494 『移 植』 Vol. 45, No. 5

総説

移植と HLA 抗体：
HLA タイプ＆スクリーンと移植後抗体モニタリング
佐治博夫
特定非営利活動法人 HLA 研究所

Transplantation and HLA antibody: posttransplantation HLA antibody monitoring and
HLA type & screen to overcome technical and logistic limitations
Hiroh SAJI
HLA Laboratory, NPO[Summary]
The important role of preformed HLA antibodies in the outcome of organ transplants has been well demonstrated for the past 40
years. During this same period, the significance of HLA antibody formation after transplantation was largely ignored. Only in thepast 10 years has it become increasingly clear that HLA antibodies formed posttransplantation are the major cause of allograft failure.
On the basis of this new finding, in addition to pretransplantation antibody screening and crossmatch, monitoring for antibody development after 3, 6, 9, and 12 months, with yearly checks thereafter, is suggested.
In stem cells（bone marrow）transplantation, HLA-identical donors have been employed for almost 40 years. However, nowadays
HLA-mismatch unrelated transplantation using cord blood and related HLA haploidentical mismatch transplantation are becoming
more popular.
In both organ and stem cells transplantation, there are so-called logistic problems of donor lymphocytes for direct crossmatchingwith unrelated donors, especially in the setting of cord blood and cadaveric grafts. Herein, the author proposes HLA type & screen ,an analog of type & screen in blood transfusion known as virtual crossmatch in the USA. This method also may partially solve another logistic problem: limited donor search for hypersensitized recipients.
Recent technical developments of HLA antibody detection and identification of specificity are reviewed herein. Finally, the epitopeof HLA antigens for antibodies is summarized, and probability of identification for immunodominant epitope and its clinical importance are mentioned.
Keywords: HLA antibody, transplantation, rejection, type & screen, virtual crossmatch, clinical monitoring

I．はじめに移植における組織適合性は生物学的な永遠の課題かもしれない。移植医療は進化によって得られた免疫個性を乗り越えようとする試みだからである。
免疫抑制剤の長足の進歩は，造血幹細胞移植を除く臓器移植の HLA バリヤーを乗り越えることを可能にしたが，それは細胞性免疫に限られている。拒絶のうち，移植後短期（1 日〜1 週間）に起こる超急性拒絶・

さじ ひろお 1937 年甲賀流忍者の末裔として生まれる。1960 年京都薬科大学卒業，
京都府立医科大学法医学教室助手，1968〜
2000 年京都府赤十字血液センター技術部・研究部長歴任，2000 年特定非営利活動法人
HLA 研究所を設立，現在理事長・所長，日本組織適合性学会監事。WHO Committee Member of Nomenclature for Minor Histocompatibility Antigens.

移植と HLA 抗体：HLA タイプ＆スクリーンと移植後抗体モニタリング

495

促進性急性拒絶は HLA 抗体や ABO 抗体による液性DP など連鎖する複数の抗原が含まれていて，推計学免疫が主たる原因で，免疫抑制剤の適用範囲外であ的手法が欠かせないものであった。つまり，膨大な手り，直接クロスマッチにより防止してきた。8〜100

間と時間がかかる検査であったが，数年前に革命がも日に起こる急性拒絶は主として細胞性免疫によるもの

たらされた。遺伝子工学的手法で単一の HLA 精製抗として，免疫抑制剤はこれを標的に開発されてきた。

原が得られるようになり，これをマイクロビーズ（フ100 日以後の慢性拒絶は免疫抑制剤の持続投与によっローサイトメトリー用）やルミネックスビーズに固相て細胞性免疫を抑制して対処されるが，液性免疫によ化した「単一抗原ビーズ（single antigen coated beads）」

