ISSN 1347-4804

October 2023
Vol.91 No.4

播種時に Y-27632 を添加したヒト iPS 細胞〔総説〕「LA-ICP-MS法による定量分析のための標準試料Solid scaleの開発とその応用例」
寺尾

祐子、椙山

卓郎、平兮

康彦、佐藤

琢也、岩戸

薫、宮下

陽介、平田

岳史……… 2

「環境調和型エーテル系溶媒「MTHP」」

齊藤

勇祐………

「炎症時におけるミクログリアのダイナミクス」

宮田

清司……… 10

小寺澤

功明……… 13間瀬暢之……… 17

河内

幾生……… 21中村

幹夫……… 33

【連

6

載】

〈LC-MS 分析「第 1 回−測定原理から様々な分野での活用例−〉 新連載

LC-MS の基礎と LCMS-2050 の特長」

〈フロー合成の魅力「第 2 回～安全・高効率なグリーンものづくりへ～〉

フロー合成の基礎～要素技術と設計～」〈幹細胞由来 EV ～治療、診断、化粧品への展開～〉「第 4 回細胞外小胞の産業化に向けた標準開発の取り組み」〔化学大家〕「パーシー・ラヴォン・ジュリアン」〔製品紹介〕
医薬品製造・品質管理

ラボウェア

CertiProシリーズ…………………………………………… 29

ガロテクトTM（赤）… ……………………………………… 28

有機合成

免

環状エーテル系溶剤MTHP… …………………………… 9
Pd/C, 球状、Pt/C, 球状………………………………… 20
核酸合成用試薬……………………………………… 25，26
機能性ポリマー… ………………………………………… 26

抗Iba1，ウサギモノクローナル抗体（6A4），組換え体…… 12
抗MAP2，モルモット
抗パルブアルブミン，モルモット
抗オキシトシン，モルモット… ………………………… 29，30

分

培

析

Solid scale LA-ICP-MS用標準試料セット… ………… 5
認証標準物質 元素標準液（CRM）… ………………… 27
ポジティブリスト関連農薬・動物用医薬品標準品… …… 27（R ）-BiAC誘導体化試薬セット… ………………………… 28
TM

疫

養

Y-27632（GMP準拠）…………………………………… 31
VEGF-165溶液，ヒト，組換え体………………………… 32
遺伝子

0.5mol/L TCEP溶液，中性… ………………………… 32〔お知らせ〕
エクソソーム関連インハウスセミナーのご案内… ……………………………………………………………… 24
和光純薬時報 Vol.91 No.3 訂正案内… …………………………………………………………………… 27
医薬品製造用原料 CertiPro シリーズカタログのご案内… …………………………………………………… 29
iPS細胞培養関連試薬・機器カタログのご案内… …………………………………………………………… 31
第 38 回 Wako ワークショップ開催のご案内… ……………………………………………………………… 36

1

R

esearch
LA-ICP-MS法による定量分析のための標準試料Solid scaleの開発とその応用例
富士フイルム株式会社 解析技術センター

1 はじめに化される。これがレーザーアブレー

い れ ば よ い と 考 え ら れ る。 実 際 に、ション現象の概要であり、このようにフェムト秒レーザーを用いたLA-ICP-して生じた試料エアロゾルをヘリウムMS法により、鉄鋼試料中の微量元素

1980年にHoukらによって報告されなどのキャリアガスでプラズマイオン

を前処理なしで直接分析した事例が報た誘導結合プラズマ質量分析法（ICP-

源 に 導 入 し て 質 量 分 析 す る の がLA-告されている4）。

1）MS法） は、周期表のほとんどすべて

ICP-MS法である。

フェムト秒レーザーの導入と並ぶもの元素を高い効率でイオン化できるこ

アブレーション用レーザーとしてうひとつの大きな進展として、高速多とから、高感度かつ迅速な元素分析法

は、ナノ秒（ns、10−9秒）のパルス幅

点レーザーアブレーション法が開発さとして様々な分野で広く活用されていを有するNd : YAGレーザーの第5高調

れたことがあげられる。この手法の特る。ICP-MS法はイオン源が大気圧で波（213 nm）やフェムト秒（fs、10−15

徴は、従来のように試料ステージを動あるため、分析目的に応じて様々な試秒）のパルス幅を有するTi : Sapphire

かすのではなく、可動鏡（ガルバノミ

料導入法の適用が可能だが、現在、最レーザーの第3高調波（260 nm）など

ラー）の角度を精密かつ高速に制御すも完成度が高く、汎用されているのの短波長でパルス幅の短いレーザーがることで、レーザー照射位置を正確かは、溶液試料をネブライザーでプラズ用いられる。このような紫外域の短パ

つ高速に移動する手法である5，6）。例

マに噴霧してイオン化する溶液噴霧導ルスレーザーを用いるのは、元素分別

えば、照射位置移動速度10 m/s以上、入法である。一方で、溶液噴霧導入法

効果（固体試料の化学組成とアブレー

2 cmの範囲内では1μmの位置分解能

で難溶解性固体試料を分析する場合、ションで発生した試料エアロゾルの化での分析が可能であると報告されてい酸による化学分解などで溶液化する必

学組成が一致しない現象）を抑制し、る7）。 な お、 高 速 多 点 レ ー ザ ー ア ブ

要があり、危険性の高い強酸（硫酸や正確な分析を行うためである。短波長

レーション法においては、ガルバノミ

フッ酸など）を使用すること、前処理レーザーを用いることで試料エアロゾ

ラーが有する高速走査性に追随できる

時に試料汚染する可能性があること、

ルを小さくすることができ、これによ

発 振 周 波 数（1 kHz以 上 ） の パ ル ス

また、溶媒による試料希釈（場合にり、プラズマ内でのイオン化を促進しレーザーが必要になる。この点におい

よっては1/1,000以下に希釈）などの課

元素分別を抑制できるだけでなく（系て も、1 MHz程 度（1秒 間 に100万 回題があった。これらの課題を解決する

統誤差低減）、プラズマ温度の低下にレーザー照射）で発振可能なフェムト

ため、固体試料を溶液化せず、そのまよるマトリックス効果増大やスパイク

秒レーザーとの組み合わせが理想的と

ま直接分析する手法として開発された状の信号も抑制できる（偶然誤差低考えられる。

手法が、試料導入にレーザーアブレー減）。

ション現象（LA）を利用するLA-ICP2，3）

フェムト秒レーザーを用いた高速多また、フェムト秒レーザーのような点レーザーアブレーション法（以下、。LA試料導入法を用

極短パルスレーザーを用いることによfsLA-ICP-MS法と略記）の特徴を活かいることにより、固体試料を前処理なり、従来は困難であった金属のようなした事例として、Agナノ粒子をタマしで迅速に分析できるだけでなく、固高い熱伝導性を有する試料を分析する

ネギの細胞組織に暴露した試料を用い

体試料中の局所分析やイメージング分ことが可能となった。これは、レーて、Agナノ粒子と溶存Ag成分を弁別

析 が 可 能 と な っ た。 本 稿 で は、LA-

ザーのパルス幅と試料の熱伝導の時間

してイメージング分析した例が報告さ

ICP-MS法による定量分析に必要な標スケールの関係から理解できる。金属

れている8）。この事例は、TOF-SIMS

準試料｢Solid scale｣の開発の経緯とその熱伝導の時間スケールはおよそ1ピなど真空系を必須とする分析法と異なのキャラクタリゼーション結果、およコ秒（ps、10秒）であることが知らり、 試 料 室 が 大 気 圧 で あ るLA-ICP-

び応用例について紹介する。

れている。試料の熱伝導の時間スケー

MS法が生体材料の優れたイメージン

ルより長いパルスレーザーを用いる

グ法となることを示したものである。

と、アブレーション現象が起こる前にまた、fsLA-ICP-MS法により、複数の熱が拡散してしまい、金属試料の融解

固体試料をあたかも溶液を混合するよMS法である2 LA-ICP-MS 法2

寺尾 祐子、椙山 卓郎、平兮 康彦、佐藤 琢也、岩戸 薫、宮下 陽介
東京大学大学院 理学系研究科 平田 岳史−12

固体試料にレーザーを照射すると、や衝撃による飛散が生じ、再現性良く

うにエアロゾル中で混合できるので、レーザーの光エネルギーが熱エネル

試料エアロゾルをイオン源であるプラ

適切な標準試料を作製できれば、これギーに変換され、照射部分の温度が急ズマに導入することができない。熱拡までLA-ICP-MS法の課題とされてき激に上昇し（条件によっては10,000℃

散の影響を抑制して金属試料を再現性た定量分析（検量線法、内部標準法、を超えることもある）、試料構成元素

良くエアロゾル化するためには、フェ標 準 添 加 法 ） が 可 能 と な る。 以 下、が爆発的に気化、あるいはエアロゾル

ムト秒の時間幅を持つ極短パルスを用我々が開発したLA-ICP-MS法による

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

定量分析のための標準試料Solid scale

表 1．標準試料 Solid…scale の仕様について述べる。

3

標準試料 Solid scale の開発

こ れ ま で、LA-ICP-MS法 で 定 量 分
析を行う場合、標準物質としてガラス標準物質や鉄鋼標準物質などが用いられてきた。これらは含まれている元素

図 1．開発した標準試料 Solid…scale の外観
表２．実験に用いた測定条件

種や濃度が限定されており，それらが分析対象と一致しない場合は使用が困難だった。また、分析対象とのマト
リックスの違いによるICP-MS信号強度の変化が問題となり、試料中の元素濃度を正確に測定できない場合があった。そこで、我々は、生体材料も視野に入れ、有機マトリックスを用いた標
準試料を開発することとした。標準試料を作成するためには、複数の元素をμm以下のオーダーで均一に分散する技術、低エネルギーで高速多点アブレーションするために必要な有機マトリックス（超高純度ポリマー） の合成技術、および均一なナノ薄膜の製膜技術が必要となるが、これらは全て
FUJIFILMグ ル ー プ の コ ア 技 術 で ある。これまでの研究開発で培ったナノ分散技術、超高純度ポリマー合成技術、精密塗布技術を駆使して、有機薄膜をマトリックスとした新たな標準物
質「Solid scale」を開発した。

4標準試料 Solid scale の特性

図 2．代表的な 6 元素の処方値と ICP-MS 信号の直線性

いては、ブランク（含有元素なし）、性評価（6 ヵ月経時品、調製直後品）

および0.1 mg/kgから100 mg/kgまで

はそれぞれMode 2，3の条件にて実施

開発した標準試料｢Solid scale｣の外の幅広い範囲をカバーしており、様々した。

観を図1に、仕様を表1に示す。超高純な定量分析の濃度校正に使用すること

信号強度の直線性度ポリマーを主成分としたナノ薄膜ができる。以下、Solid scaleのLA-ICP-

元素含有量0、0.1、1、10、100 mg/（シリコンウエハ上に成膜）にNa, Al,

MS信号の直線性、面内均一性、およ

kgで あ るSolid scaleの 濃 度 処 方 値 とMg, Ca, Ti, V, Cr, Mn, Fe, Ni, Cu, Zn,

び経時安定性を調べた結果を紹介す

LA-ICP-MS信号強度の関係を調べた。

Mo, Ag, Cd, Sn, Ba, Pbの18種類の元る。実験条件を表2に示す。レーザー

代表的な6種の元素のICP-MS信号の直素を均一に分散させたものである。膜

アブレーションは、すべての測定にお線性評価結果を図2に、全18種の元素

厚が500 nmと非常に薄いので、低エいてガルバノメトリック光学系を使用の相関係数を表3に示す。18元素全て

ネルギーで薄膜試料部が全てアブレーして行った。また、ICP-MS信号の直の相関係数は0.999以上と非常に高く、ション可能である。各元素の濃度につ線性評価はMode 1、試料面内の均一

検 量 線 精 度 が 高 い こ と が わ か っ た。

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

3

Solid scaleを用いることにより、幅広

表 3．相関係数…（r ）表 4．面内均一性と経時安定性

い濃度域での定量分析が可能になると考えられる。
面内均一性
Solid scaleの面内の均一性を調べた
結果を表4（変動係数）に示す。濃度
100 mg/kgのSolid scale（1 cm角）の9領域（各領域の大きさ：2 mm角、領域の間隔：1 mm）のLA-ICP-MS信号強度を比較した。どの元素も変動係数は5%未満であり、面内の均一性が非常に高いとわかった。
経時安定性
Solid scaleを専用容器に入れて、大気下室温で6 ヶ月間保管した後、LAICP-MS信号の直線性と面内均一性を調べた（表4）。信号の直線性、面内ばらつきともに、調製直後品と同様であり6 ヶ月経時しても変化しないことがわかった。Solid scaleは、調製後、少なくとも6 ヶ月間は安定に使用できる43と考えられる。なお、 Caの相関係数がやや低いのは、He–KEDで測定したことにより、感度が低下したためと考察した（表3はH2モードで測定）。
LA-ICP-MS信 号 の 直 線 性、 面 内 均
一性、および経時安定性の評価結果より、開発した標準試料Solid scaleは、

図 3．Solid…scale で作成した Ti の検量線

幅広い濃度領域における高精度な定量分析に活用できるものと期待される。

5 応用例3）。次に、フィルム試料の2 mm角を分析した。フィルム試料の正確なアブレーション量を知る手法としてアブレーション深さを触針式段差計で測定

Solid scaleを用いた定量分析事例とする方法や13Cの信号強度から見積もして、ポリマーフィルム中の元素定量る手法が知られている。今回は、膜厚と多検体定量分析の効率化を紹介す

既知のSolid scaleの13Cの信号強度を基

アルカリ融解法で求めた値と誤差5%る。なお、測定はそれぞれ表2のMode

準にして、式①を用いて試料のアブ以内で一致しており、Solid scaleを用

3、2にて実施した。

レーション重量（M Sam ）を求めた。

いて正確な定量分析ができるとわかっ

ポリマーフィルム中の元素定量
厚さ100μm程度のPETフィルム中のTi（TiO2） を 前 処 理 な し で 定 量 し

た。

式①
Sam
I Sam
C /C cM Sam ＝M STD × STD STD
I C /C c1313

多検体定量分析の効率化
LA-ICP-MS法 は、 試 料 交 換 が 容 易
でガラス器具の洗浄などの手間がかかた。 は じ め に、Solid scale 0 mg/kg

4

図 4．…Ti の定量結果…
（従来法の結果を併記）…エラーバー：位置違い…（3 か所）…の標
準偏差（金属元素を含まないブランク膜）とこ こ で、M STD はSolid scaleの ア ブ

らないことから、固体試料の直接分析

100 mg/kgの基板上の標準試料層を2レーション重量、I 13C は13Cの信号強度、のみならず、液体試料の迅速分析法とmm角、3 mm角、4 mm角を全層アブ

C c は試料中のC含率を示す。図4にTi

しても活用できると考えられる。液体

レーションして検量線を作成した（図の定量結果を示す。検証のため、別途試料の多検体定量分析の効率化を目的

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

図 5．…液体培地の前処理スキーム

として、細胞培養に用いる液体培地中の元素定量を検討した事例を紹介する。
液体培地中の元素濃度分布は非常に

図 6．…液体培地に含まれる元素の定量結果…
（従来法の結果を併記）

広く、濃度範囲が6桁以上にわたること も 少 な く な い。LA-ICP-MS法 で、れている元素分析法のひとつである。

液体試料を分析するスキームを図5になかでもフェムト秒レーザーとガルバ示す。まず、液体培地を10倍、100倍、ノメトリック光学系を組み合わせた

1,000倍に希釈し、各試料1μLをシリ

fsLA-ICP-MS法は、固体試料を前処理

コ ン ウ エ ハ 上 に 滴 下 乾 燥 さ せ、 約2なしで直接分析できるだけでなく、生mmΦの試料スポットを得た。次に試体試料を含む機能材料のイメージング

料スポットを含む3 mm角をソフトア

分析、さらには液体試料の多検体定量

ブレーション9）することにより、シリ分析の迅速化も可能とする画期的な分

コンウエハ上の試料を全量アブレー

析手法である。課題であった定量分析

ションした。定量は、0、0.1、1、10、に関しても、本稿で述べた標準試料

100 mg/kgのSolid scaleを用いて作製

Solid scaleなどを活用することで可能

した検量線を使って実施した。結果をと な っ た10）。 開 発 し たSolid scaleが図6に示す。Naのように数1,000 ppm

LA-ICP-MS法のさらなる発展に寄与

含有されている成分から、Baのようし、本小稿が少しでも読者諸氏の参考に数ppbと極微量な成分まで、従来のになれば幸いである。

灰化/ICP-OES、MSでの定量結果と誤開発にあたり、産業技術総合研究所

差20%以内で一致した。このことから、の槇納 好岐博士、同 山下 修司博士、

LA-ICP-MS法で液体試料の多検体定

富士フイルム株式会社 鈴木 真由美

量分析を大幅に迅速化できると期待さフェローには、多大なご助言をいただれる。

きました。また、東京大学大学院 理〔引用文献〕
1）R. S. Houk, et al . : Anal. Chem ., 52, 2283
（1980）.
2）J. S. Becker, et al . : Anal. Chim. Acta , 835, 1（2014）.
3）D. Pozebon, et al . : J. Anal. Atom. Spectrom .,32, 88（2017）.
4）T. Hirata, et al . : J. Mass Spectrom. Soc.

Jpn ., 67, 160（2019）.
5）B. Fernandez, et al . : Anal. Chem ., 80, 6981
（2008）.
6）T. D. Yokoyama, et al . : Anal. Chem ., 84,8892（2011）.
7）Y. Makino, et al . : J. Mass Spectrom. Soc.

