MicroSnap Enhanced Nutrient Broth 9ml
Directions for use with MicroSnap Coliform Detection Device (MS2-COLIFORM)
液体乳製品対象
型式: MS1-N-BROTH-9ML(100)
製品説明/使用方法

9. 結果は、RLU（相対光量単位）で表示されます。CFU 値の制限に対応するように

MicroSnap Enhanced Nutrient Broth（前培養キット）は、検出キットである MicroSnap

RLU 値のしきい値を設定します。相関は、以下の「結果の解釈」を参照してください。

Total(MS2-TOTAL)、 MicroSnap Coliform(MS2-COLIFORM)及び MicroSnap
E.coli(MS2-ECOLI)と互換性があります。

結果の解釈：

下記の使用方法の説明では、液体牛乳をサンプル対象とし MicroSnap

ルミノメータに表示される結果は相対発光量(RLU)です。採取した菌数の RLU 値は CFUColiform(MS2-COLIFORM)検出キットを用いた例を記しています。Enhanced Nutrient

値と比例しています。表 2 は RLU 値と CFU 値の換算表を示します。元の牛乳サンプル

Broth は、バイオマーカーと大腸菌群と大腸菌が持つ特定の酵素産生を強め、干渉を低減しての大腸菌群 CFU/mL の推定です。

好気性及び通性微生物を成長させるための 9ml の液体培地です。
この製品は、主に液体乳製品用です。他の製品サンプルまたは 37±0.5°C 以外の温度で培養する場合は、試験的に検査を実施し、調査をする必要があります。
表 2：MicroSnap RLU と CFU の相関関係（37±0.5°C、8 時間培養後）
別途ご準備いただく必要のある器具や試薬：

平均 CFU / mL

EnSURE luminometer (型式 ENSURE)
MicroSnap Coliform Detection Device (型式 MS2-COLIFORM)
Dry block incubator （37±0.5°C に設定）
ピペット（1ml、0.1ml）
ボルテックス(オプション)
検査手順：【動画による指導】www.youtube.com/HygienaTV【Step1】培養

EnSURE RLU
8 時間<1<50<5<100<10<200<25<500<50<1,000<100<2,000<250<5,000<500TNTC

測定のための培養手順を以下に示します。Step1 の図も参考にしてください。
使用前に外観の確認（液体が濁っている、粘性が強い、変色している）をしてください。油性ペン

多くの大腸菌・大腸菌群は、ごく少量でも存在していれば十分な酵素活性を生成し、検出されま等でサンプルが判別できるように印をつけてください。

す。8 時間を超えて培養することで、検出限界や感度がよくなることはありません。

1.

牛乳サンプルと Enhanced Nutrient Broth を室温（20-26℃で 10 分間程度）に馴染ませてください。室温に馴染んだのを確認し、Enhanced Nutrient Broth の蓋を緩めて外し、無菌的に 1ml の液体牛乳サンプルを Enhanced Nutrient Broth へ加えます。

2.

蓋を戻し、しっかりと締めます。

3.

10 秒間手で振るか、又はボルテックスミキサーで撹拌してください。

4.

8 時間、37 ± 0.5°C で培養します。下記の表 1 を参照してください。

8 時間（表 3 参照）RLU 値は増加しません。

結果

1 回目結果

2 回目

陽性/陰性

(10 分間培養)(延長培養)

CFU<1-250

それ以上検出キットを延長培養することで、RLU 値は徐々に増加します。逆に、汚染のないサンプルは

表 3：延長培養による陰陽性判定結果（例）

表 1: 37±0.5°C での培養時間と CFU
培養時間

低い RLU 値（例えば、3 または 4RLU）は、低レベルの汚染や損傷菌を示します。37℃で 10 分間か【Step2】検出結果

4RLU4RLU

陰性

4RLU

10 RLU

陽性検出の手順を以下に示します。Step 2 の図も参考にしてください。
校正と管理：
1.

2.

MicroSnap Coliform Detection を室温（20-26℃で 10 分間程度）に馴染まGLP に従い、陰陽性のコントロールを実行することをお勧めします Hygiena 社は、次のコントロールをせてください。手のひらに５回叩くか、一度下向きに強く振って下さい。これは中の液体提供しています：

試薬を検出キットの底部へ集めるためです。

●Hygiena 社ルミノメータの校正コントロールキット（型式 PCD4000）

培養済みの培養液をインキュベータから出し、サンプル入り培養液を 10 秒程度手で●大腸菌群・大腸菌のポジティブコントロール（型式 MS-PC-COLIFORM）

振るか、又はボルテックスミキサーで撹拌してください。
3.

検出キットのスナップバルブ（キャップ）をねじりながら外してください。ピペットを用いて培養液から 0.1ml を直接検出キットへ移してください。

4.

検出キットのスナップバルブを締めてください。

5.

しっかりと検出キットを持ち、親指と人差し指で上部のスナップバルブを前後に折り曲げ保存方法と保管：2-8℃で保管して下さい。
保存期限は 12 か月です。ラベルの使用期限を確認してください。

ます。完全に液体を落としきるために３回しぼります。
6.

