課題番号：重点研究29指2009
研究課題名 ：高度進行大腸癌(腹膜播種・多発肝転移)に対する新規診断・治療法の開発
主任研究者名 ：合田良政
分担研究者名 ：稲垣冬樹（NIH） 浦野泰照（東大） 矢野秀朗（Southampton university hospital）
キーワード：大腸癌、肝転移、腹膜播種、ALPPS 手術、蛍光ナビゲーション

研究成果：① 新規蛍光プローブを利用した術中リアルタイム診断技術開発「新規蛍光プローブを用いた大腸悪性疾患・腹膜疾患の術中リアルタイム診断技術開発に向けた基盤研究」の倫理委員会への申請をおこない承認を得た。現時点で 7 症例から検体(癌部・非癌部)の採取をおこなった。また蛍光プローブライブラリーと臨床検体ライセートでのスクリーニングを行うべく、既に開発済みのプローブの追加合成をおこなって、これを達成した。このライブラリーを活用して、臨床検体ライセートスクリーニングを開始した。癌部・非癌部からセルライセートを調製、蛍光プローブと反応させた際の蛍光強度の変化を定量化した。384 種類の蛍光プローブの中から、特異性・蛍光強度に優れた 10 種類のプローブにまで候補の絞り込みをおこなった。
② Borderline resectable 転移性肝がんに対する手術適応拡大
ヒト臨床検体の解析をおこなうために、「切除組織を用いた肝胆膵悪性疾患の生物学的特性解明研究」の倫理委員会への申請をおこない承認を得た。しかしながら本年度は適格な症例がなかったため、ヒト検体の採取はおこなえていない。動物モデルの解析ではラット ALPPS モデルを作成、対照群として門脈結紮モデルを作成した。
③ 腹膜偽粘液腫・大腸癌腹膜播種に対する正確な播種診断と切除
腹膜偽粘液腫や大腸癌腹膜播種は可能であればより正確に遺残なく切除することが重要である。当院
では大腸癌腹膜播種の評価を CT や PET などの画像評価に加え、診査腹腔鏡で行っていることが特徴であり、従来法より正確な評価が可能である。本研究計画では 5-ALA を用いた診査腹腔鏡、腹膜切除を計画したが、本年度は光源の購入のみにとどまった。2 年度は倫理委員会の申請と承認を経て実際にパイロットデータ取得を行う。

④ 局所高度進展直腸癌に対する積極的外科切除を中心とした集学的治療の確立
骨盤内高度進展癌に対する当院におけるこれまでの治療成績をまとめた。1995 年から 2014 年までに 43 人の局所再発直腸癌に対して切除を行った。27 人が男性、16 人が女性。年齢中央値は 64 歳。前治療が行われたのは 12 例。仙骨合併切除は 10 例に施行。切除断端陽性率は 28％であった。5 年全生存率は 54％、5 年無再発生存率は 29％であった。再発は 26 例（60％）に認め、部位別には局所 11 例、肝 9 例、肺 6 例であった。

Subject No.

：29 指 2009

Title

：Multidisciplinary approach for far advanced colon cancer

Researchers ：Yoshimasa Gohda
Key word：colon cancer, liver metastasis, peritoneal metastasis, fluorescence-guided

Abstract：

There has been cumulative evidence in favour of curative resection for pseudomyxoma peritonei
and liver/peritoneal metastasis from colorectal cancer. Peritoneal Cancer Index (PCI) score isknown to be a strong survival factor, being inversely correlated with the likelihood of achieving
complete cytoreduction. It is crucial to establish an accurate preoperative PCI score to aid patient
selection; however, the currently available imaging, namely CT or PET, has been suboptimal.
We aimed to develop new diagnostic method and treatment. We planned intraoperative real-timediagnosis using new fluorescence-guided probe and 5-aminolevulinic acid for peritoneal or liver
metastasis from colorectal cancer and pseudomyxoma peritonei.
In current year, we went no further than obtaining the approval of research ethics committee,
purchasing a source of fluorescence and narrowing down adequate probe.
In following fiscal year, we are planning to run the diagnosis peritoneal metastasis using
5-aminolevulinic of pseudomyxoma peritonei or colorectal cancer with selected fluorescence-guidedprobe.