る慢性拒絶を防ぐことは困難である。

がキット化されたことである。単一抗原との反応が陽臓器移植では細胞性免疫の制御から，液性免疫の制性であることは，すなわちその抗原特異性のある抗体

御へと力点が変ってきている。その道程にひとりの老が存在することを意味し，推計学的な推定と蓋然性の学者の名前がしきりに見え隠れする。ポール・イチ

計算は必要なくなる。抗体特異性同定の精度は著しく

ロー・テラサキの名であり，奇しくも細胞性（移植）高くなると同時に簡便化された。

免疫の創始者（ノーベル賞学者）ピーター・メダワー

直接クロスマッチは，パネルの代わりにドナーリンの弟子という因縁がある。テラサキは移植免疫＝細胞

パ球またはドナー HLA 抗原を用いて，レシピエント

性免疫という移植領域の常識に敢然と立ち向かい，液の血清との反応をみるものである。理論的には理想的性免疫は移植免疫の主役であると 20 世紀末から唱えな適合試験である。パネルが 1 個で DSA を検出でき，続け，10 年余をかけてデータを収集し続けた。そしドナーの HLA がごくまれな抗原でパネルに含まれなていま「HLA 抗体こそ超急性拒絶から慢性拒絶に至いケースでもその抗原に対する反応を確実に捉えられ

1）

るすべてにかかわる原因」であると断言する 。
直接クロスマッチは技術的問題や標準化の問題はさる。問題は，後に述べるドナーリンパ球のロジスティック（兵站学）問題や，ドナーが脳死などの状態ではておいても，ドナーリンパ球の確保と搬送というロジリンパ球が正常でない（HLA 抗原の表現に異常があスティック（兵站学）
的な問題がその実施の障害となっる）などの点である。

ている。HLA 抗体検出法は既に第四世代法に突入し1．リンパ球細胞障害試験（第一世代法）ていて，ロジスティックな問題解決が可能になったの

直接クロスマッチの手技の変遷は HLA 抗体検出手で，それを提案したい。
「HLA タイプ＆スクリーン」

技の歴史そのものである。
「リンパ球細胞障害試験

またはバーチャルクロスマッチである。これにより，（LCT）」と「抗ヒトグロブリン加リンパ球細胞障害試

超急性拒絶を防ぐとともに，慢性拒絶の主因が HLA

験（AHG-LCT）」が長年にわたって用いられ，超急性抗体であることを踏まえ，移植後 HLA 抗体モニタリ

拒絶や急性拒絶の防止に貢献してきた。ドナーのリンングを強く推奨するものである。

パ球とレシピエント血清を反応させて（AHG-LCT のII．HLA 抗体検出法／直接クロスマッチ法

場合はこの段階で抗ヒトグロブリンを反応させる），
ウサギ補体を加え，抗原抗体反応があるときに起こる

HLA 抗体スクリーニングは移植の世界では「PRA」

細胞障害をエオジンなどの染色で顕鏡して観察する方と呼ばれている。Panel reactive antibodies の略であり，法である。他法で疑わしい結果が出たときの確認試験

10 数種〜数 10 種のパネル（細胞または抗原蛋白）をとして，いまもゴールデンスタンダードとされるが，用意してそれに検体血清を反応させて抗体の有無をみ生きたリンパ球が必要で，その入手と準備に手間とコる。これに対して，直接クロスマッチは「DSA」を検ストがかかることが問題である。

出する方法である。DSA とは，ドナーに特異的に反2．混合リンパ球培養試験

応する抗体（donor specific antibody）の意である。パ

レシピエントとドナーのリンパ球を混合培養して，ネルは検体の属する ethnicity に有意の頻度で存在する

その幼若化率を判定する。HLA 適合性を細胞性免疫

HLA 抗原を網羅できるように選択される。抗体の存の手法で診る方法の 1 つである。HLA クラス"の適在が確認されたら，抗体の HLA 特異性が 同 定 さ れ合性を試験するのに適している反面，HLA クラス!

る。HLA 抗体同定検査には 70〜200 パネルが用いら適合性が反応に鈍感である欠点がある。手法の複雑性

れ，推計学的に蓋然性の高い特異性が計算される。パ

と培養に時間がかかる割には臨床医学的な相関が得ら

ネルには HLA-A，B，Bw，Cw，または HLA-DR，DQ，れないので，いまはほとんど用いられない。

496 『移 植』 Vol. 45, No. 5

3．ELISA（酵素抗体）法（第二世代法）

5．ルミネックス法（第四世代法）

マイクロプレートまたはテラサキトレーに固相化さLuminexR beads をプラットホームとする方法で あれた HLA 精製抗原に，検体血清を反応させ，洗浄後る。100 色の蛍光色調を認識するビーズ（ルミネックに結合した HLA 抗体に酵素標識抗ヒトグロブリンをス ビ ー ズ）上 に，Class%ま た は Class&の 精 製 HLA

