Vol.12(1), p.17-23, 2016

水素水商品の活性酸素消去能における比較研究金1

辰也 1,2、佐藤 和恵 2、川上 裕司 1

株式会社エフシージー総合研究所、2 昭和大学薬学部
2016.4.26 受付、2016.7.23 受理

機能水の 1 種と位置付けられている水素水について、活性酸素消去能を比較検討した。2015 年 12月から 2016 年 3 月にかけて市販されている水素水商品について、電子スピン共鳴装置を用いたス

ピントラップ法によりヒドロキシルラジカル消去能、スーパーオキシド消去能、一重項酸素消去能をそれぞれ測定した。その結果、ヒドロキシルラジカル消去能において、水素水商品の水素量との間で相関性がある結果を得た。一方、スーパーオキシド消去能と一重項酸素消去能については相関性が得られなかった。水素水中の水素分子は活性酸素種の中でも特異的にヒドロキシルラジカルと反応し、水素ラジカルと水に変換されるヒドロキシルラジカルの消去反応が起こっていると考えられ、既報 1）の反応と同一と推察された。

ただし、市販されている水素水商品を開放系にて放置すると時間単位で溶存水素量が低下したので、開封後は商品ごとに指定の保存方法を順守することや空気中に抜ける前に飲みきることに留意する必要がある。

キーワード： 水素水、活性酸素、ヒドロキシルラジカル、スーパーオキシド、一重項酸素
留水（㈱大塚製薬工場）10 mL の溶液に圧縮水素ガス（昭和電工㈱）を用いて溶存圧力 0.4 MPa（4 気圧）の水素ガ

１．序文

よって、電気分解による水素発生方法、水素ガス圧力充填

スを 1 分間、3 分間および 10 分間同じガス流量で処理し方法、水酸化カルシウムとアルミン酸カルシウムとの反て密閉し、自作の水素水を調製した。それぞれのサンプル

機能水の一つに位置づけられる水素水は、製造方法にの商品名、容量、容器、飲み口を示す（表 1）。

応による水素発生方法などが市販商品の水素水として商品展開されている。多数市場で存在している水素水商品

スピントラップ法で用いた蒸留水は大塚蒸留水（㈱大の中で、水素ガスを高圧で充填させてアルミ缶やアルミ

パウチで封入したタイプ（一般的な水素濃度は 0.8～1.6

塚製薬工場）を用いた。その他の試薬は和光純薬工業㈱のmg/L）や炭酸飲料用のペットボトル中で水素ガスを発生

特級試薬を用いた。

させて加圧条件で高濃度の水素濃度を提供する商品（一２）溶存水素濃度の測定 2)

れ、携帯が可能な水素水商品として近年需要が高まって測定した。この判定試薬は、水素濃度を測定したいサンプいる。

ルに対して白金コロイド含有メチレンブルーを滴下して、般的な商品の水素濃度は約 4.0～7.0 mg/L）などが上市さMiZ㈱製「溶存水素濃度判定試薬」を用いて水素濃度を

今回、上記の水素水商品や自作で水素ガスを封入した

サンプル中の分子状水素が白金触媒を介して活性化し、ブルーを 2 電子還元することで酸化型のメチレンブルー

水素水について活性酸素消去能を評価した。

原子状の水素へ転換され、即座に原子状水素がメチレン

２．材料と方法（青色）から還元型のロイコメチレンブルー（無色）へと水素水商品は 2015 年 12 月から 2016 年 3 月にかけて市

１）材料変換される反応を利用する。滴下を続けて合計の滴下数を基に、溶存水素濃度を同判定試薬の方法に従い数値化

販されている水素水商品を任意で11 商品選択して試験品した。

とした。また、パイレックス製スピッツ管に入れた大塚蒸

尚、電気分解によって発生させた水素水中の水素濃度

金 辰也：〒135-0064 東京都江東区青海 1-1-20 ダイバーシティ東京オフィスタワー6 階
Tel: 03-6891-8504 Fax: 03-6891-8517 E-mail: kon@fcg-r.co.jp

