広島県獣医学会雑誌
第 36 号
令 和 4 年 7 月

広 島 県 獣 医 学 会

THE
HIROSHIMA JOURNALOF
VETERINARY MEDICINE（HIROSHIMA-KEN JUI GAKKAI ZASSI）

No. 36
July 2022

THE
HIROSHIMA PREFECTURAL ASSOCIATIONOFVETERINARY MEDICINE

総広島県獣医学会雑誌

第 36 号

目次

令和４年（2022）

説

農場 HACCP および JGAP 家畜・畜産物認証の現状と今後の方向
西貝正彦………………………………………………………………………………………………… 1

産業動物
広島県における Streptococcus ruminantium の分離状況
船守足穂，細川久美子，兼廣

愛美，石浦

英文……………………………………………… 11

広島県内フリーストール酪農場での牛マイコプラズマ性乳房炎発生事例
髙嶋

実和……………………………………………………………………………………………… 17

蹄背壁に発生した肉芽形成を伴った難治性縦裂蹄の 1 症例
大下

克史，酒井

亮，堀

香織……………………………………………………………… 23

注射器製フィステルを使用した皮下膿瘍の治療法の検討
稲場緑，堀香織……………………………………………………………………………… 27

温暖地域の福山地方における牛の受胎率と妊娠期間の調査
秋田真司……………………………………………………………………………………………… 33

新規開発したガラス化胚保存器具「ビトラン -7」使用によるウシ胚の生存性と受胎率および生産現場における移植成績
工藤

敬幸，保本

朋宏，日高

健雅，山本

哲史，福本

豊，

荒木

秀美，御澤

弘靖，横田

文彦……………………………………………………………… 39

広島県に発生した乳用牛における胎膜水腫の発生事例
渡久川兼誉，横田美希，朝倉ひとみ，青山嘉朗，細川久美子，尾崎充彦……………… 45

小 動 物
全身性抗酸菌感染症と縦隔型リンパ腫を併発した猫の一例
三浦

京夏，坂井

森本

將弘，櫻井

祐介，砂原

央，藤野千賀子，一色優，藤森佳寿子，長峯真之，栄路，小田まゆみ……………………………… 49

絹糸反応性肉芽腫による十二指腸閉塞を発症した犬の 1 例
黒瀬智泰，小田まゆみ，三浦

山内

美彩，黒瀬

京夏，則包ゆう佳，三宅恵津也，紀子，眞鳥美沙麻，神野茜……………………………………………… 57

公衆衛生
地域猫活動の普及啓発及び支援事業について
仙田

佳織，白澤

清子……………………………………………………………………………… 63

獣害捕獲された野生タヌキ（Nyctereutes procyonoides）の年齢推定の試み
新田由美子，三木由美子，谷浦督規，谷浦直美……………………………………………… 67

広島市と畜場における牛伝染性リンパ腫ウイルス遺伝子の検出状況について
岡田

有香，国広

花木

直喜，坂本

彩耶，重松

紗希，太田垣寧，国井悦子，

綾……………………………………………………………………………… 75

他誌掲載論文
ライソゾーム病の犬でみられた頭位変換性捻転斜頚：回顧的観察研究
田村慎司，田村由美子，中本

内田

和幸，矢吹

映，大和

裕也，長谷川大輔，坪井誠也，

修……………………………………………………………… 81

５頭の健康犬におけるエプレレノンの血圧と心エコー及び血液生化学変化に及ぼす効果：パイロット研究
有田

申二，有田

昇，日笠

喜朗……………………………………………………………… 83

グラム染色による乳房炎原因微生物の迅速検出
鈴木

直樹，金子

宗平，磯部

直樹……………………………………………………………… 85

ワンヘルスアプローチによる水環境中の薬剤耐性菌の存在実態調査
増田加奈子，平塚

貴大，秋田

裕子，木村

淳子，槇本

佳泰……………………………… 87

活動報告
動物園における高病原性鳥インフルエンザ発生時のシミュレーション訓練
阿部会

勝彦（広島市安佐動物公園）… ……………………………………………………………… 89

報………………………………………………………………………………………………………………………… 91

関連学会案内
編集後記
投稿規程………………………………………………………………………………………………………………………… 92

Hiroshima Journal Veterinary Medicine（ISSN：0913-1418）
本学会雑誌（年刊）の既刊号（20 〜 35 号）は広島県獣医師会のホームページ（http://www.hiro-vet.or.jp/）の「学術情報」で閲覧・印刷できます．
収録している論文については，発行者あるいは著者に著作権が帰属します．
論文の一部または全文の転載については，原著者の許諾が必要です．

総 説
農場 HACCP および JGAP 家畜・畜産物認証の現状と
今後の方向
西貝

正彦

（農場 HACCP 主任審査員・JGAP 家畜・畜産物審査員・ISO22000 審査員）
（受付：令和 4 年 3 月 11 日）

Present and Future of Farm HACCP and Japan Good Agriculture PracticeControl Points（JGAP）for Livestock Farms
MASAHIKO NISHIGAI

Nasu ET Institute, 7-5, Shimakata, Nasushiobara City, Tochigi, 329-3152, Japan（Farm HACCP Chief Auditor, JGAP Auditor, ISO22000 Auditor）

1．はじめにもう一つの認証機関であるエス・エム・シー㈱における認証農場数は 86 農場（うち牛 19（乳用 8，肉
用 11），豚 56，鶏（卵用）11）となっている 1）（図 1）．

筆者は農場 HACCP 主任審査員，JGAP 審査員のほか，外資系の ISO 審査会社で ISO22000 審査員として約 10 年間，畜産農場及び水産や食肉の加工会社

また，農場 HACCP 認証農場取得への取り組みを支援するため，飼養衛生管理などの向上を目的とし農で審査を行ってきた．本稿では現場での審査経験を基に，「 農 場 HACCP」 お よ び「JGAP 家 畜・ 畜 産 物 」
認証の現状と今後の方向について述べたいと思う．
なお，審査基準となる「農場 HACCP 認証基準」と「JGAP 家畜・畜産物基準書」は 2022 年に改定される予定である．

2．農場 HACCP 認証の現状
平成 23 年 12 月に公益社団法人中央畜産会が農場
HACCP 認証協議会から農場 HACCP 認証機関とし

己責任に基づいて農場 HACCP に取り組んで生産された畜産物であることを明示する認証マークの貼付の申請の受付を開始し，令和 3 年 12 月現在で 30 社が許諾済みである 2）．

て認定され，農場 HACCP 認証審査業務を開始して以来，認証件数は順調に伸び，令和 3 年 12 月時点の中央畜産会の認証農場数は 339 農場（うち牛 138（乳用牛 35，肉用牛 100，乳肉牛 3），豚 108，鶏 93（卵用 80，肉用 13））となっている．
那須イーテイ研究所（〒 329-3152

場 HACCP に取り組み，一定の要件を満たす畜産農場を「農場 HACCP 推進農場」として中央畜産会が指定している．
さらに，中央畜産会は平成 30 年 7 月 2 日，農場
HACCP 認証マークを畜産製品に貼付できる制度を発足し，認証農場は，農場の看板，ホームページなどに
農場 HACCP 認証マークを表示することが可能となった．
加えて，農場で生産された畜産 製品（認証農場由来の畜産物を主体とするものに限定）についても，自栃木県那須塩原市島方 7-5）
─1─

農場HACCP認証取得農場数の推移（認証農場数）広島県獣医学会雑誌 № 36（2022）（令和３年１２月３日時点）（認証農場数）

450

399

400
350

250

0

200
150
100

0

3

57
18

33

6
8

8
20

H24年度

H25年度

1
16
28
6
6

H26年度

165
養鶏（肉用）

152

養鶏（採卵）

3

90

94

3

24

37
10
10

18
16

29
19

H28年度

H29年度

1

45

図1

91

養豚

0 78
21

H27年度

166

123

44

103

68

13
60

185

13

15

266

300

50

14
80

334

423

3

乳用牛・肉用牛

109

肉用牛

乳用牛

62

42

27
H30年度

34

42

42

R1年度

R2年度

R3年度

（令和３年12月３日時点）

農場HACCP認証取得農場数の推移

3．ISO22000 をベースにした農場 HACCP
認証基準

農場 HACCP 認証基準は 2 部構成で，第 1 部は農場 HACCP の導入に必要な基礎的な要求事項を設定したものとなっており，経営者による HACCP チー
ム責任者およびチーム員の任命，HACCP 計画の作

国際標準化機構（ISO）は 平成 17 年に HACCP と
ISO9001 マネジメントシステムを融合させた「ISO22000 食品安全マネジメントシステム（ISO22000：
2005）」（図 2）を発行し，食品安全の国際規格として世界中で認証を開始した 3）．平成 30 年には，建物，設備，洗浄・消毒などの食品安全のための前提条件プ
ログラムの特定と，いくつかの用語の定義の修正及び追加を伴った改訂が行われ，ISO22000：2018 が発行されている 4）．農場 HACCP 認証基準は ISO22000：
2005 をベースとした農場マネジメントシステムとして平成 21 年 8 月 14 日付で農林水産省から「畜産農場における飼養衛生管理取組認証基準（農場 HACCP
認証基準）」が公表され，統一された基準の下で農場
図2.ISO22000の成り立ち
HACCP が推進されることになった 5）．

成，文書・記録に関する要求事項などについて整理している．第Ⅱ部は各畜種（乳用牛，肉用牛，豚，採卵
鶏，肉用鶏）ごとに農場 HACCP をモデル的に示し，畜舎の要件，家畜の取扱い，従事者の衛生と安全などについて整理している 6）．
以下は「畜産農場における飼養衛生管理向上の取組
認証基準（農場 HACCP 認証基準）」より，コーデッ
クス委員会のガイドライン 7）に準拠している第 3 章・4 章を抜粋した内容である（第 1 章：範囲，引用文書，
用語，第 2 章：経営者の責任，第 5 章：教育・訓練，第 6 章評価，改善および衛生管理システムの更新，第 7 章：衛生管理文書リストおよび文書，記録に関する要求事項は省略した）．
第3章

危害要因分析の準備

HACCP チームは，第 4 章で記述される危害要因分析の準備作業として，次に掲げる事項を実施しなければならない．
1．素畜等の原材料及び資材
HACCP チームは，次について文書化し，保持し，更新しなければならない．
（1）原材料・資材の特徴（2）原材料・資材の予測される危害（3）予測される危害の予防措置（4）原材料・資材の供給者
図2

ISO22000の成り立ち

─2─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

2．畜・畜産物の特性

なければならない．作業の手順・方法は，準備作業，

HACCP チームは，次について文書化し，保持し，更新実施する作業，実施後の作業に分けて記述すること．

しなければならない．

（3）生産環境の文書化（1）家畜・畜産物の特徴・特性：性状，安全性や安定性①に関わる情報敷地，畜舎等の施設，主な設備及び道路等周囲の状況を明確にしなければならない．

（2）家畜・畜産物の出荷形態：生体，コンテナ，専用容②

器，包装形態等

家畜間の交差感染又は畜産物への交差汚染の予防を考慮した，清浄度区分（ソーニング）及び人，（3）家畜・畜産物の保証期限及びその条件：法規制や出家畜，物の流れ（動線）を検討すること．

荷先の規定がある場合は，それに従っていること③

敷地，道路，施設，主な設備等の配置を示した平（4）家畜・畜産物の出荷先：出荷先の名称，可能であれ

面図上に，清浄度区分を明示し，人，家畜，物，ば最終消費者までの流通経路及びそれぞれの経路に生産物等の流れをトレースし，各種動線図を作成

おける取扱いすること．

（5）家畜・畜産物の出荷先への情報 : ワクチン接種，薬（4）工程一覧図及び現状作業，生産環境の現場確認剤投与歴，出荷日，出荷量等

HACCP チームは，工程―覧図及び工程内現状作業，（6）家畜・畜産物の流通上の特別な管理：温度・湿度管

現状の日常作業及び定期・不定期作業，並びに生産

理，取扱い等特別な管理を必要とする事項

環境は正しく現状を反映したものであることを現場で確認し，必要であれば修正しなければならない．

3．意図する用途
第4章

HACCP チームは，以下について文書化し，保持し，更一 般的衛生管理プログラムの確立と HACCP 計画の作成

新しなければならない．
（1）家畜・畜産物の用途

HACCP チームは，次の手順により定める衛生管理システ（2）予測される取り扱い：加工の方法，最終調理法等

ムの基礎となる一般的な衛生管理プログラム（以下「一般（3）予測される誤った取扱いや使用的衛生管理プログラム」という）を確立するとともに（4）最終消費者の特定：乳幼児・老人・病人などハイリ

HACCP 計画を作成し，それに基づく活動を実施し，運用

スク者が最終消費者である場合はその特定し，その有効性，を確実にしなければならない．

4．工程―覧図（フローダイアグラム）及び現状作業，生産

1．一般的衛生管理プログラムの確立

環境の明確化と現場での確認

HACCP チームは，次の手順により定める衛生管理シス

HACCP チームは，以下に従い，工程一覧図並びに現状

テムの基礎となる一般衛生管理プログラムを確立するとの工程内作業，日常作業及び生産環境を明確にし，文書

ともに，HACCP 計画を作成し，それに基づく活勣を実化し，現場で確認し，必要に応じて更新し，保持しなけ

施し，その有効性を確実にしなければならない．

ればならない．

（1）一般的衛生管理プログラムを確立する場合，家畜伝（1）工程一覧図の作成

染病予防法第 12 条の 3 に基づく飼養衛生管理基準

HACCP チームは，すべての作業工程の順序及び相を基礎とし，適切な情報（法令・規則，家畜衛生管互関係並びに原材料・資材が使用される工程の段階

理ガイドライン，コーデックス委員会の「食品術生を図式化した工程一覧図を作成しなければならない．

の一般原則に関わる規則」及び「危害要因分析必須（2）現状作業（工程内及び日常定期・不定期作業）の明管理点（HACCP）システム及びその適用のための確化①

ガイドライン」等）に基づくものとすること．管理

工程内現状作業の明確化

方法は，作業手順書，作業マニュアル等の文書によ

HACCP チームは，すべての工程内作業の現状につり定めること．それぞれの一般的衛生管理プログラ

いて，作業の目的，目的を阻害する可能性のある要

ムは，第Ⅱ部の畜種別衛生管理規範を参考にするこ因，それを防ぐ注意点，使用する資機材及び作業の②と．

手順・方法を明確にしなければならない．作業の手（2）一般的衛生管理プログラムの検証は，計画的に実施

順・方法は，準備作業，実施する作業，実施後の作され，検証結果に基づき，必要に応じて修正するこ業に分けて記述すること．

と．また，当該検証及び修正は記録し，当該記録は現状の日常作業及び定期・不定期作業の文書化保持すること．

HACCP チームは，工程内作業以外で，日常的及び（3）一般的衛生管理プログラムの維持管理のための活動

定期・不定期に実施しているすべての作業について，は，文書化すること．

作業を実施する時期（問隔）・頻度および作業の目的，
2．危害要因分析（原則 1）

目的を阻害する可能性のある要因，それを防ぐ注意
点，使用する資機材，作業の手順・方法を明確にし

HACCP チームは，次により，すべての原材料及び作業─3─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

工程に存在する危害を列挙し，予防手段を文書化するこ

ターし，記録付けし，誰が確認するかを明確にすと．当該文書は，保持し，必要に応じて更新しなければ

ること．

ならない．

②

モニタリングを行う従事者は，適切に教育され，（1）危害の列挙

訓練されなければならない．

すべての原材料及び作業工程に危害となる要因が存在するか否かを，適切なワークシート③

モニタリングの記録は，保持されなければならな

を用いて列

い．

挙すること．当該ワークシートは，保持し，更新し（4）是正措置の確立（原則 5）なければならない．

許容限界を逸脱した場合にとるべき措置として，以（2）危害の特定と予防手段

下の事項を確立すること．

危害が存在するとしたそれぞれの原材料及び作業工①

逸脱した原因の究明

程について，危害に対する管理手段を一般的衛生管②

逸脱した状態で生産された家畜又は畜産物の分別

理プログラム又は HACCP 計画で管理するかを選択と処理の方法（他用途への転用，廃棄，その他）すること．管理手段の選択は，次の基準により決定③

正常への復帰しなければならない．

④

再発を防止するための対策①②

は，決裁権を有する責任者がそれに当たること．

がこの工程に存在するか又は入る可能性があるか実行された一連の是正措置は，記録し，保持しな管理条件によりその危害は増大するか又は制御さければならない．

れるか③④（5）検証方法の決定（原則 6）

発生頻度や重篤性からみてその危害は，HACCP

HACCP システムが HACCP 計画に従って実施され計画で扱うほど重要か又は一般的衛生管理プログているかを確認するための検証は，検証の目的，方ラムで管理可能か

法，頻度もしくは間隔を定め，計画的・定期的に行

HACCP 計画又は一般的衛生管理プログラムで扱うこと．

うとした理由は何か⑤

是正措置を行う際に起こる可能性のある生物的，化学的，物理的危害

検証では，以下の事項を確認すること．

危害を予防，排除又は減少させる実施可能で効果①

一般的衛生管理プログラム及び HACCP 計画が適的な制御手段があるか，具体的にどのような手段

正に運営されているかをモニタリング記録，是正か措置の記録，現場の査察，従事者へのインタビュー

危害要因分析の過程で一般的衛生管理プログラムなどにより確かめることの修正・改善の必要性が生じた場合は，修正する②

こと．

危害要因分析への入力情報が更新され，危害要因分析が行われ，HACCP 計画が有効で妥当なもの
であるかを確かめること

3．HACCP 計画の作成③ モニタリングに用いる機器が定められたとおりに

HACCP チ ー ム は，HACCP 計 画 を 作 成 し， 文 書 化 し，補正されていること

保 持 し， 必 要 に 応 じ て 見 直 し し な け れ ば な ら な い．

（6）文書化及び記録方法の確立（原則 7）

HACCP 計画においては，次に掲げる事項を定めるもの

文書化及び文書の管理，並びに記録付け及び記録のとする．

管理は，第 7 章 1 及び 2 に示す要件を満たすこと．

（1）必須管理点（CCP）の決定（原則 2）

4．JGAP 家畜・畜産物認証の現状

HACCP 計画によって管理しなければならない危害ごとに，必須管理点を明確にすること．また，必須管理点に対する管理手段を決定しなければならない．
（2）許容限界の決定（原則 3）
必須管理点において，家畜・畜産物の安全性に対する危害が起きるのを予防，排除または許容できる範囲内にするために，許容限界を決定すること．ただし，法規制で定められた値がある場合には，これに従わなければならない．
（3）監視（モニタリング）方法の確立（原則 4）（1） 技術委員会における JGAP 家畜・畜産物基準開発の経緯
日本 GAP 協会に JGAP 家畜・畜産物基準書の開発を行うための「技術委員会」が設けられ，平成
28 年 10 月以降，本格的な検討が進められ，平成
29 年 3 月 31 日に日本発の畜産版の GAP である，
「JGAP 家畜・畜産物」が公表された 8）．
JGAP の基準書は，家畜・畜産物の生産工程全体
を経営の基本，経営資源の管理，生産資材などの管理の 3 つに分類し重要な管理点を列挙している．
家畜の対象は，乳用牛，肉用牛，豚，肉用鶏および採卵鶏の 5 畜種の生体，畜産物の対象は，生乳，鶏卵となる．

必須管理点において，許容限界が守られていることを，測定，観察，確認して記録するモニタリングの手順及び方法を確立すること．
①

モニタリングの手順及び方法では，何を，どのような手順と方法で，どのような頻度で，誰がモニ─4─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

なお，JGAP 認証農場で生産された認証家畜・畜産物を使った肉（牛肉，豚肉，鶏肉），牛乳，卵な
どの商品・加工品は，「JGAP 農畜産物使用ロゴマーク」を表示することができる．

ニマルウェルフェアの考え方に対応した飼養管理指針」に基づいた対応」において，附属書として添付したチェックリストを活用して飼養管理の改善に取り組むことを求めている．なお，（2） JGAP 家畜・畜産物の基準書の構造と管理点のポイント
JGAP 家畜・畜産物の基準書は農場における家
畜・畜産物の管理の内容を 31 の項目に分類し，そ の 中 に さ ら に 合 計 で は 113 の 管 理 点 が あ る
チェックリスト形式となる．
また管理点のレベルとその数については，次のようになっている．
① 100％の適合が求められる「必須」「アニマルウェルフェアの考え方に対応した飼養管理指針」および当該指針に基づくチェックリ
ス ト は， 公 益 社 団 法 人 畜 産 技 術 協 会 が，OIE（国際獣疫事務局）のアニマルウェルフェアに関するコードで各畜種の生産システムに関する規約などに準拠して，乳用牛，肉用牛，豚，採卵
鶏および肉用鶏についてそれぞれ作成している．
④ 人権・福祉と労慟安全
東京 2020 大会の持続可能性に配慮した調達②③

コードにおいて重視されている人権，労働については，「14 人権・福祉と労務管理」で対応しており，また，労働安全については，「16 労働
安全管理及び事故発生時の対応」で対応している．

95％の適合が求められる「重要」
認証には影響しないが理想的な農場管理の取り組みが望まれる「努力」
実際の審査の場においては，基準書の管理点ごとに審査員が適合性を判断し，上記の基準をクリアしていれば審査に合格し，JGAP 認証書が交付される．なお，審査は審査員が農場に訪問して，農場が記録した各種の帳票類のチェツ⑤

環境保全
環境保全については，「20 エネルギー等の管理，地球温暖化防止」，「21 廃棄物の管理及び資

クをし，農場内の管理状況を確認する．
また，管理点に示される内容が適合されていない場合は不適合が出されるが，4 週間以内に是正を行い，その是正の報告が認められれば審源の有効利用」，「22 周辺環境への配慮及び地域
社会との共生」，「23 生物多様性への配慮」により，適切な管理を行うことを求めている．
（4） 農場 HACCP 認証基準と JGAP 家畜・畜産物の査に合格となる．
（3） 基準書の概要
基準書では，家畜・畜産物の生産工程全体を①経営の基本②経営資源の管理③生産資材等の管理

関係
農場の飼養衛生管理に HACCP の考え方を取り入れて，生産される畜産物の安全性を向上させる
農場 HACCP 認証基準と JGAP 家畜・畜産物はオおよび④自給飼料生産工程の専用項目の 4 つに分類し，重要な管理点を列挙している．
① 飼養衛生管理基準の遵守
飼養衛生に関する管理については，「4．1 飼養衛生管理基準の遵守」において，附属書として添付した飼養衛生管理基準の全項目について不適合がないことを，年一回以上，確認するこリンピックの食材調達基準においては，必須の要件となる JGAP に上乗せをする形で推奨基準として位置づけられていた（図 3）．
具体的には，農場 HACCP 認証基準の認証取得
農 場 に 対 し て は，JGAP 家 畜・ 畜 産 物 と 農 場
HACCP 認証基準との差分に関する文書を用意し，食品安全および家畜衛生に関する審査が重複しなとを求めている．飼養衛生管理基準は家畜伝染病予防法に基づいて定められており，家畜の伝染病の発生を予防するため，家畜の所有者に当該基準の遵守が義務づけられていることから，
JGAP においてもその遵守を確認することとしている．
②

生産工程におけるリスク管理
生産工程におけるリスク管理については，「6．
1 生産工程の明確化」，「6．2 食品安全上及び家畜衛生上の危害要因の評価」，「6．3 対策・ルー
ル・手順の決定」，「6．4 対策・ルール・手順の実施」，さらに記録，検証まで，管理点の順を追って段階的に実施するように作られている．

③

アニマルウェルフェア
アニマルウェルフェアについては，「7．1 ア─5─

いよう配慮した（表 1）．
表1．通常の審査と差分審査における管理点の数の比較
通常の審査と差分審査における管理点の数の比較
審査区分

管理点の数
合計

必須項目

重要項目

努力項目

通常の審査

113

57

42

14

差分審査

69

32

27

10

広島県獣医学会雑誌 № 36（2022）
図3.農場HACCP認証基準とJGAP家畜・畜産物の基準概念図

図3

農場HACCP認証基準とJGAP家畜・畜産物の基準概念図

5．JGAP 家畜・畜産物認証取得の審査状では微増に留まっている．この原因については，
東京 2020 オリンピック・パラリンピック競技会

認証の取得を希望する農場は，審査・認証機関（中央畜産会，エス・エム・シー㈱）に審査を申込み，認の食材調達もあり，多くの農場が JGAP 差分認証審査に合格することを目的して，農場 HACCP 認証を取得するようになり，それらの取得農場数が底上げして認証数の減少でなく，微増という結果になったと思われる．

証を取得するためには基準書「JGAP 農場用 管理点と適合基準」の必須項目（57 項目）に 100％適合，重要項目（42 項目）に 95％適合が条件となる．努力項目（14 項目）は認証に影響しないが，理想的な農場管理のために取り組みが望まれる．認証の有効期間

農場 HACCP マネジメントシステムの目的は，「農場で生産する畜産物の安心・安全および家畜疾病の発生リスクを管理するための枠組み」を提供することであり，衛生管理方針が「方向」を示すものであることに対して，衛生管理目標は「方針の達成度」を判定する「指標」と考えられる．
したがって，「衛生管理目標が達成している」ということは「農場 HACCP マネジメントシステムの目的」に適切に向かっていると考えられる．
このため，今後は農場 HACCP の認知度の向上

は 2 年間で，認証を継統するためには維持審査と更新審査が必要になる．認証を取得した農場は審査・認証機関により公表される．
令和 3 年 12 月 24 日現在，乳用牛 38 経営体，肉用
牛 73 経営体，養豚 51 経営体，採卵鶏 52 経営体，肉用鶏 30 経営体の合計 244 経営体が JGAP 家畜・畜産物の認証を取得している 9）．

6．農場 HACCP の問題点と今後の方向（1）「事業目的達成」等を目的とした農場 HACCP
マネジメントシステムの構築
中央畜産会の農場 HACCP 認証農場数は平成
24 年から平成 30 年まで順調に右肩上がりで増加（消費者への情報提供等）を図るとともに，図 4に示したように農場 HACCP 認証を取得した農場
では「事業目的達成」を目的として農場 HACCP
マネジメントシステムを構築していくことが望ましいと考える．
（2） リモート方式による現地審査の推進してきたが，令和元年からは認証を返上する農家が増え始め，全体では認証農場数は微増している（図 1）．認証を返上する農場数より新たに認証を取得する農場数が上回っているため，認証数は現

新型コロナウイルス感染拡大及び鳥インフルエ
ンザの全国的なまん延を受け，農場 HACCP の現地審査ができない農場では代替法として遠隔審査を令和 3 年から実施している．しかし，リモート
─6─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

農場HACCPマネジメントシステムの仕組み
組織の目的
パフォーマンス

衛生
管理
方針

HACCP
＋
A

現
状

安心・安全な畜産物の提供
コンプライアンス（飼養管理衛生基準等）
家畜疾病発生リスクの低減
内部及び外部コミュニケーション活動

規格の意図
した成果

P
C

•
•
•
•

農場HACCPマネジメント
システムの目的（最終ゴール）• 家畜疾病の予防• 安全な畜産物を消費者に提供• 衛生管理目標の達成⇒農場HACCPマネジメントシステムの継続的改善

D

外部環境の課題・内部環境の課題
利害関係者のニーズ・期待

図4

時間

農場HACCPマネジメントシステムの仕組み

農場HACCPマネジメントシステムの仕組み図の説明
1．家畜衛生方針について外部環境の課題・内部環境の課題及び利害関係者のニーズ・期待を考慮して作成した情報を開示し、衛生管理方針達成のために、農場の全部門で目標及び組織の目的を設定し、定期的に見直しを行う
2．規格の意図した成果（家畜疾病の予防、安全な畜産物を消費者に提供、家畜衛生管理目標の達成）により農場HACCPマネジメント
システムの継続的改善を図る
3．関連する法令・規制要求事項（飼養管理衛生基準等）その他の法令・規則を遵守する
4．家畜衛生意識向上のために、全社員に対して教育・訓練および内部・外部コミュニケーション活動を実施する

方式による現地審査が可能な力量を持つ審査員は限られているので，リモート審査の推進に向け，今後は対応可能な審査員の力量向上研修の実施を継続的に行う必要がある．
（3）「課題探求型」農場 HACCP 審査への転換
認証機関の審査員は，「規格要求事項への表面上の適合」に関する審査を基本とするため，審査対象となる文書や記録を入念に準備さえしておけば，
農場 HACCP 認証基準の表面上の適合について不適合が指摘される可能性は低い．しかし，農場
HACCP マネジメントシステムの「規格要求事項
への表面上の適合」と「適切かつ有効な運用（プロセスの有効性）」 と は 別 物 で あ る．
「農場
HACCP マネジメントシステムが組織に浸透しているか」，「農場 HACCP マネジメントシステムで結果が出ているか」という観点からプロセス（PDCA）の有効性・実効性を評価して，農場にマ
ネジメントシステム本来の目的を気づいていただく「課題探求型」審査に転換する必要があると思われる．

認証件数は平成 19 年を境に減少に転じている（図 5）．
ISO が大幅に減少している理由は①対外的なアピー
ル や 他 社 と の 差 異 化 を 期 待 し て ISO9001 とISO14001 を取得したが，維持・更新審査費用などのコストを上回るメリットを見いだせなかったこと②
ISO9001 と ISO14001 を導入しても社員が本来業務と全く別の活動として捉えているため，社員にとって余分な仕事となり，形骸化してしまったこと③「経営に役立つツール」と言いながら，ISO コンサルタン
トはシステム構築の定型的な指導しかしないこと ④
審査での指摘事項が規格に対する適合性のみであり，審査を受けても役に立たないこと⑤経営者の関与が薄いこと等が言われている．
これらの問題点を踏まえて，平成 27 年に ISO9001と ISO14001 の抜本的な改正が行われたにも拘らず，その後の ISO9001 と ISO14001 の認証売上額は減少の一途をたどっている（図 6）．いっぽう，ISO14001の審査員や主任審査員の登録者数も平成 25 年頃から

筆者は ISO22000 審査員のほかに ISO9001 と ISO減り始め，平成 31 年の登録者数はピーク時の 40％となっている．主任審査員と審査員を 100％稼働すると，現在の ISO14001 認証件数では審査員に対して仕事量が全く足りないので，ISO 認証売り上げが増加することが期待できない状況で，平成 28 年頃から一定数の審査員に仕事を集中して稼働率を上げるた

14001 審査員をマネジメントシステム審査員評価登録センター（JRCA）に登録しており，過去に審査経験もあるが，残念ながら，ISO9001 と ISO14001 のめ，審査員の大幅な整理が行われた結果，ISO14011の審査員数は激減した（図 7）．
農 場 HACCP 認 証 基 準 は ISO 規 格 で は な く ISO

7．最

後

に

─7─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

図5. ISO9001とISO14001認証登録件数の推移

ISO認証ビジネス2021

図5

ISO9001とISO14001認証登録件数の推移 ISO認証ビジネス2020

図6. ISO9001とISO14001の認証売り上の推移

図6

ISO9001とISO14001の認証売り上の推移

ISO認証ビジネス2021

ISO認証ビジネス2019

図7.CEAR登録のISO14001審査員の推移
12000

10000

8000

6000

4000

2000

図7

CEAR登録のISO14001審査員の推移

─8─

ISO認証ビジネス2019

ISO認証ビジネス2020

広島県獣医学会雑誌

9001 と ISO14001 とは別の規格なので，認証件数の減 少 の 原 因 は 異 な る と 考 え ら れ る が，ISO22000：
2005 をベースに発行された規格であり，共通している要求事項も多いため，将来は，ISO ISO9001 及びISO14001 と同様に農場 HACCP 認証登録件数が減少することも考えられる．認証登録件数が減少すれば，審査件数が減るので，新たに審査員研修を受ける人も減少し，農場 HACCP 審査員に登録する人も少なくな る こ と が 考 え ら れ る． こ の た め， 前 述 の「 農 場
HACCP の問題点と今後の方向」で述べた「事業目的達成」等を目的とした農場 HACCP マネジメントシ
ステムの構築及び「課題探求型」農場 HACCP 審査へ転換することが喫緊の課題だと考える．
「明日の農場 HACCP 認証登録件数」は「ISO9001・14000 認
証登録件数」である．
農場 HACCP 認証基準の改正を契機として「表面的な規格適合性審査」から「現実的で効果的な審査」への転換を目指して，農場 HACCP 構築及び審査体制の抜本的な見直しを図ることを期待したい．

参考文献
1） 農 林 水 産 省 消 費・ 安 全 局 動 物 衛 生 課： 農 場
HACCP 認 証 取 得 農 場 数 の 推 移 https://www.
maff.go.jp/j/syouan/douei/katiku_yobo/k_haccp/（2021）
2） 中央畜産会：「農場 HACCP 認証制度について」
https://jlia-farm-accp.jp/（2021）
3） 日本規格協会：対訳 ISO22000:2005 食品安全マ
ネジメントシステム―フードチェーンのあらゆる組織に対する要求事項 ポケット版（2007）
4） ISO 22000:2018 食品安全マネジメントシステム
要求事項の解説：湯川剛一郎（ 2019）5） 中央畜産会：「農場 HACCP 認証審査のために」（2021）
6） 中央畜産会：「畜産農場における飼養衛生管理向上の取組認証基準（農場 HACCP 認証基準）の理解と普及に向けて」（2021）
7） ワイアールシー FSMS 研究会：ISO22000:2005
食品安全チームのためのガイドライン―食品安全
マネジメントシステム入門（2006）
8） JGAP 協 会：
「JGAP 家 畜・ 畜 産 物 に つ い て 」
https://jgap.jp/jgap/livestock/（2017）9） 農林水産省畜産局畜産振興課：「畜産における生産工程管理（GAP）をめぐる情勢」https://www.
maff.go.jp/j/chikusan/kikaku/chikusan_gap.
html（2022）

─9─

№ 36（2022）

報 告
広島県における Streptococcus ruminantium の
分離状況
船守

足穂

細川久美子

兼廣

愛美

石浦

英文

（受付：令和 4 年 2 月 13 日）

Isolation cases of Streptococcus ruminantium in Hiroshima Prefecture
TARUHO FUNAMORI, KUMIKO HOSOKAWA, MEGUMI KANEHIRO and HIDEFUMI ISHIURA

Western Center for Livestock Hygiene Service, Hiroshima Prefecture, 1-15
Saijogojo-cho, Higashi-Hiroshima, Hiroshima, 739-0013

