#LIBRARYOFLIBRARIES

バイオ医薬品の未来を創る
リード抗体の発見と開発のパートナー

TWIST BIOPHARMA

治療用抗体で疾患の治療を急速に改善

抗体医薬は、自己免疫疾患、代謝疾患、神経疾患、感染症、がんなどに対する医学的展望と治療を変えた重要な薬剤です。この分野での発見と最適化の取り組みが急速に拡大しており、今なお治療法が存在しない疾患の治療への可能性が高まっています。
ライブラリと抗体の最適化プラットフォームである Twist Biopharma のライブラリで、不可能を可能に

この50年間の技術的進歩により、前臨床試験および臨床試験で用いるリード抗体候補の特定と最適化をより良く行えるようになりました。

しかし、Gタンパク質共役受容体（GPCR）などの複数回膜貫通型内在性膜タンパク質を中心とした多くは、創薬の対象とすることが困難でした。こうした分野での創薬研究は、技術的に困難であり、時間とコストを費やすことが知られています。

有望なリード抗体が特定されると、新たなボトルネックが生じます。これらの薬剤候補を最適化して有効性や開発性を高めるには、望ましくない配列空間を伴う変異導入法に頼ることが多く、下流工程で製造の負担になるおそれがあります。

究極的にはこうした課題が、革新的なバイオ医薬品の迅速かつ合理的な開発に立ちはだかっているのです。

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TWIST BIOPHARMA

Twist BiopharmaはTwist Bioscienceの一員として、そうした問題の解決策を「創り出して」います。
独自のDNA書き込み技術により、革新的な処理能力と品質に加えて圧倒的な多様性と精度でDNAプールの作製を可能としています。Twist Biopharmaはそうした技術を基盤として前例のない人工抗体ライブラリを作り出すことができ、リード抗体候補の発見、最適化および開発のプロセスを加速します。

抗体治療法の次の未来を創るDNA合成能力とバイオインフォマティクスに関する有数の専門性を備えたTwist Biopharmaは、リードの同定とその最適化に独自のメリットを提供します。

合理的に設計されたライブラリを作製 し、お客様のプロジェクトに最も効果的な配列空間をお調べします。

所望の配列空間（合理的なサンプリングによる）、天然型の相補性決定領域（CDR）レパートリー、モチーフ配列（ライブラリにわかりやすくコーティングする）に 焦点 を当てています。

フレームシフト、終止コドン、下流工程で製造に負担をかけるおそれのある異性化、開裂、脱アミド化、グリコシル化、厄介なジペプチ
ドモチーフを配列空間から 除去 します。

以上のすべてが実現することにより、機能的なリード抗体をより早く、より高い費用効率で発見し最適化できます。

合理化した抗体開発

当社は的を絞ったDNA合成によって、ファージディスプレイライブラリを構築します。結合性を基準として複数回の選択を行い、高親和性のクローンを濃縮します。

この合理化されたワークフローを基盤として、リード抗体の発見と最適化のため、お客様ごとに合わせたさまざまなサービスやサポートをご提供しています。

Twist Biopharma
標的の妥当性確認

抗体の発見

その標的と結合して機能を調節する抗体を発見

抗体の最適化（TAO）

リード抗体を最適化して有効性と開発性を向上

開発前段階

開発

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TWIST BIOPHARMA

迅速で効率的な抗体発見サービス

すべての基礎的な抗体発見プロジェクトには、それぞれに沿ったアプローチが求められます。

そのため、当社ではお客様の個々のニーズに合わせたサービスとワークフローをご用意しています。

「Library of Libraries」の使用許諾

当社の社内チームは、複数の価値の 高 い 標 的 に つい て 「L i bra ry ofLibraries」を開発して検証を行いました。これらはすべてライセンスがあれば利用できるため、お客様は社内でパンニングと下流工程における分析を行えます。

カスタムライブラリの構築

当社はお客様と協力して、ご希望の標的に対して選択したFab、scFvまたは単一ドメインVHHスキャフォールドでライブラリを構築できます。

発見のためのパートナーシップ

当社のチームがお客様と共に、目標とライブラリの仕様について話し合います。その後、「Library ofLibraries」を使用するか、選択したベクターとスキャフォールドでカスタムライブラリを作製します。

ライブラリを選択または構築したら、ビオチン化抗原・細胞を用いて選別を行い、クローンの同定とIgGの再構成を行います。さらに、規模を問わず下流工程でのIgGタンパク質の発現と精製、生化学的分析、生物物理学的分析、機能分析も当社のチームが実行できます。

ステップ1

ステップ2

ファージライブラ 細胞またはビーズをリの構築または事用いた選別
前に構築されたライブラリの使用
2週間

ステップ3

ステップ4

ステップ5

NGSおよびサン
ガー法クローン
シーケンシング

IgGへの再構成、DNAのスケールアップおよび発現IgGのハイスルー
プット精製

1週間

4週間

2週間

Twist Biopharmaとの提携に関する詳細はこちら：twistbiopharma.com/partnership4

ステップ6
結合・機能分析

2〜6週間

TWIST BIOPHARMA「Library of Libraries」で時間を節約「Library of Libraries」は事前に構築と妥当性確認が済んでいるため、すぐに使い始めることができます。
関心のある標的に対して複数のライブラリを並行して用いてパンニングを行うことで、時間を節約しながらさまざまなバリアントプールに基づいて複数のリード抗体を特定できます。