Jpn ., 67, 164（2019）.
8）S. Yamashita, et al . : Bunseki Kagaku , 68, 1（2019）.
9）Y. Makino, et al . : Metallomics（Springer,

Japan）, 93（2017）.
10）Y. Terao, et al . : Bunseki Kagaku , accepted.

学研究科 平田研究室の栗原 かのこ様

6 おわりにをはじめとする学生の皆さんには、実験に関してご指導いただきました。心

LA-ICP-MS法 は、 現 在 最 も 注 目 さより感謝致します。

Solid scaleTM LA-ICP-MS用標準試料セット
近日発売

コード No.
197-19271

品
名Solid…scaleTM…LA-ICP-MS 用標準試料セット

和光純薬時報規格
ICP 分析用

Vol.91, No.4（2023）

容量
1セット

希望納入価格（円）
照会

5

R

esearch
環境調和型エーテル系溶媒「MTHP」
株式会社クラレ

スペシャリティケミカル生産・技術・開発部

齊藤勇祐

1 はじめに
持続可能な開発目標（SDGs）の達成に向けて、近年の化学産業には「グリーンケミストリー」の推進が強く求め ら れ て い る。「 グ リ ー ン ケ ミ ス トリー」とは化学物質のライフサイクル
全体において人体の健康や生態系、環境への負荷を低減しようとする概念や

図 1．4 - メチルテトラヒドロピラン（MTHP）

図 2．MTHP と水の二層分離技術を指し、具体的な例としては廃棄物や排出二酸化炭素（CO2）、排水負

表 1．MTHP と、他の汎用エーテル系溶媒の基礎物性荷を削減・低減できるような化学反応
や化学プロセスの開発が挙げられる。
グリーンケミストリー推進を目的とした化学反応や化学プロセスの開発においては触媒や反応剤、製造設備などが重要な因子として挙げられるが、そのなかで最も重要な因子は溶媒である。溶媒は反応や抽出のために大量に使用されることから影響が大きく、グリーンケミストリー推進には安全性、リサイクル性、廃棄物削減、排水負荷低減といった観点から使用する溶媒を化物を生成するため、長期間の保管やの 水 へ の 溶 解 度 は1.5重 量%、 水 の

当社はグリーンケミストリー推進に

リサイクルを前提とした使用に関し安MTHPへ の 溶 解 度 は1.4重 量%と 小 さ大きく貢献できる環境調和型エーテル

全 上 の 大 き な 問 題 が あ る。 加 え ていため、水と自由に混和するTHFと系溶媒・4 -メチルテトラヒドロピラン

THFは水と自由に混和するため、反異なり、MTHPは水と混ざり合わず（MTHP、 図1） を 製 造・ 販 売 し て お

応溶媒として使用した場合、続く抽出

二層分離する（図2）。

り、以下でMTHPの特徴や使用例に工程では例えば酢酸エチルのような水

この水と混ざり合わず二層分離する

ついて紹介する。

と分離する抽出溶媒が別途必要となという特徴から、MTHPを溶媒としる。さらに抽出工程においては相当量て使用することで、後処理工程におけのTHFが水層に溶出するため、リサるCO2排出量削減、エネルギー使用量

イクル効率や排水負荷低減の観点から削減、排水負荷低減、高回収率での溶も大きな問題がある。

媒リサイクルを達成することが可能と選択する必要がある。

2 既存溶媒の課題
化学反応や抽出操作に用いられる溶媒には当然ながら広汎な溶解力が要求されており、一般的に用いられている
溶媒としてはジクロロメタン等のハロ

6

3 MTHP の特徴なる。具体例として、図3で1tの溶媒を使用する化学反応の後処理工程について、溶媒としてTHFを用いた場合

ゲン系溶媒、トルエン、テトラヒドロ

このような既存の溶媒に存在するとMTHPを 用 い た 場 合 と で エ ネ ル

フ ラ ン（THF） な ど が 挙 げ ら れ る。

種々の問題はMTHPを使用すること

ギー使用量とCO2排出量の試算結果のしかしながら、ハロゲン系溶媒やトルで 解 決 可 能 で あ る。MTHPと、 一 般比較を示している。

エンは高い毒性が問題であり代替が強的に用いられるエーテル系溶媒の基礎

THF溶媒の場合では、抽出工程前

く望まれている。また環状エーテル系

物性を表1に比較して示した。MTHPにTHFの加熱による濃縮が必要とな溶媒であるTHFは高い溶解力を持つはTHFと同様の環状エーテル系溶媒

り、THF 1tあ た りCO2排 出 量 換 算 でため広く用いられているが、酸化に対でありながら疎水性が高いことが最大

10.1kg分のエネルギーが必要となる。

する安定性が低く、爆発性のある過酸の特徴である。常温におけるMTHP

続いて、水と抽出溶媒である酢酸エチ

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

ルを加えて抽出を行うが、その後酢酸エチルの加熱による濃縮が再度必要となり、ここでも酢酸エチル1tあたり
CO2排 出 量 換 算 で9.6kg分 の エ ネ ル
ギーが必要となってしまう。結果としてTHF溶媒の場合ではCO2排出量換算で19.7kg分 の エ ネ ル ギ ー が 必 要 と なる。
一 方 でMTHP溶 媒 の 場 合 で は、
MTHPは水と分離するため、抽出工
程としては反応後の溶液に単純に水を加えるだけで済み、抽出工程前の加熱による濃縮は必要ない。抽出工程後の図 3．後処理工程におけるエネルギー使用量と CO2 排出量の試算

MTHPの加熱による濃縮のみ必要とな る が、MTHP 1tあ た りCO2排 出 量
換算で9.4kg分のエネルギーで済むた
め、結果としてCO2排出量の半減化・省エネルギー化が可能となる。
加えて、CO2排出量の削減と省エネ
ルギー化のほかに、MTHPには排水負荷の低減や高回収率での溶媒リサイ
ク ル が 達 成 可 能 と い う 長 所 も あ る。
THF溶媒の場合では、抽出工程において相当量のTHFが水層へ溶出するため、排水中の有機物成分が増加し排図 4．酸化安定性

図 5．酸に対する安定性

図 6．塩基に対する安定性

図 7．n -BuLi の安定性

水負荷の上昇を引き起こすだけでな
く、水層へ溶出したTHFは回収困難であり溶媒リサイクルの観点でも問題である。一方でMTHP溶媒の場合では、疎水性の高さから水層への溶出が少ないため、排水負荷の低減や高回収率でのリサイクルが可能となる。
MTHPやTHFに類似した環状エー
テル系溶媒としては2-メチルテトラヒ
ドロフラン（2MTHF）が知られており、2MTHFも水と分離するため回収再利用が可能ではある。しかしながら
2MTHFは常温における水への溶解度とTHF、2MTHFの各種安定性を比較が14重量%と非常に大きいため回収率し た デ ー タ を 図4-7に 示 す。THFやは小さいものとなり、MTHPに優位

2MTHFは酸化安定性が低いため、リ性がある（表1参照）。

サイクル使用を行った場合に爆発性の安定性の凡例

このようにMTHPはグリーンケミ

過酸化物が蓄積する恐れがある。一方

ストリー推進に大きく貢献できる溶媒

でMTHPは酸化に対し安定であるたに対しても安定であり、種々の反応やであり、加えて種々の条件における安め過酸化物が生成しにくくリサイクル

後処理工程に適用可能である。さらに定性も高いことから様々な化学反応や性 に 優 れ る（ 図4）。 加 え てMTHPは特筆すべき点としてはn -ブチルリチウ

プロセスに適用可能である。MTHP

酸性条件（図5）や塩基性条件（図6）

ム（n -BuLi）の安定性である（図7）。

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

7

THF溶媒中でn -BuLiは不安定である
ことが一般に知られているがMTHP
溶媒中では比較的安定であり、MTHP
はn -BuLiを使用するような種々の有機金属反応にも適用可能である。

4 MTHP の適用例
MTHPは前述のように安定性に優れるだけでなく、様々な化学反応に溶

図 8．グリニャール反応

媒として幅広く用いることができ、以降でその適用例を紹介する。
4 - 1．グリニャール試薬調製
図8は1-クロロヘキサンを原料としたグリニャール試薬の調製と、調製したグリニャール試薬とベンズアルデヒ
ドとの反応結果を示す。THFは様々なグリニャール試薬の調製において溶

図 9．酸化反応

媒として広く用いられているが、その沸点は66℃と低いため、常圧では反応温度を66℃以上に上げることができない。図8に示すようにTHFを溶媒とした場合には反応温度上限が66℃と低す
ぎるためクロロヘキサンからグリ
ニャール試薬調製が進行しなかった。
一方でMTHPは沸点が105℃と高いため、常圧下でもさらなる反応の高温化が可能である。MTHP溶媒でのクロロヘキサンからのグリニャール試薬調
製は反応温度を90℃に上げることで良好な収率で進行し、続くベンズアルデ
ヒドとの反応でも目的物が収率良く得られた。
4 - 2．酸化反応8

図 10．共沸脱水反応（エステル化・アセタール化）

4 - 3．共沸脱水反応
前述のようにMTHPは酸に対する

4 - 4．リチオ化、ホウ素化、鈴木 - 宮浦カップリング反応

高い安定性を有することから、図10に

ま た、MTHPはn -BuLiを 用 い る リ

示すようにMTHPはエステル化やアチオ化反応や、遷移金属錯体触媒を用

前 述 の よ う に、MTHPは 酸 化 に 対

セタール化のような、酸共存下で実施いるクロスカップリング反応にも好適する安定性が高いため酸化反応の溶媒する共沸脱水反応にも適用可能であに使用できる。

としても使用可能であり、図9に示す

る。このような共沸脱水反応にはトル

図11に4-ブロモトルエンのn -BuLiにようにアルコールの酸化反応により対エンが一般的に用いられるが、トルエよるリチオ化と、続くホウ素化の結果応するカルボン酸が収率良く得られンではその強い毒性が問題であり代替を示す。-78℃の極低温条件ではMTHP、た。ジクロロメタン等のハロゲン系溶が強く望まれている。MTHPは水とTHFいずれも良好な収率で反応が進

媒が酸化反応には用いられることが多の共沸温度が85℃、水との共沸組成が行するが、-78℃という極低温条件は

いが、ハロゲン系溶媒は強い毒性を有MTHP 81重量% : 水19重量%といずれラボスケールでは容易であっても工業することからMTHPが有力な代替候

もトルエンと同等であり有力な代替候

スケールでは実施困難な場合が多い。

補となる。

補となる。

そこで極低温条件の回避を目的として

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

-20 ℃ 条 件 で 反 応 を 行 っ た と こ ろ、
THFでは収率が大きく低下した一方
でMTHPでは良好な収率が維持されており、MTHPは工業的なリチオ化において有用であることが示された。
続いて、図11の反応で得られた4-メ
チルフェニルボロン酸とブロモベンゼ
ンとの鈴木-宮浦カップリング反応の結果を図12に示す。THFや2MTHF溶媒の場合では、水との共沸温度が低く

図 11．リチオ化、ホウ素化

図 12．鈴木−宮浦カップリング反応

反応温度を上げられないために反応が長期化し、収率が低下した。一方でMTHPでは水との共沸温度が高く高温での反応が可能なため、短時間で良好な収率で目的物が得られた。一般に用いられるトルエンと同等の成績であり、代替溶媒として有用である。
最 後 に、MTHP溶 媒 を 用 い た こ れらリチオ化、ホウ素化、鈴木-宮浦カッ
プリングのワンポット反応化の事例を紹介する（図13）。従来のプロセスでは一段目のリチオ化・ホウ素化と二段
目の鈴木-宮浦カップリングの間に分図 13．ワンポット化

液抽出と溶媒交換が必要であり煩雑な減にもつながるため、MTHPはグリー

は幅広い化学反応に適用可能であり、プロセスとなる。一方でMTHPを用

ンケミストリーに適合した溶媒としてそのうえ抽出操作をはじめとした後処いるとワンポット反応化が可能とな有用である。

理工程においてCO2排出量削減、エネり、分液抽出や溶媒交換のない簡便なプロセスで従来プロセスと同等の収率を達成することができた。このようなルギー使用量削減、排水負荷低減、高5 おわりに回収率での溶媒リサイクルが実現可能というグリーンケミストリーの推進にプロセスの簡便化はコスト削減のみな

以上紹介したように、当社製品であらずエネルギー使用量やCO2排出量削る環境調和型エーテル系溶媒「MTHP」

大きく貢献できる溶媒である。ぜひ一度、お試しいただきたい。

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MTHP
本品は、水に不溶な高沸点環状エーテルです。酸・塩基に対して安定であり、THFに近い高い溶解性を有することから、鈴木-宮浦カップリング反応やグリC6H12O＝100.16
CAS…RN®…4717-96-8

ニャール反応など様々な反応溶媒に使用できます。有機合成の反応溶媒にぜひご利用下さい。
コード No.
134-18685
132-18681

品

名規4-Methyltetrahydropyran,…with…Stabilizer…
【MTHP】

危

格

和光特級

容 量
500mL
3L

希望納入価格（円）… 3,850
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本品の詳細は当社HPをご覧下さい。
試薬事業トップ→合成・材料→溶媒→合成用溶媒→高沸点環状エーテル溶媒
https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/category/00277.html…2 〜 10℃保存…
…− 20℃保存…
…− 80℃保存 … 150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2023 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

9

R

esearch
炎症時におけるミクログリアのダイナミクス

はじめに

応用生物学系

宮田

清司

性化に伴いサイトカイン産生やM1/

殖は、神経細胞死を伴う重度の神経変M2タンパク質発現の増加だけでなく、性疾患に特異的に生じると考えられて顕著な形態変化を起こすことが報告さきました。しかし、筆者らはTLR4リ

グリア細胞の一種であるミクログリ

れています。生理的に正常条件下でガンドであるLPSにより生じる神経炎

アは、中枢神経系に存在する常在性マ

は、ミクログリアは小さな細胞体と多症において、多くの脳部位でミクログ

クロファージで、齧歯類の脳では細胞数の長い細胞質突起を樹状に伸ばしたリア密度が一過的に増加することを証の5〜12%の比率で存在しています。ミ

ramified型の形態を示しますが、活性明しました8, 9）。低用量（100 μg/kg）

クログリアは、感染や損傷による炎症化すると細胞質突起が退縮し細胞体がLPSの単回末梢投与は、マウスにおい時に活性化されることから、中枢神経肥大化したamoeboid型の形態に変化て発熱を誘起する軽度の神経炎症刺激

系の免疫担当細胞と言われています。

します5）。ミクログリアのamoeboid型

ですが、視床下部、延髄などの広い脳

しかし、最近の研究では、ミクログリへの形態変化は、脳卒中、脳損傷、ア領域でミクログリア増殖を引き起こしアは正常条件下でも細胞質突起により

ルツハイマー病などの重度の病的条件ます。ミクログリア増殖は、特に脳室周囲の微小環境を感知し中枢神経系の下で引き起こされることが知られてい周囲器官とその周辺脳部位で顕著に観機能と恒常性を制御していることが明ます1）。さらに、グラム陰性菌由来の察されました8）。脳室周囲器官とは、らかになっています1）。具体的には、エンドトキシンであるリポ多糖類

脳幹にある終板脈管器官、脳弓下器

ミクログリアは神経新生やオリゴデン（LPS） の 末 梢 投 与 も、ramified型 か官、正中隆起、最後野などの血液脳関

ドロジェネシスなどの細胞新生及びシらamoeboid型への形態変化を誘導し門を欠く脳領域の総称です。これらのナプスの刈り込みに関与しています2）。

ます5）。LPSは、神経炎症の実験動物

脳部位は、血液由来の炎症性サイトカ

一方、病原体、毒素、または機械的損モデルで最も一般的に使用されている

イン及び病原体関連分子パターンを傷、放射線被曝、自己免疫などにより病原体関連分子パターンで、自然免疫介して脳に炎症情報を伝達するため生じる脳恒常性の異変を検出し、炎症系の認識受容体であるToll様受容体4の受け渡し経路の中継点と考えられ性サイトカイン（IL-1やIL-6，TNF-α）（TLR4）によって特異的に認識され、て い ま す9, 10）。 さ ら に、 高 用 量（1の発現を増加させ、アポトーシスまた

遺伝子発現に影響を与えます。よっmg/kg）のLPS投与は、大脳、海馬なは病原体の食作用を促進させます3）。

て、神経炎症によるミクログリアの形

どを除くほぼすべての脳部位で、ミク

また、ミクログリアは抗炎症性サイト態変化は、遺伝子レベルの発現変化とログリア増殖を誘発しました8）。ミクカイン（IL-10やTGF-β）の発現も増連動して起きる特徴と考えられます。

ログリア増殖は、LPS投与後24〜72時

加させ、炎症症状を抑制することで免疫反応が過剰にならないようにしています。しかし、これら炎症性と抗炎症性のサイトカインのバランスが崩れる

TLR4 リガンド LPS の神経炎症に伴うミクログリア増殖

間の間に生じ、ミクログリア密度が増加しますが、投与後3週間以内に正常密度に戻ることより、一過性の増加であることが分かりました。ミクログリとサイトカインストームが生じ、炎症

