平成14年５月20日

第85回日本細菌学会関東支部総会の御案内ならびに演題募集
第85回日本細菌学会関東支部総会
会長笹川千尋

第85回日本細菌学会関東支部総会を下記の通り開催いたします。会員の皆様の御参加を-1i糠Nｉ

お願い申しあげます。

Ｉ・期日：平成14年11月21日(木)、２２日（金）Ⅱ、会場：東京大学医科学研究所講堂〒108-8639

束京都港区白金台４－６－１（営団地下鉄南北線白金台駅より徒歩５分）

まとめて郵送あるいはe-mail（下記参照）

Ⅲ、プログラム：でお申し込み下さい。

特別識漬Ｉ（21日１７:00～18:00）

２．抄録：Ａ４版１枚に演題名、出題者（演者に○印)、所属機関、内容（目的、方法、「エンドトキシン認識におけるToI1-

likereceptor4とＭＤ２の役割」

結果、考察）をワープロで印字しフロッピー

三宅健介（東京大学、医科学研究所）

ディスクで郵送、あるいはe-mailのいずれ

特別謝演Ⅱ（22日１６:00～18:00）「臨床におけるＭＲＳＡおよびＶＲＥの現かでお送り下さい。

３．参加申し込み：支部総会参加、予稿集、

状と問題点」

菅野治重（千葉大医学部）懇親会参加申し込み轡に所定事項をご記入「緑膿菌等グラム陰性桿菌における多剤のうえ、郵送、ＦＡＸ、あるいはe-mailで耐性の現状と問題点」

お申し込み下さい。

４．懇親会は11月22日夜（18:30～20:30）を

荒川宜親（国立感染症研究所）

予定しております。

「グラム陽性菌におけるグリコペプチド

５．申し込み先：耐性の現状と問題点」〒108-8639東京都港区白金台４－６－l

池康嘉（群馬大学医学部）

東京大学医科学研究所細菌感染分野

一般演題の日時：２１日(木)９:00～17:00
および18:30～21:0０

第85回日本細菌学会関東支部総会事務局

２２日(金)９:00～16:00

ＴＥＬ：03-5449-5252,ＦＡＸ：03-5449-5405

e-mail：gakkai＠saikinlLims､u-tokyo､ac・ｊｐ
支部総会に関する詳細はホームページでもⅣ、一般演題、総会参加、予稿集、懇親会申し込み見ることができます。

１．演題申し込み方法：演題申し込み轡（コhttp:〃saikinlLims､u-tokyo.ac､jp/gakkai／

ピー可）に所定の事項をご記入の上、抄録（下記参照）とともに所属・研究室ごとにindex・hｔｍｌ－１－

６．申し込み締切期日：学生会員および留学生は参加費と平成14年９月27日(金)必着懇親会費は半額です。

Ｖ，費用：参加費20000円、予稿集1,000円、申し込み者には振り込み用紙をお懇親会参加費2,000円送りいたします。
－●●￣●●￣●●￣ｃＤ－ＧＯ￣●B￣●●￣●●￣●C￣●■－０●￣●●￣●D￣●●￣●e￣●●￣B●￣●Ｃ－ｅ●￣C●￣●●---￣=~＝~

研究所紹介

東京都立衛生研究所
東京都立衛生研究所精度管理室山田澄夫

東京都立衛生研究所は新宿区百人町に位腿

微生物部は細菌第一研究科、細菌第二研究する本所（256名)、および立川市柴崎町の支科とウイルス研究科の３研究科から櫛成され所（53名）よりなっています。本研究所は昭ています。細菌第一研究科では、食品細菌、

和24年３月、地方衛生研究所の設廻に関する

食中毒、腸内細菌、真菌、培養基および疫学

厚生省通達および米軍軍政部当局からの同械憎報の６研究室で26名の職員が検査・研究にの指令（俗にマニトフ旋風）に基づき、既存の従事しています。主として都内で発生する食6施設を統合し、衛生行政を科学的・技術的

中毒や海外旅行者下痢症等の腸管感染症事例に支えるための試験研究機関として設立されまを基にしたこれまでの検査・研究の成果は、した。設立当初の組織は６部17課７出張所でわが国のこれら分野において有用な疫学的あありましたが、以後時代の公衆衛生学的ニー

るいは病原学的情報を多数提供してきました。

ズに対応すべ<数回の組織改正が行われ、現一例をあげますと、カンピロパクターや腸管在では６部１室１支所18科（課）で織成され11｣1,1件大腸菌（0145:ＮＭ）によるわが国最ています。事務部の他、試験検査・研究部門

初の集団食中毒を解明し、その重要性を示唆

は微生物部、理化学部、生活科学部、環境保してきました。また、黄色ブドウ球菌のコア

健部、毒性部および多摩支所、試験検査管理

グラーゼ型別や、黄色ブドウ球菌やウエルシュ部門として箱度管理室が設けられています。

菌エンテロトキシン、コレラエンテロトキシ

当研究所の業務は、感染症その他の疾病のンと大腸菌易熱性毒素（LT)、腸炎ピプリオ

予防衛生・食品衛生・薬率衛生・環境衛生・

溶血毒素（ＴＤＨ）およびベロ毒素（ＶＴ１

生体影響・輸度管理の各分野において、１）

およびＶＴ２）等の毒素の囲易迅速検出法を試験検査、２）調査研究、３）研修指導・輸確立し、それらは市販試薬として広く利用さ度管理および４）公衆衛生情報の解析提供のれています。さらに腸炎ピプリオ溶血毒素の４つの業務を柱として活動しています。以下、病原性についての阪大微研との激しい論議も細菌分野につき紹介します。

ありました。また、毒素性ショック症候群の原因毒素TSST-1の精製がスーパー抗原感染症の展開につながっています。

海外旅行者下痢症の検査からは赤痢菌の新血清型の提案、それは米国での感l鑿iiiiliii篝Ｉ

染例で確認されています。現在ではこれらの研究成果を基に、さらに発展すべくパルスフィールドゲル電気泳動法
等の適伝子解析を腸管Hln性大腸菌ｏｌ５７、サルモネラやボツリヌス菌等に､応用し、詳細な疫学情報を発信、感染症・食中毒の蔓延防止や発生予防等の衛生行政に反映させています。

－２－

細菌第二研究科は臨床細菌・結核、性感染究に取り組んでいます。またレジオネラ等の症と寄生（原）虫の３研究室、１０名で構成さ水系感染症に係わる微生物の研究は水質研究

れ、ＭＲＳＡや劇症型溶連菌感染症調査を含科の水中細菌研究室で、さらに多摩支所微生
む溶血性レンサ球菌サーベイランス、クラミ物研究科では食中毒以外の予防衛生、食品術
ジア・梅毒等の性感染症サーベイランス、結生および環境衛生に係わる広範囲な検査・研
核菌のRFLP法による分子疫学的解析を積極究を実施しています。
的に展開しています。またセラチア菌等の院最後に、当所では「東京都微生物検査情報
内感染発生時には、原因菌の解析結果や疫学（月報)」等を発行、またインターネット・ホー
倒報を提供し、原因究明に活用されています。ムページでは多くの公衆衛生hW報の提供を行っ
その他、乳肉衛生研究科では動物性食品おています。そこからは東京都の衛生悩報にもよびその加工品を対象にリステリア菌等の病アクセス可能です。是非御利用下さい。
原細菌や人獣共通感染症起因微生物の調査研（http:/WWW､tokyo-eiken､go.』p/index-jhtmD■●●□Ｐ￣■ご●□ｒ●●■●●■●●ｃ■■｡■□■■●●■⑤の■－－⑤ｃ■●ひＣＣＣ●ｃ●凸●－－▲－●●■●●●●●●●■●●の｡■●■■－●｡●￣￣凸●▲●■●●●ぜひｃ■ｃご●■ｃ①●●●●●●｡◆￣｡●●●●●●ＣＯ●｡●●●｡■●■■●●■■●●●●■・・●●■□ご●●●●ｃｃ｡●●●■｡.

フオーラム

ノ

ｉ今回のフォーラムでは「培養困難な細菌の検査法」をテーマとして、Ｍ〕'cQpkzsm(ｚＰ几eumo‐：ｉ几me、ＣｿMmm'α、（CｿMQmJﾉdOpﾉhilα）meumoJzme、L2gi…』ぬPFze[mzOphMn、抗酸菌、ｉ

ｉＯｒｉ２７ｍＱｔｓｚ`tsUgamZLshjを取り上げ、専門の先生方に執壷を依頼しました（編集委員会)。！
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培地が用いられる。この培地は雑菌の発育を

Mycoﾉﾛﾉasmapneumon'ａｅ

抑制するために酢酸タリウムとペニシリンを

杏林大学医学部感染症学識座田口晴彦

1962年Chanock等により初めて原発性異型含んでいるが、常在菌の発育によりＭｐの検出困難となる場合もある。検査材料として肺炎の病原体として同定されて、「細胞壁を上咽頭スワプを用いる。培養は37℃好気性でMycOpmsmCmeumo"jcze（Ｍ､p）は、持たず、培養できうる最も小さな病原微生物」

７～10日間行うが、我々の研究室では培地のとして基礎・臨床面から多くの研究が報告さ

乾燥を防ぐ目的で、炭酸ガスインキニベーターを用いている。コロニーの観察は検査材料接れてきた。

マイコプラズマ肺炎の頻度は、異型肺炎の種後４日目から行い、顕微鏡下（×40あるい

30～40％と言われ、約２週間の潜伏期の後、は×100)、典型的な目玉焼き状コロニーの発熱・発熱・咳嗽・感冒様症状をもって発症有無を調べる。M.Pの性状確認として、ブする。多くは軽症で治癒するが、時として急性

