抗SARS-CoV-2 S1抗体パネルデータシート

Human Monoclonal Antibody Panelfor SARS-CoV-2 S1 Protein
Twist抗SARS-CoV-2 S1抗体パネル

Twist BiopharmaはSARS-CoV-2 S1スパイクタンパク質を標的とする抗体パネルを開発しました（カタログ番号102895）。

この抗体パネルはSARS-CoV-2スパイクタンパク質との高い親和性を持つヒトIgGから構成されており、このことは治療におけるウイルス中和、診断におけるウイルス検出のどちらかの目的での展開が可能です。

新型コロナウイルス感染症（COVID-19）の世界的大流行に対応して、当社はもう1つの抗体パネルとして、ヒトACE2受容体の細胞外ドメイン（ECD）を標的とするヒト抗体パネルの開発も行いました（カタログ番号#102896）。この抗体
パネルはACE2受容体に高い親和性を持ち、このことは治療目的での阻止抗体としての展開が可能であることを示しています。

製品概要

製品名
カタログ番号
製品説明
由来種
反応性
パニング用抗原
データベースTwist抗SARS-CoV-2 S1抗体パネル
102895
SARS-CoV-2スパイク糖タンパク質を認識する32種類のヒトIgGパネル
ヒトコロナウイルスSARS-CoV-2と反応
SARS-CoV-2 S1糖タンパク質に対応する組換え断片
MN908947.3

製品ノート	Twist抗SARS-CoV-2スパイク糖タンパク質抗体パネルは、Twist Biopharmaの変異体ライブラリ作製およびスクリーニングに技術を用いて開発されたヒトIgGサブセットで構成されています。ラ
イブラリは当社独自のシリコンベースDNA合成プラットフォーム上で迅速に作製され、ファージディスプレイを用いたパニング技術を活用してS1への結合に対するスクリーニングを行いました。候補をヒト抗体IgG鎖中にクローニングしてIgG1抗体を作製し、特性評価を行いました。このライブラリ設計から抗体候補選定までの全過程に要したのは6週間未満です。

製品構成

20 µL/ウェル
容量
1 mg/mL
濃度
配送と保管	ドライアイス梱包。受領後は－20°Cで冷凍保存。凍結融解を繰り返さないこと。
43 mMクエン酸ナトリウム、130 mM炭酸水素ナトリウム、pH 6保存用バッファー
クローン性組換えモノクローナル抗体
hIgG1
アイソタイプ>95%（CE-SDS法）
純度抗SARS-CoV-2 S1抗体パネルデータシート | TWIST BIOPHARMA

データ

この32種類の新しい抗体コレクションは、標的抗原に対して非常に高い特異性と親和性を示し、ピコ～ナノモラーの範囲のアフィニティを持ちます。本パネル中の抗体の1つに関するSPR法を用いたアフィニティデータ例を以下の図1に示します。
S1：TB182-7

S1三量体：TB182-7

KD、7.2 nM

KD、<36 pM
1,000600

レスポンス（RU）

レスポンス（RU）

800

400

600
400

200

200
00200

400

600

800

時間（秒）

1,000200

1,200

400

600

800

時間（秒）

1,000

1,200

図1：抗体（S1、S1三量体）の結合カイネティクス例。10 μg/mLで固定化した抗体、濃度2.3～200 nMの抗原S1またはS1三量体（ACROBiosystems、カタログNo. S1NS52H5、SPN-C52H8）を0.5% BSA含有HBSTE中で使用。測定機器：Carterra® LSA®。

