Niigata Dent. J. 46（1）：47 － 50,

2016

新第 49 回

47

潟

新潟歯学会

歯学

会

平成 28 年４月 23 日（土）午前 10 時〜

場所

新潟大学歯学部講堂

会

抄録［一般講演］

総会

日時

学

１

歯髄幹細胞に対する lipopolysaccharide 刺激の影響
１［特別講演］

新潟大学大学院医歯学総合研究科

口腔健康科学講座 う蝕学分野

２

東京医科歯科大学大学院医歯学総合研究科 口腔機能再構築学講座 歯髄生物学分野○末山有希子１，金子友厚１，伊藤崇史１，興地隆史２

造血幹細胞・前駆細胞を維持する骨髄の微小環境（ニッチ）【目的】
大阪大学大学院

我々は，MAP1B および CD146 を発現する幹細胞様

生命機能研究科／医学系研究科 幹細胞・免疫発生研究室

長澤丘司

細胞がラット歯髄に多数分布することを報告した。しかし炎症性刺激が幹細胞の動態や遺伝子発現に及ぼす影響の 詳 細 は 不 明 で あ る。 そ こ で 本 研 究 で は， 幹 細胞 の生涯にわたり血液系・免疫系細胞を供給し続ける造血CD146（幹細胞分化能マーカー）発現と増殖能に着目し，幹細胞は，細胞数が成熟した血液細胞より圧倒的に少な

ヒト歯髄幹細胞（２種）およびラット骨髄間葉系幹細胞

く，骨髄のニッチと呼ばれる限局した特別な微小環境にを 用 い て， 細 胞 増 殖 と 幹 細 胞 分 化 能 に 対 す る

よって維持されると考えられてきた。しかし，この造血lipopolysaccharide（LPS）刺激の影響を in vitro で検討

幹細胞ニッチの実体は長年不明であった。2003 年，骨した。また LPS により歯髄炎を誘発したラット切歯歯表面に局在する骨芽細胞の一種（SNO 細胞）が造血幹

髄 組 織 を 検 索 対 象 とし て，CD146mRNA 発 現 お よ び細胞ニッチを構成すると報告されたが，その生体での機MAP1B/CD146 二重陽性細胞数の変化を併せて解析した。

能が証明されるには至らず，最近では，否定されつつあ【材料および方法】

る。私たちは，2006 年に，ケモカイン CXCL12 が，造in vitro：ヒト脱落乳歯歯髄幹細胞，ヒト歯髄幹細胞，血幹細胞の維持と免疫担当細胞の産生に必須であること

およびラット骨髄間葉系幹細胞を播種後，LPS もしくはを明らかにし，骨髄腔内に CXCL12 を高発現し，長い生理食塩液を培養液に滴下し，３，12，24，48 時間培突起を持った細網細胞の一種（CAR 細胞）を同定した養した。また，対照としてラット微小血管内皮細胞を用（１）。更に，CAR 細胞が，骨芽細胞形成に必須の転写い同様に培養した。所定時間経過後，各培養細胞から全因子 Osterix と脂肪細胞形成に必須の核内受容体 PPAR

RNA を抽出し，CD146mRNA 発現を定量解析した。また，γを同時に発現する脂肪・骨芽細胞前駆細胞であること，所定時間経過後の単位面積あたりの細胞数も定量した。

造血幹細胞の維持に必須の SCF と CXCL12 の骨髄でのin vivo：Wistar 系雄性ラットに全身麻酔を施した後，主要な産生源であること，造血幹細胞と自己複製を欠い下顎切歯を切削，露髄させ LPS を貼付したのち，窩洞た造血前駆細胞の維持に必須であることを明らかにしたを封鎖した。LPS 刺激 12，24，48 時間経過後に切歯歯（２）。最近，転写因子 Foxc1 が骨髄では CAR 細胞で特髄を摘出し，全 RNA を抽出後，real time PCR 法を用異的に高発現し，CAR 細胞による造血幹細胞ニッチのいて CD146mRNA の発現解析を行った。また上述と同形成と維持に必須であることを見出した（３）。これら

様に施術した組織に対し，固定，凍結包埋，薄切後，の知見より，造血幹細胞ニッチを構成する細胞の実体がMAP1B と CD146 に対する免疫二重染色法を行い，二分子レベルで明らかになった。

重陽性細胞数を定量した。
【結果および結論】

１，Sugiyama, T. et al., Immunity 25, 977（2006）.

in vitro に お い て， 幹 細 胞 に お け る LPS 刺 激 後 の２，Omatsu, Y. et al., Immunity 33, 387（2010）.

CD146mRNA 発現亢進と細胞増殖の亢進が観察された。

３，Omatsu, Y. et al., Nature 508, 536（2014）.