反応させ，酵素に対応する基質を加えて発色させ，吸抗原がコーティングしてある。このビーズ群に検体血光度計を用いて測定して検出する。感度/特異性とも清を反応させ，洗浄後 PE 標識抗ヒトグロブリンで蛍よいとされるが，ドナーの HLA 抗原を用いるべき直光標識して，フロー系（LABScan 100R）に流し，ビー

接クロスマッチには適さない。そのためか，普及はそズの 100 色を片方のレーザーで識別し，PE 蛍光をもれほど進まなかった。最近，ドイツでドナーリンパ球

う片方のレーザーで検出測定する。HLA 抗原ごとにを 可 溶 化 し て HLA 抗 原 を プ レ ー ト に 固 相 化 す る

PE 蛍光値が得られるので適切なカット・オフ値を設

ELISA クロスマッチ方法が開発されヨーロッパを中定して判定する。HLA 抗体スクリーニングと抗体の心に用いられている。

同定には非常に威力を発揮するが，直接クロスマッチ

4．フローサイトメトリー（FCM）法（第三世代法）には適さない。ドナーの HLA 抗原を精製してビーズ

臓器移植の世界では直接クロスマッチの標準法にに固相化することが必要となる。最近，藤原らによりなっている。感度が高いこと，臨床成績との相関が高

immunocomplex capture fluorescence analysis（ICFA）法いことから，多くの国で採用されている。ドナーのリが提案されている2）。方法を概説する。

ンパ球とレシピエントの血清を反応させ，蛍光標識抗1）ルミネックスによる直接クロスマッチ法（ICFA）

ヒトグロブリンで標識し，FCM 機で蛍光分布のシフ
トをみる方法である。蛍光分布の右方偏移で陽性を判定する。問題は機器の設定や判定にコツがいり，客観的判定が意外に難しいことであろうか。わが国でも標準的な方法として普及している。本稿は新しいクロス

概要は（図 1）
!ドナーの全血にレシピエント血清を反応させ溶血させる。
"HLA・抗体複合物（immunocomplex）をビーズに固相化（capture）する。

マッチ法の提案を主旨としているので詳細は述べな#PE 標識抗ヒトグロブリンで蛍光標識する。

い。

$蛍光強度を測定する（fluorescence analysis）。

図 1 ルミネックス法の直接クロスマッチ＝ICFA 法の概念図

移植と HLA 抗体：HLA タイプ＆スクリーンと移植後抗体モニタリング

ICFA 法 は 既 に キ ッ ト 化 さ れ て 販 売 さ れ て い るR497

項に述べるバーチャルクロスマッチをすることで，ド［WAKFlow HLA 抗体クラス'（ICFA）］。

ナーの提供がかなり改善さ れ る こ と が 知 ら れ て い

2）ルミネックス法による抗体スクリーニング法

る3）。

培養細胞から HLA クラス'抗原とクラス(抗原をレシピエントは主治医・移植医の保護下にあり容易

アフィニティークロマトグラフィーなどの手法で抽出に検体を入手できるし，必要な検体は血清または血漿精製した抗原を，ルミネックスビーズに固相化し，有であり保存や運搬も容易にできる。しかしながらド意の頻度である抗原を網羅するように 50〜80 種のパ

ナーのリンパ球検体は，血縁や家族を除き，採取が困

ネル・ビーズを作成する。キット化して市販されてい難なことが多く，運搬や保存に手間を要し，時には入る［LABScreen PRAR，OneLambda 社，WAKFlow HLA

手が不可能なこともある（臍帯血移植など）。さらにR抗体（MR），ワクナガ製薬］。抗体検出感度は非常にはドナーリンパ球がグラフトと同時に搬送され，時間高い。LCT 法の 50〜100 倍の感度を有するとされる。

的制約が厳しいことも多い。移植施設の HLA ラボは反応強度（蛍光値）と反応パターンから，HLA 抗体

24 時間体制をとるのが世界の情勢であり，専門スタの力価や広範囲〜狭範囲特異性などの性質を判断できッフの確保も課題であった（わが国では症例数の関係る。推計学的方法で抗体の抗原特異性を推定することでそれほどの問題にはなっていない）。すなわち，直もできるが，確実で簡便に特異性を同定するには，次接クロスマッチ実施にはドナー検体の採取と，入手まの single antigen coated beads 法が優れている。

