最 近 の ト ピ ッ ク ス

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最 近 の ト ピ ッ ク ス

高齢ラット臼歯窩洞形成後の歯髄反応
Pulpal responses to cavity
preparation in aged rat molars

しかし，生体は加齢により大きな変化を生じるものであり，このような歯髄反応にも変化がおこる可能性は高い。一般的に，象牙質・歯髄複合体におこる加齢変化には，歯髄や根管の容積の減少，細胞密度の減少，感覚の新潟大学大学院医歯学総合研究科
加齢歯科補綴学分野

減少，歯髄結石，象牙細管の直径の減少，象牙芽細胞突起の収縮などがあげられる 1）, 5）。しかしながら，窩洞形

修一

成のような歯の損傷を受けた場合の歯髄反応ならびに歯Division of Oral Health in Aging and Fixed Prosthodontics

髄免疫防御機構が，加齢によりどのように変化するかに

川岸恵理子，野村

Niigata University Graduate School of

ついては殆ど分かっていなかった。

Medical and Dental Sciences

そこで，歯髄免疫防御機構の加齢変化を明らかにする

Eriko Kawagishi, Syuichi Nomura

ために，これまでに明らかにしてきた成獣ラットの所見と比較して，高齢ラットにおける歯牙切削に対する歯髄の反応性について免疫組織化学の研究により得られた結果を紹介する。

Ⅰ．はじめにⅡ．方法
われわれ歯科医師は毎日のように歯の切削を行っているが，この硬組織は，象牙質・歯髄複合体という複雑な

実 験 動 物 と し て 生 後 300 〜 360 日 齢 Wistar 系 ラ ッ軟組織との連続体である。この連続体ゆえに，咬耗・磨トを用いた。麻酔下にて上顎左側第一臼歯近心面にエ耗・齲蝕や窩洞形成等の歯の損傷によって，歯髄はダメーアタービンにてタングステンカーバイドバー（直径ジを受けるわけであるが，一方，その高い修復能力によ0.6mm）を用い，注水下でグルーブ状に窩洞を形成した。

り，第三象牙質を形成し外界の刺激から自身を防衛する

窩底部残存象牙質の厚みを 150 〜 200 μm とし，仮封等ことが知られている 1）, 2）。しかし，その詳細な機序に関の処置は行わず開放とした。なお，無処置の右側第一臼歯を対照群とした。窩洞形成直後，６，12，24 時間，３，５しては不明な点が多々残されている。
これまでに我々は，生後 100 日齢の成獣ラットを用い日後にアルデヒド系固定液にて灌流固定，EDTA 脱灰て，臼歯に窩洞形成を行い，その歯髄修復過程を明らか後，凍結およびパラフィン切片を作製した。象牙芽細胞にしてきた。すなわち，窩洞形成直後には，損傷を受けの分化マーカーとして，抗 HSP 25 ポリクローナル抗た象牙芽細胞と象牙前質との間には激しい滲出性変化が体および抗 nestin モノクローナル抗体を用いた。nestin

おこり，象牙芽細胞は層構造を失ってバラバラになるは，細胞骨格を構成するフィラメントの一つである中間が，６時間後にはマクロファージによって処理される。

径フィラメントに分類される。成熟した象牙芽細胞に特12 時間後には抗原提示細胞が歯髄・象牙質界面に一過異的に発現することが報告されており，細胞体に加え細性に現れ，その細胞突起を象牙細管に伸ばす。３日後に胞突起にも免疫反応が見られることが分かっている。さなると，新たに分化した象牙芽細胞が歯髄・象牙質界面らに，抗原提示細胞のマーカーとして OX6 モノクローに配列し，抗原提示細胞は象牙芽細胞下層に移動する。

ナル抗体を用い，ABC 法にて免疫組織化学染色を行っこれらの所見は，低分子熱ショックタンパクの一つであた。また，一部の試料は，HSP 25 免疫染色後，オスる heat shock protein（HSP） 25 の発現を検索するこミウム後固定，脱水，樹脂包埋後，準超薄・超薄切片をとにより明らかになった。HSP25 は，熱ショックや有作製し，光顕，電顕にて観察した。一方，歯髄周辺部の害な化学物質など様々なストレスにより惹起される障害

