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浦 上 財団 研究 報告 書VoL6(1998)

ベ ニ バ ナ 色 素 の 抗 疾 病 食 品 素 材 と して の 機 能 開 発

五十嵐 喜 治 ・ 柳 沼 里 江(山
形大学農学部生物生産学科)

1.はれ らが老化 の進行 と密接 に関わ る生 体酸化 を防御

じめ にす る機 能 について正 常あ るい はパ ラ コー ト酸化 ス
ベ ニバ ナ(Safflower)はキク科 のベ ニバ ナ属の 植 物 に 相 当 し,そ の 学 名(Carthamzcstin‑
ctriusL.)は 属名,種 名 のい ずれ も染 色の意 味 を
表 わ し,日 本 では古 くか ら,ア イ,ム ラサ キ ととトレス負荷 ラ ッ トを用いて 検討 を行 った。
2.実

験材 料 と方 法(1)エ

キス とサフ ロ ミンAの 調製:予 め凍 結

もに代表 的な天 然染料 の材料 と して栽 培 されて きしたベニバ ナ花弁 に脱塩水 を加 え,沸 騰 下,30分

た 。 日本 では と くに山形 県最上 川流域 でひ ろ く栽

抽 出を行 った。No.2の培 されて お り,最 近で は化粧 品素材,生 花 用 とし渣 につい ては再度,同 条件 下で熱 水抽 出を行 った。

ろ紙上 で吸 引 ろ過 後,残て 平地で も栽培 され るよ うになっ た。 しか しながろ液 を合一 後,ロ ータ リーエバ ボレー ター を用 いら,最 近 で は中国か らの安価 なベニ バナの輸 入がて減 圧下濃 縮 し,凍 結乾燥 を行 ってベ ニバナ抽 出

行 われ,わ が 国での栽培 量 は急速 に減 少 しっっあ

エ キス と した。ODSHG‑5(4。6×150mm,野る。ベニ バナ(紅 花)の 花び ら色素 に は口紅,ほ化学)カ ラム を用 い,2%メ

村

タノール を展開溶 媒

ほ紅な どの化粧 品材料 と して使 用 されて いるカル

A,50%メタ ミンの他,食 用色素 として も利用 可能 な黄色の分析(40分 で溶 媒Bが100%とな るリニ アグ ラジ

サ フ ロ ミン類1β)が含 まれ て お り,そ の利 用範 囲エ ン ド;流 速,1.Oml/分;検出:410nm)のは極め て多岐 に渡 ってい る。 一方,ベ ニバ ナは薬果,サ フロ ミンA含 量 は約5%で

草 として も古 くか ら使 用 され てお り,月 経 不順,

濃 縮液 を遠 心分 離後,そ の 上清 をn一ブタ ノー ル

冷 え症,更 年期 障害,血 行障 害な どに対す る効果

ー 酢酸 一水=4:1:5(v/v,上他,最 近 で は発がん抑 制作用,抗 アレル ギー作用

媒 とす るシ リカゲルカ ラムク ロマ トグラフ ィーでな ども注 目され る よ うにな り3,4),各種生 理機 能

分画 し,粗 サ フロ ミンA画 分 を得た。 次いで,50の開発 ・探索 が行われ つつ ある。

%メ タ ノール を展 開溶 媒 とす る セフ ァデ ックス

本研究 で は,ベ ニバ ナが お茶 として飲用 されて

LH‑20カタ ノール を展 開溶 媒Bと す るHPLC

結

あ った。一 方,

層)を 展開 溶

ラム ク ロマ トグ ラ フィー で精 製 を繰 りいる こと,ま た口紅,ほ ほ紅 な どの材料 とな るカ

返 し,得 られたサ フ ロ ミンA画 分を濃縮 後,凍 結

ルタ ミンを調 製す るに先だ って抽 出す る黄 色色素乾 燥 を行 って サ フロ ミンAと した。HPLC上が 食品添 加物 と して利 用 され てい る こと等 に注 目の純 度 は80%で,そし,ベ ニバナ 黄色色素 の うち最 も多 く含 まれて いミンCを 約20%含 む標品 であ った。

るサ フロ ミンAお よびベ ニバナ熱 水抽 出エキ スの
抗疾病 食品 素材 としての 機能 を開発す るた め,そ(2)ESR分

での他 の成分 として イ ソサ フロ

析:水 酸 ラジ カル(・OH)消活 性 は1mMのDETAPAC(Diethylene

去89

ベニバナ色素の抗疾病食品素材としての機能開発
料 をそれぞ れ20C+Sa,20C+Se食とした。 また,

基本食 に0.02%の パ ラ コー トを添加 した飼料 をそれ ぞれ,20C+PQ食とし,さ らにSa,あるい は

Seを 添加 した飼 料 をそれ ぞれ,20C+PQ+Sa,
20C+PQ+Se食とした(Table1)。

飼 料 への エ

キ スの添加量 は飼料 中サ フロ ミンAと して0.05%
Fig.lChemicalStructureofSafflominA
GIu=Glucose

triaminepentaaceticacid)と1mMの鉄 を含 む0.1Mリとなる ように調節 した。動物 に は4週 齢初体 重60

硫 酸第1ン酸 緩衝 液(pH7.8)にサフロ

尚,ラ ッ トは個別 のステ ンレス製 ワイヤ ーケー ジ

過酸に 入れ,明 暗 サ イ クル12時 間,室 温22‑25°C,湿後 にシグナル を測定 して算度60%の 条 件下で飼 育 を行 った。飼 育最終 日10時

