The Hiroshima Journal of Veterinary Medicine
No.25 November 2010
CONTENTS

1
9
13
17
21
25

広島県獣医学会雑誌
第 25 号
平 成 22 年 11 月

広 島 県 獣 医 学 会

31
37

45

第二十五号

41

49
55
59

THE
HIROSHIMA JOURNALOF
VETERINARY MEDICINE（HIROSHIMA-KEN JUI GAKKAI ZASSI）

63
67

No. 25

71

November 2010

75
81
89
97
平 成 二 十 二 年 十一月

SUMMARY OF PAPER PUBLISHED IN OTHER JOURNAL
Bovine Septicemia with vegetative endocarditis caused by Pasteurella multocida A:1
MIDORI KAWAMURA ………………………………………………………………………………………… 99
Therapeutic trial with iron-chelator for acute coliform mastitis in 2 dairy cows.
YASUNORI SHINOZUKA ……………………………………………………………………………………… 101
ANNOUNCEMENT
Schedule of Allied Meetings …………………………………………………………………………………………… 103
Contribution Rules ………………………………………………………………………………………………………… 104

THE OFFICIAL ORGAN OF
THE HIROSHIMA PREFECTURAL ASSOCIATIONOF VETERINARY MEDICINE

広 島 県 獣 医 学 会 雑 誌

REVIEW
Change and development of animal hospital -From my thirty-eight years experience FUMIO SHIBASAKI …………………………………………………………………………………………
FARM ANIMAL
Evaluation of metabolic acidosis in calf diarrhea and bicarbonate dose setting using clinical symptom score
TOMOYASU KUROSE …………………………………………………………………………………………
Observation of the phalanges in 2 milk cows with intractable disease of the footKATSUFUMI OOSHITA ………………………………………………………………………………………
Cardiac anomaly in 2 infirm calves of Japanese Black Cattle
YOSHIHIRO IBARAKI …………………………………………………………………………………………
Analysis of bovine RS virus field strains isolated in Hiroshima Prefecture
TAKESHI YAMAMOTO ………………………………………………………………………………………
Instruction in raising calves of Japanese Black Cattle aiming at increasing the number of Hiroshima Cattle
HIROAKI KOBAYASHI ………………………………………………………………………………………
The Production of in-vitro fertilized embryos from Holstein cattle in the early lactation period
YASUHIRO OGATA …………………………………………………………………………………………
SMOLL ANIMAL
A case of feline chylothorax
YASUHIRO SONODA …………………………………………………………………………………………
A perinephric pseudocyst in a cat after laproscopic renal capsulectomy
YUKO YAMASHITA …………………………………………………………………………………………
Sick sinus syndrome diagnosed by Holter electrocardiography in a miniature schnauzer
NORIKO KUROSE ……………………………………………………………………………………………
Two dogs in which a calcium antagonist (diltiazem) was effective for heart rate control in atrial fibrillation
YOSHITAKA ARAMAKI ………………………………………………………………………………………
Reduction of distal tibial comminuted fracture using an original hook-plate in a cat
AKIRA SAKURADA …………………………………………………………………………………………
A miniature dachshund with non-regenerative immune-mediated hemolytic anemia treated with leflunomide
MAYUKO OOSUGI ……………………………………………………………………………………………
A dog with an intrabronchial foreign body
TOKUNORI TANIURA …………………………………………………………………………………………
Lobectomy of the lung in a Jack Russell Terrier with congenital lobar emphysema
MASAHIRO SETODA …………………………………………………………………………………………
PUBLIC HEALTH
Prevalence of spotted fever group rickettsia in dogs in Hiroshima Prefecture
SHIGEO MORINAKA …………………………………………………………………………………………
Molecular-epidemiological Analysis of Enterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7 Isolated in Hiroshima CityAKEMI SUENAGA ……………………………………………………………………………………………
Epidemiological analysis of enterohemorrhagic Escherichia coli isolates in Hiroshima Prefecture from 1999 to 2008
SACHIKO OOHARA …………………………………………………………………………………………
Characteristics of Viral Gastroenteritis in a Pediatric Population in Hiroshima Prefecture during the 2002/03 and2008/09 Epidemic Seasons
YUKIE TANIZAWA ……………………………………………………………………………………………
Measurement of urea nitrogen using a cell disruptor
NAOKI HANAKI ……………………………………………………………………………………………

THE
HIROSHIMA PREFECTURAL ASSOCIATIONOFVETERINARY MEDICINE

広島県獣医学会雑誌

第 25 号

目総平成 22 年（2010）

次説

動物病院の変遷と発展 ―私の 38 年間の経験から―
柴崎

文男……………………………………………………………………………………………… １

産業動物
子牛下痢症における臨床症状スコアを用いた代謝性アシドーシス評価と重炭酸投与量の検討
黒瀬

智泰，岩瀧

功，河野

俊朗，高橋

康雄，神岡

康博，

山形

光正，酒井

亮……………………………………………………………………………… ９

乳牛の難治性蹄病において趾骨所見を観察した 2 症例
大下

克史，柄

武志……………………………………………………………………………… 13

虚弱黒毛和種子牛の心奇形 2 例
茨木

義弘，保本

朋宏，小川

寛大，恵谷

美江，市場

聖治，酒井

亮……………… 17

県内で分離された牛 RS ウイルス野外株の遺伝子解析
山本

武，恵谷

美江……………………………………………………………………………… 21

広島牛増頭を目的とした黒毛和種子牛の哺育育成指導
小林

弘明，舛下

知穂，秋山

昌紀，山本

武，伊藤

晴朗，今井

昭……………… 25

泌乳最盛期のホルスタインからの体外受精胚生産
尾形

康弘，日高

健雅，松重

園田

康広，長澤

裕，長澤

忠美，前田

照夫……………………………………………… 31

小 動 物
猫の乳び胸の１例
晶子……………………………………………………………… 37

腹腔鏡下腎被膜切除術を行った猫の腎周囲偽嚢胞 1 症例山下裕子，佐々木之子，石崎俊史…………………………………………………………… 41

ホルター心電図により洞不全症候群と診断したミニチュアシュナウザーの１例
黒瀬

紀子，池本

麻弥，藤野

千賀子，伊藤大，小田まゆみ………………………… 45

心房細動における心拍数のコントロールにカルシウム拮抗薬（ジルチアゼム）が有効であった犬の２症例
荒蒔

義隆，荒蒔

すぐれ，千村収一…………………………………………………………… 49

脛骨遠位粉砕骨折を自作フックプレートにて整復した猫の 1 症例
櫻田

晃，長谷川

孝寿，板本

和宏，大村

斉，大村

琴枝，和田

安弘…………… 55

レフルノミドを用いて治療した非再生性免疫介在性溶血性貧血を呈したミニチュア・ダックスフンドの一例
大杉真由子，田内

利樹，井上

有希，麻生

暁秀…………………………………………… 59

犬の気管支内異物の 1 例
谷浦

督規，谷浦

倉之，谷浦

直美，上岡

尚民……………………………………………… 63

肺葉切除を実施した先天性肺葉性肺気腫のジャックラッセルテリア犬の 1 治験例
瀬戸田

正弘，谷浦

督規，杉山

晶彦，日笠

喜朗…………………………………………… 67

公衆衛生
広島県における犬の紅斑熱群リケッチアの浸潤状況調査について
森中
松本

重雄，勝部

由起子，松田

修，長谷川

亮太，菊池

和子，川西

信一，島津

幸枝，柳本

慎治，池庄司

俊治，高尾

政明，正岡

秀則，
剛…………… 71

広島市で分離された腸管出血性大腸菌 O157:H7 の分子疫学的解析
末永

朱美，田中

寛子，蔵田

和正，花木

陽子，毛利

好江，野田

衛，

石村

勝之，池田

義文，笠間

良雄，吉岡

嘉暁……………………………………………… 75

広島県内で分離された腸管出血性大腸菌の疫学的検討（1999 〜 2008 年）
大原

祥子，竹田

義弘，桑山

勝，妹尾

正登……………………………………………… 81

広島県の小児感染性胃腸炎患者における下痢症ウイルス検出状況と流行型，2002/03 〜 2008/09
谷澤

由枝，福田

伸治，重本

直樹，高尾

信一，妹尾

正登……………………………… 89

細胞破砕機を用いた尿素窒素の測定について
花木

直喜，京塚

明美，渡邊

真由美，児玉

実，佐伯

幸三，迫田

望…………… 97

他誌掲載論文（要約）
Pasteurella multocida

A：1 による疣贅性心内膜炎を伴う子牛の全身性化膿性炎

河村

美登里，星野尾

菊池

浩久，阿川

歌織，小川

寛大，本多

俊次，恵谷

美江，兼廣

愛美，

啓雄……………………………………………………………………………… 99

鉄キレート剤により治療した牛急性大腸菌性乳房炎 2 症例
篠塚会

康典……………………………………………………………………………………………… 101

報………………………………………………………………………………………………………………………… 103

関連学会案内編集後記
投稿規程

動物病院の変遷と発展

総 説―私の 38 年間の経験から―
柴

崎

文

男

（受付：平成 22 年６月 21 日）

Change and development of animal hospital- From my thirty-eight years experience FUMIO SHIBASAKI
Shibasaki Animal hospital
１-10-35, Ushita-honmachi, higashi-ku, Hiroshima 732-0066

はじめに１．開業当時（昭和 47 年）の動物病院の状況
日本の経済成長率からみると，昭和 31 年（1956年）から昭和 48 年（1973 年）は，第Ⅰ期高度経済

私が動物病院を開業した昭和 47 年（1972 年）から現在の平成 22 年（2010 年）の 38 年間は，動物病

成長期に位置づけをされ，この 17 年間の GDP（国民総生産）の実質成長率は平均 10％という高い伸びを示した（表 1）．私が開業をした昭和 47 年は，驚異的な経済成長を示した第Ⅰ期の経済成長も終りを迎え院を取り巻く環境が大きく変化を遂げた激動の時代と言える．今回，時代とともに変わっていった動物病院の姿，動物の飼主の変化，さらには社会環境の変化など動物病院を取り巻く諸問題を，私の経験を元に私の眼から見た変化，変遷，そして発展する姿を述べてみつつあった頃であった．
１）大学卒業から開業するまで私が開業をした昭和 47 年当時の開業までの過程をたい．

日本の経済動向

実質経済成長率の長期的推移と動物病院の発展
年

代

主な経済ニュース

第Ⅰ期
高度経済成長期（GDP平均10％） 

 

昭和31年（1956）：
47年（1972）
49年（1974）
50年（1975）：
55年（1980）
第Ⅱ期：
安定経済成長期
61年（1986）（GDP平均4〜5％） 平成元年（1989）：
3年（1991）
4年（1992）：
6年（1994）：
第Ⅲ期
10年（1998）
成熟経済移行期
12年（2000）：（GDP平均2.5％）
20年（2008）
22年（2010）

本文の項目別分類

第一次石油ショック

表1

第二次石油ショック
円高不況
バブル景気
平成不況

IT景気
リーマンショック

1.開業当時
2.開業初期3.動物病院の充実期

4.今日まで，そして
これからの
動物病院

GDP ベース；内閣府資料による

柴崎動物病院（〒 732-0066 広島市東区牛田本町１丁目 10-35）─1─広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

うに思われる．まず最初に選ばれた犬種は，スピッツ
種であった．外観は白色の中型のかわいい犬種であったため，大ブームを起こしたが，何せこの犬種は外見とは裏腹に性格がきつくて，よく鳴いて，人を咬むことがあったため，次第に人気がなくなっていった．しかし，このペットブームと呼ばれる頃からはじまっ

振り返ってみると，まず 4 年制の大学教育を終えると，全国各地にある受け入れ動物病院に入って，いわゆる開業見習いと称する道に入って獣医技術を習得するのである．このことは現在とあまり変わってはいな
いが，異なるところはその当時の動物病院には現在の動物看護師のような獣医師以外の職種がまったく確立
されておらず，存在すらなかったため，この代診と呼ばれる若き獣医師は，開業をするための技術の習得はもちろんのこと，その他，動物病院にまつわるすべての仕事をこなしていた．その仕事の一端としては，動物の世話からはじまって，犬の散歩，餌やり，犬舎掃
除，病院の清掃など，すべての作業を若き獣医師がやっていた．昔の丁稚奉公的なところが多分に存在して，日本における動物の飼育は現在まで形を変え，またその世相に応じて，飼育動物の種類のはやりすたりなどはあれども日本人，日本家庭にすっかり定着をしていくのである．
２． 開業初期（昭和 47 年〜昭和 55 年頃）の動物病
院の現状

り，昭和 47 年に出身地の広島市の現在地で開業をした．今考えると，開業時の年齢は 26 歳という若さで，

日本の経済成長率からみると，昭和 48 年に前述の第Ⅰ期高度経済成長が終わり，昭和 49 年から平成 5年までの約 20 年間を第Ⅱ期安定経済成長期と位置づけをされている（表 1）．この第Ⅱ期の経済成長期は，ハイテク産業（自動車，エレクトロニクスなど）を中心とした，技術立国としての地位を確保たるものとした時代でもあった．GDP は第Ⅰ期の平均 10％成長の社会的なことはまったく知らない若輩であった．しかし当時では普通の開業年齢であった．
２）当時の広島市の現状半分の平均 4 〜 5％と減少はしたが，国民の生活は安定をしていった．
動物病院という産業は，国民の生活が安定をして，私が開業をした当時の広島市内の開業者は 15 名で，現在の広島市の開業者の半数であった．また，その中の約半数以上の先生方は第二次世界大戦を経験されており，終戦後に小動物相手の診療に転向されていた．
戦争という時代に大きく振り回され，転向も余儀なく

生活にゆとりが出てきて，初めて必要となってくる，
いわば第二次産業でもあり，日本社会の発展に少し遅た．一般的にはその病院で 3 年間の修行（？），いや勉強をして，それぞれが選んだ土地で開業をするという道を歩んでいた．私の場合を例にあげると，大学を卒業した後，関西のいくつかの動物病院でお世話になれて発展をした．特に，この昭和 47 年から昭和 55
年の 10 年足らずの期間は，第Ⅱ期経済成長の上半期と重なっているが，現代の動物病院の聡明期，すなわ
ち行く末を決する手探りの重要な時期であったように思われるため，ひとつのカテゴリーとしてまとめてみた．
１）開業当時の動物飼育状況
私が開業当初（昭和 47 年）の小動物業界はペットブームと呼ばれたブームは一段落してきたが，各家庭では依然として犬猫の飼育希望は根強いものがあっされたものであったと思う．とは言え，終戦後 20 数
年間，小動物診療に携わってこられ，独特の診療体系を取られていた．その診療体系とは，往診による治療が常道であり，現在のように病院で治療をするという
いわゆる宅診治療というものは皆無であった．開業当時，私はこの往診主体の診療体制を変えて，宅診が主体となる診療形態にならなければ，理想とする欧米並
みの動物病院像に近づけないと，若輩の身でありながら熱く燃えていたものである．
３）戦後の復興からペットブームへ
終戦直後日本全体，特に広島は原爆による焼け野原となり，食うものも食えない状態であった．ここから，日本人特有の勤勉さ，賢明さで戦後復興を遂げて行った．「もはや戦後ではない」とのキャッチフレー

た．飼われる動物も，犬では屋外で飼われる犬（秋田犬や柴犬などの日本犬，シェパード，ボクサー，ドー
ベルマン，コリーなど）に人気があった．その一方，
昭和 40 年代になってからは家庭内で飼える室内犬（小型犬のマルチーズ，ポメラニアン，ヨークシャー
テリアなど）も大変な人気が出てきた時期でもあった．また，猫では，日本の在来種である日本猫の飼育傾向は，今とは変わらず家庭で飼われていたが，一方でペルシャ猫，チンチラ，シャム猫など純粋種を飼う人も増えていた．
２）その当時の動物病院の状況
ペットブームに伴って，飼育される動物も増え，当然のことながら，動物病院に来院する犬猫の頭数も増ズで呼ばれている昭和 31 年から始まった高度成長期でもあった．特に，昭和 30 年〜 35 年はその成長の初期段階でもあり，各家庭は住む家も確保され，家庭
内には 3 種の神器と呼ばれる電気製品も導入されてきた．しかし，その一方で世の中はまだ不安定で，物騒でもあったため，庭先に犬を繋ぎ泥棒よけとしていた．その犬も最初は，雑種犬であったが，同じ飼うなら純粋犬を飼おうということで，お金を出して犬を飼うという世の中になっていった．これが今でもよく使われているペットブームという用語のはしりだったよ

えていった．それに伴って，小動物診療体制もその対応に迫られた．
ⅰまずその対応の変化として，名称の変化があげられる．我々の職業の社会的な認容度が低かった時代に
─2─

広島県獣医学会雑誌

は，○○犬猫病院，○○獣医科，○○獣医科病院，○○愛犬病院など多くの名称が使われ，統一感がな
かったが，飼育動物の種類の増加や社会的な認知度が上がってくるにつけ，○○動物病院が多く使われはじめ，定着しつつあった時期でもあった．
ⅱ病院の施設および診療体制は今までの多くの先生方
は，総じて往診による診療が主であったため，診療施設はオールインワン形式（受付，診察室，手術室，入院室，薬局，検査室などを区別せず，一部屋の中に収容していた．
）がほとんどであった．この形態は意外に使い勝手は便利であったが，時代の要
求から徐々にそれぞれ目的別の各部屋に分かれていき，現在ではほとんど見られなくなった．これには診療体制の変化（往診から宅診に変わってきたこと），社会からの要求度の変化があげられるが，端的には動物病院の収入の増加とともに病院の改築，新築がなされていった．
ⅲ開業当初の数年間は，まったく暇で仕事が無い状態が続いた．今でも新規開業者は皆な同様なことと思われるが，当時の方がもっと悲惨であったように思われる．というのも，診療形態の違いのためと思っている．当時の先生の診療形態は，先に述べたように往診が主体の形態であったため，飼主さんとの結№ 25（2010）

ⅱつぎにペットブームなど社会情勢の大きな変化が到来し，いやおうなしに動物病院もその対応に迫られてきた．社会からの要求度も以前と比べると，相当高くなってきたことは，先に述べているとおりであるが，受け入れ側の動物病院の対策として，病院間あるいは獣医師間の交流をもって少しでも社会からの負託に答えようとして，研究会というものが全国各地で結成された．この研究会の勃発の時期は，先輩から聞く話では，昭和 36 年ごろから全国で結成されたそうで，仙台（2 グループ），埼玉（のぶしグループ），東京（土曜会），神奈川（湘南木曜会），
静岡，名古屋，京都（KRC），大阪（VRC），岡山（せとうち研究会），地元の広島は研和会，そして九州の福岡，大分まで数多くの研究会が組織された．
やがて，昭和 41 年頃には大阪の VRC が中心となって，これら多くの研究会を束ねた全国組織である全
国小動物臨床研究会（全小臨）が立ち上げられ，1
年に 1 回の大会が開かれるようになった．この頃の大学教育はまだ小動物に向けられてはおらず，また日本獣医師会も小動物部門はほとんどないに等しい状況下でこの全小臨の組織化は，現在の小動物臨
床の繁栄をみるにつけ，大変大きな第一歩であったように感じる．
４）東京畜犬問題と日小獣の設立
昭和 41 年頃，九州のペットショップが東京へ出て，東京畜犬という会社を設立した．外国から珍しい犬をびつきが非常に強く，今で言う顧客の囲い込みがしっかりと確立されていたため，我々のような新規開業者で，しかも「病院に連れてきてください」と言うような，宅診主体の診療形態は飼主さんにとって大きな抵抗感があったように思われる．また先輩の獣医さんからは，会合で会う度に「若い者が病院でじぃーとしていてどーするんや，朝早う起きて回らにゃー」とよく言われたものである．内心，今に時代が変わってくるのだと言い聞かせてはいたが，暇をもてあましていた．かくして，「石の上にも 3年」，「暇な時こそ勉強を」などと念仏を唱えながら，時間を過ごしていたように思う．
３）動物病院の発展と全国各地の研究会の設立
ⅰ私の代診時代（昭和 44 年〜 47 年）を含めて，それ以前からの習慣として，小動物臨床は大学で教わ
るよりは，代診で入った病院で教わるものとされていた．それだけに小動物開業者は代診先の病院選びは重要であった．その選択肢としてはよく流行っている病院であること，そこの院長が熱心に勉強していることなどが条件となっていた．このことは現在の代診先の病院選びとも大差は無いように思われるが，当時の動物病院は病院による格差が相当なものであった．その病院，病院によって，それぞれ異なった治療方法，手術法があり，また使用する薬
剤，注射薬，その他もいわゆる病院の秘伝として，
門外不出にされていたものである．当時，私が経験した病院でも，半年間近くはその病院で使用していた麻酔薬に関して，教えてもらえなかった．
─3─

たくさん買い付けて，利殖目的で各地の愛犬家に法外な値段で売りつけ，
病気にかかったら専属獣医師にかからなければならない，また食餌も会社のオリジナルのドッグフードのみで育てる．いわゆる契約飼育といった方法であった．しかしながら，この会社は狂犬病のワクチンも自社で開発をしたり，ジステンパーに罹患した犬を販売したり，現場では獣医師法，薬事法の違反事例がたくさん行われていた．結局，東京畜犬は薬事法違反で倒産に追い込まれていった．
この問題会社は，我々に大きな問題点を提起してくれた．すなわちこんな悪徳会社に雇用された獣医師を救ったり，獣医師会として，この会社自体と直接談判していくだけの政治的な組織が小動物界にも，日本獣医師会にもなかったことが判明したことである．そこで立ち上がったのが，全小臨の有志の先生方であった．そしてそれをもっと組織化しようとのことで，昭和 46 年 5 月全日本小動物臨床獣医師協議会（全小協）
が結成された．この全小協は，東京畜犬の問題をきっかけとして，作られた小動物界の政治的集団でもあり，また全小臨を引き継ぐ学術団体としての両面を持つものであった．この全小協は昭和 53 年 9 月に日本
小動物獣医師会（日小獣）と改名されて，現在に至っている 1）．

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

５）アメリカの獣医学の導入
つぎのステップとして，これからの動物病院のあり方として，何はともあれ，先進国の動物病院の視察が第一であるとのことで，有志を募ってのアメリカ西海岸の動物病院視察および AAHA（アメリカ動物病院

温計，触診による診断の時代から脱却し，新たな時代に突入していった．
ⅱ血液検査の重要性：レントゲン診断とともに，動物
病院で血液検査が実施され始めたのもこの頃からである．現在ではごくルーチンな検査として，実施されている血液検査が，開業当初はまだまだ高嶺の花であった．検査器具もひとつの検査項目に対して，それ用の器械が一台という非効率なものであったた協会）の年次大会参加という第 1 回目プログラムが
昭和 51 年（1976）に組まれた．私も若輩ながらその一員として参加をした．その AAHA の年次大会の充実度，展示会場の規模，そしてロサンゼルス近郊の動物病院の広さ，充実性など，いずれも桁外れの規模
で，眼を見張ったものである．

め，我々は選ぶのに苦慮をしていたように思う．
まず一番先に導入したものが，ヘマトクリット用の試験管と遠心機であった．その後ミクロヘマトク
リット管が開発されたが，当時は約 1ml の血液が必要でかつ得られる情報も少ないため，実際の臨床ではあまり行っていなかった．つぎに導入されたものが白血球の測定機器であった．今までは計算盤で赤血球や白血球を数えていたものが，一瞬でカウントされ，大変な驚きであった．つぎは血液化学検査

その当時，“日本の小動物臨床および動物病院はア
メリカのレベルに比較すると，30 年の歴然とした差がある．またこの差は開くことはあっても縮まることは無い”といったことが，まことしやかに言われていたし，そう思わざるを得なかった．このあたりから，
日本の小動物臨床は，何かに取り付かれたようにアメリカの獣医学を追従することとなる．
６）動物病院における新しい流れの機器であるが，これが今のように院内で簡単に実施できるようになるまでにはもう少し時間がかかった．
７）独自の動物病院の構築
アメリカの獣医学の導入で，日本の小動物部門の診

この後，アメリカの小動物関連の獣医学書の翻訳本が大量に販売されはじめた．この当時の日本のリーダーであり，翻訳を進めていった先生は，加藤元先生と松原哲舟先生の二人であった．この翻訳本の発刊事業と同時にアメリカの著名な先生方による講演会も全国各地で開催された．我々のような新進気鋭の若手の療設備および技術は飛躍的に向上をしてきた．しかしながらそのことは，学問や技術などのようにすんなり獣医師は，それこそ水を得た魚のように休みのたびに大阪まで行っていた．
ⅰレントゲン研究会：アメリカの獣医学の導入で日本の小動物臨床は急速な発展を遂げていった．中でも特記すべきこととして，レントゲンが上げられる．

した．
「アメリカの獣医学も長く時間をかけて形成されたものである．
」「アメリカの土壌にあった学問である．
」「アメリカと日本の置かれた環境は違う．」「翻訳本や講演会のような耳学問ばかりでは日本のレベルは一向

それまでもレントゲン装置は大体の病院に導入されて，別段に珍しいものではなかったが，要はその使用方法について，大きな差があった．その当時の小動物臨床では，レントゲンはほとんどが骨折など骨格系の疾患の診断時だけに使用されていたものであった．しかしアメリカの獣医学では，レントゲン
装置は骨格系の疾患時は言うまでも無いが，その他
胸腔内疾患，腹腔内疾患のいわゆる内臓疾患の診断に上がらない．
」「挙句は幕末の尊王攘夷論まで飛び出してきた．
」，侃々諤々の議論の末，結局はアメリカの獣医学を手本とした日本独自の小動物獣医学を構築す
る方向へ進むこととなった．
ⅰ小動物臨床研究会（現，動物臨床医学会，以下動臨研と略）の結成： 今から 30 数年前の昭和 53 年
（1978）〜昭和 54 年（1979）頃，鳥取県で山根義久先生（現日本獣医師会会長）を中心とした研究会

時にこそその診断的価値があり，幅広く活用されているということが判ったのもその頃であった．今現
在ではごく当たり前のことであるが，その当時では大変画期的なことであった．各動物病院は競って新を立ち上げた．手前味噌ながら，私もその 5 人の発起人の一員となった．この小動物臨床研究会はアメリカの獣医学一辺倒だった環境に対して，日本独自の獣医学，動物病院像を模索していった．山根先生をトップとして，胸部疾患の新しい手術法を開発
したり，そこから派生する内科的な治療法を構築したり，毎月 1 回，幾人かの獣医師が集まっては夜
通し勉強会を開催した．その業績を学会で報告をしていき，実績をあげていった．集まってくる獣医師
は，最初は中国地方の近場の獣医師であったが，徐々に遠方の先生方も集まってきた．その集大成の発表会を年次大会と称して，毎年 11 月に開いている．第 1 回目は，昭和 55 年 11 月鳥取市で開催をと受け入られる部分と，そうではない部分とが存在をしい装置を導入した．間もなくレントゲン研究会が設立された．この研究会は既存のいろいろな研究会と違って，大学関係者ではなくて開業者が起こしたはじめての研究会であった．研究会はめざましい活
躍をし，撮影方法，撮影条件，そして出来上がったフィルムの出来栄えのコンテスト，フィルム読影等々をテーマとして活発に議論された．この研究会の発展とともに，各病院におけるレントゲンによる診断技術が飛躍的に向上し，それ以前の聴診器と体─4─

広島県獣医学会雑誌した．その時の参加者が 127 名だったものが，以後毎年，倍々ゲームのように増えていき，第 3 回
大会からは舞台を大阪に移して，現在も大阪で開催している．昨年度（平成 21 年）の 11 月には，第30 回大会という節目の年を迎え，獣医師のほか，
動物看護師，学生，展示業者など，参加者の総数が約 5,000 名に達するという獣医界屈指の学会に育っていった．この研究会の成功が以後の小動物臨床に大きな影響をもたらしたことは言うまでもない．
３．動物病院の充実期（昭和 56 年〜平成 10 年頃）
この昭和 56 年〜平成 10 年の 17 年間は，前項の№ 25（2010）ⅱ血液検査機器：先の項で述べた血液一般検査を一歩進めて，血液化学検査が必須となってきた．その当時のアメリカの動物病院では，犬猫の肝機能，腎機能，血糖値などの数値は日常ルーチィンに計測されていた．日本の実情はまだ大分遅れていた．人医の血液検査センターは当時から存在していたが，検査数が少なかったり，時間がかかったりで，なかなか
動物病院の実情には合わなかった．そこで，動物病院仕様の血液化学検査機器がたくさん開発された．
当院でも，現在の機種は 4，5 台目になると思われる．最初の機種は，いわゆるウェットタイプと言われるもので，血液採取，血清分離をし，そしてその機械の中で約 15 〜 30 分という時間がかかった．
現在，多くの病院で使われている機種は，ドライタ
イプと呼ばれるもので，簡単な操作でしかも短時間
内に，多くの検査項目がこなせるというもので，最2. で述べたアメリカの模倣，追従から脱皮して，日本独自の，そして日本の土壌にあった動物病院像を形成していく，“動物病院の充実期”として，ひとつのカテゴリーにまとめた（表 1）．
まず，この期間のバックグランドとなる日本経済をみると，昭和 56 年から平成 5 年の約 10 年間は第Ⅱ期経済成長期の下半期に一致する（表 1）．この期間は日本経済にとって激動の時代でもあった．すなわ
ち，第 2 次石油ショック（昭和 55 年）の痛手から，やっと立ち直ったところに，また昭和 61 年（1986

初に導入をした機械と比較すると，隔世の感がある．この間，日米のメーカーは需要に対応するために大いなる努力と競争をしていった賜物と思っている．
ⅲ外科手術の改革：この時代に大きな変化があったのは，外科手術法よりも，むしろ手術に必須となる麻年）には円高不況を経験することとなった．この不況も克服したところに，今度は一転して，バブル景気（昭和 62 年〜平成 3 年）という未曾有の狂乱景気が酔法と滅菌法の 2 点であったように思われる．麻
酔法では，それまではペントバルビタール剤を単味で使用するという注射麻酔が主流であったが，このやってきた．土地，株，物価，世の中のあらゆるものの価格が異常な値上がりをするという状態が 4，5 年の間続いた．しかしながら，このような異常な景気が長続きするはずもなく，やがてその反動としての平成
不況（平成 4 年〜 6 年）にみまわれることとなった．

頃からは，まず気道と血管の確保をして，そのルートを使って何種類かの薬剤を使用するという麻酔法に変わっていった．まず前麻酔後，静脈経由で超短

平成 5 年〜 10 年は，第Ⅲ期に属しているが，この第Ⅲ期の特長は次の項，4. で述べる．
１）動物病院の発展と充実
戦後の復興とともに，国民の生活レベルが上がり，動物達にも眼を向けられだして，飼育をされはじめた．それに伴って我々小動物獣医師が必要になってきた．という図式で，いわば社会的な要請から必然的に形成されたという受身的な立場のように感じていたが，この昭和 56 年頃からは，小動物臨床および動物病院はまったく自立をして，自分の足で立てるようになっていったように感じる．
ⅰ病院の改築，新築ラッシュ：前項の 2. で述べた過程のように，日本の動物病院の方向性が決まり，この時期の動物病院は日本の経済成長の後押しを受けて目覚しい発展を遂げていった．病院の収入も格段に上昇し，病院も改築や新築ラッシュとなっていった．それまでの街の片隅のオールインワン形式の小さな診療所というイメージであったものが，一転，人医にも負けないような動物病院も出現し始めたのもこの頃である．飼い主さんから「今，大きくなっているのは，動物病院ばっかりだな．
」という皮肉も聞こえてきた．
─5─

時間麻酔薬の導入後，維持麻酔として吸入麻酔を使用するという，今ではごく当たり前の麻酔法がこの当時に取り入れられた．この麻酔法が導入された当時の感想として，手術時間に関係なく麻酔が得られ，また調節が可能という，大変画期的なものであった．もうひとつ，外科手術では必須の滅菌法も大きな変化を遂げた．それまでは手術器具を煮沸消毒したり，消毒薬液に浸けるという消毒法に変わって，オートクレーブによる滅菌法が導入されたのもこの頃である．現在はこれにガス滅菌を加えての滅菌の理論に関してはご存知のとおりである．肝心の手術法に関しては，今までの方法やあるいは新しく考案された方法など，随時フィードバックしながら時代とともに改良されていき，よい方法だけが選択され，残っていった．
ⅳ病院スタッフの補充：病院の拡大，拡張に伴って院内で一緒に働くスタッフが必要となってきたのもこの頃からである．それまでの動物病院は前項の 1. で述べたように，スタッフといえば，若き獣医師を安く雇うというのが通り相場であった．よく流行った多い病院では，獣医師が５〜 10 名もいて，すべての病院の仕事をこなしていた．ところが，時代も変わり，獣医師のレベル，待遇も上がってきたため，

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

講師が講演をされ，いかに経営実績をあげるか，いかにまわりの病院に打ち勝つか，差別化ができるかな

簡単に獣医師を雇えなくなっていったのと，大きな要因としては，病院の収入も上がってきたため，病院スタッフとしての給料が支払えるようになったことが最大の要因となったことである．こうして，アメリカ並みに，AHT（動物看護師）のようなスタッ
フが出現することとなった．因みに，私の病院で初めて雇い入れた獣医師以外の女性スタッフは，昭和60 年であり，元歯科衛生士であった．この頃は，彼女達を雇い入れた病院がそれぞれに教育をしていたものである．その頃の小動物関係の専門学校としては，トリミングの専門学校は存在していたが，動物看護師の専門学校は存在せず，平成 5 〜 10 年頃
から動物看護師の専門学校が設立され始め，現在では全国各地に創設をされている．
この昭和 56 年〜平成 10 年の 17 年間の動物病院の発展，進化に関する特長的，さらに特記すべき事
項は，まだまだたくさんあると思われるが，この項は終了する．
２）ペットからコンパニオンアニマルへ
今から 20 年前頃の昭和から平成へと変わる時期に，我々の対象とする飼育動物の呼称について，議論をされた．今まで使っていたペットという言葉に少し抵抗

ど，今までに聞いたこともない講演であった．その当時を振り返ってみると，それ程に平成不況はひどい落
ち込みで，動物病院を襲っていたかがわかる．
このような，技術の習得はもちろんのこと，院長をはじめとするスタッフの啓発など，地道な病院の努力の裏付けとして，以前に見られたような“診てやる診療”は消失していき，飼主の要求を察知する，病院の設備とスタッフの充実，飼い主への応対，院長の人間性などで，飼い主の方から選ばれていく“診させてもらう診療”に大きく転換をすることとなった．
ひとつのカテゴリーにまとめるには，あまりに長い
17 年間ではあるが，このような時代背景，経済情勢とともに動物病院は社会に対して着実な歩みをしていったし，また新しい動物病院の時代がすぐそこまでやってくる予感を感じさせた．
４． 今日まで，そしてこれからの動物病院（平成 11
年〜平成 22 年）
日本の経済成長からみると，平成 5 年から平成 22
年は，第Ⅲ期に分類されている（表 1）．この第Ⅲ期とは成熟経済移行期とされ，高齢化が進み，エネル
ギー問題が起こり，産業の空洞化が起きると予測されたとおり，現在の日本が直面をしている大問題であ感があり，時代に合わないのではという疑問を感じていた．そこで，新しい呼称を探していたところ，その頃欧米で使われていたコンパニオンアニマル（伴侶とる．
動物病院の立場からみると，この平成 11 年〜平成

しての動物）という言葉が取り上げられ，早速日本でも使うこととなった．ペットというと，飼い主が一方的に動物を飼育しているというイメージがあるが，このコンパニオンアニマルは，そこから一歩進んで，家庭内では両者は対等な立場でお互いによき伴侶とし22 年の 12 年間は，一応完成をされた動物病院が次のステップに向かって突き進んでいく時代といってもいい．またそれに伴ってあらわれる新たな影の部分も出現してきている．
１）ペットの家族化
平成 19 年（2007 年）の統計によると，家庭内で飼育されている犬の数 1,252 万頭，猫が 1,019 万頭で計 2,271 万頭となった．また同年の子供（15 歳未満て，一緒に助け合いながら生活をするという意味をもっており，時代にマッチする言葉として受け入れられた．核家族化をして家族が少なくなった代わりとして，動物が飼われるというごく自然のなりゆきであった．
３）動物病院の格差の出現
この項の昭和 56 年〜平成 10 年は，第Ⅱ期の経済性成長期で，バブル景気あり，またその反動としての平成不況がありいわゆる“山あり谷あり”の経済情勢であったが，この期間が終わる頃には，各動物病院には相当の格差が付いていたことも事実である．すなわ
ち，この期間以前の動物病院は，一般的には，夫婦で病院を経営し，もし居れば代診という構図であったものが，この 17 年間の間に技術的な進歩と同時に，スタッフが補充されたことである．また，カスタマー
サービス（顧客サービス）というものが叫ばれ出し，
院長は獣医師という技術者である点は当然のことながら，一方では経営者であるという考え方が強く導入されてきたのもこの頃であった．私が初めて院長相手の経営セミナーの講義を聞いたのは，平成 7 年（1995年）であった．経営セミナーは，当然その道のプロのの人口）の数が 1,738 万人でペット数が人間の子供の数を上回っている 2）．単純に数だけで比較することはできないが，日本社会の高齢化とともに，子供の人口は減少傾向にあるが，一方，家庭で飼育されている動物，いわゆる家庭動物は順調に増えており，その存在もまったく家族の一員とされている．またその動物の呼び方も，最初はペットだったものが，つぎにコンパ
ニオンアニマル，そして最近では家庭動物という言葉で呼ばれている．その家庭動物の治療をする我々獣医師も人医における小児科医的な扱いをされることが多くなった．
また，ある小動物関係の学会では，学会の発表時に使用する言葉として，一般的には動物の飼い主と呼ぶ
ところが，“動物の家族”という言葉に改められたり，動物の食餌を改め，“食事”と修正をされたことを聞き，我々古い人間にとっては隔世の感を感ぜざるを得ないところである．

─6─

広島県獣医学会雑誌

２）大学の方向転換
獣医科大学が 4 年制であった頃の大学教育は，時間数の不足が顕著で広く浅くの教育であったように思われる．やがて 6 年制になり，そして家庭動物に対№ 25（2010）をもっとも進化させた医療センターと言ってもよい．このセンターは，平成 19 年に神奈川県の川崎市に日本動物高度医療センターとして開院された，
人間並みの高度な診療施設である．診療体制は一次
診療は行わず，全国各地の動物病院からの紹介によって運営されている．

応する獣医師の必要性から，獣医科大学も小動物重視の教育に変わらざるを得なくなってきた．
現在はいずれの獣医科大学も，我々開業獣医師が手に負えなくなった症例を持ち込んでいく機関として心強い存在である．
また一方で，獣医科大学への入学試験が大変難しくなったのも事実である．これには，昭和 62 年から平成 5 年に発行された佐々木倫子作の“動物のお医者さん”という女性獣医師を主人公とした漫画の影響も

ⅳホームドクターか，専門病院か，総合病院の選択：
以前の動物病院は大きいか小さいかの違いはあれども，一応動物病院としての範疇内にあった．しかし，時代の流れと社会の要請からか，少し前からは動物病院の区分けがはっきりとされはじめ，今までどおりの動物病院，すなわちホームドクターで行く
か，先に述べた専門病院を目指して行くのか，さらには総合病院を目指すのか，といった選択ができるようになってきた．いずれの道を選ぶにしても，日々の勉強，そして努力が必要なことは言うまでもたぶんにあった．今や獣医科大学の偏差値は医学部並
みの難しさであると聞くと，昔人間には複雑な気持ちになる．
３）動物病院の多様化
私達の時代の獣医師および動物病院では，ひとりのない．
４）新たにあらわれた諸問題
ⅰペットロスの問題：今まで述べたように，家庭動物と呼ばれる動物と飼主の結びつきは，時代とともに大変強くなってきた．しかし動物の寿命は一般的に犬で 15 歳，猫ではもう少し長くて 17, 18 歳で人間の寿命の方より短いため，人間が動物の死を受け入獣医師が全科を診察するという，今では到底考えられないような診療体制を取っていた．しかながら，家庭内における動物達のランク付けもあがり，病気に対する飼い主の要求度も人医並みに上がってくるというよ
うなことから，各病院そして各獣医師が次第に，自分の得意分野を持って，その分野を追求していき，精通することによって，他病院からの紹介を受けるという方向に変わっていった．
ⅰ専門病院の出現：前項で述べたように，開業獣医師

れなければならない．この飼主と亡くなった動物との結びつきが強ければ強いほど，ペットロス症候群という状態に陥る人が出ることとなる．私の開業をが全科診療から得意分野を持つようになった結果，
今から 10 〜 15 年前頃から人医のように各科別の動物病院が出現をしてきた．その例として，皮膚科専門病院，整形外科専門病院，ウサギ専門のラビッ
ト病院，爬虫類の専門病院，エキゾティックの専門
病院，リハビリテーションの専門病院などがすでに創設されているが，これからはもっと多くの専門病院が出現をしてくることと思われる．

した 38 年間を振り返ってみると，最近は以前に比べて多くなったように思われる．
ⅱ日本獣医療問題研究会（JAMLAS）：この研究会は，
2 年前に結成された研究会で，開業獣医師獣医師が日常かかえている獣医事問題を持ち寄って，その道の専門家に尋ねるというもので，多くの弁護士さんも加入している．このような研究会が必要なくらい，現在は動物病院にまつわる諸問題（診療費の未払いから始まって，診察中のトラブル，麻酔事故な
どの医療過誤など）が多くなってきている．最近
は，動物病院での医療過誤問題がこうじて訴訟になるケースも珍しくない．

ⅱ高度医療の必要性：今まで述べてように，家庭動物の家庭内における存在感はこの 38 年の間に相当に上がり，社会からの動物病院に対する負託も相当に上がってきた．次のステップとして，もう少しレベ
ルアップをして人医でいう総合病院的な病院の必要性も出現をしてきた．とはいえ，この動物病院の総合病院化は，簡単なことではない．まず，その病院の流行り方が他をしのいでいることが必須条件である，それに最近では CT，MRI 装置など高額な診断機器を設置するという病院施設の充実性，さらには獣医師，獣医看護師をはじめとしての病院スタッフの充実など多くの課題がある．そのような点を満た

ま

と

め

１）私が経験をした 38 年間の開業歴を元にして，動物病院の変遷と発展を述べた．戦後から現れた動物
病院の歴史を振り返ってみると，初期の創設期，それに続く模索期，充実期，全盛期，もしあるとすれば衰退期がやってくるかもしれない．私が経験をしたこの 38 年間は，模索期から全盛期と考えられ，大変充実をした時間であったように思われる．現在の日本において，ひとつの職業が創設されて，衰退をするまでの期間は，ほぼ 30 年と言われている．
この法則を動物病院に照らし合わせてみると，私がした動物病院が各地に創設され，呼称も○○動物医療センターと名づけて，動物病院と一線を画している場合が多くみられる．
ⅲ日本動物高度医療センター：これは前項の高度医療
─7─広島県獣医学会雑誌

開業をする約 20 年近く前から，先輩たちが立ち上げられ，38 年間たった今でも，まだ全盛期にあるということは，この職業は大変に息の長い職業と思われる．考え方によると，まだまだ発展途上のように思われる．このことは，先輩諸氏，そして我々の世代の獣医師達の並々ならぬ頑張りがあったからこそと思っている．
２）本文には文献にすべき資料が少なく，過去の出来事や時代背景などを多くの先輩の先生方に尋ねさせていただきましたことを，この場を借りて深謝いた
します．

文

献

１）日本小動物獣医師会（JASAVA）の沿革（2009）２）アニコム家庭動物白書：進むペットの家族化，ア
ニコムホールディングス，4-7（2009）─8─

№ 25（2010）

子牛下痢症における臨床症状スコアを用いた代謝性アシドーシス評価と重炭酸投与量の検討黒瀬智泰１） 岩瀧功１） 河野俊朗１）高橋康雄１） 神岡康博１） 山形

光正１）

酒井

亮２）

（受付：平成 21 年 12 月 21 日）

Evaluation of metabolic acidosis in calf diarrhea and bicarbonate
dose setting using clinical symptom score
TOMOYASU KUROSE1), ISAO IWATAKI1), TOSHIRO KONO1),YASUO TAKAHASHI1), YASUHIRO KAMIOKA1), MITUMASA YAMAGATA1)
and RYO SAKAI2)
1) Shoubara Veterinary Clinical Center, P.F.A.M.A.A 2-21-20, Nishihonmachi,
Shoubara, Hiroshima 727-0013
2) Yamagata Veterinary Clinical Center, P.F.A.M.A.A 461-1, Haruki,
Kitahiroshima-cho, Yamagata-gun, Hiroshima 731-1531

SUMMARY
To treat metabolic acidosis in calf diarrhea, correction of the HCO3- level is prioritized,
but it is difficult to set the bicarbonate dose at the clinical site, and so administration at
an inappropriate dose may occur. We performed the simple evaluation of acidosis basedon clinical symptoms and determined the bicarbonate dose, and investigated its accuracy
and the results of administration. The HCO3- level and clinical symptoms (activity, milksucking ability, and fecal color) were strongly correlated, and these could be sufficiently
utilized for acidosis evaluation. It was suggested that bicarbonate dose determination
based on the symptoms was sufficiently effective. This analytical method is simple,
judgment can be made based on the 3 clinical items, and it may be markedly reproducible
and reliable.