多くの領域で抗体の発見を迅速に可能にする合成DNAライブラリ
当社が提供する小型・モジュール式抗体のライブラリは、ラマ由来天然型CDR配列とフレームワークを備えており、ヒトIgGと比べて優れた点がいくつもあります。
詳細：twistbiopharma.com/library-of-libraries/
single-domain

イオンチャネルを標的とする天然ペプチド毒素のループ配列を用いて、イオンチャネルライブラリを構築しました。一対のシステインを含むか、システインを含まないライブラリが利用可能です。

VHHライブラリ

1. VHH Ratio
2. VHH Shuffle
3. VHH hShuffle
4. VHH hShuffle HI

1. GPCR 2.0
2. GPCR 3.0

詳細：twistbiopharma.com/
library-of-libraries/gpcr

TWIST DNA

抗体構造
ライブラリ

イオンチャネル
ライブラリ

当社のライブラリは、CDR1とCDR2について、130種類の抗糖鎖抗体から得られる固有のCDRをシャッフルすることによって設計されました。
CDR3の多様性は、その境界領域ではそれらの位置で観察される境界領域の変異に制限され、境界領域以外では130種類の抗体配列が組み込まれます。

抗糖鎖抗体ライブラリ

GPCRは従来から創薬の対象とすることが困難でした。当社のライブラリは100,000を超える異なるGPCR結合モチーフを提供し、標的化が困難なこのようなクラスに対する抗体の発見を支援します。

GPCR抗体ライブラリ

高度免疫ライブラリ

1. オリジナル
2. 共通LC

蛋白質構造データバン
クに結晶構造データのある3,700の抗体から6 種類のC D Rを選択し、10 1 0 を超えるサイズのscFv抗体ライブラ
リを作製しました。

高度免疫ライブラリはFabスキャフォールドに構築され、その種類は10 10 以上に及びます。概念
実証を通した選択により、TIGITやCD3eなどに対してナノモル濃度の親和性を持つ抗体が特定されています。

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TWIST BIOPHARMA

完全ヒト最適化リード抗体

Twist Antibody Optimization（TAO）は、バイオインフォマティクスと独自のソフトウェアプラットフォームを用いて、天然ヒト重鎖・軽鎖CDR配列を含む最適化ライブラリを作製します。マウス抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、完全ヒト抗体の配列をソフトウェアに入力するだけで、アルゴリズムにより着目すべき自然変異が決定されます。この「ヒトのレパートリーにアイデアを得た」ファージライブラリは、複数回のセレクションで、ビーズまたは細胞ベースのアッセイを用いて高親和性の結合クローンを濃縮します。

入力：

マウス

カスタムソフトウェア

キメラ化

ヒト化

マウス、キメラ、ヒト化または完全ヒト抗体のヒット

ヒト「ヒトレパートリーにインスパ

4か月

6

1

2

5

3

CDR–H1968
CDR–H2: 229
CDR–H3: 267
CDR–L1: 329
CDR–L2: 2118
CDR–L3: 42

1抗体の配列をソフトウェアに入力

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オリゴプールとテンプレート
DNAを注文6

カスタムソフトウェア「ヒトレパートリーにインスパイア」

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Twist Biopharmaがライブラリを作成
しターゲットに対してスクリーニング

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出力：

完全なヒト化
完全ヒト最適化リード抗体
最適化されたリード

高親和性の独自クローンの識別後、完全長のIgGに変換し、生化学的分析、生物物理学的分析、機能分析によりスクリーニングすることができます。以上がTwist Biopharmaの包括的なTAOサービスの全容です。

TAOの詳細はこちら：twistbiopharma.com/antibody-optimization
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Twist Biopharmaのサポート能力

Twistは、抗体の発見およびTAOのコアサービスに加えて、リード抗体候補の特定や最適化の後にさらなる開発サービスを提供します。

IgG変換、発現および精製抗体の産生には費用と時間を費やす場合があります。多くの研究プログ
ラムでは、下流工程の負担を考慮して候補の一部のみを選択することを余儀なくされています。

当社は、100〜200種類の抗体候補を完全長のコドン最適化IgG遺伝子に迅速かつ簡単に変換し、カスタマイズされた高コピー数の発現ベクターにクローニングする遺伝子合成能力を有します。ワークフローを自動化して処理量を上げることで、規模を問わずわずか2週間でIgG抗体の発現と精製を行います。

IgGの特性評価

自前の能力・機器を未整備の場合、下流工程における抗体の特性評価は困難と言えます。

当社の専門家により、IgGタンパク質の収量・純度を評価することが可能です。また、熱安定性（TmおよびTagg ）を含む生物物理学的特性評価も迅速に行うことが可能です。さらに、Carterra LSAシステムとBVP結合ELISAをそれぞれ用いて、高処理量で結合親和性と多重特異性を評価することもできます。

機能分析

多くの研究グループにとって、自前の専門技術や有効な分析手段がない場合には、リード抗体の作用機序の決定がボトルネックになり得ます。
当社の専門家は、既製またはカスタマイズした分析手法を用いて、精製した抗体のアンタゴニスト効果、アゴニスト効果、またはアロステリック効果を容易に評価します。

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抗体の発見でお困りですか？

Twist Biopharmaは、お客様のバイオ医薬品開発プログラムの可能性を最大限に引き出すよう全力でサポートします。開発パイプラインの段階を問わず、次のレベルの発見につなげるソリューションが当社にはあります。

詳細はこちらtwistbiopharma.com#LibraryofLibraries

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