ミンAあ るいはエ キ ス,さ らに はDMPOと化水 素 を加 えて,1分出 した。 スー パー オキ シ ドアニオ ン(・oz>消
活 性 は2mMヒ
DETAPACをg前 後 の ウィス ター系の雄 ラ ッ トを用 い,1群5‑6頭 としてそれ ぞれ の飼 料 を11日間給 与 した。

去

ポ キ サ ン チ ン お よ び1mM
含 むそ れ ぞ れの0.1mMリ

ン酸 緩間絶 食後,ネ ンブタール(大 日本製 薬)麻 酔下開
腹 し,心 臓 か らの採 血 と肝臓,肺 の採取 を行 った。
(4)溶血赤血球 と肝 ホモ ジネー トの調 製:採衝液 の混 合液 にサ フロ ミンAあ るいはエ キス,さ血 した血 液0.lmlを1.9m1の

ら に はDMPO,キ

静 か に撹搾 ・懸 濁 して か ら,1,400×gで10分(XOD)を

サ ン チ ンオ キ シ ダ ーゼ

加 え,1分

後 に シ グナ ルの測 定 を行生 理食 塩水 に加 え,
間遠 心 分 離 を 行 い,赤 血 球 と 脂 質 過 酸 化 物

い,消 去 活性 を算出 した。 尚,測 定 機器 には 日本(TBARS=チ

電 子株 式 会社 製 ラ ジカ ルモ ニ ターFR‑30を測 定す るための試 料を調製 した。 赤血球 は生理食

用い

た。
(3)飼

オ バル ビツー ル酸反 応生成 物)を塩 水で 洗浄 後H20で料 と動物:飼 料 は20%カ ゼイ ン食 を基

本 食(20C食)と溶血 し,カ タ ラーゼ,グ ル

タチ オ ンペル オ キ シダ ーゼ(GSH‑Px)の測定

し,基 本食 にサ フ ロ ミンAをに使 用 した。 また溶血赤血 球 に0.25倍容 のエ タノ

0.05%あ るい はベニ バナエ キス を0.83%を 含む飼

ー ル と0.25倍容 のク ロロホルム を加 えて撹搾後,

TablelCompositionofthediets(%)

20C,20%caseindiet;20C+pQ,20%caseindietwithO.02%paraquat;20C+Sa,20%caseindietwithsafflomin
A;20C+pQ+Sa,20%caseindietwithbothO.02%pQandsafflominA;20C+Se,20%caseindietwithsafflo、
extract;20C+pQ+Se,20caseindietwithbothO.02%paraquatandsafflowerextract.1AIN‑93G・MXand2AIN・
93‑VXwereobtainedfromOrientalCo.,Tokyo,Japan.

、
・er

90

浦上 財 団研 究報 告 書Vol.6(1998)

4°C下,1,400×gで5分を10mMリ

遠 心 分離 し,そ の 上 清

ン酸 緩 衝 液(pH7.8)に後,SOD(ス

対 して 透 析ー パ ーオ キ シ ドジ スム タ ーゼ)の活性 測定 に用い た。

定 して測 定 し た。SOD,カタラ ーゼ 活性 の1単

位 はそれぞれ,ヘ モグロ ビン また はタ ンパ ク質1
mg当 た りNBTからのジ フォル マザ ン生成 を50%阻 害 す る酵 素量,ヘ モ グロ ビンまた はタ ンパ ク

肝臓 の各種 抗酸化 系酵 素の測 定に は採 取後直 ちに切 除 した 右葉 部 分 をDelBoccioら5)の質1mg当

た り1分 間 に過 酸化水 素 を1μmol分 解

方法に

す る酵 素量 とした。GSH‑Px,GSSG‑Rの1単

位

準 じて調製 した試料 を用 いて行 った。即 ち,切 除はヘ モグ ロビン またはタ ンパ ク質1mg当た り1

した肝 臓1gを 予 め冷 却 した1mMEDTAを

分間 にNADPHを1μmol分

0.1Mリ

ン酸 緩 衝 液(pH7.4)5mlを

含む
用いてテ

解す る酵素量 とした。

ヘ モグ ロビンは和光 純薬 のヘモ グロ ビンテス ト

フ ロン製 ホモジナ イザー 中で ホモジナ イズ を行 っを用 いて,ま たタ ンパ ク質 はLowryらた。次 いで2倍 容 の2.3%KCIをに よって定量 した。

加 えて再 度 ホモ

ジ ナイ ズを行 い,ホ モ ジネ ー トを4°C下,600×gで3分

遠心 分離 を行 った。 得 られ た上 清を4°C

下,1,400×gで10分

遠心 分離 を行 い細 胞破 砕 物

を 除 去 し た。上 清 の 一 部 を30Wの超音波装 置(6)TBARSの測 定:血の方法1°)

清TBARS(チオバル ビツール酸 反応生 成物)は 八木 の方 法11)に準じて 測定 し,血 液lml当
ヒ ド量(nmol)とた りの マ ロ ンジア ル デ