1）広島県農業共済組合連合会庄原家畜診療所（〒 727-0013
2）広島県農業共済組合連合会山県家畜診療所（〒 731-1531
─9─

広島県庄原市西本町 2 丁目 21-20）
広島県山県郡北広島町春木 461-1）

広島県獣医学会雑誌

要№ 25（2010）

約

子牛下痢症における代謝性アシドーシスの治療には HCO3- 濃度の補正を優先して試みるが，現場で重炭酸投与量を決定するのは難しく，適切でない量の投与は危険である．今回，より簡易的に臨床症状から具体的なアシドーシスを評価した上で重炭酸投与量を決定し，その評価の精度と投与成績を検証した．HCO3- 濃度と臨床症状の間には活力，哺乳欲，糞便
色に強い相関があり，アシドーシス評価として十分利用でき，予測から算出した重炭酸投与
量はアシドーシス補正に十分な効果があると示唆された．本研究の分析方法は，臨床症状３項目で判定でき簡易的で再現性・信頼性が極めて高いものと考えられる．

序

文

和種子牛 27 頭（平均 19.2±15.1 日齢）を調査対象とした．
２）試験方法ⅰ臨床検査
臨 床 症 状 6 項 目（ 活 力， 哺 乳 欲， 糞 便 色，
糞便性状，脱水度，肢端／口腔内温度）について，前者 4 項目を 0 〜 3 の 4 段階に，後者 2

現在，一般的に子牛の酸塩基平衡を評価するために，Kasari や Naylor，Garcia の 方 法 に よ り 臨 床 症
状を脱水症状や神経症状，循環器症状などに分けて多くの項目をスコアリングすることで可能となっている 1）．筆者も類似の方法で試みたが，症状の判定が困難であったり，作業が複雑であるなどの問題点があっ項目を 0 〜 2 の 3 段階にわけスコア化した．
臨床症状スコアの評価方法を表 1 に示した．
ⅱ血液検査

た ．
代謝性アシドーシスの評価は子牛下痢症において重要なことであり，アシドーシスの治療に対して重炭酸イオン（HCO3-）の補正を優先して試みている．現場
2）

ポータブル血液分析器（i-STAT，（株）扶桑薬品工業）および専用カートリッジ 6+，G3+

で補正量を決定するのは判断が難しく，投与量が足りなければ改善せず翌日悪化してしまうこともあり，大を使用して血液検査を実施した．採血および検査はヘパリン添加した 2.5ml シリンジにて頚量あるいは急速投与になってしまうと高炭酸血症や細胞内・ 脳 脊 髄 液の酸性化 を招 いてしまう恐れ が ある 1, 3）．
そのため，今回，より簡易的に臨床症状から具体的なアシドーシスの評価を試み，その上で重炭酸投与量を決定した．その評価の精度と投与成績を検証したので報告する．

静脈より約 2ml 採血後，現場で測定を行うか，
あるいはゴムキャップにより嫌気的かつ保冷状
態で診療所へ持ち帰り直ちに測定した．血液検査項目は，重炭酸イオン濃度（HCO3-），ヘマ
トクリット値（Ht），
血液尿素窒素濃度（BUN）の 3 項目とした．本研究は代謝性アシドーシ
スの評価を目的としたため，重度の脱水や腎不全の可能性のある Ht ＞ 40％あるいは BUN ＞
35mg/100ml の症例は除外した．
ⅲ統計処理および分析表作成
各臨床症状と血中 HCO3- 濃度との相関性をSperarman の順位相関係数を用いて調査した．
さらに強い相関のある臨床症状を用い，その合計スコアと血中 HCO3- 濃度の分布および平均値から血中 HCO3- 濃度を 4 段階に分類し，そ材料と方法
１． 調査１：代謝性アシドーシスの臨床症状と血中HCO3- 濃度との関係
１）供試牛
2004 年 7 月から 2005 年 6 月までに広島県内において白痢を含む感染性腸炎と診断された黒毛

表1
スコア

活力

哺乳欲

臨床症状スコアの評価

糞便色

糞便性状

脱水度

肢端／
口腔内温度

0

正常

正常

正常（茶色）

正常

眼球陥没なし正常な温かさ1

やや活力減退やや低下

黄色〜黄土色軟便

やや眼球陥没ひんやりする2

活力なく歩様蹌踉低下

淡黄色〜緑黄色

泥状〜泥水状明瞭な眼球陥没冷たい

3

昏睡／起立不能

全くなし

白色

水様（粘液便）－－─ 10 ─

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）の不足量に対する予測された重曹注を投与して実際に補正された量から算出し分析した．

れを重篤度による代謝性アシドーシスの分類表と し た． そ の 分 類 表 か ら 予 測 さ れ た 血 中
HCO3- 濃度の範囲での不足量を算出し 7％重成

曹注の投与量を決定した．この一連の作業をまとめ，より簡易的なアシドーシスの評価および重炭酸投与量決定分析表を作成した．
２．調査２：分析表におけるアシドーシス評価の精度と予測重炭酸投与による補正率
１）供試牛
2008 年 12 月から 2009 年 5 月までに広島県内において白痢を含む感染性腸炎と診断された黒毛１． 調査１：代謝性アシドーシスの臨床症状と血中HCO3- 濃度との関係
各臨床症状スコアと血中 HCO3- 濃度との関係を
表 2 に示した．活力が r ＝－0.557（p ＜ 0.01）で，哺乳欲 r ＝－0.489（p ＜ 0.01），糞便色 r ＝－0.431（p ＜ 0.05）とともに有意な強い負の相関があり，
糞便性状，脱水度，肢端／口腔内温度には有意な相関は認められなかった．また，6 項目の合計スコアには r ＝－0.561（p ＜ 0.01）と有意な強い負の相関があった．この強い相関を認めた活力，哺乳欲，和種子牛 20 例（平均 20.2±14.6 日齢）を調査対象とした．
２）試験方法
試験は全て分析表に従って実施した．供試牛に対して臨床症状をスコア化した後，そのスコアを用い代謝性アシドーシスの評価および血中
HCO3- 濃度の予測を行った．次に予測された血中 HCO3- 濃度の不足量を補正するため，分析表から算出された量の 7％重曹注を投与した．なお，治療前と治療翌日には調査１と同様の方法により血液検査を実施した．
分析表におけるアシドーシス評価の精度は，血中 HCO3- 濃度実測値と予測範囲との一致率で調

糞便色の 3 項目を用い，簡易的なアシドーシスの評価を行うこととした．なお，3 項目の合計スコアにも r ＝－0.604（p ＜ 0.01）と有意な最も強い負の相関があった．
臨床症状 3 項目の合計スコアと血中 HCO3- 濃度の相関図および各スコアでの平均 HCO3- 濃度を図1 に示した．この各スコアでの血中 HCO3- 濃度の分 布 と 平 均 値 を も と に HCO3- 濃 度 の 境 界 値 を
25.0mmol/L，17.5mmol/L，10.0mmol/L と し， 血中 HCO3- 濃度を 4 段階に分類することで代謝性ア査し，その評価には Cohen の重み付き kappa 係数を用いた．

シドーシスを重篤度により 4 つのグレードに設定した．各グレードにおける予測 HCO3- 濃度の不足
量は，各グレードの予測 HCO3- 濃度範囲の最低境

ま た， 予 測 さ れ た 重 曹 注 投 与 に よ る 血 中
HCO3- 濃度の補正率は，治療（重曹注投与）前表2

績

各臨床症状スコアと血中 HCO3- 濃度との関係

活力

哺乳欲

糞便色

糞便性状

脱水度

肢端／
口腔内温度

合計スコア
（6 項目）＊1

合計スコア＊2（3 項目）－ 0.557－ 0.489－ 0.431－ 0.181－ 0.038－ 0.215－ 0.561－ 0.604p<0.01p<0.01p<0.05nsns

ns

p<0.01p<0.01＊1：活力，哺乳欲，糞便色，糞便性状，脱水度，肢端／口腔内温度の6項目とする＊2：活力，哺乳欲，糞便色の3項目とする

図１

臨床症状3項目の合計スコアと血中HCO3-濃度の相関図
および各スコアでの平均HCO3-濃度

─ 11 ─

Sperarman's rank correlation coefficient広島県獣医学会雑誌
表3

グレードⅠ
グレードⅡ
グレードⅢ
グレードⅣ

№ 25（2010）

アシドーシスの評価および重炭酸投与量決定分析表

臨床症状
合計スコア（3項目）

HCO3-濃度予測範囲（mmol/L）

７％重曹注投与量
（ml）※

0,1,2

HCO3-＞25.0

投与なし

3,4

25≧HCO3-＞17.5

BW×2.75,6

17.5≧HCO3-＞10.0

BW×5.47,8,9

10.0≧HCO3-＞0.0

BW×9.0※不足量計算式：欠乏量（mmol/L）＝（25－HCO3-）×BW×0.6（細胞外液分布率）
7％重曹注投与量：投与量（ml）＝欠乏量×1.2
補液安全係数を1/2とする．

界値と設定し算出した．また，この不足量から補液
安全係数を 1/2 として各グレードの 7％重曹注投与
量を決定した．なお，このアシドーシスの評価および重炭酸投与量決定分析表を表 3 に示した．
２．調査２：分析表におけるアシドーシス評価の精度

負の相関があり，アシドーシスを評価する臨床症状として十分利用可能であることが認められた．また，アシドーシスは脱水の程度とは相関しないとの報告 1,4）と同様，今回，脱水度や肢端／口腔内温度が示す循環器症状とは相関性がなかった．相関性の強い活力，哺
乳欲および糞便色を利用して作成したアシドーシスの評価および重炭酸投与量決定分析表は，臨床症状がわと予測重炭酸塩投与による補正率
各グレードの HCO3- 濃度予測範囲を加えた臨床スコアと治療前の HCO3- 濃度実測値の散布図を図2 に示した．血中 HCO3- 濃度実測値と予測範囲とずか 3 項目で判定でき，過去に研究されてきた臨床
スコアシステム 1,2） よりも簡易的であると思われた．
さらに分析表から予測されたアシドーシスと血中HCO3- 濃度実測値とは非常に高い一致率であり，予の一致率は，グレード 1 が 57.1％（4/7 頭），グレー
ド 2 が 87.5 ％（7/8 頭 ）， グ レ ー ド 3 が 100.0 ％測から算出した重炭酸投与量はアシドーシス補正に十分な効果があった．このことから今回作成した分析表（4/4 頭），グレード 4 が 100.0％（1/1 頭），全体の実一致率は 80.0％でした．また，Cohen の重み付
き kappa 係数は k ＝ 0.859 であり，ほぼ完全な一致であると評価された．

は，非常に簡易的で再現性・信頼性も高い，臨床獣医師が現場ですぐに利用できるものとして大変に価値があるものと示唆された．

分 析 表か ら予測され た重曹注投与による 血中HCO3- 濃度の補正率は 49.7％であった．

文

献１）田口 清，鈴木一由監修：ウシの輸液，33-49，
77-114，獣医輸液研究会，北海道（2003）
２）黒瀬智泰：多変量解析を用いた子牛下痢症における臨床症状と血液性状との関連性，広島県獣医学会雑誌，第 21 号，８-12（2006）３）鈴木一由ほか：続 牛の補液・輸液療法 酸塩基
平衡異常の診断と治療４，臨床獣医，27（11），36-40（2009）
４）全国農業共済協会：家畜共済の診療指針Ⅰ，235265，全国農業共済協会，東京（2002）

図2

各グレードのHCO3-濃度予測範囲を加えた臨床スコアと治療前のHCO3-濃度実測値の散布図

まとめおよび考察
子牛下痢症における代謝性アシドーシスの臨床症状6 項目と血中 HCO3- 濃度との関係については，活力，
哺乳欲および糞便色と血中 HCO3- 濃度との間で強い─ 12 ─

乳牛の難治性蹄病において趾骨所見を観察した２症例
大下克史 1） 柄武志 2）

（受付：平成 21 年 12 月 21 日）

Observation of the phalanges in 2 milk cows with intractable disease of the footKATSUFUMI OOSHITA1) and TAKESHI TSUKA2)
1) Hatsukaichi Veterinary Clinic, Hiroshima P.F.A.M.A.A, 10-14 Honmachi,
Hatsukaichi, Hiroshima 738-0015
2) Veterinary Daignostic Imaging, School of Veterinary Medicine, Faculty ofAgriculture, Tottori University, 4-101, Koyama-Minami, Tottori-shi, Tottori
680-8553, JapanSUMMARY
The phalanges were observed in 2 cows which became disused due to an intractabledisease of the foot. In Case 1, deep infection was observed, and the phalanges weremarkedly deformed. In Case 2, the phalanges were fractured. Vulnerable changes
due to bone resorption and continuous weight-bearing on the lateral hoof to maintainthe posture may have been the causes of the intractable nature. Osseous changes
in the affected foot had also occurred in the same region of the contralateral foot inboth animals. The symmetric progression of osseous overgrowth with aging and bone
resorption-associated changes in the phalanges may have influenced the keratinous
disease and development of claudication.

要約

難治性蹄病により廃用となった 2 症例の趾骨所見を観察した．症例 1 は深部感染症であり，著しい趾骨の変形を認めた．症例 2 は趾骨の骨折であり，骨吸収による趾骨の脆弱化と肢勢による継続的，物理的な外蹄荷重が原因と考えられた．両症例とも罹患肢に起きていた骨変化が反対側肢においても同一部位に同様に発生していた．加齢に伴い左右対称性に進行する
骨増生や骨吸収による趾骨の変化が角質疾患や跛行の発現に影響を与えていると考えられた．

1）NOSAI 広島廿日市家畜診療所（〒 738-0015 広島県廿日市市本町 10-14）
2）鳥取大学農学部獣医学科獣医画像診断学教室（〒 680-8553 鳥取市湖山町南４丁目 101）
─ 13 ─

広島県獣医学会雑誌

はじめに№ 25（2010）

平成 20 年 8 月 26 日 包帯除去，潰瘍病変部は良好だが負重状態全く変わらず，さらに 3 日間抗生物質投与し，その後経過観察とした．
平成 20 年 9 月 9 日 起立不能に陥り廃用となる．
症例２：

近年の護蹄管理意識の高まりから，削蹄師と獣医師の連携の重要性が指摘されている．そんな中，護蹄研究会（田口清会長）は巷に氾濫している蹄病名を 12の病名に整理し，これを共通の言語としてフットケア

平成 16 年 12 月 20 日生 ホルスタイン種メス
平成 20 年 7 月 21 日 削蹄時に左後肢白線病あり，
削蹄師により処置．
平成 20 年 9 月 26 日 右後肢負重嫌悪，外蹄軸側
蹄底蹄球接合部と反軸側溝付近の白線に出血班認めるが，真皮に達する病変は確認できず．ヒールレス処置にあたっていく準備ができたところである 1）．12 の蹄病は大きく分類すると角質疾患，皮膚疾患と深部疾患に分類される．この中で蹄の深部疾患は治療に対する反応が悪いため，最も治りにくく廃用事故につながる可能性の高い疾病である．これらの肢の多くは死後剖検されることもなく，深部の病変がどのようなものであったか確認されることは少ない．今回，難治性蹄病により廃用となった 2 症例の趾骨所見を観察する機会を得たのでその概要を報告する．

施すが，O 脚肢勢顕著であり充分な免重効果が得られない（写真 3，4）．
平成 20 年 9 月 29 日 負重状態変わらないため内蹄にカウスリップ装着する．
平成 20 年 10 月 4 日 包帯除去，起立難渋するが経過観察とする．
平成 20 年 10 月 15 日 起立極めて困難となるため廃用となる．

材料および方法症例１：
平成 10 年 9 月 11 日生 ホルスタイン種メス
平成 20 年 8 月 19 日 右前肢蹄冠部腫脹，疼痛顕

CT 検査：
ヘリカル CT 装置（Pronto SE，日立メディコ）を用いた．患肢をガントリーの中心に固定し撮像した．
撮像条件は 120kV，100mA であり，骨描出ウィンドウ（WL：1000，WW：＋ 200 〜 300）で観察した．

著，負重不可能，内蹄に蹄底潰瘍あり，遊離角質除去，ヒールレス処置施し抗生物質 7 日間連続投与する（写真 1，2）．

写真１：症例１右前肢負重不可能
写真２：症例１右前肢

写真３：症例２右後肢

写真４：症例２右後肢

─ 14 ─

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

X 線検査：
コンピュータ X 線装置（REGIUS CS-3，コニカ・
ミ ノ ル タ ） を 用 い た． 撮 像 条 件 は 63kV，400mA，
0.4 秒であり，ラテラル方向，腹背方向および斜位か壊・欠損させ蹄関節まで進行している（写真 7）．この部分では骨増生部の一部欠損がみられる．また，左前肢内外蹄において屈筋結節付近に骨増生がみられる（写真 8）．その部分では，骨増生が下方向にも突出し，ら撮像を行なった．
趾骨標本：
検査終了後，70℃以上の湯に蹄鞘部を浸漬し脱蹄を行なった．

真皮層を刺激している（写真 9）．
症例２：
右後肢外蹄末節骨が屈筋結節付近で横方向に単純骨折を起こしている（写真 10）．骨標本では右後肢外蹄の末節骨は屈筋結節で横骨折を起こしており，一番大
きな本体部と骨折部後方の屈筋結節部が 2 つの骨片に分離している（写真 11）．3 つの骨片はほぼ断面が一致していた．背面からみると骨折部前方において，亀裂が生じた後に治癒したと思われる形跡が軸側部に

成

績

症例１：
右前肢内蹄では屈筋結節付近にみられる骨増生が後方へ進行している（写真 5，6）
．潰瘍は真皮層を破写真５：症例１右前肢 CT 底面

写真８：症例１左前肢 CT 底面みられる（写真 12）．

写真６：症例１右前肢 CT 側面

写真７：症例１右前肢断面写真９：症例１左前肢 CT 矢状断

写真 11：症例２右後肢外蹄趾骨

写真 10：症例２右後肢 CT 矢状断

写真 12：症例２右後肢外蹄趾骨関節面

─ 15 ─

広島県獣医学会雑誌

左右後肢外蹄末節骨底面は，反軸側を中心とした屈筋結節付近において骨増生の後から骨吸収が始まったと思われる形跡がみられ，多数の穴が形成されている（写真 13，14）．一部は骨を深部まで破壊していた．
背面には横骨折が過去に生じた後治癒したと推測される白色の癒合ラインがみられる（写真 15）．また微小
亀裂と癒合の形跡が右後肢外蹄の末節骨と同一部位にみられる．

№ 25（2010）

まとめおよび考察
今回難治性蹄病で廃用になった牛のと畜場材料を用いて深部病変を観察した．
症例 1 は深部感染症であり，著しい趾骨の変形を認めた．趾骨の変形は感染の原因であった蹄底潰瘍の結果でもあるし原因でもあると考えられる．加齢性に変形してきた趾骨は真皮に物理的な障害をもたらし，
蹄底角質の部分的な形成不全となる．そこから感染が生じ，さらに骨の変形をもたらしたと考えられる．
症例 2 は趾骨の骨折であり，骨吸収による趾骨の脆弱化と肢勢による継続的，物理的な外蹄荷重が原因と考えられた．
今回の検査で注目すべきことは，罹患肢に起きていた骨変化が反対側肢においても同一部位に同様に発生していた点である．つまりおそらくは加齢に伴い左右対称性に進行する骨増生や骨吸収による趾骨の変化が角質疾患や跛行の発現に影響を与えていると考えられ
る．今後蹄病治療や削蹄の意義を考える上で趾骨の変化にも注目していく必要があると思われる．

写真 13：症例２右後肢外蹄趾骨底面謝辞最後になりましたが検査材料の採材に御協力いただ
きました広島市食肉衛生検査所の諸先生方に深謝いた
します．

文

献

１）吉谷一紀，田口 清：削蹄師と獣医師のフットケ
アのためのウシの蹄病図譜，護蹄研究会，社会福祉法人北海道リハビリー，北海道（2008）
写真 14：症例２左後肢外蹄趾骨底面

写真 15：症例２左後肢外蹄趾骨関節面

─ 16 ─

虚弱黒毛和種子牛の心奇形 2 例
茨木義弘 1） 保本朋宏 2） 小川

寛大 3）

恵谷

美江 3） 市場聖治 4） 酒井亮 5）

（受付：平成 21 年 12 月 25 日）

Cardiac anomaly in 2 infirm calves of Japanese Black Cattle
YOSHIHIRO IBARAKI1)，TOMOHIRO YASUMOTO2), KANDAI OGAWA3)
MIE EYA3)，SHINJI ICHIBA4) and RYO SAKAI5)
1) Western Center for Livestock Hygine Service, Hiroshima Prefecture, 1-15,
Saijogojo-cho, Higashi-Hiroshima, Hiroshima 739-0013
2) Northern Center for Livestock Hygine Service, Hiroshima Prefecture, 1-4-1,
Higashi-honmachi, Shobara, Hiroshima 727-0011
3) Livestock Division, Hiroshima Prefecture 10-52, Motomachi, Naka-ku,
Hiroshima 730-8511
4) Miyoshi Veterinary Clinical Center, Hiroshima P.F.A.M.A.A., 3-6-36,
Toukaichi-higashi, Miyoshi, Hiroshima 728-0013
5) Yamagata Veterinary Clinical Center, Hiroshima P.F.A.M.A.A., 461-1,
Haruki, Kitahiroshima-cho, Yamagata-gun, Hiroshima 731-1531

SUMMARY
Two calves of Japanese Black Cattle showed infirmity from birth and died. On
necropsy, cardiac anomaly was diagnosed. In Case 1, the animal had difficulty instanding up after birth, lacked milk-sucking strength, and died at 18 days of age. No
cardiac murmur was detected. Aortic outlet from the right ventricle, pulmonary arterial
outlet from the left ventricle, and a patent foramen ovale were observed, based on whicha type 1 complete transposition of the great arteries was diagnosed. In Case 2, theanimal had difficulty in standing up after birth, lacked milk-sucking strength, developed
cardiac murmur and dyspnea, and died at 10 days of age. On necropsy, ascending aortic
hypoplasia, aortic valve atresia, narrow left ventricle, patent ductus arteriosus, andpatent foramen ovale were observed, based on which aortic atresia was diagnosed. Thiscase is valuable because only 6 cases of aortic atresia have previously been reported.

1）広島県西部家畜保健衛生所（〒 739-0013 広島県東広島市西条御条町 1-15）
2）広島県北部家畜保健衛生所（〒 727-0011 広島県庄原市東本町 1-4-1）
3）広島県農林水産局畜産課（〒 730-8511 広島県広島市中区基町 10-52）
4）広島県農業共済連合会三次家畜診療所（〒 728-0013 広島県三次市十日市東 3-6-36）
5）広島県農業共済連合会山県家畜診療所（〒 731-1531 広島県山県郡北広島町春木 461-1）
─ 17 ─

広島県獣医学会雑誌

要№ 25（2010）

約平成 20 年に出生時から虚弱症状を呈し，死亡した黒毛和種子牛 2 頭の病性鑑定を実施した結果，心奇形と診断した．症例 1 は分娩後，起立困難，哺乳力欠如を呈し 18 日齢で死亡した．心雑音は認められず，大動脈の右心室起始，肺動脈の左心室起始及び卵円孔開存が認められたことから 1 型完全大血管転換と診断した．症例 2 は分娩後，起立困難，哺乳力欠如，心雑音及び呼吸困難を呈し 10 日齢で死亡した．剖検所見で上行大動脈の低形成，大動脈弁
閉鎖，左心室狭小化，動脈管及び卵円孔開存が認められたことから大動脈閉鎖と診断した．
大動脈閉鎖はこれまで 6 例の報告しかなく貴重な症例であった．

序文（表 1）．
表１

子牛が出生直後から虚弱を呈する原因として，ウイルス感染症，遺伝性疾患，代謝異常などが報告されている 1︲3）．今回，出生直後から虚弱の症状を呈し死亡

項目した黒毛和種子牛 2 頭について病性鑑定を実施した
結果，心奇形と診断したので，その概要について報告
する．

材料と方法

生化学的検査結果（症例１）
数値

項目

数値

GGT

99（IU/L）

T-Chol51（mg/dl）

T-Bil

0.6（mg/dl）

Glu

47（mg/dl）

GOT

38（IU/L）CK

215（IU/L）

TP

4.6（g/dl）

LDH

1,087（IU/L）

Alb

3.6（g/dl）

Ca

10.8（mg/dl）

BUN

34（mg/dl）iP

6.1（mg/dl）

症例 1 は雌の死亡子牛（18 日齢），12 日齢時の血液及び母牛血清を用い，症例 2 は雄の死亡子牛（10日齢）及び 8 日齢時の血液を用いた．疫学調査は，

3）病理学的検査
ⅰ解剖所見 心臓には大動脈の右心室起始，肺動脈の左心室起始及び卵円孔の開存が認められた．

農家の聞き取り及び診療記録を基に実施した．血液学的検査は Celltac MEK-258（日本光電工業株式会社）
を用い，生化学的検査は Accute TBA-40FR（東芝メ（写真 1）．

ディカルシステムズ株式会社）を用いて実施した．病理学的検査は解剖後，定法に従って，ヘマトキシリ
ン・エオジン染色を行って鏡検した．ウイルス学的検
査は症例 1 のみアイノ，アカバネ，チュウザン，イバラキ，牛ウイルス性下痢（BVD）及び牛伝染性鼻気管炎（IBR）ウイルスについて抗体検査を実施した．

成

大動脈
肺動脈

右心室

左心室

績

１．症例１
1）疫学調査
母牛は平成 10 年 12 月 11 日生（血統：9 中丸―
栗富の 10）で，平成 19 年 6 月 8 日に第 2 平茂勝
を人工授精した．19 年度の異常産ウイルスワクチ

写真１ 症例１の心臓（ホルマリン固定）

ⅱ組織所見 肺のうっ血，肝臓のうっ血及び肝細胞の萎縮・変性を認め，酸素不足による循環障害をンは未接種であった．子牛は平成 20 年 3 月 28 日に正常娩出されたが，起立困難で，哺乳力がなかった．分娩後に哺乳や起立の介助により生存していたが，4 月 9 日頃元気消失し始め，15 日に死亡した．
なお，診療中に心雑音は認めなかった．
2）生化学的検査
GGT，T-Bil の上昇から肝・胆道障害を疑った
─ 18 ─

示唆した．その他，肺胞性肺気腫を認め，酸素不足による多呼吸を示唆した（写真 2）．
ⅲウイルス抗体検査 BVD ウイルスに対する抗体保有を母牛血清（≧ 256 倍），子牛血清（4 倍）及び脳脊髄液（4 倍）に認めた（表 2）．

広島県獣医学会雑誌
表２№ 25（2010）

ウイルス抗体検査結果（症例１）

検査項目

アイノ

アカバネ

チュウザン

イバラキ

BVD

IBR

使用株名

JaNAr－28

JaGAr－39

K－47

No.2

Nose

758

検査方法

中和

中和

中和

中和

中和

中和

母牛血清

＜2

≧256

16

＜2

≧256

8

子牛血清

＜2

16

＜2

＜2

4

＜2

脳脊髄液

＜2

＜2

＜2

＜2

4

＜2
大動脈
動脈管

上行大動脈
肺動脈
右心室

左心室
写真３ 症例２の心臓（ホルマリン固定）

写真２ 肺胞性肺気腫（ＨＥ染色× 100）

２．症例２1）疫学調査
母牛は平成 15 年 10 月 5 日生（血統：平茂勝―
初代 14）で，平成 19 年 12 月 25 日に糸福を人工授精した．20 年度の異常産ウイルスワクチンは未接種であった．子牛は平成 20 年 10 月 13 日に正常に娩出されたが，起立困難で哺乳力がなかったた
め，介助哺乳した．10 月 19 日には心雑音，21 日に呼吸困難を呈し 10 月 23 日に死亡した．
2）血液，生化学的検査
白血球数，赤血球数の増加が認められた．また，
GOT，GGT，T-Bil，ALP，BUN，iP，CK，LDHの上昇及び A/G 比の低下が認められた（表 3）
．

項目

数値

項目

160×102/μl

MCV

40f l

数値

RBC

960×10 /μl

MCH12.1pgHGB

11.6g/dl

MCHC

30.1％

HCT

38.6％

PLT

67.5×104/μl

4

肝臓の小葉中心性変性・壊死（ＨＥ染色× 100）

3）病理学的検査
ⅰ解剖所見 心臓は大動脈弁の閉鎖，上行大動脈の低形成，左心室の狭小化，動脈管の開存及び卵円孔の開存が認められた（写真 3）.
ⅱ組織所見 肺のうっ血性水腫，肝臓の小葉中心性変性・壊死を認め，それぞれ，呼吸困難，酸素不表３ 血液・生化学的検査結果（症例２）（1）血液学的検査

WBC

写真４

足による循環障害を示唆した（写真 4）.

（2）生化学的検査

項目

数値

項目

数値

GOT

251IU/L

Glu

104mg/dl

GGT

221.3IU/L

CK2,627IU/L

T-Bil

0.96mg/dl

LDH

8,375IU/L

ALP

908.8IU/L

Ca

11.1mg/dl

TP

6.2g/dliP

10.1mg/dl

BUN

97.8mg/dl

Mg

2.4mg/dl

T-Chol56mg/dl

A/G

0.77

考

察

今回，我々は 2 つの症例の心奇形に遭遇したが，2症例は異なる奇形の形態であった .
正常の心臓では右心室から肺動脈が発生し，左心室から大動脈が発生しているが，症例 1 では右心室から大動脈が発生し，左心室から肺動脈が発生していた . そして，右心房と左心房を連絡する卵円孔が開存─ 19 ─

広島県獣医学会雑誌

左心室

していた（図 1）.
また，正常の上行大動脈は太く，大動脈弁で左心室に連絡しているが，症例 2 の上行大動脈は細く，大動脈弁が閉鎖し，左心室に連絡せず，左心室腔は重度

大動脈弁

肺動脈

図２

左心室

大動脈弁

１型 TGA の模式図

大動脈閉鎖

肺動脈

卵円孔

上行大動脈

肺動脈

大動脈
図１

№ 25（2010）

大動脈閉鎖の模式図

なお，症例 1 の BVD ウイルス抗体検査で脳脊髄液に抗体を保有していたことから，子牛が BVD ウイルスに感染していたと考えられたが，中枢神経系に異常がなく，今回の虚弱との関係は不明であった .

に狭くなっていた . また，卵円孔と動脈管が開存していた（図 2）.
以上の所見から，症例 1 は 1 型完全大血管転換（1型 TGA），症例 2 は大動脈閉鎖と診断し，これらの心奇形が今回の虚弱の原因と考えられたが，大動脈閉鎖はこれまで 6 例の報告しかなく，貴重な症例であった 4︲8）.

文献１）稲葉 睦：牛の先天異常，浜名克己編，第 1 版，
11-13，学窓社，東京（2006）
２）津田知幸：牛の先天異常，浜名克己編，第 1 版，
44-60，学窓社，東京（2006）
３）浜名克己：牛の先天異常，浜名克己編，第 1 版，
260-263，学窓社，東京（2006）

症例 2 の大動脈閉鎖は臨床経過で心雑音，呼吸困難を呈し，血液，生化学検査で酸素不足を示唆する赤血
球数の上昇や肝，胆道障害を示す数値が認められたた
め，生前から心奇形が疑われたが，症例 1 のような 1型 TGA の場合では，生化学検査により肝，胆道障害を示す数値が認められたが，臨床所見で心雑音が認め

４）村上隆之：牛の先天異常，浜名克己編，第 1 版，
186-187，学窓社，東京（2006）５）村上隆之：牛の先天異常，浜名克己編，第 1 版，
190-191，学窓社，東京（2006）
６）高橋長裕：図解先天性心疾患，高橋長裕編，第 2られなかったため，当症例が心奇形と疑わなかった .
しかし，人の心室中隔欠損を伴わない 1 型 TGA は
無雑音との報告もあり，今回の症例も同様に心室中隔版，98-100，医学書院，東京（2008）
７）高橋長裕：図解先天性心疾患，高橋長裕編，第 2

欠損を伴わなかったため，雑音を聴診できなかったと考えられた 8）. 以上のことから心雑音が聴取されない
心奇形も考慮し，虚弱症状を呈す子牛の原因としてより多方面からの検査により，慎重に診断する必要があると考えた .

版，106-110，医学書院，東京（2008）８）中澤 誠：新目でみる循環器病シリーズ 13 先天性心疾患，中澤 誠，第 1 版，116-119，株式会社メジカルビュー社，東京（2008）─ 20 ─

県内で分離された牛 RS ウイルス野外株の解析
山本武 1） 恵谷

美江 2）（受付：平成 21 年 12 月 20 日）

Analysis of bovine RS virus field strains isolated in Hiroshima Prefecture
TAKESHI YAMAMOTO1) and MIE EYA2)
1) Western Center for Livestock Hygiene Service, Hiroshima Prefecture, 1-15,
Saijogojo-cho, Higashi-hiroshima, Hiroshima 739-0013
2) Livestock Division, Hiroshima Prefecture, 10-52, Motomachi, Nakaku,
Hiroshima 730-8511

SUMMARY
Gene analysis of bovine RS virus (BRSV) isolated in Hiroshima Prefecture was
performed, and the epidemiological and molecular-biological properties were comparedwith those of previously reported typical BRSV strains (control strains). All isolated
strains were classified as subgroup III, the same group as strains isolated in the US,
whereas the control strains were classified as subgroup II, the same group as strains
isolated in Europe. The gene homology between the strains isolated in the prefecture
and control strains was generally low, suggesting that mutation occurred even in the Gprotein gene region, which is reportedly relatively well conserved.