Researchers には、分担研究者を記載する。

重点研究29指2009
高度進行大腸癌(腹膜播種・多発肝転移)に対する新規診断・治療法の開発

5-ALAを用いた大腸癌腹膜播種・腹膜偽粘液腫の正確な診断

5-ALAを用いた腹膜偽粘液種に対する腹膜切除と術中腹腔内温熱化学療法
CCスコア：

CC-0 : 全くなし
-1 : 最大径2.5mm未満 →治癒切除
いかに遺残粘液がないように切除-2 : 2.5-25mm
するかが重要-3 : 25mm以上

より確実な切除を新規蛍光プローブを利用した術中リアルタイム診断技術開発
オリジナル蛍光プローブライブラリー

プローブライブラリーの臨床検体・ライセートへの適用による新規疾患特異的バイオマーカー酵素活性の発見

課題番号：29指2009
研究課題名：高度進行大腸癌(腹膜播種・多発肝転移)に対する新規診断・治療法の開発
主任研究者名 ：合田良政
分担研究者名 ：稲垣冬樹
キーワード ：大腸癌、肝転移、腹膜播種、ALPPS 手術、蛍光ナビゲーション
研究成果：① 新規蛍光プローブを利用した術中リアルタイム診断技術開発
近年の化学療法の進歩により高度進行大腸癌の生命予後は改善しつつあるが、いまなお手術治療のみが根治を期待しうる唯一の方法である。質の高い外科的切除(病変に対する過不足ない手術)をおこなうためには癌の部位を正確に把握して、微小な病変も確実に切除することが必要不可欠である。しかしながら、CT・MRI・PET など既存の画像診断技術では手術中にリアルタイムに病変を捉えることは難しく、また検出感度の問題で大きさが数 mm 程度の微小病変を捉えることは困難である。そこで本研究
では、分担研究者の浦野らが開発した蛍光プローブに注目した。この蛍光プローブは光誘起電子移動の原理に基づいて設計されており、ある特定の酵素活性を検出することが可能なプローブである。シグナルの ON/OFF が酵素活性の有無によって制御されるので、従来の Always-on のプローブと比較して、バックグラウンドのノイズが極めて低いのが利点であり、1mm 以下の微小病変を検出することも可能と考えられている。
本年度は「新規蛍光プローブを用いた大腸悪性疾患・腹膜疾患の術中リアルタイム診断技術開発に向けた基盤研究」の倫理委員会への申請をおこない承認を得た。現時点で 7 症例から検体(癌部・非癌部)の採取をおこなった。また蛍光プローブライブラリーと臨床検体ライセートでのスクリーニングを行うべく、既に開発済みのプローブの追加合成をおこなって、これを達成した。このライブラリーを活用して、臨床検体ライセートスクリーニングを開始した。癌部・非癌部からセルライセートを調製、蛍光プローブと反応させた際の蛍光強度の変化を定量化した。384 種類の蛍光プローブの中から、特異性・蛍光強度に優れた 10 種類のプローブにまで候補の絞り込みをおこなった。
② Borderline resectable 転移性肝がんに対する手術適応拡大
大量肝切除後の肝不全を予防するために残肝容積を増大させる処置として門脈塞栓術と呼ばれる方法が広く普及してきたが、増大を待つ間に病勢が進行して切除できなくなる症例が少なからずあるという問題点があった。待機期間中の病勢進行の問題を解決するべく、2012 年になって、ALPPS(AssociatingLiver Partition and Portal vein ligation for Staged hepatectomy)と呼ばれる新たな二期的肝切除法がドイツの施設から報告された。この方法では一期目の手術で門脈結紮と完全肝離断を行い、残肝容積が増大したところで二期的に肝切除を行うが、従来の PVE と比較して残肝の増大速度・増大率が優れており、手術までの待機期間も短いといった利点があった。しかしながら、死亡率が 10％前後と高いうえに胆汁漏・肝不全といった合併症の頻度も高く、安全性については十分な担保が得られていない。急速に肝再生が起こるメカニズムに関しては不明な点が多く、経験的に臨床の場で行なわれているのが現状である。本研究ではヒト臨床検体ならびに動物モデルの解析を通じて、ALPPS/ALPTIPSの肝再生メカニズムを明らかにする。
ヒト臨床検体の解析をおこなうために、「切除組織を用いた肝胆膵悪性疾患の生物学的特性解明研究」の倫理委員会への申請をおこない承認を得た。しかしながら本年度は適格な症例がなかったため、ヒト検体の採取はおこなえていない。動物モデルの解析ではラット ALPPS モデルを作成、対照群として門脈結紮モデルを作成した。術後 3 日目には ALPPS 群において有意に肝肥大の程度が亢進していた。
イメージングサイトメトリーによる解析でも ALPPS モデルにおいて増殖中の細胞が有意に増加していた。その一方で術後肝障害の程度に関しては ALPPS 群と門脈結紮群で差は認められなかった。肝臓の網羅的遺伝子解析をおこなって、ALPPS モデルに特異的な遺伝子群を抽出、解析をおこなっている。