一方，血管内皮細胞に有意な変化は観察されなかった。
in vivo では，歯髄組織の CD146mRNA 発現亢進後にMAP1B と CD146 の二重陽性幹細胞数の増加が認められ た。 以 上 の 結 果 よ り LPS 刺 激 に よ り 幹 細 胞 にCD146mRNA の発現亢進と細胞増殖能の亢進が生じる－ 47 －新潟歯学会誌4846（1）：2016

惹起されることが確認された。歯肉組織と血清中では炎ことが明らかとなった。

症性サイトカインの発現プロファイルが一部異なること
２

結紮誘導歯周炎モデルマウスにおける全身への影響から，歯周炎組織で産生された炎症メディエーターが全とそのメカニズムの解析身循環へ直接波及する可能性は低いと考えられる。

新潟大学大学院医歯学総合研究科 摂食環境制御学講座 歯周診断・再建学分野

３

１２

新潟大学大学院医歯学総合研究科 口腔生命福祉学講座 口腔保健学分野
３

新潟大学大学院医歯学総合研究科

歯学教育研究開発学分野○松田由実 1,2，高橋直紀 1,2，中島麻由佳 1,2，佐藤圭祐 1,2，

Streptococcus mutans に対する厚朴由来抽出物の殺菌ならびに抗バイオフィルム効果１

新潟大学大学院医歯学総合研究科 口腔健康科学講座 微生物感染症学分野

多部田康一１，中島貴子３，山崎和久２２３

新潟大学大学院医歯学総合研究科

口腔健康科学講座 う蝕学分野

東京医科歯科大学大学院医歯学総合研究科 摂食機能保存学講座 歯髄生物学分野○坂上雄樹 1,2，土門久哲１，小田真隆１，【目的】

竹中彰治２，興地隆史３，寺尾歯周炎は様々な全身疾患のリスク因子であることが知豊１られており，そのメカニズムのひとつとして歯周炎により誘導される全身性の炎症の影響が考えられてきた。

【目的】

我々は Porphyromonas gingivalis 経口投与モデルを用

Magnolol および Honokiol は，生薬として広く用いら

いて，腸内細菌叢の変化とそれに伴う腸管バリア機能のれている厚朴由来のポリフェノールである。鎮痛作用や低下の結果，腸管から病原因子が漏出し全身性の炎症が抗炎症作用のほか，抗菌作用を有するとされており，口惹起されることを報告した。一方で，歯周炎組織で産生腔領域では歯周病原性細菌に対する抗菌効果が報告されされた炎症メディエーターが直接全身循環に流入するこて い る。 本 研 究 で は， こ れ ら 厚 朴 由 来 抽 出 物 のとで全身性の炎症が誘導されることも考えられるが，こStreptococcus mutans 浮遊菌およびバイオフィルムにれまでその検証は十分になされていない。結紮誘導歯周対する殺菌能を解析した。

炎モデルは，歯周組織へのプラーク蓄積により顕著な歯【方法】

周組織の破壊及び炎症が誘導される。今回我々はこのモMagnolol もしくは Honokiol を添加した Brain heart

デルを用いて，歯周組織局所の炎症が全身性に与える影infusion（BHI）培地に，S.mutans MT8148 株を添加し，響とそのメカニズムを検討した。

37℃，５％ CO2 の条件下で培養した。24 時間後の培地【材料および方法】

濁度の変化により，浮遊状態における増殖抑制効果を評

10 週齢雄 C57BL/6 マウスの上顎両側第２臼歯を絹糸価した。対照として，クロルヘキシジングルコン酸塩をにて結紮し，14 日後に上顎骨を採取し，歯槽骨吸収量培地に添加した。次に，S.mutans 浮遊菌に対する各抽の計測，歯肉組織における炎症性サイトカインの遺伝子出物およびクロルヘキシジングルコン酸塩の殺菌効果発現および組織学的解析を行った。また，肝臓におけるを，コロニーカウント法により測定した。また，0.5％炎症性サイトカイン遺伝子発現，血清中の炎症性サイトスクロースを添加した BHI 培地を用い，各抽出物およカインおよびエンドトキシンレベルを解析した。更に，

びクロルヘキシジングルコン酸塩が S.mutans バイオ

腸内細菌叢及び腸管における各種遺伝子発現解析を行っ

フィルム形成能に及ぼす影響を調べた。続いて，ガラスた。

ボトムディッシュ底面に形成した S.mutans バイオフィ【結果】

ルムに，各抽出物もしくはクロルヘキシジングルコン酸

結紮群は非結紮群と比較して，顕著な歯槽骨吸収と辺塩を作用させた。その後，生細胞・死細胞同時染色キッ

縁歯肉における炎症性細胞浸潤を認めた。また，歯肉組トを用いて染色し，共焦点蛍光レーザー顕微鏡にて観察

織における IL- １β及び IL-17 の遺伝子発現は有意に上した。バイオフィルム中の菌の生存率は，バイオフィル昇した。一方，血清における IL-6 レベルは有意に上昇