軽く振って混合して下さい。

廃棄：

7.

37±0.5℃で、10±0.2 分間、検出キットを培養して下さい。

廃棄前に滅菌してください。MicroSnap はオートクレーブを実施するか 20%の漂白剤で 1 時間の8.

ルミノメータの電源をオンにし、測定の準備をします。（電源をオンにした後、15 秒の滅菌処理で滅菌が可能です。その後、廃棄してください。

カウントで測定可能となります）10 分間培養後、ただちに検出キット（チューブごと）をルミノメータに入れ、蓋を閉め、測定器を垂直に保持したまま“OK”ボタンを押して測定を開始します。15 秒のカウントダウンののちに結果が表示されます。

INS 0177

JAN 2015Rev A

MicroSnap Enhanced Nutrient Broth 9ml
Directions for use with MicroSnap Coliform Detection Device (MS2-COLIFORM)
Matrix : Liquid Milk Products
Part No : MS1-N-BROTH-9ML(100)
安全上のご注意：

製造者/販売者責任：

MicroSnap Enhanced Nutrient Broth は正しく使用すれば健康上のリスクをもたらすことは

本製品の製造者(Hygiena International Ltd)または販売者(ニッタ株式会社)は、本製品のありません。陽性が確認された使用済み試薬はバイオハザードとなり得るため、GLP 及び安全衛使用者またはその他の者に対し、本製品の使用によって直接、間接、偶発的、必然的に生じた如生規則に安全にコンプライアンスに従い処分する必要があります。

何なる損害、喪失について責任を負いません。製品に不具合が認められた場合に本製品の製造者

1.

Enhanced Nutrient Broth のチューブは使い捨て用です。再利用しないでください。

または販売者が負う義務は、製品の交換、あるいはその裁量においての返金を限度とします。不具2.

使用期限切れは使用しないでください。

合が疑われる場合には発見から 5 日以内に販売者にご連絡・返品をお願いいたします。その他につ3.

交差汚染を避けるために、サンプリングは無菌操作で行ってください。

いては販売者にお問い合わせください。

4.

光の暴露を避けてください。

5.

サンプルが適切な希釈濃度であればルミノメータで確認ができます。

6.

テストアプリケーションのため、適切な培養温度と時間を確認してください。

お問い合わせ：7.

人や動物の診断にこの検査を使用しないで下さい。

商品に関するお問い合わせは購入先または販売元までご連絡下さい。

ユーザーの責任：
MicroSnap Enhanced Nutrient Broth には染料が含まれていないため、それだけでは細菌のコロニーを検出できません。検出試薬を使用する必要があります。
検査方法がお客様の基準を満たすべく、試料数や接種量など検査条件はお客様の責において適切に選択ください。
他のあらゆる培地及びそれによる検査と同様に、MicroSnap はこの試薬で検査された食品・飲料品などの製品、またはその製造工程についての品質を保証するものではありません。
検査者・作業者への適切な訓練をお客様の責において実施ください。
培地の選択や採取方法、検査プロトコル、ハンドリングなどの外的要因によっても回収結果は影響されることがあります。
MicroSnap は、時間依存の試験であり、慎重に指示に従って最適な結果を達成することが重要です。

INS 0177

JAN 2015

Rev A

製造元：

販売元：

[Hygiena –Americas]

ニッタ株式会社

Phone：805.388.8007

クリーンエンジニアリング事業部

Fax：805.388.5531

営業部 モニタリング営業課

Email：info@hygiena.com[大阪本社]〒556-0022

大阪市浪速区桜川４－４－２６[Hygiena –International]

TEL：06-6563-1235 FAX：06-6563-1265

Phone：+44(0)1923818821[東京支店]

Fax：+44(0)1923818825〒104-0061 東京都中央区銀座８－２－１

Email：enquiries@hygiena.com

TEL：03-6744-2740 FAX：03-6744-2741
URL： www.nitta.co.jp

牛乳サンプルとブロスを22-26℃になじませます。

蓋を閉めてください。

手で振るかまたはボルテッ
クスで 10 秒間撹拌してくだ

ブロスに直接牛乳サンプルさい。

1ml を入れてください。

表 1 を参考にして、37 ±0.5℃で 8 時間培養して下さい。

検出試薬を室温になじませます。チューブ

手で振るかまたはボルテックスで培養済みサンプル 0.1ml を検検出試薬を元の状態に戻底部に溶液を集めるため、振って下さい。

10 秒間混ぜてください。

出試薬へ移して下さい。

してください。

スナップバルブを前後に倒して折り、バルブを検出試薬とサンプルと混ぜるた

10 分間、追加培養して下さい。

検出試薬をルミノメータに入れ、絞って液体をチューブ内へ落としてください。

め、優しく振って下さい。

OK ボタンを押してください。

【動画による指導】

測定結果の RLU 値を記録し、表 2 を元に判定して下さい。

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