成体の齧歯類及びヒト脳のミクログ

アの増殖は、様々なLPSセロタイプ、が急激に悪化します。末梢に存在する

リアは、比較的長寿命の細胞であり、Toll様 受 容 体2（TLR2） リ ガ ン ド

マクロファージは、主に培養系の研究

その密度は生理的に正常状態では安定

zymosanや炎症メディエーターであるに よ り 炎 症 機 能 を 担 うM1タ イ プ

しています6）。ミクログリアの自己複

プ ロ ス タ グ ラ ン ジ ンE2（PGE2） に（CD16/32やCD86陽性）と抗炎症機能

製は、生涯で数回程度生じ、増殖とア

よっても生じました11）。よって、ミクを 有 す るM2タ イ プ（CD206やYm1陽ポトーシスの空間的及び時間的調整に

ログリア増殖は感染に伴う神経炎症下6）性）に分類されていますが、この概念

よって維持されています 。一方、ミで普遍的に生じるものであり、ミクロ

が動物生体レベルでの中枢神経系ミククログリア集団は、脳卒中、脳損傷、グリア密度は容易に変化することが明

ログリアに当てはまるかについては疑アルツハイマー病、多発性硬化症、プらかになりました。

問も呈されています4）。実際に、微生

リオン病などの重度の脳疾病条件下で物内で保存されている分子モチーフでミクログリア増殖と骨髄由来のマクロある病原体関連分子パターンの投与にファージの浸潤によって増加することよる神経炎症時において、ミクログリが報告されています7）。しかし、高用

高用量（5 mg/kg）LPS投与は、マアのM1/M2タンパク質発現はほとん

量（1 mg/kg）LPSを3連 投 し て も マ

ウスの体重、摂食量、行動量などに顕ど認められません。

ウスの大脳皮質でミクログリア増殖が著な低下を起こし敗血症状態を生じま変化しないことから、ミクログリア増すが、ミクログリア増殖を増殖阻害剤

ミクログリアは、炎症などによる活10

京都工芸繊維大学

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

Beneficial or harmful

により特異的に抑制すると、このよう症のメカニズム解明に大きな貢献をし子 の み がTLR2やTLR4に よ り 認 識 さ

な 敗 血 症 のsickness responseを 悪 化ました。

れています。筆者は、病原体関連分子

11）させることが分かりました 。このこ

TLR2やTLR4は 末 梢 マ ク ロ フ ァ ーパターンは、量的に多いだけでなく、とは、ミクログリア増殖による密度

ジや樹状細胞に発現していることより、

トランスポーターなどにより生体の深増加は感染による神経炎症の急性期

脳においても、マクロファージ系のミ部まで運ばれやすい性質であることがダメージを緩和していることを示し

クログリアに発現していると思われてTLRsリガンドの条件として必須ではないかと推測しています。

ています。コロニー刺激因子1受容体います。しかし、生理的に正常な条件（CSF1R）阻害薬は、ミクログリア増

下 の マ ウ ス 脳 で は、TLR2やTLR4の殖を顕著に抑制するだけでなく、99%

mRNA発現は、他の脳部位に比べ脳によるミクログリア除去は、低用量以上のミクログリアを除去することが室周囲器官において顕著に高いことが（100 μg/kg） のLPS投 与 に よ り 誘 導可能です12）。CSF1R阻害薬によるミク報告されています9）。さらに、TLR2

される発熱を増強することが報告されログリアの除去は、脳卒中や脊髄損傷

が脳室周囲器官のミクログリアに顕著ています21）。また、CSF1R阻害薬によモデルマウスにおいて、急性期の神経に発現しているのに対して17）、TLR4

りミクログリアを除去しても、比較

細胞死を増加させることが報告されてはアストロサイトと上衣細胞に存在し的高用量（0.5 mg/kg）のLPS投与に13, 14）

clodronate liposomeの 脳 室 内 投 与。よって、急性期の炎症にていることが、免疫組織化学により解よ るsickness responseに は 影 響 が なおけるミクログリアの活性化や密度明されています18）。LPSの末梢投与は、

いことも報告されています22）。一方、増加は、神経炎症によるダメージを脳室周囲器官のアストロサイトと上衣

clodronate liposomeによるミクログリ

抑制し、神経機能を保護するbeneficial

細胞及び脳全域の血管内皮細胞においア除去は、TLR2リガンドzymosanにな機能を有すると考えられます。慢性て、TLR4の下流にあるNF-κBシグナ

よる体温低下を抑制します19）。以上の的 ス ト レ ス や 自 然 免 疫 系 のTLR2/

18）

ルを活性化します 。一方、グラム陽

結果は、作用する病原体関連分子パ

TLR4を介して生じる炎症性サイトカ

性菌由来のリポタンパク質断片である

ターンの種類により、ミクログリアのインの発現誘導とミクログリア活性化

Pam3CSK4や酵母由来のzymosanなど機能が違うことを示唆しています。

は、神経細胞の応答性減弱とうつ様のTLR2リガンドの末梢投与は、脳室

ご く 最 近、Osterhoutら は、LPSに行動を誘導することが報告されてい周囲器官のミクログリアにNF-κBシ

よる脳内の神経炎症経路について新します15, 16）。以上のように、ミクログリ

グナルを誘起します18, 19）。末梢の炎症い仮説を提唱しました23）。彼らの仮説

ア密度は、正常状態では一定ですが、情報がサイトカインを介して中枢神経によると、まず脳への炎症情報は血管感染による炎症によっても増加するこ系を活性化しているならば、同じ細胞

内皮細胞や脳室に面する上衣細胞、脳とが明らかになりました。ミクログリタイプが活性化されるように思われま室周囲器官で情報が受容され、サイト

アは、感染急性期にはbeneficialに働す が、TLR2とTLR4の リ ガ ン ド に よ

カイン、ケモカインやPGE2などのメ

きますが、逆に慢性期にはharmfulにり異なるタイプの細胞が活性化されディエーターを介してアストロサイト

います

9）

働き精神疾患発症と関連している可能

ることは興味深い事実です 。また、やミクログリアを活性化する。その性があり、今後の解明が期待されまTLR2とTLR4の発現細胞とNF-κBシ

後、これらの情報が神経系に伝達・統す。

グナル活性化細胞のタイプが同じであ合され、体温変化やsickness response

る こ と は、 脳 のTLR2とTLR4が リ ガなどが引き起こされると考えられていンドを直接受容する可能性も示唆さるようです。以上より、ミクログリア

れ ま す。TLR2あ る い はTLR4リ ガ ン

は、脳血管系、上衣細胞、脳室周囲器

ミクログリアは脳の神経炎症における主役か？

ドを脳室内投与することによっても官、アストロサイトのネットワークのBruce Beutlerは、1998年にTLR4がNF-κBシグナル活性化が、それぞれ一環として機能することで神経炎症を

LPSを認識する受容体であることを発ミクログリアとアストロサイトに生じ引き起こしていることが分かります。

見し、2011年ノーベル賞を受賞しまします。TLR4リガンドLPS及びTLR2リ

しかし、炎症時におけるミクログリア

た。活性化されたTLR4は、細胞内シ

ガンドzymosanは、脳室周囲器官の有の機能は、病原体関連分子パターンのグナル伝達経路を介して、転写因子で窓性毛細血管を介して、実質に到達す種類、あるいは急性期と慢性期などの

19, 20）。病原体

あるNF-κBやIRFを活性化し、様々なることが示されています

サイトカイン発現を誘導し炎症を促進

関連分子パターンは、比較的高分子量します。これら一連の研究は、自然免の分子が多いのですが、病原体が有す疫という新しい概念を創出し、炎症発る無数の分子の中から、ある特定の分

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

時期により異なり多様な側面があることも明らかになりつつあります。

11

についてさらなる解明が必要であると最後に（2022）.
12）Elmore, M. R. et al . : Neuron , 82, 380（2014）.
13）Szalay, G, et al . : Nat. Commun ., 7, 11499（2016）.
14）Bellver-Landete, V. et al . : Nat. Commun ., 10,518（2018）.
15）K ato, T.A. et al . : Curr. Med. Chem ., 20, 331（2013）.
16）N ie, Z. et al . : Neuron , 99, 464（2018）.
17）Murayama, S. et al . : J. Neuroimmunol ., 334,
576973（2019）.
18）Muneoka, S. et al . : J. Neuroimmunol ., 331,
58（2019）.
19）T akagi, S. et al . : J. Neuroimmunol ., 331, 74（2019）.
20）Alejandra, V-C. et al . : Sci. Rep., 7, 13113（2017）.
21）Serrats, J. et al., Neuron , 65, 94（2010）.
22）Vichaya et al . : J. Neuroimmunol ., 17, 172（2020）.
23）O sterhout, J.A. et al . : Nature , 606, 937（2022）.

思われます。
〔参考文献〕

人類は、ウイルスや細菌感染による

1）Hanisch, U-K., and Kettenmann, H. : Nat.
Neurosci ., 10, 1387（2007）.
2）Badimon, A. et al . : Nature , 586, 417（2020）.
3）Shemer, A. et al . : Trends. Immunol ., 36, 614（2005）.
4）Randsohoff, R.M. : Nat. Neurosci ., 19, 987（2016）.
5）Stratoulias, V. et al . : EMBO J ., 38, e101997（2019）.
6）Askew, K. et al . : Cell Rep ., 18, 391（2017）.
7）Gomez-Nicola, D. et al . : Neuroscientist , 21,
169（2015）.
8）Furube, E. et al . : Sci. Rep ., 8, 2203（2018）.
9）M iyata, S. : Front. Neurosci ., 16, 991779（2022）.
10）Miyata, S. : Front. Neurosci ., 9, 390（2015）.
11）Torii, K. et al . : J. Neuroimmunol ., 65, 577832

炎症発症機構がほぼ解明されたかのよ
うに思っていたと思います。しかし、コロナウイルスによるパンデミック
は、この分野における人類の理解が不十分であることを痛感させました。また、感染後に脳における後遺症なども報告されており、感染による脳の神経炎症経路については、未だに解明すべき 事 象 が 多 い こ と が わ か り ま し た。
よって、神経炎症の基礎的メカニズ
ム、特にミクログリアのダイナミクス

ミクログリア研究に！
抗Iba1，ウサギモノクローナル抗体（6A4），組換え体
Iba1は神経系のミクログリアに発現している約17kDaのタンパク質で、ミクログリアマーカーとして使用されます。
この度、新たにモノクローナル抗体を製品ラインアップに追加しました。
抗Iba1，ウサギモノクローナル抗体（6A4），組換え体はロット間差が非常に少ない抗体です。
ミクログリア研究にご活用下さい。

製品概要

バッファー組成
抗体濃度
抗原
標識
交差性
アプリケーション

PBS（50% グリセロール），0.05% アジ化ナトリウム
ラベルに記載
合成ペプチド（Iba1 の C 末端配列相同）
未標識
マウス，ラット（他動物種については検討未実施）
免疫組織染色（凍結切片）1 : 200-10,000［※最適濃度はアプリケーションごとにご検討下さい。］

アプリケーションデータ
免疫組織染色
■マウス脳

■ラット脳

本品（コード No. 018-28523）■マウス網膜本品（コード No. 018-28523）

本品（コード No. 018-28523）（サンプル）マウス脳（凍結切片）（サンプル）ラット脳（凍結切片）（サンプル）N -Methyl-N -nitrosourea にてミクロ（一次抗体希釈率）1 : 200（一次抗体希釈率）1 : 200
グリアの集積と活性化を誘導した（二次抗体）Alexa Fluor 488 標識抗ウサギ IgG 抗体 （二次抗体）Alexa Fluor 488 標識抗ウサギ IgG 抗体
マウス網膜（凍結切片）（一次抗体希釈率）1 : 2,000（二次抗体）Alexa Fluor 488 標識抗ウサギ IgG 抗体

マウス脳・網膜及びラット脳の凍結切片が染色可能であることが確認できました。
コード No.

品

012-28521
018-28523

Anti Iba1, Rabbit Monoclonal Antibody（6A4）,
recombinant

名

規格

容量

希望納入価格（円）

免疫化学用

20μL
100μL

20,00060,000…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2023 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

12

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

LC-MS 分析 －測定原理から様々な分野での活用例－

第１回

LC-MS の基礎と LCMS-2050 の特長
株式会社島津製作所

分析計測事業部

小寺澤

功明―シリーズ開始にあたって―
LC-MS は、食品・環境・バイオ・生体など幅広い分野で、高精度な分析機器として急速に普及が進んでいます。また、昨今のヘリウム不足に伴う代替法への切り替えや、検体の多様化・極微量化による装置高精度化の流れに伴い、LC-MS の更なる活躍が期待されています。試薬においても、微量不純物を低減させるなどした LC-MS 分析に適した溶媒が開発されています。
本シリーズでは、LC-MS の基礎から、様々な分野における LC-MS の活用例を第一線の研究者の方々にご紹介いただきます。本連載が読者の皆様のご研究の一助になりましたら幸いです。
◆１．はじめにLC単独では、保持時間の近い成分（Electrospray Ionization, ESI）および質量分析計（Mass Spectrometer, MS）

はピークが重なった形で検出されてし大気圧化学イオン化法（Atmosphericとは、化合物をイオン化させ、その質

まい、正確な分析の妨げになります

Pressure Chemical Ionization, APCI）

量と電荷の比（m/z ）を測定する装置

が、LC-MSでは分子量に応じたマスと呼ばれる2種類のイオン化法が使わです。検出できる質量と電荷の比を走

クロマトグラムを描画することによれています。これらは、イオン化に伴査することで質量情報（マススペクト

り、別々のピークとして分離検出されうエネルギーの授受が少ないのが特長

ル）を得ることもできます。液体クロマ

ます。これは食品や生体試料など複雑で、分子を壊さずにイオン化させられトグラフィー（Liquid Chromatography,

性の高い試料に含まれる特定の化合物

る「ソフトイオン化法」に分類されまLC）とMSを直列に接続すると、LCを分析したいときに特に役立ちます。

す。観測されるイオンから化合物の分とMSの長所を組み合わせた効果的なカラムによる分離が不完全でも分析を子量情報が容易に得られます。

分析が可能であり、この構成のために成立させやすいため、分析メソッド開

ESIでは、カラムからの溶出液に高設計された質量分析計をLC-MSと呼発の省力化や、高速化も可能です。

電圧を印加し帯電液滴を生成します。

びます。

帯電により生じる静電気的な反発力

LC-MSを用いた分析では、LCによ◆２．質量分析計の原理

が、より小さな液滴への分裂、さらにる化合物の溶出に合わせて、マススペ

質量分析計の原理概要

は脱溶媒を加速させ、最終的に化合物

クトルを数百ミリ秒程度の間隔ごと

質量分析計は化合物をイオン化し、に電荷が付与したイオンが気相に放出に取得します。取得されたデータの表

特殊な電場の中を通過させることによされます。ネブライザーガスと呼ばれ示方法として、測定された全イオンのり、イオンのm/z に応じて分離検出す

るガスを噴霧すると、LCの送液流量強度の合算値をLCの保持時間に対しる装置です。装置は主にイオン化部とが高い場合においても効率的に脱溶てプ ロ ッ ト し たTICク ロ マ ト グ ラ ム

質量分離部、イオン検出部の3つで構媒・イオン化を行うことができます。

（Total Ion Current Chromatogram,

成されます。

APCIでは、カラムからの溶出液をTICC）と、特定のm/z のイオンの強度をプロットしたマスクロマトグラム

ネブライザーガスおよび高温により気イオン化部化させてから、高電圧が印加された（Mass Chromatogram, MC） が あ り

LC-MSでは、最初にカラムからの溶ニードルから生じるコロナ放電によります。Fig.1にMS検出によるクロマト

出液を噴霧し化合物をイオン化させる

イオンを生成します。分析対象の化合グラム、MSスペクトルの例を示しま必要があります。このイオン化には、物が直接イオン化しにくい場合においす。

主にエレクトロスプレーイオン化法ても、イオン化した溶媒との相互作用

Fig.1…LC-MSで得られるデータのイメージ図

Fig.2…イオン化法の模式図（左：ESI、右：APCI）

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

13

LC-MS 分析 －測定原理から様々な分野での活用例－

Fig.4…四重極型でのイオン分離のイメージ図

オンをコリジョンガスと衝突させるな
どして分解し、その分解されたイオンを3つ目の四重極で再度分離します。
本手法を用いることで、夾雑成分の影

Fig.3…イオン化法の傾向

響を低減し高感度に分析することが可能となります。

を通じて化学的にイオン化させること

Ion Monitoring, SIMモード）。電圧をまた、その他の組み合わせとして四ができます。

走 査 す る と、 幅 広 いm/z に 対 し て ス

重極型と飛行時間型を組み合わせた質キャンする動作となり、これによりマ

量分析計などもあり、それぞれの質量

ススペクトルを得ることが可能です

分離部の特性を生かした分析が可能と（スキャンモード）。

なります。

これらイオン化法の模式図をFig.2に示しました。
このイオン化部については、化合物をイオン化させられるかどうかに関係

この正確な電圧制御によって四重極するため、対象となる化合物に合わせロッドの間を通過できたイオンのみがて 選 択 す る 必 要 が あ り ま す。ESIとイオン検出部にて検出されることとな

APCIのイオン化可能な化合物の傾向ります。

についてFig.3に示しました。
質量分離部・イオン検出部

イオン化部にて移動相を噴霧し揮発させることから、不揮発性の塩を含む

質量分離部には、四重極型以外にも移動相は使用できないという制約が飛行時間型、イオントラップ型などあります。カラムによる分離を行う際様々な質量分離部が存在します。この

pH調整が非常に重要なため、リン酸

m/z が異なるイオンは、電場・磁場

質量分離部の型によって、得られる質やクエン酸緩衝液などが良く用いられの中での振る舞いが少しずつ異なりま量の精度や分解能などが変わるため、ています。しかし、このような不揮発す。質量分離部では、この振る舞いの分析の目的に合わせて選択する必要が性塩は微細液滴の生成・脱溶媒の効率違いを利用してイオンの分離を行いまあります。

を著しく損なうため、使用できませす。イオン分離の技術には様々ありま
すが、最も汎用的なものの1つが、四ん。ギ酸、酢酸、ギ酸アンモニウム、
タンデム質量分析（MS/MS）

酢酸アンモニウムなどの揮発性の塩を重極型です。四重極は4本のロッドでタンデム質量分析とは、m/z で分離構成されており、向かい合った2本のされたイオンを続けて別の質量分離部

