トルコギキョウの弱ロゼット性 F1 品種育成と中間母本の特性向上〔平成 17～19 年度〕
宮下千枝子・南晴文*・鵜沢玲子*（商品開発科･*島しょ農林水産総合センター大島）------------------------------------------------------------------------------【要約】弱ロゼット性中間母本品種№３の F1 について抽苔特性を調査し，弱ロゼット性の遺伝様式や適応する作型などを明らかにした。これらの情報は№３を片親とする弱ロゼット性 F1 品種の育成を効率的に進めるための基礎資料として利用できる。また，№３等をもとにして劣性花色の弱ロゼット性系統を育成した。有望な２系統は，多様な花色の F1 品種を育成するための中間母本として有望である。
------------------------------------------------------------------------------【目的】

大島の主要生産品目の一つであるトルコギキョウは，育苗期の高温遭遇によりロゼット化（生育停止）する性質があり，夏播き栽培での育苗期間の長期化や冷蔵処理によるコスト上昇の原因となっている。そこで，突然変異育種法を用いて弱ロゼット性中間母本品種№３（「伊豆大島 E3 号」）を育成し，H17 年に品種登録申請を行った。本試験では第一に，№３を片親とする F1 品種育成の基礎資料とするため，F1 の諸特性を調査した。第二に，育種の効率化を図るため，弱ロゼット性に連鎖する分子マーカーの検索を行った。第三に，№３の花色等を改良し，中間母本としてより能力の高い弱ロゼット性系統の育成を行った。
【成果の概要】
１）№３の F1 の特性把握①F1 組合せと弱ロゼット性の関係
種々の F1 組合せで抽苔性を調査した結果，№３の弱ロゼット性は高温下で節間伸長を促進するが,その後の花芽形成に対する促進効果は低いことがわかった（図１）。また，その遺伝様式は不完全優性であったが，母性遺伝も示唆された。従って，№３を種子親として花粉親にロゼット化しにくい系統を用いた F1 組合せが有望である。
②F1 組合せと作型の関係
育苗期が高温となる６月中旬および８月上下旬播種の作型において，種々の F1 を栽培評価した結果，各々の作型において高率で抽苔する F1 が複数得られ，F1 親としての№３の高い能力を確認できた。ただし，６月中旬播種では高温によりボリュームが減少し，８月上下旬播種では短日条件により花芽形成が抑制されるため，切花品質の高い F1 を得るためには各々の作型での問題点を補完できる花粉親を選定する必要がある。
③採種時期と弱ロゼット性の関係
登熟期の高温遭遇によってロゼット化が誘起されるとの報告がある。そこで，№３について採種時期が夏播き栽培でのロゼット化に及ぼす影響を調査した。その結果，登熟期の高温条件はロゼット化の主要因とはならなかったものの，７月採種区でロゼット化が誘起されたことから，採種用の適切な作型の検討が必要である（図２）。
２）弱ロゼット性分子マーカーの開発①RAPD マーカーの検索

№３と親品種「天竜乙女」とを交雑した F2 集団を夏播き栽培したところ，節間伸長株とロゼット株に分離した。これらの分離集団の間で RAPD 解析を行った結果，有望な多型バンドが９本得られた（表１）。
②ジベレリンと弱ロゼット性の関係№３の弱ロゼット性の機構が明らかになれば,より効率的な育種やマーカー開発が可能となる。トルコギキョウの抽苔制御にはジベレリンが大きく関与していることから，№３の抽苔に及ぼすジベレリンの影響を調査した。ジベレリン生合成阻害剤（PBZ）によってロゼット化した株に，ジベレリンを処理して節間伸長を促進した結果，ジベレリンの効果は親品種「天竜乙女」よりも№３において顕著に高かった（図３）。このことから，№３の弱ロゼット性はジベレリンに対する感受性の変異に起因すると推測された。
３）弱ロゼット性系統の改良①劣性花色の新系統の育成
多様な花色の F1 品種を作出するためには，劣性花色（白，黄色など）の弱ロゼット性系統も新たに育成する必要がある。そこで，№３（桃色）の交雑後代等から劣性花色の８系統（F5）を選抜し，夏播き栽培で評価を行った。04R011-1 は草姿と花形に優れ，紫の遺伝因子を持たないことから多様な花色の F1 作出が可能であると推測された（表２）。
また，04R15 は花色が安定した黄色であり，草姿に優れ，草丈が高く，茎が剛健であった。
これら２系統は新しい弱ロゼット性の中間母本品種として有望である。
②倍数体の作出と特性評価
夏播き栽培では茎葉の軟弱化やボリューム不足も改善すべき大きな課題である。園芸
作物の倍数体化は茎葉が剛健になるなどの変異を誘導するのに有効な育種法である。そこで，種子への 0.5～１％コルヒチン処理を行ったところ，倍加個体（倍数体または倍数性キメラ）を得ることができた（表３）。また，倍加個体と２倍体との交配で得られる３倍体は，２倍体より剛健で晩生化するなどの特性を有し，草姿は２倍体とほぼ同等であったことから，新しい育種素材として有望である。
③培養増殖方法の確立
トルコギキョウは他殖性植物であるため，純系統の維持・増殖には組織培養系によるクローン増殖が有効である。そこで，№３の培養増殖法を確立するため，種々の培地・組織を用いて適切な培養条件を検討したところ，ＭＳ＋ＢＡ0.5mg/ℓ培地による葉片培養は，高率で多芽体を誘導できることがわかった（図４）。
【成果の活用・留意点】
１）劣性花色と弱ロゼット性をあわせ持つ有望な２系統については，今後，品種登録申請に向けて準備を行う。
２）№３および有望な劣性花色系統については，東京都種苗会において種々の F1 組合せを検討し,弱ロゼット性 F1 品種の育成を目指す。F1 組合せの選定・評価にあたっては，これまでに蓄積された知見を活用して効率的に進める。
３）倍数体の利用については，倍数体の稔性が低い傾向にあるため，採種性の向上が課題である。
４）RAPD マーカーについては，個体別の検定において再現性が不安定であったため，STS化するなどの改良が必要である。