分担研究者の持つオリジナル蛍光プローブライブラリー
ala aspGly Glu
Glu Lys
Lys Tyr
Tyr Leu
Leu ProPro alaasp serser βAla
βAla Sar
Sar -GlyGly
Gly ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○Glu
Glu ○ Dipeptides○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○composedwith non‐Lys
Lys ○○ ○ ○○ of○natural○ ○ ○ ○Dipeptide○ ○amino acids
naturalaminoacids
Tyr
Tyr ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○Leu
Leu ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ProPro ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○Phe
Phe ○ ○ ○ ○ ○ ○○Ala
Ala ○ ○ ○ ○ ○ ○○Arg
Arg ○ ○ ○ ○ ○ ○○21
Trp
Trp ○ ○ ○ ○ ○ ○○SerSer ○ ○ ○ ○ ○ ○○His ○ ○ ○ ○ ○ ○His○
P2-P1-HMRG
ala
ala ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○asp
asp ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○Dipeptides
with non‐natural
ser ○ ○ ○ ○ser○ ○○ ○ ○ ○ ○amino acids
β-Ala ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○β-Ala
SarSar ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○P2P2P1P1Ac AcG
AcG AcE
AcE AcKAcK AcYAcY AcL
AcL AcP
AcP
Ac○ ○ ○ ○ ○ ○ ○○ ○ ○ ○ ○ ○ ○○ ○ ○ ○ ○ ○ ○○ ○ ○ ○ ○ ○ ○○ ○ ○○ with
○ ○ ○Dipeptides○ ○ acetylated○ ○N‐terminus○ ○ ○○ ○ ○ ○ ○ ○ ○○ ○ ○ ○ ○ ○ ○○ ○ ○ ○ ○ ○ ○2○ ○ ○ ○ ○ ○ ○○ ○ ○ ○ ○ ○ ○○ ○ ○ ○ ○ ○ ○One amino acid※ala : D-Ala, asp : D-Asp, ser : D-ser, Sar : Sarcosine

400種以上のペプチダーゼ様加水分解酵素活性のアッセイが可能プローブライブラリーの臨床検体・ライセートへの適用による新規疾患特異的バイオマーカー酵素活性の発見
Novel targets (biomarkers):
screening directly with clinical specimens
Novel Biomarkers(Enzymatic activity)

Clinical specimens

Cultured cells= Diagnostic
probesOmics analyses
Clinical specimens / lysates
これまでに必要なプローブの追加合成を完了し、現在臨床検体ライセー
トを用いたスクリーニングを行っている。

Probe library

Biomarkers

Imaging biomarkers(Enzymes, Receptors, etc.)
Diagnostic probes

課題番号：29指2009
研究課題名：高度進行大腸癌(腹膜播種・多発肝転移)に対する新規診断・治療法の開発主任研究者名 ：合田良政
分担研究者名 ：矢野秀朗
キーワード：大腸癌、肝転移、腹膜播種、ALPPS 手術、蛍光ナビゲーション

研究成果

：

局所高度進展直腸癌に対する積極的外科切除を中心とした集学的治療の確立
仙骨や骨盤壁近傍まで直接浸潤または転移のある局所高度進行直腸癌例においては、外科的切除のみでは断端陽性となる可能性が高く、化学放射線治療などを加えた集学的治療が必要となるが、その治療戦略はいまだ確立していない。化学療法および放射線治療のレジメンについては、今後の臨床試験の成績から判断するべきであり、また、進展度診断のさらなる精度向上が望まれる。
本年度は骨盤内高度進展癌に対する当院におけるこれまでの治療成績をまとめた。1995 年から 2014年までに 43 人の局所再発直腸癌に対して切除を行った。27 人が男性、16 人が女性。年齢中央値は 64歳。前治療が行われたのは 12 例。仙骨合併切除は 10 例に施行。切除断端陽性率は 28％であった。5年全生存率は 54％、5 年無再発生存率は 29％であった。再発は 26 例（60％）に認め、部位別には局所11 例、肝 9 例、肺 6 例であった。
矢野が現在所属する Southampton university hospital では高度進行直腸癌に対して骨盤内臓全摘
は術中放射線照射などを駆使し、集学的治療を行っている。当院での成績を比較しつつ、集学的治療を確立すべく意見交換や可能であれば共同研究を行っていく。

