ISSN

Vol. 30

東海大学農学部紀要

PROCEEDINGSOFSCHOOL OF AGRICULTURE
TOKAI UNIVERSITY

0286−8180

東海大学農学部紀要
第 30 巻

2 0 1 1

2

Effects of Water Quality Purification using Canna（Canna indica hybrid）Planted in

0

1

1

The Coconut Fiber Roll…………………………………… Kyohei Kudo, Masaki Kajita, Toshio Hamada, Akiko Koike,
Chinobu Okamoto and Kiyotaka Kabata………１………………………………… Takahiro Horiguchi, Yuya Kawaguchi, Shunsuke Kawamura andTomohiro Araki………７

ヤシ繊維基盤ロールを基材としたハナカンナ植栽による水質浄化
第三〇巻

Site-directed mutagenesis of Tyr169 in goose-type lysozyme…………………………工藤匡平・梶田真祥・浜田俊雄・小池晶琴・岡本智伸・椛田聖孝………１
グース型リゾチームの分子内コアに位置する Tyr169を Phe に置換した変異体の解析……………………………………………………堀口貴広・川口裕也・河村俊介・荒木朋洋………７

Estimation of adult dispersal and egg parasitism inShjimiaeoides divinus asonis（Matsumura）

オオルリシジミの分散性と死亡要因における卵寄生蜂の評価………………………………………………………………… Kouhei Murata and Makio Iwata………15……………………………………………………………………………村田浩平・岩田眞木郎………15

Detection and Properties of Actinophages Parasitic to Streptomyces sp. Causing
Root Tumor of Melon

メロンがんしゅ病菌（Streptomyces sp.）に対するアクチノファージの検出とその性質…………………………………………………………………Keita Fujiki and Masahiro Yoshida………21………………………………………………………………………………藤木圭太・吉田政博………21

第１巻〜第30巻（1982年〜2011年）
FULL LIST OF CONTENTS

二〇一一

Vol.1〜 Vol.30（1982〜2011）

総

著

者

目

次

索

引

Index of Contributors

hyousi.indd 1

2011/03/17 10:12:20

ハナカンナの植栽による水質浄化

東海大農紀要 30：１−６（2011）

ヤシ繊維基盤ロールを基材とした
ハナカンナ植栽による水質浄化
＊

＊

＊

＊＊

工藤匡平 ・梶田真祥 ・浜田俊雄 ・小池晶琴 ・岡本智伸

＊＊＊

・椛田聖孝

＊＊＊

Effects of Water Quality Purication using Canna（Canna indica hybrid）Planted in The Coconut Fiber Roll

Kyohei KUDO, Masaki KAJITA, Toshio HAMADA, Akiko KOIKE,
Chinobu OKAMOTO and Kiyotaka KABATA（Received 4 October 2010 ; accepted 24 November 2010）

Progress of the water quality improvement of lakes and marshes is slower than those of river and sea area in Japan.
In the experiment I, water purication abilities and ecosystem of canna（Canna indica hybrid）planted in the coconut berroll were experimented set up in a pond in Kumamoto Zoo Park. The investigated parameters were water temperature, potential
hydrogen（pH）, dissolved oxygen（DO）, electrical conductivity（EC）, transparency, suspended substance（SS）,
inorganic nitrogen, orthophosphate（PO4-P）, chemical oxygen demand（COD）and biochemical oxygen demand（BOD）.
The use of the coconut ber roll made possible cultivation of canna on the pond with bottoms of exposed concrete. And thetransparency, COD and BOD were improved by planting canna. Then, pH was signicantly decreased by planting canna, but
the values of water temperature, DO, EC, inorganic nitrogen, SS and PO4-P were not changed by planting canna.
In the experiment II, effects of planting canna were investigated using water tank in the room condition. The investigatedparameters were pH, DO, EC, inorganic nitrogen and PO4-P. The contents of inorganic nitrogen and PO4-P significantly
reduced by cultivation of the plant. And the planted groupʼs value of pH, DO and EC were signicantly lower than those ofcontrol group. Therefore, it was suggested that canna is useful for water purication.

緒

法律の施行により，糞尿の管理規制が強化されたことで，

言

河川・海域においては水質環境基準の達成に一定の効果

わが国の水環境は，高度な経済成長に伴い急速に悪化が見られている（２）．ところが，それらの水域と比べしてきた（１）．加えて水質汚染には農業による影響も

湖沼は水質環境基準の達成率が低い現状にある．健全なみられる．効率化を図るために行われてきた肥料の過剰

水環境は生物及び人間にとって必要不可欠な存在であり，投入により地下水の硝酸態窒素が増加し，人体への影響

特に湖沼は治水と利水の目的や地域の人々の憩いの場等，が問題となっている．また，畜産においては家畜の多頭

人間の生活に重要な役割を果たしているため，更なる水飼育が水環境に及ぼす影響がとりざたされている．しか環境の改善が望まれている．

し，水質汚濁防止法や湖沼水質保全特別措置法の施行・一般的に湖沼は，自然条件下においてきわめて遅い速

改正により，工場の汚染物質排出規制が強化されたこと

度で富栄養化が進むことにより，貧栄養化から富栄養化

や，家畜排泄物の管理の適正化及び利用の促進に関するへと遷移する（３）．しかし，人間の生活活動等により湖沼に多量の栄養塩類が流入したため，湖沼の富栄養化＊東海大学大学院農学研究科が促進された．湖沼は水が滞留するという閉鎖的な水理＊＊東海大学大学院生物科学研究科

上の特性から，外部から流入した汚染物質が蓄積しやす＊＊＊東海大学農学部

い構造となっている（３）．そのため一旦，富栄養化が─1─

工藤匡平・梶田真祥・浜田俊雄・小池晶琴・岡本智伸・椛田聖孝
進むと水質の改善は容易ではない．

内の池の水質改善，および抽水植物の植栽が困難な水域

湖沼の問題に対してこれまで，浚渫，曝気，オゾンでの植栽技術の確立を目的とし，ヤシ繊維基盤ロールをを利用した物理・化学的処理等の対策がとられてき植栽基材に用いて，生長が早く短期間で多量の栄養塩類た．これらの物理・化学的な水質改善対策は，即効性のの回収が望めるハナカンナ（Canna indica hybrid）の植ある浚渫等もあるが，一方，高コストで持続的な水質栽を試みた．また，ハナカンナの植栽が水圏の生物多様改善が行えないという側面もある．そのため，低コス性に及ぼす影響についても一部検討した．

トで持続可能な水質改善が望まれており，現在までにヨ シ（Phragmites australis） や マ コ モ（Zizania latifolia），

材料および方法

オランダガラシ（Nasturtium ofcinale），ホテイアオイ（Eichhornia crassipes）等の水生植物を利用した生物的浄実験区の設置化の研究がなされてきた（４−７）．しかし，水生植物

本実験は，熊本市動植物園内にある池（通称：よしを利用した水質浄化では，植物の生長速度の制限により，池 ） で 行 っ た． よ し 池 の 面 積 は 約3670m ， 体 積 は 約設置から効果が現れるまでに時間を要する．浮遊植物は

2100m で，水深は約50cm とほぼ一定である．底には底繁茂の制御が難しく，水上交通や漁業を妨げる要因と泥が約20cm 堆積しており，富栄養化が進行した池といなっている（８）．また，抽水植物は根を固着させる基える．また，堆積した底泥は軟質で，水底に根付く形態盤が必要であり，水深の深い水域では利用が困難であるの水生植物は生育が困難な状態であった．

23等，水生植物の形態ごとに多くの課題が残されている．

実験にはハナカンナの植栽を行っていない対照区，植そこで本研究では，閉鎖性水域である熊本市動植物園栽を行った植栽区の２区を設置した（Fig. １）．対照区

Fig. 1. Outline map of the experimental pond.

と植栽区の面積は幅（W）15m ×長さ（L）15m としてと鉄製のチェーンを用いた．よし池にはクロエリハク

設置した．２区はいずれも内外の水の行き来がない閉鎖チョウ（Cygnus melanocory phus）が放飼されていたため，水域とするため，鉄筋で骨組みをした後，防水シート

植栽した植物を保護するため防鳥ネットを実験区と池のを施した（Fig. ２）．また，防水シートの固定には土嚢間に設置した．

─2─

ハナカンナの植栽による水質浄化

Fig. 2. Sketch of Iron bar framework and waterploof sheet.

抽水植物の植栽法

ンロールを水中に設置する方式で水質浄化を試みた．植実験を行ったよし池は動植物園内にあり，景観も考慮

栽ではベストマンロールに約10cm の穴を開け，支柱とし，観賞にも用いられるハナカンナを植栽に使用した．

共にハナカンナを植え込んだ．植栽を終えたベストマン

ハナカンナはカンナ科の抽水植物である．植栽にはベスロールを植栽区に18本，シュロ縄を用いて鉄筋骨組みに

トマンロール（富士見グリーンエンジニアリング 直径固定した（Fig. ３A）．また，植栽区にはプラスチック

30cm × L ３m）を基材として利用した．ベストマンロー

コ ン テ ナ（W33.5cm × L48.5cm × 高 さ（H）30cm） にルはヤシ繊維をポリプロピレン製のネットに高密度に詰

ベストマンロールのヤシ繊維を詰めハナカンナを植栽しめた円柱状の植栽用基材であり，ビオトープ等を設置す

た植栽ケースを８箱設置した．植栽区の面積は225m でる際，護岸から土壌の流入を抑えるために利用されていあり，植栽は総面積の12.6% を占めていた（Fig. ３B）．

2る（９）．本実験では，通常は陸地に設置するベストマ

Fig. 3. Installation of coconut ber rolls（A）, and overview after planting emerged plants（B）.

室内での水質浄化能の実験

H24.4cm）６槽を使用した．各水槽には，よし池の水は自然環境下での実験では天候等の自然条件の影響をリンの濃度が低く測定が困難だったため，よし池にも生受けやすく，純粋な因果関係を導き出すことが難しい

息しているテラピア（Tilapia mossmibica）を飼育していと考え，よし池でのフィールド実験と並行し，室内にる水槽（12頭 /m ）から採取した栄養塩類を多量に含む

おいてハナカンナの水質浄化実験を行った．室内実験

水を６ℓずつ加えた．これらの水槽に３株から４株のハには，12リットル（ℓ）水槽（W18.5cm × L31.5cm ×ナカンナを約300g 植栽した植栽水槽３槽と，植栽を行っ3

─3─

工藤匡平・梶田真祥・浜田俊雄・小池晶琴・岡本智伸・椛田聖孝ていない対照水槽３槽の２区に分けた．

査では，水生生物を各区画にトラップ（1.5L ペットボ

調査項目および分析方法

トル製・誘因餌利用）を仕掛けることで捕獲した後に同よし池の水質測定期間は2008年は７月から12月まで，定し，また，よし池に飛来する鳥類および昆虫を目視によって同定し定性的な調査を行なった．

2009年は１月から11月までとし，期間中に毎月１回の調査を行った．測定項目は，水温，pH，溶存酸素（DO），

室内の水質浄化実験では，対照水槽と植栽水槽のそれ

電気伝導率（EC），透視度，懸濁物質（SS），無機態窒

ぞれの水質変化について経時的に測定を行った．サンプ，化学的酸素要求量
素，オルトリン酸態リン（PO4-P）

リングは植栽前に１回，植栽後に３回の計４回行った．

（COD）および生物化学的酸素要求量（BOD）について

測定項目は，水温，pH，DO，EC，無機態窒素，PO4-P

調査を行った．また，生物の調査を水質測定と並行してについて調査を行った．測定法および測定機器はよし池

毎月１回行い，各区画に生息する水生生物や外部から飛での調査と同様のものを用いた．また，本実験では植栽

来する鳥類および昆虫を定性的に調査した．

したハナカンナの植栽前の重量および試験終了時の重量

水 温，pH，DO，EC は マ ル チ 水 質 モ ニ タ リ ン グ シ

について測定を行い，水質調査の終了後にケルダール法

ス テ ム（U-21XD，HORIBA） を 用 い て 測 定 し た． なによりケルダール窒素（TKN）の回収量を測定した．

お，pH は ガ ラ ス 電 極 法，DO は 隔 膜 ガ ル バ ニ 電 極 法，

統計処理
ハナカンナの植栽に伴うよし池の水質変化については，

EC は電極法にて測定を行った．透視度は透視度計（５型，SIBATA）を用いて測定を行った．SS はガラス繊

2008年と2009年の各項目の平均値を t- 検定により比較

維ろ紙（ADVANTEC GA-100，47mm）を用いて減圧ろした．室内の水質浄化実験では，対照水槽と植栽水槽の過法により測定した．無機態窒素および PO4-P は，水処理区間，ならびに調査週を要因とした二元配置の分散質測定器（DR/2000，DR2010，HACH 社）を使用し比分析を行った．

色法により測定を行った．なお，無機態窒素は硝酸態，亜硝酸態窒素（NO2-N）およびアンモ
窒素（NO3-N）

結果および考察

ニア態窒素（NH4-N）を合計したものとした．COD は
COD メーター（HC-507型，セントラル科学）により酸植栽による実験区の水質変化性法で測定を行った．BOD は BOD メーター（BODTrak，

よし池の年ごとの対照区と植栽区の水質の平均値

HACH 社）を用い BODTrak 法により測定した．生物調を Table １ に 示 し た．pH，COD お よ び BOD は2008年，Table 1．Water quality of the zoo park pond in 2008 and 20092008
Control area

2009
Experimental areaa†

Dissolved Oxygen（mg/l）

9.14±3.11

Potential Hydorogen（pH）

8.6±0.6aDater temperature（℃）

20.1±9.6

aElectrical conductivity（mS/cm）

0.23±0.02a

0.24±0.02

Transperency（cm）

23.6±12.8

aSuspended substance（mg/l）

15.2±5.3

aChemical oxygen demand（mg/l）

10.5±4.7aBiochemical oxygen demand（mg/l）

13.7±6.2

aInorganic nitrogen（mg/l）

1.23±0.47a

0.38±0.12aOrthophosphate（mg/l）

7.90±2.96
8.0±0.4b

20.7±7.4aaaControl area
9.85±1.92

aExperimental area
8.98±1.88

9.1±0.4a8.2±0.4b

21.7±9.4a21.7±7.6a0.21±0.02a

0.22±0.01

45.0±6.5b

21.6±5.4a29.6±7.5b

7.9±2.4b

16.6±7.1a13.3±5.7a4.2±1.0b9.9±4.9a6.2±2.6b

6.4±3.6b

9.5±3.6a4.0±1.2b

1.52±0.43a

0.34±0.07aaa

1.09±0.53a1.56±0.47a

0.44±0.18a

0.47±0.21

a†Means with standard deviation, followed different letters were signicantly different by stundentʼs t-test（P<0.05）

2009年の両年とも，植栽区が対照区と比較して有意に低クトンの抑制による COD や BOD の減少，および SS のい数値（P<0.05）を示した．透視度は両年とも，植栽区

ベストマンロールの網目構造への吸着が起きたのではな

が対照区と比較して有意に高い数値（P<0.05）を示した．

いかと考えられた．水温，DO，EC，無機態窒素およびまた，SS に関しては，2008年のみ植栽区が対照区と比PO4-P は，年ごとの平均では対照区と植栽区に有意な差

較して有意に低い数値（P<0.05）を示した．これらのこは見られなかった．湖沼で巻き上げられた底泥から栄養とから，抽水植物の植栽による pH の低下，植物プラン

塩類が水中に溶出するという報告があり（10），植栽区

─4─

ハナカンナの植栽による水質浄化では侵入した水鳥が盛んに活動し底泥を巻き上げていた

セミ（Alcedo stthis），アオサギ（Ardea cinerea），ダイサ

め，水鳥の活動が植栽区の水質に影響を与えたのではな

ギ（Egretta alba）およびコサギ（Egretta garzetta）等がいかと考えられた．

植栽区を餌場として利用することが確認された．冬季

実験前のよし池には抽水植物が自生しておらず，足にはこれらの鳥類に加え，越冬してきたマガモ（Anas

場となる止まり木等がなかったため，昆虫や小型の鳥

platyrhynchos），ヒドリガモ（Anas penelope）等の渡り鳥

類は池に飛来し難い状態だった．ハナカンナの植栽後が頻繁に飛来し，さらにカモが植栽したハナカンナを啄

は，アオモンイトトンボ（Ischuura senegalensis），シオ

ばむ行動が確認された．以上より，ヤシ繊維基盤ロール

カ ラ ト ン ボ（Ortheturm albistyylum specioum）， オ ニ ヤ

を基材としたハナカンナの植栽区を様々な形で生物が利ンマ（Anatogaster sieboldii）等のトンボ目が成虫の休息用し，多様性が向上する傾向が認められた．また，植栽や幼虫の羽化のための止まり木にハナカンナを利用し区を利用していたドンコ，ヨシノボリ，カワセミ等はよている姿が確認された．また，ヤシ繊維基盤ロールのし池近隣の水域で個体数が減少している種であり，植栽

ヤシで構成された部分を，コイ（Cyprinus carpio）やギによる隠れ家や餌場の形成が生態系の保護に貢献していンブナ（Carassius sp.）等の魚類が産卵場所として利用ることが示唆された．

している姿や，植栽によって形成された死角をドンコ

ハナカンナの水質浄化能（Odontobusis obscura），ヨシノボリ（Rhinogobius sp.）お室内での水槽実験における１週間ごとの対照水槽とよびモツゴ（Pseudorasbora parva）等の小型の魚類が隠

植栽水槽の無機態窒素，PO4-P，DO，EC の変化についれ家として利用する姿が確認された．鳥類では，カワて，実験結果を Fig. ４に示した．無機態窒素，PO4-P とFig. 4. Changes in water qualities of the experimental tank.

もに実験の開始から１週間後以降，植栽水槽が対照水槽

いと推察された．DO は植栽水槽において7.9mg/l からと比較して有意に低い数値（P<0.05）を示した．無機態

6.3mg/l まで低下し，対照水槽と比較して有意に低い数

窒素は植栽水槽において平均値が０週目の44.6mg/l から値（P<0.05）を示した．EC は植栽水槽において0.26mS/

３週目の24.6mg/l に大幅に減少した．PO4-P も植栽水槽

cm から0.18mS/cm まで低下し，対照水槽と比較して有において減少が見られたが，無機態窒素と比較して減少

意に低い数値（P<0.05）を示した．また，pH について

量が低く，ハナカンナは窒素に比べリンの吸収能が低も植栽水槽において8.3から6.9まで低下し，対照水槽と

─5─

工藤匡平・梶田真祥・浜田俊雄・小池晶琴・岡本智伸・椛田聖孝
比較して有意に低い数値（P<0.05）を示した．水槽実得ることが示唆された．

験の終了後，植栽水槽から回収したハナカンナの全乾物量は平均して9.7g 増加していた．この植物体の乾物

謝

中の TKN は1.5％であり，ハナカンナは植栽水槽から約辞

146mg の TKN を吸収したと推定された．ハナカンナの本研究を遂行するにあたり，実験池を提供して頂いた

TKN 含有率は，日本で水質浄化に多用される抽水植物

熊本市動植物園の村上英明園長および本田公三副園長なであるマコモの TKN 含有率と遜色がなく（11），またらびに職員の皆様に感謝の意を表します．また，NPO

生長速度もマコモより早い．このことから，ハナカンナ

法人・九州バイオフォーラムの岩井達也氏および生物資は窒素の回収に優れていると考えることができた．

源科学研究室の学生諸君にはご協力頂きました．ここに

総括

深甚なる感謝の意を表します．

ヤシ繊維基盤ロールを植栽基材に使うことで，根が固着できない水底条件でも抽水植物の生育が可能な植栽方

引用文献法を確立した．また，ヤシ繊維基盤ロールを用いた抽水植物の植栽により，生物多様性が向上される傾向が認め

１）清水正元，1988，江津湖，３，11-28．

られた．実験の結果から，ハナカンナが窒素の吸収能力

２）農林水産省 家畜排泄物の発生と管理の状況．農林に優れ，水生バイオマスによって窒素を回収する水質浄

水産省，2010，東京，http://www.maff.go.jp/j/chikusan/化システムへの導入に適していることが示唆された．

kankyo/taisaku/t_mondai/02_kanri/［2010年９月10日参照］

要３）環境庁水質保全局

約

水質法令研究会，1986，湖沼の水質保全，株式会社

わが国では河川や海域に比べて湖沼の水質改善の達成

４）財団法人地球社，東京，20−31．

日本植物調節剤研究会，1973，新版日本率が低く，その改善が望まれている．本研究では，ハナ

原色雑草図鑑，株式会社

カンナを用いてヤシ繊維基盤ロールを植栽基材とした池90−281．

での水質浄化実験を行い，その水質浄化能と生物多様性

５）辻に及ぼす影響について検討した．

盛生，宮坂

全国農村教育協会，東京，均，奥畑博史，山田一裕，平塚明，2008，日本緑化工学会，34（１），241−244．

まず，熊本市動植物園内の池に対照区と植栽区を設置

６）Montien-art, B., Nakazono, T. Okamoto, C., Odahara, T.,

し，各区間の水質変化と生物多様性への影響を検討した．

Kikuchi, M. and Kabata, K. 1998, Grassland Science, 44,

調査項目は水温，酸性度（pH），溶存酸素（DO），導電

115−121.

率（EC），透視度，懸濁物質（SS），無機態窒素，オル

７）Kabata, K., Okamoto, C., Lowilai, P. and Kikuchi, M.

，化学的酸素要求量（COD）おトリン酸態リン（PO4-P）

1993, Proceedings of the XVII International Grassland

よび生物化学的酸素要求量（BOD）とした．次に，環Congress, 1419−1420.

境要因を受けない室内での水槽実験を行い，ハナカンナ８）椛田聖孝，岡本智伸，1996，用水と排水，６，466−
467．

の栄養塩類の吸収特性について検討した．調査項目は，
pH，DO，EC，無機態窒素および PO4-P とした．

９）辻池の実験では，ヤシ繊維基盤ロールを植栽基材に使うことで，根が固着できない水底条件でもハナカンナ（３），400−403．
10）中薗孝裕，2010，東海大学大学院平成21年度博士論
文，73−80．

の植栽が可能であった．また，植栽区において，透視度，COD および BOD が改善された．水槽実験では，植盛生，軍司俊道，2004，日本緑化工学会誌，29

11）梶田真祥，2009，東海大学大学院平成21年度修士論

栽水槽において，対照水槽よりも栄養塩類の有意な減少（P<0.05）がみられ，ハナカンナが水質浄化資源になり─6─

文，51−57．

グース型リゾチームの分子内コアに位置する Tyr169を Phe に置換した変異体の解析
東海大農紀要 30：７−14（2011）

グース型リゾチームの分子内コアに位置する Tyr169を
Phe に置換した変異体の解析
堀口貴広・川口裕也・河村俊介・荒木朋洋

Site-directed mutagenesis of Tyr169 in goose-type lysozyme

Takahiro HORIGUCHI, Yuya KAWAGUCHI, Shunsuke KAWAMURA
and Tomohiro ARAKI（Received 4 October 2010 ; accepted 10 November 2010）

The roles of Tyr169, which is hydrogen-bonded to a catalytic residue（Glu73）of goose-type lysozyme, were investigatedby means of its replacement with Phe using ostrich egg-white lysozyme（OEL）. No remarkable differences in secondary
structure or substrate binding ability were observed between the wild-type and mutant Y169F, as evaluated by circulardichroism（CD）spectroscopy and chitin-coated celite chromatography. However, the enzymatic activity toward the
N-acetylglucosamine pentamer,（GlcNAc）5, was drastically reduced by the mutation. For the reversible unfolding at pH 5.0 at
30 ℃ , the Tyr169 to Phe mutation resulted in a decrease of 0.73 kcal/mol in conformational stability. These results strongly
suggested that the hydrogen bonding interaction between Glu73 and Tyr169 may serve to hold the carboxyl group of Glu73 in
the proper orientation optimal for catalysis.

緒

合部位（A − F 部位）について明らかにされ，さらに糖言

加水分解機構も推定されている．さらに，ニワトリ型リリ ゾ チ ー ム は N − ア セ チ ル ム ラ ミ ン 酸（MurNAc）

ゾチームは単純な加水分解酵素ではなく，高能率な糖転と N −アセチルグルコサミン（GlcNAc）の共重合体や移反応を触媒する複雑な反応機構を持つ酵素であること

GlcNAc の重合体のβ１−４結合を加水分解する糖加水が明らかにされている（１, 10−14）．

分解酵素である（１）．本酵素は病原菌の細胞壁に含ま

これまで，ニワトリ型リゾチームやファージ型リゾれるこれらの重合体を分解して溶菌することから，生体チームが，酵素の触媒反応機構やタンパク質の構造安定防御タンパク質と考えられている．リゾチームはそのア性機構を解明するためのモデルタンパク質として詳しく

ミノ酸配列から大きく３つのタイプ，すなわち分子量研究がなされてきたのに対し，グース型リゾチームはあ約14000のニワトリ型リゾチーム（２−４），分子量約

まり研究がなされておらず，その触媒機構や構造安定性

18700の T ４ファージ型リゾチーム（ファージ型）（５，機構の詳細はほとんど明らかでない．グース型リゾチー

６）および分子量約21000のグース型リゾチーム（７−ムの１次構造は，コクチョウ（SEL）（15），ガチョウ９）に分類されている．

（GEL）
（７）
，ダチョウ（OEL）（16），ヒクイドリ（17），ニ ワ ト リ 卵 白 リ ゾ チ ー ム（HEL） で は，（GlcNAc）
3

レア卵白リゾチーム（18）のアミノ酸配列がタンパク質

や MurNAc − GlcNAc − MurNAc の３量体との複合体の X

化学的手法で決定され，ニワトリ（19），ヒラメ（20），線結晶構造解析によって，その立体構造，２つ触媒基

チャイロマルハタ（21），サケ（22），コイ（23）のアミ（Glu35，Asp52）および６個の糖残基が結合する基質結ノ酸配列が遺伝子構造から推定されているだけである．
また，グース型リゾチームの立体構造に関しては，GEL

東海大学農学部バイオサイエンス学科と SEL の２種類が明らかにされているだけである（８，─7─堀口貴広・川口裕也・河村俊介・荒木朋洋
９，24，25）．深溝らは，GEL の GlcNAc のオリゴマー

明らかにされているが（24），E − G 部位の基質結合様式

に対する活性を解析し，６個の基質結合部位（B − G 部の情報は得られていない．グース型リゾチームは，８本位）の存在と D − E 部位間でのグリコシド結合の切断をのαヘリックスと３つのβシートからなる典型的なα＋予測した（26）．しかしながら，B − D 部位における基質

β型の立体構造を有しており（Fig. １），分子内部のコ結合様式は，GEL と（GlcNAc）
3との X 線構造解析から

ア構造を形成する３つのαヘリックス（α5，α7，Fig. 1. The three-dimensional structure of GEL. The structure was created using the coordinate le, Protein Data Bank entry 153L（24）.
The two disulde bonds（Cys4-Cys60, Cys18-Cys29）and three α-helices（α5, α7, andα8）are shown in blue and green, respectively.
The side chains of Glu73 and Tyr169 are also shown in red and orange, respectively. The hydrogen bond between Glu73 and Tyr169 isindicated by a dashed line. The gure was generated using PyMOL v.0.99.