17表 1. 水素水サンプル
A
B
C
D
E
F
G
H
I
J
K
L
M
N

商品名／水素ガス封入（自作）「アキュエラ 7.0ppm」水素水
高濃度水素水
高濃度ナノ水素水スパシア
還元性水素水
高濃度水素水 500mL
高濃度水素水 300mL
水素ガス封入（10 分間）（自作）
水素水のチカラ
ナノ水素水キヨラビ
高濃度 水素が抜けにくい水素水
高水素濃度ウォーターSWAT
Eau de Vie 24/7 booster
水素ガス封入（3 分間）（自作）
水素ガス封入（1 分間）（自作）

容量（mL）
500
210
500
310
500
300
10
300
300
330
180
180
10
10

測定において MiZ㈱製の同商品を用いて水素濃度を判定

容器
専用ペットボトル
アルミパウチ
アルミパウチ
アルミ缶
アルミパウチ
アルミパウチ
圧縮水素ガス
アルミパウチ
アルミパウチ
アルミパウチ
アルミパウチ
アルミパウチ
圧縮水素ガス
圧縮水素ガス

飲み口
キャップ方式
スパウト方式
スパウト方式
キャップ方式
スパウト方式
封切り方式
無し
封切り方式
スパウト方式
スパウト方式
スパウト方式
スパウト方式無し
無し

件）、1,000（スーパーオキシド消去能測定時条件）、500（一重項酸素消去能測定時条件) 、応答時間：0.03 sec

すると、電気分解の過程で水素と同時に発生している酸素の影響で正しく測定されていない可能性がある。本試

スピントラップ法で用いた試薬類の略語および販売会

験で評価に用いた水素水商品は、水素ガスを高圧で充填

社名を以下に示す。販売会社名を記載しなかった試薬はさせてアルミ缶やアルミパウチで封入したタイプや炭酸

和光純薬工業㈱の特級試薬を用いた。

で超過飽和状態（約 4.0～7.0 mg/L）の水素濃度提供する（Sigma-Aldrich）、DMPO：5,5-dimethyl-1-pyrroline-N-oxide

飲料用のペットボトル中で水素ガスを発生させて高圧下

4-OH

TEMP ： 2,2,6,6-tetramethyl-4-hydroxy-piperidine

商品に限定しているので、各サンプルの水素濃度の定量（ LABOTEC Co. Ltd. ）、 DTPA ： Diethylenetriamine-は担保されている。

N,N,N’,N’’,N’’-pentaacetic acid （Dojin Chemical）、PBS：

る開放系の条件で放置し、開封直後、1 時間後そして 2 時from bovine milk（Sigma-Aldrich）、H2O2：Hydrogen Peroxide、

Phosphate buffered saline (pH7.4)、XOD：Xanthine oxidase

確認試験として、水素水商品を開封後、空気に直接触れ間後の溶存水素濃度を測定した。併せて、水素水の酸化還DMF：N,N-Dimethylformamide

を用いて測定した。但し滴定での溶存水素濃度の測定でブコントロールとして L (+)-アスコルビン酸ナトリウム

元電位（vs. Ag/AgCl)を pH メーターD-52（HORIBA, Ltd.）

以下に示す活性酸素消去能の測定において、ポジティ

放された溶液中の 0.6 mg/L 以下の溶存水素濃度を正確には著しく空気中の酸素の影響を受けるので、空気中に解を用いた。

測定することは困難である。従って、表 1 に示した溶存(A) ヒドロキシルラジカル（・OH）消去能 3)

水素濃度の 0.6 mg/L 以下の値は正確な濃度を測定できていない可能性があり、空気放置 1 時間後と 2 時間後の水

フェントン反応で発生するヒドロキシルラジカルに対素濃度の値で 0.6 mg/L 以下は参考値とする。

して水素水商品の消去能を測定した。
・200 μM DTPA／大塚生理食塩水 100 μL（終濃度 100 μM）
ガラス製試験管に各溶液を加えた。

３）活性酸素消去能の測定法－電子スピン共鳴によるス

・500 μM Ferrous sulfate／大塚蒸留水 20 μL（終濃度 50

電子スピン共鳴装置は ESR-JES-RE1X（日本電子㈱製）

・100 mM DMPO／大塚蒸留水 20 μL（終濃度 10 mM）

μM）、

ピントラップ法を用いた。使用した ESR の測定条件を示す。

・評価検体溶液／大塚蒸留水 40 μL

共鳴周波数：9.39 GHz、出力：4.0 mW、磁場変調：100 kH、・10 mM H2O2 ／大塚蒸留水 20 μL（終濃度 1 mM）

観測磁場：335.5±5 mT、測定時間：1.0 min、変調幅：0.1

過酸化水素添加後の全量 200 μL を ESR 測定用扁平セ

mT、増幅率：200（ヒドロキシルラジカル消去能測定時条

ルに移し、過酸化水素の溶液添加後、2 分後に測定した。

18

(B) スーパーオキシド（・O2－）消去能 4)