し て 算 出 し た。 肝 臓 の(ブラン ソン1200モ デル,ヤ マ ト科学)で30秒 つTBARS量つ4回

ホモ ジネー トを使用 し,内 山 らの方 法12)によっ て

超 音 波 処 理 を 行 い,次 い で4°C下,

10,000×gで20分 遠 心分離 を行 い ミ トコン ドリア
画分 を沈澱 として得 た。沈澱 を0.1Mリ液(pH7.8)に
SODお

ン酸緩衝

は,そ の 酵素 活性 測 定 用 に調 製 し た

定量 した。
(7)脂質 の分析:血 清総 コ レステロー ル,ト

懸濁 後,超 音波 処理 を2分 行 い,

リア シルグ リセロー ル,リ ン脂質濃 度は,和 光純

よ びカ タラ ーゼ活 性測 定 用試 料 した。 ま

薬 か ら購 入 した市販 キ ット,そ れ ぞれ,コ レス テ

た上 清 は4°C下,100,000×gで60分

遠心分離を

ロー ルE一テス ト,ト リグ リセ ライ ドE一テ ス ト,

行い,得 られ た上清 をサ イ トゾー ル画分 と して,リン脂 質B一テス トを用い,酵 素 法 で定量 した。

SOD,カ

血 清HDL一 コ レステ ロール は和光純 薬製 のHDL一

タ ラー ゼ,グ ル タチ オ ンペ ル オキ シ ダーゼ(GSH‑Px)および グル タ チオ ン レダ ク タ

コレス テロール テス トを用 い,他 の リポ タンパ クーゼ(GSSG‑R)の活性測 定に使 用 した 。

質 をヘパ リンーマ ンガン法で 沈殿 させた後13),酵(5)酵

素 活性 の 測定:SOD活

性 は 今成 らの方法6)に準 じ,キ サ ンチ ンー キサ ンチ ンオ キシ ダ

素 法で測 定 した。
肝臓脂 質 は凍 結試 料 を用い,Folchらの方法14)

ーゼー ニ トロブルー テ トラゾ リュ ム(NBT)系によ って抽 出 ・精製 を行 った。 各脂質 は コレステ

を用い て,ま たカ タラーゼ活 性 は富 田 らの方法 に

ロールE一テス トの代 わ りにモ ノテ ス トーコ レス

準 じて 分光光 度法 を用 いてη,反 応 に よ って 分解

テロー ル(べ 一 リンガーマ ンハ イム 山之内製)をす る過 酸 化水 素 の減 少 を240nmで 経 時 的 に測定使 用 し,そ の他 は血清 の場合 と同様 なキ ッ トを用して 測定 し た。GSH‑Px活いて測定 した。

性 はLawrenceらの方法8)に準 じて基 質 としてt一ブ チル ヒ ドロペ ルオ(8)還

元 型 グル タ チオ ン とシ ステ イ ンの 定

キシ ドを使 用 し,ま た反 応 に基づ くNADPHの

量:Takahashiら

減 少 を何 らの 方法9)に準 じて340nmで 経 時的 に測め 凍 結 を 行 っ た 肝 臓0.5gに5mlの0.0343Mの 方法15>に準 じて,採 取 後 予

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ベニバナ角素の抗疾病食品素材 としての機能開発
EDTAと5mlの30%メ

タ リン酸 を加 え,氷 冷 下,ガ ラスホモ ジナ イザー を用いて ホモ ジナイズ を行っ た。4°C下,2,500×gで15分

遠 心 分 離 後,上清0.lmlに5NNaOH10,u1,0.5Mホ

ウ酸 緩衝 液(pH8.8)300μ1,0.02MEDTA20,u1,3nM
N‑(9‑acridinyl)maleimide(NAM)50μ1を
加 え て20℃ 下 で3時DevelosilODSカ

を 用 い,Takahashiら
HPLC分

間 反 応 を 行 っ た。

ラム(4.6×150mm,野村 化学)の 方 法15)と同 様 に し て析 を行 った。

(9)肺の分析:血 液 と肝臓 を採取後,直 ちに採取 し,凍 結 保存 した肺 をTBARSと抗酸 化 系

酵素 の活性 の測 定 に用 いた。SOD,カタ ラーゼ,

GSH‑Pxのの 方法16)に

活性 測 定 で はPaynterら

準 じ,試 料1gを5m1の0.2%TritonX‑100(v/v)で4℃

下,ガ ラス ホモ ジナ イザー を用 いて ホモ ジ ナイ ズ し,次 いで,4°C下,10,000×g

Fig.2HPLCchromatogramsofauthenticSafflominsand
safflowerextractfromSafflowerPetals.
(a)authenticsafflomins:1,safflominA;2,safflominC;
3,safflominB;4,isosafflominC.
(b)safflowerextract.

