ぶ

ん

せ

別

刷

き

Ⅳ0．5

1988

超臨界流体クロマトグラフィー

前田恒昭・保母敏行

窪巽

日

本

分

析

東京都品川区西五反田lT目26番2号

化

学

会

五反田サンノ、イツ304号

進歩旛説

繊

超臨界流体クロマトグラフィー

前

田

恒

昭

保

母

敏

行

が実用化ないしは実用可能になりつつあり，定性，定量
1

は

じ

め

に

の両面で利用価値が高くなっている。

超臨界流体クロマトグラフィー（supercriticalfluid

本稿はJICSTによる1984．01から1987．12までの検索

hromatography，以下SFC）は，1962年Klesperら1）にを行い，選択入手した文献を中心とし，更にそれ以前のよる創始までさかのぼることができる。その後の発展は関連文献と1987年末までに入手し得た文献を基に，主主として装置的な問題により発展が遅れていたということして装置的な進歩をまとめたものである。

とができよう。

なお，SFCに関する総説にはPeaden e㍉一，石井ら，），

SFCが盛んに研究されるようになったのは高速液体

Gere5），Fjeldst討ら6），ChesterT），Leeら8），Greibrokkら9）．

クロマトグラフィー（HPLC）の進歩と関係がある。すその他のものがある。また，1986年のAnal．Chem．では

なわち，臨界圧力以上に移動相を加圧するためのポンプ

FundamentalReviewsのgaschromatographyのところでと耐圧セルをもった紫外吸収検出器（UV検出器）が入扱われている。

手できるようになったこと，また，カラムには，シリカ

2ゲルや化学結合相をもった充てん剤を詰めたHPLC用のSFCの理論カラムがそのまま利用できるようになったことが挙げらSFCではccあるいはLCと比べてより複雑な分離条れる。一方，温度を臨界点以上に加熱するにはガスクロ件が設定できる。すなわち，固定相，移動相の種類と組

マトグラフィー（GC）用の恒温楢が利用できる。

成，分離温度のほかに，分離圧力（移動相密度）によっ

そこで1980年代初頭には，二酸化炭素あるいはヘキても分離の様子が変わってくる。そこで，これら因子がサンを移動相とし，充てんカラムとUV検出器を組み合保持値に与える効果についての検討が数多くなされていわせたものがよく使われた。HPLCをSFCへ改造するる。また，VanWasenら母によるSFCの物理化学的原ことはUV検出器のセルの窓材（石英）を厚くし，カラ

理と応用についての総説も参考になる。Peadenら川は

ム出口圧力を高めるために，バックプレッシャーバルブ

キャピラリーカラムSFCでの圧力効果，口径，圧力プを付け，カラムを恒温楢に入れて加熱できるようにする

ログラム，試料導入，検出などについての理論的処理をことで実現できる。

行っている。Chesterら12一はキャビデ）−カラムSFCにおいてGC的分離とLC的分離の両特性があることを本誌でSFCが本格的に取り上げられたのは1985年の藤田による解説2）が最初である。そこではSFCの基本

10gk

的装置，分離条件，応用例などが詳しく解説されている。

Wilschら13）11）は移動相密度の効果を理論的に解析し，とl／Tの関係から熱力学的解析により示した。

SFCの特徴は移動相の大きな溶解力，早い分離にあ

保持値の計算が可能なことを示した。更に，Sehoen一り，熱不安定物質，高分子量物質の分析に有効であるこmakersら15）16）は充てんカラムにおける圧力，密度言昆とである。最近では水素炎イオン化検出器（FID），質度プロフィルの同時計算式をカラムの多数点での熱バラ量分析計（MS）．あるいは赤外吸収検出器（IR）の利用