α8）と２本のジスルフィド結合（Cys ４− Cys60，Cys18

Glu73の側鎖の配向を規定することでグース型リゾチー− Cys29）は種間での保存性が高く，グース型リゾチー

ムの活性発現や構造安定性に重要な役割をもつことが考ムの 立 体 構 造 形 成における重要性が予測される（17，えられた．本研究では , OEL の Tyr169を Phe に置換し18）．

た変異体（Y169F）を作製し，その主鎖構造，基質結合

近年我々は，グース型リゾチームがニワトリ卵白リゾ

力，触媒活性および構造安定性への影響を解析した．

チームより遥かに強力な溶菌活性を持つなど優れた特性を有していることを示した（27，28）．さらに , OEL

材料および方法の遺伝子の人工合成と，OEL の酵母での大量発現系を構築し，OEL は糖転移反応を触媒しない糖加水分解酵

１．試薬素であることを明らかにした（29）．また，この確立し制限酵素，T4DNA リガーゼ，Taq DNA ポリメラーゼ

た酵母での大量発現系を利用して，α5の C 末端に位置はタカラバイオから購入した．発現ベクター pPIC9K とする Glu73に関する変異体の解析を行い，Glu73がグー

宿主酵母 Pichia pastoris（GS115）は Invitrogen から購入

ス型リゾチームの触媒基であることを実験的に証明しした．合成オリゴヌクレオチドプライマーの作成は，北た（30）．一方２本のジスルフィド結合に関しては，変海道システムサイエンスに依頼した．CM −トヨパール

性状態のエントロピーを下げることによってグース型リは東ソーから購入した．N −アセチルグルコサミンのキゾチームの構造安定性に重要であることを明らかにした

トオリゴ糖の調製は Rupley の方法で行った（32）．その（31）．

他の試薬は市販の特級または生化学用試薬を用いた．

Fig. １に示すように , 分子内コア構造を形成するα8の N 末端に位置する Tyr169の側鎖の水酸基は , α5に存

２．変異体 Y169F の発現および精製在する触媒基 Glu73の側鎖のカルボキシル基との距離

Y169F 遺伝子は，PCR を用いた megaprimer 法で作製が2.6Åであることから，ヘリックス間で水素結合を形し（33），DNA シークエンスを行って目的の変異を確認成していると考えられている．したがって , Tyr169はした．変異遺伝子は，pPIC9K ベクターにクローニング

─8─グース型リゾチームの分子内コアに位置する Tyr169を Phe に置換した変異体の解析
し，野生型 OEL と同様の方法で発現・精製した（30）．

を含む0.575M トリス塩酸緩衝液（pH8.6）に溶解した．

すなわち，Y169F 遺伝子がα−ファクターシグナル配列

窒素ガス存在下，β−メルカプトエタノールを2.5μl 加え，下流に連結された pPIC9K ベクターを含む酵母形質転換

40℃で１時間還元した．その後，33.5mg のモノヨード

体を３ml の BMGY 培地（２% ペプトン，１% 乾燥酵母

酢酸を含む125μl の１M 水酸化ナトリウムを加え，窒エキス，100mM リン酸カリウム pH6.0，1.34% YNB，4素ガス存在下，暗所中でカルボキシメチル化した（室温，−5×10 % ビオチン，１% グリセロール）に接種し，30℃30分）．還元カルボキシメチル化（Cm −）Y169F は10%で24時間培養した．培養液全体を200ml の BMGY 培地

酢酸で平衡化したセファデックス G −25カラム（ファルに植え継ぎ，さらに30℃で24時間培養した．次に，集マシア製）に供し，試薬を除去した後，凍結乾燥した．

菌した菌体を OD600nm が1.0になるように900ml の BMMY培地（２% ペプトン，１% 乾燥酵母エキス，100mM リ

５．アミノ酸組成分析および N 末端アミノ酸配列分析−5

ン 酸 カ リ ウ ム pH6.0，1.34%YNB，4×10 % ビ オ チ ン，

試料0.1mg を小試験管に入れ，500μl の0.05％β−メ

１% メタノール）に懸濁し，30℃で120時間培養して変ルカプトエタノールを含む６M 定沸点無鉄塩酸を加え，異体 Y169F を分泌発現させた．なお培養中は，24時間

減圧下で封管後，110℃で24時間加水分解した．加水分

毎にメタノールを終濃度１% になるように培地中に添

解物は減圧乾固した後，200μl の0.02M 塩酸に溶解し，加した．

L −8500A 型アミノ酸分析計（日立製作所製）を用いて培地中に発現した変異体 Y169F は , CM −トヨパール
カラムクロマトグラフィーで精製した．培養液を遠心分析した．N 末端アミノ酸配列分析は，自動シークエン
サー PPSQ21（島津製）を用いて行った．

分 離（2700× gmax，20分， ４ ℃） し， 培 養 上 精 と した．培養上精は蒸留水で4倍希釈し，0.03M リン酸緩衝

６．円偏光二色性（CD）スペクトルの測定

液（pH7.0）で平衡化した CM −トヨパールカラム（４×CD ス ペ ク ト ル は JASCO J −600 Spectropolarimeter

15cm）に供与した．同緩衝液および0.1M NaCl を含む同

（日本分光製）を用いて測定した．0.01 M 酢酸緩衝液

緩衝液で十分に洗浄した後，0.5M NaCl を含む同緩衝液（pH5.0）に0.15mg/ml になるように溶解した試料溶液をでタンパク質を溶出した．活性画分はさらに蒸留水で4光路長0.5mm の円筒型石英セルに入れ，室温にて遠紫倍希釈した後，遠心分離で沈殿を除去し，上清を0.03M

外部の200nm から250nm におけるスペクトルを測定した．

リン酸緩衝液（pH7.0）で平衡化した CM −トヨパール
カラム（１×95cm）に供した．同緩衝液で十分に洗浄

７．キチンコーティングセライトカラムを用いた基質親和性の測定

後，NaCl 濃度を0 M から0.35M まで直線的に上昇させてタンパク質を溶出した．溶出時の流速は20ml/h で行い，キチンコーティングセライトカラムは，Yamada らの溶出液は３ml ずつフラクションコレクターで分取した．

方法にしたがって調製した（35）．試料は約16mg/ml のクロマトグラフィーで得られた画分は紫外吸収法でタン濃度になるように0.01M リン酸緩衝液（pH7.0）で調製し，パク質を測定し，溶菌法で酵素活性を測定した．活性画

キチンコーティングセライトカラムに10μl インジェク

分は蒸留水に透析後，凍結乾燥し，変異体 Y169F の精ションした．タンパク質の溶出は，流速を0.5ml/min とし，製標品とした．なお，Y169F の濃度はアミノ酸組成分

80分間で0.01M リン酸緩衝液（pH7.0）中，NaCl 濃度を析で決定した．

０M から１M まで直線的に上昇させて行い280nm の紫外吸収で検出した．なお，分析中はカラムを氷中につけ，３．SDS −ポリアクリルアミドゲル電気泳動

カラムの温度が０℃になるようにした．

SDS − ポ リ ア ク リ ル ア ミ ド ゲ ル 電 気 泳 動（SDS −PAGE）は Laemmli らの方法にしたがって行った（34）．

８．活性測定ゲ ル 濃 度 は12.5% で 行 っ た． 分 子 マ ー カ ー は Bovine（１）溶菌法serum albumin（BSA）（M.W. 97000），Ovalbumin（M.W.

溶菌活性は MurNAc と GlcNAc の共重合体を細胞壁の45000），OEL Wild type（M.W. 21000），HEL（M.W.

構成成分とする Micrococcus luteus（シグマ製）の菌体粉

14000），を用いた．

末を基質として測定した（36）．すなわち，基質溶液は菌体を0.1M リン酸緩衝液（pH7.0）に懸濁し，540nm に４．微量還元カルボキシメチル化

おける濁度が0.9になるように調製した．反応は室温で0.5mg の Y169F を200μl の ８M 尿 素 と5.23mM EDTA

基質溶液３ml に対し，酵素溶液を10〜100μl 加えて行い，

─9─堀口貴広・川口裕也・河村俊介・荒木朋洋
540nm における濁度の減少勾配から初速度を測定した．

線は（GlcNAc）
1から（GlcNAc）
5までの標準試料を用い，酵素単位は，室温で酵素溶液１ml が１分間に540nm に濃度とピーク面積のプロットから作成した．

おける反応溶液の濁度を0.1減少させる活性の強さを１９．変性剤グアニジン塩酸（GdnHCl）に対する熱力学単位（１unit/ml）とした．

的安定性（２）N −アセチルグルコサミン（GlcNAc）のオリゴマー

GdnHCl に対するリゾチームの安定性は，GdnHCl のに対する活性測定
酵素と基質は，それぞれ0.01M 酢酸緩衝液（pH4.0）

濃度変化に伴うタンパク質の蛍光強度の変化で測定しに溶解した．基質は GlcNAc の５量体（GlcNAc）
5を用いた．試料溶液中，タンパク質濃度は0.015mg/ml, GdnHCl

た．酵素反応は酵素溶液と基質溶液をそれぞれ40℃で５は0.3〜５M になるように0.1M 酢酸緩衝液（pH5.0）で分間プレインキュベーションした後，酵素溶液に基質溶

調 整 し た． タ ン パ ク 質 溶 液0.2ml と GdnHCl 溶 液3.8ml

液を加えることによって開始した．反応溶液中の酵素とを混合，30℃で１時間以上インキュベートした後，F −−4−34500型蛍光分光光度計（日立製作所製）を用いて測定しM に調製した．反応溶液は経時的に取り出し，急冷す

た．蛍光の測定は励起波長280nm，蛍光波長360nm の時

ることで反応を停止し，さらに遠心式の限外ろ過と陽間変化を測定した．測定値は N −アセチルトリプトファ

イオン交換樹脂 Bio − Rex70（Bio − Rad 製）により酵素

ン溶液で補正後，GdnHCl 濃度に対してプロットし , 変を除去した．すなわち，反応溶液200μl を40mg の Bio −性曲線を作成した．変性過程が N（天然）状態と D（変Rex70を重層して−80℃に冷却した限外ろ過フィルター性）状態のみからなる２状態変性と仮定し，タンパク質（Ultrafree − MC；分画分子量10000，ミリポア製）上にとが半分変性する変性曲線の中点の変性剤濃度（Cm）おり，反応を停止した．フィルター上の反応溶液は攪拌

よび 変性剤非存在下での変性の自由エネルギー変化（⊿後，遠心分離（4500× gmax，２℃）を行い，酵素を除GD ）を Pace の方法にしたがって算出した（37）．

（GlcNAc）5溶液の濃度はそれぞれ１×10

M，１×10H2 O

去した．次に洗浄のため，樹脂に高純度蒸留水90μl を加えて攪拌後，遠心分離し，この操作を２回繰り返し

結果および考察た．得られた濾液は凍結乾燥を行った．凍結乾燥物は冷却した高純度蒸留水50μl に溶解し，10μl を TSK − GEL

１．変異体の発現と N 末端アミノ酸配列分析

G − Oligo − PW カラム（東ソー製）を２本直列に装着し変異体 Y169F は，培養液を遠心分離して菌体を除去た HPLC に供した．溶出は，高純度蒸留水を用い，室温，した後，陽イオン交換樹脂である CM −トヨパールを

流速0.3ml/min で行った．GlcNAc のオリゴマーは220nm用いた２段階のカラムクロマトグラフィーで精製したの紫外吸収で検出した．反応生成物の各オリゴマーの濃（Fig. ２）
．その結果，Fig. ２B に示すように，溶菌活性度はピーク面積を測定し，標準曲線から求めた．標準曲を伴う単一なピークが得られ，SDS − PAGE で均一性をFig. 2. Purication of mutant Y169F by cation exchange chromatographies.
A：The culture supernatant was applied to a column（4×15cm）of CM-Toyopearl equilibrated with 0.03M phosphate buffer, pH7.0. The
chromatogram shows elution prole with 0.03M phosphate buffer containing 0.5M NaCl after washing the column with 0.03M phosphate buffer
containing 0.1M NaCl.
B：The fractions（22-36）exhibiting the lytic activity were further puried on CM-Toyopearl column（1×95cm）in 0.03 M phosphate buffer,
pH7.0. The chromatogram shows elution prole in 0.03M phosphate buffer with a liner gradient between 0 and 0.35M NaCl. The active fractions
were pooled as indicated by the horizontal bars. The inserts show SDS-PAGE analyses of the fractions indicated.

─ 10 ─

グース型リゾチームの分子内コアに位置する Tyr169を Phe に置換した変異体の解析確認した．以上の精製過程における変異体 Y169F の収条件下では3.9であり，非還元条件下では Cm − Cys は検量は，培地900ml あたり59mg であった．次に，シグナ

出されなかった（data not shown）．したがって，変異体

ル配列の切断部位を調べるため，精製標品の N 末端ア

Y169F は野生型 OEL と同様に２本のジスルフィド結合

ミノ酸配列を自動シークエンサーで分析した．その結果，が形成されていると考えられた．また，変異体 Y169F

精製物の N 末端配列は Ser − Arg − Thr − Gly −であり，予では野生型 OEL と比較して Tyr が１つ減少し，Phe が測された N 末端配列と一致した．このことから，分泌１つ増加していた．

発現のために必要なα−ファクターシグナル配列は正確にプロセシングされていることが確認できた．

３．CD スペクトル２．アミノ酸組成分析

くフォールディングしたかを調べるために，タンパク分泌発現した変異体 Y169F がタンパク質合成後正し
OEL は２本のジスルフィド結合（Cys4− Cys60および質の主鎖構造の情報が得られる遠紫外部領域（200−

Cys18− Cys29）を有することから，まず精製した変異体

250nm）の CD スペクトルを測定した．その結果，変異

Y169F を還元剤存在下と非存在下で Cm 化し，全アミノ

体 Y169F の CD スペクトルは，野生型 OEL とほとんど

酸組成分析を行った．その結果，Cm − Cys の数は還元同一の CD スペクトルを示した（Fig. ３）．したがって，Fig. 4. HPLC of wild-type OEL and mutant Y169F on a chitin-coatedcelite column（0.75×7.5cm）. BSA was used as a control
Fig. 3. CD spectra of wild-type OEL and mutant Y169F in the
far-ultraviolet region.

変異体 Y169F は野生型 OEL と同等の主鎖構造を持つこを確立した（30）．そこで変異体 Y169F の基質親和性は，とが示された．また , 変異体 Y169F は正しい２本のジス

Glu73変異体と同様にキチンコーティングセライトカラ

ルフィド結合が形成されていることが明らかとなった .

ム対する結合力で評価した（Fig. ４）．その結果，コントロールとして用いた BSA に対して変異体 Y169F の４．基質親和性

リテンションタイムは50分であり，野生型 OEL の溶出

OEL は，活性の解析から GEL と同様に６個の基質結時間（48分）を1としたときの変異体の相対的結合力は合部位（B − G 部位）が存在すると推定されている（29）．

1.07であった．GEL は OEL とのアミノ酸配列の相同性

我々は先に，OEL の触媒基である Glu73に関する変異体が83% であり，（GlcNAc）3との複合体の X 線結晶構造でを作製し，それらの基質結合部位の全体的な基質親和性

は，Tyr169の側鎖が B − D 部位に結合した（GlcNAc）
3とを高分子基質であるキチンに対する結合力で評価する系の結合に関与していないと報告されている（24）．した─ 11 ─

堀口貴広・川口裕也・河村俊介・荒木朋洋
がって OEL は GEL と同様に Tyr169の Phe への置換が Bなかった . 変異体 Y169F の CD スペクトルやキチンコー− G 部位全体の基質親和性にほとんど影響しないと考えティングカラムへの結合力は野生型 OEL とほぼ同じでられた．

あることから，Tyr169の Phe への置換は OEL の触媒能自体を低下させたと考えられた．

５．酵素活性変 異 体 Y169F の 活 性 は， 低 分 子 基 質 で あ る

６．GdnHCl に対する安定性（GlcNAc）
5を用いて反応生成物の経時的な変化で検討し我々は先に，野生型 OEL の変性剤である GdnHCl にた．Fig. ５に示すように，野生型 OEL は基質５量体を対する変性過程が可逆的かつ２状態変性であることを報

約４時間で完全に分解し，反応時間とともに３量体と告した（30），そこで，変異体 Y169F の GdnHCl に対す２量体の増加と１量体と４量体のわずかな増加が検出る構造安定性を熱力学的に評価し，野生型 OEL と比較された．一方，変異体 Y169F では野生型 OEL と同様のした．得られた変性曲線を Fig. ６に，変性曲線から計

反応生成物のパターンを示したが , 反応速度が極端に遅算した熱力学的諸量を Table １に示した．その結果，野くなり48時間の反応でも基質５量体は完全には分解され

生型 OEL の変性の中点濃度（Cm）が2.21M であるのにFig. 6. GdnHCl-induced unfolding curves of wild-type OEL andmutant Y169F obtained by uorescence measurements.
Fig. 5. Time course plots of（GlcNAc）
5 degradation by wildtype OEL and mutant Y169F. Numerals in the gures are thepolymerization degree of the reaction product species.
（GlcNAc）1,（GlcNAc）2,（GlcNAc）3,（GlcNAc）4 , and（GlcNAc）5 are indicated as ○ , □ , ▲ , △ , and ● ,respectively.

Table 1. Parameters characterizing the GdnHCl denaturation at pH 5.0 and 30℃
∇∇

H2O

H2O

∇

∇

m
（kcal/mol・M）

Cm
（M）

Cm
（M）

GD
（kcal/mol）

GD（kcal/mol）Wild type

5.48

2.21

−

12.11

−

Y169F

5.56

2.05

−0.16

11.38

−0.73

∇

The m value is a measure of the dependence of

GD on GdnHCl concentration.

∇

対し , 変異体 Y169F の Cm は2.05M（ Cm= −0.16M）で解析を行い，１本の水素結合の安定性への寄与が0.5〜

あった．また，野生型 OEL と変異体 Y169F の変性剤非1.5kcal/mol であることを報告した（38）．今回測定した∇∇変異体 Y169F の GdnHCl に対する安定性（−0.73 kcal/

存 在 下 で の 変 性 の 自 由 エ ネ ル ギ ー 変 化 の 差（
H2O

GD ）は−0.73kcal/mol であり，変異体 Y169F の安定性mol）の低下は，Fersht らの結果とよく一致することから，

は野生型 OEL と比較して大きな変化は見られなかった．

Y169F でみられた安定性の低下は Glu73− Tyr169間の水Fersht らは，チロシン tRNA 合成酵素を用いた安定性の素結合の欠失に起因すると考えられた．

─ 12 ─

グース型リゾチームの分子内コアに位置する Tyr169を Phe に置換した変異体の解析
Natl. Acad. Sci. U. S. A. 71, 4178−4182

以上の結果より，Tyr169の Phe への置換は OEL の触媒活性を大きく低下させることが明らかとなった . 変異

７）Simpson, R. J., and Morgan, F. J.（1983）Biochim.
Biophys. Acta 744, 349−351

体 Y169F は，野生型 OEL と比較して基質結合部位全体の基質親和性に大きな変化がなかったことから，Glu73−８）Gr㶤tter, M. G., Weaver, L. H., and Matthews, B. W.
（1983）Nature 303, 828−831

Tyr169間の水素結合の欠失によって触媒基である Glu73の側鎖の配向や Glu73の側鎖のカルボキシル基の脱プロ９）Isaacs, N. W., Machin, K. J., and Masakuni, M.（1985）

トン化の効率が変化し，結果として変異体の触媒活性Aust. J. Biol. Sci. 38, 13−22が低下したのではないかと考えられた．また，Tyr169は10）Blake, C. C. F., Johnson, L. N., Mair, G. A., North, A. C.

Ile69，Ile70，Leu93，Met94，Gln95（Cβ，Cγ），Tyr147とT., Phillips, D. C., and Sarma, V. R.（1967）Proc. Roy.

ともに，グース型リゾチームの触媒基である Glu73周辺

Soc. Ser. B 167, 378−388の疎水的環境を構成していることから，今後は Tyr169

11）Strynadka, N. C. J., and James, M. N. G.（1991）J.

を Ala，Leu，Trp 等 に 置 換 し た 変 異 体 の 解 析 も 行 い，
Tyr169の側鎖の芳香環の役割も明らかにする必要がある

Mol. Biol. 220, 401−42412）Kravchenko, N. A.（1967）Proc. Roy. Soc. Ser. B 167,429−430と思われる．

13）Rupley, J. A.（1967）Proc. Roy. Soc. Ser. B 167, 416−

要

428

約

14）Sharon, N.（1967）Proc. Roy. Soc. Ser. B 167, 402−415

グース型リゾチームの構造と機能を詳細に解析する

15）Simpson, R. J., Begg, G. S., Dorow, D. S., and Morgan,一環として，ダチョウ卵白由来グース型リゾチーム（OEL）の触媒基 Glu73と水素結合を形成する Tyr169を

F. J.（1980）Biochemistry 19, 1814−1819
16）Schoentgen, F., Jollès, J., and Jollès, P.（1982）Eur. J.

Phe に置換した変異体を作製した．変異体 Y169F の主Biochem. 123, 489−497鎖構造と基質親和性は，野生型 OEL と比較してほとん

17）Thammasirirak, S., Torikata, T., Takami, K., Murata, K.,

ど変化は見られなかった．しかしながら，変異体 Y169F

and Araki, T.（2002）Biosci. Biotechnol. Biochem. 66,の低分子基質である（GlcNAc）
5に対する触媒活性は大147−156

きく減少した．また，変異体 Y169F のグアニジン塩酸

18）Pooart, J., Torikata, T., and Araki, T.（2004）Biosci.

（GdnHCl）に対する構造安定性は野生型 OEL と比較して0.73kcal/mol 減少した . これらの結果より，Tyr169は，

Biotechnol. Biochem. 68, 159−169
19）Nakano, T., and Graf, T.（1991）Biochim. Biophys.

その側鎖の水酸基を介した Glu73との水素結合によって触媒基の側鎖の配向を規定し，グース型リゾチームの活Acta 1090, 273−276
20）Hikima, J., Minagawa, S., Hirono, I., and Aoki, T.

性発現に重要な役割をはたすことが強く示唆された．

（2001）Biochim. Biophys. Acta 1520, 35−4421）Yin, S., Weng, S., Deng, W., and He, J.（2002）
Aquaculture Asia 3, 21−22

引用文献22）Kyomuhendo, P., Myrnes, B., and Nilsen, I. W.（2007）

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３）Jollès, J., Jauregui-Adell, J., Bernier, I., and Jollès,

W.（1995）J. Mol. Biol. 245, 54−68
25）Karlsen, S., Hough, E., Rao, Z. H., and Isaacs, N.

P.（1963）Biochim. Biophys. Acta 78, 668−689
４）Blake, C. C. F., Koenig, D. F., Mair, G. A., North, A. C.

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27）Thammasirirak, S., Torikata, T., Takami, K., Murata, K.,

Chem. 245, 3479−3484６）Matthews, B. W., and Remington, S. J.（1974）Proc.

─ 13 ─

and Araki, T.（2001）Biosci. Biotechnol. Biochem. 65,

堀口貴広・川口裕也・河村俊介・荒木朋洋
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404−40728）Pooart, J., Torikata, T., and Araki, T.（2005）Biosci.
Biotechnol. Biochem. 69, 103−11234）Laemmli, U. K.（1970）Nature 227, 680−68529）Kawamura, S., Fukamizo, T., Araki, T., and Torikata,35）Yamada, H., and Imoto, T.（1981）Carbohydr. Res. 92,

T.（2003）J. Biolchem. 133, 123−131

160−16230）Kawamura, S., Ohno, K., Ohkuma, M., Chijiiwa, Y., and36）Salton, M. R. J., 1952, Nature 170, 746−74737）Pace, C. N.（1990）Trends Biotechnol. 8, 93−98

Torikata, T.（2006）J. Biochem. 140, 75−8531）Kawamura, S., Ohkuma, M., Chijiiwa, Y., Kohno, D.,38）Fersht, A. R., Shi, J. P., Knill-Jones, J., Lowe, D. M.,

Nakagawa, H., Hirakawa, H., Kuhara, S., and Torikata,

Wilkinson, A. J., Blow, D. M., Brick, P., Carter, P., Waye,

T.（2008）FEBS J. 275, 2818−2830

M. M., and Winter, G.（1985）Nature 314, 235−238

32）Rupley, J. A.（1964）Biochim. Biophys. Acta. 83, 245−
255

─ 14 ─

東海大農紀要 30：15−20（2011）

オオルリシジミの分散と死亡要因

オオルリシジミの分散性と死亡要因における卵寄生蜂の評価＊

村田浩平 ・岩田眞木郎＊＊

Estimation of adult dispersal and egg parasitism inShjimiaeoides divinus asonis（Matsumura）

Kouhei MURATA and Makio IWATA（Received 4 October 2010；accepted 18 November 2010）

Shijimiaeoides divinus asonis（Matsumura, 1929）（Lycaenidae, Lepidoptera）is one of the endangered butterflies
occurring in Honshu and Kyushu. Evaluation of Trichogramma sp., egg parasitoid of this butterfly for death factors was
surveyed in the grasslands of Mt. Aso, Kyushu. The lycaenid population size was estimated by capture-recapture method. The
results obtained are summarized as follows:（1）On the southern face of Mt. Aso, the peak density of parasitized eggs
occurred earlier than in other area.（2）The number of eggs parasitized by Trichogramma sp. increased in the later
reproductive period of this buttery.（3）Parasitism by Trichogramma sp. is one of important mortality factor in the small
population of this butterfly.（4）There was evidence suggesting that the cannibalism in the larval stage would be one ofimportant death factors when their density was increased on food plants（Sophora avescens Ait.）.（5）The S. divinus asonis
adults may disperse within a limited area because the adults tended to remain within their emergence sites where they emerged
and dispersal of ying over Mt. Aso was not found. These results suggested that, in order to preserve the population of S.
divinus asonis, more monitoring data are needed on the parasitism rate by Trichogramma sp. and the frequency of cannibalism
among larvae.

緒とでその寄生率を低い水準で維持できることも明らかに

言

した（6）
．長野県安曇野市における本種の本州亜種であオオルリシジミ Shjimiaeoides divinus asonis（Matsumura,

る S. divinus barine の死亡要因の調査では，タマゴコバ

1929）は，本州と九州に生息地が限られ，絶滅の危機に

チ科のメアカタマゴバチ Trichogramma chilonis の高い寄瀕している種として1991年に環境省により編纂された生率が同地域においてレッドデータブックにおいて絶滅危惧Ⅰ類に分類されてているという報告がある（7）．

本種の定着に大きな障害になっいる（1）．著者らはこれまでに本種の飛翔行動や訪花行

本研究は，全国的にも貴重な生息地となった阿蘇地域

動などの生態や分布を明らかにするとともに，本種の保において，本種の卵寄生蜂の野外における生態を明らか

護にとって野焼きや蜜源植物の保護などの環境管理が重にするとともに，同地域内の生息地ごとの寄生率の違い

要であることを明らかにしてきた（2−5）．また，本種とオオルリシジミの生息個体数ならびに分散性との関係の個体数を変動させている重要な要因の１つとして，タを明らかにするための資料を得ることを目的として実施

マゴコバチ科の１種である卵寄生蜂 Trichogramma sp. にしたものである．

よる寄生があること，そして野焼き，放牧を継続するこ＊東海大学農学部応用植物科学科＊＊東海大学阿蘇教養教育センター
─ 15 ─

村田浩平・岩田眞木郎
×15cm）には，捕虫網を加工したものを用いた．

材料および方法
被寄生卵および未寄生卵数の推移

本種成虫の分散性の評価と生息個体数の推定

調査は，2008，2009年の２年間にわたり4月中旬から6

１回目の標識再捕調査は，2008年5月14日，15日，16

月下旬にかけて10日以上間隔が空かないよう2008年は14日，17日 の4日 間， ２ 回 目 の 標 識 再 捕 調 査 は ５ 月26日，

回，2009年は15回実施した．調査地は，熊本県阿蘇市の27日，28日の３日間実施した．調査は，本種の羽化時間

生息地（a），南阿蘇村の生息地（b），高森町の2生息地帯である午前５:30から午前７:30に生息地（d）において（c）（d）の合計4ヶ所とした．なお，各調査地間の直線，

成虫を捕獲し，グンゼ産業製水溶性合成樹脂塗料で後翅距離は，調査地（a）−（b），調査地（b）−（c），調査地

裏面に標識後放飼し，翌日の同じ時間帯に標識個体と未（d）−（a）は，それぞれ内輪山を挟んで約6km，調査地

標識個体を記録し，捕獲した個体には，前日とは異なる（c）−（d）は内輪山を挟んで約３km であった．調査は，色の水溶性合成樹脂塗料で標識し再び放飼することによ（3）と同じ500m のルートセンサスのルートに沿った任り実施した．なお，調査地（a），（b），（c）においてルー

意の25ヶ所の調査区について，各区とも任意のクララ２

トセンサス法による調査時に標識個体の有無を確認した．

株を抽出し，合計50株の花穂に産下されたオオルリシジ

本種の密度については，Petersen 法（8）により算出した．

ミの卵について被寄生卵数と未寄生卵数を記録した．寄調査日の天候は，全ての調査日で晴れもしくは曇りで生の有無は，ふ化前の卵については，未寄生卵が産卵直あった．

後の薄い緑色から白色で安定するのに対して，被寄生卵が灰白色になることから卵の色で判定するとともに，ふ結化後の卵については，オオルリシジミがふ化した場合，脱出孔は卵上部に開口するのに対して寄生蜂では，脱出果

被寄生卵および未寄生卵数の推移

孔が卵側面に開口することからそれぞれ判断した．なお，

未寄生卵数のピークは，調査地（a）では2008年が５

近 縁 種 の ル リ シ ジ ミ Celastrina argiolus labonides

月20日，2009年が５月16日，調査地（b）では，2009年（Linnaeus, 1758）の卵の表面の網目模様は，ルーペを用には未寄生卵数，被寄生卵数ともに少ないものの，両調いて比較するとオオルリシジミに比べて入り組んでおり

査年とも５月15日前後であった．調査地（c），（d）では，

コントラストが強く見えるため，識別には，ル−ペを用2008年が５月16日，2009年が５月20日であり，調査地

いて卵の表面構造を比較することにより実施した．

（a），（c），（d）の未寄生卵数のピークは，ほぼ同時期であったが，調査地（b）の未寄生卵のピークは約５日早い傾向が見られた（Fig. 1）．

本種成虫の個体数の推移
調査は，2009年，2010年の２年間にわたり（3）と同

一方，ピーク時の被寄生卵数は，両年とも調査地（d）

じ10分間，500m のルート上で発見した本種成虫の個体

が 最 も 多 か っ た も の の，2008年 の 調 査 地（a），（d），

数を記録するルートセンサス法を用いて毎回，10:00か

2009年の調査地（a）,（c）,（d）では未寄生卵数が少な

ら13:00までの間に実施した．調査は，晴天の日を選びくなるオオルリシジミの産卵期間の後期（2008年は6月

2009年は４月中旬から６月下旬までに14回，2010年は15上旬以降，2009年は５月下旬以降）に被寄生卵数が未寄回実施した．調査地は，前述の生息地（a）〜（d）の合計

生卵数を上回る現象が見られた（Fig. 1）．また，両調査

４ヶ所とした．

年とも全ての調査地で未寄生卵数が増加した後，被寄生卵数が増加する傾向が認められた（Fig. 1）．両年の気温，

野外における本種のふ化率と終齢に達する幼虫数に関す降水量を比較すると，2008年は2009年に比べて５月下旬

る実験以降の気温が高く，６月中旬以降の降水量が多かったも

2010年5月11日から６月22日にかけて，阿蘇郡高森町の本種の生息地（c）,（d）において本種がふ化後，幼のの，この両年の気象要因の違いと寄生蜂の発生消長との関係は明瞭ではなかった．