OX6 陽性細胞分布密度を比較するために生後 100 日齢から細胞を防御する役割を担っているが，象牙芽細胞にのラット第一臼歯の OX6 免疫染色標本を作製した。

おいては正常状態においても発現することが報告されている。HSP25 強陽性を示す象牙芽細胞が，窩洞形成にⅢ．結果と考察より損傷を受けることで，高濃度の HSP25 蛋白が局所に放出され，それが抗原提示細胞の遊走を促し，迅速な歯髄治癒に寄与する可能性が考えられる3）, 4）。

高齢ラットでは，成獣ラットと同様に，象牙芽細胞がHSP 25, nestin 免疫強陽性を示したが，髄角における第− 61 −

62

新潟歯学会誌36（1）：2006

一方， mild damage

三象牙質形成，咬頭間領域や髄床底部における第二象牙では，窩洞形成６〜 24 時間後質形成により歯髄腔が狭窄していた。また，興味深いこにおいて損傷部位の HSP-25 強陽性象牙芽細胞が層構造とに，高齢ラットの歯髄内では，成獣ラットと比べて歯を維持しており，滲出性変化も殆どみられなかった。し髄周辺部で OX6 陽性細胞密度が有意に増加し，同細胞かし，12 時間後に severe damage と同様に OX6 陽性が象牙前質にも存在していた。以前の研究で，ヒトの歯細胞が一過性に歯髄・象牙質界面に出現し，細胞突起をでも同様の現象がみられており，抗原提示細胞が初期免象牙細管内へ伸ばしていた。同部位を透過型電子顕微鏡

疫応答に加え，象牙芽細胞の恒常性へ関与している可能にて観察すると，損傷部位の象牙細管が空になっている性が示唆されている 6）。今後，電子顕微鏡で抗原提示細ものと象牙芽細胞の突起が存在するものがみられ，空の胞と象牙芽細胞突起の関係を明らかにする必要があると細管には抗原提示細胞や好中球が侵入していた。このこ考えている。とは，象牙芽細胞の中には損傷を受けずに生き残るもの

一方，このような高齢ラット臼歯に窩洞形成を行うが存在していることを示唆しており，個々によって象牙と， ２ つ の 異 な る 歯 髄 反 応（severe damage と mild

細管もしくは象牙芽細胞突起の状態が異なることが推測damage）が引き起こされることが分かった。 severe

された（図１）。

は，成獣ラットとほぼ同様の変化を示す群で，以上の結果より，高齢ラットにおいても歯髄防御・修窩洞形成直後に象牙芽細胞が損傷を受け，成獣ラットと復機能が保持されていることが明らかとなったが，窩洞比較すると穏やかであるが滲出性変化が惹起され，12形成後の象牙芽細胞の反応性に違いが観察された。この時間後には OX6 陽性細胞が一過性に歯髄・象牙質界面ことにより，高齢ラットでは個体により象牙芽細胞の突に出現し，細胞突起を象牙細管内へ伸ばしていた。24起もしくは細管内の状態が異なることが予想され，この時間後には歯髄・象牙質界面より HSP-25 陽性の象牙芽違いが窩洞形成後の歯髄反応の多様性を引き起こしてい細胞が消失したが，３日後には新しく分化した象牙芽細ると考えられた 7 ）。今後，歯の加齢を考慮した適切な歯胞様細胞が変性した象牙芽細胞と置き換わり，HSP-25，科処置を行うために，研究をさらに発展させていきたい。

damagenestin 免疫反応を獲得した。

図１ 窩洞形成後の高齢歯髄の反応に関する仮説。窩洞直下の歯髄・象牙質界面を示す。
a．severe damage では , 多くの象牙芽細胞が損傷を受け , たくさんの樹状細胞が歯髄・象牙質界面に集積し , 象牙細管内に細胞突起を伸ばしている。
b．mild damage では , 樹状細胞の突起が入り込んでいる象牙細管と , 象牙芽細胞が残存している細管が混在している。
DC：樹状細胞 OB：象牙芽細胞− 62 −

川岸

恵理子

ほか

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