ドウ糖分解能、アルギニン加水分解能、さら呼吸器不全、また呼吸気症状以外にも消化器にコロニーのニワトリ赤血球吸着能をもって症状や中枢神経症状などの様々な合併症を呈

Ｍ､ｐと同定する。これらの分離・同定にはし重症化するケースも少なくない。治療にはマ

通常２～４週間の時間が必要である。

クロライド系、テトラサイクリン系およびニュー（血清診断）

キノロン系抗生物質が有効である。定型肺炎

臨床では、通常、血清診断として特異抗体の第一選択剤であるβ－ラクタム系抗生物質

価や寒冷凝集素価が測定される。特異抗体とが無効であるため、その早期診断と有効薬剤

しては補体結合反応、間接赤血球凝集反応おの適切な投与が重要となる。マイコプラズマ

よび受身ゼラチン凝集反応がある。補体結合肺炎の診断には臨床的・理学的診断に加え、反応はＭｐに対する主にIgGおよび－部IgM

咽喉頭からのＭｐの分離培養、血摘学的な診断が行われる。以下に検査法を紹介する。

を測定する。間接赤血球凝集反応と受身ゼラ（Ｍ．Ｐの分離培養検査）

子にＭＰの限界膜抗原を感作し、Ｍ,ｐに対培養にはPPLO（寒天、液体および重層）する主にIgMおよび－部IgGを測定する。

チン凝集反応は、赤血球あるいはゼラチン粒－３－シングル血清の場合は、補体結合反応では６４ける集団発生が報告されている3)。さらに最倍以上、間接赤血球凝集反応と受身ゼラチン

近では動脈硬化との関連性でも注目を集めて凝集反応は320倍以上をもって陽性と判断すいる』)｡このようにＣ・meumo几ｍｅ感染の診断的意義は益々高まっているが培養が容易でる。しかしながら、有意に特異抗体の上昇を認めない場合やIgGは感染２週以降でなけないことが診断を困雌にしている。最近のれば検出されないことから、ペア血滴によるＣＰ几eumo几ｍｅ感染症の診断法について現況判断が望ましい。寒冷凝集反応は非特異的反を述べる。

応であり診断の一助と成りうるが確定診断を

１．血清鯵断法するものではない。
（迅速診断）

ｃｍｅｌＪｍｏｍａｅ感染後抗体が上昇するまでの期間が初感染で４～６週、再感染で２～３培養検査法および血清学的診断法では検査週かかるため、発症時には陰性のことがしば

手順や抗体の上昇に時間がかかる。このようを用いた迅速診断法が検討されてきている。

しばあり、回復期のペア血清での検討が不可欠となる。他の検査法や臨床経過を含めて総合的に診断することが重要である。

直接蛍光抗体法は培養検査に用いる前の上咽①Micro-IF法、ＭＦＡ法な状況から、直接蛍光抗体法、ＰＣＲ法など

頭スワプをきれいなスライドガラスに塗抹し、アセトン固定後FITC標識抗Ｍｐモノクロー
ナル抗体を反応させ蛍光顕微鏡にて観察する方法である。迅速結果を得ることができるが、特異性・検出感度の問題点が残っている。ＰＣＲ法は高感度で数時間にて結果が得られる
ことから迅速診断法としての有用性が高い。

抗CJmeumo"me特異抗体の測定法としては、単離したクラミジアの基本小体（ElementarybodyEB）を抗原としたmicro‐
ＩＦ法が標準法とされ極特異性が優れている。

しかし抗原の用意や、蛍光顕微鏡の判定に熟練を要する事などその煩雑さのため、い我々の研究室で行っているＰＣＲの場合、培ずれも研究室レベルでしか行われていない。
②ＣＦ法

養法に対する陽性一致率は98.3％、陰性賜性

また補体結合反応（CF抗体）は一般に率は99.0％の感度を得ている。

オウム病の血清診断に用いられているが、直接蛍光抗体法およびＰＣＲ法とも保険適種の鑑別は不能で確定診断にはならない。

応の検査とはなっていない。また、ＰＣＲの③ヒタザイムC・ニューモニエ

統一したプライマーによる異なる検査機関で

現在Ｃｍｅｕｍｏ几ｍｅの外膜複合体（chlaの検討も行われていない。しかしながら、患

mydialoutermembranecomplex：ＣＯＭC）を抗原としたELISA法による抗体者のケースマネージメント上有益である迅速診断法を現実化することは大切なことであり、その発展が期待される。

ChbmydVaPneUmo"'aｅ
国立感染症研究所ウイルス第一部岸本寿男

測定キット（ヒタザイムC・ニューモニエ：日立化成）のみがC､pﾉteumo"me特異抗体
を保険適応で測定できる。現時点で測定できる抗体クラスはIgG，ＩｇＡに限られているが、特に初感染での診断的意義が高い
ＩｇＭの測定について適応申請中であり、今後このキットに加えられれば、とくに小児における感染の診断的有用性がさらに高

はじめに

ＣｿMamydOPﾉtZh(CﾉMm7zydm)Ｐ姪umonj“(以下C・PJzeu7zom(zeと略す）は、1989年に新種のクラミジアとして認知された新興病原体
であるI)。ヒトを宿主として飛沫感染し、急性呼吸器感染症を起こす。市中肺炎の約一割に関与することが知られており、感染症法では４類定点報告の疾患である。本邦でも家族まることが期待される。
２．Ｃｐ"eumonjaeの検出・確認法
Ｃｍｅｕｍｏ几ｍｅの感染を確定するためには菌体あるいはその抗原蛋白やＤＮＡを検出する必要がある。呼吸器感染症患者からの検出には通常は鼻咽頭擦過材料が用いられる。喀

内感染や幼稚園、小中学校、高齢者施設にお－４－レジオネラ感染症における最近の賭題

痩、気管支肺胞洗浄液（BALF)、胸水など

東邦大学医学部微生物学教室舘田一博

からも可能とされる。

１）分離培養法

１．はじめにＨＬ細胞やHep-2細胞などの培養細胞がレジオネラ症は、細胞内寄生性グラム陰性

用いられ、分離株の検出、同定にはモノク桿菌であるL2gioJzellq属細菌による感染症であ

ローナル抗体を用いた蛍光抗体法が一般的る。本菌は1976年に米国フィラデルフィアのホで確実である。

テル宿泊客にみられた重症肺炎の原因菌として

２）抗原検出法分離されたが、その後、自然界に広く存在する①蛍光抗体法細菌であることが明らかとなっている。感染源

モノクローナル抗体で、咽頭擦過材料、としてはクーリングタワー、噴水などのエアゾ

組織切片などを直接染色し、クラミジア粒

ルが有名であるが、日本ではいわゆる“24時間子や封入体を検出する。ただし、非特異的風呂”を介した感染例の報道が記憶に新しい。

な反応物との鑑別が困難で、実用性は低い。

本菌は、欧米においては肺炎球菌、インフルエ
ンザ菌、マイコプラズマ、肺炎クラミジア（ク②酵素抗体法ＩＤＥＩＡクラミジア（現行はＩＤＥＩＡＰＣＥ

ラミドフィーラ）などに次いで頻度の高い肺炎

協和メディクス）は本来CZmdDomatZs検

病原体とされており、米国では年間10,000～5

出用に開発されたキットであるが、属共通

0,000例のレジオネラ肺炎が発症していると推抗原であるリポ多糖体（LPS）を使用して定されている。一方、本邦においてもその存在いるため、他のクラミジア種についても検は広く認識されるにいたっているが、診断法の出は可能である。呼吸器感染症におけるク特殊性からも実際の患者数は不明である。ここ

ラミジア風抗原検出のスクリーニング検査

ではレジオネラ感染症における最近の話題とし法として、ある程度応用可能である。

て、診断法および発症病態に関する新しい知見について紹介する。

３）ＤＮＡ診断法

２．診断法の進歩

ＰＣＲ（polymerasechainreaction）法
は特異性、感度ともに非常に優れているた

今日、レジオネラ症の診断法としては培養

め、培養が困難なＣｍｅｕｍｏ"ｍｅについて法、血禰抗体価測定法に加え、尿中抗原検出は有用性が高い。いくつか特異的なプライ法およびＰＣＲ法が利用可能となっている山:)。

マーが報告されて研究施設では一般的に使特に尿中抗原検出法は迅速かつ簡便に実施で用されている。いずれも優れた成緬が得らきる検査法であり注目されている。酵素抗体

れており、今後のキット化が望まれる。

法に加え、イムノクロマトグラフィ法によるおわりに診断キットが開発されており、後者を用いる

以上、Ｃ､p腰[４，０几ｍｅ感染症の検査法につとスワプで患者尿を採取してから約15分で本いて述べた。本症は非常に日常的な疾患であ症を診断できる。ただし、このキットで診断り、さらに全国的なレベルでの実態解明をすできるのは基本的にＬ・pj2eumqPhZm血滴型

すめていく必要がある。そのためには今後は１による感染症であることに注意しなければさらに簡便な抗原検出法やＰＣＲ法の開発普ならない。また、レジオネラ肺炎患者におけ及が不可欠であろう。