虫の個体数を確認し，幼虫期間を通してネットをクララの花穂ごと覆った A 区，花穂を何も覆わなかった B 区，

本種成虫の個体数の推移

本種が産卵するのを確認後，卵期間のみクララの花穂をFig. 2は，本種成虫の個体数の推移を示しており，ピー

ネットで覆いその後，ネットをはずした C 区の３区をク時の個体数は調査地（d），（a），（b）の順に多く，調それぞれ10個設定した．なお，花穂を覆ったネット（30

査地（c）では，両年とも本種成虫は確認できなかった．

─ 16 ─

オオルリシジミの分散と死亡要因

Fig. 1 Seasonal changes of mean temperature, rainfall and egg of Shijimiaeoides divinus asonis. a- d: Study sites in thegrasslands of Mt. Aso

Fig. 2 Seasonal changes of the number of adults of Shijimiaeoides divinus asonis. a, b, d: Study sites of this buttery in
the grasslands of Mt. Aso

また，両調査年とも各調査地ごとの発生消長は類似して野外における本種のふ化率と終齢に達する幼虫数

おり，調査地（a），（d）は，５月10日前後が発生のピー

C 区では，卵の自然死は見られず，花穂をネットでク，調査地（b）は，５月６日前後が発生のピークで覆っているため卵寄生蜂による寄生も認められなかった．

あった．

A,B 区では，ほぼ同じ程度（15％前後）の卵寄生蜂によ─ 17 ─

村田浩平・岩田眞木郎
る寄生と卵の自然死（７% 前後）が見られた（Fig. 3）．

てネットで覆った A 区では，共食いにより終齢に達す

C 区では，ふ化率は100％で，終齢に達した幼虫の数もる幼虫数は，３区の中で最も少なかった（Fig. 4）．

最も多くなる傾向が認められた．一方，幼虫期間を通し

Fig. 3 Percent parasitism and physiological by dead or unfertilized eggsof Shijimiaeoides divinus asonis in a pasturage of Mt. Aso. A: Covered
with net during a larvae stages, B: Non covered with net, C: Covered
with net during an egg stage
Fig. 4 Hatchability and the percentage of larval developed into thefinal instar in Shijimiaeoides divinus asonis in the field. A: Covered
with net during a larvae stage, B: Non covered with net, C: Covered
with net during an egg stage

本種成虫の分散性の評価と生息個体数の推定るため，他の調査地に比較して温暖であったためと考え

Table 1は，本種の標識再捕個体数を示している．１回られる．このことにより，生息地の地形が本種の産卵行

目の標識再捕調査における初回の回収日である５月15日

動に影響している可能性が示唆された．また，2008年のは，前日に標識後，放飼した標識個体150個体のうち20調査地（a），（d），2009年の調査地（a）,（c）,（d）で個体，２回目の回収日である５月16日には，５月14日のは未寄生卵数が少なくなるオオルリシジミの産卵期間の標識個体4個体，５月15日の標識個体３個体の標識個体

後期に被寄生卵数が未寄生卵数を上回る現象が認められ合計７個体をそれぞれ捕獲することができた．３回目のたことから，タマゴコバチ科の１種 Trichogramma sp. は，回収日である５月17日には，標識個体はまったく得られオオルリシジミの産卵期間後期の卵に対して，前期に産なかった．２回目の標識再捕調査は，５月26日に84個体下された卵に比較してより高い死亡率を与えていると考標識し，１回目の回収日である５月27日には，５月14日

えられる．

の標識個体２個体が得られ，２回目の回収日である５月28日には，５月27日の標識個体6個体が得られた．なお，

本種の死亡要因における卵寄生蜂の評価

標識個体が他の調査地で得られることはなかった．これ

本種の天敵としては，阿蘇地域から６科７種のクモとらの結果を基に本種の生息個体数を Petersen 法により推３目３科３種の昆虫，１種の昆虫寄生菌が知られている

定すると，５月15日の調査地（d）における本種の推定（６，９）．また，クモと本種の個体数の推移を比較し，生息数は，1,320個体，５月16日は，4,853個体，５月27

クモは本種の個体群密度に影響を及ぼすほどの捕食圧を日は，1,806個体，５月28日は，659個体となった．

及ぼしている可能性は低いことを指摘している（9）．さらに，タマゴコバチ科の１種 Trichogramma sp. について

考（5）は，オオルリシジミの個体数を減少させる要因の１

察つになっていることを指摘した．本研究からも，幼虫期

卵寄生蜂の寄生率の推移

間を通してネットをクララの花穂ごと覆った A 区，花未寄生卵数の推移は，調査地（a），（c），（d）ではほ穂を何も覆わなかった B 区でタマゴコバチ科の１種にぼ同時期であったが，調査地（b）では，他の３調査地

よる寄生が15％前後あり，卵期間のみクララの花穂をに比べて約５日，未寄生卵数のピークが早かった（Fig.

ネットで覆いその後，ネットをはずした C 区では，寄1）．これは，調査地（b）が南向きの斜面に位置してい生が認められず，終齢に達した幼虫の数も最も多くなる─ 18 ─

オオルリシジミの分散と死亡要因傾向が見られたことは，タマゴコバチ科の1種がオオル

は，標識した調査地から見られなくなることから，周辺

リシジミの卵の死亡要因として重要であることを示唆し地へ分散すると考えられるが，他の調査地で標識個体がている．しかしながら，Fig. 1の調査地（d）のように，得られていないことから，標高1,000m 以上の内輪山を本種の未寄生卵数が多かった2008年，少なかった2009年

越えて移動もしくは分散することは，通常の気象条件でともにその翌年は，Fig. 2に示すように成虫の個体数がは起こりにくいのではないだろうか．また，各調査地間多くなったことから，本種の未寄生卵数は翌年の成虫のの距離は３〜６km であり，阿蘇山のように地形が複雑

発生数に対する大きな影響は無いと考えられる．しかし，な地域では一定の方向性をもって２〜３日でこの距離を調査地（a）,（b）,（c）など本種の生息数が少ない生息移動もしくは分散することも通常は起こりにくいのかも

地では，未寄生卵数が少ないため，卵寄生蜂による寄生しれない．

は，次年度の本種の発生に影響するのではないだろうか．

本種の生息個体数は，ほぼ本種の個体数のピーク時にこのことから，この卵寄生蜂のオオルシシジミ個体群にあたる５月16日においても4,853個体であり，生息数は対する制御作用は，密度逆依存的であるのではないかと多いとはいえないことが推定されたことから，不法採集推察される．

などの採集圧がかかった場合，本種個体群に大きなダ一方，（10）は，オオルリシジミの幼虫を飼育するとメージを及ぼす可能性があろう．

共食いが激しいと述べているが，本調査においても幼虫

これらのことから，本種のピークの個体数は，生息地

期間を通してネットで覆った A 区では，餌資源としてごとに差があるが，本種の成虫は，羽化した場所付近にのクララの花芽をめぐる競争のためか共食いにより終齢留まる傾向が見られた．また，阿蘇内輪山を超える分散に達する幼虫数が３区の中で最も少ないことが確認されは確認できなかったことから，本種を保護していく上でた（Fig. 4）．（11）は，長野県において本種の蛹放飼に生息数が少ない生息地の保護は重要である．特に，オオよる定着化を成功させているが，幼虫を放飼した場合はルリシジミの産卵期間後期に産下された卵に高率で寄生定着が難しいようであり，本研究結果からも幼虫の共食し，本種の産卵期間後期の卵に対して高い死亡率を与えいの影響も発生数減少の要因の１つとして考えられる．

ているタマゴコバチ科の１種は，オオルリシジミの生息数が少ない場合，天敵としてその発生数に大きな影響を本種の分散能力の評価と生息個体数の推定

及ぼしている可能性が示唆されたことから，今後は，本種の１回目の標識再捕法における再捕率は，１日後Trichogramma sp. の寄生率の推移をモニタリングするこ

では，11.4％であったが，３日目には再捕率０％となっとが重要と思われる．また，本種の生息数が多い生息地

た．また，その後，２週間ほどして標識個体がえられてでは，クララ上での幼虫の共食いの頻度に関する詳細ないること（Table 1）などから，本種は，生息地に留まる調査が必要であると考えている．

傾向があると考えられる．一方で，本種は，３日目以降
Table 1. Release and capture record of Shijimiaeoides divinus asonis in 2008.
Date (released)

2008, 14, May

Date (recaptured)
14, May

15, May

16, May

17, May

26, May

27, May

28, May

-

20

4

0

-

2

0

3

0

2

0

0

0

0

0

0

15, May
16, May
17, May
2008, 27, May

628, May029, MayNo. of individuals captured

150

176

193

166

No. of individuals recaptured

-

20

7

0

No. of non-marked

150

156

186

166

No. of individuals released

150

176

193

166

─ 19 ─

84

88

46

4

6

84

84

40

84

88

46

村田浩平・岩田眞木郎

要るとともに，有意義な御助言を賜った恩師野原啓吾博士

約に対して深謝の意を表する．また，タマゴコバチ科の同オオルリシジミは，本州と九州に生息地が限られ，絶定 を 賜 っ た ウ ク ラ イ ナ National Ukrainian Academy of

滅の危機に瀕している種として環境省により絶滅危惧Ⅰ

Sciences の Dr. Victor Fursov および同定依頼の便宜をお類に分類されているチョウである．本研究では，本種のはかり戴いた農業環境技術研究所の安田耕司博士に対し貴重な生息地となった阿蘇地域においてその卵寄生蜂でても深く感謝する．阿蘇町の生息地における降水量，気あるタマゴコバチ科の１種 Trichogramma sp. の生息地ご温については，生息地にもっとも近い気象庁阿蘇乙姫測との寄生率の違いとオオルリシジミの生息数ならびに分候所の観測記録を利用させていただいた．本研究は，東散性との関係を明らかにするための資料を得ることを目

海大学総合研究機構の助成によりまとめることができた．

的として実施し次のような結果を得た．なお，本種の個ここに深く感謝の意を表する．

体数推定には，標識再捕法を用いた．
（1）南向きの斜面の本種の生息地における卵寄生蜂の寄生のピークは，他

引用文献の方位の斜面の生息地よりも早かった．
（2）本種の卵死
亡率は産卵期間後期に高くなった．
（3）Trichogramma１）環境省，1991，環境省，東京，271.

sp. は，オオルリシジミの個体数が多い生息地では翌年

２）村田浩平・野原啓吾，1993，日本産蝶類の衰亡と保護 第2集．やどりが（特別号）：151−159.

の発生に大きな影響を及ぼさないが，オオルリシジミの生息数が少ない生息地では重要な天敵の１つであること

３） 村 田 浩 平・ 野 原 啓 吾・ 阿 部 正 喜，1998， 昆 蟲，1（1）: 21-33.

が示唆された．
（4）本種の幼虫期における共食いは，ク
ララの花穂上における本種幼虫の密度が高くなった場合，

４）村田浩平・野原啓吾，2001，蝶と蛾，52（4）: 265−276．

本種の重要な死亡要因の１つである可能性が示唆された．
（5）本種の成虫は，羽化した場所付近に留まる傾向が見

５）Kouhei Murata, Chinobu Okamoto, Asana Matsuura andられ，阿蘇内輪山を越える分散は確認できなかった．こ

Makio Iwata 2008，
Trans. Lipid. Soc. Japan, 59（3）:251

れらのことから，本種個体群を維持していくためには，−259.

Trichogramma sp. の寄生率の推移をモニタリングするこ

６）村田浩平・野原啓吾，2003，昆蟲，6（2）：89−99.

とならびに本種の共食いの頻度に関する詳細な調査が必

７）中村寛志・平林純之介・江田慧子，2009，日本産蝶類の衰亡と保護要であることが示唆された．

第6集：33−38.

８）伊藤嘉昭，1992，蒼樹書房，東京，416−422．

謝９）村田浩平・野原啓吾，2005，昆蟲，8（3）：79−90.

辞10）鳩山邦夫，1996，講談社，東京，263−288.

調査を遂行するにあたり御協力をいただいた熊本県，

11）浜

阿蘇市，南阿蘇村，高森町の皆様に対し感謝の意を表す

─ 20 ─

栄一，2007，昆虫と自然 , 42（7），27−31.

東海大農紀要 30：21−28（2011）

メロンがんしゅ病菌ファージの検出と性質

メロンがんしゅ病菌（Streptomyces sp.）に対するアクチノファージの検出とその性質
藤木圭太・吉田政博

Detection and Properties of Actinophages Parasitic to Streptomyces sp. Causing Root Tumor of Melon.

Keita FUJIKI and Masahiro YOSHIDA（Received 4 October 2010；accepted 6 December 2010）

An attempt was made to isolate actinophage（phage, hereafter）that infects the Streptomyces sp. causing root tumor of
melon in order to conrm its presence and study its characteristics in host selectivity and adsorption. An enrichment culture
method was used to isolate 21 strains of the phage divided into four types by the shape of plaque from three soil samples withthe viable pathogen. These phage isolates showed no clear differentiation in parasitism to different strains of the pathogen. The
phage isolates also infected several species of genus Streptomyces that is the pathogen of potato scab, exhibiting low host
selectivity. Adsorption characteristics were also studied with six isolates of the phage that were isolated from different sourcesand different in plaque type. The phage strains were tolerant to chloroform above 1% and to heat at 50°
C for 10 minutes.
Adsorption also varied by temperature, with the optimum at 28°
C. The spore of the pathogen was a better adsorbing host forthe phage isolates than the mycelium of the pathogen; the former showed about 100 times as high a titer as the latter. Cations2+

added to the culture medium affected adsorption. Although the optimal concentration of Mg was 0.5 mM for the adsorption of2+

all the phage isolates, the optimal concentration of Ca varied among the phage isolates. A one-step growth experiment
revealed that the incubation period of the phage isolates was 170-200 minutes and the subsequent multiplication cycle was
150-210 minutes. The phage isolates showed no major differences in the characteristics and were judged to be limited indiversity. These results suggest that the phage is low in the availability of specic detection for the Streptomyces sp. causing
root tumor of melon, but is expected to be used as biological control agents for plant pathogenic Streptomyces spp.

緒もその存在が報告されており（９），病気の生態や病原言菌検出への利用性が検討されている（10−14）．また，バクテリオファージ（以下，ファージ）は，細菌に感

McKenna et al.（15）は，ジャガイモそうか病菌を用い染するウイルスとして知られており，その感染性は極めて分離した polyvalent ファージを利用した種イモ消毒にて選択性が高く，特定の細菌を宿主として増殖，溶菌をよる生物防除について報告している．

行う特徴を持っている（１）．そのため，これらの種特一方，ウリ類に発生する放線菌病としてメロンがん

異性を利用して，細菌病害の生態研究や防除を目的とししゅ病が報告されている（16，17）．本病は1982年に熊． このうち，放線菌にた研究が行われている（２−８）

本県で初めて発生が確認され（16），その後，我が国の寄生性を示すファージは特にアクチノファージ（以下，メロン産地のみならずコスタリカ共和国でも発生していファージ）と呼称されている．代表的な植物病原放線菌

る（18）．本病の症状は根部にこぶ組織を形成し，根こであるジャガイモそうか病菌（Streptomyces scabies）でぶ線虫病や他の増生病との区別が難しく，また土壌中か
らの病原菌の分離や定量が非常に困難とされている．さ東海大学農学部バイオサイエンス学科

らに，病原菌がメロン以外のウリ科作物へ広く寄生性を─ 21 ─

藤木圭太・吉田政博
有することや（19），連作や圃場の固定化による土壌微株の懸濁液として5℃で保存した．

生物相の単純化などが発生の誘因と考えられていること

２．力価測定から（20），今後の栽培様式の多様化に伴い，さらなる発生の拡大が懸念される．

ファージ液の濃度は力価（plaque forming units / ml，
以下，pfu/ml）で表した．シャーレ中の GAA 培地上でしたがって，本病の防除には，土壌中の病原菌の動態

100μl のファージ希釈液と１ml の指示菌胞子懸濁液（１を把握し，病原放線菌の生態解明が必要とされており，

×10 cfu/ml） お よ び ３ml の SYMA 培 地 と を 混 合 し，発生を予測し，回避するための迅速な土壌診断法と菌の28℃，３日間培養後，形成された溶菌斑数から算出した．

検出法の確立が求められる．その手法の一つとして

３．ファージの宿主選択性

7

ファージの利用が考えられる．しかし，これまでに本病（1）供試ファージ株と供試菌株：ファージ株として，原菌のファージの存在は確認されていない．

本試験で分離した全21株を供試した．がんしゅ病菌の異そこで，本研究では，メロンがんしゅ病菌の検出・定なった菌株に対する寄生性の検定には，当研究室保存の量法，および生物防除資材としてのファージ利用の可能

来歴の異なる22菌株（Table 1）を用いた．Streptomyces

性を検討するために，本菌に対するファージの分離を試属菌に対する検定には，植物病原菌であるジャガイモそみた結果，その存在を確認するとともに，分離ファージ

うか病菌の２種（S. scabies, S. acidiscabies）４菌株，サ株の寄生性と安定性および吸着性に関わる諸性質についツマイモ立枯病菌（S. ipomoeae）２菌株，および非病原て調べたので，その概要を報告する．

菌として，メロンがんしゅ病菌と16S-rRNA の塩基配列で高い相同性を持つ（Yoshida et al. 未発表）２種（S.
indigocolor, S. cyaneus）２菌株，形態的特徴が類似する材料および方法（16）１種（S. paradoxus）１菌株，および一般の放線菌

１．ファージの分離として１種（S. violaceoruber = S. coelicolor A3（2））１菌

分離源には，東海大学農学部植物病理学研究室で保存

株の合計７種10菌株を用いた（Table 2）．
7（ガラス温室内で年２〜３作のメロン栽培を実施して維（2）寄生性の検定：指示菌の胞子懸濁液（１×10 cfu/

持）しているメロンがんしゅ病発生歴がある33地点の土ml）は，前項と同じ方法で調製した．ファージ液は力壌を，メロン（品種：健脚）の栽培試験（60日間）によ

価を１×10 pfu/ml に調整した．試験は Drop Method（25）る発病の有無を確認後供試した．

に準じ，シャーレ中の GAA 培地上に１ml の指示菌の胞

6ファージの宿主となる指示菌のがんしゅ病菌

子懸濁液を含む SYMA 培地を重層後，この培地上に20（Streptomyces sp.）として，
当研究室保存の B −9−1株（17）μl のファージ液を滴下した．28℃，３日間培養後，溶を用い，イースト・スターチ寒天培地（以下，YSA 培地）

菌斑の形成状況を調査した．

7

上に形成された胞子を滅菌水に懸濁して，1.0×10 cfu/
ml の胞子懸濁液（21）を作製した．

溶菌斑による寄生性の程度は，溶菌斑内に指示菌の菌そうが見られない（++），溶菌斑内に一部菌そうが見ら

ファージの分離は，土壌の懸濁液を検出液として直接れる（+），溶菌斑を形成しない（−），で評価した．

分離する Robinson and Corke（22）の方法（以下，常法），

４．ファージの安定性と吸着性における性質

および土壌と指示菌との混合液を予め培養した培養液を（1）供試ファージ株と供試菌株：ファージ株は，異なっ検出液として分離する Dowding（23）の方法（以下，集た分離源と溶菌斑タイプから，大型（１mm 以上）の溶

積培養法）により実施した．両方法とも１g の土壌を用菌斑形成株としてφ21LS −1，φ33LS −1，φ31LR −1，おい，西脇ら（11）の方法を改変し，シャーレ中のグルコー

よび小型（１mm 未満）の溶菌斑形成株としてφ21SS −1，

ス・アスパラギン寒天培地（以下，GAA 培地）上で１

φ33SS −1，φ31SR −1の合計６株を用いた．指示菌はメ

ml の胞子懸濁液と100μl の検出液とを混合し，さらにロンがんしゅ病菌 B −9−1株とし，同様に調製した．

約50 ℃ の ３ml の イ ー ス ト・ 麦 芽 軟 寒 天 培 地（ 以 下，（2）クロロホルム耐性試験：ファージ液（１×10 pfu/

SYMA 培 地 ） を 加 え て 重 層 し て 固 化 さ せ た． 培 地 はml）を1.5 ml のエッペンドルフチューブに分取し，これ28℃，３日間培養後，溶菌斑の形成を確認した．溶菌斑に最終濃度が0，0.5，0.75，1.0%（v/v）となるようにクは形状に基づいて４つのタイプに分類し，純化操作を２ロロホルムを添加して撹拌後，28℃で30分間静置して処回繰り返した．最終的に得られた単溶菌斑を１ml の SM理した．処理後のファージ液は Drop Method（25）によバッファー（24）に浸漬後，宿主菌体を除去するためにる溶菌斑形成の有無を調べ，クロロホルム耐性濃度を調

0.45μm のミリポアフィルターでろ過し，純粋ファージ

査した．また，がんしゅ病菌に対するクロロホルムの殺5

─ 22 ─

メロンがんしゅ病菌ファージの検出と性質
菌効果についても検討した．すなわち，胞子懸濁液を用結いて同様に処理後，YSA 培地に接種して３日間培養し，果

１．ファージの検出

生存の有無を調べた．
4（3）耐熱性試験：ファージ液（1×10 pfu/ml）を試験管に分取し，各種温度に設定したウォーターバス中で10供試土壌の栽培試験の結果，メロンがんしゅ病の発病は４地点の土壌において確認された．

分間加熱処理した．処理後に力価を調べ，無処理（28℃）

ファージの分離の結果，常法では供試したすべての土に対する溶菌斑形成割合（%）を算出した．処理温度は壌で検出できなかった．一方，集積培養法では，33地点

40℃，50℃，55℃，60℃とした．

の土壌中でがんしゅ病の発病が確認された４土壌のうち（4）吸着時温度の試験：力価測定法に準じて，胞子３土壌（土壌番号21，31，33）において，溶菌斑の形成

懸濁液と希釈ファージ液を混合した平板培地を23℃，が認められ，がんしゅ病菌ファージを検出することがで

28℃，33℃，38℃で３日間培養後，出現した溶菌斑数をきた（Fig.1）．

計測した．
（5）指示菌体の違いによる影響試験：指示菌に用いる菌糸体は , イースト・グルコース液体培地で28℃，３
日間振とう培養した菌糸体を遠心集菌し，10倍量（v/w）の滅菌水を加え，テフロンホモジナイザーで磨砕した菌
7

糸懸濁液（約10 cfu/ml）を調製した．胞子体は前述と同様に調製した胞子懸濁液（21）を使用した．
まず，シャーレ中の GAA 培地上に１ml の菌糸懸濁液，
あ る い は 胞 子 懸 濁 液 を SYMA 培 地 で 重 層 し，Drop
Method（25）により溶菌斑形成の有無とその性状を調Fig. 1. Plaques produced by actinophages on pathogenic
Streptomyces sp. B −9−1 causing root tumor of melon.

べた．さらに，菌糸体，あるいは胞子体を指示菌体としてファージ液の力価測定を行い，両指示菌体に対する吸着性の程度を比較した．

形成溶菌斑は，大きさと輪郭において形状が異なるも（6）陽イオンの影響試験：各種濃度の陽イオン添加のが認められた．したがって，それらの特徴から大きさ

GAA 培地を用いて力価の測定を行い，陽イオン濃度とを１mm 以上（Large）と１mm 未満（Small）に分け，

2+2+

吸着性との関係を調べた．陽イオンは Mg と Ca とし，さらにその輪郭を鮮明（Sharp）と粗雑（Rough）に類別

硫酸マグネシウムと硝酸カルシウムをそれぞれ用いて，

し，4タイプ（LS: 大型・鮮明，LR: 大型・粗雑，SS: 小型・培地中の最終濃度が0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5 mM にな

鮮明，SR: 小型・粗雑）の溶菌斑を形成する合計21株のるように添加した．

ファージ株が分離された．なお，ファージ株のφ以下の（7）一段増殖実験：Dowding（23）の方法に準じて行っ

記号を，分離源土壌番号，溶菌斑タイプ，株番号としてた．10 ml の DNB 培地（Difco Nutrient Broth ２g, 蒸留水

表示した．

7

250 ml）に１ml の指示菌の胞子懸濁液（１×10 cfu/ml）

２．宿主選択性を加え，28℃，５時間振とう（120 str/min）した．これ
6

がんしゅ病菌株に対する寄生性検定では，形成溶菌斑に１ml のファージ液（１×10 pfu/ml）を加え撹拌後，中に指示菌の菌そうが認められないものと，認められる

28℃，20分間静置した．静置後，この液から10 ml を分ものが見られた（Table 1）．よって，前者は寄生性が強く，取し，0.45μm のメンブランフィルターユニットでろ過

後者は前者よりも寄生性が弱いと判断した．

した．さらに，フィルター上に10 ml の DNB 培地を注

ファージ株は来歴の異なるがんしゅ病菌株に対して広

いでフィルターを洗浄した．フィルターはユニットからく寄生性を有し，特に CB −系統の菌株に対しては全取りはずし，50 ml の DNB 培地中で撹拌して，
フィルター

ファージ株が強い寄生性を示した．また，21株中10株の表面のファージ吸着菌体（感染中心）を懸濁させ，
ファー

ファージでは供試したすべてのがんしゅ病菌株に対して

ジ培養液を作製した．

寄生性を示したが，その他の11株ではそれぞれ１〜４菌

ファージ培養液は28℃で静置培養し，培養開始時（吸株のがんしゅ病菌に対する寄生性は認められなかった．

着後20分）から経時的に力価測定法により培養液中のさらに，溶菌斑タイプ別に見ると，LS，
SS タイプのファーファージ数の推移を調べた．

ジ株は寄生性が強く，LR，SR タイプでは寄生性が弱い─ 23 ─

藤木圭太・吉田政博
Table 1. Host selectivity of actinophage isolates to different isolates of Streptomyces sp. causing root tumor of melona）Actinophage isolates
Hosts
φ21
φ31
φ33
isolates LS −1 LS −2 LS −3 LS −4 LS −5 LS −6 LS −7 SS −1 SS −2 SS −3 SS −4 SS −5 LR −1 LR −2 SR −1 SR −2 LS −1 LS −2 LS −3 SS −1 SS −2
b）
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B −9−1B −7−2
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OTP −3−1 ++KM −1−1
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Cu −3−1
A −1
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A −3
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FS −20
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FS −25
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FS −26
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FS −27
FS −28
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FS −21
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FS −32KS −22
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T −6
T −23
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CB −1−1
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CB −2−1
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CB −3−1
CB −4−1
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CB −5−4a）The signs following φ showed isolation soil number, plaque types（LS: large and sharp, LR: large and rough, SS: small and sharp, SR: small and rough）and isolated number, respectively.
b）Plaque formation by Drop Method（25）. ++: not formed host colonies in plaques, +: some host colonies were formed in plaques, − : no plaques.

傾向であった．

統の４株のファージはサツマイモ立枯病菌の１株にも寄がんしゅ病菌以外の Streptomyces 属菌７種10菌株に対生性が認められ，φ21，φ33系統のファージ株よりさらする分離ファージ株の寄生性検定の結果，全ファージ株に 広 い 宿 主 範 囲 を 有 し て い た． 一 方， φ21LS −1と φ

でがんしゅ病菌の近縁種とジャガイモそうか病菌２種に21LS −2は S. violaceoruber に対して寄生性を示さなかっ

対する寄生性が認められた（Table 2）．さらに，φ31系

た．

Table 2. Host range of actinophage isolates within plant pathogenic and nonpathogenic Streptomyces spp.
Hosts
S. scabies SH −12
S. scabies S −322
S. acidiscabies S −72
S. acidiscabies S −173
S. ipomoeae MAFF 225057
S. ipomoeae MAFF 304021
S. cyaneus JCM 4220
S. indigocolor JCM 4774
S. paradoxus JCM 3052
S. violaceoruber NBRC 15146a）, b）See Table 1.

Actinophage isolatesa）
φ21
φ−31
φ−33
LS −1 LS −2 LS −3 LS −4 LS −5 LS −6 LS −7 SS −1 SS −2 SS −3 SS −4 SS −5 LR −1 LR −2 SR −1 SR −2 LS −1 LS −2 LS −3 SS −1 SS −2
b）
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+
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+
+
+
+
+
+
+

３．クロロホルム耐性
供試した６株の全ファージで，クロロホルム１％処理においても溶菌斑を形成し，不活化しなかった．また，それらの溶菌斑中には指示菌の菌そうは認められなかった．一方，がんしゅ病菌に対しては，0.75% 以上の濃度で高い殺菌効果が認められた．
４．耐熱性
ファージ液は加熱処理後の力価測定の結果，全ファー
ジ株とも処理温度の上昇にしたがって形成溶菌斑数は減少した（Fig.2）．すなわち，40℃処理から溶菌斑形成割合の低下が始まり，55℃処理ではすべての株で溶菌斑が形成されなかった．ファージ株によって不活化の程度にFig. 2. Plaque forming ratio of actinophage isolates treated withdifferent temperatures on Streptomyces sp. B −9−1.

