MHC Vol. 18, No. 1●総説●［シリーズ： 各臓器移植についての拒絶反応の解説・移植の新しい治療法の紹介］
第4回
移植における液性免疫制御の重要性と HLA 血清学―直接クロスマッチから HLA タイプ & スクリーンへ―
佐治

博夫

特定非営利活動法人 HLA 研究所，

はじめに： HLA の発見とその後の進展は血清学に負うところが大きい。抗血清とデータの交換と国際ワークショップによるデータ解析により，HLA の全容が明らかにされた歴史がある。
そのころの HLA 血清学は HLA 抗原決定が主目的であり，そのために抗体（抗血清）の収集と特異性の解析が行われた。HLA が遺伝子タイピングで行われるようになると，わが国の HLA
血清学は衰退の危機に瀕した。臓器移植の直接クロスマッチなどに継承されたが，移植の症例数は諸外国の 10〜100 分の一であり，まさに細々と受け継がれた感がある。当時の造血幹細胞移植は HLA 一致が前提であったため，血清学的クロスマッチは行われなかった。抗血清収集で得られた HLA 血清学の経験値（HLA アロ抗体の特性）は貴重で，それを次世代へ伝える
努力がいま求められている。
近年になって HLA 血清学のルネッサンスがはじまった。Terasaki1）によって臓器移植の超急性拒絶から急性拒絶と慢性拒絶に至るすべてに HLA 抗体が関わることが明らかされた。それがきっかけで HLA 血清学の重要性が浮上した。HLA 液性免疫の制御が重視されるようになり，HLA 抗体の検出が臨床に欠くべからざる手段となったのである。加えて造血幹細胞移植の領域で，臍帯血バンクからの HLA ミスマッチ移植や，血縁間ハプロ半合致移植などが行われるようになり，この領域でもクロスマッチが必要になった。輸血の領域では血小板輸血不応や非溶血性副作用への対応に HLA 血清学が必要である。さらに HLA 抗体検出法の技術的な革新が HLA 血清学の再興に寄与した。
直接クロスマッチは技術的問題や標準化の問題はさておいても，ドナーリンパ球の確保と搬送というロジスティック（兵站学）問題がその実施の障害となっている。HLA 抗体検出法はす
でに第 4 世代法に突入していて，ロジスティックな問題解決が可能になったのでそれを提案したい。「HLA タイプ & スクリーン（HLA T & S）」またはバーチャル・クロスマッチである。
キーワード： HLA 抗体，移植後モニタリング，抗体減弱法

代表者連絡先 〒606–8396 京都市左京区川端通丸太町下ル下提
町 82 恵美須ビル 3–4F 特定非営利活動法人 HLA 研究所
佐治 博夫

電 話 075–762–5201
F A X 075–762–5202
E-mail saji@hla.or.jp― 31 ―

31

32 MHC Vol. 18, No. 1

I.

検査法

1.

HLA 抗体検出法

1–1. 第 1 世代
Terasaki の「リンパ球細胞障害試験（LCT）」と「抗ヒトグロブリン付加リンパ球細胞障害試験（AHGLCT）」はいまでも Golden Standard とされている。

plex capture fluorescence analysis（ICFA）法が提案
され2）キットが市販されている（WAKFlow® HLA 抗体クラス I & II（ICFA），湧永製薬）。生きたリンパ球が必要であるが，精製 HLA 抗原の問題点（後述）をカバーする方法として注目される。

HLA 抗体の特異性同定には Single Antigen Beads

生きたリンパ球が必要で，その入手と準備に手間と法が開発されている。遺伝子工学的手法で，単一のコストがかかり，高い技術力（経験）が必要とされる。

HLA 抗原のみを発現する培養細胞を作成し，有意の頻度である HLA 抗原をライン・アップする。培養細1–2. 第 2 世代
「ELISA 法」である。マイクロプレートまたはテラサキトレーに固相化した抽出 HLA 抗原に，検体血清を反応させ，洗浄後に結合した HLA 抗体を酵素標
識抗-ヒトグロブリンで検出するものである。ドナーの HLA 抗原を用いるべき直接クロスマッチには適さないので普及しなかった。

1–3. 第 3 世代
「フローサイトメトリー（FCM）法」は臓器移植領胞を溶解し，アフィニティー・クロマトグラフィーなどの手法で，単一の HLA 抗原を抽出・精製する（リ コ ン ビ ナ ン ト・HLA 抗 原）。ル ミ ネ ッ ク ス・ビーズへ固相化して，一つの蛍光スペクトラムをもつビーズ毎に，固相化する HLA 抗原を選択する。

100 種の蛍光スペクトラムのビーズが用意できる。いま は OneLambda 社 の 独 占 的 市 場 で あ る（LABScreen Single Antigen®）。

域では直接クロスマッチの標準法になっている。感度が高いこと，臨床成績との相関が高いことから多2.

精製 HLA 抗原固相化法の留意点

くの国で採用されている。また，FCM に適したビー精製された HLA 抗原は，細胞上にある膜貫通蛋白

ズに HLA 抗原を固相化した試薬も市販されているとしての HLA 抗原と異なる抗原性（エピトープ）を（FlowPRA Screening, FlowPRA Single Antigen,もっている。HLA Class I 分子は HLA 長鎖と β2 ミ

OneLambda 社）。機器の設定や判定にコツが要り，

クログロブリンのヘテロ・ダイマーで，抗原ペプチ

客観的判定が意外に難しい。

ドが載っている。Class II 分子は HLA α 鎖と β 鎖の1– 4. 第 4 世代

ヘテロ・ダイマーである。そうした HLA 完全分子以「ルミネックス法」は Luminex® beads（ルミネッ外の長鎖蛋白や，α 鎖または β 鎖分子も抗原としてクス・ビーズ）をプラットホームとする方法である。

固相化されている。HLA 完全分子とは異なるエピ

100 色の蛍光色調を認識するビーズ上に精製 HLA 抗原（クラス I またはクラス II）が固相化してある。このビーズ群に検体血清を反応させ，洗浄後 PE 標識抗-ヒトグロブリンで蛍光標識して，フロー系（LABScan 100®）に流し，ビーズの 100 色を片方のレーザーで識別し，PE 蛍光をもう片方のレーザーで検出測定する。HLA 抗原ごとに PE 蛍光値（IFI）が得ら

トープが固相化されていることになる。

2–1. 「HLA 自然抗体」非 HLA 抗体
発見者（Nadim EL-Awa）が「HLA Natural Antibody」と記載したので日本語訳の「HLA 自然抗体」
が慣用語になっている。正確には非 HLA 非 allo 抗体と呼ぶべきものである。精製 HLA 抗原が固相化されるので適切なカット・オフ値を設定して判定する。

HLA 以外のウイルスや食物に対する抗体との交差反HLA 抗体スクリーニング用キットが 2 社から市販されている（LABScreenPRA®，OneLambda 社。
WAKFlow®，湧永製薬）。培養細胞から免疫化学的にHLA クラス I またはクラス II 抗体を抽出精製して，応をも検出する。以下は主として経験値から述べる。

ルミネックス・ビーズに固相化したものである。直接クロスマッチ法として藤原らにより immunocom-

れたルミネックス法は非常な高感度を与えるゆえに，

2–1–1. 低力価の非 HLA 抗体
Single Antigen Beads 法では非常に高頻度（70％）
で，低力価の非 HLA 抗体が検出される。通常は蛍光値にして，1,000〜2,500 程度であり，臨床的意義はほとんどない。細胞膜上の HLA 抗原との反応性につ― 32 ―