また、移動相に使用する溶媒のグロッドに同一の高周波電圧を与えていで分離する手法のことを指します。シレードにも注意が必要です。移動相にます。イオンはこの四重極の間の空間

ングル質量分析では、バックグラウン

使用する水や有機溶媒の純度が低いとに導入され、ロッドに与えられた電場

ドイオンが存在した場合などに分析対ノイズが大きくなります。水やギ酸、によって振動しながら通過します。こ象成分の検出や定量が難しくなる場合

アセトニトリルやメタノールなどの試の時、電圧に応じて安定して通過するがあります。タンデム質量分析を用い

薬は、LC-MSグレード以上のものをイオンの質量電荷比が変化します。つるとさらに選択的に分離・検出するこ

使用することが推奨されます。

まり、電圧を調整することで、通過さとが可能となるため、より高感度に測せるイオンを選択することができます

定することが可能となります。

（Fig.4）。

14

LC-MS の留意点

一例としてトリプル四重極型質量分用いるのが一般的です。

◆３．新しい小型シングル四重極質量分析計LCMS-2050
LC 検出器としての使いやすさ

ロッドに印加する電圧を特定の値に析計があります。トリプル四重極型質

固定すると、対応したm/z のイオンの量分析計では、1つ目の四重極でイオTM
LCMS-2050は、Nexera シ リ ー ズ

みを高感度に検出できます（Selected

ンを分離した後、2つの四重極内でイと完全統合されたデザインであり操作

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

LC-MS 分析 －測定原理から様々な分野での活用例－

を 兼 ね 備 え た イ オ ン 化 部（Dual Ion
Source, DUIS）が採用されています。
従来ESIとAPCIの使い分けが求められていたところを、島津の独自技術であるDUISにより、一度の分析で幅広い化合物を測定することが可能になり
ま し た。LCMS-2050の イ オ ン 化 部 のFig.5…LCMS-2050の構成

模式図を示します（Fig.6）。

性もLCユーザーにやさしく、LC検出

ESIとDUISで測定した2つの化合物器として容易に扱うことが可能な質量のマスクロマトグラムをFig.7に示し分析計です。他のLCユニットと同サ

Fig.6…イオン化部「DUIS」の模式図ます。シメトリンはESIで感度よく検イズで、システム内に組み込むことがLCMS-2050は、 前 面 に イ オ ン 化 部

出されますが、キントゼンは低極性化

で き ま す。LCMS-2050は 真 空 起 動 後を有し、内部に質量分離部、イオン検合 物 でESIで は 検 出 で き ま せ ん。

から6分で分析開始することができる出部を有します（Fig.5）。イオン化部

DUISで測定した場合、いずれの化合

ため、LCのセットアップ中に分析準

では、装置状態を維持するために感度

物も感度よく検出することができまし

備を完了することができます。

調整、分解能調整、質量校正を自動でた。

また、LCと同じ制御用ソフトウェ

行うオートチューニング用のイオン化

アLabSolutionsTMで操作・データ解析

ユニットも配置されています。配管を優れた長期安定性・堅牢性

することが可能です。測定時間・質量交換することなく装置調整が可能であデータ採取の高速性

範囲・サンプリングレートのみ設定すり、いつも最適な装置状態で使用する

ればLC/MS分析できますので、測定ことが可能です。

めには1ピーク当たり十分なデータポ
イント数が必要で、通常10 〜 20点が時間・波長範囲・サンプリングレートを設定するPDA検出器と同じ感覚で使用できます。

クロマトグラムを正しく測定するた幅広いイオン化

求められます。データポイント数が不LCMS-2050で はESIとAPCIの 機 能足すると、ピーク本来の形状を再現でFig.8…スキャンスピードの違いによる影響

Fig.7…ESIとDUISの感度比較

Fig.9…Reserpine…1…pg…MSクロマトグラム

Fig.10…Reserpine…検量線…
（0.1〜1,000…pg）

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

15

LC-MS 分析 －測定原理から様々な分野での活用例－

きなくなるため、定量結果のばらつきにつながります。再現性の高い測定を行うためには、データ採取を高速化しサイクルタイムを短くする必要があります（Fig.8）。
LC-MSでのサイクルタイム短縮に最も寄与するのは、幅広い質量幅を短時間でスキャンする能力（高速スキャン性能）です。正イオンおよび負イオ
ンのどちらも測定する場合には、正Fig.11…負荷回数ごとの10…ng/µLプロプラノロール溶液のピーク面積値と負のイオン化モードの切り替えを
ノロールを測定することで、装置汚染なため、装置のダウンタイムを最小限

LCMS-2050で はUFscanning お よ び

に対するピーク面積値の安定性を評価にすることが可能です。

UFswitchingTM技術の採用により、同しました。

短 時 間 で 行 う こ と も 求 め ら れ ま す。
TM

型 のLC-MSで は 世 界 最 高 速 と な る

その結果、スキャンモードで測定し15,000 u/secの高速スキャンおよび10た時のピーク面積値%RSDが8.5%と良msecの正・負イオン化モード切り替

好な結果が得られました。

LC-MSは、LCに質量情報を加える
ことで更なる分離・精度の高い同定・え時間を実現しました。UFMS（Ultra

LCMS-2050は 堅 牢 な 分 析 を 可 能 と高感度検出を可能とする非常に重要で

Fast Mass Spectrometry） シ リ ー ズ

するために3つの汚れ防止対策を実施

価値のあるツールです。そのLC-MS

を通じて島津が培ってきた高電圧を高しています。

の 中 で もLCMS-2050は、LC検 出 器 と速 正 確 に 制 御 す る 技 術 が、 小 型
LC-MSでも発揮されています。
高感度と優れたダイナミックレンジ
一般的に質量分析計は高感度測定がイオンの取り込み口を大きくしながしての使いやすさとMSの優れた能力

ら装置内部の真空を維持できるよう最をかけ合わせて「使いやすさ」「基本適化された真空排気システム（特許技

性能の高さ」「コンパクトさ」の全て術）により、詰まりにくい設計となっを兼ね備えたシングル四重極質量分析ています。

計です。LC-MSを使用するハードル

可 能 で す が、LCMS-2050は、 小 型 な

Heated ESIガスにより汚れ成分をを下げつつMSとしての分析を可能にがらも期待を裏切らない感度性能を有揮発させ除去します。さらに、イオンするため、様々なユーザーの方々にスしています。Reserpineを用いた感度

取り込み口の上側に向けて吹き付ける

ムーズにお使いいただけて、創薬の合試験では、1 pgの測定で良好な面積値

ことで、イオン化は促進しながら汚れ成確認や不純物解析、食品中の機能性再現性が得られました（Fig.9）。さら

成分はMS真空内部に入らない構造と成分測定、化学材料の成分評価など広に、0.1-1,000 pg（4桁）もの幅広いダなっています（特許申請中）。

い用途・分野において活躍し、新たなイナミックレンジでの定量分析が可能です（Fig.10）。

16◆４．最後に高濃度サンプルや夾雑成分が多い
サンプルを分析した場合などに大量の技術や製品の創出に寄与することを期待します。

LC/MS測定において、装置の安定

イオンが質量分析部に導入されると、性、堅牢性は非常に重要です。ピーク

精密な部品である四重極ロッドに汚れ

LCMS-2050に 関 す る お 問 い 合 わ せ

強度や質量精度が長時間安定しているが発生することがあります。このようは、最寄の株式会社島津製作所の営業ことが、ユーザビリティおよび生産性な状態ではイオンが四重極ロッドに拠点にご相談ください。

向上に直結します。

停 滞 し 感 度 低 下 を 引 き 起 こ し ま す。

LCMS-2050の 堅 牢 性 を 評 価 す る た

LCMS-2050で は、 四 重 極 ロ ッ ド に 印

めの加速試験として、3,000 ng/μLの加する電圧をコントロールすることで溶液を1μLずつ、連続で10,000回注入

滞留したイオンを取り除きます。これしました。これは、1,000 ng/μLの試により、汚れに強い安定した分析が可

料を日常的に分析する使用環境におけ能となっています。

る15 ヶ月稼働分に相当します（100分

また、万一イオン取り込み口が詰析/日、20日/月 稼 働 ）。 加 速 試 験 中、まった場合でも、真空を停止すること

一定注入ごとに10 ng/μLのプロプラ

なくイオン取り込み部品の交換が可能

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

フロー合成の魅力 ～安全・高効率なグリーンものづくりへ～

第2回

フロー合成の基礎～要素技術と設計～
静岡大学グリーン科学技術研究所

第１回目において、フロー合成の魅

間瀬

暢之

反応速度の理解）、プロセス化学・化

フロー合成システムは、海外メーカー〜なぜフロー合成？〜について解学工学（フロー反応容器の設計と最適のVapourtec社、Syrris社、UNIQSIS説した。遠い存在だったフロー合成を化）などである。また、統計学やデー

社、Thales-Nano社、Corning社、国身近に感じてもらえただろうか？ 今

タサイエンスの知識も有用である。な

内メーカーのYMC社、EYELA社、中回、実際にフロー合成を導入するため

ぜならフロー合成では連続的なデータ

村 超 硬 社、 サ イ ダ・FDS社、DFC社に、フロー合成の基礎収集が可能であり、これらのデータをなどから購入可能である。しかし、こ分析することで、より効率的なフロー

れらのシステムの導入にはコストが必

合成手法を開発できるからである4）。

要で、特に地方大学などの予算に制約◆フロー合成を始めるために必要な準備

次に、フロー合成を制御し、実践すのある研究者にとっては負担となり得

フロー合成に関する学術論文、書るには、装置の設計についての詳細なる。そのため、初めてフロー合成に取籍、特許、参考書など、学べる資料は知識が求められる。これらはマイクロり組む際は、シンプルな構成の装置で数多くある。これらの中でも特におす

流体力学や熱力学、物質輸送理論と基本的な反応を試すことから始め、結すめの書籍は「有機合成のためのフいった基本理論に基づいている。これ

果と経験を積み重ねていくことを推奨1）である。
ロー化学（東京化学同人）」

らの理論の理解は、装置の効率的な使する。また、フロー合成システムを保

本書にはフロー化学の基礎、触媒反用と反応条件の最適化に寄与する。

有する研究者と共同研究を推進するこ力〜要素技術と設計〜について紹介する。

応、光化学反応、電気化学反応、フ

最後に、化学反応の安全性について

とも１つの方法である。これにより、

ロー精密合成、連続生産社会実装、実の知識が必要である。これには発熱量

フロー合成の専門知識を持つ研究者と験手順などが載っており、フロー化学や圧力上昇を予測する技術が含まれの協働を通じて、自身の研究を深めるのトピックスが網羅的に説明されている。これらの情報は、反応の安全な進ことができる。

る。また、オープンアクセスの「How行を確保し、過熱や過圧などの予期せ

本稿では、断りがない限り、研究室ぬ事態を避けるために重要である。

レベルから始められる手法に重点を置

2）

to approach flow chemistry」 やレジ ェ ン ド 論 文 の「The Hitchhiker's
3）

Guide to Flow Chemistry parallel」も併せて、ぜひ、ご一読していただきたい。

いて紹介する。したがって、大規模な◆フロー合成で用いられる装置

連続合成（例えば年産数千トンを目指

フロー合成で使用される主な装置とすなど）を計画する場合は、さらなるして、ポンプ、ミキサー、フロー反応

詳細な情報や指導が必要となるので、

フロー合成を実践するには、以下の容器、背圧弁などがある（図１左）。

専門書を参照することを推奨する。

学問分野の知識が必要とされる。有機

これらの装置は流量、温度、圧力の精化学（分子の設計や合成技術の理解）、

密な制御を可能にし、所望の化学反応

分析化学（反応生成物や中間体の評価を効率的かつ精度高く実行できる。

技術の理解）、物理化学（反応機構や研究室で扱うことができるサイズの◆フロー合成用ポンプとミキサー
図１左にフロー合成用装置の基本構成を示す。初めてフロー合成に取り組

図１．…フロー合成用装置の概要（左）と多相系のフローパターン（右）和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

17

フロー合成の魅力 ～安全・高効率なグリーンものづくりへ～

む際や、高精度に実験をしたい場合、を使用する方法もあり、これは通常、ことは困難であるが、配管内での制御

コストパフォーマンスが高いシリンジ

コイルリアクターと呼ばれる。入手容が可能なフロー手法は、多相系反応にポンプの使用を推奨する。ただし、試易性が高く、コイル化によりディーン

おいても大きな利点となる。

薬量がシリンジ容量に依存するため、流れを利用した混合も期待できるた

さらに、気液固反応の場合、壁近傍

連続的な試液の送液には工夫が必要でめ、初めてフロー合成に取り組む際にや触媒充填の不均一な空間に由来するあり、例えば、複数のシリンジポンプ

は、この方式を採用することを勧め

偏流（チャネリング）を制御することを用いて連続化をする必要がある。連る。

が必要である。この問題は、ハニカム

続送液する場合、耐薬品性を考慮する

また、固体触媒を用いる不均一系反構造のモノリス触媒（図１左）を活用とHPLCポンプ（フロム社製など）が

応 で は、Packed-bed反 応 容 器 と し てすることで回避できる可能性があり、好ましい選択となる。また、取り扱い

触媒を詰め込んだカラムを利用する。

キャタラー社などが研究開発に取り組が容易なダイヤフラムポンプ（タクミ

市販の触媒や自作の触媒を詰め込むこんでいる。ミキサーと触媒機能を併せナ社製など）もお勧めである。いずれとで、多種多様な反応に適応できる。

持つことで、装置のコンパクト化にもの連続型ポンプを選択する場合でも、触媒のろ過も不要であり、超高活性な貢献する技術となる。

流路やプランジャヘッドの洗浄などの固体触媒の開発により、フロー合成手

メンテナンスが必要になるため、機械法の社会実装が大きく進展する。

いじりが得意な研究者にその役割を割

フロー合成を行う最低限の設備としも、背圧弁を使用して反応系を加圧ては、ポンプ、ミキサー、反応容器、続いて、２液以上を反応させる際にし、気体の溶解度を高めたり、試薬や背圧弁が挙げられる。しかし、さらにはミキサーが必要である。T型、Y型、溶媒の沸点以上の反応を実施したりで効率的にフロー反応を進行させるためクロス型など、反応に適したタイプのきる。バッチ反応で圧力を変更するにには、オプションを考慮することが有り当てるのが無難である。

5）

ミキサーを選択する 。特に不均一系

は耐圧反応容器が必要となるが、フ益である。例えば、連続して別のサンの反応では、混合効率が反応速度に大ロー合成システムでは、任意の圧力でプルを注入することにより基質や試薬

きく影響する。したがって、反応に最容易に実験することができる。なお、の最適化をしたい場合、オートサンプ

適な混合方法を特定するために、形状

小型の背圧弁は、DFC社やフロム社

ラーを用いることで簡便化できる。まや内部流路の内径などが異なる複数のから購入できる。

た、溶媒などを検討したい場合、切りミキサーを準備し、適切に選択することが重要である。

替えバルブを導入する。さらに、反応◆多相系フロー合成における流れ

温度を精密に制御したい場合、また均一反応の場合、バッチ系でもフは、 グ ラ ジ エ ン ト 昇 温 し た い 場 合、◆フロー合成用反応容器の選択と活用

ロー系でも、各試薬が混ざり合って均

ヒーターやクーラーを設置する。ま

化学反応の種類は非常に多岐にわた

一になれば均一流となり（図１右）、

た、反応を促進するために、熱、光、るため、それに応じてフロー合成用のその後の撹拌効率の相対的重要性は低電気、マイクロ波、超音波など多くの反応容器を適切に選択することが重要下する。一方で、気体、液体、固体が外部刺激技術を導入することができる。

6）である 。例えば、マイクロチャネル

組み合わさる多相系反応では、界面で（マックエンジニアリング社など）は、の物質移動が鍵となり、ミキサーの選反応後の後処理プロセスでも、さま

ディーン流れを主とした物質混合と、択と配置は反応効率に大きく影響を及

ざまなオプションが存在する。例え

高い表面積対体積比による優れた熱移ぼす。例えば、気液反応では、気体のば、 プ ロ セ ス 分 析 技 術（PAT：Pro-動に特長がある。さらに複数のマイク

流量によって気液二相流の状況が大きcess Analytical Technology） を 駆 使ロチャネル反応容器を連結すれば、大く変わる（図１右）。ここで考えられすることで、反応の進行度合いや中間量の有用物質を生産できる。ただし、る流れのパターンには、気泡流（連続体 の 検 出 が 可 能 で あ る。IR（ メ トそれぞれの反応容器が一貫したパ

した液相中に小さな気泡が分散する流

ラー・トレド社など）、NIR（ビートフォーマンスを保つには、精密な制御

れ）、スラグ流（気液が交互に流れる

センシング社など）、NMR（Magritekと高度なエンジニアリングが必要であ流れ）、チャーン流（気体スラグが伸社など）は高い汎用性を有し、一度にる。また、マイクロ流路であるため、長し、その界面が脈動する流れ）、環

多くの情報を得られる。また、既存の化合物が結晶化しやすい反応の場合に状流（管壁に液膜が、中心部に気相がHPLCの 検 出 器（ 紫 外 可 視 吸 光 度、は、目詰まりが問題となる。
一方、反応容器として直接チューブ

18◆フロー合成システムのオプション

いずれの反応容器を選択する場合で7）存在する流れ）などがある 。これら

PDA、蛍光、示差屈折率、円二色性、の流れを大きな反応容器内で制御する

旋 光 度 ） を 活 用 す る こ と も 可 能 で、

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

フロー合成の魅力 ～安全・高効率なグリーンものづくりへ～

図２．静岡大学…間瀬研究室で自作、または改良したフロー装置

HPLCシステムを利用することは現実

い。HPLCやGCのシステムは、フロー的な選択肢となる。

UA）など）の推進が必要である。

合成システムと基本構造が同じで、精また、ヒーター以外の熱源として省反応と解析を連続的に実施して密な流量制御や検出能力が求められる電力化や特殊効果が期待できるマイク