ンス式を解くことにより導いている。

一方，神野ら17）は，多環芳香族炭化水素に関する既SupercrlticalFluidChromatography．

TsuneakiMAEDA

雷気化学計器㈱存の保持データから未知多環芳香族炭化水素の保持値をToshlyukiHoBO

東京都立大学工学部

推定する手法について検討を行い，良い実験結果を得て

332

（74）

ぶんせき19885

性であるために，特にHPLC用のシリカゲルをベースと

表1超臨界流体の物性8）

する充てん剤を用いたSFCで極性成分を溶離する際に磐（む（も（品は充てん剤の吸着性が現れる。そこで極性のある物質を
9

6

0

●
4

0

9

2

4

0

0

4

5

2

4

0

ン，アセトニトリル，六フッ化硫黄などについて検討し，保持値，選択性あるいはピーク形への効果を報告してい

0

9

−

1

0

4

・

0

7

4 U
． 0

2

1

0

1

0

I

イヤー系について検討し，残存シラノール量の効果やモ

2

−

4

る。樋口ら24），Mourierら25）も種々の固定相−モディファ

0

4

− − −

8

1

1

一 ヽ ︶

I

8

6
l

ディファイヤーの種類と濃度の効果を報告している。

2
5

0

6

9

4

9

1

7
4

1
5
り ん 一

0

0
7
1 1 −

0

6

5

l

0
0

0

− i b
〃 l

︹

3

1

I

●

3

4

0

2

0
0

0

4 0

0

3

I

0

J

3

︹

に

6

l

0
0

2

5

3

0

3

0

4 0
− i 0

ヤーとしてメタノール，エタノール．テトラとドロフラ

1

2

3

3

O

5
0

− L J

4

1

0

0

2

5

1

2

1

0

o

5

﹇ l

r

ら22）23）は二酸化炭素を移動相とする場合のモディファイ

9

I

r

7

3

l

〃

2 −
9

0

1 − −
5
6

1 ▲
c U
3
3
3

0

0
0

︵ノー

的棚胆塙塙恥Xe00CH

モディファイヤーとして添加する必要が生じる。Levy（debyes）

T言臨界温度，P言臨界圧力，p言臨界点での密度，p。00：

Blilieら26）27）をはじめモディファイヤー濃度を変化させ400気圧，換鋭温度1．03での密度るグラジュント分離法の検討例は多数ある。
一方，キャピラリーカラムでは溶融シリカ表面の吸着いる。

性が小さいため，検討例は少ない。Wrightら28）は二酸

3化炭素への水やメタノール添加がフェノール，肝トリ

移動相と分散条件

ヤコンタンその他の成分の保持値へ及ぼす効果について検討し，充てんカラムと違ってほとんど効果のないこと

前述のように，SFCではGCあるいはLCと比べてより複雑な分離条件が設定できる。最近では各因子を単独を報告している。これに対し，Fieldsら29）も二酸化炭素に，あるいは組み合わせて複数を変化させるゲラジュン

への2−プロパノール，ジクロロメタン，アセトニトリ

ト法がマイクロコンピューターとの結合で容易に行える

ルの添加効果について検討し，保持値の減少と選択性にようになってきた。分離の難しい試料の取り扱いに効果

対する効果を報告している。

的である。Schmitzら問は最近グラジュント法について
4

総説を書いている。
さて，移動相の選択は分離ばかりでなく，検出にも関

カ

4・l

ラ

ム

充てんカラム

HPLC用の充てん剤が利用可能である。Gereら30）は係してくるため重要である。SFCで現在最も多く利用されている移動相は二酸化炭素と1年ペンタンであろう。

10，5，及び3LtmのODSカラム（4．6mmXl0−25cm）

両者とも無極性移動相である。前者はいろいろな検出器について移動相密度とlogbと組み合わせて利用できるところからよく使われてい検討し，粒子が細かいほど分離効率が向上することを示る。

した。Schwarts31）は，短い充てんカラムが比較的やさ

このほかの移動相としてはプロパン，ブタンなどの炭の関係を32−100℃の間でしい分離の場合には最適であることを他のカラムとの比較から結論している。

化水素，一酸化二窒素，アンモニア，フロン．六フッ化硫黄，ジエチルエーテルなども使われている。Kuei

特異な充てん剤として，Ecknlgら32）はモレキュラー

ら19）はキャピラリーカラムでのアンモニアの利用を検シープ5Aを使いアイコサンまでのパラフィン類を20−討し，極性化合物の分離に有効であること，n一才クチ

200℃，20MPaまでのプログラミングにより分離してルまたは竹−ノニルポリシロキサン固定相が安定に組みいる。また，Macaudiereら33）はP−シクロデキストリン

合わせて使えることを示した。アンモニアは最も極性が結合シリカゲルを合成し，これを充てんしたカラムによ

強い移動相である。一方，一酸化二窒素は二酸化炭素より光学活性アミド類やホスフィンオキシド類を，り少し極性が強い。Sehwartsら20）は六フッ化硫黄をマMourierら25）31），Haraら35，36）もシリカゲルに光学活性ア