で30分 遠心分 離 を行 った。得 られた上 清に0.25倍
容の エタ ノール と0.15倍 容の クロロ ホルム を加 え

ニ バ ナエ キ ス(Se)のHPLCパて 撹 押 後,4°C下,4,000×gで20分,遠に示 した。 エキス に含 まれ るサ フロ ミン中,最 も心分離

タ ー ンをFig.2

を行 い,そ の上清 を酵素 の活性 の測定 に用 いた。

多 いの はサ フロ ミ ンA(6.0%)で,次活性 の測定法 は肝臓 の場 合 と同様 に して行 った。

Cで あった。 サ フロ ミンA,エ(10)統

計 分析:実 験 結果 は平均値 ±標準誤 差

い でB,

キスの水酸 ラジ カル,ス ーパ ーオキ シ ドアニ オン消去 活性 の測定結で表 示 し,二 元配 置分散 分析 を行 った。効果(サ果 をFig.3,4に

フロ ミンAま た はベニバ ナエ キスの有 無,パ ラ コの いずれ もラジ カル消去活性 を示 したが,サ フロ

示 した。 サ フロ ミンA,エキス

ー トの有 無,)お よび 交互 作用(サ フ ロ ミンAまミンAの1.5mg/ml水

た はベニバ ナエ キスの有 無 ×パ ラ コー トの有 無)

ジ カル,ス ーパー オキ シ ドアニ オン消去活 性 はその有 意性 は危険率5%で求 めた。 また,各 群 間のれ ぞれ,8,60%,ベ

有 意 性(p〈0.05)は,一

元 配 置 分 散 分 析(ANOVA)を

溶液 を 用 いた 時 の水酸 ラ

ニ バナ エ キ スの10mg(サフ ロ ミンAと して0.6mg/ml)水

溶 液 を用 いた時

行 っ た 後,Dunncanの多重 検の水 酸 ラジカル,ス ーパ ーオキ シ ドア ニオ ン消去定17)を用 い て検 定 した。 尚,ANOVAの結 果,

活性 はそれ ぞれ,22,88%を表示 し,エ キス には

有 意 な場 合 は各群 間 の有 意 性 はMann‑Whitney

サ フロ ミンAの 他,異 なる活性酸 素消去 物質の存検定 に よって検定 を行 った18)。

在 が示唆 された。

3.結

果

(2)サ
C),パ

(1)活

性 酸素 消去 活性:動 物実験 に用 いたべ

フロ ミンAの 給与 結 果:基 本 食(20
ラコー ト添 加食(20C+PQ),サンA添 加 食(20C+Sa),パフロミ

ラコー ト+サ フ ロ ミ

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浦 上財 団研 究 報告 書Vol.6(1998)

Fig.4ESRSpectraofspinadductsof・OZgeneratedby

Fig.3ESRspectraofspinadductsof・OHgeneratedby
FentonreactioninthepresenceofsafflominAor

hypoxanthine‑xanthineoxidasesysteminthepresence

safflowerextract.

ofsafflominAorsafflowerextract.

(a)withoutsample,(b)inthepresenceofsafflomin(a)withoutsample,(b)inthepresenceofsaff墨omin

A,(c),inthepresenceofsafflowerextract.Measure‑A,(c),inthepresenceofsafflowerextract.Measure‑mentconditions:power,4mW;centerfield,336.OmT;

mentconditions:po≪‑er,‑1mVV;centerfield,336.OmT;

sweeptime,2min;modulationwidth,79μT;timecon‑

sweeptime,2min;moduIationwidth,79μT;timecon・stant,0.3sec.

stant,0.3sec.

ンA添 加 食(20C+PQ+Sa)を給 与 した 時の 飼にはパ ラコー トとサ フロ ミンAの 交互 作用 がみ ら

料摂取 量,体 重の経 日的変 化 をFig.5に 示 した 。

れ,サ フロ ミンAに よるパ ラコー ト給 与時 のカ タ

飼 料摂 取量,体 重増加 量の いずれ もサ フロ ミンA

ラー ゼ活 性 上昇 作 用 が 観 察 され た。肝 臓GSH‑の添 加(20C+Sa)による変 動 はみ られ なか っPx活 性 に もパ ラ コー トとサ フロ ミンAの 交互 作

たが,飼 料へ のパ ラコー ト添加で摂 取量 は8日 以

用 が観 察 され た。 肝臓 ミ トコ ン ドリア 画 分 の降,体 重は9日 以降 に有意 に低下 した。 また,パSOD,カラ コー ト添加 食へ のサ フロ ミンA添 加 によって 飼意に低下 し,カ タ ラーゼ活性 の低下 は,サ フロ ミ

料摂取 量,体 重の低 下は 回復 傾向 にあ ったが有 意

ンAの 添 加 で抑制 され る傾 向 にあ った。 肝臓 のな回復 は認 め られ なか った。

TBARSは

血 清 と肝 臓 のTBARS,な

らび に赤 血 球 と肝臓 の抗 酸化系 酵素活性 へ のパラ コー ト,サ フ ロ ミ
ンAの 影響 をTable2に示 した。赤 血球 カタ ラー

タ ラー ゼ活 性 はパ ラ コー トの給 与 で有パ ラコ ー トの給 与 で有 意 に上 昇 し,

サ フロ ミンAに よ って上昇が 抑制 される傾 向を示した。
血清,肝 臓 脂 質へ の サ フロ ミンAへ の 影響 を

ゼ活性 にはサ フ ロ ミンAの 影響が観 察 され,そ のTable3に

給与 に よ り,活 性 が増 加 した。 肝臓 のSOD活ール はパ ラ コー トの給 与で有 意な低下 を示 し,そ性

示 した。肝臓 中 の トリアシル グ リセ ロ

ベニバナ色素の抗疾病食品素材としての機能開発
Table2

EffectsofsafflominAontheorganweights,serumandliverantioxidati、

93・eenzymeactivities,and

TRARSofratsfednnthediρtsw{thorwithmltnaranuat.