要

約

県内で分離された牛 RS ウイルス（BRSV）の遺伝子解析を行い，既報の BRSV 代表株（比較対照株）と疫学的および分子生物学的性状を比較調査した．その結果，分離株は全て
アメリカ分離株と同じサブグループⅢ，比較対照株はヨーロッパ分離株と同じサブグループ
Ⅱに分類された． 県内分離株と比較対照株の遺伝子相同性は全体的に低く，比較的遺伝子の保存性が高いとされる G タンパク領域においても変異が起こっていることが示唆された．

1）広島県西部家畜保健衛生所（〒 739-0013 広島県東広島市西条御条町 1-15）
2）広島県農林水産局畜産課（〒 730-8511 広島県広島市中区基町 10-52）
─ 21 ─

広島県獣医学会雑誌序文

牛 RS ウイルス（以下，BRSV）の G タンパクは，
宿主細胞表面レセプターへの吸着に関与し，抗原性の決定に重要な役割を担っている 1-7）．
Valarcher らは，BRSV を遺伝子の保存性が比較的高いとされる G タンパク領域の塩基配列により，ⅠからⅥのサブグループに分類し，地理的および時系列的関連性を報告している 8）．
今回，県内で分離された BRSV の遺伝子解析を行い， 上 記 報 告 に 基 づ き， 比 較 対 照 株（NMK-7 株，
RS-52 株）と疫学的および分子生物学的性状を比較調査したので報告する．

№ 25（2010）

的 と し た 2 種 類 の 正 方 向 プ ラ イ マ ー（F1：5＇-ATCACT CGT CAT CAC AGC CA-3＇，F2：5＇-AAA GCACCA CAC TGT CCC AA-3＇）と 2 種類の逆方向プライマー（R1：5＇-AGA GGA TGC CTT GTT GTG GA3＇，R2：5＇-TTT GAG GGT GAT TGT AGG GG-3＇）を用いて実施した．酵素およびバッファーは，タカラバ イ オ（ 株 ） 社 製 TaKaRa RNA PCR Kit（AMV）
Ver.3.0 と PERKIN ELMER 社製 Gene Amp EZr Tth
RNA PCR Kit を使用し，ASTEC 社製 PC-800 のプ
ログラム恒温槽を用いて行った．
増幅した遺伝子は，2％アガロースゲル電気泳動を実施後，エチジウムブロマイド染色を行い，1kb のDNA ラダ－をマーカーとして約 300bp のバンドを確認した．
得 ら れ た PCR 産 物 を QIAGEN 社 製 の QIAquick
PCR Purification Kit で DNA を回収し，精製後，ABI社製の BigDye Terminator v3.1 Cycle sequencing Kit
にてダイレクトシークエンスを行い，塩基配列を決定

材料と方法
1980 年度から 2006 年度に，呼吸器病の牛から分離した鼻汁由来の BRSV 8 株を材料に用いた．これ
らの野外株は，Vero 細胞を用い，34℃ 3 代，回転培した．
遺伝子相同性の解析は，HITACHI Sequencher4.8

養により分離した．材料の採材場所および分離年度を
図 1 に示した．また，比較対照株として，1969 年に国内で分離された NMK-7 株とワクチン株の RS-52

ソフトを用いて行った．分子系統樹解析は，得られた塩基配列から，ClustalW を用いて行い，解析ソフト
Tree View にて系統樹を図示した（図２）．

株を用いた．

図２
図1

採材場所・分離年度

成

BRSV の RNA の 抽 出 は， ニ ッ ポ ン ジ ー ン 社 のISOGEN-LS を 用 い た． BRSV 液 250μl に 750μlの ISOGEN-LS を添加し攪拌後，5 分間室温に静置した．これに，クロロホルム 200μl を添加し，3 分

系統樹

績

１．遺伝子相同性

間室温に静置後，遠心分離（15,000rpm，10 分）した．この上清にイソプロパノール 500μl を加え，10
分間室温に静置後，遠心分離（15,000rpm，10 分）した．この沈渣をエタノールで洗浄し，再度遠心分離（15,000rpm，15 分）により沈渣を回収後，超純水に再浮遊させて，抽出 RNA とした．
RT-PCR は， こ の 抽 出 RNA お よ び， 桐 沢 ら の 報
告 9）による BRSV G タンパク遺伝子の約 300bp を標─ 22 ─

G タンパク領域の遺伝子塩基配列の遺伝子相同性を図２に示した．野外株と比較対照株において，比較
対照株 NMK-7 株を基準とした遺伝子相同性は 91.1
〜 96.0％，比較対照株 RS-52 株を基準とした遺伝子
相同性は 91.4 〜 95.4％であった．
野外株 8 株において，No.1 を基準とした No.2 〜 8との遺伝子相同性は，90.5 〜 92.6％であった．
分離年度間の遺伝子相同性は，1997 年度と 1999 年
度に分離された No.2 〜 5 で 98.5 〜 99.8％，2006 年
度に分離された No.6 〜 8 で 97.4 〜 99.8％であった．

広島県獣医学会雑誌

２．系統樹解析
今回作成した系統樹を表 1 に示した．Valarcher らの報告 8） にしたがって分類したところ，県内で分離№ 25（2010）現在，国内ではサブグループⅢの BRSV 野外株が浸潤していると考えられた．
本県における BRSV 分離株の変異の度合いや流行を把握し，継続して野外株の疫学的，分子生物学的性された 8 株は全てアメリカ分離株と同じサブグルー
プⅢ，比較対照株はヨーロッパ分離株と同じサブグ
ループⅡに分類された．1980 年度に分離された No.1

状を調査していくことは，BRSV 変異株への現行のワクチンによる防御効果を検討する観点からも重要と考えられ，今後もこれらの調査を継続していく必要がある．

は 1997 年度以降に分離された No.2 〜 8 と同一サブグループに分類されたものの，他の分離株とは離れて
いた．

謝

辞

今回，遺伝子解析ならびにご助言をいただいた，動物衛生研究所ウイルス病研究チーム小西美佐子先生に深謝します．

文

表１１）Baker, J. C., et al.：J. Clin. Microbiol., 30, 11201126(1992)
２）Furze, J., et al.：J. Gen. Virol., 75, 363-370(1994)

遺伝子相同性（％）

考献３）Karger, A., et al.： J. Gen. Virol., 82, 631640(2001)
４）Langedijk, J.P.M., et al.： J.Virol., 71, 4055-

察

4061(1997)５）Prozzi, D., et al.： J.Gen. Virol., 78, 359-

今回，県内で分離された BRSV の遺伝子解析をした結果，県内分離株は比較対照株とサブグループが異366(1997)
６）Schrijver, R.S., et al.：Clin. Diagn. Lab.
Immunol., ３, 500-506(1996)

なっており，全て同一サブグループに分類された．しかし，No.1 は，比較対照株との遺伝子相同性が No.2
〜 8 よりもやや高く，一方で No.2 〜 8 との遺伝子相同性は低いため，No.1 の分離された 1980 年度から
No.2 の分離された 1997 年度の間に，明らかに異なる株が侵入したか，あるいは，なんらかの変異が起こったことが示唆された．
県内分離株はすべてサブグループⅢに分類され，2005 年の東北地方 10），2006 年の北海道 11）における分離株の遺伝子解析の報告と同じであったことから，

─ 23 ─

７）Sparer, T. E., et al.： J. Exp. Med., 187, 19211926(1997)
８）Valarcher, J. F., et al.： J. Virol., 74, 1071410728(2000)
９）桐沢力雄：J. Rakuno Gakuen Univ., 1994(1), 225237(1994)
10）Yaegashi G., et al.：J. Vet. Med. Sci., 67(2), 145150(2005)
11）前田友起子：第 54 回北海道家畜保健衛生業績発表会，63-66(2006)

広島牛増頭を目的とした黒毛和種子牛の哺育育成指導小林弘明 1） 舛下

知穂 1） 秋山

昌紀 2）

山本

武 2） 伊藤晴朗 2） 今井昭 3）

（受付：平成 21 年 12 月 25 日）

Instruction in raising calves of Japanese Black Cattle aiming at
increasing the number of Hiroshima Cattle
HIROAKI KOBAYASHI1), CHIHO MASUSHITA1), MASANORI AKIYAMA2)TAKESHI YAMAMOTO2), HARUO ITOU2) and AKIRA IMAI3)
1) Eastern Center for Livestock Hygiene Service, Hiroshima Prefecture, 1-1-1,
Miyoshi-cho, Fukuyama, Hiroshima 720-8511
2) Western Livestock Center for Hygiene Service, Hiroshima Prefecture, 1-15,
Saijogojo-cho, Higashi-hiroshima, Hiroshima 739-0013
3) Hiroshima prefecture, Agriculture, Forestry and Fisheries Bureau,
Agriculture and Fisheries Promotion Department, Livestock Division, 1052, Motomachi, Naka-ku, Hiroshima 730-8511

SUMMARY
Instruction in techniques of early weaning and raising calves and hygienic measures
was performed on a Japanese Black Cattle-breeding farm equipped with an early
weaning model cow barn.
This farm adopted the very early separation of calves from the mothers immediately
after birth, and calves were fed only milk replacer instead of colostrum, and no maternalmilk at all. Antibody transfer to these calves was investigated and compared with that incalves which stayed with the mothers for one week after birth.
The serum total protein (TP) and immunoglobulin G1 (IgG1) levels were measured
in calves 2-4 days after birth. The TP (6.0±0.6 g/dl) and IgG1 (27±4.1 mg/ml) levels incalves remaining with the mothers were higher than those (5.0 ± 0.36 g/dl and 15.0 ± 3.3
mg/ml, respectively) in calves separated from the mothers, suggesting favorable antibody
transfer in the former. Thus, we advised the change of calves staying with the mothersfor several days after birth and using milk replacer as a supplement. The failed transferof passive immunity (FPT) was improved, and the incidence of diseases decreased. Antibovine respiratory disease virus antibody tests were performed in calves separated fromthe mothers very early, and all antibody levels were lower than the detection limits at1）広島県東部家畜保健衛生所（〒 720-8511 広島県福山市三吉町一丁目 1-1）
2）広島県西部家畜保健衛生所（〒 739-0013 東広島市西条御条町 1-15）
3）広島県農林水産局農水産振興部畜産課（〒 730-8511 広島市中区基町 10 番 52 号）
─ 25 ─

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

4 months of age, for which we advised the administration of bovine respiratory diseasevirus vaccine at 3 months of age. The withers height and chest girth of the cows were
measured once a month, and cows showing favorable development were retained forbreeding. We held a meeting with community livestock farmers and presented thefindings. This study improved hygienic consciousness and contributed to the stablesupply of breeder and feeder cattle within the community.

要約

早期離乳技術のモデル牛舎を整備した黒毛和種繁殖農場で子牛の早期離乳方法，育成技術
及び衛生対策の指導を行った．
当該農場は子牛娩出後直ちに母子分離する超早期母子分離を行っており，子牛に対して母乳を全く給与せず初乳代用乳のみを給与していた．そこで超早期母子分離した子牛の移行抗体状況を調査するとともに，生後 1 週間母子同居した子牛の移行抗体の状況を調査し比較した．
生後 2 〜 4 日齢の子牛の血清中総タンパク（TP）及び免疫グロブリン G1（IgG1）濃度を測定した結果，母子同居した子牛の TP（6.0±0.6g/dl）及び IgG1 濃度（27±4.1mg/ml）
は，超早期母子分離子牛の TP（5.0±0.36g/dl）及び IgG1（15.0±3.3mg/ml）よりも高く，移行抗体の状況は良好と考えられた．そのため，分娩後数日間は母子を同居させる飼養管理に変更し，初乳代用乳は補完的に使うように指導した．その結果，受動免疫伝達不全（FPT）
は改善し，疾病の発生率も低下した．超早期母子分離子牛の牛呼吸器病ウイルスに対する抗体調査の結果，全ての抗体が 4 か月齢時点で検出限界以下であったため，牛呼吸器病ワクチ
ンを 3 ヶ月に接種するように指導した．毎月 1 回，育成牛の体高・胸囲を測定し，発育が良好な育成牛は繁殖牛として保留した．
今回得られた知見は，地域の畜産農家等を集めて発表した．今回の取組みにより，地域の衛生意識の向上と繁殖雌牛と肥育素牛の地域内安定供給に繋がったものと考えられた．

序

文

材料および方法

現在，本県の黒毛和種繁殖牛の飼養頭数は約 4,800頭であり，20 年前と比較して 1/3 にまで減少している．本県では広島牛を安定供給するため，乳用牛への和牛受精胚の移植や産子の哺育育成指導等に取り組んでいる．健康な和牛子牛の生産は，広島牛を安定供給するために重要となる．

１．農場概要当該農場は，平成 17 年から新規に黒毛和種繁殖素
牛の導入を開始し，平成 18 年 12 月から哺育・育成を開始した．飼養頭数は繁殖牛約 40 頭，肥育牛約140 頭を飼養しており，子牛の哺育は娩出後直ちに母子分離して人工哺育する超早期母子分離哺育を行っていた．子牛は繁殖牛舎内にある高床式金属性のカーフ
ペンで飼養していた（図 1）．

黒毛和種子牛は一般的に母牛と同居させ自然哺乳により飼養されているが，近年，母牛の発情回帰を早める目的や子牛の下痢症予防のために，超早期母子分離を行う農場が増えている．しかし，黒毛和種の子牛を人工哺育する初乳給与方法は確立されていない．
今回，地域の早期離乳技術のモデル牛舎として繁殖牛舎を整備し，黒毛和種繁殖経営を新たに始めた農場に対して，子牛の早期離乳法，育成技術及び衛生対策を検討及び指導したので，その概要を報告する．

─ 26 ─

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

留するように指導した．
2）地域への啓発
地域の畜産農家等を参集して，当該農場で得られた知見をもとに，子牛の哺育・育成技術に関する研繁殖牛舎修会を開催した．

成

カーフペン

績

１

発育及び疾病状況調査
指導前の発育状況（7 ヶ月齢，去勢及び雌各 10 頭）は，全頭概ね標準的な発育であり，約半数（去勢 4
頭，雌 6 頭）が黒毛和種の正常発育曲線の平均以上であった（図 2，3）．しかし，5 ヶ月齢までに 8 割の
図1

新規設営した繁殖牛舎とカーフペン

個体が下痢等の消化器症状または呼吸器症状を発症していた（図 4）．

２．調査内容1）実施期間：平成 19 年 9 月から平成 20 年 12 月
2）発育及び疾病状況調査
毎月 1 回，子牛の体高及び胸囲の測定を行うとともに，呼吸器及び消化器疾病の発症の有無を確認した．
3）移行抗体に関する調査
ⅰ初乳給与方法
畜主から初乳給与方法について聞き取りを行い，初乳給与に関する哺育方法の指導及び変更を行った．
ⅱ免疫保有状況の確認
生後 2 〜 4 日齢の血清を用い，免疫グロブリン
G1（IgG1）濃度を一元放射免疫拡散法で，血清総図2

発育状況（去勢）

図3

発育状況（雌）タンパク（TP）濃度を蛋白屈折計により測定した．
検査は指導前の超早期母子分離子牛と哺育方法変更
後の母子同居子牛について実施した（表 1）．
表1

免疫保有状況調査材料

1 免疫グロブリン（IgG1）
指導前（超早期母子分離）

血清

5検体

指導後（母子同居）

血清

16検体

指導前（超早期母子分離）

血清

12検体

指導後（母子同居）

血清

20検体

2 総タンパク（TP）

ⅲ抗体検査
生後 1，3，4 及び 5 ヶ月齢の超早期母子分離子
牛の各 2 頭，計 8 検体の血清を用い，牛伝染性鼻気管炎（IBR），牛 RS，牛ウイルス性下痢・粘膜病（BVD-MD），牛アデノ 7 型（Ad7）及び牛パライ
ンフルエンザ 3 型（PI3）ウイルスの抗体検査を実施した．
３．広島牛の増頭対策
1）雌牛の保留指導
発育状況調査成績をもとに，発育良好な雌牛を保図4

─ 27 ─

超早期母子分離哺育子牛の疾病発生状況（指導前）広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

２．受動免疫に関する調査
1）初乳給与方法
当該農場は，子牛の下痢症予防及び個体管理を容易にする目的で超早期母子分離哺育を行っていた．
娩出後直ちに母子を分離し，子牛には母乳を与えず
免疫グロブリン 75g 含有（表示値）の哺乳期子牛用の配合飼料（初乳代用乳）を娩出後の 1，12 及び 24 時間後の計 3 回，1 回あたり 1 袋（250g）を0.75 〜 1L の湯に溶解して給与していた．当該飼料には，1 〜 2 日齢の子牛に対して 1 日 2 回 1 袋ず
つを 0.75 〜 1L の湯に溶解して給与する方法が記

図6載してあったが，当該農場は独自の給与プログラム
で 24 時間以内に 3 回（3 袋）給与していた ( 図 5)．
畜主によると，人工哺乳を嫌い，既定量飲まない個
体もいるとのことであった．
子牛の血清中の IgG1 濃度を推定するため，子牛の体重 35kg，総血清量 6.5％と仮定し，IgG1 吸収率を生後 1 時間で 35％，12，24 時間でそれぞれ
20，0％と仮定して計算すると，血清中 IgG1 濃度は多くても 18mg/ml と推測され，受動免疫伝達不全 (FPT：Failure of passive transfer) の状態と考えられた．そのため，当該農場の子牛の免疫付与状
況を調査し，初乳給与に関する哺育方法の変更を行った．初乳代用乳は娩出後 1 時間以内に給与し，
その後 1 週間は母子を同居させる方法に変更した（図 5）．

血中 IgG1 及び TP 値

消化器
15％
未発症
54％

図7

n=13

呼吸器
31％

母子同居子牛の疾病発生状況（指導後）3）ウイルス抗体検査
4 ヶ月齢以上の子牛で呼吸器病ウイルスの抗体価が検出限界以下であった（表 2）．このことから，牛呼吸器病ワクチンを 3 ヶ月齢までに接種するよう指導した．
表2

抗体検査結果

月齢

1

1

3

3

4

4

5

5

IBR

4

4

<2

<2

<2

<2

<2

<2

牛RS

64

32

4

2

<2

<2

<2

<2

BVD

128

128

8

8

<2

<2

<2

<2

Ad-7

20

40

<10

<10

<10

<10

<10

<10

牛PI3

40

40

<10

<10

<10

<10

<10

<10

３．広島牛の増頭対策
1）雌牛の保留指導
育成雌牛のうち，体高が正常発育曲線に示される
図5

哺育・育成の改善方法

2）免疫付与状況
指導前の超早期母子分離子牛の血清中 TP 濃度は平 均 5.0±0.36（4.1 〜 5.4）g/dl，IgG1 濃 度 は 平
均 15.0±3.3（10.0 〜 18.2）mg/ml で あ っ た が，哺育方法変更後の母子同居子牛の血清中 TP 濃度は
平均 6.0±0.6（5.2 〜 7.4）g/dl，IgG1 濃度は平均27.0±4.1（20.5 〜 33.2）mg/ml に 改 善 し た（ 図6）．また，5 ヶ月齢までに下痢や呼吸器症状を呈す
る割合は 46％に減少した（図 7）．

─ 28 ─

「平均」以上の 5 頭を繁殖雌牛として農場内に保留し，その他は全頭肥育に移行した．
2）地域への啓発（地域研修会の開催）
地域の畜産農家等を参集して開催した研修会では，今回得られた知見を参考に，母子免疫の重要性，特に十分量の初乳を早期に給与することが重要であることを発表した．研修会終了後，当該農場と同様の超早期母子分離哺育を実施していた他農場が，当該農場と同様の哺育プログラムに変更した．
また，これまで自然哺乳のみで哺育を行っていた農場が，初乳代用乳を分娩直後に給与するなど，管内農場において変化が認められた．

広島県獣医学会雑誌

まとめおよび考察№ 25（2010）

謝超早期母子分離技術は，母牛の繁殖成績の向上が期待できる．また，子牛の下痢減少や疾病時の治療が容易になる等の利点ある1）．一方，子牛に対して余分な経費や労力が増え，子牛の初乳摂取量が不足した場合
は FPT となる可能性が考えられる．黒毛和種子牛の場合，生後 2 日目の血清中 IgG1 濃度が 10 〜 20mg/

辞

今回，本調査に御協力いただいた，広島県農業共済組合連合会府中家畜診療所の諸先生方に深謝します．

文献１）福島護之：子牛の損耗防止技術に関する共同試
験・情報収集報告書（平成 17 〜 18 年度），社団
法人畜産技術協会編，29-38，社団法人畜産技術協会，東京（2007）
２）小原潤子：黒毛和種産子への初乳給与，家畜診

ml 未満でも FPT の可能性が示唆されており，育成中の斃死率が高くなることが報告2,3）されている．
当該農場の育成牛の発育状況は指導前も概ね良好であったが，8 割の牛が 5 ヶ月齢までに下痢や呼吸器疾病を発症しており，子牛の血清中 IgG1 濃度が 15.0±
3.3mg/ml であり，FPT が疾病発生の一要因と考えら

療，54，643-647（2007）３）岡峰友恵ほか：和牛受精卵移植産子における初乳
給与状況の簡易な判定法の検討，広島県獣医学会
雑誌，24，47-50（2009）４）小沼 操：獣医領域における免疫学，伊沢久夫ら
編，274-284，近代出版，東京（1981）

れた．
子牛の免疫グロブリンの吸収は時間とともに低下
し，生後 24 時間には消失する4）ため，子牛に対し可能な限り早期に初乳を給与することが重要となる．小原2）は初乳製剤や IgG1 濃度の高い凍結初乳等を給与する場合は，生後 1 〜 6 時間以内に体重の 10％を目
安（2 〜 3L）に給与し，初回給与から 6 〜 12 時間以５）飼料畜産中央研究所，笠間乳肉牛研究所：母子分
離・代用乳離乳時期が発育に及ぼす影響，ちくさんクラブ 21，56，13-14（2008）６）北島輝雄ほか：子牛の超早期離乳技術における初乳給与方法の確立，佐賀県畜産試験場試験研究成績書，40，4-5（2004）

内に追加給与するとしている．当該農場で生後 6 時
間以内に給与される初乳量は，初乳代用乳 1 袋 0.75L（Ig75g）のみであり，給与量の不足が考えられた．
哺育方法を変更する際，畜主の労力と初乳代用乳にかかる経費等を削減するため母子同居の方向で検討
し，母子分離時期は下痢等の疾病予防と容易な子牛管理を行うため，飼料畜産中央研究所の報告5) を参考に
1 週間で分離することとした．しかし，自然哺乳の場
合，母牛（乳量及び IgG 含量）と子牛（初乳摂取量
及び時間）の要因により受動免疫量が大きく変動することが考えられるため，北島ら6）の報告を参考に，従来から行っている分娩後 1 時間以内の初乳代用乳 1袋の給与は継続実施することとした．その結果，子牛の IgG1 量は全個体で 20mg/ml 以上，TP 濃度も 5g/
dl 以上に上昇し，各疾病の発生率も 45％にまで減少した．
牛呼吸器病ワクチンの 3 ヶ月齢までの接種は未実施であるが，今後も衛生対策指導を継続し，疾病減少に努めたいと考えている．
最後に，地域の畜産農家等を参集して研修会を開催したことにより，関係者が母子免疫の重要性について再認識する機会となり，初乳給与方法を見直した農場が増え，健康な黒毛和種子牛の増産に寄与できたものと考える．
今後も広島牛の安定供給に繋がる取り組みを継続して行っていきたいと考えている．

─ 29 ─

泌乳最盛期のホルスタインからの体外受精胚生産尾形康弘１） 日高健雅１） 松重

忠美１） 前田照夫 2）（受付：平成 21 年 12 月 18 日）

The Production of in-vitro fertilized embryos from Holstein cattle
in the early lactation period
YASUHIRO OGATA1), TAKEMASA HIDAKA1), TADAMI MATZUSHIGE1) and TERUO MAEDA2)
1) Hiroshima Prefectural Technology Research Institute Livestock Technology
Research Center, 584, Nanatuka-cho, Shobara, Hiroshima 727-0023
2) Hiroshima University, 1-4-4, kagamiyama, Higashi-hiroshima, Hiroshima
739-8528

SUMMARY
The production of in-vivo fertilized embryos is difficult in dairy cows in the earlylactation period because their responses to externally administered hormones are poor.
Thus, in-vivo fertilized embryos are prepared in nulliparous cows or in the dry period.
We developed a technique to achieve one birth per year without prolonging thedelivery interval by preparing in-vitro fertilized embryos from Holstein cattle in the earlylactation period 40-80 days after transvaginal ovum pick-up and in-vitro fertilization
techniques not requiring superovulation treatment.
To increase the efficiency of in-vitro fertilized embryo production, gonadotropinreleasing hormone was administered at 50μg/animal 48 hours before transvaginal ovum
pick-up to increase the number of ovarian follicles.
The mean number of follicles was 16.7±1.4 in the untreated group (72 cows) and 20.5
± 1.7 in the GnRH-treated group (74 cows), showing a greater number in the GnRHtreated group.
The mean number of collected embryos was 12.1±1.4 in the untreated group (72 cows)
and 16.1 ± 1.7 in the GnRH-treated group (74 cows), showing a greater number in the
GnRH-treated group.
The number of blastocyst-stage embryos prepared by a single transvaginal collection/
in-vitro fertilization was 1.8 ± 0.3 and 3.4 ± 0.4 in the untreated and GnRH-treatedgroups, respectively, showing that the number was significantly increased in the GnRHtreated group.
It was confirmed that GnRH pretreatment increases the numbers of ovarian follicles
1）広島県立総合技術研究所 畜産技術センター（〒 727-0023 広島県庄原市七塚町 584）
2）広島大学大学院生物圏科学研究科（〒 739-8528 広島県東広島市鏡山 1-4-4）
─ 31 ─

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

and embryos collected transvaginal ovum pick-up, quality of collected eggs, andembryogenesis rate after in-vitro fertilization in Holsteins in the early lactation period
40-80 days after delivery, and successor cows can be produced.
This method enables the securing of fertilized embryos without prolonging the delivery
interval of embryo-supplier cows.

要約泌乳最盛期の乳牛は，外部から投与したホルモンに対する反応性が低く，体内受精胚を生産することが困難である．そのため，未経産牛もしくは，乾乳期に体内受精胚を生産する方法が用いられている．
そこで，過剰排卵処置を必要としない経膣採卵・体外受精技術を利用し，分娩後 40 〜 80
日の泌乳最盛期にあるホルスタイン種から体外受精胚を生産することで，分娩間隔を延長させることなく，1 年 1 産の実現が可能な技術開発を行った．
体外受精胚の生産効率を向上させるために，卵巣内の卵胞数増加を目的として，経膣採卵48 時間前に性腺刺激ホルモン放出ホルモン 50μg/頭投与した．
平均卵胞数は，無処置区で 16.7±1.4 個（72 頭），GnRH 投与区で 20.5±1.7 個（74 頭）で GnRH 投与区が多い傾向にあった．
平均採卵数は，無処置区で 12.1±1.4 個（72 頭），GnRH 投与区で 16.1±1.7 個（74 頭）でGnRH 投与区が多い傾向にあった．
1 回の経膣採卵・体外受精による胚盤胞期胚生産個数は，無処置区で 1.8±0.3 個，GnRH
投与区で 3.4±0.4 個で有意に多くなった．
分娩後 40 〜 80 日の泌乳最盛期のホルスタインでも，GnRH を前投与することで，卵巣内卵胞数，経膣採卵数，採取卵子の品質向上，体外受精後の胚発生率を改善することができ，後継牛も生産できることが確認された．
この方法の利用により，供卵牛の分娩間隔を延長することなく，受精胚を確保することが
できる．

序

文

は，生きた牛から反復して 3 〜 5 日おきの卵子採取が可能 5,6）となり，日本においては，体外受精胚生産の主流となりつつあり，生産効率を上げるための研究が行われている．
泌乳最盛期は，エネルギー不足に陥りやすく，繁殖性が低下するとの指摘も多い 7） が，体外で，卵子の成熟や受精，発育を行う経膣採卵・体外受精技術を用

乳用牛においては，近年，泌乳量の増加と反比例して，繁殖性が低下していることが世界的に問題になっている 1）．
経営の安定化のため 1 年 1 産が目標として掲げられているが，現状ではここ 10 年間で分娩間隔が約 3
日 / 年延長しているとの報告もある 2）．
高い能力を有したメス牛から短期間に多くの娘牛をいることで，これらの問題をバイパスできる可能性がある．
今回，卵子採取に不向きと考えられる泌乳最盛期にあえて卵子の採取を行い，その後に人工授精することで 1 年 1 産を維持しながらの後継牛生産が可能かど増やすために，ホルモン処置と人工授精を組み合わせた体内受精胚生産が行われている．
しかしながら，泌乳最盛期のホルスタインはホルモンに対する感受性が低く，計画通りに体内受精胚を生産することが難しい 3） ため，乾乳期や泌乳のない採卵専用牛からの採卵が行われている．

うか実験を行った．

超音波画像診断装置を用いて生きた牛の卵巣から直接卵子を吸引する経膣採卵技術 4） が導入されてから
─ 32 ─

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

材料と方法

２．性判別
体外受精胚の性判別は，培養 5 日目の桑実期胚を細胞剥離法で 2-3 個の性判別用サンプル細胞を採取もしくは，培養 7 日目に栄養膜のブレード切断法によっ当センターに繋養している，ホルスタイン種経産牛
35 頭（延べ 146 頭）を用い，分娩後 40 〜 80 日の期
間に 1 週間間隔で反復して実施した．
性腺刺激ホルモン放出ホルモン（GnRH）投与区は，て採取した細胞塊を牛胚性判別試薬キット（栄研化学株式会社）で判定を行った．
３．受精胚移植性判別済み胚の移植は，発情日を 0 日として 7 日
目に新鮮又は融解したガラス化保存胚を，ホルスタイ
ン種経産牛の黄体側子宮角に頸管経由法で行った．
妊娠診断は，妊娠 35 日齢前後（移植後 28 日目）に超音波画像診断装置を用いて行い，胎仔心拍の確認をもって妊娠と判定した．

経膣採卵 48 時間前に酢酸フェルチレリン製剤 50μg/
頭（商品名：ボンサーク注 第一製薬株式会社）を筋肉内投与した．
供卵牛は，無処置区と GnRH 投与区で 1 週間ごとに交互に使用した．
経膣採卵は，超音波画像診断装置（アロカ社 SSD1200）に経膣穿刺用コンベックス探触子（アロカ社
UHT-9106-7.5）を装着し，ディスポーザブル採卵針（ミサワ医科工業株式会社）及び卵子吸引システム

成（クック社 K-MAR-5115）を用いて行った．
卵胞数やその大きさは，ビデオ録画したものを再生してモニター上で確認した．

統計処理は全て，Welch’s t-test にて行った．
泌乳最盛期の卵巣内卵胞数は，無処置区 16.7±1.4 個（72 頭 ）
，GnRH 投 与 区 20.5±1.7 個（74 頭 ） で卵胞内卵子の回収は 3％ウシ胎児血清（FCS）及び
1.8 ユニット /ml のヘパリンを添加した乳酸加リンゲ

GnRH 投与区が多い傾向にあった（p ＜ 0.08）．

ル液（日本全薬工業株式会社 ハルゼン -V 注射液）を用いた．
卵胞内卵子は吸引圧 100mmHg で卵胞液と共に吸引採取した．採取した卵子は，10％ FCS 添加 M2 液
で 3 回以上洗浄した後，品質判定に供した．

表1

泌乳最盛期のウシの卵巣内卵胞数

試験区

供試頭数

供試卵胞数

平均卵胞数±S.E.

無処置

72

1,204

16.7±1.4b

GnRH

74

1,517

20.5±1.7a※異符号間（a, b）で有意差あり p<0.08

未成熟卵子は品質判定に，顆粒層細胞の付着度合い
及 び ブ リ リ ア ン ト ク レ シ ル ブ ル ー 52μM（Sigma

卵巣内の大型卵胞（10mm 以上）の存在数は，無処 置 区 で 1.43±0.1 個（72 頭 ），GnRH 投 与 区 0.56
± 0.1 個（74 頭）で無処置区が有意に多い傾向にあった（p ＜ 0.01）．

B-5388：BCB）で 30 分間染色による卵子細胞質の色調検査により行った．
牛血清アルブミン 4mg/ml（Sigma A-7030：BSA）
添加 D-PBS で洗浄後，倒立顕微鏡で染色度合いを観察し，濃染色（＋＋），染色（＋），無染色（－）の 3
つに区分した．
体外成熟は，TCM-199（GIBCO）に 10％ FCS（三光 純 薬 KPH21772），0.12mg/ml 卵 胞 刺 激 ホ ル モ ン（川崎製薬：FSH）と 50ng/ml 上皮性成長ホルモン（Sigma E-1264：EGF） を 添 加 し た 培 地 で 38.5 ℃，
5 ％ CO2，95 ％ air の 条 件 下 で 22 〜 24 時 間 培 養 を行った．
１．体外受精体外受精は，当センターの常法に従い，凍結精液を用いて，精子濃度を 12×106/ml に調整して媒精を 6

績

表2

卵巣内の大型卵胞数（>10mm）

試験区

供試頭数

供試
卵胞数

大型
卵胞数

平均卵胞数±S.E.

無処置

72

1,204

103

1.43±0.1b

GnRH

74

1,517

41

0.56±0.1a※異符号間（a, b）で有意差あり p<0.01

1 頭当りの経膣採卵個数は，無処置区 12.1±1.4 個（72 頭 ）
，GnRH 投 与 区 16.1±1.7 個（74 頭 ） でGnRH 投与区が多い傾向にあった（p ＜ 0.06）．

時間行った．
媒精後 72 時間目までは mSOF 培地＋ウシ血清アルブミン 3mg/ml（Sigma A-4378）＋リノール酸ア
ルブミン 0.25mg/ml（Sigma L-8384）で 38.5℃，5％CO2，5％ O2，90％ N2 の低酸素条件下で培養し，それ 以 降 は，mSOF 培 地 ＋ 10 ％ FCS（ 三 光 純 薬
KPH21772）＋リノール酸アルブミン 0.25mg/ml で38.5℃，5％ CO2，95％ air の条件下で Vero 細胞との共培養を行った．

表3

泌乳最盛期のウシからの経膣採卵成績

試験区

供試
頭数

採卵
総数

無処置

72

874
120
318
341
95
（12.1）（13.7％）（36.4％）（39.0％）（10.9％）

GnRH

74

1,194
190
441
438
125
（16.1）（15.9％）（36.9％）（36.7％）（10.5％）

ランク
GⅠ

GⅡ

GⅢ

その他

採取された卵子の BCB に対する染色性は，無処置
区 で 濃 染 色（ ＋ ＋ ）68.6 ％（583/850）， 染 色（ ＋ ）18.4 ％（156/850） と 無 染 色（ － ）13.1 ％（111/850），
─ 33 ─

広島県獣医学会雑誌

GnRH 投 与 区 で は そ れ ぞ れ，76.7 ％（906/1,181），
13.2 ％（156/1,181） と 10.1 ％（119/1,181） で GnRH
投与区の濃染色が有意に多くなった（p ＜ 0.05）．
表4経膣採卵された卵子の BCB 染色性

試験区 供試卵数

ランク
濃染色
（＋＋）

染色（＋）

無色（－）

無処置

850

583b
（68.6％）

156b（18.4％）

111（13.1％）

GnRH

1181

906a
（76.7％）

156a（13.2％）

119（10.1％）

採取卵子の体外受精成績は，無処置区で，卵割率67.8％（477/704），8 細胞期率 33.8％（238/704），桑実
期率 22.9％（161/704）と胚盤胞期率 18.9％（133/704）
で，GnRH 投与区ではそれぞれ，77.2％（722/935），42.8％（400/935），29.9％（280/935）と 27.3％（255/935）で GnRH 投与区の胚盤胞形成率が有意に高かった（p＜ 0.05）
．

発生数
卵割数

8 細胞期

桑実期

胚盤胞

704

477
238
161
133
（67.8％）（33.8％）（22.9％）（18.9％）

GnRH

935

722
400
280
255a
（77.2％）（42.8％）（29.9％）（27.3％）のとなっていた．
また，GnRH 投与による主席卵胞の排卵もしくは閉鎖により，卵胞波の新生を試みた結果，これまでの※異符号間（a, b）で有意差あり p<0.05

経膣採卵 1 回あたりの胚盤胞作出数は，無処置区報告と同様 11）に，泌乳最盛期であっても，2-3mm の小卵胞の集団から，4-6mm の中卵胞へと卵胞の大きさが変 化 して いる こと が確 認さ れ，この 時 期で もで 1.8±0.3 個，GnRH 投 与 区 3.4±0.4 個 で GnRH
投与区が有意に多くなった（p ＜ 0.05）．
表6

GnRH は効果があることがあらためて確認された．
泌乳最盛期の牛から経膣採卵を行った結果，無処置
区で平均 12.1±1.4 個の採卵ができており，GnRHの投与により，さらに平均 4 個ほど採卵数を増加さ

泌乳最盛期のウシからの胚盤胞発生数

試験区

供試頭数

1回当たり移植可能胚数

無処置

72

1.8±0.3b

GnRH74

3.4±0.4a※異符号間（a, b）で有意差あり p<0.05

移 植 し た 性 判 別 済 み 胚 の 受 胎 率 は， 無 処 置 区，GnRH 投 与 区 59.5 ％（44/74 頭 ）42.1 ％（8/9 頭 ）で両者に有意差は見られなかった．
表 7 性判別済み胚の受胎性
試験区

供試頭数

受胎頭数

受胎率（%）

無処置

19

8

42.1

GnRH

74

44

59.5

考

察

今回，泌乳最盛期である，分娩後 40 〜 80 日の期間に卵巣内を超音波画像診断装置で観察を行った結Bungartz らの報告 10） では，未経産牛や非泌乳中の牛よりも搾乳中の牛で卵胞が多く存在するとあるが，泌乳最盛期においてもこれらの結果を支持するもb

無処置あると考えられる．
今回利用した，経膣採卵・体外受精技術は，繁殖障
害の牛 8）や妊娠 90 日までの牛 9）からも体外受精胚を生産することができる画期的な技術であり，通常では，受精胚生産を行うことが不可能な母体からも体外受精胚を生産できる大きなメリットがある．

果，無処置のものでも平均 16.7±1.4 個の卵胞が存在しており，体外受精に利用可能な二次卵胞は存在する
ことが確認された．

泌乳最盛期のウシからの経膣採卵成績

試験区 供試卵数

泌乳にエネルギーを多く消費するホルスタイン種では，その反応性の低さから，通常泌乳最盛期に行われることはなく，泌乳前の未経産牛もしくは，乾乳後に行うことが多い．
ホルスタイン種は分娩後，泌乳によってエネルギー
バランスが負の状態になりやすく，赤松らの報告 7）にも粗タンパク質充足率を 100％と 115％で体内受精
胚生産性を見たとき 115％のほうが回収数，移植可能胚数ともに有意に多くなっていたとあるように，泌乳
中のホルスタイン種は，生体機能を維持するのがやっとで，繁殖機能の低下は避けることができない状況に※異符号間（a, b）で有意差あり p<0.05

表5№ 25（2010）

卵胞刺激ホルモンによる多排卵を利用した体内受精
胚生産技術は，泌乳量の少ない黒毛和種でも分娩後の卵巣・子宮機能が回復する 50 日齢以降に行っている．
─ 34 ─

せることができた．
体外で卵子の成熟を行う場合，顆粒層細胞の量や，卵子の個数はその後の発生に大きく影響を与える重要な要因である12）．
O'Doherty らの報告13） でも，単独培養を行うよりも集合培養を行ったほうが，胚盤胞発生率と受精胚の細胞数が多いことから，培養する卵子数が多いほうがより移植可能胚を作出するのに適していると考えられる．その意味でも GnRH 投与により，採取された未成熟卵子数が増加したことはその後の胚発生にプラスになると考えられる．
経膣採卵によって採取された未成熟卵子の，顆粒層細胞の付着度合いと卵子の細胞質の肉眼的な分類は，発生率に大きな影響を与える要因の一つ 14）であるが，
経膣採卵は，穿刺針の種類や連結するチューブの素材，吸引圧などによって採取される卵子の肉眼的な品

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）７）赤松裕久ら：乳牛の採胚成績に影響を及ぼす栄養要 因 の 検 討， 静 岡 県 畜 産 試 験 場 研 究 報 告，31,
18-20(2005)

質が変化する 15）ため，肉眼的な観察のみでは，卵子の品質すべてを判定することは難しい．
Alm らが，卵子の細胞質内のグルコース 6 リン酸
脱水素酵素活性を指標にブリリアントクリシルブルー
染色性による卵子の選別を行い，染色性の高いものが発生率も高いと報告 16）しており，今回，肉眼的所見
では，GnRH 投与区と無処置区の両者に有意差は認められなかったが，BCB 染色性の結果では，GnRH 投与区で染色性が高く，発生率の高い卵子が多く採取で

８）青木義和ら：ウシの繁殖生理状況の違いが超音波
経膣採卵成績に及ぼす影響，滋賀畜技セ研報，5，
1-6(1998)
９）Meintijes, M., et al.:Transvaginal aspiration ofoocytes from hormone-treated pregnant beef
cattle for in vitro fertilization, J. Anim. Sci., 73,
967-974(1995)
₁₀）Bungartz, L., et al.:Collection of oocytes from

きることが確認された．
Mao らは離乳前の豚への GnRH 投与によって，早期卵巣賦活化作用があると報告 17）しているが，分娩後のホルスタイン種においても，GnRH 投与によって，卵巣が賦活化され，卵子数の増加，卵子の品質向上がなされたとも考えられる．

cattle via follicular aspiration aided byultrasound with or without gonadtropin
pretreatment and in different reproductive
stages, 43, 667-675(1995)
₁ ₁ ） P u r s l e y, J. R . , e t a l . : S y n c h r o n i z a t i o n o fovulation in dairy cows using PGF2 α and当センターにおいて，ホルスタイン種から経膣採卵・体外受精を行い，その正常な産子の生産に成功しており 18），今回も，GnRH を投与した乳牛から経膣採卵した卵子でも無処置区と同等な受胎性が確認されており，受胎性に対する問題もないと考えられる．

GnRH, Theriogenology, 44, 915-923(1995)
₁₂）Madison, V., et al.:Selection of immature bovine
oocytes for developmental potential in vitro,

泌乳最盛期の牛からも，GnRH を経膣採卵前に投与することで，平均 3.4 個の移植可能胚を作出することが確認され，日高らの報告 19）でも，経膣採卵後のAnim. Repod. Sci., 27 (1), 1-11(1992)
₁₃）O'Doherty, E.M., et al.:Effects of culturing
bovine oocytes either singly or in groups

人工授精成績に問題がないことが報告されており，これらの技術を組み合わせることで供卵牛の 1 年 1 産

on development to blastocysts, Theriogenology,
48, 161-169(1997)₁₄）Ward, F.A., et al.:Factors affecting recovery andquality of oocytes for bovine embryo productionと受精胚移植による後継牛生産を同時に達成し，農家の希望する牛から効率的に後継牛を生産することができると考えられる．

文

in vitro using ovum pick-up technology,
Theriogenology, 54, 433-446(2000)
₁₅）木伏雅彦ら：経膣採卵における連結チューブの長さ，吸引圧及びフラッシング量がウシ卵胞卵子の採 取 効 率 に 及 ぼ す 影 響， 兵 庫 農 技 研 報，35，
5-8(1999)
₁₆）Alm, H., et al.:Bovine blastocyst development
rate in vitro is influenced by selection of

献１ ） L u c y, M . C. : R e p r o d u c t i v e l o s s i n h i g h producting dairy cattle:Where will end?, J.
Dairy Sci., 84, 1277-1293(2001)
２）坂口 実 : 乳牛繁殖性の現状と将来展望，畜産の研究, 61,75-80(2007)３）Snijders, S.E.M., et al.:Effect of genetic merit,oocytes by brilliant creylblue staining before
IVM as indicator for glucose-6-phosphate
dehydrogenase activity, Theriogenology, 63,
2194-2205(2005)₁₇）Mao, J., et al.:Reproductive, Metabolic, andendocrine responses to feed restriction and
GnRH treatment in primiparous, lacting sows,milk yield, body codition and lactation number
on in vitro oocyte development in dairy cows,
Theriogenology, 53, 981-989(2000)
４）Pieterose, M.C., et al. :Aspiration of bovine
oocytes during transvaginal ultrasound scanningof ovaries, Theriogenology, 30, 751-762(1988)
５）Walton, J.S.S., et al. :Evalution of frequency ofultrasonically guided follicle aspiration on

J. Anim. Sci., 77, 725-735(1999)₁₈）尾形康弘ら：ウシ胚からの性判別用細胞採取法の開発，広島県獣会誌，22，16-19(2007)₁₉）日高健雅ら：経膣採卵が卵巣機能に及ぼす影響について，平成 21 年度日本産業動物獣医学会講演
要旨，36(2009)

ovarian dynamics, Theriogenology, 39, 336
abst(1993)
６）Gibbons, J.R., et al. :Effects of once versus twice
weekly transvaginal follicular aspiration on
bovine oocyte recovery and embryo development,
Theriogenology, 41, 206 abst(1994)
─ 35 ─

猫の乳び胸の１例
康広１） 長澤園田裕２） 長澤晶子２）（受付：平成 21 年 10 月 27 日）

A case of feline chylothorax
YASUHIRO SONODA1), HIROSHI NAGASAWA2) and MASAKO NAGASAWA2)
1) Sonoda Animal Hospital Research Center, 584 Nanatsuka-cho, Shobara,
2-19-50, Yagi, Asaminami-ku, Hiroshima 731-0101
2) Aki Pet Clinic, 1-21-29, Yahata, Saeki-ku, Hiroshima 731-5116

SUMMARY
We encountered an 8-year-old hybrid cat with chylothorax showing dyspnea. Asinternal medical treatment, the removal of pleural effusion (200ml) and diuretic
treatment were performed on the first hospital day, but cough started on the 11thday, and pleural effusion removal (200ml) was repeated. On the 19th day, the further
accumulation of pleural effusion was observed, for which improvement by symptomatic
treatment was considered difficult. After consultation with the owner, ligation of thethoracic duct and intrathoracic omentopexy were performed. The postoperative course
was smooth, and no recurrence had occurred as of 6 months after surgery.