ムを剥離・分散させた後，コロニーカウント法により算したが，歯肉における IL-6 遺伝子発現の上昇はわずか定した。さらに，ヒト歯肉上皮細胞株 Ca9-22 に対するであった。血清中の SAA レベルの増加傾向と肝臓にお各抽出物の細胞毒性は，MTT 試験にて測定した。

ける SAA 遺伝子発現の有意な上昇を認めた。腸内細菌【結果および考察】

叢の変動は微弱で，腸管透過性関連遺伝子発現及び血清

Magnolol および Honokiol は，浮遊菌に対して殺菌効

エンドトキシンレベルに両群間での有意な変化は認めな果を示すとともに，S.mutans のバイオフィルム形成をかった。

抑制した。また，Magnolol を５分間作用させた群では，【考察】

Honokiol およびクロルヘキシジングルコン酸塩作用群

本モデルにおいて，限局的ではあるが全身性の炎症がと比較してバイオフィルム深部まで浸透殺菌されてお－ 48 －

学 会 抄 録

49り，バイオフィルム中の S.mutans の生菌数を 99.9％減／性状に依存しなかった。３）Early，Late phase の圧少させた。さらに，Magnolol および Honokiol は，有効変化は舌骨上筋群の活動性の上昇に先行しなかった。
４）

殺菌濃度においてヒト歯肉上皮細胞に対して細胞毒性を舌骨上筋群の活動は量依存性であった。５）Early およ示さなかった。以上より，Magnolol は S.mutans バイオ

び Late Phase の機能的意義は現時点では不明も，異なフィルムに対する優れた殺菌効果を有し，かつ口腔粘膜るメカニズムの存在が推察された。

への為害性が低いことが示唆された。
５４

フィリピン共和国マンダウエ市における社会経済状
況別にみた学童の齲蝕罹患状況，口腔衛生習慣，身体大気圧センサを用いた嚥下時咽頭内圧変化の測定

発育状況および食生活状況１

新潟大学大学院医歯学総合研究科
２

新潟大学医歯学総合病院
３

東京歯科大学

口腔生理学分野
歯科総合診療部１

新潟大学大学院医歯学総合研究科

口腔科学研究センター

新潟大学医歯学総合病院○長谷川真奈 1,2，山田好秋３，黒瀬雅之１，岡本圭一郎 ，藤井規孝 ，山村健介
１２口腔健康科学講座 予防歯科学分野

２

予防歯科

○西川敦子 ，山賀孝之 ，小川祐司 ，宮崎秀夫１
１２１１

【目的】
近年，東南アジア諸国はめざましい経済発展を遂げて【目的】
嚥下機能を経時的，定量的に評価すべく，従来，多くいる一方で，国内における健康格差が拡大している。しの測定システムが開発されてきた。咽頭圧測定もその範かし，社会的経済状態別にみた学童の齲蝕罹患状況に関疇である。しかしその機器の特性から嚥下時に移送されする報告は十分ではない。本研究の目的は，フィリピンる食塊が直接センサーに作用する結果，圧変化に影響を共和国マンダウエ市における学童の社会経済状況別の齲与え，結果の解釈を複雑にすることが推察されてきた。

蝕罹患状況を明らかにするとともに，口腔衛生習慣，身今回，我々は高精度の小型大気圧センサーを利用した口体発育状況および食生活状況との関連を検討することで腔・咽頭内圧測定システムを開発し，嚥下に伴う咽頭内ある。の“空気圧”の変化を評価した。

【方法】
対象はマンダウエ市内１公立小学校の６歳児 41 名と【方法】
健常被験者の中咽頭に経鼻的に大気圧センサーを留置

12 歳児 42 名および１私立小学校の６歳児 36 名と 12 歳した。また舌骨上筋活動を記録した。被験者には，唾液

児 34 名の計 153 名である。公立小学校児童を貧困層（以と 15ml および 45ml の水・２種類の性状の異なるとろ下 Low 群 ）， 私 立 小 学 校 児 童 を 中 流 階 級 層（ 以 下

み水を１回で嚥下するように指示，その際の咽頭内圧とMiddle 群）と定義し，歯科健診，身長・体重測定を実筋活動を同時記録し，応答を定量した。

施し BMI を算出した。さらに，質問紙調査を保護者（自【結果】記式）および学童（12 歳児のみ，聞き取り）に実施し，すべての嚥下動作において一過性に咽頭内圧の上昇が口腔保健行動や口腔衛生知識，さらに食習慣に関する情認められた。水，とろみ嚥下では，全試行の 99.4％で二報を得た。

