ISSN

Vol. 37

東海大学紀要 農学部

PROCEEDINGSOFSCHOOL OF AGRICULTURE
TOKAI UNIVERSITY
2 0 1 8

東海大学紀要 農学部
第 37 巻
2

Relationship between UPI and BRS Test of Mental Health for University Students

2432－7204018…………………………………………………………………………………… Ryuta Kuroyama ……１
Gene cloning and preliminary enzymological characterization of a gene homologous to………………………………………………………………… Kazunari Yoneda・Tomohiro Araki ……９

大学生への精神的健康度調査における UPI と BRS の関連性の検討
第三七巻

NAD+-dependent L-aspartate dehydrogenase

Developing Academic English for the New Curriculum at Tokai University……………………………………………………………………………………………黒山竜太………１
NAD+依存性 L-アスパラギン酸脱水素酵素ホモログ遺伝子のクローニングと機能解析………………………………………………………………………………米田一成・荒木朋洋………９………………………… Miki Rodriguez-Yagi・Daniel Minor・Michael Rupp・Ian Isemonger………17

Developing Academic English for the New Curriculum at Tokai University
Effect of season on the behaviour and spatial use of the golden snub-nosed monkey in a zoo………………………… Miki Rodriguez-Yagi・Daniel Minor・Michael Rupp・Ian Isemonger………17…………… Shuichi Ito・Ryunosuke Shimoda・Atsushi Matsumoto・Shin Oyama・Shinji Ide………₂₅

飼育下キンシコウ（Rhinopithecus roxellana）の行動と空間利用に季節が及ぼす影響……………………………………伊藤秀一・下田龍之介・松本充史・小山信・井手眞司………₂₅

二〇一八東海大農紀要 37：１－８（2018） 精神的健康度調査における UPI と BRS の関連

大学生への精神的健康度調査における
UPI と BRS の関連性の検討
黒山竜太 * **，Relationship between UPI and BRS Test of Mental Health for University Students
Ryuta KUROYAMA（Received 23 August 2017; accepted 6 September 2017）
ABSTRACTIn recent years, the need for early support for university students is increasing more and more. UPI is used in many
universities as an index to check the condition of mental health, but UPI has been questioned for accuracy as screening, andthere is a possibility that the form of asking for the presence of subjective symptoms may give resistance to respondents. So, it
seems that development of a new screening test is necessary. Therefore, in this research, we focused on resilience, examined
the relationship with UPI, and attempted classiﬁcation of resilience types, based on the circumstances that the faculty of ourdepartment A relocated campus due to major disasters.
The data for university students of 714 were adopted for analysis. The correlation between resilience and mental healthshowed a moderate negative correlation in total score. However, the match rate between UPI high scorers and resilience lowscorers was as low as 35.7%. Next, examining the grade differences and gender differences of each score, it showed differences
between grade levels for each factor at resilience, but the UPI score was different between the 1st and the 2nd grade, the 1st
and 3rd grade at the health score. Other than that, sex difference was only shown. In addition, resilient type classification
showed six types of high resilience type, optimistic solution oriented type, balanced type, self-paced type, passively
considerate type, and low resilient type. An association with mental health was found in these types of comparisons. From theabove, it was suggested that association with mental health can be found by classifying resilience.
ざまなチャンネルを用いてできるだけ多くの学生とつな問題と目的がることの必要性（2）が生じている．

近年，大学生に対する早期支援の必要性はますます高学生相談機関が多くの学生と接触しうる数少ない機会

まっている．そのなかで，学内の保健機関や学生相談機として，年度始めに実施する精神的健康度調査がある．

関が主体となり新年度開始時に精神的健康状態に関する

この指標として，1966年に全国保健管理協会によって作調査を実施し，結果に応じて呼び出しを行い精神状態の成された University Personality Inventory（以下 UPI と略

確認や学生相談室へのアクセシビリティを高める取り組す）は，回答者にとって抵抗の少ない表現（3）を用い，みが各所で行われている．本学 A 学部はこれまで黒山

かつ著作権フリーであるといった利点から，多くの大学ら（1）に示したような取り組みを続けているが，2016

で広く採用されている．酒井（4）は，UPI を他のスク

年４月に起こった熊本地震のためキャンパス移転を余儀リーニングテストと比較したうえで，学生相談の観点かなくされ，多くの学生がその後の心理的フォローの対象

らは心理的に健康な人の悩みと，精神疾患症状からくるとなっている．しかし，大規模な被災によって特定の学

苦痛とを一続きのモデルとして理解することが重要と指生を抽出することが困難な状況であったことから，さま摘しており，UPI は学生相談において今後もスクリーニ
ングとして有効な手段であると考えられる．しかし，＊東海大学阿蘇教養教育センター

UPI はスクリーニングテストとしての精度はやや疑問視＊＊東海大学阿蘇学生相談室

されており（5），また，いくら抵抗が少ない表現を用い

連絡先：黒山竜太 e-mail: kuroyama@tokai-u.jpているとはいえ，不調に関する自覚症状の有無を尋ねる
─1─

黒山

竜太

形式で精神的健康度をスクリーニングするという視点でかりやすいタイプ分類が必要ではないかと考えられる．

あるために，病的だというレッテルを貼られたくない学

各個人の回答はそれぞれの背景的要因を踏まえた結果と生は少なからず抵抗を感じ，自覚症状があっても正直になるため一概にタイプ分けを行うことには注意が必要だ

回答せず拒否反応を行うこともしばしば見られる．こうが，一方で大まかなタイプを知ることが自己理解の深化した学生にとって，学生相談室はかえって近寄りがたいとメンタルヘルスの向上を促す一助となる可能性は大き存在となってしまうことが懸念され，より抵抗の少ないい．特に，吉田（11）が学部によって学生相談機関に対形で実施できるスクリーニングテストの適用が望まれる．

するイメージや援助要請態度の違いを明らかにしている

そのためには，症状の程度を尋ねるのではなく，例えばように，心理学を専攻していない学生にとってはできる

エゴグラムなど，一般的性格傾向を示すようなテストでだけシンプルでわかりやすい形式を提供することが必要あれば，比較的抵抗は少ないのではないだろうか．こうであろうと考えられる．

したテストから場合によって要支援の学生を発見するこ以上より，本研究はレジリエンスと UPI にみる精神とができれば，心理的抵抗を少なくしたうえで早期支援

的健康との関連を明らかにすること，及びレジリエンスにつなげる可能性が高まると考えられる．

のタイプ分類を試みることを目的とする．

ところで，近年レジリエンスという概念が注目されている．レジリエンスとは Rutter（6）によって初めて示方された概念であり，「深刻な危険性にもかかわらず，適
応しようとする現象」と定義された．すなわち，深刻な法

対象：状況からの立ち直りを意味する．日本語では「弾力性」

東海大学 A 学部（理系）に在籍する１~ ４年生940名．

「精神的回復」などと訳されるが，過程としての「レジ質問紙：リエンス」とそれらに影響を与える「レジリエンシー」

１）全国保健管理協会の作成した UPI．合計60項目からとに分けて概念整理を行う必要があり，またレジリエンなり，このうち56項目を不健康尺度，４項目は健康尺度

スは環境的要因および個人的要因との相互作用を考慮すで構成されている．最近１カ月程度の自分について振りる必要があるとの指摘もある（7）．さらに平野（7）は返り，各質問に対して当てはまれば「はい」に，当てはレジリエンスを誰もが身に付けられる精神的回復力とし

まらなければ「いいえ」に回答を求めた．「はい」に１

たうえで，レジリエンスを導く多様な要因を資質的要因

点，「いいえ」に０点を与えた．

と獲得的要因に整理し，これらを捉えるため尺度化して

２）平野（8）の作成した二次元レジリエンス要因尺度

いる．また，その内容は「楽観性」
「行動力」
「社交性」

（以下 BRS と略す）
．合計21項目からなり，資質的レジなどとなっており，回答者にとっては症状を尋ねられる

リエンス要因の「楽観性」「統御力」
「社交性」
「行動

よりも負担が少ないと考えられる．

力」の４因子，及び獲得的レジリエンス要因の「自己理レジリエンスと精神的健康及び社会的適応との関連は解」「他者心理の理解」「問題解決志向」の３因子によっ

多くの研究で指摘されており（（7）；（9）など），大学生て構成されている．今の自分について振り返り，各質問に対するスクリーニングの手段として有効であると考えに対して「全く当てはまらない」～「非常によく当てはられる．しかし，レジリエンスによるスクリーニングにまる」までの６件法で回答を求め，１～６点を与えた．

ついて検討した研究は少なく，特にこれまで大学機関で手続き：多く用いられてきた UPI との関連については，まだほ

2017年４月の新年度ガイダンス実施時に，１～３年生

とんど手がつけられていない状況である．そして何より，へは「学生相談室ガイダンス」の中で筆者が直接説明の本学 A 学部が置かれた状況から，各学生に備わるレジ

上実施・回収した．また４年生へは筆者が実施要領を作

リエンスの様相が被災による心理的影響に大きく関与し成し，所属研究室単位で担当教員の指示のもと実施を依ていることを目の当たりにしている（2）ことから，レ頼した．実施に当たり，回答は任意であること，学業面

ジリエンスを測定することは適当であると考える．さらで不利になることは決してないこと，プライバシーへのに，性差や被災した学年とそうでない学年とでの違いの配慮を約束することを説明した．また，回収の段階で回有無についても検討する意義があるものと考えられる．

答が教員の目に触れないよう配慮した．なお，本アン

一方で，レジリエンスという新しい概念をフィード

ケートは学生相談室主体による「心の健康調査」としてバックという観点からみたとき，回答者である学生に説実施されたものであり，結果の希望者には相談室から連明するために，例えば芦原（10）が示すような，よりわ

絡してフィードバックを行うことが目的のひとつであっ─2─

精神的健康度調査における UPI と BRS の関連たため，上記質問項目に加えて学生証番号及び結果の分析には IBM SPSS Statistics ver.22を用いた．

フィードバック希望の有無についても記入を求めた．両倫理的配慮：
本研究は，東海大学「人を対象とする研究」倫理委員

質 問 紙 は 別 々 に 実 施・ 回 収 し た た め，UPI は723名，
BRS は738名分の回答が得られた．そのうち，個人的情会の審査を受けて実施した．

報と切り離したうえで，同一人物と照合でき欠損値のない714名分のデータを今回の分析対象とした（Table 1. 参結果および考察照）．

１）BRS と UPI の得点の関係

Table 1. 調査対象者の内訳

まず，BRS と UPI の相関係数を Table 2に示す．BRS

1 年生

2 年生

3 年生

4 年生

計

男性

142

95

102

111

450

女性

68

57

55

84

264

程度の負の相関を示し，男女とも BRS 総得点が UPI の

計

210

152

157

195

714

抑うつ，不安，健康得点と中程度の相関関係を示した．

総得点と UPI 総得点は男女でそれぞれ⊖.413，⊖.410と中因子およびカテゴリーの関係については，女性では楽観
分析方法：

性や統御力と抑うつとの間に中程度の負の相関が示され吉武（3）は UPI の56項目を「身体的訴え」「抑うつたのに対し，男性では見られなかった点で性差が示され傾向」「不安傾向」「強迫・被害関係念慮等（以下強迫傾

たが，その他の項目については大きな性差は示されな

向と略す）」の４カテゴリーからなる不健康得点，残りかった．次に，UPI における高得点者（30点以上：42の４項目は健康得点としており，本研究ではこれに倣い名）とそうでない者（672名）との間で，BRS 得点につ

５カテゴリーそれぞれの総得点を算出した．また，BRS

いて t 検定を行った．その結果，有意に UPI 高得点者のについては平野（8）に倣い７因子それぞれの平均値をBRS 得 点 が 低 い こ と が 示 さ れ た（t=⊖7.40, df=712,

算出した．

p<.001）． た だ し，UPI 高 得 点 者 の 人 数 割 合（ 全 体 の以上の得られたデータについて，まず BRS と UPI の5.9％）に相当する BRS 低得点者数を算出したところ46

相関関係を算出，および UPI 高得点者における BRS 得

名（得点率は全体の39％まで）であり，これら BRS 低点を比較した．次に，学年・性別の要因に基づき得点の得点者と UPI 高得点者との一致率は35.7％（15名）で比較を行った．さらに，階層的クラスター分析を行いあった．

BRS で得られたデータのタイプ分類を試み，タイプご以上の結果から，ある程度 BRS 得点の低さから精神との UPI における得点の比較を行った．分散分析およ的健康度についてのリスクを想定することが可能と考え

び下位検定には ANOVA4 on the Web を用い，その他のられるものの，単純に総得点の比較によって精神的健康

Table 2. 尺度間の相関関係
BRS
合計
BRS 合計楽観性 行動力 社交性 統御力

自己理解

他者心理 問題解の理解 決志向.684**

行動力.717** .310**

社交性.740** .400** .398**

統御力.719** .504** .531** .382**

自己理解

抑うつ
症状

不安
症状

強迫
症状

健康
得点

.484** .309** .250** .197** .194**.374** .390** .507** .301** .437** .502** －.276** －.188** －.264** －.306** －.171** .315**.381** .597** .267** .474** .533** －.325** －.239** －.353** －.284** －.179** .347**.440** .219** .561** .507** －.324** －.140** －.318** －.386** －.241** .516**.260** .571** .561** －.378** －.230** －.398** －.349** －.267** .311**.392** .303** －.159** －.075

他者心理の理解 .705** .289** .482** .590** .389** .177**
UPI 合計身体症状.705** .725** .718** .787** .512** .779** .776** －.413** －.247** －.432** －.414** －.266** .483**