ValuesareMeans±SEof50r6ratspergroup."SeelegendtoTable1.*2Effectofparaquat(PQ)indiets.串3Effectofsafflomin
A(Sa)indiets."lnteractionbetweenPQandSa.Withinrows,meanswithdifferentsuperscriptlettersaresignificantlydifferent(Pく0.05).

Table3EffectsofsafflominAontheserumandliverlipidconcentrationsofratsfedonthedietswithorwithoutparaquat.

ValuesareMeans±SEof50r6ratspergroup."SeelegendtoTable1.̀ZEffectofparaquat(PQ)indiets.'3Effectofsafflomin
A(Sa)indiets.*̀lnteractionbetweenPQandSa.Withinrows,meanswithdifferentsuperscriptlettersaresignificantly‑different(P<0.05).

の低 下 はサフ ロ ミンAの 添加 で抑制 され る傾 向 を示 した。 その他 の脂質 で は基 本食(20C)あはパ ラコ ー ト食(20C+PQ)へ

Table4に示 す ように肝 臓 のグ ルタ チオ ン,シるい

ス テイ ン含 量 はいずれ も,パ ラコー トの給与 で低のサ フロ ミンA

下傾 向 を示 し,サ フ ロ ミンAの 添加 はその低 下傾

添加 に よる有意 な変動 はみ られなか った。

向 を抑 制 す る傾 向 にあ った。 肺 のTBARSと抗

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浦 上財 団研 究 報告 書Vol.6(1998)

Fig.5EffectsofdietarysafflominA(Sa)onthefoodintake

Fig.6Effectsofdietar}・safflowerextract(Se)onthefoodandonthebodyweightofratsfedonadietwithor

intakeandonthebodyweightofratsfedonadietwith

withoutparaquat.

orwithoutparaquat.

▲,20Cdiet;●.20C+PQdiet;■,20C+Sadiet;◆,20△,20Cdiet;.○,20C+PQdiet;口,20C+Sediet:◇,20C+

C+PQ+Sadiet.

PQ+Sediet.

Eachsymbolisexpressedasmean±SEValuesnot

Eachsymbolisexpressedasmean±SE.Valuesnot

sharingacommonletteraresignificantlydifferentat

sharingacommonletteraresignificantlydifferentat

P〈0.05withineachindicatedday.

P〈0.05withineachindicatedday.

Table4EffectsofsafflominAontheliverglutathioneandcgsteinecontentsofratsfedonthedietsFrithorwithoutparaquat.

ValuesareMeans±SEof50r6ratspergroup.宰LSeeIegendtoTable1.宰2Effectofparaquat(PQ)indiets.*3Effectofsafflomin
A(Sa)indiets.'41nteractionbetweenPQandSa,、Vithinrows,meallswithdifferentsuperscriptlettersaresignificantlydifferent(P<0.05).

酸化 系 酵素 活性 をTable5に示 した。肺 のSOD

(3)ベニバナエ キスの給 与結果:ベ ニバナ エ

活性 には,パ ラ コー トとサ フロ ミンAの 交互作 用キ ス給与 に伴 う飼 料摂 取量 と体重 の変化 をFig.6がみ られ,サ フ ロ ミンAは パ ラコー トによ る活 性に,ま た肝臓 お よび肺 重量,さ らには血清,肝 臓の上 昇を抑制 した。カ タラーゼ活 性 はパ ラ コー トのTBARSと抗 酸 化 系酵 素 活 性 の 測 定 結 果 をの給与 に よ り低下傾 向,パ ラ コー トへ のサ フロ ミ

Table6に示 した。体 重100g当 た り肺 重量 には,ンAの 添加 でそ の低 下が 抑制 される傾 向に あった。

パ ラコー ト,ベ ニバ ナエ キスの影響,さ らに はパ

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ベニバナ色素の抗疾病食品素材としての機能開発
TableaEffectsofsafflominAonthelungTBARScontentandantioxidativeenz}・meactivitiesofratsfed
onthedietswithorwithoutparaquat.

ValuesareMeans±SEof50r6ratspergroup.*̀SeelegendtoTable1.*ZEffectofparaquat(PQ)indiets.*3Effectofsafflomin
A(Sa)indiets.'°lnteractionbetweenPQandSa.Withinrows,meanswithdifferentsuperscriptlettersaresignificantlydifferent(Pく0.05).

Table6

Effectsofsafflowerextractontheorganweights,serumandliverantioxidativeenzymeactivities,and
ontheTBARSofratsfedonthedietswithorwithoutparaquat.

ValuesareMeans±SEof50r6ratspergroup.*̀SeelegendtoTable1.̀ZEffectofparaquat(PQ)indiets.*3Effectofsafflower
extract(Se)indiets.*°lnteractionbetweenPQandSe.Withinrows,meanswithdifferentsuperscriptlettersaresignificantly
different(P〈0.05).

