®

Octet SF3 SPR
Powered and Prepared

進歩をシンプルにPowered and Prepared

どのような課題にも対応

抗体断片の特性評価、ワクチン研究、細胞全体の生物学的解析に対する現在の世界的な需要に遅れを取ることなく対応するには、最初に設定した研究仮説を実用的な結果に導くための、持続的な技術的進歩が必要不可欠です。これは特にタンパク質のラベルフリー解析の分野に当てはまります。
低分子と高分子のどちらにもきわめて高い感度を示すうえに、ベースラインのノイズとドリフトが低く、大容量インジェクションにも対2応し、グラジエントインジェクションの新技術であるOneStep と®
NeXtStep™を採用した、新しいOctet SF3では、標準的なマルチサイクルカイネティクスに比べてごく短時間で、カイネティクスと®
親和性に関する高品質なデータを取得できます。Octet SF3は、ユーザーによってユーザーのために設計されたソフトウェアと組み合わせることで、幅広い生体分子間相互作用の特性評価を迅速に行う、堅牢かつハイスループットで省メンテナンス性のSPRソリューションを提供します。
®

堅牢で省メンテナンス性のSPR
最新の流路系と最適化された電子設計により、装置の故障や閉塞の可能性を大幅に低減し、装置のダウンタイムが最小限に抑えられ、信頼性の高い高品質なデータが得られます。

ハイスループットなSPR
OneStep インジェクション技術®
1回の無人アッセイで最大768サ OneStep インジェクション技術
ンプルの完全な結合カイネティ を使用することで、複数の希釈クスと親和性のデータを生成し 系列の調製が不要になり、アッ®
ます。OneStep インジェクショ セイの開発や作業が効率化しまン技 術、72時 間 を超える無 人 す。単純に単一濃度のアナライ運転時間、独自のサンプルレイ トを調製するだけで、カイネティアウトの組み合わせにより、1回 クスやアフィニティ解析のためののランで数百ものサンプルをハ 広範な濃度勾配を作り出すことイスループットにデータを取得・ ができます。
解析することが可能です。
®

競合アッセイNeXtStep™インジェクション技
術を利用することで、単一濃度のアナライトから、複数の競合物質の存在下におけるアナライ
トのフルカイネティクスと親和性を決定できます。

3

Octet SF3：他に類を見ない®

イノベーションと設計の組み合わせ
Octet SF3 は、堅牢な工学設計による独自の技術的イノベーショ®

ンの組み合わせにより、システムの省メンテナンス性と高いサンプ
ル処理能力を備え、低分子と高分子のどちらもきわめて正確に特性評価を行えるため、あらゆるSPR使用頻度のユーザーに対して最適なシステムになっています。

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主な特長：
アナライトの希釈系列を必要とせず、表面再生のためのインジェクション回数を削減し、アッセイ開発期間を大幅に短縮する独自®のOneStep グラジエントインジェクション技術 により、カイネティ
クスと親和性を正確に測定
低分子と高分子のどちらのアッセイでも高感度にサンプルを測定
幅広いカイネティクス速度定数に対して精度が高く、高親和性相互作用も測定可能
NeXtStep™グラジエントインジェクション技術により、競合アッセ
イをきわめて正確に実施

5361424135

バッファー容量の増加
バッファートレイに1 Lの容器を3本配置することができ、1本は水ライン、2本はバッファーラインとして使用可能です。2本のバッファーラインは個別に作動するため、アッセイで2種類のランニングバッファーを使用することができます。

専用の水ライン®
Octet SF3には専用の水ラインがあり、バッファーの沈殿や閉塞のリスクが低下します。

サンプル回収結合したアナライトを回収することができ、他の分析法で同じアナライトを評価可能です。

246

最適化された流路系®
Octet SF3の流路系はあらゆる面において閉塞の潜在的な原因を最小限に抑える設計により、強力かつ堅牢で、省メンテナンスなシステムを実現しています。システムへの吸着の脱離、洗浄、除染のプロトコルにより、システムの稼動時間を最大限に保ちます。

熱力学的測定と生理学的測定®
Octet SF3は幅広い温度における相互作用の解析が可能で、生理的温度における治療薬の結合カイネティクスと親和性を迅速に評価できます。
インラインバッファーデガッサーで気泡の形成を防止し、大容量（500µL）のシリンジを併用することにより、解離速度定数の正確な算出が可能です。