応する一重項酸素と、溶液中に存在している 4-OH TEMPとの adduct［2,2,6,6-tetramethyl-4-hydoxy-piperidinyloxy（4-OH TEMPO）radical］について ESR（電子スピン共鳴）測

キサンチン－キサンチンオキシダーゼの酵素反応で人定をおこなった。光照射装置は LED（Light Emitting Diode

工的に発生するスーパーオキシドに対して、水素水商品

Green（λmax: 530 nm）光源の SLL-4100S RGB（(有)シマの消去能を測定した。
・2 mM ヒポキサンチン／100 mM PBS 50 μL（終濃度テック）を用いた。20 分照射後の溶液を ESR 測定用扁平・1.33 mM DTPA／100 mM PBS 15 μL（終濃度 100 μM）

セルに移し、測定開始した。

・1.33 M DMPO／大塚蒸留水 15 μL（終濃度 100 mM）
・評価検体もしくはコントロール／大塚蒸留水 100 μL４）消去率（％）の算出

・200 U/mL XOD／100 mM PBS 20 μL（終濃度 20 U/mL）のマンガンマーカーに対する各スペクトルの比率をシグ

し、2 分後に測定開始した。

し、平均値をシグナル比として算出した。

一検体における試薬の添加量を以下に示す。
500 μM）

XOD 添加後の全量 200 μL を ESR 測定用扁平セルに移(C) 一重項酸素（ O2）消去能1

各スピントラップ法の試験で得られた ESR スペクトル

ナル強度（SN）として数値化した。各検体は n＝3 で実施

それぞれの数値について以下の計算式で消去率を算出5)した。
消去率［％］＝100×{ 1－(SN［sample])／(SN [control]) }

光増感試薬であるローズベンガル溶液への光照射で人SN は ESR シグナル強度を示す。コントロール[control]

工的に発生する一重項酸素に対して水素水商品の消去能を測定した。
一検体における試薬の添加量を以下に示す。

は大塚蒸留水を評価検体として用いた時の測定結果を示

・評価検体もしくは大塚蒸留水（コントロールの場合）

100 μLす。サンプル濃度は、添加濃度で無く最終濃度で統一して・大塚生理食塩水 20 μLいる。ヒドロキシルラジカル消去能の場合は評価サンプ

ル容量が 40 μL／全 200 μL なので濃度 100％のサンプル

・100 mM 4-OH TEMP 40 μL（終濃度 20 mM）溶媒：で評価した時に最終濃度 20％となり、スーパーオキシド

40 ％（v/v）DMF

・100μM ローズベンガル 40μL（終濃度 20μM）溶媒：

消去能および一重項酸素消去能の場合は評価サンプル容

40％（v/v）DMF

全量 200 μL を 96well plate に滴下し、緑色光（λmax: 525

価した時に最終濃度 50％となる。ポジティブコントロー

ルの L(+)-アスコルビン酸ナトリウムについて 50％消去

量が 100 μL／全 200 μL なので濃度 100％のサンプルで評nm）照射によるローズベンガルの光増感反応によって反0

0

0（コントロール）（コントロール）

0.00020.00050.000150.000250.00010.0001% (w/v)
サンプル濃度（最終濃度）濃度（IC50：50％ Inhibition Concentration）をそれぞれのス% (w/v)
サンプル濃度（最終濃度）

332 334 336 338 340

Field (mT)(A) ヒドロキシルラジカル消去能（コントロール）

0.02
0.01
0.005
0.004
332 334 336 338 340

Field (mT)(B) スーパーオキシド消去能
図 1. ESR スペクトル（サンプル： L(+)-アスコルビン酸ナトリウム）

19% (w/v)
サンプル濃度（最終濃度）

332

334

336

338

Field (mT)(C) 一重項酸素消去能

340

0

0

0

（コントロール）（コントロール）（コントロール）

20

50（サンプルA）

20（サンプルA）

50（サンプルB）% (w/v)
サンプル濃度（最終濃度）

50（サンプルA）

50（サンプルB）

332 334 336 338 340

Field (mT)%(w/v)
サンプル濃度(A) ヒドロキシルラジカル消去能

332 334 336 338 340（サンプルB）% (w/v)
サンプル濃度

Field (mT)(B) スーパーオキシド消去能

332

334

336

338

Field (mT)