SUMMARY
Streptococcus ruminantium was identified by PCR in 28 Streptococcus suis strains
detected based on their biochemical properties by pathological tests in Hiroshima
Prefecture between 1993 and 2019. Of these, S. suis accounted for 95.4% (21/22) of pigderived strains, while S. ruminantium for 83.3% (5/6) of cattle/female goat-derived
strains. All of the S. ruminantium strains isolated in Hiroshima Prefecture were detected
mainly from lung abscesses, nasal discharges, and joint abscesses in mixed infections.
Presumably, one of the strains caused death due to sepsis. The bovine-derived strains
were resistant to SM, EM, LCM, TC, and TMP but were susceptible to various drugs,
including β-lactams. Furthermore, all of the S. ruminantium strains, including thosereported herein and previously, were determined to be S. suis using API® 20 STREP.
The S. ruminantium strains were generally negative for βGAL and ADH, while the S.
suis strains were mostly positive. The risks of S. ruminantium cannot be underestimatedbecause it is frequently isolated in cattle and female goats. However, its biochemical
properties are similar to those of S. suis, suggesting the need for the concomitant use of
PCR for accurate identification.
── Key words: Streptococcus ruminantium, Cattle, Sheep, Goat, Streptococcus suis

広島県西部家畜保健衛生所（〒 739-0013

広島県東広島市西条御条町 1-15）
─ 11 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

要約

平成 5 年～令和元年に広島県内の病性鑑定事例において生化学的性状により Streptococcus
suis と同定した 28 株について，PCR 法により Streptococcus ruminantium の識別を実施
した．豚由来株は 95.4％（21/22 株）が S. suis，牛・めん山羊由来株は 83.3％（5/6 株）がS. ruminantium と同定された．本県で分離された S. ruminantium は全例が混合感染で主に肺・鼻汁・関節膿瘍から検出され，うち 1 例は本菌による敗血症で死亡したと推察された．
牛由来株は SM・EM・LCM・TC・TMP に耐性の株を認めたが，βラクタム系を含む多くの薬剤に対し感受性であった．また，本報告及び既報を含め S. ruminantium は，アピ 20
ス ト レ ッ プ に お い て 全 て S. suis と 判 定 さ れ た が， β GAL 及 び ADH に つ い て は，S.
ruminantium は陰性，S. suis は陽性の傾向にあった．S. ruminantium は特に牛・めん山
羊において分離頻度が高く，必ずしもリスクを無視できない病原体であるが，S. suis と生化学的性状が類似しており，正確な同定には PCR 法の併用が必要と考えられた．
──キーワード：Streptococcus ruminantium，牛，めん羊，山羊，Streptococcus suis

はじめに定した 28 株（豚由来 22 株，牛由来 4 株，めん山
羊由来 2 株）を供試した．
（2）方法：石田らの方法に準拠した S. suis recN 遺伝

Streptococcus ruminantium は，グラム陽性通性嫌子を標的とした PCR 法 5）及び大倉らの方法に準拠
し た S. ruminantium 16S-rRNA を 標 的 と し た
PCR 法 2） により，S. suis 及び S. ruminantium の同定を行った．

気性球菌で，平成 29 年に Streptococcus suis 血清型
33 型から再分類された菌種である 1）．本菌は主に反芻類の口腔・扁桃・肺に常在しており，肺炎・心内膜炎・関節炎等からの分離事例が報告されているが，病原性については明らかにされていない 2-4）．しかし，本菌によると畜場での廃棄事例も報告 3） されていることから，畜産農家に対し経済的被害を及ぼす感染症の 1 つとして近年注目されつつある．
本菌の生化学的性状は S. suis と極めて類似し，簡2．S.ruminantium 分離状況調査
1. の菌種同定において S.ruminantium と鑑別した
5 株について，以下の調査を実施した．
（1）病性鑑定記録振り返り調査：過去の病性鑑定依

易同定キット使用時に参照するデータベース（https://apiweb.biomerieux.com/identIndex）上に S.
ruminantium のコードが存在しないことから，病性鑑定時における両者の正確な鑑別は困難であり，これまで詳細な同定は殆ど行われていなかった．しかし，令和元年大倉らが PCR 法による同定手法を報告し，病性鑑定施設を有する家畜保健衛生所においても容易に鑑別が可能となった 2）．そこで今回，平成 5 年度～
令和元年度に本県で S. suis と同定された分離株について，改めて PCR 法により S. ruminantium の同定

頼書及び回答書により，分離年度，由来畜種及び臓器，症状，病理学的診断，混合感染として検出された病原体について調査した．
（2）薬剤感受性試験：ペニシリン（PCG）
・アンピシ
リン（ABPC）
・セファゾリン（CEZ）
・セフォタキシム（CTX）
・ストレプトマイシン（SM）
・カナマ
イシン（KM）・ゲンタマイシン（GM）・エリスロ
マイシン（EM）・リンコマイシン（LCM）・テトラ
サイクリン（TC）
・エンロフロキサシン（ERFX）・
クロラムフェニコール（CP）・チアンフェニコール

を実施するとともに，分離状況を調査したので，その概要を報告する．

（TP）・トリメトプリム（TMP）の 14 種について，微量液体希釈法により最小発育阻止濃度（MIC）を測定した．ブレークポイントは臨床・検査標準協会指針及び既報の S. suis におけるデータ 6）を参考に設定した．
（3）生化学的性状試験：レンサ球菌同定用キット（アピ 20 ストレップ，シスメックス・ビオメリュー㈱，材料及び方法1．菌種同定（1）供試菌株：平成 5 年度～令和元年度の県内病性鑑定事例において生化学的性状により S. suis と同東京）により性状を確認し，得られた成績と既報の─ 12 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

S. ruminantium 参考株及び野外株 3-4, 7-9），本県で平成 29 年度に分離した S. suis 基準株 10）の成績と

（a）

比較した．

成

績

1．菌種同定供試菌株 28 株のうち 22 株が S. suis（豚由来 21
株，牛由来 1 株）
，5 株が S. ruminantium（牛由来 3
株，めん山羊由来 2 株）と同定され，豚由来 1 株はいずれにも同定されなかった（表 1）
．
表1
畜

種

牛（n=4）

S. suisS. ruminantium

1

3

めん山羊（n=2）
豚（n=22）（b）

菌種鑑別成績
other

2
21

1
（単位：株）

2．S. ruminantium 分離状況調査（1）平成 17 年度～令和元年度にかけて，主に肺・鼻汁・関節膿瘍から分離された．病理学的検査を実施
した 3 例については，いずれも S. ruminantium が分離された部位において化膿性病変が認められたが，全例が混合感染により検出されていた（表 2）．
菌株④の分離症例では，病理組織学的検査において

図1 肺の病理組織学的所見（菌株④）（a） 血管炎及び血栓形成を伴う肺炎が認められた（HE染色）（b）（a）の病変部に一致してグラム陽性球菌が認められた（グラム染色）肺の血管領域におけるグラム陽性球菌の浸潤と血管炎及び血栓形成を伴う肺炎が認められた（図 1）．
表2

病性鑑定記録振り返り調査成績

菌株

年度

畜種

S. ruminantium
分離組織

症状

病理診断

①

H17

牛

鼻汁

呼吸器病

NT

Pasteurella multocida
Staphylococcus hyicus

②

H28

牛

関節膿瘍

関節炎

NT

Trueperella pyogenes

③

H28

牛

肺

死亡

壊死性化膿性気管支肺炎
化膿性臍帯炎 等

Escherichia coli

④

R1

山羊

肺，腎臓
肝臓，脾臓

死亡

間質性肺炎
腎臓微小膿瘍形成

Trueperella pyogenes

⑤

R1

羊

肺

死亡

化膿性肺炎
小葉中心性肝細胞壊死

混合感染

等

Escherichia coli
Corynebacterium sp.

等（NT ： 未実施）
表3
菌株

PCG

ABPC

CEZ

CTX

SM

薬剤感受性試験成績

GM

KM

EM

LCM

TC

ERFX CPFX

CP

TP

TMP

①

牛

≦0.5

≦1

≦1

≦0.5

4

8

16

≦0.5

4

16

0.5

0.5

2

2

≦0.25

②

牛

≦0.5

≦1

≦1

≦0.5

128

8

32

16

64

32

0.5

1

2

2

≦0.25

③

牛

≦0.5

≦1

≦1

≦0.5

16

8

32

32

64

32

0.5

1

2

2

16

④

山羊

≦0.5

≦1

≦1

≦0.5

8

8

32

≦0.5

≦0.5

≦0.5

1

0.5

≦1

1

≦0.25

⑤

羊

≦0.5

≦1

≦1

≦0.5

4

8

32

≦0.5

2

≦0.5

0.5

1

2

2

≦0.25

■：耐性と考えられる項目， 数値：MIC値（μg/ml）

─ 13 ─

広島県獣医学会雑誌
表4№ 36（2022）

アピ20ストレップにおける生化学的性状

分離県
菌株名

年度

VP

HIP ESC PRYA αGAL βGUR βGAL PAL LAP ADH RIB ARA MAN SOR LAC TRE INU RAF AMD GLYG

β S. suis
HEM ID値

広島①

H17

－

－

＋

＋

＋

＋

－

－

－

－

－

－

－

－

＋

＋

＋

－

＋

＋

－

96.7

広島②

H28

－

－

＋

＋

＋

＋

－

－

－

－

－

－

－

－

＋

＋

＋

＋

＋

＋

－

93.1

広島③

H28

－

－

＋

＋

＋

＋

－

－

－

－

－

－

－

－

＋

＋

＋

＋

＋

＋

－

93.1

広島④

R1

－

－

＋

＋

－

＋

－

－

－

＋

－

－

－

－

＋

＋

＋

－

－

＋

－

99.6

広島⑤

R1

－

－

＋

＋

－

＋

－

－

－

＋

－

－

－

－

＋

＋

＋

－

＋

＋

－

99.9

－

－

＋

＋

＋

＋

－

－

＋

＋

－

－

－

－

＋

＋

＋

－

＋

＋

－

99.9

EA1832.92
H7以前
参考株
埼玉
H26

－

－

＋

＋

＋

＋

－

－

＋

－

－

－

－

－

＋

＋

＋

＋

＋

＋

－

99.2

山形

H23

－

－

＋

＋

＋

＋

－

－

＋

－

－

－

－

－

＋

＋

＋

＋

＋

＋

－

99.2

長崎①

H25

－

－

＋

－

＋

＋

－

－

＋

－

－

－

－

－

＋

＋

＋

＋

＋

＋

－

97.3

長崎②

H25

－

－

＋

－

－

＋

－

－

＋

－

－

－

－

－

＋

＋

＋

－

＋

＋

－

95.8

長崎③

H25

－

－

＋

＋

－

＋

－

－

＋

－

＋

－

－

－

＋

＋

＋

－

＋

＋

－

57.9

長崎④

H25

－

－

＋

＋

＋

＋

－

－

＋

－

－

－

＋

－

＋

＋

＋

＋

＋

＋

－

98.4

長崎⑤
広島S. suis
血清型14型

H25

－

－

＋

＋

－

＋

－

－

＋

－

－

－

－

－

＋

＋

＋

－

＋

＋

－

97.3

H29

－

－

＋

＋

－

＋

－

－

－

＋

－

－

－

－

＋

＋

－

＋

＋

＋

－

99.4

（2）牛由来株において TC の 1 剤耐性と考えられる株
が 1 株，SM・EM・LCM・TC の 4 剤 耐 性 と 考 え
ら れ る 株 が 1 株，EM・LCM・TC・TMP の 4 剤

ruminantium が分離され，病理組織学的にも肺の血耐性と考えられる株が 1 株認められた（表 3）．
（3）本県由来の S. ruminantium 5 株の生化学的性状は，既報の S. ruminantium 8 株及び S. suis 基準株 1 株 と 概 ね 同様であり，全株が S. suis（ID 値

による敗血症で死亡したと考えられた．既報においても，S. ruminantium は日和見感染症として分離される事例が多いが，様々な感染症を引き起こす可能性が報告されていることから 2-4），本菌は必ずしもリスク

管領域におけるグラム陽性球菌の浸潤と血管炎及び血栓形成を伴う肺炎を認めたことから，S. ruminantiumを無視できない病原体であると考えられた．

57.9 ～ 99.9％）と判定された（表 4）．

考

薬 剤 感 受 性 試 験 で は，SM・EM・LCM・TC・
TMP 耐性と考えられる株が牛から分離された．しかしながら，全株とも治療における第一選択薬とされる
βラクタム系を含む 10 種類の薬剤に対し感受性と考えられたことから，本菌における薬剤耐性リスクは高察

細菌の同定にあたっては，生化学的性状が重要な指標となるが，S. ruminantium と S. suis のように生
化学的性状が類似した菌株の鑑別には，遺伝子解析やくないと考えられた．
S. ruminantium 及び S. suis の生化学的性状は既報と同様に類似しており，アピ 20 ストレップにおいては両者とも全て S. suis と判定された．一方，表 3における S. ruminantium13 株の陽性率を API コー
ド表（シスメックス・ビオメリュー㈱，東京）に記載の S. suis のデータと比較したところ，β GAL 及びADH については，S. ruminantium は陰性，S. suisは陽性と異なる傾向にあり（表 5），これらの性状が両者の鑑別の指標となる可能性が考えられた．しかし抗血清等が必要となる．
今回，PCR 法により両者を解析した結果，これまで S. suis と同定されていた 28 株は，豚由来の 95.4％（21/22 株 ） が S. suis と 同 定 さ れ，S. ruminantiumは含まれなかった．一方，牛及びめん山羊においては83.3％（5/6 株）が S. ruminantium と同定され，S.
suis は 16.7％（1/6 株）であった．このことから，反芻類において生化学的性状により S. suis と同定される株が分離された際，正確な同定には PCR 法の併用が必要と考えられた．
病性鑑定記録振り返り調査の結果，S. ruminantium

ながら，調査対象が 13 株と少ないため，より多くの株を引き続き精査する必要があると考えられた．
S. ruminantium は，菌種再分類に伴い近年注目されつつあるが，本菌の病態を示した症例報告は現状には主に肺・鼻汁・関節膿瘍から分離されており，既報と同様であった 2）．病理組織学的検査を実施した 3 例については，いずれも S. ruminantium 分離部位において化膿性病変が認められたが，全例が Esherichia

おいては稀少である．今後の病性鑑定においても，今回用いた手法やデータを活用することで，診断精度の向上及び本菌に関する知見を蓄積していくことが重要である．

coli，Trueperella pyogenes 等他の病原体との混合感染により検出されており，S. ruminantium 単独による病態への関与の程度は不明であった．一方，菌株④の 症 例 に お い て は， 肺・ 肝 臓・ 脾 臓・ 腎 臓 か ら S.
─ 14 ─

広島県獣医学会雑誌
表5№ 36（2022）

S. ruminantiumとS. suisの生化学的性状比較

菌種

VP

HIP ESC PYRA αGAL βGUR βGAL PAL LAP ADH RIB ARA MAN SOR LAC TRE INU RAF AMD GLYG βHEM

S. ruminantium（n=13）

0

0

100

85

62

100

0

0

54

23

8

0

8

0

100

100

100

46

92

100

0

S. suisⅠ（APIコード表）

0

1

82

53

80

94

76

1

100

91

0

0

7

0

94

100

75

0

100

89

0

S. suisⅡ（APIコード表）

0

1

70

41

91

91

52

3

100

95

0

0

3

1

99

98

63

93

99

96

2

※ S. suis は API コード表において RAF の性状によりⅠ型及びⅡ型に区分（生物学的な分類とは異なる）

引用文献
1)

2)

6） Kataoka Y., et al: A 10-year survey of antimicrobial susceptibility of Streptococcus suis isolates from swine in Japan, J Vet Med, 62, 10531057 (2000)
7） Tien LHT., et al: Reappraisal of the taxonomy
of Streptococcus suis serotype 20, 22, 26 and 33
based on DNA-DNA homology and sodA andrecN phylogenies, Vet Microbiol, 162, 842-849

Tohya M., et al: Defining the taxonomic statusof Streptococcus suis serotype 33: the proposal
for Streptococcus ruminantium sp. Nov., J Syst
Evol Microbiol, 67, 3660-3665 (2017)
Okura M., et al: Genotypic diversity of Streptococcus suis and the S. suis-like bacterium
Streptococcus ruminantium in ruminants, Vet3)

数値：陽性率（％）(2013)
8） Higgins R., et al: Description of six new capsular types (29-34) of Streptococcus suis, J Vet Di-

Res, 50:94 (2019)
Sato T., et al: Streptococcus suis serotype 33
isolates from a case of bovine endocarditis, J

Vet Med, 66, 195-199 (2013)4） 荒井理恵ほか：既知の種に属さないレンサ球菌属菌が分離された牛肺炎の一症例と分離株の性状，
埼玉県調査研究成績報告書（家畜保健衛生業績発表集録，56，57-64（2014）
5） Ishida S., et al: Development of an appropriate
PCR system for the reclassification of Streptococcus suis, J Microbiol Methods, 107, 66-70

agn Invest, 7, 405-406 (1995)
9） 木山勇介ら：既知の種に属さないレンサ球菌属菌が関与した細菌性肺炎，長崎県平成 25 年度家畜保健衛生業績発表会集録，45-47（2013）10）Funamori T., et al: Storeptococcal infection with
Meningitis and epicarditis caused by Streptococcus suis serotype 14 in suckling pigs, J Vet
Med, 72, 533-538 (2019)(2014)

─ 15 ─

症例報告広島県内フリーストール酪農場での牛マイコプラズマ性乳房炎発生事例
髙嶋実和（受付：令和４年２月 14 日）

Cases of mycoplasmal bovine mastitis in a free stall dairy farmin Hiroshima Prefecture
MIWA TAKASHIMA

Higashihiroshima Veterinary Clinical Center, Hiroshima A.M.A.A, Inaki 284-1,
Takaya-Cho , Higashi-Hiroshima, Hiroshima 7392106

SUMMARY
Mycoplasmal (Mp) bovine mastitis is mastitis characterized by a marked decreaseor stoppage of lactation. Since it responds poorly to treatments, it may lead to marked
economic losses. Recently, in Hiroshima Prefecture, the second case of Mp mastitis
occurred, and 4 cows were confirmed to have breast infection. The cases developed in alarge free stall dairy farm that had about 100 milking cows, and some of the cattle had
been introduced from Hokkaido. This dairy farm had no past history of Mp mastitis. In
2017, Mp infection was detected in 2 cows (A, B) in April, 1 cow (C) in May, and 1 cow(D) in June, and all were culled. All 4 cows confirmed to be infected had been kept in thesame barn. In cow A, the first case, β hemolysis suggestive of Mp infection was confirmedby the second milk testing on the 4th day of disease, and a diagnosis of Mp mastitis
was made following pathological assessment by the livestock hygiene center. After the
diagnosis, bulk milk testing was conducted 6 times, and bedding change and dolomite
lime disinfection were performed in the sick/dry cattle barn. The M. bovis-positive cow
was given systemic and intramammary antibiotic administration, cows that had been
kept in the same barn as the positive cow were given systemic and intramammary
antibiotic or antibacterial administration as drying off tests, and pre-drying off andpostcalving tests were performed. The bulk milk tests and pre-drying off tests were all
negative. Regarding the postcalving tests, the primary testing was performed at theveterinary clinic, and 2 cows were positive, with 1 being infected by Acholeplasma. In
NOSAI 広島東広島家畜診療所（〒 739-2106

東広島市高屋町稲木 284-1）
─ 17 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

the cases reported here, it is possible that cow B was a M. bovis carrier that spread theinfection. The infection is considered to have spread to cows in the sick/dry cattle barn as
the carrier cow could not be completely quarantined.
── Key words: Mycoplasmal bovine mastitis, free stall, introduced cattle,
bulk milk testing

要約

牛マイコプラズマ（以下 Mp）性乳房炎は牛マイコプラズマ（以下，Mp）性乳房炎は , 量の著減もしくは泌乳停止を特徴とする乳房炎で , 治療効果が乏しく甚大な経済損失を招く．
このたび，広島県では 2 例目となる Mp 性乳房炎が発生し 4 頭の乳房感染を確認した．発生
場所はフリーストールの大型酪農場で搾乳牛頭数約 100 頭，育成牛の一部を北海道から導入している．当該農場では過去に Mp 性乳房炎の発生歴はない．2017 年 4 月 2 頭（牛 A，牛B），5 月 1 頭（牛 C），6 月 1 頭（牛 D）の Mp 感染を確認しすべて淘汰された． 確認された 4 頭はすべて同一牛舎内で飼育されていた．初発牛 A では第 4 病日で 2 度目の乳汁検査により Mp 感染を疑うβ溶血を確認した後，家畜保健衛生所の病性鑑定で Mp 性乳房炎と診断された．Mp 性乳房炎と診断後，6 回のバルク乳検査を実施，病牛・乾乳牛舎の敷料交換
及びドロマイト石灰での消毒を実施した．M.bovis 陽性牛には抗生剤の全身・乳房内投与を行い，陽性牛と同居していた牛に対し抗生剤または抗菌剤の全身・乳房内投与を用いた乾乳期治療を行い，さらに乾乳前検査，分娩後検査を実施した．バルク乳検査，乾乳前検査は共に全て陰性であった．分娩後検査は診療所で 1 次検査を行い 2 頭が陽性で，うち 1 頭はAcholeplasma 属菌であった．今回の発生では牛 B が M.bovis 保菌牛となり感染拡大させた可能性があった．保菌牛を完全隔離ができず病牛・乾乳牛舎の牛へ感染拡大させたと考えられた．
──キーワード：牛マイコプラズマ性乳房炎 ，フリーストール，導入牛，バルク乳検査

序

文

材料と方法
1

供試材料
1）農家概要：広島県内の酪農場で，飼養形態はフリーストール，搾乳牛頭数は約 100 頭，3 ～ 4 名で搾乳を行っており，育成牛の一部を北海道から導入し牛マイコプラズマ（以下，Mp）性乳房炎は，乳量の著減もしくは泌乳停止を特徴とする乳房炎で，治療効果が乏しく廃用率，再発率が高いため甚大な経済損失を招くとされている．本疾病は本州では散発的な発生が見られる．1，2） 広島県では 2015 年に最初の発生
3）が報告されている．
北海道では 2015 年～ 2017 年に実施された調査で，道内のバルク乳検査等にて 1.4 ～
4）
6.7％の農家で発生が確認された．
感染経路は乳汁による環境や搾乳器具の汚染による上向感染や，肺炎，
関 節 炎 か ら の 下 向 感 染 な ど が あ る．5, 6） こ の た び，2017 年 4 月～ 6 月計 4 頭の全身症状を伴うマイコプ
ラズマ・ボビス（以下，M.bovis）による乳房炎が発生したので概要を報告する．本症例は広島県で 2 例ている．搾乳牛舎，育成牛舎，病牛・乾乳牛舎があり，このうち搾乳牛舎は 4 群に分かれている．病牛・乾乳牛舎では 10 頭前後の牛を飼養できる広さがある．
（写真 1）子牛牛舎は搾乳牛舎から離れており（図 1），
子牛担当者は搾乳に従事していない．本農場では過去目の報告である．
─ 18 ─

にマイコプラズマ性乳房炎の発生歴はなく，1 頭目の陽性牛を確認した時点で，成牛・子牛ともに呼吸器疾
患や関節炎による往診依頼はなかった．

広島県獣医学会雑誌

写真1

病牛・乾乳牛舎№ 36（2022）

図1 農場模式図
引用元：Google社「Google マップ，Google Earth」
https://www.google.com/intl/ja/permissions/geoguidelines/（一部改変）

2 細菌学的検査ⅰ）血液寒天培地の直接鏡検：乳汁検査にて 5％羊血液寒天培地（37℃ 1 ～ 2 日間好気培養）上に認めら れ た β 溶 血 部 分 を 1cm2 の 格 子 状 に 切 り 取 りDienes 液で染色 7）し，顕微鏡にて青紫色に染色されたコロニーを観察する．
ⅱ）菌分離：M. spp.（DNA 添加変法 Hayflick 培地，
BHL 液体培地，37℃ 1 ～ 2 日間 5％炭酸ガス及び密栓培養），腸内細菌（DHL 寒天培地，37℃ 24 時
間 好 気 培 養 ）， 一 般 細 菌（5 ％ 羊 血 液 寒 天 培 地，
37℃ 48 時間 5％炭酸ガス培養）ⅲ）同定（遺伝子検査）：遺 伝 子 抽 出：InstaGene DNA 精 製 マ ト リ ッ ク ス（バイオラッド社）による抽出
遺伝子増幅：PCR 法（M.bovis 及び M. spp に特異

写真2

牛A・牛Bの罹患乳房

写真3

羊血液寒天培地上のβ溶血的な遺伝子を標的とする）
ⅳ）薬剤感受性試験（牛 A，牛 B）: 微量液体希釈法を用いた最小発育阻止濃度（Minimum Inhibitory
Concentration，以下 MIC）の測定
ⅴ）バルク乳検査：遺伝子検査

成績1）発生経過4 月 4 日病牛・乾乳牛舎の牛 A（3 月 22 日分娩）に詳細な検査を依頼したところ，M.bovis と診断されがほとんど泌乳しないとの稟告で往診した．初診時の体温は 39.5℃，乳房の腫脹硬結はなく（写真 2）食欲不振，皮温冷感など低 Ca 血症に類似した症状を併発していたが肺炎症状は見られなかった．初診日に診療所で行った細菌学的検査では有意菌陰性であったた
め，4 月 6 日再度乳汁を採材し好気培養したところ羊た．牛 A は抗生剤，Ca 剤などを投与したところ，解
熱し活力上昇したが泌乳が回復しなかったため，4 月
19 日に淘汰された．その間，牛 A は隔離されず，病牛・乾乳牛舎で飼養されていた．その後，4 月 21 日
牛 A と同居していた牛 B（3 月 18 日分娩）に発熱と乳房炎症状がみられた．乳房の腫脹硬結は認められな

血液寒天培地上にβ溶血（写真 3）のみが認められ，コロニーが肉眼的に認められなかった．また，臨床症状からも，Mp 感染が疑われたため，家畜保健衛生所

かったが，乳汁に凝固物が混入しており，細菌学的検査により M.bovis と診断された（表 1，2）
．牛 B は 5
月 1 日に育成牛舎に隔離され，泌乳停止したが全身─ 19 ─

広島県獣医学会雑誌
表1

PCR
M.bovis

一般細菌

牛A

＋

＋

＋

＋

＋

牛B

＋

＋

＋

＋

―

表2

症状が改善したため肥育牛となり 9 月 7 日に出荷された．牛 C（5 月 2 日分娩）は 5 月 18 日に M.bovis
陽性となり，抗生剤による治療を実施したが効果なく
6 月 6 日に淘汰された．牛 D（6 月 9 日分娩）は 6 月
19 日に M.bovis 陽性となり，6 月 30 日に育成牛舎に牛A・B検査結果

5％羊血液
直接鏡検
菌分離
寒天培地
（Dienes 染色）（β溶血）

隔離され 7 月 3 日に淘汰された．また，6 月 26 日には乳汁検査でβ溶血を認める Mp 疑い牛が発生したが即淘汰されたため家畜保健衛生所に検査を依頼していない．また，3 月末に牛 B と搾乳牛舎で同居していた牛 2 頭が泌乳停止となり淘汰されていたが，検査には至らなかった．これら牛 A ～ D の詳細を表 3 に，発生時系列を表 4 に示す．
2）Mp 乳房炎と診断後の対策

牛A・Bから分離されたM.bovisの薬剤感受性

薬剤名牛A
M.bovis≧ 106（mg/ml）

牛B
M.bovis≧ 106（mg/ml）

OTC

25

25

チルミコシン

12.5

6.25

ERFX

0.2

0.1

MRFX

0.8

0.8

フロルフェニコール

6.25

3.13

タイロシン

25

25

4 月から翌年 1 月までに 6 回バルク乳検査を実施したが，全て陰性であった．本検査法は 100 頭～ 300
頭（1 バルク）に 1 頭の陽性個体を検出できるという高い感度を有しているが，バルク乳では検出できない
陽性固体も存在するという報告がある 8）．そのため，

OTC：オキシテトラサイクリン，ERFX：エンロフロキサシン，
MRFX：マルボフロキサシン

表3№ 36（2022）

M.bovis陽性牛の詳細と予後

牛

生年月日

導入自家産

分娩月日

初診日

発生場所

体温（℃）

乳房症状

治療

治療回数

予後

A

2011 年
2/8

2012 年
12 月導入
北海道

3/22

4/4

病牛・
乾乳牛舎

39.5

泌乳停止

ABPC
ERFX

7回

4/19
廃用

B

2015 年
4/18

2016 年
12 月導入
北海道

3/18

4/21

搾乳牛舎

41.0

乳汁ブツ

CEZ
ERFX

6回

9/7
出荷

C

2007 年
7/4

自家産

5/2

5/18

病牛・
乾乳牛舎

39.8

乳汁ブツ

CEZ
CXM
ERFX
MRFX

9回

6/6
廃用

D

2013 年
8/23

自家産

6/9

6/17

病牛・
乾乳牛舎

40.5

乳房硬結
乳汁ブツ

ABPC
ERFX

11 回

6/30
廃用

CEZ：セファゾリン，CXM：セフロキシム，ERFX：エンロフロキサシン，MRFX：マルボフロキサシン，ABPC：アンピシリン

表4
年
月

2017
3

牛 B の同居牛 2 頭

淘汰

4

牛A

M＋
淘汰

牛B

M＋

牛C

5

Mp対策中の陽性牛発生状況と検査の経過
6

M＋

9

10

11

12

2018
1

―

―

―

―

―

淘汰
淘汰
M＋
隔離

Mp 疑い 1 頭

淘汰
―

8

隔離

牛D

バルク乳検査

7

淘汰

―

―

乾乳前検査

―

―

―

―

分娩後検査

―

―

―

2頭
＋

Ｍ＋：M.bovis 陽性，―：液体培地陰性，＋：液体培地陽性─ 20 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）は検出できず複数回必要であった．牛の臨床症状や農場の導入履歴，呼吸器疾患の発生状況等を考慮して泌乳の著減や停止を呈す原因不明の乳房炎については
Mp 性乳房炎を視野に入れて再度検査をすべきであ

M.bovis 陽性牛と同居していた牛に対して個体乳検査も並行しておこなった．搾乳牛舎で罹患牛と同居していた牛は乾乳前の乳汁検査を，また病牛・乾乳牛舎での同居牛のうち泌乳牛には乳汁検査を行い，Mp 陽性となれば治療を実施することとした．乾乳牛で陽性牛と同居していた牛は検査不可能であったため予防的治療を実施した．さらに 5 月～ 12 月の期間，分娩後検る．M.bovis による乳房炎は他のマイコプラズマ属菌による乳房炎よりも難治性で廃用・再発率が高い．5）
報告と同様に，抗生剤，抗菌剤による治療効果に乏しく罹患牛はすべて淘汰された．また今回，病牛・乾乳
牛舎で感染が拡大した一因として，早期の隔離・淘汰ができなかったことが挙げられる．農場の隔離場所が査を実施した．検査は診療所でマイコプラズマ液体培
地（マイコプラズマ用液体培地：ミヤリサン製薬）を使用し好気密栓培養をおこなった．培地が黄色に変化
し陽性となった個体（写真 4）では再度採材し，家畜保健所に詳細な検査を依頼した．
4 月の Mp 性乳房炎発生以降，5 月にドロマイド石

搾乳不可能な場所であり，隔離と治療を同時に行えなかったことにより，複数の同居牛へ感染を拡大させたと考えられた．Mp 性乳房炎を蔓延させないために，
農場内に Mp 性乳房炎を持ち込んでしまった場合には，即淘汰・隔離を検討し隔離が不可能な場合にはロープ等を用いて簡易的に隔離，タイストールでは牛床を 2 床ほど空けるなどの対策を実施する必要があ10）
る．
また，県外からの導入牛や，Mp 肺炎に罹患し灰による病牛・乾乳牛舎の消毒を行ったが，その後も継続して陽性牛が摘発された．一方，乾乳前検査はす
べて陰性あった．分娩後検査では 2 頭の陽性反応が出たが，1 頭は検査結果が判明する前に淘汰されたため詳細な検査ができず，もう 1 頭は Acholeplasma 属菌であった．その後，農場内で Mp 性乳房炎の発生はた育成牛は，搾乳牛群へ Mp 性乳房炎を持ち込む可能性があるという危機意識を持ち，着地検査や分娩前後確認されていない．

の乳汁検査を実施し，陰性を確認する必要があると考えられた．
また今回，全頭検査をせず乾乳直前から分娩 1 週間後までの個体乳検査，予防的治療を実施したが，農場関係者，臨床獣医師，関係機関が連携し対策を決定・実施できたことが農場内 Mp 性乳房炎の清浄化につながった．

謝辞

この度の Mp 対策実施において対策検討会議，バルク乳検査，PCR 検査等にご協力をいただきました北部，西部畜産事務所の方々に深謝いたします。
写真4

マイコプラズマ液体培地での黄色変化

考

引用文献

察

この度の発生はすべて M.bovis による乳房炎で，病牛・乾乳牛舎内に飼養されていた分娩後 2 カ月以内の牛が罹患した．感染源については呼吸器からの採材や悪露の細菌検査等を行っておらず，特定にはいたらなかった． 牛 B は 2016 年に導入された牛で，育成牛舎で 3 月中旬に分娩し，搾乳牛舎へ移動した．3
月末に同居牛 2 頭が原因不明の泌乳停止で淘汰され，その後病牛・乾乳牛舎へ移動した．多くの Mp 感染牛は一定の無症状期間を経て発症に至り排菌を継続するとされることから 9），牛 B が感染源となり同居牛に蔓延した可能性が考えられた．
Mp 感染を疑う所見は好気条件下で培養した羊血液
寒天培地上に形成されたβ溶血であり，一度の検査で

1） 石山大：千葉県で確認された牛マイコプラズマ性
乳房炎の 発生状況と清浄化対策，日本獣医師会
誌，67，188-192（2014）2） 川畑由夏ほか：マイコプラズマ性乳房炎の清浄化対策推進による大規模酪農経営体の健全経営支援，岩手獣医師会報，38，（2），66-69（2012）3） 秋田真司：広島県で発生した全身症状を伴うマイコプラズマ性乳房炎の集団発生事例，広島県獣医学会雑誌，32，（2017）
4） 樋口豪紀ほか：牛マイコプラズマ乳房炎に対する予防対策，家畜衛生対策推進協議会，31（2018）5） 樋口豪紀ほか：マイコプラズマ性乳房炎の特徴，
家畜感染症学会誌，41，（2015）
6） 樋口豪紀：牛マイコプラズマ乳房炎に対する予防
対策，家畜衛生対策推進協議会，27（2018）─ 21 ─