も、 生成物の精製を連続的に実施でフロー合成において非常に有用であロ波が注目されている 。そのフローきなければ、反応溶液が溜まっていく

る。研究室で眠っている状態のHPLC化は難航したが、近年の技術進歩によ一方である。反応停止剤に水を用いた装置などがあるならば、それらを再活りフロー装置（サイダ・FDS社製）が場合、非混和性の液−液抽出が必要に用する絶好の機会と言える。

開発され、デスクトップでマイクロ波8）なる。分液ロートを駆使して、連続的

既存の装置をカスタマイズすること

フロー合成が可能となった。更なる装に抽出することも可能であるが、ミキで、各自の研究に最適なフロー合成シ

置の追加により、グラジエントフロー

サーセトラー（マックエンジニアリン

ステムを構築できる。静岡大学 間瀬やその他高度なフロー合成も可能とな

グ社など）や膜分離法（Zaiput Flow

研究室で実際に稼働しているフローシ

り、デスクトップで月産1トンの合成

Technologies社など）により、連続的

ステムについて紹介する（図２）。まが視野に入ってきた（図２中）。

に有機相と水相を分離できる。

ず、反応温度を精密に制御するため

さらに、これまで存在しなかったフ研究室で生産まで検討することはに、HPLC用（ 室 温 〜 80 ℃） とGC用ロー装置を自分たちで作り上げること稀であるため、連続晶析装置の小型（室温〜 300℃）のカラムオーブンをもできる（図２右）。例えば、気相が化 は あ ま り 進 ん で い な い。 し か し、取り付け、伝熱フローシステムを構築

関与する多相系反応に、ファインバブ

iFactory社（異業種８社と１機関の連した（図２左）。オートサンプラーとルを導入することで反応効率を向上で携）は晶析から袋詰めまでのプロセス

切り替えバルブの追加により、ハイス

きる。ファインバブル発生機構をフを連続化する技術を開発しており、商ループット実験が可能となった。反応

ローシステムに組み込むことで、水素用生産への展開が推進されている。

の進行状況はIRとNIRでインライン解化反応などの効率化が達成された9）。

析し、フラクションコレクターでサン

今回はフロー合成の基礎 〜要素技

◆フロー合成を始めてみよう

プルを回収する。写真からもわかるよ

術と設計〜について概観したが、これフロー合成への取り組み方法は多岐

うに、インライン解析と切り替えバルまでフロー合成は難しそうと感じていにわたるが、まず必要な装置を自作す

ブ以外は、研究室にあった装置を有効た方も、以上の例からもわかるようるアプローチが１つの手段であり、最活用してシステムを構築した。HPLCに、既存の装置を活用したり、改良し終的に応用が利くようになる。これまシステムを用いることで、流量や温たり、自分たちでシステムを構築したでも紹介したように、日本国内では、

度、サンプルの導入やバルブの切り替りすることで、フロー合成を実行でき

フロー合成システム構築に必要な多くえをパソコンから制御できる。ただると感じていただけたのではないだろのパーツを手に入れることができる。

し、 異 な る メ ー カ ー のGCオ ー ブ ン、うか。遠い存在だったフロー合成が、最小構成ならば、30万円程度で装置をフラクションコレクター、熱電対など

もしかしたら、明日からでも始められそろえられる（例．YMC社製KeyChemは別途制御が必要で、これにはシステ

るかもと思っていただけたのではない

スタンダードシステム）。また、既存

ムエンジニアの協力や通信の標準化だろうか？ それがフロー合成の一般の分析装置の活用も考慮するのが良（OPC Unified Architecture（OPC

化につながるので、ぜひ、挑戦してい和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

19

フロー合成の魅力 ～安全・高効率なグリーンものづくりへ～

ただきたい10）。次回は、フロー合成の2）Guidi, M. et al . : Chem. Soc. Rev ., 49（24）,6）Thorat, S. et al . : Res. Rev. : J. Chem ., 11（7）,8910（2020）.

実践と学術・産業への応用について紹1（2022）.

3）Plutschack, M. B. et al . : Chem. Rev ., 117

介する。お楽しみに。

7）Wu, B. et al . : Chem. Eng. J ., 326, 350（2017）.
8）Sajiki, H. : Chem. Rec ., 19（1）,2（2019）.

（18）,11796（2017）.
4）Epps, R. W. et al . : Chem. Sci ., 12（17）, 6025

〔参考文献〕

9）Iio, T. et al . : Synlett , 31（19）,1919（2020）.
10）Hone, C. A. and Kappe, C. O. : Chem.

（2021）.

Methods , 1（11）,454（2021）.

5）Lee, C.-Y. et al . : Chem. Eng. J ., 288, 146

1）小林修，小野澤俊也：「有機合成のためのフロー化学」（東京化学同人）（2020）.

（2016）.

水添還元用フロー触媒
Pd/C, 球状、Pt/C, 球状
本品は、水素ガスを用いた還元反応の触媒であるPd/C、Pt/Cをフロー反応用に球状に加工したものになります。水素ガスを用いたフロー反応に用いることによって、オレフィ
ン、ニトロ基を効率よく還元します。フロー合成の研究・開発にぜひご利用下さい。

特

長●球状で粒子径が約 200μm で均一●圧力がかかってもつぶれにくい●圧力損失が小さく、フロー反応に適している

デ ー タ■ オレフィンの還元■ ニトロ基の還元■ 脱ベンジル化

コード No.
169-28861
167-28862
162-28851
160-28852

品

名

規

格

Pd/C,…Beads…（Pd…5%）

有機合成用

Pt/C,…Beads…
（Pt…5%）

有機合成用

容量
5g
25g
5g
25g

希望納入価格（円）22,00083,00021,00081,000…2 〜 10℃保存…
…− 20℃保存…
…− 80℃保存 … 150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2023 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

20

和光純薬時報 Vol.91, No.4（2023）

幹細胞由来 EV ～治療、診断、化粧品への展開～

第４回

細胞外小胞の産業化に向けた標準開発の取り組み
富士フイルムホールディングス株式会社

はじめに

知的財産部

河内

国際標準化推進室

幾生

生医療等評価部会（令和3年12月1日）

通常は3年と比較的短期間で開発できにおいて議論された。結論は、細胞加ること、5年ごとに維持・改訂・廃止

細胞は脂質二重膜を有する小胞にタ

工物というよりも細胞断片として扱を判断する定期見直しを必須としていンパク質や核酸などの機能分子を内包

い、最終的なヒトへの投与物としてのることから、先端分野のガイドライン

し、分泌している。分泌された小胞

明確な定義付けを行うことは、現時点として適している。米国では、2016年

が、体液を通じて周囲の細胞や遠隔地では困難と判断された2）。今後の技術12月に“21st Century Cures Act”がの細胞へと運ばれ、その小胞を受容し進展や諸外国における規制状況などの制定され、その3036項に、再生医療のた細胞に機能分子を受け渡すことで、変化を踏まえて、再考される機会があ

開発、評価、及び審査を支援するため

細胞間コミュニケーションツールとると思われる。

に、 ア メ リ カ 食 品 医 薬 品 局（FDA）

して様々な生命現象及び疾患に関与す研究開発の促進や、将来的に必要とがアメリカ国立標準技術研究（NIST）

ることが明らかになってきている。こなる規制当局との対話の効率化など、などの利害関係者と標準開発の優先順の よ う な 細 胞 外 小 胞（Extracellular

エクソソームの産業化を実現させるた

位付けを行い、標準開発を推進するこ

vesicles : EVs）は、その産生経路めの施策として、ガイドラインの整備とが規定されている 。これを受けてもしくはサイズによって、エンドソーは必須である。本稿では、主たる既存

FDAは、2019年3月に発出した産業界ムに由来する約100 nm のエクソソーのガイドラインを概説したうえで、エ向けのガイダンスの中で、製品開発やム（Exosome）、 細 胞 膜 に 由 来 す る

クソソームへの適用可否、新たなガイ承認申請に標準を活用するとそれらのマイクロサイズのマイクロベシクル

ドラインとして「標準」の必要性を説プロセスが効率化されて成功確率が高（Microvesicle）、死細胞の膜に由来す明する。

まる、と説明して標準の活用を推奨している5）。

るアポトーシス小体/小胞（Apoptoticbody）の3種類に大きく分別できる。
細胞外小胞、特にエクソソームは、

4）

再生医療分野の標準開発状況

再生医療分野の国際標準は、国際標準化機構の専門委員会276（ISO/TC

細胞、組織・臓器に対して様々な作

ICH（医薬品規制調和国際会議）で276；バイオテクノロジー）において用をもたらすと考えられており、そのは、医薬品の品質・有効性・安全性に開発されている。本委員会は、2023年

中でも抗炎症作用や免疫制御作用、関するガイドラインが整備されている8月時点で4つの作業グループ（WG）

組織修復作用などは特定の疾患に対（表１）。しかしながら、これらは低分から構成され、再生医療分野の標準はする治療薬として活用できることが子医薬品、生物薬品を主な対象とした

主として作業グループ3（WG 3；分析

期待されている。特に、間葉系幹細胞ものであり、適用範囲に細胞は含まれ（Mesenchymal stem cell : MSC）を用ていない。細胞は低分子化合物やタンいた再生医療において、MSC が持つパク質と比較して、化学式で構造を表治療効果は細胞自身が組織の細胞へ分現できない、サイズが桁違いで大き化して修復する場合もあるが、MSC

い、ヘテロ性が高いなど複雑であるたの分泌物（Secretome）による効果がめ、これらのガイドラインを解釈して

1）

高いとも考えられている 。

適用することは困難である。そこで、

このように、基礎研究が進みつつあ細胞を対象とした標準の整備が、ISOるエクソソームに対して、製造工程に（国際標準化機構）を中心に進められ

おいて細胞加工物との類似性もあるたている。標準は、開発プロセスに規制

め、再生医療等安全性確保法の対象に当 局 の 承 認 が 含 ま れ な い 点 を 除 き、加えることが第69回厚生科学審議会再ICHガイドラインと同義である。また、

表１．主なICHガイドライン
ICH-Q2（R1）
ICH-Q3A（R2）
ICH-Q6A
ICH-Q6B
ICH-Q8（R2）
ICH-Q9ICH-Q10
ICH-Q11
ICH-Q12

品質シリーズ
分析法バリデーション：実施項目&実施方法
原薬の不純物
医薬品の規格及び試験方法
バイオ医薬品の規格及び試験方法
製剤開発
品質リスクマネジメント
医薬品品質システム
原薬の製造と開発
医薬品のライフサイクルマネジメント

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

ICH ガイドライン
医薬品の品質・有効性・安全性の各分野のトピックごとに、各メンバーを代表する専門家が専門家作業部会で協議し、規制当局代表者の承認を経て作成される科学的・倫理的に適切と考えられる指針［出典：PMDA ホームページ（改変）］標準与えられた状況において最適な秩序を達成することを目的に、共通的に繰り返して使用するために、活動又はその結果に関する規則、指針又は特性を規定する文書であって、合意によって確立し、一般に認められている団体によって承認されているもの3）［出典：JIS Z 8002，3.2］

21

幹細胞由来 EV ～治療、診断、化粧品への展開～方法）及び作業グループ4（WG 4；バイオプロセッシング）において取り扱われている。また、36か国の積極参加
メンバー（P-メンバー）と16か国のオブザーバーメンバー（O-メンバー）が参画（図１）、議長及び幹事をドイツ、WG 3のコンビーナを米国、WG 4のコンビーナを日本が担っている。ISO/TC 276の国内審議団体は、日本産業標準調査会（JISC）から承認を受けた一般社団法人再生医療イノベーショ
ンフォーラム（FIRM）が担い、産官学より約85名が参画している。
ISO/TC 276において開発・発行さ
れ て い る 再 生 医 療 に 関 わ る 標 準 を、

図１．ISO/TC…276参加国「分析方法」、「周辺産業」、「製造」と分類して、以下で詳述する（図２、表２）。
「分析方法」に関する代表的な標準は、 日 米 が 共 同 開 発 し たISO 23033（細胞治療製品の試験及び特性評価に6）関する一般要求事項及び考慮事項）

であり、目的に適合する分析法のデザ
イン、分析法の妥当性確認、試験、及び報告に関する一般要求事項が規定されている。これは、ICH-Q6シリーズの細胞版と位置付けられ、従来は、各人がICH-Q6B（バイオ医薬品の規格及び試験方法）を参照して細胞を扱うための解釈を行い適用せざるを得ず、解釈の過程でバラツキが生じていた問題を解決した。
「周辺産業」に関する標準は、それぞれの対象とする製品・サービスの供図２．再生医療関連の標準群

給者と使用者（すなわち、細胞治療製品の開発・製造者）双方の役割を規定の実現を図るための「細胞製造マネジ始した。発行後に国内、次いでアジアしたものである。例えば、ISO 20399

メントシステム」である。製造フロー

圏に普及させ、再度ISOに提案する方（細胞治療製品及び遺伝子治療製品のにおける不安定要因の抽出とリスクア針である。

製造時に使用する補助材料） では、

セスメント、管理計画の策定、製造試供給者が提供すべき情報及び使用者が作、レビューの実施、及び必要に応じ採否を判断するために実施すべき事項

このサイクルを繰り返すPDCAを中心を規定している。両者が標準に準拠すに規定したものである。日本が提案しることにより、使用者は目的に適合してアジア圏を中心に多くの国々の賛同

エクソソームは細胞を由来として製た補助材料の採用判断が可能となる。

を得つつあったが、英米の一方的な反造されるため、生物薬品の一種と扱う「製造」に関する標準は、製品ライ対を受け、一旦提案を取り下げて、日ことは可能である。しかし、タンパク

フサイクルを通して一貫性のある製造

本産業規格（JIS）としての開発を開質や核酸などを脂質二重膜が内包する

7）

22

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

エクソソームに対する標準
活用・開発の提案

幹細胞由来 EV ～治療、診断、化粧品への展開～

多様な構成成分による複雑な構造物で表２．再生医療関連の標準（網掛は開発中）あるため、単純にタンパク質から成る

分類

抗体と同様に扱うことには難しさがある。エクソソームの製造プロセスに基づき、適用可能な標準、新規開発が必要な標準について考察する（図３）。
エクソソームの製造プロセスの概略

分析
方法

は、細胞調製⇒細胞培養（エクソソー
ム産生）⇒濃縮・精製⇒製剤化である。
細胞調製及び培養工程においては、
上記の再生医療に関わる標準群の適用が可能である。品質管理においては、

製造

ISO 23033をはじめとする「分析方法」に関わる標準群、製造関連では、ISO
20399、ISO/TS 23565などの「周辺産業」に関わる標準群、さらに「製造」に関わる細胞製造マネジメントシステ
ムはそのまま適用可能である。ただ

周辺
産業

番号

表題
備考
バイオテクノロジー… —細胞生存率分析方法に関する一般考
ISO/CD…8934
慮事項と要求事項—…第1部：哺乳類細胞
バイオテクノロジー… —細胞計数—… 第1部：細胞計数法の一
ISO…20391-1…:…20188）
般ガイダンス
バイオテクノロジー… —細胞計数—… 第2部：計数法パフォー
9）
ISO…20391-2…:…2019
マンスを定量化するための実験計画と統計分析
日米バイオテクノロジー… —分析方法—… 細胞治療製品の試験及協働ISO…23033…:…2021
び特性評価に関する一般要求事項及び考慮事項
提案
バイオテクノロジー… —分析方法—… バイオプロセスにおけ10）る迅速な微生物検出のための方法の選択と検証のためのリ
ISO…24190…:…2023
スクベースのアプローチ
バイオテクノロジー… — 細胞の形態学的解析の最小要件 — 日本
ISO/CD…24479
画像捕捉、画像処理、及び形態計測
提案
日本
JIS…Q…2101
バイオテクノロジー…—細胞製造マネジメントシステム
提案
バイオテクノロジー… —細胞治療製品及び遺伝子治療製品のISO…20399…:…2022
製造時に使用する補助材料
バイオテクノロジー… —バイオプロセシング—… 治療用細胞 日本
ISO…20404…:…202311）
を包含する包装材料の設計に関する一般要求事項
提案
バイオテクノロジー… —治療用細胞の輸送に関する一般要求 日本
12）
ISO…21973…:…2020事項
提案
バイオテクノロジー… —バイオプロセシング—…治療用細胞の製造
ISO/TS…23565…:…202113）に用いられる機器システムに関する一般要求事項及び考慮事項

し、細胞製造マネジメントシステムの目的であるQuality by Designの考え方の適用範囲を、エクソソームを含む培養液を最終製品と見做して培養工程までに留めるか、エクソソームの製剤化まで含む製造工程全体に広げるか、議論が必要である。
一方、工程モニタリングを含めた産生したエクソソームの分析には、ISO
23033にもICH-Q6Bにもエクソソーム

図３．エクソソームに対する標準活用に特化した記述はなく、それらの適用は不十分である。エクソソームの特性

よってはエクソソーム以外の不純物の解析と試験に関わる標準は、新規開発混入が多く、精製度が最終製品の特性のニーズがある。

に影響するリスクがある。さらにエク基礎研究が着実に進展しているエク

おわりに産生したエクソソームを含む細胞培

ソソームのサイズによる活性成分の違

ソソームの産業化に向けての課題の一養液を目的とする製品形態にするため

いや特定のサイズ以外の細胞外小胞がつに、ガイドラインとして標準の整備には、濃縮やマイクロベシクル・アポ

有効成分を含まない場合、それは不純が挙げられる。この目的に対し、再生

トーシス小体・細胞や目的外のエクソ物として捉えることもできるため、サ

医療用途として開発された標準群の活ソームを除去する精製が必要である。

イズの確認も重要になり得る。目的に用の啓蒙、特性解析・試験、濃縮・精濃縮・精製工程に関しては、多くの方適合した精製方法を選択することを支製を含むエクソソーム特有の課題に対法が提案されているが、それらの中か援するために、各精製方法の特徴、採処すべき標準開発の推進に取り組む。