楽観性

問題解決志向UPI
合計－.186** －.154** －.091－.303** －.207** －.326** －.290** －.164** .335**.728** .462** .469** .457** .419** .312** .462**－.410** －.380** －.260** －.288** －.370** －.234** －.174** －.244**.755** .933** .882** .825** －.287**

身体症状－.186** －.231** －.116

抑うつ症状－.485** －.410** －.324** －.307** －.404** －.305** －.256** －.317** .921** .586**

不安症状－.428** －.357** －.298** －.345** －.361** －.234** －.165** －.268** .870** .573** .769**

強迫症状－.196** －.236** －.062

健康得点.506** .385** .328** .469** .420** .162** .256** .367** －.304** －.219** －.305** －.339** －.131*－.135* －.229** －.067－.146* －.197** －.114.205**.509** －.283** －.171** －.300** －.261** －.193** .341**

－.032

－.054

－.044

.605** .533** .491** －.204**.791**.775** .685** －.295**.720** －.292**－.129* .804** .592** .641** .621**－.153***…p<.05, **…p<.01※斜線右上が男性，左下が女性の得点

─3─

黒山

竜太

との関連を説明することは困難であることが示唆された．

ては，有意差は示されなかった．以上より，全体的に女

２）BRS および UPI 得点の学年・性別比較

性の方が男性よりも自覚症状を表す結果となった．西因子およびカテゴリーごとに，学年と性別による２要山・笹野（12）や長尾・松永（13）などでも同様の結果

因（４×２水準）の分散分析を行った．BRS 得点全体を示しており，本研究の結果はこれらの先行研究を支持については学年の主効果が有意（F（3,706）=3.66, p<.05）

するものとなった．一方，健康得点が１年生と２，３年であり，Ryan 法による多重比較の結果４年生が１，２

生で有意差が示されたことについて，黒山ら（１）にお年生よりも有意に得点が高かった（p<.05）．因子ごとでける調査では差がなかったことを踏まえると，２，３年

は「行動力」で学年の主効果がみられ（F（3,706）=7.24,

生は震災・キャンパス移転の経験が影響している可能性，３，４年生が１，２年生よりも有意に得点がp<.001）が考えられる．

高 か っ た（p<.05）．
「社交性」（F（3,706）=4.13, p<.01）

２つの尺度の結果を踏まえると，レジリエンスと UPI「他者心理の理解」（F（3,706）=4.05, p<.01）でも学年の主

は学年および性別の比較について異なる様相を示す結果効果がみられ，４年生が１，２，３年生よりも有意に得となった．沢崎・松原（14）が年度ごとの変動が大きく点が高かった（p<.05）．
「統御力」では性別の主効果が一定の傾向を見出すことは困難と指摘しており，精神的有意であり（F（1,706）=4.69, p<.05），男性の方が女性よ

健康については本研究でも明確な学年差は示されなかっりも有意に得点が高かった（p<.05）．
「自己理解」ではた．一方でレジリエンスについては学年差が示されてお交互作用が有意であり（F（3,706）=4.18, p<.01），下位検り，レジリエンスへの発達的・環境的要因の関与が想定

定の結果3年生男性が３年生女性よりも有意に得点が高される．Gladstone, Boydell, & McKeever（15）は，レジかった（p<.05）．
「問題解決志向」では，学年の主効果

リエンスの発達の可塑性に注目する必要性を指摘しておが有意であり（F（3,706）=2.92, p<.05），３年生が１年生

り，大学という環境が学生たちのレジリエンスに与えるよりも有意に得点が高かった（p<.05）．
「楽観性」では，影響を今後も注視していくことは有意義であると考えら

有意差は示されなかった．以上より，４年生が多くの項れる．一方，平野（８）の資質的レジリエンスは持って目で下級生よりも有意に得点が高いという学年差が示さ

生まれた気質と関連が深いものを想定していることから，れた．とりわけ「社交性」，「他者心理の理解」といった示された学年差が環境の影響を示したのかどうかについコミュニケーションに関する因子で他学年と有意差が示ては今後継続して検討していく必要があると考えられる．

されたことは興味深い．おそらく A 学部は３年生の秋

３）レジエンスのタイプ分類

学期開始前後に研究室配属がなされ，小集団での団体行得られた BRS 得点を標準化し，ward 法，平方ユーク動を基本とすることが多いため，このことが上記の結果

リッド距離による階層的クラスター分析を行った．まずと関与している可能性が考えられた．また就職活動が本

男女別に分析を行ったが大きな差異は見られなかったた

格化した時期の実施でもあることも関係していることがめ，男女混合での分類を行うこととした．出力後のデン窺えた．一方で，１年生のレジリエンスの低さについて

ドログラムを確認し，クラスター数は６クラスターが妥

は注意が必要ではないかと考えられた．また「統御力」

当であると判断された（Fig. １参照）
．解釈のため，そおよび「自己理解」については性差が示され，女性の方の後因子ごとの平均得点を100％の得点率に換算し，因が自己コントロールに自信がないことが窺えた．これに子ごとにクラスターを１要因とする分散分析および下位

ついては，男性の割合が多いという A 学部の特色が影検定を行った（統計値等は省略する）．この結果に基づ響している可能性が高いと考えられた．これらのことかき，大まかに百分率で各得点率をプロットし，有意差のら，個々のレジリエンスに対する環境的要因の関与の大有無によって値を調整した表を作成した（Table ３参照）．
得られたクラスターについて，Fig. １および Table ３

きさが窺えた．
UPI に つ い て は，UPI 得 点 全 体（F（1,706）=4.36,

を参考に以下のように命名した．まず C3は，最も人数（1,706）=10.45, p<.005），不安症状
p<.05），身体症状（Fが多く，いずれの得点も平均に近いことから「バランス（F（1,706）=4.53, p<.05）については性別の主効果が有意型」と命名した．これを基準として，C4は最も人数がであり，女性が男性よりも有意に得点が高かった（いず少なく，いずれの得点も低いことから「低レジリエンス

れも p<.05）．健康得点では学年の主効果が有意であり型」と命名した．また C1は，C4と比べると得点は高い（F（3,706）=3.61, p<.05），１年生が２，３年生よりも有意ものの，他群と比べると得点は低く，社交性や他者心理に得点が高かった（p<.05）．抑うつ症状については女性の理解に比べて楽観性・行動力・統御力・問題解決志向＞男性が有意傾向（p<.10）であった．強迫症状についが低いことから「消極的配慮型」と命名した．C2は社

─4─

精神的健康度調査における UPI と BRS の関連
2
1.5
1
0.5
0
-0.5
-1
-1.5
-2
-2.5
-3
-3.5
C1

C2

楽観性

C3

行動力

社交性

C4

統御力

自己理解

C5

他者心理の理解C6

問題解決志向Fig. 1.レレジリエンスタイプごとの標準化得点
Fi g. 1.
ジ リ エ ン スタ イ プ ご と の標準化得点
Table 3. 各レジリエンスタイプの特徴

C1

C2

C3

C4

C5

C6

人数

173

61

259

11

93

117

割合

24%

9%

36%

2%

13%

16%

楽観性％

45

60

60

10

80

80

行動力％

45

60

60

20

80

60

社交性％

40

25

55

10

80

55

統御力％

40

60

60

20

80

60

自己理解％

55

55

55

40

75

75

他者心理の理解％

50

45

60

10

80

60

60

20

80

70

バランス型

低レジリエ
ンス型

高レジリエ
ンス型

楽観的解決
志向型

問題解決志向％45

50

クラスター名

消極的
配慮型

マイペース
型

※表中の各レジリエンスの得点率は近似値であり，各クラスタの数値間には有意差（p<.05）がある．

交性・他者心理の理解・自己理解が平均を下回ることかた．

ら「マイペース型」と命名した．C5はいずれの項目も次に，レジリエンスタイプごとの UPI の得点を比較

平均を大きく上回っていることから「高レジリエンス

した（Fig. 2参照）．1要因分散分析を行ったところ，UPI型」と命名した．C6は，C5についで全体的に得点が高

総得点およびすべてのカテゴリーにおいて主効果が有意く，特に楽観性・自己理解・問題解決志向が平均を大きであった（総得点：F（5,708）=22.38, p<.001，身体症状：

く上回っていることから「楽観的解決志向型」と命名し（5,708）=8.86, p<.001， 抑 う つ 症 状：F（5,708）=26.50,
F

Table 4. レジリエンスタイプにおける UPI 得点の比較

カテゴリー

多重比較結果（ryan 法，p<.05）

UPI 総得点C1/2/3/5/6<C4, C3/5/6<C1, C5/6<C2, C5<C3

身体症状

C1/2/3/5/6<C4, C3/6<C1

抑うつ症状

C1/2/3/5/6<C4, C2/3/5/6<C1, C5/6<C2, C5<C3, C5<C6

不安症状

C1/2/3/5/6<C4, C3/5/6<C1, C5/6<C2, C5<C3, C5<C6

強迫症状

C1/2/3/5/6<C4, C3/5<C1, C5<C2

健康得点

C1/2/3/4/6/<C5, C1/2/4<C6, C1/2/4<C3

─5─

黒山

竜太

（5,708）=22.45, p<.001，強迫症状：
p<.001，不安症状：F

健康得点も有意に低いことから，明らかにハイリスクで=8.41, p<.001， 健 康 得 点：F（5,708）=43.70,F（5,708）あることが示唆された．また，「消極的配慮型」は「バp<.001）．多重比較の結果，Table 4の通りとなった．さランス型」と比べるとすべてのカテゴリーで有意差を示

らに，レジリエンスタイプごとに UPI 得点における累し，これも状況によってリスクを示しやすいタイプと考積人数割合を示した（Fig. 3参照）
．累積率の上昇が緩やえられた．「マイペース型」は「消極的配慮型」とほぼかなほど，UPI 高得点者の割合が多いことを表している．

同じ特徴を示したが，抑うつに関してのみ両者に有意差

以上より，「低レジリエンス型」は不健康得点のすべが示されたことから，この型は抑うつ的特徴を示しづらてのカテゴリーにおいて他群よりも有意に得点が高く，

いと考えられるものの，リスク群に属する可能性が示唆

2

1.5

1

0.5

0

-0.5

-1

-1.5
UPI合計

身体症状

消極的配慮型

マイペース型

抑うつ症状
バランス型

不安症状

低レジリエンス型

強迫症状
高レジリエンス型

健康得点
楽観的解決志向型

レジリエンスタイプごとの
UPI
得点 得点
Fi g. Fig.
2. 2. レジ リ エ ン スタ イ プ ご と
のUPI

100%
90%
80%
70%
60%
50%
40%
30%
20%
10%
0%
0

2

4

6

8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 52 54 56

Fi g. 3.

消極的配慮型

マイペース型

バランス型

低レジリエンス型

高レジリエンス型

楽観的解決志向型

Fig.
3. リ
レジリエンスタイプごとの回答者のUPI 得点における累積率
レジ
エ ン スタ イ プ ご と の回答者のUPI
得点における 累積率─6─

精神的健康度調査における UPI と BRS の関連された．一方「高レジリエンス型」は，他群と比べて有ところで，本研究で示されたレジリエンスの学年差に意に得点が低く，健康度の高い群であるとみることがでついては，１定点での調査によるものであるため推測のきる．また「楽観的解決志向型」は，「バランス型」と域を出ない要素が多く，詳細な検討を行うことはできな比べていずれのカテゴリーにおいても有意差が示されず，かった．今後も継続して調査を行うことで，レジリエン

両者の状態像は異なる可能性があるものの，精神健康上

スの資質性と獲得性，特に資質的要因の発達可能性や可はほぼ同等の水準であることが示唆された．

塑性について，さらには震災・キャンパス移転という危

なお，タイプごとの UPI 高得点者の人数は，消極的機的環境変化の影響について，明らかにしていきたい．

配慮型は22名（12.7％），マイペース型が２名（3.3％），
バランス型が10名（3.9％），低レジリエンス型が５名

謝（45.5％），高レジリエンス型が1名（1.1％），楽観的解決辞志向型が２名（1.7％）であった．この結果を踏まえると，

本調査にご回答いただいた学生の皆さんと，日頃からバランス型や高レジリエンス型，楽観的解決志向型にも学生相談室の活動に深いご理解とご協力をいただいていある程度の UPI 高得点者が存在することから，結果のる教職員の皆様に，心からお礼申し上げます．なお，本如何にかかわらず広く働きかける必要があると考えられ

研究は学校法人東海大学総合研究機構「研究奨励補助計

た．

画」の助成を受けて行いました．

まとめと今後の課題

要約本研究は，レジリエンスを精神的健康についてのスク

近年，大学生に対する早期支援の必要性はますます高リーニングとして活用できる可能性について検討したもまっている．UPI は精神的健康度を調査する指標としてのである．分析の結果，BRS はスクリーニングテスト

多くの大学で用いられているが，スクリーニングとしてとして UPI に置き換えられるほどの検出を可能にするの精度が疑問視されていることや，自覚症状の有無を尋ことは難しいと考えられた．しかしながら，総得点の低ねるという形式は少なからず回答者にとって抵抗を生むさはある程度精神的健康との関連が推測されうることが可能性があることから，新たなスクリーニングテストの示唆された．つまり，レジリエンスは極端に強弱が示さ

開発が必要ではないかと考えられる．本学 A 学部は大れる場合，精神的健康との関連が高いと考えてよいだろ

規模災害によってキャンパス移転を行った経緯も踏まえ，う．そして，レジリエンスの６タイプを示したことで，本研究ではレジリエンスに着目して UPI との関連を検

精神的健康との関連を見出すことが可能となり，また討し，またレジリエンスのタイプ分類を試みた．

フィードバックを行う際回答者にとってある程度のわか分析には大学生714名分のデータが採用された．レジ

りやすさを提供できる可能性が見出せたと考える．そしリエンスと精神的健康との相関関係は，総得点においてて，レジリエンス得点はどの因子もほぼ60％程度の得点

中程度の負の相関を示した．しかし UPI 高得点者とレ率が平均値であることが示された．これは今後の実施やジリエンス低得点者の一致率は35.7％と低かった．次に，フィードバックに際してもひとつの指標となりうる数値