340

(C) 一重項酸素消去能

図 2. ESR スペクトル（サンプル A およびサンプル B の水素水を例示）

ピントラップ法の試験系において算出した。
各スピントラップ法の試験で得た消去能と水素濃度といて相関係数（r）および P 値を求めた。

の関係性をそれぞれ散布図にプロットし、近似曲線につ

図 1 に各スピントラップ法で測定した ESR スペクトル３．成績（結果）を示す。ポジティブコントロールの L(+)-アスコルビン酸(A) 溶存水素とヒドロキシルラジカル消去能（図 1(A)）、スーパーオキシド消去能（図 1(B)）
、一重項ナトリウム濃度依存的にヒドロキシルラジカル消去能

酸素消去能（図 1(C)）
それぞれの ESR シグナルが減衰し、消去活性を示した。L (+)--アスコルビン酸ナトリウムの消去能をそれぞれ 50％消去濃度（IC50％ (w/v)、最終濃度表

記）で(A)ヒドロキシルラジカル消去能では 0.000217％、(B)スーパーオキシド消去能では 0.000452％、(C)一重項酸
素消去能では 0.00717％であった。

カル消去活性を示した。一例として、サンプル A（商品また、一部の水素水商品についてもヒドロキシルラジ

名：「アキュエラ 7.0 ppm」水素水）とサンプル B（商品(B) 溶存水素とスーパーオキシド消去能

名：高濃度水素水）の ESR スペクトルを図 2 に示す。サンプル A はヒドロキシルラジカルを 40％以上、サンプル

B は 20％以上消去した。一方、スーパーオキシドと一重
項酸素における消去能は 10％以下で水素水商品のサンプ

図 3 にそれぞれのスピントラップ法による各試験系でルではいずれもほとんど消去しなかった。

の活性酸素消去率（％）と溶存水素との相関性をプロットしたグラフを示す。
溶存水素濃度との間に正の相関（r=0.941、P= 0.000000521）
ヒドロキシルラジカルの消去能については各水素水の(C) 溶存水素と一重項酸素消去能
図 3. 溶存水素と活性酸素消去能（14 サンプル）が確認された。

20

一方、スーパーオキシド消去能や一重項酸素消去能にオキシドも電子や水素原子、遷移金属との化学反応が進関しては弱い相関もしくは相関がみられなかった。

むことで、ヒドロキシルラジカルなど毒性の強い活性酸

従って、水素水商品、特に、水素ガスを封入したタイプ

素種に変化する。また、一重項酸素は、光増感反応や紫外の商品について、活性酸素の種類の中で特異的にヒドロ線照射で特異的に発生するので、眼や皮膚といった外部

キシルラジカルを消去する可能性が既報 の反応と同一環境に接する組織で影響を与えていると考えられる。

表 2 に各水素水商品の溶存水素量、酸化還元電位およ性酸素消去による健康増進効果を検討するにあたり、特び活性酸素消去能を示す。いずれの水素水についても、開異的にヒドロキシルラジカル消去能を発揮する水素水は放後に溶存水素量の低下と酸化還元電位の増加が起こっ

非常に有望な商材の一つになり得る。

1)と再確認された。

従って、生体において適切かつ効果的に抗酸化能や活れも若干の pH 低下傾向を示した。水素水のサンプルが開置しておくと、時間単位で溶存酸素量の低下と酸化還元

封後に空気に曝しておくことで溶存酸素濃度や溶存二酸電位の増加を招いてしまうので、商品に注意事項として化炭素の増加が影響していると考えられる。

示されている保存方法に従うといったユーザー側の配慮ている事を確認した。また、pH について、開放後にいず

しかしながら、水素水商品を開封後、空気中に曝して放も水素水商品を効果的に活用するためには必要である。
の相関性を示すグラフについて、溶存水素濃度 6.0 mg/L