ら方法を選択し、目的に適合する製品用に当たって留意すべき事項などが記形態にすることは、エクソソームの産

載されたガイドラインが必要となる。

業化における鍵となる。論文などでしかしながら、現状は適切なものが存

は、超遠心法などによる濃縮を実施し在しておらず、新規標準開発のニーズている例が多いが、多量処理ができなとしてISO/TC 276/WG 4で議論が開いため、そのまま実用化に向けて適用始された。今後の進展に期待したい。

することは難しい。また、精製方法に〔参考文献〕
1）エクソソームを含む細胞外小胞（EV）を利用した治療用製剤に関する報告書，独立行
政法人医薬品医療機器総合機構
https://www.pmda.go.jp/files/000249829.
pdf2）第69回厚生科学審議会再生医療等評価部会
議事録

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

23

幹細胞由来 EV ～治療、診断、化粧品への展開～

6）ISO 23033 : 2021, Biotechnology — Analytical10）ISO 24190 : 2023, Biotechnology — Analyticalmethods — General requirements andmethods — Risk-based approach for3）ISO/IEC Guide 2 : 2004, Standardizationconsiderations for the testing andmethod selection and validation for rapid

and related activities — General vocabulary

characterization of cellular therapeutic（対応JIS；JIS Z 8002 : 2006, 標準化及び関products

https://www.mhlw.go.jp/stf/shingi/
2r9852000002azw3.html

microbial detection in bioprocesses11）I S O 2 0 4 0 4 : 2 0 2 3 , B i o t e c h n o l o g y —連活動−一般的な用語）

7）ISO 20399 : 2022, Biotechnology — Ancillary

Bioprocessing — General requirements for4）21st Century Cures Act,

materials present during the production of

the design of packaging to contain cells forhttps://www.congress.gov/bill/114th-

cellular therapeutic products and genecongress/house-bill/34

therapy products

therapeutic use12）ISO 21973 : 2020, Biotechnology — General5）Food and Drug Administration - Center for8）ISO 20391-1 : 2018, Biotechnology — Cell

Biologics Evaluation and Research,

counting — Part 1 : General guidance onStandards Development and the Use ofcell counting methods

requirements for transportation of cells fortherapeutic use13）ISO/TS 23565-1 : 2021, Biotechnology —Standards in Regulatory Submissions9）ISO 20391-2 : 2019, Biotechnology — Cell

Bioprocessing — General requirements andReviewed in the Center for Biologics

counting — Part 2 : Experimental design

considerations for equipment systems used

Evaluation and Research - Guidance forand statistical analysis to quantify counting

in the manufacturing of cells for

Industry, 2019

method performancetherapeutic use

関連製品
コード No.

品

名

規格

容量

希望納入価格（円）MSC増殖培地132-19345

MSCultureTM…High…Growth…Basal…Medium

細胞培養用

500mL

… 15,500

133-19331…

MSCultureTM…High…Growth…Supplement

細胞培養用

5mL

… … 6,000

053-09451

EV-UpTM…EV…Production…Basal…Medium…for…MSC,…AF

細胞培養用

95mL

… 12,000

298-84001…

EV-UpTM…MSC…EV…Production…Supplement,…AF

細胞培養用

100mL用… 19,800

MagCaptureTM…Exosome…Isolation…Kit…PS…Ver.2

遺伝子研究用

297-79201

PS…CaptureTM…Exosome…ELISA…Kit…
（Anti…Mouse…IgG…POD）

298-80601

PS…CaptureTM…Exosome…ELISA…Kit…
（Streptavidin…HRP）

296-83701
290-83601
292-83801

EV産生用培地

単離/精製キット294-84101
290-84103

2回用… 20,000

10回用… 80,000

遺伝子研究用96回用… 68,000

遺伝子研究用96回用… 68,000

CD9-Capture…Human…Exosome…ELISA…Kit…
（Streptavidin…HRP）

遺伝子研究用

96回用

100,000

CD63-Capture…Human…Exosome…ELISA…Kit…
（Streptavidin…HRP）

遺伝子研究用

96回用

100,000

CD81-Capture…Human…Exosome…ELISA…Kit…
（Streptavidin…HRP）

遺伝子研究用

96回用

100,000

遺伝子研究用1キット… 20,000ELISAキット

エクソソーム膜透過処理用キット
294-85701

EV-PermTM…Permeabilization…Pretreatment…Kit…for…Exosome…Membrane

エクソソーム関連インハウスセミナー実施中！
「製品のことをもっと良く知りたい」、「メーカーに詳細を聞きたい」というお客様に、個別に製品紹介のインハウスセミナー（約30分〜、オンライン）を実施します。参加人数は1名様でも構いません。まだ購入するか決まっていない方も是非お申し込み下さい。
申し込み後、担当者よりメールにてご連絡させていただきます。
●内容

エクソソーム関連試薬・受託サービスのご紹介●時間30分〜 60分程度

●費用

無料

●言語

日本語

●形式

オンライン

●参加人数

申込はこちら↓1名様〜※1研究室/1グループにつき1回の開催とさせていただきます。
…2 〜 10℃保存…
…− 20℃保存…
…− 80℃保存 … 150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2023 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

24

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

ew Products
少量サイズで保管に便利
核酸合成用試薬

核酸合成用試薬のラベルデザインが新しくなりました！

500mL 包装

オリゴヌクレオチドを化学合成するための最も一般的な方法は、ホスホロアミダイト法による固相合成です。この合成は主に自動合成装置で行われることから、ホスホロア

当社核酸合成用試薬ラベル

ミダイト法の各反応工程に用いる専用試薬（適切な濃度や組成に調製された反応補助試薬）が必要になります。当社
では、核酸合成に適した品質の反応補助試薬（溶液）をご提供しています。
この度、ラボスケール合成のお客様のご要望にお応えして、反応補助試薬（溶液）の500mL包装をラインアップに追加しました。「危険物の指定数量に困っている」「毎回使い切りたい」お客様は500mL包装をご利用下さい。

高濃度品もラインアップ充実
核酸合成用試薬

硫化剤

核酸のりん酸部位の修飾には、O（酸素原子）をS（硫黄原子）に置換したホスホロチオアート修飾があります。
核酸医薬では、酵素の標的となるりん酸エステル結合をチ
オりん酸エステル結合に変換することで、生体内での安定性を高めることが広く知られています。

デ ー タ

このホスホロチオアートへの変換には種々の効率的な硫■ ホスホロアミダイト法の反応機構化剤が開発されてきました。その内のひとつであるDDTT
は、反応性及び安定性に優れることから最もよく用いられ

Step 1ていますが、一方で、非常に結晶性が高く、反応溶媒への溶解性が低いことが欠点です。そのため、反応で使うにはStep 2「調液が手間」「高濃度に調液するのが難しい」といった不Step 3

便さがあります。そこで、当社ではあらかじめ調液した溶液品を2種類の濃度でご提供しています。室温保管中に結Step 4晶が析出しないことを確認しているため、安心してお使いいただけます。

コード No.

品

名

規格 容量 希望納入価格（円）

Deblocking Solution
045-34445[Dichloroacetic Acid-Toluene（3:97）]

危

核酸
500mL
合成用

12,000047-34525

Deblocking Solution[Dichloroacetic Acid-Toluene（5:95）]

危

核酸
500mL
合成用

19,000040-34515

Deblocking Solution[Dichloroacetic Acid-Toluene（10:90）]

危

核酸
500mL
合成用

20,000013-19685

Activator Solution-1（0.25mol/L 4,5Dicyanoimidazole, Acetonitrile Solution）

危

核酸
500mL
合成用

9,810

015-20015

Activator Solution-3（0.25mol/L 5-Benzylthio- 核酸
500mL
危 合成用
1H -tetrazole, Acetonitrile Solution）

9,700

010-19695

核酸
Activator Solution-4（0.25mol/L 5-Ethylthio500mL
危 合成用
1H -tetrazole, Acetonitrile Solution）

8,900

Cap A Solution
033-25395[1-Methylimidazole-Acetonitrile（2:8）]

核酸
500mL
危 合成用

14,000Cap B1 Solution
036-25385[Acetic Anhydride-Acetonitrile（4:6）]

核酸
500mL
危 合成用

14,000

核酸
500mL
合成用

14,000039-25635

Cap B2 Solution[Pyridine-Acetonitrile（6:4）]

危

Cap B2 Solution
039-25375[2,6-Lutidine-Acetonitrile（6:4）]

核酸
500mL
危 合成用

14,000Oxidizing Solution
150-03515 [Iodine Solution（abt. 0.05mol/L）][Pyridine:Water（9:1）]

核酸
500mL
合成用
危

10,000

O

O

O

S

S

S

C16H14O2S2＝302.41
CAS RN® 15088-78-5
2

CH3
N
S S

N

O

O

C7H4O3S2＝200.23
CAS RN® 66304-01-6
1

S

S

N

CH3

C5H7N3S3＝205.32
CAS RN® 1192027-04-5
3

O

N
S S

C8H5NOS2＝195.26
CAS RN® 7047-10-1
4…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2023 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

25

ew Products
粉末品
No. コード No.

湿持続性を有することが知られています1）。
品

名規格/メーカー 容量 希望納入価格（円）

3H -1,2-Benzodithiol-3-one
1 324-72121 1,1-Dioxide【Beaucage試薬】

富士フイルム500mg
ワコーケミカル

10,600027-19422 Bis（phenylacetyl）Disulfide
2021-19425 【PADS】

25g
核酸合成用
500g

22,500照  会

042-34411 （   5g[ N ,N -Dimethyl
aminomethylidene）amino]3 040-34412
核酸合成用 25g
3H -1,2,4-dithiazoline-3-thione044-34415 【DDTT】
500g

19,800166-28251
5-Phenyl-3H -1,2,4-dithiazol4 164-28252
3-one
168-28255

19,80069,300
照  会

核酸合成用

   5g
25g
500g

特

●非イオン性・親水性●ヒアルロン酸に匹敵する高い
保湿持続性

69,300CAS RN® 87105-87-1

照  会■ポリメタクリロイルリシン
アミノ酸は、生命体を支えるタンパク質の構成成分であり、そのアミノ酸を組み込んだポリマーはペプチドを含め溶液品
No. コード No.

品

名

規格

様々な材料に応用されています。ポリメタクリロイルリシ

容量 希望納入価格（円）

ンは、リシンをメタクリロイル化した2種類のモノマーをSulfurizing Solution
196-18761 {0.05mol/L （100mL 23,000[ N ,N Dimethylaminomethylidene）
核酸合成用
3
amino]-3H -1,2,4-dithiazoline198-18765 3-thione Solution}
500mL 110,000[Pyridine-Acetonitrile（6:4）] 危
Sulfurizing Solution
100mL 22,000
193-18771 {0.08mol/L （[ N ,N 3
Dimethylaminomethylidene） 核酸合成用
195-18775 amino]-3H -1,2,4-dithiazoline500mL 75,000
3-thione, Pyridine Solution} 危4

長199-18751 Sulfurizing Solution（0.05mol/L 5-Phenyl-3H 1,2,4-dithiazol-3-one,
191-18755 Acetonitrile Solution）

192-18741 Sulfurizing Solution（0.1mol/L 5-Phenyl-3H 4
1,2,4-dithiazol-3-one,
194-18745 Acetonitrile Solution）

核酸合成用
危

核酸合成用
危

100mL

19,800500mL60,000100mL

22,000500mL75,000重合させた正電荷を有するアミノ酸ペンダント型ポリマー
です。

特

長

●水溶性
●アミノ基が正電荷を有するため、負電荷の表面に吸着●アミノ基とカルボキシル基は化合物の結合部位として利用可能

バイオマテリアルなどの研究・開発に〔参考文献〕

機能性ポリマー1）Akiyama, T. et al . : J. Soc. Cosmet. Chem. Jpn ., 48, 184（2014）.

近年、人工臓器に代表される生体適合性材料、ドラック
デリバリーシステム（DDS）、細胞培養シートなどバイオ

コード No.

マテリアルの研究・開発が活発に行われています。これらに使用される高分子材料の共通の特長として、非イオン性

しました。

名

容量 希望納入価格（円）

NEW

Poly
（Methoxy PEG-9 Methacrylate）
Solution（abt. 20%）351-46381［Water-1,3-Butanediol Solution］【Evemoist®】

100g

14,000NEW

Polymethacryloyl Lysine
358-46391【Curevelist®】   5g

19,500かつ親水性であることが挙げられます。当社では、本用途向けへの利用が期待される機能性ポリマーをラインアップ

品

Evemoist®、Curevelist®は富士フイルム和光純薬の登録商標です。

■ポリ（メタクリル酸メトキシPEG-9）
ポリエチレングリコール（PEG）は、非イオン性の水

その他の機能性ポリマーは当社のHPをご覧下さい。

溶性ポリマーであり、これまで様々なバイオマテリアル

試薬事業トップ→合成・材料→高分子材料→機能性ポリ材料に使用されています。ポリ（メタクリル酸メトキシ

マー

PEG-9）は側鎖に長いPEG鎖を有する、非イオン性・親水https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/category/synthesis/

性ポリマーです。本品は、ヒアルロン酸に匹敵する高い保polymer_material/polymer/index.html…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2023 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

26

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

ew Products
グレードアップ！

追加品目のお知らせ

認証標準物質 元素標準液（CRM）

ポジティブリスト関連農薬・
動物用医薬品標準品

当社は2023年3月に日本初のASNITE認定に基づいた、元素標準物質生産者の包括的認定（フレキシブル認定）を

当社では、ポジティブリスト制度の対象となる農取得しました。本認定取得に伴い、ICP分析用元素標準液

薬・動物用医薬品の標準品を取扱っております。

を順次、SIトレーサブルな認証標準物質（CRM）へ切り

下記品目を新たに発売しました。

替えてまいります。
従来品につきましては、現在庫をもって販売終了とさせ

農薬標準品て頂きます。

■ シクロピリモレート標準品■ フルエンスルホン標準品

新製品■ フルオキサストロビン代謝産物M55標準品

コード No.
近日
発売

品

名

規格

■ メトブロムロン標準品

容量 希望納入価格（円）

Neodymium Standard Solution
143-10091（Nd 1000）[CRM]

ICP分析用 100mL 照

Yttrium Standard Solution259-00711（Y 1000）[CRM]

ICP分析用 100mL 11,000

動物用医薬品標準品

会■ ツラスロマイシンA標準品
コード No.

品

名規格

容量 希望納入価格（円）032-26041 Cyclopyrimorate Standard
残留農薬試験用50mg
NEW
060-07061 Fluensulfone Standard
残留農薬試験用
50mg
Fluoxastrobin Metabolite M55
NEW
062-07021
残留農薬試験用 100mg
Standard
NEW
138-19401 Metobromuron Standard
残留農薬試験用 100mg
NEW 201-21411 Tulathromycin A Standard
高速液体クロマトグラフ用 100mg
近日発売

従来品（販売終了予定）
コード No.

品

名

規格

Neodymium Standard Solution
143-09861（Nd 1000）

容量 希望納入価格（円）ICP分析用 100mL 15,000

照  会
29,00037,00012,00020,000

随時、当社 HP のリストに発売品目を追加・更新しています。詳細は当社 HP をご覧下さい。

詳細は当社HPをご覧下さい。

試薬事業トップ→分析→残留農薬・動物用医薬品→農試薬事業トップ→分析→ICP→単元素標準液→ICP分析用

薬・動物用医薬品混合標準液検索バナー

元素標準液

https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/product/

https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/category/00442.html

search/pesticides.html

和光純薬時報 Vol.91 No.3 訂正案内
平素より当社製品をご愛顧頂き、誠にありがとうございます。
和光純薬時報 Vol.91 No.3 の記事中に誤りがございました。下記の通り訂正をご案内させていただくとともに、深くお詫び申し上げます。
記< 訂正内容 >①掲載箇所：p.26
訂正箇所：ポジティブリスト関連農薬・動物用医薬品標準品「228-02461 Valnemulin Hydrochloride Standard 50mg」の価格
訂正内容：［誤］30,000 円 ［正］40,000 円②掲載箇所：p.29

訂正箇所：「071-05473 GGsTopTM 100mg」の規格

訂正内容：［誤］細胞培養用 ［正］細胞生物学用
なお、ホームページ掲載 PDF ファイルは訂正しております。

以上…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2023 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

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ew Products
D/L-アミノ酸（キラルアミノ酸）LC/MS分析用誘導体化試薬

ガロン瓶専用保護ジャケット（R ）-BiAC 誘導体化試薬セット

ガロテクト TM

アミノ酸は生体内や天然に広く存在する化合物です。ア

本製品は、ガロン瓶専⽤の保護ジャケットです。このミノ酸には鏡像異性体であるL-アミノ酸及びD-アミノ酸が度、バイオマスプラスチックを使⽤した⾚⾊を発売しまありますが、ほとんどがL-アミノ酸として存在しています。

す。溶媒種や毒劇物の識別等にご活⽤下さい。

近年、微量に存在するD-アミノ酸について記憶・学習能力への関与等の機能性が明らかにされ、L-アミノ酸と分離分析する重要性が高まってきています。
（R ）-BiACは、D/L-アミノ酸をLC/MSで分析する際の誘導体化試薬です。（R ）-BiACを用いることにより、キラル
アミノ酸を高分解度・短時間（12分）かつ、専用機器を用いずに分析を行う事ができます。この度、誘導体化をより簡便にする専用キットを発売しました。

アプリケーションデータ
尿中の 15 種アミノ酸の分析例

乳酸菌飲料中の15種アミノ酸の分析例※ International Forum Design GmbH が主催する賞のひとつで、全世界の優れた工業デザインに与えられます。

特長●ガロン瓶が倒れにくくなる！

分析条件［HPLC］
Column : Wakopak® Ultra APDS TAG® φ 2.1mm × 100mm（D）
Column temperature : 40℃
Eluent : A）0.1% HCOOH in 10mM HCOONH3 aq.,
B）95% CH3CN in H2O
Gradient : Time（min.）B conc.（%）
Flow rate : 0.4mL/min.
0-3
3-14.314.3-17
17-17.1
17.1-18
18-18.1
18.1-20

14-16
16-33
33-45
45-90
90
90-14
14

●11種類の溶媒で耐溶剤性試験を実施！
●保管庫にジャストフィット！

［MS］
Ionazation : ESI

コード No.

