製品情報

D-グルコース / 果糖

F-キット(139106)とE-キットLiquid(E8160)の比較
1. 概要
製品F-キット

E-キット Liquid

製品番号139 106E8160

試薬容量27 テスト

50 テストヘキソキナーゼ (HK)、グルコースリン酸イソメラーゼ (PGI)、グルコース-6-リン酸脱水素酵素(G6P-DH) によって生成するNADHを340nmの吸光度によって測定

測定原理

D-Fructose + ATP-HK→ Frucose-6-Phosphate + ADP
D-Glucose + ATP-HK→ Glucose-6-Phosphate + ADP
Fructose-6-Phosphate-PGI → Glucose-6-Phosphate + ADP
G-6-P + NAD+ - G6P-DH → Gluconate-6-P + NADH + H+

エンドポイントの吸光度からランベルト・ベールの式を用いて定量値を求める

定量値の計算(＊ご希望の方にExcel のテンプレートを提供しています。)

試薬

調製後の試薬の安定性コントロール▪ Vial 1 = バッファー（粉末）▪ Vial 2 = HK / G6P-DH (懸濁液)▪ Vial 3 = PGI (懸濁液)▪ R1 = バッファー (50 ml x 2本)▪ R2 = HK / G6P-DH (12.5 ml x 2本)▪ R3 = PGI (12.5 ml x 2本)▪ Vial 1 = 4 週間

すべての試薬は調整済みの溶液で、開封後も安定

コントロールはキットに含まれる

コントロールは別売
E8440 マルチ糖類スタンダード(低濃度)

サンプル(またはブランク)
1.000 mL
Vial 10.100 mL
サンプル (または水)
1.900 mL
水ステップ

ステップ

測定手順（標準法）

サンプル(またはブランク)

R1
サンプル (または水)

2.000 mL
0.100 mL

インキュベーション 3分 吸光度(A1)測定
R20.500 mL
インキュベーション 15分 吸光度(A2)測定R30.500 mL
インキュベーション 15分 吸光度(A3)測定

インキュベーション 3分 吸光度(A1)測定
Vial 20.020 mL
インキュベーション 15分 吸光度(A2)測定
0.020 mL
Vial 3
インキュベーション 15分 吸光度(A3)測定標準法 (v=0.1mL)での測定範囲 (推奨)：20 - 1500 mg/L
LoD：4.0 mg/L、LoQ：10 mg/L

(A2-A1)の値からグルコース、(A3-A2)の値からフルクトースを個別に定量することができる
直線性→ 1 g/L (試料 = 0.100 mL)

LoD および LoQ

ランベルト・ベールより算出
LoD (v = 1 mL, ΔA = 0.010)
LoQ (v = 0.5 mL, ΔA = 0.050)

株式会社Ｊ.Ｋ.インターナショナル→ 1.5 g/L (試料 = 0.100 mL)
F-キット
0.4 mg/L8.6 mg/L

E-mail: info@jki.co.jp

https://www.jki.co.jp/

E8140
0.5 mg/L
7.4 mg/L

D-グルコース / 果糖測定における F-キットとE-キット Liquid (E8160) の比較

2. E-キットLiquid D-グルコース / D-フルクトース (E8160) のF-キットに対する評価a) ラボでの評価手順
E-キットLiquidのバリデーションを行う場合、以下の手順にしたがってください：▪ 同一の試料のD-グルコース / D-フルクトースをF-キットとE-キットliquid (E8160、50テスト) を使って測定する。
▪ 回収率を求めるには E-キットLiquidマルチ糖類スタンダード (低濃度) (E8440)を使用する。
▪ ラボで定めたQCサンプルがある場合、それを使って回収率を比較する。

▪ ルーチン測定している試料を対象に、50テストを使い切るまで両方のキットで測定する（方法間の比較）。
▪ 試料の前処理はF-キットで測定するときの方法で行い、調製した同一の試料を両方のキットで測定する。
（試料量は100µL）▪ 試料中での安定性による影響を避けるため、両キットによる測定は同時に行う。（特に、アセトアルデヒド、酢酸、アンモニア、アスコルビン酸、エタノール、亜硫酸は試料中の安定性が問題となる。）

その他の項目（直線性、精度、再現性など）のバリデーションを行う場合、さらにキットを追加する必要があります。

b) R-Biopharm社内における評価結果
E-キットLiquid マルチ糖類スタンダード (低濃度) (E8440)を使って求めた回収率▪ 回収率：100 ± 5 %▪ 注意：この回収率は E-キットLiquidの仕様に定められた値であり、すべてのロットで保証されます。

ワインおよびフルーツジュースを試料として測定値（グルコース＋フルクトース合計）を比較した。測定値は y=x の直線に接近して分布し、相関係数は100% (Passing-Bablock ﬁt)でした。なお、相関係数は測定する試料によって異なることがあります。

株式会社Ｊ.Ｋ.インターナショナル

E-mail: info@jki.co.jp

https://www.jki.co.jp/

製品情報RIDA®CUBE D-グルコース / D-フルクトース (RCS4160)
RIDA®CUBE SCANによる自動測定
1. 概要
バッファーが入ったチューブに試料を分注し、酵素が入ったキャップをしてRIDA CUBE SCANにセットすると、自動的に測定が始まり約15分で定量値が得られます。
□ ヘキソキナーゼ (HK)、グルコースリン酸イソメラーゼ (PGI)、グルコース-6-リン酸脱水素酵素(G6P-DH) を用いる酵素法□ 生成するNADHを340nmの吸光度によって測定する
D-Fructose + ATP-HK→ Frucose-6-Phosphate + ADP
D-Glucose + ATP-HK→ Glucose-6-Phosphate + ADP
Fructose-6-Phosphate-PGI → Glucose-6-Phosphate + ADP
G-6-P + NAD+ - G6P-DH → Gluconate-6-P + NADH + H+
本キットではグルコースとフルクトースの合計値が得られます。
個別に濃度を求めるには、RIDA CUBE D-グルコース(RCS4140)でグルコースの値を求め、フルクトースの濃度を計算してください。

2. 測定手順
RIDA® CUBE D-グルコース/D-フルクトース(RCS4160) キット構成

RFIDカードを機器に置く# 1: 試薬 1 (バッファー) 約660 µl、32本 (チューブ)# 2: 試薬 2 (酵素) 約330 µl、32本 (キャップ)# 3: RFIDカード、1枚試料情報をタブレットに入力- 試料名- 試料量 (20/100µl)
チューブ (試薬１)に試料を20 または 100 µl分注する

RIDA® CUBE SCAN 仕様
寸法：16 x 13.5 x 14.5 cm (H x W x D)
重量： 2.2 kg

チューブにキャップ(試薬２) をしたのち、機器にセットしてドアを閉める

光源：LED
波長選択：フィルター
フォトメーター分解能：0.0001 ABS
再現性： <1.5% CV at 1 OD
直線性： 0.1000 ‒ 3.0000 OD

測定範囲
ベーシック測定 (試料量 20 µl)：50 ～2300 mg/l
高感度測定 (試料量 100 µl)：10 ～ 500 mg/l

± 1.5% または± 0.01 ODの良い方
温度制御： 37℃± 2℃

注意：蒸留水を試料として試薬ブランクを測定し、測定値からブランクを差し引く必要がある場合があります。

株式会社Ｊ.Ｋ.インターナショナル

インターフェース：RS232, USB, Bluetooth
電源：12V DC, 2A

E-mail: info@jki.co.jp

https://www.jki.co.jp/