プレ課題研究

果実や野菜に含まれるビタミンＣの濃度を調べる

ある動物にとって、自分の体内では合成できず、食物として取り入れなければならない生理作用調節物質をビタミンという。このうちビタミンＣ（ｱｽｺﾙﾋﾞﾝ酸Ｃ ６ Ｈ ８ Ｏ ６ ）は、長期に渡る航海をする船員がかかりやすかった壊血病（不安や無気力から始まり、筋力の減退と極度の疲労、皮膚が黒ずむ、皮下・関節・歯茎からの出血、悪化すると死んでしまう）を予防し直す物質として発見された。細胞内では酸化還元反応で重要な役割を果たすほか、メラニン色素の生成反応の抑制（皮膚の黒色化を防ぐ）やコラーゲンの生成の促進に関わる。壊血病の防止には１日 20mgとればよいが、完全に正常な健康を維持するには50～90mgが必要と言われ、他のビタミンと比較して摂取を多量に要する。
ビタミンＣを必要とするのはﾋﾄのほかｻﾙ，ﾓﾙﾓｯﾄ，ｲﾝﾃﾞｨｱﾝﾌﾙｰﾂｺｳﾓﾘ及び数種類の脊椎動物のみで、ﾈｽﾞﾐ，ｳｻｷﾞ，ｲﾇ，ﾆﾜﾄﾘは自分で作ることができるので摂取の必要はない。新鮮な果実（ﾐｶﾝ，ﾚﾓﾝ，ﾌﾞﾄﾞｳ）や野菜（ﾄﾏﾄ，ｷｬﾍﾞﾂ），緑茶などに豊富に存在する。ビタミンＣは水に溶けやすく，加熱で壊れやすい。
ここでは、いろいろな食品中のビタミンＣの含有量を、調べてみよう。
＜原理＞

アスコルビン酸の還元剤としての力を利用する。
●今回のアスコルビン酸は酸化とは還元とは色素にＨを渡して、相手を還元する還元剤の役割を果たす。
酸素Ｏを● 2,6 －ジクロロインドフェノールという色素にアスコルビン酸を与える
水素Ｈをと、色素は還元されて、青色→紅色→無色へと変化する。
電子を無色を滴定の終点とする。

＜方法＞
滴定は、５ mL の色素液にアスコルビン酸溶液（または果汁や野菜汁）を滴下して加え、何 mL で終点となるかを調べていく（滴定という）。このために、
実験１
反応の確認
色素液にアスコルビン酸を加えると変色することを確認する。
実験２
色素液の検定色素液５ mL は何 mg のアスコルビン酸と反応するかを、濃度が既知のアスコルビン酸標準液で滴定し、調べておく。
実験３
ビタミンＣの定量
色素液５ mL を試料（果物や野菜）の絞り汁で滴定し、試料に含まれるアスコルビン酸の濃度を計算する。今回は各班で２種類の試料について定量する。
＜準備＞ ４人で１班，※印の器具は各実験で同じ物を使う。
実験１
実験２
実験３
試

薬

※

試験管３，ﾎｰﾙﾋﾟﾍﾟｯﾄ（5mL：色素液用）１ピペット（ﾌﾟﾗｽﾁｯｸ製…水用・ｱｽｺﾙﾋﾞﾝ酸用・ﾚﾓﾝ汁用）３，※
紙ｺｯﾌﾟ１，ﾎｰﾙﾋﾟﾍﾟｯﾄ（5mL：色素液用）１ ，ﾒｽﾋﾟﾍﾟｯﾄ（2mL：ｱｽｺﾙﾋﾞﾝ酸標準液用）１（滴定用）…試料液３０ mL（ﾐｶﾝ，ﾚﾓﾝ），紙ｺｯﾌﾟ（試料ごとに変える）２，※
ﾎｰﾙﾋﾟﾍﾟｯﾄ（5mL：色素液用）１ ，ﾒｽﾋﾟﾍﾟｯﾄ（5mL：試料滴定用）２
色素液１００ mL（2,6-ｼﾞｸﾛﾛｲﾝﾄﾞﾌｪﾉｰﾙ およそ 1mg/100ml 水溶液）
アスコルビン酸標準液３０ mL（およそ 5mg/100mL メタリン酸水溶液２%100mL）

実験１
反応の確認
試験管３本に約５ mL の色素液をとり、次の①～③のそれぞれの液体を駒込ピペットで１滴ずつ滴下し、色の変化をみる。
※駒込ピペットの小３本を使い分けて用いる。