要約

呼吸困難を呈した 8 歳，雑種猫の乳び胸に遭遇した．内科的治療として，第 1 病日から胸水の抜去（200ml）および利尿剤による治療を行った．しかしながら，第 11 病日にはまた咳が出始めたとのことで再度胸水抜去（200ml）を行い，第 19 病日には更なる胸水の貯留が見られた．対症療法による治療ではこれ以上の改善は困難であると判断し，オーナーとの相談の上，胸管結紮術・胸腔内大網固定術を実施した．術後の経過も順調で，6 ヶ月たった
現在も再発は認められない．

序

文ず，進行し線維性胸膜炎などにより死の転帰をとる場
合がある1,2）．外科治療の場合，従来行われていた胸管結紮術単独による治癒率は 20 〜 60％と低めの報告

犬猫の乳び胸の治療は，薬物療法や胸腔穿刺などの対症療法によって症状が改善することがある．しかしであった3）．近年では，胸管結紮術に加え乳び槽切除術，心膜切除術などと併用することで犬の治療成績がながら，その多くが対症療法では一時的にしか反応せ

１）そのだ動物病院（〒 731-0101 広島市安佐南区八木 2-19-50）
２）安芸ペットクリニック（〒 731-5116 広島市佐伯区八幡 1-21-29）
─ 37 ─

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

向上したとの報告が数多く上がっている4）．今回，呼吸困難を呈した猫の乳び胸に遭遇し，胸管結紮術と胸腔内大網固定術を併用した外科治療を試み，良好な結果を得ることが出来たので報告する．

症例

雑種猫，雌，8 歳，体重 4.0kg で，他院にて肺炎と診断を受け治療されるも改善が認められないとのことで来院．初診時，一般臨床所見では浅速呼吸ではある
ものの，口腔粘膜・CRP は良好であった．
 
 

各種検査
１．血液検査
血液検査では一般血液検査，生化学検査とも，特に問題は認められなかった．
（表 1）
また，FeLV，FIV ともに陰性であった．
表1
PCV
RBC
Hb
TP
II
WBC
Band
Seg
Lym
Eo
Mon
Bas
PLT

47％
586 × 104/dl
15.6g/dl
7.0g/dl2
4700/μl
0 μl3713 μl
517 μl
470 μl0 μl
0 μl
30.2 × 104/dl

血液検査結果
AST
ALT
BUN
Cre
Ca
Glu
CPK
Cho
TG
Na
K
Cl
FeLV（－）

28IU/l28IU/l26.9mg/dl
1.6mg/dl
10.7mg/dl
125mg/dl
113IU/l
201IU/l95IU/l154mmol/l
4.2mmol/l
119mmol/lFIV（－）

２．胸部 X 線検査
胸部 X 線検査ではラテラル像において中等度の胸水の貯留ならびに前縦隔洞部の不鮮明化，VD 像においては肺前葉部の透過性の低下が認められた（写真 1）
．

 

写真1

心エコー検査 Ｂモード
Ｈ：心臓
ＰＥ：胸水
胸水の貯留が観察される．

４．胸水検査
胸水検査；乳白色の胸水が約 200ml 抜去された．
胸 水 性 状 は TP 3.2g/dl， 比 重 1.026，TG ＞ 500IU/lであった（写真 3）
．

 

ラテラル像

写真2

写真3

胸水検査
胸水が200ml抜去された．

胸水塗抹検査では分葉した好中球とともに，小リンパが多数認められた（写真 4）
．



ＶＤ像

胸部X腺検査（胸水抜去前）
中等度の胸水が観察される．

写真4

胸水検査 塗抹検査（×400）
小リンパが多数観察される．

以上，乳び胸と診断し飼い主と相談の上，利尿剤の３．心エコー検査
B モード検査；胸水の貯留が認められる．また，前縦隔洞内に腫大した腫瘤は観察さてなかった（写真 2）．
─ 38 ─

投与とともに呼吸器症状が顕著になった場合に胸水抜
去を行う内科療法を行うこととなった．

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

内科治療と経過リンパ管造影検査

第 1 病日より胸水抜去後，抗生剤（マルボフロキ
サシン 5mg/kg SID）を投与開始した．第 3 病日には咳がかなり減少したとのことであったが，レントゲン検査にて軽度胸水の貯留が認められたため利尿剤

腸間膜リンパ管を可視化する目的で，手術 1 時間
前に，1ml/kg でコーンオイルを経口投与した．仰臥位にて腹部正中切開により開腹したところ，術前に投与されたコーンオイルによって腸間膜リンパ管が視認された．その後，そのリンパ管の中でも径が太めのものを選択・確保し，24G の留置針を挿入した．留置（フロセミド 2mg/kg BID）を追加投与した．第 11
病日には再度咳が認められるとのことでレントゲン検査により第 1 病日と類似した所見が認められたため
胸水抜去（200ml）を行った．その後第 19 病日には断続的な咳が認められるとのことでレントゲン検査に
よ り， 更 な る 貯 留 が 観 察 さ れ た． 同 様 に 胸 水 抜 去（300ml）を行った（写真 5）．

針の外套内にリンパ液が逆流したことを確認し，エックステンションチューブを接続した（写真 6）．

写真6 リンパ管確保像
左写真：コーンオイルによって視認されたリンパ管
右写真：留置針の外套にリンパ液の逆流が認められる．

リンパ管留置部の破綻をきたさないよう，慎重に右側 横 臥 位 に 保 定 し た． 次 に， エ ッ ク ス テ ン シ ョ ン
チューブより 1ml/kg でヨード系造影剤をゆっくり注入した．注入し終えると同時に撮影を行った．レント
ゲン写真では背側に胸管，また胸郭中間に側復路が確認された（写真 7）
．

B

A

写真5

写真7 リンパ管造影検査
 間膜リンパ管留置部より1ml/kgでヨード系造影剤を投与した
腸直後の胸管（↑上部と下部↓）が確認される．
A；胸管
B；側復路

胸部Ｘ線検査（経過）胸管結紮術・胸腔内大網固定術

以上，この時点でこれ以上，内科療法では限界があることを飼い主に説明し，相談の上，外科手術となった．

外科療法
麻酔はメデトミジン，ブトルファノールで鎮静後，ケタミンにて導入しイソフルレン吸入麻酔維持にて行った．

術式は，左側第 10-11 肋間を開胸して胸腔内へアプローチした．開胸と同時に乳び胸水の貯留が認められたが，繊維性胸膜炎像は観察されなかった．まず，
胸管結紮術を行うために右肺後葉を湿ったガーゼで保護した上で腹側へ移動させ，大動脈と背側横隔膜周囲の術野を確保した．大動脈と奇静脈の間にコーンオイ
ルによって乳白色に視認された胸管を確認し，横隔膜面近くで慎重に確保した上で絹糸にて結紮した．次─ 39 ─

広島県獣医学会雑誌に，側復路を露出するために右肺後葉を頭側へ移動させ，後縦隔部と横隔膜周囲の術野を確保した．後縦隔
洞中央部に縦断している側復路は，胸管同様，乳白色に観察され，縦隔膜を切開し横隔神経に注意しながら，絹糸にて結紮した．

文献１）望月 学：胸腔内の液体貯留（乳び胸・膿胸），SA
Medicine，44-53，インターズー，東京（2002）

胸腔内大網固定は，右肺後葉を頭背側へ移動させ，腹側横隔膜と胸骨周囲の術野を確保した．腹側横隔膜を筋肉の走行に沿う形で切開し，大網の捻転・緊張が無い様，腹腔から誘導し，横隔膜面と壁側胸膜面に吸収糸にて固定した（写真 8）．

写真8 術中所見
左写真：左側第10-11肋間を開胸胸管（↑）と結紮部（黒絹糸）が確認される．
線維性胸膜炎は確認されなかった．
右写真：横隔膜腹側を開大網を横隔膜面と壁側胸膜面に固定した．

手術翌日から元気食欲はあり，胸腔ドレーンからは約 10ml の赤色半透明様胸水が抜去された．術後 2 日
目にはほとんど胸水が認められなくドレーンを抜去した．術後 7 日目には調子もよく，抜糸となった．

考№ 25（2010）

察

今回の症例では，胸管結紮術と胸腔内大網固定術を併用した．胸腔内大網固定術は，仮に乳び胸水が貯留したとしても大網によって吸収されるため，呼吸困難になるまでは至らない事を目的として行ったが，術後，胸水が乳びでなく少量の滲出液であったので胸管の完全結紮ができ，胸管結紮だけで充分であったものと考えられた．また，胸腔内の胸管を染めて視認しやすくするために，インドシアニングリーンによるリンパ管染色を，リンパ管造影剤した同留置部位より実施
したが，リンパ管が脆弱だったためリンパ管が破綻してしまった．幸いにも，線維性胸膜炎もなく，術前に投与したコーンオイルによってリンパ管造影後も胸管がはっきり観察されたので結紮には支障がなかった．
今後，乳び槽を確保を施したり，別ルートからの染色を行うなど工夫が必要であると思われた．また，本症例では実施しなかったが，心膜切開術や乳び槽切除術など他の手術法が報告されている5）．今後，さらなる経験を重ね，手術適期・手術法などを検討する必要があると思われた．

─ 40 ─

２）Fussum, T.W., et al. : Journal of American
Veterinary Medical Association, 201(2), 31724(1992)
３）Fussum, T.W., et al. : Journal of American Veterinary Medical Association, 198(4), 672-8(1991)
４）W i l l a u r e, C.C. a n d B r e z n o c k , E. W. M . :Pleurovenous shunting technique for treatmentof chylotorax in three dogs, Journal of American
Veterinary Medical Association,191(9), 11069(1987)
５）Theresa, W. F. 著，林 慶，林 圭井子 訳：乳び胸の治療方法 乳び胸治療における最新情報 ,Surgeon39, 46-52，インターズー，東京（2003）

腹腔鏡下腎被膜切除術を行った猫の腎周囲偽嚢胞１症例
山下

裕子

佐々木

之子

石崎

俊史

（受付：平成 21 年 12 月 21 日）

A perinephric pseudocyst in a cat after laproscopic renal capsulectomy
YUKO YAMASHITA, YUKIKO SASAKI and TOSHIFUMI ISHIZAKI
Ishizaki Animal Hospital, 3-4-12, Sanjo, Kure, Hiroshima 737-0821

SUMMARY
An 11-year-old Japanese cat was brought to our animal hospital for a chief complaintof complete anorexia. A giant tumor was palpated around the right kidney, and thepresence of a perinephric pseudocyst was confirmed by ultrasonography. Percutaneous
aspiration was continued for a while and the course was observed, but fluid accumulation
continued. Thus, laproscopic renal capsulectomy was performed. The animal recovered
rapidly, and a stable condition was being maintained as of 2 years after surgery.

要

約

11 歳の日本猫が食欲廃絶の主訴で来院．腹部触診にて右腎周囲に巨大な腫瘤を発見した
ので，超音波検査を行ったところ，腎周囲偽嚢胞が確認された．経皮的穿刺吸引をしばらく続け経過を観察したが，液体は貯留し続けたため，腹腔鏡を用いた腎被膜切除術を実施した．
術後の回復は早く，2 年が経過した現在も安定した状態を維持している．

序文

腎周囲偽嚢胞は，腎臓とそれを包む被膜の間に液体が貯留する病態である1）．比較的まれな疾患であるが，8 歳以上の雄猫に好発する．片側性あるいは両側性に生じ，一般状態に明らかな異常を認めないまま，徐々に腹部が膨隆するケースが多い2）．しかし，液体の貯留程度や腎機能不全の併発の有無により，臨床徴候は様々である．多量に液体が貯留する場合には，経皮的穿刺吸引によって減圧する事で臨床徴候の改善がみらや開窓術を必要とする3,4）．
この度，両側性に腎周囲偽嚢胞を発症した猫に遭遇し，腹腔鏡下腎被膜切除術を行った結果，安定した経過をたどっている症例について報告する．

症例

日本猫，去勢済雄，11 歳，体重 4.5kg．2 日前からの元気消失，食欲廃絶の主訴で来院．腹囲膨隆が見られ，触診にて右腎のあたりに巨大な軟性腫瘤を認めた．

れるが，症例の殆どでは再発するため，腎被膜切除術
石崎動物病院（〒 737-0821 広島県呉市三条 3-4-12）
─ 41 ─

広島県獣医学会雑誌

検査

以上の検査結果から，本症例を腎周囲偽嚢胞と診断し，以下の治療を行った．

１．血液検査
初診時の血液検査で，慢性炎症像（分葉核好中球数と単球数の増加）を示す総白血球数の増加，軽度の貧血，BUN と T-Bil の上昇がみられた（表 1）
．
表1
PCV
Hb
WBC
Band
Seg
Lym
Mon
Eos
Bas
PLT

治療および経過第 1 病日に，キシラジンとモルヒネによる鎮静下で，右腎被膜下の貯留液を 250ml 経皮的に穿刺吸引したところ，その翌日から症例は元気，食欲共に回復した．しかし再度液体は貯留し，第 19 病日にも同側より 180ml 穿刺吸引した．その後も継続して貯留し初診時の血液検査所見

24%7.6g/dl
29,300/μ l
0/μ l
23,293/μ l
3,076/μ l
2,637/μ l
293/μ l0/μ l42.1 × 104/μ l

BUN
Cre
Glu
ALT
ALP
TCho
T-Bil
Ca
Alb
TP
Na
K
Cl

№ 25（2010）

33.6mg/dl
1.0mg/dl
171mg/dl
49IU/l78IU/l168mg/dl
0.7mg/dl
9.1mg/dl
2.4g/dl
7.2g/dl
145mmol/L
3.4mmol/L
111mmol/L

続け腹囲膨隆や食欲低下を繰り返した為，外科的に腎被膜切除を行う事を決定した．さらに，術創の縮小化，
手術侵襲の低減を目的に腹腔鏡下で手術を行う事を選択した．なお，左腎については第 51 病日に一度穿刺吸引したのみで，その後貯留は認められなかった．
第 79 病日，腹腔鏡下腎被膜切除術を実施．キシラ
ジン，モルヒネで鎮静後，プロポフォール，フェンタ
ニルで麻酔導入し，イソフルレンの吸入とフェンタニ
ルの持続点滴にて麻酔を維持した．更にモルヒネによる硬膜外麻酔を実施し，術中は気腹による胸部圧迫を避けるために，人工呼吸器にて呼吸管理を行った．
まず第 1 トロッカーを臍下 2cm に，第 2 トロッカー

２．腹部超音波検査
超音波検査で，両腎の被膜下に液体貯留した嚢胞を認め，特に右腎において顕著にみられた（右腎：10× 8cm, 左腎：5 × 3cm）
（写真 1）．両腎実質の大きさは正常範囲だったが（右腎：3.2 × 2.2cm，左腎：3.5 × 2.3cm），皮質，髄質の構造はやや不明瞭だった．

を剣状突起後方に，第 3 トロッカーを恥骨前縁 2cm の位置に設置した（写真 2）．各切開創は 5mm であった．
次に腹腔鏡カメラ（stryker 社製）を第 1 トロッカー
より挿入し，腹腔内を観察したところ，右腎被膜下に多量の液体貯留を認めた（写真 3）．左腎には認められなかった．超音波メス（Jhonson&Jhonson Medical
社製の Harmonic Scalpel を使用）で被膜を切開し，

左腎
写真1

右腎
腎臓超音波検査（初診時）

３．腎被膜下貯留液の性状
右腎被膜下の貯留液を経皮的穿刺吸引し分析したところ，比重は 1.020，細菌培養陰性，小型リンパ球，赤血球，好中球，大食細胞がみられ，腫瘍細胞は認めなかった．
４．尿検査尿検査では特に異常はみられなかった（表 2）．
表2
pH
Pro
Glu
Ket
Bil
OB
Urob
P/C
採尿法

7
＋
－
－
－
－
－
0.19
膀胱穿刺

尿検査所見
比重
色調
透明度
尿円柱
細胞
虫卵
細菌
結晶

＞ 1.035
黄
やや混濁
－
－
－
－
脂肪滴

最終的に腹側 3 × 5cm の被膜を切除した．腹腔内に漏れ出た貯留液は，サクションにより回収した．
術後翌日から元気，食欲とも正常に復し，回復は非
常に速かった．以後腹囲が膨隆する事無く経過は順調であったが，肝酵素（ALT, ALP）の上昇が継続してみられた為，第 215 病日に腹腔鏡下にて肝臓バイオ
プシーを実施した（表 3）．
前手術と同様，3 か所のトロッカー設置によるアプ
ローチで行い，腹腔鏡で肝臓全体を観察したところ，内側右葉に白色病巣を認め，肝全葉より検体を各々に採取した．病理診断結果は線維症を伴う中程度の門脈
肝炎と被膜下好中球性肝炎であった．採取した肝臓，
胆汁とも細菌培養は陰性であった．同時に両腎の状態を確認したところ，右腎被膜下の一部に限局性の液体貯留を認めた為，その部位の被膜を切開した．左腎には変化は認めなかった．
表3

血中肝酵素値の推移

経過ALT
第 79 病日 （手術当日）
184 U/l
第 158 病日（術後 2.5 ヵ月）
73 U/l
第 208 病日（術後 4.5 ヵ月）
166 U/l
第 215 病日（肝バイオプシー実施日） 180 U/l─ 42 ─ALP
356 U/l
286 U/l472 U/l657 U/l

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

考察

腎周囲偽嚢胞は，原因として外傷，尿路閉塞，腎被膜におけるリンパ液循環障害などが考察されているが，真の発生機序は解っていない1,2）．本症例においても原因の特定は出来なかったが，結果的に被膜切除により，液体貯留を防ぎ長期にわたる症状の安定化が得られた．
更に，腹腔鏡を用いることにより，本症例の回復も早く，早期に退院させる事が出来た．しかし，後の腎機能不全の進行に対して治療が充分に行えず，課題が残った .
肝炎については，被膜下に炎症が存在していた事から，巨大な腎周囲偽嚢胞が消化器臓器に機械的圧迫を

写真2 術中写真1 トロッカー挿入位置（写真右側が患者の頭側、左側が尾側）

加え，胆汁の排泄障害を起こしていた可能性が考えられる．しかし術後も肝炎は存在し続け，投薬治療を試みたが困難を極め治療を断念せざるを得ず，せっかくの検査が実を結ばず残念であった．
なお，腹腔鏡は日本で 1990 年に人間の胆嚢摘出術において導入されて以来，低侵襲ゆえに痛みが低減され，日帰り手術が可能になる事などから広く認知されるようになった．近年，小動物においても不妊手術をはじめ各臓器のバイオプシーや腹腔内陰睾，膀胱結石，副腎腫瘍等の摘出術にまで適応されるようになっている5）．本症例も，2 回の手術において腹腔鏡を用いる事で明らかな痛みの軽減と術後回復を早めることができた．また，わずか 5mm の切開創から臓器全体像の把握，生検材料の採取が可能であり，同様に有効性を得た．しかし，腹腔鏡手術の欠点として，①トロッカー挿入時の臓器および血管の損傷，②気腹によ写真3る呼吸抑制，③鉗子，鋏のハンドリングの難しさ等がある．この事は術者の充分なトレーニングと，助手・麻酔医とのチームワークの確立が必須条件となる．

術中写真2 右腎被膜下に液体が貯留．
被膜を超音波メスで切除している．

今後もさらに腹腔鏡手術の経験を積み重ね，適応手術の幅を広げ，技術の進歩に努めたいと考えている．

肝炎に対し，ウルソデオキシコール酸 15mg/kg/
day の処方や食事管理を試みたが，本症例は非協力的

文で治療を受け付けず，断念せざるを得なかった．
術後 2 年経過した現在，腎被膜下の液体貯留はみられず，臨床症状は安定した経過をたどっている．しかし，尿中蛋白クレアチニン比の上昇や，血中リンの上昇，カリウムの低下がみられ，腎機能低下は徐々に進行していると思われる（表 4）．これについては，
塩酸ベナゼプリルの投与や低リン食の給餌を行ったが，次第に受け付けなくなり，治療を継続させることが出来なかった .
表4

腎パネル値の推移

尿中
BUN
Cre
Ca
P
K
経過
（mmol/L） P/C 比（mg/dl）（mg/dl）（mg/dl）（mg/dl）
第 1 病日 33.6
1.0
9.1
・
3.4
・
第 79 病日 31.6
0.9
9.2
4.5
3.1
0.38
第 240 病日 34.9
0.8
9.8
・
3.1
0.54
1.5 年後
・
・
・
・
・
0.68
2.5 年後 36.8
0.7
9.3
9.3
2.4
1.56

献

１）Jody, P.L. and Carl, A.O.：小動物臨床のための 5分 間 コ ン サ ル ト， 長 谷 川 篤 彦 監 修， 第 3 版，
1068-1069，インターズー，東京（2006）
２）吉川康一：猫の診療最前線，長谷川篤彦監修，
271-272，インターズー，東京（1999）
３）Beck, J. A., et al.: Perirenal pseudocysts in 26
cats, Australian Veterinary Journal, 78,166-171(2000).
４）Ochoa, V.B., et al.: Perinephric pseudocysts inthe cat: a retrospective study and review of theliterature, Journal of Veterinary Internal
Medicine, 13, 47-55 (1999).
５）南 三郎ら：腹腔鏡下手術 – 基本装置と手技 –，獣医麻酔外科誌，35(1)，27-35（2004）─ 43 ─

ホルター心電図により洞不全症候群と診断した
ミニチュアシュナウザーの１例
黒瀬

紀子

池本

麻弥

藤野

千賀子

伊藤

大

小田

まゆみ

（受付：平成 21 年 12 月 21 日）

Sick sinus syndrome diagnosed by Holter electrocardiography
in a miniature schnauzer
NORIKO KUROSE, AYA IKEMOTO, TIKAKO HUJINO, MASARU ITO and MAYUMI ODA
Oda Animal Hospital, 3107-6, Kamura-cho, Fukuyama 729-0112

SUMMARYA 24-hour Holter electrocardiogram was recorded in a miniature schnauzer with
bradyarrhythmia showing clinical symptoms, such as syncope, convulsion, and an
unsteady gait, to investigate the relationship between arrhythmia and clinical symptoms.
Bradyarrhythmia and the clinical symptoms were associated, and sick sinus syndrome
was definitely diagnosed. The Holter electrocardiograph used may be useful to judge theapplicability of pacemaker implantation for sick sinus syndrome.

要約

徐脈性不整脈を伴い，失神，けいれん，ふらつきなどの臨床症状を呈したミニチュアシュ
ナウザーに対して不整脈と臨床症状との関係を調べるためにホルター心電図にて 24 時間記
録解析を行った．その結果，徐脈性不整脈と臨床症状との関連性が認められ，洞不全症候群と確定診断した．また今回使用したホルター心電図は洞不全症候群においてペースメーカー
移植の適応性を判断するうえでも極めて有効であると考えられた．

序

文

少を引き起こして臨床症状が発現する疾患である1）．
障害が軽度な場合は無気力，衰弱，虚脱，ふらつきな
どの臨床症状を示すのみであるが，重度になると失神，けいれんなどを引き起こし死に至る場合もある3）．
本症例の患者であるミニチュアシュナウザーは本疾患に対して遺伝的素因があることが判明している2）．
犬のホルター心電図（長時間心電図記録法）はルー

洞不全症候群は洞結節内でのインパルス形成の障害や洞結節からの伝導障害が生じ，補助的ペースメー
カーや心房，房室結節，ヒス束，プルキンエ線維の刺激伝導系に影響するため，有効な心拍出量が保たれなくなった結果，組織灌流量の減少，特に脳灌流量の減
おだ動物病院（〒 729-0112

広島県福山市神村町 3107-6）
─ 45 ─

広島県獣医学会雑誌

チン検査法としては普及していないが，現在使われている M-X および L-R 誘導法は，犬の日常生活では安定して記録できるうえに，最近のホルター心電計は超小型化されているため小型犬でも十分装着可能である．ホルター心電計の長所は 24 時間連続的に記録し，短時間で解析ができることである．動物の心電図記録
では病院内の診察台上で保定された状態で記録される
ため興奮下で短時間の記録となるため，不整脈の検出率は低下する．そして一般の心電図記録法においては
時間的に制限さ情報記録となる．一方，ホルター心電図では，ホルター装置装着後も自由に生活できるため，24 時間にわたり行動に伴う心電図変化を観察することができる4）．
今回，不整脈と臨床症状との関連性を調べるために，ホルター心電図を使用して 24 時間の観察を行い，いくつかの知見が得られたのでその概要を報告する．

症

例

方

法

ホルター心電図（フクダ ME 動物用多機能心電計
カーディサニー D700）の装着方法は，胸部から腹部にかけて毛刈りを施し，記録安定用のパッドを使って電極を貼り付けて誘導コードを取り付けた．そして，携帯型の小さなホルター心電計で 24 時間連続して心電図を記録しコンピュータで解析，診断した．ホル
ター心電計保護のためホルタージャケットの装着をし，オーナーには行動記録カードへの記入の徹底を事
細かにお願いした（写真 1）．

解析結果
24 時間観察中の最小心拍数は 23bpm，時刻は 15
時 50 分であった（図 1）．その時刻だけでなく心停止は発生しており，24 時間観察中昼間夜間を問わず発生していた．
最 大 心 拍 数 は 183bpm， 発 生 時 刻 は 7 時 53 分 であった（図 2）
．R-R 間隔がそろっていることから上

種類：ミニチュアシュナウザー，性別：メス，年齢
10 歳前後．既往歴として他院にて徐脈性不整脈を指室性頻脈（心房性リエントリー）が形成されたと思われる．頻脈も昼夜問わず観察された．心室性期外収縮は単発が 14 回検出され（図 3），心室性頻拍は検出されなかった．心室性期外収縮発現後，2 度の A-V ブ
ロックは観察されたがその後洞調律に復帰している．

摘され 2003 年 7 月から 2005 年 9 月までイソプロテ
レノールを服用した．その後服用を中止したが当院には 2006 年 4 月に健康診断のため来院した．初診時血液検査では 10％程度の脱水を認めた以外は顕著な異常は認められなかった． 2007 年 6 月に洞性徐脈によると思われる脳虚血症状（ふらつき，けいれん，失神）が頻繁に発現したためイソプロテレノールの服用を再開したが治療効果は認められず，硫酸アトロピ
ン， グ リ コ ピ ロ レ ー ト に 対 す る 反 応 も 悪 か っ た．
2007 年 9 月に中枢神経疾患を疑い，MRI 画像診断を試みたが麻酔リスクのため断念した．2008 年 9 月 18
日 13 時 16 分よりホルター心電図を装着し 24 時間観
察した．

写真1

№ 25（2010）

上室性期外収縮は単発が 1,400 回，2 連が 1,113 回，
3 連以上が 5,246 回検出された（図 4）．以上の心電図所見から洞不全症候群の Rubenstein による病型分類Ⅲ群，に分類される徐脈頻脈症候群と診断した．
オーナーの行動記録カードによると，ふるえの発現が 24 時間中に 8 回あり，その 8 回すべてで徐脈，頻脈，期外収縮のいずれかが観察された．また，けいれん発作も 24 時間中に 6 回起こっており，この時にも除脈，頻脈または期外収縮のいずれかが観察された．

小型のホルター心電計，患者コード，ケース.（左）小型犬，超小型兼用のホルタージャケット（中央），電極の装着と固定（右）．

─ 46 ─

広島県獣医学会雑誌

図1

図3№ 25（2010）図2

徐脈発現時の心電図

心室性期外収縮発現時の心電図

図4

頻脈発現時の心電図

上室性期外収縮発現時の心電図治療および経過アシュナウザーなどの家族性発症等が関係しているといわれている．徐脈を改善する薬剤としては，副交感徐脈頻脈症候群に対して硫酸アトロピン，グリコピ
ロレートを投与したが無効であり，涙液量の減少が認められたため投与を中止した．イソプロテレノールも無効であった．ペースメーカーの埋め込みを検討したが，ホルター心電図検査の 1 ヶ月後に斃死した．

神経遮断薬の硫酸アトロピン，グリコピロレートや，
交感神経刺激薬のイソプロテレノールがあるが，無効なこともあり，吸収や代謝により効果が不確実である
ことから基本的にはペースメーカー埋め込みまでの一時的な継ぎの治療法と位置付けられている3）．本症例のように洞結節でのインパルス形成の障害と洞結節からの伝導障害両方がある場合には，心房と心室それぞれにリードが入る DDD ペースメーカーが有効であったと思われる．このようにペースメーカーが治療法として有効であると考えられるとき，どのタイプのペー

考

察

24 時間中にふらつきや痙攣などの発作は頻繁に観察された．これらの臨床症状は心電図における異常所
見と同じように昼間夜間関係なく同程度発現していスメーカーを選択するべきなのか診断する場合にもホ
ルター心電図を活用するべきである．
今回，徐脈頻脈症候群による脳虚血以外の疾患との関連性は MRI 等の画像診断を行っていないため言及

た．ホルター心電図にて，徐脈から頻脈への移行，長期間の洞停止や補充収縮，上室性期外収縮も観察された．本症例の心房内では洞結節でのインパルス形成の障害や洞結節からの伝導障害が起こっていたと推測される．これらの結果から，本症例の臨床症状であるふらつき，失神，けいれん，衰弱の原因は洞不全症候群に含まれる病態の一つで Rubenstein 分類Ⅲ型である
徐脈頻脈症候群によるものであると診断した．洞不全症候群の原因としては虚血性心疾患，サルコイドーシ
スなどの浸潤性病変，炎症性疾患，心筋症，ミニチュできない．初診時，過去の病歴を聴取し，洞性徐脈による治療に当時は反応していたことから画像診断を先送りにしていたが，麻酔リスクの少ない状態で MRI検査を行い，ホルター心電図検査が実行できていればペースメーカーの移植を早期に検討できていたかもし
れない．そのためにもホルター心電図検査は不整脈疾患に対してはとても有効な手段だと考えている．

─ 47 ─

広島県獣医学会雑誌

文献１）Janice, M.B.：The 5-minute veterinary consult,
Third edition,1000-1001, interzoo, Tokyo (2006)
２）Theresa, W.F.：スモールアニマルサージェリー，
第 3 版，77-79，インターズー，東京 (2008)３）松本英樹：失神性の不整脈疾患を考える，第 27回動物臨床医学会（2006）４）内野富弥：やさしい犬の臨床ホルター心電図診断，第 11 回日本臨床獣医学フォーラム年次大会（2009）

─ 48 ─

№ 25（2010）

心房細動における心拍数のコントロールにカルシウム拮抗薬（ジルチアゼム）が有効であった犬の２症例
荒蒔義隆１） 荒蒔すぐれ１） 千村収一２）

（受付：平成 21 年 12 月 21 日）

Two dogs in which a calcium antagonist (diltiazem) was effective
for heart rate control in atrial fibrillation
YOSHITAKA ARAMAKI1), SUGURE ARAMAKI1) and SYUUICHI CHIMURA2)
1) Bay veterinary Hospital, 5-6-7 Ujinanishi, Minami-ku, Hiroshima,
Hiroshima 734-0014, Japan
2) Chimura veterinary Hospital, 20-13 Minamikarooke, Nakahonmachi,
Iwakura, Aichi 482-0042, JapanSUMMARY
The heart rate was controlled by administering a calcium antagonist, diltiazem, to 2
dogs with atrial fibrillation. In Case 1, the combination of diltiazem and metildigoxin was
effective. In Case 2, the continuous drip infusion of diltiazem was effective for controllingthe heart rate.

要約

心房細動の 2 症例に対して，カルシウム拮抗薬であるジルチアゼムを用い，心拍数のコン
トロールを行った．症例 1 において，ジルチアゼムとメチルジゴキシンとの併用は有効であった．症例 2 において，ジルチアゼムの持続点滴により心拍数のコントロールが有効に行えた．

序

文

犬猫に発生する．特に，心房表面積の拡大を起こす拡張型心筋症や重度の僧帽弁逆流を起こす心疾患に多く発生する．心房細動を呈した症例の多くは，心拍数が早く，心房収縮が欠如するため，拡張後期の心室充満が減少する．そのため，一回拍出量と心拍出量が低下
し，心拍数の増加に伴いさらなる心機能の悪化をもたらす．また，200 回 / 分を超える心拍数が 2 〜 3 週間

心房細動の発生は，心房内で多くのリエントリー回路が非常に早く非常に無秩序な脱分極を生じていることに起因する．この結果，電気的インパルスは房室結節接合部を不規則に伝導し，不規則な心室リズムを形成する．心房細動の多くは，重篤な基礎心疾患を伴う

１）ベイ動物病院（〒 734-0014 広島市南区宇品西 5-6-7）２）千村どうぶつ病院（〒 482-0042 愛知県岩倉市中本町南加路桶 20-13）
─ 49 ─

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

続くことにより，心筋不全が発生し，重篤な心不全にされた．また，拍動間隔は不整であり最強点にてギャ
ロップ様音を聴取した．血液検査では異常は認められなかった．
2）胸部レントゲン検査

陥ることが知られている ．心電図学的において，心房細動は，早く調和のとれていない上室リズムによって P 波は消失し，不規則な心房興奮のため低電位の揺れ（細動波：f 波）が現れる．さらに QRS 群は不規則に現れるため，一定でない R-R 間隔となる．よっ1）

左心房の拡大ならびに右心房の拡大が認められた．
また，肺静脈の拡張が認められ，右側後葉領域にて肺野の不透過性亢進像が確認された．Vertebal Heart
Size（VHS）は 12.1v，心胸郭比（CTR）は 70% であり，心陰影の拡大が認められた．
（写真 1）て，治療目標としては，心拍数を下げて心室興奮頻度を減少させることが重要となる2,3）．
心拍数を下げる治療薬としては，ジゴキシン，β遮断薬およびカルシウム拮抗薬が用いられる．ジゴキシ
ンは，房室結節接合部組織の迷走神経緊張を亢進させ，不応期の増加をもたらし，組織の伝導様式を遅延させることにより心拍数を減少させる．β遮断薬は，房室結節接合部に対する交感神経刺激を減少させることにより，組織の伝導様式を遅延させる．また，カルシウム拮抗薬は，遅延カルシウムチャンネルを介して脱分極させるため，房室結節接合部組織の伝導を遅延させる2）．
心拍数を下げる第一選択薬として，ジゴキシンが用いられるが，効果の発現に数日要することや，心拍数

写真1 症例1の初診時X線写真（RL像，DV像）
左房ならびに右房領域の拡大が認められる．
肺野の不透過性亢進像が認められる．

を下げる効果が不十分である場合がある．このような症例の場合には，β遮断薬またはカルシウム拮抗薬が用いられる．β遮断薬は，陰性変時作用とともに陰性

3）超音波検査
僧帽弁前尖の逸脱により，重度の僧帽弁逆流ならびに軽度の三尖弁逆流が確認された．左心房の拡大を示す左心房 / 大動脈（LA/AO）比は 2.14 であり，著し変力作用を有する薬剤であるため，基礎心疾患を有している症例に対する使用には，心不全の悪化に注意する必要がある．このため，初期投与量は低用量から開始し，反応が見られるまで徐々に増量させる投与法を行う．一方，カルシウム拮抗薬は，強い血管拡張作用

い左心房の拡大が確認された．
4）心電図検査
心拍数 211 回 / 分．P 波は消失し，小さな基線の揺れが示す細動波（f 波）が確認された．また，不整なを有するため，急激な血圧低下に注意する必要がある
が，β遮断薬と比較して陰性変力作用は軽度である．
我々は，頻脈を伴う心房細動を呈した犬の 2 症例に対して，心拍数のコントロールを試みた．その結果，カルシウム拮抗薬を使用し，有効な心拍数のコントロールが行えたのでその概要を報告する．

症

心室リズムを示す R-R 間隔の不整が認められた．以上の所見より心房細動と診断した．
（写真 2-A）【症例 2】
1）一般検査聴診にて Levine Ⅲ / Ⅵの収縮期逆流性雑音が聴取された．また，拍動間隔は不整であり最強点にてギャ

例

ロップ様音を聴取した．血液検査では異常は認められなかった．
2）レントゲン検査
左心房の軽度拡大が確認されたが，肺野の不透過性
亢進像は認められなかった．VHS は 10.0v，CTR は【症例 1】種類はキャバリア・キングチャールズ・ス
パ ニ エ ル， 年 齢 10 歳， 性 別 雄， 未 去 勢． 体 重 は9.0kg．以前から基礎疾患として僧帽弁閉鎖不全症があり，最近になり元気食欲低下，下痢が続くとのことで来院した．
【症例 2】種類は雑種，年齢 14 歳，性別雄，未去勢．
体重は 14.2kg．元気食欲廃絶，咳き込むようになったとのことで来院した．

検査成績【症例 1】
1）一般検査聴診にて Levine Ⅳ / Ⅵの収縮期逆流性雑音が聴取─ 50 ─

55％であった．
（写真 3）
3）超音波検査
僧帽弁逆流が観察された．左心房の拡大を示す LA/
AO 比は 1.80 であり，左心房の拡大が確認された．
4）心電図検査
心拍数 255 回 / 分．頻脈であり，T 波が次の QRS群に接近していることから，f 波を判定するのは困難であるが P 波は消失していた．不整な心室リズムを示す R-R 間隔の不整が認められた．心房細動と診断した．
（写真 4-A）

広島県獣医学会雑誌

写真2

症 例1の心電図検査：A 初診時（HR211回/分），B 第12病日（HR188回/分），C 第90病日（HR146回/分）．
 P波は消失し，不規則なQRS群が出現している．また，
陰性T波と重なる部分はあるが，心房細動波（f波）が認められる．

写真3

症例2の初診時X線写真（RL像，DV像）
 軽度の左房拡大が認められ，気管が上方へ挙上している．肺野の不透過性亢進像は認められない．

№ 25（2010）

写真4

治療と経過
【症例 1】心拍数のコントロールならびに僧帽弁閉鎖不全症の治療を目的として，強心配糖体であるメチル
ジゴキシン 0.005mg/kg, BID，カルシウム拮抗薬であるジルチアゼム 1.5mg/kg, BID，ACE 阻害薬である
マレイン酸エナラプリル 0.25mg/kg, BID，利尿薬であるフロセミド 1mg/kg, BID の内服を開始した．第3 病日，食欲はやや改善，下痢も治まったが活動性はなかった．心拍数は 223 回 / 分であった．第 12 病日には元気食欲回復，活動性も出てきており，心房細動は認められるが心拍数は 188 回 / 分に減少した．その後の経過は順調で，第 90 病日では，心房細動は認め

症例2の心電図検査：A 初診時（HR255回/分），
 B ジルチアゼム持続点滴2μg/kg/min（HR225回/分），
C ジルチアゼム持続点滴3μg/kg/min（HR175回/分）．
 写真4Aは，頻脈のため，一見R-R間隔の不整に気付きにくい．リエントリーをおこした心房粗動の様式を示しているようにみえるが，房室伝導を抑制する薬剤（ジルチアゼム）導入により，不規則なR-R間隔（写真4BC）が顕著に現れ，P波も消失している．また，緩やかではあるがf波が認められる.

