道報さ 告ます 2 7 号
ナ第海究
北研

s@c の湧 水に於ける サケ (Oneo ，竹 nc， huskfe.t")

卵の発生について ( 予報 )
広井

佐々 木

A Preliminary

安 川 雅十参ア

正三二 富ReportOn

田竹対

末武蛸 佐藤the Development

敏 夫*幸男*Of ChumSalmon{Oncorhynchus keta) Egg kept tn the Spring Waterof 8 @C

Osamu HIROI* Masao YASUKAWA* TOshio SUETAKE*
Shozo SASAKI*Takeo TOMITA* and Yukio SATO*

Theeggber,1972

of chumsalmon (Oncorhynchus

in the ChitoseRiverwasketa)taken frominseminated andafemale captured

reared in the spring

onwater

21stof NOvem@of 8'C andthen

their development
wasexamined.
A first cleavage furrow appeared vertically I0 hours after insemination. Eggs 0f 2 cell stage,
4 cell stage, 8 cell stage and of t6 cell stage were obtained during the periods of I0 t0 t5 hours,
I5 to I9 hours,

I9

to24 hours

and25 to 28 hours,

respectivelyTheblaS 忙 derm

Of 小 eSecomposedof monolayered
blastomeres.
Fifth cleavage furrow appeared horizontally 290r 30 hours after insemination, dividing
the blastomeres
into two layers 0f the upper and the lower.
The eggs Of 32 cell stage,
64 cell stage and Of morula stage wereobserved during the periods
from29 to 33 hours, 34 to 38 hours and from 38 to 48 hours, respectively
In the morula
eggs

wasstage,theblastoderm

times in vertical
toEggs? daysmovementorcamehorizontal

toformmultilayered blastomeresas

the result of cleavages

Of

manyplanes.

Of 3 days after insemination showed early blastula.
During the periods ranging from 4
after insemination, the blastoderm gradually enveloped their yolk mass by the downward
and became
flattening, initiating
the formation Of germ ring.
In two weeks, the blast0‑dermcovereda half of the egg
sphere and the embryonic body Of 3 mm in length had formed
already the optic vesicle in the head.
In three weeks, the embryonic body measured
about ? mmin length, having
undergone already the closure of blastopore.
In four weeks, a pair of blackeyes
wasclearly observed through the egg membrane, entering tn the eyeing stage. The embryonicbody was II mm ln length.
In 4 weeks, 4 days, the body begun t0 move.
The almost Of embryo
hatched out 60 days after insemination.
They were 22 mm @n body length.
The estimation of fertilization rates can be carried out most easily and most exactly during theperiod Of t7 to 24 hours after insemination,
atthat time eggs are developed t0 4 cell stage Or 8
北海道さけ・ますふ化場研究業
絞 第 232 号，北海道さけ・ますふ
化均千歳支場(Chitose BranchofHokkaidoSal

25

而n Hat 朴 e，y， Chitose,Jap 如)

北海道さけ・ますふ
化場 : 研究報告 第 27 号
cellstage

えまがき

さけ・ますの人 エム化事業をより―層 向上させるためには，再生産親魚の確保が重要な要素であるが，その後の種卵確保，適切な卵管理，稚幼魚の育成．適正な稚幼魚の放流などもまた重要な課題であり，それと共にサケマスの生理・生態を究明しっつ，増殖技術の向上に努めなければならない。
この意味においで卵の発生 (初期発生 ) および稚魚期の話器官の発達(後期発生) を熟知することは基本的に重要なことがらのひとっと考えられる。
サケ (Oncorhynchus

Okada1960)keta)の 初期発生はSa@to(I950)・岡田 u9 到a ， b), Mahon& HOar(1956) および等により詳細な形態学的研究がなされているが． ―走水温を用いて，発生の進行過程を詳しく追跡した報告はみられない。
進行過程を調べた。
今回は特に発生初期の結果につ
著者らはサケの同腹卵を用いて8 亡の湧水における発生のいて簡単に報告する。
本文@: 入るに先立ち，木研究について懇篤なる御指導と御助言を賜 わった北海道大学水産学部，山本喜―郎教
投に厚く御礼申しあげます。また，木研究に用いたサケ卵 および精子の採取に多大の便宜を賜わった北海道きけます増殖事業協会・三原健夫会長．同西越捕獲場，布施智 常民および同捕獲場の皆様に深甚の謝意を表します。