広島県獣医学会雑誌

7） 堀野敦子ほか : 検体の培養と観察，肺炎マイコプ
ラズマ（Mycoplasma pneumoniae）検査マニュ
ア ル P14（https://www.niid.go.jp/niid/images/
lab-manual/MycoplasmalPn.pdf）（参照 2022 年
3 月 22 日）
8） 樋口豪紀：牛マイコプラズマ乳房炎に対する予防
対 策， 家 畜 衛 生 対 策 推 進 協 議 会，15-16，19（2018）
9） 樋口豪紀：マイコプラズマ性乳房炎の対策，臨床獣医 臨時増刊号（2019）10）樋口豪紀：牛マイコプラズマ乳房炎に対する予防
対策，家畜衛生対策推進協議会，18（2018）─ 22 ─

№ 36（2022）

症例報告
蹄背壁に発生した肉芽形成を伴った難治性縦裂蹄の 1 症例
大下

克史 1）

酒井

亮 2）

堀

香織 3, 4）

（受付：令和 4 年 2 月 17 日）

A case of refractory vertical hoof crack accompanied by granulationin the dorsal hoof wall
KATSUFUMI OOSHITA1）, RYO SAKAI2）and KAORU HORI3, 4）1）Kitahirosima Veterinary Clinic, Hiroshima P.F.AM.A.A., 461-1, Haruki,
Kitahiroshima-cho, Yamagata, Hiroshima 731-1537
2）Miyoshi Veterinary Clinic, Hiroshima P.F.AM.A.A., 3-6-36, Toukaichi-higashi,
Miyoshi, Hiroshima 728-0013
3）Fuchu Veterinary Clinic, Hiroshima P.F.AM.A.A., 396-1 Fukae Jyouge-Cyo
Fuchu, Hiroshima 729-3421
4）University of Miyazaki Graduate School of Medicine and Veterinary
Medicine., 5200 Kihara, Kiyotake-Cyo, Miyazaki 889-1692

SUMMARY
Recently, atypical pathological features different from conventional hoof horn disorders
have begun to be observed in lame cattle cared for by farriers and veterinarians. Such
conditions are called non-healing claw lesion (NHCL) and are classified into toe tip
necrosis, refractory white line disease, and refractory sole ulcer. They are caused bybacterial infection not cured by usual treatments, present with severe chronic lesions
accompanied by proliferation of granulation tissue and inflammation spreading to thedermis that emits a characteristic bad smell, and are related to treponemal digitaldermatitis (DD). The case presented here was a female Holstein (4 years old) at a dairy
farm that kept 200 cows in free-stall barns. It was incapable of weight-bearing in theright hind limb, showed granulation tissue protruding from the coronal region of themedial hoof, and tunnel formation in the axial wall. The granuloma protruding fromthe horn was resected, and the gene obtained from this material was identified to be
the same as that of Treponema phagedenis. In this case, DD that originated in thecoronet extended along the axial furrow to the toe, being accompanied by sand-crack and1）NOSAI 広島 北広島家畜診療所（〒 731-1531 山県郡北広島町春木 461-1）
2）NOSAI 広島 三次家畜診療所（〒 728-0013 三次市十日市東 3-6-36）
3）NOSAI 広島 府中家畜診療所（〒 729-3421 府中市上下町深江 396-1）
4）宮崎大学大学院 医学獣医学総合研究科（〒 889-1692 宮崎県宮崎市清武町木原 5200 番地）
─ 23 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

granulation, as infection spread from the dermis in the hoof margin to the dermis in thecoronet. X-rays showed bone proliferation in the extensor process of the distal phalanx,base, and middle phalanx. In this farm, DD was prevalent, and the control of DD in cattle
is considered important for the prevention of NHCL. Regarding treatment, symptoms
could not be alleviated by resection of granuloma alone or insufficient horn removal,
and a long time was needed until cure. This experience should be utilized for futureevaluations.
── Key words: Non-healing claw lesion, Treponema phagedenis

要約近年，削蹄師や獣医師が関わる跛行牛の中に，従来見てきた蹄角質疾患とは異なる非典型的な病態のものが散見されるようになった．これらは難治性蹄角質疾患（以下 NHCL）と呼称され，蹄尖壊死，難治性白帯病，難治性蹄底潰瘍に分類される．通常の処置を行っても好転せず，重篤な病変を示す慢性の疾病で，肉芽組織の増生を伴い，特徴的な悪臭を放つ炎症が真皮に広がる細菌感染であり，趾皮膚炎（以下 DD）トレポネーマが関与している．今回の症例はフリーストール牛舎で，200 頭を飼育する酪農家のホルスタイン種雌牛（4 歳）で，右後肢負重不可能，内蹄蹄冠部に肉芽形成し突出，軸側壁に坑道を形成していた．角質から突出した肉芽を切除，この材料から得られた遺伝子は Treponema phagedenis のものと同定された．本症例は，蹄冠部に発生した DD が蹄縁真皮から蹄冠真皮へと感染が波及し，裂蹄，肉芽形成を伴いながら軸側溝に沿って蹄尖方向へ広がっていったものであり，X 線検査では
末節骨伸筋突起や底面、中節骨の骨増生が認められた．本農場では DD が蔓延しており，本
疾病のような難治性角質疾患の予防として牛群の DD コントロールが重要であると考えられる．治療方法として，角質から突出した肉芽のみの切除や不十分な角質除去では症状を改善させることはできず，治療に長期間を要したことは今後の検討材料としたい．
──キーワード：難治性蹄角質疾患，Treponema phagedenis

はじめに分類される 1）．これらは蹄角質疾患に対しての適切な処置を行っても好転せず重篤な病変を示す慢性の疾病
で，肉芽組織の増生を伴い，特徴的な悪臭を放つ炎症が真皮に広がる細菌感染であり，DD トレポネーマが関与している．治療方法は研究者によって二分され，断趾術を選択する人達と壊死組織除去後に繰り返し包趾皮膚炎（以下 DD：Digital Dermatitis）は乳牛のいかなる施設体系においても発生が見られる蹄病であり，農場から駆逐することが難しく大きな問題となっている．DD は Treponema sp. を中心とした何種類かの細菌の混合感染症であり，足下の湿潤環境と糞尿曝露による嫌気環境がリスク因子である．近年，削蹄師

帯交換をすることによって治癒に導く人達に分かれる．今回，後肢内蹄の蹄背壁において肉芽形成を伴う
難治性縦裂蹄に遭遇したので，その概要について報告する．

や獣医師が関わる跛行牛の中に，従来見てきた蹄角質疾患とは異なる非典型的な病態のものが散見されるようになった．これらは難治性蹄角質疾患（NHCL：
Non-healing claw lesion）と呼称され，いわゆるヘアリーアタックと呼ばれてきた病態である．NHCL

材料および方法

は大きく蹄尖壊死（TN：Toe necrosis），難治性白帯病（NHWD：Non-healing white line disease）， 難
治性蹄底潰瘍（NHSU：Non-healing sole ulcer）に症例は AT 市でホルスタイン種乳用牛 200 頭飼育する酪農家（フリーストール牛舎）で，患畜は平成
28 年 1 月 4 日生まれのホルスタイン種雌牛（令和 2─ 24 ─

広島県獣医学会雑誌

年 6 月 4 日分娩）である．X 線検査は携帯型Ｘ線撮影装置（PX-20BT，株式会社ケンコー・トキナー）を用い，60kV，2mAs の条件下で背掌像，側面像，斜 め 像 を 撮 影 し た． 遺 伝 子 検 査 は，PCR 検 査，
16SrRNA シークエンス解析による菌種同定を行っ
た．

成

績

令和 2 年 10 月 29 日（第 1 病日）：右後肢負重不可能．内蹄蹄冠部に肉芽形成し突出，そこから軸側壁にかけて坑道を形成している．削蹄，洗浄後，抗生物質塗布，包帯実施した．第 8 病日：遊離角質を除去，角質から突出した肉芽を切除，この材料から得られた遺伝子は Treponema phagedenis のものと同定された．また，疼痛が激しいため外蹄に蹄ブロックを装着した（写真 1）
．その他第 8 病日以降は毎回同様の処置を行った．処置内容は，削蹄，洗浄，消毒，殺菌（イソチオシアン酸アリル），抗生物質（リンコマイシ
ン、OTC），包帯である．第 15 病日：軸側溝に沿っ№ 36（2022）て蹄尖方向に坑道が進行するため角質を除去し排液させた（写真 2）．X 線検査を実施したところ，内蹄末節骨の伸筋突起に骨増生が認められた（写真 3）が，蹄関節を含めた深部に達する異常や末節骨の顕著な破壊は認められなかったため，断趾術やグラインダーによる骨デブリードマンの対象ではないと判断し，周囲の角質除去や肉芽の切除により真皮にある患部を露出させて薬剤を到達させることを治療方針とした．第22 病日：状況は変わらず蹄ブロックは脱落した（写真 4）．第 29 病日：処置の邪魔になる趾間過形成を切除した（写真 5）．第 41 病日：状況変わらないため，2.5％塩酸プロカインによる局所麻酔下で角質，真皮を含めた肉芽切除を実施した（写真 6）．第 49 病日には病変部は肉芽増生，第 61 病日にはほぼ角化し疼痛消失した（写真 7）．第 90 病日には患部全体が角化した（写真 8）．第 97 病日：第 2 回目の X 線検査実施．
内蹄末節骨伸筋突起の骨増生に加えて，内蹄末節骨底面の骨増生，内蹄中節骨の骨増生を認めた（写真 9）．

写真1 蹄背壁の縦裂蹄より増生した肉芽 写真2 蹄尖方向へ坑道形成あるため角質を切除（第8病日）
除去，廃液する（第15病日）

写真4

肉芽形成続く（第22病日）

写真5 趾間過形成切除（第29病日）─ 25 ─

写真6

写真3 伸筋突起における骨増生（第15病日 第1回X線検査）

広範囲における角質，真皮を含めた肉芽切除（第41病日 左右は処置前後）

広島県獣医学会雑誌

写真7

疼痛消失（第61病日）

考

写真8№ 36（2022）

患部角化（第90病日）

察

写真9 伸筋突起における骨増生に加え，末節骨底面，中節骨の骨増生が認められた（第97病日 第2回X線検査）

今回遭遇した縦裂蹄は，蹄冠部に発生した DD が
蹄縁真皮から蹄冠真皮へと感染が波及し，裂蹄，肉芽形成を伴いながら軸側溝に沿って蹄尖方向へ広がってせる必要があり，角質から突出した肉芽のみの切除や不十分な角質除去では症状を改善させることはできな
かった．また，蹄背壁の病変なので，削蹄処置が難し
く，十分な保定をする必要がある．そのため枠場で処置することが必要不可欠である．また，真皮に及ぶ処

いったものであった．本農場では以前悪臭と疼痛を伴った蹄縁角皮炎が発生したことがあり，このようなものが角質下の真皮層に進行すると今回のような病態

置には疼痛を伴うため，局所麻酔が必要である．
今回治療に 3 ヶ月という長期間を要したが，骨変化が進行していたことを考えると，速やかに治癒させへ移行するものと考えられる．X 線検査では末節骨伸筋突起や底面，中節骨の骨増生が認められ，これが放置されると末節骨の壊死，融解をもたらし，広範囲の組織欠損を伴う蹄尖壊死へ進行するものと考えられる．

る必要があると考えられた．初診から広範囲の切除等踏み込んだ処置を行えば短期間で治癒させることができたのか，それとも経過を見ながら段階的に進めてい
くべきか，今後の検討が必要である．

本農場では DD が蔓延しており，多くの牛がこれに罹患している．また，典型的な病変に加え，難治性

引用文献

蹄角質疾患の発生もしばしば確認している．そのため，本疾病のような難治性角質疾患の予防として牛群の DD コントロールが重要であると考えられる．
治療方法として，角質を除去し患部へ薬剤を到達さ

1） N.J.Evans, R. W. Blowy, D. Timofte, et al: Association between bovine digital dermatitis treponemes and a range of ʻnon-healingʼ bovine hoof
disorders, Veterinary Record 168, 214 (2011)─ 26 ─

原著
注射器製フィステルを使用した皮下膿瘍の治療法の検討
稲場

緑

堀

香織

（受付：令和 4 年 1 月 17 日）

Treatment of subcutaneous abscess using fistulas
made of plastic syringes
MIDORI INABA and KAORU HORI

Fuchu Veterinary Clinical Center, Hiroshima P.F.A.M.A.A, 1-396, Fukae, Joge,
Fuchu, Hiroshima，729-3421

SUMMARY
In the treatment of subcutaneous abscess, incision of the abscess for the purpose ofdrainage can eventually result in stricture that leads to pus accumulation. To address
this issue, we developed a novel treatment strategy that incorporates the use of fistulas
made of outer cylinders of plastic syringes following incision and drainage of the abscess.
We tested the effectiveness of the treatment in two cases of subcutaneous abscess
identified within the prefecture: 1) Holstein milking cattle with an abscess measuring
approximately 50 cm in diameter, and 2) Holstein feedlot cattle with an abscessmeasuring approximately 18 cm in diameter. We demonstrated that both cases recovered
well without pus accumulation following placement of the fistulas made of plastic
syringes. Our findings indicate that treatment with fistulas made of plastic syringes iseffective in maintaining a large incision in cases that require drainage of a large amountof pus. In order to fully elucidate the effect of treatment with the fistulas made of plastic
syringes, future studies should be performed with a greater number of cases to compare
the duration and cost of treatment with conventional methods.
── Key words: cattle, subcutaneous abscess, fistula

広島県農業共済組合

府中家畜診療所（〒 729-3421

広島県府中市上下町深江 396-1）
─ 27 ─

広島県獣医学会雑誌

要№ 36（2022）

約

皮下膿瘍の治療において排膿のため膿瘍を切開した場合，切開後の時間経過とともに，切開創が狭窄し，再度膿汁が貯留することがある．この問題を解決するため，切開排膿後，注射器外筒で作成したフィステル（以下，注射器製フィステル）を装着する新たな治療法を考案し，県内で発生した皮下膿瘍の 2 症例（ホルスタイン種搾乳牛 1 症例 直径約 50cm，ホル
スタイン種肥育牛 1 症例 直径約 18cm）に実施し，その治療法の有用性について検討した．
実施した 2 症例とも，注射器製フィステル装着後，膿汁の再貯留は認められず，経過は良好であった．注射器製フィステルを使用した治療法は，広い切開創を維持し，多量の膿汁を排出させる必要のある症例に対して効果的であると考えられた．今後は症例数を増やして治療
期間やコストについて従来法と比較検討し，注射器製フィステルによる治療効果について検証する必要があると考えられた．
──キーワード：牛，皮下膿瘍，フィステル

序

文

器で作成したフィステル（以下，注射器製フィステ
ル）を切開創に装着して膿汁の貯留防止を図る治療法

膿瘍とは，化膿性炎のうち組織の内部に限局性に生じ組織の融解が起こって膿が充満した空洞をつくる病
変のことを指し 1），皮下組織の深部に形成された皮下膿瘍は疼痛を伴う 2）．排膿した場合は炎症巣に肉芽組織が形成され，残された崩壊産物は吸収され治癒すを県内で発生した皮下膿瘍の 2 症例に対して実施し，有用性について検討したので報告する．

る 3）．大きな膿瘍で外部に破れにくい時には，膿瘍周
囲に肉芽組織ができ膿瘍膜を形成する 3）．一般的な治療法として切開排膿が選択されるが，切開後の時間経

1．注射器製フィステルの作成および装着方法
注射器製フィステルの作成方法を図 1 に示した．
ディスポシリンジの外筒の根元から約 2 cm から 4 cm

過とともに切開創が閉鎖し，再度膿汁が貯留することがある．牛の臨床現場では，排液の手段の一つとしてガーゼによるドレナージが試みられるが，粘稠性の高い膿汁が多量に貯留する場合，ガーゼが膿汁を完全に吸引することができず，逆に切開創を塞ぐ形となり ,再度膿汁貯留を誘発することになる．この問題点を解決するため，新たな治療法として，切開排膿後に注射の部位をカッターで切断した．切断部位は皮膚から膿瘍腔までの深さを考慮した．外筒翼状部の両側に目打
ちで 2 箇所ずつ穴を開けた．装着後の軟部組織への侵襲を軽減するため切断面をバーナーで加熱し滑らかに加工した．このようにしてあらかじめ作成した注射器製フィステルを皮下膿瘍の切開創に挿入しナイロン
糸で固定した（図 2）
．

図1

図1
(a)

材料と方法

注射器製フィステルの作成方法（a） 注射器外筒の根元から約 2 ～ 4cm をカッターで切断
注射器製フィステルの作成方法（b） 外筒翼状部の両側に目打ちで 2 箇所ずつ穴を開ける
注射器外筒の根元から約2~4cm をカッターで切断（c） 切断面をバーナーで加熱し滑らかに加工(b) 外筒翼状部の両側に目打ちで 2 箇所ずつ穴を開ける─ 28 ─

(c) 切断面をバーナーで加熱し滑らかに加工広島県獣医学会雑誌

図2№ 36（2022）

注射器製フィステルの装着方法

図 2 注射器製フィステルの装着方法（a） 切開排膿後，切開創の両側皮膚に切開創と平行にナイロン糸を 1 本ずつかける(a)（b） フィステルの穴にナイロン糸を通す
切開排膿後、切開創の両側皮膚に切開創と平行にナイロン糸を１本ずつかける（c） 切開創にフィステルを押し込む(b) フィステルの穴にナイロン糸を通す（d） ナイロン糸を外科結びで結紮しフィステルを皮膚に固定(c) 切開創にフィステルを押し込む(d) ナイロン糸を外科結びで結紮しフィステルを皮膚に固定
症例 2

2．症例
症例 1
ホルスタイン種，雌，46 ヶ月齢の搾乳牛．左腰角から左大腿部にかけて直径約 50cm の皮下膿瘍を認め

ホルスタイン種，去勢，10 ヶ月齢の肥育牛．第 1
病日，右後肢大腿部遠位に直径約 18cm の皮下膿瘍を認めた．患畜を左側横臥位にて保定し，膿瘍の上下 2箇所を切開して排膿した後，膿瘍腔を洗浄し，10ml

強い疼痛を示した．第 1 病日に上下 2 箇所を切開し粘稠性の高い多量の膿汁を排出，膿瘍腔を洗浄し切開シリンジで作成した注射器製フィステルを 2 箇所の切開創へ装着した．以降，症例 1 と同様，定期的に創へガーゼドレーンを挿入したが，ガーゼが切開創を塞ぎ膿汁の再貯留を繰り返していた．第 8 病日（第 3診目），患畜を立位にて保定した後，ガーゼドレーンを抜去し，内部に再貯留した多量の膿汁を排出，膿瘍
腔を洗浄後，上下 2 箇所の切開創へ 50ml シリンジで洗浄を行った．治療期間中，抗菌薬の全身または局所への投与は行わなかった．

作成した注射器製フィステルを装着した．装着後，定期的に上側の注射器製フィステル開口部からカテーテ症例 1
経過を図 3 に示した．第 11 病日（第 4 診目），注射

ルを挿入し，膿瘍腔に残留した膿瘍を下側の注射器製
フィステルから排出させて洗浄した．洗浄には水道水または 0.2％アクリノール水溶液を使用した．治療期
間中抗菌薬の全身または局所への投与は行わなかった．

器製フィステルの開口部から膿汁排出を認めた．第16 病日（第 5 診目），排膿量は明らかに減少し，膿瘍
腔での肉芽組織の増生と膿瘍腔の縮小が確認された．
第 24 病日（第 6 診目），上側の注射器製フィステルの脱落を確認した．膿瘍腔はさらに縮小していたため，

成績

下側の注射器製フィステルを抜去した．第 39 病日（第図3

症例1の経過図 3注射器製フィステル装着前は膿汁の再貯留を繰り返していたが，装着後は徐々に膿汁の減少が認められた．
症例 1 の経過
注射器製フィステル装着前は膿汁の再貯留を繰り返していたが,装着後は徐々に膿汁─ 29 ─
の減少が認められた.

広島県獣医学会雑誌

7 診目），膿汁の排出および膿瘍の再発を認めず，注
射器製フィステル装着部位の閉鎖を確認し治癒と判断した．
症例 2
経過を図 4 に示した．第 2 病日（第 2 診目），膿瘍腔で膿汁の再貯留は認めなかった．第 5 病日（第 3診目），肉芽組織が増生し明らかな膿瘍腔の縮小を認めたため，上下 2 箇所の注射器製フィステルを抜去した．第 15 病日（第 5 診目），膿瘍の再発を認めず，注射器製フィステル装着部位の閉鎖を確認し治癒と判断した．

まとめ及び考察№ 36（2022）

年，牛の飛節周囲炎におけるナイロン糸ドレーンの応用が報告され，良好な結果が認められている 6）．しかしながら，本症例のように粘液性の高い多量の膿汁が貯留する場合には , 治癒までに相当の時間を要することから，膿汁の貯留を防止することが可能な注射器製
フィステルを用いた治療法は従来法に代わる有用な手段と考えられた．また，ナイロン糸で皮膚へ強固に固定するため，途中で脱落する可能性が低いことも従来法と比較した場合の利点として考えられた．症例 1
では第 24 病日（フィステル装着から 16 日後）に注
射器製フィステルの脱落を認めたが，既に肉芽増生により膿瘍腔は十分に縮小し，膿瘍の治癒過程に影響を及ぼさなかったものと推察された．
今回，2 症例とも注射器製フィステル装着中，数回にわたって膿瘍腔を洗浄することを想定し，注射器製
フィステルの上から被覆材で覆う等の処置はしなかった．その結果，症例 2 では注射器製フィステルの筒の中に敷料のおが屑が詰まってしまう場合があった．
症例 1 では同様のことが発生しなかった理由として，

症例 1 及び 2 の多量の膿汁が貯留した皮下膿瘍に対して注射器製フィステルを使用した治療法を実施することで，良好な成績を得ることができた．
ディスポシリンジは比較的安価であり，臨床現場で入手が容易，かつポリプロピレン製で加工しやすいため，注射器製フィステルの材料として最適であると考直径が大きい 50ml シリンジを使用していたこと，膿
瘍が巨大であり，フィステル装着後も膿汁が持続的に内部から排出され外部からの敷料の侵入を妨げていた

えられた．今回，注射器製フィステルに使用したディスポシリンジのサイズは，切開創の大きさに合わせて決定した．ディスポシリンジのサイズ及び切断部位の位置を変えることで，様々な大きさや深さの皮下膿瘍に柔軟に対応できると考えられた．既報では，ディス
ポシリンジを材料にした注射器製フィステルを牛の第一胃慢性鼓脹症に対する第一胃瘻管形成術に使用した
報告 4），また，膀胱破裂の応急処置に使用した報告 5）ことが考えられた．症例 2 においても膿瘍腔までは敷料は達していなかったが，感染により膿瘍の悪化または治癒の遅延を招く可能性があるため，今後は被覆材の使用や敷料の工夫等，汚染防止のための処置を検がある . 皮下膿瘍の治療に用いた本症例においても，注射器製フィステルは有用であると示唆された．

討する必要があると考えられた．
以上のことより，注射器製フィステルの利点として①広い切開創を維持し，多量の膿汁を排出させる必要のある症例に対して効果的であること ②ディスポシ

滲出液や膿汁を排出させるための手法としては，
チューブドレーンも一般的に用いられる 6）．また，近リンジのサイズ及び切断箇所を調整することで様々な大きさと深さの皮下膿瘍に対応可能であること ③皮

図4

症例2の経過図 4 症例 2 の経過
膿汁の再貯留はなく，腫脹部位（丸部分）の明らかな縮小が認められた．
膿汁の再貯留はなく, 腫脹部位（丸部分）の明らかな縮小が認められた.
─ 30 ─

広島県獣医学会雑誌

膚に直接固定するため装着後脱落しにくいことが考えられた．注射器製フィステルの使用は，治療期間を短縮できる可能性があり，今後は症例数を増やし治療期
間やコストについて従来法と比較検討する必要がある

3） 北川昌伸：標準病理学，北川昌伸・仁木利郎編，第 6 版，62-63，医学書院，東京（2019）4） 近藤直，西川晃豊：牛の第一胃慢性鼓脹症に注射器製フィステルによる第一胃瘻管形成術を施した10 症例，家畜診療，66，35-41（2019）と考えられた．

文№ 36（2022）

献1） 柴田重孝：細菌による膿瘍形成（化膿性疾患），
日獣会誌，16，128-131（1963）2） 山手丈至：動物病理学各論，日本獣医病理学会
編，第 2 版，445，文永堂出版，東京（2010）─ 31 ─

5） 田浦保穂ほか：プラスチック注射器製フィステル
による子牛の膀胱破裂の応急手術例，日獣会誌，
45，933-935（1992）
6） 森田康広，峠田大志：ウシ飛節周囲炎におけるナ
イロン糸ドレーンの応用，家畜診療，65，703710（2018）

報 告
温暖地域の福山地方における牛の受胎率と妊娠期間の調査
秋田真司（受付：令和 4 年 1 月 25 日）

Survey conception rate and gestation period of cattle in Fukuyama warm area
MASASHI AKITA

Fuchu Veterinary Clinic Center, Hiroshima P.F.A.M.A.A., 396-1, Fukae,
Joge-cho, Fuchu, Hiroshima 729-3421

SUMMARY
The decreased conception rates in dairy and beef cattle have recently posed a problem.
In dairy cattle, it is mainly caused by increased lactation and decreased appetite withoxidative stress due to heat sensation in summer. Recently, climatic abnormalities,
such as heavy rain and intense heat, have been observed. In the present study, weinvestigated the breeding statuses of cattle in the Fukuyama region, with the mildest
climate in Hiroshima Prefecture. In dairy cattle, both the fertilization and conception
rates decreased in summer during the hot season. However, in Japanese Black Cattle,
the rate of fertilization did not vary seasonally, although the rate of conception was
lower in winter. The gestation period were 277.6 ± 5.31 days for Holstein females
inseminated with Holsteinʼs sperm, 283.2 ± 5.01 days for Holstein females inseminatedwith Japanese Black Cattleʼs sperm, and 289.4 ± 6.34 days for Japanese Black Cattle
inseminated with Japanese Black Cattleʼs sperm, showing significant differences fromthe standard values. Furthermore, they were shorter in summer for dairy cattle and in
winter for beef cattle, suggesting that the dairy cattle were affected by heat and beef
cattle were affected by cold, respectively. The shortened period of pregnancy in beef cattle
was normalized by increasing the heat energy by 17% to address the cold in winter.

要

約

近年，乳用牛や肉用牛ともに受胎率の低下が問題視されてきている．乳用牛については泌
乳能力の向上を要因とし，夏季における暑熱感作よる酸化ストレスを伴った食欲低下が主な原因とされている．近年は異常気象とも言うべき豪雨，猛暑などの四季の乱れが観測されて広島県農業共済組合

府中家畜診療所（〒 729-3421

広島県府中市上下町深江 396-1）
─ 33 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

いる．広島県内で最も温暖な地域の 1 つである福山地方において，牛の繁殖実態を調査した．
乳用牛では暑熱期に当たる夏季に授精件数，受胎率ともに低下していた．一方で黒毛和種については授精件数に季節的変動は少なく，冬期の受胎率低下の傾向がみられた．妊娠期間については，ホルスタイン雌にホルスタイン精子の掛け合わせが 277.6 ± 5.31 日，ホルスタイ
ン雌に黒毛和種精子の掛け合せが 283.2 ± 5.01 日，黒毛和種雌に黒毛和種精子の掛け合せが289.4 ± 6.34 日で一般的に設定されている妊娠期間とは明らかに変化していた．季節別では，
乳用牛が夏季に短く，肉用牛で冬季に短いことが認められた．乳用牛は暑熱の影響を，肉用
牛は寒冷の影響を受けていたことが示唆された．肉用牛に対する寒冷対策として，冬季にエネルギーを 17％増量したところ，妊娠期間短縮が解消された．

序

文

れぞれの間を春，秋と設定した．その結果，12 月，1月，2 月 を 冬，3 月，4 月，5 月 を 春，6 月，7 月，8月，9 月を夏，10 月，11 月を秋と区分けした．
（図 1）

乳量・乳質の能力向上により，乳用牛の受胎率が低下してきている．一方で，乳用牛ほどに必要栄養量が増加していない肉用牛でも受胎率の低下が懸念されて平野部

いる．受胎率の向上や妊娠頭数の増頭のために timed
AI や潜在性子宮内膜炎への対処法，黄体機能増強など様々な方法が試みられている 1, 3, 11）．しかし，近年，豪雨，猛暑などの異常気象が頻発しており，以前の四季とは明らかに異なってきている．このような環境変

25
20
15
10

化の状況下で，気候による影響については，ホルスタ
インに対する暑熱感作の報告 4, 5, 13, 14, 17）が多くされているが，肉用牛についての報告は少ない．今回，気候

5
0
1

4

5

1

6

7

8

9

10

11

12

（月）

福山地方の平均温度

が 23.3 件，夏が 23.3 件，秋が 28.5 件で季節による変動は無かった．（表 1）（図 2）
季節別受胎率は Hol で冬が 42.3％，春が 38.0％，
夏が 32.5％，秋が 36.8％，JB で冬が 39.4％，春が48.6％，夏が 55.9％，秋が 52.6％であった．Hol は夏季の受胎率が冬期に比べ，有意に低かった．JB では冬季の受胎率が夏期より低い傾向があった．（図 3，4）4 年間の平均受胎率はホルスタイン雌牛 - ホルス
タイン精子群（以下 hol-hol（s））が 36.1％，ホルスタ
イ ン 雌 牛 - 黒 毛 和 種 精 子 群（ 以 下 hol-JB（s）） が調査期間は 2017 年 1 月から 2020 年 12 月．調査
対象は福山地方の酪農家 6 戸と黒毛和種繁殖農家 3戸で飼養されているホルスタインと黒毛和種．調査資料は家畜共済台帳，家畜人工授精台帳，JMR 管理表，
気象庁気象データを用いた 6）．調査項目は雌牛品種
別・精液品種別・季節別の受胎率と妊娠期間について

果

3

4 年間の 1 ヶ月当たり季節別平均授精件数はホルス
タイン群（以下 Hol）で，冬が 112.7 件，春が 91.3
件，夏が 71.5 件，秋が 95.0 件であり，夏季が最も少なかった．黒毛和種群（以下 JB）は冬が 23.7 件，春

材料と方法

結

2

図

が牛の繁殖性にどのような影響を与えるのかを検討するために，広島県内で最も温暖な地域である福山地方
における牛の繁殖性に関する調査を行った．また，冬期における肉用牛の飼料給与について検討したので報告する．

調査した．気象データは 4 年間の日ごと，月ごとの平均気温，最高気温，最低気温を収集した．また，冬期における黒毛和種の飼料給与量変更が妊娠期間に及ぼす影響について調査した．統計解析は受胎率についてはχ2 検定，平均値については t 検定を用いた．

山間部

30

38.5％，JB が 49.3％であった．JB が hol-hol（s）とhol-JB（s）よりも有意に高かったが，hol-hol（s）とhol-JB（s）の受胎率には差が無かった．（図 2）
妊娠期間は hol-hol（s）が 277.6 ± 5.31 日，hol-JB（s）が 283.2 ± 5.01 日，JB が 289.4 ± 6.34 日 で それぞれの群間で有意差が認められた．また，ＪＢの胎

気象庁気象データを基に，1 ヶ月の平均気温が 5℃
以下の寒冷期を冬季，20℃以上の暑熱期を夏季，そ子については，雄が 289.7 ± 4.74 日，雌が 289.1 ±7.07 日で，性別による妊娠期間に差は認められなかっ─ 34 ─

広島県獣医学会雑誌
表1

対象の件数

（日）

300

季節別ＡＩ件数
Hol
JB

冬
338
71

春
274
70

夏
286
93

秋
190
57

計
1088
291

妊娠期間件数hol-holhol-JB
JB

冬
40
21
16

春
15
21
22

夏
43
35
30

秋
31
15
12

計
129
92
80

妊娠期間性別件数
JB雄
JB雌

c

290

ＡＩ回数

hol-hol

（日）

278

30%

277

20%

276

100

10%

275

0

0%

274

a

300
200

hol-JB

図2

JB

品種別のAI回数と受胎

hol-jb

図5279

hol-hol

jb-jb

jb雄

ｊｂ雌

277.6

260

40%

400

289.1

270

50%

a

289.7

a,b,c：t>0.01

品種別の妊娠期間

60%

b

600

289.4

283.2

a

受胎率

700
500

b

280

計
56
48

件

№ 36（2022）

a

a

a

b

273

a,b：p>0.001

272
271
冬

件

月平均ｎ

a

120

受胎率 ％

100

ｂ

60
40
20
0
冬

春

図3

図6

45
40
35
30
25
20
15
10
5
0

80

夏

春

夏

秋

hol-holの季節別妊娠期間

a,b：t>0.05

（日）

292
291
290
289
288
287

秋

286

a,b,c：t>0.01285

乳用牛の1ヶ月当り件数と受胎率

284
283
冬

件

月平均ｎ

受胎率

％

30

60

25

50

20

40

15

30

10

20

5

10

0

図7

春

図4

夏

夏

秋

JB の季節別妊娠期間

（日）

296
295
294
293
292
291
290
289
288
287
286
285

0
冬

春

秋

肉用牛1ヶ月当り件数と受胎率た．（図 5）季節別の妊娠期間について，hol-hol（s）
は冬が 278.4 ± 4.64 日，春が 278.6 ± 4.75 日，夏が294.75288.73ｔ＜0.01

増給前（TDN100%）

図8

増給後（TDN117％）

冬季における飼料増給の妊娠期間への影響

274.0 ± 8.56 日，秋が 277.8 ± 3.96 日で，夏季は他の季節に比較して短い傾向が認められた（ t ＞ 0.05）．
（図 6）hol-JB（s） は 冬 が 283.3 ± 5.39 日， 春 が283.7 ± 5.57 日， 夏が 282.4 ± 4.68 日，秋が 282.6± 5.52 日で季節的な差が無かった．JB は冬が 286.1± 9.09 日，春が 290.8 ± 7.19 日，夏が 288.3 ± 5.88

冬季において，JB の妊娠期間が短い傾向があり，受胎率も低い傾向が見られた．そのため，寒冷によるエネルギーロスを疑い，2020 年 12 月から 2021 年 2月までの冬季に飼料増給を行い，TDN 充足率を日本飼養標準の 100％から 117％へ増加させたところ，妊日，秋が 290.9 ± 5.53 日で，有意差が無いものの，
冬季に短い傾向が見られた．
（図 7）