イクロボアカラムの移動相として使い，ガソリン成分のミノ酸誘導体を化学結合した充てん剤を利用し，アミノ

グループ分離を行い，FID検出ができることを示した。

酸その他の光学分割を行っている。

Novotnyら21）は教程の移動相を比較検討し，IR検出器を使う場合，キセノンの有効なことを報告している。表4・2

lには一般に使える移動相に関する特性を示した。

充てんカラムを他の検出器，例えばFIDや質量分析

前述のように，二酸化炭素とn−ペンタンともに無極
ぶんせき1988

5

キャピラリーカラム

計とつなごうとするとき，扱いにくいところは出口流量
（75）

333

表2

が大きいことである。そこでGCでは一般的であるが．

カラムと検出器の組み合わせ

ラム（fusedsilicacapillarycolumn，FSCC）で，GC用

（80報）

3

6

1

に J

MS

4 −

ポリシロキサン系固定相液体を表面に化学結合した

o I

FID

（87報）
9

8

4

UV

よりも内径の小さな100匹m以下のものが利用される。

キャピラリーカラム報

充てんカラム報

HPLCではまだ実用的でない溶融シリカキャピラリーカ

6であるため圧力ドロップも小さく，高い理論段数のもの

O r 一

FLD
TID

q I

IR

た溶解力の大きい超臨界流体によっても流出せず 中空

8

FSCCはシラノール基が少ないため吸着性も少なく，ま1FPDが得られるという好ましい性質をもっている。ただし試

光散乱る。現在ではこのFSCCが主流となってきている。Lee

化学発光ら37）によるキャピラリーカラムSFCの現状と将来に関†略号は本文参照

2

IMS

料導入法，高感度，高選択性検出器など多くの問題はあ1

する議論は，これらの点について多くの示唆を与える。

合i）の方法が利用されている。水素炎イオン化検出器，キャピラリーカラムはほとんどすべての場合，溶融シ

質量分析計などの場合はii）が利用されている。

リカキャビラリーチェープの内面にポリシロキサン系固定相液体を化学結合させたものである。Kongら38）は

表2は調査した文献の中で使われている検出器の種類

SE−33，SE−54などを固定化した内径25−100叫mのと例数を，それらが組み合わされて使われているカラム

FSCCの作り方を報告している。これらをGCとSFCにの種類に従って集計したものである。

適用比較し，ccでの分離効率（理論段数）が約5倍良いことを示した。Kueiら39），Ogdenら40）も固定相の固5・l UV検出器

定化法を報告している。SFCでは移動相の溶解性が大

従来のHPLC用UVセルの石英窓の厚さを厚くするこ

きいので固定相の固定化はGCのものより強固にする必とで耐圧性を容易に増すことができるため．充てんカラ

要がある。Novotnyら川は固定相が膨潤することを報告，

ムを使う際に多用されてきた。今日，UV−VISの領域で注意を喚起している。Kongら42）はキャピラリー内面の使用のできる検出器，更にはフォトダイオードアレイ検

不活性化について幾つかの方法を比較検討している。

出器が入手可能である。使用例として，Jinnoら一丁当主ジー

ポリシロキサン以外の固定相としてRokushikaら43剛）

セル排出粒状物質中の多環芳香族炭化水素の同定にフォは液晶を固定相液体として使い，多環芳香族炭化水素のトダイオードアレイ検出器を活用している。
一方，キャピラリーカラムを利用する際にはよりセル分離に効果があることを示した。
キャビラリーチューブの中にHPLC用小粒径充てん剤

容積の小さいものが必要となる。最近，溶融シリカチューを充てんしたマイクロパックドカラムの利用もHirata

ブを利用したセルを使ったオンカラム検出が容易に行え

ら非的6），Takeuchiら47日こより報告されている。Hirata

るようになってきた。

ら45）は最高分子量が7000を超えるポリスチレンオリゴ
マーを10時mのシリカゲル充てんマイクロパックドカラ

5・2 水素炎イオン化検出器（FiD）

ム（0．2mmX58cm，理論段数8000段）を使って良好FIDは有機化合物一般に対し検出感度が高く，検量線の直線領域も広いため，利用価値が高い。SFCでは熱に分離している。
なお，FSCCの完成には固定相の安定性の確保，流量

不安定な物質や高沸点物質が扱われるが それらを水素制御法，試料の定置的導入法などの確立が不可欠である。

炎中に適度な流量で凝縮，圃化することなく送り込めることが重要となる。そのため，カラムとFIDとを結ぶ

5

検

出

器

ためのインターフェースとして，炎へ入る直前に圧力を超臨界流体を用いて分離した後検出器に導く方法とし急降下させ，移動相ごと噴出させるための機構（レストて，i）超臨界流体としたままで導く言i）検出器の直前

リグクー，reStrictor）の研究が必要である。Guthrle

まで超臨界状態にしておく，iii）カラムを出たら液体状ら48）は内径50匹m，外径375匹鳳の溶融シリカチューブ

態にする，の3通りが考えられる。i），ii）が主に使わの先端を焼き丸めた後，先端から平らに紙やすりで削っれているが，セルの耐圧性が悪い場合にはiii）も考慮て約］申mの穴をあけたレストリクダーを開発し，成果されねばならない。通常，UVあるいはIR検出器の場を挙げている。また，Leeら3年ま内径25−50時mの溶融

ガイ

（76）

ぶんせき19885

シリカチューブの先端に多孔質焼結層を詰めたレストリ（a〉インターフェース

グダーを開発，利用している。Chesterら49）￣51）はロボッ

トを用いてレストリクダーを作り，ポリダ）セロールエ
ステルなどの分析に利用している。Ballyが2）はテー
パーの付いたレストリククーと一定径をもつレストリグ

クーについて理論と実際の両面から検討し，テーパーの付いたもののほうが優れていると報告している。まな
Smithら53）はレストリクダーから移動相が噴出膨張する過程を観察し，温度調節の重要性を指摘している。移動相温度が臨界温度（T。）を超えると生成する液滴が0．2
匹m以下となり，換算温度（T／T。）が1．3以上になると無視できる大きさになることを明らかにしている。

なお．言うまでもないが，FIDに応答する移動相の使用はできない。水，ギ酸をモディファイヤーとして使った例も報告されている2胆）が，二酸化炭素がモディファ

イヤーなしで利用されている例が多い。
CIイオン化室

一方，前述したSchwartsら20）は耐食性があるFIDが用慧できればSF6が利用できることを，またLundanes

世運 剪 エ ー素量ミミら55）は石油のグループ分離に関し．C02とN20の比較をし，N20を使った場合バックグラウンドがC02より3けた大きいことを報告している。