各得点の学年差，性差を検討したところ，レジリエンス

であろうと考えられる．一方，平野（16）はレジリエン

では因子ごとに学年差が示されたが，UPI 得点は健康得

ス要因と心理的敏感さという概念との関係を検討し，単点に１年生と２，３年生との間に学年差があった以外は，にレジエンスが高ければ心理的適応が高まるというわけ

性差が示されたのみであった．しかし，レジリエンスのではないことを明らかにしている．レジリエンスというタイプ分類を行ったところ，高レジリエンス型，楽観的

概念は心理的適応を援助するにあたってのひとつの指標

解決志向型，バランス型，マイペース型，消極的配慮型，として重要視する必要はあるものの，その他の要因にも低レジリエンス型の６タイプが示され，これらのタイプ

注意を向けることを忘れてはならないだろう．そして，の比較では精神的健康との関連が見出された．以上より，典型的な型にあてはまらない場合や個々のケースの状況

レジリエンスは類型化することで精神的健康との関連をに応じた対応が求められることを前提としたい．また，見出せることが示唆された．

スクリーニングテストの実施が，副次的に学生相談室を身近に感じてもらい，アクセシビリティの向上に寄与するための，さらなる工夫が望まれる．
─7─

黒山

竜太
（BRS） の 作 成 ―． パ ー ソ ナ リ テ ィ 研 究，19（2），

引用文献

94-106．

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合いと心理的成長を目指して―．東海大学紀要 農大学紀要，42，53-81．
10）芦原

学部，35，33-41．

エゴグラム243パターン全解説―．講談社．

２）黒山竜太，2017，震災によりキャンパス移転を余儀なくされた学生達への心理支援―地震直後から半期

睦，1995，自分がわかる心理テスト PART2―

11）吉田彩翔，2013，学生相談機関に対する大学生のイ

授業終了までの４カ月間の活動―．学生相談研究，

メージ・知識と援助要請態度―学部による差異に着37（3），159-171．

目して―．立教大学臨床心理学研究，7，23-35．

３）吉武光世，1995，UPI からみた新入生の心の健康状

12）西山温美，笹野朋寿，2004，大学生の精神健康に関態について―他大学との比較をとおして―．東洋女する実態調査．川崎医療福祉学会誌，14（1），183-

性短期大学紀要，27，33-42．

187．

渉，野口裕之，2015，大学生を対象とした精

13）長尾美佐，松永美希，2016，大学生のストレス状況

神的健康度調査の共通尺度化による比較検討．教育下における認知的評価とレジリエンスが精神的健康

心理学研究，63，111-120．

に与える影響．立教大学臨床心理学研究，10，1-13．

４）酒井

５）山田和夫，1975，大学生精神医学的チェック・テス

14）沢崎達夫，松原達哉，1988，大学生の精神健康に関する研究（1）―筑波大学新入生に対する UPI の結ト（UPI）について．心と社会，6，41-55．

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protective factors and resistance to psychiatric disorder15）Gladstone, B. M., Boydell, K. M., & McKeever, P.，2006，

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達科学研究実践総合センター紀要 教育実践研究，

16）平野真理，2012，心理的敏感さに対するレジリエン
スの緩衝効果の検討―もともとの「弱さ」を後天的No.8，7-12．
８）平野真理，2010，レジリエンスの資質的要因・獲得的要因の分類の試み―二次元レジリエンス要因尺度

─8─

に補えるか―．教育心理学研究，60，343-354．

東海大農紀要 37：９－15（2018） L-アスパラギン酸脱水素酵素ホモログの機能解析

NAD 依存性 L-アスパラギン酸脱水素酵素ホモログ遺伝子のクローニングと機能解析+

米田一成・荒木朋洋+

Gene cloning and preliminary enzymological characterization of a gene homologous to NAD -dependent
L-aspartate dehydrogenase

Kazunari YONEDA and Tomohiro ARAKI（Received 12 June 2017; accepted 11 July 2017）
ABSTRACT
A gene encoding an L-aspartate dehydrogenase (L-aspDH, EC 1.4.1.21) homolog was identified in the human genomic
information. After gene synthesis using overlapping polymerase chain reaction, the gene was expressed in Escherichia coli,+

and the gene product was puriﬁed to homogeneity. To determine the enzyme activity, the NAD -dependent dehydrogenase
activity and NADH-dependent reductase activity (reductive amination) of the human L-aspartate dehydrogenase (Hm-aspDH)
were conﬁrmed. As a result of the enzyme assays, Hm-aspDH was not found to exhibit L-aspDH activity. We then predictedthat the ﬁrst 17 amino acids of the N-terminal region of the His-tagged recombinant Hm-aspDH may affect L-aspDH activity;
this domain was enzymatically removed using thrombin. In contrast, the activity of L-aspDH was not detectable. The Uniprot
server predicted that there were two phosphorylation sites at Ser20 and Ser168 in the Hm-aspDH amino-acid sequence. In
addition, the two predicted phosphorylation residues were mutated to glutamate residues (S20E/S168E), a phosphoserine
mimic amino-acid (negatively charged and isosteric). In summary, in this paper, we described the cloning, expression,+

puriﬁcation, and preliminary enzymological characterization of an NAD -dependent L-aspDH homolog from humans.

緒路）より合成されることが知られており（1-3），その代

言

謝経路や代謝に関わる酵素群はバクテリアや好熱菌など

L-アスパラギン酸脱水素酵素（L-aspDH，EC: 1.4.1.21）とは大きく異なる．ゲノムデータベースを利用し，A.

は L-アスパラギン酸からイミノアスパラギン酸への脱水

fulgidus L-aspDH と相同性を有するヒト由来の L-aspDH+

素反応を触媒する NAD（P） 依存性の脱水素酵素である．

ホ モ ロ グ 遺 伝 子（Hm-aspDH） を 検 索 し た 結 果，A.

L-aspDH は バ ク テ リ ア お よ び 好 熱 菌 で は 補 酵 素 NAD

fulgidus L-aspDH に26% と わ ず か で は あ る が，Putative（P） 生合成経路に関与する酵素であることがすでに報L-aspartate dehydrogenase とアノテーションされている遺

告されており（1-5），Ｘ線結晶構造解析により立体構造

伝 子（NM_001114598.1） を 見 出 し た．Hm-aspDH の アもすでに明らかになっている酵素である（6-8）．我々はミノ酸配列の特徴を解析すると，脱水素酵素活性に必須

これまでに超好熱菌 Archaeoglobus fulgidus L-aspDH の結な補酵素 NAD（P） の結合アミノ酸モチーフ（GXGXXG），

晶構造解析を行うと共に，L-aspDH の酵素化学的機能やが 厳 密 に 保 存 さ れ て い る だ け で な く，A. fulgidus++

基質認識機構，NAD（P） 生合成経路（L- アスパラギン

L-aspDH において触媒に関与することがすでに明らかに酸経路）にどのように関与するのかを明らかにしてきた．

なっているヒスチジン残基（His189）が完全に保存され一方，ヒトなどの真核生物における NAD（P） 生合成経ていることが分かった．本酵素が L-aspDH 活性を有す

路は L-アスパラギン酸経路ではなく，L-トリプトファン酵素であるのか，また，L-aspDH であるなら，生体内でから生合成されるキヌレニン経路（L- トリプトファン経

どのような代謝経路に関わる酵素であるのか全く不明で++あり，報告例はこれまでに無い．そこで，本研究ではヒ
東海大学農学部バイオサイエンス学科

ト由来の L-aspDH ホモログ遺伝子のクローニングおよ

連絡先：米田一成 e-mail: kyoneda@agri.u-tokai.ac.jp

び機能解析を行うことを目的として，Hm-aspDH 遺伝子
─9─

米田

一成・荒木

朋洋

の合成および大腸菌における大量発現系の構築を行うと（asp-F，aspR， １μg/μl） ５μl， ２ mM dNTPs Mixture

ともに，本酵素がどのような基質特異性を有するか実験

10μl，H2O ８μl，KOD FX ポリメラーゼ １μl の合計的に考察した．

50μl を PCR チューブ内で混合し，94℃２分で熱変性後，98℃ 10秒，68℃１分の反応を25サイクル行った．その後，
約850 bp のバンドの増幅をアガロースゲル電気泳動で確

材料および方法

認し，ゲル抽出することにより DNA の精製を行った．

試薬
KOD FX DNA ポ リ メ ラ ー ゼ，Taq ポ リ メ ラ ー ゼ，

Table 1. The nucleotide sequence of the gene encoding Hm-aspDH.
Gene sequence

Ligation high は東洋紡（大阪）より購入した．制限酵素（NM_001114598.1）

NdeI，EcoRI，DpnI は New England Biolabs Japan（東京）1

atg gcc gac agg ggc ccg tgg agg gtg ggc gtg gtg ggc tat ggc

から購入した．電気泳動用アガロース，IPTG（イソプ46

cgc ctc gga cag tcc ctc gtc tcc cgc ctc ttg gct cag gga cca

91

gaa ctt ggc cta gaa ctt gtt ttt gtc tgg aat cgt gac cca gga

ロピル -β-チオガラクトピラノシド），牛血漿由来トロ

136 cga atg gca ggg agc gtg ccc cct tcc ctg cag ctc cag aac ctt

ンビン，L-アスパラギン酸，NAD（P） はナカライテスク+

181 gct gcc ctt ggg gaa agg cgc cct gat ctg gtt gtg gaa gtg gcc（京都）より入手した．宿主細胞である大腸菌 JM109お226 cat ccc aaa ata atc cat gaa tct ggg gca caa atc ctg cgc cat

よび，BL21-CodonPlus（DE3）-RIPL はタカラバイオ（滋271 gcc aat ctc ctg gtg ggg tcc ccc tca gct cta agt gac cag acc賀），Agilent Technologies（米国）より入手した．オー

316 aca gag cgg cag ctc ttg gag gcc tca cag cac tgg gac cac gcc

バーラッピングプライマー，フランキングプライマー，

361 gtg ttt gtg gcc cga ggg gcc ctg tgg ggc gct gag gac atc agg

および DNA シーケンス解析は株式会社ファスマック

406 aga ttg gat gca gct ggg ggc ctc cgg agc ctt cgt gtc acc atg
451 gcc aca cac ccc gat ggc ttc cgg ctt gag gga ccc ctg gct gca（ 神 奈 川 ） に 依 頼 し た．pGEM-T Easy Vector Systems，

496 gcc cac agc cct ggg cct tgc act gtg ctc tac gaa ggc cct gtc

QIAprep Spin Miniprep kit，および pET15b ベクターはそ

541 cgt ggg ctc tgc ccc ttt gcc ccg cga aat tcc aac acc atg gcg

れ ぞ れ， プ ロ メ ガ（ 米 国 ）， キ ア ゲ ン（ ド イ ツ ），586 gcg gct gcc ctg gct gcc ccc agc ctg ggc ttc gat ggg gtg att

Novagen（ 米 国 ） よ り 入 手 し た． コ バ ル ト ア フ ィ ニ

631 ggg gtg ctc gtg gct gat acc agc ctc acg gac atg cac gtg gtg

ティーカラムである Talon はタカラバイオ（滋賀）より676 gat gta gag ctg agc gga ccc cgg ggc ccc acg ggc cga agc ttt

入 手 し た． タ ン パ ク 質 結 晶 化 キ ッ ト で あ る Crystal

721 gct gtg cac acc cgc aga gag aac cct gcc gag cca ggc gcg gtc
766 acc ggc tcc gcc acc gtc acg gcc ttc tgg cag agc ctc ctg gcc

Screen，Index，Natrix は Hampton Research（米国）から

811 tgc tgc cag ctc ccc tcc agg ccg ggg atc cat ctc tgc tga

購 入 し た． ま た，Cryo 1，2，Wizard 3，4お よ び，
Crystallization Kit for Protein Complexes は そ れ ぞ れ，

pGEM-T Easy および pET15b ベクターへのクローニング

Rigaku（東京），Sigma-Aldrich（米国）から購入した．

増幅した PCR 産物は平滑末端であるため，Taq ポリ

96穴結晶化プレートは Rigaku（東京）より購入した．

メラーゼにより3ʼ-A オーバーハングの付加を行った後，その他の試薬は市販の特級または生化学用試薬を用いた．

プロメガ社（米国）の pGEM-T Easy Vector Systems を用
いシーケンス用のベクター（pGEM-T/aspDH）の作成を

1 PCR，2 PCR
st

行った．その後，DNA シーケンスの解析を行い塩基配ndHm-aspDH を コ ー ド す る 遺 伝 子（Table 1;

列 が 正 し い 事 を 確 認 し た． pGEM-T/aspDH を NdeI，

NM_001114598.1）の合成は Dillon（9）らの方法に従い，

EcoRI で制限酵素処理し，アガロースゲル電気泳動した

オーバーラッピングプライマー（Table ２; asp-1F ～ asp-

後，約850 bp のバンドを切り出し抽出することで精製し10R）が20 bp ずつオーバーラップするように設計した．

た．pET15b もベクターと同様に NdeI，EcoRI で制限酵

その後，KOD FX ポリメラーゼを用いて1 PCR（オー

素処理後，精製を行い16℃３時間ライゲーション反応をst

バーラッピング PCR）を行った．すなわち，２× PCR

行い pET15b/aspDH の作成を行った．なお，今後，酵母

バッファー 25μl，オーバーラッピングプライマー（asp-

発現系用のベクターを作成する可能性もあるため，Hm-

1F ～ asp-10R， １μg/μl）５μl， ２mM dNTPs Mixture

aspDH 遺 伝 子（Table 1; NM_001114598.1） 内 の BamHI

10 μl，H2O 9 μ l，KOD FX ポリメラーゼ 1 μl の合計

認識配列（GG ATC

50 μl を PCR チューブ内で混合し，94℃２分で熱変性後，イマー合成時にアミノ酸（280番目の Ile）が変化しない

98℃ 10秒，68℃１分の反応を10サイクル行った．その後，ように変異（GG ATT

1 PCR 産物を用いて2 PCR を行った．1 PCR 産物１μせるようにプライマー設計を行った．

st

nd

st

l，２× PCR バッファー25μl，フランキングプライマー
─ 10 ─

840C）を，オーバーラッピングプラ
840

C; 840番目の C を T に置換）さL-アスパラギン酸脱水素酵素ホモログの機能解析
L-aspDH の発現および精製

pET15b/aspDH を 用 い，
大 腸 菌 BL21-CodonPlus

Table 2. Overlapping and flanking primers for amplification of the Hm-aspDH gene. Restriction sites andoverlapping sequences are shown in underlined and bold fonts, respectively.