られるが，心拍数は 146 回 / 分と安定していた．（写真 2-B, C）【症例 2】食欲がなく内服薬を上手く飲ませられないことや，僧帽弁閉鎖不全症が中程度で肺水腫がないことから，1 日 1 回投与可能なβ遮断薬であるカルベジ
ロール（0.2mg/kg, SID）の内服を指示した．第 4 病
日，食欲不振が続き，内服困難とのことで再来院した．依然として心房細動が認められ，心拍数は 248
回 / 分であった．ただちに入院とし，ジルチアゼムの持続点滴を開始した．ジルチアゼム持続点滴を 1μg/
kg/min から段階的に増加して，3μg/kg/min の時点において，心拍数が 175 回 / 分に安定したため，翌日
─ 51 ─

広島県獣医学会雑誌まで同量にて持続点滴を行った（写真 4-B, C）．翌日には元気食欲が回復し，第 6 病日よりジルチアゼムの内服に変更した．ジルチアゼム 1.5mg/kg TID の内服に変更後も，心拍数は 182 回 / 分と安定していたた
め退院とした．

考№ 25（2010）

トロールは不十分である場合が多い3）．さらにジゴキ
シ ン の血中 濃 度が安 定し， 効果 が発 現 する まで に
5-10 日間かかることから，症例 1 のように心拍数の減少に時間を要したことが考えられた．また，心不全を呈した心房細動の症例に対して，複数の薬剤を使用し心不全の治療を同時に行うことは，前・後負荷の軽減が左房圧の軽減と肺うっ血の改善につながり，心拍察

心房細動のタイプは，原発性と二次性に分けられる．原発性心房細動は，基礎疾患が全くないか軽度の症例にみられる．原発性心房細動の犬においては，心不全に陥っていないため安静時交感神経緊張が低く，心拍数は通常 100 〜 140 回 / 分の範囲にある．一方，二次性心房細動は，心房拡大をきたす重篤な基礎心疾
患を伴って発生するため，多くは心不全を呈している．そのため，房室結節接合部組織の安静時交感神経
緊張が高く，心拍数は 180 〜 240 回 / 分の範囲となる．二次性心房細動は，心房収縮が欠如する結果，拡張後期の心室充満が減少し，一回拍出量と心拍出量が数の減少に有効であったと考えられた．
症例 2 のように，心房細動が発生している症例は，一般状態が悪い場合が多く，食欲不振により内服が困難なことがある．そのため，一日一回投与で効果を持続できるβ遮断薬の治療の指示を行ったが，その内服投与においても心拍数を減少させることが困難な状態にあった．第 4 病日より行ったジルチアゼムの持続
点滴は，投与量に応じて心拍数のコントロールができ，翌日には元気食欲が回復し，経口投与薬への導入を可能とした．その他の心拍数を減少させる静脈投与薬として，β遮断薬であるプロプラノロールや強心配糖体であるジゴキシンがあげられるが，これらは心抑制や中毒などの副作用が強いことが知られている2,5）．
症例 2 で用いたジルチアゼムの静脈投与薬は，半減低下する．さらに心拍数増加にともない，心筋酸素消費量が増加し，心筋不全ならびに心機能の悪化をもたらす．このことから，心房細動があり心拍数が早い症
例に対する第一の治療目標としては，心拍数を下げることにあると考えられている1,2）．
症例 1 は，基礎心疾患である僧帽弁閉鎖不全症の治療と心拍数の減少を目的として治療を開始した．心期が約 2 時間と短いことや6），血圧の急激な低下を微量持続点滴によって緩和することで，安全に目標とす
る心拍数へとコントロールすることが可能であった．
これらのことから，心房細動により食欲が廃絶している症例に対するジルチアゼムの持続点滴は，安全に心拍数のコントロールが行え，その後の経口投与薬への導入手段として有効であると考えられた．

拍数を下げる第一選択薬としてジゴキシンが用いられるが，ジゴキシンは効果発現までに数日要する．さらに，220 回 / 分を超える頻脈であったため，早急に心さらに，僧帽弁逆流があり左房拡大が著しい心房細動の症例は，血栓の発生率が高いとされている．この

拍数を減少させる必要があり，カルシウム拮抗薬の併用を実施した．使用したカルシウム拮抗薬は，ベンゾ
チアゼピン系のジルチアゼムを選択した．ジルチアゼ
ムは洞房結節，房室結節の抑制作用を有し，上室性頻脈の治療薬として用いられている．また，血管拡張作ため，心房細動の症例には，血栓予防として抗凝固薬
療法（ワルファリン）または抗血小板療法（アスピリン）を実施することがある．使用する抗凝固薬として，ワルファリンやアスピリンが挙げられるが，出血傾向になることや，胃潰瘍の発生などの副作用を注意
しながら行うことが大切である1）．
症例 1 に関しては，左房拡大が顕著であったこと

用と心筋収縮抑制作用も併せ持つが，副作用は比較的軽度である．その他の上室性頻脈治療薬として，フェニルアルキルアミン系のベラパミルがある．ベラパミ
ルはジルチアゼムよりも洞房結節，房室結節の抑制作用が強く，血管拡張作用は軽度であるが，心筋収縮抑制効果が強い薬剤である．このことより，心不全症状を呈している症例に対するベラパミルの使用は，心不全のさらなる悪化をきたす場合があると考える4）．
第 3 病日では，心拍数のコントロールが不十分であったが，第 12 病日以降では，心拍数は 180 回 / 分
以下に維持でき，その後も良好な経過を得ることがでから，本来なら血栓予防を行う必要がある症例であったと考え，今後の課題としていきたい．また，症例 2に関しても，左房の拡大は中程度であるが，血栓発生による突然死や，さらなる心不全悪化を軽減させる治療を追加する必要があったと考えている．

文

きた．
ジゴキシンは，房室結節接合部組織の迷走神経緊張を亢進させ，不応期の増加をもたらすため，心不全や上室頻脈性不整脈の治療として用いられる．しかし，上室性の早期脱分極や上室頻脈の抑制効果は中程度であるため，単独の使用では心房細動時の心拍数のコン─ 52 ─

献１）Hamlin, R.L.: What is the best heart rate for adog in atrial fibrillation?, Proc. Annu. Vet. Med.
Forum, 325 (1995)
２）Kittleson, M.D. and Kienle, R.D.: 小動物の心臓病学，第 1 版，566-664，メディカルサイエンス社，東京（2003）

広島県獣医学会雑誌

３）Houghton, A.R. and David,G.: Making Sense of
the ECG A hands-on guide, 38-41, Medical
Sciences International, Ltd., Tokyo (1998)
４）矢崎義雄，遠藤政夫：カルシウム拮抗薬，初版，
34-133，医薬ジャーナル社，大阪（2001）５）Gelzer, A.R., et al. : Combination therapy withdigoxin and diltiazem controls ventricular ratein chronic atrial fibrillation in dogs better thandigoxin or diltiazem monotherapy: a randomized
crossover study in 18 dogs, J. Vet. Intern. Med.,
23 (3), 499-508 (2009)６）溝辺雅一ほか：基礎と臨床，21（11），4623-4628
ライフサイエンス出版，東京（1987）

─ 53 ─

№ 25（2010）脛骨遠位粉砕骨折を自作フックプレートにて整復した猫の１症例
櫻田晃１） 長谷川孝寿２） 板本和宏３）大村斉４） 大村琴枝４） 和田安弘５）（受付：平成 21 年 12 月 25 日）

Reduction of distal tibial comminuted fracture using an original hook-plate in a cat
AKIRA SAKURADA1), TAKAHISA HASEGAWA2), KAZUHIRO ITAMOTO3)
HITOSHI OMURA4), KOTOE OMURA4) and YASUHIRO WADA5)
1) Sakurada Animal Hospital, 1-6-17-1, Senzoku, Hesaka, Higashi-ku,
Hiroshima 732-0009
2) Misasa Animal Hospital, 8-11, Misasakitamachi, nisi-ku, Hiroshima 733-0006
3) Itamoto Animal Hospital, 2-2613-2, Fukuda, Higashi-ku, Hiroshima 732-0029
4) Pal Animal Hospital, 4-13-1F, Hjiyama-cyou, Minami-ku, Hiroshima 732-0817
5) Wada Animal Hospital, 3-1-19, Doyomaru, Saijyou, Higashi-Hiroshima,
Hiroshima 739-0007

SUMMARY
We prepared an original hook-plate by processing a 2.0-mm cuttable mini-plate andused it for the treatment of a tibial comminuted fracture with no sufficient area for screw
insertion in the distal bone fragment of a cat. Stable fixation was achieved through asmall area in the distal bone fragment, which led to a favorable bone union.

要約

遠位骨片に十分なスクリュウ刺入スペースのない猫の脛骨粉砕骨折に対し，2.0mm カッタブル・ミニプレートを加工した自作フックプレートを用いて治療を行ったところ，遠位骨片のわずかなスペースで安定した固定が得られ良好な骨癒合に導けた．

１）さくらだ動物病院（〒 732-0009 広島県広島市東区戸坂千足１丁目 6-17-1）２）三篠動物病院（〒 733-0006 広島県広島市三篠北町 8-11）
３）いたもと動物病院（〒 732-0029 広島県広島市東区福田２丁目 2613-2）４）パル動物病院（〒 732-0817 広島県広島市南区比治山町 4-13）
５）わだ動物病院（〒 739-0007 広島県東広島市西条土与丸 3-1-19）
─ 55 ─

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

はじめに脛骨骨折の治療法として，髄内ピンニング法，プ
レート法，創外固定法，インターロッキングネイルなど様々な手術法が報告されている１）．多くの場合，骨折の状態と術者の経験，手術器具の有無，動物が術後管理に協力的か否かなどの諸条件から手術法は選択される．
今回我々は，遠位骨片に４皮質以上を捉えたスクリュウを入れるスペースが無く，創外固定法が適応と判断したが，性格が激しく術後管理が困難と思われた

写真２使用した．脛骨遠位のフック挿入部は既製のアングル
ガイドが無いのでフリーハンドで行った．まず，ドリ
ルビット先の滑りと折れを避けるためφ 1.2mm キル
シュナーワイヤーにて足根関節面に達しない様注意し猫の脛骨遠位粉砕骨折の症例に対し，2.0mm カッタ
ブル・ミニプレートを加工した自作フックプレートと２枚重ねプレートにて治療したので報告する．

症

加工したカッタブル・ミニプレート

例

日本猫，去勢オス，５歳齢，体重 4.5kg．外出時の輪禍により左側後肢の挙上と左側下腿部の腫脹の主訴で来院した．X 線検査で左側脛骨遠位粉砕骨折を認めた（写真１）．骨の露出は認めなかった．
術前検査として胸部レントゲン検査（正面像，側面像）と血液検査（CBC，GLU，BUN，GPT，電解質）て下穴を開け，続いてφ 1.5 〜 2.0mm ドリルビット
にて，フック刺入穴が大きくなり過ぎない様に確認しながらフックホールを作成した．また，遠位の固定が不可能な小骨片と亀裂骨折部に対しては架橋的な強度を 得 る た め ２ 枚 重 ね プ レ ー ト（Stacked cuttable
plate2））で使用した（写真 3, 4）．カッタブル・ミニ
プレートは，いずれも瑞穂医科社製の 1.5mm 厚 20穴を使用した．

を実施したが異常は認められなかった．

前後像

写真１

側面像

写真３

２枚重ねプレート治療および経過症 例 は 静 脈 確 保 後， 塩 酸 メ デ ト ミ ジ ン 50μ/kg<SC> 及び塩酸ケタミン５mg/kg<IV> にて麻酔導入し，気管チューブを挿管後，イソフルレンにて麻酔維持を行った．
脛骨へのアプローチは定法に従い脛骨内側の脛骨ラ
イン上を切皮し，伏在動・静脈と伏在神経をテフロン
テープにて保護し，脛骨を露出した．脛骨骨幹部の分節骨片はφ 1.5mm スクリュウをラグスクリュウとして使用し，整復した．遠位の粉砕部は骨片をわずかなスペースで安定させるため，2.0mm カッタブル・ミ，
ニプレートをフックプレート２）様に加工し（写真２）─ 56 ─

前後像

写真４

手術直後

側面像

広島県獣医学会雑誌

手術翌日には歩行可能であった．当初，骨癒合状態を見ながら段階的にプレート除去を行う計画であったが，癒合が良好なことと猫の性格を考慮し，術後約４ヶ月で全てのプレートを除去した（写真５）．

№ 25（2010）

考察今回，遠位骨片に４皮質以上を捉えてスクリュウを入 れ る ス ペ ー ス が 無 く， 骨 折 範 囲 が 広 い た め
SYNTHES 社のカッタブル T 字プレートも使用できない脛骨遠位粉砕骨折に対し，大型犬の極端な脛骨遠位の骨折や転子間骨切り術などで使用される 3.5mm
フックプレートをヒントに 2.0mm カッタブル・ミニ
プレートを加工し，フックプレートとして使用した．
通常のカッタブル・ミニプレートやカッタブル T 字
プレートでは対応が難しい脛骨遠位粉砕骨折に応用できたことから，2.0mm カッタブル・ミニプレートを加工してフックプレートとして用いる手技は有効な方

前後像
写真５

法であると思われた．また，術中の気付きであるが，本症例のように小骨片や亀裂骨折のため整復が難しく
アライメントの確認が難いとき，フックプレートはフック自体に骨片の支持力があるため「仮止め」が可能であり，カントゥアリングの際にスクリュウの様に
ルーズニングを気にせず，何度も脱着可能であること

側面像
プレート除去直後

治療期間中にケージレストや外固定は実施しなかったが，仮骨が確認された術後 1.5 ヶ月までは外出は禁止した．治療期間を通してインプラントの破綻（特には，解剖学的により正常に近い状態に整復する上で大きなメリットであると思われた．

フック折れ）と懸念していたプレートによる脛骨内顆
の皮膚刺激は無かった．インプラント除去後，再骨折も無かった．解剖学的にも正常になり，運動機能も良好であった．

文献１）陰 山 敏 昭：Technical Magazine for Veterinary
Surgeons 31, Inter Zoo, 21-31（2002）
２）Brinker, W.O. 編：泉沢康晴，種子島貢司訳：新・小動物骨折内固定マニュアル，〜 AO/ASIF テクニッ
ク〜 , 187-189, メディカルサイエンス社，東京（2001）

─ 57 ─

レフルノミドを用いて治療した非再生性免疫介在性溶血性貧血を呈したミニチュア・ダックスフンドの一例
大杉真由子 1,2） 田内利樹 1,2） 井上

有希 1,2）麻生暁秀 1,2）（受付：平成 21 年 12 月 25 日）

A miniature dachshund with non-regenerative immune-mediatedhemolytic anemia treated with leflunomide
MAYUKO OOSUGI1,2), TOSHIKI TANAI1,2), YUKI INOUE1,2) and TOSHIHIDE ASOU1,2)
1) Aso Animal Hospital, 330-3 Imazu-cho, Fukuyama-shi, Hiroshima 729-0111
2) Animal Care-Hospital ALOHA, 5-12-5 Hikino-cho, Fukuyama-shi, Hiroshima
721-0942

SUMMARY
Immune-mediated hemolytic anemia is a common disease in dogs. Hemolysis occurs
in the peripheral blood or bone marrow, and many cases of bone marrow hemolysis are
intractable. We treated a miniature dachshund with immune-mediated hemolytic anemiathat developed in the bone marrow with immunosuppressors, such as prednisolone,
cyclosporin, and leflunomide. Firstly, we tried prednisolone and cyclosporin, but thesewere not effective. Thus, we used an antirheumatic for humans, leflunomide, and theanemia improved. A stable value could be maintained by combination with prednisolone,rather than leflunomide alone. The dog was maintaining a generally healthy condition
without blood transfusion as of about one year and 4 months after treatment initiation.

要約

免疫介在性溶血性貧血はイヌではよくみられる疾患である．溶血は末梢血中で起こる場合
または骨髄内で起こる場合があり，骨髄内で溶血が起こる場合は難治性のことが多い．今回，骨髄内での免疫介在性溶血性貧血を呈したミニチュア・ダックスフンドにプレドニゾロン，
シクロスポリン，レフルノミドなどの免疫抑制剤を使用して治療を行った．最初に，プレドニゾロンやシクロスポリンでの治療を試みたが効果が得られなかったため，レフルノミドという人間の抗リウマチ薬を使用したところ，貧血の改善が認められた．またレフルノミド単
独よりもプレドニゾロンを併用することで，安定した数値を保てることを確認した．症例は現在，治療開始から約１年４ヶ月経つが，輸血を行うことなく一般健康状態を維持している．

１）あそう動物病院（〒 729-0111 広島県福山市今津町 330-3）２）Animal Care Hospital ALOHA（〒 721-0942 広島県福山市引野町 5-12-5）
─ 59 ─

広島県獣医学会雑誌

序№ 25（2010）

文

免疫介在性溶血性貧血（IMHA）は，近年よく見られる疾患であり，原発性と二次性に分けられる．また，再生性と非再生性にも分けることができ，再生性は末梢血中の溶血で，非再生性は，骨髄内で赤血球前駆細胞が破壊されて起こる．
今回，この非再生性免疫介在性溶血性貧血を呈した
ミニチュア・ダックスフンドにプレドニゾロンやシク
ロスポリン，人間の抗リウマチ薬であるレフルノミド
で治療を試みた．

症

図1

例

患者：4 才，去勢済みオスのミニチュア・ダックス
フンド．
治療：2008 年 3 月から 2009 年 7 月現在までの間，
プレドニゾロン，シクロスポリン，レフルノミドなどの免疫抑制剤を使用した．

治療経過
初診時：フィラリアの検査で来院し，問診で軽度食欲不振を認めた．身体所見で，歯肉を始めとする可視粘膜の軽度蒼白が見られたため，血液検査を行ったと

血液塗抹上はわずかに網状赤血球を確認し，球状赤血球は認められなかった．腹部超音波検査は異常がなかった．
表1

血液検査結果測定値
21.7%7.4g/dl
9800/μl
6900/μl
500/μl100/μl2300/μl
33.9万/μl
12mg/dl
0.8mg/dl

項目
CA
TP
ALB
GLOB
ALT
AST
ALKP
TBIL
GLU
CHOL

ンを倍量（2mg/kg）に増量した．また，確定診断のためクームス検査（外注検査：モノリス）を行った．
第 10 病日：PCV は 20％であり，クームス検査の結果は陰性であった．
第 11 病日：PCV は 19％と更に下降，治療の好反応が見られないため，骨髄検査を行なった（診断：IDEXX，日本大学 亘准教授）．検査後，プレドニゾ
ロンをさらに増量した（2.5mg/kg）．クリンダマイシンは休薬した．
第 16 病日：骨髄検査結果はまだ不明であったが，PCV が 18％に更に下降したため，シクロスポリンの併用を開始した．
第 20 病日：骨髄検査の診断結果では，正〜過形成

ころ PCV 値が 21.7％と低く，またビリルビンは 0.3と軽度な上昇が見られた（表 1）．その他の検査については，フィラリア抗原検査，mf 検査はともに陰性，

項目
HCT
HGB
WBC
NEU
EOS
BASO
L/M
PLT
BUN
CREA

治療経過

測定値
9.8mg/dl
6.6g/l
3.1g/dl
3.5mg/dl
17IU/l
8IU/l53IU/l0.3mg/dl
114mg/dl
102mg/dl

髄で，赤芽球造血の亢進がみられた．赤芽球系には骨髄での最終産物である多染性赤血球が多く見られ，骨髄での造血異常による貧血は除外された．骨髄球系や巨核球系には著変は認められなかった（写真 1，2）．

写真1

骨髄液塗沫標本（×100）

写真2

骨髄液塗沫標本（×400）以上のことから，近辺で発生が多いバベシア症を疑って，バベシア抗原検査のため採血を行い，この日からバベシア症の治療としてクリンダマイシン（12mg/kg）と，IMHA の可能性も少なからず考えられることからプレドニゾロン（1mg/kg）を併用し，治療を開始した（図 1）．
第 8 病日：PCV は大きな変化がなく，バベシア抗原検査の結果は陰性だった（外注検査：アドテック）．
バベシア症を否定，IMHA と仮診断し，プレドニゾロ
─ 60 ─

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）以上の所見から，この症例は骨髄内で起こる免疫介在性溶血性貧血，つまり非再生性溶血性貧血である，と診断された．
第 27 病日：PCV が 16％に下降したため，緊急処

代謝を抑えるのに対し，ピリミジン代謝を阻害する．
経口投与された LEF の吸収率はほぼ 100％で，速やかに代謝されて活性代謝物である A771726 に変換され，イヌでは 2.1 〜 3.0 時間で最高血中濃度に達する．

置として輸血を行った．輸血後 PCV は 36％に上昇した．
第 31 病日：シクロスポリンの併用開始から 14 日
たっても効果が見られず，輸血後も依然 PCV が下降の経路をたどったため，シクロスポリン併用の効果はないと考えた．そこで，シクロスポリンを休薬し，プ
レドニゾロンの継続に加えレフルノミドの併用を開始した．この時プレドニゾロンは 1mg/kg に減量し，レフルノミドは 3mg/kg で開始した．その後，レフルノ

そしてこの A771726 は，ピリミジン生合成に関与するジヒドロオロト酸脱水素酵素（DHODH）の活性阻害により，DNA・RNA 合成に必要なピリミジンヌク
レオチドの生合成を抑制して，この経路からの供給に依存している T および B 活性化リンパ球の増殖と機能を抑制，サイトカイン受容体・成長因子受容体に関ミド併用開始から約 2 週間を過ぎた第 50 病日頃から，緩やかに PCV の上昇が認められた（表 1）．
第 63 病日：PCV が 30％前後と安定が続いていた
ので，プレドニゾロンを休薬し，レフルノミドのみ継続した．するとその後 PCV は緩やかに下降し，第 98
病日の PCV は 23％だった．そこで，プレドニゾロン
を 0.7mg/kg で併用再開すると，PCV は 3 週間後頃
から再び緩やかに上昇し，第 148 病日には PCV 35％

0.0129% と極めて低いが，日本における発生率は海外の 100 倍強の約 1.32% との報告があり，人種特異性があると考えられている1,2）．イヌにおいてはウエとなった．
第 162 病日：状態が安定していたので，オーナーの希望もあり，レフルノミドの投薬回数を減らすため

スティで 2 例報告がある2）が，レフルノミドの使用例

1 日 1 回投与から隔日投与に変更した．
第 260 病日：PCV が 40％前後で維持出来ていたため，再びレフルノミド単独投与にしてみると，10日後頃から，前回と同様に PCV の下降がみられた．
第 336 病日：PCV は 32％であり，プレドニゾロ

自体が少ないため，発生率や犬種特異性についてはまンの併用を 1mg/kg で再開したが反応が見られず，
392 病日からは 2mg/kg で併用すると，その後緩やかに上昇し，469 病日には PCV は 30％まで上昇した．

考連するチロシンキナーゼ活性を抑制して，免疫調節作用を発現する．
A771726 は血漿蛋白との結合率が 98％以上（ヒト・イヌ）と非常に高く，また胆汁から排泄されたA771726 は腸肝循環により腸管から再吸収される．
このため，ヒトにおける血漿半減期は約 2 週間と非常に長いのが LEF の大きな特徴だが，イヌにおいては 23.5 〜 25.2 時間である1）．
レフルノミドの副作用については，ヒトでは重篤な報 告 例 と し て 間 質 性 肺 炎 が あ る． そ の 発 生 率 は察

非再生性溶血性貧血を起こしたミニチュア・ダック
スフンドにプレドニゾロン，シクロスポリンを使用したところ反応が見られなかったが，レフルノミドを使用すると PCV の上昇を認めた．また，レフルノミド
単独での維持は難しく，プレドニゾロンとの併用で安定した状態を保つことができた．
このことから，今回の症例においては，レフルノミ
ドが非再生性免疫介在性溶血性貧血に有効であったと考えた．
また，治療反応が悪い場合，他の免疫抑制剤を併用することで良い結果が得られた．
レフルノミド（LEF）は，ヒトにおいてイソキサ
ゾール系の疾患修飾性抗リウマチ薬（DMARD）として使用される．代謝拮抗薬に分類されるが，関節リウマチの治療に使われているメトトレキサート（MTX）
が葉酸代謝を，アザチオプリン，ミゾリビンがプリン─ 61 ─

だ不明であり，懸念される部分である．そのため，使用前には飼い主に対して十分な説明と理解が必要であり，使用開始直後や薬用量を増量した際には，定期的に胸部 X 線検査を行うなど特に注意が必要である．
今回の症例では，そのような重篤な副作用は認められなかったが，レフルノミド使用開始後約 90 日頃から脱毛が見られた．脱毛部位は，ひげ，鼻鏡部，胸部から始まり，徐々に全身へと拡がった．レフルノミドの投与量を 3mg/kg １日 1 回から 3mg/kg 隔日投与にしたところ脱毛が減り，発毛し，再び 3mg/kg １日 1回にすると脱毛が顕著に見られたことから，ヒトでの副作用として脱毛は極めてまれであるが，イヌにおいての副作用の一つとして可能性が示唆される．
レフルノミドは，前述したように，犬に対しての使用報告が極端に少ないため，効果や，その他の免疫疾患への使用についても詳細はまだ不明である．今回の症例においても，プレドニゾロンやシクロスポリンの投与量を更に増量したり，アザチオプリンなどのその他の免疫抑制剤を試験的に使用したりしてみても良かったかもしれないというのが反省点である．
ただ今回の症例においては，明らかにレフルノミドが有効であったことから，難治性の非再生性免疫介在
性溶血性貧血に対して，レフルノミドは治療薬の選択肢の一つになりうると考えられた．また，その他の免疫介在性疾患への効果の可能性も示唆されるので，機会があれば検討していきたい．

広島県獣医学会雑誌

謝

辞

診断や治療にご協力，助言して頂いた日本大学の亘敏弘准教授と東京大学の大野耕一教授に陳謝致しま
す．

文

献

１）新 井 賢：Leflunomide: レ フ ル ノ ミ ド , Part1,
NJK, Mar, 18-20(2008)２）新井 賢：Leflunomide: レフルノミド , Part5, NJK,
Feb, 6-10(2009)３）Gregory C.R., et al.: Transplant Proc., 30, 41434148(1998)
４）大野耕一，宇野元子：レフルノミド投与を行った
難知性免疫介在性血小板減少症の犬の 1 例，日獣会誌，56(10), 669-72(2003)

─ 62 ─

№ 25（2010）犬の気管支内異物の１症例
谷浦督規１） 谷浦

倉之１） 谷浦

直美１） 上岡尚民２）（受付：平成 21 年 4 月 1 日）

A dog with an intrabronchial foreign body
TOKUNORI TANIURA1), KURAYUKI TANIURA1), NAOMI TANIURA1) and NAOTAMI UEOKA2)
1) Taniura Animal Hospital, 1-3-30, Kairouen, Saeki-ku, Hiroshima 731-5135
2) Ueoka Animal Hospital, 2-18-11, Yoshijimahigashi, Naka-ku, Hiroshima 730-0822

SUMMARYA 7-month-old Great Pyrenees was brought to an animal hospital for a chief complaintof cough, and severe pneumonia was diagnosed by chest X-ray radiography, but the dog
developed dyspnea the following day and was brought under oxygen inhalation to our
hospital. The animal was in recumbency and cyanosis at the time of arrival. Since theowner said that one eye of a stuffed toy was missing, we performed chest CT withoutanesthesia to confirm the pneumonia and search for a suspected intratracheal foreign
body. The presence of an intrabronchial foreign body was confirmed by CT, and its
shape and anatomical position were accurately identified employing 3DCT and virtual
endoscopy. Tracheal intubation was performed under general anesthesia, and the foreign
body was removed using an endoscope.
The combination of CT, which accurately identified the location, and endoscopy,
advantageous for treatment in addition to observation, maximized the therapeutic effectwhile being less invasive.

要

約

生後７カ月のグレート・ピレニーズが，他院にて発咳を主訴に来院した．胸部レントゲン
検査で重度の肺炎と診断され治療したが，翌日呼吸困難となり酸素吸入下で当院へ搬入された．来院時横臥，チアノーゼ状態であった．確定ではないが縫いぐるみの目の片方がないと言われるが，一般状態が重篤のため，肺炎状態の確認と気管内異物検索目的で，無麻酔下での胸部 CT 検査を実施した．CT 検査で気管支内異物を確認後，３DCT と仮想内視鏡により，正確な異物形態と解剖学的位置が確定したので，全身麻酔下にて気管送管を実施し，内視鏡検査による異物の確認と回収処置を実施した．
正確な部位を把握できる CT 検査と，観察だけでなく治療ができることがメリットである内視鏡検査，処置の組み合わせは患者にとって低侵襲でありながら最大の治療効果があったと考えられた．
１）谷浦動物病院（〒 731-5135 広島市佐伯区海老園 1-3-30）
２）うえおか動物病院（〒 730-0822 広島市中区吉島東 2-18-11）
─ 63 ─

広島県獣医学会雑誌

序№ 25（2010）

文

気管支内異物の症例は存在診断が重要である．X 線
造影検査が適応ではないため，X 線透過性異物の場合は気管に誤飲している確証が無い限り診断方法が限定される .
内視鏡検査は，麻酔下で複数に分枝していく気管支全域を存在診断目的だけに実施するにはスコープ直径の限界，検査手技が難しく，長時間の検査は肺内の炎症のリスクが増えると思われる .
一方，胸部 CT 検査では，肺野の状況と気管・気管支内の存在診断が可能である上，内視鏡の進入不可能
な細気管支まで観察が可能である．また通常の 3DCTに加え仮想内視鏡を利用することで治療前のシミュ
レーションも可能である1).

写真1 胸部CR像
右後葉に重度の肺炎像が確認された．



今回我々は，無麻酔下 CT 検査により気管内異物の存在と位置関係を把握後，内視鏡検査で実像の確認と治療を行い，低侵襲で良好な結果が得られたので報告
する .

症

例
写真2

症例は，グレート・ピレニーズ犬，メス，7 カ月齢，
他院に発咳を主訴に来院し，胸部レントゲン検査で重度肺炎の診断で治療を行った．しかし，翌日肺炎の悪化により呼吸困難となり酸素吸入下で当院へ搬入された.

CTアキシャル像と白枠部の拡大像
気管支内に異物が確認された．

当院来院時横臥，チアノーゼ状態であった．確定ではないが縫いぐるみの目の片方が見当たらないとの稟告があった .

検査手順と治療経過
一般状態が重篤のため胸部 X 線検査後（写真 1），
肺炎状態の確認と気管内異物検索目的で，無麻酔下での胸部 CT 検査を実施した .

写真3

CT像 右：サジタル像 左：コロナル像
 A：前葉気管支 B：中葉気管支 C：後葉気管支 D：副葉気管支
 異物は中葉気管と後葉気管支の中間に存在する．

CT 検査で気管支内異物を確認後（写真 2，3，4），
診断支援装置であるネットワーク型ワークステーショ
ンにて 3DCT（写真 5）と仮想内視鏡（写真 6）を作成し，術前計画により正確な異物の形態と解剖学的位
置，回収できる空間と場所を確定した .
全身麻酔下にて気管内送管を行い，気管チューブの中にスコープを挿入し，内視鏡検査による異物の確認（写真 7）と回収処置を実施した（写真 8）.
処置後の経過は良好で（写真 9），呼吸状態は安定
し，3 日目に紹介先の病院に転院した .

 
 
 

─ 64 ─

写真4

異物の大きさと存在位置
異物：16mm×12mm
気管分岐部からの距離：21mm
右気管支の直径：13mm以上

広島県獣医学会雑誌

写真5 3DCT像
気管内に泡沫状の血痰の充満が想定される．3DCTでは，画像処理によりその奥に異物を確認することができる．

写真6 仮想内視鏡像
CT画像から仮想内視鏡で術前・処置前シュミレーションを行う
ことで，実際に内視鏡検査・処置を行うイメージをたてることが可能である.

写真7 内視鏡像
左：気管内は泡沫状の血痰で充満していた．
右：治療計画で確認した同部位に同形状の異物が確認された．

図9№ 25（2010）

写真8 内視鏡像
バスケット鉗子を用いて，異物の回収を行った．

処置後3日目のX線像
 肺 炎 像 は 急 速 に 改 善 していた.

結果および考察同時挿入する方法ではリークが生じ，低酸素と過換気状態になると考えられた．また泡沫性血痰が増加し観察が困難となり異物の移動が致命傷になると判断し，
気管チューブのカフでリークを無くし，気管チューブ
内からの内視鏡挿入，観察，処置を実施した .
3DCT および仮想内視鏡による，上部・下部内視鏡検
査では観察部位が狭く，麻酔維持と検査手技が困難とされる気管・気管支内視鏡検査であっても，十分な治療計画により短時間に異物の確認，そして安全な処置が可能であった .
X 線透過性異物の気管内誤飲のケースでは，存在診
断と質的診断，そして治療前計画が可能な CT 検査と，観察と処置治療ができる内視鏡検査の組み合わせは，

内視鏡単独検査では左右どちらの気管支内に存在するものか，またその上気管支が複数分岐するため異物の存在診断は困難と思われた .
無麻酔下の CT 検査からの仮想内視鏡で，異物の場
所，気管支と異物との空間的位置関係を確認することにより，処置具の選定が処置前にできた．また異物の大きさと立体的形状などの完全な存在診断ができたた
め泡沫性の気管，気管支腔内の異物をスコープ先端やフラッシングで奥に押し込むことなく摘出処置が可能であった．治療計画で確認した部位と状態は，内視鏡所見と同様であった．重度肺炎を伴い，気管チューブ
挿管後も SPO2 も 70 台であったため，酸素吸入や吸低侵襲でありながら最大の治療効果があると考えられた.

入麻酔のために細い気管チューブや尿道カテーテルを─ 65 ─

広島県獣医学会雑誌

文献１）畦元将吾，石風呂 完：ワークステーション完全
制 覇，90-92， 日 本 放 射 線 技 師 会 出 版 会， 東 京（2008）

─ 66 ─

№ 25（2010）

肺葉切除を実施した先天性肺葉性肺気腫のジャックラッセルテリア犬の 1 治験例瀬戸田正弘 1） 谷浦

督規 2） 杉山晶彦 3） 日笠喜朗 4）

（受付：平成 21 年 7 月 22 日）

Lobectomy of the lung in a Jack Russell Terrier with congenital lobar emphysema
MASAHIRO SETODA1), TOKUNORI TANIURA2), AKIHIRO SUGIYAMA3) and YOSHIAKI HIKASA4)
1) Setoda Animal Hospital, Yakeyama-chuuou 3-20-7, Kure, Hiroshima 737-0935
2) Taniura Animal Hospital, Kairouen 1-3-30, Saeki-ku, Hirosima 731-5135
3) Laboratory of Laboratory Veterinary Medicine, Koyama-minami 4-101,
Tottori-shi, Tottori 680-8553
4) Laboratory of Veterinary Internal Medicine, Koyama-minami 4-101, Tottorishi, Tottori 680-8553

SUMMARY
A male Jack Russell Terrier at 37 days of age and weighing 1.7 kg was brought toour animal hospital for dyspnea, and emphysema was diagnosed by X-ray and CT.
Symptomatic treatment was performed under oxygen inhalation in an ICU unit because
the respiratory and nutritional conditions were poor. Total right lobectomy was performedon the 36th hospital day when the body weight increased to 2.7 kg. The outcome wasfavorable, and the general condition is relatively favorable as of more than one year after
surgery.