での時空的問題があり，これをドナーリンパ球のロジ

3）ルミネックス法による抗体特異性同定法

スティック（兵站学）問題と称し，移植領域の直接ク

遺伝子工学的手法で，単一の HLA 抗原のみを発現

ロスマッチ実施に大きな障害となっている。つまるとする培養細胞を作成し，有意の頻度である HLA 抗原

ころ，レシピエントの血清だけでクロスマッチに代替をライン・アップする。大量の単一培養細胞を溶解できる方法論が待望されてきた。

し，アフィニティークロマトグラフィーなどの手法

IV．「HLA タイプ＆スクリーン」

で，単一の HLA 抗原を抽出・精製する（リコンビナ
ント・HLA 抗原）。これをマイクロビーズ（フローサ

輸血の分野では待機手術などのためのクロスマッチ

イトメトリー用）やルミネックスビーズへ固相化すは，直接クロスマッチを省略して，「タイプ＆スクリーる。1 つの蛍光スペクトラムをもつビーズごとに，固ン」をするシステムが導入されて久しい。レシピエン相化する HLA 抗原を選択する。マイクロビーズでは

トとドナーの ABO と Rho をタイプし，レシピエント

通常 8 種，ルミネックスビーズでは 100 種の蛍光スペの血清中の不規則抗体をスクリーニングしておく。不クトラムのビーズが用意できる。いまは，OneLambda

規則抗体が陰性のときはクロスマッチを省略する。不社の独占的市場である。

規則抗体が陽性のときは抗体の特異性を同定して，そR

LABScreen Single Antigen Class' は 31 種類以上のの抗体が反応する抗原が陰性の血液を用意する。

A 座，50 種類以上の B 座および 16 種類以上 の C 座

この思想を移植 の 世 界 に 導 入 し よ う と い う の がの単一抗原が，ビーズ 1 個ずつにコートされている。

「HLA タイプ＆スクリーン」で，手順の概要は次のとLABScreen Single Antigen Class(R は 33 種類以上のおりである（図 2）。

DR 座（DRB1，DRB3＝DR52，DRB4＝DR53，DRB5＝DR51），29 種 類 以 上 の DQ 座，24 種 類 の DP 座 の単一抗原が，ビーズ 1 個ずつにコートされている。

III．直接クロスマッチのロジスティック問題
臓器移植におけるロジスティック（兵站学）
問題は，
もともと高度にアロ免疫を受け広範囲 HLA 抗体を保有する登録レシピエントへ，献腎臓器などが提供できない状況に発したタームである。後述する「マッチ・メーカー」はその解決のために開発されたソフトウエ
アである。直接クロスマッチの代替システムとして次!レシピエントとドナー候補の HLA を タ イ プ する。
"ドナー候補が有し，レシピエントにないミスマッチ抗原を同定する。
#レシピエント血清中の HLA 抗体スクリーニング検査を行う。
$HLA 抗体が陰性のときは，クロスマッチ適合と判断してこれを省略する。
%HLA 抗体が陽性の時は，その抗体の特異性を同定する。
&抗体の特異性を，"で同定されたミスマッチ抗原

498 『移 植』 Vol. 45, No. 5

図 2 HLA タイプ＆スクリーン（バーチャルクロスマッチ）と比較対照する。

世界で，臓器移植領域より先行して採用されたのは興!ドナー候補の有するミスマッチ抗原に反応する抗味深い。輸血の分野で 20 年前に導入されたシステム体が否定されるときは，クロスマッチ適合と判断してが，移植の世界に導入できなかったのは，単純にテク

直接クロスマッチを省略する。

ノロジーのせいである。

"抗体の特異性がミスマッチ抗原に対応するときは，クロスマッチ不適合と判定する。
#抗体の特異性に対応しないミスマッチ抗原を持つドナーを選択する。
HLA タイプ＆スクリーンは筆者の造語で，最近でV．移植後 HLA 抗体モニタリング
アメリカにおいて 1960 年代から 70 年前半，献腎移
植後 1 年生着率は 40% に過ぎなかったが7），いまや90% を超えるようになった。免疫抑制剤の進歩のほはアメリカなどで「Virtual Crossmatch」と称されて，かに，HLA 抗体の検出や直接クロスマッチ技術の改一部の施設と分野（屍体臓器と臍帯血移植など）に導