MHC Vol. 18, No. 133

表 1 「HLA 自然抗体」の特異性（%＝検出割合）
A locusspec
A*1102
A*8001
A*0101
A*6602
A*2501
A*3601
A*3101
A*4301
A*6601
A*3401
A*0203
A*2601
A*2902
A*2403
A*2301
A*3402
A*2901
A*6901
A*3002䛣䛴௙
A*2402
A*0201
A*1101
A*3301%MEX JPN
4.4 10.6
8.6 8.3
5.6 7.6
6.7 6.8
5.8 6.1
2.1 5.3
11.3 4.5
6.0 4.5
6.0 4.5
6.9 3.8
4.4 3.8
3.7 3.8
2.8 3.8
3.5 3.0
2.5 3.0
2.3 3.0
2.1 3.0
0.9 3.0
18.3 2.3
A*3303
A*7401
A*3201
A*6801

B locusspec
B*8201
B*4501
B*1402
B*1512
B*4402
B*1516
B*5801
B*8101
B*6701
B*0702
B*3701
B*5601
B*5703
B*0801
B*4403
B*5701
B*5001
B*4001
B*1401
䛣䛴௙
B*5401
B*4201
B*4801
B*2705%MEX JPN
10.6 15.9
5.8 9.8
0.9 9.8
10.6 8.3
6.3 6.8
10.0 4.5
2.5 4.5
4.9 3.8
3.5 3.8
3.5 3.8
7.4 3.0
3.9 3.0
3.0 3.0
4.2 2.3
2.3 2.3
2.1 2.3
1.2 2.3
0.7 2.3
0.0 2.3
B*4601
B*5501
B*4101
B*5901

C locusspec
Cw*1701
Cw*0403
Cw*0702
Cw*0202
Cw*0602
Cw*0102
Cw*1802
Cw*0303
Cw*0302
Cw*0501
Cw*1402
Cw*0304
Cw*1502
Cw*1203
Cw*0801
Cw*1601

DR locus%
spec
MEX
DRB1*0404
5.1
DRB1*1202
1.9
DRB1*1601
1.9
DRB5*0101
1.9
DRB1*0302
1.4
DRB1*0403
1.2
DRB1*1001
1.2
DRB3*0202
0.9
DRB1*1201
0.9
DRB4*0103
0.9
DRB1*1502
0.7
DRB1*0301
0.7
DRB1*0401
0.7
DRB1*1501
0.7
DRB3*0101
0.7
DRB1*0901
0.5
DRB5*0202
0.5
DRB1*0101
0.5
DRB1*0801
0.5
䛣䛴௙
DRB1*1602
DRB1*0102
DRB1*0402
DRB1*0405%
MEX JPN
10.4 24.2
NT
14.4
1.2 8.3
4.9 6.8
3.7 6.8
3.7 5.3
3.0 5.3
3.9 3.8
4.4 3.0
3.9 3.0
2.8 3.0
1.4 3.0
3.5 1.5
2.5 0.8
2.1 0.8
1.4 0.8

Normal males
JPN=Japanese # =132
MXN=Mexican # =424

DP locus

DQ locus
spec
DQA1*0503,DQB1*0301
DQA1*0601,DQB1*0301
DQA1*0303,DQB1*0301
DQA1*0505,DQB1*0301
DQA1*0301,DQB1*0301
DQA1*0501,DQB1*0201
DQA1*0102,DQB1*0502
DQA1*0102,DQB1*0609
DQA1*0301,DQB1*0302
DQA1*0101,DQB1*0501
DQA1*0401,DQB1*0402
DQA1*0302,DQB1*0303
DQA1*0103,DQB1*0603
DQA1*0201,DQB1*0303
DQA1*0301,DQB1*0304
DQA1*0303,DQB1*0401
DQA1*0201,DQB1*0402
DQA1*0103,DQB1*0601
DQA1*0102,DQB1*0602
䛣䛴௙
DQA1*0102,DQB1*0604
DQA1*0201,DQB1*0401
DQA1*0301,DQB1*0201
DQA1*0101,DQB1*0602

%
MEX
10.6
10.2
9.3
8.3
6.0
3.5
3.2
2.8
2.8
2.5
2.3
2.3
2.1
1.9
1.9
1.6
1.2
1.2
0.5

spec
DPA1*0201,DPB1*0101
DPA1*0201,DPB1*2301
DPA1*0401,DPB1*1301
DPA1*0201,DPB1*1801
DPA1*0201,DPB1*0202
DPA1*0103,DPB1*0401
DPA1*0103,DPB1*0402
DPA1*0201,DPB1*0901
DPA1*0103,DPB1*0201
DPA1*0201,DPB1*1401
DPA1*0201,DPB1*1901
DPA1*0201,DQB1*1501
DPA1*0201,DPB1*0501
DPA1*0201,DPB1*1101
DPA1*0201,DPB1*1701
DPA1*0103,DPB1*0301
DPA1*0201,DPB1*1001

%
MEX
20.6
2.8
2.3
2.1
1.9
1.6
1.6
1.2
0.9
0.9
0.9
0.9
0.7
0.7
0.7
0.2
0.2

いては不明である。健常男性の血清中に「HLA 自然る。臨床的意義はないが，検査結果の判断に影響す抗体」として高頻度に検出される HLA 特異性を表 1るので無視できない。

に示す。

2–1–2. 中〜高力価の HLA 自然抗体
古典的な LCT 法でも健常男性血清中に HLA 自然抗体が検出されていた。有名なものに抗-B8，抗A11.2（A*1102）や抗-B37 などがある。日本人男性に検出される抗-B8 は免疫原が HLA-B8 抗原とは考えられないので，自然抗体とされている。抗-A11.2
は多くが IgM 抗体で，IgG 抗体が共存する。抗-B37

3.

Single Antigen Beads 法の留意点
前述のとおり，高感度であるがゆえに検出される「いわゆる HLA 自然抗体」が高頻度に検出され，遺伝子工学で得られた精製抗原独特のエピトープへ反応する抗体がある。よってそれらを臨床的に有意なを含め非常に狭い特異性を示す。臨床的意義は不明

HLA アロ抗体と区別することが大事になる。それ以外に次の 2 点を留意したい。
3–1. プロゾーン現象： 血清不活化の必要性であるが，日本列島人からドナーを得る場合はほと抗原抗体反応（血清学）の宿命である。古典的には

んど問題にならない（クロスマッチが不適合になるこ

抗原過剰域で抗体力価が低下または偽陰性になることはあまりない）。

とを意味するが，抗体過剰域での現象を含めてプロ

2–1–3. 精製抗原特異的に反応する抗体
古典的な LCT 法や細胞膜上の HLA 分子を抗原とする方法（LIFT, ICFA）では検出されないが，精製HLA 抗原とのみ反応する抗体である。有名なものに
抗-B45（B44，ときに B49, B50 や B59 または B37と交差反応する），抗-B76（B*1512）（ときに B46 と交差反応）などが知られている。しばしば高力価（IFI
5,000〜20,000）を呈する。免疫化学的な手法のみで精製された抗原（PRA 法）には反応しにくいが，遺伝子工学的に精製された抗原（Single Antigen Beads

ゾーンと呼んでいる。ルミネックス法では極微量の精製抗原によって抗体を検出するので，抗体過剰域
でプロゾーンが起こることを予想していた。最近になっていくつかの例が発見された（未発表および学会
発表のみ）。意外にも補体が関与するプロゾーン現象であった。すなわち，EDTA 血漿を検体とすると IFI
値が 20,000 を超える高力価抗体であるのに，血清化すると IFI 値が 5,000 以下に下がるという現象である。もう一度 EDTA を加えて Ca＋＋をキレートした
り，加熱して不活化すると，IFI 値が復活する。補体

法）では強く反応する傾向がある。おそらく，不完全C1q（巨大分子）による抗体グロブリンの結合阻害がHLA 抗原； HLA 長鎖抗原などへの反応と考えられ推察される。