娠期間が 288.7 ± 3.67 日から 294.8 ± 3.30 日へ延長した．（図 8）

─ 35 ─

広島県獣医学会雑誌考察№ 36（2022）

引用文献

Hol の受胎率は JB に比較して低い．これは Hol の能力向上のほか，温暖地域である福山地方の 4 ヶ月
以上続く暑熱期が影響したと推測された 6）．夏季は受1） 秋田真司：潜在性子宮内膜炎に対する低濃度ポピ
ドンヨードのＡＩ後子宮内注入による治療効果，
臨床獣医，36，7，62-66（2018）2） 上松瑞穂：黒毛和種繁殖雌牛の血液プロファイル

胎率だけでなく，授精件数も少なかった．その理由としては，自然発情が見られることが少なく，定時授精などの処置にも反応しない乳用牛が多くなっていたことによる．これらは暑熱による DMI 減退や酸化スト
レスが大きな要因と考えられた 4, 5, 17, 18）．hol-JB（s）
は夏季における受胎率低下が顕著でなかったが，暑熱の影響を受けにくい未経産牛が半数を占めていたことが関連したと考えられた．また，夏季における holhol（s）の妊娠期間が短くなっており，これも暑熱による負のエネルギーバランス（以下ＮＥＢ）の影響と考えられた．
JB において，雌雄の性別による在胎期間に差がな
かった．これは過去の雄胎子が長いという多くの報
告 10, 12, 15）とは異なる．それらの報告でも，検定の結果から雄が長いが，その差は 1 ～ 2 日で，臨床上問

テスト，臨床獣医，35，7，68-74（2017）3） 大澤健司：定時人工授精プログラムの新しい展
開，臨床獣医，35，7，26-32（2017）4） 片桐成二：牛の受精卵の着床過程と早期胚死滅，臨床獣医，36，7，82-89（2018）5） 金澤朋美：ウシにおける季節と酸化ストレスの関係，家畜診療，65，1，39-40（2018）6） 気象庁過去の気象データ：https://www.data.jma.
go.jp/obd/stats/etm/index.php
7） 児玉 暁：宮崎県都城北諸県地域の黒毛和種子牛に お け る 在 胎 機 関 の 延 長， 日 獣 会 誌，58，6，
395-397（2005）
8） 食品産業技術総合研究機構：寒冷時の養分要求量，日本飼養標準肉用牛 2008，87，中央畜産会，

題が起こることのない数値と考えられた．むしろ，畜産農家が出産予定日を過ぎると，雄で，前だと雌だという思い込みがあること自体に問題があると考えられた．
JB の妊娠期間の延長は 1995 年頃から問題視され東京（2009）9） Szenci O., Abodelmegeid M.K.: Predication ofstillbirth in Holstein-Friesian dairy cattle bymeasuring metabolic and endocrine, parameters during the peripartal period, Reproduction
in Domestic Animals: https://doi.org/10.1111/ていたが，今回の調査でも一般に 285 日とされている妊娠期間よりも 5 日程度長くなっていた 9, 16）．季節
別では JB において，春・秋に比べ冬季に短い傾向が見られた．そのため，妊娠期間短縮の要因を気温変動
寒冷感作によるストレスを疑い，その影響を検討する
ために，分娩日の 1 週間前，2 週間前，3 週間前の平均気温，最高気温，最低気温，それぞれの気温変動，
日内較差と妊娠期間との相関を調査した．しかし，いずれも関連を認めなかった．このことから，冬季の気温変動が牛にストレスを及ぼしたとは考えにくく，む
しろ寒冷によるエネルギーロスが，妊娠期間短縮という形で発現したと推察された．そこで，寒冷によるエ
ネルギーロスを考慮して，冬季に飼料給与量を増量，TDN 充足率を日本飼養標準の 100％から 117％に強化したところ，妊娠期間の延長が認められた．JB だ
けに冬季の悪影響が現れたのは，Hol に比較して，産熱量が低い JB は 1 頭あたりの飼養面積も広く，寒冷感作を受けやすいことが要因と考えられた．また，温暖であることが，返って寒冷の影響を受けやすいのか

rda.13276 (2018)10）高橋弥生，佐竹康明：交配種雄牛が黒毛和種産子の在胎日数や生時体重に及ぼす影響，愛媛県畜セ研報，4，14-18（2017）11）伊達麻衣子，他：黒毛和種の受胎に及ぼすフルニ
キシンメグルミン投与の影響について，広島県獣医学会雑誌，30，39-41（2013）12）土江 博：管内黒毛和種繁殖牛の妊娠期間に及ぼす 要 因 に つ い て， 家 畜 人 工 授 精，309，35-39（2021）
13）Dransfield MB., Nebel RL., Pearson RE.:
Comparison of three estrus detection systems
during summer in a large commercial dairy
herd, Animal Reproduction Science, 29, 12, 5972（2004）
14）Nanas L.B.: Ultrasonographic finding of the
corpus luteum and gravid uterus during heatstress in dairy cows, Reproduction in Domestic
Animals,: https://doi.org/10.1111/rda.13996

もしれない．このことは宮崎県でも，低温の影響を受けているとの報告と一致した 2, 7）．
温暖地域と考えられていた福山地方でも寒冷の影響(2021)
15）波平友之，高橋憲司，玉城政信：沖縄における黒毛和種繁殖雌牛の妊娠期間長期化に関する調査，
日暖畜報，54，2，189-194（2011）16）萩原精一：黒毛和種における長期在胎，家畜診が示唆されたことから，低温によるエネルギーロスを緩和する飼養管理について，より詳しい調査が必要と考えられた．
─ 36 ─

広島県獣医学会雑誌

療，64，5，280-284（2017）17）真方文絵：牛卵母細胞における加齢の発生要因と胚発生能の低下のメカニズム，家畜診療，68，5，
241-246（2021）
18）三浦亮太朗：発情時の排卵卵胞の左または右卵巣での発育に影響を与える要因とそのことが受胎性に与える影響，家畜人工授精，307，1-7（2020）─ 37 ─

№ 36（2022）原 著
新規開発したガラス化胚保存器具「ビトラン-7」使用によるウシ胚の生存性と受胎率および生産現場における移植成績
工藤

敬幸 1）

保本

朋宏 1）

日高

健雅 1）

山本

哲史 1）

福本

豊 1）

荒木

秀美 1）

御澤

弘靖 2）

横田

文彦 1）

（受付：令和 4 年 2 月 4 日）

Viability and conception ratio of bovine embryo preserved by “Vitran-7”:
a newly developed embryo vitrification device.
TAKAYUKI KUDOU1），TOMOHIRO YASUMOTO1），TAKEMASA HIDAKA1），SATOSHI YAMAMOTO1），YUTAKA FUKUMOTO1），HIDEMI ARAKI1），HIROYASU MISAWA2）and FUMIHIKO YOKOTA1）

1）Hiroshima Prefecture Livestock Technology Reseach Center 5584
Nanatsuka-cho, Shobara-shi, Hiroshima-ken 727-0023
2）Misawa Medical Industry Co., Ltd. 1320-5 Nagatoro, Kasama-shi,
Ibaraki-ken 309-1712

SUMMARY
Our center developed “Vitran-7”, an instrument for thawing and transplanting
embryos preserved by vitrification at any preferred time and site, jointly with Misawa
Medical Industry Co., Ltd. To evaluate the practicality of Vitran-7, embryo thawing andtransplantation tests were performed, and the results of transplantation using marketed
Vitran-7 preserved embryos by private transplantation technicians were investigated.
In the thawing test, the embryo survival rate was 96.3% using embryos preserved in
Vitran-7 and 96.8% using embryos preserved in Cryotop with no significant difference.
In the transplantation test, the conception rate in nulliparous cows was 45.2% using
embryos preserved in Vitran-7, 29.2% using embryos cryopreserved by slow freezing,and 72.2% using embryos preserved in Cryotop, with a significant difference between
embryos cryopreserved by slow freezing and those preserved in Cryotop. In parous
cows, the conception rate was 53.8% using embryos preserved in Vitran-7, 40.0% using
embryos cryopreserved by slow freezing, and 33.3% using embryos preserved in Cryotop.
The conception rate using marketed embryos was 52.3% after preservation in Vitran-7,
1）広島県立総合技術研究所畜産技術センター（〒 727-0023 庄原市七塚町 5584）
2）ミサワ医科工業株式会社（〒 309-1712 茨城県笠間市長兎路 1320-5）
─ 39 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

14.1% after cryopreservation by slow freezing, 49.5% after preservation in Cryotop,
and 50.3% using fresh embryos, with significant differences using embryos preservedin Vitran-7, those preserved in Cryotop, and fresh embryos compared with embryos
cryopreserved by slow freezing. There was no problem in the practicality of embryospreserved in Vitran-7 with regard to the conception ability, and the conception rate
was confirmed to be comparable to that using vitrified embryos or fresh embryos inembryonal transplantations performed primarily by private transplantation technicians.
By the use of Vitran-7, it has become possible to thaw and transplant embryos preservedby vitrification with a high conception rate at any preferred time or site.
── Key words: Vitrification, thawing, devitrification, direct transplantation

要約

本センターはミサワ医科工業株式会社と共同で，ガラス化保存胚を任意の日時・場所で融解し移植できる器具である「ビトラン-7」を開発した．ビトラン-7 の実用性を検証するため，胚の融解試験及び移植試験を実施するとともに，販売したビトラン-7 保存胚を用いた民間移植技術者による移植成績を調査した．融解試験の結果，生存胚率はビトラン-7 保存胚が96.3％，Cryotop 保存胚が 96.8％であり，ビトラン-7 保存胚と Cryotop 保存胚との間に有意差は認められなかった．移植試験では未経産牛の受胎率は，ビトラン-7 保存胚が 45.2％，緩慢凍結保存胚が 29.2％，Cryotop 保存胚が 72.2％であり，緩慢凍結保存胚と Cryotop 保存胚との間に有意差が認められ，経産牛の受胎率は，ビトラン-7 保存胚が 53.8％，緩慢凍結保存
胚が 40.0％，Cryotop 保存胚が 33.3％であった．販売胚の受胎率は，ビトラン-7 保存胚が52.3％，緩慢凍結保存胚が 14.1％，Cryotop 保存胚が 49.5％，新鮮胚が 50.3％であり，ビト
ラン-7 保存胚，Cryotop 保存胚及び新鮮胚と緩慢凍結保存胚との間に有意差が認められた．
ビトラン-7 保存胚の受胎性は実用性に問題無く，民間移植技術者が主体となった胚移植において受胎率がガラス化胚及び新鮮胚と同程度であると確認できた．ビトラン-7 を活用することにより，任意の日時・場所で受胎率の高いガラス化保存胚を融解・移植することが可能となった．
──キーワード：ガラス化，融解，脱ガラス化，ダイレクト移植

序

文

度胚移植状況調査では，全体の 32.5％で緩慢凍結保存胚が用いられていた．一方で，同調査によると，受胎率はガラス化法により保存した胚が 42.1％である

広島県では，2025 広島県農林水産業アクションプ
ログラムに基づき，持続可能な広島和牛生産体制の構築を目的とし，和牛体外胚移植による乳牛を借り腹とした和牛生産を推進している．
胚移植を普及させるためには，任意の日時・場所で移植可能な方法を定着させることが有効な方法の一つと考えられる．現在，任意の日時・場所で融解・移植が可能な緩慢凍結法により保存した胚のダイレクト移のに対して緩慢凍結保存胚は 21.9％であり，緩慢凍結保存胚の受胎率が低い課題がある．ガラス化保存胚は高い受胎率が期待できるが，試験室内での融解が必要なため作業が煩雑であり，普及面に課題がある 1）, 2）．
また，新鮮胚は凍結による細胞傷害が無く高い受胎率が期待できるが，胚の供給日が限定されるため普及面に課題がある．

植が広く普及しており 1），広島県における平成 30 年

本センターはミサワ医科工業株式会社と共同で，高─ 40 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）を行った．
体外受精は，当センターの定法 5） に従い，凍結精

い受胎率が期待できるガラス化保存胚を任意の日時・場所で融解・移植できる器具である「ビトラン-7」を開発した（特許第 6238186 号）．今回，ビトラン-7の実用性を確認するため，胚の融解試験及び移植試験を実施するとともに，令和元年 10 月から販売を開始
しているビトラン-7 保存胚の受胎成績を調査したので，その概要を報告する．

液を用いて，精子濃度を 6 ～ 12×106/ml に調整して6 時間卵子と共培養することにより行った．使用した凍結精液は広島県または家畜改良事業団が所有する黒毛和種雄牛由来であり，特定の種類に偏らずに使用した．その後，ヒアルロニダーゼ（H3506：Sigma）添加 M2 培地中においてピペッティングすることにより卵丘細胞を除去し，M2 培地で洗浄した胚を，mSOF（修正合成卵管液）（表 1）に 6mg/ml 牛血清アルブミ
ン（A4378：Sigma），0.25mg/ml リノール酸アルブ
ミン（L8384：Sigma），0.12mg/ml グリシン（G7126：
Sigma），0.25mg/ml タ ウ リ ン（T8691：Sigma） お
よ び 10μL/ml ITS（I1884：Sigma） を 加 え た 培 養液（SOF-ITS）中で 38.5℃，5％ CO2，5％ O2，90％

材料と方法
1

卵子の採取
牛卵子の採取は，と体卵巣からの吸引採取及び，黒毛和種の生体卵巣からの経腟採卵（Ovum pick up:
OPU）により行った．
と体卵巣からの採卵は，と体卵巣に存在する直径7mm 以下の卵胞から注射器（注射針：21G）を用いて卵胞液と共に卵子を吸引することにより行った．
OPU は，全国農業協同組合連合会広島県本部又は当センターが所有する黒毛和種経産牛から行った．
2

N2 の条件下で 8 日間培養した．
表1

mSOF組成成分

OPU，体外胚生産方法

OPU は，超音波画像診断装置（MyLabOne VET：
メディカルタスクフォース）に卵子吸引用 OPU デバ
イ ス を 装 着 し， デ ィ ス ポ ー ザ ブ ル 採 卵 針（COVA
Needle：ミサワ医科工業）と卵子吸引システムを用い，吸引圧 100㎜ Hg で卵胞液を吸引した．回収液には，0.3 ％ ウ シ 胎 児 血 清（FCS；Standard Fetal
Bovine Serum：Hyclone），0.1g 力 価 /l 硫 酸 カ ナ マ

NaCl（191-01665：Wako）

629.4 mg

KCl（163-03545：Wako）

53.4 mg

KH2Po4（169-04245：Wako）

16.2 mg

CaCl2（038-24985：Wako）

19.0 mg

MgCl2・6H2O（135-00165：Wako）

10.0 mg

NaH2PO4・H2O（1.06346.500：Merck）
NaHCO3（191-01305：Wako）
Sodium pyruvate（P2256：Sigma）
DL- 乳酸ナトリウム（31605-72：ナカライテスク）

イシン（硫酸カナマイシン：明治）および 1.8U/ml
ヘパリン（ノボヘパリン注：持田製薬）を添加した乳酸加リンゲル液（ハルゼン V 注射液：日本全薬工業）
を用いた．吸引した回収液は，フィルター（セルコレ
クター：富士平工業）でろ過洗浄した後に卵丘細胞卵子複合体（COC）を回収し，10％ FCS 添加 M2 培地（マウス胚培養培地）3）に移し 3 回以上洗浄した．
と体及び OPU により採取した COC は，卵丘細胞の付着程度および細胞質の状況によりグレード分け
し，グレード A ～ C（グレード A：卵丘細胞が 3 層
以上緊密に付着，グレード B：卵丘細胞が緊密に付着するが一部の層が薄い，グレード C：卵丘細胞が 1層程度付着）までの卵子を供試卵とした 3）．体外成熟は Kani et al の 報 告 4） に 従 い，TCM199 培 地（Medium199：Sigma） に 10 ％ FCS，0.12 ㎎ /ml 卵

含有量（100ml 中）

4.1 mg210.6 mg
3.3 mg
50 μl

MEM アミノ酸溶液（M7145：Sigma）

1000 μl

BME アミノ酸溶液（B6766：Sigma）

2000 μl

Gentamicin（G1272：Sigma）

500 μlGlutamine（5908：日水製薬）

500 μlPhenol red（P3532：Sigma）

50 μl

3

胚の品質調査
体外受精後 6 ～ 8 日目に拡張胚盤胞に発育したものについて，IETS マニュアル 6）を指標に，内細胞塊の大きさ及び栄養膜細胞の色調，変性細胞の割合を判定基準とし，内細胞塊が胞胚腔に隆起し栄養膜との境界明瞭であり，栄養膜細胞は充実し菲薄化せず，変性細胞の割合 15％以下の胚を移植可能胚と判定した．

胞刺激ホルモン（FSH：アントリン 10：共立製薬），
50ng/ml 上 皮 成 長 因 子（EGFE1264：Sigma） お よび dbcAMP（ジブチリルアデノシン 3′
，5′
- サイク
リック－リン酸ナトリウム塩，D0260：Sigma），平
成 31 年 4 月以降は 25ng/ml システイン（L-Cysteinehydrochloride monohydrate，C7880：Sigma） を 添加した体外成熟用培地に供試卵を移動させ，38.5℃，
5％ CO2，95％ air の条件下で 22 ～ 24 時間成熟培養
─ 41 ─

4 胚の凍結・融解
1）緩慢凍結法
緩慢凍結液は，ダルベッコ PBS（－）粉末（05913：
日水製薬）を用いて使用説明書に従い作成したダル
ベッコ PBS 溶液に 5％エチレングリコール（05400983： 和 光 純 薬 ），6 ％ プ ロ ピ レ ン グ リ コ ー ル（164-04996： 和 光 純 薬 ），0.1M シ ュ ー ク ロ ー ス（196-00015：和光純薬），0.4％牛血清アルブミン（A8022：Sigma），20％ FCS を添加したものを用いた．凍結液に移植可能胚を浸漬し，ストローに封広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

入して 5 分間平衡した後，－7℃のアルコールバス
式プログラムフリーザー（ET-1：富士平工業）に導入し，2 分後に植氷，8 分間保持した後，77 分か
けて－30℃（冷却速度－0.3℃ /min）まで緩慢冷却

ン-7 のスティックとストローを接合し保存した（図 1）．
融解は専用のストローハンガーを用いて，液体窒素から取り出したビトラン-7 のストロー部分

した．緩慢冷却後，液体窒素中にストローを浸漬す
ることで凍結保存した．
融解はストローを液体窒素から取り出し，空気中で 10 秒間保持した後，35℃の温湯中に浸漬することにより行った．
2）ガラス化保存法
ⅰ Cryotop 法
前処理液は TCM199 培地に 10％エチレングリ
コール，1.0M シュークロース，20％ FCS を添

を 35℃の温湯で 15 秒間加温して融解液を融解
後，スティックを押し込み，胚置載部を融解液中に浸漬し，その後，ビトラン-7 全体を温湯に 60
秒間浸漬することにより行った（図 2）．
5 試験区の設計
1）融解試験
供試胚は，と体由来の胚を用いた．ビトラン-7
保存胚及び Cryotop 保存胚を融解後，SOF-ITS で加 し た も の を 用 い， ガ ラ ス 化 液 は M2 培 地 に30％エチレングリコール，20％ FCS を添加したものを用いた．前処理液に，移植可能胚を浸漬し，2 分間平衡した後，ガラス化液中に移動させ60 秒以内に 7 回以上洗浄した後，Cryotop（北24 時間培養した．培養後，形態的観察により生存胚 率 を 調 査 す る と と も に， ヘ キ ス ト 染 色 液（bisBenzimide H 33342 B2261：SIGMA Ardrich）
を用いて製品の手順書に従い一部の胚を染色し，蛍光顕微鏡下にて核数を計測することにより細胞数を里コーポレーション）の胚置載部に極少のガラス化液とともに胚を置き，液体窒素中に投入することでガラス化保存した．

調査した．
生存胚率の比較はカイ二乗検定により行い，平均細胞数の比較は，対応の無い t 検定により行い，有融解液は，M2 培地に 0.3M シュークロース，
意水準は 5％とした．
20 ％ FCS を 添 加 し た も の を 用 い た． 融 解 は，
2）移植試験
38℃に加温した融解液に胚置載部を直接投入後，供試胚は，OPU 由来の胚を用いた．ビトラン-7
複数回振盪して胚をCryotop
先端から分離させ
保存胚及び緩慢凍結保存胚は移植現場において融解
表５ ウシ体外胚における保存方法別の経産牛への受胎成績
た後，2ビトラン-７保存胚分間保持し，20％緩慢凍結保存胚
FCS を添加したCryotop
M2 保存胚 し，移植器具にセットした．Cryotop 保存胚は，実
項目
移植頭数
13
5
9
培地にて洗浄した．
験室内で融解後，20％ FCS を添加した M2 培地を
受胎頭数
7
2
3
ⅱ ビトラン-7 法
用いてストローに封入し，38℃に保温して移植現受胎率（％）
53.8
40.0
33.3
前処理液に，移植可能胚を浸漬し，2 分間平衡場に運搬した．受胚牛は，県内 7 戸の酪農経営体
した後，ガラス化液中に移動させ 60 秒以内に 7回以上洗浄した後，ビトラン-7 スティックの胚表６ 生産現場におけるウシ体外胚の保存方法別受胎成績
置載部に極少のガラス化液とともに胚を置き，液項目
ビトラン-７保存胚 緩慢凍結保存胚
Cryotop 保存胚体窒素中に投入することでガラス化した．ビトラ
移植頭数
151
12
95
受胎頭数
79
85
47
ン-7 ストローの黒色印部位まで融解液を充填し，aba
受胎率（％）
52.3
14.1
49.5
液 体 窒 素 で 冷 却 し た 後， 液 体 窒 素 中 で ビ ト ラが飼養する発情後 7 ～ 8 日目のホルスタイン種未
経産及び経産牛を用いた．移植は黄体側子宮内に頸管経由法により行った．妊娠診断は妊娠
40 日前後新鮮胚に，超音波画像診断装置を用いた胎仔心拍の確認ま181
91
たは直腸検査による胎膜スリップの確認によって行
a
50.3
い，受胎率を調査した．

a,b：有意差有（p <0.05）

図２ ビトラン-７融解模式図

図１ 図1
ビトラン-７構造
ビトラン-7構造

図2

─ 42 ─

ビトラン-7融解模式図

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

受胎率の比較は，Fisher の正確検定を実施し，水準間の比較は Bonferroni の多重比較法により行い， 有 意 水 準 は 5 ％ と し た． 統 計 解 析 は EZR（version:2.13.0）を用いて行った．

表33）販売胚受胎成績調査
本センターが生産・販売した OPU 由来の黒毛和種体外胚のうち，令和元年 4 月から令和 3 年 5 月までに民間移植技術者が乳用種未経産牛へ移植した胚について調査した．ビトラン-7 保存胚及び緩慢
凍結保存胚は移植現場において融解し，移植器具にセットした．Cryotop 保存胚は，実験室内で融解
後，20 ％ FCS を 添 加 し た M2 培 地 を 用 い て ス ト
ローに封入し，38℃に保温して移植現場に運搬し

63

生存数

52

61

生存率（％）

96.3

96.8

132.1±4.8

ウシ体外胚における保存方法別の未経産牛への受胎成績項目

ビトラン-7 保存胚

緩慢凍結保存胚

Cryotop 保存胚

移植頭数

31

24

18

受胎頭数

14

7

13

受胎率（％）

45.2

29.2a

72.2b

表5

ウシ体外胚における保存方法別の経産牛への受胎成績項目

ビトラン-7 保存胚

緩慢凍結保存胚

Cryotop 保存胚

移植頭数

13

5

9

受胎頭数

7

2

3

受胎率（％）

53.8

40.0

33.3

3

販売胚受胎成績調査
受胎率（受胎頭数 / 移植頭数）は，ビトラン-7 保

存胚が 52.3％（79/151），緩慢凍結保存胚が 14.1％（12/85），Cryotop 保存胚が 49.5％（47/95），新鮮胚が 50.3 ％（91/181） で あ り， ビ ト ラ ン-7 保 存 胚，
Cryotop 保存胚及び新鮮胚と緩慢凍結保存胚との間に有意差が認められた（P ＜ 0.05）（表 6）．

表2 ウシ体外胚における保存方法別の融解後生存胚数及び生存率
Cryotop 保存胚136.4±5.8

経産牛の受胎率は，ビトラン-7 保存胚が 53.8％（7/13），緩慢凍結保存胚が 40.0％（2/5），Cryotop 保
存胚が 33.3％（3/9）であり，保存区分間で有意差は認められなかった（表 5）．

は，ビトラン-7 保存胚が 96.3％（52/54），Cryotop
保存胚が 96.8％（61/63）であり，ビトラン-7 保存胚と Cryotop 保存胚との間に有意差は認められなかった（表 2）．

54

Cryotop 保存胚a, b：有意差有（p <0.05）

果ビトラン-7 保存胚

18

細胞数

表4

融解試験
融解 24 時間後の生存胚率（生存胚数 / 融解胚数）

項目

25

意差が認められた（P ＜ 0.05）（表 4）．

法を説明変数としてロジスティック回帰分析を実施
し，水準間の比較は Tukey の多重比較法により行い，有意水準は 5％とした．統計解析は R（version：
4.1.1）を用いて行った．

供試数

ビトラン-7 保存胚移植試験
未経産牛の受胎率（受胎頭数 / 移植頭数）は，ビト
ラン-7 保存胚が 45.2％（14/31），緩慢凍結保存胚が29.2％（7/24），Cryotop 保存胚が 72.2％（13/18）であり，緩慢凍結保存胚と Cryotop 保存胚との間に有拍の確認または直腸検査による胎膜スリップの確認
によって行い，受胎率を調査した．
受胎率の比較は，受胎の有無を目的変数，保存方

1

項目
計測胚数

2

た．新鮮胚は，20％ FCS を添加した M2 培地を用いてストローに封入し，38℃に保温して移植現場に運搬した．移植は発情後 7 ～ 8 日目に黄体側子
宮内に頸管経由法により行った．妊娠診断は妊娠
40 日前後に，超音波画像診断装置を用いた胎仔心

結

ウシ体外胚における保存方法別の融解後細胞数（平均値±標準偏差）考察

ビトラン-7 は，受胎率の高い Cryotop 保存胚の移植時に必要な試験室内での融解作業を，ストロー内で再現することを目的に開発した．
Cryotop によるガラス化保存法の大きな特徴は，脱平均細胞数±標準偏差は，ビトラン-7 保存胚が136.4 ± 5.8，Cryotop 保存胚が 132.1 ± 4.8 であり，
ビトラン-7 保存胚と Cryotop 保存胚との間に有意差

ガラス化による細胞傷害を防ぐことにある．脱ガラスは認められなかった（表 3）．

表6

生産現場におけるウシ体外胚の保存方法別受胎成績項目

ビトラン-7 保存胚

緩慢凍結保存胚

Cryotop 保存胚

新鮮胚

移植頭数

151

12

95

181

受胎頭数

79

85

47

91

受胎率（％）

52.3a

14.1b

49.5a

50.3a
a, b：有意差有（p <0.05）

─ 43 ─

広島県獣医学会雑誌

化は，ガラス化状態の胚やその周辺の液が液体に変化する現象であり，脱ガラス化温度域（－80℃付近）
を緩やかに通過した際に発生する．脱ガラス化が発生すると，細胞内に氷晶が生じ，胚は重大な傷害を受ける 1）．Cryotop を用いることで，加温された融解液へ，ガラス化状態の胚を直接浸漬して超急速に加温し，脱ガラス化温度域を急速に通過させることができ，脱ガラス化することなくガラス化胚を融解することが可能となる 1）, 7）, 8）．この現象をストロー内で再現するためには，温められた融解液と冷却されたガラス化胚をストロー内で同時に存在させる必要がある．
そこで，ビトラン-7 には，空気中で 45 秒程度液体№ 36（2022）

クト移植が，新鮮胚及び Cryotop 保存胚を用いた移植と同程度の有効性をもつことが示唆された．
ビトラン-7 を活用することにより，任意の日時・場所で高い受胎率が期待できるガラス化保存胚を融解・移植することが可能となった．今後は，ビトラ
ン-7 保存胚を普及させ，広島血統和牛の供給頭数拡大を推進していきたい．

謝

辞

試験及び胚移植事業に御協力いただいた胚移植技術者及び畜産農家の皆様，供卵牛の提供及び採卵実施に当たり御協力いただいた全国農業協同組合連合会広島
県本部畜産部，卵巣採材に当たり御協力いただいた広島市食肉衛生検査所の職員の皆様に感謝いたします．

窒素を貯留することができる「保冷器具」をストローに装備するとともに，ガラス化胚を載せたスティック
をストローの保冷器具部分に位置するよう接合できるようにした（図 1）．
これにより，融解時に，融解液を吸引したストロー
部分を加温している間，胚は保冷器具内の液体窒素に
よって－196℃程度に保たれるとともに，融解液加温

文献1） 一般社団法人日本家畜人工授精師協会：家畜人工授精講習会テキスト（家畜体内受精卵・家畜体外
受 精 卵 移 植 編 ）， 四 刷，88-99， 京 和 工 業 印 刷，

後にスティックを押し込むことで，チップ上の胚が加温された融解液に浸かり，胚を超急速に加温することが可能となった（図 2）．
このビトラン-7 を用いた胚の融解試験及び移植試
験において，ビトラン-7 保存胚及び Cryotop 保存胚の生存胚率，平均細胞数及び受胎率は同程度であった．ビトラン-7 を用いることにより，試験室内で実

東京（2016）2） 浜名克己，中尾敏彦，津曲茂久：獣医繁殖学，第3 版，229-233，文永堂出版，東京（2007）

施している Cryotop 保存胚の融解機序がストロー内において再現できるようになり，ビトラン-7 保存胚の融解時に脱ガラス化による細胞傷害を防ぐことが可vances in Biology & Biotechnology, 2 (1), 16-23(2015)
4） Kani, C, et al: Effect of Dibutyryl cAMP Together with FSH and EGF during In Vitro Maturation on Sperm Aster Formation and Blastocyst
Development after Intracytoplasmic Sperm In-

3） Yasuhiro, O., et al: Comparison of Two Biopsy
Methods in Bovine Embryos. Journal of Ad-

能となったと考えられた．
ビトラン-7 を広く普及させるには，一般的な民間移植技術者が同一条件で簡易に融解できる方法を確立する必要があった．

jection. Journal of Mammalian Ova Research,
28, 131-138 (2011)5） 岩水 正ら：ウシ体外受精胚の凍結保存，広島県
獣医学雑誌，13，59-62（1998）
6） Stringfellow, D.A, Seidel, SM: Manual of the International Embryo Transfer Society (IETS),
3th ed, IETS,Champaign, IL (1998)
7） 関 信輔：細胞内氷晶形成メカニズムの解明と細胞内氷晶形成回避における融解速度の重要性，低融解時の誤操作としては，融解液を吸引したストロー部分を加温する際に，保冷器具が温水に浸り保冷機能が低下し，胚が脱ガラス化することがある．
そこで，保冷器具が物理的に引っ掛かり，温水に浸らないようにしたストローハンガーを用いた融解方法を考案した．
この融解方法をもとに，民間移植技術者への技術普及を図った結果，販売胚受胎成績において，ビトラ
ン-7 保存胚は Cryotop 保存胚及び新鮮胚と同程度の受胎率が得られた．ストローハンガーを用いることにより，誰もが脱ガラス化を防ぎつつ胚を融解できるこ

温生物工学会誌，63No.2，77-84（2017）8） Kuwayama, M., et al: Highly efficient vitrification method for cryopreservation of human oo-とが示唆された．また，民間移植技術者が主体となった胚移植において，ビトラン-7 保存胚によるダイレ

cytes, Reprod Biomed Online, 11, 300-308(2005)

─ 44 ─

症例報告
広島県に発生した乳用牛における胎膜水腫の発生事例
渡久川兼誉 1）

横田青山

細川久美子 2）

嘉朗 2）

美希 1）

朝倉ひとみ 2）
尾崎充彦 1）

（受付：令和 4 年 2 月 16 日）

Anecdotal report of Cowʼs dropsy of fetal membranes in Hiroshima Prefecture.
KANETAKA TOKUGAWA1），MIKI YOKOTA1），HITOMI ASAKURA2），YOSHIRO AOYAMA2），KUMIKO HOSOKAWA2）and MITSUHIKO OSAKI1）

1）Northern Center of Livestock Hygiene Service, Prefecture of Hiroshima,
1-4-1 Higashihonmachi, Shobara, Hiroshima, 727-0011, Japan2）Western Center of Livestock Hygiene Service, Prefecture of Hiroshima,
1-15 Saijo-gojo, Higashi-Hiroshima, Hiroshima, 739-0013, JapanSUMMARYIn October 2020, a primigravid cow developed hydrops of the fetal membrane anddied at a dairy farm in Hiroshima Prefecture. As a result of pathological assessmentof the recovered fetus and placenta, the fetus was diagnosed with liver fibrosis andhydronephrosis.
── Key words: dropsy of fetal membranes

要約2020 年 10 月，広島県内の酪農場において，初妊牛が胎膜水腫を発症し死亡した．摘出した胎子と胎盤を病性鑑定した結果，胎子は肝線維症及び水腎症と診断した．
──キーワード：胎膜水腫

1）広島県北部家畜保健衛生所（〒 727-0011
2）広島県西部家畜保健衛生所（〒 739-0013

広島県東庄原市東本町 1 丁目 4-1）
広島県東広島市西条御条町 1-15）
─ 45 ─

広島県獣医学会雑誌

序№ 36（2022）

文

成

績

胎膜水腫は，胎膜腔内に胎水の過度な貯留による腹囲膨満等を主徴とする疾患で，尿膜水腫と羊膜水腫の2 種に分けられる．牛では尿膜水腫が胎膜水腫の 9 割を占め，その多くは，妊娠後期で発生が確認されてお1

農場調査
母牛は牛異常産 4 種混合不活化ワクチンを接種済みであり，これまでの治療歴は無かった．また，当該農場では今回の発症前の約 1 年以内に，受精卵移植

り，尿膜水の増量の程度は様々だが，多いもので 250
ｌ以上に達することもある．本症を発症した母牛は，子宮の異常な拡張に伴う消化器症状や呼吸促迫等の症状を認め，放置しておくと頻拍や脱水等の症状が悪化して死に至ることもある 1）．胎子は子宮内で，または牛において胎子奇形，過大子等の流死産が 5 例確認
された．