１）蒸留水を加える
２）アスコルビン酸標準液を加える
３）ミカンの絞り汁を加える
実験２

色素液の検定アスコルビン酸標準液の濃度は（）mg／mLである。

※アスコルビン酸標準液はﾒｽﾋﾟﾍﾟｯﾄ（2mL：ｱｽｺﾙﾋﾞﾝ酸標準液用）※
色素液はﾎｰﾙﾋﾟﾍﾟｯﾄ（5mL：色素液用）１を用いる！

色素液５ mL が、何 mg のアスコルビンと対応するかを調べる。
滴定は２回行い、滴定値はその平均をとる。（※値が合わないときは３回目を）１回目（）mL
平均は（）mL、２回目（）mL
よって色素液５ mL は、※３回目（）mL
アスコルビン酸（）mg と対応。
この値をＸmgとする。

実験３

ビタミンＣの定量

提出用記録用紙【操作１】：試料液の作製
試料３ｇ：乳鉢にとる。
（必要なら細かく刻む）
５％メタリン酸水溶液１２ mL
乳鉢ですりつぶす
精製水１８ mL

２％メタリン酸の濃度になる

ガーゼを用いて、ﾌﾟﾗｽﾁｯｸｺｯﾌﾟにろ液を絞り出す。
★試料３ｇから、３０mLのろ液を作成している！
☆試料が液体の場合は、試料３ mL，５％メタリン酸水溶液１２ mL，精製水１５ mL として計３０mLにする。

【操作２】：ビタミンＣの定量
色素液５ mL：ホールピペットで正確に紙コップに入れる。

★実験実施日

平成年

氏名

組番

アスコルビン酸標準液の濃度は（年）mg／mL

月日

である。

紙ｺｯﾌﾟは試料ごとに使いわける

操作１のろ液をメスピペット（5mL：試料滴定用）に入れて滴定
青→紅→無色透明にて終点 …
ＹmL※１人がメスピペットで色素液を１滴ずつ加え、１人は紙コップをゆすり、１滴加えるごとに試料をかくはんする。
所要時間は１分くらいが望ましく、早すぎたり遅すぎたりしない。
滴定は同一試料について２回ずつ行い、平均値を求めて計算に使う。 （値が合わなければ３回目を）【 試料中のビタミンＣ濃度の計算 】
実験２ の、色素液５ ml を無色にするアスコルビン酸の質量を Ｘmg ，
実験３ の【操作２】の滴定値を ＹmL とする。
【操作１】で、試料３ｇから３０ mL のろ液を作成している（１０倍に希釈）。
このことから、試料１ｇ（生重量）あたりに含まれるビタミンＣの質量
Ｘ mg × ３０ mL（ｍｇ/ｇ）は
Ｙ mL３ ｇで求められる。
では、試料１００ｇ中のビタミンＣ濃度（mg/100g）は★ピペットの使い方
ピペットには、1 ～ 5mL ぐらいをおおよそ量りとる駒込ピペットと、正確な容量を量りとるホールピペットやメスピペットがある。
ホールピペットの使い方は…
①ピペットは溶液に深くいれて使う。途中で先端が液面から離れると、口の中に液が入ってくる。
②ピペットで液を標線の少し上まで吸い上げ、上端を人さし指で押えて口からとる。
指の押え方を少しゆるめて親指と人さし指でピペットを回すと液面がゆっくりと下がるので、液を標線まで下げ、再び人さし指でかたく押さえて、別の器に取り出す。
③液の流出は 自然に行わせ る（決して口では吹 か な い ）。 最 後 の １ 滴 を 落 と す と き は 吸
い口をもう 一度押さえ、 一方の手でピペッ
トのふくら みを握って手 のひらであたためると、ピペ ット内の空気 の膨張により液が完全に放出する。
④ピペットがぬれていると、そのために試料液がうすめられてしまう。必ずよく乾いたピペットを使うようにする。乾燥が間に合わないときは、試料液の一部であらかじめピペットを 2 ～ 3 回共洗いする。

実験２
色素液５ mL が、何 mg のアスコルビン酸と対応するか。
滴定値
１回目
（）mL
平均は（）mL、２回目（）mLよって色素液５ mL は、３回目（）mL
アスコルビン酸（
実験３

各資料について滴定は３回行い、その平均値を計算に用いる。

試料名①）mg と対応。

レモン

滴定値（Ｘ ml）２つ

計算式

試料 100 ｇ中の濃度

平均値はmg/100g②

ミカン

平均値はmg/100g

考 察１）実験３で、自分達が定量した値について、別紙の表の値と比較せよ。

２）次回は各班でテーマを決め、ビタミンＣの定量を用いたミニ研究を行う。
この定量方法を行うにあたり、より正確な値を求めるために、注意しなければならないことを書き出せ。