SGI-M100 Application
Application Note
SGI-P100
Note

No.AS170701
No. AS170601

メタボローム分析用SPE-GC-MSシステムを用いたアミノ酸、有機酸、核酸の一斉分析
はじめに
従来のメタボローム分析は、採取した試料を溶媒抽

SGI-M100
SGI-P100

測定条件

for SPE-GC system

出、遠心濃縮、凍結乾燥、誘導体化等の前処理工程が煩雑であるため、長時間を要するとともに熟練されSPE-GC Interface (SGI-M100; AiSTI)
Sample Volume: 40 μL
た技術が必須となる。また、多検体前処理した場合、SPE: Flash-SPE AOS (AiSTI)
誘導体化後から測定までの時間が異なってしまう。これ Inlet (LVI-S250; AiSTI)
Insert: Spiral Insert (AiSTI)
らは定量値の偏りやばらつきの要因となり、多サンプルのInj. Temp.: 80ºC(0.2min)-50ºC/min-290ºC(38min)
メタボローム解析を遂行する上で致命的な短所である。
GC 7890B(Agilent)
本研究では、迅速な自動誘導体化とその誘導体化かColumn: DB-5ms, 0.25 mm i.d.×30 m, df 0.25μm
Oven: : 60ºC(2min)-15ºC/min-240ºC -20ºC/min
らGCMSへの直接試料導入を目指して、固相誘導体-310ºC（1min）化法を用いたオンラインSPE-GC/MSシステムの開発をInlet Mode: Split行ったので報告する。
Split ratio : 50
Carr. gas: He, 1.1 mL/min
MS 5977B(Agilent)
Detector Temp: 290℃
MS Method: Scan 70-500 m/z

Flash-SPE

Information
参考文献
メタボロミクス国際学会（2017）Development of online
SPE-GC-MS system with
automated SPE-based
derivatization method
for metabolome analysis.
Ryoichi SASANO1,
Koji MACHITANI2,
Shusuke OSAKI2,
Masahiro FURUNO3,
Eiichiro FUKUSAKI3

メタボローム分析用SPE-GC-MSシステム“写真およびイメージの無断転載禁止“

前処理フロー

Sample※マウス血清1; Aisti Science co., Ltd.,
2; Industrial Technology
Center of Wakayama
prefecture,
3; Osaka University

AiSTI SCIENCE
固相抽出からGC/MS注入工程（全自動処理）
自動前処理時間 （精製・脱水・誘導体化）: 10 min

誘導体化から注入までの時
間が常に一定

溶出・注入
胃袋型
インサート

FlashSPE

コンディショ
ニング

GC-MS

試料
負荷

洗浄・脱水誘導体化

LVIS250
大量注入口

Product
SPE-GCｲﾝﾀｰﾌｪｰｽ
SGI-P100
固相カートリッジ
Flash-SPE HLB
GC大量注入装置
LVI-S250

株式会社アイスティサイエンス〒640-8341
和歌山市黒田120-6 ｱｿｰﾄ黒田2F
TEL. 073-475-0033
FAX. 073-497-5011

www.aisti.co.jp

No. AS170601
No.AS170701

AiSTI Application Note
標準溶液のSCANトータルイオンクロマトグラム[ｸﾛﾏﾄｸﾞﾗﾑ]

TIC:5977585-024,25

5.0E+06113,4
4.0E+06

15,1610125 8796

3.0E+06

223

20

1728
26

14

2.0E+06

29
27

118
19

13

1.0E+0621

22

0.0E+00
R.T-->
07:00
08:00
09:00
10:00
11:00
12:00
13:00
14:00
15:00
1.Alanine-2TMS
2. Valine-2TMS
3. Phosphate-3TMS
4. Leucine-2TMS
5. Isoleucine-2TMS

6. Proline-2TMS
7. Glycine-3TMS
8. Succinic acid-2TMS
9. Fumaric acid-2TMS
10. Serine-3TMS

11. Threonine-3TMS
12. Malic acid-3TMS
13. Aspartic acid-3TMS
14. Methionine-2TMS
15. Proline-oxo-2TMS

16. Cytosine-2TMS
17. Aminobutyric acid-3TMS
18. Ketoglutaric acid-3TMS
19. Glutamic acid-3TMS
20. Phenylalanine-2TMS

26. Adenine-2TMS
27. Lysine-4TMS
28. Tyrosine-3TMS
29. Guanine-3TMS

21. Asparagine-3TMS
22. Putrescine-4TMS
23. Aconitic acid-3TMS
24. Citric acid-4TMS
25. Ornithine-4TMS

サンプル抽出液の固相負荷量とピーク面積値（代表例）
Alanine-2TMS

1.E+07

R² = 0.9985

1.E+07

Methionine-2TMS

3.E+05

R² = 0.9944

3.E+05

1.E+07

Tyrosine-3TMS

3.E+06

R² = 0.996
2.E+06

2.E+05
2.E+06

8.E+06
2.E+05
6.E+06

1.E+06
1.E+05

4.E+06

5.E+055.E+04

2.E+06
0.E+000.E+000.E+00020

4060

Sample loading volume (μL)