ジ

レストりクター保護管善書善書善書善書、
膨強談10−50Torr

CIリベラ一箪硬

5・3 質量分析計（MS）

GC−MSに見るように，MSとの結合も要求が強い。

多くの研究実施例が報告されている。FIDの場合と同様．
レストリグクーの使用が必要となる。まだ

図1

MS

へ

の

接

続

例的

通常，化学

イオン化法によるスペクトルがとられる。これはEl法蕾を試みているが，加熱温度を高めることが必須のようではクラスターイオンを生じやすいからである。

である。
一方．Berryら62）は移動ベルト式HPLC−MS用イン

SFC−MSではSmithら561￣58）の多くの研究報告がある。

最近，図1に示すようなイオン源のリペラー電極の後ろ

ターフェースを利用し，キサンナン，スルホンアミド，

をメカニカルポンプ吸引する方法を開発し，ガス流量がステロイドなどをEI法及びCI法で検出している。質量高められ．バックグラウンド，イオン化効率，感度の改分析計としては4電極質量分析計の利用が多いが，善ができたことを報告している。例えば

FT−MSの使用例6輝iもある。

ピロリジンアルカロイドを1−3ngの検出下限で測定している。

なお，メタノールを10％C02に添加した移動相を

Matsumotoら59）はLC−MS用に開発された真空噴霧イ

使ってアルカロイドのSFC−MS分析をしている例60，もンターフェースを利用し，ヘキサンーエタノール系移動

あるが，MS検出におけるモディファイヤーの効果につ柏，ODS−Q3（30−50時m）充てんマイクロパックドカラ

いて更に検討がなされる必要があろう。
SFC−MSの総説にはWrightら65）のものが参考にな

ム（0．5mmX70cm）を260−280℃で使って分離した

スチレンオリゴマーなど幾つかの試料の検出に利用して

る。

いる。
まだ

5・4 赤外線吸収検出器（lR）

Crowtherら60）は種々の充てんカラムとMSをIR検出器についてはその測定手法を2種類に分ける

組み合わせてコデイン，カフェインなどの数十〜数百ことができる。

pg領域での検出を行っている。

第1の方法は，UVセルの場合と同様，耐圧性の窓を

Zauggら61）はクラスターイオンによる感度の低下，CI

もったフローセルを使う方法である。第2の方法は，とEIの混じったスペクトルを与えるとされるEI法の改ぶんせき1988

5

（77）

335

KClあるいはKBrのような赤外透明物質をカラム出口

メタノール（95：5）とともに溶出する成分を吹きつけで移動させながら移動相を吹きつけて溶出成分を採取て輔集後拡散反射法でIR吸収測定にかけ，クロマトグ

し，TLCにおいてデンシトメーターでクロマトグラム

ラムを得ている。キノン類に適用し，UV検出法と比較を得るようにIR吸収を測定，クロマトグラムあるいはしている。分離度が少し落ちるがS／Nはむしろ優れてスペクトルを得る方法である。どちらの方法にも大きないた。

問題点がある。前者では移動相が測定波長において吸収

Jinnoら73）はバッファーメモリ法と呼ぶ手法をスチレ

帯をもっているためにセルの光臨長を短くしなければな

ンオリゴマ一，メチルフェニルポリシロキサンの検出にらず，感度に問題を生ずることである。後者では移動相適用している。マイクロパックドカラムからn−ヘキサの揮発性が試料成分のそれよりずっと大きくなければな

ンーエタノール（9：l）とともに溶出した成分をKBr結らないこと，クロマトグラムがリアルタイムで得にくい晶板の上に約1mmの幅で析出させ，IR測定する方法でことである。

ある。スペクトル，クロマトグラムともに繰り返し測定

5・4・1フローセル方式

可能という特徴がある。

Shaferら66）はSFCの検出器として最初にFT−lRを適用した。C02を移動相としPentonyら74）75日まZnSe板を使っている。微小領域にて利用している。彼らはC02の赤外透過性について圧付着したngレベルの多環芳香族炭化水素，キノンなど

力との関係から調べ報告している。C02は667cm￣1，を検出している。

2350cm￣1付近，3650cm￣1付近に強い吸収を，またなお．SFC−IRに関してはJinnoによる総説Tb一に詳しい。

1200−1400cm￣lの間にFermi共鳴による吸収をもっている。CaF2窓をもった光路長1cmのフローセルを使い，

5・5 蛍光検出器（FLD）

アニソール，アセトフェノン，ニトロベンゼンについて−高感度，選択的検出器として発展，利用されつつある

3唯あればS／Nの良いスペクトルがとれるとしている。
Hughesら67）もC02のIR透過性についてその圧力依存検出器にFLDがある。UVオンカラム検出器に見た測性を調べ，低圧のほうが透過性が高いことを報告してい定系について少しの変更で蛍光検出が可能である。

る。Hughesらは後述するように，窓材としてZnSeを使

Fjeldstedら7年ま走査型蛍光検出器の，またGluckmanい，芳香族カルポニルの検出下限として500ng以下とら78）はフォトダイオードアレイ利用検出器の試作をし報告している。Jordanら68）は移動相としてフロン23とている。

C02とを比較し，フロン23が4000cm￣lから2500cm￣L

で透明であり，COZと相補的に使えることを報告して5・6いる。一万，01esikら21）69，は各種移動相の検討に基づき，以上の検出器のほかに，Westら79）はGC用熱イオン