― 33 ―

34 MHC Vol. 18, No. 1

㐿ఎᏄ䛴ྞ๑

DRB1 DRB2 DRB3 DRB4 DRB5 DRB6 DRB7 DRB8 DRB9

DR1 䜴䝯䞀䝛
DR1, DR10, DR103, 䛮䛓䛱DR15

DR51 䜴䝯䞀䝛
DR15, DR16, 䛮䛓䛱DR1

DR51

DR52 䜴䝯䞀䝛
DR3, DR11, 12, DR13, 14, 1403 䛰䛯

DR52

DR53 䜴䝯䞀䝛DR4, DR7, DR9

DR53

DR8 䜴䝯䞀䝛
DR8

図1

HLA-DRB 領域の構造

DR1 グループや DR8 グループは発現遺伝子として DRB1 のみをもつが，DR51, 52, 53, グルー
プは発現遺伝子として，それぞれ DRB5, DRB3, DRB4 をもっている。偽遺伝子の種類と数もグループによって異なっている。

発現遺伝子

偽遺伝子

血清を検体とするときは 56℃ 30 分加熱して不活は単一の抗原が固相化されている。例えば，DR15

化する前処置が必要であり，EDTA 血漿を用いる方（DRB1*1502）と連鎖する DR51（DRB5*0102）は，が無難といえる。とくに臨床症例の抗体価の推移を抗体スクリーニング用のビーズでは同じビーズに固見るときは注意を要する。

相化されるが，Single Antigen Beads では，DR15

3–2. 連鎖の考慮とくに HLA クラス II 抗体特異性

ビーズと DR51 ビーズが別に作成されている。ドの判断

ナー候補の有するミスマッチ抗原が DR15 であると他のドナー抗原や免疫化学的に得られた PRA 抗原

きは，レシピエントに抗-DR15 が検出されないことと異なり，遺伝子工学により人工的に得られた単一を確認すると同時に，抗-DR51 の存在をも否定しな

HLA 抗原であることを念頭に置く。すなわち，遺伝

ければ，バーチャル・クロスマッチ適合とはいえな子が近接して連鎖する抗原が，別々に精製されてビーい。逆にいえば，抗-DR51 が検出されるときは，連ズに固相化されているので「連鎖」の概念なしに結鎖する DR15，DR16 も（抗-DR15，-DR16 が検出さ果を判断してはならない。最も留意しなければなられなくても）バーチャル・クロスマッチ（次項）不適ないのは，HLA Class II のパネルである。とくに DR合とみなす必要がある。DRB 領域の遺伝子構造を図

抗原（DRB1 産物）と DR51（DRB5 産物），DR52

1 に示す。

（DRB3 産物），DR53（DRB4 産物）の関係性である。

臨床的には HLA-A, B, DR 座しかタイプされていこれらは DRB 領域に近接して存在し，非常に強い連ないドナーが多い。レシピエントに抗-HLA-C があ

鎖不平衡が成立している。培養パネル細胞から HLAるとき，HLA-C 座の連鎖を予測してドナー特異的クラス II 分子を抽出精製すると，連鎖する DR 抗原

HLA 抗体（DSA（donor specific antibody））を推測することが求められる。同様に抗-DQ や抗-DP が検出されたときは，DR 座との連鎖で DQ 座を推測して DSA かどうかを判断したり，ときには DPB1 タがすべて抽出される。これらを固相化した「抗体ス
クリーニング」用のビーズには「連鎖する抗原」の全てが含まれる。これに対して Single Antigen Beads― 34 ―

MHC Vol. 18, No. 1
表2

35

移植 Graft や輸血血球における HLA 分子の座位別抗原の表現

Graftॾ½งऊ‫ڥ‬ըఝೠ

HLA-A

HLA-B

HLA-Cw

HLA-DR

HLA-DQ

HLA-DP

൫‫ڼ‬

+

+

+

+

0

+

Muczynski etal (2003)(3)(2001)(4)੧‫ڥ‬Փެභ

+

+

?

+

0

+

‫ڥ‬њࡿᗡެභ

+

+

+~0

+

+

+

Ottmann etal(1988) (5)Piacibello etal (1987) (6)Aglietta etal (1986) (8)Falkenburg etal (1986) (9)

‫಻ࣹڥ‬

+

+

+

0

0

0

᭵ໞ‫ע‬

+

+

?

+

?

?

T ެභ

+

+

+

0

0

0

ԩ঴ T ެභ

+

+

+

+

?

+

B ެභ

+

+

+

+

+

+

૒‫ע‬

+

+

+

+

0

+

क໗

用も長期生着に関する限り有意の相関は得られていイピングが必要になる。

ない。さらに Bortezomib 投与による Clonal deletion
II.

移植臨床

プロトコールによる腎生着が，免疫抑制剤なしで得HLA 抗体の臨床的意義を知るには，その標的となる HLA 抗原が移植臓器・組織・細胞に存在するかど
うかが第一義的問題である。HLA 座位別の抗原の有無を表 2 に示す。ついで抗体の力価（カットオフ値）
が議論になる。HLA 抗体の存否を決めるカットオフ

拒絶の原因が，移植後に産生される HLA 抗体である

値と，臨床的意義を決めるカットオフ値は乖離してことは，膨大なデータによって証明された13）。つまよい。

り，長期生着率を高め，臓器の half-life を延長させられているので（後述），移植免疫において液性免疫が細胞性免疫を凌駕する主役であるとするコンセプ
トは確かなものになりつつある。
肝臓を含め（Ashihara ら）12）多くの移植臓器の慢性るには，原因である HLA 抗体をモニタリングし，液1.

性免疫を制御することが求められる。移植後 1 年以臓器移植
クロスマッチの高感度への転換と，移植後の高感

内に de novo の DSA が検出されると，拒絶が早く起度 HLA 抗体モニタリングの実施が肝要である。

こり，それ以後に検出されるときは，拒絶が遅延す

1–1. 移植後 HLA 抗体モニタリングの重要性
アメリカにおける 1960 年代から 70 年前半，献腎移植後 1 年生着率は 40％ に過ぎなかったが10），いまや 90％ を超えるようになった。免疫抑制剤の進歩のほかに，HLA 抗体の検出や直接クロスマッチ技術の改善によって，超急性拒絶や急性拒絶（100 日まで）る。移植後 1 年以内は 3 ヵ月ごと（3, 6, 9, 12 ヶ月の4 回），以後，6 ヶ月〜1 年ごとの HLA 抗体モニタリ
ングが推奨される。モニタリングは HLA クラス I とクラス II 抗体スクリーニングで行う。HLA 抗体が検出されたときは，特異性を同定し，DSA かどうかを判断し抗体価の推移を見る。心臓移植ではクラス I 抗を防ぐことができるようになったことが要因である。

体が重視されるように，臓器によって異なる戦略が

しかしながら，生着腎の half-life は，1966–1975 年

あっても良い。移植後の DSA はグラフトによって，で 7.5 年10），1987–1995 年で 7.5 年11）と変化なく，吸収されるので血清中には極わずかしか残らない。高1996–2006 年でも 8.1 年11）と大きな改善は見られない。すなわち，HLA 抗体検出技術の進歩は，長期生感度な抗体スクリーニング法が必要である。IgG サ
ブクラスのうち，IgG3 抗体が重要であるという知見

着にはほとんど貢献していないといえる。細胞性免が出始めている（Terasaki 私信）。

疫抑制剤（cyclosporine, tacrolimus（FK-506）, siro-DSA が検出されたときは HLA 抗体の除去またはlimus, mycophenolate mofetil（MMF）その他）の使産生を制御することが求められる。その方法につい― 35 ―