出生直後に死亡することが多い．
2020 年 10 月，広島県内の酪農場において，初妊
牛が胎膜水腫を発症し死亡した．乳用牛での胎膜水腫の症例は少なく，ほとんど報告されておらず，希少な

2

外貌所見（写真 1）
胎子の頭尾長は 100cm，外観は腹囲膨満を呈し，背側まで波動感を認めた．全身の皮下及び筋間に浮腫を認め，皮膚は赤色を呈していた．

症例のため報告する．

材料と方法
1

発生概要及び材料
乳用牛約 100 頭飼養のフリーバーン農場において，分娩予定 2 カ月前の 22 カ月齢初産牛が腹部膨満及び
呼吸促迫を呈した．臨床獣医師が鼓脹症を疑うも穿刺によってガスが抜けず，腸管の膨張を疑い開腹手術を行ったところ，子宮膨満が認められた．子宮穿刺により約 100 ｌの尿膜水を排出したが翌日，眼球陥没など著しい脱水症状を呈し，起立不能となり夕方死亡した．病性鑑定のため，死亡翌日に開腹して胎子（受精写真1

卵移植した胎齢 210 日，ホルスタイン種，雌）及び胎盤を摘出した．

3

2 方法
1）農場調査
農家からの聞取りにより，臨床経過及び飼養管理

死亡胎子

病理解剖学的所見
胎子の胸腔，心嚢内には暗赤色の胸水及び心嚢水の貯留が認められた．腹腔内は胸腔と同様に暗赤色の腹水が著しく貯留していた（写真 2）．心臓は心臓壁の肥大及び心筋の肥厚が認められた（写真 3）．腎臓は融解し，右腎の腫大が顕著であった．また，実質に水疱が認められた（写真 4）．肝臓は腫大し表面に凹凸が認められた（写真 5）．

状況調査を実施した．
2）病理学的検査
剖検後，採材臓器を 10％中性緩衝ホルマリンで固定し，パラフィン包埋，切片を作成した．それをヘマトキシリン・エオジン（HE）染色及びアザン染色を実施した．
3）生化学的検査
胎子の心嚢水，胸水，腹水を用いて尿素態窒素濃度（BUN），グルタミン酸オキサロ酢酸トランスア
ミナーゼ活性（GOT），総ビリルビン（T-Bil），乳酸脱水素酵素（LDH），クレアチンフォスフォキ
ナーゼ活性（CPK）及び電解質を生化学自動分析装置（富士ドライケム 7000V，富士フイルムメディ
カル（株），東京）で測定した．

写真2

─ 46 ─

暗赤色の腹水広島県獣医学会雑誌

写真3№ 36（2022）

写真4

肥大した心臓

腎臓の融解及び実質の水疱4

病理組織学的所見
腎臓は腎杯の拡張とともに，皮質及び髄質の萎縮を認めた．皮質の大部分は変性，自己融解し，表層は脱落していた．髄質は集合管及び尿細管が拡張し，一部で嚢胞様を呈していた（写真 6）．集合管及び尿細管上皮が多層化配列を呈し，狭窄した管腔構造が認められた（写真 7）．肝臓はび慢性に類洞の拡張と充うっ血，肝細胞間の剥離，変形及び空胞変性を認めた．さ
らに，結合組織がび慢性に増殖していた（写真 8）．
また，胎盤には異常が認められなかった．
写真5

5

腫大し凹凸のある肝臓

生化学的検査（表 1）
胎 子 体 液 は BUN，AST，T-Bil，LDH，CPK，K

が高値であり，Na や Cl など電解質の低下が認めら
れた．

写真6

写真7

腎臓髄質の嚢胞形成（矢頭），良質表層の脱落（矢印），HE染色

狭窄した尿細管，HE染色（Bar=10μm）

写真8

─ 47 ─

肝臓，アザン染色（Bar=100μm）

広島県獣医学会雑誌
表1№ 36（2022）

胎子体液の生化学検査結果

項目

単位

心嚢水

胸水

腹水

（※）基準値

BUN

mg/dl

70.6

70.7

67.7

4.0-8.8

結果
↑

AST

U/L

1,401

439

73

0-37

↑

T-Bil

mg/dl

3.2

4.0

1.3

0.1-0.8

↑

LDH

U/L

>9,000>9,0001,978692-1,445

↑

CPK

U/L

3,734

>20,000

4,155

4.8-12.1

↑

Na

mEq/l

80

83

100

138-148

↓

K

mEq/l

40.5

36.6

14.9

3.9-5.3

↑

Cl

mEq/l

48

52

58

96-110↓※胎子体液の基準値は確認できなかったため，新生牛血液の基準値を参考にしたまとめ及び考察に腎機能異常を引き起こし，大量の尿を排出させ胎膜水腫を発症させる遺伝性疾患のバーター症候群 1 型
は，黒毛和種にのみ報告があるが 2），本症例のような

病理解剖学的所見及び組織学的所見，生化学的検査から，胎子は水腎症及び肝線維症と診断された．母牛の肝機能や腎機能及び胎盤に異常は認められなかった．

ホルスタイン種での報告は確認できなかった．当該農場では本症例の他にも受精卵移植牛において流死産が発生している．これらの流死産への胎膜水腫の関与

以上のことから，本症例の母牛は胎膜水腫に起因した内臓圧迫と重度脱水により死亡，胎子は尿排出阻害や，その発生原因解明のために，今後も検査を継続していくことが必要と考える．

による腎不全並びに子宮内での圧迫により死亡したと推察された．
胎膜水腫の発生原因として，胎盤機能の異常や奇形
胎子，遺伝性疾患等が挙げられる．また，双胎や体外受精，トランスジェニック，クローン由来胎子の妊娠の場合は，特に発生リスクが高いとされている 1）．本症例では母牛に異常がなく，生化学的検査において胎文

献1） 居在家義昭ほか：獣医繁殖学，中尾敏彦編，第 4版，391-394，文永堂出版，東京（2012）2） Sasaki,S., et al: A missense mutation in solute
carrier family 12, member 1 (SLC12A1) causes
hydrallantois in Japanese Black cattle, BMC
Genomics, 17,724-738 (2016)

子体液電解質の異常が認められたことから，遺伝性疾患が原因であった可能性が示唆された．しかし，胎子─ 48 ─

症例報告
全身性抗酸菌感染症と縦隔型リンパ腫を併発した猫の一例
三浦

京夏 1）

坂井

祐介 2）

森本

將弘 2）

櫻井

優 2）

砂原

央 3）

藤森佳寿子 5）

藤野千賀子 4）一色長峯

小田まゆみ 1）

栄路 5）

真之 2）

（受付：令和 4 年 1 月 20 日）

A cat with systemic Mycobacterium avium subsp. hominissuis infection andmediastinal lymphoma.
KONATSU MIURA1），YUSUKE SAKAI2），HIROSHI SUNAHARA3），CHIKAKO FUJINO4），SANEYUKI ISSHIKI2），MASAHIRO MORIMOTO2），YU SAKURAI2），KAZUKO FUJIMORI5），EIJI NAGAMINE5）and MAYUMI ODA1）

1）Oda Animal Hospital, 3131-1, Kamura-cho, Fukuyama-shi, Hiroshima
729-0112, Japan.
2）Laboratory of Veterinary Pathology, Joint Faculty of Veterinary Medicine,
Yamaguchi University, 1677-1 Yoshida, Yamaguchi-shi, Yamaguchi
753-0841, Japan.
3）Laboratory of Surgery, Joint Faculty of Veterinary Medicine, Yamaguchi
University, 1677-1 Yoshida, Yamaguchi-shi, Yamaguchi 753-0841, Japan.
4）Matsuoka Animal Hospital, 3-22-6, Myojin, Mihara-shi, Hiroshima
723-0046, Japan.
5）IDEXX Laboratories, 5-8-18, Kajino-cho, Koganei-shi, Tokyo 184-8515,
Japan.

SUMMARY
Mycobacterium spp. causes Mycobacterium infection, which rarely causes systemic
acid-fast bacillus infection with systemic granuloma. Only a few reports have been
published on the infection in pet animals. We encountered a case of systemic granuloma
caused by severe acid-fast bacillus infection, accompanied by mediastinal lymphoma,
in a cat living indoors. The animal was pathologically examined by postmortem
autopsy, followed by genetic analysis. Postmortem autopsy revealed a large amount of
Mycobacterium spp. in the macrophages of affected tissue, which was identified to be1）おだ動物病院（〒 729-0112 広島県福山市神村町 3131-1）
2）山口大学共同獣医学部病態制御学講座（〒 753-0841 山口県山口市吉田 1677-1）
3）山口大学共同獣医学部臨床獣医学講座（〒 753-0841 山口県山口市吉田 1677-1）
4）松岡動物病院（〒 723-0046 広島県三原市明神 3 丁目 22-6）
5）アイデックスラボラトリーズ株式会社（〒 184-8515 東京都小金井市梶野町 5-8-18）
─ 49 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

Mycobacterium avium subsp. hominissuis by genetic analysis. Lymphocyte-like tumor
cells proliferated in a solid mediastinal tumor. Immunostaining revealed that, the tumor
was B-cell lymphoma. Genetic analysis identified mutations in the clarithromycin
resistance gene, although no mutation was found in other drug resistance genes.
Furthermore, the expressions of MHC class I and II molecules were decreased. As
observed in the present case, the medical treatment of systemic feline acid-fast bacillus
infection may be complicated by lymphoma. The drug resistance and decreased antigen
presentation should be pathologically investigated.
── Key words: systemic acid-fast bacillus infection, feline, mediastinal type

要約

抗酸菌感染症は，Mycobacterium 属細菌による感染症であり，稀に全身性に肉芽腫が発生する全身性抗酸菌感染症が引き起こされるが，伴侶動物における報告は非常に少ない．今回
我々は，完全室内飼育の猫において，重度の抗酸菌感染による全身性肉芽腫と，縦隔型リンパ腫を併発した一例に遭遇し，死後剖検によりその病態を明らかにすると共に，遺伝子解析を実施した．死後剖検では，病変組織のマクロファージ内に多量の Mycobacterium 属細菌が認められ，遺伝子解析により Mycobacterium avium subsp. hominissuis であることが判明した．また，縦隔に形成された腫瘤には，リンパ球様腫瘍細胞が充実性に増殖しており，免疫染色によりこの腫瘤は B 細胞性リンパ腫であることが判明した．遺伝子解析により，クラリ
スロマイシン耐性遺伝子の変異が認められたが，他薬剤耐性遺伝子の変異は認められなかった．また，MHC クラス I，II 分子の発現低下が観察された．本症例により，猫の全身性抗酸菌感染症において，リンパ腫を併発し治療が困窮する症例も存在することが示され，その薬剤耐性と抗原提示能の低下についての病態を明らかにすることが必要であると考察した．
──キーワード：全身性抗酸菌感染症，猫，縦隔型リンパ腫，薬剤耐性序

文かになっていない 2, 5, 6, 7）．今回，我々は完全室内飼育の猫において，抗酸菌感染症による全身性肉芽腫を呈し，死後剖検により縦隔型リンパ腫を併発していた症例に遭遇したため，ここに報告する．

Mycobacterium 属細菌による感染症は古くから存在し，結核を引き起こす M. tuberculosis の他に M.
avium，M. bovis，M. microti など多数の亜種が存在する 1-3）．ヒトにおける抗酸菌感染症は，主に呼吸器を介して侵入し，全身性感染症になると多臓器に肉芽腫性病変をつくることが知られている 4）．猫では，主に M. microti や M. bovis，稀に M. tuberculosis によ症

例

症例は雑種猫，9 歳 1 ヶ月齢，避妊雌，体重 3.58kg（初診時）．既往歴はなく，猫エイズウイルス抗体，猫る感染が見られるが，全身性抗酸菌感染症は稀である．全身性抗酸菌感染症は Mycobacterium 属細菌が全身，または付属リンパ節へ播種することにより引き起こされる 6）．また，動物における抗酸菌感染症

白血病ウイルス抗原共に陰性，完全室内飼育であった．

2, 3, 5, 6）

成は， 人 獣 共 通 感 染症としても問題になること が ある 1, 3, 8）．全身性抗酸菌感染症を呈した猫の例は数例存在するが，その報告数は非常に少なく，病態は明ら績

第 1 病日，口が痛そうとのことで来院．食欲不振，
元気消失を呈し，口腔内に重度の炎症を認め，触診に─ 50 ─

広島県獣医学会雑誌て両側下顎リンパ節の軽度腫大を認めた．視診での口腔内の炎症所見から，重度歯周病を疑い，セフォベシ
ンナトリウム（コンベニア注Ⓡ）8mg/kg とメチルプレ
ドニゾロン酢酸エステル（デポ・メドロール注 Ⓡ ）№ 36（2022）

身麻酔を含めたリスクをオーナーに検討してもらった
のち，第 368 病日，麻酔下での CT 検査，生検を実施した．挿管時に咽喉頭部を圧排する腫瘤が口腔内に観察された（写真 2）．

10mg/kg を皮下注射した．第 47 病日に，症状の再発が見られたためセフォベシンナトリウム（コンベニア
注Ⓡ ）8mg/kg を再度使用した．第 73 病日に口内炎，
食欲不振の症状が改善されないことから，エンロフロ
キサシン（バイトリルⓇ）5mg/kg po SID を処方した．
第 80 病日の再診時に，左側咽頭部と，下顎リンパ節の部位に 25mm×10mm の結節を発見した．口内炎と食欲不振の症状は改善していなかった．下顎リンパ節の針生検により細菌感染が疑われたため，エンロフ
ロキサシン（バイトリルⓇ）5mg/kg po SID を再度処方し，アイデックスラボラトリーズ株式会社（以下IDEXX） に 細 胞 診 を 依 頼 し た． 第 84 病 日，IDE
XX から抗酸菌感染症である診断が下ったため，過去の報告を参考とし 7）, クラリスロマイシン（クラリス Ⓡ ）14mg/kg po BID，リファンピシン（リファン
ピンⓇ）11mg/kg po SID の投薬を開始した（写真 1）．

写真2 挿管時にみられた口腔内腫瘤
写真2 挿管時にみられた口腔内腫瘤
挿管自体は可能であったが、腫瘤（矢頭）が咽喉頭部を圧排していた。

挿管自体は可能であったが、腫瘤（矢尻）が咽喉
頭部を圧排していた。
CT 検査では，左軟口蓋から咽喉頭にかけて均一増強性を示す 5.2cm×1.9cm の腫瘤が見られ，縦隔リン
パ節と，気管気管支，空腸，下顎，内側咽喉頭リンパ節の腫大，両側腎臓結石が見つかり，左肺後葉においてはびまん性に高 CT 値陰影が見られた（写真 3，4，5）．
咽頭部腫瘤と左右下顎リンパ節はパンチ生検（18G
Tru-cut 針），縦隔リンパ節は細胞診を実施し，それぞれ IDEXX に提出した．また，同日に食道カテーテルを設置し，投薬と栄養補給が可能となるようにした．第 378 病日，咽頭部腫瘤と下顎リンパ節は炎症性肉芽腫と診断され，縦隔リンパ節はリンパ腫の可能性が高いとの所見であったが確定診断には至らなかった．第 379 病日，抗生剤としてクラリスロマイシン，
写真1 下顎リンパ節FNA チールネルゼン染色（×1000倍）
リファンピシン，クロファジミンの 3 種に加えてエ（Bar＝20μm）
マクロファージと、赤色に染色される抗酸菌（矢頭）が多数観
ンロフロキサシンを再度処方した．第 381 病日，咽写真１ 下顎リンパ節FNA チールネルゼン染色 （×1000倍）（Bar=20μm）
察された。 提供：IDEXX ラボラトリーズ 藤森 佳寿子先生
頭部腫瘤と左右下顎リンパ節のチールニルゼン染色標
マクロファージと、赤色に染色される抗酸菌（矢尻）が多数観察された。
本にて抗酸菌が多数観察されたため，抗酸菌感染によ第 185 病日，食欲不振は多少改善が見られたが，る炎症病変が考えられるという結果が返却された．第6）
提供：IDEXX388
ラボラトリーズ
咽頭部と下顎の結節は小さくならないため，クラリス
か ら， イ ソ ニ ア ジ ド
病 日， 過 去 の 治 藤森
療 報 告佳寿子先生Ⓡ
ロマイシンとクロファジミン（ランプレン ）14mg/
3.5mg/kg BID，リファンピシン 10mg/kg SID，エン
kg po SID の内服に変更した．その後は体重が 3.7kg
ロフロキサシン 7mg/kg SID，更に嘔気予防のためメまで増加し，良好に経過を過ごしていた．第 351 病
トクロプラミド（プリンペラン＠）0.3mg/kg BID，プ
日，3.7kg から 3.1kg と急激な体重減少，食欲低下，
レドニゾロン 0.5 ～ 1mg/kg SID を経口薬として使用
嚥下困難で来院され，口腔内の視診にて咽頭部の腫脹した．第 395 病日，元々えずきが間欠的にあったが，を認めた．薬剤の組み合わせをクラリスロマイシン，
頻度がかなり増えたとのことで来院．イソニアジドに
リファンピシン，クロファジミンの 3 種併用で処方よる副作用も考えられたため休薬した．第 402 病日，した．第 359 病日，体重が減少し続けており，食欲イソニアジドを休薬してもえずきは変わらず，食欲は廃絶であったこと，また，猫の抗酸菌感染症でのステ廃絶していた．左右の瞳孔径が不整なことがあるとの
6）
ロイド使用報告があったことから ，抗生剤に加えてことであった．イソニアジドを休薬しても状態の改善
プレドニゾロンを 0.5mg/kg SID で経口投与した．全が見られなかったため，やむを得ずクラリスロマイシ
─ 51 ─

写真3

頸

左軟口蓋
咽頭後リ
（矢尻）

が咽喉

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

頭

尾

頭

写真4

尾

CT画像（サジタル像）

写真3 頸部腹側からのCT3D画像 縦隔リンパ節の重度腫大が認められ、針生検を
写真4 CT画像（サジタル像）
写真5 CT画像（コロナル像）
左軟口蓋から咽喉頭にかけて下顎、内側実施した。
写真5 CT画像（コロナル像）
写真4 CT画像（サジタル像）
縦隔リンパ節の重度腫大が認められ、針生検を実
左肺後葉においてびまん性に高CT
咽頭後リンパ節の重度腫大が認められ施した。
値陰影が見られた。（矢頭）
た。
（矢頭）
写真3
頸部腹側からのCT３D画像
縦隔リンパ節の重度腫大が認められ、針生検を左肺後葉においてびまん性に高CT値陰影実施した。
が見られた（矢尻）写真5 CT画像（コロナル像）

左軟口蓋から咽喉頭にかけて下顎、内側
咽頭後リンパ節の重度腫大が認められた。
イソニアジド（矢尻）

左肺後葉においてびまん性に高CT値陰影が見られた（矢尻）エンロフロキサシン

プレドニゾロンクロファジミン

リファンピシンクラリスロマイシン
0

50

100

150

図１

200

250

300

350

400

450

病日

各種薬剤と投与期間

ン，リファンピシン，クロファジミンの組み合わせに戻した（図 1）．
しかし体重減少が改善せず，第 426 病日に自宅にて斃死した．
その後，山口大学病理学研究室に死後剖検を依頼した．病変の認められる各々の外観所見は，頸部リンパ節 が 腫 大 し， 口 腔内では口蓋扁桃より隆起し た 約
2.5cm の腫瘤と，それに類似した 1cm 程度の腫瘤が咽頭扁桃部に認められた．胸腔には 5cm 弱の大型腫それぞれ組織学的検査により，頸部リンパ節群では微細顆粒状の細胞質を有するマクロファージが重度に浸潤しており，オーラミン・ローダミン染色によりマ
クロファージ内に多量の Mycobacterium 属菌が認められ，腸間膜リンパ節，肺門リンパ節，腸管，舌でも同様の所見が得られた．口腔内腫瘤でも微細顆粒状の細胞質を有するマクロファージが重度に浸潤している像が得られたが本来の組織構築が残されておらず，由来組織の判定は困難であった（写真 11，12）．

瘤が食道や気管に癒着・圧排して存在し，肺や心臓も圧排していた（写真 6，7，8）．
左肺前葉に径 2cm 程の気腫が存在していた（写真9）．
腹腔内では腸間膜リンパ節が 6cm 程度に腫大し，空腸から回腸にかけて点状出血巣が散見された．両側肺野において全葉で重度の肺水腫が認められ，微細顆粒状の細胞質を有するマクロファージの集簇巣も一部で認められた．両側腎臓において皮質で広範な尿細管の壊死巣が多見され，梗塞による虚血性壊死と考えられた．胸腔内腫瘤ではリンパ球様腫瘍細胞が充実性に増殖しており，免疫染色で CD79a に弱陽性～陽性，の 腎 臓 が 萎 縮 し， 梗 塞 病 巣 が 複 数 認 め ら れ た（ 写真 10）．

CD20 に弱陽性，CD3，Iba-1 に陰性を示したため，
B 細胞性リンパ腫と考えられた．オーラミン・ローダ
─ 52 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

提供：
坂井祐

提供：山口大学
提供：山口大学
坂井祐介 坂井祐介
先生
先生

写真6
写真7
写真8
写真6
写真7
写真6
写真7
写真8
頸部の結節状病変（矢頭）はいずれも外部から認められた口腔内腫瘤は口蓋扁
縦隔に大型腫瘤が1つ認められ（矢頭）、肺
頸部の結節状病変（矢尻）はいずれ
外部から認められた口腔内腫瘤は口蓋扁桃に起始し、径頸部の結節状病変（矢尻）はいずれ
外部から認められた口腔内腫瘤は口蓋扁桃に起始し、径腫大した頸部リンパ節であった
桃に起始し、径2cm程度（矢頭）。咽頭や心臓を尾側に圧排していた。
縦隔に大型腫瘤が1つ認められ(矢尻)、肺 や心も腫大した頸部リンパ節であった
2cm程度 (矢尻)。咽頭扁桃にも同様の質感で径1cm程度のも腫大した頸部リンパ節であった
2cm程度 (矢尻)。咽頭扁桃にも同様の質感で径1cm程度の扁桃にも同様の質感で径1cm程度の病変
提供：山口大学 坂井祐介先生
病変が形成される(矢印) (矢印)
病変が形成されるが形成される（矢印）

提供：山口大学

坂井祐介先生写真9

写真10

左肺前葉に径2cm程度の気腫が存在した（矢頭）。
腎皮質に赤色楔形の梗塞病変が複数認められた（矢頭）。
写真10
写真９

提供：山口大学 坂井祐介先生
左肺前葉に径2cm程度の気腫が存在した (矢尻)。 腎皮質に赤色楔形の梗塞病変が複数認められた（矢尻）。

提供：山口大学

写真11 腫大した頸部リンパ節
A：組織が微細顆粒を細胞質に持つマクロファージで占められる（Bar＝50μm）
写真11 腫大した頸部リンパ節
B：多核ラングハンス氏巨細胞（Bar＝10μm）

坂井祐介

提供：山口大学

先生

坂井祐介先生10μm
A:組織が微細顆粒を細胞質に持つマクロファージで占められる（Bar=50μm）
AR─ 53 ─

B:多核ラングハンス氏巨細胞（Bar=10μm）
提供：山口大学

坂井祐介

先生

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

写真12
C：頸部リンパ節のオーラミン・ローダミン染色：細胞質内の多量の抗酸菌（赤）（Bar＝10μm）
写真12D：空腸のパイエル板でも組織がマクロファージに占拠されている像が得られた（Bar＝50μm）

提供：山口大学

坂井祐介先生C：頸部リンパ節のオーラミン・ローダミン染色：細胞質内の多量の抗酸菌（赤）（Bar=10μm）
パ腫が発生した報告が存在するが 12），動物において
ミン染色で Mycobacterium 属菌は認められなかった．
D：空腸のパイエル板でも組織がマクロファージに占拠されている像が得られた（Bar=50μm）
組織を用いた PCR 検査では，本症例が Mycobacterium
avium subsp. hominissuis（以下 MAH）による感染

全身性抗酸菌感染症とリンパ腫の併発した症例は筆者
提供：山口大学 坂井祐介
が調べる限り存在せず，その因果関係については不明

で あ っ た こ と が 明 ら か に な っ た． ま た，23s
ribosomal RNA の点突然変異が見られ，クラリスロ
マイシン耐性が示唆された．他薬剤に関しても同様のであり，検討が必要である．治療が奏功しなかった他の理由として，遺伝子解析で明らかになった薬剤耐性の獲得も挙げられるが，耐性獲得を証明できたのはク検査を用いたが，耐性はみられなかった．同組織において，MHC クラス I，II 分子の発現が低下している
こ と が 発 見 さ れ，これは抗酸菌感染によりマ ク ロ
ファージの抗原提示能が減退し，リンパ球を誘導できなくなっていた可能性を示唆した．

ラリスロマイシンだけであり，抗酸菌感染症において薬剤耐性の獲得を調査することは意義が少ないという報告もあることから 13），薬剤耐性だけを治療が奏功しなかった理由としては考えにくい．また，抗酸菌感
染 に お け る 抗 原 提 示 分 子 の 抑 制 は M. bovis や M.
avium においても過去に報告がある 14-17）．本症例に考察おいても，マクロファージの抗原提示分子の発現低下が見られたことにより，抗酸菌感染により抗原提示能

今回の症例は，口腔内病変から始まり，リンパ節，
腸管や肺にも抗酸菌感染が見られたことから，全身性抗酸菌症であったと考えられた．猫において MAH による感染例は過去にも存在するが，筆者の調べる限り
4 例 と 非 常 に 少 な い 5, 9-11）． 過 去 の 報 告 に よ る と，
MAH が汚染された土壌や水に存在することから，幼少期の不顕性感染もしくは食物や水による感染が最も疑われるが 5），本症例において感染経路を探索することは困難であり，未だ不明である．また，本症例では，口腔内の症状から始まり，抗生剤の投薬により第350 病日までは良好な経過をたどっていたが，第 351
病日からはえずきや，迷走神経への影響と思われる瞳孔不同など胸腔内病変による症状の方が強く出ていたため，第 351 病日から病態が悪化したことは，縦隔型リンパ腫が発生し，影響を及ぼしていたタイミングであったとも考えられる．胸腔内腫瘤の細胞診の段階
でリンパ腫が疑われていたが，抗がん剤治療により免疫力が低下し抗酸菌感染症が悪化する可能性を考え，
治 療 に 臨 む こ と が で き な か っ た． ヒ ト で は M.
tuberculosis による結核から気管支原発 MALT リン
─ 54 ─

が減退し，リンパ球を誘導できなくなっていた可能性が高いと推察され，これもまた本症例において抗酸菌感染症が全身に波及し，適切な免疫誘導が不可能となり，治療が奏功しなくなっていた原因の一つとして考えられる．
MAH の猫からヒトへの感染はまだ報告が見られな
いが，M. bovis が猫からヒトへ伝播した可能性があるとする報告や 3），逆に M. tuberculosis がヒトからイヌへ感染した例などが報告されている 8）ことから，今後，MAH においても，伴侶動物として存在する猫から，ヒトへ伝播する可能性も大いに考えられる．ヒトにおいても，抗酸菌感染症における薬剤耐性は問題になっていることから 18），今回の症例のように治療が困窮した症例のデータが今後も蓄積され，その病態が明らかになることは，人獣共通感染症予防の観点においても重要なきっかけになると考えられる．本症例
では初診時に歯周病だと誤診してしまったが，最初から丁寧な触診，問診をしていれば早めに抗酸菌感染症
であると気づくことができたと考えられる．猫の全身性抗酸菌感染症を長期的に追った報告はまだ少ないた先生

広島県獣医学会雑誌

め，この投稿により，類似した症例に遭遇した時，一人でも多くの獣医師に抗酸菌感染症を鑑別リストに加えていただけると幸いである．また，先述したとおり，動物で抗酸菌感染症とリンパ腫が併発した症例はsubsp. hominissuis menigoencephalitis in a cat,
Vet. Microbiol., 204, 43-45 (2017)10）Beck, A., et al:Mucocutaneous Inflammatory
Pseudotumors in Simultaneous Mycobacterium
avium subsp. avium and Mycobacterium avium

筆者が調べる限り本症例が初であり，猫でもヒトと同様に抗酸菌による抗原刺激によりリンパ腫が発生したのかは不明なままであるが，治療が困窮した大きな一因であると考えられるため，今後の症例の蓄積，解明に期待する．筆者自身も，今後同様の症例に遭遇した
場合は積極的に検査をすすめ，救命できるような治療法を模索していくべきであると考えている．

謝№ 36（2022）

subsp. hominissuis Infection in a Cat, J. Comp.
Pathol., 153(4), 227-230 (2015)11）Klang, A., et al: Mycobacterium avium subspecies hominissuis infection in a domestic European shorthair cat, Wien. Tieraztl. Monatsschr.,
101, 74-78 (2014)12）Tom-O, K, MD., et al: Bronchus-AssociatedLymphoid Tissue Lymphoma and Mycobacteri-辞

um tuberculosis Infection:An Unusual Case
遺伝子解析及びスライドを提供していただいた坂井
祐介先生，剖検に携わっていただいた砂原央先生，症例を一緒に担当してくださった藤野千賀子先生，また，剖検に症例を提供してくださった本症例の飼い主

and Review of the Literature, Respir Care.,52(6), 755-758 (2007)13）Bruffaerts, N., et al. Genome Sequences of Four
Strains of Mycobacterium avium subsp. hominissuis, Isolated from Swine and Humans, Dif-

様に深謝します．

fering in Virulence in a Murine Intranasal In-

文献1） 辻本元ほか：獣医内科学，辻本元編，改訂版，592-593，文永堂出版，東京（2011）
2） Yesari, E., et al: Case report: systemic tuberculosis caused by Mycobacterium bovis in a cat,
BMC Vet Res., 15:9 (2019)fection Model, Genome Announc., 4(3), e00533–
e16 (2016)14) Hussain, S., et al: Mycobactrerium avium Infection of Mouse Macrophages Inhibits IFN-γ
Janus Kinase-STAT Signaling and Gene Induction by Down-Regulation of the IFN-γ Receptor., J.Immnol.,163(4), 2041-2048 (1999)
15）Jha, S.S., et al:Virulence-related Mycobacterium avium subsp hominissuis MAV_2928 gene3） Catherine, M, O., et al: Cat-to-Human Transmission of Mycobacterium bovis, United King-is associated with vacuole remodeling in mecro-dom, Emerg Infect Dis., 25(12)2284-2286 (2019)4） Falkinham, J.O.3rd., et al: Epidemiology of In-

phages, BMC Microbiol., 10, 100 (2010)16）Weiss, D.J., et al: Regulation of Expression ofMajor Histocompatibility Antigens by Bovine
Macrophages Infected with Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis or Mycobacterium
avium subsp. avium, Infect. Immun., 69(2),fection by Nontuberculous Mycobacteria, Clin
Microbiol Rev., 9: 177-215 (1996)
5） Kanegi, R., et al: Clinical findings and treatment of disseminated ʻMycobacterium avium
subspecies hominissuis’ infection in a domestic
cat, J. Vet. Med. Sci., 81(12), 1842-1849 (2019)6） 古川修治ほか：同居猫にみられた全身性抗酸菌感染症の２例，動物臨床医学，10（2），95-99（2001）
7） Petra, Cˇ., et al: Systemic Mycobacterium kansasii Infection in Two Related Cats, Pathogens.,
9(11), 959 (2020)
8） Anna, P, V, M., et al: Case Report:DissminatedMycobacterium tuberculosis Infection in a Dog,
Am. J. trop. MedHyg., 88(3), 596-600 (2013)
9） Madarame, H., et al: Mycobacterium avium

1002-1008 (2001)17）Wojciechowski, W., et al: Attenuation of MHC
Class II Expression in Macrophages Infectedwith Mycobacterium bovis Bacillus CalmetteGuerin Involves ClassⅡ Transactivator and
Depends on the Nramp1 Gene, J. Immunol.,163(5), 2688-2696 (1999)
18）佐々木結花ほか：中高年者を中心に生じた多剤耐性結核菌による集団感染事例，Kekkaku，Vol.74，
No.7，549-553（1999）

─ 55 ─

症例報告絹糸反応性肉芽腫による十二指腸閉塞を発症した犬の 1 例
黒瀬

智泰

小田まゆみ

三浦

京夏

山内

美彩

紀子

眞鳥美沙麻

黒瀬

則包ゆう佳
神野

三宅恵津也
茜

（受付：令和 4 年 1 月 18 日）

A case of duodenal obstruction due to silk-reactive granuloma in a dog
TOMOYASU KUROSE，MAYUMI ODA，KONATU MIURA，YUKA NORIKANE，ETSUYA MIYAKE，MISA YAMAUTI，NORIKO KUROSE，MISAO MATORI and AKANE KANNO

Oda Animal Hospital, 3131-1 Kamura-cho, Fukuyama-shi,Hiroshima 729-0112

SUMMARY
We encountered a dog that was diagnosed with silk-reactive granuloma one year after
contraceptive surgery and developed duodenal obstruction despite immunosuppressive
therapy that had continued for four years after removal of the residual silk. This animal
was a female mixed-breed dog aged 1 year and 7 months, which underwent contraceptive
surgery at 7 months old. She was referred to our hospital with chief complaints ofdepression, despite a good appetite, and abdominal distention for a week. The dog
was diagnosed with silk-reactive granuloma, with CRP 6.9 mg/dL, infiltrative tumors
detected near the left and right kidneys by abdominal ultrasonography (the left tumor
infiltrated the spleen), and silk sutures found on the left and right tumors and at the
tip of the residual uterine horn by test laparotomy. As the tumors could not be excised,prednisolone and cyclosporine were continuously administered to suppress their growth.
Subsequently, the animal was recovering well with dose adjustment. However, the dog
was brought to our hospital at the age of 5 years and 9 months with a chief complaint ofvomiting. Abdominal ultrasonography and CT revealed that the right tumor spreading
to the duodenum caused obstruction and the left tumor infiltrated the left kidneywith ureteral involvement. After resection of the obstructed duodenum by laparotomy,
intestinal anastomosis was performed but the tumors on both sides could not be excised.
Subsequently, the symptoms were improved with recovery of urination. The dog was
histopathologically diagnosed with purulent granulomatous inflammation. Recently, silkreactive granuloma has become less common because of the widespread use of vascular

おだ動物病院（〒 729-0112

広島県福山市神村町 3131-1）
─ 57 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

sealing systems. However, it should be noted that contraceptive/castration surgery with asilk suture may cause a granuloma, which would be life-threatening if it becomes severe,
as observed in this case.
── Key words: Dog, Silk-reactive granuloma, Duodenal obstruction,
Suturereactive granuloma, Sterilization surgery

