課題番号：29指 1011

研究課題名

：HIV・HBV重複感染におけるHBV慢性化と免疫再構築肝炎の新規診断マーカーの開発と臨床的有用性の検証研究主任研究者名 ：由雄祥代
キーワード

国立国際医療研究センター 肝疾患研究部

肝疾患先端治療研究室長：肝臓、炎症、免疫、B 型肝炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、ケモカイン、サイトカイン、Hepatitis B surface antigen 、免疫再構築症候群
研究成果：

本研究は、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)と B 型肝炎ウイルス(HBV)の重複感染者に焦点を当て、予後規定因子である HBV 関連慢性肝疾患の成立と病態進展の機序を解明し、防止のための介入方法を開発すること、ART 開始後に発症する免疫再構築症候群（IRIS）による肝障害の鑑別方法や治療法を開発し有用性を検証することを目的としている。本年度は、1) HIV 陽性 B 型急性肝炎患者（HBs 抗原陰性化症例、慢性化症例）、2) HIVHBV 重複感染者のうち、明らかに免疫再構築肝炎と診断された症例において、経時的・横断的に血清中のケモカイン・サイトカインを検討し、特徴的な所見を見出したので報告する。
1) HIV 慢性化に寄与する分子機構解明
B 型急性肝炎では、ほぼ全症例において HBs 抗原陰性化が得られるが、HIV 感染患者において、B型急性肝炎後の慢性化率は HIV 非感染者の約 6 倍と高く、HIV 感染に伴う免疫異常が B 型肝炎慢性化に寄与すると考えられているが詳細は明らかではない。慢性肝炎患者においては広汎な免疫異常が存在しており、核酸アナログ治療によっても HBs 抗原陰性化を達成することは困難である。これまでに私たちは、HIV 非感染者における B 型急性肝炎患者においては、CXCL9,CXCL10, CXCL11, CXCL13,IL-21 の上昇が認められ、特に CXCL13-IL-21 誘導が HBs 抗原陰性化（非慢性化）に重要であることを見出している。今回、HIV 重複感染者においては、慢性化群で有意に HBV DNA 量高値、ALT 低値、CCL3 低値、CCL20 低値であることを見出した。これにより、HIV 重複感染者 B 型急性肝炎の HBs 抗原陰性化にはケモカイン CCL3/CCL20 の発動が必要である可能性が示唆された。また In vitro の検討において、HIV 単独感染者単球由来マクロファージは、HBV 応答性に CCL3, CCL20 を産生することを確認した。

2) 免疫再構築肝炎（IRIS）発症機序解明と診断マーカーの開発
明らかに免疫再構築肝炎（IRIS）と診断された全７症例において、IRIS では CXCL9, CXCL10, CXCL11,CXCL13 の上昇はないこと、また発症前に有意な低下する因子があることを同定した。今後 IRIS 未発症例も含めて症例数を重ね、本年度のパイロット研究の妥当性を検証する予定である。

Subject No.

：29 指 1011

Title

：Comprehensive analysis of immune responses with HBsAg loss and immune
reconstitution syndrome in patients with HIV/HBV co-infection

Researchers：Sachiyo Yoshio, M.D., Ph.D. Chief, Division of Advanced Therapeutic Research for

Hepatic Diseases, NCGM;
Key word：liver, inflammation, immunity, hepatitis B virus, human immunodeficiency virus,

chemokine, cytokine, hepatitis B surface antigen, immune reconstitution syndrome
Abstract：The purpose of this study is to clarify the mechanism and identify reliablebiomarkers of chronicity following acute hepatitis B and hepatitis B virus (HBV)-related immune
reconstitution syndrome (IRIS) in HIV-infected patients. This year, we longitudinally andcross-sectionally examined multiple chemokines and cytokines in the sera of the HIV-infectedpatients with 1) acute hepatitis B (Chronicity-/+), and 2) apparent HBV-related IRIS.
1) The mechanism of chronicity in acute hepatitis B infection with HIV infection
At primary HBV infection, almost all of the patients attain HBsAg loss, although coinfection withhuman immunodeficiency virus (HIV) is associated with a higher chronicity rate. Immune
dysfunction caused by HIV infection might contribute to chronicity in HBV infection. However, themechanism of development of chronicity after acute HBV infection in HIV-coinfected patients has
not been elucidated. We found that CXCL9, CXCL10, CXCL11, CXCL13, and IL-21 were elevatedat the phase of hepatitis. In particular, the axis of CXCL13-IL-21 was important for HBsAg loss atacute hepatitis in HIV non-infected patients. In this study, we showed the importance of CCL3
and CCL20 in HBsAg loss in acute hepatitis B patients with HIV co-infection. We showed thathigh titer of HBV DNA, low levels of ALT, low levels of serum CCL3 and CCL20 were associatedwith chronicity. In vitro, human monocyte-derived macrophages recovered from HIV-infectedpatients produced substantial amounts of CCL3 and CCL20 in response to HBV.
2) The mechanism and biomarker of HBV-related immune reconstitution syndrome (IRIS)
In all 7 apparent HBV-related IRIS, no elevation of CXCL9, CXCL10, CXCL11, or CXCL13 wasobserved. Factor X was decreased prior to the ALT elevation. Further study is underway toconfirm the feasibility of the factor.