36 MHC Vol. 18, No. 1ては，III 章で詳述する。

あり，DSA があるときは，50％ の確率で拒絶が起こ

臨床的意義のある抗体力価については，臓器の種ることを明らかにした。その後，同じ Cohort で藤原別，移植前か移植後かによって異なるカットオフ値

ら15）は ICSF 法で DSA を検出する（4/8）とき，全例が設定されるべきで，現在は議論中である。

（4 例）に拒絶が起こることを報告した。

1–2. HLA 抗体保有者へのロジスティックス（兵站学）

一方でハプロ半合致移植における HLA 抗体の影響

臓器移植の待機者リストは増加の一途をたどってについては兵庫医科大学でデータが蓄積され，Yoshi-いる。とくに HLA 抗体保有者への，臓器ロジス

hara らは移植前に DSA があるとき，25〜40％ に生

ティック問題（後述）は国際的に議論が多い。待機者

着不全が招来されることを明らかにした（投稿中）。

の HLA 抗体の有無，その HLA 抗体の特異性がわ

2010 年には NMDP（全米骨髄バンク）のデータが明らかにされ，DSA があるとき，拒絶の Odds ratio は
22 倍になんなんとすると報告された16）。われわれは多施設共同研究により，DSA 陽性のハプロ半合致移植 20 例を解析し，DSA が Class I 抗体であるとき
25％，Class II 抗体であるとき 18％ に拒絶を認めた。
また IFI が 3,800 を超える DSA は拒絶率 50％，そかっていれば，HLA タイプ & スクリーン（後述）など打つ手はありそうである。HLA 抗体を保有する待機者の抗体同定検査を定期的に行うことを提案する。
費用が問題になるが，希望者へのオプション検査（有料）であれば実施可能と考える。
2.

造血幹細胞移植

れ以下では拒絶を認めなかった。興味あることに免疫系がドナー細胞によって再構築されるので，Class II 抗体のみが検出された 4 例に IFI の高値を含臓器移植とは異なる視点が求められる。造血幹細胞

め拒絶はなかった（自家データ・学会発表のみ）。臨

移植はもともと HLA 一致のドナーからの移植が主流

床的なカットオフ値を 3,500 にすべきかもしれない。

であり，HLA 抗体の影響はほとんどなかった。かね移植前に直接クロスマッチや HLA タイプ & スクてより血縁間 Haploidentical で HLA 1 座ミスマッチ

リーン（後述）が陽性（不適合）になり，そのドナー移植は標準選択とされ，その後，臍帯血バンクの成を選択せざるを得ないときは，移植直前に血小板（ド立によって非血縁間臍帯血ミスマッチ移植が普及し，ナー候補の血小板が最適）輸血によって HLA 抗体を

さらにケモリフラクトリー患者へのハプロ半合致

吸収し，残存または新たに分化する抗体産生細胞を（HLA 2 座以上ミスマッチ）の適用がコンセンサスを得るなど，HLA ミスマッチ造血幹細胞移植が日常的

Bortezomib によって除去することが薦められる（後に詳述）。血漿交換の HLA 抗体の除去効果は意外にに行われるようになった。

得られない。

2–1. 臍帯血・HLA ミスマッチ移植
ミスマッチ移植は，とくに臍帯血移植は拒絶率が高2–2. 移植後モニタリング
移植前に HLA 抗体が検出されるレシピエントは，移植後の HLA 抗体モニタリングが推奨される。早期

い」ことがクローズアップされた。その中には HLAに抗体が減弱・消失すれば予後は良好なことが多い。

抗体による拒絶が含まれていることは容易に推測さ抗体が長期に持続するときは，免疫抑制剤の減量にれたが，ときまさに EBM かまびすしい時期であり，

よる GVH 効果を図ることが薦められる。抗体の持データの蓄積が要望されるままに過ぎた時期でも続はレシピエントの免疫細胞が（ひいては腫瘍細胞）あった。それに先立ち，東京大学医科学研究所の臍が残存している証拠と考えられるからである。実際

帯血移植グループは，HLA 抗体保有者への臍帯血移レシピエント由来抗体が持続する症例の予後は例外

植を自粛する方針を出した。東京都赤十字血液センなく悪い（自家データ）。

ター臍帯血バンクの高梨や，兵庫臍帯血バンクの荒2–3. HLA 抗体陽性ドナー
ドナーが HLA 抗体を持っているとき，移植後にドナー由来の HLA 抗体が検出されることがある（自家データ 4 例と学会発表データ）。ドナーの形質細胞が当初は慣習からクロスマッチは行われず，「HLA

木らは臍帯血移植における HLA 抗体の関与について
データを収集し始め，ようやく 2008 年 Takanashi ら
14）は，臍帯血移植における拒絶の主因は HLA 抗体で― 36 ―

MHC Vol. 18, No. 1

37

レシピエント内で抗体を産生した結果と推定される。

れている（2009）12）。多くは ATG と CyA の投与を受

血小板輸血不応からその現象が発見された例もある

けており，1/4 は HLA 抗体を持っていた。半数は細（万木ら，学会発表）。以上のことから，移植後にド菌，残りは真菌感染で，平均 9（2–43）回の顆粒球輸

ナーの免疫担当細胞が HLA 抗体を産生することは普血を受け，生存率は 58％ であった。輸血後の顆粒球通と考えてよい。HLA ミスマッチや血縁間ハプロ半

数は予後および HLA 抗体の有無で差はなかった。過合致移植のときは，ドナー由来の HLA 抗体が，レシ去の多くの報告も HLA 抗体の影響はないとするもの

ピエントのミスマッチ HLA 抗原と反応するとき，が多いが，HLA 適合をすすめるものもある19）。

GVH 反応を起こす可能性を否定できない。HLA 不適合移植後は，臓器移植と同様に HLA 抗体モニタリ

酸化酵素の補充であり，活性酸素による殺菌効果をングが必要な時代が来るかもしれない。ドナー由来得るためである。よって輸血顆粒球の recovery は重の HLA 抗体がどの程度持続するか，臨床への影響な要である。Heim ら（2010）20）によれば，CGD におどは今のところ不明である。

ける輸血顆粒球の recovery は HLA 抗体があるとき

3.

19.7±17.4％（n＝15），ないとき 0.95±1.59％（n＝16）であり有意差（p＜0.01）があった。HLA 抗体の輸血臨床

CGD への顆粒球輸血は正常顆粒球による NADPH

血小板輸血と顆粒球輸血のみ述べる。白血球除去

有無により呼吸困難などの輸血副作用頻度にも有意輸血が日常的に行われるようになっても，HLA 適合差があり，HLA 抗体があって，効果のない顆粒球

血小板輸血の適応は依然としてあるし，顆粒球輸血

輸血は避けるべきとしている。顆粒球 recovery はが重症再生不良性疾患（SAA）や造血幹細胞移植後な

NADHP 酸化酵素のマーカーである dihydrorhodamine 123 を用いたサイトメトリーで測定している点がおもしろい。CGD への顆粒球輸血は造血幹細胞移どの重症感染の救命に適用される。顆粒球機能に異常がある慢性肉芽腫性疾患（CGD）への適応もある。

3–1. HLA 適合血小板輸血
受血者の HLA 抗体を DSA としない血小板ドナー
を 選 択 す る こ と に な る。そ の 際，Single Antigen
Beads 法を用いると，速やかにドナーの選択が可能である。Single Antigen Beads 法は高感度であるゆ
えに，どの程度の IFI をカットオフ値とすべきか議論のあるところである。暫定的であるが 3,000〜5,000

植後の重症感染にも奏功している21）。
4.