【具体的データ】
10080

№３

開花株率（％）

F1（№３×高温抽苔個体）
60

F1（№３×強ロゼット性品種）
強ロゼット性品種

40

メロウピンク
つくしの羽衣20

図１ №３の F1 における節間伸長株率と開花株率

0020

4060
節間伸長株率（％）

80

2004 年６月 29 日播種，８月 11 日定植。供試品種・系統数は，F1 （№３×高温抽苔個体）が９系統，F1（№３×強ロゼット性品種）が７系統，強ロゼット性品種が４品種。

100

100
①２月採種
②７月採種
③８月採種

全ロゼット株率（％）

80

表１ №３と天竜乙女の F2 分離集団で検出された
RAPD マーカー
プライマー

60

OPA-0640

OPA-1220

OPA-17
OPF-07
OPF-150№１№２№３ MP-H

バンドサイズ（bp）
1800
1000
2300
1800
1200
2100
600
3200
3300

多型の有無
節間伸長株
ロゼット株+++++++++-

図２ 採種時期が夏播き栽培におけるロゼット化に及ぼす影響２反復の平均値±標準偏差を示す。

100

PBZ または高温によるロゼット株に対して GA3 100μg/株を葉面散布し，以後１週間ごとに計４回処理．１回目の処理開始日から１週間ごとに節間伸長株率を調査．供試数は 18 株×２反復。ブロットは平均±標準偏差。

№３ ＰＢＺ+ GA

80
節間伸長株率（％）

図３ ジベレリン処理がロゼット株の節間伸長に及ぼす影響№３ ＰＢＺ
60

天竜 ＰＢＺ+ GA
天竜 ＰＢＺ40

天竜 高温ロゼット+ GA
20

天竜 高温ロゼット

002468
処理後週数10

表２ 劣性花色系統の開花株率
品種・系統

節間伸長株率(%)

育成経過

50％開花期a

開花株率(%)

花色№３との F1の花色

劣性花色系統（№２×№３）×つくしの雪
04R011-1
97.1±4.1
93.3± 1.4
11 月下白単
桃単
99.0±1.4
98.1± 0.0
11 月下白単
紫単
04R021-1① （№２×№３）
04R021-1② ×ﾋﾟｰﾀｰﾌﾞﾙｰﾗｲﾝ 2 後代
100.0±0.0
100.0± 0.0
11 月中白単
紫単
04R031-4
98.1b96.2
11 月下白単
紫単
ﾌｫｰｴﾊﾞｰﾎﾜｲﾄ×№2
04R032-1
100.0±0.0
99.0± 1.4
11 月中
白単
紫単
04R033-2
99.0±1.492.2± 2.9
12 月上
白単
紫単
（№3×№2）×つくしの羽衣
04R061-1
100.0b55.8
12 月下 桃刷毛目*c
ｸﾘｽﾀﾙｲｴﾛｰγ線照射後代
04R1599.0±1.4
94.2± 0.0
12 月上
黄単
*
対照品種
№3
92.7±5.574.9±24.1
12 月上桃単
ｷｬﾝﾃﾞｨﾎﾜｲﾄ
100.0±0.0
100.0± 0.0
11 月中
純白単
ﾒﾛｳﾋﾟﾝｸ
93.8±1.8
83.8± 1.8
12 月上桃単
つくしの羽衣88.8±5.3
38.8± 1.8
桃刷毛目
ﾋﾟｯｺﾛﾎﾜｲﾄ
0.0b0.0
純白単2007 年７月 12 日播種，８月 22 日定植，12 月 27 日調査。数値は２反復の平均±標準偏差を示す。 a) 節間伸長し出蕾した株のうち半数が開花した時期。-は調査期間中に 50％開花に至らなかった。 b) 反復無し。 c) 未実施。

表３ コルヒチン処理が実生の倍数性に及ぼす影響
処理濃度
倍数性（個体数）
系統
検定数（％）
2x2x+4x0.56866
2№３1.06258
30.50aＴＨ
1.030291

倍加個体率 b（％）
2.96.53.34x010a) 順化時に全て枯死したため検定できなかった。 b) 倍加個体＝2x+4x 個体および 4x 個体。

シュート形成率

多芽体形成率

100形成率（％）

8060
40200
個体番号/品種・系統

1234561№1234№2561234561№323456ﾋﾟｰﾀｰﾌﾞﾙｰﾗｲﾝ2

図４ 弱ロゼット性系統の葉片培養におけるシュート・多芽体形成率
培地はＭＳ＋ＢＡ0.5mg/ℓ。シュート形成率は，シュートが１本以上形成された組織片の割合。
多芽体形成率は，シュートが５本以上形成された組織片の割合。

【発表資料】
１）平成 16～19 年度成果情報
２）宮下千枝子・南 晴文（2007）植物の生長調節 42:88-92．