材料および方法
木研究に用いたサケ (Oncorhynchusketa) の成熟卵は1972 年HH21日に石狩ill水系千歳川の北海道さけ・ます増殖事業協会
西越捕獲場で捕獲した3 年魚、 (フ オーク・レングス
66 ． 4伽，体重3 ， 240e) を開腹して採取した。

栗叩数は3 ， U52 粒で，その生卵の卵重は平均0． W8e ， 卵径は平均7． 3mni であった。

卵 は受精せずに体腔液と共に保温ジャーに収容した (AMll:30)。 同時に6 尾の成熟雄サケから精液を水冷し精液は車で約20 分間さけ・ますふ化た瓶に搾出した。採卯時の室温は9 ． 0@C であった。採取した来受精卵および場千歳支場ふ化室に運搬した。
媒精はふ化室で12 時15 分に行なった。
媒精時の室温は9 or@ であった。卵はアトキンス式ふ化器に入れ，水温・8． Ofのふ化用水(湧水) に浸潰した。

媒精役48時:問までI 時問問隔で，2‑7ふ化器に収容した
卵 は発生状態を調べるため・各々 2研立 BOuin 液で固定し．卵膜を除去して光学顕微鏡下で調べた。また 媒精後2 ．

3，日まではI 日申 間隔で4 週間の卵 も同じく固定した。

果'

糸士
口

媒精直後に4 粒， 媒精役16H時間までにさらに6 粒の死卵が認められた。
しかし，その後 4 週間 (発眼期) まで死卵はみられなかった。
媒精後4 週問までに固定観察した
I ， 250 粒中で不受精卵は僅かに2 粒であった。発眼後卵に強い振動を与えて淘汰検卵を行なったところ， I叫立の不受精死卯および2 粒の受精後死卵が得られた。
従って受精率は99 ． 2% となった。

胚盤形成期 (Blastodisc formation s血 ge)
受精から第I 分割の開始直前までの卵を胚盤形成期とした。この期間に卵ば胚盤形成を行なうが， 胚盤は平坦であった。この時期の卵は媒精役lu時間までを占めた(図― 102 細胞期 (2 cellstage)

第 I 分割の開始から第 2 分割開始直前までの卵で，タト観上明らかに2 割球が認められるものおよび2 割球を形成中のものを2 細胞期とした。
この時期の卵は媒精役lo 時間からIh時間まで出現した(図 ― 10 媒精後I山寺間では 85%0. 11‑14 時問では100% ． そしてh 時問では55% の卵がこの時期を示し，45%0 の 卵は 4 細胞期に入っていた。 媒精後10 時間で分割溝は平坦な胚盤の中央部に 浅く部分的に生じ，その後分割溝は深く延びると共に胚盤も隆起する。13, 14時間の 卵では2 つの明瞭な割球がみられた。

26

8 での湧水に於けるサケ(Oncorhi)nchusketa)卵の発生にっいて(予報)ノ@叶 @Bh@l@@l@

午SOl

叱"@i@

咋叩

臼。 。。 。

"巾叩。 '@@Au@=@ 32==ll.;l bl@@@@@@l@
毛一而叫

ハ印

i@2bl=‑@@@@l16ee""叩寸つ' "。。'" 恥叩。

。

。。

@

ヒ ll

'" "卯

BlL@。 @a"on材 @@@叫土@叩

sl*Et

田1.m..,,,,,,wa)
4831567DAY8 での木片に右けるサケ
卯の丼主知柱は吉発生時
乃の束の出現
友S@(%) を示す□l

Text‑fig. 1. Development
The
4 細胞期

shaded portionof chum

represents

salmoneggs

a percentage

a[the waterof ovain eachtemperatureof 8'Cdevelopmental

stage.

(4 cell staggd

第 2 分割の開始から第 3 分割開始直前までの卵で・外観上明らかに4 割球が認められるものおよび4 割球を形成中のものを4 細胞期とした。この時期の卵は媒楕後1ワ時間から 19時間に出現した (図 ― Uk 媒楕後Iワ時間では45%,16‑1 舐宇 間では100%0 そして凹
時間では 70% の卵がこの時期を示し， 3&% は 8 細胞期に該当していた。
媒楕後15,16時間では第 2 分割溝が部分的に浅くみられるのみで．肉眼では2 割球にみえた。
17‑19B 時間ではその分割溝は深くなり，肉眼でも4 割球と判別しえた。
8 佃胞期 (8 cellstage)

第 3 分割の開始から
第 4 分割開始直前までの卵で 外親上明らかに8 割球が認められるものおよび8 割球を形・卵は媒精役I蛸 間から24 時間にみられた(図― 10 媒精役1瞬間では成中のものを8 細胞期とした。この時期のカ。浅く

20‑3L 椅 @間ではI田 % ， 24時間では 85% の卵がこの時期を示していた。
媒楕後19, 20特 @間では第3 分割溝・―見，4 割球の様にみられたが， 21‑24 時間では肉眼でも容易に8 割球が認め牙卜 胚盤は長方形又は・30%.