Mode : SRM

品

名

規格

025-19761（R ）-BiAC（R ）-BiAC Derivatization
近日
発売 296-86001
Reagents Set

アミノ酸分析用

近日
発売

NEW

235-64051●⾼耐久性！

Wakopak Ultra APDS TAG
φ2.1mm × 100mm（D）®

®

容量 希望納入価格（円）

照会

アミノ酸分析用 1キット 照

会

無規格

5mg

1本

120,000

詳細は当社 HP をご覧下さい。

コード No.

品

名293-36321 GalloTectTM（White）
TM
近日
発売 295-36881 GalloTect （Red）

規格

容量 希望納入価格（円）

無規格
無規格

1個
1個

試薬事業トップ→分析→アミノ酸・ペプチド・タンパク質

詳細は当社 HP をご覧下さい。

→アミノ酸（定量・組成分析）→（R ）-BiAC 法（キラルア

試薬事業トップ→常用試薬・ラボウェア→ラボウェア→安ミノ酸 LC/MS 分析）

全・保護用品→ガロテクト TM

https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/category/03157.html

https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/category/02166.html…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
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2,800
照会

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

ew Products
新たにラインアップしました！
モルモット抗体

医薬品製造用原料
CertiPro シリーズ
当社では、医薬品の製造工程にご使用いただくことが可
能な「医薬品製造用原料」をご提供しています。日本薬局

抗パルブアルブミン, モルモット

方および日本薬局方外医薬品規格（局外規）、医薬品添加抗オキシトシン, モルモット

物規格（薬添規）等公定書収載品目の他、公定書に収載のない（non-conpendialな）成分では当社の自主規格品をご提供しています。 管理基準により、CertiPro（GMP管理品）とCertiPro-L（ISO9001管理品）に区分しています。

抗MAP2, モルモット

加え、USP（米国薬局方）、Ph.Eur.（欧州薬局方）規格項
目への適合、エンドトキシン試験を実施しています。
■ CertiPro新製品
コード No.

品

名

規格

適合規格
®
容量 CAS RN エンドトキシン
USP/NF Ph.Eur.

037-26035 グルコン酸カルシウム 日本
ーー033-26037 水和物「製造専用」 薬局方
NEW
197-19195 精製白糖
日本（NF） ✓
NEW
薬局方
193-19197「製造専用」

500g
1.5EU/g299-28-5
未満
10kg
500g
0.2EU/g57-50-1未満
10kg◆精製白糖「製造専用」＜低エンドトキシンタイプ＞
精製白糖は、医薬品添加剤として錠剤の糖衣や賦形剤に用いられています。
この度、新たにエンドトキシン値を 0.2EU/g 未満保証とした精製白糖「製造専用」を販売します。
GMP 管理により製造を行っており、医薬品製造工程にご使用いただけます。

■ CertiPro-L新製品
コード No.
NEW

本品はモルモットから得られたポリクローナル抗体です。神経科学研究にご活用下さい。

一部品目では、日本薬局方、局外規、薬添規への適合に

NEW

抗 MAP2, モルモット

品

MAP2は神経細胞に豊富に存在する微小管結合タンパク質であり、汎用的なニューロンマーカーとして広く使用さ
れます。

製品概要
組成

血清

抗原

ラットMAP2（全長）

標識

未標識

種交差性

マウス, ラット

アプリケーション

免疫組織染色（凍結切片）1 : 500-1,500※最適濃度は実験系ごとにご検討下さい。

アプリケーションデータ
（A）大脳皮質 運動野

名

容量

CAS RN®

（B）小脳

エンドトキシン

196-19182
25g
デキストラン硫酸ナトリウム5000
9011-18-1
190-19185
500g

50EU/g未満◆デキストラン硫酸ナトリウム 5000
デキストラン硫酸ナトリウムは細胞培地の添加剤として、細胞の保存、タンパク質の前処理等に用いられています。
本品はエンドトキシン値、DNase 活性、RNase 活性を保証し、医薬品製
造用原料としてご使用いただけます。

2023年版カタログ配布中！
医薬品製造用原料 CertiPro シリーズの製品ラインアップをご紹介しています。
カタログをご希望の場合は、当社または当社代理店営業員
までお問い合わせ下さい。
なお、下記 URL・QR コードからもダウンロード可能です。
https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/pharmaceuticalraw-materials/catalog/index.html

詳細及び CertiPro シリーズの製品一覧は
当社医薬品原料分野 HP をご覧下さい。
https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/
pharmaceutical-raw-materials/index.html（A および A’）（サンプル）マウス脳（凍結切片）（一次抗体希釈率）MAP2 1 : 1,500（二次抗体）Alexa Fluor 488 標識抗モルモット IgG 抗体（共染色）緑：MAP2、青：DAPI（B および B’）（サンプル）マウス脳（凍結切片）（一次抗体希釈率）MAP2 1 : 1,500（二次抗体）Alexa Fluor 488 標識抗モルモット IgG 抗体
Alexa Fluor 594 標識抗モルモット IgG 抗体（共染色）緑：MAP2、赤：カルビンディン（データご提供：京都工芸繊維大学 応用生物学系 宮田清司 先生）…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
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和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

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ew Products〔参考文献〕

製品概要

1）Taniguchi, Y. et al . : Cell Tissue Res ., 343, 303（2011）.
2）Mannari, T. et al . : Glia , 61, 957（2013）.
3）Hourai, A. and Miyata, S. : J. Neurosci. Res ., 91, 757（2013）.
4）Morita, S. et al . : Cell Tissue Res ., 359, 865（2015）.

抗パルブアルブミン, モルモット

組成PBS，血清

抗原

KLH結合合成ペプチド（オキシトシン配列相同）

標識

未標識

種交差性

ヒト, マウス, ラット, ウシ

アプリケーション

パルブアルブミンは低分子のカルシウム結合性アルブミンです。脳では一部のGABA作動性ニューロンに発現して免疫組織染色（凍結切片）1 : 1,500※最適濃度は実験系ごとにご検討下さい。

アプリケーションデータ

おり、抑制性ニューロンのマーカーとして広く使用されます。

（A）視床下部 （B）室傍核 （C）視索上核

製品概要
組成

血清

抗原

ラットパルブアルブミン組換えタンパク質

標識

未標識

種交差性

マウス, ラット

アプリケーション

免疫組織染色（凍結切片）1 : 1,000-3,200※最適濃度は実験系ごとにご検討下さい。

アプリケーションデータ
体性感覚野

Ⅳ-Ⅴ層

（A）
（サンプル）マウス脳（凍結切片）（一次抗体希釈率）オキシトシン  1 : 1,500（二次抗体）Alexa Fluor 488 標識抗モルモット IgG 抗体（B および C）（サンプル）マウス脳（凍結切片）（一次抗体希釈率）オキシトシン  1 : 1,500（二次抗体）Alexa Fluor 488 標識抗モルモット IgG 抗体
  Alexa Fluor 594 標識抗モルモット IgG 抗体（共染色）緑：オキシトシン、赤：バソプレシン、青：DAPI（A）（サンプル）マウス脳（凍結切片）（一次抗体希釈率）パルブアルブミン  1 : 1,500（二次抗体）Alexa Fluor 488 標識抗モルモット IgG 抗体（B）（サンプル）マウス脳（凍結切片）（一次抗体希釈率）パルブアルブミン  1 : 1,500（二次抗体）Alexa Fluor 488 標識抗モルモット IgG 抗体
Alexa Fluor 594 標識抗モルモット IgG 抗体（共染色）緑：パルブアルブミン、赤：HuC/D、青：DAPI（データご提供：京都工芸繊維大学 応用生物学系 宮田清司 先生）（データご提供：京都工芸繊維大学 応用生物学系 宮田清司 先生）〔参考文献〕〔参考文献〕

1）Taniguchi, Y. et al . : Cell Tissue Res ., 343, 303（2011）.

1）Miyata, S. : Front. Endocrinol ., 8, 275（2017）.

抗オキシトシン, モルモット

コード No.

オキシトシンは視床下部で産生され、下垂体後葉から放出されるペプチドホルモンです。子宮収縮や母乳分泌を促
進し、母性行動の形成に関与するため、「幸せホルモン」「愛情ホルモン」などと呼ばれています。近年では、うつや自閉症などの精神疾患分野でも注目されています。

品

名

近日
発売

013-28551 Anti MAP2, Guinea Pig

近日発売

010-28561

近日発売

017-28571 Anti Oxytocin, Guinea Pig

Anti Parvalbumin, Guinea Pig

規格

容量 希望納入価格（円）

免疫
化学用

50μL

照

会

免疫
化学用

50μL

照

会

免疫
化学用

50μL

照

会

…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2023 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

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和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

ew Products
Y-27632シリーズ

再生医療等製品の商業生産向けの原材料

当社では4つのタイプのY-27632製品を取扱っており、使Y-27632（GMP 準拠）

用目的に合わせてお選びいただけます。

ICH-Q7（原薬GMP）に準拠した、再生医療等製品の商Y-27632（GMP準拠）業生産向けの原材料です。再生医療等製品の製造に使用できるよう、適切な品質管理体制のもとで製造されています。
Y-27632とは
選 択 的 か つ 強 力 なROCK
forming kinase/Rho binding
kinase）阻害剤です。ヒトES
散時に細胞死を抑制する、まC14H21N3O・2HCl・H2O = 338.27
CAS RN® 331752-47-7

た凍結保存後の細胞生存率が向上すると報告されています。
Y-27632（GMP準拠）

ISO9001

✓

動物由来物
フリー

✓

✓

✓

✓

エンドトキ
シン試験

✓

✓

✓

✓

マイコプラズマ
否定試験

✓

✓

✓

✓

規格

容量 希望納入価格（円）259-00613
257-00614

徴

036-24023●生菌数試験、エンドトキシン試験、マイコプラズマ否定

034-24024

試験、残留溶媒試験を実施

名

Y-27632, MF※2

●プロセスバリデーション、分析バリデーション、洗浄バ●動物由来物フリー
細胞培養用

5mg 120,000
25mg 480,000

16,500細胞    5mg 44,000
培養用 25mg 165,000
100mg 照会

35,00093,500※2 ISO9001管理の再生医療等製品の商業生産向けの製品です。
製造工程・分析法のバリデーション、変更管理を実施しています。

リデーションの実施
容量 希望納入価格（円）

CultureSure® Y-27632

039-24591 CultureSure® 10mmol/L Y-27632 細胞 300μL
培養用 1mL
035-24593 Solution, Animal-derived-free●培地添加剤製造設備の専用化による汚染リスクの抑制

規格細胞    5mg 55,000
培養用 25mg 220,000   1mg030-24026●ISO 14644-1クラス6相当のクリーンルームでの小分け

名品

030-24021●GMP管理体制による文書化品✓✓試験を行っています。

コード No.

✓✓コード No.

252-00701 Y-27632※1
NEW 258-00703（GMP Compliant）

✓

生菌数試験

エンドトキシン試験、マイコプラズマ否定試験、残留溶媒

特

✓

関連製品

GMP設備・管理体制で製造されています。生菌数試験、NEW✓

CultureSure®
CultureSure® 10mmol/L
Y-27632
Y-27632溶液，
動物由来物フリー

無菌試験（Rho-associated coiled-coil

細胞やヒトiPS細胞の細胞分ICH-Q7

Y-27632，
MF

詳細は、当社 HP をご覧下さい。
https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/
category/03097.html※1 冷所（25℃以下）で保管して下さい。

iPS細胞培養関連試薬・機器カタログ 配布中！
ヒト iPS 細胞用の無血清培地や、低分子化合物溶液、サイトカイン溶液からイメージング機器
まで、iPS 細胞を扱う研究者の方々に役立つ当社の試薬・機器をラインアップしています。この度、2023 年度より新たに内容を改訂しました。ぜひご一読下さい。
カタログをご希望の場合は、下記 URL、QR コードからダウンロードして下さい。
https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/catalog/pdf/catalog_0054.pdf…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2023 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

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ew Products
関連製品

血管内皮細胞系の増殖・分化誘導にサイトカイン溶液

VEGF-165 溶液，ヒト，組換え体
VEGF（Vascular Endothelial Growth Factor： 血 管 内皮細胞成長因子）は、血管内皮細胞の増殖、分化、生存に関与し重要な役割を果たします。

いずれもフィルター滅菌済みのため、そのまま培地に添加してご使用いただけます。
コード No.

品

名規格

容量 希望納入価格（円）

用も報告されています。また、腫瘍血管形成や転移にも関

再生医療等製品材料適格性確認書取得済みのサイトカイン溶液
014-27621 Activin A Solution, Human，
10μg
44,000
細胞培養用
010-27623 recombinant
50μg 154,000
10μg
43,000195-19071 SCF Solution, Human,
細胞培養用
191-19073 recombinant
50μg 160,000

わることから、疾患研究にも重要です。

116-01151

VEGF-165は、VEGFファミリーのひとつであり、最も発現量も多く、個体レベルでは血管新生、脈管形成に重要な因子です。胚の発育、子宮内膜との相互作用の促進の作

本品は、フィルター滅菌済みの溶液品のため、そのまま培地に添加できます。溶解時のコンタミやフィルター滅菌
時のタンパク質のロスがなく、安心してご使用いただけまKGF Solution, Human,
recombinant

サイトカイン溶液
062-06661
bFGF Solution, MF
068-06663

細胞培養用

10μg

39,000

細胞培養用

50μL 105,000
50μL×４ 341,300す。
本品は、味の素株式会社が製造しています。

高還元力・無臭の次世代還元剤！
特長0.5mol/L TCEP 溶液，中性●溶解操作が不要な溶液品

タンパク質のジスルフィド結合を切断するチオールフ●そのまま培地に添加可能

リーの還元剤です。従来の還元剤である2-メルカプトエタ
ノールやジチオスレイトールよりも還元力が高く、無臭溶液品の利点で、酸化されにくい次世代の還元剤です。タンパク質の変

粉末溶解時に懸念される下記のリスクが回避できます。

性を防ぐ中性に調整した使いやすい溶液タイプで、0.2μm●溶媒添加時のコンタミフィルターろ過済みです。
この度、ヌクレアーゼ活性試験済みの分子生物学用グ●フィルター滅菌時のフィルターへの吸着によるロス●タンパク質濃度の保証

レードをラインアップしました。DNaseやRNaseの混入を●溶媒選択ミスによる失活

気にせず使用できます。

特製品概要●起源：Corynebacterium glutamicum expressed humanvascular endothelial growth factor-165●組成：20mmol/L 酸化型グルタチオン、20mmol/L くえん酸ナトリウム、pH3.5（0.2μmフィルター滅菌済み）（VEGFR2/NFAT レポーターアッセイ）●エンドトキシン：0.1EU/μg 未満

名222-02481 VEGF-165 Solution, Human,
近日
recombinant
発売 228-02483●広い範囲のpH条件下でも安定●ヌクレアーゼ活性試験済み

CAS RN® 51805-45-9

度が50mmol/Lとなるようにサンプルバッファーを調製し●生物学的活性（EC50）：1〜30ng/mL

品●無臭

SDS-PAGEの還元剤として使用される場合は、本品の終濃●タンパク質濃度：0.10〜0.14mg/mL

コード No.

●還元力が高い使 用 例●純度（SDS-PAGE）：95% 以上

近日
発売

長

て下さい。
コード No.

