GeneAce RL qPCR Mix with UNG
I.

Description

V.

Typical PCR Protocol

GeneAce RL qPCR Mix with UNG is a real time PCR

Choose an appropriate total reaction volume, depending

reagent for the intercalator method. The Dye contained inon the instrument used. (e.g., 50 µL or 25 µL)

this product generates a higher fluorescence signal

Choose ResoLight Dye or SYBR

compared to other fluorescence dyes and PCR products

fluorescence wavelength setting.

can be analyzed with higher resolution in melting curves.

The Dye contained in 2x GeneAce RL qPCR Mix isBecause this product contains dUTP instead of dTTP,excited by light with a wavelength between 450 nm andCarryover contamination can be prevented by using

500-nm and the maximum excitation is at 487 nm. The

included UNG. UNG is an enzyme that degrades PCR

fluorescence wavelength is between 480 nm and 560 nm

products containing uracil bases by reacting at 50°C for

and the maximum is at 503 nm.

®

Green I for the2-minutes before the PCR reaction.
50x ROX Passive Reference might be required for using
real time PCR instruments that normalize the fluorescentComponent

Volumesignal by ROX (This product does not contain ROX).

2 x GeneAce RL qPCR Mix No ROX

25.0 μL

25 μM each Primers

1.0 μL0.5 μL

Uracil-DNA Glycosylase (UNG)

0.5 μL0.25 μL

II. Storage–20°C, protected from light.

Template
d.d.H2O

up toVolume
12.5 μL

5.0 μL

2.5 μL50.0 μL

25.0 μL

This product should be protected from light. After thawing,
the master mix may be stored at 4°C for up to one monthor returned to -20°C for long term storage by expired date.

III.

Components
200 rxns1)

2 x GeneAce RL qPCR Mix No ROX *1250 μL x 4

Uracil-DNA Glycosylase (UNG), 1U/ μL

100 μL x 1

ddWater

1250 μL x 4*1) It contains Hot-Start Gene Taq NT, dNTP Mixture with dUTP,
Mg2+, fluorescence dye, and stabilizerIV.

Recommended cycler conditions
50°C

2 min.

UNG treatment

95°C

10 min.

Enzyme activation

95°C

30 sec.

60°C

1 min.

45 cycles

Melting curve analysis

Optimum PCR condition depends on primer sequenceand template DNA and so on.

Notes・ The PCR must start with an initial 10 minutesincubation at 95°C to activate the chemicallymodified Hot-Start Taq DNA polymerase.
・ We recommend two-step protocols. (See V. Typical
PCR protocol)
・ Always ensure that the product has been fully thawed
and mixed before use. Gently mix the mixtures without
creating bubbles.

NIPPON GENE CO., LTD.
www.nippongene.com

For Research Use Only

GeneAce RL qPCR Mix with UNG
I.

V. 使用例

製品説明
GeneAce RL qPCR Mix with UNG は、インターカレーター

ご使用の装置に対応した反応液量でご使用下さい。

法用のリアルタイム PCR 試薬です。反応液に含まれる蛍光

蛍光波長の設定は ResoLight Dye もしくは SYBR Green I

色素は、一般的な蛍光色素に比べ蛍光シグナルが改善されを選択します。ているため融解曲線時により高い分解能で PCR 産物を解析

2 x GeneAce RL qPCR Mix に含まれる蛍光色素の励起波することができます。また、本製品は dTTP の代わりに dUTP

長は 450-500 nm で最大値は 487 nm、 蛍光波長はが含まれているため、添付の UNG (Uracil-DNA

480-560 nm で最大値は 503 nm です。

®

Glycosylase) を使用することにより、PCR 産物のキャリーオーバーによるクロスコンタミネーションを防ぐことが可能です。
UNG は、ウラシル塩基を含む DNA を切断する酵素で、PCR前に 50°C で 2 分間反応させることで、ウラシルを含まないDNA には影響を与えず、ウラシルを取り込んだ PCR 産物等を分解します。
なお、ROX による補正が必要なリアルタイム PCR 装置で使用する場合は、別売の 50× ROX Passive Reference のご利＜反応液（例）＞[ 50 μL 系 ][ 25 μL 系 ]2 x GeneAce RL qPCR Mix

25.0 μL

12.5 μL

25 μM each Primers

1.0 μL0.5 μL

Uracil-DNA Glycosylase (UNG)

0.5 μL0.25 μL

Template
d.d.H2Oup to

5.0 μL

2.5 μL50.0 μL

25.0 μL

用をお勧めします。
＜推奨 PCR サイクル条件＞

II. 保存－20℃ (遮光)・ ラベル記載の使用期限内にご使用ください。
・ 4℃保存(遮光)も可能ですが、その場合は１ヶ月以内にご50°C

2 min.

UNG 処理95°C

10 min.

酵素活性化ステップ

95°C

30 sec.

60°C

1 min.

45 cycles

使用下さい。
融解曲線解析

III. 製品内容
試 薬

プライマーの設計や鋳型 DNA 等により反応の至適条件が変200 反応用

2 x GeneAce RL qPCR Mix *1)

1250 μL x 4 本

Uracil-DNA Glycosylase (UNG), 1U/ μL

100 μL x 1 本

ddWater

1250 μL x 4 本

わることがあります。

＊1) Hot-Start Gene Taq NT, dNTP Mixture (dUTP を含む), Mg2+,蛍光色素, stabilizer を含んでいます。

IV. 注意・ 化学修飾を施したホットスタート PCR 用酵素を用いている
ため、酵素活性化ステップ（95℃ 10min.）を必ず実施してください。
・ 推奨 PCR サイクル条件にてご使用下さい。（V.使用例 参照）
・ 使用時は、泡立てないように穏やかに転倒混和し、試薬を十分均一にしてからご使用ください。

株式会社ニッポンジーン

本製品は、試薬（試験研究用）として販売しているものです。
医薬品の用途には使用しないでください。

TEL 076-451-6548

FAX 076-451-6547

www.nippongene.com
HO18R305