─ 24 ─

メロンがんしゅ病菌ファージの検出と性質は若干の差はあるが，耐熱温度は全株とも50℃，10分で38℃では指示菌がまったく生育せず，溶菌斑も形成され

あった．

なかった．

５．吸着時温度６．菌体の違いによる吸着性の違い

形成溶菌斑数は，すべてのファージ株で28℃が最も多供試ファージ６株は菌糸体を宿主にしても吸着後の溶く， 次 い で33 ℃，23 ℃ の 順 で あ っ た（Fig.3）． な お，菌が可能で，溶菌斑の形成が認められた（Table 3）．しかし，それらは胞子体での透明な溶菌斑と異なり，全体が不透明の濁った溶菌斑であった．また，両菌体を指示菌としたファージ液の力価測定は，いずれの株でも胞子体での方が高い値を示した（Table 3）．すなわち，ファージ株によってその程度にφ33SS −1の69倍からφ31LR −1の328倍までの違いはあるものの，全株において胞子で2の力価の方が約10 台高い値として検出された．
７．吸着時の陽イオンの影響
硫酸マグネシウムの添加では，すべてのファージ株で同様の傾向を示し，0.5 mM 添加で最も多い溶菌斑が形
Fig. 3. Plaque formation of actinophage isolates on Streptomyces sp. B −9−1 at different temperatures for adsorption.

成され，無添加培地に比べて溶菌斑形成割合が18〜34％．一方，0.5 mM 以上では濃度の増向上した（Fig.4− A）

Table 3. Comparison of spore and mycelium as host on formed plaques and titer of actinophage isolates on Streptomyces sp. B-9-1
Actinophage
isolates

Transparency ofa）formed plaques
Clear
TurbidClear
TurbidClear
TurbidClear
TurbidClear
TurbidClear
TurbidTypes of host

Spore
MyceliumSpore
φ33LS −1
MyceliumSpore
φ31LR −1
MyceliumSpore
φ21SS −1
MyceliumSpore
φ33SS −1
MyceliumSpore
φ31SR −1
Myceliuma）Plaque formation by Drop Method（25）.
φ21LS −12+

2+

Fig. 4. Effect of concentrarion of Mg and Ca on adsorption of actinophage isolates on Streptomyces sp. B −9−1.

─ 25 ─

Titer（pfu/ml）
6

2.86×104
3.13×107
3.93×105
1.60×107
5.56×105
1.69×106
2.25×104
1.98×106
8.20×105
1.19×107
1.98×104
9.45×10

藤木圭太・吉田政博
加とともに溶菌斑数は減少し，2.0 mM 以上ではすべてた．そこで，この２株についてはさらに高濃度域での試のファージ株で無添加培地よりも少なくなる傾向を示し験を行ったところ，20 mM で最大となった（Fig.4− C）
．

た．

８．
一段増殖

硝酸カルシウムの添加では，φ21LS −1，φ31LR −1，

大型溶菌斑を作るファージ株（LS，LR）では，培養

φ31SR −1，φ33LS −1の４株は１〜1.5 mM の添加で最液からの検出ファージ数は，培養開始直後には変化がなも多い溶菌斑が形成され，９〜52％の向上が認められた

かったが，培養後170〜200分を増殖開始点として，その（Fig.4− B）．しかし，φ21SS −1とφ33SS −1株は，2.5 mM

後増加し，180〜210分間増殖し続けた（Fig.5− A）．同様

までの濃度範囲では溶菌斑数の増減が明確ではなかっに，小型溶菌斑を形成するファージ株（SS，SR）は，Fig. 5. One-step growth curve of actiophages isolates on Streptomyces sp. B −9−1 at 28℃ .
A: actinophage isolates with large type of plaques，
B: actinophage isolates with small type of plaques.

培養後170〜200分を増殖開始点としてファージ数が増加

一方，ファージ株の検出において，形状が異なる溶菌．これし，その後150〜210分間増殖し続けた（Fig.5− B）

斑が見られた．このように，複数の溶菌斑のタイプを示らのファージ株は溶菌斑の大小に関わらず，吸着後約すファージが存在することは，ジャガイモそうか病菌で170〜200分の潜伏時間を経て増殖が開始され，その後約も報告されており，溶菌斑の形状によって宿主範囲や吸150〜210分間は子ファージの放出が続く増殖サイクルを着性において違いがあることが多い（9，12）．分離した

持つことが示された．本試験で測定された分離ファージ

21株のファージの宿主選択性を検討したところ，がん株の増殖サイクルは両溶菌斑タイプで大差なかった．

しゅ病菌22菌株に対して広く寄生し，菌株間で分離源や溶菌斑タイプの違いによる明確な寄生性の分化を確認す

考ることはできなかった．また，他種放線菌への宿主選択

察性では，がんしゅ病菌の近縁種およびジャガイモそうか

メロンがんしゅ病の発病歴をもつ33土壌中４土壌で栽病菌の２種に対して，さらに一部の系統のファージ株で培試験による発病によって病原菌の存在を確認し，そのはサツマイモ立枯病菌に対しても寄生し，広い宿主範囲

うち３土壌からがんしゅ病菌ファージを検出することがを持つことが判明した．よって，今回分離したメロンができた．これは，宿主となるがんしゅ病菌が生存していんしゅ病菌ファージは，がんしゅ病菌に対する特異性はる環境下にのみ，本ファージは存在しているものと考え低く，本病原菌の特異的検出への利用は困難であると考られる．また，集積培養法でのみ検出されたことは，土えられた．しかし，本ファージが広く植物病原放線菌に壌中に存在したファージ量が極めて少ないことを示唆す

対して寄生性を示したことから，植物放線菌病の生物防るものである．

除資材（15）としての可能性が考えられる．
─ 26 ─

メロンがんしゅ病菌ファージの検出と性質
Streptomyces 属菌のファージの多くは1.0％のクロロホ

最適濃度以上になると溶菌斑数は急激に減少することか

ルムによって急激に不活化するとされている（24）．しら，陽イオンによって溶菌斑形成の阻害も起こり，添加かし，本ファージでは1.0％のクロロホルム処理でも活時の濃度設定は慎重に検討する必要があると考えられた．

性が低下しなかった．さらに，がんしゅ病菌へのクロロ

一段増殖実験は，ファージの吸着から子ファージ放出

ホルムの殺菌効果より，本ファージ液中の宿主菌体の殺までの増殖様相を知ることができ，ファージを扱う上で菌処理には0.75％クロロホルムの利用が可能であると考重要である．本試験で用いた６株のがんしゅ病菌ファーえられた．

ジは，170〜200分の潜伏期間と150〜210分の増殖期間を本ファージの耐熱温度は50℃，10分であった．この温有することが明らかとなった．

度はカンキツ潰瘍病菌ファージの耐熱性（26）と同様のStreptomyces の研究に広く用いられる S. coelicolor A3

結果であった．一方，S. lividans などのファージでは，（2）のファージにおいて，Dowding（23）は40分間の潜吸着時の温度により溶菌斑形成頻度が変化する報告があ

伏期間と30分間の増殖期間があることを示している．まる（27）．本ファージにおいても吸着時の培養温度によった，S. scabies MR13のファージでは，潜伏期間と増殖期て溶菌斑数が変化した．すなわち，23℃では宿主菌体の間はそれぞれ30分間であることが知られている（10）．

生育が不十分であるため（16），ファージが菌体へ吸着

これらのファージと比べると，本ファージの潜伏期間はしにくいのではないかと考えられた．また，33℃では宿約４〜７倍長く，増殖期間も約４〜５倍長い特徴を持っ主菌体の生育は良好であるが（16），28℃に比べて溶菌ていた．一方，S. indigocolor を宿主としてφ21LS −1の斑数は減少した．このことは，本ファージが高温下で吸一段増殖実験を試みた結果，30〜50分間の潜伏期間と70

着性が低下しやすい傾向にあることを示している．よっ〜80分の増殖期間を確認している（データの掲載なし）．

て，本ファージは28℃でより効率よく吸着し，増殖の最

このことから，本ファージはがんしゅ病菌に対しては長適温度が明らかとなった．

い増殖サイクルを有し，宿主菌の違いによりその増殖サ

放線菌はその生活環において，菌糸体と胞子体を形成イクルにも違いが生じることが推察される．

する．本ファージの両菌体に対する吸着性からは，共に以上のように，今回分離されたメロンがんしゅ病菌の溶菌することは確認出来たが，菌糸体への吸着性は胞子

ファージ株は，その分離源の違いや形成する溶菌斑タイ体に比べて劣っていることが示唆された．力価測定値でプの違いに関わらず，宿主選択性や吸着性の特徴は類似

比較した場合，胞子体を使用した力価が，菌糸体を使用する点が多く，本ファージの表現形質においては多様性

2

した時よりも約10 倍高い値を示すことが明らかとなっに乏しいと考えられた．

た．Ronser and Gutstein（28） は S. albus の 胞 子 発 芽 と本研究では，メロンがんしゅ病菌に寄生性を示すアク

ファージの吸着実験から，菌糸体へ吸着するファージ粒

チノファージの存在を初めて確認し，それらの吸着性に子の数は胞子体へよりも多いと推察している．よって，関する性質について明らかにした．しかしながら，今回，本ファージの効率的増殖には胞子体を宿主とすることが分離したファージ株は，がんしゅ病菌に対する宿主特異効果的であると思われる．また，菌糸体で存在する病原性を有するものではなかった．よって，がんしゅ病菌の菌への防除資材としての施用には，胞子体に比べてより特異的検出や定量への利用性は低いことが示唆される．

多くのファージ量を必要とするものと考える．

一方，本ファージは他の放線菌にも広く寄生性を示した

ファージの増殖には２価の陽イオンの添加が効果的でことから，さらに多くの放線菌に対する宿主選択性の確あり，その最適濃度はファージによって異なっている認を行うことで，特定の環境における放線菌の検出や定

2＋2＋（24）．また，菌体への吸着性でも Mg や Ca などの陽量，ならびに病原菌に対する微生物農薬としての利用のイ オ ン を 通 常 よ り 多 く 必 要 と す る も の が 多 く，

可能性も広がるものと考える．

2＋

S. parvulus のファージでは25 mM の Ca 添加により，吸着性が向上している（29）．本ファージでも２種類の陽要

2＋イオンの影響を検討し，その最適濃度は Mg ではすべ2+

約ての株で0.5 mM，Ca では４株が1〜1.5 mM，φ21SS −1

メロンがんしゅ病菌に対するアクチノファージ（以下，とφ33SS −1の２株では20 mM と高いことを明らかにしファージ）の分離を試み，本ファージの存在を初めて確た．このことから，小型（１mm 未満）で輪郭が鮮明な認するとともに，宿主選択性と安定性および吸着性にお溶菌斑を形成する２株のファージは他の４株とは吸着性ける性質について調べた．がんしゅ病発生歴を持つ土壌においてやや異なっていることが示唆される．さらに，のうち本病原菌が生存する３土壌から集積培養法によっ─ 27 ─

藤木圭太・吉田政博て21株のファージが得られ，これらは溶菌斑の形状に基８）Tanaka, H., Negishi, H. and Maeda, H., 1990, Ann.

づき４タイプに類別された．これらのファージ株は，がんしゅ病菌の異なる菌株との間に明確な寄生性の分化は

Phytopath. Soc. Japan, 56, 243−246.
９）Newbould, F.H.S. and Garrarad, E.H., 1954, Can. J. Bot.,

見られなかった．また，ジャガイモそうか病菌等の数種の Streptomyces 属菌に対しても寄生性を示し，宿主選択32, 386−391.
10）El-Sayed, EL-S.A., El-Didamony, G. and Mansour, K.,
2001, Folia Microbiol, 46, 519−526.

性は低かった．さらに，分離源と溶菌斑タイプの異なる
６株のファージについて，安定性と吸着性に関わる性質

11）西脇由恵，秋野聖之，生越 明，1996，土と微生物，
47，45−50．

を調べた．ファージ粒子のクロロホルム耐性は１％以上，耐熱性は50℃，10分であった．また，温度により吸着性

12）西脇由恵，美濃健一，1997，日植病報，63，255−に違いが見られ，吸着温度は28℃が最適であった．宿主
菌体への吸着性は胞子体が菌糸体よりも良好で，力価測256（講要）．
13）Ogiso, H., Akino, S. and Ogoshi, A., 1999, Soil

2

定においても約10 倍高い値を示した．培地への陽イオ
2+

ン添加は吸着性に影響し，Mg では全株が0.5 mM 濃度

Microorganisms, 53, 37−43.
14）小倉玲奈，小木曽久志，秋野聖之，生越 明，1996，

2+で最適であったが，Ca ではファージ株間で違いがみられた．一段増殖実験では，潜伏期間が170〜200分，その土と微生物，48，44（講要）．
15）Mckenna, F., El-Tarabily, K.A., Hardy, G.E.ST.J.and

後の増殖期間が150〜210分の増殖サイクルであった．本ファージ株はこれらの性質において大差なく，多様性がDell, B., 2001, Plant Pathol, 50, 666−675.
16）小林研三，吉田政博，中山武則，古賀成司，1987，

低いと考えられた．以上のことから，本ファージはメロンがんしゅ病菌の特異的検出への利用性は低いが，植物

日植病報，53，562−565．
17）吉田政博，小林研三，1991，日植病報，57，540−
548．

病原放線菌に対する生物防除資材としての利用が期待される．

18）Loria, R., Coombs, J., Yoshida, M., Kers, J. andBukhalid, R. A., 2003, Physiol. Mol. Plant Pathol., 62,

謝68−69.

辞19）吉田政博，小林研三，1996，九州東海大農紀要，15，
27−34．

本研究を遂行するにあたり，ジャガイモそうか病菌を分譲いただいた佐賀県上場営農センター田代暢哉博士に20）吉田政博，小林研三，1994，九病虫研会報，40，38

お礼申し上げる．

−42．
21）吉田政博，小林研三，1994，日植病報，60：514−
522．

引用文献

22）Robinson, J.B. and Corke, C.T., 1959, Can. J. Microbiol.,5, 479−484.

１）後藤正夫，1989，微生物学辞典（日本微生物学会編），技報堂，東京，p.907．

23）Dowding, J.E., 1973, J. Gen. Microbiol., 76, 163−165.

２）安達直人，小原達二，畔上耕児，2003，日植病報，

24）Kieser, T., Bibb, M.J., Buttner, M.J., Chater, K.F. and69，286（講要）．

Hopwood, D.A., 2000, Practical Streptomyces Genetics,

３）畔上耕児，小原達二，2003，日植病報，69，45（講The John Innes Foundation, Norwich, pp.271−288.
25）Daiz, L.A., Hardisson, C. and Rosario, R.M., 1989, J.

要）．

Gen. Microbiol., 135, 1847−1856.

４）畔上耕児，松浦貴之，井上康宏，2006，日植病報，

26）脇本

71，39（講要）．
５）Balogh, B. and Jones, J.B, 2003, Plant Disease, 87, 949−

哲，1967，日植病報，33，301−310．

27）Klaus, S., Krugel, H., Suss, F., Neigenfind, M.,

954.

Zimmermann, I. and Taubeneck, M., 1981, J. Gen.
Microbiol., 123, 269−279.

６）Iriarte, F.B., Balogh, B., Momol, M.T., Smith, L.M.,
Wilson, M. and Jones, B., 2007, Appl. Environ.

28）Ronser, A. and Gutstein, R., 1980, Microbiol., 27, 256−257.

Microbiol., 73, 1704−1711.
７）Goodridge, L.D, 2004, TRENDS in Biotechnology, 22,29）Chater, K.F. and Carter, A.T., 1979, J. Gen. Microbiol.,384−385.

155, 431−442.
─ 28 ─

東海大学農学部紀要第30巻（記念号）の発刊に寄せて
副学長（九州キャンパス担当） 加

藤

雅

史

本年度、1980年４月に九州東海大学農学部として設置された農学部が開設30周年を迎えました。この間、関西以西で私立大学唯一の農学部として、地域に密着した教育研究を推進しつつ、社会のニーズである新たな分野を取り込みながら発展してまいりました。
2000年には農学部を応用植物科学科、応用動物科学科、バイオサイエンス学科という現在の３学科体制といたしました。そして、2008年には学校法人東海大学内の三大学が統合して新たな東海大学となり、農学部も東海大学農学部として再出発しました。また、2009
年にはバイオテクノロジーセンター新館（３号館）を竣工させ、最先端の分析機器等を導入し教育研究の環境をいっそう充実させております。
農学部設置の翌年に創刊した農学部紀要が今回で第30巻を迎えました。この紀要に掲載の論文は常に社会の発展と変化に対応した新たな科学分野を取り込んだ内容となっており、農学部の教育と研究における歴史を示す象徴といえましょう。
日本では2004年12月をピークに人口が減少に転じ高齢化社会に突入している一方で、世界的には人口が更に急増しており、食料問題を見ても、量的な問題と安全性の問題の両面で21世紀の世界の緊急課題となっております。こうした農学分野の重要性からも、東海大
学農学部は更に幅広い教育研究を推し進め、国内はもとよりアジア諸国さらに世界の国々との交流を推進し、その使命を果たしてまいります。
農学部長

村

田

達

郎

農学部は、1980年に開設されて今年は30周年目の記念の年を迎えます。それと同時に農学部紀要も、1981年に創刊号が発行されてから、今年第30巻の記念号を発行することになりました。
本学部の大きな特徴は、他の大学では類を見ない講義棟と実習場が隣接し、阿蘇という豊かな自然条件下で、実学を尊重する教育研究を一貫して行ってきたことです。開設当初、地域に密着した研究テーマである「阿蘇地帯における農業開発に関する総合的研究」を農学部の共同テーマとして採択し、教職員一丸となって研究を開始したのをつい昨日のように思い出されます。そのために、初期の紀要には、「阿蘇地域を中心に行われた栽培試
験」や「阿蘇の牧草地や野草地に関する研究」などが数多く掲載されています。その後、バイオテクノロジー２号館、そして昨年９月には、バイオテクノロジー３号館が竣工し、教育研究環境が飛躍的に整ってきました。それに伴い、紀要に掲載される論文も、最先端の技術を駆使した論文が数多く掲載されるようになりました。
近年、地球環境問題の深刻化、食料不足や食の安全性への不安など、都市に住む人たちも農業に強い関心を示すようになり、農学部に対する期待は益々高まっていると感じます。
東海大学農学部の紀要も、第30巻の記念号の発刊を契機に、農学を学ぶ人たちへの研究成果の有効な伝達手段となるように、さらに内容を充実させ、発展することを祈念します。
2011年３月

─ 29 ─

九州東海大学農学部紀要目

総次

第１巻〜第27巻（1982年〜2008年）
第１巻（昭和57年，1982年３月）
0101

九州各県の水稲収量の動向と関与要因の解析……………………………………………藤井義典・和田0102

マツ属数種の核型について（英文）…………………………………………戸田義宏・川畑勝也・長野克也………７

0103

コンピュータによる農業集落区分と農業開発計画……………………………………………………山中0104

和牛の優良系統造成に関する基礎的研究
Ⅰ．黒毛和種における系統間交配による子牛の離乳前発育について………………熊崎一雄・芝田

0105

草地への窒素多肥が放牧牛の採食量と増体量に及ぼす影響………………菊地正武・田野

0106

ジエチルスチルベステロールジクロロアセチル標準液のガスクロマトグラフによる分析（英文）0107

耐寒性クロレラの飼料化に関する基礎的研究

0108

幼児運動能力の発達に関する研究

学………１
守………17
猛………35

仁・柴田章夫………43…………………………………………………………………………………………………………飛岡久弥………49…………………………………………………椛田聖孝・清水正元・波多野昌二・貞包治夫・渡辺忠雄………55
Ⅰ．熊本市内公立保育園の幼児運動能力テストとその分布傾向について……………………………………………………米沢久・紫垣由則・西岡寅雄・太田紘一・土橋敏郎………61

第２巻（昭和58年，1983年３月）
0201

休眠期のリンゴの水分吸収（英文）……………………………………………………………………飯塚一郎………１0202

環境保全のための野菜病害に対する総合防除対策の検討……………………………………………小林研三………７0203

スギの核型について（Ⅻ）（英文）………………………………………………………………………戸田義宏………190204

阿蘇の牧草地および野草地における草生産の実態…………………………飛岡久弥・菊地正武・加藤正信………250205

褐毛和種雌牛における心拍数と発生熱量との関係…………飛岡久弥・菊地正武・加藤正信・柴田正貴・久米新一・滝沢静雄・八木満寿雄・中西雄二………310206

かつお節の香気成分に関する研究
Ⅲ．中性非カルボニル化合物…………………………………………………………………………伊東保之………350207

幼児運動能力の発達に関する研究
Ⅱ．幼児運動能力の加令に伴う種目別発達傾向について………………太田紘一・土橋敏郎・紫垣由則………450208

幼児運動能力の発達に関する研究
Ⅲ．Ｔスコアーによる種目間の加令に伴う発達の違いについて………………………………………………………………………………土橋敏郎・太田紘一・紫垣由則………550209

幼児運動能力の発達に関する研究
Ⅳ．５段階評点法による標準化について………………………………………………米沢久・紫垣由則………63

第３巻（昭和59年，1984年３月）
0301

熊本市の野菜価格問題とその計量経済分析……………………………………………………………山中0302

和牛の優良系統造成に関する基礎的研究
Ⅱ．褐毛和種の離乳前発育形質に及ぼす遺伝と環境の要因…………………………芝田

0303

猛・熊崎一雄………15和牛の優良系統造成に関する基礎的研究
Ⅲ．褐毛和種の産肉形質を支配する遺伝的要因………………………………………熊崎一雄・芝田

0304

守………１

猛………23

裏山放牧地における褐毛和種成雌牛の行動と発生熱量……………………飛岡久弥・菊地正武・加藤正信………31

─ 30 ─

0305

合成発情ホルモンを投与した去勢および半去勢雄成メン羊における含窒素成分の尿中排泄量と血漿中濃度の変動……………………………………………………………………………………………飛岡久弥・川島良治………390306

めん羊における消化管内寄生線虫の動向…………………………………………………森友靖生・芦沢広三………450307

ユキノシタにおける原形質分離現象の温度による物理的および耐寒適応的変化…………………八戸正夫………510308

幼児運動能力の発達に関する研究

0309

ホテイアオイの栽培と利用及びその栽培施設の開発……………………………………清水正元・椛田聖孝………650310

アジア・太平洋地域に於ける経済開発と環境保全について（英文）………………………………清水正元………75

Ⅴ．因子分析による共通性の変化について…………………………………………………………米沢久………57

第４巻（昭和60年，1985年３月）
0401

スギ科の細胞遺伝学的研究
Ⅴ．スギ科の核型………………………………………………………………………………………戸田義宏………１

0402

Erwinia carotovora subsp. carotovora のストレプトマイシン（SM）耐性変異菌の出現様相……………………………………………………………………………………………小林研三・吉田政博………190403

冬季の低温が鶏の産卵に及ぼす影響………………………………………仁木隆博・信国喜八郎・鳥潟隆雄………270404

和牛の優良系統造成に関する基礎的研究
Ⅳ．BLUP 法による褐毛和種産肉形質に対する種雄牛評価 …………………………熊崎一雄・芝田

0405

猛………35和牛の優良系統造成に関する基礎的研究
Ⅴ．複数形質 BLUP 法による褐毛和種の増体および枝肉形質に対する種雄牛評価……………………………………………………………………………………………熊崎一雄・芝田

猛………430406

Filaroides martis に因るイタチ肺の結節性寄生巣について ………………芦沢広三・森友靖生・立山晉………490407

家畜の腸結節虫症の病理学的所見
Ⅰ．牛の野外感染例の病変について…………………………芦沢広三・森友靖生・立山

0408

晉・三好雅和………55

家畜の腸結節虫症の病理学的所見
Ⅱ．めん羊の自然感染例の病変について……………………芦沢広三・森友靖生・立山晉・三好雅和………650409

ウマの甲状腺および上皮小体におけるＣ細胞の分布について

0410とうふ粕配合飼料による豚の肥育試験………………………………………飛岡久弥・菊地正武・加藤正信………83

0411

ホテイアオイによる富栄養水からの窒素・リンの吸収と高水分サイレージの調製に関する研究……………………………………………………森友靖生・芦沢広三・立山晉・山口良二・野坂大………75………………………………………………………………………………椛田聖孝・清水正元・五斗一郎………93
0412

緑葉中のフェノール性化合物と抽出蛋白質との関係、主としてホテイアオイについて…………………………………………………………………………………………………………芦刈信幸………99

0413

ゴーダタイプチーズ熟成中の蛋白質分解……………………井越敬司・小林弘昌・上野川修一・山内邦男 ·……1050414

UHT- 殺菌牛乳の保存性に関する研究 …………………………………………………………………伊東保之 ·……1110415

車椅子バスケットボールにおける意識調査と形態比較に関する判別分析について………………米沢

久 ·……117

第５巻（昭和61年，1986年３月）
0501

リンゴ茎頂の耐凍性の季節変化（英文）………………………………………………………………片野0502

自然農法水田における水稲栽培に関する研究

學………１

Ⅵ．1984年度，東北，北陸ならびに九州地方における収量調査結果の概要……………………………………………………………………………………………片野0503

學・浅海明龍………７

自然農法水田における水稲栽培に関する研究
Ⅷ．湿田・乾田における水稲の生育，収量ならびに雑草生態について，熊本県下の一事例…………………………………………………………………………………………………………片野

學………150504

かんしょの配偶子形成過程………………………………………………………………………………村田達郎………230505

スギ科の細胞遺伝学的研究

0506

農業分野のコンピューター化の進展とソフトウェア教育の必要性…………………………………山中0507

和牛の優良系統造成に関する基礎的研究

Ⅵ．スギ科の核型⑵…………………………………………………………戸田義宏・長野克也・神西幸治………33

─ 31 ─

守………45

Ⅵ．褐毛和種雌牛の最確哺育能力に及ぼす各種要因の影響…………………………熊崎一雄・芝田

猛………550508

エストロジェン投与による雄雛左性腺の雌性化，特に投与量と形態的，組織的変化との関係について

0509

一般成分分析に用いる草試料の調製方法に関する検討…………………………………飛岡久弥・加藤正信………710510

反芻胃液中揮発性脂肪酸の分析方法に関する検討………………………………………飛岡久弥・加藤正信………77

0511

ヘキセステロールディカプリレートの投与が高粗繊維飼料を給与したハムスターの成長と体組成に及ぼす影響………………………………………………………………………………小栁深・桝田信也・西山久吉………61……………………………………………………………………………………………飛岡久弥・川島良治………830512

家畜の腸結節虫症の病理学的所見
Ⅲ．豚における自然感染例の病変……………………………芦沢広三・森友靖生・立山

0513

晉・三好雅和………89

ジャージー牛の初乳から常乳への乳成分の変化について………………………………………………………………小林弘昌・井越敬司・有馬俊六郎・伊東保之………990514

ゴーダタイプチーズ中のプロティナーゼ抽出に及ぼす pH の影響……………………………………………… 井越敬司・小林弘昌・有馬俊六郎・上野川修一・山内邦男 ……1050515

ゴーダタイプチーズより抽出されるジペプチド水解酵素画分の性質……………………………………………………………………………井越敬司・小林弘昌・有馬俊六郎 ·……1090516

二，三の草類における蛋白質の抽出性と人工消化率…………………………………………………芦刈信幸 ·……1130517

牛乳の加熱処理によるリジノアラニンの生成及びその抑制…………………………………………伊東保之 ·……1170518

魚類のクレアチンキナーゼに関する研究………………………………………………………………伊東保之 ·……1230519

本学学生の敏捷性・パワー・心肺機能に関する研究…………………………………………………………………米沢久・太田紘一・土橋敏郎・紫垣由則 ·……131

第６巻（昭和62年，1987年３月）
0601

茎頂培養によるヤマザクラ（Prunus jamasakura SIEB. ex KOIDZ.）の繁殖（英文）…………………片野0602

自然農法水田における水稲栽培に関する研究

學………１

Ⅹ．乾田・湿田における土壌の化学性ならびに水稲根群の形態形成について，熊本県下の１事例…………………………………………………………………………………………………………片野
0603

學………５

原野開墾畑における Rhizoctonia 属菌の分布とダイコン根腐病の発生との関係……………………………………………………………………………………………吉田政博・小林研三………17

0604

コンピューター・ネットワーク・システムの経済分析−農産物市場経済を中心として−0605…………………………………………………………………山中

守………23和牛の優良系統造成に関する基礎的研究
Ⅶ．褐毛和種若雌牛の12カ月齢体重及び体型測定値に及ぼす要因とこれら発育測定値間の相互関係……………………………………………………………………………………………芝田猛・熊崎一雄………470606

本学繋養ジャージー種搾乳牛の第一胃液及び血液性状に関する研究…………………飛岡久弥・加藤正信………570607

褐毛和種育成雌牛の増体，飼料効率及び繁殖成績に及ぼすサリノマイシン投与の影響………………………………………………………………………………飛岡久弥・菊地正武・加藤正信………630608

褐毛和種育成雌牛の第一胃内容液及び血液性状に及ぼすサリノマイシン投与の影響………………………………………………………………………………飛岡久弥・菊地正武・加藤正信………690609

家畜の腸結節虫症の病理学的所見

0610

Prostaglandin による放牧和牛の性周期同期化 …………………和田

0611

ホテイアオイサイレージの実用化に関する基礎的研究

Ⅳ．山羊における自然感染例の病変…………………………芦沢広三・森友靖生・立山晉・三好雅和………77

宏・桧垣克己・石橋義美・榎野俊文………89−糖蜜アルコール廃液濃縮液添加によるホテイアオイサイレージの調整について−…………………………………………………………………椛田聖孝・清水正元・芦刈信幸・菊地正武………95
0612