研究発表及び特許取得報告について

課題番号：29指2009

研究課題名：高度進行大腸癌(腹膜播種・多発肝転移)に対する新規診断・治療法の開発
主任研究者名：合田良政

論文発表
論文タイトル

著者

掲載誌

掲載号

年

両葉多発大腸癌肝転移に対するALPTIPS 1st 稲垣冬樹, 阪本 単行本「手術の流pp.90-99
Stage良弘儀」南江堂

2017

両葉多発大腸癌肝転移に対するALPTIPS 2nd 阪本良弘, 稲垣 単行本「手術の流pp.100-106
Stage冬樹儀」南江堂

2017

Diagnostic performance of 18F-FDG PET/CTHotta M,
using point spread function
Minamimoto R,
reconstruction on initial staging ofYano H, Gohda
rectal cancer: a comparison study withY, Shuno Y.
conventional PET/CT and pelvic MRI.

Cancer Imaging

18(1)

2018

Gut67(2)2018

矢野秀朗、合田良政、清松知「Marginally resectable 局所進行大腸癌へ充、竹村信行、 日本外科学雑誌の治療戦略」P2, P3腹膜播種
山田和彦、國土典宏

119(5)

2018

合田良政, 秀野
【腹膜と腹水を究める-新しい考え方と治療 泰隆, 清松知
外科法】 腹膜転移に対する外科治療とHIPEC充, 國土典宏,
矢野秀朗

80(6)

2018

Induction of IFN-λ3 as an additional
effect of nucleotide, not nucleoside,analogs: a new potential target for
hepatitis B virus infection.

Murata K,
Asano M,
Matsumoto A,
Sugiyama M,
Nishida N,
Tanaka E,
Inoue T,
Sakamoto M,
Enomoto N,
Shirasaki T,
Honda M,
Kaneko S,
Gatanaga H,
Oka S,
Kawamura YI,
Dohi T, Shuno
Y, Yano H,
Mizokami M.

学会発表
タイトル

発表者

学会名

大腸癌腹膜転移（播種）に対する外科手術を 矢野秀朗、合田
JDDW2017
中心とした集学的治療
良政、國土典宏

場所

年月福岡

2017年10月

矢野秀朗、合田
大腸癌腹膜転移に対する集学的治療法におけ 良政、清松知
第55回日本癌治療横浜る積極的外科切除の役割
充、秀野泰隆、 学会学術集会
國土典宏

2017年10月

研究発表及び特許取得報告について

合田良政、秀野
第72回日本大腸肛
大腸癌腹膜転移に対する完全減量切除と術中 泰隆、井上裕
門病学会学術集会 福岡
腹腔内温熱化学療法章、片岡温子、矢野秀朗

2017年11月

枝元良広、合田良政、秀野泰
隆、片岡温子、腹膜偽粘液腫に対する小網、肝門部領域完全
井上裕章、平野
切除への取り組み－完全減量切除率向上への第78回日本臨床外
貴佐雄、山田和
東京
取り組み－
科学会総会
彦、徳原真、安田秀光、橋本政典、矢野秀朗、
國土典宏

2017年11月

合田良政、井上大腸癌腹膜転移に対する完全減量切除と術中 裕章、秀野泰
腹腔内温熱化学療法(Cytoreductive surgery 隆、清松知充、
combined with hyperthermic
竹村信行、山田 第118回日本外科学
東京
intraperitoneal chemotherapy for
和彦、徳原真、 会学術集会
colorectal or appendiceal peritoneal
橋本政典、安田metastasis.)
秀光、國土典宏、矢野秀朗

2018年4月

竹村信行、稲垣冬樹、三原史
ICG蛍光法ならびにmain portal fissure離断 規、黒川敏昭、
第72回手術手技研を用いたS1 paracaval領域の小肝細胞癌に対 徳原真、清松知
徳島究会する肝切除の工夫充、山田和彦、
矢野秀朗、國土典宏

2018年5月

Cytoreductive surgery combined withhyperthermic intraperitoneal
chemotherapy for colorectal orappendiceal peritoneal metasitasis.

Gohda Y,
Deguchi K,
Nagai Y,
Kataoka K,
Ohtani T,
Kiyomatsu T,
Kokudo N, YanoY.

The 11thInternational
Congress on
Peritoneal
Surface
Malignancies

Paris, France

2018年9月

その他発表(雑誌、テレビ、ラジオ等)
タイトル

発表者

発表先

場所年月日

該当なし

特許取得状況について※出願申請中のものは(発明名称)記載のこと。
登録番号

該当なし

※該当がない項目の欄には「該当なし」と記載のこと。
※主任研究者が班全員分の内容を記載のこ

特許権者(申請者）
登録日(申請日)（共願は全記載）

出願国