社内資料

ヒアルロン酸 Na 点眼液 0.1%「ニットー」－生物学的同等 性 に関する資料－

東亜薬品株式会社

1社内資料

1. 旧々処方（グルコン酸クロルヘキシジン処方）と先発医薬品の生物学的同等性
I.

目的
ヒアルロン酸 Na 点眼液 0.1%「ニットー」（旧々処方）（1mL 中にヒアルロン酸ナトリウム 1mg 含有）の効能・効果は「シェーグレン症候群，スティーブンス・ジョンソン症候群，眼球乾燥症候群（ドライアイ）等の内因性疾患および術後，薬剤性，外傷，コンタクトレンズ装用等による外因性疾患に伴う角結膜上皮障害」であるため，ヒアレイン点眼液 0.1%（製造販売元：参天製薬株式会社）を標準製剤として，外科的手法により作製した角膜上皮損傷モデルに対する治療効果を比較することにより生物学的同等性を検討した．

II. ウサギを用いた実験的角膜上皮損傷モデル（n-ヘプタノール剥離）に対する治療効果
1. 方法
ウサギ[Kbl:JW（Healthy），雄] に対して，点眼麻酔後に右眼を脱臼させ，n-ヘプタノールを浸したろ紙を60 秒間角膜上に付着させて角膜上皮損傷モデルを作製した．投与は角膜上皮損傷作製直後，2，4 及び 6時間後の 1 日 4 回，同時刻並びに同回数で合計 3 日間，右眼に被験物質［ヒアルロン酸 Na 点眼液 0.1%「ニットー」（旧々処方）］及び標準製剤をマイクロピペットを用いて 50 µL を眼球角膜上に投与した．対照群においても同様の頻度で生理食塩液を投与した．左眼は無処置とした．
損傷治癒効果は，角膜上皮損傷作製直後，6，18，24，30，42，48，54 および 66 時間後に，フルオレセインを用いて角膜の損傷部位を染色後，スリットランプで観察し，角膜上皮損傷作製直後の面積に対する割合（角膜損傷面積率）（%）を算出し評価した．
2. 結果
各群の角膜損傷面積率を図 1 に示した．
ヒアルロン酸Na点眼液0.1%「ニットー」(旧々処方)

角膜創傷面積（相対値%）

100

標準製剤（点眼剤、0.1%)
Control（基剤）5000153045607590時間 (hr)

図 1 角膜損傷面積率（外科的剥離）
統計解析の結果，両剤ともに対照物質との間に有意な差が認められたが（p<0.01），両製剤間では有意な差は認められなかった．

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III. ウサギを用いた実験的角膜上皮損傷モデル（外科的剥離）に対する治療効果
1. 方法
ウサギ[Kbl:JW（Healthy），雄]に対して，点眼麻酔後に右眼を脱臼させ，生検用トレパンで一定の圧を加えながらマークを付けた．外科用メスを用いて，マーク内の角膜上皮および角膜実質層の上層を剥離して角膜上皮損傷モデルを作製した．角膜上皮損傷作製直後，2，4 及び 6 時間後の 1 日 4 回，同時刻並びに同回数で合計 4 日間，右眼に被験物質［ヒアルロン酸 Na 点眼液 0.3%「ニットー」（旧々処方）及び標準製剤］をマイクロピペットを用いて 50 µL を眼球角膜上に投与した．対照群においても同様の頻度で生理食塩液を投与した．左眼は無処置とした．
損傷治癒効果は，角膜上皮損傷作製直後，12，24，36，48，60，72 および 84 時間後に，フルオレセインを用いて角膜の損傷部位を染色後，スリットランプで観察し，角膜上皮損傷作製直後の面積に対する割合（角膜損傷面積率）（%）を算出し評価した．
2. 結果
各群の角膜損傷面積率を図 2 に示した．
ヒアルロン酸Na点眼液0.1%「ニットー」(旧々処方)

角膜創傷面積（相対値%）

100

標準製剤（点眼剤、0.1%)
Control（基剤）

50001530456075

時間 (hr)

図 2 角膜損傷面積率（n-ヘプタノール剥離）
統計解析の結果，両剤ともに対照物質との間に有意な差が認められたが（p<0.01），両製剤間では有意な差は認められなかった．

IV. 評価以上の結果より，本試験において，ヒアルロン酸 Na 点眼液 0.1%「ニットー」（旧々処方）は，先発医薬品ヒアレイン
点眼液 0.1%と生物学的に同等であると判断された

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2. 旧処方（パラオキシ安息香酸エステル処方）と旧々処方（グルコン酸クロルヘキシジン処方）の生物学的同等性
I. 目的
ヒアルロン酸 Na 点眼液 0.1%「ニットー」（旧処方）（1mL 中にヒアルロン酸ナトリウム 1mg 含有）について，ヒアルロン酸 Na 点眼液 0.1%「ニットー」（旧々処方）から処方の一部を変更するに伴い，旧々処方との生物学的同等性試験を実施した．旧々処方を標準製剤として，n-ヘプタノールおよび外科的手法により作製した角膜上皮損傷モデルに対する治療効果を比較することにより生物学的同等性を検討した．