ホテイアオイ乾燥粉末からの蛋白質抽出……………………………………芦刈信幸・椛田聖孝・清水正元………99

0613

野球における投手と捕手の心理分析
本学野球部の投手と捕手の行動特性について…………………………………………太田紘一・米沢─ 32 ─

久 ·……105

第７巻（昭和63年，1988年３月）
0701

自然農法水田における水稲栽培に関する研究
Ⅺ．九州地方における品種栽培試験の結果………………………………片野學・上村光昭・朝倉啓之………１0702

柑きつ園内における在来天敵の有効性の評価…………………………………………………………野原啓吾………110703

ヒメアカホシテントウムシの産卵行動に関する研究…………………………………野原啓吾・岩田眞木郎………170704

柑きつ園におけるカイガラムシ類の捕食虫キムネタマキスイムシの生態に関する研究0705

褐毛和種育成雌牛の飼料成分消化率に及ぼすサリノマイシン投与の影響

0706

ラジノクローバー優占草地に放牧したジャージー種未経産牛の牧草摂取量ならびにそれが牛の繁殖および乳房に…………………………………………………………………………………………野原啓吾・岩田眞木郎………25………………………………………………………………………………飛岡久弥・菊地正武・加藤正信………33
及ぼす影響…………………………和田宏・湯原正高・池本威夫・妹尾素男・奥島史朗・福島滋・森田誠………370707

肝臓型豚腎虫症の病理学的所見………………………………………………芦沢広三・森友靖生・立山晉………470708

Stephanurus dentatus により惹起された豚肺病変について …………………芦沢広三・森友靖生・立山晉………570709

牛の先天異常に関する形態学的研究

0710

ニホンキジ卵白リゾチームに関する研究

0711

ニホンキジ卵白リゾチームに関する研究

0712

S・M・A テストによる本学体操競技選手の心理分析

Ⅰ．先天性両側性無眼球症について………………………………………森友靖生・芦沢広三・田中穂積………65
Ⅰ．精製，タンパク質的性質及び触媒作用……………………………鳥潟隆雄・蔵本真由美・荒木朋洋………73
Ⅱ．ニホンキジ卵白リゾチームのアミノ酸配列………………………荒木朋洋・蔵本真由美・鳥潟隆雄………81…………………………………………………………………紫垣由則・太田紘一・土橋敏郎・米沢

久………87

第８巻（平成元年，1989年３月）
0801

ブドウ

巨峰

の結実特性…………………………………………………………………小松春喜・中川昌一………１

0802

サツマイモの茎頂培養における培地条件の検討……………………………村田達郎・福岡壽夫・宮司佑三………９0803

サツマイモの PFP 処理による染色体減数個体の作出 ……………………村田達郎・福岡壽夫・宮司佑三………150804

サツマイモのプロトプラスト培養における各種アミノ酸の影響…………………………………………………………………村田達郎・星野匡樹・福岡壽夫・宮司佑三………230805

ヤマイモ（Dioscorea opposita Thunb.）キチナーゼの一次構造に関する研究
Ⅰ．トリプシンペプチドのアミノ酸配列（英文）…………荒木朋洋・古賀大三・井手明雄・鳥潟隆雄………290806

阿蘇原野の立地と植生
Ⅰ．阿蘇原野の立地………………………………清水正元・椛田聖孝・岩水哲夫・岡本智伸・菊地正武………370807

鶏の成長および筋肉重量に及ぼす甲状腺ホルモンおよび雄性ホルモンの欠如の影響…………………………………………………………………………………………仁木隆博・信国喜八郎………470808

In Vitro におけるウシ黄体に対する Prostaglandin の効果 …………………和田0809

牛の性周期同期化に対する PGF2αおよびその analog の効果…………………………………………和田宏・石井隆・石橋武彦………550810

牛の肺および腸間膜リンパ節への Setaria sp. の迷入例 …………………………………芦沢広三・森友靖生………690811

牛・めん羊における鞭虫症の病理組織学的所見…………………………………………芦沢広三・森友靖生………77

0812

Metastrongylus spp. により惹起されたイノシシ肺病変の病理学的所見 ………………芦沢広三・森友靖生………85

宏………63

第９巻（平成2年，1990年３月）
0901

針葉樹の変異に関する細胞遺伝学的研究

0902

原野開墾ダイコン畑における軟腐病の発生由来……………………………小林研三・春田0903

花をとりまく昆虫群集構造についての研究

Ⅰ．Cryptomeria japonica D. DON の変異について ………………………中村未樹・長野克也・戸田義宏………１
潔・吉田政博………９

Ⅰ．西表島における訪花性膜翅目昆虫の活動について…………………………………………岩田眞木郎………170904

オレンジ輸入自由化影響力の計量経済モデル分析

─ 33 ─

−甘夏みかんを対象として−…………………………………………………………………………山中

守………250905

開発途上国の農村開発におけるコミュニティ・リーダーシップの重要性…………………………家永泰光………330906

ホテイアオイの栽培と利用に関する研究−群落の生長解析および太陽エネルギー利用効率−…………………………………………………………………岡本智伸・椛田聖孝・清水正元・菊地正武………450907

家畜および実験動物の下垂体における鉛ヘマトキシリン陽性細胞の形態と分布………………………………………………………………………………石橋武彦・谷口牧子・森友靖生………530908

三次元画像解析装置を用いた無眼球症子牛における視覚系の検討……………………森友靖生・石橋武彦………61

0909

Dictyocaulus viviparus の寄生に因る牛肺病変の病理組織学的所見 ……………………芦沢広三・森友靖生………670910

豚腎虫症に関する病理学的研究
Ⅰ．泌尿器系における病変分布について………………………………………………芦沢広三・森友靖生………750911

豚腎虫症に関する病理学的研究
Ⅱ．泌尿器系病変の組織所見について…………………………………………………芦沢広三・森友靖生………83

0912

ホロホロチョウ卵白リゾチームのヒスチジン残基の化学修飾…………………………………………………蔵本真由美・稲葉洋文・浅川茂樹・荒木朋洋・鳥潟隆雄………91

0913

リゾチームのエステラーゼ活性………………………………浅川茂樹・蔵本真由美・荒木朋洋・鳥潟隆雄………97

第10巻（平成３年，1991年3月）
1001

水稲根群の形態形成に関する研究

1002

ソメイヨシノ（Prunus yedoensis MATSUM.）の茎頂培養ならびに茎頂の液体窒素中における凍結保存（英文）1003

プロトプラスト培養に関する研究

1004

サツマイモの茎カルスからの植物体再分化と回転培養による大量増殖………………村田達郎・福岡壽夫………37

1005

サツマイモの稔実性におけるウィルスフリー化の影響………………………………………………村田達郎………451006

ライグラスとトールフェスクの属間雑種における花序及び葉組織の比較（英文）−とくに移植時期に着目した場合−………………………………………岡村文生・片野

學・栗原……………………………………………………………………………………………片野學・入江亮次………17

Ⅰ．レタスのプロトプラスト培養方法について（英文）………………田中孝幸・松村……………………………………………………………………………………………陳
1007

浩………１

正・森永安弘………29

才夫・福岡壽夫………57

針葉樹の変異に関する細胞遺伝学的研究
Ⅱ．スギ Cryptomeria japonica D. DON の枝変わり個体の核型について………………………………………………………………………………中村未樹・長野克也・戸田義宏………671008

ヒノキ科樹木の染色体に関する研究

1009

ヤマノイモ（Dioscorea japonica Thunb.）酸性キチナーゼのＮ末端ドメインの存在とそのアミノ酸配列1010

放牧草地における植生と植物群落地下部量との関連………………………岡本智伸・椛田聖孝・菊地正武………97

1011

大麦ホールクロップサイレージのメン羊による消化率と摂取量に及ぼす各種添加剤の影響

Ⅷ．ビャクシン属の核型について…………………………………………長野克也・中村未樹・戸田義宏………75………………………………………船津二郎・荒木朋洋・鳥潟隆雄・見明史雄・古賀大三・井手明雄………89…………………………………………………………………… 飛岡久弥・Rajeev Pradhan・田先威和夫 ·……1051012

異なった環境温度下における鶏雛の成長および飼料摂取量に及ぼす甲状腺ホルモンの影響

1013

牛の皮膚表皮におけるランゲルハンス細胞の形態と分布…………………………………………………………………………………………信国喜八郎・仁木隆博 ·……113……………………………………………………… 石橋武彦・成田牧子・Juanito A. Eyadan・森友靖生 ·……121

第11巻（平成４年，1992年3月）
1101

単細胞ラン藻，Synechococcus sp. Miami BG 43511の同調培養時における脂質変動…………………………………………………………………椛田聖孝・岡本智伸・菊地正武・三井

1102
1103

旭………１

マウスの８細胞期胚由来分離胚の染色体検査におけるコルセミドおよびビンブラスチンの効果…………………………………………………………………………………………大久津昌治・小栁

深………７

過剰排卵処理マウスから得られる胚の数に及ぼす週齢と発情周期の影響…………大久津昌治・小栁

深………15

─ 34 ─

1104

PVDF 膜を用いた微量固相手動アミノ酸配列分析法 ……………………荒木朋洋・蔵本真由美・鳥潟隆雄………211105

雄鶏の筋肉，骨，内臓および脂肪の重量に及ぼす視床下部正中隆起破壊の影響

1106

阿蘇地方における野草地の利用形態が植生に及ぼす影響…………………岡本智伸・椛田聖孝・菊地正武………33

1107

ウマ C ３の遺伝的多型とその血中濃度に及ぼす遺伝子効果 …………………………芝田

1108

ミシマサイコの栽培に関する研究…………………………………………………………………………………………仁木隆博・信国喜八郎………27

第３報
1109

秋まき栽培した実生の生育について……………笹原俊哉・宇都宮英昭・片野猛・阿部恒夫………43
學・栗原

浩………51

學・栗原

浩………61

ミシマサイコの栽培に関する研究
第４報

根群形態とサイコサポニン含有量について………笹原俊哉・伊東保之・片野1110

日本における自然農法稲作（英文）………………………………… Neera Preecha・片野1111

熊本県八代郡市におけるイグサ栽培に関する研究

學・長谷川利拡………671112

野菜軟腐病菌とクリスタル紫耐性菌との混合培養における相互関係………………………………小林研三………831113

野菜軟腐病菌のストレプトマイシン耐性の変異………………………………………………………小林研三………911114

花をとりまく昆虫群集構造についての研究− NPK 施肥量と吸収量および収量・品質について− ………………長谷川利拡・大嶋和則・片野

學………75

Ⅱ．西表島における訪花性昆虫の種間関係について……………………………………………岩田眞木郎………99

第12巻（平成５年，1993年3月）
1201

サツマイモの葯培養による植物体再分化…………………………………………………村田達郎・福岡壽夫………１

1202

ヤマノイモ（Dioscorea japonica）低分子酸性キチナーゼの部分アミノ酸配列…………………………………………………野村将三・荒木朋洋・今野浩之・蔵本真由美・鳥潟隆雄………111203

ハプロタイプ（Hal, Gpi, α 1Bg, 6Pgd）による豚ハロセン遺伝子型の推定………………………………………………………………………………芝田

1204

猛・阿部恒夫・秋田富士………19

大麦ホールクロップサイレージの子メン羊による摂取量と消化率に及ぼす添加剤の効果に関する予備試験（英文）……………………………………………………………………………飛岡久弥・大塚貫・田先威和夫………271205

水酸化ナトリウム液浸漬処理が稲ワラの化学組成及び in vitro 乾物消化率におよぼす効果（英文）1206

阿蘇地方の野草地における植生と放牧生産性の関係…………岡本智伸・服部法文・椛田聖孝・菊地正武………391207

放牧時における双子メン羊の吸乳行動の観察事例………………………瀬尾哲也・仁木隆博・信国喜八郎………491208

孵卵初期に投与したアンドロジェンが鶏性腺の発達に及ぼす影響1209

牛の消化管および生殖道粘膜上皮におけるランゲルハンス細胞の形態と分布……………………………………………………… Pradhan Rajeev・澤田公一・飛岡久弥・田先威和夫………33………………………………………………………………桝田信也・中田英史・大久津昌治・小栁

深………55……………………………………………………… 石橋武彦・Juanito A. Eyadan・成田牧子・森友靖生………63

第13巻（平成６年，1994年3月）
1301

小粒種子スイカの育成に関する研究（英文）…………………………… Satit Wimol・田中孝幸・水谷高幸………１

1302

肥後ギクの小花培養に関する研究…………………………………………………………水谷高幸・田中孝幸………９1303

サツマイモの胚珠培養

1304

花をとりまく昆虫群集構造についての研究

1305

阿蘇地域における水田昆虫の様相

Ⅰ．前処理および培養条件………………………………………………………………村田達郎・福岡壽夫………15
Ⅲ．西表島における野生ハナバチ類の季節的訪花活動について………………………………岩田眞木郎………21
Ⅰ．環境保全型水田と慣行農法水田の比較……………………………………………村田浩平・野原啓吾………33

第14巻（平成７年，1995年3月）
1401

多胚性カンキツ小粒種子からの３倍体育成（英文）…………………………………………………………トゥーラポング，ピチット・小松春喜・岩政正男………１

1402

熊本県における気象からみた水稲の生育・収量予測に関する研究─ 35 ─

Ⅰ．発育予測について………………………長谷川利拡・宮地好徳・紫垣秀明・高野順也・三浦
1403

学・崎原

健・片野

學………９

…………………………………………高野順也・長谷川利拡・片野

學………17

熊本県における気象からみた水稲の生育・収量予測に関する研究
Ⅱ．乾物生産の予測について

1404

西表島における野生ランの生態学的研究…………………………………………………田中孝幸・水谷高幸………251405

阿蘇地域における水田昆虫の様相
Ⅱ．イネミズゾウムシの発生と栽培管理の関係………………………………………村田浩平・野原啓吾………331406

タマネギ保護葉中のヒアルロニダーゼ活性阻害物質…………………………………………伊東保之・小野政輝・増岡（郡山）智加子・矢原正治・野原稔弘………431407

濃厚飼料多給下の褐毛和種肥育牛の成長に及ぼす活性炭給与の効果（英文）……………………………………………………………………… 飛岡久弥・ガリリョ，アーネスト P．
………49

1408

子めん羊の増体，ルーメン液および血液性状と飼料成分の消化率に及ぼす活性炭給与の効果（英文）……………………………………………… ガリリョ，アーネスト P．
・プラダン，ラジブ・飛岡久弥………571409

褐毛和種放牧における親子分離哺乳方式の試み〜親子分離哺乳における子牛の行動………………………服部法文・飛岡久弥・春日克範・伊地知英昭・坂井英文・猿渡郁夫・加藤正信………65

第15巻（平成８年，1996年3月）
1501

イグサ根群の形態形成（英文）…………………………デットピラットモンゴン，ソムヨット・片野

1502

イグサ一株の茎数と不定根数との関係（英文）…………………………………………………………デットピラットモンゴン，ソムヨット・片野

學………１

1503

學………11

イチゴ新品種 ʻ ひまつり ʼ について………………………福岡壽夫・村田達郎・小村秋則・中尾繁伸・島村俊也・中尾栄治・木之内

均………191504

メロンがんしゅ病病原放線菌の病原性と宿主範囲………………………………………吉田政博・小林研三………271505

八重山および阿蘇地域における野生ランの保護に関するアンケート調査……………田中孝幸・水谷高幸………351506

沖縄に自生するニッパヤシ Nypa fruticans Wurmb.

1507

情報ネットワークシステムの進展と卸売市場の問題…………………………………………………山中1508

鶏雛の筋肉重量の増加に及ぼす甲状腺ホルモン欠如の影響…………仁木隆博・カンタプラブ，スキット………63

1509

ダイズ（Glycine max L.）酸性クラスⅢキチナーゼのアミノ酸配列

Ⅰ．生育の現状………………………………………………………………仲里長浩・花城良廣・後藤勝美………49
守………55………………………………………………………………堀田和義・荒木朋洋・蔵本真由美・鳥潟隆雄………71

第16巻（平成９年，1997年3月）
1601

雄ブロイラーの成長に伴なう筋肉，骨，内臓および脂肪の重量変動（英文）………………………………………………………… スキット カンタプラブ・仁木隆博・信國喜八郎………１1602

濃厚飼料多給下の子めん羊の血液酵素活性に及ぼす活性炭と杉木炭給与の影響…………………………………………………… 東隆博・正田富貴子・プラダン ラジブ・飛岡久弥………９1603

褐毛和種牛繁殖牛の基礎飼料としてのアンモニア処理ワラの利用（英文）1604

褐毛和種放牧における親子分離哺乳の検討〜親子分離哺乳における吸乳量と乳成分および子牛の発育1605

褐毛和種繁殖牛の泌乳特性1606

リゾチームの基質結合部位Ｅ・Ｆに関する研究……………蔵本真由美・深溝

1607

淡水産ラン藻，スイゼンジノリ（Aphanothece sacrum（Sur.）Okada）の一般成分および培養法に関する研究

1608

ドウダンツツジの茎頂培養ならびに茎頂液体窒素中凍結保存に関する研究…………坂根1609

メロンがんしゅ病の発病におよぼす土壌環境の影響……………………………………吉田政博・小林研三………69…………………………………………………………………プラダン

ラジブ・日下部昭雄・飛岡久弥………17………………………………………服部法文・飛岡久弥・衣川和人・藤原信弘・山本智行・西…………辻

理絵………25

顕・岡本智伸・椛田聖孝・服部法文・神鷹孝至・菊地正武………33
慶・荒木朋洋・鳥潟隆雄………39……………………………………………………椛田聖孝・岡本智伸・小田原健・中園孝裕・菊地正武………47

─ 36 ─

巌・片野

學………55

第17巻（平成10年，1998年３月）
1701

アジア４ヶ国における花卉類に対する園芸的嗜好と野生ランの保護に関する意識調査（英文）…………… 田中孝幸・水谷高幸・サレー カズィミン・朴仁煥・サティット ウィモル・安藤尚弘………１

1702

阿蘇黒ボク土水田における有機物連用効果

1703

孵卵初期にエストロジェンを投与した初生雄鶏における右性腺の形態的・組織的変化

1704

褐毛和種子牛の吸乳期における増体に影響をおよぼす要因（英文）1705

スッポン卵白リゾチームの分離・精製に関する研究………………………荒木朋洋・山本貴樹・鳥潟隆雄………35

1706

ベニジュケイ卵白リゾチームの精製と活性…………………………………関1707

熊本市動植物園の富栄養池における動物プランクトン群集の相互関係（英文）

第１報

初期３年間の水稲の生育・養分吸収に対する効果…………大山信雄・片野學・長谷川利拡………９……………………………………………………………………………………………桝田信也・小栁………………………………………岡本智伸・辻

深………25顕・椛田聖孝・服部法文・神鷹孝至・菊地正武………29………………………………………………バンヤット

忍・荒木朋洋・鳥潟隆雄………41

モンティーン−アート・中園孝裕・岡本智伸
小田原健・菊地正武・椛田聖孝………49

1708

熊本市動植物園池における動物プランクトンと水質との関係および動物プランクトン種の同定（英文）……………………………………………バンヤット

モンティーン−アート・中園孝裕・小田原健

岡本智伸・菊地正武・椛田聖孝………611709

温帯および熱帯の富栄養池における環境要因に伴う動物プランクトン生産の季節的変動の比較（英文）……バンヤット

モンティーン−アート・小田原

健・岡本智伸・中園孝裕・菊地正武・椛田聖孝………75

第18巻（平成11年，1999年３月）
1801

アルゼンチンより採集したアルファルファの遺伝的特性

1802

太田

………………………………………………………………古田恵美子・松田靖・村田達郎・福岡壽夫………１

ポンカン（Citrus reticulata Blanco.）の珠心カルスからの体細胞胚形成と発芽に及ぼす培養環境の影響…………………………………………………………………長澤幸治・友松公一・國武久登・小松春喜………111803

ヤマノイモのむかごに関する組織化学的観察とキチナーゼの免疫組織化学染色………………………………………………………………………………荒木朋洋・村田達郎・鳥潟隆雄………19

1804

熊本市動植物園池における植物プランクトンと水質との関係および植物プランクトン種の同定（英文）……………………………………………バンヤット

モンティーン−アート・大住啓一郎・中薗孝裕
小田原健・岡本智伸・菊地正武・椛田聖孝………23

1805

マウス卵巣内におけるオキシトシン局在部位の免疫組織化学的検討（英文）1806

分析センターにおけるインターネット活用の研究…………………………………………………………………… Thevin Vongpralub・桝田信也・小栁

深………35……………………荒木朋洋・千々岩有紀・若林清史・釼持幸康・門田善太郎・淀谷和彦・浜平義人
田中敬三・田川晴通・大庭康彦・井手口健・藤下光身・飯田昌盛・鳥潟隆雄………43

第19巻（平成12年，2000年３月）
1901

ブリ・フィッシュサイレージの pH と化学組成に及ぼす各種添加剤濃度の影響………………………………………… バローガ

1902

トウフ粕とフィッシュサイレージ混合飼料による水田放飼後のアヒルの肥育………………………………………… バローガ

1903

J．アントニオ・組田友紀子・吉原利枝・飛岡久弥………１
J．アントニオ・吉原利枝・組田友紀子・飛岡久弥………11

ウミガメ卵白リゾチームに関する研究：アオウミガメ卵白リゾチームの分離・精製……………………………………………………………荒木朋洋・亀崎美代子・千々岩有紀・鳥潟隆雄………21

1904

卵発生過程および貯蔵過程における卵白タンパク質とリゾチームの変動に関する研究……………………………………………………荒木朋洋・桑村義仁・桑原英知・桝田信也・鳥潟隆雄………29

1905

Festuca 属× Lolium 属の複二倍体雑種における種子稔性に関する組織学的研究………………………………………………………………宇田川珠美・松田

1906

フローサイトメトリーによるカンキツ類の倍数性の判定─ 37 ─

靖・村田達郎・福岡壽夫………37

…………………………………………………………………春崎聖一・國料大輔・國武久登・小松春喜………45
1907

沖縄県石垣市のマンゴー古木の探索とその特性

1908

沖縄県八重山郡竹富町西表島における環境保全型水稲栽培の実態調査……………崎原健・小川哲子・北島一幸・仲里長浩・川満洋一・津嘉山彦・國武久登・小松春喜………53………………………………………………………………………………片野1909

鯉の放魚密度が水稲の生育，収量，雑草生育に及ぼす影響………………片野1910

鯉放魚および合鴨放飼が水稲の生育，収量ならびに根系形態に及ぼす影響，

學・古賀亮・仲里長浩………61

學・栗原正成・橋本

熊本県阿蘇郡白水村における一事例……………………………………………………片野功………71

學・五味和明………79

第20巻（平成13年，2001年３月）
2001

ワビスケツバキ Camellia wabiske の起源に関する研究（英文）……………………………………………………田中孝幸・桐野秋豊・箱田直紀・藤枝國光・水谷高幸………１

2002

カンキツの培養小植物体の成長に及ぼす温度と CO2濃度の影響 …………長澤幸治・國武久登・小松春喜………９

2003

ジャガイモマイクロチューバー中に含まれるキチナーゼの分離…………………………………………………荒木朋洋・井上志野夫・坂元雄二・大西2004

昇・鳥潟隆雄………15

阿蘇地方における不耕起火入れ直播法により造成した野草・牧草混在草地の放牧利用下での植生と植物生産性……………………………………………………………岡本智伸・椛田聖孝・菊地正武………25

第21巻（平成14年，2002年３月）
2101

プロテオーム解析のためのオンメンブレン微量配列分析（英文）2102

ヒクイドリ（Casuarius casuarius）グースタイプリゾチームの物理化学的安定性に関する研究（英文）2103

部位特異的変異法を用いたリゾチームのアミノ酸置換と活性…………………………………………… Jureerut Pooart・長経子・芝田猛・鳥潟隆雄・荒木朋洋………１………………………………… Sompong Thammasirirak・鳥潟隆雄・高見一利・村田浩一・荒木朋洋………９Ⅰ．Phe34を His に置換した変異体の活性 …………………河村俊介・野崎健司・荒木朋洋・鳥潟隆雄………172104

本学草地における出現植物種………………………………………………………………岡本智伸・椛田聖孝………252105

琉球列島に自生するトサカメオトランの生態学的研究……………………水谷高幸・松羽研・田中孝幸………372106

多人数の英語クラスを運営する方法（英文）…………………………………………………… Craig S. Ellis………532107

中曽根元総理の教育改革について（英文）………………………………… Richard S. Lavin・Craig S. Ellis………61

第22巻（平成15年，2003年３月）
2201

Random amplied polymorphic DNA による日本のサツマイモ（Ipomoea batatas（L.）Lam）品種の遺伝的類縁関係の解析（英文）………………………岡田吉弘・齋藤

2202

彰・那須ひとみ・内田定康・宮崎力・松田靖・村田達郎………１

タイ王国産のウリ科作物を台木に用いたメロンの接ぎ木親和性に関する研究……………………………………………… 田中孝幸・水谷高幸・Kamol Lertrat・Nipon Jayamangkala
Satit Wimol・Suchila Techawongstien………９2203

文法項目「冠詞」の比較分析（英文）…………………………………………………………… Craig S. Ellis………152204

英語プログラムの開発（英文）………………………………………… Craig S. Ellis・八木ロドリゲス美樹………212205

対人関係における認知の仕組み− TAT と一般性セルフ・エフィカシィー尺度による調査− ……………………佐々亜裕美・武田慎一………37

第23巻（平成16年，2004年３月）
2301

改良型褐色肉用鶏の筋肉および脂肪の重量に及ぼす制限給餌の影響

2302

ペプチドマッピング法によるグース型リゾチーム構造解析のための……………………………………………………………………………仁木隆博・芝田
シナガチョウリゾチームの構造解析と標準マップ作成

─ 38 ─

猛・信國喜八郎………１

……………………………………………………荒木朋洋・猶崎克弘・今村正哉・河村俊介・鳥潟隆雄………９2303

スイゼンジノリ（Aphanothece sacrum（Sur.）Okada）を添加したチーズの試作およびそのタンパク質分解2304

プロテオーム解析のためのタンパク質消化最適化条件の検討………………………井越敬司・小林弘昌・小野政輝・岡本智伸・伊東保之・増岡智加子・椛田聖孝………21…………………………………高井良安希子・ティーラジェグル，ヤワラック・鳥潟隆雄・荒木朋洋………292305

簡易 DNA メチル化検定法としての Hpa Ⅱ -PCR 法 ……………………………………山下秀次・芝田2306

自然農法条件下で生育した水稲の不定根における障害根の多発

2307

琉球列島に自生するアオイボクロ Nervilia aragoana の保護を目的とした生態学的研究……………………片野………………………………………………………………………………水谷高幸・松羽2308

猛………37

學・徳久洋子………43
研・田中孝幸………51

住吉浜に生育するアマモ（Zostera marina L.）の遺伝的構造に関する研究…………………………………………………………………前原峰雄・長野克也・戸田義宏・渡辺敦史………612309

青年期におけるストレス・コーピング・スタイル−アイデンティティ確立の観点から−………………………………………………佐々亜裕美・武田慎一………692310

人格変容についての進化心理学的アプローチ…………………………………………………………武田慎一………77

2311

授業評価………………………………………………………………………………………八木ロドリゲス美樹………85

第24巻（平成17年，2005年）
2401

エレクトロスプレー質量分析におけるトリプシンペプチドイオン化に関する研究……………………………………………………………荒木朋洋・重留瑠璃・高井良安希子・鳥潟隆雄………１2402

逆相 HPLC カラムを用いたタンパク質プロファイリング ………………荒木朋洋・富田和臣・鳥潟隆雄………152403

イネミズゾウムシ幼虫の接種が水稲の生育，収量ならびに不定根形成に及ぼす影響

2404

Zoysia（日本シバ）属植物の茎頂からのカルス形成と植物体再分化2405

日本固有種ラン藻・スイゼンジノリ（Aphanothece sacrum（Sur.）Okada）の……………………………………………………………………………伊藤昌隆・片野學・新谷亜希子………23……………………………………………………………………… Anurug Poeaim・松田

靖・村田達郎………29

培養および構成単糖と機能性の検索…………椛田聖孝・岡本智伸・笹田直繁・小野政輝・井越敬司・小林弘昌・増岡智加子・伊東保之………372406

東洋的霊性：悲哀についての進化心理学的アプローチ………………………………………………武田慎一………452407

青年期の対人関係におけるストレス・コーピングと肯定的な情動−アイデンティティ確立の観点から−………………………………………………佐々亜裕美・武田慎一………53

第25巻（平成18年，2006年）
2501

イネミズゾウムシ幼虫による水稲不定根の食害と苗質，生育，収量および水田面との関係

2502

阿蘇地方におけるヤーコン（Smallanthus sonchifolius）栽培とそのサイレージ調製

2503

モンゴルの馬乳酒からのバクテリオシン生産乳酸菌の探索……………多賀直彦・松崎信治郎・原田

2504

Homo Credens についての進化心理学的序説 …………………………………………………………武田慎一………23……………………………………………………………………………………………伊藤昌隆・片野…………………………椛田聖孝・岡本智伸・小池晶琴・本田知史・本田憲昭・松田

學………１

靖・村田達郎………９
孝………15

第26巻（平成19年，2007年）
2601

国指定天然記念物「スイゼンジノリ発生地」の現状およびその保護対策…………………………………………………椛田聖孝・岡本智伸・小田原健・中薗孝裕・大住啓一郎
笹田直繁・市川

2602

勉・金子好雄・荒牧昭二郎………１

製糖工場より分離した酵母由来のインベルターゼに関する研究（英文）…………………………………………………… Nipa Milintawisamai・多賀直彦・吉田政博・荒木朋洋………７2603