（DE3）-RIPL の形質転換を行った，形質転換した大腸

Oligonucleotide sequence（5'-3'）

Primers
Overlapping primers
asp-1F

ATGGCCGACAGGGGCCCGTGGAGGGTGGGCGTGGTGGGCTATGGCCGCCTCGGACAGTCCCTCGTCTCCCGCCTCTTGGCTCAGGGACCAGAACTTGGCC

リンを含む LB 平板寒天培

asp-2R

GCAGCAAGGTTCTGGAGCTGCAGGGAAGGGGGCACGCTCCCTGCCATTCGTCCTGGGTCACGATTCCAGACAAAAACAAGTTCTAGGCCAAGTTCTGGTCCCTGA

地 に プ レ ー テ ィ ン グ し，

asp-3FCAGCTCCAGAACCTTGCTGCCCTTGGGGAAAGGCGCCCTGATCTGGTTGTGGAAGTGGCCCATCCCAAAATAATCCATGAATCTGGGGCACAAATCCTGCGCCAT

asp-4RGGTCCCAGTGCTGTGAGGCCTCCAAGAGCTGCCGCTCTGTGGTCTGGTCACTT
AGAGCTGAGGGGGACCCCACCAGGAGATTGGCATGGCGCAGGATTTGTGCCC

asp-5F

GGCCTCACAGCACTGGGACCACGCCGTGTTTGTGGCCCGAGGGGCCCTGTGGG
GCGCTGAGGACATCAGGAGATTGGATGCAGCTGGGGGCCTCCGGAGCCTTCG

asp-6RGAGCACAGTGCAAGGCCCAGGGCTGTGGGCTGCAGCCAGGGGTCCCTCAAGCC
GGAAGCCATCGGGGTGTGTGGCCATGGTGACACGAAGGCTCCGGAGGCCCCC

asp-7F

CTGGGCCTTGCACTGTGCTCTACGAAGGCCCTGTCCGTGGGCTCTGCCCCTTT
GCCCCGCGAAATTCCAACACCATGGCGGCGGCTGCCCTGGCTGCCCCCAGCC

asp-8RGGTCCGCTCAGCTCTACATCCACCACGTGCATGTCCGTGAGGCTGGTATCAGCC
ACGAGCACCCCAATCACCCCATCGAAGCCCAGGCTGGGGGCAGCCAGGGCA

asp-9FGATGTAGAGCTGAGCGGACCCCGGGGCCCCACGGGCCGAAGCTTTGCTGTGCA
CACCCGCAGAGAGAACCCTGCCGAGCCAGGCGCGGTCACCGGCTCCGCCACC

asp-10R

TCAGCAGAGATGAATCCCCGGCCTGGAGGGGAGCTGGCAGCAGGCCAGGAGGCT
CTGCCAGAAGGCCGTGACGGTGGCGGAGCCGGTGACCG

asp-F

TTC CATATG GCCGACAGGGGCCCGTGGAGG (NdeI)

asp-R

GAATTC TCAGCAGAGATGAATCCCCGGCCT (EcoRI)

菌 を50μg/ml の ア ン ピ シ

37℃でインキュベートした．
形成したコロニーを50μg/
ml アンピシリンを含む LB培地（トリプトン10 g，酵
母エキス５g，NaCl 10 g）
１ L に 植 菌 し，37 ℃ で
OD600＝0.6になるまで振とう培養した後，１mM になるように IPTG を加え HmaspDH の発現を誘導し，さらに37℃で４時間振とう培
養した．培養終了後，遠心分 離（6,000 rpm，10分 間 ）により集菌を行い，10 mM

Flanking primers

Tris-HCl buffer（pH 8.0）50
ml に懸濁した．菌体懸濁液を超音波破砕し，遠心分離ノ反応）は下記の活性測定用反応溶液を用いて行った．

（12,000 rpm，10分間）により得られた上清を粗酵素液とす な わ ち，100 mM Na2HPO4/NaOH（pH 11），10 mM L-

した．Hm-aspDH の精製には親和性クロマトグラフィー

アスパラギン酸，1.25 mM NAD ，精製酵素，水が合計である Talon コバルトアフィニティーカラムクロマトグ

１ml になるように調製した．NAD 以外の反応溶液を光ラ フ ィ ー を 使 用 し た． 平 衡 化 バ ッ フ ァ ー に は10 mM

路長１cm のキュベットに入れて混合した後，NAD を

+

+

+

Tris-HCl buffer（pH 8.0）
，0.5 M NaCl を用い，溶出バッ

添加して波長340 nm における１分間の吸収の増加量

ファーには平衡化バッファー中に各濃度のイミダゾール（NADH の増加量）を分光光度計（Hitachi U-2910）を用を含むバッファーで溶出するステップワイズ法（５mM，いて室温で測定した．また，L-aspDH の逆反応の酵素活

50 mM，100 mM，300 mM イミダゾール）を用いた．精性測定（還元的アミノ化反応）は下記の活性測定用反応

製酵素は透析バッファー（10 mM Tris-HCl buffer（pH 8.0），溶液を用いて行った．すなわち，100 mM Tris/HCl（pH

0.2 M NaCl，５mM βメルカプトエタノール）で４℃，

7.5）， ５ mM オ キ サ ロ 酢 酸，800 mM NH4Cl，0.2 mM

16時間透析を行い実験に用いた．

NADH，精製酵素，水が合計１ml になるように調製した．
NADH 以外の反応溶液をキュベットに入れて混合した

SDS-PAGE

後，NADH を添加して波長340 nm における１分間の吸SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動（SDS-PAGE;

収の減少量（NADH の減少量）を分光光度計（Hitachi

12.5% ア ク リ ル ア ミ ド ス ラ ブ ゲ ル， 厚 さ １mm）はU-2910）を用いて室温で測定した．タンパク質濃度測

Leammli（10） の 方 法 に 従 っ て 行 っ た． 泳 動 後，定は Bradford 色素結合法を用い（11），検量線を作成すCoomassie brilliant blue R-250を用いタンパク質バンドのるための標準タンパク質としてウシ血清アルブミンを用染色を行った．

いた．

L-aspDH の活性測定

L-aspDH の結晶化

NAD 依存性 L-aspDH の酵素活性測定（酸化的脱アミ+─ 11 ─

MICROCON YM-30（Millipore，米国）を使用し精製

米田

一成・荒木

朋洋

酵素を8.7 mg/ml まで濃縮後，補酵素である NAD を終Hm-aspDH の配列内には疎水性に富んだ膜結合領域が無濃度１mM になるように加えたホロ型および NAD を加

図表・説明文く，可溶性に発現するという結果が得られていた．

++

Fig. 1
えないアポ型酵素を調製後，シッティングドロップ蒸気

拡散法を用いて結晶化スクリーニングを行った．すなわ
ち，96穴結晶化プレートを使用し，精製酵素１μl とリ
ザーバー溶液１ μl を混合した後，リザーバー溶液100μl と共に密閉し，暗所（20℃）で約１ヶ月静置した .
トロンビンを用いた His-tag の切断
Hm-aspDH の N 末 端 に 付 加 さ れ て い る His-tag 配 列（17アミノ酸残基）の切断にはトロンビン（牛血漿由来）を用いた．トロンビンによる切断は Hm-aspDH 精製酵素（8.7 mg/ml），切断バッファー（20 mM Tris-HCl
buffer（pH 8.0），150 mM NaCl，2.5 mM CaCl2），トロン
ビン（1 U/μl）を用いた．酵素反応は室温で行い，２
時間，４時間，６時間，16時間後にサンプルを回収し，Fig. 1. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE) of recombinant human L-aspDH (Hm-aspDH). Lane 1,
marker proteins; lane 2, crude extract; lane 3, puriﬁed Hm-aspDH after2+
Fig. 1. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide
gel electrophoresis (SDS-PAGE) of
passing through a Co afﬁnity column.

SDS-PAGE で His-tag 切断の確認を行うと共に，L-aspDHの酵素活性測定（酸化的脱アミノ反応）を行った．
355

L-aspDH (Hm-aspDH).
recombinant human+

Lane 1, marker proteins; lane 2, crude

NAD 依存性アスパラギン酸脱水素酵素活性の検出

部位特異変異導入

extract; lane 3, purified Hm-aspDH after +passing through a Co2+ affinity column.

リン酸化セリン（ホスホセリン）の構造をミミックす

精製酵素を用いて NAD 依存性 L-アスパラギン酸脱水

る目的で S20E/S168E の作成を行った．すなわち，S20E

素酵素活性の測定を行った．酸化的脱アミノ反応の基質の場合 TCC（Ser）から GAA（Glu）へ変異させるためとして，L-アスパラギン酸，D-アスパラギン酸，L-グル

5'-CTCGGACAGGAACTCGTCTCCCGCCTCTTG-3'360

タミン酸，L-グルタミン，L-アスパラギン，L-ホモセリン，（S20E-F），5'-CAAGAGGCGGGAGACGAGTTCCTGTCC

L-オルニチン，L-スレオニン，D-スレオニン，L-イソロ

GAG-3'（S20E-R）プライマーを用いた（塩基置換部位を

イシン，L-リジン，L-プロリン，L-トリプトファン，L-アンダーラインで示した）．また，S168E の場合 AGC

チロシン，L-アルギニン，L-システイン，L-ロイシン，L-（Ser）から GAA（Glu）へ変異させる目的で5'-GGCTGC

アラニン，L-ヒスチジン，グリシン，L-セリン，D-セリ

AGCCCACGAACCTGGGCCTTGCAC-3'（S168E-F），

ン，L-メチオニン，L-バリン，L-フェニルアラニン，DL-

5'-GTGCAAGGCCCAGGTTCGTGGGCTGCAGCC-3'
365

アロスレオニン，DL-グリセリン酸，3-ヒドロキシプロ（S168E-R）プライマーを用いた．部位特異変異導入はDL-スレオ3-フェニル
ピオン酸，DL-3-ヒドロキシ酪酸，
15

DpnI 法（12）を用いて行った．

セリン，ヒドロキシピバル酸メチル，DL- 乳酸，DL- 酒石
酸，１，４ブタンジオール，クエン酸，DL- リンゴ酸，

フマル酸，マロン酸を用いたが，活性の検出はできな

結果および考察

かった．また，補酵素特異性として NAD ，NADP を用+

Hm-aspDH の発現および精製+

いたが，活性の検出には至っていない．還元的アミノ化

Talon コバルトアフィニティーカラムクロマトグラ

反応も測定したが，酸化的脱アミノ反応と同じく，活性フィーにより Hm-aspDH の精製を行い SDS-PAGE に供の 検 出 は で き な か っ た． 宿 主 細 胞 を 大 腸 菌 BL21-

した結果，100 mM イミダゾール溶出画分でメインバン

CodonPlus（DE3）-RIPL か ら Rosetta-gami B（DE3）に 変 更ドが得られ，ほぼ単一に精製する事に成功した（Fig.1）．

しても活性が検出されることは無かった．

サブユニット分子量は約29 kDa であり，アミノ酸配列

すでに我々の研究室では超好熱菌 A. fulgidus L-aspDHから予測される分子量と一致していた．本酵素は真核生の結晶構造を明らかにしており（8），その立体構造情報

物由来の酵素であるため，可溶性に発現する可能性は低から補酵素および基質の結合に関わるアミノ酸残基を特いと当初予測していたが，SOSUI WWW Server（http://

定している（Fig.2）．そこで，A. fulgidus L-aspDH と Hm-harrier.nagahama-i-bio.ac.jp/sosui/）を用いた配列解析では

aspDH のアミノ酸配列を比較したところ，Hm-aspDH で─ 12 ─

L-アスパラギン酸脱水素酵素ホモログの機能解析
Fig. 2は NAD 結合モチーフである GXGXXG のグリシンリッ
13

+

18

チな配列は完全に保存されており，本酵素は補酵素
NAD（P） を利用する脱水素酵素であることが予測され+る．また，A. fulgidus L-aspDH において触媒に関与する
アミノ酸残基である His189は His223として完全に保存されていた（Fig.3）．その他にも基質の結合に関与すると考えられるアミノ酸残基にもわずかではあるが，類似性が見られることから，L-aspDH として機能する酵素であることが予測される．
トロンビンによる His-tag の切断および部位特異変異導入
NAD 依存性 L-アスパラギン酸脱水素酵素活性が検出+されると予測していたが，活性が検出されなかったため，
N 末端に付加されている His-tag 配列が活性に影響していると考え，トロンビンによる His-tag 配列の除去（切370

Fig. 2. The NAD /citrate-bound active site of A. fulgidus L-aspDH (PDB+
code = 2DC1) is shown. NAD (yellow) and citrate (white) molecules
Fig. 2. The NAD + /citrate-bound active site of A. fulgidus L-aspDH (PDB code =are shown as stick models. The oxygen and nitrogen atoms are shown
2DC1)
shown.
NAD + (yellow)
and citrate (white) molecules are shown as stickin redisandblue colors,
respectively.
+断）を試みた．トロンビンによる Hm-aspDH の切断はmodels.