II. ウサギを用いた実験的角膜上皮損傷モデル（外科的剥離）に対する治療効果
1. 方法
ウサギ[Kbl:JW（Healthy），雄]に対して，点眼麻酔後に右眼を脱臼させ，生検用トレパンで一定の圧を加えながらマークを付けた．外科用メスを用いて，マーク内の角膜上皮および角膜実質層の上層を剥離して角膜上皮損傷モデルを作製した．角膜上皮損傷作製直後，2，4 及び 6 時間後の 1 日 4 回，同時刻並びに同回数で合計 4 日間，右眼，左眼の順に対照物質（製剤基剤），ヒアルロン酸 Na 点眼液 0.1%「ニットー」（旧処方），ヒアルロン酸 Na 点眼液 0.1%「ニットー」（旧々処方）の順で割り付け，マイクロピペットを用いて 50 µL を眼球角膜上に投与した．
損傷治癒効果は，角膜上皮損傷作製直後，12，24，36，48，60，72 および 84 時間後に，フルオレセインを用いて角膜の損傷部位を染色後，スリットランプで観察し，角膜上皮損傷作製直後の面積に対する割合（角膜損傷面積率）（%）を算出し評価した．
2. 結果各群の角膜損傷面積率を図 3 に示した．

角膜創傷面積（相対値%）

100
ヒ ア ル ロ ン 酸Na点 眼液 0.1%
「 ニ ッ ト ー 」(旧処 方)
ヒ ア ル ロ ン 酸Na点 眼液 0.1%
「 ニ ッ ト ー 」(旧々 処方)

50Control（ 基 剤 ）00153045607590時間 (hr)

図 3 角膜損傷面積率（外科的剥離）
統計解析の結果，両剤ともに対照物質との間に有意な差が認められたが（p<0.01），両製剤間では有意な差は認められなかった．
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III. ウサギを用いた実験的角膜上皮損傷モデル（n-ヘプタノール剥離）に対する治療効果
1. 方法
ウサギ[Kbl:JW（Healthy），雄] に対して，麻酔後に，n-ヘプタノールを浸したろ紙を 60 秒間角膜上に付着させて角膜上皮損傷モデルを作製した．投与は角膜上皮損傷作製直後，2，4 及び 6 時間後の 1 日 4 回，同時刻並びに同回数で合計 3 日間，右眼，左眼の順に対照物質（製剤基剤），ヒアルロン酸 Na 点眼液
0.1%「ニットー」（旧処方），ヒアルロン酸 Na 点眼液 0.1%「ニットー」（旧々処方））の順で割り付け，マイクロピペットを用いて 50 µL を眼球角膜上に投与した．
損傷治癒効果は，角膜上皮損傷作製直後，6，18，24，30，42，48，54 および 66 時間後に，フルオレセインを用いて角膜の損傷部位を染色後，スリットランプで観察し，角膜上皮損傷作製直後の面積に対する割合（角膜損傷面積率）（%）を算出し評価した．
2. 結果
各群の角膜損傷面積率を図 4 に示した．

角膜創傷面積（相対値%）

100
ヒ ア ル ロ ン 酸Na点 眼液 0.1%
「 ニ ッ ト ー 」(旧処 方)
ヒ ア ル ロ ン 酸Na点 眼液 0.1%
「 ニ ッ ト ー 」(旧々 処方)

50Control（ 基 剤 ）001530456075時間 (hr)

図 4 角膜損傷面積率（n-ヘプタノール剥離）
統計解析の結果，両剤ともに対照物質との間に有意な差が認められたが（p<0.01），両製剤間では有意な差は認められなかった．

IV. 評価以上の結果より，本試験において，ヒアルロン酸 Na 点眼液 0.1%「ニットー」（旧処方）は，ヒアルロン酸 Na 点眼液 0.1%「ニットー」（旧々処方）と生物学的に同等であると判断された．

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3. 新処方と旧処方の生物学的同等性
I. 目的
ヒアルロン酸 Na 点眼液 0.1%「ニットー」は東亜薬品株式会社で開発した医療用後発医薬品であり，眼球乾燥症候群（ドライアイ）やコンタクトレンズ装用等に伴う角結膜上皮障害の治療を目的とする点眼剤である．本薬は，製剤 1 mL 中に有効成分として精製ヒアルロン酸ナトリウムを 1 mg含有する．今回，ヒアルロン酸ナトリウムの保水作用を指標に，in vitro 保水作用評価法を用いて本薬と旧処方品との生物学的同等性を検証した．

II. 方法
本試験は，「申請資料の信頼性の基準（医薬品，医療機器等の品質，有効性及び安全性の確保等に関する法律施行規則第 43 条，昭和 36 年 2 月 1 日厚生省令第 1 号，平成 26 年 11 月 21 日厚生労働省令第 128 号改正）」を遵守して実施された．
一群あたり 18 枚のソフトコンタクトレンズ（SCL）を使用し，SCL 1 枚に試験製剤（ヒアルロン酸 Na 点眼液 0.1%「ニットー」）あるいは標準製剤（旧処方品；ヒアロンサン点眼液 0.1%）を 20分間隔で 20 µL ずつ 4 回滴下した．初回滴下直後及び初回滴下後 180 分に滴下物を含む SCL 重量を測定し，初回滴下後 180 分時点における残存率を算出し，試験群間における残存率の差の 95%信頼区間を算出して同等性を評価した．同等性基準の許容域については，予試験の成績を基に−3.15～3.15%と設定した．

III. 結果及び評価
試験製剤群における初回滴下直後及び初回滴下後 180 分時点の SCL 重量は，それぞれ 46.96±0.32及び 37.62±0.98 mg であった．同時点における標準製剤群の SCL 重量は，それぞれ 47.05±0.35及び 37.51±0.78 mg であった．初回滴下後 180 分時点における残存率は，試験製剤群及び標準製剤群でそれぞれ 80.11±2.02 及び 79.74±1.67%であった．両試験群間の残存率の差の 95%信頼区間は−0.88～1.63%であり，予め設定した同等性基準の許容域を満たした．
試験製剤群及び標準製剤群の残存率の差は設定した同等性許容域の範囲内にあり，試験製剤と標準製剤の保水作用に差はみられなかった．したがって，ヒアルロン酸 Na 点眼液 0.1%「ニットー」
は旧処方品と生物学的に同等と判断した．
以上

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