Researchers には、分担研究者を記載する。

1-H29中間報告29指1011

HIV・HBV重複感染におけるHBV慢性化と免疫再構築肝炎の新規診断マーカーの開発と臨床的有用性の検証研究

HIV重複感染B型急性肝炎患者におけるHBs抗原陰性化寄与因子
Pilot study
HBV/HIV co-infection
HBsAg loss +rAHi, resolved AH with HIV infection

HBsAg loss -pAHi, persistent AH with HIV infection

私たちは、HIV非感染者B型急性肝炎患者において、CXCL13, IL-21がHBs抗原陰性化に重要であることを明らかにしている（under revision)。
一方、HIV重複感染者においては、小数例の検討で、慢性化群で有意にHBV DNA量高値、ALT低値、CCL3低値、CCL20低値である可能性を見出した。

2

免疫再構築肝炎（IRIS）発症機序解明と診断マーカーの開発
HIV非感染者同様に、HIV重複感染B型急性肝炎患者では肝炎期に、CXCL9, CXCL10,CXCL11, CXCL13, IL-21することを見出した。

ALT
ALT

B型急性肝炎HIV＋自然排除

B型急性肝炎HIV-自然排除

pg/ml ++CXCL9H u M IG / C X C L 9 (1 4 )
800

600

免疫再構築肝炎
600--

IRISでは、CXCL9, CXCL10, CXCL11, CXCL13の上昇は認めず、発症前にFactor Xが低下することを見出した。

TFV

400

1500

急性肝炎

10400

8200

1000

200

64

4000

136/
279//

128324//548020200022000020800//7/
777060CXCL1022///60/

182//213/5/
60H u IP - 1 0 / C X C L 1 0 (4 8 )0

2 0 0 8 /2 /1 3

2 0 0 7 /9 /2 6

2 0 0 7 /7 /1 8

2 0 0 7 /5 /2 3

2 0 0 7 /4 /4

2 0 0 6 /1 2 /7HBV DNACXCL9,10,11pg/ml

2CXCL9,10,11pg/ml0

2 0 0 6 /8 /2

2 0 0 6 /5 /3 10

700

20500

300
600

3000
200
400

2000
100

200

1000/1

36/29/7/128324800222000000202//7/7/
7700CXCL130220/6/

542//

218600/5/
6Factor X

H u M D C / C C L 2 2 (2 9 )

150

1500

400

H u B C A - 1 / C X C L 1 3 (7 4 )0H u B C A - 1 / C X C L 1 3 (7 4 )

500

40/3/

CXCL13pg/ml

H u B C A - 1 / C X C L 1 3 (7 4 )60

2CXCL13pg/ml

70010300

1000

100

500

5000200
20100

0

731//

921362/

712/4/521/

8/

83

TFV, tenofovir

47/

2/
5/

3

1136/2//
9/

12

83/
7//
54//

2

47002//

00222/
1/

002

18/

00
2

3/
5/

9//
0002

9/

80002

9/

60
9/

002

99/

30//

3

10

52213/
0/

20/

0
2

990
2

1/

21/
20/

1/

62

81/
00/

0
2

111/

02

0

99020001/32//102902/
11/910209/

10//00990研究発表及び特許取得報告について

課題番号：29指1011
研究課題名：HIV・HBV重複感染におけるHBV慢性化と免疫再構築肝炎の新規診断マーカーの開発と臨床的有用性の検証

主任研究者名：由雄

祥代

論文発表
論文タイトル

著者

Hepatitis Action Plan and changing trend
Kanto T andof liver disease in Japan-viral
Yoshio S
hepatitis and NAFLD.

掲載誌掲載号

Euroasian J ofHepato7:61-65
Gastroenterology

年
2017年

学会発表
タイトル
HBs抗原陰性化を規定する免疫因子の検討—HBV単独感染とHBV/HIV重複感染

発表者
由雄

祥代

学会名

場所

日本肝臓学会総会 大阪年月2018年6月

その他発表(雑誌、テレビ、ラジオ等)
タイトル

発表者

発表先

場所

年月日

該当なし

特許取得状況について※出願申請中のものは(発明名称)記載のこと。
登録番号

該当なし

※該当がない項目の欄には「該当なし」と記載のこと。
※主任研究者が班全員分の内容を記載のこと。

特許権者(申請者）
登録日(申請日)（共願は全記載）

出願国