SDS-PAGE の分子量のシフトで容易に判断できた．そこ

respectively.

で，２時間，４時間，６時間，16時間切断した酵素をサ

わち，pET15b-S20E/S168E の二重変異体作成を行い，ンプルとして，L-アスパラギン酸脱水素酵素活性の測定を行ったが，活性は検出できなかった．

The oxygen and nitrogen atoms are shown in red and blue colors,

グルタミン酸（Glu; E）へ部位特異変異を行った．すな

375

wild-type と同様に発現，精製に成功したが，L-アスパラ
ギ ン 酸 脱 水 素 酵 素 活 性 の 検 出 は で き な か っ た．Hm-

Hm-aspDH の配列情報を詳細に解析した結果，Uniprot

aspDH の S20の位置は A. fulgidus L-aspDH の立体構造上

ウ ェ ブ サ ー バ ー の リ ン 酸 化 情 報 サ イ ト（http://www.

では F14であり，補酵素 NAD の結合にも，基質結合に

uniprot.org/uniprot/A6ND91） に お い て20番 目 お よ び168

も，2量体化にも関与しない場所に位置するアミノ酸で番目のセリン残基が翻訳後修飾を受け，リン酸化する可あった．また，Hm-aspDH の S168においては A. fulgidus

能性があることを新たに見出した（Fig.3）．そこで，リL-aspDH の 配 列 上 で ギ ャ ッ プ が 挿 入 さ れ て い る た め

ン酸化セリン（ホスホセリン）の構造をミミックする目（Fig.3），比較できる配列が存在しないことから，立体的でセリンにリン酸基が結合した鎖長にほぼ等しく（同

構造上でこの位置のリン酸化にどのような意味があるの

Fig. 3比体積），リン酸基と同様にマイナスチャージを有するか推測することは極めて困難である．

+

16

380

Fig. 3. Amino acid sequence alignment of human and A. fulgidus L-aspDHs (Hm aspDH, human L-aspDH; Af aspDH, A.
（13）. The asterisks indicate conserved residues. The grayfulgidus L-aspDH). Sequences were aligned using CLUSTALW+
boxes represent the GXGXXG and catalytic His residues. The residues involved in NAD and citrate (substrate analog)
binding are shown in blue and red, respectively. The yellow boxes represent the putative phosphorylation residues (Ser20,
in parenthesis.
Ser168). The
homology
human
and A. fulgidus
L-aspDH
L-aspDHs (HmFig.sequence
3. Aminoacid between
sequencealignmentof humanand isA.shown
fulgidus

aspDH, human L-aspDH; Af aspDH, A. fulgidus L-aspDH). Sequences were aligned

─ 13 ─

385

using CLUSTALW（13）. The asterisks indicate conserved residues.
represent the GXGXXG and catalytic His residues.

The gray boxes

The residues involved in NAD +

米田

一成・荒木

Hm-aspDH の結晶化

朋洋に，Talon コバルトアフィニティークロマトグラフィー

本研究では L-アスパラギン酸脱水素酵素ホモログであにより精製を行った．その後，L-aspDH の酵素活性測定

る Hm-aspDH の発現・精製には成功したものの，NAD+（酸化的脱アミノ反応，および還元的アミノ化反応）を依存的 L-アスパラギン酸脱水素酵素活性の検出には未だ

約40種類の基質アナログに対して行ったが，L-aspDH 活に成功していない．アミノ酸配列情報の比較により，超性の検出には至らなかった．N 末端に付加している His-

好熱菌 A. fulgidus L-aspDH ですでに明らかになっている

tag 配列が活性に影響を与えている可能性が考えられた触媒に関わるアミノ酸残基や補酵素 NAD の結合に関わため，プロテアーゼであるトロンビンで His-tag の除去

るアミノ酸残基，基質の結合に関わるアミノ酸残基もを行ったが，L-aspDH 活性は検出できなかった．Uniprot+

Hm-aspDH には存在すると予測されるが，活性が全く検

ウェブサーバーを用いた Hm-aspDH の詳細なアミノ酸

出できていない．この原因を解明するためにも基質結合配列解析により20番目および168番目のセリンが翻訳後部位の構造に着目した酵素の３次元立体構造からのアプ修飾としてリン酸化される可能性が明らかになったため，ローチが重要であると考えられる．そこで，約1，100のリン酸化セリンの構造をミミックする目的でセリンにリ

結晶化条件を用い，酵素の結晶化を試みたが，結晶の析ン酸基が結合した鎖長にほぼ等しく，リン酸基と同様に出には至っていない．結晶化用に濃縮した Hm-aspDH

マイナスチャージを有するグルタミン酸へ部位特異変異を－20℃で凍結保存後，解凍すると酵素が凝集し白濁しを行い（S20E/S168E），L-aspDH の活性測定を行った．

た沈殿になってしまうことから，容易にアグリゲーショ

これらの研究結果は，プレリミナリーなデータではある

ンしてしまう酵素であり，難結晶化酵素であると考えらが，真核生物由来のアミノ酸脱水素酵素のクローニング，

れる．今後，メタノール資化酵母などの真核生物由来の発現，機能・構造解析を行う上で有用な情報となりうる．

宿主細胞を使用した発現系を試みる予定である．これらの研究結果は，真核生物由来のアミノ酸脱水素酵素の発

引用文献

現や構造・機能解析の研究を行う上で有用な情報となりうる．

１）Nasu, S., Wicks, F.D. and Gholson, R.K. 1982, Biochim.
Biophys. Acta 704, 240-252.

謝２）Rizzi, M. and Schindelin, H. 2002, Curr. Opin. Struct.

辞Biol. 12, 709-720.

本研究を実施するにあたり，貴重なご意見や様々な支

３）Sakuraba, H., Satomura, T., Kawakami, R., Yamamoto, S.,

援を頂きました大阪工業大学工学部生命工学科 大島敏

Kawarabayasi, Y., Kikuchi, H. and Ohshima, T. 2002,

久教授，香川大学農学部応用生物科学科 櫻庭春彦教授

Extremophiles 6, 275-281.

に感謝いたします．本研究の一部は東海大学総合農学研

４）Sakuraba, H., Yoneda, K., Asai, I., Tsuge, H., Katunuma,

究所プロジェクト研究の資金援助により実施されたもの

N. and Ohshima, T. 2008, Biochim. Biophys. Acta 1784,です．

563-571.
５）Sakuraba, H., Tsuge, H., Yoneda, K., Katunuma, N. and要

Ohshima, T. 2005, J. Biol. Chem. 280, 26645-26648.

約６）Yang, Z., Savchenko, A., Yakunin, A., Zhang, R.,
Edwards, A., Arrowsmith, C. and Tong, L. 2003, J. Biol.

L-アスパラギン酸脱水素酵素（L-aspDH，EC 1.4.1.21）

Chem. 278, 8804-8808.

は細菌では補酵素 NAD 生合成経路に関与することが知+られている酵素であるが，ヒト由来 L-aspDH の機能や

７）Yoneda, K., Kawakami, R., Tagashira, Y., Sakuraba, H.,

構造，生体内での役割に関する報告例は全くない．我々

Goda, S. and Ohshima, T. 2006, Biochim. Biophys. Acta

は，ヒトゲノム情報からすでに結晶構造解析が明らかに

1764, 1087-1093.

な っ て い る 超 好 熱 菌 Archaeoglobus fulgidus L-aspDH と８）Yoneda, K., Sakuraba, H., Tsuge, H., Katunuma, N. andOhshima, T. 2007, FEBS J. 274, 4315-4325.

26% の 同 一 性 を 有 し，Putative L-aspartate dehydrogenaseとアノテーションされている遺伝子（NM_001114598.1）

９）Dillon, P.J. and Rosen, C.A. 1993, Methods Mol. Biol.
15, 263-268.

を 見 出 す こ と に 成 功 し た． ヒ ト 由 来 L-aspDH（HmaspDH）の遺伝子をオーバーラッピング PCR 法により10）Laemmli, U.K. 1970, Nature 227, 680-685.

全合成し，大腸菌を宿主細胞として大量発現させると共11）Bradford, M.M. 1976, Anal. Biochem. 72, 248-254.

─ 14 ─

L-アスパラギン酸脱水素酵素ホモログの機能解析

12）Bok, J.W. and Keller, N.P. 2012, Methods Mol Biol. 944,

13）Thompson, J.D., Higgins, D.G. and Gibson, T.J. 1994,

163-174.

Nucleic Acids Res. 22, 4673-4680.

─ 15 ─

Developing Academic English for the New Curriculum at Tokai University
東海大農紀要 37：17－24（2018）

Developing Academic English for the New Curriculumat Tokai University
Miki Rodriguez-Yagi ・Daniel Minor ・Michael Rupp ・Ian Isemonger
*

*

*

**

（Received 28 November 2017; accepted 23 January 2018）
SummaryThis paper is part of a larger research effort at developing a new academic English language program for the School of
Agriculture at Tokai University. The purpose of this paper is to investigate differences in levels of student interest and difﬁcultywhen comparing the standard Tokai University general education textbook readings with readings for which the content was
speciﬁcally chosen to be more closely aligned with agricultural sciences, namely for students majoring in agriculture（Plant,
Animal and Bioscience）. The results reported are based on a statistical analysis of questionnaire data gathered twice（time 1
and time 2）from three classes of intermediate level students（time 1, n = 80; time 2, n = 74）from both the ﬁrst（one class ofagriculture and one of non-agriculture majors）and second year（agriculture majors）. Results indicated that agriculture
students are more interested in reading agriculture related materials than the standard general readings offered in the required
English courses, while for students in non-agriculture majors, there was no difference in interest levels.

developed in cooperation with professors of agricultural

1．Introduction

courses, they conducted a preliminary needs analysis in the

The 2018 academic school year will bring with it theform of a questionnaire survey. The results showed that

introduction of two new English courses to the School ofagriculture teachers wanted the students to master basic

Agriculture at Tokai University. The courses to be added are

vocabulary, grammar, and translation skills. Some teachers

called “Academic English” and “Global Skills”, and they will

also indicated a need for students to learn to effectively use

form a large part of the required English program. Academic

dictionaries and WEB translation techniques. While this may

English is defined by the Tokai University Educational

not seem commensurate with the turn to greater emphasis on

Council（1）in broad terms to refer to the development ofcommunicative English in Japan（3）, it is important to

Academic subjects based on a cooperative effort between theremember that the requirements of students in the science-

English Language instructors and the academic subject

related fields often relate to accessing information in

instructors. Global skills, on the other hand, refers to the skills

international research which of course is most frequently inrequired of a global citizen, which in the contexts of English

English. The skills required for this are relatively aligned withlanguage education is being interpreted as integrative skills

what the respondents requested in the survey administered bysuch as those necessary to give and actively take part inRodriguez-Yagi and Minor to teachers of agriculture.

presentations in an English context. Anticipating this change

A needs analysis was performed, after which a literature

to the curriculum, Rodriguez-Yagi and Minor（2）explored

review was conducted which resulted in content-based

methods for the development of an appropriate Academic

instruction（4-8）being judged as most appropriate to theEnglish course. First, as it is a subject which is to belearner context of the School of Agriculture. Pursuant to thisresearch trajectory, a small-scale pilot class was conducted in*

Aso Liberal Arts Education Center, Tokai University

fall 2015（2）. The outcome of the pilot class was judged to be**

Department of Communication and Information Studies andpositive based on student and instructor feedback. However,

Post Graduate School of Social and Cultural Studies,

one limitation of the pilot study was that the students wereFaculty of Letters, Kumamoto University

self-selected, and thus it may have been that their levels of─ 17 ─

Miki Rodriguez-Yagi・Daniel Minor・Michael Rupp・Ian Isemonger
English proﬁciency and motivation were not on par with thefor the participants. There was also some minor change in thelevels of many of their classmates. As Academic English will

participants at Time 1 and Time 2 due to absences etc. The

be a required subject, which students of all levels must take, itmain groups for the analysis therefore, and in terms of which

was necessary to conduct a larger scale multi-class pilot study,

each RQ was addressed, were the following:

which is the subject of this paper. In spring 2017, a larger
team of researchers took part in conducting this morea） Entire Sample A single dependent sample by design, but

extended pilot study on Academic English in Tokai

with unmatched pairs, responding at Time 1 [n = 80] andUniversityʼs School of Agriculture.