その赤外透過性からキセノンを移動相として使うことを化検出器（TID）に内径5umのレストリグクーを介し勧めている。1mgの2，6−teγトプチルフェノールを検出てキャピラリーカラムをつなぎ20pgの♪−ニトロフェその他の検出器している。キセノンは高価であるが，キャピラリーカラ

ノールを検出している。Markidesら期は炎光光度検出

ムの場合その消費量はわずかであることから，今後一般器（FPD）をSFCの特性に合わせて改良した2段フレー的に利用されることが予想される。

ム型とし，C02を移動相とした場合のパラチオンの検前述の01esikら21）69，は窓材にGeを，Jordanら68）は出下限25ng（Smode）及び0．5ng（Pmode）を得てい

ZnSeを使っているが，これより前Hughesら6年ま窓材る。Carraudら8叫ま充てんカラムにつないだレストリク

としてGaAs，As2S3，ZnSe，ZnSについて検討し，強度，ダーから移動相を噴霧，蒸発させる光散乱検出器を利用

赤外透過性，入手しやすさなどの観点からZnSeの利用

し，各種化合物を数十ngの感度で検出している。これを勧めている。JohnsonらTO）はZnSe窓を使用する高圧らのほかイオン移動度検出器82）83），化学発光検出器問な

光パイプフローセルを製作し，各種化合物（270昨以上）

どの利用が検討されている。なお，SFC用検出器に関の定性に充分利用できるスペクトルを得ている。

してはNovotnyによる総説85）がある。

5・4・2

溶媒除去方式LC−IRにおいて使われてい6る手法であるが，これをSFCに最初に導入したのは

ポ

ン

プ

Shaferら7°である。彼らはその後改良発展させ∵2），ガラ

移動相の送液にはHPLC用のポンプが一般に用いられ

スの上にKCl粉を敷き（4mmX2mmX25cm），これている。SFCではC02のような液化ガスを安定に供給を一定速度で動かし，そこへレストリクダーからCO2−

し，圧力（密度）を制御するためにポンプには特別な注

336

（78）

ぶんせき19885恵が必要である。プランジャーポンプを用いる場合，加圧時の気化を防ぐため，ポンプヘッドの冷却（0℃以下）

シIIンジ ポンプ 劍5h8ｨ985r 7ﾈ987bが必要であるが，Greibrokkら86）はチェック弁の追加と冷却でピークの再現性，保持の再現性が増すと報告している。更に，シリンジポンプとの比較を行い，FIDのノ
恒温槽 剳f

イズレベルにより送液の安定性を調べた。その結果，キャ

ﾆ6

ﾘ(孰

8ﾘ(

5H92

プルパルプ

ピラリーカラムに適する微小流量（100両／min以下）ではシリンジポンプが優れているが，ポンプへの充てん時にピストンを冷却しなければならないこと，充てんに時
パイトン 0リン ステ

間がかかることなどから充てんカラム用の送液はプラン
ジャーポンプでも充分であると結論している。
Porterら8丁目よシリンジポンプにC02を充てんする方法としてヘリウムで加圧して充てんする方法と，ピスト／レス （l 俎ﾉ

ｸ6

484

8ｲ

ﾖﾈ

｢

劍

ﾈ4ﾈ82

ン部を冷却して充てんする方法を比較し，ヘリウムがヒラリーカラム

C02とともに送られると保持の再現性が悪くなるので
図2

冷却して充てんする方法が良いと報告している。

超臨界状態での試料導入法の一例89）

このほかに，Parienteら籾はコンピューター制御の空気圧増幅式のポンプをキャピラリーカラム用の送液に用うが再現性が良いことを明らかにしている。

い．シリンジポンプより良い性能を得ている。このポン

さて，溶液として導入する場合，試料が室温で溶媒に

プは走流量送液を目的として作られたHPLC用ポンプに溶けることが必要である。しかし，一般的に趨臨界流体

対し，走圧力送液に向いておりSFCに適するとのことの溶解性は室温における溶媒のそれよりずっと大きい。

である。

そこで前記Jacksonら89、の手法やGmuerら90〉91，，あるい

7は充てんカラムを使っているがSkeltonら921や斎藤ら93）

試料の導入法の手法が抽出効果も含まれて有効となる。

充てんカラムを使う場合にはHPLC用の試料導入器が8

そのまま流用できることから，あまり問題はない。ただ

応

用し，試料を溶媒に溶かして導入することが多いが，溶媒

従来の充てんカラム，UV検出器を使うSFCに加え．

の選択に注意しないと分離に影響が出ることが考えられ

昨年より我が国でもキャピラリーカラム用の装置が市販る。

されるようになった。これらの装置を利用しての分析例
一方，キャピラリーカラムの場合には，スプi）ットあはしだいに増えている。Schwarts31）はSFCの応周分野

るいはスプリ・ソトレス導入法がとられる。通常，60−を，i）工業分野言i）生化学分野言ii）化石燃料のタイ

200nlのサンプルループをもった高圧バルブを使い言容プ分析の三つに分けているが，実際に対象とされた成分

煤に溶かした試料を導入する。しかし，75nl以上を導は多岐にわたる。詳しくはWhiteら9両の総説その他を入するときはスプリットする必要があると報告されてい参照されたい。
マルチデイメンショナルクロマトグラフィーあるいはる3㌔現在60nlの内容積をもったものは人手可能である。