要約

避妊手術の 1 年後に絹糸反応性肉芽腫と診断され，残存絹糸摘出後 4 年間に及ぶ免疫抑制
療法を続けたにもかかわらず十二指腸閉塞を発症した犬に遭遇した．症例はミックス，1 歳 7か月，雌，避妊済（生後 7 か月）で，1 週間前から食欲はあるが元気がなく，お腹が張っているという主訴で来院．CRP 6.9mg/dl，腹部超音波検査にて左右腎臓付近に浸潤性腫瘤があり，左側は脾臓にも浸潤を認め，試験開腹にて左右腫瘤と遺残した子宮角先端部に絹糸を確認し絹糸反応性肉芽腫と診断した．腫瘤の外科的切除は不可能と判断し，腫瘤の増大を抑制する目的でプレドニゾロンおよびシクロスポリンの継続的な投薬を行った．その後，薬用量を調整することにより経過は良好であったが，5 歳 9 か月で再び嘔吐を主訴に来院され，腹部超音波検査および CT 検査にて右腫瘤が十二指腸にまで及び閉塞，左腫瘤が左腎への浸潤と尿管の巻き込みを確認した．開腹手術にて十二指腸閉塞部を切除し腸管吻合術を行ったが，左右とも腫瘤切除は不可能であった．その後は，臨床症状および排尿の経過は良好である．
病理組織検査の結果，化膿性肉芽腫性炎症と診断された．近年，血管シーリングシステムの普及に伴い遭遇する機会は減少傾向にあるが，本例のように絹糸を使用した避妊去勢手術は肉芽腫形成の要因となり重症化すると生死に係わる疾病となり得ることを留意しておくべきである．
──キーワード：犬，絹糸反応性肉芽腫，十二指腸閉塞，避妊手術，縫合糸反応性肉芽腫序

文

制療法を続けたにもかかわらず十二指腸閉塞を発症した症例に遭遇したので報告する．

犬の縫合糸反応性肉芽腫は外科手術に用いた縫合糸に対する生体の異物反応により形成され，皮下では脂症

例

肪織炎をきっかけに，縫合糸の周囲や皮下組織に肉芽腫および炎症が生じたもの 1） で，体腔内ではそれらが臓器への癒着により胃腸炎や腸閉塞などを引き起こ

マルチーズとヨークシャーテリアのミックス，1 歳
7 か月，雌，他院にて生後 7 か月で避妊済，予防は完すことがある．臨床症状は非特異的で，無症状あるいは嘔吐，下痢，元気消失，食欲不振，体重減少，発熱などがあり 1）, 2），既報 2）, 3）では，犬種としてミニチュ
アダックスフントでの発症が多く，術後診断期間は1 ヶ月から 4 年と幅広く，雌避妊後の縫合糸確認例は8 割程度とされている．

全にされており，既往歴として避妊手術 3-4 ヶ月後に皮膚縫合部の縫合糸反応があり処置が行われていたが詳細は不明であった．
当院には 1 週間前から食欲はあるが元気がなく，お腹が張っているという主訴で来院され，初診時の臨床
症状は，体温 39.4℃，腹部膨満，嘔吐，空咳，鼻水

近年，縫合糸を使わない手術として血管シーリング
システムの普及に伴い遭遇する機会は減少傾向にあるが，今回，犬で避妊手術の 1 年後に絹糸反応性肉芽腫と診断され，残存絹糸摘出後 4 年間に及ぶ免疫抑であった．血液検査では好中球，好酸球が多く，TP8.4g/dl お よ び グ ロ ブ リ ン 5.7g/dl と 上 昇，CRP は6.9mg/dl と高値を示した（表 1）．腹部超音波検査では 左 右 腎 臓 付 近 に 浸 潤 性 腫 瘤 を 認 め， 右 側 は長 径
─ 58 ─

広島県獣医学会雑誌表1を 認 め た と の こ と で あ っ た． 体 重 6.15 ㎏， 体 温
39.0℃，腹囲膨満を呈し，下痢はなかった．

初診時の血液検査所見

RBC

×104/µl

653

HGB

g/dl

HCT

％

MCV

TP

g/dl

8.4

12.6

ALB

g/dl

2.7

38.9

GLB

g/dl

5.7

fl

59.6

A/G

№ 36（2022）

検査および治療

0.47

MCH

pg

19.3

GLU

mg/dl

123

MCHC

g/dl

32.4

BUN

mg/dl

9.5

WBC

×102/µl

166

GPT

U/I

20

LYM

％

9.7

CRP

mg/dl

6.9

OTHR

％

79.8

EO

％

10.5

PLT

×104/µl

36.8

1．腹部超音波検査（写真 1）
胃から十二指腸の著しい拡張，液体貯留，十二指腸下行部付近に高エコー像を認め，管腔内が狭窄しており消化管閉塞が疑われた．
2．CT 検査（写真 2）
左右腎臓尾側に低増強性腫瘤を認め，中心部に石灰化，子宮遺残物に連続していた．右占拠性物質は後腹膜の浸潤部位から十二指腸にまで増大しており，十二指腸下行部における閉塞が確認された．左占拠性物質
は脾臓，左腎に浸潤し尿管を巻き込み造影遅延を認め

23.1㎜，左側は 26.8㎜で脾臓への浸潤を認めた．
第 7 病日に試験開腹を実施したところ，右側腫瘤は右腎尾側に位置し腹膜癒着，後腹膜腔への浸潤も疑われ，左側腫瘤は脾臓壁側面後縁，左腎尾側および腹た．
3．開腹手術（写真 3）
十二指腸閉塞部を腫瘤から剥がした後，閉塞部位を切除し腸管吻合術を行った．左右ともに腹膜や腎臓へ癒着した腫瘤の切除は不可能であった．また，膵臓への物理的な影響はなかった．

膜に癒着しており，左右の腫瘤はともに遺残した子宮
角先端に連続した．左右卵巣は存在せず，腫瘤と子宮角先端の間に絹糸を確認したため，卵巣摘出術が行われていたものと考えられた．これら肉眼的所見から絹糸反応性肉芽腫と診断した．
治療は試験開腹時に著しい腫瘤の臓器，腹膜への癒着のため外科的切除は不可能と判断し，絹糸摘出のみをした．そのため，内科的治療を選択し 62 日間の抗生物質（エンロフロキサシン，オルビフロキサシン）の投与と腫瘤の増大の抑制を目的として免疫抑制剤のプレドニゾロン 0.4 ～ 1.0mg/kg（1 回 / 日）およびシクロスポリン 4.7 ～ 7.5mg/kg（1 回 / 日）を臨床症状
および CRP 濃度の変化に合わせて継続的な投与を行った．試験開腹および内科的治療の開始後は，元気，食欲が次第に回復し経過良好であった．
しかし，5 歳 9 か月で再び嘔吐を主訴に来院された．
前日から嘔吐が続き，茶色の水様性の液体で血液混入

術後翌日は血液の混入した茶色の液状物の嘔吐が認められたが，その後はなく，術後 3 日目より食事を再開し食欲の改善がみられた．また，排尿には問題はみられず，排便は退院後に確認され異常はなかった．
4．病理組織検査（写真 4）
病理組織検査は（有）パソラボへ検査を依頼した．
十二指腸漿膜から筋層にかけてマクロファージや好中球を主体とした不規則な結節構造を形成し，辺縁にリンパ球や形質細胞が浸潤しており，化膿性肉芽腫性炎症と診断された．なお，結節内に縫合糸は確認されな
かった．

※

（A）
（A）
（A）消化管閉塞が疑われた十二指腸下行部の高エコー像（矢頭：閉塞部）

（B）

（B）
写真1

写真1

腹部超音波検査所見

腹部超音波検査所見（B）十二指腸近位の著しい拡張、液体貯留（※：液体貯留）（A）消化管閉塞が疑われた十二指腸下行部の高エコー像（矢頭：閉塞部）（B）十二指腸近位の著しい拡張，液体貯留（※：液体貯留）

─ 59 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

（A）
（A）

（B）
（B）

（C）
（C）

（D）
（D）
写真2 CT検査所見
CT検査所見
写真2（A）左右腎臓尾側に低増強性腫瘤，中心部に石灰化，子宮遺残物に連続（矢頭：低増強性腫瘤）（A）左右腎臓尾側に低増強性腫瘤，中心部に石灰化，子宮遺残物に連続（矢頭：低増強性腫瘤）（B）右占拠性物質は後腹膜の浸潤部位から十二指腸にまで増大し消化管を閉塞（矢頭：後腹膜へ浸潤した腫瘤，矢印：十二指腸への連続部）（B）右占拠性物質は後腹膜の浸潤部位から十二指腸にまで増大し消化管を閉塞（矢頭：後腹膜へ浸潤した腫瘤，矢印：十二指腸への連続部）（C）左占拠性物質は脾臓、左腎に浸潤（矢頭）（C）左占拠性物質は脾臓，左腎に浸潤（矢頭）（D）左占拠性物質は左尿管を巻き込み造影遅延を認めた（矢頭）（D）左占拠性物質は左尿管を巻き込み造影遅延を認めた（矢頭）

写真3

写真3

開腹手術時の十二指腸の閉塞部位

開腹手術時の十二指腸の閉塞部位

写真4写真4病理組織検査所見
病理組織検査所見（左）10％ホルマリン固定：漿膜から筋層の構造が不明瞭，線維組織の増生と境界不明瞭な黄白色の結節，結節の中に縫合糸は認められなかった（左）10％ホルマ
リン固定：漿膜から筋層の構造が不明瞭，線維組織の増生と境界不明瞭な黄白色の結節，結節の中に縫合糸は認められなかった（中）HE染色・×100：漿膜面（A）から筋層（B）にかけて線維組織の増生と結節構造（＊）が形成され腸管が肥厚，粘膜（C）への波及はない（中）HE染色・×100：漿膜面（A）から筋層（B）にかけて線維組織の増生と結節構造（＊）が形成され腸管が肥厚，粘膜（C）への波及はない（右）HE染色・×400：結節構造は多数の炎症細胞の集簇（※）し結節構造間には線維組織が増生（F），結節中心部は好中球の浸潤からなり，辺縁部にはマクロファージが配列（右）HE染色・×400：結節構造は多数の炎症細胞が集簇（※）
し結節構造間には線維組織が増生（F），結節中心部は好中球の浸潤からなり，辺縁部にはマクロファージが配列

─ 60 ─

広島県獣医学会雑誌考察№ 36（2022）

量に依存していたと考えられた．
症例個体については，元々皮膚縫合部位での縫合糸反応があったこともあり，異物に対して過敏な体質で本症例は避妊手術において絹糸が使用されたと考えられ，子宮から連続した腫瘤が形成されていたことか
ら絹糸反応性肉芽腫と診断した．その後，化膿性肉芽
腫性炎症による十二指腸閉塞にまで及んだが，その原ある可能性があった．そのため，今後もどこに炎症が波及するかわからないので定期的な腹部超音波検査や血液検査が必要であると考える．また，十二指腸部の炎症は外科的切除により経過は良好だが，残存する腫因は CT 画像において既存の腫瘤から連続した炎症が十二指腸に到達していたことと，病理組織検査では十二指腸閉塞の炎症部に縫合糸は存在しなかったことから，絹糸摘出後の炎症進行によるものと考えられた．
犬の避妊去勢手術を想定したラットを用いた縫合糸
反応性肉芽腫の実験例 4） では，炎症細胞浸潤は皮膚

瘤は左尿管を巻き込んでおり今後も腎疾患等の危険性があるため注意が必要と考えられる．
以上のことから，絹糸を使用した避妊去勢手術は肉芽腫形成の要因となり，重症化や他の組織へ影響が及んでしまうと生死に係わる疾病となり得ることを留意しておくべきである．そして，本例のような縫合糸摘出後や一般の外科手術後においても肉芽腫性炎症を特徴とする新たな疾患を発症する可能性があることも知っておく必要があると示唆された．

切開部に比べて避妊手術の卵巣動脈と子宮頸部の結紮部位および去勢手術の精索と精巣動脈の結紮部位で強く，どの縫合糸でも肉芽腫は形成され，縫合糸別に浸潤程度に有意な差はないが，炎症の程度はモノフィラ
メント吸収糸やステンレスワイヤーと比較して絹糸とマルチフィラメント吸収糸で顕著で，縫合糸が存在す
る限り組織反応は継続すると報告している．本症例と比較すると，重症度が高いと考えられる避妊手術と絹糸の条件は一致しているものの，縫合糸が取り除かれた後も組織反応は継続されていた点が異なった．

文献1） 赤熊美紀：犬の治療ガイド 2020，辻本元ほか編，
第 1 刷，803-804， エ デ ュ ワ ー ド プ レ ス， 東 京（2020）
2） 千々和宏作ほか：卵巣子宮摘出後に縫合糸反応性肉芽腫が疑われた犬 22 症例における長期予後と併発疾患の臨床的解析，獣医麻酔外科学雑誌，
39（2），21-27（2008）

内科的治療については，免疫抑制剤を症状に合わせて薬用量を調整しつつ投薬を継続していたにもかかわらず，炎症の進行を抑えることができなかった．成書ではプレドニゾロン 2 ～ 4mg/㎏（1 回 / 日）を推奨
されており 1），本症例では比較的低用量で治療してい3） 土田靖彦ほか：犬の術後縫合糸肉芽腫に関する病理学的研究，日獣会誌，62（5），388-394（2009）たことが原因と示唆されるが，実際にこの用量を使用し続けることは副作用の面から困難と考えられる．ま4） 土田靖彦ほか：ラットを用いた術後縫合糸肉芽腫に関する実験病理学的研究，日獣会誌，61（11），873-879（2008）

た，シクロスポリンは最大容量まで使用していたため，緩和治療に対する奏功性はプレドニゾロンの薬用─ 61 ─

報

告地域猫活動の普及啓発及び支援事業について
仙田

佳織

白澤

清子

（受付：令和 3 年 12 月 15 日）

Public awareness and Support project of Regional cat activity
KAORI SENDA and SUGAKO SHIRASAWA

Hiroshima City Animal Care Center 11-27, Fujimi-cho, Naka-ku, Hiroshima
730-0043

SUMMARY
Hiroshima City Animal Center has been helping the neighborhood associations
working on regional cat activity by providing free operations of cats’ infertility castration
since 2014. However, many other neighborhood associations have not joined theactivity yet, because it’s not widely award. In 2017, we did a questionnaire survey ofneighborhood associations which had not joined the activity to see whether they knew
the activity. The results showed half of the associations didn’t know the activity. So
we promoted the information sessions for better public awareness. As a result, joining
number of the associations has increased to 418(22% of neighborhood associations in
Hiroshima city)
In 2021, we conducted a questionnaire survey of the associations to know how they feel
about the activity. We get the results that 96.9% were well or fairly satisfied and 95.2%
admitted the effects of the activity.
Assignments is how to get rid of lack of awareness and collaboration. To make theactivity more lively and acceptable, people’s understanding is essential. So we’ll try tohave more information assets and reassess the support target. Through these procedures
we hope the activity could be moved ahead.

要約

平成 26 年から地域猫活動に取り組む町内会等に対して，動物管理センタ―（以下センター）
が無償で不妊去勢手術を実施する等の支援を行っているが，未参加町内会が多く，原因として周知不足が考えられた．そこで，平成 29 年に，未参加町内会にアンケート調査を行い，普広島市動物管理センター（〒 730-0043

広島市中区富士見町 11-27）
─ 63 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

及啓発及び支援事業を行った．また，令和 3 年には，参加町内会を対象に本事業の評価についてのアンケート調査を行った．平成 29 年のアンケート調査から，地域猫活動について「知らなかった」という回答が約半数あり，認知不足が判明したため，説明会や広報等により，普及啓発を行った．その結果，令和 3 年 8 月末までの活動町内会数は累計 418（市内全町内会に占める割合：約 22％）に達し，手術数は累計 4448 頭となった．令和 3 年のアンケート
調査結果から，「活動に参加してよかった・まあよい」とする回答が 96.9％あり，「活動の効果があった・少しある」とする回答が 95.2％あった．課題については，周知不足や協力者不足等が挙がった．活動を促進するためには市民の理解を得ることが必要不可欠であり，引き続き説明会の開催や広報等普及啓発に努めていきたい．また，今後，より取り組みやすい制
度となるよう支援対象の見直し等検討し，事業の推進を図っていきたい．

序

文

占め，その理由の多くが「地域住民の理解を得ること」や「捕獲や手術のための搬送などの協力者の確保」が困難，といった意見が挙がった．
2 普及啓発効果（図 1）

平成 26 年から地域猫活動に取り組む町内会等に対して，センターが無償で不妊去勢手術を実施する等の支援を行っている．平成 29 年に，未参加町内会にア

地域猫活動の説明会後に行ったアンケートでは，「“ 地域猫のことがよくわかった．参加してよかった．”」，「“ 良い活動なので取り組んでみたい ”」という意見が多数あり，さらに説明会に参加した町内会からンケート調査を行い，普及啓発及び支援事業を行った．また，令和 3 年には，参加町内会を対象に本事業の評価についてのアンケート調査を行ったので，経の活動申請があった．
また，広報紙やメディアによる広報をきっかけとして活動のことを知ったという方からの問い合わせや，過を報告する．

方法

実際に活動申請した町内会もあった．
その結果，令和 3 年 8 月末までの活動町内会数は
累計 418（市内全町内会に占める割合：約 22％）に達し，手術数は累計 4448 頭となった．
3 活動効果調査結果（Ｒ３）1

アンケート調査（H29）
平成 29 年，市内の地域猫活動未参加の町内会を対象に，野良猫の状況や地域猫活動の認知度等に関するアンケート調査を行った（送付数 1624 件，回答数
1267 件）．
2 普及啓発平成 30 年から市内全 8 区にて地域猫活動についての説明会を行い，市の広報誌やテレビ等のメディアを活用し，活動の普及啓発を行った．
3 活動効果調査（R3）
令和 3 年，既に活動している町内会を対象に活動の効果や課題等についてアンケート調査を行った（送付数 177 件，回答数 130 件）．

結令和 3 年に行った既に地域猫活動を実施している町内会へのアンケート調査結果から，「活動に参加してよかった・まあよい」とする回答が 96.9％あり，「 活 動 の 効 果 が あ っ た・ 少 し あ る 」 と す る 回 答 が95.2％あった．また，課題については，町内への周知不足や協力者不足等が挙がった．

（頭数）
1400

果

1200
1000

1

アンケート調査結果（H29）
地域に野良猫がいると把握している町内会は 68％
で，そのうち 6 割が苦情などのトラブルがあると答え，多くは糞尿被害であった．

800
600
400

地域猫活動の認知度については，「知っている」が20％，「知らなかった」や「詳しくは知らなかった」
が 80％であった．
「活動の取り組みに理解はできるものの，町内での取り組みは困難」との意見が過半数を─ 64 ─

200
0

H26

H27

H28

H29

町内会数
図1

（町内会数）
450
400
350
300
250
200
150
100
50
0
H30 R1
R2
R3
手術頭数 （8月まで）

参加町内会数及び手術頭数

広島県獣医学会雑誌考№ 36（2022）

する意見が多かった一方，周知不足等の課題について指摘があったことから，対応を検討していきたい．
活動を促進するためには市民の理解を得ることが必要不可欠であり，引き続き説明会の開催や広報等普及啓発に努めていきたい．また，今後，より取り組みや察

町内会に行ったアンケート調査から，地域猫活動に関する認知不足が判明した．また，地域猫活動未参加の町内会でも 68％の野良猫の生息が確認された．普及啓発の実施後，活動町内会の増加とともに手術実績

すい制度となるよう支援対象の見直し等を検討し，事業の推進を図っていきたい．

も伸びたことから，効果的な啓発方法であったと思われる．
平成 26 年から支援事業を開始して 7 年が経過し 1）, 2），
何年も活動している町内会では，野良猫をほとんど見なくなったという声も多い．
一方，センターへの猫に関する苦情や相談依頼件数は依然として減少しておらず，地域猫活動だけでなく猫の適切な飼育の啓発が必要と考えられた．
また，アンケート調査結果から，活動の効果を評価

─ 65 ─

文献1） 阿部勝彦ほか：地域猫活動の推進，広島県獣医学会雑誌，32，109-114（2017）2） 白澤清子：地域猫活動の普及啓発及び支援事業について，全国動物管理関係事業所会議 動物愛護
管理調査研究発表会資料（2017）

原 著
獣害捕獲された野生タヌキ（Nyctereutes procyonoides）の
年齢推定の試み
新田由美子 1）

三木由美子 1）

谷浦

督規 2）

谷浦

直美 2）

（受付：令和 3 年 12 月 8 日）

Age estimation of raccoon dogs (Nyctereutes procyonoides)by the morphometry of cranium
YUMIKO NITTA1），YUMIKO MIKI1），TOKUNORI TANIURA2）and NAOMI TANIURA2）

1）Hiroshima Shudo University, Ozukahigashi 1-1-1, Asaminami-ward,
Hiroshima 731-3195
2）Taniura Animal Hospital, Kairouen 1-3-30, Saeki-ward, Hiroshima
731-5135

SUMMARY
Introduction: The Japan Veterinary Medical Association sets up the activity policy
to create the society in which humans and animals coexist. Under this activity policy,
wildlife is expected to play important roles especially in the field of biodiversity
conservation. The wildlife in satoyama share their habitat with humans. They internalize
this common environment through agricultural farm plants. Therefore, general conditionsof these animals provide valuable information for us to monitor local environment.
In order to confirm the age-dependent accumulation of environmentally hazardous
substances in mammals, lifespan of the wild raccoon dogs (Nyctereutes procyonoides)
was estimated with an original strategy, morphometric and computed tomography (CT)examinations on craniums.
Materials and Methods: Cranial specimens of the 16 wild raccoon dogs were used
for this study (Nitta and Katoh, JEIS, 45-55, 2020). Morphometry of the cranium
was performed with a digital measuring instrument and with the images of CT forinvestigations of each cavity of the skull as well as of bone thickness. Measures of 26
variables were standardized and provided for further multivariate analyses, principal
component analyses, cluster analyses and other statistical analyses. The craniums were

1）広島修道大学（〒 731-3195
2）谷浦動物病院（〒 731-5135

広島市安佐南区大塚東 1-1-1）
広島市佐伯区海老園 1-3-30）
─ 67 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

sorted by their morphometrically estimated lifespan. Correlation between the individual
lifespan and the concentrations of cadmium and zinc in kidney were examined.
Results: Principal component analysis showed one case of a different cranial morphology.
The variables concerning to sutures, tympanic cavities and teeth showed highcontributions to the principal components. Cluster analyses could pick up the estimatedages of young and matured clearly. Accumulations of cadmium and zinc in kidney, which
we had reported, of the aged cases were found high.
Conclusion: Lifespan estimation of wild raccoon dogs was challenged with an original
strategy: morphometric and CT examinations on craniums. Among the 26 indicessubmitted for multivariable analyses in view point of the postnatal development of
cranium were effective for the analyses, careful observations of the tympanic bulb in
temporal bone, sutures, and mandibula contributed for estimating the lifespan of raccoondogs.
── Key words: age estimation, cadmium, cranium, morphometry, raccoon dog

要約

序論：日本獣医師会は活動方針に，「ヒトと動物が共存して生きる社会」を目指すことを掲げ
る．生物多様性保全の分野で，野生動物の存在と社会的役割が重みを増す．里山を生息圏とする野生動物はヒトの生活圏との距離が近く，一部を共有する．両者は共通の圃場作物を介して共有環境を内在化する．従って，野生動物の健康状態は，ヒトの公衆衛生環境を監視・調査する際に貴重な情報を提供してくれる．本研究では，害獣捕獲された野生動物の年齢を推計し，それらが生物濃縮する環境汚染物質の測定結果を用いて，生物濃縮の時間依存性を検証する．
材 料 と 方 法： 野 生 タ ヌ キ（Nyctereutes procyonoides）16 症 例 を 対 象 と し た（Nitta andKatoh, JEIS, 45-55, 2020）．頭蓋の骨格標本を作製し，デジタル式計測器で形態測定し，CT
画像を観察した．全 26 変数の値を標準化し，多変量解析した．頭蓋の成熟度を示す変数により，16 症例の個体成熟度を序列化した．
成績：1 検体に，他とは異なる頭蓋形態を認めた．縫合線，鼓室包および上顎に関する変数
が，捕獲までの生存期間の長い症例の 2 例を，捕獲までの生存期間の短い症例の 3 症例を，それぞれ同定した．長期生存と推定できた 2 症例はカドミウム（Cd）を高濃度に腎に蓄積した．
考察：野生動物の健康状態は生息環境を反映する．里山でヒトと共生する野生タヌキが腎にCd を蓄積していた．この検体について，成熟度を骨格計測法で序列化する方法で Cd 蓄積の曝露期間依存性を示すことができた．害獣捕獲された野生の哺乳動物において，側頭骨の成長に伴う鼓室包の変化，縫合線の不明瞭化，上顎の変化を数値化することができた．頭蓋計測による序列は，環境汚染物質濃度による序列との相関関係を検証することで，一定の評価が可能であった．
──キーワード：カドミウム，形態計測，タヌキ，頭蓋，年齢依存性

─ 68 ─

広島県獣医学会雑誌

序№ 36（2022）

文および組織を手作業で剥皮，除去し，頭蓋の骨格標本とした．
2．生命倫理：野生動物の屍体の扱いは，「山口県野生鳥獣肉の衛生管理対策」（https://www.pref.yamaguchi.

害獣捕獲された野生動物の年齢（捕獲時までの生存期間）を推定することは，環境汚染物質の分布を知り，それからの曝露を評価してヒトの公衆衛生へ貢献する研究の対象動物とする場合に，貴重な情報とな

lg.jp/cms/a15300/syoku/yasei-chouju.html） お よ び「日本獣医師会・獣医師倫理綱領」（http://nichiju.lin.
gr.jp/about/pdf/chikai.pdf）を遵守した．
3．形態計測：頭蓋骨格標本へ，扁平骨境界明瞭化の目的で，アルシアンブルー，アリザリンレッドおよびる 1）．重金属の Cd と Zn を，広島広域都市圏の南部
地 域 に 生 息 す る イ ノ シ シ（Sus scrofa） と タ ヌ キ（Nyctereutes procyonoides）の腎に認め，高濃度集積する個体もあった 2）．Cd の腎集積における年齢依存1．頭蓋骨格標本：16 例のタヌキの屍体を対象とした．これらは，2017 ～ 2019 年の狩猟シーズンに圃場進入した害獣として捕獲され，研究に供された 2）

その二重染色を行った．頭蓋内腔および鼓室包内腔の観 察 に， 内 視 鏡（ 直 径 3.7mm）（3R-VFIBER37,
3R-SOLUTION Co. Ltd., Fukuoka, Japan） を 用 い
た．指標部位をデジタルノギスで計測し，縫合線および上顎骨と歯を観察して所見を数値化した（図 1，表2）．計測と観察は 3 回実施し，そのうちの 1 回分を解析に用いた．
4．CT 検査：頭蓋骨格標本を腹側臥位とし，Optima
CT660（GE Health Care Co. Ltd., Japan）を用いて厚さ 0.625mm で連続撮影した 6）．撮影情報を解析ソ
フトウェア（OsiriX）（North Tech Co., Ltd., Sapporo,
Japan）にて DICOM ファイルへ変換し，CT 画像を（表 1）．剖検後の屍体を－70℃で 2 週間以上保管した．その後に室温で解凍し，頭部の表皮，筋肉，臓器得た．頭蓋各部位を観察，計測し，TBO-CT のデー
タをその後の解析に供した（図 1，表 2）．

性 を確認する目的で，剖検所見等の病理学的検索と骨格標本および骨格 CT（Computed Tomography）
画像を用いた解剖学的検索で，タヌキの生存期間推定を行った．推定した生存期間と腎に集積する Cd，Zn
濃度との相関について検討した．
3）

材料と方法

表１. 表1
野生タヌキ16例の剖検時の特徴
野生タヌキ16例の剖検時の特徴c)

体重 (kg)c)

腎Cd (mg/kg)

c)

腎Zn (mg/kg)

剖検時肉眼所見

鼓室包肉眼所見性1

左前腕損傷（手掌, 橈骨・尺骨の遠位1/3喪失）

N.S.

♂

5.2

8.19

20.3

2

N.S. a)

右側萎縮

♂

4.6

1.30

22.1

N.S.

♀

4.2

20.6

31.7

3

b)

寄生虫感染 (Thelazia callipaeda) , 右側眼
瞼肥厚, 子宮内着床痕

4

N.S.

N.S.

♂

5.6

0.43

12.6

5

N.S.

N.S.

♀

4.2

6.56

27.4

6

体幹表皮の広範囲脱毛(Sarcoptes scabier)

b)

N.S.

♂

2.6

3.30

27.0

7

体幹表皮の広範囲脱毛(Sarcoptes scabier)

b)

N.S.

♂

3.2

1.21

24.3

8

N.S.

左側滲出液貯留

♂

4.0

2.71

18.9

9

N.S.

N.S.

♀

2.9

1.36

26.8

10

体幹表皮の広範囲脱毛(Sarcoptes scabier)

両側滲出液貯留，鼓膜肥厚

♂

1.9

0.04

15.9

11

子 宮 内 着床 痕

左側滲出液 貯留

♀

5.5

10.35

23.8

12

体幹表皮の広範囲脱毛(Sarcoptes scabier)

N.S.

♂

3.2

2.90

25.3

13

N.S.

N.S.

♂

3.8

0.93

18.3

14

N.S.

N.S.

♀

3.5

1.06

20.0

15

N.S.

N.S.

♀

2.9

6.41

21.9

16

N.S.

N.S.

♀

3.5

0.26

20.7

b)

b)

a): 著変なし；b):
寄生虫を，光学顕微鏡下で形態学的に同定した 4, 5）；c): 論文から転載した 2）．
a): 著変なし；b): 寄生虫を，光学顕微鏡下で形態学的に同定した4, 5）； c): 論文から転載した 2) .
cd：カドミウム；Zn：亜鉛。

cd:カドミウム；Zn：亜鉛。

─ 69 ─

c)

捕獲年

2017

2018

2019

広島県獣医学会雑誌(A)№ 36（2022）（D)
SH (SH-CT)

CCT-CH

UT

TBH

BFS
SqS

TBO-CT
TL

LS
NL

FPL

(B)

POC PBZB (ZB-CT)

（E)

*
*

TBB
(TBB-CT)AFS

A : 側面図．SH: Skull height; UT: Length of the upper toothrow; TBH:
Tympanic bulla height; TBO-CT: Tympanic bulla ossification by computed
tomography (CT).
B : 背面図．TL: Total length; NL: Nasal length; FPL: Frontal plus parietal
length; IC: Interorbital constriction; PB: Postorbital breadth; POC:
Postorbital constriction; POC: Postorbital constriction; CB: Coronalbreadth; ZB: Zygomatic breadth.
C : 腹側面図．TBL: Tympanic bulla length; TBD: Tympanic bulla diagonal;
TBB: Tympanic bulla breadth; TBB: Tympanic bulla breadth; ＊:observation point of maxilla pits.
D : 縫合線の側面図（頬骨弓を外す）と背面図．FNS:
図１Frontal nasal suture;
CS: Coronal suture; BFS: Butterfly frontal suture; SqS: Squamosal suture;
SL: Lambda suture; AFS: Anterior frontal suture; SS: Sagittal suture.

TBL
TBD

SS

FNS

IC

CB (CB-CT1, CB-CT2)

(C)

CS

図1

頭蓋の測定指標と縫合線

表２.測定指標と測定値
表2 測定指標と測定値
計測・観察部位

計測 値

指標
番号

略語

1
2
1

検査材料

全16例 (平均±標準偏差)

解説

材料

骨

Se x

-

屍体

-

BW

Body weight (kg)屍体-

3.8 ± 1.1

CB

Coronal breadth (mm)

頭蓋骨格

前頭

33.57 ± 2.80

7 for female, 9 for male

2

TL

Total length (mm)頭蓋骨格

上顎, 前頭, 側頭, 後頭

110.17 ± 5.74

3

NL

Nasal length (mm)

頭蓋骨格

鼻

40.11 ± 3.15

4

FPL

Frontal plus parietal length (mm)

頭蓋骨格

前頭, 側頭64.98 ± 3.76

5

UT

Upper toothrow length (mm)頭蓋骨格

上顎, 前頭, 側頭, 後頭

43.45 ± 2.39

6SH

Skull height (mm)

頭蓋骨格

後頭

42.33 ± 1.15

7

ICInterorbital constriction (mm)

頭蓋骨格

前頭

22.13 ± 1.14

8

PB

Postorbital breadth (mm)

頭蓋骨格

前頭

35.42 ± 2.54

9

POC

Postorbital constriction (mm)

頭蓋骨格

前頭

21.86 ± 1.73
61.42 ± 2.58

10

ZB

Zygomatic breadth (mm)

頭蓋骨格

頭頂

11

TBL

Tympanic bulla length (mm)

頭蓋骨格

頭頂

12

TBD

Tympanic bulla diagonal (mm)

頭蓋骨格

頭頂

13

TBB

Tympanic bulla breadth (mm)

頭蓋骨格

頭頂

14

TBH

Tympanic bulla height (mm)

頭蓋骨格

頭頂

15

TBO-CT

Tympanic bulla ossification (CT)

CT 画像

頭頂

16

BFS

Butterfly frontal suture

頭蓋骨格

前頭

17

SqS

Squamosal suture

頭蓋骨格

側頭

18

SS

Sagital suture

頭蓋骨格

頭頂

19

AFS

Anterior frontal suture

頭蓋骨格

前頭

20

LS

Lambda suture

頭蓋骨格

頭頂, 後頭21

CSCoronal sutur

頭蓋骨格

前頭, 頭頂22

FNS

Frontal nasal suture

頭蓋骨格

前頭, 上顎23

MTN

Maxillar teeth number

頭蓋骨格

上顎

24

MTM

Maxillar tooth mamelon

頭蓋骨格

上顎

25

MTPu

Maxillar tooth pulp

頭蓋骨格

上顎

26

MPi

Maxillar pit

頭蓋骨格

上顎

─ 70 ─

表３に表示

広島県獣医学会雑誌

5．統計解析：統計解析に供した指標の総数は 30 で，頭蓋の 26，性，体重，Cd 濃度および亜鉛（Zn）濃度であった．MTN，MTM，MTPn，MPi，縫合線および TBO-CT 指標へ，ダミー・スコアを付した．計測
値とダミー・スコアを，式：u ＝（Xi – μ）
/σにより標メス，と相関した（p<0.05）．
症例 10 は全症例中において，TL が最小，SH とPOC が 最 大 で あ っ た（ 図 2）
．POC/TL，POC/ZB，
CB/ZB の比が症例 10 以外の 15 症例の平均値に対し，それぞれ 1.6，1.4，1.2 倍であった．
鼓 室 包 の 所 見 と 形 態 は 多 様 で あ っ た 8）． 症 例 8，
10，11 に内視鏡観察にて中耳の滲出性炎症像を認め，鼓膜は肥厚し不透明で，耳小骨が滲出液で覆われた（表 1）．症例 2 で，左外側は粗面を呈して萎縮し，左右鼓室包の TBH 不均衡（左：6.4mm，右：10.1mm）

準化した 7）．ここで，u は標準化値，Xi は測定値，μは平均値，σは標準偏差を，それぞれ表す．全指標について，相互間の統計学的有意差検定し（Student’s
t-test）， 相 関 係 数 を 求 め， 多 変 量 解 析 を 行 っ た．
EXCEL 多変量解析 version 3（ESUMI, Tokyo, Japan）と KaleidaGraph version 3.6（HULYNKS, Tokyo,
Japan）のソフトウェアを用いた．

成を認めた．TOB-CT は 4 症例（25％）で両側鼓室包の骨化を認めなかった（表 3，図 3）．
頭蓋指標の連続変数について，16 例の平均値を表
2 に，名義変数の値を症例ごとに表 3 に示す．MTM（切縁結節）を 11/16（68.8％）に認め，MTPu（歯髄可視）の症例は 7/16（43.7％）であった（表 4）．

績

1．頭蓋骨格の特徴：26 指標を観察し，計測した（表2）．連続変数に関して性差はなかった．TBL が TLと相関した（p<0.05）．名義変数のうちの MTN が性，
(A)

(B)

№ 36（2022）

症例 3，11 では歯の磨耗が著しかった．

(C)

NL

IC

TL

A : 頭蓋背面の測定指標．TL: total length;
NL: nasal length; FPL: frontal plus
parietal length; IC: interorbital
constriction; PB: postorbital breadth;
POC: post orbital construction; CB
coronal breadth; ZB: zygomatic
breadth.
B : 症例 8.
C : 症例 10.