４．考察

また、ヒドロキシルラジカル消去能と溶存水素濃度とであったサンプル A のヒドロキシルラジカル消去能の結反応性の高い不対電子を有する活性酸素は、他の物質

果を除いて、改めて 13 種類のサンプルについて（14 種類

から電子を奪い取ることで酸化反応を促進する。生体に－1 種類＝13 種類）プロットした（図 4）。近似式と相関おける活性酸素は、美容や健康に関して増悪要因になりる一部のスーパーオキシドは合目的的に発生し、抗カビ、係数は 13 種類の場合でも高い相関性を保っていたので、抗菌や抗ウイルスの生体防御に寄与するとも言われてい近似式や相関係数は頑健性が担保されていると考えられる。

る。しかしながら、13 種類のサンプルでのプロットでは得ると言われている一方、ミトコンドリア由来で発生す14 種類でのそれに対して傾きの数値が約 30％増加した。
大気圧における溶存水素濃度の飽和濃度は約 1.58 mg/L

ヒドロキシルラジカルは活性酸素の中で最も反応性が強く、酸化力も強いのが特徴である。
脂質、糖質、タンパク質など生体を構成する化合物と反で、それ以上の高濃度で密閉されている水素水を容器か応して酸化を引き起こす。一方、スーパーオキシド（O2 ）ら開封すると、大気圧に曝される過程で溶存水素濃度のは、それ自体に損傷力は強くなく、体内で必要に応じて発減衰が著しいために、溶存水素濃度が高濃度のサンプル

生し、外部からの異物（カビ、バクテリア、ウイルスなど）のヒドロキシルラジカルの測定値が低く出たと推察する。

－

を殺菌・除去する役割を担っている。但し、そのスーパーA

水素水サンプルヒドロキシルラジカル消去能（％）
スーパーオキシド消去能（％）
一重項酸素消去能（％）
開封直後
溶存水素量
（mg/L）

空気中解放 1 時間後
空気中解放 2 時間後

B

55.0

24.3

3.43

8.31

12.08
6.0
4.0
1.6

表 2.各水素水商品の測定結果
C

7.84

4.59

2.47

0.4

0.5

5.98

2.2

1.2

0.7

E

13.7

5.95

1.0

D

9.1

0.8
0.6

8.8

F

G

H

I

J

K

5.42

7.58

6.00 11.04 12.18

0.2

1.1

5.62

2.73

3.32

3.83

0.8

0.6

1.2

1.2

1.4

1.4

0.3

0.1

1.6
0.5

8.26 10.12
1.1
0.8

0.9
0.6

7.99
1.1
0.8

8.85
0.9
0.7

17.7

N

7.67

4.44 15.27

0.2

M

25.2 17.23 12.23 20.43 21.51

6.99 16.21
1.1

L

8.9

7.59 14.31
1.0
0.7
0.4

1.1
0.8
0.4

14.1
2.34
0.8
0.6
0.3

開封直後

-583

-432

-680

-488

-587

-491

-294

-542

-485

-425

-480

-378

-282

-254

（mV）

空気中解放 2 時間後

-270

-175

-252

-227

-301

-189

185

-326

-288

-249

-97

-45

71

104

pH

開封直後

酸化還元電位

空気中解放 1 時間後

空気中解放 1 時間後
空気中解放 2 時間後

-380
7.11

6.62
6.28

-233
7.08
6.62
6.15

-456
7.17
7.01
6.53

-353
7.81
7.58
7.29

-372
6.89
6.02
5.85

-263
7.68

6.95

7.04

6.03

7.11

* 空気中解放 1 時間後と 2 時間後の水素濃度の値で 0.6 mg/L 以下は参考値とする。

21

35

6.74

-487
7.42
7.19
7.14

-326
7.26
7.19
7.16

-384

-256

-189

-55

16

7.11

7.77

7.82

7.03

6.84

6.87

7.47

7.47

6.45

6.52

6.99

7.53

7.48

6.76

6.63

モデル試験により特異的に水素分子がヒドロキシルラジ
カル消去能を発揮することを確認した。

６．謝辞
活性酸素消去の試験実施にあたり御尽力いただきました昭和大学薬学研究科臨床分析化学教授 荒川秀俊先生に深謝いたします。

1) Ohsawa I, Ishikawa M, Takahashi K et al.: Hydrogen acts as
７．参考文献図 4. 13 サンプルによる溶存水素とa therapeutic antioxidant by selectively reducing cytotoxic
oxygen radicals. Nat Med., 13: 688-694, 2007.

