魚の生体染色にっいてI

注射による二ジマスのウロコの 染色効果について
小ApplicatioH

林哲

Of Biological夫

StaiD for Pish

Study I・

Effectiveness of Biological Stain for the StudyOf Scale fD Kainbow Trout by Injection.
TetsuoExperiments
andas

have been

the marking

KOBAYASHI

done t0 determine the effectivenessagent fn the fish employing

S andPb‑acetate

Threekinds Of Alizarin

wereused. Stain solution
redphysiological sonution andS solution
1.0%

werewerein distilled

Of biologicalstain for the scale study

rainbow trout {Salmo gai‑rdnentoprepared,

namely1.0%and0.5 %Pb‑acetate

solution

wasusedwater.

bodyirideus'). Alizarin

injected

muscle 0f rainbow

red

trout

respectively.

each;n 0.67%

as

0. 1 %;n water(distilled).
The

results 0f the experiment indicate that partial staing withstaingwith

Pb‑acetatemusclepink

annulus markis unsuccessfu1. In each

injected

part,while ;n the scales distant fromwithmmAlizarinred

S fs successful

experiment

by injection

widthclearly observed ;n the scales around thewasthe injected parts these0f Alizarin

butwerered S into thefoundnotanyannulus

mark.
生体染色の方法は通常，組織学的，細胞学的研究に広く用いられ，その機構解明に大きく役立つている。
―力水産研究の面において七魚類のある期間の成長屋，年倫形成時期の決定，並びに標識の目的等のために・その応用面は極めて大きいと考えられる。
HiyamaanH ICMkawa・(l952 ， 195 めはキソギヨ ，マ" ゼに，またN ね hiwaki

and Yagi (l953) はスジイルカに夫人酪酸鉗を注射してその明かな効果を見出している。今回，筆者はアリザ
リソ レッドS 並びに酷酸鉗を二ジ ? スに注射してそのウロコにどの様な染色効果があるかを知るため二，三の予備的な夫鹸を行った。
この丈鹸を行三に当り，飼育管理に多大の労を煩 した千歳支場菅原弥太郎氏，又材料の提供並びに睡六便宜亡司られた道止水産
牌化場及び同場千歳支場負 各位に対して深謝する。支，尖鹸方法について
色々と5，@jL を与えもれた北人水産学部久保達郎，札幌医大山崎英雄の両先生に対し厚く御礼申上げる。

実
実験は l957 年 2 月 l2

口

験

方法

，千歳支場において隅化後約l0 ヵ月を経た体長8 0‑11.0cmの二ジマスを用いた。

・染色液は生理食塩水，蒸溜水を溶媒としてアリザリソレッドS の 3 唾類の注外悌
こと酷 酸鉗の l 種の注射液を 夫夫用いた。アリ ザりンレッドS 染色液は 0． 67%
溜水に l． 0%の生理食塩水中にアリザりソレヅド S を l 0%・と0． 5%

又， 蒸の割今で夫々 混合して3 種類の注射液を作つた。又酪酸鉛の染色液は蒸溜水に酷酸鉛0 l % の割合
・

北侮迫さけ・ます ふ化場研究業績第 l49 号
・さけ・ます ふ化場 : 研究報告第・l4 号で溶解した。

夫々の実験E 分並びに実験尾数を示せば下記の通りである。
Exp.

Stain andNoSOlvent

percent

Alizarin red S 1.0%
I． 0%

KL0f ‑fish―Number

Distilled waterl50. 67 %I5

Physiological solution

I40． 5%W

0. 1 %

Pb‑acetate

注射の方法は魚を I． 0%

DistilledI5waterのウレタリ溶液で麻酔して後，注射針 □ 4m 山口径の注射器で魚体の心体側の背筋(背鰭の下部) に筋肉注射した。
注射量はアりザリソレッドS ，及び酪酸鉛，共に魚体の大きさlcm
0． 0lccに対しての割合で筋肉注射した。

注射した各実験
魚は夫々 標識をつげ，水温8。 C‑12。 C の 湧水で飼育した。
そしてfi5 日後の4 月 l6 日に測定，採鱗を行い，アリザりソレッドS 注射のウロコの標本はそのままの状態で， 又酪酸鉛注射のものは硫化水素で処理 CHiyamaand Ichikawa'52)

して夫々 染色の有無を観察した。尚 アリ ザリソレッドS 注射の芙験魚の―部は継続して飼育し 時間の経過並びに成長にともないその染色結果がどの様に変化するか観察した。

観察結果

アりザりソ レッド s について
アリザリソレッドS の染色波の注射による魚体への障害は明らかでないが，別途，予備実験
0 25%)
・(濃度 l 0%・―において呼吸，漉泳への障害並ぴに擁死は認められなかった。
しかし今回の実験において各宍験共， 麓死魚が生じた。即ち，実験I (充詔水によをL． 0%)― 15 尾中，3 尾， 弊死率20.0%