善によって，超急性拒絶や急性拒絶（100 日まで）を入されつつある3-6）。わが国でも HLA 不適合造血幹細防ぐことができるようになったことが要因である。し

胞移植や臍帯血移植の分野で採用され始めた。HLA

かしながら，献腎臓器の half-life は，1966〜1975 年で抗体の適合性を考慮する歴史が浅い造血幹細胞移植の7.5 年7），1987〜1995 年で 7.5 年8）と変化 な く，1996〜

移植と HLA 抗体：HLA タイプ＆スクリーンと移植後抗体モニタリング

2006 年でも 8.1 年8）と大きな改善はみられない。すな得ている。今後の発展が期待される。

わち，HLA 抗体検出技術の進歩は，長期生着にはほ2．造血幹細胞移植

499

とんど貢献していないといえるし，細胞性免疫抑制剤

免疫系がドナー細胞によって再構築されるので，臓［cyclosporine，tacrolimus（FK-506），sirolimus，mycophe-器移植とは異なる発想が求められる。移植前に HLA

nolate mofetil（MMF），その他］の使用も長期生着にタイプ＆スクリーン（バーチャル・クロスマッチ）が関する限り有意の相関は得られていない。さらに，陽性（不適合）になり，そのドナーを選択せざるを得

bortezomib 投与による clonal

ないときは，移植直前に血小板（ドナー由来が最適）

deletion プロトコールによる腎生着が，免疫抑制剤なしで得られているので，輸血によって HLA 抗体を吸収し，rituximab や borte-

移植免疫において液性免疫が細胞性免疫を凌駕する主zomib を併用することが勧められる。血漿交換は HLA役であるとするコンセプトは確かなものになりつつあ

抗体の除去効果が意外に得られない。

る。
1．臓器移植移植前に HLA 抗体が検出されるレシピエントは，移植後の HLA 抗体モニタリングが推奨される。早期

一方で，肝臓を含め9）多くの移植臓器の慢性拒絶のに抗体が減弱・消失すれば予後は良好なことが多い

原因が，移植後に産生される HLA 抗体で あ る こ と（自家データ）。抗体が長期に持続するときは，免疫抑は，膨大なデータによって証明された10）。つまり，長制剤の減量による GVH 効果を図ることが勧められ期生着率を高め，臓器の half-life を延長させるには，る。抗体の持続はレシピエントの免疫細胞が（ひいて原因である HLA 抗体をモニタリングし，液性免疫を

は腫瘍細胞）が残存している証拠と考えられるからで制御することが求められる。保険適用の問題はあるもある。

のの，移植後 1 年以内は 3 か月ごと（3，6，9，12 かドナーが HLA 抗体を持っているとき，移植後にド月の 4 回），以後 1 年ごとの HLA 抗体モニタリング

ナー由来の HLA 抗体が検出されることがある（自家が推奨される。HLA クラス!とクラス"抗体スクリー

データ）。ドナーの形質細胞がレシピエント内で抗体

ニングと，HLA 抗体が検出されたときは，特異性をを産生した結果と推定される。血小板輸血不応からそ

同定しかつ抗体価の推移を見ることがよい。心臓移植の現象が発見された例もある。以上のことから，移植

ではクラス!抗体が重視されるように，臓器によって後にドナーの免疫担当細胞が HLA 抗体を産生するこ異なる戦略があってもよい。DSA（donor specific anti-とは可能と考えている。臍帯血移植や血縁間 Haploi-body）はグラフトによって，吸収されるので血清中にdentical（ハプロ半合致）移植のときは，ドナー由来

はごくわずかしか残らない。高感度な抗体スクリーニの HLA 抗体が，レシピエントのミスマッチ HLA 抗

ング法が必要である。

原と反応して，GVH 反応を起こす可能性も否定でき

DSA が検出されたときは，HLA 抗体の除去またはない。HLA 不適合移植後は，臓器移植と同様に HLA

産生を制御することが求められる。MMF の大量投与

抗体モニタリングが必要な時代が来るかもしれない。

や11），rituximab（リツキサンR）による B 細胞から 形質細胞への転換を抑制12），bortezomib（ベルケードR）

VI．Single antigen coated beads 法の留意点

による形質細胞の除去13）などが試みられている。Borte-

遺伝子工学により人工的に得られた HLA 抗原であzomib は一定の効果が認められる。1 回 1.3 mg/m2，Dayることを念頭に置く。すなわち，単一精製抗原には人