図2および表1に示される通り、当社の抗体パネルは組換えS1タンパク質へのさまざまな特異的結合度を示します。組換
えSARS-CoV-2 S1タンパク質（ACROBiosystems、カタログ番号S1N-C82E8）を、384ウェル（NUNC® MaxiSorp ELISAプレート）上で4℃にて一晩、1.0 mg/ml、20 μL/ウェルでに固定化させました。それらのプレートに対して、Thermo Fisher
Scientific® SuperBlock® T20 TBS（カタログ番号37536）を100 μL/ウェル用いて室温で1時間ブロッキングを行いました。抗
S1抗体パネルをPBSでノーマライズ後、50 nMから0.0076 nMまでの希釈系列を調製し、それらをブロッキング後のプレートに加えて室温で1時間インキュベートし、PBSと0.05％ Tween20を用いて5回洗浄しました。ペルオキシダーゼAffiniPure
ヤギ抗ヒトIgG二次抗体（Jackson Immuno Research Laboratories、カタログ番号109-035-098）を1：5,000の希釈で20 μL/ウェル添加することにより、結合を検出しましたPBSおよびTween20による洗浄（5回）後、30 μL/ウェルのHRP基質（Thermo Fisher Scientific TMB Ultra ELISA、カタログ番号34029）を添加し、さらに30 μL/ウェルの1.0 M H3PO4を添加して反応を停止させました。450 nmでの吸光度を測定し、濃度の対数に対して最大結合率をプロットしました。EC50は、3種類のパラメータを用いて非線形カーブフィッティングを行うソフトウェアGraphpad Prism® 8を用いて、最大結合率の半値として算出しました。
S 1単量体への結合

1.2

1.00.8

最 大 結 合率0.60.4

0.20.00.1-0.21
抗体（nM）

10100

図2：ELISA法を用いた抗体パネルの結合率測定

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抗体

EC50 (nM)
0.08001

抗体

EC50 (nM)

TB182-13

TB181-40

4.413

TB181-04

0.09604

TB181-02

6.548

TB181-03

0.133

TB181-23

7.833

TB182-03

0.1332

TB181-28

7.92

TB181-06

0.1479TB182-14

7.92

TB181-130.2035

TB181-44

8.669

TB182-07

0.283

TB181-53

10.25

TB181-36

0.523

TB182-15

12.58

0.5584

TB181-19

17.5

TB182-04

0.612

TB181-27

48.46

TB181-47

0.9402

TB182-05

63.43

TB181-41

1.409

TB181-12

95.66

TB181-08

2.15TB181-48

95.66

TB181-25

2.284

TB181-51

98.17

TB181-14

2.559

TB182-17

100

TB181-39

4.157

TB182-20

100

TB181-42

表1：ELISA法を用いた抗体パネルの結合率測定（EC50）

品質管理と特性評価

精製した抗体をA280（Big Lunatic、Unchained Labs®）で定量し、還元条件下でのCE-SDS分析（Perkin Elmer® LabChip® System）を行って純度を評価しました。
TWIST抗SARS-CoV-2 S1抗体パネルプレートマップ

1234

A

TB181-02

TB181-19

TB181-41

TB182-04

B

TB181-03

TB181-23

TB181-42

TB182-05

C

TB181-04

TB181-25

TB181-44

TB182-07

DTB181-06

TB181-27

TB181-47

TB182-13

E

TB181-08

TB181-28

TB181-48

TB182-14F

TB181-12

TB181-36

TB181-51

TB182-15

GTB181-13

TB181-39

TB181-53

TB182-17

H

TB181-14

TB181-40

TB182-03

TB182-20

プレートマップ：一括再注文用に各クローンの位置およびそれぞれの名称を示しています

Twist抗SARS-CoV-2 S1抗体パネルは、Twist Biopharmaの製品ラインナップに含まれています。
製品一覧：twistbioscience.com/coronavirus-research-tools

注文情報102895 Twist抗SARS-CoV-2 S1抗体パネル
102896 Twist抗ヒトACE2抗体パネル

詳しくはTwist Biopharma（biopharma@twistbioscience.com）
までお問い合わせください。

これらの製品には Twistの供給取引条件（ twistbioscience.com/supply-terms-and-conditions）および抗体に関する補足的取引条件（ https://www.twistbioscience.com/page/antibody-supplemental-terms-and-conditions）に明記されている通り、一定の使用制限が適用されます。

DOC-001169 Rev 1

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リスク低減 | 失敗率の低下 | 上市までの時間短縮
Twist Bioscienceの一部門であるTwist Biopharmaは、独自のDNA書き込み技術を用いてパートナー企業による抗体治療法の開発、最適化を加速させています。

Twistは人体が持つ配列に一致するよう正確に設計された独自の抗体ライブラリーを構築することで、抗体治療法の開発と最適化のため不可欠かつ偏りのないリソースをパートナー企業に提供しています。
提携に関するお問い合わせ先
biopharma@twistbioscience.com
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