カラムスイッチング法と呼ばれる方法も試みられていスプリット法はスプリット比とピーク面積に直接関係る。Christensen95）はNH2カラムとODSカラムの2本のがないこと，スプリット比が圧力の影響を受けることな

充てんカラムを組み合わせ，CO2移動相を使ってコーどが知られている。Jacksonら恥は図2に示すような試

ルタール成分の細かな分離に適用している。Levyら96−

料導入系を作り，耐圧サンプルバイアル中で超臨界ペン

はSFCとGCを組み合わせ炭化水素の良好な分離を得

タンにピレンを溶解した後バルブ糸目レープ容積0．2両ている。
一方，SFCを分収用に使った例として，Campbellら97），

からキャピラリーカラムへ導入する方法を検討している。スプリット比を変えて6回導入したときの標準偏差

Nishiokaら98）の多環芳香族化合物への適用例がある。

を求め，ジクロロメタン溶液として導入した場合の結果と比較し，超臨界流体に溶かしてスプリット導入したほぶんせき1988

5

（79）

337

26）A．し．Blilie．T．Greibrokk：AnaL Chem．．57．2239

9

ま

と

め

（1985）．
27）A．し．Blilie．T．Greibrokk：）．ChmatOgr‥

以上，80年代に入ってから目覚ましく発展をしてい349，317（1985）．

るSFCの様子を見てきたが．今後，分析用としてはキャ

28）B．W．Wright．R．D．Smith：1．Chnmah2gγ〟，355、367

ピラリーカラムあるいはマイクロパックドカラムの利用（1986）．

29）S．M．Fields．K．E．Markides，M．し．Lee：）．Chma−

がますます増えるものと考えられる。それに伴い，試料

togγ．，406．223（1987）．

の導入法，固定相，検出法をはじめとする幾つかの問題

30）D．R．Gere．R．Board．D．McManigill：Anat．Chen．，54．

点の解決が望まれる。一方，分取用としてあるいはオン

736（1982）．

ラインプロセス分析用としても有効に利用されることが

31）H．E．Schwarts：LC一cc．5，14（1987）．
32）W．Ecknig．H−J．PoIster：Sep，Scl．Techno上期待される。

21．139（1986）．
33）P．Macaudiere．M．Caude．R．Rosset．A．Tambute：）．
文C初動的OtOgr．，405．135（1987）．

献l）B．Klesper，A．H．Corwin．D．A．Turner：）．Org．

34）p．A．Mourler，B．Eliot．M．H．Caude，R．H．Rosset．A．

C庇肋．．27，700（1962）．

G．Tambute：AnaL Che桝．，57．2819（1985）．

2）藤田一組：ぶんせき，1985，847．

35）S．Hara，A．Dobashl．T．Hondo．M．Saito．M．Senda：

3）P．A．Peaden．M．し．Lee：！．Liq．Chromatogγ．，5．179］IRC CC，）．Itigh Reso初．CllIma10gγ．CIemmatogr．Com一m聞肋．．9，249（1986）．

（1982）．

4）竹内豊美，石井大道：

高分解能クロマトグラフィー動，化36）S．Hara．A．Dobashl、K．Kinoshita．T．Hondo，Nt．SaltO、学の領域増刊138号，p．59（1983）．

M．Senda：1．Chromatogγ〟．371、153（1986）．

5）D．R．Gere：Science（Washington．D．C．），222，253（1983）．

37）M．し．Lee、K．B．Markides：HRC CC．）．郁gh Resotut．

6）J．C．FIeldsted，M．し．Lee：Anat．Chem．．56．619（1984）．

Chmnatogγ．Chγ捌010gr．αmm肋．，9，652（1986）．

7）T．し．Chester：）．ChlmnEogγ．Sci．，241226（1986）．

38）R．C．Kong；S．M．Fields，W．P．Jackson，M．し．Lee：）．

8）M．し．Lee，K．B．Markldes：Science（Washington．D．C．），

Chlm的αめ〝．．289．105（1984）．

235、1342（1987）．

39）J．C．Kuei．B．J．Tarbet．W．P．Jackson．J．S．Bradshaw、
K．E．MarkIdes，M．し．Lee：ChromatoGraphea、20、25

9）T．Greibrokk，B．B．Berg、A．し．Blilie，J．Doeh上A．Far−

brot，B．Lundanes：）．Chma的γ‥394．429（1987）．

（1985）．

40）M．W．Ogden，H．M．McNalr：HRCCC．）．mgIIReso初．

10）U．vanWasen，1．Swald．G．M．Schnelder：Angeu′．Chem．

CI〝Oma府7．Chnmat的γ．Com肋

Int．Ed．Engl．，19，575（1980）．

11）p．A．Peaden，M．し．Lee：）．ChIOmatOgr．，259．1（1983）．

41）M．Novotny．P．David：HRCCC．）．HighResotut．Chroma−12）T．し．Chester．D．P．Innis：HRC CC．）．High ResoLul．