要

約

生後 37 日齢で体重 1.7kg 雄のジャックラッセルテリアが呼吸困難で来院した．レントゲ
ン検査および CT 検査の結果，肺気腫と診断した．呼吸状態，栄養状態が優れないため，
ICU ユニットの中で酸素吸入を行いながら対症療法を行い，体重が 2.7kg に発育した時点の36 病日目に右肺葉全摘出手術を実施した．予後は良好で，術後 1 年以上経過した後も一般状態は比較的良好である．

１）せとだ動物病院（〒 737-0935 広島県呉市焼山中央 3-20-7）２）谷浦動物病院（〒 731-5135 広島県広島市佐伯区海老園 1-3-30）
３）鳥取大学農学部獣医臨床検査学教室（〒 680-8553 鳥取県鳥取市湖山町南 4-101）
４）鳥取大学農学部獣医内科学教室（〒 680-8553 鳥取県鳥取市湖山町南 4-101）
─ 67 ─

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

はじめに
肺葉性肺気腫は，先天性あるいは後天性にも発生するが，犬での発生は極めて稀である．我が国においては 22 ヵ 月 齢 の 雄 の ポ メ ラ ニ ア ン（Matsumoto ら，2003 年），10 歳齢の雌のシーズー（Orima ら，1992年）などの報告1,2）がある．筆者らはジャックラッセ
ルテリアの幼犬において呼吸様式が急速に悪化する症例に遭遇した．胸部単純レントゲン検査や CT 検査所
見より，右肺葉に生じた肺葉性肺気腫と診断され，外科治療により改善したので報告する．筆者らの知る限

写真2り，本症例が幼犬および本品種では初めての治験例で
ある．

症

成

例

績

手 術 は イ ソ フ ル レ ン 吸 入 麻 酔 下 で Time-Cycle・Volume-Limit の 人 工 呼 吸 器（ACE-3000・ACOMA社）を用いて行った．開胸は左下横臥位にて右第 6・
7 肋骨間で実施した．開胸直後に露出した右肺は泡の症例はジャックラッセルテリア，雄，37 日齢，体重 1.7kg で，2 日前から呼気時間の延長する努力性呼吸，初診当日朝から急に呼吸困難（呼気性呼吸困難）

ように柔らかく弾力性に乏しく，優しく圧迫しても圧迫痕が残るような状態であった．肺葉は，右気管支分な状態になり来院した．
胸部レントゲン写真にて右肺葉の拡張と透過性の亢進が確認され（写真 1），CT 画像から右肺葉の拡張に岐部において気管支と動・静脈を一括して二重結紮した後，切除した．右肺葉切除を行う事により，圧迫萎
縮していた左肺が拡張した．この際，術中 EtCO2 はよる左肺葉の圧迫萎縮と心臓の左方変位を確認（写真2）した事から肺気腫と診断した．ICU（フジヒサビック / アトムアメニティー 1）内で酸素濃縮器（O2クリーン 5・TERUMO 社）を用いて 95%O2/4L/min
で酸素吸入を行いながら対症療法を続ける事で呼吸状態の改善を認めた．しかし，ICU を退出すると 12 時

右肺葉摘出直後に急上昇したが，右肺のさらなる拡張を少しでも防ぐ目的で気道内圧 15 cm/H2O で行ってい た 調 節 呼 吸 を 25cm/H2O に 加 圧 す る こ と で，
EtCO2 の上昇は速やかに正常値に回復した（図 1）．
以後は，定法に従い右胸腔内にドレインを設置後，閉胸した．術後の麻酔覚醒はスムーズであり，術後 2間程度で呼吸困難に陥ることから，臨床症状の改善のためには気腫肺の切除が必要であると判断された．体が小さく，直ちに手術をするのはリスクが高いと判断し，まず ICU 内で飼育管理を継続し，36 病日（生後73 日目）に体重が 2.7kg まで成長した時点で他の兄弟犬と同等の栄養状態に回復したので，右肺の摘出手術を実施した．

 部CT画像：右肺の拡張により，左肺を圧迫し拡張不胸全を起こし，心臓の左方変位が認められた．右肺の血管走行は肺葉全域にわたり認められた．

日間継続して ICU 内で酸素吸入を行い，術後管理を行った．術後 2 日目の胸部レントゲン撮影で，左肺の拡張を確認し，一般状態が良好であったので胸腔内ドレインを抜管し，ICU を退出させた．術後 7 日目には退院した．術後 14 日目の抜糸時の胸部レントゲ
ン写真には特に異常は認められず，呼吸状態も良好であった．術後 146 日目（生後 219 日）に身体検査のため再来院した．胸部レントゲン写真では左肺の拡張が認められ，血液一般検査において異常は認められず（図 1），PaO2 を含む血液ガス所見においても動・静脈血ともに正常範囲内にあった（図 2）．現在，若干の運動不耐性がみられるが，日常生活を過ごすことには何ら問題はなく，良好に経過している．
摘出肺では病理組織学的に，①気管支・細気管支・肺胞の著明な拡張（写真 3），②気管支軟骨の無形成（写真 3），③気管支・細気管支における未分化上皮細写真1胞の存在および当該上皮細胞の配列異常（写真 4），④気管支平滑筋線維の走行異常（写真 4），⑤気管支動脈の走行異常（写真 5）が認められたことから，先天性肺葉性肺気腫と診断された．

 診時胸部レントゲン写真：DV像にて右葉の透過性の
初亢進と，拡張による心臓の左方へのシフト．RR像にて拡張した左肺が胸骨と心尖部の間に割り込むことにより心臓が背側シフトしたので，気胸様の間隙が認められた．

─ 68 ─

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

まとめ
人および犬における先天性肺葉性肺気腫の病理発生機序については，気管支軟骨の異形成，低形成，無形成の関与が示唆されているが，詳細は不明である．肺気腫の確定診断は，組織学的に肺繊維化の所見を認め写真3

 葉全域にわたり肺胞，細気管支および気管支（矢印）
肺の拡張が認められた．
 気管支腺や平滑筋線維層を有しているにも関わらず，気管支軟骨を有さない気管支が散在していた（矢印）．

ず，呼吸細気管支壁または肺胞壁の破壊と拡張との所見が病理形態的に必要である．
今回の症例は，生後 37 日より呼吸状態が悪化し，
生後 73 日目に ICU 内で体力が蓄えられた時点において右肺葉切除術を実施したところ，術後経過は良好
で，以後，呼吸状態の改善が認められた．本例では，肺葉切除時に EtCO2 濃度が一過性に上昇したが，この タ イ ミ ン グ を 目 安 に し て Time-Cycle・VolumeLimit で調節呼吸を行い，気腫肺の容積が過剰に大きくならないように換気量をコントロールすることで残された肺によるガス交換をスムーズに行うことが出来た．調節呼吸時の換気量のコントロールは，肺葉摘出までは気腫肺の容積が過剰に大きくならないように
ETCO2・PaO2 が正常値範囲内に収まる範囲内に低容量で行い，肺葉摘出後は換気量を増加させ気道内圧を25cmH2O に設定することで気腫肺の容積を必要以上に拡張することを防ぐことが出来たと思われ，本法は術中の操作をスムーズにするために有用な手法と思われる．今回の症例のように生後間もない早期に先天性肺気腫を発見できた場合において，症例が手術侵襲に耐えうる状態まで成長した時点で手術を実施すること

写真4 い ずれの細気管支も未分化上皮細胞で構成されていた（矢印）．また，
当該上皮細胞は配列異常を呈していた（矢印）．
 細気管支および気管支の平滑筋線維は走行異常を呈していた（矢頭）．

が術後管理の面でも重要であると思われる．今回の症例ではダブルルーメンカテーテルまたはユニベント
チューブと気管支ブロッカーなどを用いて分離肺換気の手技を行わなかったが，それらを利用すれば術前に肺換気能力の検査が可能と思われ，今後の課題としたい．
追跡調査にて，生後 1 年以上経過後も異常がなく日常生活を過ごしているとの報告を受けた．しかしながら呼吸器の予備能力が健康犬と比べ，劣っている可能性があることから，呼吸器感染症などを起こさない
ように，定期的なワクチン接種などを実施することを指導した．
本症例では，生後早期に発症したことからも発生段階における異常が原因と思われることから，今後における再発のリスクは少ないものと予想する．

文
写真5

気管支動脈の走行異常が認められた．

献１）Orima. H., et al.:A Case of Lobar Emphysema
in a Dog. J. Vet. Med. Sci., 54 (4), 797-982 (1992)
２）Matumoto, H., et al.: Surgical Correction ofCongenital Lobar Emphysema in a Dog. J. Vet.
Med. Sci., 66 (2), 217-219 (2004)
─ 69 ─

広島県における犬の紅斑熱群リケッチアの浸潤状況調査について
森中重雄 1） 勝部由起子 1） 松田

政明 1）

正岡

亮太 1） 菊池

和子 1） 川西秀則 1）修 1） 長谷川俊治 1） 高尾

信一 2）

松本
島津

幸枝 2） 柳本慎治 3） 池庄司

剛 4）

（受付：平成 21 年 12 月 8 日）

Prevalence of spotted fever group rickettsia in dogs in Hiroshima Prefecture
SHIGEO MORINAKA1), YUKIKO KATUBE1), MASAAKI MATUDA1)RYUTA MASAOKA1), KAZUKO KIKUCHI1), HIDENORI KAWANISHI1)OSAMU MATSUMOTO1), TOSHIHARU HASEGAWA1), SHINICHI TAKAO2)
YUKIE SHIMAZU2), SHINJI YANAGIMOTO3) and TSUYOSI IKESYOJI4)
1) Hiroshima Prefectural Animal Management and Welfare Center, 8915-2,
Minamigata, Hongo-cho, Mihara, Hiroshima 729-0413
2) Center for Health and Environment, Hiroshima Prefectural Technology
Research Institute, 1-6-29, Minami-machi, Minami-ku, Hiroshima 734-0007
3) Hiroshima Prefectural Western Center for Public Health Kure Branch
Office, 1-3-25, Nishicyuo, Kure, Hiroshima 737-0811
4) Hiroshima Prefectural Eastern Center for Public Health, 26-12, Kohamacyo, Onomichi, Hiroshima 722-0002

SUMMARY
To investigate the prevalence of spotted fever group rickettsia in dogs in Hiroshima
Prefecture, an anti-spotted fever group rickettsia antibody test was performed using
sera collected from 200 dogs housed in the Hiroshima Prefectural Animal Care Center
between September 2008 and May 2009. Thirty-seven animals (18.5%) were antibodypositive, and antibody-positive animals were present in 11 (8 cities and 3 towns) of
18 municipalities (10 cities and 8 towns), suggesting that ticks carrying spotted fevergroup rickettsia are widely distributed in the prefecture. In domestic dogs, 9 (33.3%) of
27 animals were antibody-positive, showing that domestic dogs may be parasitized byticks carrying spotted fever group rickettsia during a walk. It is necessary to call for
prevention against ticks and promote education concerning animal-derived infections
including spotted fever group rickettsiosis to prevent dog-mediated human infection.
1）広島県動物愛護センター（〒 729-0413 広島県三原市本郷町南方 8915-2）
2）広島県立総合技術研究所保健環境センター（〒 734-0007 広島市南区皆実町 1-6-29）
3）広島県西部保健所呉支所（〒 737-0811 広島県呉市西中央一丁目 3-25）
4）広島県東部保健所（〒 722-0002 広島県尾道市古浜町 26-12）
─ 71 ─

広島県獣医学会雑誌

要№ 25（2010）

約広島県の犬における紅斑熱群リケッチアの浸潤状況を把握するため，平成 20 年 9 月から
平成 21 年 5 月の間に広島県動物愛護センターに収容された犬 200 頭から採取した血清を用い，紅斑熱群リケッチアに対する抗体調査を実施した．その結果，37 頭（18.5％）が抗体陽性であり，18 市町（10 市 8 町）中 11 市町（8 市 3 町）で抗体陽性個体が認められ，紅斑熱群リケッチアを保有するマダニは，県内広範囲に分布していると考えられた．また，飼い犬では 27 頭中 9 頭（33.3％）が抗体陽性であったことから，飼い犬も散歩中に紅斑熱群
リケッチアを保有するマダニの寄生を受ける可能性があり，マダニに対する予防喚起を行う
と共に，犬を介した人への感染予防のため，紅斑熱群リケッチア感染症を含む動物由来感染症についての知識の普及啓発を図っていく必要がある．

序文

Rickettsia japonica を病原体とする日本紅斑熱は，マダニを媒介とする動物由来感染症であり，人において高熱，発疹，刺し口の硬結を主な症状とする 1）．昭和 59 年に徳島県で初めて患者が確認されて以来，西日本を中心に患者が確認されていたが，近年では関東，東北地方でも患者が確認されている 1-2）．広島県
では平成 11 年に初めて尾道市で患者が確認されて以降 1），県東部で毎年数名の患者が確認されている 3）．
本症の犬における感染については，平成 16 年に徳島県で入院中の日本紅斑熱患者の飼い犬が急死し，当該犬からリケッチア抗原が検出されたことから，飼い犬を介した日本紅斑熱の感染の可能性が示唆されている 4）．
また，山口県では飼い犬の 21.1％が紅斑熱群リケッ
チア抗体陽性であったとの報告 5） もあり，犬を介した人への感染予防が重要と考えられるが，広島県では犬における紅斑熱群リケッチアの浸潤状況は把握されていない．
今回我々は，広島県内の犬における紅斑熱群リケッ

２．対象検体の区分
1）前期検体前期検体としては，調査期間の前期に採血した，
比較的マダニの寄生が多いと思われる野犬，放浪犬
100 頭の血清を対象とした．
2）後期検体前期検査の結果を受け，野犬と放浪犬だけでな
く，所有権放棄された飼い犬も含め，残りの 100頭から採取した血清を後期検体とした．
３．検査方法
犬の血清を検査材料とし，抗原には日本紅斑熱リケッチアの YH 株を用いて，間接蛍光抗体法（以下 IFA という）により抗体価を測定した．抗体陽性基準は，IgG 抗体価が 40 倍以上のものを抗体陽性とした．なお，IFA による抗体測定法では，リケッチア種間の交差反応が認められることから，抗体陽性は紅斑熱群リケッチア抗体陽性とした．

結果

１．紅斑熱群リケッチアに対する抗体保有状況
対象とした全 200 頭中 37 頭（18.5％）が抗体陽性であり（図 1），それらの抗体価は 40 倍から 320 倍

チアの浸潤状況を把握し，人への感染予防の一助とするため，広島県内（広島市，呉市，福山市を除く）から収容された犬から採取した血清を材料として，紅斑
熱群リケッチアに対する抗体調査を実施し，若干の知見が得られたので報告する．

までの範囲であった．
性 別 で は， 雄 は 99 頭 中 22 頭（22.2 ％），雌では101 頭中 15 頭（14.9％）が抗体陽性であった．
年齢別の抗体保有状況を図 2 に示した．抗体の保有は，年齢の高い個体だけでなく，若い個体にも認め
られた．

調査方法
１．検査対象
平成 20 年 9 月から平成 21 年 5 月に広島県動物愛護センターに収容された犬 200 頭（内訳は野犬 141
頭，放浪犬 32 頭，飼い犬 27 頭）を対象とした．なお，首輪はあるが，飼い主不明として引き取った犬を放浪犬と分類した．
─ 72 ─

広島県獣医学会雑誌

図１№ 25（2010）

図４

広島県動物愛護センターに収容された犬 200 頭における紅斑熱群リケッチアに対する抗体保有状況

後期検体（野犬・放浪犬・飼い犬）の生育環境別抗体陽性状況

４．生育環境別にみた抗体保有状況（全検体）
調査対象とした全 200 頭について，それらの生育環境別に抗体保有状況を調べた．その結果，野犬では141 頭 中 22 頭（15.6％）， 放 浪 犬 32 頭 中 6 頭（18.8 ％）
， 飼 い 犬 27 頭 中 9 頭（33.3 ％） で あ っ た（図 5）．

図２

収容犬（200頭）の年齢別紅斑熱群
リケッチア抗体保有状況

２．前期検体（野犬，放浪犬）における抗体保有状況
比較的マダニの寄生の可能性が高いと思われた野犬，放浪犬の 100 頭について，それらの抗体保有状
況 を 調 査 し た（ 図 3）
． そ の 結 果，100 頭 中 18 頭
（18.0％）が抗体陽性であり，その内訳は野犬 85 頭
中 15 頭（17.6％），放浪犬 15 頭中 3 頭（20.0％）が

図５

５．地域別結果
市町別では，今回検査を行った 18 市町（10 市 8町）中 11 市町（8 市 3 町）で抗体陽性個体が認められた（表 1）．また，市町別検査結果の状況から，県内広範囲に抗体陽性個体が認められた（図 6）．

抗体陽性であった．

図3

全検体（野犬・放浪犬・飼い犬）の生育環境別抗体陽性状況

前期検体（野犬・放浪犬）の生育環境別抗体陽性状況

３．後期検体（野犬，放浪犬，飼い犬）における抗体保有状況
前期検体での検査結果を受け，野犬，放浪犬に加えて所有権放棄された飼い犬も検査対象に加えた 100
頭から採血した血清について抗体保有状況を調べた．
その結果，後期検体 100 頭中 19 頭が抗体陽性であり，内訳は野犬 56 頭中 7 頭（12.5％），放浪犬 17 頭中 3
頭（17.6％），飼い犬 27 頭中 9 頭（33.3％）が抗体陽性であった（図 4）．

─ 73 ─

図６

抗体陽性犬の地域分布状況（広島市，呉市，福山市を除く）

広島県獣医学会雑誌
表１

市町
廿日市市

野

育

環

境

犬

放浪犬

飼い犬

合計

＊

—

1/3

1/5

0/2

安芸高田市

0/3

3/6

3/4

6/13

安芸太田町

1/1

0/3

1/1

2/5

北広島町

0/1

—

—

0/1

海田町

1/2

—

—

1/2

熊野町

—

—

0/1

0/1

坂

町

—

—

0/1

0/1

江田島市

0/10

—

0/1

0/11

東広島市

6/48

0/6

2/2

8/56

大崎上島町

0/2

—

—

0/2

竹原市

3/8

0/1

—

3/9

三原市

2/15

0/2

0/1

2/18

尾道市

5/31

0/2

0/2

5/35

神石高原町

0/1

—

0/1

0/2

府中市

2/6

0/2

0/3

2/11

世羅町

1/8

1/2

1/2

3/12

三次市

0/2

0/3

0/1

0/6

庄原市

1/1

2/5

1/4

4/10

22/141

6/32

9/27

37/200計

日本紅斑熱をはじめ，紅斑熱群リケッチア感染症については，新しい動物由来感染症であり，一般に知られていない．従って，紅斑熱群リケッチア感染症を含む動物由来感染症についての知識の普及啓発が必要と市町別にみた紅斑熱群リケッチアの抗体を保有する犬の頭数
飼考えている．そのために，①動物取扱責任者研修において，今回の調査結果を踏まえた動物由来感染症の講習を行い，顧客への説明時に動物由来感染症についての説明を十分に行うよう指導する．②犬の譲渡希望者を対象としている飼育講習会で，動物由来感染症の講
習項目に今回の調査結果の内容も含め，内容の充実に努める．③広島県動物愛護センターのホームページでも，動物由来感染症について，定期的に更新を行い，最新の情報提供に努める．などの活動を計画してい
る．

文

献

１）馬原文彦：日本紅斑熱の発見と臨床的疫学研究 ,モダンメディア，54(2)，29-41(2007)
２）国立感染症研究所：特集 つつが虫病・日本紅斑2006 〜 2009，病 原 微 生 物 検 出 情 報 月報，31(5),120-122(2010)
３）Takao,S., et al.:The First Reported Case ofJapanese Spotted Fever in Hiroshima Prefecture,
Japan, Jpn. J. Infect. Dis., 53(5), 216-217(2000)
４）島津幸枝ほか：広島県における日本紅斑熱患者の＊：陽性頭数 / 検査頭数考№ 25（2010）

発生状況，病原微生物検出情報月報，31(5), 131132(2010)５）船津 格ほか：山口県における犬の紅斑熱群リケッ

察

広島県での日本紅斑熱患者は，主に県東部地域に集中して確認されている 4）．しかし，今回の犬を用いた調査結果から，県東部地域だけでなく，県内の広範囲な地域で抗体陽性個体が認められたことから，紅斑熱

チア抗体保有状況調査，Yamaguchi J.Vet.Med.，33，31-34(2006)

群リケッチアを保有するマダニは広島県内に広く分布している可能性が考えられた．
日本紅斑熱患者のほとんどは，比較的マダニとの接触の機会が多い農作業者や森林作業者であるとの報告がある 1）．しかし，今回の調査結果をみると，飼い犬においても抗体陽性率は 33.3％と高率であった．その中には，住宅街で飼育されていた犬においても紅斑
熱群リケッチア抗体陽性が確認されている．このことは，上記の比較的マダニとの接触の多い者に限らず，犬の飼育者においても，飼い犬が野山や草むらの散歩中にマダニの寄生を受け，それを介して感染する可能性があることを示唆している．そのため，飼い犬や飼育者に対しては，①犬の散歩時には，ノーリードの禁止及び放し飼いの禁止を徹底し，犬へのマダニ寄生を予防する．②犬の外部寄生マダニを駆除するために定期的に薬剤を投与する．③犬の生活環境の清潔保持のために，常に犬舎周囲を清掃しマダニの生活環を断ち切る．などの予防対策が重要であると思われる．
─ 74 ─

広島市で分離された腸管出血性大腸菌
O157：H7 の分子疫学的解析
末永朱美 1） 田中寛子 1） 蔵田

和正 2） 花木

陽子 1）

毛利

好江 1） 野田衛 3） 石村

勝之 1） 池田

義文 1）

笠間

良雄 1） 吉岡嘉暁 1）

（受付：平成 21 年 12 月 20 日）

Molecular-epidemiological Analysis of Enterohemorrhagic
Escherichia coli O157:H7 Isolated in Hiroshima CityAKEMI SUENAGA1), HIROKO TANAKA1), KAZUMASA KURATA2), YOKO HANAKI1),YOSHIE MORI1), MAMORU NODA3), KATSUYUKI ISHIMURA1), YOSHIFUMI IKEDA1),YOSHIO KASAMA1) and YOSHIAKE YOSHIOKA1)
1) Hiroshima City Institute of Public Health, 4-1-2, Shoko-center, Nishi-ku,
Hiroshima 733-8650
2) Engineer Section, Facilities Division, Environment Directorate, Hiroshima
City, 1-6-34, Kokutaiji, Naka-ku, Hiroshima 730-8586
3) National Institute of Health Sciences, 1-18-1, Kamiyoga, Setagaya-ku,
Tokyo 158-8501

SUMMARY
A total of 28 enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) O157:H7 strains isolated
from 15 cases in Hiroshima City between April 2008 and May 2009 were molecularepidemiologically analyzed by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE), IS-printing system
and multiple-locus variable-number tandem repeat analysis (MLVA). Twenty-eight
isolates were subtyped into 12 distinct code types and the isolates derived from the samecase showed an identical code type by IS-printing system. These isolates were clusteredby PFGE and MLVA. By setting an appropriate criterion, depending on the method, forclustering based on the genetic similarity, all isolates from the same case were respectively
classified into the identical type. The three molecular typing methods seemed to havealmost the same ability to discriminate the isolates studied. All isolates from the sameoutbreak or domestic cases were classified into the distinct same type, demonstrating thatthey were epidemiologically related each other. Some sporadic isolates were also classified
into the same type, suggesting that they were related each other although there was not
any epidemiological information.

1）広島市衛生研究所（〒 733-8650 広島市西区商工センター 4 丁目 1-2）
2）広島市環境局施設部施設課（〒 730-8586 広島市中区国泰寺町 1 丁目 6-34）
3）国立医薬品食品衛生研究所（〒 158-8501 東京都世田谷区上用賀 1 丁目 18-1）
─ 75 ─

広島県獣医学会雑誌

要№ 25（2010）

約2008 〜 2009 年に広島市で分離された腸管出血性大腸菌 O157：H7，15 事例 28 株を，パル ス フ ィ ー ル ド ゲ ル 電 気 泳 動 法（PFGE），IS-printing 法，Multiple-Locus Variablenumber tandem repeat Analysis（MLVA）の 3 法で分子疫学的解析を行い，比較検討した．
IS-printing 法では 15 事例 28 株を 12 のコード型に分けることができ，同一事例の株は全て同一コード型に分類された．PFGE 法，MLVA 法によるクラスタ解析において，類似度を適切に設定することで同一事例の株は同一型として分けられ，3 法でほぼ一致した型別を行うことができた．これにより集団事例や家族間感染事例では一致した型となり疫学的関連の裏付けとなった．一方，散発事例で同一型となった株もあり，疫学的関連性を示すデータは認められないが，共通の感染源を持つ可能性が示唆された．

序

文

表１
番
号

供試分離株の由来及び毒素型

発生地区

事例
区分

年
齢

性
別

1 2008/5/20

安佐北散発01 43

2 2008/5/26

佐伯区

集団

4

3 2008/5/29

佐伯区

集団

1

M 保育園児 VT1,2

4

-

佐伯区

集団

32

M

指導員

VT1,2

5

-

佐伯区

集団

57

M

会社員

VT1,2

6

-

佐伯区

集団

58

F

会社員

VT1,2

7

2008/6/1

佐伯区

集団

1

M 保育園児 VT1,2

ルスネットとしてデータベース化が進んでいる．しかし，その解析能や迅速性などにおいて問題点が指摘さ

8

2008/6/2

佐伯区

集団

1

M 保育園児 VT1,2

9

-

佐伯区

集団

28

F

れている 1） ため，PFGE 法に代わる新たな分子疫学
的 解 析 手 法 と し て IS-printing 法 や Multiple-Locus
Variable-number tandem repeats Analysis（MLVA）

10 2008/6/7

佐伯区

集団

3

M 保育園児 VT1,2

11 2008/7/23

南

区

散発02

2

M 保育園児12 2008/7/22

西区

近年，食品流通の国際化，大規模化，広域化に伴い原材料汚染した食品による腸管出血性大腸菌による広域散発性食中毒事例が報告されている 1）．また，腸管出血性大腸菌感染症は感染症法に基づきその発生が届けられているが，感染経路として食品の喫食が推定されるものも少なくない．これらの集団発生事例の感染源の特定や散発事例間の疫学的関連性を調べるための分子疫学的解析法としてパルスフィールドゲル電気泳動法（PFGE 法）が全国で広く実施されており，パが開発されその有用性の評価が行われている 1-4）．しかし，この 3 法について，菌株間の分解能，簡便性など，検査法としての有用性を同時に比較した報告は発症日

１．供試菌株
供試菌株は 2008 年 4 月から 2009 年 3 月に広島市域で分離された腸管出血性大腸菌 O157：H7，15 事
例，28 株を用いた．分離菌株の VT 型別結果と由来を表 1 に示す．

VT2

保育園児 VT1,2

会社員

VT1,2

VT2

会社員

VT2

M

会社員

VT1,2

14 2008/7/26 安佐南区 散発05

5

M 幼稚園児 VT1,2

中

3

M 幼稚園児 VT1,2

区

散発06

M

高校生

VT2

17

-

安佐南区 家族01 17

M

高校生

VT2

18

-

安佐南区 家族01 42

M

会社員

VT2

19 2008/8/26

西

区

散発07

6

M

小学生

VT2

20 2008/8/24

東

区

家族02

8

M

小学生

VT1,2

21 2008/8/26

東

区

家族02

4

F

幼稚園児 VT1,2

22 2008/9/17

東区

散発08 60

F

無

職

VT1,2

23 2008/9/18 安佐北区 家族03

0

F

無

職

VT2

安佐北区 家族03

3

M

無

職

VT2

散発09 34

M

会社員

VT2

-

25 2008/12/5

西26 2009/3/3

安佐北区 散発10

7

M

小学生

VT1,2

27 2009/3/11 安佐南区 家族04

2

M 保育園児

VT2

会社員

VT2

28

-

-：無症状保菌者

─ 76 ─

看護師

F

M

24

材料と方法

F

散発03 46

16 2008/7/28 安佐南区 家族01 15

月に広島市で分離された腸管出血性大腸菌 O157：
H7，28 株について 3 法を用いて分子疫学的に解析し，その解析結果と疫学的背景との関連性について考察を
加えた．

毒素型

13 2008/7/25 安佐南区 散発04 29

15 2008/7/26

少ない．一方，これらの分子疫学的解析手法の適応の目的は，各事例が疫学的に関連するか否かを明らかにしていくことにあるため，それらの解析手法で分類された結果が疫学的関連性を反映するかを検証することが重要である．そこで，2008 年 4 月から 2009 年 3

職業区

安佐南区 家族04 24

M広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

２．PFGE 解析
PFGE は，国立感染症研究所の示した PFGE New
Protocol に準じて，古田ら 5）の方法に従った．PFGE

ラ ム は Fingerprinting Ⅱ（Bio-Rad） で ク ラ ス タ ー
解析し作成した．
４．IS-printing 解析
IS-printing system®（東洋紡）を用い，添付のプ
ロトコールに従い実施した．MLVA 用試料と同様に作成したテンプレートを用い，1st set，2nd set の 2つの反応系で PCR を行った．PCR 反応液は各 set の

画像は画像解析ソフト Fingerprinting Ⅱ（Bio-Rad）
を 用 い， 類 似 係 数 Dice， デ ン ド ロ グ ラ ム タ イ プ
UPGMA，トレランス設定は最適化 0％，トレランス
1.0％でクラスター解析を行い，デンドログラムを作成した．
３．MLVA 解析
MLVA は，Hyytia-Trees ら 6） のプライマーを使用
し，古田ら 5） の方法に従った．使用したプライマーと蛍光標識の種類は表 2 に示した．試料は，1 コロ
ニーを 50μl の 25mMNaOH 水溶液に懸濁し，95℃
で 5 分間加熱後，4μl の 1MTris-HCl（pH7.5）を加えて中和し，12,000rpm で 5 分間遠心した上清をテンプレートとした．解析により得られた推定分子量から繰り返し回数（以下，RN）を計算した．測定可能な PCR 産物が得られない場合は，配列が確認できない”null allele”として RN は 0 とした．デンドログ
表２
PCR増幅系

primer No.
K-3

K-9
Mix1
K-25

K-34

K-17

K-19
Mix2
K-36

K-37

Mix3

K-10

Primer Mix 5μl，2 × IS-P Master Mix25μl，DDW19μl，DNA テンプレート 1μl で全 50μl として調製し，PCR 条件は 96℃ 2 分加熱した後，96℃，
20 秒，64℃，30 秒，68℃，1 分のサイクルを 20 回繰り返した後 4℃に保った．PCR 反応後は Nusieve
GTG Agarose と Seakem GTG Agarose を 2：1 の割合で混ぜた 3％アガロースゲルで約 70 分間泳動した．
結果は，プライマーごとに増幅ありを「1」，なしを「0」と判定し，各セットとも増幅サイズの大きいバ
ンドから順に 3 バンドごとに割り当てた「1」「2」「4」の係数を乗じた数値を加算し，1st，2nd の順に並べて 12 桁で表わして IS コード型とした．

MLVA 解析に用いた PCR 増幅系とプライマーの塩基配列
Dye

ForwardHEX

ReverseForwardGAA CAA CCT AAA ACC CGC CTC GCC ATC G
6-FAM

ReverseForward

TET

6-FAM

HEX

TET

TET

ReverseGG CGT CCT TCA TCG GCC TGT CCG TTA AAC
GCC GCT GAA AGC CCA CAC CAT GC

6-FAM

ReverseForwardGC AGT GAT CAT TAT TAG CAC CGC TTT CTG GAT GTT C
GGG GCA GGG AAT AAG GCC ACC TGT TAA GC

ReverseForwardGC AGT TGC TCG GTT TTA ACA TTG CAG TGA TGAGGA AAT GGT TTA CAT GAG TTT GAC GAT GGC GAT C

ReverseForward

GA CAA GGT TCT GGC GTG TTA CCA ACG G
GTT ACA ACT CAC CTG CGA ATT TTT TAA GTC CC

ReverseForwardGC CGG AGG AGG GTG ATG AGC GGT TAT ATT TAG TG
GCG CTG AAA AGA CAT TCT CTG TTT GGT TTA CAC GAC

ReverseForwardGC GCT GGT TTA GCC ATC GCC TTC TTC C
GTG TCA GGT GAG CTA CAG CCC GCT TAC GCT C

ReverseForwardprimer (5'-3')GG CGG TAA GGA CAA CGG GGT GTT TGA ATT G

GC CGC CCC TTA CAT TAC GCG GAC ATT CGCA GGA GAA CAA CAA AAC AGA CAG TAA TCA GAG CAG CHEXTT CAT TTC TAC AGT CTC AGT ATT TTC CTT TAGAT GCC GGA TGA AAA TGA TAA GTT

─ 77 ─

広島県獣医学会雑誌成績

№ 25（2010）

２．MLVA 解析結果
MLVA による RN を基にクラスタ解析した結果，

１．PFGE 解析結果
供試 28 株は 14 の PFGE 型に分類された（図 1）．
集団事例から分離された 9 株は類似度 100％で全て同一クラスタに分類された．家族間感染事例 01 〜 04の 4 例は同一事例間の類似度は 100％で，それぞれ同一クラスタに分類された．散発事例由来株の多くはそれぞれ異なる PFGE 型に分類されたが，散発事例 07と 10 は類似度 100％で同一クラスタに分類され，散発事例 04 と 05，散発事例 03 と 09 は類似度 95％以上の高い相同性を示した．

供試 28 株は 20 の MLVA 型に分類された（図 2）．集
団事例 9 株中 6 株は全ての RN が同じであった．他の 3 株中 2 株は K36 において RN が 1 違い，もう 1
株は K10 において RN が 2 違いの結果であった（表3）．集団事例 9 株間の類似度は最小で 86.1％であった．家族間感染事例 01 の 3 株は 2 か所で RN が 1 違
いで，3 株間の類似度は 81.3％であった．家族間感染事例 04 は全ての RN が同じで類似度 100％，家族間感染事例 02，03 は 1 か所で RN が 1 違いで類似度
86％以上のクラスタを形成した．多くの散発事例はそれぞれ異なる MLVA 型に分類されたが，散発事例
04 と 05 は 1 か所で，07 と 10，03 と 09 は 2 か所でRN が異なる程度の家族間感染事例と同等の類似度で，高い相同性を示した（図 2，表 3）．

図１

図２

PFGE によるクラスタ解析結果

MLVA によるクラスタ解析結果

─ 78 ─

表３

分離株の MLVA 解析による繰り返し回数

事例
区分

VT
型

株
K25 K3 K34 K9 K17 K19 K36 K37 K10
数

散発01

2

1

5

散発02

2

1

散発03

2

1

散発09

2

14

9

13

5

6

5

7

4

5

5

15

1

5

散発04 1,2

1

散発05 1,2

36

7

0

5

8

6

5

0

9

13

7

6

4

7

30

14

9

13

7

6

4

7

29

3

10

10

11

8

6

6

6

29

1

3

10

10

11

8

6

6

6

28

散発06 1,2

1

5

12

9

11

12

6

11

7

27

散発07 1,2

1

5

9

10

11

8

6

6

6

29

散発10 1,2

1

5

9

10

12

8

6

6

6

40

散発08 1,2

1

5

9

10

11

7

6

6

6

46

集

団 1,2

6

6

12

9

15

7

7

8

7

30

集

団 1,2

2

6

12

9

15

7

7

7

7

30

集

団 1,2

1

6

12

9

15

7

7

8

7

32

家族01

2

1

4

10

7

0

3

6

4

10

50

家族01

2

1

4

10

7

0

3

6

4

11

50

家族01

2

1

3

10

7

0

3

6

4

10

50

家族02

2

1

4

8

8

14

5

7

9

6

14

家族02

2

1

5

8

8

14

5

7

9

6

14

家族03

2

1

4

7

7

18

3

5

9

12

7

家族03

2

1

4

7

7

17

3

5

9

12

7

家族04

2

2

4

17

7

12

4

10

4

7

27

広島県獣医学会雑誌

３．IS-printing 解析結果
供試 28 株は 12 の IS コード型に分けられた（表4）．集団事例および家族間感染事例では，同一事例
から分離された菌株は全て同一 IS コード型に分類された．散発事例 03 と 09，04 と 05，07 と 10 の 3 組

一方，散発事例においても IS-printing 法で同一のIS コード型に分類される事例が 3 組認められた（表4）．これらは PFGE 解析，MLVA 解析でも同一または類似度の高いクラスタを形成したことから，非常に近縁な株であることが示唆された 2,3,5） が，収集され6 株はそれぞれ同一 IS コード型であった．
表4
事

た情報から共通の感染源を見出すことはできなかった．
今回，VT1，2 産生株と VT2 産生株を混在して解析を行ったが、毒素型が異なる株間で同一または類似度の高いクラスタを形成することはなかった。また毒

事例別の毒素型および IS コード型

例

VT型

ISコード型集団事例

1,2117177601747

家族間事例012

215455605243

家族間事例022311557710413

家族間事例032115057303443

家族間事例042305457711242

散発事例01

2517557611653

散発事例022012057214443

散発事例03・09

2317557611653

散発事例04・05

1,2317577611757

散発事例061,2717557611657

散発事例07・10

1,2317575211757

散発事例081,2317577611557

素型によりある一定のパターンを示すなどの型別できるような傾向も見られなかった .
今後は時期的，地域的に近い事例で PFGE 解析，
MLVA 解析で同一または類似度の高いクラスタとなり，同一の IS コード型とされた事例に関してはより詳しい情報を収集し，感染源の追及や感染予防に役立てていきたい．

文献１）寺嶋 淳（研究代表者）：広域における食品由来
感染症を迅速に探知するために必要な情報に関する研究 平成 20 年度総括・平成 18 〜 20 年度総

４．3 法の比較
集団事例および家族間感染事例 01 〜 04 で分離された株は，PFGE 解析，MLVA 解析において同一または類似度の高いクラスタを形成し，IS-printing 法
では同一の IS コード型であった．また IS-printing
法で同一 IS コード型に分類された散発事例 03 と 09，
04 と 05，07 と 10 の株は，PFGE 解析，MLVA 解析
においても集団事例，家族間感染事例と同等以上の類似度を示した．しかし，これらの株間の疫学的関連性は確認できなかった．

考№ 25（2010）

合研究報告書，18-26（2009）２）Tadasuke O., et al.:Development of a Multiplex
PCR-Based Rapid Typing Method forEnterohemorrhagic Escherichia coli O157
Strains, J. Clin. Microbiol., 49(9)., 2888-2894(2009)
３）Yingxin Pei, et al.:Molecular Characterizationof Enterohemorrhagic Escherichia coli
O157:H7 Isolates Dispersed across Japan byPulsed Field Gel Electrophoresis and MultipleLocus Variable-Number Tandem Repeat
Analysis, Jpn. J. Infect. Dis., 61,58-64(2008)
４）Keys, C. et al.:Highly diverse variable number
tandem repeat loci in the E. coli O157:H7 andO55:H7 genomes for high-resolution moleculartyping, J. Appl. Microbiol., 98 (4), 928-40 (2005)
５）古田喜美ほか：2004 年中国・四国地区で分離された腸管出血性大腸菌 O157:H7 の分子疫学的解
析，広島県獣医学会雑誌，No.21，55-60(2006)６）Hyytia-Trees, E., et al.:Second generation
subtyping:a proposed PulseNet protocol for
multiple-locus variable-number tandem repeat
analysis of Shigatoxin-producing Escherichia
coli O157(STEC O157), Foodborne Pathog.Dis.,察

集 団 事 例 9 株， 家 族 間 感 染 事 例 4 例 9 株 は ISprinting 法を用いると，同一事例株は同一 IS コード
型として分類され，それぞれを異なる事例として区別することができた．また PFGE 解析でもそれぞれ類似度 100％のクラスタを形成した．MLVA 解析では完全に RN が一致する株は半数程度であったが，RNが異なる場合でも 2 か所以下で，クラスタ解析での類似度が 80％以上の相同性の高い結果であった．このことから，今回の同一事例の株は同一感染源由来であることが考えられた 2,4,5）．また，MLVA 解析での類似度が 80％以上である場合，それらの株間は疫学的に関連する可能性を考慮すべきであることが示唆された．今後も同様の解析を継続し，PFGE 解析，MLVA
解析，IS-printing 法による分類と疫学的背景との関連性をより明らかにしていく必要がある．

3, 118-131(2006)

─ 79 ─

広島県内で分離された腸管出血性大腸菌の疫学的検討（1999 〜 2008 年）
大原

祥子

竹田

義弘

桑山

勝

妹尾

正登

（受付：平成 21 年１月８日）

Epidemiological analysis of enterohemorrhagic Escherichia coli isolates in
Hiroshima Prefecture from 1999 to 2008
SACHIKO OOHARA, YOSHIHIRO TAKEDA, MASARU KUWAYAMA and MASATO SENO
Center for Health and Environment, Hiroshima Prefectural Technology
Research Institute, 1-6-29, Minami-machi, Minami-ku, Hiroshima 734-0007

SUMMARY
We evaluated annual changes in the number of patients infected withenterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) in 1,008 patients reported in Hiroshima
Prefecture (except Hiroshima City) from 1999 to 2008. In addition, the serotypes andverotoxin (VT) types of 711 EHEC strains sent to our center were analyzed, and drug
sensitivity was evaluated in 240 strains isolated after 2006. The annual number ofreported patients with EHEC in the prefecture was the highest in 1999, decreased
thereafter, but began to increase again in 2004, and has reached about a million in recent
years. Reports of infected patients were observed throughout the year, but their number
was the highest in August. Ten serotypes were detected, and O157 (55.0%), O26 (35.4%),
and O111 (4.4%) strains accounted for 94.8% of all strains. The VT type frequently
observed was VT1+VT2 (60.6%) for O157, VT1 (94.4%) for O26, and VT1+VT2 (61.3%) for
O111. VT2 was not observed for O26 or O111. Drug sensitivity tests showed resistancein 31.9% of O157 strains (most frequently single drug resistance to ampicillin: 54.2%), in
72.2% of O26 strains (most frequently double drug resistance to ampicillin-Augmentin:
46.2%), and in all O111 strains (most frequently triple drug resistance to streptomycin,
tetracycline, and kanamycin). Resistance to fosfomycin, widely used in Japan, wasobserved in only one 026 strain, suggesting the usefulness of this drug for treating
EHEC.