食塩水によるl． 0%)― わ 尾中4 尾， 蝉死率26.7%，実験B (0.67%

2 尾， 幣死率 l4.3%の死魚が夫々 生じた。

注射後の休色の変化にっいてはt‑2，実験fT (0.67%の生理食塩水による0． 5%)の生理l4 尾巾，日後， 鯛蓋， 鯉条骨の表皮，腹部等の色素の少い部分は淡紅色に変色して，その表皮にアりザリソレッドS の赤色色素が顕徹鏡により観察された。
そして―般的に魚は黒味を帯びた休色となる。しかしその様に染色された部分は日時の経過にともない大部分は次第に退色する。又注射した部分は注射直後，黒く変色するが後赤色に変り長期間，その痕跡が残ゐ。
ウロコの染色状態にっいて，染色されたウロコには
幅 O． Q3‑0Circuli l‑2． 05mmの淡紅色に染色された 環状部分が本に亘って明瞭に示された(写真 B) 。 その染色環の色彩の濃淡は―様でなく，―般に濃い染色環を有するウ @a コはその染色環の内側の部分七 淡紅色に染色される傾向があるが染色環は明瞭に識別する李が出来た。ス染色環の外側の部分は全く染色されないで注射後 65 日には新らしいdrrnliが 3‑4木形成されている。 この様な染色環を有するウロコは魚体の全部のウ " コ C 示されず，その洋射部分の附正のウロコにのみ観察された。即ち第 I 表に示された通り実験I ，注射時，n，

L 共その注射部からのウロコはl00% 染色環が観察された。又アリ ザリソレ，ド S の 惨透が見られた左体側からのウ L コに約50%

Table 1． Showing

the number

taken fromeach

Of fish with stained scale (+)

partofpercent

stained scale (― )body ineachexperiment.
Number

Stain and内外の染色環を有する個体が観察

and without

Of fishSOlvent―l+I2

O． 5%

l2t2L5NOte;*@ Partinjected魚、 の 生体染色についてされた。しかし胸鰭，脂鰭の 卜部 並びR，下郡のウロコには染色環を有するものは全く観察されなかった。
又この様な染色環を有するウロコを酸 (氷酷蜘 で処理した場合，その染色部分は次第に退色現匁を起し 又アルカリ (苛性ソーダー) で処理した場合は若干発色現象を起し，通常，アリザリゾレ，ド S の 酸，アルカりに対すると同様な反応の示す車が観察された"
次に注射後 2 ヵ年間 (777H)

飼育した標本かも採集 L， た ウロコ u959

年 3fn30

口採取) にも第l 回の染色環が消失する事なく，明瞭に観察されたC写真f 。
コ

酷酸鉛 について硝酸鉛を注射された魚につ: 、 ではアりザりソレッドS の場台と異り ，その休色には何等変化も見られず， 又注
射後，塊死魚も見られなかつた， 旺射してから65 日後の魚のウ U コはHiya 皿 aand

Ich@kawa('52) が用いたと同様なガ法により硫化水素で鉛の硫化を試みたが， 第 l 表の芙験ff@ 示された如く 注射郡並びに休の各部のウ
ロコにはその染色現象は全く観察する車が出来なかった，考察ァリザりソレッドS を染色液とレ二 魚の体に注射した
場合の障害にっいては充分明らかな報告は照い，今回の実験に先立つて行われた予備実験においては蝉死魚は見られなかつたが，今回の突験には l4 ． 3‑26.7%の姥死魚を十じ ，これに対して酷醗鉛において弊死が児られなかった車からしてぞの障害は或 る程度あると考えられる。 しかしこの様な障害につい‑r は注削方法並びにぞの時の魚の生理状態，そし‑r 薬品自身の毒性等
色々な原因も考えられ，その詳細な事にっいては今後の実験に侯たねばならない。
ァりザりン
色素は通常，水に不溶性の色素であるが筋肉汁射された夫験魚は旭置後，l ― 2 口 してその鯛蓋，腹部等が淡紅色に変化する車からその色素の‑ 部は血液等により体の各部に運ばれる車は明らかである。 しかしながら英色環を有するウ @@I̲r はその注射部附
正或は注射液の 惨透が見われた部分のみ観察され，注射部位から遠く離れた所のゥ u コには染色現象が全く見られなか@@@)だ「この事はァりザリン色素の不溶性を示すと共に，それにともなうウ U コに 附首した染色色素の可視的な発色の度合によるものと推察される。しかしこの様なアりザソ染色は如何なる機構によつてなされるのか明らかでない。
レリドS による魚のウ U コの部分的なウロコの染色
環は―般に淡紅色を示し Circu@il ‑2本に亘り0 03‑0・． 05mmの 幅で明瞭な環状に形成される，そしてその内側の染色は極めでうずいか或は父殆んど認められない。
この様な事から染色環は注射後のウ Lコの 成長部分を示し， ぞの染色環はアリザりソ色素の染色効カのある期問に成長した部分と考えられる。
従づてその内側の部分は
注 引前に形成した部分と考えられる。
染色環の幅はゥL コの成長と‑H;身 すされた
アリザりソレ・ノド

S の染色効カとの復今した結果を示す七のと推察され， ウロコの成長と色素の染色効果の持続性にづいて今後の 菜験に期待し度い。 又ウU コの アリ ザリンレッドS に染色された部分の酸，りン レッドS の 酸，

? ルカ りに対する反応は， アリ ザアルカリに対する反応と同様に退色，発色の現珠が認めもれた。
しかしながら江別してから2 ヵ年問の飼育の標本にもその第 I 口口の染色環が明瞭に認められた
車は ウ ココの組織内のァリザりソ色素が魚の 体内において比較的安定した状態で存在する事を示すものと考えられる。
・方，硝酸鉗の注射においてそのウ U コの染色は全く認められなかった
安は突験の不備による
4， のか或は又魚

白 体の生理的な色々 な作用による七のか，今の所明らかでない，以上二ジマスのウ。コ に対するアり ザリンレヅ ド S の染色効架についで述べたがぞの結果，酪酸釦 (Hiyam"I・ hikawaと同様，焦り成長，標識等の研究に指標の―づとして成る程度期待出来るものと考えられる，

'52)

献

文
・Hiyama,Y.

and

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Nishiwaki, M.
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