PB
POC

FPL

CB
106.31mm
ZB

95.32 mm62.74 mm62.23 mm

図2

頭蓋のCT画像

図２
表３.出生後の成長に関連した頭蓋測定指標とその値
表3 出生後の成長に関連した頭蓋測定指標とその値
上顎
屍体

症例
MTN
1

2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13

縫合線

0

0
1
0
0
0
0
0
0
0
1
0
0

MTM
1

0
0
1
1
1
1
1
1
0
1
0
0

1

1
1
0
0
1
0
0
0
0
1
1
1

MPi
1

1
0
0
0
0
1
0
0
0
1
1
1

頭蓋骨格 (mm)

頭蓋骨格

頭蓋骨格
MTPu

鼓室包

BFS
1

0
0
0
0
1
1
1
1
0
0
1
0

SqS
1

1
0
1
1
1
1
0
0
0
1
1
0

SS/AFS
0

1
0
0
0
0
0
1
1
0
0
1
0

LS
1

1
0
0
0
0
1
0
0
0
1
1
1

CS
1

1
1
0
1
1
1
0
1
1
1
1
1

FNS
1

1
0
0
1
1
1
0
1
0
1
1
1

CT画像

TBL

TBD

TBW

TBH

TBO-CT

17.8

10.0

7.7

9.1

-1

17.1
15.5
18.8
18.7
16.8
17.2
17.6
17.8
16.2
17.6
16.7
16.4

8.2
10.0
10.7
13.2
9.8
9.7
10.3
9.3
10.9
7.4
10.8
10.0

5.5
4.7
5.0
5.9
6.3
6.2
6.2
7.2
6.1
5.4
6.4
6.2

7.9
9.7
10.0
11.5
8.7
8.0
10.0
9.1
9.0
8.8
11.2
9.2

14

1

1

0

0

1

0

1

1

1

1

17.3

12.8

5.0

11.0

15

0

1

1

1

0

0

1

1

1

0

17.5

11.8

6.0

9.9

16

0

1

1

0

1

1

1

1

1

1

15.9

10.6

6.4

10.4

0
1
1
-1
-1
-1
0
1
1
1
1
0
1

1

1

上顎の特徴，縫合線，TBO-CT へ，ダミースコアを適用した．上顎指標では，MTN: 0 を正常上顎歯数，1 を正常未満; MTM: 0 を切歯・上顎の特徴, 縫合線, TBO―CTへ、ダミースコアを適用した。上顎指標では、MTN: ０を正常上顎歯数, １を正常未満; MTM:
犬歯にマメロンあり，1をなし; MTPu: １をなし;
0 を歯髄無着色，1を着色; MPi:0 を上顎骨吸収穴（第4 前臼歯と第 1 臼歯の間）なし，1 をあり．
０を切歯・犬歯にマメロンあり,
MTPu: ０を歯髄無着色,
１を着色;
MPi: ０を上顎骨吸収穴（第４前臼歯と第１臼歯の間）なし,
１をあり。縫合線指標では、０を不明瞭,
１を明瞭。鼓室包指標では、鼓室包が完全に化骨するものを骨化
縫合線指標では，0を不明瞭，1を明瞭．鼓室包指標では，鼓室包が完全に化骨するものを骨化と定義した．TBO-CT
において，－1 をと定義した。TBO-CTにおいて、−１を非骨化,
０を片側性骨化、１を両側性骨化。
非骨化，0 を片側性骨化，1を両側性骨化．

─ 71 ─

広島県獣医学会雑誌(A)№ 36（2022）(B)

A : 頭 蓋 骨 格 標 本 代 表 例（ 症 例 12, ア ル
シアンブルー染色）の側面画像．CS:
coronal suture; FNS: frontal nasal
suture ; BFS: butterfly frontal suture
B : 鼓室包片則骨化例（症例 2）の環状面
CT 画像（A の破線部断面）を示す . 鼓
室包の厚さは均一でなく，左側鼓室包の大部分に骨化を認めない（＊）．
C : 鼓室包片則骨化例（症例 2）の水平面
CT 画像（症例 2）．鼓室包断面（A の実践部断面）を示す．左側鼓室包の大部分に骨化を認めない（＊）．

CS
FNS

*

9.52 mm(C)*

7.79 mm

BFS

図3

頭蓋の骨格標本とCT画像
図３

表4
症例

性

上顎歯数

右列
I
3 a)
3
2 b), c)
3 a)
3
3
3 a)
3 a)
3 a)
3 a)
2 b), c)
3 a)
3 a)
3
3
3 a)

♂
♂
♀
♂
♀
♂
♂
♂
♀
♂
♀
♂
♂
♀
♀
♀

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16

上顎歯の所見

C
1
1 c)
1 c)
1
1
1
1
1
1
1
1 c)
1
1
1
1
1

P
4
4 d)
4 d), e)
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4

M
2
2 c), e)
2 c)
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2

総歯冠数

左列

I
3
3 c)
3 c)
3
3
3
3
3
3
3
3 c)
3
3
3
3
3

C
1
1 d)
1 d)
1
1
1
1
1
1
1
1 d)
1
1 d)
1 d)
1
1

P
4
4 d)
4 d)
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
3 b)
4

M
2
2 c)
2 c)
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2

17
17
16
17
17
17
17
17
17
17
16
17
17
17
16
17

I: 切歯; C: 犬歯; P: 前臼歯; M: 臼歯; a): MTM（切縁結節）; b): MTN（歯冠部喪失）; c): 歯冠部摩耗; d): MTPu（歯髄可視）; e): MPi（上顎骨吸収穴）.

(A)

(B)

3

3

7

pc2

1

9

6
12 13

0

2
11

8

-2

14
15

-2

-1

13
2
11

0
-1

4

3

10
-3

5

12 16 15 14

1

16

-1

-3

2

1

pc2

2

9
8

3
1 6 7
4

-2

0

pc1

1

2

-3

3

図4

-3

-2

-1

0

pc1

5

1

2

3

タヌキ症例の26頭蓋指標による主成分分析

A : 頭蓋骨格指標 26 による 16 症例の 2 次
元分布．症例 10 が他の 15 例の分布集団から乖離する．
B : 成長に伴い変化する頭蓋骨格指標 15 による 15 症例の 2 次元分布．生存期間の長い指標値を示したグループ（□），
短い指標値を示したグループ（●），その中間値のグループ（△）．数値は症例番号を示す．

図４

以上より，症例 3，11 は生存期間が長く，症例 1，
5，6，7 は比較的短く，それ以外は両者の中間にあるとの指標値を示した．
2．多変量解析：頭蓋指標 26 を用いて主成分分析を指標として貢献した，二次元座標上で，症例 10 が他の 15 例の分布と乖離した．従って，これ以後は 15
例を分析対象とした．
上顎 4 指標，縫合線 7 指標，鼓室包 5 指標を用い

行 っ た（ 図 4-A）
． 主 成 分 1 へ は ZB，FPL，TL が，
主成分 2 へは FNS，TBW，NL が，それぞれ上位 3て，主成分分析とクラスター分析を行った．症例 2，
3，11 が，それぞれ 3/5，5/5，4/5 の頻度で生存期間

─ 72 ─

広島県獣医学会雑誌の長いグループに分類された．症例 4，5 が，それぞれ 4/5，5/5 の頻度で生存期間の短いグループに分類された．症例 9 が症例 2，3，11 を含むグループに属する頻度は 0/5 であった．

有用性を本研究は明らかにし，TBL は TL と相関した．他方，個体レベルの中耳の炎症が鼓室包完全骨化と関連するか，明らかでない．

MTN はメスと有意に相関したので，これ以後は上
顎 3 指標，縫合線 7 指標，鼓室包 5 指標を用いて，主成分分析とクラスター分析を行った（図 4-B）．症
例 2，3，11 は引き続き生存期間の長いグループへ，
症例 4，5 は引き続き生存期間の短いグループへ，明確に分類された．
3．腎 Cd 濃度と頭蓋指標値との関係：タヌキの腎濃
度 は，3>11>1>5>15>6>12>8>9>2>7>14>13>4>16>
10 の降順を示した（表 1）．腎 Cd 濃度の高かった症

謝辞

著者らは，放送大学教授加藤和弘先生に多変量解析の指導をいただきました．山口県登録ハンター佐々邉
邦男さんに野生動物検体の確保でご協力をいただきました．著者一同，感謝申し上げます．

文献1） 野田隆史：群集モジュール法による汚染の間接的影響の理解：生態学的視点．日本生態学会誌，
66，95-108（2016）
2） Nitta, Y., Katoh, K.: Wildlife as a biomonitoring

例 3 と 11 はメスで，剖検時に子宮着床痕と上顎歯磨耗の所見を認め，CT 画像で鼓室包の両側骨化を認めた．さらに，症例 3 の CT 画像で大泉門部の骨菲薄化が著しかった．

考№ 36（2022）

察剖検所見と頭蓋計測データとに基づき，16 例の野生タヌキの生存期間を推定した．その推定を検証する
ため，腎の Cd，Zn の濃度と比較した．高い腎 Cd 濃度を示した 2 症例は，頭蓋骨格標本解析においても長い生存期間の特徴を示すことを確認した．症例 10は頭蓋骨格標本解析で他の症例と異なる値と形態を示し， 生 前 の 水 頭 症 を 推 察 し た． 頭 蓋 指 標 の う ち，MTN は Sex と統計学的有意差をもって相関した．これらのことから，タヌキ頭蓋計測指標のうち，個体成長とともに変動する指標は生存期間推定へ寄与した．
その寄与率を考察する際は，症例 10 を除く 15 症例での多変量解析が合理的である．
野 生 動 物 の 生存期間の推定は，長骨の骨端 線 閉
鎖 9），頭蓋の縫合線閉鎖 10），歯のセメント質の年輪
線確認 11），下顎の第 3 臼歯萌出をもって成熟個体とする 12），などの報告がある．
ヒトを対象とする科学捜査においては，歯のセメン
ト質の年輪線確認が最も信頼度の高い年齢推計方法とされる 13）．同様の方法は，キツネ 14），ニホンジカ 15），
タヌキ 11）の年齢推計に適用されてきた．縫合線と年齢との相関は報告が少ない．タヌキとキツネにおいて，縫合線が成熟個体かどうかの判断に用いられた論文では，縫合線の特定や頭蓋あたりの閉鎖縫合線の本
数記述はなかった 15）．
頭蓋の鼓室包に関する指標は，生存期間（年齢）推定に有用であった．TBL は TL の一部として，オオ
カミ 16, 17），朝鮮半島南に生息するタヌキ 12），ホンド
タ ヌ キ 9, 11）， お よ び フ ィ ン ラ ン ド に 生 息 す る タ ヌ
キ 11, 18） に対する頭蓋計測において扱われるものの，TBL としての報告は見当たらない．鼓室包の指標は，肉食動物の形態計測で用いられてこなかったが，その─ 73 ─

model of terrestrial cadmium (Cd): Kidneys offemale wildlife reflecting the environmental
Cd. J Environ Info Sci., 2020 (1), 45-55 (2020)
3） Kurata, Y., et al: Chronic cadmium treatment
induces tubular nephropathy and osteomalacic
osteopenia in ovariectomized cynomolgus monkeys. Vet Pathol., 51, 919-931 (2014)4） Gama, A., et al: First report of Thelazia callipaeda infection in wild European rabbits (Oryctolagus cuniculus) in Portugal. Parasites andVectors, 9, 236 DOI: 10.1186/s13071-016-1526-1(2016)
5） Saito, M.U., Sonoda, Y.: Symptomatic raccoon
dogs and sarcoptic mange along an urban gradient. Ecohealth., 14(2), 318-328 (2017)6） 谷浦督規 ほか：CT 検査が診断治療に有用であった腹部に発生した巨大脂肪腫の 3 症例．広島県
獣医学会雑誌，31，76-80（2016）7） 下田和孝 ほか：北海道産カラフトマスの形態変異．日本水産学会雑誌，76（1），20-25（2010）8） Wible, J.R., Spaulding, M.: A reexamination of
the carnivora malleus (mammalia, placentalia),
pros one, 7(11),e50485(2012),(online), (https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/
journal.pone.0050485).(accessed 2022-04-17)
9） Hidaka, S., et al: Morphology and morphometryof skulls of raccoon dogs, Nyctereutes procyonoides and badgers, Meles meles. J Vet Med Res,.
60 (2), 161-167 (1998)
10）Jurgelėnas, E., et al: On the skull morphologyof raccoon dog (Yctereutes procyowordes) andred fox (Vulpes vulpes). Acta Zoologica Lituanica, 17 (1), 41-46 (2007)
11）Kauhala, K., et al: Skull and tooth morphology

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

of Finnish and Japanese raccoon dogs. Annales
Zoologici Fennici., 35 (1), 1-16 (1998)
12）K i m , S. - I . , e t a l : S e x u a l d i m o r p h i s m o fcraniodental morphology in the raccoon dog
Nyctereutes procyonoides from South Korea. J

J Zool London, 184, 91-117 (1978)15）Iinuma, Y.: Daily Incremental Lines in Sika
Deer (Cervus nippon) Dentine. J Vet Med Sci.,
64 (9), 791-795 (2002)16）Endo, O., et al: Osteometrical and CT examina-

Vet Med Sci., 74, 1609-1616 (2012)13）Swetha, G., et al: Quantitative analysis of den-tion of the Japanese wolf skull. J Vet Med Sci.,
59, 531-538 (1997)17）Khosravi, R., et al: Morphometric variations of
the skull in the Gray Wolf (Canis lupus) in
Iran. Acta Theriologica, 57, 361-369 (2012)tal age estimation by incremental line of cementum. J Oral Maxillofac Pathol., 22, 138-142(2018)
14）Harris, S.: Age determination in the Red fox(Vulpes vulpes)–an evaluation of technique efficiency as applied to a sample of suburban foxes.

18）Helle, E., Kauhara, K.: Age structure, mortality,
and sex ratio of the raccoon dog in Finland. J
Mamm., 74, 936-942 (1993)

─ 74 ─

報 告
広島市と畜場における牛伝染性リンパ腫ウイルス遺伝子の検出状況について
岡田

有香

国広

彩耶

重松

紗希

太田垣

国井

悦子

花木

直喜

坂本

綾

寧

（受付：令和 4 年 1 月 20 日）

Detection of bovine leukemia virus genes in Hiroshima City slaughterhouse
YUKA OKADA，SAYA KUNIHIRO，SAKI SHIGEMATSU，YASUSHI OOTAGAKI，ETSUKO KUNII，NAOKI HANAKI and AYA SAKAMOTO

Hiroshima City Meat Inspection Office, 1-11-1 Kusatsuko, Nishi-ku,
Hiroshima, 733-0832

SUMMARY
For detecting the bovine leukemia virus (BLV) gene, we used to amplify the target
gene and qualitatively measure the virus gene but presently measure it quantitatively
using real-time PCR. In this study, we quantitatively examined the BLV gene in cattle
brought into the Hiroshima City slaughterhouse by real-time PCR and investigated thestatus of its detection. The BLV gene was detected from all 6 animals that developed thedisease, and it was detected as markedly high levels, particularly, in the tumor tissues.
Concerning asymptomatic cattle, the BLV gene was detected in 13 (37.1%) of the 35
animals aged 30 months or less and 17 (56.7%) of the 30 animals aged more than 30
months. The BLV gene was also detected in some of the asymptomatic cattle in which
no abnormality was noted by in-life or postmortem tests, although at lower levels thanin symptomatic animals. Among the asymptomatic cattle, the BLV gene was more often
detected in those aged over 30 months than in those aged 30 months or less, and all 6
symptomatic animals were aged more than 30 months, suggesting that the BLV genepositive rate rises with age. For the future, we will also measure the BLV gene level inthe blood of asymptomatic cattle and compare the data with those in the animals thathave developed the disease. In addition, we will accumulate data of real-time PCR byincreasing the number of samples and evaluate the diagnostic criteria for bovine leukosis
by investigating the differences in the BLV gene levels according to the age, breed,
広島市食肉衛生検査所（〒 733-0832

広島市西区草津港 1-11-1）
─ 75 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

organs, and tissues.
── Key words: Bovine leukosis, BLV, real-time PCR

要約

牛伝染性リンパ腫ウイルス（BLV）遺伝子の検出については，これまで当所では目的の遺伝子を増幅し定性的なウイルス遺伝子の測定を行っていたが，現在はリアルタイム PCR 法による定量的な測定を実施している．今回，広島市と畜場に搬入された牛の BLV 遺伝子をリア
ルタイム PCR 法によって定量的に測定し，その検出状況を調査した．発症牛では測定を行った全 6 頭から BLV 遺伝子が検出され，特に腫瘍組織からは顕著に高い値が得られた．無症牛では，30ヶ月齢以下の牛 35 頭中 13 頭（37.1％），30ヶ月齢超えの牛 30 頭中 17 頭（56.7％）から BLV 遺伝子が検出された．生体検査及び解体後検査で所見がみられなかった無症牛でも，発症牛よりも低い値ではあるが BLV 遺伝子が検出される個体がみられた．無症牛の中では，30ヶ月齢超えの牛は 30ヶ月齢以下の牛と比較して BLV 遺伝子を保有している比率が高く，また発症牛 6 頭についても全頭が 30ヶ月齢を超えていることから，高齢になるにつれ BLVの保有率が上昇することが示唆された．今後は，無症牛についても血液中の BLV 遺伝子量の測定を行い，発症牛のデータと比較したいと考えている．また，検体数を増やしてリアルタ
イム PCR 法によるデータを蓄積し，月齢，品種や，臓器，組織等の BLV 遺伝子量の傾向を調査することで，牛伝染性リンパ腫の判定基準等を検討していきたい．
──キーワード：牛伝染性リンパ腫，BLV，リアルタイム PCR

序文が，現在はリアルタイム PCR 法により定量的に測定を行っている．
そこで，広島市と畜場に搬入された牛の BLV 遺伝子の検出状況をリアルタイム PCR 法により調査したので概要を報告する．

牛伝染性リンパ腫は体表リンパ節や体腔内リンパ節の腫大等を起こす疾病で，地方病性と散発性に分けられ，地方病性牛伝染性リンパ腫（EBL）については，
牛伝染性リンパ腫ウイルス（BLV）により引き起こ
される．
BLV は牛のリンパ球に感染し，抗体が産生された後も排除されないまま持続感染する 1）．これらの牛の多くは健康な無症状キャリアーとなり，EBL を発症することなく生涯を終える．一方，発症牛は削痩，元気消失，眼球突出，下痢，便秘等の症状を呈する．全身のリンパ節を中心に諸臓器（特に心臓，胃，子宮等）に広く腫瘍を形成し，予後不良となる．

材料と方法
2021 年 1 月から 8 月にかけて，本市と畜場に搬入された牛のうち解体後検査において複数箇所にリンパ腫または腫瘍組織が認められた牛（発症牛）6 頭（ホルスタイン 4 頭 , 黒毛和種 2 頭）
（表 1）と牛伝染性リンパ腫の症状，肉眼所見のみられない牛（無症牛）
65 頭（ホルスタイン 18 頭，黒毛和種 33 頭，交雑種

近年，牛伝染性リンパ腫は全国で発生頭数が増加傾向にあり 2），当所でも例年 10 頭以上の発生がみられている．当所では，生体検査所見，血液検査所見，病理組織検査所見，PCR 検査 3） による BLV 遺伝子の検出等により，総合的に牛伝染性リンパ腫の診断を行っている．BLV 遺伝子の検出は，これまでコンベンショナル PCR 法による定性的な測定を行っていた14 頭）（表 2）を調査対象とした．発症牛は血液，脾
臓，腫瘍化したリンパ節及び臓器（腫瘍組織部分）を検体とし，無症牛は頭部リンパ節を検体とした．採材
した検体は NucleoSpin Blood Quick Pure（タカラバ
イオ株式会社）により，添付マニュアルに従い DNAを抽出した．その後，ウシ白血病ウイルス検出キット（タカラバイオ株式会社）を使用し，リアルタイム
─ 76 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

PCR 装置（CFX96 Deep well Real-Time System, BioRad）を用いて BLV の遺伝子量を測定した．

表3

発症牛のBLV遺伝子コピー数

症例番号

血液

脾臓

1

1,750

1,730

腫瘍組織① 腫瘍組織② 腫瘍組織③
11,100

10,200（内腸骨リンパ節） （心臓）表1

発症牛の個体情報

2

症例番号

品種

性別

月齢

1

ホルスタイン

雌

100

2

黒毛和種

雌

79

3

ホルスタイン

雌68

4

ホルスタイン

雌75

5

ホルスタイン

雌

78

6

黒毛和種

雌

3

17.3

1,010

4

12,60065.3

品種108,000

13,700988,000

25,10053,600（乳房リンパ節）（縦隔リンパ節）
5

131

5,670

48,00022,100（大動脈リンパ節）（第 4 胃）12382,300 14,000

18,90030,700（子宮）（心臓）

191,000
（心臓）

月齢

雌

去勢雄

30ヶ月以下30ヶ月超え

黒毛和種

23

10

16

17

ホルスタイン

14

4

5

13

交雑種

13

1

14

0

成

63,400（内腸骨リンパ節）（大動脈リンパ節）

無症牛の個体情報

性別

3,560

（内腸骨リンパ節）（腹壁腫瘍）

6
表2707

75，78，79，100，123ヶ 月 齢 で，60ヶ 月 齢 以 上 であった．各牛の品種や出生地，飼養農場に目立った傾向はみられなかった．
無症牛の頭部リンパ節においては，30ヶ月齢以下の牛 35 頭中 13 頭（37.1％），30ヶ月齢超えの牛 30
頭中 17 頭（56.7％）から BLV 遺伝子が検出された

績

発症牛では，測定を行った全ての検体から 10,000
コピーを超える BLV 遺伝子が検出された．特に腫瘍組織において顕著に高い値が得られた（表 3）．血液及び脾臓から検出された BLV 遺伝子量は，症例 6 のみ腫瘍組織と同じレベルの遺伝子量であったが，個体間のばらつきが大きく，腫瘍組織と比較して少なかった（図 1）．発症牛は 6 頭とも雌であり，月齢は 68，

図1

（図 2）
．30ヶ月を超えている牛の方が BLV 遺伝子を保有している割合が高かった．
発症牛と無症牛の BLV 遺伝子量を比較すると，発症牛の腫瘍組織からは無症牛の頭部リンパ節よりも顕著に多い BLV 遺伝子量が検出されていた（図 3）．一方，発症牛の血液及び脾臓からは，無症牛の頭部リンパ節と同程度の BLV 遺伝子量しか検出されない個体もあり，ばらつきがみられた．

発症牛の個体別BLV遺伝子コピー数

─ 77 ─

広島県獣医学会雑誌

図2

図2№ 36（2022）

無症牛のBLV遺伝子検出の有無

無症牛のＢＬＶ遺伝子検出の有無

図３ 発症牛と無症牛のＢＬＶ遺伝子コピー数の比較
図3 発症牛と無症牛のBLV遺伝子コピー数の比較

まとめ及び考察
発症牛では，全ての検体から高い値の BLV 遺伝子が検出されたことから，EBL の発症には一定量以上の BLV の存在が必要であることが示唆された．また，
血液及び脾臓と比べ，腫瘍組織で値が高かったことから，BLV が感染後に B リンパ球が腫瘍化しリンパ節等の好発臓器に病変を形成して，発症に至ると考えられた．
更に，牛伝染性リンパ腫は 4 歳から 8 歳での発症が多いとされている 4）5）6）．今回の調査でも発症牛の月齢は 68 ～ 123ヶ月齢であり，既報と類似した結果が得られた．
今回，生体所見及び解体後検査で牛伝染性リンパ腫

30ヶ月齢超えの無症牛は 30ヶ月齢以下の無症牛と比較して BLV 遺伝子を保有している比率が高く，高齢になるにつれ BLV の保有率が上昇している．感染
牛のほとんどは無症状で経過するが，数％は発症する
こと 4） からも，無症牛の発生リスクは高齢になるにつれて徐々に高くなることが示唆された．また，高齢
牛の BLV 保有率が高くなることは，BLV が感染牛の血液等を介して感染すること 4） から，高齢になるにつれて吸血昆虫や，注射，直腸検査等出血を伴う獣医療行為によるウイルス曝露が増加することによるものと考えられた．
発症牛において腫瘍組織の BLV 遺伝子量が無症牛よりも顕著に高いことは，先述したように EBL の発症には一定量以上の BLV の存在が必要であるということを示していると思われた．また，発症牛の脾臓及の症状，肉眼所見のない無症牛でも，発症牛よりも少ない値ではあるが BLV 遺伝子が確認された．これらの牛は健康な無症状キャリアーであり，牛伝染性リンパ腫の発症リスクを有していることが窺える．

び血液については，無症牛と同程度のものもあること
からも，個体間での遺伝子量のばらつきが大きく，特に血液に関しては BLV 遺伝子量に差が出ることが報─ 78 ─

広島県獣医学会雑誌

告されており 7）8），今回の調査でも同様の結果が得られた．このことからも，現時点では血液等を EBL 判定の指標とすることは難しく，検体数を更に増やして検討する必要があると考えられた．更に，血液中の3） 中川剛志ほか：核酸クロマト型チップを用いた地
方型牛白血病 PCR 迅速診断の一考察，広島県獣医学会雑誌，31，139-142（2016）4） 動物衛生研究所：家畜の監視伝染病，（オンライン），（https://www.naro.affrc.go.jp/org/niah/
disease_fact/t08.html），（参照 2020-08-01）
5） 村上賢二ほか：我が国の地方病性白血病の発生動
向と対策，日獣会誌，62，499-502（2009）
6） 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機
構：乳用牛及び肉用繁殖牛における牛白血病ウイルスの全国浸潤状況，（オンライン），（https://www.naro.go.jp/project/results/laboratory/niah/
2012/170d3_01_24.html），（参照 2020-08-01）
7） 宗村佳子：牛白血病ウイルス遺伝子量を指標とした地方病性牛白血病の診断法に関する研究，岐阜
大学機関リポジトリ，甲第 446 号（2015），（オン

BLV 遺伝子量は発症牛でしか測定を行っていないた
め，今後無症牛の血中 BLV 遺伝子量の測定を実施することで，無症牛と発症牛の BLV 遺伝子量を比較検討できると考えている．
今後は，更に検体数を増やしてリアルタイム PCR法によるデータを蓄積し，月齢，品種や，臓器，組織等の BLV 遺伝子量の傾向を調査することで，EBL の判定基準等を検討していきたい．

文№ 36（2022）

献1） 農林水産省：牛白血病に関する衛生対策ガイドラ
イン，（オンライン），（https://www.maff.go.jp/j/syouan/douei/ebl.html），（参照 2020-08-01）
2） 農 林 水 産 省： 農 林 水 産 省 監 視 伝 染 病 発 生 年 表ライン）（，http://repository.lib.gifu-u.ac.jp/handle/
20.500.12099/53641），（参照 2021-04-12）
8） 鈴木健太郎：リアルタイム PCR を用いた地方病性牛白血病の診断法の検討，第 39 回全国食肉衛（1998 ～ 2020），（オンライン），（https://www.
maff.go.jp/j/syouan/douei/kansi_densen/kansi_

生検査所協議会微生物部会総会・研修会資料，
36-38（2019）

densen.html），（参照 2021-08-01）

─ 79 ─

他誌掲載論文
ライソゾーム病の犬でみられた頭位変換性捻転斜頚：
回顧的観察研究田村慎司 1）

田村由美子 1）

中本裕也 2, 3）

坪井

誠也 5）

内田

矢吹

映 6）

和幸 5）

長谷川大輔 4）
大和

修 6）

Positioning head tilt in canine lysosomal storage disease:
A retrospective observational descriptive study
SHINJI TAMURA1），YUMIKO TAMURA1），YUYA NAKAMOTO2, 3），DAISUKE HASEGAWA4），
MASAYA TSUBOI5），KAZUYUKI UCHIDA5），AKIRA YABUKI6）and OSAMU YAMATO6）

1）Tamura Animal Clinic, 7-16, Yoshimien, Saeki-ku, Hiroshima 731-5132
2）Neuro Vets Animal Neurology Clinic, Kyoto, 550-4, Bishamon-cho, Nakagyouku,
Kyoto 604-0981
3）Veterinary Surgery, Graduate School of Life and Environmental Science, Osaka
Prefecture University, 1-58, rinkuujuraikita, Izumisano, Japan 598-8531
4）Laboratory of Veterinary Radiology, Nippon Veterinary and Life Science
University, 1-7-1, Kyonancho, Musashisakai, Tokyo 180-8602
5）Laboratory of Veterinary Pathology, Graduate School of Agriculture and Life
Science, University of Tokyo, 1-1-1, Yayoi, Bunkyo-ku, Tokyo 113-8657
6）Laboratory of Clinical Pathology, Joint Faculty of Veterinary Medicine,Kagoshima University, 1-21-24, Korimoto, Kagoshima 890-0065

SUMMARY
Positioning head tilt is a neurological sign that has recently been described in dogs
with congenital cerebellar malformations. This head tilt is triggered in response to head
movement and is believed to be caused by a lack of inhibition of the vestibular nuclei by
the cerebellar nodulus and ventral uvula (NU), as originally reported cases were dogs
with NU hypoplasia. We hypothesized that other diseases, such as lysosomal storage1）たむら動物病院（〒 731-5132 広島市佐伯区吉見園 7-16）
2）Neuro Vets 動物神経科クリニック（〒 604-0981 京都府京都市中京区毘沙門町 550-4）
3）大阪府立大学大学院生命環境科学部獣医学科獣医外科学教室（〒 598-8531 大阪府泉佐野市りんくう従来北 1-58）
4）日本獣医生命科学大学獣医学部獣医放射線学研究室（〒 180-8602 東京都武蔵野市境南町 1-7-1）
5）東京大学大学院農学生命科学研究科獣医病理学研究室（〒 113-8657 東京都文京区弥生 1-1-1）
6）鹿児島大学共同獣医学部獣医学科臨床獣医学講座臨床病理学分野（〒 890-0065 鹿児島市郡元 1-21-24）
─ 81 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

diseases that cause degeneration in the whole brain, including NU, may cause NU
dysfunction and positioning head tilt. Videos of the clinical signs of canine lysosomal
storage disease were retrospectively evaluated. In addition, postmortem NU specimensfrom each dog were histopathologically evaluated. Nine dogs were included, five withlysosomal storage disease, two Chihuahuas with neuronal ceroid lipofuscinosis (NCL),
two Border Collies with NCL, one Shikoku Inu with NCL, two Toy Poodles with GM2
gangliosidosis, and two Shiba Inus with GM1 gangliosidosis. Twenty-eight videos
recorded the clinical signs of the dogs. In these videos, positioning head tilt was observedin seven of nine dogs, two Chihuahuas with NCL, one Border Collie with NCL, one
Shikoku Inu with NCL, one Toy Poodle with GM2 gangliosidosis, and two Shiba Inus
with GM1 gangliosidosis. Neuronal degeneration and loss of NU were histopathologicallyconfirmed in all diseases. As positioning head tilt had not been described until 2016, it
may have been overlooked and may be a common clinical sign and pathophysiology indogs with NU dysfunction.
── Key words: positioning head tilt, dog, lysosomal storage disease, ceroid lipofuscinosis,
GM1 gangliosidosis, GM2 gangliosidosis, nodulus, ventral uvula

要約

頭位変換性捻転斜頚は，先天性小脳奇形の犬において近年我々によって報告された神経徴候である．この徴候は頭部の動きが引き金になって認められ，小脳の小節・虫部垂（NU）の低形成の犬で観察されていることから同部位による前庭神経核への抑制入力の欠如が原因であると考えられている．我々は，頭位変換性捻転斜頚が NU の機能不全で生じる徴候であれ
ば，NU を含む小脳全体が萎縮するライソゾーム病においても頭位変換性捻転斜頚が観察されるのではないかと仮説を立て，我々がこれまでに遭遇したライソゾーム病症例の臨床徴候を記録した動画を再評価した．また，剖検で得られた NU の標本を病理組織学的に再評価した．神経セロイドリポフスチノーシス（NCL）のチワワ 2 例，NCL のボーダーコリー 2 例，
NCL の四国犬 1 例，GM2 ガングリオシドーシスのトイプードル 2 例，GM1 ガングリオシ
ドーシスの柴犬 2 例の計 5 疾患，9 症例が評価された．28 の動画で臨床徴候が記録されていた． そ の う ち，NCL の チ ワ ワ 2 例，NCL の ボ ー ダ ー コ リ ー 1 例，NCL の 四 国 犬 1 例，
GM2 ガングリオシドーシスのトイプードル 1 例，GM1 ガングリオシドーシスの柴犬 2 例の計 7 症例で頭位変換性捻転斜頚が観察された．NU における神経細胞の変性と脱落が全ての疾患で病理組織学的に確認された．頭位変換性捻転斜頚は 2016 年になるまで知られていな
かったが，これまで見落とされていただけで NU の機能不全で生じる一般的な臨床徴候および病態の可能性がある．
──キーワード：頭位変換性捻転斜頚，犬，ライソゾーム病，セロイドリポフスチノーシス，
GM1 ガングリオシドーシス，GM2 ガングリオシドーシス，小節，虫部垂
Frontiers in Veterinary Science, 8: 802668 (2021). doi: 10.3389/fvets.2021.802668（オンラインで全文および動画が無料で閲覧可能）

─ 82 ─

他誌掲載論文
5 頭の健康犬におけるエプレレノンの血圧と心エコー及び血液生化学変化に及ぼす効果：パイロット研究
有田

申二 1）

有田

昇 1）

日笠

喜朗 2）

Effects of eplerenone on blood pressure, echocardiographic
and serum biochemical variables in five healthy dogs: a pilot study
SHINJI ARITA1），NOBORU ARITA1）and YOSHIAKI HIKASA2）

1）Arita Sougo Animal Hospital, 1-14-6 Nishi, Hachihonmatsu,
Higashihiroshima-shi, Hiroshima 739-0147, Japan.
2）Laboratory of Veterinary Internal Medicine, Joint Department of
Veterinary Medicine, Faculty of Agriculture, Tottori University, 4-101
Koyama-Minami, Tottori 680-8553, Japan.