クロスマッチから HLA T & S へ
脳死ドナーからの臓器移植，臍帯血バンクからの造血幹細胞移植，HLA 適合血小板輸血などにおける直接クロスマッチには，ドナーリンパ球の入手が困難なことが多い。いわゆるドナーリンパ球のロジス

をカットオフ値にすることが提唱されている（高ら，ティック問題がある。移植におけるロジスティック私信）。通常は血液センターに保管されたドナーリンス（兵站学）は，もともと高度にアロ免疫を受け広範

パ球と直接クロスマッチをして出庫されるが，リン囲 HLA 抗体を保有する登録レシピエントへ，献腎臓

パ球の保存にはロジスティックな問題が付きまとう。

器などが提供できない状況に発した用語であり，臍

クロスマッチを繰り返すうちに凍結リンパ球を費消

帯血移植や，血小板輸血にも同様の問題がある。レ

してしまうこともある。その際は後述する「HLA

シピエントは主治医・移植医の保護下にあり容易に

T & S」を採用することがよい。いずれその方向を目

検体を入手できるし，必要な検体は血清または血漿指すべきかも知れない。

であり保存や運搬も容易にできる。しかしながらド

3–2. 顆粒球輸血17）
HLA 抗体を有する受血者への顆粒球輸血について

ナーのリンパ球検体は，血縁や家族を除き，採取がコンセンサスは得られていない。出血予防のためのには入手が不可能なこともある（臍帯血移植など）。

血小板輸血と異なり，目的の多くが感染の治療であさらには脳死臓器移植ではドナーリンパ球がグラフ

り，血球数を維持することではないからである。32

トと同時に搬送され，時間的制約が厳しいことも多名の SAA 患者に顆粒球輸血が行われた経験が報告さい。移植施設の HLA ラボは 24 時間体制をとるのが困難なことが多いし，運搬や保存に手間を要し，時― 37 ―

38 MHC Vol. 18, No. 1

世界の趨勢であり，専門スタッフの確保も課題であっしい。レシピエントとドナーの ABO と Rho をタイた（わが国では症例数の関係でそれほどの問題には

プし，レシピエントの血清中の不規則抗体をスクリーなっていない）。すなわち，直接クロスマッチ実施にニングしておく。不規則抗体が陰性のときはクロス

はドナー検体の採取と，入手までの時空的問題があマッチを省略できる。不規則抗体が陽性のときは抗り，これをドナーリンパ球のロジスティック（兵站体の特異性を同定して，その抗体が反応する抗原が学）問題とよび，移植領域の直接クロスマッチ実施に陰性の血液を用意する。

大きな障害となっている。つまるところ，入手しやこの思想を移植の世界に導入しようというのが

すいレシピエントの血清だけでクロスマッチに代替「HLA タイプ & スクリーン（T & S）」で，手順の概できる方法論が待望されてきた。

要は次のとおりである（図 2）。

輸血の分野では待機手術などのためのクロスマッ① レシピエントとドナー候補の HLA をタイプしてチは，直接クロスマッチを省略して，「タイプ & ス（または臍帯血バンクの HLA リストと照合しクリーン（T & S）」をするシステムが導入されて久て），拒絶方向のミスマッチ抗原を同定する。

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図2

HLA タイプ＆スクリーン（バーチャル・クロスマッチ）― 38 ―

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MHC Vol. 18, No. 139

検査を行う。

MMF）や，MMF の大量投与や26），Rituximab（リツキサン®）による B 細胞から形質細胞への転換を抑制27），

HLA 抗体が陰性のときは，クロスマッチ適合となどが試みられている。物理的な抗体除去（血漿交換

判断してこれを省略する。

や抗体除去フィルター）が行われているが，一時的なHLA 抗体が陽性の時は，その抗体の特異性をSingle Antigen Beads 法で同定する。

臨床効果しか得られない。多発性骨髄腫の治療薬と抗体の特異性を，同定された拒絶方向ミスマッ

センファーマ，武田薬品）はプロテアソーム阻害剤でチ抗原と比較対照する。または臍帯血バンクやあり，活性化された形質細胞や活性化 T 細胞など細HLA 適合血小板ドナープールの HLA リストか

胞周期の短い細胞に働いてアポトーシスを誘導する

ら適合者を検索する。

ことが知られている（Every ら）28）。HLA アロ抗体のドナー候補の有するミスマッチ抗原に反応する除去効果29）30）の他，マウスの実験で GVL を阻害せず抗体が否定されるときは，クロスマッチ適合とや臍帯血移植で一部採用され始めた。輸血分野で 20

GVHD を予防する効果があることも注目されている（2004）31）。Koreth ら（2009）32）は 23 例の非血縁間
HLA ミスマッチ移植に GVHD 予防剤として，Bortezomib, FK-506, Methotrexate を 適 用 し た。Bortezomib 関連毒性はほとんどなく，II-IV 急性 GVHD
を 3 例に認め，day 180 における累積頻度は 13％ であった。慢性 GVHD は 9 例に認め 1 年累積頻度は41％ であった。非再発 TRM はなく，再発率は 29％，
全・非 再 発・event free 生 存 率 は そ れ ぞ れ 75％，
64％，59％ であった。慢性 GVHD 治療効果もありそうである33）34）。本章では Bortezmib を中心に述べ年前に採用されたシステムが，移植の世界で採用でる。

レシピエント血清中の HLA 抗体スクリーニング

②
③
④
⑤

⑥

判断して直接クロスマッチを省略する。
⑦

抗体の特異性がミスマッチ抗原に対応するときは，クロスマッチ不適合と判定する。

⑧ 抗体の特異性に対応しないミスマッチ抗原を持
つドナーを選択する。

HLA タイプ & スクリーンは筆者の造語で，最近ではアメリカなどで「Virtual Crossmatch」と称して，一部の分野（屍体臓器と臍帯血移植など）に導入されつつある22）23）24）25）。わが国でもハプロ半合致移植

して市販されている Bortezomib（ベルケード® ヤン

きなかったのはテクノロジーのせいであり，HLA 遺伝子タイピングとルミネックス法による抗体検査の1.

迅速化と高精度・高感度が実現されて導入可能になった。

Bortezomib の作用機序と移植への応用
プロテアソーム阻害剤で，骨髄腫治療薬として販売されている。プロテアソームは細胞内の異常構造の蛋白質や，不要蛋白質を分解する酵素を有する細III.

HLA 液性免疫制御

胞内構造で，細胞周期に重要な役割を担っている。細Medawar が細胞性免疫を解明し定義して以来，胞内にある不要な蛋白質はユビキチンで標識され，ユ移植免疫は細胞性免疫と同義であった。免疫抑制

ビキチン・蛋白質は，プロテアソームに運ばれ酵素剤も細胞性免疫の制御を目的として開発された。

分解される（ユビキチン・プロテアソーム経路）。骨Medawar の弟子である Terasaki Ichiro は液性免疫の髄腫細胞をはじめ腫瘍細胞は，細胞周期に関連した臨床的重要性に早くから注目し，精力的に臨床デー

このプロテアソームに何らかの異常があり，正常細タを蓄積し，HLA 抗体すなわち，HLA 液性免疫が胞よりもプロテアソーム阻害に対する感受性が高い移植の成否，生着期間に第一義的に重要であることと考えられている。腫瘍は正常細胞に比べて細胞増を明らかにした。HLA 抗体検査の開発と革命にも関殖が非常に早い（細胞周期が短い）ので，蛋白質の合与してきたことは周知のことであり，彼こそが HLA成も正常細胞より盛んに行われ，構造異常蛋白質が血清学のルネッサンスをもたらしたといってよい。

過量になる。プロテアソーム阻害により，この構造

しかるに市販の免疫抑制剤では液性免疫の制御

異常蛋白質が分解されないと，細胞機能は低下し，アは困難である。免疫抑制剤のカクテル（FK506 とポトーシスへと誘導される。

― 39 ―

40 MHC Vol. 18, No. 1

B 細胞が活性化し，抗体産生細胞： 形質細胞へ分の生着を得ている。ときにサイクロスポリンや MMF

化すると細胞周期が短く増殖速度が速くなるので，を要する症例もあるが，多くはステロイドのみで経Bortezomib によってアポトーシスが誘導される。抗原刺激を与えて B 細胞クローンを可及的に形質細胞へ分化させた後に Bortezomib を投与すると，その抗原に対する B 細胞クローンが激減し，Clonal deletion

過している。このインドにおける臨床治験の結果を得て，アメリカでもサンフランシスコとニューヨー
クで治験が始まるという（Terasaki 私信）。今後の発展が期待される。

に近い状態を招来させることが可能である。同様の機序が T 細胞においても起こりえるので，造血幹細4.