ニワトリとウズラのリアルタイム PCR 解析における内在性コントロール遺伝子の検討……………………………………………………………………………山下秀次・衛藤浩太郎・関─ 39 ─

大亮………15

2604

学生相談の教育活動におけるストレスマネジメントの意義−イメージと身体的アプローチの利用−………………………………………………………………………………………………………井上久美子………23

第27巻（平成20年，2008年）
2701

13C/15N でダブルラベル化したダチョウ卵白リゾチームの Pichia pastoris での発現…………………………………………………中川博之・中嶋章悟・深溝

2702

慶・鳥潟隆雄・河村俊介………１

乾燥地におけるシードペレットおよび保水剤の利用に関する研究…………………………………………………本田知史・北野尋美・岡本智伸・原2703

敏夫・椛田聖孝………９

ウシの消化管内線虫に対するモキシデクチン製剤の有効性評価試験…………………………森友靖生・森実和子・實田正博・服部法文・椛田聖孝・谷峰人・緒方良彦

下城研一・福島さつき・加崎弘康・渡邊誠治………152704

大麦ワラサイレージの化学組成と in vitro 乾物消化率に及ぼす水分量と各種添加剤の影響（英文）2705

習熟度別学習指導の効果について−新しい大学英語教育のカリキュラム開発を目指して−………………………………………………………………………………… プラダン ラジブ・飛岡久弥………21…………………………………………………………………………………………………………磯田隆啓………27

─ 40 ─

東海大学農学部紀要
総目

次第28巻〜第30巻（2009年〜2011年）
第28巻（平成21年，2009年）
2801

膵吸虫（膵蛭）が寄生していた子牛膵臓の病理学的所見……………………………………森友靖生・望月聡子・中本幸子・茶山裕子・荒牧祐治・堀井洋一郎………１2802

トウフ粕混合サイレージの調製およびバークシャー種への給与試験……………… 久保達也・久保研一・プラダン ラジブ・岡本智伸・小野政輝・井越敬司・椛田聖孝………９2803

子豚の生理状態，発育ならびに行動に対する阿蘇黄土（リモナイト）給与の効果

2804

農学部初年次学生を対象とした学習支援環境の構築−コミュニケーションに注目した学びのための居場所…………………………………………………………………小池晶琴・本田憲昭・岡本智伸・椛田聖孝………15「あっそ〜の試み」−……………………………………………………………………………井上久美子・衞藤仁・奈良知恵………23

第29巻（平成22年，2010年）
2901

膵蛭（Eurytrema pancreaticum）が自然感染しためん羊における膵臓の病理学的所見……………………… 森友靖生・望月聡子・中本幸子・坪井亜樹・田代 誠・椛田聖孝・堀井洋一郎………１2902

鶏の頚二腹筋を用いた筋線維総数推定のための簡便法の検討……………………………………………………………………………………………仁木隆博・芝田

2903

猛………７

ニンジンジュース粕サイレージの調製およびバークシャー種への給与試験………………………………………浜田俊雄・小山陽子・本田憲昭・槐島清文・岡本智伸・椛田聖孝………112904

ダチョウ卵白由来グース型リゾチームとジスルフィド結合欠失変異体の大腸菌での発現系の確立………………………………………………………………中嶋章吾・千々岩有紀・鳥潟隆雄・河村俊介………172905

グース型リゾチームの分子内コアに位置する Tyr147を Ala に置換した変異体の解析……………………………………………………………仲宗根公一・千々岩有紀・鳥潟隆雄・河村俊介………272906

大学体育における知識・能力の形成（5）−基礎的な戦術を内容とした実験授業−……………………………………………………笠井妙美・西田明史・水月晃・柿原一貴・則元志郎………35

第30巻（平成23年，2011年）
3001

ヤシ繊維基盤ロールを基材としたハナカンナ植栽による水質浄化………………………………………工藤匡平・梶田真祥・浜田俊雄・小池晶琴・岡本智伸・椛田聖孝………１3002

グース型リゾチームの分子内コアに位置する Tyr169を Phe に置換した変異体の解析…………………………………………………………………堀口貴広・川口裕也・河村俊介・荒木朋洋………７3003

オオルリシジミの分散性と死亡要因における卵寄生蜂の評価…………………………………………………………………………………………村田浩平・岩田眞木郎………153004

メロンがんしゅ病菌（Streptomyces sp.）に対するアクチノファージの検出とその性質……………………………………………………………………………………………藤木圭太・吉田政博………21

─ 41 ─PROCEEDINGSOFSCHOOL OF AGRICULTURE
KYUSHU TOKAI UNIVERSITYFULL LIST OF CONTENTS
Vol.1〜 Vol.27（1982〜2008）
Vol.1

１９８２

0101

Analysis on the Trend of Rice Yield in Kyushu District…………………………Yoshisuke Fujii and Manabu Wada………１

0102

Karyological Studies in Some Species of Pinus ………… Yoshihiro Toda, Katsuya Kawabata and Katsuya Nagano………７

0103

Computer-Aided Classication on Rural Communities and Agricultural Development Planning

0104

Basic Studies on Development of Excellent Strains in Japanese Beef Cattle……………………………………………………………………………………………… Mamoru Yamanaka………17
Ⅰ．Preweaning Growth of Calves by Linecrossing of Japanese Black Breed………………………………………………………………………… Kazuo Kumazaki and Takeshi Shibata………35
0105

Effect of Nitrogen Fertilizing on the Voluntary Intake and the Daiey Gain of Grazing Steers…………………………………………………………… Masatake Kikuchi, Hitoshi Tano and Fumio Shibata………430106

Gas Chromatographic Analysis of Diethylstilbestrol Dichloroacetyl Standard …………………… Hisaya Tobioka………490107

Studies on Utilization of Cold Resistant Chlorella as Livestock Feed

0108

A Study on the Development of Motor Ability in Infants………………… Kiyotaka Kabata, Masamoto Shimizu, Shoji Hatano, Haruo Sadakane and Tadao Watanabe………55
Ⅰ．On the Frequency of Motor Ability Test in Public Nursery Schools of Kumamoto City………………… Hisashi Yonezawa, Yoshinori Shigaki, Torao Nishioka, Kouichi Ohta and Toshiro Dobashi………61

Vol.2

１９８３

0201

Water Absorption of Apple Trees During Dormancy ………………………………………………… Ichiro Iizuka………１

0202

Studies on the Integrated Control Countermeasure against Diseases of0203

On the Karyotype of Cryptomeria japonica D. DON（Ⅻ） ……………………………………… Yoshihiro Toda………190204

The Field Research on the Nutritional Productivity of the Improved and Native Grasslands in Aso

Vegetable Culture on Purpose of Environmental Integrity …………………………………… Kenzoh Kobayashi………７……………………………………………………… Hisaya Tobioka, Masatake Kikuchi and Masanobu Kato………25
0205

The Relationship Between Heart Rate and Heat Production of Japanese Brown Cattle………………………………………… Hisaya Tobioka, Masatake Kikuchi, Masanobu Kato, Masaki Shibata,
Shinichi Kume, Shizuo Takizawa, Masuo Yagi and Yuji Nakanishi………310206

Studies on the Flavors of Katsuo-bushi
Ⅲ．Volatile Hydrocarbons and Neutral, Non-Carbonyl Oxygenated Compounds ……………… Yasuyuki Ito………350207

A Study on the Development of Motor Ability in Infants
Ⅱ．On Development Tendency of Childrenʼs Motor Ability in Each Item as Age Goes on………………………………………………………… Kouichi Ohta, Toshiro Dobashi and Yoshinori Shigaki………450208

A Study on the Development of Motor Ability in Infants
Ⅲ．On Development of Childrenʼs Motor Ability Shown in T-Score as Age Goes on………………………………………………………… Toshiro Dobashi, Kouichi Ohta and Yoshinori Shigaki………55

0209

A Study on the Development of Motor Ability in Infants
Ⅳ．Standardization by the Use of 5 Grading Method ……………… Hisashi Yonezawa and Yoshinori Shigaki………63

─ 42 ─

Vol.3

１９８４

0301

Econometric Analysis on the Problem of Prices of Vegetables in Kumamoto City …………… Mamoru Yamanaka………１

0302

Basic Studies on Development of Excellent Strains in Japanese Beef Cattle
Ⅱ．Genetic and Environmental Effects on Preweaning Growth of Japanese Brown Calves………………………………………………………………………… Takeshi Shibata and Kazuo Kumazaki………15

0303

Basic Studies on Development of Excellent Strains in Japanese Beef Cattle
Ⅲ．Genetic Factors Affecting Growth and Carcass Traits of Japanese Brown Cattle………………………………………………………………………… Kazuo Kumazaki and Takeshi Shibata………23

0304

Grazing Behaviour and Production of the Japanese Brown Cattle on the Pasture Adjacent to the Barn……………………………………………………… Hisaya Tobioka, Masatake Kikuchi and Masanobu Kato………310305

The Changes of the Urinary Excretions and the Plasma Concentrations of Certain Nitrogen Compounds
in a Castrated and a Partially Castrated Male Sheep Injected with Synthetic Estrogen………………………………………………………………………… Hisaya Tobioka and Ryoji Kawashima………390306

Investigation of Gastrointestinal Nematodes in Sheep …………………… Yasuo Moritomo and Hirozo Ashizawa………450307

Physical and Adaptive Changes in Phenomena on the Plasmolysis of

0308

A Study on the Development of Motor Ability in Infants

0309

Cultivation and Utilization of the Water Hyacinth and the Invention of the Facility for its Cultivation

0310

Environmental Conservation for Economic Development in Asia and the Pacic Region

Saxifraga stolonifera with Changing Temperature …………………………………………………… Masao Yae………51
Ⅴ．Changes in the Communality with Factor Analysis as Age Goes on …………………… Hisashi Yonezawa………57……………………………………………………………………… Masamoto Shimizu and Kiyotaka Kabata………65……………………………………………………………………………………………… Masamoto Shimizu………75

Vol.4

１９８５

0401

Cytrogenetical Studies on Taxodiaceae

0402

Some Aspect on Mutational Induction of Streptomycin Resistance in Erwinia carotovora subsp.carotovora

0403

Effects of Winter Temperatures on Egg Production in Domestic Fowl

0404

Basic Studies on Development of Excellent Strains in Japanese Beef Cattle

Ⅴ．Karyotype of Taxodiaceae ………………………………………………………………… Yoshihiro Toda………１……………………………………………………………………… Kenzoh Kobayashi and Masahiro Yoshida………19……………………………………………………… Takahiro Niki, Kihachiro Nobukuni and Takao Torikata………27
Ⅳ．Sire Evaluation for Beef Production Trait of Japanese Brown Cattle by BLUP Method………………………………………………………………………… Kazuo Kumazaki and Takeshi Shibata………350405

Basic Studies on Development of Excellent Strains in Japanese Beef Cattle
Ⅴ．Sire Evaluation for Growth and Carcass Traits of Japanese Brown Cattle by Multiple Trait BLUP Procedure………………………………………………………………………… Kazuo Kumazaki and Takeshi Shibata………430406

Nodular Parasitic Foci Caused by Filaroides martis in the Lungs of Weasels…………………………………………………… Hirozo Ashizawa, Yasuo Moritomo and Susumu Tateyama………49

0407

Pathological Findings of Oesophagostomiasis in the Domestic Animals
Ⅰ．Lesions of Field Infection Cases in Cattle……………………………… Hirozo Ashizawa, Yasuo Moritomo, Susumu Tateyama and Masakazu Miyoshi………55

0408

Pathological Findings of Oesophagostomiasis in the Domestic Animals
Ⅱ．Lesions of Naturaly Infected Sheeps……………………………… Hirozo Ashizawa, Yasuo Moritomo, Susumu Tateyama and Masakazu Miyoshi………650409

Distribution of C-cells in Equine Thyroid Gland and Parathyroid Gland………………… Yasuo Moritomo, Hirozo Ashizawa, Susumu Tateyama, Ryoji Yamaguchi and Dai Nosaka………75

0410

The Fattening Performance of Swine Given the tofu Cake Ration……………………………………………………… Hisaya Tobioka, Masatake Kikuchi and Masanobu Kato………83

─ 43 ─

0411

Studies on the Absorption of Nitrogen and Phosphorus from Eutrophic Water by
Water Hyacinth and Preparation of High-moisture Silage of the Plants………………………………………………………… Kiyotaka Kabata, Masamoto Shimizu and Ichiro Goto………93

0412

Relation between the Phenolic Compound in Green Leaves and the Protein Extracted,
Mainly in the Case of Water Hyacinth ……………………………………………………… Nobuyuki Ashikari………99

0413

Proteolysis in Gouda-Type Cheese during Ripening……………………………… Keiji Igoshi, Hiromasa Kobayashi, Shuichi Kaminogawa and Kunio Yamauchi ……1050414

Studies on the Keeping Quality of UHT-Pasteurized Milk…………………………………………… Yasuyuki Ito ……1110415

Discriminant Analytic Study to Clarify the Distinction in a Consciousness andPhysique of Wheelchair Basketball Players ………………………………………………… Hisashi Yonezawa ……117

Vol.5

１９８６

（No.1−4 is Changed to Vol.1−4, respectively）
0501

Seasonal Changes of Freezing Tolerance of Apple Shoot Tips …………………………………… Manabu Katano………１

0502

Rice Culture under the Natural Farming System without Chemicals and Barnyard Manure
Ⅵ．Yield Survey at Tohoku, Hokuriku and Kyushu Districts in 1984…………………………………………………………………………… Manabu Katano and Akitatsu Asami………７0503

Rice Culture under the Natural Farming System without Chemicals and Barnyard Manure
Ⅷ．Growth and Yield of Rice Plants and Ecological Response of Weeds in Ill-and
Well-drained Paddy Field, A Case Study in Kumamoto Prefecture ………………………… Manabu Katano………15

0504

Anatomical Observation on the Gametogenesis in Sweet Potato, Ipomoea batatas（L.）Lam.

0505

Cytogenetical Studies on Taxodiaceae

0506

Increase in the Use of the Computer in Agricultural Sector and the Necessity for Education on Software………………………………………………………………………………………………… Tatsuro Murata………23
Ⅵ．Karyotype of Taxodiaceae ⑵ ……………………… Yoshihiro Toda, Katsuya Nagano and Kouji Kaminishi………33……………………………………………………………………………………………… Mamoru Yamanaka………450507

Basic Studies on Development of Excellent Strains in Japanese Beef Cattle
Ⅵ．Inuence of Some Factors on Most Probable Producing Ability of Japanese Brown Cow………………………………………………………………………… Kazuo Kumazaki and Takeshi Shibata………55

0508

Feminization of the Male Left Gonad of Chicks by Injection of Estrogen during Incubation,
Especially on the Interrelations between Doses and Morphological and Histological Changes………………………………………………… Fukashi Koyanagi, Shinya Masuda and Hisayoshi Nishiyama………610509

Comparison of the Methods of Preparing Grass Sample Used for Proximate Analysis…………………………………………………………………………… Hisaya Tobioka and Masanobu Kato………71

0510

Methods of Sample Preparation for Determination of Volatile Fatty Acids in Rumen Fluid…………………………………………………………………………… Hisaya Tobioka and Masanobu Kato………77

0511

The Effect of Hexestrol Dicaprylate Injection on the Growth and Body Composition of
the Hamster Fed with a Diet Containing Crude Fiber at High Level………………………………………………………………………… Hisaya Tobioka and Ryoji Kawashima………83

0512

Pathological Findings of Oesophagostomiasis in the Domestic Animals
Ⅲ．Lesions of Natural Infection Cases in Pigs……………………………… Hirozo Ashizawa, Yasuo Moritomo, Susumu Tateyama, and Masakazu Miyoshi………89

0513

Changes of the Chemical Composition and Properties from Colostrum to Normal Milk of Jersey Cows

0514

Effect of pH on the Extraction of Proteinase from Gouda-Type Cheese……………………………………… Hiromasa Kobayashi, Keiji Igoshi, Shunrokuro Arima and Yasuyuki Ito………99……………………………………………………… Keiji Igoshi, Hiromasa Kobayashi, Shunrokuro Arima,
Shuichi Kaminogawa and Kunio Yamauchi ·……1050515

Some Properties of Fraction of Dipeptide Hydrolyic Enzyme Extracted from Gouda-Type Cheese…………………………………………………… Keiji Igoshi, Hiromasa Kobayashi and Shunrokuro Arima ·……109

0516

Extractability and Articial Digestibility of Protein in Leaves of Several Plants ……………… Nobuyuki Ashikari ·……113

─ 44 ─

0517

Formation of Lysinoalanine during Heat-Treatment of Milk and Its Inhibition ……………………… Yasuyuki Ito ·……1170518

Studies on Creatine Kinase of Fishes ………………………………………………………………… Yasuyuki Ito ·……123

0519

Agility, Power and Heart Lung Function Status of Our University Students Measured by Sports Test…………………………………… Hisashi Yonezawa, Kouichi Ohta, Toshiro Dobashi and Yoshinori Shigaki ·……131

Vol.6
0601

１９８７

Propagation of Japanese Cherry（Prunus jamasakura SIEB. ex KOIDZ.）by Shoot-tip Culture………………………………………………………………………………………………… Manabu Katano………１

0602

Rice Culture under the Natural Farming System without Chemicals and Barnyard Manture
Ⅹ．Chemical Characteristics of the Soil and Root System Formation in Rice Plants in
Well-and Ill-drained Paddy Field, A Case Study in Kumamoto Prefecture ………………… Manabu Katano………５

0603

Relation between the Population of Rhizoctonia spp. and the Appearance of Root Rot of Japanese Radish

0604

Economic Analysis of the Computer Network System on Agricultural Market ………………… Mamoru Yamanaka………230605

Basic Studies on Development of Excellent Strains in Japanese Beef Cattle

in Reclaimed Fields of Natural Grasslands…………………………… Masahiro Yoshida and Kenzoh Kobayashi………17

Ⅶ．Factors Affecting Body Weight and Body Measurements of Japanese Brown Heifer
at Twelve Months of Age and Relationship among Those Body Sizes………………………………………………………………………… Takeshi Shibata and Kazuo Kumazaki………47
0606

Study on the Constituents of Ruminal Fluid and the Blood Characteristics ofJersey Cow Maintained in the Stock Farm of Kyushu Tokai University…………………………………………………………………………… Hisaya Tobioka and Masanobu Kato………57

0607

Effect of Salinomycin on Body Weight Gain, Feed Efciency and Reproduction of Growing Heifers
of Japanese Brown Breed …………………………… Hisaya Tobioka, Masatake Kikuchi and Masanobu Kato………63

0608

Effect of Salinomycin on the Constituents of Ruminal Fluid and the Blood Characteristics
of Growing Heifers of Japanese Brown Breed ……… Hisaya Tobioka, Masatake Kikuchi and Masanobu Kato………69

0609

Pathological Findings of Oesophagostomiasis in the Domestic Animals
Ⅳ．Lesions of Naturally Infected Goats……………………………… Hirozo Ashizawa, Yasuo Moritomo, Susumu Tateyama and Masakazu Miyoshi………77

0610

Effect of Prostaglandins on Synchronization of Estrus in Beef Cattle on Pasture………………………………………… Hiroshi Wada, Katsumi Higaki, Yoshimi Ishibashi and Toshifumi Eno………89

0611

Basic Studies on the Practical Use of Water Hyacinth Silage− Preparation of Water Hyacinth Silage by the Addition of Concentrated Waste Solution of
Alcoholic Fermentation of Molasses −…………………………… Kiyotaka Kabata, Masamoto Shimizu, Nobuyuki Ashikari and Masatake Kikuchi………95

0612

Protein Extraction from Dry Powder of Water Hyacinth………………………………………………… Nobuyuki Ashikari, Kiyotaka Kabata and Masamoto Shimizu………99

0613

Psychological Analysis of the Pitcher and Catcher in BaseballOn Behavioral Characteristics of the Batteries in Our University Baseball Club…………………………………………………………………………… Kouichi Ohta and Hisashi Yonezawa ·……105

Vol.7
0701

１９８８

Rice Culture under the Natural Farming System without Chemicals and Barnyard Manure
Ⅺ．Varietal Response to Yield in Kyushu District…………………………………………………… Manabu Katano, Mitsuaki Uemura and Hiroyuki Asakura………１

0702

Evaluation of the Efciency of Native Natural Enemies in the Citrus Orchards …………………… Keigo Nohara………110703

Studies on the Ovipositing Behaviour of Chilocorus kuwanae SILVESTRI（Coleoptera, Coccinellidae）

0704

Biological Study of Cybocephalus gibbulus（ERICHSON）,（Coleoptera, Cybocephaliedae）,………………………………………………………………………………… Keigo Nohara and Makio Iwata………17
a Predator of the Scale Insects in the Citrus Orchards ………………………… Keigo Nohara and Makio Iwata………25

─ 45 ─

0705

Effect of Salinomycin on Feed Digestibility of Growing Heifers of Japanese Brown Breed……………………………………………………… Hisaya Tobioka, Masatake Kikuchi and Masanobu Kato………33

0706

Intake of Forage by Jersey Heifer Grazing on a Ladino Clover Dominant Pasture,and its Inuence on Fertility and Udder of the Cattle……………………………………………Hiroshi Wada, Masataka Yuhara, Takeo Ikemoto, Motowo Senowo,
Shiroh Okushima, Shigeru Fukushima and Makoto Morita………37

0707

Pathological Findings of the Hepatic Lesions in Swine Infected with Stephanurus dentatus

0708

Pulmonary Lesions Caused by Stephanurus dentatus in Swine

0709

Morphological Studies on Congenital Abnormality in Cattle

0710

Studies of Japanese Pheasant Lysozyme…………………………………………………… Hirozo Ashizawa, Yasuo Moritomo and Susumu Tateyama………47…………………………………………………… Hirozo Ashizawa, Yasuo Moritomo and Susumu Tateyama………57
Ⅰ．Congenital Bilateral Anophthalmia……………… Yasuo Moritomo, Hirozo Ashizawa and Hozumi Tanaka………65
Ⅰ．Purication, General Properties of Protein and Catalized Reaction……………………………………………………… Takao Torikata, Mayumi Kuramoto and Tomohiro Araki………73
0711

Studies of Japanese Pheasant Lysozyme
Ⅱ．Amino Acid Sequence of Japanese Pheasant Lysozyme……………………………………………………… Tomohiro Araki, Mayumi Kuramoto and Takao Torikata………81

0712

Psychological Analysis of the S・M・A Test on the Gymnastic Players at Our University…………………………………… Yoshinori Shigaki, Kouichi Ohta, Toshiro Dobashi and Hisashi Yonezawa………87

Vol.8

１９８９

0801

Characteristics of Berry Setting inʻ Kyohoʼ Grape ……………………… Haruki Komatsu and Shoichi Nakagawa………１

0802

Culture Condition on Shoot Tip Culture of Sweet Potato, Ipomoea batatas（L.）Lam.
……………………………………………………………… Tatsuro Murata, Hisao Fukuoka and Yuzo Miyaji………９0803

Production of Plants with Reduced Chromosome Number by para-Fluorophenylalanine
Treatment in Sweet Potato, Ipomoea batatas（L.）Lam.
……………………………………………………………… Tatsuro Murata, Hisao Fukuoka and Yuzo Miyaji………15

0804

Effects of Several Amino Acids on Protoplast Culture of Sweet Potato, Ipomoea batatas（L.）Lam.
……………………………………………… Tatsuro Murata, Koki Hoshino, Hisao Fukuoka and Yuzo Miyaji………230805

Study of the Primary Structure of Yam（Dioscorea opposita Thunb.）Tuber Chitinase
Ⅰ．Amino Acid Sequence of the Tryptic Peptides…………………………………………………… Tomohiro Araki, Daizo Koga, Akio Ide and Takao Torikata………29

0806

Habitat and Plant Communities in the Range at Mt.Aso
Ⅰ．The Habitat in the Range at Mt. Aso……………………………………………………… Masamoto Shimizu, Kiyotaka Kabata, Tetsuo Iwamizu,
Chinobu Okamoto and Masatake Kikuchu………370807

Effects of Androgen and / or Thyroid Hormone Deciency on Growth and Skeletal Muscle Weights in Domestic Fowl…………………………………………………………………………Takahiro Nikki and Kihachiro Nobukuni………47

0808

Effect of Prostaglandin on Bovine Corpus Luteum in Vitro…………………………………………………………… Hiroshi Wada, Takashi Ishii and Takehiko Ishibashi………55

0809

Effects of PGF2α and Its Analog on Synchronization of Estrus Cycle in Cows ……………………… Hiroshi Wada………630810

Erratic Parasitism of Setaria sp. in the Lungs and Mesenteric Lymph-node of Cattle

0811

Histopathological Findings of Trichuriasis in Cattle and Sheep…………… Hirozo Ashizawa and Yasuo Moritomo………77

0812

Pathological Findings of the Pulmonary Lesions Caused by Metastrongylus spp. in Wild Boars………………………………………………………………………… Hirozo Ashizawa and Yasuo Moritomo………69………………………………………………………………………… Hirozo Ashizawa and Yasuo Moritomo………85

─ 46 ─

Vol.90901

１９９０

Cytogenetical Studies on Variations of Conifer
Ⅰ．Variation of Cryptomeria japonica D. DON ……… Miki Nakamura, Katsuya Nagano and Yoshihiro Toda………１

0902

Research on the Infection Source of Bacterial Soft Rot Disease in Japanese
Radish Fields Reclaimed from Natural Grassland………………………………………………………Kenzo Kobayashi, Kiyoshi Haruta and Masahiro Yoshida………９0903

Study on the Insect Community on Flower
Ⅰ．On the Behaviour of the Flower-visiting Hymenopterous Insects in Iriomote Island ……… Makio Iwata………17

0904

Econometric Analysis of Changes in Price of Summer Orange under the Trade Liberalization……………………………………………………………………………………………… Mamoru Yamanaka………25

0905

A Case Study on Rural Development−Community Leadership as a Prime Mover……………………………………………………………………………………………… Yasumitsu Ienaga………33

0906

Studies on the Cultivation and Utilization of Water Hyacinth−The Growth Analysis and Solar Energy Efciency of the Community−…………………………… Chinobu Okamoto, Kiyotaka Kabata, Masamoto Shimizu and Masatake Kikuchi………450907

Morphology and Distribution of Lead-hematoxylin Positive Cells in the Pituitaries
of Domestic and Experimental Animals ………… Takehiko Ishibashi, Makiko Taniguchi and Yasuo Moritomo………530908

Studies of the Optic Regions on Anophthalmic Calves Using Three Dimensional Image Analyzer……………………………………………………………………… Yasuo Moritomo and Takehiko Ishibashi………61

0909

Histopathological Findings of the Pulmonary Lesions Associated with Dictyocaulus viviparus Infestation in Cattle…………………………………………………………………………

0910

Pathological Studies of the Swine Kidney-worm Disease

0911

Pathological Studies of the Swine Kidney-worm Disease

Hirozo Ashizawa and Yasuo Moritomo………67

Ⅰ．Distribution of the Lesions Caused in Urinary Organs …………… Hirozo Ashizawa and Yasuo Moritomo………75
Ⅱ．Histopathological Findings of the Lesions Caused in Urinary Organs………………………………………………………………………… Hirozo Ashizawa and Yasuo Moritomo………83
0912

Chemical Modication of Histidine Residues of Guineahen Egg-white Lysozyme………………… Mayumi Kuramoto, Hirofumi Inaba, Shigeki Asakawa, Tomohiro Araki and Takao Torikata………91

0913

Esterase Activity of Lysozymes…………………………………… Shigeki Asakawa, Mayumi Kuramoto, Tomohiro Araki and Takeo Torikata………97

Vol.10１９９１

1001

Studies on the Formation of Rice Root System with a Special Emphasis on the Effect of Transplanting Season

1002

Shoot-tip Culture of Japanese Flowering Cherry（Prunus yedoensis MATSUM.）

1003

Studies on the Protoplast Culture……………………………………………………… Fumio Okamura, Manabu Katano and Hiroshi Kurihara………１
and Possible Cryopreservation of Shoot-tip in Liquid Nitrogen ……………… Manabu Katano and Ryoji Irie………17
Ⅰ．Procedure of Protoplast Culture of Lettuce（Lactuca sativa L.）………………………………………………… Takayuki Tanaka, Tadashi Matsumura and Yasuhiro Morinaga………29
1004

Plant Regeneration from Stem Callus and Rapid Clonal Propagation by Roller Tube Culture of Sweet Potato,

1005

Effects of Virus Elimination on Seed Setting in Sweet Potato, Ipomoea batatas（L.）Lam.