長円形となった。
l細胞 期 (16 cellstaee)

第 4 分割の開始から第 5 分割の開始直前までの卵で，外観上明らかl:16 割球が認められるものおよび16割球を形成中のものをIQ細胞期とした。この時期の卵は媒精役M 時間から2S時@間に出現した(図― 1U 媒楕後24 時問の卵の15% がこの時期のもっとも初期のものであった。これらの卵では8 割球のうちの中央剖の4 個の割球にのみ第 3 分割溝がみられ・両外側の各々 2 個の割球には注意深く親察しても・分割溝が認めえなかった。
従って外規上・これらの醜は 12 割球にみられた。同形態の卵は媒精後2蛸 間でもi0% 出現した (図 ― 1o 媒精後2硝 間で外側の4 割球に浅い分割溝が生じていた。
媒精役26時 :間から28は残りの90% の 卵は―見 12 割球にみられたが・・時間の卵は明瞭に16 割球が認められた。
胚盤は低ぃ惰円丘陵状を呈していた。
3細胞 期 (32 CellS色 ge)

第 5 分割の開始から第6 分割の開始直前までの卵で・糊上 32 割球が認められるものおよび
32 割球を形成中のg7

北海道さけ・ますふ
化場 : 研究報告 第 27 号

刃ものを 細胞期とした。この時期の卵は媒精役29 時間から33 時問にあらわれた(図 ― 1L 媒精役29時間の90% お
よび30 時間の30% の卵がこの時期のもっとも初期のものであった。これらの卵 では中央部に比較的小さな16 割球
8 割球がみられ・
外観上24 割球ヵ蒋忍 められる。同じく，媒精役29 時間の10% および30 時間の70%と周囲に大きいの 卵 もまた―
見 ， 24 割球にみられるが， 川則の 8 割球には浅い分割溝が存在していた。
媒精役H 時間の卵は全て32 割球の卵であった。胚盤ば低い階円丘陵形で， 割球は上層の16 割球が卵黄に接した16 割球の上に浮あがってみられる。
従ってこの時期の第 5 分割は第4 分割までの垂直面(vertiCal p@aneS) とは異なり，水平面(horiZon‑tal planeS ) で生じ．結果として胚盤は単層から2 層の割球配列となった。

(64 ceH

6咄胞期S日 ge)

第 6 分割の開始から第7 分割の開始直前までの卵で，外観上． 例割球を形成しているかまたはその途上のものを利細胞期とした。
この時期の卵は媒精後払時問から38 時間を占めていた(図 ― 1U 媒精後M ， 3M 時問の卵は第6 分割の進行により・胚盤の上層に32 割球が数えられるが，下層の割球は比較的大きく． 数も少ないようにみえ進んでいないようにみられた。
この正確な判定は且織 学的観察によらねばならることから第6 分割が下層までは糸ない。―方 36,・3m時 @間の全卵および38時@間の70% の 卵は上下層にぼほ似た大きさの割球がみられ．上層に32 害 @球が確認きれた。
胚盤はさらに盛あがり，半球形に近くなった。
桑実期 (MOrulas血 Re)

第 7 分割1@叩条の多くの分割により・分割途上および分割後の不定形の割球が桑実様形態を示す時期を桑実期とした。 この時期の卵は媒精役?3s時間から4S 時間に亘って観察された。
媒精後38時@問の30% の卵がこの時期のもっとも初期のものであった。これらの卵は中央部にのみ，第7 分割の進行により生じた比較的小形の割球がみられ困難となっていた。
この時期では時間を経るごとに割球は数度の垂直面
又 は水平面のるが 割球の計数は極めて・数カ十 増えると共に多層自己 タ Uとなった。
割球はさらに/[ さくなり
形は不定形であった。胚分割のくりかえしにより
ト盤はさらに盛あがり， 半惰円球状を呈した。
胞胚期 (Blas 血 las ぬ ge)