る尿中抗原の排出は、急性期だけではなく肺文献炎発症後４～８週間以上も持続する症例が散１）GraystonJT,ｅｔａｌ：JSystBacterio１．

見されている。この事実は、レジオネラ肺炎

３９:88-90（1989）

において、たとえ適切な抗菌薬療法が行われ２）KishimotoTandSoejima:RInLMed

たとしても、菌（少なくとも菌体抗原）が長３２:934-937(1993）

期間にわたって宿主内に存在していることを

３）SaikkuP,ｅｔａｌ:Anlnt･Med、意味しており、その発症病態を考える上で興116:273-278(1992）

味深い。
－５－

一方、レジオネラ症の遺伝子診断としては、

その誘導あるいは阻害を通して感染症発症病

macropbageinfectivitypotentiatoｒ（ｍ妙領域、５SrRNA16SrRNAなどをターゲッ態に関与している事実が報告されている。レトとした方法が報告されている。レジオネラ

胞障害が確認されていたが、そのメカニズム

ジオネラ感染においても、感染細胞に強い細は健常人のロ腔・鼻腔には存在しないことかは良く理解されていなかった。最近になって、ら、nestedPCR法あるいはreal-timePCR

培養細胞を用いたimvitro実験において、レ法により感度を高めた診断法が報告され、そジオネラ感染１～８時間という急性期にマクの有用性が確認されている。ただし、本症でロファージおよび肺胞上皮細胞にアポトーシ

は腹性痩、血性痩が対象となることが多く、スが誘導されることが報告され、その機序とこの場合には種々のポリメラーゼ阻害物質(宿主細胞由来ＤＮＡ、ヘム、酸性糖など）

してレジオネラによる生体細胞caspass3の活性化が考えられている0)。我々もＡ／Ｊマの混入により偽陰性となることがあることにウスを用いたレジオネラ肺炎モデルでアボトー

注意しなければならない。最近になって、シスの関与を検討したところ、感染１～２日

Lindsayらはレジオネラ肺炎患者５例の急性目をピークにcaspase-3の活性化、およびア

期および回復期血清において、ｍｉｐプライ

ポトーシス細胞の増加を認めている。本現象

マーを用いたＰＣＲ検査でいずれも陽性であっがヒトのレジオネラ肺炎の発症病態にどのよたことを報告している3)。またMurdochらうに関与しているのかは依然として不明であは、レジオネラ肺炎患者28例から採取されたるが、本症患者にしばしばみられる強い低酸

血摘および尿を対象にＬ５Ｓプライマーを用素血症、ＡRDSあるいは肺の線維化との関連

いたＰＣＲ遺伝子検査を行ない、血滴で12例についても今後さらに解析する必要があるで(42.9％)、尿で13例（46.4％）が陽性であっあろう。

たことを報告している⑪。血清および尿を対

４．参考文献象とした過伝子診断は現時点では確立した検１）山口恵三他・LegjoJzelね肺炎の診断法と査法とは言えないが、レジオネラ症診断の困

臨床的特徴に関する検討．感染症学雑誌．

難さ、血清・尿採取の容易さなどを考えると、本法は将来的に有望なレジオネラ症診断法の７１：634-643,1997.

2）TatedaK･etaLEvaluationofclinical1つと考えることができる。

usefulnessofthemicroplateagglutin

３．発症病態

ationtestforserologicaldiagnosis

レジオネラは細胞内寄生菌であり、その感

ofLegionellapneumoniaJ，Med・

染防御機柵としてはThl-サイトカイン反応

Microbiol47：325-32801998.

およびこれを介した細胞性免疫の発動が重要である。実際に本症患者の血清中のThl-お3）ＬｉｎｄｓａｙＤＪｅｔａＬＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｍｉｐ
ｇｅｎｅｂｙＰＣＲｆｏｒｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆＬｅｇｉｏ

よびTh2-サイトカインを測定した成綱によｌｍａｉres0diseaSe．Ｊ，ClinMicTobio１．

ると、ＩＩＨ、Ⅱ－１０（Tb2-サイトカイン）は

３２：3068-3069,1994.

検出されなかったのに対し、IFN－７、IL-124）MurdochDR、ｅｔａＬＵｓｅｏｆｔｈｅといったThl-サイトカインの産生が多くの

ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａctiontodetect

患者において認められている`)。この点につL卍gjo）ｕｅｌｍＤＮＡｉｎｕｒｉｎｅａｎｄｓｅｒｕｍ

いて我々は、レジオネラ感染時に見られる

ｓａｍｐｌｅsfrompatientswithpneumonia

IL-12の由来として好中球が重要であり、本Clin・Infect・Ｄｉｓ２３：475-480,1996

細胞がレジオネラ感染時のThl-Th2パラン５）TatedaKetaLSerumcytokinesin

スに影響を与えているという事実をＡ／Ｊマ

patientswithLegionellapneumonia：

ウスを用いた肺炎モデルで確認している`.？)。

relativepredominanceofThl-type

近年、クラミジア、リケッチア、抗酸菌など

cytokines，ＣｌｉｎＤｉａｇｎＬａｂｌｍｍｕｎｏ１．

の病原体が生体側アポトーシス機櫛に作用し、５:401,1998.

－６－

ている。新指針の特徴は、迅速に成織を得る
こと、検査の感度や精度を配慮した方法を採用したことであり、詳細を表１に示す。しかし、これらの方法を実際に使用するとなると、作業の能率化、経済性、検査担当者の安全性(特に設備）などの面から、直ちに変更できない部分もある。本稿では新指針の内容と導入の問題点について考えてみたい。
１．検査室の安全対策（安全キャビネットの

6）TatedaK、etaLEarlyrecruitment

ofneutrophilsdeterminessubsequent
T1／T2hostresponsesinamurine
modelofLegionellapneumophila
pneumoma

ＪＩｍｍｕｎｏＬ１６６:3355-61,2001.

7）ＴａｔｅｄａＫｅｔａｌ・Chemokine-dependentneutrophilrecruitmentinamurine
modelofLegionellapneumonia：potentialroleofneutropbilsasimmunor

点検は大丈夫か？）

新指針では結核菌検査にはクラスn以上の安全キャビネットの設置が不可欠としている。
この装置も正しい使用法が守られてこそ安全が保証されるものである。機械の原理を理解

egulatorycells、Infectlmmun、６９:2017-24,2001.

8）ＧａｏＬＹ・etaLActivationofcaspase

３duringLegionellapneumophilainducedapoptosis，Infect・Ｉｍｍｕｎ６７：

し、正しく作励しているか否かのチェックを毎回行う必要がある。安全キャビネットとよ4886,1999.

く似た装置に「クリンベンチ」がある。この機械は作動すると機内の空気が術者の方へ排出されるものがある。このような機種を用いている施設はないと思うが、機内の空気の流「新結核菌検査指針」の導入をめざして
順天堂大学附属病院臨床検査部

小栗豊子

れは必ず点検しなければならない。

20年ぶりに登埋した新指針「新結核菌検査指針」が日本結核病学会

なお、結核菌が多量に含まれる検体が通常の細菌検査（一般細菌検査）に提出される場

抗酸菌検査法検討委員会で作成され、2000年
結核菌検査指針は1950年に第１版が出版され、合もある。クラスⅡ以上の安全キャビネット
は結核菌に限らず、通常の細菌検査でも必需

その後６回の改訂が行われたが、1979年以降、品であるといえる。

方法の見直しは行われないまま20年以上経過し、今回の新指針の登場となった。この間、

２．検体の品質管理（Miller＆Jonesの分

５月に財団法人結核予防会より出版された。

類、Gecklerの分類の導入は７）
喀庚では肉眼的検査としてMiller＆Jones

検査法の進歩は著しく、新技術を採用した施設と、従来法を継承している施設とでは検査の分類が推奨されている。これは肺炎などの成績の精度や迅速性に大きな差が出ている。
新指針はこれらのギャップを解消するため

細菌検査でもかなり普及しており、取り入れることには何ら問題はないと思われる。しかの新マニュアルとして大きな期待が寄せられ

し、Gecklerの分類を取り入れるには難色を示す恵見もある。その理由は、これを行うために検体の直接塗抹標本を１枚余分に作成し、染色する必要が

表１新結核菌検査指針2000の内容
1．検査室の安全対策（クラスⅡ安全キャビネットの設置）あるからである。一方、抗酸菌の塗2．検体の品質管理法の導入

抹検査には、検体より遠心集菌した（Miller＆Jonesの分類、Gecklerの分類）

材料を蛍光法で検査することが推奨

3．集菌法の導入されており、この標本をGecklerの分

4．分離培養に液体培地を導入類に用いることはできない（後述)。

5．核酸検査法を導入

しかし、旧指針の直接塗抹検査であ6．薬剤感受性検査法（固定漉度法から比率法に変更）れば、特にグラム染色を行わなくと

7．制度管理の実施方法の確立

も抗酸菌染色標本からGecklerの分類－７－

を行うことは可能である。
Gecklerの分類は必要に応じ実施すること
でよいではないかと思う。

２．塗抹検査（50,1の遠心管の使用、３．００ＯＧの遠心は可能か？）

喀痩の塗抹検査には古くから膿性部分を検査する直接塗抹法が用いられてきた。しかし、喀痩中の抗酸菌の分布は不均一であることから、新指針では、均質化して遠心する集菌法が採用された。これには50,1の遠心管を使用し、パイオハザード対策が考慮されている