1006

Comparison of Inorescence Morphology and Leaf Anatomy between Ryegrass, Tall Fescue and Their Hybrids

1007

Cytogenetical Studies on Variations of Conifer

Ipomoea batatas（L.）Lam. ……………………………………………… Tatsuro Murata and Hisao Fukuoka………37………………………………………………………………………………………………… Tatsuro Murata………45……………………………………………………………………………………Caifu Chen and Hisao Fukuoka………57
Ⅱ．Karyotype of Bud Mutant in Cryptomeria japonica D. DON………………………………………………………… Miki Nakamura, Katsuya Nagano and Yoshihiro Toda………67

─ 47 ─

1008

Study on the Chromosome of Cupressaceae
Ⅷ．Karyotype of Juniperus …………………………… Katsuya Nagano, Miki Nakamura and Yoshihiro Toda………75

1009

Existnence of N-terminal Domain in Yam（Dioscorea japonica Thunb.）Aerial Tuber Acidic Chitinase
and Its Amino Acid Sequence……………………… Jiro Funatsu, Tomohiro Araki, Takao Torikata, Fumio Miake, Daizo Koga and Akio Ide………89

1010

Relationship between Vegetation and Underground Rhytomass in Some Vegetation Types of Grazing Pasture……………………………………………………Chinobu Okamoto, Kiyotaka Kabata and Masatake Kikuchi………97

1011

The Effects of Various Additives on the Digestibility and Intakes of Whole-crop Barley Silages by Wether……………………………………………………………… Hisaya Tobioka, Rajeev Pradhan and Iwao Tasaki ·……105

1012

Effects of Thyroid Hormone on Growth and Feed Consumption of Chicks in Different Ambient Temperatures……………………………………………………………………… Kihachiro Nobukuni and Takahiro Nikki ·……113

1013

Morphology and Distribution of Langerhans Cell in the Epidermis of Cattle………………………………… Takehiko Ishibashi, Makiko Narita, Juanito A. Eyadan and Yasuo Moritomo ·……121

Vol.111101

１９９２

Lipid Changes of Unicellular Cyanobacterium, Synechococcus sp. Miami BG 43511 during the Synchronous Growth……………………………………Kiyotaka Kabata, Chinobu Okamoto, Masatake Kikuchi and Akira Mitsui………１

1102

Effects of Colcemid and Vinblastine Sulfate on the Chromosomal Analysis of the Demi-Embryos Derived from
8-cell Stage Mouse Embryos ………………………………………………Shoji Ookutsu and Fukashi Koyanagi………７1103

Inuences of Age and Estrous Cycle on the Number of Embryos Recovered from Superovulated Mice……………………………………………………………………………Shoji Ookutsu and Fukashi Koyanagi………15

1104

Micro Solid Phase Manual Amino Acid Sequencing Method Using PVDF Memblane……………………………………………………… Tomohiro Araki, Mayumi Kuramoto and Takao Torikata………211105

Effects of Lesion of the Hypothalamic Median Eminence on Weights of Muscle, Bone, Viscera and Fat in Cocks……………………………………………………………………… Takahiro Nikki and Kihachiro Nobukuni………27

1106

Effects of Pasture Management on Vegetations in Aso Area

1107

Genetic Polymorphism and Gene Effect on the Concentration of Equine C3

1108

Cultivation of Bupleurum falcatum L.

……………………………………………………Chinobu Okamoto, Kiyotaka Kabata and Masatake Kikuchi………33…………………………………………………………………………………Takeshi Shibata and Tsuneo Abe………43
Ⅲ．Growth and Development of Seedling Sowed in Autumn……………………………… Toshiya Sasahara, Hideaki Utsunomiya, Manabu Katano and Hiroshi Kurihara………51
1109

Cultivation of Bupleurum falcatum L.
Ⅳ．Root System and Content of Saikosaponins……………………………………… Toshiya Sasahara, Yasuyuki Ito, Manabu Katano and Hiroshi Kurihara………61

1110

Rice Culture under Nature Farming in Japan …………

1111

N, P and K Fertilization, Absorption, Yield and Quality in Mat Rush Production at Yatsushiro, Kumamoto Prefecture

Preecha Neera, Manabu Katano and Toshihiro Hasegawa………67……………………………………………………Toshihiro Hasegawa, Kazunori Oshima and Manabu Katano………75
1112

Relationship between Soft-Rot Bacteria of Vegetables and Crystal Violet Tolerant Bacteria in the Mixed Culture

1113

Studies on Streptomycin Resistant Mutation in Soft-Rot Bacteria of Vegetables ……………… Kenzo Kobayashi………91

1114

Studies on the Insect Community on Flower…………………………………………………………………………………………………Kenzo Kobayashi………83

Ⅱ．The Interspecic Relations among Flower-visiting Insects in Iriomote Island ……………… Makio Iwata………99

Vol.12

１９９３

1201

Plant Regeneration from Anther Culture of Sweet Potato, Ipomoea batatas（L.）Lam.

1202

Partial Amino Acid Sequence of Low Molecular Weight Acidic Chitinase…………………………………………………………………………… Tatsuro Murata and Hisao Fukuoka………１
from Yam（Dioscorea japonica）Aerial Tuber─ 48 ─

……………… Masakazu Nomura, Tomohiro Araki, Hiroyuki Konno, Mayumi Kuramoto and Takao Torikata………111203

Prediction of Porcine Halothane Genotypes by mean of Haplotypes（Hal, Gpi, α 1Bg, 6Pgd）

1204

Preliminary Experiment on the Effect of Additives on Digestibility and Intake………………………………………………………………… Takeshi Shibata, Tsuneo Abe and Tomiji Akita………19
of Whole-crop Barley Silages with Lamb …………………… Hisaya Tobioka, Tohru Ohtsuka and Iwao Tasaki………27
1205

Effect of Dip-treatment of Rice Straw with Sodium Hydroxide Solution on Chemical Composition
and in vitro Dry Matter Digestibility ………Rajeev Pradhan, Kohichi Sawada, Hisaya Tobioka and Iwao Tasaki………33

1206

Relationship between Vegetation and Productivity of Grazing Native Pasture in Aso Area……………………………… Chinobu Okamoto, Norihumi Hattori, Kiyotaka Kabata and Masatake Kikuchi………39

1207

Observations on the Suckling Behaviour of Twin Lambs in the Pasture………………………………………………………… Tetsuya Seo, Takahiro Nikki and Kihachiro Nobukuni………49

1208

Inuences of Androgen Injected at an Early Stage of Incubation on the Development of Fowl Gonads…………………………………………… Shinya Masuda, Eiji Nakata, Shoji Ookutsu and Fukashi Koyanagi………55

1209

Morphology and Distribution of Langerhans Cells in the Epithelium of the Digestive and Reproductive Tracts of Cattle……………………………………akehiko Ishibashi, Juanito A. Eyadan, Makiko Narita and Yasuo Moritomo………63

Vol.131301

１９９４Studies on the Breeding of Small-Seed Watermelon………………………………………………………… Satit Wimol, Takayuki Tanaka and Takayuki Mizutani………１

1302

Study on the Floret Culture of Higo-chrysanthemum …………………

1303

Ovule Culture of Sweet Potato, Ipomoea batatas（L.）Lam.

1304

Studies on the Insect Cummunity on Flower

1305

The Insect Fauna of Paddy Field in Aso Area

Takayuki Mizutani and Takayuki Tanaka………９Ⅰ．Pretreatment and Culture Condition ………………………………… Tatsuro Murata and Hisao Fukuoka………15
Ⅲ．Seasonal Change in Flower-visiting Activity of Wild Bees in Iriomote Island ……………… Makio Iwata………21
Ⅰ．Comparision of Paddy Fields under the Sustainable and the Customary Cultivations.
……………………………………………………………………………… Kouhei Murata and Keigo Nohara………33

Vol.141401

１９９５

Triploid Plants from Small Seeds of Polyembryonic Citrus Cultivars……………………………………………………… Pichit Toolapong, Haruki Komatsu and Masao Iwamasa………１

1402

Prediction of Rice Growth and Yield based on the Weather-Crop Relation in Kumamoto Prefecture
Ⅰ．Prediction of Developmental Stages…………………………………… Toshihiro Hasegawa, Yoshinori Miyachi, Hideaki Shigaki, Junya Takano,Manabu Miura, Ken Sakihara and Manabu Katano………９1403

Prediction of Rice Growth and Yield based on the Weather-Crop Relation in Kumamoto Prefecture
Ⅱ . Prediction of Dry Matter Production ……………… Junya Takano, Toshihiro Hasegawa and Manabu Katano………17

1404

Ecological Studies on the Wild Orchids of Iriomote-jima Island

1405

The Insect Fauna of Paddy Field in Aso Area……………………………………………………………………… Takayuki Tanaka and Takayuki Mizutani………25
Ⅱ．The Inuence of the Paddy Field Management on the Seasonal Fluctuationof Rice Water Weevil（Lissorhoptrus oryzophilus KUSCHEL） …………… Kouhei Murata and Keigo Nohara………33
1406

Hyaluronidase Inhibitors of Onion（Allium cepa L.）Skin………………………………………… Yasuyuki Ito, Masateru Ono, Chikako Masuoka（nee Kohriyama）,
Shoji Yahara and Toshihiro Nohara………431407

Growth Performance of Japanese Brown Cattle Fed Concentrate-Based Diets with

1408

Effects of Actibated Charcoal on Growth, Ruminal Characteristics, Blood Proles and Feed Digestibility

and without Activated Charcoal in Practical Beef Operations ………… Hisaya Tobioka and Ernesto P. Garillo………49
in Growing Sheep …………………………………… Ernesto P. Garillo, Rajeev Pradhan and Hisaya Tobioka………57

─ 49 ─

1409

Preliminary Application of Nursing Facilities for Calves Separated
from Grazing Cows to Grazing Management of Japanese Brown Cattle−Behaviour of Calves in Nursing Facilities for Calves Separated from Grazing Cows………………………………………… Norifumi Hattori, Hisaya Tobioka, Katsunori Kasuga, Hideaki Ijichi,
Hidefumi Sakai, Ikuo Saruwatari and Masanobu Kato………65

Vol.15

１９９６

1501

Root System Development of Mat Rush by Soil Prole and Monolith Method

1502

Numerical Relationship between the Stems and Adventitious Roots per Hill in Mat Rush

1503

A New Strawberry Cultivar ʻHimatsuriʼ………………………………………………………………… Somyot Detpiratmongkol and Manabu Katano………１………………………………………………………………… Somyot Detpiratmongkol and Manabu Katano………11………………………………………… Hisao Fukuoka, Tatsuro Murata, Akinori Komura, Shigenori Nakao,
Toshiya Shimamura, Eiji Nakao and Hitoshi Kinouchi………19
1504

Pathogenicity and Host Range of Streptomyces sp. Causing Root Tumor of Melon

1505

Survey on the Conservation of Wild Orchid at the Yaeyama Islands and Aso Area

1506

Study on the Nypa fruticans Wurmb. in Okinawa

1507

Problems of Wholesale Markets through the Information Network System …………………… Mamoru Yamanaka………55

1508

Effect of Thyroid Hormones Deciency on the Increase in Muscle Weights of Chicks……………………………………………………………………… Masahiro Yoshida and Kenzo Kobayashi………27……………………………………………………………………… Takayuki Tanaka and Takayuki Mizutani………35（Ⅰ）The Present State of Natural Growth …… Nagahiro Nakazato, Yoshihiro Hanashiro and Katsumi Goto………49………………………………………………………………………… Takahiro Nikki and Sukit Khantaprab………63
1509

Amino Acid Sequence of Acidic Class Ⅲ Chitinase from Soybean（Glycine max L.）Seeds………………………………… Kazuyoshi Horita, Tomohiro Araki, Mayumi Kuramoto and Takao Torikata………71

Vol.161601

１９９７

Changes in Weights of Muscle, Bone,Viscera and Fat with Growth of Male Broiler Chickens…………………………………………………… Sukit Khantaprab, Takahiro Nikki and Kihachiro Nobukuni………1

1602

Effect of Activated Charcoal and Japanese Cedar Charcoal Feeding on the Blood Enzyme Activities
of Growing Sheep Fed Concentrate-based Diets………………………………………Takahiro Azuma, Fukiko Masada, Rajeev Pradhan and Hisaya Tobioka………91603

Introduction of Ammoniated Cereal Straws as Basal Diet of Japanese Brown Cattle to Cow-Calf

1604

Preliminary Application of Nursing Facilities for Calves Separated from Grazin Cows−

Operation Under Practical Farm Conditions …………… Rajeev Pradhan, Akio Kusakabe and Hisaya Tobioka………17
Suckling Milk Yield, Composition and Body Weight of Calf………………………………………………………… Norifumi Hattori, Hisaya Tobioka, Kazuto Kinugawa,
Nobuhiro Fujiwara, Tomoyuki Yamamoto and Rie Nishi………25
1605

Characteristics of Milk Composition and Milk Production in Japanese Brown Cows…………………………………………… Ken Tsuji, Chinobu Okamoto, Kiyotaka Kabata, Norifumi Hattori,
Takashi Koutaka and Masatake Kikuchi………33

1606

Study on Subsites E and F of Lysozyme

1607

Studies on the General Analysis and Cultivation Methods of Freshwater Cyanobacterium…………………………………… Mayumi Kuramoto, Tamo Fukamizo, Tomohiro Araki and Takao Torikata………39
Suizenjnori（Aphanothece sacrum（Sur.）Okada）………… Kiyotaka Kabata, Chinobu Okamoto, Takeru Odahara, Takahiro Nakazono and Masatake Kikuchi………47
1608

Shoot-tip Culture of Enkianthus perulatus Schneid. and Cryopreservation of Shoot-tip in Liquid Nitrogen……………………………………………………………………………… Iwao Sakane and Manabu Katano………55

1609

Effects of Soil Environmental Conditions on Occurrence of Root Tumor of Melon─ 50 ─

……………………………………………………………………… Masahiro Yoshida and Kenzo Kobayashi………69

Vol.171701

１９９８Survey on the Preference for Horticultural Plants and the Consciousness on Wild Orchids in Four Asian Countries………………………………………………………Takayuki Tanaka, Takayuki Mizutani, Saleh Kadzimin,
Park In-Hwan, Satit Wimol and Naohiro Ando………１

1702

Effects of Long Term Application of Organic Materials to the Paddy Field Originated fromAso Volcanic Ash on the Soil Fertility and Rice Growth
Ⅰ．Effects on the Rice Growth and Nutrient Uptake for the Initial Three Years…………………………………………………… Nobuo Ohyama, Manabu Katano and Toshihiro Hasegawa………９

1703

Morphological and Histological Changes of Right Gonad in Day-old Male Chick Injected
Estrogen at Early Stage of Incubation ………………………………… Shinya Masuda and Fukashi Koyanagi………25

1704

Factors Affecting Weight Gain of Suckling Japanese Brown Calves…………………………………………… Chinobu Okamoto, Ken Tsuji, Kiyotaka Kabata, Norifumi Hattori,
Takashi Koutaka and Masatake Kikuchi………29

1705

Study of the Separation and Purication of Soft-shelled Turtle Lysozyme……………………………………………………… Tomohiro Araki, Takaki Yamamoto and Takao Torikata………35

1706

Purication and Activity of Temminckʼs Tragopan Lysozyme…………………………………………………………… Shinobu Seki, Tomohiro Araki and Takao Torikata………41

1707

Seasonal Change of Zooplankton in the Eutrophic Kumamoto Zoo Basin………………………………………………… Bunyat Montien-Art, Takahiro Nakazono, Chinobu Okamoto,Takeru Odahara, Masatake Kikuchi and Kiyotaka Kabata………49

1708

Relationship between Zooplankton and Water Quality in Kumamoto Zoo Basin……………………………… Bunyat Montien-Art, Takahiro Nakazono, Takeru Odahara, Chinobu Okamoto,
Masatake Kikuchi and Kiyotake Kabata………61

1709

Comparison on Seasonal Variation of Zooplankton Biomass with Some Environmental Factors
in the Eutrophic Basins of Temperate and Tropical Regions……………………………… Bunyat Montien-Art, Takeru Odahara, Chinobu Okamoto, Takahiro Nakazono,
Masatake Kikuchi and Kiyotaka Kabata………75

Vol.181801

１９９９

Genetic Characteristics in Alfalfa Collected from Argentine………………………………………… Emiko Furuta, Yasushi Matsuda, Tatsuro Murata and Hisao Fukuoka………１

1802

Effect of in vitro Environmental Conditions on Somatic Embryogenesis and its Germinationfrom Nucellar Calli of ʻOhtaʼ Ponkan（Citrus reticulata Blanco）…………………………………Kohji Nagasawa, Kohichi Tomomatsu, Hisato Kunitake and Haruki Komatsu………11

1803

Histochemical Observation and Immunohistochemical Staining of Yam Chitinase of Aerial Tuberin Yam, Dioscorea Japonica Thunb. ………………………Tomohiro Araki, Tatsuro Murata and Takao Torikata………19

1804

Identication of Phytoplankton and the Relationship between Phytoplankton Biomass
and Water Quality in Kumamoto Zoo Basin……………………………… Bunyat Montien-Art, Keiichirou Osumi, Takahiro Nakazono, Takeru Odahara,
Chinobu Okamoto, Masatake Kikuchi and Kiyotaka Kabata………23

1805

Immunocytochemical Evidence for the Presence of Oxytocin in the Mouse Ovary…………………………………………………… Thevin Vongpralub, Shinya Masuda and Fukashi Koyanagi………35

1806

Internet Applications for the Instrumental Analysis Center………………Tomohiro Araki, Yuki Chijiiwa, Kiyofumi Wakabayashi, Yukiyasu Kenmotsu, Zentaro Kadota,
Kazuhiko Yodoya, Yoshito Hamahira, Keizo Tanaka, Harumiti Tagawa, Yasuhiko Ooba,
Takeshi Ideguti, Mitsumi Fujishita, Masamori Iida and Takao Torikata………43

─ 51 ─

Vol.19
1901

２０００

The Effects of Levels of Additives on the pH and Chemical Compositions of
Yellow Tail（Seriola quinqueradiata）Fish Silage……………………………………… Antonio J. Barroga, Yukiko Kumita, Rie Yoshihara and Hisaya Tobioka………１

1902

Fattening of Ducks with Tofu Cake and Fish Silage Mixed Diet after Paddy Herding……………………………………… Antonio J. Barroga, Rie Yoshihara, Yukiko Kumita and Hisaya Tobioka………11

1903

Study of the Egg White Lysozyme in Sea Turtle: Preparation and Purication of Green Turtle Lysozyme…………………………………………… Tomohiro Araki, Miyoko Kamesaki, Yuki Chijiiwa, Takao Torikata………21

1904

Study of the Changes of Protein and Lysozyme of Egg White on Embryonic Development and Storage……………… Tomohiro Araki, Yoshihito Kuwamura, Hidetomo Kuwahara, Shinya Masuda, Takao Torikata………29

1905

Histological Study on Seed Fertility in Amphidiploids of Festuca genus × Lolium genus Hybrids…………………………………… Tamami Udagawa, Yasushi Matsuda, Tatsuro Murata and Hisao Fukuoka………37

1906

Determination of Ploidy Levels of Citrus species using Flow Cytometry…………………………………… Seiichi Harusaki, Daisuke Kokuryo, Hisato Kunitake and Haruki Komatsu………45

1907

Survey and Evaluation of Old Mango Trees in Ishigaki City, Okinawa.
………………… Ken Sakihara, Akiko Ogawa, Kazuyuki Kitajima, Nagaharu Nakazato, Youichi Kawamitsu,
Hiko Tsukayama, Hisato Kunitake, Haruki Komatsu………53

1908

Present Status of Rice Cultivation under Environmentally Friendly Farming System
at Iriomote Island of Taketomi Town in Okinawa Prefecture…………………………………………………………… Manabu Katano, Ryo Koga and Nagahiro Nakazato………61

1909

Effect of Carp Density on Growth and Yield of Paddy Rice and Weed Growth

1910

Effect of Carp and Aigamo Duck Setting on Growth, Yield, and Root System of Paddy Rice,……………………………………………………… Manabu Katano, Masanari Kurihara and Isao Hashimoto………71
One Case Study at Hakusui Village of Aso District in Kumamoto Prefecture…………………………………………………………………………… Manabu Katano and Kazuaki Gomi………79

Vol.202001

２００１Studies on the Origin of Camellia wabiske……………… Takayuki Tanaka, Shuho Kirino, Naotoshi Hakoda, Kunimitsu Fujieda and Takayuki Mizutani………１

2002

Effects of Temperature and CO2 Concentration on the Growth of Citrus Plantlets……………………………………………………… Kohji Nagasawa, Hisato Kunitake and Haruki Komatsu………９

2003

Separation of the Chitinase in Potato Microtuber………………………… Tomohiro Araki, Shinobu Inoue, Yuji Sakamoto, Noboru Onishi and Takao Torikata………15

2004

Vegetation and Productivity of a Pasture Improved by Sod-seeding under Grazing Conditionsin the Aso Region of Kyushu District……………………………………………………Chinobu Okamoto, Kiyotaka Kabata and Masatake Kikuchi………25

Vol.21

２００２

2101

The On-membrane Microsequencing Technique for Proteome Analysis

2102

Study of the Physicochemical Stability of Cassowary（Casuarius casuarius）Goose-Type Lysozyme…………………………… Jureerut Pooart, Keiko Cho, Takeshi Shibata, Takao Torikata and Tomohiro Araki………１………………………………………………… Sompong Thammasirirak, Takao Torikata, Kazutoshi Takami,
Koichi Murata and Tomohiro Araki………９2103

Expression and Mutational Analysis of Hen Egg-White Lysozyme
Ⅰ．Site-Directed Mutagenesis of Phe34 in the subsite F of Hen Egg-White Lysozyme and Its Activity…………………………………… Shunsuke Kawamura, Kenji Nozaki, Tomohiro Araki and Takao Torikata………172104

The Plant Species Occurring in Grasslands of Kyushu Tokai University in the Aso Region of the Kyushu District…………………………………………………………………………Chinobu Okamoto and Kiyotaka Kabata………25

─ 52 ─

2105

Ecological Studies on the Terrestrial Orchid, Geodorum Densiorum in the Ryukyu Islands…………………………………………………… Takayuki Mizutani, Hazime Matsuba and Takayuki Tanaka………37

2106

Managing Large English Classes …………………………………………………………………… Craig S. Ellis………532107

Aspects of the Nakasone Education Reforms ………………………………… Richard S. Lavin and Craig S. Ellis………61

Vol.222201

２００３

The Genetic Relationship between Japanese Sweet Potato（Ipomoea batatas（L.）Lam）Cultivars Analyzed
by Random Amplied Polymorphic DNA………………………………………………… Yoshihiro Okada, Akira Saito, Hitomi Nasu, Sadayasu Uchita,
Chikara Miyazaki, Yasushi Matuda and Taturou Murata………１

2202

Study on the Grafting Compatibilities of Melon with the Cucurbitaceous Crops in Thailand………………………………… Takayuki Tanaka, Takayuki Mizutani, Kamol Lertrat, Nipon Jayamangkala,Satit Wimol and Suchila Techawongstien………９2203

A Comparative Analysis of a Grammar Feature-Articles …………………………………………… Craig S. Ellis………15

2204

Developing an English Language Program ……………………………… Craig S. Ellis and Miki Yagi-Rodriguez………212205

A Study on the Cognition of Interpersonal Relationship−By means of both TAT and Generalized Self-Efcacy Scale−……………………………………………………………………………… Ayumi Sassa and Shinichi Takeda………37

Vol.232301

２００４

Effect of Restricted Feeding on Weights of Muscle and Fat in Improved Brown Meat Type Commercial Chickens………………………………………………………Takahiro Nikki, Takeshi Shibata and Kihachiro Nobukuni………１

2302

Structural Analysis of Chinese Goose Lysozyme for Construction of Standard Peptide Map for Peptide Mapping……………… Tomohiro Araki, Katsuhiro Naozaki, Masaya Imamura, Shunsuke Kawamura, Takao Torikata………９2303

Trial Making and the Proteolysis of the Cheese Added Suizenjinori（Aphanothece sacrum（Sur.）Okada）……………………………………… Keiji Igoshi, Hiromasa Kobayashi, Masateru Ono, Chinobu Okamoto,
Yasuyuki Ito, Chikako Masuoka, Kiyotaka Kabata………212304

Study of the Optimized Condition of Protein Digestion for Proteome Analysis…………………………………… Akiko Takaira, Yaovalak Teerajetgul, Takao Torikata and Tomohiro Araki………29

2305

Hpa Ⅱ -PCR Method as a Convenient DNA Methylation Status Assay………………………………………………………………………… Hideji Yamashita and Takeshi Shibata………37

2306

Frequent Occurrence of Injured Adventitious Roots in Rice Plants Grown under Nature Farming…………………………………………………………………………… Manabu Katano and Yoko Tokuhisa………43

2307

Ecological Studies on the Conservation of Terrestrial Orchid, Nervilia aragoana in the Ryukyu Islands…………………………………………………… Takayuki Mizutani, Hazime Matsuba and Takayuki Tanaka………51

2308

Study of the Genetic Structure of Zostera marina L. Grown on the Sumiyoshi Beach.
………………………………………… Takao Maehara, Katsuya Nagano, Yosihiro Toda and Atusi Watanabe………61

2309

A Study on the Stress Coping Style for Adolescence

2310

The Evolutionary Psychological Perspective on Personality Change …………………………… Shinichi Takeda………77

2311

Curriculum Evaluation ……………………………………………………………………… Miki Yagi-rodriguez………85−from the View Point of Ego-Identity Formation− ………………………… Ayumi Sassa and Shinichi Takeda………69

Vol.242401

２００５Study of Ionization of Tryptic Peptides on Electrospray Ionization Mass Spectrometry………………………………………… Tomohiro Araki, Ruri Shigetome, Akiko Takaira and Takao Torikata………１

2402

Proling of Proteins Using Reversed-phase HPLC Column………………………………………………………… Tomohiro Araki, Kazuomi Tomita and Takao Torikata………15

2403

Effect of Inoculation of Rice Water Weevil Larva on Growth, Yield and Formation of Adventitious Root of Rice Plants

─ 53 ─

…………………………………………………………………Masataka Ito, Manabu Katano and Akiko Niiya………23
2404

Callus Formation and Plant Regeneration from Shoot Tips of Zoysia species

2405

Studies on the Analysis of Cultivation Conditions and Constitutive Monosaccharides,………………………………………………………… Anurug Poeaim, Yasushi Matsuda and Tatsuro Murata………29
and Function for Food in Suizenjinori（Aphanothece sacrum（Sur.）Okada Indigenous to Japan.
………………………… Kiyotaka Kabata, Chinobu Okamoto, Naoshige Sasada, Masateru Ono, Keiji Igoshi,
Hiromasa Kobayashi, Chikako Masuoka and Yasuyuki Ito………37
2406

Oriental Spirituality : Sadness from the Perspective of Evolutionary Psychology ……………… Shinichi Takeda………452407

The Interpersonal Stress Coping and Positive Emotions among Adolescents−from the Viewpoint of Ego-Identity Formation− ………………………… Ayumi Sassa and Shinichi Takeda………53

Vol.252501

２００６

Relationship between Adventitious Roots Eaten by Rice Water Weevil Larva and Seedling, Growth,
Yield and Levels of Paddy Fields …………………………………………… Masataka Ito and Manabu Katano………1

2502

Studies on the Cultivation of Yacon Plants（Smallanthus sonchifolius（Poepp. & Endl.）H. Robinson）
and the Preparation of Yacon Silage in Aso Area.
………………………………………… Kiyotaka Kabata, Chinobu Okamoto, Akiko Koike, Tomohiro Honda,
Kensho Honda, Yasushi Matsuda and Tatsuro Murata………92503

Screening of Bacteriocin-producing Lactic Acid Bacteria from Fermented Mare Milk in Mongolia

2504

An Introduction of Evolutionary Psychology about Home Credens ……………………………… Shinichi Takeda………23…………………………………………………………… Naohiko Taga, Shinjiro Matsuzaki, Takashi Harada………15

Vol.262601

２００７Studies on the Protective Measures and Current State of Japanese Natural Treasure [Suizenjinori generation ground]……………… Kiyotaka Kabata, Chinobu Okamoto, Takeru Odahara, Takahiro Nakazono, Keiichirou Osumi,
Naoshige Sasada, Tsutomu Ichikawa, Yoshio Kaneko and Shojirou Aramaki………１

2602

Study of Invertase from Yeast Isolate from Sugar Industry

2603

Study of the Selection of Appropriate Internal Control Genes for Real-Time Quantitive RT-PCR Analysis in Chicken and………………………………… Nipa Milintawisamai, Naohiko Taga, Masahiro Yoshida and Tomohiro Araki ………7
Quail……………………………………………………………… Hideji Yamashita, Kotaro Eto and Daisuke Seki………15
2604

The Meaning of the Stress Management Education in the Student Counseling Activity -In the Application of Image andPhysical Method………………………………………………………………………………………………… Kumiko Inoue………23

Vol.27
13

２００８

15

2701

Expression of C/ N Double-labeled Ostrich Egg-white Lysozyme in Pichia pastoris

2702

Studies on the Utilization of Seed-pellet and Biodegradable Polymer in Arid Area

2703

Evaluation of the Efcacy of Moxidectin Against Gastrointestinal Nematodes in Cattle………… Hiroyuki Nakagawa, Shogo Nakajima, Tamo Fukamizo, Takao Torikata and Shunsuke Kawamura………１…………………… Tomohito Honda, Hiromi Kitano, Chinobu Okamoto, Toshio Hara and Kiyotaka Kabata………９…………… Yasuo Moritomo, Kazuko Morizane, Masahiro Saneda, Norifumi Hattori, Kiyotaka Kabata, Mineto Tani,
Yoshihiko Ogata, Kenichi Shimojo, Satsuki Fukushima, Hiroyasu Kazaki and Seiji Watanabe………15
2704

Effect of Moisture Content and Addition of Different Levels of Alkali and Cellulsae on Chemical Composition and in vitro
Dry Matter Digestibility of Barley Straw Silage…………………………………………………………………………… Rajeev Pradhan and Hisaya Tobioka………212705

On the Effect of a Prociency Based Graded Program -Toward the Development of a New English Education at College……………………………………………………………………………………………………Takahiro Isoda………27

─ 54 ─PROCEEDINGSOFSCHOOL OF AGRICULTURE
TOKAI UNIVERSITYFULL LIST OF CONTENTS
Vol.28〜 Vol.30（2009〜2011）
Vol.282801

２００９

Pathological Aspects of the Pancreas Parasitized by Flukes（Eurytrema spp.）in Calves………………………………………Yasuo Moritomo, Satoko Mochizuki, Sachiko Nakamoto, Yuko Sayama,
Yuji Aramaki and Yoichiro Horii………１

2802

Preparation and Soybean Crude Residue Mixed Silage and Its Effect on Performance and Carcass Quality in
Fattening Berkshire Pigs…………………………… Tatsuya Kubo, Kenichi Kubo, Rajeev Pradhan, Chinobu Okamoto, Masateru Ono,
Keiji Igoshi and Kiyotaka Kabata………９2803

Effect of Limonite Supplementation on Physiological State, Growth and Behavior of Piglets（Berkshire)……………………………………… Akiko Koike, Kensho Honda, Chinobu Okamoto and Kiyotaka Kabata………15

2804

Trial of a Learning Environment to Support for the First-year Students in a Department of Agriculture -An Approach of“AsSO?!” Project Focused on Communication…………………………………………………………………… Kumiko Inoue, Masashi Eto and Chie Nara………23

Vol.292901

２０１０

Pathological Aspects of the Fluke（Eurytrema pancreaticum）Infected Pancreas in the Sheep……………… Yasuo Moritomo, Satoko Mochizuki, Sachiko Nakamoto, Aki Tsuboi, Makoto Tashiro, Kiyotaka Kabata
and Yoichiro Horii………１

2902

Study of Simple Methods to Estimate Number of Muscle Fibers by using M. biventer cervicis of Chicken…………………………………………………………………………… Takahiro Nikki and Takeshi Shibata………７2903

Preparation of Carrot Juice Residue Mixed Silage and Its Effect of Performance and Carcass Quality in Fattening Berkshire
Pigs…………………………Toshio Hamada, Yoko Oyama, Kensho Honda, Kiyofumi Gejima, Chinobu Okamoto
and Kiyotaka Kabata………112904

Overexpression and Characterization of Ostrich Egg-white Lysozyme and Its Disulde-mutant in E. coli.
…………………………………… Shogo Nakajima, Yuki Chijiiwa, Takao Torikata and Shunsuke Kawamura………172905

Site-directed Mutagenesis of Tyr147 in the hydrophobic core of Goose-type Lysozyme

2906

The Acquisition of Knowledge and Ability Through the University Physical Education（5）–An Experimental Study in………………………………… Kouichi Nakasone, Yuki Chijiiwa, Takao Torikata and Shunsuke Kawamura ………27
Class: Teaching Basic Strategies in Physical Education –……………………… Taemi Kasai, Akihito Nishida, Akira Suigetsu, Kazutaka Kakihara and Shiro Norimoto………35

─ 55 ─

Vol.303001

２０１１

Effects of Water Quality Purication using Canna（Canna indica hybrid）Planted in The Coconut Fiber Roll
Kyohei Kudo, Masaki Kajita, Toshio Hamada, Akiko Koike,Chinobu Okamoto and Kiyotaka Kabata………１

3002

Site-directed mutagenesis of Tyr169 in goose-type lysozyme

3003

Estimation of adult dispersal and egg parasitism in Shjimiaeoides divinus asonis（Matsumura）

3004

Detection and Properties of Actinophages Parasitic to Streptomyces sp. Causing Root Tumor of Melon…………………………… Takahiro Horiguchi, Yuya Kawaguchi, Shunsuke Kawamura and Tomohiro Araki………７……………………………………………………………………………… Kouhei Murata and Makio Iwata………15………………………………………………………………………………Keita Fujiki and Masahiro Yoshida………21

─ 56 ─

著

者

索

引

第１巻〜第30巻（1982年〜2011年）
Index of Contributors
Vol.1〜 Vol.30（1982〜2011）
氏

名

論文番号

氏

名

（Ａ）

論文番号

（Ｅ）

阿部恒夫（Abe, T.）

1107

1203

Ellis, Craig S.