胞移植における GVHD 予防への適用が示唆される。

移植前に HLA 抗体を保有する症例の DSA 除去

Every と Terasaki ら（2010）36）は，移植後に DSAが検出された 13 例の生体腎移植のレシピエントに
Bortezomib を式どおり投与し，HLA 抗体を Single
Antigen Beads 法で 1 週ごとにモニターし，同時に麻疹と破傷風抗体を定量した。全員に 50％ 以上のDSA 減量を認め，10/13 例に完全な DSA の消失を見た。1 年後も減量効果は持続していた。しかるに抗麻疹 IgG と破傷風トキソイドは 1 年後も変化なく，（クロスマッチ陰性化の狙い）や，移植後 HLA 抗体

効果域にとどまったと報告している。細胞質内のモニタリングで，DSA が検出されたときは，抗体除

reticulum への蛋白質の蓄積が多いときは（活性化形

去か減弱が求められる。

質細胞），プロテアソーム阻害によって細胞のアポ

Bortezomib は 1 回 1.3 mg/m2，Day 1，4，8，11 に投与を 1 クールとし，10 日間の休薬後に 2 クール目

トーシスが起こるが，蛋白質の蓄積が少ないとき（ウを開始することが推奨されている。中力価抗体の減細胞）ではアポトーシスが起こらず生きつづけると仮弱には 1 クールで効果があるが，高力価抗体には 2説している。

動物実験ではあるが，GVL 効果を阻害しない GVHD
予防法として注目されている31）。ひとつには Bort-

ezomib 自身が抗腫瘍効果（腫瘍細胞のアポトーシス）を発揮するからであろう。
2.

抗体除去（減弱）法としての Bortezomib 投与

形質細胞除去は抗ウイルスを抑制しない

イルスワクチンで感作されたメモリー B 細胞や形質〜3 クールが必要とされている。HLA 抗体（IgG）の半減期は，ほぼ 1 ヶ月あり Bortezomib の投与のみ

IV.

では即効性を期待できない。造血幹細胞移植のレシ

小板でもよい。免疫刺激により活性化する形質細胞

HLA 抗体の最も特徴的な性質は「多様な交差反応」である。HLA はアリル間の gene conversion（遺伝子交換）様の変異で進化してきた。ただし，DPB1
は例外的に point mutation が主たる進化要因である。
よって，DP 座以外の HLA 抗原はアミノ酸配列をを Bortezomib で制御すれば，DSA 産生クローンの共有する抗原群があり，これがエピトープとなり得

除去につながるかもしれない。臓器移植では血小板る も の を「交 差 反 応 抗 原 群」cross reactive group

輸血の代わりに血漿交換で HLA 抗体を減弱させるこ（CREG）として分類してきた（図 3）。それを詳細にとが推奨されている。

解析し発展させたのがエピトープ解析である。初期

ピエントの場合は，血小板輸血による HLA 抗体の吸収後に Bortezomib を投与することが良いと考える。
血小板はドナー候補の血小板が最適で，ランダム血HLA 抗原エピトープには HLA のアミノ酸配列から共通項を見出して，仮3.

Bortezomib 単独による腎移植

想エピトープとして交差反応を説明していた。われ）Terasaki ら35（私信）はすでに Bortezomib 投与による「Clonal Deletion」プロトコールを開発し，血縁者間腎移植に適用し，無投薬（2 例）かステロイド
以外の免疫抑制剤を使用しない 17 症例に 2 年以上の生着，約 100 症例（うち 2 例は無投薬）に 1 年以上

われは免疫原となる抗原が特定できる妊婦血清を得て，Single Antigen Beads 法を用いてエピトープ解析を行った。輸血歴のない妊婦に HLA 抗体が検出されるとき，その免疫原はハプロ共有の児に存在する
父由来 HLA 抗原（inherited paternal antigens）に限― 40 ―

MHC Vol. 18, No. 1

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交差反応抗原群の相関図，Cross Reactive Map― 41 ―