３，００ＯＧの遠心器を用いる方法が採用されている。当時（新指針が出て間もない頃)、多くの微生物検査室では10,1の滅菌スピッツ、
遠心器は1,700Ｇ程度のものが用いられており、50,1の遠心管、3,00ＯＧの遠心器を備えた施設はほとんどなかったのではないかと思う。しかし、現在ではこれらを備えた検査室が増加しているようである。また、1,70ＯＧの遠心器でも検体の前処理に遠心補助剤（市販品）を用いることで、3,00ＯＧと同等の集菌効果をあげることが可能になった。この遠心補助剤は検体処理液に添加することにより、
沈澱物を生じさせ、集菌効果をあげるものである。セントラップNＢ（日水)、好酸菌前処
理キット（ニチピー）より市販されている。
なお、遠心器のパイオハザード対策の普及率については明らかではないが、未設極の施設が多いのではないかと思われる。このパイオハザードとなどが考えられる。

３．培養検査（一般細菌には新鮮な疲を、抗酸菌検査には疲の量を多く）先の塗抹検査でもふれたが、５０mlの遠心管、3,00ＯＧの遠心条件、パイオハザード対策の備わった遠心器により集菌したものを培養することが推奨されている。確かに喀痩鐙が５～10,1で、すべての検体を検査するには50mＩの遠心管が必要である。通常の細菌検査に提出される喀痩の通は少ない。肺炎などの起炎菌決定のためには新鮮な材料が必要なため、１回のみの喀出渓が採取されているが、抗酸菌検査では雑菌処理を行うため、多少時間を要しても喀痩量が多い（５～10,1）方がよいのかも知れない。このあたりも臨床側にアピールする必要があろう。

４．培養検査（小川培地の雑菌汚染率はベテラン技師では少ないといわれるが…）
新指針では前処理にＮＡＬＯＮａＯＨ法を採用している。この方法は従来のNaOHのみを用いる方法に比べ、NaOHの濃度が低く抑えられている（最終のNaOH濃度は１％）ため、雑菌汚染率が高くなる。雑菌汚染率は施設によりかなり異なっており、結核専門の施設では比較的少ないようである。雑菌汚染が多くなる原因は、喀疾の均質化が十分できていな

いため、粘液物質の核心部分にNaOHが到達せず雑菌処理できないとされている。ベテランが行えば雑菌汚染率を低く抑えることがで対策とは、逮心管をさらにフク付きの容器（カプセル）に入れ、遠心するもので、この容器の開閉を安全キャビネットの中で行うことにより、外部への汚染を避けるためのものである。
喀痩を築菌処理した場合としない場合の鏡きるとの意見もあるが、初心者が行ってもうまくできる方法でなければ、臨床検査には取り入れ難い。

検の検出感度は三浦らの報告では前者で38％，
後者で261％である。集菌効果は喀痩、が少ない場合（１ｍI程度）では小さいが、多い場合は大きい。

本年４月の第77回日本結核病学会のシンポジウムで、国内のアンケート調査の結果が報告されたが、集菌法を採用している施設は半数にも達していない。その理由はコスト高(50ml遠心管、ＰＢＳ，集菌補助剤）になること、操作が煩雑なこと、集菌操作が危険なこ

爺者らも新指針どおりに行ってみたが、小川培地や工藤PD培地の雑菌汚染が箸増し、やむなくもとの方法に戻して現在に至っている。新指針の前処理法は液体培地を分離培地に用いた場合の処理方法である。これらの液体培地は抗菌薬を添加して用いるため、細菌の発育が阻止される。しかし、小川培地には抗菌薬の添加はないので、新指針の処理法には無理があると思う。

新指針の前処理方法を用いて、小川培地と液体培地それぞれ１本ずつに接種するのが最も理想的な検査法である。液体培地は自動検－８－出機械と組み合わせることにより、小川培地に比べ、抗酸菌の検出日数を著しく短縮できる。新指針では雑菌処理の時間を正確に守るために、１ラウンド当たり８検体以内に抑えて行うよう奨めている。このことも作業能率の低下に繋がり、採用し難い点といえる。
５．培地（液体培地はどのくらい早く検出できるか）

キャピリアＴＢは免疫クロマトグラフィー法により、ヒト型結核菌を15分で同定するキットである。これは培養菌を用いて行う方法で、患者検体を直接用いた検出はできない。培猛菌の検査では核酸検査よりも迅速に、しかも安いコストで検査できる。PCR法は検査に５時間を必要とするが、患者検体からの直接検出が可能であり、ヒト型結核菌（Ｍtube‐

ＭGIT（BectonDickinson）やＭB／BacT

rmjosjSconzp【Eｴ)、ＭａＵｉｕｍ,Ｍ・iJztm“‐(OrganonTeknika）は液体培地を用いた抗ｌｌｕｊＱｒＦの３菌種が判定できる。なお、遺伝子検査の欠点は①生菌と死菌の識別がつかない

酸菌検査システムであり、検討成績はいずれ

非結核性抗酸菌では小川法で23日、ＭGITでこと、②何らかの原因で遺伝子の増幅が阻害される場合がある（陽性でも検出できない場
合がある）こと、③高価なこと、④偽陽性のでる場合があることなどである。これらの検査は迅速検査として高く評価されており、検７日（16日の差）である。培養中の雑菌汚染

査室でもかなり受け入れられている。

も評価が高い。小川培地に比べ菌の増殖力、検出感度とも優れている。小川法とMGIＴとの比較成績では結核菌群は小川法で平均発育日数が24日、ＭGITでは14日（10日の差)、

７．薬剤感受性検査（固定濃度法から比率法の頻度は小川法で３．３～５．５％、ＭＧＩＴで２へ）～４．７％と大差はない。ＭGIT、ＭB／BacT

抗酸菌の薬剤感受性検査の対象菌種は、ヒともに検出機械を用いるとその都度陽性が感知できるが、ＭGITは専用の紫外線ランプにト型菌を含む抗酸菌全体に用いられるものとよる目視観察も可能である。この方法に核酸検査を併用すると60～70％が２週間以内に分解釈している施設が多いのではないかと思われる。新指針では方法、薬剤震度が一新され、小川培地を用いた比率法で、対象菌種は結核離・同定を完了できる。液体培地と7Ｈ１1寒天培地や小川培地との併用が推奨される。高価菌に限定したものとされていた。しかし、Mであることから初感染患者など症例を週んで用

1BqJzsasjiも対象としてよいとのことである。

いるのがよい。液体培地の欠点としては、①菌固定濃度法では１薬剤に２～３掴度を用いた数が測定できないこと、②複数の抗酸菌が存方法であったが、比率法では１濃度（INH

在した場合これらの発見が困難なこと、③菌発は２濃度）のみを用いる。比率法では薬剤不育確認には抗酸菌染色が絶対必要なこと、④含の対照培地に10-2および10-`希釈の２本をまれに小川培地に発育するが液体培地に発育用いることになった。この方法では、①判定しない株がみられること、⑤価格が高いこと、が感性（Ｓ）と耐性（Ｒ）の２段階となるの⑥取り扱いに危険を伴うことなどである。
なお、小川培地は従来からの３％培地に比場合、偽耐性に判定されることを防ぐことがで、成績を理解し易い、②接種菌量が過剰な

べ２％培地（日水、極東）や工藤PＤ培地

できるなどの利点がある。培地メーカーでは(ニチピー）がより広範囲の抗酸菌の発育に

新指針に対応した培地が販売されており、今

適し、菌の増殖速度もやや速い。これらの培後普及するもの考えられる。なお、試験管培地にはピルピン酸や可溶性デンプンなどが添地ではなく、トレイを用いた簡易法が市販さ加されている。

れているが、これらについて、従来法（試験管培地を用いた方法）との比較がより一層必液体培地が普及しにくい原因は価格が高い

要であると思う。

ことが最大の理由かもしれない。

６．同定検査（免疫クロマトグラフィー法はMGITなどの液体培地を用いた場合は１～

ヒト型結核菌の同定にわずか15分、ＰＣＲ

２週間で迅速に薬剤感受性検査が判定できる。

法では５時間）指針では方法の紹介程度であるが、現在、国－９－

内での検討が進められており、近いうちに｢推奨法」として認知されるものと思われる。
この方法ではcontamimation（特に複数の抗酸菌）のチェックが難しいことが難点である｡
比率法はわが国で用いられてまだ日が浅い

培養検査は小川培地を用いた方法は150点、液体培地（ＭIGTなど）を用いた方法は160点である。培地の価格は小川培地１本、１９０
円、ＭIGTは700円前後と思われる。培地価
格の差は大きいのに対し、点数はわずか10点

が、今後、普及することにより新たな課題が生ずるかも知れない。

である。

８．精度管理（結核菌自体の危険性、検査所

１薬剤につき750円から1,000円である。保
険点数は３剤までが230点、４剤以上が２７０点であり、試薬代が点数をオーバーしている。
一方、ＭGITの感受性検査は４剤で2,800円程度である。小川培地の方はｌ薬剤毎に対照培地が添付されているが、検査する場合は４剤セットで行うことが多いので、メーカー側

要日数など簸点が多い）－段細菌では日本医師会、臨床検査技師会などで行われているが、抗酸菌については全く行われていない。この理由は①菌の取り扱

いに危険を伴うこと、②培養に長期間を要することなどが大きく関わっている。しかし、塗抹標本の鏡検程度のことは可能である。
抗酸菌の精度管理は一般細菌と別のルート
で、施設の設備なども確認の上、実施し、検査の指導体制を深めてゆくことが必要である。
施設内での精度管理（特に薬剤感受性検査）も不可欠である。