多くの分割によって生じた小割球がぼ@靱求 形となって胚盤内に均―に分布する卵から盤が卵黄を包むように胚拡大し・胚環の―部が陥 入する卵 までを胞胚期とした。この時期は媒精後3 日から7 日間の卵に観察された(図胚― 1L 媒精後3 日の 卵は頷頭状に盛あがった 盤を有し・割球はぼほ球形で均―に分布していた。
媒精役4 日以沿って拡大すると共に平坦になった。
媒精役5 日から7 日にかけて胚盤の周辺
降の卵の胚盤は徐々 に卵黄表面には肥厚し ， 胚環 (Germ r@ng) を形成するが．その形成過程は移行的で外観から明瞭にE 乃 @Jすることは困難であった。また・

胚環の陥入についても明瞭に判別しえなかった。
胚環の形成およびその―部の陥入に関しても，詳

細なma織ギ 内観察によって判定する必要があろう。
胚体形成 (Embryonic body‑format@on)
媒精役14 日で胚盤は卵の半分を包み・その―部の肥厚から胚体が既に生じていた。
胚体には既に頭部に眼包(optic vesicle) が分化していた。
胚体の長さは0m であった。媒精役21 日で胚体は Imm 長になり，既に原口は閉黒色色素の沈着がみられ，その後28 日までその沈着は濃く大きくなり．
31 日鎖していた。媒楕後25 日に眼に薄く後では明瞭な黒い眼となった。
28 日後で胚体はIImm 長となり・卵黄表面の血管には血液が流れていた。
31 日後では 胚体は盛んに動いていた。
媒精役60 日で稚魚の殆んどがぶ出した。
稚魚は?， 2n@m長であった。

察考
サケ卵では．2 細胞期の卵は7． 2でで受精後18 ． 5時間・9‑12でおよび10‑15 でで 9‑H

8， @たで 14 ―旧時間 (Mahon

時間 (岡田， 19 巳a， b;0kada

すると報告されている。
―方，木研究の8 での場合では10‑1でで受精役2v 時間 (Mahon &HOar,1956)， 8‑10@G， 1%0) ，n‑n&HOar， 1956) ， 8‑10で，． 5でで2L時 @間 (Sa@to， 1950) に出現

硝 間で2 細胞期を経過した。4 細胞期の卵は 7． 2(Okada,1960) および9‑¥7C(岡田， 1954a) の下では12‑1 日時間，または10‑15c の下では11‑14時間 (岡田， 1954b) に現われると報告きれている。
本研究では媒精役15‑19時間に同期の卵を確認した。8 細胞期の卵は7． 5でで受精役28 時間 (Mahon &HOar,1956) ． 8‑10 でおよび9‑12@C で16‑19B 時間 (岡田， 19 糾a;okada,1960) で認められたという。
しかし8 て@の 下ではこの朗の 卵
28

8 での湧水に於けるサケ(Oncorhynchus ke@a)卵の発生について(予報)は 19‑24 時間に観察されており， 7 ． 5@C と 9‑12fの場合の中問にあらわれた。
上記の様に水温が高い程，発生の速度がより速いことを示しているが，サケ卵の水温と発生速度の相関を論ずるには資料が乏しい。水温と発生ー速度の関係は卵の管理・取扱いに除して，極めて重要な問題であであり．今後更に異なった多くの―走水温で卵発生の進 @r 刀犬 態を調べた上で追求する必要があろう。
2 細胞期からI珊胞 期までの卯 ではいずれも割球は単層に配列しているが．
32 細胞期で初めて割球は上層および下層の2 層に配列するようになった。
これは第I 分割から第4 分割までが垂直面に生じ，第5 分割は水平面で生じることを示している。
このことはワカサギ(Hyvomesus Olidus PALLAS)の 卵発生の場合にも観察きれてい(Yamada,1963)0

る8 細胞期から3a細胞期までの間で分割途上の移行像がみられた。
即わち，外観上12 割球又は24 割球をもっ卵であ り，これらは夫々 第 4 分割および第5 分割の初期に生じていた。これらの場合で分割は胚盤の中央部に 近い割球群から進行していた。
同じく．第6 分割の場合にも似た様相を呈する。
この場合には割球は，i2細胞期で既に2層 配列となっており，まず上層のIf 割球に分割が生じ， 続いて下層のIf 割球が分割するようにみられた。
従って，