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41

42 MHC Vol. 18, No. 1
表3

HLA クラス I 抗体が認識するエピトープ図 4 を参照

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1

2

3

4

5

6

7

8

I-0101

35

45

46

RMA

B*1301 B*1501 B*1502 B*1512 B*1513 B*1516 B*4601 B*5701

65

+
+1

I-0201

41

46

AAQ

B*1501 B*1502 B*1512 B*1513 B*4601

I-0301

43

62

QR

A*2501 A*2601 A*3301 A*3303 A*3401 A*6601 A*6602 A*6801+2

I-0302

43

69

PA

B*0702 B*1516 B*2705 B*2708 B*4201 B*5401 B*5501 B*5601+7I-0303

43

69

76

PAE

B*0702 B*1516 B*2705 B*2708 B*4201 B*5401 B*5501 B*5601+6I-0401

45

62

65

66

69

TRQITT

B*1801 B*3501 B*3701 B*5101 B*5102 B*5201 B*5301 B*7801

I-050162

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I-0502

43

62

66

76

79

I-060165

66

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I-060265

66

69

I-060365

66

69

I-060465

66

I-060565

66

I-060665

6970

I-060766

69

I-060865

69

I-070167 163

I-0801

69

80

82

I-0901

73

76

77

71

GE
QGKVG

A*0201 A*0203 A*0206 A*0207 B*5701 B*5703 B*5801
A*0201 A*0203 A*0206

QIA

B*0702 B*2705 B*2708 B*4201 B*5401 B*5501 B*5601 B*6701

70

RKAH

A*0201 A*0203 A*0206

70

QIAQ

B*0702 B*4201 B*5401 B*5501 B*5502 B*5601 B*6701 B*8101

70

GKH

A*2301 A*2402 A*2403

70

RNH

A*0101 A*2501 A*2601 A*3101 A*3201 A*3301 A*3303 A*3601

+3

QRQT

B*4601 C*0102 C*0202 C*0302 C*0303 C*0304 C*0501 C*0801

+3

70

KAH

A*0201 A*0203 A*0206 A*2301 A*2402 A*2403

80

QTI

B*1513 B*3801 B*4901 B*5101 B*5102 B*5201 B*5301 B*5901

FT

B*5901 B*0801

73

83

+3

+1

TNRG

B*0801 B*1401 B*1402 B*1501 B*1502 B*1503 B*1510 B*1512

+13

TEN

A*2301 A*2402 A*2403 B*1301 B*1513 B*1516 B*3801 B*4402+10I-0902

73

76

77

TVS

B*4601 C*0102 C*0302 C*0303 C*0304 C*0801 C*1402 C*1601

I-0903

73

76

77

TAN

A*0101 A*1101 A*1102 A*2501 A*2601 A*2901 A*2902 A*3401

I-0904

73

76

77

IVD

A*3101 A*3301 A*3303

I-0905

76

77

80

ENI

A*2301 A*2402 A*2403 B*1513 B*1516 B*3801 B*4901 B*5101

I-0906

76

77

80

ANT

A*0101 A*2601 A*2901 A*2902 A*3601 A*4301 A*8001

I-0907

79

80

RI

A*2301 A*2402 A*2403 A*2501 A*3201 B*1513 B*1516 B*3801+9I-100176 163EE

B*0702 B*1301 B*2705 B*2708 B*4001 B*4002 B*4701 B*4801+1I-110180

90

IA

A*2301 A*2402 A*2403 A*3201 B*1513 B*1516 B*3801 B*4901+8I-110282

83

LR

A*2301 A*2402 A*2403 A*2501 A*3201 B*1301 B*1513 B*1516+15

I-110390D

A*0101 A*1101 A*1102 A*2501 A*2601 A*3401 A*3601 A*4301+7I-1201

109 163

LT

B*0801 B*1401 B*1402 B*1801 B*3701 B*3801 B*3901 B*3905+16K

A*0201 A*0203 A*0206 A*2301 A*2402 A*2403 A*6801 A*6802+1

I-1301

127

I-1401

138 142 144 145 149

MTKHA

+9

+7

A*0201 A*0203 A*0206 A*6801 A*6802 A*6901

I-1402142 143 144

ISQ

B*4001 B*4801 B*8101 C*1701

I-1403144 145 149

QRT

A*2501 A*2601 A*3401 A*4301 A*6601 A*6602

I-1501

149 150 151

AAH

A*0201 A*0203 A*0206 A*0301 A*1101 A*1102 A*2402 A*2403

I-1502150 151 152

AHA

A*1101 A*1102

I-1503150 151 152

AHV

A*0201 A*0206 A*2402 A*2403 A*6801 A*6802 A*6901

I-1504150 151 152

ARE

B*0702 B*1401 B*1402 B*1501 B*1502 B*1503 B*1510 B*1512

I-1601163 166 167

EEW

A*6602 B*0702 B*1301 B*2705 B*2708 B*4001 B*4002 B*4701+5I-1602163 166 167

LEW

B*1501 B*1502 B*1503 B*1510 B*1513 B*1516 B*3501 B*4005

+15

+3

+25

I-1603163 166 167

REW

A*1101 A*1102 A*2501 A*2601 A*4301 A*6601

I-1604166 167

DG

A*0101 A*2301 A*2402 A*8001 B*1512

I-1605163

R

A*0101 A*1101 A*1102 A*2501 A*2601 A*4301 A*6601

I-1701

177 178

DK

B*0702 B*4001 B*4801 B*8101

I-1801

184 207

AS

A*0201 A*0203 A*0206 A*2501 A*2601 A*2901 A*2902 A*3101+12

I-1901

267 268

PE

C*0102 C*0202 C*0302 C*0303 C*0304 C*0401 C*0501 C*0602+6I-1902267 268

QE

B*7301 C*0702 C*1701― 42 ―

MHC Vol. 18, No. 1

I-0401 ǣȏȃÓȒ

I-601~I-0607 ǣȏȃÓȒ

I-0901~I-0904 ǣȏȃÓȒ

I-1001 ǣȏȃÓȒ

B5 CRAG (‫ތ܉‬ಶ҃‫ۍܨ‬٫)=A2, A9(23,24), A10(25,26,)+

Bw4, A1+A10(25,26)+A11

B7 CRAG =B35,B51,B52,B53,,B18,B78

A19(31,32,33), B7/22 CRAG

B46+Cw

B7,B27,B13,B60,B61,B48

I-1501~I1504 ǣȏȃÓȒ

I-1601~I-1604 ǣȏȃÓȒ

A11, A2+A11, A2+A28 (68,

B7 CRAG, B5/15 CRAG69) +A9(23,24)

A10(25,26+)+A11, A1+A9

図443ǣȏȃÓȒǚǆưǉƧই¹‫ۍܨ‬ȕȒǼȄƶࢍඈƳંƌସ‫ޒ‬ƶ੩฻ƳǊƊǓº‫ދ‬ইƷସ‫ޒ‬ƶ੩฻¹ЫইƷरƓǑº

HLA クラス I 抗原のエピトープ。アミノ酸と特異性は表 4 参照，同位置で複数のエピトープ特異性が表現される

定され，座位あたり最大 1 抗原である。反応陽性と測が期待されるからである37）。

なる allele/ 抗原群と免疫原 HLA との共通エピトー
プを「赤座 Epigraph ソフトウエア（エクセル・マク

参考文献

ロ）」
（赤座達也の好意による）で解析した。その結果

1. Terasaki PI, Cai J. Human leukocyte antigen
antibodies and chronic rejection: from association to causation. Transplantation 2008; 86:
377–83.
2. Fujiwara K, Shimano K, Tanaka H, et al: Application of bead array technology to simultaneous detection of human leucocyte antigen andhuman platelet antigen antibodies. Vox Sang,
2009. 96: 244–251,
3. Muczynski KA, Cotner T, Anderson SK.: Unusual expression of human lymphocyte antigenclass II in normal renal microvascular endothelium. Kidney Int. 2001 Feb; 59（2）: 488–97.
4. Muczynski KA, Ekle DM, Coder DM, Anderson SK: Normal human kidney HLA-DRexpressing renal microvascular endothelialを表 3 にまとめその一部を図 4 に図示する37）。抗原
エピトープはペプチドを受容する位置の α-Helix 周
辺に集中して存在することがわかる。また，分子の同じ位置に複数以上のエピトープが表現されることも理解でき，交差反応の概念も整理できる。多クローンである高度免疫アロ抗体を単一 HLA 抗原で吸収後に，解離抗体（おそらく単クローン抗体）を得て，Single Antigen Beads 法でその特異性を判定し，エピトープを推定するという解析も行われている38）。
われわれは HLA エピトープ解析をすすめ，抗体産生につながりやすい免疫優性エピトープ（Immuno-

dominant Epitope）を解明し，HLA の組み合わせによって液性免疫が刺激されやすいものと，抗体レス
ポンスが起こりにくい組み合わせを予知できるようにしたいと考えている。これにより，移植の予後推― 43 ―

44 MHC Vol. 18, No. 1

cells: characterization, isolation, and regulationof MHC class II expression. J Am Soc Nephrol.
2003 May; 14（5）: 1336–48.
5. Ottmann OG, Nocka KH, Moore MA, Pelus
LM.: Differential expression of class II MHC
antigens in subpopulations of human hematopoietic progenitor cells. Leukemia. 1988 Oct; 2（10）: 677–86.
6. Busch FW, Langer M, Pawelec G, Ziegler A,
Wernet P, Bühring HJ, Meyer P, Müller C.: Aclass II antigens on human hematopoietic progenitors. Blut. 1987 Mar; 54（3）: 179–88.
7. Piacibello W, Aglietta M, Stacchini A, Spinelli
P, Salvetti L, Kerim S, Malavasi F, Infelise V,
Resegotti L, Gavosto F.: Expression of HLAclass II determinants by normal and chronic
myeloid leukemia progenitors. Leuk Res. 1987;
11（3）: 285–90.
8. Aglietta M, Piacibello W, Stacchini A, Dezza L,
Sanavio F, Malavasi F, Infelise V, Resegotti L,
Gavosto F.: Expression of HLA class II（DR,DQ）determinants by normal and chronic myeloid leukemia granulocyte/monocyte progenitors. Cancer Res. 1986 Apr; 46（4 Pt 1）: 1783–
7.
9. Falkenburg JH, Fibbe WE, Veenhof WF, Koning F, van Eeden G, Voogt PJ, Jansen J.: Selective removal of clonogenic neoplastic B cells
from human bone marrow using anti-HLA-DQ
antibodies and complement. Exp Hematol.
1986 Feb; 14（2）: 101–7.
10. Fifteen years of HL-A: what is the importanceof HL-A compatibility for clinical outcome ofrenal transplantations? Vox Sang 1978. 34: 171–88.
11. Kaneku HK, Terasaki PI. Thirty year trend in
kidney transplants: UCLA and UNOS Renal
Transplant Registry. Clin Transpl 2006: 1–27.
12. Ashihara E, Tsuji H, Sakashita H, Haga H,
Yurugi K, Kimura S, Egawa H, Manabe T,
Uemoto S, Maekawa T.: Antidonor antibody inpatients receiving ABO-identical and HLAmismatched living donor liver transplants: effect onsurvival. Transplantation. 2007; 83（4）: 506–9.
13. Everly MJ,. Terasaki PI: Monitoring and treating posttransplant human leukocyte antigen antibodies. Human Immunology 2009. 70: 655–
659.
14. Takanashi M, Fujiwara K, Tanaka H, Satake M,
Nakajima K.: The impact of HLA antibodies
on engraftment of unrelated cord blood transplants. Transfusion. 2008 Apr; 48（4）: 791–3.
15. 藤原孝記，高梨美乃子，田中秀則，柏瀬貢一，佐竹正博，中島一格： 非血縁者間臍帯血移植におけるレシピエント HLA 抗体と生着の関連性について； HLA ミスマッチ移植における ICFA 法を用いた交差試験の有用性。MHC 2010 17（1）。