９．抗酸菌検査の保険点数

抗酸菌検査の保険点数を表２に示した。抗酸菌塗抹検査は現在、蛍光法が主流であり、本年４月から38点になった。これは集菌法、直接塗抹法のいずれを用いても同じである。
喀痩の場合、直接塗抹は腹性部分を塗抹するのみで簡単であるが、集菌には、均質化と雑菌処理、さらにＰＢＳで洗浄したものを用いることになる。集菌操作は煩雑であり、所要時間も多く、危険度も高い。両者では点数に差がつけられてよいと思う。

薬剤感受性検査は小川培地（試験管）ではでこれらをセットにして市販すれば価格を下げられるのではないかと思う。
以上、抗酸菌検査に新指針を導入するに当たっての問題点を述べた。検査点数と試薬価格のアンバランスが新指針の導入に大きく影翻していることも事実である。現状では集菌法の普及、迅速性に優れた液体培地の普及、検体の前処理法の検討など多くの課題がある。

液体培地は固形培地との併用が理想的である。
液体培地は価格が高いので症例を選んで使用することになろう。新指針の導入を前向きに取り入れる努力を期待したい。
文献

日本結核病学会抗酸菌検査法検討委員会縄：新結核菌検査指針２０００（阿部千代治監修)：
財団法人結核予防会、東京、2000年５月

表２抗酸菌検査の保険点数の推移
種別
結核菌塗抹検査

結核菌培養検査（小川培地）
ナイアシンテスト

抗酸菌同定

抗酸菌薬剤感受性（４剤以上）
結核菌群核酸増幅同定検査｣M・qUium／、０ｍ“【比lu花核酸同定検査
結核菌群抗原同定検査

霞轄;曰
H10年改正 H12年改正 H13年改正 H14年改正 H14年-1碑 (％）
4５

4５

4５

3８

－７

15.6

190

190

180

150

－３０

1６ ７

125

125

120

100

－２０

1６ ７

330

330

330

280

－５０

1５ ２

360

360

320

270

－５０

1５ ６

650

550

－１００

1５ ４

670

570

－１００

1４ ９

330

330

正１．表中の点欽に10を乗じたものが金額⑥９
函１４年の結核菌塗抹検査38点は380円｡
圧１．表中の点数に10を乗じたものが金額。例えば平成14年の結核菌塗抹検査38点は380円。

注２．ＭGITを用いた培養検査は、上記の点数とは別である。平成13年では190点であったが、平成14年では160点となった。

－１０－

Ｒにより検出する方法である。検体には通ｏ"e"脂rsursugamushノ

常感染初期の血液を用いる。採血に当たっ千葉県衛生研究所海保郁男、水口康雄ては、抗凝固剤入り（beparinは不可）の

Ｉはじめに感染症法の施行に伴い、つつが虫病は全数採血管で採血し、１～２日以内に検査を行把握の対象疾患となり、医師による届け出がうときは４℃に、それ以上に期間を置く場

義務づけられた。しかし、ots“s必guJmjsAj

合には-30℃以下に保存する。

をはじめとした各種リケッチアは危険度レベ

血液の採取は発病後出来るだけ早い時期

ル３の病原体であり、取り扱いにＰ３施設をが望ましいが、蕊者らは発病後10日目まで必要とする事から一般の検査室では病原体のの検体から○.Cs“sugumushiDNAを検出分離による診断を下すことは難しい。そこでしている。

現在、検査は特異抗体の証明あるいはＰＣＲ

１）ＤＮＡの抽出は血液そのものあるいはによる核酸の増輻が主流となっている。

パフィーコート（白血球層）から市販の

Ⅱつつが虫病およびｏ・rswsugamUwの抽出用キットを用いて行う。

２）nestedPCR用のprimerは○.tsutsUgu‐

検査法

mushjの56-ｋＤａタンパクをコードして

１．間接蛍光抗体法（IF法）

いる遺伝子上に設定したものを用い:)、ＩＦ法により特異的IgM、ＩｇＧ抗体を検出する方法で、最も簡便であり、検出感度・増幅は１ｓＬ２ｎｄＰＣＲ共に94℃１分、特異性共に高い！)。

５７℃１分、７０℃１分で30～35サイクル行１）披験血清としては発症初期（急性期）

う。陽性であれば１ｓｔＰＣＲで約１，OOOと５～10日の間隔（回復期）を開けて採

bp、２，．PCRで500bp付近にバンドが取したペア血滑を用意する。

出現する。患者検体の場合１ｓｔＰＣＲのみでは増幅されたバンドが観察されない

２）血溺は20倍希釈をスタートとし、２倍事が多い。

段階希釈を行い、ＩＦ法用の抗原（OZsut‐

３．OtsutsuguJmLshZの分離

sL4gmnusﾉｉｔの各株）が塗抹されている材料としては血液が用いられる。分離に抗原スライドを用いて反応させる。反応後、スライドグラス上の血清を十分洗い

はマウスを使う方法と培養細胞を用いる法

流しFITC標識杭ヒトIgMあるいはIgGがあるが、前者の方が効率がよい。詳細は紙面の都合もあり文献を参照されたいs)。

を用いて２次反応を行う。

、その他

３）反応後、標識抗体を十分洗い流し、蛍光顕微鏡にて観察を行う。特異的な淡緑つつが虫病の抗体検査は国市魔染症研究所

色の穎粒を認めたものを以て陽性とする。

あるいは各衛生研究所で可能である。早期の使用抗原としては、少なくとも標準株で診断さえつけばtetracyclin系の抗生物質投あるKato、Karp、Guilliamの３株につ与により数日で回復する病気であるが、残念いて実施する必要がある。

なことに未だに毎年数名の死者が出ているこ

診断の確定には急性期の抗体価に比し回とを知っておく必要がある。

復期の抗体価が、いずれかの１株に対し４

参考文献

倍以卜卜昇している事の確認が必要である。

１）海保郁男、時枝正吉：検査と技術もし１度の血澗しか採取出来ていない場合

２２:279-281,1994

２）Furuya,Ｙ､ｅｔａｌ:J､C1inMicobio１．

には、つつが虫病の特徴的な臨床症状（発熱、発疹、刺□）を考慮した上でIgM抗体価20倍以上、もしくはIgG抗体価80倍

３１:1637-1640,1993

３）Kawamura,Ａｅｔａｌ:Tsutsugamusi

以上を以て陽性とする。

Diseasepp275-282,Univ・TokyoPress．

２．ＰＣＲ法8）

検体中のOtsutsl4gumuWDNAをＰＣ－１１－1）名称：第１１回Lancefieldレンサ球菌研究会2）会期：平成14年６月１日（土)、２日（日）3）場所：阿波観光ホテル（徳島県徳島市一番町３－ 16-3）
Tel：O88P622-5161（代表)、Ｆａｘ：088-622- 2857

5）世話人、問合せ先：〒770-8503徳島県徳島市蔵本Ｉ
問合せ先：〒770-8503徳島県徳島市蔵本町３丁目18番地１５
徳島大学医学部栄養衛生学識座教授太
徳島大学医学部栄養衛生学識座教授太田房雄
Tel＆Ｆａｘ：088633-9428、e-mail：Ota＠nutr,ｍｅ｡.tokushima-u,acjp

1）名称：東大医科研幹細胞シンポジウム「幹細胞から臓器形成へ」
2）会期：2002年６月13日（木）～14日（金）3）場所：東京大学医科学研究所識堂（東京都港区白金台４－６－１）

4）貿任者：東京大学医学研究所幹細胞シグナル分子制御研究分野西中村隆一
5）問合せ先：〒108-8639東京都港区白金台４－６－１

東京大学医科学研究所幹細胞シグナル分子制御研究分野西中村隆一
忠l）名称：第15回臨床微生物迅速診断研究会総会
2）会期：平成14年６月15日（土）～16日（日）iｉ 3）場所：きゅりあん（品川区立総合区民会館）（東京都品川区東大井５－１８－１）
4）総会長：岡田厚（NTT東日本関東病院臨床検査部）
5）事務局：〒1418625品川区東五反田５－９－２２
NTT東日本関東病院臨床検査部田澤庶子

Tel：O3-3448-6412、e-mail：okada＠kmcmhc・eastntt・cojpl）名称：第６回腸管出､1件大腸菌感染症シンポジウム

2）会期：平成14年６月24日（月）、２５日（火）3）場所：国立願染症研究所共用第一会織室
4）世話人：渡辺治雄、国立感染症研究所細菌部
5）事務局：〒162-8640東京都新宿区戸山１－２３－１
第６回腸管HElm件大腸菌感染症シンポジウム事務局田村和満
Ｔｅｌ：O3-5285-1111ext2231、Ｆａｘ：O3-5285-1163

e-mail：kazutamu＠nihgojp1）名称：第８回日本へリコパクター学会2）会

期：平成14年６月27日（木）、２８日（金）3）場

所：栃木県総合文化センター（〒320-853O栃木県宇都宮市本町１－８）4）会

長：寺野彫（濁協医科大学消化器内科）

態

せ先：第８回日本へリコパクター学会事務局米田政志
Ｔｅｌ：0282-86-1111、Ｆａｘ：0282-86-7761

－１２－

；

蕊

l）名称：第１１回内毒素・LPS研究会
2）会期：2002年６月29日（土）午後3）場所：園ウ慰染症研究所（東京都新宿区戸山）4）世話人：西島正弘（国立感染研究所、細胞化学部）