10gr．Ch〝mOf唱γ．Com関脇‥9．647（1986主42）R，C．Kong．C．し．Woo陸y．S．M．Fields．M．し．Lee：

ChTmatOgγ．ChronIatQgr．Co〝nlun．．8．561（1985）．

C初maIog舶ゆh宛．18．362（1984）．

13）A．Wilseh．G．M．Schneider：）．ChrolnatOgγ〟．357．239

43）S．Rokushika，K．P．Nalkwad主（1986）．
14）K．H．Linnemann，A．Wllsch、G．M．Schneider：）．Chro・

A．し．Jadhav．H．

Hatano：HRCCC．）．HighResoluL ChnmatOgγ．Chrtmalogr．

mOt呼γ〟．369．39（1986）．

Cの競mm．．8，480（1985）．

15）P．J．Schoenmakers：！．Ch／0mWgγ．．315．1（1984）．

44）S．Rokushika．K．P．Naikwadi、A．し．Jadhalr．H．

16）p．B．Schoenmakers，P．B．Rothfusz．F．C．C．J．G．

Hatano：Chmaiog舶h偽0，22．209〈1986）．

Verhoeven：）．ChronaLogr‥395．91（1987）．

45）Y．Hirata．F．Nakata：）．ChromaLogγ‥295，31511984）．

17）K．JinnoI T．HoshlnO．T．Hondo．M．Saito．M．Senda：

46）Y．HIrata．F．Nakata．M．Kawasakl：HRCCC．）．HighRe−

Al的l．Chem．．58．2696（1986）．

so初．Ch肋atOgγ．ChnmatOgγ．Cのれmun．，9．633（1986）．

18）F．P．SchmltZ．E．Klesper：）．ChromatOgr．、388、3（1987）．

47）T．Takeuch主D．lshli．帆SaltO．K．Hlb主）．Chnmatogγ．．

19）J．C．Kue主K．B．Markides、M．し．Lee：HRCCC、）．mgh

295、323（1984）．

Reso短．Ch調耽めgT．Chm肋010gr．Com肋間．，10．257（1987）．

48）E．J．Cuthrie．H．E．Schwartz弓．Chromatogγ．Sa‥24，236（1986）．

20）H．E．Schwarts，R．C．Brownlee号．ChIOmatOgγ．，353，77（1986）．

49）T．し．Chester．D．P．InnlS，G．D．Owens：＾nat．Chem．．

21）S．B．French同1．Novotny：AnaLChem‥58．164（1986）．

57．2243（1985）．

22）J．M．Levy，W．M．Ritchey：tmC cc，1．mgh Resotu信50）T．し．Chester，D．P．lnllis：HRC CC，），mgh ResoluI．

Ch棚α塵γ．Ch青OmatOgγ．Commm．．8．503（1985）．

ChronatQgγ．ChrmaEogγ．Conmun．．9．178（1986主23日．M．Levy，W．M．RltChey：）．ChromEogγ．Sr信‥24．242

51）T，し．Chester，D．P．InnlS：HRC CC．）．H略h Resolut．

（1986）．

C励ma塵γ．Chmね010gγ．Cのnmun．，9．209（1986）．

24）樋口 彰I小林美音．保母敏行．鈴木繁喬，前田恒昭：第52）R．W．Bally，C．A．Cramers：HRCCC．！．High RcsoLut．

48回分析化学討論会講演要旨集，p．251（1987）．

Clmma的γ．ChmmIogγ．Cmmm．．9．626（1986）．

25）P．Mouricr，P．Sassiat，M．Caude、R．Rosset：／．Chroma・

53）R．D．Smith，J．し．Fulton，R．C．Petersen．A．J．Kopr主togγ．，353，61（1986）．

338

仇、8．816（1985）．

va．B．W．Wright：AnaL．Cheln．，58．2057（1986）．

（80）

ぶんせき1988554）E．Lundanes，T．Greibrokk：）．ChronaLogr‥

Lee：！．Chnmaのγ．．279．423（1983）．

349．43978）J．C．Gluckman．D．C．SheLly，M．V．Novotny：Anat．

（1985），

Chem．．57．1546（1985）．

55）B．Lundanes．B．Iversen，T．Grelbrokk：］．Chromatogγ‥79）W．R．West，M．し．Lee：HRCCC．！．mghResoLut，Chro・

366．391（1986）．

natogr．ChrmatQgγ．07mmun．．9，161（1986）．

56）R．D．Smith，H．R．Udseth：AnaL．Chem．．59．13（1987）．
57）H．T．Kalinosk主80）K．E．Markides．B．D．Lee．R．Bolick．M．し．Lee：AnaL．

H．R．Udeseth，E．K．Chess．R．D．

Smith：1．Chma嬢γ．．394，3（1987）．

Chem．，58，740（1986）．
81）P．Carraud．D．Thiebaut．M．Caude，R．Rosset．M．Lafos・

58）G．Holzer，し．H．Zalkow．C．F．Asibal：）．Chronntogr．．

400，317（1987）．

se，M．Dreux：J．Chmnatogr．Sci．．25，395（1987）．

59）K．Matsumoto．S．Tsuge，Y．Hirata：AuL Sci‥

82）R．し．Eatherton．M．A．Morrissey．W．F．Siems，H．H．

2，3

Hill，Jr∴HRC CC，）．High Reso柄．C励nnatQgγ．Ch筋a・（1986）．
60）J．B．Crowther．J．D．Henion：Anal．Chem‥