1，4，8，11 に投与を 1 サイクルとする。中力価抗体

工的に得られたエピトープが含まれる可能性に留意しの減弱には 1 サイクルで効果があるが，高力価抗体になければならない。また，遺伝子が近接して連鎖するは 2〜3 サイクルが必要と示唆されている。輸血によ抗原が，別々に精製されてビーズに固相化されている

る HLA 抗体の吸収と同時に，免疫刺激により活性化

ので「連鎖」の概念なしに結果を判断してはならない。

する形質細胞を bortezomib で制御すれば，HLA 抗体

最も留意しなければならないのは，クラス"のパネル

産生クローンの除去につながるかもしれない。

である。とくに DR 抗原（DRB1 抗原）と DR51（DRB

Terasaki ら14）は 既 に bortezomib 投 与 に よ る「Clonal

5 の 産 物），DR52（DRB3 の 産 物）
，DR53（DRB4 のDeletion」プロトコールを開発し，血縁者間腎移植に産物）の関係性である。これらは DRB 領域に近接し適用し，ステロイド以外の免疫抑制剤を使用しない 17て存在し，非常に強い連鎖不平衡が成立している。培症例に 2 年以上の生着，10 症例に 1 年以上の生着を養パネル細胞から HLA クラス"分子を抽出精製する

500 『移 植』 Vol. 45, No. 5

図 3 HLA-DRB 領域の構造
DR1 グループや DR8 グループは発現遺伝子として DRB1 のみを持つが，DR51，52，53，
グループは発現遺伝子として，それぞれ DRB5，DRB3，DRB4 を持っている。偽遺伝子の種類と数もグループによって異なっている。

と，連鎖する DR 抗原がすべて抽出される。これらを「抗原間の共通エピトープ（Shared

固相化した「抗体スクリーニング」用のビーズには対する反応であることが明確にされた。過去にいわれ「連鎖する抗原」のすべてが含まれる。これに対してた主反応に対する交差反応＝副反応はアナログ的感覚

single antigen coated beads は単一の抗原が固相化されである。検出される HLA 抗体の大多数は臨床的意義ている。例えば，DR15（DRB1 ＊1502）と連鎖する DRについては等価と考えてよい。HLA エピトープにつ＊51（DRB5 0102）は，抗体スクリーニング用のビー

epitope：SP）」にいては後述する。

ズでは同じビーズに固相化さ れ る が，single antigen

VIII．HLA 自然抗体の意義

coated beads では，DR15 ビーズと DR51 ビーズが別に作成されている。ドナー候補の有するミスマッチ抗原

HLA 抗体の検出感度が高くなったことで，免疫機が DR15 であるときは，レシピエントに抗-DR15 が検会がないと思われる健常人からしばしば HLA 抗体が出されないことを確認すると同時に，抗-DR51 の存在検出される15）。われわれはこれを「HLA 自然抗体」とをも否定しなければ，バーチャル・クロスマッチ適合

よんで，HLA 抗原を免疫原とするアロ抗体と区別しとはいえない。逆にいえば，抗-DR51 が検出されるとている。HLA 自然抗体とは，ウイルスや食物蛋白をきは，連鎖する DR15，DR16 も（抗-DR15，-DR16 が免疫原とし，HLA 抗原とエピトープを共有する抗体

検出されなくても）バーチャル・クロスマッチ不適合と推定され，ときに HLA 精製抗原と反応するものととみなす必要がある。DRB 領域の遺伝子構造を図 3解釈している。検出頻度は意外に高いがアロ抗体とのに示す。

明確な区別は困難で，低力価か（例外＝抗-A＊1102，

VII．交差反応の臨床的意義

抗-B＊0801 など），日本列島人に検出されない HLA 抗
原に対するものか，自然抗体リストにあるか，などの抗原抗体反応における交差反応は古くから知られて経験値に基づいて判断するしかない。健常日本人とメいるが，HLA 抗原についてはごく一般的で，交差反