Tel：O3-5285-1158、Ｆａｘ：03-5285-1157、e-mail：nishim＠mihgojpl）名称：第23回日本炎症・再生医学会
2）会期：2002年７月２日（火）、３日（水）3）場所：京王プラザホテル（新宿区西新宿２－２－１ＴＥＬ：03-3344-0111（代表)）4）会長：浅野茂隆（東京大学医科学研究所先端医療研究センタ・センター長）
5）事務局：〒108-8639東京都港区ロ全台４－６－１

束京大学医科学研究所先端医療研究センター細胞療法研究分野辻浩一郎
Tel：03-5499-5694、Ｆａｘ：O3-5449-5428、e-mail：tsujik＠imsu-tokyo・acjpl）名称：第13回日本生体防御学会総会・第３9回補体シンポジウム；

2）会期：2002年７月11日（木）午後～７月13日（土）１８：00まで
3）場所：日大会館（東京都千代田区九段四丁目８番24号、TeLO3-5275ell2）
4）問合せ先：〒113-8657東京都文京区弥生１－１－１
東京大学農学部応用免疫学教室小野寺節
Ｔｅｌ：O3-5841-5196、Ｆａｘ：O3-58418020

e-mail：aonoder＠maiLecc・u-tokyo・ac,jｐl）名称：第49回毒素シンポジウム
2）会期：平成14年７月10日（水）午後～７月12日（金）午前3）場所：国際観光旅館水明館（岐阜県益田郡下呂町、Ｏ576-25-2800）
4）世話人幹事：横地高志（愛知医科大学微生物免疫）
5）問合せ先：〒480-1195長久手町岩作雁又２１

愛知医科大学医学部微生物免疫学吉田友昭
Ｔｅｌ：O561-62-3311ext2270、ＦＡＸ：O561-63-9187

e-mail：tomo＠aichi-med-uacjp
1）名称：第16回BacterialAdherence＆Biofilm

2）会期：平成14年７月13日（土）3）場所：ニッコーホテルズインターナショナル大分東洋ホテル（〒870-0816大分市田室町９番20号、TeLO97-545-1040、Ｆａｘ：097-545-1023）
4）会長：那須勝大分医科大学内科学第二5）問合せ先：〒879-5593大分郡挟間町医大ケ丘１－１
大分医科大学内科第二第16回BacterialAdherence＆Biofilm躯務局
門田淳一、永井寛之
36-5804FHx2O97-549-4245、ｅ－ｍａｉｌ：nRikn2＠oita-medaci■

－１３－

間

Ｎ

2）会期：平成14年７月16日（火）～17日（水）3）場所：久留米大学筑水会館TeLO942-31-7551、ＦＡＸ：0942-31-7699
4）総会長：伊東恭悟（久留米大学医学部免疫学識座）
Ｔｅｌ：O942-31-7551、Ｆａｘ：O942-31-7699

e-mail：hyukari＠medkurumeu・acjp
1）名称：第９回マクロライド新作用研究会

2）会期：2002年７月19日（金）～７月20日（土）3）場所：銀座東部ホテル：東京都・中央区
4）世話人：杏林大学医学部第一内科、後藤元

5）事務局：〒113-8603東京都文京区千駄木１－１－５

第９回マクロライド新作用研究会事務局
担当日本医科大学第４内科：吾妻安良太、臼杵二郎
Ｔｅｌ：03-3822-2131ｅｘｔ６４８２、FaxO3-5685-2084l）名称：第３１回薬剤耐性菌シンポジウム
2）会期：平成14年８月30日（１３：００～)、３１日（～１２：00）

3）場所：群馬県利根郡水上町（水上ホテル聚楽）4）会長：平井敬二（杏林製薬創薬研究本部）
5）ＩＦ務局：〒371-8511前橘市昭和町３丁目39-22
群馬大学医学部薬剤耐性菌実験施設大久保豊司

Tel：O27-220-8085、Ｆａｘ：O27-220-8088、e-mail：okubot＠ｍｅ｡､gunma-u・acjp
1）名称：第75回日本生化学会大会2）会期：2002年10月14日（祝）～17日（木）3）場所：国立京都国際会館、京都宝ケ池プリンスホテル（京都市左京区宝ケ池）
4）会頭：大島泰郎（東京薬科大学生命科学部細胞機能学研究室）
5）事務局：〒560-0082塁中市新千里東町１－４－２
千里ライフサイエンスセンターピル14階（財）日本学会事務センター大阪事務所（学会センター関西）
Tel：06-6873-2301、Ｆａｘ：06-6873-2300l）名称：第10回国際ブドウ球菌学会

2）会期：2002年10月16日～19日3）場所：つくば国際会議場エポカルつくば（茨城県つくば市竹園２－２０－３）
Ｔｅ】：O298-61-0001、Ｆａｘ：0298-61-1209、ＵＲＬ：ｈｔｔｐ：〃ｗｗｗ､epochaLorjp／
4）世話人：平松啓一

5）ＩＩＪ務局：順天堂大学医学部細菌学教室

Tel：O3-5802-1040、Ｆａｘ：O3-5684-7830、e-mail：info＠staphylococcus,net

6）ホームページ：ｈｔｔｐ：〃ｗｗｗ・staphylococcusorg/e､/index・hｔｍｌ

－１４－

蕊

海外会員便り
DepartmentoflnfectiousDisease，University ofCaliforniaSanFrancisco（UCSF)／

順天堂大学医学部細菌学片山由紀

私のアメリカ留学の話は、私が平松啓一教

本に住んでいた時には考えられない気候だ。

授の順天堂大学医学部細菌学教室の大学院生

日本海側の暗い冬を過ごした福井市育ちの私時代に、教授のご好意により、私の留学の為には、ここの気候は、格BII、サンクチュアリーにUniversityofCaliforniaSanFranciscoのように感じる。毎日、ＵＣＳＦまでの電車を(UCSF）のHenrynCbambers（チャンパー

待つあいだ、大平洋から大陸へ吹き上がる真っス）教授をご紹介して頂いた頭から始まった。

白な強風に全身全霊を委ね、昨日までの自分

その後、私は、Chambers教授にＥメールでを一掃して、今日のために一新する。西海岸

ポスドク希望の旨、その当時の自分の研究内の風は、嫌な事（思いもよらぬ実験のアクシ

容、履歴轡を送ったが、いっこうに教授からデントetc.）をすっきり忘れさせてくれ、さの返信メールは届かず、音信不通が５ケ月続らにクリエイティプにさせてくれる感じがすいた。“本当に私は留学できるのか？”つとる。ここで、“あれ、車社会のアメリカで電不安になってきた丁度その頃、私はデンマー

車通学？”と疑問に思われる邪でしょう。こクの国際ブドウ球菌学会に参加し、そこで私

こサンフランシスコ市内では、交通、不動産

はChambers教授と直接お会いする機会を（地価高謄）駆情を考えると電車通学の方が、得た。その学会中にChambers教授は、私の単身留学の私にとって便利のようだ。

研究内容に大変興味を持ち、その結果やっと、

さて電車に乗っていると、たまにUCSFの

私はそこでのポスドク２年間の切符を確実に医者が、首に聴診器をぶら下げた救急着姿で、手にしたのである。渡米、１０ケ月前の事であっ

分厚いファイルを無理矢理押し込みジッパー

た｡そしてついに2001年５月９日、朝６時半、の壊れたリュックを足下において、座って寝単身留学だった私は、スーツケース１個と段ている人を見かける。Incredible11日本ではボール箱２個で、身も心も軽くサンフランシ

考えられない光景である。私の働いているラスコ（SF）に到着した。大変運の良い事に、

ボは、UCSFで－度電車を降りて、さらにシャ

私は、到着したその日のうちに２年間滞在のトルパスで20分ぐらい行った国立総合病院の為のアパートが決まり、そして気持ちに余裕中にある。この病院のまわりは、UCSFのキャの出た私は、レンタカーを借りて、生活必需

ンパス街の雰囲気とは変わり、ホームレス、品、日常品などを買い出した。さらに余裕のジャンキー、がたむろっていて、見た目、治出てきた私は、何を思った事か、渡米初日に安が良くない。昨日も、病院の外から研究室研究室にも足を運び、ボスへ挨拶に行ったらの中へ“クサ”の匂いが入って来たばかりでば、５０ページに及ぶグラントの為の実験内容ある。最近判ったのだが、この辺は、日本人の書類をわたされてしまい、大変後悔した

用のSF観光ガイドの本によると、“治安が(今、思えば、当たり前の事である)。そして、

良くないので避けるべき地域”の一つに挙げその３日後に研究室のミーティングに出て、られていた。しかし現地アメリカ人にとって、渡米４日後には、私は時差ぼけの治らないま

ここは治安の悪い場所ではなく普通なのだそま、ベンチの前に立って仕事をしていた。

うだ。最初は、私もこの治安の悪さに－歩引

渡米10ケ月経過した今日。３月。朝７時。

いていたが、１ケ月でこの雰囲気に慣れてし

SF市内西部。ふと見上げると、身体ごと吸

まい、今では、よく建物の周りを一人で歩いい込まれそうなコバルトブルーの空が、大平てランチに出かけている（それなりの服装を

洋の水平線の彼方へ果てしなく続いている。

していれば、大丈夫のようだ)。さて、やっSFに来てから、雨が降ったのは、私の覚えとラボの話に移る。私が属する感染症部にはている限り20数日。平均気温８度～15度。日