ハイスループットなサンプル取得®
OneStep とハイスループットモードの併用で、独立した768サンプルを®
24時間以内に解析することができます。Octet SF3は72時間以上の連続稼働が可能なため、きわめてハイスループットなライブラリースクリーニングにも最適です。

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OneStep グラジエントインジェクション技術®

OneStep グラジエントインジェクション技術は、Taylorの分散理®

論に基づき、移動するバッファーの流れの中に単一濃度のアナライトを拡散させ、3桁以上の濃度勾配を作り出すことで、単一濃度のアナライトから分子のカイネティクスと親和性を正確に測定することを可能にします。

Octet SF3で標準的なマルチサイクルカイネティクス（MCK）も®
実施できますが、OneStep インジェクションにより各アナライトの®

--

OneStep グラジエントインジェクション技術の特長：®

正確性：マルチサイクルカイネティクスの速度定数とほぼ同一
処理速度：センサーチップ再生、サンプル調製、データ取得、カイネティクスと親和性の解析に必要な時間を大幅に短縮
スループット：単一濃度のアナライトで各相互作用を評価できるため、各サンプルプレートを最大限に利用可能希釈系列の調製は不要です。

A.

拡散tstart

流れ

1B.

C1/C0t1
t2
t30tstop
tstart

図1t1t2t3

τtstop

注記：(A) OneStep による注入ライン内のグラジエント形成と、(B) フローセルで測定された各時間のアナライト濃度。青色はランニングバッファー、ピンク色はアナライトを示す。グラジエント形成ならびにフローセルにおけるアナライト濃度との関係は、5つの時点における注入ラインのシミュレートスナップショット（t start ～ tstop）で示される。１回のインジェクションで全てのアナライト濃度系列を評価できることを示している。
®

6

A.

60

図2Ch 3

レスポンス
（RU）

50
40
30
20
1000

B.

100

100

200

時間（秒）

300

400500

標準的なマルチサイクルカイネティクスにより、5段階トラスツズマブ希釈系列を調整、データ取得、グローバル解析を実行した結果、親和定数（KD）は7.19pMと計算された。。

Ch 1レスポンス（RU）

806020C.
レスポンス
（RU）

600100200

300

時間（秒）

400500

結論

OneStep グラジエントインジェクションを使用した
場合、アナライトの濃度が1点でも、希釈系列による

Ch 340302010レスポンス
（RU）

D.

®

マルチサイクルカイネティクスアッセイと同様の結果が得られた。このことは、日常的な装置使用だけでなく、ハイスループットなヒット同定スクリーニングについても、時間、コスト、労力の大幅な削減が実現することを示している。

500OneStep グラジエントインジェクション技術を使用した場合 、に、マルチサイクルカイネティクスアッセ
イ用に調製したすべての濃度において、KD値に大きな差異は認められなかった。たとえば、濃度が25nM、8.3 nM、0.926 nMのトラスツズマブを使用した結果、それぞれ9.85 pM（図2B）、8.49 pM（図2C）、8.60 pM （図2D）のKD値を達成できた。
®

400

注記：HER2 （リガンド）に対するトラスツズマブFab抗体（アナライト）。（A）マルチサイクルカイネ
ティクス（MCK、短時間/長時間、完全解離は非®
表示）と（B ～ D） Octet SF3 SPRプラットフォー®
ムでの Octet インジェクションによる測定の両手法の結果を示す。トラスツズマブFab抗体のマルチサイ
クルカイネティクスの希釈系列は25 nM、8.3 nM、2.78 nM、0.926 nM、0.309 nM。

0100200時間（秒）300

4005001816 Ch 1
14121086420
0100200300

時間（秒）400500

7NeXtStep™グラジエントインジェクション技術
競合アッセイは、ヒットしたフラグメントをコントロール分子と競合させることにより活性部位バインダーを見いだすことができ、創薬においてきわめて有用です。NeXtStep™インジェクション技術では、1回のインジェクションで競合分子の存在下におけるアナライトのふるまいを測定できる独自の機能を備えています。NeXtStep™を使用すれば、ランニングバッファー中に競合物質を入れる必要が無く、1回のアッセイで複数のアナライトと競合分子の評価が可能です。フルカイネティクスプロファイル、親和性、部位特異的競合を、競合分子の存在下における結合の変調として明確に識別することができます。