Time 2 [n = 74], to Material Sample 1 and Material
Sample 2, respectively, and treated as statistically

The purpose of this study was essentially threefold. First,
it was necessary to determine whether material aligned with a

independent samples due to the lack of matched pairs.

content-based approach（4-8）would be considered preferable
to existing materials, and this was taken to be an issueb） Te a c h e r S u b s a m p l e s Tw o s e p a r a t e s u b s a m p l e sstrongly aligned with the studentsʼ level of interest in thecomprising the students in each of the administering

materials. Second, it was important to begin to at least engage

teachersʼ classes. Each subsample was dependent by

with the issue of difﬁculty of material, given the limitations ofdesign but with unmatched pairs, responding at Time 1

the previous pilot study（2）, even if the pragmatic constraints

and Time 2. Teacher 1 had responses at Time 1（n = 25）on this, given the need to conduct the study within the classes

and Time 2（n = 26）. Teacher 2 had responses at Time 1

available, prevented a comprehensive engagement. Third, and（n = 55）and Time 2（n = 48）. In each subsample, Timegiven the different study tracks of students who will take the

1 and Time 2 responses were treated as statisticallyAcademic English course, it was also important to examine

independent due to the lack of matched pairs.

how prior knowledge might affect studentsʼ perspective on
new materials. It was anticipated that this issue would overlapc） Study Track Subsamples Two separate subsamples

with the issue of student interest in potential materials. Given

comprising students in the School of Agriculture（ag）

these three overarching aspects of interest, a study was

and in the School of Industrial and Welfare Engineering

designed with the agenda of providing evidence-based

combined with the School of Business Administration

conclusions with respect to them. One overall difﬁculty was（eb）. Each subsample was dependent by design but withthat there were limited options for the design given the dual

unmatched pairs, responding at Time 1 and Time 2. Ag

challenges of working within the groups available, i.e. groups

had responses at Time 1（n = 55）and Time 2（n = 48）.

constituted through the existing educational, institutional andEb had responses at Time 1（n = 25）and Time 2（n =curricular parameters, as well as maintaining respondent

26）. In each subsample, Time 1 and Time 2 responses

anonymity.

were treated as statistically independent due to the lackof matched pairs.

2.0

Design and Research Questions

There were three research questions which were as follows:

There were three main research questions for the study
which pertained to each of the main survey items and these

RQ1

covered level of interest, difficulty and familiarity/prior

Is there a signiﬁcant difference in the level of interest for theknowledge, respectively. The responses on these items

Regular Reading（Material Sample 1）and the Cowspiracy

comprised the dependent variable. The two material types（Material Sample 2）for the three groups（a, b, and c）?

（Material Sample 1 and Material Sample 2）comprised

RQ2

different levels of the independent variable（i.e. type ofIs there a significant difference in the perceived level ofmaterial）in a within-group design at Time 1 and Time 2. The

difﬁculty for the Regular Reading（Material Sample 1）andwithin-group design, however, came without matched pairs

the Cowspiracy（Material Sample 2）for the three groups（a,（i.e. participants could not be tracked from Time 1 to Time 2）,b, and c）?

and this was due to the exigencies of maintaining anonymity

RQ3─ 18 ─Developing Academic English for the New Curriculum at Tokai University
Is there a signiﬁcant difference in the level of familiarity with,

RW1eb were made up of the second highest level of ﬁrst year

or prior knowledge of, the Regular Reading（Material Sample

class 2 students at School of Agriculture and School of1）and the Cowspiracy（Material Sample 2）for the three

Industrial and Welfare Engineering combined with the Schoolgroups（a, b, and c）?

of Business Administration. RW1ag students were compliant
to the teacherʼs instructions, and worked well both

3.0

individually and in small groups. The RW1eb class students

Methoddisplayed a wider range of responses to the teacherʼsGiven that the study was conducted within the existing

instructions, from very responsive to somewhat reluctant.

class allocation system, random sampling was not possible.

Many worked well both individually and in small groups, but

The study was conducted with three intact classes, and wasothers were less active in the classroom. The atmosphere oftherefore based on a sample of convenience.

the RW2ag students was generally quiet and serious, and it
was often a challenge for the teacher to get them to talk freely
and collaborate with each other, though they were friendly

3.1 Participants

and polite in general. On a one to one basis, the teacher would

Two Reading and Writing 1 intermediate classes and one
Reading and Writing 2 intermediate class participated. One ofnotice that some students were much more talkative and easy
going.

the Reading and Writing 1 classes was not from the School of
Agriculture（ag）but rather from the School of Industrial andWelfare Engineering combined with the School of Business

3.2 Material

Administration（eb）. The classes are designated as RW1ag,

Each class used two kinds of material. The first was a

RW1eb, and RW2ag. It was decided to include the class fromchapter from the regular reading textbooks（9, 10）and thethe Schools of Industrial and Welfare Engineering andsecond was Cowspiracy（11）. The RW1 regular reading isBusiness Administration to ascertain if the result is speciﬁc tofrom Chapter 5 of the reading textbook, Select Readings -the studentsʼ major.

Elementary Book A（Oxford）, and was titled “A City Without

For the Material Sample 1 lesson, RW1ag had 27

Oil”. The RW2 regular reading is from Chapter 12 of thestudents, RW1eb had 25 students, and RW2ag had 25

reading text book, Select Readings - Elementary Book B

students. For the Material Sample 2 lesson, RW1ag had 25（Oxford）, and was titled “Protecting Culture and Traditions”.

students, RW1eb had 26 students, and RW2ag had 26

Cowspiracy was selected as it was among the materials

students. The range of the placement test results was 40-47

used in the small-scale pilot class. Furthermore, the topic was（RW1ag）, 33-39（RW1eb）, and 42-49（RW2ag）. The

related to agriculture, which makes it viable as material forplacement test is given to new students during the orientation

Academic English in the School of Agriculture. Cowspiracy isperiod in the beginning of April. The questions on the test are

a documentary ﬁlm and the reading material talks about what

multiple choice with 30 grammar, 30 listening, and 40 readingkind of ﬁlm it is, what kind of impact it had on young people,

questions. The grammar section involves ﬁlling in blanks inand the background of the film. According to the Tokai

30 single sentences. The listening section consists of three

University syllabus, the target level for RW1 Intermediate isparts. The ﬁrst part has 20 short dialogues, each one followed

CEFR（12）A2 and for RW2 Intermediate is CEFR B1, while

by a question, the second part is a longer conversation with

Cowspiracy is set at CEFR B1（13）.

ﬁve questions, and the last part is a lecture with ﬁve questions.
The reading section has four passages with ten questions each.
Based on the placement test results, students are

3.3 Procedurestreamed into one of three levels, namely, Basic, Intermediate,

Teacher 1 taught one class of second year intermediate

or Advanced. All of the RW1ag, RW1eb, and RW2ag classstudents majoring in agriculture, while teacher 2 taught two

students had been placed into the intermediate level as

first year classes of intermediate students, one class which

determined by the Tokai English placement test. Students

was of agriculture students and the other which was ofwere further divided into class 1 and class 2. RW1ag andbusiness or engineering students. After the Material Sample 1

─ 19 ─

Miki Rodriguez-Yagi・Daniel Minor・Michael Rupp・Ian Isemonger
lesson and again after the Material Sample 2 lesson, students

Sample 2）, and the purpose of their combined summation in

were given a questionnaire utilizing a 5-point Likert-scale toTable 1 is to describe general tendencies across question typemeasure studentsʼ perception in three areas, namely interest,

rather than by material type（for the latter see Table 2 and 3

difﬁculty, and familiarity. Ratings of 5 indicated the highest

below）. From the means presented in Table 1, it is clear thatinterest, the least difﬁcult, and the most familiar, while ratings

there was a general tendency to respond more positively toof 1 indicated the lowest interest, the most difﬁcult, and theItem 1（Interest question）than to Item 2 and 3（Difficulty

least familiar.

question and Familiarity/Prior Knowledge question）, and thistendency is evident independent of the material type（Material

4.0

Sample 1 or 2）which presents as the object for the rating

Results

response. With respect to standard deviation, Item 1 was

The results for this study are divided into two sections,somewhat higher than for the other two items. All results fornamely, descriptive statistics（Section 4.1）and inferential

skew and kurtosis were acceptable; if not meritorious in somestatistics（Section 4.2）
. The descriptive statistics section

cases（e.g. Item 2 for which both skew and kurtosis was very

covers the means（as a measure of central tendency）and thelow）. Skew for Item 1 was somewhat high, but was not above

standard deviations（as a measure of score spread）for scores

an absolute value of 2 which would be the start point for aon the Likert-scale items（Questions 1, 2 and 3）. In addition,questionable level of skew.

the skew and kurtosis for scores generated on the three Likertscale items are also reported. The inferential statistics section
covers a series of statistical tests（Mann-Whitney U Test）

Table 1．Means, Standard Deviations, and Critical Ratio for Skew andKurtosis for Items on Survey Questionnaire（both Material
Samples Combined）

designed to adjudicate the research questions posed by the

Mean

Item 1

154

3.46

.923

-2.00

0.60

study. Due to the absence of matched pairs－a limitation
mentioned above in the section on research questions－dependent measures statistical tests could not be used,

Critical Critical
Std.
Ratio for Ratio for
Deviation
Kurtosis
Skew

N

Item 2

154

2.82

.896

-0.38

-0.02

because they require such matched pairs. The Mann-Whitney

Item 3

154

2.70

.879

-1.29

-0.83

U Test, for ordinal scales on the dependent variable, was used

Valid N154

by treating the dependent groups as independent groups. The
analytical consequence of this is that statistical power was

Tables 2 and 3 present the means, standard deviations andsacriﬁced, and a beta error or Type II error（i.e. the error of

critical ratios for skew and kurtosis for the same scores on theincorrectly retaining the null hypothesis, or a false negative）

Likert-scale items, but by material type. Table 2 presents the

becomes more likely.

results for the Regular Reading（Material Sample 1）and
Table 3 the results for the alternative Cowspiracy（Material

4.1

Sample 2）.

Descriptive Statistics
There were cases of potential patterned responses in thedataset, i.e. where students responded in the same way for all

Table 2．Means, Standard Deviations, and Critical Ratio for Skew andKurtosis for Items on Survey Questionnaire（Material Sample
1, Regular Reading）

questions. This appeared to occur more often for the industrial
and welfare engineering and business administration students.
However, given the limited number of questions it was not

Item 1
Item 2Item 3
Valid Npossible to conﬁrm this completely, and no data was excluded.
Table 1 below presents the means, standard deviations,

N

Mean

80
80
80
80

3.34
2.88
2.70

Critical Critical
Std.
Ratio for Ratio for
Deviation
Kurtosis
Skew
.913
-1.95
0.29
.891
0.12
0.46
.906
-1.14
-1.15

and critical ratio for skew and kurtosis for each of the Likertscale items appearing in the research questionnaire which wasBoth Table 2 and Table 3 present results which follow

completed by participants（N=154, for each item）. Thisthe same general pattern as those presented in Table 1; withincludes the responses obtained for both the Regular Reading

Table 1 having represented the combination of the results seen

（Material Sample 1）and the alternative Cowspiracy（Material

in Table 2 and 3. The mean for Item 1 is considerably higher─ 20 ─Developing Academic English for the New Curriculum at Tokai University
than the means for Item 2 and 3 in both Table 2 and Table 3.

would most likely be the case for Item 1 where the p value

However, this elevation of mean for Item 1 with respect to thewas .134 and the closest to being below the alpha level of .05.

other two items is more pronounced in Table 3（Material

Nonetheless, on the power which was available to statistical

Sample 2; Cowspiracy Reading）than in Table 2（Material

testing, the results all indicate no statistical differences.

Sample 1, Regular Reading）; although this difference isreported here as an observation by inspection rather than a

4.2.2 Subsamples by Teacher（b）
When the Mann-Whitney U Test was conducted withindifference supported by statistical inference.
Table 3．Means, Standard Deviations, and Critical Ratio for Skew andKurtosis for Items on Survey Questionnaire（Material Item 2,
Cowspiracy Reading）

the two teacher groups/subsamples（i.e. once for Teacher 1ʼs
students and once for Teacher 2ʼs students）, it was found thatlevel of interest（Item 1）did produce a signiﬁcant result for
Teacher 1ʼs students across Material Sample 1 at Time 1

Critical Critical
Std.
Ratio for Ratio for
Deviation
Kurtosis
Skew

N

Mean

Item 1

74

3.59

.920

-1.03

0.54

Item 2

74

2.76

.904

-0.65

-0.44

other evaluation items（Items 2 and 3）in Teacher 1ʼs

Item 3

74

2.70

.856

-0.67

0.22

subsample, and there were no significant results at all for

Valid N

74

（Mean = 3.48）and Material Sample 2 at Time 2（Mean =4.00）. No other significant differences were found for the

Teacher 2ʼs subsample. Again the problem of having
unmatched pairs forced the treatment of groups, which were

Notable observations about the standard deviations, withdependent by design, as statistically independent groups, andrespect to Table 1 and 2, would include the relatively larger

the same qualiﬁcations with regard to statistical power apply.

difference in standard deviation for scores across Material

The statistically significant result for the Teacher 1

Sample 1 and 2 on the third item（i.e. Item 3 which related tosubsample on Item 1 needs to be interpreted with caution

prior knowledge）; and this despite the mean being precisely

because student assignment to Teacher 1 and Teacher 2 was

the same in both cases. With respect to skew and kurtosis,

not balanced in terms of either size or study track. Teacher 1ʼs

there are no salient observations to be made. All values for the

subsample（n = 51）included only the School of Agriculture

critical ratio were acceptable.

students（RW2ag）, while Teacher 2ʼs subsample（n = 103）
included both the School of Agriculture（RW1ag）students（n4.2= 52）and the School of Industrial and Welfare Engineering

Inferential Statistics

combined with the School of Business Administration

The results for all executions of the Mann-Whitney U（RW1eb）students（n = 51）. Thus the signiﬁcant difference

Test are reported below, and these include results for each ofobtained here for Teacher 1ʼs subsample on the level ofthe three Likert-response items and for each of the groups（a,interest（Item 1）is less likely related to a teacher variable,b and c）identiﬁed in the research questions. The alpha level,

and more likely related to a study-track variable which

or significance level, was set in advance at .05, and thus

expresses itself unequally across the two teachers due toinferences below are associated with a 95% conﬁdence level.

imbalance in student assignment. The results in Section 4.2.3
below corroborate this cautioning.

4.2.1 Entire Sample（a）
For a Mann-Whitney U Test involving the entire sample

4.2.3 Subsamples by Study Track（c）

at Time 1（n = 80）and Time 2（n = 74）, no significant

In this analysis, the Mann-Whitney U Test wasdifferences were found across Material Sample 1 and Material

conducted within the two study-track groups/subsamples（i.e.