４つの小ラボがあり、私はそのうちの一つの－１５－

Ｄｅｒｓ４動受（Ｍ・ＤＪ，Ｊｏｓｅ感染症侯王（lJh.，.）．盃老;＿ＤＣ

V願FIH鋼１石:裏：

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大会にも出場し、趣味、仕事の両面で充実した生活を送っている。羨ましい限りである。そんな彼の愛称は"Ｄｒ、Genius厨…
現在この研究室で、私にとって－番大変な躯を挙げれば、たった一つ、１週間に一度のミーティングだろう。我々の小ラボは全員で８人だが、直接実験に携わっているのは５人.私も含めたその５人は、週一回のミーティン
グで１週間分の各自のデーターを簡単に10分で説明をし、特にその中で興味深い人のデーターを集中して、全員でデスカッショ
ンしていく。ご存じの通り、たつた１週間で新しい結果を出すの

小ラボのポスドクである。そしてChambersＩま、なかなか難しく、その為には、毎日、ハ
教授は、４つの小ラボすべての大ボスになる。イスピードで仕事をする事が要求される。泣大ボスは、病院の感染症部の部長も兼任してきそうなくらい大変である。どうやって仕事いるため、早朝より夕方まで病棟で回診をしをこなしているのか？ここで、テクニシャンて、その後、大学内研究室の教授室に鰯在しのＤｏｎｇ（ドゥオン）の登場である。ＵＣパ－ている。が、最近、大ボスは15年ぶりにラボクレー校のパイオロジー部を一昨年卒業したで実験をしてエンジョイしている。言う間でばかりのDongのおかげで、我々は、雑用事もなく、現在ラボの中はてんやわんやである。の一切ない、自分の実験だけに打ち込んでい私の直接師事している先生は、中国人のＺａる毎日を送り、着々と仕事をこなしていくの、９（ハン）ZHomg先生で、2001年、β‐である。今日も、また、慌ただしく１日が過lactamasegene（B1aZ）関係の解析で、雑誌ぎ終わりを告げる。

SCIENCEに発表した大物である。彼は、野留学中もいろいろお世話になっています、
球に例えるなら、ホームランか三振になる仕順天堂大学細菌学教室の平松先生はじめ皆様
事しかしない。さらに彼は、驚く事に今年もに感謝致します。また、この場をお借りして、（１）カリフォルニア州の卓球トーナメント昨年９月11日のＮＹ・同時多発テロの犠牲者のチャンプであり、さらに数回、全米、世界の方々に、追悼の意を表します。（片山）「●￣￣￣￣￣■●￣￣￣￣￣￣￣￣●の￣~~■￣￣￣￣￣￣￣｡￣－－■￣－￣の■■~~--■■￣￣■■~■￣~￣~￣￣￣■ロー~￣￣｡￣￣~■￣●ＤＣ￣~￣￣~~￣~●~￣￣￣￣￣￣句Bezlo"ｄ肋eLaboJTztoJZ’----_…_____－－－－…___…__…－－－－－－____…____…_…＿……_______ｊ

歳はとればとるほど楽しいか残躯は天のゆるすところ
東邦大学医学部看麺学科客員教授橋本一楽しまざるをこれ如何

群馬大学を退官してからもう10年たった。私はそれまでの仕駆を中公新書にまとめあ
北里研究所での嘱託部長も今年で終わりであげることが出来たし、その過程で北研の若者る。昨年までは上記表題の「か」のない心境たちに教えられてパソコンでの文や図つくりで伊達正宗の晩年の詩に共感したものだったにも慣れた。デジカメも薦められてもう４代
馬上少年は過ぎ目である。一つの教室に専念することから解世平らかにして白髪多し放されて、広く内外の元気のいい研究者の業－１６－

綴をたどるのが今は何よりも楽しい。多くの逢う知人も「相変わらずお元気ですね」と挨学会研究会で気に入ったスライド発表をデジ拶してくれるが、私の心にもどうやら初めてカメで撮り、あとでゆっくり復習すると論語

悲哀感が陰をおとしたようである。それは一冒頭の句が身にしみる。好きなテーマをゆっ方に落ち着いた謙虚さをも与えてくれそうにくり調べることができるのも有り難い。東思える。これこそが老いというものであろう。

京に３日でていると友情を深める機会もふえ

再びイエーツの詩が思いだされる：

るし、魅力ある女友だちに逢うのも嬉しい。

葉は多けれど根は一つ

曾て「働くものより観るものへ」という本がまだうら若く、偽りの多かりし日にあったが、筋骨力が衰える分だけ五感の精度

つねにわれ、葉や花を日向にゆりぬが増すからだろうか。４日前橋にいると自然

今ぞわれ、まことの中に枯れゆかんがまた身近になり、近くは林業試験所、遠く

・私は樹々の冬枯の梢を見上げるのが好きだっは県北のブナ林など、四季おりおりの花や樹々た。しかし今の私は見上げると首が痛い。下の印象をカメラに収めて、パソコンで縄架し、を向いて歩こうよ、の身となったのである。

年々のアルバムを作るのも楽しい。

これはまた、６のの根っこを観るようにとの基礎研究者は貧乏なものであるが、学会主催が各地であるから桔樹日本中めぽしいところ

教訓かもしれぬ。老いを忘れず日々を大切に過ごしたいと思うのが昨今の私である。

は観終わったし、外国へももうさほど行きたいとも思わない。大体観光旅行は味の薄いもので、数少ない人とのじっくりと深い交わりがないと、今、カビとキノコの研究が面白い
帝京大学医真菌研究センター安部茂

思い出も空しいものである。米国には２年以上

いまでも憶えているが、私が大学院洋生だっいたのにその地に懐かしさはなく、そのときイた頃、親しい友人が、「きみの研究の分野でエーツの詩を個人教授してもらったアイルラン

は、基本的で重大な砺実は、セントラルドグ

ド生まれの老婦人には今なお惹かれ文通していマのように、明らかにされてしまっているじゃる。短いながらハンガリーで過ごした－ケ月にないか｡」とシニカルな微笑みしながら問いも夢のような思い出がある。長い年月の間の薄かけた。微生物学研究室で、一生懸命研究しい思い出よりは、一瞬の深い体験がそれぞれのていた若い私は、それを聞いて、「きみは、人の歴史を作り上げて行くのではなかろうか。

部外者的にしか状況を見ないから自然が理解

どこで教わったのか忘れたが、私はよくできたように見えるだけで、よく見ると微生｢放我と集我」という言葉を思う。自我の進

物学の分野では分からないことだらけだよ｡

化には集中と放散の両面が必要と思うがこの

それに、まだ治せなくて困っている感染症の頃は特に集中力が足りないのを自覚する。世患者がいっぱいいるんだよ｡」と反発した。

紀が改まった機会に、と言う気持ちから、今この20余年を振り返り、その様に答えたのはまで300人に出していた年賀状も100人に狭正しかったと確信できる。

め、更に少ない人数とより深く交わりたいとしかしながら微生物学の現状をみると、昔心掛けることにした。

受けたその質問を思い起こし、真剣にならざ

丁度そこに我が身へ災難が降り掛かったのるをえない場面があるように思える。個々のであった。４年前、胆石を煩い、七転八倒の学問領域は、ますます専門的になり、残され苦しみを経験し、２年前の左大腿深部瀞脈血た疑問を多くの研究者が争って食いついてい栓症以来、生涯ワーファリンを飲む身となっるようにみえるときがある。特に、臨床に直たが、今回は第６頚骨に異常がおき、２ケ月結しない基礎領域にたずさわる研究者は“薬も左腕の重い痛みを耐え続けることとなった。

剤耐性”“遺伝子診断”“生体応答”などの鎮痛薬も睡眠薬も効かぬ夜々、私は寛に自分一部の対象に集中しており、その分野はまるの老いをつくづくと知らされたのであった。

で戦場の様相を呈している。

頭と□は依然として元気であり、久しぶりにそんな戦場の中にとり残され、夜明けを侍－１７－

っ暗黒大陸が“カビとキノコ”の真菌学領域

彩な生活活性を示す抗生物質のソースとしてのように見える。真菌は６万種以上あり、個々真菌は注目されはじめている。

の真菌種は複雑な遺伝子制御を受けながら、医学領域の真菌学を対象とする専門的な学

多様な生活環境を持っている。その中で感染会としては、日本医真菌学会がある。この学症をおこすものは少ないがそれぞれがきわめ会は皮膚科領域の研究者が多く皮膚真菌症についての研究は充実しているが、それ以外のて多彩な病理を示すのである。
この“カビとキノコ”に関する細菌学的な深在性真菌症、基礎に関する分野での専門家

研究は、研究者が少ないため、おくれているは極端に少ない。それゆえ、医真菌学を専門と言わざるをえない。たとえば、健常人の消とする私達は、細菌学会の中でより広い視野化管内にすみながら、時として病原性をしめで多くの微生物学専門家と討論し、その研究

す酵母であるCbmj`Qal6jcm2sですら、進の方法論を学び、協力していかねばならない化の中でどのようにヒトに感染しつづけてきと考えている。

たか。その組織侵襲を支える酵母形から菌糸私達の帝京大学医真菌研究センターは、国形へと発育形態を変えるメカニズムはなにか

際的に見ても数少ない真菌学研究の専門機関などの問題はほとんど明らかになっていない。

である。山口英世所長以下の努力により菌株

皮膚真菌症に関辺するＭ口mssezm属の種の保存は、糸状菌2,800余株、酵母4,000余株

分類も明確になったのもこの数年のことであに達し、そのコレクションは、臨床分離株をる。また、真菌アレルギーや、食用のキノコ

中心にわが国有数のものである。また、その類などの真菌樹成成分の体内摂取がどのよう活動内容としては、真菌に関連する化学療法、な免疫学的作用を示すかも、充分に明らかに