2106

秋田富士（Akita, T.）1203

榎野俊文（Eno, T.）0610

安藤尚弘（Ando, N.）1701

衛藤浩太郎（Eto, K.）2603

荒木朋洋（Araki, T.）

0710

0711

0805

0912

衞藤

2804

0913

1009

1104

1202

Eyadan, Juanito A.

1509

1606

1705

1706

1803

1806

1903

1904

2003

2101

2102

2103

2302

2304

2401

2402

2602

3002

仁（Eto, M.）1013

藤枝國光（Fujieda, K.）2001

藤井義典（Fujii, Y.）0101

荒牧昭二郎（Aramaki, S.）2601

藤木圭太（Fujiki, K.）

3004

2801

藤下光身（Fujishita, M.）

1806

有馬俊六郎（Arima, S.）

0513

0514

浅川茂樹（Asakawa, S.）

0912

0913

朝倉啓之（Asakura, H.）

0701

浅海明龍（Asami, A.）0502

芦刈信幸（Ashikari, N.）

0412

0516

0611

0612

芦沢広三（Ashizawa, H.）

0306

0406

0407

0408

福島さつき（Fukushima, S.）

2703

0409

0512

0609

0707

福島

0706

0708

0709

0810

0811

船津二郎（Funatsu, J.）

1009

0812

0909

0910

0911

古田恵美子（Furuta, E.）1801

隆博（Azuma, T.）0515

藤原信弘（Fujiwara, N.）

1604

深溝

慶（Fukamizo, T.）

1606

2701

福岡壽夫（Fukuoka, H.）

0802

0803

0804

1004

1006

1201

1303

1503

1801

1905

滋（Fukushima, S.）

（Ｇ）
（Ｂ）
1902

（Ｃ）
陳

才夫（Chen, C.）

1407

Garillo, Ernesto P.
1901

槐島清文（Gejima, K.）2903

五味和明（Gomi, K.）1910

五斗一郎（Goto, I.）0411

後藤勝美（Goto, K.）

1506

1408

1006

千々岩有紀（Chijiiwa, Y.）

1806

長

2101

経子（Cho, K.）

1903

2904

2905

（Ｈ）

（Ｄ）
Detpiratmongkol, Somyot

1501

1502

土橋敏郎（Dobashi, T.）

0108

0207

0208

2204

1209

1602

Barroga, Antonio J.

2203

（Ｆ）

荒牧祐治（Aramaki, Y.）

東

2107

0519

0712

箱田直紀（Hakoda, N.）2001

浜田俊雄（Hamada, T.）2903

浜平義人（Hamahira, Y.）1806

花城良廣（Hanashiro, Y.）

1506

原

2702

敏夫（Hara, T.）原田孝（Harada, T.）

春崎聖一（Harusaki, S.）

─ 57 ─

2503
1906

3001

氏
春田

名

論文番号

潔（Haruta, K.）0902

長谷川利拡（Hasegawa, T.）

1110

1111

1402

氏

論文番号

（Ｋ）

1403

1702
橋本

名

椛田聖孝（Kabata, K.）

0107

0309

0411

0611

功（Hashimoto, I.）

1909

2601

0612

0806

0906

波多野昌二（Hatano, S.）

0107

1010

1101

1106

1206

服部法文（Hattori, N.）

1206

1409

1605

1607

1704

1707

1704

2703

1708

1709

1804

2004

2104

2303

2405

2502

2702

2703

2802

2803

2901

2903

3001

桧垣克己（Higaki, K.）0610

本田憲昭（Honda, K.）

2502

2803
2702

本田知史（Honda, T.）2502

堀口貴広（Horiguchi, T.）

3002

1604

1605

2903

2901

門田善太郎（Kadota, Z.）1806

堀井洋一郎（Horii, Y.）

2801

Kadzimin, Saleh1701

堀田和義（Horita, K.）1509

梶田真祥（Kajita, M.）3001

星野匡樹（Hoshino, K.）0804

柿原一貴（Kakihara, K.）2906

亀崎美代子（Kamesaki, M.）1903

神西幸治（Kaminishi, K.）

0505

（Ｉ）
市川

勉（Ichikawa, T.）

上野川修一（Kaminogawa, S.） 0413
2601

井手明雄（Ide, A.）

0805

井手口

1806

健（Ideguti, T.）1009

金子好雄（Kaneko, Y.）

2601

0514

笠井妙美（Kasai, T.）2906

春日克範（Kasuga, K.）

1409

片野

0501

0502

0503

0601

0602

0701

1001

1002

學（Katano, M.）

家永泰光（Ienaga, Y.）0905

井越敬司（Igoshi, K.）

0413

0513

0514

2303

2405

2802

1108

1109

1110

1111

飯田昌盛（Iida, M.）

1806

1402

1403

1501

1502

飯塚一郎（Iizuka, I.）

0201

1608

1702

1908

1909

0515

1910

2306

2403

2501

0204

0205

0304

0410

2302

0509

0510

0606

0607

0912

0608

0705

1409

2701

2904

伊地知英昭（Ijichi, H.）

1409

池本威夫（Ikemoto, T.）0706

今村正哉（Imamura, M.）
稲葉洋文（Inaba, H.）
井上久美子（Inoue, K.）2604

井上志野夫（Inoue, S.）2003

加藤正信（Kato, M.）2804

川畑勝也（Kawabata, K.）0102

川口裕也（Kawaguchi, Y.）3002

川満洋一（Kawamitsu, Y.）1907

河村俊介（Kawamura, S.）

2103

2302

2905

3002

0305

0511

入江亮次（Irie, R.）1002

石橋武彦（Ishibashi, T.）0808

石橋義美（Ishibashi, Y.）0610

川島良治（Kawashima, R.）

0907

0908

1013

1209
石井

隆（Ishii, T.）0808

加崎弘康（Kazaki, H.）2703

磯田隆啓（Isoda, T.）2705

釼持幸康（Kenmotsu, Y.）1806

伊藤昌隆（Ito, M.）

2403

2501

Khantaprab, Sukit

1508

1601

伊東保之（Ito, Y.）

0206

0414

0513

0517

菊地正武（Kikuchi, M.）

0105

0204

0205

0304

0518

1109

1406

2303

0410

0607

0608

0611

2405

0705

0806

0906

1010

岩政正男（Iwamasa, M.）

1401

1101

1106

1206

1605

岩水哲夫（Iwamizu, T.）

0806

1607

1704

1707

1708

岩田眞木郎（Iwata, M.）

0703

0704

1709

1804

2004

1304

3003

0903

1114
木之内

（Ｊ）
Jayamangkala, Nipon

2202

─ 58 ─

均（Kinouchi, H.）1503

衣川和人（Kinugawa, K.）1604

桐野秋豊（Kirino, S.）

2001

北島一幸（Kitajima, K.）1907

北野尋美（Kitano, H.）

2702

氏

名

論文番号

小林弘昌（Kobayashi, H.）

0413

0513

2303

2405

小林研三（Kobayashi, K.）

0202

0402

0603

0902

1112

1113

1504

1609

古賀大三（Koga, D.）

0805

1009

亮（Koga, R.）1908

小池晶琴（Koike, A.）

古賀

2502

2803

3001
1802

國料大輔（Kokuryo, D.）1906

小松春喜（Komatsu, H.）

0801

1401

1907

2002

小村秋則（Komura, A.）1503

今野浩之（Konno, H.）

1202
1605

1704

小栁

0508

1102

1703

1805

久保研一（Kubo, K.）

2802

0515

1906

名

論文番号

松崎信治郎（Matsuzaki, S.）2503

見明史雄（Miake, F.）

1009

三井

旭（Mitsui, A.）

1101

三浦

学（Miura, M.）1402

宮地好徳（Miyachi, Y.）1402

宮司佑三（Miyaji, Y.）

0802

宮崎

2201

力（Miyazaki, C.）

0803

0804

三好雅和（Miyoshi, M.）

0407

0408

0512

0609

水谷高幸（Mizutani, T.）

1301

1302

1404

1505

1701

2001

2105

2202

2307

神鷹孝至（Koutaka, T.）深（Koyanagi, F.）

0514

氏

1103

1208

望月聡子（Mochizuki, S.）

2801

2901

Montien-Art, Bunyat

1707

1708

1709

1804

森永安弘（Morinaga, Y.）

1003

森田

0706
0306

0406

0407

0408

誠（Morita, M.）

森友靖生（Moritomo, Y.）

久保達也（Kubo, T.）

2802

0409

0512

0609

0707

工藤匡平（Kudo, K.）

3001

0708

0709

0810

0811

熊崎一雄（Kumazaki, K.）

0104

0302

0303

0812

0907

0908

0909

0405

0507

0605

0910

0911

1013

1209

2703

2801

2901

久米新一（Kume, S.）0205

組田友紀子（Kumita, Y.）

1901

1902

國武久登（Kunitake, H.）

1802

1906

1907

蔵本真由美（Kuramoto, M.）

0710

0711

0912

1104

1202

1509

1108

1109

0404

森実和子（Morizane, K.）

2703

2002

村田浩一（Murata, K.）

2102

0913

村田浩平（Murata, K.）

1305

1405

3003

1606

村田達郎（Murata, T.）

0504

0802

0803

0804

浩（Kurihara, H.）

1001

1004

1005

1201

1303

栗原正成（Kurihara, M.）

1909

1503

1801

1803

1905

日下部昭雄（Kusakabe, A.）

1603

2201

2404

2502

桑原英知（Kuwahara, H.）1904

桑村義仁（Kuwamura, Y.）

1904

0102

0505

0901

1008

2308
2002

栗原

（Ｎ）
長野克也（Nagano, K.）（Ｌ）
Lavin, Richard S.

2107

長澤幸治（Nagasawa, K.）

1802

Lertrat, Kamol2202

中川博之（Nakagawa, H.）

2701

（Ｍ）

中川昌一（Nakagawa, S.）0801

中嶋章悟（Nakajima, S.）

2701

2904

中本幸子（Nakamoto, S.）

2801

2901
1007

前原峰雄（Maehara, T.）2308

中村未樹（Nakamura, M.）0901

正田富貴子（Masada, F.）1602

中西雄二（Nakanishi, Y.）0205

桝田信也（Masuda, S.）

0508

1208

1703

1805

1904
増岡
（郡山）
智加子（Masuoka（nee Kohriyama）, C.）1406

中尾栄治（Nakao, E.）1503

中尾繁伸（Nakao, S.）

1503

仲宗根公一（Nakasone, K.）2905

中田英史（Nakata, E.）

1208

1008

増岡智加子（Masuoka, C.）

2303

2405

仲里長浩（Nakazato, N.）

1506

1907

1908

松羽

研（Matsuba, H.）

2105

2307

中園孝裕（Nakazono, T.）

1607

1707

1708

松田

靖（Matsuda, Y.）

1801

1905

1804

2601

松村

正（Matsumura, T.）

2201

2404

2502

猶崎克弘（Naozaki, K.）

2302

1003

奈良知恵（Nara, C.）2804

─ 59 ─

1007

1709

氏

名

論文番号

氏

名

1209

論文番号

成田牧子（Narita, M.）1013

那須ひとみ（Nasu, H.）

2201

Neera, Preecha1110

新谷亜希子（Niiya, A.）2403

Poeaim, Anurug2404

仁木隆博（Nikki, T.）

0403

0807

1012

1105

Pooart, Jureerut

2101

1207

1508

1601

2301

Pradhan, Rajeev

1011

1205

1408

1603

2704

2802

（Ｐ）
朴

仁煥（Park, I.）

1701

2902
Nipa Milintawisamai

2602

西

理絵（Nishi, R.）1604

西田明史（Nishida, A.）2906

西岡寅雄（Nishioka, T.）0108

西山久吉（Nishiyama, H.）

0508

信國喜八郎（Nobukuni, K.）

0403

0807

1012

1207

1601

2301

0702

0703

0704

野原啓吾（Nohara, K.）（Ｓ）
貞包治夫（Sadakane, H.）
齋藤
1105
1305

1405

0107

彰（Saito, A.）2201

坂井英文（Sakai, H.）1409

坂元雄二（Sakamoto, Y.）

2003

坂根

巌（Sakane, I.）

1608

崎原

健（Sakihara, K.）

1402

1907

野原稔弘（Nohara, T.）1406

實田正博（Saneda, M.）2703

野村将三（Nomura, M.）1202

猿渡郁夫（Saruwatari, I.）1409

則元志郎（Norimoto, S.）2906

笹田直繁（Sasada, N.）

2405

2601

野坂

大（Nosaka, D.）0409

笹原俊哉（Sasahara, T.）

1108

1109

野崎健司（Nozaki, K.）2103

佐々亜裕美（Sassa, A.）

2205

2309

2407

澤田公一（Sawada, K.）

1205

（Ｏ）
小田原

健（Odahara, T）

緒方良彦（Ogata, Y.）

1602

1607

1707

2601

1804

1708

1709

2703

茶山裕子（Sayama, Y.）

2801

関

大亮（Seki, D.）

2603

関

忍（Seki, S.）

1706

妹尾素男（Senowo, M.）0706

瀬尾哲也（Seo, T.）1207

柴田章夫（Shibata, F.）0105

柴田正貴（Shibata, M.）

0205

芝田

小川哲子（Ogawa, A.）1907

太田紘一（Ohta, K.）

0108

0207

0613

0712

0104

0302

0303

0404

大塚

1204

0405

0507

0605

1107

2101

2301

2305

0208

0209

貫（Ohtsuka, T.）

0208

0519

猛（Shibata, T.）

大山信雄（Ohyama, N）

1702

1203

岡田吉弘（Okada, Y.）

2201

2902

岡本智伸（Okamoto, C.）

0806

0906

1010

1101

紫垣秀明（Shigaki, H.）

1402

2601

1106

1206

1605

紫垣由則（Shigaki, Y.）

0108

0207

1607

1704

1707

1708

0519

0712

1709

1804

2004

2104

重留瑠璃（Shigetome, R.）

2401

2303

2405

2502

2702

島村俊也（Shimamura, T.）

1503

2802

2803

2903

3001

清水正元（Shimizu, M.）

0107

0309

0310

0411

0611

0612

0806

0906

岡村文生（Okamura, F.）

1001

奥島史朗（Okushima, S.）0706

下城研一（Shimojo, K.）

2703

大西

2003

水月

2906

昇（Onishi, N.）

小野政輝（Ono, M.）1406

大庭康彦（Ooba, Y.）1806

大久津昌治（Ookutsu, S.）1102

大嶋和則（Oshima, K.）1111

大住啓一郎（Osumi, K.）1804

小山陽子（Oyama, Y.）

2903

2303

2405

1103

1208

晃（Suigetsu, A.）

2802

（Ｔ）
多賀直彦（Taga, N.）

2601

─ 60 ─

2503

田川晴通（Tagawa, H.）

1806

高井良安希子（Takaira, A.）2304

高見一利（Takami, K.）

2102

2602
2401

氏

名

論文番号

高野順也（Takano, J.）

1402

1403

武田慎一（Takeda, S.）

2205

2309

2407

2504

2310

氏

名

論文番号

（Ｖ）

2406

1805

Vongpralub, Thevin

滝沢静雄（Takizawa, S.）0205

田中穂積（Tanaka, H.）0709

田中敬三（Tanaka, K.）1806

田中孝幸（Tanaka, T.）

1003

1301

1302

1404

和田

宏（Wada, H.）

0610

1505

1701

2001

2105

和田

学（Wada, M.）

0101

2202

2307

若林清史（Wakabayashi, K.）

1806

谷

（Ｗ）

峰人（Tani, M.）2703

渡辺敦史（Watanabe, A.）2308

谷口牧子（Taniguchi, M.）0907

渡邊誠治（Watanabe, S.）

2703

田野

0105

渡辺忠雄（Watanabe, T.）

0107

Wimol, Satit

1301

仁（Tano, H.）

田先威和夫（Tasaki, I.）

1011

1204

1205

田代

誠（Tashiro, M.）

2901

立山

晉（Tateyama, S.）

0406

0407

0408

0409

0512

0609

0707

0708

0706

0808

1701

2202

（Ｙ）

Techawongstien, Suchila2202

八戸正夫（Yae, M.）

0307

Teerajetgul, Yaovalak

2304

八木満寿雄（Yagi, M.）

0205

Thammasirirak, Sompong2102

飛岡久弥（Tobioka, H.）

0106

0204

0205

0304

0305

0410

0509

0510

矢原正治（Yahara, S.）

1406

0511

0606

0607

0608

山口良二（Yamaguchi, R.）

0409

0705

1011

1204

1205

山本貴樹（Yamamoto, T.）

1705

1407

1408

1409

1602

山本智行（Yamamoto, T.）

1604

1603

1604

1901

1902

山中

守（Yamanaka, M.）

0103
0904

1507

0102

0203

0401

0505

山下秀次（Yamashita, H.）

2305

2603

0901

1007

1008

2308

0514

八木ロドリゲス美樹（Yagi-Rodriguez, M.）
2204

2704
戸田義宏（Toda, Y.）

2311

0301

0506

0604

0415

山内邦男（Yamauchi, K.）

0413

2306

淀谷和彦（Yodoya, K.）1806

富田和臣（Tomita, K.）

2402

米沢

0108

0209

0308

友松公一（Tomomatsu, K.）

1802

0519

0613

0712

Toolapong, Pichit

1401

0402

0603

0902

鳥潟隆雄（Torikata, T.）

0403

0710

0711

0805

1609

2602

3004

0912

0913

1009

1104

吉原利枝（Yoshihara, R.）

1901

1902

1202

1509

1606

1705

湯原正高（Yuhara, M.）

0706

1706

1803

1806

1903

1904

2003

2101

2102

2103

2302

2304

2401

2904

2905

徳久洋子（Tokuhisa, Y.）

2402

2701

1605

1704

坪井亜樹（Tsuboi, A.）2901

津嘉山彦（Tsukayama, H.）

1907

（Ｕ）
内田定康（Uchita, S.）2201

宇田川珠美（Udagawa, T.）1905

上村光昭（Uemura, M.）

0701

久（Yonezawa, H.）

吉田政博（Yoshida, M.）

顕（Tsuji, K.）

辻

0809

宇都宮英昭（Utsunomiya, H.） 1108

─ 61 ─

1504

東海大学農学部紀要委員会とその各巻の掲載論文数と項数
巻数

発行年月日

1

1982年３月

2

1983年３月

3

1984年３月

4

1985年３月

5

1986年３月

6

1987年３月

7

1988年３月

8

1989年３月

9

1990年３月

10

1991年３月

11

1992年３月

12

1993年３月

13

1994年３月

14

1995年３月

15

1996年３月

16

1997年３月

17

1998年３月

18

1999年３月

19

2000年３月

20

2001年３月

21

2002年３月

22

2003年３月

23

2004年３月

24

2005年３月

25
26
27

2006年３月
2007年３月
2008年３月

紀要委員会委員名簿【委員長】加藤 正信 【委 員】新関 宏夫・伊東【幹 事】小栁 深・山中 守【委員長】加藤 正信【委 員】新関 宏夫・伊東【幹 事】小栁 深・山中 守【委員長】飯塚 一郎 【委 員】菊池 正武・米沢【幹 事】井越 敬司・小松 春喜【委員長】飯塚 一郎 【委 員】菊池 正武・米沢【幹 事】井越 敬司・小松 春喜【委員長】芦沢 広三 【委 員】飯塚 一郎・米沢【幹 事】小松 春喜・森友 靖生【委員長】松村正 【委 員】小林 弘昌・太田【幹 事】小松 春喜・森友 靖生【委員長】松村正 【委 員】小林 弘昌・大塚【幹 事】岩田眞木郎・森友 靖生【委員長】松村正 【委 員】鳥潟 隆雄・大塚【幹 事】岩田眞木郎・荒木 朋洋【委員長】松村正 【委 員】鳥潟 隆雄・大塚【幹 事】岩田眞木郎・荒木 朋洋【委員長】松村正 【委 員】信國喜八郎・芦刈【幹 事】岩田眞木郎・桝田 信也【委員長】小林 研三 【委 員】信國喜八郎・芦刈【幹 事】吉田 政博・桝田 信也【委員長】小林 研三 【委 員】小林 弘昌・嶋村【幹 事】吉田 政博・仁木 隆博【委員長】大山 信雄 【委 員】小林 弘昌・嶋村【幹 事】仁木 隆博・長谷川利拡【委員長】大山 信雄 【委 員】大塚 徳勝・小栁【幹 事】長谷川利拡・プラダン、ラジブ【委員長】大山 信雄 【委 員】大塚 徳勝・小栁【幹 事】水谷 高幸・プラダン、ラジブ【委員長】菊池 正武 【委 員】山口 武夫【幹 事】水谷 高幸・山下 秀次【委員長】菊池 正武 【委 員】内掘 弘治【幹 事】國武 久登・山下 秀次【委員長】内掘 弘治 【委 員】飛岡 久弥【幹 事】國武 久登・山下 秀次【委員長】内掘 弘治 【委 員】飛岡 久弥【幹 事】國武 久登・山下 秀次【委員長】小林 弘昌 【委 員】伊東 保之【幹 事】國武 久登・岡本 智伸【委員長】小林 弘昌 【委 員】伊東 保之・水谷
岡本 智伸【委員長】椛田 聖孝 【委 員】伊東 保之・河村【幹 事】水谷 高幸【委員長】椛田 聖孝【委 員】伊東 保之・片野【幹 事】河村 俊介【委員長】片野學【委 員】伊東 保之・椛田
河村 俊介【委員長】片野
學 【委 員】椛田 聖孝・山下【委員長】山下 秀次 【委 員】椛田 聖孝・片野【委員長】山下 秀次 【委 員】椛田 聖孝・片野─ 62 ─

保之
保之
久
久
久
紘一
徳勝
徳勝
徳勝
信幸
信幸
清
清
深
深

高幸
俊介
學
聖孝
秀次
學
學

掲載
論文数

項数

8

B5版
73

9

68

10

91

15

122

19

136

13

112

12

93

12

93

13

102

13

131

14

107

9

71

5

41

9

74

9

79

9

75

9

86

6

48

10

89

4

36

7

A4版
68

5

43

11

89

7

59

4
4
5

29
29
38

巻数

発行年月日

28

2009年３月

29
30

紀要委員会委員名簿【委員長】椛田 聖孝【委 員】片野井上久美子【委員長】椛田 聖孝【委 員】片野2010年３月
井上久美子【委員長】米田 一成【委 員】椛田
2011年３月
ロドリゲス八木美樹
第１巻から第30巻までの合計

─ 63 ─

學・山下

秀次

學・米田

一成

聖孝・片野

學

掲載
論文数

項数

4

33

6

40

4

28

265

2183

紀

要

委 員 長
委
員

委

員

米
田
椛
田
片
野
ロドリゲス

会
一
聖

成
孝
學
八木美樹

EDITIONAL COMMITTEE OF PROCEEDINGS
ChairmanKazunari Yoneda

MemberKiyotaka Kabata
Manabu Katano
Miki Yagi-Rodriguez

Published by
School of Agriculture, Tokai University
Minamiaso-mura, Aso-gun, Kumamoto, 869−1404
Japan

東 海 大 学 農 学 部 紀 要
第30巻

2 0 1 1

2011年３月15日発行
発 行 所

東海大学農学部〒869−1404
電話

印 刷 所

0967
（67）−0611（代）

有限会社ベストプロセス〒862−0938
電話

hyousi.indd 2

熊本県阿蘇郡南阿蘇村河陽

熊本県熊本市長嶺東８丁目13−17096（388）−0889

2011/03/17 10:12:21

ISSN

Vol. 30

東海大学農学部紀要

PROCEEDINGSOFSCHOOL OF AGRICULTURE
TOKAI UNIVERSITY

0286−8180

東海大学農学部紀要
第 30 巻

2 0 1 1

2

Effects of Water Quality Purification using Canna（Canna indica hybrid）Planted in

0

1

1

The Coconut Fiber Roll…………………………………… Kyohei Kudo, Masaki Kajita, Toshio Hamada, Akiko Koike,
Chinobu Okamoto and Kiyotaka Kabata………１………………………………… Takahiro Horiguchi, Yuya Kawaguchi, Shunsuke Kawamura andTomohiro Araki………７

ヤシ繊維基盤ロールを基材としたハナカンナ植栽による水質浄化
第三〇巻

Site-directed mutagenesis of Tyr169 in goose-type lysozyme…………………………工藤匡平・梶田真祥・浜田俊雄・小池晶琴・岡本智伸・椛田聖孝………１
グース型リゾチームの分子内コアに位置する Tyr169を Phe に置換した変異体の解析……………………………………………………堀口貴広・川口裕也・河村俊介・荒木朋洋………７

Estimation of adult dispersal and egg parasitism inShjimiaeoides divinus asonis（Matsumura）

オオルリシジミの分散性と死亡要因における卵寄生蜂の評価………………………………………………………………… Kouhei Murata and Makio Iwata………15……………………………………………………………………………村田浩平・岩田眞木郎………15

Detection and Properties of Actinophages Parasitic to Streptomyces sp. Causing
Root Tumor of Melon

メロンがんしゅ病菌（Streptomyces sp.）に対するアクチノファージの検出とその性質…………………………………………………………………Keita Fujiki and Masahiro Yoshida………21………………………………………………………………………………藤木圭太・吉田政博………21

第１巻〜第30巻（1982年〜2011年）
FULL LIST OF CONTENTS

二〇一一

Vol.1〜 Vol.30（1982〜2011）

総

著

者

目

次

索

引

Index of Contributors

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