80

0204060

Sample loading volume (μL)

080

20

40

8
5,681,853
2,853,359
4,266,977
4,223,433
1,121,838
3,101,102
3,070,554
28,003
12,142
1,685,417
920,805
19,941
233,191
97,718868,861
5,028
82,175
1,405,403
753,925
314,421652,659
2,978
364,748
790,0953,136

95,706,369
2,867,084
4,210,194
4,227,870
1,118,968
3,103,402
3,113,071
27,16911,996
1,696,241
914,839
19,094
238,539
99,320
839,473
5,413
87,546
1,516,263
773,827
317,960
737,745
3,005
433,653
852,3362,457

60

Sample loading volume (μL)

80

マウス血清のピーク面積値の再現性
No.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25

CompoundAlanine-2TMS
Valine-2TMS
Phosphate (3:1)-3TMS
Norleucine-2TMS
Isoleucine-2TMS
Proline-2TMS
Glycine-3TMS
Succinic acid-2TMS
Fumaric acid-2TMS
Serine-3TMS
Threonine-3TMS
Malic acid-3TMS
Aspartic acid-3TMS
Methionine-2TMS
Proline-oxo-2TMS

Cytosine-2TMS
Aminobutyric acid-3TMS
Glutamic acid-3TMS
Phenylalanine-2TMS
Citric acid-4TMS
Ornithine-4TMS

Adenine-2TMS
Lysine-4TMS
Tyrosine-3TMS

Guanine-3TMS

1
5,541,262
2,755,712
4,201,912
4,056,211
1,078,007
2,990,521
3,037,839
29,04014,4001,617,736
854,196
20,457
195,51293,568719,078
5,878
87,027
1,268,042
699,562
335,441
663,367
4,077
384,118
739,5513,773

25,554,574
2,771,037
4,356,822
4,080,919
1,080,660
3,000,081
2,895,879
29,234
13,605
1,601,793
855,270
20,641
183,707
94,791
784,164
5,728
83,832
1,206,401
714,084
333,534
673,4443,243
400,505
763,6703,789

35,750,943
2,893,545
4,434,444
4,276,463
1,131,523
3,191,334
3,107,951
29,61014,528
1,691,622
914,762
21,151
208,840
100,427
740,721
5,647
70,197
1,296,449
762,498
337,541
787,729
3,358
466,485
838,1103,207

45,697,229
2,911,101
4,412,647
4,306,038
1,141,625
3,154,192
3,217,887
29,11813,7571,701,792
923,062
21,808210,072
104,122869,323
5,592
83,924
1,342,892
773,628
334,091
789,718
3,410
466,911
848,3093,438

5
5,588,344
2,803,596
4,201,988
4,157,663
1,094,518
3,053,991
3,354,424
26,403
13,4691,664,881
882,377
19,071
204,684
101,698
610,496
5,629
75,857
1,281,052
724,391
312,166
771,470
3,217449,562
773,7372,485

65,721,789
2,871,371
4,259,611
4,270,224
1,124,087
3,162,046
3,293,368
27,322
13,211
1,718,251
911,832
20,283
225,449
103,386
641,127
5,516
76,002
1,393,273
758,118
321,946
808,655
2,885
483,398
850,3072,720

75,850,742
2,926,797
4,389,792
4,312,737
1,139,671
3,244,535
3,059,023
28,53012,847
1,759,025
928,177
20,751
240,856
105,816
674,841
4,974
85,355
1,513,486
786,916
322,681
771,975
3,216
450,203875,807
2,968

Ave.
RSD, %
5,677,012
1.8
2,850,400
2.1
4,303,821
2.2
4,212,395
2.2
1,114,544
2.2
3,111,245
2.8
3,127,777
4.5
28,2703.9
13,3286.7
1,681,862
2.9
900,591
3.2
20,355
4.4
215,650
9.3
100,094
4.2
749,787
13.0
5,489
5.6
81,3247.3
1,358,140
8.0
749,661
4.0
325,5313.0
739,640
8.2
3,265
10.8
433,287
9.5
814,6585.9
3,10816.1