分子生物学、形態学、免疫学についてなど多されていない。今、まさに細菌学研究の20年

岐にわたっている。今後もこうした研究を通前の状態に近く、興味深い疑問が次々と湧き、し、カビやキノコについて部外者から見ても今まさに“面白い”のがカビとキノコだと言興味深い発見をし、しかも医学的に重要な貢える。その兆しは、すでに始まり、近年、多献をしていきたいと考えている。

第84回日本細菌学会関東支部総会報告
横浜市立大学医学部細菌学教室奥田研爾
平成13年11月26,27日の両日、神奈川県民重大な現象を引き起こしていることを大きくホールにおいて開かれました第84回日本細菌警告されました。野田公俊教授、山本友子教学会関東支部総会は、多数の参加者による活授（千葉大学）は、「細菌の病原因子のコン発な質疑応答を経て、盛況の内に無事終了出トロール」をテーマに、細菌に関する重要な来ました。これもひとえに参加出席して会を新知見を色々と紹介していただき、笹川千尋

盛り上げて下さいました大勢の会員諸氏の御教授（東京大学医科学研究所）には「赤痢菌配慮の賜です。御参加くださいましたシンポの粘膜上皮感染機構」というタイトルで御講

ジストの先生方、快く座長を引き受けて下さっ横を賜り、世界をリードしている独創的なおた諸先生方、発表演題に御協力下さいました仕事の一環を御紹介していただきました。更
会員の先生方には深く御礼申し上げます。参に、小出幸夫教授からは、「ＤＮＡワクチン
加者延べ300人余り、一般演題44、シンポジをめぐる話題」ということで、ＤＮＡワクチ
ウム３題、特別講演３題という内容でした。ンの国内の股新情報をシンポジウムでまとめ太田美智男教授（名古屋大学）が行われたて下さいました。

｢飼料添加（成長促進）抗生物質と耐性菌」招聰外国人研究者による研究発表では、スと題したシンポジウムでは、今まで畜産等でウェーデンのカロリンスカ研究所のBrittａ
広汎に抗生物質が使用され、環境汚染というWahren教授が“HIV-1の種々サプタイプに－１８－れましたが、結核、リケッチアなどの種々感染症の疫学調査など多岐にわたる報告がなされました。‘細菌学，の領域は、これからもその多様性がさらに拡がると思われます。今まではヒトと直接かかわりのある医学、薬学系大学、国公立の研究所や衛生試験

BrittaWah歴､教授所、保健所あるいは各種企業の研究室に所属される会員の先生方からの発表が殆どであったのは当然ですがこれからは家畜衛生

DcnnisKlinman博士試験所や、農業試験所の先生方の参加も歓迎したいと思います。新興感染症の問題
有効な多価ＤＮＡワクチン”について、米国

６あります。再興感染症は私達の油断を狙ってります。再興感染症は私達の油断を狙って

食品医薬品局（ＦＤＡ）のDennisKlinman

います。次回の総会では昨年話題となったプリ

博士は、病原関連パターンとして哺乳類の自オンや炭疽菌の調査、研究なども加わり更に幅

然免疫応答に関わっているとされる細菌由来

広い豊富な研究発表が予想されます。

のＤＮＡ（ＣｐＧモチーフ)が、ワクチンによる抗原特異的免疫反応に対する強力なアジュ

２６日夜の懇親会では、ミナト横浜の夜景をパッ

パント物質として利用出来る事を報告されてクに会員の先生方が和気あいあいに歓談されていました。日本人研究者による一般演題の発いるご様子に私達も大変嬉しく思いました。次表では分子生物学的あるいは免疫学的手法を回の第85回日本細菌学会関東支部総会カヘ益々用いた病原性の解析等が多かったように思わ充実した学会となることを希望しております。

】２$薊癖i鋼3慈議fH鐘（($錨f韓誼蕊ffrEニヱＴ露:霊謹92蕊舗i(K轌呂蕊璽辮縛韓宅E瀧羅::４YFL蒋霊諒錦平成13年～15年第５回日本細菌学会
関東支部評議員会議事録

X)荊目患宮騨鐸鐸鶉輔療巍韓鋼蕊舞醇鰊壗輯韓麓ＧＵ露薄辮ｶｾﾞ弾q露露9鰯蕊標M鰯E２回25甥鐺顛

の２日間、東大医科学研究所識堂にて開催の予定との説明がなされた。

４各種小委員会報告：学術集会委員会報告

日時：平成13年11月26日12時00分～13時00分

は山田委員長より、合同学会委員会報告は

場所：神奈川県民ホール小会箪室

出席：安部茂、今西健一、伊藤輝代、大谷剛、
大野尚仁、奥田研爾、加藤哲男、神谷茂、
切替照雄、小出幸夫、笹原武志、

山口委員長より、編集委員会報告は神谷委

員長より、将来計画委員会報告は小出委員
長より、それぞれなされた。

笹川千尋(第85回関東支部総会長)、

審蟻駆項

清水徹、平井義一、松井英則、山口恵三、

１平成13年度会計決算報告：内山支部長よ山田澄夫、渡辺治雄、内山竹彦(支部長)、

り平成13年度の会計決算が報告され、つづ加藤秀人（幹事）

いて伊藤、切替会計監香桓当委員より会計

欠席：池康嘉、辨野義己の使途について不備は無かったことが報告
され、承認された。

報告事項

２平成14年度予算案：内山支部長より平成

１物故会員の報告：内山支部長より平成１３

１４年度予算について説明がなされ、承認さ年度の物故会員（竹田多恵氏､小原康治氏）れた。

について報告がなされた。

２第84回関東支部総会進行状況：奥田総会

平成13年日本細菌学会関東支部総会
会務総会議事録

長より総会の進行状況について報告がなされた。

３第85回関東支部総会準備状況：笹川千尋

日時：平成13年11月26日13時30分～14時00分

総会長より、総会は平成14年11月21,22日

場所：神奈川県民ホール小ホール－１９－

議長：奥田研爾第84回関東支部総会長

平成13年度浅川賞受賞
内山竹彦

報告事項

（東京女子医科大学、微生物学・免疫学）

１逝去会員への黙祷：逝去会員竹田多恵「スーパー抗原性細菌毒素の研究」

氏、小原康治氏への黙祷がなされた。
２会務報告：内山支部長より総会員数（平成12年10月１日～13年９月30日）は、正会

員1,373名、学生会員86名であることが報【繧集後記】

忙裏、山我を看る。閑中、我山を看る。
相似て、相似ず。忙は総て、閑に及ばず。

告された。

（文天祥）

３第Ｍ回関東支部総会の進行状況：奥田総会長から進行状況の説明がなされた。

末代の政治家かつ詩人であった文天祥は山と私達とのsituationが忙しいか否かによっ

４第85回関東支部総会準備状況：笹川総会て全く異なることを説く。十分な余裕のある長より、総会は平成14年11月21日～22日に時間をもつことにより、私達は主体的に「山」

東京大学医科学研究所識堂にて開催予定と(対象はあらゆるものを意図していると考えの説明がなされた。

られる）をつぶさに看ることができるとの教５小委員会報告えであろう。携帯電話、パソコン、e-maiL

各種小委員会報告：合同学会委員会報告は

on-1inejournal、IT-文献検索等々、私達の山口委員長より、編集委員会報告は神谷委

周りには便利この上ないものが急速に増えて員長より、将来計画委員会報告は小出委員

いるが、それでも一向忙しいままである。こ長より、学術集会委員会報告は山田委員長

れらを習熟しかつ十分活用して、余裕のあるからそれぞれなされた。

時間を持ちたいものだと思っている。
今回のフォーラムは「培養困難な細菌の検審識事項査法」をとり上げました。会員外の先生方か

１平成13年度会計報告と承認：内山支部長

らも極めて有用な原稿を賜りましたことを深より平成13年度会計決算報告の説明がなさ

く感謝申し上げます。今回から新しく東京薬れ、つづいて伊藤会計監杏相当委員より会

科大学の大野尚仁先生に縄集委員会に加わっ計の使途に不備がなかった旨の説明がなさていただきました。新しい編集委員会の下、れ、承認された。

関東支部ニュースが更に充実していくよう努

２平成14年予算案の承翌：内山支部長より力したいと存じます。（ＳＫ.）

平成14年度の予算案について説明があり、承認された。

日本細菌学会

３第86回（平成15年度）関東支部総会長の承認と挨拶：内山支部長から第86回関東支部総会長は第４回日本細菌学会関東支部評
議員会の選挙において杏林大学医学部神谷茂先生が選考されたとの説明がなされ、承認された。つづいて、神谷茂第86回関東支関東支部ニュース
第39号（2002.5.20）
発行：日本細菌学会関東支部〒162東京都新宿区河田町８－１－８６６６東京女子医科大学

微生物学免疫学教室内
支部長内山竹彦
編集伊藤師代、大野尚仁
神谷茂（責任者)、

部総会長の挨拶があった。

〈受賞のお知らせ〉

本年４月４～６日に行われた第75回日本細平井義一
Te1O3-3353-8111（内線22713）

菌学会総会において、関東支部会員の中から下記の受鐵者がありましたのでお知らせいた

FaxO3-5269-7411

E-mail：tuchi＠researchtwmuacjp

します。受賞を心よりお祝い申し上げます。
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