ラコー トとベニバ ナ エキスの 交互作 用が認 め られた。 血清TBARSには,パ ラ コー トお よび ベニ

100g当 た りの 肺重量 の有 意 な増加 を有 意 に抑制した。赤 血球SODお

よび カタ ラー ゼ活性 に はベバ ナ エ キ ス の 影 響 が み られ な か っ た が,肝 臓ニ バナエ キスの効 果が観 察 され,エ キスに よる活

TBARSに性 の上昇 が観察 された。 肝臓サ イ トゾール画 分のはパ ラ コー トの 影響 お よびパ ラコ ー

トとベニ バナエ キス の交互作 用が み られ,エ キス

カタ ラー ゼお よびGSSG・R活はパ ラコー トに よるTBARSの響 がみ られ,エ キス によ りカ タラー ゼ活性 は低下

上昇 を抑 制 した。

また,ベ ニ バ ナエ キ ス はパ ラコ ー トに よ る体重を,GSSG‑R活

性 に はエ キス の影

性 は上昇 を示 した。 また ミ トコ

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浦上 財 団研 究報 告 書Vol.6(1998)

Table7Effectsofsafflowerextractontheserumandliverlipidconcentrationsofratsfedonthedietswithorwithoutparaquat.

ValuesareMeans±SEof50r6ratspergroup."SeelegendtoTable1.'ZEffectofoaraauat(PO)indiets.'3Effectofsafflower
extract(Se)indiets.*°lnteractionbetweenPQandSe.Withinrows,meanswithdifferentsuperscriptlettersaresignificantly
different(P<0.05).

Table8

Effectsofsafflowerextractontheliverglutathioneandcysteinecontentsofratsfed
onthedietskithorwithoutparaquat.

Valuesare?Means±SEof50r6ratspergroup.*'SeelegendtoTable1.s2Effectofparaquat(PQ)indiets.*3Effectofsafflower
extract(Se)indiets.網InteractionbetweenPQandSe.Withinrows,meanswithdifferentsuperscr{ptlettersaresignificantly
different(Pく0.05).

Table9EffectsofsafflowerextractonthelungTBARScontentandantioxidativeenzymeactivitiesofratsfed
onthedietswithorwithoutparaquat.

ValuesareMeans±SEof50r6ratspergroup."SeelegendtoTab亘e1,準2Effectofparaquat(PQ)indiets.*3Effectofsafflower
extract(Se)indiets."lnteractionbetweenPQandSe.Withinrows.meanswithdifferentsuperscriptlettersaresignificantly
different(Pく0.05).

ン ド リア画 分の カタラー ゼ活性 はパ ラコー トの 給

一ル濃 度に はパラ コー トの影 響 と,パ ラコー トと与で有 意 に低 下 し,ベ ニバ ナエ キスの添 加 はその

エキ スの交互作 用が み られ,エ キ スはパ ラコー ト

低下 を抑制 した。

に よる トリアシル グ リセ ロールの低 下を有意 に抑血清 お よび肝臓 の脂質濃 度 をTable7に示 した。

制 した。Table8に

示 す ように肝臓 グル タチ オ ン

血清 トリア シル グ リセ ロール濃度 に はパ ラ コー ト

量に はパラ コー トの影 響が観 察 され,そ の添 加での影響 が観察 され,そ の濃 度が有 意に低 下 した。

低 下傾 向を示 したが,ベ ニバ ナエ キスの添加 は そまたベ ニバ ナエ キスの飼料 への添 加 はその低下 をの低下 を抑制 する傾 向にあ った。肝臓 システイ ン

緩和す る傾 向に あった。肝臓 トリア シルグ リセ ロ

量 はパ ラ コー トの添加 で低下 傾向,パ ラ コー ト添

97

ベニバナ色素の抗疾病食品素材 としての機能開発
加飼料 へ のエキ スの添加 で低下が わずか なが ら抑にお けるカ タラーゼ活性 のパ ラコー ト給 与 に伴 う

制 される傾 向に あった。

低 下 とサフ ロ ミンAの 添加に よる回復傾 向,肝 臓ベ ニ バ ナエ キ スの 肺TBARS,抗活性 への影 響 をTable9に

酸化 系 酵 素

示 した 。TBARS値にTBARSのパ ラコー トによ る上 昇 とサ フ ロ ミン

A添 加 によ る上 昇の抑制 傾向(Table2),肝臓 トはパ ラ コー ト,エ キス の影響が み られ なか ったが,リア シルグ リセロール のパ ラコー ト給与 に伴 う低

カ タラー ゼ活性 にはエ キスの影響,さ らにはパ ラ

下 と,サ フ ロ ミンA添 加 に よる低 下の抑 制傾向,

コー トとエキス の交互作 用が観察 され,エ キ スはさ らにはパ ラコー ト給 与に伴 う肝臓還 元型 グル タ

パ ラコー ト給与時 にカ タラーゼ活 性 を上 昇 させ る

チオ ン量 の低下 と,サ フロ ミンA添 加 に よる低 下作用 を示 した。 また,カ タ ラー ゼ活性 はパ ラコーの抑制 傾 向(Table5)はトの給与 で低下傾 向,エ キスの添 加で低 下の抑 制が生体 内酸化 に防御的 に作用 してい るこ とを示 唆