品

名

0.5mol/L TCEP Solution,
NEW 208-21541
Neutral pH
規格

細胞培養用

容量 希望納入価格（円）規格

容量 希望納入価格（円）

分子生物学用 1.5mL

その他の分子生物学用試薬も多数取揃えています。詳細

10μg

照

会

は当社 HP をご覧下さい。

50μg

照

会

https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/category/01632.html…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2023 年 10 月時点での情報です。最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

32

10,000

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

化学大家 462
パーシー・ラヴォン・ジュリアン（1899 . 4 . 11 ～ 1975 . 4 . 19）
東邦大学名誉教授

中村幹夫ていなかったため、白人のクラスメー
１．はじめにトに比べ学力が圧倒的に不足していた

1973年4月24日、黒人の化学者であのである。ジュリアンは近くの高校でり実業家でもあるパーシー・ラヴォ

リメディアル教育を受けながら大学のン・ジュリアン（Percy Lavon Julian）

授業にも取り組んだ。すさまじい努力（図1）は、米国科学アカデミー事務局の結果、大学2年生になる頃にはクラから予期せぬ電話を受けた。「開催中スメートを凌ぐ学力を身につけた。彼の科学アカデミー年会で、あなたがア

は化学を担当していたブランチャード

カデミー会員に選出されました。おめ

教 授（William Blanchard） か ら 大 き

でとうございます。」科学者にとってな影響を受け、将来は医師ではなく最高の栄誉の一つである米国科学アカ

Ph.D.を取得して大学教授になり、化

デミーの会員に黒人化学者が選ばれた

学の研究を行おうと考えるようになっ瞬間であった。しかし、ここに至るまた（図2）。卒業時には最優秀生徒に与での道のりは決して平坦なものではな

えられる卒業生総代の栄誉を得た。まく、その成果は激しい人種差別の中でた、 名 誉 あ るPhi Beta Kappa（ 成 績

成し遂げられたものであった。ジュリ

優秀な大学生の友愛会）のメンバーにアンの一生を辿った人は誰もが次のよ
うな共通の疑問を持つであろう。「もし人種差別のない社会であったら、彼はどれほどの業績を残し、私たちはどれほどの恩恵を受けただろうか。」
２．生い立ち推薦された。

図 1．パ ー シ ー・ ラ ヴ ォ ン・ ジ ュ リ ア ン（1950 年頃）
https://digital.sciencehistory.org/
works/nk322f063（2023年5月30日閲覧）

３．学位取得を目指して

キャッスルに到着すると程なく、自分院での奨学金が得られずPh.D.取得の最優秀生徒として卒業したジュリアンではあったが、黒人であるため大学が歓迎されていないことを知った。大夢は絶たれた。ブランチャード教授はパーシー・ラヴォン・ジュリアンは学内の宿舎や食堂の使用が黒人には禁学位がなくても化学教師になれる黒人

1899年4月11日にアメリカ・アラバマ

じられていたのである。幸い、フラタ系大学への就職を勧めた。そこでジュ州モンゴメリーで父ジェームズ・ザム

ニティー（友愛会）のメンバーのおか

リアンはテネシー州のフィスク大学でナーと母エリザベス・レナとの間に長げで、フラタニティーハウスにある食化学教育に携わった。勤めて2年後の男として生まれた。ジュリアンの祖父

堂の給仕やボイラー管理の仕事を条件

1922年、ハーバード大学のオースチンは元奴隷であった。当時のアラバマ州に地下室に住むことが許され、最低限奨学金を受けることができたので、マでは黒人の教育は8年間が普通であっの生活が保障された。ジュリアンにサチューセッツ州ケンブリッジに移ったが、父ジェームズはさらに2年間のとって、もう一つの大きな悩みは学力た。ハーバード大学では著名な有機化教育を受け郵政公社の郵便配達人といであった。2年間の準備教育しか受け学者コーラー教授（Elmer P. Kohler）

う安定した仕事に就くことができた。
父は「黒人がこの社会で活躍するためには白人と同じ大学で教育を受けることが最も重要である」と考え、ジュリ
アンを何とか大学に進ませ医師にしたいと考えていた。南北戦争後のアメリカでは、いくつかの白人系大学が少数の黒人の入学を認めるようになっていた。幸いジュリアンはそのような大学の 一 つ、 イ ン デ ィ ア ナ 州 グ リ ー ン
キャッスルにあるデポー大学に入学できた。1916年、 大 きな 希 望 を 胸 に 抱き、家族全員に見送られてモンゴメ
リー駅から列車に乗ったが、グリーン

図 2．デポー大学科学クラブ員（1918 年）。最後列左がジュリアン、前列左から 3 人目が顧問のブランチャード教授（文献 3）

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

33

のもとで研究を行い、1年でMasterの

手紙が悪意をもってアフロ・アメリカ

学位を取得した。さらにPh.D.取得を新聞に投稿され、ジュリアンのみなら目指したが、大学はジュリアンの学位ず大学の評判も貶めたのである。その取得を拒否した。おそらく「白人学生ため、理事会はジュリアンの解雇を決は黒人の大学院生からの指導を嫌が定せざるを得なかった。ハワード大学

る」ことが理由ではないかとされている。

を解雇され、行く先が無く途方に暮れ

1926年、学位取得の夢を叶えられなていた時、学部長に昇進していたデ

かったジュリアンは失意のうちにケンポー大学のブランチャード教授が彼をブリッジを去り、ワシントンD.C.にあ研究職として採用してくれた。ハワー

る黒人系のハワード大学で准教授の職

ド大学での身分に比べれば大きな降格に就いた。勤務して2年が経過したとではあったが、ジュリアンにとってはき朗報がもたらされた。ロックフェ研究に集中できる職であった。早速、たが黒人とは知らなかったので」と言ラー財団へ申請していた奨学金が採択

ウィーン大学時代の友人ピクル博士

われた。次に、ウィスコンシン州アッされたのである。ジュリアンはこの奨（Josef Pikl）をアメリカに呼び、カラプルトンにある製紙化学研究所に申請学金でオーストリアに行き、ウィーン

バル豆に含まれ、緑内障の治療薬としした。研究者としての採用がほぼ決定

大学で学位取得を目指すという大きなて用いられていたフィゾスチグミンのしたが、会社のあるアップルトン市に決断をした。1929年、ジュリアン30歳

合成研究に取り掛かった（図3）。このは「黒人は日没前に町を離れなければのときである。

研究は既にイギリスの著名な化学者ロならない」という条例があったため、ウィーン大学ではアルカロイドの研

ビンソン教授（Robert Robinson）のここでの就職も断念せざるを得なかっ

究で世界的に著名なシュペート教授

グループが先行していたが、ジュリア

た。幸いこの研究所の理事で、シカゴ（Ernst Späth）のもとでコリダリス・

ンとピクルはより効率的な合成経路をにある大手塗料会社グリッデン社の副カバ（ケシ科の顕花植物）の根に含ま考え、「インドールシリーズの研究」

社長がジュリアンの経歴を高く評価れる成分の研究を行った。ここでは黒として米国化学会誌（JACS）に次々し、グリッデン社への就職を勧めてく人に対する人種差別を全く受けなかっと論文を発表した。シリーズの第IVれた。グリッデン社は大豆製品研究所たため、快適な研究生活を送ることが報では、ロビンソンらの報告したフィ部門を創設し、ジュリアンをその研究できた。また、余暇を利用して友人た

ゾ ス チ グ ミ ン の 前 駆 物 質d,l -エ セ レ

所長に抜擢した。1930年代、黒人が大ちとコンサート、ダンスパーティー、

トールは誤りであると主張し、続く第企業の社員になることも、ましてや研

スキーなどアメリカでは想像すらでき

V報では自身の方法で合成したd,l -エ

究所長になることも前例がなかった。

なかった生活を楽しんだ。研究は順調

セレトールから2段階でフィゾスチグ

グリッデン社の社長がジュリアンにに進み、2年後には学位審査発表会がミンが得られることを示した。この成与えた最初の仕事は大豆からタンパク設けられた。ジュリアンは流ちょうな果によりジュリアンは36歳にして世界質を分離精製することであった。まドイツ語で原稿を全く見ずにコリダリ的に著名な化学者になった。

た、仕事を開始するにあたって、ジュリアンには開発に携わる技術者を採用

ス・アルカロイドについて1時間講演し多数の聴衆を驚かせた。シュペート

５．大学から企業へする権限が与えられた。それによりい教授も「これほど優秀な学生には出フィゾスチグミンの全合成という輝

くつかの大学から黒人を含む精鋭が集会ったことが無い」と絶賛した。1931

かしい成果を挙げたジュリアンはデ

められ、ジュリアンのもとに研究グ

年、学位を目指してから11年目にしてポー大学やミネソタ大学から教授職のループが結成された。ジュリアンのグ

遂に念願のPh.D.を取得した。

オファーを受けた。しかし、いずれの

ループは1年で大豆からタンパク質を大学でも黒人であるという理由で理事

分離精製する方法を確立した。得られ会からの承諾が得られなかった。そこ

たタンパク質は水性ペイント、接着

４．フィゾスチグミンの全合成

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図 3．デ ポー大学で実験中のジュリアン（1930 年頃）（文献 3）

1931年秋、帰国してハワード大学にで彼は大学で研究者になるという当初

剤、紙の表面処理剤、卵白に代わるホ戻った。大学は学位を取得したジュリの夢を諦め、企業で働く決断をした。

イップクリームなど様々な製品の原料

アンを正教授で化学科長とする破格のしかし最初に申請した全米最大の化学に使用され、会社に莫大な利益をもた待遇で迎えたが、ほどなく学内トラブ会社デュポンでは、一緒に申請した友らした。また、ガソリンや石油火災にルに巻き込まれてしまった。ウィーン

人のピクルは採用されたがジュリアン

極めて有効なエアロフォームと呼ばれ大学での楽しい生活を記した同僚へのは不採用であった。面接員から「あなる噴霧消火剤にも用いられた。この消和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）

火剤は第二次世界大戦でアメリカ艦船

リアンは安価なコルチゾンを提供するに設置され数千人の軍人の命を火災かためには植物ステロイドから合成するら救った。

ことが重要であると考え、副腎皮質にあるコルチゾン前駆体のサブスタンス

６．性ホルモンの合成

Sを大豆油から大量合成した。という

大豆油からタンパク質を分離精製すのも、この物質の11位の炭素に酸素がる仕事の過程で、グリッデン社におけ導入できればコルチゾンに変換できる

るジュリアンの地位を危うくするようか ら で あ る。 彼 の 予 想 は 的 中 し た。

な大事故が起きた。大量の純粋な大豆

アップジョン社の研究者が酵素を用い油に水が混入し、大豆油が使用不能にて11位への酸素導入に成功し、コルチなったのである。電話連絡を受けたゾンの大量合成が可能になった。これ

ジュリアンが駆けつけてプラントを見によりコルチゾンをリウマチ患者の治ると、巨大なタンク内は白色の細かな療薬として用いることができるように粒子で満ちており、タンクの底には白なった。

図 4．1993 年に発行されたジュリアンの肖像を記した米国郵政公社の切手（文献 2）

色の結晶が析出していた。ジュリアン

1953年、ジュリアンはステロイドのはこの結晶がステロイドの一種、スチ研究を発展させるため17年間勤務した

1990年、コルチゾンの合成で全米発明

グマステロールであることを見出し

グリッデン社を退社し、新たな会社、家殿堂入りを果たした。1993年、米国た。この事故の5年前、ドイツの化学

ジュリアン研究所を設立し多数の黒人

郵政公社はジュリアンの肖像画を記し者がスチグマステロールからプロゲス

化学者を採用した。グアテマラ産ヤム

た郵便切手を発行した（図4）。さらにテロンへの実験室での合成方法を発表

イモを原料としたステロイド事業は順

1999年、米国化学会はジュリアンによしていた。卵巣から分泌されるプロゲ

調 に 進 み 会 社 は 大 き な 利 益 を 得 た。

るフィゾスチグミンの合成を「米国化

ステロンは妊婦の流産や未熟児出産を1961年、ジュリアンは会社を製薬大手

学史における歴史的ランドマーク」に防ぐ重要な女性ホルモンであるが、薬のスミス、クライン、フレンチ社（現、選んだ。もしジュリアンが人種差別の剤としては極めて高価であった。ジュ

グラクソ・スミスクライン, GSK）にない社会で活躍出来ていたら……。彼

リアンは大豆油から得られるスチグマ

大金で売却し、それにより全米で最もは晩年のインタビューで次のように述

ステロールを原料に用い、ドイツ化学

裕福な黒人の一人になった。その後もべている。「私が住んでいるこの良き者の合成手法でプロゲステロンを大量

いくつかの製薬会社のコンサルタント

国は、人生のいくつかの重要な局面でに得る工業的方法を確立し、価格を大として活動するとともに、大学の支援

私から機会を奪ってきたように思う。

幅に下げることに成功した。同様に、事業、黒人の教育や居住に対する差別

それでも私はその時々で得ることがでスチグマステロールからテストステロ

撤 廃 な ど の 公 民 権 運 動 に も 尽 力 し、きた仕事に全力で取り組んだ。多分、ンなど他の性ホルモンや多種のホルモ

1975年4月19日に肝臓がんで76年の人

私は良い化学者であったと思う。でン前駆体を合成し、塗料会社であるグ生に幕を閉じた。

も、私が夢に描いていた化学者ではな

リッデンを全米でも有数のファインケ
ミカルの会社に成長させた。

かった。」
８．おわりにすさまじい人種差別の中で化学者と７．コルチゾンの合成して、実業家として成功したジュリア

リウマチは激痛を伴う難病で、当ンに対して数多くの栄誉が与えられ時、様々な治療法が試みられていたた。1947年、NAACP（全米黒人地位が、 い ず れ も 全 く 効 果 が 無 か っ た。

向上協会）は多くの重要な発見とたく

1949年、副腎皮質ホルモンのコルチゾさんの人命を救った業績に対し、権威ンがリウマチ患者に対して劇的な効果あるスピンガーン・メダルを授与しを発揮することがミネソタ州メイた。1950年、シカゴ・サン・タイムズ

ヨー・クリニックの医師らにより報告

誌はジュリアンをシカゴの「時の人」

された。しかし動物から抽出されたコに選んだ。彼は19の大学から名誉学位

ルチゾンは極めて高価で、薬剤としての称号を受け、5つの大学では理事との使用は事実上不可能であった。ジュ

して大学の運営に携わった。没後の

和光純薬時報Vol.91, No.4（2023）〔参考文献〕
1）P BS NOVA S34E08, Forgotten Genius,
https://www.youtube.com/watch?v=KSq_
sdYNNk（2023年5月26日閲覧）2）Seeman, J. I. : PNAS , 119, 29（2022）.
https://www.pnas.org/doi/full/10.1073/
pnas.2208883119（2023年5月26日閲覧）3）h t t p s : / / w w w . a c s . o r g / e d u c a t i o n /whatischemistry/landmarks/julian.html（2023年5月26日閲覧）4）Späth, E. and Julian, P. L. : Berichte , 64, 1131
（1931）.
5）Julian, P. L. and Pikl, J. : J. Am. Chem. Soc .,57, 563（1935）.
6）Julian, P. L. and Pikl, J. : J. Am. Chem. Soc .,57, 755（1935）
.

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第38回

Wako ワークショップ

日会時：2023 年 11 月 22 日（水）10：00 〜 17：00（終了時間は変更になる場合があります。）
場：秋葉原コンベンションホール（ウェビナーによるハイブリッド開催）〒 101 - 0021 東京都千代田区外神田 1 - 18 - 13 秋葉原ダイビル 2 F
オーガナイザー：佐谷 秀行 藤田医科大学 研究推進本部
がん医療研究センター・橋渡し研究シーズ探索センター 特命教授・センター長
主催：富士フイルム和光純薬株式会社
定
員：秋葉原コンベンションホール 300 名
ウェビナーによる参加 1 , 000 名（申込みは先着順で、定員になり次第、締め切らせていただきます。）
参
加費：無料（事前登録制）
申 込 方 法：下記ホームページ「参加申込み」よりお申込み下さい。
UR
L ：https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/seminar/037969.html
お 問 合 せ 先：Wako ワークショップ係
TEL：06 - 6203 - 1788 e-mail：ffwk-seminar@fujifilm.com〈講演プログラム〉●はじめに：［本日のオーバービュー］
佐谷 秀行（藤田医科大学 研究推進本部 がん医療研究センター・橋渡し研究シーズ探索センター
特命教授・センター長）
セクションⅠ：［新技術による血液・免疫系解析の進歩］●「固形がんに対する CAR-T 細胞療法の進展と将来展望」
玉田 耕治（山口大学大学院 医学系研究科 免疫学講座 教授）●「血液研究が拓くがん研究の未来」
井上 大地（公益財団法人神戸医療産業都市推進機構先端医療研究センター 血液・腫瘍研究部 部長）
セクションⅡ：［ゲノム解析の新展開］●「リキッドバイオプシー最前線〜最新技術から臨床実装まで〜」
藤澤 孝夫（国立がん研究センター東病院 TR 支援室 / 頭頸部内科）●「ロングリードシーケンサーを用いた新たながんエピゲノム異常の解明」
永江 玄太（東京大学 先端科学技術研究センター ゲノムサイエンス＆メディシン分野 社会連携部門
セクションⅢ：［難治性がんへの挑戦］●「がんのフェロトーシス回避機構と新規治療法の開発」
永野 修（藤田医科大学 研究推進本部 がん医療研究センター 教授）●「がんのウイルス療法の臨床開発と実用化」
藤堂 具紀（東京大学 医科学研究所 先端医療研究センター 先端がん治療分野 教授）●おわりに佐谷 秀行（藤田医科大学 研究推進本部 がん医療研究センター・橋渡し研究シーズ探索センター
特命教授・センター長）…2 〜 10℃保存…− 20℃保存…− 80℃保存
150 …− 150℃保存 表示がない場合は室温保存です。
…特定毒物
  
…毒物
…劇物
…毒薬
…劇薬 危 …危険物
…向精神薬
…特定麻薬向精神薬原料特定    
…化審法 第一種特定化学物質…化審法 第二種特定化学物質…化学兵器禁止法 第一種指定物質…化学兵器禁止法 第二種指定物質
毒素等 …国民保護法
覚 …覚せい剤取締法
掲載内容は、2023 年 10 月時点での情報です。上記以外の法律及び最新情報は、当社 HP をご参照下さい。

特任准教授）…カルタヘナ法【試薬】
試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
試験研究用以外にご使用された場合、いかなる保証も致しかねます。試験研究用以外の用途や原料にご使用希望の場合、弊社営業部門にお問合せ下さい。
【医薬品原料】
製造専用医薬品及び医薬品添加物などを医薬品等の製造原料として製造業者向けに販売しています。製造専用医薬品（製品名に製造専用の表示があるもの）のご購入には、確認書が必要です。
記載希望納入価格は本体価格であり消費税などが含まれておりません。

和光純薬時報 Vol. 91 No. 42023 年 10 月 15 日 発行
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編集責任者
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36

刷

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Vol.91 No.4

「シン・がん医療：
新技術に裏打ちされたがんの基礎と臨床」