相性の圧変化を示したが，唾液嚥下では 0.1％であった。

【結果および考察】

液体嚥下群で見られた二相性の圧変化を Early phase と

齲蝕罹患状況は６歳児では df 者率，dft 指数および齲Late phase に区分し解析した。Late phase の圧変化は蝕歯にしめる処置歯の割合（ft/dft）を，12 歳児ではEarly phase より大きかった。45ml の水嚥下時の Early

DMF 者率，DMF 指数おおび齲蝕歯にしめる処置歯のphase の 圧 変 化 は 15ml よ り 有 意 に 大 き か っ た。Late割合（FT/DMFT）を比較した。いずれの項目も Lowphase は食塊の量や性状の影響を受けなかった。さらに群の有病率が高く処置歯率が低い傾向を示したが，両群

液体嚥下群の Late phase の AUC は唾液嚥下と同じでともに罹患状況は悪く統計学的有意差が認められたのはあった。筋活動は量依存性の増加を認めるも，性状の違12 歳 児 の DMF 者 率（Low 群，Middle 群 そ れ ぞ れいの影響を受けなかった。Early phase の圧がピークと92.9％，70.6％，p ＝ 0.014）のみであった。BMI は 12

なるタイミングは筋活動が最大となる時点にほぼ一致

歳 児 女 子 で 統 計 学 的 有 意 差 が 認 め ら れ た（Low 群，し，Late phase の発現はその後であった。

Middle 群それぞれ 16.2,20.1，p ＝ 0.0002）。また，質問【結論】

紙調査の結果は，保護者では学歴，１日の歯磨き回数，１）唾液，液体嚥下に伴う咽頭圧変化はそれぞれ単相

口腔保健知識，歯痛症状の有無，定期的歯科受診および性，二相性の変化を示した。２）Early Phase の圧変化数項目の食物摂取の頻度に，学童（12 歳児のみ）ではは量依存性の増加を示したのに対し，Late phase は量１日の歯磨き回数，口腔保健知識，数項目の食物摂取の－ 49 －

新潟歯学会誌

5046（1）：2016

頻度に両群で統計学的有意差が認められた。社会経済状であった。手術時の平均年齢は 22 ±７歳で最年長 59 歳，

況により齲蝕に関する学童の健康格差が存在し，その背最年少 12 歳であった。年齢層の内訳は 15 歳以上 25 歳

景因子として口腔保健知識や食習慣の違いなどが考えら未満が 1065 名と最も多く，全体の 73.6％を占めていた。

れたが，中流階級層の齲蝕罹患状況も悪く，さらなる歯臨床診断は Angle ３級症例が 1145 例（79.1％），Angle科保健対策の必要性が示唆された。

２級症例が 125 例（8.6％）で，その他 178 例（12.3％）であった。口蓋裂を含めた先天疾患を伴った症例は 60６新潟大学大学院医歯学総合研究科顎顔面再建学講座

名（4.0％），外傷起因性症例は 10 名（0.7％）認めた。

組織再建口腔外科学分野における 48 年間の顎矯正手

術式は上顎 LeFort1 型骨切り術と下顎枝矢状分割法の術の臨床的検討

併用が 584 例（40.3％）と最も多く，次いで下顎枝矢状分割法単独 563 例（38.9％），curved oblique osteotomy

新潟大学大学院医歯学総合研究科 顎顔面再建学講座 組織再建口腔外科学分野○長谷部大地，須田大亮，浅井佑介，
小島拓，加藤祐介，小林正治

53 例（3.7％）body osteotomy 34 例（2.3％）の順であった。平均手術時間は 221.6 ± 95 分，平均出血量は 549.4± 415ml であり，最も多かった出血量は 4608ml であった。術中に輸血を行った症例は 979 症例（67.6％）で，内訳は同種間輸血 106 症例，自己血輸血 865 症例，同種【緒言】
外科的矯正治療のさらなる向上のため，今回，われわ間輸血と自己血輸血の併用５症例であった。年別の症例

れは当分野において過去 48 年間に行われた顎矯正手術数の平均は 30.2 ± 23.1 例で，1968 年の２例から始まり，の臨床統計的検討を行った。

その後年々増加していき 1998 年以降は年間 30 症例を越【対象】えるようになっていた。年間最多は 2005 年の 79 例，最当分野にて 1968 年１月から 2015 年 12 月までの 48 年間に顎変形症の診断で顎矯正手術を行った顎変形症患者

少は 1968 年の２例であった。
【結語】

1452 名のうち，資料が整った 1448 名を対象として性別・患者は 10 代後半から 20 代前半の女性が多かった。術手術時年齢，臨床診断，術式，手術時間，出血量，輸血式は時代とともに変化していき，近年では患者の期待に量等を検討した。

応えるために，より複雑な術式が用いられるようになっ【結果】ていた。

対象の内訳は男性 473 名，女性 975 名で男女比は１：2.1－ 50 －