Sample 2 for any of the three items. Times 1 and 2 wereonce for RW1ag and RW2ag students and once for RW2eb

treated as statistically independent groups given thatstudents, using Time 1 and Time 2 in each case as statistically

respondents could not be tracked across these two

independent groups given that pairs could not be matched）.

administrations of the research questionnaire, and therefore

For the School of Agriculture students（subsample）apairs could not be matched. The loss of statistical powersignificant difference was found with respect to level ofmeans that false negatives are a possibility. Speculatively, thisinterest（Item 1）across Material Sample 1（Mean = 3.49）

─ 21 ─

Miki Rodriguez-Yagi・Daniel Minor・Michael Rupp・Ian Isemonger
and Material Sample 2（Mean = 3.85）. The p value was .043

such as Cowspiracy may be more appropriate for students inand thus less than the alpha level of .05 set in advance. This

the School of Agriculture. The results obtained in this study

indicates that this subsample found Material Sample 2

do provide preliminary evidence that students from the School（Cowspiracy）more interesting, and this inference can beof Agriculture were more interested in the reading which

made at the 95% conﬁdence level.

aligned with their ﬁeld of specialization. This can be claimed

The results here bear on the results immediately above

with relative confidence because the statistical procedure（Section 4.2.2）, because Material Sample 2（Cowspiracy）isemployed, given the properties of the data and design

thematically related to the study-track of the agriculture

constraints, if anything, lacked statistical power. This

students, and therefore more likely to be of interest to them.

essentially means that a false negative（Type II error）

The significant difference obtained above on the same item

presents as more of a possible problem than a false positive（Item 1）in Teacher 1ʼs group, but not in Teacher 2ʼs group, is（Type I error）. Put another way, the statistical tests were notarguably because Teacher 1 only had students from the School

very sensitive given the constraints, and it is possible that realof Agriculture while Teacher 2 also had students from thedifferences were not actually detected by the tests.

engineering/business track for whom there was no signiﬁcantdifference in terms of Item 1 or level of interest.

5.0

6.0 Future Research
In this study, the students from second highest level class

Discussion（based on the placement test results）were chosen to

In the small-scale pilot class conducted previous to thisparticipate. Their placement test scores ranged from 33 to 49.

study, only eight self-selected students, whose placement test

The very bottom class scores ranged from 19 to 32. Future

scores were in the range of 38-66, participated（2）. This range

research should be conducted with the lowest levels as well.

of scores is higher than the typical placement test scores of

One consideration involved in this would be to adapt themost intermediate level students. It was anticipated that thereading material to be easier. Another consideration would bematerial used in the pilot class, Cowspiracy, might be too

the manner of delivery of the material. The teaching

difﬁcult for use in a regular size intermediate class. However,methodology may require modiﬁcation in the case of lower-

the difficulty level did not appear to be a problem aslevel classes; i.e. making more use of Japanese and relying

evidenced by the results obtained in this study with a larger

more heavily on a grammar-translation approach. The

sample. There was no significant difference in the studentsʼ

approach adopted by the professors of agricultural sciences inperception of difﬁculty between Material Sample 1 and 2.

the “Reading Academic Papers in English” course is highly

The participants in this study were not self-selected, asassociated with the grammar-translation method. Therefore, it

had been the case in the previous study. However, there weremight be beneﬁcial for students if they started to follow thisindications that for the subsample of students from the School

kind of approach for Academic English as well.

of Agriculture, Cowspiracy was more interesting than the

At present, the Ministry of Education is promoting theregular reading. It is important to reiterate that the signiﬁcantteaching of English through English, which is well-known.

result obtained for level of interest within the Teacher 1 group

However, a questionnaire administered to the agriculture

but not within the Teacher 2 group needs to be interpreted

teachers did not show satisfaction with the present English

with caution. The result here is arguably a proxy for the result

education at Tokai Universityʼs School of Agriculture. Using

obtained by study track, because the agriculture study track

the Academic English classes as a bridge between the general

was more heavily represented in participant group taught byeducation English classes and the more specialized “Academic

Teacher 1. This was a design limitation in this study, but not a

Paper Reading” classes, could be one way to scaffold thedesign limitation which could be avoided given the stricturestransition and provide students with a more secure footingof conducting the study within the curriculum and with intact

across these two aspects of the curriculum. A more graduatedclasses.

approach facilitated by the Academic English classes could

As the new curriculum is emphasizing Academic English
which is related to the studentsʼ major areas of study, readings

thus facilitate more conﬁdence and motivation on the part ofstudents.

─ 22 ─Developing Academic English for the New Curriculum at Tokai University
This paper indicated that agriculture students are more

（5）Mohan, B.A., 1986. Language and content（Vol. 5288）.

interested in reading agriculture related materials than the

Addison Wesley Publishing Company.

standard general readings offered in the required English（6）Mehisto, P., Marsh, D. and Frigols, M.J., 2008. Uncoveringcourses. In future research, it will also be important to explore

CLIL content and language integrated learning in bilingual

other teaching methodologies in addition to using theand multilingual education. Macmillan.

grammar-translation approach, as well as exploring materials（7）Stryker, S.B. and Leaver, B.L. eds., 1997. Content-basedfor various difficulty levels for use in both basic andinstruction in foreign language education: Models andintermediate classes.

methods. Georgetown University Press.
（8）Jack C. Richards and Theodore S. Rodgers, 1986,
Approaches and Methods in Language Teaching －Third

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Edition, Cambridge University Press, Cambridge
2017年度カリ（9）Linda, L., 2014. Select readings second edition elementary

キュラム改訂，2015

A, Oxford University Press.

（2）Rodriguez-Yagi, M. and Minor, D, 2017. Exploring（10）Linda, L., 2014, Select readings second edition elementary
B, Oxford University Press.

academic English for the new curriculum at Tokai
University. Proceedings of School of Agriculture Tokai（11）https://eewiki.newint.org/images/3/3d/Cowspiracy.pdf

University, Vol. 36, 15⊖21.

（12）https://www.coe.int/en/web/common-european-framework（3）Tanaka, T., 2009. Communicative language teaching and-reference-languages/table-1-cefr-3.3-common-reference-levels-global-scale

its cultural appropriateness in Japan. Doshisha studies in（13）https://eewiki.newint.org/index.php?search=cowspiracy

English, 84, pp.107⊖123.
（4）Brinton, D., Snow, M.A. and Wesche, M.B., 2003.
Content-based second language instruction. Universityof Michigan Press.

─ 23 ─

&title=Special%3ASearch&fulltext=Search

Miki Rodriguez-Yagi・Daniel Minor・Michael Rupp・Ian Isemonger

東海大学新カリキュラムのアカデミック英語の開発
ロドリゲス八木美樹
Daniel Minor
Michael Rupp
Ian Isemonger
抄録
本稿は東海大学農学部新カリキュラムのアカデミック英語開発において適した教材選定のために行った研究を報告する．現在の英語コミュニケーション科目であるリーディング＆ライティング１，２の教科書の英文（Material
Sample 1, time 1）と農学に関連する英文（Material Sample 2, time 2）をそれぞれ「興味深さ」
「難易度」
「内容に関
する知識」に関して問うアンケートを実施した．農学部１年２クラス中級レベル（習熟度別４クラス上から２番目），農学部２年２クラス中級レベル（習熟度別４クラス上から２番目），基盤工学部・経営学部１年２クラス中級
レベル（習熟度別６クラス上から２番目）が回答し，統計的には３つのグループに分けられた．１つ目は上記３クラス全体，２つ目は２年を教えた Teacher 1 と１年を教えた Teacher 2の比較，３つ目は農学部と基盤工学部・経営学部の比較である．結果，唯一有意差が認められたのは農学部生が教科書の英文よりも農学に関連する英文の方に興味をもった点である．基盤工学部生と経営学部生のクラスではそのような差はなかった．
「難易度」に関してはMaterial Sample 1 と Material Sample 2 の間に差は見られず，農学に関した英文が特に難しいということはなかった．
本研究では習熟度別クラスの上から２番目で行ったので，最下位レベルのクラスでの調査も必要である．

─ 24 ─

東海大農紀要 37：２５－２９（2018）

飼育下キンシコウの行動

飼育下キンシコウ（Rhinopithecus roxellana）の行動と空間利用に季節が及ぼす影響
伊藤秀一 ・下田龍之介 ・松本充史 ・小山
1

12

信 ・井手眞司2

2

Effect of season on the behaviour and spatial use of the golden snub-nosed monkey in a zoo
Shuichi ITO, Ryunosuke SHIMODA, Atsushi MATSUMOTO, Shin OYAMA, Shinji IDE（Received 29 November 2017; accepted 31 January 2018）
ABSTRACT
Although the regulation of environmental temperature is an important part of animal management, the zoo environment may
still be different from the wild. In Japanese zoo, animal care must particularly be taken fore those from alpine regions during
the summer. In this study, the behaviour and spatial use of the golden snub-nosed monkey (Rhinopithecus roxellana) was
compared during summer and autumn in Kumamoto Zoo and Botanical Gardens. Behavioral observations showed that themonkeys spent 60% of their time in inactive (e.g., resting and visual investigation) and 30% of their time in active behaviours(e.g., foraging and social behaviour) during both summer and autumn, with no signiﬁcant differences between the two seasons.
However, during summer, the monkeys frequently used the highest and shadiest places in the enclosure, whereas during
autumn they frequently used places that were exposed to sunlight, demonstrating that their spatial use varied between seasons.
Therefore, this study demonstrated that golden snub-nosed monkeys at Kumamoto Zoo and Botanical Gardens selected places
to avoid the heat, but did not change their behaviours or activities during summer.

緒

飼育施設が限られた面積であることからも，動物が環境

言を選択することが困難であり，暑熱もしくは寒冷ストレ

動物園は，国外も含めた様々な地域に生息している生物を集めて展示する施設であることから，本来の生息環

スは，動物の行動や生理に大きく影響することが予想される．

境とは異なる気象条件での飼育となる場合が多い．そのキンシコウ（Rhinopithecus roxellana）は，中国におけため，生息域から遠く離れた動物園での飼育展示は，動る国家一級重点保護野生動物であり希少な動物である

物にとって暑熱もしくは寒冷ストレス環境となる（1-2）（8）．西南暖地に位置する熊本市動植物園では，中国とことがある．産業動物では，暑熱もしくは寒冷ストレスの長期学術共同研究を目的としてキンシコウが飼育され刺激は，呼吸数の増加や，採食量の低下，乳量や増体量，ている．キンシコウの生息地は，年間平均気温が５℃～

繁殖成績などに影響する（3-4）ことから，生産性への15℃であるが，夏期の熊本市における日中平均気温は

影響を最小限にするために畜舎の改良などの対応が行わ

30℃以上であり，飼育下と気温が大きく異なる．しかし，れている（5-6）．一方で，動物は環境に対して適応的にキンシコウ導入から25年以上経過しているにもかかわら行動し，強いストレス刺激を回避する能力を有している

ず，死亡した個体も無く，順調な飼育展示が行われていことから，野生動物は季節によって活動地域を変更して，る．そこで，本研究では，さらなる管理法の改善および最適な気温環境を選択する行動が報告されている（7）．

飼育設備の改良への一助とするために，本来は寒冷な高しかし，動物園においては，産業動物の管理と同様に，山性であるキンシコウが，西南暖地である九州の動物園で，夏期にどのように対処しているかを明らかにするために，キンシコウの行動ならびに空間利用について，本1

東海大学農学部応用動物科学科

2

熊本市動植物園

来の生息環境と比べて暑熱環境であると考えられる夏期

連絡先：伊藤秀一 e-mail: shuichi_ito@agri.u-tokai.ac.jpと，比較的気温が低い秋期を比較した．
─ 25 ─

伊藤秀一・下田龍之介・松本充史・小山信・井手眞司

３．行動および利用場所の記録

材料および方法

調査は，観察者1名が，晴天時に観覧通路より目視で実施した．観察期間は，夏期を2009年８月12日から９月

1．供試動物および施設
熊本市動植物園において飼育されている５頭のキンシ

11日のうちの15日間，秋期を2009年10月15日から11月18

コウ（学名：Rhinopithecus roxellana）のうち，成熟した

日のうちの13日間とし，９時30分から16時まで実施した．

2 頭 の オ ス を 観 察 対 象 と し た． 供 試 個 体 に は 星 星

雨天時は観察を中止した．管理の都合上でキンシコウの（SinSin）と飛飛（FeiFei）という愛称がつけられていた．

寝室収容時間が早まる際には，15時に観察を終了した．

キンシコウの飼育場は，放飼場とバックヤードである寝室から構成され，放飼場には木製の多層構造物が設置さ

a）行動観察れ，動物は横方向および縦方向に自由に移動すすること

行動観察は，直接観察法による30秒間隔の瞬間サンプが可能であった．また，夏期には天井に庇陰用のシート

リングを行った．観察項目は，摂食（Foraging），移動が設置されていた．放飼場の概要を Figure 1に示した．

（Moving），休息（Resting），内部探査（Investigation），

キンシコウは９時から16時までを放飼場で，16時以降は視覚探査（Visual Investigation），敵対行動（Agonistic），

寝室内で過ごしていた．供試個体は，個体間での闘争を慰安（Comfort），排泄（Excretion），社会行動（Social）

防ぐために，日替わりで1頭のみが放飼場に展示されてとした．観察に用いた行動カテゴリーを Table 1に示した．

いた．場内中央には仕切りが設置されており，右側の放本研究での観察個体は単独飼育であったが，隣のケージ

飼場では観察対象としたオス個体が展示され，左側の放の個体と物理的に接触が可能なため，社会行動について

飼場では供試個体と血縁関係のある他の３頭が展示されも記録を行った．

ていた．給餌は，朝夕の2回行われ，朝は健康観察のた

Table 1. Ethogram of behaviours observed in the study.