39–46.
16. Spellman S, Bray R, Rosen-Bronson S, Haagenson M, Klein J, Flesch S, Vierra-Green C, Anasetti C. The detection of donor-directed, HLAspecific alloantibodies in recipients of unrelated
hematopoietic cell transplantation is predictiveof graft failure. Blood. 2010 Apr 1; 115（13）:2704–8.
17. Massey E, Paulus U, Doree C, Stanworth S.
Granulocyte transfusions for preventing infections in patients with neutropenia or neutrophil
dysfunction. Cochrane Database Syst Rev. 2009
Jan 21;（1）: CD005341.
18. Quillen K, Wong E, Scheinberg P, Young NS,
Walsh TJ, Wu CO, Leitman SF. Granulocytetransfusions in severe aplastic anemia: aneleven-year experience. Haematologica. 2009
Dec; 94（12）: 1661–8.
19. Atallah E, Schiffer CA. Granulocyte transfusion. Curr Opin Hematol. 2006 Jan; 13（1）: 45–
9.
20. Heim KF, Fleisher TA, Stroncek DF, Holland
SM, Gallin JI, Malech HL, Leitman SF. The relationship between alloimmunization and posttransfusion granulocyte survival: experience in― 44 ―

MHC Vol. 18, No. 1

a chronic granulomatous disease cohort. Transfusion. 2010 Dec 22. doi: 10.1111/j.1537–2995.
21. Bielorai B, Toren A, Wolach B, Mandel M, Golan H, Neumann Y, Kaplinisky C, Weintraub M,
Keller N, Amariglio N, Paswell J, Rechavi G.
Successful treatment of invasive aspergillosis inchronic granulomatous disease by granulocytetransfusions followed by peripheral blood stem
cell transplantation. Bone Marrow Transplant.
2000 Nov; 26（9）: 1025–8.
22. Tambur AR, Ramon DS, Kaufman DB, etal:
Perception versus reality?: Virtual crossmatch̶ how to overcome some of the technical andlogistic limitations. Am J Transplant. 2009. 9:
1886–93.
23. Gutman JA, McKinney SK, Pereira S, etal:
Prospective monitoring for alloimmunization incord blood transplantation: “virtual crossmatch”
can be used to demonstrate donor-directed antibodies. Transplantation. 2009. 287（3）: 415–8.
24. Zachary AA, Sholander JT, Houp JA, LeffellMS.: Using real data for a virtual crossmatch.
Hum Immunol. 2009. 70: 574–9.
25. Bingaman AW, Murphey CL, Palma-Vargas J,
Wright F.: A virtual crossmatch protocol significantly increases access of highly sensitized patients to deceased donor kidney transplantation.
Transplantation. 2008. 86: 1864–8.
26. Rebellato LM, Zadeh S, Ozawa M, et al. Mycophenolic acid may reduce donor specific HLA
antibody strength in kidney transplant recipients. Am J Transplant 2009; 9:（Suppl 2）: 641（Abstract）.
27. Becker YT, Becker BN, Pirsch JD, Sollinger
HW. Rituximab as treatment for refractory kidney transplant rejection. Am J Transplant 2004;
4: 996–1001.
28. Everly MJ, Everly JJ, Susskind B, Brailey P,
Arend LJ, Alloway RR, Roy-Chaudhury P,
Govil A, Mogilishetty G, Rike AH, Cardi M,
Wadih G, Tevar A, Woodle ES. Bortezomib

45

provides effective therapy for antibody- andcell-mediated acute rejection. Transplantation.
2008 Dec 27; 86（12）: 1754–61.
29. Perry DK, Burns JM, Pollinger HS, Amiot BP,
Gloor JM, Gores GJ, Stegall MD. Proteasome
inhibition causes apoptosis of normal humanplasma cells preventing alloantibody production. Am J Transplant. 2009 Jan; 9（1）: 201–9.
30. Diwan TS, Raghavaiah S, Burns JM, Kremers
WK, Gloor JM, Stegall MD. The impact of proteasome inhibition on alloantibody-producing
plasma cells in vivo. Transplantation. 2011 Mar
15; 91（5）: 536–41.
31. Sun K, Welniak LA, Panoskaltsis-Mortari A,
OʼShaughnessy MJ, Liu H, Barao I, Riordan W,
Sitcheran R, Wysocki C, Serody JS, Blazar BR,
Sayers TJ, Murphy WJ. Inhibition of acutegraft-versus-host disease with retention ofgraft-versus-tumor ffects by the proteasome inhibitor bortezomib. Proc Natl Acad Sci U S A.
2004 May 25; 101（21）: 8120–5.
32. Koreth J, Stevenson KE, Kim HT, Garcia M,
Ho VT, Armand P, Cutler C, Ritz J, Antin JH,
Soiffer RJ, Alyea EP 3rd. Bortezomib, tacrolimus, and methotrexate for prophylaxis of graftversus-host disease after reduced-intensity conditioning allogeneic stem cell transplantationfrom HLA-mismatched unrelated donors.
Blood. 2009 Oct 29; 114（18）: 3956–9.
33. Mateos-Mazon J, Pérez-Simón JA, Lopez O,
Hernández E, Etxebarria J, San Miguel JF. Useof bortezomib in the management of chronic
graft-versus-host disease among multiple myeloma patients relapsing after allogeneic transplantation. Haematologica. 2007 Sep; 92（9）:1295–6.
34. Koreth J, Alyea EP, Murphy WJ, Welniak LA.
Proteasome inhibition and allogeneic hematopoietic stem cell transplantation: a review. Biol
Blood Marrow Transplant. 2009 Dec; 15（12）:1502–12.

― 45 ―

46 MHC Vol. 18, No. 1

35. Trivedi HL, Kaneku H, Terasaki PI etal: Clonal
Deletion Using Total Lymphoid Irradiation with
No Maintenance Immunosuppression in Renal
Allograft Recipients. Clinical Transplants 2009,
265–280.
36. Everly MJ, Terasaki PI, Hopfield J, Trivedi HL,
Kaneku H. Protective immunity remains intact
after antibody removal by means of proteasome
inhibition. Transplantation. 2010 Dec 27; 90（12）:1493–8.
37. Maruya E, Sasaki N, EI-Awar N, Akaza T,

Kitawaki J, Saji H, and Paul. Terasaki PI:
Immunogenic HLA Class I Epitopes Identified
by Humoral Response to Pregnancies. ClinicalTransplants 2008, 215–227
38. Nadim El-Awar N, Terasaki PI, Nguyen A,
Sasaki N, Morales-Buenrostro, LE, Saji H,
Maruya E, Poli F: Epitopes of human leukocyte
antigen class I antibodies found in sera of normal healthy males and cord blood. Human Immunol. 2009. 70: 844–853.

― 46 ―