1.01.0溶液A0.4溶液B

アナライトの割合

アナライトの割合

0.60.80.40.2040

時間（秒）

60080

注記：フローセル通過時の各溶液の割合を時間経過でチャート化した図。インジェ
クション開始時の溶液はほぼ全体が溶液B （競合分子）だが、インジェクションが進行していくと徐々に溶液A （アナライトと競合分子）に置き換わり、注入の最終段階ではほぼ全体が溶液Aになる。

8アナライト0.60.2

図3

競合分子0.80.80

NeXtStep™によるグラジエントインジェクションでは、溶液A （アナライトと競合分子）と溶液B （競合分子のみ）を使用し、競合分子濃度は常に一定に保たれます。両溶液はサンプル保持ラインに順次拡散され、フローセルに達した時点で、溶液の順序を反転させます。注入の初期は、ほぼ全体が溶液Bです（図3）。NeXtStep™によるインジェクションが進行しても競合分子の濃度は一定に保たれ、アナライトの濃度はグラジエントがかかった上昇を示します（図4）。

図4050時間（秒）150250

注記：競合分子の濃度はアッセイ中を通して一定。しかし、インジェクションが進行すると溶液Aが大きな割合を占めるようになるため、アナライトの濃度が徐々に上昇する。

ベンゼンスルホンアミド

4030201000200100

図5

注記：NeXtStep™によるグラジエントインジェクションを用いて、ビオチン標識されたII型炭酸脱水酵素に対するフロセミドとベンゼンスルホンアミドの結合における競合作用を特定した。
ビオチン標識されたII型炭酸脱水酵素をリガンドと®
するOctet SPR SADHセンサーチップ を調 整した。それぞれの競合分子の代わりに、同一のセンサーチップ表 面 に、HBS-EP+とともに(A)ベンゼフロセミド

403020100300

時間（秒）

C.

50

レスポンス（RU）

B.

50

レスポンス（RU）

レスポンス（RU）

A.

0100

200

時間（秒）

300

ンスルホンアミド（青）と(B)フロセミド（緑）の、NeXtStep™による連続的なグラジエントインジェクションを行った。(C)続いて、濃度を一定に保った ベ
ンゼンスルホンアミドと（競合分子としての）フロセミドのNeXtStep™によるグラジエントインジェクションを行い（茶色の線）、阻害されていないフロセミド（緑）とベンゼンスルホンアミド（青）それぞれの結合プロファイルと比較した。

50
フロセミド

40

ベンゼンスルホンアミドとフロセミド

30
ベンゼンスルホンアミド

20
1000100

200

時間（秒）

300

フロセミド（緑）、ベンゼンスルホンアミド（青）、フロセミドとベンゼンスルホンアミド（茶色）のセンサー
グラムを比較すると、親和性の高いフロセミドの相互作用により、親和性の低いベンゼンスルホンアミドの結合プロファイルが完全に阻害され、相加作用がないことが示された。もしそれぞれの分子がII型炭酸脱水酵素に独立して結合するのであればそれは相加反応となるはずである。よってこれらの2分子は結合ポケットが共通していると考えられる。

図6

Ch 1

注記：結合への影響を調べるために、アナライトと競合分子の直接的な競合アッセイとしてNeXtStep™によるグラジエントインジェクションアッセイを行うことも可能である。

Furosemideand HBS-EP+
Furosemide

レスポンス（RU）

15

図6に示すとおり、競合分子の非存在下におけるカイネティクス応答を測定するために、HBS-EP+とともにフロセミドを注入した（緑）。続いて、競合分子としてNeXtStep™によるメタンスルホンアミドのグラジエントインジェクションを行った結果、フロセミドの結合に明らかな変化が見られた（青）。

1050

Methanesulfonamide

050100150200

時間（秒）250300350

NeXtStep™グラジエントインジェクション技術の主な特長は、複数の競合分子をアッセイプレートから直接注入し、目的のアナライト分子との相互作用の可能性を確認できるため、1回の無人運転により多数の競合アッセイを迅速に行えることにある。

9

専用設計のソフトウェアにより装置の省メンテナンス性と使いやすさを実現
Octet SF3システムに記録された高品質データは、®
Octet SPR Analysisソフトウェアで簡便に解析すること®

ができます。

アッセイの設定
直感的なドラッグ＆ドロップ レイアウトにより、アッセイデザイン®
はかつてないほど容易になりました。Octet SPR Discovery
ソフトウェアにより、サンプルパラメーターの定義、共通または個別サンプルフローレートの作成、注入量とレポートポイントの追加を迅速に行うことができます。データの作成もこれまでになく簡単になりました。