作 用 を示 した。SOD,GSH‑Px活して いる もの と推察 される。 パラ コー トが蓄積 さ

性 に はパ ラコ

ー ト,エ キスの影 響 はみ られ なかった。

れや すい肺 にお いて は2°)TBARS,SOD,カーゼ,お よびGSH‑Px活4.考

い ずれ もサ フ ロ ミンAタラ

性 のい ずれ にお いて も察

有 意 な差 は なか った が,カ タラーゼ活 性 はパラ コ
ベ ニバ ナエキ スに含 まれ る黄色 色素 の うち最 もー トで低 下傾 向,パ ラコー ト食への サフ ロ ミンA

多 い,サ フロ ミンAは 水 酸 ラジカル,ス ーパ ーオの添加 でそ の低 下が抑 制 され る傾向 にあ った。

キシ ドア ニオ ンのいず れ も消去 する活性 を示 した

パ ラコー ト食への ベニバナ エキ スの添加 は,パが,サ フロ ミンA含 量 の少 ないエキ スの方が,サラ コー トに よる飼育後 半 にお け る飼料 摂取 量 と体フロ ミンAよ りも強 いラジ カル消去活性 を示 し,重の減 少 を有 意に抑制 した(Fig.6)。 また,パ ラ

エ キス中 にはサ フロ ミンAと 異 なる ラジカル 消去

コー トに よる肝臓TBARSの活性 物質,あ るいはサ フロ ミンAの 消去 活性 を助に抑制 した。 パ ラコー ト給与 に伴 う肝臓 ミ トコ ン

有 意 な上昇 を有 意

長 する成 分の存在 す るこ とが示 唆 され た。強 い活

ドリア画分 のカタ ラーゼ活性 の低下 もエ キス添加性酸 素消 去能 はベニバ ナエ キスの活性 酸素消 去食で緩和 され たが,緩 和 はベニ バナ エキスが サフ ロ

品素 材 と しての利 用 ・開発の点 か ら興 味深 い。パミンAに 比 べて遥か に強 く(Table6),ベ

ラコー トに よる生体 内酸化 ス トレス はNADPH一エ キスの強 い生体 内酸 化防御 機能 が推察 された。

シ トク ロムP‑450還 元 サイ クルに よるスーパ ーオ

ベニ バナエ キス において はサフ ロ ミンAの 場合 とキシ ドアニオ ンの生成 と,そ れに引 き続 く活 性酸は異 な り,肝 臓の他,血 清 にお いて もパ ラ コー ト

素種 の生 成が原 因 となる ことが知 られてい る ことに よる トリア シル グ リセ ロールの低 下 を抑 制 し,か ら19),サフロ ミンA,ベニバナ

ニバ ナエキ スの活性 酸

また肺 にお ける カタラーゼ活 性で はその低 下 を抑

素 消去能 は これ らが生体 内 に取 り込 まれた さい,

制 す る よ り,む し ろ上 昇 させ る 傾 向 に あ り

生 体酸化 に防御 的に作 用す るこ とが期 待で きる。
サ フロ ミンAは パ ラコー トによ る飼 育後半 における飼料 摂取量,お よび体重 の減少 を緩和 する傾向を示 し(Fig.5),パラコー トによ る生 体内 活性(Table7,9),ベ

ニバ ナエ キス が生体 内 抗酸化系酵 素の高 い活性維 持作用 を通 して生体酸 化 に防御的 に作用 す るこ とが推察 され た。
サ フロ ミンA,ベニバ ナエキ スのいず れ も肝臓

酸 素の生 成が原 因 となる酸化 ス トレスを防御 す る

中 の還元型 グル タチオ ン濃 度 を上 昇 させ る傾向 に

可 能性 を示 した 。 また,肝 臓 ミトコン ドリア画分

あ り,活 性 の発 現 にグル タ チオ ン を必 要 とす る98

浦 上 財団 研 究報 告書Vol.6(1998)

GSH‑Px,GSSG‑Rの円滑 な活性発 現に奏 功す る

ラコー トによ る肝 臓 ミ トコ ン ドリア画 分の カタ ラ

もの と推 察 される。 サフ ロ ミン類 はフ ェノール性ーゼ活性 の低下 の抑制,肝 臓 トリア シル グ リセ ロ

水 酸基 を有す る ことか ら,そ の還元 性 を利 用 してール濃度 と還元型 グル タチオ ン濃度 の低 下 を抑制

パ ラ コー トによる生体 内還元 型 グルタチ オンの消する傾向 を示 した。

費21)を節約 して いる こと も十分 考慮 され るが,その詳細 につ いては検討 が必 要 とされる。

ベニバ ナエキ スにお いて もサフ ロミンAと 同 じ
よ うな効 果を示 したが,作 用効 果 はサフ ロ ミンA

飼料 に添加 したベ ニバ ナエキ スの中の サフ ロ ミに比 べ て遥 か に強 く,エ キ スにはサ フロ ミンAとンA量 はサ フロ ミンA添 加飼 料中 のサ フロ ミンAは異な る生 体酸化 防御機 能性成 分,あ るい はサ フ

量 と同 じ ことか ら,エ キ スの強 い効 果 を考 慮 した

ロ ミンAの 効果 を助長 する成 分の含 まれて いる こ

場 合,エ キ ス中に はサフ ロ ミンAと は異 なる生体とが推察 された 。

酸 化防御 成分 あるい は,サ フロ ミンAの 効 果 を助
長 す る成 分の 存在す る ことが推察 され,今 後の解本研究 を遂行 す るにあた り,研 究助 成金 を賜 り明が待 たれ る。ベニ バナの色 素成 分,特 にサ フロ