ヒドロキシルラジカル消去能（サンプル A をデータから割愛）

2) See T, Kurokawa R, Sato B: A convenient method for

determining the concentration of hydrogen in water: use of

今後は、水素水サンプルが ESR 測定時まで空気に曝され

methylene blue with colloidal platinum. Med Gas Res., 2: 1-

る影響がより少ない Stopped-flow 装置を備えた ESR 測定

6, 2012.

3) Ando T, Yoshikawa T, Tanigawa T et al.: Quantification of

今回実施した試験は、活性酸素種ごとに人工的に発生

singlet oxygen from hematoporphyrin derivative by electron

こるかは不明であるが、先行研究として、成人 7 名に水4) Minamiyama Y, Yoshikawa T, Tanigawa T et al.:の実験手法を活用する手段が適すると考えられる。

spin resonance. Life Sci, 61: 1953-1959, 1997.

させている特殊な環境下での反応のため体内で実際に起素水を摂取した時の呼気分析で水素の吸収や体内動態をAntioxidative effects of a processed grain food. J Nutr Sci

水素水の 59％はそのまま排出され、残りのほとんどは体

5) Kon T, Tanigawa T, Hayamizu K et al.: Singlet oxygen

見積もっている報告がある 6)。被験者の呼気分析により、内で消費されると報告されている。また、水素水飲用 10

Vitaminol (Tokyo)., 40: 467-477, 1994.

quenching activity of human serum. Redox Report: 9: 325-

分後に呼気中 36 ppm（36 mg/L）の最大濃度に達し、その330, 2004.

後、飲用 60 分後にはベースラインに戻ったので、有機化

6) Shimouchi A, Nose K, Mizukami T et al.: Molecular合物に比べて水素の体内動態は非常に速やかであると考

inhalation of hydrogen gas. Adv Exp Med Biol., 789: 315-321,

hydrogen consumption in the human body during the2013.

えられる。水素分子はヒドロキシルラジカル消去能に使

水に溶け込んだ水素が体内においてどのような生理的

7) Yoritaka A, Takanashi M, Hirayama M et al.: Pilot study of

検証が進んでいる。パーキンソン病患者への 48 週間飲用

blind placebo-controlled trial. Mov Disord., 28: 836-839,

われ、皮膚表面に放出されると推定される。

効果を生じるのか疾病者を対象にしたヒト臨床試験でのH₂ therapy in Parkinson's disease: a randomized double-

や境界型糖尿病患者に 8 週間飲用 による症状の改善が

2013.

7)

8)

8) Kajiyama S, Hasegawa G, Asano M et al.: Supplementation

健康増進効果の科学的解明が望まれる。

of hydrogen-rich water improves lipid and glucose

５．結論

glucose tolerance. Nutr Res., 28: 137-143, 2008.

報告されていることから、今後は健常な人を対象にした

metabolism in patients with type 2 diabetes or impaired

水素水中に含有している水素分子について、溶液中の22

Comparative Study on the Active Oxygen Scavenging Abilityof Hydrogen Water Goods

Tatsuya KON1, Kazue SATOH2 and Yuji KAWAKAMI1
1

FCG Research Institute, Inc., 2 Showa University

We compared and studied the active oxygen-scavenging ability of hydrogen rich water. We evaluated the scavenging

abilities of hydroxyl radical, superoxide, and singlet oxygen, on the hydrogen water samples which were in the market
from December 2015 to March 2016 by the spin trapping method using an electron spin resonance apparatus.

As aresult, we found that there was relationship between the ability to scavenge hydroxyl radical and the hydrogenconcentration in the hydrogen water samples.

On the other hand, there was no relationship between the ability toscavenge superoxide and that to scavenge singlet oxygen. It was suggested that hydrogen molecule in hydrogen water
undergoes neutralization specifically with the hydroxyl radical among active oxygen species.

Dissolved hydrogen content decreased with time when hydrogen water samples obtained from the market were left

exposed to the atmosphere. Hence, it is necessary to pay attention, after opening on every sample, to observe thedesignated preservation method and to drink off the water before the discharge of hydrogen into air.

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