広島県立総合技術研究所保健環境センター（〒 734-0007 広島市南区皆実町 1-6-29）
─ 81 ─

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

要約

広島県内（広島市を除く）で 1999 年から 2008 年に届出のあった腸管出血性大腸菌感染者 1,008 人の発生動向を調査した．また，当センターに搬入された腸管出血性大腸菌 711 株の血清型，ベロ毒素型について検査すると共に，2006 年以降に分離された 240 株について
は薬剤感受性についても検討した．県内の腸管出血性大腸菌感染者の届出数は 1999 年が最も多く，その後減少したが，2004 年から再び増加傾向を示し，最近は 100 人台で推移している．感染者は年間を通じて届出られたが，全体では 8 月が最も多かった．10 種類の血清型が検出され，そのうち O157（55.0％），O26（35.4％），O111（4.4％）の 3 血清型が全体 の 94.8 ％ を 占 め た． ベ ロ 毒 素 型 は，O157 は VT1+VT2 型（60.6 ％），O26 は VT1 型（94.4％），O111 は VT1+VT2 型（61.3％）が多かった．また，O26 と O111 には VT2 型は認められなかった．薬剤感受性試験では，O157 は 31.9％が耐性でアンピシリン単剤耐性型（54.2％），O26 は 72.2％が耐性でアンピシリン・オーグメンチンの 2 剤耐性型（46.2％），
O111 は全て耐性でストレプトマイシン・テトラサイクリン・カナマイシンの 3 剤耐性型
（50.0％）が最も多かった．わが国で多く使用されているホスホマイシンは O26 に耐性株が1 株認められたのみであり，腸管出血性大腸菌感染症の治療に有効であることが示唆された．

序文2）供試菌株
供試菌株には EHEC 感染者の糞便から分離されたもののうち，当センターに搬入された 711 株（1
患者 1 菌株）を DHL 寒天培地（ニッスイ）で再分
離し，純培養した後，定法 7） に従って大腸菌と同

腸 管 出 血 性 大 腸 菌 感 染 症（Enterohemorrhagic
Escherichia coli：EHEC）は，腹痛，頻回の水様下痢，出血性腸炎などを主症状とし 1），重症化すると溶血 性 尿 毒 症 症 候 群（Hemolytic uremic syndrome：

定したものを使用した．
２．血清型別試験
血清型別は，病原大腸菌免疫血清「生研」（デンカ生研）を用いて行った．
３．VT 型別試験
VT の 型 別 は，RPLA 法 お よ び PCR 法 で 行 っ た．
RPLA 法は，VTEC-RPLA「生研」（デンカ生研）を用いて実施した．PCR 法のプライマーには，特殊細菌検出用 Primer Set EVT-1/2 と EVS-1/2（TaKaRa）
を用いて VT1 および VT2 遺伝子を検出した．なお，

HUS）を引き起こす．また，感染力も強く，きわめて少ない菌量で感染し 4），ヒトからヒトへの二次感染も発生する．そのため現在，赤痢菌やコレラ菌と同様に，感染症法に基づく全数把握の 3 類感染症とし
2, 3）て感染者全ての届出が義務付けられている．
広 島 県 で は，1996 年 に 大 阪 府 堺 市 で 大 規 模 なO157 集団感染事例 5）が発生した同じ年の 6 月に，県北の小学校で 185 人の O157 集団感染事例が発生した 6）．その後も毎年県内では，集団または散発事例が発生しており，その感染防止対策が求められている．

PCR 法の反応条件はプライマーの使用説明書に従った．
４．薬剤感受性試験
薬剤感受性試験には，供試菌株のうち 2006 年以降に分離された 240 株を用いた．

そのため今回著者らは，県内の EHEC 感染症の特徴を把握し感染防止対策に資するため，1999 年から2008 年に県内で届出られた EHEC 感染者の発生動向を調査した．また，当センターに搬入された EHEC
株の血清型，ベロ毒素型（Vero toxin：VT）を検査すると共に，2006 年以降に分離された菌株について
は薬剤感受性について検討したので報告する．

対象および方法
１．対 象
1）EHEC 感染者の発生動向調査
1999 年 か ら 2008 年 に， 県 内（ 広 島 市 を 除 く ）で届出のあった感染者 1,008 人について調査した．

また，NCCLS 法に準拠したセンシ・ディスク（BD）
を用い，1 濃度ディスク法により実施した．薬剤にはアンピシリン（ABPC），ストレプトマイシン（SM），
テ ト ラ サ イ ク リ ン（TC），シプロフロキサシン（CPFX）， カ ナ マ イ シ ン（KM），セフォタキシム（CTX）， ク ロ ラ ム フ ェ ニ コ ー ル（CP），ST 合 剤（ST）
，オーグメンチン（AMPC/CVA），ゲンタマイ
シン（GM），ナリジクス酸（NA）およびホスホマイ
シン（FOM）の 12 種類を使用した．

─ 82 ─

広島県獣医学会雑誌

成№ 25（2010）績

２．血清型の年次別推移
供試した 711 株の血清型を年次別に表 2 に示した．
10 種類の血清型が検出され，そのうち O157 が全体の 55.0％（391 株）を占めた．次いで O26（35.4％：

１．EHEC 感染者の年次別・月別推移
EHEC 感染者の年次別・月別届出数を表 1 に示した．年次別では，感染者の届出数が最も多かったのは1999 年の 182 人であった．次いで 2000 年（132 人），

252 株），O111（4.4％：31 株）が多く，この 3 血清型が全体の 94.8％を占めた．その他の血清型では
O145（3.5 ％：25 株 ），O103（0.8 ％：6 株 ），O128（0.3 ％：2 株 ），O91，O119，O121 お よ び O124
（0.1％：1 株）が認められた．
年次別では，主要 3 血清型のうち，O157 は毎年検出され，1999 年と 2002 年を除き最も多く，40.7％（2000 年：37/91 株）〜 85.2％（2003 年：23/27 株）を占めた．O26 も毎年検出され，1999 年と 2002 年

2006 年（118 人），2008 年（113 人）および 2007 年（102 人）が多かった．また，届出数は 1999 年以降，2003 年の 52 人まで減少したが，2004 年から再び増加傾向を示し，最近は毎年 100 人以上の届出がされている．さらに，1999 年から 2002 年までの届出数には，集団感染事例による感染者が多く含まれていたが，最近はほとんどが散発事例によるものであった．
月別では，5 月から 10 月に届出数が多く，全体では 8 月に感染のピークがみられた．その一方，2006

は O157 の検出数よりも多かった．O111 は検出されない年もみられ，2000 年に最も多く検出された．また，1999 年から 2002 年に検出された O26 と O111
は，集団感染事例によるものが多かった．

年の 12 月，2007 年の 11 月には，8 月のピーク時と同様か，またはそれ以上の届出がみられた．
表１

EHEC 感染者の年次別・月別届出数
月

年

合計

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

1999

－

－

－

1

4

109＊

23＊

12＊

9

7

16＊

1

182＊

2000

－

－

1

1

9

20＊

23

38＊

12

12

5

11

132＊

2001

6

2

6

2

8

10

15＊

26

8

5

－

5

93＊

2002

1

1

－

6

5＊

9＊

7

9＊

5

5

2

5

55＊

2003

－

－

1

－

3

1

10

9

3

20

3

2

52

2004

－

－

1

3

14

7

9

33

10

12

2

2

93

2005

－

－

－

－

8

5

14

14

10

12

－

5

68

2006

－

4

1

1

13

10

14

22

18

11

2

22

118

2007

3

14

1

1

5

9

12

18

7

6

24

2

102

2008

1

2

－

1

7

11

17

9

1

7

113

62

1008＊

合計

11

23

11

＊

16

23
＊

76

191

34
＊

150

＊

215

99

99

55

＊

＊集団感染患者数を含む

表２
血清
型

EHEC 血清型の年次別検出数
年

1999

2000

2001

2002

2003

2004

2005

2006

2007

2008

合計

O157

22（8）

37（5）

41

14

23

33

36

72

54

59

391
（13）

O26

140（135）

28（17）

9
（9）

23（8）

4

14

16

11

2

5

252（169）

O111－

24（10）

1

1

－

－

1

－

－

4

31
（10）

O145

－

－

1

－

－

－

－

1

23

－

25

O103

－

1

－

－

－

－

－

1

1

3

6

O128

－

－

－

－

－

－

－

－

－

2

2

O91

－

－

－

－

－

－

－

－

－

1

1

O119

－

－

－

－

－

－

－

－

1

－

1

O121

－

－

－

－

－

1

－

－

－

－

1

O124

－

1

－

－

－

－

－

－

－

－

1

52（9）

38（8）

27

48

53

85

81

74

合計
（

162（143）

91（32））集団感染事例数

─ 83 ─

711（192）

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

３．VT 型の年次別推移
供試菌株の主要 3 血清型とその他の血清型の VT 型
を年次別に表 3 に示した．O157 は VT1 と VT2 の両毒素産生型（VT1+VT2）が 60.6％（237 株）を占めた． 次 い で VT2 単 独 産 生 型（VT2） が 37.1 ％（145

単 剤 耐 性 型（39.5 ％：34 株 ） が 最 も 多 く， 次 い でABPC・AMPC/CVA の 2 剤耐性型（22.1％：19 株），
ABPC・SM・TC・AMPC/CVA の 4 剤耐性型（7.0％：6 株），AMPC/CVA 単剤耐性型（5.8％：5 株）が多かった．また，これら 14 種類の薬剤耐性パターンの株）と多かったが，VT1 単独産生型（VT1）は 2.3％
（9 株 ） と 少 な か っ た． 一 方，O26 は VT1 型 が94.4％（238 株）と著しく多く，VT1+VT2 型は 5.6％
（14 株）と少なかった．また，VT2 型は認められなかった．O111 は VT1+VT2 型が 61.3％（19 株）と最も多く，次いで VT1 型が 38.7％（12 株）で，VT2 型

うち全ての血清型に共通したものは認められなかった．
血清型別では，
O157 は 185 株のうち 59 株（31.9％）が耐性を示し，薬剤耐性パターンは 10 種類に分類された．そのうち ABPC 単剤耐性型（54.2％：32 株）
が最も多く，次いで ABPC・AMPC/CVA の 2 剤耐性型，ABPC・SM・TC・AMPC/CVA の 4 剤耐性 型 が多かった．O26 は 18 株のうち 13 株（72.2％）が耐性を示し，薬剤耐性パターンは 6 種類に分類された．
そのうち AMPC・AMPC/CVA の 2 剤耐性型（46.2％：
6 株）が最も多かった．また，FOM 耐性株が 1 株認められた．さらに O26 の薬剤耐性パターンは，6 種

は O26 と同様に認められなかった．その他の血清型
は VT1 型 が 81.1 ％（30 株 ）
，VT1+VT2 型 が 16.2 ％（6 株），VT2 型が 2.7％
（1 株）であった．
年次別では，O157 は 2007 年に VT2 型（63.0％：
34/54 株 ） が 多 か っ た が， そ の 他 の 年 は い ず れ も
VT1+VT2 型が最も多かった．O26 は毎年 VT1 型が最 も 多 か っ た が，1999 年 は VT1+VT2 型（9.3 ％：13/140 株）も多く認められた．O111 は検出されない類中 5 種類が O157 の薬剤耐性パターンと一致していた．O111 は 4 株全てが耐性を示し，薬剤耐性パターンは 3 種類に分類された．そのうち SM・TC・KMの 3 剤耐性型が多かった．その他の血清型は 33 株のうち 10 株（30.3％）が耐性を示し，耐性パターンは5 種類に分類された．そのうち ABPC・AMPC/CVA

年 も あ り， 検 出 数 も 少 な か っ た が 2005 年 を 除 き
VT1+VT2 型が多かった．
４．薬剤感受性供試した 240 株の血清型およびその薬剤耐性パター
ンを表 4 に示した．供試菌株の 35.8％（86 株）がい
ずれかの薬剤に耐性を示した．これらの耐性株が耐性を示した薬剤は ABPC，SM，TC，KM，CTX，ST，の 2 剤耐性型が最も多かった．次いで ABPC・CTX・
AMPC/CVA の 3 剤 耐 性 型 が 多 く，ABPC・SM・
TC・KM・AMPC/CVA の 5 剤耐性型も 1 株認められ

AMPC/CVA および FOM の 8 剤であった．その薬剤耐性パターンは 14 種類に分類され，そのうち ABPC
表３
血清型

O157

O26

O111

その他

合

計

毒素型

た．

EHEC 毒素型の年次別検出数
年

合計

1999

2000

2001

2002

2003

2004

2005

2006

2007

2008

VT1

－

4

－

－

－

－

2

－

1

2

9

VT2

2

14

18

6

8

16

9

28

34

10

145

VT1+VT2

20

19

23

8

15

17

25

44

19

47

237

VT1

127

28

9

23

4

13

16

11

2

5

238

VT2

－

－

－

－

－

－

－

－

－

－

－

VT1+VT2

13

－

－

－

－

1

－

－

－

－

14

VT1

－

10

－

－

－

－

1

－

－

1

12

VT2

－

－

－

－

－

－

－

－

－

－

－

VT1+VT2

－

14

1

1

－

－

－

－

－

3

19

VT1

－

1

－

－

－

－

－

2

24

3

30

VT2

－

－

－

－

－

1

－

－

－

－

1

VT1+VT2

－

1

1

－

－

－

－

－

1

3

6

VT1

127

43

9

23

4

13

19

13

27

11

289

VT2

2

14

18

6

8

17

9

28

34

10

146

VT1+VT2

33

34

25

9

15

18

25

44

20

53

276

─ 84 ─

広島県獣医学会雑誌
表４№ 25（2010）

EHEC 血清型別の薬剤感受性
血薬剤耐性パターン

清

型

合

計

O157

O26

O111

その他

感受性

126

5

－

23

154

ABPC

32

－

1

1

34

AMPC/CVA

2

2

1

－

5

FOM

－

1

－

－

1

ABPC･SM

2

－

－

－

2

ABPC･TC

2

1

－

－

3

ABPC･AMPC/CVA

9

6

－

4

19

SM･TC

2

－

－

1

3

ABPC･SM･TC

3

1

－

－

4

ABPC･ST･AMPC/CVA

1

－

－

－

1

ABPC･CTX･AMPC/CVA

－

－

－

3

3

SM･TC･KM

－

－

2

－

2

ABPC･SM･TC･AMPC/CVA

4

2

－

－

6

ABPC･SM･ST･AMPC/CVA

2

－

－

－

2

ABPC･SM･TC･KM･AMPC/CVA

－

－

－

1

1

185

18

4

33

240

合

計

供試薬剤：アンピシリン（ABPC），ストレプトマイシン（SM），テトラサイクリン（TC），シプロフロキサシン（CPFX），カナマイシン（KM），セフォタキシム
（CTX），
クロラムフェニコール（CP），ST合剤（ST），オーグメンチン（AMPC/CVA），ゲンタマイシン（GM），ナリジクス酸（NA），ホスホマイシン（FOM）

考察

EHEC 株の血清型は，全国の調査では O157 が最も多く，次いで O26，O111 が多く検出されている 8）．

EHEC 感染症は，1999 年 4 月に施行された感染症法において，全数把握の 3 類感染症として，全国の本県においても分離株の血清型は 10 種類に分類されたが，O26 の集団感染のあった年を除けば O157 が
毎年 4 割〜 8 割を占めた．また，O157 に次いでは
O26 が多く検出されており，血清型の検出状況は全国と同様な傾向であった．そのため，特定の血清型の
急 増 が み ら れ た 場 合 に は， 集 団 感 染 や Diffuse

EHEC 感染者が報告されている．全国の EHEC 感染
者数は，2001 年に 4,000 人を上回ったものの，2003
年に一旦減少したが，その翌年から再び増加傾向を示し，毎年，3,000 〜 4,000 人台で推移している 8）．
本県では，感染症法が施行された 1999 年に県東部

Outbreak が示唆され，パルスフィールドゲル電気泳動法（PFGE 法）11） やプラスミドプロファイル 6） などによる遺伝子解析を行い，菌株間の関連性を検討する必要がある．また，全国では県内で検出された血清型以外にも多様な血清型が検出されており，その中には現在の市販抗血清では型別できない血清型があること が 指 摘 さ れ て い る 12, 13）． こ の こ と か ら， 通 常 のEHEC 検査においては，分離株の血清型別を行い，血清型が判定されたものについて VT 検査を行うが，分離株の血清型が型別できない場合においても，患者が EHEC 感染を疑う症状を示した場合には，VT の産生性の確認が必要であることに留意すべきである．

の保育所の園児，職員およびそれらの家族において
EHEC O26 による大規模な集団発生が起こり 9），これまで最多の感染者数（182 人）が報告されている．
その後は 2003 年に 52 人まで減少したが，2004 年から再び増加傾向を示し，2006 年以降は 100 人台まで増加して全国と類似した発生動向がみられている．また，最近はほとんどが散発事例による届出によるもの
であるが，Diffuse Outbreak10） も考えられ，感染者からの喫食状況等の詳しい遡り調査が必要と思われる．
EHEC 感染の好発時期は，他の細菌性食中毒と同様に気温の高い 8 月が多く，全国と同様な傾向であった 8）．しかし，11 月や 12 月の気温が下がる時期にも発生のピークがみられる年もあったことから，気温の低い季節においても食品の取り扱いには十分注意し，
夏季と同様に衛生的に取り扱うことが感染防止には重要である．

EHEC 株 の VT 型 は，O157 は VT1+VT2 型（60.6％）と VT2 型（37.1％）が多く，
VT1 型（2.3％）は極めて少数であった．このことは，全国的な調査においても同様な傾向が見られている 8）．しかし，海外では国によって VT2 型が多いことが示されている

─ 85 ─

14）

ことと，県内においても 2007 年には VT2 型が増広島県獣医学会雑誌

加していることを併せ考えると，今後の O157 の VT
型 の 推 移 が 注 目 さ れ る． 一 方，O26 は VT1 型（94.4％）が著しく多く，VT2 型は認められていない．
O157 における VT 型の発現状況とは明らかに異なっていた．しかしながら，この特徴は O26 分離株の主体を集団発生事例が占めていることによるものとも考え ら れ た．O111 は O157 と 比 べ VT1+VT2 型（61.3％）の占める割合は同様であったが，VT1 型（38.7％）が多いのが特徴であった．一方，VT2 型はO26 と同様に認められなかった．その他の血清型はそれぞれ例数が少なく，特徴的な傾向は明らかでなかった．
薬剤感受性試験では，供試した EHEC 株のうち

№ 25（2010）

解析等を行い，EHEC 感染症の原因究明や発生予防，
感染拡大防止を図ることが重要である．

文献１）山本達男：小児腸管出血性大腸菌感染症とその発症メカニズム，新潟医学会雑誌，120，485-493（2006）
２）中村純一ほか：出血性大腸炎を伴った溶血性尿毒症性症候群の 1 例，日消外会誌，26，2231-2234

35.8％は耐性株であった．血清型別では，O157 は31.9％が耐性を示し，増田ら 15）の報告とほぼ同様な耐性率であった．一方，三輪ら 16）の耐性率は 16.9％と低く，耐性率については種々の報告がみられている．また，甲斐ら 17）は 1995 年までに分離された散発事例由来株の薬剤感受性を調査し，14.4％に耐性を認めたが，年次別では耐性株は 1994 年以降急増し，1995 年には 35.3％に達したことを指摘している．そのため県内の分離株についても今後の耐性率の推移をみる必要がある．また，O157 には多剤耐性が多いという報告もあるが 15,16），今回の調査では，薬剤耐性パターンは ABPC 単剤耐性型（54.2％）が最も多く，
AMPC/CVA 単剤耐性型（3.4％）を含めると 57.6％が単剤耐性であった．しかし，その他はいずれも 2
剤 以 上 の 多 剤 耐 性 型 で あ り，ABPC・SM・TC・
AMPC/CVA の 4 剤耐性型も 3 番目に多かったことから，県内の O157 の多剤耐性の動向についても今後注（1993）
３）齊藤剛仁ほか：腸管出血性大腸菌感染症における溶血性尿毒素症症候群 2008 年，病原微生物検出
情報，30，122-123（2009）４）伊藤 武，甲斐明美：今，微生物による食中毒で何が問題となっているか，モダンメディア，50，
104-116（2004）５）Michino, H., et.al.：Massive outbreak ofEscherichia coli O157:H7 infection inschoolchildren in Sakai City, Japan, associatedwith consumption of white radish sprouts, Am.
J. Epidemiol., 150, 787-796（1999）
６）小川博美ほか：広島県 T 小学校で発生した腸管
出血性大腸菌 O157:H7 集団事例とその細菌学的検討，日食微誌，14，101-110（1997）
７）善養寺浩ほか：腸管病原菌の検査法，第 4 版，
192-203，医学書院，東京（1985）
８）国立感染症研究所感染症情報センター：特集 腸
管出血性大腸菌感染症 2009 年 4 月現在，病原微
生物検出情報，30，119-121（2009）９）高口仁弘ほか：福山市における腸管出血性大腸菌

意が必要である．また，O26 と O111 は，耐性率がそれぞれ 72.2％，100％と高く，2 剤以上の多剤耐性が多かった．厚生労働省のホームページに掲載されている「一次，二次医療機関のための腸管出血性大腸菌（O157 等）感染症治療の手引き（改訂版）」（www1.

O26 による集団事例の分子遺伝学的解析，日細菌誌，56，325（2001）
₁₀）尾関由姫恵ほか：市販和風キムチに起因する腸管
出血性大腸菌 O157:H7 Diffuse Outbreak 事例，

mhlw.go.jp/o-157/manual.html）では，抗菌薬による治 療 に は， 小 児 で は FOM， ノ ル フ ロ キ サ シ ン（NFLX），KM，成人ではニューキノロン，FOM の使用が示されている．そのうち，これまでわが国ではFOM の投与が多く実施されているが，今回の調査においては，FOM に耐性を示したのは O26 の 1 株だ
けであり，FOM は EHEC 感染症の治療において有効であると考えられた．しかし近年，FOM に耐性を示すヒト由来の EHEC 株が国内で確認されており 18），
さらに EHEC 感染症の主な原因食品のひとつにあげられている牛からも FOM 耐性の EHEC 株が検出されている 19）ことから，今後，EHEC 感染症の治療に

感染症誌，77，493-498（2003）
₁₁）Izumiya, H., et al.: Molecular typing ofenterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7
isolates in Japan by using pulsed-field gelelectrophoresis, J. Clin. Microbiol., 35, 1675-

支障をきたす可能性も否めない．
以上のことから，今後も EHEC 感染症の発生動向

1680（1997）₁₂）伊豫田淳ほか：市販血清では同定できない腸管出血性大腸菌の分離状況（2000 年〜 2003 年），病原微生物検出情報，25，141-143（2004）
₁₃）佐藤由美ほか：市販免疫血清では同定できなかった腸管出血性大腸菌による集団感染事例，宮城県
保健環境センター年報，23，51-54（2005）
₁₄）Leotta, G. A., et al.: Characterisation of Shiga
toxin-producing Escherichia coli O157 strainsには注意し，できるだけ感染者からの分離株を収集して血清型別，VT 型別，薬剤感受性試験および遺伝子

isolated from humans in Argentina, Australia
and New Zealand, BMC Microbiol., 8, 46（2008）─ 86 ─

広島県獣医学会雑誌₁₅）増田高志ほか：静岡県におけるヒト由来志賀毒素
産生性大腸菌の血清型，志賀毒素型，薬剤感受性および O157 のファージ型（1987 〜 2002 年），
日食微誌，21，44-51（2004）
₁₆）三輪良雄ほか：腸管出血性大腸菌 O157 の薬剤感
受性及び薬剤耐性とプラスミドの関連について，
感染症誌，76，439-449（2002）₁₇）甲斐明美ほか：わが国における Vero 毒素産生性
大腸菌の分離状況，臨床と微生物，23，827-37（1996）
₁₈）国立感染症研究所感染症情報センター：秋田県において 1996 〜 2006 年に分離された腸管出血性大腸菌の薬剤耐性状況，病原微生物検出情報，
28，166-167（2007）₁₉）前原智史ほか：夏季における牛の腸管出血性大腸
菌 O157 保菌状況と分離株の薬剤感受性，日獣会
誌，58，205-208（2004）

─ 87 ─

№ 25（2010）広島県の小児感染性胃腸炎患者における下痢症ウイルス検出状況と流行型，2002/03~2008/09
谷澤

由枝

福田

伸治

重本

高尾

信一

妹尾

正登

直樹

（受付：平成 21 年 1 月 8 日）

Characteristics of Viral Gastroenteritis in a Pediatric Population in Hiroshima
Prefecture during the 2002/03 and 2008/09 Epidemic Seasons
YUKIE TANIZAWA, SHINJI FUKUDA, NAOKI SHIGEMOTO, SHINICHI TAKAO and MASATO SENO
Center for Health and Environment, Hiroshima Prefectural Technology
Research Institute, 1-6-29, Minami-machi, Minami-ku, Hiroshima 734-0007

SUMMARY
We investigated the incidence of gastroenteritis viruses such as norovirus (NoV),
sapovirus (SaV), human astrovirus (HAstV), Group A and C rotaviruses (ARV and CRV),
and enteric adenovirus (EAdV) in the pediatric population in Hiroshima prefecture
between 2002/03 and 2008/09 epidemic seasons. Of 528 stool samples examined during
among 7 epidemic seasons, 251(46.6%) were positive for such gastroenteritis viruses. NoVG
Ⅱ (64.5%) was predominant, followed by ARV (21.0%), HAstV (5.2%), EAdV (4.8%), SaV(2.4%), and CRV (0.8%). Two peaks of incidence were found in December and March. The
peaks in December and March reflected epidemics of NoV and ARV, respectively. In NoV,
although genotype GⅡ.4 was detected during all 7 epidemic seasons, genotype GⅡ.3 waspredominant in the 2003/04, 2005/06, and 2007/08 epidemic seasons. In ARV, the major
genotype was G3P [8], but genotype G1P [8] was predominant in the 2004/05 epidemic
seasons.
In conclusions, the monthly incidence differed among gastroenteritis viruses. Although
NoV and ARV as the leading agents of infant gastroenteritis each demonstrated major
genotypes among 7 epidemic seasons, other genotypes became epidemic during several
epidemic seasons. Furthermore, the seasonal incidence of each gastroenteritis virus
varied among the epidemic seasons.

広島県立総合技術研究所保健環境センター（〒 734-0007 広島県広島市南区皆実町 1 丁目 6-29）
─ 89 ─

広島県獣医学会雑誌

要№ 25（2010）

約

2002/03 〜 2008/09 年の 7 流行シーズンに，県内医療機関（主に小児科）にて採取された
感染性胃腸炎患者糞便 528 検体について下痢症ウイルスの検索を行った．251 検体（46.6％）から下痢症ウイルスが検出された．下痢症ウイルスの検出率はノロウイルス（NoV）遺伝子
グループ（G）Ⅱが 64.5％と最も高く，次いで A 群ロタウイルス（ARV）21.0％，ヒトアス
トロウイルス（HAstV）5.2％，腸管アデノウイルス（EAdV）4.8％，サポウイルス（SaV）
2.4％および C 群ロタウイルス（CRV）0.8％の順であった．下痢症ウイルスの検出のピーク
は 2 峰性を示し，NoV を主体とする 12 月のピークと，ARV を主体とする 3 月のピークが認められた．最も多く検出された NoVG Ⅱには 6 遺伝子型が認められた．遺伝子型 GⅡ.4 は最も優勢な遺伝子型で全シーズンにわたり検出されたが，GⅡ.3 が優勢なシーズンが 3 シー
ズン（2003/04 年，2005/06 年および 2007/08 年シーズン）認められた．次に多く検出された ARV については，優勢な遺伝子型は，G3P［8］であったが，2004/05 年シーズンでは
G1P［8］が優勢であった．以上のように，小児感染性胃腸炎の流行時期（月）にはその原因
ウイルス種により違いが認められた．また，小児感染性胃腸炎の原因の主流を占める NoV
および ARV には全シーズンを通じて主要な流行型が存在することが認められたが，シーズンによっては異なった型が流行する特徴も認められた．一方で，シーズンによっては原因ウ
イルス種間の検出割合に変動が認められた．

序

文

40 型および 41 型が感染性胃腸炎の原因型として報告されている 9）．このように，感染性胃腸炎ウイルスに

ウイルス性感染性胃腸炎は毎年全国で多発し，乳幼児から成人まで全ての年齢層に急性胃腸炎を起こすことが知られている 1－3）．平成 20 年度の感染症発生動向 調 査 を 見る と，全国の感 染性胃腸炎の 患者 数ははそれぞれ多くの型が存在するが，流行シーズンに989,647 人と全感染症の中で最も多くを占めていた．
感染性胃腸炎の主たる原因ウイルスにはノロウイルス（NoV）， サ ポ ウ イ ル ス（SaV），アストロウイルス（HAstV），A 群 お よ び C 群 ロ タ ウ イ ル ス（ARV・CRV），腸管アデノウイルス（EAdV）などが知られているが，それぞれのウイルスには多くの遺伝子グループ（G）あるいは遺伝子型が存在する．感染性胃腸炎の主要な原因となる NoV には遺伝子グループ GI〜 GV の 5 グループが存在するが，ヒトに病原性を示すのは，GⅠ，GⅡおよび GⅣに属するウイルスで，さらに 30 種以上の遺伝子型に分類されている 4）．また，NoV と同様に主要な小児感染性胃腸炎の原因ウ
イルスであるロタウイルスは A 〜 F の 6 群に分類され 5），我が国では A および C 群がヒトの感染性胃腸炎に関与している．さらに，ロタウイルス感染性胃腸炎の大部分を占める ARV は表面の構造蛋白である
VP7 と VP4 の抗原性の違いによる G 遺伝子型（VP7
遺伝子型）と P 遺伝子型（VP4 遺伝子型）により，少なくとも 24 型に分類されている 6）．また，HAstVには 7 つの血清型が存在し 7），SaV は GⅠ〜 GⅤの 5つの遺伝子グループが存在する 8）．同様に，EAdV は
─ 90 ─

よっては主流な型が変化すること 10）あるいは地域によって流行するウイルス種やその流行型が異なることも報告されている 11）．
そこで，今回我々は 2002/03 年から 2008/09 年の
最近 7 シーズンの広島県における小児の散発性感染性胃腸炎の原因ウイルスの流行状況および流行型を解析し，流行の特徴を明らかにしたので報告する．

材料および方法
１．供試検体2002 年 6 月から 2009 年 5 月の間に，広島県の医療機関（主に小児科）において採取された散発性感染性胃腸炎患者の糞便 528 検体を対象とした．なお，
本研究では 6 月から翌年 5 月を 1 流行シーズンと定義した．
２．NoV，SaV，HAstV 遺伝子の検出
NoV，SaV お よ び HAstV の 検 出 は Fukuda ら 12）の報告に従い行った．すなわち，PBS(－) で 10％乳剤を調整し，遠心上清 140μl から QIAamp viral RNAmini kit（QIAGEN）を用いて RNA を抽出した．逆転写反応は 5 × RT buffer 5μl，dNTPs （各 2 mM
濃 度 ）4 μl，ラ ン ダ ム プ ラ イ マ ー（pdN9，50μM，
Takara）1μl，ReverTra Ace（100 U/μl，TOYOBO）

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

1μl，RNase イ ン ヒ ビ タ ー（40 U/μl，TOYOBO）

結

0.5μl に RNA 抽出液 9.5μl を加えて行った．作製した cDNA は以下の PCR に用いた．NoVG Ⅰの検出プ
ライマーには G1SKF/G1SKR13） を，NVG Ⅱの検出に は G2SKF/G2SKR，G2ALSKR13,14） を 使 用 し た．
SaV の 検 出 に は SR80/JV33 プ ラ イ マ ー 15） ま た は
SV-F22/SV-R2 プライマー 16） を，HAstV の検出にはAC230/AC1’プライマー 17） を用いた．PCR 反応は10 × PCR buffer 5μl，dNTP（各 2.5mM 濃度）4μl，各プライマー（10μM）各 1μl，Ex Taq （5 U/μl，
TaKaRa）0. 25μl，cDNA 3μl を加え，滅菌精製水で全量を 50μl とし，94℃ 3 分間加熱後，94℃ 45 秒，

１．2002/03 年から 2008/09 年の 7 シーズンにおける下痢症ウイルスの検出状況
2002/03 年から 2008/09 年の 7 シーズンにおける各ウイルスの検出状況を表 1 に示した．感染性胃腸炎患者の糞便 528 検体について，下痢症ウイルス検索を行った結果，251 検体（46.6％）から原因ウイルスが検出された．
原因ウイルスとして最も多く検出されたのは NoV
で，検出率は 65.0％（163 検体）であった . そのうち
G Ⅱ が 64.5 ％（160 検 体 ） と 大 半 を 占 め，G Ⅰ が1.2％（3 検体）であった . 次いで ARV が 21.0％（52検体）と多く検出された．以下，HAstV 5.2％（16
検体），EAdV 4.8％（12 検体），SaV 2.4％（6 検体），

55℃ 45 秒，72℃ 60 秒を 40 サイクル行い，最後に72℃ 15 分間反応させた．
３．ARV，CRV，EAdV 抗原の検出
ARV の検出にはロタクロン（TFB）を，CRV の検出には C 群ロタウイルス検出用 RPHA キット（デンカ生研）を，EAdV の検出にはアデノクロン E（TFB）
をそれぞれ用い，添付の説明書に従って行った．

CRV 0.8％（2 検体）の順で検出された . 重複感染は1.2％（3 検体）で認められた．
シーズン別のウイルス検出率では 2003/04 年シーズンが 37.2％（35/94）と最も低く，2008/09 年シーズンが 66.7％（18/27）と最も高かった．また，検出されたウイルス種別に見ると，2002/03 年シーズンに
は ARV が 最 も 多 く 検 出 さ れ 49.2 ％ を 占 め た が，４．検出ウイルスの遺伝子型別
1）NoV の遺伝子型別
NoV 陽性であった 160 検体のうち，ランダムに選択した NoVG Ⅱ 53 株について PCR 増幅産物のダイレクトシークエンスを行い，塩基配列を決定した．PCR 産 物 は QIAquick PCR Purification Kit（QIAGEN）で精製した．そして，Kageyama らの2003/04 年シーズン以降は NoVG Ⅱが最も優勢で，
過 半 数 を 占 め て い た． 特 に，2006/07 年 お よ び
2007/08 年 シ ー ズ ン は NoVG Ⅱ が 89.8 ％ お よ び

スキーム（分類）に従い，遺伝子型別を行った 4）．
2）SaV の遺伝子型別

88.2％と大多数を占めた．
HAstV は 例 年 0 〜 3 検 体 の 検 出 で あ っ た が，
2005/06 年シーズンには例年よりも多い 7 検体から検出され，2005/06 年シーズンに検出された下痢症ウイ
ルスの 21.4％（7/16）を占めた．

Okada ら 15）の方法により遺伝子型別を行った．
3）ARV の遺伝子型別P 遺 伝 子 型 別（VP4） は Gentsch ら 17） お よ び
Gómara ら 6） の方法に，G 遺伝子型別（VP7）はGouven ら 18）の方法に従い行った．
4）HAstV の血清型別
Sakamoto ら 19） の方法により血清（遺伝子）型
別を行った．
表１

果

SaV は 2002/03 年から 2004/05 年シーズンには 1〜 3 検体の検出であったが，2005/06 年から 2007/08
年シーズンには検出されなかった．
EAdV は 2003/04 年シーズンに最も多い 5 検体から検出され，他のシーズンでは 2002/03 年に 1 検体，

患者糞便からのシーズン別下痢症ウイルス検出状況
検出ウイルス数（％）

シーズン

検査
検体数

陽性検体数
（％）

NoVGⅠ

NoVGⅡ

SaV

HAstV

ARV

CRV

EAdV

2002/03137

61（44.5）1（1.6）

23（37.7）3（4.9）

2（ 3.3）30（49.2）

1（1.6）

1（ 1.6）

2003/0494

35（37.2）

19（54.3）

1（2.9）

1（ 2.9）9（25.7）1（3.3）

2004/0569

30（43.5）

18（60.0）1（ 3.3）6（20.0）2005/0648

29（60.4）

20（71.4）

7（21.4）1（ 3.6）

2006/07116

61（52.6）

53（89.8）

3（ 1.7）

1（ 1.7）

2007/0837

17（45.9）15（88.2）

2008/0927

18（66.7）

12（66.7）1（5.6）

2（11.1）

3（16.7）計528

251（46.6）

160（64.5）

6（2.4）

16（ 5.2）

52（21.0）2（3.4）

3（1.2）

5（14.3）4（13.3）1（3.6）
2（ 3.4）

2（11.8）
2（0.8）＊（ ）内は陽性検体中の各ウイルス陽性率 (％ ) を示す
NoV：ノロウイルス，SaV：サポウイルス，HAstV：ヒトアストロウイルス，ARV：A 群ロタウイルス，CRV：C 群ロタウイルス，
EAdV：腸管アデノウイルス

─ 91 ─

12（ 4.8）

広島県獣医学会雑誌

2004/05 年に 4 検体および 2006/07 年には 2 検体から検出された．
CRV は 7 シーズンを通し 2 検体からのみ検出された．
２．月別の下痢症ウイルス検出状況№ 25（2010）
表２

シーズン別のノロウイスルス G Ⅱ遺伝子型検出状況

シーズン

遺伝子型
GⅡ.2

GⅡ.3

GⅡ.4

3

1

2003/04

検出された 2002/03 シーズンから 2008/09 シーズ
ンまでの 7 シーズンを合わせた下痢症ウイルスの月
別検出状況を図 1 に示した．下痢症ウイルスは 10 月から 3 月の秋から冬に集中して検出され，12 月および 3 月の 2 峰性のピークが認められた．12 月のピー
クは NoV が主体で 77.6％（38/49）を占めた．一方，
3 月のピークは ARV が主体で 52.1％（25/48）を占めた．
NoV のみについて見ると，例年 11 月または 12 月に検出のピークが認められたが，2006/07 年シーズン
は 10 月にピークが認められた．また，7 シーズンに検出された NoV の 81.6％は 10 月から 3 月の秋から冬に集中していた．一方，4 月から 9 月の検出率は18.4％と低いものの，一年を通して NoV が検出され

2004/0548

2005/06

2008/09

1

計

1

2

10

13

3
5

5

2

1

3

2006/07
2007/08

計GⅡ.6 GⅡ.13 GⅡ.16

18

1

10

2

1

28

4

1

17

14
1

53

2002/03 年から 2004/05 年シーズンに検出された
ARV のうち 44 株について遺伝子型別を実施した結果を表 3 に示した . 検出された遺伝子型は G1P［8］，
G2P［8］，G3P［8］および G9P［8］の 4 種類であった．
そのうち最も多く検出された遺伝子型は G3P［8］で，56.8 ％（25/44） を 占 め た．G3P［8］は 2002/03 年 お
よ び 2003/04 年 シ ー ズ ン の 主 流 型 で あ っ た が，
2002/03 年 シ ー ズ ン に は G9P［8］も 36.7 ％（11/30）と多く検出された．また，2004/05 年シーズンは検出された 6 株中 5 株（83.3％）が G1P
［8］
であった．

た．
次に ARV のみについて見ると，1 月から 5 月の間にのみ検出され，検出のピークは，3 月であった．
HAstV は 1 月から 6 月の間に検出され，2 月およ表３