如gr．Comn棚m上，9，154（1986）．

57．271183）S．Rokushika，H．Hatano．H．H．Hill，Jr∴Ana上Chen‥（1985）．
61）S．D．Zaugg，S．J．Deluca．G．U．Holzer，K〟

59，8（1987）．

L84）K．Grolimund．W．P．Jackson，M．Joppich．W．Nus・

Voorhees：HRC CC，）．High Reso柄．Chrtmatogγ．ChlOna一

Shaum，K〟婦7．α肋棚肋．，10．100（1987）．

Anton，H．M．Widner：Proceedings of the

SeVenthinternat10nal symposium on capillary chromatog−

62）A．J．Berry，D．B．Cames．J．R．Perkins：）．Chrvmatogr．，

363，147は986）．

raphy．p．625（1986）．

85）M．Novotny：HRCCC、）．mghReso撮．ChroInatOgr．Chro・

63）B．D．Lee，J．D．Henion．R．B．Cody．J．A．Kinsinger：

Al初．Chem．．59．1309（1987）．

mofogγ．Cの棚的机，9，137（1986）．
86）T．GreIbrokk．A．し．BⅢC．E．J．Johansen，E．

64）D．A．LatIde、Jr‥S．し．Pentoney．Jr．．P．R．GI・iffiths．

Lundanes：AnaL．Chem．，56，2681（1984）．

C．し．W撮ins：Amu．CI柁n‥59．2283（1987）．

87）N．L．Porter．B．E．Richter．D．J．Bornhop，D．W．

65）B．W．Wrlght．H．T．Kalinoskl，H．R．Udseth．R．D．
Smith：HRC CC．）．High Reso初．ChmnatOgr．Chmaaogγ．

Later，F．H．Beyerlein：HRCCC．）．mghResoLut．Chroma−

Cmmu押．，9．145（1986）．

to灯．ChlmatOgγ．Commu鮎，10，477（1987）．
88）C．し．Pariente，S．し．Pentoney．Jr．，P．R．Griffiths．K．

66）K．H．Shafer．P．R．Griffiths：高調l．Chem．．55．1939（1983）．

H．Shafer：Anal．Chem．，59．808は987）．
89）W．p．Jackson．K．B．Markides．M．し．Lee：HRCCC．）．

67）M．E．Hughes、J．し．Fasching：）．Chnmatogγ．Sce‥23．

斑gh Reso初．Chl切離Ogr．ChrmatOgr．Com外地的．，9，213

535（1985）．

（1986）．

68日．Wr．Jordan，し．T．Taylor弓．Chronatogγ．Sci．．24．82

90）W．Gmuer．J．0．Bosset，B．Plattner：）．Ch雄matOgγ．、（1986）．

388．143（1987）．

69）S．V．01esik．S．B．French．M．Novotny言ChrolnatOg一91）W．Gmuer．J．0．Bosset、E．Plattner：）．Chronatogγ．、

触7㍍0，18，489（1984）．

388，335（1987）．

70）C．C．Johnson．J．W．Jordan．し．T．TaylQrl D．W．

92）R．J．Skelton，Jr‥C．C．Johnson．し．T．Taylor：Chl働a−Vidrine：Chnmatographia，20．717（1985）．

t昭胸勅的，21，3（1986）．

71）K．H．Shafer，S．し．Pentony．Jr．．P．R．Gritfiths：93）K．SugiyamalM．Saito，T．Hondo．M．Senda：）．Chl例的−HRC CC．）．mgh Resotui．ChwnaEogr．Chronatogr、Co競い

togr‥332．107（1985㌦

肌請出，7，707（1984）．

94）C．M．White、R．K．Houck：HRC CC，）．mgh RcsoLuE．

72）K．H．Shafer．S．し．Pentoney，Jr．，P．R．Griffiths：AnaL．

Chem．，躯，58（1986）．

C mma約gγ．ChnmOtQgr．cm肋間筋‥9、4（1986）．
95）R．G．Christensen：HRCCC、）．H略hResotut．ChTOnatOgr．

73）C．Funmoto，Y．Hirata、K．Jinno：）．Chnmahgγ．，332，47

C励mOtOgγ．Cの防州朋励‥8、824（1985）．

（1985）．

96）J，M．Levy，J．P．Guzowsk主W．B．Huhak：HRCCC，）．

74）S，し．Pentoney．Jr．，K．H．Shafer．P．R．Grif鉦hs．R．

H好h Reso初．C柄の面ogγ．Cnm鳩atOgγ．Comm調‥10．337

Fuoco：HRC CC．1．mgh ResoLul．Chmatogγ．ChrontatOgγ．

（1987），

Cmmu73．、9、168（1986）．

97）R．M．CampbelL M．し．Lee：Anal．Chent‥75）S．し．Pentoney．Jr．．K．H．Shafer．P．R．G高fiths弓．

Ckmat0〝．Sc仁24．230（1986）．

98）M．NIShioka，D．G．Whjtlng、R．M．Campben．M．し．

76）K．Jmno：Chronatogゆhia，23，55（1987）．
77）J．C．Fjeldsted−

ぷんせき1988

Lee：Anal．Chen．，58，2251（1986主

B．E．Richter．W．P．Jackson，M．し．

5

58．2247（1986）．

（81）339