胚第 6 分割の初期には外観上48 割球の 盤が生じる。しかしながら．
2 層 配列となっているため．下層についての詳細は判定し難い。Mahon& HOar(1956) は後期分割期 (late segmentationsぬ ge) で下層の分割が上層のそれよりもゆっくり生じると述べている。
木研究における
8 での場合の発生の各時期の卵の出現頻度(図 ― i) から 例細胞期までの各々 の時期の滞留時間を推定すると次の様になる:は 5 ． iFi時間・胚盤形成期は9 ． 15 時間，2 細胞期は 4 ． 5 時間，4 細胞期は4 15 時間，8 細胞期・16細胞期は4 ． 15 時間．32細胞期は5 0時間および倒細胞期は4 瓜午 問である。 2 細胞期の滞留期間は・・胚盤形成期を除く， 他の時期: 比 して長く，又 4 細胞期および16 細胞期のそれらは約 I 時間短いことが判る 。 この相違は各々 の分割に要する時間の差

・

又 は休止期の時間の差によるものと考えられるが，詳細は更に糸且織 学的研究結果を待たね
ぽ ならないo

サケ卵の受精率の早期判定の方法および時期にっいては既に岡田 u954a)
は 4 細胞卵の出現する時期，10‑15R

ではl1‑14により詳細に述べられている。
彼時間を受精率の判走時期としている。
我々の観察では．4 細胞期の後期から8 細胞期までの卵は胚盤の隆起も明瞭であり， 又形も長方形状になり，肉眼でもっとも容易に判定しうる。しかもこれらの時期で他のより進んだ又 はより遅れた時期の卵 はまったくみられなかった(図― 10 従って，svの場合ではこれらの時期の卵が出現する
媒精後17‑24 時間にもっとも確実に． もっとも容易に受精率の 判走を行ないうる。

要糸勺

石狩@ll水系千歳川で捕獲されたサケ (Oncorhynchvsketa)の 3 年魚から同腹卵を採取し， 8 でのふ化用水Q勇水) i@浸潰して発生の進@干 /犬 態を調べた。
I ． 胚盤形成期の卯は媒精役10 時問まで，2 細胞期は媒精役10‑1R 時間，4 細胞期は15‑19@ 時間，― 24 時間・

1f 細胞期は2R‑28 時間・

32 細胞期は29‑.33時@問 ，8 細胞期は乃M 細胞期は34‑38 時間・桑実期は38‑48 時問に夫々 みられた。
2．

第 I 分割から第4 分割までおよび
第 6 分割は胚盤の垂直面で生じ・―方，第5 分割は水平面で行なわれた。

この水平面の分割により?32細胞期の卵は 2 層の割球配列となった。
3．

8 ででは4 細胞期の後期から8 細胞期までの卵が17‑24 時間に出現する。
この時期はもっとも容易に，もっとも確実に受精率の判定ができる。
4 ． 媒精役3 日で卵は胞胚期に入り，4‑7日で胚盤は除々 に卵黄に沿って伸張し．扁平となると共に，その周囲には胚環が形成された。
2 週間後の卵では胚盤は卵の半分を包み・頭部にB尺&B 色 の発達した3mm 長の胚体が生じていた。3 週間後では胚体は7mmmmまで発達し・原口は既に閉鎖していた。
4 週間後では肉眼で黒色色素の沈着した眼がみられ， 胚体は11mm 長であった。
卵黄表面の血管にば血流がみられた。
．3$1日後で胚体は動き始めた。

60 日後で椎色はふ出し・体長22nimi‑@ 達した。

29

北海道さけ・ますふ化場 :研究報告第 27 号
文献Of 小 e chumsalmon,0ncor

岡田俵 1954a ．賦活きれた来受精卵雌の 形態変化にっいて， 水乎報告

9 ， 127‑132

岡田庁 1954b ． 鮭卵受精率の早期判定について．北大農宇部邦文紀要
2，17‑20Mahon,E． F.&W.s.Hoar

1956.

The

early development

杓nchus keta

(WALBAUM).J.MOrph.98,1‑47

0kada,
ica@

Studies OnS.1960.

disturbances

Sait0, S.1950.

The．

.1our.Facul.

embryological

小 e dog‑salmon,0ncorh

Yamada, J. 1963.
Fac.Fish.

The

the critical per@od

Of susceptibilityOf the developing fisheees

如 r. HOkkaido

Univ.51.343‑379

study Of fishes.1.General

ノ inchus ke@a

WALBAIIM.JOur.Facul.

normal developmental

stages

忙 mechan‑of the pond

HOkkaido Univ. 14,121‑126

30

ObservationOn

小 e ear@y deve@opment

位 r. HOkkaido

smelt, HypomesusO@

Univ.48.267‑289
olidus (PALLAS).

Bull