キシコ人男性に検出された「HLA 自然抗体」を表 1

応のない抗体のほうがまれである。近年になって，に示す。

HLA 抗体のエピト ー プ 解 析 が 行 わ れ，交 差 反 応 は臨床的意義についてはデータの蓄積がなく不明であ移植と HLA 抗体：HLA タイプ＆スクリーンと移植後抗体モニタリング

表 1 「HLA 自然抗体」の特異性

図 4 交差反応抗原群の相関図，cross reactive map

501502 『移 植』 Vol. 45, No. 5る。低力価で特異的（狭い範囲の反応性）な自然抗体

外的にポイントミューテー シ ョ ン が 主 た る 進 化 要は移植臨床に影響がないと判断してよい。

因）。よって，アミノ酸配列を共有する抗原群があり，

IX．HLA 抗原エピトープ

これがエピトープとなりうるものを「交差反応抗原群」
として分類してきた（図 4）。それを発展させたのがHLA 抗体の最も特徴的な性質は「多様な交差反応」

エピトープ解析である。初期には HLA のアミノ酸配である。HLA はアリル間のジーン・コンバージョン

列から共通項を見出して，仮想エピトープとして交差（遺伝子交換）様の変異で進化してきた（DPB1 は例

反応を説明していた。それを利用して移植のマッチン

表 2 HLA クラス I 抗体が認識するエピトープ

移植と HLA 抗体：HLA タイプ＆スクリーンと移植後抗体モニタリング

503

図 5 エピトープの例示
抗-A2＋24 の特異性をもつ抗体が認識するエピトープの 4 例を示す。左 2 例は免疫原が A＊
0206 で，右 2 例は A＊2402 である。I-1501 と I-1503 は非常に近い位置の似たアミノ酸配列であるが，交差反応が微妙に違う。
※表 2 を参照。

グを予想しようとする「HLA マッチ・メーカー」と2）Fujiwara K, Shimano K, Tanaka H, et al. Application

いう有名なソフトウエア（Excel のマクロ）が使用さ

of bead array technology to simultaneous detection

れてきた16）。われわれは免疫原となる抗原が特定でき

of human leucocyte antigen and human platelet anti-

る妊婦血清を得て，single antigen coated beads 法を用

gen antibodies. Vox Sang 2009; 96: 244-251.

いてエピトープ解析を行ってきた。輸血歴のない妊婦

3）Tambur AR, Ramon DS, Kaufman DB, et al. Percep-に HLA 抗体が検出されるとき，その免疫原は Haploi-tion versus reality?: Virtual crossmatch―how todentical の児に存在する父由来 HLA 抗原（inherited pa-

overcome some of the technical and logistic limita-

ternal antigens）に限定され，座位あたり最大 1 抗原でtions. Am J Transplant 2009; 9: 1886-1893.

ある。反応陽性となる allele/抗原群と免疫原 HLA と4）Gutman JA, McKinney SK, Pereira S, et al. Prospec-の共通エピトープ（SP）を「赤座 Epigraph ソフトウ

tive monitoring for alloimmunization in cord bloodエア（Excel のマクロ）」（赤座達也の好意による）で

transplantation: virtual crossmatch can be used to

解析した。その結果を表 2 にまとめ，その一部を図 5

demonstrate donor-directed antibodies. Transplanta-に図示する17）。また，単一 HLA 抗原で吸収後解離して得た HLA 抗体を用いた解析もすすめている。
われわれは HLA エピトープ解析をすすめ，抗体産生につながりやすいエピトープ（immunodominant epi-

tion 2009; 287: 415-418.
5）Zachary AA, Sholander JT, Houp JA, et al. Using
real data for a virtual crossmatch. Hum Immunol
2009; 70: 574-579.

tope）を解明し，HLA の組み合わせによって液性免6）Bingaman AW, Murphey CL, Palma-Vargas J, et al.

疫が刺激されやすいものと，抗体レスポンスが起こり

A virtual crossmatch protocol significantly increases

にくい組み合わせを予知できるようにしたいと考えて

access of highly sensitized patients to deceased donor

いる。これにより，移植の予後推測が期待されるから

kidney transplantation. Transplantation 2008; 86:

17）

である 。

1864-1868.
7）Fifteen years of HL-A: what is the importance of
HLA compatibility for clinical outcome of renal
文 献transplantations? Vox Sang 1978; 34: 171-188.

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ney transplants: UCLA and UNOS Renal Transplanttion. Transplantation 2008; 86: 377-383.

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