図7

®

図8

®

注記：Octet SPR Discovery Software: ユーザーがメンテナンスにかける手間を省略し、装置の稼働時間を最大化するための、装置のチューブ、プローブ、フローセル、センサー表面の洗浄メニュー。

メソッド設定ページでは、定義済みの多数のメソッドから選択して設定のガイドとして利用可能で、独自メソッドの作製、修正、表示にも柔軟に対応します。
迅速なデータ解析
SPRベースの断片スクリーニングのデータ解析はかなり煩雑で、1枚のプレートのスクリーニングに数日かかる場合もありま®
す。Octet SPR Analysisソフトウェアは、非ヒットからのヒットの選択に統合アプローチを採用しており、スクリーニングの日別データや装置別データの正規化が可能であるため、スクリーニング戦略全体を迅速に比較することができます。この統合により、数時間から数日かかっていた後処理時間を数秒から数分に大幅に短縮できます。

注記：Octet SPR Discovery Software: 高品質データを簡単に作成するのに役立つ、あらゆるアッセイ対応の定義済みのメソッドプロトコール。

このソフトウェアにはカイネティクス、親和性、マストランスポート補正、マルチサイト結合といったモデルが組み込まれており、必要に応じた相互作用へのフィッティングが可能です。一次スクリーニングデータですぐにKD解析が可能で、手間と時間がかかる、間違いの起こりやすい二次スクリーニングは不要です。
メンテナンス®
Octet SF3のメンテナンスについては、ユーザーが行う必要のある作業が最小限に抑えられており、システムのメンテナンスにかける時間が短縮され、データの生成に集中する時間を増やすことができます。

図9

注記：Octet SPR Discovery Software: 直感的に操作できる構成で、アナラ
イトID、濃度、注入タイプ、共通の結合/解離時間などの変数が表示されるアッセイメソッド設定ページ。

10®

Octet SF3注文情報®

®

Octet SF3®

Octet SF3 SPR System®

Octet SF3 SPR System Installation

製品番号

Octet-SF384IAFF3

Octet SF3仕様®

ベースライン特性

屈折率レンジ

1.33 ～ 1.40

ベースラインドリフト

代表値 < 0.3 RU/分

ベースラインノイズ

検出可能分子量可変データレート
親和性レンジ
作業レンジ

代表値 < 0.025 RU （RMS）
有機分子については下限なし

1、2、5、10、20、40 Hz
fM ～ mM

結合速度定数（ka)10 ― 10 M s

グローバル解析の親和定数（KD）

10 ― 10 M

解離速度定数（kd)29-1-110 ― 2.5 s-6-3-1-12濃度

サンプル濃度 >1 pM

無人稼働時間72時間超、既定の稼動時間制限なし

サンプルラックオプション

96バイアル、ディープウェル、PCRフォーマット、384ウェルマイクロプレート、カスタム可能な高容量バッファーライン選択

3種類のラインの自動切り替え

サンプル取得サンプル容量システムとサンプルの温度制御

任意のサンプルラック2個と試薬ラック2個

4 ～ 40° C （最大：周囲温度より15℃下まで）

インラインバッファーデガッサーあり

フローチャンネル数3

フローチャンネル容量<90nL

フローセルと注入部
フローパス

1、1–2、1–2–3、3、3–2、3–2–1

チャンネル間デッドボリューム<20nL

フローレート

0.1 ～ 200 µL/分

注入量

2 ～ 700 µL

注入の上昇時間と下降時間<0.75秒 @ 25 µL/分

グラジエント注入
同時注入

ソフトウェア®

Octet SPR Analysis Hit Selection
寸法

幅×高さ×奥行き重量

OneStep （ハイスループットモードでの使用を含む）、NeXtStep™
®

ありあり

61 cm × 61 cm × 51 cm
66 kg

11

ザルトリウス・ジャパン株式会社
東京本社〒140-0001
東京都品川区北品川1-8-11
Daiwa 品川North ビル4 階

Phone: 03 6478 5200 Fax: 03 6478 5494
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名古屋営業所〒461-0002
名古屋市東区代官町35-16

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Octet-SF3-Instrument-Brochure-ja-L-Sartorius
Status: 03 | 2022

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