SUMMARY
Eplerenone (EP), an aldosterone antagonist, is reported to produce renal and cardiac
protective effects in non-canine species. However, there are no detailed reports available
on cardiovascular effects of EP in dogs. This study aimed to determine effect of EP on
echocardiographic parameters, blood pressures and biochemical variables in healthy
dogs. Five healthy Beagle dogs were randomly divided between, and repeatedly used ineach of 3 dose groups, received 2.5, 5, or 10 mg/kg BW EP orally q24 h, for 4 wks. Serumbiochemical test, blood pressure, and Doppler echocardiography measurements were
performed before EP administration and at 1, 2, and 4 wks after EP administration.
Treatment with EP reduced mean blood pressure in a dose-dependent manner, andsignificantly (but in a dose-independent manner) decreased left atrium/aorta ratio, early
diastolic transmitral flow, early diastolic transmitral flow/late diastolic transmitral flow,
peak velocity of early diastolic transmitral flow/peak velocity of early diastolic mitralannular motion, left ventricle and right ventricle Tei indices, stroke volume, cardiac
output, and mid systole myocardial velocity gradient 1 to 4 wks after administration.
Deceleration time of early diastolic transmitral flow significantly increased after EP
administration. No significant changes were observed in serum biochemical variables.

1）有田綜合動物病院（〒 739-0147 広島県東広島市八本松西 1-14-6）
2）鳥取大学農学部共同獣医学科獣医内科学（〒 680-8553 鳥取市湖山町南 4-101）
─ 83 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

The results indicated that EP might reduce preload, thereby decreasing left atrial size.
In addition, reduction of left ventricular stiffness may have theoretically taken place
but this could not be tested using the present study design. It is suggested that EP
administration within the dose range used in this study is safe for administration to
healthy dogs. Further studies are needed to explore both safety and efficacy, as well as toseek a recommended dose range of EP treatment in client-owned dogs with heart disease.
── Key words: eplerenone, healthy dog, echocardiographic

要約

抗アルドステロン薬であるエプレレノン（EP）は，犬以外の動物種で腎臓及び心臓の保護効果をもたらすことが報告されている．しかしながら，犬における EP の心血管系への影響に関する詳細な報告はない．本研究は，健康犬における心エコーパラメータと血圧及び血液生化学変数に関して，EP の効果を明らかにすることを目的とした．5 頭の健康なビーグル犬
はランダムに分けられて，3 つの用量群のそれぞれで繰り返し使用された．EP は 2.5，5 もしくは 10mg/kg にて 24 時間ごとに 4 週間経口投与した．血液生化学検査，血圧測定及びドプラ心エコー検査は，EP 投与前，投与 1，2 及び 4 週間後に実施した．EP の投与 1 から 4週間後は，用量依存的に平均血圧を低下させ，用量に依存せず左心房大動脈径比，左室流入
拡張早期波，左室流入拡張早期波と左室流入心房収縮期波の比，左室流入拡張早期波と僧帽弁輪運動速拡張早期波の比，左室と右室 Tei index，1 回拍出量，心拍出量そして収縮中期心筋速度勾配を有意に低下させた．左室流入拡張早期波の減速時間は，EP の投与後有意に増加した．血液生化学検査では有意差は認められなかった．この結果から，EP は前負荷を減らし，それによって左心房サイズを減らす可能性があることを示した．加えて，左室スティフネスの低下が理論的に起こった可能性があるが，現在の研究デザインを使用してテストすることはできなかった．本研究で使用した用量範囲内の EP 投与は，健康犬にとって安全であることが示唆された．飼主が所有する心疾患犬において，EP 治療の推奨用量範囲だけでな
く，安全性と有効性を調査する更なる研究が必要である．
──キーワード：エプレレノン，健康犬，心エコー検査
Vet Med Int. https://doi.org/10.1155/2020/5193856

─ 84 ─

他誌掲載論文
グラム染色による乳房炎原因微生物の迅速検出
鈴木

直樹 1）

金子

宗平 2）

磯部

直樹 1）

Rapid determination of pathogens in mastitic milkof dairy cows using Gram staining
NAOKI SUZUKI1），SOHEI KANEKO2）and NAOKI ISOBE1）（accepted, 28 December 2021）

1）Graduate School of Integrated Sciences for Life, Hiroshima University,
Higashi-Hiroshima, Hiroshima 739-8528, Japan
2）Higashi-Hiroshima Veterinary Clinical Center, Hiroshima P.F.A.M.A.A,
284-1 Inaki Takaya-cyo, Higashi-Hiroshima, Hiroshima 739-2106, JapanSUMMARY
This study aimed to determine whether causative pathogens in mastitic milk can
be determined by Gram staining after the centrifugation of milk. Gram staining was
performed using unconcentrated and concentrated milk cells. Using this method, we
found that the background of microscopic image of unconcentrated milk cells wascomplex and bacteria were difficult to detect. In contrast, the background of the smears
in the concentrated milk cells was translucent, and bacterial and somatic cells wereclearly visible. The sensitivity and specificity of the Gram staining of concentrated milkcells were 84.4% and 86.0% and 50.0% and 94.5% for the detection of gram-positiveand gram-negative bacteria, respectively. The presented method provides a simple andinexpensive means of determining mastitis-causing pathogens.
── Key words: dairy cow, diagnosis, Gram staining, mastitis
The Journal of Veterinary Medical Science，in press（https://doi.org/10.1292/jvms.21-0631）

1）広島大学 大学院統合生命科学研究科／生物生産学部（〒 739-0046 広島県東広島市鏡山 2-2965）
2）広島県農業共済組合 東広島家畜診療所（〒 739-2106 広島県東広島市高屋町稲木 284-1）
─ 85 ─

広島県獣医学会雑誌

要№ 36（2022）

約

グラム染色による乳中の乳房炎原因微生物検出を目的に，乳汁の遠心によって得られる濃縮細胞懸濁液のグラム染色性を検討した．乳房炎乳の直接塗抹と濃縮細胞懸濁液塗抹のグラ
ム染色像を比較した結果，直接塗抹では染色像の背景が濃く不整であり微生物の検出が困難であった一方，濃縮細胞懸濁液塗抹では背景が改善され，乳中の微生物および細胞が明瞭に観察された．濃縮細胞懸濁液を用いたグラム染色の乳房炎原因微生物検出感度／特異度は，グラム陽性菌およびグラム陰性に対し，それぞれ 84.4% ／ 86.0% および 50.0% ／ 94.5% であった．本方法による乳房炎原因微生物の迅速診断は，簡便かつ低コストであるため普及性が高いと考えられた．
──キーワード：乳牛，診断，グラム染色，乳房炎─ 86 ─

他誌掲載論文
ワンヘルスアプローチによる水環境中の薬剤耐性菌の存在実態調査
増田加奈子

平塚

貴大

秋田

裕子

木村

淳子

槇本

佳泰

（受付：令和 3 年 12 月 20 日）

Survey of Antimicrobial Resistant Bacteria in the Aquatic Environment Basedon the One Health Approach.
KANAKO MASUDA，TAKAHIRO HIRATSUKA，HIROKO AKITA，JUNKO KIMURA，YOSHIYASU MAKIMOTO

Public Health and Environment Center, Hiroshima Prefectural Institute ofTechnology Research
1-6-29, Minamimachi, Minami-ku, Hiroshima 734-0007

SUMMARY
We clarified the state of presence of extended spectrum β-lactamase (ESBL)producing bacteria and carbapenemase-producing Enterobacteriaceae (CPE) in aqueous
environments and carried out genotype analysis of drug-resistant strains and evaluationof multi-drug resistance. Escherichia coli was isolated most frequently as ESBLproducing bacteria, with the CTX-M-9 group and CTX-M-1 group accounting for 77.4
and 22.6%, respectively. The percentage of ST131 was 41.9%, and the fluoroquinoloneresistance rate was 38.9% in non-ST131 but 69.2% in ST131. It was found that strains
showing drug-resistance genes and drug susceptibility patterns similar to those of ESBLproducing bacteria detected in humans can also be detected in aqueous environments.
Concerning CPE, GES-24 Klebsiella pneumoniae and Enterobacter cloacae and K.
pneumoniae co-harboring IMP-11 and NDM-1 were isolated. GES-24 was susceptible tosome cephems and carbapenems, but the strains that co-harbored IMP-11 and NDM-1
were resistant to all cephems and carbapenems. Whether the strains that co-harboredIMP-11 and NDM-11 originally existed or developed by plasmid transmission in theculturing process for bacterial isolation from environmental water is unclear, but it wasestablished that an NDM type showing resistance to most drugs was present in aqueous
environments.
── Key words: Drug-resistant bacteria, aqueous environment, ESBL, CPE

─ 87 ─

広島県獣医学会雑誌

要№ 36（2022）

約

基質特異性拡張型β - ラクタマーゼ（ESBL）産生菌およびカルバペネマーゼ産生腸内細菌科細菌（CPE）の水環境中の存在実態を明らかにするとともに，薬剤耐性菌の遺伝子型解析および多剤耐性の評価を行った．ESBL 産生菌は Escherichia coli が最も多く分離され，
CTX-M-9group が 77.4％，CTX-M-1group が 22.6％であった．ST131 の割合は 41.9％であり，フルオロキノロン系薬剤耐性率は non-ST131 が 38.9％であるのに対し，ST131 は69.2％であった．水環境中においても人から検出される ESBL 産生菌と同様の薬剤耐性遺伝
子や薬剤感受性パターンを示す株が検出されることが明らかとなった．CPE は GES-24 のKlebsiella pneumoniae と Enterobacter cloacae，IMP-11 と NDM-1 を同時に保有する K.
pneumoniae が分離された．GES-24 は一部のセフェム系薬剤とカルバペネム系薬剤に感性を示したが，IMP-11，NDM-1 同時保有株は全てのセフェム系薬剤とカルバペネム系薬剤に耐性を示した．同時保有株が元々存在していたのか，環境水からの菌分離における培養過程
でプラスミドの伝達があったのか定かではないが，ほとんどの薬剤に耐性を示す NDM 型が
水環境中に存在していたことが明らかとなった．
──キーワード：薬剤耐性菌，水環境，ESBL，CPE
広島県立総合技術研究所保健環境センター研究報告─ 88 ─

第 29 号，1－6，2021

活動報告
動物園における高病原性鳥インフルエンザ発生時のシミュレーション訓練
阿部勝彦（広島市安佐動物公園）

ヒトの世界では COVID-19（新型コロナウイルス感染症）が猛威を振るい大変な状況が続いています
が，HPAI（高病原性鳥インフルエンザ感染症）も令
和 2 年以降，2 年連続，日本国内で発生し，養鶏業界

まず，令和 2 年 12 月 8 日には web 講習会として，HPAI の基礎知識からこれまでの発生動物園の対応等について聴講しました．
令和 3 年 1 月 21 日には安佐動物公園の科学館ホーに多大な損害を与えています．
これまで日本の動物公園等でも発生しており，平成
22 年度（2010 年度）には富山県，山口県，兵庫県でH5N1 亜型により，コブハクチョウ，コクチョウが確定検査陽性となり，飼養していたハクチョウ類，カモ類 400 羽以上を殺処分しました．また，平成 28 年度（2016 年度）には秋田県，愛知県，京都府，兵庫県でルを会場に，中四国の動物園水族館関係者を対象としたシミュレーション訓練をリアル＋ web で開催しました．
主催者は環境省，事務局は自然環境研究センター．

H5N6 亜型により，コクチョウ，シロフクロウ，シジュウカラガン，マガモ等が確定検査陽性となり，飼関で，web 参加は環境省関係 6 名，講師 2 名，オブザーバー 4 名，事務局 4 名でした．視聴のみの参加

養していたハクチョウ類，カモ類 50 羽以上を殺処分しました．
今後，動物公園内で疑い事例が発生した際に，慌てず迅速に対応するために環境省主催の HPAI 発生を想定した訓練を開催したものです．

は全て web 参加で，中国 4 県の 7 自治体，四国 3 県の 4 自治体，中四国の動物園水族館 22 園館でした．

プレイヤーとして実際に会場で参加したのは，安佐動物公園＋協会職員 12 名，広島県・広島市関係 5 機

開催前準備として，事前に事務局である自然環境研究センターと当園で打合せをし，会場のレイアウトを

安佐動物公園の飼育鳥種と飼養場所

─ 89 ─

広島県獣医学会雑誌№ 36（2022）

検討しました．当園の鳥類の飼養状況，飼育場所，飼育担当者とその業務の順序等を事務局に提示し，事務局主導で当園マニュアルと矛盾の無いように訓練シナリオを作成していきました．なお，シナリオは担当職

プ，グループ②は対外的な対応を検討するグループに分かれて協議し，協議後に検討結果を発表するという形式で進められました．このシナリオでは，園内の鳥類にも感染が広がり，なかなか終息しないという困難

員のみしか知らされていません．

な状況でした．

当初はプレイヤー全員が当園に集合して訓練実施の予定でしたが，COVID-19 感染状況がひっ迫してきたため，急遽，広島県内の自治体のみ集合し，他機関
は web 参加することとなりました．そのため，web
開催のために必要な機材を事務局より送ってもらい，
3 台の PC は当園で準備し，開催前に事前のテストを行うという状態でした．

web 参加者の音声が会場スピーカーから聞き取りにくい，会場の音声がマイクで拾いにくく，web 参
加者に協議の状況が伝わらない等の課題がありましたが，これらのハード面が改善されれば，web 開催でも十分に訓練の様子を体感できると思われました．
今回，検討した訓練シナリオを受けて，発生時に臨時休園措置や感染拡大予防対策を検討しましたが，開催当日は，事務局がシナリオに沿いスライド画面上で進行していき，「〇月〇日園内で死亡野鳥を発見」
からイベントが始まりました．これらのイベントが発生する度に園内でどのように対応するか発言を求めら

様々な部分で HPAI を念頭に入れた防疫措置の難しさを痛感しました．
特に，複数の鳥類担当者が担当の鳥舎に出入りする
順序，鳥舎の網目の大きさなどの基本的な防疫対策，
希少性の高い鳥類を守るための基本的な取り扱いにつれます．さらに，インフル簡易検査陽性時，確定検査
陽性時に，グループ①は園内対応を検討するグルー

いて検討が必要なことがわかり，大変貴重な講習会でした．

シミュレーション訓練の様子（グループ①は園内対応，グループ②は対外的な対応を検討）

─ 90 ─

会

報〈学会開催のご案内〉
１）第62回広島県獣医学術学会
日時：令和４年７月31日（日）10時〜
場所：ホテルグランヴィア広島
広島市南区松原町1-5☎082-262-111

２）令和４年度獣医学術中国地区学会
日時：令和４年９月３日（土）〜４日（日）場所：山口グランドホテル
山口市小郡黄金町1-1☎083-972-7777

３）第21回アジア獣医師会連合（FAVA）大会
第40回日本獣医師会獣医学術学会年次大会（令和４年度）
日時：令和４年11月11日（金）〜13日（日）場所：ヒルトン福岡シーホーク
福岡市中央区地行浜2-2-3
問い合わせ先☎092-844-8111

公益社団法人日本獣医師会事務局
東京都港区南青山1-1-1☎03-3475-1601

編

集

新青山ビル西館23階

FAX 03-3475-1604

後記

新型コロナ発生から現在に至るこの 2 年半の間

ナウイルスに対する基礎的な免疫を獲得したこに，各種学会や研修会がすっかり様変わりしてしと，現在流行しているウイルス株（オミクロン）

まいました．それまでは，全国各地から発表者，

が比較的病原性が強くないこともあり，日々の生

参加者が一同に集まり，賑やかに開催されていた活も徐々に新型コロナ流行以前に戻りつつありま

ものが，新型コロナのパンデミックを受けて，自す．そのため，今年度（令和 4 年度）の，広島県宅や職場からウエブを利用しての発表や参加と獣医学会や獣医学術中国地区学会については，今いった方式が定着しつつあります．それはそれで，のところ従来の対面での学会開催が予定されていわざわざ時間とお金をかけて会場に行かなくてもると聞いています．

発表・参加できるというメリットもありますが，

広島県の獣医師会の会員の皆様におかれまして

一方で以前のように，個々の発表に対して会場では，日ごろの成果を県獣医学会と，それに続く中の熱心な質疑応答，夜には情報交換会等でも熱く

国地区学会に発表頂くとともに，広島県獣医学会

討論していたのが懐かしく感じます．

雑誌にもご投稿いただきますようお願い致しま

他の学会同様に，広島県獣医学会や獣医学術中

す．なお，本誌は写真，図表ともにカラーでの対国地区大会，日本獣医師会獣医学術学会年次大会

応が可能ですので，カラー写真を使って論文発表

も，2020 年度は全面中止，2021 年度はウエブ等したいと思われる先生方には，特にお勧めです．
（担当：編集委員長

を活用しての非対面での開催となりました．
幸いにも，多くの人がワクチン接種で新型コロ
─ 91 ─

髙尾信一）

公益社団法人広島県獣医師会
広島県獣医学術学会雑誌投稿規程（目的）第 1 条 この規程は，公益社団法人広島県獣医師会（以下「本会」という．
）に所属する広島県獣医学術
学会（以下「学会」という．
）が発行する広島県獣医学術学会雑誌（以下「学会誌」という．
）の投稿に関する事項を定める．
第 2 条 学会誌は，獣医学に関する領域での臨床，
公衆衛生，畜産及びこれらと関連のある諸問題に関する論文，報告その他関連記事を掲載するものとする．
なお，各原稿の内容における，症例及び実験動物の取り扱いは，「動物の愛護及び管理に関する法律」に照らし，動物の取り扱いに関し，倫理上の問題がある原稿は，採択しない．
（投稿）
第 3 条 学会誌への投稿者は，本会の会員でなければならない．ただし，会員外であっても本会編集委
員会が認めたものはその限りでない．
第 4 条 各年学会で発表され，学会幹事会において審議決定されたもの（以下「推薦投稿」という．
）を掲載するものとする．
第 5 条 学会規程第 12 条第 2 項による編集委員会が必要と認めたときは，特に依頼して投稿（以下「特別投稿」という．
）を求めることができる．その場
合には，第 4 条の適用を受けない．
第 6 条 会員で投稿（以下「一般投稿」という．
）を希望する場合，その採否は，編集委員会で決定する．その場合，投稿に関する規定は，本規程の適用を受けるものとする．
（編集）
第 7 条 学会誌は，原則として次の区分により編集される．「総説」
，
「原著」
，
「報告」
，
「技術研究レポート」等推薦投稿及び一般投稿は，他誌に未発表であることが望ましい．ただし，他誌掲載論文の場
合は，掲載された雑誌名，巻，号，頁と邦文，英文の要約のみを本誌に掲載する．
また，学会誌には，推薦投稿，特別投稿及び一般
投稿のほか，学会案内及び編集委員会が必要とする学会会務を掲載することができる．
第 8 条 すべての投稿の掲載順序等は，編集委員会
において決定する．また，推薦投稿，一般投稿については，編集委員から原稿の加除，変更を求めることがある．
第 9 条 原稿は，パーソナルコンピュータを使用して原稿を作成し，A4 判用紙を使用し，1 頁を 25 字×
24 行として行間をあけ横書きとする．また，やむを得ない場合は，A4 判 400 字詰め 25 字× 16 行の原稿用紙を用いて作成する．
推薦投稿及び一般投稿についての最大制限頁数
は，刷り上がり 5 頁以内（A4 判図表を含む．
）とする．ただし，特別投稿については，この限りでない．
（刷り上がり 1 頁は，400 字詰め原稿用紙の約 6 枚に相当する．
）（費用）
第 10 条 すべての投稿の掲載料及び学会誌発行に関する費用は，本会が負担する．ただし，別刷り 30
部までは無料配布とし，それを越えるものは，実費を徴収する．別刷りを希望しない場合は，投稿時その旨を原稿に記載する．
第 11 条 特別投稿については，相当する額の謝金を支払うことが出来る．謝金の有無及び額は，編集委員会が決定し，学会幹事会の承認を受けるものとする．
（執筆要領）
第 12 条 推薦投稿及び一般投稿の執筆要領は，次のとおりとする．
（1）原稿用紙は，第 9 条による．
（2）新かなづかいを用い，横書きで簡潔に記述する．
（3）原稿第 1 枚目に標題，著者名，所属（〒住所）を邦文及び英文で書き，次いで，要約（邦文原稿で 600 字以内，英文要約で 500 語以内）
，序文，
材料と方法，成績，考察，結語，
和文要約及び英文要約の末尾に，5 語以内でキーワードを記載するものとする．
（4）初回原稿の提出は正副各 1 部を A4 版用紙の印刷物で提出するものとする．受理，査読が完了後は，修正された完全原稿の印刷物（1 部）と編集
可能なデジタルデータ（CD など）を添付して提出するものとする．
原 稿 の 提 出 に あ た っ て は， 別 紙「 投 稿 論 文
チェック表」を添付するものとする．
（5）外来語は，カタカナで書く．外国人名や適当な日本語訳のない術語あるいは地名，薬剤名等は，原綴りを用いる（なるべくタイプ）．学名は，イタリック体を用い朱のアンダーラインで示す．
（6）特殊な，あるいは特定分野のみで用いられている単位，符号，略号及び表現等には，必ず簡単な説明を付けること．
（7）図，表，写真には，図 1，表 1 及び写真 1 などの番号を付け，本文とは別に添付し，本文原稿の欄外にそれぞれの挿入希望部位を指定（朱書）する．図，表及び写真は，明瞭なものでなければならない．カラー写真等を希望する場合は，その旨明記（朱書）する．ただし，費用については，原則として実費を徴収するものとする．
なお，編集委員会が，カラー印刷が必要と認めた写真については，学会誌発行費の予算の範囲内において本会が負担する．
（8）章節のはじめかたは，なるべく１２---，１）２）---，ⅰⅱ --- の順にする．
（9）文献は，本文の引用箇所の肩に１），２），３） などの番号で引用順に示す．
なお，末尾文献表は，本文中に引用したものに限り必要最少限に止どめる．著者名は，2 名までは列記し，3 名以上の場合は，筆頭者のみを記し，
以下は，ほか（et al）とする．
文献の記載方法は，次の例による．
〔雑誌〕
著者名：論文表題（原則として記述する．），誌名 ,巻，頁（西暦年）─ 92 ─

第 13 条 初校は，著者が原稿の控えを用いて行う．
ただし，校正の際の新たな加筆は，認めない．再校以降は，筆者校に基づいて編集委員会が行う．
第 14 条 投稿は，封筒の表に「原稿在中」と朱書し書留で郵送する．持参の場合は，受付証を手交する．
宛て先 〒 734-0034 広島市南区丹那町 4 番 2 号
公益社団法人広島県獣医師会
TEL（082）251-6401（著作権）
第 15 条 学会誌に掲載された原稿の著作権は，本会に帰属する．
（原稿の処理等）
第 16 条 学会誌に掲載した原稿は，返却しない．
（雑則）
第 17 条 前各条に規定するもののほか，編集委員会に必要な事項は編集委員会の議決を経て編集委員長
がこれを処理する．

《例》
1）清水亀平次：牛の非定型抗酸菌感染について，
日獣雑誌，36，507-514（1983）
2）Yuasa, N., et al: Avian Dis., 24, 197-201（1980）〔単行本〕
著者名：書名 , 編集者名 , 版 , 頁 , 発行所 , 発行地
（西暦年）
《例》
1）笹原次郎：最新家畜伝染病，越智勇一編，第 1版，209-212，南江堂書店，東京（1970）
2）Senll, E.S. and Atkins, E.: fever. In The
Infiammatory process, Grant, L. and McCuskey, R.T.editors, 465-506, Academic Press
Inc., New York（1965）〔インターネット資料〕
著者名（全員列記），論文のタイトル名，誌名，巻，頁（一箇所のみ），年次，媒体，入手先（URL カッ
コ書き）
，入手日（
「参照」として，年月日を記載）とする．
《例》
1）永田四朗：犬ブルセラ症の検出法，家庭動物の感染症学会誌，25，55-65（2010），（オンライン），（http://www.petzoonosis/article/25/1/1pdf/s），（参照 2013-04-20）
2）Williams A: Superinfection of bovine leukemia
virus genotypes in Africa,cattle doctor, 50, 215220（2012）,（online）,（http://www.cattledoctor/
lin/15/12/20/pdf/）,（accessed 2013-05-05）

附則
この規程は，一般社団法人及び一般財団法人に関する法律及び公益社団法人及び公益財団法人の認定等に関する法律の施行に伴う関係法律の整備等に関する法律第 106 条 1 項に定める公益法人の設立の登記の日から施行する．
2 この規程は，平成 27 年 8 月 30 日に一部改正し，
平成 27 年 8 月 30 日から施行する．
3 この規程は，平成 29 年 1 月 30 日に一部改正し，
平成 29 年 1 月 30 日から施行する．
1

編

集

委

員

会

阿

部

勝

彦

荒

蒔

義

隆

上

岡

尚

民

尾

崎

充

彦

柴

崎

桃

子

髙

尾

信

一＊

玉

川

朋

治

田

村

慎

司

森

本

和

秀

山

岡

弘

二

東久保

靖

＊＊

＊委員長 ＊＊副委員長（あいうえお順）

広島県獣医学会雑誌
第36号

2022 年７月発行
発行

所 公益社団法人 広 島 県 獣 医 師 会
広島市南区丹那町４番２号（〒 734-0034）
電 話 広島（082）251-6401
ＦＡＸ 広島（082）255-3424
E-mail: jimu@hiro-vet.or.jp
http://www.hiro-vet.or.jp

発行責任者
印

刷

所

木原

敏博

編集責任者

髙尾

信一

株式会社ユニバーサルポスト

広島市南区大州５丁目 1-1（〒 732-0802）
電 話 広島（082）281-4221

─ 93 ─

公益社団法人日本獣医師会の会員の皆様へ
サイバー攻撃への備え、用意していますか?

サイバー保険特約のご案内
サイバー保険特約の概要
業務遂行する上で被る可能性のある、サイバーセキュリティ被害を補償する保険特約です。
獣医師賠償責任保険のオプションとしてご加入いただけます。（本特約のみのご加入はできません。）
第三者への
賠償責任

サイバー攻撃、情報漏えい、システム管理などに起因して他人に経済的損害を与えた場合の賠償責任・争訟費用の補償
損害賠償金

事故対応に
かかる
自社の費用

協力費用

サイバー攻撃、情報漏えいなどの発生に起因して生じる『事故調査』から『解決/再発防止』までの諸費用の補償
データ復旧費用

争訟費用

見舞費用

原因調査費用
etc

他人事ではない高額サイバー事故
１．約2割の企業がサイバー攻撃の被害に!


中小企業の約2割が過去にサイバー攻撃の被害を経験しており、もはや他人事ではありません。
PCのウィルス感染による顧客情報の漏えいや取引先へのウィルス感染ファイルの送付、貴社ＨＰの不正改ざんによる閲覧者の被害など、身近なところにサイバーリスクは潜んでいます。

過去にサイバー攻撃の被害を受けた
サイバー攻撃の被害を受けてない 81.2%

18.8%

出典:一般社団法人日本損害保険協会「中小企業の経営者のサイバーリスク意識調査2019」

２．不正アクセスにかかる調査費用は高額!
【不正アクセスにかかる調査費用例】

合計 約1,300万円

 ひとたび事故が発生すると、原因調査から顧客・取引先への謝罪などの各種対応や巨額な損害賠償の発生など対応範囲は広範にわたり、負担するコストも莫大となる可能性があります。

補償内容・保険料（保険期間1年、一括払）

初動対応

約100万円

過去ログ解析

約300万円

原因・影響範囲調査

約800万円弁護士・コンサル相談など

約100万円

加入タイプ

プラン１

プラン２

プラン３

賠償責任保険金（期間中）（自己負担額10万円）

500万円

1,000万円

1億円

費用保険金（1事故・期間中）（縮小てん補割合90%）

100万円

300万円

3,000万円

年間保険料

8,000円

12,000円

24,000円

中途加入も随時受け付けております!未加入の方はぜひご検討ください!
 この広告は概要を説明したものです。詳しい内容につきましては、取扱代理店または損保ジャパンまでお問い合わせください。 また、その他の補償内容につきましては、必ずパンフレットまたはご契約のしおり等をご確認ください。

＜お問い合わせ先・取扱代理店＞＜引受保険会社＞〒163-1529 東京都新宿区西新宿1-6-1 新宿エルタワー29F
TEL:03（3340）6497
FAX:03（3340）5700
Mail:njkyousai@nichizei.com
ご不明な点がありましたら、Mailでもお問い合わせ可能です。

団体・公務開発部第二課〒160-8338 東京都新宿区西新宿1-26-1
TEL 03（3349）5402（平日午前9時から午後5時）

株式会社安田システムサービス（SJ21-01825 2021.5.31）

［動物看護学科］
動物看護コース

３年課程

育
成
を
目
指
し
て
い
ま
す

構
築
が
出
来
る
人
材
の

よ
り
良
い
社
会
と
生
活
の

［動物管理学科］
グルーミングコース
ドッグトレーニングコース
ドッグセラピーコース〒730-0041 広島市中区小町 8-33
TEL 082-546-1195 FAX 082-546-1199

URL http://animal.ac.jp

環
境
の
中
で

人
と
動
物
の
関
わ
る

株式会社
ア
ス
コ
株式会社
ア
ス
コ
エバルスアグロテック株 式 会 社
Ｍ Ｐ ア グ ロ 株 式 会 社
ヒ カ リ サ カ モト 株 式 会 社
ヒカ
カ業
モト
会社
社
広
島 リ県サ薬株 株式式会（アイウエオ順）

The Hiroshima Journal of Veterinary Medicine
No.36 July 2022
CONTENTSREVIEW
Present and Future of Farm HACCP and Japan Good Agriculture Practice Control Points（JGAP）for Livestock Farms
MASAHIKO NISHIGAI …………………………………………………………………………………………………1
FARM ANIMAL
Isolation cases of Streptococcus ruminantium in Hiroshima Prefecture
TARUHO FUNAMORI ……………………………………………………………………………………………… 11

Cases of mycoplasmal bovine mastitis in a free stall dairy farm in Hiroshima Prefecture
MIWA TAKASHIMA ………………………………………………………………………………………………… 17

A case of refractory vertical hoof crack accompanied by granulation in the dorsal hoof wall
KATSUFUMI OOSHITA ……………………………………………………………………………………………… 23
Treatment of subcutaneous abscess using fistulas made of plastic syringes
MIDORI INABA …………………………………………………………………………………………………… 27

Survey conception rate and gestation period of cattle in Fukuyama warm area
MASASHI AKITA …………………………………………………………………………………………………… 33

Viability and conception ratio of bovine embryo preserved by “Vitran-7”: a newly developed embryo vitrification device.
TAKAYUKI KUDOU ………………………………………………………………………………………………… 39
Anecdotal report of Cow’s dropsy of fetal membranes in Hiroshima Prefecture.
KANETAKA TOKUGAWA …………………………………………………………………………………………… 45

SMALL ANIMAL
A cat with systemic Mycobacterium avium subsp. hominissuis infection and mediastinal lymphoma.
KONATSU MIURA ………………………………………………………………………………………………… 49

A case of duodenal obstruction due to silk-reactive granuloma in a dog
TOMOYASU KUROSE ……………………………………………………………………………………………… 57

PUBLIC HEALTH
Public awareness and Support project of Regional cat activity
KAORI SENDA……………………………………………………………………………………………………… 63
Age estimation of raccoon dogs (Nyctereutes procyonoides) by the morphometry of cranium
YUMIKO NITTA …………………………………………………………………………………………………… 67

Detection of bovine leukemia virus genes in Hiroshima City slaughterhouse
YUKA OKADA …………………………………………………………………………………………………… 75
SUMMARY OF PAPER PUBLISHED IN OTHER JOURNAL
Positioning head tilt in canine lysosomal storage disease: A retrospective observational descriptive study
SHINJI TAMURA …………………………………………………………………………………………………… 81

Effects of eplerenone on blood pressure, echocardiographic and serum biochemical variables in five healthy dogs: a pilot study
SHINJI ARITA ……………………………………………………………………………………………………… 83
Rapid determination of pathogens in mastitic milk of dairy cows using Gram staining
NAOKI SUZUKI …………………………………………………………………………………………………… 85

Survey of Antimicrobial Resistant Bacteria in the Aquatic Environment Based on the One Health Approach.
KANAKO MASUDA ………………………………………………………………………………………………… 87
ACTIVITY REPORT……………………………………………………………………………………………………………… 89
ANNOUNCEMENT
Schedule of Allied Meetings ……………………………………………………………………………………………………… 91
Contribution Rules ………………………………………………………………………………………………………………… 92

THE OFFICIAL ORGAN OF
THE HIROSHIMA PREFECTURAL ASSOCIATIONOF VETERINARY MEDICINE