めに寝室内で果実などを飼育員が手渡しで与えられた．
さらに，放飼場内の踊り場にはトウネズなどの葉が給餌

Bahaviour pattern

Description

図表・説明文されていた．夕は寝室内で同様の飼料が給餌された．

Foraging

Biting, sniffing, or manipulating pieces of food, anddrinking water

MovingWalking, running or climbing

Resting

Sitting or standing without moving

Investigation

Exploring the wall, fence, ground or others with nose

Visual Investigation Visually scanning to environment without moving
Agonistic

Fight or threats for other animals and observer

Confort

Grooming, licking, picking or otherwise manipulating
own body

Excretion

Urination or defecation

SocialAllogrooming or playing with other animalsb）放飼場内における空間利用
放飼場内の空間を，地面からの高さと，前面フェンス
からの奥行きを基準にそれぞれ分割し，キンシコウが利Fig. 1. Schematic of Golden snub-nosed monkey exhibition in
Kumamoto city botanical and zoological garden (Front view).

用している場所の記録を行った（Figure 2および Figure3）．水平方向は，地面（G），多層構造の下部（T1），中間部（T2），上部（T3）および天井フェンス（R）とし，

2．環境温度
本研究では，気温と環境温度（WBGT）を測定した．

さらにフェンスを下から F1～ F3に分割した（図2）．

Figure 1 本調査では測定器を屋外に設置したことから，環境温度
Schematic＝0.7×湿球温度＋0.2×黒球温度
of Golden snub-nosed monkey exhibitionin Kumamoto city botanical andT＋0.1×乾球温度とした．測定器具は，黒球温度計（150mm：ISUZU
製 株式
zoologicalgarden (Front view).
会社安藤計器製工所）と乾球湿球温度計（トヤマ計器株
式会社 東京）を用いた．黒球温度計は地面から150cmの位置に設置した．
Fig. 2. Vertical space utilization divided into 5 sections from grand to roof.

─ 26 ─
Figure 2
Vertical space utilization divided into 5 sections from grand to roof.

飼育下キンシコウの行動
2．各行動の発現割合
各行動が1日に占める割合を，個体ごとに Figure 5に示した．飛飛の社会行動は，夏期が0.6±1.6％であったのに対し，秋期は10.4±5.6％と高かった（P＜0.05）．また，内部探査行動にも差は認められたが，その差は小さ
く，さらにその他の行動に差は認められなかった．秋期
で社会行動が増加した理由については不明であった．星Fig. 3. Horizontal space utilization divided into 3 sections

星の休息行動は，夏期が28.3±10％であったのに対し，奥行きでは観覧者通路側に近い空間（f），中間部（c），

秋期は16.1±5.2％と低かった（P＜0.05）．同様に静止し最も奥（b）に分割した（図３）．空間利用の記録には，
Figure3

た状態である視覚探査は，夏期が36±8.6％であったのHorizontal
space utilization divided into 3 sections
直接観察法による15秒間隔の瞬間サンプリングを行った．

に対し，秋期は45±5.4％と高かった（P＜0.05）．さらまた，空間利用位置の判断基準は，キンシコウの左手がに移動と内部探査に期間で有意な差が認められたが，そ位置する場所とした．

の差は小さかった．個体ごとに，休息，視覚探査および排泄行動を合計した値を非活動的行動，摂食・飲水，位置移動，内部探査，敵対行動，慰安・身繕いおよび社会

４．統計解析
行動は1日に占める各行動の発現割合について，観察行動を合計した値を活動的行動として算出したところ，

日を反復として，個体ごとに季節間で対応のある T 検

両個体共に季節間に差がなく，非活動的行動の発現は約定を用いて統計解析を行った．空間利用については，垂60％であった（Figure 6）．本研究における夏期と秋期の直方向と水平方向のそれぞれについて各位置の利用割合

環境温度と気温は，10℃前後の差がみられたことから，を算出し，行動と同様に観察日を反復として個体ごとに気温の変化に対して，行動や活動性が変化すると考えた

季節間で対応のある T 検定を用いて統計解析を行った．

が，星星は気温の上昇により休息行動が増加し，移動行

すべての統計解析には，Mac 統計解析 ver.1.5（株式会社

動が減少したものの，両個体ともに変化した行動は無エスミ 東京）を用いた．

かった．また，活動的行動と非活動的行動の割合も変化
FeiFei

SinSin結果および考察1．環境温度ならびに気温
観察日の測定温度ならびに気温の平均値を，季節ごとに Figure 4に示した．夏期の気温は32.1±1.1℃，環境温
度は23.6±1.7℃で，秋季はそれぞれ20.3±3.8℃と14.7±
3.1℃であった．環境温度と気温の差は，夏期が－8.5℃，
秋期は－5.5℃であり，両季節で環境温度が気温を超えることはなかった．
Fig. 5. The time budgets (＋SD) of each behavior in each Goldensnub-nosed monkey.
Figure 5

FeiFei

SinSinThe time budgets (＋SD) of each behavior in each Golden snub-nosed monkey (SinSin
and FeiFei).

Fig. 4. Average temperature and wet bulb globe temperature(＋SD) of
each season.
Figure 4

Fig. 6. The time budgets (＋SD) of active and inactive behaviour ineach Golden snub-nosed monkey.

─ 27 ─

Average temperature and wet bulb globe temperature(＋SD) of each season.

Figure 6
The time budgets (＋SD) of active and inactive behaviour in each Golden snub-nosed
monkey (SinSin and FeiFei).

伊藤秀一・下田龍之介・松本充史・小山信・井手眞司間利用を Figure 8に個体ごとに示した．飛飛は，T2としなかった．
動物園などの飼育環境は，野生生息地と比べると極端

F1，2，3の利用について両期に差が認められ，秋期はに狭く構造も単純であることから，1日の行動時間配分

夏 期 に 比 べ て T2で30.2 ％ 増 加 し（P＜0.05），F3で はについて休息時間が多く，様々な異常行動の発現が問題

36.8％減少した（P＜0.05）．また，同様に星星においてとなっている（9）．本研究では，どちらの期間においても，T2の利用において差が認められ，秋期では8.3％増

も非活動的行動の発現割合が60％を占めた．チンパン

加した（P＜0.05）．奥行きを基準とした場合は，両個体

ジー飼育においては，給餌回数を一日一回から二回に増共に，夏期は最も後方の空間である B の滞在時間が長やすと採食時間が増加し，採食に関わる行動以外に対し

くなり，全ての区画で差が認められた．このように，供ても影響を与えること（10）や，屋外展示場に高さ４m

試動物は，夏期において日中日陰が形成される空間や放と８m の木製三次元構造物を導入し，新しい行動レパー

飼場内で最も高さのある空間を頻繁に利用し，秋期ではトリーを増やす物理的エンリッチメントの効果が報告さ逆に日中は日光があたる空間を利用していた．野性のれている（11）ことから，施設をキンシコウの特性にあBlack snub-nosed monkey では，気温の低い冬期や春期はわせることで活動的な行動を増やすことができるかもし

寒さによるエネルギー消費を最小限にするために強風とれない．一方で，野生のキンシコウや，同じ体構造をもなる場所を避け，日向を選択すること（12）や，屋外放つと言われるホワイトヘッドラングール（12），フラン

飼場におけるチンパンジーでは，体温調節を目的として

ソアルトン（13）は，通年を通して休息行動が1日の約利用する空間を選択する（14）こと，日陰の存在が重要80％程度と，最も多く見られたとの報告があることから，

であること（15）が確認されている．熊本市動植物園で供試個体は，野生における行動特性が飼育環境下でも発飼育されているキンシコウも，飼育環境下でありながら，現していた可能性も考えられた．

利用する空間を季節や気温によって変化させることによって，環境への適応をはかっていることが確認された．
特に，夏期には飼育施設の後方の利用と，個体差はある

３．空間利用地面からの位置を基準とした空間利用の1日の合計をものの，上部の利用が増えたことから，観覧者通路のア

Figure 7に，前面フェンスからの奥行きを基準とした空スファルトからの照り返しなど，コンクリート面を避け

FeiFei

SinSinた可能性が考えられた．このような空間の利用によって，熊本市動植物園のキンシコウは，暑熱時においても非活
動的な行動の割合が急激に増加するなどの大きな行動パ
ターンが変化しないと考えられた．霊長類の管理において，タワーを設置することは，木から木へ移動するという，その動物の正常行動発現にもつながることから，福祉レベルが向上することが報告されているが，本研究か
ら暑熱対策として有効であることが確認された．動物園
動物の飼育管理においては，その動物が有している適応力を発揮できる環境を提供する必要があり，そのためにFig. 7. Seasonal variation of vertical space utilization (＋SD) of two
animals.
Figure 7

FeiFeiは管理する動物の特徴を明らかにすることが重要であろう．

SinSin要

Seasonal variation of vertical space utilization (＋SD) of two
animals.

約

環境温度は飼育管理において重要な要因であるが，展示動物は本来の生息環境と異なる気候で飼育されていることが多く，特に高山地帯を生息域とする動物の管理では，暑熱環境となる日本の夏期は十分な注意が必要である．本研究では，動物園動物の飼育管理法改善の基礎的Fig. 8. Seasonal variation of horizontal space utilization (＋SD) of two
animals.

Figure 8
Seasonal variation of horizontal space utilization (＋SD) of two
animals.

知見とすることを目的として，夏期と秋期において熊本
市動植物園で飼育されている2頭のキンシコウ雄個体を
─ 28 ─

飼育下キンシコウの行動観察対象とし，行動ならびに放飼場の空間利用の比較を

洋一・山口直己．2013．北東北地域の酪農現場にお行った．行動観察の結果，両期間において，休息や視覚ける暑熱の影響の実態調査．Animal Behaviour and

探査等の非活動的行動については全体の60％，摂食や社Management. 49（4）：153-163.

会行動などの活動的な行動は約30％となり，季節間では

７） 泉 山 茂 之．1999． 上 高 地 に お け る ニ ホ ン ザ ル

差は認められなかった．一方で，夏期は放飼場内で最も（Macaca fuscata）自然群の遊動の季節性と積雪期の高い場所や，日中でも日陰が形成されている場所を頻繁

気象条件の影響．霊長類研究 ．15：343-352.

に利用していたが，秋期は日光の入る場所を頻繁に利用

８）福田史夫・榎本 知郎・和田一雄・渡邊邦夫・鈴木

し，季節によって利用する場所を変化させていた．本研

克 哉．2004． 秦 嶺 山 脈 に 於 け る キ ン シ コ ウ

究により熊本市動植物園のキンシコウは，夏期は暑熱を

Pygarhrix (Rhinopithecus) roxellana．研究と保護の現避けるための空間を選択することによって，行動や活動状．霊長類研究 ．20（2）：133-136．

性が変化しないことが明らかとなった．

９）森村成樹・平田聡・倉島治・落合－大平知美．2008．
国内飼育下チンパンジーの個体群管理と動物福祉．

霊長類研究 ．24：17-24.

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チンパンジーの行動への影響．霊長類研究 ．15：

1）Rees P A. 2004. Low environmental temperature causes

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紀

要

委 員 長
委
員

委

米
松
黒
松

員
田
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一
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成
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和

EDITORIAL COMMITTEE OF PROCEEDINGS
ChairmanKazunari Yoneda

MemberYasushi Matsuda
Ryuta Kuroyama
Hirokazu Matsumoto

Published by
School of Agriculture, Tokai University
9⊖1⊖1 Toroku, Higashi-ku, Kumamoto-shi, Kumamoto,862⊖8652, Japan

東 海 大 学 紀 要
第37巻

農 学 部

2 0 1 82018年3月15日発行
発 行 所

東海大学農学部〒862－8652
電話

印 刷 所

熊本県熊本市東区渡鹿９－１－１

096
（382）
－1141
（代）

有限会社ベストプロセス〒861－8038
電話熊本県熊本市東区長嶺東8丁目13－17

096
（388）
－0889

ISSN

Vol. 37

東海大学紀要 農学部

PROCEEDINGSOFSCHOOL OF AGRICULTURE
TOKAI UNIVERSITY
2 0 1 8

東海大学紀要 農学部
第 37 巻
2

Relationship between UPI and BRS Test of Mental Health for University Students

2432－7204018…………………………………………………………………………………… Ryuta Kuroyama ……１
Gene cloning and preliminary enzymological characterization of a gene homologous to………………………………………………………………… Kazunari Yoneda・Tomohiro Araki ……９

大学生への精神的健康度調査における UPI と BRS の関連性の検討
第三七巻

NAD+-dependent L-aspartate dehydrogenase

Developing Academic English for the New Curriculum at Tokai University……………………………………………………………………………………………黒山竜太………１
NAD+依存性 L-アスパラギン酸脱水素酵素ホモログ遺伝子のクローニングと機能解析………………………………………………………………………………米田一成・荒木朋洋………９………………………… Miki Rodriguez-Yagi・Daniel Minor・Michael Rupp・Ian Isemonger………17

Developing Academic English for the New Curriculum at Tokai University
Effect of season on the behaviour and spatial use of the golden snub-nosed monkey in a zoo………………………… Miki Rodriguez-Yagi・Daniel Minor・Michael Rupp・Ian Isemonger………17…………… Shuichi Ito・Ryunosuke Shimoda・Atsushi Matsumoto・Shin Oyama・Shinji Ide………₂₅

飼育下キンシコウ（Rhinopithecus roxellana）の行動と空間利用に季節が及ぼす影響……………………………………伊藤秀一・下田龍之介・松本充史・小山信・井手眞司………₂₅

二〇一八