び 3 月に多く検出された．
SaV，CRV および EAdV については，明確な季節
集積性は認められなかった．

シーズン

シーズン別の A 群ロタウイルス遺伝子型検出状況
遺伝子型別

計

G1P［8］ G2P［8］ G3P［8］ G9P［8］2002/03

1

17

11

29

2003/042

7

9

2004/05

5

1

6

計

7

1

25

11

44

HAstV の 遺 伝 子 型 を 表 4 に 示 し た． 検 出 さ れ た
HAstV の血清型は 1 型，4 型および 7 型であったが，最も主流な血清型は 1 型で，全体の 68.8％（11/16）と大部分を占めた．4 型（4 株）と 7 型（1 株）は，

図 1 月別の下痢症ウイルス検出数（2002/03-2008/09 シーズンの合計）

いずれも 2005/06 年シーズンにのみ検出された．
表４

３．各下痢症ウイルスにおける流行型の変化
最も多く検出された NoV G Ⅱの遺伝子型を表 2 に示した．NoV G Ⅱ 53 株について遺伝子型別を行なったところ，GⅡ.2，GⅡ.3，GⅡ.4，GⅡ.6，GⅡ.13 およびGⅡ.16 の 6 遺伝子型が検出された．これらのうち GⅡ.4
は 52.8％（28/53）を占め，6 シーズンで最も多く検出 さ れ た 遺 伝 子 型 で あ っ た． し か し，2003/04 年，
2005/06 年および 2007/08 年シーズンについては GⅡ.3が最も多く検出され，それぞれ 75％（3/4），76.5％（13/17）および 66.7（2/3）を占めた．また，検出数
は 少 な い が，2005/06 年 シ ー ズ ン に は GⅡ.16 が，
2008/09 年シーズンには GⅡ.13 がそれぞれ 1 株，初めて検出された．

─ 92 ─

シーズン

シーズン別のアストロウイルス遺伝子型検出状況
遺伝子型
G1P［8］

G2P［8］

G3P［8］

計

2002/032

2

2003/04

1

1

2004/05

1

1

2005/062

2006/073

3

2008/09

2

2

計

11

4

1

7

2007/0841

16

広島県獣医学会雑誌を迎える ARV により形成されていることが明らかとなった．さらに，NoV は流行時期である秋から冬以

2002/03 シーズンから 2008/09 シーズンに検出された SaV は合計 6 株であり，そのうち 1 株が G Ⅱであり，残り 5 株は G Ⅰであった．
また，EAdV については検出された 13 株中 1 株が41 型であった以外は全て 40 型であった．

考№ 25（2010）

外の時期においても通年検出されたことから，流行期
以外でも注意が必要であると考えられる．
国立感染症研究所で集計された成績を見ると，日本国内での ARV の G 遺伝子型は，1990 年代までは G1

察が圧倒的に優位であったが，2000 年頃から急減し，
2002/03 年には 10％以下となり，その後 2003 〜 2004年にかけて，G3 および G4 が優位になっている 25,26）．

今回，我々は 2002/03 年から 2008/09 年の 7 シー
ズンの間に採取した感染性胃腸炎患者糞便 528 検体についてウイルス学的検索を行ったところ , 全体の46.6％から下痢症ウイルスを検出した．7 シーズン全
体における下痢症ウイルスの検出率は NoVG Ⅱが64.5％と過半数を占め，次いで ARV の 21.0％であり，NoV とは大きな差が認められた．この傾向は我が国
で の 他 の 報 告 と 同 様 で あ り， 原 田 ら は NoVG Ⅱ
57.0％に対し ARV 11.4％と検出率に大きな差があったことを報告している 20）．流行シーズン別に見ると，2002/03 年シーズンに最も多く検出されたウイルスはARV であり，このシーズンに検出された下痢症ウイ
ルスの 49.2％を占めたが，2003/04 年シーズン以降
は NoVG Ⅱが過半数を占めるようになり，2006/07
年シーズンには検出された下痢症ウイルスの 89.8％を占めていた．ARV の検出率が減少し，NoV の検出率が増加した一因は，ARV の診断にイムノクロマト

また，1999 年からは，新たに認められるようになった G9 を含めた多数の型が同時に流行していたが 27），
2004/05 年シーズン以降は再び G1 が優勢になったと報告されている 28）．広島県においても主流な遺伝子型 で あ る G1P［8］お よ び G3P［8］が 全 検 出 型 の 約
72.7％を占め，優勢型であったが，世界的に G9 が増加した時期 29） と同じく，2002/03 年シーズンには県内でも G9P［8］の流行も認められ，シーズンによって流行型が変化することが確認された．G 遺伝子型を規定する VP7 と P 遺伝子型を規定する VP4 はウイ
ルスの外層タンパク質をコードする遺伝子分節である
ことから 28），これらの遺伝子型の推移を把握することは疫学上重要であると考えられる．
HAstV の検出率はこれまでの報告では全体の 2.1〜 3.2％程度であり，主流な血清型は 1 型であると報告されているが 10,16,30），我々の調査では 2005/06 年
シーズンには 4 型が最も多く検出されており，大阪

グラフィーなどの簡易法が普及し，臨床現場で容易に診断できる体制が整ったため，ARV と診断された糞便が採取されなくなったことが影響していると考えられる．
しかし一方で，1995/96 年から 2001/02 年の 7 シー

府では 6 型による集団感染も報告されていることから 16,31），1 型以外の血清型の動向にも注意する必要がある．
また，SaV については HAstV と同様に下痢症ウイ
ルス全体に対する検出率は低かったが，遺伝子型 G
Ⅰが主流であった．これは全国的にも同様の傾向であるが，2007 年以降散発性胃腸炎感染事例から G IVに属する株が多く検出されたことが報告されていることから 20），今後 G Ⅰと同様に G Ⅳの動向についても注意する必要がある．
今回の調査結果をまとめると，2002 年 6 月から2009 年 5 月までの広島県における小児感染性胃腸炎の主要な原因は NoV（そのなかでも G Ⅱ）と ARVであり，流行シーズンの前半は NoV が，後半は ARV

ズンにおける広島県での NoV 検出率は約 41.0％であったのに対し 9），最近の 7 シーズンでは 65.0％と約 1.6 倍 増 加 し て い る． ま た，Motomura ら も
2006/07 年の冬季に NoV 感染症患者が前年の 4 倍に増加していることを報告していることから 21），全国
的に感染性胃腸炎における NoV の占める割合が増加していることから，その重要性が近年益々高まっていると考えられる．
NoV について，さらにその遺伝子型別まで詳しく解析してみると NoVG Ⅱは 7 シーズンで 6 種類の遺伝子型が検出されており，そのうち遺伝子型 GⅡ.4 が最も多く検出された型であった．NoV が爆発的に流行した 2006/07 年シーズンには広島県でも NoVG Ⅱ
検出率が 89.8％と前シーズンの約 2.7 倍増加し，GⅡ.4
が主流であった．この結果は他の報告においても同様であり 22－24），広島県のみでなく全国で GⅡ.4 が主要な流行型になっていたと考えられる．
下痢症ウイルスの月別の検出率は他の報告や以前の本県における結果と同様に 2 峰性のピークとなり 10,25），
前半が主に 11 月および 12 月に流行のピークを迎える NoV により形成され，後半は 3 月に流行のピーク
─ 93 ─

が主要な原因ウイルスであることが明らかとなった．
また，それらには主要な流行型が認められるものの，シーズンによっては他の型が流行する特徴も認められた．また，シーズンによっては原因となるウイルス種の検出割合にも変動が認められた．

文献１）Gallimore, C. I., et al.:Diversity of entericviruses detected in patients withgastroenteritis in a tertiary referral pediatric広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

specific primers, Arch. Virol., 151, 2503-2509(2006)
₁₆）Sakon, N., et al.: Genomic characterization ofhuman astrovirus type 6 Katano virus and theestablishment of a rapid and effective reverse
transcription-polymerase chain reaction to
detect all serotypes of human astrovirus, J.
Med. Virol., 61, 125-131 (2000)

hospital, J. Med. Virol., 73, 443-449 (2004)
２）Bon, F., et al.:Prevalence of group A rotavirus,
human calicivirus, astrovirus, and adenovirus
type 40 and 41 infections among children withacute gastroenteritis in Dijon, France, J. Clin.
Microbiol., 37, 3055-3058 (1999)
３）Chikhi-Brachet, R., et al.:Virus diversity in a
winter epidemic of acute diarrhea in France, J.
Clin. Microbiol., 40, 4266-4272 (2002)₁₇）Gentsh, J. R., et al.:Identification of group A４）Kageyama, T., et al.:Coexistence of Multiple
genotypes, including newly identified
genotypes, in outbreaks of gastroenteritis due

rotavirus gene 4 types by polymerase chain
reaction, J. Clin. Microbiol., 30, 1365-1373(1992)

to norovirus in Japan, J. Clin. Microbiol., 42,2988-2995 (2004).
５）小林宣道ほか : 胃腸炎ウイルス , ロタウイルス ,ウイルス , 50, 157-172 (2000)
６）Iturriza-Gomara, M., et al.:Diversity within the
VP4 gene of rotavirus P[8] strains: implications
for reverse transcription-PCR genotyping, J.
Clin. Microbiol., 38, 898-901 (2000)
７）Lee, T. W. and Kurtz, J. B.:Prevalence of human₁₈）Gouven, V., et al.:Polymerase chain reaction
amplification and typing of rotavirus nucleic
acid from stool specimens, J. Clin. Microbiol.,28, 276-282 (1990)
₁₉）Sakamoto,T., et al. : Molecular epidemiology ofastroviruses in Japan from 1995 to 1998 by
reverse transcription-polymerase chain
reaction with serotype-specific primers (1 to 8),
J. Med. Virol., 61, 26-31 (2000)

astrovirus serotypes in the Oxford region 197692, with evidence for two new serotypes,
Epidemiol. Infect., 112, 187-193 (1994)
８）Farkas, T., et al.:Genetic diversity amongsapoviruses, Arch. Virol., 149, 1309-1323 (2004)₂₀）Harada, S., et al.:Surveillance of pathogens in
outpatients with gastroenteritis andcharacterization of sapovirus strains between９）Li, L., et al.:Characterizations of adenovirus
type 41 isolates from children with acutegastroenteritis in Japan, Vietnam, and Korea，
J. Clin. Microbiol.,42, 4032-4039(2004)

2002 and 2007 in Kumamoto Prefecture, Japan,
J. Med. Virol., 81, 1117-1127 (2009)₂₁）Motomura, K., et al.:Identification ofmonomorphic and divergent haplotypes in
2006/2007 norovirus GII/4 epidemic population
by genome-wide tracing of evolutionary history,₁₀）福田伸治ほか：乳幼児感染性胃腸炎患者におけるNorwalk virus，Sapporo virus お よ び Humanastrovirus の検出状況と流行型 , 感染症誌 , 77,965-970 (2003)
₁₁）Zhou,Y., et al.:Serotypes of human rotaviruses

J. Virol., 82, 11247-11262 (2008)₂₂）Ozawa, K., et al.:Norovirus infections insymptomatic and asymptomatic food handlers
in Japan, J. Clin. Microbiol., 45, 3996-4005(2007)

in 7 regions of Japan from 1984 to 1997, 感染症
誌 , 73, 35-42(1999)
₁₂）Fukuda, S., et al.:Rapid detection of norovirus
from fecal specimens by real-time reverset r a n s c r i p t i o n- l o o p - m e d i a t e d i s o t h e r m a lamplification assay, J. Clin. Microbiol., 44,1376-1381 (2006)₁₃）Kojima, S., et al.:Genogroup-specific PCRprimers for detection of Norwalk-like viruses, J.
Infect. Dis., 100, 107-114 (2002)
₁₄）Nishida, T., et al.:Genotyping and quantitationof noroviruses in oysters from two distinct sea
areas in Japan, Microbiol. Immunol., 51, 177-₂₃）国立感染症研究所感染症情報センター 病原微生物 検 出 情 報 事 務 局： ノ ロ ウ イ ル ス の 流 行
2006/07 シーズン , 病原微生物検出情報 , 28, 277278 (2007)₂₄）本村和嗣ほか : ヒトノロウイルス 2006 年株 , 臨
床と微生物，36, 205-209 (2009)
₂₅）国立感染症研究所感染症情報センター 病原微生物検出情報事務局：ロタウイルス 2004 年現在 ,病原微生物検出情報 , 26, 1-2 (2005)
₂₆）Zhou, Y., et al.:Rotavirus infection in children
in Japan, Pediatrc. Int., 42, 28-39 (2000)
₂₇）Desselberger, U., et al.:Rotavirus epidemiology
and surveillance, Novartis Found. Symp., 238,

184 (2007)₁₅）Okada, M., et al.:The detection of humansapoviruses with universal and genogroup-

125-147 (2001)₂₈）牛島廣治：ウイルス性胃腸炎の診断法と疫学の過去，現在と今後の展望，ウイルス，59, 75-90(2009)─ 94 ─

広島県獣医学会雑誌

₂₉）Yoshinaga, M., et al.:Changing distribution ofgroup A rotavirus G-types and genetic analysisof G9 circulating in Japan, Arch. Virol., 151,
183-192 (2006)₃₀）Noel，J.，et al.:Typing of human astrovirus
from clinical isolates by enzyme immunoassay
and nucleotide Sequencing，J. Clin. Microbiol.，
33，797-801 (1995)₃₁）Oishi, I., et al.:A large outbreak of acutegastroenteritis associated with astrovirus
among students and teachers in Osaka, Japan,
J. Infect. Dis., 70, 39-43 (1994)

─ 95 ─

№ 25（2010）広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

細胞破砕機を用いた尿素窒素の測定について
花木

直喜

京塚

明美

渡邊真由美

児玉

実

佐伯

幸三

迫田

望

（受付：平成 21 年 12 月 21 日）

Measurement of urea nitrogen using a cell disruptor
NAOKI HANAKI, AKEMI KYOZUKA, MAYUMI WATANABE,
MINORU KODAMA, KOUZOU SAIKI and NOZOMU SAKODA
Hiroshima City Meat Inspection Office, 11-1, 1-chome, Kusatsuko, Nishi-ku,
Hiroshima 733-0832

SUMMARY
Muscular urea nitrogen measurements employing the current processing method of
boiling extraction and a cell disruptor were compared. The values measured using these2 processing methods were markedly correlated.
Processing using a cell disruptor may be employed as a substitute precise test method
for the current boiling extraction method. When blood cannot be collected from a carcass,this method may be applicable using muscle as a sample.

要約

筋肉中の尿素窒素の測定法として，従来の煮沸抽出による処理法と細胞破砕機を用いた処理法とを比較をした．両処理法による筋肉中尿素窒素の測定値には高い相関が認められた．
細胞破砕装置による処理法は，精密検査法として、従来の煮沸抽出法の代用方法として用いることができると考えられた．また，枝肉から血液が得られない場合に，同方法は，筋肉を材料として検査が可能である．

序文

尿毒症は，種々の原因で体内に尿素窒素が蓄積する
全身性の疾患であり，と畜場法でも全廃棄の対象疾病とされている．広島市と畜場では，解体後検査で年間数頭の尿毒症を疑う事例があり，その診断のため，検査保留時の精密検査において筋肉中の尿素窒素（MUN）の測定を実施している．迅速な測定が必要なことから今回，MUN の測定において，従来の煮沸抽出による処理（煮沸抽出法）に加え，細胞破砕機を用いた処理（細胞破砕法）を行い，若干の知見を得たので，その概要を報告する．

広島市食肉衛生検査所（〒 733-0832 広島市西区草津港一丁目 11 番 1 号）
─ 97 ─

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

材料と方法

表1

１．材料
平成 15 年 4 月から平成 21 年 7 月までに，広島市
と畜場で処理され，解体後の検査で，腎臓や膀胱等の所見から尿毒症が疑われた獣畜計 39 頭（牛 30 頭，

煮沸抽出液

＞

細胞破砕液

18

〃

＝

〃

9

〃

＜

〃

12

計

豚 8 頭，山羊 1 頭）の頚部筋肉を用いた．
２．方法
下記 1,2）の方法により得られた測定用検体を用いて考アークレイ社のスポットケム SP4420 で，ドライケ
ム法により尿素窒素を測定した．
1）煮沸抽出法（従来法）
細切した頚部筋肉 5g に蒸留水 20ml を加え，15

両方法の測定値を比較したところ（表 1），両者間で得られる測定値には差がないため，より少ない検体

45 秒処理後，12,000 回転 5 分で遠心分離した上清（細胞破砕液）を測定用検体とした．

績

煮沸抽出液と細胞破砕液における尿素窒素測定値の関係を図 1 に示した．回帰直線は y ＝ 0.947x ＋ 3.796
で，ほぼ原点を通り傾きも 1 に近い直線となった．
また相関係数は 0.990 と有意な正の相関を示した．（t検定：p<0.01）
比較した 39 検体のうち，同じ値を示したものが 9検体，細胞破砕液が煮沸抽出液より低い値を示したものが 18 検体，逆に細胞破砕液が煮沸抽出液より高い値を示したものが 12 検体であり，どちらかの方法が高い値を示す等偏りは認められなかった．
（表 1）

た．

文

煮沸抽出液

n ＝ 39

検査所事業概要，20（2003）

150
100
50
0

0

50

100

150

200

250

300

細胞破砕液
図1

献

１）上山富士雄，高山直裕：筋肉を検体とした尿毒症の迅速検査法，平成 19 年度佐世保市食肉衛生検査所事業概要，49-51（2007）２）岡田麻由ほか：細胞破砕器を用いた食肉中の残留抗生物質簡易検査，平成 16 年度広島市食肉衛生

r ＝ 0.990（p<0.01)200

量で簡便・短時間に検査できる細胞破砕法は，精密検査時の検査法として，有用であると思われた．
また，豚の枝肉検査時に尿毒症を疑う所見が認められ，血液を採取できない場合の検査保留の判断のために，BUN 測定の代用法とすることが可能と考えられた．
さらには，少量の筋肉で検査できることから，気になる所見が見られた時などに，MUN を測定し，検査値と肉眼所見の程度の比較をすることで，検査員の判
断基準の再確認をすることにも有用であると考えられ

y ＝ 0.947x ＋ 3.796250察

液中尿素窒素量（BUN）をもとに精密検査保留をし，MUN も測定して合否判断の目安としている．
従来の煮沸抽出法は，筋肉の細切や，15 分間の煮
沸等前処理が必要で時間がかかるため，手技が簡便で短時間処理のできる細胞破砕法による測定を試み，比較を行った．

び蒸留水 1.4ml を入れ，細胞破砕機（フナコシ社のファストプレップ FP120）を用いて，6,500 回転

300

39

尿毒症は，その発生原因や程度により，生体所見や解体後検査時の肉眼所見に様々な状態がみられる．臭気や目視による官能検査での判断では，検査員の主観により判断基準にバラツキが生じやすくなる．そこ
で，客観的な判断を行うため，多くの検査所同様，血分間煮沸抽出した後，ろ過して得られた液（煮沸抽出液）を測定用検体とした．
2）細胞破砕法
BSE 検査で用いるビーズ入りのグラインディン
グチューブに頚部筋肉 350mg，ねじ 2 個（4mm ×
6mm ステンレス製 6 角穴付き止めねじ）およ成

BUN 測定値の偏り

煮沸抽出液と細胞破砕液の BUN 値相関─ 98 ─

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

他誌掲載論文Pasteurella multocida A：1 による疣贅性心内膜炎を伴う
子牛の全身性化膿性炎
河村美登里 1） 星野尾歌織 2） 小川

寛大 3） 本多

俊次 4）

恵谷

浩久 3） 阿川啓雄 5）美江 3） 兼廣愛美 1） 菊池

Bovine Septicemia with vegetative endocarditis caused by Pasteurella multocida A:1
MIDORI KAWAMURA1), KAORI HOSHINOO2), KANDAI OGAWA3), SYUNJI HONDA4),MIE EYA3), MEGUMI KANEHIRO1), HIROHISA KIKUCHI3) and HIROO AGAWA5)
1) Western Center of Livestock Hygiene Service, Prefecture of Hiroshima, 1-15
Gojo, saijo, Higashi-Hiroshima, Hiroshima 739-0013
2) National Institute of Animal Health, 3-1-5 Kannondai, Tsukuba, Ibaraki
305-0856
3) Livestock Division Department of Agriculture, Prefecture of Hiroshima, 1052 Motomachi, Naka-ku, Hiroshima 730-8511
4) Eastern Center of Livestock Hygiene Service, Prefecture of Hiroshima, 1-11 Miyoshimachi, Fukuyama, Hiroshima 720-8511
5) Northern Center of Livestock Hygiene Service, Prefecture of Hiroshima,
1-4-1 Higashimotomachi, Shobara, Hiroshima 727-0011

SUMMARY
A 35-day-old calf in a dairy farm in Hiroshima Prefecture died after showing
respiratory disorder and swelling of joints. Bacteriological and histopathologicalexamination revealed the case as systemic infection and vegetative endocarditis caused
by Pasteurella multocida A:1 (Carter’s capsular type A：Heddleston’s somatic type 1),
showing atypical biochemical characteristics, i.e., positive in acid production from Lactose
and positive in hydration of o-nitrophenyl-β-D-galactocpyranoside. This is the first reportof bovine septicemia caused by P. multocida A:1.
── Key words: Pasteurella multocida Serotype A:1 Vegetative endocarditis

１）広島県西部家畜保健衛生所（〒 739-0013 広島県東広島市西条御条町 1-15）＊連絡先 河村美登里 E-mail:njwchikusan@pref.hiroshima.lg.jp
２）独立行政法人 農業・食品産業技術総合研究機構 動物衛生研究所（〒 305-0856 茨城県つくば市観音台 3-1-5）
３）広島県農林水産局畜産課（〒 730-8511 広島県広島市中区基町 10-52）
４）広島県東部家畜保健衛生所（〒 720-8511 広島県福山市三吉町 1-1-1）
５）広島県北部家畜保健衛生所（〒 727-0011 広島県庄原市東本町 1-4-1）
─ 99 ─

広島県獣医学会雑誌

要№ 25（2010）

約

広島県内の乳用牛約 40 頭を飼養する農場で，35 日齢の子牛 1 頭が，呼吸器症状と四肢関節の腫脹を呈し斃死した。病性鑑定の結果，非定型的生化学的性状（ラクトース分解能陽性
およびβ-ガラクトシダーゼ陽性）を示す Pasteurella multocida 血清型 A：1（莢膜抗原
Carter の A 型，菌体抗原 Heddleston の 1 型）が分離され，左心室の疣贅性心内膜炎を伴う敗血症と診断した．牛から P. multocida 血清型 A：1 が分離されることは稀で，同様の病態に関する報告はない．
──キーワード Pasteurella multocida 血清型 A:1

疣贅性心内膜炎

日本獣医師会雑誌，63(11)，866-869(2010)

─ 100 ─

広島県獣医学会雑誌№ 25（2010）

他誌掲載論文鉄キレート剤により治療した牛急性大腸菌性乳房炎 2 症例
篠

塚

康

典

Therapeutic trial with iron-chelator for acute coliform mastitis in 2 dairy cows.
YASUNORI SHINOZUKA
Miyoshi Veterinary Clinical Center, Hiroshima P.F.A.M.A.A.
Tokaichi-Higashi 3-6-36, Miyoshi, Hiroshima 728-0013

SUMMARY
We evaluated the therapeutic efficacy of iron-chelator with acute coliform mastitis in
2 dairy cows. In virtue of the moderate to severe clinical signs, flunixinmeglumine (2 mg/kg), a commercially available non-steroidal anti-inflammatory drug was administeredintravenously (IV), and IV fluid therapy was initiated as systemic treatment. As a local
treatment, mammary irrigation using a sterile saline solution (1000 ml) containing
dexamethasone (10 mg) was performed. After milking out the infected quartercompletely, intra-mammary infusion of 500 mg deferoxamine was performed. After
treatment, somatic cell counts and the number of bacteria decreased gradually, milk
production increased gradually without subsequent milk loss. Over all, this treatment
allowed immediate recovery of the cow with no side effects and a perfect recovery of milk
production. These our results provide clinically useful information that can be applied toachieve good recovery of milk production.

要

約

乳牛の牛急性大腸菌性乳房炎 2 症例に対し，泌乳能力低下の原因となる乳腺組織損傷の抑制と原因菌コントロールを目的として，鉄キレート剤を用いた治療を行った．2 症例とも全身治療（補液および非ステロイド系消炎剤）を投与するとともに，局所治療として，デキサ
メサゾンを溶解した生理食塩水を洗浄液とした乳房内洗浄療法を実施後，鉄キレート剤を乳房内投与した．抗生物質は全身・局所とも使用しなかった．2 症例とも，乳汁中生菌数と体細胞数は漸減するとともに乳量は次第に増加し罹患前と同等の泌乳能力を回復した．これらのことから，鉄キレート剤の乳房内投与は，牛の牛急性大腸菌性乳房炎の治療法の一助となる可能性があると考えられた．
家畜診療，57, 405-410(2010)広島県農業共済組合連合会三次家畜診療所（〒 728-0013 三次市十日市東三丁目 6-36）
─ 101 ─会

報〈学会開催のご案内〉
１）平成22年度日本獣医師会獣医学術学会年次大会（岐阜）（１）日時：平成23年２月11日（祝）～13日（日）

（２）場

所：岐阜市

長良川国際会議場

岐阜市

TEL

TEL

058-296-1200

岐阜都ホテル058-295-3100

２）平成23年度獣医学術中国地区学会（１）開催日時：平成23年10月15日（土）〜16日（日）（２）開催場所：ホテルグランヴィア広島〒732-0822

広島市南区松原町１番５号

TEL

082-262-1111※慣例により、平成23年度広島県獣医学会は、この中国地区学会として開催されますので、積極的に参加、発表をお願いします。
上記学会は、獣医師生涯研修事業ポイント取得対象学会となっております。
会員各位、多数御参加くださいますようお願い申し上げます。

編

集

後

記

本誌第 25 号をお届けします。最初の編集委員会で瀧口会長より故山下先生の訃報と経緯を伺い、あの優しい笑顔が思い出されました。家畜保健衛生所勤務のころ
NOSAI の発表会で講師をお願いし気軽に引き受けていただき、以来大変お世話になりっぱなしでした。本人のご意思で密葬されたとのことで、最後の別れもできず、
また今まで頂いた恩も返せず残念でした。ご冥福をお祈りします。さて、平成 22 年はサッカーワールドカップ
南アフリカ大会予選突破で沸き返ったものの、宮崎県口
蹄疫発生で（全国の畜産会は厳戒態勢となり）最終的には 29 万頭弱の牛豚が殺処分されました。さらに記録的猛暑の夏が９月まで続き熱射病が多発し、庄原や世羅では猛烈な集中豪雨で土石流が発生し家屋・田畑が流され尊い命が失われました。
第 54 回県獣医学会は８月 22 日リーガロイヤルホテ
ル広島を会場として開催され、産業動物・公衆衛生部門
17 題、小動物部門 15 題が発表されました。市民公開講座として岡田先生による「愛犬と楽しく暮らそう、犬のトレーニング --- 犬に芸を教えてみませんか？」の講演会があり好評でした。開会式において第 53 回発表演題の中から次の３題の学術奨励賞の表彰がありました。

「産業動物」部門 篠塚康典先生の「鉄キレート剤により治療した牛急性大腸菌性乳房炎２症例」「小動物」
部門 上岡尚民先生の「イヌの白内障乳化吸引術 47 症
例の術後成績の比較検討」「公衆衛生」部門 花木直喜先生の「細胞破砕器を用いた食肉中の尿素窒素の測定について」 さらに第 24 号掲載論文の中から、尾村特別賞として 黒瀬智泰先生の「血便を呈した急性コクシジウム症に対するデキサメサゾン投与効果の検討」が表彰されました。今後とも会員の皆様の学術・技術の研鑽と相互の理解・レベルアップのための有意義な学会とするために積極的に参加・発表をお願いします。
平成 22 年度中国地区３学会（岡山）では次の三題が優秀演題に選ばれました。
産業動物部門「まきづめ牛に発生した蹄底潰痬に対する傾斜つき蹄ブロックによる治療方法の検討」
大下 克史先生「 黒 毛 和 種 繁 殖 農 家 で 発 生 し た Clostridium
hemolyticum による細菌性血色素尿症」
篠塚 康典先生
小動物部門「筋肉・腱疾患における CT 検査の有用性」
谷浦 督規先生（檜垣 恒夫 記）

─ 103 ─社団法人広島県獣医師会広島県獣医学会雑誌投稿規程（目的）する。ただし、特別投稿については、この限りでな

第１条 この規程は、社団法人広島県獣医師会（以下「本い。（刷り上がり１頁は、400字詰め原稿用紙の約６会」という。
）に所属する広島県獣医学会（以下「学会」という。
）が発行する、広島県獣医学会雑誌（以下「学会誌」という。
）の投稿に関する事項を定める。

枚に相当する。）
（費用）
第10条

すべての投稿の掲載料及び学会誌発行に関学会誌は, 獣医学に関する領域での臨床、公する費用は、本会が負担する。ただし、別刷り30部

衆衛生、畜産及びこれらと関連のある諸問題に関すまでは無料配布とし、それを越えるものは、実費をる論文、報告その他関連記事を掲載するものとする。

徴収する。別刷りを希望しない場合は、投稿時その第２条

 なお、各原稿の内容における、症例及び実験動物の取り扱いは、「動物の愛護及び管理に関する法律」

旨を原稿に記載する。
第11条

特別投稿については、相当する額の謝金を支に照らし、動物の取り扱いに関し、倫理上の問題が払うことが出来る。謝金の有無及び額は、編集委員会

ある原稿は、採択しない。

が決定し、学会評議員会の承認を受けるものとする。

（投稿）（執筆要領）

第３条

第12条

学会誌への投稿者は、本会の会員でなければとおりとする。

ならない。
第４条

推薦投稿及び一般投稿の執筆要領は、次の各年学会で発表され、学会評議員会において（１）原稿用紙は、第９条による。

審議決定されたもの（以下「推薦投稿」という。
）（２）新かなづかいを用い、横書きで簡潔に記述する。

を掲載するものとする。

（３）原稿第１枚目に標題、著者名、所属（〒住所）

学会規程第12条第２項による編集委員会が必を邦文及び英文で書き、次いで、要約（邦文原要と認めたときは、特に依頼して投稿（以下「特別稿で600字以内、英文要約で500語以内）、序文、投稿」という。
）を求めることができる。その場合

材料と方法、成績、考察、結語、謝辞、文献のには、第４条の適用を受けない。

順序とする。

第５条

第６条

会員で投稿（以下「一般投稿」という。
）を希望する場合、その採否は、編集委員会で決定する。
その場合、投稿に関する規程は、本規程の適用を受スでタイプしたものとする。
（４） 原稿は、正、副各１部、計２部提出する。副
の１部は、コピーとする。

けるものとする。

 なお、原稿コピーの１部を著者は、保存して

（編集）
第７条

 なお、英文要約は、タイプ用紙にダブルスペー

学会誌は、原則として次の区分により編集さ

置くこと。

れる。
「総説」
、
「原著」
、
「報告」
、
「技術研究レポート」（５）外来語は、カタカナで書く。外国人名や適当等推薦投稿及び一般投稿は、他誌に未発表であるこな日本語訳のない術語あるいは地名、薬剤名等とが望ましい。ただし、他誌掲載論文の場合は、掲

は、原綴りを用いる（なるべくタイプ）。学名は、載された雑誌名、巻、号、頁と邦文、英文の要約のイタリック体を用い朱のアンダーラインで示す。
（６）特殊な、あるいは特定分野のみで用いられてみを本誌に掲載する。
 また、学会誌には、推薦投稿、特別投稿及び一般
投稿のほか、学会案内及び編集委員会が必要とする

いる単位、符号、略号及び表現等には、必ず簡単な説明を付けること。
（７） 図、表、写真には、図１、表１及び写真１な

学会会務を掲載することができる。
すべての投稿の掲載順序等は、編集委員会にどの番号を付け、本文とは別に添付し、本文原おいて決定する。また、推薦投稿、一般投稿につい稿の欄外にそれぞれの挿入希望部位を指定（朱第８条ては、編集委員から原稿の加除、変更を求めること書）する。図、表及び写真は、明瞭なものでながある。

ければならない。カラー写真等を希望する場合

原稿は、パーソナルコンピュータを使用しては、その旨明記（朱書）する。ただし、費用に原稿を作成し、A４判用紙を使用し、１頁を25字×ついては、
原則として実費を徴収するものとする。

24行として行間をあけ横書きとする。また、やむを なお、編集委員会が、カラー印刷が必要と認得ない場合は、A４判400字詰め25字×16行の原稿

めた写真については、学会誌発行費の予算の範用紙を用いて作成する。

囲内において本会が負担する。

第９条

 推薦投稿及び一般投稿についての最大制限頁数
は、刷り上がり５頁以内（A４判図表を含む。）と
─ 104 ─（８）章節のはじめかたは、なるべく１２---、１）２）---、ⅰⅱ---の順にする。

以降は、筆者校に基づいて編集委員会が行う。

（９）文献は、本文の引用箇所の肩に１）, ２）, ３）

第14条などの番号で引用順に示す。

投稿は、封筒の表に「原稿在中」と朱書し書留で郵送する。持参の場合は、受付証を手交する。

 なお、末尾文献表は、本文中に引用したもの

宛て先に限り必要最少限に止どめる。著者名は、２名〒734-0034 広島市南区丹那町４番２号
社団法人広島県獣医師会までは列記し、３名以上の場合は、筆頭者のみ

TEL（082）251－6401

を記し、以下は、ほか（et al.）とする。
第15条

 文献の記載方法は、次の例による。

この規程に関して疑義を生じたときは、編集委員会の定めるところによる。

〔雑誌〕

第16条

著者名：論文表題（原則として記述する。
）
，
誌名，巻，

この規程を改廃しようとするときは、編集委員会が行い、理事会の承認を得るものとする。

頁（西暦年）《例》
１）清水亀平次：牛の非定型抗酸菌感染について，

附則

日獣会誌, 36, 507-514（1983）
２）Yuasa, N., et al.：Avian Dis., 24, 197-201（1980）〔単行本〕
著者名：書名, 編集者名, 版, 頁, 発行所, 発行地（西１

この規程は、昭和60年９月9日から施行する。

２

この規程は、昭和61年５月20日から施行する。

３

この改正は、平成12年12月20日から施行する。

４ 第２条の条文については，学会誌第17号の編集か

暦年）ら適用する。

《例》

５ この規程は、平成17年４月１日から一部改正し施

１）笹原次郎：最新家畜伝染病, 越智勇一編, 第１版,

行する。

209-212, 南江堂書店, 東京（1970）６ この規程は、平成19年３月５日から一部改正し施

２）Senll, E.S. and Atkins, E.：fever. In The Infiammatory

行する。
７ この規程は、平成19年６月19日から一部改正し施

process, Grant, L. and Mc-Cuskey, R.T.editors, 465-506,

行する。

Academic Press Inc., New York（1965）
第13条

８ この規程は、平成22年８月18日から一部改正し施初校は、著者が原稿の控えを用いて行う。

行する。

ただし、校正の際の新たな加筆は、認めない。再校

編

集

委

員

会

大

竹

昭

仁

小

川

博

美＊

柴

崎

文

男

大

丸

秀

士

高

尾

信

一

竹

中

雅

彦

田

村

慎

司

檜

垣

恒

夫

松

重

忠

美

務

中

昌

己

山

岡

弘

＊＊

二

＊委員長 ＊＊副委員長（あいうえお順）

広島県獣医学会雑誌
第 25 号
2010 年 11 月発行
発

行

所 社団法人 広 島 県 獣 医 師 会
広島市南区丹那町４番２号（〒 734-0034）
電 話 広島（082）251-6401
ＦＡＸ 広島（082）255-3424
E-mail:hiro-vet@atlas.plala.or.jp
http://www.hiro-vet.or.jp

発行責任者
印

刷

所

瀧口

次郎

編集責任者

小川

博美

中本総合印刷株式会社

広島市南区大州５丁目 1-1（〒 732-0802）
電 話 広島（082）281-4221

─ 105 ─株式会社アス

コ

エバルスアグロテック株 式 会 社
ヒ カ リ サ カ モト 株 式 会 社
広 島 県 薬 業 株 式 会 社（アイウエオ順）

─ 108 ─The Hiroshima Journal of Veterinary Medicine
No.25 November 2010
CONTENTS

1
9
13
17
21
25

広島県獣医学会雑誌
第 25 号
平 成 22 年 11 月

広 島 県 獣 医 学 会

31
37

45

第二十五号

41

49
55
59

THE
HIROSHIMA JOURNALOF
VETERINARY MEDICINE（HIROSHIMA-KEN JUI GAKKAI ZASSI）

63
67

No. 25

71

November 2010

75
81
89
97
平 成 二 十 二 年 十一月

SUMMARY OF PAPER PUBLISHED IN OTHER JOURNAL
Bovine Septicemia with vegetative endocarditis caused by Pasteurella multocida A:1
MIDORI KAWAMURA ………………………………………………………………………………………… 99
Therapeutic trial with iron-chelator for acute coliform mastitis in 2 dairy cows.
YASUNORI SHINOZUKA ……………………………………………………………………………………… 101
ANNOUNCEMENT
Schedule of Allied Meetings …………………………………………………………………………………………… 103
Contribution Rules ………………………………………………………………………………………………………… 104

THE OFFICIAL ORGAN OF
THE HIROSHIMA PREFECTURAL ASSOCIATIONOF VETERINARY MEDICINE

広 島 県 獣 医 学 会 雑 誌

REVIEW
Change and development of animal hospital -From my thirty-eight years experience FUMIO SHIBASAKI …………………………………………………………………………………………
FARM ANIMAL
Evaluation of metabolic acidosis in calf diarrhea and bicarbonate dose setting using clinical symptom score
TOMOYASU KUROSE …………………………………………………………………………………………
Observation of the phalanges in 2 milk cows with intractable disease of the footKATSUFUMI OOSHITA ………………………………………………………………………………………
Cardiac anomaly in 2 infirm calves of Japanese Black Cattle
YOSHIHIRO IBARAKI …………………………………………………………………………………………
Analysis of bovine RS virus field strains isolated in Hiroshima Prefecture
TAKESHI YAMAMOTO ………………………………………………………………………………………
Instruction in raising calves of Japanese Black Cattle aiming at increasing the number of Hiroshima Cattle
HIROAKI KOBAYASHI ………………………………………………………………………………………
The Production of in-vitro fertilized embryos from Holstein cattle in the early lactation period
YASUHIRO OGATA …………………………………………………………………………………………
SMOLL ANIMAL
A case of feline chylothorax
YASUHIRO SONODA …………………………………………………………………………………………
A perinephric pseudocyst in a cat after laproscopic renal capsulectomy
YUKO YAMASHITA …………………………………………………………………………………………
Sick sinus syndrome diagnosed by Holter electrocardiography in a miniature schnauzer
NORIKO KUROSE ……………………………………………………………………………………………
Two dogs in which a calcium antagonist (diltiazem) was effective for heart rate control in atrial fibrillation
YOSHITAKA ARAMAKI ………………………………………………………………………………………
Reduction of distal tibial comminuted fracture using an original hook-plate in a cat
AKIRA SAKURADA …………………………………………………………………………………………
A miniature dachshund with non-regenerative immune-mediated hemolytic anemia treated with leflunomide
MAYUKO OOSUGI ……………………………………………………………………………………………
A dog with an intrabronchial foreign body
TOKUNORI TANIURA …………………………………………………………………………………………
Lobectomy of the lung in a Jack Russell Terrier with congenital lobar emphysema
MASAHIRO SETODA …………………………………………………………………………………………
PUBLIC HEALTH
Prevalence of spotted fever group rickettsia in dogs in Hiroshima Prefecture
SHIGEO MORINAKA …………………………………………………………………………………………
Molecular-epidemiological Analysis of Enterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7 Isolated in Hiroshima CityAKEMI SUENAGA ……………………………………………………………………………………………
Epidemiological analysis of enterohemorrhagic Escherichia coli isolates in Hiroshima Prefecture from 1999 to 2008
SACHIKO OOHARA …………………………………………………………………………………………
Characteristics of Viral Gastroenteritis in a Pediatric Population in Hiroshima Prefecture during the 2002/03 and2008/09 Epidemic Seasons
YUKIE TANIZAWA ……………………………………………………………………………………………
Measurement of urea nitrogen using a cell disruptor
NAOKI HANAKI ……………………………………………………………………………………………

THE
HIROSHIMA PREFECTURAL ASSOCIATIONOFVETERINARY MEDICINE