ま した浦 上食品 ・食文 化振興 財団,ま た,既 知試

ミン類 の食品 添加物 として の利用 は今回 明 らか に

料 としての各種 サ フロ ミン類 を ご恵与 いた だい た

された サフ ロ ミンAの 生体酸 化防御 機能 の点か ら

山形大学 工学部 小野寺 準一教授 に心 か ら感謝 の意

その利用 の拡 大が期 待 され るが,精 製前 のエキ ス

を表 します。

の状態 での食 品素材 としての利用 もその強 い生体
酸 化防御 機能 の視点 か ら,今 後考慮 すべ き事項 と考 えられる。

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フロ ミンA,および ベニバ ナの熱 水抽出液(ベ ニ

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saffloweryellow,ChemistryLetters.,433‑436(1981)3)水バナエ キス)の 活性 酸素消 去活性,さ らには それらが正 常,お よびパ ラ コー ト酸化 ス トレス負荷 ラッ トの血 清 ・肝臓の 脂質過酸 化,脂 質濃 度,抗 酸

野 瑞 夫 監 修:日

本 薬 草 全 書,p.556‑568,新

日本 法規

出 版 株 式 会 社(1995)
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Tanimura,andY.Saito:ProfilesofPotentiallyAntial‑
lergicFlavonoidsin27KindsofHealthTeaandGreen

化 系酵素 活性 に及 ぼす影響 につ いて比較検 討 した。
サ フロ ミンA,ベニバ ナ エ キス のい ずれ もinvitroにお い て水酸 ラ ジカ ル,ス ーパ ーオ キ シ ド
アニオ ン消去 活性 を有す るこ と,ま たサ フロ ミン

TeaInfusions,J.Agric.FoodChem.,45,2561‑
2564(1997)5)G.DelBoccio,D.Lapenna,E.Porreca,A.Pannelli,F.
Savini,P.Feliciani,G.Ricci,andF.Cuccurulle:Aortic
antioxidantdefencemechanism:timerelatedchangesin

Aよ りベニバ ナエ キスの方 が消去 活性の 高い こ とがESRのcholesterol‑fedrabbits,Atherosclerosis,81,127‑135

測定 結果 よ り示 された。

サ フロ ミンAは 飼育 後半 にお けるパ ラコー トによる飼料 摂取 量,体 重の低下 を緩和 す る傾 向,ま(1990)
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た,パラコ ー トによ る肝 臓 脂 質過 酸 化物

(TBARS)の上昇 を抑制 す る傾向,さ らに はパ

7)富

田 勲,佐

伸 夫 編,医野 満 昭:過酸 化 脂 質 実 験 法,金

歯 薬 出 版,149‑150頁

田 尚 志,植田

99

ベニバナ色素の抗疾病食品素材 としての機能開発
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ル の

変 化,日

本

ofglutathioneandsomethiolsinbloodandmammaliantissuesbyhighperformanceliquidchromatography,

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栄 養

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100

URAKAMIFOUNDATIONMEMOIRSVol.6(1998)

DevelopmentofFunctionsofSafflowerPigmentsasFoodMaterial
AvailabletoPreventDisease
KiharuIgarashiandSatoeYaginuma(DepartmentofBioproduction,FacultyofAgriculture,YamagataUniversity)

SafflominA,whichisthemostabundantyellowpigmentcontainedinsafflower
petals,andanextractpreparedfrompetalsbyextractingthemwithboiledwater(safflowerextract)wasanalyzedforitsradicalscavengingactivityinvitYO.Theprotec‑
tiveeffectsofsafflominAandsafflowerextractfromoxidativestresswerealsodeter‑
minedbymeasuringtheireffectsonserumandliverlipidperoxidationandontheserum
andliverlipidlevels,aswellastheantioxidativeenzymeactivitiesinratswithorwithout
paraquat‑inducedoxidativestress.
BoththesafflominAandsafflowerextractshowedhydroxylradicalandsuperoxideanionscavengingactivities,withhigherscavengingactivityinthesafflowerextractthan
inthesafflominA,suggestingthatithaveothercompoundswhichscavengeradicalsor
strengthentheradicalscavengingactivityofsafflominA.
SafflominAtendedtosuppressadecreaseinfoodintakeandbodyweight,andto
suppressanincreaseinthelipoperoxide(TBARS)contentwhichwascausedbyparaquat
feedinglateinthefeedingperiods.SafflominAalsotendedtosuppressadecreaseinthe
catalaseactivityinlivermitochondria]fractionandtosuppressdecreasesinlivertriacylg‑
lycerolandreducedglutathionelevelsinratssubjectedtooxidativestressbyparaquat.
Safflowerextractalsoactedpreventivelyagainstparaquat‑inducedoxidativestressthe
sameasdidsafflominA.However,theactivitiesofsafflowerextractwerestrongerthan
thoseinsafflominA,suggestingthatotheractivecompoundswhichmaypreventoxidative
stressinvivoorenhancetheeffectsofsafflominAinvivo,maybeinvolvedintheextract.